CZ20002361A3 - Triazinové deriváty - Google Patents

Abstract

Předkládané řešení se týká triazinové sloučeniny vzorce I, použitelné při léčení onemocnění a poruch centrální nervové soustavy ajejleh farmaceuticky přijatelných derivátů, farmaceutických prostředků sjejich obsahem, jejich použití při léčení těchto onemocnění a způsobů jejich výroby.

Description

Předkládaný vynález se týká triazinové sloučeniny použitelné při léčení onemocnění a poruch centrální nervové soustavy (CNS) a jejích farmaceuticky přijatelných derivátů, farmaceutických prostředků s jejich obsahem, jejich použití při léčení těchto onemocnění a způsobů jejich výroby.

Dosavadní stav techniky

EP-A-0021121 a EP-A-0247892 popisují 3,5-diaminotriaziny, například 3,5-diamino-6-(2,3-dichlorofenyl)-1,2,4-triazin (lamotrigin), které jsou účinné při léčení poruch CNS a zvláště jsou využitelné při léčení epilepsie.

Předkládaný vynález se týká derivátu 5-aminotriazinu, který je blokátorem sodíkového kanálu. Tato sloučenina má překvapivě silné protikřečové účinky, přičemž má zvýšenou účinnost ve srovnání s lamotriginem a zvýšenou selektivitu z hlediska vedlejších účinků na CNS a inhibice enzymu dihydrofolátreduktázy. Sloučenina je proto použitelná při léčení onemocnění centrální nervové soustavy, jako je epilepsie.

Podstata vynálezu

Předkládaný vynález tedy poskytuje sloučeninu vzorce (I)

0) tj. 5-amino-6-[2,3,5-trichlorofenylj-1,2,4-triazin a její farmaceuticky přijatelné deriváty.

Pod termínem farmaceuticky přijatelný derivát is se rozumí jakákoli farmaceuticky přijatelná sůl nebo solvát sloučenin vzorce (I), nebo jakákoli jiná sloučenina, která je schopná po podání příjemci poskytnout (přímo nebo nepřímo) sloučeninu vzorce (I) nebo její aktivní metabolít nebo zbytek (například překurzor). Odkazy na sloučeniny vzorce (I) tedy budou v dalším znamenat jak sloučeninu vzorce (I) tak i jejich farmaceuticky přijatelné deriváty.

Mezi vhodné farmaceuticky přijatelné soli sloučeniny vzorce (I) patří adiční soli s kyselinami vytvořené s anorganickými ~ nebo organickými kyselinami, s výhodou anorganickými kyselinami, například hydrochloridy, hydrobromidy a sulfáty.

Vhodné prekurzory jsou v oboru dobře známé a patří sem Nacylové deriváty, například na jakémkoli ze čtyř atomů dusíku sloučenin vzorce (I), například jednoduché acylové deriváty jako je acetyl, propionyl apod. nebo skupiny jako je R-O-CH₂-atom dusíku nebo R-O-C(O)-atom dusíku.

Sloučeniny vzorce (I) jsou použitelné zvláště jako protikřečové látky. Jsou proto využitelné při léčení epilepsie. Mohou být použity pro zlepšení stavu pacienta, typicky člověka, trpícího epilepsií. Mohou být použity pro zmírnění příznaků epilepsie u pacienta. Epilepsie má zahrnovat následující záchvaty: jednoduché částečné záchvaty, komplexní částečné záchvaty, sekundární generalizované záchvaty,

generalizované záchvaty včetně absenčních záchvatů, myoklonické záchvaty, klonické záchvaty, tonické záchvaty, tonicko-klonické záchvaty a atonické záchvaty.

Sloučeniny vzorce (I) jsou dále použitelné při léčení bipolárních onemocnění, známých také jako manická deprese. Je možno léčit bipolární onemocnění typu I nebo II. Sloučeniny vzorce (I) mohou tedy být použity pro zlepšení stavu pacienta - člověka trpícího bipolárním onemocněním. Mohou být použity pro zmírnění příznaků bipolární poruchy u hostitele. Sloučeniny vzorce I mohou být také použity při léčení unipolární deprese.

Sloučeniny vzorce (I) jsou použitelné jako analgetika. Proto mohou být využity při léčbě nebo prevenci bolesti. Mohou být použity pro zlepšení stavu pacienta, typicky člověka, trpícího bolestí. Mohou být také použity pro zmírnění bolesti u pacienta. Sloučeniny vzorce (I) mohou být použity jako analgetika pro léčení akutní bolesti jako je kosterně svalová bolest, pooperační bolest a bolest po chirurgickém zákroku, chronická bolest jako je chronická bolest zánětlivého původu (například revmatoidní artritida a osteoartritida), neuropatická bolest (například postherpetická neuralgie, neuralgie trigeminu a bolest udržovaná sympatikem) a bolest spojená s rakovinou a fibromyalgií. Sloučeniny vzorce (I) mohou být také použity při léčbě nebo prevenci bolesti spojené s migrénou.

Sloučeniny vzorce (I) jsou dále použitelné při léčení funkčních poruch střeva, které zahrnují nevředovou dyspepsii, při léčení bolesti na prsou jiného než srdečního původu a zvláště při léčení syndromu dráždivého střeva. Syndrom dráždivého střeva je gastrointestinální porucha charakterizovaná bolestí v břiše a změněným chováním střeva bez jakéhokoliv důkazu organického onemocnění. Sloučeniny vzorce (I) mohou být tedy použity pro zmírnění bolesti spojené se syndromem dráždivého střeva. Může být tedy zlepšen stav pacienta trpícího syndromem dráždivého střeva.

• ·

Sloučeniny vzorce (I) mohou být také použitelné při léčení neurodegenerativních onemocnění, jako je Alzheimerova choroba, ALS, onemocnění motorických neuronů, Parkinsonova choroba, svalová skleróza, makulární degenerace a glaukom. Sloučeniny vzorce (I) mohou být také použity jako neuroprotektivní látky a při léčbě degenerace nervů po mrtvici, zástavě srdce, plicním bypassu, úrazu mozku, úrazu páteře apod.

Sloučeniny vzorce (I) jsou dále použitelné při léčení ušních šelestů.

Sloučeniny vzorce (I) jsou dále použitelné při prevenci nebo snížení závislosti nebo prevenci nebo snížení tolerance nebo zpětné tolerance na látce vyvolávající závislost. Příklady látek vyvolávajících závislost jsou opiáty (například morfin), látky tlumící centrální nervovou soustavu (například ethanol), psychostimulační látky (například kokain) a nikotin.

