CZ124499A3

CZ124499A3 - Estery N-(aryl/heteroarylacetyI)aminokyselin, farmaceutické kompozice které je obsahují a způsoby inhibice uvolňování beta-amyloidového peptidu a/nebo jeho syntézy použitím takových sloučenin

Info

Publication number: CZ124499A3
Application number: CZ19991244A
Authority: CZ
Inventors: Jing Wu; Eugene D. Thorsett; Jeffrey S. Nissen; Thomas E. Mabry; Lee H. Latimer; Varghese John; Lawrence Y. Fang; James E. Audia
Original assignee: Elan Pharmaceuticals, Inc.; Eli Lilly And Company
Priority date: 1997-11-20
Filing date: 1997-11-20
Publication date: 2000-07-12

Abstract

sloučeniny obecného vzorce I, které inhibují uvolňování βamyloidového peptidu a/nebo jeho syntézu. Sloučeniny lze použítjako léčivo při léčbě Alzheimerovy nemoci, řešení se také týká farmaceutických kompozic, které obsahují sloučeninu, inhibující uvolňování β-amyloidového peptidu a/nebo jeho syntézu, pomocí takových kompozic.

Description

Předložený vynález se týká sloučenin, které inhibují uvolňování β-amyloidového peptidů a/nebo jeho syntézu a proto jsou použitelné při léčení Alzheimerovy nemoci. Předložený vynález se také týká farmaceutických kompozic, obsahujících takové sloučeniny stejně tak jako způsobů inhibice uvolňování β-amyloidového peptidů.

Dosavadní stav techniky

Reference

Následující publikace, patenty a patentové přihlášky jsou v této přihlášce citovány pod čísly, uvedenými jako horní indexy:

¹ Glenner a kol. Alzheimer's Disease: Initial Report of the Purification a Characterization of a Novel Cerebrovascular Amyloid Protein, Biochem. Biophys, Res. Commun., 120:885- 890 (1984).

² Glenner a kol. Polypeptide Markér for Alzheimer's Disease a its Use for Diagnosis, U. S. Patent No. 4,666,829 issued May 19. 1987.

³ Selkoe, „The Molecular Pathology of Alzheimer's Disease, Neuron. 6:481-498 (1991).

⁴ Goate a kol., Segregation of a Missense Mutation in the Amyloid Precursor Protein Gene with Familial Alzheimer's Disease, Nátuře, 349:704-106 (1990).

⁵ Chartier-Harlan a kol., Early-Onset Alzheimer's Disease Caused by Mutations at Codon 711 of the β-Amyloid Precursor Protein Gene, Nátuře, 353:844-846 (1989).

⁶ Murrell a kol., A Mutation in the Amyloid Precursor Protein Associated with Hereditary Alzheimer's Disease, Science, 254:97-99 (1991).

⁷ Mullan a kol., A Pathogenic Mutation for Probable Alzheimer's Disease in the APP Gene at the N-Terminus of βAmyloid, Nátuře Genet., 1:345-341 (1992).

⁸ Schenk a kol., „Methods a Compositions for the Detection of Soluble β-amyloid Peptide, International Patent

4 4 · 4 9 « 4 9 9 4 4 • 49 444 444

4 4 4

4 4· * 9

ApplicationPublication No. WO 94/10,569. published 11 May 1994.

⁹ Selkoe, Amyloid Protein a Alzheimer's Disease, Scientific American, pp. 2-8, November, 1991.

¹⁰ Losse a kol., Tetrahedron, 27:1423—1434 (1971).

¹¹ Citron a kol., Mutation of the β-Amyloid Precursor Protein in Familial Alzheimer's Disease Increases β-Protein Production, Nátuře, 360:672-674 (1992j.

¹² Hansen a kol., „Reexamination a Further Development of a Precise a Rapid Dye Method for Measuring Cell Growth/Cell Kill, J. Immun. Meth., 119:203-210 (1989).

¹³ P. Seubert, Nátuře (1992) 359:325-327 ¹⁴ Johnson-Wood a kol., PNAS USA (1997) 94:1550-1555 ¹⁵ Tetrahedron Letters, 34(48), 7685 (1993))

Všechny výše uvedené publikace, patenty a patentové přihlášky jsou zde zahrnuty ve své celistvosti jako reference stejným způsobem, jak kdyby každá jednotlivá publikace, patent nebo patentová přihláška byly specificky a individuálně uvedeny jako reference, zahrnuté ve své celistvosti.

	/Z ·· · v » · · ·	» ·· ·· ··« « * ··
	• ·	• · · · · * ·
	• · '«	• · · 9 · · · ·*·
	<t ·	• * · · ·
	• · ·· · · ·
Alzheimerova nemoc (AD) je	degenerativní	mozková porucha,
charakterizovaná klinicky	progresivní	ztrátou paměti,
poznávacích schopností, myšlení, úsudku a	emoční stability,

které postupně vedou k hlubokému mentálnímu poškození a nakonec k smrti. Alzheimerova nemoc je velmi obvyklou příčinou progresivního duševního selhání (demence) starých lidí a má se za to, že představuje čtvrtou nejrozšířenější příčinu smrti ve Spojených státech. Alzheimerova nemoc byla pozorována u různých ras a etnických skupin po celém světě a představuje jeden z nejzávažnějších současných a budoucích veřejných zdravotních problémů. Odhaduje se, že tato nemoc v současné době zasahuje dva až tři miliony osob jen v samotných Spojených státech. Alzheimerova nemoc je v současné době neléčitelná. V současné době není znám žádný způsob léčení, který by účinně předcházel Alzheimerově nemoci nebo zamezoval jejím symptomům.

Mozky osob, postižených Alzheimerovou nemocí vykazují charakteristické léze, které jsou nazývány senilní (nebo amyloidní) plaky, amyloidovou angiopatii (amyloid deponovaný v krevních cévách) a neurofibrilární zauzlení. U pacientů s Alzheimerovou nemocí se obecně nachází velký počet těchto lézí, obzvláště amyloidní plaky a neurofibrilární zauzlení, v řadě oblastí lidského mozku, které jsou důležité pro paměťové a poznávací funkce. Menší množství těchto lézí s omezenějším anatomickým rozložením se také nachází v mozku většiny starých lidí, kteří nemají klinickou Alzheimerovu nemoc. Amyloidní plaky a amyloidová angiopatie také charakterizuje mozek osob s onemocněním Trisomy 21 (Downův syndrom) a dědičnou mozkovou hemoragií s tt· · tt · · · tt tt tt · • · ··· · ··tt tt tt · tt · tt tttt tt tt tt tt · tttt • · tt • tt · • tttt · · · • · tt · tt· amyloidózou holandského typu (HCHWA-D). V současné době definitivní diagnóza Alzheimerovy nemoci obvykle vyžaduje pozorování výše uvedených lézí v mozkové tkáni pacientů, kteří na chorobu zemřeli a nebo, řidčeji, v malých bioptických vzorcích mozkové tkáně odebrané v průběhu invazivní neurochirurgické procedury.

Základní chemická složka amyloidních plaků a vaskulárních amyloidových depozitů (amyloidová angiopatie), charakteristických pro Alzheimerovu nemoc a další výše uvedené poruchy, je protein o molekulové hmotnosti přibližně 4,2 kilodaltonů (kD) skládající se z přibližně 39-43 aminokyselin, který je označován jako β-amyloidový peptid (βΑΡ) nebo někdy Αβ, ΑβΡ nebo β/Α4. β-amyloidový peptid byl nejprve vyčištěn a jeho částečná sekvence aminokyselin byla určena Glennerem a kol.¹ Způsob izolace a údaje o sekvenci prvních 28 aminokyselin jsou popsány v U.S. Patentu č. 4,666, 829².

Molekulárně biologické a proteinově chemické analýzy ukázaly, že β-amyloidový peptid je malý fragment daleko většího prekurzorového proteinu (APP), který je normálně produkován buňkami v mnoha tkáních různých zvířat, v to počítaje člověka. Znalost struktury genového kódu APP prokázaly, že β-amyloidový peptid vzniká jako peptidový segment, které je odštěpen od APP proteázovým enzymem nebo enzymy. Přesný biochemický mechanismus, kterým je βamyloidový peptidový fragment odštěpen od APP a následně uložen ve formě amyloidních plaků v mozkové tkáni a ve • · · ·

· ♦ · • · · · · · • 9 • · «0 stěnách cerebrálních a meningeálních krevních cév, je v současné době neznámý.

Řada důkazů naznačuje, že cerebrální ukládání βamyloidového peptidu hraje ústřední roli v patogenezi Alzheimerovy nemoci a může předcházet kognitivním symptomům o roky nebo desetiletí, viz například Selkoe³. Nejdůležitějším důkazem je objev, že DNA mutace s chybným smyslem v aminokyselině 717 izoformy APP o 770 aminokyselinách může být nalezena u postižených členů, ale ne u nezasažených členů řady rodin s geneticky určenou (familiární) formou Alzheimerovy nemoci (Goate a kol.⁴; Chartier-Harlan a kol.⁵; a Murrell a kol.⁶) a je označována jako Švédská varianta. Dvojitá mutace, která spočívá v mutaci lysinu⁵⁹⁵-methioninu⁵⁹⁶ na asparagin⁵⁹⁵-leucin⁵⁹⁶ (s odvoláním na izoformu 695) a byla nalezena ve švédské rodině, byla popsána v roce 1992 (Mullan a kol.⁷) . Analýzy genetické vazby prokázaly, že tyto mutace, stejně tak jako jisté další mutace v genu APP, jsou specifickou molekulární příčinou Alzheimerovy nemoci u postižených členů takových rodin. Kromě toho mutace aminokyseliny 693 v izoformě APP o 770 aminokyselinách byly identifikovány jako příčina choroby, spočívající v ukládání β-amyloidového peptidu, HCHWA-D a změna alaninu na glycin v aminokyselině 692 se zdá být příčinou fenotypu, který připomíná Alzheimerovu nemoc u některých pacientů, ale HCHWA-D u jiných. Objev těchto a dalších mutací APP v geneticky způsobených případech Alzheimerovy nemoci dokazují, že změna APP a následné ukládání fragmentu β-amyloidového peptidu může způsobit Alzheimerovu nemoc.

I přes pokrok, kterého bylo dosaženo v pochopení mechanismu, který je základem Alzheimerovy nemoci a dalších nemocí spojených s β-amyloidovým peptidem přetrvává potřeba vyvinout způsoby a kompozice pro léčbu nemoci nebo nemocí. Ideálně by způsoby léčení byly založeny na látkách, které by byly schopny inhibice uvolňování β-amyloidového peptidu a/nebo jeho syntézy in vivo.

Podstata vynálezu

Předložený vynález se týká objevu třídy sloučenin, které inhibují uvolňování β-amyloidového peptidu a/nebo jeho syntézu jsou proto použitelné při prevenci Alzheimerovy nemoci u pacientů s náchylností pro Alzheimerovu nemoc a/nebo při léčení pacientů s Alzheimerovu nemocí s cílem inhibovat další zhoršování jejich stavu. Třída sloučenin, které mají popsané vlastnosti je definována obecným vzorcem I, který následuje:

R² ve kterém

R¹ je zvolen ze souboru, zahrnujícího • · ♦ · » ·

9

9 9 · « ·· · ·

a) alkyl, alkenyl, alkcykloalkyl, fenyl-(R)_m,-, naftyl(R)_m-, kde R je alkylenová skupina s 1 až 8 atomy uhlíku a m je celé číslo, které se rovná 0 nebo 1, cykloalkyl, cykloalkenyl, 3-pyridyl, 4-pyridyl a heteroaryl, jiný než 3- a 4-pyridyl, se 3 až 10 atomy a 1 až 4 heteroatomy, zvolenými ze souboru, zahrnujícího atom kyslíku, síru a atom dusíku, kde heteroarylová skupina je popřípadě substituována 1 až 3 substituenty, zvolenými ze souboru, zahrnujícího alkyl, alkoxy, aryl, aryloxy, atom halogenu, skupinu nitro, thioalkoxy a thioaryloxy s tou podmínkou, že pokud takový heteroaryl obsahuje alespoň jeden dusíkový heteroatom, pak také obsahuje alespoň jeden kyslíkový a/nebo sírový heteroatom;

(b) substituovanou fenylovou skupinu obecného vzorce II:

ve kterém

R je alkylen, obsahující 1 až 8 atomů uhlíku, m je celé číslo, které se rovná 0 nebo 1,

R^a a R^a' jsou nezávisle zvoleny ze souboru, zahrnujícího atom vodíku, skupinu hydroxy, atom fluoru a methyl;

• 9 99 9 9

9 9 · 9 9

9 9 9 9 9

99 999 999

9 9 9 ·» · • 9 99

9 • · « • ·

999 · · *

R^b a R^b' jsou nezávisle zvoleny ze souboru, zahrnujícího atom vodíku, alkyl, alkoxy, aryl, skupinu kyano, cykloalkyl, atom halogenu, heteroaryl, heterocyklický systém, skupinu nitro, trihalomethyl, thioalkoxy, thioaryloxy, thioheteroaryloxy a -C(O)R⁴, kde R⁴ je zvolen ze souboru, zahrnujícího alkyl, aryl, alkoxy a aryloxy; a

R^c je zvolen ze souboru, zahrnujícího atom vodíku, alkyl, aryl, skupinu kyano, atom halogenu, skupinu nitro nebo R^b a R^c jsou k sobě kondenzovány a vytvářejí methylendioxy kruh s fenylovým kruhem; a pokud R^b a/nebo R^b' a/nebo R^c je atom fluoru, atom chloru, atom bromu a/nebo skupina nitro, pak R^a a/nebo R^a' mohou také představovat atom chloru; a (c) 1- nebo 2-naftyl-(R)_m- substituovaný v poloze 5,

6, 7 a/nebo 8 jedním až čtyřmi substituenty, zvolenými ze souboru, zahrnujícího alkyl, alkoxy, atom halogenu, skupinu kyano, skupinu nitro, trihalomethyl a thioalkoxy, kde R je alkylenová skupina obsahující 1 až 8 atomů uhlíku a m je celé číslo, které se rovná 0 nebo 1;

R² je zvolen ze souboru, zahrnujícího atom vodíku, alkyl, fenyl, alkylalkoxy, alkylthioalkoxy; a

R³ je zvolen ze souboru, zahrnujícího - (CH₂) _nCR¹⁰R⁵R⁶, kde n je celé číslo, které se rovná 0, 1 nebo 2, R⁵ a R⁶ jsou nezávisle zvoleny ze souboru, zahrnujícího atom vodíku, alkyl, alkenyl, aryl, heteroaryl, heterocyklický systém, -NR⁷R⁸, kde R⁷ a R⁸ jsou nezávisle na sobě atom vodíku nebo alkyl a -COOR⁹, kde R⁹ představuje alkyl a kde dále • · ··

9 9 · 9 « • 9 9 9 9 9

99 999 999

9 9 9

999 99 99 ty

R⁵ a R⁶ mohou být spojeny a vytvářet cykloalkylovou skupinu, cykloalkenylovou skupinu, arylovou skupinu, heteroarylovou skupinu a heterocyklickou skupinu a pokud R⁵ a R⁶ nejsou spojeny, aby vytvářely arylovou nebo heteroarylovou skupinu, pak R¹⁰ je zvolen ze souboru, zahrnujícího atom vodíku a alkyl s tou podmínkou, že pokud n je rovno nule, potom R¹⁰ představuje atom vodíku a pokud n je větší než nula a R⁵ a R⁶ jsou spojeny, aby vytvářely arylovou nebo heteroarylovou skupinu, potom R¹⁰ představuje vazbu uvnitř této skupiny;

X představuje atom kyslíku nebo atom síry;

X' představuje atom vodíku, skupinu hydroxy nebo atom fluoru;

X představuje atom vodíku, skupinu hydroxy nebo atom fluoru nebo X' a X spolu vytvářejí oxo skupinu, a jejich farmaceuticky přijatelné soli s dodatečnými podmínkami, že:

pokud R¹ představuje fenyl, R² představuje -CH (CH3) CH2CH3, X představuje atom kyslíku a X' a X představují atom vodíku, potom R³ nepředstavuje -CH2CH₃ nebo -CH₂CH (CH₃) ₂;

pokud R¹ představuje fenyl, R³ představuje -CH2CH (CH3) 2, X představuje atom kyslíku a X' a X představují atom vodíku, potom R² nepředstavuje -CH(CH3)₂, pokud R¹ představuje pyrid-3-yl, R² představuje ethyl, X představuje atom kyslíku a X' a X představují atom vodíku, potom R³ nepředstavuje -CH₂CH (CH₃) ₂, pokud R¹ představuje indoxazin-3-yl, 2,4-dimethylthiazol-5yl, 4-methyl-l,2,5-thiooxadizol-3-yl nebo 3,5di(trifluormethyl)fenyl, R² představuje methyl, X představuje atom kyslíku a X' a X představují atom fy#

ft ·	•	• ftft		• ft · ·
• ·
•	ft	• ft	•	• ftft ·
•	ft ♦	• ·	• *	• ftft ftftft
•	•	• ·	•	• ·
ftft··	ftftft	• ftft ft·		ft ft ftft

vodíku, potom R³ nepředstavuje -CH2CH (CH3) 2, a pokud R¹ představuje -CH2-fenyl, R³ představuje -CH₂CH₃, X představuje atom kyslíku a X' a X představují atom vodíku, potom R² nepředstavuje -CH₂CH(CH₃)₂.

Je překvapivé, že substituenty v poloze 2 a/nebo 6 fenylové skupiny jsou omezeny na substituenty, uvedené výše a větší substituenty, jiné než ty, které byly konkrétně specifikovány výše, eliminují schopnost výsledné sloučeniny inhibovat uvolňování β-amyloidového peptidu a/nebo jeho syntézu.

V souladu s tím se předložený vynález v jednom ze svých způsobových předmětů týká způsobu inhibice uvolňování βamyloidového peptidu a/nebo jeho syntézy v buňce, přičemž tento způsob zahrnuje podávání do takové buňky takového množství sloučeniny nebo směsi sloučenin obecného vzorce I uvedeného výše, která je účinná pro inhibici buněčného uvolňování a/nebo syntézy β-amyloidového peptidu.

Protože in vivo vytváření β-amyloidového peptidu souvisí s patogenezí Alzheimerovy nemoci^8,9, sloučeniny obecného vzorce I mohu také být použity spolu s farmaceutickými kompozicemi pro profylaktickou a/nebo terapeutickou prevenci a/nebo léčení Alzheimerovy nemoci. Proto se v dalším ze svých předmětů předložený vynález týká profylaktického způsobu prevence vzniku Alzheimerovy nemoci u pacienta s rizikem vzniku Alzheimerovy nemoci, přičemž uvedený způsob zahrnuje podávání uvedenému pacientovi farmaceutické kompozice, zahrnující farmaceuticky inertní /z nosič a účinné množství sloučeniny nebo směsi sloučenin obecného vzorce 1 uvedeného výše.

Ve svém dalším předmětu se předložený vynález týká terapeutického způsobu léčení pacienta trpícího Alzheimerovou nemocí pro inhibici dalšího zhoršování stavu uvedeného pacienta, přičemž uvedený způsob zahrnuje podávání uvedenému pacientovi farmaceutické kompozice, obsahující farmaceuticky inertní nosič a účinné množství sloučeniny nebo směsi sloučenin obecného vzorce I uvedeného výše.

V obecném vzorci I uvedeném výše, výhodné R¹nesubstituované arylové skupiny zahrnují například fenyl, 1-naftyl, 2-naftyl a podobně.

Výhodné R¹ substituované arylové skupiny zahrnují například monosubstituované fenyly, které mají jednoduchou substituci v poloze 2, 3 nebo 4 , kde každý z jednotlivých substituentů je ?governed odpovídající skupinou R^a/R^a', R^b/R^b' a R^c; disubstituované fenyly, které zahrnují fenyly, které mají substituenty v polohách 2,3, v polohách 2,4, v polohách 2,5, v polohách 2,6, v polohách 3,4, v polohách 3,5 nebo v polohách 3,6, kde každý ze substituentů je ?governed odpovídajícími skupinami R^a, R^a', R^b, R^b' a R^c; a trisubstituované fenyly, které zahrnují fenyly, které mají tři substituenty v polohách 2,3,4, v polohách 2,3,5, v polohách 2,3,6, v polohách 3,4,5 a v polohách 3,4,6 , kde každý ze substituentů je ?governed odpovídajícími skupinami R^a, R^a', R^b, R^b a R^c. Výhodně substituované fenylové skupiny /β nezahrnují více než 3 substituenty.

Příklady substituovaných fenylů zahrnují například 4fluorfenyl, 4-chlorfenyl, 4-bromfenyl, 4-nitrofenyl, 4methylfenyl, 3-methoxyfenyl, 3-nitrofenyl, 3-fluorfenyl, 3chlorfenyl, 3-bromfenyl, 3-thiomethoxyfenyl, 3-methylfenyl, 3-trifluormethylfenyl,2-hydroxyfenyl, 2-methylfenyl, 2fluorfenyl, 3, 4-dichlorfenyl, 3,4-methylen-dioxyfenyl, 3,5difluorfenyl, 3,5-dichlorfenyl, 2,4-dichlorfenyl a 2,5difluorfenyl.

Výhodné R¹ skupiny představované skupinou fenyl-Rzahrnují, uvedeno jako příklad, benzyl, 3-fenylethyl, 4fenyl-n-propyl a podobně.

Výhodné R¹ alkylové, alkcykloalkylové, cykloalkylová a cykloalkenylová skupiny zahrnují, uvedeno jako příklad, sek.-butyl, cyklopropyl, cyklobutyl, cyklohexyl, cyklopentyl, cyklohex-l-enyl, -CH₂-cyklopropyl, -CH₂cyklobutyl, -CH₂-cyklohexyl, -CH₂-cyklopentyl, -CH₂CH₂cyklopropyl, -CH₂CH₂-cyklobutyl, -CH₂CH₂-cyklohexyl, -CH₂CH₂cyklopentyl a podobně.

Výhodné R¹ heteroaryly a substituované heteroaryly zahrnují, uvedeno jako příklad, pyrid-3-yl, pyrid-4-yl, thien-2-yl, thien-3-yl, benzothiazol-4-yl, 2fenylbenzoxazol-5-yl, furan-2-yl, benzofuran-2-yl, benzothiofen-3-yl, 2-chlorthien-5-yl, 3-methylisoxazol-5yl, 2-(fenylthio)thien-5-yl, 6-methoxythiofen-2-yl, 3fenyl-1,2,4-thiooxadiazol-5-yl, 2-fenyloxazol-4-yl a • Φ · φ · · · · • Β Φ · Β · Β • φ * Β ··· ΦΦΦ

Φ Β Β Β Β •ΒΒΒΒ ΒΒ Β· podobně.

Výhodně je R² zvolen ze souboru, zahrnujícího alkyl, obsahující od 1 do 4 atomů uhlíku, fenyl, skupinu alkylalkoxy, obsahující od 1 do 4 atomů uhlíku a skupinu alkylthioalkoxy, obsahující od 1 do 4 atomů uhlíku. Obzvláště výhodné substituenty R² zahrnují, uvedeno jako příklad, methyl, ethyl, n-propyl, iso-propyl, n-butyl, isobutyl, -CH2CH2SCH3, cyklohexyl a fenyl.

Pokud X představuje atom kyslíku, výhodné substituenty R³zahrnují například methyl, ethyl, iso-propyl, n-propyl, nbutyl, iso-butyl, cyklopentyl, allyl, iso-but-2-enyl, 3methylpentyl, -CH2-cyklopropyl, -CH₂-cyklohexyl, -CH₂-(3tetrahydrofuranyl), -CH₂-thien-2-yl, -CH₂(1methyl)cyklopropyl, -CH₂-thien-3-yl, -CH₂-C(0)O-t-butyl, CH₂-C(CH₃)₃, -CH₂CH(CH₂CH₃)₂, -2-methylcyklopentyl, cyklohex-2-enyl, -CH [CH (CH₃) ₂] COOCH₃, -CH₂CH₂N (CH₃) ₂,

CH₂C (CH₃) =CH₂, -CH₂CH=C(CH₃)₂ a podobně.

Pokud X představuje atom síry, výhodné substituenty R³zahrnují například iso-but-2-enyl a iso-butyl.

Předložený vynález se také týká nových farmaceutických kompozic, obsahujících farmaceuticky inertní nosič a sloučeninu obecného vzorce I uvedeného výše.

Obzvláště výhodné sloučeniny pro použití ve způsobech a kompozicích podle předloženého vynálezu zahrnují, uvedeno jako příklad, následující sloučeniny, kde stereochemie φ φ φ * φ φ • φ φ

φ φφφφ skupiny R² (pokud to přichází v úvahu) je výhodně odvozena od L-aminokyseliny:

N-(fenylacetyl)alanin, iso-butylester

N-(3-fenylpropionyl)alanin, iso-butylester

N-(3-methylpentanoyl)alanin, iso-butylester

N-[(4-chlorfenyl)acetyl]alanin, iso-butylester

N-[(3,4-dichlorfenyl)acetyl]alanin, iso-butylester

N-[(3-pyridyl)acetyl]alanin, iso-butylester

N-[(1-naftyl)acetyl]alanin, iso-butylester

N-[(2-naftyl)acetyl]alanin, iso-butylester

N-(4-fenylbutanoyl)alanin, iso-butylester

N-(5-fenylpentanoyl)alanin, iso-butylester

N-[(4-pyridyl)acetyl]alanin, iso-butylester

2-[(3,4-dichlorfenyl)acetamido]máselná kyselina, iso-butylester

2-[(3-methoxyfenyl)acetamido]máselná kyselina, iso-butylester

2-[(4-nitrofenyl)acetamido]máselná kyselina, iso-butylester 2-[(3,4-methylendioxyfenyl)acetamido]máselná kyselina, iso-butylester

2-[(thien-3-yl)acetamido]máselná kyselina, iso-butylester 2-[(4-chlorfenyl)acetamido]máselná kyselina, iso-butylester 2-[(3-nitrofenyl)acetamido]máselná kyselina, iso-butylester 2-[(2-hydroxyfenyl)acetamido]máselná kyselina, iso-butylester

2-[(2-naftyl)acetamido]máselná kyselina, iso-butylester 2-[(2,4-dichlorfenyl)acetamido]máselná kyselina, iso-butylester

2-[(4-bromfenyl)acetamido]máselná kyselina, iso-butylester 2-[(3-chlorfenyl)acetamido]máselná kyselina, iso-butylester • ·« ·· ··

9· · · 9 19 9

9 9 9 9 9 9 • · · · ·«· 99 9

9 9 9 9

999 99 91 99

2-[(3-fluorfenyl)acetamido]máselná kyselina, iso-butylester 2-[(benzothiazol-4-yl)acetamido]máselná kyselina, iso-butylester

2-[(2-methylfenyl)acetamido]máselná kyselina, iso-butylester

2-[(2-fluorfenyl)acetamido]máselná kyselina, iso-butylester 2-[(4-fluorfenyl)acetamido]máselná kyselina, iso-butylester 2-[(3-bromfenyl)acetamido]máselná kyselina, iso-butylester 2-[(3-trifluormethylfenyl)acetamido]máselná kyselina, iso-butylester

2-[(2-thienyl)acetamido]máselná kyselina, iso-butylester 2-(fenylacetamido)máselná kyselina, iso-butylester N-(fenylacetyl)valin, 2-methylbutylester

N-(fenylacetyl)methionin, iso-butylester

N-(fenylacetyl)leucin, iso-butylester

N-[(3-chlorfenyl)acetyl]alanin, 3-methylbut-2-enylester N-[(3-chlorfenyl)acetyl]alanin, cyklopropylmethylester N-[(3-chlorfenyl)acetyl]alanin, 2-thienylmethylester N-[(3-chlorfenyl)acetyl]alanin, (1-methylcyklopropyl)methylester

N-[(3-chlorfenyl)acetyl]alanin, 3-thienylmethylester N-[(3-chlorfenyl)acetyl]alanin, 2-methylcyklopentylester N-[(3-chlorfenyl)acetyl]alanin, 2-methylprop-2-enylester N-[(3-chlorfenyl)acetyl]alanin, cyklohex-2-enylester N-[(2-fenylbenzoxazol-5-yl)acetyl]alanin, iso-butylester N-[(3-methylthiofenyl)acetyl]alanin, iso-butylester N-4-[(2-furyl)acetyl]alanin, iso-butylester

N-[(benzofuran-2-yl)acetyl]alanin, iso-butylester

N-[(benzothiofen-3-yl)acetyl]alanin, iso-butylester N-[(2-chlor-5-thienyl)acetyl]alanin, iso-butylester

·· ·· ·« 4 4 4 4

4 4 4 4 « « 44 444 «4«

4 4 · «4 ·4 44

Ν-[(3-methyl-isoxazol-5-yl)acetyl]alanin, iso-butylester N-[(2-fenylthiothienyl)acetyl]alanin, iso-butylester N-[(6-methoxybenzothiofen-2-yl)acetyl]alanin, iso-butylester

N-[(3-fenyl-l,2,4-thiadiazol-5-yl)acetyl]alanin, iso-butylester

N-[(2-fenyloxazol-4-yl)acetyl]alanin, iso-butylester

N-[(3-methylfenyl)acetyl]alanin, iso-butylester

N-[(2,5-difluorfenyl)acetyl]alanin, iso-butylester

N-[(3,5-diflurofenyl)acetyl]alanin, iso-butylester

N-[(3-thienyl)acetyl]alanin, iso-butylester

N-[(4-methylfenyl)acetyl] alanin, iso-butylester

N-(fenylacetyl)alanin, (1-methoxykarbonyl)iso-butylester

N-[(3-nitrofenyl)acetyl]alanin, iso-butylester

N-[(3,5-difluorfenyl)acetyl]alanin, ethylester

N-[(3-nitrofenyl)acetyl]methionin, ethylester

N-[(3-chlorfenyl)acetyl]alanin, iso-butylester

N- [ (3-chlorfenyl)acetyl]alanin,

2-(N,N-dimethylamino)ethylester

2-[(3,5-dichlorfenyl)acetamido]hexanová kyselina, methylester

N-[(3,5-dichlorfenyl)acetyl]alanin, iso-butylester

N-(cyklohexylacetyl)alanin, iso-butylester

N-(cyklopentylacetyl)alanin, iso-butylester

N-[(cyklohex-l-enyl)acetyl]alanin, iso-butylester

N-[(3-chlorfenyl)acetyl]alanin, 3-methylbut-2-enylthioester

N-[(2-fenyl)-2-fluoracetyl]alanin, ethylester

N-(3,5-difluorfenylacetyl)fenylglycin, methylester

N-(3,5-difluorfenylacetyl)fenylglycin, iso-butylester

N-(cyklopentylacetyl)fenylglycin, methylester » · · · «·· 9·9

N-(cyklopentylacetyl)alanin, methylester N-(cyklopropylacetyl)fenylglycin, methylester N-(cyklopropylacetyl)alanin, methylester N-[(3-nitrofenyl)acetyl]methionin, iso-butylester

Kromě toho se předložený vynález obecného vzorce III:

dále týká sloučenin

ve kterém

R¹ je zvolen ze souboru, zahrnujícího

a) alkyl, alkenyl, alkcykloalkyl, fenyl-(R) _m,-, naftyl(R)_m-, kde R je alkylenová skupina s 1 až 8 atomy uhlíku a m je celé číslo, které se rovná 0 nebo 1, cykloalkyl, cykloalkenyl, 3-pyridyl, 4-pyridyl a heteroaryl, jiný než 3- a 4-pyridyl, se 3 až 10 atomy a 1 až 4 heteroatomy, zvolenými ze souboru, zahrnujícího atom kyslíku, síru a atom dusíku, kde heteroarylová skupina je popřípadě substituována 1 až 3 substituenty, zvolenými ze souboru, zahrnujícího alkyl, alkoxy, aryl, aryloxy, atom halogenu, skupinu nitro, thioalkoxy a thioaryloxy s tou podmínkou, že pokud ' takový heteroaryl obsahuje alespoň jeden ·· ···· dusíkový heteroatom, pak také obsahuje alespoň jeden kyslíkový a/nebo sírový heteroatom;

(b) substituovanou fenylovou skupinu obecného vzorce II:

(R)_n

II ve kterém

R je alkylen, obsahující 1 až 8 atomů uhlíku, je celé číslo, které se rovná 0 nebo 1, m

R^a zvoleny ze souboru, skupinu hydroxy, atom zvoleny alkyl, ze souboru, alkoxy, aryl, a R^a jsou nezávisle zahrnujícího atom vodíku, fluoru a methyl;

a R^b‘ jsou nezávisle zahrnujícího atom vodíku, skupinu kyano, cykloalkyl, atom halogenu, heteroaryl, heterocyklický systém, skupinu nitro, trihalomethyl, thioalkoxy, thioaryloxy, thioheteroaryloxy a -C(O)R⁴, kde R⁴ je zvolen ze souboru, zahrnujícího alkyl, aryl, alkoxy a aryloxy; a

R^c je zvolen ze souboru, zahrnujícího atom vodíku, alkyl, aryl, skupinu kyano, atom halogenu, skupinu nitro nebo R^b a R^c jsou k sobě kondenzovány a vytvářejí methylendioxy kruh s fenylovým kruhem; a pokud R^b a/nebo R^b' a/nebo R^c je atom fluoru, atom chloru, atom bromu a/nebo skupina nitro, pak R^aa/nebo R^a' mohou také představovat atom chloru; a (c) 1- nebo 2-naftyl-(R)_m-, kde R je alkylenová skupina obsahující 1 až 8 atomů uhlíku a m je celé číslo, které se rovná 0 nebo 1, substituovaný v poloze 5, 6, 7 a/nebo 8 jedním až čtyřmi substituenty, zvolenými ze souboru, zahrnujícího alkyl, alkoxy, atom halogenu, skupinu kyano, skupinu nitro, trihalomethyl a thioalkoxy;

R³ je zvolen ze souboru, zahrnujícího - (CH₂)_nCR¹⁰R⁵R⁶, kde n je celé číslo, které se rovná 0, 1 nebo 2, R⁵ a R⁶ jsou nezávisle zvoleny ze souboru, zahrnujícího atom vodíku, alkyl, alkenyl, aryl, heteroaryl, heterocyklický systém, -NR⁷R⁸, kde R⁷ a R⁸ jsou nezávisle na sobě atom vodíku nebo alkyl a -COOR⁹, kde R⁹ představuje alkyl a kde dále R⁵ a R⁶ mohou být spojeny a vytvářet cykloalkylovou skupinu, cykloalkenylovou skupinu, arylovou skupinu, heteroarylovou skupinu a heterocyklickou skupinu a pokud R⁵ a R⁶ nejsou spojeny, aby vytvářely arylovou nebo heteroarylovou skupinu, pak R¹⁰ je zvolen ze souboru, zahrnujícího atom vodíku a alkyl s tou podmínkou, že pokud n je rovno nule, potom R¹⁰ představuje atom vodíku a pokud n je větší než nula a R⁵ a R⁶ jsou spojeny, aby vytvářely arylovou nebo heteroarylovou skupinu, potom R¹⁰ představuje vazbu uvnitř této skupiny;

X představuje atom kyslíku nebo atom síry;

X' představuje atom vodíku, skupinu hydroxy nebo atom • 0

0000 fluoru;

pokud R¹ představuje fenyl, R² představuje -CH (CH3) CH2CH3, X představuje atom kyslíku a X' a X představují atom vodíku, potom R³ nepředstavuje -CH2CH3 nebo -CH₂CH (CH₃) ₂;

pokud R¹ představuje fenyl, R³ představuje -CH2CH (CH3) 2, X představuje atom kyslíku a X’ a X představují atom vodíku, potom R² nepředstavuje -CH(CH3)2ř pokud R¹ představuje pyrid-3-yl, R² představuje ethyl, X představuje atom kyslíku a X' a X představují atom vodíku, potom R³ nepředstavuje -CH₂CH (CH₃) ₂, pokud R¹ představuje indoxazin-3-yl, 2,4-dimethylthiazol-5yl, 4-methyl-l,2,5-thiooxadizol-3-yl nebo 3,5di(trifluormethyl)fenyl, R² představuje methyl, X představuje atom kyslíku a X' a X představují atom vodíku, potom R³ nepředstavuje -CH₂CH (CH₃) ₂, a pokud R¹ představuje -CH2-fenyl, R³ představuje -CH2CH₃, X představuje atom kyslíku a X' a X představují atom vodíku, potom R² nepředstavuje -CH₂CH(CH₃)₂, a navíc s další podmínkou, že je vyloučena následující známá sloučenina:

ethylester N-(fenylacetyl)methioninu.

