CZ111494A3 - Process for preparing an intermediate for the preparation of n-(phosphonomethyl)glycine - Google Patents
Process for preparing an intermediate for the preparation of n-(phosphonomethyl)glycine Download PDFInfo
- Publication number
- CZ111494A3 CZ111494A3 CZ941114A CZ111494A CZ111494A3 CZ 111494 A3 CZ111494 A3 CZ 111494A3 CZ 941114 A CZ941114 A CZ 941114A CZ 111494 A CZ111494 A CZ 111494A CZ 111494 A3 CZ111494 A3 CZ 111494A3
- Authority
- CZ
- Czechia
- Prior art keywords
- acid
- acid component
- glycine
- phosphonomethyl
- reaction
- Prior art date
Links
- XDDAORKBJWWYJS-UHFFFAOYSA-N glyphosate Chemical compound OC(=O)CNCP(O)(O)=O XDDAORKBJWWYJS-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 49
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title claims abstract description 8
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims description 18
- HHLFWLYXYJOTON-UHFFFAOYSA-N glyoxylic acid Chemical compound OC(=O)C=O HHLFWLYXYJOTON-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 179
- AEMRFAOFKBGASW-UHFFFAOYSA-N Glycolic acid Chemical compound OCC(O)=O AEMRFAOFKBGASW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 119
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims abstract description 87
- MGRVRXRGTBOSHW-UHFFFAOYSA-N (aminomethyl)phosphonic acid Chemical compound NCP(O)(O)=O MGRVRXRGTBOSHW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 83
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 62
- 102000016938 Catalase Human genes 0.000 claims abstract description 50
- 108010053835 Catalase Proteins 0.000 claims abstract description 50
- 108010062584 glycollate oxidase Proteins 0.000 claims abstract description 49
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 47
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 46
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 claims abstract description 46
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 claims abstract description 46
- 230000008569 process Effects 0.000 claims abstract description 32
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims abstract description 20
- 238000011065 in-situ storage Methods 0.000 claims abstract description 6
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims description 42
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims description 42
- FVTCRASFADXXNN-SCRDCRAPSA-N flavin mononucleotide Chemical compound OP(=O)(O)OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)CN1C=2C=C(C)C(C)=CC=2N=C2C1=NC(=O)NC2=O FVTCRASFADXXNN-SCRDCRAPSA-N 0.000 claims description 32
- 229940013640 flavin mononucleotide Drugs 0.000 claims description 32
- FVTCRASFADXXNN-UHFFFAOYSA-N flavin mononucleotide Natural products OP(=O)(O)OCC(O)C(O)C(O)CN1C=2C=C(C)C(C)=CC=2N=C2C1=NC(=O)NC2=O FVTCRASFADXXNN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 32
- 239000011768 flavin mononucleotide Substances 0.000 claims description 32
- 235000019231 riboflavin-5'-phosphate Nutrition 0.000 claims description 32
- 239000003054 catalyst Substances 0.000 claims description 29
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 claims description 29
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 claims description 29
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 26
- MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N Hydrogen peroxide Chemical compound OO MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 20
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 claims description 20
- KDLHZDBZIXYQEI-UHFFFAOYSA-N Palladium Chemical compound [Pd] KDLHZDBZIXYQEI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 19
- -1 glyoxylic acid acid Chemical class 0.000 claims description 15
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 14
- 238000005984 hydrogenation reaction Methods 0.000 claims description 12
- PXHVJJICTQNCMI-UHFFFAOYSA-N Nickel Chemical compound [Ni] PXHVJJICTQNCMI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 11
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 claims description 10
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 claims description 10
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 claims description 8
- 230000001590 oxidative effect Effects 0.000 claims description 7
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N ethylene glycol Natural products OCCO LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 230000009467 reduction Effects 0.000 claims description 5
- 102000004316 Oxidoreductases Human genes 0.000 claims description 4
- 108090000854 Oxidoreductases Proteins 0.000 claims description 4
- 229910052759 nickel Inorganic materials 0.000 claims description 4
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 claims description 3
- 239000005909 Kieselgur Substances 0.000 claims description 3
- 239000007868 Raney catalyst Substances 0.000 claims description 3
- 229910000564 Raney nickel Inorganic materials 0.000 claims description 3
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- WGCNASOHLSPBMP-UHFFFAOYSA-N hydroxyacetaldehyde Natural products OCC=O WGCNASOHLSPBMP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 102100038837 2-Hydroxyacid oxidase 1 Human genes 0.000 claims 2
- 239000005562 Glyphosate Substances 0.000 abstract description 3
- 229940097068 glyphosate Drugs 0.000 abstract description 3
- 229960004275 glycolic acid Drugs 0.000 description 50
- 102100038838 2-Hydroxyacid oxidase 2 Human genes 0.000 description 45
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 41
- MUBZPKHOEPUJKR-UHFFFAOYSA-N Oxalic acid Chemical compound OC(=O)C(O)=O MUBZPKHOEPUJKR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 31
- AEMRFAOFKBGASW-UHFFFAOYSA-M Glycolate Chemical compound OCC([O-])=O AEMRFAOFKBGASW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 25
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-M Formate Chemical compound [O-]C=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 22
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 19
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 18
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 14
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 14
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 14
- FERIUCNNQQJTOY-UHFFFAOYSA-N Butyric acid Chemical compound CCCC(O)=O FERIUCNNQQJTOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 241000228245 Aspergillus niger Species 0.000 description 11
- 241000219315 Spinacia Species 0.000 description 11
- 235000009337 Spinacia oleracea Nutrition 0.000 description 11
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 10
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 10
- 108030001056 (S)-2-hydroxy-acid oxidases Proteins 0.000 description 8
- CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N Carbon dioxide Chemical compound O=C=O CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 7
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 7
- 239000002585 base Substances 0.000 description 5
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 5
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 5
- 239000000443 aerosol Substances 0.000 description 4
- 239000012736 aqueous medium Substances 0.000 description 4
- 239000001569 carbon dioxide Substances 0.000 description 4
- 229910002092 carbon dioxide Inorganic materials 0.000 description 4
- 239000004009 herbicide Substances 0.000 description 4
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 4
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N methanoic acid Natural products OC=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000000376 reactant Substances 0.000 description 4
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 4
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- PIICEJLVQHRZGT-UHFFFAOYSA-N Ethylenediamine Chemical compound NCCN PIICEJLVQHRZGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000006227 byproduct Substances 0.000 description 3
- 230000003197 catalytic effect Effects 0.000 description 3
- 239000003638 chemical reducing agent Substances 0.000 description 3
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 3
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 3
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 3
- 230000002363 herbicidal effect Effects 0.000 description 3
- 150000002466 imines Chemical class 0.000 description 3
- 230000002452 interceptive effect Effects 0.000 description 3
- 235000006408 oxalic acid Nutrition 0.000 description 3
- 150000002978 peroxides Chemical class 0.000 description 3
- 235000021317 phosphate Nutrition 0.000 description 3
- BASFCYQUMIYNBI-UHFFFAOYSA-N platinum Chemical compound [Pt] BASFCYQUMIYNBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- HZAXFHJVJLSVMW-UHFFFAOYSA-N 2-Aminoethan-1-ol Chemical compound NCCO HZAXFHJVJLSVMW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 4-(3-methoxyphenyl)aniline Chemical compound COC1=CC=CC(C=2C=CC(N)=CC=2)=C1 OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N Ammonia chloride Chemical compound [NH4+].[Cl-] NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O Ammonium Chemical class [NH4+] QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 2
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FSVCELGFZIQNCK-UHFFFAOYSA-N N,N-bis(2-hydroxyethyl)glycine Chemical compound OCCN(CCO)CC(O)=O FSVCELGFZIQNCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 244000061176 Nicotiana tabacum Species 0.000 description 2
- 235000002637 Nicotiana tabacum Nutrition 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 2
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 2
- 239000007998 bicine buffer Substances 0.000 description 2
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000009903 catalytic hydrogenation reaction Methods 0.000 description 2
- 238000006555 catalytic reaction Methods 0.000 description 2
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 description 2
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 2
- XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-N dimethylselenoniopropionate Natural products CCC(O)=O XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 2
- 235000019253 formic acid Nutrition 0.000 description 2
- LEQAOMBKQFMDFZ-UHFFFAOYSA-N glyoxal Chemical compound O=CC=O LEQAOMBKQFMDFZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000002374 hemiaminals Chemical class 0.000 description 2
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 2
- KQNPFQTWMSNSAP-UHFFFAOYSA-N isobutyric acid Chemical compound CC(C)C(O)=O KQNPFQTWMSNSAP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000007791 liquid phase Substances 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- 230000008929 regeneration Effects 0.000 description 2
- 238000011069 regeneration method Methods 0.000 description 2
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 2
- HXKKHQJGJAFBHI-UHFFFAOYSA-N 1-aminopropan-2-ol Chemical compound CC(O)CN HXKKHQJGJAFBHI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PKAUICCNAWQPAU-UHFFFAOYSA-N 2-(4-chloro-2-methylphenoxy)acetic acid;n-methylmethanamine Chemical compound CNC.CC1=CC(Cl)=CC=C1OCC(O)=O PKAUICCNAWQPAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OORRCVPWRPVJEK-UHFFFAOYSA-N 2-oxidanylethanoic acid Chemical compound OCC(O)=O.OCC(O)=O OORRCVPWRPVJEK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000000832 Ayote Nutrition 0.000 description 1
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-M Bicarbonate Chemical class OC([O-])=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N Copper Chemical compound [Cu] RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 240000004244 Cucurbita moschata Species 0.000 description 1
- 235000009854 Cucurbita moschata Nutrition 0.000 description 1
- 235000009804 Cucurbita pepo subsp pepo Nutrition 0.000 description 1
- MYMOFIZGZYHOMD-UHFFFAOYSA-N Dioxygen Chemical compound O=O MYMOFIZGZYHOMD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- VGGSQFUCUMXWEO-UHFFFAOYSA-N Ethene Chemical compound C=C VGGSQFUCUMXWEO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000005977 Ethylene Substances 0.000 description 1
- OHWRASKXEUIFFB-UHFFFAOYSA-N NCP(O)=O Chemical compound NCP(O)=O OHWRASKXEUIFFB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-N Propanedioic acid Natural products OC(=O)CC(O)=O OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KJTLSVCANCCWHF-UHFFFAOYSA-N Ruthenium Chemical compound [Ru] KJTLSVCANCCWHF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241001464837 Viridiplantae Species 0.000 description 1
- HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N Zinc Chemical compound [Zn] HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IKHGUXGNUITLKF-XPULMUKRSA-N acetaldehyde Chemical compound [14CH]([14CH3])=O IKHGUXGNUITLKF-XPULMUKRSA-N 0.000 description 1
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 1
- 150000004705 aldimines Chemical class 0.000 description 1
- 229910052783 alkali metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000008044 alkali metal hydroxides Chemical class 0.000 description 1
- 229910000318 alkali metal phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000001340 alkali metals Chemical class 0.000 description 1
- 229910052784 alkaline earth metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000001342 alkaline earth metals Chemical class 0.000 description 1
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019270 ammonium chloride Nutrition 0.000 description 1
- 150000003863 ammonium salts Chemical class 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 150000008064 anhydrides Chemical class 0.000 description 1
- 125000000129 anionic group Chemical group 0.000 description 1
- 150000001450 anions Chemical class 0.000 description 1
- 239000003125 aqueous solvent Substances 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 238000010533 azeotropic distillation Methods 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 238000012742 biochemical analysis Methods 0.000 description 1
- 150000004649 carbonic acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- QISYLDKVPDFKSB-UHFFFAOYSA-N carbonic acid;hydrate Chemical compound O.OC(O)=O.OC(O)=O QISYLDKVPDFKSB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000002091 cationic group Chemical group 0.000 description 1
- 150000001768 cations Chemical class 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 239000003610 charcoal Substances 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 229910017052 cobalt Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010941 cobalt Substances 0.000 description 1
- GUTLYIVDDKVIGB-UHFFFAOYSA-N cobalt atom Chemical compound [Co] GUTLYIVDDKVIGB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000009833 condensation Methods 0.000 description 1
- 230000005494 condensation Effects 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 229910052802 copper Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010949 copper Substances 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 239000000539 dimer Substances 0.000 description 1
- 229910001882 dioxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L dipotassium hydrogen phosphate Chemical compound [K+].[K+].OP([O-])([O-])=O ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 238000010494 dissociation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000005593 dissociations Effects 0.000 description 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 1
- 125000004185 ester group Chemical group 0.000 description 1
- 230000007717 exclusion Effects 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 239000006260 foam Substances 0.000 description 1
- 150000004675 formic acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 229940015043 glyoxal Drugs 0.000 description 1
- 239000013529 heat transfer fluid Substances 0.000 description 1
- 150000002373 hemiacetals Chemical class 0.000 description 1
- 150000004680 hydrogen peroxides Chemical class 0.000 description 1
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 238000010952 in-situ formation Methods 0.000 description 1
- 229910052741 iridium Inorganic materials 0.000 description 1
- GKOZUEZYRPOHIO-UHFFFAOYSA-N iridium atom Chemical compound [Ir] GKOZUEZYRPOHIO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940102253 isopropanolamine Drugs 0.000 description 1
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 1
- VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N maleic acid Chemical compound OC(=O)\C=C/C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N 0.000 description 1
- 239000011976 maleic acid Substances 0.000 description 1
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 1
- YACKEPLHDIMKIO-UHFFFAOYSA-N methylphosphonic acid Chemical compound CP(O)(O)=O YACKEPLHDIMKIO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000000896 monocarboxylic acid group Chemical group 0.000 description 1
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 229910052762 osmium Inorganic materials 0.000 description 1
- SYQBFIAQOQZEGI-UHFFFAOYSA-N osmium atom Chemical compound [Os] SYQBFIAQOQZEGI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000007800 oxidant agent Substances 0.000 description 1
- MUMZUERVLWJKNR-UHFFFAOYSA-N oxoplatinum Chemical compound [Pt]=O MUMZUERVLWJKNR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000005949 ozonolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 229910052763 palladium Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000005501 phase interface Effects 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- XYFCBTPGUUZFHI-UHFFFAOYSA-O phosphonium Chemical class [PH4+] XYFCBTPGUUZFHI-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 1
- 150000004714 phosphonium salts Chemical class 0.000 description 1
- 150000003013 phosphoric acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 231100000208 phytotoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000000885 phytotoxic effect Effects 0.000 description 1
- 229910052697 platinum Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910003446 platinum oxide Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 1
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 235000019260 propionic acid Nutrition 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 235000015136 pumpkin Nutrition 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- IUVKMZGDUIUOCP-BTNSXGMBSA-N quinbolone Chemical compound O([C@H]1CC[C@H]2[C@H]3[C@@H]([C@]4(C=CC(=O)C=C4CC3)C)CC[C@@]21C)C1=CCCC1 IUVKMZGDUIUOCP-BTNSXGMBSA-N 0.000 description 1
- 238000004064 recycling Methods 0.000 description 1
- 230000001172 regenerating effect Effects 0.000 description 1
- 229910052703 rhodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010948 rhodium Substances 0.000 description 1
- MHOVAHRLVXNVSD-UHFFFAOYSA-N rhodium atom Chemical compound [Rh] MHOVAHRLVXNVSD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052707 ruthenium Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000005070 sampling Methods 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 229910001220 stainless steel Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010935 stainless steel Substances 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 230000002195 synergetic effect Effects 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N trans-butenedioic acid Natural products OC(=O)C=CC(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 1
- 229910052723 transition metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000003624 transition metals Chemical class 0.000 description 1
- 239000002699 waste material Substances 0.000 description 1
- 229910052725 zinc Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011701 zinc Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P13/00—Preparation of nitrogen-containing organic compounds
- C12P13/04—Alpha- or beta- amino acids
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
- C07C51/00—Preparation of carboxylic acids or their salts, halides or anhydrides
- C07C51/347—Preparation of carboxylic acids or their salts, halides or anhydrides by reactions not involving formation of carboxyl groups
- C07C51/373—Preparation of carboxylic acids or their salts, halides or anhydrides by reactions not involving formation of carboxyl groups by introduction of functional groups containing oxygen only in doubly bound form
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
- C07F9/00—Compounds containing elements of Groups 5 or 15 of the Periodic Table
- C07F9/02—Phosphorus compounds
- C07F9/28—Phosphorus compounds with one or more P—C bonds
- C07F9/38—Phosphonic acids [RP(=O)(OH)2]; Thiophosphonic acids ; [RP(=X1)(X2H)2(X1, X2 are each independently O, S or Se)]
- C07F9/3804—Phosphonic acids [RP(=O)(OH)2]; Thiophosphonic acids ; [RP(=X1)(X2H)2(X1, X2 are each independently O, S or Se)] not used, see subgroups
- C07F9/3808—Acyclic saturated acids which can have further substituents on alkyl
- C07F9/3813—N-Phosphonomethylglycine; Salts or complexes thereof
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
- C12P7/40—Preparation of oxygen-containing organic compounds containing a carboxyl group including Peroxycarboxylic acids
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
- C12P7/40—Preparation of oxygen-containing organic compounds containing a carboxyl group including Peroxycarboxylic acids
- C12P7/42—Hydroxy-carboxylic acids
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
Description
Oblast techniky
Vynález se týká způsobu výroby směsí kyseliny glyoxylové a kyseliny aminomethylfosfonové (AMPA) a následující výroby N-(f osf onomethyl )glycinu, který bývá označován názvem glyfosát. Konkrétněji se vynález týká enzymatického postupu, který zahrnuje reakci kyseliny glykolové s kyslíkem ve vodném roztoku za přítomnosti AMPA a katalyzátorů skládajících se z glykolát oxidasy [ (S)—2— hydroxykyselina oxidasa, EC 1.1.3.15] a katalasy (EC 1.11.1.6), za vzniku směsi obsahující glyoxylovou kyselinu a AMPA in šitu, kterážto směs se potom hydrogenuje, za vzniku N-(f osf onomethyl Jglycinu, což je postemergentní fytotoxická látka a herbicid se širokým spektrem účinnosti, užitečný při regulaci růstu širokého rozsahu rostlin.
Dosavadní stav techniky
Glykolát oxidasa je enzym, který se' běžně nalézá v buňkách listů zelených rostlin a savčích buňkách a který katalýzuje oxidaci glykolové kyseliny na glyoxylovou kyselinu za současné'tvorby peroxidů vodíku. Tuto reakci lze popsat následující chemičkou rovnicí: 4 7 ' * í - -----hoch2co2h + o2 ——:-> ochco2h + h2o2
N. E. Tolbert et al., (J. Biol. Chem., sv. 181, str. 905 - 914 (1949)) poprvé oznámili objev enzymu extrahovaného z listů tabáku, který katalýzuje oxidaci glykolové kyseliny na kyselinu mravenčí a oxid uhličitý přes tvorbu meziproduktu, kterým je glyoxylová kyselina.
Přídavkem určitých sloučenin, jako je ethylendiamin bylo možno omezit další oxidaci intermediární glyoxylové
.....‘ kyseliny. Podle této citace se oxidace provádějí při pH přibližně 8, obvykle za použití kyseliny glykolové v koncentraci přibližně 3 až 40mM (mmol/1). Optimální hodnota pH pro oxidaci glykolátu je údaje 8,9. Bylo oznámeno, že kyselina šťavelová (v lOOmM koncentraci) inhibuje katalytické působení glykolát oxidasy. Podobně, K. E. Richardson a N. E. Tolbert, J. Biol. Chem., sv. 236. str. 1280— 1284 (1961) ukázali, že pufry obsahující tris(hydroxymethyi)aminomethan (TRIS) inhibují tvorbu kyseliny šřavelové při oxidaci glykolové kyseliny, která je katalýzována glykolát oxidasou. C. O. Clagett, N. E. Tolbert a R. H. Burris (J. Biol. Chem., sv. 178, str. 977 - 987 (1949)) oznámili že, optimální hodnota pH pro oxidaci
.. glykolové kyseliny? kyslíkem, která je katalýzována glykolát ; oxidasou,“ je„ přibližně? 7,8 - 8,6 a optimální teplota leží v rozmezí od :35 do 40 °C< „ ?;I. Zelitch a S. Ochoá [J. Biol. Chem., sv. 201, str. 707 - 718 (1953)] a J. C. Robinson ~et^al. ,-(J..Biol. Chem. , sv. 237, str. 2001 - 2009 (1962) ] oznámili, že tvorba
77kyselprie oxidaci glýkolově ή ; kyseliny. půsoJiehím/glykqlátýqxidasy;ζβ;& špenátu je ^důsledkem
-;neenzymatické; reakcej peroxidu?<yqdíku_. sj glyoxylovou kyselinou, ;6> autoři žjiětili^žeý-přídavkem; kátalasy, což, je enzym, ; který katalýzuj eí rózklad.peroxidu-vodíku, e j e, možno pods tatně zlepšit výtěžky glyoxylové kyseliny tím, že se potlačí tvorba:* kyseliny;, mravenčí. a. oxidu .uhličitého. Také bylo zjištěno, že lze podstatně zvýšit stabilitu glykolát oxidasy přídavkem FMN (flavinmononukleotidu).
N. A. Frigerio a H. A. Harbury [J. Biol. Chem., sv. 231, str. 135 - 157 (1958)] oznámili přípravu a vlastnosti glykolová kyselina oxidasy, izolované ze špenátu. Bylo zjištěno, že tento purifikovaný enzym je velmi nestálý v roztoku. Tato nestálost byla vysvětlována poměrně slabou vazbou flavinmononukleotidu (FMN) k účinnému místu enzymu a disociací enzymaticky účinných tetramerů a/nebo oktamerů enzymu na enzymaticky neúčinné monomery a dimery, které se nevratně agregují a srážejí. Přídavkem FMN (flavinmononukle otidu) k roztokům tohoto enzymu bylo možno dosáhnout podstatného zvýšení stability enzymu. Vysoké koncentrace proteinu nebo vysoká iontová síla jsou schopny enzym udržet ve formě oktamerů nebo tetramerů.
