CH692132A5 - Adenosin-A3-Rezeptor-Modulatoren - Google Patents

Adenosin-A3-Rezeptor-Modulatoren Download PDF

Info

Publication number
CH692132A5
CH692132A5 CH00012/01A CH122001A CH692132A5 CH 692132 A5 CH692132 A5 CH 692132A5 CH 00012/01 A CH00012/01 A CH 00012/01A CH 122001 A CH122001 A CH 122001A CH 692132 A5 CH692132 A5 CH 692132A5
Authority
CH
Switzerland
Prior art keywords
alkyl
amino
triazolo
compound
furyl
Prior art date
Application number
CH00012/01A
Other languages
English (en)
Inventor
Pier Givanni Baraldi
Pier Andrea Borea
Original Assignee
King Pharmaceuticals Res & Dev
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by King Pharmaceuticals Res & Dev filed Critical King Pharmaceuticals Res & Dev
Publication of CH692132A5 publication Critical patent/CH692132A5/de

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
    • C07D487/12—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains three hetero rings
    • C07D487/14—Ortho-condensed systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/519—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim ortho- or peri-condensed with heterocyclic rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D513/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for in groups C07D463/00, C07D477/00 or C07D499/00 - C07D507/00
    • C07D513/12—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for in groups C07D463/00, C07D477/00 or C07D499/00 - C07D507/00 in which the condensed system contains three hetero rings
    • C07D513/14—Ortho-condensed systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K49/00—Preparations for testing in vivo
    • A61K49/001—Preparation for luminescence or biological staining
    • A61K49/0013—Luminescence
    • A61K49/0017—Fluorescence in vivo
    • A61K49/0019—Fluorescence in vivo characterised by the fluorescent group, e.g. oligomeric, polymeric or dendritic molecules
    • A61K49/0021—Fluorescence in vivo characterised by the fluorescent group, e.g. oligomeric, polymeric or dendritic molecules the fluorescent group being a small organic molecule
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K51/00—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo
    • A61K51/02—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo characterised by the carrier, i.e. characterised by the agent or material covalently linked or complexing the radioactive nucleus
    • A61K51/04—Organic compounds
    • A61K51/041—Heterocyclic compounds
    • A61K51/044—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine, rifamycins
    • A61K51/0459—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine, rifamycins having six-membered rings with two nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, e.g. piperazine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K51/00—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo
    • A61K51/02—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo characterised by the carrier, i.e. characterised by the agent or material covalently linked or complexing the radioactive nucleus
    • A61K51/04—Organic compounds
    • A61K51/0491—Sugars, nucleosides, nucleotides, oligonucleotides, nucleic acids, e.g. DNA, RNA, nucleic acid aptamers
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/02—Non-specific cardiovascular stimulants, e.g. drugs for syncope, antihypotensives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/04—Inotropic agents, i.e. stimulants of cardiac contraction; Drugs for heart failure
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/12—Antihypertensives
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07B—GENERAL METHODS OF ORGANIC CHEMISTRY; APPARATUS THEREFOR
    • C07B2200/00—Indexing scheme relating to specific properties of organic compounds
    • C07B2200/05—Isotopically modified compounds, e.g. labelled
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
    • G01N2333/435—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from animals; from humans
    • G01N2333/705—Assays involving receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • G01N2333/72—Assays involving receptors, cell surface antigens or cell surface determinants for hormones
    • G01N2333/726—G protein coupled receptor, e.g. TSHR-thyrotropin-receptor, LH/hCG receptor, FSH
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2500/00—Screening for compounds of potential therapeutic value

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Optics & Photonics (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
  • Saccharide Compounds (AREA)
  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)