Výhodné sloučeniny obecného vzorce III uvedeného výše zahrnují sloučeniny popsané v obecném vzorci IV, který následuje:

·« « · »· e· »· • ··· Φ · Φ · * φφ * • φ φφφ · φ φ · • · · φφφφ φφφ φφφ • · φφφ φ · • ••Φ φφφ φφφ φφ ·· ··

R¹	R²	R³	X
Γ - ........^{.. 1} -φ	-CHj	-CH_;CH(CKj),	0
-CtL-φ	-CH,	-CH.,CH(CHj),	0
	-CHj	-CH,CH(CHj)₂	1 0
4-ci-<a-	-ch₃	-CH₂CH(CH₃)₂	o
3.4-α-ψ-	-CH,	-CHjCHfCH,),	0
pyrid-3-yl	-ch₃	. -CH₂CH(CH_?)j	0
1-naftyl	-CHj	-CH,CH(CHj)₂	0
2-naftyl	-CHj	-CH₂CH(CHj)₂	0
-(CH,),-0	-CHj	-CH₂CH(CHj)₂	0
-(CH,)₃-<p	-CHj	-CH,CH(CHj)j	0
pyrid-4-yl	-CHj	-CH₂CH(CHj)₂	0
3.4-di-Cl-4>-	-CHjCH,	-CH₂CH(CHj),	0
3-CHjCM>-	-CILCHj	-CH₂CH(CH,)₂	0
4-ΝΟ₂-φ-	-CH,CH,	-CH₂CH(CH,)₂	0
3,4-methylene- dioxyfenyl-	-CH,CHj	-CH₂CH(CHj)₂	0

• tt · · ·· ·· ·· « « tttt ··*· ···· • · · · · «··· t · · · · · » ··· ··· • · · · · · · ···· · * · Λ 99 9 9 9 <9 ··

R¹	R²	R³	X
thien-3-yl	-CH,CH,	-CHjCH(CH,)j	0
4-C1-0-	-CHjCH,	-CH₂CH(CH,)j	0
3-ΝΟ₂-φ-	-CHjCHj	-CHjCH(CH,)j	O
2-ΗΟ-φ-	-ch,ch.	-CHjCH(CH,)j	0
2-naftyl	-CHjCHj	-CHjCH(CH,)₂	0
2,4-di-CM-	-CH_;CHj	-CHjCH(CH,)j	0
4-Br-</>-	-CH,CH,	-CH,CH(CH,)j	0
3-Cl-</>-	-CH,CH,	-CH₂CH(CH,)j	0
3Τ-Φ-	-ch,ch.	-CHjCH(CH,)j	0
benzothiazol-4-yl	-CH,CH,	-CHjCH(CH,)j	O
2-CH,-<£-	-CH,CH,	-CH₂CH(CH,)j	0
2-F-tt-	-CHjCHj	-CH_;CH(CH,)j	0
4-F-«^.	-CH,CH,	-CH,CH(CH,)j	0
3-Βγ-Φ-	-CHjCHj	-CH,CH(CH,)j	0
3-CF₃-4>-	-CHjCHj	-CHjCH(CH₃)j	0
thien-2-yl	-CHjCHj	-CH₂CH(CH,)j	0
Φ-	-CHjCHj	-CHjCH(CH,)j	O
Φ-	-CH(CHj)₂	-CHjCH(CH,)CH₃CH,	0
Φ-	-CHjCHjSCHj	-CHjCH(CH,)j	0
Φ-	-CHjCH(CH₃)j	-CHjCH(CH,)j	0
3-α-φ-	-CHj	-CH,CH=C(CH,)j	0
3-ci-</>-	-CHj	-CHj-cyklopropyl	0
3-C1-4»-	-CHj	-CHj-2-thienyl	O
3-0Ι-φ-	-CH,	.CH, -CHjC^ \| \|^CH, CH,	O
3-α-φ-	-CH,	-CH,-3-thienyl	O

R*	1 ^R2	R³	X
3-Cl-t/>-	-CH₃	-(2-CH₃- cyklopentyl)	o
3-Ο-φ-	-ch₃	-CH₂C=CH₂ 1 ch₃	o
3-Ο-φ-	-CH,	-cyklohex-2-enyl	0
2-[enyl- benzoxazol-5-yl	-CH₃	-CHjCH(CH₃)₂	0
3-CH₃S-é-	-ch₃	-CH,CH(CH₃)₂	0
furan-2-yl	-ch₃	-CH_;CH(CH₃)₂	0
benzoftiran-2-yl	-CH,	-CH₂CH(CH₃)₂	0
benzothien-3-yl	-CH₃	-CH₂CH(CH₃)j	0
2-chloro- thien-5-yl	-CH₃	-CHjCH(CH₃)₂	o
3-methyl- isoxazol-5-yl	-ch₃	-CH₂CH(CHj)₂	o
2-4>-S-thien-5-yl	-ch₃	-CH₂CH(CH₃)₂	o
6-CHjO- benzothiofen-2-yI	-ch₃	-CH₂CH(CH₃)₂	0
3-fenyl-1,2,4thiadiazol-5-yl	-ch₃	-CH₃CH(CH₃)₂	0
2-<£-oxazol-4-yl	-CH,	-CH₂CH(CH₃)₂	0
3-CHj-©-	-CH,	-CH₂CH(CH₃)₂	0
2,5-di-F-<£-	-ch₃	-CH₂CH(CHj)₂	0
3,5-di-F-</>-	-CHj	-CH₂CH(CH₃)₂	0
thien-3-yl	-CH,	-CH₂CH(CHj)₂	0
4-CH₃-</>-	-ch₃	-CH₂CH(CHj)₂	0
Φ-	-ch₃	-CHCOOCHj 1 CH(CH₃)₂	0
3-NO₂-</>-	-ch₃	-CH₂CH(CH₃)₂	0

• *

R'	R²	R³	X
3,5-di-F-d>	-CH,	-CH,CH,	0
3-ΝΟ_;-ψ-	-CHiCHjSCH,	-ch₂ch.	0
3-Cl-d>-	-CH,	-CH₂CH(CH,)₂	0
3-C1-0-	-CH,	-CH₂CH₂N(CH,)₂	0
3,5-di-Cl-0-	-CHjCHjCHjCH,	-CH,	0
3,5-di-Cl-0-	-CH,	-CH₂CH(CH,)₂	0
cyklohexyl	-CH,	-CH,CH(CH,)₂	0
cyklopentyi	-CH,	-CH₂CH(CH,)₂	0
cyklohex-l-enyl	-CH,	-CH₂CH(CH,)₂	0
3-Cl-<ř>-	-CH,	-CH₂CH=C(CH,)₂	s
3,5-di-F-d>-	-Φ	-CH,	0
3,5-diF-d.	-</>	-CH₂CH(CH,)₂	0
cyklopentyi	-Φ	-CH,	0
cyklopentyi	-CH,	-CH,	0
cyklopropyl	-Φ	-CH,	0
cyklopropyl	-CH,	-CH,	0
3-ΝΟ₂-φ	-CHjCH,SCH,	-CH₂CH(CH,)₂	0

Další výhodné sloučeniny obecného vzorce I uvedeného výše zahrnují sloučeninu, ve které R¹ představuje fenyl, R²představuje atom fluoru a R³ představuje methyl.

Detailní popis vynálezu

Jak bylo uvedeno výše, předložený vynález se týká sloučenin, které inhibují uvolňování β-amyloidového peptidu

9 a/nebo jeho syntézu a v souladu s tím je možno je použít při léčení Alzheimerovy nemoci. Předtím, něž bude předložený vynález dále detailně popsán, budou nejprve definovány následující výrazy.

Definice

Výraz β-amyloidový peptid se vztahuje k peptidu o 39-43 aminokyselinách, který má molekulovou hmotnost přibližně 4,2 kD, přičemž tento peptid je v zásadě homologický té formě proteinu, kterou popsal Glenner a kol.¹, v to počítaje mutace a post-translační modifikace normálního βamyloidovového peptidu. Ať se nachází v jakékoli podobě, βamyloidový peptid je fragment většího transmembránového glykoproteinu o přibližně 39-43 aminokyselinách, který je označován jako β-amyloidový prekursorový protein (APP). Jeho sekvence 43-aminokyselin je následující:

Asp	Ala	Glu	Phe	Arg	His	Asp	Ser	Gly	Tyr
11
Glu	Val	His	His	Gin	Lys	Leu	Val	Phe	Phe
21
Ala	Glu	Asp	Val	Gly	Ser	Asn	Lys	Gly	Ala
31
Ile	Ile	Gly	Leu	Met	Val	Gly	Gly	Val	Val
41
Ile	Ala	Thr	(SEC	> ID	NO:	1)

nebo sekvence, která je této sekvenci v zásadě homologická.

·· ·· *·

9 9 9 9 9

99 999 999

Alkyl se vztahuje k monovalentním alkylovým skupinám, které výhodně obsahují od 1 do 10 atomů uhlíku a výhodněji 1 až 6 atomů uhlíku. Jako příklady tohoto výrazu je možno uvést skupiny jako jsou methyl, ethyl, n-propyl, isopropyl, n-butyl, iso-butyl, terč.-butyl, n-hexyl a podobně.

Alkylen se vztahuje k divalentním alkylenovým skupinám, které výhodně obsahují od 1 do 8 atomů uhlíku a výhodněji 1 až 6 atomů uhlíku. Jako příklady tohoto výrazu je možno uvést skupiny jako jsou methylen (-CH₂-) , ethylen (-CH₂CH₂), isomery propylenu (například -CH₂CH₂CH₂- a -CH (CH3) CH₂-) a podobně.

Alkoxy se vztahuje ke skupině alkyl-O-, kde alkyl má stejný význam, jaký byl definován výše. Výhodné alkoxy skupiny zahrnují, uvedeno jako příklad, skupiny methoxy, ethoxy, n-propoxy, iso-propoxy, n-butoxy, terč.-butoxy, sek.-butoxy, n-pentoxy, n-hexoxy, 1,2-dimethylbutoxy a podobně.

Alkylalkoxy se vztahuje ke skupině -alkylen-O-alkyl, kde alkylen a alkyl mají význam, který byl definován výše. Takové skupiny zahrnují, uvedeno jako příklad, methylenmethoxy (-CH2OCH3) , ethylenmethoxy (-CH₂CH₂OCH3) , npropylen-iso-propoxy (-CH₂CH₂CH₂OCH(CH₃) ₂), methylen-terc.butoxy (-CH₂-O-C(CH₃) 3) a podobně.

Alkylthioalkoxy se vztahuje ke skupině -alkylen-Salkyl, ve které alkylen a alkyl mají význam, který byl • · · 9 9 «9 9

9 9 9 9 9 9

9 99 999 999

9 9 9 9

999 99 99 99 definován výše. Takové skupiny zahrnují, uvedeno jako příklad, methylenthiomethoxy (-CH₂SCH₃) , ethylenthiomethoxy (~CH₂CH₂SCH3) , n-propylen-iso-thiopropoxy (CH2CH2CH2SCH (CH3) 2), methylen-terc.-thiobutoxy (-CH2SC (CH₃) ₃) a podobně.

Alkenyl se vztahuje k alkenylovým skupinám, které výhodně obsahují od 2 do 10 atomů uhlíku a výhodněji 2 až 6 atomy uhlíku a mají výhodně 1 a výhodněji 1-2 míst alkenylového nenasycení. Výhodné alkenylové skupiny zahrnují ethenyl (CH=CH₂) , n-propenyl (-CH₂CH=CH₂) , iso-propenyl (-C (CH₃) =CH₂) a podobně.

Alkinyl se vztahuje k alkinylovým skupinám, které výhodně obsahují od 2 do 10 atomů uhlíku a výhodněji 2 až 6 atomů uhlíku a mají alespoň 1 a výhodně 1-2 místa alkinylového nenasycení. Výhodné alkinylové skupiny zahrnují ethinyl (C=CH), propargyl (-CH₂C=CH) a podobně.

Acyl se vztahuje ke skupinám alkyl-C(O)-, aryl-C(O)- a heteroaryl-C(O)-, kde alkyl, aryl a heteroaryl mají význam, který byl definován výše.

Acylamino se vztahuje ke skupině -C(O)NRR, kde každý R je nezávisle atom vodíku nebo alkyl.

Alkcykloalkyl se vztahuje ke skupině -alkylen-cykloalkyl, kde alkylen a cykloalkyl mají význam, který byl definován výše.

//

Aminoacyl se vztahuje ke skupině -NRC(O)R, kde každý R je nezávisle atom vodíku nebo alkyl.

Acyloxy se vztahuje ke skupinám alkyl-C(O)0-, aryl-C(0)0. heteroaryl- C(O)O- a heterocykl-C(O)0-, kde alkyl, aryl, heteroaryl a heterocyklický systém mají význam, který byl definován výše.

Aryl se vztahuje k nenasycené aromatické karbocyklické skupině, obsahující od 6 do 14 atomů uhlíku, která má jednoduchý kruh (například fenyl) nebo více kondenzovaných kruhů (například naftyl nebo anthryl). Výhodné aryly zahrnují fenyl, naftyl a podobně.

Pokud není jinak omezeno definicí arylového substituentu, takové arylové skupiny mohou být popřípadě substituovány 1 až 3 substituenty, zvolenými ze souboru, zahrnujícího hydroxy, acyl, acyloxy, alkyl, alkoxy, alkenyl, alkinyl, amino, aminoacyl, aryl, aryloxy, karboxyl, karboxylalkyl, acylamino, skupinu kyano, atom halogenu, skupinu nitro, heteroaryl, trihalomethyl, thioalkoxy a podobně. Výhodné substituenty zahrnují alkyl, alkoxy, atom halogenu, skupinu kyano, skupinu nitro, trihalomethyl a thioalkoxy.

Aryloxy se vztahuje ke skupině aryl-Ο-, ve které arylová skupina je jako bylo definováno výše, v to počítaje popřípadě substituované arylové skupiny jako bylo také definováno výše.

Karboxylalkyl se vztahuje ke skupině -C(0)O-alkyl, kde ty • · ·· ·· ·· ·· ···· · ♦ · · • · · · · · · · • · · · · · ··· ··· • » · · · · • · · ··· ♦· ·· «· alkyl má stejný význam, jaký byl definován výše.

Cykloalkyl se vztahuje k cyklickým alkylovým skupinám, obsahujícím od 3 do 10 atomů uhlíku, které mají jednoduchý cyklický kruh nebo více kondenzovaných kruhů, které mohou být popřípadě substituovány od 1 do 3 alkylovými skupinami. Takové cykloalkylové skupiny zahrnují, uvedeno jako příklad, jednoduché kruhové struktury jako je cyklopropyl, cyklobutyl, cyklopentyl, cyklooktyl, 1-methylcyklopropyl, 2-methylcyklopentyl, 2- methylcyklooktyl a podobně nebo vícenásobné kruhové struktury jako je adamantanyl a podobně.

Cykloalkenyl se vztahuje k cyklickým alkenylovým skupinám, obsahujícím od 4 do 8 atomů uhlíku, které mají jednoduchý cyklický kruh a alespoň jedno místo vnitřního nenasycení, které mohou být popřípadě substituovány od 1 do 3 alkylovými skupinami. Příklady vhodných cykloalkenylových skupin zahrnují například cyklobut-2-enyl, cyklopent-3enyl, cyklookt-3-enyl a podobně.

Halo nebo halogen se vztahuje k atomu fluoru, atomu chloru, atomu bromu a atomu jodu a výhodně buď k atomu fluoru nebo k atomu chloru.

Heteroaryl se vztahuje k monovalentní aromatické skupině obsahující 2 až 8 atomů uhlíku a 1 až 4 heteroatomy, zvolené ze souboru, zahrnujícího atom kyslíku, atom dusíku a atom síry, uvnitř kruhu.

• · · 9

999 999

9

99

Pokud není jinak omezeno definicí heteroarylového substituentu, takové heteroarylové skupiny mohou být popřípadě substituovány 1 až 3 substituenty zvolenými ze souboru, zahrnujícího alkyl, alkoxy, aryl, aryloxy, atom halogenu, skupinu nitro, heteroaryl, thioalkoxy, thioaryloxy. Takové heteroarylové skupiny mohou mít jednoduchý kruh (například pyridyl nebo furyl) nebo více kondenzovaných kruhů (například indolizinyl nebo benzothienyl). Výhodné heteroaryly zahrnují pyridyl a furyl.

Heterocykl nebo heterocyklický systém se vztahuje k monovalentní (to jest jedno místo připojení) nasycené nebo nenasycené skupině, která má jednoduchý kruh nebo více kondenzovaných kruhů, od 1 do 8 atomů uhlíku a od 1 do 4 heteroatomů, zvolených ze souboru, zahrnujícího atom dusíku, atom síry nebo atom kyslíku, uvnitř kruhu.

Pokud není jinak omezeno definicí heterocyklického substituentu, takové heterocyklické skupiny mohou být popřípadě substituovány 1 až 3 substituenty zvolenými ze souboru, zahrnujícího alkyl, alkoxy, aryl, aryloxy, atom halogenu, skupinu nitro. heteroaryl, thioalkoxy, thioaryloxy a podobně. Takové heterocyklické skupiny mohou mít jednoduchý kruh (například piperidinyl nebo tetrahydrofuryl) nebo více kondenzovaných kruhů (například indolinyl, dihydrobenzofuran nebo chinuklidinyl). Výhodné heterocykly zahrnují piperidinyl, pyrrolidinyl a tetrahydrofuryl.

• · · ftft ftft • · ftftft ftft ftftft • ftft ftftft • · ftft • ft ftft ftft

Příklady heterocyklů a heteroarylů zahrnují, aniž by tím byly omezeny, furan, thiofen, thiazol, oxazol, benzothiazol, benzofuran, benzothiofen, pyrrol, imidazol, pyrazol, pyridin, pyrazin, pyrimidin, pyridazin, indolizin, isoindol, indol, indazol, purin, chinolizin, isochinolin, chinolin, ftalalin, naftylpyridin, chinoxalin, chinazolin, cinnolin, pteridin, karbazol, karbolin, fenanthridin, akridin, fenanthrolin, isothiazol, fenazin, isoxazol, fenoxazin, fenothiazin, imidazolidin, imidazolin, piperidin, piperazin, pyrrolidin, indolin a podobně.

Thiol se vztahuje ke skupině -SH.

Thioalkoxy se vztahuje ke skupinám -S-alkyl, kde alkyl má stejný význam, jaký byl definován výše.

Thioaryloxy se vztahuje ke skupině aryl-S-, kde arylová skupina je jako bylo definováno výše, v to počítaje popřípadě substituované arylové skupiny, jak byly také definováno výše.

Thioheteroaryloxy se vztahuje ke skupině heteroaryl-S-, kde heteroarylové skupina je jako bylo definováno výše, v to počítaje popřípadě substituované arylové skupiny jak byly také definovány výše.

Výraz farmaceuticky přijatelná sůl se vztahuje k farmaceuticky přijatelné soli sloučeniny obecného vzorce I, která je odvozena od řady organických a anorganických iontů dobře známých ze stavu techniky a zahrnujících, uvedeno • · »· 00 00 ·· 00 0 · · · · · • 0 0 0 0 0 0 0

0 00 00 000 000 0 0 0 0 0 0

000 000 00 00 00 pouze jako příklad, ionty sodíku, draslíku, vápníku, hořčíku, amonium, tetraalkylamonium a podobně; a pokud molekula obsahuje bázickou funkční skupinu, pak také soli organických nebo anorganických kyselin, jako je hydrochlorid, hydrobromid, tartarát, mesylát, octan, maleát, oxalát a podobně.

Příprava sloučenin

Sloučeniny obecného vzorce I uvedeného výše je možné snadno připravit několika divergentními syntetickými cestami, přičemž konkrétní cesta je zvolena vzhledem k obtížnosti přípravy sloučeniny, komerční dostupnosti výchozích materiálů, a podobně.

První způsob syntézy zahrnuje konvenční kopulaci derivátu octové kyseliny s primárním aminem esterifikované aminokyseliny, jak je znázorněno v reakci (1):

• · • · ·· ·· «···

ve které R¹, R², R³, X, X' bylo definováno výše.

a X mají stejný význam, jako

Reakce (1) zahrnuje pouze kopulaci vhodného derivátu octové kyseliny ]L s primárním aminem esteru 2^ aminokyseliny za podmínek, které vedou k vytvoření N-acetylového derivátu 2· Tato reakce se běžně provádí v syntéze peptidů a způsoby syntézy, které jsou v ní používané mohou být také použity pro přípravu N-acetylových esterů 2 aminokyselin podle předloženého vynálezu. Například lze použít dobře známé kopulační reagenty jako jsou karbodiimidy nebo BOP (benzotriazol-l-yloxy-tris(dimethylamino)fosfonium hexafluorfosfát) se současným použitím dobře známých aditiv, jako je N-hydroxysukcinimid, 1-hydroxybenzotriazol a podobně mohou být použity pro usnadnění kopulace. Reakce

..

se běžně provádí v inertním aprotickém ředidle jako je dimethylformamid, dichlormethan, chloroform, acetonitril, tetrahydrofuran a podobně. Alternativně mohou být použity v reakci (1) halogenovodíkové sloučeniny _1 a, pokud jsou použity, jsou typicky použity v přítomnosti vhodné báze pro vychytávání kyseliny, vytvořené v průběhu reakce. Vhodné báze zahrnují, uvedeno jako příklad, triethylamin, diisopropylethylamin, N-methylmorfolin a podobně.

Reakce (1) je výhodně prováděn při teplotě od přibližně 0 °C do přibližně 60 °C až do ukončení reakce, což obvykle nastává po uplynutí od 1 do přibližně 24 hodin. Po ukončení reakce se N-acetylester 3 aminokyseliny izoluje obvyklými způsoby, v to počítaje precipitace, chromatografie, filtrace a podobně.

V reakci (1) je každý z reagentů (derivát 1 octové kyseliny a ester 2 aminokyseliny) dobře známý ze stavu techniky a mnoho z nich je komerčně dostupných.

Alternativně syntéza popsaná výše v reakci (1) může být prováděna na aminokyselině (XR³ = OH) a po vytvoření Nacetylu, jak bylo popsáno výše, se potom karboxylová kyselina esterifikuje buď alkoholem (HOR³) nebo thioalkoholem (HSR³) za obvyklých podmínek N-acetyl ester 3 aminokyseliny, který představuje sloučeninu obecného vzorce I. Například esterifikační procedury pro získání R³skupin, obsahujících esterové skupiny, mohou být dosaženy použitím způsobu, který popsali Losse. a kol.¹⁰

V ještě dalším provedení předloženého vynálezu, mohou být použity konvenční transesterifikační techniky pro přípravu řady různých esterových skupin na N-acetylesterech 3 aminokyselin. Za stavu techniky je známa řada způsobů k provádění transesterifikace a každá taková technika pouze nahrazuje -OR skupinu na esteru N-acetylesteru 2 aminokyseliny různou -OR³/-SR³ skupinou, odvozenou od odpovídajícího alkoholu (to jest HOR³) nebo thioalkoholu (to jest HSR³) a v některých případech je použit katalyzátor jako je iso-propoxid titaničitý pro usnadnění dokončení reakce. V jednom způsobu se alkohol HOR³ nebo thioalkohol HSR³ nejprve zpracovává hydridem sodným ve vhodném ředidle jako je toluen pro vytvoření odpovídajícího sodného alkoxidu nebo thioalkoxidu, který je potom použit pro provedení transesterifikace N-acetylesteru 3 aminokyseliny. Účinnost tohoto způsobu jej činí obzvláště účinným při použití vysokovroucích a/nebo drahých alkoholů.

V jiném způsobu transesterif ikace se N-acetylester aminokyseliny, který má být transesterifikován, umístí do velkého přebytku alkoholu nebo thioalkoholu, kterým se provádí transesterifikace. Potom se přidá katalytické množství hydridu sodného a reakce postupuje za obvyklých podmínek rychle a tím transesterifikovaný produkt, vyžaduje použití velkého se získá požadovaný Protože tento protokol přebytku alkoholu nebo thioalkoholu, tato procedura je obzvláště vhodná, pokud alkohol je laciný.

Transesterifikace poskytuje jednoduchý způsob vytváření

7/2 f ·· · · ·· ·· ·· • · · · · · · · · ·· · ·· ··· · · · · • · · · · · · ······ • · · · · · · ···· ··· ··· ·· ·· ·· široké škály substituentů R³ na sloučeninách obecného vzorce I uvedeného výše. Ve všech případech alkoholy a thioalkoholy, použité pro provádění transesterifikace jsou dobře známé ze stavu techniky, přičemž významné množství jich je komerčně dostupných.

Další způsoby přípravy esterů podle předloženého vynálezu zahrnují, uvedeno jako příklad, nejprve hydrolýzu esteru na volnou kyselinu, následovanou O-alkylací halo-R³ skupinou v přítomnosti báze jako je uhličitan draselný.

Sloučeniny popsané výše mohou být také připraveny použitím karbodiimidových peptidových kopulačních reagentů na polymerním nosiči. Byl například popsán EDC ve formě na polymerním nosiči (Tetrahedron Letters, 34(48), 7685 (1993) )¹⁵. Kromě toho byl objeven nový karbodiimidový kopulační reagent, PEPC a jeho odpovídající polymerové nesené formy, které jsou velmi užitečné pro přípravu sloučenin podle předloženého vynálezu.

Polymery, vhodné pro použití při přípravě kopulačního reagentů na polymerním nosiči, jsou buď komerčně dostupné nebo mohou být připraveny připraven způsoby dobře známými odborníkovi v oboru polymerů. Vhodný polymer musí mít připravené postranní řetězce nesoucí skupiny, které reagují s koncovým aminem karbodiimidu. Takové reaktivní skupiny zahrnují atom chloru, atom bromu, atom jodu a methansulfonyl. Výhodně je reaktivní skupinou chlormethylová skupina. Kromě toho kostra polymeru musí být inertní ke karbodiimidu a za reakčních podmínkek, za

kterých budou konečný polymerové vázané kopulační reagenty používány.

Jisté hydroxymethylované pryskyřice mohou být přeměněny na chlormethylované pryskyřice, použitelné pro přípravu kopulačního reagentu na polymerním nosiči. Příklady takových hydroxylovaných pryskyřice zahrnují 4hydroxymethyl-fenylacetamidomethylovou pryskyřici (pryskyřice Pam) a 4-benzyloxybenzylalkoholovou pryskyřici (pryskyřice Wang), dodávané společností Advanced Chemtech of Louisville, Kentucky, USA (viz Advanced Chemtech 19931994 katalog, strana 115) . Hydroxymethylové skupiny těchto pryskyřice mohou být přeměněny na požadované chlormethylové skupiny libovolným z řady způsobů, dobře známých odborníkovi v oboru.

Výhodné pryskyřice jsou styren/divinylbenzenové pryskyřice, snadné komerční dostupnosti. Jak naznačuje, pryskyřice jsou již chlormethylované v důsledku jejich již jejich název chlormethylované a nevyžadují žádné chemické modifikace před použitím. Tyto pryskyřice pryskyřice jsou obchodně známy jako Merrifieldovy a jsou dodávané společností Aldrich Chemical Company, Milwaukee, Wisconsin, USA (viz Aldrich 1994-1995 katalog, strana 899). Způsoby přípravy PEPC a jeho polymerové nesených forem jsou naznačeny v následujícím schématu.

LG

Funkcionalizovaná pryskyřice, kde P znamená inertní polymer a LG = Cl, Br, I nebo OSO₂CH₃

Takové způsoby jsou popsány úplnějším způsobem v U.S. předběžné patentové přihlášce 60/019,790, podaná 14. června 1996, která je zde zahrnuta ve své celistvosti jako reference. Stručně řečeno se PEPC připraví nejprve reakcí ethylisokyanatanu s 1-(3-aminopropyl)pyrrolidinem. Výsledná močovina se zpracovává 4-toluensulfonylchloridem a tím se získá PEPC. Polymerové nesená forma se připraví reakcí PEPC se vhodnou pryskyřicí za standardních podmínek a tím se získá požadovaný reagent.

Kopulační reakce karboxylové kyseliny, používající těchto reagentů, jsou prováděny při teplotě od zhruba teploty okolí do přibližně 45 °C, po dobu od přibližně 3 do 120 hodin. Typicky může být produkt isolován promýváním reakční tfO • · • · · · · ···· • · · ·· · · ······ • · · · · · · ···· ··· ··· ·· ·· ·· směsi, která má být připravena, CHC1₃ a koncentrací zbývající organické fáze za sníženého tlaku. Jak bylo diskutováno výše, izolace produktu z reakční směsi, pokud byl použit polymerně vázaný reagent, je velmi zjednodušeno, neboť vyžaduje pouze filtraci reakční směsi a potom koncentraci filtrátu za sníženého tlaku.

Další způsoby přípravy esterů jsou podány v příkladech uvedených níže.

V těchto způsobech syntézy mohou výchozí materiály obsahovat chirální centrum (například alanin) a pokud je použit racemický výchozí materiál, výsledný produkt je směs R,S enantiomerů. Alternativně může být použit chirální isomer výchozího materiálu a jestliže použitý reakční protokol neracemizuje tento výchozí materiál, je získán chirální produkt. Takové reakční protokoly mohou zahrnovat inverzi chirálního centra v průběhu syntézy.

V souladu s tím, pokud není uvedeno jinak, produkty podle předloženého vynálezu jsou směsi R,S enantiomerů. Pokud je však požadován chirální produkt, pak chirální produkt výhodně odpovídá L-aminokyselinovému derivátu. Alternativně chirální produkty mohou být získány purifikačními způsoby, které separují enantiomery z R,S směsi a tím se získá jeden nebo druhý stereoisomer. Takové techniky jsou dobře známy ze stavu techniky.

Farmaceutické přípravky

Pokud jsou používány farmaceuticky, jsou sloučeniny obecného vzorce I obvykle podávány ve formě farmaceutických kompozic. Tyto sloučeniny mohou být podávány řadou různých cest, které zahrnují cestu orální, rektální, transdermální, subkutánní, intravenózní, intramuskulární a intranasální. Tyto sloučeniny jsou účinné jako injektovatelné i jako orální kompozice. Takové kompozice mohou být připraveny způsobem dobře známým ve farmaceutickém oboru a obsahují alespoň jednu účinnou sloučeninu.

Tento vynález se také týká farmaceutických kompozic, které obsahují jako účinnou složku jednu nebo více sloučenin obecného vzorce I uvedeného výše spolu s farmaceuticky přijatelným nosičem. Při vytváření kompozic podle předloženého vynálezu se účinná složka obvykle smísí s excipientem, zředí excipientem nebo se obklopí takovým nosičem, který může být ve formě kapslí, oplatek, sáčků nebo jiných obalů. Pokud excipient slouží jako ředidlo, může být představován pevným, polotuhým nebo kapalným materiálem, který slouží jako vehikulum, nosič nebo médium pro účinnou složku. Kompozice tedy může být ve formě tablet, pilulek, prášků, pastilek, sáčků, oplatek, elixírů, suspenzí, emulzí, roztoků, sirupů, aerosolů (ve formě pevné látky nebo v kapalném médiu), mastí, obsahujících například až do 10% hmotnostních účinné sloučeniny, měkkých a tvrdých želatinových kapslí, čípků, sterilních injektovatelných roztoků a sterilně balených prášků.

Při přípravě přípravku může být nutné rozemlít účinnou sloučeninu, aby bylo dosaženo odpovídající velikosti částic před jejich kombinací s dalšími složkami. Pokud je účinná sloučenina v zásadě nerozpustná, je obvykle rozemleta na velikost částic menší než 200 mesh. Jestliže je účinná sloučenina v zásadě rozpustná ve vodě, velikost částic se normálně upraví mletím na takovou velikost, aby bylo dosaženo v zásadě stejnoměrného rozptýlení v přípravku, například na velikost přibližně 40 mesh.