Existují četné další odkazy, které se vztahují k oxidaci glykolové kyseliny, která je kagalýzována glykolová kyselina oxidasou. Izolace enzymu (a zkušební metoda) jsou popsány v následujících odkazech: I. Zelitch, Methods in Enzymology, sv. 1, Academie Press New York, 1955, str. 528 532 (enzym ze špenátových a tabákových listů); M. Nishimura et al., Arch. Biochem. Biophys., sv. 222, str. 397 - 402 (1983) (z kotyledonů tykve); H. Asker a D. Davies, Biochem. Biophys. Acta, sv. 761, str. 103 - 108 (1983) (z jater krysy); a M. J. Emes a K. H. Erismaňn, Int. J. Biochem., sv 16, str. 1373 - 1378 (1984) (z Lemma minor L.). Strukturu tohoto enzymu rovněž oznámili E. Cederlund eť al.,*[Eur. J. Biochem., sv. 173, str. 523 - 530 (1988) a Y. Linďquist a C Branden, J. Biol. Chem., sv. 264, str. 3624 - 3628 (1989)].
Jsou známy četné metody pro přípravu N-(fosfóňómethyl)glycinu z áminomethylf osf onové kyseliny a1 glyoxylové kyseliny. Jedna taková metoda., která je popsána v Rogers et al., Evropská patentová přihláška č. 186 648, zahrnuje kondenzaci glyoxylové kyseliny nebo její soli s aminomethylfosfonovou kyselinou nebo její solí, za vzniku meziproduktu, který je obvykle považován za aldimin (Schiffovu bázi), který se bez izolace redukuje, například katalytickou hydrogenací, na N-(f osf onomethyl )glycin. Při druhé z těchto metod (Gaertner, US patent 4 094 928) se stejný meziprodukt, karbonylaldiminomethanfosfonát,
připravuje reakcí esteru kyseliny glyoxylové s esterem aminomethylfosfonové kyseliny v nevodném rozpouštědle. Po azeotropickém oddestilování vody a odstranění rozpouštědla se izolovaný ester karbonylaldiminomethanfosfonové kyseliny redukuje a esterové skupiny se hydrolýzují, za vzniku N-(fosfonomethyl)glycinu.
Výše uvedené postupy, které vedou k N-(fosfonomethyl )glycinu, mají nevýhodu v tom, že glyoxylová kyselina je velmi nákladná výchozí látka, a proto je snaha získat požadovanou látku méně nákladnými způsoby. Existující způsoby přípravy glyoxylové kyseliny, jako je hydrolýza dihalogenoctové kyseliny, elektrolytická redukce kyseliny šťavelové, oxidace glyoxalu, katalytická oxidace ethylenu nebo acetaldehydu a ozonolýza kyseliny maleinové, jejích esterů,nebo jejího anhydridu, jsou v praxi doprovázeny jedním nebo více problémy, jako jsou například nákladné stupně separace a čištění, nízké výtěžky nebo velké množství odpadních produktů. Způsob popsaný Gaertnerem je též 1 nevýhodný z toho důvodu, že vyžaduje několik přídavných' stupňů (které j sou spojeny s odpovídáj ícím poklesem výtěžku). a nežádoucí izolací meziproduktu.
Další způsob syntézy N-(fosfonomethyljglycinu, který, j e popsán vJ&S patentu č. 4 6 7 o 191 (Kleiněr) ? zahrnuj e reakci aminomethyífosfónóvé kyseliny nebo její soli přibližně s dvěma molárními ekvivalenty glyoxylové kyseliny ve vodném prostředí. Nadbytek glyoxylové kyseliny zřejmě působí jako redukční činidlo, které převádí intermediární reakční produkt kyseliny glyoxylové a kyseliny aminomethylfosfonové na požadovaný N-(f osf onomethyl) glycin a sám o sobě se oxiduje na jeden nebo více vedlejších produktů, včetně oxidu tíhličitého. Podobně, Fields et al., (US patent č. 4 851 159) připravují N-(f osf onomethyl) glycin zahříváním N-acylaminomethylfosfonové kyseliny s glyoxylovou kyselinou nebo jejím derivátem. Molární poměr glyoxylové reakční složky k N-acylaminosložce je přednostně v rozmezí od 2 do 1. Při nižších molárních poměrech se dosahuje snížených výtěžků.
Postupy podle Kleinera a Fieldse et al. mají nevýhodu nejen v tom, že se při nich používá poměrně nákladné glyoxylové kyseliny, nýbrž i v tom, že se tato kyselina také obětuje jako redukční činidlo (tj. na každý mol vyrobeného N-(fosfonomethyl)glycinu se používá přibližně jednoho mol glyoxylátu jako redukčního činidla) a jako kondenzační činidlo pro amino(nebo N-acylamino)methylfosfonovou kyselinu.
Podstata vynálezu
Jedním aspektem tohoto vynálezu je způsob výroby směsí kyseliny glyoxylové (nebo její soli) a kyseliny aminomethylfosfonové (AMPA) (nebo její soli) oxidací ' glykolové kyseliny kyslíkem ve vodném roztoku a za t přítomnosti’ AMPÁ a dvou enzymatických katalyzátorů, tj. glykolát oxidasy ( (S) -2-hýdroxykyselina oxidasy, EC 1.1.3.15] a kaťálasy (EC 1.11.1.6). Jako takový) představuje tento první aspekt vynálezu způsob výroby meziproduktu pro výrobu N-(fosfonomethyl)glycinu,J kterýžto meziprodukt zahrnuje složku glyóxylové kyseliny a složku aminomethylfosfonové kyseliny. Tento způsob zahrnuje enzymaticky katalyzovanou konverzi složky glykolové kyseliny na složku glyoxylové kyseliny za přítomnosti aminomethylfosfonové kyseliny.
Prvním aspektem předmětu vynálezu je tedy způsob výroby směsi, která je užitečná jako meziprodukt pro výrobu N—(fosfonomethyl)glycinu, jehož podstata spočívá v tom, že zahrnuje stupně tvorby glyoxylové kyseliny in šitu, které se provádějí tak, že se do vodného roztoku složky glykolové kyseliny a složky aminomethylfosfonové kyseliny, zavede první. katalyzátor, který je schopen katalýzovat oxidaci složky glykolové kyseliny kyslíkem na složku glyoxylové kyseliny a peroxid vodíku a druhý katalyzátor, který je schopen katalýzovat rozklad peroxidu vodíku, hodnota pH tohoto roztoku se nastaví do rozmezí od 6 do asi 10, roztok se uvede do styku se zdrojem kyslíku při účinné teplotě a po dobu postačující pro konverzi přinejmenším části složky glykolové kyseliny na složku glyoxylové kyseliny, za přítomnosti složky aminomethylfosfonové kyseliny a styk roztoku s kyslíkem se přeruší před převedením tohoto meziproduktu na N-(fosfonomethyl)glycin.
Dalším aspektem tohoto vynálezu je způsob výroby N-(fosfonomethylJglycinu, který se provádí tak, že se oxiduje glykolové kyselina kyslíkem ve vodném roztoku a za přítomnosti aminomethylfosfonové kyseliny a dvou enzymatických katalyzátorů, tj.^glykolát^oxidasy [ (S)-2-hydroxykyselina .oxidasy, ECL,1.1.3.15·].* a katalasy ( ECTIT.11.176)ž ^seýredůlai Jet v znikláí ^mes 7 glyoacylóyé--------kyseliny a aminomethylf osf onovékyseliný. vzniklá^ in šitu ve vodném:roztoku, za vzniku požadovaného N-(fosfonomethýl)glycinu,, který představuj e_ postemergentně účinnou^ fytotoxickou látku a herbicid. .
‘ *’ O Λ , ~ .
. . ’ · -, · -.· r v. ·' i}-. v:·:·-·-/.?’-} , 'tj-, ·
Druhým aspektem tohoto vynálezu je tedy způsob výroby N-(fosfonomethylJglycinu, jehož podstata spočívá v tom, že se
a) vyrobí směs složky glyoxylové kyseliny a složky aminomethylfosfonové kyseliny oxidací glykolové kyseliny kyslíkem ve vodném roztoku za přítomnosti aminomethylfošfonové kyseliny a enzymu glykolát oxidasy a katalasy a
b) směs vyrobená ve stupni a) se redukuje, za vzniku N-( fosf onomethyl) glycinu.
Jinými slovy, druhý aspekt tohoto vynálezu spočívá v tom, že se směs, získaná podle prvního aspektu tohoto vynálezu, podrobí hydrogenaci, za vzniku N-(fosfonomethyl)glycinu.
Je třeba si uvědomit, že směsi vyrobené enzymatickou oxidací glykolové kyseliny za přítomnosti aminomethylfosfonové kyseliny způsobem podle vynálezu nutně obsahují kromě požadované složky glyoxylové kyseliny také různé vedlejší produkty oxidace (jako jejichž neomezující příklady je možno uvést šíavelany, mravenčany a oxid uhličitý). V těchto směsích budou také přítomny nezreagované glykolátý, jakož i různé přísady, jako je flavinmononukleotid (dále označovaný zkratkou FMN) apod. z nichž všechny mohou popřípadě ovlivňovat požadovanou následnou hydrógehační reakci Λ Tak například se z jistilo (na toto zjištění se vynález neomezuje), že jak formiát tak FMN* sriižuj i* dosaženou uhlíkovou bilanci / pokud jsóiír přítomny v průběhu hydrogenace glyoxylové kyseliny, prováděné za přítomnosti AMPA. Předmětem tohoto vynálezu je proto dále i způsob odstraňování a regenerace enzymů z roztoku vzniklého při enzýmatickě/jxidaci a případný způsob odstraňování FMN před hydrogenačním stupněm.
Jako katalyzátorů se přednostně používá enzymů. Prvním enzymem je přednostně glykolát oxidasa E (S)-2-hydroxykyselina oxidasa, EC 1.1.3.15) a druhým enzymem je přednostně katalasa (EC 1.11.1.6). Po ukončení kontaktu roztoku s kyslíkem za přítomnosti katalyzátorů či enzymů se katalyzátory či enzymy odstraní, například ^t/iUióčtiiiii.t^AÍÍtdsi^íi.iZUíriTi.íS.
iXi-Vb· < Lí^ííiVi ί */^Λ * ·Υ>ί'iíÁM.·» :XJ 1’· i filtrací nebo centrifugací a teprve potom se roztok vystaví redukčním podmínkám, které jsou nutné pro výrobu N-(fosfonomethyl)glycinu.
Díky tomu, že způsob podle vynálezu umožňuje vyhnout se přípravě glyoxylové kyseliny ve zvláštním stupni představuje účinnější a ekonomičtější způsob výroby N-(fosfonomethyl)glycinu.
Předmětem vynálezu je tedy zlepšený způsob výroby N-(fosfonomethyl)glycinu zahrnující enzymatickou přípravu a následující redukci směsi glyoxylové kyseliny a aminomethyl fosfonové kyseliny, který se vyhýbá nutnosti odděleně připravovat glyoxylovou kyselinu.
Předmět vynálezu také představuje způsob, při němž se glyoxylové , kyselina enzymaticky tvoří in šitu za přítomnosti, aminomethylfosfonové kyseliny ze snadno dostupného prekursoru,. totiž, glykolové. kyseliny, což se v konečném důsledkusprojevuje tím, že jek dispozici účinnější auhospcdarnějšíýzpůsobryýroby^N-(f osf onomethyl) glycinu.-----------_ Následuje podrobnější popis vynálezu.
