CZ20004621A3

CZ20004621A3 - A preparation containing carabine and inositol phosphate as a nutritional supplement or drug

Info

Publication number: CZ20004621A3
Application number: CZ20004621A
Authority: CZ
Inventors: Claudio Cavazza
Original assignee: Sigma Tau Healthscience Spa
Priority date: 2000-04-19
Filing date: 2000-04-19
Publication date: 2001-06-13

Abstract

Je popsán přípravek vhodný k prevenci a/nebo léčbě kardiovaskulárních a neurocerebrálních, tkáňových anoxických forem, svalových energetických nedostatečností, abnormalit zánětlivého typu, změn krevní koagulace jako je trombóza a tkáňových proliferujících forem, který lze brát ve formě doplňkové výživy, podpůrné výživy nebo jako skutečné léčivo, které obsahuje jako charakteristické účinné složky: (a) propionyl-L-karnitin nebo jeho farmakologicky přijatelnou sůl; a (b) inositolfosfát, zvláště inositohexafosfát (IP6).A preparation suitable for the prevention and/or treatment of cardiovascular and neurocerebral, tissue anoxic forms, muscle energy deficiencies, inflammatory-type abnormalities, blood coagulation changes such as thrombosis and tissue proliferative forms is described, which can be taken in the form of a nutritional supplement, nutritional support or as an actual drug, which contains as characteristic active ingredients: (a) propionyl-L-carnitine or a pharmacologically acceptable salt thereof; and (b) inositol phosphate, in particular inositohexaphosphate (IP6).

Description

Oblast technikyTechnical area

Vynález se týká kombinovaného přípravku, obsahujícího karnitin a inositolfosfát, vhodného jako doplňková výživa nebo léčivo.The invention relates to a combined preparation containing carnitine and inositol phosphate, suitable as a nutritional supplement or a medicine.

r tr t

Dosavadní stav technikyState of the art

Jak karnitiny, tak inositolhexafosfát jsou pro své důležité metabolické a farmakologické působení dobře známy, a to vedlo k četným významným farmakologickým a klinickým zjištěním.Both carnitines and inositol hexaphosphate are well known for their important metabolic and pharmacological actions, and this has led to numerous significant pharmacological and clinical findings.

Co se týká karnitinů, je jejich úloha při β-odbourávání mastných kyselin a syntéze ATP dobře známa.As for carnitines, their role in β-degradation of fatty acids and ATP synthesis is well known.

Jsou také obdařeny důležitým antioxidačním účinkem, jak to dokládá jejich ochranný účinek proti lipoperoxidaci fosfolipidových buněčných membrán a proti oxidativní zátěži vyvolávané v myokardiálních a endotheliálních buňkách. Tyto biochemické účinky karnitinů se obrážejí ve vynikajících výsledcích získaných v klinické praxi při jejich použití při léčbě různých forem atherosklerozy, myokardiální ischemie, periferní vaskulopatie nebo diabetů.They are also endowed with an important antioxidant effect, as demonstrated by their protective effect against lipoperoxidation of phospholipid cell membranes and against oxidative stress induced in myocardial and endothelial cells. These biochemical effects of carnitines are reflected in the excellent results obtained in clinical practice when they are used in the treatment of various forms of atherosclerosis, myocardial ischemia, peripheral vasculopathy or diabetes.

Také pro inositolhexafosfát (IP6) byly publikovány mnohé výzkumné studie jak biochemické, tak klinické povahy, ukazující jejich působení a využití při prevenci a léčbě mnohých patologických změn. I když se zájem o tyto sloučeniny datuje mnoho let nazpět, kdy byla určitým semenům rostlin pro velké procento IP6 přisuzována schopnost antioxidačního působení IP6 z důvodu dlouho trvající schopnosti zachovávat klíčivost, teprve nedávno výzkumníci začali určovat jeho antitrombotické a antisklerotické vlastnosti a jeho schopnost působit kardioprotektivně proti poškozování vyvolaného infarktem, rovněž tak jako jeho schopnost působit ochranně proti nastartování nádorových procesů. Tyto • · vlastnosti mohou mít částečnou spojitost s jeho vysokou antioxidační schopností a na druhé straně s jeho schopností interferovat s uvolňováním cytokináz a dalších látek vyvolaných aktivací receptorů řídících systémy buněčné transdukce.Many research studies, both biochemical and clinical, have also been published on inositol hexaphosphate (IP6), showing its action and use in the prevention and treatment of many pathological changes. Although interest in these compounds dates back many years, when certain plant seeds with a high percentage of IP6 were attributed with an antioxidant effect due to their long-lasting ability to maintain germination, only recently have researchers begun to determine its antithrombotic and antisclerotic properties and its ability to act cardioprotectively against damage caused by infarction, as well as its ability to act protectively against the initiation of tumor processes. These properties may be partly related to its high antioxidant capacity and, on the other hand, to its ability to interfere with the release of cytokines and other substances induced by the activation of receptors controlling cell transduction systems.

Ve skutečnosti je dobře známo, že inositolhexafosfát, IP6 či fytin je ve vysokém množství přítomen ve všech tkáních a buňkách. IP6 tvoří 1 až 5 % hmotnostních mnoha obilnin a luštěnin jako například rýže, mouky, sóji, ve kterých je obsaženo přibližně 50 % zásob fosforu. Hlavní oblastí v klinické praxi, ve které byl IP6 úspěšně využit vedle jiných dalších léčebných postupů, je léčba hypercholesterolemie a atherosklerozy, rovněž tak jako hyperkalcemie a rozpouštění ledvinových kamenů. Slibných výsledků bylo rovněž experimentálně dosaženo při jeho využití k inhibici agregace krevních destiček vyvolané ADP nebo reperfuzního poškození takových orgánů, jako je například srdce.In fact, it is well known that inositol hexaphosphate, IP6 or phytin, is present in high amounts in all tissues and cells. IP6 constitutes 1 to 5% by weight of many cereals and legumes such as rice, flour, soybeans, which contain approximately 50% of the phosphorus reserves. The main area in clinical practice in which IP6 has been successfully used, among other therapeutic procedures, is the treatment of hypercholesterolemia and atherosclerosis, as well as hypercalcemia and the dissolution of kidney stones. Promising results have also been obtained experimentally in its use to inhibit ADP-induced platelet aggregation or reperfusion injury of organs such as the heart.

Jeho inkorporace do erythrocytů vede navíc k větší dostupnosti použitelného kyslíku v takových případech, kdy je schopnost získat dostupný kyslík omezena, jako je tomu u ischemie orgánů, hemolytické anemii, plicní nedostatečnosti a erythrocytoze.Additionally, its incorporation into erythrocytes leads to greater availability of usable oxygen in cases where the ability to obtain available oxygen is limited, such as in organ ischemia, hemolytic anemia, pulmonary insufficiency, and erythrocytosis.

Opětovně lze prohlásit, že hlavním faktorem způsobujícím aktivitu IP6 je jeho síla antioxidačního působení spojená především s jeho schopností tvořit cheláty se železem.Once again, it can be stated that the main factor causing the activity of IP6 is its antioxidant power, primarily associated with its ability to form chelates with iron.

