CS273657B1 - Two-component agent for magnesium photometric determination - Google Patents

Two-component agent for magnesium photometric determination Download PDF

Info

Publication number
CS273657B1
CS273657B1 CS336987A CS336987A CS273657B1 CS 273657 B1 CS273657 B1 CS 273657B1 CS 336987 A CS336987 A CS 336987A CS 336987 A CS336987 A CS 336987A CS 273657 B1 CS273657 B1 CS 273657B1
Authority
CS
Czechoslovakia
Prior art keywords
magnesium
solution
mol
agent
magon
Prior art date
Application number
CS336987A
Other languages
English (en)
Other versions
CS336987A1 (en
Inventor
Marta Prom Farm Valickova
Vratislav Ing Csc Chromy
Original Assignee
Marta Prom Farm Valickova
Chromy Vratislav
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Marta Prom Farm Valickova, Chromy Vratislav filed Critical Marta Prom Farm Valickova
Priority to CS336987A priority Critical patent/CS273657B1/cs
Publication of CS336987A1 publication Critical patent/CS336987A1/cs
Publication of CS273657B1 publication Critical patent/CS273657B1/cs

Links

Landscapes

  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
  • Investigating Or Analyzing Non-Biological Materials By The Use Of Chemical Means (AREA)

Description

(57) Činidlo se skládá ze dvou roztoků, a to z roztoku metalochromního indikátoru l-azo~2-hydroxy-3-(2,4-dimethylkarboxyanilido)-naftalen-1'-(2-hydroxybenzenu) ve specifické směsi dvou organických rozpouštědel Ν,Ν-dimethylformamidu adimethylsulfoxidu a z roztoku tetraboritanového pufru obsahujícího acyklický alkohol s celkovým počtem 1 až 3 atomy uhlíku.
Obě složky jsou v činidle obsaženy v objemových poměrech 1:10 až 1 : 50. Dvousložkové činidlo se vyznačuje vysokou stálostí metalochromního indikátoru v roztoku a je zejména vhodné pro analýzu hořčíku v tělních tekutinách. Vlastní analytické činidlo pro stanovení hořčíku se připraví smícháním jeho obou složek ve výše uvedených poměrech před provedením analýzy.
(11)
(13) Bl
(51) Int. Cl. 5
G 01 N 21/27
G 01 N 21/78
CS 273657 Bl
Předmětem vynálezu je dvousložkové činidlo pro fotometrické stanovení hořčíku.
Je známo, že hořčík je nezbytný aktivátor řady enzymových pochodů zejména transfosforylačnícli a bývá nezbytným elementem i při oxidačních fosforylacích. Hraje významnou úlohu v metabolismu ribonukleových kyselin, cholesterolu, lipidů, aktivaci esteras cholesterolu a různých lipas, působí uktivíičně při syntézu metabolismu bílkovin. Významný jo i vliv hořčíku na centrální nervový pyntám; nedostatek hořčíku způsobuje zvýšenou dráždivost až tetanii. Snížený obsah hořčíku v séru byl zjištěn při poruchách nervových, cévních a srdečních, při těžkých průjmových onemocněních, cirhoao jater a některých dalfiích oneiiioonňních. Zvýšený obsah hořčíku jo naproti tomu nacházen zejména při nedostatečnosti ledvin, při diabetických komatech a acidosách.
Z uvedeného vyplývá, že stanovení hořčíku zejména v krevním séru je důležitým ukazatelem řady vážných poruch. Proto je stanovení sérového hořčíku zařazeno do palety biochemických vyšetření prováděných v oddělení klinické biochemici.
Ku stanovení obsahu hořčíku, zojména v aóru noho v moči, byla postupně navržena colá řada analytických metod, z nichž v poslední době jednoznačně převažují metody instrumentální, založené na atomové absorpční spektrofotometr!! a metody fotometrické, kdy se měří zbarvení barevných komplexů hořčíku s vhodnými analytickými činidly, například metaloehromními indikátory. Fotometrické metody s ohledem na dostupné přístrojové vybavení většiny biochemických laboratoří zatím převažuji.
