CS206393B1 - Způsob výroby neurohypofysárních hormonů a jejich analogů - Google Patents
Způsob výroby neurohypofysárních hormonů a jejich analogů Download PDFInfo
- Publication number
- CS206393B1 CS206393B1 CS819179A CS819179A CS206393B1 CS 206393 B1 CS206393 B1 CS 206393B1 CS 819179 A CS819179 A CS 819179A CS 819179 A CS819179 A CS 819179A CS 206393 B1 CS206393 B1 CS 206393B1
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- tmb
- cys
- gly
- pro
- asn
- Prior art date
Links
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title claims description 7
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 title claims description 4
- 239000005556 hormone Substances 0.000 title claims description 4
- RDOXTESZEPMUJZ-UHFFFAOYSA-N anisole Chemical compound COC1=CC=CC=C1 RDOXTESZEPMUJZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 14
- KRHYYFGTRYWZRS-UHFFFAOYSA-N Fluorane Chemical compound F KRHYYFGTRYWZRS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- 229910000040 hydrogen fluoride Inorganic materials 0.000 claims description 9
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims description 8
- UZKWTJUDCOPSNM-UHFFFAOYSA-N methoxybenzene Substances CCCCOC=C UZKWTJUDCOPSNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- -1 2,4,6-tri-methylbenzyl group Chemical group 0.000 claims description 6
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 6
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 claims description 5
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 claims description 5
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 claims description 4
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 4
- ITMCEJHCFYSIIV-UHFFFAOYSA-N triflic acid Chemical compound OS(=O)(=O)C(F)(F)F ITMCEJHCFYSIIV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- DKIDEFUBRARXTE-UHFFFAOYSA-N 3-mercaptopropanoic acid Chemical group OC(=O)CCS DKIDEFUBRARXTE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N Sulfur Chemical compound [S] NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 239000011593 sulfur Substances 0.000 claims description 3
- XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N L-Cysteine Chemical compound SC[C@H](N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N 0.000 claims 1
- 238000010511 deprotection reaction Methods 0.000 claims 1
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 11
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 239000000543 intermediate Substances 0.000 description 5
- XNOPRXBHLZRZKH-DSZYJQQASA-N oxytocin Chemical group C([C@H]1C(=O)N[C@H](C(N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@H](N)C(=O)N1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(N)=O)=O)[C@@H](C)CC)C1=CC=C(O)C=C1 XNOPRXBHLZRZKH-DSZYJQQASA-N 0.000 description 5
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 4
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 4
- KBZOIRJILGZLEJ-LGYYRGKSSA-N argipressin Chemical group C([C@H]1C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@@H](C(N[C@@H](CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)N1)=O)N)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)NCC(N)=O)C1=CC=CC=C1 KBZOIRJILGZLEJ-LGYYRGKSSA-N 0.000 description 4
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 4
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 4
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 4
- 102400000050 Oxytocin Human genes 0.000 description 3
- 101800000989 Oxytocin Proteins 0.000 description 3
- XNOPRXBHLZRZKH-UHFFFAOYSA-N Oxytocin Natural products N1C(=O)C(N)CSSCC(C(=O)N2C(CCC2)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C1CC1=CC=C(O)C=C1 XNOPRXBHLZRZKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 3
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 3
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 3
- 229960001723 oxytocin Drugs 0.000 description 3
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 3
- 102400000059 Arg-vasopressin Human genes 0.000 description 2
- 101800001144 Arg-vasopressin Proteins 0.000 description 2
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N Trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 description 2
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 2
- 125000000151 cysteine group Chemical group N[C@@H](CS)C(=O)* 0.000 description 2
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 2
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 2
