CS262560B1 - Thermotolerant scidotolerant methylotrophic yeast strain of the microorganism Hanaenula sp. CCY 38—34—1 - Google Patents
Thermotolerant scidotolerant methylotrophic yeast strain of the microorganism Hanaenula sp. CCY 38—34—1 Download PDFInfo
- Publication number
- CS262560B1 CS262560B1 CS877606A CS760687A CS262560B1 CS 262560 B1 CS262560 B1 CS 262560B1 CS 877606 A CS877606 A CS 877606A CS 760687 A CS760687 A CS 760687A CS 262560 B1 CS262560 B1 CS 262560B1
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- strain
- methanol
- yeast
- ccy
- alcohol oxidase
- Prior art date
Links
Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
Abstract
Kvasničný kmen mikroorganismu Hanaenula sp. využívá k růstu metanol, etanol, sacharidy a směsi metanolu se sacharidy, sulfitovými výluhy, melasou a hydrolyzáty lignosulfitových odpadů, přičemž produkuje za zvýšených fermgntačnich teplot, tj. 38 až 40 °C v kyselém prostředí pH 2,8 až 3,5 za nesterilnich podmínek vysoké množství biomasy bohaté na bílkoviny a termostabilní enzym alkohol oxidázu, kmen je uložen ve sbírce kultur kvasinek Chemického centra SAV v Bratislavě /CC/ pod číslem CCY 38-34-1. Kmen je použitelný jako producent biomasy vhodné jako bílkovinné krmivo pro výkrm hospodářských zvířat a jako producent termostabilního enzymu alkohol oxidázy, který se používá zejména k detekci etanolu v biologických materiálech, jako nezbytná složka detekčních činidel, enzymových a kvasničných elektrod i jako bělicí složka do pracích prášků.The yeast strain of the microorganism Hanaenula sp. uses methanol, ethanol, carbohydrates and mixtures of methanol with carbohydrates, sulfite leachates, molasses and hydrolysates of lignosulfite waste for growth, while producing at elevated fermentation temperatures, i.e. 38 to 40 °C in an acidic environment pH 2.8 to 3.5 under non-sterile conditions a high amount of biomass rich in proteins and the thermostable enzyme alcohol oxidase, the strain is stored in the collection of yeast cultures of the Chemical Center of the Slovak Academy of Sciences in Bratislava /CC/ under the number CCY 38-34-1. The strain is usable as a producer of biomass suitable as protein feed for fattening livestock and as a producer of the thermostable enzyme alcohol oxidase, which is used mainly for the detection of ethanol in biological materials, as an essential component of detection reagents, enzyme and yeast electrodes and as a bleaching component in washing powders.
Description
Vynález se týká termotolerantního a acidotolerantního metylotrofního kvasničného kmene mikroorganismu Hansenula sp.The invention relates to a thermotolerant and acidotolerant methylotrophic yeast strain of the microorganism Hansenula sp.
Kmen kvasničného mikroorganismu označeného Hansenula sp. 3 podle vynálezu využívá za termofilních podmínek ke svému růstu metanol, etanol, sacharidy a směsi metanolu se sacharidy, sulfitovými výluhy, melasou a hydrolyzáty lignocelulózových odpadů, přičemž produkuje na těchto substrátech v kyselém prostředí za nesterilnich podmínek biomasu bohatou na bílkoviny a esenciální aminokyseliny a na metanolu nebo na směsích s metanolem termostabil ní enzym alkohol oxiďázu. Kmen je uložen ve sbírce kultpr kvasinek Chemického centra SAV v Bratislavě /CC/ pod číslem CCY 38-34-1.A strain of yeast microorganism designated Hansenula sp. 3 according to the invention utilizes methanol, ethanol, carbohydrates and mixtures of methanol with carbohydrates, sulphite leaches, molasses and hydrolysates of lignocellulosic waste under thermophilic conditions to produce protein and essential amino acid-rich biomass on these substrates under acidic conditions of methanol or on mixtures with methanol the thermostable enzyme alcohol oxidase. The strain is deposited in the yeast culture collection of the Chemical Center of the Slovak Academy of Sciences (CC) under number CCY 38-34-1.
Charakteristickým znakem tohoto nového průmyslového kvasničného kmene mikroorganismu je schopnost růstu v širokém rozmezí kultivačních teplot 28 až 50 °C, s výhodou při 38 až 40 °C, v širokém rozmezí pH 2,8 až 4,5 média, s výhodou při pH 3,0 až 3,5, což umožňuje vést výrobní proces kvasničných bílkovin s maximálními růstovými parametry i obsahem bílkovin a alkohol oxidázy za nesterilnich podmínek při snížených nárocích na chlazení fermentační kapaliny v průměhu kultivace.A characteristic feature of this new industrial yeast strain is the ability to grow over a wide range of culture temperatures of 28 to 50 ° C, preferably at 38 to 40 ° C, over a wide pH range of 2.8 to 4.5 medium, preferably at pH 3, 0 to 3.5, which enables the production process of yeast proteins with maximum growth parameters as well as protein and alcohol oxidase content to be conducted under non-sterile conditions with reduced demands on the cooling of the fermentation liquid during cultivation.
