CZ2003392A3

CZ2003392A3 - Kontrastní prostředek pro zobrazení plaků, nádorů a nekróz pomocí magnetické resonance

Info

Publication number: CZ2003392A3
Application number: CZ2003392A
Authority: CZ
Inventors: Johannes Platzek; Peter Mareski; Ulrich Niedballa; Bernd Radüchel; Hanns-Joachim Weinmann; Bernd Misselwitz
Original assignee: Schering Aktiengesellschaft
Priority date: 2000-08-11
Filing date: 2001-07-23
Publication date: 2003-09-17
Also published as: NO20030604L; JP2004506025A; IL154385A0; RU2290206C2; HUP0300736A3; WO2002013874A8; AU7754901A; EE200300061A; MXPA03001287A; NO20030604D0; SK1572003A3; AR034139A1; NZ523932A; KR20030022387A; HRP20030173A2; DE10066210B4; CN1469757A; BR0113188A; PL365596A1; WO2002013874A2

Description

Kontrastní prostředek pro zobrazení plaků, nádorů a nekróz pomocí magnetické resonance

Oblast techniky

Tento vynález popisuje použití kovových komplexů obsahujících perfluoralkylové zbytky, které vykazují kritickou micelární koncentraci menší než 10'³ mol/1, hydrodynamický micelární průměr (2 Rh) větší než 1 nm a protonovou relaxivitu v plasmě (R¹) větší než 10 1/mmol.s, jako kontrastní látku u NMR imagingu a zobrazování plaků, lymfatických uzlin, infarktových a nekrotických tkání, stejně jako pro nezávislé zobrazování nekrtických a nádorových tkání. Ukazuje se, že kovové komplexy obsahující perfluoalkylové zbytky s jmenovanými vlastnostmi, se obzvláště hodí pro nezávislé monitorování plaků, nádorů a nekróz pomocí NMR imagingu a zároveň tak mohou pokrývat důležitou oblast monitorování infarktu a nekrózy.

Dosavadní stav techniky

Arterioskleróza je vážná a častá chorobná změna tepen provázená ztuhnutím, ztrátou elasticity a zeslabením průměru. Představuje častou příčinu smrti v západní industriální společnosti. Změny cévních stěn pomocí nerovnoměrného usazování lipidů, nárůstu pojivové tkáně a zanášení vápníkem vedou k stěnové nestabilitě, žilním změnám a k ukládání sraženin. Příčinou onemocnění jsou četné endogenní a exogenní újmy na zdraví popřípadě onemocnění, jako např. hypertonie, hyperlipidemie, hyperfibrinogenamie, diabetes mellitus, toxiny, nikotin, komplexy antigen-protilátka, záněty, • · · · · · hypoxie, psychický stres, stáří a rodinné zatížení. Tyto vlivy vedou k narušení integrity žilních stěn, k porušení kontroly růstu buněk hladkého svalstva žilních stěn a k porušení odbourávání zestárlých buněk. Léčení samotné arteriosklerózy není možné, cílem úsilí lékařů je prevence pomocí snížení rizikových faktorů, např. pomocí odstranění lipidů.

Diagnosa arteriosklerózy v klinické praxi se v současné době provádí hlavně pomocí angiografie coby hlavním standardem. Limitem u všech metod, založených na měření snížení žilní světlosti, je však ranné stádium tohoto onemocnění, které se vyznačuje ztloustnutím žilních stěn při normální žilní světlosti (Gladov S, Zarins CK, Quantitating atherosclerosis. v Bond MG, Insull W, Glagov S, Chandler AB, Cornhill JF (eds.). Clinical Diagnosis of Atherosclerosis. Quantitative Methods of Evaluation. New York: SpringerVerlag, 1983, 11-35). Další metoda pro diagnostické posouzení žilních stěn a světlosti je intravaskulární nebo perkutánní ultrazvuk.

Nukleárně magnetická resonanční tomografie (NMRT) je moderní, neinvazivní radiologická metoda, která umožňuje velmi dobře prostorové a časově rozlišené zobrazení fyziologických a patofyziologických struktur. Použití specifických kontrastních činidel se selektivním obohacením v určitých tkáních a orgánech významně zvyšuje diagnostickou hodnotu této metody. Příprava kontrastních činidel se selektivním v arteriosklerotických plácích mi choroby v dřívějších stádiích a umožňovala cílenou terapii a profylaxi, takže je zde potřeba vhodných kontrastních činidel.

i vést tím by obohacením k lokalizaci byly použity fluorescenční

V US Patent 4,577,636 jsou nárokovány hematoporfyrinové deriváty jako kontrastní činidla pro detekci atherosklerotických plaků. Jako metody scintigrafie, roentgenová spektroskopie, spektroskopie a u paramagnetických metaloporfyrinů také NMR spektroskopie. Jako paramagnetické ionty byly uvedeny Gd, Cr, Co, Ni, Ag a Eu. Nevýhodou těchto sloučenin je fakt, že se porfyriny ukládají v kůži a způsobují zabarvení, které může přetrvávat až několik týdnů. Kromě toho vedou k fotosensibilizaci. Kromě toho je zde nebezpečí, že při dlouhé době setrvání in vivo metaloporfyriny ztrácejí kov.

Přihláška WO 95/09856 popisuje metaloporfyriny (deuteroporfyriny) pro použití v diagnose a terapii plaků. Jako diagnostická metoda byla použita metoda NMR imagingu. Také tyto porfyriny způsobuj í zabarvení kůže.

V přihlášce WO 95/09013 byly popsány konjugáty specificky vázaných polypeptidů a metalokomplexů. Tyto sloučeniny se mohou také vázat na plaky a tím umožňovat diagnosu a terapii. Jako diagnostická metoda byla použita scintigrafie, počítačová tomografie a NMR imaging. Zatímco jsou uvedeny experimentální podmínky pro scintigrafii, údaje pro NMR imaging chybí.

V US patent 5,807,536 byly použity značené ftalokyaniny jako kontrastní látky pro zobrazování plaků. Jako diagnostická metoda byla použita roentgenová spektroskopie, počítačová tomografie, scintigrafie, SPÉCT a NMR imaging. Experimentálně doložená je scintigrafie.

• · · · • · · ·

Z literatury je známa celá řada kontrastních činidel pro zobrazování infarktu a nekrosy. Již ranné výzkumy prolézaly, že lokalizace infarktu a nekrosy je lepší díky nasazení kontrastních látek u neinvazivních metod jako je scintigrafie nebo NMR tomografie. V literatuře zaujímá velkou část použití porfyrinu pro imaging nekrózy. Dosažené výsledky poskytují ale rozporuplný obraz. Jak popsali Winkelman a Hoyes v Nátuře, 200, 903 (1967), mangan-5,10,15,20-tetrakis(4 sulfonatofenyl)porfyrin (TPPS) se selektivně hromadí v nekrotické části tumoru.

Lyon et al. (Magn. Res. Med. 4, 24 (1987)) oproti tomu pozorovali, že se mangan-TPPS v těle rozděluje, a to v ledvinách, játrech, nádorech a v malé míře ve svalech. Je zajímavé, že koncentrace v nádoru nejdříve dosahuje 4. den svého maxima, a to poté co byla podle autorů zvýšena dávka z 0,12 mmol/kg na 0,2 mmol/kg. Autoři také popisují

nespecifické vázání TPPS	v	nádoru. Bockhurst	et	al . také
referují v	Acta	Neurochir	60,	347 (1994, Suppl),	že	MnTPPS	se
selektivně	váží	v nádorech	•
Foster et	al.	(J. Nucl.	Med. 26, 756 (1985))	nalezli,	sz ze

^lxlIn-5,10,15,20-tetrakis-(4-N-methylpyridinium)porfyrin (TMPyP) se neobohacuje v nekrotické části, ale spíše v živých okrajových vrstvách. Závěr, že existuje látková výměna porfyrin-tkáň, je zřejmý ale nikoliv přesvědčivý.

Ni et al. popisuje v Circulation vol. 90, č. 4, díl 2, strana 1468, abstrakt č. 2512 (1994), že s využitím mangantetrafenyl-porfyrinu (Mn-TPP) a gadolinium-mesoporfyrinu (GdMP) může být zobrazena oblast infarktu. V mezinárodní patentové přihlášce WO 95/31219 byly použity obě sloučeniny φφφφ k zobrazování infarktu a nekrózy. Autoři Marchal a Ni popisují (viz Příklad 3), že u sloučeniny Gd-MP je obsah kovu v infarzovaných ledvinách podobně stejně vysoký jako je tomu u neinfarzovaných orgánů, přičemž je ale devětkrát vyšší než je tomu u infarzované tkáně myokardu (Příklad 1). Podivuhodné bylo, že poměr intenzity signálu u NMRI pro infarzovanou a zdravou tkáň v obou případech byl 2,10 popř. 2,19. Další metaloporfyriny byly popsány v přihlášce DE 19835082 (Schering AG).

Porfyriny mají sklon k tomu, že se ukládají v kůži, což vede k fotosensibilizaci. Senzibilizace může trvat dny až týdny. To je nežádoucí vedlejší účinek při použití porfyrinu jako diagnostika. Kromě toho je terapeutický index pro porfyriny velmi malý, např. pro Mn-TPPS se dosahuje účinku teprve při dávkách od 0,2 mmol/kg, LD₅₀ leží již kolem 0,5 mmol/kg.

Kontrastní látky pro zobrazení nekrosy a infarktu, které nejsou na bázi porfyrinových zbytků, jsou popsány v DE 19744003 (Schering AG), DE 19744004 (Schering AG) a WO 99/17809 (EPIX).

V DE 19744003 jsou popsány oligomerní sloučeniny, složené z jádra,na které jsou připojeny 1 až 3 kovové komplexy.

V přihlášce 19744004 jsou uvedeny lipofilní komplexy kovů pro imaging nekrosy a infarktu. K těmto sloučeninám patří kovové komplexy polyaminopolykarboxylových kyselin, polyaminopolyfosforečných kyselin, porrfyrinů, texafyrinů, safyrinů a peptidů.

• · ·· ····

V EPIX přihlášce WO 99/17809 je popsáno použití derivátů DTPA pro zobrazování nekros. Nejlepší sloučeninou je komplex gadolinia s fosfodiestery hydroxymethyl-DTPA (MS-325).

Také kovové komplexy obsahující perfluoralkylové zbytky jsou známy jako kontrastní činidla pro NMR imaging. Patenty WO 97/26017 (Schering) a WO 99/01161 (Schering) popisují perfluoralkylové kovové komplexy jako lymfografika. WO 99/01161 popisuje kromě toho vhodnost diesterových sloučenin pro zobrazování cévních prostorů (činidla krevního řečiště).

Byly také popsány kontrastní látky pro zobrazování tumorů a nekróz pomocí NMR imagingu.

V EP 417870 Al jsou uvedeny sloučeniny pro nádorovou diagnosu a terapii. Z patentu vyplývá, že mohou být zobrazovány také infarkty a ischémie. Experimentální potvrzení tohoto výroku ovšem v přihlášce chybí. Nárokované sloučeniny lze považovat za cheláty komplexů typu N2S2 a N3S s radioizotopy. Jako diagnostická metoda slouží scintigrafie.

V německém patentu DE 19646762 byla také použita scintigrafie jako diagnostická metoda. V patentu jsou nárokovány kovové cheláty jako radiosensitizátory pro terapii hypoxických nádorů a pro diagnostiku hypoxických stavů a nekróz.

V popisné části je také jmenováno použití jako NMR diagnostik, róntgenových diagnostik a radiodiagnostik.

V německé přihlášce DE 19824653 jsou popsány porfyriny jako nekroseafynové látky pro terapii nádorů. V přihláčce se tvrdí, že sloučeniny se hromadí v nekrotických a hypoxických oblastech nádorů. Sloučeniny mohou být použity pro • · AAA· diagnostické účely ve formě jejich kovových derivátů s paramagnetickými izotopy popř. radioizotopy.

Obě přihlášky - DE 19646762 a DE 19824653 - mají společné, že zobrazování nekrosy a nádoru nelze provádět nezávisle na sobě, neboť je nekrotickou částí tumoru.

Podstata vynálezu

Úkolem předloženého vynálezu je zajištění kontrastních látek pro NMR imaging, které by byly vhodné pro zobrazování plaků, lymfatických uzlů, infarzovaných a nekrotických tkání a také pro nezávislé zobrazování nekróz a nádorů.

Překvapivě bylo nalezeno, že kovové komplexy obsahující perfluoralkylové zbytky, mající kritickou micelární koncentraci menší než 10³ mol/1, hydrodynamický micelární průměr (2 Rh) větší než 1 nm a protonovou relaxivitu (R¹) větší než 10 1/mmol.s, jsou velmi vhodné pro použití jako kontrastní látky pro NMR imaging při zobrazování plaků. Kromě toho mohou být tyto sloučeniny použity pro zobrazování lymfatických uzlin, infarzovaných a nekrotických tkání a také pro nezávislé zobrazování nekrotické tkáně a nádorové tkáně.

Jako kovové komplexy obsahující perfluoralkylové zbytky vhodné podle tohoto vynálezu se rozumí amfifilní sloučeniny, které vykazují v molekule nepolární část perfluoralkylového řetězce, které jsou případně k molekule připojeny pomocí lipofilní spojky. Polární část sloučenin podle tohoto vynálezu je tvořena jedním nebo více kovovými komplexy a případně přivěšenými dalšími polárními skupinami.

• · · · · · · · Μ • · · · · · ··· ·

Ve vodných systémech se tyto sloučeniny vykazují chování klasických tensidů (jako např. natrium-dodecylsulfát, SDS) . Tedy snižují povrchové napětí vody. Pomocí tensiometrie může být stanovena tzv. kritická micelární koncentrace (CMC v jednotkách mol/1). K tomu se stanovuje povrchové napětí v závislosti na koncentraci měřené sloučeniny. CMC se poté spočítá z průběhu funkce povrchového napětí (c) . Kritická micelární koncentrace sloučenin podle tohoto vynálezu musí být menší než 10'³ mol/1, s výhodou menší než 10'⁴ mol/1.

Amfifilní sloučeniny podle tohoto vynálezu v roztoku asociují a existují jako agregáty, u nichž se určuje velikost (2 Rh) těchto agregátů (např. micel, kotoučů, měchýřků) pomocí foton-korelač spektroskopie (PCS).

Jako druhé kritérium slouží hydrodynamický průměr 2 Rh, který musí být měnší než 1 nm. Podle tohoto vynálezu jsou obzvláště vhodné takové perfluoralkylové kovové komplexy, které mají 2 Rh 3 nm, obzvláště výhodné mají 2 Rh > 4 nm.

Jak určení CMC tak také foton-korelační spektroskopie jsou popsány v H. D. Dórfer, „Grenzfláchen- und Kolloidchemie, Weinheim, New York, Basel, Camridge, Tokyo, VSH 1994.

Jako třetí kriterium slouží protonová relaxivita v plasmě (R¹) při 40 °C a síle pole 0,47 Tesla. Relaxivita, která se vykadřuje v jednotkách [l/mmol.s], je kvantativním měřítkem zkrácení relaxační doby T¹ protonů. Pro účely tohoto vynálezu musí být relaxivita co nejvyšší a vyšší než 10 l/mmol.s, s výhodou vyšší než 13 l/mmol.s, obzvláště výhodně vyšší než 15 l/mmol.s.

·· ··«· • « • · ♦ · · ·

Relaxivita R¹ [1/mmol.s] NMR kontrastních látek podle tohoto vynálezu byla určována pomocí přístroje Minispec P 20 od firmy Bruker. Měření bylo prováděno při teplotě 40 °C a síle pole 0,47 Tesla. Pro každou Tl-sekvence: 180°-TI-90°, inverzní odezva, bylo získáno 8 bodů. Jako médium byla použita hovězí plasma od firmy Kraeber. Koncentrace kontrastních látek [mmol/1] leží v rozmezí od 0,30 do 1,16.

V jednom provedení tohoto vynálezu jsou jako výhodně sloučeniny popsány sloučeniny vzorce I podle nároku 8 až 11. Zde se jedná o sloučeniny známé, popsané v WO 97/26017. Tato přihláška také obsahuje jejich přípravu. Překvapivě se ukázalo, že tyto sloučeniny jsou velmi vhodné jako NMR kontrastní činidla pro zobrazování plaků. Jako obzvláště výhodné jsou uvedeny kovové komplexy I až IV a XI až XIII (viz také Tabulku 1).

V dalším provedení tohoto vynálezu jsou jako obzvláště výhodné uvedeny sloučeniny obecného vzorce Ia podle nároků 12 až 21. Tyto sloučeniny jsou známy a jsou popsány v WO 99/01161. Jejich použití jako NMRI kontrastních látek pro zobrazování plaků nebylo dříve popsáno. Z těchto látek je obzvláště výhodné použití kovového komplexu XIV (viz. Tabulka 1) ·

V dalším výhodném provedení tohoto vynálezu jsou zahrnuty makrocyklické perfluoralkylové sloučeniny obecného vzorce lb

A

I F

K-N—L-R (lb) kde

K je komplexující činidlo nebo kovový komplex obecného vzorce lib »· «··· ·· ··· ·

kde (Hb) označuje vodíkový atom nebo kovový ekvivalent atomového čísla 23 až 29, 42 až 46 nebo 58 až 70,

R² a R³ označují vodíkový atom, alkylovou skupinu mající až 7 atomů uhlíku, benzylovou skupinu, fenylovou skupinu, skupinu -CH₂OH nebo skupinu -CH₂-O-CH₃, a

U² znamená zbytek L¹, kde L¹ a U² jsou navzájem nezávisle stejné nebo rozdílné,

A¹ označuje vodíkový atom, rovnou nebo rozvětvenou alkylovou skupinu mající 1 až přerušenou s 1 až 15 atomy atomů uhlíku, případně kyslíku a/nebo případně substituovanou s 1 až 10 hydroxylovými skupinami, 1 až 2 skupinami COOH, fenylovou skupinou, benzylovou skupinou a/nebo 1 až 5 skupinami OR⁹, přičemž R⁹ je vodíkový atom nebo alkylový zbytek mající 1 až 7 atomů uhlíku nebo zbytek -L¹R^f,

L¹ označuje vodíkový atom, rovnou nebo rozvětvenou alkylenovou skupinu mající 1 až 30 atomů uhlíku, případně přerušenou s 1 až 10 atomy kyslíku, 1 až 5 skupinami -NH-CO-, 1 až 5 skupinami -CO-NH-, popřípadě fenylovou skupinou přípdaně substituovanou se skupinou -COOH, 1 až 3 atomy síry, 1 až 2 skupinami -N(B¹)-SO2-, a/nebo 1 až 2 skupinami -S02NÍB¹)- kde B¹ je skupina A¹, skupina -NHCO-, skupina -CONH-, skupina N(B¹)-SO2- nebo skupina -SO₂-N(B¹)- a/nebo případně substituovaná se zbytkem R^F, a ·· «·*·

R^f je rovný nebo rozvětvený perfluoralkýlový zbytek vzorce CnF2nE, kde n je číslo 4 až 30 a

E je koncový fluorový atom, chlorový atom, bromový atom, jodový atom nebo vodíkový atom, a případně přivěšené kyselé skupiny mohou být jako soli organických a/nebo anorganických aminů nebo aminokyselin nebo aminokyselinových amidů.

Sloučeniny podle tohoto vynálezu jsou určené pro použití jako NMR diagnostika, kovový iont signálové skupiny tedy musí být paramagnetický. Takové ionty jsou obzvláště dvojmocné a trojmocné ionty prvků atomových čísel 23 až 29, 42 až 46 a 58 až 70. Vhodnými ionty jsou například chromitý, železnatý, kobaltnatý, nikelnatý, medhatý, praseodymitý, neodymitý, samaritý a yterbitý. Kvůli jejich silnému magnetickému momentu jsou obzvláště vhodné ionty gadolinitý, terbitý, dysprositý, holmitý, erbitý, železitý a manganatý ion.

Obzvláště vhodné jsou manganatý, železnatý, železitý, praseodymitý, neodymitý, samaritý, gadolinitý a ytterbitý ion, obzvláště dysprositý iont.

Alkylové skupiny R², R³, R⁹ mohou být rovné nebo rozvětvené. Jako příklady mohou být jmenovány methyl, ethyl, propyl, isopropyl, n-butyl, 1-methylpropyl, 2-methylpropyl, n-pentyl, 1-methylbutyl, 2-methylbutyl, 3-methylbutyl, 1,2dimethylpropyl.

R², R³ a R⁹ jsou s výhodou vodíkový atom a alkylové skupiny mající 1 až 4 atomy uhlíku, obzvláště výhodné jsou vodíkový atom a methylová skupina.

·· ·«··

9999

Benzylová a fenylová skupina v R², A¹ a B¹ mohou být na fenylovém kruhu substituovány. Jako substituenty připadají v úvahu skupina -COOH.

Když sloučenina vzorce Ib obsahuje současně zbytek L¹ a U², potom L¹ a U² mohou být navzájem různé.

Alkylenové skupiny U² mající 1 až 30 uhlíkových atomů mohou být rovné nebo rozvětvené. Jako příklady můžeme jmenovat methylen, ethylen, propylen, isopropylen, n-butylen, 1methylpropylen, 2-methylpropylen, n-pentylen, 1methylbutylen, 2-methylbutylen, 3-methylbutylen, 1,2dimethylpropylen.

Pro U² ve významu alkylen jsou výhodné alkylové skupiny mající 1 až 10 uhlíkových atomů, obzvláště výhodné jsou C₂ až C₄ alkylenové skupiny.

A¹ alkylové skupiny mající 1 až 30 uhlíkových atomů mohou být rovné nebo rozvětvené. Jako příklady mohou být jmenovány methyl, ethyl, propyl, isopropyl, n-butyl, 1-methylpropyl, 2methylpropyl, n-pentyl, 1-methylbutyl, 2-methylbutyl, 3methylbutyl, 1,2-dimethylpropyl, hexyl.

A¹ alkylové skupiny mající 1 až 30 uhlíkových atomů mohou být přerušeny 1 až 15 atomy kyslíku, a/nebo mohou být substituovány s 1 až 10 hydroxyskupinami, 1 až 5 alkoxyskupinami nebo 1 až 2 skupinami -COOH, jako například C₂H₄-O-CH₃, C₃H₆-O-CH₃,

C₂H₄-O- (C₂H₄-O) _t-C₂H₄-OH, C₂H₄-O-(C₂H₄-O)_t-C₂H₄-OCH₃, kde t = 0 až 13,

C₂H₄-OH, C₃H₆-OH, C₄H₈-OH, C₅Hio-OH, C₆H₁₂-OH, C₇H₁₄-OH, stejně jako jejich rozvětvené izomery, • fc fcfcfc· • fc fcfcfcfc • fcfc • fcfc · • fcfc fcfc fcfcfcfc • · 4 • · · I fcfc fcfc

CH(OH)CH₂OH,

CH(OH)CH(OH)CH20H, CH₂ [CH (OH) ] /CHaOH, kde u¹ =1 až 10

CH [CH₂ (OH) ] CH (OH) CH₂OH,

C₂H₄CH(OH)CH₂OH, (CH₂)_sCOOH kde s =1 až 15,

C₂H₄-O- (C₂H₄-O) _t-CH₂COOH kde t = 0 až 13,

C₂H₄-O- (C₂H₄-O)_t-C₂H₄-C_nF_2nE kde t = 0 až 13, n = 4 až 20 a E = fluorový atom, vodíkový atom, chlorový atom, bromový atom nebo atom jodu. Obzvláště výhodné pro A¹ jsou vodík, alkyl mající 1 až 10 uhlíkových atomů,

C₂H₄-O-CH₃, c₃h₆-o-ch₃,

C₂H₄-O- (C₂H₄-O)_x-C₂H₄-OH, C₂H₄-O-(C₂H₄-O)_x-C₂H₄-OCH₃ kde x = 0 až

5,

C₂H₄OH, C₃H_sOH,

CH₂ [CH(OH) ]_yCH₂OH, kde y = 1 až 6

CH [CH₂ (OH) ] CH (OH) CH₂OH, (CH₂)_wCOOH kde w =1 až 10, C₂H₄-O- (C₂H₄-O) X-CH₂COOH kde x = 0 až 5,

C₂H₄-O-(C₂H₄-O) _x-C₂H₄-C_nF_2nE kde x = 0 až 5, n =4 až 15 a E = fluorový atom.

Pokud má sloučenina obecného vzorce lb dva zbytky iZ-R*’, potom mohou být tyto zbytky navzájem rozdílné.