Pro fotometrické stanovení hořčíku se v posledních letech využívá hlavně l-azo-2-hydroxy-3-(2,4-dimethylkarboxyanilido)-naftalen-1'-(2-hydroxybenzen), nazývaný také komerčními názvy Magon nebo Xylidilová modř II. Podrobným studiem optických vlastností Magonu se zabývali například Svoboda a Chromý (Anal. Chim. Acta 54, 121 až 131, 1971) a jeho aplikaci pro fotometrické stanovení hořčíku v biologických tekutinách popsali Chromý a spol. (Biochcm. Med. 7, 208 až 217, 1973). Při fotometrickém stanovení hořčíku Magonem se měří zbarvení relativně slabého komplexu O složení MgR,, kde R je Magon, s konstantou stability K = 6,1 . 10 a absorpčním molárním koeficientem 4,3 .10 1 . mol . cm . Pracuje se s nejméně trojnásobným přebytkem činidla a měří se při vlnové délce 505 nm.
Komplex je nutné měřit v prostředí obsahujícím 60 až 40 objemových dílů vody a 40 až 60 objemových dílů alkoholu. Jinak klesá citlivost stanovení a jak činidlo, tak i komplex se z reakční směsi vylučují. Vyšší množství alkoholu je naopak nepříznivé, nebot při analýze biologických tekutin způsobuje srážení bílkovin ze vzorku. Z uvedených důvodů se obvykle připravuje roztok Magonu v alkoholu, který se před analýzou smíchá se stejným množstvím vodného roztoku pufru. Poměrně velmi specifické a přesné dodržení optimálních reakčních podmínek klade vysoké nároky na složení, stálost a čistotu analytického činidla.
Nevýhodou metalochromního činidla Magon je jeho malá rozpustnost ve vodě a polárních rozpouštědlech. Proto se obvykle připravují roztoky Magonu rozpouštěním ve vroucím ethanolu nebo rozpuštěním v dimethylformamidu a neředěním ethanolem. Jak bylo zjištěno, ani tyto roztoky nejsou stálé a vhodné pro analytické účely. Magon se z těchto roztoků postupně vylučuje ve formě nerozpustné látky, klesá jeho účinná koncentrace v činidle a mění se jak směrnice kalibrační přímky, tak i lineární rozsah kalibrační funkce. Magon vyloučený spontánně z ethanolového roztoku so během stárnutí již nechová jako metalochromní indikátor, jedná se pravděpodobně o oxidovanou formu, která není vhodná pro fotometrické účely. Uvedené nevýhody, nízká rozpustnost Magonu, změny, kterým podléhá v roztoku ethanolu, mají nepříznivý vliv na fotometrické stanovení hořčíku, nebot se mění citlivost reakce a průběh kalibrační funkce.
Zejména při stanovení hořčíku v séru nemocných s vážnými ledvinovými poruchami, kdy rychle vzrůstá obsah hořčíku v séru, nestačí analytická koncentrace Magonu v činidle a narůstá nebezpečí nesprávné analýzy, diagnózy a postupu léčebného procesu. V řadě případů je nutné sérum ředit a výsledkem je další snížení přesnosti analýzy. Je proto žádoucí í* •c · «V
CS 273657 Bl tyto nevýhody odstranit a připravit takové analytické činidlo pro fotometrické stanovení hořčíku, které by nemělo uvedené nedostatky.
