CS204368B1 - Spósob přípravy imobilizovaných enzýmov o vysokej špecifickej aktivitě - Google Patents
Spósob přípravy imobilizovaných enzýmov o vysokej špecifickej aktivitě Download PDFInfo
- Publication number
- CS204368B1 CS204368B1 CS736178A CS736178A CS204368B1 CS 204368 B1 CS204368 B1 CS 204368B1 CS 736178 A CS736178 A CS 736178A CS 736178 A CS736178 A CS 736178A CS 204368 B1 CS204368 B1 CS 204368B1
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- hours
- specific activity
- glass
- reacted
- enzyme
- Prior art date
Links
- 230000000694 effects Effects 0.000 title claims description 10
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title claims description 3
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 title description 15
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 title description 15
- 108010093096 Immobilized Enzymes Proteins 0.000 claims description 14
- 239000011521 glass Substances 0.000 claims description 14
- ZWZVWGITAAIFPS-UHFFFAOYSA-N thiophosgene Chemical compound ClC(Cl)=S ZWZVWGITAAIFPS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- RJDYKQDRMZDDOM-UHFFFAOYSA-N 1,6-diaminohexane-2,5-diol Chemical compound NCC(O)CCC(O)CN RJDYKQDRMZDDOM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 claims description 4
- 238000003756 stirring Methods 0.000 claims description 4
- FALRKNHUBBKYCC-UHFFFAOYSA-N 2-(chloromethyl)pyridine-3-carbonitrile Chemical compound ClCC1=NC=CC=C1C#N FALRKNHUBBKYCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 229940014800 succinic anhydride Drugs 0.000 claims description 3
- 125000004103 aminoalkyl group Chemical group 0.000 claims description 2
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N Toluene Chemical compound CC1=CC=CC=C1 YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 6
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 5
- 238000000034 method Methods 0.000 description 5
- 239000005373 porous glass Substances 0.000 description 5
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 4
- ZBKFYXZXZJPWNQ-UHFFFAOYSA-N isothiocyanate group Chemical group [N-]=C=S ZBKFYXZXZJPWNQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 3
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 3
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 3
- 102100032404 Cholinesterase Human genes 0.000 description 2
- 108090000371 Esterases Proteins 0.000 description 2
- 102100022624 Glucoamylase Human genes 0.000 description 2
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- PXHVJJICTQNCMI-UHFFFAOYSA-N Nickel Chemical compound [Ni] PXHVJJICTQNCMI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 230000001588 bifunctional effect Effects 0.000 description 2
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 2
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 2
- NHJVRSWLHSJWIN-UHFFFAOYSA-N 2,4,6-trinitrobenzenesulfonic acid Chemical compound OS(=O)(=O)C1=C([N+]([O-])=O)C=C([N+]([O-])=O)C=C1[N+]([O-])=O NHJVRSWLHSJWIN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000346770 Bispora Species 0.000 description 1
- BTBUEUYNUDRHOZ-UHFFFAOYSA-N Borate Chemical compound [O-]B([O-])[O-] BTBUEUYNUDRHOZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010053652 Butyrylcholinesterase Proteins 0.000 description 1
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920001503 Glucan Polymers 0.000 description 1
- 108010073178 Glucan 1,4-alpha-Glucosidase Proteins 0.000 description 1
- XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N L-Cysteine Chemical compound SC[C@H](N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N L-valine Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-N Malonic acid Chemical compound OC(=O)CC(O)=O OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XNPOFXIBHOVFFH-UHFFFAOYSA-N N-cyclohexyl-N'-(2-(4-morpholinyl)ethyl)carbodiimide Chemical compound C1CCCCC1N=C=NCCN1CCOCC1 XNPOFXIBHOVFFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GRYLNZFGIOXLOG-UHFFFAOYSA-N Nitric acid Chemical compound O[N+]([O-])=O GRYLNZFGIOXLOG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BPQQTUXANYXVAA-UHFFFAOYSA-N Orthosilicate Chemical compound [O-][Si]([O-])([O-])[O-] BPQQTUXANYXVAA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YGYAWVDWMABLBF-UHFFFAOYSA-N Phosgene Chemical compound ClC(Cl)=O YGYAWVDWMABLBF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004952 Polyamide Substances 0.000 description 1