Předkládaný vynález tedy dále poskytuje použití sloučeniny vzorce (I) nebo jejího farmaceuticky přijatelného derivátu v humánním a veterinárním lékařství.

Předkládaný vynález dále poskytuje použití sloučeniny vzorce (I) při výrobě farmaceutického prostředku pro léčení poruch, které byly například popsány výše.

Předkládaný vynález dále zahrnuje způsob léčení pacienta trpícího nebo vnímavého k onemocnění tak jak bylo v podstatě uvedeno výše, kde tento způsob zahrnuje podávání terapeuticky účinného množství sloučeniny vzorce (I) pacientovi.

Termín „léčení“ jak se zde používá, zahrnuje jak léčení již vyvinutých poruch, tak i jejich prevenci.

Přesné množství sloučenin vzorce (f) podávané hostiteli, zvláště člověku, bude na rozhodnutí ošetřujícího lékaře. Použitá dávka však

bude záviset na celé řadě faktorů včetně věku a pohlaví pacienta, na konkrétním léčeném onemocnění a jeho vážnosti a cestě podávání.

Sloučenina vzorce (I) může být podávána v dávce od 0,1 do 10 mg/kg tělesné hmotnosti na den a zvláště 0,3 až 3 mg/kg tělesné hmotnosti na den, počítáno jako volná báze. Rozmezí dávek pro dospělého člověka je obecně od 8 do 1000 mg/den, jako například od 35 do 800 mg/den, s výhodou 10 až 200 mg/den nebo 20 až 200 mg/den, počítáno jako volná báze.

Sloučeniny vzorce (I) a jejich farmaceuticky přijatelné deriváty se vhodně podávají ve formě farmaceutických prostředků. V dalším provedení vynálezu se tedy poskytuje farmaceutický prostředek s obsahem sloučeniny vzorce (I) nebo jejího farmaceuticky přijatelného derivátu upravený pro použití v humánním nebo veterinárním lékařství. Takové prostředky mohou být pohodlně ve formě pro použití běžným způsobem ve směsi s jedním nebo více fyziologicky přijatelnými nosiči nebo pomocnými látkami.

I když je možné podávat sloučeniny vzorce (I) jako čisté chemikálie, je výhodné jejich podávání ve formě farmaceutického prostředku. Farmaceutické prostředky podle předkládaného vynálezu obsahují sloučeniny vzorce (I) spolu s jedním nebo více farmaceuticky přijatelnými nosiči nebo ředivy a popřípadě dalšími léčebnými složkami. Nosič nebo nosiče musí být „přijatelné“ ve smyslu kompatibility s jinými složkami formulace a nesmí mít škodlivé účinky na příjemce.

Mezi formulace patří formy vhodné pro orální, parenterální (včetně subkutánního, například ve formě injekce nebo depotní tablety, intradermálního, intrathekálního, intramuskulárního, například depotního a intravenózního), rektální a místní (včetně dermálního, bukálního a sublingválního) podávání, ačkoliv nejvhodnější cesta může záviset například na stavu a poruše pacienta. Tyto formulace mohou být vhodně přítomny v jednotkové dávkové formě a mohou být

9 9 ·

9 9 · • 9 99 9 9999

999 999 99 99 9· 99 připraveny jakýmkoli způsobem známým v oboru farmacie. Všechny tyto způsoby zahrnují krok uvedení do styku sloučeniny vzorce (1) nebo její farmaceuticky přijatelné adiční soli s kyselinou („účinná složka“) s nosičem, který je tvořen jednou nebo více přídavnými složkami. Formulace se obecně připravují stejnoměrným a dokonalým smísením účinné složky s kapalnými nosiči nebo jemně rozemletými pevnými nosiči nebo oběma a potom v případě potřeby tvarováním výrobku do požadované formy.

Formulace podle předkládaného vynálezu vhodné pro orální podávání mohou být ve formě diskrétních jednotek jako jsou kapsle, tobolky nebo tablety (například žvýkací tablety zvláště pro pediatrické podávání), vždy s obsahem předem určeného množství účinné složky; jako prášek nebo granule; jako roztok nebo suspenze ve vodné kapalině nebo nevodné kapalině; nebo jako kapalná emulze typu olej ve vodě nebo voda v oleji. Účinná složka může být také přítomna jako bolus, lektvar nebo pasta.

Tablety je možno vyrábět lisováním nebo formováním za vlhka (moulding), popřípadě spolu s jednou nebo více dalšími přídavnými složkami. Lisované tablety mohou být vyrobeny lisováním účinné složky ve volně sypké formě jako je prášek nebo granule, popřípadě ve směsi s pojivém, kluznou látkou, inertním ředivem, povrchově aktivní nebo dispergační látkou. Tablety formované za vlhka mohou být vyráběny lisováním práškové směsi navlhčené inertním kapalným ředivem na vhodném stroji. Tablety mohou být popřípadě potahovány nebo drážkovány a mohou být formulovány tak, aby se dosáhlo pomalého nebo řízeného uvolňování aktivní složky z tablety.

Formulace pro parenterální podávání zahrnují vodné a nevodné sterilní injekční roztoky, které mohou obsahovat antioxidanty, pufry, bakteriostatické látky a rozpouštědla, která způsobují isotonický stav prostředku s krví zamýšleného příjemce; a vodné a nevodné sterilní suspenze, které mohou obsahovat suspendující prostředky a zahušťující látky. Formulace mohou být v zásobnících pro jednotkovou dávku nebo větší počet dávek, například v zatavených ampulích a lahvičkách, a mohou být uchovány v lyofilizovaném stavu, který vyžaduje pouze přídavek sterilního kapalného nosiče, například vody pro injekce bezprostředně před použitím. Injekční roztoky a suspenze pro přípravu před použitím mohou být vyrobeny ze sterilních prášků, granulí a tablet výše popsaného typu.

Formulace pro rektální podávání mohou být ve formě čípků s obvyklými nosiči jako je kakaové máslo, tuhý tuk nebo polyethylenglykol.

Formulace pro místní podávání v ústech, například bukálně nebo sublingválně, zahrnují pastilky obsahující účinnou složku v ochuceném základu jako je sacharóza a akácie nebo tragakant, a pastilky obsahující účinnou složku v základu, jako je želatina a glycerol nebo sacharóza a akácie.

Sloučeniny podle vynálezu mohou být také formulovány jako depotní preparáty. Tyto formulace s dlouhodobým působením mohou být podávány implantací (například subkutánně nebo intramuskulárně) nebo intramuskulární injekcí. Tak například sloučeniny podle vynálezu mohou být formulovány s vhodnými polymerními nebo hydrofobními materiály (například jako emulze v přijatelném oleji) nebo iontoměničovými pryskyřicemi nebo jako obtížně rozpustné deriváty, například obtížně rozpustné soli.