Co se týká vaskuloprotektivních, neuroprotektivních a antianoxických účinků IP6, zvyšuje jeho inkorporace do erythrocytů stabilitu iontů železa v nich, a ty pak mohou být vzájemně uvolňovány mezi erythrocyty samotnými a navíc zvyšováním jejich affinity ke kyslíku se vytváří větší množství dostupného kyslíku v těch tkáních, které se staly anoxickými.Regarding the vasculoprotective, neuroprotective and anti-anoxic effects of IP6, its incorporation into erythrocytes increases the stability of iron ions in them, which can then be mutually released between erythrocytes themselves, and in addition, by increasing their affinity for oxygen, a greater amount of available oxygen is created in those tissues that have become anoxic.

I když antioxidační účinky IP6 je nutno přičíst k významné aktivitě v metabolické a kardiovaskulární úrovní, musejí být vzhledem k protizánětlivým, imunostimulačním a protinádorovým vlastnostem vzaty v úvahu i další mechanizmy objasňované v této studii.Although the antioxidant effects of IP6 must be attributed to significant activity at the metabolic and cardiovascular levels, other mechanisms must also be taken into account due to the anti-inflammatory, immunostimulatory and antitumor properties elucidated in this study.

IP6 a inositolpentafosfát IP5 patří mezi hlavní fosfáty inositolu přítomné v buňkách. Vedle úpravy hemoglobinové affinity ke kyslíku a působení jako neurotransmitery vykonávají důležitou funkci pro převodové signály působící z povrchu buňky do jejího vnitřku, v aktivaci genu a při tvorbě cytokinás a faktorů řídících růst buněk.IP6 and inositol pentaphosphate IP5 are among the main inositol phosphates present in cells. In addition to regulating hemoglobin affinity for oxygen and acting as neurotransmitters, they perform important functions in transducing signals from the cell surface to the interior, in gene activation, and in the production of cytokines and cell growth factors.

V případě protinádorové aktivity IP6 se předpokládá defosforylace IP6 na IP5 a IP3 a tím i snižování zásoby inositolfosfátu charakterizovaného nižším stupněm fosforylace, jehož rozsah reguluje nebo inhibuje růst buněk. IP6 je navíc schopný blokovat aktivitu fosfatidylinositol-3-kinazy (PI-3-kinasa) a tím blokovat faktor epidermálního růstu a převod mimobuněčných signálů regulovaných aktivací proteinkinasy.In the case of the antitumor activity of IP6, it is assumed that the dephosphorylation of IP6 to IP5 and IP3 and thus the reduction of the pool of inositol phosphate characterized by a lower degree of phosphorylation, the extent of which regulates or inhibits cell growth, is involved. In addition, IP6 is able to block the activity of phosphatidylinositol-3-kinase (PI-3-kinase) and thus block epidermal growth factor and the transduction of extracellular signals regulated by protein kinase activation.

Jiným faktorem, který je nositelem protinádorové aktivity IP6 je ten, že jeho defosforylace na IP3 vypadá, jako by měla vazbu na otevírání odpovídajících vápníkových kanálů, jejichž nárůst není pouze kritickým prvkem při proliferaci buněk, ale je také důležitým faktorem při zavádění buněčné apoptozy. Navíc bylo zjištěno, že IP6 je odpovědný za inzulínové receptory růstového faktoru (IFG-II) a jako důsledek toho bylo demonstrováno, že jejich genové zvýraznění dává možnost vzniku různých nádorových kmenů. V každém případě bylo zjištěno, že IGF receptory jsou důležité při iniciaci buněčné hyperplasie.Another factor that contributes to the antitumor activity of IP6 is that its dephosphorylation to IP3 appears to be linked to the opening of the corresponding calcium channels, the increase of which is not only a critical element in cell proliferation but is also an important factor in the induction of cellular apoptosis. In addition, IP6 has been found to be responsible for the insulin growth factor (IFG-II) receptors and as a consequence, it has been demonstrated that their gene amplification gives rise to various tumor strains. In any case, IGF receptors have been found to be important in the initiation of cellular hyperplasia.

Při protizánětlivém, imunostimulačním a protinádorovém působení IP6 se předpokládají dva různé mechanizmy. Jeden je typický pro antioxidační látky, které podobně jako kyselina salicylová inhibují aktivitu přenosu genů přes NK-kbIkB systém a další, který přes zásobník inositolfosfátu reguluje růstové faktory. Z praktického hlediska se v protinádorové oblasti ukázal IP6 jako účinný pro inhibici střevních nádorů vyvolaných u zvířat azoxymethanem, a to podle velikosti dávky.Two different mechanisms are assumed for the anti-inflammatory, immunostimulatory and antitumor effects of IP6. One is typical of antioxidant substances, which, like salicylic acid, inhibit the activity of gene transfer through the NK-kbIkB system, and another, which regulates growth factors through the inositol phosphate reservoir. From a practical point of view, in the antitumor field, IP6 has been shown to be effective in inhibiting intestinal tumors induced in animals by azoxymethane, depending on the dose.

Jeho použití se také ukázalo jako stejně účinné pro nádor prsu vyvolaný 7,12dimethylbenzanthracenem (DMBA) nebo methylnitrosomočovinou. Výborné výsledky byly také získány při použití IP6 u nádorů plic, prostaty a jater. Zkoušky provedené na lidských materiálech, zvláště na adenokarcinomových a leukemických buňkách ověřily protinádorovou účinnost IP6.Its use has also been shown to be equally effective for breast tumors induced by 7,12-dimethylbenzanthracene (DMBA) or methylnitrosourea. Excellent results have also been obtained with the use of IP6 in lung, prostate and liver tumors. Tests carried out on human materials, especially on adenocarcinoma and leukemia cells, have verified the antitumor efficacy of IP6.

, í, í

Podstata vynálezuThe essence of the invention

Nyní bylo překvapivě zjištěno, že kombinovaný přípravek obsahující charakteristické složky:It has now surprisingly been found that a combination preparation containing the characteristic ingredients:

(a) propionyl-L-karnitin nebo jednu z jeho farmakologicky přijatelných solí; a (b) inositolfosfát vybíraný ze skupiny sestávající z inositolmonofosfátu, inositoltetrafosfátu, inositolpentafosfátu a zvláště inositolhexafosfátu (IP6) je obzvláště účinný při prevenci a/nebo léčbě kardiovaskulárních a neurocerebrálních postižení a různých forem tkáňové anoxie, abnormalit zánětlivého typu, energetických svalových nedostatečností a tkáňových proliferujících forem jako výsledek silného, neočekávaného synergického účinku působeného jeho složkami.(a) propionyl-L-carnitine or one of its pharmacologically acceptable salts; and (b) an inositol phosphate selected from the group consisting of inositol monophosphate, inositol tetraphosphate, inositol pentaphosphate and especially inositol hexaphosphate (IP6) is particularly effective in the prevention and/or treatment of cardiovascular and neurocerebral disorders and various forms of tissue anoxia, inflammatory-type abnormalities, energetic muscle deficiencies and tissue proliferative forms as a result of the strong, unexpected synergistic effect exerted by its components.

Také bylo zjištěno, že složka (a) může dále případně obsahovat další „karnitin“ vybíraný ze skupiny sestávající z L-karnitinu, acetyl-L-karnitinu, butyryl-Lkamitinu, valeryl-L-karnitinu a isovaleryl-L-kamitinu nebo jejich farmakologicky přijatelných solí nebo jejich směsí a složka (b) může navíc obsahovat inositol.It has also been found that component (a) may further optionally comprise another "carnitine" selected from the group consisting of L-carnitine, acetyl-L-carnitine, butyryl-L-carnitine, valeryl-L-carnitine and isovaleryl-L-carnitine or their pharmacologically acceptable salts or mixtures thereof and component (b) may additionally comprise inositol.

