CS269981B2 - Method of grippal vaccine production - Google Patents

Method of grippal vaccine production Download PDF

Info

Publication number
CS269981B2
CS269981B2 CS864197A CS419786A CS269981B2 CS 269981 B2 CS269981 B2 CS 269981B2 CS 864197 A CS864197 A CS 864197A CS 419786 A CS419786 A CS 419786A CS 269981 B2 CS269981 B2 CS 269981B2
Authority
CS
Czechoslovakia
Prior art keywords
influenza
derivative
antigen
vaccine
hana
Prior art date
Application number
CS864197A
Other languages
English (en)
Other versions
CS419786A2 (en
Inventor
Kuniaki Nerome
Akira Oya
Kunio Ohkuma
Atsuo Inoue
Original Assignee
Nat Inst Health
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Nat Inst Health filed Critical Nat Inst Health
Publication of CS419786A2 publication Critical patent/CS419786A2/cs
Publication of CS269981B2 publication Critical patent/CS269981B2/cs

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/12—Viral antigens
    • A61K39/145—Orthomyxoviridae, e.g. influenza virus
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/12—Viral antigens
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/10—Dispersions; Emulsions
    • A61K9/127—Synthetic bilayered vehicles, e.g. liposomes or liposomes with cholesterol as the only non-phosphatidyl surfactant
    • A61K9/1271—Non-conventional liposomes, e.g. PEGylated liposomes or liposomes coated or grafted with polymers
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/10—Dispersions; Emulsions
    • A61K9/127—Synthetic bilayered vehicles, e.g. liposomes or liposomes with cholesterol as the only non-phosphatidyl surfactant
    • A61K9/1271—Non-conventional liposomes, e.g. PEGylated liposomes or liposomes coated or grafted with polymers
    • A61K9/1272—Non-conventional liposomes, e.g. PEGylated liposomes or liposomes coated or grafted with polymers comprising non-phosphatidyl surfactants as bilayer-forming substances, e.g. cationic lipids or non-phosphatidyl liposomes coated or grafted with polymers
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/10—Dispersions; Emulsions
    • A61K9/127—Synthetic bilayered vehicles, e.g. liposomes or liposomes with cholesterol as the only non-phosphatidyl surfactant
    • A61K9/1277—Preparation processes; Proliposomes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/48—Preparations in capsules, e.g. of gelatin, of chocolate
    • A61K9/50—Microcapsules having a gas, liquid or semi-solid filling; Solid microparticles or pellets surrounded by a distinct coating layer, e.g. coated microspheres, coated drug crystals
    • A61K9/5005—Wall or coating material
    • A61K9/5063—Compounds of unknown constitution, e.g. material from plants or animals
    • A61K9/5068—Cell membranes or bacterial membranes enclosing drugs
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A61P31/16—Antivirals for RNA viruses for influenza or rhinoviruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
    • A61K2039/55511—Organic adjuvants
    • A61K2039/5555—Muramyl dipeptides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
    • A61K2039/55511—Organic adjuvants
    • A61K2039/55555—Liposomes; Vesicles, e.g. nanoparticles; Spheres, e.g. nanospheres; Polymers
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
    • C12N2760/00011—Details
    • C12N2760/16011—Orthomyxoviridae
    • C12N2760/16111—Influenzavirus A, i.e. influenza A virus
    • C12N2760/16134—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S436/00—Chemistry: analytical and immunological testing
    • Y10S436/829—Liposomes, e.g. encapsulation
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10T—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER US CLASSIFICATION
    • Y10T428/00—Stock material or miscellaneous articles
    • Y10T428/29—Coated or structually defined flake, particle, cell, strand, strand portion, rod, filament, macroscopic fiber or mass thereof
    • Y10T428/2982—Particulate matter [e.g., sphere, flake, etc.]
    • Y10T428/2984—Microcapsule with fluid core [includes liposome]

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Dispersion Chemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)