- 238000002523 gelfiltration Methods 0.000 description 2
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 2
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 2
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 2
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M sodium hydroxide Inorganic materials [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 1,2-bis(ethenyl)benzene;1-ethenyl-2-ethylbenzene;styrene Chemical compound C=CC1=CC=CC=C1.CCC1=CC=CC=C1C=C.C=CC1=CC=CC=C1C=C NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HVCNXQOWACZAFN-UHFFFAOYSA-N 4-ethylmorpholine Chemical compound CCN1CCOCC1 HVCNXQOWACZAFN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BTJIUGUIPKRLHP-UHFFFAOYSA-N 4-nitrophenol Chemical compound OC1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1 BTJIUGUIPKRLHP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 1
- QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N Dicylcohexylcarbodiimide Chemical compound C1CCCCC1N=C=NC1CCCCC1 QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LEVWYRKDKASIDU-IMJSIDKUSA-N L-cystine Chemical group [O-]C(=O)[C@@H]([NH3+])CSSC[C@H]([NH3+])C([O-])=O LEVWYRKDKASIDU-IMJSIDKUSA-N 0.000 description 1
- GXBMIBRIOWHPDT-UHFFFAOYSA-N Vasopressin Natural products N1C(=O)C(CC=2C=C(O)C=CC=2)NC(=O)C(N)CSSCC(C(=O)N2C(CCC2)C(=O)NC(CCCN=C(N)N)C(=O)NCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C1CC1=CC=CC=C1 GXBMIBRIOWHPDT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010004977 Vasopressins Proteins 0.000 description 1
- 102000002852 Vasopressins Human genes 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 150000001450 anions Chemical class 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 239000003729 cation exchange resin Substances 0.000 description 1
- 238000009833 condensation Methods 0.000 description 1
- 230000005494 condensation Effects 0.000 description 1
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 1
- 229960003067 cystine Drugs 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- UZUODNWWWUQRIR-UHFFFAOYSA-L disodium;3-aminonaphthalene-1,5-disulfonate Chemical compound [Na+].[Na+].C1=CC=C(S([O-])(=O)=O)C2=CC(N)=CC(S([O-])(=O)=O)=C21 UZUODNWWWUQRIR-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 230000006334 disulfide bridging Effects 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000007243 oxidative cyclization reaction Methods 0.000 description 1
- 238000010647 peptide synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 229960003726 vasopressin Drugs 0.000 description 1
Landscapes
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Description
Předmětem vynálezu je způsob výroby neurohypofysárních hormonů a jejich analogů, obsahujících ve své molekule disulfidovou vazbu. . .
Řada biologicky aktivních peptidů obsahuje ve své molekule zbytky cysteinu (většinou spojených disulfidovou vazbou na zbytky cystinu). Jejich synthetická výroba je založena na použití chránících skupin síry cysteinu; tyto chránící skupiny jsou v posledním stupni odstraněny a disulfidová vazba je uzavírána oxidační cyklisací. Dva hlavní požadavky, kladené na tyto chránící skupiny, jsou: a) dostatečná stabilita během jednotlivých stupňů synthesy; b) jejich odstranění za takových podmínek, aby nebyl narušen již vybudovaný peptidový řetězec. Žádná z dosud popsaných chránících skupin (přehled viz: Schróder E., Liibke K.: The Peptides. Academie Press, New York 1965; Houben-Weyl: Methoden der organischen Chemie, díl 15: Synthese von Peptiden (E. Wiinsch, vyd.). Thieme Verlag, Stuttgart 1974) však tyto požadavky nesplňuje.
Novost předmětu vynálezu spočívá ve zjištění, že 2,4,6-trimethylbenzylová chránící skupina sirý cysteinu je dostatečně stabilní za' podmínek běžně používaných při synthese peptidů a že se dá odstranit kapalným fluorovodíkem v přítomnosti anisolu při 0 °C za několik desítek minut, nebo za stejných podmínek kyselinou trifluormethansulfonovou, tzn. za podmínek, kdy nedojde k narušení peptidového řetězce.
Podstatou způsobu výroby neurohypofysárních hormonů a jejich analogů je, že se z lineárních peptidů, ve kterých je síra cysteinových zbytků nebo zbytků kyseliny β-merkaptopropionové chráněna 2,4,6-trimethylbenzylovou skupinou, odstraní tyto chránící skupiny působením kapalného fluorovodíku nebo kyselinou trifluormethansulfonovou. Uvedený způsob výroby se provádí s výhodou v přítomnosti anisolu při teplotě 0+10 °C.