- RTAQQCXQSZGOHL-UHFFFAOYSA-N Titanium Chemical compound [Ti] RTAQQCXQSZGOHL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N Valine Natural products CC(C)C(N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QCWXUUIWCKQGHC-UHFFFAOYSA-N Zirconium Chemical compound [Zr] QCWXUUIWCKQGHC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000003973 alkyl amines Chemical class 0.000 description 1
- XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N aluminium Chemical compound [Al] XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052782 aluminium Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 1
- 238000004873 anchoring Methods 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 1
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 1
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 1
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- CGMRCMMOCQYHAD-UHFFFAOYSA-J dicalcium hydroxide phosphate Chemical compound [OH-].[Ca++].[Ca++].[O-]P([O-])([O-])=O CGMRCMMOCQYHAD-UHFFFAOYSA-J 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- DNJIEGIFACGWOD-UHFFFAOYSA-N ethyl mercaptane Natural products CCS DNJIEGIFACGWOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ACCCMOQWYVYDOT-UHFFFAOYSA-N hexane-1,1-diol Chemical compound CCCCCC(O)O ACCCMOQWYVYDOT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NAQMVNRVTILPCV-UHFFFAOYSA-N hexane-1,6-diamine Chemical compound NCCCCCCN NAQMVNRVTILPCV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 1
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 1
- 229910010272 inorganic material Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011147 inorganic material Substances 0.000 description 1
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- 229910052759 nickel Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910017604 nitric acid Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 229920002401 polyacrylamide Polymers 0.000 description 1
- 229920002647 polyamide Polymers 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 238000002444 silanisation Methods 0.000 description 1
- 239000005368 silicate glass Substances 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 125000006850 spacer group Chemical group 0.000 description 1
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 description 1
- 239000010936 titanium Substances 0.000 description 1
- 229910052719 titanium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000004474 valine Substances 0.000 description 1
- 229910052726 zirconium Inorganic materials 0.000 description 1
- DGVVWUTYPXICAM-UHFFFAOYSA-N β‐Mercaptoethanol Chemical compound OCCS DGVVWUTYPXICAM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Landscapes
- Immobilizing And Processing Of Enzymes And Microorganisms (AREA)
Description
Vynález sa týká sposobu přípravy •imobilizovaných enzýmov o vysokej špecifickej aktivitě.
Imobilizácia enzýmov na vodonerozpustných nosičoch, látkách organického alebo anorganického povodu pomocou funkčných skupin schopných reagovat s aminokyselinami a bielkovinami enzýmu za vzniku kovalentne j vazby je dókladne opísaný (napr. Methods in Enzymology Vol. XLIV, Immobilized Enzymes, Ed. Klaus Morbach, Academie Press, New York, San Francisko, London, 1976). Organické látky napr. celulóza, polyamidy, polyakrylamid a pod. majú ako nosiče isté nevýhody, nakolko nemajú dostatočnú mechanická stabilitu, sú citlivé voči rozpúšťadlám, voči změnám pH a iontovej sily a sú často napádané mikroorganizmami. Z tohto dóvodu sú častokrát upřednostňované anorganické látky s enzýmami viazanými kovalentnou vazbou pomocou specifických funkčných skupin. Nakolko nosič anorganického povodu tieto funkčně skupiny pováčšine nemá, je nutná jeho předběžná úprava, napr. pomocou aminoalkylsilánov, čím povrch získá organické funkčně skupiny, napr. alkylamíny, ktoré vytvárajú s anorganickou látkou kovalentnú vazbu. Dalšia úprava takto získaného materiálu móže byť převedená napr. pomocou tiofosgénu, fosgénu, anhydridu dikarbónovýoh kyselin, připadne dalšími spósobmi.
