CH721627A2 - Composition pour le rajeunissement de la peau - Google Patents

Abstract

La présente invention fait référence à une composition comprenant comme principe actif le myconoside de formule (I), à une formulation cosmétique comprenant le myconoside, et ayant pour utilité la promotion du rajeunissement de la peau d'un individu. L'invention fait également référence à l'utilisation de ladite composition ou de ladite formulation pour le rajeunissement de la peau d'un individu et à une méthode cosmétique du rajeunissement de la peau d'un individu comprenant l'application de ladite composition ou de ladite formulation sur la peau dudit individu.

Description

[0001] La présente invention fait référence à une composition comprenant comme principe actif le myconoside, à une formulation cosmétique comprenant le myconoside, et ayant pour utilité la promotion du rajeunissement de la peau d'un individu. L'invention fait également référence à l'utilisation de ladite composition ou de ladite formulation pour le rajeunissement de la peau d'un individu et à une méthode cosmétique du rajeunissement de la peau d'un individu comprenant l'application de ladite composition ou de ladite formulation sur la peau dudit individu.

ÉTAT DE LA TECHNIQUE

[0002] Les mécanismes du vieillissement de la peau ont été largement étudiés dans la littérature scientifique. Les causes du vieillissement de la peau sont multiples et variées et incluent, entre autres, la diminution de production de collagène et d'élastine au fil du temps, ainsi que la baisse de l'hydratation de la peau, le ralentissement du métabolisme de régénération cellulaire, l'exposition au soleil et autres promoteurs de formation de radicaux libres ainsi que l'hygiène de vie d'un individu (alimentation, tabagisme, habitudes de sommeil). Le processus du vieillissement de la peau est également influencé par des facteurs génétiques tels que l'existence de polymorphismes génétiques pouvant par exemple affecter les gènes impliqués dans la production de collagène, d'élastine ou d'enzymes antioxydants. De plus, le processus du vieillissement de la peau est influencé par les gènes liés à la régénération cellulaire, la division cellulaire et la réparation de l'ADN, les gènes impliqués dans la réponse au stress oxydatif (ex. radicaux libres). Des altérations génétiques, telles que mutations, peuvent affecter lesdits processus et provoquer le vieillissement de la peau.

[0003] De plus, divers procédés épigénétiques sont susceptibles d'influencer le processus du vieillissement de la peau. Parmi ces procédés sont connus la méthylation de l'ADN, l'acétylation de l'histone, la compaction de l'ADN ou l'expression de miARN. En particulier, le profil de méthylation de l'ADN varie avec l'âge de l'individu. Au fil du temps, une perte globale de méthylation de l'ADN associée à une hyperméthylation de certaines zones de l'ADN a lieu, comme par exemple l'apparition d'îles CpG. Ces changements altèrent l'expression des gènes impliqués dans des processus liés au vieillissement, tels que le cycle cellulaire, la réparation de l'ADN, l'inflammation, l'apoptose (mort cellulaire programmée) et le contrôle de la sénescence cellulaire. Il est de plus connu que certains changements de méthylation de l'ADN associés au vieillissement sont réversibles. Ceci est par exemple illustré par Gordin Zupkovitz et al. dans „Analysis of Methylation Dynamics Reveals a Tissue-Specific, Age-Dependent Decline in 5-Methylcytosine Within the Genome of the Vertebrate Aging Model Nothobranchius furzeri“ Frontiers in Molecular Biosciences, 2021, vol. 8, DOI=10.3389/fmolb.2021.627143.

[0004] Quelques composés phytochimiques sont connus pour leur capacité à contrôler des protéines de contrôle épigénetique de l'expression de certains gènes, comme par exemple la protéine NRF2. Ces composés sont par exemple la curcumine, le sulforaphane, le resveratrol, la réserpine, et l'acide ursolique. Rúbia C. G. Corrêa, Rosane M. Peralta, Charles W. I. Haminiuk, Giselle Maria Maciel, Adelar Bracht & Isabel C. F. R. Ferreira décrivent dans „New phytochemicals as potential human anti-aging compounds: Reality, promise, and challenges“ Critical Reviews in Food Science and Nutrition, 2018, 58:6, 942-957 divers agents phytochimiques susceptibles d'agir contre vieillissement par contrôle épigénétique. Ces documents ne mentionnent en aucun cas le myconoside comme principe actif, ou un extrait de Haberlea Rhodopensis.

[0005] D'autre part, les plantes de résurrection sont des plantes susceptibles de se régénérer suite à de longues périodes de sécheresse montrant une grande résilience à la déshydratation, pouvant se régénérer rapidement en contact avec l'eau. Gechev, T.S., Benina, M., Obata, T. et al. décrivent dans „Molecular mechanisms of desiccation tolerance in the resurrection glacial relic Haberlea Rhodopensis.“ Cell. Mol. Life Sci. 2013, 70, 689-709 les changements de programmation génétique induits par la sécheresse qui confèrent à cette plante ses propriétés uniques de résistance à la sécheresse.

[0006] Divers agents cosmétiques utiles pour le rajeunissement de la peau sont connus. Ceux-ci incluent les agents de croissance topique influant sur le métabolisme du collagène, comme décrits par Daniel J. Quinlan et al. dans „Topical growth factor preparations for facial skin rejuvenation: A systematic review“ Journal of Cosmetic Dermatology 2023, 22, 2023-2039. D'autre part, certaines plantes, telle que la centella asiatica, l'aloe vera, le thé vert ou le gingko biloba sont actuellement utilisées dans des formulations cosmétiques pour le rajeunissement de la peau grâce à leurs propriétés antioxydantes, hydratantes ou de promotion de la régénération cellulaire.

[0007] Il existe dans la technique le besoin d'apporter de nouveaux ingrédients cosmétiques susceptibles de promouvoir le rajeunissement de la peau par contrôle épigénétique, notamment par modulation de la méthylation de l'ADN.

RÉSUMÉ DE L'INVENTION

[0008] Après d'intensifs travaux de recherche, les inventeurs ont découvert que le principe actif myconoside de formule (I) est susceptible de restaurer la méthylation de l'ADN causée par le vieillissement grâce à un contrôle épigénétique. De plus, ledit composé est susceptible de réguler l'expression de gènes impliqués dans la prolifération cellulaire, la défense cellulaire, la fibrose, la remodélation cellulaire et la réparation de l'ADN. Ledit composé permet de plus réduire l'expression de protéines impliquées dans le processus de vieillissement telles que la collagénase interstitielle (MMP-1), la stromelysine (MMP-3) et la metalloproteinase de matrice (MMP-14), chymase, neprilysine, les immunoglobulines (IGHG2, IGLL5, IGKC, IGHG1), la synthase des prostaglandines G et H; et induire l'expression de protéines dont l'expression est typiquement réduite du fait du vieillissement telles que filaggrine, filaggrine 2, kératine cytosquelettique II 78, alpha-2 caténine, protéine liant l'actine LIM 1 et sphingolipide delta(4) désaturase. En outre, ledit composé de formule (I) est susceptible d'annuler au moins partiellement les modifications de la morphologie cellulaire liées à la sénescence. Ledit composé de formule (I) peut être obtenu par extraction de la plante Haberlea Rhodopensis. Ledit composé de formule (I) est par conséquent utile dans une méthode cosmétique de rajeunissement de la peau et/ou dans une méthode cosmétique de traitement ou prévention des conséquences du vieillissement de la peau.

[0009] Ainsi, un premier aspect de l'invention fait référence à une composition comprenant comme principe actif le myconoside de formule (I). Le composé de formule (I) est particulièrement utile dans la formulation de compositions cosmétiques pour le rajeunissement de la peau.

[0010] Un second aspect de l'invention fait donc référence à une formulation cosmétique pour promouvoir le rajeunissement de la peau comprenant la composition selon le premier aspect de l'invention.

[0011] Un troisième aspect de l'invention fait référence à l'utilisation de la composition selon le premier aspect de l'invention ou de la formulation cosmétique selon le second aspect de l'invention pour promouvoir le rajeunissement de la peau.

[0012] Un quatrième aspect de l'invention fait référence à une méthode cosmétique de promotion du rajeunissement de la peau qui comprend l'application sur la peau d'un individu, de préférence sur le visage dudit individu, de la composition selon le premier aspect de l'invention ou de la formulation cosmétique selon le second aspect de l'invention pour promouvoir le rajeunissement de la peau.