Nevýhody odstraňuje dvousložkové činidlo pro fotometrické stanovení hořčíku na bázi l-azo-2-hydroxy-3-(2,4-dimethylkarboxyanilido)-naftalen-1'-(2-hydroxybenzenu) a tetraboritanového pufru. Jeho podstata spočívá v tom, že se skládá z jednoho objemového dilu roztoku obsahujícího 1 až 10 mmol/1 l-azo-2-hydroxy-3-(2,4-dimethylkarboxyanilido)-naftalen-1(2-hydroxybenzenu), 5 až 7 mol/1 Ν,Ν-dimethylformamidu a 4 až 9 mol/1 dimethylsulfoxidu a 10 až 50 objemových dílů vodně-alkoholického roztoku obsahujícího 0,005 až 0,1 mol/1 tetraboritanu alkalického kovu a 4 až 15 mol/1 acyklického alkoholu o celkovém počtu 1 až 3 atomů uhlíku.
Roztok Magonu podle vynálezu se vyznačuje velmi dobrou stabilitou, Magon se nevylučuje z roztoku a jeho složení se dlouhodobě nemění. Uvedená kombinace dvou specifických organických rozpouštědel umožňuje podstatně zvýšit obsah Magonu v roztoku a zabraňuje jeho nevratným změnám. Kombinace vodného roztoku pufru s alifatickým alkoholem, který je obvykle nezbytnou součástí reakčni směsi při stanovení hořčíku Magonem, stabilizuje dlouhodobě roztok pufru a chrání jej před baktoriální kontaminací. Pro vlastní fotometrické stanovení hořčíku se připraví reakčni směs smícháním roztoku Magonu s roztokem pufru, například 1 díl roztoku Magonu a 25 dilů roztoku pufru podle vynálezu, které zaručují optimální složení reakčni směsi pro fotometrické stanovení hořčíku. Směs obsahuje dostatečný přebytek Magonu postačující i pro analýzu biologických.tekutin obsahujících patologicky zvýšený obsah hořčíku. Lze například provádět přímo, bez ředění, analýzu sér dialyzovaných nemocných obsahujících až 2 mmol hořčíku v litru séra.
Dvousložkové činidlo podle vynálezu lze průmyslově vyrábět, nebot jeho obě složky jsou stálé a zaručuji dlouhodobě přesné a správné fotometrické stanovení hořčíku s citlivostí a přesností požadovanou pro biochemické analýzy a v koncentračním rozsahu vhodném pro analýzu běžných biologických tekutin, zejména séra a plazmy, aniž by bylo nutné biologické vzorky před analýzou ředit. 5:
Příklad 1
a) Připraví se roztok obsahující l,44„g (3,5 mmol) l-azo-hydroxy-3-(2,4-dimethylkarboxyanilido) -naftalen-1 (2-hydroxybenzenu· (dále jen Magon), 450 ml (5,85 molů) Ν,Ν-dimethylformamidu a 450 ml (6,34 molů) dimethylsulfoxidu.
b) Připraví se 25 1 roztoku pufru Obsahujícího 97,6 g (0,25 molů) tetraboritanu sodného dekahydrátu v 10,2 1 (0,57 molů) destilované vody a 12,2 1 (214,6 molů) ethanolu. Roztok se promichá a jeho pH se upraví postupným přidávání hydroxidu sodného na pH 10,9 (potřeba asi 20 g hydroxidu sodného) a doplní se vodou na 25 1.
Pro fotometrické stanovení se připraví reakčni směs obsahující jeden objemový díl roztoku a) a 25 objemových dílů roztoku b).
Příklad 2
a) Připraví se roztok 0,82 g (1,9 mmolů) Magonu ve směsi 365 g (5 molů) N,N-dimethylforma)·.
midu a 702 g (8,98 molů) dimethylsulfoxidu. \
b) Připraví se 1 000 ml pufru obsahujícího 0,005 molů tetraboritanu draselného a 480 g (14,98 molů) methanolu a doplní se vodou na 1 000 ml. Jeho pH se nastaví na hodnotu + 0,2.
Před použitím se smíchají dva objemové díly roztoku a) s 25 objemovými díly roztoku b),
M*
CS 273657 Bl
Příklad 3
a) Připraví. :io roztok obsahující 4,1 g (9,9 mmolů) Mngonu, 511 g (6,99 molů) Ν,Ν-dimethylformamidu a 313 g (4 moly) dimethylsulfoxidu.
b) Připraví se 1 000 ml pufru obsahujícího 0,1 molu tetraboritanu draselného a 241 g (4,0 mol) 1-propnnolu, doplní no vodou na 1 000 ml a pH so nastaví jako v příkladu lb).
Před fotometrickým stanovením hořčíku se smíchá 1 objemový díl roztoku a) s 50 objemovými díly roztoku b).