Hmotnostní poměr složky (a) ke složce (b), kterému se dává přednost se pohybuje v rozmezí od 1 : 10 do 1 : 1.The preferred weight ratio of component (a) to component (b) is in the range of 1:10 to 1:1.

·· ···· ·· ···· ·· • · · · · · · · · • · · · · · · « « · » • · · · · · · · · · • · · ·· ·· β * ····· ···· ·· ···· ·· • · · · · · · · · • · · · · · · « « · » • · · · · · · · · · • · · ·· ·· β * ···

Složka (b) může být v přípravku přítomna ve formě rostlinného produktu nebo extraktu rostlinného produktu obsahujícího vysoké procento inositolfosfátů. Vhodnými rostlinnými produkty jsou například otruby a neloupaná rýže.Component (b) may be present in the preparation in the form of a plant product or an extract of a plant product containing a high percentage of inositol phosphates. Suitable plant products are, for example, bran and paddy rice.

Přípravek podle vynálezu lze používat buď jako doplňkovou výživu nebo nutriční doplněk hlavně s preventivním účinkem a jako léčivo k léčbě klinicky zjištěných onemocnění.The preparation according to the invention can be used either as a supplementary food or nutritional supplement mainly with a preventive effect and as a medicine for the treatment of clinically established diseases.

Překvapující synergický účinek, kterého je dosahováno kombinací „karnitinů“ a inositolfosfátů, avšak zvláště propionyl-L-karnitinu a IP6 byl potvrzen mnoha farmakologickými zkouškami (z nichž některé jsou zde dále popsány) volenými takovým způsobem, aby se zajistila vysoká předpovídací schopnost s výhledem na praktické využití tohoto přípravku a to jak na poli prevence, tak jako přísně terapeutická látka.The surprising synergistic effect achieved by the combination of "carnitines" and inositol phosphates, but especially propionyl-L-carnitine and IP6, has been confirmed by numerous pharmacological tests (some of which are described below) chosen in such a way as to ensure high predictive power with a view to the practical use of this preparation, both in the field of prevention and as a strictly therapeutic substance.

Toxikologické zkouškyToxicological tests

Jak L-karnitin a propionyl-L-karnitin tak inositolhexafosfát (IP6) jsou známě svou charakteristickou malou toxicitou a dobrou tolerovatelností. Tyto významné charakteristiky byly ověřeny jednoduchým orálním podáváním L-karnitinu a IP6 krysám a myším v dávkách odpovídajících 1 g.kg'¹ a 750 mg.kg’¹ a u propionyl-Lkarnitinu a IP6 v dávkách odpovídajících 750 mg.kg'¹ a 500 mg.kg'¹ a nebyla zjištěna žádná toxická reakce nebo netolerance. Také bylo tolerováno intraperitoneální podávání 500 mg propionyl-L-karnitinu a 300 mg inositolhexafosfátu krysám a nebyly při tom zjištěny žádné toxické účinky. Tyto vynikající charakteristiky nízké toxicity byly také ověřeny výsledky zkoušek zahrnujících denní orální podávání 300 mg.kg'¹ propionyl-L-karnitinu společně s 200 mg.kg'¹ IP6 krysám po dobu třiceti po sobě jdoucích dní. Na konci těchto ···· ·· ···· «· * * 0 0 0 · · · · · 0 0 · · · · · • 00 · · · · * · « • · 0 00 00 «0 00· zkoušek nebylo zjištěno žádné zmenšení růstu zvířat na které bylo takto působeno, ani nebyly zjistitelné změny hodnot hematokrytu či jiných proměnných složek krve, zvláště sérové glukózy, BUN a cholesterolu.Both L-carnitine and propionyl-L-carnitine and inositol hexaphosphate (IP6) are known for their characteristic low toxicity and good tolerability. These significant characteristics were verified by simple oral administration of L-carnitine and IP6 to rats and mice at doses corresponding to 1 g.kg' ¹ and 750 mg.kg' ¹ and of propionyl-L-carnitine and IP6 at doses corresponding to 750 mg.kg' ¹ and 500 mg.kg' ¹ and no toxic reaction or intolerance was observed. Intraperitoneal administration of 500 mg of propionyl-L-carnitine and 300 mg of inositol hexaphosphate to rats was also tolerated and no toxic effects were observed. These excellent characteristics of low toxicity were also verified by the results of tests involving daily oral administration of 300 mg.kg' ¹ propionyl-L-carnitine together with 200 mg.kg' ¹ IP6 to rats for thirty consecutive days. At the end of these tests, no reduction in the growth of the animals so treated was observed, nor were any detectable changes in the hematocrit or other blood variables, particularly serum glucose, BUN and cholesterol.

Při autopsii nebylo možno navíc zjistit žádné abnormality základních ani histologických změn základní parenchymální tkáně zkoušených orgánů.Moreover, no abnormalities of the underlying or histological changes of the underlying parenchymal tissue of the examined organs could be detected during autopsy.

Protizánětlivé účinky zjišťované zkouškou na karageninový edemAnti-inflammatory effects determined by the carrageenan edema test

Ke zjištění protizánětlivého účinku nového přípravku byla použita zkouška na karagenní edem, při které byl do nožek krys vpichován karagenin.To determine the anti-inflammatory effect of the new preparation, a carrageenan edema test was used, in which carrageenan was injected into the legs of rats.

Injikování 0,1 ml 1 % roztoku karageninu (Sigma Chemical, St. Louis, Mo, USA) do subplanární oblasti pravé nožky krysy vyvolalo znatelný edém nožky, který dosáhl maximální intenzity 4 až 5 hodin po injikování. Edém byl měřen rtuťovou plethysmografií v různých časových intervalech až do čtyř hodin po injikování karageninu.Injection of 0.1 ml of a 1% carrageenan solution (Sigma Chemical, St. Louis, Mo, USA) into the subplanar region of the right foot of a rat induced marked edema of the foot, which reached its maximum intensity 4 to 5 hours after injection. Edema was measured by mercury plethysmography at various time intervals up to four hours after carrageenan injection.

Jak propionyl-L-karnitin (250 mg.kg'¹), tak IP6 (250 kg.kg'¹) byly podávány orálně půl hodiny před subplantární karageninovou injekcí. Výsledky této zkoušky (viz tabulka 1) ukazují, že jak propionyl-L-karnitin, tak i nositolhexafosfát vykazují slabý inhibiční účinek na zánětlivou reakci vyvolanou karageninem, avšak jejích kombinace téměř zcela inhibovala edém vyvolaný karageninem, čímž je demonstrován neočekávaný a překvapující synergický účinek propionyl-Lkarnitinu a inositolhexafosfátu.Both propionyl-L-carnitine (250 mg.kg' ¹ ) and IP6 (250 mg.kg' ¹ ) were administered orally half an hour before subplantar carrageenan injection. The results of this test (see Table 1) show that both propionyl-L-carnitine and inositol hexaphosphate have a weak inhibitory effect on the inflammatory reaction induced by carrageenan, but their combination almost completely inhibited the edema induced by carrageenan, thus demonstrating the unexpected and surprising synergistic effect of propionyl-L-carnitine and inositol hexaphosphate.

