CS233088B1 - ) Trojsodná soí 6- [2-sulfo-4-(4-amino-3-sulfo-l-antrachinón- amino/j anilino-4-(x- sulfoanilino)-l,3,5‘-triazín-2-yl-hydroxyetylcelulózy a sposob jej přípravy - Google Patents
) Trojsodná soí 6- [2-sulfo-4-(4-amino-3-sulfo-l-antrachinón- amino/j anilino-4-(x- sulfoanilino)-l,3,5‘-triazín-2-yl-hydroxyetylcelulózy a sposob jej přípravy Download PDFInfo
- Publication number
- CS233088B1 CS233088B1 CS402683A CS402683A CS233088B1 CS 233088 B1 CS233088 B1 CS 233088B1 CS 402683 A CS402683 A CS 402683A CS 402683 A CS402683 A CS 402683A CS 233088 B1 CS233088 B1 CS 233088B1
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- amino
- sulfo
- hydroxyethylcellulose
- triazine
- sulpho
- Prior art date
Links
- 239000004354 Hydroxyethyl cellulose Substances 0.000 title claims description 25
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title description 4
- 229940071826 hydroxyethyl cellulose Drugs 0.000 title 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 title 1
- 229920000663 Hydroxyethyl cellulose Polymers 0.000 claims description 31
- 235000019447 hydroxyethyl cellulose Nutrition 0.000 claims description 20
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 14
- HRXKRNGNAMMEHJ-UHFFFAOYSA-K trisodium citrate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O HRXKRNGNAMMEHJ-UHFFFAOYSA-K 0.000 claims description 14
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 9
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 claims description 7
- CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L Sodium Carbonate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 6
- 229910000029 sodium carbonate Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 claims description 3
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 claims description 2
- 238000003818 flash chromatography Methods 0.000 claims description 2
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 claims description 2
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 claims description 2
- 239000012736 aqueous medium Substances 0.000 claims 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 claims 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 8
- YKCWQPZFAFZLBI-UHFFFAOYSA-N cibacron blue Chemical compound C1=2C(=O)C3=CC=CC=C3C(=O)C=2C(N)=C(S(O)(=O)=O)C=C1NC(C=C1S(O)(=O)=O)=CC=C1NC(N=1)=NC(Cl)=NC=1NC1=CC=CC=C1S(O)(=O)=O YKCWQPZFAFZLBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 6
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 6
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 6
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 5
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 5
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 5
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 4
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 description 2
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 2
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 2
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 2
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 2
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 2
- FYGDTMLNYKFZSV-URKRLVJHSA-N (2s,3r,4s,5s,6r)-2-[(2r,4r,5r,6s)-4,5-dihydroxy-2-(hydroxymethyl)-6-[(2r,4r,5r,6s)-4,5,6-trihydroxy-2-(hydroxymethyl)oxan-3-yl]oxyoxan-3-yl]oxy-6-(hydroxymethyl)oxane-3,4,5-triol Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1OC1[C@@H](CO)O[C@@H](OC2[C@H](O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]2O)CO)[C@H](O)[C@H]1O FYGDTMLNYKFZSV-URKRLVJHSA-N 0.000 description 1
- FIDRAVVQGKNYQK-UHFFFAOYSA-N 1,2,3,4-tetrahydrotriazine Chemical compound C1NNNC=C1 FIDRAVVQGKNYQK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920002498 Beta-glucan Polymers 0.000 description 1
- 229920001503 Glucan Polymers 0.000 description 1
- 229920002527 Glycogen Polymers 0.000 description 1
- 229920001612 Hydroxyethyl starch Polymers 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- 238000001042 affinity chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000006555 catalytic reaction Methods 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 150000002170 ethers Chemical class 0.000 description 1
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 238000005227 gel permeation chromatography Methods 0.000 description 1
- 229940096919 glycogen Drugs 0.000 description 1
- 229940050526 hydroxyethylstarch Drugs 0.000 description 1
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 1
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 125000000075 primary alcohol group Chemical group 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 230000009257 reactivity Effects 0.000 description 1
- 239000012266 salt solution Substances 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
Landscapes
- Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)
Description
(54) Trojsodná soí 6- [2-sulfo-4-(4-amino-3-sulfo-l-antrachinón- amino/j anilino-4-(x- sulfoanilino)-l,3,5‘-triazín-2-yl-hydroxyetylcelulózy a sposob jej přípravy
233 088
Vynález sa týká trojsodnej soli 6-[2-sulfo-4-(4-amino-3sulfo-l-antrachinón-amino)j anilino-4-(x-sulfoanilino)-l,3,5triazín-2-yl-hydroxyetylcelulózy a sposobu jej přípravy.