Pro zbytek LI jsou uvedeny příklady, kde α označuje vazbu na dusík a β vazbu na zbytek RF:

a-(CH₂)_s-p kde s = 1 až 15 a-CH₂-CH₂- (O-CH₂-CH₂-) _γ-β, kde y = 1 až 6, a-CH₂-(O-CH₂-CH₂-) ₇-β, kde y = 1 až 6, α-0Η₂-ΝΗ-0Ο-β, *· **·· ·· φφ ·· ···· a-CH₂-CH₂-NH-SO₂-^, α - CH₂ - NH - CO - CH₂ - Ν (CH2COOH) - S0₂ - β, cc-CH₂-NH-CO-CH₂-N (c₂h₅) -so₂-p, a-CH₂-NH-CO-CH₂-N (c₁₀h₂₁) -so₂-p, a-CH₂-NH-CO-CH₂-N(C₆Hi₃) -SO₂-p,

0t-CH₂-NH-CO- (CH₂) io-N(C₂H₅) -δθ₂-β, a-CH₂-NH-CO-CH₂-N (-CH₂-C₆H₅) -3Ο₂-β, oc-CH₂-NH-CO-CH₂-N(-CH₂-CH₂OH) -εο₂-β, a-CH₂-NH-CO- (CH₂) i₀-S-CH₂CH₂-^ , a-CH₂-NH-CO-CH₂-O-CH₂CH₂-^, a-CH₂-CH₂-NH-CO-CH₂-O-CH₂CH₂^, a-CH₂-(CH₂-CH₂O)_y-(CH₂)₃-NH-CO-CH₂-O-CH₂CH₂^, kde y = 1 až 6, a-CH₂-NH-CO- (CH₂) ι₀-Ο-ΟΗ₂ΟΗ₂-β, a-CH₂-CH₂-NH-CO- (CH₂) ι₀-Ο-ΟΗ₂ΟΗ₂-β, a-CH₂-C₆H₄-O-CH₂-CH₂-^, kde fenylenová skupina je substituovaná v polohách 1,4 nebo 1,3, a- CH₂ -0- CH₂ - C (CH₂ -OCH₂CH₂ - C₆F₁₃) ₂ - (CH₂) ₃ - CH₂ -0-CH₂CH₂ - β, a-CH₂-NH-CO-CH₂-CH₂-CON-CH₂-CH₂-NHCOCH₂-N (C₂H₅) SO₂C₈F₁₇a-CH₂-CH₂-NH-CO-CH₂-N (C₂H₅) -δθ₂-β, a - CH₂ - 0 - CH₂ - CH (OC₁₀H₂₁) - CH₂ - 0 - CH₂CH₂ - β, a- (CH₂-NHCO) ₄-CH₂O-CH₂CH₂^, a- (CH₂-NHCO) ₃-ΟΗ₂Ο-0Η₂ΟΗ₂-β, a - CH₂ - OCH₂C (CH₂OH) 2 - ch₂ - o - ch₂ch₂ - β,

COOH a-CH₂-NH-CO-CH₂-N(C₆H₅) -SOa-β, a-NH-CO-CH₂CH₂-β, • · • · ·

a-NH-CO-CH₂-O-CH₂CH₂-P, a-NH-CO-β, a-NH-CO-CH₂-N (CH₂COOH) -SO₂-p, a-NH-CO-CH₂-N (c₂h₅) -so₂-p,

Ct-NH-CO-CH₂-N(C₁₀H₂₁) -SOa-β, a-NH-CO-CH₂-N (C₆H₁₃) -δθ₂-β, a-NH-CO- (CH₂)₁₀-N(C₂H₅) -εο₂-β, a-NH-CO-CH₂-N(-CH₂C₆H₅) -δθ₂-β, a-NH-CO-CH₂-N(-CH₂-CH₂OH) -SOs-β, α-ΝΗ-ΟΟ-ΟΗ₂-β, a-CH₂-O-C₆H₄-O-CH₂-CH₂^, a-CH₂-C₆H₄-O-CH₂-CH₂^, a-N(C₂H₅) -SOz-β, a-N(C₆H₅) -3Ο₂-β, a-N(C₁₀H₂i) -δθ₂-β, a-N(C₆H₁₃) -SOs-β, cc-n(c₂h₄oh) -εο₂-β, a-N(CH₂COOH) -3Ο₂-β, a-N(CH₂C₆H₅) -5Ο₂-β, a-N [CH (CH₂OH) ₂] -εο₂-β, a-N [CH (CH₂OH) CH(OH) (CH₂OH) ] -δθ₂-β,

Preferovány jsou:

α-ΟΗ₂-Ο-ΟΗ₂-ΟΗ₂-β, a-CH₂-CH₂- (O-CH₂-CH₂-) _γ-β, kde y = 1 až 6, a-CH₂-(O-CH₂-CH₂-) _ζ-β, kde y = 1 až 6, a-CH₂-CH₂-NH-SO₂^, např. 10 α - CH₂ - NHCOCH₂ - O - CH₂ - CH₂ - β, • · · ·

α - CH₂ - CH2NHCOCH2 - Ο - ch₂ - CH₂ - β, a-CH₂-(CH2CH2O) y (CH₂) 3NHCO-CH2-O-CH₂-CH₂-p, kde y = 1 až 6, a-CHz-NHCO (CH₂) ₁₀-O-CH₂-CH2-p, a - CH₂ - CH₂ - NHCO (CH₂) 1 o ~ O - CH₂ - CH₂ - β, a-CH₂-O-CH₂-CH (OCi₀H₂i) -CH₂-O-CH₂-CH₂-^, a-CH₂-O-C₆H₄-O-CH₂-CH₂^, a-CH₂-C₆H₄-O-CH₂-CH₂^.

Obzvláště výhodné zbytky L¹ podle tohoto vynálezu jsou takové, které jsou uvedeny ve sloučeninách v příkladech provedení v tomto vynálezu.

Pro U² platí výše uvedené zbytky pro L¹ a preferované a obzvláště preferované zbytky mají stejný význam jako ve výše uvedeném alkylenu, s tou podmínkou, že nesmí vykazovat žádný dusíkatý atom v α poloze a žádnou koncovou (β-pozice) skupinu S02- nebo CO- skupinu.

Preferované zbytky B¹ jsou vodík, rovné nebo rozvětvené alkylové řetězce mající 1 až 10 atomů uhlíku, které mohou být případně přerušeny s 1 až 5 atomy kyslíku, a/nebo případně substituovány s 1 až 5 hydroxyskupinami, 1 až 2 skupinami

COOH, fenylovou skupinou případně substituovanou se skupinou COOH, benzylovou skupinou a/nebo 1 až 5 skupinami OR⁹, kde R⁹označuje vodíkový atom nebo alkylový zbytek mající 1 až 3 atomy uhlíku.

Preferované zbytky R^F jsou rovné nebo rozvětvené perfluorované alkylové zbytky vzorce C_nF_2nE, kde n je číslo 4 až 15 a E je koncový atom fluoru.

♦ ·

Příprava sloučeniny obecného vzorce lb podle tohoto vynálezu k-n-l-r^f (ib) A kde K je komplexující činidlo vzorce lib nebo kovový komplex obecného

způsobem:

(Hb)

Metoda A

Karboxylová kyselina vzorce Illb obsahuje již ekvivalent kovového iontu R¹.

Uvedená kyselina Illb případně aktivovaná in šitu s R¹ coby ekvivalentem kovového iontu se nechá kondenzovat s aminem IVb v kondenzační reakci za vzniku amidu lb.

Tento způsob výroby kovového komplexu amidu karboxylových kyselin je znám z DE 196 52 386.

Reakční směs používaná pro kondenzační reakce obsahuje směs kovového komplexu karboxylové kyseliny Illb, nesoucí případně • · ··· · karboxy- a/nebo hydroxyskupinu v ochráněné formě a alespoň jednu látku umožňující vznik roztoku v množství až 5 molárních ekvivalentů, s výhodou 0,5 až 2 molární ekvivalenty, vybranou tak aby kovový komplex karboxylové kyseliny mohl být uveden do předložených reagencií a izolován (např. odpařením, lyofilizací nebo sušením pomocí rozprašování vodného nebo s vodou nemísitelného roztoku složky nebo pomocí vyloučení přídavkem organického rozpouštědla do tohoto roztoku) a reagovat s činidlem štěpitelným s kondenzačním činidlem, popřípadě také s in sítu přídavkem látek umožňujících rozpuštění do suspenze kovového komplexu karboxylové kyseliny, vodou štěpitelného činidla a pžípadně kondenzačního činidla v DMSO.

konečně se nechá v DMSO s vodou a případně

Tímto postupem vzniklá reakční směs se nechá předreagovat (aktivizace kyselinou) po dobu 1 až 24, s výhodou 3 až 12 hod při teplotě od 0 °C do 50 °C, s výhodou při laboratorní teplotě.

Nakonec se přidá amin obecného vzorce IVb

R' 'n^/L^r^f

I

A (ivb) kde R³, L¹, R^F a A¹ mají stejný význam jako bylo uvedeno dříve, a to bez rozpouštědla nebo v rozpouštědle jako je např. dimethylsulfoxid, alkoholy jako třeba methanol, ethanol, isopropanol nebo jejich směsi, formamid, dimethylamid, voda nebo směsi uvedených rozpouštědel, s výhodou dimethylsulfoxid, voda nebo s vodou mísitelná rozpouštědla. Kvůli vzniku amidu se výše získaná reakční směs udržuje při teplotě od 0 °C do 70 °C, s výhodou od 30 °C do 60 °C, po dobu 1 až 48 hod, s výhodou 8 až 24 hod.

····

9

V jednom provedení se ukázalo jako výhodné, že se amin používá do reakce ve formě jeho soli, např. s kyselinou bromovodíkovou nebo jako hydrochlorid. Kvůli uvolnění aminu se přidává báze jako třeba triethylamin, diisopropylethylamin, N-methylmorfolin, pyridin, tripropylamin, tributylamin, hydroxid lithný, uhličitan lithný, hydroxid sodný nebo uhličitan sodný.

Chránící skupiny, které jsou případně ještě přítomny, se na závěr odštěpí.

Izolace reakčních produktů se provádí způsoby známými odborníkům v oboru, obzvláště pomocí vysrážení s organickým rozpouštědlem, s výhodou s acetonem,

2-butanonem, diethyletherem, kyselinou octovou, methyl-terč.butyletherem, isopropanolem nebo jejich směsmi. Další čištění může být provedeno např. pomocí chromatografie, krystalizaci nebo pomocí ultrafiltrace.

Jako látky umožňující rozpuštění jsou vhodné alkalické soli, soli alkalických zemin, trialkylamonné soli, tetraalkylamonné soli, močovina, N-hydroxyimid, hydroxyaryltriazol, substituované fenoly a soli heterocyklických aminů. Například jmenujme chlorid lithný, bromid lithný, jodid lithný, bromid sodný, jodid sodný, lithium-ethansulfonát, natriumlithium-p-toluensulfonát, natrium-pbromid draselný, jodid draselný, chlorid sodný, bromid hořečnatý, chlorid hořečnatý, jodid hořečnatý, tetraethylamonium-p-toluensulfonát, tetramethylamonium-ptoluensulfonát, pyridinium-p-toluensulfonát, triethylamoniump-toluensulfonát, 2-morfolinoethylsulfonová kyselina, 4nitrofenol, 3,5-dinitrofenol, 2,4-dichlorfenol, Nmethansulfonát, toluensulfonát, hydroxysukcinimid,

N-hydroxyftalimid, močovina, ·· ···♦

tetramethylmočovina, N-methylpyrrolidon, formamid stejně jako cyklické močoviny, kde pět nejdříve zmíněných patří mezi výhodné.

Jako vodou štěpitelné reakční činidlo slouží všechna činidla známá odborníkům v oboru. Jako příklad jmenujme karbodiimidy a oniové reakční činidla jako např. dicyklohexylkarbodiimid (DCCI), l-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)karbodíimidhydrochlorid (EDC), benzotriazol-1-yloxytris(dimethylamino)fosfonium-hexafluorfosfát (BOP) a 0-(benzotriazol-l-yl)1,1,3,3-tetramethyluroniumhexafluorfosfát (HBTU), s výhodou DCCI.

V literatuře jsou popsány například následující postupy: Aktivace kyarboxylových kyselin. Přehled v Houben-Weyl, Methoden der Organischen Chemie, díl ΎΖ/Ί, Georg Thieme Verlag Stuttgart,1974 (a J. Chem. Research (S) 1996, 302). Aktivace s karbodiimidy. R. Schwyzer a H. Kappeler, Helv. 46: 1550 (1963) .

E. Wúnsch et al., B.100: 173 (1967).

Aktivace s karbodiimidy/l-Hydroxysukcinimidem: J. Am. Chem. Soc. 86: 1839 (1964) stejně jako J. Org. Chem. 53: 3583 (1988). Synthesis 453 (1972).

Anhydridová metoda, 2-Ethoxy-1-ethoxykarbonyl-l,2dihydrochinolin:

B. Belteau et al. , J. Am. Chem. Soc., 90: 1651 (1986), H.

Kunz et al. , Int. J. Pept. Prot. Res., 26: 493 (1985) und J.

R. Voughn, Am. Soc. 73: 3547 (1951).

Imidazol idová metoda: B. F. Gisin, R. B. Menifield, D. C. Tosteon, Am. Soc. 91: 2691 (1969).

Metoda chloridu kyselin, thionylchlorid: Helv., 42: 1653 (1959) .

Oxalylchlorid: J. Org. Chem., 29: 843 (1964).

·· 444· «4 4444

4 ·

Jako případné pomocné látky pro použití v kondenzačních reakcích se používají všechny látky známé odborníkům v oboru (Houben-Weyl, Methoden der organischen Chemie, díl XV/2, Georg Thieme-Verlag, Stuttgart, 1974). Jako příklad mohou být uvedeny 4-nitrofenol, N-hydroxysukcinimid, 1-hydroxybenzotriazol, l-hydroxy-7-azabenzotriazol, 3,5-dinitrofenol a pentafluorfenol. Preferované jsou 4-nitrofenol a Nhydroxysukcinimid, obzvláště výhodné je prvně jmenované činidlo.

Odštěpení chránící skupiny se provádí pomocí postupů známých odborníkům v oboru, například hydrolýzou, hydrogenolýzou, alkalickým zmýdelněním esteru s bází ve vodné-alkoholickém roztoku při teplotě od 0 °C do 50 °C, kyselým zmýdelněním s minerální kyselinou nebo v případě např. terč.butylestrů s pomocí trifluoroctové kyseliny [Protective Groups in Organic Synthesis, 2. vydání, T. W. Greene a P.G.M. Wuts, John Wifey and Sons, lne. New York, 1991], v případě benzyletherů pomocí vodíku a paladia na uhlíku.

Příprava výchozích látek, Sloučenina vzorce Illb

COOR

COOR (Illb) je známa z DE 196 52 386. Aminy obecného vzorce IVb ·· fcfcfcfc ♦ · ·· » · < · · • · · · * · · · · · • · · · ·· ···· ·· fcfcfcfc

• · (XVb) jsou komerčně dostupné (Fluorchem, ABCR) nebo mohou být připraveny pomoci následujících postupů, kde se sloučenina obecného vzorce Vb nechá reagovat s aminem obecného vzorce VIb a na závěr se provádí redukce sloučeniny obecného vzorce

Vllb:

+ A + A R'

(Vb) (VIb) (Vllb) (IVb) kde

R^f, A¹, L¹ a R³ mají stejný význam jako bylo uvedeno výše a L' je skupina L¹, kde chybí a-CH₂ skupina a R9 je vodík nebo methylová skupina.

Podle výše uvedeného se karboxylová kyselina Illb aktivizuje podle postupů známých z literatury před reakcí s aminem VIb. V případě, že R^s je methylová skupina, provádí se aminolýza.

Sloučeniny obecného vzorce Vb jsou komerčně dostupné (Fluorochem, ABCR) nebo se připravují podle postupu v DE 196 03 033.

Sloučeniny vzorce VIb jsou komerčně dostupné (Fluorochem, ABCR) nebo mohou být připraveny podle známých postupů jako třeba Houben-Weyl, Methoden der Organischen Chemie, XI/2, Stickstoffverbindungen, Georg Thieme Verlag Stuttgart, 1957, str. 680, J. E. Rickman a T. Atkins, Am. Chem. Soc., 96:

*« ··*· ··

2268, 1974, 96: 2268, F. Chavez a A. D. Sherry, J. Org. Chem., 1989, 54: 2990:

Sloučeniny obecného vzorce IVb se připravují známým způsobem [Helv. Chim. Acta, 77: 23 (1994)] redukcí sloučenin obecného vzorce VII např. pomocí diboranu nebo lithium aluminium hydridem a odštěpením chránících skupin.

Metoda B.

Jako výchozí látky slouží karboxylové kyseliny vzorce IIIx kde R¹ je vodík, které neobsahují žádný ekvivalent kovového iontu R¹. Karboxylové skupiny byly známými postupy ochráněny za vzniku sloučeniny vzorce lily, kde R⁵ je libovolná chránící skupina a R⁵' je její prolátka.

(»lx> (lily)

Jako chránící skupiny karboxylové kyseliny připadají v úvahu např. rovné nebo rozvětvené alkyly mající 1 až 6 uhlíkových atomů, arylové a aralkylové skupiny, např. methyl, ethyl, propyl, butyl, fenyl, benzyl, difenylmethyl, trifenylmethyl, bis(p-nitrofenyl)ová skupina stejně jako trialkylsilylové skupiny. Preferována je terc-butylová skupina.

• · · · • ·

Reakce chráněné karboxylové kyseliny lily s aminem vzorce IVb a odštěpení chránících skupin se provádí stejně jako v postupu A a v následujícím kroku se nechá získaná karboxylová kyselina Ix reagovat s alespoň jedním oxidem kovu nebo kovovou solí prvku požadovaného atomového čísla jako je popsáno např. v DE 195 25 924.

Kovový komplex připravený metodou A nebo metodou B obsahuje volné skupiny -COOH, které se mohou vyskytovat jako soli fyziologicky přijatelných anorganických nebo organických bází.

Neutralizace případně přítomných volných karboxylových skupin se provádí s pomocí anorganických bází (např. hydroxidy, uhličitany nebo hydrogenuhličítany) např. sodíku, draslíku, lithia, hořčíku nebo vápníku a/nebo organických bází mezi jinými primární, sekundární a terciální aminy jako třeba ethanolamin, morfolin, glukamin, N-methyl- a N,Ndimethylglukamin, stejně jako bazické aminokyseliny, jako např. lysin, arginin, a ornithin nebo amidů původně neutrálních nebo kyselých minokyselin.

Podle tohoto vynálezu jsou obzvláště výhodné kovové komplexy V, VII, VIII, IX a X (viz Tabulka 1).

Tyto sloučeniny obecného vzorce Ib jsou velmi vhodné jako kontrastní činidla pro NMR zobrazování plaků.

V dalším preferovaném provedení tohoto vynálezu zahrnuje perfluoralkylové komplexy s cukernými zbytky obecného vzorce Ic • · · · • · w

(Y-R)p¹ (lc) kde

R je mono- nebo oligosacharidovy zbytek vázaný přes 1-OH nebo 1-SH pozici,

R^F je perfluorovaný, rovný nebo rozvětvený uhlovodíkový řetězec vzorce -C_nF_2nE, kde E představuje fluor, chlor, brom, jod, nebo vodíkový atom a n je celé číslo 4 až 30,

K je kovový komplex obecného vzorce líc,

ROOC

N-»-j— (llc) kde

R¹ je vodíkový atom nebo ekvivalent kovového iontu atomového čísla 23 až 29, 42 až 46 nebo 58 až 70, s tou podmínkou, že alespoň dva R¹ jsou ekvivalent iontu kovu,

R¹ a R³ jsou navzájem nezávisle vodík, alkyl mající 1 až 7 atomů uhlíku, benzylová skupina, fenylová skupina, skupina CH₂OH nebo skupina -CH₂OCH₃, a

U skupina -C₆H₄~0-CH₂-co, skupina - (CH₂) ι-₅-ω, fenylová skupina, skupina -CH₂-NHCO-CH₂-CH(CH₂COOH) -06Η₄-ω, skupina C₆H₄- (OCH₂CH₂) o-i-N (CH₂COOH) -CH₂-co, nebo alkylenová skupina mající 1 až 12 atomů uhlíku nebo skupina C₇-Ci₂-C₆H₄-O-, případně přerušené s jedním nebo více atomy kyslíku, 1 až 3 « · • · · · • ·

I skupinami -NHCO-, 1 až 3 skupinami -CO-NH- a/nebo substituované s 1 až 3 skupinami - (CH₂) 0-5COOH, kde ω je místo vázání na skupinu -CO-, nebo sloučeniny obecného vzorce IIIc

ROOC

kde R¹ má výše uvedený význam, R⁴ je vodík nebo ekvivalent kovového iontu uvedený v definici R¹ a U¹ je skupina -C₆H₄-OCH₂-ro-, kde ω je vazebné místo ke skupině -C0-, nebo sloučeniny obecného vzorce IVc

ROOC

(IVc) kde R¹ a R² mají výše uvedený význam, nebo sloučeniny obecného vzorce VcA nebo VcB

CO-**

COOR

R¹OOC n:

-COOR¹

-COOR¹ (VcA)

• · · · • « • · <· ·

kde R¹ má výše uvedený význam, (VcB) nebo obecného vzorce Víc

ROOC—\ —CO—wv

ROOC '^{N N}—COOR¹ (^Vlc) kde R¹ má výše uvedený význam, nebo sloučeniny obecného vzorce VIIc

ROOCROOCROOC— ROOCO (VHc) kde R¹ má výše uvedený význam,

U1 je skupina -C₆H₄-0-CH2-o-, kde ω je vazebné místo ke skupině -CO-, nebo sloučeniny obecného vzorce VIIIc

ROOC

H (VIIIc) kde R¹ má výše uvedený význam, a kde případně volné karboxylové skupiny ve zbytku K mohou být ve formě solí organických a/nebo anorganických bází nebo aminokyselin nebo amidů aminokyselin,

G v případě, že K je kovový komplex líc až VIIc, je alespoň třikrát funkcionalizovaný zbytek vybrán z následující skupiny obsahující zbytky a) až j)

a)

f<IH β

b)

c)

a

d) • · ···« * · · · · • ♦ · » · · •9 * · « , ···· «φ «φ

e)

-a

f)

NH -CO -C—(CHA-N 1 ^HNH i ,N-*T ž ‘ff

H

-CO-C—(CH^-N^-a NH β

g)

NH

NH-CO-CH-ÍCHjVNH^XN-CO-CH-(CH₂)4-NH-^a

NH

Ϊ

NH-CO-CH-(CH₂)₄-NH~*^ NH

h)

i) •(CHJ.

-S-CON NH

j) a^NH—CH —CO —^Y 4 β a

G když K je kovový komplex VIIlc, je alespoň trojnásobně funkcionalizovaný zbytek vybraný z následující skupiny obsahující k) a 1)

k) p^NH-(CH₂)4-C_H“CO-^a

NH i

Y

i) • ί» • · · A • ♦ · A · • * • A •AAA • · A • · « • · · · ·· AA o^CO-CH^CH-CHr-CO-^Y I ²NH

I ř

kde α označuje vazebné místo G ke komplexu, β označuje vazebné místo G ke zbytku Y a γ označuje vazebné místo G ke zbytku Z.

Y je skupina -CH₂-, skupina δ-(CH₂) i-sCO-β, δ-ΟΗ₂-<ΖΉΟΗ-ΟΟ-β, nebo skupina δ-CH (CHOH-CH₂OH) -CHOH-CHOH-CO-β, kde δ označuje vazebné místo k cukernému zbytku R a β je vazebné místo ke zbytku G,

Z je

Y—^N-SO₂-£

Y-COCH₂-N(C₂H₅)-SO₂-e,

Y-COCH2-O-(CH₂)2SO2-e,

O ^N-SQ-£ nebo γ - NHCH₂CH₂ - 0 - CH₂CH₂ -ε kde γ je místo připojení Z ke zbytku G a ε místo připojení Z k polyfluorovanému zbytku R^Fa l¹, m¹ jsou nezávisle na sobě celá čísla 1 nebo 2 p¹ je celé číslo 1 až 4.

• 4 4 4

4 *

Sloučeniny podle tohoto vynálezu jsou určené pro použití jako NMR diagnostika, kovový iont signálové skupiny tedy musí být paramagnetický. Takové ionty jsou obzvláště dvojmocné a trojmocné ionty prvků atomových čísel 23 až 29, 42 až 46 a 58 až 70. Vhodnými ionty jsou například chromítý, železnatý, kobaltnatý, nikelnatý, měďnatý, praseodymitý, neodymitý, samaritý a yterbitý. Kvůli jejich silnému magnetickému momentu jsou obzvláště vhodné ionty gadolinitý, terbitý, dysprositý, holmitý, erbitý, železitý a manganatý ion.

Kyselé vodíkové atomy případně se vyskytující v Rl, to znamená takové, které nemohou být substituovány centrálním iontem, se mohou případně částečně nebo zcela vyskytovat ve formě solí s kationty anorganických a/nebo organických bází nebo aminokyselin nebo amidů aminokyselin.

Vhodnými anorganickými kationty je např. lithný iont, draselný iont, vápenatý iont, a obzvláště sodný iont. Vhodné kationty organických bází jsou mimo jiné kationty odvozené od primárních, sekundárních nebo terciálních aminů, jako třeba ethanolamin, diethanolamin, morfolin, glukamin, N,Ndimethylglukamin a obzvláště N-methylglukamin. Vhodné kationty aminokyselin jsou obzvláště lysin, arginin a ornithin stejně jako amidy původně kyselých nebo neutrálních aminokyselin.

Obzvláště výhodné sloučeniny obecného vzorce Ic jsou takové, které mají makrocyklus K obecného vzorce líc.

Zbytek U v kovovém komplexu K je s výhodou skupina -CH₂- nebo skupina C₆H₄-0-CH₂-o, kde ω je vazebné místo ke skupině -CO-.

Alkylové skupiny R² a R³ v makrocyklu obecného vzorce líc mohou být rovné nebo rozvětvené. Jako příklad mohou být uvedeny methyl, ethyl, propyl, isopropyl, n-butyl, lmethylpropyl, 2-methylpropyl, n-pentyl, 1-methylbutyl, 2methylbutyl, 3-methylbutyl, 1,2-dimethylpropyl. S výhodou jsou R² a R³ navzájem nezávisle vodík nebo alkyl mající 1 až 4 atomy uhlíku. V jednom obzvláště preferovaném provedení tohoto vynálezu je R² methyl a R³ je vodík.

Benzylová nebo fenylová skupina R² nebo R³ v makrocyklu K obecného vzorce líc mohou být také substituovány na jádře.

Zbytek R v obecném vzorci Ic označuje mono- nebo oligosacharidový zbytek nebo zbytek thiocukru, které jsou vázané přes 1-OH- nebo 1-SH- pozici, přičemž mohou být podle tohoto vynálezu také nahrazeny desoxycukry, a které obsahují jednu nebo více OH skupin obsahujících vodíkový atom. V preferovaném provedení tohoto vynálezu R je monosacharidový zbytek s 5 nebo 6 atomy uhlíku, s výhodou glukosa, manosa, galaktosa, ribosa, arabinosa nebo xylosa, nebo jejich desoxycukry jako třeba 6-desoxygalaktosa (fukosa) nebo 6desoxymannosa (rhamnosa) nebo jejich thiocukry, přičemž glukosa, mannosa a galaktosa jsou obzvláště výhodné.

