CZ9901630A3 - Aminy N-(aryl/heteroaryl/alkylacetyl)aminokyselin, farmaceutické kompozice, které je obsahují a způsoby inhibice uvolňování beta- amyloidového peptidu a/nebo jeho syntézy použitím takových sloučenin - Google Patents

Description

Aminy N-(aryl/heteroaryl/alkylácetyl)aminokyselin, farmaceutické kompozice, které je obsahují a způsoby inhibice uvolňování β-amyloidového peptidu a/nebo jeho syntézy použitím takových sloučenin

Křížové reference na vztahující se přihlášky

Tato přihláška se vztahuje k následujícím U.S. předběžným přihláškám:

1. U.S. Předběžná přihláška č. 60/_ vytvořená na základě ustanovení 37 C.F.R. §1,53(b)(2)(ii) z U.S. Patentové přihlášky č. 08/754,895, podané 22. listopadu 1996; a

2. U.S. Předběžná přihláška č. 60/_ vytvořená na základě ustanovení 37 C.F.R. §1,53(b)(2)(ii) z U.S. Patentové přihlášky č. 08/807,538, podané 28. února 1997;

které jsou zahrnuty ve své celistvosti jako reference.

Oblast techniky

Předložený vynález se týká sloučenin, které inhibují uvolňování β-amyloidového peptidu a/nebo jeho syntézu a proto jsou použitelné při léčení Alzheimerovy nemoci. Předložený vynález se také týká farmaceutických kompozic, obsahujících takové sloučeninyy stejně tak jako způsobů inhibice uvolňování β-amyloidového peptidu.

Reference

Následující publikace, patenty a patentové přihlášky jsou v této přihlášce citovány pod čísly, uvedenými jako horní indexy:

¹ Glenner a kol. Alzheimer's Disease: Initial Report of the Purification and Characterization of a Novel Cerebrovascular Amyloid Protein, Biochem. Biophys, Res. Commun., 120:885-890 (1984).

² Glenner a kol. Polypeptide Markér for Alzheimer's Disease and its Use for Diagnosis, U. S. Patent No. 4,666,829 vydán 19. května 1987.

³ Selkoe, „The Molecular Pathology of Alzheimer's Disease, Neuron, 6:481-498 (1991).

⁴ Goate a kol., Segregation of a Missense Mutation in the Amyloid Precursor Protein Gene with Familial Alzheimer's Disease, Nátuře, 349:704-106 (1990).

⁵ Chartier-Harlan a kol., Early-Onset Alzheimer's Disease Caused by Mutations at Codon 711 of the β-Amyloid Precursor Protein Gene, Nátuře, 353:844-846 (1989).

⁶ Murrell a kol., A Mutation in the Amyloid Precursor Protein Associated with Hereditary Alzheimer's Disease, Science, 254:97-99 (1991).

⁷ Mullan a kol., A Pathogenic Mutation for Probable Alzheimer's Disease in the APP Gene at the Ν-Terminus of βAmyloid, Nátuře Genet., 1:345-341 (1992).

⁸ Schenk a kol., „Methods and Compositions for the Detection of Soluble β-amyloid Peptide, International Patent ApplicationPublication No. WO 94/10,569. publikován 11. května 1994.

⁹ Selkoe, Amyloid Protein and Alzheimer's Disease, Scientific American, pp. 2-8, listopad 1991.

¹⁰ Tetrahedron Letters, 34(48), 7685 (1993)) ¹¹ Losse a kol., Tetrahedron, 27:1423-1434 (1971).

¹² Citron a kol., Mutation of the β-Amyloid Precursor Protein in Familial Alzheimer's Disease Increases β-Protein Production, Nátuře, 360:672-674 (1992).

¹³ Hansen a kol., „Reexamination and Further Development of a Precise and Rapid Dye Method for Measuring Cell Growth/Cell Kill, J. Immun. Meth., 119:203-210 (1989).

Všechny výše uvedené publikace, patenty a patentové přihlášky jsou zde zahrnuty ve své celistvosti jako reference stejným způsobem, jak kdyby každá jednotlivá publikace, patent nebo patentová přihláška byly specificky a individuálně uvedeny jako reference, zahrnuté ve své celistvosti.

Dosavadní stav techniky

Alzheimerova nemoc (AD) je degenerativní mozková porucha, charakterizovaná klinicky progresivní ztrátou paměti, poznávacích schopností, myšlení, úsudku a emoční stability, které postupně vedou k hlubokému mentálnímu poškození a nakonec k smrti. Alzheimerova nemoc je velmi obvyklou příčinou progresivního duševního selhání (demence) starých lidí a má se za to, že představuje čtvrtou nejrozšířenější příčinu smrti ve Spojených státech. Alzheimerova nemoc byla pozorována u různých ras a etnických skupin po celém světě a představuje jeden z nej závažnějších současných a budoucích veřejných zdravotních problémů. Odhaduje se, že tato nemoc v současné době zasahuje dva až tři miliony osob jen v samotných Spojených státech. Alzheimerova nemoc je v současné době neléčitelná. V současné době není znám žádný způsob léčení, který by účinně předcházel Alzheimerově nemoci nebo zamezoval jejím symptomům.

Mozky osob, postižených Alzheimerovou nemocí, vykazují charakteristické léze, které jsou nazývány senilní (nebo amyloidní) plaky, amyloidovou angiopatii (amyloid deponovaný v krevních cévách) a neurofibrilární zauzlení. U pacientů s Alzheimerovou nemocí se obecně nachází velký počet těchto lézí, obzvláště amyloidní plaky a neurofibrilární zauzlení, v řadě oblastí lidského mozku, které jsou důležité pro paměťové a poznávací funkce. Menší množství těchto lézí s omezenějším anatomickým rozložením se také nachází v mozku většiny starých lidí, kteří nemají klinickou Alzheimerovu nemoc. Amyloidní plaky a amyloidová angiopatie také charakterizuje mozek osob s onemocněním Trisomy 21 (Downův syndrom) a dědičnou mozkovou hemoragií s amyloidózou holandského typu (HCHWA-D). V současné době definitivní diagnóza Alzheimerovy nemoci obvykle vyžaduje pozorování výše uvedených lézí v mozkové tkáni pacientů, kteří na chorobu zemřeli a nebo, řidčeji, v malých bioptických vzorcích mozkové tkáně odebrané v průběhu invazivní neurochirurgické procedury.

Základní chemická složka amyloidních plaků a vaskulárních amyloidových depozitů (amyloidová angiopatie), charakteristických pro Alzheimerovu nemoc a další výše uvedené poruchy, je protein o molekulové hmotnosti přibližně 4,2 kilodaltonů (kD)_z skládající se přibližně 39-43 aminokyselin, který je označován jako β-amyloidový peptid (βΑΡ)i nebo někdy Αβ, ΑβΡ nebo β/Α4. β-amyloidový peptid byl nejprve vyčištěn a jeho částečná sekvence aminokyselin byla určena Glennerem a kol.¹ Způsob izolace a údaje o sekvenci prvních 28 aminokyselin jsou popsány v U.S. Patentu č. 4,666, 829².

Molekulárně biologické a proteinově chemické analýzy ukázaly, že β-amyloidový peptid je malý fragment daleko většího prekurzorového proteinu (APP), který je normálně produkován buňkami v mnoha tkáních různých zvířat, v to počítaje člověka. Znalost struktury genového kódu APP prokázaly, že β-amyloidový peptid vzniká jako peptidový segment, které je odštěpen od APP proteázovým enzymem nebo enzymy. Přesný biochemický mechanismus, kterým je βamyloidový peptidový fragment odštěpen od APP a následně uložen ve formě amyloidních plaků v mozkové tkáni a ve stěnách cerebrálních a meningeálních krevních cév, je v současné době neznámý.

Řada důkazů naznačuje, že cerebrální ukládání βamyloidového peptidu hraje ústřední roli v patogenezi Alzheimerovy nemoci a může předcházet kognitivním symptomům o roky nebo desetiletí, viz například Selkoe³. Nejdůležitějším důkazem je objev, že DNA mutace s chybným smyslem v aminokyselině 717 izoformy APP o 770 aminokyselinách může být nalezena u postižených členů, ale ne u nezasažených členů řady rodin s geneticky určenou (familiární) formou Alzheimerovy nemoci (Goate a kol.⁴; Chartier-Harlan a kol.⁵; a Murrell a kol.⁶) a je označována jako Švédská varianta. Dvojitá mutace, která spočívá v mutaci lysinu⁵⁹⁵-methioninu⁵⁹⁶ na asparagin⁵⁹⁵-leucin⁵⁹⁶ (s odvoláním na izoformu 695) a byla nalezena ve švédské rodině, byla popsána v roce 1992 (Mullan a kol.⁷). Analýzy genetické vazby prokázaly, že tyto mutace, stejně tak jako jisté další mutace v genu APP, jsou specifickou molekulární příčinou Alzheimerovy nemoci u postižených členů takových rodin. Kromě toho mutace aminokyseliny 693 v izoformě APP o 770 aminokyselinách byly identifikovány jako příčina choroby, spočívající v ukládání β-amyloidového peptidu, HCHWA-D a změna alaninu na glycin v aminokyselině 692 se zdá být příčinou fenotypu, který připomíná Alzheimerovu nemoc u některých pacientů, ale HCHWA-D u jiných. Objev těchto a dalších mutací APP v geneticky způsobených případech Alzheimerovy nemoci dokazují, že změna APP a následné ukládání fragmentu β-amyloidového peptidu může způsobit Alzheimerovu nemoc. ^{I *}

I přes pokrok, kterého bylo dosaženo v pochopení mechanismu, který je základem Alzheimerovy nemoci a dalších nemocí spojených s β-amyloidovým peptiden^ přetrvává potřeba vyvinout způsoby a kompozice pro léčbu nemoci nebo nemoci. Ideálně by způsoby léčení byly založeny na látkách, které by byly schopny inhibice uvolňování β-amyloidového peptidu a/nebo jeho syntézy in vivo.

Předmět vynálezu

Předložený vynález se týká objevu třídy sloučenin, které inhibují uvolňování β-amyloidového peptidu a/nebo jeho syntézy a proto jsou použitelné při prevenci Alzheimerovy nemoci u pacientů, náchylných k Alzheimerově nemoci a/nebo pro léčbu pacientů trpících Alzheimerovou nemocí, aby se zabránilo dalšímu zhoršování jejich stavu. Třída sloučenin, které mají uvedené vlastnosti, je definována obecným vzorcem I, který následuje:

X'

R‘Z .CX NH >C⁷

CH '^S'NR³R³‘

ve kterém R¹ a) alkyl, cykloalkyl, systém, kde je zvolen ze souboru, zahrnujícího alkenyl, alkaryl, alkcykloalkyl, aryl, cykloalkenyl, heteroaryl a heterocyklický heteroaryl nebo heterocyklická skupina jsou popřípadě substituovány 1 až 3 substituenty, zvolenými ze souboru, zahrnujícího alkyl, alkoxy, aryl, aryloxy, atom halogenu, skupiny nitro, thioalkoxy a thioaryloxy;

(b) substituovanou fenylovou skupinu obecného vzorce II

R^b‘ R’

ve kterém R představuje alkylen, obsahující od 1 do 8 atomů uhlíku, m je celé číslo, které se rovná 0 nebo 1,

R^a a R^a' jsou nezávisle zvoleny ze souboru, zahrnujícího atom vodíku, skupinu hydroxy, atom fluoru a methyl;

R^b a R^b' jsou nezávisle zvoleny ze souboru, zahrnujícího atom vodíku, alkyl, alkoxy, aryl, aryloxy, skupiny kyano, cykloalkyl, atom halogenu, heteroaryl, heteroaryloxy, heterocyklický systém, skupiny nitro, trihalogenmethyl, thioalkoxy, thioaryloxy, thioheteroaryloxy a -C(O)R⁴, kde R⁴ je zvolen ze souboru, zahrnujícího alkyl, aryl, alkoxy a aryloxy; a

R^c je zvolen ze souboru, zahrnujícího atom vodíku, alkyl, aryl, skupinu kyano, atom halogenu, skupinu nitro a kde R^b a R^c jsou k sobě kondenzovány a vytvářejí methylendioxy kruh s fenylovým kruhem; a pokud R^b a/nebo R^b' a/nebo R^c je atom fluoru, atom chloru, atom bromu a/nebo skupina nitro, potom R^a a/nebo R^a' mohou také představovat atom chloru; a ·· > « • · • · · 0 0 · * ·

0 0· (c) 1- nebo 2-naftyl substituovaný 8 jedním až čtyřmi substituenty, zahrnujícího alkyl, alkoxy, atom halogenu, skupiny kyano, nitro, trihalogenmethyl a thioalkoxy;

R² je zvolen ze souboru, zahrnujícího atom vodíku, alkyl, obsahující od 1 do 4 atomů uhlíku, alkylalkoxy, obsahující od 1 do 4 atomů uhlíku, alkylthioalkoxy, obsahující od 1 do 4 atomů uhlíku; a

R³ a R³' jsou nezávisle zvoleny ze souboru, zahrnujícího:

(a) atom vodíku s tou podmínkou, že oba substituenty R³ a R³' nemohou představovat atom vodíku;

(b) alkyl s tou podmínkou, že pokud R³ představuje atom vodíku, potom alkylová skupina R³' má přímý uhlíkový řetězec o délce alespoň 5 atomů uhlíku od atomu dusíku, přičemž řetězec může být popřípadě substituován jednou nebo více alkylovými skupinami a s další podmínkou, že pokud oba substituenty R³ a R³' jsou alkyl, potom alespoň jedna alkylová skupina má uhlíkový řetězec délky alespoň 5 atomů uhlíku, přičemž řetězec může být popřípadě substituován jednou nebo více alkylovými skupinami;

(c) -(R⁷)n(W)_p, kde R⁷ představuje alkylenovou skupinu, W je zvolen ze souboru, zahrnujícího:

v poloze 5, 6, 7 a/nebo zvolenými ze souboru,

			,- ···.· :’···. ·- . .· 49 .;·· , · · · «	9 ' 9 9' ·' . ·	· ·
	10	-	: ftftft 99	• ftftft	• ·

• ft ·· • · · · • · · · *·· ftftft • · • ft ftft (i)

kde R⁵, R⁵', R⁹ a R⁹' jsou nezávisle zvoleny ze souboru, zahrnujícího atom vodíku, hydroxyl, alkyl, substituovaný alkyl, alkoxy, substituovanou skupinu alkoxy, amino, alkylamino, dialkylamino, aryl, acyl, acylamino, acyloxy, aminoacyl, skupinu kyano, cykloalkyl, atom halogenu, karboxyl, karboxylové estery, heteroaryl a heterocyklický systém, a

R⁶ je zvolen ze souboru, zahrnujícího atom vodíku, hydroxyl, alkyl, substituovaný alkyl, amino, alkylamino, dialkylamino, aryl, acyl, acylamino, acyloxy, alkoxy, substituovanou skupinu alkoxy, aminoacyl, skupinu kyano, cykloalkyl, atom halogenu, karboxyl, karboxylové estery, heteroaryl, heterocyklický systém a kde R⁶ a jeden ze substituentů R⁵ nebo R⁵' jsou kondenzovány a vytváří heterocyklický kruh obsahující 4 až 10 atomů, který má 1 až 3 heteroatomy, zvolené ze souboru, zahrnujícího atom kyslíku, atom dusíku a atom síry;

s tou podmínkou, že pokud n je rovno nule, R⁹ a R⁹' představují atom vodíku;

(ii) heteroaryl; a i A. a · · » · · · : · · < t · · ··· ··· • · · · · · * ··· (· *·· *·· ·· ♦· (iii) N-heterocyklický systém, s tou podmínkou, že pokud W je N- heterocyklický systém, potom n není rovno nule; a n je celé číslo, které se rovná 0 nebo 1, a p je celé číslo, které se rovná 1 až 3 s tou podmínkou, že pokud n je rovno nule potom p je rovno 1, a

(d) -CH(<X>)CH2C(O)O-Q,	kde	Q je zvolen ze	souboru,
zahrnujícího alkyl, systém	aryl,	heteroaryl a heterocyklický
X' představuje atom fluoru;	vodíku,	skupinu hydroxy	nebo atom
X představuje atom	vodíku,	skupinu hydroxy	nebo atom
fluoru nebo X' a X spolu vytvářejí oxo skupinu,

Z je zvolen ze souboru, zahrnujícího kovalentní vazbu, která váže R¹ k -CX'X-, atom kyslíku a atom síry; a s tou podmínkou, že pokud R¹ představuje fenyl, R² představuje methyl, X' a X představují atom vodíku, Z je skupina, která kovalentně váže R¹ k -CX'X-, m je rovno nule, R³ představuje atom vodíku, R³' je -(R⁷)_n(W)_p, kde n je rovno nule a p je rovno jedné a W představuje

potom (i) R⁵, R⁵ , R⁹, R⁹ a R⁶ nejsou všechny atom vodíku a • · • • · · > · • · ·

- 12 • · • · (ii) R⁵, R⁵', R⁹, R⁹' jsou atom vodíku a R⁶ představuje methoxy;

s další podmínkou, že pokud R¹ představuje 3,5difluorfenyl, R² představuje methyl, X' a X představují atom vodíku, Z je skupina, která kovalentně váže R¹ k CX'X”-, m je rovno nule, R³ představuje atom vodíku, R³' je - (R⁷)n(W)_p, kde n je rovno jedné a p je rovno jedné, R⁷ představuje ethylen a W představuje

R⁹ R^s

R⁹' R^s' potom R⁵, R⁵', R⁹, R⁹' a R⁶ nepředstavují všechny atom vodíku; a s další podmínkou, že pokud R¹ představuje 3,5difluorfenyl, R² představuje methyl, X' a X představují atom vodíku, Z je skupina, která kovalentně váže R¹ k CX'X”- a m je rovno nule, R³ představuje atom vodíku, R³' je - (R⁷)_n(W)p, kde n je rovno nule a p je rovno jedné, W představuje

> « · ► · · • · ·

R’ R⁵

a R⁵', R⁹, R⁹' jsou atom vodíku, potom R⁵ a R⁶ nejsou kondenzovány aby vytvářely s fenylovým kruhem, ke kterému jsou připojeny, ftalimidovou skupinu.

V souladu s tím se jeden ze způsobových předmětů předloženého vynálezu týká způsobu inhibice uvolňování βamyloidového peptidu a/nebo jeho syntézy v buňce, ve kterém se podává do takové buňky takové množství sloučeniny nebo směsi sloučenin obecného vzorce I uvedeného výše, které je účinné pro inhibici buněčného uvolňování a/nebo syntézy βamyloidového peptidu.

Protože the in vivo vytváření β-amyloidového peptidu je spojeno s patogenezí Alzheimerovy nemoci^8,9, sloučeniny obecného vzorce I mohou být také použity spolu s farmaceutickou kompozicí pro profylaktickou a/nebo terapeutickou prevenci a/nebo léčbu Alzheimerovy nemoci. V souladu s tím se ve svém dalším předmětu předložený vynález týká profylaktického způsobu prevence vzniku Alzheimerovy nemoci u pacienta s rizikem vzniku Alzheimerovy nemoci, přičemž uvedený způsob zahrnuje podávání farmaceutické kompozice, obsahující farmaceuticky inertní nosič a účinné e ·« · · • · » <t · 0 0 • · 0 · · •·· ·· 000 ·00

množství sloučeniny nebo směsi sloučenin obecného vzorce I uvedeného výše, uvedenému pacientovi.

Ve svém dalším předmětu se předložený vynález týká terapeutického způsobu léčení pacienta trpícího Alzheimerovou nemocí pro inhibici dalšího zhoršování stavu uvedeného pacienta, přičemž uvedený způsob zahrnuje podávání farmaceutické kompozice, obsahující farmaceuticky inertní nosič a účinné množství sloučeniny nebo směsi sloučenin obecného vzorce I uvedeného výše, uvedenému pacientovi.

V obecném vzorci I uvedeném výše, výhodné R¹ nesubstituované arylové skupiny zahrnují například fenyl,

1-naftyl, 2-naftyl a podobně.

Výhodné R¹ substituované arylové skupiny zahrnují například monosubstituované fenyly, které mají jednoduchou substituci v poloze 2, 3 nebo 4, kde každý z jednotlivých substituentů je dán odpovídajícími skupinami R^a, R^b a R^c; disubstituované fenyly, které zahrnují fenyly, které mají dva substituenty v polohách 2,3-positions, v polohách 2,4, v polohách 2,5, v polohách 2,6, v polohách 3,4, v polohách 3,5 nebo v polohách 3,6, kde každý ze substituentů je dán odpovídajícími skupinami R^a, R^a', R^b, R^b' a R^c; a trisubstituované fenyly, které zahrnují fenyly, které mají tři substituents v polohách 2,3,4, v polohách 2,3,5, v polohách 2,3,6, v polohách 3,4,5 a v polohách 3,4,6, kde každý ze substituentů je dán odpovídajícími skupinami R^a, R^a', R^b, R^b' a R^c. Výhodně substituované fenylové skupiny nezahrnují více než 3 substituenty.

9 «·	9		9 9
99 « 9	9 9	9 9	9 9
9 99	9		9 ·
9 9 9 9	9		9 999
9 9 9	9		9
9 9 9 9 9	9 9 9	9 9 9	9 e

Příklady substituovaných fenylů zahrnují například 4fluorfenyl, 4-chlorfenyl, 4-bromfenyl, 4-nitrofenyl, 4methylfenyl, 3-methoxyfenyl, 3-nitrofenyl, 3-fluorfenyl, 3chlorfenyl, 3-bromfenyl, 3-thiomethoxyfenyl, 3-methylfenyl, 3-trifluormethylfenyl, 2-hydroxyfenyl, 2-methylfenyl, 2fluorfenyl, 3,4-dichlorfenyl, 3,4-methylen- dioxyfenyl,

3,5-difluorfenyl, 3,5-dichlorfenyl, 2,4-dichlorfenyl a 2,5difluorfenyl.

Výhodné R¹ alkarylové skupiny zahrnují, uvedeno jako příklad, benzyl, 3-fenylethyl, 4-fenyl-n-propyl a podobně.

Výhodné R¹ alkylové, cykloalkylové a cykloalkenylové skupiny zahrnují, uvedeno jako příklad, sek.-butyl, cyklopropyl, cyklobutyl, cyklohexyl, cyklopentyl, cyklohexl-enyl, -CH₂-cyklopropyl, -CH₂-cyklobutyl, -CH₂-cyklohexyl, -CH₂-cyklopentyl, -CH₂CH₂-cyklopropyl, -CH₂CH₂-cyklobutyl, CH₂CH₂-cyklohexyl, -CH₂CH₂-cyklopentyl a podobně.

Výhodné R¹ heteroaryly a substituované heteroaryly zahrnují, uvedeno jako příklad, pyrid-3-yl, pyrid-4-yl, thiofen-2-yl, thiofen-3-yl, benzothiazol-4-yl, 2fenylbenzoxazol-5-yl, furan-2-yl, benzofuran-2-yl, thionaften-2-yl, 2-chlorthiofen-5-yl, 3-methylisoxazol-5yl, 2-(thiofenyl)thiofen-5-yl, 6-methoxythionaften-2-yl, 3fenyl-1,2,4-thiooxadiazol-5-yl, 2-fenyloxazol- 4-yl a podobně.

Výhodně R² je zvolen ze souboru, zahrnujícího alkyl, obsahující od 1 do 4 atomů uhlíku, alkylalkoxy, obsahující od 1 do 4 atomů uhlíku a alkylthioalkoxy, obsahující od 1 • φ ' - φ φ • · φ φ • ·· • · · * φφφ • φ · φ φ • · · · • * · φ φ φ ♦ ♦ φφφ φφφ do 4 atomů uhlíku. Obzvláště výhodné substituenty R² zahrnují, uvedeno jako příklad, methyl, ethyl, n-propyl, iso-propyl, n-butyl, iso-butyl, -CH₂CH₂SCH₃ a podobně.

Výhodně R³ představuje atom vodíku a R³' je zvolen ze souboru, zahrnujícího 3-hydroxyfenyl, 3-methoxyfenyl, 3ethoxykarbonylfenyl, n-hexyl, n-oktyl, 4ethoxykarbonylfenyl, 4-methoxykarbonylfenyl, 3-chlorfenyl, 3-kyanofenyl, 3,5-dichlorfenyl, -CH(CH₃)<I>(R stereoisomer) , -CH(CH₃)O (S stereoisomer), ftalid-6-yl, 2-hydroxypyrid-3yl, 2-(methoxykarbonylmethyl)benzyl, 3(methoxykarbonyl)benzyl, 2—(2'— methoxykarbonylmethylfenyl)benzyl a 2-fenylbenzyl.

Obzvláště výhodné sloučeniny pro použití ve způsobech a kompozicích podle předloženého vynálezu zahrnují, uvedeno jako příklad, následující sloučeniny:

N-(3-hydroxyfenyl)-N'-(fenylacetyl)-L-alaninamid

N-(3-methoxyfenyl)-Ν' -(fenylacetyl)-L-alaninamid

N-(3-ethoxyfenyl)-Ν' -(fenylacetyl)-L-alaninamid

N-(4-ethoxykarbonylfenyl)-Ν' -(fenylacetyl)-L-alaninamid

N-(n-hexyl)-Ν' -(3,5-difluorfenylacetyl)-L-alaninamid

N-(n-oktyl)-Ν' -(3,5-difluorfenylacetyl)-L-alaninamid

N-(3-methoxyfenyl)-Ν' -(3,5-difluorfenylacetyl)-L-alaninamid • φφ « φ ·· ·· • φ φ · φ φ ·φ « « * » • ΦΦ φ φ φ · · · φ φ φ » · φ · ······

ΦΦΦ · · 9 9

ΦΦΦ · Φ ΦΦΦ ΦΦΦ ΦΦ ΦΦ

Ν-(4-ethoxykarbonylfenyl)-Ν' -(3,5-difluorfenylacetyl)-Lalaninamid

N-(3-ethoxykarbonylfenyl)-Ν' -(3,5-difluorfenylacetyl)-Lalaninamid

N-(3-chlorfenyl)-N'-(3,5-difluorfenylacetyl)-L-alaninamid

N-(3,5-dichlorfenyl)-Ν' -(3,5-difluorfenylacetyl)-Lalaninamid

N-(3-kyanofenyl)-Ν' -(3,5-difluorfenylacetyl)-L-alaninamid

N-(ftalid-6-yl)-N'-(3,5-difluorfenylacetyl)-L-alaninamid

N-[(4-methoxykarbonylfenyl)methyl]-N'-(3,5difluorfenylacetyl)-L-alaninamid

N-(1-kyano-l-fenylmethyl)-Ν' -(3,5-difluorfenylacetyl)-Lalaninamid

N-[(R)-1-fenylethyl]-N'-(3,5-difluorfenylacetyl)-Lalaninamid

N-[(S)-1-fenylethyl]-N'-(3,5-difluorfenylacetyl)-Lalaninamid

N-[2-hydroxypyridin-3-yl]-Ν' -(3,5-difluorfenylacetyl)-Lalaninamid

0» • 0 0 ·

0 0 · · • · · • * 0000

0

0 0 0 0 0 0

Ν-[2-methoxykarbonyl-l-fenylethyl]-Ν'-(3,5difluorfenylacetyl)-L-alaninamid

Ν-[a-pyridin-2-yl-benzyl]-Ν' -(3,5-difluorfenylacetyl)-Lalaninamid

N-[1-(N-ftalamido)pent-2-yl]-Ν' -(3,5-difluorfenylacetyl)-Lalaninamid

N-[2-(methoxykarbonylmethyl)benzyl]-Ν' -(3,5difluorfenylacetyl)-L-alaninamid

N-[3-(methoxykarbonyl)benzyl]-N'-(3,5-difluorfenylacetyl)L-alaninamid

N-[2-(2'-methoxykarbonylmethylfenyl)benzyl]-Ν' -(3,5difluorfenylacetyl)-L-alaninamid

N-[2-fenylbenzyl]-N'-(3,5-difluorfenylacetyl)-L-alaninamid • · · 4 4 • 4· 4 • · · , ·' '^: 4 ^: • · « ' . 4 · •4 44 ··· “4 4 · · 4

Ještě dále se předložený vynález týká nových sloučenin obecného vzorce I uvedeného výše. Výhodné sloučeniny mají obecný vzorec II uvedený v Tabulce I, která následuje:

.CHR¹

II

O

CH

NHR³

R1	R2	R3’
-Φ	-ch3	3-HO-ó-
-Φ	-ch3	3-CH3O-</>-
-Φ	-ch3	3-CH3CH2O(CO)-ó-
-Φ	-ch3	4-CH3CH2O(O)C-ó-
3,5-di-F-</>-	-ch3	CH3(CH2)s-

·· • ·

·· ·· • · · · • 9 9 9

999 999 ·

1 R·	R2	R3'
3,5-di-F-<£-	-ch3	CH,(CH2)7-
3,5-di-F-</>-	-ch.	3-CH,0-</>-
3,5-di-F-<č>-	-ch3	4-CH3CH2O(O)C-é-
3,5-di-F-$-	-ch3	3-CH,CH2O(O)C-</>-
3,5-di-F-</>-	-CH3	3-Cl-</>-
3,5-di-F-</>-	-ch3	3,5-di-Cl-é-
3,5-di-F-</>-	-ch3	3-kyano-</>-
3,5-di-F-</>-	-ch.	ftalid-6-yl
3,5-di-F-</>-	-CH,	4-CH3O(O)C-é-CH2-
3,5-di-F-</>-	-CH,	a-kyanobenzyl-
3,5-di-F-</>-	-ch3	(R)-CH3(é)CH-
3,5-di-F-</>-	-Ch,	(S)-CH,(</>)CH-
3,5-di-F-^-	-CH,	2-hydroxypyridin-3-yl
3,5-di-F-<í>-	-CH,	a-pyridin-2-yl-benzyl |
3,5-di-F-(/>-	-CH, .	1 -(N-f talamido)pent-2 -yi
I 3,5-di-F-</>-	-CH,	2-(methoxy- karbonylmethyl)benzyl
| 3,5-di-F-tf>-	-CH,	3-(methoxy- karbonyl)benzyl
| 3,5-di-F-</>-	-CH,	2-(2'-methoxy- karbonylmethyl- fenyDbcnzyl
3,5-di-F-</>-	-CH3	2-ícnylbenzyI
| 3,5-di-F-</>-	-ch3	2-methoxykarbonyl1-fenylcthyl |

	99			9	99	9 9
9 ·		•	99	9 9	9 9	9 9
	99		9	9	9 9	9 9
« ·		9 9	9	9	9 99 9	99 9
• ·		9	•	9	9	9
* 9	9 9		• 9 ·	999	9 9	9 9

Detailní popis předloženého vynálezu

Jak bylo uvedeno výše předložený vynález se týká sloučeniny, které inhibují uvolňování β-amyloidového peptidu a/nebo jeho syntézy a v souladu s tím je možno je použít při léčení Alzheimerovy nemoci. Předtím než bude předložený vynález dále detailněji popsán, budou nejprve definovány následující výrazy.

Definice

Výraz β-amyloidový peptid se vztahuje k peptidu o 39-43 aminokyselinách, který má molekulovou hmotnost přibližně 4,2 kD, přičemž tento peptid je v zásadě homologický té formě proteinu, kterou popsal Glenner a kol.¹, v to počítaje mutace a post-translační modifikace normálního βamyloidovového peptidu. Ať se nachází v jakékoli podobě, βamyloidový peptid je fragment o přibližně 39-43 aminokyselinách většího transmembránového glykoproteinu, který je označován jako β-amyloidový prekursorový protein (APP). Jeho sekvence 43-aminokyselinje následující:

1 Asp	Ala	Glu	Phe	Arg	His	Asp	Ser	Gly	Tyr
11 Glu	Val	His	His	Gin	Lys	Leu	Val	Phe	Phe
21 Ala	Glu	Asp	Val	Gly	Ser	Asn	Lys	Gly	Ala
31 Ile	Ile	Gly	Leu	Met	Val	Gly	Gly	Val	Val
41 Ile	Ala	Thr	(SEQ ID	NO:	1)

nebo sekvence, která je

• 4 4 • 4 · 4 4 4 jí v zásadě homologická.

Alkyl se vztahuje k monovalentním alkylovým skupinám, které výhodně obsahují od 1 do 20 atomů uhlíku, výhodně 1 do 10 atomů uhlíku a výhodněji 1 do 6 atomů uhlíku. Jako příklady tohoto výrazu je možno uvést skupiny jako jsou methyl, ethyl, n-propyl, iso-propyl, n-butyl, iso-butyl, nhexyl a podobně.

Substituovaný alkyl se vztahuje k alkylové skupina, výhodně obsahující od 1 do 10 atomů uhlíku, která má od 1 do 3 substituentů, zvolených ze souboru, zahrnujícího alkoxy, substituovanou skupinu alkoxy, acyl, acyloxy, acylamino, amino, aminoacyl, aminokarboxy esters, skupinu kyano, cykloalkyl, halogen, hydroxyl, karboxyl, karboxylové estery, thiol, thioalkoxy, substituovanou skupinu thioalkoxy, aryl, heteroaryl, heterocyklický systém, skupinu nitro a mono- a di-alkylamino, mono- a di(substituovaný alkyl)amino, mono- a di-arylamino, mono- a di- heteroarylamino, mono- a di-heterocyklickou aminovou skupinu a nesymetrické di- substituované aminy, které mají různé substituenty zvolené ze souboru, zahrnujícího alkyl, substituovaný alkyl, aryl, heteroaryl a heterocyklický systém.

Alkylen se vztahuje k divalentním alkylenovým skupinám, které výhodně obsahují od 1 do 10 atomů uhlíku a výhodněji 1 až 6 atomů uhlíku, které mohou mít přímý řetězec nebo být rozvětvené. Jako příklady tohoto výrazu je možno uvést skupiny jako jsou methylen (-CH₂-) , ethylen (-CH₂CH₂-), • BB . ·9 Β .. ΒΒ >-'·· ββ · · . - ^ζ ·· ·· · « · · • ·β β β β β β β • Β ·· ·_;· · · Β ··· ΒΒΒ

Β Β ·. Β Β · ·

ΒΒΒ ΒΒ ΒΒΒ ΒΒΒ ΒΒ ΒΒ isomery propylenu (například -CH₂CH₂CH₂- a -CH (CH₃) CH₂-) a podobně.

Alkaryl se vztahuje k -alkylen-arylovým skupinám, které výhodně obsahují od 1 do 10 atomů uhlíku v alkylenové části a od 6 do 14 atomů uhlíku v arylové části. Takové alkarylová skupiny jsou například benzyl, fenethyl a podobně.

Alkcykloalkyl se vztahuje k -alkylen-cykloalkylovým skupinám, které výhodně obsahují od 1 do 10 atomů uhlíku v alkylenové části a od 3 do 8 atomů uhlíku v cykloalkylové části. Takové alkcykloalkylové skupiny jsou například -CH₂cyklopropyl, -CH₂CH₂-cyklohexyl a podobně.

Alkoxy se vztahuje ke skupině alkyl-O-. Výhodné alkoxy skupiny zahrnují, uvedeno jako příklad, methoxy, ethoxy, npropoxy, iso-propoxy, n-butoxy, terč.-butoxy, sek.-butoxy, n-pentoxy, n-hexoxy, 1,2-dimethylbutoxy a podobně.

Substituovaná skupina alkoxy se vztahuje ke skupině substituovaný alkyl-O-, kde substituovaný alkyl má stejný význam, jaký byl definován výše.

Alkylalkoxy se vztahuje ke skupině -alkylen-O-alkyl, která zahrnuje zahrnuje, uvedeno jako příklad, methylenmethoxy (-CH₂OCH₃) , ethylenmethoxy (-CH₂CH₂OCH₃) , methylen-iso-propoxy (-CH₂-O-CH (CH₃) ₂) a podobně.

Alkylthioalkoxy se vztahuje ke skupině -alkylen-Salkyl, která zahrnuje, uvedeno jako příklad, methylenthiomethoxy (-CH₂SCH₃) , ethylenthiomethoxy (24 • 0 4 9 49 00

4 99 99 0 0 0 0

4 4 0 0 0 · • · · · 9 1 999 999

9 4 4 1 4

CH2CH2SCH3) , methylen-iso-thiopropoxy (-CH2SCH (CH3) 2) a podobně.

Alkenyl se vztahuje k alkenylovým skupinám, které výhodně obsahují od 2 do 10 atomů uhlíku a výhodněji 2 do 6 atomů uhlíku a mají alespoň 1 a výhodně 1-2 místa alkenylového nenasycení. Výhodné alkenylové skupiny zahrnují ethenyl (CH=CH₂) , n-propenyl (-CH₂CH=CH₂) , iso-propenyl (-C (CH₃) =CH₂) a podobně.

Alkinyl se vztahuje k alkinylovým skupinám, které výhodně obsahují od 2 do 10 atomů uhlíku a výhodněji 2 do 6 atomů uhlíku a mají alespoň 1 a výhodně 1-2 místa alkinylového nenasycení. Výhodné alkinylové skupiny zahrnují ethinyl (CH=CH₂) , propargyl (-CH₂CH=CH₂) a podobně.

Acyl se vztahuje ke skupinám alkyl-C(O)-, substituovaný alkyl-C(O)-, cykloalkyl-C(0)aryl-C(O)-, heteroaryl-C(0)a heterocykl-C(0)kde alkyl, substituovaný alkyl, cykloalkyl, aryl a heteroaryl mají význam, který byl definován výše.

Acylamino se vztahuje ke skupině -C(0)NRR, kde každý R je nezávisle atom vodíku nebo alkyl.

Aminoacyl se vztahuje ke skupině -NRC(O)R, kde každý R je nezávisle atom vodíku nebo alkyl.

Acyloxy se vztahuje ke skupinám alkyl-C(O)0-, substituovaný alkyl-C(0)0-, cykloalkyl-C(0)0-, aryl-C(0)0-, heteroaryl-C(0)0- a heterocykl-C(0)0-, kde alkyl, substituovaný alkyl, cykloalkyl, aryl, heteroaryl a

Φ · ·· · · ΦΟ · · •φφφ φφ φφ ···· φ φ» · φ φφφφ

ΦΦΦΦ Φ 9 · φφφ ΦΦΦ

ΦΦΦ Φ Φ « ·

ΦΦΦ ΦΦ ΦΦΦ ·«* ΦΦ ·« heterocyklický systém mají význam, který byl definován výše.

Aryl se vztahuje k nenasycené aromatické karbocyklické skupině 6 až 14 atomů uhlíku, která má jednoduchý kruh (například fenyl) nebo více kondenzovaných kruhů (například naftyl nebo anthryl). Výhodné aryly zahrnují fenyl, naftyl a podobně.

Pokud není jinak omezeno definicí pro jednotlivý substituent, takové arylové skupiny mohou popřípadě být substituovány 1 až 3 substituenty, zvolenými ze souboru, zahrnujícího hydroxy, acyl, acyloxy, alkyl, alkoxy, alkenyl, alkinyl, amino, aminoacyl, aryl, aryloxy, karboxyl, karboxylové estery, amino karboxylové estery, skupinu kyano, atom halogenu, skupinu nitro, heteroaryl, heterocyklický systém, thioalkoxy, trihalogenmethyl a podobně. Výhodné substituenty zahrnují alkyl, alkoxy, atom halogenu, skupinu kyano, skupinu nitro, trihalogenmethyl a thioalkoxy.

Aryloxy se vztahuje ke skupině aryl-Ο-, kde arylová skupina je jako bylo definováno výše, v to počítaje popřípadě substituované arylové skupiny jako bylo také definováno výše .

Karboxyl se vztahuje ke skupině -C(O)OH; karboxylové estery se vztahuje ke skupinám -C(0)O-alkyl, -C(0)0substituovaný alkyl, -C(0)0-aryl, -C(0)O-heteroaryl a C(0)O-heterocyklický systém; a aminokarboxylové estery se vztahuje ke skupinám -NHC(O)OR, kde R je alkyl, • · ·

- 2fc ·· ·· • · · · • · · · • · · · · · • · substituovaný alkyl, aryl, cykloalkyl, heteroaryl nebo heterocyklický systém.

Cykloalkyl se vztahuje k cyklickým alkylovým skupinám, obsahujícím od 3 do 10 atomů uhlíku, které mají jednoduchý cyklický kruh nebo více kondenzovaných kruhů, které mohou být popřípadě substituovány 1 až 3 alkylovými skupinami. Takové cykloalkylové skupiny zahrnují, uvedeno jako příklad, jednoduché kruhové struktury jako je cyklopropyl, cyklobutyl, cyklopentyi, cyklooktyl, 1methylcyklopropyl, 2-methylcyklopentyl, 2- methylcyklooktyl a podobně nebo vícenásobné kruhové struktury jako je adamantanyl a podobně.

