CS273781B1 - Diagnostic strips for azocouplable substances determination - Google Patents

Description

Mezi diagnostickými prostředky, používanými v klinické biochemii ke zjištování různých funkčních poruch pacientů, si v poslední době vydobyly čelné místo diagnostické proužky, Důvodem je nejenom neobyčejná jednoduchost a rychlost jejich použití, ale i vysoká spolehlivost získaných nálezů, kterou tyto proužky vykazují díky obrovskému pokroku, dosaženému v jejich formulaci a způsobu výroby v posledních dvou desetiletích.

Přes tento pokrok však bohužel dodnes nelze konstatovat, že by výroba diagnostických proužků byla zcela bez problémů. Jednou z dosud nevyřešených potíží jsou vlastnosti dnes obecně užívaného nasákavého nosiče, na kterém jsou naneseny všechny chemikálie a činidla, potřebná pro průběh barevné reakce diagnostických proužků.

Přesto, že patentová literatura uvádí bohatý výčet nejrůznějších nasákavých materiálů použitelných pro tento účel, používá se v současné době prakticky výlučně neklížený filtrační papír. I když tento materiál předčí svými vlastnostmi všechny ostatní navržené materiály, zůstává jeho nedostatkem skutečnost, že jeho mechanické vlastnosti jsou silně ovlivňovány některými chemikáliemi nutnými pro funkci proužků. Zvláště negativně působí na soudržnost vláken papíru kyselé prostředí, které je potřebné například ke stanovení některých azokopulovatelných látek, jako je například urobilinogen nebo bilirubin. Tento nežádoucí jev se pak projevuje velmi nepříznivě při dalším zpracování papíru, jako je například jeho řezání, při němž se papír láme a rozvrstvuje.

Na překlenutí tohoto nedostatku byl zaměřen již západoněmecký patent 2,007,013, dle něhož byl u diagnostických proužků ke stanovení bilirubinu papír nahrazen rounem z umělých vláken jako například polypropylenu. Toto řešení se však neosvědčilo, nebot připravené proužky měly sice dokonalou mechanickou pevnost, poskytovaly však s bilirubinem tak slabé zbarvení, že nebyly použitelné ke stanovení nižších koncentrací tohoto žlučového barviva. Ukázalo se totiž, že podstatným rozdílem mezi papírem z celulozóvých vláken a rounem ze syntetických vláken je to, že při impregnaci papíru vnikne část činidel i do dutých celulózových vláken, zatímco u syntetických vláken se činidla zachytí pouze na povrchu vláken.

Obdobný novější západoněmecký patent 2,158,124, který doporučuje použití vlisu nebo rouna sestávajícího zcela nebo převážně z polyamidových vláken, rovněž nepřinesl uspokojivé řešení, neboí reakce na nosiči z polyamidových vláken jsou sice poněkud intenzivnější než na rounech například z vláken polypropylenových, polyesterových nebo polyvinylchloridových, stále však zdaleka nedosahuje intenzity a barevné brilance reakcí na podlož ce z normálního filtračního papíru.

Tyto potíže odstraňuje vynález, jehož předmětem jsou diagnostické proužky ke stanovení azokopulovatelných látek jako je zejména urobilinogen a bilirubin v tělních tekutinách, obsahující činidlo schopné vstupovat v kyselém prostředí se stanovovanou látkou do azokopulační reakce, vyznačené tím, že obsahují dále jako kližidlo hydrofilní, ve vodě rozpustnou modifikovanou celulózu, jako je například ethylhydroxymethylcelulóza nebo methylhydroxypropylcelulóza nebo methylcelulóza nebo methylkarboxymethylcelulóza v množství 1 až 10 hmotových procent, vztaženo na celkovou hmotnost všech pevných látek, které se při impregnaci na papír nanášejí.

Tato hydrofilní, ve vodě rozpustná modifikovaná celulóza zvyšuje dokonale soudržnost celulózových vláken papíru a tím jeho mechanickou pevnost a v silně kyselém prostředí, jak je nutné například u proužků pro stanovení dvou zmíněných žlučových barviv, urobilino genu a zvláště bilirubinu. Přitom tyto polymery nejenom, že nesnižují intenzitu zbarvení, vzniklých při reakci s uvedenými azokopulovatelnými látkami, ale naopak vývin zbarvení τ

•Ά

CS 273781 Bl 2 podporují a zvyšují i jeho brilanci.