Sloučeniny obecného vzorce Ic podle tohoto vynálezu jsou výhodné, když R^F je skupina -C_nF_2n+i, kde n je s výhodou číslo od 4 do 15. Obzvláště výhodné jsou zbytky -C₄F₉, -C₆Fi_3/

CsFi7z -Ci₂F₂₅ a -Ci₄F₂₉ stejně jako zbytky sloučenin uvedených v příkladech provedení.

Nejméně třikrát funkcionalizovaný zbytek Ic, představující „molekulární lešení, provedení tohoto vynálezu lysinový zbytek

G v obecném vzorci je v preferovaném (a) nebo (b).

Y a Z jsou spojky uvedené v obecném vzorci Ic, kde s výhodou navzájem nezávisle Z je zbytek

7—Νζ_/N-SO₂-£ a Y je zbytek δ-<ΖΉ₂ΟΟ-β.

Perfluoralkylové kovové komplexy obsahující zukerné zbytky obecného vzorce Ic <K),¹-G - (Z-R^F)_m’

I (Ic) (Y-R)p’ kde K je kovový komplex obecného vzorce líc až VIIc a G má význam vzorců a) až j), kde Y, Z, R, R^F, m¹, p¹ a I¹ mají stejný význam jako bylo uvedeno výše, se připravují tak, že se známým způsobem karboxylové kyselina obecného vzorce Iíi

COOR⁵

R 00C

n-u^oh (Hi) kde R⁵ je ekvivalent iontu kovu atomového čísla 23 až 29, 42 až 46 nebo 58 až 70, nebo označuje chránící skupinu karboxylu a R², R³ a U mají výše uvedený význam • · ···· nebo karboxylové kyselina obecného vzorce lili

COOR⁵

R^SOOC

(HH) kde R⁴, R⁵ a U maj i uvedený význam nebo karboxylové kyselina obecného vzorce IVi

R 00C

OH (IVi) kde R⁵ a R² maj £ uvedený význam nebo karboxylové kyselina obecného vzorce Vi nebo Vii

X^_Ki^~CO“OH ζ '—COOR⁵ r⁵ooc^7ⁿ \ Kj-COOR⁵COOR⁵ x^COORf Z —coor⁵

N

HOOC / \ _Mx~COOR⁵

COOR⁵ (Vi) (Vii) kde R⁵ má uvedený význam nebo karboxylové kyselina obecného vzorce Vli

R^SOOCR^SOOC:n n:

-co-oh

-coor⁵ (^v,i)

«.

·· 9999 • fc •fcfc * · • · fc • · · ♦ · · · ♦ · fcfc

kde R⁵ má uvedený význam nebo karboxylové kyselina obecného vzorce Vili r⁵ooc r⁵ooc r⁵ooc r⁵ooc kde R^s a U¹ mají uvedený význam, v případně aktivované formě se nechá reagovat s aminem obecného vzorce IXc

H - G - (Z-R^F)_m ¹

I (IXc) (Y-R)p¹ kde G má význam vzorců a) až j) a R, R^F, Y, Z, m¹ a p¹ mají výše uvedený význam, kondenzační reakcí a po případném následném odštěpení vyskytujících se chránících skupin, vzniká kovový komplex obecného vzorce Ic, nebo když R⁵ je chránící skupina, po odštěpení této chránící skupiny se nechá reagovat známým způsobem s alespoň jedním oxidem kovu nebo kovovou solí prvků atomového čísla 23 až 29, 42 až 46 nebo 58 až 70 a na závěr podle potřeby se kyselé vodíkové atomy substituují kationty anorganických a/nebo organických bází, aminokyselin nebo amidů aminokyselin.

Sloučeniny obecného vzorce Ic podle tohoto vynálezu, kde K je kovový komplex obecného vzorce VIIIc a G má význam vzorců k)

• · • · *♦·· • · · * ♦ <

·* ♦ ·· ··· • ♦ : : * • · · ♦ · ·· ·· ♦· nebo 1) se připravují tak, že se amin obecného vzorce Vlili

R OOC

_N-^h

H (Vlili) kde R5 ie ekvivalent iontu kovu atomového čísla až 29, 42 až 46 nebo 58 až 70 nebo karboxylová chránící skupina nechá známým postupem reagovat s případně aktivovanou karboxylovou skupinou obecného vzorce Xc

HO - G - (Z-R^F)_m' ¹ (Xo) (Y-R)_p’ kde G má význam vzorců k) nebo 1) a R, RF, Y, Z, ml a pl mají výše uvedený význam, kondenzační reakcí a po případném odštěpení vyskytujících se chránících skupin vzniká kovový komplex obecného vzorce lc nebo když R⁵ je chránící skupina, po odštěpení této chránící skupiny se nechá reagovat známým způsobem s alespoň jedním oxidem kovu nebo kovovou solí prvků atomového čísla 23 až 29, 42 až 46 nebo 58 až 70 a na závěr podle potřeby se kyselé vodíkové atomy substituují kationty anorganických a/nebo organických bází, aminokyselin nebo amidů aminokyselin.

Uvedené karboxylové kyseliny obecného vzorce Iii až buď známé sloučeniny nebo se připraví postupy v příkladech provedení. Příprava karboxylové obecného vzorce Iii je známa z DE 196 52 3 86.

Vili jsou popsanými kyseliny Příprava

999

9 • 4 4· karboxylové kyseliny obecného vzorce IVi je možná podle popisu v DE 197 28 954.

Výchozí látkou pro sloučeniny obecného vzorce VcA je N³-(2,6dioxomorfolinoethyl) -N⁶- (ethoxykarbonylmethyl) -3,6-diazaoktandiová kyselina, která je popsána v EP 263 059.

Sloučeniny obecného vzorce VcB jsou odvozené od izomeru diethylentriamin-pentaoctové kyseliny, který je vázaný přes octovou kyselinu na středním atomu dusíku. Tato DTPA je popsána v patentu DE 195 07 819 a DE 195 08 058.

Sloučeniny obecného vzorce Víc jsou odvozeny od N(karboxymethyl)-N-[2-(2,6-dioxo-4-morfolinyl)ethyl]glycinu, jehož příprava je popsána v J. Am. Oil. Chem. Soc. (1982), 59 (2), 104-107.

Sloučeniny obecného vzorce Vile jsou odvozeny od 1-(4karboxymethoxybenzyl)-ethylendiamin-tetraoctové kyseliny, která je popsána v US 4,622,420.

Perbenzylované zukerné kyseliny používané jako výchozí sloučeniny mohou být připraveny analogicky podle Lockhoff, Angew. Chem. 1998, 110, č. 24, str. 3634. Tak byla provedena např. syntéza 1-O-octové kyseliny perbenzylované glukosy přes dvě látky, a to přes trichloracetamidát a reakcí s ethylesterem hydroxyoctové kyseliny za katalýzy s BF₃ v THF a závěrečným zmýdelněním s NaOH ve směsi methanol-THF.

V preferovaném způsobu provedení tohoto vynálezu se používá jako výchozí látka zmíněná perbenzylované cukerná kyselina, kde se perbenzylovaný 1-OH-cukr rozpustí v rozpouštědle

•	39	·· ···· • ♦ · • · · • · · ·· ·	·· ·· • · · · · • · · · • ; · · * · • · · ·
nemísitelném s vodou a nechá se	reagovat s	alkylačním
činidlem	obecného vzorce XIc
	Nu-L-COO-Sg	(XIc)
kde Nu	je odstupující skupina, L	je skupina	- (CH₂) (1-5) ,
skupina	-CH₂-CHOH-, skupina -CH(CHOH-	-CH₂OH)-CHOH-CHOH- a Sg

·♦ ·♦ je chránící skupina, v přítomnosti báze a případně katalyzátoru fázového přenosu. Jako odstupující skupina může být v alkylačním činidlu obecného vzorce XIc například použit zbytek -Cl, -Br, -J, OTs, -OMs, -OSO₂CF₃, -OSO2C4H9 nebo -OS0₂C₈Fi₇ .

Jako chránící skupina se používají obvyklé chránící skupiny, známé odborníkům v oboru (Protective Groups in Organic Synthesis, 2. vydání, T. W. Greene a P. G. M. Wuts, John Wiley & Sons lne., New York 1991).

Substituce podle tohoto vynálezu se provádí při teplotě od 0 do 50 °C, s výhodou při teplotě od 0 °C do pokojové teploty. Reakční čas je od 10 minut do 24 hod, s výhodou od 2 0 minut do 12 hod.

Báze se používá buď v tuhé formě, s výhodou rozemletá na prášek, nebo jako 10% až 70%, s výhodou 30% až 50% vodný roztok. Jako preferované báze jsou NaOH a KOH.

Jako organické rozpouštědlo nemísitelné s vodou mohou být při alkylací podle tohoto vynálezu použity toluen, benzen, CF₃benzen, hexan, cyklohexan, diethylether, tetrahydrofuran, dichlormethan, MTB nebo jejich směsi.

Jako katalyzátory fázového přenosu se ve způsobu výroby podle tohoto vynálezu používají známé kvartérní amonniové a fosfoniové soli nebo crownethery jako třeba [15]-crown-5 nebo [18]-crown-6. S výhodou se používají kvarterní amoniové soli ·· ··»· se čtyřmi stejnými nebo rozdílnými uhlovodíkovými skupinami v kationtu, vybrané ze skupiny obsahující methyl, ethyl, propyi, isopropyl, butyl nebo isobutyl. Uhlovodíkové skupiny na kationtu musí být dostatečně veliké, aby zaručovaly dobrou rozpustnost alkylačního činidla v organickém rozpouštědle. Obzvláště výhodné podle tohoto vynálezu jsou N(Butyl)₄ ⁺Cl‘, N (butyl) 4⁺HSO4', ale také N (methyl) ₄ ⁺ď .

Obzvláště výhodné sloučeniny vzorce lc podle tohoto vynálezu jsou kovové komplexy XV z Tabulky 1 (příklad 1).

V dalším preferovaném provedení tohoto vynálezu se používají perfluoralkylové kovové komplexy s polárními zbytky obecného vzorce Id (K),’-G - <Z-R^F)_m’

I (Id) (R)p² kde

R^f je perfluorovaný, rovný nebo rozvětvený uhlovodíkový řetězec vzorce -CnF2nE, kde E je koncový fluor, chlor, brom, jod nebo vodíkový atom a n je číslo od 4 do 30,

K je kovový komplex obecného vzorce lid

ROOC

R³

Ň-

Old) kde ·· .... ,.

ί ! · · · · .

Ji.· · » ·

Ji! ··· ·.

..· ; · · · ·· ...

» .

• ti ti • « • titi • ti titi • ti titi

R¹ je vodíkový atom nebo ekvivalent kovového iontu atomového čísla 23 až 29, 42 až 46 nebo 58 až 70,

U skupina -C₆H₄-O-CH₂-a>, skupina - (CH₂) ι_₅-ω, fenylová skupina, skupina -CH₂-NHCO-CH₂-CH (CH₂COOH)-C₆H₄-a>, skupina C₆H₄-(OCH₂CH₂) o-i-N (CH₂COOH) -CH₂-o, nebo alkylenová skupina mající 1 až 12 atomů uhlíku nebo skupina C₇-Ci₂-C₆H₄-O-, případně přerušené s jedním nebo více atomy kyslíku, 1 až 3 skupinami -NHCO-, 1 až 3 skupinami -CO-NH- a/nebo substituované s 1 až 3 skupinami - (CH₂) ₀-₅COOH, kde ω je místo vázání na skupinu -CO-, nebo obecného vzorce IIId

COOR¹ coor⁴ Q

ROOC'

COOR¹ (llld) kde R¹ má výše uvedený význam, R⁴ je vodík nebo ekvivalent iontu kovu uvedený pod R¹ a U¹ je skupina -C_sH₄-0-CH₂-co-, kde ω je vazebné místo ke skupině -COnebo obecného vzorce IVd *« ·· • · 4 0 * • · · · • · e φ φ • · · · ·· »··· ·· ·<·· • « • · • · • · · ·* ··

(IVd) kde R¹ a R² mají výše uvedený význam, nebo obecného vzorce VdA nebo VdB /^_N^-CO-v / '-COOR¹

R¹OOC / \ _n^coor¹ ^-COOR¹ (VdA)

-COOR¹

^..x-COOR¹Z ^^-COOR¹ (VdB) kde R¹ má výše uvedený význam, nebo obecného vzorce Vid

ROOC

CO—

COOR¹ (Vid) kde R¹ má výše uvedený význam, nebo obecného vzorce Vild

ROOCR¹OOCROOCROOC:n :n

(Vild) • · · · kde R¹ má výše uvedený význam a

U1 je skupina -C₆H₄-O-CH₂-w-, kde w je vazebné místo ke skupině —CO-, a kyselé skupiny vyskytující se případně ve zbytku K mohou být přítomny ve formě solí organických a/nebo anorganických bází nebo aminokyselin nebo amidů aminokyselin,

G je alespoň třikrát funkcionalizovaný zbytek vybraný z následujících zbytků a) až g)

a)

rilH β

b)

α

c)

d) • ·

f)

g)

h)

β

(CH₂)₄-C-NČ0^H

Y

CO-C—(CHJ^-N NH

I

• · · · γ -co-(CH₂)₂.₃-ch-co-^3

NH

I α

i) β -A* CO-(CH₂)₂.₃-CH-CO-^,y NH kde a označuje vazebné místo G ke komplexu K, β označuje vazebné místo G ke zbytku R a γ označuje vazebné místo G ke zbytku Z

Z je

Y—^N-SO₂-£

Y-C(O)CH₂O(CH₂)2-e, kde γ označuje vazebné místo Z ke zbytku G a ε označuje vazebné místo Z k perfluoralkylovému zbytku R^FR je polární zbytek vybraný z komplexu K obecného vzorce lid až Vild, kde R¹ je vodíkový atom nebo ekvivalent iontu kovu atomového čísla 20, 23 až 29, 42 až 46 nebo 58 až 70, a zbytky R², R³, R⁴, U a U¹ mají výše uvedený význam nebo zbytek kyseliny listové nebo uhlovodíkový řetězec mající 2 až 30 uhlíkových atomů, rovný nebo rozvětvený, nasycený nebo nenasycený, vázaný ke zbytku G prostřednictvím skupiny -CO-, -SO₂- nebo přímo, • » ·· ··· · případně přerušený s 1 až 10 kyslíkovými atomy, 1 až 5 skupinami NHC0-, 1 až 5 skupinami -CONH-, 1 až 2 atomy síry, až 5 -NH- skupinami nebo 1 až 2 fenylovými skupinami, které mohou být případně substituovány s 1 až 2 OH skupinami, 1 až

NH₂ skupinami, 1 až 2 -COOH skupinami nebo 1 až 2 -SO₃H skupinami nebo l¹, m¹, p² jsou navzájem nezávisle celá čísla 1 nebo 2.

Sloučeniny podle tohoto vynálezu jsou určené pro použití jako NMR diagnostika, kovový iont signálové skupiny tedy musí být paramagnetický. Takové ionty jsou obzvláště dvojmocné a trojmocné ionty prvků atomových čísel 23 až 29, 42 až 46 a 58 až 70. Vhodnými ionty jsou například chromítý, železnatý, kobaltnatý, nikelnatý, meďnatý, praseodymitý, neodymitý, samaritý a yterbitý. Kvůli jejich silnému magnetickému momentu jsou obzvláště vhodné ionty gadolinitý, terbitý, dysprositý, holmitý, erbitý, železítý a manganatý ion.

Obzvláště vhodné jsou manganatý, železnatý, praseodymitý, neodymitý, samaritý, gadolinitý a ion, obzvláště dysprositý iont.

železitý, ytterbitý

Kyselé vodíkové atomy případně se vyskytující v R¹, to znamená takové, které nemohou být substituovány centrálním iontem, se mohou případně částečně nebo zcela vyskytovat ve formě solí s kationty anorganických a/nebo organických bází nebo aminokyselin nebo amidů aminokyselin.

Vhodnými anorganickými kationty je např. lithný iont, draselný iont, vápenatý iont, a obzvláště sodný iont. Vhodné kationty organických bází jsou mimo jiné kationty odvozené od • · primárních, sekundárních nebo terciálních aminů, jako třeba ethanolamin, diethanolamin, morfolin, glukamin, N,Ndimethylglukamin a obzvláště N-methylglukamin. Vhodné kationty aminokyselin jsou obzvláště lysin, arginin a ornithin stejně jako amidy původně kyselých nebo neutrálních aminokyselin.

Obzvláště výhodné sloučeniny obecného vzorce Id jsou takové, které mají makrocyklus K obecného vzorce lid, IIId, VdB nebo Vild.

Zbytek U v kovovém komplexu K je s výhodou skupina -CH₂- nebo skupina C₆H₄-O-CH₂-ro, kde ω je vazebné místo ke skupině -CO-.

Alkylové skupiny R² a R³ v makrocyklu obecného vzorce líc mohou být rovné nebo rozvětvené. Jako příklad mohou být uvedeny methyl, ethyl, propyl, isopropyl, n-butyl, 1methylpropyl, 2-methylpropyl, n-pentyl, 1-methylbutyl, 2methylbutyl, 3-methylbutyl, 1,2-dimethylpropyl. S výhodou jsou R² a R³ navzájem nezávisle vodík nebo alkyl mající 1 až 4 atomy uhlíku.

V obzvláště preferovaném provedení tohoto vynálezu je R²methyl a R³ je vodík.

Benzylová skupina nebo fenylová skupina R² nebo R³v makrocyklu K obecného vzorce lid může být také na kruhu substituována.

Polární zbytek R v obecném vzorci Id je obzvláště výhodné provedení komplexu K, který může být mimo jiné Gd³⁺ nebo Mn²⁺komplex stejně jako Ca²⁺. Obzvláště výhodné jako polární

zbytky R jsou komplexy K obecného vzorce lid, Illd, VdA nebo Vild. Obzvláště výhodné jsou takové, kde jsou jako R¹ekvivalenty iontu kovu atomového čísla 20, 25, 39 nebo 64.

V dalším výhodném provedení tohoto vynálezu má skupina R následující význam:

-C (0) CH₂CH₂SO₃H

-C (0) CH₂OCH₂CH₂OCH₂CH₂OH

-C(O)CH₂OCH₂CH₂OH

-C (O) CH₂OCH₂CH (OH) CH₂0H

-C(0)CH₂NH-C(0)ch₂cooh

-C (O) CH₂CH (OH) ch₂oh

-c (O) ch₂och₂cooh

-so₂ch₂ch₂cooh

-C (0)-C₆H₃-(m-COOH) ₂

-C (0) CH₂0 (CH₂) 2-C₆H₃- (m-COOH) ₂

-C (0) CH₂O-C₅H₄-m-SO₃H

-C (0) CH₂NHC (0) CH₂NHC (0) CH₂OCH₂COOH

-C (O) CH₂OCH₂CH₂OCH₂COOH

-C (0) CH₂OCH₂CH (OH) CH₂O-CH₂CH₂OH

-C (0) CH₂OCH₂CH (OH) CH₂O-CH₂CH (OH) -CH₂0H

-C(O)CH₂SO₃H

-C (0) CH₂CH₂COOH

-C (0) CH (OH) CH (OH) CH₂OH

-C(O)CH₂O[(CH₂)₂Oh-₉-CH₃

-C(O)CH₂O[(CH₂)₂O]i.₉-H

-C(O)CH₂OCH(CH₂OH)₂

-C (0) CH₂OCH (CH₂OCH₂COOH) 2

-C (0) -C₆H₃- (m-0CH₂C00H) ₂

-c (0) -ch₂o- (ch₂) ₂0 (ch₂) ₂o- (ch₂) ₂o (ch₂) ₂och₃s výhodou -C(O)CH₂O[(CH₂)₂O]₄-CH₃.

• 0 · ·

0 • 0 0 0 0 0 0 • 0 0 0 0 0

V dalším preferovaném provedení označuje zbytek R zbytek kyseliny listové.

Sloučeniny obecného vzorce Id podle tohoto vynálezu jsou výhodné, když R^F je skupina -C_nF_2n+1, kde n je s výhodou číslo od 4 do 15. Obzvláště výhodné jsou zbytky -C4F9, -C₆Fi₃,

CeFi7, -Ci₂F₂5 a -Ci₄F₂9.

Minimálně třikrát funcionalizovaný zbytek G v obecném vzorci Id, představující „molekulární lešení” je v preferovaném provedení vynálezu lysinový zbytek (a) nebo (b).

Z označuje spojku uvedenou v obecném vzorci Id, kde je preferován zbytek y—^N-SO₂-£

Perfluoralkylové komplexy kovů s polárními skupinami obecného vzorce Id (K),’-G-(Z-R^f)„¹ ¹ (Id) (R)p² kde K, G, R, Z, připravují tak,

Ilk

R^f, l¹, m¹ a P² mají výše uvedený význam, se že se karboxylové kyselina obecného vzorce ·· ····

kde R⁵ je ekvivalent iontu kovu atomového čísla 23 až 29, 42 až 46 nebo 58 až 70 nebo chránící skupina karboxylu a R², R³a U maj £ výše uvedený význam nebo karboxylová kyselina obecného vzorce Illk

(lllk) kde R⁴, R⁵ a U¹ mají výše uvedený význam nebo karboxylová kyselina obecného vzorce IVk

kde R⁵ a R² maj í výše uvedený význam nebo karboxylová kyselina obecného vzorce Vk nebo Vm • · ·· ···· • · ··· ·

HOOC

COOR⁵'-COOR⁵

COOR®

COOR⁵ (Vk) (Vm) kde R⁵ má výše uvedený význam nebo karboxylová kyselina obecného vzorce Vlk

R^SOOC

CO-OH

COOR⁵ (Vlk) kde R⁵ má výše uvedený význam nebo karboxylová kyselina obecného vzorce VIIk

R^SOOCR^SOOCR^SOOCR^SOOC:n :n

o

JI iK^OH (Vllk) kde R⁵ a U¹ má výše uvedený význam, případně v aktivované formě, se nechá známým způsobem reagovat s aminem obecného vzorce VIIId

H -G - (Z-RV | (Vllld) (R)p^S kde G, R, Z, R^F, m¹ a p¹ mají výše uvedený význam, kondenzační reakcí a po případném následném odštěpení vyskytujících se chránících skupin, vzniká kovový komplex obecného vzorce Id, nebo • · · · · • · · · ·· ··· když R⁵ je chránící skupina, po odštěpení této chránící skupiny se nechá reagovat známým způsobem s alespoň jedním oxidem kovu nebo kovovou solí prvků atomového čísla 23 až 29, 42 až 46 nebo 58 až 70 a na závěr podle potřeby se kyselé vodíkové atomy substituují kationty anorganických a/nebo organických bází, aminokyselin nebo amidů aminokyselin.

Uvedené karboxylové kyseliny obecného vzorce Ilk až VIIk jsou buď známé sloučeniny nebo mohou být připraveny postupy uvedenými v příkladech provedení. Příprava karboxylových kyselin obecného vzorce Ilk je známa v DE 196 52 386.

Příprava karboxylových kyselin obecného vzorce IVk je popsána v DE 197 28 954.

Prolátky sloučenin obecného vzorce VdA je N³-(2,6dioxomorfolinoethyl) -N⁶- (ethoxykarbonylmethyl) -3,6-diazaoktandiová kyselina, která je popsána v EP 263 059.

Sloučeniny obecného vzorce VdB jsou odvozené od izomeru diethylentriamin-pentaoctové kyseliny, který je vázaný přes octovou kyselinu na středním atomu dusíku. Tato DTPA je popsána v patentu DE 195 07 819 a DE 195 08 058.

Sloučeniny obecného vzorce Vid jsou odvozeny od N(karboxymethyl)-N-[2-(2,6-dioxo-4-morfolinyl)ethyl]glycinu, jehož příprava je popsána v J. Am. Oil. Chem. Soc. (1982), 59 (2), 104-107.

Sloučeniny obecného vzorce Vild jsou odvozeny od 1-(4karboxymethoxybenzyl)-ethylendiamin-tetraoctové kyseliny, která je popsána v US 4,622,420.

·· ·«·· • 4) ····

Jako obzvláště výhodná sloučenina obecného vzorce Id podle tohoto vynálezu se používá kovový komplex XVI z Tabulky 1.

V dalším preferovaném provedení tohoto vynálezu mohou být použity galenické přípravky, obsahující paramagnetické a diamagnetické perfluoralkylované látky. S výhodou jsou tyto paramagnetické a diamagnetické látky dostupné ve vodném rozpouštědle.

Jako paramagnetické perfluoralkylované sloučeniny v přípravcích podle tohoto vynálezu mohou být použity všechny výše popsané kovové komplexy obecného vzorce I, la, Ib, Ic a/nebo Id.

Diamagnetické perfluoralkylované sloučeniny jsou takové sloučeniny obecného vzorce XX:

R^F-L²-B² (XX) kde R^f je rovný nebo rozvětvený perfluoralkylový zbytek se 4 až 3 0 uhlíkovými atomy, L² je spojka a B² je hydrofilní skupina. Spojka L² je přímé spojení, skupina -SO2- nebo rovný nebo rozvětvený uhlovodíkový řetězec až s 20 uhlíkovými atomy, které mohou být substituovány s jednou nebo více skupinami -OH, -COO-, -SO3- a/nebo obsahující jednu nebo více skupin -0-, -S-, -C0-, -C0NH-, -NHCO-, -CONR⁹-, -NR⁹CO-, -SO2, -PO₄‘-, -NH-, -NR⁹-, arylový kruh nebo piperazin, kde R⁹ je alkylový zbytek mající 1 až 20 uhlíkových atomů, který může obsahovat jeden nebo více 0 atomů a/nebo může být substituovaný se skupinou -COO- nebo skupinou -SO₃.