Cykloalkenyl se vztahuje k cyklickým alkenylovým skupinám, obsahujícím od 4 do 10 atomů uhlíku, které mají jednoduchý cyklický kruh a alespoň jedno místo vnitřního nenasycení, které mohou být popřípadě substituovány 1 až 3 alkylovými skupinami. Příklady vhodných cykloalkenylových skupin zahrnují například cyklobut-2-enyl, cyklopent-3enyl, cyklookt-3-enyl a podobně.

Halo nebo halogen se vztahuje k atom fluoru, atom chloru, atom bromu a atom jodu a výhodně buď k atom fluoru nebo atomu chloru.

Heteroaryl se vztahuje k monovalentní aromatické karbocyklické skupině, obsahující od 1 do 10 atomů uhlíku a 1 až 4 heteroatomy, zvolené ze souboru, zahrnujícího atom kyslíku, atom dusíku a atom síry, uvnitř kruhu.

• · • ·

4» · · · • · · · • ··· ···

Pokud není jinak omezeno definicí pro jednotlivý substituent, takové heteroarylové skupiny mohou být popřípadě substituovány 1 až 3 substituenty, zvolenými ze souboru, zahrnujícího alkyl, alkoxy, aryl, aryloxy, atom halogenu, skupinu nitro, heteroaryl, hydroxy, thioalkoxy, thioaryloxy a podobně. Takové heteroarylové skupiny mohou mít jednoduchý kruh (například pyridyl nebo furyl) nebo více kondenzovaných kruhů (například indolizinyl nebo benzothienyl). Výhodný heteroaryly zahrnují pyridyl, pyrrolyl a furyl.

Heteroaryloxy se vztahuje ke skupině heteroaryl-Ο-, kde heteroaryl je jako bylo definováno výše, v to počítaje popřípadě substituované heteroarylové skupiny jako bylo také definováno výše.

Heterocykl nebo heterocyklický systém se vztahuje k monovalentní nasycené nebo nenasycené skupině, která má jednoduchý kruh nebo více kondenzovaných kruhů, obsahuje d 1 do 10 atomů uhlíku a od 1 do 4 heteroatomů, zvolených ze souboru, zahrnujícího atom dusíku, atom síry nebo atom kyslíku, uvnitř kruhu.

Pokud není jinak omezeno definicí pro heterocyklický substituent, takové heterocyklické skupiny mohou být popřípadě substituovány 1 do 3 substituenty, zvolenými ze souboru, zahrnujícího alkyl, alkoxy, aryl, aryloxy, atom halogenu, skupinu nitro, heteroaryl, thioalkoxy, thioaryloxy a podobně. Takové heterocyklické skupiny mohou mít jednoduchý kruh (například piperidinyl nebo tetrahydrofuranyl) nebo více kondenzovaných kruhů.

- &-·· ·· • · · · • · · · • · · · · · • ·

Příklady heterocyklů a heteroarylů zahrnují, aniž by tím byly omezeny, pyrrol, imidazol, pyrazol, pyridin, pyrazin, pyrimidin, pyridazin, indolizin, isoindol, indol, indazol, purin, chinolizin, isochinolin, chinolin, ftalazin, naftylpyridin, chinoxalin, chinazolin, cinnolin, pteridin, karbazol, karbolin, fenanthridin, akridin, fenanthrolin, isothiazol, fenazin, isoxazol, fenoxazin, fenothiazin, imidazolidin, imidazolin, piperidin, piperazin, indolin, ftalimide, 1,2,3,4- tetrahydroisochinolin, 4,5,6,7tetrahydrobenzo[b]thiofen, thiazol, thiazolidin, thiofen, benzo[b]thiofen, morfolino, piperidinyl, pyrrolidin, tetrahydrofuranyl a podobně.

Heterocyclyloxy se vztahuje ke skupině heterocykl-O-, kde heterocyklický systém, je jako bylo definováno výše, v to počítaje popřípadě substituované heterocyklické skupiny, jako bylo také definováno výše.

Thiol se vztahuje ke skupině -SH.

Thioalkoxy se vztahuje ke skupinám -S-alkyl, kde alkyl má stejný význam, jaký byl definován výše .

Thio-substituovaná alkoxy skupina se vztahuje ke skupinám -S-substituovaná alkoxy, kde substituovaná alkoxy skupina je jako bylo definováno výše.

Thioaryloxy se vztahuje ke skupině aryl-S-, kde arylová skupina je jako bylo definováno výše, v to počítaje popřípadě substituované arylové skupiny jako bylo také definováno výše.

• 99 9 9 ·9

9 9 99 9 9 9 · ·

99 9 9 9 9 9

Thioheteroaryloxy se vztahuje ke skupině heteroaryl-S-, kde heteroarylové skupina je jako bylo definováno výše, v to počítaje popřípadě substituované arylové skupiny, jako bylo také definováno výše.

Farmaceuticky přijatelná sůl se vztahuje k farmaceuticky přijatelné soli sloučeniny obecného vzorce I, kde soli jsou odvozeny od řady organických a anorganických iontů dobře známých ze stavu techniky a zahrnují, uvedeno pouze jako příklad, ionty sodíku, draslíku, vápníku, hořčíku, amonium, tetraalkylamonium a podobně; a pokud molekula obsahuje bázickou funkční skupinu, soli organických nebo anorganických kyselin, jako je hydrochlorid, hydrobromid, tartarát, mesylát, octan, maleát, oxalát a podobně.

Příprava sloučenin

Sloučeniny obecného vzorce I je možné snadno připravit několika divergentními syntetickými cestami, přičemž konkrétní cesta je zvolena vzhledem k obtížnosti přípravy sloučeniny, komerční dostupnosti výchozích materiálů a podobně.

První způsob syntézy zahrnuje konvenční kopulaci kyselého derivátu s primárním aminem esterifikované aminokyseliny, jak je znázorněno v reakci (1), který následuje:

··

3CC ί• · · · • ··· ··· o

II

CX OH I

X'

HΉ OR' I

R² 2

0)

X'

II I

O R² ve které R¹, R², X' a X mají význam definovaný výše a R¹ představuje výhodně atom vodíku nebo alkylovou skupinu.

reagenty, jako dobře známých

Reakce (1) zahrnuje pouze kopulace vhodného kyselého derivátu /1 s primárním aminem /2 aminokyseliny/esterem aminokyseliny za podmínek, které vedou k vytvoření Nacetylového derivátu /3. Tato reakce se běžně provádí v peptidové syntéze a způsoby syntézy, které jsou v ní používané mohou být také použity pro přípravu N-acetyl aminokyseliny/esteru aminokyseliny /3. Mohou být například pro usnadnění kopulace použity dobře známé kopulační jsou karbodiimidy, se současným použitím aditiv jako je N-hydroxysukcinimid, 1·· · · ·· ·· • · ftft · · ftftft.'· • ft · · · ft · · •ftft · · · ftftft ftftft ft“ ft · · · · hydroxybenzotriazol a podobně. Reakce se běžně provádí v inertním aprotickém ředidle jako je dimethylformamid, dichlormethan, chloroform, acetonitril, tetrahydrofuran a podobně.

Alternativně ve výhodném provedení předloženého vynálezu mohou být použity v reakci (1) halogenovodíkové sloučeniny /1 a pokud jsou takto použity, je typické použít je v přítomnosti vhodné báze pro vychytávání kyseliny, vytvořené v průběhu reakce. Vhodné báze zahrnují, uvedeno jako příklad, triethylamin, diisopropylethylamin, Nmethylmorfolin a podobně.

Reakce (1) je výhodně prováděna při teplotě od přibližně 0 °C do přibližně 60 °C až do ukončení reakce, což obvykle nastává po uplynutí od 1 do přibližně 24 hodin. Po ukončení reakce se N-acetyl aminokyselina/ester aminokyseliny /3 izoluje obvyklými způsoby, v to počítaje precipitaci, chromatografii, filtraci a podobně nebo alternativeně v případě esteru, se tento hydrolyzuje na odpovídající karboxylovou kyselinu bez purifikace a/nebo izolace jiným než konvenčním zpracováním (například vodnou extrakcí a podobně).

Jestliže se vytvoří N-acetylester aminokyseliny, je typicky přeměněn na odpovídající kyselinu před kopulací s aminem HNR³R³'. Kopulace je provedena použitím dobře známých peptidových kopulačních chemických postupů s dobře známými kopulačními reagenty jako jsou karbodiimidy se současným použitím dobře známých aditiv jako je N-hydroxysukcinimid,

1-hydroxybenzotriazol a podobně, které mohou být použity pro usnadnění kopulace. Reakce se běžně provádí v inertním • · • · ·· • · · • · · · » • · · · • · · · • ··· ··· • · aprotickém polárním ředidle jako je dimethylformamid, dichlormethan, chloroform, acetonitril, tetrahydrofuran a podobně. Alternativně může být esterová skupina sloučeniny /3 v některých případech přeměněna přímo na amidovou skupinu konvenční ester/amidovou výměnnou reakcí, která je dobře známa ze stavu techniky.

V reakci (1) je každý z reagentů (derivát octové kyseliny /1 a aminokyselina/ester aminokyseliny /2) dobře znám ze stavu techniky a mnoho z nich je komerčně dostupných.

Alternativně sloučeniny obecného vzorce I mohou být připraveny nejprve vytvořením amidu aminokyseliny a potom Ν'-acetylací těchto esterů. To znamená, že amin HNR³R³' je kopulován na N'-blokovanou aminokyselinu Blok-NHCHR²COOH za konvenčních kopulačních podmínek a tím se získá N'blokovaný amid aminokyseliny Blok-NHCHR²C (0) NR³R³'. Blokující skupina se potom odstraní za konvenčních podmínek a tím se získá volný amin, který se potom N'-acetyluje způsobem popsaným výše a tím se získají sloučeniny obecného vzorce I.

Po ukončení kopulace a N'-acetylace (v libovolném pořadí) mohou být výsledné amidy derivatizovány konvenčními chemickými postupy a tím se získají deriváty syntetizovaných sloučenin. Například reaktivní funkční skupina, která je blokována buď na skupině R² a/nebo na skupině R³ může být odblokována a potom derivatizována. Například Boc-chráněná amino skupina na R² (například lysinový postranní řetězec) může být odblokována po syntéze a amino skupina může být acylována nebo jiným způsobem derivatizována.

·· · · • ··

·· ·· • · · · • · · · ··· ··· ·· ··

Sloučeniny popsané výše mohou být také připraveny použitím karbodiimidových peptidových kopulačních reagentů na polymerním nosiči. Byla například popsána polymerové nesená forma EDC (Tetrahedron Letters, 34(48), 1685 (1993) )¹⁰. Kromě toho byl objeven nový karbodiimidový kopulační reagent, PEPC a jeho odpovídající polymerové nesené formy, které jsou velmi užitečné pro přípravu sloučenin podle předloženého vynálezu.

Polymery vhodné pro použití při přípravě kopulačních reagentů na polymerním nosiči jsou buď komerčně dostupné nebo mohou být připraveny způsoby dobře známý odborníkovi v oboru polymerů. Vhodný polymer musí nést volné postranní řetězce nesoucí skupiny, které reagují s koncovým aminem karbodiimidu. Takové reaktivní skupiny zahrnují atom chloru, atom bromu, atom jodu a methansulfonyl. Výhodně je reaktivní skupina tvořena chlormethylovou skupinou. Kromě toho kostra polymerumusí být inertní vůči karbodiimidu a reakčním podmínkám, za kterých bude konečný polymerové vázaný kopulační reagent používán.

Jisté hydroxymethylované pryskyřice mohou být přeměněny na chlormethylované pryskyřice, použitelné pro přípravu kopulačních reagentů na polymerních nosičích. Příklady těchto hydroxylovaných pryskyřice zahrnují 4-hydroxymethylfenylacetamidomethylovou pryskyřici (pryskyřice Pam) a 4benzyloxybenzylalkoholovou pryskyřici (pryskyřice Wang), dodávané společností Advanced Chemtech, Louisville, Kentucky, USA (viz Advanced Chemtech 1993-1994 katalog, strana 115) . Hydroxymethylové skupiny těchto pryskyřice ·· • 99

9 99 99

9 9 9 9 9 9 9

9 9 9 9 9

9 9 999999

9 9 9

999 999 99 9C mohou být přeměněny na požadované chlormethylové skupiny kterýmkoli ze způsobů, dobře známých odborníkovi v oboru.

Výhodné pryskyřiceé jsou chlormethylované styrenové/divinylbenzenové pryskyřice v důsledku jejich snadné komerční dostupnosti. Jak již jméno naznačuje, tyto pryskyřices jsou již chlormethylovány a nevyžadují žádné chemické modifikace před použitím. Tyto pryskyřice jsou obchodně známy jako Merrifieldovy pryskyřice a jsou dodávané společností Aldrich Chemical Company, Milwaukee, Wisconsin, USA (viz Aldrich 1994-1995 katalog, strana 899). Způsoby přípravy PEPC a jeho polymerové nesených forem jsou naznačeny v následujícím schématu.

* ·

✓^LG

Funkcionalizovaná pryskyřice kde * inertní polymer a LG = Cl, Br, I nebo OSO₂CH₃

Takové způsoby jsou popsány úplnějším způsobem v U.S. Patentové přihlášce č. 60/019,790 podané 14. června 1996, která je zde zahrnuta ve své celistvosti jako reference. Stručně řečeno se PEPC připraví nejprve reakcí ethylisokyanatanu s 1-(3-aminopropyl)pyrrolidinem. Výsledná močovina se zpracovává 4-toluensulfonylchloridem a tím se získá PEPC. Polymerové nesená forma se připraví reakcí PEPC ·· ·· · · ···· ·· · · · · · · « · « · · « ··«*·· se vhodnou pryskyřicí za standardních podmínek a tím se získá požadovaný reagent.

Kopulační reakce karboxylové kyseliny, používající těchto reagentů, jsou prováděny při teplotě od zhruba teploty okolí do přibližně 45 °C, po dobu od přibližně 3 do 120 hodin. Typicky může být produkt isolován promýváním reakční směsi, která má být připravena, CHCI3 a koncentrací zbývající organické fáze za sníženého tlaku. Jak bylo diskutováno výše, izolace produktu z reakční směsi, pokud byl použit polymerně vázaný reagent, je velmi zjednodušeno, neboť vyžaduje pouze filtraci reakční směsi a potom koncentraci filtrátu za sníženého tlaku.

Další způsoby přípravy esterů jsou podány v příkladech uvedených níže.

V těchto způsobech syntézy mohou výchozí materiály obsahovat chirální centrum (například alanin) a pokud je použit racemický výchozí materiál, výsledný produkt je směs R,S enantiomerů. Alternativně může být použit chirální isomer výchozího materiálu a jestliže použitý reakční protokol neracemizuje tento výchozí materiál, je získán chirální produkt. Takové reakční protokoly mohou zahrnovat inverzi chirálního centra v průběhu syntézy.

V souladu s tím, pokud není uvedeno jinak, produkty podle předloženého vynálezu jsou směsi R,S enantiomerů. Pokud je však požadován chirální produkt, pak chirální produkt výhodně odpovídá L-aminokyselinovému derivátu. Alternativně chirální produkty mohou být získány purifikačními způsoby, které separují enantiomery z R,S směsi a tím se získá jeden • · · · · · · ·· • · nebo druhý stereoisomer. Takové techniky jsou dobře známy ze stavu techniky.

Farmaceutické přípravky

Pokud jsou používány farmaceuticky, jsou sloučeniny obecného vzorce I obvykle podávány ve formě farmaceutických kompozic. Tyto sloučeniny mohou být podávány řadou různých cest, které zahrnují cestu orální, rektální, transdermální, subkutánní, intravenózní, intramuskulární a intranasální. Tyto sloučeniny jsou účinné jako injektovatelné i jako orální kompozice. Takové kompozice mohou být připraveny způsobem dobře známým ve farmaceutickém oboru a obsahují alespoň jednu účinnou sloučeninu.

Tento vynález se také týká farmaceutických kompozic, které obsahují jako účinnou složku jednu nebo více sloučenin obecného vzorce I uvedeného výše spolu s farmaceuticky přijatelným nosičem. Při vytváření kompozic podle předloženého vynálezu se účinná složka obvykle smísí s excipientem, zředí excipientem nebo se obklopí takovým nosičem, který může být ve formě kapslí, oplatek, sáčků nebo jiných obalů. Pokud excipient slouží jako ředidlo, může být představován pevným, polotuhým nebo kapalným materiálem, který slouží jako vehikulum, nosič nebo médium pro účinnou složku. Kompozice tedy může být ve formě tablet, pilulek, prášků, pastilek, sáčků, oplatek, elixírů, suspenzí, emulzí, roztoků, sirupů, aerosolů (ve formě pevné látky nebo v kapalném médiu), mastí, obsahujících například až do 10% hmotnostních účinné sloučeniny, měkkých a tvrdých želatinových kapslí, Čípků, sterilních injektovatelných roztoků a sterilně balených prášků.

• 00 0 0 00 00 00 0 0 00 00 0 0 · '«

00 0 0 0000 00 00 0 0 0 0 0 0000 0 0 0 0 0 0 0

000 00 000 000 00 00

Při přípravě přípravku může být nutné rozemlít účinnou sloučeninu, aby bylo dosaženo odpovídající velikosti částic před jejich kombinací s dalšími složkami. Pokud je účinná sloučenina v zásadě nerozpustná, je obvykle rozemleta na velikost částic menší než 200 mesh. Jestliže je účinná sloučenina v zásadě rozpustná ve vodě, velikost částic se normálně upraví mletím na takovou velikost, aby bylo dosaženo v zásadě stejnoměrného rozptýlení v přípravku, například na velikost přibližně 40 mesh.

Některé příklady vhodných excipientů zahrnují laktózu, dextrózu, sacharózu, sorbitol, manitol, škroby, arabskou gumu, fosforečnan vápenatý, algináty, tragacant, želatinu, křemičitan vápenatý, mikrokrystalickou celulózu, polyvinylpyrrolidon, celulózu, sterilní vodu, sirup a methylcelulózu. Přípravky mohou dále obsahovat: lubrifikační činidla jako je talek, stearan hořečnatý a minerální olej; smáčedla; emulsifikační a suspenzní činidla; konzervační činidla jako je methyl- a propylhydroxybenzoát; sladidla a ochucovadla. Kompozice podle předloženého vynálezu mohou být připraveny tak, aby poskytovaly okamžité, trvalé nebo zpožděné uvolňování účinné složky po jejím podání pacientovi, použitím procedur známých ze stavu techniky.

Kompozice jsou výhodně připraveny jako jednotková dávka, přičemž každá dávka obsahuje od přibližně 5 do přibližně 100 mg, obvykleji od přibližně 10 do přibližně 30 mg, účinné složky. Výraz „jednotková dávka znamená fyzicky diskrétní jednotku, vhodnou jako jedna dávka pro člověka nebo další savce, každá jednotka přitom obsahuje předem

4 . ·; -···.' . 44* ' • 4 4

- * ·

♦ · · • · · · 4 44· 449

9

9 44 stanovené množství účinné látky, vypočtené tak, aby vyvolalo požadovaný terapeutický účinek, spolu s vhodným farmaceutickým excipientem. Výhodně se sloučenina obecného vzorce I uvedeného výše používá tak, že nečiní více než 20 hmotnostních procent farmaceutické kompozice, výhodně ne výše než 15 hmotnostních procent, zatímco zbývající část je tvořena farmaceuticky inertním nosičem nebo nosiči.

Účinná sloučenina působí v širokém rozmezí dávek a je obecně podávána ve farmaceuticky účinném množství. Je však zřejmé, že množství sloučeniny, které bude skutečně podáváno, bude určeno lékařem v závislosti na relevantních okolnostech, které zahrnují stav, který má být léčen, zvolený způsob podávání, sloučeninu, která je podávána, věk, váhu a odezvu individuálního pacienta, závažnost pacientových symptomů a podobně.

Pro přípravu pevných kompozic jako jsou tablety se hlavní účinná složka smíchá s farmaceutickým excipientem, aby vytvořila pevnou předběžně zpracovanou kompozici, obsahující homogenní směs sloučenin podle předloženého vynálezu. Pokud se o této předběžně zpracované kompozici mluví jako o homogenní, míní se tím, že účinná složka je dispergována stejnoměrně v celé kompozici, tak aby kompozice mohla být snadno rozdělena do účinných jednotkových dávek, jako jsou tablety, pilulky a kapsle, které obsahují totéž množství účinné látky. Tato pevná předběžně zpracovaná kompozice se potom rozděluje na jednotkové dávky typu, který byl popsán výše a které obsahují například od přibližně 0,1 do přibližně 500 mg účinné složky podle předloženého vynálezu.

materiálů, jako jsou polymerických kyselin a

Tablety nebo pilulky podle předloženého vynálezu mohou být potahované nebo mít jiné složení, aby se vytvořila dávková forma, která poskytuje výhodu prodlouženého působení. Například mohou tablety nebo pilulky obsahovat vnitřní dávku složky a vnější dávku složky, přičemž vnější dávka vytváří obal vnitřní dávky. Tyto dvě složky dávkové formy mohou být odděleny enterickou vrstvou, která slouží k tomu aby zabránila desintegraci v žaludku a dovolila vnitřní složce projít neporušena do dvanácterníku a nebo aby bylo dosaženo jejího zpožděného uvolňování. Pro vytvoření takové enterické vrstvy nebo povlaku lze použít množství materiály obsahující řadu směsí polymerických kyselin s materiály jako je šelak, ketylalkohol a acetát celulózy.

Kapalné formy, ve kterých mohou být obsaženy nové kompozice podle předloženého vynálezu, mohou být vytvořeny pro podávání orálním způsobem nebo ve formě injekce a zahrnují vodné roztoky vhodně ochucených sirupů, vodné nebo olejové suspenze a ochucené emulze s jedlými oleji jako je olej bavlníkového semene, sezamový olej, kokosový olej nebo podzemnicový olej, stejně tak jako elixíry a podobná farmaceutická vehikula.

Kompozice pro inhalaci nebo vdechování zahrnují roztoky a suspenze ve farmaceuticky přijatelných vodných nebo organických rozpouštědlech nebo jejich směsi a prášky. Kapalné a pevné kompozice mohou obsahovat vhodné farmaceuticky přijatelné excipienty jaké byly popsány výše. Výhodně jsou takové kompozice podávány orální nebo nasální respirační cestou pro vyvolání lokálního nebo systemického • ·

účinku. Kompozice ve výhodně farmaceuticky přijatelných rozpouštědlech mohou být rozprašovány použitím inertních plynů. Atomizované roztoky mohou být přímo vdechovány z rozprašovacího zařízení nebo může být rozprašovací zařízení připevněno k obličejové masce nebo dýchacímu přístroji s přerušovaným přetlakem. Roztoky, suspenze nebo práškové kompozice mohou být podávány, výhodně orálně nebo nasálně, ze zařízení, které podávají přípravek vhodným způsobem.

Následující příklady přípravků ilustrují farmaceutické kompozice podle předloženého vynálezu.

Příklad přípravku 1

Byly připraveny tvrdé želatinové kapsle, obsahující následující složky.

Složka

Množství (mg/kapsle)

Účinná složka Škrob

Stearan hořečnatý

30,0 305, 0 5,0

Výše uvedené složky byly smíchány a plněny do tvrdých želatinových kapslí v množství 340 mg.

Příklad přípravku 2

Byly připraveny tablety, používajíce složky uvedené níže:

Množství

	......'0-00 • 9 9 9 0 00 • · · · 0 0 0 - 42 - .....	• 0 . . ‘00 : -00 • · · · : ·. · · :· ·. · · 0 0« ··.. • 9 000000 • ·0: '····· : 0 • 00 0·· 00 00
Složka (mg/tableta)
Účinná složka	25,0
Celulóza, mikrokrystalická 200,0
Koloidní oxid křemičitý	10,0
Kyselina stearová	5,0
Složky byly smíchány a	lisovány do tvaru	tablet, z nichž

každá měla hmotnost 240 mg.

Příklad přípravku 3

Byl připraven suchý práškový inhalační přípravek s obsahem následujících složek:

Složka Hmotn. %

Účinná složka 5

Laktóza 95

Účinná složka jje míchána s laktózou a směs je vložena do inhalačního zařízení se suchým práškem.

Příklad přípravku 4

Tablety, každá obsahující 30 mg účinné složky, byly připraveny následujícím způsobem:

Složka

Množství (mg/tablet) ·· · · ·· ·· · · · · • ·· ♦ · · ·· · • · · · · · · ··· ··· • ♦ * ♦ · · · ··· ·· ··· ··· ·· ·Φ

Účinná složka 30,0 mg

Škrob 45,0 mg

Mikrokrystalická celulóza35,0 mg

Polyvinylpyrrolidon (jako 10% roztok ve sterilní vodě) 4,0 mg

Sodný karboxymethylový škrob4,5 mg

Stearan hořečnatý 0,5 mg

Talek_ 1,0 mg

Celkově 120 mg

Účinná složka, škrob a celulóza se prosívají sítem s velikostí ok 20 U.S. mesh a pečlivě se smíchají. Roztok polyvinylpyrrolidonu se smíchá se vzniklým práškem, a prosívá sítem s velikostí ok 16 U.S. mesh. Takto vytvořené granule se suší při teplotě 50 až 60 °C a prosívají sítem s velikostí ok 16 U.S. mesh. Sodný karboxymethylový škrob, stearan hořečnatý a talek, předem prosívané sítem s velikostí ok 30 U.S. mesh, byly potom přidány ke granulím, a po smíchání se látka lisovala na tabletovacím stroji a tím se získaly tablety, které každá vážila 120 mg.

Příklad přípravku 5

Kapsle, každá obsahující 40 mg léku, byly vytvořeny následujícím způsobem:

Složka

Množství (mg/kapsle)

·'

Účinná složka Škrob

Stearan hořečnatý

40,0 mg 109,0 mg 1,0 mg

Celkově

150,0 mg

Účinná složka, škrob a stearan hořečnatý byly smíchány, prosívány sítem s velikostí ok 20 U.S. mesh a plněny do tvrdých želatinových kapslí v množství 150 mg.

Příklad přípravku 6

Čípky, každý obsahující 25 mg účinné složky, byly vytvořeny následujícím způsobem:

Složka Množství

Účinná složka 25 mg

Glyceridy nasycených mastných kyselin do 2,000 mg

Účinná složka byla prosívána sítem s velikostí ok 60 U.S. mesh a suspendována v glyceridech nasycených mastných kyselin , které byly předtím roztaveny použitím minimálního množství tepla. Směs byla potom vlita do čípkové formy o nominální kapacitě 2,0 g a ponechána ochladnout.

Příklad přípravku 7

Suspenze, obsahující 50 mg léku v dávce 5,0 ml, byly vytvořeny následujícím způsobem:

• ·

Složka

Množství

Účinná složka Xanthanová guma

50,0 mg 4,0 mg

Sodná karboxymethylcelulóza (11%) Mikrokrystalická celulóza (89%)50,0 mg

Sacharóza

Benzoát sodný Ochucovadlo a barvivo Purifikovaná voda do

1,75 g

10,0 mg

q.v.

5,0 ml

Účinná složka, sacharóza a xanthanová guma byly smíchány, prosívány sítem s velikostí ok 10 U.S. mesh a potom smíchány s předem vytvořeným roztokem mikrokrystalické celulózy a sodné karboxymethylcelulózy ve vodě. Benzoát sodný, ochucovadlo a barvivo byly rozpuštěny v malém množství vody a byly přidány za míchání. Potom bylo přidáno dostatečné množství vody pro dosažení požadovaného objemu.

•« • ·· r · · *, » · ' , ' ·¹· ' :

··· ^:· · · ·

Příklad přípravku 8

Množství

Složka (mg/kapsle)

Účinná složka 15,0 mg

Škrob 407,0 mg

Stearan hořečnatý_3,0 mg

Celkově 425,0 mg

Účinná složka, škrob a stearan hořečnatý byly smíchány, prosívány sítem s velikostí ok 20 U.S. mesh a plněny do tvrdých želatinových kapslí v množství 560 mg.

Příklad přípravku 9

Subkutánní přípravek může být připraven následujícím způsobem:

Složka

Množství

Účinná složka 5,0 mg

Kukuřičný olej 1 ml

Příklad přípravku 10

Topický přípravek může být připraven následujícím způsobem:

• · » · · ··· I ·· * · ·

Složka

Množství

Účinná složka 1-10 g Emulsifikační vosk 30 g Tekutý parafín 20 g Měkký bílý parafín do 100 g

Měkký bílý parafín byl zahříván až do roztavení. Byl přidán kapalný parafín a emulsifikační vosk a směs byla míchána do rozpuštění. Byla přidána účinná složka a míchání pokračovalo do vytvoření disperze. Směs byla potom chlazena, dokud neztuhla.

Další výhodné přípravky, využívající způsobu podle předloženého vynálezu používají transdermální podávači zařízení („náplasti) . Takové transdermální náplasti mohou být používány za účelem dosažení kontinuální nebo diskontinuální infuze sloučenin podle předloženého vynálezu v řízených množstvích. Konstrukce a použití transdermálních náplastí pro podávání farmaceutického činidla je dobře známá ze stavu techniky. Viz například U.S. Patent 5,023,252, vydaný 11. června 1991, který je zde zahrnut jako reference. Takové náplasti mohou být konstruovány pro podávání farmaceutického činidla kontinuálním nebo nárazovým způsobem nebo v případě potřeby.

Často je žádoucí nebo nutné dopravit farmaceutické kompozice do mozku, buď přímo nebo nepřímo. Přímé techniky obvykle zahrnují umístění katetru pro podávání léku do příjemcova ventrikulárního systému, který obejde hematoencefalickou bariéru. Jeden takový implantovatelný podávači systém, použitý pro transport biologických faktorů

	• fc		•	•	• ·	fc ·
• · ·		c	• ·	fc ·	fc fc	• ·
•	• fc		fc	•	• ·	fc ·
• ·		<· ·	•	•	• ·· ·	• · ·
• ·		e	•	•	•	fc
fc · »	• fc		• · ·	• · ·	« ·	fc fc

do specifických anatomických oblastí těla je popsán v U.S.

Patentu č. 5,011,472, který je zde zahrnut jako reference.

Nepřímé techniky, kterým je obecně dávána přednost, obvykle zahrnují přípravu kompozice tak, aby poskytovala latenciaci léku přeměnou hydrofilního léku na lipidové rozpustný lék. Latenciace je obvykle dosažena blokováním hydroxylové, karbonylové, sulfátové a primární aminové skupiny, která se ve sloučenině nachází, aby se látka stala více rozpustnou v lipidech a tím i vhodnější k přenosu přes hematoencefalickou bariéru. Alternativně může být dodávání hydrofilního léku zesíleno intra-arteriální infuzi hypertonických roztoků, které přechodně otevřou hematoencefalickou bariéru.

Další vhodné přípravky pro použití podle předloženého vynálezu mohou být nalezeny v Remingron’s Pharmaceutical Sciences, Mace Publishing Company, Philadelphia, PA, 17th ed. (1985).

Použitelnost

Sloučeniny a farmaceutické kompozice podle předloženého vynálezu jsou použitelné pro inhibici uvolňování βamyloidového peptidu a/nebo jeho syntézy a na základě toho mohou být použity pro léčení Alzheimerovy nemoci u savců, v to počítaje člověka.

Jak již bylo uvedeno výše, sloučeniny které byly popsány výše jsou vhodné pro použití v množství systémů podávání léků, které byly uvedeny výše. Kromě toho, za účelem zvýšení poločasu pobytu podávané sloučeniny v séru mohou φ φ · · · φ· · · φ ·

Φ φ Φ Φ Φ φ φ φφφ φφφ • φ · • φ φ φ · φ φ • φ φ φ φ

♦ ΦΦ být sloučeniny enkapsulovány, vloženy do lumenálních liposomů, připraven jako koloid nebo upraveny další obvyklou technikou, která dosahuje prodloužení poločasu pobytu sloučeniny v séru. Řada způsobů, které jsou použitelné pro přípravu liposomů, jsou popsány například v patentech Szoka a kol., U.S. Patenty č. 4,235,871, 4,501,728 a 4,837,028, které jsou zde všechny zahrnuty jako reference.

Množství sloučeniny, podávané pacientovi, se mění v závislosti na podávané látce, cíli podávání, jako je profylaxe nebo terapie, stavu pacienta, způsobu podávání a podobně. Při terapeutickém podávání jsou kompozice podávány pacientovi, který již trpí Alzheimerovou nemocí, v množství dostatečném k alespoň částečnému zastavení dalšího vzniku symptomů nemoci a jejích komplikací. Množství vhodné pro dosažení tohoto cíle je zde označováno jako „terapeuticky účinná dávka. Množství, které je účinné pro toto použití, závisí na úsudku ošetřujícího lékaře a vychází z faktorů jako je stupeň nebo závažnost Alzheimerovy nemoci u pacienta, věk, váha a celkový stav pacienta a podobně. Výhodně, při použití jako terapeutické látky, jsou sloučeniny podle předloženého vynálezu podávány v dávkách, které jsou v rozmezí od přibližně 1 do přibližně 500 mg/kg/den.

V případě profylaktického podávání jsou kompozice podávány pacientovi, u kterého je riziko vývinu Alzheimerovy nemoci (určené například genetickým vyhledáváním nebo na základě rodinné anamnézy), v množství dostatečném k inhibici nástupu symptomů nemoci. Množství vhodné pro dosažení tohoto cíle je zde označováno jako „profylakticky účinná ♦ '.«·-·· »' ·.' v 9 ' 99 ·· • 9 · 9 9 9 9 9 « 99 9 ·9 · · 9999

9999 9 · 999 999

- 9 9 ^: · 9 9 9 9 9

999 99 999 999 99 99 dávka. Množství, které je účinné pro toto použiti, závisí na úsudku ošetřujícího lékaře a vychází z faktorů jako je stupeň nebo závažnost Alzheimerovy nemoci u pacienta, věk, váha a celkový stav pacienta a podobně. Výhodně, při použití jako profylaktické látky, jsou sloučeniny podle předloženého vynálezu podávány v dávkách, které jsou v rozmezí od přibližně 1 do přibližně 500 mg/kg/den.

Jak bylo uvedeno výše, sloučeniny jsou podávány pacientovi ve formě farmaceutických kompozic popsaných výše. Tyto kompozice mohou být sterilizovány obvyklými sterilizačními technikami nebo mohou být sterilně filtrovány. Výsledné vodné roztoky mohou být baleny pro použití tak jak byly získány, mohou být lyofilizovány, přičemž lyofilizovaný přípravek může být kombinován se sterilním vodným nosičem před podáváním. pH přípravku sloučeniny je typicky mezi 3 a 11, výhodněji od 5 do 9 a nej výhodněji od 7 do 8. Je zřejmé, že použití některých z uvedených excipientů, nosičů nebo stabilizátorů povede k vytvoření farmaceutických solí.

Následující syntetické a biologické příklady jsou podány pro ilustraci předloženého vynálezu a není jejích cílem jakýmkoli způsobem omezit rozsah předmětu předloženého vynálezu. Pokud není uvedeno jinak, všechny teploty se udávají ve stupních Celsia.

• · * · ·· ·· • ·0 · · • f.- 19 ? · : · • 9. 4 4 4

4 44 114 44

1 44

1. 1 4

4.9 4

499 499

4

44

Příklady provedení vynálezu

V příkladech uvedených níže mají následující zkratky níže uvedené významy. Pokud je použita zkratka, která není definována, má svůj obecně přijímaný význam.

aq = vodný

Boc = terč.-butoxykarbonyl

BOP = benzotriazol-l-yloxy-tris(dimethylamino)fosfonium hexafluorfosfát bd = široký doublet bs = široký singlet c = koncentrace (g/ml) cc = kubický centimeter

CDI = 1,1'-karbonyldiimidazol d = doublet dd = doublet doubletů

DMAP = dimethylaminopyridin

DMF = dimethylformamid

DMSO = dimethylsulfoxid

EDC = 1-(3-dimethylaminopropyl)-3-ethylkarbodiimid, hydrochlorid

EDTA = ethylen diamin tetraoctová kyselina eq. = ekvivalent

EtOAc = ethylacetát

EtOH = ethanol g = gram h = hodina

L = litr m = multiplet

M% = molární procento

4.	• 4	'7-9-.''	'4 ·.	. 4 4	4 4 :
4 4 4	;. 4, ' ‘	• 4	• 4	·· 4 · 4	4 ' 4
4	• •'-..i’	9 ·	4	. · 4 »	4 4
4 9		4	4 '	:9'·· 999	4 4 4
4 4	i 4 ',···	4	• -4--.-	•	4
• 4 4'	44	4 4 4	4 4 4	4 4	4 4

max = maximum

MeOH = methanol meq - miliekvivalent mg - miligram ml = mililitr mm - milimeter mM = milimolární mmol = milimol mp = teplota tání

N = normální ng = nanogram nm = nanometr

OD = optická hustota (optical density)

PEPC = 1-(3-(l-pyrrolidinyl)propyl)-3-ethylkarbodiimid pg = pikogram pM = pikomolární

Obecná procedura A'

Kopulace R^XC(X*) (X) C(0)Cl s H₂NCH (R²) C (0) XR³

Do míchaného roztoku hydrochloridu iso-butylesteru (D,L)alaninu (z Příkladu B uvedeného níže) (4,6 mmolů) v 5 ml pyridinu bylo přidáno 4,6 mmolů chloridu kyseliny. Okamžitě nastala precipitace. Směs byla míchána po dobu 3,5 hodin, zředěna 100 ml diethyletheru, promývána 10 % HCI třikrát, jednou solankou, 20 % jednou uhličitanem draselným a jednou solankou. Roztok byl sušen nad síranem hořečnatým, filtrován a odpařen za sníženého tlaku a tím se získal produkt. Další estery aminokyselin mohou také být použity v této proceduře.

• ft· ft · ftft ftft ftftft · · · ftft · ftft ft • ·· ' ft ftftft·· •ftftft · ftft ft·· ··· • ftftft · · ·

Obecná procedura B'

Kopulace R^XC (X' ) (X) C (0) OH s H₂NCH (R²) C (O) XR³

Roztok kyseliny (3,3 mmolů) a CDI v 20 ml THF byl míchán po dobu 2 hodin. Byl přidán L-alanin, iso-butylester, hydrochlorid (z Příkladu B uvedeného níže) (3,6 mmolů), následovaný 1,5 ml (10,8 mmolů) acetylaminu. Reakční směs byla míchána přes noc. Reakční směs byla zředěna 100 ml diethyletheru, promývána 10 % HCI třikrát, jednou solankou, 20 % jednou uhličitanem draselným a jednou solankou. Roztok byl sušen nad síranem hořečnatým, filtrován a odpařen za sníženého tlaku a tím se získal produkt. Další estery aminokyselin mohou také být použity v této proceduře.

Obecná procedura C'

Esterifikace R¹C (X') (X) C (O) NHCH (R²) C (O) OH s HOR³

Do míchaného roztoku fenylacetylvalinu (1,6470 g, 7,0 mmolů) v 20 ml THF byl přidán CDI (1,05 g, 6,5 mmolů) a směs byla míchána po dobu 1,5 hodin. 2-Methylbutanol (0,53 g, 6 mmolů) byl přidán do směs, následovaný přidáním NaH (0,16 g, 6,5 mmolů). Okamžitě nastalo bublání. Reakční směs byla míchána přes noc. Reakční směs byla zředěna 100 ml diethyletheru, promývána 10 % HCI třikrát, jednou solankou, 20 % jednou uhličitanem draselným a jednou solankou. Roztok byl sušen nad síranem hořečnatým, filtrován a odpařen za sníženého tlaku a tím se získal produkt. Další N-acyl aminokyseliny a alkoholy mohou také být použity v této proceduře.

Obecná procedura D'

Hydrolýza esteru na volnou kyselinu

4 44 4	4 4 4	4 4
4 4 4		•	4 4	4 4	4 4	4 4
•	44		4	4	4 4	4 4
• 4		4 4	4	4	4 444	4 4 4
4 4		4	4	4	4	4
• 4 4	4 4		4 4 4	4 4 4	4 4	4 4

Hydrolýza esteru na volnou kyselinu byla prováděna obvyklými způsoby. Níže jsou uvedeny dva příklady takových obvyklých de-esterifikačních způsobů.