Description

ERFINDUNGSGEBIET
Die vorliegende Erfindung bezieht sich auf bestimmte Pyrazolo-triazolo-pyrimidine, Triazolo-triazolo-pyrimidine und Imidazolo-triazolo-pyrimidine und in deren Verwendung in der medizinischen Praxis als Modulatoren von Adenosin-A3-Rezeptoren.
STAND DER TECHNIK
Drei Hauptklassen von Adenosin-Rezeptoren, bezeichnet als A1, A2 und A3, sind bereits pharmakologisch charakterisiert worden. A1-Rezeptoren werden zur Inhibierung von Adenylat-cyclase über Gi-Proteine gekoppelt, und es wurde auch gefunden, dass sie sich an andere sekundäre Botensysteme koppeln, einschliesslich Abschwächung oder Stimulierung von Phosphoinosit-Umsätzen und Aktivierung von lonenkanälen. A2-Rezeptoren werden in zwei Unterklassen unterteilt, nämlich A2A und A2B, mit denen Adenosinagonisten Adenylatcyclase mit hoher und niedriger Affinität aktivieren. Die Sequenz des A3-Rezeptors wurde zuerst in der cDNa-Bibliothek von Ratten gefunden, und diese Sequenz, welche später durch Homologie zu anderen an G-Protein gekoppelten Rezeptoren, ausgehend von einer cDNA-Bibliothek von Rattengehirn, geklont wurden, entsprach einem neuen, funktionellen Adenosin-Rezeptor.
Die Entdeckung des A3-Rezeptors hat neue therapeutische Ausblicke im Gebiet der Purine eröffnet. Insbesondere steuert der A3-Rezeptor Vorgänge der Entzündung, des niedrigen Blutdrucks und der Degranulierung von Mastzellen. Dieser Rezeptor spielt augenscheinlich auch eine Rolle im Zentralnervensystem. Der A3-selektive Agonist IB-MECA verursacht Verhaltensstörungen und schützt bei ständiger Verabreichung gegen Blutleere im Gehirn. Es wurde weiterhin gefunden, dass A3-selektive Agonisten bei hohen Konzentrationen eine Apoptose in menschlichen Leukämiezellen HL-60 verursachen. Diese und andere Befunde haben den A3-Rezeptor ein viel versprechendes therapeutisches Ziel werden lassen. Selektive Antagonisten für den A3-Rezeptor werden als potenzielle entzündungshemmende Mittel oder mögliche antiischemische Mittel im Gehirn gesucht. In letzter Zeit waren A3-Antagonisten in der Entwicklung als Medikamente gegen Asthma, Depressionen, Herzrhythmusstörungen, zum Schutze von Nieren, gegen die Parkinsonsche Krankheit und zur Verbesserung der Auffassungsgabe.
Die vorliegende Erfindung hat demgemäss zum Ziel, Verbindungen und deren Herstellungsverfahren sowie Verwendungen zu entwickeln, welche Agonisten, Teilagonisten und/oder Antagonisten des Adenosin-A3-Rezeptors darstellen.
ÜBERBLICK ÜBER DIE ERFINDUNG
Es werden Verbindungen geoffenbart, die als starke und doch selektive Modulatoren des Adenosin-A3-Rezeptors mit einer Wirkung als Antagonisten dieses Rezeptors verwendbar sind, und Verfahren zu deren Herstellung beschrieben.
Die Verbindungen haben die folgende Formel:
oder
worin bedeuten: A Imidazol, Pyrazol oder Triazol; R -C(X)R1, -C(X)-N(R1)2, -C(X)OR1, -C(X)SR1, -SOnR1, -SOnOR1, -SOnSR1 oder -SOn-N(R1)2 mit X = O, S oder NR1; R1 Wasserstoff, Alkyl, substituiertes Alkyl, Alkenyl, substituiertes Alkenyl, Alkinyl, substituiertes Alkinyl, Aryl, Heteroaryl, einen heterocyclischen Rest, Niederalkanoyl oder, wenn R1 an ein Stickstoffatom gebunden ist, bildet es zusammen mit dem N-Atom einen Azetidinring oder einen 5- oder 6-gliedrigen heterocyclischen Ring, der eines oder mehrere Heteroatome wie N, O, S enthält; R2 Wasserstoff, Alkyl, substituiertes Alkyl, Aralkyl, substituiertes Aralkyl, Heteroaryl, substituiertes Heteroaryl oder Aryl; R3 Furyl, Pyrryl, Thiophenyl, Benzofuryl, Benzopyrryl oder Benzothiophenyl, wobei diese Reste gegebenenfalls einen oder mehrere folgende Substituenten tragen: Hydroxy, Acyl, gegebenenfalls substituiertes Alkyl, Alkoxy, Alkenyl oder Alkinyl, Amino, substituiertes Amino, Aminoacyl, Acyloxy, Acylamino, Alkaryl, Aryl, Aryloxy, Azido, Carboxyl, Carboxyalkyl, Cyano, Halogen, Nitro, Heteroaryl, Heteroaryloxy, einen Heterocyclus, Heterocyclooxy, Aminoacyloxy, Oxyacylamino, Thioalkoxy, substituiertes Thioalkoxy, Thioaryloxy, Thioheteroaryloxy, -SO-Alkyl, -SO-substituiertes Alkyl, -SO-Aryl, -SO-Heteroaryl, -SO2-Alkyl, -SO2-substituiertes Alkyl, -SO2-Aryl, -SO2-Heteroaryl, Trihalogenmethyl; n 1 oder 2; und deren pharmazeutisch zulässige Salze.
Vorzugsweise ist R1 Wasserstoff, C1- bis C8-Alkyl, C2- bis C7-Alkenyl, C2- bis C7-Alkinyl; C3- bis C7-Cycloalkyl; C1- bis C5-Alkyl, substituiert durch eines oder mehrere Halogenatome, Hydroxygruppen, C1- bis C4-Alkoxy, C3- bis C7-Cycloalkyl oder Gruppen der Formel -N(R1)2, -C(O)N(R1)2; Aryl, substituiertes Aryl, worin die Substitution ausgewählt ist aus C1- bis C4-Alkoxy, C1- bis C4-Alkyl, Nitro, Amino, Cyano, C1- bis C4-Haloalkyl, C1- bis C4-Haloalkoxy, Carboxy, Carboxyamido; C7- bis C10-Aralkyl, worin der Arylrest durch einen oder mehrere Substituenten substituiert sein kann, wie sie oben für Aryl definiert sind; eine Gruppe der Formel -(CH2)m-Het, worin Het ein 5- oder 6-gliedriger aromatischer oder nichtaromatischer heterocyclischer Ring ist, der eines oder mehrere Heteroatome N, O und/oder S enthält, und m eine ganze Zahl von 1 bis 5 ist.
Bevorzugte C1- bis C8-Alkylgruppen sind Methyl, Ethyl, Propyl, Butyl und Isopentyl. Beispiele von C3- bis C7-Cycloalkylgruppen sind Cyclopropyl, Cyclopentyl und Cyclohexyl. Beispiele von C1- bis C5-Alkylgruppen, die mit C3- bis C7-Cycloalkylgruppen substituiert sind, umfassen Cyclohexylmethyl, Cyclopentylmethyl und 2-Cyclopentylethyl. Beispiele substituierter C1- bis C5-Alkylgruppen sind 2-Hydroxyethyl, 2-Methoxyethyl, Trifluormethyl, 2-Fluormethyl, 2-Chlorethyl, 3-Aminopropyl, 2-(4-Methyl-1-piperazin)-ethyl, 2-(4-Morpholinyl)-ethyl, 2-Aminocarbonylethyl, 2-Dimethylaminoethyl und 3-Dimethylaminopropyl. Aryl ist bevorzugt Phenyl, welches gegebenenfalls durch Cl, F, Methoxy, Nitro, Cyano, Methyl, Trifluormethyl oder Difluormethoxy substituiert ist. Beispiele heterocyclischer Gruppen mit 5 oder 6 Ringgliedern, welche N, O und/oder S enthalten, sind Piperazinyl, Morpholinyl, Thiazolyl, Pyrazolyl, Pyridyl, Furyl, Thienyl, Pyrrolyl, Triazolyl und Tetrazolyl. Beispiele von Aralkyl mit 7 bis 10 C-Atomen sind Benzyl oder Phenethyl, gegebenenfalls substituiert durch einen oder mehrere Substituenten, ausgewählt aus Cl, F, Methoxy, Nitro, Cyano, Methyl, Trifluormethyl und Difluormethoxy. Vorzugsweise ist R1 Wasserstoff, C1- bis C8-Alkyl, Aryl oder C7- bis C10-Aralkyl, vorzugsweise gegebenenfalls substituiert durch Halogenatome. Vorzugsweise ist X Sauerstoff, R2 ist Alkyl oder substituiertes Alkyl mit 2 oder 3 C-Atomen, und R3 ist Furan.
Besonders bevorzugte Verbindungen sind solche, bei denen R eine Phenethylgruppe ist, in welcher der Phenylring einen oder mehrere Substituenten trägt, ausgewählt aus Chlor, Fluor, Methoxy, Nitro, Cyano, Methyl, Trifluormethyl und Difluormethoxy.
Die möglichen Bedeutungen von A gehen aus den folgenden Strukturformeln hervor:
Die Verbindungen können in einem Verfahren zum Modulieren von Adenosin-A3-Rezeptoren bei Säugetieren und Menschen verwendet werden. Die Verfahren bestehen darin, dass man eine wirksame Menge einer Verbindung der Formel I verabreicht, welche ausreicht, Adenosin-A3-Rezeptoren im Säugetier abzuschwächen. Die Verwendungen der Verbindungen umfassen ausserdem - Behandlung von Bluthochdruck, - Behandlung entzündlicher Symptome wie rheumatischer Arthritis und Schuppenflechte, - Behandlung allergischer Störungen wie Heuschnupfen und allergischem Nasenkatarrh; - Mastzellen-Degranulation; - Antitumor-Wirkstoffe; - Behandlung von Sauerstoffmangel im Herzen; - Schutz gegen zerebrale Blutleere, - Verwendungen zur Diagnose, beispielsweise um die Anwesenheit einer oder mehrerer der oben beschriebenen medizinischen Bedingungen festzustellen, oder in einem Test zur Bestimmung der Wirksamkeit anderer Verbindungen bei der Bindung des A3-Adenosinrezeptors (d.h. durch Verdrängungshemmung, bestimmt durch verschiedene Bindungsversuche) wie beschrieben in Jakobson und Van Rhee, Purinergic approaches to experimental therapy, Jacobson and Jarvis, Herausgeber, Wiley, New York, 1997, S. 101-128; Mathot et al., Brit. J. Pharmacol, 116: 1957-1964 (1995); van der Wenden et al., J. Med. Chem., 38: 4000-4006 (1995); und van Calenbergh, J. Med. Chem., 40: 3765-3772 (1997), und der Inhalt dieser Veröffentlichungen ist Teil des vorliegenden Dokumentes.
Die Verbindungen können ausserdem in einem Verfahren zur vollständigen oder teilweisen Inhibierung von Adenylatcyclase (A3) in einem Säugetier und beim Menschen verwendet werden. Die Verfahren bestehen darin, dass man eine wirksame Menge einer Verbindung der Formel I verabreicht, die ausreicht, um Adenylatcyclase ganz oder teilweise zu inhibieren. Die Verbindungen können auch markiert werden und dazu gebraucht werden, die Anwesenheit von Tumorzellen aufzuspüren, die Adenosin-A3-Liganden bei einem Patienten oder in einer Probe enthalten, indem man die Zellen mit der markierten Verbindung in Kontakt bringt, die Bindung der Verbindung an die A3-Rezeptoren abwartet und dann auf die Anwesenheit der Markierung prüft.
Die Verbindungen können in pharmazeutischen Formulierungen verwendet werden, die eine Verbindung der Formel I und einen oder mehrere Exzipienten enthalten. Verschiedene chemische Zwischenprodukte können zur Herstellung der Verbindungen eingesetzt werden.
KURZBESCHREIBUNG DER ZEICHNUNGSFIGUREN
Fig. 1 ist ein Diagramm, welches die Sättigung der Bindung von [<1><2><5>I]AB-MECA in fmol/mg Protein an menschliche A3-Rezeptoren, exprimiert in HEK-293-Zellen, in Abhängigkeit von der molaren Konzentration von [<1><2><5>I]AB-NMCA zeigt. Fig. 2 ist ein Diagramm, welches die Sättigung der Bindung von [<1><2><5>I]AB-MECA in fmol/mg Protein an menschliche A3-Rezeptoren, exprimiert in der JURKAT-Zelllinie, in Abhängigkeit von der molaren Konzentration von [<1><2><5>I]AB-NECA zeigt. Aus der Figur geht hervor, dass die Dichte des festgestellten A3-Rezeptors etwa 300 fmol/mg Protein in Jurkat-Zellmembranen bei Verwendung von [<1><2><5>I]AB-MECA betrug. Fig. 3 und 4 sind Diagramme, die die Sättigung der Bindung eines tritierten Analogs der Verbindung 47 (5-[[(4-Methoxyphenyl)-amino]-carbonyl]-amino-8-propyl-2-(2-furyl)-pyrazolo[4,3-e]-1,2,4-triazolo[1.5-c]-pyrimidin in fmol/mg Protein an A3-Rezeptoren, exprimiert in der JURKAT-Zelllinie in Abhängigkeit von der molaren Konzentration der Verbindung 102 zeigen. Die Werte dieser Figuren zeigen die Anwesenheit von Adenosin-A3-Rezeptoren in menschlichen Tumorzellen in hoher Dichte. Beispielsweise wurden etwa 1300 fmol/mg Protein in Jurkat-Zellen und 650 fmol/mg Protein in HL60-Zellen gefunden. Daher ist die Verbindung 102 ein bei weitem empfindlicheres Werkzeug zur Aufspürung von Adenosin-A3-Rezeptoren als [<1><2><5>I]AB-MECA. Diese Befunde haben die Bestimmung der Anwesenheit von A3-Rezeptoren in vielen menschlichen Tumoren erleichtert.
EINZELBESCHREIBUNG DER ERFINDUNG
Das vorliegende Dokument offenbart Verbindungen, die als starke und dennoch selektive Modulatoren von Adenosinrezeptoren mit einer Wirksamkeit als A3-Agonisten und in machen Fällen auch als A3-Antagonisten nützlich sind, sowie Verfahren zu deren Herstellung und Verwendung.
Die Verbindungen können in Verfahren zur Modulierung von Adenosin-A3-Rezeptoren in Säugetieren und Menschen verwendet werden. Diese Verfahren bestehen darin, dass eine wirksame Menge einer Verbindung der Formel I, die zur Moderierung der Adenosin-A3-Rezeptoren des Säugetiers oder Patienten ausreicht.
Die Verbindungen können als pharmazeutische Formulierungen eingesetzt werden, die eine Verbindung der Formel I und einen oder mehrere Exzipienten enthalten. Verschiedene chemische Zwischenprodukte können zur Herstellung der Verbindungen verwendet werden.
Definitionen
Für den Text des vorliegenden Dokuments gelten folgende Definitionen:
Eine Verbindung ist ein Agonist eines Adenosin-A1-Rezeptors, wenn sie in der Lage ist, Adenylatcyclase (A3) vollständig zu inhibieren und dazu befähigt ist, [<1><2><5>I]-AB-MECA bei einem Bindungswechseltest zu verdrängen.
Eine Verbindung ist ein partieller Agonist eines Adenosin-A3-Rezeptors, wenn sie in der Lage ist, Adenylatcyclase (A3) teilweise zu inhibieren und dazu befähigt ist, [<1><2><5>I]-AB-MECA bei einem Bindungswechseltest zu verdrängen.
Eine Verbindung ist ein Antagonist eines Adenosin-A3-Rezeptors, wenn sie in der Lage ist, die Inhibition durch einen Agonisten zu verhindern und dazu befähigt ist, [<1><2><5>I]-AB-MECA bei einem Bindungswechseltest zu verdrängen.
Eine Verbindung ist für den A3-Rezeptor selektiv, wenn das Verhältnis der Aktivitäten von A1/A3 und A2/A3 grösser als 50 und vorzugsweise zwischen 50 und 100 ist, ganz bevorzugt grösser als 100.
Die Definition "Alkyl" bezieht sich auf einwertige, gerad- oder verzweigtkettige oder cyclische Alkylgruppen mit 1 bis 20 C-Atomen, vorzugsweise 1 bis 10 C-Atomen ("Niederalkyl") und insbesondere 1 bis 6 C- Atomen. Beispiele dafür sind Methyl, Ethyl, n-Propyl, iso-Propyl, n-Butyl, iso-Butyl, n-Hexyl usw. Die Angaben "Alkylen" und "Niederalkylen" beziehen sich auf zweiwertige Reste der entsprechenden Alkane. Andere Molekülteile mit Namen, die von Alkanen abgeleitet sind, wie Alkoxyl, Alkanoyl, Alkenyl, Cycloalkenyl usw. mit dem Vorsatz "Nieder" besitzen Kohlenstoffketten mit bis zu 10 Atomen. In Fällen, wo die Mindestanzahl von Kohlenstoffatomen grösser als 2 ist, z.B. bei Alkenyl (Minimum: 2) oder Cycloalkyl (Minimum; 3), bezieht sich "Nieder" auf diese Anzahl als Mindestanzahl.
Der Ausdruck "substituiertes Alkyl" umfasst Alkylgruppen, bevorzugt mit 1 bis 10 C-Atomen ("substituiertes Niederalkyl") und 1 bis 5, bevorzugt 1 bis 3 Substituenten, ausgewählt aus Alkoxy, substituiertem Alkoxy, Cycloalkyl, substituiertem Cycloalkyl, Cycloalkenyl, substituiertem Cycloalkenyl, Acyl, Acylamino, Acyloxy, Amino, substituiertem Amino, Aminoacyl, Aminoacyloxy, Oxyacylamino, Cyano, Halogen, Hydroxy, Keto, Thioketo, Carboxyl, Carboxyalkyl, Thiol, Thioalkoxy, substituiertem Thioalkoxy, Aryl, Aryloxy, Heteroaryl, Heteroaryloxy, Heterocyclen, Hydroxyamino, Alkoxyamino, Nitro, -SO-alkyl, -SO-subst. Alkyl, -SO-aryl, -SO-heteroaryl, -SO2-alkyl, -SO2-subst. Alkyl, -SO2-aryl, -SO2-heteroaryl, Mono- und Dialkylamino, Mono- und Di-(subst. Alkyl)-amino, Mono- und Diarylamino, Mono- und Diheteroarylamino, Mono- und Di-heterocyclus-amino, sowie unsymmetrisch disubstituierte Amine mit Alkyl, Aryl, Heteroaryl und Heterocyclen als Substituenten. Andere Reste mit dem Vorwort "substituiert" umfassen die oben aufgeführten Gruppen oder Atome als Substituenten.
"Alkaryl" bezieht sich auf eine durch Aryl substituierte Alkylgruppe. Die Bindung geschieht über die Alkylgruppe. "Aralkyl" ist ein durch Alkyl substituierter Arylrest, der über den Arylrest gebunden ist.
Der Begriff "Alkoxy" bezieht sich auf die Gruppe "Alkyl-O-", worin Alkyl wie oben definiert ist. Bevorzugte Alkoxygruppen sind beispielsweise Methoxy, Ethoxy, n-Propoxy, i-Propoxy, n-Butoxy, tert-Butoxy, sec-Butoxy, n-Pentoxy, n-Hexoxy, 1,2-Dimethylbutoxy usw.
Der Ausdruck "Alkenyl" bezieht sich auf Alkenylgruppen mit bevorzugt 2 bis 10 C-Atomen und insbesondere 2 bis 6 C-Atomen und mit mindestens 1 und vorzugsweise 1 oder 2 Doppelbindungen. Bevorzugte Alkenylgruppen sind Ethenyl (-CH=CH2), n-Propenyl (-CH2CH=CH2), i-Propenyl (-C(CH3)=CH2) u.Ä.
"Alkinyl" bedeutet Alkinylgruppen mit bevorzugt 2 bis 10 C-Atomen, insbesondere 2 bis 6 C-Atomen und mit 1 oder 2 Dreifachbindungen.
Der Ausdruck "Acyl" bezieht sich auf die Gruppen Alkyl-C(O)-, substituiertes Alkyl-C(O)-, Cycloalkyl-C(O)-, substituiertes Cycloalkyl-C(O)-, Aryl-C(O)-, Heteroaryl-C(O)- und Heterocyclus-C(O)-, worin Alkyl, substituiertes Alkyl, Cycloalkyl, substituiertes Cycloalkyl, Aryl, Heteroaryl und Heterocyclus wie oben definiert sind.
In diesem Dokument bedeutet der Ausdruck "Acylamino" die Gruppe -C(O)NRR, worin die Reste R unabhängig voneinander für Wasserstoff, Alkyl, substituiertes Alkyl, Aryl, Heteroaryl oder Heterocyclus stehen, worin Alkyl, substituiertes Alkyl, Aryl, Heteroaryl und Heterocyclus wie oben definiert sind.
Der Ausdruck "Aryl" bezieht sich auf ungesättigte aromatische carbocyclische Gruppen mit 6 bis 14 Kunststoffatomen und einem einzigen Ring (beispielsweise Phenyl) oder kondensierte Ringe (beispielsweise Naphthyl oder Anthryl). Bevorzugte Arylreste sind Phenyl, Naphthyl u.Ä. Solche Arylgruppen können durch 1 bis 5 Substituenten und vorzugsweise 1 bis 3 Substituenten substituiert sein, ausgewählt aus den Resten Hydroxy, Acyl, Alkyl, Alkoxy, Alkenyl, Alkinyl, substituiertes Alkyl, substituiertes Alkoxy, substituiertes Alkenyl, substituiertes Alkinyl, Amino, substituiertes Amino, Aminoacyl, Acyloxy, Acylamino, Alkaryl, Aryl, Aryloxy, Azido, Carboxyl, Carboxyalkyl, Cyano, Halogen, Nitro, Heteroaryl, Heteroaryloxy, Heterocyclus, Heterocyclooxy, Aminoacyloxy, Oxyacylamino, Thioalkoxy, substituiertes Thioalkoxy, Thioaryloxy, Thioheteroaryloxy, -SO-Alkyl, -SO-substituiertes Alkyl, -SO-Aryl, -SO-Heteroaryl, -SO2-Alkyl, -SO2-subst. Alkyl, -SO2-Aryl, -SO2-Hereroaryl, Trihalogenmethyl. Bevorzugte Substituenten sind Alkyl, Alkoxy, Halogen, Cyano, Nitro, Trihalogenmethyl und Thioalkoxy.
Der hierin verwendete Ausdruck "Cycloalkyl" bezieht sich auf cyclische Alkylgruppen mit 3 bis 12 Kohlenstoffatomen und einem einzigen Ring oder mehreren kondensierten Ringen. Solche Cycloalkylgruppen sind beispielsweise Monocyclen wie Cyclopropyl, Cyclobutyl, Cyclopentyl, Cyclooctyl u.Ä. oder multiple Ringstrukturen wie Adamantyl u.Ä.
Die Definition "Halogen" oder "Halo" bezieht sich auf Fluor, Chlor, Brom und lod und ist vorzugsweise entweder Fluor oder Chlor.
Der Ausdruck "Heteroaryl" bezieht sich auf aromatische carbocyclische Gruppen mit 1 bis 15 C-Atomen und 1 bis 4 Heteroatomen, ausgewählt aus Sauerstoff, Stickstoff und Schwefel, eingebaut in mindestens einen Ring (falls mehr als ein Ring vorliegt).
Solche Heteroarylgruppen können durch 1 bis 5 Substituenten und vorzugsweise 1 bis 3 Substituenten substituiert sein, wobei der oder die Substituenten ausgewählt sind aus Hydroxy, Acyl, Alkyl, Alkoxy, Alkenyl, Alkinyl, subst. Alkyl, subst. Alkoxy, subst. Alkenyl, subst. Alkinyl, Amino, subst. Amino, Aminoacyl, Acyloxy, Acylamino, Alkaryl, Aryl, Aryloxy, Azido, Carboxyl, Carboxylalkyl, Cyano, Halo, Nitro, Heteroaryl, Heteroaryloxy, Heterocyclo, Heterocyclooxy, Aminoacyloxy, Oxyacylamino, Thioalkoxy, subst. Thioalkoxy, Thioaryloxy, Thioheteroaryloxy, -SO-alkyl, -SO-subst. Alkyl, -SO-Aryl, -SO-Heteroaryl, -SO2-Alkyl, -SO2-subst. Alkyl, -SO2-Aryl, SO2-Heteroaryl und Trihalomethyl. Bevorzugte Substituenten sind Alkyl, Alkoxy, Halogen, Cyano, Nitro, Trihalogenmethyl und Thioalkoxy. Solche Heteroarylgruppen können aus einem einzigen Ring bestehen (beispielsweise Pyridyl oder Furyl) oder sie können mehrere kondensierte Ringe aufweisen (beispielsweise Indolizinyl oder Benzothienyl).
Der Ausdruck "Heterocyclus" oder "heterocyclisch" bezieht sich auf einwertige gesättigte oder ungesättigte Gruppen mit einem einzigen Ring oder mehreren kondensierten Ringen und mit 1 bis 15 Kohlenstoffatomen und 1 bis 4 Heteroatomen, ausgewählt aus Stickstoff, Schwefel und Sauerstoff und im Ring eingebaut.