Zaklížení papíru hydrofilní, ve vodě rozpustnou modifikovanou celulózou podle vynálezu je sice možné provést již při výrobě papíru běžným o sobě známým způsobem; daleko výhodnější a ekonomičtější je však postup, při němž se uvedené kližidlo nanese na již hotový, neklížený papír při impregnaci, kterou se na papír nanášejí součásti reakčniho systému diagnostických proužků, tj. jestliže se kližidlo přidá do tzv. impregnačních roztoků teprve při výrobě proužků.

Přitom k dokonalému účinku postačuje zcela malé množství kližidla, které se pohybuje v rozmezí od 1 do 10 % s výhodou 2 až 3 % 'hmotových, vztaženo na celkovou hmotnost všech pevných látek, které se při impregnaci na papír nanášejí.

Příklady

1. Diagnostické proužky ke stanoveni urobilinogenu v moči

Impregnační roztok A:

Voda destilovaná 185 ml

Kyselina citrónová 40 g

Dvojsodná sůl kyseliny 1,5-naftalendisulfonové 28 g

Hydroxypropylmethylceluloza, acetonový roztok (4 g/100 ml) 45 ml dodecylsulfát sodný, vodný roztok (1 g/100 ml) 5 ml

Impregnační roztok B:

Octan ethylnatý 200 ml

N-(4-benzyloxybenzenazo)morfolin 1,44 g

Filtrační papír o plošné hmotnosti 180g/m^e postupně naimpregnuje výše uvedenými roztoky A a B do nasycení tak, že po každé impregnaci se papír dokonale vysuší proudem vzduchu o teplotě 50 °C. Takto naimpregnovaný papír se poté rozřeže na čtverečky o rozměru 6x6 mm, které se nalepí, například pomocí oboustranné samolepící pásky na konec plastické fólie o rozměru 6 x 80 mm.

Papír, naimpregnovaný výše uvedenými roztoky, obsahuje hydrofilní, ve vodě rozpustnou methylhydroxypropylcelulózu a je při řezání i dalším mechanickém zpracování a manipulaci dokonale soudržný, zatímco papír naimpregnovaný stejnými roztoky, avšak bez modifikované celulózy se při sebemenším mechanickém namáhání láme a rozvrstvuje.

2. Diagnostické proužky ke stanovení bilirubinu v moči

Impregnační roztok A:

Voda destilovaná 100 ml kyselina metafosforečná 10 g

Kyselina citrónová 4 g

2,6-Dichlorbenzendiazonium tetrafluoroborát 0,1 g

Methylcelulóza, vodný roztok (4 g/100 ml) 18 ml /

Impregnační roztok B:

Octan ethylnatý ' 50 ml

Ethylalkohol 20 ml

Voda destilovaná 10 ml

CS 2737Θ1 Bl

Sodná sůl 3,9-diethyl-6-tridekanol-hydrogensulfátu,

25% vodný roztok 0,5 ml

Diagnostické proužky se připraví způsobem popsaným v příkladu 1. Takto připravený papír je podstatně mechanicky odolnější než papír připravený impregnací roztoky bez přítomnosti methylcelulózy.

3. Diagnostické proužky ke stanovení bilirubinu v moči

Impregnační roztok A:

Voda Destilovaná 100 ml

Kyselina metafosforečná 10 g

Kyselina citrónová A g

2,É-Dichlorbenzendiazonium tetrafluoroborát 0,1 g

Ethylhydroxymethylcelulóza, vodný roztok (2,4 g/100 ml) 18 ml

Impregnační roztok B:

Octan ethylnatý 50 ml

Ethylalkohol 20 ml

Voda destilovaná 10 ml

Sodná sůl 3,9-diethyl-6-tridekanolhydrogensulfátu, vodný roztok (25 g/100 ml) 0,5 ml

Diagnostické proužky se připraví stejným způsobem jako v příkladu 1. Takto připravený papír je mechanicky podstatně odolnější pří zpracování než papír připravený impregnací roztoku bez přítomnosti ethylhydroxymethylcelulózy.

4. Diagnostické proužky ke stanovení urobllinogsnu v moči

Impregnační roztok A:

Voda destilovaná 100 ml

Kyselina citrónová monohydrát 20 g

Dvojsodná sůl kyseliny 1,5-naftalendisulfonové 14 g

Methylkarboxymethylcelulóza, vodný roztok (4 g/100 ml) 27 ml

Dodecylsulfát sodný, vodný roztok (1 g/100 ml) 2,5 ml

Impregnační roztok B:

Octan ethylnatý 200 ml

4-Benzyloxybenzendiazonium tetrafluoroborát 1,44 g

Diagnostické proužky se připraví stejným způsobem jako v příkladu 1. Methylkarboxymethylcelulóza přítomná v impregnačním roztoku podstatně vylepší mechanické vlastnosti impregnovaného papíru, který je pak při řezání nebo jiném mechanickém zpracování dokonale soudržný a neláme se. V nepřítomnosti methylkarboxymethylcelulózy je papír lámavý a snadno se rozvrstvuje.