Do esteru v 1: 1 směs CH3OH/H2O byly přidány 2-5 ekvivalenty K₂CO₃. Směs byla zahříván na teplotu přibližně 50 °C po dobu přibližně 0,5 až 1,5 hodin dokud tle neukázala ukončení reakce. Reakční směs byla ochlazena na teplotu okolí a methanol byl odstraněn za sníženého tlaku. pH zbývajícího vodného roztoku byl upraven na přibližně 2 a ethylacetát byl přidán pro extrakci produktu. Organická fáze byla potom promývána nasyceným vodným NaCl a sušena nad MgSOí. Roztok byl zbaven rozpouštědla za sníženého tlaku a tím se získal produkt.

Ester aminokyseliny byl rozpuštěn ve směsi dioxan/voda (4 : 1) do které byl přidán LiOH (přibližně 2 ekviv.), který byl rozpuštěn ve vodě tak, aby celkové rozpouštědlo po adici bylo přibližně 2 : 1 dioxan:voda. Reakční směs byla míchána do ukončení reakce a dioxan byl odstraněn za sníženého tlaku. Residuum bylo zředěno EtOAc, vrstvy byly odděleny a vodná vrstva okyselena na pH 2. Vodná vrstva byla zpětně extrahována EtOAc, sloučené organické látky byly sušen nad Na₂SO4 a rozpouštědlo bylo odstraněno za sníženého tlaku po filtraci. Residuum bylo čištěno obvyklými způsoby (například rekrystalizace).

Posledně uvedený příklad bude dále rozveden. Methylester 3NO₂ fenylacetyl alaninu 9,27 g (0,0348 molů) byl rozpuštěn v 60 ml dioxanu a 15 ml H₂O a byl přidán LiOH (3,06 g, 0,0731 molů), který byl rozpuštěn v 15 ml H₂O. Po míchání po dobu 4 hodin byl dioxan odstraněn za sníženého tlaku a

	'· 9	• ·
·· «	·♦	• ·	9 9	9 9	• ·
	««'	•	9	9 ♦	• ·
	··	• :	9	• ··«	« · ·
• ·	•	•	9	•	•
• · ·	··	• · ·	99 9	• *	• ·

residuum bylo zředěno EtOAc, vrstvy byly odděleny a vodná vrstva byla okyselena na pH 2. Vodná vrstva byla zpětně extrahována EtOAc (4 x 100 ml), sloučené organické látky byly sušeny nad Na₂SO₄ a rozpouštědlo bylo odstraněno za sníženého tlaku po filtraci. Residuum bylo rekrystalizováno z EtOAc/isooktan a to dalo 7,5 g (85 %) 3nitrofenylacetylalaninu.

C11H12N2O5 dává C = 52,38, H = 4,80 a N = 11,11.

Nalezeno analýzou: C = 52,54, H = 4,85 a N = 11,08.

[a]23 = “ 29,9 při 589 nm.

Obecná procedura E'

BOP kopulace kyseliny a alkoholu za nízké teploty Roztok methylenchloridu, obsahující karboxylovou kyselinu (100% molárních) a N-methylmorfolin (150 % molárních) byl ochlazen na teplotu -20 °C pod dusíkovou atmosférou. BOP (105 % molárních) byl přidán v jedné dávce a reakční směs byla udržován při teplotě -20 °C po dobu 15 minut. Byl přidán odpovídající alkohol (120 % molárních) a reakční směs byla ponechána zahřát se na teplotu okolí a míchána po dobu 12 hodin. Reakční směs byla potom vlita do vody a extrahována ethylacetátem (3x). Sloučené ethylacetátová zpětně promýván nasycenou vodnou kyselinou části byly citrónovou sodným (2x) hořečnatým odstraněno produkt.

(2x), nasyceným solankou (Ix) , vodným hydrogenuhličitanem sušeny nad bezvodým síranem nebo síranem sodným a rozpouštědlo bylo za sníženého tlaku a tím se získal surový ·· · ' · Φ· ·· • · · · * · · '· · · ·· · · · · · 1 1 · · · · .· ·· · · · · • · · · ' · · • · · · · · ·· · ·· · ·

Obecná procedura F^z

EDC kopulace kyseliny a aminu

Derivát kyseliny byl rozpuštěn v methylenchloridu. Amin (1 ekviv.), N-methýlmorfolin (5 ekviv.) a monohydrát hydroxybenzotriazolu (1,2 ekviv.) byly přidány po sobě. Reakční směs byla ochlazena na teplotu přibližně 0 °C a potom bylo přidáno 1,2 ekviv. hydrochloridu l—(3— dimethylaminopropyl)-3-ethylkarbodiimidu. Roztok byl ponechán za míchání přes noc a vrátil se na teplotu okolí pod tlakem N₂. Reakční směs byla nakonec zpracována promýváním roztokem nasyceného vodného Na₂CO₃, O,1M citrónové kyseliny a solankou před sušením Na₂SO₄ a odstraněním rozpouštědel a tím se získal surový produkt. Čisté produkty byly získány mžikovou chromatografií ve vhodném rozpouštědle.

Obecná procedura G'

EDC kopulace kyseliny a aminu

Baňka s kulatým dnem byla naplněna karboxylovou kyselinou (1,0 ekviv.), hydrátem hydroxybenzotriazolu (1,1 ekviv.) a aminem (1,0 ekviv.) v THF pod dusíkovou atmosférou. Vhodné množství (1,1 ekviv. pro volné aminy a 2,2 ekviv. hydrochloridové soli aminů) báze, jako je Hunigova báze, bylo přidáno do dobře míchané směsi, následováno EDC (1,1 ekviv.). Po míchání po dobu od 4 do 17 hodin při teplotě okolí rozpouštědlo bylo odstraněno za sníženého tlaku, residuum bylo vyjmuto ve směsi EtOAc (nebo podobné rozpouštědlo)/voda. Oganická vrstva byla promývána nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného, IN HCI, solankou a sušena nad bezvodým síranem sodným. V některých případech byl izolovaný produkt analyticky čistý již v tomto stádiu, zatímco v jiných případech bylo nutné

9 9 9 ' 9 ' '99 - ·ί ·

9999 99 99 999 9

99 9 9 9 9 9.9

9999 9 99999 999

9 9 9 9 9 9

999 99 999 999 99 99 čištění chromatografii a/nebo rekrystalizací před biologickými pokusy.

Obecná procedura H'

Kopulace R^xC(X’) (X)C(O)C1 s H₂NCH (R²) C (0) XR³

Přebytek oxalylchloridu v dichlormethanu byl přidán k derivátu kyseliny společně s jednou kapkou DMF. Výsledná směs byla míchána po dobu přibližně 2 hodin nebo dokud neustalo bublání. Rozpouštědlo bylo potom odstraněno za sníženého tlaku a znovu zředěno bezvodým methylenchloridem. Do výsledného roztoku byl přidán přibližně 1,1 ekviv. vhodného esteru aminokyseliny a methylamin (1,1 ekviv. v methylenchloridu). Systém byl míchán při teplotě okolí po dobu 2 hodin a potom rozpouštědlo bylo odstraněno za sníženého tlaku. Residuum bylo rozpuštěno v ethylacetátu, promýváno 1 N HCl následovaným IN NaOH. Organická vrstva byla sušena nad bezvodým síranem sodným filtrována a rozpouštědlo bylo odstraněno za sníženého tlaku a tím se získal požadovaný produkt.

Obecná procedura I'

P-EPC kopulace

P-EPC kopulace používá ester aminokyseliny a sloučeninu, představovanou substituovanou octovou kyselinou. Derivát kyseliny octové je dobře znám v oboru a je typicky komerčně dostupný. Ester aminokyseliny se připraví obvyklými způsoby ze známých a typicky komerčně dostupných N-BOC aminokyselin, jak je popsáno v Obecné proceduře J uvedené dále.

• 00 · 0 '00 0» 00 0 0 00 00 · ·· ·

00 0 · · 0 · 0 00 00 0 0 0 000000 0 0 0 0 0 0 0

000 00 000 000 00 00

Konkrétně byly vhodná volná báze aminoesteru (0,0346 mmolů) a substituovaná fenyloctová kyselina (0,069 mmolů) rozpuštěny v 2,0 ml CHCI3 (prostý EtOH), zpracovávány 150 mg of P-EPC (0,87 mekviv./g) a reakční směs byla míchána po dobu 4 dní při teplotě 23 °C. Reakční směs byla filtrována přes vrstvu bavlny, proplachována 2,0 ml GHCI3 a filtrát byl odpařen pod proudem dusíku. Čistota každého vzorku byla určena pomocí ¹H-NMR a pohybovala se v rozmezí od 50 % do >95 %. Z každé reakce bylo získáno mezi 8,0 a 15,0 mg konečného produkt, který byl testován bez dalšího čištění.

Obecná procedura J'

Syntéza esterů aminokyselin z odpovídající N-BOC aminokyseliny

A. Esterifikace kyseliny.

N-BOC aminokyselina byla rozpuštěna v dioxanu a zpracovávána přebytkem alkoholu (přibližně 1,5 ekviv.) a katalytickým DMAP (100 mg) při teplotě 0 °C. Míchání pokračovalo do ukončení reakce a poté byl produkt získán obvyklými způsoby.

B. Odstranění N-BOC skupiny.

N-BOC chráněná aminokyselina byla rozpuštěna v methylenchloridu (0,05M) a zpracovávána 10 ekvivalenty TFA při teplotě okolí pod dusíkovou atmosférou. Reakce byla monitorována chromatografií na tenké vrstvě dokud nebyl spotřebován výchozí materiál obvykle za 1-5 hodin. Dalších 10 ekvivalentů TFA bylo přidáno do reakční směsi pokud výchozí materiál byl stále přítomen po uplynutí 5 hodin. Reakční směs byla opatrně neutralizována Na₂CO3, oddělena, organická vrstva byla promývána solankou a sušena nad

		• ·			ft	·«	• ft
• ft	•		« j	• ·	• ·	• ·	•	•
: · '		• ft		•	•	• -ft	•	•
•	•		• ·	•	•	• ftft ·	• ft	•
•	•		•	•	•	•		•
• ft ·		• ft		• · ·	• ftft	• ·	« ·

bezvodým NažSOí. Surový amin byl potom používán bez čištění.

Specifická provedení těchto procedur jsou následující:

1. Racemická (+/-)-N-BOC-a-amino-máselná kyselina (Aldrich) (9,29 g, 0, 0457 molů) byla rozpuštěna v 100 ml dioxanu a zpracovávána iso-butylalkoholem (6,26 ml, 0,0686 molů), EDC (5,72 g, 0,0457) a katalytickým DMAP (100 mg) při teplotě 0 °C. Po míchání po dobu 17 hodin byly organické složky odpařeny za sníženého tlaku, residuum bylo zředěno EtOAc, promýváno NaHCO3, solankou a sušeno nad Na2SO4. Odpaření dalo 8,42 g (71 %) oleje.

C13H25NO4 dává: C = 60,21, H = 9,72 a N = 5,40.

Analýzou nalezeno: C = 59,91, H = 9,59 a N = 5,67.

Výše uvedený N-BOC ester aminokyseliny (8,00 g, 0,032 molů) byl zbaven ochranných skupin výše popsaným způsobem a to dalo 3,12 g (61 %) volné báze ve formě bezbarvého oleje, který v klidu tuhnul.

2. L-N-BOC-alanin (Aldrich) (8,97 g, 0,047 molů) byl rozpuštěn v 100 ml CH2CI2, iso-butylalkoholu (21,9 ml, 0,238 molů) a zpracováván DMAP (100 mg) a EDC (10,0 g, 0,52 molů) při teplotě 0 °C. Směs byla míchána po dobu 17 hodin, zředěna H2O, promývána 1,0 N HC1, NaHCC>3, potom solankou a organické složky byly sušeny nad Na2SO₄. Filtrace a odpaření dalo 11,8 g (kvantitativně) L-N-BOC isobutylesteru alaninu, který byl kontaminován malým množstvím rozpouštědla. Vzorek byl sušen ve vakuu pro analytickou analýzu.

C12H23NO4 dává: C = 58,79, H = 9,38 a N = 5,71.

« 0 «0 ' r «

I 0

0 ' 0 '

0« « 0 • ·

0 · 0

0

Analýzou nalezeno: C = 58,73, H = 9,55 a N = 5,96.

Výše uvedený N-BOC ester aminokyseliny (11,8 g, 0,0481 molů) byl zbaven ochranných skupin výše popsaným způsobem. Volná báze byla přeměněna na odpovídající HCI sůl použitím nasyceného HCI (g)/EtOAc a tím se získal L-N-alanin, isobutylester, hydrochlorid. Získáno bylo 4,2 g (48 %) bezbarvé pevné látky.

O7H15NO2 . HCI dává: C = 46,25, H = 8,88 a N = 7,71.

Analýzou nalezeno: C = 46,01, H = 8,85 a N = 7,68.

Obecná procedura K'

Vytváření methylesteru z aminokyseliny

Aminokyšelina (aminokyselina nebo hydrochlorid aminokyseliny) byla suspendována v methanolu a ochlazena na 0 °C. Plynný HCI byl probubláván roztokem po dobu 5 minut. Reakční směs byla ponechána zahřát se na teplotu okolí a potom míchána po dobu 4 hodin. Rozpouštědla potom byla odstraněna za sníženého tlaku a takto požadovaná aminokyselina ve formě methylesteru. Tento produkt byl obvykle dalšího čištění.

byla získána hydrochloridu používán bez

Příklad A'

Syntéza volné a na polymer vázané PEPC

N-ethyl-N'-3-(1-pyrrolidinyl)propylmočoviny

Do roztoku 27,7 g (0,39 molů) ethylisokyanátu v 250 ml chloroformu bylo přidáno 50 g (0,39 molů) 3—(1— pyrrolidinyl)propylaminu po kapkách s chlazením. Jakmile byla adice ukončena, chladicí lázeň byla odstraněna a reakční směs byla míchána při teplotě okolí po dobu 4 hodin. Reakční směs byla potom koncentrován za sníženého » · · > · · ·· · I • · t « ·· tlaku a tím se získalo 74,5 g (96,4 %) požadované močoviny ve formě čirého oleje.

1-(3-(1-pyrrolidinyl)propyl)-3-ethylkarbodiimid (P-EPC)

Do roztoku 31,0 g (0,156 molů) N-ethyl-N’-3-(1pyrrolidinyl)propylmočoviny v 500 ml dichlormethanu bylo přidáno 62,6 g (0,62 molů) triethylaminu a roztok byl ochlazen na teplotu 0 °C. Do tohoto roztoku bylo potom přidáno 59,17 g (0,31 molů) 4-toluenesulfonylchloridu v 400 ml dichlormethanu po kapkách takovou rychlostí, aby reakční směs byla udržována při teplotě 0-5 °C. Po ukončení přidávání reakční směs byla ohřátá na teplotu okolí a potom zahřívána na teplotu zpětného toku po dobu 4 hodin. Po ochlazení na teplotu okolí byla reakční směs promývána nasyceným vodným uhličitanem draselným (3 x 150 ml) . Vodné fáze byly sloučeny a extrahovány dichlormethanem. Všechny organické fáze byly sloučeny a koncentrovány za sníženého tlaku. Výsledná oranžová suspenze byla suspendována v 250 ml diethyletheru a roztok byl usazováním oddělen od pevné látky. Proces suspenze/usazování byl opakován ještě třikrát. Etherické roztoky byly sloučeny a koncentrovány za sníženého tlaku a tím se získalo 18,9 g (67 %) požadovaného produktu ve formě surového oranžového oleje. Část oleje byla destilována ve vakuu a tím se získal bezbarvý olej, destilující při teplotě 78-82 °C (0,4 mm Hg).

Příprava polymerové nesené formy 1-(3-(1pyrrolidinyl)propyl)-3-ethylkarbodiimidu (P-EPC)

Suspenze 8,75 g (48,3 mmolů) 1-(3-(1-pyrrolidin-yl)propyl)3-ethylkarbodiimidu a 24,17 g (24,17 mmolů) Merrifieldovy pryskyřice (2 % zesíťování, 200-400 mesh, chlormethylovaný kopolymer styrenu/divinylbenzenu, 1 mekviv. Cl/g) v dimethylformamidu byla zahřívána při teplotě 100 °C po dobu 2 dní. Reakční směs byla ochlazena a filtrována a výsledná pryskyřice byla promývána postupně 1 1 DMF, 1 1 THF a 1 1 diethyletheru. Zbývající pryskyřice byl potom sušena ve vakuu po dobu 18 hodin.

Příklad B'

Příprava alaninu ve formě hydrochloridu iso-butylesteru Směs 35,64 g (0,4 molů) (D,L)-alaninu (Aldrich) (nebo Lalaninu (Aldrich)); 44 ml (0,6 molů) thionylchloridu (Aldrich) a 200 ml isobutanolu bylo zahříván na teplotu zpětného toku po dobu 1,5 hodin a těkavé složky byly úplně odstraněny v rotační odparce při teplotě 90 °C za sníženého tlaku a tím se získal (D,L)-alanin ve formě hydrochloridu iso-butylesteru (nebo L-alanin ve formě hydrochloridu isobutylesteru) , který byl dostatečně čistý, aby mohl být používán pro další transformace.

Příklad C'

Příprava 3,5-dichlorfenyloctové kyseliny

Do roztoku 3,5 g 3,5-dichlorbenzylalkoholu (Aldrich) v 75 ml dichlormethanu při teplotě 0 °C bylo přidáno 1,8 ml methan sulfonylchloridu, následované 3,5 ml triethylaminu, přidaného po kapkách. Po uplynutí 2 hodin roztok byl zředěn na 150 ml dichlormethanem, promýván 3N HC1, nasyceným vodným NaHCO3, sušen nad Na₂SO₄ a rozpouštědla byla odstraněna a tím se získal požadovaný 3,5-dichlorbenzylmethanesulfonát ve formě žlutého oleje, který byl používán bez čištění.

Surový sulfonát byl rozpuštěn v 50 ml DMF při teplotě 0 °C a potom bylo přidáno 3 g KCN. Po uplynutí 2 hodin bylo ··· ··· přidáno dalších 50 ml DMF a roztok byl míchán po dobu 16 hodin. Červený roztok byl zředěn 1 1 H₂O a okyselen na pH 3 pomocí 3N HCI. Vodný roztok byl extrahován dichlormethanem. Sloučené organické látky byly promývány 3N HCI, sušeny nad Na₂SO₄ a rozpouštědla byla odstraněna za sníženého tlaku a tím se získal surový 3,5-dichlorfenylacetonitril, který byl používán bez čištění.

Nitrile byl přidán do směsi 40 ml koncentrované kyseliny sírové a 50 ml H₂O a zahříván na teplotu zpětného toku po dobu 48 hodin, ochlazen na teplotu okolí a míchán po dobu 48 hodin. Reakční směs byla zředěna do 1 1 drceného ledu, ohřátá na teplotu okolí a extrahována 2 x 200 ml dichlormethanu a 2 x 200 ml ethylacetátu. Obě sady organických látek byly sloučeny a promývány nasyceným vodným NaHCO3. NaHCO3 frakce byly sloučeny a okyseleny na pH 1 pomocí 3N HCI. Bílá pevná látka byla příliš jemné pro filtraci a byla vyextrahována 2 x 200 ml dichlormethanu. Sloučené organické látky byly sušeny nad Na₂SO₄ a rozpouštědla byla odstraněna za sníženého tlaku a tím se získala surová 3,5-dichlorfenyloctová kyselina ve formě bílé pevné látky. Pevná látka byla suspendována hexanem a filtrována a tím se získalo 1,75 g bílé pevné látky.

NMR (CDC1₃) : (v ppm) 3,61 (s, 2H) , 7,19 (s,lH), 7,30 (s, IH) .

Příklad D'

Syntéza N-(3-chlorfenylacetyl)alaninu

Sloučenina z názvu byla připravena použitím L-alaninu (Nova Biochem) a 3-chlorfenyloctové kyseliny (Aldrich) postupem podle obecných procedur F nebo G, následovaných hydrolýzou použitím obecné procedury D.

*· > a ··

Příklad Al

Syntéza N-(fenylacetyl)-D,L-alaninu ve formě isobutylesteru

Postupem podle obecné procedury A uvedené výše a použitím fenylacetylchloridu (Aldrich) a D,L-alaninu ve formě hydrochloridu iso-butylesteru (z Příkladu B uvedeného výše) byla připravena sloučenina z názvu. Reakce byla monitorována chromatografii na tenké vrstvě na silikagelu a čištění bylo prováděno extrakcí Et2O následovanou promýváním vodným K2CO3 a vodným HCI.

NMR data byla následující:

¹H-nmr (CDC1₃) : δ = 7,23-7,36 (m, 5H), 6,18 (d, 1H), 4,58 (t, J = 7,3 Hz, 1H) , 3,87 (m, 2H) , 3,57 (s, 2H) , 1,90 (m, 1H), 1,34 (d, J = 7,2 Hz, 3H), 0,89 (d, J = 6,8 Hz, 6H). ¹³C-nmr (CDCI3) : δ = 172,7, 170,3, 134,5, 129,2, 128,8,

127,2, 71,3, 48,1, 43,4, 27,5, 18,8, 18,3.

C15H21NO3 (MW = 263, 34; hmotová spektroskopie (MH⁺ = 264)) • · ·· • · ·

Příklad A2

Syntéza N-(3-fenylpropionyl)-D,L-alaninu ve formě isobutylesteru

Postupem podle obecné procedury A uvedené výše a použitím 3-fenylpropionylchloridu (Aldrich) a D,L-alaninu ve formě hydrochloridu iso-butylesteru (z Příkladu B uvedeného výše) byla připravena sloučenina z názvu ve formě pevné látky, která má teplotu tání v rozmezí 51 °C-54 °C. Reakce byla monitorována chromatografii na tenké vrstvě na silikagelu a čištění bylo prováděno extrakcí Et2O následovanou promýváním vodným K2CO3 a vodným HC1.

NMR data byla následující:

¹H-nmr (CDC1₃) : δ = 7,25 (m, 2H), 7,19 (m, 3H), 6,28 (d, J = 7,2 Hz, IH), 4,58 (kvint., J = 7,2 Hz, IH), 3,89 (m, 2H), 2,95 (t, J = 7,7 Hz, 2H), 2,50 (m, 2H), 1,92 (m, IH), 1,33 (d, J = 7,1 Hz, 3H), 0,91 (d, J = 6,7 Hz,

6H) .

¹³C-nmr (CDC1₃) : δ = 173,0, 171,5, 140, 6, 128,3, 128,1,

126,0, 71,2, 47,8, 37,9, 31,4, 27,5, 18,79, 18,77, 18,3. C16H23NO3 (MW = 277,37, hmotová spektroskopie (MH⁺ 278))

Příklad A3

Syntéza N-(3-methylpentanoyl)-L-alaninu ve formě isobutylesteru

Postupem podle obecné procedury B a použitím 3methylpentanové kyseliny (Aldrich) a L-alaninu ve formě hydrochloridu iso-butylesteru (z Příkladu B uvedeného výše) byla připravena sloučenina z názvu ve formě oleje. Reakce byla monitorována chromatografii na tenké vrstvě na silikagelu a čištění bylo prováděno extrakcí Et2<0 následovanou promýváním vodným K2CO3 a vodným HC1.

·· • · · 9 • · · ·

9 9·9

9

99

NMR data byla následující: ^-nmr (CDC1₃) : δ = 6,08 (d, J J = 7,3 Hz, IH), 3,92 (m, 2H), 3H), 1,40 (d, J = 7,2 Hz, 3H) , 0, 85-0, 96 (m, 12H) .

5,9	Hz,	IH)
2,22	(m,	IH)
1,35	(m,	IH)

4,62 (kvint., 1,84-2,00 (m, 1,20 (m, IH), ¹³C-nmr (CDC1₃) : δ = 173,3, 172,1, 71,4, 47,9, 43,9, 32,3, 29,38, 29,35, 27, 6, 19,10, 19,06, 18,93, 15, 91, 18,72,

18,67, 11,3.

C13H25NO3 (MW = 243,35, hmotová spektroskopie (MH⁺ 244))

Příklad A4

Syntéza N-[(4-chlorfenyl)acetyl]-L-alaninu ve formě isobutylesteru

Postupem podle obecné procedury B a použitím 4chlorfenyloctové kyseliny (Aldrich) a L-alaninu ve formě hydrochloridu iso-butylesteru (z Příkladu B uvedeného výše) byla připravena sloučenina z názvu ve formě pevné látky, která má teplotu tání 111 °C - 113 °C. Reakce byla monitorována chromatografii na tenké vrstvě na silikagelu a čištění bylo prováděno extrakcí Et₂O následovanou promýváním vodným K₂CC>3 a vodným HC1.

NMR data byla následující:

^-nmr (CDC1₃) : δ = 7,30 (d, J = 8,2 Hz, 2H) , 7,21 (d, J = 8,3 Hz, 2H) , 6,18 (d, J = 5,5 Hz, IH), 4,57 (kvint., J =

7,2 Hz, IH), 3,88 (m, 2H), 3,53 (s, 2H), 1,91 (m, IH), 1,36 (d, J = 7,1 Hz, 3H), 0,90 (d, J = 6,8 Hz, 6H).

¹³C-nmr (CDCI3) : δ = 172,8, 169,8, 133,1, 133,0, 130,6,

128,9, 71,4, 48,2, 42,6, 27,6, 18,85, 18,82, 18,4.

Ci₅H₂oN0₃C1 (MW = 297,78, hmotová spektroskopie (MH⁺ 298)) · · • · · • · · • ··· • · ·· ·· • · · — ·

Příklad A5

Syntéza N-[(3,4-dichlorfenyl)acetyl]-L-alaninu ve formě iso-butylesteru

Postupem podle obecné procedury B a použitím 3,4dichlorfenyloctové kyseliny (Aldrich) a L-alaninu ve formě hydrochloridu iso-butylesteru (z Příkladu B uvedeného výše) byla připravena sloučenina z názvu ve formě pevné látky, která má teplotu tání 81 °C-83 °C. Reakce byla monitorována chromatografií na tenké vrstvě na silikagelu a čištění bylo prováděno extrakcí Et₂O následovanou promýváním vodným K₂CO₃ a vodným HCl.

NMR data byla následující:

1H-nmr	(CDC13) : δ = 0,	90 (d, J =	6,8 Hz,	6H), 1,38 (d, J =
7,1 Hz,	3H), 1,91 (m,	IH), 3,50	(s, 2H),	3,90 (m, 2H) , 4,57
(kvint.	, J = 7,1 Hz,	IH), 6,31	(d, J =	4,9 Hz, IH), 7,12
(m, IH)	, 7,38 (m, 2H)	•
13C-nmr	(CDCI3) : δ =	18,4, 18,8	, 18,9,	27,6, 42,2, 48,3,
71,5,	128,6, 130,6,	131,2, 13;	1,3, 132	, 6, 134,7, 169,2,

172,8.

Ci₅Hi₉NO₃C1₂ (MW = 332,23, hmotová spektroskopie (MH⁺ 332 )

Příklad A6

Syntéza N-[(4-methylfenyl)acetyl]-D,L-alaninu ve formě isobutylesteru

Postupem podle obecné procedury B a použitím 4methylfenyloctové kyseliny (Aldrich) a D,L-alaninu ve formě hydrochloridu iso-butylesteru (z Příkladu B uvedeného výše) byla připravena sloučenina z názvu ve formě pevné látky, která má teplotu tání 102 °C-104 °C. Reakce byla monitorována chromatografií na tenké vrstvě na silikagelu (Rf = 0,6 v 33 % ethylacetát/hexanes) a čištění bylo _ · • 4 9 9 4 4 · · ·· 4 4 44

444 4 4 4 444 • · · · · • 44 444 999 4· .9 ·- 4

4 4 4

4 prováděno extrakcí Et₂O následovanou promýváním vodným K₂CO₃ a vodným HCl.

NMR data byla následující:

¹H-nmr (CDC1₃) : δ = 0,90 (d, J = 6,7 Hz, 6H), 1,35 (d, J =

7,2 Hz, 3H), 1,91 (m, IH), 2,34 (s, 3H), 3,55 (s, 2H), 3,88 (m, 2H), 4,58 (m, IH), 6,05 (bd, IH), 7,16 (s, 4H). ¹³C-nmr (CDCla) : δ = 18,5, 18,85, 18,87, 21,0, 27, 6, 43,1,

48,1, 71,3, 129,2, 129, 6, 131,3, 136, 9, 170, 6, 172,8. Ci6H₂₃NO₃ (MW = 277,37, hmotová spektroskopie (MH⁺ 278))

Příklad A7

Syntéza N-[(3-pyridyl)acetyl]-D,L-alaninu ve formě isobutylesteru

Postupem podle obecné procedury F a použitím 3pyridyloctové kyselina ve formě hydrochloridu (Aldrich) a D,L-alaninu ve formě hydrochloridu iso-butylesteru (z Příkladu B uvedeného výše) byla připravena sloučenina z názvu ve formě pevné látky, která má teplotu tání 62 °C-64 °C. Reakce byla monitorována chromatografii na tenké vrstvě na silikagelu (Rf = 0,48, 10 % methanol/dichlormethan) a čištění bylo prováděno silikagelovou chromatografii.

NMR data byla následující:

^xH-nmr (CDC1₃) : δ = 8,40 (d, J = 2,8, 2H) ; 7,6 (m, IH) :

7,16 (m, 2H); 4,5 (kvint., J = 7,2, 7,2, IH); 3,8 (m, 2H); 3,48 (s, 2H); 1,8 (m, IH); 1,30 (d, J= 7,2, 3H); 0,81 (d, J = 6,7, 6H).

¹³C-nmr (CDC1₃) : δ = 173,4, 170, 1, 150, 6, 148,8, 137,4,

131,4, 124,1, 71,9, 48,9, 40,6, 28,1, 19,5, 19,4, 18,6. Ci₄H₂oN₂0₃ (MW - 264, hmotová spektroskopie MH⁺ 265))

Příklad A8

Syntéza N-[(1-naftyl)acetyl]-L-alaninu ve formě isobutylesteru

Postupem podle obecné procedury B a použitím 1-naftyloctové kyseliny (Aldrich) a L-alaninu ve formě hydrochloridu isobutylesteru (z Příkladu B uvedeného výše) byla připravena sloučenina z názvu ve formě pevné látky, která má teplotu tání 69 °C-73 °C. Reakce byla monitorována chromatografii na tenké vrstvě na silikagelu a čištění bylo prováděno extrakcí Et₂O následovanou promýváním vodným K₂CO₃ a vodným HCI.

NMR data byla následující:

xH-nmr (CDC13)	: δ = 0,83 (m, 6H)	, 1,25 (d,	J =	7,1 Hz, 3H),
1,81 (m, 1H),	3,79 (m, 2H), 4.M	(2s, 2H),	4,57	(kvint., J =
7,3 Hz, 1H),	5,99 (d, J = 7,1	Hz, 1H), 7	,44 l	[m, 2H), 7,53
(m, 2H), 7,85	(m, 2H) , 7,98 (m,	1H) .

¹³C-nmr (CDC1₃) : δ = 18,2, 18,81, 18,83, 27,5, 41, 5, 48,2,

71,3, 123,7, 125,6, 126,1, 126,6, 128,2, 128,5, 128,7,

130,7, 132,0, 133,9, 170,3, 172,5.

Ci9H₂₃NO₃ (MW = 313,40, hmotová spektroskopie (MH⁺ 314))

Příklad A9

Syntéza N-[(2-naftyl)acetyl]-L-alaninu ve formě isobutylesteru

Postupem podle obecné procedury B a použitím 2-naftyloctové kyseliny (Aldrich) a L-alaninu ve formě hydrochloridu isobutylesteru (z Příkladu B uvedeného výše) byla připravena sloučenina z názvu ve formě pevné látky, která má teplotu tání 128 °C-129 °C. Reakce byla monitorována chromatografii na tenké vrstvě na silikagelu a čištění bylo prováděno

ΊΟ

• ·

·) »4 extrakcí Et₂O následovanou promýváním vodným K₂CO₃ a vodným HCI.

NMR data byla následující:

^xH-nmr (CDC1₃) : δ = 0,86 (m, 6H), 1,35 (d, J = 7,1 Hz, 3H), 1,78 (m, IH), 3,76 (s, 2H), 3,87 (m, 2H), 4,62 (kvint., J=

7,2 Hz, IH), 6,13 (d, J = 7,1 Hz, IH) , 7,41 (m, IH) , 7,48 (m, 2H), 7,74 (s, IH), 7,83 (m, 3H).

¹³C-nmr (CDC1₃) : δ = 18,4, 18,82, 18,85, 27,6, 43,7, 48,2,

71,4, 125,9, 126,3, 127,2, 127,6, 127,7, 128,2, 128,7,

132,0, 132,5, 133,5, 170,3, 172,8.

C19H23NO3 (MW = 313,40, hmotová spektroskopie (MH⁺ 314)).

Příklad A10

Syntéza N-(4-fenylbutanoyl)-L-alaninu ve formě isobutylesteru

Postupem podle obecné procedury B a použitím 4fenylbutanové kyseliny (Aldrich) a L-alaninu ve formě hydrochloridu iso-butylesteru (z Příkladu B uvedeného výše) byla připravena sloučenina z názvu ve formě oleje. Reakce byla monitorována chromatografií na tenké vrstvě na silikagelu a čištění bylo prováděno extrakcí Et₂O následovanou promýváním vodným K2CO3 a vodným HCI.

NMR data byla následující:

1H-nmr	(CDCI3) : δ = 0,92 (d	, J = 6,7 Hz,	6H), 1,38	(d, J =
7,1 Hz,	3H), 1,96 (m, 3H) ,	2,21 (t, J =	7,1 Hz,	2H), 2.M
(t, J =	= 7,3 Hz, 2H), 3,90	(m, 2H), 4,59	(kvint.,	J = 7,2
Hz, IH)	, 6,31 (d, IH), 7,16	(m, 3H), 7,24	(m, 2H) .
13C-nmr	(CDCI3) : δ = 18,3,	18,75, 18,78,	26, 8, 27,	5, 34,9,

35,3, 47,8, 71,2, 125,7, 125,2, 128,3, 141,3, 172,1, 173,0. Ci₇H₂5NO₃ (MW = 291,39, hmotová spektroskopie (MH⁺ 292)).

• O « 44 '99 .· · · · · <6 · · ·

99····

9 • O 4 9

Příklad All

Syntéza N-(5-fenylpentanoyl)-L-alaninu ve formě isobutylesteru

Postupem podle obecné procedury B a použitím 5fenylpentanové kyseliny (Aldrich) a L-alaninu ve formě hydrochloridu iso-butylesteru (z Příkladu B uvedeného výše) byla připravena sloučenina z názvu ve formě oleje. Reakce byla monitorována chromatografií na tenké vrstvě na silikagelu a čištění bylo prováděno extrakcí Et₂O následovanou promýváním vodným K2CO3 a vodným HCl.

NMR data byla následující:

^-nmr (CDC1₃) : δ = 7,23 (m, 2H) , 7,17 (m, 3H) , 6,30 (d,

1H), 4,59 (kvint., J = 7,3 Hz, 1H), 3,91 (m, 2H), 2,61 (t, J = 7,2 Hz, 2H), 2,22 (t, J = 7,2 Hz, 2H) , 1,93 (m, 1H), 1,66 (m, 4H), 1,38 (d, J = 7,2 Hz, 3H) , 0,92 (d, J = 6,7

Hz, 6H).

¹³C-nmr (CDC1₃) : δ = 173, 1, 172,3, 142,0, 128,2, 128,1,

125,6, 71,2, 47,8, 36,1, 35,5, 30,8, 27,5, 25,0, 18,80,

18,77, 18,4.

C18H27NO3 (MW = 305,39, hmotová spektroskopie (MH⁺ 306)).

Příklad A12

Syntéza N-[(4-pyridyl)acetyl]-D,L-alaninu ve formě isobutylesteru

Postupem podle obecné procedury F a použitím 4pyridyloctové kyseliny ve formě hydrochloridu (Aldrich) a (D,L)-alaninu ve formě hydrochloridu iso-butylesteru (z Příkladu B uvedeného výše) byla připravena sloučenina z názvu ve formě pevné látky, která má teplotu tání 64 °C-66 °C. Reakce byla monitorována chromatografií na tenké vrstvě • 1 • 0 * i • · • · '<

• ·

0 · 0 » · • 0 .· ' 00 ' ' · · · • · · · 0 0« • · »0 0 0 na silikagelu (Rf = 0,43 10 % methanol/dichlormethan) a čištění bylo prováděno silikagelovou chromatografií.

NMR data byla následující:

xH-nmr (CDC13) : δ =	8,51	(dd, J = 1,6,	2,8, 1,6,	2H) ;	7,23
(dd, J = 4,3, 1,6,	4,4,	2H); 6,71 (d,	J = 6,8,	IH) ;	4,56
(kvint., J = 7,3,	7,2,	IH); 3,88 (m,	2H); 3,53	(s,	2H) ;
1,89 (m, IH); 1,36	(d, J	= 7,2, 3H); 0,	-88 (d, J =	= 6,7,	, 6B)

¹³C-nmr (CDC1₃) : δ = 173,5, 169,3, 150,5, 144,4, 125, 1,

72, 1, 48, 9, 43,0, 28,2, 19,5, 19,5, 18,9.

C14H20N2O3 (MW = 264, hmotová spektroskopie (MH⁺ 265))

Příklad A13

Syntéza N-(fenylacetyl)-L-alaninu ve formě iso-butylesteru Postupem podle obecné procedury B a použitím fenylacetylchloridu (Aldrich) a L-alaninu ve formě hydrochloridu iso-butylesteru (z Příkladu B uvedeného výše) byla připravena sloučenina z názvu ve formě pevné látky, která má teplotu tání 45 °C-47 °C. Reakce byla monitorována chromatografií na tenké vrstvě na silikagelu a čištění bylo prováděno extrakcí Et2O následovanou promýváním vodným K₂CO₃ a vodným HCI.

NMR data byla následující:

xH-nmr	(CDC13) :	6 = 7,24-7,39 (m, 5	H), 6,14 (d, IH), 4,58
(t, J =	= 7,3 Hz,	IH), 3,88 (m, 2H),	3,58 (s, 2H), 1,90 (m,
IH), 1,	35 (d, J	=7,2 Hz, 3H), 0,89	(d, J = 6,7 Hz, 6H).
13C-nmr	(CDC13) :	δ = 172,8, 170,4,	134,5, 129, 3, 128,9,
127,2,	71,3, 48,	1, 43,5, 27,5, 18,9,	18,8, 18,4.

Ci5H₂iNO₃ (MW = 263,34, hmotová spektroskopie (MH⁺ 264)).

• 1 49

4 9 ·

4 4 ·

000 000 • 0

0 0 0

Příklad A14

Syntéza 2-[(3,4-dichlorfenyl)acetamido]máselné kyseliny ve formě iso-butylesteru

Postupem podle obecné procedury I uvedené výše a použitím

3,4-dichlorfenyloctové kyseliny (Aldrich) a iso-butyl-2aminobutyrátu (připraven postupem podle obecné procedury J uvedené výše) byla připravena sloučenina z názvu. Reakce byla monitorována chromatografií na tenké vrstvě na silikagelu a čištění bylo prováděno filtrací, jak je popsáno v obecné proceduře.

NMR data byla následující:

^xH-nmr (CDC1₃) : δ = 7,36 (m, 3H) , 6,03 (bd, 1H) , 4,54 (m, 1H), 3,87 (m, 2H), 3,49 (s, 2H) , 1,93 (m, 2H) , 1,72 (m, 1H), 0,88 (d, 6H), 0,80 (t, 3H).

Příklad A15

Syntéza 2-[(3-methoxyfenyl)acetamido]máselné kyseliny ve formě iso-butylesteru

Postupem podle obecné procedury I uvedené výše a použitím 3-methoxyfenyloctové kyseliny (Aldrich) a iso-butyl-2aminobutyrátu (připraven postupem podle obecné procedury J uvedené výše) byla připravena sloučenina z názvu. Reakce byla monitorována chromatografií na tenké vrstvě na silikagelu a čištění bylo prováděno filtrací, jak je popsáno v obecné proceduře.

NMR data byla následující:

¹H-nmr (CDC1₃) : δ = 6,75 (m, 4H) , 5,93 (bd, 1H) , 4,51 (m, 1H), 3,83 (m, 2H) , 3,75 (s, 2H) , 3,52 (s, 2H) , 1,82 (m, 2H), 1,60 (m, 1H), 0,64 (d, 6H), 0,74 (t, 3H).

C17H25NO4 (MW = 307,39, hmotová spektroskopie (MH⁺ 309)).

