CZ20012183A3 - Způsob kontinuálního oddělování látek podle velikosti molekuly - Google Patents
Způsob kontinuálního oddělování látek podle velikosti molekuly Download PDFInfo
- Publication number
- CZ20012183A3 CZ20012183A3 CZ20012183A CZ20012183A CZ20012183A3 CZ 20012183 A3 CZ20012183 A3 CZ 20012183A3 CZ 20012183 A CZ20012183 A CZ 20012183A CZ 20012183 A CZ20012183 A CZ 20012183A CZ 20012183 A3 CZ20012183 A3 CZ 20012183A3
- Authority
- CZ
- Czechia
- Prior art keywords
- separation
- sec
- smb
- parameters
- continuous
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 44
- 238000000926 separation method Methods 0.000 title abstract description 36
- 230000008569 process Effects 0.000 title description 15
- 239000000126 substance Substances 0.000 title description 7
- 238000001542 size-exclusion chromatography Methods 0.000 claims abstract description 28
- 238000013375 chromatographic separation Methods 0.000 claims description 4
- 238000005227 gel permeation chromatography Methods 0.000 claims description 4
- 238000011437 continuous method Methods 0.000 abstract description 2
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 7
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 7
- BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N casein, tech. Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CC(C)C)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(C(C)O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(COP(O)(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(N)CC1=CC=CC=C1 BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000009792 diffusion process Methods 0.000 description 6
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 6
- 239000005018 casein Substances 0.000 description 5
- 235000021240 caseins Nutrition 0.000 description 5
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 5
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 5
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 5
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 4
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 4
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 4
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 4
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 4
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 4
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 4
- 229920002521 macromolecule Polymers 0.000 description 4
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 4
- 102000008192 Lactoglobulins Human genes 0.000 description 3
- 108010060630 Lactoglobulins Proteins 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 239000003463 adsorbent Substances 0.000 description 3
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 description 3
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 3
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 3
- 238000012821 model calculation Methods 0.000 description 3
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 3
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 3
- 238000004088 simulation Methods 0.000 description 3
- 235000020183 skimmed milk Nutrition 0.000 description 3
- 239000002594 sorbent Substances 0.000 description 3
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 2
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 2
- 238000005094 computer simulation Methods 0.000 description 2
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 2
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 2
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 2
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 2
- 150000002605 large molecules Chemical class 0.000 description 2
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 2
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 2
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 2
- 230000008929 regeneration Effects 0.000 description 2
- 238000011069 regeneration method Methods 0.000 description 2
- HBAQYPYDRFILMT-UHFFFAOYSA-N 8-[3-(1-cyclopropylpyrazol-4-yl)-1H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-5-yl]-3-methyl-3,8-diazabicyclo[3.2.1]octan-2-one Chemical class C1(CC1)N1N=CC(=C1)C1=NNC2=C1N=C(N=C2)N1C2C(N(CC1CC2)C)=O HBAQYPYDRFILMT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101100368725 Bacillus subtilis (strain 168) tagF gene Proteins 0.000 description 1
- 102000004407 Lactalbumin Human genes 0.000 description 1
- 108090000942 Lactalbumin Proteins 0.000 description 1
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 1
- 229920003171 Poly (ethylene oxide) Polymers 0.000 description 1
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 1
- 102000007056 Recombinant Fusion Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010008281 Recombinant Fusion Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102100037486 Reverse transcriptase/ribonuclease H Human genes 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 238000005377 adsorption chromatography Methods 0.000 description 1
- 235000020244 animal milk Nutrition 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 230000002860 competitive effect Effects 0.000 description 1
- 239000000470 constituent Substances 0.000 description 1