[0013] Un aspect additionnel de la présente invention fait référence à une méthode cosmétique qui comprend l'application sur la peau d'un individu, de préférence sur le visage dudit individu, de la composition selon le premier aspect de l'invention ou de la formulation cosmétique selon le second aspect de l'invention pour: (i) accroître la production d'au moins une protéine parmi collagène, élastine, fibronectine, protéines de la matrice extracellulaire et protéines de la barrière cutanée; et/ou (ii) inhiber au moins une enzyme de dégradation de la matrice extracellulaire; et/ou (iii) promouvoir la migration de kératinocytes; et/ou (iv) promouvoir l'expression d'enzymes antioxydants; et/ou (v) inhiber l'expression de marqueurs impliqués dans la réponse inflammatoire; et/ou (vi) annuler au moins partiellement les modifications de la morphologie cellulaire liées à la sénescence.

DESCRIPTION DÉTAILLÉE

[0014] Tous les termes utilisés ici dans cette demande, sauf indication contraire, doivent être compris dans leur sens ordinaire tel que connu dans la technique. D'autres définitions plus spécifiques pour certains termes utilisés dans la présente demande sont telles qu'exposées ci-dessous et sont destinées à s'appliquer uniformément tout au long de la description et des revendications, à moins qu'une définition autrement expressément énoncée ne fournisse une définition plus large.

[0015] Dans le contexte de la présente invention, et plus particulièrement dans le champ de la cosmétique, le terme „rajeunissement“ fait référence à la réversion au moins partielle des conséquences du vieillissement de la peau telles que, en particulier, (i) la réduction de production de collagène, d'élastine, de fibronectine ou des protéines de la matrice extracellulaire ou de la barrière cutanée, (ii) l'activation d'enzymes de dégradation de la matrice extracellulaire telles que les métalloprotéinases matricielles, (iii) la diminution de l'expression d'enzymes antioxydants, et/ou (iv) l'augmentation de l'expression de marqueurs impliqués dans la réponse inflammatoire.

[0016] Comme indiqué ci-dessus, un premier aspect de la présente invention fait référence à une composition comprenant comme principe actif le myconoside de formule (I)

[0017] Dans une réalisation particulière du premier aspect de l'invention, ladite composition est telle que le composé de formule (I) représente entre 20% et 80% en poids de ladite composition; de préférence, ladite composition est telle que le composé de formule (I) représente entre 40% et 60% en poids de ladite composition. Dans une réalisation plus particulière du premier aspect de l'invention, ladite composition est telle que le composé de formule (I) représente entre 41% et 53% en poids de ladite composition, par exemple à peu près 45%.

[0018] Dans une réalisation particulière du premier aspect de l'invention, ladite composition est un extrait de feuilles de Haberlea Rhodopensis. Dans cette réalisation particulière, ladite composition est telle que le composé de formule (I) représente de préférence entre 40% et 60% en poids de ladite composition. Dans une réalisation particulière du premier aspect de l'invention, ladite composition est un extrait de feuilles de Haberlea Rhodopensis dans laquelle le composé de formule (I) représente entre 41% et 53% en poids de ladite composition, par exemple à peu près 45%.

[0019] Dans une réalisation particulière du premier aspect de l'invention, ladite composition comprend en outre au moins un composant choisi parmi lutéoléine, acide sinapique, hespéridine et acide férulique.

[0020] Un procédé d'obtention dudit extrait de feuilles de Haberlea Rhodopensis représente un aspect additionnel de la présente invention. Ce procédé comprend les étapes suivantes: (i) proportionner des feuilles de Haberlea Rhodopensis; de préférence, lesdites feuilles sont essentiellement sèches; (ii) éventuellement, triturer les feuilles de Haberlea Rhodopensis obtenues dans l'étape (i) de façon à obtenir des solides ayant une taille moyenne de entre 0.1 et 5 mm; (iii) soumettre les solides obtenus dans l'étape (i) ou (ii) à une extraction solide-liquide en infusant lesdits solides dans un mélange hydroalcoholique à une température de entre 20 et 60 °C, à une pression d'entre 0,8 et 1,3 bar et pour une pèriode d'au moins 3 h; de préférence entre 4 et 6 heures; de préférence la phase liquide d'extraction consiste en un mélange d'eau et d'éthanol dont la teneur en éthanol est entre 50% (vol/vol) et 90% (vol/vol); de préférence la phase liquide d'extraction consiste en un mélange 1:4 (vol/vol) d'eau et d'éthanol; (iv) séparer les phases solides et liquides résultantes de l'étape (iii); de préférence par filtration; pour obtenir une phase liquide; (v) éventuellement, soumettre à nouveau les résidus solides résultants de l'étape (iv) aux étapes (iii) et (iv); pour obtenir une phase liquide; (vi) évaporer les solvents des phases liquides obtenues en (iv) et (v).

[0021] Comme indiqué ci-dessus, le deuxième aspect de la présente invention fait référence à une formulation cosmétique pour promouvoir le rajeunissement de la peau comprenant la composition du premier aspect de l'invention.

[0022] Dans une réalisation particulière du deuxième aspect de l'invention, ladite formulation cosmétique comprend une composition telle que définie dans n'importe quelle réalisation particulière ou préférée du premier aspect de l'invention.

[0023] Dans une réalisation particulière du deuxième aspect de l'invention, ladite formulation cosmétique est de base aqueuse ou hydroalcoholique; de préférence, elle est de base aqueuse.

[0024] Dans une réalisation particulière du deuxième aspect de l'invention, ladite formulation cosmétique est telle que le contenu en poids de la composition selon le premier aspect de la présente invention est d'entre 1% et 3%.

[0025] Dans une réalisation particulière du deuxième aspect de l'invention, ladite formulation cosmétique est de base aqueuse et comprend entre 1% et 3% en poids une composition selon le premier aspect de l'invention qui est un extrait de feuilles de Haberlea Rhodopensis dans lequel le composé de formule (I) représente entre 40% et 60% en poids dudit extrait et comprenant en outre au moins un composant choisi parmi lutéoléine, acide sinapique, hespéridine et acide férulique, le pH de ladite formulation étant compris entre 5,5 et 6,5.

[0026] La formulation cosmétique du deuxième aspect de l'invention peut comprendre en outre des ingrédients additionnels conventionnels et reconnaissables par l'homme du métier comme formant part de formulations cosmétiques. Lesdits agents additionnels peuvent être par exemple un ou plusieurs agents parmi les agents conservateurs, colorants, parfums et fragrances, agents anti-âge, agents apaisants, émollients, surfactants, émulsifiants, agents épaississants et agents stabilisants. De tels ingrédients sont par exemple décrits dans le chapitre 2 de „Introduction to Cosmetic Formulation and Technology 2<nd>Edition“ par Gabriella Baki, Wiley, December 2022, ISBN : 978-1-119-70983-1. Ces ingrédients seront facilement reconnaissables par l'homme du métier.

[0027] Par conséquent, dans une réalisation particulière du deuxième aspect de l'invention, ladite formulation cosmétique comprend en outre un ou plusieurs agents conservateurs. Dans cette réalisation particulière, lesdits agents conservateurs sont de préférence sélectionnés parmi le groupe consistant en alcool benzylique, acide déhydroacétique ou un de ses sels acceptables en cosmétique, acide benzoïque ou un de ses sels acceptables en cosmétique, acide propionique ou un de ses sels acceptables en cosmétique, acide salicylique ou un de ses sels acceptables en cosmétique, acide sorbique ou un de ses sels acceptables en cosmétique, formaldéhyde, biphényle-2-ol ou un de ses sels acceptables en cosmétique, pyrithione de zinc, chlorobutanol, acide p-hydroxybenzoïque ou un de ses sels et esters acceptables en cosmétique, acide formique, formate de sodium, acide undécylénique ou un de ses sels acceptables en cosmétique, hexetidine, alcool dichloro-2,4-benzylique, triclocarban, chlorocrésol, triclosan, chloroxylénol, méthénamine, phénoxy-2-éthanol, diméthylol, diméthylhydantoïne, o-cymen-5-ol, chlorophene, imidazolinyl urea, diazolidiinyl urea, parabens, bromochlorophene, methyl(chloro)isothiazolinone, chloroacétamide, chlorhexidine ou un de ses sels acceptables en cosmétique, phénoxypropanol, chlorpenesine, sels acceptables en cosmétique de behentrimonium, hexamidine ou un de ses sels acceptables en cosmétique, glutaral, chlorphenesin, hydroxyméthylaminoacétate de sodium, chlorure de benzethonium, sels acceptables en cosmétique de benzalkonium, (phénylméthoxy)méthanol, (phényloxy)éthanol, benzylhemiformal, carbamate de 3-iodo-2-propynylbutyle et un de leurs mélanges.