Description

Vynález se týká způsobu výroby chřipkové vakcíny.
Protože účinnost v současné době používaných chřipkových HA vakcín je vystavena fluktuaci v důsledku mutací, ke který· dochází na HA (hemaglutininu) molekuly převládajícího viru, je velice žádoucí vyvinout efektivnější vakcíny než jsou dosavadní vakcíny· □eden ze současných přístupů vývoje chřipkové vakcíny je zaměřen na složku vakcíny sestávající z HA a NA (neuraminidáza) jako hlavních složek, tj· chřipková hana vakcína· Výsledná vakcína obsahující čištěný HA a NA je uvažována vzhlede* к bezpečnosti a účinnosti jako ideální vakc/na a byla již zavedena do praktického používání v Anglií· Ve skutečnosti je však účinnost takové vakcíny ještě nepostačující·
Vynález se zvláště týká způsobu výroby vakcíny sestávající z umělých váčkovítých částic komplexu HANA odvozeného od chřipkového viru, známého jako aktivní složka vakcíny, a derivátu muramyldipeptidu (dála označováno jako deriváty MOP) známého jako syntetická pomocná látka, přičemž umělé částice mají podobnou velikost a tvar ve srovnání s přirozeně se vyskytujícími Částicemi chřipkového viru·
Na druhé straně je jiný přístup zaměřen na použití pomocných látek· Výsledkem této práce bylo vyvinutí muramyldipeptidu (MOP), jakož i četných druhů MDP derivátů, které zlepšily immunopotenciaci a podobně, příslušnou chemickou modifikací MDP jako nových pomocných látek· Vzhledem к těmto MDP derivátům, uváděným například Коtáni· ve spol. v YAKUGUKU ZASSHI 103/1/, 1-27, 1983, s tím, že 6-0-/2-tetradecyIhexadekanoly/ MDP byl podán morčatům spolu s chřipkovou vakcínou (tj· HANA vakcínou) obsahující vysoce čištěné HA a NA jako hlavní složky, a že bylo dosaženo efektivního efektu adjuvantů· Avšak HANA vakcína získaná jednoduchým přidáním těchto MOP derivátů jako pomocných látek к vakcínš nevede к vakcíně o adekvátní účinností·
V důsledku toho je primárním záměrem tohoto vynálezu získat novou chřipkovou vakcínu, která má ve srovnání s obvyklou vakcínou zlepšenou immunogenitu.
Dalším záměrem tohoto .vynálezu je získat novou chřipkovou vakcínu obsahující umělé váčkovíté částice komplexu HANÁ antigenu a derivátu MDP, jenž má téměř stejnou velikost částic a tvar jako částice přirozeného viru·
Tyto í jiné znaky tohoto vynálezu budou zřejmé z následujícího popisu·
Vynález poskytuje chřipkovou vakcínu obsahující umělé váčkovíté Částice komplexu HANA antigenu a nejméně jeden derivát MDP, kde MDP derivát vytváří membránu částice (odpovídající lipidové membráně částice přirozeného viru) na jejímž povrchu je HANA antigen vázán na derivát MDP za vzniku komplexu, který se takto liší od vakcíny získané prostým smícháním vakc/ny a pomocnou látkou· Umělé váčkovíté Částice komplexu HANA antigenu a MDP derivátu získané podle vynálezu mají tedy téměř stejnou velikost částic a stejný tvar jako Částice přirozeného viru.
Obr· 4 představuje srovnání pásů hustoty metodou stanovení hustoty sacharozy gradientním odstředěním ke zýištění tvorby komplexu, získaného způsobem podle vynálezu·
Předmětem vynálezu je tedy způsob výroby chřipkové vakcíny tak, Že se smíchá chřipkový HANA antigen a alespoň jeden deriyát__muramylpeptldu, a to ester muramylpeptidu s vyšší alifatickou kyselinou obecného vzorce I
kde
Q znamená zbytek synthetické vyšší alifatické kyseliny o 20 až 60 atomech1 uhlíku,
A * znamená L-alanin, L-serin nebo glycin a
isoGln znamená d-formu isoglutaminu, nebo acylovaný derivát muramylpeptidu obecného vzorce II
(II)
CHCO - X - NHCHCH2 CH2CO - ϊ
D kde
X znamená aminokyselinu,
Y znamená zbytek -HN-A nebo zbytek «1
-NHCH(CH)n -NHCO-A, kde znamená atom vodíku, nižší alkyl, karboxamidoskupinu nebo karboxyl, n znamená Číslo 1 až 6,
A znamená nasycený nebo nenasycený alifatický uhlovodíkový zbytek o 8 až 30 atomech uhlíku a
