CZ2002529A3 - Derivát ascidideminu, způsob jeho přípravy a farmaceutický prostředek, který ho obsahuje - Google Patents

Description

Oblast techniky

Vynález se týká farmaceutických prostředků na bázi polyaromatických sloučenin, použitelných zejména jako protinádorových léčivDosavadní stav techniky

V roce 1999 bylo použito cytotoxických léčiv (chemoterapie) ke snižování velikosti rakovinových nádorů a k zachycení očekávaného vývoje nádorového procesu v nemnoha případech se záměrem potlačit hromadění rakovinových buněk a rizika metastáz v kombinaci dříve zavedených chemických látek s dalšími látkami, kterých se používá teprve po několik dešti letí. Například 5-f1uorouraci 1 (5-FU), o němž se poznalo před 40 lety, že je nejaktivnějším lékem při rakovinách tlustého střeva a konečníku, může být nahražen některým ze specifických inhibitorů topoisomerázy (irinotecan nebo topotecan), pokud nádor již není na 5-FU citlivý- Léčebné možnosti, známé pro léčení nádorů tlustého střeva a konečníku, obohatil oxaliplatinem. což je nový donor“ místo 5-FU nebo selektivní inhibitory syntetázy thymidylát. Tato koexistence se neomezuje na léčení rakovin tlustého střeva a konečníku, jelikož rovněž chemoterapie rakoviny prsu, vaječníků a plic se zaměřuje nyní na deriváty taxanu (paclitaxel, docetaxel). Potřeba účinnějších a lépe snášených léčiv, zlepšující přežití a kvalitu života nemocných, je naléhavá, jelikož vezme-li se jenom příklad kolorektálních nádorů, zjistilo se (S.L. Parker, T Tong, S. Bolden a kol., CA Cancer J.Clin. 1997), že jenom ve Spojených Státech bylo diagnostikováno více než 131000 nových případů v roce 1997, z nichž 54 000 vedlo k úmrtí pacientů. Znalost této situace iniciovala vynálezce zajímat se o rodinu polyaromatic• rííí ů kých sloučenin ještě málo studovaných, identifikovaných v řasách Ascidies teplých moří k vyvinutí originální chemie léčiv určené k izolování syntetických sloučenin, majících cytotoxickou aktivitou významnou pro léčení.

Moře a oceány, které zaujímají více než 70 % povrchu země, obsahují mořské rostliny a houby, jejichž systematické progresivní farmakognostické studie ukazují, že tyto živé organismy mohou obsahovat kompexní alkaloidy mající zajímavé farmakologické vlastnosti.

Například houby Cryptotheca crypta a Halichondria okadai jsou předmětem prohloubených studií od objevení přítomnosti cytarabinu nebo halichondrinu B v jejich buňkách. Stejně je tomu u rodiny tunicierů ód izolování aplidinu tunicieru Aplidium albicans, která žije u ostrovů Baleár (Španělsko). Alkaloidy s tetrahydroisochinolinovou strukturou byly izolovány z řasy Ecteinascidia turbinata. Mezi nimi je předmětem prohloubených předklinických studií ecteinascidin-743 (E. Igbicka a kol., Symposium NCI-EORTC práce 130, str. 34, 1998) i klinické zkoušky zaměřené na definování jeho terapeutického potenciálu jako protirakovinného léčiva (A. Bowmann a kol . , Symposium NCI-EORTC práce 452, str.118, 1998: M. Vi1lanova-Calero a kol., Symposium NCI-EORTC práce 453, str. 118, 1998: M.J.X. Hillebrand a kol., Symposium NCI-EORTC práce 455, str. 119, 1998: E. Citkovic a kol., Symposium NCI-EORTC práce 456, str.

, l

119, 1998). Nově jsou deriváty pentacyklických ras předmětem farmakochemických prací (D.J.Hagan a kol., J. Chem. Soc. Perkin Transf- 1, str. 2739 až 2746, 1997).

Jiný přírodní alkaloid mořského původu, ascididemin, byl extrahován z řasy Didemnum sp. (J.Kobayashi a kol., Tetrahedron Lett. 29, str. 1177 až 1180, 1988) a z ascidie Cystodytes dellechiajei (I. Bonnard a kol., Anti-cancer Drug design 10, str. 333 až 346, 1995). Ascididemin má vlastnosti antiprolife3

4· ·· ·· • · · · » · rační objevené na modelu myší leukemie (linie P388 nebo L1210) a popsal je F. Schmitz a kol- (J. Org. Chem. 56, str. 804 až 808, 1991), B. Lindsay a kol. (Bioorg. Med. Chem. Lett. 5, str. 739 až 742, 1995) a J. Kobayashi a kol. (Tetrahedron Lett. 29, str. 1177 až 1180, 1988) a na modelu lidské leukemie, který popsal I. Bonnard a kol. (Anti-cancer Drug Design 10, str. 333 až 346, 1995). Připomíná se také 2-bromleptoclinidon, který izoloval S. J. Bloor a kol. (J. Ann. Chem. Soc. 109, str. 6134 až 6136, 1989) z ascidie Leptoclinides sp. a které syntetizoval F. Bracher a kol. (Hétérocycles 29, str. 2093 až 2095, 1989), pak M.E. Jung a kol. (Heterocycles 39= 2, str. 767 až 778, 1994). 2-Bromoleptoc1inidon představuje cytoxicitu na buněčném modelu leukemie s ED 50 0,4 pg/ml. Cytotoxické vlastnosti byly potvrzeny F. Bracherem (Pharmazie 52, str. 57 až 60, 1997), jak in vitro - u 60 linií nádorových buněk v kultuře, tak in vivo na modelech xenoimplantátů lidských linií nádorových buněk (nádory tlustého střeva SW-620, HTC116, ledvinový nádor A498 a melanom LOX IM VI) implantovaných myším.

Z ostatních derivátů ascideminu jako je 11-hydroxyascididemin, 11-methoxyascididemin, 11-fenylascididemin, a 11-nitrofenylaseididemin, 1-nitroascididemin, 3-nitroascididemin a neocaliactin jsou popsány v chemickém plánu (podle číslování, které zavedl S.J. Bloor a kol. 1987), různými skupinami jako t

je skupina F.J. Schmitze (J. Org. Chem. 56, str. 804 až 808, 1991) a Y. Kitahary a kol. (Heterocycles 36, str. 943 až 946, 1993, Tetrahedron Lett. 53, str. 17029 až 17038, 1997), G. Gellerman a kol. (Tetrahedron Lett. 34, str. 1827 až 1830, 1993), S. Nakahary a kol. (Heterocycles 36, str. 1139 až 1144, 1993), I. Spectora a kol. (americký patentový spis číslo US 5 432172, 11. července 1995).

Meridin je dalším přírodním alkaloidem extrahovaným z ascidie Aphicarpa meridiana nebo z mořské houby Corticum sp. Meridin izoloval F.J. Schmitz a kol. (J.Org. Chem. 56, s:tr. 804 • V • · ···· ···· ·· ·· ·· ·· • · · · ». · · • · « · · • · · · · · • · β « β • · ···· · · ···· až 808, 1991) a jeho antiproliferační vlastnosti na modelu myší leukemie (P388) a protihoubové vlastnosti jsou popsány v americkém patentovém spise číslo US 5 182 287 (Gunawardana a kol. 23. ledna 1993). Zprávu o jeho cytotoxických vlastnostech na dvou lidských buněčných liniích: buňkách nádoru tlustého střeva (HT-29) a rakoviny plic (A549) podal R.E. Longley a kol. (J. of Nat. Products 56, str. 915 až 920, 1993).

Mezi těmito sloučeninami je možno také uvést cystodamin, pentacyklický alkaloid Izolovaný z ascidie Cystodytes dellechiajei N. Bontempsem a kol. (Tetrahedron Lett- 35. str. 7023 až 7026, 1994), který vykazuje cytotoxickou aktivitu na lyphoblastech lidské leukemie.

Podstata vynálezu

Podstatou vynálezu je farmaceutický protředek obsahující účinné množství sloučeniny obecného vzorce I nebo la

(I) (la) kde znamená

R¹ , R²

R³ , R⁴ a R⁵ atom vodíku, atom halogenu, alkylovou skupinu s 1 až 6 • · ίβίβ β 6 « atomy uhlíku, hydroxylovou skupinu, skupinu -CHO, OR⁸, -COOH, -CN, -CO2R⁸, -C0NHR⁸, -C0NR⁸R⁹ , -NH₂ , NHR⁸ a

-NCR8)2, -NH-CH2-CH2-NCCH3 >2, -NH-CH2-CH2-Cl, -NHC0R8,
morfolinoskupinu	, nitroskupinu, skupinu SO3H,
-CH2-N-C00R8 í	-CH2-N-C00R8 (
1 CH2-C00R9	1 CH2-Ar
kde znamená R8 a R9 skupinu alkylovou s 1 až uhlíku, fenylalkylovou s 1 až 6 atomy uhlíku v	6 atomy a1kýlo-

vém podílu a Ar arylovou skupinu se 6 až 14 atomy uhlíku,

R⁶ atom vodíku, atom halogenu, skupinu alkylovou s 1 až 6 atomy uhlíku, skupinu -(CH2)nR¹⁰, kde znamená R¹⁰ atom halogenu, skupinu -OH, alkoxyskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, skupinu -O-CO-alkýlovou s 1 až 6 atomy uhlíku v alkylovém podílu a η 1 až 6, skupinu -CN, -C02Et, -COR¹¹, kde znamená R¹¹ alkylovou skupinu s 1 až 6 atomy uhlíku a fenylalkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylovém podílu a skupinu -NR¹²R¹³, kde znamená R¹² a R¹³ na sobě nezávisle atom vodíku nebo skupinu alkylovou s 1 až 6 atomy uhlíku, fenylalkylovou s 1 až 4 atomy uhlíku, skupinu -CCH2>nR¹⁴, kde znamená R¹⁴ atom halogenu, alkoxyskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku nebo -N(CH3>2 a η 1 až 6,

R⁷ atom vodíku, skupinu alkylovou s 1 až 6 atomy uhlíku, fenylalkylovou s 1 až 4 atomy uhlíku, skupinu —NR¹⁵R¹⁶, kde znamená R¹⁵ a R¹⁶ na sobě nezávisle atom vodíku, skupinu alkylovou s 1 až 6 atomy uhlíku, fenylalkylovou s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylovém podílu nebo skuinu -<CH2>nR¹⁷ kde znamená R¹⁷ atom vodíku, atom halogenu, skupinu -OH, alkoxyskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku ani až 6, a jejich adiční soli s farmaceuticky přijatelnými kyselinami.

Vynález se zvláště týká sloučenin obecného vzorce I a/nebo

Ia, kde znamená

R¹ , R² , R³ ,

R⁴ a R⁵ atom vodíku, atom halogenu, skupinu alkylovou s 1 až 6 atomy uhlíku, hydroxy1ovou, -CHO, -0R⁸ , -COOH, -CN, -CO2R⁸, -CONHR⁸, -C0NR⁸R⁹, -NH2 , -NHR⁸ , -NCR⁸>2, -NH-CH2-CH₂-NCCH₃ >2, -NHCOR⁸, morfolinoskupinu, nitroskupinu, skupinu SO3H,

-CH2-N-COOR⁸ -CH2-N-COOR⁸ í í

CH₂-C00R⁹ CH₂-Ar kde znamená R⁸ a R⁹ skupinu alkylovou s 1 až 6 atomy uhlíku a Ar je skupinu arylová se 6 až 14 atomy uhlíku.

Vynález se obzvláště týká sloučenin obecného vzorce I a

Ia, kde znamená

R¹ , R² , R³ ,

R⁴, a R⁵ atom vodíku, atom halogenu, skupiny alkylovou s 1 až 6 atomy uhlíku, hydroxyskupinu, skupinu -0R⁸, -NO2, -NH2, -NHR⁸, -NCR⁸ )2, -NH-CH2-CH2-NCCH₃>2 ,

-N-CH2-CH2-C1, -NHCOR⁸, kce znamená

R⁸ znamená alkylovou skupinu s 1 až 6 atomy uhlíku.

R⁶ atom vodíku, skupinu -CCH2>nR¹⁰, kde znamená R¹⁰ atom halogenu, skupinu -O-CO-CH3, alkylovou s 1 až 6 atomy uhlíku, skupinu -NR¹²R¹³, kde znamená R¹² a R¹³ na sobě nezávisle atom vodíku, skupinu alkylovou s 1 až 6 atomy uhlíku, benzylovou, -<CH2>nR¹⁴,

kde znamená R¹⁴ atom halogenu, alkoxyskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku nebo -NCCH3>2 a η 1 až 6.

R⁷ atom vodíku, skupinu alkylovou s 1 až 6 atomy uhlíku, benzylovou, -NR¹⁵R¹⁶, kde znamená R¹⁵ a R¹⁶ na sobě nezávisle atom vodíku, skupinu alkylovou s 1 až 6 atomy uhlíku, benzylovou, -CCH2)nR¹⁷ kde znamená R¹⁷ atom vodíku, atom halogenu, hydroxyskupinu, alkoxyskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku ani až 6 a jejich adiční soli s farmaceuticky přijatelnými kyselinami.

Přednost se dává sloučenám obecného vzorce I, kde alespoň jedna skupina R¹, R², R³, R⁴ a R⁵ znamená skupinu OR⁸ .

Adiční soli s farmaceuticky přijatelnými kyselinami“ jsou soli, kteří mají biologické vlastnosti volných zásad bez nežádoucích účinků. Jsou to soli s minerálními kyselinami, jako je kyselina chlorovodíková, bromovodíková, sírová, dusičná, fosforečná: kyselé kovové soli jako je dinatriumortofosfát a káli umhydrogensul fát a organické kyseliny.

Obecně lze připravit sloučeniny obecného vzorce (I) a <Ia) následujícím způsobem:

a) nechá se reagovat hetero Die1s-Aderovovou reakcí chinoleindion obecného vzorce IV

CIV) a azadien obecného vzorce V

N(CH₃)₂ kde znamená X methylovou skupinu, za získání směsi slouče-

b) sloučeniny obecných vzorců II a Ha se případně oddělí ci) nechá se reagovat sloučenina obecného vzorce II a/nebo Ha s dimethylformamiddimethylacetalem za získání enaminu obecného vzorce III a lila

Clila) do enaminfi se zavádějí substituenty R⁶ a R⁷ a produkty se cyklizují za získání sloučenin obecného vzorce I a/nebo Ia, nebo

C2) se současně zavádějí substitue ty a provádí se cyklizace

. · · · · · ········ «· · ·· za získání sloučenin obecného vzorce I a/nebo la.

d) popřípadě se sloučeniny I a la oddělí.

Sloučeniny obecného vzorce I a/nebo la, kde znamená R⁶ a R⁷ atom vodíku, se mohou připravoat tak, že

a) se nechá reagovat sloučenina obecného vzorce IV

CIV) kde jednotlivé symboly mají shora uvedený význam, a azadien obecného vzorce V

X

L zR⁵

R⁴ (V)

N(CH₃)₂ kde znamená X skupinu CH2-^CH2-NHBoc a ostatní symboly mají shora uvedený význam, za získání směsi sloučenin obecného vzorce II a Ila

ΙΌ

b) popřípadě se sloučeniny obecných vzorců II a Ha oddělí

c) cyklizují se sloučeniny obecných vzorců II a Ha za získání sloučenin obecného vzorce I a/nebo la,

d) případně se sloučeniny obecného vzorce I a la oddělíCyklizační reakce sloučenin obecných vzorců III a lila se může provádět za tepla v přítomnosti chloridu amonného ve vhodném rozpouštědle.

Pokud znamená X skupinu CH2-CH2-NHBoc, získají se sloučeniny obecného vzorce I a la přímo v přítomnosti hydrogenuhličitanu sodného v prostředí kyseliny trifluoroctové ze sloučenin obecného vzorce II a Ha.

Zavádění substituentu R⁶ je možné za použití reaktivních derivátů, jako jsou R-C0C1, C1CN, ClCCfeEt, C1CH2OR, FCIO3 nebo CH2 = N⁺(CH3)2l“(v CH3COOH).

Zavádění substituentu R⁷ je možné Mannichovou reakcí s aldehydem obecného vzorce R⁷-CH0. V takovém případě lze současnou cyklizací provádět v přítomnosti nadbytku chloridu amonného v kyselině octové.

Příkladně lze připravit substituovaný azadien podle následujícího schéma (ve schéma znamená

TEMPO = volný radikál tetramethyl-l-piperidinyloxy

TBAC1 = chlorid tetrabutyl amonný

FMTP = formylmethylentrifenylfosforan) «· · · . - ·♦ ·· ·· íí íí*· ···< * / ·· · ·· · • · « · · • · ··· · id i-terč-buty 1 d i karbonát

BocNH

ΌΗ

NaOH 1N

ΌΗ sloučenina 1

N-chlorsukcinimid

BocNH'

FMTP

BocNH^^i

TEMPO

TBACI sloučenina 2 sloučenina 3 O'

BocNH^^i d imethy1hydraz i n ->sloučenina 4

Následující příklady objasňují způsob přípravy sloučenin obecného vzorce I a/nebo la.