Způsob výroby peptidů, obsahujících cystein a jeho deriváty, se dále objasňuje v příkladech provedení:
Přiklad 1
Výchozí látka, lineární chráněný nonapeptid o oxytocinové sekvenci (Z-Cys(TMB)-Tyr(Bu‘(-Ile-Gln-Asn-Cys(TMB)-Pro-Leu-Gly-NH2, kde TMB značí 2,4,6-trimethylbenzylovou chránící skupinu a všechny aminokyseliny jsou L-konfigurace), byla připravena postupnou výstavbou z karboxylového konce většinou pomocí | 20β 3&3 * · . j: .....
| aktivních esterů odpovídajících o-niírobenzensulfenylaminokyselin; vlastnosti jednotlivých meziproduktů > jsou uvedeny v tabulce 1.
'5 Tabulka 1
| Meziprodukt | T.t. (°C) | Wd (c = 0,5;dimethylformamid) | Analysa C, Η, N (%) i Vypočteno Nalezeno | ||
| Z-Cys(TMB)-Pro-Leu-Gly-NH2 | 197 až 199 | -50,0° | 62,46; | 7,24 | 10,71 |
| 62,16; | 7,30 | 11,01 | |||
| Nps-Asn-Cys(TMB)-Pro-Leu- | 222 až 224 | -80,4° | 54,94; | 6,40 | 14,24 : |
| -Gly-NH2> | 54,75; | 6,32 | 14,00 i | ||
| Nps-Gln-Asn-Cys(TMB)-Pro- | 196 až 197 | -59,4° | 53,81; | 6,38 | 15,31 |
| -Leu-Gly-NH2 | 53,66; | 6,30 | 15,11 | ||
| Nps-Ile-Gln-Asn-Cys(TMB)- | 238 až 240 | -66,0° | 54,90; | 6,76 | 14,98 : |
| -Pro-Leu-Gly-NH2 | 55,04; | 6,64 | 14,89 | ||
| Nps-Tyr(Bu‘)-Ile-Gln-Asn- | 221 až 223 | + 3,0° | 57,77; | 6,95 | 13,41 : |
| -Cys(TMB)-Pro-Leu-Gly-NH2 | • 57,73; | 6,75 | 13,66 | ||
| Z-Cys(TMB)-Tyr(Bu‘)-Ile- | 239 až 241 | -54,0° | 61,54; | 7,30 | 11,48 |
| -Gln-Asn-Cys(TMB)-Pro-Leu-Gly-NH2 | 61,32; | 7,21 | 11,28 |
• Chráněný lineární nonapeptid (Z-Cys(TMB)-Tyr(But)-Ile-Gln-Asn-Cys(TMB)-Pro-Leu-Gly-NH2; 50 mg) a anisol (0,6 ml) byly rozpuštěny v kapalném fluorovodíku (7 ml). Po 30 minutách při 0 °C byl fluorovodík odpařen, odparek byl rozpuštěn ve vodě, vodný roztok byl extrahován etherem, potom byla vodná fáze zředěna vodou na objem 150 ml a její pH bylo upraveno 0,lM-NaOH na hodnotu 6,75. Po jednohodinove oxidaci vzdušným kyslíkem bylo pH sníženo O,1M-HC1 na hodnotu 3,8 a roztok byl lyofílisován. Po čištění protiproudným roztřepáváním a gelovou filtrací bylo získáno 13,2 mg (39%) oxytocinu o [a]D = -27,8° (c = 0,2; 1M kyselina octová) chromatografický i elektroforeticky čistého. Aminokyselinové složení (po 20 h hydrolyse 6M-HC1 při 105 °C ve vakuu 130 Pa): |Cys 1,99, Tyr 0,95, Ile 0,99, Glu 1,00, Asp 1,00, Pro 1,00, Leu 1,05, Gly 1,01. Pro C43H66N12O12S2.2CH3COOH.2H2O (1163,3) vypočteno: 48,53% C, 6,76% H, 14,45% N; nalezeno: 48,37% C, 6,82% H, 14,18% N. Připravený oxytocin měl plnou biologickou aktivitu v testu na izolovaném proužku krysí dělohy a v galaktogogickém testu in vivo (Berde B., Boissonnas R. A.: Handbook of Experimental Pharmacology, díl 23, str. 802-863. Springer-Verlag, Berlin 1968).