Hydrofilní skupina B² je mono- nebo disacharid, blízká skupina -COO' nebo skupina -SO₃'-, dokarboxylová kyselin, isoftalová kyselina, pikolinová kyselina, benzensulfonová ·· ··«· ·· ··· ·

kyselina, tetrahydropyrandikarboxylová kyselina, 2,6pyridindikarboxylová kyselina, kvartérní amoniová skupina, aminopolykarboxylová kyselina, aminodipolyethylenglykolsulfonová kyselina, aminopolyethylnglykolová skupina, skupina S0₂-(CH₂) 2-OH-, polyhydroxyalkylenový řetězec s minimálně dvěmi hydroxyskupinami nebo jeden nebo více polyethylenglykolových řetězců s alespoň dvěma glykolovými jednotkami, kde polyethylenglykolový řetězec je ukončen skupinou -OH nebo skupinou OCH₃. Takovéto sloučeniny jsou již částečně známé, částečně byly tyto sloučeniny nově syntetizovány za účelem výroby přípravků podle tohoto vynálezu. Známé perfluoralkylové látky a jejich přípravy jsou popsány v následujících publikacích:

J. G. Riess, Journal of Drug Targeting,	1994,	Vol.	2,	str.
455-468;
J. B. Nivet et al., Eur. J. Med. Chem.,	1991,	Vol.	26,	str
953-960;
M.-P. Krafft et al., Angew. Chem., 1994,	Vol.	106,	č.	10,

str. 1146-1148;

M. Lanier et al., Tetrahedron Letters, 1995, Vol. 36, č. 14, str. 2491-2492;

F. Guillod et al., Carbohydrate Research,1994, Vol. 261, str. 37-55;

S. Achilefu et al., Journal of Fluorine Chemistry, 1995, Vol. 70, str. 19-26;

L. Clary et al., Tetrahedron, 1995, Vol. 51, č. 47, str. 13073-13088;

F. Szoni et al., Journal of Fluorine Chemistry, 1989, Vol. 42, str. 59-68;

H. Wu et al., Supramolecular Chemistry,1994, Vol. 3, str. 175-180;

•9 9999

F. Guileri et al., Angew. Chem. 1994, Vol. 106, č.14, str. 1583-1585;

M.-P. Krafft et al., Eur. J. Med. Chem., 1991, Vol. 26, str. 545-550;

J. Greiner et al., Journal of Fluorine Chemistry, 1992, Vol. 56, str. 285-293;

A. Mílius et al., Carbohydrate Research,1992, Vol. 229, str. 323-336;

J. Riess et al., Colloids and Surfaces A, 1994, Vol. 84, str. 33-48;

G. Merhi et al., J. Med. Chem., 1996, Vol. 39, str. 44834488;

V. Cirkva et al., Jounal of Fluorine Chemistry, 1997, Vol.

83, str. 151-158;

A. Ould Amanetoullah et al., Journal of Fluorine Chemistry, 1997, Vol. 84, Str. 149-153;

J. Chen et al., Inorg. Chem., 1996, Vol. 35, str. 1590-161;

L. Clary et al., Tetrahedron Letters, 1995, Vol. 36, č. 4, Str. 539-542;

MM. Chaabouni et al., Journal of Fluorine Chemistry, 1990, Vol. 46, str. 307315;

A. Mitius et al., New J. Chem., 1991, Vol. 15, str.337-344;

M. -P. Krafft et al., New J. Chem.,1990, Vol. 14, str. 8698 75;

J: B. Nivet et al., New J. Chem., 1994, Vol. 18, str. 861869;

C. Santaella et al., New	J.	Chem., 1991,	Vol.	15, str.685-
692;
C. Santaella et al., New	J.	Chem., 1992,	Vol.	16, str. 399-
4 04;
A. Mílius et al., New J.	Chem., 1992, Vol	. 16,	str. 771-773;

«· ·« ♦ · · · · · • · · · · ·· ····

F. Szónyi et al., Journal of Fluorine Chemistry, 1991, Vol. 55, str. 85-92;

C. Santaella et al., Angew. Chem., 1991, Vol. 103, č. 5, str. 584-586;

M.-P. Krafft et al., Angew. Chem., 1993, Vol. 105, č. 5, str. 783-785; EP 0 548 096 B1.

Příprava nových perfluoralkylových sloučenin sleduje analogicky literární přípravu výše uvedených známých sloučenin a je popsána v Příkladech provedení. Jedná se o sloučeniny obecného vzorce XXI í^-X¹ (XXI) kde R^F je rovný nebo rozvětvený perfluoralkylový zbytek mající 4 až 3 0 uhlíkových atomů a X¹ je zbytek vybraný ze skupiny obsahující následující substituenty (n je číslo od 1 do 10):

fcfc ···· ·· rf··

·· ···· • · · ·· · • 44

4444

4 4 • 4 4 • 4 9 4

49

OH • · ···· ·· ·· ·· • · · ·

COO· ta ·

Preferované diamagnetické perfluoralkylované látky jsou takové, které mají monosacharíd jako hydrofilní skupinu B². Obzvláště preferované diamagnetické perfluoralkylové sloučeniny obsahují perfluoralkylový zbytek R_f mající 6 až 12 uhlíkových atomů, spojku L², kde L² je skupina -SO₂- nebo rovný nebo rozvětvený uhlovodíkový řetězec mající až 20 atomů uhlíku, který může obsahovat jednu nebo více skupin -0-, -C0, -CONH-, -NHCO-, -CONR-, -NRC0-, -S0₂- nebo piperazin, kde R má výše uvedený význam a monosacharidový zbytek coby B².

Další vhodné diamagnetické perfluoralkylové sloučeniny jsou konjugáty z cyklodextrinu a perfluoralkylové sloučeniny. Tyto konjugáty se skládají z α-, β- nebo γ-cyklodextrinu a sloučeniny obecného vzorce vzorce XXII

A^lZ-RF (XXII) kde A¹ je molekula adamantanu, molekula bifenylu nebo molekula anthracenu, L³ je spojka a R^F je rovný nebo rozvětvený perfluoralkylový zbytek mající 4 až 30 uhlíkových atomů. Spojka L³ je rovný uhlovodíkový řetězec mající 1 až 20 uhlíkových atomů, který může být přerušen jednou nebo více skupinami C0-, S0₂-, CONH-, NHCO-, C0NR-, NRCO-, NH-, NR nebo piperazinem, kde R je alkylový zbytek mající 1 až 5 atomů uhlíku.

Obzvláště preferované jsou následující sloučeniny:

• · · · • · • ·

ΓΤτΑτ ^Sso,-c₈f₁₇ |Α| (^1^°^{5 C} ^F’⁷

····

\_/ \_/ Η θ8»Ί7

Galenické přípravky podle tohoto vynálezu obsahují paramagnetické a diamagnetické perfluoralkylové sloučeniny ve směsném poměru mezi 5:95 až 95:5. Výhodné jsou směsné poměry mezi 40:60 a 60:40 obou látek. Obě látky se používají v milimolárních koncentracích. Jde o koncentrace mezi 0,5 a 1000 mmol/1 rozpouštědla. Rozpouštědlem je s výhodou voda. Koncentrace kovu přípravku se pohybuje v rozsahu od 50 do 250 mmol/1.

Preferovány jsou směsi paramagnetické a diamagnetické perfluoralkylové sloučeniny, kde pefluoralkylový řetězec obsahuje od 6 do 12 uhlíkových atomů. Obzvláště výhodné jsou směsi, kde jak paramagnetické tak i diamagnetické perfluoralkylové sloučenina obsahuje perfluoralkylový řetězec mající 8 atomů uhlíku.

Příprava galenických přípravků se provádí tak, že se odváží paramagnetické perfluoralkylové sloučenina (složka A) a diamagnetické perfluoralkylové sloučenina (složka B) v molárním zlomku mezi 0,05 a 0,95 a rozpustí se ve vhodném rozpouštědle. Obzvláště vhodným rozpouštědlem je voda. K tomuto roztoku se v přebytku přidají další přídavné galenické • · · · · ···· ©· «· složky jako třeba pufry a vápenaté soli komplexních činidel. Roztok se pak intenzivně míchá při teplotě 10 až 100 °C. Alternativně se roztok nechá v ultrazvukové lázni. Další alternativa je zpracování roztoku za pomoci mikrovln.

U látek, kde se jednotlivé složky nerozpouštějí ve vodě, se ukazuje jako výhodné použití rozpouštědla jako je alkohol (např. methanol nebo ethanol) nebo jiného s vodou mísitelného rozpouštědla, které se poté nechá pomalu oddestilovat. Destilace může být provedena za vakua. Zbytek se na závěr rozpustí ve vodě a roztok se zfiltruje. Je také možné, že se jednotlivé složky každá zvlášť rozpustí v rozpouštědle, poté se spojí dohromady a zpracují se dále podle výše uvedeného postupu. Bylo zjištěno, že je výhodné použití relativně silných koncentrací roztoku (větší než 100 mmol) komplexu kovu (složka A), ke kterému se přidá čistá složka B a směs se poté míchá nebo zpracovává ultrazvukem nebo mikrovlnami jak bylo zmíněno výše.

Celkově je možno říci, že jako obzvláště výhodné sloučeniny jsou komplexy gadolinia I až XVI uvedené v Tabulce 1, které splňují kritéria podle tohoto vynálezu.

Jak paramagnetické sloučeniny obecného vzorce I, la, lb, Ic a Id podle tohoto vynálezu tak i paramagnetické a diamagnetické perfluoralkylové sloučeniny jsou vhodné pro výše uvedené použití jako kontrastní činidla při NMR imagingu pro zobrazování plaků, nádorů a nekróz.

·· φφφφ «φ «· ·· ···· ·· · φ · · · φφ · · · » · » · ····

Tabulka 1: Obzvláště výhodné kovové komplexy pro použití podle tohoto vynálezu Komplex Literatura, Název

I WO 97/26017 Příklad 33f

Komplex gadolinia s 10-[l-Methyl-2-oxo-3-aza-5-oxo-{4perfluoroktylsulfonyl-piperazin-l-yl}-pentyl]-1,4,7tris(karboxymethyl)-1,4,7,10-tetraazacyklododekanem

II WO 97/26017, Příklad 2c

Komplex gadolinia s 10-[2-Hydroxy-4-aza-5-oxo-7-oxa10,10,11,11,12,12,13,13,14,14,15,15,16,16,17,17-heptadekafluorheptadecyl]-1,4,7-tris(karboxymethyl)-1,4,7,10tetraazacyklododekanem

III WO 97/26017, Příklad 34b

Komplex gadolinia s 10-[2-Hydroxy-4-aza-5,9-dioxo-9-{4perfluoroktyl)piperazin-1-yt}-nonyl]-1,4,7tris(karboxymethyl)-1,4,7,10-tetraazacyklododekanem

IV WO 97/26017, Příklad lc

Komplex gadolinia s 10- [2-Hydroxy-4-aza-5-oxo-7-aza-7(perfluoroktylsulfonyl)-nonyl-1,4,7-tris(karboxymethyl)1,4,7,10-tetraazacyklododekanem

V Příklad 2c, Tato přihláška

1.4.7- Tris(karboxylátomethyl)-10-(3-aza-4-oxo-hexan-5yl)-kyselina-N-(2,3-dihydroxypropyl)-N-(1H,1H,2H,2H,4H,4H,

5H,5H-3-oxa)-perfluortridecyl)amid]-1,4,7,10-tetraazacyklododekan, komplex gadolinia

VI WO 97/26017, Příklad 3c

Komplex gadolinia s 10-[2-Hydroxy-4-oxa-1H,1H,2H, 3H,3H,5H,5H,6H,6H-perfluortetradecyl]-1,4,7tris(karboxymethyl)-1,4,7,10- tetraazacyklododekanem

VII Příklad 5e, Tato přihláška

1.4.7- Tris(karboxylátomethyl)-10-{(3-aza-4-oxo-hexan-5yl)kyselina-[N(3,6,9,12,15-pentaoxa)-hexadecyl)-N-(1H,1H,2H, • · · · · · • « · ·

2H,4H,4H,5H,5H-3-oxa)-perfluortridecyl]-amid}-1,4,7,10tetraazacyklododekan, komplex gadolinia

VIII Příklad 3c, tato přihláška

1,4,7-Tris(karboxylátomethyl)-10-{(3-aza-4-oxo-hexan-5yl)-kyselina-N-(5-hydroxy-3-oxa-pentyl)-N-(ÍH,ÍH,2H,2H,4H,

4H,5H,5H-3-oxa)perfluortridecyl]-amid}-1,4,7,10tetraazacyklododekan, komplex gadolinia

IX Příklad 6b, tato přihláška

1.4.7- Tris(karboxylátomethyl)-10-{(3-aza-4-oxo-hexan-5yl)-sáure- [N-3,6,9,16-tetraoxa-13-aza-14-oxo-Ci₉-C₂₆-heptadekafluor)hexakosyl]-amid}-1,4,7,10-tetraazacyklododekan, komplex gadolinia

X Příklad lc, tato přihláška

1.4.7- Tris(karboxylátomethyl)-10-[(3-aza-4-oxo-hexan-5yl]-kyselina-N-(2methoxyethyl)-N-(ÍH,ÍH,2H,2H,4H,4H,5H,5H-3oxa)-perfluortridecyl]amid}-l,4,7,10-tetraaza-cyklododekan, komplex gadolinia

XI WO 97/26017, Příklad 32c

Komplex gadolinia s 10-[2-Hydroxy-4-aza-5-oxo-7-oxa10,10,11,11,12,12,13,13,14,14,15,15,16,16,17,17,18,18,19,19henikosafluornonadecyl]-1,4,7-tris(karboxymethyl)-1,4,7,10tetraazacyklododekanem

XII WO 97/26017, Příklad 38d

Komplex gadolinia s 10-[2-Hydroxy-4-aza-5-oxo-ll-aza-ll(perfluoroktylsulfonyl)-tridecyl]-1-4-7-tris(karboxymethyl)1,4,7,10-tetraazacyklododekanem

XIII WO 97/260Í7, Příklad 35d

Komplex gadolinia s 10-[2-Hydroxy-4-aza-5-oxo-7-aza-7(perfluoroktylsulfonyl)-8-fenyl-oktyl]-1,4,7tris(karboxymethyl)-1,4,7,10-tetraazacyklododekanem

XIV WO 99/01161, Příklad lg • · • · · · ·♦ · · · 4 4 44 4

4 4 4 4 4 4 4 4

4 4 4 4 4 4 4 4 4 4

4 4 44 4 4 44 4 4 44

1,4,7-Tris{l,4,7-tris(N-(karboxylatomethyl)-10-[N-lmethyl-3,6-diaza-2,5,8-trioxooctan-l,8-diyl]-1,4,7,10tetraazacyklododekan, Gd-komplex}-10-N-2H,2H,4H,4H,5H,5H-3oxa-perfluor-tridekanoyl]-1,4,7,10-tetraazacyklododekan, Gdkomplex

XV Příklad 21f, tato přihláška

6-N-[1,4,7-Tris(karboxylatomethyl)-1,4,7,10-tetraazacyklododekan-10-N-(pentanoyl-3-aza-4-oxo-5-methyl-5-yl)]-2-N[1-0-a-D-karbonylmethyl-mannopyranosa]-L-lysin-1-[1-(4perfluoroktylsulfonyl)piperazin]-amid, Gd-komplex

XVI Příklad 54b, tato přihláška

2,6-N, Ν'-Bis[1,4,7-tris(karboxylátomethyl)-1,4,7,10-tetraazacyklododekan-10 (pentanoyl-3-aza-4-oxo-5-methyl-5-yl)]-lysin[1-(4-perfluoroktylsulfonylpiperazin]-amid, Gd-komplex.

Tabulka 2

Fyzikálně chemické parametry komplexů podle tohoto vynálezu uvedených v Tabulce 1

Komplex číslo	CMC (mol/1)	2 Rh (nm)	R¹ plasma (1/mmol.s)
I	1,86 X 10-6	4,6	35,7
II	2,30 X 10-5	14	33
III	7,06 X 10-6	3,2	24,9
IV	1,0 X 10-6	31,5	29,7
v	3,9 x 10-6	4,4	9,6
VI	1,44 x 10-5	3,2	27,5
VII	5,20 x 10-5	3,0	30,3
VIII	2,92 x 10-5	25	21,2
IX	2,65 X 10-6	6,0	13,3
X	7,90 x 10-6	5,4	25,7
XI	2,88 x 10-6	35,5	24,8
XII	1,07 x 10-5	7,4	30,5
XIII	3,25 X 10-6	4,3	34,0
XIV	8,90 x 10-4	2,2	19,5
XV	2,50 x 10-6	4,4	15,9
XVI	3,90 X 10-6	4,9	21,3

CMC: kritická micelární koncentrace

Rh: hydrodynamický micelární průměr

R¹: relaxivita

4444

4 4 4

4 4 4 • 4

2H,2H,4H,4H,5H,5H-3-oxa2H,2H,4H,4H,5H,5H-3-oxaPříklady provedení vynálezu

Příklad 1

a) N-(2-methoxy)-ethylamid perfluortridekanové kyseliny

Ke 30 g (57,45 mmol) perfluortridekanové kyseliny ve 300 ml dichlormethanu bylo přidáno 8,90 g (70 mmol) oxalylchloridu a směs byla míchána 12 hod při laboratorní teplotě. Směs byla odpařena do sucha za ’ sníženého tlaku. Zbytek byl rozpuštěn ve 100 ml dichlormethanu a při 0°C byl příkapán k roztoku 4,51 g (60 mmol) 2-methoxyethylaminu a 6,07 g (60 mmol) triethylaminu, rozpuštěných ve 200 ml dichlormethan. Směs byla 3 hod míchána při 0 °C, a poté 6 hod při laboratorní teplotě. Pak bylo přidáno 300 ml 5 % vodné kyseliny chlorovodíkové a směs byla intenzívně míchána 15 minut. Organická fáze byla oddělena, sušena nad bezvodým síranem hořečnatým a byla odpařena ve vakuu. Zbytek byl chromatografován na silikagelu (Eluent: dichlormethan/aceton= 20:1). Výtěžek: 30,28 g (91 % teoretické hodnoty) bezbarvé tuhé látky.

Elementární analýza:

Spočteno: C 31,10 H 2,44 N 2,42 F 55,76

Nalezeno: C 30,87 H 2,58 N 2,35 F 55,51

b) N-(2-Methoxyethyl)-Ν-(IH,IH,2H,2H,4H,4H,5H,5H-3-oxa)pertluortridecylamin g (51,79 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu la bylo rozpuštěno ve 300 ml tetrahydrofuranu a bylo přidáno 31 ml 10 M roztoku borandimethylsulfidu (v tetrahydrofuranu). Směs byla vařena 16 hodin za refluxu. Pak byla směs ochlazena na 0°C a bylo přikapáno 200 ml methanol, a směs byla na závěr odpařena do sucha ve vakuu. Zbytek byl dán do směsi 300 ml ·· ··♦·

4· ···· ethanolu a 50 ml 10% vodného roztoku kyseliny chlorovodíkové, a reakční směs byla míchána 8 hodin při teplotě 40 °C. Směs pak byla odpažena do sucha ve vakuu, zbytek byl dán do 300 ml 5% hydroxidu sodného a byl třikrát extrahován s 300 ml dichlormethanu. Organické fáze byly spojeny a byly sušeny nad síranem hořečnatým, odpařeny do sucha za sníženého tlaku a čištěny chromatografií na silikagelu (eluent:

dichlormethan/2-propanol= 20:1). Výtěžek: 26,93 g (92 % teoretického množství) bezbarvé tuhé látky.

Elementární analýza (spočteno na bezvodou látku):

Spočteno: C 31,87 H 2,85 N 2,48 F 57,14

Nalezeno: C 31,69 H 3,10 N 2,27 F 56,88

c) 1,4,7-Tris(karboxylátomethyl)-10-[(3-aza-4-oxo-hexan-5yl)-kyselina-N-(2-methoxyethyl)-N-(1H,1H,2H,2H,4H,4H,5H,5H-3oxa)-perfluortridecyl)amid]-1,4,7,10-tetraazacyklododekan, komplex s gadoliniem (komplex kovu X) g (15,88 mmol) komplexu gadolinia s 10—[l— (karboxymethylkarboamoyl)-ethyl]-1,4,7,10tetraazacyklododekan-1,4,7-trioctovou kyselinou a 1,35 g (31,76 mmol) lithiumchloridu bylo rozpuštěno při 60 °C ve 100 ml dimethylsulfoxidu. Směs byla ochlazena na 15 °C a bylo přidáno 8,98 g (15,88 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu lb. Směs byla míchána 10 minut a bylo přidáno 7,42 g (30 mmol) 2ethoxy-l-ethoxykarbonyl-1,2-dihydrochinolinu. Reakční směs byla míchána 12 hodin při laboratorní teplotě. Reakční roztok byl vylit do směsi 200 ml acetonu a 1300 ml diethyletheru a směs byla míchána 2 hodiny při laboratorní teplotě. Vyloučená sraženina byla zfiltrována, byla rozpuštěna v malém množství směsi ethanolu a vody a byla chromatografována na silikagelu RP-18 (Mobilní fáze: gradient tetrahydrofuran/acetonitril/ti# ti titititi ti ti ti • titi titi titititi ··· ·«· ···· *· · ·· ··»· ·· ·· • ti titititi voda). Výtěžek: 15,14 g (81 % teoretického množství) bezbarvého, amorfního prášku. Obsah vody: 5,7 %.

Elementární analýza (spočteno na bezvodou látku):

Spočteno: C 34,70 H 3,77 N 7,14 F 27,44 Gd 13,36 Nalezeno: C 34,51 H 3,94 N 7,02 F 27,25 Gd 13,18

Příklad 2

a) N-{2,3-dihydroxypropyl)-amid 2H,2H,4H,4H,5H,5H-3-oxa)perfluortridekanové kyseliny

- Ke 30 g (57,45 mmol) 2H,2H,4H,4H,5H,5H-3-oxaperfluortridekanové kyseliny ve 300 ml dichlormethanu bylo přidáno 8,90 g (70 mmol) oxalylchloridu a reakční směs byla míchána 12 hodin při laboratorní teplotě. Směs pak byla odpařena do sucha za sníženého tlaku. Zbytek byl rozpuštěn ve 100 ml dichlormethanu a při teplotě 0 °C byl přikapán k roztoku 5,47 g (60 mmol) 2,3-dihydroxypropylaminu a 6,07 g (60 mmol) triethylaminu, rozpuštěných ve 200 ml dichlormethanu. Směs byla míchána 3 hodiny při teplotě 0 °C, a na závěr 6 hodin při laboratorní teplotě. Pak bylo přidáno 300 ml 5%vodné kyseliny chlorovodíkové a směs byla míchána 15 minut. Organická fáze byla oddělena, sušena nad síranem hořečnatým a byla odpařena do sucha za sníženého tlaku. Zbytek byl chromatografován na silikagelu (mobilní fáze: dichlormethan/ethanol= 15:1). Výtěžek: 29,70 g (87 % teoretického množství) bezbarvé tuhé látky.

Elementární analýza:

Spočteno: C 30,32 H 2,20 N 2,36 F 54,35

Nalezeno: C 30,12 H 2,41 N 2,18 F 54,15

b) N-(2,3-Dihydroxypropyl)-N-(1H,1H,2H, 2H,4H,4H,5H,5H-3-oxaperfluortridecyl)-amin • fc ···· • fc ···· • fc ·· fcfc · · · · · fcfc v • fcfc fcfc fcfcfcfc • fcfc fcfcfc fcfcfcfc • fc · fcfc fcfcfcfc fcfc fcfc g (48,8 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 2a bylo rozpuštěno ve 300 ml tetrahydrofuranu a bylo přidáno 50 ml 10 M roztoku borandimethylsulfidu (v tetrahydrofuranu). Reakční směs byla zahřívána 16 hodin pod refluxem. Pak byla ochlazena na teplotu 0°C a bylo přikapáno 300 ml methanolu, a na závěr byla směs odpařena do sucha za sníženého tlaku. Zbytek byl dán do směsi 300 ml ethanolu a 50 ml 10% vodné kyseliny chlorovodíkové a byla 8 hodin míchána při teplotě 60°C. Směs byla odpařena za sníženého tlaku a zbytek byl dán do 5% vodného roztoku hydroxidu sodného a byl třikrát extrahován s 300 ml dichlormethanu. Organická fáze byla sušena nad síranem hořečnatým, byla odpařena do sucha za sníženého tlaku a zbytek byl chromatografován na silikagelu (Mobilní fáze: dichlormethan/methanol= 15:1). Výtěžek: 24,07 g (85 % teoretického množství) bezbarvé tuhé látky.