Z anorganických materiálov, ako vhodné enzymové nosiče sú kysličníky hliníka, železa, kysličník nikelnatý, titaničitý, zirkoničitý, hydroxylapatit, kremičitany a porézně sklo. Velkost pórov u porézneho skla umožňuje přístupnost enzýmov v procése imobilizácie ako aj substrátov v priebehu reakcie s imobilizovaným enzýmom do vnútomého priestoru nosiča. Účinnost reakcie imobilizácie enzýmu, specifická aktivita imobilizovaného enzýmu a jeho stabilita pri skladovaní na povrchu nosiča však závisí na dlžke a substituentoch zlúčeniny (spacera) obsahujúceho funkónú skupinu vhodnú k zakotveniu enzýmu. Příprava imobilizovaných enzýmov o vysokej špecifickej aktivitě, vysokej účinnosti reakcie s bielkovinou enzýmu a dlhej stabilitě imobilizovaného enzýmu počas skladovania je zahrnutá v riešení tejto přihlášky vynálezu.
Podstata vynálezu spočívá v tom, že povrch skla sa nechá reagovat s χ-aminopropyltrietoxysilánom pri teplote 100 až 120 °C po dobu 4 až 10 hodin, pričom získaný produkt obsahujúci aminoalkylskupiny sa nechá v druhom stupni reagovat s tiofosgénom pri 70 až 90 °C po dobu 2 až 8 hodin a získaný polyizotiokyanát sa nechá reagovat v treťom stupni s 1,6 diamino-2,5-dihydroxyhexánom po dobu 2 až hodin pri 80 až 100 °C a získaný derivát obsahu júci vól’né primárné aminoskupiny sa modifikuje v reakcii s vhodným činidloňi, napr. tiofosgénom v štvrtom stupni pri 70 až 90 °C po dobu 2 až 6 hodin, alebo anhydridom kyseliny jantárovej a v poslednom stupni sa na. takto upravenom nosiči imobilizuje enzým za miešania po dobu 1 až 20 hodin pri teplote 0 až 40 °C, pri pH 4 až 6.
Výhoda uvedeného spósobu imobilizácie spočívá v tom, že pomocou bifunkčnej šesťuhlíkatej látky obsahujúcej hydroxylové skupiny v sústave k reaktívnym skupinám (napr. — NH2) sa zvyšuje účinný povrch umožňujúci získať až 96% enzýmu naneseného na nosič v aktívnej formě (podlá údajov D. L. Latigue, Immobilized Enzymes for Industrial Reactors, London 1975, str. 127) zostáva aj za najlepších podmienok len asi 80 % enzýmu po imobilizácii na nosiči v aktívnej formě. Pokles aktivity imobilizovaného enzýmu zakotveného na skle modifikovaným vyššie uvedeným spósobom počas skladovania je o 10 až 30 % nižší ako u nosičov bez tej to modifdkácie alebo so zavedením bifunkčnej látky dlhšej alebo kratšej ako 6 uhlíkovej. Přístupnost aktívneho centra imobilizovaného enzýmu pre reakciu so substrátom alebo inhibítorom je lepšia ako u nosičov nemodifikovaných týmto sposobom.
Příklady prevedenia
Příklad 1
Sklo o kontrolovanej velkosti pórov (10 g), CPG-10, 1400 o zrnitosti 120/200, stredný priemer pórov 1200 A, specifický - povrch. 12,5 m2/g (fa Electronucleonics, USA) sa: za-, Ihrievalo v zriedenej (1:1) kyselině dusičnéj pri teplote 120 °C po dobu 5 hodin. Partikule skla sa potom premyli nadbytkem (500 ml) vody, destilovanej vody a acetónom a vysušili. Vysušené sklo sa reaktivovalo v prúde kyslíka pri teplote 400 °C po dobu 12-hod. Aktivované sklo (10 g) sa použilo k silanizácii, ktorá sa prevádzala v 10 % roztoku χ-aminopropyltrietoxysilánu v toluene (160 ml) pri teplote i20 °C po dobu 4 hodin. Produkt reakcie silinizácie sa premýval nadbytkem toluenu (400 ml) za účelom odstránenia nezře-. agovaného χ-aminopropyltrietoxysilánu. Prernyté sklo sa sušilo pri teplote 100 °C cez noc. Získané sklo obsahujúce primárné aminoskupiny sa charakterizovalo na ich obsah pomocou metody využívajúcej 2,4,6 — trinitroben-: zénsulfónovou kyselinou (H. Wand, M; Rudel a H. Dantzemberg, Z. Chemie, 18, 224 (1978). Porézně sklo s primárnými aminoskupinami (10 g) sa nechalo reagovat s tiofosgénom (10 %-ný roztok) tiofosgénu v chloroforme (200 ml) pri teplote 80 °C cez noc. Získané sklo obsahujúce izotiokyanátové funkčně skupiny sa charakterizovalo na ich obsah pomocou reakcii s (U — 41C) valínom (U — 14G) cysteínom a merkaptoetanolom.