Solche heterocyclischen Gruppen können mit 1 bis 5 Substituenten, ausgewählt aus Alkyl, subst. Alkyl, Alkoxy, subst. Alkoxy, Aryl, Aryloxy, Halogen, Nitro, Heteroaryl, Thio, Thioalkoxy, subst. Thioalkoxy, Thioaryloxy, Trihalogenmethyl und Ähnlichen substituiert sein.
Wenn die oben aufgeführten Gruppen einen oder mehrere Substituenten aufweisen, so ist natürlich klar, dass solche Gruppen keine Substituenten oder Substitutionsmuster enthalten, welche sterisch unmöglich und/oder synthetisch nicht machbar sind.
Gemäss vorliegender Definition bedeutet "Carbonsäurederivat" und "Sulfonsäurederivat" eine Gruppe -C(X)R1, -C(X)-N(R1)2, -C(X)OR1, -C(X)SR1, -SOnR1, -SOnOR1, -SOnSR1 oder -SOn-N(R1)2, worin X für O, S oder NR1 steht, und R1 Wasserstoff, Alkyl, substituiertes Alkyl oder Aryl bedeutet, und deren aktivierte Derivate wie die Anhydride, Ester und Halogenide, beispielsweise Chloride, Bromide und lodide, welche dazu verwendet werden, die Carbonsäure- und Sulfonsäurederivate an die 5-Aminogruppe unter Anwendung der üblichen Kopplungschemie anzukoppeln.
"Pharmazeutisch annehmbare Salze" bezieht sich auf Salze einer erfindungsgemässen Verbindung, die von einer grossen Anzahl organischer und anorganischer gegen Ionen abgeleitet sind, die dem Fachmann geläufig sind und beispielsweise die Ionen Natrium, Kalium, Calcium, Magnesium, Ammonium und Tetraalkylammonium und Ähnliche umfassen; enthält das Molekül eine basische Funktionalität, können Salze organischer oder anorganischer Säuren wie die Hydrochloride, Hydrobromide, Tartrate, Mesylate, Acetate, Maleate, Oxalate und Ähnliche als pharmazeutisch annehmbare Salze verwendet werden.
Der Ausdruck "Schutzgruppe" oder "Blockierungsgruppe" bezieht sich auf beliebige Gruppen, die, wenn sie an eine oder mehrere Hydroxylgruppen, Aminogruppen oder Carboxylgruppen der Verbindungen gebunden sind (einschliesslich deren Zwischenprodukte wie die Aminolactame, Aminolactone usw.), bestimmte Reaktionen verhindern, wobei diese Gruppen dann nach üblichen chemischen oder enzymatischen Arbeitsweisen zur Wiederherstellung der Hydroxyl-, Amino- oder Carboxylgruppe abgespalten werden können. Bevorzugte abspaltbare Aminoblockierungsgruppen sind die üblichen Substituenten wie t-Butyloxycarbonyl (t-BOC), Benzyloxycarbonyl (CBZ) u.Ä., die unter den bekannten Bedingungen abgespalten werden können und mit der Natur des Produktes vereinbar sind.
Es werden die folgenden Abkürzungen verwendet:
Abkürzungen:
[<1><2><5>I]AB-MECA = [<1><2><5>I]N6-(Amino-3-iodobenzyl)-adenosin-5 min -N-methyluronamid;
PIA = (R)-N6(Phenylisopropyl)-adenosin;
DMSO = Dimethysulfoxid;
I-AB-MECA = N<6>-(4-amino-3-iodobenzyl)-adenosin-5 min -N-methyluronamid;
IB-MECA = N<6>-(3-lodobenzyl)-adenosin-5 min -N-methyluronamid;
Ki = Gleichgewichts-Inhibitionskonstante;
NECA = 5 min -N-Ethylcarboxamido-adenosin;
THF = Tetrahydrafuran;
Tris = Tris(hydroxymethyl)aminomethan.
Herstellung der Verbindungen
Die organischen Chemiker wissen, dass reaktive und delikate funktionelle Gruppen vor einer bestimmten Reaktion oder Reaktionsfolge oft geschützt werden müssen und dann nach Beendigung der letzten Reaktion zu ihrer ursprünglichen Form wieder hergestellt werden müssen. Üblicherweise schützt man die Gruppen durch Umwandlung in ein relativ stabiles Derivat. Beispielsweise kann eine Hydroxylgruppe in eine Ethergruppe und eine Aminogruppe in ein Amid oder Carbamat umgewandelt werden. Verfahren zum Schutz und zur Aufhebung des Schutzes, auch bekannt als "Blockieren" und "Entblockieren" sind bekannt und werden laufend angewendet, siehe beispielsweise T. Green, Protective Groups in Organic Synthesis, John Wiley, New York (1981) oder Protective Groups in Organic Chemistry, J. F. W. McOmie, Plenum Press, London (1973).
Die vorliegenden Verbindungen werden vorzugsweise hergestellt durch Umsetzen einer Verbindung der unten stehenden Formel II mit einem geeigneten Carbonsäure- oder Sulfonsäurederivat unter Verwendung bekannter Chemie:
Verbindungen der Formel II können unter Verwendung der folgenden Schemata I und II hergestellt werden, worin R3 für Furan steht.
Schema I
Reagenzien: A) Triethylorthoformiat; B) 2-Furancarbonsäurehydrazid, 2-Methoxyethanol; C) PhOPh, 260 DEG C; D) 10% HCI, unter Rückfluss; E) Cyanamid, p-TsOH, N-Methylpyrrolidon
Schema II
Reagenzien: F) Furancarbonsäurehydrazid, Diphenylether; E) Cyanamid, pTsOH, N-Methylpyrrolidon.
Man erhält die Verbindungen der Formel II entweder auf indirektem Weg, beschrieben in Schema I, oder nach dem direkten Weg von Schema II. Geeignete Ausgangsmaterialien für beide Reaktionsschemata sind heterocyclische Ortho-aminonitrile der Formel III, im Allgemeinen hergestellt nach synthetischen Prozessen, die in der Literatur beschrieben und im Buch von E. C. Taylor und A. McKillop enthalten sind (Bd. 7 der Reihe Advances in Organic Chemistry, Interscience, 1970).
Orthoaminonitrile III überführt man in die entsprechenden Imidate der Formel IV durch Reaktion mit einem Überschuss an Ethylorthoformiat bei der Rückflusstemperatur während 8 bis 10 Std. Die Reaktion führt nach Abdampfen des Ethylorthoformiats zu einem praktisch reinen entsprechenden Imidat IV in hoher Ausbeute, nachgewiesen durch die IR- und <1>H NMR-Analyse der rohen Reaktionsprodukte.
Die Imidate der Formel IV werden dann einer Folge von zwei Reaktionen unterworfen, die die tricyclische Struktur der Formel VI in hoher Ausbeute liefert.
Die Reaktionsabfolge umfasst a) Umsetzung mit 2-Furancarbonsäurehydrazin in Lösung in 2-Methoxyethanol bei der Rückflusstemperatur während 8 bis 10 Std., und man erhält die Zwischenprodukte der Formel V; thermische Cyclisierung Letzterer zu den entsprechenden Verbindungen der Formel VI durch Erhitzen in Diphenylether bei der Temperatur von 260 DEG C während 0,5 bis 1 Std.
Die tricyclischen Verbindungen VI werden dann mit HCI am Rückfluss während 1 bis 3 Std. hydrolysiert unter Bildung der Triazole VII, die schliesslich mit Cyanamid in N-Methylpyrrolidon beim Rückfluss und in Gegenwart von para-Toluolsulfonsäure cyclisiert werden (Schema I).
ln manchen Fällen kann man die Triazole VII erhalten, indem man ein Orthoaminonitril III mit 2-Furancarbonsäurehydrazid in Diphenylether erhitzt. Triazole VII werden dann wie oben beschrieben im Schema II cyclisiert. In den folgenden Schemata III, IV und V wird die Synthese der Verbindungen der Formel II, in denen A ein Triazolring ist, in näheren Einzelheiten aufgeführt.
Schema III
Synthese von 5-Amino-7-subst-2(2-furyl)-1,2,3-triazolo[5,4-e]-1,2,4-triazolo[1,5-c]-pyrimidinderivaten
Schema IV
Synthese von 5-Amino-8-subst.2(2-furyl)-1,2,3-triazolo[5,4-e]-1,2,4-triazolo[1,5-c]-pyrimidinderivaten
Reagenzien: A) Furancarbonsäurehydrazid, PhOPh, 260 DEG C, B) NH2CN, p-TsOH, M-Methylpyrrolidon
Schema V
Synthese von 5-Amino-9-subst.2(2-furyl)-1,2,3-triazolo[5,4-e]-1,2,4-triazolo[1,5-c]-pyrimidinderivaten
Reagenzien: A) Furancarbonsäurehydrazid, PhOPh, 260 DEG C, B) NH2CN, p-TsOH, N-Methylpyrrolidon
Schliesslich werden die 5-aminohaltigen Verbindungen II mit Carbonsäuren, Sulfonsäuren, aktivierten Carbonsäuren, aktivierten Sulfonsäuren, Thiocarbonsäuren, aktivierten Thiocarbonsäuren und Ähnlichen umgesetzt, wobei sich die gewünschten Verbindungen bilden. Aktivierte Carbonsäuren sind Säurehalogenide, Ester, Anhydride und andere Derivate, von denen man weiss, dass sie mit Aminen unter Bildung von Amiden reagieren. Aktivierte Sulfonsäuren sind beispielsweise Sulfonylhalogenide wie Sulfonylchlorid.
Es ist nicht in allen Fällen erforderlich, aktivierte Carbonsäure- und Sulfonsäurederivate zu verwenden. Die Säuren selbst können mit den Aminen gekoppelt werden durch Anwendung der üblichen Kopplungschemie, beispielsweise unter Verwendung von Dicyclohexyl-diimid (DCI) und anderen üblicherweise benutzten Kopplungsmitteln. Geeignete Kopplungsbedingungen zur Bildung von Amidbindungen sind den Fachleuten auf dem Gebiet der Peptidsynthese bekannt.
Im Allgemeinen kann die oben beschriebene Chemie verwendet werden, um 8-(Ar)alkyl-2-(2-furyl)-pyrazoloÄ4,3-eÜ-1,2,4-triazoloÄ1,5-cÜ-pyrimidine herzustellen, wenn man 3-Cyano-2-aminopyrazole als Ausgangsverbindungen einsetzt. Die 3-Cyano-2-aminopyrazole können in einem polaren aprotischen Lösungsmittel wie Dimethylformamid (DMF) mit einem Alkylhalogenid (RX) umgesetzt werden, um eine Gruppe R an eines der Ring-Stickstoffatome zu bringen. Die so erhaltene Verbindung kann mit Triethylorthoformiat am Rückfluss gekocht werden, wobei sich ein Imino-ethylester bildet, der dann mit Furansäurehydrazid umgesetzt werden kann, vorzugsweise unter Verwendung eines Dean-Stark-Abscheiders zur azeotropischen Entfernung von Reaktionswasser, und man erhält die 8-(Ar)alkyl-2-(2-furyl)-pyrazolo[4,3-e]-1,2,4-triazolo[1,5-c]-pyrimidine. Diese Produkte können zur Verwendung in den folgenden Reaktionsstufen durch Chromatografie gereinigt werden, beispielsweise in Ethylacetat/Hexan 1:1.
Das Produkt dieser Reaktion kann nun mit einer geeigneten Säure, beispielsweise HCI, am Rückfluss umgesetzt werden, gefolgt von einer Reaktion mit Cyanamid in einem Lösungsmittel wie N-Methylpyrrolidon unter Zugabe catalytischer Mengen von Para-toluolsulfonsäure bei erhöhten Temperaturen. Man erhält 5-Amino-8-(Ar)alkyl-2-(2-furyl)-pyrazolo[4,3-e]-1,2,4-triazolo[1,5-c]-pyrimidine.
Diese aminsubstituierten Verbindungen können nun mit geeigneten Isocyanaten unter Bildung von Harnstoffverbindungen umgesetzt werden, mit aktivierten Carbonsäuren wie Säurehalogenide unter Bildung von Amiden, mit aktivierten Sulfonsäuren wie Sulfonsäurehalogeniden unter Bildung von Sulfonamiden oder anderen reaktiven Carbonsäure- oder Sulfonsäurederivaten unter Bildung anderer gewünschter Verbindungen.
Triazolo-triazolo-pyrimidinverbindungen können unter Anwendung einer ähnlichen Chemie erhalten werden, wobei man aber von einem geeigneten funktionalisierten Azid ausgeht und dieses Azid mit H2NC(O)CH2CN zur Bildung des ersten heterocyclischen Ringes umsetzt, gefolgt von einer Reaktion der Amidgruppe mit einem Entwässerungsmittel wie POCl3 unter Bildung eines Nitrils. Das erhaltene Cyano-aminotriazol kann auf die gleiche Art wie die oben besprochenen 3-Cyano-2-aminopyrazole zu entsprechenden Triazolotriazolopyrimidinen weiter umgesetzt werden.
Synthese radioaktiv markierter analogen Verbindungen
Die Verbindungen können mit einer geeigneten radioaktiven Markierung versehen werden. Beispiele geeigneter Radiomarkierungen sind <3>H und <1><4>C, aber es können auch andere nichttoxische Radiomarkierungen verwendet werden, wie sie üblicherweise in pharmakokinetischen Studien eingesetzt werden. Mittel zur Einführung von Radiomarkierungen in organische Verbindungen sind dem Fachmann bekannt.
Wenn die Verbindungen 5-[[subst. Phenyl)-amino]-carbonyl]-amino-8-(ar)alkyl-2-(furyl)-pyrazolo[4,3-e]-1,2,4-triazolo[1,5-c]-pyrimidinverbindungen oder 5-Amino-8-(ar)alkyl-2-(2-furyl)-pyrazolo[4,3-e]-1,2,4-triazolo[1,5-c]-pyrimidinverbindungen sind, so ist die Einführung einer Tritium-Markierung recht einfach.
Bei einer Ausführungsform ist ein geeignetes Ausgangsmaterial eine Verbindung, in welcher die (Ar)alkylgruppe an der 8-Stellung eine Doppelbindung enthält. Diese Doppelbindung kann man nun mit Tritium in Anwesenheit eines geeigneten Katalysators umsetzen, beispielsweise Palladium auf Aktivkohle, oder mit anderen bekannten Hydrierungskatalysatoren.
Beispielsweise kann man 5-[[(4-Methoxyphenyl)-amino]-carbonyl]-amino-8-(1,2-ditritiopropyl)-2-(2-furyl)-pyrazolo[4,3-e]-1,2,4-triazolo[1,5-c]- pyrimidin (Verbindung 102) dadurch herstellen, dass man Tritium in die Doppelbindung von 5-[[(4-Methoxyphenyl)-amino]-carbonyl]-amino-8-1-propenyl-2-(2-furyl)-pyrazolo[4,3-e]-1,2,4-triazolo[1,5-c]-pyrimidin (Verbindung 101) einführt. Die Verbindung 102 wird weiter unten unter Bezugnahme auf Studien bezüglich verschiedener Bindungsaffinitäten an JURKAT-Krebszellen besprochen.
Man kann aber auch die Tritiummarkierung durch Verbindungen einführen, die man mit der 5-Aminogruppe unter Bildung der Amide, Harnstoffe oder anderer Gruppen an der 5-Stellung umsetzt. Beispielsweise können die Isocyanate, die man zur Herstellung der 5-Aminocarbonylaminoverbindungen einsetzt, die in diesem Dokument beschrieben sind, Tritium oder andere Radiomarkierungen enthalten, und diese können daher leicht in das Endprodukt eingeführt werden.
In einer anderen Ausführungsform kann man die Radiomarkierung in das Molekül einführen, während das Ringsystem aufgebaut wird. Wie schon oben unter Bezugnahme auf die Synthese der Verbindungen der Formel II besprochen wurde, werden verschiedene tricyclische Verbindungen der Formel VI mit HCI hydrolysiert, um die Triazole der Formel VII zu ergeben, die dann mit Cyanamid am Rückfluss in Gegenwart von P-Toluolsulfonsäure cyclisiert werden, wie im Schema I gezeigt wird. Es ist nun relativ einfach, eine <1><4>C-Markierung an dieser Stelle der Synthese einzuführen, indem man mit <1><4>C markiertes Cyanamid verwendet.
lodierte Verbindungen können beispielsweise hergestellt werden, indem man radioaktives lod in die aromatische Verbindung einbringt, die mit der 5-Aminogruppe reagieren soll. Die Einführung des lods in aromatische Ringe ist dem Fachmann gut bekannt. Es ist einfach, ein lodatom in die aromatischen Verbindungen einzuführen, die mit der 5-Aminogruppe unter Bildung der hierin beschriebenen Verbindungen reagieren.
Daher kann man nur unter Anwendung der gängigen Techniken leicht geeignete radiomarkierte analoge Verbindungen herstellen.
Synthese von fluoreszenzmarkierten analogen Verbindungen
Wie bei den radio-markierten Verbindungen ist die Synthese von fluoreszenzmarkierten Verbindungen relativ einfach. Vorzugsweise stehen die fluoreszierenden Gruppen in der R2-Stellung, obwohl auch eine Substitution an der Stellung R3 möglich ist. Bei einer Ausführungsform sind die fluoreszierende Gruppe oder die Gruppen ein Furanring, der in der Stellung R3 gebunden sein kann. Andererseits können auch andere aromatische Ringe verwendet werden. Fluoreszierende Markierungen sind dem Fachmann bekannt und können unter Anwendung bekannter Chemie an die hierin beschriebenen Verbindungen angebracht werden.
Verfahren zur Verwendung der Verbindungen
Die Verbindungen können in allen Fällen verwendet werden, bei denen Agonisten und Antagonisten der A3-Rezeptors im Spiele sind, nämlich - Behandlung von Bluthochdruck; - Behandlung entzündlicher Symptome wie rheumatische Arthritis und Schuppenflechte; - Behandlung allergischer Störungen wie Heuschnupfen und allergischem Nasenkatarr; - Mastzellen-Degranulation; - Antitumor-Wirkstoffe; - Behandlung von Sauerstoffmangel im Herzen; und - Schutz gegen zerebrale Blutleere; wie beispielsweise beschrieben in Jacobson, TIPS Mai 1998, S. 185-191, wobei der Inhalt dieses Artikels Bestandteil des vorliegenden Dokuments sein soll. Eine bevorzugte Verwendung dieser Verbindungen ist das Aufspüren und/oder die Behandlung von Krebs. Wie weiter unten besprochen wird, exprimieren Tumorzellen in A3-Rezeptor. Es wird angenommen, dass der A3-Rezeptor die Zellen vor einer Beschädigung durch Blutleere schützt, wenn sie keine ausreichende Blutversorgung erhalten. Verschiedene handelsübliche Medikamente und auch in Entwicklung befindliche Medikamente zielen auf die Inhibierung der VEGF-Expressionen ab, welche die Blutversorgung der Tumorzellen abschneidet. Ein Agonismus des Adenosin-A3-Rezeptors kann jedoch eine Schutzwirkung herbeiführen und die Abtötung der Tumorzellen verhindern, während die Zellen eine ausreichende Blutversorgung nicht mehr erhalten. Durch Zugabe von Antagonisten dieser Rezeptoren zusammen mit Verbindungen gegen VEGF oder anderen antiangiogenen Substanzen können die Tumorzellen von einer neuen Blutversorgung abgeschnitten werden und verlieren den Schutz gegen Beschädigung durch Blutleere, welchen der Agonismus des A3-Rezeptors herbeiführt.
Die Verbindungen können dem Patienten auf beliebige medizinisch annehmbare Weise verabreicht werden. Geeignete Verabreichungsmittel sind oral, rectal, örtlich oder parenteral (einschliesslich subkutan, intramuskulär und intravenös). Eine orale oder parenterale Verabreichung ist bevorzugt.
Die Menge der Verbindungen, die als Modulator eines Adenosin-Rezeptors wirksam ist, hängt natürlich vom jeweilig behandelten Patienten oder Säugetier ab und wird schliesslich vom behandelnden Arzt oder Veterinär festgesetzt. Die dabei zu beachtenden Faktoren sind die zu behandelnde Störung, die Art der Verabreichung, die Art der Formulierung, das Gewicht, die Flächengrösse, das Alter und der Allgemeinzustand des zu behandelnden Patienten oder Tieres und die jeweilig zu verabreichende Verbindung. Im Allgemeinen liegt eine geeignete wirksame Dosierung im Bereich von etwa 0,1 mu g/kg bis etwa 10 mg/kg pro Körpergewicht und Tag, vorzugsweise im Gebiet von ca. 1 mg/kg bis etwa 3 mg/kg pro Tag.
Die gesamte Tagesdosis kann als Einzeldosis, als Mehrfachdosis, beispielsweise 2- bis 6-mal pro Tag, oder durch intravenöse Infusion während einer bestimmten Zeit gegeben werden. Dosierungen oberhalb oder unterhalb des oben genannten Bereiches liegen auch im Schutzumfang der vorliegenden Erfindung und können einem bestimmten Patienten gegeben werden, wenn es gewünscht oder notwendig ist. Beispielsweise würde bei einem Tier mit einem Gewicht von 75 kg eine Tagesdosis zwischen etwa 75 mg und 220 mg liegen und eine typische Dosierung bei etwa 150 mg. Wenn mehrere Einzeldosierungen angezeigt sind, kann man beispielsweise 50 mg einer Verbindung 3-mal pro Tag verabreichen.
Bei einer anderen Ausführungsform können die radiomarkierten Verbindungen einem Patienten verabreicht werden, um eine Untersuchung durchzuführen, welche die Anwesenheit oder Abwesenheit von krebsbefallenen Tumorzellen bestimmt, die A3-Rezeptoren exprimieren. Die hierin beschriebenen Verbindungen, welche eine relativ hohe Affinität für den Untertypus des A3-Rezeptors aufweisen, werden mit Vorteil einem Patienten verabreicht, und nachdem sich die Verbindungen an die A3-Rezeptoren gebunden haben, die in den Tumorzellen vorliegen, kann der Ort der Verbindungen durch Bestimmung des Ortes der radiomarkierten Verbindungen festgestellt werden. Apparate zur Bestimmung des Ortes und der Dichte von radiomarkierten Verbindungen sind den Fachleuten gut bekannt.
Die Verwendung von radiomarkierten und/oder fluoreszenzmarkierten Verbindungen bei der Chirurgie zur Entfernung von Krebsgewebe kann ebenfalls von Vorteil sein. Oftmals sollte der Chirurg wissen, ob er das Krebsgewebe vollständig entfernt hat. Dazu können die radioaktiv oder fluoreszierend markierten Verbindungen dem Patienten entweder vor oder nach der Operation verabreicht werden, wobei sie sich an Krebszellen binden, welche im Patienten vorliegen. Die Zeit der Verabreichung hängt u.a. von der Aufnahme der jeweiligen Verbindung durch die bestimmten Tumorzellen ab sowie vom Ort des Tumors im Körper. Der Chirurg hat dann eine relativ einfache Möglichkeit, die Anwesenheit von zurückgebliebenen Krebszellen nach Entfernung des Tumors zu bestimmen. Die Anwesenheit von restlichen Tumorzellen kann dadurch bestimmt werden, dass man die Fluoreszenz oder die Radioaktivität an der Operationsstelle misst, wobei die üblichen analytischen Geräte eingesetzt werden, die der Fachwelt bekannt sind.