.«A
Katalytická oxidace, glykolové kyseliny nebo její vhodné soli se účelně provádí tak, že se glykolové kyselina uvádí do styku se zdrojem molekulárního kyslíku za přítomnosti enzymatického katalyzátoru, který katalýzu je reakci glykolové kyseliny s kyslíkem za vzniku glyoxylové kyseliny. Jedním takovým katalyzátorem je enzym glykolát oxidasa (EC 1.1.3.15), který je též znám pod označením kyselina glykolové oxidasa. Glykolát oxidasa se může izolovat z četných zdrojů, které jsou v tomto oboru dobře známy. Glykolát oxidasa, které, se při reakci používá, by měla být přítomna v účinné koncentraci, obvykle koncentraci
- 9 od asi 0,01 do asi 1000 IU/ml, přednostně od asi 0,1 do asi 4 IU/ml. Jednotka IU (International Unit) je definována jako množství enzymu katalýzu jící transformaci 1 gmol substrátu za minutu. Způsob stanovení tohoto enzymu je popsán v I. Zelitch a S. Ochoa [J. Biol. Chem., sv. 201, str. 707 - 718 (1953)]. Této metody se také používá pro stanovení aktivity regenerované nebo recyklované glykolát oxidasy.
Přestože je enzymaticky katalýzovaná reakce glykolové kyseliny s kyslíkem dobře známa, až dosud nebylo dosaženo vysoké selektivity na glyoxylovou kyselinu a nejsou k dispozici žádné zprávy o tom, že by enzymatická oxidace glykolové kyseliny, byla prováděna za přítomnosti aminomethylfosfonové kyseliny (AMPA). Dřívější patentová přihláška,., tj. mezinárodní přihláška PCT s publikačním číslem WO 91/05868, z 2. května 1991 o názvu Production of Glyoxylic Acid by Enzymatic Oxidation of Glycolic Acid popisuje, způsob enzymatické konverze glykolové kyseliny na glyoxylovou kyselinu za přítomnosti kyslíku, aminového pufru a rozpustného enzymu glykolát oxidasy a katalasy. Při tomto způsobu byl demonstrován neočekávaný synergický účinek vyplývající ž použití katalasy (za účelem rozložení peroxidu vodíku, který vzniká jako vedlejší produkt) a aminového pufru, který umožňuje získat chemický adukt s vyrobenou glyoxylovou kyselinou (což omezuje další oxidaci této látky). Ani přidání samotné katalasy ani přidání samotného aminového pufru nemá za následek dosažení vysoké selektivity, která je pozorována, když jsou najednou přítomny obě tyto látky a téměř kvantitativní výtěžek glyoxylové kyseliny, kterého se při reakci dosahuje je vyšší, než je výtěžek, který mohl být očekáván na základě součtu účinků katalasy a aminového pufru, pokud se těchto látek používá jednotlivě.
- 10 .Zjistilo se, že zlepšení výtěžků glyoxylátu, kterého se dosahuje tím, že se vytvoří komplex glyoxylátu a aminového pufru, který je odolný vůči oxidaci (přes tvorbu N-substituovaného hemiaminalu a/nebo iminu), je závislé na hodnotě pKa protonovaného aminového pufru. Výsledek oxidace vodného roztoku glykolové kyseliny (ve formě 0,25M roztoku) za přítomnosti aminového pufru (0,33M, pH 8,3), gíykolát oxidasy (0,5 IU/ml), katalasy (1400 IU/ml) a FMN (0,01mM) při 30 °C a za tlaku kyslíku 0,1 MPa za dobu 24 hodin je uveden v následující tabulce, současně s výsledky reakcí, které byly prováděny za použití dvou pufrú, u nichž nelze očekávat, že by mohly vytvářet komplex s glyoxylátera (fosfátový a bicinový pufr):
| Pufr (pKa) | Oxalát (%) | Glyoxylát (%) | Gíykolát (%.) | Formiát (%) |
| ethylendiamin | ||||
| (6,85; 9,93) | 6,8 | 85,5 | 0,8 | 2,4 |
| TRIS (8,08) | 1,1 | 81,0 | 2,8 | 12,0 |
—methylenamin---------
| (10,62) | 1,0 | 53,9 | 39,8 | 5,1 |
| ethanolamin | ||||
| (9/50) | 1/8 | 69,6 | 4,81 | 24,5 |
| chlorid amonný | ||||
| (9/24) | 1,1 | 39,9 | 37,7 | 18,9 |
| isopropanolamin | ||||
| (9,43) | 2,0 | 60,0 | 4,8 | 37,4 |
| bicin (8,30) | 1/0 | 24,9 | 25,6 | 43,8 |
| fosfát | ||||
| (2,15; 7,10; 12,3) | 0,7 | 24,5 | 52,4 | 21,2 |
Ze zkoušených aminových pufrů se s aminy, jejichž hodnota pKa je přibližně rovna pH reakční směsi nebo nižší (tj. ethylendiaminem a TRIS) dosahuje podstatně vyšších výtěžků glyoxylátu (a nižší tvorby formiátu a oxalátu) ve srovnání s aminovými pufry, jejichž hodnoty pKa jsou vyšší, než je hodnota pH, při níž byla reakce prováděna. Tyto výsledky jsou konsistentní s očekáváním, že přítomnost neprotonovaného aminu představuje nutnou podmínku pro tvorbu oxidačně stálého N-substituovaného hemiaminalového a/nebo iminového komplexu s glyoxylátem. Aminový pufr, jehož hodnota pKa je podstatně vyšší než pH reakční směsi, by byl v reakční směsi přítomen převážně ve formě protónovaného amoniového iontu, a proto by byla menší pravděpodobnost vzniku takových komplexů s glyoxylátem.
Hodnota pKa protónovaného aminu odvozeného od aminomethylfosfonové kyseliny (AMPA) je údajně 10,8 (Lange’s Handbook of Chemistry, J. A. Dean, Ed., McGraw-Hill, New York, 1979,12. vydání) a proto nebylo možno očekávat, že přídavkem AMPA při enzymatické oxidaci glykolové kyseliny při pH v rozmezí od 7 do 9 by se mohlo projevit zvýšením výtěžků glyoxylové kyseliny. Připojené příklady ilustrují, že za použití tohoto aminu je možno dosáhnout výtěžků kyseliny glyoxylové až 92 %. Kromě neočekávaných vysokých výtěžků glyoxyloyé kyseliny se použití AMPA také projevuje ve zlepšené regeneraci aktivity glykolát oxidasy a katalasy, ve.srovnání s reakcemi, které se provádějí za nepřítomnosti přidané AMPA (příklad 13). Při postupech, při nichž se používá enzymových katalyzátorů bývá regenerace katalyzátoru pro recyklování obvykle nutná, poněvadž náklady na katalyzátor tvoří podstatnou složku celkových výrobních nákladů.
Optimálních výsledků při použití glykolát oxidasy jako katalyzátoru oxidační konverze glykolové kyseliny na glyoxylovou kyselinu se získají v tom případě, že se do reakčního roztoku přidá katalyzátor rozkladu peroxidu
- 12 r vodíku. Jedním takovým katalyzátorem, který způsobuje rozklad peroxidu a který je účinný v kombinaci s glykolát oxidasou, je enzym katalasa (E.C.1.11.1.6). Katalasa katalýzuje rozklad peroxidu vodíku na vodu a kyslík a předpokládá se, že příčinou zlepšení výtěžků glyoxylové kyseliny při způsobu podle vynálezu, poněvadž urychluje rozklad peroxidu vodíku vznikajícího spolu s glyoxylovou kyselinou při glykolát oxidasou katalýzované reakci glykolové kyseliny s kyslíkem. Koncentrace katalasy by měla být v rozmezí od 50 do 50000 IU/ml, přednostně 500 až 15000 IU/ml. Koncentrace katalasy a glykolát oxidasy se přednostně nastavuje do výše uvedených rozmezí tak, aby poměr (uváděný pro každý enzym v IU) katalasy ke glykolát oxidase byl přinejmenším asi 250:1.
Další případnou, ale často prospěšnou přísadou k reakčnímu roztoku je flavinmononukleotid (FMN), kterého se obvykle používá v koncentraci od 0,0 do asi 2,0mM, přednostně asi 0,01 až asi 0,2mM. Předpokládá se, že FMN zvyšuje produktivitu glykolát oxidasy, čímž je míněno množství glykolové kyseliny převedené na glyoxylovou------kyselinu, vztažené na jednotku enzymu. Uváděná koncentrace přidaného FMN představuje přídavnou koncentraci FMN k množství FMN, které je popřípadě do reakčního systému zavedeno spolu s enzymem (FMN se totiž často přidává· k enzymu v průběhu jeho přípravy). Struktura FMN a způsob jeho analýzy jsou popsány v K. Yagai, Methods of Biochemical Analysis, sv. X, Interscience Publishers, New York, 1962, str. 319 - 355.
Glykolová kyselina (kyselina 2-hydroxyoctová) je obchodné dostupná. Při reakci podle vynálezu leží její počáteční koncentrace v rozmezí od 0,10 do 2,0, přednostně od 0,25 do l,0M. Může se jí používat jako takové nebo ve formě kompatibilní soli, tj. soli, která je rozpustná ve vodě a jejíž kation nenarušuje požadovanou konverzi glykolové kyseliny na glyoxylovou kyselinu nebo následující reakci získané glyoxylové kyseliny s aminomethylfosfonovou kyselinou, kterou se připravuje N-(fosfonomethyl)glycin. Vhodná kompatibilní solitvorná kationtové skupina se snadno může zjistit pokusně. Jako reprezentativní příklady vhodných solí je možno uvést soli alkalických kovů, kovů alkalických zemin, amonné soli, substituované amoniové soli, fosfoniové soli a substituované fosfoniové soli.
Konverze glykolové kyseliny na glyoxylovou kyselinu se účelně a přednostně provádí ve vodných prostředích. Do tohoto vodného prostředí se přidává aminomethylfosfonová kyselina (AMPA) nebo její vhodná sůl až do dosažení molárního poměru AMPA/glykolová kyselina (výchozí množství) , v rozmezí od 0,01/1,0 do 3,0/1,0, přednostně od 0,25/1,0 do 1,05/1,0. Po smísení AMPA s glykolovou kyselinou ve vodném roztoku se hodnota pH výsledné směsi nastaví na 6 až 10, přednostně7,0 až 9,0. V tomto rozmezí pH se může přesná hodnota pH nastavit,na požadovanou hodnotu přídavkem , .jakékoliv kompatibilní,neinterferuj ící báze, jako je hydroxid uhličiban^ hydrogenxíhličitari a fosforečnan alkalického kovu. V průběhu reakce hodnota, pH reakční směsi poněkud klesá, takže je často užitečné zahajovat reakci ._y blízkosti horní meze rozmezí pH, v němž má enzym maximální aktivitu, t j. při asi 9,0 až 8,5, aby mohla hodnota pH v průběhu reakce poklesnout. Hodnota pH se popřípadě také může udržovat separátním přidáváním neinterferujícího anorganického nebo organického pufru, poněvadž aktivita enzymu se mění s pH.