♦ « • * ·« • · α • 9 99

9 9

9 9 9

9 9 9

99 9 999

9

9 9 9

Příklad Α16

Syntéza 2-[(4-nitrofenyl)acetamido]máselné kyseliny ve formě iso-butylesteru

Postupem podle obecné procedury I uvedené výše a použitím 4-nitrofenyloctové kyseliny (Aldrich) a iso-butyl-2aminobutyrátu (připraven postupem podle obecné procedury J uvedené výše) byla připravena sloučenina z názvu. Reakce byla monitorována chromatografii na tenké vrstvě na silikagelu a čištění bylo prováděno filtrací, jak je popsáno v obecné proceduře.

NMR data byla následující:

^xH-nmr (CDC1₃) : δ = 8,16 (d, 2H) , 7,44 (d, 2H) , 6,04 (bd, 1H), 4,55 (m, 1H), 3,86 (m, 2H), 3,66 (s, 2H), 1,86 (m, 2H), 1,67 (m, 1H), 0,85 (d, 6H), 0,81 (t, 3H).

C16H22N2O5 (MW = 322,36, hmotová spektroskopie (MH⁺ 323)).

Příklad A17

Syntéza 2-[(3,4-methylendioxyfenyl)acetamido] máselné kyseliny ve formě iso-butylesteru

Postupem podle obecné procedury I uvedené výše a použitím

3,4-(methylendioxy)-fenyl octové kyseliny (Aldrich) a isobutyl-2-aminobutyrátu (připraven postupem podle obecné procedury I uvedené výše) byla připravena sloučenina z názvu. Reakce byla monitorována chromatografii na tenké vrstvě na silikagelu a čištění bylo prováděno filtrací, jak je popsáno v obecné proceduře.

NMR data byla následující:

¹H-nmr (CDC1₃) : δ = 6,72 (m, 3H) , 5,92 (bd, 1H) , 4,54 (m. 1H), 3,86 (m, 2H), 3,66 (s, 2H) , 1,86 (m, 2H) , 1,66 (m, 1H) , 0,89 (d, 6H), 0,79 (t, 3H) .

Příklad A18

Syntéza 2-[(thien-3-yl)acetamido]máselné kyseliny ve formě iso-butylesteru

Postupem podle obecné procedury I uvedené výše a použitím 3-thiofenoctové kyseliny (Aldrich) a iso-butyl-2aminobutyrátu (připraven postupem podle obecné procedury J uvedené výše) byla připravena sloučenina z názvu. Reakce

byla monitorována chromatografii na	tenké vrstvě	na
silikagelu a čištění bylo prováděno	filtrací, jak	je
popsáno v obecné proceduře.
NMR data byla následující:
^-nmr (CDC13) : δ = 7,37 (m, IH) , 7,16	(m, IH), 7,04	(m,
IH), 6,05 (Μ, IH), 4,57 (m, IH), 3,66	(s, 2H), 1,93	(m,
2H), 1,67 (m, IH), 0,91 (d, 6H), 0,86 (t,	3H) .
Příklad A19
Syntéza 2-[(4-chlorfenyl)acetamido]máselné kyseliny	ve

formě iso-butylesteru

Postupem podle obecné procedury I uvedené výše a použitím 4-chlorfenyloctové kyseliny (Aldrich) a iso-butyl-2aminobutyrátu (připraven postupem podle obecné procedury J uvedené výše) byla připravena sloučenina z názvu. Reakce byla monitorována chromatografii na tenké vrstvě na

silikagelu a	čištění bylo	prováděno	filtrací,	jak	je
popsáno v obecné proceduře.
NMR data byla	následuj ící:
xH-nmr (CDC13)	: δ = 7,22 (m,	2H), 7,11	(m, 2H),	5, 80	(m,
IH), 4,44 (m,	IH), 3,78 (m,	2H), 3,43	(s, 2H),	1,77	(m,
2H) , 1,56 (m,	IH), 0,83 (d, 6H) 0,71 (t,	3H) .

Φ ΦΦ *· e · · · φ ·

Φ · ♦ Φ · φ Φ φφφ φφφ φ * · φ φ Φ · * · · • Φ • · φφ • «4 • Φ ♦ ΦΦ

Příklad Α20

Syntéza 2-[(3-nitrofenyl)acetamido]máselné kyseliny ve formě iso-butylesteru

Postupem podle obecné procedury I uvedené výše a použitím 3-nitrofenyloctové kyseliny (Aldrich) a iso-butyl-2aminobutyrátu (připraven postupem podle obecné procedury I uvedené výše) byla připravena sloučenina z názvu. Reakce byla monitorována chromatografií na tenké vrstvě na silikagelu a čištění bylo prováděno filtrací, jak je popsáno v obecné proceduře.

NMR data byla následující:

^-nmr (CDC1₃) : δ = 8,15 (m, 2H) , 7,65 (m, 1H) , 6,08 (m,

1H), 4,46 (m, 1H) , 3,92 (m, 2H) , 3,68 (s, 2H) , 1,91 (m,

2H), 1,75 (m, 1H), 0,98 (d, 6H), 0,71 (t, 3H).

Příklad A21

Syntéza 2-[(2-hydroxyfenyl)acetamido]máselné kyseliny ve formě iso-butylesteru

Postupem podle obecné procedury I uvedené výše a použitím

2-hydroxyfenyloctové kyseliny (Aldrich) a iso-butyl-2aminobutyrátu (připraven postupem podle obecné procedury J uvedené výše) byla připravena sloučenina z názvu. Reakce byla monitorována chromatografií na tenké vrstvě na silikagelu a čištění bylo prováděno filtrací, jak je popsáno v obecné proceduře.

NMR data byla následující:

xH-nmr (CDC13) :	δ = 7,14	(m,	1H) ,	7,01	(m,	1H),	6, 93	(m,
1H) , 6,79 (m,	1H) ,	6,46	(m,	1H) ,	4,51	(m,	1H) ,	3,87	(m,
2H), 3,57 (s,	2H) ,	2,01	(m,	2H),	1,75	(m,	1H) ,	0,89	(d,

6H), 0,85 (t, 3H).

• ·	·· •	··	• 4
	··	•
• ·	• ·	•
• ·	♦	•
• 4	• 9		• ·

♦ · ·· • · · * « · · · • «·· ··· • · • · · ♦

Příklad A22

Syntéza 2-[(2-naftyl)acetamido]máselné kyseliny ve formě iso-butylesteru

Postupem podle obecné procedury I uvedené výše a použitím

2-naftyloctové kyseliny (Aldrich) a iso-butyl-2aminobutyrátu (připraven postupem podle obecné procedury J uvedené výše) byla připravena sloučenina z názvu. Reakce byla monitorována chromatografii na tenké vrstvě na silikagelu a čištění bylo prováděno filtrací, jak je popsáno v obecné proceduře.

NMR data byla následující:

¹H-nmr (CDC1₃) : δ = 7,83 (m, 7B) , 5,95 (m, IH) , 4,58 (m, IH), 3,84 (m, 2H) , 3,75 (s, 2H) , 1,89 (m, 2H) , 1,63 (m, IH) , 0, 91 (d, 6H) , 0,81 (t, 3H) .

C20H25NO3 (MW = 327,42, hmotová spektroskopie (MH⁺ 328)).

Příklad A23

Syntéza 2-[(2,4-dichlorfenyl)acetamido]máselné kyseliny ve formě iso-butylesteru

Postupem podle obecné procedury I uvedené výše a použitím

2,4-dichlorfenyloctové kyseliny (Aldrich) a iso-butyl-2aminobutyrátu (připraven postupem podle obecné procedury J uvedené výše) byla připravena sloučenina z názvu. Reakce byla monitorována chromatografii na tenké vrstvě na silikagelu a čištění bylo prováděno filtrací, jak je popsáno v obecné proceduře.

NMR data byla následující:

^xH-nmr (CDC1₃) : δ = 7,49 (m, IH) , 7,22 (m, 2H) , 5,98 (m,

IH), 4,52 (m, IH) , 3,86 (m, 2H) , 3,61 (s, 2H) , 1,84 (m,

2H), 1,62 (m, IH), 0,87 (d, 6H), 0,80 (t, 3H).

Příklad A24

Syntéza 2-[(4-bromfenyl)acetamido]máselné kyseliny ve formě iso-butylesteru

Postupem podle obecné procedury I uvedené výše a použitím 4-bromfenyloctové kyseliny (Aldrich) a iso-butyl-2aminobutyrátu (připraven postupem podle obecné procedury J uvedené výše) byla připravena sloučenina z názvu. Reakce byla monitorována chromatografii na tenké vrstvě na silikagelu a čištění bylo prováděno filtrací, jak je popsáno v obecné proceduře.

NMR data byla následující:

xH-nmr (CDC13) : δ = 7,43 (d,	2H), 7,19 (d,	2H)	5,85 (m,
IH), 4,51 (m, IH), 3,81 (m,	2H), 3,47 (s,	2H) ,	1,84 (m,
2H), 1,61 (m, IH) 0,84 (d, 6H), 0,76 (t, 3H). Ci6H22NO3Br (MW = 356,26, hmotová spektroskopie	(MH+	358)).

Příklad A25

Syntéza 2-[(3-chlorfenyl)acetamido])máselné kyseliny ve formě iso-butylesteru

Postupem podle obecné procedury I uvedené výše a použitím

3-chlorfenyloctové kyseliny (Aldrich) a iso-butyl-2aminobutyrátu (připraven postupem podle obecné procedury I uvedené výše) byla připravena sloučenina z názvu. Reakce byla monitorována chromatografii na tenké vrstvě na silikagelu a čištění bylo prováděno filtrací, jak je popsáno v obecné proceduře.

NMR data byla	následuj ící:
1H-nmr (CDC13)	: δ = 7,25 (m,	3H), 7,12	(m,	IH)	5,80 (m,
IH) , 4,52 (m,	IH), 3,86 (m,	2H), 3,50	(s,	2H) ,	1,87 (m,
2H), 1,67 (m,	IH) 0,88 (d, 6H)	, 0,77 (t,	3H) .
Ci6H22NO3C1 (MW	= 311,81, hmotová spektroskopie	(MH+	313)) .

Příklad A26

Syntéza 2-[(3-fluorfenyl)acetamido]máselné kyseliny ve formě iso-butylesteru

Postupem podle obecné procedury 1 uvedené výše a použitím

3-fluorfenyloctové kyseliny (Aldrich) a iso-butyl-2aminobutyrátu (připraven postupem podle obecné procedury J uvedené výše) byla připravena sloučenina z názvu. Reakce byla monitorována chromatografií na tenké vrstvě na silikagelu a čištění bylo prováděno filtrací, jak je popsáno v obecné proceduře.

NMR data byla následující:

xH-nmr (CDC13) : δ = 7,31 (m, IH) , 7,01	(m,	3H)	5,95	(m,
IH) , 4,54 (m, IH) , 3,84 (m, 2H) , 3,54	(s,	2H) ,	1,88	(m,
2H), 1,65 (m, IH) 0,87 (d, 6H), 0,81 (t,	3H) .
C16H22NO3F (MW = 295,35, hmotová spektroskopie	(MH+	296)).

Příklad A27

Syntéza 2-[(benzothiazol-4-yl)acetamido]máselné kyseliny ve formě iso-butylesteru

Postupem podle obecné procedury I uvedené výše a použitím

4-benzothiazol-4-yl octová kyselina (Chemservice) a isobutyl-2-aminobutyrátu (připraven postupem podle obecné procedury J uvedené výše) byla připravena sloučenina z názvu. Reakce byla monitorována chromatografií na tenké vrstvě na silikagelu a čištění bylo prováděno filtrací, jak je popsáno v obecné proceduře.

NMR data byla následující:

^-nmr (CDC1₃) : δ = 7,82 (m, IH) , 7,51-7,21 (m, 4H) 5,84 (m, IH), 4,51 (m, IH), 3,90 (s, 2H), 3,79 (m, 2H) , 1,78 (m, 2H), 1,58 (m, IH) 0,80 (d, 6H), 0,66 (t, 3H).

• ·· • ft ···»··>

• ft ft · ft' ft · .♦· · ftftft • · ft' ft ftftft ftft ftft

Příklad A28

Syntéza 2-[(2-methylfenyl)acetamido]máselné kyseliny ve formě iso-butylesteru

Postupem podle obecné procedury I uvedené výše a použitím

2-methylfenyloctové kyseliny (Aldrich) a iso-butyl-2aminobutyrátu (připraven postupem podle obecné procedury J uvedené výše) byla připravena sloučenina z názvu. Reakce byla monitorována chromatografii na tenké vrstvě na silikagelu a čištění bylo prováděno filtrací, jak je popsáno v obecné proceduře.

NMR data byla následující:

^-nmr (CDC13) : δ = 7,18 (m, 410, 5,79 (m, lip, 4,54	(m, (m,
1H), 3,85 (m, 2H), 1,59 (m,	2H), 3,59 (s, 2H) , 3,29 (s, 1H) 0,87 (d, 6H), 0,77 (t, 3H) 291,39, hmotová spektroskopie	3H), 1,51 (M+ 291) ) .
C17H25NO3	(MW =
Příklad	A29
Syntéza	2-[(2-fluorfenyl)acetamido]máselné	kyseliny	ve

formě iso-butylesteru

Postupem podle obecné procedury I uvedené výše a použitím

2-fluorfenyloctové kyseliny (Aldrich) a iso-butyl-2aminobutyrátu (připraven postupem podle obecné procedury J uvedené výše) byla připravena sloučenina z názvu. Reakce byla monitorována chromatografii na tenké vrstvě na silikagelu a čištění bylo prováděno filtrací, jak je popsáno v obecné proceduře.

NMR data byla následující:

*· ♦ • 9 99 9 ·

9 9 · • * * « » 9 9 9 « 9 9 ··

999 999

999 999

99

1H-nmr (CDC13)	: δ = 7,25	(m,	IH), 7,09	(m,	3H)	6,03	(m,
IH), 4,54	(m,	IH), 3,87	(m,	2H), 3,57	(s,	2H) ,	1,89	(m,
2H), 1,64	(m,	IH) 0,88 (d,	6H)	, 0,80 (t,	3H) .

Příklad Α30

Syntéza 2-[(4-fluorfenyl)acetamido]máselné kyseliny ve formě iso-butylesteru

Postupem podle obecné procedury I uvedené výše a použitím

4-fluorfenyloctové kyseliny (Aldrich) a iso-butyl-2aminobutyrátu (připraven postupem podle obecné procedury J uvedené výše) byla připravena sloučenina z názvu. Reakce byla monitorována chromatografii na tenké vrstvě na silikagelu a čištění bylo prováděno filtrací, jak je popsáno v obecné proceduře.

NMR data byla následující:

1H-nmr (CDC13) : δ = 7,20	(m,	2H), 6,97	(m,	2H)	5,87	(m,
IH) , 4,492 (m, IH) , 3,83	(m,	2H), 3,48	(s,	2H),	1,86	(m,
2H), 1,60 (m, IH) 0,87 (d,	6H) ,	0,78 (t,	3H) .
C16H22NO3F (MW = 295,35, hmotová	spektroskopie	(MH+	296) ) .

Příklad A31

Syntéza 2-[(3-bromfenyl)acetamido]máselné kyseliny ve formě iso-butylesteru

Postupem podle obecné procedury I uvedené výše a použitím

3-bromfenyloctové kyseliny (Aldrich) a iso-butyl-2aminobutyrátu (připraven postupem podle obecné procedury J uvedené výše) byla připravena sloučenina z názvu. Reakce byla monitorována chromatografii na tenké vrstvě na silikagelu a čištění bylo prováděno filtrací, jak je popsáno v obecné proceduře.

NMR data byla následující:

^xH-nmr (CDC1₃) : δ = 7,45 (m, 2H) , 7,23 (m, 2H) 5,95 (m, IH), 4,55 (m, IH) 3,84 (m, 2H) 3,55 (s, 2H), 1,89 (m, 2H), 1,68 (m, IH) 0,91 (d, 6H), 0,81 (t, 3H).

Ci6H22NO₃Br (MW = 356,26, hmotová spektroskopie (M⁺ 357) .

Příklad A32

Syntéza 2-[(3-trifluormethylfenyl)acetamido]máselné kyseliny ve formě iso-butylesteru

Postupem podle obecné procedury I uvedené výše a použitím

3-trifluormethylfenyloctové kyseliny (Aldrich) a iso-butyl2-aminobutyrátu (připraven postupem podle obecné procedury J uvedené výše) byla připravena sloučenina z názvu. Reakce byla monitorována chromatografii na tenké vrstvě na silikagelu a čištění bylo prováděno filtrací, jak je popsáno v obecné proceduře.

NMR data byla následující:

1H-nmr (CDC13) : δ = 7,52 (m,	IH), 7,47	(m,	2H)	6,01	(m,
IH), 4,56 (m, IH) , 3,86 (m,	2H), 3,61	(s,	2H) ,	1,84	(m,
2H), 1,62 (m, IH) 0,87 (d, 6H)	, 0,80 (t,	3H) .
C17H22NO3F3 (MW = 345, 36, hmotová spektroskopie	(MH+	345))	*

Příklad A33

Syntéza 2-[(2-thienyl)acetamido]máselné kyseliny ve formě iso-butylesteru

Postupem podle obecné procedury I uvedené výše a použitím 2-thiofenoctové kyseliny (Aldrich) a iso-butyl-2aminobutyrátu (připraven postupem podle obecné procedury J uvedené výše) byla připravena sloučenina z názvu. Reakce byla monitorována chromatografii na tenké vrstvě na silikagelu a čištění bylo prováděno filtrací, jak je popsáno v obecné proceduře.

NMR data byla následující:

¹H-nmr (CDC1₃) : δ = 6,89 (m, 3H), 6,07 (bd, IH), 4,50 (m, IH), 3,82 (m, 2H) , 3,71 (s, 2H) , 1,85 (m, 2H) , 1,62 (m, IH), 0,81 (d, 6H), 0,75 (t, 3H).

C14H21NO3S (MW = 283,39, hmotová spektroskopie (MH⁺ 284)).

Příklad A34

Syntéza 2-(fenylacetamido)máselné kyseliny ve formě isobutylesteru

Postupem podle obecné procedury H uvedené výše a použitím fenyloctové kyseliny (Aldrich) a iso-butyl-2-aminobutyrátu (připraven postupem podle obecné procedury J uvedené výše) byla připravena sloučenina z názvu. Reakce byla monitorována chromatografií na tenké vrstvě na silikagelu a čištění byl chromatografií na silikagelu použitím směsi 9: 1 toluen:EtOAc jako vymývacího rozpouštědla.

NMR data byla následující:

¹H-nmr (CDC1₃) : δ = 7,17-7,28 (m, 5H), 6,23 (bd, IH) , 4,51 (m, IH), 3,86 (m, 2H), 3,54 (s, 2H), 1,87 (m, 2H), 1,62 (m, IH), 0,87 (d, 6H), 0,78 (t, 3H).

C16H23NO3 (MW = 277,36, hmotová spektroskopie (MH⁺ 277)).

Příklad A35

Syntéza N-(fenylacetyl)valinu ve formě 2-methylbutylesteru

Krok A. Příprava N-(fenylacetyl) valinu

Do míchaného roztoku 5,15 g (44 mmolů) valinu (Bachem) v 50 ml (100 mmolů) 2N NaOH ochlazeného na teplotu 0 °C bylo přidáno po kapkách 5,3 ml (40 mmolů) fenylacetylchloridu (Aldrich). Bezbarvý olej precipitoval. Reakční směs byla ponechána zahřát se na teplotu okolí a byla míchána po dobu

- ·* • ft · · • 9 9

9 9 9 ft · • 9 9 9

9 9 9

999 999

999 99 hodin, promývána 50 ml diethyletheru, okyselena na pH 23 vodným HCI. Vytvořený bílý precipitát byl odfiltrován, promýván důkladně vodou, následovanou diethyletherem a tím se získalo 7,1 g (30 mmol, 69 % výtěžek) sloučeniny z názvu.

NMR data byla následující:

xH-nmr	(DMSO-d6) : δ = 12,63 (s,	1H),	8,25 (d,	J = 8,6 Hz,
1H), 7,	27 (m, 5H), 4,15 (m, 1H),	3,56 (d, J =	13,8 Hz, 1H),
3,47 (d	, J = 13,8 Hz, 1H), 2,05	(m,	1H), 0,87	(d, J = 6,8,
Hz, 3H)	, 0,84 (d, J = 6,8 Hz, 3)
13C-nmr	(DMSO-de) : δ = 173,2, 170,4,	136, 6,	129,0, 128,2,

126,3, 57,1, 41,9, 30,0, 19,2, 18,0.

C13H17NO3 (MW = 235,29, hmotová spektroskopie (MH⁺ = 236))

Krok B. Syntéza N-(fenylacetyl)valinu ve formě 2methylbutylesteru

Postupem podle obecné procedury C a použitím N(fenylacetyl)valinu, připraveného v Kroku A uvedeném výše a 2-methylbutan-l-olu (Aldrich) byla připravena sloučenina z názvu ve formě diastereomerické směsi. Reakce byla monitorována chromatografii na tenké vrstvě na silikagelu a čištění bylo prováděno filtrací, jak je popsáno v obecné proceduře.

NMR data byla následující:

1H-nmr (CDCI3) : δ =	7,25-7,40	(m, 5H) ,	5, 95	(d,	1H) ,	4,56
(m, 1H), 3,84-4,00	(m, 2H),	3,61 (s,	2H) ,	2,10	(m,	1H) ,
1,68 (m, 1H), 1,38	(m, 1H), 1,	15 (m 1H)	, 0,82-0,94	(m,	9H) ,

0,76 (d, 3H).

¹³C-nmr (CDCI3) : δ = 171,84, 171,81, 170,7, 134,6, 129,31,

129,27, 128,9, 127,3, 69,8, 57,0, 43, 7, 33, 9, 31, 3, 25, 9,

25,8, 18,9, 17,4, 16,34, 16,27, 11,12, 11,07.

00 « 0 00 ·· •••0 00 00 0000

00 0 0 0 0 .0 0 0 0 0 0 0 0 0 000 000 • 00 0 0 0 0

C18H27NO3 (MW = 305,42, hmotová spektroskopie (MH⁺ 306)).

Příklad A36

Syntéza N-(fenylacetyl)-L-methioninu ve formě isobutylesteru

L-Methionin (0,1299, 0,869 mmolů) (Aldrich) byl v dioxanu (5,0 ml) a zpracováván nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného (5,0 ml), následovaným fenylacetylchloridem (Aldrich) (0,114 ml, 0,822 mmolů). Po míchání po dobu 17 hodin při teplotě okolí směs byla zředěna ethylacetátem, vrstvy byly odděleny a vodná vrstva byla okyselena na pH 2 pomocí 5N HCI. Surový produkt byl extrahován do ethylacetátu, sušen nad síranem sodným, sušen ve vakuu a používán bez dalšího čištění. N-fenylacetyl-Lmethionin (0,1285 g, 0,447 mmolů) byl rozpuštěn v 3,0 ml dioxanu a iso-butylalkoholu (0,2 ml) a zpracováván EDC (0, 094 g, 0,492 mmolů) a katalytickým DMAP (0,015 g) . Po míchání po dobu 17 hodin při teplotě 23 °C byla směs odpařen za sníženého tlaku na olej, residuum bylo zředěno v EtOAc a promýváno 0,1 N HCI a nasyceným hydrogenuhličitaném sodným. Chromatografie na silikagelu použitím 98:2 CHCl₃/MeOH jako vymývacího rozpouštědla poskytla čistý produkt.

NMR data byla následující:

¹H-nmr (CDC1₃) : δ = 7,4-7,23 (m, 5H), 6,14 (bd, 1H) , 4,70 (m, 1H), 3,89 (d, 2H), 3,62 (s, 2H) , 2,43 (m, 2H), 2,12 (m, 1H), 1,93 (m, 2H), 0,94 (d, 6H).

Ci₇H₂₅NO₃S (MW = 323, 17, hmotová spektroskopie (M⁺ 323) • · · • · • ·· ··· fc· · dioxanu (5,0 ml) hydrogenuhličitanu

Příklad A37

Syntéza N-(fenylacetyl)-L-leucinu ve formě iso-butylesteru

L-Leucine (Aldrich) (0,1149, 0,869 mmolů) byl vyjmut v a zpracováván nasyceným roztokem sodného (5,0 ml) následovaného fenylacetylchloridem (Aldrich) (0,114 ml, 0,822 mmolů). Po míchání po dobu 17 hodin při teplotě okolí směs byla zředěna ethylacetátem, vrstvy byly odděleny a vodná vrstva byla okyselena na pH 2 pomocí 5N HCI. Surový produkt byl extrahován do ethylacetátu, sušen nad síranem sodným, sušen ve vakuu a používán bez dalšího čištění. N-Fenylacetyl-Lleucin (0,0081 g, 0,038 mmolů) byl rozpuštěn v 2,0 ml CHCI3 (prostého EtOH) a iso-butylalkoholu (0,055 ml) a zpracováván P-EPC (100 mg, 0,87 miliekvivalentů). Směs byla míchána po dobu 4 dní, filtrována přes vrstvu bavlny a filtrát byl odpařen za sníženého tlaku na olej, který byl dostatečně čistý pro testování.

NMR data byla následující:

^xH-nmr (CDC1₃) : δ = 7,22 (m, 5H) , 5,57 (d, 1H) , 4,35 (m,

1H), 3,35 (m, 3H), 1,35 (m, 4H), 0,68 (m, 9H).

C18H27NO3 (MW = 305, 40, hmotová spektroskopie (M⁺ 305)).

Příklad A38

Syntéza N-[(3-chlorfenyl)acetyl]alaninu ve formě 3methylbut-2-enylesteru

Postupem podle obecné procedury C uvedené výše a použitím N-(3-chlorfenylacetyl)alaninu (z Příkladu D uvedeného výše) a 3-methylbut-2-en-l-olu (Aldrich) může být připravena sloučenina z názvu. Reakce byla monitorována chromatografii na tenké vrstvě na silikagelu a čištění bylo prováděno kapalinovou chromatografii použitím směsi 30 % EtOAc/hexan jako vymývacího rozpouštědla.

9 · ·♦ • · · • ·«· ··« • « • ·· · *

NMR data byla následující:

^xH-nmr (CDC1₃) : δ = 7,39-7,16 (m, 4H) , 6,06 (d,

5,29 (m, IH) , 4,63 (d, J = 9 Hz, 2H) , 3,56 (s,

1H), 5,382H), 1,79 (s, 3H), 1,7 (s, 3H), 1,39 (d, J = 9 Hz, 3H)

Příklad A39

Syntéza N-[(3-chlorfenyl)acetyl]alaninu ve formě cyklopropylmethylesteru

Postupem podle obecné procedury C uvedené výše a použitím N-(3-chlorfenylacetyl)alaninu (z Příkladu D uvedeného výše a cyklopropylmethanolu (Aldrich) může být připravena sloučenina z názvu. Reakce byla monitorována chromatografií na tenké vrstvě na silikagelu a čištění bylo prováděno kapalinovou chromatografií použitím směsi 3:7 EtOAc:hexan jako vymývacího rozpouštědla.

NMR data byla následující:

¹H-nmr (CDC1₃) : δ = 7,2-7,1 (m, 4H) , 6,09 (s, IH) , 4,6 (dq, J = 9 Hz, IH), 3,96 (dd, J = 9Hz, 2H) , 3,59 (s, 2H) , 1,2 (d, J= 9Hz, 3H), 1,2-1,0 (m, IH), 0,60-0,50 (m, 2H), 0,300,20 (m, 2H).

Příklad A40

Syntéza N-[(3-chlorfenyl)acetyl]alaninu ve formě 2thienylmethylesteru

Postupem podle obecné procedury C uvedené výše a použitím N-(3-chlorfenylacetyl)alaninu (z Příkladu D uvedeného výše a 2-thiofenmethanolu (Aldrich) může být připravena sloučenina z názvu. Reakce byla monitorována chromatografií na tenké vrstvě na silikagelu a čištění bylo prováděno kapalinovou chromatografií použitím směsi 3:7 EtOAc:hexan jako vymývacího rozpouštědla.

• 4

4 4 4 ► 4 4 4 » 4 4 4

444 444

NMR data byla následující:

¹H-nmr (CDC1₃) : δ = 7,37-6, 97 (m, 7H) , 5,97 (q, J = 14 Hz,

2H), 4,6 (dq, J = 9 Hz, IH) , 3,76 (s, 2H) , 1,38 (d, J =

9Hz, 3H).

Příklad A41

Syntéza N-[(3-chlorfenyl)acetyl]alaninu ve formě (1methylcyklopropyl)methylesteru

Postupem podle obecné procedury C uvedené výše a použitím N-(3-chlorfenylacetyl)alaninu (z Příkladu D uvedeného výše a (1-methylcyklopropyl)methanolu (Aldrich) může být připravena sloučenina z názvu. Reakce byla monitorována chromatografii na tenké vrstvě na silikagelu a čištění bylo prováděno kapalinovou chromatografii použitím směsi 3:7 EtOAc:hexan jako vymývacího rozpouštědla.

NMR data byla následující:

^xH-nmr (CDC1₃) : δ = 8,6 (bd, J = 9 Hz, IH) , 3,86 (q, J = 14 Hz, 2H), 3,4 (s, 2H), 2,29 (q, J = 9 Hz, IH) , 1,3 (d, J = 9Hz, 3H), 1,03 (s, 3H), 0,5-0,4 (m, 2H), 0,4-0,28 (m, 2H) .

Příklad A42

Syntéza N-[(3-chlorfenyl)acetyl]alaninu ve formě 3thienylmethylesteru

Postupem podle obecné procedury C uvedené výše a použitím N-(3-chlorfenylacetyl)alaninu (z Příkladu D uvedeného výše a 3-thiofenmethanolu (Aldrich) může být připravena sloučenina z názvu. Reakce byla monitorována chromatografii na tenké vrstvě na silikagelu a čištění bylo prováděno kapalinovou chromatografii použitím směsi 3:7 EtOAc:hexan jako vymývacího rozpouštědla.

NMR data byla následující:

• 9

Φ 9 9 9 • .9 • ·

9

9 9 9

9 9 • 9 9

999 999

1H-nmr (CDC13) : δ = 8,03 (bd,	J =	9 Hz, IH)	, 7,56-7,5	(m,
IH), 7,47 (bs, IH), 7,4-7,17	(m,	4H), 7,06	(d, J = 9	Hz,

ΙΗ), 5,1 (s, 2H), 4,3 (dq, IH), 1,3 (d, J = 9 Hz, 3H) .

Příklad A43

Syntéza N-[(3-chlorfenyl)acetyl]alaninu ve formě 2methylcyklopentylesteru

Postupem podle obecné procedury C uvedené výše a použitím N-(3-chlorfenylacetyl)alaninu (z Příkladu D uvedeného výše a 2-methylcyklopentanolu (Aldrich) může být připravena sloučenina z názvu. Reakce byla monitorována chromatografii na tenké vrstvě na silikagelu a čištění bylo prováděno kapalinovou chromatografii použitím směsi 3:7 EtOAc:hexan jako vymývacího rozpouštědla.

NMR data byla následující:

^-nmr (CDC1₃) : δ = 7,39-7,16 (m, 4H), 6,3 (bd, IH) , 4,79-

4,7	(m,	IH) ,	4,6-4,25	(m,	J = 9 Hz, IH) , 3,58 (s,	2H) ,
2,09·	-1,8	(m,	2H), 1,74	-1,6	(m, 2H) , 1,39 (dd, J =	9 Hz,
3H) ,	1,2	(dt,	J = 9 Hz,	IH) ,	0,98 (dd, J = 9 Hz, 2H)

C17H22NO3CI (MW = 323,52, hmotová spektroskopie (MH⁺ 323).

Příklad A44

Syntéza N-[(3-chlorfenyl)acetyl]alaninu ve formě 2methylprop-2-enylesteru

Postupem podle obecné procedury C uvedené výše a použitím N-(3-chlorfenylacetyl)alaninu (z Příkladu D uvedeného výše a 2-methylprop-2-en-l-olu (Aldrich) může být připravena sloučenina z názvu. Reakce byla monitorována chromatografií na tenké vrstvě na silikagelu a čištění bylo prováděno kapalinovou chromatografii použitím směsi 3:7 EtOAc:hexan jako vymývacího rozpouštědla.

• · • ·

NMR data byla následující:

^-nmr (CDC1₃) : δ = 7,39-7,16 (m, 4H) , 6,03 (bs, 1H) , 4,77 (s, 2H), 4,7-4,29 (m, 3H), 2,59 (s, 2H), 1,73 (s, 3H), 1,43 (d, J = 9 Hz, 3H)

C15H18NO3CI (MW = 295,76, hmotová spektroskopie (MH⁺ 295)).

Příklad A45

Syntéza N-[(3-chlorfenyl)acetyl]alaninu ve formě cyklohex2-enylesteru

Postupem podle obecné procedury C uvedené výše a použitím N-(3-chlorfenylacetyl)alaninu (z Příkladu D uvedeného výše a cyklohex-2-en-l-olu (Aldrich) může být připravena sloučenina z názvu. Reakce byla monitorována chromatografií na tenké vrstvě na silikagelu a čištění bylo prováděno kapalinovou chromatografií použitím směsi 3:7 EtOAc:hexan jako vymývacího rozpouštědla.

NMR data byla následující:

¹H-nmr (CDC1₃) : δ = 8,6 (bd, J = 9 Hz, 1H) , 7,4-7,2 (m,

4H), 6,0-5,8 (m, 1H), 5,7-5,5 (m, 1H), 5,1 (bs, 1H), 4,134,29 (m, 1H), 3,5 (s, 2H) , 2,1-1,9 (m, 2H) , 1,8-1,69 (m,

1H), 1,69-1,49 (m, 4H), 1,3 (dd, J = 9 Hz, 3H)

C17H20NO3CI (MW = 321,8, hmotová spektroskopie (MH⁺ 321,2)).

Příklad A46

Syntéza N-[(2-fenylbenzoxazol-5-yl)acetyl]alaninu ve formě iso-butylesteru

Postupem podle obecné procedury I uvedené výše a použitím 5-(2-fenylbenzoxazol)-yl-octové kyseliny (CAS # 62143-69-5) a alaninu ve formě iso-butylesteru (připraven postupem podle obecné procedury I uvedené výše) byla připravena sloučenina z názvu.

9-99 · 9 9 9 9 9

9 9 9 * · 99 9 99 9

99 9 9 9999 •9 99 9 9 · 999999 • · · ·9 9 9

NMR data byla následující:

^-nmr (CDC13) : δ = 8,24	(m,	3H), 7,68	(m,	IH) ,	7,51	(m,
5H) , 6,04 (m, IH) , 4,58	(m,	IH), 3,85	(m,	2H) ,	3, 68	(s,
2H), 1,9 (m, IH), 1,35 (d,	3H)	z 0,87 (d,	6H) .

C22H24N2OZ) (MW = 380, hmotová spektroskopie (MH⁺ 381) ) .

Příklad A47

Syntéza N-[(3-methylthiofenyl)acetyl]alaninu ve formě isobutylesteru

Postupem podle obecné procedury I uvedené výše a použitím 3-methylthiofenyloctové kyseliny (CAS # 18698-73-2) a alaninu ve formě iso-butylesteru (připraven postupem podle obecné procedury J uvedené výše) byla připravena sloučenina z názvu. Reakce byla monitorována chromatografii na tenké vrstvě na silikagelu a čištění bylo prováděno filtrací, jak je popsáno v obecné proceduře.

NMR data byla následující:

¹H-nmr (CDC1₃) : δ = 7,14 (m, 2H) , 7,01 (m, IH) , 4,56 (m,

IH), 3,88 (m, 2H), 3,54 (s, 2H) , 2,46 (s, 3H) , 1,89 (m,

IH), 1,35 (d, 3H) 0,85 (d, 5H).

C16H23NO3S (MW = 309, hmotová spektroskopie (MH⁺ 310)).

Příklad A48

Syntéza N-4-[(2-furyl)acetyl]alaninu ve formě isobutylesteru

Postupem podle obecné procedury I uvedené výše a použitím 2-furyloctové kyseliny (CAS # 2745-26-8) a alaninu ve formě iso-butylesteru (připraven postupem podle obecné procedury J uvedené výše) byla připravena sloučenina z názvu. Reakce byla monitorována chromatografii na tenké vrstvě na

• »· · 4

4 4 4 ' ' *· · « · · · • · · < ' · .

• · · · · • · · · 4 44 4 44 silikagelu a čištění bylo prováděno filtrací, jak je popsáno v obecné proceduře.

NMR data byla následující:

^xH-nmr (CDC1₃) : δ = 7,36 (m, IH), 6,34 (m, ÍH), 6,21 (m, IH), 4,56 (m, IH) , 3,91 (m, 2H) , 3,61 (s, 2H), 1,92 (m, IH), 1,38 (d, 3H) 0,89 (d, 6H).

C13H19NO4 (MW = 253, hmotová spektroskopie (MH⁺ 254)).

Příklad A4 9

Syntéza N-[(benzofuran-2-yl)acetyl]alaninu ve formě isobutylesteru

Postupem podle obecné procedury I uvedené výše a použitím benzofuran-2-yloctové kyseliny (Maybridge) a alaninu ve formě iso-butylesteru (připraven postupem podle obecné procedury J uvedené výše) byla připravena sloučenina z názvu. Reakce byla monitorována chromatografii na tenké vrstvě na silikagelu a čištění bylo prováděno filtrací, jak je popsáno v obecné proceduře.

NMR data byla následující:

^xH-nmr (CDC1₃) : δ = 7,51 (m, IH), 7,44 (m, 1H),7,25 (m,

2H), 6,67 (s, IH), 4,60 (m, IH) , 3,87 (m, 2H) , 3,77 (s,

2H), 1,88 (m, IH), 1,38 (d, 3H), 0,87 (d, 6H).

C17H21NO4 (MW = 303, hmotová spektroskopie (MH⁺ 304)).

Příklad A50

Syntéza N-[(benzothiofen-3-yl)acetyl]alaninu ve formě isobutylesteru

Postupem podle obecné procedury I uvedené výše a použitím thianaften-3-yloctové kyseliny (Lancaster) a alaninu ve formě iso-butylesteru (připraven postupem podle obecné procedury J uvedené výše) byla připravena sloučenina z ♦ · · « φ • ··

1 · · φ · · · · · · · · · • · • · 9 · názvu. Reakce byla monitorována chromatografií na tenké vrstvě na silikagelu a čištění bylo prováděno filtrací, jak je popsáno v obecné proceduře.

NMR data byla následující:

xH-nmr (CDC13) : δ = 7,89	(m,	IH) ,	7,76	(m,	IH) ,	7,38	(m,
3H), 6,07 (m, IH) , 4,57	(m,	IH),	3,92	(m,	2H) ,	3,82	(s,
4H), l.M (m, IH), 1,32 (d,	3H)	0,85	(d,	6H) .

C17H21NO3S (MW = 319, hmotová spektroskopie (MH⁺ 320) ) .

Příklad A51

Syntéza N-[(2-chlor-5-thienyl)acetyl]alaninu ve formě isobutylesteru

Postupem podle obecné procedury I uvedené výše a použitím 5-chlor-2-thienyloctové kyseliny (CAS # 13669-19-1 a alaninu ve formě iso-butylesteru (připraven postupem podle obecné procedury J uvedené výše) byla připravena sloučenina z názvu. Reakce byla monitorována chromatografií na tenké vrstvě na silikagelu a čištění bylo prováděno filtrací, jak je popsáno v obecné proceduře.

NMR data byla následující:

¹H-nmr (CDC1₃) : δ = 6,77 (m, IH) , 6,68 (d, IH) , 6,31 (m,

IH), 4,59 (m, IH) , 3,91 (m, 2H) , 3,38 (s, 2H) , 1,90 (m,

IH), 1,39 (d, 3H), 0,89 (d, 5H).

Ci₃Hi₈NO₃SC1 (MW = 303, hmotová spektroskopie (MH⁺ 303) ) .

• · · · · ·» · · 44 9 4 9 9 4 9 4 4 4 9

49 9 9 4. 4 4 4

4 444 9 4-999 449

9 9 · · 9 9

949 44 444 449 49 94

Příklad A52

Syntéza N-[(3-methylisoxazol-5-yl)acetyl]alaninu ve formě iso-butylesteru

Postupem podle obecné procedury I uvedené výše a použitím (3-methyl-isoxazol-5-yl)octové kyseliny (CAS # 19668-85-0) a alaninu ve formě iso-butylesteru (připraven postupem podle obecné procedury J uvedené výše) byla připravena sloučenina z názvu. Reakce byla monitorována chromatografii na tenké vrstvě na silikagelu a čištění bylo prováděno filtrací, jak je popsáno v obecné proceduře.