Eine Bestimmung von Krebszellen in vitro kann dadurch ausgeführt werden, dass man die Verbindungen einer Suspension von Zellen in einem Zellkulturmedium zugibt, die Bindung der Verbindung an die Adenosin-A3-Rezeptoren in den Krebszellen abwartet und dann die Markierung bestimmt.
Formulierungen
Die oben beschriebenen Verbindungen werden vorzugsweise in Form von Zubereitungen verabreicht, die einen Wirkstoff enthalten, d.h. eine Verbindung der Formel I, zusammen mit einem annehmbaren Träger für die jeweilige Art der Verabreichung. Geeignete pharmazeutisch annehmbare Trägerstoffe sind dem Fachmann bekannt.
Die Formulierungen können gegebenenfalls andere therapeutisch aktive Bestandteile enthalten, wie antivirale Mittel, Antitumormittel, Antibiotika, entzündungshemmende Mittel, Analgesika und Immunosuppressoren. Der Träger muss pharmazeutisch annehmbar sein in dem Sinne, dass er mit den anderen Bestandteilen der Formulierung verträglich ist und den Patienten nicht negativ beeinflusst.
Die Formulierungen können Trägerstoffe enthalten, die zur oralen, rektalen, örtlichen oder parenteralen Verabreichung (subkutan, intramuskulär und intravenös) geeignet sind. Bevorzugte Trägerstoffe sind diejenigen für eine orale oder parenterale Verabreichung.
Formulierungen, die für die parenterale Verabreichung geeignet sind, bestehen üblicherweise aus einer sterilen wässrigen Zubereitung des Wirkstoffes, die vorzugsweise isotonisch mit dem Blut des Empfängers ist. Solche Formulierungen können also destilliertes Wasser, eine 5%ige Lösung von Dextrose in destilliertem Wasser oder eine Salzlösung sein. Nützliche Formulierungen sind ausserdem konzentrierte Lösungen oder Feststoffe, die die Verbindung der Formel I enthalten und nach Verdünnung mit einem geeigneten Lösungsmittel eine Lösung ergeben, die sich zur oben erwähnten parenteralen Verabreichung eignet.
Zum Zwecke einer enteralen Verabreichung kann die Verbindung mit einem inerten Trägerstoff in Einzeleinheiten formuliert werden, beispielsweise Kapseln, Dragees, Tabletten oder Täfelchen, von denen jede eine bestimmte Menge an Wirkstoff enthält; als Pulver oder Granulat; oder als eine Suspension oder Lösung in einer wässrigen oder nicht wässrigen Flüssigkeit, beispielsweise als Sirup, Elixier, Emulsion oder Suspension. Geeignete Träger sind Stärke oder Zucker und können weiterhin Schmiermittel, Aromastoffe, Bindemittel und andere Stoffe der gleichen Art enthalten.
Eine Tablette kann durch Kompression oder Giessen hergestellt werden, gegebenenfalls mit einem oder mehreren Hilfsstoffen. Gepresste Tabletten werden durch Komprimieren des Wirkstoffes in rieselfähiger Form, d.h. als Pulver oder Granulat, gegebenenfalls vermischt mit Hilfsstoffen wie Bindemitteln, Schmiermitteln, inerte Verdünner, oberflächenaktive Mittel oder Dispergiermittel hergestellt. Gegossene Tabletten werden hergestellt, indem man in einer geeigneten Maschine ein Gemisch der gepulverten Wirkstoffverbindung mit einem geeigneten Trägerstoff aufschmilzt.
Ein Sirup oder eine Suspension werden hergestellt, indem man den Wirkstoff einer konzentrierten wässrigen Lösung eines Zuckers, beispielsweise Saccharose, hinzugibt, unter eventueller Zugabe von Hilfsstoffen. Solche Hilfsstoffe können Aromastoffe, Kristallisationsverzögerer des Zuckers oder Mittel sein, die die Löslichkeit anderer Bestandteile verbessern, beispielsweise ein mehrwertiger Alkohol wie Glycerin oder Sorbit.
Die Verbindungen können auch örtlich verabreicht werden in Form einer Lösung, einer Salbe, Crème, Lotion oder eines polymeren Materials (beispielsweise ein Pluronik< TM >, BASF), und es können die aus der Pharmazie bekannten üblichen Herstellungsmethoden angewendet werden. Ausser der Lösung, der Salbe, Crème, des Gels, der Lotion oder des polymeren Stoffes und des Wirkstoffes können solche örtlichen Formulieren auch noch Konservierungsmittel, Parfums und andere pharmazeutische Wirkstoffe enthalten.
Zur rektalen Verabreichung stellt man Suppositorien mit einem üblichen Träger wie Kakaobutter oder Witepsol S55 (Warenzeichen der Dynamite Nobel Chemical, Deutschland) her.
Die Wirkstoffverbindung kann auch in Form von Liposomen oder Mikrokügelchen (oder Mikropartikeln) verabreicht werden. Verfahren zur Herstellung von Liposomen und Mikrokügelchen zur Verabreichung an einen Patienten sind dem Fachmann bekannt. Die US-Patentschrift Nr. 4 789 734, deren Inhalt Teil der vorliegenden Beschreibung ist, beschreibt Verfahren zum Einkapseln biologischer Materialien in Liposomen. Dabei wird im Prinzip das Material in einer wässrigen Lösung aufgelöst und die geeigneten Phospholipide und Lipide hinzugegeben, wobei wenn nötig Tenside mitverwendet werden, und die Mischung wird dialysiert oder mit Ultraschall behandelt, falls erforderlich. Eine Übersicht über bekannte Verfahren findet man in G. Gregoriadis, Kapitel 14, "Liposome", Drug Carriers in Biology and Medicine, Seiten 287-341 (Academic Press, 1979). Mikrokügelchen aus Polymeren oder Proteinen sind der Fachwelt bekannt und können an den Durchgang durch den Magen-Darm-Kanal unmittelbar in den Blutstrom angepasst werden. Der Wirkstoff kann aber auch in den Mikrokügelchen oder deren Mischungen für eine langsame Abgabe, die sich über Tage oder Monate erstrecken kann, implantiert werden. Siehe beispielsweise US-A-4 906 474, 4 925 673 und 3 625 214, deren Offenbarung als Teil des vorliegenden Dokumentes gelten soll.
Bevorzugte Mikroteilchen sind diejenigen, die man unter Verwendung von biologisch abbaubaren Polymeren herstellt, wie Polyglycoliden, Polylactiden und deren Copolymeren. Der Fachmann ist in der Lage, schnell ein geeignetes Trägersystem zu finden, welches von verschiedenen Faktoren abhängt, beispielsweise die gewünschte Geschwindigkeit der Wirkstoffabgabe und die gewünschte Dosierung.
Die Formulierungen können auf einfache Weise in Dosierungseinheiten gebracht werden und können nach den in der Pharmazie bekannten Verfahren hergestellt werden. In allen Fällen wird der Wirkstoff mit einem Träger kombiniert, der einen oder mehrere Hilfsstoffe darstellt. Im Allgemeinen werden die Formulierungen durch gleichförmiges und gründliches Vermischen des Wirkstoffes mit einem flüssigen oder fein verteilten festen Träger hergestellt und dann, wenn nötig, in eine gewünschte Form der Dosierungseinheit gebracht.
Ausser den vorstehend genannten Bestandteilen können die Formulierungen weitere Hilfsstoffe enthalten, die der Art der Formulierung angepasst sind, beispielsweise Verdünner, Puffer, Geruchsstoffe, Bindemittel, Tenside, Verdicker, Schmiermittel, Suspensionshilfsmittel, Konservierungsmittel (einschliesslich Antioxidantien) u.Ä.
Bestimmung des Aktivitätsgrades der Verbindungen
Die Aktivität der Verbindungen kann in einfachen Routineversuchen auf eine der folgenden Arten festgestellt werden.
Bindung des Adenosin-A1- und A2A-Rezeptors an Ratten
Herstellung der Membran:
Männliche Wistar-Ratten (200-250 g) werden betäubt und getötet, und das gesamte Hirn (ausser Gehirnstamm Striatum und Cerebellum) wird auf Eis präpariert. Das Hirngewebe wird in einem Polytron (Einstellung 5) in 20 Vol.-Teilen von 50 mM-Tris-HCI vom pH 7,4 zerschlagen. Das Homogenat wird dann bei 48 000 g 10 Minuten lang zentrifugiert und der tablettenartige Rückstand erneut in Tris-HCI suspendiert, welche 2 IU/ml an Adenosin-Deaminase, Typ VI (Sigma Chemical Company, St. Louis, MO, USA) enthält. Nach 30 Minuten Inkubieren bei 37 DEG C werden die Membranen zentrifugiert und die Rückstände bei -70 DEG C gelagert. Das Striatalgewebe wird in einem Polytron in 25 Vol.-Teilen an 50 mM Tris-HCL-Puffer homogenisiert, welcher 10 mM MgCl2 vom pH 7,4 enthält. Das Homogenat wird dann 10 Min. bei 48 000 g und 4 DEG C zentrifugiert und erneut in Tris-HCI-Puffer, enthaltend 2 IU/ml Adenosin-Deaminase, suspendiert. Nach 30-minütigem Inkubieren bei 37 DEG C werden die Membranen zentrifugiert und der Rückstand bei -70 DEG C aufbewahrt.
Versuche zum Binden an Radioliganden:
Die Bindung von [<3>H]-DPCPX (1,3-Dipropyl-8-cyclopentylxanthin) an Rattenhirnmembranen wird im Wesentlichen nach dem vorbeschriebenen Verfahren von Bruns et al., Proc. Natl. Acad. Sci, 77, 5547-5551, 1980, ausgeführt. Verdrängungsversuche werden in 0,25 ml eines Puffers, der 1 nM [<3>H]-DPCPX, 100 mu l verdünnte Membranen aus Rattenhirn (100 mu g Protein pro Test) und mindestens 6 bis 8 verschiedene Konzentrationen der zu prüfenden Verbindung enthält, ausgeführt. Unspezifische Bindungen können in Gegenwart von 10 mu M CHA (N<6>-Cyclohexyladenosin) bestimmt werden, und diese beträgt stets </= 10% der Gesamtbindung. Die Inkubationsdauer ist normalerweise 120 Min. bei 25 DEG C.
Die Bindung von [<3>H]-SCH 58261 (5-Amino-7-(2-phenylethyl)-2-(2-furyl)-pyrazolo[4,3-e]-1,2,4-triazolo[1,5-c]-pyrimidin) an Striatalmembranen (100 mu g Protein pro Test) wird nach den von Zocchi et al. beschriebenen Verfahren J. Pharm. and Exper. Ther. 276: 398-404 (1996) ausgeführt. Bei Verdrängungsuntersuchungen sollten mindestens 6 bis 8 unterschiedliche Konzentrationen an zu untersuchender Verbindung verwendet werden. Unspezifische Bindung kann in Gegenwart von 50 mu M NECA (5 min -(N-Ethylcarboxamido)-adenosin) bestimmt werden. Die Inkubationsdauer beträgt normalerweise 60 Min. bei 25 DEG C.
Gebundene und freie Radioaktivität kann dadurch getrennt werden, dass man das Versuchsgemisch durch Whatman-GF/B-Glasfaserfilter unter Verwendung einer Zellsammelvorrichtung nach Brandel (Gaithersburg, MD, USA) abfiltert. Das Inkubationsgemisch wird mit 3 ml eiskaltem Inkubationspuffer verdünnt, schnell im Vakuum filtriert und das Filter 3-mal mit 3 ml Inkubationspuffer gewaschen. Die auf dem Filter gebundene Radioaktivität kann beispielsweise durch Flüssigkeits-Szintillationspektrometrie gemessen werden. Die Proteinkonzentration wird beispielsweise nach der Bio-Rad-Methode bestimmt (Bradford, Anal. Biochem. 72: 248 (1976)), wobei Rinderalbumin als Bezugsstandard verwendet wird.
Bindung von menschlichem geklontem Adenosin-A3-Rezeptor
Bestimmung der Bindung des Rezeptors:
Bindungsanalysen werden nach den Verfahren ausgeführt, die von Salvatore et al. in Proc. Natl. Acad. Sci. 90: 10365-10369 (1993) beschrieben wurden. Zur Untersuchung der Sättigung wird ein Aliquot von Membranen (8 mg Protein/ml) aus HEK-293-Zellen mit menschlichem rekombinantem Adenosin-A3-Rezeptor (Research Biochemical International, Natick, MA, USA) transfiziert, werden mit 10 bis 12 verschiedenen Konzentrationen an [<1><2><5>l] AB-MECA im Bereich von 0,1 bis 5 nM inkubiert. Verdrängungsversuche werden jeweils doppelt in einem Endvolumen von 100 mu l in Teströhrchen ausgeführt, die 0,3 nM [<1><2><5>I]AB-MECA, 50 mM Tris-HCI-Puffer, 10 mM MgCl2 vom pH 7,4 und 20 mu l verdünnten Membranen (12,4 mg Protein/ml) und mindestens 6 bis 8 unterschiedliche Konzentrationen zu prüfender Liganden enthalten.
Die Inkubationsdauer betrug 60 Min. bei 37 DEG C. Gebundene und freie Radioaktivität würden durch Filtrieren des Testgemisches durch Glasfaserfilter Whatman GF/B unter Verwendung eines Zellensammlers nach Brandel voneinander getrennt. Unspezifische Bindung ist definiert als eine Bindung in Anwesenheit von 50 mu M R-PIA und betrug etwa 30% der Gesamtbindung. Das Inkubationsgemisch wurde mit 3 ml eiskaltem Inkubationspuffer verdünnt, schnell im Vakuum filtriert, und das Filter wurde 3-mal mit 3 ml Inkubationspuffer gewaschen. Die am Filter gebundene Radioaktivität wurde in einem Beckmanzähler gamma 5500B gezählt. Die Proteinkonzentration kann nach der Bio-Rad-Methode (3) mit Rinderalbumin als Bezugsstandard bestimmt werden.
Datenanalyse
Die Werte der Inhibierungskonstante Ki können aus denjenigen der IC50 mit der Gleichung nach Cheng & Prusoff berechnet werden (Cheng und Prusoff, Biochem. Pharmacol. 22: 3099-3108 (1973)), Ki = IC50/(1 + [C*] / KD*), worin [C*] die Konzentration des Radioliganden und KD* dessen Dissoziationskonstante sind.
Ein Programm für eine gewichtete, nichtlineare Kurve der kleinsten Quadrate LIGAND (Munson und Rodbard, Anal. Biochem. 107: 220-239 (1990)) kann zur Computeranalyse von Sättigungs- und Inhibitionsversuchen verwendet werden. Die Daten werden meist als geometrische Mittel mit einer Verlässlichkeit von 95% oder 99% angegeben.
BEISPIELE
Die folgenden Beispiele veranschaulichen erfindungsgemässe Aspekte, sollen aber nicht als Einschränkungen verstanden werden. Die in den Beispielen verwendeten Symbole und Konventionen sollen mit denjenigen übereinstimmen, die in der internationalen chemischen Gegenwartsliteratur verwendet werden, beispielsweise im Journal of the American Chemical Society ("J. Am. Chem. Soc.") und Tetrahedron.
Beispiel 1: Herstellung von 8-(Ar)alkyl-2-(2-furyl)-pyrazolo[4,3-e]-1,2,4-triazolo[1,5-c]-pyrimidinen (Verbindungen 18 bis 25)
8-(Ar)alkyl-2-(2-furyl)-pyrazolo[4,3-e]-1,2,4-triazolo[1,5-c]-pyrimidine wurden nach der im folgenden Schema VI gezeigten Synthesestrategie hergestellt:
Schema Vl. Allgemeines Verfahren zur Herstellung von 8-(Ar)alkyl-2-(2-furyl)-pyrazolo[4,3-e]-1,2,4-triazolo[1,5-c]-pyrimidinen (18 bis 25)
Reagenzien: a) NaH, DMF, RX; b) HC(OEt)3, Rückfluss, c) Furoylhydrazid, MeO(CH2)2OH; d) Ph2O, 260 DEG C, Flashchromatografie
Zur Herstellung der Verbindungen 18 bis 25 wird eine Lösung von 1 (10 mmol) in 40 ml DMF, gekühlt auf 0 DEG C, mit NaH (60% in \l, 12 mmol) in Anteilen über 10 Minuten behandelt. Nach 45 Minuten wurde das entsprechende Ar(alkyl)halogenid zugegeben, das Reaktionsgemisch auf 25 DEG C erwärmt und 3 bis 5 Std. gerührt (TLC:EtOAc 1:1). Die Reaktion wurde durch Zugabe von 80 ml Wasser abgestoppt, und die wässrige Schicht wurde mit 5 x 25 ml EtOAc extrahiert. Die organischen Schichten wurden miteinander vereinigt, über Na2SO4 getrocknet, filtriert und das Filtrat unter vermindertem Druck eingeengt, und man erhielt das alkylierte Pyrazol (2-9) als untrennbare Mischung von N<1>- und N<2>-Isomeren (Verhältnis etwa 1:4). Dieses Gemisch aus N<1>- und N<2>-substituierten 4-Cyano-5-amino-pyrazolen (2-9) wurde dann in 60 ml Triethylorthoformiat gelöst und die Lösung unter Stickstoff 8 Std. lang am Rückfluss gekocht. Dann wurde das Lösungsmittel unter Vakuum entfernt und der ölige Rückstand, nämlich das Gemisch von Imidaten (10-17) in 50 ml 2-Methoxyethanol gelöst, und es wurden 13 mmol 2-Furancarbonsäurehydrazid zugesetzt. Das Gemisch wurde 5 bis 10 Std. lang am Rückfluss gekocht, das Lösungsmittel nach dem Erkalten unter vermindertem Druck entfernt und der dunkle ölige Rückstand wurde ohne weitere Reinigung in 50 ml Diphenylether bei 260 DEG C an einem Dean-Stark-Wasserabscheider zur azeotropen Abscheidung des Reaktionswassers cyclisiert. Nach 11/2 Std. wurde das Gemisch in 300 ml Hexan eingegossen und abgekühlt. Die Fällung wurde abfiltriert und der Rückstand durch Chromatografie (EtOAC/Hexan 1:1) gereinigt. Auf diese Weise wurde das N<8>-alkylierte Hauptprodukt (18-25) in guter Gesamtausbeute gewonnen.
Nach dieser allgemeinen Arbeitsweise wurden die folgenden Verbindungen hergestellt:
8-Methyl-2-(2-furyl)-pyrazolo[4,3-e]-1,2,4-triazolo[1,5-c]-pyrimidin (18)
Ausbeute 45%; gelber Feststoff, Fp. 155-156 DEG C (EtOAc-Leichtbenzin); IR (KBr): 1615, 1510 cm<-><1>; <1>H NMR (DMSO d6) delta 4.1 (s, 1H); 6.32 (m, 1H); 7.25 (m, 1H); 8.06 (m, 1H); 8.86 (s, 1H); 9.38 (s, 1H).
8-Ethyl-2-(2-furyl)-pyrazoloÄ4,3-eÜ-1,2,4-triazoloÄ1,5-cÜ-pyrimidin (19)
Ausbeute 50%; hellgelber Feststoff, Fp. 188-189 DEG C (EtOAc-Leichtbenzin); IR (KBr): 1620, 1500 cm<-><1>; <1>H NMR (DMSO d6) delta ; 1.67 (t, 2H, J = 7); 4.53 (q, 2H, J = 7); 6.59 (m, 1H); 7.23 (m, 1H); 7.64 (s, 1H); 8.34 (s, 1H); 9.10 (s, 1H).
8-Propyl-2-(2-furyl)-pyrazoloÄ4,3-eÜ-1,2,4-triazoloÄ1,5-cÜ-pyrimidin (20)
Ausbeute 60%; gelber Feststoff, Fp. 189-190 DEG C (EtOAc-Leichtbenzin); IR (KBr): 1600, 1505 cm<-><1>; <1>H NMR (DMSO d6) delta : 0.98 (t, 2H, J = 7); 2.03-2.10 (m, 2H); 4.41 (q, 2H, J = 7); 6.60 (m, 1H); 7.24 (m, 1H); 7.64 (s, 1H); 8.32 (s, 1H); 9.10 (s, 1H).
8-Butyl-2-(2-furyl)-pyrazolo[4,3-e]-1,2,4-triazolo[1,5-c]-pyrimidin (21)
Ausbeute 50%; hellgelber Feststoff, Fp. 245-247 DEG C (EtOAc-Leichtbenzin); IR (KBr): 1610, 1500 cm<-><1>; <1>H NMR (DMSO d6) delta , 0.9 (m, 3H); 1.3 (m, 2H); 1.9 (m, 2H); 4.5 (t, 2H, J = 7.2); 6.2 (m, 1H); 7.3 (m, 1H); 8.0 (m, 1H); 8.9 (s, 1H); 9.4 (s, 1H).
8-Isopentyl-2-(2-furyl)-pyrazolo[4,3-e]-1,2,4-triazolo[1,5-c]-pyrimidin (22)
Ausbeute 54%; hellgelber Feststoff, Fp. 235-237 DEG C (EtOAc-Leichtbenzin); IR (KBr): 1635, 1510, 1450 cm<-><1>; <1>H HMR (DMSO d6) delta ; 1.0 (d, 6H, J = 6.2); 1.5-1.9 (m, 3H); 4.6 (t, 2H, J = 7.4); 6.6 (m, 1H); 7.3 (m, 1H); 7.7 (m, 1H); 8.8 (s, 1H); 9.1 (s, 1H).
8-(2-Isopentenyl)-2-(2-furyl)-pyrazolo[4,3-e]-1,2,4-triazolo[1,5-c]-pyrimidin (23)
Ausbeute 48%; gelber Feststoff, Fp. 210-212 DEG C (EtOAc-Leichtbenzin); IR (KBr): 1625, 1500, 1430 cm<-><1>; <1>H NMR (DMSO d6) delta ; 1.79 (s, 3H); 1.87 (s, 3H); 5.05 (d, 2H, J = 6); 5.55-5.63 (m, 1H); 6.60 (m, 1H); 7.24 (m, 1H); 7.64 (s, 1H); 8.34 (s, 1H); 9.10 (s, 1H).
8-2-Phenylethyl-2-(2-furyl)-pyrazolo[4,3-e]-1,2,4-triazolo[1,5-c]-pyrimidin (24)
Ausbeute 56%; Fp. 268-270 DEG C (EtOAc-Leichtbenzin); IR (KBr): 1660, 1510, 1450 cm<-><1>; <1>H NMR (DMSO d6) delta : 3.32 (t, 2H, J = 6.7); 4.72 (t, 2H, J = 6.7); 6.73 (s, 1H); 7.23 (m, 5H); 7.95 (s, 1H); 8.8 (s, 1H); 9.41 (s, 1H).
Anal. (C18H14N6O) C, H, N.
8-(3-Phenylpropyl)-2-(2-furyl)-pyrazolo[4,3-e]-1,2,4-triazolo[1,5-c]-pyrimidin (25)
Ausbeute 63%; gelber Feststoff, Fp. 165-166 DEG C (EtOAc-Leichtbenzin), IR (KBr): 1630, 1500, 1440 cm<-><1>; <1>H NMR (DMSO d6) delta : 2.34-2.48 (m, 2H); 2.67 (t, 3H, J = 7.5); 4.43 (t, 2H, J = 7.5); 6.61 (m, 1H); 7.16-7.32 (m, 6H); 7.64 (d, 1H, J = 2); 8.29 (s, 1H); 9.02 (s, 1H).
Beispiel 2: Herstellung von 5-Amino-8-(ar)alkyl-2-(2-furyl)-pyrazolo[4,3-e]-1,2,4-triazolo[1,5-c]-pyrimidinen (Verbindungen 33 bis 40)
5-Amino-8-(ar)alkyl-2-(2-furyl)-pyrazolo[4,3-e]-1,2,4-triazolo[1,5-c]-pyrimidine können nach der Synthesestrategie hergestellt werden, welche im folgenden Schema VII gezeigt ist:
Schema VII: Allgemeine Verfahren zur Herstellung von 5-Amino-8-(ar)alkyl-2-(2-furyl)-pyrazolo[4,3-e]-1,2,4-triazolo[1,5-c]-pyrimidinen (Verbindungen 33 bis 40)
Reagenzien: a) HCI, Rückfluss; b) NH2CN, 1-Methyl-2-pyrrolidon, p-TsOH, 140 DEG C
Zur Herstellung der Verbindungen 33 bis 40 wurde eine Lösung des Gemisches von 10 mmol Triazolopyrimidin (18-25) in 50 ml wässriger 10%iger HCI 3 Std. lang am Rückfluss gekocht. Die Lösung wurde dann abgekühlt und mit einer gesättigten NaHCO3-Lösung bei 0 DEG C neutralisiert. Die Verbindungen (26-33) wurden mit 3 x 20 ml EtOAc extrahiert, die organischen Schichten über Na2SO4 getrocknet und unter Vakuum eingedampft. Das erhaltene rohe Amin (26-33) wurde in 40 ml N-Methylpyrrolidon gelöst, 60 mmol Cyanamid und 15 mmol p-Toluolsulfonsäure wurden zugegeben, und das Gemisch wurde 4 Std. lang auf 160 DEG C erhitzt. Dann wurden noch 60 mmol Cyanamid zugesetzt und die Lösung über Nacht erwärmt. Die Lösung wurde dann mit 80 ml EtOAc verdünnt, der Rückstand (überschüssiges Cyanamid) abfiltriert, das Filtrat unter vermindertem Druck eingeengt und mit 3 x 30 ml Wasser gewaschen. Die organische Schicht wurde über Na2SO4 getrocknet und im Vakuum eingeengt. Der Rückstand wurde chromatografisch gereinigt (EtOAC/Leichtbenzin 2:1), und man erhielt das gewünschte Produkt (34-41) als Feststoff.