Nový průmyslový kvasničný kmen je vhodný jako producent biomasy, která je použitelná jako hodnotné bíkovinné krmivo pro hospodářská zvířata a jako producent.termostabilního enzymu alkohol oxidázy, která je použitelná k detekci etanolu a metanolu v biologických materiálech do detekčních směsí a enzymových a kvasničných elektrod i jako bělicí složka do pracích prášků.The new industrial yeast strain is suitable as a biomass producer, useful as a valuable protein feed for livestock and as a producer of the thermostable enzyme alcohol oxidase, useful for detecting ethanol and methanol in biological materials into detection mixtures and enzyme and yeast electrodes as well as bleaching component for washing powders.
Kmen Hansenula sp. 3 byl získán v laboratoři selekcí směsné kultury mikroorganismů izolované ze zahradní půdy na médiu s metanolem a následným dvojstupňovým šlechtěním.The Hansenula sp. 3 was obtained in the laboratory by selecting a mixed culture of microorganisms isolated from garden soil on a medium with methanol and subsequent two-stage breeding.
Šlechtění v prvém stupni bylo provedeno pomocí selekčního tlaku fermentačních teplot vyšších než 30 °C. Postupným zvyšováním teploty kultivace po 2 °C a kultivací kultury tak dlouho až rostly buňky při vyšší teplotě na médiu s metanolem stejnými růstovými parametry jako buňky při teplotě o 2 °C nižší, byly postupně selektovány kultury buněk rostoucí optimálně při stále vyšších fermentačních teplotách. Termotolerantní mutant Hansenula sp. byl získán selekcí rychle rostoucích buněk při 40 °C. Po prověření stálosti nabytné termotolerance byl mutant v druhém stupni šlechtění podroben selekčnímu tlaku nízkých pH média v chemostatu při limitaci růstu buněk metanolem při 40 °C. Postupným snižováním pH média při vyšších zřeáovacích rychlostech byl konečně získán termotolerantní a acidotolerantni kmen Hansenula sp. 3.The breeding in the first stage was carried out by selection pressure of fermentation temperatures higher than 30 ° C. By gradually raising the culture temperature to 2 ° C and culturing the culture until the cells were grown at a higher temperature on the medium with methanol with the same growth parameters as the cells at 2 ° C lower, cell cultures growing optimally at increasingly higher fermentation temperatures were gradually selected. Thermotolerant mutant Hansenula sp. was obtained by selecting fast growing cells at 40 ° C. After checking the stability of the acquired thermotolerance, the mutant in the second breeding stage was subjected to the selective pressure of low pH medium in the chemostat, limiting the cell growth by methanol at 40 ° C. By gradually decreasing the pH of the medium at higher aging rates, the thermotolerant and acidotolerant Hansenula sp. 3.
Dále je uvedena charakteristika vlastnosti nového termotolerantního a acidotolerantního kmene Hansenula sp. 3.The characteristics of the new thermotolerant and acidotolerant strain Hansenula sp. 3.
Morfologická a fysiologická charakteristika:Morphological and physiological characteristics:
Povrch kolonií nového kmene na sladinkovém agaru při 40 °C po 48hodinové inkubaci je hladký, barvy bílé až světle krémové.The surface of the colonies of the new strain on the malt agar at 40 ° C after a 48-hour incubation is smooth, white to pale creamy in color.
Sporulace positivní:Positive sporulation:
Buňky se množí pučením, po 48hodinové inkubaci pfi 40 °C jsou sferoidní až mírně oválné, velikosti 2,5 až 4 /un.The cells multiply by budding, after 48 hours incubation at 40 ° C they are spheroid to slightly oval, size 2.5 to 4 / un.
Kmen fermentuje glukosu a asimiluje glukosu, sacharosu, xylosu, mannosu, rlbosu, maltosu, cellobiosu, manitol, ribitol, glycerol, metanol, etanol a dusičnan draselný.The strain fermentes glucose and assimilates glucose, sucrose, xylose, mannose, rlbose, maltose, cellobiosis, mannitol, ribitol, glycerol, methanol, ethanol and potassium nitrate.
K optimálnímu růstu na metanolu vyžaduje malá množství thlaminu a biotinu.It requires small amounts of thlamine and biotin for optimal growth on methanol.