Trojsodná sol 2-chlór-6-[2-sulfo-4-(4-amino-3-sulfo-lantrachinón-amino)] anilino-4-(x-sulfoanilino)-1,3,5-triazínu je farbivo, ktoré reaguje v alkalickom prostředí v rozmedzí teplót 70 až 80 °C s polysacharidmi za vzniku stálých éterických derivátov fo.F. Kennedy: Advan. Carbohyd. Chem. Biochem. 29, 305 (1974)] . Farbivo takto viazané na vhodný nerozpustný polysacharidový nosič slúži, na základe jeho interakcie s niektorými enzýmami, ako ligand v afinitnej chromatografii týchto enzýmov. z rozpustných polysacharidov derivatizovaných týmto farbivom boli připravené trojsodná sol 5-[2-sulfo-4-(4-amino-3-sulfo-l-antrachinón-amino)] anilino-4-(x-sulfoanilino)-l,3, 5-triazin-2-yl-dextránu, hydrolyzovaného škrobu, glykogénu [p. Gemeiner, 0. Mislovičová, 0. Zemek, L. Kuniak: Collect. Czech. Chem. Commun. 46, 419 (1981)J a hydroxyetylškrobu.
Všetky tieto polysacharidy sú vetvené cC-glukány, na rozdiel od hydroxyetylcelulózy, ktorá je /3-glukán s lineárnym reťazcom.
Podmienky reakcie hydroxyetylcelulózy s trojsodnou solou 2-chlór-6-[2-sulfo-4-(4-amino-3-sulfo-l-antrachinón-amino)] anilino-4-(x-sulfoanilino)-1,3,5-triazínom sa líšia od podmienok farbenia dextránov[p. Gemeiner a kol.: Collect. Czech. Chem. Commun, 46, 419 (1981)] tým, že sú miernejsie ale sa pri nich dosiahne rovnaký stupeň substitúcie. Oe to spósobené váčšou reaktivitou hydroxyetylcelulózy v důsledku přítomnosti váčšieho množstva primárné alkoholických skupin, ktoré reagujú přednostně. Pri izolácii ziskanej trojsodnej soli 6-[2-sulfo-.4-(4-amino-sulfo-l-antrachinón-amino)J anilino-4-( x-sulfoanilino)-1,3,5-triazin-2-yl-hydroxyetylcelulózy nie je možné pri
- 3 233 088 molekulových hmotnostiach nad 100 000 použiť metodu gélovej chroraatografie pre velmi vysokú viskozitu roztoku tejto zlúčeniny.
Uvedený problém rieši tento vynález. Podstatou vynálezu je trojsodná soX 6-[2-sulfo-4-(4-aminO“Sulfo-l-antrachinónamino)J anilino-4-(x-sulfoanilino)-1,3,5-triazxn-2-yl-hydroxyetylcelulózy, kde x je poloha substituenta 2 alebo 4 vzorca I
kde R představuje hydroxyetylcelulózu so stupňom substitúcie
2,5 a priememej molekulovej hmotnosti 2.104 až 5,4.105. Ďalej podstatou vynálezu je spósob přípravy týchto derivátov, ktorý sa vyznačuje tým, že jednotlivé frakcie hydroxyetylcelulózy reagujú vo vodnom alkalickom prostředí a za přítomnost i 1,7 % chloridu sodného pri teplote 70 až 80 °C a počas dvoch hodin s trojsodnou solou 2-chlór-6~[2-sulfo-4-(4-amino-3-sulfo-l-antrachinón-amino)J anilino-4-(x-sulfoanilino)-1,3 ,5-triazxnu vzorca II pri váhových pomeroch trojsodná sol 2-chlór-6-
233 088
- [2-sulfo-4-(4-amino~3-sulfo-l-antrachinón-amino j] anilino-4-(x-sulfoanilino)-1,3,5-triazínu : hydroxyetylcelulóza : uhličitan sodný = 0,2 až 0,32 : 1 : 0,54 až 0,59, načo sa zafarbená hydroxyetylcelulóza oddělí od nenaviazaného farbiva bu3 gólovou chromatografiou (do priemernej molekulovej hmotnosti Mw 100 000) alebo 6 až 7 násobným zrážaním a následnou centrifugáciou z 0,5 % vodného roztoku chloridu sodného (nad Mw 100 000).