Reakciá sá prevádzala tak, že porézně sklo (10 g) obsahujúce izotiokyanátové skupiny sa nechalo reagovat s 2,5 %-ným 1,6 diamino— 2,5-dihydroxyhexánom (v 400 ml chloroformu) pri teplote 80 °C po dobu 5 hodin. Nezreagovaný diaminohexán sa vymyl nadbytkom (0,6 1) chloroformu, (0,5 1) vody a (0,5 1) acetonu. Reakcia takto modifikovaného porézneho skla s tiofosgénom prebehla v 10 %-nom roztoku tiofosgénu v 200 ml chloroformu pri teplote 80 °C po dobu 5 hodin.
Takto připravený nosič (10 g) sa použil k imobilizácii pseudooholínesterázy (acylcholín acylhydnoláza EC 3.1.1.8). Pseudocholínesteráza z konskej plazmy (0,5 g, 120 U/mg) sá rozpustila v 200 ml 0,02 M borátového pufru (pH 8,5) a přidalo sa 10 g porézneho skla so zavedeným 1,6-diamino—2,5 dihydroxyhexánom a izotiokyanátovými funkčnými skupinami. Imobilizácia prebiehala za miešania po dobu 2 hodin. Nezareagovaný rozpustný enzým sa vymyl 2 M chloridom sodným vo vodě (500 ml). Imobilizovaný enzým sa udržiaval vo zvlhčenom stave pri 4°C a aktivita poklesla za 1 rok o 15%. Získaná specifická aktivita enzýmu 2300 U/g, účinnost imobilizácie 95 %. Příklad 2
Tak ako uvedené v příklade 1 s tým rozdielom, že po zavedení 1,6-diamino—2,5-dihydroxyhexánu derivatizované sklo (10 g) s volnými aminoskupinami sa nechá reagovat s anhydridom kyseliny jantárovej (4 g) v 200 ml chloroformu pri teplote 80 °C po dobu 2 hodin. Reakčný produkt sa premyl vo vodě (500 ml) a acetone (300 ml) a vysušil. Ďalšia modifikácia skla (10 g) obsahujúceho vol’né karboxylové skupiny sa previedla v 2 %-nom vodnom roztoku l-cyklohexyl-3-(2-morfolinoetyl) karbódiimidu o pH 4,8 za miešania pri izbovej teplote po dobu 1 hodiny. Získané derivatizované sklo sa premylo 4 rázy vodou (500 ml) před imoibilizáciou enzýmu. Imobilizácia enzýmu sa prevádzala rovnako ako uvedené v příklade 1, s tým rozdielom, že teplota pri reakcii imobilizácie sa udržiavala v rozmedzí 0 až 2 °C. Specifická aktivita imobilizovaného enzýmu 2050 U/g. Účinnost.imobilizácie 85 %. Příklad 3
Tak ako uvedené v příklade 1 s tým rozdielom, že sa namiesto pseudooholínesterázy použije glukoamyláza (a-l,4-glukán glukohydroláza EC 3.2.1.3) s Endomycopsis bispora. Specifická aktivita imobilizovaného enzýmu 1200 U/g,účinnost imobilizácie 92 %.
Snobilizované enzýmy na nosiooch za využitia 1,6 diamino-2,5—dihydroxyhexánu sú vhodné pre priemyseínú aplikáciu a pre použitie v analytickej ohémii.