Tabulka 1Table 1

Protizánětlivý účinek zjišťovaný zkouškou na karageninový edemAnti-inflammatory effect determined by carrageenan edema test

1 h 1 hour % inhibice po 2h % inhibition after 2h 4h 4h propionyl-L-karnitin 250 mg.kg'¹ propionyl-L-carnitine 250 mg.kg' ¹ - - 15±0,3 15±0.3 8±0,9 8±0.9 IP6 250 mg.kg'¹ IP6 250 mg.kg' ¹ 15+1,1 15+1.1 20±2,1 20±2.1 15±0,6 15±0.6 propionyl-L-karnitin 250 mg.kg'¹ + propionyl-L-carnitine 250 mg.kg' ¹ + 00±4,8 00±4.8 80±7,1 , 80±7.1 , 50±3,9 50±3.9

IP6 250 mg.kg'¹ IP6 250 mg.kg' ¹

Protizánětlivý účinek prováděný zkouškou na arthritidu vyvolanou kolagenemAnti-inflammatory effect performed by collagen-induced arthritis assay

Potvrzení protizánětlivého účinku přípravku podle vynálezu bylo získáno za použití zkoušky na arthritidu typu II vyvolanou kolagenem technikou popsanou Trenthamem (Trentham, D. R.: J. Exp. Med., 146, 857, 1977). Při této zkoušce byla skupina myší imunizována intradermálním injikováním 100 pg přírodního kolagenu emulgovaného ve Freundově kompletním adjuvantu (Difco Labs., Detroit, USA) do kořene ocasu.Confirmation of the anti-inflammatory effect of the preparation according to the invention was obtained using the collagen-induced arthritis type II test according to the technique described by Trentham (Trentham, D. R.: J. Exp. Med., 146, 857, 1977). In this test, a group of mice was immunized by intradermal injection of 100 pg of natural collagen emulsified in Freund's complete adjuvant (Difco Labs., Detroit, USA) at the base of the tail.

Po třech týdnech bylo takto připraveným zvířatům opět intraperitoneálně injikována stejná dávka emulgovaného kolagenu. Propionyl-L-karnitin (200 mg.kg'¹) nebo inositolhexafosfát (200 mg.kg'¹) nebo obě sloučeniny v kombinaci se orálně podávaly ode dne injikovíní kolagenu až do konce šestého týdne.After three weeks, the animals thus prepared were again intraperitoneally injected with the same dose of emulsified collagen. Propionyl-L-carnitine (200 mg.kg' ¹ ) or inositol hexaphosphate (200 mg.kg' ¹ ) or both compounds in combination were orally administered from the day of collagen injection until the end of the sixth week.

Jedna skupina zvířat neobdržela žádný přípravek a sloužila jako kontrolní skupina. Intenzita edému byla posuzována stupnicí od 1 do 4. Výsledky této zkoušky ukazují silný synergismus mezi propionyl-L-karnitinem a inositolhexafosfátem. Propionyl-L-karnitin samotný nevykazoval žádný inhibiční účinek na edém vyvolaný kolagenem a IP6 vyvolal pouze slabé zmenšeníOne group of animals received no preparation and served as a control group. The intensity of edema was assessed on a scale from 1 to 4. The results of this test show a strong synergism between propionyl-L-carnitine and inositol hexaphosphate. Propionyl-L-carnitine alone showed no inhibitory effect on collagen-induced edema and IP6 induced only a weak reduction.

00

- 8 (přibližně 20 %), avšak pokud byly podány obě sloučeniny v kombinaci, inhibice edému byla vyšší než 80 %.- 8 (approximately 20%), however, when both compounds were administered in combination, the inhibition of edema was greater than 80%.

Působení proti agregaci destičekAntiplatelet aggregation activity

Působení přípravku podle vynálezu proti agregaci destiček bylo sledováno na vzorcích krve zdravých dobrovolníků. Na vzorky se působilo citrátem sodným a byly zcentrifugovány (145g po dobu 5 minut při 22°C) a spočítán počet destiček (CA 580 = 4 Platelet Counter - DelCon). Pokud to bylo nutné, byla tato hodnota upravena na hodnotu 300000 destiček na ml přídavkem PPP (Platelet Poor Plasma = plasma s omezeným počtem destiček), získané centrifugováním krve 1600g po dobu 10 min. při 22 °C.The effect of the preparation according to the invention on platelet aggregation was monitored on blood samples from healthy volunteers. The samples were treated with sodium citrate and centrifuged (145g for 5 minutes at 22°C) and the platelet count (CA 580 = 4 Platelet Counter - DelCon) was counted. If necessary, this value was adjusted to 300,000 platelets per ml by adding PPP (Platelet Poor Plasma = plasma with a limited number of platelets), obtained by centrifuging the blood at 1600g for 10 minutes at 22°C.

Použitým agregačním činidlem byl kolagen (2,5 ng.ml'¹ ,5 ng.ml·¹) a vyvolaná agregace byla měřena fotometrícky způsobem popsaným Bornem (Born, G. V.: Nátuře, 194,927, 1962). Agregace destiček byla měřena při základních podmínkách a po 10 min. inkubace se samotným propionyl-L-karnitinem a IP6 nebo s jejich kombinací.The aggregation agent used was collagen (2.5 ng.ml· ¹ ,5 ng.ml· ¹ ) and the induced aggregation was measured photometrically according to the method described by Born (Born, GV: Nature, 194,927, 1962). Platelet aggregation was measured under basal conditions and after 10 min. incubation with propionyl-L-carnitine and IP6 alone or with their combination.

Použité dávky propionyl-L-karnitinu byly 10 ng a 20 ng.ml·¹ a u IP6 byly dávky 4 ng a 8 ng.ml'¹.The doses of propionyl-L-carnitine used were 10 ng and 20 ng.ml· ¹ and the doses of IP6 were 4 ng and 8 ng.ml· ¹ .

Výsledky těchto zkoušek ukazují, že zatímco propionyl-L-karnitin samotný neinhibuje agregační účinky kolagenu, samotný IP6 je snižuje až ke 40 %. Kombinace obou slučenin však má za důsledek úplnou inhibici agregačního účinku (100 %), což je ukazatel účinného synergického působení mezi propionylL-karnitinem a IP6.The results of these tests show that while propionyl-L-carnitine alone does not inhibit the aggregation effects of collagen, IP6 alone reduces them by up to 40%. However, the combination of both compounds results in complete inhibition of the aggregation effect (100%), indicating an effective synergistic action between propionyl-L-carnitine and IP6.