A - Příprava azadienu (sloučenina 4)

A-l-Příprava N-Boc-l-amino-2-hydroxypropanu (sloučenina 1)

Do roztoku 2 ml (27 mmol) 3-amino-l-propanolu ve směsi 60 ml dioxanu, 30 ml vody a 30 ml IN roztoku hydroxidu sodného se přidá při teplotě 0 C 4,2 g (29,7 mmol) di-terc-butyldikarbonátu. Reakční směs se míchá přes noc při teplotě okolí a okyselí se koncentrovanou kyselinou chlorovodíkovou na hodnotu pH 1. Po několika extrakcích <3x 50 ml) ethylacetátem se organické fáze suší síranem hořečnatým a zkoncentrují se na rotační odparce, čímž se získá žádaná sloučenina v podobě žlutého oleje. (Výtěžek 85¾.) • 1H RMN (CDCI3): 1,25 (s, 9H) ; 2,50 (m, 2H) ; 3,05 (m, 2H) ; 3,45 (m, 2H) ; 5,40 (s široké, 1H).

A-2- Příprava N-Boc-3-aminopropanalu (sloučenina 2)

Suspenduje se 18 g (103 mmol sloučeniny 1, 1,62 g (10,4 mmol) volného radikálutetramethyl-l-piperidinyloxy (TEMPO),

2,9 g (10,45 mmol) tetrabutylamoniumchloridu a 21 g (75,5 mmol) N-chlorsukcinimidu ve 351 ml systému hydrogenuhličitan sodný/uhličitan sodný (0,05 N/0,05N) a 351 ml chloroformu- Reakční suspenze se intenzivně míchá dvě hodiny. Organická fáze se dekantuje, suší se síranem hořečnatým a odpaří se na rotační odparce, čímž se získá žádaný aldehyd ve formě čirého oranžového oleje. (Výtěžek 100¾.) • ¹H RMN (CDCI₃): 1,35 (s, 9H) ;.2,44 (d, 2H, J = 6,8 Hz); 3,21 (m, 2H); 4,90 (s široké,

1H); 6,04 (dd, 1H, J - 8 4,15,6 Hz); 6,74 (td, 1H, J = 6,8a 15,6 Hz); 9,39 (d, 1H, J =

Hz).

A-3-Příprava N-Boc-5-amino-2-penten-l-alu (sloučenina 3)

Ve 350 ml benzenu se rozpustí 11 g (66,7 mmol) sloučeniny 2 a 24,3 g (80 mmol) formylmethylentrifenylfosforánu (FMTP) a reakční roztok se udržuje devět hodin na teplotě zpětného toku. Po odpaření rozpouštědla na rotační odparce se zbytek zfiltruje nejdříve na oxidu křemičitém [(chloroform/heptan 1:1) pak chloroform] k odstranění trifenylfosfinu. Druhá filtrace na oxidu křemičitém (AcOEt/heptan 8=2) umožní získat 3,88 g sloučeniny 3 v podobě žlutooranžového oleje. (Výtěžek 29¾. ) • ¹H RMN (CDCI3): 1,47 (s, 9H); 2,60 (m, 2H); 3,38 (m. 2H), 4,82 (s g_irOké1H); 6,18 (dd, 1H); 6,88 (td, 1H); 9,55 (d, 1H).

A-4-Příprava dimethylhydrazonu N-Boc-5-amino-2-penten-l-alu (sloučenina 4)

Do 1,47 ml (19,5 mmol) dimethylhydrazinu a 8 kapek kyšeo líny octové ve 30 ml etheru se přidá při teplotě O C 3,88 g ·· ·· ·· ·· ·· ·<

• ;· · · ·· · · ·· , • · · · · · · , • · ·· · · ·· · . · * * 4®· ··· β«β® ®«®6 ·· 9999 99 ···« <19,5 mmol) sloučeniny 3. Reakční směs se míchá 10 minut, organická fáze se dekantuje, promyje se IN kyselinou chlorovodíkovou, pak nasyceným roztokem chloridu sodného. Po vysušení síranem horečnatým a po odpaření rozpouštědla na rotační odparce se získá 4,4 g hydrazonu Csloučeniny 4) v podobě žlutooranžového oleje. CVýtěžek 94%.) • ¹H RMN (CDCI3): 2,30 (s, 9H); 2,3 (m, 2H); 2,82 (m, 2H), 4,52 (s široké&H) ; 5,70 l (td, 1H, J = 6,8 «3.15,6 Hz); 6,22 (ddd, 1H, J = 0,8 et 8,8 2.15,6 Hz); 6,96 (d, 1H, J = 8,8 Hz).

¹³C RMN (CDCI3): 28,15 ; 33,05 :.39,58 ; 42,51 ; 78,77 ; 130,84 ; 130,95 ; 135,54

155,68.

B- Příprava sloučenin obecného vzorce II a Ha

B-l- Příprava 4-methylpyrido[2,3-g]chinolin-5,10-dionu Craeziprodukt I-lb) a 4-methylpyrido[3,2-g]chinolin-5,10-dionu Cmeziprodukt Il-lb)

Směs 0,5 g ¢3,14 mmol) chinolin-5,8-dionu, 0,35 g ¢3,14 mmol) dimethylhydrazonkrotonaldehydu a 0,45 ml ¢4,76 mmol) acetanhydridu ve 20 ml chloroformu se zpracuje během jedné hodiny v ultrazvukové lázni. Po odpaření rozpouštědla na rotační odparce se reakční směs zfiltruje na sloupci oxidu křemičitého Cchloroform), čímž se získá 0,428 g směsi dvou isomerů I-la a Il-la v podobě fialového prášku. Tento prášek a 1,6 g ¢18,4 mmol) oxidu manganičitého se suspenduje ve 20 ml chloroformu a směs se udržuje dvě hodiny na teplotě zpětného toku. Po zfiltrování přes cellit se filtrát zkoncentruje na rotační odparce a po čištění bleskovou chromatografií na sloupci oxidu křemičitého Cdichlormethan/methanol 98=2) se získá meziprodukt CI-lb): 4-methylpyrido[2,3-g]chinolin-5,10-dion ¢40 mg) Cvýtěo žek 6%) v podobě hnědého prášku o teplotě tání 220 C.

• ¹H RMN (CDCI3): 2,91 (s, 3H); 7,54 (d, 1H, J = 4,8 Hz); 7,75 (dd, 1H, J = 4 7,6

Hz); 8,67 (dd, 1H, J = 2 7,6 Hz); 8,91 (d, 1H, J = 4,8 Hz); 9,12 (dd, 1H, J = 2 ' 4

Hz).

· «9

·* «· • · · ·

9 9 • · 9 9 9 • 9 9

9« 9999 • 999 . 13c RMN (CDCI3): 22,75 ; 127,93 ; 128,04 ; 129,32 ; 131,50 ; 135,50 ; 148,73 ; 149,26 ; 152,11 /153,68 ; 155.47 181,46 ; 182,87.

• IR (CHCI3): 1689 cm'¹.

Meziprodukt (II-lb)^: 4-methylpyridoE3,2-g]chinolin-5,10-dion (160 mg) (výtěžek 23¾) v poddobě hnědého prášku o teplotě tání 270 °C.

• 1h RMN (CDCI3): 2,94 (s, 3H); 7,52 (d, 1H, J = 4,8 Hz) /7,76 (dd, 1H, J = 4,8 . 8,4

Hz) ; 8,59 (dd, 1H, J = 2 a 8,4 Hz); 8,92 (d, 1H, J = 4,8 Hz); 9,11 (dd, 1H, J = 2^ 4,8 Hz).

• 13c RMN (CDCI3): 22,81 ; 128,30 ; 128,39 ; 130,84 ; 131,55 ; 135,52 ; 147,90; 149,95 ; 151,74 ; 153,94 ; 155,35 ; 180,42 ; 184,02. IR (HCCI3) 1672 ; 1700.

B-2= Příprava 9-methoxy-4-methylpyrido[2,3-g] chinol in-5 , ÍO-’ dionu (meziprodukt I-2b) a 6-methoxy-4-methylpyrido[3,2-g]chinolin-5,10-dionu (meziprodukt II-2b)

Směs 0,5 g (2,8 mmol) 4-methoxychinolin-5,8-dionu, 0,32 g (2,87 mmol) dimethylhydrazonkrotonaldehydu a 0,4 ml (4,23 mmol) acetanhydridu v 8 ml chloroformu se uržuje jednu hodinu na teplotě zpětného toku. Po odpaření rozpouštědla na rotační odparce se reakční směs zfiltruje přes oxid křemičitý (dichlormethan/methanol 98=2) a získá se 0,48 g směsi dvou isomerfi I-2a a II-2a v podobě fialového prášku. Tento prášek a 2,3 g (26,45 mmol) oxidu manganičitého se suspenduje ve 26 ml chloroformu a směs se udržuje dvě hodiny na teplotě zpětného toku. Po zfiltrování přes cel lit se filtrát zkoncentruje na rotační odparce a po čištění bleskovou chromatografií na sloupci oxidu křemičitého (dichlormethan/methanol 98=2) se získá meziprodukt (I-2b): 9-methoxy-4-methyl pyr i do [2,3-g] chinol in-5 ,10-dion (57 mg) (výtěžek 8¾) v podobě červeného prášku.

· 1H RMN (ČDCI3): 2,84 (s, 3H); 4,06 (s, 3H) · 7,18(d, 1H, J = 6 Hz); 7,46 (d, 1H, J = 4,4 Hz); 8,87 (d, 1H, J = 6 Hz); 8,87 (d, 1H, J = 4,4 Hz).

·« «· * < » <

···· ···· ·· ····

Meziprodukt CII-2b)= 6-methoxy-4-methyIpyrido[3,2-g]chinolin5.10- dion ¢293 mg) Cvýtěžek 40%) v podobě oranžového prášku.

• 'H RMN (CDCI3): 2,80 (s, 3H); 4,05 (s, 3H); 7,2 (d, 1H, J = 6 Hz); 7,48 (d, 1H, J = j 4,8 Hz); 8,85 (d, 1H, J = 6 Hz); 8,88 (d, 1H, J = 4,8 Hz).

• 13C RMN (CDCI3): 21,75 ; 43,41 ; 112,74 ; 119,72 ; 130,93 ; 131,04 ; 148,32; 149,22; 150,26 ; 151,60 ; 152,80; 155,11 ; 181,44; 184,53.

• IR (CHCI3): 1675 ; 1700 cm'¹.

B-3= Příprava 9-nitro-4-methylpyrido[2,3-g]chinolin-5,10-dionu (meziprodukt I-5b) a 6-nitro-4-methylpyridot3,2-g]chinolin5.10- dionu (meziprodukt. II-5b)

Směs 0,8 g (3,92 mmol) 4-nitrochinolin-5,8-dionu, 0,65 g (5,8 mmol) dimethylhydrazonkrotonaldehydu a 0,55 ml (5,8 mmol) acetanhydridu v 10,5 ml chloroformu se zpracuje během 30 minut v ultrazvukové lázni. Po odpaření rozpouštědla na rotační odparce se reakční směs zfiltruje na sloupci oxidu křemičitého (dichlormethan/methanol 98=2), čímž se získá 0,7 g směsi dvou isomerfi I-5a a II-5a v podobě fialového prášku. Tento prášek a

2,9 g (33,4 mmol) oxidu manganičitého se suspenduje ve 29 ml chloroformu a směs se udržuje dvě hodiny na teplotě zpětného toku. Po zfiltrování přes cellit se filtrát zkoncentruje na rotační odparce a po vyčištění bleskovou chromatografií na sloupci oxidu křemičitého (dichlormethan/methanol 98=2) se získá meziprodukt (I-5b)^; 9-nitro-4-methylpyrido[2,3-g]chinolin-5 , 10-dion 110 mg (výtěžek 11%) v podobě prášku.

• ¹H RMN (CDCI3): 2,98 (s, 3H) ; 7,19 (d, 1H, J = 5,6 Hz) ; 7,54 (d, 1H, J = 4,8 Hz); 8,79 (d, 1H, J = 5,6 Hz); 8,94 (d, 1H, J = 4,8 Hz).

• IR(HCCl3): 1703 cm'¹.

Mmeziprodukt (II-5b): 6-nitro-4-methylpyrido[3,2-g]chinolin5.10- dion (165 mg) (výtěžek 16%) v podobě žlutohnědého prášku.

• 1h RMN (CDCI3): 2,85 (s, 3H) ; 7,6^, 1H, J = 4,8 Hz); 7,74 (d, 1H, J = 4,8 Hz); 8,99 (d, 1H, J = 4,8 Hz); 9,33 (d, 1H, J = 4,8 Hz).

B-4 = Pr íprava - 9-d imethy1am i no-4-methy1pyr i do[2,3-g]ch i no1 i n5,10-dionu (meziprodukt I-3b) a 6-dimethylamino-4-methylpyrido[3,2-g]chinolin-5,10-dionu (meziprodukt II-3b)

Ve 2,1 ml dimethylformamidu se rozpustí 150 mg (0,588 mmol) nitrovaného tricyklu I-5a a II-5a a 0,4 ml (1,95 mmol) N,N-dimethylformamiddiethylacetalu a reakční směs se udržuje jednu o

hodinu na teplotě 130 C. Po odpaření rozpouštědla za použití vývěvy se získá meziprodukt II-3a a II-3b, kterých se použije přímo v dalším stupni:

Meziprodukt II-3b= 6-dimethylamino-4-methylpyrido[3,2-g]chino1in-5,10-dion (výtěžek 94%).

• RMN (CDCI3); 2,77 (s, 3H); 3,05 (s, 6H); 6,89 (d, 1H, J = 6 Hz); 7,39 (d, 1H,

J = 4,8 Hz); 8,42 (d, 1H, J = 6 Hz); 8,-74 (d, 1H, J = 4,8 Hz).

B-5: Příprava 9-chlor-4-(N-Boc-l-aminoethan-5,10-dihydropyrido[2,3-g]chinolin-5,10-dionu (meziprodukt I-7b) a 6-chlor-4-(N-Boc-l-aminoethan-5,10-dihydropyrido[3,2-g]chinolin-5,10dionu (meziprodukt II-7b)

Směs 0,6 g (3,1 mmol) 4-chlorchinolin-5,8-dionu, 0,75 g (3,1 mmol) dimethylhydrazonu 4 a 0,45 ml (4,76 mmol) acetanhydridu v 8,5 ml chloroformu se zpracuje během 30 minut v ultrazvukové lázni. Po odpaření rozpouštědla na rotační odparce se do reakční směsi přidá 2,7 g (31,1 mmol) oxidu manganičitého a 22 ml chloroformu a směs se udržuje dvě hodiny na teplotě zpětného toku. Po zfiltrování přes cellit se filtrát zkoncentruje na rotační odparce načež se čistí bleskovou chromatografií na sloupci oxidu křemičitého (dichlormethan/methanol 98=1), čímž se získá meziprodukt I-7b= 9-chlor-4-(N-Boc-l-aminoethan-5,10-dihydropyrido[2,3-glchinolin-5,10-dion -70 mg (výtěžek 6%) v podobě hnědého prášku.

• ¹H RMN (CDCI3): 1,35 (s, 9H); 3,45-3,52 (m, 4H); 4,86 (s širokčl H); 7,56 (d, 1H,

J = 4,0 Hz); 7,74 (d, 1H, J = 5,2 Hz); 8,90 (d, 1H, J = 5,2 Hz); 8,94 (d, 1H, J = 4

Hz) ; . 13_C RMN (CDCÍ3): 28,37 ; 35,32 ; 40,30 ; 79,47 ; 126,84 ; 128,04 ; 130,88 ;

131,17 ; 145,78 ; 150,34 ; 150,98 ; 152,29 ; 154,05 ; 154,36 ; 155,88 ; 179,76 ; is?·)'.':

• ÍR (CHCI3): 1695 cm'¹.

• · · ’ © ·'··'· · · · · • A © · * © β *

Meziprodukt II-7b= 6-chlor-4-(N-Boc-l-aminoethan-5.10-dihydropyridoC3,2-g]chinolin-5,10-dion v podobě hnědého prášku (200 mg) (výtěžek 17%).

• 1³C RMN (CDCI3): 28,24 ; 34,96 ; 40,33 ; 79,47 ; 128,46 ; 130,15 ; 131,06; 131,59 , 145,20 ; 148,76 ; 149,71 ; 151,74 ; 153,88 ; 153,92 ; 155,84 ; 179,76 ; 183,20.