Elementární analýza:

Spočteno: C 31,05 H 2,61 N 2,41 F 55,66

Nalezeno: C 31,91 H 2,78 N 2,33 F 55,47

c) 1,4,7-Tris(karboxylátomethyl)-10-[(3-aza-4-oxo-hexan-5yl)-kyselina-N-(2,3-dihydroxypropyl)-N-(1H,1H,2H,2H,4H,4H,5H, 5H-3-oxa)-perfluortridecyl)amid]-1,4,7,10tetraazacyklododekan, komplex s gadoliniem (kovový komplex V) g (15,88 mmol) komplexu gadolinia s 10-[1(karboxymethylkarboamoyl)-ethyl]-1,4,7,10tetraazacyklododekan-1,4,7-trioctovou kyselinou a 1,35 g (31,76 mmol) chloridu lithného bylo při teplotě 60 °C rozpuštěno ve 100 ml dimethylsulfoxidu. Směs byla ochlazena na 15 °C a bylo přidáno 9,21 g (15,88 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 2b. Směs byla míchána 10 minut a bylo přidáno 7,42 g (30 mmol) 2-ethoxy-l-ethoxykarbonyl-l,2•4 444· ·· 4· ·· ···· • · 4 ···· ·« · • · · · · · · · · ··· ··· ···· ·* · .····· ·· ·· dihydrochinolinu. Směs pak byla míchána 2 hodiny při laboratorní teplotě. Roztok byl nalit do směsi 200 ml acetonu a 1300 ml diethyletheru a směs byla míchána 2 hodiny při laboratorní teplotě. Vyloučená sraženina byla zfiltrována, sraženina byla rozpuštěna v malém množství směsi ethanol/voda a byla chromatografována na silikagelu RP-18. (Mobilní fáze: Gradient tetrahydrofuran/acetonitril/voda). Výtěžek: 16,09 g (85 % teoretického množství) bezbarvého, amorfního prášku. Obsah vody: 6,3 %

Elementární analýza: (spočteno na bezvodou látku):

Spočteno: C 34,26 H 3,64 N 7,05 F 27,10 Gd 13,19

Nalezeno: C 34,12 H 3,83 N 6,91 F 26,88 Gd 12,93

Příklad 3

a) N-(5-hydroxy-3-oxa-pentyl)-amid 2H,2H,4H,4H,5H,5H-3-oxaperfluortridekanové kyseliny

Ke 30 g (57,45 mmol) 2H,2H,4H,4H,5H,5H-3-oxaperfluortridekanové kyseliny ve 300 ml dichlormethanu bylo přidáno 8,90 g (70 mmol) oxalylchloridu a směs byla 12 hodin míchána při laboratorní teplotě. Reakční směs byla odpařena do sucha za sníženého tlaku. Zbytek byl rozpuštěn ve 100 ml dichlormethanu a při teplotě 0°C byl přikapán do rotroku 6,25 g (60 mmol) 5-hydroxy-3-oxa-pentylaminu a 6,07 g (60 mmol) triethylaminu ve 200 ml dichlomnethanu. Směs byla míchána 3 hodiny při teplotě 0°C, a poté 6 hodin při laboratorní teplotě. Pak bylo přidáno 300 ml 5 % vodné kyseliny chlorovodíkové a směs byla intenzivně míchána 15 minut. Organická fáze byla oddělena, byla vysušena nad síranem hořečnatým a poté byla odpařena do sucha za sníženého tlaku. Zbytek byl chromatografován na silikagelu (Mobilní fáze: dichlormethan/aceton=15:1).

ΦΦ φφφφ φφ ·φφ φ φφφ φφφ φφφφ φφ · φφφφφφ ·« φφ

Výtěžek: 32,20 g (92 % teoretického množství) bezbarvé tuhé látky.

Elementární analýza:

Spočteno: C 31,54 H 2,65 N 2,30 F 53,01

Nalezeno: C 31,61 H 2,84 N 2,14 F 52,85

b) N-(5-Hydroxy-3-oxa-pentyl)-Ν-(IH,IH,2H,2H,4H,4H,5H,5H-3oxa-perfluortridecyl)-amin g (49,24 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 3a bylo rozpuštěno ve 300 ml tetrahydrofuranu a bylo přidáno 31 ml 10M roztoku borandimethytsulfidu (v tetrahydrofuranu). Reakční směs byla míchána 16 hodin pod refluxem. Pak byla reakce ochlazena na 0°C a bylo přikapáno 200 ml methanolu, na závěr byla směs odpařena do sucha za sníženého tlaku. Zbytek byl dán do směsi 300 ml ethanolu a 50 ml 10% vodné kyseliny chlorovodíkové a byla 10 hodin zahřívána na 50°C. Reakční směs byla odpařena ve vakuu do sucha a zbytek byl dán do 300 ml 5% vodného roztoku hydroxidu sodného a byl třikrát extrahován s 300 ml dichlormethanu. Organická fáze byla sušena nad síranem hořečnatým, byla odpařena do sucha za sníženého tlaku a zbytek byl chromatografován na silikagelu (Mobilní fáze: Dichlormethan/2-propanol= 20:1).

Výtěžek: 26,09 g (89 % teoretického množství) bezbarvá tuhá látka

Elementární analýza:

Spočteno: C 32,28 H 3,05 N 2,35 F 54,25

Nalezeno: C 32,12 H 3,21 N 2,18 F 54,09

c) 1,4,7-Tris(karboxylátomethyl)-10-[(3-aza-4-oxo-hexan-5yl)-kyselina-N-(5-hydroxy-3-oxa-pentyl)-Ν-(IH,IH,2H,2H,4H,4H, 5H,5H-3-oxa)-perfluortridecyl)-amid]-1,4,7,10-tetraazacyklododekan, komplex s gadoliniem (kovový komplex VIII) toto to· ·· to « · · · ·· · • •to toto » · · » • to totototo toto · toto 9 g (15,88 mmol) komplexu gadolinia s 10-[1(karboxymethylkarboamoyl)-ethyl]-1,4,7,10-tetraazacyklododekan-1,4,7-trioctovou kyselinou a 1,35 g (31,76 mmol) chloridu lithného bylo při teplotě 60 °C rozpuštěno ve 100 ml dimethylsulfoxidu. Směs byla ochlazena na 15 °C a bylo přidáno 9,45 g (15,88 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 3b. Směs byla míchána 10 minut a bylo přidáno 7,42 g (30 mmol) 2ethoxy-l-ethoxykarbonyl-1,2-dihydrochinolinu. Směs byla míchána 12 hodin při laboratorní teplotě. Roztok pak byl nalit do směsi 200 ml acetonu a 1300 ml diethyletheru a pak byla směs míchána 2 hodiny při laboratorní teplotě. Vyloučená sraženina byla zfiltrována, rozpuštěna v malém množství směsi ethanol/voda a byl chromatografován na silikagelu RP-18 (Mobilní fáze: Gradient tetrahydrofuran/acetonitril/voda). Výtěžek:16,10 g (84 % teoretického množství) bezbarvého amorfního prášku: 5,7 %

Elementární analýza (spočteno na bezvodou látku):

Spočteno: C 34,83 H 3,84 N 6,96 F 26,76 Gd 13,03

Nalezeno: C 34,65 H 3,96 N 6,84 F 26,62 Gd 12,91

Příklad 4

a) N-(2-hydroxyethyl)-amid 2H,2H,4H,4H,5H,5H-3-oxaperfluortridekanové kyseliny

Ke 30 g (57,45 mmol) 2H,2H,4H,4H,5H,5H-3-oxaperfluortridekanové kyseliny ve 300 ml dichlormethanu bylo přidáno 8,90 g (70 mmol) oxalylchloridu a směs byla míchána 12 hodin při laboratorní teplotě. Reakční směs byla odpařena do sucha za sníženého tlaku. Zbytek byl rozpuštěn ve 100 ml dichlormethanu a při teplotě 0 °C byl přikapán ke směsi 3,66 g (60 mmol) 2-aminoethanolu a 6,07 g (60 mmol) triethylaminu, rozpuštěné ve '200 ml dichlormethanu. Reakční směs byla míchána 3 hodiny při teplotě 0 °C, a poté 6 hodin při ·9 • · · · • · 9 ·· ····

9 9 ·

9 9

9999 • 9 9 9

99 laboratorní teplotě. Pak bylo přidáno 300 ml 5% vodné kyseliny chlorovodíkpvé a směs byla intenzivně míchána 15 minut. Organická fáze byla oddělena, sušena nad síranem hořečnatým a byla odpařena do sucha za sníženého tlaku. Zbytek byl chromatografován na silikagelu (Mobilní fáze: dichlormethan/aceton= 20:1).

Výtěžek: 28,90 g (89 % teoretického množství)

Elementární analýza:

Spočteno: C 29,75 H 2,14 N 2,48 F 57,14

Nalezeno: C 29,61 H 2,29 N 2,37 F 57,01

b) N-(2-Hydroxyethyl)-N-(ÍH,ÍH,2H, 2H;4H, 4H,5H,5H-3-oxa)perfluortridecyl)-amin g (49,54 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 4a bylo rozpuštěno ve 300 ml tetrahydrofuranu a bylo přidáno 31 ml 10M roztoku borandimethylsulfidu (v tetrahydrofuranu). Směs byla zahřívána 16 hodin za refluxu. Pak byla ochlazena na teplotu 0 °C a bylo přikapáno 200 ml methanolu, poté byla reakční směs odpařena do sucha za sníženého tlaku. Zbytek byl dán do směsi 300 ml ethanol a 50 ml 10% vodné kyseliny chlorovodíkové a směs byla míchána 10 hodin při teplotě 50°C. Směs byla ve vakuu odpařena do sucha, zbytek byl rozpuštěn ve 300 ml 5 % vodného roztoku hydroxidu sodného a byl třikrát extrahován s 300 ml dichlormethanu. Organická fáze byla sušena nad síranem hořečnatým, byla odpařena do sucha za sníženého tlaku a zbytek byl chromatografován na silikagelu (Mobilní fáze: dichlormethan/2-propanol= 15:1). Výtěžek: 25,12 g (92 % teoretického množství) bezbarvé tuhé látky. Elementární analýza (spočteno na bezvodou látku):

Spočteno: C 30,50 H 2,56 N 2,54 F 58,59

Nalezeno: C 30,32 H 2,71 N 2,48 F 58,43 • · · · • · • · · ·

c) 1,4,7-Tris(karboxylátomethyl)-10-[(3-aza-4-oxo-hexan-5~ yl)-kyselina-N-(2-hydroxyethyl)-N-(1H, 1H, 2H, 2H, 4H, 4H,5H,5H-3oxa)-pertluortridecyl)amin-amid]-1,4,7,10-tetraazacyklododekan, komplex s gadoliniem g (15,88 mmol) komplexu gadolinia s 10-[1(karboxymethylkarboamoyl)-ethyl]-1,4,7,10tetraazacyklododekan-1,4,7-trieoctovou kyselinou a 1,35 g (31,76 mmol) chloridu lithného bylo rozpuštěno při teplotě 60 °C ve 100 ml dimethylsulfoxidu. Reakční směs byla ochlazena na- 15 °C a bylo přidáno 8,75 g (15,88 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 4b. Směs byla míchána 10 minut a poté bylo přidáno 7,42 g (30 mmol) 2-ethoxy-l-ethoxykarbonyl-l,2dihydrochinolinu. Směs byla míchána 12 hodin při laboratorní teplotě. Reakční roztok byl nalit do směsi 200 ml acetonu a 1300 ml diethyletheru a byl míchán 2 hodiny při laboratorní teplotě. Vyloučená sraženina byla zfiltrována, rozpuštěna v malém množství ethanolu a vody a byla chromatografována na silikagelu RP-18 (Mobilní fáze: Gradient tetrahydrofuran/ acetonitril/voda). Výtěžek: 16,81 g (91 % teoretického množství) bezbarvý amorfní prášek. Obsah vody: 7,2 %. Elementární analýza (spočteno na bezvodou látku):

Spočteno: C 34,08 H 3,64 N 7,23 F 27,77 Gd 13,52

Nalezeno: C 33,91 H 3,82 N 7,14 F 27,58 Gd 13,41

Příklad 5

a) Amid 2H,2H,4H,4H,5H,5H-3-oxa-perfluortridekanové kyseliny Ke 30 g (57,45 mmol) 2H,2H,4H,4H,5H,5H-3-oxaperfluortridekanové kyseliny ve 300 ml dichlormethanu bylo přidáno 8,90 g (70 mmol) oxalylchloridu a směs byla míchána 12 hodin při laboratorní teplotě. Pak byla reakční směs odpařena do sucha za sníženého tlaku. Zbytek byl rozpuštěn ve 200 ml dichlormethanu. Pak byl roztokem při teplotě 0°C • · • · • · · · probubláván plynný amoniak přibližně 2 hodiny. Směs byla míchána 4 hodiny při teplotě 0°C, a poté byla míchána 2 hodiny při laboratorní teplotě. Pak bylo přidáno 300 ml 5% vodné kyseliny chlorovodíkové a směs byla intenzivně míchána 5 minut. Organická fáze byla oddělena, byla sušena nad síranem hořečnatým a poté byla odpařena do sucha. Zbytek byl chromatografován na silikagelu (Mobilní fáze: dichlormethan/ aceton= 20:1). Výtěžek: 27,85 g (93 % teoretického množství) Elementární analýza:

Spočteno: C 27,66 H 1,55 N 2,69 F 61,97

Nalezeno: C 27,49 H 1,72 N 2,54 F 61,81

b) ÍH,ÍH,2H,2H,4H,4H,5H,5H-3-oxa-perfluortridecylamin, hydrochlorid g (51,8 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 5a bylo rozpuštěno ve 300 ml tetrahydrofuranu a bylo přidáno 31 ml 10M roztoku borandimethylsulfidu (v tetrahydrofuranu). Směs byla míchána 16 hodin za refluxu. Poté byla ochlazena na teplotu 0 °C a bylo přikapáno 200 ml methanoíu, na závěr byla reakční směs odpařena do sucha za sníženého tlaku. Zbytek byl rozpuštěn ve směsi 400 ml ethanolu a 100 ml 10 % vodné kyseliny chlorovodíkové a byl 8 hodin míchán při teplotě 60°C. Směs byla odpařena ve vakuu a zbytek byl krystalizován z malého množství ethanol/diethylether.

Výtěžek: 26,75 g (95 % teoretického množství) bezbarvé krystalické tuhé látky.

Elementární analýza:

Spočteno: C 26,51 H 2,04 N 2,58 F 59,41 Cl 6,52

Nalezeno: C 26,37 H 2,21 N 2,46 F 59,25 Cl. 6,38

c) N-(1H,1H,2H,2H,4H,4H,5H,5H-3-oxa)-perfluortridecyl}-amid 3,6,9,12,15-Pentaoxahexadekanové kyseliny • · ·· ···· • · · · · · · ·· · ··· ··· ····

Ke směsi 26,5 g (48,74 mmol) titulní sloučeniny 2 Příkladu 5b a 14,8 g (146,2 mmol) triethylaminu, rozpuštěné ve 300 ml dichlormethanu bylo při teplotě 0 °C přikapáno 14,24 g (50 mmol) 3,6,9,12,15-pentaoxahexadekanoyl chloridu a směs byla míchána 3 hodiny při teplotě 0 °C. Bylo přidáno 300 ml 5% vodné kyseliny chlorovodíkové a směs byla 30 minut intenzivně míchána. Organická fáze byla oddělena, sušena nad síranem hořečnatým a byla odpařena do sucha za sníženého tlaku. Zbytek byl chromatografován na silikagelu (Mobilní fáze: dichlormethan/aceton: 20:1).

Výtěžek: 32,03 g (87 % teoretického množství) bezbarvý olej. Elementární analýza:

Spočteno: C 36,57 H 4,00 N 1,85 F 42,75

Nalezeno: C 36,46 H 4,12 N 1,76 F 42,53

d) N-(3,6,9,12,15-Pentaoxahexadecyl)-Ν-(IH,IH,2H,2H,4H,4H-3oxa)-perfluortridecyl)-amin g (41,03 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 5c bylo rozpuštěno ve 300 ml tetrahydrofuranu a bylo přidáno 25 ml 10M borandimethylsulfidu (v tetrahydrofuranu). Směs byla míchána 6 hodin pod refluxem. Směs pak byla ochlazena na teplotu 0 °C a bylo přikapáno 200 ml methanol, poté byla reakční směs odpařena do sucha za sníženého tlaku. Směs byla nalita do směsi 300 ml ethanol/50 ml 10 % vodné kyseliny chlorovodíkové a reakční směs byla míchána 8 hodin při teplotě 40°C. Směs byla odpařena za sníženého tlaku do sucha, zbytek byl rozpuštěn ve 300 ml 5 % vodného hydroxidu sodného a třikrát extrahován s 300 ml dichlormethanu. Organická fáze byla sušena nad síranem hořečnatým, byla odpařena do sucha za sníženého tlaku a zbytek byl chromatografován na silikagelu (Mobilní fáze: dichlormethan/2-propanol= 15:1).

Výtěžek: 27,68 g (91 % teoretického množství).

• ·

Elementární analýza:

Spočteno: C 37,26 H 4,35 N 1,89 F 43,56

Nalezeno: C 37,11 H 4,51 N i ,73 F 43,41

e) 1,4,7-Tris(karboxylátomethyl)-10-{(3-aza-4-oxo-hexan-5yl)-kyselina-[N-3,6,9,12,15-pentaoxa)-hexadecyl)-N(1H,1H,2H,2H,4H,4H,5H,5H-3oxa)-perfluortridecyl)-amid}1,4,7,10-tetraazacyklododekan, komplex s gadoliniem (Kovový komplex VII) g (15,88 mmol) gadolinitého komplexu 10-[1(karboxymethylkarboamoyl)-ethyl]-1,4,7,10-tetraazacyklododekan-1,4,7-trioctové kyseliny a 1,35 g (31,76 mmol) chloridu lithného bylo rozpuštěno při teplotě 60 °C ve 100 ml dimethylsulfoxidu. Směs byla ochlazena na teplotu 15 °C a bylo přidáno 11,77 g (15,88 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 5d. Směs byla míchána 10 minut a bylo přidáno 7,42 g (30 mmol) 2-ethoxy-l-ethoxykarbonyl-l,2-dihydrochinolinu. Reakční směs byla míchána 12 hodin při laboratorní teplotě. Směs byla nalita do roztoku 200 ml acetonu a 1300 ml diethyletheru a byla míchána 2 hodiny při laboratorní teplotě. Vyloučená sraženina byl zfiltrována, rozpuštěna v malém množství směsi ethanol/voda a byla chromatografována na silikagelu RP-18 (Mobilní fáze: Gradient tetrahydrofuran/ acetonitril/voda).

Výtěžek: 18,05 g (84 % teoretického množství) bezbarvého amorfního prášku. Obsah vody: 6,2 %.

Elementární analýza (spočteno na bezvodou látku):

Spočteno: C 37,28 H 4,47 N 6,21 F 23,87 Gd 11,62 Nalezeno: C 37,11 H 4,61 N 6,03 F 23,64 Gd 11,42

Příklad 6

A A AAAA

A A · AAAA AA A

AA A AA AAAA A· AA

a) 1,4,7-Tris(karboxylátomethyl)-10-[(3-aza-4-oxo-hexan-5yl)-kyselina-N-(12-amino-3,6,9-trioxa-dodecyl)-amid]1,4,7,10-tetraazacyklododekan, komplex gadolinia g (15,88 mmol) komplexu gadolinia s 10-[1(karboxymethylkarboamoyl)-ethyl]-1,4,7,10-tetraazacyklododekan-1,4,7-trioctovou kyselinou a 1,35 g (31,76 mmol) chloridu lithného a 3,66 g (31,76 mmol) N-hydroxysukcinimidu bylo rozpuštěno při teplotě 60 °C ve 100 ml dimethylsulfoxidu. Reakce byla ochlazena na teplotu 15 °C a bylo přidáno 3,51 g (17 mmol) Ν,N'-dicyklohexylkarbodiimidu a směs byla míchána 5 hodin při teplotě 15 °C. Kvůli odstranění močoviny byla reakční směs zfiltrována. K filtrátu bylo přidáno 14,66 g (60 mmol) 1,12-diamino-3,6,9-trioxa-dodekanu a 2,02 g (20 mmol) triethylamin a směs byla míchána 12 hodin při laboratorní teplotě. Roztok byl nalit do směsi 1500 ml diethyletheru a 50 ml n-butanolu a byla míchána 30 minut. Vypadnutá tuhá látka byla zfiltrována a chromatografována na silikagelu RP-18. (Mobilní fáze: Gradient tetrahydrofuran/ acetonitril/voda).

Výtěžek: 12,66 g (69 % teoretického množství) bezbarvého, amorfního prášku. Obsah vody: 3,5 %.

Elementární analýza (spočteno na bezvodou látku):

Spočteno: C 30,16 H 4,54 N 8,49 F 27,96 Gd 13,61 Nalezeno: C 30,02 H 4,68 N 8,35 F 27,81 Gd 13,45

b) 1,4,7 Tris(ckarboxylátomethyl)—10—{(3-aza-4-oxo-hexan-5 yl)-kyselina-[N-3,6,9,16-tetraoxa-13-aza-14-oxo-Ci₉-C26-heptadekafluor)-hexakosyl]-amid}-l,4,7,10-tetraazacyklododekan, komplex gadolinia (komplex kovu IX)

11,3 g (21,64 mmol) 2H,2H,4H,4H,5H,5H-3-oxaperfluortridekanové kyseliny, 0,85 g (20 mmol) chloridu ··· ··· · · · · lithného a 4,95 g (43 mmol) N-hydroxysukcinimidu bylo rozpuštěno při teplotě 25 °C ve 150 ml dimethylsulfoxidu, Reakční směs byla ochlazena na teplotu 15 °C a bylo přidáno 6,19 g (30 mmol) N,N'-dicyklohexylkarbodiimidu a směs byla míchána 5 hodin při teplotě 15 °C. K odstranění močoviny byl roztok zfiltrován. K filtrátu bylo přidáno 12,5 g (10,82 mmol) titulní sloučeniny z příkladu 6a a 3,29 g (32,47 mmol) triethylaminu a směs byla míchána 12 hodin při laboratorní teplotě. Roztok byl nalit do 1300 ml diethyletheru a 100 ml acetonu a byla míchána 30 minut. Vyloučená tuhá látka byla zfiltrována a chromatografována na silikagelu RP-18 (Mobilní fáze: Gradient tetrahydrofuran/acetonitril/voda).

Výtěžek:13,01 g (90% teoretického množství). Obsah vody: 6, 7%.

Elementární analýza (spočteno na bezvodou látku):

Spočteno: C 36,86 H 4,30 N 7,34 F 24,17 Gd 11,77

Nalezeno: C 36,68 H 4,41 N 7,25 F 24,03 Gd 11,55

Příklad 7

1,4,7-Tris(karboxylátomethyl)-10-[(3-aza-4-oxo-hexan-5-yl) kyselina-N-(1H,1H,2H,2H,4H,4H,5H,5H-3-oxa-perfluortridecyl)amid]-1,4,7,10-tetraazacyklododekan, komplex s gadoliniem g (15,88 mmol) komplexu gadolinia s 10-[1(karboxymethylkarboamoyl)-ethyl]-1,4,7,10-tetraazacyklododekan-1,4,7-trioctovou kyselinou a 1,35 g (31,76 mmol) chloridu lithného a 3,66 g (31,76 mmol) N-hydroxysukcinimidu bylo při teplotě 60 °C ve 100 ml dimethylsulfoxidu. Směs byla ochlazena na teplotu 15 °C a bylo přidáno 3,51 g (17 mmol) N,N'-dicyklohexylkarbodiimidu a reakční směs byla míchána 5 hodin při teplotě 15 °C. K odstranění močoviny byla reakční směs zfiltrována. K filtrátu bylo přidáno 8,63 g (15,88 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 5b a 5,06 g (50 mmol)

4 · 4

4444

4 4444 44 4

444 444 4444 triethylaminu a reakční směs byla 12 hodin míchána při laboratorní teplotě. Roztok byl nalit do 1500 ml diethyletheru a 100 ml acetonu a směs byla míchána 30 minut. Vyloučená tuhá látka byla zfiltrována a byla chromatografována na silikagelu RP-18. (Mobilní fáze: Gradient tetrahydrofuran/acetonitril/voda).

Výtěžek: 13,86 g (78 % teoretického množství) bezbarvého, amorfního prášku. Obsah vody: 9,3 %.

Elementární analýza (spočteno na bezvodou látku):

Spočteno: C 33,28 H 3,42 N 7,51 F 28,87 Gd 14,05 Nalezeno: C 33,12 H 3,61 N 7,37 F 28,69 Gd 13,89

Příklad 8

a) N-(2,3,4,5,6-pentahydroxy)-hexylamid 2H,2H,4H,4H,5H,5H-3oxa-perfluortridekanové kyseliny

Ke 30 g (57,45 mmol) 2H,2H,4H,4H,5H,5H-3-oxaperfluortridekanové kyseliny ve 300 ml dichlormethanu bylo přidáno 8,90 g (70 mmol) oxalylchloridu a reakční směs byla míchána 12 hodin při laboratorní teplotě. Poté byla odpařena do sucha za sníženého tlaku. Zbytek byl rozpuštěn ve 100 ml dichlormethanu a při teplotě 0 °C byl přikapán k roztoku 10,87 g (60 mmol) glukaminu a 6,07 g (60 mmol) triethylaminu, ve 150 ml dichlormethanu a 150 dioxan. Reakční směs byla 3 hodiny míchána při teplotě 0 °C, a poté byla míchána 8 hodin při laboratorní teplotě. Pak bylo přidáno 400 ml 5% vodné kyseliny chlorovodíkové a směs byla intenzivně míchána 15 minut. Organická fáze byla oddělena, sušena nad síranem hořečnatým a byla odpařena do sucha za sníženého tlaku. Zbytek byl chromatografován na silikagelu (Mobilní fáze: dichlormethan/methanol= 5:1).

Výtěžek: 30,71 g (78 % teoretického množství)

Elementární analýza:

• · ··· · ·· ··« ·

Spočteno: C 31,55 H 2,94 N 2,04 F 47,13

Nalezeno: C 31,44 H 3,09 N 1,97 F 47,01

b) N-(2,3,4,5,β-pentahydroxyhexyl)-N-1H,1H,2H,2H,4H,4H,5H, 5H-3-oxaperfluortridecyl)-amin g (43,77 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 8a bylo rozpuštěno ve 300 ml tetrahydrofuranu a bylo přidáno 50 ml 10M roztoku borandimethylsulfidu (v tetrahydrofuranu). Reakční směs byla zahřívána 48 hodin k varu. Reakční směs byla ochlazena na 0 °C a bylo přikapáno 500 ml methanolu, reakční směs byla odpařena do sucha za sníženého tlaku. Zbytek byl rozpuštěn ve směsi 500 ml ethanolu a 100 ml 10% vodné kyseliny chlorovodíkové a směs byla míchána 15 hodin při teplotě 60°C. Reakční směs byla odpařena za sníženého tlaku, zbytek byl dán do 400 ml 5% roztoku hydroxidu sodného a byl extrahován pětkrát se 400 ml chloroformu. Organická fáze byla sušena nad síranem hořečnatým, byla odpařena do sucha za sníženého tlaku a zbytek byl chromatografován na silikagelu (Mobilní fáze: dichlormethan/methanol= 3:1). Výtěžek: 19,69 g (67 % teoretického množství) bezbarvé tuhé látky.