Claims (1)
- PREDMET VYNÁLEZUSposob přípravy imobilizovaných enzýmov o vysokej specifickéj aktivitě vyznačujúci sa tým, že sa povrch skla nechá reagovat s r-aniinopr-opyltrietoxysilánom pri teplote 100 až 120 °C po dobu 4 až 10 hodin, pričom získaný produkt obsahujúci aminoalkylové skupiny sa nechá v druhom stupni reagovat s tiofosgénom pri teplote 70 až 90 °C po dobu 4 až 8 hodin a získaný izotiokyanát alkylderivát sa nechá reaogavť v treťom stupni, s 1,6-diamino—2,5dihydroxyhexánom po dobu 4 až 8 hodin pri teplote 80 až 100 °C a získaný derivát obsahujúci volné primárné- aminoskupiny sa modifikuje v reakeii s tiofosgénom v štvrtom stupni pri teplote 70 až 90 °C po dobu 2 až 8 hodin alebo s anhydridom kyseliny jantárovej a v poslednom stupni ha takto upravenom skle. sa imobilizuje enzým za miešania po dobu 1 až 20 -hodin pri teplote 0 až 40 °C a pH 4 až 6.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS736178A CS204368B1 (sk) | 1978-11-13 | 1978-11-13 | Spósob přípravy imobilizovaných enzýmov o vysokej špecifickej aktivitě |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS736178A CS204368B1 (sk) | 1978-11-13 | 1978-11-13 | Spósob přípravy imobilizovaných enzýmov o vysokej špecifickej aktivitě |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS204368B1 true CS204368B1 (sk) | 1981-04-30 |
Family
ID=5422614
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS736178A CS204368B1 (sk) | 1978-11-13 | 1978-11-13 | Spósob přípravy imobilizovaných enzýmov o vysokej špecifickej aktivitě |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CS (1) | CS204368B1 (sk) |
-
1978
- 1978-11-13 CS CS736178A patent/CS204368B1/sk unknown
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US3959078A (en) | Enzyme immobilization with a thermochemical-photochemical bifunctional agent | |
| US3802997A (en) | Method of stabilizing enzymes | |
| JP2862509B2 (ja) | リパーゼ固定化用担体及び固定化リパーゼ | |
| EP0158909B1 (en) | Immobilized enzymes, processes for preparing same and use thereof | |
| US3930951A (en) | Bonding enzymes to porous inorganic carriers | |
| JPS5978687A (ja) | 固定化酵素配合体 | |
| JPS6133557B2 (sk) | ||
| EP0105736B1 (en) | Immobilization of proteins on polymeric supports | |
| US4204041A (en) | High loading of immobilized enzymes on activated carbon supports | |
| US4268419A (en) | Support matrices for immobilized enzymes | |
| US4289853A (en) | High loading of immobilized enzymes on activated carbon supports | |
| US7556945B1 (en) | Method for converting sucrose to β-D-glucose | |
| JPS6239997B2 (sk) | ||
| Stults et al. | Immobilization of proteins on partially hydrolyzed agarose beads | |
| CS204368B1 (sk) | Spósob přípravy imobilizovaných enzýmov o vysokej špecifickej aktivitě | |
| US4206286A (en) | Immobilization of proteins on inorganic supports | |
| Messing et al. | Covalent coupling of alkaline bacillus subtilis protease to controlledpore silica with a new simplified coupling technique | |
| JPS61181376A (ja) | 固定化された生物学的活性化合物の製造方法 | |
| WO1989008705A1 (en) | Supports for proteins and amino acids | |
| Melius et al. | Immobilization of lipase to cyanogen bromide activated polysaccharide carriers | |
| KR100883206B1 (ko) | 실라카 비드를 포함하는 생물 촉매 고정화용 담체, 및 이의용도 | |
| SU744002A1 (ru) | Способ получени иммобилизованных ферментов | |
| SU732278A1 (ru) | Способ модификации полисахаридов | |
| KR830002697B1 (ko) | 고정화 효소의 제조방법 | |
| JPS6279784A (ja) | 酵素固定化用担体 |