Je známo, že glykolová kyselina a glyoxylová kyselina je vysoce disociována ve vodě a při pH v rozmezí od 6 do 10 je převážně, pokud ne úplně, přítomna ve formě glykolátových či glyoxylátových iontů. Odborníkům v tomto oboru je také zřejmé, že glyoxylová kyselina (a konjugovaná báze, glyoxylátový anion) může být též přítomna v hydratované formě, například ve formě sloučeniny Vzorce (HO)2CHCOOH a/nebo ve formě hemiacetalu vzorce HOOCCH(OH)OCH(OH)COOH, kteréžto sloučeniny a jejich aniontové varianty jsou ekvivalentní glyoxylové kyselině a jejímu aniontu v tom smyslu, že jsou vhodnými reakčními složkami pro tvorbu N-(fosfonomethyl)glycinu.
Kyslík (02), tj. oxidační činidlo pro konverzi glykolové kyseliny na glyoxylovou kyselinu, se může k reakční směsi přidávat v plynné formě tak, že se kapalná fáze míchá na fázovém rozhraní plyn-kapalina nebo se může zavádět prostřednictvím membrány propustné pro kyslík. Předpokládá se, že za většiny podmínek je reakční rychlost přinejmenším z části kontrolována rychlostí, kterou se kyslík rozpouští ve vodném prostředí. Přestože se tedy může kyslík přidávat do reakční směsi ve formě vzduchu, přednostně se používá kyslíku v poměrně čisté formě a dokonce se pracuje za zvýšených tlaků. Ačkoliv neexistuje žádná horní hranice^J^aku kyslíku, může se používat tlaku kyslíku až do 5 MPa a přednostní horní hranice tlaku kyslíku je 1,5 MPa. Míchání je důležité pro zajištění vysokého stupně rozpouštění kyslíku a tedy vysoké reakční rychlosti. Může se použít jakékoliv vhodné formy míchání, jako například míchání rotačním míchadlem. Na druhé straně, jak je dobře známo odborníkům v oboru enzymů, mohou vysoké střižné síly při míchání nebo míchání s vysokou tvorbou pěny mít za následek snížení aktivity enzymu nebo enzymů a je zapotřebí se mu vyhnout.
Reakční teplota je důležitou proměnnou, poněvadž ovlivňuje reakční rychlost a stabilitu enzymů. Může se pracovat při reakční teplotě od 0 do 40 °C, ale přednostní rozmezí reakční teploty je 5 až 15 °C. Jestliže se pracuje v přednostním teplotním rozmezí, maximalizuje se regenerovaná aktivita enzymu na konci reakce. Teplota by neměla být tak nízká, aby vodný roztok začal mrznout. Teplotu lze regulovat běžnými metodami jako například tím, že se pracuje v duplikátorové reakční nádobě a duplikátorovým pláštěm se vede teplosměnná kapalina o vhodné teplotě. Reakční nádoba může být zhotovena z jakéhokoliv materiálu, který je inertní vůči reakčním složkám.
Po skončení reakce se mohou enzymy oddělit filtrací nebo odstřelováním a mohou se recirkulovat. Alternativně se mohou denaturovat a vysrážet zahřátím, například pětiminutovým zahříváním na 70 °C a/nebo se mohou ponechat v reakční směsi, pokud jejich přítomnost při následujících stupních konverze směsi glyoxylové kyseliny a aminomethylfosfonové kyseliny na N-(fosfonomethyl)glycin a izolace N-(fosfonomethyDglýčinu z reakční směsi není na závadu.
Po ukončení kontaktu reakčního roztoku s kyslíkem a přednostně po*odstranění enzymu glykolát oxidasy a enzymu katalasy, pokud jsou tyto enzymy přítomny/ se může popřípadě odstranit, z reakční směsi flavihmonohůkléotid1 (FMN) tím, že se roztok uvede do styku s aktivnímMhlím. Roztok obsahující glyoxylóvou kyselinu a ámiriométhylf osf onovou kyselinu (o nichž šé předpokládá, že jsou v rovnováze s odpovídajícím iminem) se redukuje, za vzniku N-(f osf onomethyl Jglycinu.
Katalytická hydrogenace představuje přednostní metodu pro přípravu N-(f osf onomethyl Jglycinu ze směsi glyoxylové kyseliny a aminomethylfosfonovové kyseliny. Katalyzátory, které jsou vhodné pro tento účel zahrnují (uvedený výčet není omezující) různé kovy ze skupiny platiny, jako je iridium, osmium, rhodium, ruthenium, platina a paladium a také různé jiné přechodové kovy, jako je kobalt, měď, nikl a zinek. Katalyzátor může být čistý (tj. bez nosiče), například Raneyův nikl nebo oxid platiny nebo může být nanesen na nosiči, jako například platina na uhlíku, paladium na oxidu hlinitém nebo nikl na křemelině. Přednost se dává paladiu na uhlíku, niklu na křemelině a Raneyovu niklu.
Hydrogenace se může provádět při pH v rozmezí od 4 do 11, přednostně od 5 do 10. V tomto rozmezí pH se může přesná hodnota nastavovat na požadovanou hodnotu přídavkem jakékoliv kompatibilní neinterferující báze nebo kyseliny.
Jako neomezující příklady vhodných bází je možno uvést hydroxidy, uhličitany, hydrogenuhličitany a fosforečnany alkalických kovů a jako neomezující příklady vhodných kyselin je možno uvést kyselinu chlorovodíkovou, kyselinu sírovou nebo kyselinu fosforečnou.
Hydrogenační teplota a tlak mohou kolísat v širokých mezích. Teplota může být obecně v rozmezí od 0 do 150, přednostně od 20 do 90 °C, zatímco tlak vodíku leží obvykle v rozmezí přibližně od tlaku atmosferického do asi
MPa, přednostně od 0,1 do 1,0 MPa. Hydrogenačního__________________ katalyzátoru se používá v minimální koncentraci, která postačuje pro dosažení požadované reakční rychlosti a úplné konverze výchozích látek za zvolených reakčních podmínek.
Tato koncentrace se snadno určí pokusem. Katalyzátoru se může používat v množství od 0,001 do 20 nebo více dílů hmotnostních na 100 dílů hmotnostních směsi glyoxylové kyseliny a AMPA, použité při reakci.
N-(fosfOnomethyl)glycin, což je látka důležitá jako postemergentní herbicid, se může izolovat z redukčního roztoku, at již se použije jakéhokoliv způsobu redukce, libovolným způsobem izolace známým v tomto oboru, jako jsou například způsoby popsané v US.patentech č. 4 851 159 a
670 191 a Evropských patentových přihláškách č. 186 648 a 413 672.
V následujících příkladech, které mají za úkol dále objasnit vynález, aniž by jej omezovaly, jsou výtěžky glyoxylátu, formiátu a oxalátu a regenerovaného glykolátu uváděny v procentech, vztažených na celkové množství glykolové kyseliny přítomné na počátku reakce. Analýzy reakční směsi se provádějí za použití vysokotlaké kapalinové chromatografie. Analýzy organických kyselin se provádějí za použití sloupce Bio-Rad HPX-87H a AMPA a N-(fosfonomethyl)glycin se analýzují za použití analytického sloupce Bio-Rad Aminex glyphosate. Uváděné výtěžky N-(fosfonomethyl)glycinu jsou vztaženy budf na glyoxylát nebo AMPA, v závislosti na tom, která reakční složka je při reakci omezující.
Příklady provedeni vynálezu
Příklad 1 ' '
Do 85ml Fischer-Porterovy skleněné aerosolové reakční nádoby se umístí magnetická míchací tyčinka a 10 ml vodného roztoku obsahujícího glykolovou kyselinu (0,25M), aminomethylfosfonovou kyselinu (AMPA, 0,263M), FMN (0,01mM), kyselinu propionovou (vnitřní standard proHPLC, 0,125M), glykolát oxidasu (ze špenátu, 1,0 IU/ml) a katalasu (z ' Aspergillus niger, 1400 IU/ml) při pH 8,5. Reakční nádoba se uzavře, směs uvnitř se ochladí na 15 °C a potom se nádoba propláchne kyslíkem tím, že se uvede kyslík až do tlaku 481 kPa a potom se tlak uvolní na tlak atmosférický, přičemž tento postup se provádí za míchání a opakuje se 5x. Potom se do nádoby uvede znovu kyslík až do tlaku 481 kPa a směs se míchá při 15 °C. Vzorkovacím otvorem se z nádoby injekční stříkačkou odebírají alikvotní vzorky (0,10 ml) (bez poklesu tlaku v nádobě) v pravidelných intervalech a tyto vzorky se analyzují HPLC, za účelem sledování postupu reakce. Po 5 hodinách reakce ukazuje HPLC obsah glyoxylátu 70,4 %, formiátu 19,6 % a oxalátu 2,2 % a obsah zbývajícího glykolátu 5,3 %. Zbytková aktivita gíykolát oxidasy je 27 % a katalasy 100 % jejich původní hodnoty.
Příklad 2 (srovnávací)
Opakuje se reakce popsaná v příkladu 1 za použití 0,33M hydrogenfosforečnanu didraselného místo 0,265M AMPA. Po 5 hodinách reakce ukazuje HPLC obsah glyoxylátu 34,1 %, formiátu 11,1 % a oxalátu 0,2 % a obsah zbývajícího glykolátu 58,7 %. Po 23 hodinách reakce ukazuje HPLC obsah glyoxylátu 39,4 %, formiátu 44,7 % a oxalátu 15,34 %, přičemž obsah zbývajícího glykolátu je nulový. Zbytková aktivita gíykolát oxidasy je 85 % a katalasy 87 % jejich původní hodnoty.
Příklad- 3 (srovnávací)
Opakuje se reakce popsaná v příkladu 1 za použití 0,263M bicinového pufru místo 0,265M AMPA. Po 5 hodinách reakce ukazuje HPLC obsah glyoxylátu 42,5 %, formiátu 49,6 % a oxalátu 10,1 % a obsah zbývajícího glykolátu 0,2 %. Zbytková aktivita gíykolát oxidasy je 47 % a katalasy 100 % jejich původní hodnoty.
Příklad 4
Opakuje se reakce popsaná v příkladu 1 za použití 5600 IU/ml katalasy z Aspergillus niger. Po 6 hodinách reakce ukazuje HPLC obsah glyoxylátu 85,5 %, formiátu 7,6 % a oxalátu 3,3 % a obsah zbývajícího glykolátu 2,5 %. Zbytková aktivita glykolát oxidasy je 36 % a katalasy 100 % jejich původní hodnoty.
Příklad 5
Opakuje se reakce popsaná v příkladu 1 za použití 14000 IU/ml katalasy z Aspergillus niger. Po 6 hodinách reakce ukazuje HPLC obsah glyoxylátu 88,0.%, formiátu 3,3 % a oxalátu 3,0 % a obsah zbývajícího glykolátu 3,4 %. Zbytková aktivita glykolát oxidasy je 28 % a katalasy 96 % jejich původní hodnoty.
p ř i k 1 a d . 6 -- . ·
.... > . .. ·. \ - .