Protisklerotické účinkyAntisclerotic effects

Protisklerotické účinky nového přípravku byly posuzovány u různých skupin krys (samci krys chovu Wistar), kterým byla podávána atherogenická strava obsahující • · · ·· · % kaseinu, 1 % cholesterolu, 15 % bavlníkového oleje, 60 % cukru a 200 mj. g'¹ potravy po šest po sobě následujících týdnů v režimu navrženém Melinowem (Melinow, M. R.: Atherosclerosis, 48, 105, 1983). Na konci šestého týdne působení se vytvářely znatelné atherosklerotické vaskulární léze, které byly zvláště zřetelné v místě abdominální aorty. Závažnost těchto lézí byla hodnocena morfometrickou metodou měřením tloušťky abdominální aorty a intenzitou zabarvení vyvolaného Súdánem IV stupnicí progresivního systému od 1 do 5. V těchto zkouškách obdržely krysy denní dávky 150 mg.kg'¹ propionyl-L karnitinu a 100 mg.kg¹ IP6 současně s jejich atherogenní potravou. Výsledky zkoušek provedených na krysách takto chovaných ukázaly, že zatímco samotný propionylL-karnitin či IP6 vyvolají pouze slabý ochranný účinek, podávání těchto dvou sloučenin v kombinaci téměř zcela inhibuje výskyt atherosklerotických lézí, jak to ukázala morfometrická měření a barvení Súdánem IV, a tím se v tomto případě prokazuje mohutný synergický účinek kombinace propionyl-L-karnitinu a IP6.The antisclerotic effects of the new preparation were assessed in different groups of rats (male Wistar rats) which were fed an atherogenic diet containing • · · · · · % casein, 1 % cholesterol, 15 % cottonseed oil, 60 % sugar and 200 IU g' ¹ of food for six consecutive weeks in the regimen proposed by Melinow (Melinow, MR: Atherosclerosis, 48, 105, 1983). At the end of the sixth week of treatment, noticeable atherosclerotic vascular lesions were formed, which were especially evident in the abdominal aorta. The severity of these lesions was assessed by morphometric method by measuring the thickness of the abdominal aorta and the intensity of Sudan IV staining on a progressive system scale from 1 to 5. In these tests, rats received daily doses of 150 mg.kg' ¹ propionyl-L-carnitine and 100 mg.kg ¹ IP6 simultaneously with their atherogenic diet. The results of the tests carried out on rats thus bred showed that while propionyl-L-carnitine or IP6 alone induce only a weak protective effect, the administration of these two compounds in combination almost completely inhibits the occurrence of atherosclerotic lesions, as shown by morphometric measurements and Sudan IV staining, thus demonstrating in this case a powerful synergistic effect of the combination of propionyl-L-carnitine and IP6.

Vliv na svalové cvičeníEffect on muscle exercise

Jelikož IP6, který je bohatý na fosfátové skupiny a je dobrou energetickou rezervou, byla provedena řada zkoušek k určení, zda může jeho podávání prodloužit dobu vytrvalostního plavání myší nucených plavat v obdélníkové nádrži plné vody technikou popsanou Zhengem (Zheng, R. L.: Acta Pharmacol. Sinica, 14, 47, 1993), a zda lze tento účinek zvýšit použitím kombinace s karnitinem, jako například s propionyl-L-karnitinem. Zkoušky byly provedeny s různými skupinami zvířat, kterým byl podáván samotný propionyl-L-karnitin (200 mg.kg¹) nebo IP6 (100 mg.kg¹), či obě sloučeniny v kombinaci.Since IP6, which is rich in phosphate groups and is a good energy reserve, a series of tests were performed to determine whether its administration could prolong the endurance swimming time of mice forced to swim in a rectangular tank full of water by the technique described by Zheng (Zheng, RL: Acta Pharmacol. Sinica, 14, 47, 1993), and whether this effect could be enhanced by the use of a combination with carnitine, such as propionyl-L-carnitine. Tests were performed with different groups of animals administered propionyl-L-carnitine alone (200 mg.kg ¹ ) or IP6 (100 mg.kg ¹ ), or both compounds in combination.

Sloučeniny byly podávány orálně po tři dny předcházející zkoušce. U takto připravených zvířat se měřil čas vytrvalého plavání a porovnáván s kontrolními zvířaty. Střední čas vytrvalého plavání se mírně zvýšil u krys, které obdržely jak samotný propionyl-L-karnitin tak IP6, avšak významné prodloužení času plavání ·· 9 99 9The compounds were administered orally for three days prior to the test. The sustained swimming time of the animals thus prepared was measured and compared with the control animals. The mean sustained swimming time was slightly increased in rats that received both propionyl-L-carnitine and IP6 alone, but a significant increase in swimming time was not observed in rats that received both propionyl-L-carnitine and IP6 alone.

- 10 bylo zjištěno u zvířat, která obdržela kombinaci propionyl-L-karnitinu a IP6, čímž byl potvrzen zřejmý synergický účinek (viz tabulka 2).- 10 was found in animals that received the combination of propionyl-L-carnitine and IP6, confirming a clear synergistic effect (see Table 2).

V jiné sérii zkoušek byl hodnocen účinek propionyl-L-karnitinu a IP6 na nucené svalové cvičení, které, jak známo, může vytvářet sloučeniny s reaktivním kyslíkem (ROS - reactive oxygen species), záněty a poškození svalových struktur.Another series of trials evaluated the effect of propionyl-L-carnitine and IP6 on forced muscular exercise, which is known to generate reactive oxygen species (ROS), inflammation, and damage to muscle structures.

Nucené svalové cvičení bylo zkoušeno na různých skupinách krys tak, že byly ponechány běhat na pohyblivém pásu s řízenou rychlostí a úhlem náklonu, jak to popisuje Li (Li, J. X.: Acta Pharmacologica Sinica, 20, 126, 1999) a Husain (Husajn, K.: Pathophysiology, 4, 69, 1997). Zvířata byla ponechána běhat na přibližně 5° stoupání při rychlosti pásu 28 m.min'¹. Zvířata byla ponechána takto namáhat po dobu přibližně 85 minutového cvičení.Forced muscle exercise was tested on different groups of rats by allowing them to run on a moving treadmill with controlled speed and angle of inclination, as described by Li (Li, JX: Acta Pharmacologica Sinica, 20, 126, 1999) and Husain (Hussein, K.: Pathophysiology, 4, 69, 1997). The animals were allowed to run on an approximately 5° incline at a treadmill speed of 28 m.min' ¹ . The animals were allowed to exercise in this manner for approximately 85 minutes.

Zkouška byla provedena na skupinách zvířat, která po tři dny předcházející cvičební zkoušce obdržela samostatně 200 mg.kg'¹ propionyl-L-karnitinu nebo 100 mg.kg'¹ IP6 nebo jejich kombinaci. Pět a třicet minut po ukončení cičení byly z utracených zvířat odebrány vzorky svalu gastrocnemius a ty použity k měření obsahu malondialdehydu (MDA) jakožto představitele úrovně lipoperoxidace reakcí s kyselinou thiobarbiturovou metodou popsanou Ohkawou (Ohkawa, H.: Anal. Biochem., 95, 351, 1979).The test was performed on groups of animals that received 200 mg.kg' ¹ propionyl-L-carnitine or 100 mg.kg' ¹ IP6 or their combination for three days prior to the exercise test. Thirty-five minutes after the end of weaning, gastrocnemius muscle samples were taken from the sacrificed animals and used to measure the content of malondialdehyde (MDA) as a representative of the level of lipoperoxidation by reaction with thiobarbituric acid by the method described by Ohkawa (Ohkawa, H.: Anal. Biochem., 95, 351, 1979).

Jak je z výsledků uvedených v tabulce 3 zřejmé, jak samotný propionyl-L-karnitin, tak samotný IP6 snížily úroveň svalové lipoperoxidace ve svalovém homogenátu, jak to bylo stanoveno menším zvýšením MDA, což se ukázalo velmi zřetelně u kontrolních zvířat pět minut po ukončení cvičení. Kombinace propionyl-L-karnitinu a IP6 na druhé straně vytvořila téměř úplnou ochranu proti lipoperoxidaci ve svalech pokusných zvířat, čímž se také i v tomto případě prokázalo synergické působení propionyl-L-karnitinu a IP6.As can be seen from the results presented in Table 3, both propionyl-L-carnitine alone and IP6 alone reduced the level of muscle lipoperoxidation in muscle homogenate, as determined by a smaller increase in MDA, which was very evident in control animals five minutes after the end of exercise. The combination of propionyl-L-carnitine and IP6, on the other hand, produced almost complete protection against lipoperoxidation in the muscles of experimental animals, thus demonstrating the synergistic effect of propionyl-L-carnitine and IP6 in this case as well.