Elementární analýza:

Spočteno: C 32,20 H 3,30 N 2,09 F 48,11

Nalezeno: C 32,05 H 3,43 N 1,97 F 47,93

c) 1,4,7-Tris(karboxylátomethyl)-10-{(3-aza-4-oxo-hexan-5yl)-kyselina-[N-2,3,5,β-pentahydroxy)-hexyl-N(1H,1H,2H, 2H,4H,4H,5H,5H-3-oxa-perfluortridecyl]-amid}1,4,7,10-tetraazacyklododekan, komplex gadolinia g (15,88 mmol) komplexu gadolinia s 10—[1— (karboxymethylkarboamoyl)-ethyl]-1,4,7,10-tetraazacyklododekan-1,4,7-trioctovou kyselinou a 1,35 g (31,76 mmol) •4 4444

4444 chloridu lithného bylo při teplotě 60 °C rozpuštěno ve 100 ml dimethylsulfoxidu. Reakční směs byla ochlazena na teplotu 15 °C a bylo přidáno 15,88 g (15,88 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 8b. Reakční směs byla míchána 10 minut pak bylo přidáno 7,42 g (30 mmol) 2-ethoxy-l-ethoxykarbonyl-l,2dihydrochinolinu. Směs byla míchána 12 hodin při laboratorní teplotě. Reakční směs byla nalita do směsi 200 ml acetonu a 1300 ml diethyletheru a reakční směs byla míchána 2 hodiny při laboratorní teplotě. Vyloučená sraženina byla zfiltrována, sraženina byla rozpuštěna v malém množství smsi ethanol/voda a byla chromatografována na silikagelu RP-18. (Mobilní fáze: Gradient tetrahydrofuran/acetonitril/voda). Výtěžek: 16,10 g (79 % teoretického množství) bezbarvého, amorfního prášku. Obsah vody: 6,3%.

Elementární analýza (spočteno na bezvodou látku):

Spočteno: C 36,64 H 3,93 N 6,55 F 25,17 Gd 12,26

Nalezeno: C 34,49 H 4,13 N 6,48 F 25,03 Gd 12,11

Příklad 9

a) N-(2,2-dimethyl-5-hydroxy-l,3-dioxepan-6-yl)-amid

2H,2H,4H,4H,5H,5H-3-oxa-perfluortridekanové kyseliny

Ke 30 g (57,45 mmol) 2H,2H,4H,4H,5H,5H-3-oxaperfluortridekanové kyseliny ve 300 ml dichlormethanu bylo přidáno 8,90 g (70 mmol) oxalylchloridu a směs byla míchána 12 hodin při laboratorní teplotě. Reakční směs byla odpařena do sucha za sníženého tlaku. Zbytek byl rozpuštěn ve 100 ml dichlormethanu a byl při teplotě 0 °C přikapán k roztoku 9,67 g (60 mmol) 5-amino-2,2-dimethyl-l,3-dioxepan-6-olu a 6,07 g (60 mmol) triethylaminu, rozpuštěných ve 200 ml dichlormethanu. Směs byla míchána 3 hodiny při teplotě 0°C, a poté 5 hodin při laboratorní teplotě. Bylo přidáno 300 ml vody a směs byla míchána 15 minut. Organická fáze byla ·· · ΑΦΦ • · • · φ φ φφ ·ΦΦ· •Φ ···· oddělena, sušena nad síranem hořečnatým a byla odpařena do sucha za sníženého tlaku. Zbytek byl chromatografován na silikagelu (Mobilní fáze: dichlormethan/aceton=15:1).

Výtěžek: 27,62 g (85 % teoretického množství).

Elementární analýza:

Spočteno: C 34,30 H 3,03 N 2,11 F 48,54

Nalezeno: C 34,15 H 3,19 N 2,04 F 48,37

b) N-(l-Hydroxymethyl-2,3-dihydroxypropyl)-Ν-(IH,IH,2H,2H, 4H,'4H, 5H, 5H-3-oxa-perfluortridecyl) -amin g (40,58 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 9a bylo rozpuštěno ve 300 ml tetrahydrofuranu a bylo přidáno 26 ml 10M roztok borandimethyfsulfidu (v tetrahydrofuranu). Směs byla míchána 20 hodin za refluxu. Poté byla ochlazena na teplotu 0°C a bylo přikapáno 300 ml methanolu, na závěr byla reakční směs odpařena do sucha za sníženého tlaku. Zbytek byl rozpuštěn ve směsi 300 ml ethanolu a 100 ml 10% vodné kyseliny chlorovodíkové a směs byla míchána 6 hodin při teplotě 60°C. Směs byla odpařena do sucha za sníženého tlaku, zbytek byl rozpuštěn ve 400 ml 5% vodného hydroxidu sodného a byla pětkrát extrahována s 250 ml chloroformu. Organická fáze byla sušena nad síranem hořečnatým, byla odpařena do sucha za sníženého tlaku a zbytek byl chromatografován na silikagelu (Mobilní fáze: dichlormethan/methanol= 6:1). Výtěžek: 20,09 g (81 % teoretického množství) bezbarvé tuhé látky.

Elementární analýza:

Spočteno: C 31,44 H 2,97 N 2,29 F 52,83

Nalezeno: C 31,26 H 3,11 N 2,18 F 52,67

c) 1,4,7-Tris(karboxylátomethyl)—10—{(3-aza-4-oxo-hexan-5yl)-kyselina-[N-l-hydroxymethyl-2,3-dihydroxypropyl)-N·»· ·«··

1119

H

II 1 9 19 9 11 1 • 11 11 1111

III 111 1111 11 1 11 1111 11 11 (1H,1H,2H,2H,4H,4H,5H,5H-3-oxa-perfluortridecyl]-amid}1,4,7,10-tetraazacyklododekan, komplex gadolinia g (15,88 mmol) komplexu gadolinia s 10-[1(karboxymethylkarbamoyl)-ethyl]-1,4,7,10-tetraazacyklododekan-1,4,7-trioctové kyseliny a 1,35 g (31,76 mmol) chloridu lithného bylo rozpuštěno při teplotě 60 °C ve 100 ml dimethylsulfoxidu. Směs byla ochlazena na 15 °C a bylo přidáno 9,71 g (15,88 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 9b. Reakční směs byla míchána 10 minut a bylo přidáno 7,42 g (30 mmol) 2-ethoxy-l-ethoxykarbonyl-l,2-dihydrochinolinu. Směs byla míchána 12 hodin při laboratorní teplotě. Roztok byl nalit do směsi 200 ml acetonu a 1300 ml diethyletheru a míchána 2 hodiny při laboratorní teplotě. Vyloučená sraženina byla zfiltrována, rozpuštěna ve směsi ethanol/voda a byla chromatografována na silikagelu RP-18 (Mobilní fáze: Gradient tetrahydrofuran/acetonitril/voda). Výtěžek: 13,40 g (69% teoretického množství) bezbarvého, amorfního prášku. Obsah vody: 9,1 %.

Elementární analýza (spočteno na bezvodou látku):

Spočteno: C 34,37 H 3,79 N 6,87 F 24,41 Gd 12,86

Nalezeno: C 34,18 H 3,95 N 6,71 F 24,25 Gd 12,70

Příklad 10

a) N- [ (2-benzyloxykarbonylamino)-ethyl]-amid perfluoroktylsulfonové kyseliny g (173,4 mmol) l-Benzyloxykarbonylamino-2-aminoethan hydrochloridu, 87,1 g (173,4 mmol) perfluoroktylsulfofluoridu a 35,42 g (350 mmol) triethylaminu bylo zahříváno 10 hodin na teplotu 80°C. Směs byla ochlazena na laboratorní teplotu a byla přímo nalita na sloupec silikagelu kvůli čištění (Mobilní fáze: dichlormethan/aceton= 20:1).

• fc fcfcfcfc • fc fcfcfcfc • fc « fcfcfcfc fc· · • fcfc fcfcfc fcfcfcfc fc fcfcfc ··· fcfcfcfc • fcfc fcfc fcfcfcfc fcfc fc *

Výtěžek: 42,22 g (36 % teoretického množství) bezbarvé tuhé látky.

Elementární analýza:

Spočteno: C 31,97 H 1,94 N 4,14 F 47,75 S 4,74

Nalezeno: C 31,83 H 2,11 N 4,03 F 47,63 S 4,63

b) N-[ (2-amino)-ethyl]-amid perfluoroktylsulfonové kyseliny g (44,36 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 10a bylo rozpuštěno ve 300 ml methanolu a bylo přidáno 5 g palladiového katalyzátoru (10 % Pd/C), s směs byla hadrogenována přes noc při laboratorní teplotě. Katalyzátor byl odfiltrován a filtrát byl odpařen do sucha za sníženého tlaku. Výtěžek: 24.05 g (kvantitativně) bezbarvé tuhé látky. Elementární analýza:

Spočteno: C 22,15 H 1,30 N 5,17 F 59,57

Nalezeno: C 22,04 H 1,41 N 5,05 F 59,62

c) 1,4,7-Tris(karboxylátomethyl)-10-{(3-aza-4-oxo-hexan-5yl)-kyselina-N-[(2-perfluoroktylsulfonylamino)-ethyl]-amid)1, 4,7,10-tetraazacyklododekan, komplex gadolinia g (15,88 mmol) komplexu gadolinia s 10-[1(karboxymethylkarbamoyl)-ethyl]-1,4,7,10-tetraazacyklododekan-1,4, 7-trioctovou kyselinou a 1,35 g (31,76 mmol) chloridu lithného a 3,66 g (31,76 mmol) N-hydroxysukcinimidu bylo při teplotě 60 °C rozpuštěno ve 100 ml dimethylsulfoxidu. Směs byla ochlazena na teplotu 15 °C a bylo přidáno 3,51 g (17 mmol) N,N'-dicyklohexylkarbodiimid a byla míchána 5 hodin při teplotě 15 °C. K odstranění močoviny byl reakční roztok zfiltrován. K filtrátu bylo přidáno 8,61 g (15,88 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 10b a 2,02 g (20 mmol) triethylaminu a směs byla míchána 12 hodin při laboratorní teplotě. Roztok byl nalit do směsi 1500 ml • · · · · · • ·

	88	• · · • · · • · · ·· ·	• · · • · · · • · · • · · · · ·	• · · • · · · • · · · ·· ··
diethyletheru a 100 ml aceton a	byla míchána 30	minut.
Vyloučená sraženina byla	zfiltrována a	byla	čištěna
chromatografii na silikagelu	RP-18	(Mobilní	fáze: Gradient

tetrahydrofuran/acetonitril/voda).

Výtěžek: 15,76 g (86 % teoretického množství) bezbarvého, amorfního prášku. Obsah vody: 6,5 %.

Elementární analýza (spočteno na bezvodou látku):

Spočteno: C 30,19 H 3,06 N 8,50 F 27,99 Gd 13,63 S 2,78 Nalezeno: C 30,03 H 3,18 N 8,41 F 27,81 Gd 13,50 S 2,61

Příklad 11

a) N-(2-benzyloxykarboxylamino-ethyl]-amid 2H,2H,4H,4H,5H,5H3-oxa-perfluortridekanové kyseliny

Ke 30 g (57,45 mmol) 2H,2H,4H,4H,5H,5H-3-oxaperfluortridekanové kyseliny ve 300 ml dichlormethanu bylo přidáno 8,90 g (70 mmol) oxalylchloridu a reakční směs byla míchána 12 hodin při laboratorní teplotě. Pak byla odpařena do sucha za sníženého tlaku. Zbytek byl rozpuštěn ve 100 ml dichlormethanu a byl při teplotě 0°C přikapán k roztoku 13,84 g (60 mmol) l-benzyloxykarbonylamin-2-aminoethan hydrochloridu a 12,14 g (120 mmol) triethylaminu, ve 200 ml dichlormethanu. Reakční směs byla míchána 3 hodiny při teplotě 0°C, a poté 5 hodin při laboratorní teplotě. Bylo přidáno 300 ml 5% vodné kyseliny chlorovodíkové a směs byla míchána 15 minut. Organická fáze byla oddělena, sušena nad síranem hořečnatým a byla odpařena do sucha za sníženého tlaku. Zbytek byl chromatografován na silikagelu (Mobilní fáze: dichlormethan/aceton= 20:1).

Výtěžek: 33,30 g (83 % teoretického množství) bezbarvé tuhé látky.

Elementární analýza:

Spočteno: C 37,84 H 2,74 N 4,01 F 46,25 • ·· ·

Nalezeno: C 37,67 H 2,89 N 3,88 F 46,11

b) N-[(2-amino)-ethyl]amid 2H,2H,4H,4H,5H,5H-3-oxaperfluortridekanové kyseliny g (42,96 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 11 bylo rozpuštěno v 500 ml methanolu a bylo přidáno 5 g paladiového katalyzátoru (10 % Pd/C), směs pak byla hydrogenována přes noc při laboratorní teplotě. Katalyzátor byl zfiltrován a filtrát byl odpařen do sucha za sníženého tlaku.

Výtěžek: 24,24 g (kvantitativně) bezbarvé tuhé látky. Elementární analýza:

Spočteno: C 29,80 H 2,32 N 4,96 F 57,24

Nalezeno: C 29,67 H 2,4i N 4,88 F 57,15

c) 1,4,7-Tris-(karboxylátomethyl)—10—{(3-aza-4-oxo-hexan-5yl)-kyselina-N-[3-aza-6-oxa-4-oxo-(C₉-Ci₆-heptadekaf luor)hexadecyl]-amid}-1,4,7,10-tetraazacyklododekan- komplex s gadoliniem g (15,88 mmol) komplexu gadolinia s 10-[1(karboxymethylkarboamoyl)-ethyl)-1,4,7,10-tetraazacyklododekan-1,4,7-trioctovou kyselinou a 1,35 g (31,76 mmol) chloridu lithného a 3,66 g (31,76 mmol) N-hydroxysukcinimidu bylo při teplotě 60 °C rozpuštěno ve 100 ml dimethylsulfoxidu. Směs byla ochlazena na teplotu 15 °C a bylo přidáno 3,51 g (17 mmol) Ν,N'-dicyklohexylkarbodiimidu a směs byla míchána 5 hodin při teplotě 15 °C. K odstranění močoviny byl roztok zfiltrován. K filtrátu bylo přidáno 8,96 g (15,88 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 11b a bylo přidáno 2,02 g (20 mmol) triethylaminu a poté byla směs míchána 12 hodin při laboratorní teplotě. Reakční směs byla nalita do směsi 1500 ml diethyletheru a 100 ml acetonu a reakční směs byla míchána 30 minut. Vyloučená sraženina byla

zfiltrována a byla chromatografována na silikagelu RP-18 (Mobilní fáze: Gradient tetrahydrofuran/acetonitril/voda). Výtěžek: 15,31 g (82 % teoretického množství) bezbarvého, amorfního prášku. Obsah vody: 6,3%.

Elementární analýza (spočteno na bezvodou látku):

Spočteno: C 33,71 H 3,51 N 8,34. F 27,46 Gd 13,37

Nalezeno: C 33,61 H 3,63 N 8,17 F 27,31 Gd 13,20

Příklad 12

a) ' N-[(2-hydroxy)-ethyl]amid 2H,2H,4H,4H,5H,5H-3-oxaperfluorundekanové kyseliny

K 24,25 g (57,45 mmol) 2H,2H,4H,4H,5H,5H-3-oxaperfluortridekanové kyseliny ve 300 ml dichlormethanu bylo přidáno 8,90 g (70 mmol) oxalylchloridu a směs byla míchána 12 hodin při laboratorní teplotě. Reakční směs byla odpařena do sucha za sníženého tlaku. Zbytek byl rozpuštěn ve 100 ml dichlormethanu a byl při teplotě 0 °C přikapán ke směsi 3,66 g (60 mmol) ethanolaminu a 6,07 g (60 mmol) triethylaminu, rozpuštěné ve 200 ml dichlormethanu. Směs byla míchána 3 hodiny při teplotě 0°C, a poté 6 hodin při laboratorní teplotě. Bylo přidáno 300 ml 5% vodné kyseliny chlorovodíkové a směs byla intenzivně míchána 15 minut. Organická fáze byla oddělena, sušena nad síranem hořečnatým a byla odpařena do sucha za sníženého tlaku. Zbytek byl chromatografován na silikagelu (Mobilní fáze: dichlormethan/aceton= 20:1). Výtěžek: 24,86 g (93 % teoretického množství) bezbarvé tuhé látky.

Elementární analýza:

Spočteno: C 30,98 H 2,60 N 3,01 F 53,09

Nalezeno: C 30,71 H 2,81 N 2,87 F 52,82 • ·

Φ ······ ·· · *

b) Ν-(2-Hydroxyethyl)-Ν-1Η,ÍH,2H,2H,4H,4H,5H,5H-3-oxaperftuorundecyl)-amin g (51,59 mmol) der titulní sloučeniny z Příkladu 12a bylo rozpuštěno ve 300 ml tetrahydrofuranu a bylo přidáno 31 ml 10M roztoku borandimethylsulfidu (v tetrahydrofuranu). Směs byla zahřívána 12 hodin pod refluxem. Směs byla ochlazena na 0 °C a bylo přikapáno 200 ml methanoíu, a poté byla odpařena do sucha za sníženého tlaku. Zbytek byl rozpuštěn ve směsi 300 ml ethanolu a 50 ml 10% vodné kyseliny chlorovodíkové a směs byla 8 hodin míchána při teplotě 40°C. Reakční směs byla odpařena do sucha, zbytek byl rozpuštěn ve 300 ml 5% vodného roztoku hydroxidu sodného a byl extrahován třikrát s 300 ml dichiormethanu. Organická fáze byla sušena nad síranem hořečnatým, byla odpařena do sucha za sníženého tlaku a zbytek byl chromatografován na silikagelu (Mobilní fáze: dichlormethan/2-propanol= 20:1).

Výtěžek: 20,95 g (90 % teoretického množství) bezbarvé tuhé látky.

Elementární analýza:

Spočteno: C 31,94 H 3,13 N 3,10 F 54,73

Nalezeno: C 31,71 H 3,31 N 3,01 F 54,58

c) 1,4,7-Tris-(karboxylátomethyl)—10—{(3-aza-4-oxo-hexan-5yl)-kyselina-N-[(2-hydroxy)-ethyl-N-(ÍH,ÍH,2H,2H,4H,4H,5H,5H3-oxa)-perfluorundecyl]-amid}-1,4,7,10-tetraazacyklododekankomplex s gadoliniem g (15,88 mmol) komplexu gadolinia s 10-[1(karboxymethylkarboamoyl)-ethyl]-1,4,7,10-tetraazacyklododekan-1,4,7-trioctovou kyselinou a 1,35 g (31,76 mmol) chloridu lithného bylo při teplotě 60 °C rozpuštěno ve 100 ml dimethylsulfoxidu. Směs byla ochlazena na 15 °C a bylo přidáno 8,98 g (15,88 mmol) titulní sloučeniny z příkladu

12b. Směs byla míchána 10 minut a bylo přidáno 7,42 g (30 mmol) 2-ethoxy-l-ethoxykarbonyl-l,2-dihydrochinolinu. Pak byla směs míchána 12 hodin při laboratorní teplotě. Roztok byl nalit do směsi 200 ml acetonu a 1300 ml diethyletheru a směs byla míchána 2 hodiny při laboratorní teplotě. Vyloučená sraženina byla zfiltrována, rozpuštěna v malém množství směsi ethanol/voda a byl chromatografován na silikagelu RP-18. (Mobilní fáze: Gradient tetrahydrofuran/acetonitril/voda). Výtěžek: 14,01 g (83 % teoretického množství) bezbarvého, amorfního prášku.

Elementární analýza:

Spočteno: C 35,03 H 3,98 N 7,91 F 23,24 Gd 14,79

Nalezeno: C 34,85 H 4,19 N 7,75 F 23,05 Gd 14,58

Příklad 13

a) N-(3,6,9,12-tetraoxa-tridecyl)-amid 2H,2H,4H,4H,5H,5H-3oxa-perfluorundekanové kyseliny

Ke 24,25 g (57,45 mmol) 2H,2H,4H,4H,5H,5H-3-oxaperfluorundekanové kyseliny ve 300 ml dichlormethanu bylo přidáno 8,90 g (70 mmol) oxalylchloridu, a směs byla míchána 12 hodin při laboratorní teplotě. Směs byla odpařena do sucha za sníženého tlaku. Zbytek byl rozpuštěn ve 100 ml dichlormethanu a byl při teplotě 0 °C přikapán ke směsi 12,44 g (60 mmol) 3,6,9,12-tetraoxa-tridecylaminu a 6,07 g (60 mmol) triethylaminu, rozpuštěné ve 200 ml dichlormethanu. Směs byla míchána 3 hodiny při teplotě 0 °C, a poté 6 hodin při laboratorní teplotě. Pak bylo přidáno 300 ml 5% vodné kyseliny chlorovodíkové a směs byla intenzivně míchána 15 minut. Organická fáze byla oddělena, sušena nad síranem hořečnatým a byla odpařena do sucha za sníženého tlaku. Zbytek byl chromatografován na silikagelu (mobilní fáze: dichlormethan/aceton=15:1).

• · ·« ·

Výtěžek: 31,61 g (90 % teoretického množství) bezbarvé tuhé látky.

Elementární analýza:

Spočteno: C 37,33 H 4,29 N 2,29 F 40,40

Nalezeno: C 37,15 H 4,41 N 2,12 F 40,18

b) N-(3,6,9,12-Tetraoxatridecyl)-Ν-(IH,IH,2H,2H,4H,4H,5H,5H3-oxa-perfluorundecyl)-amin g (50,7 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 13a bylo rozpuštěno ve 300 ml tetrahydrofuranu a bylo přidáno 32 ml 10M roztoku borandimethylsulfidu (v tetrahydrofuranu). Směs pak byla zahřívána 16 hodin pod refluxem. Reakční směs byla ochlazena na teplotu 0 °C a bylo přikapáno 200 ml methanolu, na závěr byla reakční směs odpařena do sucha za sníženého tlaku. Zbytek byl rozpuštěn ve 300 ml ethanolu a 50 ml 10% vodné kyseliny chlorovodíkové a směs byla míchána 8 hodin při teplotě 40°C. Směs byla odpařena do scuha za sníženého tlaku, zbytek byl dán do 300 ml 5% vodného hydroxisu sodného a byla třikrát extrahována s 300 ml dichlormethanu. Organická fáze byla sušena nad síranem hořečnatým, byla odpařena do sucha za sníženého tlaku a zbytek byl chromatografován na silikagelu (Mobilní fáze: dichlormethan/2-propanol= 20:1). Výtěžek: 28,17 g (93 % teoretického množství) bezbarvé tuhé látky. Elementární analýza (spočteno na bezvodou látku):

Spočteno: C 38,20 H 4,72 N 2,34 F 41,34

Nalezeno: C 38,05 H 4,83 N 2,40 F 41,50

c) 1,4,7 Tris-(karboxylátomethyl)—10—{(3-aza-4-oxo-hexan-5yl)-kyselina-N-[(3,6,9,12-tetraoxa)-tridecyl-N-(IH,IH,2H,2H, 4H,4H,5H,5H-3-oxa)-perfluorundecyl]-amid}-1,4,7,10tetraazacyklododekan- komplex gadolinia • ·· · ····

·· ·· g (15,88 mmol) komplexugadolinia s 10—[l— (karboxymethylkarboamoyl)-ethyl]-1,4,7,10-tetraazacyklododekan-1,4,7-trioctovou kyselinou a 1,35 g (31,76 mmol) chloridu lithného bylo rozpuštěno při teplotě 60 °C ve 100 ml dimethylsulfoxidu. Směs byla ochlazena na teplotu 15 °C a bylo přidáno 9,49 g (15,88 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 13b. Směs byla míchána 10 minut a bylo přidáno 7,42 g (30 mmol) 2-ethoxy-l-ethoxykarbonyl-l,2-dihydrochinolin. Směs byla míchána 12 hodin při laboratorní teplotě. Reakční směs pak byla nalita do směsi 200 ml acetonu a 1300 ml diethylethera a směs byla míchána 2 hodiny při laboratorní teplotě. Vyloučená sraženina byla zfiltrována, rozpuštěna v malém množství směsi ethanolu a vody a byla chromatografována na silikagelu RP-18 (Mobilní fáze: Gradient tetrahydrofuran/acetonitril/voda). Výtěžek: 16,13 g (84 % teoretického množství).

Elementární analýza:

Spočteno: C 37,75 H 4,67 N 6,95 F 20,43 Gd 13,01

Nalezeno: C 37,91 H 4,81 N 6,83 F 20,60 Gd 13,15

Příklad 14

a) terc.Butylester 2-N-(IH,IH,2H,2H,4H,4H,5H,5H-3-oxaperfluortridecyl)-aminooctové kyseliny

Ke 32,0 g (58,65 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 5b a 24,89 g (180 mmol) uhličitanu draselného ve 300 ml acetonitrilu bylo při teplotě 50 °C přikapáno 6,523 g (40 mmol) terč.butylesteru kyseliny bromoctové a reakční směs byla míchána 3 hodiny při této teplotě. Pak bylo přidáno 300 ml dichlormethanu, vyloučené soli byly zfiltrovány a filtrát byl odpařen ve vakuu do sucha. Zbytek byl chromatografován na silikagelu (Mobilní fáze: dichlormethan/2-propanol= 20:1).

• · • · • ·

Výtěžek: 28,11 g (57 % teoretického množství) bezbarvé tuhé látky.