- 238000010924 continuous production Methods 0.000 description 1
- 238000012937 correction Methods 0.000 description 1
- 238000010612 desalination reaction Methods 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 239000002158 endotoxin Substances 0.000 description 1
- 230000007717 exclusion Effects 0.000 description 1
- 238000005194 fractionation Methods 0.000 description 1
- 238000004255 ion exchange chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 1
- 238000004811 liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000011068 loading method Methods 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- SYSQUGFVNFXIIT-UHFFFAOYSA-N n-[4-(1,3-benzoxazol-2-yl)phenyl]-4-nitrobenzenesulfonamide Chemical class C1=CC([N+](=O)[O-])=CC=C1S(=O)(=O)NC1=CC=C(C=2OC3=CC=CC=C3N=2)C=C1 SYSQUGFVNFXIIT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 description 1
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 1
- 229920001296 polysiloxane Polymers 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 238000003672 processing method Methods 0.000 description 1
- 230000011218 segmentation Effects 0.000 description 1
- 230000000087 stabilizing effect Effects 0.000 description 1
- 229920001059 synthetic polymer Polymers 0.000 description 1
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- 230000009261 transgenic effect Effects 0.000 description 1
- 239000011800 void material Substances 0.000 description 1
- 235000021241 α-lactalbumin Nutrition 0.000 description 1
Classifications
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01D—SEPARATION
- B01D15/00—Separating processes involving the treatment of liquids with solid sorbents; Apparatus therefor
- B01D15/08—Selective adsorption, e.g. chromatography
- B01D15/10—Selective adsorption, e.g. chromatography characterised by constructional or operational features
- B01D15/18—Selective adsorption, e.g. chromatography characterised by constructional or operational features relating to flow patterns
- B01D15/1814—Recycling of the fraction to be distributed
- B01D15/1821—Simulated moving beds
- B01D15/1828—Simulated moving beds characterised by process features
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01D—SEPARATION
- B01D15/00—Separating processes involving the treatment of liquids with solid sorbents; Apparatus therefor
- B01D15/08—Selective adsorption, e.g. chromatography
- B01D15/10—Selective adsorption, e.g. chromatography characterised by constructional or operational features
- B01D15/18—Selective adsorption, e.g. chromatography characterised by constructional or operational features relating to flow patterns
- B01D15/1814—Recycling of the fraction to be distributed
- B01D15/1821—Simulated moving beds
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/02—Column chromatography
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Sustainable Development (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Treatment Of Liquids With Adsorbents In General (AREA)
- Solid-Sorbent Or Filter-Aiding Compositions (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Separation Using Semi-Permeable Membranes (AREA)
Description
Oblast techniky
Vynález se týká použití způsobu chromatografického oddělování látek na základě vylučování podle velikosti (size exclusion chromatography, SEC) způsobem kontinuální chromatografie, zejména chromatograie simulovaného pohyblivého lože (simulated moving bed SUB).
Dosavadní stav techniky
Oddělování látek, zvláště makromolekulárníchlátek, podle velikosti molekul je široce rozšířeným způsobem chromatografického oddělování. Zvláště při čištění peptidů a proteinů se způsobů oddělování jako například chromatografií na základě vylučování podle velikosti (SEC), často označované jako gelová permeační chromatografie, používá v široké míře. Například G. Subramanian (Process scale liquid chromatography“, VCH Weinheim 1995), popsuje preparát ivní aplikace tohoto způsobu oddělování. Všechny tyto aplikace jsou však založeny na způsobu zpracování po dávkách, který se vyznačuje časo-prostorovou náročností. Při tomto způsobu se sloučeniny napřed dlouhou dobu uchovávají, což vyžaduje dlouhodobé cykly (dobu mezi dvěma injekcemi). Jelikož většina sloučenin použitých v SEC má jen malou stabilitu vůči tlaku, není možno zvýšit průtočnou rychlost k dosažení rychlejšího oddělování. Kromě toho většina nosičů má špatnou schopnost zatěžování (méně než objemově 5 % gelu). Některé z těchto problémů je možno vyřešit použitím kontinuálních způsobů. Dosud však nebylo možno aplikovat způsoby oddělování SEC kontinuálně; parametry pro kontinuální oddělování tohoto typu by musely být stanoveny vhodnými modelovými výpočty. Kromě toho musejí získané procesní parametry umožňovat trvalý provoz.
• ·
Kontinuálních chromatograických způsobů, jako je například chromatografie simulovaného pohyblivého lože (SMB), se tradičně používá ve velkém měřítku v petrochemickém průmyslu nebo při výrobě cukru. Dosud se však těchto způsobů požívalo v průmyslu čistých a farmaceutických chemikálií, v zásadě pro oddělování isomerů a enantiomerů, to znamená při problémech oddělování klasických dvousložkových směsí. Počáteční snahy izolovat složky z vícesložkových směsí byly rovněž popsány.