Některé příklady vhodných excipientů zahrnují laktózu, dextrózu, sacharózu, sorbitol, manitol, škroby, arabskou gumu, fosforečnan vápenatý, algináty, tragacant, želatinu, křemičitan vápenatý, mikrokrystalickou celulózu, polyvinylpyrrolidon, celulózu, sterilní vodu, sirup a methylcelulózu. Přípravky mohou dále obsahovat: lubrifikační činidla jako je talek, stearan hořečnatý a minerální olej; smáčedla; emulsifikační a suspenzní činidla; konzervační činidla jako je methyl- a propylhydroxybenzoát; sladidla a ochucovadla. Kompozice podle předloženého vynálezu mohou být připraveny tak, aby poskytovaly okamžité, trvalé nebo zpožděné uvolňování účinné složky po jejím podání pacientovi, použitím procedur známých ze stavu techniky.

Kompozice jsou výhodně připraveny jako jednotková dávka, přičemž každá dávka obsahuje od přibližně 5 do přibližně 100 mg, obvykleji od přibližně 10 do přibližně 30 mg, účinné složky. Výraz „jednotková dávka znamená fyzicky diskrétní jednotku, vhodnou jako jedna dávka pro člověka

• ·· nebo další savce, každá jednotka přitom obsahuje předem stanovené množství účinné látky, vypočtené tak, aby vyvolalo požadovaný terapeutický účinek, spolu s vhodným farmaceutickým excipientem. Výhodně se sloučenina obecného vzorce I uvedeného výše používá tak, že nečiní více než 20 hmotnostních procent farmaceutické kompozice, výhodně ne výše než 15 hmotnostních procent, zatímco zbývající část je tvořena farmaceuticky inertním nosičem nebo nosiči.

Účinná sloučenina působí v širokém rozmezí dávek a je obecně podávána ve farmaceuticky účinném množství. Je však zřejmé, že množství sloučeniny, které bude skutečně podáváno, bude určeno lékařem v závislosti na relevantních okolnostech, které zahrnují stav, který má být léčen, zvolený způsob podávání, sloučeninu, která je podávána, věk, váhu a odezvu individuálního pacienta, závažnost pacientových symptomů a podobně.

Pro přípravu pevných kompozic jako jsou tablety se hlavní účinná složka smíchá s farmaceutickým excipientem, aby vytvořila pevnou předběžně zpracovanou kompozici, obsahující homogenní směs sloučenin podle předloženého vynálezu. Pokud se o této předběžně zpracované kompozici mluví jako o homogenní, míní se tím, že účinná složka je dispergována stejnoměrně v celé kompozici, tak aby kompozice mohla být snadno rozdělena do účinných jednotkových dávek, jako jsou tablety, pilulky a kapsle, které obsahují totéž množství účinné látky. Tato pevná předběžně zpracovaná kompozice se potom rozděluje na jednotkové dávky typu, který byl popsán výše a které ·· · · ·· ·· ·· • · ·· ·· · « · 9 · ·

9 9 9 9 9 9 9 9

9 9 9 9 9 9 999 999 · · · · · «

9999 999 999 99 99 99 obsahují například od přibližně 0,1 do přibližně 500 mg účinné složky podle předloženého vynálezu.

Tablety nebo pilulky podle předloženého vynálezu mohou být potahované nebo mít jiné složení, aby se vytvořila dávková forma, která poskytuje výhodu prodlouženého působení. Například mohou tablety nebo pilulky obsahovat vnitřní dávku složky a vnější dávku složky, přičemž vnější dávka vytváří obal vnitřní dávky. Tyto dvě složky dávkové formy mohou být odděleny enterickou vrstvou, která slouží k tomu aby zabránila desintegraci v žaludku a dovolila vnitřní složce projít neporušena do dvanácterníku a nebo aby bylo dosaženo jejího zpožděného uvolňování. Pro vytvoření takové enterické vrstvy nebo povlaku lze použít množství materiálů, jako jsou materiály obsahující řadu polymerických kyselin a směsí polymerických kyselin s materiály jako je šelak, ketylalkohol a acetát celulózy.

Kapalné formy, ve kterých mohou být obsaženy nové kompozice podle předloženého vynálezu, mohou být vytvořeny pro podávání orálním způsobem nebo ve formě injekce a zahrnují vodné roztoky vhodně ochucených sirupů, vodné nebo olejové suspenze a ochucené emulze s jedlými oleji jako je olej bavlníkového semene, sezamový olej, kokosový olej nebo podzemnicový olej, stejně tak jako elixíry a podobná farmaceutická vehikula.

Kompozice pro inhalaci nebo vdechování zahrnují roztoky a suspenze ve farmaceuticky přijatelných vodných nebo organických rozpouštědlech nebo jejich směsi a prášky.

ί#Γ

0 0 00 00 • ♦ o · · · · · · • 0 0 0 0 0 0 ♦ 00 0000 000

0 0 0 0 0 0000 000 000 00 00 • · 0

Kapalné a pevné kompozice mohou obsahovat vhodné farmaceuticky přijatelné excipienty jaké byly popsány výše. Výhodně jsou takové kompozice podávány orální nebo nasální respirační cestou pro vyvolání lokálního nebo systemického účinku. Kompozice ve výhodně farmaceuticky přijatelných rozpouštědlech mohou být rozprašovány použitím inertních plynů. Atomizované roztoky mohou být přímo vdechovány z rozprašovacího zařízení nebo může být rozprašovací zařízení připevněno k obličejové masce nebo dýchacímu přístroji s přerušovaným přetlakem. Roztoky, suspenze nebo práškové kompozice mohou být podávány, výhodně orálně nebo nasálně, ze zařízení, které podávají přípravek vhodným způsobem.

Následující příklady přípravků ilustrují farmaceutické kompozice podle předloženého vynálezu.

Příklad přípravku 1

Byly připraveny tvrdé želatinové kapsle, obsahující následující složky.

Množství

Složka (mg/kapsle)

Účinná složka 30,0

Škrob 305,0

Stearan hořečnatý 5,0

Výše uvedené složky byly smíchány a plněny do tvrdých želatinových kapslí v množství 340 mg.

♦ ·· ·* ·· • * · · · « « · • · · 9 9 · · • · · 9 · ···«·· • · · 9 9

999 99 99 99

Příklad přípravku 2

Byly připraveny tablety, používajíce složky uvedené níže:

Množství

Složka (mg/tableta)

Účinná složka 25,0

Celulóza, mikrokrystalická 200,0

Koloidní oxid křemičitý 10,0

Kyselina stearová 5,0

Složky byly smíchány a lisovány do tvaru tablet, z nichž každá měla hmotnost 240 mg.

Příklad přípravku 3

Byl připraven suchý práškový inhalační přípravek s obsahem následujících složek:

Složka Hmotn. %

Účinná složka 5

Laktóza 95

Účinná složka je míchána s laktózou a směs je vložena do inhalačního zařízení se suchým práškem.

φφφ · ·« φ φφ φφ φφ φφφφ φφφφ φφφ φφφφ φ φ φ φ φφφ ··« φφφ φ φ φφφ φφ φφ »·

Příklad přípravku 4

Tablety, každá obsahující 30 mg účinné složky, byly připraveny následujícím způsobem:

Množství

Složka (mg/tablet)

Účinná složka	30,0	mg
Škrob	45,0	mg
Mikrokrystalická celulóza	35,0	mg
Polyvinylpyrrolidon
(jako 10% roztok ve sterilní vodě)	4,0	mg
Sodný karboxymethylový škrob	4,5	mg
Stearan horečnatý	0,5	mg
Talek	1,0	mg
Celkově	120	mg

Účinná složka, škrob a celulóza se prosívají sítem s velikostí ok 20 U.S. mesh a pečlivě se smíchají. Roztok polyvinylpyrrolidonu se smíchá se vzniklým práškem, a prosívá sítem s velikostí ok 16 U.S. mesh. Takto vytvořené granule se suší při teplotě 50 až 60 °C a prosívají sítem s velikostí ok 16 U.S. mesh. Sodný karboxymethylový škrob, stearan horečnatý a talek, předem prosívané sítem s velikostí ok 30 U.S. mesh, byly potom přidány ke granulím, a po smíchání se látka lisovala na tabletovacím stroji a tím se získaly tablety, které každá vážila 120 mg.

• ·· ·· · • · φφ · • · • · · • ·

Φ··· ··· φ φφ ·· • · φ « · • φ φ φ · • φ ··· ΦΦΦ • φ · φ· φφ

Příklad přípravku 5

Kapsle, každá obsahující 40 mg léku, byly vytvořeny následujícím způsobem:

Složka	Množství (mg/kapsle)
Účinná složka	40,0 mg
Škrob	109,0 mg
Stearan hořečnatý	1,0 mg
Celkově	150,0 mg

Účinná složka, škrob a stearan hořečnatý byly smíchány, prosívány sítem s velikostí ok 20 U.S. mesh a plněny do tvrdých želatinových kapslí v množství 150 mg.

Příklad přípravku 6

Čípky, každý obsahující 25 mg účinné složky, byly vytvořeny následujícím způsobem:

Složka Množství

Účinná složka 25 mg

Glyceridy nasycených mastných kyselin do 2,000 mg

Účinná složka byla prosívána sítem s velikostí ok 60 U.S. mesh a suspendována v glyceridech nasycených mastných kyselin , které byly předtím roztaveny použitím minimálního

·· · • · množství tepla. Směs byla potom vlita do čípkové formy o nominální kapacitě 2,0 g a ponechána ochladnout.

Příklad přípravku 7

Suspenze, obsahující 50 mg léku v dávce 5,0 ml, byly vytvořeny následujícím způsobem:

Složka Množství

Účinná složka 50,0 mg

Xanthanová guma 4,0 mg

Sodná karboxymethylcelulóza (11%)

Mikrokrystalická celulóza (89%)50,0 mg

Sacharóza 1,75 g

Benzoát sodný 10,0 mg

Ochucovadlo a barvivo q.v.

Purifikovaná voda do 5,0 ml

Účinná složka, sacharóza a xanthanová guma byly smíchány, prosívány sítem s velikostí ok 10 U.S. mesh a potom smíchány s předem vytvořeným roztokem mikrokrystalické celulózy a sodné karboxymethylcelulózy ve vodě. Benzoát sodný, ochucovadlo a barvivo byly rozpuštěny v malém množství vody a byly přidány za míchání. Potom bylo přidáno dostatečné množství vody pro dosažení požadovaného objemu.

&Ί>

• ·

Příklad přípravku 8

Složka	Množství (mg/kapsle)
Účinná složka	15,0 mg
Škrob	407,0 mg
Stearan hořečnatý	3,0 mg

Celkově 425,0 mg

Účinná složka, škrob a stearan hořečnatý byly smíchány, prosívány sítem s velikostí ok 20 U.S. mesh a plněny do tvrdých želatinových kapslí v množství 560 mg.

Příklad přípravku 9

Subkutánní přípravek může být připraven následujícím způsobem:

Složka

Množství

Účinná složka 5,0 mg

Kukuřičný olej 1 ml

Příklad přípravku 10

Topický přípravek může být připraven následujícím způsobem:

Složka φφφφ • · • · • · · φ

Množství

Účinná složka Emulsifikační vosk Tekutý parafín Měkký bílý parafín do

1-10 g g 20 g

100 g

Měkký bílý parafín byl zahříván až do roztavení. Byl přidán kapalný parafín a emulsifikační vosk a směs byla míchána do rozpuštění. Byla přidána účinná složka a míchání pokračovalo do vytvoření disperze. Směs byla potom chlazena, dokud neztuhla.

Další výhodné přípravky, využívající způsobu podle předloženého vynálezu používají transdermální podávači zařízení („náplasti). Takové transdermální náplasti mohou být používány za účelem dosažení kontinuální nebo diskontinuální infuze sloučenin podle předloženého vynálezu v řízených množstvích. Konstrukce a použití transdermálních náplastí pro podávání farmaceutického činidla je dobře známá ze stavu techniky. Viz například U.S. Patent 5,023,252, vydaný 11. června 1991, který je zde zahrnut jako reference. Takové náplasti mohou být konstruovány pro podávání farmaceutického činidla kontinuálním nebo nárazovým způsobem nebo v případě potřeby.

Často je žádoucí nebo nutné dopravit farmaceutické kompozice do mozku, buď přímo nebo nepřímo. Přímé techniky obvykle zahrnují umístění katetru pro podávání léku do

příjemcova ventrikulárního systému, který obejde hematoencefalickou bariéru. Jeden takový implantovatelný podávači systém, použitý pro transport biologických faktorů do specifických anatomických oblastí těla je popsán v U.S. Patentu č. 5,011,472, který je zde zahrnut jako reference.

Nepřímé techniky, kterým je obecně dávána přednost, obvykle zahrnují přípravu kompozice tak, aby poskytovala latenciaci léku přeměnou hydrofilního léku na lipidově rozpustný lék. Latenciace je obvykle dosažena blokováním hydroxylové, karbonylové, sulfátové a primární aminové skupiny, která se ve sloučenině nachází, aby se látka stala více rozpustnou v lipidech a tím i vhodnější k přenosu přes hematoencefalickou bariéru. Alternativně může být dodávání hydrofilního léku zesíleno intra-arteriální infuzí hypertonických roztoků, které přechodně otevřou hematoencefalickou bariéru.

Další vhodné přípravky pro použití podle předloženého vynálezu mohou být nalezeny v Remingron's Pharmaceutical Sciences, Mace Publishing Company, Philadelphia, PA, 17th ed. (1985).

Použitelnost

Sloučeniny a farmaceutické kompozice podle předloženého vynálezu jsou použitelné pro inhibici uvolňování βamyloidového peptidu a/nebo jeho syntézy a na základě toho mohou být použity pro léčení Alzheimerovy nemoci u savců, v to počítaje člověka.

• ftftft · · · · · · · · • ft · · · ftftftft • · ft ftft ftft ft····· • · ftftft ftft • ftftft ftftft ftftft ·· ftft ftft

Jak již bylo uvedeno výše, sloučeniny které byly popsány výše jsou vhodné pro použití v množství systémů podávání léků, které byly uvedeny výše. Kromě toho, za účelem zvýšení poločasu pobytu podávané sloučeniny v séru mohou být sloučeniny enkapsulovány, vloženy do lumenálních liposomů, připraven jako koloid nebo upraveny další obvyklou technikou, která dosahuje prodloužení poločasu pobytu sloučeniny v séru. Řada způsobů, které jsou použitelné pro přípravu liposomů, jsou popsány například v patentech Szoka a kol., U.S. Patenty č. 4,235,871, 4,501,728 a 4,837,028, které jsou zde všechny zahrnuty jako reference.

pacienta,

Výhodně,

Množství sloučeniny, podávané pacientovi, se mění v závislosti na podávané látce, cíli podávání, jako je profylaxe nebo terapie, stavu pacienta, způsobu podávání a podobně. Při terapeutickém podávání jsou kompozice podávány pacientovi, který již trpí Alzheimerovou nemocí, v množství dostatečném k alespoň částečnému zastavení dalšího vzniku symptomů nemoci a jejích komplikací. Množství vhodné pro dosažení tohoto cíle je zde označováno jako „terapeuticky účinná dávka. Množství, které je účinné pro toto použiti, závisí na úsudku ošetřujícího lékaře a vychází z faktorů jako je stupeň nebo závažnost Alzheimerovy nemoci u věk, váha a celkový stav pacienta a podobně, při použití jako terapeutické látky, jsou sloučeniny podle předloženého vynálezu podávány v dávkách, které jsou v rozmezí od přibližně 1 do přibližně 500 mg/kg/den.

r ·· · ··· ···· • ··· · · · · · · · » • · · · · ···« * * · · · · · ······ • · · · · · · ···· ··· ··· ·· * *

V případě profylaktického podávání jsou kompozice podávány pacientovi, u kterého je riziko vývinu Alzheimerovy nemoci (určené například genetickým vyhledáváním nebo na základě rodinné anamnézy), v množství dostatečném k inhibici nástupu symptomů nemoci. Množství vhodné pro dosažení tohoto cíle je zde označováno jako „profylakticky účinná dávka. Množství, které je účinné pro toto použití, závisí na úsudku ošetřujícího lékaře a vychází z faktorů jako je stupeň nebo závažnost Alzheimerovy nemoci u pacienta, věk, váha a celkový stav pacienta a podobně. Výhodně, při použití jako profylaktické látky, jsou sloučeniny podle předloženého vynálezu podávány v dávkách, které jsou v rozmezí od přibližně 1 do přibližně 500 mg/kg/den.

Jak bylo uvedeno výše, sloučeniny jsou podávány pacientovi ve formě farmaceutických kompozic popsaných výše. Tyto kompozice mohou být sterilizovány obvyklými sterilizačními technikami nebo mohou být sterilně filtrovány. Výsledné vodné roztoky mohou být baleny pro použití tak jak byly získány, mohou být lyofilizovány, přičemž lyofilizovaný přípravek může být kombinován se sterilním vodným nosičem před podáváním. pH přípravku sloučeniny je typicky mezi 3 a 11, výhodněji od 5 do 9 a nej výhodněji od 7 do 8. Je zřejmé, že použití některých z uvedených excipientů, nosičů nebo stabilizátorů povede k vytvoření farmaceutických solí.

Následující syntetické a biologické příklady jsou podány pro ilustraci předloženého vynálezu a není jejích cílem jakýmkoli způsobem omezit rozsah předmětu předloženého vynálezu.

Příklady provedení vynálezu

V diskuzi provedené výše a v příkladech uvedených níže mají následující zkratky níže uvedené významy. Pokud je použita zkratka, která není definována, má svůj obecně přijímaný význam.

bm = široký multiplet

BOC = terč.-butoxykarbonyl

BOP = benzotriazol-l-yloxy-tris(dimethylamino)fosfonium hexafluorfosfát bd = široký doublet bs = široký singlet

CDI = 1,l-karbodiimidazol d = doublet dd = doublet doubletů dq = doublet kvartetů dt = doublet tripletů

DMF = dimethylformamid

DMAP = dimethylaminopyridin

DMSO = dimethylsulfoxid

EDC = 1-(3-dimethyaminopropyl)-ethylkarbodiimid, hydrochlorid eq. = ekvivalent

EtOAc = ethylacetát g = gram • · • · · • · · • · · ·· · h = hodina

Hunigova báze = diisopropylethylamin kg = kilogram = litr m = multiplet

M = molární

M% = molární procento max = maximum meq = miliekvivalent mg = miligram ml = mililitr mm = milimeter mmol = milimol

N = normální ng = nanogram nm = nanometr

OD = optická hustota (optical density)

P-EPC = 1-(3-(1-pyrrolidinyl)propyl)-3-ethylkarbodiimid psi = liber na čtvereční palec Φ = fenyl q = kvartet quint = kvintet rpm - otáček za minutu s = singlet t = triplet

TFA = trifluoroctová kyselina

THF = tetrahydrofuran tle = chromatografie na tenké vrstvě μΐ = mikrolitr

UV = ultrafialový • 9

9 9

9 9 9

9 ♦ 9 9

9

9999 999

Kromě toho, výraz Aldrich označuje, že sloučenina nebo reagent, použitá v následujících příkladech, je dodávaná společností Aldrich Chemical Company, lne., 1001 West Saint Paul Avenue, Milwaukee, WI 53233 USA;

výraz Fluka označuje, že sloučenina nebo reagent je dodávaná společností Fluka Chemical Corp., 980 South 2nd Street, Ronkonkoma NY 11779 USA;

výraz Lancaster označuje, že sloučenina nebo reagent je dodávaná společností Lancaster Synthesis, lne., P.O. Box 100 Windham, NH 03087 USA;

výraz Sigma označuje, že sloučenina nebo reagent je dodávaná společností Sigma, P.O. Box 14508, St. Louis MO 63178 USA;

výraz Chemservice označuje, že sloučenina nebo reagent je dodávaná společností Chemservice lne., Westchester, PA, USA;

výraz Bachem označuje, že sloučenina nebo reagent je dodávaná společností Bachem Bioscience lne., 3700 Horizon Drive, Renaissance at Gulph Mills, King of Prussia, PA 19406 USA;

výraz Maybridge označuje, že sloučenina nebo reagent je dodávaná společností Maybridge Chemical Co. Trevillett, Tintagel, Cornwall PL34 OHW United Kingdom; a výraz TCI označuje, že sloučenina nebo reagent je dodávaná společností TCI America, 9211 North Harborgate St., Portland, Oregon, 97203, OR, USA;

výraz Alfa označuje, že sloučenina nebo reagent je dodávaná společností Johnson Maithey Catalog Company, lne.

• 9 9 9 • 9 9 9 • 9 9 9

999 999

9

Bond Street, Ward Hill, MA 01835-0747; a výraz Nova Biochem označuje, že sloučenina nebo reagent je dodávaná společností NovaBiochem USA, 10933 North Torrey Pines Road, P.O. Box 12087, La Jolla CA 92039- 2087.

V příkladech uvedených níže, všechny teploty jsou uvedeny ve stupních Celsia (pokud není uvedeno jinak) a byly použity následující obecné procedury pro přípravu uvedených sloučenin.

Obecná procedura A

Kopulace R¹C(X') (X)C(O)Cl s H₂NCH (R²) C (O) XR³

Do míchaného roztoku hydrochloridu iso-butylesteru (D,L)alaninu (z Příkladu B uvedeného níže) (4,6 mmolů) v 5 ml pyridinu bylo přidáno 4,6 mmolu chloridu kyseliny. Okamžitě nastala precipitace. Směs byla míchána po dobu 3,5 hodin, zředěna 100 ml diethyletheru, promývána 10 % HC1 třikrát, jednou solankou, 20 % jednou uhličitanem draselným a jednou solankou. Roztok byl sušen nad síranem hořečnatým, filtrován a odpařen za sníženého tlaku a tím se získal produkt. Další estery aminokyselin mohou také být použity v této proceduře.

Obecná procedura B

Kopulace R^XC (X' ) (X) C (O) OH s H₂NCH (R²) C (O) XR³

Roztok kyseliny (3,3 mmolů) a CDI v 20 ml THF byl míchán po dobu 2 hodin. Byl přidán L-alanin, iso-butylester, hydrochlorid (z Příkladu B uvedeného níže) (3,6 mmolů), následovaný 1,5 ml (10,8 mmolů) acetylaminu. Reakční směs byla míchána přes noc. Reakční směs byla zředěna 100 ml třikrát, jednou solankou, a jednou solankou. Roztok »··· • · • · ·· • · · · • · · 9 ··· ··· diethyletheru, promývána 10 % HCI 20 % jednou uhličitanem draselným byl sušen nad síranem hořečnatým, filtrován a odpařen za sníženého tlaku a tím se získal produkt. Další estery aminokyselin mohou také být použity v této proceduře.

Obecná procedura C

Esterifikace R^XC (X' ) (X) C (O) NHCH (R²) C (O) OH s HOR³

Do míchaného roztoku fenylacetylvalinu (1,6470 g, 7,0 mmolů) v 20 ml THF byl přidán CDI (1,05 g, 6,5 mmolů) a směs byla míchána po dobu 1,5 hodin. 2-Methylbutanol (0,53 g, 6 mmolů) byl přidán do směs, následovaný přidáním NaH (0,16 g, 6,5 mmolů). Okamžitě nastalo bublání. Reakční směs byla míchána přes noc. Reakční směs byla zředěna 100 ml diethyletheru, promývána 10 % HCI třikrát, jednou solankou, 20 % jednou uhličitanem draselným a jednou solankou. Roztok byl sušen nad síranem hořečnatým, filtrován a odpařen za sníženého tlaku a tím se získal produkt. Další N-acyl aminokyseliny a alkoholy mohou také být použity v této proceduře.

Obecná procedura D

Hydrolýza esteru na volnou kyselinu

Hydrolýza esteru na volnou kyselinu byla prováděna obvyklými způsoby. Níže jsou uvedeny dva příklady takových obvyklých de-esterifikačních způsobů.

Do esteru v 1: 1 směs CH₃OH/H₂O byly přidány 2-5 ekvivalenty K₂CO₃. Směs byla zahříván na teplotu přibližně 50 °C po dobu přibližně 0,5 až 1,5 hodin dokud tle ···· 999 «

I · ··♦ neukázala ukončení reakce. Reakční směs byla ochlazena na teplotu okolí a methanol byl odstraněn za sníženého tlaku. pH zbývajícího vodného roztoku byl upraven na přibližně 2 a ethylacetát byl přidán pro extrakci produktu. Organická fáze byla potom promývána nasyceným vodným NaCl a sušena nad MgSO₄. Roztok byl zbaven rozpouštědla za sníženého tlaku a tím se získal produkt.

Ester aminokyseliny byl rozpuštěn ve směsi dioxan/voda (4 : 1) do které byl přidán LiOH (přibližně 2 ekviv.), který byl rozpuštěn ve vodě tak, aby celkové rozpouštědlo po adici bylo přibližně 2 : 1 dioxan:voda. Reakční směs byla míchána do ukončení reakce a dioxan byl odstraněn za sníženého tlaku. Residuum bylo zředěno EtOAc, vrstvy byly odděleny a vodná vrstva okyselena na pH 2. Vodná vrstva byla zpětně extrahována EtOAc, sloučené organické látky byly sušen nad Na2SO₄ a rozpouštědlo bylo odstraněno za sníženého tlaku po filtraci. Residuum bylo čištěno obvyklými způsoby (například rekrystalizace).

Posledně uvedený příklad bude dále rozveden. Methylester 3NO2 fenylacetyl alaninu 9,27 g (0,0348 molů) byl rozpuštěn v 60 ml dioxanu a 15 ml H₂O a byl přidán LiOH (3,06 g, 0,0731 molů), který byl rozpuštěn v 15 ml H2O. Po míchání po dobu 4 hodin byl dioxan odstraněn za sníženého tlaku a residuum bylo zředěno EtOAc, vrstvy byly odděleny a vodná vrstva byla okyselena na pH 2. Vodná vrstva byla zpětně extrahována EtOAc (4 x 100 ml), sloučené organické látky byly sušeny nad Na₂SO₄ a rozpouštědlo bylo odstraněno za sníženého tlaku po filtraci. Residuum bylo rekrystalizováno • ·

9999 ··

I 9 9 9 » · « Φ ··· 999

9

99 z EtOAc/isooktan a to dalo 7,5 g (85 nitrofenylacetylalaninu.

C11H12N2O5 dává C = 52,38, H = 4,80 a N = 11,11. Nalezeno analýzou: C = 52,54, H = 4,85 a N = 11,08. [<x] 23 = - 29, 9 @ 589 nm.

Obecná procedura E

BOP kopulace kyseliny a alkoholu za nízké teploty Roztok methylenchloridu, obsahující karboxylovou kyselinu (100% molárních) a N-methylmorfolin (150 % molárních) byl ochlazen na teplotu -20 °C pod dusíkovou atmosférou. BOP (105 % molárních) byl přidán v jedné dávce a reakční směs byla udržován při teplotě -20 °C po dobu 15 minut. Byl přidán odpovídající alkohol (120 % molárních) a reakční směs byla ponechána zahřát se na teplotu okolí a míchána po dobu 12 hodin. Reakční směs byla potom vlita do vody a extrahována ethylacetátem (3x). Sloučené ethylacetátové zpětně promýván nasycenou vodnou kyselinou části byly citrónovou (2x) , nasyceným sodným (2x), solankou (lx) , vodným hydrogenuhličitanem sušeny nad bezvodým síranem hořečnatým nebo síranem sodným a rozpouštědlo bylo odstraněno za sníženého tlaku a tím se získal surový produkt.

Obecná procedura F

EDC kopulace kyseliny a aminu

Derivát kyseliny byl rozpuštěn v methylenchloridu. Amin (1 ekviv.), N-methylmorfolin (5 ekviv.) a monohydrát hydroxybenzotriazolu (1,2 ekviv.) byly přidány po sobě. Reakční směs byla ochlazena na teplotu přibližně 0 °C a

0000

00 00 0 0

0 0 0 0 0 0

0 0 000 00

00 0 0 0 0 • 0 0 0 «00 000 0 0

0 00 potom bylo přidáno 1,2 ekviv. hydrochloridu l—(3— dimethylaminopropyl)-3-ethylkarbodiimidu. Roztok byl ponechán za míchání přes noc a vrátil se na teplotu okolí pod tlakem N₂. Reakční směs byla nakonec zpracována promýváním roztokem nasyceného vodného Na₂CO₃, O,1M citrónové kyseliny a solankou před sušením Na₂SO₄ a odstraněním rozpouštědel a tím se získal surový produkt. Čisté produkty byly získány mžikovou chromatografií ve vhodném rozpouštědle.

Obecná procedura G

EDC kopulace kyseliny a aminu

Baňka s kulatým dnem byla naplněna karboxylovou kyselinou (1,0 ekviv.), hydrátem hydroxybenzotriazolu (1,1 ekviv.) a aminem (1,0 ekviv.) v THF pod dusíkovou atmosférou. Vhodné množství (1,1 ekviv. pro volné aminy a 2,2 ekviv. hydrochloridová soli aminů) báze, jako je Hunigova báze, bylo přidáno do dobře míchané směsi, následováno EDC (1,1 ekviv.). Po míchání po dobu od 4 do 17 hodin při teplotě okolí rozpouštědlo bylo odstraněno za sníženého tlaku, residuum bylo vyjmuto ve směsi EtOAc (nebo podobné rozpouštědlo)/voda. Oganická vrstva byla promývána nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného, IN HCI, solankou a sušena nad bezvodým síranem sodným. V některých případech byl izolovaný produkt analyticky čistý již v tomto stádiu, zatímco v jiných případech bylo nutné čištění chromatografií a/nebo rekrystalizaci před biologickými pokusy.

···

9

9 99 • 9 • · · • · ···· ··· • · • · • 9

9

99

9 9 9 • · · · ··· ··· • ·

99

Obecná procedura H

Kopulace R¹C (X' ) (X) C (0) Cl s H₂NCH (R²) C (0) XR³

Přebytek oxalylchloridu v dichlormethanu byl přidán k derivátu kyseliny společně s jednou kapkou DMF. Výsledná směs byla míchána po dobu přibližně 2 hodin nebo dokud neustalo bublání. Rozpouštědlo bylo potom odstraněno za sníženého tlaku a znovu zředěno bezvodým methylenchloridem. Do výsledného roztoku byl přidán přibližně 1,1 ekviv. vhodného esteru aminokyseliny a methylamin (1,1 ekviv. v methylenchloridu). Systém byl míchán při teplotě okolí po dobu 2 hodin a potom rozpouštědlo bylo odstraněno za sníženého tlaku. Residuum bylo rozpuštěno v ethylacetátu, promýváno 1 N HCI následovaným IN NaOH. Organická vrstva byla sušena nad bezvodým síranem sodným filtrována a rozpouštědlo bylo odstraněno za sníženého tlaku a tím se získal požadovaný produkt.

Obecná procedura I

P-EPC kopulace

P-EPC kopulace používá ester aminokyseliny a sloučeninu, představovanou substituovanou octovou kyselinou. Derivát kyseliny octové je dobře znám v oboru a je typicky komerčně dostupný. Ester aminokyseliny se připraví obvyklými způsoby ze známých a typicky komerčně dostupných N-BOC aminokyselin, jak je popsáno v Obecné proceduře J uvedené dále.

Konkrétně byly vhodná volná báze aminoesteru (0,0346 mmolů) a substituovaná fenyloctová kyselina (0,069 mmolů) rozpuštěny v 2,0 ml CHCI3 (prostý EtOH), zpracovávány 150

• ♦ φφ • φ • · φ φ φφφφ φφφ φφ

• · · φ • φ φ φ φφφ φφφ φ φ φφ φφ mg of P-EPC (0,87 mekviv./g) a reakční směs byla míchána po dobu 4 dní při teplotě 23 °C. Reakční směs byla filtrována přes vrstvu bavlny, proplachována 2,0 ml CHCI3 a filtrát byl odpařen pod proudem dusíku. Čistota každého vzorku byla určena pomocí ¹H-NMR a pohybovala se v rozmezí od 50 % do >95 %. Z každé reakce bylo získáno mezi 8,0 a 15,0 mg konečného produkt, který byl testován bez dalšího čištění.

Obecná procedura J

Syntéza esterů aminokyselin z odpovídající N-BOC aminokyseliny

A. Esterifikace kyseliny.

N-BOC aminokyselina byla rozpuštěna v dioxanu a zpracovávána přebytkem alkoholu (přibližně 1,5 ekviv.) a katalytickým DMAP (100 mg) při teplotě 0 °C. Míchání pokračovalo do ukončení reakce a poté byl produkt získán obvyklými způsoby.

B. Odstranění N-BOC skupiny.

N-BOC chráněná aminokyselina byla rozpuštěna v methylenchloridu (0,05M) a zpracovávána 10 ekvivalenty TFA při teplotě okolí pod dusíkovou atmosférou. Reakce byla monitorována chromatografii na tenké vrstvě dokud nebyl spotřebován výchozí materiál obvykle za 1-5 hodin. Dalších 10 ekvivalentů TFA bylo přidáno do reakční směsi pokud výchozí materiál byl stále přítomen po uplynutí 5 hodin. Reakční směs byla opatrně neutralizována Na₂CO₃, oddělena, organická vrstva byla promývána solankou a sušena nad bezvodým Na₂SO₄. Surový amin byl potom používán bez ·· · • · * • * 9 • · · • ♦ · • ·· ·· čištění.

Specifická provedení těchto procedur jsou následující:

1. Racemická (+/-)-N-BOC-a-amino-máselná kyselina (Aldrich) (9,29 g, 0,0457 molů) byla rozpuštěna v 100 ml dioxanu a zpracovávána iso-butylalkoholem (6,26 ml, 0,0686 molů), EDC (5,72 g, 0,0457) a katalytickým DMAP (100 mg) při teplotě 0 °C. Po míchání po dobu 17 hodin byly organické složky odpařeny za sníženého tlaku, residuum bylo zředěno EtOAc, promýváno NaHCO₃, solankou a sušeno nad Na₂SO₄. Odpaření dalo 8,42 g (71 %) oleje.

Ci₃H₂₅NO₄ dává: C = 60,21, H = 9,72 a N = 5,40.

Analýzou nalezeno: C = 59,91, H = 9,59 a N = 5,67.

Výše uvedený N-BOC ester aminokyseliny (8,00 g, 0,032 molů) byl zbaven ochranných skupin výše popsaným způsobem a to dalo 3,12 g (61 %) volné báze ve formě bezbarvého oleje, který v klidu tuhnul.

