CS272889B1 - Mouse lymphocyte hybridome blv p 24 ueo-25 e 11/8 - Google Patents
Mouse lymphocyte hybridome blv p 24 ueo-25 e 11/8 Download PDFInfo
- Publication number
- CS272889B1 CS272889B1 CS152589A CS152589A CS272889B1 CS 272889 B1 CS272889 B1 CS 272889B1 CS 152589 A CS152589 A CS 152589A CS 152589 A CS152589 A CS 152589A CS 272889 B1 CS272889 B1 CS 272889B1
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- hybridome
- virus
- blv
- ueo
- protein
- Prior art date
Links
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 title claims abstract description 5
- 210000004408 hybridoma Anatomy 0.000 claims description 12
- 241000714266 Bovine leukemia virus Species 0.000 claims description 10
- 241001529936 Murinae Species 0.000 claims description 4
- 108010087302 Viral Structural Proteins Proteins 0.000 claims 1
- 241000700605 Viruses Species 0.000 abstract description 8
- 239000000427 antigen Substances 0.000 abstract description 5
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 abstract description 5
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 abstract description 5
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 abstract description 4
- 238000001514 detection method Methods 0.000 abstract description 4
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 abstract description 4
- 208000032839 leukemia Diseases 0.000 abstract description 3
- 101710172711 Structural protein Proteins 0.000 abstract description 2
- 238000001261 affinity purification Methods 0.000 abstract 1
- 235000015278 beef Nutrition 0.000 abstract 1
- 230000003472 neutralizing effect Effects 0.000 abstract 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 6
- 238000000034 method Methods 0.000 description 6
- 101900319158 Bovine leukemia virus Capsid protein p24 Proteins 0.000 description 4
- 210000003200 peritoneal cavity Anatomy 0.000 description 4
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 4
- 206010003445 Ascites Diseases 0.000 description 3
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 3
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 3
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 3
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 3
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 3
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 3
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 3
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 3
- NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 2,3-bis(butanoylsulfanyl)propyl butanoate Chemical compound CCCC(=O)OCC(SC(=O)CCC)CSC(=O)CCC NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 2
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 2
- 239000004793 Polystyrene Substances 0.000 description 2
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 2
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 2
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 2
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 229920002223 polystyrene Polymers 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- 238000009007 Diagnostic Kit Methods 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 206010035226 Plasma cell myeloma Diseases 0.000 description 1
- 101000933967 Pseudomonas phage KPP25 Major capsid protein Proteins 0.000 description 1
- 229920002684 Sepharose Polymers 0.000 description 1
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 1
- 210000004102 animal cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000000628 antibody-producing cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 1
- 210000003567 ascitic fluid Anatomy 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 1
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 1
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000002405 diagnostic procedure Methods 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 239000008241 heterogeneous mixture Substances 0.000 description 1
- 210000004754 hybrid cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000016784 immunoglobulin production Effects 0.000 description 1
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 238000011005 laboratory method Methods 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 201000000050 myeloid neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000003127 radioimmunoassay Methods 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 238000004114 suspension culture Methods 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 230000009385 viral infection Effects 0.000 description 1
- 210000002845 virion Anatomy 0.000 description 1
Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Description
Vynález sa týká nového myšieho lymfocytárneho hybridámu BLV p24UBO-25Ell/8 t. j. hybridnej bunečnej linie, ktorá bola zostrojená fáziou buniek myšej myelámovej linie Sp2/O a myších lymfoidných buniek, produkujácich protilátky namierené proti hlavnému Štrukturálnemu proteinu p24 virusu bovinnej leukémie (BLV). Protein p24 je základnou sáčastou viriónu virusu bovinnej leukémie. Nález antip24-protilátok u zvierat má význam pře diagnostiku leukémie hovadzieho dobytka.
Doteraz sa protilátky proti antigénom BLV vyrábajú tak, že purifikovaný p24 je opakované injikovaný produkčným zvieratám, najčastejšie králikom. Sérum takto imunizovaných zvierat, odebrané po určitej době pSsobenia antigénu, sláži ako zdroj protilátok. Tento postup má mnohé nevýhody, pře každá imunizáciu je nutné izolovat’ znova protein p24 z virusu, jeho purifikáeia je drahá a časové náročná. Okrem toho v sére imunizovaných zvierat sa nachádza heterogénna zmes protilátok, ktorých spektrum je v každom zvierati rSzne a neopakovatelné. Sérum takto získané obsahuje tiež protilátky voči nečistotám antigénového preparátu, ktoré je potom nutné odstraňovat/ vysycovaním.
Z týchto dovodov výrobné šarže sa značné odliSujá a kvalita získaných polyklonálnych protilátok nie je štandardná.
