CN119979570B - Pop_A17G020368基因及其在促进植株生长中的应用 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了Pop_A17G020368基因及其在促进植株生长中的应用，涉及植物基因工程技术领域，所述基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。本发明通过对Pop_A17G020368基因的克隆和分析，并结合农杆菌介导的遗传转化技术在84K杨树中过表达Pop_A17G020368基因，验证了该基因的功能。与野生型相比，过表达Pop_A17G020368基因植株能够显著促进杨树的株高和茎粗的生长。证明了Pop_A17G020368基因在促进杨树株高及次生生长的重要作用。本发明对研究树木生长稳定性和培育林木新品种具有重要现实及理论指导意义。

Description

Pop_A17G020368基因及其在促进植株生长中的应用
技术领域
本发明涉及植物基因工程技术领域，更具体的说是涉及Pop_A17G020368基因及其在促进植株生长中的应用。
背景技术
杨树是一种重要的林木资源，具有生长快、适应性强、用途广泛等特点，广泛应用于造林、城市绿化和木材生产。然而，传统的杨树育种方法周期长、效率低，难以满足日益增长的木材需求。随着分子生物学和基因工程技术的发展，通过基因工程手段改良杨树的生长性状已成为一种有效的育种策略。然而，目前与杨树次生生长相关的功能基因数量有限。
因此，挖掘更多促生功能基因是本领域技术人员亟需解决的问题。
发明内容
有鉴于此，本发明提供了Pop_A17G020368基因及其在促进植株生长中的应用。
为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案：
Pop_A17G020368基因，所述基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。
本发明的另一目的是，提供Pop_A17G020368蛋白，所述蛋白的氨基酸序列如SEQID NO.2所示。
本发明的另一目的是，提供一种生物材料，所述生物材料为以下任意一种：
A：能够使核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示的基因过表达的表达盒；
B：含有A所述表达盒的重组载体；
C：含有A所述表达盒或B所述重组载体的重组微生物；
D：含有A所述表达盒或B所述重组载体或C所述重组微生物的非可再生的植物部分。
本发明的另一目的是，提供上述基因、或者上述蛋白、或者上述生物材料在促进植物生长中的应用。
优选的，所述应用为提高植物株高和/或提高植物茎基部直径。
本发明的另一目的是，提供一种促进植物生长的育种方法，利用转基因手段，提高Pop_A17G020368基因的表达量，所述Pop_A17G020368基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。
经由上述的技术方案可知，与现有技术相比，本发明通过对Pop_A17G020368基因的克隆和分析，并结合农杆菌介导的遗传转化技术在84K杨树中过表达Pop_A17G020368基因，验证了该基因的功能。与野生型相比，过表达Pop_A17G020368基因植株能够显著促进杨树的株高和茎粗的生长。证明了Pop_A17G020368基因在促进杨树株高及次生生长的重要作用。本发明对研究树木生长稳定性和培育林木新品种具有重要现实及理论指导意义。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据提供的附图获得其他的附图。
图1为野生型与转基因植株表型。
图2为阳性过表达植株检测电泳图。
图3为野生型与转基因植株中Pop_A17G020368基因的表达情况。
图4为Pop_A17G020368基因在野生型不同组织中的表达情况。
图5为野生型与转基因植株株高定量结果。
图6为野生型与转基因植株茎基部直径定量结果。
具体实施方式
为了便于理解本发明，下面将参照实施例对本发明进行更全面的描述，以下给出了本发明的较佳实施例。但是，本发明可以以许多不同的形式来实现，并不限于本文所描述的实施例。提供这些实施例的目的是使对本发明的公开内容的理解更加透彻全面。应理解，下述实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件，例如Sambrook等分子克隆：实验室手册（New York: Cold Spring Harbor Laboratory Press, 1989）中所述的条件，或按照制造厂商所建议的条件。实施例中所用到的各种常用试剂，均为市售产品。