O znamená d-formu, při teplotě do 30 °C v pufru o pH 5,5 až 9, získaná směs se solubilizuje povrchově aktivním Činidlem, odstranitelným dialýzou, přičemž hmotnostní poměr chřipkového antigenu к derivátům muramyldipeptidu Je 1 : 30 až 0,8 : 50, hmotnostní poměr povrchově aktivního činidla к derivátu muramyldipeptidu je do 10 : 1, solubilizace se provádí za přítomnosti například cholesterolu, lecithinu, dicetylfosfátu nebo směsi těchto látek, a následně se odstraní povrchově aktivní činidlo dialýzou v pufru o pH 5,5 až 9 při osmotickém tlaku alespoň 250 mosm/kg za získání chřipkové vakcíny, obsahující umělé váčkovité částice komplexu chřipkového antigenu a derivátu muramyldipeptidu.
Hmotnostní poměr derivátů muramylpeptidu к cholesterolu se pohybuje v rozmezí : 50 až 30 : 50.
Hmotnostní poměr derivátu muramyldipeptidu к lecithinu se pohybuje v rozmezí : 10 až 1 : 50 a hmotnostní poměr lecithinu к dicetylfosfátu v rozmezí 1 : 0,05 až : 2.
CS 269981 82
S výhodou, se к výrobě vakc/ny užije chřipkového antigenu, který byl získán čistěním viru chřipky·
Muranýldipeptidové deriváty, kterých Je možno užít i při provádění způsobu podle vynálezu byly popsány například ve zveřejněných Japonských patentových přihláškách (Kokai) 6* 52-46020, 52-158812, 55-19236, 55-28932, 55-28933, 56-18996, 56-49396 a 60-78997.
Výhodně Je použití 6-O-(2-tetradecylhexadekanoyl)muramyldipeptid, označovaný B30-DMP. Tento ester Je popsán ve zveřejněné Japonské patentové přihláSce C. 54-130517.
Výhodný Je rovněž N* -(N-acetylmuramyl-L-alanyl-D-isoglutaminyl)-N^-steflroy1-L-lysin, označovaný Jako MOP-Lys (K18).
Dále Je výhodné použití N^-(N-acetylmuramyl-N-methyl-L-alanyl-D-isoglutaminy 1)-N^ -stearoyl-L-lysin, označovaný MOP (MeAla)-Lys(ie)t který Je popsán ve zveřejněné Japonské patentové přihlášce č· 60-78997·
HANA antigen, používaný při provádění způsobu podle vynálezu Je možno získat čistěním chřipkového viru odstředěním pří vysoké rychlosti nebo chemickým zpracováním allantoidní tekutiny, získané z vajec, infikovaných chřipkovým virem, solubilizací čištěného viru neiontovým povrchově aktivním činidlem, například na bázi Tritonu x-100 nebo NP-40, které Je možno vyjádřit obecným vzorcem
přičemž v NP-40 znamená n 9j
Triton X Je směs látek, v nichž n znamená 9 a 10, anlontovým povrchově aktivním činidlem, například desoxycholátem sodným nebo cholátem sodným nebo kationtovým povrchově aktivním činidlem, například cetyl trimethylaminiovou soli, které Je možno odstranit dialýzou, nebo rozkladem čištěného viru organickým rozpouštědlem, například etherem a potom dalSím čistěním takto získaného materiálu stanovením hustoty sacharózy gradientním odstředěním, afinitní chromatografií nebo podobně.
Vynález bude osvětlen následujícími příklady.
Příklad i
Příprava chřipkového HANA antigenu
Chřipkový virus A(Bangkok/l)79 (H3N2) byl naočkován do 50 000 Jedenáct dnů starých slepičích vajec a byl pěstován 48 hodin při teplotě 34 °C. Pak byla vejce na 1 den zchlazena na teplotu 4 °C a ze zchlazených vajec bylo získáno 500 1 allantoidní tekutiny· Tři litry čištěného viru byly získány při koncentraci 400 ^ug N/ml tak, že tato tekutina byla podrobena vysokoobrátkovému odstředění rychlosti 23 000 otáček za minutu po 90 minut (typ 55-Pi Hitachi Ltd) za chlazení, pak byla odstředěna při 6000 otáčkách za minutu a pak bylo užito metody gradientního odstředění při použití až 50 % hmot, roztoku sacharózy a 35 000 otáček za minutu na dobu 60 minut (odstředivka Kli, Electro-Nucleonics lne.)· pak byl přidán Triton x-100 к výslednému roztoku viru v takovém množství, že Jeho konečná koncentrace byla i % hmot, a virus byl solubilizován energickým mícháním, Čímž bylo získáno 1 litr čištěného HANA antigenu s koncentrací bílkoviny 400 yug N/ml metodou gradientního odstředění při použití koncentrace až do 50 % hmotnostnícn sacharózy (odstředivka Kil Jako svrchu), 35 000 otáček/min., 50 minut.
Při míšení antigenu HANA a muramyldipeptidového derivátu byl užit pufr o pH! 7,0 až 7,4 a složky byly míšeny při teplotě 20 až 25 °C. Téhož pufru a téže teploty bylo užito i v následujícím příkladu 2·