2. L-N-BOC-alanin (Aldrich) (8,97 g, 0,047 molů) byl rozpuštěn v 100 ml CH₂C1₂, iso-butylalkoholu (21,9 ml, 0,238 molů) a zpracováván DMAP (100 mg) a EDC (10,0 g, 0,52 molů) při teplotě 0 °C. Směs byla míchána po dobu 17 hodin, zředěna H₂O, promývána 1,0 N HCI, NaHCO₃, potom solankou a organické složky byly sušeny nad Na₂SO₄. Filtrace a odpaření dalo 11,8 g (kvantitativně) L-N-BOC isobutylesteru alaninu, který byl kontaminován malým množstvím rozpouštědla. Vzorek byl sušen ve vakuu pro analytickou analýzu.

Οι₂Η₂₃ΝΟ₄ dává: C = 58,79, H = 9,38 a N = 5,71.

φ φ

φφφφ φ φφ • Φ φ* • φφφφ • φφφφ φ φ φφφ φφφ • φ φ • Φ φφ

Analýzou nalezeno: C = 58,73, Η = 9,55 a Ν = 5,96.

Výše uvedený N-BOC ester aminokyseliny (11,8 g, 0,0481 molů) byl zbaven ochranných skupin výše popsaným způsobem. Volná báze byla přeměněna na odpovídající HC1 sůl použitím nasyceného HC1 (g)/EtOAc a tím se získal L-N-alanin, isobutylester, hydrochlorid. Získáno bylo 4,2 g (48 %) bezbarvé pevné látky.

C7H15NO2 . HC1 dává: C = 46,25, H = 8,88 a N = 7,71.

Analýzou nalezeno: C = 46,01, H = 8,85 a N = 7,68.

Obecná procedura K

Vytváření methylesteru z aminokyseliny

Aminokyselina (aminokyselina nebo hydrochlorid aminokyseliny) byla suspendována v methanolu a ochlazena na 0 °C. Plynný HC1 byl probubláván roztokem po dobu 5 minut. Reakční směs byla ponechána zahřát se na teplotu okolí a potom míchána po dobu 4 hodin. Rozpouštědla potom byla odstraněna za sníženého tlaku a takto požadovaná aminokyselina ve formě methylesteru. Tento produkt byl obvykle dalšího čištění.

byla získána hydrochloridu používán bez

Příklad A

Syntéza volné a na polymer vázané PEPC N-ethyl-N'-3-(1pyrrolidinyl)propylmočoviny

Do roztoku 27,7 g (0,39 molů) ethylisokyanátu v 250 ml chloroformu bylo přidáno 50 g (0,39 molů) 3-(lpyrrolidinyl)propylaminu po kapkách s chlazením. Jakmile byla adice ukončena, chladicí lázeň byla odstraněna a

*· • · * 99

• 9

99 reakční směs byla míchána při teplotě okolí po dobu 4 hodin. Reakční směs byla potom koncentrován za sníženého tlaku a tím se získalo 74,5 g (96,4 %) požadované močoviny ve formě čirého oleje.

1-(3-(1-pyrrolidinyl)propyl)-3-ethylkarbodiimid (P-EPC)

Do roztoku 31,0 g (0,156 molů) N-ethyl-N'-3-(1pyrrolidinyl)propylmočoviny v 500 ml dichlormethanu bylo přidáno 62,6 g (0,62 molů) triethylaminu a roztok byl ochlazen na teplotu 0 °C. Do tohoto roztoku bylo potom přidáno 59,17 g (0,31 molů) 4-toluenesulfonylchloridu v 400 ml dichlormethanu po kapkách takovou rychlostí, aby reakční směs byla udržována při teplotě 0-5 °C. Po ukončení přidávání reakční směs byla ohřátá na teplotu okolí a potom zahřívána na teplotu zpětného toku po dobu 4 hodin. Po ochlazení na teplotu okolí byla reakční směs promývána nasyceným vodným uhličitanem draselným (3 x 150 ml) . Vodné fáze byly sloučeny a extrahovány dichlormethanem. Všechny organické fáze byly sloučeny a koncentrovány za sníženého tlaku. Výsledná oranžová suspenze byla suspendována v 250 ml diethyletheru a roztok byl usazováním oddělen od pevné látky. Proces suspenze/usazování byl opakován ještě třikrát. Etherické roztoky byly sloučeny a koncentrovány za sníženého tlaku a tím se získalo 18,9 g (67 %) požadovaného produktu ve formě surového oranžového oleje. Část oleje byla destilována ve vakuu a tím se získal bezbarvý olej, destilující při teplotě 78-82 °C (0,4 mm Hg).

Příprava polymerové nesené formy 1-(3-(1pyrrolidinyl)propyl)-3-ethylkarbodiimidu (P-EPC)

♦ « ·· · · · • · · φ

Ě8 ·· • · · • φ · • ··· • ·

Suspenze 8,75 g (48,3 mmolů) 1-(3-(1-pyrrolidin-yl)propyl)3-ethylkarbodiimidu a 24,17 g (24,17 mmolů) Merrifieldovy pryskyřice (2 % zesíťování, 200-400 mesh, chlormethylovaný kopolymer styrenu/divinylbenzenu, 1 mekviv. Cl/g) v dimethylformamidu byla zahřívána při teplotě 100 °C po dobu 2 dní. Reakční směs byla ochlazena a filtrována a výsledná pryskyřice byla promývána postupně 1 1 DMF, 1 1 THF a 1 1 diethyletheru. Zbývající pryskyřice byl potom sušena ve vakuu po dobu 18 hodin.

Příklad B

Příprava alaninu ve formě hydrochloridu iso-butylesteru Směs 35,64 g (0,4 molů) (D,L)-alaninu (Aldrich) (nebo Lalaninu (Aldrich)); 44 ml (0,6 molů) thionylchloridu (Aldrich) a 200 ml isobutanolu bylo zahříván na teplotu zpětného toku po dobu 1,5 hodin a těkavé složky byly úplně odstraněny v rotační odparce při teplotě 90 °C za sníženého tlaku a tím se získal (D,L)- alanin ve formě hydrochloridu iso-butylesteru (nebo L-alanin ve formě hydrochloridu isobutylesteru) , který byl dostatečně čistý, aby mohl být používán pro další transformace.

Příklad C

Příprava 3,5-dichlorfenyloctové kyseliny

Do roztoku 3,5 g 3,5-dichlorbenzylalkoholu (Aldrich) v 75 ml dichlormethanu při teplotě 0 °C bylo přidáno 1,8 ml methan sulfonylchloridu, následované 3,5 ml triethylaminu, přidaného po kapkách. Po uplynutí 2 hodin roztok byl zředěn na 150 ml dichlormethanem, promýván 3N HC1, nasyceným vodným NaHCO3, sušen nad Na2SO₄ a rozpouštědla byla • ·

odstraněna a tím se získal požadovaný 3,5-dichlorbenzylmethanesulfonát ve formě žlutého oleje, který byl používán bez čištění.

Surový sulfonát byl rozpuštěn v 50 ml DMF při teplotě 0 °C a potom bylo přidáno 3 g KCN. Po uplynutí 2 hodin bylo přidáno dalších 50 ml DMF a roztok byl míchán po dobu 16 hodin. Červený roztok byl zředěn 1 1 H₂O a okyselen na pH 3 pomocí 3N HCl. Vodný roztok byl extrahován dichlormethanem. Sloučené organické látky byly promývány 3N HCl, sušeny nad Na₂SO₄ a rozpouštědla byla odstraněna za sníženého tlaku a tím se získal surový 3,5-dichlorfenylacetonitril, který byl používán bez čištění.

Nitrile byl přidán do směsi 40 ml koncentrované kyseliny sírové a 50 ml H₂O a zahříván na teplotu zpětného toku po dobu 48 hodin, ochlazen na teplotu okolí a míchán po dobu 48 hodin. Reakční směs byla zředěna do 1 1 drceného ledu, ohřátá na teplotu okolí a extrahována 2 x 200 ml dichlormethanu a 2 x 200 ml ethylacetátu. Obě sady organických látek byly sloučeny a promývány nasyceným vodným NaHCO3. NaHCO3 frakce byly sloučeny a okyseleny na pH 1 pomocí 3N HCl. Bílá pevná látka byla příliš jemné pro filtraci a byla vyextrahována 2 x 200 ml dichlormethanu. Sloučené organické látky byly sušeny nad Na₂SO₄ a rozpouštědla byla odstraněna za sníženého tlaku a tím se získala surová 3,5-dichlorfenyloctová kyselina ve formě bílé pevné látky. Pevná látka byla suspendována hexanem a filtrována a tím se získalo 1,75 g bílé pevné látky.

NMR (CDCI3) : (v ppm) 3,61 (s, 2H) , 7,19 (s,lH), 7,30 (s, • ·· · ·

Příklad D

Syntéza N-(3-chlorfenylacetyl)alaninu

Sloučenina z názvu byla připravena použitím L-alaninu (Nova Biochem) a 3-chlorfenyloctové kyseliny (Aldrich) postupem podle obecných procedur F nebo G, následovaných hydrolýzou použitím obecné procedury D.

Příklad 1

Syntéza N-(fenylacetyl)-D,L-alaninu ve formě isobutylesteru

Postupem podle obecné procedury A uvedené výše a použitím fenylacetylchloridu (Aldrich) a D,L-alaninu ve formě hydrochloridu iso-butylesteru (z Příkladu B uvedeného výše) byla připravena sloučenina z názvu. Reakce byla monitorována chromatografii na tenké vrstvě na silikagelu a čištění bylo prováděno extrakcí Et₂O následovanou promýváním vodným K2CO3 a vodným HCI.

NMR data byla následující:

¹H-nmr (CDC1₃) : δ = 7,23-7,36 (m, 5H) , 6,18 (d, 1H) , 4,58 (t, J = 7,3 Hz, 1H) , 3,87 (m, 2H) , 3,57 (s, 2H) , 1,90 (m, 1H) , 1,34 (d, J = 7,2 Hz, 3H), 0,89 (d, J = 6,8 Hz, 6H). ¹³C-nmr (CDC1₃) : δ = 172,7, 170,3, 134,5, 129,2, 128,8,

127,2, 71,3, 48,1, 43,4, 27,5, 18,8, 18,3.

C15H21NO3 (MW = 263,34; hmotová spektroskopie (MH⁺ = 264))

Příklad 2

Syntéza N-(3-fenylpropionyl)-D,L-alaninu ve formě isobutylesteru

• ·· ·· ·· • · · · · ·· · • · · · · · · • · ·· ··· ··· • · · · ·

Postupem podle obecné procedury A uvedené výše a použitím 3-fenylpropionylchloridu (Aldrich) a D,L-alaninu ve formě hydrochloridu iso-butylesteru (z Příkladu B uvedeného výše) byla připravena sloučenina z názvu ve formě pevné látky, která má teplotu tání v rozmezí 51 °C-54 °C. Reakce byla monitorována chromatografii na tenké vrstvě na silikagelu a čištění bylo prováděno extrakcí Et₂O následovanou promýváním vodným K₂CO₃ a vodným HC1.

NMR data byla následující:

^xH-nmr (CDC1₃) : δ = 7,25 (m, 2H) , 7. 19 (m, 3H) , 6,28 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 4,58 (kvint., J = 7,2 Hz, 1H), 3,89 (m, 2H), 2,95 (t, J = 7,7 Hz, 2H), 2,50 (m, 2H) , 1,92 (m, 1H) , 1,33 (d, J = 7,1 Hz, 3H), 0,91 (d, J = 6,7 Hz,

6H) .

¹³C-nmr (CDC1₃) : δ = 173, 0, 171,5, 140, 6, 128,3, 128,1,

126,0, 71,2, 47,8, 37,9, 31,4, 27,5, 18,79, 18,77, 18,3. Ci_SH₂₃NO₃ (MW = 277,37, hmotová spektroskopie (MH⁺ 278))

Příklad 3

Syntéza N-(3-methylpentanoyl)-L-alaninu ve formě isobutylesteru

Postupem podle obecné procedury B a použitím 3methylpentanové kyseliny (Aldrich) a L-alaninu ve formě hydrochloridu iso-butylesteru (z Příkladu B uvedeného výše) byla připravena sloučenina z názvu ve formě oleje. Reakce byla monitorována chromatografii na tenké vrstvě na silikagelu a čištění bylo prováděno extrakcí Et₂O následovanou promýváním vodným K₂CO₃ a vodným HC1.

NMR data byla následující:

¹H-nmr (CDC1₃) : δ = 6,08 (d, J =5,9 Hz, 1H), 4,62 (kvint.,

J = 7,3 Hz, IH), 3,92 (m, 2H), 2,22 (m, IH), 1,84-2,00 (m, 3H) , 1,40 (d, J = 7,2 Hz, 3H), 1,35 (m, IH), 1,20 (m, IH), 0,85-0,96 (m, 12H).

¹³C-nmr (CDC1₃) : δ = 173,3, 172,1, 71,4, 47,9, 43, 9, 32,3, 29,38, 29,35, 27,6, 19,10, 19,06, 18,93, 15,91, 18,72,

18,67, 11,3.

C13H25NO3 (MW = 243,35, hmotová spektroskopie (MH⁺ 244))

Příklad 4

Syntéza N-[(4-chlorfenyl)acetyl]-L-alaninu ve formě isobutylesteru

Postupem podle obecné procedury B a použitím 4chlorfenyloctové kyseliny (Aldrich) a L-alaninu ve formě hydrochloridu iso-butylesteru (z Příkladu B uvedeného výše) byla připravena sloučenina z názvu ve formě pevné látky, která má teplotu tání 111 °C - 113 °C. Reakce byla monitorována chromatografií na tenké vrstvě na silikagelu a čištění bylo prováděno extrakcí Et₂O následovanou promýváním vodným K₂CO₃ a vodným HCl.

NMR data byla následující:

^-nmr (CDC1₃) : δ =	7,30	(d, J = 8,2 Hz,	2H) ,	7,21 (d, J =
8,3 Hz, 2H), 6,18	(d, J	= 5,5 Hz, IH),	4,57	(kvint., J =
7,2 Hz, IH), 3,88 (	m, 2H)	, 3,53 (s, 2H),	1,91	(m, IH), 1,36
(d, J = 7,1 Hz, 3H)	, 0,90	(d, J = 6,8 Hz,	6H) .

¹³C-nmr (CDC1₃) : δ = 172,8, 169, 8, 133,1, 133,0, 130,6,

128,9, 71,4, 48,2, 42,6, 27,6, 18,85, 18,82, 18,4. C15H20NO3CI (MW - 297,78, hmotová spektroskopie (MH⁺ 298))

Příklad 5

55?

Syntéza N-[(3,4-dichlorfenyl)acetyl]-L-alaninu ve formě iso-butylesteru

Postupem podle obecné procedury B a použitím 3,4dichlorfenyloctové kyseliny (Aldrich) a L-alaninu ve formě hydrochloridu iso-butylesteru (z Příkladu B uvedeného výše) byla připravena sloučenina z názvu ve formě pevné látky, která má teplotu tání 81 °C-83 °C. Reakce byla monitorována chromatografií na tenké vrstvě na silikagelu a čištění bylo prováděno extrakcí Et2O následovanou promýváním vodným K₂CO₃a vodným HCI.

NMR data byla následující:

¹H-nmr	(CDCI3) : δ = 0,	90 (d, J =	6,8 Hz,	6H) ,	1,38 (	d, J =
7,1 Hz,	3H), 1,91 (m,	1H), 3,50 (	s, 2H),	3,90	(m, 2H)	, 4,57
(kvint.	, J = 7,1 Hz,	1H), 6,31	(d, J =	4,9	Hz, 1H)	, 7,12
(m, 1H)	, 7,38 (m, 2H)	•
¹³C-nmr	(CDCI3) : δ =	18,4, 18,8,	18,9,	27,6	, 42,2,	48,3,
71,5,	128,6, 130,6,	131,2, 131	,3, 132	,6,	134,7,	169,2,

172,8.

C15H19NO3CI2 (MW = 332,23, hmotová spektroskopie (MH⁺ 332 )

Příklad 6

Syntéza N-[(4-methylfenyl)acetyl]-D,L-alaninu ve formě isobutylesteru

Postupem podle obecné procedury B a použitím 4methylfenyloctové kyseliny (Aldrich) a D,L-alaninu ve formě hydrochloridu iso-butylesteru (z Příkladu B uvedeného výše) byla připravena sloučenina z názvu ve formě pevné látky, která má teplotu tání 102 °C-104 °C. Reakce byla monitorována chromatografií na tenké vrstvě na silikagelu (Rf = 0,6 v 33 % ethylacetát/hexanes) a čištění bylo prováděno extrakcí Et₂O následovanou promýváním vodným K₂CO₃a vodným HCl.

NMR data byla následující:

^xH-nmr	(CDC1₃) : δ	= 0,90	(d, J =	6, 7 Hz, 6H) ,	1,35 (d, J =
7,2 Hz,	3H), 1,91	(m, IH)	, 2,34	(s, 3H), 3,55	(s, 2H), 3,88
(m, 2H)	, 4,58 (m,	IH), 6,	05 (bd,	IH), 7,16 (s,	4H) .
¹³C-nmr	(CDCI3) : δ	= 18,5	, 18,85	, 18,87, 21,0,	27,6, 43, 1,
48,1, 7	1,3, 129,2,	129,6,	131,3,	136, 9, 170,6,	172,8.

Οΐ6Η₂₃Νθ3 (MW = 277,37, hmotová spektroskopie (MH⁺ 278))

Příklad 7

Syntéza N-[(3-pyridyl)acetyl]-D,L-alaninu ve formě isobutylesteru

Postupem podle obecné procedury F a použitím 3pyridyloctové kyselina ve formě hydrochloridu (Aldrich) a D,L-alaninu ve formě hydrochloridu iso-butylesteru (z Příkladu B uvedeného výše) byla připravena sloučenina z názvu ve formě pevné látky, která má teplotu tání 62 °C-64 °C. Reakce byla monitorována chromatografii na tenké vrstvě na silikagelu (Rf = 0,48, 10 % methanol/dichlormethan) a čištění bylo prováděno silikagelovou chromatografii.

NMR data byla následující:

¹H-nmr (CDCI3) : δ = 8,40	(d,	J = 2	,8, 2H);	7,6	(m, IH) :
7,16 (m, 2H); 4,5 (kvint.,	J	= 7,2,	7,2, IH)	; 3,8	(m, 2H) ;
3,48 (s, 2H); 1,8 (m, IH);	1,	30 (d,	J = 7,2,	3H) ;	0,81 (d,
J = 6, 7, 6H) . ¹³C-nmr (CDCI3) : δ = 173,	4,	170,1,	150,6,	148,8	, 137,4,

131,4, 124,1, 71,9, 48,9, 40,6, 28,1, 19,5, 19,4, 18,6. Ci₄H₂oN₂03 (MW = 264, hmotová spektroskopie MH⁺ 265))

• ·

Příklad 8

Syntéza N-[(1-naftyl)acetyl]-L-alaninu ve formě isobutylesteru

Postupem podle obecné procedury B a použitím 1-naftyloctové kyseliny (Aldrich) a L-alaninu ve formě hydrochloridu isobutylesteru (z Příkladu B uvedeného výše) byla připravena sloučenina z názvu ve formě pevné látky, která má teplotu tání 69 °C-73 °C. Reakce byla monitorována chromatografii na tenké vrstvě na silikagelu a čištění bylo prováděno extrakcí Et₂O následovanou promýváním vodným K₂CO₃ a vodným HC1.

NMR data byla následující:

¹H-nmr (CDC1₃) : δ = 0,83 (m, 6H) , 1,25 (d, J = 7,1 Hz, 3H) , 1,81 (m, IH), 3,79 (m, 2H), 4.M (2s, 2H), 4,57 (kvint., J = 7,3 Hz, IH), 5,99 (d, J = 7,1 Hz, IH), 7,44 (m, 2H), 7,53 (m, 2H), 7,85 (m, 2H), 7,98 (m, IH).

¹³C-nmr (CDC1₃) : δ = 18,2, 18,81, 18,83, 27,5, 41,5, 48,2, 71,3, 123,7, 125,6, 126,1, 126,6, 128,2, 128,5, 128,7,

130,7, 132,0, 133,9, 170,3, 172,5.

Ci₉H₂₃NO₃ (MW = 313,40, hmotová spektroskopie (MH⁺ 314))

Příklad 9

Syntéza N-[(2-naftyl)acetyl]-L-alaninu ve formě isobutylesteru

Postupem podle obecné procedury B a použitím 2-naftyloctové kyseliny (Aldrich) a L-alaninu ve formě hydrochloridu isobutylesteru (z Příkladu B uvedeného výše) byla připravena sloučenina z názvu ve formě pevné látky, která má teplotu tání 128 °C-129 °C. Reakce byla monitorována chromatografii • ·· ·· ·· ··· · · · · · • · © · · · · • · ·· ··· ©·© ···· ··· ·©· ·· *· na tenké vrstvě na silikagelu a čištění bylo prováděno extrakcí Et₂O následovanou promýváním vodným K2CO3 a vodným HCI.

NMR data byla následující:

¹H-nmr (CDC1₃) : δ = 0,86 (m, 6H) , 1,35 (d, J = 7,1 Hz, 3H) , 1,78 (m, IH), 3,76 (s, 2H), 3,87 (m, 2H), 4,62 (kvint., J = 7,2 Hz, IH), 6,13 (d, J = 7,1 Hz, IH) , 7,41 (m, IH) , 7,48 (m, 2H), 7,74 (s, IH), 7,83 (m, 3H).

¹³C-nmr (CDCI3) : δ = 18,4, 18,82, 18,85, 27,6, 43,7, 48,2, 71,4, 125,9, 126,3, 127,2, 127,6, 127,7, 128,2, 128,7,

132,0, 132,5, 133,5, 170,3, 172,8.

C19H23NO3 (MW = 313,40, hmotová spektroskopie (MH⁺ 314)).

Příklad 10

Syntéza N-(4-fenylbutanoyl)-L-alaninu ve formě isobutylesteru

Postupem podle obecné procedury B a použitím 4fenylbutanové kyseliny (Aldrich) a L-alaninu ve formě hydrochloridu iso-butylesteru (z Příkladu B uvedeného výše) byla připravena sloučenina z názvu ve formě oleje. Reakce byla monitorována chromatografií na tenké vrstvě na silikagelu a čištění bylo prováděno extrakcí Et2O následovanou promýváním vodným K2CO3 a vodným HCI.

NMR data byla následující:

¹H-nmr	(CDCI3) : δ = 0,92 (d, J = 6,7 Hz,	6H), 1,38	(d, J =
7,1 Hz,	3H) , 1,96 (m, 3H) , 2,21 (t, J =	7,1 Hz,	2H), 2.M
(t, J =	= 7,3 Hz, 2H), 3,90 (m, 2H), 4,59	(kvint.,	J = 7,2
Hz, IH)	, 6,31 (d, IH), 7,16 (m, 3H), 7,24	(m, 2H).
¹³C-nmr	(CDCI3) : δ = 18,3, 18,75, 18,78,	26,8, 27,	5, 34,9,

35,3, 47,8, 71,2, 125,7, 125,2, 128,3, 141,3, 172,1, 173,0.

99 99 • · · · · · • 9 9 9 9 ♦

99 999 999

9999 «99 999

99

C17H25NO3 (MW = 291,39, hmotová spektroskopie (MH⁺ 292)).

Příklad 11

Syntéza N-(5-fenylpentanoyl)-L-alaninu ve formě isobutylesteru

Postupem podle obecné procedury B a použitím 5fenylpentanové kyseliny (Aldrich) a L-alaninu ve formě hydrochloridu iso-butylesteru (z Příkladu B uvedeného výše) byla připravena sloučenina z názvu ve formě oleje. Reakce byla monitorována chromatografií na tenké vrstvě na silikagelu a čištění bylo prováděno extrakcí Et₂O

následovanou promýváním vodným K₂CO₃ a vodným HC1.
NMR data byla následující:
¹H-nmr (CDCI3) : δ = 7,23 (m, 2H) ,	7,17 (m,	3H) ,	6, 30	(d,
1H), 4,59 (kvint., J = 7,3 Hz, 1H) ,	3,91 (m,	2H) ,	2,61	(t,
J = 7,2 Hz, 2H) , 2,22 (t, J = 7,2	Hz, 2H),	1, 93	(m,	1H) ,
1,66 (m, 4H) , 1,38 (d, J = 7,2 Hz,	3H), 0,92 (d,	I =	6,7

Hz, 6H).

¹³C-nmr (CDC1₃) : δ = 173,1, 172,3, 142,0, 128,2, 128,1,

125,6, 71,2, 47,8, 36,1, 35,5, 30,8, 27,5, 25,0, 18,80,

18,77, 18,4.

Ci₈H₂7NO₃ (MW = 305, 39, hmotová spektroskopie (MH⁺ 306)).

Příklad 12

Syntéza N-[(4-pyridyl)acetyl]-D,L-alaninu ve formě isobutylesteru

Postupem podle obecné procedury F a použitím 4pyridyloctové kyseliny ve formě hydrochloridu (Aldrich) a (D,L)-alaninu ve formě hydrochloridu iso-butylesteru (z Příkladu B uvedeného výše) byla připravena sloučenina z

7/ • 00 · 0 00 0

0 0 ·000

0 00 000 000

0 0 0 0

00000 00 00 názvu ve formě pevné látky, která má teplotu tání 64 °C-66 °C. Reakce byla monitorována chromatografií na tenké vrstvě na silikagelu (Rf = 0,43 10 % methanol/dichlormethan) a čištění bylo prováděno silikagelovou chromatografií.

NMR data byla následující:

¹H-nmr	(CDCI3) : δ =	8,51	(dd, J = 1,	r6,	2,8	, 1,6,	2H) ;	7,23
(dd, J	- 4,3, 1,6,	4,4,	2H) ; 6,71	(d,	J --	= 6,8,	IH) ;	4,56
(kvint.	, J = 7,3,	7,2,	IH) ; 3,88	(m,	2H)	; 3,53	(s,	2H) ;
1,89 (m	, IH); 1,36	(d, J	= 7,2, 3H)	,· o,	, 88	(d, J =	= 6,7,	6B)

¹³C-nmr (CDC1₃) : δ = 173,5, 169,3, 150,5, 144,4, 125, 1,

72,1, 48,9, 43,0, 28,2, 19,5, 19,5, 18,9.

C14H20N2O3 (MW = 2 64, hmotová spektroskopie (MH⁺ 2 65) )

Příklad 13

Syntéza N-(fenylacetyl)-L-alaninu ve formě iso-butylesteru Postupem podle obecné procedury B a použitím fenylacetylchloridu (Aldrich) a L-alaninu ve formě hydrochloridu iso-butylesteru (z Příkladu B uvedeného výše) byla připravena sloučenina z názvu ve formě pevné látky, která má teplotu tání 45 °C-47 °C. Reakce byla monitorována chromatografií na tenké vrstvě na silikagelu a čištění bylo prováděno extrakcí Et₂O následovanou promýváním vodným K₂CO₃a vodným HCI.

NMR data byla následující:

^-nmr (CDC1₃) : δ = 7,24-7,39 (m, 5H) , 6,14 (d, IH) , 4,58 (t, J = 7,3 Hz, IH) , 3,88 (m, 2H) , 3,58 (s, 2H) , 1,90 (m, IH), 1,35 (d, J = 7,2 Hz, 3H), 0,89 (d, J = 6,7 Hz, 6H). ¹³C-nmr (CDC1₃) : δ = 172,8, 170, 4, 134,5, 129, 3, 128,9,

127,2, 71,3, 48,1, 43,5, 27,5, 18,9, 18,8, 18,4.

• 9 9 9 99 ·· ··

9 ·· 99 99 9999 • · 999 9999 • 99 9999 999 999 • · 9 9 9 9 9

9999 999 999 99 99 99

C15H21NO3 (MW = 263,34, hmotová spektroskopie (MH⁺ 264)).

Příklad 14

Syntéza 2-[(3,4-dichlorfenyl)acetamido]máselné kyseliny ve formě iso-butylesteru

Postupem podle obecné procedury I uvedené výše a použitím

3,4-dichlorfenyloctové kyseliny (Aldrich) a iso-butyl-2aminobutyrátu (připraven postupem podle obecné procedury J uvedené výše) byla připravena sloučenina z názvu. Reakce byla monitorována chromatografií na tenké vrstvě na silikagelu a čištění bylo prováděno filtrací, jak je popsáno v obecné proceduře.

NMR data byla následující:

¹H-nmr (CDCI3) : δ = 7,36 (m, 3H) , 6,03 (bd, 1H) , 4,54 (m, 1H) , 3,87 (m, 2H) , 3,49 (s, 2H) , 1,93 (m, 2H) , 1,72 (m, 1H), 0,88 (d, 6H), 0,80 (t, 3H).

Příklad 15

Syntéza 2-[(3-methoxyfenyl)acetamido]máselné kyseliny ve formě iso-butylesteru

Postupem podle obecné procedury I uvedené výše a použitím 3-methoxyfenyloctové kyseliny (Aldrich) a iso-butyl-2aminobutyrátu (připraven postupem podle obecné procedury J uvedené výše) byla připravena sloučenina z názvu. Reakce byla monitorována chromatografií na tenké vrstvě na silikagelu a čištění bylo prováděno filtrací, jak je popsáno v obecné proceduře.

NMR data byla následující:

¹H-nmr (CDCI3) : δ = 6,75 (m, 4H) , 5,93 (bd, 1H) , 4,51 (m, 1H), 3,83 (m, 2H) , 3,75 (s, 2H) , 3,52 (s, 2H) , 1,82 (m, φφ • * «φφφ • φφ φφ φφ ·· φ φ φφφφ φφφ φφφφ • · · · Φ<· φ·· φφφ φ · φφφ φφ φφ φφ

2Η) , 1,60 (m, 1Η) , 0,64 (d, 6Η) , 0,74 (t, 3Η) . Ci₇H₂₅NO₄ (MW = 307,39, hmotová spektroskopie (MH⁺ 309)).

Příklad 16

Syntéza 2-[(4-nitrofenyl)acetamido]máselné kyseliny ve formě iso-butylesteru

Postupem podle obecné procedury I uvedené výše a použitím

4-nitrofenyloctové kyseliny (Aldrich) a iso-butyl-2aminobutyrátu (připraven postupem podle obecné procedury J uvedené výše) byla připravena sloučenina z názvu. Reakce byla monitorována chromatografii na tenké vrstvě na silikagelu a čištění bylo prováděno filtrací, jak je popsáno v obecné proceduře.

NMR data byla následující:

^-nmr (CDC1₃) : δ = 8,16 (d, 2H) , 7,44 (d, 2H) , 6,04 (bd, IH) , 4,55 (m, IH) , 3,86 (m, 2H) , 3,66 (s, 2H) , 1,86 (m, 2H), 1,67 (m, IH), 0,85 (d, 6H), 0,81 (t, 3H).

C16H22N2O5 (MW - 322,36, hmotová spektroskopie (MH⁺ 323)).

Příklad 17

Syntéza 2-[(3,4-methylendioxyfenyl)acetamido] máselné kyseliny ve formě iso-butylesteru

Postupem podle obecné procedury I uvedené výše a použitím

3,4-(methylendioxy)-fenyl octové kyseliny (Aldrich) a isobutyl-2-aminobutyrátu (připraven postupem podle obecné procedury I uvedené výše) byla připravena sloučenina z názvu. Reakce byla monitorována chromatografii na tenké vrstvě na silikagelu a čištění bylo prováděno filtrací, jak je popsáno v obecné proceduře.

NMR data byla následující:

·· · ··· ¹H-nmr (CDC1₃) : δ = 6,72 (m, 3H) , 5,92 (bd, IH) , 4,54 (m. IH) , 3,86 (m, 2H) , 3,66 (s, 2H) , 1,86 (m, 2H) , 1,66 (m, IH) , 0,89 (d, 6H), 0,79 (t, 3H) .

Příklad 18

Syntéza 2-[(thien-3-yl)acetamido]máselné kyseliny ve formě iso-butylesteru

Postupem podle obecné procedury I uvedené výše a použitím

3- thiofenoctové kyseliny (Aldrich) a iso-butyl-2aminobutyrátu (připraven postupem podle obecné procedury J uvedené výše) byla připravena sloučenina z názvu. Reakce byla monitorována chromatografii na tenké vrstvě na silikagelu a čištění bylo prováděno filtrací, jak je popsáno v obecné proceduře.

NMR data byla následující:

¹H-nmr (CDC1₃) : δ = 7,37 (m, lip, 7,16 (m, IH) , 7,04 (m,

IH), 6,05 (Μ, IH), 4,57 (m, IH) , 3,66 (s, 2H) , 1,93 (m,

2H), 1,67 (m, IH), 0,91 (d, 6H), 0,86 (t, 3H).

Příklad 19

Syntéza 2-[(4-chlorfenyl)acetamido]máselné kyseliny ve formě iso-butylesteru

Postupem podle obecné procedury I uvedené výše a použitím

4- chlorfenyloctové kyseliny (Aldrich) a iso-butyl-2aminobutyrátu (připraven postupem podle obecné procedury J uvedené výše) byla připravena sloučenina z názvu. Reakce byla monitorována chromatografii na tenké vrstvě na silikagelu a čištění bylo prováděno filtrací, jak je popsáno v obecné proceduře.

NMR data byla následující:

• · ^-nmr (CDC1₃) : δ = 7,22 (m, 2H) , 7,11 (m, 2H), 5,80 (m,

IH) , 4,44 (m, IH) , 3,78 (m, 2H) , 3,43 (s, 2H) , 1,77 (m,

2H), 1,56 (m, IH), 0,83 (d, 6H) 0,71 (t, 3H).

Příklad 20

Syntéza 2-[(3-nitrofenyl)acetamido]máselné kyseliny ve formě iso-butylesteru

Postupem podle obecné procedury I uvedené výše a použitím 3-nitrofenyloctové kyseliny (Aldrich) a iso-butyl-2aminobutyrátu (připraven postupem podle obecné procedury I uvedené výše) byla připravena sloučenina z názvu. Reakce byla monitorována chromatografii na tenké vrstvě na silikagelu a čištění bylo prováděno filtrací, jak je popsáno v obecné proceduře.

NMR data byla následující:

¹H-nmr (CDC1₃) : δ = 8,15 (m, 2H) , 7,65 (m, IH) , 6,08 (m,

IH) , 4,46 (m, IH) , 3,92 (m, 2H) , 3,68 (s, 2H) , 1,91 (m,

2H), 1,75 (m, IH), 0,98 (d, 6H) 0,71 (t, 3H).