B-6: Příprava 3-methoxy-4-methylpyrido[2,3-g]chinolin-5,10dionu (meziprodukt I-8b) a 3-methoxy-4-methylpyrido[3,2-g]chinolin-5,10-dionu (meziprodukt II-8b)

Směs 1 g (6,28 mmol) chlorchinolin-5,8-dionu, 1,78 g (12,57 mmol) dimethylhýdrazon-2-methoxy-2-butenalu ve 25 ml chloroformu se míchá 5 hodin při teplotě místnosti. Po odpaření rozpouštědla na rotační odparce se reakční směs zfiltruje přes oxid křemičitý (dichlormethan/methanol 95=5), čímž se získá 1,55 g směsi dvou isomerfl, I-8a a II-8a v podobě fialového prášku. Tento prášek a 1 g (11,5 mmol) oxidu manganičitého se suspenduje ve 30 ml chloroformu a směs se míchá jednu hodinu při teplotě místnosti. Po zfiltrování přes cel lit se filtrát zkoncentruje na rotační odparce a čistí se bleskovou chromatografií na sloupci oxidu křemičitého (dichlormethan/ methanol 99=1), čímž se získá meziprodukt I-8b= 3-methoxy-4-methylpyrido[2,3-g]chinolin-5,10-dion 110 mg (výtěžek 7%) v podobě hnědého prášku o teplotě tání >260 C.

• ¹H RMN (CDCI3): 2,79 (s, 3H); 4,11 (s, 3H); 7,72 (dd, IH, J = 4,8 8,1 Hz); 8,66 (s , 1H); 8,67 (dd, 1H, J = 8,1a? 1,9 Hz); 9,10 (dd, 1H, J = 4,8 A 1,9 Hz).

• 13_C RMN (CDCI3): 13,03 ; 56,87 ; 127,88 ; 129,50 ; 129,95 ; 135,50 ; 136,64 ;

139,26 ; 142,56 ; 149,33 ; 155,11 ; 157,24 ; 180,63 ; 183,56.

• IR (CHCI3): 1684 cm'¹.

•Φ 1» ΦΦ Μ φ · · · · · · Φ φ φ φ 4» · Φ

Φ Φ ΦφφΦ ·

Φ·Φ φ · *

ΦΦ ΦΦΦΦ ΦΦ ΦΦΦΦ

Meziprodukt II-8b: 3-methoxy-4-methylpyrido[3,2-g]chinolin-5,10-dion (190 mg) (výtěžek 12¾) v podobě hnědého prášku.

• 1h RMN (CDCI3): 2,77 (s, 3H); 4,12 (s, 3H); 7,74 (dd, 1H, J = 4,6 .. 8,0 Hz); 8,60 (dd, 1H, J = 8,0a 1,6 Hz); 8,68 (s, 1H); 9,12 (dd, 1H, J = 4,6 a».. 1,6 Hz).

• ¹³C RMN (CDCI3): 12,98 ; 56,93 ; 127,99 ; 129,06 ; 131,27 ; 135,53 ; 136,84 ; 138,81 ; 143,27 ; 148,16 ; 155,20 ; 157,16, 179,69 ; 184,59.

• IR (CHCI3): 1670 ; 1692 cm'¹.

B-7 = Příprava 3.9-dimethoxy-4-methylpyrido[2,3-g]chinolin-5,10dionu (meziprodukt I-9a) a 3,6-dimethoxy-4-methylpyrido[3.2-g]chinolin-5,10-diónu (meziprodukt II-9b)

Do roztoku 4-methoxychinolindionu (1.33 g, 7 mmol) ve 30 ml chloroformu se přikape 2-methoxy-2-butenaldimethylhydrazon (1 g, 7,1 mmol) v 15 ml chloroformu. Reakční směs se míchá pět hodin při teplotě okolí v prostředí dusíku za nepřístupu světla. Po odpaření rozpouštědla na rotační odparce se získaný produkt čistí bleskovou chromatografií na oxidu křemičitém (chloroform, pak chloroform/methanol 98^:2, pak 95=5) k získání první frakce Fi obsahující nearomatický produkt a druhé frakce F2 obsahující žádaný produkt. Přidá se 1 g oxidu manganičitého do frakce Fi a 30 ml chloroformu. Míchá se 90 minut. Po filtraci na cellitu a po promytí sraženiny chloroformem plus methanolem se zkoncentruje na rotační odparce k získání frakce Fi . Frakce Fi a F2 se spojí a čistí se bleskovou chromatografií (chloroformu, pak chloroformu/methanol 97=3) za získání dvou žádaných sloučenin I-9a a II-9b v podobě hnědého prášku. Meziprodukt II-9b= 3,6-dimethoxy-4-methylpyrido[3,2-glchinolin5,10-dion (výtěžek 11¾). (210 mg), teplota tání >260 C.

• ¹H RMN (CĎCI3): 2,68 (s, 3H); 4,09 (s, 3H); 4,10 (s, 3H);· 7,18 (d, ΊΗ, J = 5,5 Hz); 8,60 (s, 1H); 8,88 (d; 1H, J = 5,5 Hz).

. 13_C RMN (CDCI3): 12,85 ; 56,81 ; 56,84 ; 111,14 ; 121,32 ; 130,95,136,43,13 , ; 141,95 ; 150,31 ; 155,44 ; 157,33.; 165,97 ; 180,13 ; 184,24.

• IR (CHCI3)1678,1692 cm’.

B-8 Příprava 3-methoxy-4-methyl-9-chlorpyridoC2,3-g]chinolin5,10-dionu (meziprodukt I-10b) a 3-methoxy-4-methyl-6-chlorpyrido[3,2-g]chinolin-5,10-dionu (meziprodukt II-10b)

Do roztoku 4-chlorchinolindionu (1,37 g, 7,1 mmol) ve 30 ml chloroformu se přikape 2-methoxy-2-butenaldimethylhydrazonu (1 g, 7,1 mmol) v 15 ml chloroformu. Reakční směs se míchá pět hodin při teplotě okolí v prostředí dusíku za nepřístupu světla. Po odpaření rozpouštědla na rotační odparce se získaný produkt čistí bleskovou chromatografií na oxidu křemičitém (chloroform, pak chloroform/methanol 98=2) za získání první frakce Fi obsahující nearomatický produkt. Do této frakce Fi se přidá 1 g oxidu manganičitého a 30 ml chloroformu- Reakční směs se míchá 60 minut při teplotě okolí. Po filtraci na cellitu a po promyti sraženiny chloroformem a methanolem se reakční směs zkoncentruje na rotační odparce. Získaný produkt se čistí bleskovou chromatografií na oxidu křemičitém (97=3) za získání dvou žádaných sloučenin I-10b a II-10b v podobě žlutého prášku.

Meziprodukt II-10b= 3-methoxy-4-methy1-6-chlorpyrido[2,3-gl chinolin-5,10-dion (výtěžek 5%), (100 mg), teplota tání >260 C.

• 1H RMN (CDCI3): 2,68 (s, 3H); 4,11 (s, 3H); 7,71 (d, 1H, J = 5,2 Hz); 8,64 (s, 1H) ; 8,90 (d, 1H, J = 5,2 Hz).

• 1³C RMN (CDCI3) : 12,96 ; 56,97 ; 128,92 ; 130,72 ; 130,98 ; 136,95 ; 138,12 ; 141,93 ; 145,06 ; 150,21 ; 153,85 ; 157,55 ; 179,31 ; 183,67.

• IR (CHCI3): 1696 ; 1684 cm¹.

o ΦΦ Φ· ♦· ·· ·· φ » # · · · · φ · »φ ♦ • φ φ « β φ β ο «φφφφ φφφφ φ φ φ φ φ φ φ φ φ φφφφ φφφφ «φ φφφφ φφ φφφφ

Β-9 Příprava 3-methoxy-4-methyl-9-dimethylaminopyridoE2,3-g]chinolin-5,10-dionu (meziprodukt I-llb) a 3-methoxy-4-methyl6-dimethylaminopyrido[3,2-g]-chinolin-5,10-dionu (meziprodukt II-llb)

Roztok I-10b nebo II-10b (90 mg, 0,31 mmol) dimethylamoniumchloridu (127 mg, 1,56 mmol) a hydroxidu sodného (63 mg, 1,56 mmol) ve směsi tetrahydrofuran/voda (4 ml=2ml) se udržuje jednu hodinu na teplotě zpětného toku. Po odpaření rozpouštědla se produkt vyjme do 50 ml směsi dichlormethan/methanol 95=5. Organické fáze se získá, suší se síranem hořečnatým, odpaří se na rotační oparce a získaný produkt se čistí bleskovou chromatografií na oxidu křemičitém (dichlormethan/methanol 95=5) za získání žádané sloučeniny I-llb a II-llb v podobě žlutého prášku.

Mez i produkt 11-11b = 3-methoxy-4-methy1-6-d i raethylamí nopyri do[3,2-g]-chinolin-5,10-dion (80 mg) (výtěžek 87¾). teplota tání >.260.

• 1h RMN (CDCI3): 2,64 (s, 3H); 3,06 (s, 6H); 4,08 (s, 3H); 6,95 (d, 1H, J = 5,9 Hz) ; 8,53 (d, 1H, J = 5,9 Hz); 8,56 (s, 1H).

• 13_C RMN (CDCI3) : 12,62 ; 43,40 ; 56,80 ; 112,39 ; 120,50 ; 132,23 ; 135,90

136,08 ; 141,86 ; 150,53 ; 151,70 ; 155,04 ; 157,19 ; 180,67 ; 185,45.

• IR (CHCI3): 1693 ; .1654 cm“¹.

B-10= Příprava 3,7-dimethoxy-4-methylpyrido[2,3-g]-chinolin-5,10-dionu (meziprodukt I-12b) a 3,8-dimethoxy-4-methylpyrido[3,2-g]-chinolin-5,10-dionu (meziprodukt II-12b)

1. Příprava 2-methoxychinolin-5,8-dionu

Suspenze 5,8-dioxokarbostyrilu (3,1 g, 17,7 mmol), uhličitanu stříbrného (10,2 g, 37 mmol) a methyljodidu (31 ml, 498

• · ···· 9* · mmol) v 1,2 1 chloroformu se míchá ve tmě 90 hodin při teplotě okolí. Sraženina se odfiltruje a filtrát se zkoncentruje na rotační odparce. Získaný produkt se čistí filtrací na oxidu křemičitém (chloroform), čímž se získá žádaný chinon v podobě e

žluté pevné látky (2,2 g), (výtěžek 66¾). teplota tání 196 C• ¹H RMN (CDCI₃): 4,14 (s, 3H); 6,95 (d, 1H, J = 10,3 Hz); 7,02 (d, 1H, J = 10,3 Hz); 7,06 (d, 1H, J = 8,8 Hz); 8,25 (d, 1H, J = 8,8 Hz).

•¹³C RMN (CDCI_a) : 54,70 ; 116,68 ; 124,32 ; 136,83 ; 137,54 ; 138,21 ; 146,58 ; 167,14; 183,48; 184,31.

2. Příprava 3,7-dimethoxy-4-methylpyrido[2,3-g]-chinolin□,10-dionu (meziprodukt I-12b) a 3,8-dimethoxy-4-methylpyrido[3,2-g]-chinolin-5,10-dionu (meziprodukt II-12b)

Do roztoku methoxychinolindionu (1,0 g, 5,3 mmol) v 60 ml tetrahydrofuranu še přikape roztok 2-methoxy-2-butenaldimethylhydrazonu (0,75 g, 5,3 mmol) v 10 ml tetrahydrofuranu. Reakční směs se míchá 40 hodin při teplotě okolí v prostředí dusíku za nepřístupu světla. Po odpaření rozpouštědla na rotační odparce se získaný produkt rozpustí v 80 ml chloroformu a přidá se oxid manganičitý 85¾ (5,4 g, 53 mmol). Reakční směs se míchá dvě hodiny a zfíltruje se přes cellit. Po zkoncentrování na rotační odparce se získaný produkt čistí bleskovou chromatografií na oxidu křemičitém (chloroformu, čímž se získají sloučeniny I-12b a II-12b v podobě hnědého prášku.

Meziprodukt II-12b.: 3,8-dimethoxy-4-methylpyrido[3,2-gl -chino1in~5,10-dion (výtěžek 8¾). (120 mg). Teplota tání >260 C• ¹H RMN (CDCI3): 2,74 (s* 3H); 4,09 (s, 3H); 4,20 (s, 3H); 7,09 (d, 1H, J = 8,4 Hz); 8,41 (d, 1H, J = 8,4 Hz); 8,63 (s, 1H).

• ¹³C RMN (CDCI₃):

• IR(CHCI3): 1667, 1693 cm’¹.

B-ll^: Příprava 8-ethoxykarbonyl-6-(2 -N-Boc-aminoethyl)pyrido[2,3-glchinolin-5,10-dionu (meziprodukt I-13b) a 7-ethoxykarbonyl-6-(2 -N-Boc-aminoethy1)pyrido-[3,2-glchinolin-5,10-dionu (meziprodukt II-13b)

Do roztoku 3-ethylchinolinkarboxylát-5,8-dionu (1,05 g,

4,54 mmol) a acetanhydridu (4,6 ml) v 75 ml acetonitrilu se přikape roztok N-Boc-5-amino-2-penten-l-aldimethylhydrazonu <1,1 g 4,56 mmol) v 15 ml acetonitrilu. Reakční směs se míchá 24 hodin při teplotě okolí v prostředí dusíku za nepřístupu světla. Po odpaření rozpouštědla na rotační odparce se přidá do získaného produktu 5 g óxiddu manganičitého a 150 ml chloroformu. V míchání se pokračuje po 1,5 hodin při teplotě okolí- Po zfiltrování přes cel lit a promytí sraženiny chloroformem pak methanolem se reakční směs zkoncentruje na rotační odparce. Získaný produkt se čistí napřed filtrací přes oxid křemičitý (dichlormethan/methanol 99=1, pak 97=3) pak bleskovou chromatografií na oxidu křemičitém (99=1), čímž se získají sloučeniny I-13b a II-13b v podobě hnědého prášku.

Meziprodukt II-13b: 7-ethoxykarbony1-6-(2 -N-Boc-aminoethy1)pyrido-[3,2-glchinolin-5,10-dion (výtěžek 3%), (60 mg). Teplota tání 170 C.

• ¹H RMN (CDCI3): 1,36 (s, 9H); 1,47 (t, 3H, J = 7,4 Hz); 3,52 (m, 4H); 4,51 (q, 2H,

J= 7,4 Hz); 4,78 (slširq, ÍH); 7,57 (d, 1H, J = 5,2 Hz); 8,99 (d, 1H, J = 5,2 Hz);

9,17 (d, 1H, J = 2,2 Hz); 9,64 (d, 1H, J = 2,2 Hz).

• 1³C RMN (CDCI3): 14,33 ; 28,40 ; 35,74 ; 40,22 ; 62,62 ; 79,63 ; 128,65 ; 130,33 , 130,49 ; 131,83 ; 137,30 ; 149,60 ; 150,23 ; 152,72 ; 154,23 ; 155,72 ; 155,98 , 163,52 ; 179,69 ; 183,38.

• IR (CHCI3): 3457 ; 1726 ; 1705 ; 1677 cm¹.

B-12^: Příprava 7-hydroxy-4-(2 -N-Boc-aminoethyl)pyrido[2.3-g]chinolin-5,10-dionu (meziprodukt I-14b) a 8-hydroxy-4-(2 -NBoc-aminoethy1)pyrido-[3,2-g]chinolin-5,10-dionu (meziprodukt II-14b)

Do roztoku 5,8-dioxokarbostyrilu (0,98 g, 5,59 mmol) a acetanhydridu (5,8 ml) ve 100 ml acetonitrilu se přikape roztok N-Boc-5-amino-2-penten-l-aldimethylhydrazonu (1,49 g, 6,l5 mmol) ve 30 ml acetonitrilu. Reakční směs se míchá 16 hodin při teplotě okolí v prostředí dusíku za nepřístupu světla. Po odpaření rozpouštědla na rotační odparce se přidá do získaného produktu 7 g (80,5 mmol) oxidu manganičitého a 180 ml chloroformu. V míchání se pokračuje po 1,5 hodin při teplotě okolí. Po zfiltrování přes cel lit a promytí sraženiny chloroformem, pak methanelem se reakční směs zkoncentruje na rotační odparce. Získaný produkt se čistí filtrací na oxidu křemičitém (dichlormethan/methanol 98=2, pak 95=5), čímž se získají sloučeniny I-14b a II-14b v podobě hnědého prášku.

Meziprodukt II-14b: 8-hydroxy-4-(2 -N-Boc-aminoethyl)pyrido[3,2-g]chinolin-5,10-dion (výtěžek 12¾). (230 mg). Teplota tání 252 “c.

• 1h RMN (CDCI3): 1,56 (s, 9H) ; 3,49 (m, 4H); 4,73 (slarge, 1H) ; 6,94 (d, 1H, J =

9,6 Hz); 7,54 (d, 1H, J = 4,8 Hz); 8,10 (d, 1H, J = 9,6 Hz); 8,89 (d, 1H, J = 4,8 Hz) ' ; 9,66 (slarge, 1H).

• ¹3c RMN (CDCI3) : 28,29 ; 35,53 ; 40,24 ; 117,01 ; 127,87 ; 128,62 ; 132,29 ; 136,18 ; 138,04 ; 148,25 ; 152,26 ; 153,33 ; 155,86 ; 176,36 ; 181,35.

• IR (CHCI3): 3457 ; 3340 ; 1693 ; 1663 cm¹.

B-13:Příprava 7-hydroxy-4-methylpyrido[2,3-g]chinolin-5,10dionu (meziprodukt I-15b) a 8-hydroxy-4-methylpyriodo[3,2-g] chinolin-5,10-dionu (meziprodukt II-15b)

Do roztoku 5,8-dioxokarbostyrilu (1 g, 5,71 mmol) a acet- 24 anhydridu ¢6,2 ml) ve 220 ml acetonitrilu se přikape roztok 2-butenaldimethylhydrazonu (0,703 g, 6,28 mmol) ve 20 ml acetonitrilu. Reakční směs se míchá 16 hodin při teplotě okolí v prostředí dusíku za nepřístupu světla a zahříváním se udržuje po dobu 6 hodin na teplotě zpětného toku. Po odpaření rozpouštědla na rotační odparce se získaný produkt čistí filtrací na oxidu křemičitém (dichlormethan/methanol 98=2) za získání první frakce obsahující žádaný nearomatický produkt. Do reakční směsi se přidají 3 g oxidu manganičitého a 65 ml chloroformu a směs se míchá přes noc při teplotě okolí. Po zfiltrování přes cellit a promytí sraženiny chloroformem, pak methanolem se reakční směs zkoncentruje na rotační odparce. Získaný produkt se čistí bleskovou chromatografií na oxidu křemičitém (99=1) za získání žádaných sloučenin I-15b a II-15b v podobě béžového prášku.

Meziprodukt II-15b= 8-hydroxy-4-methylpyrldo[3,2-g]chinolin-5,10-dion (výtěžek 12¾). Teplota tání >260 C.

• ¹H RMN (DMSO-d₆): 2,79 (s, 3H); 6,82 (d, 1H, J = 9,5 Hz); 7,73 (d, 1H, J = 5,2 Hz) ; 8,05 (d, 1H, J = 9,5 Hz); 8,85 (d, 1H, J = 5,2 Hz); 12,27 (g_iroké1H).

Z • 13c RMN (DMSO-d₆): 21,92 ; 114,30 ; 122,66 ; 127,30 ; 131,52 ; 135,94 ; 148,60 ; 149,60 ; 152,48 (2C); 176,41 ;-182,13 (2C).

• IR (CHCI3): 1684 ; 1664 cm^-1.

B-14 = Příprava 7-methoxy-4-methylpyrido[2,3-gl chinolin-5,10-dionu (meziprodukt I-16b) a 8-methoxy-4-methylpyriodo[3,2-g]chinolin-5,10-dionu (meziprodukt II-16b)

Směs sloučenin I-15b nebo II-15b (70 mg, 0,29 mmol), methyl jodidu (1 ml, 15,8 mmol) a A92CO3 (170 mg, 0,62 mmol) ve 100 ml chloroformu se míchá 14 hodin za nepřísupu světla při o

teplotě okolí, načež se udržuje pět hodin na teplotě 56 C. Po zkoncentrování na rotační odparce se získaný produkt čistí bleskovou chromatografií na oxidu křemičitém (dichlormethan/

methanol 99,5=0,5), čímž se získají sloučeniny I-16b a II-16b v podobě béžověhnědého prášku.

Meziprodukt II-16b= 8-methoxy-4-methylpyrido[3,2-g]chinolin5,10-dion (výtěžek 41¾). (30 mg). Teplota tání 128 C.

• ¹H RMN (CDCI3): 4,14 (s, 3H); 7,07 (d, 1H, J = 8.8 Hz); 7,44 (d, 1H, J = 4,8 Hz);

8,37 (d, 1H, J = 8,8 Hz); 8.85 (d, 1H, J = 4,8 Hz).

•13c RMN (CDCI3) : 54,92; 117,58; 126,24; 128,09; 131,30; 137,73; 147,31 , 150,00 ; 151,34 ; 153,38 ; 167,39 ; 180,44; 183,70.

• IR (CHCI3): 1765 ; 1698 ; 1667 ; 1603 cm'¹.

B-15= Příprava 7,9 dichlor-4-methylpyrido[2,3-g]chinolin-5,10dionu (meziprodukt I-17b) a 6,8-dichlor-4-methylpyrido[3,2-g] chinolin-5,10-dionu (meziprodukt II-17b)

I. Příprava 2,4-dichlorchinolin-5,8-dionu

Do roztoku 2,4-dichlor-5,8-dimethoxychinolinu (2,85 g,

II, 04 mmol) ve směsi aceton i tr i 1 /voda (150 ml/75 ml) se po částech přidá ceriumámonoumnitrát (CAN 21,4 g, 39,03 mmol). Reakční směs se míchá 40 minut při teplotě okolí. Po odpaření acetonitrilu se přidá 50 ml vody a 200 ml nasyceného roztoku hydrogenuhličitanu sodného. Vodná fáze se extrahuje dichlormethanem (5x 200 ml). Po vysušení síranem hořečnatým se rozpouštědlo odpaří na rotační odparce za získání žádané sloučeniny v podobě hnědého prášku (1,9 g). (Výtěžek:75¾.)

Teplota tání: 161 C.

• ¹H RMN (CDCI3) : 7,03 (d, 1H, J = 10,6 Hz); 7,11 (d, 1H, J = 10,6 Hz) ; 7,74 (s, 1H).

• 13_C RMN (CDCI3) 124,43; 131,10; 136,91 ; 139,52; 146,69; 148,96; 156,16;

180,53:182,01.

• IR (CHCI3): 1687 ; 1676 cm'¹.

2. Příprava 7,9-dichlor-4-methylpyrido[2,3-g]chinolin-5,10 ·· ·· ♦ · 99 * ·

-dionu (meziprodukt I-17b) a6,8-dichlor-4-methylpyrido[3,2-g]chinolin-5,10-dionu (meziprodukt II-17b)

Do roztoku 2,4-dichlorchinolin-5,8-dionu (0,6 g, 2,63 mmol) a acetanhydridu (5 ml) ve 100 ml acetonitrilu se přikape roztok 2-butenaldimethylhydrazonu (0,325 g, .2-,89. mmol) ve 20 ml acetonitrilu. Reakční směs se míchá 20 hodin při teplotě okolí v prostředí dusíku za nepřístupu světla. Po odpaření rozpouštědla na rotační odparce se získaný produkt vyjme do 140 ml chloroformu. Přidá se 3,65 g oxidu manganičitého a reakční směs se míchá 56 hodin při teplotě místnosti. Po zfiltrování přes cel lit a promytí sraženiny chloroformu, pak methanolem se roztok zkoncentruje na rotační odparce. Získaný produkt se čistí bleskovou chromatografií na oxidu křemičitém (dichlormethan) k získání žádaných sloučenin . I-17b a II-17b v podobě hědého prášku.

Meziprodukt II-17b= 6,8-dichlor-4-methyIpyrido[3,2~glchinolin5,10-dion (výtěžek=41%), (314 mg). Teplota tání= 177 C• ¹H RMN (CDCI3): 2,87 (s, 3H); 7,56 (d, 1H, J = 4,8 Hz); 7,79 (s, 1H); 8,93 (d, 1H,

J = 4,8 Hz).

•¹³C RMN (CDCIs) : 22,41 ; 125,44; 127,84;. 131,13; 131,30; 147,44; 149,81 ; 150,62 ; 151,90 ; 154,30 ; 156,58 ; 179,12 ; 180,66.

• IR (CHCI3): 1706 ; 1683 cm'¹

B-16: Příprava 7,9 dimethoxy-4-methylpyrido[2,3-g]chinolin-5,10-dionu (meziprodukt I-18b) a6,8-dimethoxy-4-methylpyrido[3,2-g]chinolin-5,10-dionu (meziprodukt II-18b)

Směs sloučenin I-17b nebo II-17b (80 mg, 0,27 mmol), methylátu sodného (300 mg sodíku ve 40 ml methanolu, 13,04 mmol) ve 40 ml methanolu se udržuje 17 hodin na teplotě zpětného toku. Reakční směs se odpaří k suchu a přidá se 50 ml vody- Po neutralizaci 25% kyselinou chlorovodíkovou se roztok extrahuje dichlormethanem (3x50 ml). Po vysušení síranem hořečnatým a ·· 99 99 ·· 99 99 • 9 · · · · · · · · · odpaření na rotační odparce se získají kvantitativně sloučeniny I-18b a II-18b.

Meziprodukt II-18b^; 6,8-dimethoxy-4-methylpyrido[3,2-g]chinolin-5 , 10-dion. Teplota tání 219 C.

• 1h RMN (CDCI3) : 2,88 (s, 1H); 4,03 (s, 3H) ; 4,07 (s, 3H); 6,53 (s, 1H), 7,45 (d, 1H, J = 4,8 Hz); 8,83 (d, 1H, J = 4,8 Hz).

• 13q RMN (CDCI₃) : 22,64 ; 54,73 ; 56,80 ; 97,79 ; 117,61 ; 129,55 ; 131,46 ;

148,67 ; 149,41 ; 150,73 ; 152,96 ; 167,95 ; 168,00 ; 180,91 ; 183,41.

• IR (CHCI3): 1701 ; 1668 cm'¹·

Příklady provedení vynálezu

Příklad 1

7H-pyrido[4.3.2-de][1.10]fenantrolin-7-on (CRL 8293) a 7H-pyridoC4,3,2-de][1,73fenantrolin-7-on (CRL 8294)

V prostředí dusíku se udržuje jednu hodinu na teplotě 120 C 63 mg (2,81 mmol) sloučeniny I-lb a 1,7 ml (9,84 mmol) dimethylf ormam i dd i ethyl acetalů ve 4,5 ml dimethylformamidu. Po odpaření rozpouštědla za použití vývěvy se přidá 3,5 g (65 mmol) chloridu amonného a 60 ml absolutního ethanolu. Reakční směs se udržuje 30 minut na teplotě zpětného toku. Pó odpaření ethanolu na rotační odparce se do zbytku přidá 50 ml vody a extrahuje se dichlormethanem (3x 50 ml). Po vysušení síranem hořečnatým a po odpaření rozpouštědla se získá 0,6 g CRL 8294 v podobě nazenavého prášku.

7H-pyridoC4,3,2-de][1,10]fenantrolin-7-on (CRL 8293) (výtěžek 90¾). teplota tání: 240 °C.

• 1h RMN (CDCI3): 7,68 (dd, 1H, J = 4,4 et 8 Hz); 7,87 (d, 1H, J = 5,6 Hz); 8,02 (d,

1H, J = 5,2 Hz); 8,77 (dd, 1H, J = 1,6 á. 8 Hz); 9,11 (d, 1H, J = 5,2 Hz); 9,16 (dd,

1H, J = 1,6 4,4 Hz); 9,19 (d, 1H, J = 5,6 Hz).

• 13c RMN (CDCI3): 120,95 ; 124,40 ; 126,14 ; 129,32 ; 136,78 ; 139,09 ; 147,45 ; 148,58 ; 148,82 ; 148,96 ; 150,66 ; 152,00 ; 155,73 ; 181,96.

Β · ·· * · ·

ΒΒ »· ·· β·

7H-pyridoE4,3,2-de][1,7]fenantrolin-7-on (CRL 8294)

Popsaným způsobem se z meziproduktu ΙΙ-lb, získá 72 mg sloučeniny CRL 8294 v podobě žlutého prášku. (Výtěžek 80¾.) • ¹H RMN (CDCI3) :7,76 (dd, 1H, J = 4,4 et 8 Hz); 7,80 (d, 1H, J = 5,2 Hz) ; 7,99 (d, 1H, J = 5,6 Hz); 8,93 (d, 1H, J = 5,6 Hz); 9,05 (dd, 1H, J = 1,6 :4,4 Hz); 9,17 (dd, 1H, J = 1,6 et 8 Hz); 9,19 (d, 1H, J = 5,2Hz).

• ¹³C RMN (CDCI3): 119,39 ; 120,01 ; 123,85 ; 128,15 ; 132,87 ; 133,80 ; 138,65 ; 147,54 ; 147,74 ; 148,93 ; 149,49 ; 149,99 ; 152,97 ; 180,73.

Příklad 2

8-Methoxy-7H-pyrido[4,3,2-de][1,10]fenantrolin-7-on (CRL

8363) a ll-methoxy-7H-pyrido[4,3,2-de][1,7]fenantrolin-7-on (CRL

8364)

Udržuje se 74 mg (2,92 mmol) sloučeniny I-2b, 2 ml (11,8 mmol) dimethylformámiddiacetalů v 5,2 ml dimethy1formámidu v prostředí dusíku jednu hodinu na teplotě 120 C. Po odpaření rozpouštědla za použití vývěvy se přidá 4,5 g (83,6 mmol) chloridu amonného a 67 ml absolutního ethanolu. Reakční směs se udržuje 30 minut na teplotě zpětného toku. Po odpaření ethanolu na rotační odparce se do zbytku přidá 50 ml vody a směs se extrahuje dichlormethanem (3x 50 ml). Po vysušení organických fází síranem hořečnatým a po odpaření rozpouštědla na rotační odparce se^- zbytek čistí bleskovou chromatografií na sloupci oxidu křeničitého (chloroform/methanol 98=2), čímž se získá 0,28 g CRL 8363 v podobě oranžového prášku.

8-methoxy-7H-pyrido[4,3,2-de][1,10]fenantrolin-7-on (CRL 8363) (Výtěžek 37¾.) ·· ·· ·· ·· *· ·· ···· · · · · · · · · • · · · ··· · • ···· · β β · · • · · · · · · · ···· ···· ·· ···· ·· ···· ¹Η RMN (CDCI3): 4,20 (s, 3Η); 7,13 (d, 1 Η, J = 5,6 Hz); 7,82 (d, 1H, J = 5,2 Hz); 7,94 (d, 1H, J = 6 Hz); 8,92 (d, 1H, J = 5,6 Hz); 9,07 (d, 1H, J = 6 Hz); 9,13 (d, 1H,

J = 5,2 Hz); 9,19 (d, 1H, J = 5,2 Hz).

¹³C RMN (CDCI3); 56,77 ; 109,26 ; 119,70 ; 120,47 ; 123,09 ; 138,50 ; 147,85 ; 148,25 ; 148,69 ; 150,66 ; 154,08 ; 155,68 ; 167,54 ; 180,40.

ll-methoxy-7H-pyrido[4,3,2-de] [1,7] f enantrol in-7-on CCRL 8364)

CVýtěžek 50%.) • ¹H RMN (CDCI3): 4,15 (s, 3H>; 7,26 (d, 1H, J = 6 Hz); 7,70 (d, 1H, J = 6 Hz); 7,96 (d, 1H, J = 5,6 Hz) ; 8,85 (d, 1H, J = 6 Hz); 8,97 (d, 1H, J = 6 Hz); 9,15 (d, 1H, J =

5,6 Hz).

• ¹³C RMN (CDCI3): 57,05 ; 111,33 ; 118,72 ; 119,61 ; 122,12 ; 124,29 ; 138,56 ; 146,71.; 147,10 ; 148,69 ; 149,81 ; 150,96 ; 153,13 ; 165,83 ; 180,82.

Příklad 3

8-CDimethylamino)-7H-pyrido[4,3,2-de][1,10]fenantrolin-7-on CCRL 8800) a

11-(dimethylamino)-7H-pyrido[4,3,2-de][1,7]fenantrolin-7-on CCRL 8367)

Udržuje se 80 mg <0,3 mmol) tricyklické sloučeniny I-3b nebo tricyklické sloučeniny II-3b a 0,21 ml <1,05 mmol) dimethy 1formámiddiethylacetalů v 1,2 ml.dimethy1formámidu jednu hodinu na teplotě 120 °C v prostředí dusíku. Po odpaření rozpouštědla za použití vývěvy se přidá 0,5 g <9,3 mmol) chloridu amonného a 80 ml absolutního ethanolu. Reakční směs se udržuje 40 minut na teplotě zpětného toku. Po odpaření ethanolu na rotační odparce se do zbytku přidá 5 ml vody a směs se extrahuje dichlormethanem <3x5 ml). Organické fáze se suší síranem hořečnatým a rozpouštědlo se odstraní na rotační odparce, čímž se získají kvantitativně dvě tetracyklické sloučeniny v podobě červeného prášku.