Příprava vakcíny a test na imunitu
Za použití svrchu získaného roztoku přečištěného HANA antigenu byly připraveny čtyři druhy vzorků vakcín, jejichž složení Je uvedeno v tabulce 1· Vakcíny byly získány následujícím způsobem:
Příslušné složky byly smíchány a potom byl přidán oktylglukosid v takovém množství, aby konečné koncentrace glukosidu byla 3 % hmot· po solubilizaci složek byla provedena obvyklým způsobem dialýza ve fosfátovém pufru· Koncentrace HANA antigenu v každém takto získaném vzorku byla nastavena na 0,8 ^ug N/ml a potom provedeno očkování v dávce 0,5 ml/myš do peritonea každé skupiny 15 DDY myší /stáří 4 týdnů j/. Potom byly myši rozděleny do tří skupin po pěti, a myším příslušné skupiny byla odebírána po dobu Jednoho, dvou a tří týdnů krev a byly prováděny hemaglutininové inhibiční testy podle metody WHO za účelem změření schopnosti tvoření protilátek.
DDY myši byly také immunizovány výše uvedenými vzorky metodou popsanou vpředu a infikovány virem kmene užitým к přípravě vakcíny o dva týdny později. Test na vznik plaků pomocí MDCK buněk byl prováděn na plicích za účelem změření množství viru v plicích. Získané výsledky Jsou uvedeny v tabulce 1.
T a b u 1 к a 1
Schopnost tvorby protilátek /Н1 hodnota/ 1 Test ochrany před infekcí výsledek
Vzorek č· Přípravek 1 týden 2 týdny 3 týdny přítomnost zápalu plic množství virů /počet/ml
1 HANA B30-MDP 0,8 50 /UgN /Ug < 16 64 128 nepřítomen 10 -
2 HANA B30-MDP cholesterol 0,8 50 50 /UgN /ug /ug 64 128 256 nepřítomen 10 >
> 3 HANA B30-MDP lecithin dicetyl-řosfát 0,8 50 250 250 /UgN /ug /ug /«g <16 32 64 nepřítomen 10 > ‘ i |
4 HANA MDP-LYS Д18/ lec ithin dicetylfos fát 0,8 50 250 250 /Ufl /ug /ug 32 64 512 nepřítomen í 10 > 1 í
5 Srovnávací příklad HANA 0,8 /UgN <16 16 32 př í tomen 2,9 x 1O3 i _______i
CS 269981 82
Oak Je zřejmé z výsledků uvedených v tabulce 1, nají všechny vakcíny podle vynálezu vyšší schopnost tvorby protilátek ve srovnání s příklady obsahující·! jenoo HANA.
Z pozorování vzorků vakc/n z příkladů č. 1, 2 a 4 pomocí elektronového mikroskopu bylo potvrzeno* že umělé váčkovité částice MDP derivátu, které sají stejnou velikost a stejný tvar Jako částice přirozeného chřipkového viru, na jejichž povrchu Jsou HANA antigeny vázány na MDP derivát, takže vzniká komplex.
Za účelem průkazu, zdali výše uvedený vzorek č, 1 vytváří kcmplex, byly měřeny hustoty HANA-antigenu, celkového viru a vzorku č\ 1 metodou gradlentniho odstředění pro zjištění hustoty sacharozy. Dek Je zřejmé z výsledků uvedených na obr. 4, má vzorek č. 1 pásy v odlišných plochách ve srovnání a polohami HANA-antigenu a celkového viru, takže lze uzavřít, že vzorek č. 1 vytváří komplex odlišný od HANA-antigenu a celkového viru. Příklad 2
HANA-antigen byl připraven stejným způsobem, jaký Je uveden v příkladu 1, s výjimkou použití chřipkového Jmene A/Fllipiny/2/82 /H^NL,/. HANA-antigen byl smíchán se složkami uvedenými v tabulce 2, načež byla směs vystavena účinku ultrazvuku po dobu 8 minut zařízením Heat Systems W3 75 Sonlcator, opatřeným kelíškovitou nálevkou (rozsah 2,5) (Heat Systém, ultrasonica·, lne·)· Schopnost tvorby protilátek každého takto získaného vzorku byla měřena stejným způsobem, Jaký je uveden v přikladu 1.
Docílené výsledky Jsou uvedeny v tabulce 2, která ukazuje, že vakcíny podle vynálezu mají dobrou schopnost tvořit protilátky.
Tabulka 2
Příklad č.
Přípravek
HI hodnota (po uplynutí 3 týdnu)
HANA
B3O-MDP
512
HANA
B3O-MDP lecithin dicetyl fosfát
1,0 /UgN
30 Z9
450 Z9
50 Z9
512
HANA
ВЗО-МОР cholesterol
1,0 ^ugN /Ug zug
1024
HANA
MDP-LYS (L18/ lecithin dicetylfosfát
1,0 /UgN yug
450 /Ug /ug
1024
HANA
MDP-LYS /L18/ cholesterol
1*0 yUgN yug
512
srovnávací * příklad HANA
256
CS 269981 82 □ак Je zřejmé z výše uvedených příkladů 1 a 2, má chřipková vakcína p od levý nálezu dobrou immunogenicitu a zlepšené protektivní vlastností proti chřipkové infekci.