Elementární analýza:

Spočteno: C 34,80 H 3,24 N 2,25 F 51,98

Nalezeno: C 34.,98 H 3,31 N 2,20 F 52,16

b) 1,4,7-Tris-(karboxylátomethyl)-10-{(3-aza-4-oxo-hexan-5yl)-kyselina-N[(terč.butyloxykarbonylmethyl)-N-(ÍH,ÍH,2H,2H, 4H,4H,5H,5H-3-oxa)-perfluortridecyl]-amid}-l,4,7,10tetraazacyklododekan- komplex gadolinia g (15,88 mmol) komplexu gadolinia s 10-[1(karboxymethylkarboamoyl)-ethyl]-1,4,7,10-tetraazacyklododekan-1,4,7-trioctové kyseliny a 1,35 g (31,76 mmol) chloridu lithného bylo při teplotě 60 °C rozpuštěno ve 100 ml dimethylsulfoxidu. Směs byla ochlazena na 15 °C a bylo přidáno 9,87 g (15,88 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 14a. Reakční směs byla míchána 10 minut a bylo přidáno 7,42 g (30 mmol) 2-ethoxy-l-ethoxykarbonyl-l,2-dihydrochinolinu.

Směs pak byla míchána 12 hodin při laboratorní teplotě. Směs pak byla nalita do směsi 200 ml acetonu a 1300 ml diethyletheru a byla míchána 2 hodiny při laboratorní teplotě. Vyloučená sraženina byla zfiltrována, rozpuštěná ve směsi ethanol/voda a byla chromatografována na silikagelu RP18 (Mobilní fáze: Gradient tetrahydrofuran/acetonitril/voda). Výtěžek: 16,64 g (85 % teoretického množství)

Elementární analýza:

Spočteno: C 36,04 H 3,92 N 6,82 F 26,19 Gd 12,72

Nalezeno: C 35,92 H 3,83 N 6,91 F 26,29 Gd 12,84

c) 1,4,7-Tris-(karboxylátomethyl)-10-{(3-aza-4-oxo-hexan-5yt)-kyselina-N-[(karboxymethyl)-N-(ÍH, ÍH, 2H, 2H, 4H,4H,5H,5H-3• 444

44 ·44 ·

4 · · · ♦

4 4

4444 oxa)-perfluortridecyl]-amid}-l,4,7,10-tetraazacyklododekankomplex gadolinia g (8,11 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 14b bylo rozpuštěno v 50 ml trifluoroctové kyseliny a byla míchána 5 hodin při laboratorní teplotě. Směs byla odpařena do sucha a byla chromatografována na silikagelu RP-18 (Mobilní fáze: Gradient tetrahydrofuran/acetonitril/voda). Po odpaření frakcí obsahujících produkt byl zbytek rozpuštěn ve vodě a pH bylo nastaveno na hodnotu 7,2 pomocí 5% hydroxidu sodného. Roztok byl zfiltrován a filtrát byl lyofilizován. Výtěžek: 10,48 g (91 % teoretického množství).

Elementární analýza (spočteno na bezvodou látku):

Spočteno: C 33,06 H 3,28 N 7,01 F 26,94 Gd 13,12 Na 1,92 Nalezeno: C 33,19 H 3,40 N 7,20 F 27,14 Gd 13,25 Na 2,00

Příklad 15

a) N-(2-hydroxyethyl)amid 2H,2H,4H,4H,5H,5H-3-oxaperfluortridekanové kyseliny

Ke 32 g (56,61 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 4a bylo přidáno 2,96 g (74 mmol) hydridu sodného (z 60 % hydridu sodného v parafinovém oleji) ve 300 ml tetrahydrofuranu a směs byla míchána 3 hodiny při laboratorní teplotě pod atmosférou dusíku. Pak bylo přidáno 7,67 g (74 mmol) terc-butylesteru kyselinu bromoctové rozpuštěné ve 20 ml tetrahydrofuranu, a směs byla míchána 5 hodin při teplotě 50 °C. Pak bylo přidáno 50 ml methanolu a směs byla odpařena do sucha za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatografií na silikagelu (Mobilní fáze: dichlormethan/2-Propanol= 20:1). Výtěžek: 23,46 g (61 % teoretického množství).

Elementární analýza:

Spočteno: C 35,36 H 3,26 N 2,06 F 47,54

Nalezeno: C 35,52 H 3,40 N 2,17 F 47,40 • to ····

b) N-(1H,1H,2H,2H,4H,4H,5H,5H-3-oxa-perfluortridecyl)-N- [4terc. butyloxykarbonyl-3-oxa)-butyl]-amin

35,0 g (51,52 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 15a bylo rozpuštěno ve 300 mi tetrahydrofuranu a bylo přidáno 31 ml 10M roztoku borandimethylsulfidu (v tetrahydrofuranu). Reakce byla zahřívána 16 hodin za refkuxu. Pak byla ochlazena na teplotu 0 °C a bylo přikapáno 200 ml methanolu, na závěr byla odpařena do sucha za sníženého tlaku. Zbytek byl rozpuštěn ve směsi 300 ml ethanolu a 50 ml 10% vodné kyseliny chlorovodíkové a směs byla míchána 8 hodin při teplotě 40°C. Reakční směs byla odpařena do sucha, zbytek byl rozpuštěn ve 300 ml 5% vodného roztoku hydroxidu sodného a byl extrahován třikrát s 300 ml dichlormethanu. Organická fáze byla sušena nad síranem hořečnatým, byla odpařena do sucha za sníženého tlaku a zbytek byl chromatografován na silikagelu (Mobilní fáze: dichlormethan/2-propanol= 20:1).

Výtěžek: 31,88 g (93 % teoretického množství).

Elementární analýza:

Spočteno: C 36,10 H 3,64 N 2,11 F 48,54

Nalezeno: C 35,90 H 3,75 N 2,20 F 48,71

c) 1,4,7-Tris-(karboxylátomethyl)—10—{(3-aza-4-oxo-hexan-5yl)-kyselina-N-[(4-terc.butyloxykarbonyl-3-oxa)-butyl)-N-(1H, 1H,2H,2H,4H,4H,5H,5H-3-oxa)-perfluortridecyl]-amid)-1,4,7,10tetraazacyklododekan, komplex gadolinia g (15,88 mmol) komplexu gadolinia s 10-[1(karboxymethylkarboamoyl)-ethyl]-1,4,7,10-tetraazacyklododekan-1,4,7-trioctové kyseliny a 1,35 g (31,76 mmol) chloridu lithného bylo rozpuštěno při teplotě 60 °C ve 100 ml dimethylsulfoxidu. Směs byla ochlazena na 15 °C a bylo přidáno 10,57 g (15,88 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 15b. Směs byla míchána 10 minut a bylo přidáno 7,42 g (30 ·· Π·» • 4 •♦Ί* mmol) 2-ethoxy-l-ethoxykarbonyl-l,2-dihydrochinolinu. Reakční směs byla míchána 12 hodin při laboratorní teplotě. Roztok byl vylit do směsi 200 ml acetonu a 1300 ml diethyletheru a směs byla míchána 2 hodiny při laboratorní teplotě. Vyloučená sraženina byla zfiltrována, rozpuštěna v malém množství směsi ethanol/voda a byla chromatografována na silikagelu RP-18. (Mobilní fáze: Gradient tetrahydrofuran/acetonitril/voda). Výtěžek: 16,63 g (82 % teoretického množství).

Elementární analýza:

Spočteno: C 36,68 H 4,10 N 6,58 F 25,29 Gd 12,31

Nalezeno: C 36,81 H 4,20 N 6,41 F 25,40 Gd 12,19

d) 1, 4,7-Tris-(karboxylátomethyl)-10-{(3-aza-4-oxo-hexan-5yl)-kyselina-[N-(4-karboxy-3-oxa)-butyl}-N-(IH,IH,2H,2H,4H,

4H,5H,5H-3oxa)-perfluortridecyl]-amid}-1,4,7,10-tetraazacyklododekan, komplex gadolinia g (9,40 mmol] titulní sloučeniny z Příkladu 15c bylo rozpuštěno v 50 ml trifluoroctové kyseliny a směs byla 5 hodin míchána při laboratorní teplotě. Směs byla odpařena za sníženého tlaku do sucha a zbytek byl chromatografován na silikagelu RP-18 (Mobilní fáze: Gradient tetrahydrofuran/ acetonitril/voda) . Po odpaření frakcí obsahujících produkt byl zbytek rozpuštěn ve vodě a pH bylo nastaveno na hodnotu 7,2 pomocí 5% hydroxidu sodného. Roztok byl zfiltrován a filtrát byl lyofilizován. Výtěžek: 11,41 g (92 % teoretického množství). Obsah vody: 5,8 %.

Elementární analýza: (spočteno na bezvodou látku):

Spočteno: C 33,82 H 3,49 N 6,76 F 25,98 Gd 12,65 Na 1,85 Nalezeno: C 33,95 H 3,60 N 6,88 F 26,15 Gd 12,49 Na 1,93

Příklad 16 • · • · • ·

Ν-(2Η,2Η,4Η,4Η,5Η,5H-3-oxa-perfluortridecyl)-amid ·· ··*· ·· ····

2H,2H,4H,4H,5H,5H-3-oxa-perfluortridekanové kyseliny

Ke 30 g (57,45 mmol) 2H,2H,4H,4H,5H,5H-3-oxaperfluortridekanové kyseliny ve 300 ml dichlormethanu bylo přidáno 8,90 g (70 mmol) oxalylchloridu a směs byla míchána 12 hodin při laboratorní teplotě. Směs byla odpařena do sucha za sníženého tlaku. Zbytek byl rozpuštěn ve 100 ml dichlormethanu a poté byl při teplotě 0 °C přikapán ke směsi 32,62 g (60 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 5b a 6,07 g (60 mmol) triethylaminu, rrozpuštěné ve 200 ml dichlormethanu. Směs byla míchána 3 hodiny při 0 °C, a poté 6 hodin při laboratorní teplotě. Bylo přidáno 300 ml 5% vodného roztoku kyseliny chlorovodíkové a směs byla míchána 15 minut. Organická fáze byla oddělena, sušena nad síranem hořečnatým a odpařena do sucha za sníženého tlaku. Zbytek byl chromatografován na silikagelu (Mobilní fáze: dichlormethan /aceton=15:1). Výtěžek: 52,87 g (91 % teoretického množství). Elementární analýza:

Spočteno: C 28,50 H 1,49 N 1,38 F 63,87

Nalezeno: C 28,65 H 1,61 N 1,50 F 64,01

b) N-Bis-(1H,1H,2H,2H,4H,4H,5H,5H-3-oxa)-perfluortridecyl) amin g (51,42 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 16a bylo rozpuštěno v 500 ml tetrahydrofuranu a bylo přidáno 31 ml 10M borandimethylsulfidu (v tetrahydrofuranu). Směs byla míchána 6 hodin za refluxu. Poté byla ochlazena na teplotu 0 °C a bylo přikapáno 200 ml methanolu, na závěr byla odpařena do sucha za sníženého tlaku. Zbytek byl rozpuštěn ve směsi 400 ml ethanolu a 70 ml 10% vodného roztoku kyseliny chlorovodíkové a směs byla míchána 8 hodin při teplotě 40°C. Směs byla odpařena do sucha, zbytek byl rozpuštěn v 400 ml 5 • · • · · · · ·

100 % vodného roztoku hydroxisu sodného a byl třikrát extrahován s 400 mi dichlormethanu. Organická fáze byla sušena nad síranem hořečnatým, byla odpařena do sucha za sníženého tlaku a zbytek byl chromatografován na silikagelu (Mobilní fáze: dichlormethan/2-propanol= 20:1). Výtěžek: 47,18 g (92% teoretického množství) bezbarvé tuhé látky.

Elementární analýza:

Spočteno: C 28,90 H 1,72 N 1,40 F 64,77

Nalezeno: C 30,03 H 1,81 N 1,55 F 65,00

c) 1,4,7-Tris(karboxylátomethyl)-10-[(3-aza-4-oxo-hexan-5yl)-kyselina-N-bis-(1H,ÍH,2H,2H,4H,4H,5H,5H-3-oxaperfluortridecyl)-amid]-1,4,7,10-tetraazacyklododekan, komplex gadolinia g (15,88 mmol) komplexu gadolinia s 10-[1(karboxymethylkarboamoyl)-ethyl]-1,4,7,10-tetraazacyklododekan-1,4,7-trioctovou kyselinou a 1,35 g (31,76 mmol) chloridu lithného bylo rozpuštěno při teplotš 60 °C ve 100 ml dímethyfsulfoxidu. Směs byla ochlazena na teplotu 15 °C a bylo přidáno 15,84 g (15,88 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 16b. Směs byla míchána 10 minut a bylo přidáno 7,42 g (30 mmol) 2-ethoxy-l-ethoxykarbonyl-l, 2-dihydrochinolinu. Směs byla míchána 12 hodin při laboratorní teplotě. Reakční směs byla nalita do směsi 200 ml acetonu a 1300 ml diethyletheru a byla míchána 2 hodiny při laboratorní teplotě. Vyloučená sraženina byla zfiltrována, rozpuštěna v malém množství směsi ethanol/voda a byla chromatografována na silikagelu RP-18 (Mobilní fáze: Gradient tetrahydrofuran/ acetonitril/voda.

Výtěžek: 20,95 g (82 % teoretického množství).

Elementární analýza:

Spočteno: C 32,10 H 2,82 N 5,22 F 40,14 Gd 9,77 • · • · · ·

101

Nalezeno: C 29,87 H 2,91 N 5,09 F 40,28 Gd 9,98

Příklad 17

a) N-(5-hydroxy-3-oxapentyt)-amid 2H, 2H, 4H,4H,5H,5H-3-oxaperfluortridekanové kyseliny

Ke 32 g (52,52 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 3a bylo přidáno 2,80 g (70 mmol) hydridu sodného (z 60% hydridu sodného v parafinovém oleji) ve 300 ml tetrahydrofuranu a smě-s byla míchána 3 hodiny při laboratorní teplotě pod atmosférou dusíku. Pak bylo přidáno 9,68 g (70 mmol) terc-butylesteru kyseliny bromoctové rozpuštěné ve 20 ml tetrahydrofuranu a směs byla míchána 5 hodin při teplotě 50 °C. Bylo přidáno 50 ml methanolu a směs byla odpařena do sucha za sníženého tlaku. Zbytek byl chromatografován na silikagelu (Mobilní fáze: dichlormethan/2-propanol= 20:1). Výtěžek: 19,31 g (59 % teoretického množství).

Elementární analýza:

Spočteno: C 32,76 H 2,91 N 2,25 F 51,82

Nalezeno: C 32,98 H 2,99 N 2,36 F 51,98

b) N-(3,β-Dioxa-heptyl)-N-(1H,1H,2H,2H,4H,4H,5H,5H-3-oxaperfluortridecyl)-amin g (51,34 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 17a bylo rozpuštěno ve 300 ml tetrahydrofuranu a bylo přidáno 31 ml 10M roztoku borandimethylsulfidu (v tetrahydrofuranu). Směs byla míchána 16 hodin za refluxu. Směs byla ochlazena na teplotu 0 °C a bylo přikapáno 200 ml methanolu, na závěr byla odpařena ve vakuu do sucha. Zbytek byl rozpuštěn ve směsi 300 ml ethanolu a 50 ml 10% vodného roztoku kyseliny chlorovodíkové a směs byla míchána 8 hodin při teplotě 40°C. Směs byla odpařena ve vakuu, zbytek byl rozpuštěn ve 300 ml • · · · • ·

5% vodného roztoku hydroxidu sodného a směs byla třikrát extrahována se 300 ml dichlormethanu. Organická fáze byla sušena nad síranem hořečnatým, byla odpařena do sucha za sníženého tlaku a zbytek byl chromatografován na silikagelu (Mobilní fáze: dichlormethan/2-propanol= 20:1). Výtěžek: 28,47 g (91 % teoretického množství).

Elementární analýza:

Spočteno: C 33,51 H 3,31 N 2,30 F 53,01

Nalezeno: C 33,63 H 3,41 N 2,21 F 52,87

c) 1,4,7-Tris(karboxylátomethyl)-10-[(3-aza-4-oxo-hexan-5yl)-kyselina-N-(3,6-dioxa)-heptyl-N-(IH,IH,2H,2H,4H,4H,5H,5H3-oxa-perfluortridecyl)-amid]-1,4,7,10-tetraazacyklododekan, komplex gadolinia g (15,88 mmol) komplexu gadolinia s 10-[1(karboxymethylkarbamoyl)-ethyl]-1,4,7,10-tetraazacyklododecan-1,4,7-trioctovou kyselinou a 1,35 g (31,76 mmol) chloridu lithného bylo při teplotě 60 °C rozpuštěno ve 100 ml dimethylsulfoxidu. Směs byla ochlazena na teplotu 15 °C a bylo přidáno 9,68 g (15,88 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 17b. Směs byla míchána 10 minut a bylo přidáno 7,42 g (30 mmol) 2-ethoxy-l-ethoxykarbonyl-l,2-dihydrochinolinu. Reakční směs byla míchána 12 hodin při laboratorní teplotě. Reakční směs byla nalita do směsi 200 ml acetonu a 1300 ml diethyletheru a byla míchána 2 hodiny při laboratorní teplotě. Vyloučená sraženina byla zfiltrována, rozpuštěna ve směsi ethanol/voda a byla chromatografována na silikagelu RP18 (Mobilní fáze: Gradient tetrahydrofuran/Acetonitril/voda). Výtěžek: 16,09 g (83 % teoretického množství).

Elementární analýza:

Spočteno: C 35,41 H 3,96 N 6,88 F 26,45 Gd 12,88

Nalezeno: C 35,57 H 4,11 N 6,72 F 26,58 Gd 12,97 ···· ·· ··

103

Příklad 18

a) N-(hexyl)-amid 2H,2H,4H,4H,5H,5H-3-oxa-perfiuortridekanové kyseliny

Ke 30 g (57,45 mmol) 2H,2H,4H,4H,5H,5H-3-oxaperfIuortridekanové kyseliny ve 300 ml dichlormethanu bylo přidáno 8,90 g (70 mmol) oxalylchloridu a směs byla míchána 12 hodin při laboratorní teplotě. Poté byla odpařena do sucha za sníženého tlaku. Zbytek byl rozpuštěn ve 100 ml dichlormethanu a při teplotě 0 °C byl přikapán do směsi 6,07 g (-60 mmol) n-hexylamina a 6,07 g (60 mmol) triethylaminu, rozpuštěné ve 200 ml dichlormethanu. Směs byla míchána 3 hodiny při teplotě 0 °C, a poté 6 hodin při laboratorní teplotě. Bylo přidáno 300 ml 5% vodné kyseliny chlorovodíkové a směs byla míchána 15 minut. Organická fáze byla oddělena, sušena nad síranem hořečnatým a byla odpařena do sucha za sníženého tlaku. Zbytek byl chromatografován na silikagelu (Mobilní fáze: dichlormethan/aceton=20:1).

Výtěžek: 30,95 g (89 % teoretického množství).

Elementární analýza:

Spočteno: C 35,72 H 3,33 N 2,31 F 53,35

Nalezeno: C 35,60 H 3,45 N 2,43 F 53,63

b) N-(Hexyl)-N-(1H,1H,2H, 2H, 4H,4H,5H,5H-3-oxaperfluortridecyl)-amin g (51,21 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 18a bylo rozpuštěno v 300 ml tetrahydrofuranu a bylo přidáno 31 ml 10M roztoku borandimethylsulfidu (v tetrahydrofuranu). Směs byla zahřívána 16 hodin pod refluxem. Směs byla ochlazena na teplotu 0 °C a bylo přikapáno 200 ml methanolu, na závěr byla směs odpařena do sucha za sníženého tlaku. Zbytek byl nalit do směsi 300 ml ethanolu a 50 ml 10% vodného roztoku kyseliny chlorovodíkové a směs byla 8 hodin míchána při teplotě 40°C.

• · • · · · • ti • ti • tititi • ti ti titititi titi ti

104

Směs byla odpařena do sucha za sníženého tlaku, zbytek byl rozpuštěn ve 300 ml 5% vodného roztoku hydroxidu sodného a byl extrahován třikrát s 300 ml dichlormethanu. Organická fáze byla sušena nad síranem hořečnatým, byla odpařena do sucha za sníženého tlaku a zbytek byl chromatografován na silikagelu (Mobilní fáze: dichlormethan/2-propanol= 20a). Výtěžek: 28,16 g (93 % teoretického množství)

Elementární analýza:

Spočteno: C 36,56 H 3,75 N 2,37 F 54,62

Nalezeno: C 36,40 H 3,82 N 2,27 F 54,81

c) 1,4,7-Tris(karboxylátomethyl)-10-{(3-aza-4-oxo-hexan-5yl)-kyselina-[N-(hexyl)-N-(1H,1H,2H,2H, 4H,4H, 5H,5H-3-oxaperfluortridecyl]-amid}-l,4,7,10-tetraazacyklododekan, komplex gadolinia g (15,88 mmot) komplexu gadolinia s 10-[1(karboxymethylkarboamoyl)-ethyl-1,4,7,10-tetraazacyklododekan-l , 4 , 7-trioctovou kyselinou a 1,35 g (31,76 mmol) chloridu lithného bylo rozpuštěno při teplotě 60 °C ve 100 ml dimethytsulfoxidu. Směs byla ochlazena na teplotu 15 °C a bylo přidáno 10,98 g (15,88 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 18b. Směs byla míchána 10 minut a bylo přidáno 7,42 g (30 mmol) 2-ethoxy-l-ethoxykarbonyl-l, 2-dihydrochinolinu. Směs pak byla míchána 12 hodin při laboratorní teplotě. Reakční směs byla nalita do směsi 200 ml acetonu a 1300 ml diethyletheru a byla míchána 2 hodiny při laboratorní teplotě. Vyloučená sraženina byla zfiltrována, rozpuštěna ve směsi ethanol/voda a byla chromatografována na silikagelu RP18 (Mobilní fáze: Gradient tetrahydrofuran/acetonitril/voda). Výtěžek:16,29 g (84 % teoretického množství).

Elementární analýza:

Spočteno: C 36,94 H 4,19 N 6,99 F 26,85 Gd 13,07 • · • A

105

A ·

AAA· • A A AA·· ·· ·

Nalezeno: C 37,18 H 4,31 N 7,18 F 26,67 Gd 13,19

Příklad 19

a) N-[(10-terc.butyloxykarbonyl)-decyl]-amid 2H,2H,4H,4H,5H,5H-3-oxa-perfluortridekanové kyseliny

Ke 30 g (57,45 mmol) 2H,2H,4H,4H,5H,5H-3-oxaperfluortridekanové kyseliny ve 300 ml dichlomethanu bylo přidáno 8,90 g (70 mmol) oxalylchloridu a směs byla míchána 12 hodin při laboratorní teplotě. Směs byla odpařena do sucha za - sníženého tlaku. Zbytek byl rozpuštěn ve 100 ml dichlormethanu a při teplotě 0 °C byl přikapán ke směsi 15,45 g (60 mmol) terč.butylester 11-amino-undekanové kyseliny a 6,07 g (60 mmol) triethylaminu, rozpuštěné ve 200 ml dichlormethanu. Směs byla míchána 3 hodiny při teplotě 0°C, a poté 6 hodin při laboratorní teplotě. Bylo přidáno 300 ml 5% vodného roztoku kyseliny chlorovodíkové a směs byla míchána 15 minut. Organická fáze byla oddělena, sušena nad síranem hořečnatým a byla odpařena do sucha za sníženého tlaku. Zbytek byl chromatografován na silikagelu (Mobilní fáze: dichlormethan/aceton=20:1). Výtěžek: 42,04 g (92% teoretického množství).

Elementární analýza:

Spočteno: C 42,58 H 4,76 N 1,84 F 42,41

Nalezeno: C 42,74 H 4,90 N 1,73 F 42,61

b) N-(10-terc.Butyloxykarbonyl-decyl)-N-(1H,1H,2H,2H,4H,4H, 5H,5H-3-oxas-perfluortridecyl)-amin g (51,21 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 19 a bylo rozpuštěno ve 300 ml tetrahydrofuranu a bylo přidáno 31 ml 10M roztoku borandimethylsulfidu (v tetrahydrofuranu). Směs byla míchána 16 hodin za refluxu. Poté byla ochlazena na teplotu 0°C a bylo přidáno 200 ml methanolu, na závěr byla • · · · • ·

106 směs odpařena do sucha za sníženého tlaku. Zbytek byl rozpuštěn ve směsi 400 ml ethanolu a 70 ml 10% vodného roztoku kyseliny chlorovodíkové a byla 8 hodin míchána při teplotě 40 °C. Směs byla odpařena do sucha ve vakuu, zbytek byl rozpuštěn ve 350 ml 5% vodného roztoku hydroxisu sodného a byla extrahována třikrát s 400 ml dichlormethanu. Organická fáze byla sušena nad síranem hořečnatým, byla odpařena do sucha za sníženého tlaku a zbytek byl chromatografován na silikagelu (Mobilní fáze: dichlormethan/2-propanol= 20:1). Výt-ěžek: 34,84 g (91 % teoretického množství).