'-v- Opakuje se reakce popsaná v příkladu 1 za použití
56000 IU/mlkatalasy z Aspergillus niger. Po 6 hodinách reakce-'ukazuje HPLC obsah glyoxylátu 84,0%p formiátu 0,4 % á oxalátu- 2,5 %J a obsah zbývajícího glykolátu 8,4 ·%.· Zbytková aktivita glykolát oxidasy je 16 % a katalasy 76 % jejich původní hodnoty.
Příklad 7
Do 85ml Fischer-Porterovy skleněné aerosolové reakční nádoby se umístí magnetická míchací tyčinka a 10 ml vodného roztoku obsahujícího glykolovou kyselinu (0,25M), aminomethylfosfonovou kyselinu (AMPA, 0,20M), FMN (0,01mM), kyselinu máselnou (vnitřní standard pro HPLC, 0,10M), glykolát oxidasu (ze špenátu, 1,0 IU/ml) a katalasu (z Aspergillus niger, 14000 IU/ml) při pH 8,5. Reakční nádoba se uzavře, směs uvnitř se ochladí na 5 °C a potom se nádoba propláchne'kyslíkem tím, že se uvede kyslík až do tlaku 481 kPa a potom se tlak uvolní na tlak atmosférický, přičemž tento postup se provádí za míchání a opakuje se 5x. Potom se do nádoby uvede znovu kyslík až do tlaku 481 kPa a směs se míchá při 5 °C. Vzorkovacím otvorem se z nádoby injekční stříkačkou odebírají alikvotní vzorky (0,10 ml) (bez poklesu tlaku v nádobě) v pravidelných intervalech a tyto vzorky se analyzují HPLC, za účelem sledování postupu reakce. Po 6 hodinách reakce ukazuje HPLC obsah glyoxylátu 92,3 %, formiátu 4,36 % a oxalátu 5,5 %, přičemž obsah zbývajícího glykolátu je nulový. Zbytková aktivita glykolát oxidasy je 87 % a katalasy 88 % jejich původní hodnoty. Koncová hodnota pH reakční směsi je 6,7.
Výsledná směs glyoxylové kyseliny (0,23M) a AMPA (0,20M) se přefiltruje v koncentračním zařízení Amicon Centriprep 10 (vylučovací mez molekulové hmotnosti 10000), aby se odstranily rozpustné enzymy a potom se filtrát umístí do 85ml Fischer-Porterovy láhve vybavené magnetickou míchací tyčinkou. Do této láhve se přidá 0,100 g 10% paladia na uhlíku, láhev se uzavře, propláchne dusíkem a potom se do ní uvede vodík do tlaku 343 kPa, načež se vzniklá směs míchá při 25 °C. Koncentrace N-(fosfonomethyl)glycinu (stanovená HPLC) je po 17 hodinách reakce 0,13M (66% výtěžek, vztaženo na AMPA).
Příklad 8
Do 85ml Fischer—Porterovy skleněné aerosolové reakční nádoby se umístí magnetická míchací tyčinka a 10 ml vodného roztoku obsahujícího glykolovou kyselinu (0z50M), aminomethylfosfonovou kyselinu (AMPA, 0,40M), FMN (0,01mM), kyselinu máselnou (vnitřní standard pro HPLC, 0,10M), glykolát oxidasu (ze špenátu, 1,0 IU/mlj a katalasu (z Aspergillus niger, 14000 IU/ml) při pH 8,5. Reakční nádoba se uzavře, směs uvnitř še ochladí na 5 °C (místo na 15 °C, jak to bylo uvedeno v některých z předchozích příkladů) a potom se nádoba propláchne kyslíkem tím, že se uvede kyslík až do tlaku 481 kPa a potom se tlak uvolní na tlak atmosférický, přičemž tento postup se provádí za , míchání a opakuje.se 5x. Potom se do nádoby uvede znovu kyslík až ďo tlaku 481 kPa a směs se~ míchá'při 5 °c. Vzorkovacím otvorem se z nádoby injekční stříkačkou odebírají alikvotní vzorky (0,10 ml) (bez poklesu tlaku ^nádobě )_v pravidelných intervalech a tyto vzorky se analyzují HPLCr za účelem sledovánípostupu reakce. Po 17,5 hodiný reakce ukazuje HPLC obsah glyoxylátu 91,0 %, formiátu > v... ,2,9/%a oxalátu. 2,9 % a obsah, zbývájícího glykolátu je /A %- Zbytková aktivita glykolát oxidasy je 63 % a katalasy
Λ jejich původní hodnoty. Koncová hodnota pH reakční směsi je 6,7.
τ(. A /?
Výsledná směs glyoxylové kyseliny (0,46M) a AMPA (0,40M) se přefiltruje v koncentračním zařízení Amicon Centriprep 10 (vylučovací mez molekulové hmotnosti 10000), aby se odstranily rozpustné enzymy a potom se filtrát umístí do 85ml Fischer-Porterovy láhve vybavené magnetickou míchací tyčinkou. Do této láhve se přidá 0,100 g 10% paladia na uhlíku, láhev se uzavře, propláchne dusíkem a potom se do ní uvede vodík do tlaku 343 kPa, načež se vzniklá směs míchá při 25 °C. Koncentrace N-(fosfonomethyl)glycinu (stanovená
HPLC) je po 17 hodinách reakce 0,29M (72% výtěžek, vztaženo na AMPA).
Příklad 9
Enzymatická oxidace glykolové kyseliny, která je popsána v příkladu 8, se opakuje za použití 10 ml vodného roztoku obsahujícího glykolovou kyselinu (0,75M), aminomethylfosfonovou kyselinu (AMPA, 0,60M), FMN (Ο,ΟΙπιΜ), kyselinu máselnou (vnitřní standard pro HPLC, 0,10M), glykolát oxidasu (ze špenátu, 2,0 IU/ml) a katalasu (z Aspergillus niger, 14000 IU/ml) při pH 8,5. Po 40 hodinách reakce ukazuje HPLC obsah glyoxylátu 83,2 %, formiátu 2,3 % a oxalátu 7,5 % a obsah zbývajícího glykolátu je 0 %.
Zbytková aktivita glykolát oxidasy je 65 % a katalasy 86 % jejich původní hodnoty. Koncová hodnota pH reakční směsi je 6,8.
Výsledná směs glyoxylové kyseliny (0,62M) a AMPA (0,60M) se přefiltruje v koncentračním zařízení Amicon Centriprep 10 (vylučovací mez molekulové hmotnosti 10000), aby se odstranily rozpustné enzymy a potom se filtrát umístí do 85ml Fischer-Porterovy láhve vybavené magnetickou míchací tyčinkou. Do této láhve se přidá 0,100 g 10% paladia na uhlíku, láhev se uzavře, propláchne dusíkem a potom se do ní uvede vodík do tlaku 343 kPa, načež se vzniklá směs míchá při 25 °C. Koncentrace N-( f osf onomethyl Jglycinu (stanovená HPLC) je po 24 hodinách reakce 0,42M (70% výtěžek, vztaženo na AMPA).
Příklad 10
Enzymatická oxidace glykolové kyseliny, která je popsána v příkladu 8, se opakuje za použití 10 ml vodného roztoku obsahujícího glykolovou kyselinu (l,0M), aminomethylfosfonovou kyselinu (AMPA, 0,80M), FMN (0,01mM), kyselinu máselnou (vnitřní standard pro HPLC, 0,10M), glykolát oxidasu (ze špenátu, 2,0 IU/ml) a katalasu (z Aspergillus niger, 14000 IU/ml) při pH 8,5. Po 66 hodinách reakce ukazuje HPLC obsah glyoxylátu 78,9 %, formiátu 2,2 % a oxalátu 12,1 % a obsah zbývajícího glykolátu je 2,0 %. Zbytková aktivita glykolát oxidasy je 64 % a katalasy 87 % jejich původní hodnoty. Koncová hodnota pH reakční směsi je 6,9.
Výsledná směs glyoxylové kyseliny (0,79M) a AMPA (0,80M) se přefiltruje v koncentračním'zařízení Amicon Centriprep 10 (vylučovací mez molekulové hmotnosti 10000), aby. se odstranily rozpustné enzymy a potom še filtrát tuniští do 85ml Fischer-Porterovy láhve vybavené magnetickou míchací tyčinkouDo této láhve. Še přidá 0,100 g Í0$T páladia na uhlíku, láhev še uzavře, propláchne dusíkěmT a’ potom se do ní uvede vodík do tlaku 343 kPá, načež'se vzniklá směs míchá při 25 °Č. Koncentrace N-(fosforioměthyDglycinu(stanovená HPLC) je po 23 hodinách/reakce^O,51M (65% výtěžek, vztaženo na glyoxylóvoů kyselinu) . .··-«·
Příklad ll
Reakce podle příkladu 8 se opakuje při pH 8,0. Po
17,5 hodiny reakce ukazuje HPLC obsah glyoxylátu 87,0 %, formiátu 2,2 % a oxalátu 1,9 % a obsah zbývajícího glykolátu je 8,5 %. Zbytková aktivita glykolát oxidasy je 44 % a katalasy 97 % jejich původní hodnoty.
Příklad 12
Reakce podle příkladu 8 se opakuje při pH 7,0. Po
17,5 hodiny reakce ukazuje HPLC obsah glyoxylátu 88,0 %, formiátu 1,4 % a oxalátu 1,9 % a obsah zbývajícího glykolátu je 8,2 %. Zbytková aktivita gíykolát oxidasy je 44 % a katalasy 93 % jejich původní hodnoty.
Příklad 13
Do 85ml Fischer-Porterovy skleněné aerosolové reakční nádoby se umístí magnetická míchací tyčinka a 10 ml vodného roztoku obsahujícího glykolovou kyselinu (0,50M),
FMN (0,01mM), kyselinu isomáselnou (vnitřní standard pro HPLC, 0,10M), gíykolát oxidasu (ze špenátu, 1,0 IU/ml) a katalasu (z Aspergillus niger, 14000 IU/ml) při pH 8,5. Reakční nádoba se uzavře, směs uvnitř se ochladí na 5 °C a potom se nádoba propláchne kyslíkem tím, že se uvede kyslík až do tlaku 481 kPa a potom se tlak uvolní na
Xlak_atmosférický, přičemž_ jtento^ postup se provádí za __ míchání a opakuje se 5x. Potom se do nádoby uvede znovu kyslík až do tlaku 481 kPa a směs se míchá při 5 °C.