Příklad 21

Syntéza 2-[(2-hydroxyfenyl)acetamido]máselné kyseliny ve formě iso-butylesteru

Postupem podle obecné procedury I uvedené výše a použitím

2-hydroxyfenyloctové kyseliny (Aldrich) a iso-butyl-2aminobutyrátu (připraven postupem podle obecné procedury J uvedené výše) byla připravena sloučenina z názvu. Reakce byla monitorována chromatografii na tenké vrstvě na silikagelu a čištění bylo prováděno filtrací, jak je popsáno v obecné proceduře.

NMR data byla následující:

• · ♦ ·· ·· ··

^xH-nmr (CDC1₃) :	δ =	7,14	(m,	IH) ,	7,01	(m,	IH) ,	6, 93	(m,
IH) , 6,7 9 (m,	IH) ,	6,46	(m,	IH) ,	4,51	(m,	IH) ,	3, 87	(m,
2H) , 3,57 (s,	2H) ,	2,01	(m,	2H) ,	1,75	(m,	IH) ,	0,89	(d,

βΗ), 0,85 (t, 3Η).

Příklad 22

Syntéza 2-[(2-naftyl)acetamidojmáselné kyseliny ve formě iso-butylesteru

Postupem podle obecné procedury I uvedené výše a použitím 2-naftyloctové kyseliny (Aldrich) a iso-butyl-2aminobutyrátu (připraven postupem podle obecné procedury J uvedené výše) byla připravena sloučenina z názvu. Reakce byla monitorována chromatografií na tenké vrstvě na silikagelu a čištění bylo prováděno filtrací, jak je popsáno v obecné proceduře.

NMR data byla následující:

¹H-nmr (CDCI3) : δ = 7,83 (m, 7B) , 5,95 (m, IH) , 4,58 (m, IH) , 3,84 (m, 2H) , 3,75 (s, 2H) , 1,89 (m, 2H) , 1,63 (m, IH), 0,91 (d, 6H), 0,81 (t, 3H).

C20H25NO3 (MW = 327,42, hmotová spektroskopie (MH⁺ 328)).

Příklad 23

Syntéza 2-[(2,4-dichlorfenyl)acetamido]máselné kyseliny ve formě iso-butylesteru

Postupem podle obecné procedury I uvedené výše a použitím

2,4-dichlorfenyloctové kyseliny (Aldrich) a iso-butyl-2aminobutyrátu (připraven postupem podle obecné procedury J uvedené výše) byla připravena sloučenina z názvu. Reakce byla monitorována chromatografií na tenké vrstvě na silikagelu a čištění bylo prováděno filtrací, jak je

I · · · » · · 9

999 999 popsáno v obecné proceduře.

NMR data byla následující:

¹H-nmr (CDC1₃) : δ = 7,49 (m, l)e, 7,22 (m, 21p 5,98 (m, lis, 4,52 (m, 1H) , 3,86 (m, 2H) , 3,61 (s, 2H) , 1.84 (m, 2H), 1,62 (m, 1H), 0,87 (d, 6H), 0,80 (t, 3H).

Příklad 24

Syntéza 2-[(4-bromfenyl)acetamido]máselné kyseliny ve formě iso-butylesteru

Postupem podle obecné procedury I uvedené výše a použitím 4-bromfenyloctové kyseliny (Aldrich) a iso-butyl-2aminobutyrátu (připraven postupem podle obecné procedury J uvedené výše) byla připravena sloučenina z názvu. Reakce byla monitorována chromatografii na tenké vrstvě na silikagelu a čištění bylo prováděno filtrací, jak je popsáno v obecné proceduře.

NMR data byla	následuj ící:
¹H-nmr (CDC1₃)	: δ = 7,43 (d,	2H) , 7,19	(d,	2H)	5,85	(m,
1H) , 4,51 (m,	1H) , 3,51 (m,	2H), 3,47	(s,	2H) ,	1,84	(m,
2H), 1,61 (m,	1H) 0,84 (d, 6H)	, 0,76 (t,	3H) .
C₁₆H₂₂NO₃Br (MW	= 356,26, hmotová spektroskopie	(MH⁺	358) )

Příklad 25

Syntéza 2-[(3-chlorfenyl)acetamido])máselné kyseliny ve formě iso-butylesteru

Postupem podle obecné procedury I uvedené výše a použitím

3-chlorfenyloctové kyseliny (Aldrich) a iso-butyl-2aminobutyrátu (připraven postupem podle obecné procedury I uvedené výše) byla připravena sloučenina z názvu. Reakce byla monitorována chromatografii na tenké vrstvě na silikagelu a čištění bylo prováděno filtrací, jak je popsáno v obecné proceduře.

NMR data byla následující:

¹H-nmr (CDC1₃) : δ = 7,25 (m, 3H) , 7,12 (m, IH) 5,80 (m, IH) , 4,52 (m, IH) , 3,86 (m, 2H) , 3,50 (s, 2H) , 1,87 (m, 2H), 1,67 (m, IH) 0,88 (d, 6H), 0,77 (t, 3H).

C16H22NO3CI (MW = 311,81, hmotová spektroskopie (MH⁺ 313)).

Příklad 26

Syntéza 2-[(3-fluorfenyl)acetamido]máselné kyseliny ve formě iso-butylesteru

Postupem podle obecné procedury 1 uvedené výše a použitím 3-fluorfenyloctové kyseliny (Aldrich) a iso-butyl-2aminobutyrátu (připraven postupem podle obecné procedury J uvedené výše) byla připravena sloučenina z názvu. Reakce byla monitorována chromatografii na tenké vrstvě na silikagelu a čištění bylo prováděno filtrací, jak je popsáno v obecné proceduře.

NMR data byla následující:

¹H-nmr (CDC1₃) : δ = 7,31 (m, IH) , 7,01 (m, 3H) 5,95 (m, IH), 4,54 (m, IH) , 3,84 (m, 2H) , 3,54 (s, 2H) , 1,88 (m, 2H), 1,65 (m, IH) 0,87 (d, 6H), 0,81 (t, 3H).

C16H22NO3F (MW = 295,35, hmotová spektroskopie (MH⁺ 296)).

Příklad 27

Syntéza 2-[(benzothiazol-4-yl)acetamido]máselné kyseliny ve formě iso-butylesteru

Postupem podle obecné procedury I uvedené výše a použitím 4-benzothiazol-4-yl octová kyselina (Chemservice) a isobutyl-2-aminobutyrátu (připraven postupem podle obecné • · procedury J uvedené výše) byla připravena sloučenina z názvu. Reakce byla monitorována chromatografii na tenké vrstvě na silikagelu a čištění bylo prováděno filtrací, jak je popsáno v obecné proceduře.

NMR data byla následující:

^-nmr (CDC1₃) : δ = 7,82 (m, IH) , 7,51-7,21 (m, 4H) 5,84 (m, IH), 4,51 (m, IH), 3,90 (s, 2H), 3,79 (m, 2H), 1,78 (m, 2H), 1,58 (m, IH) 0,80 (d, 6H) , 0,66 (t, 3H).

Příklad 28

Syntéza 2-[(2-methylfenyl)acetamido]máselné kyseliny ve formě iso-butylesteru

Postupem podle obecné procedury I uvedené výše a použitím 2-methylfenyloctové kyseliny (Aldrich) a iso-butyl-2aminobutyrátu (připraven postupem podle obecné procedury J uvedené výše) byla připravena sloučenina z názvu. Reakce byla monitorována chromatografii na tenké vrstvě na silikagelu a čištění bylo prováděno filtrací, jak je popsáno v obecné proceduře.

.NMR data byla následující:

¹H-nmr (CDC1₃) : δ - 7,18 (m, 410, 5,79 (m, lip, 4,54 (m,

IH) , 3,85 (m, 2H) , 3,59 (s, 2H) , 3,29 (s, 3H) , 1,51 (m,

2H), 1,59 (m, IH) 0,87 (d, 6H), 0,77 (t, 3H).

C17H25NO3 (MW = 291,39, hmotová spektroskopie (M⁺ 291)).

Příklad 29

Syntéza 2-[(2-fluorfenyl)acetamido]máselné kyseliny ve formě iso-butylesteru

Postupem podle obecné procedury I uvedené výše a použitím

2-fluorfenyloctové kyseliny (Aldrich) a iso-butyl-2aminobutyrátu (připraven postupem podle obecné procedury J uvedené výše) byla připravena sloučenina z názvu. Reakce byla monitorována chromatografii na tenké vrstvě na silikagelu a čištění bylo prováděno filtrací, jak je popsáno v obecné proceduře.

NMR data byla následující:

^xH-nmr (CDC1₃) : δ = 7,25 (m, 1H) , 7,09 (m, 3H) 6,03 (m, 1H) , 4,54 (m, 1H) , 3,87 (m, 2H) , 3,57 (s, 2H) , 1,89 (m, 2H), 1,64 (m, 1H) 0,88 (d, 6H), 0,80 (t, 3H).

Příklad 30

Syntéza 2-[(4-fluorfenyl)acetamido]máselné kyseliny ve formě iso-butylesteru

Postupem podle obecné procedury I uvedené výše a použitím

4-fluorfenyloctové kyseliny (Aldrich) a iso-butyl-2aminobutyrátu (připraven postupem podle obecné procedury J uvedené výše) byla připravena sloučenina z názvu. Reakce byla monitorována chromatografii na tenké vrstvě na silikagelu a čištění bylo prováděno filtrací, jak je popsáno v obecné proceduře.

NMR data byla následující:

¹H-nmr (CDC1₃) : δ = 7,20	(m,	2H) , 6,97	(m,	2H) 5,87	(m,
1H) , 4,492 (m, 1H) , 3,83	(m,	2H), 3,48	(s,	2H), 1,86	(m,
2H), 1,60 (m, 1H) 0,87 (d,	6H) ,	. 0,78 (t,	3H) .
C16H22NO3F (MW = 295,35, hmotová	spektroskopie	(MH⁺ 296) ) .

Příklad 31

Syntéza 2-[(3-bromfenyl)acetamido]máselné kyseliny ve formě iso-butylesteru ft· ftftft · · · · • ft · ftft · ft ftftft ftft · • ft ftftft · · ···· ftftft ftftft ·· ftft ftft

Postupem podle obecné procedury I uvedené výše a použitím 3-bromfenyloctové kyseliny (Aldrich) a iso-butyl-2aminobutyrátu (připraven postupem podle obecné procedury J uvedené výše) byla připravena sloučenina z názvu. Reakce byla monitorována chromatografii na tenké vrstvě na silikagelu a čištění bylo prováděno filtrací, jak je popsáno v obecné proceduře.

NMR data byla následující:

¹H-nmr (CDC1₃) : δ = 7,45 (m, 2H) , 7,23 (m, 2H) 5,95 (m,

1H), 4,55 (m, 1H) 3,84 (m, 2H) 3,55 (s, 2H), 1,89 (m, 2H),

1,68 (m, 1H) 0,91 (d, 6H), 0,81 (t, 3H).

Ci6H₂₂NO₃Br (MW = 356,26, hmotová spektroskopie (M⁺ 357).

Příklad 32

Syntéza 2-[(3-trifluormethylfenyl)acetamido]máselné kyseliny ve formě iso-butylesteru

Postupem podle obecné procedury I uvedené výše a použitím 3-trifluormethylfenyloctové kyseliny (Aldrich) a iso-butyl2-aminobutyrátu (připraven postupem podle obecné procedury J uvedené výše) byla připravena sloučenina z názvu. Reakce byla monitorována chromatografii na tenké vrstvě na silikagelu a čištění bylo prováděno filtrací, jak je popsáno v obecné proceduře.

NMR data byla následující:

¹H-nmr (CDC1₃) : δ = 7,52	(m, 1H), 7,47	(m,	2H)	6,01
1H) , 4,56 (m, 1H) , 3,86	(m, 2H) , 3,61	(s,	2H) ,	1, 84
2H), 1,62 (m, 1H) 0,87 (d,	6H), 0,80 (t,	3H) .
Ci7H₂₂NO₃F₃ (MW = 345, 36, hmotová spektroskopie	(MH⁺	345) )

Příklad 33

·· ·· ·· • * · · · · • · · · · · • · · ··· ··· • · · · • ·· ·· ··

Syntéza 2-[(2-thienyl)acetamido]máselné kyseliny ve formě iso-butylesteru

Postupem podle obecné procedury I uvedené výše a použitím 2-thiofenoctové kyseliny (Aldrich) a iso-butyl-2aminobutyrátu (připraven postupem podle obecné procedury J uvedené výše) byla připravena sloučenina z názvu. Reakce byla monitorována chromatografií na tenké vrstvě na

silikagelu a	čištění bylo	prováděno	filtrací,	jak	je
popsáno v obecné proceduře.
NMR data byla	následuj ící:
¹H-nmr (CDC1₃)	: δ = 6,89 (m,	3H), 6,07	(bd, 1H),	4,50	(m,
1H) , 3,82 (m,	2H) , 3,71 (s	, 2H) , 1,85	(m, 2H),	1, 62	(m,
1H), 0,81 (d,	6H), 0,75 (t,	3H) .
C14H21NO3S (MW =	= 283,39, hmotová spektroskopie (MH⁺	284)) .

Příklad 34

Syntéza 2-(fenylacetamido)máselné kyseliny ve formě isobutylesteru

Postupem podle obecné procedury H uvedené výše a použitím fenyloctové kyseliny (Aldrich) a iso-butyl-2-aminobutyrátu (připraven postupem podle obecné procedury J uvedené výše) byla připravena sloučenina z názvu. Reakce byla monitorována chromatografií na tenké vrstvě na silikagelu a čištění byl chromatografií na silikagelu použitím směsi 9: 1 toluen:EtOAc jako vymývacího rozpouštědla.

NMR data byla následující:

^-nmr (CDC1₃) : δ = 7,17-7,28 (m, 5H) , 6,23 (bd, 1H), 4,51 (m, 1H), 3,86 (m, 2H), 3,54 (s, 2H), 1,87 (m, 2H), 1,62 (m, 1H) , 0,87 (d, 6H), 0,78 (t, 3H) .

C16H23NO3 (MW = 277,36, hmotová spektroskopie (MH⁺ 277)).

·« ·· ft · · · » · · · ·· · · · · • ·· ··

Příklad 35

Syntéza N-(fenylacetyl)valinu ve formě 2-methylbutylesteru

Krok A. Příprava N-(fenylacetyl) valinu

Do míchaného roztoku 5,15 g (44 mmolů) valinu (Bachem) v 50 ml (100 mmolů) 2N NaOH ochlazeného na teplotu 0 °C bylo přidáno po kapkách 5,3 ml (40 mmolů) fenylacetylchloridu (Aldrich). Bezbarvý olej precipitoval. Reakční směs byla ponechána zahřát se na teplotu okolí a byla míchána po dobu 18 hodin, promývána 50 ml diethyletheru, okyselena na pH 23 vodným HCl. Vytvořený bílý precipitát byl odfiltrován, promýván důkladně vodou, následovanou diethyletherem a tím se získalo 7,1 g (30 mmol, 69 % výtěžek) sloučeniny z názvu.

NMR data byla následující:

¹H-nmr (DMSO-d₆) : δ = 12,63 (s, IH) , 8,25 (d, J = 8,6 Hz,

IH), 7,27 (m, 5H), 4,15 (m, IH), 3,56 (d, J = 13,8 Hz, IH), 3,47 (d, J = 13,8 Hz, IH), 2,05 (m, IH), 0,87 (d, J = 6,8, Hz, 3H), 0,84 (d, J = 6,8 Hz, 3) ¹³C-nmr (DMSO-dg): δ = 173,2, 170, 4, 136, 6, 129, 0, 128,2,

126,3, 57,1, 41,9, 30,0, 19,2, 18,0.

C13H17NO3 (MW = 235,29, hmotová spektroskopie (MH⁺ = 236))

Krok B. Syntéza N-(fenylacetyl)valinu ve formě 2methylbutylesteru

Postupem podle obecné procedury C a použitím N(fenylacetyl)valinu, připraveného v Kroku A uvedeném výše a 2-methylbutan-l-olu (Aldrich) byla připravena sloučenina z názvu ve formě diastereomerické směsi. Reakce byla φφφφ · • φ · · φ φφ φ • · · · φ · φ • φ φφ ΦΦΦ ΦΦΦ

ΦΦΦ φ φ • ΦΦ φφ φφ φφ monitorována chromatografii na tenké vrstvě na silikagelu a čištění bylo prováděno filtrací, jak je popsáno v obecné proceduře.

NMR data byla následující:

¹H-nmr (CDC1₃) : δ = 7,25-7,40 (m, 5H) , 5,95 (d, IH) , 4,56

(m,	IH), 3.M-4	,00 (m, 2H), 3	,61 (s,	2H), 2,10 (m, IH), 1,68
(m,	IH), 1,38	(m, IH), 1,15	(m IH) ,	0,82-0,94 (m, 9H), 0,76
(d,	3H) .
¹³c-	•nmr (CDC1₃)	: δ = 171,84,	171,81	, 170,7, 134,6, 129,31,
129	,27, 128,9,	127,3, 69,8,	57,0,	43,7, 33,9, 31,3, 25,9,

25,8, 18,9, 17,4, 16,34, 16,27, 11,12, 11,07.

C18H27NO3 (MW = 305,42, hmotová spektroskopie (MH⁺ 306)).

Příklad 36

Syntéza N-(fenylacetyl)-L-methioninu ve formě isobutylesteru

L-Methionin (0,1299, 0,869 mmolů) (Aldrich) byl v dioxanu (5,0 ml) a zpracováván nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného (5,0 ml), následovaným fenylacetylchloridem (Aldrich) (0,114 ml, 0,822 mmolů). Po míchání po dobu 17 hodin při teplotě okolí směs byla zředěna ethylacetátem, vrstvy byly odděleny a vodná vrstva byla okyselena na pH 2 pomocí 5N HC1. Surový produkt byl extrahován do ethylacetátu, sušen nad síranem sodným, sušen ve vakuu a používán bez dalšího čištění. N-fenylacetyl-Lmethionin (0,1285 g, 0,447 mmolů) byl rozpuštěn v 3,0 ml dioxanu a iso-butylalkoholu (0,2 ml) a zpracováván EDC (0,094 g, 0,492 mmolů) a katalytickým DMAP (0,015 g) . Po míchání po dobu 17 hodin při teplotě 23 °C byla směs odpařen za sníženého tlaku na olej, residuum bylo zředěno v

9 9

9 9 9 9 9 9

9999 999 999

9 9 9 9

999 99 99 99

EtOAc a promýváno 0,1 N HC1 a nasyceným hydrogenuhličitanem sodným. Chromatografie na silikagelu použitím 98:2 CHCl₃/MeOH jako vymývacího rozpouštědla poskytla čistý produkt.

NMR data byla následující:

¹H-nmr (CDC1₃) : δ = 7,4-7,23 (m, 5H) , 6,14 (bd, 1H) , 4,70 (m, 1H), 3,89 (d, 2H), 3,62 (s, 2H), 2,43 (m, 2H), 2,12 (m, 1H), 1,93 (m, 2H), 0,94 (d, 6H).

C17H25NO3S (MW = 323,17, hmotová spektroskopie (M⁺ 323) dioxanu (5,0 ml) hydrogenuhličitanu

Příklad 37

Syntéza N-(fenylacetyl)-L-leucinu ve formě iso-butylesteru L-Leucine (Aldrich) (0,1149, 0,869 mmolů) byl vyjmut v a zpracováván nasyceným roztokem sodného (5,0 ml) následovaného fenylacetylchloridem (Aldrich) (0,114 ml, 0,822 mmolů). Po míchání po dobu 17 hodin při teplotě okolí směs byla zředěna ethylacetátem, vrstvy byly odděleny a vodná vrstva byla okyselena na pH 2 pomocí 5N HC1. Surový produkt byl extrahován do ethylacetátu, sušen nad síranem sodným, sušen ve vakuu a používán bez dalšího čištění. N-Fenylacetyl-Lleucin (0,0081 g, 0,038 mmolů) byl rozpuštěn v 2,0 ml CHC1₃(prostého EtOH) a iso-butylalkoholu (0,055 ml) a zpracováván P-EPC (100 mg, 0,87 miliekvivalentů). Směs byla míchána po dobu 4 dní, filtrována přes vrstvu bavlny a filtrát byl odpařen za sníženého tlaku na olej, který byl dostatečně čistý pro testování.

NMR data byla následující:

¹H-nmr (CDC1₃) : δ = 7,22 (m, 5H) , 5,57 (d, 1H) , 4,35 (m,

1H), 3,35 (m, 3H), 1,35 (m, 4H), 0,68 (m, 9H).

0 · 0 0 0 0

0 0 0 0 0 0

0 00 000 000

0 0 0 ·

000 00 00 00

Ci₈H₂7NO₃

0

0 0

0000 0 (MW = 305,40, hmotová spektroskopie (M⁺ 305)).

Příklad 38

Syntéza N-[(3-chlorfenyl)acetyl]alaninu ve formě 3methylbut-2-enylesteru

Postupem podle obecné procedury C uvedené výše a použitím N-(3-chlorfenylacetyl)alaninu (z Příkladu D uvedeného výše) a 3-methylbut-2-en-l-olu (Aldrich) může být připravena sloučenina z názvu. Reakce byla monitorována chromatografií na tenké vrstvě na silikagelu a čištění bylo prováděno kapalinovou chromatografií použitím směsi 30 % EtOAc/hexan jako vymývacího rozpouštědla.

NMR data byla následující:

X-nmr (CDC1₃) : δ = 7,39-7,16 (m, 4H) , 6,06 (d, IH) , 5,385,29 (m, IH), 4,63 (d, J = 9 Hz, 2H) , 3,56 (s, 2H) , 1,79 (s, 3H), 1,7 (s, 3H), 1,39 (d, J = 9 Hz, 3H)

Příklad 39

Syntéza N-[(3-chlorfenyl)acetyl]alaninu ve formě cyklopropylmethylesteru

Postupem podle obecné procedury C uvedené výše a použitím N-(3-chlorfenylacetyl)alaninu (z Příkladu D uvedeného výše a cyklopropylmethanolu (Aldrich) může být připravena sloučenina z názvu. Reakce byla monitorována chromatografií na tenké vrstvě na silikagelu a čištění bylo prováděno kapalinovou chromatografií použitím směsi 3:7 EtOAc:hexan jako vymývacího rozpouštědla.

NMR data byla následující:

^-nmr (CDC1₃) : δ = 7,2-7,1 (m, 4H) , 6,09 (s, IH) , 4,6 (dg, J = 9 Hz, IH) , 3,96 (dd, J = 9Hz, 2H) , 3,59 (s, 2H) , 1,2

(d, J = 9Hz, 3H), 1,2-1,0 (m, 1H) , 0,603-0,503 (m, 2H) ,

0,300-0,203 (m, 2H).

Příklad 40

Syntéza N-[(3-chlorfenyl)acetyl]alaninu ve formě 2thienylmethýlesteru

Postupem podle obecné procedury C uvedené výše a použitím N-(3-chlorfenylacetyl)alaninu (z Příkladu D uvedeného výše a 2-thiofenmethanolu (Aldrich) může být připravena sloučenina z názvu. Reakce byla monitorována chromatografií na tenké vrstvě na silikagelu a čištění bylo prováděno kapalinovou chromatografií použitím směsi 3:7 EtOAc:hexan jako vymývacího rozpouštědla.

NMR data byla následující:

¹H-nmr (CDC1₃) : δ = 7,37-6, 97 (m, 7H) , 5,97 (q, J = 14 Hz, 2H) , 4,6 (dq, J = 9 Hz, 1H) , 3,76 (s, 2H) , 1,38 (d, J = 9Hz, 3H).

Příklad 41

Syntéza N-[(3-chlorfenyl)acetyl]alaninu ve formě (1methylcyklopropyl)methylesteru

Postupem podle obecné procedury C uvedené výše a použitím N-(3-chlorfenylacetyl)alaninu (z Příkladu D uvedeného výše a (1-methylcyklopropyl)methanolu (Aldrich) může být připravena sloučenina z názvu. Reakce byla monitorována chromatografií na tenké vrstvě na silikagelu a čištění bylo prováděno kapalinovou chromatografií použitím směsi 3:7 EtOAc:hexan jako vymývacího rozpouštědla.

NMR data byla následující:

^xH-nmr (CDC1₃) : δ = 8,6 (bd, J = 9 Hz, 1H) , 3,86 (q, J = 14 • · · » ♦ ·♦··· • · · · ·

Hz, 2H) , 3,4 (s, 2H), 2,29 (q, J = 9 Hz, IH) , 1,3 (d, J = 9Hz, 3H), 1,03 (s, 3H), 0,5- 0,4 (m, 2H), 0,4-0,28 (m, 2H) .

Příklad 42

Syntéza N-[(3-chlorfenyl)acetyl]alaninu ve formě 3thienylmethylesteru

Postupem podle obecné procedury C uvedené výše a použitím N-(3-chlorfenylacetyl)alaninu (z Příkladu D uvedeného výše a 3-thiofenmethanolu (Aldrich) může být připravena sloučenina z názvu. Reakce byla monitorována chromatografií na tenké vrstvě na silikagelu a čištění bylo prováděno kapalinovou chromatografií použitím směsi 3:7 EtOAc:hexan jako vymývacího rozpouštědla.

NMR data byla následující:

¹H-nmr (CDC1₃) : δ = 8,03 (bd, J = 9 Hz, IH) , 7,56-7,5 (m, IH), 7,47 (bs, IH), 7,4-7,17 (m, 4H) , 7,06 (d, J = 9 Hz, IH), 5,1 (s, 2H), 4,3 (dq, IH), 1,3 (d, J = 9 Hz, 3H).

Příklad 43

Syntéza N-[(3-chlorfenyl)acetyl]alaninu ve formě 2methylcyklopentylesteru

Postupem podle obecné procedury C uvedené výše a použitím N-(3-chlorfenylacetyl)alaninu (z Příkladu D uvedeného výše a 2-methylcyklopentanolu (Aldrich) může být připravena sloučenina z názvu. Reakce byla monitorována chromatografií na tenké vrstvě na silikagelu a čištění bylo prováděno kapalinovou chromatografií použitím směsi 3:7 EtOAc:hexan jako vymývacího rozpouštědla.

NMR data byla následující:

¹H-nmr (CDC1₃) : δ = 7,39-7,16 (m, 4H) , 6,3 (bd, IH) , 4,79-

	9 9 99 9 9 9 9 9 * 9 9999 ···	« 99 99 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 • 9« «9	• 9 99 9 9 9 9 9 9 9 9 9 999 99«
9 99	9 99
4,7 (m, 1H),	4,6-4,25 (m, J = 9 Hz, 1H),	3,577	(S,	2H) ,
2,09-1,8 (m,	2H) , 1,74-1,6 (m, 2H) , 1,39	(dd, J	= 9	Hz,
3H), 1,2 (dt,	J = 9 Hz, 1H), 0,979 (dd, J =	9 Hz, 2H)
Ci₇H₂2NO₃C1 (MW	= 323,52, hmotová spektroskopie (MH⁺	323)	•
Příklad 44
Syntéza N-[	(3-chlorfenyl)acetyl]alaninu	ve formě	2-

methylprop-2-enylesteru

Postupem podle obecné procedury C uvedené výše a použitím N-(3-chlorfenylacetyl)alaninu (z Příkladu D uvedeného výše a 2-methylprop-2-en-l-olu (Aldrich) může být připravena sloučenina z názvu. Reakce byla monitorována chromatografií na tenké vrstvě na silikagelu a čištění bylo prováděno kapalinovou chromatografií použitím směsi 3:7 EtOAc:hexan jako vymývacího rozpouštědla.

NMR data byla následující:

¹H-nmr (CDC1₃) : δ = 7,39-7,16 (m, 4H) , 6,03 (bs, 1H) , 4,77 (s, 2H) , 4,7- 4,29 (m, 3H) , 2,59 (s, 2H) , 1,73 (s, 3H) , 1,43 (d, J = 9 Hz, 3H)

C15H18NO3CI (MW = 295,76, hmotová spektroskopie (MH⁺ 295)).

Příklad 45

Syntéza N-[(3-chlorfenyl)acetyl]alaninu ve formě cyklohex2-enylesteru

Postupem podle obecné procedury C uvedené výše a použitím N-(3-chlorfenylacetyl)alaninu (z Příkladu D uvedeného výše a cyklohex-2-en-l-olu (Aldrich) může být připravena sloučenina z názvu. Reakce byla monitorována chromatografií na tenké vrstvě na silikagelu a čištění bylo prováděno kapalinovou chromatografií použitím směsi 3:7 EtOAc:hexan

jako vymývacího rozpouštědla.

NMR data byla následující:

^-nmr (CDC1₃) : δ = 8,6 (bd, J = 9 Hz, IH) , 7,4-7,2 (m, 4H), 6,0-5,8 (m, IH), 5,7-5,5 (m, IH), 5,1 (bs, IH), 4,134,29 (m, IH) , 3,5 (s, 2H), 2,1- 1,9 (m, 2H), 1,8-1,69 (m, IH), 1,69-1,49 (m, 4H), 1,3 (dd, J = 9 Hz, 3H)

C17H20NO3CI (MW = 321,8, hmotová spektroskopie (MH⁺ 321,2)).

Příklad 46

Syntéza N-[(2-fenylbenzoxazol-5-yl)acetyl]alaninu ve formě iso-butylesteru

Postupem podle obecné procedury I uvedené výše a použitím

5-(2-fenylbenzoxazol)-yl-octové kyseliny (CAS # 62143-69-5) a alaninu ve formě iso-butylesteru (připraven postupem podle obecné procedury I uvedené výše) byla připravena sloučenina z názvu.

NMR data byla následující:

¹H-nmr (CDC1₃) : δ = 8,24	(m,	3H), 7,68	(m,	IH) ,	7,51	(m,
5H) , 6,04 (m, IH) , 4,58	(m,	IH), 3,85	(m,	2H) ,	3, 68	(s,
2H), 1,9 (m, IH), 1,35 (d,	3H)	, 0,87 (d,	6H) .

C22H24N2O4 (MW = 380, hmotová spektroskopie (MH⁺ 381) ) .

Příklad 47

Syntéza N-[(3-methylthiofenyl)acetyl]alaninu ve formě isobutylesteru

Postupem podle obecné procedury I uvedené výše a použitím 3-methylthiofenyloctové kyseliny (CAS # 18698-73-2) a alaninu ve formě iso-butylesteru (připraven postupem podle obecné procedury J uvedené výše) byla připravena sloučenina z názvu. Reakce byla monitorována chromatografii na tenké • (i · · · · vrstvě na silikagelu a čištění bylo prováděno filtrací, jak je popsáno v obecné proceduře.

NMR data byla následující:

^-nmr (CDC1₃) : δ = 7,14 (m, 2H) , 7,01 (m, IH), 4,56 (m,

IH), 3,88 (m, 2H), 3,54 (s, 2H) , 2,46 (s, 3H) , 1,89 (m,

IH), 1,35 (d, 3H) 0,85 (d, 5H).

C16H23NO3S (MW = 309, hmotová spektroskopie (MH⁺ 310) ) .

Příklad 48

Syntéza N-4-[(2-furyl)acetyl]alaninu ve formě isobutylesteru

Postupem podle obecné procedury I uvedené výše a použitím 2-furyloctové kyseliny (CAS # 2745-26-8) a alaninu ve formě iso-butylesteru (připraven postupem podle obecné procedury J uvedené výše) byla připravena sloučenina z názvu. Reakce byla monitorována chromatografii na tenké vrstvě na silikagelu a čištění bylo prováděno filtrací, jak je popsáno v obecné proceduře.

NMR data byla následující:

¹H-nmr (CDC1₃) : δ = 7,36 (m, IH) , 6,34 (m, IH) , 6,21 (m,

IH), 4,56 (m, IH) , 3,91 (m, 2H) , 3,61 (s, 2H) , 1,92 (m,

IH), 1,38 (d, 3H) 0,89 (d, 6H).

C13H19NO4 (MW = 253, hmotová spektroskopie (MH⁺ 254)).

Příklad 49

Syntéza N-[(benzofuran-2-yl)acetyl]alaninu ve formě isobutylesteru

Postupem podle obecné procedury I uvedené výše a použitím benzofuran-2-yloctové kyseliny (Maybridge) a alaninu ve formě iso-butylesteru (připraven postupem podle obecné

procedury J uvedené výše) byla připravena sloučenina z názvu. Reakce byla monitorována chromatografii na tenké vrstvě na silikagelu a čištění bylo prováděno filtrací, jak je popsáno v obecné proceduře.

NMR data byla následující:

¹H-nmr (CDC1₃) : δ = 7,51 (m, 1H) , 7,44 (m, 1H),7,25 (m, 2H), 6,67 (s, 1H), 4,60 (m, 1H) , 3,87 (m, 2H), 3,77 (s, 2H), 1,88 (m, 1H), 1,38 (d, 3H) , 0,87 (d, 6H).

C17H21NO4 (MW = 303, hmotová spektroskopie (MH⁺ 304)).

Příklad 50

Syntéza N-[(benzothiofen-3-yl)acetyl]alaninu ve formě isobutylesteru

Postupem podle obecné procedury I uvedené výše a použitím thianaften-3-yloctové kyseliny (Lancaster) a alaninu ve formě iso-butylesteru (připraven postupem podle obecné procedury J uvedené výše) byla připravena sloučenina z názvu. Reakce byla monitorována chromatografii na tenké vrstvě na silikagelu a čištění bylo prováděno filtrací, jak je popsáno v obecné proceduře.

NMR data byla následující:

¹H-nmr (CDC1₃) : δ = 7,89 (m, 1H) , 7,76 (m, 1H) , 7,38 (m,

3H), 6,07 (m, 1H) , 4,57 (m, 1H) , 3,92 (m, 2H) , 3,82 (s,

4H), l.M (m, 1H), 1,32 (d, 3H) 0,85 (d, 6H).

C17H21NO3S (MW = 319, hmotová spektroskopie (MH⁺ 320) ) .

Příklad 51

Syntéza N-[(2-chlor-5-thienyl)acetyl]alaninu ve formě isobutylesteru

Postupem podle obecné procedury I uvedené výše a použitím

• · · « · qoo

5-chlor-2-thienyloctové kyseliny (CAS # 13669-19-1 a alaninu ve formě iso-butylesteru (připraven postupem podle obecné procedury J uvedené výše) byla připravena sloučenina z názvu. Reakce byla monitorována chromatografii na tenké vrstvě na silikagelu a čištění bylo prováděno filtrací, jak je popsáno v obecné proceduře.