11- Cdimethylamino)-7H-pyrido[4,3,2-del [ 1,7] f enantrol in-7-on CCRL 8367) ·· ·· ·· ·· ·· ·· ·· · · · · · « ♦ · · • ··· · · · · • · · · · · ·· · · • · » · · «·· ··· ···· ·· ···· «· ···· • Ίη RMN (CDCI3): 3,00 (s, 6Η); 7,09 (d, 1Η, J = 5,2 Hz); 7,57 (d, 1H, J = 5,6 Hz) ;

7,90 (d, 1H, J = 5,2 Hz); 8,54 (d, 1H, J = 5,2 Hz); 8,89 (d, 1H, J = 5,2 Hz); 9,11 (d, 1H, J = 5,6 Hz).

Příklad 4

8-Hydroxy-7H-pyridoE4,3,2-delE1,101fenantrolin-7-on (CRL 8802) a

ll-hydroxy-7H-pyrido[4,3,2-delE1,71fenantrolxn-7-on (CRL 8388)

Rozpustí se 50 mg (0,126 mmol) tricyklické sloučeniny I-7b nebo tricyklické sloučeniny II-7b v 0,5 ml TFA, načež se reakční roztok míchá 24 hodin. TFA se odpaří na rotační odparce a přidává se nasycený roztok hydrogenuhličitanu sodného až k dosažení hodnoty pH 9-10. Reakční směs se extrahuje dichlormethanem (3x 3 ml). Po vysušení síranem hořečnatým a odpaření rozpouštědla na rotační odparce se získá 20 mg tetracyklické sloučeniny v podobě žlutého prášku.

ll-hydroxy-7H-pyrido[4,3,2-delE1,7]fenantrolin-7-on (CRL8388) (Výtěžek 62¾.) Teplota tání 260 C.

’ 1H RMN (CDCI3): 7,20 (d, 1H, J = 5,6 Hz); 7,83 (d, 1H, J = 6 Hz); 8,00 (d, 1H, J =

Hz); 8,72 (d, 1H, J = 6 Hz); 8,76 (d, 1H, J = 6 Hz); 9,24 (d, 1H, J = 5,6 Hz) 14 65 (s, 1H). ’ • ¹³C RMN (DMSO, dg): 116,22 ; 116,35 ; 118,61 ; 120,24 ; 124,06 ; 138,09; 143,61 ; 148,04 ; 148,99 ; 149,41 ; 152,61 ; 153,01 ; 165,80 ; 179,55.

Příklad 5

8-Chlor-7H-pyridoE4,3,2-de][1,10]fenantrolin-7-on (CRL 8396) a ll-chlor-7H-pyrido[4,3,2-de][1,7]fenantrolin-7-on (CRL 8801)

Rozpustí se 260 mg (0,67 mmol) tricyklické sloučeniny I-7b nebo tricyklické sloučeniny II-7b ve 2,6 ml TFA a reakční roz31 • · * » · · · · « ** 9 • «se β « 9 * • e · · 9 9 9 9 9 9

9 9 9 9 9 9 9

9999 9999 99 M·· *· 9999 tok se míchá 64 hodin. TFA se odpaří na rotační odparce a přidává se 200 ml systému dichlormethan/methanol 95=5 a nasycený roztok hydrogenuhličitanu sodného až k dosažení hodnoty pH 10. Získaná organická fáze se promyje vodou. Po vysušení síranem hořečnatým a odpaření rozpouštědla na rotační odparce se získá 40 mg tetracyklické sloučeniny v podobě hnědého prášku, který se promyje etherem.

8-chlor-7H-pyrido[4,3,2-de][1,10]fenantrolin-7-on (CRL 8396) (Výtěžek 28¾.) Teplota tání >260 *C.

• ¹H RMN (CDCI3): 7,68 (d, 1H, J = 5,2 Hz); 7,89 (d, 1H, J = 5,5 Hz); 8,01 (d, 1H, J = 5,5 Hz) ; 8,96 (d, 1H, J = 5,2 Hz) ; 9,14 (d, 1H, J = 5,5 Hz); 9,19 (d, 1H, J = 5,5 Hz).

• 13c RMN (DMSO, dg) :119,87 ; 120,88 ; 123,61 ; 126,31 ; 129,01 ; 138,56 ; 146,87 ; 147,37 ; 148,46 ; 148,94 ; 149,76 ; 153,85 ; 153,96 ; 179,87.

Příklad 6

4-Methoxy-7H-pyrido[4,3,2-de][1,10]fenantrolin-7-on(CRL 8400) a 4-methoxy-7H-pyrido[4,3,2-de][1,7]fenantrolin-7-on (CRL 8401)

Udržuje se 100 mg (0,39 mmol) tricyklické sloučeniny I-8b nebo tricyklické sloučeniny II-8b a 0,27 ml (1,37 mmol) dimethy 1 formám i dd i ethyl acetalu v 0,7 ml dimethylformamid jednu hodinu na teplotě 120 C v prostřeí dusíku. Po odpaření rozpouštědla za použití vývěvy se přidá 0,6 g (11,7 mmol) chloridu amonného a 90 ml absolutního ethanolu. Reakční směs se udržuje 30 minut na teplotě zpětného toku. Po odpaření rozpouštědla se do zbytku přidá 10 ml vody a extrahuje se dichlormethanem (3x10 ml). Po vysušení síranem hořečnatým a odpaření rozpouštědla na rotační odparce a po čištění filtrací na oxidu křemičitém (dichlormethan/methanol 95=5) se získají sloučeniny CRL 8400 a CRL 8401 v podobě hnědého prášku.

4-methoxy-7H-pyrido[4,3,2-del[1,10]fenantrolin-7-on (CRL 8400) (Výtěžek 83¾. 85 mg.) Teplota tání >260 C.

• ¹H RMN (CDCI3): 4,27 (s, 3H) ; 7,65 (dd, 1H, J = 4,8 et 8 Hz) ; 8,15 (d, 1H, J = 6

Hz); 8,70 (s, 1H); 8,78 (dd, 1H, j = 8 1,9 Hz); 9,10 (d, 1H, J = 6 Hz) ; .9,13 (dd,

1H, J = 1,9 et 4,8 Hz).

• ¹³C RMN (DMSO, d₆) :56,97 ; 115,63 ; 120,81 ; 125,52 ; 129,02 ; 129,16 ; 130,22 ; 136,24 ; 139,81 ; 147,37 ; 149,31 ; 151,65 ; 153,07 ; 154,81 ; 180,34.

' · IR(CHCl3): 1674 cm'¹.

4-methoxy-7H-pyrido[4,3,2-de][1,7]fenantrolin-7-on (CRL 8401) (Výtěžek 59¾.) Teplota tání >260 C• 1H RMN (COCI3): 4,27 (s, 3H); 7,74 (dd, 1H, J = 4,4 .8,1 Hz); 8,08 (d, 1H, J = 5,6

Hz); 8,72 (s, 1H) ; 8,93 (d, 1H, J = 5,6 Hz) ; 9,05 (dd, 1H, J = 1,9 ^4,4 Hz); 9,19 (dd, 1H, J = 1,9 .8,1 Hz).

• 13C RMN (DMSO, d₆): 57,03 ; 115,16.; 119,70 ; 127,69 ;‘129,48 ; 130,15; 132,86 ; 133,74 ; 140,82 ; 146,80 ; 147,98 ; 148,63 ; 152,81 ; 152,98 ; 179,84.

• IR (CHCI3): 1679 cm'l.

Příklad 7

4,8-Dimethoxy-7H-pyridoC4,3,2-delC1,101fenantrolin-7-on * (CRL 8803) a

4,ll-dimethoxy-7H-pyrido[4,3.2-de]C1,7]fenantrolin-7-on (CRL 8440)

Roztok sloučeniny I-9bnebo II-9b (1OO mg, 0,35 mmol) a N,N-dimethylformamiddiethylacetal (0,24 ml, 1,23 mmol) v 1 ml dimethylformamidu se udržuje 90 minut na teplotě 120 C. Reakční směs se zkoncentruje ve vakuu k odstranění dimethylformamidu a zbytek se zředí ve 100 ml absolutního ethanolu. Po přidání 0,6 g chloridu amonného se' reakční směs udržuje 30 minut na teplotě zpětného toku. Po zkoncentrování na rotační od33 parcé se přidá 30 ml vody a směs se extrahuje chloroformem <3x75 ml). Organické fáze se suší síranem hořečnatým a zkoncentrují se. Získaný produkt se čistí chromatografií na oxidu křenmičitém (chloroform/methanol 95=5), čímž se získají žádané sloučeniny v podobě žlutého prášku4,ll-dimethoxy-7H-pyridoE4,3,2-de][1,7]fenantrolin-7-on (CRL 8440) (Výtěžek 26%, 27 mg.) Teplota tání >260 C.

• ”>H RMN (DMS0-d₆) : 4,08 (s, 3H) ; 4,26 (s, 3H); 7,54 (d, 1H, J = 5,9 Hz); 7,98 (d,

1H, 5,9 Hz); 8,77 (d, 1H, J - 5,9 Hz); 8,83 (s, 1H);8,94(d, 1H,J = 5,9Hz).

• 13C RMN (DMSO-dg) : 57,41 ; 58,07 ; 112,43 ; 113,75 ; 119,84 ; 122,13 ; 129,60 ; 130,54 ; 140,17 ; 146,81 ; 150,17 ; 150,62 ; 153,03 ; 153,35 ; 166,06 ; 179,30.

• IR (CHCI3): 1682 ; 1608 ; 1572 cm-'..

. · MS : m/z 293 (34); 292 (42); 220 (19); 192 (30); 165 (22).

Příklad 8

4-Methoxy-8-dimethylamino-7H-pyridoE4,3,2-de]E1,10]fenantrolin-7-on (CRL 8804) a

4-methoxy-ll-dimethylamino-7H-pyridoE4,3,2-de]E1,7]fenantrolin-7-on (CRL 8441)

Roztok sloučeniny I-llb nebo II-llb <80 mg, 0,27 mmol) a N,N-dimethylformamiddiethylacetalu (0,18 ml, 0,94 mmol) ve o

ml dimethylformamid se udržuje tři hodiny na teplotě 120 C. Reakční směs se zkoncentruje ve vakuu k odstranění dimethylformamidu a zbytek se zředí v 90 ml absolutního ethanolu. Po přidání 0,4 g chloridu amonného se reakční směs udržuje 30 minut na teplotě zpětného toku. Reakční směs se odpaří na rotační odparce. Přidá se 30 ml vody, načež se roztok extrahuje dichlormethanem (3x50 ml). Organické fáze se suší síranem hořečnatým a zkoncentrují se. Získaná produkt se čistí bleskovou chromatografií na oxidu křemičitém (dichlormethan/methanol 95=5), čímž se získají žádané tetracyklické sloučeniny v podo34 bě červenohnědého prášku.

4-methoxy-ll-dimethylamino-7H-pyrido[4,3,2-de]t1,71fenantro1in-7-on (CRL 8441) (Výtěžek 40%, 33 mg.) Teplota tání za rozkladu.

; ’ ¹H RMN (CDCI₃): 3,02 (s, 6H); 4,23 (s, 3H); 7,08 (d, 1H, J = 5,9 Hz); 7,87 (d, 1H, J = 5,5 Hz); 8,54 (d, 1H, J = 5,9 Hz); 8,65 (s, 1H); 8,90 (d, 1H, J = 5,5 Hz).

• 13C RMN (CDCI3) : 44,28 ; 56,94 ; 112,14 ; 113,63 ; 119,38 ; 119,73 ; 129,31 ; 129,99 ; 140,20 ; 145,81 ; 150,31 ; 150,63 ; 151,41 ; 152,99 ; 156,77 ; 180,57.

• IR (CHCS3): 1682 cm¹.

• MS : m/z 306 (52) ; 305 (32) ; 291 (100) ; 290 (66) ; 276 (24) ; 248 (9) ; 220 (13) ; 193(21).

Příklad 9

4,10-Dimethoxy-7H-pyrido[4,3,2-del[1,101fenantrólin-7-on (CRL 8805) a

4.9- dimethoxy-7H-pyrido[4,3,2-de][1,7]fenantrólin-7-on (CRL 8479)

Roztok sloučeniny I-12b nebo II-12b (100 mg, 0,35 mmol) a N, N-dimet.hylf ormamiddiethy lacetalu (0,24 ml, 1,23 mmol) v 1 o

ml dimethy1formámidu se udržuje jednu hodiny na teplotě 120 C. Reakční směs se zkoncentruje ve vakuu k odstranění dimethylformamidu a zbytek se rozpustí ve 100 ml absolutního ethanolu. Po přidání 0,54 g chloridu amonného se reakční směs udržuje 30 minut na teplotě zpětného toku a zkoncentruje se na rotační odparce. Přidá se 20 ml vody, roztok se extrahuje chloroformem (3x30 ml). Organické fáze se suší síranem hořečnatým a zkoncentrují se. Získaný produkt se čistí bleskovou chromatografií na oxidu křemičitém (chloroform), čímž se získají žádané tetracykl ické sloučeniny v podobě zeleného prášku.

4.9- dimethoxy-7H-pyrido[4,3,2-del[1,7]fenantrólin-7-on • · (CRL 8479) (Výtěžek 36¾. 37 mg.) Teplota tání >260 C.

: · 1H RMN (DMSO-d₆) : 4,21 (s, 3H); 4,24 (s, 3H); 7,16 (d, 1H, J = 8,8 Hz); 7,98 (d,

• IR (CHCI₃): 1679 cm’¹.

• MS : m/z 293 (44); 248 (100); 220 (12).

Příklad 10

9- Ethoxykarbonyl-?H-pyrido[4,3,2-de][1,10]fenantrolin-7-on (CRL 8805) a

10- ethoxykarbony1-7H-pyrido[4,3,2-de][1,7]fenantrolin-7-on (CRL 8482)

Roztok sloučeniny I-13b nebo II-13b (30 mg, 0,07 mmol) a kyseliny trifluoroctové (0,27 ml, 3,5 mmol) v 15 ml dichlormethanu se míchá 64 hodin. Po zkoncentrování na rotační odparce se reakční směs alkalizuje 10 ml nasyceného roztoku hydrogenuhličitanu sodného a extrahuje sě chloroform (2x30 ml). Organické fáze se suší síranem hořečnatým a zkoncentrují se na rotační odparce. Získaný zbytek se čistí filtrací na oxidu křemičitém, čímž se získají žádané tetracyklické sloučeniny v podobě žlutého prášku.

10-ethoxykarbonyl-7H-pyrido[4,3,2-de][1,7]fenantrolin-7-on (CRL 8482) (Výtěžek 53¾. 11,3 mg.) Teplota tání 246 °C.

• ¹H RMN (ČDCI3): 1,49 (t, 3H, J = 7,3 Hz); 4,53 (q, 2H, J = 7,3 Hz); 7,85 (d, 1H, J = 5,9 Hz); 8,03 (d, 1H, J = 5,5 Hz) ;'8,98 (d, 1H, J = 5,9 Hz); 9,22 (d, 1H, J = 5,5 Hz); 9,56 (d, 1H, J = 1,9 Hz); 9,73 (d, 1H, J = 1,9 Hz).

• 13C RMN (CDCI3) : 14,32 ; 62,29 ; 119,61 ; 120,39 ; 124,04 ; 129,94 ; 132,60 ; 135,46 ; 138,77 ; 147,74 ; 148,78 ; 149,17 ; 149,46 ; 153,23 ; 164,15 ; 180,20 (1C nepozorováno) • IR (CHCI3): 1726,1694 cm’¹.

• MS : m/z .305(92); 260 (7); 232 (93), 204 (25).

Příklad 11

10-Hydroxy-7H-pyrido[4,3,2-de][1,10]-fenantrolin-7-on (CRL 8809) a

9-hydroxy-7H-pyrIdo[4,3,2-de][1,7]-fenantrolxn-7-on (CRL 8483)

Roztok sloučeniny I-14b nebi II-14b (tricyklická sloučenina 56) (50 mg, 0,135 mmol) a kyseliny trifluoroctové (0,54 ml, 7 mmol) ve 30 ml dichlormethanu se míchá 48 hodin. Po zkoncentrování na rotační odparce se reakční směs alkal izuje 13 ml nasyceného roztoku hydrogenuhličitanu sodného a extrahuje se dichlormethan (7x30 ml). Organické fáze se suší síranem hořečnatým a zkoncentrují se na rotační odparce. Získaný zbytek se čistí bleskovou chromatografií (dichlormethan/methanol 97-2), čímž se získají žádané tetracyklické sloučeniny v podobě oranžového prášku.

9-Hydroxy-7H-pyrido[4,3,2-de][1,7]-fenantrolin-7-on(CRL 8483) (Výtěžek 50%, 16,8 mg.) Teplota tání >260 C.