Claims (5)

  1. PŘEDMĚT VYNÁLEZU
    Dvousložkové činidlo pro fotometrické stanovení hořčíku na bázi l-azo-
  2. 2-hydroxy-
  3. 3-(2,
  4. 4-dimethylkarboxyanilido)-naftalen-1'-(2-hydroxybenzenu) a tetraboritanového pufru, vyznačující se tím, že se skládá z jednoho objemového dílu roztoku obsahujícího 1 až 10 mmol/1 l-azo~2-hydroxy-3-(2,4-dimethylkarboxyanilido)-naftalen-1'-(2-hydroxybenzenu),
  5. 5 až 7 mol/1 Ν,Ν-dimethylformamidu a 4 až 9 mol/1 dimethylsulfoxidu a 10 až 50 objemových dílů vodně-alkoholického roztoku obsahujícího 0,005 až 0,1 mol/1 tetraboritanu alkalického kovu a 4 až 15 mol/1 acyklického alkoholu o celkovém počtu 1 až 3 atomů uhlíku.
CS336987A 1987-05-12 1987-05-12 Two-component agent for magnesium photometric determination CS273657B1 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CS336987A CS273657B1 (en) 1987-05-12 1987-05-12 Two-component agent for magnesium photometric determination

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CS336987A CS273657B1 (en) 1987-05-12 1987-05-12 Two-component agent for magnesium photometric determination

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CS336987A1 CS336987A1 (en) 1990-08-14
CS273657B1 true CS273657B1 (en) 1991-03-12

Family

ID=5373528

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CS336987A CS273657B1 (en) 1987-05-12 1987-05-12 Two-component agent for magnesium photometric determination

Country Status (1)

Country Link
CS (1) CS273657B1 (cs)

Also Published As

Publication number Publication date
CS336987A1 (en) 1990-08-14

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Goldenberg et al. Simplified method for the estimation of inorganic phosphorus in body fluids
Burch et al. Improved method for measurement of delta-aminolevulinic acid dehydratase activity of human erythrocytes
Chromy et al. Re-evaluation of EDTA-chelated biuret reagent
Abernethy et al. Micellar improvement of the calmagite compleximetric measurement of magnesium in plasma.
CA1176962A (en) Magnesium assay and reagents therefor
EP0075921B1 (en) Reagent mixture for measuring magnesium
US4448889A (en) Fluid analysis
US4393142A (en) Assay method and reagent for the determination of chloride
US4683208A (en) Method for the determination of bilirubin
Anisimovich et al. Spectrophotometric determination of proteins in biological fluids
US3938954A (en) Determination of calcium
US4818703A (en) Stabilized alkaline picrate reagent for jaffe creatinine determination
Cox et al. The measurement of dehydroascorbic acid and diketogulonic acid in normal and diabetic plasma
US4529708A (en) Assay for the determination of creatinine
US3649198A (en) Diagnostic method for the determination of uric acid in blood
CS273657B1 (en) Two-component agent for magnesium photometric determination
JPH04504467A (ja) アルブミン―テトラゾリウム相互作用を使用するアッセイ
US3853473A (en) Reagent and method for urea determination
US4030885A (en) Bilirubin determination
CN108956971A (zh) 一种丙戊酸免疫检测试剂及其制备和检测方法
US4454230A (en) Assay method and reagent composition for the determination of magnesium
JPH03206896A (ja) 体液中の微量成分定量法
AU621858B2 (en) Calcium assay reagent
US3607077A (en) Compositions of agreeable odor for the determination of aldoses
JP2808459B2 (ja) 血液中のフルクトサミンの測定方法及び測定用試薬