NMR data byla následující:

¹H-nmr (CDC-1₃) : δ = 6,07 (s, 2H) , 4,56 (m, 1H) , 3,92 (m,

2H), 3,68 (s, 2H), 2,29 (s, 3H), 1,94 (m, 1H), 1,89 (d, 3H) 0,91 (d, 6H).

C13H20N2O4 (MW = 268, hmotová spektroskopie (MH⁺ 269)).

Příklad A53

Syntéza N-[(2-fenylthiothienyl)acetyl]alaninu ve formě isobutylesteru

Postupem podle obecné procedury I uvedené výše a použitím (2-fenyl-thiothienyl)octové kyseliny a alaninu ve formě iso-butylesteru (připraven postupem podle obecné procedury J uvedené výše) byla připravena sloučenina z názvu. Reakce byla monitorována chromatografii na tenké vrstvě na silikagelu a čištění bylo prováděno filtrací, jak je popsáno v obecné proceduře.

NMR data byla následující:

^-nmr (CDC1₃) : δ = 7,21-7,11 (m, 6H) , 6,92 (d, 1H) , 4,56(m, 1H), 3,87 (m, 2H), 3,72 (s, 2H), 1,94 (m, 1H), 1,38 (d, 3H) 0,89 (d, 6H).

C19C23NO3S2 (MW = 377, hmotová spektroskopie (MH⁺ 378)).

44

4 4

4 4

444 444

4 4 4 44

Příklad A54

Syntéza N-[(6-methoxybenzothiofen-2-yl)acetyl]alaninu ve formě iso-butylesteru

Postupem podle obecné procedury I uvedené výše a použitím (6-methoxythianaften-2-yl)octové kyseliny a alaninu ve formě iso-butylesteru (připraven postupem podle obecné procedury J uvedené výše) byla připravena sloučenina z názvu. Reakce byla monitorována chromatografii na tenké vrstvě na silikagelu a čištění bylo prováděno filtrací, jak je popsáno v obecné proceduře.

NMR data byla následující:

¹H-nmr (CDC1₃) : δ = 7,59 (d, IH) , 7,33 (d, IH) , 7,16 (s, IH), 7,03 (dd, IH), 4,56 (m, IH), 3,87(s, 3H), 3.M (m, 2H), 3,76 (s, 2H),1,85 (m, IH), 1,30 (d, 3H) 0,86 (d, 6H). C18H23NO4S (MW = 3491, hmotová spektroskopie (MH⁺ 350) ) .

Příklad A55

Syntéza N-[(3-fenyl-l,2,4-thiadiazol-5-yl)acetyl]alaninu ve formě iso-butylesteru

Postupem podle obecné procedury I uvedené výše a použitím (3-fenyl-l,2,4-thiadiazol-5-yl)octové kyseliny (CAS # 90771-06-5) a alaninu ve formě iso-butylesteru (připraven postupem podle obecné procedury J uvedené výše) byla připravena sloučenina z názvu. Reakce byla monitorována chromatografii na tenké vrstvě na silikagelu a čištění bylo prováděno filtrací, jak je popsáno v obecné proceduře.

NMR data byla následující:

¹H-nmr (CDC1₃) : δ = 7,47 (m, 5H) , 4,66 (m, IH) , 4,16 (s,

2H), 3,91 (m, 2H), 1,93 (m, IH), 1,48 (d, 3H) 0,93 (d, 6H). C17H21N3O3S (MW = 347, hmotová spektroskopie (MH⁺ 348)).

•	00		0	0	0 0	00
0 0 ·		0	0 0	0 0	• 0	0 ·
•	00		0	0	0 «	0 0
• ·		0 ·	0	0	0 00 0	0 0 0
0 »		0	0	•	0	0
0 0 0	0 0		000	000	0 0	0 0

Příklad A56

Syntéza N-[(2-fenyloxazol-4-yl)acetyl]alaninu ve formě isobutylesteru

Postupem podle obecné procedury I uvedené výše a použitím (2-fenyloxazol-4-yl)octové kyseliny (ČAS # 22086-89-1) a alaninu ve formě iso-butylesteru (připraven postupem podle obecné procedury J uvedené výše) byla připravena sloučenina z názvu. Reakce byla monitorována chromatografií na tenké vrstvě na silikagelu a čištění bylo prováděno filtrací, jak je popsáno v obecné proceduře.

NMR data byla následující:

Příklad A57

Syntéza N-[(3-methylfenyl)acetyl]alaninu ve formě isobutylesteru

Postupem podle obecné procedury I uvedené výše a použitím 3-methylfenyloctové kyseliny (Aldrich) a alaninu ve formě iso-butylesteru (připraven postupem podle obecné procedury J uvedené výše) byla připravena sloučenina z názvu. Reakce byla monitorována chromatografií na tenké vrstvě na silikagelu a čištění bylo prováděno filtrací, jak je popsáno v obecné proceduře.

NMR data byla následující:

^-nmr (CDC1₃) : δ = 7,21 (m, 1H) , 7,07 (m, 3H) , 4,54 (m,

1H), 3,83 (m, 2H) , 3,52 (s, 2H) , 2,35 (s, 3H) , 1,87 (m,

1H), 1,32 (d, 3H), 0,88 (d, 6H).

C16H23NO3 (MW = 277, hmotová spektroskopie (MH⁺ 278) ) .

• ·» · » ·· ΦΦ

9 · · 9 9 9 9 · Φ Φ · • ·-· 4 * ΦΦΦΦ • Φ » Φ · Φ φ φφφ φφφ • Φ' Φ 7 Φ Φ · : Φ Φ φ

ΦΦΦ ΦΦ ΦΦΦ ΦΦΦ 99 99

Příklad Α58

Syntéza Ν-[ (2,5-d.ifluorfenyl) acetyl] alaninu ve formě isobutylesteru

Postupem podle obecné procedury I uvedené výše a použitím

2.5- difluorfenyloctové kyseliny (Aldrich) a alaninu ve formě iso-butylesteru (připraven postupem podle obecné procedury J uvedené výše) byla připravena sloučenina z názvu. Reakce byla monitorována chromatografií na tenké vrstvě na silikagelu a čištění bylo prováděno filtrací, jak je popsáno v obecné proceduře.

NMR data byla následující:

^-nmr (CDC1₃) : δ = 7,08-6,94 (m, 3H), 4,57 (m, 1H) , 3,91 (m, 2H), 3,56 (s, 2H), 1,92 (m, 1H), 1,41 (d, 3H) 0,91 (d, 6H) .

Ci5Hi9NO₃F₂2 (MW = 299, hmotová spektroskopie (hlH+ 300) ) .

Příklad A59

Syntéza N-[(3,5-diflurofenyl)acetyl]alaninu ve formě isobutylesteru

Postupem podle obecné procedury I uvedené výše a použitím

3.5- difluorfenyloctové kyseliny (Aldrich) a alaninu ve formě iso-butylesteru (připraven postupem podle obecné procedury J uvedené výše) byla připravena sloučenina z názvu. Reakce byla monitorována chromatografií na tenké vrstvě na silikagelu a čištění bylo prováděno filtrací, jak je popsáno v obecné proceduře.

NMR data byla následující:

^-nmr (CDC1₃) : δ = 6,81 (m, 2H) , 6,74 (m, 1H) , 6,06 (m,

1H), 4,57 (m, 1H) , 3,92 (m, 2H) , 3,51 (s, 2H) , 1,94 (m,

1H), 1,36 (d, 3H) 0,87 (d, 6H).

Ci₅Hi9NO₃F₂ (MW = 299, hmotová spektroskopie (MH⁺ 300)).

• 0

0

0

0 0 ·· 00 ·'' «'« »'

0 0 « '0 '000 ·»·

Příklad A60

Syntéza N-[(3-thienyl)acetyl]alaninu ve formě isobutylesteru

Postupem podle obecné procedury I uvedené výše a použitím 3-thiofenoctové kyseliny (Aldrich) a alaninu ve formě isobutylesteru (připraven postupem podle obecné procedury J uvedené výše) byla připravena sloučenina z názvu. Reakce byla monitorována chromatografií na tenké vrstvě na silikagelu a čištění bylo prováděno filtrací, jak je popsáno v obecné proceduře.

NMR data byla následující:

^-nmr (CDC13) : δ = 7,	33 (m, IH) , 7	. 14	(m, IH),	7,01 (m,
IH), 6,5 (m, IH), 4,58	(m, IH), 3,88	(m,	2H), 3,60	(s, 2H),
1,91 (m, IH), 1,37 (d,	3H), 0,92 (d,	6H)	•
Optická rotace: [a]23 -	52 (c 1 MeOH)	při	589 nm.

C13H19NO3S (MW - 269, hmotová spektroskopie (MH⁺ 269) ) .

Příklad A61

Syntéza N-[(4-methylfenyl)acetyl]-L-alaninu ve formě isobutylesteru

Postupem podle obecné procedury I uvedené výše a použitím 4-methylfenyloctové kyseliny (Aldrich) a L-alaninu ve formě iso-butylesteru (připraven postupem podle obecné procedury J uvedené výše) byla připravena sloučenina z názvu. Reakce byla monitorována chromatografií na tenké vrstvě na silikagelu a čištění bylo prováděno filtrací, jak je popsáno v obecné proceduře.

NMR data byla následující:

• ·· « ♦ · · · · <

·'·· · t · · · · • · · · ··· 99 999

90

0 9 9

0 9 9

999 999

9

9 9 99 ¹H-nmr (CDC1₃) : δ = 7,11 (s, 4H), 5,93 (m, IH) , 4,58 (m,

IH), 3,58 (m, 2H) , 3,54 (s, 2H) , 2,33 (s, 3H) , 1,89 (m,

IH), 1,32 (d, 3H), 0,89 (d, 6H) .

Ci6H23NO₃ (MW = 277,35, hmotová spektroskopie (MH⁺ 278)).

Příklad A62

Syntéza N-(fenylacetyl)-L-alaninu ve formě S-l(methoxykarbonyl) iso-butylesteru

Postupem podle obecné procedury K a použitím (S)-(+)-2hydroxy-2-methylmáselné kyseliny (Aldrich) namísto aminokyseliny byl připraven methyl (S)-(+)-2-hydroxy-2methylbutyrát. Methyl (S)-(+)-2-hydroxy-2-methylbutyrát byl potom kopulován s karbobenzyloxy-L-alaninem (Aldrich) použitím obecné procedury E a tím se získal karbobenzyloxyL-alanin ve formě S-l-(methoxykarbonyl)iso-butylesteru. Karbobenzyloxy-L-alanin ve formě S-l-(methoxykarbonyl)isobutylesteru (1,0 g) byl potom rozpuštěn v 20 ml methanolu a 6N HCl (0,5 ml) a bylo přidáno 10 % paládium na aktivním uhlí (0,1 g). Tato reakční směs byla hydrogenován při tlaku 40 psi vodíku v Parrově přístroji po dobu 5 hodin při teplotě okolí a potom filtrována přes vrstvu Celitu. Filtrát byl koncentrován za sníženého tlaku a tím se získal L-alanin S-l-(methoxykarbonyl) ve formě hydrochloridu isobutylesteru (98 % výtěžek). L-Alanin S-l-(methoxykarbonyl) ve formě hydrochloridu iso-butylesteru byl potom kopulován s fenyloctovou kyselinou použitím obecné procedury G a tím se získala sloučenina z názvu.

NMR data byla následující:

^-nmr (CDC1₃) : δ= 7,35 - 7,20 (m, 5H), 6,22 (bd, IH) , 4,83 (d, IH), 4,65 (p, IH), 3,68 (s, 3H), 3,55 (s, 2H), 2,21 (m, IH), 1,40 (d, 3H), 0,97 (d, 3H), 0,93 (d, 3H).

100

	• 0		•	0	00	00
00 *		•	00	0 0	0 «	0 «
•	00		•	0	• 0	0' ' 0
• 0		• ·		0	« 00«	0 0 0
- 0 0		•	•	«	0	0
• 00	• 0		• 0 0	000	0 0	0 0

¹³C-nmr (CDC1₃) : δ = 173,25, 171, 18, 170,22, 135, 11, 129, 94, 129,50, 127,88, 52,67, 48,49, 43,98, 30,53, 19,21, 18,75,

17,58.

Příklad A63

Syntéza N-[(3-nitrofenyl)acetyl]-L-alaninu ve formě isobutylesteru

Postupem podle obecné procedury H uvedené výše a použitím 3-nitrofenyloctové kyseliny (Aldrich) a L-alaninu ve formě hydrochloridu iso-butylesteru (z Příkladu B uvedeného výše) byla připravena sloučenina z názvu. Reakce byla monitorována chromatografií na tenké vrstvě na silikagelu a čištění bylo prováděno rekrystalizaci z butylchloridu.

NMR data byla následující:

¹H-nmr (CDC1₃) : δ = 8,17 (m, 2H) , 7,68 (d, IH) , 7,52 (t,

IH), 6,18 (m, IH), 4,48 (m, lH) , 3,94 (m, 2H) , 3,67 (s,

2H), 1,93 (m, IH), 1,42 (d, 3H), 0,91 (d, 3H).

Optická rotace: [a]₂3 -49 (c 5, MeOH).

Příklad A64

Syntéza N-[(3,5-difluorfenyl)acetyl]alaninu ve formě ethylesteru

Postupem podle obecné procedury G a použitím 3,5difluorfenyloctové kyseliny (Aldrich) a alaninu ve formě ethylesteru (Aldrich) byla připravena sloučenina z názvu ve formě pevné látky, která má teplotu tání 93 °C-95 °C.

Reakce byla monitorována chromatografií na tenké vrstvě na silikagelu (Rf = 0,8 v EtOAC) a čištění bylo prováděno chromatografií na silikagelu použitím EtOAc jako vymývacího rozpouštědla, následovanou rekrystalizaci z 1-chlorbutanu. NMR data byla následující:

101 • ··.·...··..····. . :.. 9· 4 > · ·· . · ’ ·: '..···· · • · · .·' 99» 0 0 0 • · .0.0-. ·.. 0 . * • · 000 000 00 00 ^xH-nmr (DMSO-d₆) : δ = 1,30 (d, 3H) ; 3,52 (s, 2H) .

C₁₃Hn₅NO₃F₂ (MW = 271,26, hmotová spektroskopie (MH⁺ 271)).

Příklad A65

Syntéza N-[(3-nitrofenyl)acetyl]methioninu ve formě ethylesteru

Postupem podle obecné procedury G uvedené výše a použitím 3-nitrofenyloctové kyseliny (Aldrich) a methioninu ve formě hydrochloridu ethylesteru (Aldrich) byla připravena sloučenina z názvu. Reakce byla monitorována chromatografií na tenké vrstvě na silikagelu a čištění bylo prováděno rekrystalizací z butylchloridu. NMR data byla následující: ^xH-nmr (CDC1₃) : δ G= 8,18 (s, 1H) , 8,15 (d, 1H) 7,66 (d,

1H) ,	7,48	(t,	1H) , 6,30	(m, 1H), 4,67	(m, 1H), 4,21	(t,
2H) ,	3, 67	(s,	2H), 2,47	(t, 2H), 2,12	(m, 2 Η) , 2,08	(s,
3H) ,	1,27	(t,	3H) .
Optická rotace	: [a]23 -30	(c 5, MeOH).

Příklad A66

Syntéza N-[(3-chlorfenyl)acetyl]alaninu ve formě isobutylesteru

Postupem podle obecné procedury G uvedené výše a použitím 3-chlorfenyloctové kyseliny (Aldrich) a alaninu ve formě iso-butylesteru (připraven postupem podle obecné procedury J uvedené výše) byla připravena sloučenina z názvu. Reakce byla monitorována chromatografií na tenké vrstvě na silikagelu.

NMR data byla následující:

^xH-nmr (CDC1₃) : δ = 7,29 (m, 3H) , 7. 18 (m, 1H) , 6,0 (m, 1H) , 4,56 (m, 1H) , 3,89 (m, 2H), 3,53 (s, 2H) , 1,91 (m, 1H) , 1,39 (d, 3 Η), 0,91 (d, 3H).

- 102 Optická rotace: [a] -45 (c 5, MeOH).

C15H20NO3CI (MW =; 297,78, hmotová spektroskopie (MH⁺ 297).

Příklad A67

Syntéza N-[(3-chlorfenyl)acetyl]alaninu ve formě 2-(N,Ndimethylamino)ethylesteru

Postupem podle obecné procedury C uvedené výše a použitím N-(3-chlorfenyl-acetýl)alaninu (z Příkladu D uvedeného výše a 2-(N,N-dimethyl amino) ethanolu (Aldrich) může být připravena sloučenina z názvu. Reakce byla monitorována chromatografii na tenké vrstvě na silikagelu a čištění bylo prováděno kapalinovou chromatografii použitím směsi 0,1:2:0,79 NH4OH: EtOH: CHCI3 jako vymývacího rozpouštědla.

NMR data byla následující:

XH-	nmr (CDCI3) : 7,37	(s, 1H), 7,33-7,2	(m,	3H) , 4,675-4,6
(m,	1H), 4,5-4,37 (m,	1H), 4,25-4,13 (m,	1H)	, 3,6 (d, J = 7
Hz,	2H), 2,86 (s, 2H)	, 2,3 (s, 6H), 1,23	(d,	J = 9 Hz, 3H).

C15H21N2O3CI (MW = 313,799, hmotová spektroskopie (M⁺ 313)).

Příklad A68

Syntéza 2-[(3,5-dichlorfenyl)acetamido]hexanové kyseliny ve formě methylesteru

Postupem podle obecné procedury F uvedené výše a použitím 3,5-dichlorfenyloctové kyseliny (z Příkladu C uvedeného výše) a L-norleucinu ve formě hydrochloridu methylesteru (Bachem) byla připravena sloučenina z názvu ve formě pevné látky, která má teplotu tání 77 °C-78 °C. Reakce byla monitorována chromatografii na tenké vrstvě na silikagelu (Rf = 0,70 v 40 % EtOAC/hexanech) a čištění bylo prováděno mžikovou chromatografii na silikagelu použitím 40 %

EtOAc/hexany jako vymývacího rozpouštědla.

' «·

0 0 0 0 · 0 · 0« ·

			103 -	• 00* 0 * · 0 0 0 · 0 • 0» 00 000 <00	• 00 00 0. 00 *«
NMR dat	.a byla	následuj ící:
xH-nmr	(CDC13)	: δ = 7,20 (s,	, 7,18	(s), 6,6 (m), 4,55	(m),
3,7 (s)	, 3,5	(s), 3,4 (s),	2,0 (s)	, 1,8 (m), 1,6 (mj,	1,2
(m) , 0,	8 (t) .
13C-nmr	(CDC13)	: δ = 173,54,	169,67,	138,43, 135,72, 128	,33,

128,07, 78,04, 77,62, 77,19, 53.Μ, 52,90, 43,14, 32,57,

27,87, 22,81, 14,41.

Příklad Α69

Syntéza Ν-[(3,5-dichlorfenyl)acetyl]-L-alaninu ve formě iso-butylesteru

Postupem podle obecné procedury F uvedené výše a použitím

3,5-dichlorfenyloctové kyseliny (z Příkladu C uvedeného výše) a L-alaninu ve formě hydrochloridu iso-butylesteru (z Příkladu B uvedeného výše) byla připravena sloučenina z názvu ve formě pevné látky, která má teplotu tání 1150-116 °C. Reakce byla monitorována chromatografií na tenké vrstvě na silikagelu (Rf = 0,40 v 3 % methanol/dichlormethan) a čištění bylo prováděno mžikovou chromatografií na silikagelu použitím směsi 3 % methanol/dichlormethan jako vymývacího rozpouštědla.

NMR data byla následující:

^xH-nmr (CDC1₃) : δ = 7,27 (d, J = 2 Hz, IH) , 7,19 (s, 2H) ,

6,22 (d, J = 6 Hz, IH) , 4,59 (kvint., J = 7 Hz, IH) , 3,9 (q, J = 4 Hz, 2H), 3,5 (s, 2H) , 1,9 (m, IH) , 1,4 (d, J = 7

Hz, 3H), 0,91 (d, J = 7 Hz, 6H).

¹³C-nmr (CDC1₃) : δ= 173, 45, 169, 37, 138,31, 135, 75, 128,39, 128,11, 78,04, 77,61, 77,19, 72,19, 54,03, 48,97, 43,12,

28,24, 19,52, 19,49, 19,09.

C15H19NO3CI2 (MW = 331,9, hmotová spektroskopie (MH⁺ 332)).

• φ φ

104

Příklad Α70

Syntéza N-(cyklohexylacetyl)-L-alaninu ve formě isobutylesteru

Postupem podle obecné procedury B uvedené výše a použitím cyklohexyloctové kyseliny (Aldrich) a L-alaninu ve formě hydrochloridu iso-butylesteru (z Příkladu B uvedeného výše) byla připravena sloučenina z názvu ve formě pevné látky, která má teplotu tání 92 °C-93 °C. Reakce byla monitorována chromatografii na tenké vrstvě na silikagelu (Rf = 0,39 v 1:3 EtOAc:hexan) a čištění bylo prováděno extrakcí Et2O následovanou promýváním vodným K2CO3 a vodným HC1.

NMR data byla následující:

1H-nmr	(CDCI3) : δ =	= 0,93 (d,	J = 6,7 Hz,	6H), 0,85-1,01 (m,
2H), 1,	05-1,35 (m,	3H), 1,40	(d, J = 7,1	Hz, 3H), 1,60-1,85
(m, 6H)	, 1,95 (m,	IH), 2,06	(d, J =t 7,0	Hz, 2H), 3,92 (m,
2H), 4,	61 (m, IH) ,	6,08 (bd,	IH) .
13C-nmr	(CDCI3) : δ	= 18,7,	18,9, 26,0,	26, 1, 27,6, 33,0,
35,3, 4	4,6, 47,9,	71,4, 171,	8, 173,3.

C15H27NO3 (MW = 269, 39, hmotová spektroskopie (MH⁺ 270)).

Příklad A71

Syntéza N-(cyklopentylacetyl)-L-alaninu ve formě isobutylesteru

Postupem podle obecné procedury B uvedené výše a použitím cyklopentyloctové kyseliny (Aldrich) a L-alaninu ve formě hydrochloridu iso-butylesteru (z Příkladu B uvedeného výše) byla připravena sloučenina z názvu ve formě pevné látky, která má teplotu tání 62 °C - 64 °C. Reakce byla monitorována chromatografii na tenké vrstvě na silikagelu (R_f = 0,37 v 1: EtOAc:hexan) a čištění bylo prováděno • '44 4 4 44 44

4 4 9 » 4 ' 4 · 4 4 · «

444 * 4 » 44 * . 4 44 4 4 4 444 444

4 4 4 4 4 4

4 ·4 44 4 444 44 (»4 extrakcí Et₂O, následovanou promýváním vodným K₂CO₃ a vodným HCI.

NMR data byla následující:

^xH-nmr (CDC1₃) : δ = 0,87 (d, J = 6,8 Hz, 6H), 1,01-1,17 (m, 2H), 1,4 (d, J = 7,2 Hz, 3H), 1,40-1,62 (m, 4H), 1,70-1,83 (m, 2H), 1,89 (m, IH , 2,15 (m, 3H), 3,86 (m, 2H) , 4,55 (m, IH), 6,30 (d, J = 7,1 Hz, IH .

¹³C-nmr (CDC1₃) : δ = 18,4, 18,78, 18,80, 24,8 (velmi vysoký), 27,5, 32,2 , 32,32, 36,9, 42,5, 47,7, 71,2, 172,2, 173. .

Elementární Analýza

Vypočteno ( %): C, 65,85; H, 9,87; N, 5,49;

Nalezeno( %): , 66,01; H, 10,08; N, 5,4 .

Ci₄H₂₅NO₃ (MW = 255, 36, hmotová spektroskopie (MH⁺ 256)

Příklad A72

Syntéza N-[(cyklohex-l-enyl)acetyl]-L-alaninu ve formě isobutylesteru

Postupem podle obecné procedury B uvedené výše a použitím cyklohex-l-enyloctové kyseliny (Alfa) a L-alaninu ve formě hydrochloridu iso-butylesteru (z Příkladu B uvedeného výše) byla připravena sloučenina z názvu ve formě pevné látky, která má teplotu tání 49 °C-51 °C. Reakce byla monitorována chromatografii na tenké vrstvě na silikagelu (R_e = 0,40 v 1:3 EtOAc:hexan) a čištění bylo prováděno extrakcí Et₂O následovanou promýváním vodným K₂CO₃ a vodným HCI.

NMR data byla následující:

^xH-nmr (CDC1₃) : δ = 0,91 (d, J = 4,5 Hz, 3H) , 0,93 (d, J = 6,7 Η , 3H) , 1,40 (d, J = 7,2 Hz, 3H) , 1,52-1,70 (m, 4H) , 1,97 (m, 3H), 2,06 (b , 2H) , 2,89 (s, 2H) , 3,92 (m, 2H) , 4,59 (m, IH), 5,65 (s, IH), 6,33 (d, J = 6,6 Hz, IH).

106

9 9 ·	•	9	99
• ··	•	9	9 9 9 ·
• · * 9	.9	•	» ··· 999
9 9 9	9	•	• ·
9 9 9 9	99 9	• · ·	9 9 ··

¹³C-nmr (CDC1₃) : δ = 18,7, 18, 91, 18,93, 21, 9, 22,7, 25, 3, 27,6, 28,3, 46,1, 47,9, 71,4, 127,1, 132,5, 170,6, 173,1. Elementární Analýza

Vypočteno (%): C, 67,38; H, 9,42; N, 5,24;

Nalezeno(%): C, 67,34; H, 9,54; N, 5,16.

Ci₅H₂₅NO₃ (MW = 267,37, hmotová spektroskopie (MH⁺ 268)).

Příklad A73

Syntéza N-[(3-chlorfenyl)acetyl]alaninu ve formě 3methylbut-2-enyl thioesterů

Postupem podle obecné procedury C uvedené výše a použitím N-[(3-chlorfenyl)acetyl] alaninu a 3-methyl-2butenthioesteru (TCI) může být připravena sloučenina z názvu. Reakce byla monitorována chromatografii na tenké vrstvě na silikagelu a čištění bylo prováděno kapalinovou chromatografii použitím směsi 3:7 EtOAc:hexan jako vymývacího rozpouštědla.

NMR data byla následující:

¹H-nmr (DMSO-d₆) : δ = 5,2-5, 075 (m, IH) , 4,37 (dq, J = 9 Hz, IH), 3,56 (s), 3,43 (d, J = 12 Hz, 2H) , 1,266 (d, J = 12 Hz, 6H), 1,3 (d, J = 9 Hz, 3H).

Ci6H₂oN0₂ClS (MW = 325,86, hmotová spektroskopie (M⁺ 325)).

Příklad A74

Syntéza N-[(2-fenyl)-2-fluoracetyl]alaninu ve formě ethylesteru

Postupem podle obecné procedury F uvedené výše a použitím α-fluorfenyl octové kyseliny (Aldrich) a alaninu ve formě ethylesteru (Aldrich) byla připravena sloučenina z názvu. Reakce byla monitorována chromatografii na tenké vrstvě na silikagelu (Rf = 0,75 v 1: 1 EtOAc/hexan) a čištění bylo

107 • '·· 9 '4 4< «·

4 4 · *· ·· · · * ·

44 4 -4 4 4 ·· · · · 4 4 4 4·4 4 4·

4 4 4 4 4 4 prováděno chromatografií na silikagelu použitím směsi 1:2 ethylacetát/hexany jako vymývacího rozpouštědla.

NMR data byla následující:

/H-nmr (DMSO-d₆) : δ = 1,14 (q, 3H) , 1,34 (d, 3H) , 4,07 (m,

2H), 4,33 (m, 1H) , 5,84 (d, 1H), 6,01 (d, 1H) , 7,40-7,55 (m, 5H), 8,87 (m, 1H).

C13H16NO3F (MW = 253,27, hmotová spektroskopie (MH⁺ 253)).

Příklad A75

Syntéza N-(3,5-difluorfenylacetyl)-L-fenylglycinu ve formě methylesteru

Postupem podle obecné procedury F uvedené výše a použitím

3.5- difluorfenyloctové kyseliny (Aldrich) a L-fenylglycinu ve formě hydrochloridu methylesteru (Bachem) byla připravena sloučenina z názvu.

NMR data byla následující:

^-nmr (CDC1₃) : δ = 7,4-7,3 (m, 5H) , 6,9-6,7 (m, 3H) , 6,55 (d 1H, 7,1 Hz), 5,56 (d 1H 7 Hz), 3,72 (s 3H), 3,57 (s 2H) ¹³C-nmr (CDC1₃) : δ = 197,6, 177,6, 171,8, 169,3, 136, 7, 129,6, 129,3, 127,8, 113,0, 112,9, 112,7, 111,4, 103,8, 103, 5, 65, 1, 57,2, 53, 5, 45, 1, 43,3, 43,3

C17H15NO3F2 (MW = 319,31, hmotová spektroskopie (MH⁺ 320)).

Příklad A76

Syntéza N-(3,5-difluorfenylacetyl)-L-fenylglycinu ve formě iso-butylesteru

3.5- difluorfenyloctová kyselina (Aldrich) byl EDC kopulována s L-fenylglycinem ve formě hydrochloridu methylesteru (Bachem) použitím obecné procedury F uvedené výše. Výsledná sloučenina byla umístěna do velkého přebytku požadovaného alkoholu. Bylo přidáno katalytické množství

108

• 9 ·	9		9 9	. 9 9
• · · ·	9 9 .	9 9	9 »	9 9
.9 99	9		9 «	9 . 9
• · 9 9	9	9	9 9 9 9	9 9 9
9 9*		9	9	9
* 9 9 9 9	9 9 9	9 9 9	9 9	' ··

bezvodého NaH a reakce byla sledována chromatografii na tenké vrstvě. dokud již nebyla detekována přítomnost výchozího materiálu. Reakce byla zastavena mililitry IN HCl a po několika minutách míchání byl přidán nasycený vodný NaHCO₃. Objem reakční směsi byla zmenšen v rotační odparce, až byl odstraněn přebytek alkoholu a potom zbývající residuum bylo vyjmuto v ethylacetátu a byla přidána další voda. Organická fáze byla promývána nasyceným vodným NaCl a sušena nad MgSO₄. Roztok byl zbaven rozpouštědla v rotační odparce a residuum, představující surový produkt, bylo potom dále čištěno chromatografii.

NMR data byla následující:

¹H-nmr (CDC1₃) : δ = 7,35-7,3 (m, 5Η) , 6,8-6,7 (m 3Η) , 6,60 (d IH, 7 Hz), 5,55 (d 1Η 7,1 Hz), 3,9 (m 2H) , 3.M (s 2H) , 1,85 (m IH 7 Hz), 0,8 (q 6H 7 Hz) ¹³C-nmr (CDC1₃) : δ = 171,3, 169,3, 165,4, 138,5, 137,0,

129.5, 129,2, 127,6, 113,1, 113,0, 112,8, 112,7, 103,8,

103.5, 103,2, 75,5, 57,2, 43,4, 43,3, 28,2, 19,3

C2oH2iN0₃F2 (MW = 361,39, hmotová spektroskopie (MH⁺ 362)).

Příklad A77

Syntéza N-(cyklopentylacetyl)-L-fenylglycinu ve formě methylesteru

Postupem podle obecné procedury D uvedené výše a použitím cyklopentyloctové kyseliny (Aldrich) s L-fenylglycinem ve formě hydrochloridu methylesteru (Bachem) byla připravena sloučenina z názvu.

NMR data byla následující:

^xH-nmr (CDC1₃) : δ = 7,35 (s, 5H) , 6,44 (bd, IH) , 5,6 (d, IH), 3,72 (s, 3H), 2,24 (bs, 3H), 1,9-1,4 (m, 6H), 1,2-1,05 (m, 2H)

ft · ·

109 ¹³C-nmr (CDC1₃) : δ = 172,3, 171, 7, 136, 7, 129, 0, 128,6,

127,3, 56,2, 52,7, 42,5, 36,9, 32,40, 32,38, 24,8

Příklad A78

Syntéza N-(cyklopentylacetyl)-L-alaninu ve formě methylesteru

Postupem podle obecné procedury D uvedené výše a použitím cyklopentyloctové kyseliny (Aldrich) s L-alaninem ve formě hydrochloridu methylesteru (Sigma) byla připravena sloučenina z názvu.

NMR data byla následující:

^xH-nmr (CDC1₃) : δ = 6,38 (d, 1H) , 4,50 (m, 1H) , 3,65 (s, 3H), 2,13 (bs, 3H), 1,80-1,00 (m (zahrnuje d při 1,30, 3H), 11H) ¹³C-nmr (CDC1₃) : δ = 173,7, 172,5, 52,1, 47, 6, 42,3, 36, 8,

32,15, 32,14, 18,0

C11R19NO3 (MW = 213,28, hmotová spektroskopie (MH⁺ 214)).

Příklad A79

Syntéza N-(cyklopropylacetyl)-L-fenylglycinu ve formě methylesteru

Postupem podle obecné procedury D uvedené výše a použitím cyklopropyloctové kyseliny (Aldrich) s L-fenylglycinem ve formě hydrochloridu methylesteru (Bachem) byla připravena sloučenina z názvu.

NMR data byla následující:

^xH-nmr (CDC1₃) : δ = 7,35 (m, 5H) 6,97 (M, J = 7,2 Hz, 1H)

5,59 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 3,71 (s, 3H), 2,17 (m, 2H), 1,050,95 (m, 1H), 0,62 (m, 2H), 0,02 (m, 2H) ¹³C-nmr (CDC1₃) : δ = 171,9, 174,6, 136, 6, 129, 0, 128,5,

127,2, 56,1, 52,7, 41,0, 6,9, 4,37, 4,33 • · ·

110 • ·* ·· · ♦ • ·· • « * ·

9 *

4 4 4 ► 4 4 » · 4

949

Příklad A80

Syntéza N-(cyklopropylacetyl)-L-alaninu ve formě methylesteru

Postupem podle obecne procedury D uvedené výše a použitím cyklopropylóctové kyseliny (Aldrich) s L-alaninem ve formě hydrochlorid methylestěru (Sigma) byla připravena sloučenina z názvu.

NMR data byla následující:

1H-nmr (CDC13) : δ = 6,60 (d, IH) ,	4,55	(m, IH), 3,69	(s,
3H) , 2,10 (m, 2H), 1,34 (d, 3H), 0,	95 (m,	IH), 0,58 (m,	2H)
0,15 (m, 2H)
13C-nmr (CDC13) : δ = 173,7, 172,3,	52,3,	47,7, 41,0, 18	,2,
6,7, 4,27, 4,22

Příklad A81

Syntéza N-[(3-nitrofenyl)acetyl]-L-methioninu ve formě isobutylesteru

Postupem podle obecné procedury H uvedené výše a použitím nitrofenyloctové kyseliny (Aldrich) a L-methioninu (Aldrich) byla připravena sloučenina z názvu ve formě snědého oleje. Reakce byla monitorována chromatografií na tenké vrstvě na silikagelu.

NMR data byla následující:

‘H-nmr (CDC13) :	δ =	8,16 (m,2H) 7,67 (d,IH)	7,32	(t,	IH) ,
6,31 (bd, IH),	4,69	(m, IH), 3,90 (d, 2H) ,	3, 68	(s,	2H) ,
2,47 (t, 2H),	2,15	(m, IH), 2,02 (s, 3H),	1, 90	(m,	2H) ,
0,91 (d, 6H).
CL7H24N2O5S (MW =	368,	4, hmotová spektroskopie	(MH+.	368)).

	0 - 111 - .	0 0 « 0 0 0 0 0 • 0 0 0 «0 0 00 0 0 000.0·. 0 »0 0 0 0 000 000 ,
0 0 0 · - 0 0 00 000 «00 · 0 0	«· 0 0
Následuj ící	obecné procedury A -	B a Příklady B1	- B2
ilustrují	alternativní	syntézu	N-
(aryl/heteroarylacetyl)aminokyselin,	použitelných	jako

výchozí materiál pro přípravu amidů podle předloženého vynálezu.

Obecná procedura A

Příprava chloridu kyseliny

3.5- Difluorfenyloctová kyselina (30 g, 0,174 molů) (Aldrich) byla rozpuštěna v dichlormethanu and tento roztok byl ochlazen na teplotu 0 °C. Byl přidán DMF (0,5 ml, katalytický), následovaný přidáním po kapkách oxalylchloridu (18 ml, 0,20 molů) v průběhu periody 5 minut. Reakční směs byla míchána po dobu 3 hodin a potom rotoodpařena za sníženého tlaku na residuum, které bylo umístěno pod vysokovakuovou vývěvu na dobu 1 hodiny a takto byl získán 3,5-difluorfenylacetylchlorid ve formě hustého žlutého oleje. Ostatní chloridy kyselin mohou být připraveny podobným způsobem.

Obecná procedura B

Schotten-Baumanova procedura

3.5- Difluorfenylacetylchlorid (z obecné procedury A) byl přidán po kapkách do 0 °C roztoku L-alaninu (Aldrich) (16,7 g, 0,187 molů) v 2 N hydroxidu sodném (215 ml, 0,43 molů). Reakční směs byla míchána po dobu 1 hodiny při teplotě 0 °C a potom přes noc při teplotě okolí. Reakční směs byla zředěna vodou (100 ml), potom extrahována ethylacetátem (3 x 150 ml) . Organická vrstva byla potom promývána solankou (200 ml), sušena nad MgSOí and rotoodpařena za sníženého / ·· · · »4 '' 4 · 4 4 • 4 4 4 4

444 444

4 4 • 4 4 4 * 4 4 ' 4 4

4 4 4 • A; ' «4

112

4 4 4 tlaku na residuum. Rekrystalizace residua ze směsi ethylacetát/hexany přinesla požadovaný produkt (34,5 g, 82 % výtěžek). Ostatní chloridy kyselin mohou být používány v této proceduře a tím se získajd meziprodukty, použitelné podle předloženého vynálezu.

Příklad Β 1

Syntéza N-(fenylacetyl)-L-alaninu Postupem podle obecné procedury B sloučenina z názvu připravena z (Aldrich) and L-alaninu (Aldrich) ve která má teplotu tání 102-104 °C.

NMR data byla následující:

¹H-nmr (CDC1₃) : δ = 9,14 (br s, IH) ,

6,20 (d, J = 7,0 Hz, IH), 4,55 (m, IH) (d, J = 7,1 Hz, 3H) .

uvedené výše byla fenylacetylchloridu formě pevné látky,

7,21-7,40 (m, 5H) ,

3,61 (s, 2H) , 1,37 ¹³C-nmr (CDC1₃) : δ = 176,0, 171,8, 134,0, 129,4, 127,5,

48,3, 43,2, 17,9.

Příklad B2

Syntéza N-(3,5-Difluorfenylacetyl)-L-alanin

Postupem podle obecné procedury B uvedené výše byla připravena sloučenina z názvu z 3,5difluorfenylacetylchloridu (z obecné procedury A uvedené výše) and L-alaninu (Aldrich).

NMR data byla následující:

^xH-nmr (CD₃OD) : δ = 8,32 (br s, 0,3H), 6,71 (m, 2H) , 6,60 (m, IH), 4,74 (br s, 1,7H), 4,16 (m, IH) , 3,36 (s, 2H) , 1,19 (d, J = 7,3 Hz, 3H).

- 113 -

	99			•	··	• ·
• ·		•		• ·	« ·	• ·
	11		♦	•	• ·	• 1
• ·		f 9	•	•	• 199	999
		1' . .		•	•	•
• 9	• ·		·· ·	♦ · ·	• ·	• ·

¹³C-nmr (CD3OD) : δ = 175, 9, 172, 4, 164,4 (dd, J = 13,0, 245,3 Hz), 141,1, 113,1 (dd, J = 7,8, 17,1 Hz), 102,9 (t, J = 25,7 Hz), 49,5, 42,7, 17,5.

Sloučeniny uvedené v Příkladech 1-22 byly připraveny jednou z obecných procedur A-G, pokud není uvedeno jinak.

Obecná procedura A

EDC kopulační procedura I

Do 1 : 1 směsi odpovídající karboxylové kyseliny and amino esteru/amidu v CH2CI2 při teplotě 0 °C bylo přidáno 1,5 ekvivalentů triethylaminu, následovaných 2,0 ekvivalenty monohydrátu hydroxybenzotriazolu, potom 1,25 ekvivalenty hydrochloridu 1-(3-dimethylaminopropyl)-3-ethylkarbodiimidu (EDC). Reakční směs byla míchána přes noc při teplotě okolí a potom přenesena do separační nálevky. Směs byla promývána vodou, nasyceným vodným NaHCC>3, 1 N vodnou kyselinou chlorovodíkovou and nasyceným vodným chloridem sodným a potom sušena nad MgSC>4. Roztok byl zbaven rozpouštědla v rotační odparce a tím se získal surový produkt.