Nach dieser allgemeinen Arbeitsweise wurden die folgenden Verbindungen erhalten:
5-Amino-8-methyl-2-(2-furyl)-pyrazolo[4,3-e]-1,2,4-triazolo[1,5-c]-pyrimidin (34)
Ausbeute 53%; gelber Feststoff, Fp. 167-168 DEG C (EtOAc-Leichtbenzin); IR (KBr): 3500-2950, 1680, 1645, 1610, 1560, 1455 cm<-><1>; <1>H NMR (DMSO d6) delta : 4.12 (s, 3H); 6.70 (m, 1H); 6.99 (bs, 2H); 7.18 (m, 1H); 7.81 (s, 1H); 8.42 (s, 1H).
5-Amino-8-ethyl-2-(2-furyl)-pyrazolo[4,3-e]-1,2,4-triazolo[1,5-c]-pyrimidin (35)
Ausbeute 65%; gelber Feststoff, Fp. 249-250 DEG C (EtOAc-Leichtbenzin); IR (KBr): 3430-2950, 1680, 1655, 1620, 1550, 1450 cm<-><1>; <1>H NMR (DMSO d6) delta ; 1.46 (t, 2H, J = 7); 4.30 (d, 2H, J = 7); 6.72 (m, 1H); 7.18 (m, 1H); 7.93 (bs, 2H); 7.93 (s, 1H); 8.62 (s, 1H).
5-Amino-8-propyl-2-(2-furyl)-pyrazolo[4,3-e]-1,2,4-triazolo[1,5-c]-pyrimidin (36)
Ausbeute 57%, hellgelber Feststoff, Fp. 209-210 DEG C (EtOAc-Leichtbenzin), IR (KBr): 3400-2900, 1660, 1645, 1610, 1545, 1430 cm<-><1>; <1>H NMR (DMSO d6) delta : 0.83 (t, 2H, J = 7); 1.81-1.91 (m, 2H); 4.22 (d, 2H, J = 7); 6.71 (m, 1H); 7.19 (m, 1H); 7.63 (bs, 2H); 7.93 (s, 1H); 8.61 (5, 1H).
5-Amino-8-butyl-2-(2-furyl)-pyrazolo[4,3-e]-1,2,4-triazolo[1,5-c]-pyrimidin (37)
Ausbeute 47%; weisser Feststoff, Fp. 200-203 DEG C (EtOAc-Leichtbenzin), IR 3500-2900, 1685, 1640, 1620, 1550, 1450 cm<-><1>; <1>H NMR (DMSO d6) delta : 0.9 (t, 3H); 1.2 (m, 2H); 1.8 (m, 2H); 4.2 (t, 2H); 6.7 (m, 1H); 7.2 (m, 2H); 7.6 (s, 1H); 8.0 (s, 1H); 8.6 (s, 1H).
5-Amino-8-isopentyl-2-(2-furyl)-pyrazolo[4,3-e]-1,2,4-triazolo[1,5-c]-pyrimidin (38)
Ausbeute 60%; weissgrauer Feststoff, Fp. 212-213 DEG C (EtOAc-Leichtbenzin); IR (KBr): 3500-2850, 1670, 1650, 1615, 1560, 1455 cm<-><1>; <1>H NMR (CDCl3) delta : 0.96 (d, 6H, J = 6.4); 1.59 (m, 1H); 1.86 (m, 2H); 4.32 (t, 2H, J = 6.4); 6.58 (m, 1H); 6.72 (bs, 2H); 7.21 (d, 1H, J = 4.2); 7.63 (d, 1H, J = 1.2); 8.10 (s, 1H).
5-Amino-8-(2-isopentenyl)-2-(2-furyl)-pyrazolo[4,3-e]-1,2,4-triazolo[1,5-c]-pyrimidin (39)
Ausbeute 58%; hellgelber Feststoff, Fp. 178-179 DEG C (EtOAc-Leichtbenzin); IR (KBr): 3520-2950, 1665, 1640, 1610, 1555, 1450 cm<-><1>; <1>H NMR (CDCl3) delta : 1.74 (s, 3H); 1.77 (s, 3H); 4.87 (d, 2H, J = 7); 5.43-5.46 (m, 1H); 6.72 (m, 1H); 7.18 (m, 1H); 7.62 (bs, 2H); 7.93 (s, 1H); 8.55 (s, 1H).
5-Amino-8-(2-phenylethyl)-2-(2-furyl)-pyrazolo[4,3-e]-1,2,4-triazolo[1,5-c]-pyrimidin (40)
Ausbeute 45%; weisser Feststoff, Fp. 183-185 DEG C (EtOAc-Leichtbenzin); IR (KBr): 3500-2900, 1670, 1645, 1620, 1530, 1455 cm<-><1>; <1>H NMR (DMSO d6) delta : 3.21 (t, 2H, J = 6.4); 4.53 (t, 2H, J = 6.4); 6.7 (s, 1H); 7.1-7.4 (m, 6H); 7.65 (bs, 2H); 7.93 (s, 1H); 8.45 (s, 1H).
5-Amino-8-(2-phenylpropyl)-2-(2-furyl)-pyrazolo[4,3-e]-1,2,4-triazolo[1,5c]-pyrimidin (41)
Ausbeute 57%; gelber Feststoff, Fp. 183-185 DEG C (EtOAc-Leichtbenzin), IR (KBr): 3510-2950, 1665, 1640, 1615, 1520, 1455 cm<-><1>; <1>H NMR (DMSO d6) delta : 2.14-2.21 (m, 2H); 2.54 (t, 2H, J = 7); 4.29 (t, 2H, J = 6.4); 6.71 (s, 1H); 7.14-7.32 (m, 6H); 7.64 (bs, 2H); 7.93 (s, 1H); 8.64 (s, 1H).
Beispiel 3: Herstellung von 5-[[(subst. Phenyl)-amino]-carbonyl]-amino-8-(ar)alkyl-2-(2-furyl)-pyrazolo[4,3-e]-1,2,4-triazolo[1,5-c]-pyrimidinen
5-[[(subst. Phenyl)-amino]carbonyl]amino-8-(ar)alkyl-2-(2-furyl)pyrazolo[4,3-e]-1,2,4-triazolo[1,5-c]-pyrimidine können gemäss der im folgenden Schema VIII gezeigten Synthesestrategie erhalten werden:
Schema VIII: Allgemeine Arbeitsweise zur Herstellung von 5-[[(subst. Phenyl)-amino]-carbonyl]-amino-8-(ar)alkyl-2-(2-furyl)-pyrazolo[4,3-e]-1,2,4-triazolo[1,5-c]-pyrimidinen (42 bis 57)
Zur Herstellung der Verbindungen 42 bis 57 wurde die entsprechende Aminoverbindung (34 bis 41) (10 mmol) in frisch destilliertem THF (15 ml) gelöst, und es wurde das entsprechende Isocyanat (13 mmol) zugegeben. Das Gemisch wurde unter Argon 18 Std. am Rückfluss gekocht. Dann wurde das Lösungsmittel unter vermindertem Druck entfernt und der Rückstand durch Flash-Chromatografie (EtOAc-Leichtbenzin 4-6) gereinigt. Nach dieser allgemeinen Arbeitsweise wurden die folgenden Verbindungen hergestellt:
5-[[(3-Chlorphenyl)-amino]-carbonyl]-amino-8-methyl-2-(2-furyl)-pyrazolo[4,3-e]-1,2,4-triazolo[1,5-c]-pyrimidin (42)
Ausbeute 98%; hellgelber Feststoff, Fp. 142-145 DEG C (Et2O-Leichtbenzin); IR (KBr): 3210-2930, 1660, 1630, 1610, 1500 cm<-><1>; <1>H NMR (CDCl3) delta : 4.21 (s, 3H); 6.60 (m, 1H); 7.11 (d, 1H, J = 8); 7.13-7.28 (m, 2H); 7.55 (d, 1H, J = 8); 7.65 (s, 1H); 7.78 (d, 1H, J = 2); 8.22 (s, 1H); 8.61 (bs, 1H); 11.24 (bs, 1H).
5-[[(4-Methoxyphenyl)-amino]-carbonyl]-amino-8-methyl-2-(2-furyl)-pyrazolo[4,3-e]-1,2,4-triazolo[1,5-c]-pyrimidin (43)
Ausbeute 99%; gelber Feststoff, Fp. 193-195 DEG C (Et2O-Leichtbenzin); IR (KBr): 3200-2900,1664, 1625, 1600, 1500 cm<-><1>, <1>H NMR (CDCl3) delta : 3.81 (s, 3H); 4.20 (s, 3H); 6.61 (m, 1H); 6.85 (d, 2H, J = 9); 7.26 (m, 1H); 7.55 (d, 2H, J = 9); 7.65 (s, 1H); 8.21 (s, 1H); 8.59 (bs, 1H); 10.96 (bs, 1H).
5-[[(3-Chlorphenyl)-amino]-carbonyl]-amino-8-ethyl-2-(2-furyl)-pyrazolo[4,3-e]-1,2,4-triazolo[1,5-c]-pyrimidin (44)
Ausbeute 98%; hellgelber Feststoff, Fp. 204-205 DEG C (Et2O-Leichtbenzin); IR (KBr): 3220-2930, 1660, 1620, 1600, 1500 cm<-><1>; <1>H NMR (CDCl3) delta : 1.71 (t, 3H, J = 7); 4.50 (q, 2H, J = 7); 6.67 (m, 1H); 7.20 (d, 1H, J = 8); 7.31 (m, 1H); 7.61 (d, 1H, J = 8); 7.70 (s, 1H); 7.84 (s, 1H); 8.30 (s, 1H); 8.67 (bs, 1H); 11.30 (bs, 1H).
5-[[(4-Methoxyphenyl)-amino]-carbonyl]-amino-8-ethyl-2-(2-furyl)-pyrazolo[4,3-e]-1,2,4-triazolo[1,5-c]-pyrimidin (45)
Ausbeute 99%; hellgelber Feststoff, Fp. 200-201 DEG C (Et2O-Leichtbenzin); IR (KBr): 3250-2950, 1665, 1620, 1610, 1520 cm<-><1>; <1>H NMR (CDCl3) delta : 1.71 (t, 3H, J = 7); 3.85 (s, 3H); 4.49 (s, 3H); 6.65 (m, 1H); 6.88 (d, 2H, J = 9); 7.26 (m, 1H); 7.58 (d, 2H, J = 9); 7.69 (s, 1H); 8.28 (s, 1H); 8.63 (bs, 1H); 10.99 (bs, 1H).
5-[[(3-Chlorphenyl)-amino]-carbonyl]-amino-8-propyl-2-(2-furyl)-pyrazolo[4,3-e]-1,2,4-triazolo[1,5-c]-pyrimidin (46)
Ausbeute 95%, weisser Feststoff, Fp. 138-139 DEG C (Et2O-Leichtbenzin); IR (KBr): 3210-2920, 1655, 1615, 1600, 1510 cm<-><1>; <1>H NMR (CDCl3) delta ; 1.71 (t, 3H, J = 7); 2.04 (m, 2H); 4.36 (q, 2H, J = 7); 6.62 (m, 1H); 7.12 (d, 1H, J = 8); 7.27 (m, 1H); 7.56 (d, 1H, J = 8); 7.66 (s, 1H); 7,80 (s, 1H; 8.24 (s, 1H); 8.62 (bs, 1H); 11.08 (bs, 1H).
5-[[(4-Methoxyphenyl)-amino]-carbonyl]-amino-8-propyl-2-(2-furyl)-pyrazolo[4,3-e]-1,2,4-triazolo[1,5-c]-pyrimidin (47)
Ausbeute 98%; hellgelber Feststoff, Fp. 146-148 DEG C (Et2O-Leichtbenzin); IR (KBr): 3230-2950, 1660, 1620, 1600, 1530 cm<-><1>; <1>H NMR (CDCl3) delta : 0.98 (t, 3H, J = 7); 2.04-2.08 (m, 2H); 3.82 (s, 3H); 4.35 (t, 2H, J = 7); 6.61 (m, 1H); 6.89 (d, 2H, J = 9); 7.25 (m, 1H); 7.56 (d, 2H, J = 9); 7.65 (s, 1H); 8.23 (s, 1H); 8.59 (bs, 1H); 10.95 (bs, 1H).
5-[[(3-Chlorphenyl)-amino]-carbonyl]-amino-8-butyl-2-(2-furyl)-pyrazolo[4,3-e]-1,2,4-triazolo[1,5-c]-pyrimidin (48)
Ausbeute 97%; weisser Feststoff, Fp. 210-212 DEG C (Et2O-Leichtbenzin); IR (KBr): 3240-2970, 1650, 1610, 1510 cm<-><1>; <1>H NMR (CDCl3) delta : 1.00 (t, 3H, J = 7); 1.39-1.41 (m, 2H); 1.99-2.03 (m, 2H); 4.41 (q, 2H, J = 7); 6.63 (m, 1H); 7.14 (d, 1H, J = 8); 7.29 (m, 1H); 7.56 (d, 1H, J = 8); 7.67 (s, 1H), 7.80 (s, 1H); 8.25 (s, 1H); 8.63 (bs, 1H); 11.26 (bs, 1H).
5-[[(4-Methoxyphenyl)-amino]-carbonyl]-amino-8-butyl-2-(2-furyl)-pyrazolo[4,3-e]-1,2,4-triazolo[1,5-c]-pyrimidin (49)
Ausbeute 96%; weisser Feststoff, Fp. 197-198 DEG C (Et2O-Leichtbenzin); IR (KBr): 3250-2960, 1665, 1610, 1600, 1520 cm<-><1>; <1>H NMR (CDCl3) delta : 0.98 (t, 3H, J = 7); 1.38-1.42 (m, 2H); 2.02-2.05 (m, 2H); 3.82 (s, 3H); 4.39 (t, 2H, J = 7); 6.63 (m, 1H); 6.92 (d, 2H, J = 9); 7.25 (m, 1H); 7.57 (d, 2H, J = 9); 7.67 (s, 1H); 8.23 (s, 1H); 8.60 (bs, 1H); 10.95 (bs, 1H).
5-[[(3-Chlorphenyl)-amino]-carbonyl]-amino-8-isopentyl-2-(2-furyl)-pyrazolo[4,3-e]-1,2,4-triazolo[1,5-c]-pyrimidin (50)
Ausbeute 97%; hellgelber Feststoff, Fp. 199-200 DEG C (Et2O-Leichtbenzin), IR (KBr): 3230-2950, 1655, 1600, 1510 cm<-><1>; <1>H NMR (CDCl3) delta : 1.01 (d, 6H, J = 7.5); 1.49-1.51 (m, 1H); 1.88-2.03 (m, 2H); 4.42 (t, 2H, J = 7); 6.62 (m, 1H); 7.13 (d, 1H, J = 8); 7.34 (m, 1H); 7.57 (d, 1H, J = 8); 7.67 (s, 1H); 7.80 (s, 1H); 8.24 (s, 1H); 8.63 (bs, 1H); 11.25 (bs, 1H).
5-[[(4-Methoxyphenyl)-amino]-carbonyl]-amino-8-isopentyl-2-(2-furyl)-pyrazolo[4,3-e]-1,2,4-triazolo[1,5-c]-pyrimidin (51)
Ausbeute 98%; weisser Feststoff, Fp. 192-193 DEG C (Et2O-Leichtbenzin); IR (KBr): 3230-2970, 1660, 1615, 1600, 1500 cm<-><1>; <1>H NMR (CDCl3) delta : 0.99 (d, 6H, J = 7.5); 1.58-1.22 (m, 1H); 1.87-1.97 (m, 2H); 3.82 (s, 3H); 4.40 (t, 2H, J = 7); 6.62 (m, 1H); 6.91 (d, 2H, J = 9); 7.23 (m, 1H); 7.58 (d, 2H, J = 9); 7.66 (s, 1H); 8.23 (s, 1H); 8.59 (bs, 1H); 10.94 (bs, 1H).
5-[[(3-Chlorphenyl)-amino]-carbonyl]-amino-8-(2-isopentenyl)-2-(2-furyl)-pyrazolo[4,3-e]-1,2,4-triazolo[1,5-c]-pyrimidin (52)
Ausbeute 99%; weisser Feststoff, Fp. 204-205 DEG C (Et2O-Leichtbenzin); IR (KBr): 3245-2960, 1650, 1600, 1510 cm<-><1>, <1>H NMR (CDCl3) delta : 1.84 (s, 3H); 1.88 (s, 3H); 5.01 (d, 2H, J = 8); 5.57 (m, 1H); 6.62 (m, 1H); 7.12 (d, 1H, J = 8); 7.29 (m, 1H); 7.56 (d, 1H, J = 8); 7.66 (s, 1H); 7.80 (s, 1H); 8.26 (s, 1H); 8.60 (bs, 1H); 11.26 (bs, 1H).
5-[[4-Methoxyphenyl)-amino]-carbonyl]-amino-8-(2-isopentenyl)-2-(2-furyl)-pyrazolo[4,3-e]-1,2,4-triazolo[1,5-c]-pyrimidin (53)
Ausbeute 96%; hellgelber Feststoff, Fp. 198-199 DEG C (Et2O-Leichtbenzin); IR (KBr): 3235-2950, 1665, 1620, 1600, 1510 cm<-><1>, <1>H NMR (CDCl3) delta : 1.83 (s, 3H); 1.87 (s, 3H); 3.81 (s, 3H); 4.97 (d, 2H, J = 7); 5.57 (m, 1H); 6.61 (m, 1H); 6.93 (d, 2H, J = 9); 7.24 (m, 1H); 7.54 (d, 2H, J = 9); 7.66 (s, 1H); 8.25 (s, 1H); 8,58 (bs, 1H); 10.96 (bs, 1H).
5-[[3-Chlorphenyl)-amino]-carbonyl]-amino-8-(2-phenylethyl)-2-(2-furyl)-pyrazolo[4,3-e]-1,2,4-triazolo]1,5-c]-pyrimidin (54)
Ausbeute 98%; weisser Feststoff, Fp. 186-187 DEG C (Et2O-Leichtbenzin); IR (KBr): 3250-2970, 1660, 1610, 1515 cm<-><1>; <1>H NMR (CDCl3) delta : 3.33 (t, 2H, J = 7); 4.62 (t, 2H, J = 7); 6.60 (m, 1H); 7.19-7.35 (m, 7H); 7.57 (d, 1H, J = 8); 7.61 (s, 1H); 7.81 (s, 1H); 7.89 (s, 1H); 8.63 (bs, 1H); 11.27 (bs, 1H),
5-[[4-Methoxyphenyl)-amino]-carbonyl]-amino-8-(2-phenylethyl)-2-(2-furyl)-pyrazolo[4,3-e]-1,2,4-triazolo[1,5-c]-pyrimidin (55)
Ausbeute 99%, weisser Feststoff, Fp. 180-181 DEG C (Et2O-Leichtbenzin), IR (KBr): 3245-2960, 1660, 1615, 1600, 1500 cm<-><1>; <1>H NMR (CDCl3) delta : 3.42 (t, 2H, J = 7); 3.82 (s, 3H); 4.60 (t, 2H, J = 7); 6.60 (m, 1H); 6.93 (d, 2H, J = 9); 7.09 (m, 2H); 7.20-7.28 (m, 4H); 7.56 (d, 2H, J = 8); 7.60 (s, 1H); 7.89 (s, 1H); 8.59 (bs, 1H); 10.96 (bs, IH).
5-[[3-Chlorphenyl)-amino]-carbonyl]-amino-8-(2-phenylpropyl)-2-(2-furyl)-pyrazolo[4,3-e]-1,2,4-triazolo[1,5-c]-pyrimidin (56)
Ausbeute 99%; hellgelber Feststoff, Fp. 183-184 DEG C (Et2O-Leichtbenzin), IR (KBr): 3245-2960, 1665, 1610, 1515 cm<-><1>; <1>H NMR (CDCI3) delta : 2.46 (m, 2H); 2.73 (t, 2H, J = 7); 4.43 (t, 2H, J = 7); 6.66 (m, 1H); 7.19-7.40 (m, 8H); 7.59 (d, 1H, J = 8); 7.64 (s, 1H); 7.85 (m, 1H); 8.25 (s, 1H); 8.67 (bs, 1H); 11.30 (bs, 1H).
5-[[4-Methoxyphenyl)-amino]-carbonyl]-amino-8-(2-phenylpropyl)-2-(2-furyl)-pyrazolo[4,3-e]-1,2,4-triazolo[1,5-c]-pyrimidin (57)
Ausbeute 98%; weisser Feststoff, Fp. 183-184 DEG C (Et2O-Leichtbenzin); IR (KBr): 3240-2950, 1665, 1615, 1600, 1510 cm<-><1>; <1>H NMR (CDCl3) delta : 2.46 (m, 2H); 2.73 (t, 2H, J = 7); 4.42 (t, 2H, J = 7); 6.67 (m, 1H); 6.96 (d, 2H, J = 9); 7.22-7.41 (m, 6H); 7.60 (d, 2H, J = 8); 7.64 (s, 1H); 8.25 (s, 1H), 8.65 (bs, 1H); 11.16 (bs, 1H).
Beispiel 4. Herstellung von 5-[(Benzyl)-carbonyl]-amino-8-(ar)alkyl-2-(2-furyl)-pyrazolo[4,3-e]-1,2,4-triazolo[1,5-c]-pyrimidinen (Verbindungen 58 und 59)
5-[(Benzyl)-carbonyl]-amino-8-(ar)alkyl-2-(2-furyl)-pyrazolo[4,3-e]-1,2,4-triazolo[1,5-c]-pyrimidine erhält man nach der Synthesestrategie des folgenden Schemas IX:
Schema IX: Allgemeine Arbeitsweise zur Herstellung von 5[(Benzyl)-carbonyl]-amino-8-(ar)alkyl-2-(2-furyl)-pyrazolo[4,3-e]-1,2,4-triazolo[1,5-c]-pyrimidinen (58, 59)
Zur Herstellung der Verbindungen 58 und 59 wurde die entsprechende Aminoverbindung (38 oder 41) (10 mmol) in frisch destilliertem THF (15 ml) gelöst, und das entsprechende Säurehalogenid (13 mmol) sowie Triethylamin (13 mmol) wurden zugegeben. Das Gemisch wurde 18 Std. unter Argon am Rückfluss gekocht. Das Lösungsmittel wurde dann unter vermindertem Druck entfernt und der Rückstand in EtOAc (30 ml) gelöst und die Lösung zweimal mit Wasser (15 ml) gewaschen. Die organische Phase wurde über Na2SO4 getrocknet und unter vermindertem Druck eingeengt. Der Rückstand wurde mittels Flash-Chromatografie (EtOAc-Leichtbenzin 4:6) gereinigt, und es wurden die Verbindungen 58 und 59 erhalten:
5-[(Benzyl)-carbonyl]-amino-8-isopentyl-2-(2-furyl)-pyrazolo[4,3-e]-1,2,4-triazolo[1,5-c]-pyrimidin (58)
Ausbeute 85%; hellgelber Feststoff, Fp. 144-145 DEG C (Et2O-Leichtbenzin), IR (KBr): 3255-2930, 1673, 1620, 1610, 1520 cm<-><1>; <1>H NMR (CDCl3) delta : 0.98 (d, 6H, J = 7.5); 1.60 (m, 1H); 1.91 (m, 1H); 4.40 (t, 2H, J = 7); 4.53 (s, 2H); 6.60 (m, 1H); 7.18 (m, 1H); 7.26-7.39 (m, 5H); 7.64 (s, 1H); 8.22 (s, 1H); 9.11 (bs, 1H).
5-[(Benzyl)-carbonyl]-amino-8-(3-phenylpropyl)-2-(2-furyl)-pyrazolo[4,3-e]-1,2,4-triazolo]1,5-c]-pyrimidin (59)
Ausbeute 95%; hellgelber Feststoff, Fp. 116-117 DEG C (Et2O-Leichtbenzin), IR (K-Br): 3250-2900, 1675, 1625, 1600, 1500 cm<-><1>; <1>H NMR (CDCl3) delta : 2.39 (m, 2H); 2.67 (t, 2H, J = 7); 4.37 (t, 2H, J = 7); 4.53 (s, 2H); 6.61 (m, 1H); 7.16-7.43 (m, 11H); 7.65 (s, 1H); 7.64 (s, 1H); 8.19 (s, 1H); 9.12 (bs, 1H).
Beispiel 5: Herstellung von 1-subst.-4-Cyano-5-aminopyrazolen
Nach den in J. Org. Chem. 1956, 21, 1240; J. Am. Chem. Soc. 1956, 78, 784, und den darin zitierten Referenzen beschriebenen Arbeitsweisen wurden die folgenden Verbindungen hergestellt, und zwar ausgehend von handelsüblichem Ethoxymethylen-malodinitril und N<1>-substituierten Hydrazinen, die ebenfalls im Handel erhältlich sind: 1-Methyl-4-cyano-5-aminopyrazol 1-n-Butyl-4-cyano-5-aminopyrazol 1-Isopentyl-4-cyano-5-aminopyrazol 1-(2-Cyclopentyl)-ethyl-4-cyano-5-aminopyrazol 1-Hydroxyethyl-4-cyano-5-aminopyrazol 1-Phenyl-4-cyano-5-aminopyrazol 1-tert.Butyl-4-cyano-5-aminopyrazol 1-Phenylethyl-4-cyano-5-aminopyrazol 1-(2-Chlorphenyl)-4-cyano-5-aminopyrazol.
Diese Verbindungen können als Zwischenprodukte zur Herstellung von Pyrazolo-triazolo-pyrimidinverbindungen, wie hierin beschrieben, verwendet werden.
Beispiel 6: Herstellung von 1-substituierten 4-Cyano-3-aminopyrazolen
Ausgehend von 4-Cyano-5-aminopyrazol, hergestellt nach der Arbeitsweise gemäss Chem. Pharm. Bull. 1970, 18, 2353, oder gemäss J. Heterocyclic Chem. 1979, 16, 1113, können 1-substituierte 4-Cyano-3-aminopyrazole durch direkte Alkylierung mit dem entsprechenden Alkylhalogenid in Dimethylformamid bei 80 DEG C in Gegenwart von wasserfreiem Kaliumcarbonat erhalten werden. Aus dem Reaktionsgemisch, das die beiden in N<1>- und N<2>-Stellung alkylierten Isomere in einem Verhältnis von etwa 1:2 enthält, kann das N<2>-Isomere durch einfaches Umkristallisieren oder säulenchromatografisch an Kieselgel und Eluierung mit Gemischen aus Ethylacetat und Petrolether abgetrennt werden. Unter Anwendung dieser Techniken wurden hergestellt: 1-Methyl-4-cyano-3-aminopyrazol 1-Butyl-4-cyano-3-aminopyrazol 1-Benzyl-4-cyano-3-aminopyrazol 1-Isopentyl-4-cyano-3-aminopyrazol 1-Phenylethyl-4-cyano-3-aminopyrazol.
Diese Verbindungen können als Zwischenprodukte zur Herstellung von hierin beschriebenen Pyrazolo-triazolo-pyrimidinverbindungen verwendet werden.
Beispiel 7: Herstellung von Phenylethyl-4-cyano-3-aminopyrazolen
a) Eine Suspension von 30 mmol wasserfreiem Kaliumcarbonat in 50 ml DMF wird mit 20 mmol 3-Amino-4-cyanopyrazol versetzt und das Gemisch 30 Min. lang auf 80 DEG C erwärmt. Der Suspension wird 25 mmol Phenethylbromid zugesetzt und das Ganze 2 Std. auf 80 DEG C erwärmt. Nach Abkühlen auf Zimmertemperatur wird die Mischung unter Vakuum zur Trockne gebracht und der Rückstand in 100 ml destilliertem Wasser aufgenommen und mit 3 x 50 ml Ethylacetat extrahiert. Die vereinigten organischen Extrakte trocknet man über wasserfreiem Natriumsulfat und bringt unter Vakuum zur Trockne. Der Rückstand besteht aus einem 1:3-Gemisch von 1-Phenylethyl-4-cyano-5-aminopyrazol (20%) und 1-Phenylethyl-4-cyano-3-aminopyrazol (60%), das als solches in Beispiel 9 verwendet werden kann oder zunächst an Kieselgel chromatografiert wird (Eluierung mit einem Ethylacetat-Hexan-Gemisch) unter Bildung von 1-Phenylethyl-4-cyano-5-aminopyrazol, Fp. 172-173 DEG C, Ausbeute 20%, <1>H-NMR (DMSO-d6): 3,04 (t, 2H); 4,12 (t, 2H); 5,85 (sb, 2H); 7,21-7,30 (m, 5H); 7,41 (s, 1H); 1- beta -Phenylethyl-4-cyano-3-aminopyrazol (60%); Fp. 98-100 DEG C; <1>H-NMR (CDCl3): 3,07 (t, 2H); 4,10 (t, 2H); 4,23 (sb, 2H); 7,17 (s, 1H); 7,00-7,28 (m, 5H).
b) Eine Lösung von 20 mmol 1- beta -Phenylethyl-4-cyano-5-aminopyrazol in 40 ml Triethylorthoformiat wurde unter Stickstoff 8 Std. am Rückfluss gekocht. Das überschüssige Orthoformiat wurde im Vakuum bis zur Trockne entfernt, und das zurückbleibende gelbe \l wird in Diethylether gelöst und auf Kieselgel perkoliert; man erhält den entsprechenden Iminoether in 87% Ausbeute. Der nach dem Verdampfen des Orthoformiats erhaltene Rückstand ist praktisch rein und wird unmittelbar in der folgenden Stufe eingesetzt.
Eine Lösung von 20 mmol des Iminoethers und von 2,5 g 2-Furancarbonsäurehydrazid (22 mmol) in 50 ml 2-Methoxyethanol wurde 5 bis 10 Std. lang am Rückfluss gekocht. Nach dem Abkühlen wird die Lösung zur Trockne eingedampft unter Zurücklassung eines öligen Rückstandes, der in 50 ml Diphenylether und in einer Dean-Stark-Apparatur zur Abscheidung des bei der Reaktion gebildeten Wassers thermisch cyclisiert wird. Nach 1,5 Std. wird die Reaktion mittels TLC (Ethylacetat:Petrolether 2:1) geprüft, und wenn die Ausgangsverbindung vollständig verschwunden ist, wird das Gemisch abgekühlt und mit Hexan versetzt. Die erhaltene Fällung wird abfiltriert und umkristallisiert und ergibt in 20%iger Ausbeute 7-( beta -Phenylethyl)-2-(2-furyl)-pyrazolo[4,3-e]-1,2,4-triazolo[1,5-c]-pyrimidin vom Fp. 174-175 DEG C, <1>H-NMR (DMSO-d6): 3,23 (t, 2H); 4,74 (t, 2H); 6,75 (s, 1H); 7,14-7,17 (m, 5H); 7,28 (s, 1H); 7,98 (s, 1H); 8,53 (s, 1H); 9,56 (s, 1H).
Auf ähnliche Weise erhält man ausgehend von 1- beta -Phenylethyl-4-cyano-3-aminopyrazol in 60%iger Ausbeute 8-( beta -Phenylethyl)-2-(2-furyl)-pyrazolo[4,3-e]-1,2,4-triazolo[1,5-c]-pyrimidin vom Fp. 268-270 DEG C, <1>H-NMR (DMSO-d6): 3,32 (t, 2H); 4,72 (t, 2H); 6,73 (s, 1H); 7,23 (m, 5H); 7,95 (s, 1H); 8,8 (s, 1H); 9,41 (s, 1H).