• 1H RMN (CDCI3): 7,06 (d, 1H, J = 9,5 Hz); 7,72 (d, ΊΗ, J = 5,9 Hz); 8,02 (d, 1H, J = 5,2 Hz); 8,70 (d, 1H, J = 9,5 Hz); 8,87 (d, 1H, J = 5,9 Hz); 9,19 (d, 1H, J = 5,5 Hz).

• IR (CHCI3) 1690 ; 1667 ; 1602 cnT¹· • MS : m/z 249 (100); 221 (77,6); 193 (99,2).

Příklad 12

10-Methoxy-7H-pyrido[4,3,2-de][1,10]fenantrolin-7-on (CRL 8810) a 9-methoxy-7H-pyrido[4,3,2-de][1,7]fenantrolin-7-on (CRL 8484)

Roztok sloučeniny I-16b nebo II-16b (200 mg, 0,786 mmol) a N,N-dimethylformamiddiethylacetalu (0,47 ml, 2,73 mmol) ve 3,2 ml dimethy 1 formani i du se udržuje dvě hodiny na teplotě zpětného toku. Reakční směs se zkoncentruje ve vakuu k odstranění dimethylformamidu a zbytek se rozpustí ve 200 ml absolutního et37

• · · · · · · ··· ·· ···· ·· ···· hanolu. Po přidání 1,4 g (26,2 mmol) chloridu amonného se reakční směs udržuje 30 minut na teplotě zpětného toku. Po zkoncentrování na rotační odparce se přidá se 50 ml vody, načež se roztok extrahuje dichlormethan (5x40 ml). Organické fáze se suší síranem hořečnatým a zkoncentrují se. Získaný produkt se čistí bleskovou chromatografií na oxidu křemičitém (dichlormethan/methanol 99=1), čímž se získají žádané tetracyklické sloučeniny v podobě hnědého prášku.

9-methoxy-7H-pyrido[4,3,2-de][1,7]fenantrolin-7-on (CRL 8484) (Výtěžek 10¾. 20 mg.) Teplota tání >260 C.

• ¹H RMN (CDCI3): 4,14 (s, 3H); 7,11 (d, 1H, J = 8,8 Hz); 7,63 (d, 1H, J = 5,5 Hz); 7,87 (d, 1H, J = 5,5 Hz); 8,77 (d, 1H, J = 5,5 Hz); 8,91 (d, 1H, J = 8,8 Hz); 9,09 (d, 1H, J = 5,5 Hz).

•¹³C RMN (CDCI3) : 53,41 ; 117,66; 118,54; 118,93; 123,70; 127,73; 136,29; 138,52 ; 145,95 ; 147,45 ; 148,03 ; 148,83 ; 150,19 ; 165,86 ; 180,55.

• IR (CHCI3): 1686 cm’¹.

• MS : m/z 263 (8,2); 233 (25,1); 204 (35,4).

Příklad 13

8.10- Dimet.hoxy-7H-pyrido[4,3,2-de] 11,10] f enantrol in-7-on (CRL 8811) a

9.11- dimethoxy-7H-pyridol4,3,2-de][1,7]fenantrolln-7-on (CRL 8485)

Na teplotě zpětného toku se udržuje 1,5 hodin roztkok (105 mg, 0,37 mmol) a ml, 1,29 mmol) v 1,5 zkoncentruje ve vakuu sloučeniny I-18b nebo sloučeniny II-18b N,N-dimethy1formámiddiethylacetal (0,22 ml dimethylformamidu. Reakční směs se k odstranění dimethylformamidu a zbytek se rozpustí v 95 ml absolutního ethanolu. Po přidání 0,7 g chloridu amonného (13,08 mmol) se reakční směs udržuje 30 minut na teplotě zpětného toku. Po zkoncentrování na rotační odparce se přidá se 50 ·· ·· ·· ·· ♦· ·· « · · · · · · · · · · · e β β β ··· ·

4· ···· ml vody, načež se roztok extrahuje dichlormethan (5x40 ml). Organické fáze se suší síranem horečnatým a zkoncentrují se. Získaný produkt se čistí bleskovou chromatografií na oxidu křemičitém (dichlormethan/methanol 99=1), čímž se získají žádané tetracyklické sloučeniny v podobě žlutooranžového prášku.

9,ll-dimethoxy-7H-pyridoE4,3,2-de]E 1,7]fenantrolin-7-on (CRL 8485).

(Výtěžek 9¾. 10 mg.) Teplota tání >260 C.

• ¹H RMN (CDCI3): 4,12 (s, 3H); 4,16 (s, 3H); 6,65 (s, 1H); 7,64 (d, 1H, J = 5,5 Hz) ; 7,92 (d, 1H, J = 5,5 Hz); 6,93 (d, 1H, J = 5,5 Hz); 9,14 (d, 1H, J = 5,5 Hz).

•¹³C RMN (CDCI3) : 54,39; 57,02; 98,26; 117,89; 118,64; 118,86; 124,16 ; 138,50 ; 146,93 ; 147,09 ; 148,29 ; 148,62 ; 151,50 ; 166,32; 167,73 ; 180,65.

• IR (CHCI3): 1688 cm-'.

•MS: m/z 293 (15); 292 (28); 233(24); 204 (13); 165 (10).

Příklad 14

8- Dimethylamino-10-chlor-7H-pyrido[4,3,2-de][1,10]fenantrolin-7-on (CRL 8812) a

9- chlor-ll-dimethylamino-7H-pyridoE4,3,2-de]El,71fenantrolin-7-on (CRL 8486)

Roztok sloučeniny I-17b nebo II-17b (110 mg, 0,375 mmol) a N,N-dimethylformamiddiethylacetalu (0,23 ml, 1,31 mmol) v 1.1 ml dimethylformamidu se udržuje 1,5 hodin na teplotě zpětného toku. Reakční směs se zkoncentruje ve vakuu k odstranění dimethy 1 formám i du a zbytek se rozpustí v 95 ml absolutního ethanolu. Po přidání 0,7 g chloridu amonného (13,08 mmol) se reakční směs udržuje 30 minut na teplotě zpětného toku, načež se zkoncentruje na rotační odparce. Přidá se 50 ml vody a roztok se extrahuje dichlormethanem (5x40 ml). Organické fáze se suší síranem hořečnatým a zkoncentrují se. Získaná produkt se čistí bleskovou chromatografií na oxidu křenmičitém (dichlormethan/ methanol 99=1), čímž se získají žádané tetracyklické sloučeni39 ·· φφ ·Φ φφ φφ φφ φφφφ ΦΦΦ· φφφφ φ ··· · · - φ φ • φφφφ Φ··Φ φ φ · φφφ φφφ ···· φφφφ φφ φφφφ φφ φφφφ ny v podobě červenofialového prášku.

9-chlor-ll-dimethylamino-7H-pyrido[4,3,2-de][1,7]fenantrolin-7-on (CRL 8486) (Výtěžek 3¾. 3,3 mg.) Teplota tání 246 C.

• ¹H RMN (CDCI3): 3.04 (s, 6H); 7.11 (s, 1H); 7,61 (d, 1H, J = 5,5 Hz); 7,92 (d, 1H, J = 5,5 Hz); 8,90 (d, 1H, J = 5,5 Hz); 9,14 (d, 1H, J = 5,5 Hz).

•13C RMN (CDCI3) : 44.39; 113.57; 117.60; 119.00 ; 119.37; 123.99; 138.50; 146.51 ; 146.77 ; 148.83 ; 150.68 ; 150.89 ; 153.68 ; 158.21 ; 180.05.

• IR (CHCl3); 1698 cm-‘.

• MS : m/z 311 (19); 309 (11); 296 (89); 294 (100); 269 (4); 267 (1); 204 (66).

Příklad 15

4-Hydroxy-7H-pyrido[4,3,2-del[1,101fenantrolin-7-on dijodhydrát (CRL 8813) a

4-hydroxy-7H-pyrido[4,3,2-de][1, 7]fenantrolin-7-on di jodhydrát (CRL 8487)

Do suspense sloučeniny CRL 8400 nebo sloučeniny CRL 8401 (50 mg, 0,19 mmol) v kyselině octové (4 ml) se přidá kyselina jodovodíková (57¾ ve vodě:10 ml, 44,6 mmol). Směs se udržuje 21 hodin na teplotě 100 °C. Po vychladnutí a zfiltrování se dijodhydrát žádaných sloučenin izoluje v podobě fialového prášku.

4-hydroxy-7H-pyrido[4,3,2-de][1.73fenantrolin-7-on dijodhydrát (CRL 8487) (Výtěžek 85¾. 82 mg.) Teplota tání >260 °C.

• ¹H RMN (DMSO-d₆): 6,75 (d, 1H, J = 5,8 Hz); 7,42 (slářir , 1H); 7,63 (dd, 1H, J = 8,4 . 4,4 Hz); 8,20 (d, 1H, J = 5,8 Hz); 9,07 (m, 2H).

• IR (CHCI3): 3037 ; 1647 ; 1635 ; 1617 ; 1604 cm-’.

·* ·· ·· «» ·· *· • » · · · ··· · · » · β β β β « ₉ · φ

9 9 9 9 9 · ···· 99 9999

Příklad 16

4-Chlor-7H-pyrido[4,3,2-del[1,103fenantrolin-7-on (CRL 8806 a 4-chlor-7H-pyrido[4,3,2-de][1,7]fenantrolin-7-on (CRL 8480)

Roztok sloučeniny CRL 8813 nebo sloučeniny CRL 8487 (45 mg, 0,14 mmol) v oxychloridu fosforečném (3,5 ml) se udržuje dvě hodiny na teplotě zpětného toku. Po odpaření na rotační odparce se reakční směs alkalizuje na hodnotu pH 8 roztokem hydrogenuhličitanu sodného IN (10 ml) a extrahuje se směsí 5 % methanolu/chloroform (2x20 ml)- Organické fáze se suší síranem hořečnatým a odpaří se na rotační odparce. Zbytek se čistí bleskovou chromatografií (dichlormethan/methanol 99=1), čímž se získají žádané sloučeniny v podobě hnědého prášku.

4-chlor-7H-pyrido[4,3,2-de][1,7]fenantrolin-7-on (CRL8480) (Výtěžek 4%, 2 mg.) Teplota tání >260 C.

• ¹H RMN (CDCI₃): 7,78 (dd, 1H, J = 4,4 a, 8,1 Hz); 8,08 (d, 1H, 5,9 Hz) ; 9,03 (d,

1H, J = 5,9 Hz) ; 9,07 (dd, 1H, J = 4,4 3. 1,8 Hz) ; 9,18 (s, 1H); 9,19 (dd, 1H, J = ;

1,8 8,1 Hz).

• ¹³C RMN (CDCI3) : 116,63 ; 119,80 ; 128,25 ; 132,64 ; 134,05 ; 137,03 ; 145,92 ;

147,56 ; 147,78 (2C); 148,47 ; 149,93 ; 153,31 ; 180,08.

• IR (CHCI3): 1692 ; 1608 cnr¹ · • MS : m/z 269 (34); 267 (100); 232 (60); 204 (29).

Příklad 17

4-Dimethylamino-7H-pyrido[4,3,2-de][1,10]fenantrolin-7—on (CRL 8807) a

4-dimethylamino-7H-pyrido[4,3,2-de][1,7]fenantrolin-7-on (CRL 8481)

Roztok sloučeniny CRL 8806 nebo sloučeniny CRL 8480 (14 mg, 0,052 mmol) v chlorhydrátu dimethylaminu (24 mg,0,29 mmol) ·

a uhličitanu sodného (13 mg, 0,32 mmol) ve směsi tetrahydrofuran/voda (2 ml/1 ml) se udržuje 1,5 hodin na teplotě zpětného toku. Po odpaření na rotační odparce se reakční směs vyjme do 15 ml vody. Po extrakci chloroformem (3x20 ml) se organické fáze suší síranem hořečnatým a odpaří se na rotační odparce. Získaný zbytek se čistí bleskovou chromatografií (chloroform/ methanol 95=5), čímž se získají žádané sloučeniny v podobě červeného prášku.

4-dimethylamino-7H-pyrido[4,3,2-de][1,71fenantrol in-7-on (CRL 8481) (Výtěžek 63¾. 9 mg.) Teplota tání >260 C.

H RMN (CDCI₃) 3,34 (s, 6H); 7,71 (dd, 1H, J = 4,4 et 8,1 Hz); 7,96 (d, 1H, 6,0 Hz) ; 8.62 (s, 1H) ; 8,83 (d, 1H, J = 6,0 Hz); 9,04 (dd, 1H, J = 1,5 et4,4 Hz); 9,19 (dd, 1H, J = 1,5 ól 8,1 Hz).

C RMN (CDCI3) 44,06 (2C); 117,89 ; 120,40 ; 127,22 ; 129,69 ; 132,59 ; 133,68 ; 135,30 ; 138,51 ; 144,67 ; 146,98 ; 148,14 ; 149,16 ; 152,66 ; 179,55.

• IR(CHCl3): 1666 cm'¹.

• MS: m/z 276 (100); 249 (11); 204(1).

Příklad 18

3-Acetoxymet.hy 1 - 7H-pyr i do [4,3,2-del [1,101 f enantrol in-7-on (CRL 8825) a

3-acetoxymethyl-7H-pyrido[4,3,2-de] [1,7] fenantrol in-7-on (CRL 8824)

Roztok sloučeniny I-lb a sloučeniny Il-lb (0,11 mg, 0,5 mmol) a dimethy1formámiddiethylacetalu (1,5 mmol) v dimethyl. o formamid (3 ml) se udržuje jednu hodinu na teplotě 120 C v prostředí dusíku. Po vychladnutí se reakční směs zkoncentruje ve vakuu k získání žádaného derivátu v pevné formě. Uvedený pevný derivát (125 mg, 0,45 mmol) se vyjme do dimethyIformamidu a přidá se 13 mg (0,7 mmol) Eschenmoserovy soli. Směs se udržuje 30 minut na teplotě 115 C v prostředí dusíku. Po vychladnutí se přidá chlorid amonný (10 mmol) a kyselina octová e

(75 ml) v prostředí udržovaném 30 minut na teplotě 115 C. Po vychladnutí se reakční směs vlije do ledu, alkalizuje se 10% roztokem hydroxidu draselného a extrahuje se chloroformem. Organické fáze se suší síranem hořečnatým a odpaří se a zkoncentrují se na rotační odparce. Zbytek se čistí bleskovou chromatografií na oxidu křemičitém.

Uvedeným způsobem se připraví sloučeniny:

3-acety1-7H-pyrido[4,3,2-de][1,10]fenantrolin-7-on (CRL 8815) a 3-acetyl-7H-pýrido[4,3,2-del[1,7]fenantrolin-7-on (CRL 8814)

3-kyano-7H-pyrido[4,3,2-del[1,101fenantrolin-7-on(CRL 8817) a 3-kyano-7H-pyrido[4,3,2-de][1,7]fenantrolin-7-on (CRL 8816)

3-ethoxykarbonyl-7H-pyrido[4,3,2-de][1,101fenantrolin-7-on (CRL 8819) a

3-ethoxykarbonyl-7H-pyrido[4,3,2-del[1,7]fenantrolin-7-on (CRL 8818)

3-methoxymethy1-7H-pyrido[4,3,2-de][1,10]fenantrolin-7-on (CRL 8821) a

3-methoxymethy1-7H-pyrido[4,3,2-de][1,71fenantrolin-7-on (CRL 8820)

3-fluoro-7H-pyrido[4,3,2-de][1,10]fenantrolin-7-on (CRL 8823) a 3-fluoro-7H-pyrido[4,3,2-del[1,7]fenantrolin-7-on (CRL 8822)

3-Acetoxymethyl-9-methoxy-7H-pyrido[4,3,2-de] [ 1,103-fenantrolin-7-on (CRL 8825) a

3-acetoxymethy1-9-methoxy-7H-pyrido[4,3,2-de][1,7]-fenantrolin-7-on (CRL 8824).

·· ··

Příklad 19

2-Methyl-7H-pyrido[4,3,2-de][1,103fenantrolin-7-on (CRL 8827) a 2-met.hy 1-7H-pyr i do [4,3,2-de] C 1,71 fenantrol in-7-on (CRL 8826) Směs sloučenin I-lb a Il-lb (80 mg, 0,4 mmol) se rozpustí v kyselině octové (10 ml) s chloridem amonným (64 mg, 12 mmol) a směs se za míchání zahřeje na teplotu 70 C. Přikape se acetaldehyd (88 mg, 2 mmol) v kyselině octové (10 ml). Směs se udržuje 45 minut na teplotě zpětného toku v prostředí dusíku, pak se ochladí. Po přidání vody se směs alkal izuje hydroxiden amonným a extrahuje se dichlormethanem. Po vysušení síranem hořečnatým se zbytek čistí bleskovou chromatografií na oxidu křemičitém.