Výhodou navrhovaného spósobu přípravy trojsodnej soli 6-[2-sulfo-4-(4-amino-3-sulfo-l-antrachinón-amino)] anilino-4-(x-sulfoanilino)-1,3,5-triazín-2-yl-hydroxyetylcelulózy je, že poskytuje farebné deriváty vodorozpustného polysacharidu s lineárnou strukturou t.j. hydroxyetylcelulózy, ktoré sú vhodné pre štúdium interakcie farebného polysacharidu s enzýmom. Ďalšou výhodou je spósob izolácie tejto látky z reakčnej zmesi na základe jej nerozpustnosti v roztoku solí v 50 až 60 % výtažku.
Příklad 1 mg hydroxyetylcelulózy (HEC) o priemernej molekulovej hmotnosti (Mw) 350 000 sa rozpustí v 2 ml destilovanej vody pri teplote 60 °C. Potom sa přidá 7 mg trojsodnej soli 2-chlór-6-(2-sulfo-4-(4-amino-3-sulfo-l-ant rachinón-amino)] anilino-4-(x-sulfoanilino)-1,3 ,5-triazínu (Cibacron Blue 3G-A) rozpustenej v 0,2 ml destilovanej vody. Reakčná zmes sa mieša pri teplote 60 °C po dobu 30 min. Potom sa přidá 43,75 mg chloridu sodného a pokračuje sa v miešaní ešte po dobu 30 min. Po zvýšeni teploty na 80 °C sa přidá 15 mg uhličitanu sodného rozpuštěného v 0,05 ml destilovanej vody a reakčná zmes sa mieša ešte po dobu 2 h. Po ochladení sa reakčná zmes zriedi s 20 ml destilovanej vody a zneutralizuje zriedenou kyselinou chlorovodíkovou na pH 7. Zafarbená hydroxyetylcelulóza sa vyzráža přidáním 20 ml 1 % vodného roztoku chloridu sodného a ochladením na teplotu 4 °C. Zrazenina sa odcentrifuguje pri 4.10 otáčkách za min. Supernatant sa oddělí a zrazenina sa rozpusti v 20 ml destilovanej vody pri teplote 50 °C. Z roztoku sa Cibacron Blue-HEC znovu vyzráža s 20 ml 1 % vodného roztoku chloridu sodného pri teplote 4 °C a znovu odcentrifuguje. Toto sa opakuje 6 krát, až kým je supernatant bezfarebný. Získaná Cibacron Blue-HEC sa rozpustí v 20 ml destilovanej vody a dialyzuje po dobu 24 h proti
233 088 destilovanej vodě. Po oddělení nerozpustných podielov odfiltrováním sa získaný modrý roztok odpaří na vákuovej rotačnej odparke do sucha pri tlaku 5 kPa* po přidaní a znovu odpaření etanolu a potom acetonu sa získá suchý Cibacron Blue-HEC (15,2 mg) s obsahom 68 yumólu Cibacron Blue-HEC/g.