Příklad 2
Výchozí látka, lineární chráněný nonapeptid o vasopresinové sekvenci (Z-Cys(TMB)-Tyr(Bu‘)-Phe-Gln-Asn-Cys(TMB)-Pro-Arg(Tos)-Gly-NH2, kde TMB značí 2,4,6-trimethylbenzylovou skupinu a všechny aminokyseliny jsou L-konfigurace), byla připravena obdobně jako oxytocinový nonapeptid v příkladu 1; vlastnosti jednotlivých meziproduktů jsou uvedeny v tabulce 2.
Tabulka 2
| Meziprodukt | T.t. (0 °c) | Wn (c = 0,5; dimethylformamid) | Analysa C, Η, N (%) Vypočteno Nalezeno | ||
| Z-Cys(TMB)-Pro-Arg(Tos)- | 118 až 120 | -32,8° | 57,86; | 6,40; | 13,17 |
| Gly-NH2 | 57,65; | 6,49; | 13,14 | ||
| Nps-Asn-Cys(TMB)-Pro- | 169 až 171 | -60,1° | 52,47; | 5,83; | 15,65 |
| -Arg(Tos)-Gly-NH2 | 52,72; | 5,91; | 15,48 | ||
| Nps-Gln-Asn-Cys(TMB)-Pro- | 154 až 156 | -48,7° | 51,83; | 5,89; | 16,37 |
| -Arg(Tos)-Gly-NH2 | 51,97; | 5,97; | 16,27 |
206 333
| Meziprodukt | T.t. (0°C) | Mu (c = β,5; dimethylformamid) | Analysa C, Η, N (%) Vypočteno Nalezeno | ||
| Nps-Phe-Gln-Asn-Cys(TMB)- | 171 až 173 | — 28;4° | 54,35; | 5,92; | 15,56 |
| -Pró-Arg(Tos)-Gly-NH2 | 54,18; | 6,07; | 15,42 | ||
| : Nps-Tyr(Bul)-Phe-Gln-Asn- | 184 až 186 | + 4,0° | 56,86; | 6,20; | 14,21 |
| ; -Cys(TMB)-Pro-Arg(Tos)-Gly-NH2 | 56,74; | 6,02; | 14,06 | ||
| Z-Cys(TMB)-Tyr(Bu‘)-Phe-Gln-Asn- | 195 až 197 | -40,3° | 61,31; | 6,71; | 12,61 |
| -Cys(TMB)-Pro-Arg(Tos)-Gly-NH2 | 61,16; | 7,01; | 12,65 |
Chráněný lineární nonapeptid (Z-Cys(TMB)-Tyr(Bu‘)-Phe-Gln-Asn-Cys(TMB)-Pro-Arg(Tos)-Gly-NH2;
mg) a anisol (0,6 ml) byly rozpuštěny v kapalném fluorovodíku (10 ml). Po 30 minutách míchání při 0 °C byl fluorovodík odpařen za vakua, odparek byl rozpuštěn ve vodě (20 ml) a vodný roztok byl extrahován etherem, filtrován přes sloupec slabě basického měniče aniontů (v acetátovém cyklu) a pH roztoku bylo upraveno N-ethylmorfolinem na hodnotu 6,7. Vodný roztok byl oxidován vzdušným kyslíkem po dobu 1 h, pH roztoku bylo upraveno kyselinou octovou na hodnotu 3,7 a roztok byl lyofilisován. Produkt byl čištěn geíovou filtrací a bylo získáno 15 mg (40%) arginin-vasopresinu o [a]p = —21,9° (c = 0,2, 1M kyselina octová), chromaťográfičky i elektroforeticky čistého. Aminokyselinové složení (po 20 h hydrolyse 6M-HC1 při 105 °C ve vakuu 130 Pa): |Cys 1,95, Tyr 0,93, Phe 1,03, Glu 0,98, Asp 1,00, Pró 1,06, Arg 1,06, Gly 1,05. Pro C46H65N15O12S2.2CH3COOH.2H2O (1240,4) vypočteno: 48,42% C, 6,26% H, 16,95% N; nalezeno: 48,18 % C, 6,33 % H, 16,87 % N. Připravený arginin-vasopresm měl plnou biologickou aktivitu v presorickém testu na despinalisované kryse (Berde B., Boissonnas R. A.: Handbook of Experimental Pharmacology, díl 23, str. 802-863. Springer-Verlag, Berlin 1968).