除非另有定义，本文所使用的所有的技术和科学术语与属于本发明的技术领域的技术人员通常理解的含义相同。在本发明的说明书中所使用的术语只是为了描述具体的实施例的目的，不是旨在于限制本发明。本文所使用的术语“和/或”包括一个或多个相关的所列项目的任意的和所有的组合。
本发明表达盒是指能够在宿主细胞中表达所述Pop_A17G020368基因的DNA，该DNA不但可包括启动编码基因转录的启动子，还可包括终止编码基因转录的终止子。进一步，所述表达盒还可包括增强子序列。
实施例1
Pop_A17G020368基因的克隆与载体构建
1.总RNA提取：使用RNA提取试剂盒（购自北京艾德莱生物科技有限公司）提取野生型银腺杨无性系84K杨树总RNA。
2.cDNA合成：利用cDNA合成试剂盒EasyScript® First-Strand cDNA SyntheticSuperMix（购自北京全式金生物技术有限公司），采用一步法将上一步提取的总RNA反转录成单链cDNA。
3.基因克隆：采用高保真酶扩增基因片段。
参照Pop_A17G020368基因的CDS序列，双酶切位点为BamHI和KpnI，以此设计pCAMBIA2300：35s：Pop_A17G020368-GFP的正反向引物，并委托生物公司合成引物，用于Pop_A17G020368基因的扩增。
Pop_A17G020368基因CDS序列：
ATGCCTTCCCAGACCAACTCCCACTTCTCCCTTCCAAGGTGGATTGGATTACTGTCTCACAAGAACAGCCAAAGCGAAACTGGTGACAATAATGACAACAGCAACCTTAACAGTACCAACAACATTGACGACAGCAACCCTATCTCTAACTCCATAGAATGCTACGCTTGCACACAAGTAGGAGTTCCTGTCTTCCACTCCACAAGCTGTGACCAGGCCCACCAGCCTGAATGGGAGGCCTCCGCGGGCTCATCATTAGTCCCCATCAAAAACCGGCTAGGTTCAAGAAAGAGCCCAGCAAGCCGAGCCCAATCTCGCCGGCCGGCCGGTCCATTCGGAACCATTCTCGATCCACGTAGCAAGCGGGTACAGAAATGGAACCGGGCTTTCCTGCTAGCACGTGGCATGGCTTTGGCAGTCGATCCCTTGTTTTTCTACGCTCTGTCGATAGGGAGAAACGGGGCCCCTTGCTTGTACATGGACGGTGGGTTGGCCGCAATCGTGACCGTCCTTCGCACGAGTGTGGATGCTATACACTTGTGCCATCTGTGGTTACAATTCAGGTTGGCTTATGTGTCAAGAGAGTCTCTTGTCGTGGGGTGCGGGAAACTGGTGTGGGACGCACGTGCCATCGCATCTCATTACGTGAGGTCTCTTAAGGGCTTCTGGTTTGATGCTTTTGTCATTCTTCCCGTTCCTCAGGCTGTATTTTGGTTACTTGTACCCAGATTAATCAGAGAAGAGCAGATTAAGCTCATAATGACAATACTTTTGCTGATCTTCTTGTTCCAATTCCTCCCTAAGGTGTACCACTGCATATGTTTGATGAAAAGAATGCAAAAGGTCACAGGTTATATCTTTGGCACCATTTGGTGGGGCTTCGGCCTTAATCTCATTGCCTACTTCATTGCCTCTCATGTTGCTGGTGGATGTTGGTATGTCCTCGCAATACAACGCGTCGCTTCATGTCTCAGGCAGAGTTGTGAGAGGAGGCCTAATTGTGATCTCTCTTTGGCTTGCTCGGAGGAGGTTTGCTATCAGTTCCTGTTACGATCAGGCACAATTGGAAATCCATGCGTTGGAAACACAACACATACTGTTAGAAAGCCTATGTGCCTGGATGTTAATGGAGCTTTCAATTATGGGATTTACAAGTGGGCTCTTCCAGTCATTTCTAGCAATTCTTTGTCTGTGAAGATTCTTTATCCCATTTTCTGGGGTTTAATGACCCTCAGCACCTTTGGCAATGATCTTGAACCAACAAGTCACTGGCTAGAAGTAATCTTCAGTATATGTATCGTTCTCAGTGGTTTAATGCTCTTCACTCTTCTGATTGGGAACATCCAGGTGTTCTTGCACGCGGTCATGGCAAAGAAGAGAAAAATGCAGCTGAGATGCGGAGATATGGAATGGTGGATGAGGAGGAGACAGTTGCCTTCTCGTTTGAGACAGAGAGTTCGCCATTATGAACGGCAGAGATGGGCAACCATGGGAGGTGAAGATGAGATAGAACTAATCACAGACTTACCTGAAGGACTCCGGAGAGATATCAAGCGCTATCTTTGCCTAGATCTTATCAAGAAGGTGACACAAATGAACACTTAG，SEQ ID NO.1。
氨基酸序列：
MPSQTNSHFSLPRWIGLLSHKNSQSETGDNNDNSNLNSTNNIDDSNPISNSIECYACTQVGVPVFHSTSCDQAHQPEWEASAGSSLVPIKNRLGSRKSPASRAQSRRPAGPFGTILDPRSKRVQKWNRAFLLARGMALAVDPLFFYALSIGRNGAPCLYMDGGLAAIVTVLRTSVDAIHLCHLWLQFRLAYVSRESLVVGCGKLVWDARAIASHYVRSLKGFWFDAFVILPVPQAVFWLLVPRLIREEQIKLIMTILLLIFLFQFLPKVYHCICLMKRMQKVTGYIFGTIWWGFGLNLIAYFIASHVAGGCWYVLAIQRVASCLRQSCERRPNCDLSLACSEEVCYQFLLRSGTIGNPCVGNTTHTVRKPMCLDVNGAFNYGIYKWALPVISSNSLSVKILYPIFWGLMTLSTFGNDLEPTSHWLEVIFSICIVLSGLMLFTLLIGNIQVFLHAVMAKKRKMQLRCGDMEWWMRRRQLPSRLRQRVRHYERQRWATMGGEDEIELITDLPEGLRRDIKRYLCLDLIKKVTQMNT，SEQ ID NO.2。
引物序列如下：
2300-0368-F:5’-CATTTGGAGAGGACAGGGTACCATGCCTTCCCAGACCAACTCC-3’，SEQ IDNO.3；
2300-0368-R:5’-CAGAAAATTTCTAGAGGATCCAGTGTTCATTTGTGTCACCTTC-3’，SEQ IDNO.4。
4.载体线性化:将pCAMBIA2300-35S-GFP的载体质粒利用限制性内切酶BamHI和KpnI进行双酶切，得到线性化的载体片段。
5.琼脂糖凝胶电泳检测及纯化回收：利用1%浓度的琼脂糖凝胶进行电泳检测，检测目的基因Pop_A17G020368条带大小及线性化载体的条带大小分别为1602bp及12000bp左右，并将两者利用琼脂糖凝胶回收试剂盒（购自北京艾德莱生物科技有限公司）进行目的基因片段及线性载体片段的纯化回收。
6.载体构建：将扩增的Pop_A17G020368基因片段插入到pCAMBIA2300-35S-GFP载体的BamHI和KpnI位点间，利用无缝克隆的预混液Gibson Assembly Master Mix（购自NEB公司）构建重组载体pCAMBIA2300：35s：Pop_A17G020368-GFP。
7.转化大肠杆菌感受态细胞TOP 10（购自北京艾德莱生物科技有限公司，具体操作方法和用量参照说明书）：将步骤6中的反应产物加入大肠杆菌感受态细胞中进行转化，后均匀涂布于含卡那霉素的LB平板上。37℃倒置培养过夜。
8.阳性克隆鉴定：利用JP-0368-F、JP-GFP-R为引物，挑取单克隆进行菌落PCR鉴定，阳性克隆将获得800bp的扩增条带，挑取阳性克隆若干，在新的卡那霉素平板上划线保种，同时接入含卡那霉素的LB液体培养基中，37℃，180～230rpm振荡培养过夜。次日将菌液送至公司测序。测序引物序列如下：
JP-0368-F：5’-GAAAGCCTATGTGCCTGGATG-3’，SEQ ID NO.5；
P-GFP-R：5’- TGTTGACGAGGGTGTCTCCCT -3’，SEQ ID NO.6。
9.质粒提取，使用质粒小提试剂盒（试剂盒购自天根生化科技北京有限公司）提取正确编辑的载体质粒，步骤参考试剂盒说明书。
10.转化农杆菌感受态细胞GV3101（购自上海唯地生物技术有限公司，具体操作步骤参照说明书），最后将重悬的菌体涂于附加50 mg/L卡那霉素和50 mg/L利福平的固体LB培养基上，28℃培养36～48 h。利用引物JP-0368-F和JP-GFP-R菌液PCR检测阳性克隆，获得含有正确过表达载体的农杆菌。
实施例2
农杆菌介导的遗传转化