Claims (5)

1· Způsob výroby chřipkové vakcíny, vyznačující se tím, že se míchá chřipkový HANA antigen a alespoň jeden derivát muramyldipeptidu a to ester muramyldipcpridu 8 vyšší alifatickou kyselinou obecného vzorce I
CH3 CH CO - A - isoGln kde q znamená zbytek synthetické vyšší alifatické kyseliny se 20 až 60 atomy uhlíku,
A znamená L-alanin, L-eerin nebo glycin a iso-Gln znamená d-formu isoglutaminu, nebo acylovaný derivát murasyldipeptidu obecného vzorce II (II) kde χ znamená aminokyselinu, у znamená zbytek -HN-A nebo zbytek
-NHCH(CH)n -NHCO-A,
7‘ kde znamená atom vodíku» nižší alkyl» karboxamidoskupinu nebo karboxylovou skupinu» n žnanená číslo 1 až 6»
Λ znamená nasycený nebo nenasycený alifatický uhlovodíkový zbytek o 8 až 30 atomech uhlíku a znamená d-formu» při teplotě do 30 °C v pufru o pH 5,5 až 9» získaná směs se solubilízuje povrchově aktivním Činidlem» odstranitelným dialýzou, přičemž hmotnostní poměr chřipkového antigenu к derivátům пигавгуldipeptidu Je 1 : 30 až 0»8 : 50» hmotnostní poměr povrchově aktivního činidla к derivátu murawyldipeptidu je do 10 : 1» solubilizace se provádí za přítomnosti například cholesterolu, lecithinu, dicetyl fosfátu nebo směsi těchto látek, a následně se odstraní povrchově aktivní činidlo dialýzou v pufru o pH 5,5 až 9 při osmotickém tlaku alespoň 250 mOsm/kg za získání chřipkové vakcíny, obsahující umělé váčkovíté části komplexu chřipkového, antigenu a derivátu muramyIdipeptidu·
2. Způsob podle bodu 1» vyznačující se tím» že hmotnostní poměr derivátu muramyldipoptidu к cholesterolu je 50 : 50 až 30 : 50·
3· Způsob podle bodu 1» vyznačující se tím» že hmotnostní poměr derivátu muramyldipeptidu к lecithinu je 1 : 10 až 1 : 50 a lecithinu к dicetylfosfátu 1 : 0,05 až 1 : 2·
4· Způsob podle bodu 1, vyznačující se tím, že se užije chřipkového antigenu, připraveného čištěním viru chřipky·
5« Způsob podle bodu 1» vyznačující se tím, že se deriváty muramyldipeptidu volí
CS864197A 1985-06-06 1986-06-06 Method of grippal vaccine production CS269981B2 (en)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP60123341A JPH0688911B2 (ja) 1985-06-06 1985-06-06 インフルエンザワクチン及びその製造方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CS419786A2 CS419786A2 (en) 1989-04-14
CS269981B2 true CS269981B2 (en) 1990-05-14