Příklad 3
Chráněný lineární nonapeptid (Z-Cys(TMB)-Tyr(Bu‘)-Phe-Gln-Ásn-Čys(ŤMB)-Pro-Arg-(Tos)-Gly-NH2; 50 mg) byl rozpuštěn v kyselině trifluoroctové (0,6 ml), k roztoku byl přidán anisol (40 μΐ), roztok byl ochlazen na 0 °C a byla k němu přidána kyselina trifluormethansulfonová (0,4 ml). Po 30 minutách při 0 °C byla reakční směs zředěna etherem, pevný podíl byl odcentrifugován, rozpuštěn ve vodě (150 ml), pH roztoku bylo nastaveno na hodnotu 6,8 a reakční směs byla oxidována vzduchem 1 h. Její pH bylo nastaveno kyselinou octovou na hodnotu 4,4 a roztok byl filtrován přes karboxylátový katex. Anorganické podíly byly vymyty 0,25% vodnou kyselinou octovou a produkt byl vymyt 50% vodnou kyselinou octovou. Roztok byl zředěn vodou a lyofilisován. Lyofilisát byl čištěn gelovou filtrací a bylo získáno 15,8 mg (42%) arginin-vasopresinu o stejných vlastnostech jako v příkladu 2.
Příklad 4
Výchozí látka, Mpr(TMB)-Tyr(Bu‘)-Phe-Gln-Asn-Cys(TMB)-Pro-Arg(Tos)-Gly-NH2 (kde Mpr značí zbytek kyseliny /J-merkaptopropionové) byla připravena kondensací volného Tyr(Bu')-Phe-Gln-Asn-Cys(TMB)-Pro-Arg(Tos)-Gly-NH2 s p-nitrofenylesterem kyseliny jS-S-(2,4,6-trimethylbenzyl)merkaptopropionové (t.t. 210 až 212 °C, chromatograficky jednotné). Tento ester byl připraven z kyseliny /J-S-(2,4,6-trimethylbenzyl)merkaptopropionové a p-nitrofenolu působením dicyklohexylkarbodiimidu ve výtěžku 91 %.
Chráněný peptid (Mpr(TMB)-Tyr(But)-Phe-Gln-Asn-Cys(TMB)-Pro-Arg(Tos)-Gly-NH2; 50 mg) a anisol (0,6 ml) byly rozpuštěny v kapalném fluorovodíku (7 ml). Po 30 minutách při 0 °C byl fluorovodík odpařen, odparek byl rozpuštěn ve vodě (20 ml), suspense byla extrahována etherem, vodná fáze byla zředěna na objem 150 ml, její pH bylo upraveno na 6,75 a roztok byl oxidován 0,01M-K3Fe(CN)6 1 h. pH roztoku bylo upraveno na hodnotu 4,5, roztok byl zbaven anorganických solí filtrací přes sloupec katexu a surový analog vasopresinu byl vymyt 50% vodnou kyselinou octovou. Po zředění vodou byl roztok lyofilisován. Po čištění beznosičovou elektroforesou bylo získáno 14,6 mg (37 %) chromatograficky a elektroforeticky čistého analogu. Jeho presorická aktivita odpovídala plně publikovanému údaji (Berde B., Boissonnas R. A.: Handbook of Experimental Pharmacology, díl 23, str. 802-863. Springer-Verlag, Berlin 1968).