Navíc k výše uvedeným složkám mohou formulace obsahovat další v oboru běžné prostředky, přičemž se bere ohled na typ příslušné formulace, například formy vhodné pro orální podávání mohou obsahovat chuťové přísady.

Výhodné jednotkové dávkové formy jsou formy obsahující účinnou denní dávku jak bylo uvedeno výše nebo její vhodný podíl, účinné složky. Běžně může jít od 5 mg do 1000 mg, jako například od • fc fcfc • · · · ♦ ♦ · · • fc · · • fc fcfcfc · • fc fcfc • · · • · fc • fcfcfc • · · fcfc · · mg do 1000 mg, vhodněji 35 mg až 800 mg a nejvhodněji 10 až 200 mg nebo 20 až 200 mg, počítáno jako volná báze.

Sloučeniny vzorce (I) mohou být použity v kombinaci s jinými terapeutickými látkami, například dalšími protikřečovými látkami. Jestliže se sloučeniny vzorce (I) používají v kombinaci s dalšími terapeutickými látkami, mohou být tyto sloučeniny podávány jakoukoli vhodnou cestou buď postupně nebo současně. Vynález tedy v dalším provedení poskytuje kombinaci obsahující sloučeninu (i) nebo její farmaceuticky přijatelný derivát spolu s další terapeutickou látkou.

Výše uvedené kombinace mohou být vhodně ve formě pro použití jako farmaceutický prostředek a další provedení vynálezu budou tedy tvořit farmaceutické prostředky obsahující kombinaci jak bylo definováno výše spolu s farmaceuticky přijatelným nosičem nebo pomocnou látkou. Jednotlivé složky těchto kombinací mohou být podávány buď postupně nebo souběžně v oddělených nebo kombinovaných farmaceutických prostředcích.

Jestliže se sloučenina vzorce (I) nebo její farmaceuticky přijatelný derivát používá v kombinaci s druhou terapeutickou látkou s účinností proti stejnému onemocnění, dávka každé sloučeniny se může lišit od dávky při jejím samostatném použití. Vhodné dávky budou odborníkům v oboru zřejmé.

Předkládaný vynález dále poskytuje způsob výroby sloučenin vzorce (I) a jejich farmaceuticky přijatelných derivátů.

Sloučeniny vzorce (I) mohou být připraveny dále uvedenými způsoby, které tvoří další provedení vynálezu.

Podle obecného způsobu (A) je možno připravit sloučeninu vzorce (I) za vhodných reakčních podmínek ze sloučeniny vzorce (II)

SMe • · « · 9 9 9 9

9 999 9 9 · · ·

9 9 9 9 9 9 (Π) například redukcí, s výhodou použitím redukujícího kovu jako je Raneyův nikl a zdroje vodíku jako je monohydrát hydrazinu, ve vhodném rozpouštědle jako je ethanol, s výhodou při zvýšené teplotě, například mezi 70 až 75 °C.

Podle dalšího způsobu (B), který tvoří další provedení vynálezu, může být sloučenina vzorce (I) připravena za vhodných reakčních podmínek reakcí sloučeniny vzorce (III)

S(O)_nMe (III) kde n může být 1 nebo 2, s redukčním činidlem. Mezi vhodná redukční činidla patří borohydridy, s výhodou borohydrid sodný. Reakcí je možno provádět ve směsi rozpouštědel jako je ether, s výhodou tetrahydrofuran a alkohol, s výhodou t-butanol, a při pokojové teplotě.

Sloučenina vzorce (III) může být vyrobena za vhodných reakčních podmínek reakcí sloučeniny vzorce (II) s oxidačním činidlem jako je perkyselina, například peroxymonosulfát draselný nebo kyselina m-chlorperbenzoová, a při snížené teplotě, například <5 °C, přičemž tento způsob tvoří další provedení vynálezu.

• 4 ·« 44 *4 • · · · 4 · · · «4 4 4·4 4 4 · 4 4

4 · 4 4 4 4

Sloučenina vzorce (II) může být vhodně připravena reakcí 2,3,5-trichlorbenzoylkyanidu s S-methylthiosemikarbazidovou solí, s výhodou hydrojodidem, v přítomnosti zředěné minerální kyseliny, s výhodou zředěné kyseliny sírové, přičemž tento způsob tvoří další provedení vynálezu.

Sloučenina vzorce (II) může být alternativně vyrobena za vhodných reakčních podmínek fotolýzou roztoku sloučeniny vzorce (IV) zářením v rozmezí vlnových délek 320 a 750 nm

(IV) ve vhodném rozpouštědle jako je alkohol, s výhodou propan-1-ol a při zvýšené teplotě, například teplotě varu rozpouštědla pod zpětným chladičem, přičemž tento způsob představuje další provedení vynálezu.

2,3,5-trichlorbenzoylkyanid a S-methylthiosemikarbazid mohou být vyrobeny způsoby běžnými v oboru a představují tak další provedení vynálezu.

Sloučenina vzorce (IV) může být vyrobena za vhodných reakčních podmínek reakcí sloučeniny vzorce (V)

(V)

		99	99
	• ·	9 9 9	9	9	9	9
•	• · ·	• ···	9 9	9	•	9
•	• ·	• ·	9	9	•	9
···	»·* ··	99	99		··

s dehydratačním činidlem, s výhodou difosforylchloridem, přičemž tento způsob představuje další provedení vynálezu.

Sloučenina vzorce (V) může být vhodně připravena reakcí sloučeniny vzorce (VI)

COCONH₂ (VI) s S-methylthiosemikarbazidovou solí, s výhodou hydrojodidem, ve vhodném rozpouštědle, například ethanolu, a při zvýšené teplotě například 50 °C, přičemž tento způsob představuje další provedení vynálezu.

Sloučenina vzorce (VI) může být vyrobena za vhodných reakčních podmínek reakcí 2,3,5-trichlorbenzoylkyanidu se silnou vodnou kyselinou, s výhodou koncentraovanou kyselinou chlorovodíkovou, přičemž tento způsob představuje další provedení vynálezu.

Prekurzory sloučenin vzorce (I) mohou být vyrobeny běžnými způsoby.

Následující příklady jsou uvedeny pro ilustraci vynálezu, aniž by však měly být považovány za jeho omezení.