K získání vhodných procesních parametrů pro chromatografi i SMB byla vyvinuta řada simulačních modelů,z nichž precizní procesní model SMB má největší dosah. Simulační postupy jsou popsány v literatuře (například Nicloudem a kol., Nancy, 1993; a WO 97/34 918. Těmto způsobům je společné stanovení adsorpčních isotherm analytů; tyto výsledky měření jsou pak základem pro modelové výpočty. V nejnověji byla předvedena modelové oddělování binárních směsí na základě pravého protíproudného modělu (G. Sort i a kol., AlChE Journal 39, str. 471 až 472p a E. Francotte a kol., J. Chromatogr. A 769, str. 239 až 248 1998). V dalším vývoji byly parametry optimalizovány od první souboru parametrů, použitím detailních procesní simulace (J. Strube, U. Altenhoner, M. Meurer a H. Schmidt-Traub, Chem. Ing. Těch. 69, str. 328 až 331, 1997; a dizertační práce J.Strube, University of Dortmund, 1996). Všechny tyto modely jsou však založeny na stanovení adsorpčních isotherm.
Zatímco dosud používané modely chromatografického oddělování pro způsoby SMB, například dělení enantiomerů nebo ionexová chromatografie, jsou založeny na adsorpčních procesech, je způsob SEC založen na úplně odlišném způsobu: pro analyty s různou velikostí molekul jsou k disposici různé objemy v důsledku rozdělení velikostí pórů v sorbentu; větší molekuly tak eluují dříve než menší. SEC je tak založena na difusním mechanizmu se začleněním mechanizmu vylučování velikostí, bez adsorpce analytů sorbentem. Proto nedochází k fázovým rovnováhám
jako u adsorpdní chromatografie. Nemohou být tedy pro SEC použity dosud známé způsoby modelování, které poskytují parametry pro chromatografi i SMB. Zejména vyvstává problém stabilizace rafinátové fronty složky zachycené nejkrátce v oblasti sekce IV, tedy mezi liniemi rafinátu a eluentu. Tento problém se dále zvyšuje, jelikož u mnohých způsobů oddělování SEC je část analytů eluována v prázdném objemu. Takové složky jsou převáděny zónou IV a kontaminují exahovanou složku. Dosud nebylo možno aplikovat procesní parametry z počítačových modelů po dávkách na kontinuální způsoby oddělování (například separační způsoby SMB) pro způsoby oddělování SEC a tedy zvláště k získání parametrů oddělování pro způsoby kontinuální oddělování, které dovolují stálý provoz.
Úkolem vynálezu tedy je vyvinout modely a způsoby, které poskytnou parametry oddělování pro způsoby kontinuálního oddělování, které umožní dosáhnout stálého provozu zvláště pro způsoby oddělování SEC.
Podstata vynálezu
Způsob kontinuální oddělování, zvláště způsoby SMB spočívá podle vynálezu v tom, že se analyty oddělují chromatografií vylučování podle velikosti (gelová permeační chromatografie).
Vynález blíže objasňuje následující popis a připojené obrázky.
Přehlad obrázků na výkresech
Na obr. 1 je oddělování SEC prášku odstředěného mléka na 600* mm Superformance R sloupci plněném Fractogelem R EMD BioSEC(S).
Na obr. 2 až 4 jsou chromatogramy jednotlivých složek:
obr. 2 kase inová frakce RT 39,5; 53,92 min • ·
• · · ·
| obr. | 3 | β-laktoglobulin A | RT | 63, 52 | min |
| obr. | 4 | a-laktalbumin | RT | 71,60 | min |
Na obr. 5 je eluční chromátogram jednotlivých složek stanovená jako výsledek přesného modelování jednotlivých látek podle vynálezu.
Na obr. 6 je profil interní axiální koncentrace jednotky SEC/ SMB s koncentracemi jednotlivých složek v individuálních zónách na konci doby cyklu.
Teoretický model výpočtu pro jednoduché systémy složek pro oddělování SEC při způsobu po dávkách popsal Rien Gu (Mathernatic Modelling of Líquid Chromatography, Springer Verlag, 1955).