Uvedené nedostatky hoře uvedeného postupu konvenčnej imunizácie odpadná, keS máme k dispozícii hybridám produkujúci monoKLonálnu protilátku proti štrukturálnemu proteinu p24 BLV, ktorý je uložený v zbierke hybridómov oddelenia molekulárnej virológie Ústavu experimentálnej onkolágie SAV v Bratislavě, ul. 5sl. armády 21, pod označením UEO-25E11/8.
Uvedený hybridám bol získaný v podstatě postupom známým v odbornéj literatuře ako hybridómová technolágia (Kohler, G,, Milstein, C.: Continuous cultures of fused cells secretxng antibody of prodefined speoificity, Nátuře 256, 495, 1975),(B.H.Burdon, P.H. VanKnippenberg: Laboratory techniques in biochemistry and molecular biology. Vol. 13, Monoelonal Antibody Technology, Elsevier, Amsterdam 1984). Postup, ktorým boli hýbridámy připravené bol námi modifikovaný (0,Orlík, ¢. Altaner: Modifications of hybridoma technology yield of monoelonal antibody producing cells, J. Immunol. Methods, 115,
55-59, 1988). ’
Výhodou hybridámu je, že produkuje homogénne monoklonálne protilátky, ktoré reagujá s proteínom p24 BLV, Hybridám BLVp240E0-25Ell/8, je možno kultivovat in vitro v médiách vhodných pre živočišné buňky a sáčasne je adaptovaný pre rast in vivo v peritoneálnej dutině myšieho kmeňa BALB/c. Z konzerv, ktoré sú uchovávané v kvapalnom dusíku, je možno zahájit produkciu protilátky bez áalšieho antigénu. Protilátka produkovaná KLánom BLVp24-25Ell/8 reaguje Specificky s determinantou proteinu p24 BLV,
Příklad: Za áčelom pomnoženia hybridámových buniek in vivo bolo 2*10x10^ buniek injikované do peritoneálnej dutiny myší kmeňa BALB/c. Týmto myšiam bolo 14 dní predtým injikované do peritoneálnej dutiny 0.5 ml Přistanu alebo inkompletného Preudova adjuvans za áčelom vytvorenia sterilného ascitu, ktorý napomáhá· rastu injikovaných hybridámových buniek. Po 14 dňoch rastu hybridámových buniek v peritoneálnej dutině, myš bola usmrtená a naprodukovaná ascitická tekutina bola sterilně odobraná. Celkom sa získalo 8 ml ascitovej tekutiny, ktorá obsahovala 9mg/ml imunoglobulínu. Monoklonálna'protilátka reagovala Specificky s proteínom p24-BLV a s desintegrovaným vírusom v rádioprecipitačnom teste a rádioimunologickom teste. Z ascitickej tekutiny bol imunoglobulín izolovaný pomocou chromatografie na koláne'Protein’ A-Sepharose alebo inou vhodnou metádou. Takto purifikovaná monoklonálna protilátka je vhodná pre poťahovanie polystyrénových materiálov (mikrotitračné. doštičky, polystyrénové tyčinky) za áčelom přípravy diagnostických sáprav na detekciu BLV infikovaných zvierat.
Xn vitro rastů buňky hybridómu ako polosuspenzná kultúra, Základným kultivačným mé diom je Dulbeccova modifikácia Eaglova minimálneho esenoiálneho média doplněného 5 percentami koňského alebo iného séra vhodného pre tkáňové kultúry. Hybridóm je kultivovaný pri 37 °C v C02 termostate, jeho štandardná generačná doba je přibližné 24 hodin. Produ kovaná protilátka je monoklonálny imunoglobulín podtriedy IgGl.
Hybridóm BLVp24UEO-25Ell/8 mdže byť priemyslovo využívaný ako zdroj protilátky pro ti štrukturélnerau proteinu p24 BLV v diagnostických metodách, v purifikačných metodách iných aplikáciach.
Konkrétné má využitie: pri výrobě imunodiagnostických súprav na detekciu infekcie hovádzieho dobytka vírusom bovinnej leukémie, pri purifikécii virusového proteinu p24 imunoafinitnou chromatografiou, pri vyhodnocovaní antigénnej variability virusového proteinu p24, ako zdroj protilátky jedinej podtriedy pre přípravu sér, pre detekciu virusového antigénu v infikovaných zvieratách.