Přiklad 2
Postup podlá příkladu 1 s tým rozdielom, že sa použije HEC (Mw = 41 OOO) a 6,6 mg farbiva Cibacron Blue 3G-A, Zafarbená HEC sa oddělí od nenaviazaného farbiva na koloně naplnenej dextránom sieťovaným epichlórhydrínom (Sephadex G-25 fine). Objem náplně kolony je 100 ml, výška 21,5 cm a priemer 2,5 cm. Eluuje sa destilovanou vodou, pri prietoku eluátu kolonou 30 až 35 ml/h Ziska sa suchý Cibacron Blue-HEC (21 mg) s obsahom 79,3 yumólu Cibacron Blue/g.
Příklad 3
Postup podlá příkladu 1 s tým rozdielom, že sa použije HEC (Mw = 540 000) a 6,6 mg farbiva Cibacron Blue 3G-A. Získá sa suchý Cibacron Blue-HEC (17,8 mg) s obsahom 60,6 yuroólu Cibacron Blue/g.
Příklad 4
Postup podlá příkladu 1 s tým rozdielom, že sa použije HEC (Mw 350 000, 8 mg farbiva Cibacron Blue 3G-A a teplota 70 °C. Získá sa suchý Cibacron Blue-HEC (16,5 mg) s obsahom 65,4 ^umól Cibacron Blue/g.
Vynález má využitie v enzýmovom inžxnierstve a v biochémii a to pri izolácii a purifikácii enzýmov alebo ako substráty a inhibitory enzýmami katalyzovaných reakcii.
PREDMET VYNÁLEZU
Claims (2)
1. Trojsodná sol 6- 2-sulfo-4-(4-amino-3-sulfo-l-antrachinónamino) anilino-4-(x-sulfoanilino)-1,3,5-triazín-2-yl-hydroxyetylcelulózy, kde x je poloha substituenta 2 alebo 4 vzorca I kde R představuje hydroxyetylcelulózu so stupňom substitúcie
A 5
2,5 a priemernou molekulovou hmotnostou 2.10 až 5,4.10 .
2. Spósob pripravy podía bodu 1 vyznačujúci sa tým, že jednotlivé frakcie hydroxyetylcelulózy reagujú vo vodnom prostředí a za přítomnosti 1,7 % chloridu sodného pri teplote 70 až 80 °C a po dobu dvoch hodin s trojsodnou solou 2-chlór-6- 2-sulfo-4(4-araino-3-sulfo-l-antrachinón-amino) anilino-4-(x-sulfoanilino) -1,3,5-triazínu vzorca II pri váhových pomeroch trojsodná sol
50; Na (II)
7 233 088
2-chló r-6- 2-sulfo-4-(4-amino-3-sulfo-l-ant rachinón-amino) anilino-4-(x-sulfoanilino)-l,3,5-triazínu : hydroxyetylcelulóza :
: uhličitan sodný = 0,2 až 0,32 : 1 : 0,58 až 0,69, načo sa zafarbená hydroxyetylcelulóza oddělí od nenaviazaného farbiva bu3 gólovou chromatografiou (do priemernej molekulovej hmotnosti Mw 100 000) alebo 6 až 7 násobným zrážaním a následnou centrifugáciou z 0,5 % vodného roztoku chloridu sodného (nad Mw 100 000) .