c) Eine Suspension von 10 mmol des Produktes der Stufe b) in 5,0 ml 10%iger HCI wird unter Rühren 3 Std. lang am Rückfluss gekocht. Nach dem Abkühlen wird die Lösung mit konz. Ammoniumhydroxid bei 0 DEG C alkalisch gestellt, und die erhaltene Fällung wird filtriert oder mit 3 x 100 ml Ethylacetat extrahiert und im Vakuum zur Trockne gebracht. Man erhält das entsprechende 1-( beta -Phenylethyl)-4-[3(2-furyl)-1,2,4-triazol-5-yl]-5-aminopyrazol vom Fp. 175-176 DEG C, <1>H-NMR (DMSO-d6): 3,15 (t, 2H); 4,48 (t, 2H); 5,78 (s, 1H); 6,37 (s, 1H); 6,68 (s, 1H); 7,1 (s, 1H); 7,27-7,28 (m, 5H); 7,82 (s, 1H); 14,51 (sb, 2H); auf ähnliche Weise wird 1-( beta -Phenylethyl)-4-[3(2-furyl)-1,2,4-triazol-5-yl]-3-aminopyrazol vom Fp. 205-206 DEG C erhalten; <1>H-NMR (DMSO-d6): 3,12 (t, 2H); 4,46 (t, 2H); 5,75 (s, 1H); 14,41 (sb, 2H).
d) 60 mmol Cyanamid werden zu einer Suspension von 10 mmol des Amins von Stufe c) in 40 ml N-Methylpyrrolidon gegeben, gefolgt von 15 mmol p-Toluolsulfonsäure. Man erwärmt das Gemisch unter Rühren auf 160 DEG C. Nach 4 Std. werden weitere 60 mmol Cyanamid zugegeben, und man hält die Temperatur über Nacht. Dann wird das Gemisch mit 200 ml heissem Wasser behandelt und die Fällung abfiltriert, mit Wasser gewaschen und aus Ethanol umkristallisiert, und man erhält das entsprechende 5-Amino-7-( beta -phenylethyl)-2-(2-furyl)-pyrazolo[4,3-e]-1,2,4-triazolo[1,5-c]-pyrimidin vom Fp. 225-226 DEG C. <1>H NMR (DMSO-d6): 3,21 (t, 2H); 4,51 (t, 2H); 6,65 (s, 1H); 7,1-7,44 (m, 5H, Atom und 1H); 7,78 (s, 1H); 7,89 (sb, 2H); 8,07 (s, 1H).
Auf ähnliche Weise wurde 5-Amino-8-( beta -phenylethyl)-2-(2-furyl)-pyrazolo[4,3-e]-1,2,4-triazolo[1,5-c]-pyrimidin vom Fp. 212-213 DEG C erhalten. <1>H NMR (DMSO-d6): 3,21 (t, 2H); 4,53 (t, 2H); 6,7 (s, 1H); 7,1-7,4 (m, 5H, Atom und 1H); 7,65 (sb, 2H); 7,93 (s, 1H); 8,45 (s, 1H).
Beispiel 8: Herstellung von 4-Cyano-5-amino-1,2,3-triazolen
Eine Suspension von 0,23 mol Kaliumcarbonat in 70 ml DMSO wird nacheinander mit 70 mmol Cyanoacetamid und 54,5 mmol p-Fluorbenzylazid versetzt. Die Lösung wird bei Zimmertemperatur 1 Std. lang gerührt und dann in 1,5 l Wasser gegossen. Der sich abgetrennte Feststoff wird abfiltriert, mit Wasser gewaschen und im Ofen bei 70 DEG C getrocknet; man erhält 1-(p-Fluorbenzyl)-4-carboxamido-5-amino-1,2,3-triazol in 96%iger Ausbeute, Fp. 198-199 DEG C; <1>H NMR (DMSO-d6): 7,5-7,1 (in, 6H); 6,4 (s, 2H), 5,4 (s, 2H). Eine Suspension von 5 mmol des Amids in 5 ml DMF wird bei 0 DEG C unter Rühren mit 10 mmol POCl3 versetzt. Die Lösung wird 5 Min. bei 0 DEG C, 10 Min. bei 25 DEG C und 15 Min. bei 80 DEG C gerührt. Nach Abkühlen auf Zimmertemperatur werden 5 ml N-HCI zugegeben und die Mischung 5 Min. am Rückfluss gekocht. Von der gekühlten Lösung trennt sich 1-(p-Fluorbenzyl)-4-cyano-5-amino-1,2,3-triazol (90%). Fp. 185-186 DEG C; <1>H-NMR (DMSO-d6): 7,3-7,0 (m, 6H); 5,5 (s, 2H); IR (KBr): 3400, 3220, 2220, 1655 cm<-><1>.
Auf analoge Weise wurden die folgenden Verbindungen hergestellt: 1- oder 2-Benzyl-4-cyano-5-amino-1,2,3-triazol 1- oder 2-(o-Fluorbenzyl)-4-cyano-5-amino-1,2,3-triazol 1- oder 2-(p-Fluorbenzyl)-4-cyano-5-amino-1,2,3-triazol 1- oder 2-Butyl-4-cyano-5-amino-1,2,3-triazol 1- oder 2-Isopentyl-4-cyano-5-amino-1,2,3-triazol 1- oder 2-(Methoxyethyl)-4-cyano-5-amino-1,2,3-triazol 2-Heptyl-4-cyano-5-amino-1,2,3-triazol 1- oder 2-Octyl-4-cyano-5-amino-1,2,3-triazol.
Diese Verbindungen können als Zwischenprodukte zur Herstellung der hierin beschriebenen Triazolo-triazolo-pyrimidine verwendet werden.
Beispiel 9: Herstellung von Ethoxymethylenamino-Heterocyclen
Die Herstellung von Ethoxymethylenamino-Heterocyclen der Formel IV geschieht durch Kochen der entsprechenden o-Aminonitrile mit Ethylorthoformiat. Als Beispiel wird die Herstellung von 4-Cyano-5-(ethoxymethylenamino)-1-butylpyrazol angegeben. Eine Lösung von 20 mmol 4-Cyano-4-amino-1-butylpyrazol in 40 ml Triethylorthoformiat wird unter Stickstoff 8 Std. lang am Rückfluss gekocht. Der Überschuss an Orthoformiat wird im Vakuum zur Trockne entfernt, und das zurückbleibende gelbe \l in Ethylether gelöst und durch Kieselgel eluiert. Man erhält die reine Verbindung in 87%iger Ausbeute. In vielen Fällen ist der nach dem Abdampfen des Orthoformiats erhaltene Rückstand praktisch rein und wird ohne weiteres in den folgenden Stufen eingesetzt. IR (Nujol): 3140, 2240, 1640 cm<-><1>; <1>H-NMR (CDCl3): 8,4 (s, 1H); 7,9 (s, 1H), 4,5 (t, 2H); 4,3 (q, 2H); 1,8 (m, 2H); 1,5 (m, 2H); 1,4 (t, 3H); 0,9 (t, M).
Beispiel 10: Cyclisierung von Ethoxymethylenamino-Heterocyclen
Eine Lösung von 20 mmol des Ethoxymethylenamino-Heterocyclus und 2,5 g (22 mmol) 2-Furancarbonsäurehydrazid in 50 ml 2-Methoxyethanol wird 5 bis 10 Std. lang am Rückfluss gekocht. Nach dem Abkühlen wird die Lösung zur Trockne eingedampft, und es bleibt ein \l zurück, das in 50 ml Diphenylether in einem Rundkolben mit angeschlossener Dean-Stark-Wasserfalle, die das Reaktionswasser azeotrop abscheidet, thermisch cyclisiert wird. Nach verschiedenen Reaktionsdauern (3 bis 5 Std.) wird die Reaktion mittels TLC (Ethylacetat/Petrolether 2:1) überprüft, und wenn kein Ausgangsprodukt mehr nachweisbar ist, wird abgekühlt und das Gemisch mit Hexan versetzt. Die sich bildende Fällung wird abfiltriert und aus einem passenden Lösungsmittel umkristallisiert. In manchen Fällen trennt sich ein zähes \l aus der Lösung, das dann dekantiert und extrahiert wird. Der ölige Rückstand wird dann an Kieselgel chromatografiert und mit Ethylacetat-Petrolether-Gemischen eluiert. Man erhält die tricyclische Verbindung Vl.
Als Beispiel werden die analytischen und spektroskopischen Eigenschaften einiger nach diesem Beispiel erhaltener Verbindungen angegeben: 7-Butyl-2-(2-furyl)-pyrazolo[4,3-e]-1,2,4-triazolo[1,5-c]-pyrimidin: <1>H-NMR (DMSO-d6): 9,6 (s, 1H); 8,6 (s, 1H); 8,0 (m, 1H); 7,4 (m, 1H); 6,7 (m, 1H); 4,5 (t, 2H); 1,9 (m, 2H); 1,3 (m, 2H); 0,9 (t, 3H). 8-Butyl-2-(2-furyl)-pyrazolo[4,3-e]-1,2,4-triazolo[1,5-c]-pyrimidin: <1>H-NMR (DMSO-d6): 9,5 (s, 1H); 8,9 (s, 1H); 8,0 (m, 1H); 7,3 (m, 1H), 6,2 (m, 1 H); 4,5 (t, 2H); 1,9 (m, 2H); 1,1 (m, 2H); 0, 9 (m, 3 H). Im 2D-NMR-Spektrum (NOESY) zeigt das bei 4,5 resonierende N-CH2-Signal sich überschneidende Peaks mit dem C9-H-Signal, das bei 8,9 resoniert. 7-Isopentyl-2-(2-furyl)-pyrazolo[4,3-e]-1,2,4-triazolo[1,5-c]-pyrimidin: <1>H-NNM (CDCl3): 9,1 (s, 1H); 8,8 (s, 1H); 7,7 (m, 1H); 7,3 (m, 1H); 6,6 (m, 1H); 4,6 (t, 2H); 1,8-1,7 (m, 3H); 1,0 (d, 6H). 8-Isopentyl-2-(2-furyl)-pyrazolo[4,3-e]-1,2,4-triazolo[1,5-c]-pyrimidin: <1>H-NMR (CDCl3): 9,1 (s, 1H); 8,8 (s, 1H); 7,7 (m, 1H); 7,3 (m, 1H); 6,6 (m, 1H), 4,6 (t, 2H); 1,9-1,5 (m, 3H); 1,0 (d, 6H).
Nach oben stehender Vorschrift wurden die folgenden Verbindungen hergestellt: 7-Methyl-2-(2-furyl)-pyrazolo[4,3-e]-1,2,4-triazolo[1,5-c]-pyrimidin; 8-Methyl-2-(2-furyl)-pyrazolo[4,3-e]-1,2,4-triazolo[1,5-c]-pyrimidin; 7-(2-Chlorphenyl)-2-(2-furyl)-pyrazolo[4,3-e]-1,2,4-triazolo[1,5-c]-pyrimidin; 7-Phenylethyl-2-(2-furyl)-pyrazolo[4,3-e]-1,2,4-triazolo[1,5-c]-pyrimidin; 7-tert.Butyl-2-(2-furyl)-pyrazolo[4,3-e]-1,2,4-triazolo[1,5-c]-pyrimidin; 7-(2-Cyclopentyl)-ethyl-2-(2-furyl)-pyrazolo[4,3-e]-1,2,4-triazolo[1,5-c]-pyrimidin; 8-Benzyl-2-(2-furyl)-pyrazolo[4,3-e]-1,2,4-triazolo[1,5-c]-pyrimidin; 7-Benzyl-2-(2-furyl)-1,2,3-triazolo[5,4-e]-1,2,4-triazolo[1,5-c]-pyrimidin; 7-(2-Fluorbenzyl)-2-(2-furyl)-1,2,3-triazolo[5,4-e]-1,2,4-triazolo[1,5-c]-pyrimidin; 7-(4-Fluorbenzyl)-2-(2-furyl)-1,2,3-triazolo[5,4-e]-1,2,4-triazolo[1,5-c]-pyrimidin; 7-Butyl-2-(2-furyl)-1,2,3-triazolo[5,4-e]-1,2,4-triazolo[1,5-c]-pyrimidin; 7-Isopentyl-2-(2-furyl)-1,2,3-triazolo[5,4-e]-1,2,4-triazolo[1,5-c]-pyrimidin; 7-(2-Methoxy)-ethyl-2-(2-furyl)-1,2,3-triazolo[5,4-e]-1,2,4-triazolo[1,5-c]-pyrimidin, 7-Heptyl-2-(2-furyl)-1,2,3-triazolo[5,4-e]-1,2,4-triazolo[1,5-c]-pyrimidin; 7-Octyl-2-(2-furyl)-1,2,3-triazolo[5,4-e]-1,2,4-triazolo[1,5-c]-pyrimidin; 8-Benzyl-2-(2-furyl)-1,2,3-triazolo[5,4-e]-1,2,4-triazolo[1,5-c]-pyrimidin; 8-(2-Fluorbenzyl)-2-(2-furyl)-1,2,3-triazolo[5,4-e]-1,2,4-triazolo[1,5-c]-pyrimidin; 8-(4-Fluorbenzyl)-2-(2-furyl)-1,2,3-triazolo[5,4-e]-1,2,4-triazolo[1,5-c]-pyrimidin; 8-Butyl-2-(2-furyl)-1,2,3-triazolo[5,4-e]-1,2,4-triazolo[1,5-c]-pyrimidin; 8-Isopentyl-2-(2-furyl)-1,2,3-triazolo[5,4-e]-1,2,4-triazolo[1,5-c]-pyrimidin; 8-Hexyl-2-(2-furyl)-1,2,3-triazolo[5,4-e]-1,2,4-triazolo[1,5-c]-pyrimidin; 8-Heptyl-2-(2-furyl)-1,2,3-triazolo[5,4-e]-1,2,4-triazolo[1,5-c]-pyrimidin; 8-Octyl-2-(2-furyl)-1,2,3-triazolo[5,4-e]-1,2,4-triazolo[1,5-c]-pyrimidin; 9-Benzyl-2-(2-furyl)-1,2,3-triazolo[5,4-e]-1,2,4-triazolo[1,5-c]-pyrimidin; 9-(2-Fluorbenzyl) 2-(2-furyl)-1,2,3-triazolo[5,4-e]-1,2,4-triazolo[1,5-c]-pyrimidin; 9-(4-Fluorbenzyl) 2-(2-furyl)-1,2,3-triazolo[5,4-e]-1,2,4-triazolo[1,5-c]-pyrimidin.
Diese Verbindungen lassen sich als Zwischenprodukte zur Herstellung der vorliegenden Triazolo-triazolo-pyrimidine und der Pyrazolo-triazolo-pyrimidine verwenden.
Beispiel 11: Herstellung von 5-Amino-7-[aralkyl]-2-(2-furyl)-pyrazolo[4,3-e]-1,2,4-triazolo[1,5-c]-pyrimidinen
Eine Suspension von 10 mmol der Amine der Formel VII in 40 ml N-Methylpyrrolidon wird mit 60 mmol Cyanamid und dann mit 15 mmol p-Toluolsulfonsäure versetzt. Das Gemisch wird unter magnetischem Rühren auf 160 DEG C erhitzt. Nach 4 Std. werden weitere 60 mmol Cyanamid zugesetzt, und das Erhitzen wird über Nacht fortgesetzt. Das Gemisch wird dann mit 200 ml heissem Wasser behandelt und der ausgefallene Feststoff abfiltriert, mit Wasser gewaschen und aus Ethanol umkristallisiert. Wenn keine Ausfällung auftritt, wird die Lösung mit 4 x 100 ml Ethylacetat extrahiert, die Extrakte mit 2 x 50 ml Salzlösung gewaschen, getrocknet und im Vakuum lösungsmittelfrei eingedampft. Der Rückstand wird dann an Kieselgel chromatografiert und mit Ethylacetat eluiert.
Im Folgenden werden die analytischen und spektroskopischen Eigenschaften einiger nach diesem Beispiel erhaltener Verbindungen angegeben: 5-Amino-7-butyl-2-(2-furyl)-pyrazolo[4,3-e]-1,2,4-triazolo[1,5-c]-pyrimidin. Fp. 183-185 DEG C; <1>H-NMR (DMSO-d6) 8,1 (s, 1H); 8,0 (s, 2H); 7,9 (m, 1H); 7,2 (m, 1H); 6,7 (m, 1H); 4,2 (t, 2H), 1,9 (m, 2H); 1,5 (m, 2H); 0,9 (t, 3H). 5-Amino-8-butyl-2-(2-furyl)-pyrazolo[4,3-e]-1,2,4-triazolo[1,5-c]-pyrimidin. Fp. 157-158 DEG C; <1>H-NMR (DMSO-d6) 8,6 (s, 1H); 8,0 (s, 1H); 7,6 (s, 2H); 7,2 (m, 1H); 6,7 (m, 1H); 4,2 (t, 2H); 1,8 (m, 2H); 1,2 (m, 2H); 0,9 (t, 3H). 5-Amino-7-benzyl-2-(2-furyl)-1,2,3-triazolo[5,4-e]-1,2,4-triazolo[1,5-c]-pyrimidin. Fp. 295-297 DEG C; <1>H-NMR (DMSO-d6) 8,5 (s, 2H); 8,0 (s, 1H); 7,3 (m, 6H); 6,7 (m, 1H)- 5,7 (s, 2H). 5-Amino-7-o-fluorbenzyl-2-(2-furyl)-1,2,3-triazolo[5,4-e]-1,2,4-triazolo[1,5-c]-pyrimidin. Fp. 310-312 DEG C; <1>H-NMR (DMSO-d6) 8,5 (s, 2H); 8,0 (s, 1H); 7,3 (m, 5H); 6,8 (s, 1H); 5,75 (s, 2H). 5-Amino-7-methyl-2-(2-furyl)-pyrazolo[4,3-e]-1,2,4-triazolo[1,5-c]-pyrimidin. Fp. 210-213 DEG C. 5-Amino-7-tert.butyl-2-(2-furyl)-pyrazolo[4,3-e]-1,2,4-triazolo[1,5-c]-pyrimidin. Fp. 238-240 DEG C. 5-Amino-2-(2-furyl)-pyrazolo[4,3-e]-1,2,4-triazolo[1,5-c]-pyrimidin. Fp. 248-250 DEG C. 5-Amino-7-(2-hydroxyethyl)-2-(2-furyl)-pyrazolo[4,3-e]-1,2,4-triazolo[1,5-c]-pyrimidin. Fp. 258-260 DEG C. 5-Amino-7-phenyl-2-(2-furyl)-pyrazolo[4,3-e]-1,2,4-triazolo[1,5-c]-pyrimidin. Fp. 295-297 DEG C. 5-Amino-7-isopentyl-2-(2-furyl)-pyrazolo[4,3-e]-1,2,4-triazolo[1,5-c]-pyrimidin. Fp. 208-210 DEG C. 5-Amino-8-isopentyl-2-(2-furyl)-pyrazolo[4,3-e]-1,2,4-triazolo[1,5-c]-pyrimidin. Fp. 200-203 DEG C. 5-Amino-7-phenethyl-2-(2-furyl)-pyrazolo[4,3-e]-1,2,4-triazolo[1,5-c]-pyrimidin. Fp. 225 DEG C. 5-Amino-7-benzyloxyethyl-2-(2-furyl)-pyrazolo[4,3-e]-1,2,4-triazolo[1,5c]-pyrimidin. 5-Amino-7-[ beta -(4-isobutylphenethyl-2-(2-furyl)-pyrazolo[4,3-e]-1,2,4-triazolo[1,5-c]-pyrimidin, Fp. 207-210 DEG C.
Diese Verbindungen können mit einem geeigneten Säure- oder Sulfonsäurederivat umgesetzt werden, wobei Verbindungen der Formel I erhalten werden.
Beispiel 12: Herstellung von subst.4-Carboxamido-5-amino-1,2,3-triazolen
15,1 g (0,1 mol) p-Fluorbenzylazid und 10,8 g (0,13 mol) Cyanacetamid werden in dieser Reihenfolge in eine Suspension von 57,5 g (0,42 mol) gepulvertem Kaliumcarbonat in 150 ml DMSO gegeben. Das Gemisch wird 1 Std. bei Zimmertemperatur gerührt und dann in 3 l Wasser gegossen. Der sich abtrennende Feststoff wird abfiltriert und gründlich mit Wasser gewaschen. Man erhält 22,47 g (96%) 1-p-Fluorbenzyl-4-carboxamido-5-amino-1,2,3-triazol. Fp. 189-199 DEG C; <1>H-NMR (DMSO-d6): 7,5-7,1 (m, 6H); 6,4 (s, 2H); 5,4 (s, 2H).
Auf analoge Weise erhält man: 2-Fluor-6-chlorbenzyl-4-carboxamido-5-amino-1,2,3-triazol. Fp. 230-231 DEG C; <1>H-NMR (DMSO-d6): 5,40 (s, 2H); 6,52 (sb, 2H); 7,12-7,45 (m, 5H); 3-Fluorbenzyl-4-carboxamido-5-amino-1,2,3-triazol. Fp. 211 DEG C; <1>H-NMR (DMSO-d6): 5,46 (s, 2H), 6,47 (sb, 2H); 7,00-7,52 (m, 6H); 2-Fluorbenzyl-4-carboxamido-5-amino-1,2,3-triazol. Fp. 195-197 DEG C; 1-( beta -Phenylethyl)-4-carboxamido-5-amino-1,2,3-triazol. Fp. 181-183 DEG C; <1>H-NMR (DMSO-d6): 3,04 (t, 2H); 4,35 (t, 2H); 6,30 (sb, 2H); 7,20-7,47 (m, 7H).
Beispiel 13: Herstellung von subst.4-Cyano-5-amino-1,2,3-triazolen
Eine Suspension von 23,4 g (0,1 mol) 1-p-Fluorbenzyl-4-carboxamido-5-amino-1,2,3-triazol in 100 ml DMF, bei 0 DEG C magnetisch gerührt, wird mit 20,8 ml (0,2 mol) POCl3 versetzt. Die Lösung wird 5 Std. bei 0 DEG C, 10 Std. bei Zimmertemperatur und schliesslich 15 Std. bei 80 DEG C geführt. Nach dem Abkühlen werden 100 ml 1N HCI zugegeben und die Lösung 5 Std. am Rückfluss gekocht; nach Abkühlen fällt 1-p-Fluorbenzyl-4-cyano-5-amino-1,2,3-triazol in einer Menge von 18,54 g (90%) aus; Fp. 185-186 DEG C; <1>H-NMR (DMSO-d6): 7,3-7,0 (m, 6H); 5,5 (s, 2H); IR (KBr): 3400, 3220, 2220, 1655 cm<-><1>.
Auf analoge Weise wurden die folgenden Verbindungen hergestellt: 2-Fluor-6-chlorbenzyl-4-cyano-5-amino-1,2,3-triazol; Fp. 181-185 DEG C; <1>H-NMR (DMSO-d6): 5,40 (s, 2H); 7,26-7,50 (m, 5H). 3-Fluorbenzyl-4-cyano-5-amino-1,2,3-triazol; Fp. 195-197 DEG C; <1>H-NMR (DMSO-d6): 5,44 (s, 2H); 7,00-7,43 (m, 6H). 2-Fluorbenzyl-4-cyano-5-amino-1,2,3-triazol; Fp. 195-197 DEG C. 1-( beta -phenylethyl)-4-cyano-5-amino-1,2,3-triazol; Fp. 149-150 DEG C; <1>H-NMR (DMSO-d6): 3,04 (t, 2H); 4,36 (t, 2H); 7,03 (sb, 2H); 7,23-7,28 (m, 5H).
Beispiel 14: Herstellung von subst.-4-[3-(2-Furyl)-1,2,4-triazol-5-yl]-5-amino-1,2,3-triazolen
Eine Suspension von 20 mmol 1-p-Fluorbenzyl-4-cyano-5-amino- 1,2,3-triazol und 22 mmol 2-Furancarbonsäurehydrazid in 30 ml Diphenylether wird unter Rühren an einem Dean-Stark-Apparat zum Rückfluss erhitzt (260 DEG C), bis die Ausgangsverbindung verschwindet (TLC; 1 bis 2 Std.). Nach dem Abkühlen wird das Gemisch mit Petrolether verdünnt und die erhaltene Fällung entweder abfiltriert oder abdekantiert und an einer Kieselgelkolonne chromatografiert, die mit Ethylacetat/Petrolether 2:1 eluiert wird.
1-p-Fluorbenzyl-4-[3-(2-furyl)-1,2,4-triazol-5-yl]-5-amino-1,2,3-triazol, Fp. 266-268 DEG C; <1>H-NMR (DMSO-d6): 14,5 (s, 1h); 7,8 (s, 1H); 7,4-7,1 (m, 5H); 6,6 (s, 1H); 6,5 (s, 2H); 5,5 (s, 2H).
Auf ähnliche Weise wird 1-( beta -Phenylethyl)-4-[3-(2-furyl)-1,2,4-triazol-5-yl]-5-amino-1,2,3-triazol, Fp. 200-202 DEG C; <1>H-NMR (DMSO-d6): 13,8 (sb, 1h); 7,78 (s, 1H); 7,2-7,4 (m, 5H), 6,95 (s, 1H); 6,61 (s, 1H); 5,5 (sb, 2H); 4,16 (t, 2H); 3,07 (t, 2H) erhalten; Ausbeute 50%.
Beispiel 15: Herstellung von 5-Amino-7-subst.-2-(2-furyl)-1,2,3-triazolo[5,4-e]-1,2,4-triazolo[1,5-c]-pyrimidinen
Eine Suspension von 0,325 g (1 mmol) 1-p-Fluorbenzyl-4-[3-(2-furyl)-1,2,4-triazol-5-yl]-5-amino-1,2,3-triazol in 4 ml N-Methylpyrrolidon wird mit 6 mmol Cyanamid und dann mit 1,5 mmol p-Toluolsulfonsäure versetzt. Unter Magnetrühren wird auf 160 DEG C erhitzt. Nach 4 Std. wird eine zweite Portion von 6 mmol Cyanamid zugegeben und es wird über Nacht weiter erhitzt. Das Gemisch wird mit 20 ml Wasser behandelt, und der ausgefallene Feststogg wird abfiltriert; gibt es keine Fällung, so wird das Gemisch 4-mal mit 10 ml Ethylacetat extrahiert, die Extrakte werden mit 2 x 5 ml Kochsalzlösung gewaschen, getrocknet und unter Vakuum vom Lösungsmittel befreit. Der Rückstand wird dann an einer Kieselgelsäule chromatografiert und mit Ethylacetat eluiert. Man erhält 105 mg (30%) 5-Amino-7-p-fluorbenzyl-2-(2-furyl)-1,2,3-triazolo[5,4-e]-1,2,4-triazolo[1,5-c]-pyrimidin, Fp. 266-268 DEG C; <1>H-NMR (DMSO-d6): 8,5 (sb, 2H); 7,95 (s, 1H); 7,4-7,1 (m, 6H); 6,7 (s, 1H); 5,7 (s, 2H).
Auf analoge Weise wurden hergestellt: 5-Amino-7-o-fluorbenzyl-2-(2-furyl)-1,2,3-triazolo[5,4-e]-1,2,4-triazolo[1,5-c]-pyrimidin, Fp. 310 DEG C; 5-Amino-7- benzyl-2-(2-furyl)-1,2,3-triazolo[5,4-e]-1,2,4-triazolo[1,5-c]-pyrimidin, Fp. 295-297 DEG C; 5-Amino-7-(2-fluor-6-chlorbenzyl)-2-(2-furyl)-1,2,3-triazolo [5,4-e]-1,2,4-triazolo[1,5-c]-pyrimidin, Fp. 218-220 DEG C; <1>H-NMR (DMSO-d6): 8,51 (sb min , 2H); 7,98 (s, 1H); 7,55-7,28 (m, 4H); 6,77 (m, 1H); 5,73 (s, 2H); 5-Amino-7-(m-fluorbenzyl)-2-(2-furyl)-1,2,3-triazolo[5,4-e]-1,2,4-triazolo[1,5-c]-pyrimidin, Fp. 280-283 DEG C; <1>H-NMR (DMSO-d6): 8,45 (sb, 2H); 7,98 (s, 1H); 7,4-7,1 (m, 5H); 6,76 (s, 1H); 5,75 (s, 2H); 5-Amino-7-( beta -phenylethyl)-2-(2-furyl)-1,2,3-triazolo[5,4-e]-1,2,4-triazolo[1,5-c]-pyrimidin, Fp. 269-271 DEG C; <1>H-NMR (DMSO-d6): 8,4 (sb, 2H); 7,98 (s, 1H); 7,3-7,15 (m, 6H); 6,86 (s, 1H); 4,71 (t, 2H); 3,31 (t, 2H).
Beispiel 16: Weitere Verbindungen
Unter Anwendung der oben beschriebenen Chemie gelangte man zu folgenden zusätzlichen Verbindungen der Formel
<TABLE> Columns=3 Head Col 1: Verbindung Nr. Head Col 2: R Head Col 3: R1 60 H H 61 H 4-MeO-Ph-NHCO- <CEL AL=L>62<CEL AL=L>H 3-CI-Ph-NHCO- 63 tert.-C4H9 H 64 tert.-C4H9<CEL AL=L>4-MeO-Ph-NHCO- 65 tert.-C4H9 3-CI-Ph-NHCO- 66 CH3<CEL AL=L>PH-NHCO- 67 CH3 4-SO3H-Ph-NHCO- 68 CH3<CEL AL=L>3,4-Cl2-Ph-NHCO- 69 CH3 3,4-(OCH2Oles Siliciumdioxid 2 g </TABLE> <TABLE> Columns=2 (B) Tabletten für orale Verabreichung - für 100 Tabletten Head Col 1: Bestandteil Head Col 2: Menge Wirkstoff 50 g Stärke 50 g <CEL AL=L>Magnesiumstearat<CEL AL=L>5 g </TABLE>
Der Wirkstoff und die Stärke werden mit Wasser granuliert und getrocknet. Zu den getrockneten Körnern wird Magnesiumstearat gegeben und das Gemisch gründlich durchgemischt. Es wird dann in Tabletten gepresst. <TABLE> Columns=2 (C) Injektion - für 1000 Ampullen von je 1 ml Head Col 1: Bestandteil Head Col 2: Menge Wirkstoff 10 g Puffer q.s. Propylenglycol<CEL AL=L>400 mg Wasser für Injektion q.s. 1000 ml </TABLE>
Der Wirkstoff und der Puffer werden bei etwa 50 DEG C im Propylenglycol gelöst. Das Wasser für die Injektion wird dann unter Rühren zugegeben, die erhaltene Lösung filtriert, in Ampullen abgefüllt, diese verschlossen und im Autoklaven sterilisiert. <TABLE> Columns=2 (D) Kontinuierliche Injektion - für 1000 ml Head Col 1: Bestandteil Head Col 2: Menge Wirkstoff 10 g Puffer q.s. Wasser für Injektion<CEL AL=L>q.s. 1000 ml </TABLE>
Dem Fachmann, der über ein Fachwissen für normale Routineexperimente verfügt, kann viele Equivalente der Ausführungsformen der Erfindung, die in diesem Dokument beschrieben sind, auffinden. Solche Equivalente werden ebenfalls von den folgenden Ansprüchen mitumfasst.