Family

ID=14858166

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CS864197A CS269981B2 (en) 1985-06-06 1986-06-06 Method of grippal vaccine production

Country Status (12)

Country Link
US (1) US4826687A (cs)
EP (1) EP0205098B1 (cs)
JP (1) JPH0688911B2 (cs)
KR (1) KR940001373B1 (cs)
CN (1) CN1020407C (cs)
AT (1) ATE76756T1 (cs)
AU (1) AU585353B2 (cs)
CA (1) CA1262091A (cs)
CS (1) CS269981B2 (cs)
DE (1) DE3685519T2 (cs)
ES (1) ES8707113A1 (cs)
SU (1) SU1651782A3 (cs)

Families Citing this family (42)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5897873A (en) * 1984-04-12 1999-04-27 The Liposome Company, Inc. Affinity associated vaccine
US6090406A (en) * 1984-04-12 2000-07-18 The Liposome Company, Inc. Potentiation of immune responses with liposomal adjuvants
US5916588A (en) * 1984-04-12 1999-06-29 The Liposome Company, Inc. Peptide-containing liposomes, immunogenic liposomes and methods of preparation and use
US5026557A (en) * 1987-09-09 1991-06-25 The Liposome Company, Inc. Adjuvant composition
WO1990001948A1 (en) * 1988-08-25 1990-03-08 The Liposome Company, Inc. Influenza vaccine and novel adjuvants
NZ230423A (en) * 1988-08-25 1993-08-26 Liposome Co Inc A dosage form comprising an antigen and a multilamellar liposome comprising dimyristolyphosphatidylcholine (dmpc) and cholesterol
US5100662A (en) * 1989-08-23 1992-03-31 The Liposome Company, Inc. Steroidal liposomes exhibiting enhanced stability
AU7239191A (en) * 1990-01-25 1991-08-21 University Of Colorado Foundation, Inc., The Method for preventing immune suppression in trauma patients
JP2777258B2 (ja) * 1990-03-13 1998-07-16 第一製薬株式会社 ムラミルジペプチド含有脂質膜構造体
US5091188A (en) * 1990-04-26 1992-02-25 Haynes Duncan H Phospholipid-coated microcrystals: injectable formulations of water-insoluble drugs
US5246707A (en) * 1990-04-26 1993-09-21 Haynes Duncan H Sustained release delivery of water-soluble bio-molecules and drugs using phospholipid-coated microcrystals, microdroplets and high-concentration liposomes
GB9018690D0 (en) * 1990-08-24 1990-10-10 Wellcome Found Vaccines
CA2054228A1 (en) * 1990-10-30 1992-05-01 Masaharu Oki Muramyldipeptide derivatives and influenza vaccine comprising the derivatives
BR9506885A (pt) * 1994-02-24 1997-08-19 Micro Pak Inc Vacinas contendo vesículas de lipidio paucilamelares como adjuvantes imunológicos
CA2234957C (en) 1995-10-17 2006-12-19 Inge B. Henriksen Insoluble drug delivery
US6465016B2 (en) 1996-08-22 2002-10-15 Research Triangle Pharmaceuticals Cyclosporiine particles
US7255877B2 (en) * 1996-08-22 2007-08-14 Jagotec Ag Fenofibrate microparticles
AU762246B2 (en) * 1998-02-11 2003-06-19 Rtp Pharma Corporation Method and composition for treatment of inflammatory conditions