[0028] Dans une réalisation encore plus particulière du deuxième aspect de l'invention, ladite formulation cosmétique comprend en outre un ou plusieurs agents conservateurs sélectionnés parmi le groupe consistant en alcool benzylique, (phényloxy)éthanol, chlorpenesin, acide déhydroacétique ou un de ses sels acceptables en cosmétique et un de leurs mélanges.

[0029] Dans une réalisation particulière du deuxième aspect de l'invention, ladite formulation cosmétique comprend en outre un ou plusieurs agents conservateurs, lesquels représentent entre 0.1% et 2% en poids de la formulation cosmétique.

[0030] Dans une réalisation particulière du deuxième aspect de l'invention, ladite formulation cosmétique comprend en outre un agent apaisant qui consiste en un mélange d'extrait de graine de Cucurbita Epo, d'eau de mer et d'eau, tel qu'Ocâline XP™.

[0031] D'autres agents apaisants peuvent être utilisés dans la formulation cosmétique du deuxième aspect de la présente invention. Ceux-ci sont par exemple les agents apaisants sélectionnés parmi le groupe consistant en extrait d'aloé vera, extrait de camomille, extrait de calendula, allantoïne, bisabolol, extrait de thé vert, extrait d'avoine, extrait de réglisse, extrait de concombre et panthénol. Par conséquent, dans une réalisation particulière du deuxième aspect de l'invention, ladite formulation cosmétique comprend en outre un ou plusieurs agents apaisants acceptables en cosmétique, chacun desdits agents apaisants étant de préférence sélectionnés parmi le groupe consistant en extrait d'aloé vera, extrait de camomille, extrait de calendula, allantoïne, bisabolol, extrait de thé vert, extrait d'avoine, extrait de réglisse, extrait de concombre et panthénol.

[0032] Dans une réalisation particulière du deuxième aspect de l'invention, ladite formulation cosmétique comprend en outre un surfactant acceptable en cosmétique, tel que le glucoside de décyle et/ou l'alcool décylique ou un extrait hydrolysé de Candida Bombicola tel que Sophogreen Plus™.

[0033] D'autres agents surfactants peuvent être utilisés dans la formulation cosmétique du deuxième aspect de la présente invention. Ceux-ci sont par exemple les surfactants sélectionnés parmi le groupe consistant en laurysulfate de sodium laurethsulfate de sodium, bétaïne de cocamidopropyle, glucoside de décyle, glucoside de lauryl, polysorbate, alcohol cetilique, alcool stéarylique, glycereth 26, glucoside de cétearyle, cocamide de diethanolamine, cocoamphodiacétate de sodium et oléate de sorbitan.

[0034] Dans une réalisation particulière du deuxième aspect de l'invention, ladite formulation cosmétique comprend en outre un polymère hydrosoluble sélectionné parmi (i) la gomme de rhizobian, le hyaluronate de sodium et un de leurs mélanges tel que Sens'Hyal™ ou (ii) la gomme de xanthane, la gomme de Cyamopsis Tetragonoloba et un de leurs mélanges tel que Syner-GX™.

[0035] Dans une réalisation particulière du deuxième aspect de l'invention, ladite formulation cosmétique comprend en outre un ou plusieurs agents anti-âge acceptables en cosmétique, chacun desdits agents anti-âge étant de préférence sélectionnés parmi le groupe consistant en rétinoïdes, acide hyaluronique ou un de ses sels acceptables en cosmétique, acide hyaluronique acétylé ou un de ses sels acceptables en cosmétique, un mélange de mannose-6-phosphate et mannose dans lequel le ratio molaire de mannose-6-phosphate à mannose est compris entre 3:1 et 0.3:1, un extrait de Mastocarpus Stellatus, acide glycolique, acide lactique, vitamine C, acide salicylique, coenzyme Q10, facteur de croissance de l'épiderme (EGF), céramides, vitamine B3, peptides de promotion de la production de collagène et resveratrol.

[0036] Comme indiqué ci-dessus, un troisième aspect de l'invention fait référence à l'utilisation de la composition selon le premier aspect de l'invention ou de la formulation cosmétique selon le second aspect de l'invention pour promouvoir le rajeunissement de la peau.

[0037] Dans une réalisation particulière, le troisième aspect de l'invention fait référence à l'utilisation de la composition selon le premier aspect de l'invention ou de la formulation cosmétique selon le second aspect de l'invention pour: (i) accroître la production d'au moins une protéine parmi collagène, élastine, fibronectine, protéines de la matrice extracellulaire et protéines de la barrière cutanée; et/ou (ii) inhiber au moins une enzyme de dégradation de la matrice extracellulaire; et/ou (iii) promouvoir la migration de kératinocytes; et/ou (iv) promouvoir l'expression d'enzymes antioxydants; et/ou (v) inhiber l'expression de marqueurs impliqués dans la réponse inflammatoire; et/ou (vi) annuler au moins partiellement les modifications de la morphologie cellulaire liées à la sénescence.

[0038] Un quatrième aspect de l'invention fait référence à une méthode cosmétique de promotion du rajeunissement de la peau qui comprend l'application sur la peau d'un individu, de préférence sur le visage dudit individu, de la composition selon le premier aspect de l'invention ou de la formulation cosmétique selon le second aspect de l'invention pour promouvoir le rajeunissement de la peau.

[0039] Un aspect additionnel de la présente invention fait référence à une méthode cosmétique qui comprend l'application sur la peau d'un individu, de préférence sur le visage dudit individu, de la composition selon le premier aspect de l'invention ou de la formulation cosmétique selon le second aspect de l'invention pour: (i) accroître la production d'au moins une protéine parmi collagène, élastine, fibronectine, protéines de la matrice extracellulaire et protéines de la barrière cutanée; et/ou (ii) inhiber au moins une enzyme de dégradation de la matrice extracellulaire; et/ou (iii) promouvoir la migration de kératinocytes; et/ou (iv) promouvoir l'expression d'enzymes antioxydants; et/ou (v) inhiber l'expression de marqueurs impliqués dans la réponse inflammatoire; et/ou (vi) annuler au moins partiellement les modifications de la morphologie cellulaire liées à la sénescence.

[0040] Tout au long de la description et des revendications, le mot „comprend“ et les variantes du mot ne visent pas à exclure d'autres caractéristiques techniques, additifs, composants ou étapes. De plus, le mot „comprend“ englobe les cas de „consiste en“ et „consiste essentiellement en“. Des objets, avantages et caractéristiques supplémentaires de l'invention deviendront apparents à l'homme du métier lors de l'examen de la description ou pourront être appris par la pratique de l'invention. Les exemples suivants sont fournis à titre d'illustration, et ils ne sont pas destinés à limiter la présente invention.

EXEMPLES

Abréviations

[0041] PBS: tampon phosphate salin NHDFs: fibroblastes dermiques humains normaux SVF: facteurs dérivants du sérum gDNA: ADN génomique DMP: positions méthylées différemment

Exemple 1: Extraction de Haberlea Rhodopensis

[0042] Des feuilles sèches de Haberlea Rhodopensis (origine: Suisse) ont été triturées et réduites en petits morceaux ayant pour taille moyenne entre 0.1 et 5 mm. Une fois réduites, lesdites feuilles ont été soumises à une étape d'extraction solide-liquide par infusion desdites feuilles dans un mélange eau-éthanol à une température d'environ 40 °C. Après 4 à 6 heures d'infusion, la phase liquide a été isolée par filtration et le solvant éliminé par évaporation rotative. Ce procédé d'extraction permet d'isoler un extrait d'Haberlea Rhodopensis qui contient entre 40% et 60% en poids du composé de formule (I) (myconoside).

Exemple 2: Contrôle épigénétique par modification de la méthylation de l'ADN de fibroblastes humains

Procédure

[0043] Des cultures de fibroblastes dermiques humains normaux (NHDFs) d'un sujet donneur jeune (âgé de 25 ans) et d'un sujet donneur mûr (âgé de 54 ans) ont été réalisées à raison de 300,000 cellules par puits dans une plaque de 6 puits. Après 48 heures de culture, les NHDFs ont été rincés deux fois avec du PBS et mis à reposer dans un milieu libre en SVF pour une nuit avant stimulation. Les cellules du sujet donneur jeune n'ont pas été traitées pendant que les cellules du sujet donneur mûr ont été stimulées avec une solution contenant un extrait de Haberlea Rhodopensis à 0.2% selon l'Exemple 1. Après 36 heures de traitement, les cellules ont été récoltées après un traitement avec de la trypsine, rincées avec du PBS et les pastilles contenant les cellules stockées à -80 °C. L'ADN génomique fut extrait desdites pastilles par le biais d'une étape de RNAse (MagAttract HMW, Qiagen), pour être ensuite purifié et traité avec du bisulfite de sodium (EZ DNA methylation kit, Zymo research).