Claims (2)
- PŘEDMĚT V Y NÁ LEZ Ú1. -Způsob výroby neurohypofysárních hormonů a jejich analogů, vyznačený tím, že se z lineárních peptidů, ve kterých je síra cysteinových zbytků nebo zbytků kyseliny jS-merkaptopropionové chráněna 2,4,6-tri-í jpethylbenzylovou skupinou, odstraní tyto chránící skupiny působením kapalného fluorovodíku nebo; kyselinou trifluormethansulfonovou. . ,, J
- 2. Způsob výroby podle bodu 1, vyznačený tím, že se odstraňování chránících skupin provádí v přítomnosti; anisolu při teplotě 0 + 10 °C.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS819179A CS206393B1 (cs) | 1979-11-28 | 1979-11-28 | Způsob výroby neurohypofysárních hormonů a jejich analogů |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS819179A CS206393B1 (cs) | 1979-11-28 | 1979-11-28 | Způsob výroby neurohypofysárních hormonů a jejich analogů |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS206393B1 true CS206393B1 (cs) | 1981-06-30 |
Family
ID=5432142
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS819179A CS206393B1 (cs) | 1979-11-28 | 1979-11-28 | Způsob výroby neurohypofysárních hormonů a jejich analogů |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CS (1) | CS206393B1 (cs) |
-
1979
- 1979-11-28 CS CS819179A patent/CS206393B1/cs unknown
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US4368192A (en) | Peptides | |
| Law et al. | Synthesis of 2-p-Methoxyphenylalanine Oxytocin (O-Methyl-oxytocin) and Some Observations on its Pharmacological Behavior1 | |
| US4271068A (en) | Process for the manufacture of cystine-containing peptides | |
| HU206126B (en) | Process for producing growth hormone releasing factor derivatives | |
| US4487765A (en) | Peptides | |
| JPH085916B2 (ja) | 新規カルシトニン誘導体 | |
| CA1337407C (en) | Dimeric peptides having a stimulatory effect on haemopoiesis and a process for their preparation | |
| EP0037516A1 (en) | N-omega substituted derivatives of 1-Desamino-vasopressin analogs | |
| Katsoyannis et al. | Synthetic Studies on Arginine-vasopressin: Condensation of S-Benzyl-N-carbobenzoxy-L-cysteinyl-L-tyrosyl-L-phenylalanyl-L-glutaminyl-L-asparagine and its O-Tosyl Derivative with S-Benzyl-L-cysteinyl-L-prolyl-L-arginylglycinamide1 | |
| JPH0317098A (ja) | 合成ペプチド及びその塩並びにそれらの製造法 | |
| US4203975A (en) | Psychopharmacological peptides suitable for therapeutic administration | |
| Ferger et al. | Four cyclic disulfide pentapeptides possessing the ring of vasopressin | |
| DE3040825A1 (de) | Neues tridekapeptid, verfahren zu seiner herstellung und verwendung | |
| EP0185320B1 (en) | Partially modified, retro-inverso neurotensin analogs | |
| US3953415A (en) | Process for the preparation of biologically active polypeptides containing aspartyl group | |
| CA1292841C (en) | Peptide derivatives, their production and use | |
| Hiskey et al. | Sulfur-Containing Polypeptides. VI. Stability Studies on Unsymmetrical Open-Chain Cystine Derivatives1-3 | |
| CS206393B1 (cs) | Způsob výroby neurohypofysárních hormonů a jejich analogů | |
| JPH0730112B2 (ja) | ブラジキニン拮抗作用をもつ新規の擬似ペプチド化合物 | |
| Hase et al. | SYMMETRICAL DISULFIDE BONDS AS S‐PROTECTING GROUPS AND THEIR CLEAVAGE BY DITHIOTHREITOL: SYNTHESIS OF OXYTOCIN WITH HIGH BIOLOGICAL ACTIVITY | |
| US4508645A (en) | Analogs of neurohypophysial hormones with inhibition effects | |
| Acher | Chemistry of neurohypophysial hormones | |
| US4117117A (en) | Tridecapetide having gastrin effect | |
| Schwartz et al. | Insulin analog possessing higher in vitro biological activity than receptor binding affinity.[21-Proline-B] insulin | |
| US3752799A (en) | Nalpha-acetyl-2-o-methyltyrosine-oxytocin |