• · · · ti titi ti • · · · · • ti

Příklady provedení vynálezu

Meziprodukt 1

Kyselina 2,3,5-trichlorbenzoová

2,3,5-Trichlorbenzaldehyd (197,40 g, 0,94 mol, Lancaster) byl rozpuštěn v t-butanolu (785 ml), míchán a zahříván pod dusíkem při 50 °C. 2M vodný hydroxid sodný (940 ml) byl zahřát na 50 °C a přidán k roztoku aldehydu. Peroxid vodíku (27,50 % vodný roztok, 699 g, 5,65 mol) byl přidán dávkovacím čerpadlem v průběhu 45 min, přičemž teplota byla udržována mezi 57 - 60 °C. Reakční směs byla potom míchána a zahřívána v atmosféře dusíku další hodinu, byla ochlazena a odpařena ve vakuu. Získána kaše byla zfiltrována a filtrát byl promyt toluenem (2 x 300 ml) a potom okyselen (pH 1) 5M kyselinou chlorovodíkovou za důkladného míchání. Získaná hustá bílá sraženina byla zfiltrována, promyta vodou (3 x 300 ml) a sušena ve vakuu při 50 °C. Výtěžek 180 g (85 %). Teplota tání 155 - 158 °C (pěna).

Meziprodukt 2

2,3,5-Trichlorbenzoylchlorid

2,3,5-Trichlorbenzoová kyselina (75 g, 0,33 mol, příklad 1) a thionylchlorid (197,47 ml, 271,32 g, 2,28 mol) byly zahřívány pod zpětným chladičem v bezvodém toluenu (350 ml) při 120 °C 3 hod. Reakční směs byla ochlazena na pokojovou teplotu a odpařena ve vakuu. Zbytek byl azeotropně destilován s bezvodým toluenem (3 x 100 ml) za získání hnědého viskózního oleje.

Alternativně může být příprava provedena následujícím způsobem:

2,3,5-Trichlorbenzoová kyselina (75 g, 333 mmol, 1 ekv.) byla přidána k toluenu (225 ml) a kaše byla zahřívána pod zpětným

0000 00 • 0 0000 000· 0 0 00 0 00000 00 0 0 0 00 0 0000

000 000 00 00 00 00 chladičem 2 hod s připojeným Dean-Starkovým přístrojem. Kyselina se po zahřátí rozpustila. Roztok byl ochlazen za důkladného míchání a přikapávací nálevkou byl v průběhu 1 hod přidán pyridin (0,2 mi, kat.~0,5 mol. %) a thionylchlorid (26,7 ml, 365 mmol, 1,1 ekv.) při udržování vnitřní teploty mezi 70 - 80 °C. Po ukončení přidávání byla směs zahřívána pod zpětným chladičem 2 hod. Roztok byl ochlazen, těkavé látky byly odstraněny ve vakuu a potom azeotropně destilovány s toluenem (2 x 50 ml) za získání čirého žlutého oleje jako produktu.

Meziprodukt 3

2,3,5-Trichlorbenzovlkyanid

Kyanid měďný (63,88 g, 0,71 mol), jodid draselný (108,20 g, 0,65 mol) byly zahřívány pod zpětným chladičem v bezvodém xylenu (590 ml) při 150 °C 24 hod s použitím Dean-Starkova přístroje. Byl přidán roztok 2,3,5-trichlorbenzoylchloridu v bezvodém xylenu (150 ml) a získaná suspenze byla zahřívána pod zpětným chladičenm v atmosféře dusíku při 150 °C 3 dny. Suspenze byla zfiltrována a filtrát byl odpařen ve vakuu, δ (CDCI₃): 7,80 (s, 1H), 8,0 (s, 1H).

Příprava může být alternativně provedena následujícím způsobem:

Jodid draselný (66,25 g, 400 mmol, 1,2 ekv.) (prosátý pro získání velikosti částic <1 mm) a kyanid měďný (36 g, 400 mmol, 1,2 ekv.) v xylenu (400 ml) byly zahřívány pod zpětným chladičem 3 hod s připojeným Dean-Starkovým přístrojem. Směs byla ochlazena a byl přidán 2,3,5-trichlorbenzoylchlorid v xylenu (100 ml). Směs byla zahřívána pod zpětným chladičem s připojeným Dean-Starkovým přístrojem.Směs postupně v průběhu 30 min změnila barvu z červené na oranžovou a přes noc byl získán světle hnědý roztok.

··· · • 9 9 9 9 9 9 *

9 9 9 9 9 9 9

9 · · · · · · · · · • · · · · · · · · 9 9 9 9 9 9

Směs byla zahřívána pod zpětným chladičem 40 hod, potom byla ochlazena a anorganické látky byly odfiltrovány. Xylen byl odstraněn ve vakuu při 55 °C, azeotropně destilován s toluenem (2 x 50 ml), potom byl přidán Buchiho vstupem petrolether s teplotou varu 60 - 80 °C (260 ml) za získání hnědého roztoku. Při ochlazení se vytvořila hnědá sraženina. Roztok byl míchán při pokojové teplotě přes noc, pevná látka byla odfiltrována a promyta petroletherem s teplotou varu 60 - 80 °C (100 ml). Pevné podíly byly do sucha odsáty pod dusíkem pro získání prvního podílu žluté pevné látky, 2,3,5trichlorbenzoylnitrilu (45,5 g, 58,1 %).

Filtrát byl koncentrován, ponechán stát 24 hod a potom byl získán druhý podíl (6,5 g, 8,7 %), a nakonec třetí podíl (5,3 g, 6,8 %).

Celkový výtěžek (57,6 g, 73,8 %). NMR (d6-DMSO) dppm: 8,03 (d, 1H), 8,34 (d, 1H)

Meziprodukt 4

Hydrojodid S-methylthiosemikarbazidu

Thiosemikarbazid (448 g, 0,50 mol, Aldrich) a jodmethan (300 ml, 5 mol) byly zahřívány pod zpětným chladičem v 95% ethanolu (2000 ml) 5 hod a potom ochlazeny na pokojovou teplotu. Požadovaný produkt byl odfiltrován, promyt etherem (3 x 100 ml) a sušen ve vakuu. Výtěžek 647 g. Teplota tání 138 - 140 °C.