[0044] L'analyse quantitative de la méthylation de l'ADN a été établie à l'aide d'un kit Illumina Infinium Human Methylation EPIC qui permet déterminer le degré de méthylation de 850 000 sites CpG, aussi nommées positions méthylées différemment (DMP). Ces CpG se rassemblèrent en 1386 clusters représentatifs des groupes CpG de l'ADN. Une première sélection des cibles modulées a été établie pour les promoteurs ayant montré une modification significative de la méthylation entre le sujet donneur jeune non traité et le sujet donneur mûr soumis au traitement, ce qui a permis de sélectionner 349 groupes CpG associés au vieillissement. Une seconde sélection a été réalisée parmi ces promoteurs identifiés en choisissant les groupes CpG pour lesquels l'extrait de Haberlea Rhodopensis a induit une modification du degré de méthylation chez le sujet donneur d'âge mûr similaire à celui observé chez le sujet donneur jeune, réduisant le nombre de groupes CpG à 25 groupes.

Résultats

[0045] Parmi ces 349 groupes CpG, 148 groupes CpG sont hyperméthylés avec l'âge et 165 groupes CpG sont hypométhylés. Le degré de méthylation a une influence importante sur l'expression des gènes, puisqu'un gène hyperméthylé n'est pas exprimé tandis qu'un gène hypométhylé peut être exprimé. Ces résultats démontrent l'impact de l'âge sur la méthylation de l'ADN. Les deux donneurs montrent un profil relativement différent de méthylation de l'ADN et valide l'approche expérimentale pour évaluer l'impact de l'ingrédient sur la méthylation de l'ADN reliée à l'âge.

[0046] L'analyse du méthylome de l'ADN des sujets donneurs d'âge jeune et mûr non soumis ou soumis au traitement d'extrait de Haberlea Rhodopensis et tenant en compte les 25 groupes CpG dont le degré de méthylation est affecté par le traitement avec l'extrait de Haberlea Rhodopensis montre que le traitement avec l'extrait d'Haberlea Rhodopensis de l'Exemple 1 permet de restaurer significativement le degré de méthylation d'un sujet d'âge mûr au degré de méthylation d'un sujet jeune.

[0047] De plus, parmi ces 25 groupes CpG représentant des promoteurs, 14 sont directement liés au vieillissement. Ceux-ci se trouvent hyperméthylés chez le sujet donneur jeune et ne sont par conséquent pas exprimés, tandis qu'ils se trouvent hypométhylés chez le sujet d'âge mûr, ce qui induit leur expression. Une analyse plus détaillée de ces promoteurs a permis identifier six fonctions biologiques associées à ceux-ci: inflammation, invasion, maladies associées au vieillissement, altérations de la barrière dermique, apoptose et fibrose. L'expression des gènes associés à ces fonctions biologiques se voie par conséquent inhibée par le traitement par l'extrait de Haberlea Rhodopensis à 0.2% durant 36 h, du fait de la restauration de l'hyperméthylation des groupes CpG impliqués. Ces résultats mettent en évidence la capacité de l'extrait de Haberlea Rhodopensis de l'Exemple 1 à promouvoir le rajeunissement de la peau par contrôle épigénétique.

[0048] Le tableau 1 ci-dessous décrit la liste des 14 promoteurs mentionnés ci-dessus, dont le degré de méthylation varie de par le traitement avec l'extrait d'Haberlea Rhodopensis de l'Exemple 1.

Exemple 3: Analyse transcriptomique de fibroblastes humains

Procédure

[0049] Des cultures de fibroblastes dermiques humains normaux (NHDFs) d'un sujet donneur mûr (âgé de 54 ans, même sujet que dans Exemple 2) ont été réalisées à raison de 300,000 cellules par puits dans une plaque de 6 puits. Après 48 heures de culture, les NHDFs ont été rincés deux fois avec du PBS et mis à reposer dans un milieu libre en SVF pour une nuit avant stimulation. Les cellules du sujet donneur mûr ont été stimulées avec une solution contenant un extrait de Haberlea Rhodopensis à 0.2% selon l'Exemple 1. Après 48 heures de traitement, l'ARN total a été extrait par extraction totale. Après un contrôle de la qualité de l'ARN extrait, une transcription inverse a été réalisée afin d'obtenir l'ADNc correspondant. Une réaction en chaîne par polymérase quantitative par transcription inverse a été ensuite réalisée sur des plateaux spécifiques désignés pour étudier l'expression des différents gènes impliqués dans la biologie de la peau des NHDFs à raison de 10 ng d'ADNc par puits. Les résultats de l'expression génétique obtenue avec les fibroblastes ont été normalisés selon les gènes de ménage POLR2A (ARN polymérase II, subunité A) et HMBS (hydrocyméthylbilane synthase). Les gènes présentant une modification relevante comparés au sujet donneur d'âge mûr non traité ont été notés.

Résultats

[0050] Cette analyse transcriptomique a permis identifier que l'extrait d'Haberlea Rhodopensis de l'Exemple 1 permet réguler l'expression des gènes impliqués dans la prolifération cellulaire, la défense cellulaire et la réparation de l'ADN. Le principe actif est également capable de moduler l'expression des gènes impliqués dans la fibrose et la remodélation cellulaire. Plus précisément, il a été observé une induction significative: – des gènes FGF7 impliqués dans les processus de prolifération cellulaire et apoptose, – des gènes HSP90AA1 et SO2 impliqués dans les processus de défense cellulaire et suggérant une meilleure défense face à l'oxydation, – des gènes GADD45A impliqués dans la réparation cellulaire, – du gène ELN qui code l'élastine, un composant essentielle de la matrice extracellulaire de la peau.

[0051] De plus, il a été observé une inhibition des gènes MMP3 qui codent l'enzyme impliqué dans la dégradation de la matrice extracellulaire de la peau ainsi qu'une inhibition des gènes ACTA2 qui codent une protéine impliquée dans le processus de fibrose. Par conséquent, les résultats de l'Exemple 3 indiquent que l'application de l'extrait de Haberlea Rhodopensis de l'Exemple 1 initie un procédé global de rajeunissement en réactivant certains procédés qui s'inhibent avec l'âge ou en inhibant certains procédés responsables du vieillissement.

Exemple 4: Analyse du protéome d'explants de peau humaine

Procédure

[0052] Préparation des échantillons: Des explants de peau d'un donneur jeune (18 ans) et d'un donneur mûr (53 ans) ont été maintenus en survie dans une interface air-liquide. Les explants de peau du jeune donneur n'ont pas été traités tandis que les explants de peau du donneur mature ont été traités localement avec une solution de l'extrait de Haberlea Rhodopensis de l'Exemple 1 à 3% et comparé par rapport à un état non traité. Les traitements et le milieu ont été renouvelés quotidiennement pendant 5 jours. Après ces 5 jours de stimulation, les explants cutanés ont été rincés deux fois avec du PBS et ont été congelés à - 80 °C.

[0053] Traitement des échantillons: Les explants, après avoir été dilacérés avec des ciseaux, ont été transférés dans des tubes contenant des billes UFO en acier inoxydable et 800 µl de tampon iST LYSE (Désoxycholate, TCEP et Chloroacétamide). Les échantillons ont été lysés par deux cycles de battage de billes. Les homogénats ont été transférés dans des tubes d'extraction de protéines Diagenode, contenant des billes de 1 mm, et placés dans un bain sonicateur (Bioruptor Pico, Diagenode) pour parfaire, par microcavitation, la lyse des cellules et organites ainsi que le cisaillement de l'ADN. Les protéines ont été solubilisées, réduites et alkylées par ébullition dans du tampon iST LYSE (Désoxycholate, TCEP et Chloroacétamide). La concentration en protéines a été déterminée par la méthode BCA.