Zjistilo se, že stabilní procesní parametry pro použití SEC oddělování SEC při způsobech SMB lze získat následujícím způsobem podle vynálezu:
a) Vypočtou se doby prodlevy v separačním sloupci oddělovaných látek a pás rozšíření píků látky. Doby prodlevy se vypočtou pomocí například shora uvedeného způsobu, který popsal Tien Gu (1995)
b) Údajů získaných pomocí (analytických) chromátogramů po dávkách se použije k výpočtu efektivních porozit každé složky a dob prodlevy.
c) Pás rozšíření se může vypočítat například z koeficientů efektivní molekulové difúze. Koeficienty efektivní molekulové difúze se mohou určit na bázi Stokes-Einsteinovy relace a molekulových hmotností složek.
d) Zkontroluje se souhlas vypočtených hodnot (kroky b) & c)) s pozorovaným elučním profilem a v popřípadě se souhlas vypočtených hodnot s experimentálními opraví v dalších iterakčních krocích.
e) Potřebné čisté poměry průtočných rychlostí procesu SMB se vypočtou z parametrů výpočtu změřeného modelu způsoby, které jsou v zásadě známy, jak vyznačeno například ve shora u-
vedené publikacích G. Storti a kol. (1993) a v disertační práci Strubeho (1996).
Shora uvedený postup výpočtu doby prodlevy a pásu rozšíření a výsledné parametry umožňují dříve znmámé modely (G.Storti a kol., 1993; a disertace Strubeho, 1996) použitelné i bez určení adsorpčních isoterm.
Ukázalo se, že navrhovaný model je dostatečně přesný, je-li kontrolován pro různé koncentrace a lineární rychlosti na individuálním sloupci. Rozdělení dob prodlevy sé zde stanoví difusními parametry, jež platí pro interní objemy částic sorbentu. Efektivní koeficienty molekulární difuse se stanoví z molekulárních hmotností složek podle Stokes-Einsteinova vztahu a vezmou se v úvahu v modelu jako koeficienty přenosu materiálu.
Podle vynálezu může být použito obecně známých nosičů SEC; přednost se dává nosičům SEC stabilním vůči tlaku, které jsou pravděpodobně obchodně dostupné, například FraktogelR EMD BioSEC (popsaný v německém patentovém spise číslo DE 43 16 136).
Podle vynálezu se použije pravděpodobně obchodně dostupných jednotek SMB. Těmi jsou například jednotky konstruované spojením dvoucestných ventilů nebo jednotek majících víceprůchodný ventil. Oddělování se provádí za isokratických podmínek a může být tedy automatizována v simulovaném systému pohyblivého lože.
Při izolování složek z několikasložkových směsí mohou být složky, které eluují jako první nebo poslední brány přímo v čisté formě. Pro izolace látkek, které jsou z obou stran obloženy nečistotami, může být dosaženo vyčištění kombinací několikanásobných čisticích kroků SMB (jak je popsáno například ve světovém patentovém spise číslo WO 97/34 918.
• · ·Φ
Φ ·
ΦΦΦΦ
Ke splnění zvláštních požadavků daných biotechnologickými problémy dělení několikasložkové směsi se obzvlášť dobře hodí k odstraňování nečistot s velkým rozměrem molekul tak zvaný otevřený (open mode) postup se 3 zónami bez uzavírání oběžného průtoku nebo akumulací z procesů, má-1 i být získán podíl s nízkou molekulovou hmotností a také pro přímé získání produktů s velkou molekulou přímo.
Ke splnění požadavků CIP (cleaning in plače - čištění na místě), provozu s promývanými sloupci v zóně 1 až 4 (s funkcemi regenerace adsorbentu a čištění desorbentu) a promývání a rovněž regenerace a čištění adsorbentu a také sekcí potrubních dílů a součástí, je například hydroxid sodný rozhodující pro fungování a zabránění akumulace.