• fl ··»· ·· ···· ·· • · · · · · 4 • · · • · · « · · » · · • · · flfl flfl flfl• fl ··»· ·· ···· ·· • · · · · · 4 • · · • · · « · · » · · • · · flfl flfl flfl

- 11 Tabulka 2- 11 Table 2

Zkouška vytrvalostního plavání látka Doba plavání (min.) kontrolní 98±15 propionyl-L-karnitin 116±19Endurance swimming test substance Swimming time (min.) control 98±15 propionyl-L-carnitine 116±19

IP6 136±16 propionyl-L-karnitin + IP6 184±22IP6 136±16 propionyl-L-carnitine + IP6 184±22

Tabulka 3Table 3

Zkouška svalového vyčerpáníMuscle exhaustion test

Látka Obsah MDA ve svalu [nmol.g'¹ (hmotn/hmotn)]Substance MDA content in muscle [nmol.g' ¹ (wt/wt)]

po 5 min. after 5 minutes po 30 min. after 30 minutes kontrolní control 234±9 234±9 225±11 225±11 propionyl-L-karnitin propionyl-L-carnitine 210±10 210±10 212±14 212±14 IP6 IP6 200+16 200+16 205±8 205±8 propionyl-L-karnitin + IP6 propionyl-L-carnitine + IP6 175±12 175±12 181±12 181±12

Vliv na neuronální hypoxiiEffect on neuronal hypoxia

K vyhodnocení ochranného účinku přípravku podle vynálezu na poškození v neuronální oblasti způsobené hypoxii byly provedeny zkoušky na kulturách kuřecích cerebrálních neuronů, u kterých se omezení respirace buněk vyvolá zavedením NaCN do kultur. Energetický metabolismus neuronálních kultur byl hodnocen měřením koncentrace ATP přítomné v kulturách bez působení látek nebo kulturách, ke kterým byl přidán propionyl-L-karnitin nebo IP6 v dávkách 100 a 50 mg.!'¹. Kuřecí cerebrální neuronové kultury byly připraveny technikou popsanou Pettmanem (Pettman, B.: Nátuře, 281, 378, 1979). Cytotoxická hypoxie byla vyvolána přidáváním NaCN ke kultivačnímu mediu až do konečné ·· ··♦· tt ···· ·· • · · · · · · · · ··· · · · · · • · · · · · ···· ·· ·To evaluate the protective effect of the preparation according to the invention on damage in the neuronal area caused by hypoxia, tests were performed on chicken cerebral neuron cultures, in which the restriction of cell respiration was induced by introducing NaCN into the cultures. The energy metabolism of neuronal cultures was evaluated by measuring the concentration of ATP present in cultures without the action of substances or in cultures to which propionyl-L-carnitine or IP6 was added in doses of 100 and 50 mg.!' ¹ . Chicken cerebral neuron cultures were prepared by the technique described by Pettman (Pettman, B.: Nature, 281, 378, 1979). Cytotoxic hypoxia was induced by adding NaCN to the culture medium up to the final ·· ··♦· tt ···· ·

- 12 koncentrace 1 mmol.l'¹. Po 120 min. bylo medium vyměněno za medium bez NaCN a metabolismus buněk byl blokován promytím ledovým roztokem ústojného roztoku. Hodnocení ATP bylo provedeno postupem popsaným Wernerem (Werner, A. J.: Chromatogr. Biomed. Appl., 421, 257, 1987).- 12 concentration of 1 mmol.l' ¹ . After 120 min. the medium was replaced with medium without NaCN and the cell metabolism was blocked by washing with ice-cold buffer solution. ATP assessment was performed according to the procedure described by Werner (Werner, AJ: Chromatogr. Biomed. Appl., 421, 257, 1987).

Výsledky těchto zkoušek jsou uvedeny v tabulce 4. Měření ATP ukazují, že hladiny ATP jsou podstatně sníženy anoxií a zůstávají nízké i po třicetiminutové reoxidaci, zatímco v případě, že je přítomen samotný propionyl-L-karnitin nebo IP6 nebo v kombinaci, je možno pozorovat menší snížení hladiny ATP, rovněž tak jako rychlé obnovení hladin ATP.The results of these tests are presented in Table 4. ATP measurements show that ATP levels are significantly reduced by anoxia and remain low even after thirty minutes of reoxygenation, while when propionyl-L-carnitine or IP6 are present alone or in combination, a smaller reduction in ATP levels can be observed, as well as a rapid recovery of ATP levels.

Tabulka 4Table 4

Vliv na neuronální hypoxii látka ATP nmol.g'¹ proteinu po reoxidační doběEffect on neuronal hypoxia substance ATP nmol.g' ¹ protein after reoxidation period

0 min. 0 minutes 30 min. 30 minutes kontrolní control 9,2±0,9 9.2±0.9 14,4±1,2 14.4±1.2 propionyl-L-karnitin propionyl-L-carnitine 11,1±1,6 11.1±1.6 16,3±2,2 16.3±2.2 IP6 IP6 12,4±2,1 12.4±2.1 16,9±1,9 16.9±1.9 propionyl-L-karnitin + IP6 propionyl-L-carnitine + IP6 15,8±2,4 15.8±2.4 23,7±2,3 23.7±2.3

Antiproliferativní působeníAntiproliferative action

Z pohledu mnoha výzkumných studií týkajících se preventivního chemoterapeutického protinádorového působení pokusně dokazovaného pomocí IP6, zvláště proti nádorům střeva a prsu, bylo hodnoceno antiproliferativní působení přípravku podle vynálezu ve vztahu k proliferaci kožní tkáně pokusně vyvolané na myších subkutálním injikováním teleocidinu, který je podobně jako forbolmyristáty schopný způsobit proliferující kožní abnormality podobné nádorům (Fujiki, A.: Biochem. Biophys. Res. Comm., 90, 976, 1979).In view of the numerous research studies concerning the preventive chemotherapeutic antitumor action experimentally demonstrated by IP6, especially against intestinal and breast tumors, the antiproliferative action of the preparation according to the invention was evaluated in relation to the proliferation of skin tissue experimentally induced in mice by subcutaneous injection of teleocidin, which, like phorbol myristates, is capable of causing proliferating skin abnormalities similar to tumors (Fujiki, A.: Biochem. Biophys. Res. Comm., 90, 976, 1979).

Jelikož je kožní reakce vyvolaná teleocidinem provázena zvýšením ornitinSince the skin reaction induced by teleocidin is accompanied by an increase in ornithine

Μ 0··· 0 0 00··M 0··· 0 0 00··

0 0 0 0 ·00 0 0 0 ·0

0 0 0 0 0 00 0 0 0 0 0

0 · 00 0 000 • 00 0000 ·0 · 00 0 000 • 00 0000 ·

0 00 000 00 00

- 13 dekarboxylázové aktivity, může být tento enzym považován za markér na proliferační reakci a na její rozdílné stupně závažnosti.- 13 decarboxylase activity, this enzyme can be considered a marker for the proliferative reaction and its different degrees of severity.