Optimální růstová teplota je 38 až 40 °C. Maximální růstová teplota je 50 °C.The optimum growth temperature is 38-40 ° C. The maximum growth temperature is 50 ° C.
Kmen roste na minerálním médiu s metanolem, etanolem, sacharidy a směsemi různých substrátů s maximálními růstovými výtěžky i· obsahem bílkovin a enzymu alkohol oxidázy v Širokém rozmezí pH 2,8 až 4,5.The strain grows on mineral medium with methanol, ethanol, carbohydrates and mixtures of various substrates with maximum growth yields as well as protein and alcohol oxidase enzymes in a wide pH range of 2.8 to 4.5.
V submersních kultivacích roste kmen homogenně, bez růstu buněk na povrchu stěn kultivač nich nádob.In submersible cultures, the strain grows homogeneously, without cell growth on the wall surfaces of the cultivation vessels.
Nový produkční kmen se odlišuje od známých metylotrofních kmenů Hansenula vyšší termotolerantností a acidotolerantnosti.The new production strain differs from the known methylotrophic Hansenula strains by higher thermotolerance and acidotolerance.
Kmen Hansenula sp. 3 roste na minerální půdě, která obsahuje 0,5 až 5 % metanolu nebo etanolu, ale i glycerolu, glukosy, xylosy, sacharosy, mannosy, ribosy, směsi metanolu se sacharidy, sulfitovými výluhy, melasou, hydrolyzáty lignocelulózových odpadů, dále chlorid amonný nebo síran amonný, amoniak, fosforečnan draselný nebo sodný i amonný, kyselinu fosforečnou, síran hořečnatý, chlorid sodný ve vodovodní vodě, déle nízká množství kvasničného výluhu nebo melasových výpalků a nepatrné množství biotinu nebo desbiotinu.The Hansenula sp. 3 grows on mineral soil containing 0.5 to 5% of methanol or ethanol, but also glycerol, glucose, xylose, sucrose, mannose, ribose, methanol-saccharide mixtures, sulphite leaches, molasses, hydrolysates of lignocellulosic waste, ammonium chloride or ammonium sulphate, ammonia, potassium or sodium and ammonium phosphates, phosphoric acid, magnesium sulphate, sodium chloride in tap water, longer low levels of yeast extract or molasses stillage and a small amount of biotin or desbiotin.
Nejvyšších výtěžností biomasy i nejvyšších růstových rychlostí buněk dosahuje kmen na minerální půdě s 0,05 až 0,2 % metanolu nebo etanolu, ale i sacharidů a jejich směsí při 38 až 40 °C při obohacení minerální půdy o kvasničných výluh nebo melasové výpalky (100 až 200 mg.L-1) a biotin (10 jig.L-1) .The highest biomass yields and the highest cell growth rates are achieved on mineral soil with 0.05 to 0.2% methanol or ethanol, but also carbohydrates and their mixtures at 38 to 40 ° C when enriching mineral soil with yeast extract or molasses stillage (100 up to 200 mg.L -1 ) and biotin (10 µg.L -1 ).
Při růstu v chemostatu při limitaci růstu metanolem se nový kmen vyznačuje 36 až 38% výtěžnosti na substrát při 40 °C a pH 3,0. Biomasa obsahuje 55 % dusíkatých látek (hrubých bílkovin) bohatých na esenciální aminokyseliny zejména na lysin. Při vyšších zředovacích rychlostech na metanolu v chemostatu nehromadí v médiu kyselinu mravenči.When growing in a chemostat while limiting growth with methanol, the new strain is characterized by 36-38% yield per substrate at 40 ° C and pH 3.0. Biomass contains 55% crude protein (crude protein) rich in essential amino acids, especially lysine. At higher dilution rates on methanol in the chemostat, formic acid does not accumulate in the medium.
Kmen produkuje na metanolu nebo na směsích s metanolem zvýšená množství enzymu alkohol oxidázy. Zejména při růstu v chemostatu za limitace růstu metanolem, při nízkých zředovacích rychlostech D 0,03 až 0,1 při 40 °C a pH 3,0 obsah alkohol oxidázy v buňkách dosahuje 16 až 20 % obsahu extrahovatelných bílkovin.The strain produces increased amounts of the enzyme alcohol oxidase on methanol or on mixtures with methanol. Especially when grown in a chemostat with growth limits by methanol, at low dilution rates D of 0.03 to 0.1 at 40 ° C and pH 3.0, the alcohol oxidase content in the cells reaches 16-20% of the extractable protein content.
Alkohol oxidáza nového termotolerantního a acidotolerantního kmene vykazuje maximální aktivitu při 45 až 50 °C a značnou termostabilnost.The alcohol oxidase of the novel thermotolerant and acidotolerant strain shows maximum activity at 45-50 ° C and considerable thermostability.