Vzorkovacím otvorem se z nádoby injekční stříkačkou odebírají alikvotní vzorky (0,10 ml)'(bez poklesu tlaku v nádobě) v pravidelných intervalech a tyto vzorky se analyzují HPLC, za účelem sledování postupu reakce. Po 21 hodinách reakce ukazuje HPLC obsah glyoxylátu 81,7 %, formiátu 1,2 % a oxalátu 2,2 % a obsah zbývajícího glykolátu je
7,5 %. Zbytková aktivita gíykolát oxidasy je 19 % a katalasy 77 % jejich původní hodnoty. Tato reakce se potom opakuje za použití 0,50M glykolové kyseliny a 0,25M, 0,375M, 0,40M,
0,50M nebo 0,625M aminomethylfosfonovové kyseliny (AMPA). Výtěžky reakčních produktů a regenerovaných enzymů při těchto reakcích jsou uvedeny v následující tabulce:
| AMPA (M) | glyoxylát (%) | formiát oxalát glykolát glykolát | katalasa (*) | |||
| (%) | (*) | (%) | oxidasa (%) | |||
| 0,00 | 81,7 | 1,2 | 2,2 | 7,5 | 19 | 77 |
| 0,25 | 79,4 | 2,1 | 3,3 | 2,5 | 48 | 79 |
| 0,375 | 78,3 | 2,3 | 3,6 | 1,7 | 57 | 95 |
| 0,40 | 91,0 | 2,9 | 2,9 | 4,1 | 63 | 91 |
| 0,50 | 85,2 | 1,5 | 3,3 | 5,5 | 49 | 93 |
| 0,625 | 79,6 | 1,7 | 1,8 | 14,0 | 42 | 94 |
Příklad 14
Enzymatická oxidace glykolové kyseliny, která je , popsána v příkladu 8, se opakuje za použití 10 ml vodného roztoku obsahujícího glykolovou kyselinu (0,25M), aminomethylfosfonovou kyselinu (AMPA, 0,263M), FMN (0,01mM), kyselinu máselnou (vnitřní standard pro HPLC,
0,25M), glykolát oxidasu (ze špenátu, 1,0 IU/ml) a katalasu (z Aspergillus niger, 14000 IU/ml) při pH 7,0 a při teplotě 15 °C. Po 8 hodinách reakce ukazuje HPLC obsah glyoxylátu 82,8 %, formiátu 0,9 % a oxalátu 2,1 % a obsah zbývajícího glykolátu je 13,9 %. Koncová hodnota pH reakční směsi je 6,6'. ' - ’ 3 V nf
Výsledná směs glyoxylové kyseliny (0,21M) a AMPA (0,263M) se přefiltruje v koncentračním zařízení Amicon Centriprep 10 (vylučovací mez molekulové hmotnosti 10000), aby se odstranily rozpustné enzymy a potom se filtrát a 50 mg 10% paladia na uhlíku umístí do tlakové nádoby z nerezové oceli, zevnitř obložené sklem. Nádoba se uzavře, propláchne dusíkem a potom se do ní uvede vodík do tlaku 6,87 MPa, načež se vzniklá směs třepe při 25 °C. Tlak uvnitř nádoby poklesne v průběhu první půlhodiny reakce na stálou hodnotu a upraví se přivedeným vodíkem znovu na 6,87 MPa. Po 4 hodinách se tlak v nádobě uvolní a nádoba se propláchne dusíkem. Koncentrace N-(fosfonomethyl)glycinu (stanovená HPLC) je 0,16 M (76% výtěžek, vztaženo na glyoxylovou kyselinu).
Příklad 15
Enzymatická oxidace glykolové kyseliny, která je popsána v příkladu 14, se opakuje při pH 8. Po 8 hodinách reakce ukazuje HPLC obsah glyoxylátu 86,7 %, formiátu 1,8 % a oxalátu 4,1 % a obsah zbývajícího glykolátu je 13,2 %. Koncová hodnota pH reakční směsi je 6,7.
Výsledná směs glyoxylové kyseliny (0,22M) a AMPA (0,263M) se hydrogenuje za tlaku 6,87 MPa stejným postupem, jaký je popsán v příkladu 5. Po 4 hodinách je koncentrace N-(fosfonomethyl)glycinu (stanovená HPLC) je 0,14 M (64% výtěžek, vztaženo na glyoxylovou kyselinu).
Příklad 16
Enzymatická oxidace glykolové kyseliny, která je popsána v příkladu 14, se opakuje při pH 9. Po 7 hodinách reakce ukazuje HPLC obsah glyoxylátu 70,0 %, formiátu 5,6 % a oxalátu 11,1 % a obsah zbývajícího glykolátu je 0 %. Koncová hodnota pH reakční směsi je 6,8. '
Výsledná směs glyoxylové kyseliny (0,18M) a AMPA (0,263M) se hydrogenuje za tlaku 6,87 MPa stejným postupem, jaký je popsán v příkladu 5. Po 4 hodinách je koncentrace
N-(fosfonomethyl)glycinu (stanovená HPLC) je 0,094 M (52 % výtěžek, vztaženo na AMPA).
Příklad 17
Enzymatická oxidace glykolové kyseliny, která je popsána v příkladu 14, se opakuje při pH 8,5 za použití počáteční koncentrace glykolové kyseliny 0,50M a AMPA 0,40M. Po 16,5 hodiny reakce ukazuje HPLC obsah glyoxylátu 85,4 %, formiátu 3,5 % a oxalátu 6,3 % a obsah zbývajícího glykolátu je 1,4 %. Koncová hodnota pH reakční směsi je 7,0.
Výsledná směs glyoxylové kyseliny (0,43M) a AMPA (0,40M) se hydrogenuje za tlaku 6,87 MPa stejným postupem, jaký je popsán v příkladu 5. Po 4 hodinách je koncentrace N-( fosf onomethyl) glycinu (stanovená HPLC) je 0,30 M (75 % výtěžek, vztaženo na AMPA).
Příklad 18
Enzymatická oxidace glykolové kyseliny, která je popsána v příkladu 8, se opakuje za použití 10 ml vodného roztoku obsahujícího glykolovou kyselinu (0,50M), aminomethylf osf onovou kyselinu (AMPA, 0,375M), FMN (0,01mM), kyselinu máselnou (vnitřní standard pro HPLC, 0,10M), glykolát oxidasu (ze špenátu, 1,0 IU/ml) a katalasu (z Aspergillus niger, 14000 IU/ml) při pH 8,5. Po 17 hodinách reakce ukazuje HPLC obsah glyoxylátu 87,1 %, formiátu 1,9 % a oxalátu 2,1 % a obsah zbývajícího glykolátu je 8,9 %. Koncová hodnota pH reakční směsi je 6,7.
Výsledná směs glyoxylové kyseliny (0,435M) a AMPA (0,375M) se přefiltruje v koncentračním zařízení Amicon
Centriprep 10 (vylučovací mez molekulové hmotnosti 10000), aby se odstranily rozpustné enzymy a potom se filtrát smíchá s 50 mg odbarvovacího uhlí (aby se odstranil FMN) a znovu se přefiltruje. Výsledný filtrát se umístí do 85ml FischerPorterovy láhve vybavené magnetickou míchací tyčinkou. Do této láhve se přidá 0,100 g 10% paladia na uhlíku, láhev se uzavře, propláchne dusíkem a potom se do ní uvede vodík do tlaku 342 kPa, načež se vzniklá směs míchá při 25 °C. Koncentrace N-(fosfonomethyl)glycinu (stanovená HPLC) je po 17 hodinách reakce 372M (99% výtěžek, vztaženo na AMPA).
Claims (21)
- PATENTOVÉ NÁROKY1. Způsob výroby meziproduktu pro výrobuN-(fosfonomethyl)glycinu, kterýžto meziprodukt zahrnuje složku glyoxylové kyseliny a složku aminomethylfosfonové kyseliny, vyznačující se tím, že zahrnuje enzymaticky katalyzovanou konverzi složky glykolové kyseliny na složku glyoxylové kyseliny za přítomnosti aminomethylfosfonové kyseliny.
- 2. Způsob výroby směsi glyoxylové kyseliny a aminomethylfosfonové kyseliny, vyznačuj ící se tím, že zahrnuje stupeň oxidace glykolové kyseliny kyslíkem ve vodném roztoku za přítomnosti aminomethylfosfonové kyseliny a enzymů glykolát oxidasy a katalasy.
- 3. Způsob výroby směsi, která je vhodná jako' meziprodukt pro výrobu N-(f osf onomethyl) glycinu, v ý z n á č u j íc i ' se tím , že* zahrnuje' /stupně tvorby gíýóxýlové kyseliny in šitu, které se provádějí tak, že se dó vodného roztoku složky glykolové kyseliny a složky aminomethylfosfonové kyseliny/ zavede první katalyzátor, který jé schopen katalýzovat oxidaci složky , glykolové kyseliny 'kyslíkem ňa složku glyoxylové kyseliny a peroxid vodíku a druhý katalyzátor, který je schopen katalýzovat rozklad peroxidu vodíku, hodnota pH tohoto roztoku se nastaví do rozmezí od 6 do asi 10, roztok se uvede do styku se zdrojem kyslíku při účinné teplotě a po dobu postačující pro konverzi přinejmenším části složky glykolové kyseliny na složku glyoxylové kyseliny, za přítomnosti složky aminomethylfosfonové kyseliny a styk roztoku s kyslíkem se přeruší před převedením tohoto meziproduktu na N-(f osf onomethyl) glycin.
- 4. Způsob výroby N-(fosfonomethyl)glycinu, vyznačující se tím, že sea) vyrobí směs složky glyoxylové kyseliny a složky aminomethylfosfonové kyseliny oxidací glykolové kyseliny kyslíkem ve vodném roztoku za přítomnosti aminomethylfosfonové kyseliny a enzymu glykolát oxidasy a katalasy ab) směs vyrobená ve stupni a) se redukuje, za vzniku N-(fosfonomethyl)glycinu.
- 5. Způsob výroby N-(fosfonomethyl)glycinu vyznačující se tím, že zahrnuje tyto stupně:(i) enzymatickou tvorbu směsi složky glyoxylové kyseliny a složky aminomethylfosfonové kyseliny in šitu, která se provádí tak, že se do vodného roztoku složky glykolové kyseliny a složky aminomethylfosfonové kyseliny, zavede první katalyzátor, který je schopen katalýzovat ” oxidaci-glykolové kyselinykyslí kem na glyoxylovou kyselinu a peroxid vodíku a druhý katalyzátor, který je schopen katalýzovat rozklad peroxidu vodíku, hodnota pH tohoto roztoku se nastaví do rozmezí od 6 do asi 10, (ii) tento roztok se uvede do styku se zdrojem kyslíku při účinné teplotě a po dobu postačující pro konverzi přinejmenším části složky glykolové kyseliny na složku glyoxylové kyseliny, za přítomnosti složky aminomethylfosfonové kyseliny, (iii) styk tohoto roztoku s kyslíkem se přeruší a (iv) vzniklá směs se podrobí hydrogenaci, za vzniku N-(fosfonomethyl·) glycinu.
- 6. Způsob podle některého z nároků 1, 3 nebo 5, vyznačující se tím, že se konverze katalýzuje glykolátoxidasou.
- 7. Způsob podle některého z nároků 1, 3 nebo 5, vyznačující se tím, že pracuje za přítomnosti katalasy.
- 8. Způsob podle některého z předchozích nároků vyznačující se tím, že se pracuje za přítomnosti flavinmononukleotidu.
- 9. Způsob podle některého z předchozích nároků vyznačující se tím, že se pracuje při pH v rozmezí od asi 6,0 do asi 10,0.
- 10. Způsob podle některého z předchozích nároků vyznačující se tím, že se pracuje při teplotě v rozmezí od.0 do asi 40 °C.' .
- 11.. Způsob podle některého z předchozích nároků vyznačuj i c,í s e t ífm , že glykólát óxidasa je přítomna v koncentraci od 0,01do asi 1Ó00 IU/mí.