Claims (17)

1. Verbindung der Formel
oder
worin bedeuten: A Imidazol, Pyrazol oder Triazol; R -C(X)R1, -C(X)-N(R1)2, -C(X)OR1, -C(X)SR1, -SOnR1, -SOnOR1, -SOnSR1 oder -SOn-N(R1)2; R1 Wasserstoff, Alkyl, substituiertes Alkyl, Alkenyl, substituiertes Alkenyl, Alkinyl, substituiertes Alkinyl, Aryl, Heteroaryl, einen heterocyclischen Rest, Niederalkanoyl oder, wenn R1 an ein Stickstoffatom gebunden ist, bildet es zusammen mit dem N-Atom einen Azetidinring oder einen 5- oder 6-gliedrigen heterocyclischen Ring, der eines oder mehrere Heteroatome enthält; R2 Wasserstoff, Alkyl, substituiertes Alkyl, Aralkyl, substituiertes Aralkyl, Heteroaryl, substituiertes Heteroaryl oder Aryl; R3 Furyl, Pyrryl, Thiophenyl, Benzofuryl, Benzopyrryl oder Benzothiophenyl, wobei diese Reste gegebenenfalls einen oder mehrere folgende Substituenten tragen: Hydroxy, Acyl, gegebenenfalls substituiertes Alkyl, Alkoxy, Alkenyl oder Alkinyl, Amino, substituiertes Amino, Aminoacyl, Acyloxy, Acylamino, Alkaryl, Aryl, Aryloxy, Azido, Carboxyl, Carboxyalkyl, Cyano, Halogen, Nitro, Heteroaryl, Heteroaryloxy, einen Heterocyclus, Heterocyclooxy, Aminoacyloxy, Oxyacylamino, Thioalkoxy, substituiertes Thioalkoxy, Thioaryloxy, Thioheteroaryloxy, -SO-Alkyl, -SO-substituiertes Alkyl, -SO-Aryl, -SO-Heteroaryl, -SO2-Alkyl, -SO2-substituiertes Alkyl, -SO2-Aryl, -SO2-Heteroaryl, Trihalogenmethyl; X O, S oder NR1, n 1 oder 2; und deren pharmazeutisch zulässige Salze.
2. Verbindung nach Anspruch 1, worin R für -C(X1)R1, -C(X1)-N(R1)2, -SOnR1 oder -SOn-N(R1)2 steht, worin X1 O oder S ist.
3. Verbindung nach Anspruch 1, worin R1 Wasserstoff, Alkyl, Alkenyl oder Aryl bedeutet.
4. Verbindung nach Anspruch 1, worin R2 Wasserstoff, Alkyl, Alkenyl oder Aryl bedeutet.
5. Verbindung nach Anspruch 1, worin R3 Furanyl ist.
6. Verbindung nach Anspruch 1, worin X Sauerstoff ist.
7. Verbindung nach Anspruch 1, worin A für einen Triazoloring steht.
8. Verbindung nach Anspruch 1, worin A für einen Pyrazoloring steht.
9. Verwendung einer Verbindung nach Anspruch 1 in einem Verfahren zur Herstellung eines Medikaments zur Behandlung von Hypertension, Entzündungen, allergischen Reaktionen, Mastzellen-Degranulation, Tumoren und Sauerstoffmangel im Herzmuskel und zum Schutz gegen Blutleere im Gehirn.
10. Verwendung nach Anspruch 9 einer Verbindung, worin R für -C(X1)R1, -C(X1)-N(R1)2, -SOnR1 oder -SOn-N(R1)2 steht, worin X1 O oder S ist.
11. Verwendung nach Anspruch 10 einer Verbindung, worin R1 Wasserstoff, Alkyl, Alkenyl oder Aryl bedeutet.
12. Verwendung nach Anspruch 9 einer Verbindung, worin R2 Wasserstoff, Alkyl, Alkenyl oder Aryl bedeutet.
13. Verwendung nach Anspruch 9 einer Verbindung, worin X Sauerstoff ist.
14. Verwendung nach Anspruch 9 einer Verbindung, worin A für einen Pyrazoloring steht.
15. Verwendung nach Anspruch 9 einer Verbindung, worin A für einen Triazoloring steht.
16. Verwendung nach Anspruch 9 einer Verbindung nach Anspruch 1 in einem Verfahren zur Herstellung eines Medikaments zur Behandlung von Sauerstoffmangel im Herzmuskel und Blutleere im Gehirn.
17. Verfahren zur Bestimmung des Vorliegens von Tumorzellen mit einer hohen Konzentration von Adenosin-A3-Rezeptoren in einer Zellprobe, dadurch gekennzeichnet, dass (a) eine Suspension der Zellen in einem Kulturmedium erzeugt wird, (b) den Zellen eine Verbindung gemäss Anspruch 1 zugegeben wird, welche eine Markierung aufweist, die nach einer Bindung der Verbindung an Tumorzellen erfasst werden kann, (c) eine Bindung der Verbindung an die Tumorzellen abgewartet wird, und (d) die Markierung erfasst wird.
CH00012/01A 1998-09-16 1999-09-15 Adenosin-A3-Rezeptor-Modulatoren CH692132A5 (de)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US09/154,435 US6448253B1 (en) 1998-09-16 1998-09-16 Adenosine A3 receptor modulators
US09/379,300 US6407236B1 (en) 1998-09-16 1999-08-23 Adenosine A3 receptor modulators