CS 273781 81

5. Diagnostické proužky ke stanoveni bilirubinu v krevném séru

Impregnační roztok:

Voda destilovaná 100 ml

Dvojsodná sůl kyseliny 1,5-naftalendisulfonové 2,15 g

Theofyllin 1,39 g

Methylkarboxymethylcelulóza, vodný roztok (3 g/100 ml) 32,5 ml

Kyselina metafosforečná 7,14 g

2,4-Dichlorbenzendiazonium tetrafluoroborát 0,29 g

Filtrační papír o plošné hmotnosti 120 g/m se naimpregnuje výše uvedeným roztokem do nasycení a dokonale se usuší proudem vzduchu o teplotě 50 °C. Takto naimpregnovaný papír se pak rozřeže na čtverečky o rozměru 6x6 mm, které se nalepí, například pomocí oboustranné samolepící pásky, na konec plastické fólie o rozměru 6 x 80 mm.

Naimpregnovaný papír obsahující methylkarboxymethylcelulózu vykazuje při mechanickém zpracování a manipulaci lepši soudržnost než papír naimpregnovaný stejnými roztoky, avšak bez modifikované celulózy, který se při mechanickém zpracování láme a rozvrstvuje.

6. Diagnostické proužky ke stanovení urobilinogenu v moči

Impregnační roztok A:

Voda destilovaná 130 ml

Kyselina citrónová monohydrát 28,1 g

Dvojsodná sůl kyseliny 1,5-naftalendisulfonové 19,7 g

Hydroxypropylcelulóza, vodný roztok (3 g/100 ml) 42,2 ml

Dodecylsulfát sodný, vodný roztok (1 g/100 ml) 3,5 ml

Impregnační roztok B:

Octan ethylnatý 100 ml

N-(4-Benzyloxybenzenazo)morfolin 0,72 g

Diagnostické proužky se připraví stejným způsobem jako v příkladu 1. Přítomnost hydroxypropylcelulózy způsobuje, že papír je při mechanickém zpracováni dokonale soudržný, kdežto v nepřítomnosti modifikované celulózy se papír při mechanickém namáhání rozvrstvuje a láme.

7. Diagnostické proužky ke stanovení bilirubinu v moči

Impregnační roztok A:

Voda destilovaná 120 ml

Kyselina metafosforečná 12 g

Kyselina citrónová monohydrát 4,8 g

2,6-Dichlorbenzenazomorfolin 0,1 g

Impregnační roztok B:

Octan ethylnatý 45 ml

Ethylalkohol · 18 ml

Sodná sůl 3,9-diethyl-6-tridekanolhydrogensulfátu, 25% vodný roztok

0,45 ml

CS 273781 01

Hydroxypropylmethylcelulosaftalát, vodný roztok (4 g/100 ml) 12 ml

Diagnostické proužky se připraví způsobem popsaným v příkladu 1. Papír naimpregnovaný výše uvedenými roztoky, obsahuje hydrofilní, ve vodě rozpustnou hydroxypropylmethylcelulózuftalát a je při mechanickém zpracování dokonale soudržný, zatímco papír naimpregnovaný stejnými roztoky, avšak bez modifikované celulózy se při sebemenším mechanickém namáhání láme a rozvrstvuje.

Claims (1)

1. PŘEDMĚT VYNÁLEZU

   Diagnostické proužky ke stanovení azokopulovatelných látek jako je zejména urobilinogen a bilirubin v tělních tekutinách, obsahující činidlo schopné vstupovat v kyselém prostředí se stanovovanou látkou do azokopulační reakce, vyznačené tím, že obsahují jako kližidlo hydrofilní, ve vodě rozpustnou modifikovanou celulózu, jako je například ethylhydroxymethylcelulóza, nebo methylhydroxypropylcelulóza nebo methylcelulóza nebo methylkarboxymethylcelulóza, v množství 1 až 10 hmotových procent, vztaženo na celkovou hmotnost všech pevných látek, které se při impregnaci na papír nanášejí.