Meziprodukt 5

3-Thiomethyl-5-amino-6-í2,3,5-trichlorfenvn-1,2,4-triazin [vzorec (ll)1

Způsob A

Hydrojodid S-methylthiosemikarbazidu (38,59 g, 0,17 mol) byl suspendován v zředěné kyselině sírové (95,83 ml koncentrované kyseliny sírové/95,83 ml vody) a směs byla míchána 1 hod při *

• · · · · · · * • · · 4 4 4 ·· ·· · • · · · · · · • · · 4 · · 44 pokojové teplotě. Pomalu byl přidán roztok 2,3,5trichlorbenzoylkyanidu (18 g, 0,077 mol) v acetonitrilu (90 ml) a získaná směs byla míchána při pokojové teplotě 11 dnů. Reakční směs byla zředěna vodou a extrahována ethylacetátem (3 x 250 ml). Ethylacetátová vrstva byla promyta vodou (2 x 300 ml), sušena nad bezvodým síranem hořečnatým, zfiltrována a filtrát byl odpařen ve vakuu. Zbytek byl rozpuštěn v propan-1-olu (500 ml) a zahříván pod zpětným chladičem při 130 °C 4 hod. Reakční směs byla ochlazena na pokojovou teplotu a odpařena ve vakuu. Zbytek byl rozdělen mezi 2N vodný roztok hydroxidu sodného (100 ml) a ethylacetát (300 ml). Ethylacetátová vrstva byla promyta vodou (2 x 100 ml), sušena nad bezvodým síranem hořečnatým, zfiltrována a filtrát byl odpařen ve vakuu. Zbytek byl čištěn bleskovou chromatografií s použitím cyklohexanu až směsi 1 : 3 cyklohexan:ether jako eluentu. Výtěžek 1,90 g (8 %). Teplota tání 138 - 140 °C.

Způsob B

2-[S-methylthiosemikarbazono]-2-[2,3,5-trichlorfenyl]-acetonitril (1,00 g, 3,11 mmol) byl míchán v propan-1-olu (40 ml) a zahříván pod zpětným chladičem pod dusíkem. Do směsi byla ponořena wolframová žárovka 300 W a reakce byla ponechána probíhat za těchto podmínek 48 hod. Reakční směs byla ochlazena na pokojovou teplotu, žárovka byla vypnuta a roztok byl odpařen ve vakuu, přičemž vznikl tmavý olej, který stáním krystalizoval. Pevná látka byla rozetřena s methanolem, zfiltrována a vysušena za poskytnutí produktu 3-thiomethyl-5-amino-6-[2,3,5-trichlorfenyl)-1,2,4-triazinu. Výtěžek 770 mg (77,0 %). NMR (d₆-DMSO) δ ppm: 2,50 (s, 3H), 7,15 (široký s, 1H), 7,63 (d, 1H), 7,90 (široký s, 1H), 8,00 (d, 1H). LC/MS, Pozotivní elektrorozprašování (M+1)⁺ = 321/323 • · · · ·· ··

Meziprodukt 6

3-Methvlsulfoxy-5-amino-6-F2,3,5-trichlorfenyP-1,2,4-triazin [vzorec (lll)j

3-Thiomethyl-5-amino-6-[2,3,5-trichlorfenyl]-1,2,4-triazin (6 g, 18,7 mmol, 1 ekv.) byl suspendován v dichlormethanu (650 ml) a směs byla ochlazena na 5 °C. Najednou byla přidána kyselina mchlorperbenzoová (5,66 g, 18,7 mmol, podle předpokladu 57%, ~1 ekv.) a směs byla míchána při <10 °C 20 min v dusíku za vzniku čirého žlutého roztoku. Analýza TLC (směs 1 : 1 cyklohexan : ethylacetát) ukázala, že již není přítomen žádný výchozí materiál. Reakce byla ukončena přidáním siřičitanu sodného (10 g) a vody (200 ml) do důkladně míchaného roztoku. Vrstvy byly odděleny a organická vrstva byla promyta 10% vodným roztokem siřičitanu sodného (100 ml). Testovací proužky na peroxid Merck ukázaly negativní výsledek. Organická vrstva byla promyta nasyceným hydrogenuhličitanem sodným (200 ml), potom promyta roztokem soli (200 ml) a sušena nad bezvodým síranem hořečnatým. Organický roztok byl zfiltrován a rozpouštědlo bylo odstraněno ve vakuu za získání žluté pevné látky, 3-methylsulfoxy-5-amino-6-[2,3,5-trichlorfenyl]-1,2,4-triazinu. Výtěžek 5,82 g (92,2 %).

NMR(CDCI₃) δ ppm: 3,05 (s, 3H), 7,39 (d, 1H), 7,69 (d, 1H). LC/MS Pozitivní elektrorozprašování (M + 1)⁺ = 337/339.

Meziprodukt 7

2-Oxo-2-[2,3,5-trichlorfenvH-acetamid [vzorec (Vi)1

2,3,5-Trichlorbenzoylkyanid (10,0 g, 46 mmol) byl přidán ke koncentrované kyselině chlorovodíkové (140 ml) a míchán při pokojové teplotě 48 hod. Suspenze byla zředěna vodou (100 ml) a zfiltrována. Světlehnědá pevná látka byla promyta vodou a potom sušena vzduchem 1 hod. Surový produkt byl potom rozpuštěn v ·* · · · fcfc · * tfc * • · fcfcfcfc fcfcfct • fc fcfc ······ fcfc » • · ·· · fcfcfcfc • fcfc fcfcfc fcfc fcfc fcfc fcfc ethylacetátu (400 ml), promyt nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného (2 x 300 ml) a potom roztokem soli (300 ml) a potom byl sušen nad síranem hořečnatým, zfiltrován a odpařen za poskytnutí béžové pevné látky.

Tato pevná látka byla rozetřena ve směsi hexan/toluen (200 ml), zfiltrována a sušena ve vakuu za získání bělavé pevné látky, 2-oxo-2-[2,3,5-trichlorfenylj-acetamidu. Výtěžek 7,02 g (65,3 %). NMR (d₆DMSO) δ ppm: 7,77 (d, 1H), 8,09 (d, 1H), 8,13 (široký s, 1H), 8,48 (široký s, 1H). LC/MS, Negativní elektrorozprašování (M - 1)' = 250/252.

Meziprodukt 8

2-[S-Methylthiosemikarbazono1-2-f2,3,5-trichlorfenvn-acetamid fvzorec

ÍYH

2-Oxo-2-[2,3,5-trichlorfenyl]-acetamid (5,00 g, 19,8 mmol) a hydrojodid S-methylthiosemikarbazidu (9,20 g, 39,5 mmol) byly suspendovány v ethanolu (100 ml) a zahřívány při 50 °C pod dusíkem přes noc. Chromatografie na tenké vrstvě ukázala, že je stále přítomný výchozí materiál, a proto byl přidán další hydrojodid Smethylthiosemikarbazidu (4,00 g, 172 mmol) a míchání pokračovalo při 50 °C 2 hod. Reakční směs byla odpařena ve vakuu za získání hnědého oleje. Tento olej byl rozpuštěn v ethylacetátu (400 ml), promyt vodou (300 ml), potom roztokem soli (300 ml), sušen nad síranem hořečnatým, zfiltrován a odpařen ve vakuu za získání žlutohnědé gumy. Tato guma byla čištěna chromatografií na koloně s použitím směsi 1 : 1 ethylacetát:hexan jako eluentu. Produkt, převážně E isomer, byl získán jako bleděžlutá pevná látka, výtěžek 4,25 g (63,2 %). NMR (d₆-DMSO) δ ppm: 2,14 (s, 3H), 7,28 (d, 1H), 7,31 (široký s, 1H), 7,84 (d, 1H), 8,28 (široký s, 1H). LC/MS, Pozitivní elektrorozprašování (M+1)⁺ = 339/341.