[0054] LC-MS/MS: 300 ng de peptides ont été injectés trois fois pour chaque échantillon. La chromatographie de phase liquide a été réalisée à l'aide d'un équipement Ultimate 3000 (Dionex) en utilisant une colonne C18 (75 µm × 50 cm, matériau 2 µm) en appliquant un gradient de 2,5 % à 35 % d'acétonitrile pendant 120 minutes à un débit de 300 ml/min après une étape de piégeage de 3 minutes sur la précolonne. Les données ont été acquises à l'aide d'un spectromètre de masse Q-Exactive (Thermo). Le scan MS a été réalisé avec une résolution de 70 000 et un temps d'accumulation de 60 ms. Le scan MS/MS a été réalisé avec une résolution de 17 500 sur les 10 ions les plus intenses de chaque cycle avec un temps d'accumulation de 60 ms. 6545 cycles ont été réalisés, soit une moyenne de 17 cycles par pic chromatographique.

[0055] Identification des protéines: Les protéines ont été identifiées à l'aide de l'algorithme SEQUEST-HT par rapport à une base de données rassemblant le protéome humain de référence et les enzymes utilisées pour la digestion extraites d'UNIPROT. Les paramètres de recherche étaient: enzyme = trypsine (complète); erreur de clivage autorisée = 2; tolérance d'erreur des précurseurs = 10 ppm; tolérance d'erreur de fragment = 0,02 Da; Modification dynamique = oxydation (M), désamidation (N/Q); Modification de l'extrémité protéique = acétylation; Modification statique = carbamidométhyle (C).

[0056] La détermination du taux de fausses découvertes (FDR) a été effectuée à l'aide de l'algorithme Percolator. Tous les spectres rapportés avec un niveau de confiance inférieur à „élevé“ par SEQUEST-HT, donc considérés comme non identifiés, ont été retraités par l'algorithme MS Amanda 2.0 sur la même base de données que ci-dessus. Les paramètres de recherche étaient: enzyme = trypsine (complète); erreur de clivage autorisée = 2; tolérance d'erreur des précurseurs = 10 ppm; tolérance d'erreur de fragment = 0,02 Da; Modification dynamique = oxydation (M)(P), désamidation (N/Q); Modification de l'extrémité protéique = acétylation, Met-Loss, Met-Loss+Acetyl; Modification statique = carbamidométhyle (C). La détermination du taux de fausses découvertes (FDR) a été effectuée à l'aide de l'algorithme Percolator.

[0057] Quantification des protéines: Les données ont été traitées à l'aide de Minora et du mappeur de fonctionnalités pour le logiciel Proteome Discoverer 2.4.

[0058] Les paramètres d'intégration des pics étaient: Recalibrage post-acquisition = Vrai (paramètres fins); Longueur de trace minimale = 5; Nombre minimum d'isotopes = 2; max Delta RT pour l'isotope = 0,2 min; Niveau de confiance PSM pour l'intégration = Élevé.

[0059] Les paramètres d'alignement chromatographique étaient les suivants: alignement RT = TRUE; Réglage des paramètres = bien; décalage RT max = 5 min; tolérance de masse = 10 ppm. Les paramètres de mappage des fonctionnalités étaient: RT tolérance = automatique; tolérance de masse = automatique; S/N seuil = 2.

[0060] Les analyses statistiques ont été effectuées à l'aide du nœud quantificateur Precursors Ions pour le logiciel Proteome Discoverer 2.4.

[0061] Les paramètres généraux de quantification étaient: Peptide à utiliser = Unique + RAZOR (Unique = peptides qui ne sont pas partagés par différentes protéines ou groupes de protéines; RAZOR = peptides partagés par plusieurs groupes de protéines mais utilisés uniquement pour quantifier la protéine avec le plus grand nombre de peptides uniques et avec la séquence d'acides aminés la plus longue); Considérez les groupes de protéines pour l'unicité du peptide = True; Rejeter les résultats Quan avec des canaux manquants = False. Les paramètres de quantification des précurseurs étaient les suivants: abondance des précurseurs en fonction de la zone; Nombre minimum Fonction de réplication = 50% (les peptides doivent être détectés dans au moins 50% de l'échantillon d'un groupe pour être utilisés dans la quantification). Paramètres de normalisation: quantité totale de peptides (calcule la somme totale des valeurs d'abondance pour chaque injection sur tous les peptides identifiés, l'injection avec l'abondance totale la plus élevée est utilisée comme référence pour corriger les valeurs d'abondance dans toutes les autres injections par un facteur constant par injection, de sorte qu'à la fin l'abondance totale est la même pour toutes les injections.)

[0062] Sélection des données: Une première sélection a été réalisée en sélectionnant uniquement les protéines modulées au moins par le vieillissement (donneur mature versus donneur jeune) ou par l'extrait d'Haberlea Rhodopensis (donneur mature traité versus donneur mature non traité): 469 protéines ont été sélectionnées sur 2788 analysées. Parmi ces 469 protéines ont été sélectionnées des protéines qui sont restituées par l'actif de la même manière que celles observées chez le jeune donneur, donnant une sélection de 61 protéines. Chacune de ces 61 protéines a été analysée pour comprendre l'activité biologique de l'extrait de Haberlea Rhodopensis.

Résultats

[0063] L'analyse du protéome global du donneur jeune (gauche), du donneur d'âge mûr n'ayant pas reçu de traitement (milieu) et du donneur d'âge mûr ayant reçu le traitement (droite) basé sur l'expression normalisée des protéines a permis d'identifier 469 protéines dont l'expression se trouve modulée du fait du vieillissement du sujet. Ces résultats mettent en évidence que le traitement avec l'extrait de Haberlea Rhodopensis de l'Exemple 1 influence le protéome du donneur d'âge mûr en faveur du rajeunissement, au vu des similitudes entre les protéomes du donneur d'âge mûr ayant reçu le traitement et du donneur jeune.

[0064] Parmi les 210 protéines identifiées comme étant modifiées de façon significative durant le vieillissement, l'expression de 124 d'entre elles augmente tandis que l'expression de 86 d'entre elles se voit réduite du fait du vieillissement. L'expression de 29% de ces protéines est restaurée au niveau d'expression du donneur jeune après traitement avec la solution d'extrait d'Haberlea Rhodopensis, ce qui correspond à 61 protéines.

[0065] Par la suite, lesdites 61 protéines ont été identifiées, ce qui a permis de mettre en évidence que le vieillissement cause un impact significatif sur le remodelage de la peau, l'inflammation de la peau, la réduction de la défense de la peau aux oxydants, liés à une surexpression des protéases MMP-1, MMP-3 et MMP-14. De plus, un impact fort sur la barrière dermique a été observé lié à la sous-expression de filaggrine ou filaggrine Il ou de protéines impliquées dans la cohésion du derme comme par exemple la catenin-α-2 ou la kératine. Une perte du contrôle de l'inflammation liée au vieillissement a également été observée, liée à la surexpression du système de réponse immunitaire impliquant par exemple la synthase de prostaglandine G/H et des immunoglobulines.

[0066] Les résultats obtenus suggèrent de plus que, quand un sujet d'âge mûr est soumis à un traitement avec un extrait de Haberlea Rhodopensis, la restauration de mécanismes dérégulés à cause du vieillissement a été observée, parmi lesquels: – l'expression des protéines reliées à la dégradation du derme MMP-1, MMP-3 et MMP-14 s'est vue réduite de 46%, 45% et 34% respectivement; – l'expression des protéines reliées à la dégradation du derme chymase et neprylysine s'est vue réduite de 59% et 22% respectivement; – l'expression des protéines reliées à la construction de la barrière dermique filaggrine, filaggrine II, kératine Il cytosquelettique 78, caténine alpha-2, protéine LIM 1 liant l'actine et sphingolipide delta(4) désaturase s'est vue accroître de 55%, 58%, 69%, 71%, 72% et 70% respectivement; – l'expression des immunoglobulines reliées à l'activation de la réponse immunitaire IGHG2, IGLL5, IGKC, IGHG1 s'est vue réduite de 72%, 112%, 56%, et 59% respectivement et l'expression de la protéine de liaison aux acides gras et prostaglandine G/H synthase s'est vue réduite de 59% et 28% respectivement; et – l'expression du membre 7 de la famille des déshydrogénases/réductases à chaîne courte 9C s'est vue accroître de 74%.

[0067] L'extrait de Haberlea Rhodopensis permet donc: – de restaurer les propriétés biomécaniques de la peau en protégeant la structure du derme par inhibition des protéines reliées à la dégradation du derme; – d'améliorer la barrière de la peau; – de réactiver le système de réponse immunitaire; et – de restaurer les défenses face aux agents oxydants.