Způsob dělení podle vynálezu umožňuje zlepšené oddělování proteinů podle velikosti molekul, jelikož se může provádět kontinuálně a plně automatizovaně ve velkých jednotkách; těchto způsobů oddělování je možno používat zejména v následujících aplikačních oborech:
- čištění proteinů od transgenického zvířecího mléka,
- čištění proteinů, například faktorů VIII, vW a IX od krevní plasmy,
- čištění plasmidů,
- dalším velkoobjemovým způsobem je odsolování zaváděných směsí, jehož ekonomie je zlepšena kontinuální metodou SEC,
- v tak zvaném zacilování drog je záměrem dodávat drogy specificky do míst působení. K tomu se využívá například liposomů obohacených drogou. Problém přípravy takových liposomů spočívá v oddělování liposomů neobsahujících drogu od liposomů drogou obohacených. Toho se dá dosáhnout ve velkém měřítku kontinuální metodou SEC,
- kromě frakcionace přírodních makromolekul může být způsobu použito pro syntetické polymery, například pro polyethylenoxidy a silikony,
- v kombinaci s reaktivním nosičem, jak tomu je u reaktivních SMB, mohou být reakce a oddělování prováděny v jediné operaci . Možnou aplikací je odstraňování jednotek TAG 2 rekombinantních proteinů proteásou a současným odstraňováním jednotek TAG 3 cílových proteinů SEC/SMB,
- způsoby podle vynálezu se kromě toho hodí pro zbavování biologických produktů virů, pro odstraňování endotoxinů, zvláště v agregovaném stavu, nebo pro čištění virů.
Další možné aplikace vyplývají z kolísavého rozdělení velikosti pórů použitých nosičů. Například systémů s jemně porézními gely je možno použít k čištění peptidů, jako je například izulin.
I bez dalších podrobností se předpokládá že pracovníci v oboru budou schopni využít uvedeného popisu v nejširším míře. Výhodná provedení a příklady je proto třeba považovat za pouhé objasnění, které vynález nikterak neomezují. Popis doplňují odkazy na literaturu (patenty a publikace).
Vynález objasňují, nijak však neomezují následující příklady praktického provedení.
Příklady provedení vynálezu
Př í k1ad použ i t í
Popisuje se odstraňování kaseinoivého podílu z odstředěného práškového mléka. Ke stanovení provozních parametrů se vzorek a hlavní jednotlivé složky podrobují chromatografií po dávkách:
Na obr. 1 je oddělování SEC prášku odstředěného mléka na sloupcovém plněném 600* 16 mm Superformance R s Fractogelem R EMD BioSEC(S) a na obr. 2 až 4 jsou chromatogramy jednotlivých • ···· •·ο ·
- ·8 · e· φ · • *
| složek = | |||||
| obr. | 2 | kase inová frakce | RT | 39, 5; | 53,92 min |
| obr. | 3 | £J-laktoglobul in A | RT | 63, 52 | min |
| obr. | 4 | a-1aktalbůmin | RT | 71,60 | min |
Na obr. 5 je eluční chromatogram jednotlivých složek stanovený jako výsledek přísného modelování jednotlivých látek podle vynálezu.
Na obr. 6 je profil interní axiální koncentrace jednotky SEC/SMB s koncentracemi jednotlivých složek v individuálních zónách na konci doby cyklu. Provozní parametry se stanoví způsobem podle vynálezu.
Označení složek:
| Složka | Doba prodlevy | |
| A | 106,86 | |
| B | 98, 64 | |
| C | 71,39 | at- 1 akta lbům i n |
| D | 64, 16 | β-laktoglobulin |
| E | 50, 00 | kasein |
| F | 43, 26 | kasein |
| Jednotka | SMB s uvedenými parametry | je schopná produkovat |
| složky E | a F (kasein) a A-D v čistotě | >99% . |
| Provozní | parametry |
průměr sloupce délka sloupce počet sloupců segmentace mm
150 mm
2-2-2-2 ·· ···♦ • · · · · ♦· ·
- Θ ·«· J · ···.· J • · 9 9 9 9 ·· ···«·· · · *· *·
| průtočné rychlosti .· | |
| vnitřní rychlot v zóně 1 | 2,7 ml/min |
| eluční činidlo | 1,506 ml/min |
| extrakt | 1,578 ml/min |
| napájení | 0, 84 ml/min |
| koncentrace napájení | 100 mg/ml |
| doba cyk1u | 21 min |
| Porovnání způsobu po dávkách se způsobem | SMB podle vynálezu: | |
| Parametr | Dávkový | SMB |
| průměr sloupce | 26 mm | 26 mm |
| délka sloupce | 600 mm | 150 mm |
| počet sloupců | 1 | 8 |
| celkový objem sloupců | 319 cm3 | 637 cm3 |
| koncentrace napájení | 100 mg/ml | 100 mg/ml |
| průtočná rychlost napájení | - | 0,84 ml/min |
| injekční objem | 200 pl | - |
| doba cyklu | 120 min | - |
| prosazení napájení/den | 0, 636 g/d | 120,96 g/d |
| produktivita (g napájení | ||
| /d*L objem sloupce) | 1,99 g/dxL | 189,9 g/dxL |
| spotřeba elučního | ||
| činidla (ml/g napájení) | 723,6 ml/g | 17, 78 ml/g |
| Porovnání výkonu produkt i v i ta | 1 | 95, 43 |
| Spotřeba elučního činidla | 40, 69 | 1 |
Porovnání produktivity zpracování po dávkách a způsobu
• · ··« ·♦· ··
SMB ukazuje velkou přednost kontinuálního konkurenčního způsobu díky ekonomičtějšímu využití.