9 · • · 9 4 4 · 4«·· · 9 · ······ · · 4

4 4 9 4 9 4 4 ·

4·· ·44 44 «4 49 49

Meziprodukt 9

2-íS-Methvlthiosemikarbazono1-2-í2,3,5-trichíorfenvn-acetonitril fvzorec íivu

2-[S-Methylthiosemikarbazid]-2-[2,3,5-trichlorfenyl]-acetamid (2 g, 5,89 mmol) byl po částech přidáván k roztoku difosforylchloridu (2,97 g, 1,63 ml, 11,8 mmol) v 1,4-dioxanu (16 ml) a směs byla míchána pod dusíkem 6 hod. Tmavý roztok byl odpařen ve vakuu za poskytnutí tmavě žlutého oleje. Tento olej byl rozpuštěn v ethylacetátu (50 ml), promyt vodou (50 ml), nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného (50 ml), roztokem soli (50 ml), potom sušen nad síiranem hořečnatým, zfiltrován a odpařen ve vakuu za poskytnutí tmavě žlutého oleje. Surový produkt byl čištěn chromatografií na koloně s použitím směsi 3 : 1 hexan : ethylacetát jako eluentu. Produkt 2-[S-methylthiosemikarbazono]-2-[2,3,5-trichlorfenyl)-acetonitril byl získán jako žlutý olej, který stáním krystalizoval na žlutou pevnou látku. Výtěžek 1,16 g (61,2 %). NMR (d6-DMSO) δ ppm: 2,20 (s, 1H), 3,38 (široký s, 3H), 7,68 (široký s, 1H), 7,95 (d, 1H), 8,12 (široký s, 1H). LC/MS, Pozitivní elektrorozprašování (M+1)⁺ =321/323.

Příklad

5-Amino-6-í2,3,5-trichlorfenyl1-1,2,4-triazin

Způsob A

Raneyův nikl (3,50 g, suspenze ve vodě, Fluka) byl suspendován v roztoku 3-thiomethyl-5-amino-6-(2,3,5-trichlorfenyl)-1,2,4-triazinu (1,75 g, 5,44 x 10'³ mol) v absolutním ethanolu (30 ml) a směs byla míchána při 70 °C. K suspenzi by! v průběhu 30 min po kapkách přidán monohydrát hydrazinu (3,50 ml, 3,54 g, 0,11 mol).

• · • · ·· · · · * · #· · • · · · · · ·«·« • · · · ······ · · · • · · · · · · · · . I9_žf......

Získaná směs byla míchána při 70 - 75 °C 2 hod, zfiltrována, promyta horkým absolutním ethanolem (3 x 20 ml) a filtrát byl odpařen ve vakuu. Zbytek byl čištěn bleskovou chromatografií s použitím směsi 15 : 25 cyklohexan : ether jako eluentu a potom preparativní HPLC na koloně Supelcosil ABZ a 50% směsi acetonitril/voda a 0,1% kyseliny mravenčí jako eluentu. Výtěžek 0,134 g (9 %). Teplota tání 220 222 °C, R_t = 13,691 min, NMR(d₆-DMSO) δ ppm: 6,90 (široký, s, 1H), 7,60 (d, 1H), 7,70 (široký, s, 1H), 8,0 (d, 1H), 8,70 (s, 1H). LC/MS (El) M⁺ = 275/277.

Způsob B

3-Methylsulfoxy-5-amino-6-[2,3,5-trichlorfenyl)-1,2,4-triazin (5,82 g, 17,2 mmol, 1 ekv.) byl rozpuštěn ve směsi 1 : 1 THF : t-butanol (1800 ml). Najednou byl přidán borohydrid sodný (915 g, 24,08 mmol, ~1,4 ekv.) a získaná směs byla míchána při pokojové teplotě pod dusíkem 2 hod. Veškeré rozpouštědlo bylo odstraněno ve vakuu za získání žluté pevné látky, která potom byla azeotropně destilována s tetrahydrofurenem (200 ml). Pomalu byla přidána 10% vodná kyselina citrónová (500 ml) při udržování teplota pod 20 °C a potom ethylacetát (500 ml). Vrstvy byly odděleny a vodná vrstva byla dále extrahována ethylacetátem (500 ml). Spojené organické vrstvy byly promyty nasyceným roztokem soli, sušeny nad bezvodým síranem hořečnatým, zfiltrovány a veškeré těkavé podíly byly odstraněny ve vakuu za získání žluté pevné látky. Produkt byl čištěn s použitím chromatografie na koloně a 20% ethylacetátu v hexanu jako eluentu se zvýšením na 60 % ethylacetátu v hexanu. Frakce s obsahem produktu byly spojeny a odpařeny ve vakuu za získání žluté pevné látky, 3-thiomethyl-5-amino-6-[2,3,5-trichlorfenyl]-1,2,4-triazinu. Výtěžek 1,5 g (31,7%).

• · φ • φ φ « φ φ φ φ φ · φ « φ φφφ • · φ · φ « · φφ φ φ φ φ φ φφφ φφφ φφ φφ φφ φφ

NMR(d₆-DMSO) δ ppm: 7,67 (d, 1Η), 8,02 (d, 1Η), 8,75 (s, 1 Η), 7,0-7,2 (široký s, 1H), 7,7-8,0 (široký s, 1H). LC/MS Pozitivní elektrorozprašování (M + 1)⁺ = 275/277.

Farmaceutické příklady

Sterilní formulace

Příklad A mg/ml

Sloučeniny podle vynálezu 0,1 mg

Chlorid sodný USP 9,0 mg

Voda pro injekce USP k doplnění do 1 ml

Složky se rozpustí v části vody pro injekce a roztok se doplní na celkový objem pro poskytnutí koncentrace 0,1 mg/ml sloučenin podle vynálezu. Jestliže se používá sůl sloučenin, množství sloučenin se zvýší pro poskytnutí koncentrace 0,1 mg/ml volné báze. Roztok může být zabalen pro injekční použití, například naplněním a uzavřením do ampulí, lahviček nebo stříkaček. Ty mohou být asepticky plněny a/nebo nakonec sterilizovány, například autoklávováním při teplotě 121 °C.