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CH692132A5 true CH692132A5 (de) 2002-02-28

Family

ID=22551355

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CH00012/01A CH692132A5 (de) 1998-09-16 1999-09-15 Adenosin-A3-Rezeptor-Modulatoren

Country Status (27)

Country Link
US (2) US6448253B1 (de)
JP (1) JP2002524519A (de)
KR (1) KR100448555B1 (de)
CN (1) CN1154494C (de)
AT (2) AT414240B (de)
AU (1) AU749211B2 (de)
BR (1) BR9913766A (de)
CA (1) CA2332007C (de)
CH (1) CH692132A5 (de)
DE (1) DE19983530T1 (de)
DK (1) DK200100432A (de)
ES (1) ES2204262B1 (de)
FI (1) FI116624B (de)
GB (1) GB2353527B (de)
HU (1) HUP0102589A3 (de)
ID (1) ID28100A (de)
IL (1) IL156851A (de)
LU (1) LU90687B1 (de)
NO (1) NO318078B1 (de)
NZ (1) NZ509149A (de)
RO (1) RO121030B1 (de)
RU (1) RU2250904C2 (de)
SE (1) SE522578C2 (de)
TR (1) TR200003461T2 (de)
WO (1) WO2000015231A1 (de)
YU (1) YU83600A (de)
ZA (1) ZA200101626B (de)

Families Citing this family (54)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6921825B2 (en) 1998-09-16 2005-07-26 King Pharmaceuticuals Research & Development, Inc. Adenosine A3 receptor modulators
IL133680A0 (en) * 1999-09-10 2001-04-30 Can Fite Technologies Ltd Pharmaceutical compositions comprising an adenosine receptor agonist or antagonist
KR20030076633A (ko) * 2001-02-05 2003-09-26 가부시키 가이샤 오오쯔카 세이야쿠 고우죠우 트리아조로퀴나졸린 및 피라졸로 트리아조로피리미딘유도체, 의약조성물,아데노신 에이3 수용체 친화제,안압저하제, 녹내장의 예방 및 치료를 위한 제제 및안압저하 방법
CA2468649C (en) * 2001-11-30 2009-03-10 Schering Corporation Adenosine a2a receptor antagonists
HUP0105407A3 (en) * 2001-12-21 2004-04-28 Sanofi Aventis Triazolo[1,5-a]quinolin derivatives, process for their preparation, pharmaceutical compositions thereof and intermediates
IL160133A0 (en) * 2002-05-30 2004-06-20 King Pharmaceuticals Res & Dev Pharmaceutically active compounds having a tricyclic pyrazolotriazolopyrimidine ring structure and methods of use
US20060100168A1 (en) * 2002-09-30 2006-05-11 The Trustee Of Boston University Method of treating cancer using adenosine and its analogs
US20040167212A1 (en) * 2002-10-07 2004-08-26 Bednarski Mark D. X-nitro compounds, pharmaceutical compositions thereof and uses thereof
EP1554583B1 (de) * 2002-10-22 2007-08-22 Can-Fite Biopharma Ltd. Die verwendung von dem a3 adenosin rezeptor als marker eines krankheitszustandes
HUP0203976A3 (en) * 2002-11-15 2004-08-30 Sanofi Aventis Adenozine a3 receptors, process for their preparation and pharmaceutical compositions containing them
US8236874B2 (en) * 2003-06-11 2012-08-07 3M Innovative Properties Company Compositions and method for improving the processing of polymer composites
US7402625B2 (en) * 2003-06-11 2008-07-22 3M Innovative Properties Company Compositions and method for improving the processing of polymer composites
CN1898246B (zh) * 2003-10-28 2010-10-27 先灵公司 制备取代的5-氨基-吡唑并[4，3-e]-1，2，4-三唑并[1，5-c]嘧啶的方法
WO2005060981A2 (en) * 2003-12-19 2005-07-07 Schering Corporation Pharmaceutical compositions
EP1766060A4 (de) * 2004-05-14 2007-11-28 King Pharmaceuticals Res & Dev Verfahren zur diagnose und prognostizierung von soliden tumoren und melanom
AU2005306325A1 (en) * 2004-11-22 2006-05-26 King Pharmaceuticals Research & Development Inc. Enhancing treatment of HIF-1 mediated disorders with adenosine A3 receptor agonists
WO2007040565A2 (en) * 2004-11-22 2007-04-12 King Pharmaceuticals Research & Development, Inc. Enhancing treatment of cancer and hif-1 mediated disoders with adenosine a3 receptor antagonists
US7507842B2 (en) * 2005-08-12 2009-03-24 Radiorx, Inc. Cyclic nitro compounds, pharmaceutical compositions thereof and uses thereof
US20070135380A1 (en) 2005-08-12 2007-06-14 Radiorx, Inc. O-nitro compounds, pharmaceutical compositions thereof and uses thereof
US20090088403A1 (en) * 2007-05-07 2009-04-02 Randy Blakely A3 adenosine receptors as targets for the modulation of central serotonergic signaling
JP2011528363A (ja) * 2008-07-16 2011-11-17 キング・ファーマシューティカルズ・リサーチ・アンド・デベロプメント・インコーポレイティッド アテローム性動脈硬化症の治療
TWI404931B (zh) * 2009-02-20 2013-08-11 財團法人國家同步輻射研究中心 癌化生物樣本之檢測方法及其使用之檢驗試劑
WO2011010306A1 (en) 2009-07-21 2011-01-27 Ramot At Tel-Aviv University Ltd. A3 adenosine receptor ligands for modulation of pigmentation
PE20121336A1 (es) * 2009-12-01 2012-11-03 Abbvie Inc Nuevos compuestos triciclicos
US8471041B2 (en) * 2010-02-09 2013-06-25 Alliant Techsystems Inc. Methods of synthesizing and isolating N-(bromoacetyl)-3,3-dinitroazetidine and a composition including the same
US8664247B2 (en) 2011-08-26 2014-03-04 Radiorx, Inc. Acyclic organonitro compounds for use in treating cancer
US20140308260A1 (en) 2011-10-07 2014-10-16 Radiorx, Inc. Methods and compositions comprising a nitrite-reductase promoter for treatment of medical disorders and preservation of blood products
CA2850723C (en) 2011-10-07 2019-07-09 Radiorx, Inc. Organonitro thioether compounds and medical uses thereof
US9227979B2 (en) * 2012-01-25 2016-01-05 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Fluorescent antagonists of the A3 adenosine receptor
ES2578363B1 (es) 2015-01-22 2017-01-31 Palobiofarma, S.L. Moduladores de los receptores A3 de adenosina
WO2016202935A1 (en) * 2015-06-19 2016-12-22 Bayer Pharma Aktiengesellschaft Glucose transport inhibitors
US11512092B2 (en) 2015-10-16 2022-11-29 Abbvie Inc. Processes for the preparation of (3S,4R)-3-ethyl-4-(3H-imidazo[1,2-a]pyrrolo[2,3-e]-pyrazin-8-yl)-n-(2,2,2-trifluoroethyl)pyrrolidine-1-carboxamide and solid state forms thereof
EP3362455A1 (de) 2015-10-16 2018-08-22 AbbVie Inc. Verfahren zur herstellung von (3s,4r)-3-ethyl-4-(3h-imidazo[1,2-a]pyrrolo[2,3-e]-pyrazin-8-yl)-n-(2,2,2-trifluorethyl)pyrrolidin-1-carboxamid und festkörperformen davon
US10550126B2 (en) 2015-10-16 2020-02-04 Abbvie Inc. Processes for the preparation of (3S,4R)-3-ethyl-4-(3H-imidazo[1,2-A]pyrrolo[2,3-e]-pyrazin-8-yl)-N-(2,2,2-trifluoroethyl)pyrrolidine-1-carboxamide and solid state forms thereof
US11365198B2 (en) 2015-10-16 2022-06-21 Abbvie Inc. Processes for the preparation of (3S,4R)-3-ethyl-4-(3H-imidazo[1,2-a]pyrrolo[2,3-e]-pyrazin-8-yl)-N-(2,2,2-trifluoroethyl)pyrrolidine-1-carboxamide and solid state forms thereof
US12365689B2 (en) 2015-10-16 2025-07-22 Abbvie Inc. Processes for the preparation of (3S,4R)-3-ethyl-4-(3H-imidazo[1,2-a]pyrrolo[2,3-e]-pyrazin-8-yl)-n-(2,2,2-trifluoroethyl)pyrrolidine-1-carboxamide and solid state forms thereof
US11524964B2 (en) 2015-10-16 2022-12-13 Abbvie Inc. Processes for the preparation of (3S,4R)-3-ethyl-4-(3H-imidazo[1,2-a]pyrrolo[2,3-e]-pyrazin-8-yl)-n-(2,2,2-trifluoroethyl)pyrrolidine-1-carboxamide and solid state forms thereof
US11780848B2 (en) 2015-10-16 2023-10-10 Abbvie Inc. Processes for the preparation of (3S,4R)-3-ethyl-4-(3H-imidazo[1,2-a]pyrrolo[2,3-e]-pyrazin-8-yl)-n-(2,2,2-trifluoroethyl)pyrrolidine-1- carboxamide and solid state forms thereof
US10342778B1 (en) 2015-10-20 2019-07-09 Epicentrx, Inc. Treatment of brain metastases using organonitro compound combination therapy
US9987270B1 (en) 2015-10-29 2018-06-05 Epicentrix, Inc. Treatment of gliomas using organonitro compound combination therapy
CN109069420A (zh) 2016-01-11 2018-12-21 埃皮辛特瑞柯斯公司 2-溴-1-(3，3-二硝基氮杂环丁烷-1-基)乙酮静脉施用的组合物和方法
SG11201903312VA (en) 2016-10-14 2019-05-30 Epicentrix Inc Sulfoxyalkyl organonitro and related compounds and pharmaceutical compositions for use in medicine
ES2676535B1 (es) 2017-01-20 2019-04-29 Palobiofarma Sl Moduladores de los receptores a3 de adenosina
CN120661512A (zh) 2017-03-09 2025-09-19 艾伯维公司 治疗克罗恩病和溃疡性结肠炎的方法
US11564922B2 (en) 2017-03-09 2023-01-31 Abbvie Inc. Methods of treating crohn's disease and ulcerative colitis
DK3601296T3 (da) 2017-03-30 2022-08-29 iTeos Belgium SA 2-oxo-thiazolderivater som a2a-inhibitorer og forbindelser til anvendelse ved behandling af cancere
EP3648740A1 (de) 2017-07-07 2020-05-13 EpicentRx, Inc. Zusammensetzungen zur parenteralen verabreichung von therapeutika
WO2019164593A2 (en) 2018-01-08 2019-08-29 Epicentrx, Inc. Methods and compositions utilizing rrx-001 combination therapy for radioprotection
CN108864114B (zh) * 2018-06-04 2020-11-06 应世生物科技(南京)有限公司 选择性a2a受体拮抗剂
US11376255B2 (en) 2018-09-11 2022-07-05 iTeos Belgium SA Thiocarbamate derivatives as A2A inhibitors, pharmaceutical composition thereof and combinations with anticancer agents
CN111205291B (zh) * 2018-11-22 2022-08-23 上海科技大学 三唑并环类化合物、其制备方法、中间体和应用
CN111004245B (zh) * 2019-12-11 2022-01-07 徐州医科大学 吡唑-嘧啶并咪唑类化合物、制备方法及其应用
US12233053B2 (en) 2021-05-04 2025-02-25 Oradin Pharmaceutical Ltd. Adenosine A3 receptor antagonists for treating aging skin and wounds
CN116854644B (zh) * 2023-07-06 2025-10-21 浙江大学 5-氨基-1-烷基-1h-1,2,3-三氮唑-4-甲酰胺类化合物及其制备和应用

Family Cites Families (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3625214A (en) 1970-05-18 1971-12-07 Alza Corp Drug-delivery device
US4906474A (en) 1983-03-22 1990-03-06 Massachusetts Institute Of Technology Bioerodible polyanhydrides for controlled drug delivery
US4789734A (en) 1985-08-06 1988-12-06 La Jolla Cancer Research Foundation Vitronectin specific cell receptor derived from mammalian mesenchymal tissue
EP0545913B1 (de) 1986-08-18 1999-02-24 Emisphere Technologies, Inc. Abgabesysteme für Arzneimittel
AU612331B2 (en) * 1986-09-30 1991-07-11 Ciba-Geigy Ag 2-substituted-e-fused-(1,2,4)triazolo(1,5-c)pyrimidines pharmaceutical compositions
HU208693B (en) * 1991-02-22 1993-12-28 Egyt Gyogyszervegyeszeti Gyar Process for producing 1,2,4-triazolo (1,5-a) pyrimidinis derivatives and their carbicycli-tetrahydro-thiofurane-tetrahydrothiopyrane-, or tetrahydropyridine- condensated derivatives or medical preparatives containing them
IT1264901B1 (it) 1993-06-29 1996-10-17 Schering Plough S P A Analoghi eterociclici di 1,2,4-triazolo(15-c)pirimidine ad attivita' antagonista per il recettore a2 dell'adenosina
US5688774A (en) 1993-07-13 1997-11-18 The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services A3 adenosine receptor agonists
EP0666079B1 (de) * 1993-07-27 2001-11-07 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. Arzneimittel gegen Parkinsonsche Krankheit
IT1275420B (it) 1995-06-02 1997-08-05 Schering Plough S P A Metodo per misurare l'affinita' di legame al recettore a2a dell'adenosina di componenti di interesse farmacologico mediante l'uso del ligando triziato (3h)-sch 58261
IT1277392B1 (it) 1995-07-28 1997-11-10 Schering Plough S P A Analoghi eterociclici di 1,2,4-triazolo(1,5-c]pirimidine ad attivita' antagonista per il recettore a2a dell'adenosina
EP2311806A3 (de) * 1996-01-29 2011-08-10 The United States of America, Represented by the Secretary, Department of Health and Human Services Dihydropyridin-, Pyridin-, Benzopyranon- und Triazolchinazolinderivate, ihre Herstellung und Verwendung als Adenosinrezeptorantagonisten
US6326390B1 (en) * 1998-08-25 2001-12-04 King Pharmaceuticals Reseach And Development, Inc. Use of adenosine A3 receptor antagonists to inhibit tumor growth

Also Published As

Publication number Publication date
CN1154494C (zh) 2004-06-23
FI20002367L (fi) 2001-01-19
SE522578C2 (sv) 2004-02-17
ID28100A (id) 2001-05-03
KR20010089154A (ko) 2001-09-29
CA2332007C (en) 2007-08-07
CA2332007A1 (en) 2000-03-23
YU83600A (sh) 2003-12-31
SE0003984D0 (sv) 2000-11-01
AU749211B2 (en) 2002-06-20
ATA904399A (de) 2006-01-15
HK1035671A1 (en) 2001-12-07
AT503591A2 (de) 2007-11-15
FI116624B (fi) 2006-01-13
CN1303289A (zh) 2001-07-11
NO318078B1 (no) 2005-01-31
RO121030B1 (ro) 2006-11-30
NZ509149A (en) 2003-08-29
NO20005508D0 (no) 2000-11-01
DK200100432A (da) 2001-03-14
HUP0102589A2 (hu) 2001-11-28
KR100448555B1 (ko) 2004-09-13
AT414240B (de) 2006-10-15
WO2000015231A8 (en) 2000-06-15
US6407236B1 (en) 2002-06-18
DE19983530T1 (de) 2001-11-08
TR200003461T2 (tr) 2001-06-21
WO2000015231A9 (en) 2000-08-17
ZA200101626B (en) 2001-12-13
RU2250904C2 (ru) 2005-04-27
BR9913766A (pt) 2001-06-05
GB2353527A (en) 2001-02-28
AU6248299A (en) 2000-04-03
LU90687B1 (en) 2000-12-19
GB2353527B (en) 2004-02-25
ES2204262A1 (es) 2004-04-16
WO2000015231A1 (en) 2000-03-23
IL156851A (en) 2006-08-20
HUP0102589A3 (en) 2002-01-28
JP2002524519A (ja) 2002-08-06
SE0003984L (sv) 2000-12-22
ES2204262B1 (es) 2005-03-01
NO20005508L (no) 2001-03-15
GB0027879D0 (en) 2000-12-27
US6448253B1 (en) 2002-09-10

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CH692132A5 (de) Adenosin-A3-Rezeptor-Modulatoren
DE69705312T2 (de) N6-heterocyclisch-substituierte adenosin-derivate
DE60120494T2 (de) Substituieten triazoldiamin derivaten und ihre verwendung als kinase inhibitoren
DE60206775T2 (de) Agonisten für den adenosin a3 rezeptor
DE69815554T2 (de) Purinderivate und antagonisten des adenosin-a2-rezeptors, welche zur vorsorge oder heilung von diabetes dienen
EP0682027B1 (de) Pyrrolopyrimidinderivate mit antiproliferativer Wirkung
DE69804273T2 (de) 5h-Thiazolo[3,2-a]pyrimidinderivate
DE60026155T2 (de) Einige alkylendiamin-substituierte heterocyclen
DE69633860T2 (de) Oral aktive adenosinkinase-inhibitoren
DE3855333T2 (de) Therapeutische Nukleoside
DE69812070T2 (de) Immununterdrückende Effekte von 8 substituierten Xanthinderivaten
DE69926665T2 (de) Azolo-Pyrimidine
MXPA03011958A (es) Moduladores del receptor a3 de adenosina.
DE10238723A1 (de) Phenyl-substituierte Pyrazolyprimidine
EP1628980B1 (de) 6-arylmethyl-substituierte pyrazolopyrimidine
DE60218434T2 (de) 4-(2-BUTYLAMINO)-2,7-DIMETHYL-8-(2-METHYL-6-METHOXYPYRID-3-YL) PYRAZOLO- 1,5-Aö-1,3,5-TRIAZIN, SEINE ENANTIOMEREN UND PHARMAZEUTISCH ANNEHMBARE SALZE ALS CORTICOTROPIN-RELEASING-FACTOR-REZEPTOR-LIGANDEN
EP1626971B1 (de) 6-cyclylmethyl- und 6-alkylmethyl-substituierte pyrazolopyrimidine
DE69909209T2 (de) Pyrimidinon-derivate, diese verbindungen enthaltenden pharmazeutische zubereitungen und verfharen zu ihrer herstellung
DE3887793T2 (de) 5-Amino- oder substituierte Amino-1,2,3-Triazole, verwendbar als Antiproliferativa.
DE68925270T2 (de) Pyrrolo[3,2-e]pyrazolo[1,5-a]pyrimidinderivate und diese enthaltende Arzneimittel
DE69632726T2 (de) Verwendung von thiazerin-, oxazepin-, und diazepinverbindungen, zur hemmung von hiv, herpesvirus und zur unterdruckung der immunabwehr
DE69127010T2 (de) Selektive Adenosinreceptoren
DE3512629C2 (de) s-Triazolo[1,5-a]pyrimidine und Verfahren zu ihrer Herstellung
DE3904795C2 (de) Pharmazeutisches Präparat und dessen Verwendung
EP2298773B1 (de) 6-Cyclylmethyl- und 6-Alkylmethyl-substituierte Pyrazolopyrimidine

Legal Events

Date Code Title Description
PFA Name/firm changed

Owner name: MEDCO RESEARCH, INC. TRANSFER- KING PHARMACEUTICAL

PL Patent ceased