Při těchto zkouškách byl teleocidin injikován subkutálně do vyholeného hřbetu myší v dávce 5 pg na jednu myš.In these tests, teleocidin was injected subcutaneously into the shaved back of mice at a dose of 5 µg per mouse.

Jeden týden před injikováním teleocidinu obdržely různé skupiny zvířat orální dávku propionyl-L-karnitinu (200 mg.kg'¹) nebo IP6 (100 mg.kg'¹) nebo obě sloučeniny . v kombinaci. Pět hodin po injikování teleocidinu bylo na zhomogenizovaném epidermisu zvířat chovaných podle metody popsané 0’Brienem (0’Brien, T. G.: Cancer Res., 42, 2841, 1982) provedeno hodnocení ornitindekarboxylázy.One week before injection of teleocidin, different groups of animals received an oral dose of propionyl-L-carnitine (200 mg.kg- ¹ ) or IP6 (100 mg.kg- ¹ ) or both compounds in combination. Five hours after injection of teleocidin, ornithine decarboxylase was assayed on homogenized epidermis of animals raised according to the method described by O'Brien (O'Brien, TG: Cancer Res., 42, 2841, 1982).

Vyhodnocení koncentrace ornitindekarboxylázy v proteinu epidermálního extraktu bylo provedeno technikou popsanou Lowrym (Lowry, O. H.: J. Biol. Chem., 193, 265, 1951). Jak je zřejmé z výsledků uvedených v tabulce 5, je zvýšené působení ornitindekarboxylázy vyvolané teleocidinem značně omezeno předchozím podáváním samotného propionyl-L-karnitinu nebo IP6. Pokud se však tyto sloučeniny použily v kombinaci, došli ke značnému a vysoce významnému snížení ornitindekarboxylázy.The evaluation of the concentration of ornithine decarboxylase in the protein of the epidermal extract was carried out by the technique described by Lowry (Lowry, O. H.: J. Biol. Chem., 193, 265, 1951). As is evident from the results shown in Table 5, the increased activity of ornithine decarboxylase induced by teleocidin is considerably reduced by the previous administration of propionyl-L-carnitine or IP6 alone. However, when these compounds were used in combination, a considerable and highly significant reduction of ornithine decarboxylase was obtained.

Tabulka 5Table 5

Antiproliferační působení látka kontrolní teleocidin propionyl-L-karnitinAntiproliferative effect of control substance teleocidin propionyl-L-carnitine

IP6 propionyl-L-karnitin + IP6 působení ornitindekarboxylázy nmol CO₂ za 60 min.mg'¹ proteinu 0,055±0,004 2,6+0,4 2,1+0,2 1,95±0,2 0,58±0,9IP6 propionyl-L-carnitine + IP6 action of ornithine decarboxylase nmol CO ₂ per 60 min.mg' ¹ protein 0.055±0.004 2.6+0.4 2.1+0.2 1.95±0.2 0.58±0.9

000· • · · · · 0 0 0 00000· • · · · · 0 0 0 00

0 0 0 0 · · 0 0 • · · 0 0 · 0000 0 «00 0000 40 00 0 0 0 · · 0 0 • · · 0 0 · 0000 0 «00 0000 40 0

0 00 00 00 0000 00 00 00 000

- 14 Farmakologicky přijatelnou solí L-karnitinu nebo alkanoyl-L-karnitinu je míněna jakákoliv sůl těchto aktivních složek s kyselinou, která nedává vznikat nežádoucím toxickým nebo vedlejším účinkům. Tyto kyseliny jsou odborníkům ve farmacii dobře známy.- 14 By pharmacologically acceptable salt of L-carnitine or alkanoyl-L-carnitine is meant any salt of these active ingredients with an acid which does not give rise to undesirable toxic or side effects. These acids are well known to those skilled in the art of pharmacy.

Příklady vhodných solí, které však nikterak neomezují jejich rozsah jsou: chlorid, bromid, jodid, aspartát, kyselý aspartát, citrát, kyselý citrát, vínan, fosforečnan, kyselý fosforečnan, fumarát, kyselý fumarát, glycerofosfát, glukofosfát, mléčnan, maieát, kyselý maieát, orotát, šťavelan, kyselý šťavelan, síran, kyselý síran, trichloracetát, trifluoracetát a methansulfonát.Examples of suitable salts include, but are not limited to: chloride, bromide, iodide, aspartate, acid aspartate, citrate, acid citrate, tartrate, phosphate, acid phosphate, fumarate, acid fumarate, glycerophosphate, glucophosphate, lactate, maleate, acid maleate, orotate, oxalate, acid oxalate, sulfate, acid sulfate, trichloroacetate, trifluoroacetate, and methanesulfonate.

Seznam farmakologicky přijatelných solí schválených FDA je uveden v Int. J. of Pharm., 33, 201 -217, 1986; tato poslední publikace je sem vložena jako odkaz.A list of pharmacologically acceptable salts approved by the FDA is given in Int. J. of Pharm., 33, 201-217, 1986; this latter publication is incorporated herein by reference.

Přípravek podle vynálezu může také obsahovat vitaminy, koenzymy, minerální látky a antioxidanty.The preparation according to the invention may also contain vitamins, coenzymes, minerals and antioxidants.

K výrobě přípravků s ohledem na specifickou cestu jejich podávání lze použít příslušné excipienty, které jsou farmaceutickým a potravinářským odborníkům známy.Appropriate excipients known to pharmaceutical and food experts can be used to prepare formulations for a specific route of administration.

Příklady provedeníDesign examples

Ilustrativní, avšak nikterak neomezující příklady přípravků podle vynálezu jsou uvedeny níže.Illustrative, but non-limiting, examples of compositions according to the invention are given below.

1) 1) propionyl-L-karnitin inositolhexafosfát propionyl-L-carnitine inositol hexaphosphate 250 mg 250 mg 250mg 250mg 2) 2) L-karnitin L-carnitine 150 mg 150 mg propionyl-L-karnitin propionyl-L-carnitine 150 mg 150 mg inositolhexafosfát inositol hexaphosphate 300 mg 300 mg

·> 0000 00 *000 00·> 0000 00 *000 00

0 00 0 0000 00 0 000

000 000 00000 000 00

000 000 0000000 000 0000

000 0000 00000 0000 00

0 0 00 00 00 00 0 00 00 00 0

- 15 3)- 15 3)

4)4)

5)5)

6)6)

7)7)