Uvedeným způsobem se připraví sloučeniny:

2-benzy1-7H-pyrido[4,3,2-de][1,101fenantrolin-7-on (CRL 8829) a 2-benzy1-7H-pyridol4,3,2-de]11,7]fenantrolin-7-on (CRL 8828).

2-(2 -chlorethyl)-7H-pyrido[4,3,2-de]t1,10]fenantrolin-7-on (CRL 8831) a

2-(2 -chlorethyl-7H-pyrido[4,3,2-de][1,7]fenantrolin-7-on (CRL 8830).

2-(2 -Methoxymethy1)-7H-pyridot4,3,2-de][1,10]fenantrolin-7-on (CRL 8833) a

2-(2 -methoxymethy1-7H-pyrido[4,3,2-de][1,7]fenantrolin-7-on (CRL 8832).

Dále uvedené výsledky farmakologických studií in vitro a in vivo dokládají cytotoxické vlastnosti sloučenin obecného vzorce I a Ia včetně maximálních tolerovaných dávek (DMT).

- Cytotoxická aktivita na nádorových buněčných liniích

v kultuře (test MTT)

Vliv sloučenin obecného vzorce I a la na nádorové buňky se vyhodnocuje kolorimetrickou zkouškou (MTT) (T. Mosman, J. Immunol. Methods 65, str. 55 až 63, 1983: J. Carmichael a kol., Cancer Res. 47, str. 936 až 942, 1987).

Princip testu MTT je založen na mitochondriální redukci živými metabolicky aktivními buňkami produktu MTT (bromid 3-(4,5-dimethy1thiazo1-2-y1)-2,5-difeny1tetrazo1u) ž1uté barvy na produkt barvy modré formazan. Množství takto získaného formazanu je přímo úměrné množství živých buněk obsažených v kultivačních důlcích. Toto množství formazanu se měří spektrofotometrem.

Buněčné linie se udržuují v jednovrstvové kultuře při teplotě 37 °C v kultivačních, zátkou uzavřených lahvičkách obsahujících zásadité prostředí MEM25MM HEPES (Minimum Essential Medium). Toto prostředí je přizpůsobeno pro růst pásma různých savčích buněk diploidních nebo primárních. Do tohoto prostředí se přidá:

- 5 % SVE (telecí zárodečné sérum) čištěného při teplotě 56 C během jedné hodiny,

-0,6	mg/ml	L-glutaminu,
- 200	IU/ml	pěnici 11 inu,
- 200	mg/ml	streptomyc inu,
- 0,1	mg/ml	gentamicinu.

□d American Type Culture Collection (ATCC, Rockville, MD USA) se získá 12 buněčných linií. Těmi jsou=

- U-373MG (code ATCC=HTB-17) a U-87MG (code ATCC =HTB-14) , což jsou 2 glioblastorny,

- SW1088 (code ATCC:HTB-12) což je astrocytom,

- A549 (code ATCC-CCL-185) a A-427 (code ATCC:HTB-53, což jsou dvě nemalé buňky rakoviny plic,

- HCT-15 (code ATCC:CCL-225) a LoVo (code ATCC:CCL-229) což

jsou 2 kolorektání rakovinové buňky,

- T-47D (code ATCC: HTB-133) a MCF7 (code ATCC=HTB-22), což jso dvě buňky rakoviny prsu,

- J82 (code ATCC:HTB-1) a T24 (code ATCC:HTB-4), což jsou 2 buňky rakoviny močového měchýře,

- PC-3 (code ATCC: CRL-1435) což je buňka rakoviny prostaty.

Plán testů: 100 μΐ buněčné suspenze obsahující 20 000 až . 50 000 (podle použitého buněčného typu) buněk/ml se naočkuje na 96-důlkové tit-rační destičky s plochými důlky k inkubaci o

při teplotě 37 C v prostředí s 5 % oxidu uhličitého a se 70¾ vlhkostí. Po 24-hodinové inkubaci se kultivační prosředí nahradí čerstvým 100 μΐ prostředím obsahujícím bud' různé testované sloučeniny o koncentraci 10^-5 až 10^-loM nebo rozpouštědlo sloužící k uvedení testovaných produktů do roztoku (kontrolní vzorek). Po 72 hodinách inkubace za uvedených podmínek se kultivační prostředí nahradí 100 μΐ žlutavého roztoku MTT rozpuštěného k dosažení 1 rag/ml v RPMI 1640. Mikrodestíčky se o

znovu inkubují tři hodiny při teplotě 37 C, načež Se 1O minut odstřeďují při 400 g. Žlutavý roztok MTT se eliminuje a modré krystaly formazanu, vytvořené na hladině buněk, se rozpustí ve 100 μΐ DMSO. Mikrodestičky se podrobí 5 minut míchání- Intenzita modrého zabarvení, pocházejícího z transformace produktu MTT žlutého na modrý formazan ještě žijícími buňkami, se podle zkušenosti kvantifikuje spektrometricky přístrojem DYNATECH IMMUNOASSAY SYSTEM na dlouhých vlnách 570 nm a 630 nm odpovídajících vlnovým délkám maximální absorbance formazanu a šumu pozadí. Integrovaná logika spektrometru vypočte střední hodnoty optické hustoty podle hodnot odchylek od standardu (Dev. Std-) a střední chyby vůči průměru (ESM). Inhibiční aktivita buněčného růstu sloučenin obecného vzorce I a Ia u různých buněčných nádorových linií se porovnává s aktivitou přírodního produktu. Jako příklad jsou v následující tabulce I uvedeny hodnoty koncentrací obsahující získá-

·· ♦· • · '·· ► · ·· • · · · né IC50 na různých buněčných liniích.

Soubor studovaných sloučenin vykazuje významnou inhibiční aktivitu buněčné proliferace 12 rakovinových lidských linií: U-87MG, U-373MG, SV 1088, T24, J82, HCT-15, L0V0, MCF7, T-47D, A549, A427 a PC-3 s jednou C150, která může být mezi 10^-5 až 10^-9 podle složení testovaných rakovinových buněk.

1- Stanovení maximální tolerované dávky (DMT)

Maximálně tolerovaná dávka se vyhodnocuje na myších B6D2F1/Jico o stáří 4 až 6 týdnů. Sloučeniny se podávají intraperitoneálně po zvyšujících se dávkách od 2,5 do 160 mg/kg. Hodnota DMT (vyjádřená v mg/kg) se stanoví sledováním hodnoty přežití zvířat 14 dnů po podání jedné dávky testovaného produktu. Sledují se rovněž hmotnostní přírůstky zvířat během testovaného časového úseku. Je-li dávka DMT větší než 160 mg/ kg, považuje se za přípustnou dávka 160 mg/kg. Výsledky stanovení maximální tolerované dávky (DMT) jsou v tabulce II.

Tabulka II

Maximální tolerované dávky

Sloučenina CRL DMT mg/kg

CRL	8388	(příklad	4)	10
CRL	8293	(příklad	1)	10
CRL	8294	(příklad	1)	10
CRL	8363	(příklad	2)	10
CRL	8364	(příklad	2)	5

- 4?

»* φφ φ φ · φ φ ο φφφφ

CRL 8367	(příklad 3)	10
CRL	8396	(příklad	5)	20
CRL	8400	(příklad	6)	>160
CRL	8401	(příklad	6)	>160
CRL	8440	(příklad	7)	20
CRL	8441	(příklad	8)	>160

Produkty této rodiny vykazují buď určitou přímou toxicitu nebo jí mohou být zbaveny a může se jich používat in vivo ve zvýšených tkáňových koncentracích tedy ve větších dávkách.

3- Protinádorová aktivita in vivo

Sudie se provádějí na následujících modelech:

- karcinom prsu u myší MXT hormono-necitlivých (MXT-HI),

- adenokarcinom prsu myší MXT hormono-citlivých (MXT-HS)

- lymfom L 1210.

Model adenokarcinomu prsu myší MXT, který popsal Watson a kol. (Cancer Res. 37, str. 3344 až 48, 1977) se provádí na naočkovaných myších B6D2F1/Jlco ve věku 4 až 6 týdnů je odvozen z galaktoforních kanálků prsní žlázy. Nejdříve hormono-citlivý (model MXT-HS), diferencovaný tumor se vyvíjí proti tumoru hormono-necitlivému nediferencovanému (model MXT-HI). Testují se činidla, jejichž protinádorová aktivita byla doložena na klinickém plánu prodlužujícím přežití zvířat s tumory MXT-HI a tumory MXT-HS. To je případ například cyklofosfamidu, etopsidu a také adriamycinu.

Model lymfomu L 1210 je modelem buněk leukemie L 1210

myšího původu zavedeých myším subkutánně. Ve 100 % případů vybudí rychle rostoucí pevný subkutánní tumor (L 1210). Když byla hodnota DMT určitého produktu stanovena, je jeho protinádorová aktivita in vivo charakterizována dávkami DMT/2, DMT/4 a DMT/8 na modelech adenokarcinomu prsu myšího původu MXT-HS, karcinomu prsu myšího původu MXT-HI a na modelu subkutáního lymfomu L 1210 .

Ve všech dříve uvedených příkladech, jakéhokoli modelu, vyznačuje se kontrolovaný stav souborem 9 až 15 myší, kterým je podáno během 3 týdnů v rámci 3 podání (v pondělí, ve středu a v pátek) za týden objem 0,2 ml fyziologického séra obsahujícího rozpoutědlo použité k rozpuštění různých použitých sloučenin obecného vzorce I a Ia.

Během studie se stanoví jak růst nádoru, tak míra přežití myš í.

I) Nádorový růst se stanoví měřením dvakrát týdně (v úterý a v pátek) povrchu naroubovaných nádorů MXT-HS, MXT-HI nebo L 1210. Tento povrch se vypočte jako součin dvou největších navzájem kolmých os nádoru. Hodnota těchto os se změří pomocí posuvného měřítka.

ii) Míra přežití myší se vypočte z poměru T/C, kde (počet dní přežití myši

T= z průměru ostřených myší) (průměr ošetrenmých myší ) (počet myší uhynulých ve dnech, které předcházely dní ošetření myši) (počet myší uhynulých ve stejný den jako střední ošetřená myš)

·· ·· ♦· ·· • · · · « · · ® ® · · · • · · · · · • · · «β ·· ···· «· ···· ·· ·· • · · · • · • β • · . ···· ···· (počet dní přežití myši

C= z průměru oštřených myš í ) (průměr ošetřenmých myš í ) (počet myší uhynulých ve dnech, které předcházely dni ošetření myši) (počet myší uhynulých ve stejný den jako střední kontrolní myši)

Tento poměr vyjadřuje střední dobu přežití souboru myší ošetřených v poměru ke střední době přežití střední myši kontrolního souboru myší. Tak jedna zavedená molekula způsobí významné zvýšení (P<0,05) přežití zvířat, jestliže poměr T/C přesáhne 130 %. Naopak představuje toxický účinek, pokud je tato hodnota poměru T/C nižší než 70 %.

3.1 Karcinom prsu u myší (MXT-HI)

Jako příklad se uvádí vliv dvou prostředků CRL 8293 a CRL 8294 na růst nádorů MXT-HI. Každá skupina myší s naroubovanými nádory MXT-HI je závislá na daném experimentálním stavu zahrnujícím 15 zvířat.

Ošetření 1

Produkt CRL 8293 se podá intra-peritoneálně. První injekce produktu se provede 7. dne po naroubování (den 7) s řadou tří injekcí za týden (pondělí, středa a pátek) během tří po sobě následujících týdnů dávkou 5 mg/kg.

Ošetření 2

Produkt CRL 8294 se podává intraperitoneálně. První injekce produktu se provede 7. dne po naroubování (den 7) s řadou tří injekcí za týden (pondělí, středa a pátek) během tří po sobě následujících týdnů dávkou 5 mg/kg.

···· • · · · · · ···'< ββββ ·· ···· ·4

V následující tabulce III jsou v procentech udána zmenšení (-) nebo zvětšení ( + ) povrchu nádorů MXT-HI zavedených ošetřením 1 a 2 vůči kontrolnímu stavu 21- dne po nádorovém roubování po šesti podáních produktu CRL 8293 nebo produktu CRL 829421. dne po naroubování žije 100% kontrolovaných zvířat.

Tabulka III

Ošetření	Povrch nádoru (v %)
1 (CRL8293)	-33
2 (CRL9294)	-36

Tyto výsledky dokládají, že jak CRL 8293 tak CRL 8294 vyvolávají významné zpomalení růstu nádorů MXT-HI. Tyto výsledky ukazují, že produkty obecného vzorce I a la podané in vivo a na tomto modelu vykazují zajímavé protinádorové působení.

3.2 Adenokarcinom prsu u myší (MXT-HS)

Jako příklad se uvádí vliv CRL8293 a CRL8294 na růst nádorů MXT-HS. Každá skupina myší s naroubovaným nádorem MXT-HS a ve vztahu k daným experimentálním podmínkám zahrnuje 9 zvířat.

Ošetření 10

Produkt CRL 8293 se podává intraperitoneálně. První injekce produktu se provede 7. dne po naroubování (den 7)’ s řadou tří injekcí za týden (pondělí, středa a pátek) během tří po sobě následujících týdnů dávkou 5 mg/kg.

Ošetření 20 ♦

Produkt CRL8294 se podává intraperitoneálně. První injekce produktu se provede 7. dne po naroubování (den 7) s řadou

·«··

- 51 ** ·· ♦· ·· 9» • · » · 9 9 9 • ···· ··«· * * Φ · . · · φ

9999 9999 99 9339 99 tří injekcí za týden (pondělí, středa a pátek) během tří po sobě následujících týdnů dávkou 5 mg/kg.

V následující tabulce IV jsou v procentech udána zmenšeňí (-) nebo zvětšení ( + ) povrchu nádorů MXT-HS zavedených ošetřením 10 a 20 vůči kontrolnímu stavu 31. dne po nádorovém roubování po 9 podáních produktu CRL 8293 nebo produktu CRL 8294. 31- dne po naroubování žije 100¾ kontrolovaných zvířat.

Tabulka IV
Ošetření	Povrch nádoru (v ^)
10 (CRL8293)	-45
20 (CRL9294)	-64

Tyto výsledky dokládají, že CRL 8293 a CRL8294 vyvolávají velmi výrazné významné zpomalení růstu nádorů MXT-HI. Tyto výsledky ukazují, podobně jako v případě MXT-HI, že produkty obecného vzorce I a la podané in vivo a na modelu MXT-HS vykazují velmi zajímavé protinádorové působení.

3.3- Lymfom L1210

Jako příklad se uvádí vliv produktu CRL8294 na dobu přežití myší (tabulka V). Každá skupina myší s naroubovaným lymfomem L1210 a ve vztahu k daným experimentálním podmínkám zahrnuje 9 zvířat.

Ošetření 100

Produkt CRL 8294 se podává samotný intraperitoneálně. První injekce produktu se provede 7. dne po naroubování (den 7) s řadou tří injekcí za týden (pondělí, středa a pátek) během tří po sobě následujících týdnů dávkou 1,25 mg/kg.

Tabulka V

Ošetření T/C (v %) (CRL8294) 136

Na subkutánním modelu lymfomu L1210 vykazuje prostředek CRL 8294 obecného vzorce I protínádorové působení, které se projevuje se významným prodloužením střední doby přežití skupiny myší takto ošetřených oproti střední době přežití kontrolních zvířat.

4- Poměry cytotoxické tolerance/aktivity

V tabulce VI jsou výsledky středních IC50 (v nM) (vypočtených z cytotoxické aktivity u 12 studovaných nádorových li. nií) a poměry DMT/IC50 (poměry jsou vypočteny, přičemž poměry DMT a IC50 jsou vyjádřeny bezrozměrnými čísly.

Tabulka VI

Sloučenina CRL	IC50 (nM)	DMT/IC50	DMT/IC50*
CRL 8388 (příklad 4)	6200	0,0016	1
CRL 8293 (příklad 1)	1250	0,008	5
CRL 8294 (příklad 1)	1450	0,007	4,4
CRL 8363 (příklad 2)	500	0,02	12,5
CRL 8364 (příklad 2)	270	0,019	12
CRL 8367 (příklad 3)	1650	0,006	3,8 ·

···· ····

CRL	8396	(příklad	5)	600	0,033	20,6
CRL	8400	(příklad	6)	380	0,42	262
CRL	8401	(příklad	6)	53	3	1870
CRL	8440	(příklad	7)	10	0,42	1240
CRL	8441	(příklad	8)	5000	3	19,8

χ poměr DMT/IC50 různých sloučenin je stanoven vůči referenčnímu poměru 1 pro CRL 8388..

Sloučeniny obecného vzorce I a Ia vykazují významnou protinádorovou aktivitu jak in vitro, tak in vivo za popsaných experimentálních podmínek. In vitro inhibují růst nádorových buněk, jak to dokládají výsledky kolorimetrických zkoušek MTT. In vivo inhibují významným způsobem růst nádorů MXT-HI a MXT-HS a prodlužují významnou měrou střední dobu přežití myší ve skupině rovněž ošetřené a naroubované lymfomem L 1210 oproti střední době přežití střední myši ze skupiny myší kontrolních.