Claims (2)
- PREDMET VYNÁLEZUMyší lymfocytárny hybridóm BLVp-24UEO-25Ell/8 produkujúci monoklonálnu protilátku podtriedy IgGl proti štrukturálnemu proteinu p24 virusu bovinnej leukémie.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS152589A CS272889B1 (en) | 1989-03-11 | 1989-03-11 | Mouse lymphocyte hybridome blv p 24 ueo-25 e 11/8 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS152589A CS272889B1 (en) | 1989-03-11 | 1989-03-11 | Mouse lymphocyte hybridome blv p 24 ueo-25 e 11/8 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS152589A1 CS152589A1 (en) | 1990-06-13 |
| CS272889B1 true CS272889B1 (en) | 1991-02-12 |
Family
ID=5349845
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS152589A CS272889B1 (en) | 1989-03-11 | 1989-03-11 | Mouse lymphocyte hybridome blv p 24 ueo-25 e 11/8 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CS (1) | CS272889B1 (sk) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN116284352A (zh) * | 2022-08-22 | 2023-06-23 | 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所（中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心） | 牛白血病病毒抗体及检测试剂盒 |
-
1989
- 1989-03-11 CS CS152589A patent/CS272889B1/cs unknown
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN116284352A (zh) * | 2022-08-22 | 2023-06-23 | 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所（中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心） | 牛白血病病毒抗体及检测试剂盒 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CS152589A1 (en) | 1990-06-13 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| KR100214759B1 (ko) | 인간 인터로이킨-6 수용체에 대한 항체 | |
| EP0014519B1 (en) | Cell lines, process for preparing them and process for producing antibodies | |
| AU2010236056B2 (en) | Process for the production of a hybridoma and antibody obtained therefrom, able to recognize more than one vitamin D metabolite | |
| JP2735947B2 (ja) | Ｂ細胞リンパ腫に対するイディオタイプのワクチン接種 | |
| EP0038642B1 (en) | A monoclonal antibody against hepatitis b and its production, a hybridoma producing the monoclonal antibody and compositions containing it, the propagation of the hybridoma and the monoclonal antibody for use as an antiviral agent against hepatitus b and in isolating hepatitus b surface antigen from a sample | |
| JPS592276B2 (ja) | ウイルス抗体の製造方法 | |
| CN110938007B (zh) | 三氯杀螨醇半抗原、人工抗原、抗体及其合成方法和应用 | |
| US7871621B2 (en) | Anti-HBs monoclonal antibody | |
| CS272889B1 (en) | Mouse lymphocyte hybridome blv p 24 ueo-25 e 11/8 | |
| CS272890B1 (en) | Mouse lymphocyte hybridome blvgp 51 ueo-4e9/32e5 | |
| CS272887B1 (en) | Mouse lymphocyte hybridome blvgp 30 ueo-94 c 11/2/e11 | |
| CS272886B1 (en) | Mouse lymphocyte hybridome blvgp 51 ueo-6a12/a7 | |
| CS272888B1 (en) | Mouse lymphocyte hybridome blvgp 51 ueo-25 e11/2 | |
| Opolski et al. | Polymorphic and autoreactive H-2-specific monoclonal antibody isolated after injections of syngeneic Sendai virus-coated lymphocytes | |
| WO1989000607A1 (en) | Preparation of human monoclonal antibodies of selected specificity and isotypes | |
| Novak et al. | Preparation and characterization of hybridomas producing monoclonal antibodies against human alpha interferon | |
| RU2093572C1 (ru) | Штамм гибридных культивируемых клеток mus musculus l., используемый для получения моноклональных антител к l -цепям иммуноглобулинов свиньи | |
| RU93019968A (ru) | Штамм гибридных культивируемых клеток животного mus musculus - продуцент моноклональных антител к с-концевой части белка р24 вируса иммунодефицита человека i типа | |
| Liu et al. | Monoclonal antibodies (mAbs) as useful research and diagnostic probes | |
| RU2007452C1 (ru) | Штамм гибридных культивируемых клеток mus musculus - продуцент моноклональных антител, используемых для диагностики вирусной геморрагической болезни кроликов | |
| RU1801117C (ru) | Способ получения монокло- нального антитела к моноклональному антителу к белку т4 лимфоцита человека, культивируемая клетка гибридомы jthfs-про- дуцентмоноклонального антитела к моноклональному антителу к белку т4 лимфоцита чело- века, культивируемая клетка гибридомы jti-if3-f5 - продуцент моноклонального антитела к моноклональному антителу к белку т4 лимфоцитачеловека, культивируемая клетка гибридомы jti-id7 - про- дуцент моноклонального антитела к моноклональному антителу к белку т4 лимфоцита человека, культивируемая клетка гибридомы jt2-n15 - продуцент моноклонального антитела к моноклональному антителу к белку т4 лимфоцитачеловека | |
| CS270543B1 (cs) | Myši lymfocytáeny hybridóm VU 2-L/5 | |
| Kitao et al. | Monoclonal antibodies to L-asparaginase | |
| CS267392B1 (sk) | Myší lymfocytámy hybridóm VÚ IFN ALó | |
| CS239800B1 (cs) | Myší lymfocytární hybridom IMG CZAS TU-04 |