Obecná procedura B

EDC kopulační procedura II

Baňka s kulatým dnem byla naplněna odpovídající karboxylovou kyselinou (1,0 ekviv.), hydrátem hydroxybenzotriazolu (1,1 ekviv.) and odpovídajícím aminem (1,0 ekviv.) v THF pod dusíkovou atmosférou. Do míchané směsi bylo přidáno odpovídající množství (1,1 ekviv. pro volný amin and 2,2 ekviv. pro hydrochloridovou sůl aminu) vhodné báze, jako je Hunigova báze, následované hydrochloridem 1-(3-dimethylaminopropyl)-3ethylkarbodiimidu (EDC) (1,1 ekviv.). Po míchání po

114 • ·· · · ·· φ · ·· ·· ♦ ·· φ * φφφφ · · • ·; · · ·

ΦΦΦ Φ Φ ΦΦΦΦΦΦ ·· ·· • · · · • φ φ Φ

ΦΦΦ ··· • ·

9 9 9 přibližně 4 hodiny až 17 hodin při teplotě okolí bylo rozpouštědlo odstraněno za sníženého tlaku and residuum bylo vyjmuto v EtOAc (nebo podobném rozpouštědle)/H₂0. Extrakty byly promýván nasyceným NaHCO₃, 1 N vodnou kyselinou chlorovodíkovou, solankou and sušeny nad Na₂SO₄. V některých případech vyžadoval izolovaný produkt další čištění použitím standardních procedur, jako je •chromatografie a/nebo rekrystalizace.

Obecná procedura C

EDC kopulační procedura III

Směs vhodné karboxylové kyseliny (1 ekviv.), 1hydroxybenzotriazolu (1,6 ekviv.), vhodného aminu (1 ekviv.), N-methylmorfolinu (3 ekviv.) and dichlormethanu (nebo DMF pro nerozpustné substráty), ochlazená v lázni led-voda, byla míchána dokud nebyl získán čirý roztok. Do reakční směsi byl přidán EDC (1,3 ekviv.) and chladicí lázeň byla ponechána zahřát se na teplotu okolí v průběhu 1-2 hodin. Reakční směs byla potom míchána přes noc. Reakční směs byla potom odpařena do sucha ve vakuu and do residua byl přidán 20 % vodný uhličitan draselný. Směs byla intenzivně protřepávána and ponechán v klidu po několik hodin nebo přes noc, bylo-li to nutné, dokud olejovitý produkt neztuhnul. Ztuhlý produkt byl potom odfiltrován, promýván důkladně 20 % uhličitanu draselného, vodou, 10 % HC1 and vodou a tím se získal produkt. Racemizace nebyla pozorována při použití této proceduty.

115 • · ·· ♦ · fc · · · • fc · · · · » « fc · · · · · ··* ··· • · fc · · ·

Obecná procedura D

CDI kopulační procedura I

Roztok vhodné kyseliny (3,3 mmolů) and 1,1'karbodiimidazolu (CDI) v 20 ml THF byl míchán po dobu 2 hodin. Byl přidán hydrochlorid esteru aminokyseliny (3,6 mmolů), následovaný 1,5 ml (10,8 mmolů) triethylaminu. Reakční směs byla míchána přes noc a potom rozpuštěna v 100 ml diethyletheru, promývána 10 % HCI třikrát, jednou

solankou, 20 % jednou	uhličitanem	draselným	and jednou
solankou. Roztok byl	sušen	nad	síranem	hořečnatým,
filtrován and odpařen a	tím se	získal	produkt.
Obecná procedura E CDI kopulační reakce II
Roztok kyseliny (1,08	mmolů)	and	1,1'-karbodiimidazolu

(CDI, 0, 972 mmolů) v 10 ml THF byl míchán po dobu 1-2 hodin. Byl přidán vhodný amin (1,188 mmolů) and reakční směs byla míchána přes noc. Celá reakční směs byla rozpuštěna v 100 ml ethylacetátu, promývána 10 % HCI (50 x 2 ml) , jednou solankou, 20 % jednou uhličitanem draselným and jednou solankou. Roztok byl sušen nad síranem hořečnatým, filtrován and odpařen a tím se získal produkt.

Obecná procedura F

EDC kopulační procedura IV

Baňka s kulatým dnem byla naplněna vhodnou karboxylovou kyselinou (1,0 ekviv.), hydrátem hydroxybenzotriazolu (1,1 ekviv.) and vhodným aminem (1,0 ekviv.) v THF pod dusíkovou atmosférou. Odpovídající množství (1,1 ekviv. pro volný amin and 2,2 ekviv. pro hydrochloridovou sůl aminu) vhodné báze, jako je Hunigova báze, bylo přidáno do míchané směsi, následováno hydrochloridem 1-(3-dimethylaminopropyl)-3• 0

- 116 0 0 » 0 0 0

I 0 · , 0 .

000 000 . 0 0 ·0 ethylkarbodiimidu (EDC) (1,1 ekviv.). Po míchání po přibližně 4 hodiny až 17 hodin při teplotě okolí bylo rozpouštědlo odstraněno za sníženého tlaku and residuum bylo vyjmuto v EtOAc (nebo podobném rozpouštědle)/H₂0. Extrakty byly promývány nasyceným NaHC03, 1 N vodnou kyselinou chlorovodíkovou, solankou and sušeny nad Na₂SO₄. V některých případech izolovaný produkt vyžadoval další čištění použitím standardních procedur, jako je chromatografie a/nebo rekrystalizace.

sušena (síran sodný) bílá pevná látka, silikagelu použitím

Příklad A

Syntéza hydrochloridu 2-amino-l-ftalimidopentanu 2-Amino-l-pentanol byl míchán ve směsi chlorformu and nasyceného vodného hydrogenuhličitanu sodného.' V jedné dávce byl přidán di-terc.-butyldikarbonát (1,05 ekviv.) and směs byla míchána dokud nebyl spotřebován výchozí materiál. Organická část byla oddělena, sušena (síran sodný) and koncentrována. Surový materiál byl čištěn silikagelovou chromatografií použitím 1: 1 směsi ethylacetát/hexany. Produkt byl rozpuštěn v THF. Byl přidán triethylamin (1,1 ekviv.) and směs byla ochlazena v ledové lázni. Byl přidán po kapkách methansulfonylchlorid (1,1 ekviv.) and směs byla míchána dokud nebyl spotřebován výchozí materiál. Směs byla koncentrována za sníženého tlaku a potom byla rozdělena mezi ethylacetát and vodu. Organická část byla oddělena, and koncentrována a tím se získala která byla chromatografována na 30 % ethylacetátu v hexanech and nakonec krystalizována ze směsi 1-chlorbutan/hexany. Krystalický produkt byl míchán v bezvodém DMF and byl přidán ftalimid draselný (1,1 ekviv.). Směs byla míchána po dobu 18 hodin a potom byla koncentrována za sníženého

117 ·· · · ·· ·· ♦ * · · * »· ♦ ·.·»·· • · · · · · · «·♦ ··· • · · · · « · ··· ·· *»· ··· ·♦ ·· tlaku. Residuum bylo rozděleno mezi ethylacetát and vodu. Organická část byla sušen and koncentrována a tím se získala bílá pevná látka. Pevná látka byla vyjmuta v chlorformu and filtrována přes vrstvu oxidu křemičitého. Vymývací rozpouštědlo obsahující produkt bylo koncentrováno a tím se získal surový produkt ve formě bílé pevné látky. Bílá pevná látka byla vyjmut v bezvodém dioxanu and výsledný roztok byl nasycen plynným HC1. Po míchání po dobu 30 minut byla směs koncentrován a tím se získala bílá pevná látka, která byla titrována v etheru. Sloučenina z názvu byla shromážděna, promývána etherem and sušena ve vakuové peci.

Příklad B

Syntéza 5-aminodibenzosuberanu

5-Chlordibenzosuberan (Aldrich) byl zahříván při teplotě zpětného toku v 7N NH₃ v MeOH. Po uplynutí 18 hodin byla reakční směs koncentrována na pevnou látku, která byla čištěna silikagelovou chromatografii a tím se získala sloučenina z názvu.

Příklad 1

Syntéza N-(3-hydroxyfenyl)-N’-(fenylacetyl) -L-alaninamidu Postupem podle obecné procedury C and použitím Nfenylacetyl)-L-alaninu (Příklad Bl) and 3-hydroxyanilinu (Aldrich) byla připravena sloučenina z názvu ve formě pevné látky (teplota tání = 164-167 °C). Produkt byl čištěn extrakcí pomocí EtOAc and promýváním vodným NaHCO₃ and HC1. NMR data byla následující:

¹H-nmr (DMSO-d₆) : δ = 9,90 (s, IH) , 9,40 (s, IH) , 8,41 (d, J = 7,4 Hz, IH) , 7,27 (m, 4H) , 7,20 (m, 2H) , 7,07 (t, J =

118 ft »· ft · ·.·;···.·..··· • ft · · ·· ftft · ‘ ft.·· ' · • ftft. · . · · ftft · • · ftft · · «······ • · · · .ft'.···..:.·. · • ftft ftft ftftft ftftft ft· ··

8,0 Hz, 1H), 6,98 (m, 1H), 6,46 (dd, J = 1,7, 7,1 Hz, 1H) , 4,43 (m, 1H), 3,50 (s, 2H), 1,30 (d, J = 7,1 Hz, 3H). ¹³C-nmr (DMSO-d₆) : δ = 171,2, 170,0, 157, 6, 140, 0, 136, 4,

129,4, 129,1, 128,2, 126,3, 110,5, 110,0, 106,4, 49,1,

41,9, 18,4.

C₁₇H₁₈N₂O₃ (MW = 298,34) ;

hmotová spektroskopie (MH⁺) 297 (M-H)⁺.

Příklad 2

Syntéza N-(3-methoxyfenyl)-Ν'-(fenylacetyl)-L-alaninamidu Postupem podle obecné procedury E and použitím N(fenylacetyl)-L-alaninu (Příklad Bl) and 3-methoxyanilinu (Aldrich) byla připravena sloučenina z názvu ve formě pevné látky (teplota tání = 154-157 °C).

NMR data byla následující:

^-nmr (CDC1₃) : δ = 9,38 (s, 1H), 7,20-7,35 (m, 6H), 7,007,15 (m, 2H), 6,91 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,62 (dd, J = 2,2,

8,1 Hz, 1H), 4,85 (kvint., J = 7,2 Hz, 1H), 3,70 (s, 3H) ,

3,57 (s, 2H), 1,42 (d, J = 7,0 Hz, 3H) .

¹³C-nmr (CDC1₃) : δ = 171, 6, 171, 0, 159, 9, 139, 1, 134,4,

129,5, 129,2, 128,8, 127,2, 112,2, 110,1, 105,5, 55,1,

49, 8, 43, 3, 18,5.

C₁₈H₂oN₂0₃ (MW = 312,37);

hmotová spektroskopie (MH⁺) 313.

119 ·· • · ·· • · · «· . ·.

• · · • · · ··· ··.·.

··* ·· · • ·· ··

Příklad 3

Syntéza N-(3-ethoxykarbonylfenyl)-N'-(fenylacetyl)-Lalaninamidu

Postupem podle obecné procedury E and použitím N(fenylacetyl)-L-alaninu (Příklad Bl) and ethyl-3aminobenzoátu (Aldrich) byla připravena sloučenina z názvu ve formě pevné látky (teplota tání = 142-145 °C) .

NMR data byla následující:

^xH-nmr (CDC1₃) : δ = 9,44 (s, IH) , 8,16 (d, J = 1,8 Hz, IH) ,

7,74 (dd, J = 5,0, 8,0 Hz, 2H), 7,21-7,36 (m, 6H), 6,71 (d,

J = 7,6 Hz, IH) , 4,86 (m, IH) , 4,35 (q, J = 7,1 Hz, 2H) ,

3,65 (s, 2H), 1,42 (d, J = 7,0 Hz, 3H) , 1,35 (t, J = 7,8

Hz, 3H).

¹³C-nmr (CDC1₃) : δ = 171,5, 170, 8, 166,2, 138,2, 134,2,

131,0, 129,2, 129,0, 128,9, 127,4, 125,2, 124,2, 120,7,

61,1, 49,7, 43,5, 18,5, 14,3.

C₂oH₂₂N20₄ (MW = 354,41);

hmotová spektroskopie (MH⁺) 355.

Příklad 4

Syntéza N-(4-ethoxykarbonylfenyl)-Ν' -(fenylacetyl)-Lalaninamidu

Postupem podle obecné procedury E and použitím N(fenylacetyl)-L-alaninu (Příklad Bl) and ethyl-4aminobenzoátu (Aldrich) byla připravena sloučenina z názvu ve formě pevné látky (teplota tání = 175-178 °C).

NMR data byla následující:

¹H-nmr (CDC1₃) : δ = 9,61 (s, IH) , 7,91 (dd, J = 7,1, 8,9

Hz, 2H), 7,50 (dd, J = 5,2, 8,7 Hz, 2H), 7,21-7,38 (m, SH) , 6,86 (d, J = 7,6 Hz, IH) , 4,88 (kvint., J = 7,1 Hz, IH) , 4,35 (q, J = 7,1 Hz, 2H), 3,62 (s, 2H), 1,36-1,44 (m, 6H) .

120 *· ·· « · • · ·

·.. .· '· ··· · · ·» «φ ·' Ϊ» ·, ' • · · * • · • Μ ♦ ** ···'»· • « · 9

999 999

9

99 ¹³C-nmr (CDC1₃) : δ = 171,7, 171,0, 166, 1, 142,1, 134,2,

130,5, 129,2, 128,9, 127,5, 125,7, 118,9, M.8, 49,8, 43,3, 18,6, 14,3.

C20H22N2O4 (MW = 354,41);

hmotová spektroskopie (MH⁺) 353 (M-H)⁺.

Příklad 5

Syntéza N-(η-Hexyl)-N'-(3,5-difluorfenylacetyl)-Lalaninamidu

Postupem podle obecné procedury B and použitím N-(3,5difluorfenylacetyl)-L-alaninu (Příklad B2) and n-hexylaminu (Aldrich) byla připravena sloučenina z názvu ve formě oleje. Reakce byla monitorována chromatografii na tenké vrstvě (Rf = 0,31 v 5 % MeOH/CH2Cl2) and produkt byl čištěn mžikovou sloupcovou chromatografii použitím 5 %

MeOH/CH2Cl2 jako vymývacího rozpouštědla.

NMR data byla následující:

¹H-nmr (CDC1₃) : δ = 7,62 (d, IH) , 7,14 (t, IH) , 6,80-6,60 (m, 3H), 4,62 (p, IH) , 3,44 (s, 2H) , 3,23-3,01 (m, 2H) , 1,41 (m, 2H), 1,39 (d, 3H), 1,23 (m, 8H), 0,83 (t, 3H). ¹³C-nmr (CDC1₃) : δ = 173,0, 170,3, 165,1, 165,0, 161,8,

161,7, 139,47, 139,3, 139,2, 112,8, 112,7, 112,6, 112,5,

103,3, 103,0, 102,6, 49,5, 42,9, 40,1, 31,9, 29,8, 27,0,

23,0, 19,4, 14,5.

C17H24N2O2F2 (MW = 326, 39);

hmotová spektroskopie (MH⁺) 327.

- 121 ι· · · · ·

Příklad 6

Syntéza N-(n-oktyl)-Ν' -(3,5-difluorfenylacetyl)-Lalaninamidu

Postupem podle obecné procedury B and použitím N-(3,5difluorfenylacetyl)-L-alaninu (Příklad B2) and n-oktylaminu (Aldrich) byla připravena sloučenina z názvu ve formě oleje. Reakce byla monitorována chromatografii na tenké vrstvě (Rf = 0,35 v 5 % MeOH/CH₂Cl2) and produkt byl čištěn mžikovou sloupcovou chromatografii použitím 5 %

MeOH/CH₂Cl₂ jako vymývacího rozpouštědla.

NMR data byla následující:

^xH-nmr (CDC1₃) : δ = 7,50 (d, IH), 7,03 (t, IH) , 6,75-6,60 (m, 5H), 4.M (p, IH), 3,48 (s, 2H), 3,24-3,04 (m, 2H), 1,40 (m, 2H), 1,38 (d, 3H), 1,23 (m, 10H), 0,86 (t, 3H).

¹³C-nmr (CDC1₃) : δ = 172,9, 170,2, 165,2, 165,0, 161,9,

161,7, 139,3, 139,2, 139. 1, 112,8, 112,7, 112,6, 112,5,

103.4, 103,0, 102,7, 49,5, 43,0, 40,1, 32,3, 29,9, 29,7,

27.4, 23, 1, 19, 4, 14,6.

C₁₉H₂₈N₂O₂F₂ (MW = 354,44);

hmotová spektroskopie (MH⁺) 355.

Příklad 7

Syntéza N-(3-methoxyfenyl)-Ν' -(3,5-difluorfenylacetyl)-Lalaninamidu

Postupem podle obecné procedury E and použitím N-(3,5difluorfenylacetyl)-L-alaninu (Příklad B2) and 3methoxyanilinu (Aldrich) byla připravena sloučenina z názvu.

NMR data byla následující:

^xH-nmr (DMSO-d₆) : δ = 1,30 (d, J = 7,0 Hz, 3H) , 3,54 (s,

2H), 3,71 (s, 3H), 4,40 (kvint., J = 7,0 Hz, IH) , 6,62 (d,

122 • 00

J = 6,7 Hz, IH), 6,9&7,26 (m, 5H), 7,29 (s, IH), 8,51 (d, J =7,1 Hz, IH), 10,04 (s, IH).

¹³C-nmr (DMSO-d₆) : δ = 18,2, 41,2, 49,2, 54,9, 101, 9 (t, J = 25,5 Hz), 104,9, 108,7, 111,4, 112,2 (dd, J = 7,3, 17,0

Hz), 129,5, 140,1, 140,7, 159,5, 162,1 (m), 168,9, 171,3. C18H18N2O3F2 (MW = 348,35); hmotová spektroskopie (MH⁺) 349.

Příklad 8 Syntéza

N- (4-ethoxykarbonylfenyl)-Ν' -(3,5difluorfenylacetyl)-L-alaninamidu

Postupem podle obecné procedury E and použitím N-(3,5difluorfenylacetyl)-L-alaninu (Příklad B2) and ethyl-4aminobenzoátu (Aldrich) byla připravena sloučenina z názvu. NMR data byla následující:

¹H-nmr (DMSO-dg) : δ = 1,32 (m, 6H) , 3,55 (s, 2H) , 4,27 (q, J = 7,0 Hz, 2H) , 4,42 (kvint., J = 7,0 Hz, IH) , 7,00 (m, 2H), 7,08 (m, IH) , 7,73 (d, J = 8,5 Hz, 2H), 7,91 (d, J =

8.7 Hz, 2H), 8,57 (d, J = 6,7 Hz, IH), 10,40 (s, IH).

¹³C-nmr (DMSO-d₆) : δ = 14,2, 17,9, 41,1, 49,4, 60,5, 101,9 (t, J = 25,3 Hz), 112,2 (dd, J = 7,4, 16,9 Hz), 118,6,

124,3, 130,3, 140,6, 140,8, 143,3, 162,1 (dd, J = 13,1,

243.7 Hz), 165,3, 169,0, 171,9.

C20H20N2O4F2 (MW = 390,39);

hmotová spektroskopie (MH⁺) 391

Příklad 9

Syntéza N-(3-ethoxykarbonylfenyl)-Ν'-(3,5difluorfenylacetyl)-L-alaninamidu

123 * « · * ' .4. · · « · ·· · · ·4 »» 4 44 4

44 4 4 « 4 4 4

4 4 4 4 444444

4 4 4 4 4 4

44« 44 440 444 ¢¢ 4 4

Postupem podle obecné procedury E and použitím N-(3,5difluorfenylacetyl)-L-alaninu (Příklad B2) and ethyl-3aminobenzoátu (Aldrich) byla připravena sloučenina z názvu. NMR data byla následující:

^-nmr (CDC1₃) : δ = 1,34 (t, J = 7,1 Hz, 31~), 1,47 (d, J = 6,9 Hz, 3H) , 3, 57 (s, 2H) , 4,33 (q, J = 7,1 Hz, 2H), 4,85 (kvint., J = 7,1 Hz, IH), 6,66 (m, IH), 6,78 (m, 2H), 7,16 (d, J = 7,4 Hz, IH), 7,30 (m, IH), 7,74 (t, J = 7 8 Hz 2H) ,

8,12 (dl J = 1,8 Hz, IH),1 9,38 (s, IH).

^X3C-nmr (CDC1₃) : δ = 14,2, 18,6, 42,7, 49, 9, 61,2, 102,8 (t,

J = 25,1 Hz), 112,2 (dd, J 8,0, 17,1 Hz), 120, 9, 124,3,

125,4, 129,0, 131,1, 137,9 138,0, 163,0 (dd, J = 12,6,

247,7 Hz), 166,2, 170,2, 171,0.

C2oH2oN₂0₄F₂ (MW = 390,39);

hmotová spektroskopie (MH⁺) 391.

Přiklad 10

Syntéza N-(3-chlorfenyl)-Ν'-(3,5-difluorfenylacetyl)-L alaninamidu

Postupem podle obecné procedury E and použitím N-(3,5difluorfenylacetyl)-L-alaninu (Příklad B2) and 3chloranilinu (Aldrich) byla

NMR	data byla nás	leduj ící:
xH-nmr (DMSO-d6) :	δ = 1,31
2H) ,	4,38 (kvint.	, J = 7,1
2H) ,	7,33 (m, IH)	, 7,46 (d,
8,57	(d, 7,0 Hz,	IH), 10,26
X3C-nmr (DMSO-d6) :	δ = 18,0,
Hz) ,	112,2 (dd,	J = 7,3,

130,5, 133,1, 140,4, 140,5, Ci7H₁₅N₂O₂F2Cl (MW = 352,77);

připravena sloučenina z názvu.

(d, J =	7,1	Hz, 3H),	3,55	(s,
Hz, IH),	7,00	(m, 2H),	7,09	(m,
J = 8,2	Hz,	IH), 7,80	(s,	IH) ,
(s, IH).
41,2, 49	,3,	101,9 (t,	J =	25, 5

16,7 Hz), 117,6, 118,6, 123,0,

140,7, 162,2 (m), 169,0, 171,7.

• ·: O

- 124 |ft^:í ·/ 1 ··· ·· tr * · .·' ♦ • · » · • · · · · · • ' ·· · te ··

hmotová spektroskopie (MH⁺) 353.

Příklad 11

Syntéza N-(3,5-dichlorfenyl)-Ν'-(3,5-difluorfenylacetyl)-Lalaninamidu

Postupem podle obecné procedury E and použitím N-(3,5difluorfenylacetyl)-L-alaninu (Příklad B2) and 3,5dichloranilinu (Aldrich) byla připravena sloučenina z názvu.

NMR data byla následující:

¹H-nmr (DMSO-d6) : δ = 1,31 (d, J = 7,0 Hz, 3H) , 3,55 (s, 2H), 4,34 (m, 1H) , 7,00 (m, 2H) , 7,07 (m, 1H) , 7,27 (s, 1H), 7,66 (s, 2H), 8,59 (d, J = 6,6 Hz, 1H), 10,39 (s, 1H). ¹³C-nmr (DMSO-d6) : δ = 17,7, 41,1, 49,5, 101,9 (t, J = 25,5 Hz), 112,3 (dd, J = 7,7, 16,9 Hz), 117,3, 122, 6, 134,1,

140,4, 140,6, 140,7, 141,2, 162,1 (dd, J= 13,4, 243,9 Hz),

169,1, 172,0.

Ci₇Hi4N2O₂F₂Cl2 (MW = 387,22);

hmotová spektroskopie (MH⁺) 387.

Příklad 12

Syntéza N-(3-kyanofenyl)-Ν' -(3,5-difluorfenylacetyl)-Lalaninamidu

Postupem podle obecné procedury E and použitím N-(3,5difluorfenylacetyl)-L-alaninu (Příklad B2) and 3kyanoanilinu (Aldrich) byla připravena sloučenina z názvu. NMR data byla následující:

^xH-nmr (DMSO-d₆) : δ = 1,32 (t, J = 7,1 Hz, 3H) , 3,55 (s,

2H), 4,39 (kvint., J = 7,0 Hz, 1H), 7,00 (m, 2H) , 7,08 (m, 1H), 7,52 (m, 2H), 7,82 (m, 1H), 8,08 (s, 1H) , 8,60 (d, J = 6,8 Hz, 1H), 10,42 (s, 1H).

125 «0· · 0 00 00 • ·0 . · ·· . 0 / 0 0 .0:0 ·:' / -0 ; 0 0 0 0 .·. #·· - ; '0 ’ ' ·: -z·,··· ·0 :0 0· 0 ·' 0 ,#.¹»/ · ' '0 i.:'.* 0«· 000 ' 0 ·0, .Τ ·0..·· . 0 .·. '0 .0 0 • 00 00.· - 000 ---0 0 0 . 00 »0¹³C-nmr (DMSO-dg): δ = 17,9, 41,1, 49,4, 101,9 (t, J = 25,4 Hz), 112,2 (dd, J = 7,7, 17,0 Hz), 118,7, 121,8, 123,7,

126,9, 130,3, 139,7, 140,6, 140,8, 162,1 (dd, J = 13,3,

243,6 Hz), 169,1, 172,0.

C₁₈H₁₅N₃O₂F₂ (MW = 343, 34);

hmotová spektroskopie (MH+) 344.

Příklad 13

Syntéza N-(ftalid-6-yl)-Ν'-(3,5-difluorfenylacetyl)-Lalaninamidu

Postupem podle obecné procedury E and použitím N-(3,5difluorfenylacetyl)-L-alaninu (Příklad B2) and 6aminoftalidu (Aldrich) byla připravena sloučenina z názvu ve formě pevné látky (teplota tání = 241-245 (dekomposice). Reakce byla monitorována chromatografií na tenké vrstvě (Rf = 0,11 v 1: 1 EtOAc/hexany) and produkt byl čištěn precipitací z vody.

NMR data byla následující:

^xH-nmr (DMSO-d₆) : δ = 1,34 (d, J = 7,1 Hz, 3H) , 3,56 (s,

2H), 4,42 (m, 1H), 5,36 (s, 2H) , 7,00 (d, J = 6,9 Hz, 2H), 7,08 (m, 1H), 7,62 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,81 (m, 1H), 8,21 (s, 1H), 8,59 (d, J= 6,8 Hz, 1H), 10,42 (s, 1H).

¹³C-nmr (DMSO-d₆) : δ = 18,0, 41,2, 49,3, 69, 8, 101, 9 (t, J =

25.7 Hz), 112,3 (dd, J = 7,4, 16,9 Hz), 114,2, 123,4,

125,3, 125,5, 139,7, 140,6, 141,9, 162,1 (dd, J = 13,4,

243.7 Hz), 169,1, 170,8, 171,8.

Ci₉Hi₆N₂O₄F₂ (MW = 374,35);

hmotová spektroskopie (MH+) 375.

126 • · ► 4

9 9 •

999

9 9 9 * 9 9 9

9 * 9

999 999 ♦ ' . ft

9 .9 9'

Příklad 14

Syntéza N-[(4-methoxykarbonylfenyl)methyl]-N'-(3,5difluorfenylacetyl)-L-alaninamidu

Postupem podle obecné procedury D and použitím N-(3,5difluorfenylacetyl)-L-alaninu (Příklad B2) and methyl-4aminomethylbenzoátu . HCl (Aldrich) byla připravená sloučenina z názvu ve formě pevné látky (teplota tání = 191-192 °C) . Reakce byla monitorována chromatografii na tenké vrstvě (Rf = 0,19 v 1: 1 EtOAc/hexany) and produkt byl čištěn precipitací z vody.

NMR data byla následující:

¹H-nmr (DMSO-d₆) : δ = 1,25 (d, J = 7,0 Hz, 3H) , 3,53 (s,

2H), 3,84 (s, 3H), 4,30 (m, IH), 4,35 (d, J = 6,0 Hz, 2H), 6,99 (d, J = 6,9 Hz, 2H) , 7,08 (t, J = 2,1 Hz, IH) , 7,35 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 7,88 (d, J = 8,2 Hz, 2H) , 8,43 (d, J =

7,2 Hz, IH), 8,57 (t, 5,9 Hz, IH).

¹³C-nmr (DMSO-d₆) : δ = 18,2, 41,3, 41,7, 48,5, 52,1, 101,9 (t, 25,4 Hz), 112,2 (dd, J = 7,5, 17,0 Hz), 127,1, 128,1,

129,2, (140, 6, 140, 8 as multiplet) , 145,2, 162,1 (dd, J =

13,4, 243,7 Hz), 166,1, 168,9, 172,5.

C₂oH₂oN₂0₄F₂ (MW = 390,39);

hmotová spektroskopie (MH⁺) 391.

Příklad 15

Syntéza N-(1-kyano-l-fenylmethyl)-Ν'-(3,5difluorfenylacetyl)-L-alaninamidu

Postupem podle obecné procedury B and použitím N-(3,5difluorfenylacetyl)-L-alaninu (Příklad B2) and hydrochloridu 1-kyano-l-fenylmethylaminu byla připravena sloučenina z názvu ve formě pevné látky (teplota tání = 209-213 °C) . Reakce byla monitorována chromatografii na

127 ' 4 44 . 9 Λ · .4' ' .,-'.·.·' ··« ' .·· « « f. 4 1· ' -< · . t · 4 4 •44 « 4 · » 4 4 :-: 4 4 ·4 · 4 v·' 4 · 444*44 tenké vrstvě (Rf = 0,5 v 10 % MeOH/CHCl3) and produkt byl čištěn rekrystalizací z l-chlorbutanu/acetonitrilu.

NMR data byla následující:

^xH-nmr (DMSO-d₆) : δ = 3,50-3,55 (singlety, 2H) ; 6,18 (d,

1H) .

Ci₉H₁₇F2N3O₂ (MW= 357,36);

hmotová spektroskopie (M⁺) 357.

Příklad 16

Syntéza N-[(S)-1-fenylethyl]-Ν' -(3,5-difluorfenylacetyl)-Lalaninamidu

Postupem podle obecné procedury B and použitím N-(3,5difluorfenylacetyl)-L-alaninu (Příklad B2) and (S)-(-)-1fenylethylaminu (Aldrich) byla připravena sloučenina z názvu. Reakce byla monitorována chromatografií na tenké vrstvě (Rf = 0,45 v 9:1 CHCl₃/MeOH) and produkt byl čištěn silikagelovou chromatografií použitím 95:5 CHCls/MeOH jako vymývacího rozpouštědla.

NMR data byla následující:

^xH-nmr (CDC1₃) : δ = 7,18-7,28 (m, 5H), 6,81 (m, 1H) , 6,67 (m, 2H), 6,63 (m, 1H), 6,60 (m, 1H), 5,01 (m, 1H), 4,44 (m, 1H), 3,36 (m, 2H), 1,43 (d, 3H), 1,36 (d, 3H).

Optická rotace: [a]₂3 = -103° (c 1, MeOH).

C19H20F2N2O2 (MW = 346,38);

hmotová spektroskopie (M⁺) 346.

Příklad 17

Syntéza N-[(R)-1-fenylethyl]-Ν' -(3,5-difluorfenylacetyl)-Lalaninamidu

Postupem podle obecné procedury B and použitím N-(3,5difluorfenylacetyl)-L-alaninu (Příklad B2) and (R)-(+)-1• φ

- 128

Φ φφ • i φ φ «·» · * φ . ‘ φ* ,. φ φ .

• · φ · · '·« .φ .· φ « φφφφ φ · φφφ * · · φ φ ·. ' ♦ φφφ ·* · φ fenylethylaminu (Aldrich) byla připravena sloučenina z názvu. Reakce byla monitorována chromatografií na tenké vrstvě (Rf = 0,35 v 9: 1 CHCl₃/MeOH) and produkt byl čištěn silikagelovou chromatografií použitím 96:4 CHC1₃/MeOH jako vymývacího rozpouštědla.

NMR data byla následující:

^xH-nmr (CDC1₃) : δ = 7,31 (m, 5H), 6,78 (m, 2H), 6,71 (m,

1H), 6,32 (m, 1H) , 5,01 (m, 1H), 4,46 (m, 1H), 3,45 (m,

2H), 1,43 (d, 3H), 1,30 (d, 3H) .

Optická rotace: [a]₂₃ - +5,97° (c 1, MeOH).

Ci₉H₂₀F₂N₂O₂ (MW = 346,38);

hmotová spektroskopie (M⁺) 346.

Příklad 18

Syntéza N-[2-methoxykarbonyl-l-fenylethyl]-N'-(3,5difluorfenylacetyl)-L-alaninamidu

Postupem podle obecné procedury B and použitím N-(3,5difluorfenylacetyl)-L-alaninu (Příklad B2) and hydrochloridu methyl-3-amino-3-fenylpropionátu byla připravena sloučenina z názvu. Reakce byla monitorována chromatografií na tenké vrstvě (R_f = 0,45 v 9: 1 CHCl₃/MeOH) and produkt byl čištěn silikagelovou chromatografií použitím 95:5 CHCl₃/MeOH jako vymývacího rozpouštědla.

NMR data byla následující:

^xH-nmr (CDC1₃) : δ = 7,25 (m, 5H) , 6, 89-6, 67 (m, 2H) , 6,37 (m, 1H), 5,36 (m, 1H), 4,52 (m, 1H), 3,63 and 3,60 (s, 3H), 3,51 and 3,45 (s, 2H), 2,80 (m, 2H), 1,37 (t, 3H).

C₂₁H₂₂F₂N₂O₄ (MW = 404,41);

hmotová spektroskopie (M⁺) 404.

A/íií • <

♦ · • · «----0 i Í :

-129 ' • · ·

S: ί ♦ · « « « I · · <· · ·· ·

Příklad 19

Syntéza N-[2-hydroxypyridin-3-yl]-N'-(3,5difluorfenylacetyl)-L-alaríinamidu

Postupem podle obecné procedury C and použitím N-(3,5difluorfenylacetyl)-L-alaninu (Příklad B2) and 3-amino-2hydroxypyridinu (připraven Pd/G hydrogenaci 2-hydroxy-3nitropyridinu za standardních podmínek v EtOH/HOAc) byla připravena sloučenina z názvu.

NMR data byla následující:

^xH-nmr (DMSO-d₆) : δ = 1,28 (d, J=7 Hz, 3H), 3,55 (s, 2H), 4,51 (brq, J = 7 Hz, IH), 6,20 (t, J=7 Hz, IH) , 6,95-7,2 (m, 4H), 8,18 (dd, J=l,7, 7,3 Hz, IH) , 8,64 (d, J=7,0 Hz,

IH), 9,24 (s, IH).

^X3C-nmr (ĎMSO-d₆) : δ = 17,9, 41,5, 49,7, 102,0, 102,3,

102,6, 105,6, 112,5, 112,6, 112,8, 112,9, 123,4, 128,20,

112,21, 129,2, 140,8, 160,9, 164,0, 164,2, 169,6, 172,1. C₁₆H₁₅F₂N₃O₃ (MW = 335) .

Příklad 20

Syntéza N-l-(ftalimido) pent-2-yl-N'-(3,5difluorfenylacetyl)-L-alaninamidu

Postupem podle obecné procedury F and použitím N-(3,5difluorfenylacetyl)-L-alaninu (Příklad B2) and hydrochloridu 2-amino-l-ftalimidopentanu (z Příkladu A uvedeného výše) byla připravena sloučenina z názvu. Reakce byla monitorována chromatografií na tenké vrstvě (Rf =0,3 v 5 % MeOH/CHCl₃) and produkt byl čištěn silikagelovou chromatografií použitím 5 % MeOH/CHCl₃ jako vymývacího rozpouštědla, následovanou rekrystalizaci z chlorbutanu/acetonitrilu.

NMR data byla následující:

130

« * · » · ·

^xH-nmr (DMSO-d₆) : δ = 4,1 (m, 2H) , 7,83 (bs, 4H) . C24H25N3O4F2 (MW = 457,48); hmotová spektroskopie (MH⁺) 457.

Příklad 21

Syntéza

N-[a-pyridin-2-yl-benzyl]-N'-(3,5difluorfenylacetyl)-L-alaninamidu

Postupem podle obecné procedury F and použitím N-(3,5difluorfenylacetyl)-L-alaninu (Příklad B2) and a-(2pyridyl)benzylaminu (Maybridge) byla připravena sloučenina z názvu. Produkt byl čištěn silikagelovou chromatografii použitím 5 % MeOH/CHCl3 jako vymývacího rozpouštědla, následovanou rekrystalizací z n-chlorbutanu/acetonitrilu. NMR data byla následující:

^xH-nmr (DMSO-d₆) : δ = 6,10 (d, IH), 4,46 (m, IH) .

C₂₃H₂₁F₂N₃O₂ (MW = 409,44);

hmotová spektroskopie (MH⁺) 409.

Příklad 22

Syntéza N-[2-(methoxykarbonylmethyl)benzyl]-Ν' -(3,5difluorfenylacetyl)-L-alaninamidu

Hydrochlorid 2-(Aminomethyl)-benzenacetátu byl míchán v bezvodém methanolu. Po kapkách byl přidán thionylchlorid (1,1 ekviv.) and směs byla míchána při teplotě okolí přes noc a tím se získal hydrochlorid methyl-2-(aminomethyl)benzenacetátu ve formě bílé pevné látky.

N(3, 5-difluorfenylacetyl)-L-alanin (Příklad B2) v dichlormethanu byl kopulován s hydrochloridem methyl-2(aminomethyl)-benzenacetátu použitím EDC, HOBT, DMA a tím se získala sloučenina z názvu.

MS (M⁺) 404,1 \

*

131

---0 ·♦

0.9 9 .

0 9 '0 ' 0 ' ' • ' 0--990 09 • 9 « 9 9 0 •09 909

0

9 0 0

Příklad 23

Syntéza N-[3-(methoxykarbonyl)benzyl]-Ν' -(3,5— difluorfenylacetyl)-L-alaninamidu

Sloučenina z názvu byla připravena postupem podle procedury popsané v Příkladu 22, ale použitím hydrochloridu methyl-3(aminomethyl)-benzenacetátu namísto hydrochloridu methyl-3(aminomethyl)-benzoátu.

NMR data byla následující:

^xH-nmr (CDC1₃) : δ = 1,410 (d, 3H), 3,56 (s, 2H) .

MS (M⁺) 390.

Příklad 24

Syntéza N-[2-(2'-methoxykarbonylmethylfenyl)benzyl]-Ν' (3,5-difluorfenylacetyl)-L-alaninamidu

Sloučenina z názvu byla připravena postupem podle procedury popsané v Příkladu 22 ale použitím 2-(2'methoxykarbonylmethylfenyl)benzylaminu namísto hydrochloridu methyl-3-(aminomethyl)-benzoátu.

Příklad 25

Syntéza N-[2-fenylbenzyl]-Ν' -(3,5-difluorfenylacetyl)-Lalaninamidu

Sloučenina z názvu byla připravena postupem podle procedury popsané v Příkladu 22 ale použitím 2-fenylbenzylaminu namísto hydrochloridu methyl-3-(aminomethyl)-benzoátu..

NMR data byla následující:

^xH-nmr (CDC1₃) : δ = 1,22 (d, 3H) , 3,46 (s, 2H) .

MS (M⁺) 408.

*· ··

I « ·· · · ; ··'♦· i · *··'. » '9 · . ·’ ··· ' .'·» ·

132 Příklad 26

Buněčné prohledávání pro detekci inhibitorů tvorby βamyloidu

Množství, sloučenin obecného vzorce I uvedeného výše bylo testováno na jejich schopnost inhibice vytváření β-amyloidu v buňkách, obsahujících švédskou mutaci. Tato prohledávací analýza používala buňky (K293 = linie lidských ledvinových buněk), které byly stabilně transfektovány genem amylóidového prekursorového proteinu 751 (APP751), obsahujícího dvojitou mutaci Lys₆5iMet₆52 na Asn₆5iLeu₆52 (při číslování APP751) způsobem, který byl popsán v publikaci mezinárodní patentové přihlášky č. 94/10569® a v Citron a kol.¹². Tato mutace je obecně nazývána švédskou mutací a buňky, označené jako „293 751 SWE, byly vloženy na destičky Corning s 96 jamkami v množství 1,5-2,5 χ 10⁴ buněk na jamku v Dulbeccově minimálním esenciálním mediu s přídavkem 10% fetálního hovězího séra. Počet buněk je důležitý k tomu, aby bylo dosaženo ELISA výsledků pro βamyloid v lineární oblasti analýzy (přibližně od 0,2 do 2,5 ng na ml).