Exemple 5: Réduction de la senescence cellulaire

Procédure

[0068] La sénescence cellulaire a été analysée à l'aide de l'activité SA-β galactosidase qui est considérée comme un biomarqueur du vieillissement. Un modèle réplicatif de sénescence utilisant de jeunes fibroblastes humains provenant d'un donneur âgé de 29 ans (abdominoplastie) a été développé. La sénescence cellulaire par réplication successive en culture a été induite jusqu'à la 9<ème>itération. Les fibroblastes sénescents ont été stimulés ou non avec une solution contenant l'extrait d'Haberlea Rhodopensis de l'Exemple 1 à 0,2% pendant 48 h et de jeunes fibroblastes non traités ont été utilisés comme contrôle cellulaire non sénescent. La sénescence cellulaire a été mesurée à l'aide du kit 96-well Cellular Senescence Assay (SA beta-Gal Activity) (CBA-231, Cell Biolabs) permettant de mesurer l'activité SA-β Galactosidase.

[0069] En bref, les cellules ont été rincées avec du PBS et lysées avec du tampon de lyse cellulaire 1X comme recommandé par le fabricant. Les lysats cellulaires ont été centrifugés et le surnageant a été incubé dans une plaque noire à 96 puits pendant 2 h à 37 °C avec le tampon de test composé de tampon de réaction, de substrat SA-β-Gal et de β-mercaptoéthanol. Après 2 h d'incubation, la réaction a été arrêtée avec la solution Stop incluse dans le kit et la fluorescence a été mesurée avec un lecteur de microplaques Tecan Spark à 360 nm (Excitation) / 465 nm (Émission).

Résultats

[0070] L'analyse des résultats obtenus indique que, après 48 heures de traitement avec l'extrait d'Haberlea Rhodopensis (solution à 0.2%) de l'Exemple 1, une réduction de 31% de la SA-β galactosidase a été observée, indiquant que cet extrait est utile pour freiner la senescence cellulaire.

[0071] La restauration de la morphologie des cellules d'un patient donneur d'âge mûr traitée comme indiqué ci-dessus a été observée par microscopie de fluorescence suite à l'immunocoloration avec de la vimentine; en particulier, la morphologie fusiforme des fibroblastes s'est vue restaurée par rapport à un fibroblaste non traité.

Exemple 6: Essais en double aveugle

[0072] Le but de cette étude est d'évaluer l'efficacité d'un produit cosmétique comprenant le composé de formule (I) pour rendre la peau plus lumineuse, réduire les taches cutanées et rendre le teint plus homogène. Pour ce faire, une étude clinique en double aveugle sur un panel de 20 sujets volontaires a été réalisée. Dans cette étude, l'efficacité des produits étudiés sur leur capacité à rendre la peau plus lumineuse, réduire les taches cutanées et rendre le teint plus homogène a été évaluée 30 minutes, 15 jours, 30 jours et 60 jours après l'application quotidienne des formulations étudiées.

Compositions étudiées:

[0073] Composition placebo: aqua, néopentanoate d'octyldodécyle, octyldodecanol, myristate de myristyle, polymère réticulé d'acrylates/C10-30d'acrylate d'alkyle, hydroxyde de sodium, phénoxyéthanol, methylparaben, butylparaben, ethylparaben, propylparaben, isobutylparaben.

[0074] Composition comprenant le composé de formula (I): aqua, néopentanoate d'octyldodécyle, octyldodecanol, myristate de myristyle, polymère réticulé d'acrylates/C10-30d'acrylate d'alkyle, hydroxyde de sodium, phénoxyéthanol, methylparaben, butylparaben, ethylparaben, propylparaben, isobutylparaben, 3% Composition A.

[0075] La Composition A est un mélange comprenant 98.9% d'eau, 1% d'Isocide® BAS (conservateur disponible dans le commerce chez Lehvoss consistant en un mélange d'alcool benzylique, d'acide déhydroacétique et d'eau) et 0.1% de l'extrait de feuilles de Haberlea Rhodopensis de l'Exemple 1.

Critères de sélection des sujets volontaires

[0076] Les sujets volontaires ont été sélectionnés selon les critères d'admission et non-admission suivants: – Critères d'admission: sujets féminins en bonne santé, d'âge entre 35 et 65 ans, sujets sans teint, type: caucasien, sujets présentant des taches brunes visibles sur la peau dues à une exposition excessive au soleil et/ou au vieillissement chronologique, sujets de phototype ii/iii (selon la classification de Fitzpatrick), sujets ayant observé une période de repos adéquate entre des études similaires, engagement à ne pas utiliser pendant toute la période d'étude des produits thématiques ayant un effet similaire à celui du produit à tester, engagement à ne pas changer la routine quotidienne habituelle, absence de dermatopathies, sujets ne suivant pas de traitement pharmacologique (local ou systémique), sujets au courant de la procédure de test et ayant signé un formulaire de consentement éclairé; anamnèse négative pour l'atopie. – Critères de non-admission: non-satisfaction des critères d'admission; sujets présentant des allergies ou une sensibilité aux produits cosmétiques, crèmes solaires, produits de toilette et/ou principes actifs topiques; sujets présentant des problèmes dermatologiques sur l'aire d'essai.

Procédure

[0077] L'essai clinique a été réalisé de la façon suivante: a) inscription de 20 sujets volontaires admissibles selon les critères détaillés ci-dessus; b) évaluation de l'effet et de l'efficacité des produits après une seule application et après une période d'utilisation de 30 minutes, 15 jours, 30 jours et 60 jours. Le jour de l'analyse, il fut demandé aux participantes d'appliquer le produit sur le visage propre et sec sous la supervision d'un chercheur. Chaque volontaire appliquait la composition comprenant le composé de formule (I) sur une moitié du visage et la composition placebo sur l'autre moitié du visage. Un chercheur a évalué la condition de la peau à T0 et a expliqué aux participantes la procédure à suivre pour utiliser les produits et répondre audit questionnaire.

Matériaux et méthodes

[0078] Méthode de mesure de l'élasticité de la peau: La mesure de l'élasticité de la peau est basée sur la méthode d'aspiration/allongement et sur la libération ultérieure de la peau à l'intérieur de l'ouverture de l'instrument. Pendant la phase d'aspiration/allongement, l'instrument génère une pression négative constante (450 mbar) capable d'aspirer la peau à l'intérieur de la sonde de mesure. La phase d'aspiration est suivie de la phase de relâchement, au cours de laquelle la pression à l'intérieur de la sonde est commutée à 0 mbar permettant la récupération cutanée après la phase d'élongation. Un système de mesure optique évalue la profondeur de la peau à l'intérieur de la sonde dans les deux phases de la mesure, les données obtenues sont ensuite élaborées et affichées graphiquement et numériquement afin de calculer les propriétés viscoélastiques de la peau. L'instrument utilisé pour la mesure est le CUTOMETER® MPA 580 (Courage+Khazaka, Electronic GmbH).

[0079] Méthode de mesure de la luminosité de la peau/valeur de brillance: La luminosité de la peau est évaluée au moyen d'un spectrophotomètre/colorimètre CM-700d (Konica Minolta), en acquérant la valeur de brillance calculée avec le miroir réfléchissant dans la direction de 8 degrés. La valeur de brillance mesure la composante spéculaire de la lumière réfléchie et est en corrélation avec la perception de brillance. L'instrument évalue la couleur conformément à une méthode internationale standardisée développée par la Commission internationale de l'éclairage (CIE) qui comprend la détermination des coordonnées dans l'espace chromatique CIELab.

[0080] Des photographies digitales furent prises avant et après utilisation des produits (NiKon D300, Nikon corporate, Japan doté d'un objectif macro AF-S Micro Nikkor 60 mm f/2.8 G ED, Nikon corporate, Japan et un système de flash kit R1C1, Nikon corporate, Japan).

[0081] Après 60 jours d'utilisation des produits, il fut demandé aux volontaires de remplir un questionnaire.

Résultats de valeur de brillance

[0082] Les résultats des Tableaux 2 et 3 montrent respectivement les valeurs de brillance mesurées pour les volontaires soumis à un traitement cosmétique comme indiqué ci-dessus avec la composition comprenant le composé de formule (I) (Tableau 2) appliquée sur une moitié du visage ou la composition placebo (Tableau 3) appliquée sur l'autre moitié du visage.