- 12. Způsob podle některého ž předchozích nároků vyznačují ci s e tím , že katalasa je přítomna v koncentraci od 50 do 50000 IU/ml.
- 13. Způsob podle nároku 4, vyznačující setím, že dále zahrnuje stupeň oddělování a regenerace enzymů z roztoku získaného ve stupni (a), před prováděním redukčního stupně (b).tímZpůsob podle nároku 4, vyznačující že se směs glyoxylové kyseliny ve stupni (a) _ li·. - ϊ-l i ~:6'6·.</' i.-.í .- 32 vyrábí za přítomnosti flávinmononukleotidu, přičemž tento způsob zahrnuje přídavný stupeň odstraňování flavinmononukleotidu z roztoku vzniklého ve stupni (a), před prováděním redukčního stupně (b).
- 15. Způsob podle nároku 5, vyznačující se tím, že prvním katalyzátorem je glykolát oxidasa a druhým katalyzátorem je katalasa.
- 16. Způsob podle nároku 5, vyznačující se tím, že se hydrogenace provádí za přítomnosti katalyzátoru.
- 17. Způsob podle nároku 16, vyznačující se tím, že hydrogenační katalyzátor je zvolen ze souboru zahrnujícího paladium na uhlíku, nikl na křemelině a Raneyův nikl.
- 18. Způsob podle nároku 17, vyznačující se tím, že hydrogenační katalyzátor je přítomen v množství v rozmezí od 0,001 do 20 dílů hmotnostních, vztaženo na 100 dílů spojené hmotnosti použité glyoxylové kyseliny a aminomethylfosfonové kyseliny.
- 19. Způsob podle nároku 17, vyznačuj ící se tím, že se hydrogenace provádí při pH v rozmezí od 4 do 11 a teplotě v rozmezí od 0 do 150 °C a za tlaku vodíku v rozmezí od 0,1 do asi 10 MPa.
- 20. Způsob podle některého z nároků 1, 2 nebo 3, vyznačující se tím, že zahrnuje další stupeň redukce meziproduktu, za vzniku N-(fosfonomethyl)glycinu.<»r·- 33 'ΐ,V se tím hydrogenací22.se tím připravuje aZpůsob podle nároku 20, vyznačující , že se meziprodukt redukuje katalytickouZpůsob podle nároku 21, vyznačují že se reakční směs obsahující meziprodukt hydrogenuje in sítu.
- 23. Použití způsobu podle kteréhokoliv z nároků 1, 2 nebo 3 pro výrobu N-(f osf onomethyl )glycinu.
- 24.kteréhoko1 i vProdukt připravitelný způsobem podle z nároků 1, 2 nebo 3.MP-894-94-Če .·r
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US78864091A | 1991-11-06 | 1991-11-06 | |
| US07/788,683 US5135860A (en) | 1991-11-06 | 1991-11-06 | Process for preparing glyoxylic acid/aminomethylphosphonic acid mixtures |
| US07/788,648 US5180846A (en) | 1991-11-06 | 1991-11-06 | Hydrogenation of enzymatically-produced glycolic acid/aminomethylphosphonic acid mixtures |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CZ111494A3 true CZ111494A3 (en) | 1994-12-15 |
Family
ID=27419857
Family Applications (2)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CZ941113A CZ111394A3 (en) | 1991-11-06 | 1992-11-03 | Process for preparing n-(phosphonomethyl)glycine |
| CZ941114A CZ111494A3 (en) | 1991-11-06 | 1992-11-03 | Process for preparing an intermediate for the preparation of n-(phosphonomethyl)glycine |
Family Applications Before (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CZ941113A CZ111394A3 (en) | 1991-11-06 | 1992-11-03 | Process for preparing n-(phosphonomethyl)glycine |
Country Status (16)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (4) | EP0541333A1 (cs) |
| JP (2) | JPH07501940A (cs) |
| CN (2) | CN1073482A (cs) |
| AU (2) | AU658956B2 (cs) |
| BR (2) | BR9206882A (cs) |
| CA (2) | CA2123079C (cs) |
| CZ (2) | CZ111394A3 (cs) |
| DE (1) | DE69210771T2 (cs) |
| ES (1) | ES2087460T3 (cs) |
| HU (2) | HUT71955A (cs) |
| ID (1) | ID1002B (cs) |
| IL (2) | IL103645A (cs) |
| MX (2) | MX9206362A (cs) |
| MY (1) | MY130099A (cs) |
| NZ (2) | NZ245011A (cs) |
| WO (2) | WO1993009243A1 (cs) |
Families Citing this family (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH07501940A (ja) * | 1991-11-06 | 1995-03-02 | ユニバーシテイ・オブ・アイオワ・リサーチ・フアウンデーシヨン | 酵素的に得られたグリオキシル酸／アミノメチルホスホン酸混合物の水素添加 |
| AU7316194A (en) * | 1993-03-03 | 1996-01-25 | E.I. Du Pont De Nemours And Company | Glyoxylic acid/aminomethylphosphonic acid mixtures prepared using a microbial transformant |
| AU6831894A (en) * | 1993-05-28 | 1994-12-20 | E.I. Du Pont De Nemours And Company | Process for preparing glyoxylic acid/dialkyl aminomethylphosphonate mixtures |
| AU7211994A (en) * | 1993-07-01 | 1995-01-24 | E.I. Du Pont De Nemours And Company | Glycolate oxidase production |
| WO1995001443A1 (en) * | 1993-07-01 | 1995-01-12 | E.I. Du Pont De Nemours And Company | Microbial transformants of hansenula that express glycolate oxidase and catalase |
| AU674619B2 (en) * | 1994-12-15 | 1997-01-02 | Jack Newman | Stereoscopic micromirror display |
| WO2022133719A1 (en) * | 2020-12-22 | 2022-06-30 | Rhodia Operations | Method for producing glycolic acid |
Family Cites Families (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| NL7514315A (nl) * | 1974-12-11 | 1976-06-15 | Monsanto Co | Werkwijze voor de bereiding van carbonylaldimino- methaanfosfonaten. |
| IL48619A (en) * | 1974-12-11 | 1978-04-30 | Monsanto Co | Process for the production of n-(phosphonomethyl)-glycine compounds |
| HUT41415A (en) * | 1984-12-28 | 1987-04-28 | Monsanto Co | Process for preparing n-phosphono-methyl-glycine derivatives |
| ATE94210T1 (de) * | 1989-10-16 | 1993-09-15 | Du Pont | Verfahren zur herstellung von glyoxylsaeure durch enzymatische oxydation von glykolsaeure. |
| JPH07501940A (ja) * | 1991-11-06 | 1995-03-02 | ユニバーシテイ・オブ・アイオワ・リサーチ・フアウンデーシヨン | 酵素的に得られたグリオキシル酸／アミノメチルホスホン酸混合物の水素添加 |
-
1992
- 1992-11-03 JP JP5508669A patent/JPH07501940A/ja active Pending
- 1992-11-03 WO PCT/US1992/009420 patent/WO1993009243A1/en not_active Ceased
- 1992-11-03 ES ES92310063T patent/ES2087460T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1992-11-03 HU HU9401416A patent/HUT71955A/hu unknown
- 1992-11-03 EP EP92310064A patent/EP0541333A1/en not_active Withdrawn
- 1992-11-03 DE DE69210771T patent/DE69210771T2/de not_active Expired - Fee Related
- 1992-11-03 EP EP92310063A patent/EP0545553B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1992-11-03 AU AU30617/92A patent/AU658956B2/en not_active Ceased
- 1992-11-03 EP EP92924227A patent/EP0611398A1/en active Pending
- 1992-11-03 AU AU30616/92A patent/AU673146B2/en not_active Expired - Fee Related
- 1992-11-03 EP EP92924228A patent/EP0611399A1/en active Pending
- 1992-11-03 WO PCT/US1992/009419 patent/WO1993009242A1/en not_active Ceased
- 1992-11-03 CA CA002123079A patent/CA2123079C/en not_active Expired - Fee Related
- 1992-11-03 CA CA002123081A patent/CA2123081C/en not_active Expired - Fee Related
- 1992-11-03 CZ CZ941113A patent/CZ111394A3/cs unknown
- 1992-11-03 HU HU9401419A patent/HUT71271A/hu unknown
- 1992-11-03 BR BR9206882A patent/BR9206882A/pt not_active Application Discontinuation
- 1992-11-03 BR BR9206884A patent/BR9206884A/pt not_active Application Discontinuation
- 1992-11-03 CZ CZ941114A patent/CZ111494A3/cs unknown
- 1992-11-03 JP JP50866893A patent/JP3315119B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 1992-11-04 MY MYPI92002001A patent/MY130099A/en unknown
- 1992-11-04 NZ NZ245011A patent/NZ245011A/en not_active IP Right Cessation
- 1992-11-04 NZ NZ245012A patent/NZ245012A/en not_active IP Right Cessation
- 1992-11-05 MX MX9206362A patent/MX9206362A/es unknown
- 1992-11-05 IL IL10364592A patent/IL103645A/en not_active IP Right Cessation
- 1992-11-05 IL IL10364692A patent/IL103646A/en not_active IP Right Cessation
- 1992-11-05 MX MX9206363A patent/MX9206363A/es not_active Application Discontinuation
- 1992-11-06 ID IDP497492A patent/ID1002B/id unknown
- 1992-11-06 CN CN92114383A patent/CN1073482A/zh active Pending
- 1992-11-06 CN CN92114382A patent/CN1073481A/zh active Pending
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CZ11194A3 (en) | Module differential switch | |
| EP0837834A1 (en) | Formic acid and formaldehyde destruction in waste streams | |
| US6624322B1 (en) | Method for preparing β-phosphorous nitroxide radicals | |
| JP2002522548A (ja) | Ｎ−置換ｎ−（ホスホノメチル）グリシンの酸化によるｎ−（ホスホノメチル）グリシン製造方法 | |
| HU213759B (en) | Process for the preparation of pyruvic acid | |
| Turner et al. | A combined chemical-enzymic synthesis of 3-deoxy-D-arabino-heptulosonic acid 7-phosphate | |
| CZ111494A3 (en) | Process for preparing an intermediate for the preparation of n-(phosphonomethyl)glycine | |
| US5135860A (en) | Process for preparing glyoxylic acid/aminomethylphosphonic acid mixtures | |
| EP1571138B1 (en) | Processes for producing (4e)-5-chloro-2-isopropyl-4-pentenoic ester and optically active isomer thereof | |
| CA2067382C (en) | Production of glyoxylic acid from glycolic acid | |
| US5180846A (en) | Hydrogenation of enzymatically-produced glycolic acid/aminomethylphosphonic acid mixtures | |
| EP0059655B1 (fr) | Procédé d'obtention de l'epsilon-caprolactone | |
| US5262314A (en) | Enzymatic oxidation of glycolic acid in the presence of non-enzymatic catalyst for decomposing hydrogen peroxide | |
| US5221621A (en) | Production of glyoxylic acid from glycolic acid | |
| JPS635037A (ja) | ２，３−ジクロル−１−プロペンの製法 | |
| JP2000273071A (ja) | ベタインの溶液の製造 | |
| JP2006521102A (ja) | 組合わされた補因子依存型酵素反応系 |