NMR data byla následující:

¹H-nmr (CDC1₃) : δ = 6,77 (m, IH) , 6,68 (d, IH) , 6,31 (m,

IH), 4,59 (m, IH) , 3,91 (m, 2H) , 3,38 (s, 2H), 1,90 (m,

IH), 1,39 (d, 3H), 0,89 (d, 5H).

Ci₃Hi₈NO₃SC1 (MW = 303, hmotová spektroskopie (MH⁺ 303) ) .

Příklad 52

Syntéza N-[(3-methylisoxazol-5-yl)acetyl]alaninu ve formě iso-butylesteru

Postupem podle obecné procedury I uvedené výše a použitím (3-methyl-isoxazol-5- yl)octové kyseliny (CAS # 19668-85-0) a alaninu ve formě iso-butylesteru (připraven postupem podle obecné procedury J uvedené výše) byla připravena sloučenina z názvu. Reakce byla monitorována chromatografii na tenké vrstvě na silikagelu a čištění bylo prováděno filtrací, jak je popsáno v obecné proceduře.

NMR data byla následující:

^-nrar (CDC1₃) : δ = 6,07 (s, 2H) , 4,56 (m, IH) , 3,92 (m,

2H), 3,68 (s, 2H), 2,29 (s, 3H), 1,94 (m, IH), 1,89 (d, 3H) 0, 91 (d, 6H) .

C13H20N2O4 (MW = 268, hmotová spektroskopie (MH⁺ 269)).

Příklad 53

Syntéza N-[(2-fenylthiothienyl)acetyl]alaninu ve formě iso♦ • · · · · • ·

9 99 9

9

99 butylesteru

Postupem podle obecné procedury I uvedené výše a použitím (2-fenyl-thiothienyl)octové kyseliny a alaninu ve formě iso-butylesteru (připraven postupem podle obecné procedury J uvedené výše) byla připravena sloučenina z názvu. Reakce byla monitorována chromatografii na tenké vrstvě na silikagelu a čištění bylo prováděno filtrací, jak je popsáno v obecné proceduře.

NMR data byla následující:

^-nmr (CDC1₃) : δ = 7,21-7,11 (m, 6H) , 6,92 (d, IH) , 4,56(m, IH), 3,87 (m, 2H), 3,72 (s, 2H), 1,94 (m, IH), 1,38 (d, 3H) 0,89 (d, 6H) .

C19C23NO3S2 (MW = 377, hmotová spektroskopie (MH⁺ 378)).

Příklad 54

Syntéza N-[(6-methoxybenzothiofen-2-yl)acetyl]alaninu ve formě iso-butylesteru

Postupem podle obecné procedury I uvedené výše a použitím (6-methoxythianaften-2- yl)octové kyseliny a alaninu ve formě iso-butylesteru (připraven postupem podle obecné procedury J uvedené výše) byla připravena sloučenina z názvu. Reakce byla monitorována chromatografii na tenké vrstvě na silikagelu a čištění bylo prováděno filtrací, jak je popsáno v obecné proceduře.

NMR data byla následující:

^xH-nmr (CDC1₃) : δ = 7,59 (d, IH) , 7,33 (d, IH) , 7,16 (s,

IH), 7,03 (dd, IH), 4,56 (m, IH), 3,87(s, 3H), 3.M (m, 2H), 3,76 (s, 2H),1,85 (m, IH), 1,30 (d, 3H) 0,86 (d, 6H). C18H23NO4S (MW = 3491, hmotová spektroskopie (MH⁺ 350)).

• · 0 0 0 0 «··· • · · · · ·

0 0 0 9 99 999 9 9 · ·

102 ^xH-nmr (CDC1₃) : δ = 7,59 (d, IH), 7,33 (d, IH), 7,16 (s,

IH), 7,03 (dd, IH), 4,56 (m, IH), 3,87(s, 3H), 3.M (m, 2H), 3,76 (s, 2H),1,85 (m, IH), 1,30 (d, 3H) 0,86 (d, 6H). C18H23NO4S (MW = 3491, hmotová spektroskopie (MH⁺ 350) ) .

Příklad 55

Syntéza N-[(3-fenyl-1,2,4-thiadiazol-5-yl)acetyl]alaninu ve formě iso-butylesteru

Postupem podle obecné procedury I uvedené výše a použitím (3-fenyl-l,2,4-thiadiazol-5-yl)octové kyseliny (CAS # 90771-06-5) a alaninu ve formě iso-butylesteru (připraven postupem podle obecné procedury J uvedené výše) byla připravena sloučenina z názvu. Reakce byla monitorována chromatografií na tenké vrstvě na silikagelu a čištění bylo prováděno filtrací, jak je popsáno v obecné proceduře.

NMR data byla následující:

^xH-nmr (CDC1₃) : δ = 7,47 (m, 5H) , 4,66 (m, IH) , 4,16 (s,

2H), 3,91 (m, 2H), 1,93 (m, IH), 1,48 (d, 3H) 0,93 (d, 6H). C17H21N3O3S (MW = 347, hmotová spektroskopie (MH⁺ 348)).

Příklad 56

Syntéza N-[(2-fenyloxazol-4-yl)acetyl]alaninu ve formě isobutylesteru

Postupem podle obecné procedury I uvedené výše a použitím (2-fenyloxazol-4- yl)octové kyseliny (CAS # 22086-89-1) a alaninu ve formě iso-butylesteru (připraven postupem podle obecné procedury J uvedené výše) byla připravena sloučenina z názvu. Reakce byla monitorována chromatografií na tenké vrstvě na silikagelu a čištění bylo prováděno filtrací, jak je popsáno v obecné proceduře.

··

A « · · · · ···· ··· ··· · ·

- 103 Příklad 57

Syntéza N-[(3-methylfenyl)acetyl]alaninu ve formě isobutylesteru

Postupem podle obecné procedury I uvedené výše a použitím 3-methylfenyloctové kyseliny (Aldrich) a alaninu ve formě iso-butylesteru (připraven postupem podle obecné procedury J uvedené výše) byla připravena sloučenina z názvu. Reakce byla monitorována chromatografii na tenké vrstvě na silikagelu a čištění bylo prováděno filtrací, jak je popsáno v obecné proceduře.

NMR data byla následující:

^-nmr (CDC1₃) : δ = 7,21 (m, IH) , 7,07 (m, 3H) , 4,54 (m,

IH), 3,83 (m, 2H) , 3,52 (s, 2H) , 2,35 (s, 3H) , 1,87 (m,

IH), 1,32 (d, 3H), 0,88 (d, 6H).

C16H23NO3 (MW = 277, hmotová spektroskopie (MH⁺ 278)).

Příklad 58

Syntéza N-[(2,5-difluorfenyl)acetyl]alaninu ve formě isobutylesteru

Postupem podle obecné procedury I uvedené výše a použitím 2,5-difluorfenyloctové kyseliny (Aldrich) a alaninu ve formě iso-butylesteru (připraven postupem podle obecné procedury J uvedené výše) byla připravena sloučenina z názvu. Reakce byla monitorována chromatografii na tenké vrstvě na silikagelu a čištění bylo prováděno filtrací, jak je popsáno v obecné proceduře.

NMR data byla následující:

^-nmr (CDC1₃) : δ = 7,08-6, 94 (m, 3H) , 4,57 (m, IH) , 3,91 (m, 2H), 3,56 (s, 2H), 1,92 (m, IH), 1,41 (d, 3H) 0,91 (d, • 9 • Φ ΦΦ · · Φ 99 9 9 9

9 9 9 9 9 9 9 9

Φ Φ ΦΦ Φ· ΦΦΦΦΦΦ • Φ Φ · Φ · · ···· 999 ΦΦΦ ·· 99 99

- 104 6Η) .

C15H19NO3F2 (MW = 299, hmotová spektroskopie (hlH+ 300) ) .

Příklad 59

Syntéza N-[(3,5-diflurofenyl)acetyl]alaninu ve formě isobutylesteru

Postupem podle obecné procedury I uvedené výše a použitím 3,5-difluorfenyloctové kyseliny (Aldrich) a alaninu ve formě iso-butylesteru (připraven postupem podle obecné procedury J uvedené výše) byla připravena sloučenina z názvu. Reakce byla monitorována chromatografii na tenké vrstvě na silikagelu a čištění bylo prováděno filtrací, jak je popsáno v obecné proceduře.

NMR data byla následující:

^-nmr (CDC1₃) : δ = 6,81 (m, 2H) , 6,74 (m, IH) , 6,06 (m,

IH), 4,57 (m, IH) , 3,92 (m, 2H) , 3,51 (s, 2H) , 1,94 (m,

IH), 1,36 (d, 3H) 0,87 (d, 6H).

C15H19NO3F2 (MW = 299, hmotová spektroskopie (MH⁺ 300)).

Příklad 60

Syntéza N-[(3-thienyl)acetyl]alaninu ve formě isobutylesteru

Postupem podle obecné procedury I uvedené výše a použitím 3-thiofenoctové kyseliny (Aldrich) a alaninu ve formě isobutylesteru (připraven postupem podle obecné procedury J uvedené výše) byla připravena sloučenina z názvu. Reakce byla monitorována chromatografii na tenké vrstvě na silikagelu a čištění bylo prováděno filtrací, jak je popsáno v obecné proceduře.

NMR data byla následující:

·

- 105 9 9 99 ^-nmr (CDC1₃) : δ = 7,33 (m, IH), 7. 14 (m, IH), 7,01 (m, IH), 6,5 (m, IH), 4,58 (m, IH), 3,88 (m, 2H) , 3,60 (s, 2H), 1,91 (m, IH), 1,37 (d, 3H) 0,92 (d, 6H).

Optická rotace: [a]23 -52 (c 1 MeOH) @ 589 nm.

C₁₃H₁₉NO₃S (MW = 269, hmotová spektroskopie (MH⁺ 269) ) .

Příklad 61

Syntéza N-[(4-methylfenyl)acetyl]-L-alaninu ve formě isobutylesteru

Postupem podle obecné procedury I uvedené výše a použitím 4-methylfenyloctové kyseliny (Aldrich) a L-alaninu ve formě iso-butylesteru (připraven postupem podle obecné procedury J uvedené výše) byla připravena sloučenina z názvu. Reakce byla monitorována chromatografií na tenké vrstvě na silikagelu a čištění bylo prováděno filtrací, jak je popsáno v obecné proceduře.

NMR data byla následující:

¹H-nmr (CDC1₃) : δ = 7,11 (s, 4H) , 5,93 (m, IH) , 4,58 (m,

IH), 3,58 (m, 2H) , 3,54 (s, 2H) , 2,33 (s, 3H) , 1,89 (m,

IH), 1,32 (d, 3H), 0,89 (d, 6H).

C16H23NO3 (MW = 277,35, hmotová spektroskopie (MH⁺ 278)).

Příklad 62

Syntéza N-(fenylacetyl)-L-alaninu ve formě S-l(methoxykarbonyl) iso-butylesteru

Postupem podle obecné procedury K a použitím (S)-( + )-2hydroxy-2-methylmáselné kyseliny (Aldrich) namísto aminokyseliny byl připraven methyl (S)-(+)-2- hydroxy-2methylbutyrát. Methyl (S)-(+)-2-hydroxy-2-methylbutyrát byl potom kopulován s karbobenzyloxy-L-alaninem (Aldrich)

- 106 použitím obecné procedury E a tím se získal karbobenzyloxyL-alanin ve formě S-l-(methoxykarbonyl)iso-butylesteru. Karbobenzyloxy-L-alanin ve formě S-l-(methoxykarbonyl)isobutylesteru (1,0 g) byl potom rozpuštěn v 20 ml methanolu a 6N HCI (0,5 ml) a bylo přidáno 10 % paládium na aktivním uhlí (0,1 g). Tato reakční směs byla hydrogenován při tlaku 40 psi vodíku v Parrově přístroji po dobu 5 hodin při teplotě okolí a potom filtrována přes vrstvu Celitu. Filtrát byl koncentrován za sníženého tlaku a tím se získal L-alanin S-l-(methoxykarbonyl) ve formě hydrochloridu isobutylesteru (98 % výtěžek). L-Alanin S-l-(methoxykarbonyl) ve formě hydrochloridu iso-butylesteru byl potom kopulován s fenyloctovou kyselinou použitím obecné procedury G a tím se získala sloučenina z názvu.

NMR data byla následující:

¹H-nmr (CDC1₃) : δ= 7,35 - 7,20 (m, 5H) , 6,22 (bd, 1H) , 4,83 (d, 1H), 4,65 (ρ, 1H), 3,68 (s, 3H), 3,55 (s, 2H), 2,21 (m, 1H), 1,40 (d, 3H), 0,97 (d, 3H), 0,93 (d, 3H).

¹³C-nmr (CDC1₃) : δ= 173,25, 171,18, 170,22, 135, 11, 129, 94, 129,50, 127,88, 52,67, 48,49, 43,98, 30,53, 19,21, 18,75, 17,58.

Příklad 63

Syntéza N-[(3-nitrofenyl)acetyl]-L-alaninu ve formě isobutylesteru

Postupem podle obecné procedury H uvedené výše a použitím 3-nitrofenyloctové kyseliny (Aldrich) a L-alaninu ve formě hydrochloridu iso-butylesteru (z Příkladu B uvedeného výše) byla připravena sloučenina z názvu. Reakce byla monitorována chromatografii na tenké vrstvě na silikagelu a «· ·· ·· • · · · · · • · 9 0 0 · · · 99 9 0 0 0 · · · • 0 99 00

- 107 čištění bylo prováděno rekrystalizací z butylchloridu.

NMR data byla následující:

^-nmr (CDC1₃) : δ = 8,17 (m, 2H) , 7,68 (d, IH) , 7,52 (t,

IH), 6,18 (m, IH), 4,48 (m, IH) , 3,94 (m, 2H) , 3,67 (s,

2H), 1,93 (m, IH), 1,42 (d, 3H), 0,91 (d, 3H).

Optická rotace: [a]23 “49 (c 5, MeOH).

Příklad 64

Syntéza N-[(3,5-difluorfenyl)acetyl]alaninu ve formě ethylesteru

Postupem podle obecné procedury G a použitím 3,5difluorfenyloctové kyseliny (Aldrich) a alaninu ve formě ethylesteru (Aldrich) byla připravena sloučenina z názvu ve formě pevné látky, která má teplotu tání 93 °C-95 °C.

Reakce byla monitorována chromatografii na tenké vrstvě na silikagelu (Rf = 0,8 v EtOAC) a čištění bylo prováděno chromatografii na silikagelu použitím EtOAc jako vymývacího rozpouštědla, následovanou rekrystalizací z 1-chlorbutanu. NMR data byla následující:

¹H-nmr (DMSO-d₆) : δ = 1,30 (d, 3H) ; 3,52 (s, 2H) .

C₁₃Hri₅NO₃F₂ (MW = 271,26, hmotová spektroskopie (MH⁺ 271)).

Příklad 65

Syntéza N-[(3-nitrofenyl)acetyl]methioninu ve formě ethylesteru

Postupem podle obecné procedury G uvedené výše a použitím 3-nitrofenyloctové kyseliny (Aldrich) a methioninu ve formě hydrochloridu ethylesteru (Aldrich) byla připravena sloučenina z názvu. Reakce byla monitorována chromatografii na tenké vrstvě na silikagelu a čištění bylo prováděno • · • ftft • · · · · • ftft ·· ftft ftft · · ftftftft • ftft ftftftft ft · ·· ftftft ftftft • · · ftft • ftft ftft ·· ··

108 rekrystalizací z butylchloridu. NMR data byla následující:

^xH-nmr (CDC1₃) : δ G= 8,18 (s, 1H), 8,15 (d, 1H)	7, 66	(d,
1H), 7,48 (t, 1H), 6,30 (m, 1H) , 4,67 (m, 1H) ,	4,21	(t,
2H), 3,67 (s, 2H), 2,47 (t, 2H) , 2,12 (m, 2 Η) ,	2,08	(s,

3H), 1,27 (t, 3H).

Optická rotace: [a]23 -30 (c 5, MeOH).

Příklad 66

Syntéza N-[(3-chlorfenyl)acetyl]alaninu ve formě isobutylesteru

Postupem podle obecné procedury G uvedené výše a použitím 3-chlorfenyloctové kyseliny (Aldrich) a alaninu ve formě iso-butylesteru (připraven postupem podle obecné procedury J uvedené výše) byla připravena sloučenina z názvu. Reakce byla monitorována chromatografii na tenké vrstvě na silikagelu.

NMR data byla následující:

^xH-nmr (CDC1₃) : δ = 7,29 (m, 3H) , 7. 18 (m, 1H) , 6,0 (m, 1H), 4,56 (m, 1H) , 3,89 (m, 2H) , 3,53 (s, 2H) , 1,91 (m, 1H), 1,39 (d, 3 Η), 0,91 (d, 3H).

Optická rotace: [a] -45 (c 5, MeOH).

C15H20NO3CI (MW =; 297,78, hmotová spektroskopie (MH⁺ 297).

Příklad 67

Syntéza N-[(3-chlorfenyl)acetyl]alaninu ve formě 2-(N,Ndimethylamino)ethylesteru

Postupem podle obecné procedury C uvedené výše a použitím N-(3-chlorfenyl- acetyl)alaninu (z Příkladu D uvedeného výše a 2-(N,N-dimethyl amino) ethanolu (Aldrich) může být připravena sloučenina z názvu. Reakce byla monitorována • · φ • φ φφ φ φ • · φ φ • •ΦΦ ΦΦΦ • ·· φφ φφ φ φφφφ φ φφφφ φ φ ·ΦΦ ΦΦΦ φ φ φ

109 chromatografii na tenké vrstvě na silikagelu a čištění bylo prováděno kapalinovou chromatografii použitím směsi 0,1:2:0,79 NH₄OH:EtOH:CHCl₃ jako vymývacího rozpouštědla.

NMR data byla následující:

^-nmr (CDC1₃) : 7,37 (s, IH) , 7,33-7,2 (m, 3H) , 4,675-4,6 (m, IH), 4,5- 4,37 (m, IH), 4,25-4,13 (m, IH), 3,6 (d, J = 7 Hz, 2H), 2,86 (s, 2H) , 2,3 (s, 6H), 1,23 (d, J = 9 Hz, 3H) .

C15H21N2O3CI (MW = 313, 799, hmotová spektroskopie (M⁺ 313)).

Příklad 68

Syntéza 2-[(3,5-dichlorfenyl)acetamido]hexanové kyseliny ve formě methylesteru

Postupem podle obecné procedury F uvedené výše a použitím

3,5-dichlorfenyloctové kyseliny (z Příkladu C uvedeného výše) a L-norleucinu ve formě hydrochloridu methylesteru (Bachem) byla připravena sloučenina z názvu ve formě pevné látky, která má teplotu tání 77 °C-78 °C. Reakce byla monitorována chromatografii na tenké vrstvě na silikagelu (Rf = 0,70 v 40 % EtOAC/hexanech) a čištění bylo prováděno mžikovou chromatografii na silikagelu použitím 40 %

EtOAc/hexany jako vymývacího rozpouštědla.

NMR data byla následující:

^-nmr (CDC1₃) : δ = 7,20 (s), 7,18 (s), 6,6 (m) , 4,55 (m) ,

3,7 (s), 3,5 (s) , 3,4 (s) , 2,0 (s) , 1,8 (m) , 1,6 (m) , 1,2 (m), 0,8 (t).

¹³C-nmr (CDC1₃) : δ = 173, 54, 169, 67, 138,43, 135,72, 128,33, 128,07, 78,04, 77,62, 77,19, 53.M, 52,90, 43,14, 32,57,

27,87, 22,81, 14,41.

99 • 9 9 9 • 9 9 9

999 999

9

99

110

Příklad 69

Syntéza N-[(3,5-dichlorfenyl)acetyl]-L-alaninu ve formě iso-butylesteru

Postupem podle obecné procedury F uvedené výše a použitím

3,5-dichlorfenyloctové kyseliny (z Příkladu C uvedeného výše) a L-alaninu ve formě hydrochloridu iso-butylesteru (z Příkladu B uvedeného výše) byla připravena sloučenina z názvu ve formě pevné látky, která má teplotu tání 1150-116 °C. Reakce byla monitorována chromatografií na tenké vrstvě na silikagelu (Rf = 0,40 v 3 % methanol/dichlormethan) a čištění bylo prováděno mžikovou chromatografií na silikagelu použitím směsi 3 % methanol/dichlormethan jako vymývacího rozpouštědla.

NMR data byla následující:

¹H-nmr (CDC1₃) : δ = 7,27 (d, J = 2 Hz, 1H) , 7,19 (s, 2H) ,

6,22 (d, J = 6 Hz, 1H) , 4,59 (kvint., J = 7 Hz, 1H) , 3,9 (q, J = 4 Hz, 2H), 3,5 (s, 2H) , 1,9 (m, 1H) , 1,4 (d, J = 7

Hz, 3H), 0,91 (d, J = 7 Hz, 6H).

¹³C-nmr (CDC1₃) : δ= 173, 45, 169, 37, 138,31, 135,75, 128,39, 128,11, 78,04, 77,61, 77,19, 72,19, 54,03, 48,97, 43,12,

28,24, 19,52, 19,49, 19,09.

C15H19NO3CI2 (MW = 331,9, hmotová spektroskopie (MH⁺ 332)).

Příklad 70

Syntéza N-(cyklohexylacetyl)-L-alaninu ve formě isobutylesteru

Postupem podle obecné procedury B uvedené výše a použitím cyklohexyloctové kyseliny (Aldrich) a L-alaninu ve formě hydrochloridu iso-butylesteru (z Příkladu B uvedeného výše) byla připravena sloučenina z názvu ve formě pevné látky, • · · • 00 • 0

111 cyklohexyloctové kyseliny (Aldrich) a L-alaninu ve formě hydrochloridu iso-butylesteru (z Příkladu B uvedeného výše) byla připravena sloučenina z názvu ve formě pevné látky, která má teplotu tání 92 °C- 93 °C. Reakce byla monitorována chromatografií na tenké vrstvě na silikagelu (Rf = 0,39 v 1:3 EtOAc: hexan) a čištění bylo prováděno extrakcí Et2O následovanou promýváním vodným K₂CO₃ a vodným HCI.

NMR data byla následující:

¹H-nmr (CDC1₃) : δ = 0,93 (d, J = 6,7 Hz, 6H) , 0,85-1,01 (m, 2H), 1, 05- 1,35 (m, 3H) , 1,40 (d, J = 7,1 Hz, 3H) , 1,601,85 (m, 6H), 1,95 (m, 1H), 2,06 (d, J =t 7,0 Hz, 2H) , 3,92 (m, 2H), 4,61 (m, 1H), 6,08 (bd, 1H).

¹³C-nmr (CDC1₃) : δ = 18,7, 18,9, 26, 0, 26, 1, 27,6, 33, 0,

35,3, 44,6, 47,9, 71,4, 171,8, 173,3.

C₁₅H₂₇NO₃ (MW = 269, 39, hmotová spektroskopie (MH⁺ 270)).

Příklad 71

Syntéza N-(cyklopentylacetyl)-L-alaninu ve formě isobutylesteru

Postupem podle obecné procedury B uvedené výše a použitím cyklopentyloctové kyseliny (Aldrich) a L-alaninu ve formě hydrochloridu iso-butylesteru (z Příkladu B uvedeného výše) byla připravena sloučenina z názvu ve formě pevné látky, která má teplotu tání 62 °C - 64 °C. Reakce byla monitorována chromatografií na tenké vrstvě na silikagelu (R_f = 0,37 v 1: EtOAc:hexan) a čištění bylo prováděno extrakcí Et₂O, následovanou promýváním vodným K₂CO₃ a vodným HCI.

NMR data byla následující:

·« ·· 99 · 9 · · ·

9 9 9 9 9 9 9 9

9 9 9999 999 999 • · · · · · · e··· ··· ··· ·· ·· ··

- 112 -

^xH-nmr	(CDC1₃) : δ = 0,	87 (d, J = 6, 8 Hz, 6H) ,	1, 01	-1	,17 (m,
2H), 1.	4 (d, J = 7,2	Hz, 3H), 1,40-1,62 (m,	4H) ,	lr	70-1,83
(m, 2H)	, 1,89 (m, IH	, 2,15 (m, 3H), 3,86 (m,	2H) ,	4	,55 (m,
IH), 6,	30 (d, J = 7,1	Hz, IH .
¹³C-nmr	(CDCI3) : δ =	= 18,4, 18,78, 18,80,	24,	8	(velmi
vysoký)	, 27,5, 32,2 ,	32,32, 36,9, 42,5, 47,7	, 71,	2,	172,2,

173. .

Elementární Analýza

Vypočteno ( %): C, 65,85; H, 9,87; N, 5,49;

Nalezeno( %): , 66,01; H, 10,08; N, 5,4 .

C14H25NO3 (MW = 255,36, hmotová spektroskopie (MH⁺ 256)

Příklad 72

Syntéza N-[(cyklohex-l-enyl)acetyl]-L-alaninu ve formě isobutylesteru

Postupem podle obecné procedury B uvedené výše a použitím cyklohex-l-enyloctové kyseliny (Alfa) a L-alaninu ve formě hydrochloridu iso-butylesteru (z Příkladu B uvedeného výše) byla připravena sloučenina z názvu ve formě pevné látky, která má teplotu tání 49 °C-51 °C. Reakce byla monitorována chromatografií na tenké vrstvě na silikagelu (R_f = 0,40 v 1:3 EtOAc:hexan) a čištění bylo prováděno extrakcí Et₂O následovanou promýváním vodným K₂CO₃ a vodným HCl.

NMR data byla následující:

^xH-nmr (CDC1₃)	: δ = 0,91	(d, J	=4,5 Hz, 3H), 0,93	(d,	J =
6,7 Η , 3H) ,	1,40 (d, J	= 7,2	Hz, 3H), 1,52-1,70	(m,	4H) ,
1,97 (m, 3H),	2,06 (b ,	2H) ,	2,89 (s, 2H), 3,92	(m,	2H) ,

4,59 (m, IH), 5,65 (s, IH) , 6,33 (d, J = 6,6 Hz, IH) . ¹³C-nmr (CDC1₃) : δ = 18,7, 18,91, 18,93, 21,9, 22,7, 25, 3,

27,6, 28,3, 46, 1, 47,9, 71,4, 127, 1, 132,5, 170, 6, 173, 1.

tt tt · • · · • ·· • · tt· ··

113

Elementární Analýza

Vypočteno (%): C, 67,38; H, 9,42; N, 5,24; Nalezeno(%): C, 67,34; H, 9,54; N, 5,16.

C15H25NO3 (MW = 267,37, hmotová spektroskopie (MH⁺ 268)).

Příklad 73

Syntéza N-[(3-chlorfenyl)acetyl]alaninu ve formě 3methylbut-2-enyl thioesteru

Postupem podle obecné procedury C uvedené výše a použitím N-[(3-chlorfenyl)acetyl] alaninu a 3-methyl-2butenthioesteru (TCI) může být připravena sloučenina z názvu. Reakce byla monitorována chromatografií na tenké vrstvě na silikagelu a čištění bylo prováděno kapalinovou chromatografií použitím směsi 3:7 EtOAc:hexan jako vymývacího rozpouštědla.

NMR data byla následující:

^xH-nmr (DMSO-dg): δ = 5,2-5,075 (m, 1H) , 4,37 (dq, J = 9 Hz, 1H) , 3,56 (s), 3,43 (d, J = 12 Hz, 2H) , 1,266 (d, J = 12 Hz, 6H), 1,3 (d, J = 9 Hz, 3H).

C16H20NO2CIS (MW = 325, 86, hmotová spektroskopie (M⁺ 325)).

Příklad 74

Syntéza N-[(2-fenyl)-2-fluoracetyl]alaninu ve formě ethylesteru

Postupem podle obecné procedury F uvedené výše a použitím α-fluorfenyl octové kyseliny (Aldrich) a alaninu ve formě ethylesteru (Aldrich) byla připravena sloučenina z názvu. Reakce byla monitorována chromatografií na tenké vrstvě na silikagelu (Rf = 0,75 v 1: 1 EtOAc/hexan) a čištění bylo prováděno chromatografií na silikagelu použitím směsi 1:2

- 114 ethylacetát/hexany jako vymývacího rozpouštědla.

NMR data byla následující:

^-nmr (DMSO-d₆) : δ = 1,14 (q, 3H), 1,34 (d, 3H), 4,07 (m, 2H), 4,33 (m, 1H) , 5,84 (d, 1H) , 6,01 (d, 1H) , 7,40-7,55 (m, 5H), 8,87 (m, 1H).

C13H16NO3F (MW = 253,27, hmotová spektroskopie (MH⁺ 253)).

Příklad 75

Syntéza N-(3,5-difluorfenylacetyl)-L-fenylglycinu ve formě methylesteru

Postupem podle obecné procedury F uvedené výše a použitím

3,5-difluorfenyloctové kyseliny (Aldrich) a L-fenylglycinu ve formě hydrochloridu methylesteru (Bachem) byla připravena sloučenina z názvu.

NMR data byla následující:

^lH-nmr (CDC13) : δ = 7,4-7,3 (m, 5H) , 6,9-6,7 (m, 3H) , 6,55 (d 1H, 7,1 Hz), 5,56 (d 1H 7 Hz), 3,72 (s 3H) , 3,57 (s 2H) ¹³C-nmr (CDC13) : δ = 197,6, 177,6, 171, 8, 169, 3, 136, 7, 129,6, 129,3, 127,8, 113,0, 112,9, 112,7, 111,4, 103,8, 103,5, 65,1, 57,2, 53,5, 45,1, 43,3, 43,3

C17H15NO3F2 (MW = 319,31, hmotová spektroskopie (MH⁺ 320)).

Příklad 76

Syntéza N-(3,5-difluorfenylacetyl)-L-fenylglycinu ve formě iso-butylesteru

3,5-difluorfenyloctové kyselina (Aldrich) byl EDC kopulována s L-fenylglycinem ve formě hydrochloridu methylesteru (Bachem) použitím obecné procedury F uvedené výše. Výsledná sloučenina byla umístěna do velkého přebytku požadovaného alkoholu. Bylo přidáno katalytické množství • ·

- 115 • · · φ<a bezvodého NaH a reakce byla sledována chromatografii na tenké vrstvě. dokud již nebyla detekována přítomnost výchozího materiálu. Reakce byla zastavena mililitry IN HC1 a po několika minutách míchání byl přidán nasycený vodný NaHCCb. Objem reakční směsi byla zmenšen v rotační odparce, až byl odstraněn přebytek alkoholu a potom zbývající residuum bylo vyjmuto v ethylacetátu a byla přidána další voda. Organická fáze byla promývána nasyceným vodným NaCl a sušena nad MgSO₄. Roztok byl zbaven rozpouštědla v rotační odparce a residuum, představující surový produkt, bylo potom dále čištěno chromatografii.

NMR data byla následující:

¹H-nmr	(CDCI3) : δ = 7,	35-7,3	(m, 5H) , 6,8	-6,7 (m 3H	), 6,60
(d IH,	7 Hz), 5,55 (d	IH 7,1	Hz) , 3,9 (m	2H), 3.M	(s 2H),
1,85 (m	IH 7 Hz), 0,8	(q 6H 7	Hz)
¹³C-nmr	(CDCI3) : δ =	171,3,	169,3, 165,	4, 138,5,	137,0,
129,5,	129,2, 127,6,	113,1,	113,0, 112,	8, 112,7,	103,8,

103,5, 103,2, 75,5, 57,2, 43,4, 43,3, 28,2, 19,3 C20H21NO3F2 (MW = 361,39, hmotová spektroskopie (MH⁺ 362) ) .

Příklad 77

Syntéza N-(cyklopentylacetyl)-L-fenylglycinu ve formě methylesteru

Postupem podle obecné procedury D uvedené výše a použitím cyklopentyloctové kyseliny (Aldrich) s L-fenylglycinem ve formě hydrochloridu methylesteru (Bachem) byla připravena sloučenina z názvu.

NMR data byla následující:

^xH-nmr (CDC1₃) : δ = 7,35 (s, 5H) , 6,44 (bd, IH) , 5,6 (d, IH), 3,72 (s, 3H), 2,24 (bs, 3H), 1,9-1,4 (m, 6H), 1,2-1,05

116 (m, 2H) ¹³C-nmr (CDC1₃) : δ = 172, 3, 171,7, 136,7, 129, 0, 128, 6,

127,3, 56,2, 52,7, 42,5, 36,9, 32,40, 32,38, 24,8

Příklad 78

Syntéza N-(cyklopentylacetyl)-L-alaninu ve formě methylesteru

Postupem podle obecné procedury D uvedené výše a použitím cyklopentyloctové kyseliny (Aldrich) s L-alaninem ve formě hydrochloridu methylesteru (Sigma) byla připravena sloučenina z názvu.

NMR data byla následující:

^-nmr (CDC1₃) : δ = 6,38 (d, IH) , 4,50 (m, IH) , 3,65 (s, 3H), 2,13 (bs, 3H), 1,80-1,00 (m (zahrnuje d při 1,30, 3H), 11H) ¹³C-nmr (CDCI3) : δ = 173,7, 172,5, 52,1, 47,-6, 42,3, 36, 8, 32,15, 32,14, 18,0

C11R19NO3 (MW = 213,28, hmotová spektroskopie (MH⁺ 214)).

Příklad 79

Syntéza N-(cyklopropylacetyl)-L-fenylglycinu ve formě methylesteru

Postupem podle obecné procedury D uvedené výše a použitím cyklopropyloctové kyseliny (Aldrich) s L-fenylglycinem ve formě hydrochloridu methylesteru (Bachem) byla připravena sloučenina z názvu.

NMR data byla následující:

^-nmr (CDC1₃) : δ = 7,35 (m, 5H) 6,97 (M, J = 7,2 Hz, IH) 5,59 (d, J = 7,8 Hz, IH), 3,71 (s, 3H), 2,17 (m, 2H), 1,050,95 (m, IH), 0,62 (m, 2H) , 0,02 (m, 2H) « · (* ·

	• « · · · · · • · · #»··»· • · · · · · ··· ··« ··· · · - 117 -	β » ·· · • • ·
¹³C-nmr	(CDCI3) : δ = 171, 9, 174,6, 136, 6, 129,0,	128,5,
127,2,	56,1, 52,7, 41,0, 6,9, 4,37, 4,33
Příklad	80
Syntéza	N-(cyklopropylacetyl)-L-alaninu ve	formě

methylesteru

Postupem podle obecné procedury D uvedené výše a použitím cyklopropyloctové kyseliny (Aldrich) s L-alaninem ve formě hydrochlorid methylesteru (Sigma) byla připravena sloučenina z názvu.