Nový kmen umožňuje vsádkovou i kontinuální přípravu kvasničné biomasy, použitelnou bud jako hodnotné mikrobni bílkoviny nebo jako zdroj enzymu alkohol oxidázy, nebo obou současně, za nesterilních podmínek při nízkých pH média 3,0 až 3,5 a vysokých teplot 38 až 40 °C při zachování maximálních růstových parametrů i obsahu bílkovin a alkohol oxidázy.The new strain allows batch and continuous preparation of yeast biomass, usable either as valuable microbial proteins or as a source of the alcohol oxidase enzyme, or both, under non-sterile conditions at low pH media of 3.0 to 3.5 and high temperatures of 38 to 40 ° C preservation of maximum growth parameters as well as protein content and alcohol oxidase.
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS877606A CS262560B1 (en) | 1987-10-22 | 1987-10-22 | Thermotolerant scidotolerant methylotrophic yeast strain of the microorganism Hanaenula sp. CCY 38—34—1 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS877606A CS262560B1 (en) | 1987-10-22 | 1987-10-22 | Thermotolerant scidotolerant methylotrophic yeast strain of the microorganism Hanaenula sp. CCY 38—34—1 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS760687A1 CS760687A1 (en) | 1988-08-16 |
| CS262560B1 true CS262560B1 (en) | 1989-03-14 |
Family
ID=5425542
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS877606A CS262560B1 (en) | 1987-10-22 | 1987-10-22 | Thermotolerant scidotolerant methylotrophic yeast strain of the microorganism Hanaenula sp. CCY 38—34—1 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CS (1) | CS262560B1 (en) |
-
1987
- 1987-10-22 CS CS877606A patent/CS262560B1/en not_active IP Right Cessation
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CS760687A1 (en) | 1988-08-16 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US4472504A (en) | Hyperproducing cellulase microorganism | |
| Moyer et al. | Penicillin: VIII. Production of penicillin in surface cultures | |
| Fukumura | Screening, Classification and Distribution of l-α-Amino-ε-caprolactam-hydrolyzing Yeasts | |
| WO1984004542A1 (en) | A method for producing ethanol from xylose-containing substance | |
| CN101855973B (en) | A kind of laccase-producing fungus strain albicans and its cultivation method and application | |
| Fukumura | Hydrolysis of L-α-amino-ε-caprolactam by yeasts | |
| SE453836B (en) | BIOLOGICALLY CLEAN CULTURE OF SACCHAROMYCES CEREVISIAE AND ITS APPLICATION FOR HYDROLYSIS OF RAFFINOS | |
| El-Nawwi et al. | Production of single-cell protein and cellulase from sugarcane bagasse: effect of culture factors | |
| US4224410A (en) | Method for ethanol fermentation | |
| RU2220590C1 (en) | Method for obtaining fodder protein product based upon grain raw material | |
| CS262560B1 (en) | Thermotolerant scidotolerant methylotrophic yeast strain of the microorganism Hanaenula sp. CCY 38—34—1 | |
| US2557078A (en) | Enzyme production | |
| US6716617B1 (en) | Fermentation method with continuous mass cultivation of ciliates (protozoa) for producing biogenous valuable substances | |
| SU1643608A1 (en) | Strain of fungus allescheria terrestris producer of cellulases | |
| SU598933A1 (en) | Method of obtaining ferment preparation containing b-1,3 and b-1,6 glucanase | |
| JPH0121957B2 (en) | ||
| SU840099A1 (en) | Method of saccharification of starch raw material in alcohol production | |
| SU448219A1 (en) | The method of obtaining biomass | |
| SU1599431A1 (en) | Nutrient medium for cultivating fusarium graminearium as producer of galactosoxidase | |
| CS262561B1 (en) | Acidotolerant methylotrophic yeast strain of Candida boidinil CCY 29-37-9 | |
| SU1705338A1 (en) | Strain of yeast candida requinii - is a produced of alcoholdehydrogenase | |
| US2676905A (en) | Starch saccharifying enzymes high in maltase activity | |
| SU1094346A1 (en) | Ashergillus awamori vud t-2 no.f 203 strain as producer of amylolytic ferments used for saccharification starch-containing raw material in producing of alcohol and method of obtaining amylolytic ferments for saccharification | |
| SU958498A1 (en) | Process for producing alpha-mannase | |
| SU1325074A1 (en) | Strain of schizosaccharomyces pombe vkpm y-441 yeast for baking bread |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| IF00 | In force as of 2000-06-30 in czech republic | ||
| MM4A | Patent lapsed due to non-payment of fee |
Effective date: 20001022 |