Oprava ve vytištěných popisech vynálezu
V popisu vynálezu fe autonMau n&všááeaX fe· 233 G&.i < rv 4026*83 > je cnybtó vytištěno sezináredoí sa třídění·
Správné i Xnt«Olž β 06 8 l>/0®
C Oř B 13/06
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS402683A CS233088B1 (cs) | 1983-06-03 | 1983-06-03 | ) Trojsodná soí 6- [2-sulfo-4-(4-amino-3-sulfo-l-antrachinón- amino/j anilino-4-(x- sulfoanilino)-l,3,5‘-triazín-2-yl-hydroxyetylcelulózy a sposob jej přípravy |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS402683A CS233088B1 (cs) | 1983-06-03 | 1983-06-03 | ) Trojsodná soí 6- [2-sulfo-4-(4-amino-3-sulfo-l-antrachinón- amino/j anilino-4-(x- sulfoanilino)-l,3,5‘-triazín-2-yl-hydroxyetylcelulózy a sposob jej přípravy |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS233088B1 true CS233088B1 (cs) | 1985-02-14 |
Family
ID=5382041
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS402683A CS233088B1 (cs) | 1983-06-03 | 1983-06-03 | ) Trojsodná soí 6- [2-sulfo-4-(4-amino-3-sulfo-l-antrachinón- amino/j anilino-4-(x- sulfoanilino)-l,3,5‘-triazín-2-yl-hydroxyetylcelulózy a sposob jej přípravy |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CS (1) | CS233088B1 (sk) |
-
1983
- 1983-06-03 CS CS402683A patent/CS233088B1/cs unknown
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JPS5841836B2 (ja) | 可溶性肝臓ウリカ−ゼ、その製法及び尿酸の測定法 | |
| JPH05137570A (ja) | サツカライド変性された水溶性の蛋白質−複合体 | |
| Kaul et al. | Isolation of six novel phosphoinositol-containing sphingolipids from tobacco leaves | |
| JPS62126977A (ja) | 水溶性の安定化されたペルオキシダ−ゼ誘導体、及びその製法 | |
| US4088639A (en) | Macromolecular adenine nucleotide derivatives | |
| US6703496B1 (en) | Starch phosphates, method for the production thereof and their use | |
| Turková et al. | Immbilization on cellulose in bead form after periodate oxidation and reductive alkylation | |
| CS233088B1 (cs) | ) Trojsodná soí 6- [2-sulfo-4-(4-amino-3-sulfo-l-antrachinón- amino/j anilino-4-(x- sulfoanilino)-l,3,5‘-triazín-2-yl-hydroxyetylcelulózy a sposob jej přípravy | |
| EP0943627A1 (en) | Method for preparation of amphoteric guar gum derivatives | |
| CA1277658C (en) | Anionically modified polysaccharides, process for their preparation and the use thereof | |
| Coughlin et al. | Preparation and properties of soluble–insoluble nicotinamide coenzymes | |
| Yamazaki et al. | A New Method of Chemical Modification of N6‐Amino Group in Adenine Nucleotides with Formaldehyde and a Thiol and Its Application to Preparing Immobilized ADP and ATP | |
| US2856398A (en) | Carboxymethyl dextran-iron complexes | |
| Wood et al. | Characterization of a virus-inhibiting polysaccharide from Phytophthora infestans | |
| AU5853896A (en) | Synthesis of glycopolymers | |
| Rupérez et al. | Extracellular β-malonoglucan from Penicillium erythromellis | |
| US3000872A (en) | Preparation of carboxymethyl dextran-iron complexes | |
| CS261080B1 (sk) | Trojsodná sol' 0-(4-(N-etyl-N-fenylamíno)-6-(4-metyl-2-sulfobenzén- -l-azo-2-(l-hydroxy-3,6-bissulfonát-l-yl)amíno]-l,3,5-triazín-2-yl}škrobu | |
| Gemeiner et al. | Preparation of p-aminobenzyl cellulose and its utilization for immobilization of enzymes | |
| US4929556A (en) | Enzyme immobilization with polysulfonium salts | |
| CS240463B1 (cs) | Trojsodná sol' 4-(N-etyl-N-f0nylamíno)-8-(4-meíyll-2-sulíobenzén-l- -azo-2-(l-hydroxy-3,6-bÍ8Sulfonaft-l-yl)antíno ]-1,3,5-triazín- -2-ylhydroxyetylcelulózy a sposob jej přípravy | |
| CS229094B1 (cs) | Trojsodná sof 6-[2-sulfo-4-(4-amino-3-siilfo-1-antrachinón-amino)]- anilino-4-(x-sulfoanilino)-1,3,5-triazín-2-yl-hydroxyetylškrobu a sposob jeho přípravy | |
| CS254162B1 (cs) | Sposob přípravy rozpustného cbromolytickéha substrátu na stanovenie (3(l-*3) glukanázy | |
| US3176007A (en) | Process employing chelating agents to prepare sludge-free hydroxyalkyl starch ethers | |
| US5399681A (en) | Method for preparing N6 -substituted NAD, NADP or FAD |