1. 将Pop_A17G020368的过表达载体通过农杆菌介导的遗传转化体系导入杨树叶片中，经过叶片预培养、农杆菌浸染及暗培养、诱导分生芽化、组培瓶诱导生根、炼苗后移栽温室进行土培。
（1）叶片预培养：在无菌超净台中，提前打开高温灭菌器对剪刀，镊子，和组培手术刀进行高温灭菌，冷却后，剪取野生型84K杨树的叶片，并用手术刀垂直切脉在叶子中间划3-4道伤口，后放置于提前配置的预培养基上，25℃，光照条件（光照16h/黑暗8h培养）下2-3天。
（2）农杆菌浸染及暗培养：提前12-16小时，于 100mL含有抗生素 (50 mg/L 卡那霉素，50 mg/L 利福平) LB 液体培养基中加入500μL-1mL含有正确编辑Pop_A17G020368载体的农杆菌，混匀后放入 28℃，200 rpm/min 振荡培养过夜。次日，测农杆菌的OD600为0.6-1.0时即可。在无菌超净台中，提前紫外灭菌并打开高温灭菌器对镊子进行灭菌，待镊子冷却后，将预培养基上的叶片夹至放有农杆菌锥形瓶中，计时15-20min，期间2-3min均匀地摇晃锥形瓶。计时结束后，将叶片夹出至高压蒸汽灭菌后的滤纸上，吸取叶片表面多余的菌液后，将叶片放至暗培养基，25℃，黑暗培养2-3天。
（3）诱导芽分化：将暗培养后的叶片，转移至卡那霉素筛选压为20-30mg /L的分化培养基进行诱导分化，每培养6-8天换一次培养基，25℃，光照条件（光照16h/黑暗8h培养）下培养，直至分化生出不定芽。
（4）组培瓶诱导生根：将生长至1-2cm长度的不定芽用灭菌后的镊子从叶子上分离下来，并转移至卡那霉素筛选压为15-20mg /L的生根培养基上，25℃，光照条件（光照16h/黑暗8h培养）下培养直至生根，4-5周左右长至正常植株大小后，进行扩繁。
（5）炼苗后移栽温室进行土培：当组培苗生长45天左右并且根系发达时，炼苗 3-5天后进行移栽。 用清水洗去杨树根部的培养基，移栽到灭过菌的营养土中，置于温室培养。
本实施例所用培养基的配方见表1：
表1
实施例3
1.转基因过表达植株的鉴定
在超净台中剪取转化后生根的不同株系杨树叶片，同时对各个株系进行标号，使用基因组DNA提取试剂盒（购自于江苏康为世纪生物科技股份有限公司，具体操作步骤参照说明书）进行基因组DNA的提取。
利用引物JP-0368-F和JP-GFP-R，通过PCR克隆包含Pop_A17G020368与GFP融合表达的片段800bp 鉴定转基因成功的阳性植株。通过鉴定得到OE-1和OE-2为Pop_A17G020368基因过表达成功株系（参见附图1-附图3）。
2.Pop_A17G020368基因在调控树木株高及次生生长过程的作用
（1）荧光实时定量PCR方法检测Pop_A17G0203688在不同组织部位中的表达量：
84K杨树总RNA提取：剪取野生型84K植株的根茎叶部位以用来检测目的基因在不同组织部位中的表达量，以及剪取不同株系的过表达植株OE-1/-2和野生型84K组培苗叶片，以用来鉴定过表达植株的目的基因表达情况。使用液氮研磨法，根据EASYspin Plus 植物RNA快速提取试剂盒（购自北京艾德莱生物科技有限公司，具体操作步骤参照说明书）,提取得到总RNA溶液。
cDNA合成：将上述不同株系的总RNA，使用一步法cDNA 合成试剂盒（购自于北京全式金生物技术有限公司，具体操作步骤参照说明书）进行反转录合成cDNA。
荧光实时定量PCR方法检测：利用北京艾德莱生物科技有限公司SYBRGreenqPCRMix进行Pop_A17G020368的基因不同部位表达定量测定,反应体系及PCR程序参考试剂盒说明书。所用Pop_A17G020368基因的PCR引物为qPCR-0368-F1和 qPCR-0368-R1，内参基因为Actin，引物为Actin-F和Actin-R，三次生物学实验重复结果表明，Pop_A17G020368基因在84K中的组织表达量为叶片最高，其次为茎和根，对不同组织部位的表达量检测结果见附图4。OE-1和OE-2植株中的Pop_A17G020368的表达量均高于野生型，对转基因杨树转录水平表达量检测结果见附图3。
qPCR-0368-F1：5’-GAGACAGAGAGTTCGCCATT-3’，SEQ ID NO.7；
qPCR-0368-R1：5’-GATAAGATCTAGGCAAAGAT-3’，SEQ ID NO.8。
Actin-F：5’-AAACTGTAATGGTCCTCCCTCCG-3’，SEQ ID NO.9；
Actin-R：5’-GCATCATCACAATCACTCTCCGA-3’，SEQ ID NO.10。