Po inkubaci přes noc při teplotě 37 °C v inkubátoru ekvilibrovaném 10% oxidem uhličitým byla média odstraněna a nahrazena 200 μΐ sloučeniny obecného vzorce I (lék), obsahující médium, na jamku pro dvouhodinové předběžné působení a buňky byly inkubovány výše uvedeným způsobem. Zásobní roztoky léku byly připraveny v 100% dimethylsulfoxidu, tak aby při konečné koncentraci léku, použité při zpracování, koncentrace dimethylsulfoxidu

133

0 »0 * .»
• 0 0 0	0.0	99
0 00 9 0 9 0 9 0·	9 9 9
00 0 00	999	♦ 9

» W · . · v v ' > . 0 0 '.·· » 0 · *

0 9, ··· ·!· Λ' ,,:0 ..

0 ,.-0.0..

nepřekročila 0,5% a byla ve skutečnosti obvykle rovna 0,1%.

Na konci periody předběžného působení byla média opět odstraněna a nahrazena médiem, obsahujícím čerstvý lék výše uvedeným způsobem a buňky byly inkubovány po dobu dalších dvou hodin. Po tomto zpracování byly destičky centrifugovány v přístroji Beckman GPR při 1200 otáčkách za minutu po dobu pěti minut při teplotě okolí na peletové buněčné zbytky ze zpracovaného média. Z každé jamky bylo 100 μΐ zpracovaného média nebo jeho vhodného zředění přeneseno na ELISA destičku pokrytou protilátkou 266¹⁴ proti aminokyselinám 13-28 β-amyloidového peptidu, která je popsána v publikaci mezinárodní patentové přihlášky č. 94/10569⁸ a uchováváno při teplotě 4 °C přes noc. ELISA test, používající označené protilátky 6C6¹⁴ proti aminokyselinám 1-16 β-amyloidového peptidu byl proveden následující den pro určení množství vytvořeného βamyloidového peptidu.

Cytotoxické účinky sloučenin byly měřeny modifikací způsobu, který popsali Hansen a kol.,¹³. K buňkám, které zůstaly v tkáňové kultuře na destičce bylo přidáno 25 μΐ zásobního roztoku (5 mg/ml) 3, (4,5-dimethylthiazol-2-yl)2,5-difenyltetrazolium bromidu (MTT) do konečné koncentrace 1 mg/ml. Buňky byly inkubovány při teplotě 37 °C po dobu jedné hodiny a buněčná aktivita byla zastavena přidáním stejného objemu MTT lýzového pufru (20% hmotn./obj. dodecylsulfátu sodného v 50% dimethylformamidu, pH 4,7). Úplná extrakce byla dosažena protřepáváním přes noc při teplotě okolí. Byl měřen rozdíl OD562nm a OD₆₅onm v mikrodestičkové čtečce Molecular Device UV_max jako indikátor

134 • »· ·» φ '·.

• · :· .·'<· <

• ·· - Φ -·-· · ··· ·· • · > · • ·

Φ 1 1 · ,· Φ ··♦ 191

11 • 11 « • · · ·

ΦΦΦ »·· • ·

11 buněčné životaschopnosti.

Výsledky ELISA analýzy β-amyloidového peptidu byly upraveny podle standardní křivky a vyjádřeny jako ng/ml βamyloidového peptidu. Pro normalizaci na cytotoxicitu, byly tyto výsledky děleny výsledky MTT a vyjádřeny jako procento výsledku proti kontrolnímu vzorku bez léku. Všechny výsledky představují střední hodnotu a standardní odchylku z alespoň šesti opakovaných pokusů.

Testované sloučeniny byly analyzovány na aktivitu pro inhibici vytváření β-amyloidového peptidu v buňkách, používajíce tento test. Výsledky tohoto testu ukazují, že každá ze sloučenin podle předloženého vynálezu, která byla testována, snižuje vytváření β-amyloidového peptidu o alespoň 30% ve srovnání s kontrolním vzorkem.

Příklad 27

In vivo potlačení uvolňování a/nebo syntézy β-amyloidu

Tento příklad ilustruje, jak sloučeniny podle předloženého vynálezu mohou být testovány na in vivo potlačení uvolňování a/nebo syntézy β-amyloidu. Pro tyto experimenty byly použity 3 až 4 měsíce staré PDAPP myši [Games a kol., (1995) Nátuře 373:523-527]. V závislosti na tom, která sloučenina byla testována, byla sloučenina obvykle připravena s koncentrací 5 nebo 10 mg/ml. Vzhledem k nízké rozpustnosti sloučenin, mohly být podávány s různými vehikuly, jako je kukuřičný olej (Safeway, South San Francisco, CA); 10% EtOH v kukuřičném oleji (Safeway); 2hydroxypropyl^-cyklodextrin (Research Biochemicals

135

9·· 999 ·9

9 9 ·

9 9 9

International, Natick MA) ; a karboxymethyl-celulóza (Sigma Chemical Co., St. Louis MO). Konkrétně pro příklad 141 byla vehikulem karboxymethyl-celulóza (Sigma).

Myším byla podána dávka subkutánně pomocí jehly velikosti 26 a po 3 hodinách byla zvířata usmrcena C0₂ narkózou a krev byla odebrána srdeční punkcí, používajíce 1 cc 25G 5/8 tuberkulin stříkačku/jehlu, potřenou roztokem 0,5 M EDTA, pH 8,0. Krev byla vložena do Becton-Dickinsonovy vakuové trubice, obsahující EDTA a odstřeďovány po dobu 15 minut při 1500 g a při teplotě 5 °C. Potom byly odebrány myší mozky a kortex a hippokampus byly disektovány a uloženy na led.

1. Mozkový test

Pro přípravu hippokampální a kortikální tkáně pro enzymově vázaný imunosorbentní test (ELISA) byla každá oblast mozku homogenizována v 10 objemech ledového guanidinového pufru (5,0 M guanidin-HCl, 50 mM Tris-HCl, pH 8,0) používajíce motorizovaný drtič Kontes (Fisher, Pittsburgh PA) . Homogenáty byly jemně homogenizovány na rotující platformě po dobu tří až čtyř hodin při teplotě okolí a uchovávány při teplotě -20 °C kvantitativním stanovením β-amyloidu.

Mozkové homogenáty byly zředěny 1:10 ledovým kaseinovým pufrem [0,25% kaseinu, fosforečnanově pufrovaný fyziologický roztok (PBS), 0,05% azidu sodného, 20 μg/ml aprotininu, 5 mM EDTA, pH 8,0, 10 gg/ml leupeptinu] , čímž se snížila konečná koncentrace guanidinu na 0,5 M před centrifugací při 16, 000 g po dobu 20 minut při teplotě 4 °C. Byly připraveny β-amyloidové standardy (aminokyseliny

136 • . «· ,. · . · ·· »» 'β·.'··''.'.» · ' · » · · · ·♦ »·· · ·· • : · ·..·»' · « «·* ··' . ♦·« ♦·♦ ·« ··

1-40 nebo 1-42), takže konečná kompozice se rovnala 0,5 M guanidinu v přítomnosti 0,1% albuminu hovězího séra (BSA).

Totální β-amyloidová sendvičová ELISA, určující jak βamyloid (aminokyseliny 1-40) tak i β-amyloid (aminokyseliny 1-42) spočívala ve dvou monoklonálních protilátkách (mAb) proti β-amyloidu. Zachycovací protilátka, 266¹⁴, je specifická na aminokyseliny 13 -28 β-amyloidu. Protilátka 3D6¹⁵, která je specifická na aminokyseliny 1-5 β-amyloidu, byla biotinylována a sloužila jako druhá (indikační) protilátka v testu. 3D6 biotinylační procedura používá protokol výrobce (Pierce, Rockford IL) pro NHS-biotinové označení imunoglobulinů s výjimkou, že byl použit pufr 100 mM hydrogenuhličitan sodný, pH 8,5. 3D6 protilátka nerozpoznává vylučovaný amyloidový prekursorový protein (APP) nebo APP plné délky, ale detekuje pouze β-amyloidové druhy aspargové kyseliny aminového konce. Test měl dolní mez citlivosti přibližně 50 pg/ml (11 pM) a nevykazoval žádnou křížovou reaktivitu na endogenní myší β-amyloidový peptid v koncentracích až do 1 ng/ml.

Konfigurace sendvičového testu ELISA určujícího hladinu βamyloidu (aminokyseliny 1-42) používá monoklonální protilátku 21F12¹⁵ (která rozpoznává aminokyseliny 33-42 βamyloidu) jako první (zachytávací) protilátku. Biotinylovaná 3D6 je také indikační protilátka v tomto testu, který má dolní mez citlivosti přibližně 125 pg/ml (28 pM).

266 a 21F12 zachytávací monoklonální protilátky byly

137 naneseny v koncentraci 10 gg/ml na 96 jamkové imunotestovací destičky (Costar, Cambidge MA) přes noc při teplotě okolí. Destičky byly potom odsáty a blokovány 0,25% lidským sérovým albuminem v PBS pufru po dobu alespoň 1 hodiny při teplotě okolí, potom uchovávány vysušené při teplotě 4 °C až do použití. Destičky byly před použitím rehydratovány promývacím pufrem (Tris-pufrovaný fyziogický roztok, 0,05% Tween 20). Vzorky a standardy byly přidány na destičky a inkubovány přes noc při teplotě 4 °C. Destičky byly promývány 3 krát promývacím pufrem mezi každým krokem testu. Biotinylované 3D6, zředěné na 0,5 pg/ml v kaseinovém inkubačním pufru (0,25% kasein, PBS, 0,05% Tween 20, pH 7,4) byly inkubovány v jamkách po dobu 1 hodiny při teplotě okolí. Avidin-HRP (Vector, Burlingame CA) zředěný 1:4000 v kaseinovém inkubačním pufru byl přidán do jamek po dobu 1 hodiny při teplotě okolí. Byl přidán kolorimetrický substrát, Slow TMB-ELISA (Pierce, Cambridge MA) a ponechán reagovat po dobu 15 minut, poté byla enzymatická reakce zastavena přidáním 2 N H2SO4. Reakční produkt byl kvantifikován, používajíce zařízení Molecular Devices V_max (Molecular Devices, Menlo Park CA) , měřením rozdílu absorpce při 450 nm a 650 nm.

2. Krevní test

EDTA plasma byla zředěna 1: 1 ve vzorkovacím ředidle (0,2 g/1 fosforečnan sodný . H₂O (monobazický), 2,16 g/1 fosforečnan sodný . 7H₂O (dibázický), 0,5 g/1 thimerosal, 8,5 g/1 chlorid sodný, 0,5 ml TritonX-405, 6,0 g/1 hovězí sérový albumin prostý globulinu a voda). Vzorky a standardy ve vzorkovacím ředidle byly testovány používajíce totální β-amyloidový test (266 zachytávací protilátky /3D6 «· · · · · · . * · · * · · · < ·. · . · · · · · · • · . · · • · · ··· · · ··

- 138

indikační protilátky), popsaný výše . pro mozkový test s výjimkou že bylo použito vzorkovací ředidlo namísto kaseinového ředidla.

Ve srovnání s výše uvedeným popisem mohou být odborníky provedeny různé modifikace a změny kompozic a způsobů. Všechny takové modifikace spadají do rozsahu připojených patentových nároků.

Claims (9)

1. Sloučenina obecného vzorce I:

X' O ve kterém R¹ je zvolen ze souboru, zahrnujícího

a) alkyl, alkenyl, alkaryl, alkcykloalkyl, aryl, cykloalkyl, cykloalkenyl, heteroaryl a heterocyklický systém, kde heteroaryl nebo heterocyklické skupina jsou popřípadě substituovány 1 až 3 substituenty, zvolenými ze souboru, zahrnujícího alkyl, alkoxy, aryl, aryloxy, atom halogenu, skupiny nitro, thioalkoxy a thioaryloxy;

(b) substituovanou fenylovou skupinu obecného vzorce II

R^b R^a' ^{r <R)m}' RhR’ ve kterém R představuje alkylen, obsahující od 1 do 8 atomů uhlíku, m je celé číslo, které se rovná 0 nebo 1, ♦ 4 • » • · · ·

4 4

4 4

4 »

- 140 R^a a R^a’ jsou nezávisle zvoleny ze souboru, zahrnujícího atom vodíku, skupinu hydroxy, atom fluoru a methyl;

R^b a R^b' jsou nezávisle zvoleny ze souboru, zahrnujícího atom vodíku, alkyl, alkoxy, aryl, aryloxy, skupiny kyano, cykloalkyl, atom halogenu, heteroaryl, heteroaryloxy, heterocyklický systém, skupiny nitro, trihalogenmethyl, thioalkoxy, thioaryloxy, thioheteroaryloxy a -C(O)R⁴, kde R⁴ je zvolen ze souboru, zahrnujícího alkyl, aryl, alkoxy a aryloxy; a

R^c je zvolen ze souboru, zahrnujícího atom vodíku, alkyl, aryl, skupinu kyano, atom halogenu, skupinu nitro a kde R^b a R^c jsou k sobě kondenzovány a vytvářejí methylendioxy kruh s fenylovým kruhem; a pokud R^b a/nebo R^b' a/nebo R^c je atom fluoru, atom chloru, atom bromu a/nebo skupina nitro, potom R^a a/nebo R^a' mohou také představovat atom chloru; a (c) 1- nebo 2-naftyl substituovaný v poloze 5, 6, 7 a/nebo 8 jedním až čtyřmi substituenty, zvolenými ze souboru, zahrnujícího alkyl, alkoxy, atom halogenu, skupiny kyano, nitro, trihalogenmethyl a thioalkoxy;

R² je zvolen ze souboru, zahrnujícího atom vodíku, alkyl, obsahující od 1 do 4 atomů uhlíku, alkylalkoxy, obsahující od 1 do 4 atomů uhlíku, alkylthioalkoxy, obsahující od 1 do 4 atomů uhlíku; a

R³ a R³' jsou nezávisle zvoleny ze souboru, zahrnujícího:

(a) atom vodíku s tou podmínkou, že oba substituenty R³ a R³' nemohou představovat atom vodíku;

(b) alkyl s tou podmínkou, že pokud R³ představuje atom vodíku, potom alkylová skupina R³' má přímý uhlíkový řetězec o délce alespoň 5 atomů uhlíku od atomu dusíku, přičemž řetězec může být popřípadě substituován jednou nebo více alkylovými skupinami a s další podmínkou, že pokud oba substituenty R³ a R³' jsou alkyl, potom alespoň jedna alkylová skupina má uhlíkový řetězec délky alespoň 5 atomů uhlíku, přičemž řetězec může být popřípadě substituován jednou nebo více alkylovými skupinami;

• ο ► 9 · 9 • · » * · · $ • · 9 9 *· 99

- 141 (c) -(R⁷)n(W)_p, kde R⁷ představuje alkylenovou ze souboru, zahrnujícího:

(i) • »999 skupinu, W je zvolen souboru, kde R⁵, R⁵', R⁹ a R⁹' jsou nezávisle zvoleny ze zahrnujícího atom vodíku, hydroxyl, alkyl, substituovaný alkyl, alkoxy, substituovanou skupinu, alkoxy, amino, alkylamino, dialkylamino, aryl, acyl, acylamino, acyloxy, aminoacyl, skupinu kyano, cykloalkyl, atom halogenu, karboxyl, karboxylové estery, heteroaryl a heterocyklický systém, a

R^s je zvolen ze souboru, zahrnujícího atom vodíku, hydroxyl, alkyl, substituovaný alkyl, amino, alkylamino, dialkylamino, aryl, acyl, acylamino, acyloxy, alkoxy, substituovanou skupinu alkoxy, aminoacyl, skupinu kyano, cykloalkyl, atom halogenu, karboxyl, karboxylové estery, heteroaryl, heterocyklický systém a kde R⁶ a jeden ze substituentů R⁵ nebo R⁵' jsou kondenzovány a vytváří heterocyklický kruh obsahující 4 až 10 atomů, který má 1 až 3 heteroatomy, zvolené ze souboru, zahrnujícího atom kyslíku, atom dusíku a atom síry;

s tou podmínkou, že pokud n je rovno nule, R⁹ a R⁹' představují atom vodíku;

(ii) heteroaryl; a (iii) N-heterocyklický systém, s tou podmínkou, že pokud W je Nheterocyklický systém, potom n není rovno nule; a n je celé číslo, které se rovná 0 nebo 1, a p je celé číslo, které se rovná 1 až 3 s tou podmínkou, že pokud n je rovno nule potom p je rovno 1, a ·· ·· « · 9 <

• 9 * V ♦ · · · « • 00

- 142 0· (d) -CH (Φ) CH₂C (O) 0-Q, kde Q je zvolen ze souboru, zahrnujícího alkyl, aryl, heteroaryl a heterocyklický systém X' představuje atom vodíku, skupinu hydroxy nebo atom fluoru;

X představuje atom vodíku, skupinu hydroxy nebo atom fluoru nebo X' a X spolu vytvářejí oxo skupinu,

Z je zvolen ze souboru, zahrnujícího kovalentní vazbu, která váže R¹ k -CX’X-, atom kyslíku a atom síry; a s tou podmínkou, že pokud R¹ představuje fenyl, R² představuje methyl, X' a X představují atom vodíku, Z je skupina, která kovalentně váže R¹ k -CX’X-, m je rovno nule, R³ představuje atom vodíku, R³' je -(R⁷)_n(W)_p, kde n je rovno nule a p je rovno jedné a W představuje potom (i) R⁵, R⁵', R⁹, R⁹' a R⁶ nejsou všechny atom vodíku a (ii) R⁵, R⁵', R⁹, R⁹’ jsou atom vodíku a R⁶ představuje methoxy; s další podmínkou, že pokud R¹ představuje 3,5-difluorfenyl, R² představuje methyl, X' a X představují atom vodíku, Z je skupina, která kovalentně váže R¹ k -CX'X~, m je rovno nule, R³ představuje atom vodíku, R³' je ~(R⁷)_n(W)_p, kde n je rovno jedné a p je rovno jedné, R⁷ představuje ethylen a W představuje • »

R⁹' R⁵ potom R⁵, R⁵', R⁹, R⁹' a R⁶ nepředstavují všechny atom vodíku; a s další podmínkou, že pokud R¹ představuje 3,5-difluorfenyl, R² představuje methyl, X' a X představují atom vodíku, Z je skupina, která kovalentně váže R¹ k -CX’X~ a m je rovno nule, R³ představuje atom vodíku, R³' je -(R⁷)_n(W)_p, kde n je rovno nule a p je rovno jedné, W představuje

R⁹ R⁵

R⁶ a R⁵', R⁹, R⁹' jsou atom vodíku, potom R⁵ a R⁶ nejsou kondenzovány aby vytvářely s fenylovým kruhem, ke kterému jsou připojeny, ftalimidovou skupinu.

2. Sloučenina podle nároku 1, ve které R¹ představuje nesubstituovanou arylovou skupinu.

3. Sloučenina podle nároku 1, ve které nesubstituovaná R¹ arylová skupina je zvolena ze souboru, zahrnujícího fenyl, 1-naftyl a 2naftyl.

• · « · »

- 144 • · · e β

« · • · · · • · ·

0 · « · · • · • · 9

0 · * • · « • · 9

0 0

4. Sloučenina podle nároku 1, ve které R¹ představuje substituovanou arylovou skupinu.

5. Sloučenina podle nároku 4, ve které substituované arylové skupiny jsou substituované fenylové skupiny definované následujícím způsobem:

(a) monosubstituované fenyly, které mají jednoduchou substituci v poloze 2, 3 nebo 4, přičemž každý z jednotlivých substituentů je dán odpovídajícími skupinami R^a, R^b a R^c;

b) disubstituované fenyly, které mají dva substituenty v polohách

2.3, v polohách 2,4, v polohách 2,5, v polohách 2,6, v polohách

3.4, v polohách 3,5 nebo v polohách 3,6, přičemž každý ze substituentů je dán odpovídajícími skupinami R^a, R^a', R^b, R^b' a R°; a (c) trisubstituované fenyly, které mají tři substituenty v polohách 2,3,4, v polohách 2,3,5, v polohách 2,3,6, v polohách 3,4,5 a v polohách 3,4,6, přičemž každý ze substituentů je dán odpovídajícími skupinami R^a, R^a', R^b, R^b' a R^c.

6. Sloučenina podle nároku 5, ve které substituované fenylové skupiny jsou zvoleny ze souboru, zahrnujícího 4-fluorfenyl, 4chlorfenyl, 4-bromfenyl, 4-nitrofenyl, 4-methylfenyl, 3methoxyfenyl, 3-nitrofenyl, 3-fluorfenyl, 3-chlorfenyl, 3bromfenyl, 3-thiomethoxy-fenyl, 3-methylfenyl, 3trifluormethylfenyl, 2-hydroxyfenyl, 2-methylfenyl, 2-fluorfenyl, 3,4-dichlorfenyl, 3,4-methylendioxyfenyl, 3,5-difluorfenyl, 3,5dichlorfenyl, 2,4-dichlorfenyl a 2,5-difluorfenyl.

7. Sloučenina podle nároku 1, ve které R¹ představuje alkarylovou skupinu.

8. Sloučenina podle nároku 7, ve které R¹ alkarylová skupina je zvolena ze souboru, zahrnujícího benzyl, fenylethyl, 3-fenyl-npropyl a 4-fenyl-n-butyl.

ft · ♦ «

- 145 9. Sloučenina podle nároku 1, ve které R¹ je zvolen ze souboru, zahrnujícího alkylové, alkenylové, cykloalkylová a cykloalkenylová skupiny.

10. Sloučenina podle nároku 9, ve které R¹ představuj e alkyl. 11. Sloučenina podle nároku 9, ve které R¹ představuj e cykloalkyl 12. Sloučenina podle nároku 9, ve které R¹ představuje alkenyl. 13. Sloučenina cykloalkenyl. podle nároku 9, ve které R¹ představuj e 14. Sloučenina podle nároku 9, ve které R¹ alkylové,

cykloalkylová, alkenylové a cykloalkenylová skupiny jsou zvoleny ze souboru, zahrnujícího sek.-butyl, cyklopropyl, cyklobutyl, cyklohexyl, cyklopentyl, cyklohex-l-enyl, -CH₂-cyklopropyl, -CH₂cyklobutyl, -CH₂-cyklohexyl, -CH₂-cyklopentyl, -CH₂CH₂-cyklopropyl, -CH₂CH₂-cyklobutyl, -CH₂CH₂-cyklohexyl a -CH₂CH₂-cyklopentyl.

15. Sloučenina podle nároku 1, ve které R¹ je zvolen ze souboru, zahrnujícího heteroarylové a substituované heteroarylové skupiny.

16. Sloučenina podle nároku 15, ve které R¹ heteroarylové a substituované heteroarylové skupiny jsou zvoleny ze souboru, zahrnujícího pyrid-3-yl, pyrid-4-yl, thiofen-2-yl, thiofen-3-yl, benzothiazol-4-yl, 2-fenylbenzoxazol-5-yl, furan-2-yl, benzofuran-2-yl, thionaften-2-yl, 2-chlorthiofen-5-yl, 3methylisoxazol-5-yl, 2-(thiofenyl)thiofen-5-yl, 6methoxythionaften-2-yl, 3-fenyl-l,2,4-thiooxadiazol-5-yl a 2fenyloxazol-4-yl.

17. Sloučenina podle nároku 1, ve které R² je zvolen ze souboru, zahrnujícího alkyl, obsahující od 1 do 4 atomů uhlíku, • * • · · · • · • ·»· • · * · · · « r * « • «

- 146 ·♦ ·· • ♦ 4 · • · * · • · · · • · · · alkylalkoxy, obsahující od 1 do 4 atomů uhlíku a alkylthioalkoxy, obsahující od 1 do 4 atomů uhlíku.

18. Sloučenina podle nároku 17, ve které R² je zvolen ze souboru, zahrnujícího methyl, ethyl, n-propyl, iso-propyl, n-butyl, isobutyl a -CH₂CH₂SCH₃.

19. Sloučenina podle nároku 1 ve které X' a X představují oba atom vodíku a Z představuje kovalentní vazbu, která váže R¹ k CX'X-.

20. Sloučenina podle nároku 1, ve které R³ představuje atom vodíku a R³' je zvolen ze souboru, zahrnujícího 3-hydroxyfenyl, 3methoxyfenyl, 3- ethoxykarbonylfenyl, n-hexyl, n-oktyl, 4ethoxykarbonylfenyl, 4-methoxykarbonylfenyl, 3-chlorfenyl, 3kyanofenyl, 3,5-dichlorfenyl, -ΟΗ(ΟΗ₃)Φ (R stereoisomer), CH(CH₃)O (S stereoisomer), ftalid-6-yl, 2-hydroxypyrid-3-yl, 2(methoxykarbonylmethyl)benzyl, 3-(methoxykarbonyl)benzyl, 2-(2'methoxykarbonylmethylfenyl)benzyl a 2-fenylbenzyl.

21. Sloučenina obecného vzorce I podle nároku 1, zvolená ze souboru zahrnujícího:

N-(3-hydroxyfenyl)-N'-(fenylacetyl)-L-alaninamid

N-(3-methoxyfenyl)-Ν' -(fenylacetyl)-L-alaninamid

N-(3-ethoxyfenyl)-Ν' -(fenylacetyl)-L-alaninamid

N-(4-ethoxykarbonylfenyl)-Ν' -(fenylacetyl)-L-alaninamid

N-(n-hexyl)-N'-(3,5-difluorfenylacetyl)-L-alaninamid

N-(n-oktyl)-Ν'-(3,5-difluorfenylacetyl)-L-alaninamid • 4

4 · * · · * 4 • ·4 4

4· 44 ···* 44

- 147 N-(3-methoxyfenyl)-Ν'-(3,5-difluorfenylacetyl)-L-alaninamid

N-(4-ethoxykarbonylfenyl)-Ν' -(3,5-difluorfenylacetyl)-Lalaninamid

N-(3-ethoxykarbonylfenyl)-Ν’ -(3,5-difluorfenylacetyl)-Lalaninamid

N-(3-chlorfenyl)-Ν' -(3,5-difluorfenylacetyl)-L-alaninamid

N-(3,5-dichlorfenyl)-N'-(3,5-difluorfenylacetyl)-L-alaninamid

N-(3-kyanofenyl)-Ν'-(3,5-difluorfenylacetyl)-L-alaninamid

N-(ftalid-6-yl)-Ν' -(3,5-difluorfenylacetyl)-L-alaninamid

N-[(4-methoxykarbonylfenyl)methyl]-Ν' -(3,5-difluorfenylacetyl)-Lalaninamid

N-(1-kyano-l-fenylmethyl)-N'-(3,5-difluorfenylacetyl)-Lalaninamid

N-[(R)-1-fenylethyl]-N'-(3,5-difluorfenylacetyl)-L-alaninamid

N-[(S)-1-fenylethyl]-N'-(3,5-difluorfenylacetyl)-L-alaninamid

N-[2-hydroxypyridin-3-yl]-N'-(3,5-difluorfenylacetyl)-Lalaninamid

N-[2-methoxykarbonyl-l-fenylethyl]-N'-(3,5-difluorfenylacetyl)-Lalaninamid

N-[a-pyridin-2-yl-benzyl]-N'-(3,5-difluorfenylacetyl)-Lalaninamid • · • · • φ

- 148 • « · · · ·

Ν-[1-(N-ftalamido)pent-2-yl]-Ν'-(3,5-difluorfenylacetyl)-Lalaninamid

Ν-[2-(methoxykarbonylmethyl)benzyl]-N'- (3,5-difluorfenylacetyl)L-alaninamid

N-[3-(methoxykarbonyl)benzyl]-N'-(3,5-difluorfenylacetyl)-Lalaninamid

N-[2-(2'-methoxykarbonylmethylfenyl)benzyl]-N'-(3,5difluorfenylacetyl)-L-alaninamid

N-[2-fenylbenzyl]-N'-(3,5-difluorfenylacetyl)-L-alaninamid.

22. Sloučenina pro použití jako léčivo pro inhibici uvolňování βamyloidového peptidu a/nebo jeho syntézy v buňce, obecného vzorce I

X' .cx

R^JZ ~ .NH C ^NR³R³'

R² (I) ve kterém R¹ je zvolen ze souboru, zahrnujícího

a) alkyl, alkenyl, alkaryl, alkcykloalkyl, aryl, cykloalkyl, cykloalkenyl, heteroaryl a heterocyklický systém, kde heteroaryl nebo heterocyklická skupina jsou popřípadě substituovány 1 až 3 substituenty, zvolenými ze souboru, zahrnujícího alkyl, alkoxy, aryl, aryloxy, atom halogenu, skupiny nitro, thioalkoxy a thioaryloxy;

« ·

-149 9

9999 • 99 ♦ • · · • 9 • · 9 •9 99 • 9 9 9 • · « 9

9 9 9 9 • « · 9

99 99 (b) substituovanou fenylovou skupinu obecného vzorce II

R^b' R^a'

R^O V-(R)„II

R^b

R^a ve kterém R představuje alkylen, obsahující od 1 do 8 atomů uhlíku, m je celé číslo, které se rovná 0 nebo 1,

R^a a R^a' jsou nezávisle zvoleny ze souboru, zahrnujícího atom vodíku, skupinu hydroxy, atom fluoru a methyl;

R^b a R^b' jsou nezávisle zvoleny ze souboru, zahrnujícího atom vodíku, alkyl, alkoxy, aryl, aryloxy, skupiny kyano, cykloalkyl, atom halogenu, heteroaryl, heteroaryloxy, heterocyklický systém, skupiny nitro, trihalogenmethyl, thioalkoxy, thioaryloxy, thioheteroaryloxy a -C(O)R⁴, kde R⁴ je zvolen ze souboru, zahrnujícího alkyl, aryl, alkoxy a aryloxy; a

R^c je zvolen ze souboru, zahrnujícího atom vodíku, alkyl, aryl, skupinu kyano, atom halogenu, skupinu nitro a kde R^b a R^c jsou k sobě kondenzovány a vytvářejí methylendioxy kruh s fenylovým kruhem; a pokud R^b a/nebo R^b' a/nebo R^c je atom fluoru, atom chloru, atom bromu a/nebo skupina nitro, potom R^a a/nebo R^a' mohou také představovat atom chloru; a (c) 1- nebo 2-naftyl substituovaný v poloze 5, 6, 7 a/nebo 8 jedním až čtyřmi substituenty, zvolenými ze souboru, zahrnujícího alkyl, alkoxy, atom halogenu, skupiny kyano, nitro, trihalogenmethyl a thioalkoxy;

R² je zvolen ze souboru, zahrnujícího atom vodíku, alkyl, obsahující od 1 do 4 atomů uhlíku, alkylalkoxy, obsahující od 1 do 4 atomů uhlíku, alkylthioalkoxy, obsahující od 1 do 4 atomů uhlíku; a • · • · · • · « • · · • · · « ·

- 150 R³ a R³' jsou nezávisle zvoleny ze souboru, zahrnujícího:

(a) atom vodíku s tou podmínkou, že oba substituenty R³ a R³' nemohou představovat atom vodíku;

(b) alkyl s tou podmínkou, že pokud R³ představuje atom vodíku, potom alkylová skupina R³' má přímý uhlíkový řetězec o délce alespoň 5 atomů uhlíku od atomu dusíku, přičemž řetězec může být popřípadě substituován jednou nebo více alkylovými skupinami a s další podmínkou, že pokud oba substituenty R³ a R³' jsou alkyl, potom alespoň jedna alkylová skupina má uhlíkový řetězec délky alespoň 5 atomů uhlíku, přičemž řetězec může být popřípadě substituován jednou nebo více alkylovými skupinami;

(c) -(R⁷)n(W)_p, kde R⁷ představuje alkylenovou skupinu, W je zvolen ze souboru, zahrnujícího:

(i)

R⁹ R⁵

R⁹' R⁵ kde R⁵, R⁵', R⁹ a R⁹' jsou nezávisle zvoleny ze souboru, zahrnujícího atom vodíku, hydroxyl, alkyl, substituovaný alkyl, alkoxy, substituovanou skupinu alkoxy, amino, alkylamino, dialkylamino, aryl, acyl, acylamino, acyloxy, aminoacyl, skupinu kyano, cykloalkyl, atom halogenu, karboxyl, karboxylové estery, heteroaryl a heterocyklický systém, a

R⁶ je zvolen ze souboru, zahrnujícího atom vodíku, hydroxyl, alkyl, substituovaný alkyl, amino, alkylamino, dialkylamino, aryl, acyl, acylamino, acyloxy, alkoxy, substituovanou skupinu alkoxy, aminoacyl, skupinu kyano, cykloalkyl, atom halogenu, karboxyl, karboxylové estery, heteroaryl, heterocyklický systém a kde R⁶ a jeden ze substituentů R⁵ nebo R⁵' jsou kondenzovány a

9 ·

- 151 - • · • · • · vytváří heterocyklický kruh obsahující 4 až 10 atomů, který má 1 až 3 heteroatomy, zvolené ze souboru, zahrnujícího atom kyslíku, atom dusíku a atom síry;

s tou podmínkou, že pokud n je rovno nule, R⁹ a R⁹' představují atom vodíku;

(ii) heteroaryl; a (iii) N-heterocyklický systém, s tou podmínkou, že pokud W je Nheterocyklický systém, potom n není rovno nule; a n je celé číslo, které se rovná 0 nebo 1, a p je celé číslo, které se rovná 1 až 3 s tou podmínkou, že pokud n je rovno nule potom p je rovno 1, a (d) -CH(Φ) CH₂C(O)O-Q, kde Q je zvolen ze souboru, zahrnujícího alkyl, aryl, heteroaryl a heterocyklický systém X' představuje atom vodíku, skupinu hydroxy nebo atom fluoru;

X představuje atom vodíku, skupinu hydroxy nebo atom fluoru nebo X' a X spolu vytvářejí oxo skupinu,

Z je zvolen ze souboru, zahrnujícího kovalentní vazbu, která váže R¹ k -CX'X-, atom kyslíku a atom síry; a s tou podmínkou, že pokud R¹ představuje fenyl, R² představuje methyl, X' a X představují atom vodíku, Z je skupina, která kovalentně váže R¹ k -CX'X-, m je rovno nule, R³ představuje atom vodíku, R³' je ~(R⁷)_n(W)_p, kde n je rovno nule a p je rovno jedné a W představuje

R⁹ R⁵ .R6

R⁹' R⁵ potom (i) R⁵, R⁵', R⁹, R⁹' a R⁶ nejsou všechny atom vodíku a (ii) R⁵, R⁵', R⁹, R⁹' jsou atom vodíku a R⁶ představuje methoxy;

·· 4444

- 152 ·· 44 • 4 · • « · • 4 ··· *4 • · 4 • 4 4 • 4 4 • · 4 s další podmínkou, že pokud R¹ představuje 3,5-difluorfenyl, R² představuje methyl, X' a X představují atom vodíku, Z je skupina, která kovalentně váže R¹ k -CX'X-, m je rovno nule, R³ představuje atom vodíku, R³' je -(R⁷)_n(W)_p, kde n je rovno jedné a p je rovno jedné, R⁷ představuje ethylen a W představuje

R⁹ R⁵

R⁹' R⁵' potom R⁵, R⁵', R⁹, R⁹' a R⁶ nepředstavují všechny atom vodíku; a s další podmínkou, že pokud R¹ představuje 3,5-difluorfenyl, R² představuje methyl, X' a X představují atom vodíku, Z je skupina, která kovalentně váže R¹ k -CX’X”- a m je rovno nule, R³ představuje atom vodíku, R³' je ~(R⁷)n(W)_p, kde n je rovno nule a p je rovno jedné, W představuje a R⁵', R⁹, R⁹' jsou atom vodíku, potom R⁵ a R⁶ nejsou kondenzovány aby vytvářely s fenylovým kruhem, ke kterému jsou připojeny, ftalimidovou skupinu.

·· · • · · 0 «· 00

- 153 ···· 00 ··*·

23. Sloučenina nebo směs sloučenin podle nároku 22 pro použití jako léčivo pro prevenci vzniku Alzheimerovy nemoci u pacienta s rizikem vzniku Alzheimerovy nemoci, obecného vzorce I:

X' 0 r^!z . CX .NH ^C.

nr³r³' ve kterém R¹ je zvolen ze souboru, zahrnujícího

a) alkyl, alkenyl, alkaryl, alkcykloalkyl, aryl, cykloalkyl, cykloalkenyl, heteroaryl a heterocyklický systém, kde heteroaryl nebo heterocyklická skupina jsou popřípadě substituovány 1 až 3 substituenty, zvolenými ze souboru, zahrnujícího alkyl, alkoxy, aryl, aryloxy, atom halogenu, skupiny nitro, thioalkoxy a thioaryloxy;

(b) substituovanou fenylovou skupinu obecného vzorce II

R^b' R^a

II

Ř^b

R^a ve kterém R představuje alkylen, obsahující od 1 do 8 atomů uhlíku, m je celé číslo, které se rovná 0 nebo 1,

R^a a R^a’ jsou nezávisle zvoleny ze souboru, zahrnujícího atom vodíku, skupinu hydroxy, atom fluoru a methyl;

• ·

- 154 • ···<

* · • · · ·

R^b a R^b' jsou nezávisle zvoleny ze souboru, zahrnujícího atom vodíku, alkyl, alkoxy, aryl, aryloxy, skupiny kyano, cykloalkyl, atom halogenu, heteroaryl, heteroaryloxy, heterocyklický systém, skupiny nitro, trihalogenmethyl, thioalkoxy, thioaryloxy, thioheteroaryloxy a -C(O)R⁴, kde R⁴ je zvolen ze souboru, zahrnujícího alkyl, aryl, alkoxy a aryloxy; a

R^c je zvolen ze souboru, zahrnujícího atom vodíku, alkyl, aryl, skupinu kyano, atom halogenu, skupinu nitro a kde R^b a R^c jsou k sobě kondenzovány a vytvářejí methylendioxy kruh s fenylovým kruhem; a pokud R^b a/nebo R^b' a/nebo R^c je atom fluoru, atom chloru, atom bromu a/nebo skupina nitro, potom R^a a/nebo R^a' mohou také představovat atom chloru; a (c) 1- nebo 2-naftyl substituovaný v poloze 5, 6, 7 a/nebo 8 jedním až čtyřmi substituenty, zvolenými ze souboru, zahrnujícího alkyl, alkoxy, atom halogenu, skupiny kyano, nitro, trihalogenmethyl a thioalkoxy;

R² je zvolen ze souboru, zahrnujícího atom vodíku, alkyl, obsahující od 1 do 4 atomů uhlíku, alkylalkoxy, obsahující od 1 do 4 atomů uhlíku, alkylthioalkoxy, obsahující od 1 do 4 atomů uhlíku; a

R³ a R³' jsou nezávisle zvoleny ze souboru, zahrnujícího:

(a) atom vodíku s tou podmínkou, že oba substituenty R³ a R³' nemohou představovat atom vodíku;

(b) alkyl s tou podmínkou, že pokud R³ představuje atom vodíku, potom alkylová skupina R³' má přímý uhlíkový řetězec o délce alespoň 5 atomů uhlíku od atomu dusíku, přičemž řetězec může být popřípadě substituován jednou nebo více alkylovými skupinami a s další podmínkou, že pokud oba substituenty R³ a R³' jsou alkyl, potom alespoň jedna alkylová skupina má uhlíkový řetězec délky alespoň 5 atomů uhlíku, přičemž řetězec může být popřípadě substituován jednou nebo více alkylovými skupinami;

(c) -(R⁷)_n(W)p, kde R⁷ představuje alkylenovou skupinu, W je zvolen ze souboru, zahrnujícího:

(i) kde R⁵, R⁵', R⁹ a R⁹' jsou nezávisle zvoleny ze souboru, zahrnujícího atom vodíku, hydroxyl, alkyl, substituovaný alkyl, alkoxy, substituovanou skupinu alkoxy, amino, alkylamino, dialkylamino, aryl, acyl, acylamino, acyloxy, aminoacyl, skupinu kyano, cykloalkyl, atom halogenu, karboxyl, karboxylové estery, heteroaryl a heterocyklický systém, a

R⁶ je zvolen ze souboru, zahrnujícího atom vodíku, hydroxyl, alkyl, substituovaný alkyl, amino, alkylamino, dialkylamino, aryl, acyl, acylamino, acyloxy, alkoxy, substituovanou skupinu alkoxy, aminoacyl, skupinu kyano, cykloalkyl, atom halogenu, karboxyl, karboxylové estery, heteroaryl, heterocyklický systém a kde R⁶ a jeden ze substituentů R⁵ nebo R⁵' jsou kondenzovány a vytváří heterocyklický kruh obsahující 4 až 10 atomů, který má 1 až 3 heteroatomy, zvolené ze souboru, zahrnujícího atom kyslíku, atom dusíku a atom síry;

s tou podmínkou, že pokud n je rovno nule, R⁹ a R⁹' představují atom vodíku;

(ii) heteroaryl; a (iii) N-heterocyklický systém, s tou podmínkou, že pokud W je Nheterocyklický systém, potom n není rovno nule; a n je celé číslo, které se rovná 0 nebo 1, a p je celé číslo, které se rovná 1 až 3 s tou podmínkou, že pokud n je rovno nule potom p je rovno 1, a (d) -CH(Φ) CH₂C(O)O-Q, kde Q je zvolen ze souboru, zahrnujícího alkyl, aryl, heteroaryl a heterocyklický systém

- 156 •9 94 ► · · 9 •9 « • ·· · ·· ···· 9 9 9 494

44 99 • 9 9 9 • 9 4 4 • · 9 4 • 4 9 9 ·· 49

X' představuje atom vodíku, skupinu hydroxy nebo atom fluoru;

X představuje atom vodíku, skupinu hydroxy nebo atom fluoru nebo X' a X spolu vytvářejí oxo skupinu,

Z je zvolen ze souboru, zahrnujícího kovalentní vazbu, která váže R¹ k -CX'X-, atom kyslíku a atom síry; a s tou podmínkou, že pokud R¹ představuje fenyl, R² představuje methyl, X' a X představují atom vodíku, Z je skupina, která kovalentně váže R¹ k -CX'X-, m je rovno nule, R³ představuje atom vodíku, R³' je -(R⁷)n(W)_p, kde n je rovno nule a p je rovno jedné a W představuje potom (i) R⁵, R⁵', R⁹, R⁹' a R⁶ nejsou všechny atom vodíku a (ii) R⁵, R⁵', R⁹, R⁹' jsou atom vodíku a R⁶ představuje methoxy; s další podmínkou, že pokud R¹ představuje 3,5-difluorfenyl, R² představuje methyl, X' a X představují atom vodíku, Z je skupina, která kovalentně váže R¹ k -CX'X-, m je rovno nule, R³ představuje atom vodíku, R³' je ~(R⁷)_n(W)_p, kde n je rovno jedné a p je rovno jedné, R⁷ představuje ethylen a W představuje

- 157 • 4 ·· • · · · • · · • ·*· 4 • 4 ···· 44 *· »>··· • 4 • · 44 • 44 ·· ·· • · · 4 • · · 4 • · 4 4 • · · · ·· 44

R⁹' R⁵' potom R⁵, R⁵', R⁹, R⁹' a R⁶ nepředstavují všechny atom vodíku; a s další podmínkou, že pokud R¹ představuje 3,5-difluorfenyl, R² představuje methyl, X' a X představují atom vodíku, Z je skupina, která kovalentně váže R¹ k -CX'X- a m je rovno nule, R³ představuje atom vodíku, R³' je -(R⁷)_n(W)_p, kde n je rovno nule a p je rovno jedné, W představuje

R⁹ R^s

R⁶ a R⁵', R⁹, R⁹' jsou atom vodíku, potom R⁵ a R⁶ nejsou kondenzovány aby vytvářely s fenylovým kruhem, ke kterému jsou připojeny, ftalimidovou skupinu.