Na rozdíl od mechanismů adsorpční separace se podle vynálezu nepředepisují žádné fázové rovnovážné isotermy, ale místo toho se jako parametrů používá první doba pro kontinuální způsob, rozdílné rychlosti difuse do částic adsorbentu, což je charakteristika složky oddělované způsobem SEC a rozdílné dostupné objemy pórů. Oba parametry, které jsou chrakteristické pro efekty separace způsobem SEC jsou pro první dobu brány v úvahu realisticky v modelu na kterém je vynález založen.
Průmyslová využitelnost
Způsob kontinuální gelové permeační chromatografie pro účinné oddělování látek na základě velikosti jejich molekul.
Claims (2)
- PATENTOVÉ NÁROKY1. Způsob kontinuálního chromatografického odělování, vyznačující se tím, šese analyty oddělují chromatograf i í na základě vylučování podle velikosti (gelovou permeační chromatografií) .
- 2. Způsob podle nároku 1, vyznačující se tím, še způsobem kontinuální chromatografické separace je způsob SMB.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DE19858892A DE19858892A1 (de) | 1998-12-19 | 1998-12-19 | Kontinuierliches Verfahren zur Trennung von Stoffen nach Molekülgröße |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CZ20012183A3 true CZ20012183A3 (cs) | 2002-02-13 |
Family
ID=7891862
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CZ20012183A CZ20012183A3 (cs) | 1998-12-19 | 1999-12-04 | Způsob kontinuálního oddělování látek podle velikosti molekuly |
Country Status (7)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US6551512B1 (cs) |
| EP (1) | EP1140316B1 (cs) |
| JP (1) | JP2002532730A (cs) |
| AT (1) | ATE307649T1 (cs) |
| CZ (1) | CZ20012183A3 (cs) |
| DE (2) | DE19858892A1 (cs) |
| WO (1) | WO2000037156A1 (cs) |
Families Citing this family (23)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP1545574B8 (en) * | 2002-09-13 | 2014-09-24 | Biogen Idec Inc. | Method of purifying polypeptides by simulated moving bed chromatography |
| JP2006513170A (ja) * | 2002-11-18 | 2006-04-20 | トーラス エイチエスエイ エルエルシー | 酸および塩基から溶液を連続的に自動混合する方法 |
| KR100735738B1 (ko) | 2003-12-05 | 2007-07-06 | 학교법인 인하학원 | Ｓｍｂ 크로마토그래피를 이용하여 단백질을 재접힘시키는방법 |
| US7087177B2 (en) * | 2004-04-16 | 2006-08-08 | Baxter International Inc. | Methods for determining flow rates of biological fluids |
| US20060062889A1 (en) * | 2004-09-17 | 2006-03-23 | Solae, Llc. | Soy protein-containing composition |
| US7169425B2 (en) * | 2004-09-17 | 2007-01-30 | Solae, Llc | Size exclusion chromatography process for the preparation of an improved soy protein-containing composition |
| US7544293B2 (en) | 2005-09-26 | 2009-06-09 | Semba Inc. | Valve and process for interrupted continuous flow chromatography |
| WO2008008730A2 (en) | 2006-07-08 | 2008-01-17 | Personics Holdings Inc. | Personal audio assistant device and method |
| US8807164B2 (en) * | 2006-08-30 | 2014-08-19 | Semba Biosciences, Inc. | Valve module and methods for simulated moving bed chromatography |
| US7790040B2 (en) | 2006-08-30 | 2010-09-07 | Semba Biosciences, Inc. | Continuous isocratic affinity chromatography |
| EP4023330A1 (en) * | 2009-12-15 | 2022-07-06 | Waters Technologies Corporation | Device and methods for performing size exclusion chromatography |
| EP2682168A1 (en) | 2012-07-02 | 2014-01-08 | Millipore Corporation | Purification of biological molecules |
| CN118388581A (zh) | 2013-03-08 | 2024-07-26 | 建新公司 | 治疗性蛋白药物物质的整合连续制造 |