Další sterilní formulace je možno připravit podobně pro získání jiných koncentrací sloučenin.

Příklad B

Sloučeniny podle vynálezu

Mannitol

Voda pro injekce k doplnění do mg/ml 0,5 mg 50,0 mg ml «· ·· *· ··

9 9 9 9 9 9 ·

9 9 9 9 9 9 9

9 9999· 99 9

Složky se rozpustí v části vody pro injekce. Směs se doplní na konečný objem a míchá se do homogenity. Prostředek se filtruje přes sterilizační filtr a plní do skleněných lahviček. Lahvičky se lyofilizují a uzavřou. Rekonstituce před použitím se provede vhodným rozpouštědlem.

Formulace pro orální podávání

Tablety je možno připravovat obvyklými způsoby jako je přímé lisování nebo granulace za vlhka. Tablety mohou být potažené vhodným filmotvorným materiálem, jako je materiál Opadry, s použitím standardních způsobů. Tablety mohou být alternativně potahovány cukrem.

Příklad C

Přímo lisované tablety mg/tableta

Sloučeniny podle vynálezu 5,0 mg

Stearan hořečnatý 4,0 mg

Mikrokrystalická celulóza (Avicel PH102) do 400,0 mg

Sloučeniny podle vynálezu se prošijí sítem 30 mesh (595 pm) a smísí s materiálem Avicel a stearanem hořečnatým. Získaná směs se lisuje do tablet pomocí vhodného tabletovacího lisu opatřeného raznicí o průměru 11,0 mm, takže se získá množství 5 mg sloučenin podle vynálezu na tabletu. Podobným způsobem je možno připravit tablety s jiným obsahem účinné látky, které obsahují například 25 nebo 100 mg sloučeniny podle vynálezu na tabletu.

· • · · · · ··· • · · ····«· · « • · · · · · · • ··· ·· ·· ·· ··

Příklad D

Tablety granulované za mokra mg/tableta

Sloučeniny podle vynálezu 5,0 mg

Předželatinizovaný škrob 28,0 mg

Sodná sůl glykolátu škrobu 16,0 mg

Stearan hořečnatý 4,0 mg

Laktóza do 400,0 mg

Sloučeniny podle vynálezu, laktóza, předželatinizovaný škrob a sodná sůl glykolátu škrobu se za sucha smísí a potom granulují pomocí vhodného objemu čištěné vody. Získané granule se suší a smísí se stearanem hořečnatým. Sušené granule byly lisovány na vhodném tabletovacím lisu opatřeném raznicí 11,0 mm pro získání obsahu 5 mg sloučenin podle vynálezu v tabletě.

Byly připraveny také tablety s jinými obsahy, například 25 a 100 mg/tabletu.

Příklad E

Tvrdá želatinová kapsle mg/kapsle

Sloučeniny podle vynálezu 5,0 mg

Mikrokrystalická celulóza (Avicel PH102) do 700,0 mg

Sloučeniny podle vynálezu se prošijí sítem 30 mesh (595 pm) a potom smísí s mikrokrystalickou celulózou pro získání homogenní směsi. Směs může být potom plněna do tvrdých želatinových kapslí velikosti 0EL pro získání kapslí s obsahem 5,0 mg sloučenin podle vynálezu na kapsli.

φ φ φ • · · • φ φ φ ♦

· φφ φφ' ·· φφ φ φ • φ φ φ • 9 9 ·

Φ · Φ Φ • 9 9 * • Φ ΦΦ

Podobným způsobem mohou být připraveny kapsle s jinými obsahy sloučenin podle vynálezu, jako je 25 nebo 100 mg/kapsli.

Příklad F

Měkká želatinová kapsle mg/kapsle

Sloučeniny podle vynálezu 10,0 mg

Polyethylenglykol 90,0 mg

Propylenglykol do 200,0 mg

Polyethylenglykol a propylenglykol se vzájemně smísí, v případě potřeby za tepla. Směs se míchá do homogenity. Přidají se sloučeniny podle vynálezu a směs se opět míchá do homogenity. Směs se potom plní do vhodné želatinové hmoty pro získání měkkých želatinových kapslí s obsahem 200 mg prostředku pro získání obsahu 10,0 mg sloučenin podle vynálezu na kapsli.

Podobným způsobem je možno připravit kapsle s jiným obsahem účinných látek, například 5 a 25 mg/kapsli sloučenin podle vynálezu.

Příklad G

Sirup

Sloučeniny podle vynálezu 5,0 mg

Roztok sorbitolu 1500,0 mg

Glycerol 1000,0 mg

Benzoát sodný 5,0 mg

Příchuť 12,5 mg

Čištěná voda do 5,0 ml *·· · «0 0 0 · 0 ·

040« 0 00 «

0* 0 9 9 9 9 9 99 9

9 9 9 9 9 9

00 00 0« 99

Benzoát sodný se rozpustí v části čištěné vody a přidá se roztok sorbitolu. Přidají se sloučeniny podle vynálezu, příchuť a glycerol a směs se míchá do homogenity. Získaná směs se doplní na požadovaný objem čištěnou vodou.

Další formulace

Příklad H

Čípek mg/čípek

Sloučeniny podle vynálezu 10,0 mg

Tuhý tuk Witepsol W32 do 2000,0 mg

Materiál Witepsol W32 se roztaví při teplotě přibližně 36 °C. Do jeho části se přidají sloučeniny podle vynálezu a směs se míchá. Přidá se zbývající roztavený Witepsol W32 a směs se míchá do homogenity. Formy se plní 2000 mg formulace pro získání obsahu 10,0 mg sloučenin podle vynálezu v čípku.

Příklad I

Transdermální prostředek

Sloučeniny podle vynálezu 5,0 mg

Kapalný silikon 90,9 mg

Koloidní oxid křemičitý 5,0 mg

Provede se smísení kapalného silikonu a účinné látky a přidá se koloidní oxid křemičitý. Materiál se potom dávkuje do polymerního laminátu složeného z polyesterové stahovací fólie lepidla pro styk s kůží složeného ze silikonu nebo akrylových polymerů, membrány pro řízení průniku léčiva z polyolefinu (vyrobené například z polyethylenu nebo polyvinylacetátu) nebo polyurethanu a nepropustné krycí ··· · • ··· 9 9 * * * • · 9 9 9·· ♦ ♦ ♦ · 9 9 ·· membrány z vícevrstevného polyesteru, kde tento laminát se potom teplem uzavře.