NMR data byla následující:

¹H-nmr (CDCI3) : δ = 6,60 (d, IH) , 4,55 (m, IH) , 3,69 (s,

3H), 2,10 (m, 2H), 1,34 (d, 3H), 0,95 (m, IH), 0,58 (m, 2H) 0,15 (m, 2H) ¹³C-nmr (CDC1₃) : δ = 173,7, 172,3, 52,3, 47,7, 41,0, 18,2, 6,7, 4,27, 4,22

Příklad 81

Syntéza N-[(3-nitrofenyl)acetyl]-L-methioninu ve formě isobutylesteru

Postupem podle obecné procedury H uvedené výše a použitím nitrofenyloctové kyseliny (Aldrich) a L-methioninu (Aldrich) byla připravena sloučenina z názvu ve formě snědého oleje. Reakce byla monitorována chromatografií na tenké vrstvě na silikagelu.

NMR data byla následující:

^-nmr (CDC1₃) : δ = 8,16	(m,2H) 7,67 (d,lH)	7,32	(t,	IH) ,
6,31 (bd, IH), 4,69 (m,	IH), 3,90 (d, 2H),	3, 68	(s,	2H) ,
2,47 (t, 2H) , 2,15 (m,	IH) , 2,02 (s, 3H),	1,90	(m,	2H) ,
0,91 (d, 6H).

·

- 118 *· 99 • 9 · · « · A · • A · · · · • · • A »·

C17H24N2O5S (MW = 368,4, hmotová spektroskopie (MH⁺. 368)).

Příklad 82

Buněčné prohledávání pro detekci inhibitorů tvorby βamyloidu

Množství sloučenin obecného vzorce I uvedeného výše bylo testováno na jejich schopnost inhibice vytváření β-amyloidu v buňkách, obsahujících švédskou mutaci. Tato prohledávací analýza používala buňky (K293 - linie lidských ledvinových buněk), které byly stabilně transfektovány genem amyloidového prekursorového proteinu 751 (APP751), obsahujícího dvojitou mutaci Lys65iMet₆₅₂ na Asn₆5iLeu652 (při číslování APP751) způsobem, který byl popsán v publikaci mezinárodní patentové přihlášky č. 94/10569⁸ a v Citron a kol.¹¹. Tato mutace je obecně nazývána švédskou mutací a buňky, označené jako „293 751 SWE, byly vloženy na destičky Corning s 96 jamkami v množství 1,5-2,5 x 10⁴buněk na jamku v Dulbeccově minimálním esenciálním mediu s přídavkem 10% fetálního hovězího séra. Počet buněk je důležitý k tomu, aby bylo dosaženo ELISA výsledků pro βamyloid v lineární oblasti analýzy (přibližně od 0,2 do 2,5 ng na ml).

Po inkubaci přes noc při teplotě 37 °C v inkubátoru ekvilibrovaném 10% oxidem uhličitým byla média odstraněna a nahrazena 200 ml sloučeniny obecného vzorce I (lék), obsahující médium, na jamku pro dvouhodinové předběžné působení a buňky byly inkubovány výše uvedeným způsobem.

• · · · ·«» • · · · · « * • · · · · · · · · · • · · * · • 9« 9 9 9 9 99

119

Zásobní roztoky léku byly připraveny v 100% dimethylsulfoxidu, tak aby při konečné koncentraci léku, použité při zpracování, koncentrace dimethylsulfoxidu nepřekročila 0,5% a byla ve skutečnosti obvykle rovna 0,1%.

Na konci periody předběžného působení byla média opět odstraněna a nahrazena médiem, obsahujícím čerstvý lék výše uvedeným způsobem a buňky byly inkubovány po dobu dalších dvou hodin. Po tomto zpracování byly destičky centrifugovány v přístroji Beckman GPR při 1200 otáčkách za minutu po dobu pěti minut při teplotě okolí na peletové buněčné zbytky ze zpracovaného média. Z každé jamky bylo 100 ml zpracovaného média nebo jeho vhodného zředění přeneseno na ELISA destičku pokrytou protilátkou 266¹³proti aminokyselinám 13-28 β-amyloidového peptidu, která je popsána v publikaci mezinárodní patentové přihlášky č. 94/10569⁸ a uchováváno při teplotě 4 °C přes noc. ELISA test, používající označené protilátky 6C6¹³ proti aminokyselinám 1-16 β-amyloidového peptidu byl proveden následující den pro určení množství vytvořeného βamyloidového peptidu.

Cytotoxické účinky sloučenin byly měřeny modifikací způsobu, který popsali Hansen a kol.,¹². K buňkám, které zůstaly v tkáňové kultuře na destičce bylo přidáno 25 ml zásobního roztoku (5 mg/ml) 3, (4,5-dimethylthiazol-2-yl) 2,5-difenyltetrazolium bromidu (MTT) do konečné koncentrace 1 mg/ml. Buňky byly inkubovány při teplotě 37 °C po dobu jedné hodiny a buněčná aktivita byla zastavena přidáním stejného objemu MTT lýzového pufru (20% hmotn./obj.

• ·

9 99 9 ·

• * ·*

- 120 *··* • »· dodecylsulfátu sodného v 50% dimethylformamidu, pH 4,7). Úplná extrakce byla dosažena protřepáváním přes noc při teplotě okolí. Byl měřen rozdíl OD₅62nni a OD₆50nm v mikrodestičkové čtečce Molecular Device UV_max jako indikátor buněčné životaschopnosti.

Výsledky ELISA analýzy β-amyloidového peptidu byly upraveny podle standardní křivky a vyjádřeny jako ng/ml βamyloidového peptidu. Pro normalizaci na cytotoxicitu, byly tyto výsledky děleny výsledky MTT a vyjádřeny jako procento výsledku proti kontrolnímu vzorku bez léku. Všechny výsledky představují střední hodnotu a standardní odchylku z alespoň šesti opakovaných pokusů.

Testované sloučeniny byly analyzovány na aktivitu pro inhibici vytváření β-amyloidového peptidu v buňkách, používajíce tento test. Výsledky tohoto testu ukazují, že každá ze sloučenin podle předloženého vynálezu, která byla testována, snižuje vytváření β-amyloidového peptidu o alespoň 30% ve srovnání s kontrolním vzorkem.

Příklad 83

In vivo potlačení uvolňování a/nebo syntézyβ-amyloidu

Tento příklad ilustruje, jak sloučeniny podle předloženého vynálezu mohou být testovány na in vivo potlačení uvolňování a/nebo syntézy β-amyloidu. Pro tyto experimenty byly použity 3 až 4 měsíce staré PDAPP myši [Games a kol., (1995) Nátuře 373:523-527]. V závislosti na tom, která

• · · 0 ·

0 0 · 0 · · · • > · 0 0 0 «

0 0 ·· 0·0 ·00

9 · · · • 000 00 ·* ··

- 121 sloučenina byla testována, byla sloučenina obvykle připravena s koncentrací 5 nebo 10 mg/ml. Vzhledem k nízké rozpustnosti sloučenin, mohly být podávány s různými vehikuly, jako je kukuřičný olej (Safeway, South San Francisco, CA);. 10% EtOH v kukuřičném oleji (Safeway); 2hydroxypropyl-b-cyklodextrin (Research Biochemicals International, Natick MA); a karboxymethyl-celulóza (Sigma Chemical Co., St. Louis MO). Konkrétně pro příklad 141 byla vehikulem karboxymethyl-celulóza (Sigma).

Myším byla podána dávka subkutánně pomocí jehly velikosti 26 a po 3 hodinách byla zvířata usmrcena CO₂ narkózou a krev byla odebrána srdeční punkcí, používajíce 1 cc 25G 5/8 tuberkulinovou stříkačku/jehlu, potřenou roztokem 0,5 M EDTA, pH 8,0. Krev byla vložena do Becton-Dickinsonovy vakuové trubice, obsahující EDTA a odstřeďovány po dobu 15 minut při 1500 g a při teplotě 5 °C. Potom byly odebrány myší mozky a kortex a hippocampus byly disektovány a uloženy na led.

1. Mozkový test

Pro přípravu hippocampální a kortikální tkáně pro enzymově vázaný imunosorbentní test (ELISA) byla každá oblast mozku homogenizována v 10 objemech ledového guanidinového pufru (5,0 M guanidin-HCl, 50 mM Tris-HCl, pH 8,0) používajíce motorizovaný drtič Kontes (Fisher, Pittsburgh PA) . Homogenáty byly jemně homogenizovány na rotující platformě po dobu tří až čtyř hodin při teplotě okolí a uchovávány při teplotě -20 °C kvantitativním stanovením β-amyloidu.

- 122 « · · · • · · · · · • · · · · * ·> ι·» « * · * * » · »· ·* ··

Mozkové homogenáty byly zředěny 1:10 ledovým kaseinovým pufrem [0,25% kaseinu, fosforečnanově pufrovaný fyziologický roztok (PBS), 0,05% azidu sodného, 20 mg/ml aprotininu, 5 mM EDTA, pH 8,0, 10 mg/ml leupeptinu], čímž se snížila konečná koncentrace guanidinu na 0,5 M před centrifugací při 16, 000 g po dobu 20 minut při teplotě 4 °C. Byly připraveny β-amyloidové standardy (aminokyseliny 1-40 nebo 1-42), takže konečná kompozice se rovnala 0,5 M guanidinu v přítomnosti 0,1% albuminu hovězího séra (BSA).

Totální β-amyloidová sendvičová ELISA, určující jak βamyloid (aminokyseliny 1-40) tak i β-amyloid (aminokyseliny 1—42) spočívala ve dvou monoklonálních protilátkách (mAb) proti β-amyloidu. Zachycovací protilátka, 266¹³, je specifická na aminokyseliny 13 -28 β-amyloidu. Protilátka 3D6¹⁴, která je specifická na aminokyseliny 1-5 β-amyloidu, byla biotinylována a sloužila jako druhá (indikační) protilátka v testu. 3D6 biotinylační procedura používá protokol výrobce (Pierce, Rockford IL) pro NHS-biotinové označení imunoglobulinů s výjimkou, že byl použit pufr 100 mM hydrogenuhličitan sodný, pH 8,5. 3D6 protilátka nerozpoznává vylučovaný amyloidový prekursorový protein (APP) nebo APP plné délky, ale detekuje pouze β-amyloidové druhy aspargové kyseliny aminového konce. Test měl dolní mez citlivosti přibližně 50 pg/ml (11 pM) a nevykazoval žádnou křížovou reaktivitu na endogenní myší β-amyloidový peptid v koncentracích až do 1 ng/ml.

Konfigurace sendvičového testu ELISA určujícího hladinu β• · « • · * » · · • ·

123 amyloidu (aminokyseliny 1-42) používá monoklonální protilátku 21F12¹⁴ (která rozpoznává aminokyseliny 33-42 βamyloidu) jako první (zachytávací) protilátku. Biotinylovaná 3D6 je také indikační protilátka v tomto testu, který má dolní mez citlivosti přibližně 125 pg/ml (28 pM).

266 a 21F12 zachytávací monoklonální protilátky byly naneseny v koncentraci 10 mg/ml na 96 jamkové imunotestovací destičky (Costar, Cambidge MA) přes noc při teplotě okolí. Destičky byly potom odsáty a blokovány 0,25% lidským sérovým albuminem v PBS pufru po dobu alespoň 1 hodiny při teplotě okolí, potom uchovávány vysušené při teplotě 4 °C až do použití. Destičky byly před použitím rehydratovány promývacím pufrem (Tris-pufrovaný fyziogický roztok, 0,05% Tween 20). Vzorky a standardy byly přidány na destičky a inkubovány přes noc při teplotě 4 °C. Destičky byly promývány 3 krát promývacím pufrem mezi každým krokem testu. Biotinylované 3D6, zředěné na 0,5 mg/ml v kaseinovém inkubačním pufru (0,25% kasein, PBS, 0,05% Tween 20, pH 7,4) byly inkubovány v jamkách po dobu 1 hodiny při teplotě okolí. Avidin-HRP (Vector, Burlingame CA) zředěný 1:4000 v kaseinovém inkubačním pufru byl přidán do jamek po dobu 1 hodiny při teplotě okolí. Byl přidán kolorimetrický substrát, Slow TMB-ELISA (Pierce, Cambridge MA) a ponechán reagovat po dobu 15 minut, poté byla enzymatická reakce zastavena přidáním 2 N H2SO4. Reakční produkt byl kvantifikován, používajíce zařízení Molecular Devices V_max(Molecular Devices, Menlo Park CA) , měřením rozdílu absorpce při 450 nm a 650 nm.

- 124 • * e · φ

• • e · ·

0 00 00 9 9 9 · 9 · · · · · *

9 9 99 9 9··

9· · «

9 9 9 · · ·

2. Krevní test

EDTA plasma byla zředěna 1: 1 ve vzorkovacím ředidle (0,2 g/1 fosforečnan sodný . H₂0 (monobazický), 2,16 g/1 fosforečnan sodný . 7H₂O (dibázický), 0,5 g/1 thimerosal, 8,5 g/1 chlorid sodný, 0,5 ml TritonX-405, 6,0 g/1 hovězí sérový albumin prostý globulinu a voda). Vzorky a standardy ve vzorkovacím ředidle byly testovány používajíce totální b-amyloidový test (266 zachytávací protilátky /3D6 indikační protilátky), popsaný výše pro mozkový test s výjimkou že bylo použito vzorkovací ředidlo namísto kaseinového ředidla.

Ve srovnání s výše uvedeným popisem mohou být odborníky provedeny různé modifikace a změny kompozic a způsobů. Všechny takové modifikace spadají do rozsahu připojených patentových nároků.

- 125

SEZNAM SEKVENCÍ (1) OBECNÉ INFORMACE:

(i) PŘIHLAŠOVATELÉ:

ATHÉNA NEUROSCIENCES, INC.

ELI LILLY & COMPANY

JING WU

EUGENE D. THORSETT JEFFREY S. NISSEN THOMAS E. MABRY LEE H. LATIMER VARGHESE JOHN

LAWRENCE Y. FANG JAMES E. AUDIA (ii) NÁZEV VYNÁLEZU:

N-(ARYL/HETEROARYLACETYL)

ESTERY AMINOKYSELIN, FARMACEUTICKÉ KOMPOZICE, KTERÉ JE OBSAHUJÍ A ZPŮSOBY INHIBICE UVOLŇOVÁNÍ β-AMYLOIDOVÉHO PEPTIDU A/NEBO JEHO

SYNTÉZY POUŽITÍM TAKOVÝCH SLOUČENIN (iii) POČET SEKVENCÍ: 1 (iv) ADRESA PRO KORESPONDENCI:

(A) ADRESÁT: Burns, Doane, Swecker & Mathis, LLP (B) ULICE: P.O. Box 1404 (C) MĚSTO: Alexandria

- 126

• · ♦ · • ♦ * · • · · · · · • · * ·- «» (D) STÁT: Virginia (E) ZEMĚ: U.S.A.

(F) PSČ: 22313-1404 (v) POČÍTAČOVĚ ZPRACOVATELNÁ FORMA:

(A) DRUH MÉDIA: Pružný disk (B) POČÍTAČ: IBM PC compatible (C) OPERAČNÍ SYSTÉM: PC-DOS/MS-DOS (D) SOFTWARE:Patentln Release #1,0,

Version #1. 30 (vi) DATA SOUČASNÉ PŘIHLÁŠKY:

(A) PŘIHLÁŠKA ČÍSLO: Nepřiděleno (B) DATUM PODÁNÍ: Nepřiděleno (C) KLASIFIKACE:

(vii) DATA PŘEDCHOZÍ PŘIHLÁŠKY:

(A) U.S. PATENTOVÁ PŘIHLÁŠKA Č. 08/754,895 (B) DATUM PODÁNÍ: 22. listopad 1996 (viii) INFORMACE O PATENTOVÉM ZÁSTUPCI:

(A) JMÉNO: Swiss, Gerald F.

(B) REGISTRAČNÍ ČÍSLO: 30,113 (C) REFERENCE/ČÍSLO DOKUMENTU: 002010-051 (ix) TELEKOMUNIKAČNÍ INFORMACE:

(A) TELEFON: 650-77377-854-7400 (B) TELEFAX: 650-77377-854-8275 (2) INFORMACE PRO SEQ ID NO:1:

127 • · · · » · · » t · • · · · » « « · • > · · · * · · · · » · • · * · · · « · · · · · · · ·* · · (i) VLASTNOSTI SEKVENCE:

(A) DÉLKA: 43 aminokyselin (B) TYP: peptid (D) TOPOLOGIE: lineární (ii) TYP MOLEKULY: peptid

(xi;	1 POPIS	SEKVENCE: SEQ ID	NO 1:
Asp 1	Ala Glu	Phe Arg His Asp 5	Ser Gly Tyr Glu Val His His 10
Gin 15	Lys Leu	Val Phe Phe Ala 20	Glu Asp Val Gly Ser Asn Lys 25
Gly 30	Ala Ile	Ile Gly Leu Met 35	Val Gly Gly Val Val Ile Ala 40

Thr

Zastupuje:

dr. Otakar Švorčík

Claims

00 *· · yl, thien-3-yl, benzothiazol-4-yl, 2-fenylbenzoxazol-5-yl, furan2-yl, benzofuran-2-yl, benzothiofen-3-yl, 2-chlorthien-5-yl, 3methylisoxazol-5-yl, 2- (fenylthio)thien-5-yl, 6-methoxythiofen-2yl, 3-fenyl-l,2,4-thiooxadiazol-5-yl a 2-fenyloxazol-4-yl.

63. Farmaceutická kompozice podle nároku 47, vyznačující se tím, že R² je zvolen ze souboru, zahrnujícího alkyl, obsahující od 1 do 4 atomů uhlíku, alkylalkoxy, obsahující od 1 do 4 atomů uhlíku, fenyl a alkylthioalkoxy, obsahující od 1 do 4 atomů uhlíku.

64. Farmaceutická kompozice podle nároku 63, vyznačující se tím, že R² je zvolen ze souboru, zahrnujícího methyl, ethyl, n-propyl, iso-propyl, n-butyl, iso-butyl, -CH2CH2SCH3 a fenyl.

65. Farmaceutická kompozice podle nároku 47, vyznačující se tím, že X' a X představuji oba atom vodíku a X představuje atom kyslíku.

66. Farmaceutická kompozice podle nároku 65, vyznačující se tím, že R³ je zvolen ze souboru, zahrnujícího methyl, ethyl, isopropyl, n-propyl, n-butyl, iso-butyl, cyklopentyl, allyl, isobut-2-enyl, 3-methylpentyl, -CH₂-cyklopropyl, -CH₂-cyklohexyl, CH₂~(3-tetrahydrofuranyl), -CH₂-thien-2-yl, -CH₂-(1methyl)cyklopropyl, -CH₂-thien-3-yl, -CH₂-C(0)O-terc.-butyl, -CH₂C(CH₃)₃, -CH₂CH (CH₂CH₃) 2, -2-methylcyklopentyl, -cyklohex-2-enyl, CH[CH(CH₃)₂]COOCH₃, -CH₂CH₂N(CH₃)₂, -CH₂C(CH₃)=CH₂ a -CH₂CH=C(CH₃)₂.

67. Farmaceutická kompozice podle nároku 47, vyznačující se tím, že X' a X představují oba atom vodíku a X představuje atom síry.

68. Farmaceutická kompozice podle nároku 67, vyznačující se tím, že R³ je zvolen ze souboru, zahrnujícího íso-but-2-enyl a isobutyl .

- 152

69. Farmaceutická kompozice podle nároku 47, vyznačující se tím, že sloučenina obecného vzorce I je zvolena ze souboru, zahrnujícího:

N-(fenylacetyl)alanin, iso-butylester

N-(3-fenylpropionyl)alanin, iso-butylester

N-(3-methylpentanoyl)alanin, iso-butylester

N-[(4-chlorfenyl)acetyl]alanin, iso-butylester

N-[(3,4-dichlorfenyl)acetyl]alanin, iso-butylester

N-[(3-pyridyl)acetyl]alanin, iso-butylester

N- [ (1-riaftyl) acetyl] alanin, iso-butylester

N-[(2-naftyl)acetyl]alanin, iso-butylester

N-(4-fenylbutanoyl)alanin, iso-butylester

N-(5-fenylpentanoyl)alanin, iso-butylester

N-[(4-pyridyl)acetyl]alanin, iso-butylester

2-[(3,4-dichlorfenyl)acetamido]máselná kyselina, iso-butylester

2-[(3-methoxyfenyl)acetamido]máselná kyselina, iso-butylester

2-[(4-bromfenyl)acetamido]máselná kyselina, iso-butylester 2-[(3-chlorfenyl)acetamido]máselná kyselina, iso-butylester 2-[(3-fluorfenyl)acetamido]máselná kyselina, iso-butylester 2-[(benzothiazol-4-yl)acetamido]máselná kyselina, iso-butylester • · · • · ·· · • · · · ·

- 153 • · « · · « • · · · · · ι ······· · · 1 • · · · · I ·· · ·· ··

2-[(2-methylfenyl)acetamido]máselná kyselina, iso-butylester 2-[(2-fluorfenyl)acetamido]máselná kyselina, iso-butylester 2-[(4-fluorfenyl)acetamido]máselná kyselina, iso-butylester 2-[(3-bromfenyl)acetamido]máselná kyselina, iso-butylester 2-[(3-trifluormethylfenyl)acetamido]máselná kyselina, iso-butylester

2-[(2-thienyl)acetamido]máselná kyselina, iso-butylester

2-(fenylacetamido)máselná kyselina, iso-butylester

N-(fenylacetyl)valin, 2-methylbutylester

N-(fenylacetyl)methionin, iso-butylester

N-(fenylacetyl)leucin, iso-butylester

N-[(3-chlorfenyl)acetyl]alanin, 3-methylbut-2-enylester

N-[(3-chlorfenyl)acetyl]alanin, cyklopropylmethylester

N-[(3-chlorfenyl)acetyl]alanin, 2-thienylmethylester

N-[(3-chlorfenyl)acetyl]alanin, (1-methylcyklopropyl)methylester

N-[(3-chlorfenyl)acetyl]alanin, 3-thienylmethylester

N-[(3-chlorfenyl)acetyl]alanin, 2-methylcyklopentylester

N-[(3-chlorfenyl)acetyl]alanin, 2-methylprop-2-enylester

N-[(3-chlorfenyl)acetyl]alanin, cyklohex-2-enylester

N-[(2-fenylbenzoxazol-5-yl)acetyl]alanin, iso-butylester

N-[(3-methylthiofenyl)acetyl]alanin, iso-butylester

N-4-[(2-furyl)acetyl]alanin, iso-butylester

N-[(benzofuran-2-yl)acetyl]alanin, iso-butylester

N-[(benzothiofen-3-yl)acetyl]alanin, iso-butylester

N-[(2-chlor-5-thienyl)acetyl]alanin, iso-butylester

N-[(3-methyl-isoxazol-5-yl)acetyl]alanin, iso-butylester N-[(2-fenylthiothienyl)acetyl]alanin, iso-butylester N-[(6-methoxybenzothiofen-2-yl)acetyl]alanin, iso-butylester

N-[(3-fenyl-l,2,4-thiadiazol-5-yl)acetyl]alanin, iso-butylester

N-[(2-fenyloxazol-4-yl)acetyl]alanin, iso-butylester

N-[(3-methylfenyl)acetyl]alanin, iso-butylester

N-[(2,5-difluorfenyl)acetyl]alanin, iso-butylester

N-[(3,5-diflurofenyl)acetyl]alanin, iso-butylester ·· φφ φφ · φ φ ΦΦΦ φ ΦΦΦ φ ΦΦΦ • · ΦΦΦ φ φφφφ

ΦΦΦ ΦΦΦ

ΦΦ·ΦΦ φφ φ

- 154

Ν-[(3-thienyl)acetyl]alanin, iso-butylester

Ν-[(4-methylfenyl)acetyl] alanin, iso-butylester

N-(fenylacetyl)alanin, (1-methoxykarbonyl)iso-butylester

N-[(3-nitrofenyl)acetyl]alanin, iso-butylester

N-[(3,5-difluorfenyl)acetyl]alanin, ethylester

N-[(3-nitrofenyl)acetyl]methionin, ethylester

N-[(3-chlorfenyl)acetyl]alanin, iso-butylester

N-[(3-chlorfenyl)acetyl]alanin,

2-(N,N-dimethylamino)ethylester

000 0 · · ·

0 000 0 0000

0 0 0 · ·

·· · ··

JUDr. Otakar Švorčík - 128 ·· ·· .. · .. .. — · · ··· ·.·. ···· · ··· « ·» , advokát * · · · · ······· · · · • · · · · · · · · · Hálkova 120 00, Praha 2 ···· ·· ·· β ·· ·· PAT E Ν T OVÉ NÁROKY: 1. Sloučenina obecného vzorce III: X v X” 0 \ / H II . HI Ύ f R2 XR³ /

ve kterém

R¹ je zvolen ze souboru, zahrnujícího

a) alkyl, alkenyl, alkcykloalkyl, fenyl-(R)_m,-, naftyl-(R) _m, kde R je alkylenová skupina s 1 až 8 atomy uhlíku a m je celé číslo, které se rovná 0 nebo 1, cykloalkyl, cykloalkenyl, 3-pyridyl, 4pyridyl a heteroaryl, jiný než 3- a 4-pyridyl, se 3 až 10 atomy a 1 až 4 heteroatomy, zvolenými ze souboru, zahrnujícího atom kyslíku, síru a atom dusíku, kde heteroarylová skupina je popřípadě substituována 1 až 3 substituenty, zvolenými ze souboru, zahrnujícího alkyl, alkoxy, aryl, aryloxy, atom halogenu, skupinu nitro, thioalkoxy a thioaryloxy s tou podmínkou, že pokud takový heteroaryl obsahuje alespoň jeden dusíkový heteroatom, pak také obsahuje alespoň jeden kyslíkový a/nebo sírový heteroatom;

(b) substituovanou fenylovou skupinu obecného vzorce II:

- 129 ve kterém

R^b a R^b' jsou nezávisle zvoleny ze souboru, zahrnujícího atom vodíku, alkyl, alkoxy, aryl, skupinu kyano, cykloalkyl, atom halogenu, heteroaryl, heterocyklický systém, skupinu nitro, trihalomethyl, thioalkoxy, thioaryloxy, thioheteroaryloxy a C(O)R⁴, kde R⁴ je zvolen ze souboru, zahrnujícího alkyl, aryl, alkoxy a aryloxy; a

R^c je zvolen ze souboru, zahrnujícího atom vodíku, alkyl, aryl, skupinu kyano, atom halogenu, skupinu nitro nebo R^b a R^c jsou k sobě kondenzovány a vytvářejí methylendioxy kruh s fenylovým kruhem; a pokud R^b a/nebo R^b' a/nebo R^c je atom fluoru, atom chloru, atom bromu a/nebo skupina nitro, pak R^a a/nebo R^a' mohou také představovat atom chloru; a (c) 1- nebo 2-naftyl-(R)_m-, kde R je alkylenová skupina obsahující 1 až 8 atomů uhlíku a m je celé číslo, které se rovná 0 nebo 1, substituovaný v poloze 5, 6, 7 a/nebo 8 jedním až čtyřmi substituenty, zvolenými ze souboru, zahrnujícího alkyl, alkoxy, atom halogenu, skupinu kyano, skupinu nitro, trihalomethyl a thioalkoxy;

R³ je zvolen ze souboru, zahrnujícího - (CH₂) _nCR¹⁰R⁵R⁶, kde n je celé číslo, které se rovná 0, 1 nebo 2, R⁵ a R⁶ jsou nezávisle

- 130 zvoleny ze souboru, zahrnujícího atom vodíku, alkyl, alkenyl, aryl, heteroaryl, heterocyklický systém, -NR⁷R⁸, kde R⁷ a R⁸ jsou nezávisle na sobě atom vodíku nebo alkyl a -COOR⁹, kde R⁹představuje alkyl a kde dále R⁵ a R⁶ mohou být spojeny a vytvářet cykloalkylovou skupinu, cykloalkenylovou skupinu, arylovou skupinu, heteroarylovou skupinu a heterocyklickou skupinu a pokud R⁵ a R⁶ nejsou spojeny, aby vytvářely arylovou nebo heteroarylovou skupinu, pak R¹⁰ je zvolen ze souboru, zahrnujícího atom vodíku a alkyl s tou podmínkou, že pokud n je rovno nule, potom R¹⁰představuje atom vodíku a pokud n je větší než nula a R⁵ a R⁵ jsou spojeny, aby vytvářely arylovou nebo heteroarylovou skupinu, potom R¹⁰ představuje vazbu uvnitř této skupiny;

X představuje atom kyslíku nebo atom síry;

X' představuje atom vodíku, skupinu hydroxy nebo atom fluoru;

pokud R¹ představuje fenyl, R² představuje -CH (CH3) CH2CH3, X představuje atom kyslíku a X' a X představují atom vodíku, potom R³ nepředstavuje -CH2CH3 nebo -CH2CH (CH₃) ₂;

pokud R¹ představuje fenyl, R³ představuje -CH2CH (CH3) 2, X představuje atom kyslíku a X' a X představují atom vodíku, potom R² nepředstavuje -CH(CH3)₂, pokud R¹ představuje pyrid-3-yl, R² představuje ethyl, X představuje atom kyslíku a X' a X představují atom vodíku, potom R³ nepředstavuje -CH₂CH (CH₃) 2, pokud R¹ představuje indoxazin-3-yl, 2,4-dimethylthiazol-5-yl, 4methyl-1,2,5-thíooxadizol-3-yl nebo 3,5-di(trifluormethyl)fenyl, R² představuje methyl, X představuje atom kyslíku a X' a X představují atom vodíku, potom R³ nepředstavuje -CH2CH (CH3) 2, a pokud R¹ představuje -CH2-fenyl, R³ představuje -CH2CH3, X představuje atom kyslíku a X' a X představují atom vodíku, potom R² nepředstavuje -CH2CH (CH₃) 2, • · ·

131 a navíc s další podmínkou, že je vyloučena následující známá sloučenina:

ethylester N-(fenylacetyl)methioninu.

2. Sloučenina podle nároku 1, nesubstituovanou fenylovou skupinu.

ve které

R¹ představuje

3. Sloučenina podle nároku 1, ve nesubstituovanou naftylovou skupinu, zahrnujícího 1-naftyl a 2-naftyl.

které R¹ představuje zvolenou ze souboru,

4. Sloučenina podle nároku 1, ve které R¹substituovanou fenylovou skupinu obecného vzorce II.

představuje

5. Sloučenina podle nároku 4, ve které substituovaná fenylová skupina je definována následujícím způsobem:

(a) monosubstituované fenyly, které mají jednoduchou substituci v poloze 2, 3 nebo 4, kde každý z jednotlivých substituentů je určen odpovídajícími skupinami R^a, R^b a R^c;

b) disubstituované fenyly, které mají dva substituenty v polohách

2.3, v polohách 2,4, v polohách 2,5, v polohách 2,6, v polohách

3.4, v polohách 3,5 nebo v polohách 3,6, kde každý ze substituentů je určen odpovídajícími skupinami R¹, R^a', R^b, R^b' a R^c; a (c) trisubstituované fenyly, které mají tři substituenty v polohách 2,3,4, v polohách 2,3,5, v polohách 2,3,6, v polohách 3,4,5 a v polohách 3,4,6 a kde opětně každý ze substituentů je určen odpovídajícími skupinami R^a, R^a', R^b, R^b' a R^c.

6. Sloučenina podle nároku 5, ve které substituované fenylové skupiny jsou zvoleny ze souboru, zahrnujícího 4-fluorfenyl, 4chlorfenyl, 4-bromfenyl, 4-nitrofenyl, 4-methylfenyl, 3methoxyfenyl, 3-nitrofenyl, 3-fluorfenyl, 3-chlorfenyl, 3- 132 » · · • · • · ·· bromfenyl, 3-thiomethoxyfenyl, 3-methylfenyl, 3trifluormethylfenyl, 2-hydroxyfenyl, 2-methylfenyl, 2-fluorfenyl, 3,4-dichlorfenyl, 3,4-methylendioxyfenyl, 3,5-difluorfenyl, 3,5dichlorfenyl, 2,4-dichlorfenyl a 2,5-difluorfenyl.

7. Sloučenina podle nároku 1, ve které R¹ představuje skupinu fenyl-(R)_m-, kde R je alkylen, obsahující od 1 do 8 atomů uhlíku a m je rovno 1.

8. Sloučenina podle nároku 7, ve které R¹ je zvolen ze souboru, zahrnujícího benzyl, 3-fenyl-n-propyl a 4-fenyl-n-butyl.

9. Sloučenina podle nároku 1, ve které R¹ je zvolen ze souboru, zahrnujícího skupiny alkyl, alkenyl, alkcykloalkyl, cykloalkyl a cykloalkenyl.

10. Sloučenina podle nároku 9, ve které R¹ představuj e alkyl. 11. Sloučenina podle nároku 9, ve které R¹ představuj e cykloalkyl 12. Sloučenina podle nároku 9, ve které R¹ představuj e alkenyl.

13. Sloučenina podle nároku 9, ve které R¹ představuje cykloalkenyl.

14. Sloučenina podle nároku 9, ve které alkylové, cykloalkylové, alkcykloalkylové, alkenylové a cykloalkenylová skupiny R¹ jsou zvoleny ze souboru, zahrnujícího sek.-butyl, cyklopropyl, cyklobutyl, cyklohexyl, cyklopentyl, cyklohex-l-enyl, -CH₂cyklopropyl, -CH₂-cyklobutyl, -CH₂-cyklohexyl, -CH₂-cyklopentyl, CH₂CH₂-cyklopropyl, -CH₂CH₂-cyklobutyl, -CH₂CH₂-cyklohexyl a CH₂CH₂-cyklopentyl.

15. Sloučenina podle nároku 1, ve které R¹ je zvolen ze souboru, zahrnujícího heteroarylové a substituované heteroarylové skupiny.