θ)θ)

směs karnitinů carnitine blend 300 mg 300 mg (L-karnnitin 75 mg, acetyl-L-karnitin 75 mg, karnitin 75 mg, isovaleryl-L-karnitin 75 mg) inositolhexafosfát (L-carnitine 75 mg, acetyl-L-carnitine 75 mg, carnitine 75 mg, isovaleryl-L-carnitine 75 mg) inositol hexaphosphate propionyl-L- propionyl-L- 300 mg 300 mg propionyl-L-karnitin propionyl-L-carnitine 200 mg 200mg inositolhexafosfát inositol hexaphosphate 200 mg 200mg inosin inosine 100 mg 100mg směs karnitinů carnitine blend 200 mg 200mg (L-karnnitin 50 mg, acetyl-L-karnitin 50 mg, karnitin 50 mg, isovaleryl-L-karnitin 50 mg) , inositolfosfátový komplex (L-carnitine 50 mg, acetyl-L-carnitine 50 mg, carnitine 50 mg, isovaleryl-L-carnitine 50 mg) , inositol phosphate complex propionyl-L- propionyl-L- 200 mg 200mg (inositolhexafosfát 100 mg, inositolpentafosfát 50 mg, (inositol hexaphosphate 100 mg, inositol pentaphosphate 50 mg, inositoltetrafosfát 50 mg) inosin inositol tetraphosphate 50 mg) inosine 100 mg 100mg acetyl-L-karnitin acetyl-L-carnitine 200 mg 200mg propionyl-L-karnitin propionyl-L-carnitine 200mg 200mg inositolhexafosfát inositol hexaphosphate 400 mg 400 mg inosin inosine 200 mg 200mg propionyl-L-karnitin propionyl-L-carnitine 200mg 200mg inositolhexafosfát inositol hexaphosphate 200 mg 200mg inosin inosine 100 mg 100mg koenzym Q10 coenzyme Q10 20 mg 20 mg vitamin E vitamin E 5 mg 5mg β-karoten β-carotene 10 mg 10mg bioflavonoidy bioflavonoids 25 mg 25 mg vitamin C vitamin C 25 mg 25 mg selen selenium 50 mg 50 mg rostlinná vláknina vegetable fiber 50 pg 50 pg stearan hořečnatý magnesium stearate 5 mg 5mg propionyl-L-karnitin propionyl-L-carnitine 200 mg 200mg Inositolhexafosfát Inositol hexaphosphate 200 mg 200mg inosin inosine 100 mg 100mg kreatin creatine 100 mg 100mg vitamin vitamin 1 mg 1mg vitamin B₂ vitamin _B2 3 mg 3mg vitamin B₆ vitamin _B6 5mg 5mg nikotinamid nicotinamide 5 mg 5mg vitamin E vitamin E 5 mg 5mg β-karoten β-carotene 10 mg 10mg vitamin B₁₂ vitamin _B12 2pg 2pg kyselina listová folic acid 700 pg 700 pg

·♦ ···· ·Φ »··· ·· ·· ··· ···· • · · ··· ···· · • · · · · · · ·· ·.·♦ ···· ·Φ »··· ·· ·· ··· ···· • · · ··· ···· · • · · · · · · ·· ·.

·· · · · · · · * ····· · · · · · · * ···

- 16 Využitelnost- 16 Usability

Předložený vynález se týká přípravku k předcházení a/nebo léčbě kardiovaskulárních a neurocerebrálních potíží, různých tkáňových anoxických forem, energetické svalové nedostatečnosti, abnormalit zánětlivého typu, změn v krevní koagulaci jako je trombóza a proliferující tkáňové formy.The present invention relates to a preparation for the prevention and/or treatment of cardiovascular and neurocerebral disorders, various tissue anoxic forms, energetic muscle insufficiency, inflammatory-type abnormalities, changes in blood coagulation such as thrombosis and proliferative tissue forms.

r tr t

Přípravek může mít formu a působit jako doplňková výživa nebo jako skutečný medikament v závislosti na tom, zda má jít o podpůrný nebo preventivní účinek nebo může mít přísně terapeutický účinek, kterým může působit podle stavu příslušného jedince, pro kterého se použije.The preparation may take the form and act as a nutritional supplement or as an actual medication, depending on whether it is intended to have a supportive or preventive effect, or it may have a strictly therapeutic effect, which it may exert according to the condition of the individual for whom it is used.

Claims

Patent claims

1. Combination product containing:

(a) propionyl L-carnitine or a pharmacologically acceptable salt thereof; and (b) inositol phosphate.

The composition of claim 1, wherein the inositol phosphate is selected from the group consisting of inositol monophosphate, inositol tetrafosphate, inositol pentaphosphate, and inositol hexaphosphate (IP6).

The composition of claim 1 or 2, wherein component (a) further comprises a "carnitine" selected from the group consisting of L-carnitine, acetyl L-carnitine, butyryl L-carnitine, valeryl L-carnitine, isovaleryl -L-carnitine or a pharmacologically acceptable salt or mixture thereof.

The composition of claims 1 to 3, wherein component (b) further comprises inositol.

Composition according to claims 1 to 4, characterized in that the weight ratio (a): (b) ranges from 1: 10 to 1: 1.

Composition according to any one of the preceding claims, characterized in that component (b) is a plant product or an extract of plant products containing inositol phosphate.

Preparation according to claim 6, characterized in that the plant product is bran or raw rice and / or extracts thereof.

A composition according to any one of the preceding claims wherein the pharmacologically acceptable salt of L-carnitine or alkanoyl-L-carnitine is selected from the group consisting of: chloride, bromide, iodide, aspartate, acid aspartate, citrate, ··· · E t t t t t · · · t t t t t

9 9 9 9 9 9 9 9 · ·· 9 99 99 99 999

- 18 citric acid, tartrate, phosphate, acid phosphate, fumarate, acid fumarate, glycerophosphate, glucophosphate, lactate, maleate, acid maleate, orotate, acid oxalate, sulphate, acid sulphate, trichloroacetate, trifluoroacetate and methanesulphonate.

Composition according to any one of the preceding claims, characterized in that it contains vitamins, coenzymes, minerals and antioxidants.

Composition according to any one of the preceding claims, characterized in that it is in the form of a nutritional supplement for oral administration.

í *

Composition according to any one of the preceding claims, characterized in that it is in the form of a medicament which is administered orally, parenterally, rectally or transdermally.

Supplementary nutrition according to claim 10 for the prevention of tissue anoxic forms, cardiac or nerve disorders, muscle energy deficiency, asthenia and exhaustion, inflammatory type abnormalities and tissue proliferating forms.

Medicament according to claim 11 for the therapeutic treatment of free radical-induced pathologies, for the treatment of cardiovascular or cerebral disorders caused by tissue anoxia or aging, changes in blood coagulation such as thrombosis, inflammatory-type abnormalities, muscular energy deficiencies associated with asthenia and fatigue and as adjuvants in treating proliferating tissue forms.

The supplementary nutrition of claim 12, which is in the form of tablets, pills, capsules, granulates or syrups.

15. A medicament according to claim 13 in the form of tablets, pills, capsules, granules, syrups, suppositories, vials or drops.

· * «· · · · · · · ·

4 9 9

9 9 9 9

9

99 99

999

- 19

16. Use of a combined preparation consisting of characteristic active ingredients:

(a) propionyl L-carnitine or a pharmacologically acceptable salt thereof; and (b) an inositol phosphate selected from the group consisting of inosiitol monophosphate, inositol tetrafosphate. inositol pentaphosphate and especially inositol hexaphosphate (IP6 >).

for the preparation of a nutritional supplement or medicament suitable for the prevention and / or treatment of cardiovascular or neurocerebral disorders caused by chronic or acute tissue anoxia, energetic insufficiency, inflammatory-type abnormalities, nerve and muscle asthenia and proliferating tissue forms.

Use according to claim 16, characterized in that component (a) further comprises a "carnitine" selected from the group consisting of L-carnitine, acetyl-L-carnitine, butyryl-L-carnitine, valeryl-L-carnitine, isovaleryl-L -carnitine or pharmacologically acceptable salts or mixtures thereof, and component (b) further comprises inositol.