Díky svým cytotoxickým vlastnostem jsou popsané sloučeniny obecného vzorce I a Ia popřípadě ve formě svých solí nebo solvátů farmaceuticky snášenlivé a mohou sloužit jako účinné látky léčiv k léčení rakovinových nádorů a jejich metastáz.

Sloučeniny obecného vzorce I a Ia se obvykle podávají v dávkovačích jednotkách stanovených podle m² povrchu těla nebo podle tělesné hmotnosti v kg. S výhodou jsou dávkovači jednotky podávány v podobě farmaceutických prostředků, ve kterých je účinná látka smísena s alespoň jedním farmaceutickm excipientem.

• ·

Sloučenin obecného vzorce I a Ia se může použít podle rakovinové pathologie léčeného pacienta v dávkách 0,05 až 350 mg/m² povrchu těla, s výhodou v dávkách 0,5 až 50 mg/m² a den pro léčbu v její ostré fázi v závislosti na cyklech každé kúry. K léčení se použije s výhodou sloučenin obecného vzorce I a Ia v dávkách 0,05 až 25 mg/m²/den, s výhodou 0,1 až 1,5 mg/m²/den podle počtu cyklů léčebné kúry. Dávky mohou být spojeny s protinádorovými léčivy používanými podle ověřených protokolů intenzivní polychemické terapie.

Ve farmakologických prostředcích podle vynálezu pro orální nebo intravenozní podání mohou být účinné látky podávány v jednotné formě podání, ve směsi s klasickými farmaceutickými nosiči přijatelnými při léčbě lidí. Jednotková forma podání zahrnuje formy orální cestou, jako jsou tablety popřípadě dělitelné nebo želatinové kapsle, implantáty a formy pro intravenozní podání.

K parenterálnímu podání (intravenozní perfúze konstantní dávkou) se použijí sterilní vodné suspenze, solankové isotonické sterilní roztoky nebo roztoky sterilní a injektovatelné, které obsahují dispergační a/nebo solubilizační farmaceuticky kompatibilní činidla, například propylenglykol, polyethylenglykol a β-cyklodextrin.

K přípravě injektovatelného vodného roztoku k intravenoznímu podávání po dobu 1 až 24 hodin je možno použít korozpouštěla, například alkoholu, jako je ethanol, glykolu jako je polyethylenglykol nebo propylenglykol a tensioaktivního hydrofilního činidla jako je Tveen 80.

Přípravuje-1i se prostředek v pevné formě, jako tablety, je možno přidat účinnou látku popřípadě rozmělněnou, změkčovadlo jako je laurysulfát sodný a vše smísit s farmaceutickým nosičem, jako jsou oxid křemičitý, želatina, škrob, laktóza, • · · •· eeee stearát horečnatý, mastek, arabská klovatina nebo jejich analogy. Tablety je možno doplnit sacharózou, různými polymery nebo jinýmin vhodnými látkami například dodávajícími prodloužený nebo zpožděný účinek nebo uvolňujícími kontinuálně stanovené množství účinné látky.

V případě želatinových kapslí se smísí účinná látka s ředidlem, jako je glykol nebo ester glycerolu k vnesení získané směsi do měkkých nebo tvrdých kapslíťíčinná látka může být formulována také ve formě mikrokapslí nebo mikrokuliček, popřípadě s jedním nebo s několika nosiči nebo přísadami.

Účinná látka může být obsažena také ve formě komplexu s cyklodextrinem, jako je například s α-, β- nebo gama-cyklodextrin, 2-hydroxypropy1-β-cyklodextrin nebo methyl-β-cyklodextrin.

Pro cytotoxickou aktivitu se sloučenin obecného vzorce I používá k léčení většiny pevných nádorů, zejména k léčení mozkových nádorů, rakoviny plic, nádorů vaječníků, nádorů prsu, rakovin dělohy, kolorektální rakoviny, rakoviny prostaty a nádorů varlat.

Průmyslová využitelnost

Derivát ascidideminu, jeho soli a solváty pro výrobu farmaceutických prostředků k rakoviny mozku, plic, léčení většiny pevných nádorů, zejména vaječníků, prsu, dělohy, kolorektálního

systému, prostaty a varlat.

JDr. Petr KsSenský advokát

ADVOKÁTn/kaNCĚLÁR SfciéCKrt ZELeniY ŠVOpČÍK KALENSKÝ

A PARTNEŘI

120 00 Praha 2/Hálkova 2 Česká republika

Claims (13)

PATENTOVÉ NÁROKY 'ΖΰΰΙ -Γ2-7

1.

Derivát ascidideminu obecného vzorce I nebo la

R5

R⁴ kde znamená

R¹ , R²

R³ , R⁴ a R⁵ atom vodíku, atom halogenu, alkylovou skupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, hydroxylovou skupinu, skupinu -CHO, OR⁸ , -COOH, -CN, -CO2R⁸ , -C0NHR⁸ , -C0NR⁸R⁹ , -NH2 , NHR⁸ a -N(R⁸)₂, -NH-CH2-CH2-NCCH3 )2 . -NH-CH2-CH2-CI, -NHCOR⁸, morfolinoskupinu, nitroskupinu, skupinu SO3H,

-CH2-N-COOR⁸ -CH2-N-COOR⁸ í í

CH2-COOR⁹ CH₂-Ar kde znamená R⁸ a R⁹ skupinu alkylovou s 1 až 6 atomy uhlíku, fenylalkylovou s 1 až 6 atomy uhlíku v alkylovém podílu a Ar arylovou skupinu se 6 až 14 atomy uh1 íku,

R⁶ atom vodíku, atom halogenu, skupinu alkylovou s 1 až 6 atomy uhlíku, skupinu -CCIfc^nR¹⁰, kde znamená R¹⁰ atom halogenu, skupinu —OH, alkoxyskupinu s 1 az 6 atomy uhlíku, skupinu -O-CO-alkýlovou s 1 až 6 atomy uhlíku v alkylovém podílu a η 1 až 6, skupinu -CN, -CQ2Et, -COR¹¹, kde znamená R¹¹ alkylovou skupinu s 1 až 6 atomy uhlíku a fenylalkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylovém podílu a skupinu -NR¹²R¹³, kde znamená R¹² a R¹³ na sobě nezávisle atom vodíku nebo skupinu alkylovou s 1 až 6 atomy uhlíku, fenylalkylovou s 1 až 4 atomy uhlíku, skupinu -(CH2>nR¹⁴, kde znamená R¹⁴ atom halogenu, alkoxyskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku nebo -NCCH3Í2 ani až 6,

R⁷ atom vodíku, skupinu alkylovou s 1 až 6 atomy uhlíku, fenylalkylovou s 1 až 4 atomy uhlíku, skupinu -NR¹⁵R¹⁶ , kde znamená R¹⁵ a R¹⁶ na sobě nezávisle atom vodíku, skupinu alkylovou s 1 až 6 atomy uhlíku, fenylalkylovou s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylovém podílu nebo skuinu -CCH2?nR¹⁷ kde znamená R¹⁷ atom vodíku, atom halogenu, skupinu -OH, alkoxyskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku ani až 6, a jeho adiční soli s farmaceuticky přijatelnými kyselinami.

2-(2-chlorethy1)-7H-pyrido[4,3,2-de][1,10]fenantrolin-7-on a jejich adiční soli s farmaceuticky přijatelnými kyselinami.

2- (2-chlorethyl)-7H-pyrido[4,3,2-de][1,7]fenantrolin-7-on a jejich adiční soli s farmaceuticky přijatelnými kyselinami.

2. Derivát'ascidideminu podle nároku 1 obecného vzorce I nebo la, kde znamená R¹ , R² , R³ ,

R⁴ a R⁵ atom vodíku, atom halogenu, skupinu alkylovou s 1 až 6 atomy uhlíku, hydroxylovou, -CHO, -0R⁸ , -COOH, -CN, -C0₂R⁸, -C0NHR⁸, -C0NR⁸R⁹, -NH2 , -NHR⁸ ,

-NCR⁸)₂, -NH-CH2-CH2-NCCH3)₂, -NHC0R⁸, morfolinoskupinu, nitroskupinu, skupinu SO3H,

-CH2-N-COOR⁸ -CH2-N-COOR⁸

CH2-COOR⁹ CH₂-Ar kde znamená R⁸ a R⁹ skupinu alkylovou s 1 až 6 atomy uhlíku a Ar je skupinu arylová se 6 až 14 atomy β · · uhlíku, ' a jeho adiční soli s farmaceuticky přijatelnými kyselinami.

3- acetoxymethy1-7H-pyrido[4,3,2-de]I1,10]fenantrolin-7-on, 3-acetoxymethy1-9-methoxy-7H-pyrido[4,3,2-de][1,10]fenantrolin-7-on, .·* ·· ·· • « · · · · • · « β • · · · · .

»· ·«

3- acetoxymethyl-9-methoxy-7H-pyrido[4,3,2-de][1,7]fenantrolin-7-on,

3. Derivát ascidideminu podle nároku 1 obecného vzorce I nebo la, kde znamená

R⁴, a R⁵ atom vodíku, atom halogenu, skupiny alkylovou s 1 až 6 atomy uhlíku, hydroxyskupinu, skupinu -OR⁸ , -N0₂, -NH2 , -NHR⁸, -NCR⁸ >2, -NH-CH2 -CH2-NCCH3 >2 , -N-CH2-CH2-Cl, -NHCOR⁸, kce znamená

R⁸ znamená alkylovou skupinu s 1 až 6 atomy uhlíku.

R⁶ atom vodíku, skupinu -CCH2>nR¹⁰, kde znamená R¹⁰ atom halogenu, skupinu -O-CO-CH3, alkylovou s 1 až 6 atomy uhlíku, skupinu -NR¹²R¹³ , kde znamená R¹² a R¹³ násobě nezávisle atom vodíku, skupinu alkylovou s 1 až 6 atomy uhlíku, benzylovou, -<CH2>nR¹⁴, kde znamená R¹⁴ atom halogenu, alkoxyskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku nebo -N(CH3)2 a η 1 až 6.

R⁷ atom vodíku, skupinu alkylovou s 1 až 6 atomy uhlíku, benzylovou, -NR¹⁵R¹⁶, kde znamená R¹⁵ a R¹⁶ na sobě nezávisle atom vodíku, skupinu alkylovou s 1 až 6 atomy uhlíku, benzylovou, -CCH₂)nR¹⁷ kde znamená R¹⁷ atom vodíku, atom halogenu, hydroxyskupinu, alkoxyskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku a η 1 až 6, a jeho adiční soli s farmaceuticky přijatelnými kyselinami.

4.10- dimethoxy-7H-pyrido[4,3,2-de][1,7]fenantrolin-7-on,

4,8-dimethoxý-7H-pyrido[4,3,2-de][1,10]fenantrolin-7-on,

4- methoxy-7H-pyrido[4,3,2-de][1,10]fenantrolin-7-on,

4.9- dimethoxy-7H-pyrido[4,3,2-de][1,7]fenantrolin-7-on,

4.11- dimethoxy-?H-pyrido[4,3,2-de][1,7]fenantrolin-7-on,

4-methoxy-7H-pyrido[4,3,2-de][1,7]fenantrolin-7-on,

4. Derivát ascidideminu podle nároku 3 obecného vzorce I nebo la, kde alespoň jedna skupina R¹, R², R³, R⁴ a R⁵ znamená skupinu OR⁸ a ostatní symboly mají v nároku 3 uvedený význam, a jeho adiční soli s farmaceuticky přijatelnými kyselinami.

5. · Derivát ascidideminu podle nároku 3 obecného vzorce I nebo la, kde znamená

R¹, atom vodíku, atom halogenu, hydroxyskupinu, methoxyskupinu, nitroskupinu, skupinu -NH2 , -NHCH3, -NH-CH2-CH2-NCCH3 >2 , -N-CH2-CH2 -CI, -NHCOCH3,

R² atom vodíku,

R³ a R⁵ atom vodíku, hydroxyskupinu nebo methoxyskupinu, a ostatní symboly mají v nároku 3 uvedený význam a jeho adiční soli s farmaceuticky přijatelnými kyselinami.

6. Derivát ascidideminu podle nároku 3 obecného vzorce I vybraný ze souboru zahrnujícího ll-methoxy-7H-pyrido[4,3,2-de][1,7]fenantrolin-7-on, ll-chlor-7H-pyrido[4,3,2-de][1,7]fenantrolin-7-on,

7. Derivát ascidideminu podle nároku 3 obecného vzorce Ia vybraný ze souboru zahrnujícího

8. Farmaceuický prostředek, vyznačující se tím, že obsahuje účinné množství sloučeniny podle nároku 1 až 7 jakožto cytostatikum pro ošetřování rakovinových nádorů a jejich metastáz.

8.10- dimethoxy-7H-pyrido[4,3,2-de][1,10]fenantrolin-7-on,

8-chlor-7H-pyrido[4,3,2-de][1,10]fenantrolin-7-on,

8-methoxy-7H-pyrido[4,3,2-de][1,10]fenantrolin-7-on,

9. Použití sloučenin podle nároku 1 až 7 pro výrobu protirakovinových léčiv.

9.11- dimethoxy-7H-pyrido[4,3,2-de][1,7]fenantrolin-7-on, 3-acetoxymethy1-7H-pyrido[4,3,2-de][1,7]fenantrolin-7-on,

9- methoxy-7H-pyrido[4,3,2-de][1,7]fenantrolin-7-on,

10. Způsob přípravy sloučenin obecného vzorce I a Ia vyznačující se tím, že

a) nechá se reagovat hetero Diels-ftderovovou reakcí chinoleindion obecného vzorce IV (IV)

N R⁴ N(CHa)2 (V) kde znamená X methylovou skupinu, za získání směsi sloučenin obecného vzorce II a Ha • · · · · · • · ·· • · · I ·· ·<

> · · .

(Ha)

b) sloučeniny obecných vzorců II a Ha se případně oddělí ci) nechá se reagovat sloučenina obecného vzorce II a/nebo Ha s dimethylformamiddimethylacetalem za získání enaminu obecného vzorce III a lila do enaminů se zavádějí substituenty R⁶ a R⁷'a produkty se cyklizují za získání sloučenin obecného vzorce I a/nebo Ia, nebo

C2) se současně zavádějí substituenty a provádí se cyklizace za získání sloučenin obecného vzorce I a/nebo Ia,

d) popřípadě se sloučeniny I a Ia oddělí.

10- methoxy-7H-pyrido[4,3,2-de][1,7]fenantrolin-7-on,

11. Způsob přípravy sloučenin obecného vzorce I a Ia kde znamená R⁶ a R⁷ atom vodíku, vyznačující se tím, že ·· ·· > · · <

·· ·· ► · · « ·· ·· ► · · <

»······· • · © <

• · <

···· ·«

a) se nechá reagovat Diels-Alderovou reakcí sloučenina obecného vzorce IV

CIV) kde jednotlivé symboly mají shora uvedený význam, a azadien obecného vzorce V

X

N(CH₃)₂ kde znamená X skupinu CH2-CH2-NHBoc a ostatní symboly mají shora uvedený význam, za získání směsi sloučenin obecného vzorce II a Ha (Ila) shora uvedený význam,

b) popřípadě se sloučeniny obecných vzorců II a Ha oddělí

c) cyklizují se sloučeniny obecných vzorců II a Ha za získání sloučenin obecného vzorce I a/nebo la, ·· ·· ► · · « ·· ·· > · · I ·♦ '·· * · · « • ·e e eeee ·· ···· • β >· ···<

d) případně se sloučeniny obecného vzorce I a Ia oddělí.

12. Způsob ošetřování pacientů trpících rakovinou, vy značuj ící se tím, že se jim podává účinné množství sloučeniny podle nároku 1.

13.

(

R¹ , R² R³ , R⁴ a R⁵ atom vodíku, atom halogenu, alkylovou skupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, hydroxylovou skupinu, skupinu -CHO, OR⁸, -COOH, -CN, -C02R⁸, -C0NHR⁸ , -C0NR⁸R⁹, -NH2 , NHR⁸ a -NCR⁸ >2, -NH-CH2-CH2-NCCH3)2 , -NH-CH2-CH2-Cl, -NHC0R⁸ , morfolinoskupinu, nitroskupinu, skupinu SO3H,

-CH2-N-COOR⁸ í

ch₂ -coor⁹

-ch₂-n-coor⁸ í

CH2-Ar kde znamená R⁸ a R⁹ skupinu alkylovou s 1 až 6 atomy uhlíku, fenylaikylovou s 1 až 6 atomy uhlíku v alkylovém podílu a Ar arylovou skupinu se 6 až 14 atomy uhlíku.