Tableau 2

[0083] 1 17,5 33,8 18 18 20,1 93,10 5,10 3,40 14,90 2 12,5 22 13 13 13,6 76,70 1,20 2,00 9,20 3 23 48,5 23 23 22,4 110,90 -2,20 -1,70 -2,60 4 10,6 46,1 13 13 13,3 334,50 17,80 21,60 25,40 5 23,1 47 25 25 25 103,50 6,10 7,40 8,20 6 15,8 33,2 16 17 16,9 110,10 1,90 4,40 7,00 7 21,2 31,5 23 22 22,3 48,60 6,10 3,10 5,20 8 18,8 41,3 21 20 20,7 120,00 9,70 7,60 10,30 9 7,3 18,2 7,6 7,8 9,1 150,00 4,40 7,10 25,00 10 6,6 30,3 7,1 7,8 7,7 359,10 7,60 18,20 16,70 11 16,8 42,6 17 17 16,3 153,00 -1,40 -0,80 -3,20 12 11,2 20,9 13 14 14,2 87,10 19,10 23,50 27,10 13 9,4 39,5 11 10 10,3 319,80 12,60 7,30 9,50 14 10,6 25,2 11 11 12,1 137,70 -0,90 2,80 14,20 15 10,3 19,3 12 13 12,4 87,40 17,50 22,30 20,40 16 12,2 35,6 13 13 13,8 191,80 8,20 5,70 13,10 17 9,5 25,3 10 11 11,5 166,60 6,30 15,80 21,10 18 12,6 23,8 12 12 14,1 88,90 -5,60 -3,20 11,90 19 18,1 38,2 19 19 18,9 111,00 2,80 2,20 4,40 20 14,5 45,9 D.O. D.O. D.O. 216,60 - - - Moyenne 14,1 33,4 14,8 15 16 153,30 6,10 7,80 12,50

Tableau 3

[0084] 1 17 31 16 17 16,7 83,40 -3,60 -1,80 -1,20 2 12 28,4 12 12 12,5 130,90 -0,80 -2,40 1,60 3 25 43,2 22 24 23,7 74,80 -10,60 -4,50 -4,10 4 10 32,1 10 9,8 10 211,70 1,00 -4,90 -2,90 5 23 47,7 25 25 25,6 106,80 9,20 8,80 11,00 6 16 32,1 17 17 16,7 96,90 4,30 3,70 2,50 7 20 40 20 20 19,3 96,10 -1,50 -2,50 -5,40 8 18 36,3 18 19 18,5 105,10 2,30 5,60 4,30 9 7 20,1 8,2 8,5 8,4 187,10 17,10 21,40 20,00 10 6,8 23,6 7,2 7,4 7,5 247,10 5,90 8,80 10,30 11 15 32,3 14 14 14,6 122,80 -2,10 -3,40 0,70 12 15 30,6 16 16 16,5 101,30 6,60 8,10 8,60 13 11 27,3 12 12 12 157,70 8,50 9,40 13,20 14 9,7 21,6 8,5 8,7 9,2 122,70 -12,40 -10,30 -5,20 15 10 31,4 11 11 10,7 207,50 6,90 5,90 4,90 16 12 33,5 13 12 12,6 191,30 9,60 7,80 9,60 17 9,6 21,5 10 10 11 124,00 6,30 7,30 14,60 18 11 20,1 9,3 9,6 10,2 91,40 -11,40 -8,60 -2,90 19 18 36,5 16 17 17,2 107,40 -7,40 -4,00 -2,30 20 12 28,5 D.O. D.O. D.O. 133,60 Moyenne 13,9 31 14 14 14 135 1,50 2,30 4,10

[0085] Les résultats des Tableaux 2 et 3 suggèrent que la composition comprenant le composé de formule (I) permet d'améliorer la valeur de brillance de la peau de façon plus efficace que la composition placebo testée.

Résultats de luminosité de la peau

[0086] Les résultats des tableaux 4 et 5 montrent respectivement les valeurs de luminosité mesurées pour les volontaires soumis à un traitement cosmétique comme indiqué ci-dessus avec la composition comprenant le composé de formule (I) (Tableau 4) appliquée sur une moitié du visage ou la composition placebo (Tableau 5) appliquée sur l'autre moitié du visage.

Tableau 4

[0087] 1 62,6 66 66 69,2 4,60% 5,70% 10,50% 2 60,8 59 60 62 -3,60% -1,60% 2,00% 3 66,8 65 68 64,5 -2,40% 1,30% -3,50% 4 55,3 60 61 63,3 8,80% 10,60% 14,40% 5 63,9 67 67 68,2 4,80% 4,90% 6,80% 6 59,2 58 60 62,5 -2,60% 1,60% 5,60% 7 63,3 65 65 66,5 2,50% 2,40% 5,10% 8 61,7 66 66 68,2 6,20% 7,40% 10,60% 9 58,3 58 61 62,7 -1,30% 5,30% 7,50% 10 57,7 61 61 62,7 5,00% 6,20% 8,60% 11 61,6 60 60 60 -3,30% -3,00% -2,70% 12 61,2 64 65 66,2 4,90% 6,60% 8,20% 13 60,2 65 65 68,2 7,70% 8,00% 13,30% 14 65,3 65 64 67,4 -1,30% -2,30% 3,20% 15 62,1 64 65 67,5 2,30% 5,00% 8,70% 16 56,5 58 60 60,7 3,00% 6,40% 7,40% 17 60,2 63 66 66,8 4,30% 10,00% 11,00% 18 58,6 57 58 60,2 -2,00% -1,00% 2,70% 19 66,3 66 66 67,2 -1,10% -0,50% 1,40% 20 60,2 D.O. D.O. D.O. Moyenne 61,1 62,3 63 65 1,90% 3,80% 6,40%

Tableau 5

[0088] 1 63 61 62 61,8 -2,20% -1,00% -1,50% 2 63 63 62 61 0,20% -2,00% -3,40% 3 66 64 64 65,3 -3,30% -2,70% -0,70% 4 54 59 58 57 8,20% 6,30% 5,20% 5 62 66 68 70,1 6,50% 8,70% 12,40% 6 61 61 62 62,2 0,70% 1,20% 2,40% 7 63 60 60 62,3 -3,90% -3,60% -0,60% 8 62 63 62 58,6 1,70% 0,10% -5,60% 9 58 63 65 65,2 8,70% 10,90% 11,80% 10 61 61 63 63,2 0,20% 3,30% 4,50% 11 64 62 64 63 -3,20% -0,90% -2,10% 12 62 64 65 65,6 3,40% 4,30% 6,10% 13 63 66 66 66,8 5,30% 5,90% 6,70% 14 62 59 66 60 -6,10% 4,90% -3,90% 15 60 67 67 67,2 10,90% 11,40% 12,10% 16 55 58 58 59,3 4,30% 5,30% 7,40% 17 63 67 70 71,2 5,20% 10,90% 12,70% 18 56 50 53 55,2 -9,70% -5,00% -0,70% 19 66 65 67 66,3 -2,00% 2,10% 0,80% 20 62 D.O. D.O. D.O. Moyenne 61 62 63 63,2 1,30% 3,20% 3,30%

[0089] Les résultats des Tableaux 4 et 5 suggèrent que la composition comprenant le composé de formule (I) permet d'améliorer la luminosité de la peau de façon plus efficace que la composition placebo testée.

Résultats de l'évaluation de l'élasticité de la peau

[0090] Les résultats des tableaux 6 et 7 montrent respectivement les valeurs d'élasticité mesurées pour les volontaires soumis à un traitement cosmétique comme indiqué ci-dessus avec la composition comprenant le composé de formule (I) (Tableau 6) appliquée sur une moitié du visage ou la composition placebo (Tableau 7) appliquée sur l'autre moitié du visage.