♦ · · • · • Β

Β Β

Β · • · • · · · Β · · · • · · • · ·

- 133 thien-3-yl, furan-2-yl,

16. Sloučenina podle nároku 15, ve které heteroarylové a substituované heteroarylové skupiny R¹ jsou zvoleny ze souboru, zahrnujícího pyrid-3-yl, pyrid-4-yl, thien-2-yl, benzothiazol-4-yl, 2-fenylbenzoxazol-5-yl, benzofuran-2-yl, benzothiofen-3-yl, 2-chlorthien-5-yl, 3methylisoxazol-5-yl, 2-(fenylthio)thien-5-yl, 6-methoxythiofen-2yl, 3-fenyl-l,2,4-thiooxadiazol-5-yl a 2-fenyloxazol-4-yl.

17. Sloučenina podle nároku 1, ve které R² je zvolen ze souboru, zahrnujícího alkyl, obsahující od 1 do 4 atomů uhlíku, alkylalkoxy, obsahující od 1 do 4 atomů uhlíku, fenyl a alkylthioalkoxy, obsahující od 1 do 4 atomů uhlíku.

18. Sloučenina podle nároku 17, ve které R² je zvolen ze souboru, zahrnujícího methyl, ethyl, n-propyl, iso-propyl, n-butyl, isobutyl, fenyl a -CH2CH2SCH3.

19. Sloučenina podle nároku 1, ve které X' a X představují oba atom vodíku a X představuje atom kyslíku.

20. Sloučenina podle nároku 19, ve které R³ je zvolen ze souboru, zahrnujícího methyl, ethyl, iso-propyl, n-propyl, n-butyl, isobutyl, cyklopentyl, allyl, iso-but-2-enyl, 3-methylpentyl, -CH₂cyklopropyl, -CH₂-cyklohexyl, -CH₂-(3-tetrahydrofuranyl), -CH₂thien-2-yl, ~CH₂-(1-methyl)cyklopropyl, -CH₂-thien-3-yl, -CH₂C(O)O-terc. -butyl, -CH₂-C (CH₃) ₃, -CH₂CH (CH₂CH₃) 2, -2methylcyklopentyl, -cyklohex-2-enyl, -CH[CH(CH₃) ₂] COOCH₃, CH₂CH₂N (CH₃) 2, -CH₂C (CH₃)=CH₂ a -CH₂CH=C (CH₃) 2 .

21. Sloučenina podle nároku 1, ve které X' a X představují oba atom vodíku a X představuje atom síry.

22. Sloučenina podle nároku 21, ve které R³ je zvolen ze souboru, zahrnujícího iso-but-2-enyl a iso-butyl.

• · ·

- 134 ► · · • · • » «· • · • · · • · · • · φ « · ·

23. Sloučenina podle nároku 1, ve které sloučenina obecného vzorce I je zvolena ze souboru, zahrnujícího:

N-(fenylacetyl)alanin, iso-butylester

N-(3-fenylpropionyl)alanin, iso-butylester

N-(3-methylpentanoyl)alanin, iso-butylester

N-[(4-chlorfenyl)acetyl]alanin, iso-butylester

N-[(3,4-dichlorfenyl)acetyl]alanin, iso-butylester

N- [ (3-pyridyl)acetyl]alanin, iso-butylester

N-[(1-naftyl)acetyl]alanin, iso-butylester

N-[ (2-naftyl)acetyl]alanin, iso-butylester

N- (4-fenylbutanoyl)alanin, iso-butylester

N- (5-fenylpentanoyl)alanin, iso-butylester

N-[(4-pyridyl)acetyl]alanin, iso-butylester

2-[(3,4-dichlorfenyl)acetamido]máselná kyselina, iso-butylester

2-[(3-methoxyfenyl)acetamido]máselná kyselina, iso-butylester

2-[(4-nitrofenyl)acetamido]máselná kyselina, iso-butylester

2-[(3,4-methylendioxyfenyl)acetamido]máselná kyselina, iso-butylester

2-[(thien-3-yl)acetamido]máselná kyselina, iso-butylester

2-((4-chlorfenyl)acetamido]máselná kyselina, iso-butylester 2-[(3-nitrofenyl)acetamido]máselná kyselina, iso-butylester 2-[(2-hydroxyfenyl)acetamido]máselná kyselina, iso-butylester

2-[(2-naftyl)acetamido]máselná kyselina, iso-butylester

2-[(2,4-dichlorfenyl)acetamido]máselná kyselina, iso-butylester

2-[(4-bromfenyl)acetamido]máselná kyselina, iso-butylester 2-[(3-chlorfenyl)acetamido]máselná kyselina, iso-butylester 2-[(3-fluorfenyl)acetamido]máselná kyselina, iso-butylester 2-[(benzothiazol-4-yl)acetamido]máselná kyselina,

135 ·· ·· 4 » · · Φ • ··· · • · · · · • · Φ Φ » · · · · · I

ΦΦΦΦ Φ φ Φ Φ iso-butylester

2-[(2-methylfenyl)acetamido]máselná kyselina, iso-butylester

N-(fenylacetyl)methionin, iso-butylester

N-(fenylacetyl)leucin, iso-butylester

N-[(benzofuran-2-yl)acetyl]alanin, iso-butylester

N-[(benzothiofen-3-yl)acetyl]alanin, iso-butylester N-[(2-chlor-5-thienyl)acetyl]alanin, iso-butylester N-[(3-methyl~isoxazol-5~yl)acetyl]alanin, iso-butylester N-[(2-fenylthiothienyl)acetyl]alanin, iso-butylester N-[(6-methoxybenzothiofen-2-yl)acetyl]alanin, iso-butylester

N-[(3-fenyl-l,2,4-thiadiazol-5-yl)acetyl]alanin, iso-butylester

N-[(2-fenyloxazol-4-yl)acetyl]alanin, iso-butylester

136 φ φφφ φ φφ φ φ φ φφφφ φ φ φφ φ φ φ φ φφφφ φ φ φ φ φ φφ

Ν-[(3-methylfenyl)acetyl]alanin, iso-butylester

Ν- [ (2,5-difluorfenyl)acetyl]alanin, iso-butylester

N-[(3,5-diflurofenyl)acetyl]alanin, iso-butylester

N-[(3-thienyl)acetyl]alanin, iso-butylester

N-[(4-methylfenyl)acetyl] alanin, iso-butylester

N-(fenylacetyl)alanin, (1-methoxykarbonyl)iso-butylester

N-[(3-nitrofenyl)acetyl]alanin, iso-butylester

N-[(3,5-difluorfenyl)acetyl]alanin, ethylester

N-[(3-nitrofenyl)acetyl]methionin, ethylester

N-[(3-chlorfenyl)acetyl]alanin, iso-butylester

N- [ (3-chlorfenyl)acetyl]alanin,

2-(N,N-dimethylamino)ethylester

2-[(3,5-dichlorfenyl)acetamido]hexanová kyselina, methylester

N-[(3,5-dichlorfenyl)acetyl]alanin, iso-butylester

N-(cyklohexylacetyl)alanin, iso-butylester

N-(cyklopentylacetyl)alanin, iso-butylester

N-[(cyklohex-l-enyl)acetyl]alanin, iso-butylester

N-[(3-chlorfenyl)acetyl]alanin, 3-methylbut-2-enylthioester

N-[(2-fenyl)-2-fluoracetyl]alanin, ethylester

N-(3,5-difluorfenylacetyl)fenylglycin, methylester

N-(3,5-difluorfenylacetyl)fenylglycin, iso-butylester

N-(cyklopentylacetyl)fenylglycin, methylester

N-(cyklopentylacetyl)alanin, methylester

N-(cyklopropylacetyl)fenylglycin, methylester

N-(cyklopropylacetyl)alanin, methylester

N-[(3-nitrofenyl)acetyl]methionin, iso-butylester.

Μ 4 • 4 4 4

4 · 4 • 4 ·· · « 4 4 4 4

4 4 4 4

- 137

24. Látka obecného vzorce I

XR³

4 4444 4 pro použití jako léčivo;

kdy v obecném vzorci I:

R¹ je zvolen ze souboru, zahrnujícího

a) alkyl, alkenyl, alkcykloalkyl, fenyl-(R)_m,-, naftyl-(R) _m-, kde R je alkylenové skupina s 1 až 8 atomy uhlíku a m je celé číslo, které se rovná 0 nebo 1, cykloalkyl, cykloalkenyl, 3-pyridyl, 4pyridyl a heteroaryl, jiný než 3- a 4-pyridyl, se 3 až 10 atomy a 1 až 4 heteroatomy, zvolenými ze souboru, zahrnujícího atom kyslíku, síru a atom dusíku, kde heteroarylové skupina je popřípadě substituována 1 až 3 substituenty, zvolenými ze souboru, zahrnujícího alkyl, alkoxy, aryl, aryloxy, atom halogenu, skupinu nitro, thioalkoxy a thioaryloxy s tou podmínkou, že pokud takový heteroaryl obsahuje alespoň jeden dusíkový heteroatom, pak také obsahuje alespoň jeden kyslíkový a/nebo sírový heteroatom;

(b) substituovanou fenylovou skupinu obecného vzorce II:

(R)m — ve kterém ♦ · · • · • · • · • · • ···· · · • · · ·· · • · · • ·

138

R^c je zvolen ze souboru, zahrnujícího atom vodíku, alkyl, aryl, skupinu kyano, atom halogenu, skupinu nitro nebo R^b a R^c jsou k sobě kondenzovány a vytvářejí methylendioxy kruh s fenylovým kruhem; a pokud R^b a/nebo R^b' a/nebo R^c je atom fluoru, atom chloru, atom bromu a/nebo skupina nitro, pak R^a a/nebo R^a' mohou také představovat atom chloru; a (c) 1- nebo 2-naftyl- (R)_m- substituovaný v poloze 5, 6, 7 a/nebo

8 jedním až čtyřmi substituenty, zvolenými ze souboru, zahrnujícího alkyl, alkoxy, atom halogenu, skupinu kyano, skupinu nitro, trihalomethyl a thioalkoxy, kde R je alkylenová skupina obsahující 1 až 8 atomů uhlíku a m je celé číslo, které se rovná 0 nebo 1;

R³ je zvolen ze souboru, zahrnujícího - (0¾)_nCR¹⁰R⁵R⁶, kde n je celé číslo, které se rovná 0, 1 nebo 2, R⁵ a R⁶ jsou nezávisle zvoleny ze souboru, zahrnujícího atom vodíku, alkyl, alkenyl, aryl, heteroaryl, heterocyklický systém, -NR⁷R⁸, kde R⁷ a R⁸ jsou nezávisle na sobě atom vodíku nebo alkyl a -COOR⁹, kde R⁹představuje alkyl a kde dále R⁵ a R⁶ mohou být spojeny a vytvářet cykloalkylovou skupinu, cykloalkenylovou skupinu, arylovou skupinu, heteroarylovou skupinu a heterocyklickou skupinu a pokud R⁵ a R⁶ nejsou spojeny, aby vytvářely arylovou nebo heteroarylovou skupinu, pak R¹⁰ je zvolen ze souboru, zahrnujícího atom vodíku a

139 ·· ·· 99 9 ·· ·· • · · 9 9 9 9 · 9 · • · ·· · 9 9 * 9 99 9 « · 999 9 9999 99 99 · • •9 99 9 · ♦ · ·

9999 99 9« 9 9999 alkyl s tou podmínkou, že pokud n je rovno nule, potom R¹⁰představuje atom vodíku a pokud n je větší než nula a R⁵ a R⁶ jsou spojeny, aby vytvářely arylovou nebo heteroarylovou skupinu, potom R¹⁰ představuje vazbu uvnitř této skupiny;

X představuje atom kyslíku nebo atom síry;

X' představuje atom vodíku, skupinu hydroxy nebo atom fluoru;

pokud R¹ představuje fenyl, R² představuje -CH (CH3) CH2CH3, X představuje atom kyslíku a X' a X představují atom vodíku, potom R³ nepředstavuje -CH2CH3 nebo -CH2CH (CH3) ₂;

pokud R¹ představuje fenyl, R³ představuje -CH2CH (CH3) 2, X představuje atom kyslíku a X’ a X představují atom vodíku, potom R² nepředstavuje -CH(CH3)₂, pokud R¹ představuje pyrid-3-yl, R² představuje ethyl, X představuje atom kyslíku a X' a X představují atom vodíku, potom R³ nepředstavuje -CH₂CH (CH₃) ₂, pokud R¹ představuje indoxazin-3-yl, 2,4-dimethylthiazol-5-yl, 4methyl-1,2,5-thiooxadizol-3-yl nebo 3,5-di(trifluormethyl)fenyl, R² představuje methyl, X představuje atom kyslíku a X' a X představují atom vodíku, potom R³ nepředstavuje -CH2CH(CH3) 2, a pokud R¹ představuje -CH2-fenyl, R³ představuje -CH₂CH₃, X představuje atom kyslíku a X' a X” představují atom vodíku, potom R² nepředstavuje -CH₂CH (CH₃) ₂.

25. (4.)Látka obecného vzorce I podle nároku 24 pro použití jako léčivo, kdy R¹ představuje nesubstituovanou fenylovou skupinu.

26. Látka obecného vzorce I podle nároku 24 pro použití jako léčivo, kdy R¹ představuje nesubstituovanou naftylovou skupinu, zvolenou ze souboru, zahrnujícího 1-naftyl a 2-naftyl.

- 140 ·· • 0 00 · *0 ·· • » 0 * · · 40··

0 0 0 0 · ··· 0 00 0

0 0 000 0000000 00 0 0 00 00 0 0000 • 000 «0 00 0 00 00

27. Látka obecného vzorce I podle nároku 24 pro použití jako léčivo, kdy R¹ představuje substituovanou fenylovou skupinu obecného vzorce II.

28. Látka obecného vzorce I podle nároku 27 pro použití jako léčivo, kdy substituovaná fenylová skupina je definována následujícím způsobem:

b) disubstituované fenyly, které mají dva substituenty v polohách

2.3, v polohách 2,4, v polohách 2,5, v polohách 2,6, v polohách

29. Látka obecného vzorce I podle nároku 28 pro použití jako léčivo, kdy substituované fenylové skupiny jsou zvoleny ze souboru, zahrnujícího 4-fluorfenyl, 4-chlorfenyl, 4-bromfenyl, 4nitrofenyl, 4-methylfenyl, 3-methoxyfenyl, 3-nitrofenyl, 3fluorfenyl, 3-chlorfenyl, 3-bromfenyl, 3-thiomethoxyfenyl, 3methylfenyl, 3-trifluormethylfenyl, 2-hydroxyfenyl, 2methylfenyl, 2-fluorfenyl, 3,4-dichlorfenyl, 3,4methylendioxyfenyl, 3,5-difluorfenyl, 3,5-dichlorfenyl, 2,4dichlorfenyl a 2,5-difluorfenyl.

30. Látka obecného vzorce I podle nároku 24 pro použití jako léčivo, kdy R¹ představuje skupinu fenyl-(R)_m-, kde R je alkylen, obsahující od 1 do 8 atomů uhlíku a m je rovno 1.

141

31. Látka obecného vzorce I podle nároku 30 pro použití jako léčivo, kdy R¹ je zvolen ze souboru, zahrnujícího benzyl, 3-fenyln-propyl a 4-fenyl-n-butyl.

32. Látka obecného vzorce I podle nároku 24 pro použití jako léčivo, kdy R¹ je zvolen ze souboru, zahrnujícího skupiny alkyl, alkenyl, alkcykloalkyl, cykloalkyl a cykloalkenyl.

33. Látka obecného vzorce I podle nároku 32 pro použití jako léčivo, kdy R¹ představuje alkyl.

34. Látka obecného vzorce I podle nároku 32 pro použití jako léčivo, kdy R¹ představuje cykloalkyl.

35. Látka obecného vzorce I podle nároku 32 pro použití jako léčivo, kdy R¹ představuje alkenyl.

36. Látka obecného vzorce I podle nároku 32 pro použití jako léčivo, kdy R¹ představuje cykloalkenyl.

37. Látka obecného vzorce I podle nároku 32 pro použití jako léčivo, kdy alkylové, cykloalkylová, alkcykloalkylové, alkenylové a cykloalkenylová skupiny R¹ jsou zvoleny ze souboru, zahrnujícího sek.-butyl, cyklopropyl, cyklobutyl, cyklohexyl, cyklopentyl, cyklohex-l-enyl, -CH₂-cyklopropyl, -CH₂-cyklobutyl, -CH₂cyklohexyl, -CH₂-cyklopentyl, -CH₂CH₂-cyklopropyl, -CH₂CH₂cyklobutyl, -CH₂CH₂-cyklohexyl a -CH₂CH₂-cyklopentyl.

38. Látka obecného vzorce I podle nároku 24 pro použití jako léčivo, kdy R¹ je zvolen ze souboru, zahrnujícího heteroarylové a substituované heteroarylové skupiny.

39. Látka obecného vzorce I podle nároku 38 pro použití jako léčivo, kdy heteroarylové a substituované heteroarylové skupiny R¹jsou zvoleny ze souboru, zahrnujícího pyrid-3-yl, pyrid-4-yl, · ·· ··· · · · · ···· · · · · · ·· · • · · · · · ···· · · · · · _ 149- ··········

Λ. ‘ί <*····· ·· · ···· thien-2-yl, thien-3-yl, benzothiazol-4-yl, 2-fenylbenzoxazol-5yl, furan-2-yl, benzofuran-2-yl, benzothiofen-3-yl, 2-chlorthien5-yl, 3-methylisoxazol-5-yl, 2-(fenylthio)thien-5-yl, 6methoxythiofen-2-yl, 3-fenyl-l,2,4-thiooxadiazol-5-yl a 2fenyloxazol-4-yl:

40. Látka obecného vzorce I podle nároku 24 pro použití jako léčivo, kdy R² je zvolen ze souboru, zahrnujícího alkyl, obsahující od 1 do 4 atomů uhlíku, alkylalkoxy, obsahující od 1 do 4 atomů uhlíku, fenyl a alkylthioalkoxy, obsahující od 1 do 4 atomů uhlíku.

41. Látka obecného vzorce I podle nároku 30 pro použití jako léčivo, kdy R² je zvolen ze souboru, zahrnujícího methyl, ethyl, n-propyl, iso-propyl, n-butyl, iso-butyl, -CH₂CH₂SCH₃ a fenyl.

42. Látka obecného vzorce I podle nároku 24 pro použití jako léčivo, kdy X' a X představují oba atom vodíku a X představuje atom kyslíku.

43. Látka obecného vzorce I podle nároku 42 pro použití jako léčivo, kdy R³ je zvolen ze souboru, zahrnujícího methyl, ethyl, iso-propyl, n-propyl, n-butyl, iso-butyl, cyklopentyi, allyl, iso-but-2-enyl, 3-methylpentyl, -CH₂-cyklopropyl, -CH₂-cyklohexyl,

-CH₂- (3-tetrahydrofuranyl) , -CH₂-thien-2-yl, -CH₂-(1methyl)cyklopropyl, -CH₂-thien-3-yl, -CH₂-C(O)0-terc.-butyl, -CH₂C(CH₃)₃, -CH₂CH(CH₂CH₃)₂, -2-methylcyklopentyl, -cyklohex-2-enyl, CH [CH (CH₃) ₂] COOCH₃, -CH₂CH₂N(CH₃)₂, -CH₂C (CH₃) =CH₂ a -CH₂CH=C(CH₃)₂.

44. Látka obecného vzorce I podle nároku 24 pro použití jako léčivo, kdy X' a X představují oba atom vodíku a X představuje atom síry.

- 143 • · · · · · • · * φ · · · ······· φφ φ

45. Látka obecného vzorce I podle nároku 42 pro použití jako léčivo, kdy R³ je zvolen ze souboru, zahrnujícího iso-but-2-enyl a iso-butyl.

46. Látka obecného vzorce I podle nároku 24 pro použití jako léčivo, kdy sloučenina obecného vzorce I je zvolena ze souboru, zahrnuj ícího:

N-(fenylacetyl)alanin, iso-butylester

N-(3-fenylpropionyl)alanin, iso-butylester

N-(3-methylpentanoyl)alanin, iso-butylester

N-[(4-chlorfenyl)acetyl]alanin, iso-butylester

N-[(3,4-dichlorfenyl)acetyl]alanin, iso-butylester

N-[(3-pyridyl)acetyl]alanin, iso-butylester

N-[(1-naftyl)acetyl]alanin, iso-butylester

N-[(2-naftyl)acetyl]alanin, iso-butylester

N-(4-fenylbutanoyl)alanin, iso-butylester

N-(5-fenylpentanoyl)alanin, iso-butylester

N-[(4-pyridyl)acetyl]alanin, iso-butylester

2-[(3,4-dichlorfenyl)acetamido]máselná kyselina, iso-butylester

2-[(3-methoxyfenyl)acetamido]máselná kyselina, iso-butylester

2-[(thien-3-yl)acetamido]máselná kyselina, iso-butylester 2-[(4-chlorfenyl)acetamido]máselná kyselina,, iso-butylester 2-[(3-nitrofenyl)acetamido]máselná kyselina, iso-butylester 2-((2-hydroxyfenyl)acetamído]máselná kyselina, iso-butylester

2-[(4-bromfenyl)acetamido]máselná kyselina, iso-butylester • · · · » · 0

0 0 0 0

0 0 <

0 0 4 »000 ··

- 144 • · ·

0 0 0 0«

2-[(3-chlorfenyl)acetamido]máselná kyselina, iso-butylester 2-[(3-fluorfenyl)acetamido]máselná kyselina, iso-butylester 2-[(benzothiazol-4-yl)acetamido]máselná kyselina, iso-butylester

2-[(2-methylfenyl)acetamido]máselná kyselina, iso-butylester

2-[(2-fluorfenyl)acetamido]máselná kyselina, iso-butylester 2-[(4-fluorfenyl)acetamido]máselná kyselina, iso-butylester 2-[(3-bromfenyl)acetamidojmáselná kyselina, iso-butylester 2-[(3-trifluormethylfenyl)acetamido]máselná kyselina, iso-butylester

N-(fenylacetyl)methionin, iso-butylester

N-(fenylacetyl)leucin, iso-butylester

N-[(benzofuran-2-yl)acetyl]alanin, iso-butylester

N-[(benzothiofen-3-yl)acetyl]alanin, iso-butylester N-[(2-chlor-5-thienyl)acetyl]alanin, iso-butylester N-[(3-methyl-isoxazol-5-yl)acetyl]alanin, iso-butylester N-[(2-fenylthiothienyl)acetyl]alanin, iso-butylester N-[(6-methoxybenzothiofen-2-yl)acetyl]alanin, iso-butylester

145 • · · « • · · • · · · • · · • · 4 • · · · · · <»· « ·· ·· • · · · ♦ · • · · · · · * ······· ·· · • · · · · · ·· · ·· ··

Ν-[(3-fenyl-l,2,4-thiadiazol-5-yl)acetyl]alanin, iso-butylester

N-[(2-fenyloxazol-4-yl)acetyl]alanin, iso-butylester

N-[(3-methylfenyl)acetyl]alanin, iso-butylester

N-[(2,5-difluorfenyl)acetyl]alanin, iso-butylester

N-[(3,5-diflurofenyl)acetyl]alanin, iso-butylester

N-[(3-thienyl)acetyl]alanin, iso-butylester

N-[(4-methylfenyl)acetyl] alanin, iso-butylester

N-(fenylacetyl)alanin, (1-methoxykarbonyl)iso-butylester

N-[(3-nitrofenyl)acetyl]alanin, iso-butylester

N-[(3,5-difluorfenyl)acetyl]alanin, ethylester

N-[(3-nitrofenyl)acetyl]methionin, ethylester

N-[(3-chlorfenyl)acetyl]alanin, iso-butylester

N-[(3-chlorfenyl)acetyl]alanin,

2-(N,N-dimethylamino)ethylester

2-[(3,5-dichlorfenyl)acetamido]hexanová kyselina, methylester

N-[(3,5-dichlorfenyl)acetyl]alanin, iso-butylester

N-(cyklohexylacetyl)alanin, iso-butylester

N-(cyklopentylacetyl)alanin, iso-butylester

N-[(cyklohex-l-enyl)acetyl]alanin, iso-butylester

N-[(3-chlorfenyl)acetyl]alanin, 3-methylbut-2-enylthioester

N-[(2-fenyl)-2-fluoracetyl]alanin, ethylester

N-(3,5-difluorfenylacetyl)fenylglycin, methylester

N-(3,5-difluorfenylacetyl)fenylglycin, iso-butylester

N-(cyklopentylacetyl)fenylglycin, methylester

N-(cyklopentylacetyl)alanin, methylester

N-(cyklopropylacetyl)fenylglycin, methylester

N-(cyklopropylacetyl)alanin, methylester

N-[(3-nitrofenyl)acetyl]methionin, iso-butylester « · · « · • ·

- 146 • · · 0 vyznačující se tím, že a farmaceuticky účinné

47. Farmaceutická kompozice, farmaceuticky inertní nosič sloučeniny obecného vzorce I:

obsahuje množství ve kterém

R¹ je zvolen ze souboru, zahrnujícího

a) alkyl, alkenyl, alkcykloalkyl, fenyl-(R)_m,-, naftyl-(R)_m-, kde R je alkylenová skupina s 1 až 8 atomy uhlíku a m je celé číslo, které se rovná 0 nebo 1, cykloalkyl, cykloalkenyl, 3-pyridyl, 4pyridyl a heteroaryl, jiný než 3- a 4-pyridyl, se 3 až 10 atomy a 1 až 4 heteroatomy, zvolenými ze souboru, zahrnujícího atom kyslíku, síru a atom dusíku, kde heteroarylové skupina je popřípadě substituována 1 až 3 substituenty, zvolenými ze souboru, zahrnujícího alkyl, alkoxy, aryl, aryloxy, atom halogenu, skupinu nitro, thioalkoxy a thioaryloxy s tou podmínkou, že pokud takový heteroaryl obsahuje alespoň jeden dusíkový heteroatom, pak také obsahuje alespoň jeden kyslíkový a/nebo sírový heteroatom;

(b) substituovanou fenylovou skupinu obecného vzorce II:

(R)_m— ve kterém

147

ΦΦΦΦ · ··· · • · «·· φ φ φ φ φ · φ φφφφφ· · φ φ φ φ φφ ·· · ··

R^c je zvolen ze souboru, zahrnujícího atom vodíku, alkyl, aryl, skupinu kyano, atom halogenu, skupinu nitro nebo R^b a R^c jsou k sobě kondenzovány a vytvářejí methylendioxy kruh s fenylovým kruhem; a pokud R^b a/nebo R^b' a/nebo R^c je atom fluoru, atom chloru, atom bromu a/nebo skupina nitro, pak R^a a/nebo R^a' mohou také představovat atom chloru; a (c) 1- nebo 2-naftyl-(R) _m- substituovaný v poloze 5, 6, 7 a/nebo

R³ je zvolen ze souboru, zahrnujícího - (CH₂) _nCR¹⁰R⁵R⁶, kde n je celé číslo, které se rovná 0, 1 nebo 2, R⁵ a R⁶ jsou nezávisle zvoleny ze souboru, zahrnujícího atom vodíku, alkyl, alkenyl, aryl, heteroaryl, heterocyklický systém, -NR⁷R⁸, kde R⁷ a R⁸ jsou nezávisle na sobě atom vodíku nebo alkyl a -COOR⁹, kde R⁹představuje alkyl a kde dále R⁵ a R⁶ mohou být spojeny a vytvářet cykloalkylovou skupinu, cykloalkenylovou skupinu, arylovou skupinu, heteroarylovou skupinu a heterocyklickou skupinu a pokud R⁵ a R⁶ nejsou spojeny, aby vytvářely arylovou nebo heteroarylovou skupinu, pak R¹⁰ je zvolen ze souboru, zahrnujícího atom vodíku a • · • · 4

I · · 4 • · · *

- 148 • · · · · « alkyl s tou podmínkou, že pokud n je rovno nule, potom R¹⁰představuje atom vodíku a pokud n je větší než nula a R⁵ a R⁶ jsou spojeny, aby vytvářely arylovou nebo heteroarylovou skupinu, potom R¹⁰ představuje vazbu uvnitř této skupiny;

X představuje atom kyslíku nebo atom síry;

X' představuje atom vodíku, skupinu hydroxy nebo atom fluoru;

pokud R¹ představuje fenyl, R³ představuje -CH2CH (CH3) 2, X představuje atom kyslíku a X¹ a X představují atom vodíku, potom R² nepředstavuje -CH(CH3)₂, pokud R¹ představuje pyrid-3-yl, R² představuje ethyl, X představuje atom kyslíku a X' a X představují atom vodíku, potom R³ nepředstavuje -CH₂CH (CH₃) ₂, pokud R¹ představuje indoxazin-3-yl, 2,4-dimethylthiazol-5-yl, 4methyl-1,2,5-thiooxadizol-3-yl nebo 3,5-di(trifluormethyl)fenyl, R² představuje methyl, X představuje atom kyslíku a X' a X představují atom vodíku, potom R³ nepředstavuje -CH2CH(CH3) 2, a pokud R¹ představuje -CH2-fenyl, R³ představuje -CH₂CH₃, X představuje atom kyslíku a X' a X představují atom vodíku, potom R² nepředstavuje -CH₂CH (CH₃) ₂.

48. Farmaceutická kompozice podle nároku 47, vyznačující se tím, že R¹ představuje nesubstituovanou fenylovou skupinu.

49. Farmaceutická kompozice podle nároku 48, vyznačující se tím, že R¹ představuje nesubstituovanou naftylovou skupinu, zvolenou ze souboru, zahrnujícího 1-naftyl a 2-naftyl.

149

50. Farmaceutická kompozice podle nároku 47, vyznačující se tím, že R¹ představuje substituovanou fenylovou skupinu obecného vzorce II.

51. Farmaceutická kompozice podle nároku 50, vyznačující se tím, že substituovaná fenylová skupina je definována následujícím způsobem:

b) disubstituované fenyly, které mají dva substituenty v polohách

2.3, v polohách 2,4, v polohách 2,5, v polohách 2,6, v polohách

3.4, v polohách 3,5 nebo v polohách 3,6, kde každý ze substituentů je určen odpovídajícími skupinami R¹, R^a', R^b, R^b' a (c) trisubstituované fenyly, které mají tři substituenty v polohách 2,3,4, v polohách 2,3,5, v polohách 2,3,6, v polohách 3,4,5 a v polohách 3,4,6 a kde opětně každý ze substituentů je určen odpovídajícími skupinami R^a, R^a', R^b, R^b' a R^c

52. Farmaceutická kompozice podle nároku 51, vyznačující se tím, že substituované fenylové skupiny jsou zvoleny ze souboru, zahrnujícího 4-fluorfenyl, 4-chlorfenyl, 4-bromfenyl, 4nitrofenyl, 4-methylfenyl, 3-methoxyfenyl, 3-nitrofenyl, 3fluorfenyl, 3-chlorfenyl, 3-bromfenyl, 3-thiomethoxyfenyl, 3methylfenyl, 3-trifluormethylfenyl, 2-hydroxyfenyl, 2methylfenyl, 2-fluorfenyl, 3,4-dichlorfenyl, 3,4methylendioxyfenyl, 3,5-difluorfenyl, 3,5-dichlorfenyl, 2,4dichlorfenyl a 2,5-difluorfenyl.

53. Farmaceutická kompozice podle nároku 47, vyznačující se tím, že R¹ představuje skupinu fenyl-(R)_m-, kde R je alkylen, obsahující od 1 do 8 atomů uhlíku a m je rovno 1.

·· ♦·

- 150

54. Farmaceutická kompozice podle nároku 53, vyznačující se tím, že R¹ je zvolen ze souboru, zahrnujícího benzyl, 3-fenyl-n-propyl a 4-fenyl-n-butyl.

55. Farmaceutická kompozice podle nároku 47, vyznačující se tím, že R¹ je zvolen ze souboru, zahrnujícího skupiny alkyl, alkenyl, alkcykloalkyl, cykloalkyl a cykloalkenyl.

56. Farmaceutická že R¹ představuje kompozice alkyl. podle nároku 55, vyznačuj ící se tím, 57. Farmaceutická že R¹ představuje kompozice cykloalkyl podle • nároku 55, vyznačuj ící se tím, 58. Farmaceutická že R¹ představuje kompozice alkenyl. podle nároku 55, vyznačuj ící se tím, 59. Farmaceutická že R¹ představuje kompozice podle cykloalkenyl. nároku 55, vyznačuj ící se tím, 60. Farmaceutická kompozice podle nároku 55, vyznačuj ící se tím,

že alkylové, cykloalkylové, alkcykloalkylové, alkenylové a cykloalkenylové skupiny R¹ jsou zvoleny ze souboru, zahrnujícího sek.-butyl, cyklopropyl, cyklobutyl, cyklohexyl, cyklopentyl, cyklohex-l-enyl, -CH₂-cyklopropyl, -CH₂-cyklobutyl, -CH₂cyklohexyl, -CH₂-cyklopentyl, -CH₂CH₂-cyklopropyl, -CH₂CH₂cyklobutyl, -CH₂CH₂-cyklohexyl a -CH₂CH₂-cyklopentyl.

61. Farmaceutická kompozice podle nároku 47, vyznačující se tím, že R¹ je zvolen ze souboru, zahrnujícího heteroarylové a substituované heteroarylové skupiny.

62. Farmaceutická kompozice podle nároku 61, vyznačující se tím, že heteroarylové a substituované heteroarylové skupiny R¹ jsou zvoleny ze souboru, zahrnujícího pyrid-3-yl, pyrid-4-yl, thien-2- 151

2-[(3,5-dichlorfenyl)acetamido]hexanová kyselina, methylester

N- [(3,5-dichlorfenyl)acetyl]alanin, iso-butylester

N-(cyklohexylacetyl)alanin, iso-butylester

N-(cyklopentylacetyl)alanin, iso-butylester

N-[(cyklohex-l-enyl)acetyl]alanin, iso-butylester

N-[(3-chlorfenyl)acetyl]alanin, 3-methylbut-2-enylthíoester

N-[(2-fenyl)-2-fluoracetyl]alanin, ethylester

N-(3,5-difluorfenylacetyl)fenylglycin, methylester

N- (3,5-difluorfenylacetyl)fenylglycin, iso-butylester

N-(cyklopentylacetyl)fenylglycin, methylester

N-(cyklopentylacetyl)alanin, methylester

N-(cyklopropylacetyl)fenylglycin, methylester

N-(cyklopropylacetyl)alanin, methylester

N-[(3-nitrofenyl)acetyl]methionin, iso-butylester.