| TWI709569B (zh) | 2014-01-17 | 2020-11-11 | 美商健臻公司 | 無菌層析樹脂及其用於製造方法的用途 |
| TWI671312B (zh) | 2014-01-17 | 2019-09-11 | 美商健臻公司 | 無菌層析法及製法 |
| FR3018450B1 (fr) * | 2014-03-11 | 2016-04-15 | Lab Francais Du Fractionnement | Procede de preparation de proteines plasmatiques humaines |
| US20180353875A1 (en) * | 2015-12-22 | 2018-12-13 | Basf Se | A process for purification of polyether block copolymers |
| BR112021003420A2 (pt) | 2018-08-31 | 2021-05-18 | Genzyme Corporation | resina cromatográfica estéril e uso da mesma em processos de manufatura |
| EP3742160B1 (en) * | 2019-05-24 | 2023-08-09 | Sartorius Stedim Biotech GmbH | Chromatography method, method of determining the concentration of at least one compound in a chromatography method and method of obtaining at least one chromatography method parameter |
| EP3742159A1 (en) | 2019-05-24 | 2020-11-25 | Sartorius Stedim Biotech GmbH | Chromatography method, method of determining the influence of the interdependency of at least two parameters in a chromatography method and method of obtaining at least one chromatography method parameter |
| FR3142761A1 (fr) | 2022-12-01 | 2024-06-07 | IFP Energies Nouvelles | Procede de recyclage de plastiques mettant en œuvre un dispositif en lit mobile simule a exclusion sterique |
| FR3142759A1 (fr) | 2022-12-01 | 2024-06-07 | IFP Energies Nouvelles | Procede de recyclage de plastiques a base de polyolefines mettant en œuvre un dispositif en lit mobile simule a exclusion sterique |
| FR3142760A1 (fr) | 2022-12-01 | 2024-06-07 | IFP Energies Nouvelles | Procede de recyclage de dechets a base de plastiques pvc mettant en œuvre un dispositif d’extraction des chaines polymeres en lit mobile simule a exclusion sterique |
Family Cites Families (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP3010816B2 (ja) * | 1991-08-22 | 2000-02-21 | ダイセル化学工業株式会社 | 光学分割における光学異性体と溶媒との回収方法、溶媒の循環使用方法、および光学異性体の再利用方法 |
| DE4316136A1 (de) | 1993-05-13 | 1994-11-17 | Merck Patent Gmbh | Verfahren und Träger für die Gelpermeationschromatographie |
| US5465748A (en) * | 1994-05-24 | 1995-11-14 | Millipore Corporation | Sanitizable slider diaphragm valve |
| US5630943A (en) * | 1995-11-30 | 1997-05-20 | Merck Patent Gesellschaft Mit Beschrankter Haftung | Discontinuous countercurrent chromatographic process and apparatus |
| DE19611094C2 (de) | 1996-03-21 | 1999-06-17 | Dresden Arzneimittel | Verfahren zur Reinigung von Cyclosporin A und/oder verwandten Cyclosporinen aus einem Cyclosporin-haltigen Rohextrakt unter Anwendung chromatographischer Verfahren mit Kieselgel als Adsorbens |
| US6063284A (en) * | 1997-05-15 | 2000-05-16 | Em Industries, Inc. | Single column closed-loop recycling with periodic intra-profile injection |
| US5968362A (en) * | 1997-08-04 | 1999-10-19 | Controlled Enviromental Systems Corporation | Method for the separation of acid from sugars |
| US5939565A (en) * | 1997-11-03 | 1999-08-17 | Cultor Food Science, Inc. | Recovery of γ-pyrones |
| US6293999B1 (en) * | 1999-11-30 | 2001-09-25 | Uop Llc | Process for separating propylene from propane |
-
1998
- 1998-12-19 DE DE19858892A patent/DE19858892A1/de not_active Withdrawn
-
1999
- 1999-12-04 CZ CZ20012183A patent/CZ20012183A3/cs unknown
- 1999-12-04 JP JP2000589262A patent/JP2002532730A/ja active Pending
- 1999-12-04 AT AT99963388T patent/ATE307649T1/de not_active IP Right Cessation