4« * 4 •

····

- 158 » 4 ··· •4 44·· • 4 · • · 444 • · 9 ·· 99 • · · φ • ·· 4 • · 4 4 • 4 4 · ·· 44

24. Sloučenina nebo směs sloučenin podle nároku 22 pro použití jako léčivo pro léčení pacienta trpícího Alzheimerovou nemocí pro inhibici dalšího zhoršování stavu uvedeného pacienta, obecného vzorce I:

X'

R‘Z .CX .NH

CH nr³r³' q

ve kterem R je zvolen ze souboru, zahrnujícího

a) alkyl, alkenyl, alkaryl, alkcykloalkyl, aryl, cykloalkyl, cykloalkenyl, heteroaryl a heterocyklický systém, kde heteroaryl nebo heterocyklická skupina jsou popřípadě substituovány 1 až 3 substituenty, zvolenými ze souboru, zahrnujícího alkyl, alkoxy, aryl, aryloxy, atom halogenu, skupiny nitro, thioalkoxy a thioaryloxy;

(b) substituovanou fenylovou skupinu obecného vzorce II

R^b' R^a'

RHfoV(R)_mII

R^b

R^a ve kterém R představuje alkylen, obsahující od 1 do 8 atomů uhlíku, • · · ·

- 159 - ·· 9· • « · · • · · * * · * · ί « · · « m je celé číslo, které se rovná 0 nebo 1,

R^a a R^a' jsou nezávisle zvoleny ze souboru, zahrnujícího atom vodíku, skupinu hydroxy, atom fluoru a methyl;

R^b a R^b' jsou nezávisle zvoleny ze souboru, zahrnujícího atom vodíku, alkyl, alkoxy, aryl, aryloxy, skupiny kyano, cykloalkyl, atom halogenu, heteroaryl, heteroaryloxy, heterocyklický systém, skupiny nitro, trihalogenmethyl, thioalkoxy, thioaryloxy, thioheteroaryloxy a -C(O)R⁴, kde R⁴ je zvolen ze souboru, zahrnujícího alkyl, aryl, alkoxy a aryloxy; a

R^c je zvolen ze souboru, zahrnujícího atom vodíku, alkyl, aryl, skupinu kyano, atom halogenu, skupinu nitro a kde R^b a R^c jsou k sobě kondenzovány a vytvářejí methylendioxy kruh s fenylovým kruhem; a pokud R^b a/nebo R^b' a/nebo R^c je atom fluoru, atom chloru, atom bromu a/nebo skupina nitro, potom R^a a/nebo R^a' mohou také představovat atom chloru; a (c) 1- nebo 2-naftyl substituovaný v poloze 5, 6, 7 a/nebo 8 jedním až čtyřmi substituenty, zvolenými ze souboru, zahrnujícího alkyl, alkoxy, atom halogenu, skupiny kyano, nitro, trihalogenmethyl a thioalkoxy;

R² je zvolen ze souboru, zahrnujícího atom vodíku, alkyl, obsahující od 1 do 4 atomů uhlíku, alkylalkoxy, obsahující od 1 do 4 atomů uhlíku, alkylthioalkoxy, obsahující od 1 do 4 atomů uhlíku; a

R³ a R³' jsou nezávisle zvoleny ze souboru, zahrnujícího:

(a) atom vodíku s tou podmínkou, že oba substituenty R³ a R³' nemohou představovat atom vodíku;

(b) alkyl s tou podmínkou, že pokud R³ představuje atom vodíku, potom alkylová skupina R³' má přímý uhlíkový řetězec o délce alespoň 5 atomů uhlíku od atomu dusíku, přičemž řetězec může být popřípadě substituován jednou nebo více alkylovými skupinami a s další podmínkou, že pokud oba substituenty R³ a R³' jsou alkyl, potom alespoň jedna alkylová skupina má uhlíkový řetězec délky alespoň 5 atomů uhlíku, přičemž řetězec může být popřípadě substituován jednou nebo více alkylovými skupinami;

• · « ··

- 160 Íí · · · ·» (c) -(R⁷)_n(W)_p, kde R⁷ představuje alkylenovou skupinu, W je zvolen ze souboru, zahrnujícího:

(i) kde R⁵, R⁵', R⁹ a R⁹' jsou nezávisle zvoleny ze souboru, zahrnujícího atom vodíku, hydroxyl, alkyl, substituovaný alkyl, alkoxy, substituovanou skupinu alkoxy, amino, alkylamino, dialkylamino, aryl, acyl, acylamino, acyloxy, aminoacyl, skupinu kyano, cykloalkyl, atom halogenu, karboxyl, karboxylové estery, heteroaryl a heterocyklický systém, a

R⁶ je zvolen ze souboru, zahrnujícího atom vodíku, hydroxyl, alkyl, substituovaný alkyl, amino, alkylamino, dialkylamino, aryl, acyl, acylamino, acyloxy, alkoxy, substituovanou skupinu alkoxy, aminoacyl, skupinu kyano, cykloalkyl, atom halogenu, karboxyl, karboxylové estery, heteroaryl, heterocyklický systém a kde R⁶ a jeden ze substituentů R⁵ nebo R⁵' jsou kondenzovány a vytváří heterocyklický kruh obsahující 4 až 10 atomů, který má 1 až 3 heteroatomy, zvolené ze souboru, zahrnujícího atom kyslíku, atom dusíku a atom síry;

s tou podmínkou, že pokud n je rovno nule, R⁹ a R⁹' představují atom vodíku;

(ii) heteroaryl; a (iii) N-heterocyklický systém, s tou podmínkou, že pokud W je Nheterocyklický systém, potom n není rovno nule; a n je celé číslo, které se rovná 0 nebo 1, a p je celé číslo, které se rovná 1 až 3 s tou podmínkou, že pokud n je rovno nule potom p je rovno 1, a i

- 161 9· ·· ♦····· tt· ·· k · · · ··· ··· • · · * ···· · ·· • ···«· « ·«· « · · • ··« · «··· ·>·· · · ·· ··· W · ·· (d) -CH(Φ) CH₂C(O)0-Q, kde Q je zvolen ze souboru, zahrnujícího alkyl, aryl, heteroaryl a heterocyklický systém X' představuje atom vodíku, skupinu hydroxy nebo atom fluoru;

X představuje atom vodíku, skupinu hydroxy nebo atom fluoru nebo X' a X spolu vytvářejí oxo skupinu,

Z je zvolen ze souboru, zahrnujícího kovalentní vazbu, která váže R¹ k -CX'X-, atom kyslíku a atom síry; a s tou podmínkou, že pokud R¹ představuje fenyl, R² představuje methyl, X' a X představují atom vodíku, Z je skupina, která kovalentně váže R¹ k -CX'X-, m je rovno nule, R³ představuje atom vodíku, R³' je - (R⁷)n(W)_p, kde n je rovno nule a p je rovno jedné a W představuje potom (i) R⁵, R⁵', R⁹, R⁹' a R⁶ nejsou všechny atom vodíku a (ii) R⁵, R⁵ , R⁹, R⁹ jsou atom vodíku a R⁶ představuje methoxy; s další podmínkou, že pokud R¹ představuje 3,5-difluorfenyl, R² představuje methyl, X' a X představují atom vodíku, Z je skupina, která kovalentně váže R¹ k -CX'X-, m je rovno nule, R³ představuje atom vodíku, R³' je ~(R⁷)_n(W)_p, kde n je rovno jedné a p je rovno jedné, R⁷ představuje ethylen a W představuje

0 0 00

0 0 0 0 0

0 · · 0

9 ··· 0 *

0 0 ·

0 0 0 0 0 0 • · 9 0 0 0

- 162 0 »0

00 «0

0 · 0 *

0 »0 I

0 0 0 0 9

0 0 0 0

0 0 «0

R⁹ R⁵

O^_R‘

R⁹' R⁵' potom R⁵, R⁵ , R⁹, R⁹ a R⁶ nepředstavují všechny atom vodíku; a s další podmínkou, že pokud R¹ představuje 3,5-difluorfenyl, R² představuje methyl, X’ a X představují atom vodíku, Z je skupina, která kovalentně váže R¹ k -CX’X”- a m je rovno nule, R³ představuje atom vodíku, R³' je -(R⁷)_n(W)_p, kde n je rovno nule a p je rovno jedné, W představuje

R⁹ R⁵

R⁶ a R⁵', R⁹, R⁹' jsou atom vodíku, potom R⁵ a R⁶ nejsou kondenzovány aby vytvářely s fenylovým kruhem, ke kterému jsou připojeny, ftalimidovou skupinu.

25. Sloučenina podle nároku 22, 23 nebo 24, pro použití jako léčivo, kde R¹ představuje nesubstituovanou arylovou skupinu.

26. Sloučenina podle nároku 25, pro použití jako léčivo, kde nesubstituovaná R¹ arylová skupina je zvolena ze souboru, zahrnujícího fenyl, 1-naftyl a 2-naftyl.

- 163 φ Φ φ» • φ φ ·

Φφ · φ φφφφ φ φ φ φ φ Φ · φ

Φ φφφ φ φφφφ φ» · · φ·φ

Φ Φ φ

φ φ φ » φ Φ Φ Φ φ φ φ φ φ β- φφ

27. Sloučenina podle nároku 22, 23 nebo 24, pro použití jako léčivo, kde že R¹ představuje substituovanou arylovou skupinu.

28. Sloučenina podle nároku 27, pro použití jako léčivo, kde substituované arylové skupiny jsou substituované fenylové skupiny definované následujícím způsobem:

(a) monosubstituované fenyly, které mají jednoduchou substituci v poloze 2, 3 nebo 4, přičemž každý z jednotlivých substituentů je dán odpovídajícími skupinami R^a, R^b a R^c;

0) disubstituované fenyly, které mají dva substituenty v polohách

2.3, v polohách 2,4, v polohách 2,5, v polohách 2,6, v polohách

3.4, v polohách 3,5 nebo v polohách 3,6, přičemž každý ze substituentů je dán odpovídajícími skupinami R^a, R^a', R^b, R^b' a R^c; a (c) trisubstituované fenyly, které mají tři substituenty v polohách 2,3,4, v polohách 2,3,5, v polohách 2,3,6, v polohách 3,4,5 a v polohách 3,4,6, přičemž každý ze substituentů je dán odpovídajícími skupinami R^a, R^a', R^b, R^b' a R^c.

29. Sloučenina podle nároku 28, pro použití jako léčivo, kde substituované fenylové skupiny jsou zvoleny ze souboru, zahrnujícího 4-fluorfenyl, 4-chlorfenyl, 4-bromfenyl, 4nitrofenyl, 4-methylfenyl, 3-methoxyfenyl, 3-nitrofenyl, 3fluorfenyl, 3-chlorfenyl, 3-bromfenyl, 3-thiomethoxy-fenyl, 3methylfenyl, 3-trifluormethylfenyl, 2-hydroxyfenyl, 2methylfenyl, 2-fluorfenyl, 3,4-dichlorfenyl, 3,4methylendioxyfenyl, 3,5-difluorfenyl, 3,5-dichlorfenyl, 2,4dichlorfenyl a 2,5-difluorfenyl.

30. Sloučenina podle nároku 22, 23 nebo 24, pro použití jako léčivo, kde R¹ představuje alkarylovou skupinu.

• * · · • 0 0 9 • · ·

9 Μ» ζ • 0

449 4 4 9 » 9

9 9 9 0

- 164 0 0 9 9 • · 4 4

4 9 4 9

9 9 0 9

9 0 0 9

44 09

31. Sloučenina podle nároku 30, pro použití jako léčivo, kde R¹ alkarylová skupina je zvolena ze souboru, zahrnujícího benzyl, fenylethyl, 3-fenyl-n-propyl a 4-fenyl-n-butyl.

32. Sloučenina podle nároku 22, 23 nebo 24, pro použití jako léčivo, kde že R¹ je zvolen ze souboru, zahrnujícího alkylové, alkenylové, cykloalkylové a cykloalkenylové skupiny.

33. Sloučenina podle nároku představuje alkyl. 32, pro použití jako léčivo, kde R¹ 34. Sloučenina podle nároku představuje cykloalkyl. 32, pro použití jako léčivo, kde R¹ 35. Sloučenina podle nároku představuje alkenyl. 32, pro použití jako léčivo, kde R¹ 36. Sloučenina podle nároku představuje cykloalkenyl. 32, pro použití jako léčivo, kde R¹ 37. Sloučenina podle nároku 32, pro použití j ako léčivo, kde R¹ alkylové, cykloalkylové, alkenylové a cykloalkenylové skupiny

jsou zvoleny ze souboru, zahrnujícího sek.-butyl, cyklopropyl, cyklobutyl, cyklohexyl, cyklopentyl, cyklohex-l-enyl, -CH₂cyklopropyl, -CH₂-cyklobutyl, -CH₂-cyklohexyl, -CH₂-cyklopentyl, CH₂CH₂-cyklopropyl, -CH₂CH₂-cyklobutyl, -CH₂CH2-cyklohexyl a CH₂CH₂-cyklopentyl.

38. Sloučenina podle nároku 22, 23 nebo 24, pro použití jako léčivo, kde R¹ je zvolen ze souboru, zahrnujícího heteroarylové a substituované heteroarylové skupiny.

39. Sloučenina podle nároku 38, pro použití jako léčivo, kde R¹ heteroarylové a substituované heteroarylové skupiny jsou zvoleny ze souboru, zahrnujícího pyrid-3-yl, pyrid-4-yl, thiofen-2-yl,

9 9 * 9

- 165 • · · β • 999 9 9 9 9 •9 9 9 99·· « 99 9 • «99 99 * 999 99 9 • · 9 · 999 0 9

9···«· 99999 99 99 thiofen-3-yl, benzothiazol-4-yl, 2-fenylbenzoxazol-5-yl, furan-2yl, benzofuran-2-yl, thionaften-2-yl, 2-chlorthiofen-5-yl, 3methylisoxazol-5-yl, 2-(thiofenyl)thiofen-5-yl, 6methoxythionaften-2-yl, 3-fenyl-l,2,4-thiooxadiazol~5-yl a 2fenyloxazol-4-yl.

40. Sloučenina podle nároku 22, 23 nebo 24, pro použití jako léčivo, kde R² je zvolen ze souboru, zahrnujícího alkyl, obsahující od 1 do 4 atomů uhlíku, alkylalkoxy, obsahující od 1 do 4 atomů uhlíku a alkylthioalkoxy, obsahující od 1 do 4 atomů uhlíku.

41. Sloučenina podle nároku 40, pro použití jako léčivo, kde R² je zvolen ze souboru, zahrnujícího methyl, ethyl, n-propyl, isopropyl, n-butyl, iso-butyl a -CH2CH2SCH3.

42. Sloučenina podle nároku 22, 23 nebo 24, pro použití jako léčivo, kde X' a X představují oba atom vodíku a Z představuje kovalentní vazbu, která váže R¹ k -CX'X-.

43. Sloučenina podle nároku 42, pro použití jako léčivo, kde R³ představuje atom vodíku a R³' je zvolen ze souboru, zahrnujícího 3-hydroxyfenyl, 3-methoxyfenyl, 3-ethoxykarbonylfenyl, n-hexyl, n-oktyl, 4-ethoxykarbonylfenyl, 4-methoxykarbonylfenyl, 3chlorfenyl, 3-kyanofenyl, 3,5-dichlorfenyl, -CH(CH₃)<E> (R stereoisomer), -0Η(0Η₃)Φ (S stereoisomer), ftalid-6-yl, 2hydroxypyrid-3-yl, 2-(methoxykarbonylmethyl)benzyl, 3(methoxykarbonyl)benzyl, 2-(2'-methoxykarbonylmethylfenyl)benzyl a 2-fenylbenzyl.

44. Sloučenina obecného vzorce I podle nároků 22, 23 nebo 24, pro použití jako léčivo zvolená ze souboru, zahrnujícího:

N-(3-hydroxyfenyl)-N'-(fenylacetyl)-L-alaninamid • · ···· • ·

- 166 • 4 · 4 ·

4 · · a φ ··· · · • · * • · · · · » «

99 ·· • · 9 9 » · · 9 ·

9 9 9 9 9 9

9 0 9 9 9 ft «4 · 0

Ν-(3-methoxyfenyl)-Ν' -(fenylacetyl)-L-alaninamid

N-(3-ethoxyfenyl)-Ν' -(fenylacetyl)-L-alaninamid

N-(4-ethoxykarbonylfenyl)-Ν' -(fenylacetyl)-L-alaninamid

N-(n-hexyl)-Ν' -(3,5-difluorfenylacetyl)-L-alaninamid

N-(n-oktyl)-Ν' -(3,5-difluorfenylacetyl)-L-alaninamid

N-(3-methoxyfenyl)-Ν' -(3,5-difluorfenylacetyl)-L-alaninamid

N-(4-ethoxykarbonylfenyl)-Ν' -(3,5-difluorfenylacetyl)-Lalaninamid

N-(3-ethoxykarbonylfenyl)-Ν' -(3,5-difluorfenylacetyl)-Lalaninamid

N-(3-chlorfenyl)-Ν' -(3,5-difluorfenylacetyl)-L-alaninamid

N-(3,5-dichlorfenyl)-Ν' -(3,5-difluorfenylacetyl)-L-alaninamid

N-(3-kyanofenyl)-N'-(3,5-difluorfenylacetyl)-L-alaninamid

N-(ftalid-6-yl)-Ν' -(3,5-difluorfenylacetyl)-L-alaninamid

N-[(4-methoxykarbonylfenyl)methyl]-N'-(3,5-difluorfenylacetyl)-Lalaninamid

N-(1-kyano-l-fenylmethyl)-Ν' -(3,5-difluorfenylacetyl)-Lalaninamid

N-[(R)-1-fenylethyl]-Ν' -(3,5-difluorfenylacetyl)-L-alaninamid

N-[(S)-1-fenylethyl]-N'-(3,5-difluorfenylacetyl)-L-alaninamid

- 167 •0 ·· · 0 9 99 9 99 99 • 9 9 9 9 · 9 «000 • 0 > · · 0 · 0 0 9 9 0 * 0000« 0 0 0« 0 0 0 • · 00 0 0000 •00000 0 0 000 0 · 00

Ν-[2-hydroxypyridin-3-yl]-Ν'-(3,5-difluorfenylacetyl)-Lalaninamid

Ν-[2-methoxykarbonyl-l-fenylethyl]-Ν' -(3,5-difluorfenylacetyl)-L alaninamid

Ν-[a-pyridin-2-yl-benzyl]-Ν' -(3,5-difluorfenylacetyl)-Lalaninamid

N-[1-(N-ftalamido)pent-2-yl]-N’ - (3,5-difluorfenylacetyl)-Lalaninamid

N-[2-(methoxykarbonylmethyl)benzyl]-N’- (3,5-difluorfenylacetyl)L-alaninamid

N-[3-(methoxykarbonyl)benzyl]-N'-(3,5-difluorfenylacetyl)-Lalaninamid

N-[2-(2’-methoxykarbonylmethylfenyl)benzyl]-Ν' -(3,5difluorfenylacetyl)-L-alaninamid

N-[2-fenylbenzyl]-Ν' -(3,5-difluorfenylacetyl)-L-alaninamid.

45. Farmaceutická kompozice, obsahující farmaceuticky inertní nosič a farmaceuticky účinné množství sloučeniny obecného vzorce

I:

« · • · fc « fc··

- 168 R‘Z

X

I .cx

C'

II o

NH.

CH

NR³R³'

R² ve kterém R¹ je zvolen ze souboru, zahrnujícího

a) alkyl, alkenyl, alkaryl, alkcykloalkyl, aryl, cykloalkyl, cykloalkenyl, heteroaryl a heterocyklický systém, kde heteroaryl nebo heterocyklická skupina jsou popřípadě substituovány 1 až 3 substituenty, zvolenými ze souboru, zahrnujícího alkyl, alkoxy, aryl, aryloxy, atom halogenu, skupiny nitro, thioalkoxy a thioaryloxy;

(b) .substituovanou fenylovou skupinu obecného vzorce II

R^b R^a'

II ve kterém R představuje alkylen, obsahující od 1 do 8 atomů uhlíku, m je celé číslo, které se rovná 0 nebo 1,

R^a a R^a' jsou nezávisle zvoleny ze souboru, zahrnujícího atom vodíku, skupinu hydroxy, atom fluoru a methyl;

R^b a R^b' jsou nezávisle zvoleny ze souboru, zahrnujícího atom vodíku, alkyl, alkoxy, aryl, aryloxy, skupiny kyano, cykloalkyl, atom halogenu, heteroaryl, heteroaryloxy, heterocyklický systém, skupiny nitro, trihalogenmethyl, thioalkoxy, thioaryloxy, • 0

0 0 • 0

0 0

0 0 0 0 • 0

0 0 0 0 0

0 0

- 169 0 • 0 · 0 ·0

0 0· 0

0 0 0 0

0 0 0 0 thioheteroaryloxy a -C(O)R⁴, kde R⁴ je zvolen ze souboru, zahrnujícího alkyl, aryl, alkoxy a aryloxy; a

R^c je zvolen ze souboru, zahrnujícího atom vodíku, alkyl, aryl, skupinu kyano, atom halogenu, skupinu nitro a kde R^b a R^c jsou k sobě kondenzovány a vytvářejí methylendioxy kruh s fenylovým kruhem; a pokud R^b a/nebo R^b' a/nebo R^c je atom fluoru, atom chloru, atom bromu a/nebo skupina nitro, potom R^a a/nebo R^a' mohou také představovat atom chloru; a (c) 1- nebo 2-naftyl substituovaný v poloze 5, 6, 7 a/nebo 8 jedním až čtyřmi substituenty, zvolenými ze souboru, zahrnujícího alkyl, alkoxy, atom halogenu, skupiny kyano, nitro, trihalogenmethyl a thioalkoxy;

R² je zvolen ze souboru, zahrnujícího atom vodíku, alkyl, obsahující od 1 do 4 atomů uhlíku, alkylalkoxy, obsahující od 1 do 4 atomů uhlíku, alkylthioalkoxy, obsahující od 1 do 4 atomů uhlíku; a

R³ a R³' jsou nezávisle zvoleny ze souboru, zahrnujícího:

(a) atom vodíku s tou podmínkou, že oba substituenty R³ a R³' nemohou představovat atom vodíku;

(b) alkyl s tou podmínkou, že pokud R³ představuje atom vodíku, potom alkylová skupina R³' má přímý uhlíkový řetězec o délce alespoň 5 atomů uhlíku od atomu dusíku, přičemž řetězec může být popřípadě substituován jednou nebo více alkylovými skupinami a s další podmínkou, že pokud oba substituenty R³ a R³' jsou alkyl, potom alespoň jedna alkylová skupina má uhlíkový řetězec délky alespoň 5 atomů uhlíku, přičemž řetězec může být popřípadě substituován jednou nebo více alkylovými skupinami;

(c) -(R⁷)n(W)_p, kde R⁷ představuje alkylenovou skupinu, W je zvolen ze souboru, zahrnujícího:

(i) kde R⁵, R⁵', R⁹ a R⁹' jsou nezávisle zvoleny ze souboru, zahrnujícího atom vodíku, hydroxyl, alkyl, substituovaný alkyl, alkoxy, substituovanou skupinu alkoxy, amino, alkylamino, dialkylamino, aryl, acyl, acylamino, acyloxy, aminoacyl, skupinu kyano, cykloalkyl, atom halogenu, karboxyl, karboxylové estery, heteroaryl a heterocyklický systém, a

R⁶ je zvolen ze souboru, zahrnujícího atom vodíku, hydroxyl, alkyl, substituovaný alkyl, amino, alkylamino, dialkylamino, aryl, acyl, acylamino, acyloxy, alkoxy, substituovanou skupinu alkoxy, aminoacyl, skupinu kyano, cykloalkyl, atom halogenu, karboxyl, karboxylové estery, heteroaryl, heterocyklický systém a kde R⁶ a jeden ze substituentů R⁵ nebo R⁵' jsou kondenzovány a vytváří heterocyklický kruh obsahující 4 až 10 atomů, který má 1 až 3 heteroatomy, zvolené ze souboru, zahrnujícího atom kyslíku, atom dusíku a atom síry;

s tou podmínkou, že pokud n je rovno nule, R⁹ a R⁹' představují atom vodíku;

(ii) heteroaryl; a (iii) N-heterocyklický systém, s tou podmínkou, že pokud W je Nheterocyklický systém, potom n není rovno nule; a n je celé číslo, které se rovná 0 nebo 1, a p je celé číslo, které se rovná 1 až 3 s tou podmínkou, že pokud n je rovno nule potom p je rovno 1, a (d) -CH(Φ) CH2C(O)O-Q, kde Q je zvolen ze souboru, zahrnujícího alkyl, aryl, heteroaryl a heterocyklický systém X' představuje atom vodíku, skupinu hydroxy nebo atom fluoru;

• φ

ΦΦ· 1 • 9 • ·

- 171 11 11 9 1 9

11 1

11 9

11 1

X představuje atom vodíku, skupinu hydroxy nebo atom fluoru nebo X' a X spolu vytvářejí oxo skupinu,

Z je zvolen ze souboru, zahrnujícího kovalentní vazbu, která váže R¹ k -CX'X-, atom kyslíku a atom síry; a s tou podmínkou, že pokud R¹ představuje fenyl, R² představuje methyl, X' a X představují atom vodíku, Z je skupina, která kovalentně váže R¹ k -CX’X-, m je rovno nule, R³ představuje atom vodíku, R³' je ~(R⁷)_n(W)_p, kde n je rovno nule a p je rovno jedné a W představuje potom (i) R⁵, R⁵', R⁹, R⁹' a R⁶ nejsou všechny atom vodíku a (ii) R⁵, R⁵', R⁹, R⁹' jsou atom vodíku a R⁶ představuje methoxy; s další podmínkou, že pokud R¹ představuje 3,5-difluorfenyl, R² představuje methyl, X' a X představují atom vodíku, Z je skupina, která kovalentně váže R¹ k -CX'X”-, m je rovno nule, R³ představuje atom vodíku, R³' je -(R⁷)_n(W)_p, kde n je rovno jedné a p je rovno jedné, R⁷ představuje ethylen a W představuje

R⁹' R⁵ potom R⁵, R⁵', R⁹, R⁹' a R⁶ nepředstavují všechny atom vodíku; a s další podmínkou, že pokud R¹ představuje 3,5-difluorfenyl, R² představuje methyl, X' a X představují atom vodíku, Z je skupina, která kovalentně váže R¹ k -CX'X~ a m je rovno nule, R³ představuje atom vodíku, R³' je -(R⁷)_n(W)_p, kde n je rovno nule a p je rovno jedné, W představuje

R⁹ R⁵

R⁶ a R⁵', R⁹, R⁹' jsou atom vodíku, potom R⁵ a R⁶ nejsou kondenzovány aby vytvářely s fenylovým kruhem, ke kterému jsou připojeny, ftalimidovou skupinu.

45. Farmaceutická kompozice podle nároku 45, vyznačující se tím, že R¹ představuje nesubstituovanou arylovou skupinu.

- 173 4

444

4 4 4·* 4

4 4 4 444 • 4 44

4 4 4

4 4 4

4 4 4 • 4 4

47. Farmaceutická kompozice podle nároku 46, vyznačující se tím, že nesubstituovaná R¹ arylová skupina je zvolena ze souboru, zahrnujícího fenyl, 1-naftyl a 2-naftyl.

48. Farmaceutická kompozice podle nároku 45, vyznačující se tím, že R¹ představuje substituovanou arylovou skupinu.

49. Farmaceutická kompozice podle nároku 48, vyznačující se tím, že substituované arylové skupiny jsou substituované fenylové skupiny definované následujícím způsobem:

(a) monosubstituované fenyly, které mají jednoduchou substituci v poloze 2, 3 nebo 4, přičemž každý z jednotlivých substituentů je dán odpovídajícími skupinami R^a, R^b a R^c;

0) disubstituované fenyly, které mají dva substituenty v polohách

2.3, v polohách 2,4, v polohách 2,5, v polohách 2,6, v polohách

3.4, v polohách 3,5 nebo v polohách 3,6, přičemž každý ze substituentů je dán odpovídajícími skupinami R^a, R^a', R^b, R^b' a R^c; a (c) trisubstituované fenyly, které mají tři substituenty v polohách 2,3,4, v polohách 2,3,5, v polohách 2,3,6, v polohách 3,4,5 a v polohách 3,4,6, přičemž každý ze substituentů je dán odpovídajícími skupinami R^a, R^a', R^b, R^b' a R^c.

50. Farmaceutická kompozice podle nároku 49, vyznačující se tím, že substituované fenylové skupiny jsou zvoleny ze souboru, zahrnujícího 4-fluorfenyl, 4-chlorfenyl, 4-bromfenyl, 4nitrofenyl, 4-methylfenyl, 3-methoxyfenyl, 3-nitrofenyl, 3fluorfenyl, 3-chlorfenyl, 3-bromfenyl, 3-thiomethoxy-fenyl, 3methylfenyl, 3-trifluormethylfenyl, 2-hydroxyfenyl, 2methylfenyl, 2-fluorfenyl, 3,4-dichlorfenyl, 3,4methylendioxyfenyl, 3,5-difluorfenyl, 3,5-dichlorfenyl, 2,4dichlorfenyl a 2,5-difluorfenyl.

51. Farmaceutická kompozice podle nároku 45, vyznačující se tím, že R¹ představuje alkarylovou skupinu.

·· ····

- 174 • ftft · · • ftft ftft ft ··· ftft · • · · · • ftft ftft ftft • ft ·· • ftft·· ·♦· ft « · · • ♦ · ftft · • · ft · ft ··· ftft ··

52. Farmaceutická kompozice podle nároku 51, vyznačující se tím, že R¹ alkarylová skupina je zvolena ze souboru, zahrnujícího benzyl, fenylethyl, 3-fenyl-n-propyl a 4-fenyl-n-butyl.

53. Farmaceutická kompozice podle nároku 45, vyznačující se tím, že R¹ je zvolen ze souboru, zahrnujícího alkylové, alkenylové, cykloalkylové a cykloalkenylové skupiny.

54. Farmaceutická kompozice podle nároku 53, vyznačující se tím, že R¹ představuje alkyl.

55. Farmaceutická kompozice podle nároku 53, vyznačující se tím, že R¹ představuje cykloalkyl.

56. Farmaceutická kompozice podle nároku 53, vyznačující se tím, že R¹ představuje alkenyl.

57. Farmaceutická kompozice podle nároku 53, že R¹ představuje cykloalkenyl.

vyznačující se tím,

58. Farmaceutická kompozice podle nároku 53, vyznačující se tím, že R¹ alkylové, cykloalkylové, alkenylové a cykloalkenylové skupiny jsou zvoleny ze souboru, zahrnujícího sek.-butyl, cyklopropyl, cyklobutyl, cyklohexyl, cyklopentyl, cyklohex-1enyl, -CH₂-cyklopropyl, -CH₂-cyklobutyl, -CH₂-cyklohexyl, -CH₂cyklopentyl, -CH₂CH₂-cyklopropyl, -CH₂CH₂-cyklobutyl, -CH₂CH₂cyklohexyl a -CH₂CH₂-cyklopentyl.

59. Farmaceutická kompozice podle nároku 45, vyznačující se tím, že R¹ je zvolen ze souboru, zahrnujícího heteroarylové a substituované heteroarylové skupiny.

·· ·· > · 4 4

4 4 4 • ··· 4 4 > 4 4 4 4 4

- 175 ·· 44·4 44 44 ♦ · · · φ · ·

4 4 444 · · · · « · · ··· 44 4 • · · 4 4 4 4 •4 «44 «φ 44

60. Farmaceutická kompozice podle nároku 59, vyznačující se tím, že R¹ heteroarylové a substituované heteroarylové skupiny jsou zvoleny ze souboru, zahrnujícího pyrid-3-yl, pyrid-4-yl, thiofen2-yl, thiofen-3-yl, benzothiazol-4-yl, 2-fenylbenzoxazol-5-yl, furan-2-yl, benzofuran-2-yl, thionaften-2-yl, 2-chlorthiofen-5yl, 3-methylisoxazol-5-yl, 2-(thiofenyl)thiofen-5-yl, 6methoxythionaften-2-yl, 3-fenyl-l,2,4-thiooxadiazol-5-yl a 2fenyloxazol-4-yl.

61. Farmaceutická kompozice podle nároku 45, vyznačující se tím, že R² je zvolen ze souboru, zahrnujícího alkyl, obsahující od 1 do 4 atomů uhlíku, alkylalkoxy, obsahující od 1 do 4 atomů uhlíku a alkylthioalkoxy, obsahující od 1 do 4 atomů uhlíku.

62. Farmaceutická kompozice podle nároku 61, vyznačující se tím, že R² je zvolen ze souboru, zahrnujícího methyl, ethyl, n-propyl, iso-propyl, n-butyl, iso-butyl a -CH2CH2SCH3.

63. Farmaceutická kompozice podle nároku 47, vyznačující se tím, že X' a X představují oba atom vodíku a Z představuje kovalentní vazbu, která váže R¹ k -CX'X”-.

64. Farmaceutická kompozice podle nároku 63, vyznačující se tím, že R³ představuje atom vodíku a R³' je zvolen ze souboru, zahrnujícího 3-hydroxyfenyl, 3-methoxyfenyl, 3ethoxykarbonylfenyl, n-hexyl, n-oktyl, 4-ethoxykarbonylfenyl, 4methoxykarbonylfenyl, 3-chlorfenyl, 3-kyanofenyl, 3,5dichlorfenyl, -CH(CH₃)<I> (R stereoisomer) , -CH(CH₃)<J> (S stereoisomer), ftalid-6-yl, 2-hydroxypyrid-3-yl, 2(methoxykarbonylmethyl)benzyl, 3-(methoxykarbonyl)benzyl, 2-(2¹ methoxykarbonylmethylfenyl)benzyl a 2-fenylbenzyl.

65. Farmaceutická kompozice podle nároku 45, vyznačující se 1-írn, že sloučenina obecného vzorce I je zvolen ze souboru, zahrnujícího:

N-(3-hydroxyfenyl) -N' -(fenylacetyl)-L-alaninamid

N-(3-methoxyfenyl) -N' -(fenylacetyl)-L-alaninamid

N-(3-ethoxyfenyl)-Ν' -(fenylacetyl)-L-alaninamid

N-(4-ethoxykarbonylfenyl)-Ν' -(fenylacetyl)-L-alaninamid

N-(n-hexyl)-N'-(3,5-difluorfenylacetyl)-L-alaninamid

N-(n-oktyl)-Ν' -(3,5-difluorfenylacetyl)-L-alaninamid

N-(3-methoxyfenyl)-N'-(3,5-difluorfenylacetyl)-L-alaninamid

N-(4-ethoxykarbonylfenyl)-Ν' -(3,5-difluorfenylacetyl)-Lalaninamid

N-(3-ethoxykarbonylfenyl)-Ν' -(3,5-difluorfenylacetyl)-Lalaninamid

N-(3-chlorfenyl)-Ν' -(3,5-difluorfenylacetyl)-L-alaninamid

N-(3,5-dichlorfenyl)-Ν' -(3,5-difluorfenylacetyl)-L-alaninamid

N-(3-kyanofenyl)-Ν' -(3,5-difluorfenylacetyl)-L-alaninamid

N-(ftalid-6-yl)-Ν' -(3,5-difluorfenylacetyl)-L-alaninamid

N-[(4-methoxykarbonylfenyl)methyl]-N'-(3,5-difluorfenylacetyl)-L alaninamid • · • · • ·

- 177 ·· ·« ·· ·«·· • · · · · · · • · · · ···· • · · · · · · · • · · · · ···· · · · · ···

Ν-(l-kyano-1-fenylmethyl)-Ν' -(3,5-difluorfenylacetyl)-Lalaninamid

N-[(R)-1-fenylethyl]-N'-(3,5-difluorfenylacetyl)-L-alaninamid

N-[(S)-1-fenylethyl]-Ν' -(3,5-difluorfenylacetyl)-L-alaninamid

N-[2-hydroxypyridin-3-yl]-Ν'-(3,5-difluorfenylacetyl)-Lalaninamid

N-[2-methoxykarbonyl-l-fenylethyl]-Ν'-(3,5-difluorfenylacetyl)-L alaninamid

N-[a-pyridin-2-yl-benzyl]-Ν' -(3,5-difluorfenylacetyl)-Lalaninamid

N-[1-(N-ftalamido)pent-2-yl]-N'-(3,5-difluorfenylacetyl)-Lalaninamid

N-[2-(methoxykarbonylmethyl)benzyl]-N'-(3, 5-difluorfenylacetyl)L-alaninamid

N-[3-(methoxykarbonyl)benzyl]-N'-(3,5-difluorfenylacetyl)-Lalaninamid

N-[2-(2'-methoxykarbonylmethylfenyl)benzyl]-N'-(3,5difluorfenylacetyl)-L-alaninamid

N-[2-fenylbenzyl]-N'-(3,5-difluorfenylacetyl)-L-alaninami d