（2）转基因植株的表型观察：将生根后长势一致的野生型(WT)，过表达(OE-1/-2)株系移至土壤中生长。表型观察及统计测定发现，同一生长时期过表达株系的株高显著高于野生型(参见附图5)；对野生型和OE-1/-2植株的茎基部直径进行统计，发现OE-1/-2植株的茎基部直径均显著大于野生型（参见附图6）。
本说明书中各个实施例采用递进的方式描述，每个实施例重点说明的都是与其他实施例的不同之处，各个实施例之间相同相似部分互相参见即可。
对所公开的实施例的上述说明，使本领域专业技术人员能够实现或使用本发明。对这些实施例的多种修改对本领域的专业技术人员来说将是显而易见的，本文中所定义的一般原理可以在不脱离本发明的精神或范围的情况下，在其它实施例中实现。因此，本发明将不会被限制于本文所示的这些实施例，而是要符合与本文所公开的原理和新颖特点相一致的最宽的范围。

Claims (6)

1.Pop_A17G020368基因，其特征在于，所述基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。
2.Pop_A17G020368蛋白，其特征在于，所述蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。
3.一种生物材料，其特征在于，所述生物材料为以下任意一种：
A：包括插入核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示的基因的表达载体 pCAMBIA2300-35S-GFP的表达盒；
B：含有A所述表达盒的重组载体；
C：含有A所述表达盒或B所述重组载体的重组微生物；
D：含有A所述表达盒或B所述重组载体或C所述重组微生物的非可再生的植物部分。
4.权利要求1所述基因、或者权利要求2所述蛋白、或者权利要求3所述生物材料在促进杨树生长中的应用。
5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述应用为提高杨树株高和/或提高杨树茎基部直径。
6.一种促进杨树生长的育种方法，其特征在于，利用转基因手段，将
Pop_A17G020368
基因插入到表达载体 pCAMBIA2300-35S-GFP 中，提高
Pop_A17G020368
基因的表达量，所述
Pop_A17G020368
基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。
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* Cited by examiner, † Cited by third party
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CN118581135A (zh) * 2024-06-06 2024-09-03 北京林业大学 一种杨树cdpk6基因在林木育种中的应用

Family Cites Families (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101706465B (zh) * 2009-12-03 2012-11-21 天津市农业生物技术研究中心 利用离体叶片的抗胁迫能力鉴定杨树耐盐潜力的方法
BR112017011653A2 (pt) * 2014-12-29 2018-03-06 Swetree Technologies Ab plantas lenhosas tendo propriedades de crescimento melhoradas

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN118581135A (zh) * 2024-06-06 2024-09-03 北京林业大学 一种杨树cdpk6基因在林木育种中的应用

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
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Hybrid origin of Populus tomentosa Carr. identified through genome sequencing and phylogenomic analysis;An, X.M.等;BioRxiv;20200409;1-38 *

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