- 1999-12-04 EP EP99963388A patent/EP1140316B1/de not_active Expired - Lifetime
- 1999-12-04 US US09/857,975 patent/US6551512B1/en not_active Expired - Fee Related
- 1999-12-04 WO PCT/EP1999/009495 patent/WO2000037156A1/de not_active Ceased
- 1999-12-04 DE DE59912722T patent/DE59912722D1/de not_active Expired - Lifetime
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| ATE307649T1 (de) | 2005-11-15 |
| JP2002532730A (ja) | 2002-10-02 |
| EP1140316B1 (de) | 2005-10-26 |
| US6551512B1 (en) | 2003-04-22 |
| WO2000037156A1 (de) | 2000-06-29 |
| DE19858892A1 (de) | 2000-06-21 |
| EP1140316A1 (de) | 2001-10-10 |
| DE59912722D1 (de) | 2005-12-01 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US6551512B1 (en) | Continuous method for separating substances according to molecular size | |
| De Luca et al. | Modern trends in downstream processing of biotherapeutics through continuous chromatography: The potential of Multicolumn Countercurrent Solvent Gradient Purification | |
| US7901581B2 (en) | Chromatography method | |
| Steinebach et al. | Continuous counter‐current chromatography for capture and polishing steps in biopharmaceutical production | |
| US20200378934A1 (en) | Method in a Chromatography System | |
| Doultani et al. | Fractionation of proteins from whey using cation exchange chromatography | |
| Santos et al. | Fractionation of the major whey proteins and isolation of β-Lactoglobulin variants by anion exchange chromatography | |
| CN1777435B (zh) | 通过模拟移动床层析纯化多肽的方法 | |
| Imamoglu | Simulated moving bed chromatography (SMB) for application in bioseparation | |
| Voswinkel et al. | Fractionation of all major and minor whey proteins with radial flow membrane adsorption chromatography at lab and pilot scale | |
| CN110325854B (zh) | 监测连续色谱中的性能 | |
| Großhans et al. | An integrated precipitation and ion-exchange chromatography process for antibody manufacturing: process development strategy and continuous chromatography exploration | |
| Barnthouse et al. | Cation-exchange displacement chromatography for the purification of recombinant protein therapeutics from variants | |
| CN121796952A (zh) | 连续色谱中的方法 | |
| Rojas et al. | Size-exclusion chromatography applied to the purification of whey proteins from the polymeric and saline phases of aqueous two-phase systems | |
| Fontan et al. | Adsorption isotherms and thermodynamics of α-lactalbumin on an anionic exchanger | |
| Billakanti et al. | Characterization of cryogel monoliths for extraction of minor proteins from milk by cation exchange | |
| Buchacher et al. | Continuous removal of protein aggregates by annular chromatography | |
| US10717023B1 (en) | Method for continuous purification | |
| Ottens et al. | Advances in process chromatography and applications in the food, beverage and nutraceutical industries | |
| US20160074775A1 (en) | Continuous chromatography method and system | |
| Ottens et al. | Multi-component fractionation in SMB chromatography for the purification of active fractions from protein hydrolysates | |
| Leaver et al. | A method development study of the production of albumin from animal blood by ion-exchange chromatography | |
| US20160074774A1 (en) | Chromatography method and system | |
| Lucena et al. | Separation of &α-Lactalbumin and &β-Lactoglobulin by Preparative Chromatography Using Simulated Moving Beds |