Tableau 6

[0091] 1 0,551 0,615 0,629 0,622 11,70% 14,30% 13,00% 2 0,61 0,623 0,649 0,697 2,10% 6,30% 14,10% 3 0,551 0,575 0,585 0,601 4,20% 6,20% 9,00% 4 0,563 0,685 0,695 0,713 21,70% 23,40% 26,50% 5 0,567 0,636 0,648 0,652 12,10% 14,30% 15,00% 6 0,693 0,675 0,712 0,696 -2,70% 2,70% 0,40% 7 0,613 0,653 0,703 0,713 6,60% 14,80% 16,40% 8 0,533 0,604 0,624 0,674 13,20% 17,00% 26,30% 9 0,439 0,48 0,524 0,533 9,20% 19,40% 21,30% 10 0,633 0,721 0,732 0,733 14,10% 15,80% 15,80% 11 0,57 0,593 0,613 0,584 4,00% 7,50% 2,50% 12 0,703 0,799 0,815 0,815 13,60% 16,00% 15,90% 13 0,628 0,737 0,726 0,721 17,20% 15,50% 14,80% 14 0,644 0,664 0,655 0,775 3,10% 1,70% 20,30% 15 0,493 0,55 0,583 0,603 11,60% 18,30% 22,50% 16 0,524 0,626 0,633 0,663 19,50% 20,80% 26,70% 17 0,603 0,635 0,635 0,714 5,40% 5,30% 18,50% 18 0,49 0,503 0,521 0,524 2,70% 6,50% 7,00% 19 0,524 0,523 0,544 0,552 -0,20% 3,90% 5,40% 20 0,633 D.O. D.O. D.O. Moyenne 0,575 0,626 0,644 0,662 8,90% 12,10% 15,30%

Tableau 7

[0092] 1 0,565 0,569 0,544 0,563 0,60% -3,70% -0,50% 2 0,594 0,603 0,613 0,601 1,50% 3,10% 1,20% 3 0,554 0,556 0,551 0,551 0,50% -0,60% -0,40% 4 0,586 0,624 0,633 0,663 6,50% 8,00% 13,20% 5 0,57 0,597 0,613 0,641 4,70% 7,50% 12,50% 6 0,689 0,673 0,697 0,684 -2,30% 1,10% -0,70% 7 0,585 0,553 0,584 0,575 -5,50% -0,10% -1,70% 8 0,552 0,557 0,556 0,552 0,90% 0,80% 0,10% 9 0,441 0,496 0,525 0,533 12,50% 19,30% 20,90% 10 0,63 0,685 0,641 0,601 8,90% 1,90% -4,50% 11 0,612 0,624 0,603 0,603 1,90% -1,60% -1,60% 12 0,655 0,659 0,703 0,697 0,60% 7,30% 6,30% 13 0,591 0,606 0,647 0,663 2,50% 9,50% 12,20% 14 0,628 0,602 0,621 0,632 -4,10% -1,10% 0,70% 15 0,412 0,466 0,477 0,501 13,20% 15,80% 21,70% 16 0,512 0,556 0,574 0,584 8,50% 12,00% 14,00% 17 0,653 0,636 0,703 0,697 -2,70% 7,50% 6,60% 18 0,521 0,503 0,552 0,556 -3,60% 5,90% 6,70% 19 0,497 0,51 0,512 0,513 2,70% 3,20% 3,20% 20 0,601 D.O. D.O. D.O. Moyenne 0,571 0,583 0,597 0,601 2,50% 5,00% 5,80%

[0093] Les résultats des Tableaux 6 et 7 suggèrent que la composition comprenant le composé de formule (I) permet d'améliorer l'élasticité de la peau de façon plus efficace que la composition placebo testée.

Claims (18)

1. Composition comprenant comme principe actif le myconoside de formule (I)

2. Composition selon la revendication 1 dans laquelle le composé de formule (I) représente entre 40% et 60% en poids de ladite composition.

3. Composition selon l'une quelconque des revendications 1 et 2 qui est un extrait de feuilles de Haberlea Rhodopensis.

4. Formulation cosmétique pour promouvoir le rajeunissement de la peau comprenant la composition selon l'une quelconque des revendications 1 à 3.

5. Formulation cosmétique selon la revendication 4 qui est de base aqueuse.

6. Formulation cosmétique selon l'une quelconque des revendications 4 et 5 dans laquelle le contenu en poids de ladite composition est compris entre 1% et 3%.

7. Formulation cosmétique selon l'une quelconque des revendications 4 à 6 dans laquelle le pH de ladite formulation est compris entre 5,5 et 6,5.

8. Formulation cosmétique selon l'une quelconque des revendications 4 à 7 qui comprend en outre un ou plusieurs agents conservateurs.

9. Formulation cosmétique selon la revendication 8 dans laquelle lesdits agents conservateurs sont sélectionnés parmi le groupe consistant en alcool benzylique, acide déhydroacétique ou un de ses sels acceptables en cosmétique, acide benzoïque ou un de ses sels acceptables en cosmétique, acide propionique ou un de ses sels acceptables en cosmétique, acide salicylique ou un de ses sels acceptables en cosmétique, acide sorbique ou un de ses sels acceptables en cosmétique, formaldéhyde, biphényle-2-ol ou un de ses sels acceptables en cosmétique, pyrithione de zinc, chlorobutanol, acide p-hydroxybenzoïque ou un de ses sels et esters acceptables en cosmétique, acide formique, formate de sodium, acide undécylénique ou un de ses sels acceptables en cosmétique, hexetidine, alcool dichloro-2,4-benzylique, triclocarban, chlorocrésol, triclosan, chloroxylénol, méthénamine, phénoxy-2-éthanol, diméthylol, diméthylhydantoïne, o-cymen-5-ol, chlorophene, imidazolinyl urea, diazolidiinyl urea, parabens, bromochlorophene, methyl(chloro)isothiazolinone, chloroacétamide, chlorhexidine ou un de ses sels acceptables en cosmétique, phénoxypropanol, chlorpenesine, sels acceptables en cosmétique de behentrimonium, hexamidine ou un de ses sels acceptables en cosmétique, glutaral, chlorphenesin, hydroxyméthylaminoacétate de sodium, chlorure de benzethonium, sels acceptables en cosmétique de benzalkonium, (phénylméthoxy)méthanol, (phényloxy)éthanol, benzylhemiformal, carbamate de 3-iodo-2-propynylbutyle et un de leurs mélanges.

10. Formulation cosmétique selon l'une quelconque des revendications 8 et 9 dans laquelle lesdits agents conservateurs sont sélectionnés parmi le groupe consistant en alcool benzylique, (phényloxy)éthanol, chlorpenesin, acide déhydroacétique ou un de ses sels acceptables en cosmétique et un de leurs mélanges.

11. Formulation cosmétique selon l'une quelconque des revendications 8 à 10 qui comprend entre 0.1% et 2% en poids desdits agents conservateurs.

12. Formulation cosmétique selon l'une quelconque des revendications 4 à 11 qui comprend en outre un mélange de cucurbitine et d'eau de source marine, tel qu'Ocâline XP™.

13. Formulation cosmétique selon l'une quelconque des revendications 4 à 12 qui comprend en outre un surfactant acceptable en cosmétique, tel que le glucoside de décyle et/ou l'alcool décylique ou un extrait hydrolysé de Candida Bombicola tel que Sophogreen Plus™.

14. Formulation cosmétique selon l'une quelconque des revendications 4 à 13 qui comprend en outre un polymère hydrosoluble sélectionné parmi (i) la gomme de rhizobian, le hyaluronate de sodium et un de leurs mélanges tel que Sens'Hyal™ ou (ii) la gomme de xanthane, la gomme de Cyamopsis Tetragonoloba et un de leurs mélanges tel que Syner-GX™.

15. Formulation cosmétique selon l'une quelconque des revendications 4 à 14 qui comprend en outre un ou plusieurs agents anti-âge acceptables en cosmétique, chacun desdits agents anti-âge étant de préférence sélectionnés parmi le groupe consistant en rétinoïdes, acide hyaluronique ou un de ses sels acceptables en cosmétique, acide hyaluronique acétylé ou un de ses sels acceptables en cosmétique, un mélange de mannose-6-phosphate et mannose dans lequel le ratio molaire de mannose-6-phosphate à mannose est compris entre 3:1 et 0.3 :1, un extrait de Mastocarpus Stellatus, acide glycolique, acide lactique, vitamine C, acide salicylique, coenzyme Q10, facteur de croissance de l'épiderme (EGF), céramides, vitamine B3, peptides de promotion de la production de collagène et resveratrol.

16. Formulation cosmétique selon l'une quelconque des revendications 4 à 15 qui comprend en outre un ou plusieurs agents apaisants acceptables en cosmétique, chacun desdits agents apaisants étant de préférence sélectionnés parmi le groupe consistant en extrait d'aloé vera, extrait de camomille, extrait de calendula, allantoïne, bisabolol, extrait de thé vert, extrait d'avoine, extrait de réglisse, extrait de concombre et panthénol.

17. Utilisation de la composition selon l'une quelconque des revendications 1 à 3 ou de la formulation cosmétique selon l'une quelconque des revendications 4 à 16 pour promouvoir le rajeunissement de la peau.

18. Méthode cosmétique de promotion du rajeunissement de la peau qui comprend l'application sur la peau d'un individu, de préférence sur le visage dudit individu, de la composition selon l'une quelconque des revendications 1 à 3 ou de la formulation cosmétique selon l'une quelconque des revendications 4 à 16.