US6979456B1 (en) 1998-04-01 2005-12-27 Jagotec Ag Anticancer compositions
ES2216517T3 (es) 1998-05-29 2004-10-16 Skyepharma Canada Inc. Composiciones de microcapsulas termoprotegidas y procedimiento para su esterilizacion terminal con vapor.
EP1105096B1 (en) 1998-08-19 2003-10-29 Skyepharma Canada Inc. Injectable aqueous dispersions of propofol
IL143197A0 (en) 1998-11-20 2002-04-21 Rtp Pharma Inc Dispersible phospholipid stabilized microparticles
DE60020382T2 (de) * 1999-09-21 2006-01-26 Skyepharma Canada Inc., Verdun Oberflächenmodifizierte teilchenförmige zusammensetzungen biologisch aktiver stoffe
NZ522239A (en) 2000-04-20 2004-03-26 Skyepharma Canada Inc Improved water-insoluble drug particle process
AU8847101A (en) 2000-08-31 2002-03-13 Rtp Pharma Inc Milled particles
US20020058065A1 (en) * 2000-09-20 2002-05-16 Pol-Henri Guivarc'h Insoluble drug particle compositions with improved fasted-fed effects
US8586094B2 (en) * 2000-09-20 2013-11-19 Jagotec Ag Coated tablets
AU2001259099B2 (en) * 2001-02-22 2005-12-22 Skyepharma Canada Inc. Fibrate-statin combinations with reduced fed-fasted effects
US20040071734A1 (en) * 2001-02-23 2004-04-15 Nathalie Garcon Novel vaccine
JP2004520144A (ja) * 2001-04-27 2004-07-08 グラクソスミスクライン　バイオロジカルズ　ソシエテ　アノニム 新規ワクチン
EP1416986A4 (en) * 2001-06-29 2005-12-14 Becton Dickinson Co INTRADERMIC DISTRIBUTION OF VACCINES AND GENE THERAPEUTIC AGENTS VIA MICROCANNULE
JP2006522022A (ja) 2003-02-14 2006-09-28 ザ キュレイターズ オブ ザ ユニバーシティー オブ ミズーリ プロテアソーム干渉に関連する避妊法および組成物
US20050123550A1 (en) * 2003-05-12 2005-06-09 Laurent Philippe E. Molecules enhancing dermal delivery of influenza vaccines
US7588774B2 (en) * 2003-05-12 2009-09-15 Becton, Dickinson And Company Molecules enhancing dermal delivery of influenza vaccines
TWI329130B (en) 2003-06-19 2010-08-21 Bestewil Holding Bv Functionally reconstituted viral membranes containing adjuvant
WO2005074460A2 (en) * 2003-12-05 2005-08-18 Becton Dickinson And Company Methods of enhancing immune response in the intradermal compartment and compounds useful in the methods
US20060121055A1 (en) * 2004-12-06 2006-06-08 Becton, Dickinson And Company, Inc. Compositions with enhanced immunogenicity
US7468187B2 (en) 2005-10-18 2008-12-23 Iowa State University Research Foundation, Inc. Canine influenza virus and related compositions and methods of use
EP2139908A4 (en) * 2007-03-12 2011-02-16 Antigen Express Inc REMOVAL OF PROTEIN Li INVOLVED IN Li-RNAi CONSTRUCTIONS IN ANTICANCER IMMUNOTHERAPY
EP2278997B1 (en) 2008-04-21 2016-08-10 Nanobio Corporation Nanoemulsion influenza vaccine
WO2013006797A1 (en) 2011-07-06 2013-01-10 Nanobio Corporation Human respiratory syncytial virus vaccine
WO2013028738A1 (en) 2011-08-22 2013-02-28 Nanobio Corporation Herpes simplex virus nanoemulsion vaccine