Biologické údaje

Inhibični účinek na sodíkové kanály řízené napětím

Pro vyhodnocení účinnosti sloučeniny vzorce (I) na rekombinantní Na⁺ kanál lidského mozku typ IIA exprimovaný v buňkách vaječníků čínského křečka bylo použito techniky přiložení napětí na celou buňku (whole-cell voltage-clamp). Sloučenina vzorce (I) inhibuje tyto kanály v závislosti na napětí a použití s odhadovanou hodnotou K, 11 μΜ pro rovnovážný stav inaktivace, což je přibližně 70 x více než účinnost v klidovém stavu (IC50 = 785 μΜ).

Zvýšená selektivita na stav kanálu a větší inhibice v závislosti na použití ve srovnání s lamotriginem (přibližně 30 x) poskytuje mechanismus, kterým sloučenina vzorce (I) selektivně blokuje přenos způsobený vysokofrekvenčním spouštěním akčních potenciálů (záchvatová aktivita). To podporuje zjištění, že sloučenina vzorce (I) je silnější protikřečová látka než lamotrigin a má vyšší terapeutický index.

Protikřečová účinnost

Bylo ukázáno, že sloučenina vzorce (I) má protiepileptické účinky u dvou modelů generalizované epilepsie na hlodavcích, testu maximálního elektrošoku u krysy (MES), který je zvířecí mode! odrážející lidské generalizované tonicko-klonické křeče a testu infuze pentylentetrazolu u myší, který napodobuje absenční křeče u člověka a myoklonický epileptický záchvat petit mal.

Například samcům krys kmene Han Wistar (hmotnost 150 200 g) byla orálně podávána suspenze testované sloučeniny v 0,25% ·

• ··· «9

9· • · 9 9 · * · · 9 *

9 9 ·

9 9 9 methylcelulóze 2 hod před testem. Těsně před testováním se provádí vizuální pozorování na přítomnost ataxie. Pomocí ušních elektrod se aplikuje proud 200 mA v trvání 200 ms a zaznamenává se přítomnost nebo nepřítomnost natažení zadní končetiny. Sloučenina vzorce (I) měla hodnotu ED₅o 1,7 mg/kg ve srovnání s hodnotou 6,1 mg/kg pro lamotrigin s terapeutickým indexem (poměr ED₅₀ pro ataxii a ED₅₀ pro test MES) 23,7 ve srovnání s 3,3 pro lamotrigin.

Sloučenina vzorce (I) měla v testu infúze pentylentetrazolu u myši hodnotu ED50 3,8 mg/kg při dávkování 1 hod po PTZ ve srovnání s hodnotou ED₅₀ 8,4 mg/kg pro lamotrigin.

Analgetické účinky

Bylo také ukázáno, že sloučenina vzorce (I) má analgetické účinky v modelech bolesti. Tři hodiny po intraplantárním podání karagenanu (100 μΙ 2%) kryse dojde ke snížení zatěžování zanícené tlapky a zvýšení objemu tlapky související s akutní hyperalgézií a zánětem. Sloučenina vzorce (I) podaná orálně 30 min před karagenanem poskytne v závislosti na dávce inhibice snížení zatěžování indukovaného karagenanem s hodnotou ED50 7,5 mg/kg ve srovnání s 23,5 mg/kg pro lamotrigin. Sloučenina vzorce (I) měla také v tomto modelu významné protizánětlivé účinky při dávce 30 mg/kg (50% snížení objemu tlapky).

Účinnost proti neurotoxicitě indukované MPTP

Model MPTP u myši se obecně používá jako model Parkinsonovy choroby.

Samci myši C57BL/6 dostali čtyři intraperitoneální injekce MPTP.HCI (15 mg volné báze na kg; Research Biochemicals) ve fyziologickém roztoku v intervalech 2 hod. Kontrolní myši dostávaly pouze fyziologický roztok. Testovaná sloučenina byla podávána ve • · · ti ti · ti ti • ti · tititi titi titi ti • ti · · · ti ti formě čtyř podkožních injekcí v olivovém oleji v intervalech 2 hod, 30 min před každou injekcí MPTP.

Sedm dní po injekcí MPTP byly myši usmrceny a bylo jim vyjmuto corpus striatum, které bylo okamžitě zmraženo a skladováno při -80 °C až do analýzy. V den analýzy byly tkáňové vzorky sonikovány v 10 objemech (hmotnost/objem) 0,1 M kyseliny chloristé s obsahem 1,9 mM hydrogensiřičitanu sodného a 1,6 mg/ml DBA-HBr. Po centrifugaci (2800 g, 10 min při pokojové teplotě) a filtraci (velikost pórů 0,5 pm, Millipore), byl supernatant převeden do nádobky a umístěn v autosampleru (M231XL, Gilson). Pomocí HPLC byl měřen obsah dopaminu. Sloučenina vzorce (I) poskytla 75% ochranu proti vyčerpání dopaminu při dávkování 3 mg/kg (x 4) a 98% ochranu při dávkování 10 mg/kg (x 4).

Claims (6)

1. Triazinové deriváty vzorce (I)

   Cl h₂n

   Cl

   Ci

   N^N (l) a jejich farmaceuticky přijatelné deriváty.
2. 2. Sloučenina podle nároku 1 pro použití v lékařství.
3. 3. Farmaceutický prostředek obsahující triazinový derivát podle nároku 1 spolu s farmaceuticky přijatelným nosičem.
4. 4. Použití triazinového derivátu podle nároku 1 při výrobě farmaceutického prostředku pro použití při léčení epilepsie, bipolární poruchy nebo manické deprese, bolesti, funkčních poruch střeva, neurodegenerativních onemocnění, neuroprotekce, neurodegenerace, ušních šelestů nebo závislosti nebo tolerance na látky indukující závislost.
5. 5. Způsob léčení pacienta trpícího nebo vnímavého k epilepsii, bipolárním poruchám nebo manické depresi, bolesti, funkčním • 9 ·9

   9 9 9 9

   9 9 9 9

   9 9 999

   9 9 9

   99 99

   9 9

   9 9 9 · • · 99 poruchám střeva, neurodegenerativním onemocněním, neuroprotekci, neurodegeneraci, ušním šelestům nebo závislosti nebo toleranci na látky indukující závislost.
6. 6. Způsob výroby triazinového derivátu vzorce (I) podle nároku 1, vyznačující se tím, že se redukuje sloučenina vzorce (II)