Family Cites Families (12)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4009258A (en) * 1972-09-25 1977-02-22 The Mount Sinai School Of Medicine Of The City University Of New York Influenza vaccine containing a recombinant, antigenically hybridized virus and method of using the same
CH589453A5 (cs) * 1974-01-14 1977-07-15 Sandoz Ag
US4117113A (en) * 1974-06-25 1978-09-26 National Research Development Corporation Immunological preparations
US4196191A (en) * 1975-09-29 1980-04-01 Burroughs Wellcome Co. Biological preparations
US4261975A (en) * 1979-09-19 1981-04-14 Merck & Co., Inc. Viral liposome particle
ATE8584T1 (de) * 1980-01-16 1984-08-15 Hans Georg Prof. Dr. Weder Verfahren und dialysiereinrichtung zur herstellung von bilayer-vesikeln und verwendung der bilayer-vesikel.
DE3173713D1 (en) * 1980-09-05 1986-03-20 Frappier Armand Inst Formation of an immunosome exclusively made of viral antigens reconstituted on an artificial membrane
US4327182A (en) * 1981-01-22 1982-04-27 Connaught Laboratories Incorporated Purification of influenza sub-unit vaccine
US4565696A (en) * 1983-08-03 1986-01-21 The Regents Of The University Of California Production of immunogens by antigen conjugation to liposomes
FR2551758B1 (fr) * 1983-08-16 1986-01-31 Anvar Derives de muramyl-peptides et de steroides ayant des proprietes d'activation des macrophages
IL69720A (en) * 1983-09-14 1987-08-31 Univ Ramot Anti-tumor pharmaceutical compositions comprising liposome-bound porphyrins
US4663161A (en) * 1985-04-22 1987-05-05 Mannino Raphael J Liposome methods and compositions

Also Published As

Publication number Publication date
CA1262091A (en) 1989-10-03
KR940001373B1 (ko) 1994-02-21
AU585353B2 (en) 1989-06-15
EP0205098A3 (en) 1989-03-22
JPS61282321A (ja) 1986-12-12
EP0205098B1 (en) 1992-06-03
DE3685519T2 (de) 1993-01-21
AU5836586A (en) 1986-12-18
CS419786A2 (en) 1989-04-14
KR870000075A (ko) 1987-02-16
ES555748A0 (es) 1987-07-01
EP0205098A2 (en) 1986-12-17
US4826687A (en) 1989-05-02
ATE76756T1 (de) 1992-06-15
SU1651782A3 (ru) 1991-05-23
CN1020407C (zh) 1993-05-05
JPH0688911B2 (ja) 1994-11-09
ES8707113A1 (es) 1987-07-01
CN86103717A (zh) 1987-02-11
DE3685519D1 (de) 1992-07-09

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CS269981B2 (en) Method of grippal vaccine production
JP2703528B2 (ja) 免疫原性複合体を含有するワクチン
Perrin et al. Rabies immunosome (subunit vaccine) structure and immunogenicity. Pre-and post-exposure protection studies
EP0942928B1 (en) Subunit respiratory syncytial virus vaccine preparation
DE69534670T2 (de) Immunstimulierende zusammensetzungen,die ein minerales salz und ein weiteres adjuvant enthalten
EP0222415A2 (en) Viral glycoprotein subunit vaccine
Nerome et al. Development of a new type of influenza subunit vaccine made by muramyldipeptide-liposome: enhancement of humoral and cellular immune responses
US20080248057A1 (en) Multivalent immunogenic composition containing RSV subunit compostion and influenza virus preparation
US4148876A (en) Biological preparations
EP0090886A2 (en) Stabilization of influenza virus vaccine
EP2058002A1 (en) Reconstituted respiratory syncytial virus membranes and use as respiratory syncytial virus vaccine
GB1564500A (en) Biological preparations
MX2013003451A (es) Generacion de particulas de virosoma.
US20020136739A1 (en) Subunit respiratory syncytial virus preparation
US20210008195A1 (en) Vaccines against hendra and nipah virus infection
Berezin et al. Isolation and studies of myxovirus glycoproteins
CA2436126A1 (en) Subunit respiratory syncytial virus vaccine preparation