Elementární analýza:

Spočteno: C 43,38 H 5,12 N 1,87 F 43,20

Nalezeno: C 43,22 H 5,23 N 1,96 F 43,33

c) 1,4,7-Tris(karboxylátomethyl)—10—{(3-aza-4-oxo-hexan-5yl)-kyselina-[N-(10-terč.butyloxykarbonyl)-decyl-N-(1H,1H,2H, 2H,4H, 4H, 5H,5H-3-oxa-perfluortridecyl]-amid}-1,4,7,10tetraazacyklododekan, komplex gadolinia g (15,88 mmol) komplexu gadolinia s 10-[1(karboxymethylkarboamoyl)-ethyl]-1,4,7,10-tetraazacyklododekan-1,4,7-tríoctovou kyselinou a 1,35 g (31,76 mmol) chloridu lithného bylo rozpuštěno při teplotě 60 °C ve 100 ml dimethylsulfoxidu. Směs byla ochlazena na 15 °C a bylo přidáno 11,87 g (15,88 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 19b. Směs byla míchána 10 minut a poté bylo přidáno 7,42 g (30 mmol) 2-ethoxy-l-ethoxykarbonyl-l,2-dihydrochinolinu. Směs pak byla míchána 12 hodin při laboratorní teplotě. Reakční roztok byl poté nalit do směsi 200 ml acetonu a 1300 ml diethyletheru a byla míchána 2 hodiny při laboratorní teplotě. Vyloučená sraženina byla zfiltrována, rozpuštěna ve směsi ethanol/voda a byla chromatografována na silikagelu RP18 (Mobilní fáze: Gradient tetrahydrofuran/acetonitril/voda).

• « · · ·· • 4 4 4 · 4 ···· «4 ·

107

Výtěžek: 17,92 g (83 % teoretického množství).

Elementární analýza:

Spočteno: C 40,65 H 4,89 N 6,18 F 23,76 Gd 11,57

Nalezeno: C 40,81 H 4,99 N 6,32 F 23,94 Gd 11,73

d) 1,4,7-Tris-(karboxylátomethyl)-10-{(3-aza-4-oxo-hexan-5yl)-kyselina-[N-(10-karboxy)-decyl-N-(1H, 1H, 2H, 2H, 4H,4H,5H, 5H-3oxa)-perfluortridecyl]amid}-l,4,7,10-tetraazacyklododekan, komplex gadolinia, sodná sůl g (8,83 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 19c bylo rozpuštěno v 50 ml trifluoroctové kyseliny a směs byla 5 hodin míchána při laboratorní teplotě. Směs byla odpařena do sucha za sníženého tlaku a zbytek byl chromatografován na silikagelu RP-18 (Mobilní fáze: Gradient tetrahydrofuran/ acetonitril/voda). Po odpaření frakcí obsahujících produkt bylo pH nastaveno na hodnotu 7,2 pomocí vodného roztoku 5% hydroxidu sodného. Roztok byl zfiltrován a filtrát byl lyofilizován.

Výtěžek: 12,48 g (92 % teoretického množství).

Obsah vody: 6,2%.

Elementární analýza (spočteno na bezvodou látku):

Spočteno: C 38,07 H 4,34 N 6,34 F 24,37 Gd 11,87 Na 1,73 Nalezeno: C 37,89 H 4,44 N 6,22 F 24,51 Gd 12,01 Na 1,80

Příklad 20

a) N-(1H, 1H, 2H, 2H, 4H, 4H, 5H, 5H-3oxa)-perfluortridecyl)amid 15-Benzyl-3,6,9,12,15-Pentaoxa-hexadekanové kyseliny

K 19,67 g (57,45 mrnof) 15-Benzyl-3,6,9,12,15pentaoxahexadekanové kyseliny ve 250 ml dichlormethanu bylo přidáno 8,90 g (70 mmol) oxalylchloridu a směs byla míchána 12 hodin pří laboratorní teplotě. Reakční směs byla odpařena do sucha za sníženého tlaku. Zbytek byl rozpuštěn ve 100 ml • · ··« «

dichlormethanu a byl při teplotě 0 °C přikapán ke směsi 32,62 g (60 mmol) 1H,1H,2H,2H,4H,4H,5H, 5H-3-oxa-perfluortridecylamin hydrochloridu a 6,07 g (60 mmol) triethylaminu, rozpuštěné ve 200 ml dichlormethanu. Směs byla míchána 3 hodiny při teplotě 0 °C, a poté 6 hodin při laboratorní teplotě. Bylo přidáno 300 ml 5% vodné kyseliny chlorovodíkové a směs byla míchána 15 minut. Organická fáze byla oddělena, sušena nad síranem hořečnatým a odpařena do sucha za sníženého tlaku. Zbytek byl chromatografován na silikagelu (Mobilní fáze: dichlormethan/aceton= 20:1).

Výtěžek: 44,91 g (94 % teoretického množství) bezbarvé tuhé látky.

Elementární analýza:

Spočteno: C 41,89 H 4,12 N 1,68 F 38,84

Nalezeno: C 42,02 H 4,25 N 1,83 F 39,07

b) N-l5-Benzyl-3,6,9,12,15-pentaoxa-hexadecyl)-N-(1H,1H,2H,

2H,4H,4H,5H,5H-3oxa)-perfluortridecyl)-amin g (51,72 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 20a) bylo rozpuštěno ve 400 ml tetrahydrofuranu a bylo přidáno 31 ml 10M roztoku borandimethylsulfidu (v tetrahydrofuranu). Směs byla míchána 16 hodin pod refluxem. Pak byla ochlazena na teplotu 0°C a bylo přikapáno 200 ml methanolu, a reakční směs byla poté odpařena do sucha za sníženého tlaku. Zbytek byl rozpuštěn ve směsi 400 ml ethanolu a 50 ml 10% vodné kyseliny chlorovodíkové a byl míchán 8 hodin při teplotě 40°C. Reakční směs byla odpařena do sucha za sníženého tlaku, byla rozpuštěna ve 350 ml 5 % vodného roztoku hydroxidu sodného a byla třikrát extrahována se 400 ml dichlormethanu. Organická fáze byla sušena nad síranem hořečnatým, byla odpařena do sucha za sníženého tlaku a zbytek byl ·· ···· ·· 99 99 9999

9 9 9 9 9 9 ·· 9

109 chromatografován na silikagelu (mobilní fáze:

dichlormethan/2-propanol= 20:1).

Výtěžek: 39,32 g (93 % teoretického množství).

Elementární analýza:

Spočteno: C 42,60 H 4,12 N 1,68 F 38,84

Nalezeno: C 42,45 H 4,23 N 1,57 F 38,99

c) 1,4,7-Tris-(karboxylátomethyl)-10-{(3-aza-4-oxo-hexan-5yl)-kyselina-[N-(15-benzyl-3,6,9,12,15-pentaoxa)-hexadecyl-N(1H-, 1H,2H,2H,4H,4H,5H, 5H-3-oxa) -tridecyl] -amid} -1,4,7,10tetraazacyklododekan, komplex gadolinia g (15,88 mmol) komplexu gadolinia s 10-[1(karboxymethylkarbamoyl)-ethyl)-1,4,7,10-tetraazacyklododekan-1,4,7-trioctvou kyselinou a 1,35 g (31,76 mmol) chloridu lithného bylo při teplotě 60 °C rozpuštěno ve 100 ml dimethylsulfoxidu. Směs byla ochlazena na teplotu 15 °C a bylo přidáno 12,98 g (15,88 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 20b). Směs byla míchána 10 minut a bylo přidáno 7,42 g (30 mmol) 2-ethoxy-l-ethoxykarbonyl-l,2dihydrochinolinu. Reakční směs pak byla míchána 12 hodin při laboratorní teplotě. Reakční roztok byl nalit do směsi 200 ml acetonu a 1300 ml diethyletheru a byl míchán 2 hodiny při laboratorní teplotě. Vyloučená sraženina byla zfiltrována, byla rozpuštěna v malém množství směsi ethanolu a vody a byla chromatografována na silikagelu RP-18 (Mobilní fáze: Gradient tetrahydrofuran/acetonitril/voda).

Výtěžek: 18,84 g (83 % teoretického množství).

Elementární analýza:

Spočteno: C 40,34 H 4,51 N 5,88 F 22,60 Gd 11,00

Nalezeno: C 40,50 H 4,62 N 5,76 F 22,73 Gd 11,16

110 • 4 4 44 4

4 4 44 4

• · 4 4 4 4 • 4 ···· 44 44

d) 1,4,7-Tris-(karboxylátomethyl)-10-{(3-aza-4-oxo-hexan-5yl)-kyselina-[N-(14-hydroxy -3,6,9,12-tetraoxa)-tetradecyl-N(1H,1H,2H,2H,4H,4H,5H,5H-3-oxa)-perfluortridecyl]-amid}1,4,7,10-tetraazacyklododekan, komplex gadolinia g (8,40 mmot) titulní sloučeniny z Příkladu 20c bylo rozpuštěno ve 150 ml methanol a bylo přidáno 1,0 g paladiového katalyzátoru (10 % Pd/C), směs pak byla hydrogenována přes noc při laboratorní teplotě. Katalyzátor byl odfiltrován a filtrát byl odpařen do sucha za sníženého tlaku.

Výtěžek: 10,13 g (95 % teoretického množství).

Elementární analýza:

Spočteno: C 38,80 H 4,61 N 1,10 F 25,45 Gd 12,39

Nalezeno: C 38,87 H 4,73 N 1,20 F 25,58 Gd 12,50

Příklad 21

a) 2-N-Trifluoracetyl -6-N- benzyloxycarbonyl-L-lysin

100,0 g (356,7 mmol) 6-N-Benzyloxykarbonyl-L-lysinu bylo rozpuštěno ve směsi 1000 ml ethylesterz trifluoroctové kyseliny a 500 ml ethanolu a směs byla míchána 24 hodin při laboratorní teplotě. Směs byla odpařena do sucha, a byla krystalizována z diisopropyletheru.

Výtěžek:128,9 g (96 % teoretického množství) bezbarvého krystalického prášku. Teplota tání: 98,5 °C .

Elementární analýza :

Spočteno: C 51,07 H 5,09 N 7,44 F 15,14

Nalezeno: C 51,25 H 5,18 N 7,58 F 15,03

b) 2-N-Trifluoracetyl-6-N-benzyloxykarbonyl-L-lysin [1-(4perfluoroktylsulfonyl)-piperazin]-amid

Ke 125,0 g (332,0 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 21

a) a 188,7 g (332,0 mmol) 1- perfluoroktylsulfonylpiperazinu •4 4444

4444 (připraveného podle DE 19603033) v 750 ml tetrahydrofuranu bylo při teplotě 0°C přidáno 164,2 g (0,664 mmol) EEDQ (ethylester kyseliny 2-ethoxy-l,2-dihydrochinolin-lkarboxylové) a směs byla míchána přes noc při laboratorní teplotě. Reakční směs byla poté odpařena do sucha a byla chromatografována na silikagelu (Mobilní fáze: dichlormethan /methanol = 20:1). Výtěžek : 286,0 g (93% teoretického množství) bezbarvé tuhé látky. Teplota tání: 92 °C . Elementární analýza:

Spočteno: C 36,30 H 2,83 N 6,05 F 41,01 S 3,46

Nalezeno: C 36,18 H 2,94 N 5,98 F 40,87 S 3,40

c) 6-N-Benzyloxykarbonyl-L-lysin-[1-(4perfluoroktylsulfonyl)-piperazin]-amid

Do roztoku 280,0 g (302,2 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 21 b) ve 2000 ml ethanolu, byl při teplotě 0°C zaváděn plynný amoniak 1 hodinu. Reakční směs pak byla míchána další 4 hodiny při teplotě 0 °C. Poté byla odpažena do sucha a zbytek byl rozmíchán s vodou. Směs byla zfiltrována a tuhá látka byla sušena ve vakuu při teplotě 50 °C. Výtěžek: 243,5 g (97 % teoretického množství) bezbarvé amorfní tuhé látky. Elementární analýza:

Spočteno: C 37,60 H 3,28 N 6,75 F 38,89 S 3,86

Nalezeno: C 37,55 H 3,33 N 6,68 F 38,78 S 3,81

d) 6-N-Benzyloxykarbonyl-2-N-[1-O-a-D-karbonylmethyl(2,3,4,6-tetra-O-benzyl-mannopyranosa]-L-lysin-[1-(4perfluoroktylsulfonyl)-piperazin]-amid

K roztoku 100,0 g (120,4 mol) titulní sloučeniny z Příkladu 21c), 72,1 g (120,4 moi) 1-0-oc-D-karboxymethyl2,3,4,6-tetra-O-benzylmannopyranosy a 13,86 g (120,4 mmol) Nhydroxysukcinimidu, rozpuštěné v 500 ml dimethylformamidu, φφ φφφφ φφ

Φ I • φ φ «φφφ φφ φ

112 φφφ ><# *φ·φφ «φ · φφ φφφφ φφ «· • · «φφφ bylo při teplotě 0°C přidáno 41,27g (200,0 mmol) N,Ndicyklohexylkarbodiimidu. Směs byla míchána 3 hodiny při teplotě 0°C a poté přes noc při laboratorní teplotě. Vyloučená sraženina byla odfiltrována, filtrát byl odpařen do sucha ve vakuu a zbytek byl chromatografován na silikagelu. (Mobilní fáze : dichlormethan/ethanol = 20:1).

Výtěžek: 136,1 g (87% teoretického množství) tuhého oleje. Elementární analýza:

Spočteno: C 57,32 H 4,89 N 4,31 F 24,86 S 2,47

Nalezeno: C 57,38 H 5,07 N 4,22 F 24,78 S 2,39

e) 2-N-[1-0-a-D-Karbonylmethyl-mannopyranosa)-L-lysin-1-[(4perfluoroktylsulfonyl)-piperazin]-amid

130,0 g (100,0 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 21d) bylo rozpuštěno ve 2000 ml ethanolu a bylo přidáno 10,0 g paladiového katalyzátoru (10% Pd/C). Směs byla hydrogenována 12 hodin při laboratorní teplotě. Katalyzátor byl poté odfiltrován a filtrát byl odpařen ve vakuu do sucha.

Výtěžek		91,7	g	(kvantitativně	)	bezbarvé tuhé látky
Elementární	analýza:
Spočteno:	c	34,07	H	3,63	N	6,11 S	3,	50	F	35,24
Nalezeno:	c	33, 91	H	3,72	N	6,04 S	3,	40	F	35,31
Nalezeno:	c	33, 91	H	3,72	N	6,04 S	3,	40

f) 6-N-[1,4,7-Tris(karboxylátomethyl)]-1,4,7,10-tetraazacyklododekan-10-N-(pentanoyl-3-aza-4-oxo-5-methyl~5-yl)]-2-N[1-O-a-D-karbonylmethytmannopyranosa]-L-lysin-[l—(4— perfluoroktylsulfonyl)-piperazin)-amid, komplex gadolinia (kovový komplex XV)

50,0 g (54,55 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 21 e), 6,28 g (54,55 mmol) N-hydroxysukcinimidu, 4,62 g (109,0 mmol) ·* ···· ·* ·· • * · ···· φ* · t · t ·· * » · ·

113 ··· ·«« * · · » • φ φ ·· ♦··· ·· ·* chloridu lithného a 34,35 g (54,55 mmol) 1,4,7-tris (karboxylátomethyl)-10- (karboxy-3-aza-4-oxo-5-methyl-pent-5yl)-1,4,7,10-tetraazacyklododekan, Gd-komplexu, bylo za slabého zahřátí rozpuštěno ve 400 ml dimethylsulfoxidu. Při teplotě 10 °C bylo přidáno 16,88 g (81,8 mol) N,Ndicyklohexylkarbodiimidu a reakční směs byla poté míchána přes noc při laboratorní teplotě. Roztok byl nalit do 3000 ml acetonu a směs byla míchána 10 minut. Vyloučená tuhá látka byla zfiltrována a poté byla chromatografována na silikagelu (RP-18 mobilní fáze: Gradient voda/ethanol/acetonitril) . Výtěžek: 75,9 g (91,0 % teoretického množství) bezbarvé tuhé látky. Obsah vody : 8,6 %.

Elementární analýza (spočteno na bezvodou látku):

Spočteno: C 35,34 H 4,09 N 8,24 S 2,10 F 21,12 Gd 10,28 Nalezeno: C 35,28 H 4,15 N 8,19 S 2,15 F 21,03 Gd 10,14

Příklad 22

a) 6-N-[1,4,7-Tris(karboxylátomethyl]-1,4,7,10tetraazacyklododekan-10-N(pentanoyl-3-aza-4-oxo-5-methyl-5yl)]-2-N-[1-O-a-D-karbonylmethylmannopyranosa)-L-lysin-[1(4-perfluoroktylsulfonyl)-piperazin]-amid, Gd komplex

50,0 g (54,55 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 21 e), 6,28g (54,55 mmol) N-hydroxysukcinimidu, 4,62 g (109,0 mol) chloridu lithného a 34,35 g (54,55 mmol) 1,4,7-tris (karboxylátomethyl)-10-(karboxy-3-aza-4-oxo-5-methyl-pent-5yl)-1,4,7,10-tetraazacyklododekan, Gd-Komplex, bylo za slabého zahřívání rozpuštěno ve 400 ml dimethylsulfoxidu. Pak bylo při teplotě 10 °C přidíno 16,88 g (81,8 mmol) N,Ndicyklohexylkarbodiimidu a směs byla míchána přes noc při laboratorní teplotě. Reakční roztok byl nalit do 3000 ml acetonu a směs byla míchána 10 minut. Vyloučená sraženina byla odfiltrována a poté byla čištěna chromatografií na • · ·· • · · ·

114

silikagelu (RP-18 Mobilní fáze: Gradient voda/ethanol/ acetonitril.

Výtěžek: 76,0 g (92,0% teoretického množství) bezbarvé tuhé látky. Obsah vody: 6,88 % .

Elementární analýza (spočteno na bezvodou látku):

Spočteno: C 34,90 H 3,93 N 8,32 S 2,12 F 21,33 Gd 10,38 Nalezeno: C 34,81 H 4,02 N 8,27 S 2,09 F 21,22 Gd 10,19

Příklad 23

a) ' 2-[4-3-Oxapropionová kyselina-ethylester]-fenyloctová kyselina-methylester

Ke 200,0 g (1204,0 mmol) ethylesteru 4hydroxyfenyloctové kyseliny, 212,0 g (2000,0 mmol) uhličitanu sodného ve 2000 ml acetonu bylo přidáno 233,8 g (1400,0 mmol) ethylesteru 2-bromoctové kyseliny a směs byla 5 hodin zahřívána k refluxu. Tuhá látka byla odfiltrována a filtrát byl odpařen ve vakuu. Zbytek byl chromatografován na silikagelu. (Mobilní fáze : n-hexan/ethylacetát = 15:1). Výtěžek: 288,5 g (95,0 % teoretického množství) bezbarvého oleje. Elementární analýza:

Spočteno: C 61,90 H 6,39

Nalezeno: C 61,75 H 6,51

b) 2-[ 4-3-Oxapropionová kyselina-ethylester)]-fenyl-2bromoctová kyselina-methylester

Ke 285,0 g (1130,0 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 23a), rozpuštěné ve 2000 ml chloridu uhličitého, bylo přidáno 201,0 g (1130,0 mmol) N-bromsukcinimidu a 100,0 mg dibenzoylperoxidu a směs byla 8 hodin zahřívána k refluxu. Směs byla poté ochlazena v ledové lázni, vyloučený sukcinimid byl odfiltrován a filtrát byl odpařen do sucha za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatografií na silikagelu.

• · « ·

(Mobilní fáze: n-hexan/aceton =15 : 1).

Výtěžek: 359,2 g (96,0 % teoretického množství) bezbarvého tuhého oleje. Elementární analýza:

Spočteno: C 47,28 H 4,57 Br 24,16 Nalezeno: C 47,19 H 4,71 Br 24,05

c) 2-[4-(3-Oxapropionová kyselina-ethylester)]-fenyl-2-[1(1,4,7,10-tetraazacyklododekan-l-yl]-methylacetát

Ke 603,0 g (3500,0 mmol) 1,4,7,10tetraazacyklododekanu, v 6000 ml chloroformu bylo přidáno 350,0 g (1057,0 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 23b) a směs byla míchána přes noc při laboratorní teplotě. Směs byla extrahována třikrát se 3000 ml vody, organická fáze byla sušena nad síranem hořečnatým a byla odpařena ve vakuu do sucha. Zbytek byl použit bez dalšího čištění v následující reakci (Příklad 23d). Výtěžek : 448,0 g (kvantitativně) bezbarvého tuhého oleje.

Elementární analýza:

Spočteno: C 59,70 H 8,11 N 13,26

Nalezeno: C 59,58 H 8,20 N 13,18

d) 2-[4-(3-Oxapropionová kyselina)]-fenyl-2-[1,4,7tris(karboxymethyl)-1,4,7,10-tetraazacyklododekan-10-yl]octová kyselina

445,0 g (1053,0 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 23c) a 496,0 g (5270,0 mmol) chloroctové kyseliny bylo rozpuštěno ve 4000 ml vody. Bylo přidáno 30% vodný roztok hydroxidu sodného až do pH 10 a směs byla míchána 8 hodin při teplotě 70°C. Poté bylo pH reakce nastaveno pomocí 30% vodného roztoku hydroxidu sodného na hodnotu 13 a směs byla vařena 30 minut pod refluxem. Roztok byl ochlazen v ledové lázni a pomocí přídavku koncentrované kyseliny chlorovodíkové bylo pH odpařena.

hodinu při

116 nastaveno na hondotu 1. Reakční směs pak byla Zbytek byl dán do 4000 ml methanolu a byl míchán 1 laboratorní teplotě. Vyloučená sůl byla odfiltrována a filtrát byl odpařen do sucha, přičemž zbytek byl čištěn pomocí chromatografie na silikagelu RP-18 C (Mobilní fáze : Gradient voda/ethanol/acetonitril).

Výtěžek : 403,0 g (69,0% teoretického množství) bezbarvé tuhé látky. Obsah vody: 10,2 % .

Elementární analýza (spočteno na bezvodou látku):

Spočteno: C 51,98 H 6,18 N 10,10

Nalezeno: C 51,80 H 6,31 N 10,01

e) 2-[4-(3-Oxapropionová kyselina)]-fenyl-2-[1,4,7tris(karboxylátomethyl)-1,4,7,10-tetraazacyklododekan-10-yl] octová kyselina, Gd-Komplex

Ke 400 g (721,3 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 23d) ve 2000 ml vody bylo přidáno 130,73 g (360,65 mmol) komplexu gadolinia a směs byla míchána 5 hodin při teplotě 80°C. Roztok byl zfiltrován a filtrát byl odpařen do sucha za sníženého tlaku.

Výtěžek: 511 g (kvantitativně) bezbarvé amorfní tuhé látky. Obsah vody :11,0 %.

Elementární analýza (spočteno na bezvodou látku):

Spočteno: C 40,67 H 4,41 N 7,98 Gd 22,19

Nalezeno: C 40,51 H 4,52 N 8,03 Gd 22,05

f) 6-N-[2-[4-(3-Oxapropionyl)-fenyl]-2-(1,4,7-tris (karboxylátomethyl)-1,4,7,10-tetraazacyklododekan-10-yl]octová kyselina)]-2-N-(1-O-a-D-karbonylmethyl-mannopyranosa)-L-lysin-[1-(4-perfluoroktylsulfonyl)-piperazin]amid, Gd-Kompiex, sodná sůl • ·

117

50,0 g (54,55 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 21 e), 6,28 g (54,55 mmol) N-hydroxysukcinimidu, 4,62 g (109,0 mmol) chloridu lithného a 38,66 g (54,55 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 23e) bylo za slabého zahřívání rozpuštěno ve 400 ml dimethylsulfoxidu. Poté bylo při teplotě 10 °C přidáno 16,88 g (81,8 mmol) N,N-dicyklohexylkarbodiimidu a směs byla poté míchána přes noc při laboratorní teplotě. Reakční roztok byl nalit do 3000 ml acetonu a byl míchán 10 minut. Vyloučená tuhá látka byla odfiltrována a poté čištěna chromatografií na silikagelu (RP-18; Mobilní fáze: Gradient voda/ethanol/ acetonitril). Získaný produkt byl rozpuštěn v malém množství vody a byl přidán vodný roztok hydroxidu sodného až do pH 7,4. Roztok produktu byl poté lyofilizován. Výtěžek: 79,1 g (89% teoretického množství) bezbarvé tuhé látky. Obsah vody: 10,3 % .

Elementární analýza (spočteno na bezvodou látku):

Spočteno: C 36,86 H 3,77 N 6,88 S 1,97 F 19,82 Gd 9,65 Nalezeno: C 36,75 H 3,80 N 6,80 S 2,03 F 19,75 Gd 9,57

Příklad 24

a) 6-N- [1,4,7-Tris(terč.butyloxykarbonylmethyl)-10karboxymethyl-1,4,7,10-tetraazacyklododekan-10karbonylmethyl] -2-N- (1-O-oc-D-karbonylmethyl-mannopyranosa) L-lysin-[1-(4-perfluoroktylsulfonyl)-piperazin]-amid

15,0 g (26,19 mmol) 1,4,7-tris(terč.butyloxykarbonylmethyl)-10-karboxymethyl-l,4,7,10-tetraazacyklododekanu, 24,0 g (26,19 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 21e) a 3,01 g (26,19 mmol) N-hydroxysukcinimidu bylo při teplotě 0 °C rozpuštěno ve 150 ml dimethylformamidu a bylo přidáno 8,25 g (40,0 mmol) N,N-dicyklohexylkarbodiimidu. Směs byla míchána přes noc při laboratorní teplotě. Vyloučená močovina byla odfiltrována a filtrát byl odpařen do sucha za sníženého • · · • ·

118 tlaku. Zbytek byl chromatografován na silikagelu. (Mobilní fáze: dichlormethan/methanol = 20:1).

Výtěžek: 35,45 g (92,0 % teoretického množství) bezbarvé tuhé látky.

Elementární analýza:

Spočteno: C 44,08 H 5,69 N 7,62 F 21,95 S 2,18

Nalezeno: C 44,01 H 5,81 N 7,53 F 21.87 S 2,03

b) 6-N-[1,4,7-Tris(karboxylátomethyl]-1,4,7,10-tetraazacyklodoďekan-10-karbonylmethyl-]-2-N-[1-O-a-D-karbonylmethylmannopyranosa]-L-lysin-[1(4-perfluoroktylsulfonyl)piperazin]-amid, Gd-komplex

30,0 g (20,39 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 24a) bylo rozpuštěno v 50 ml chloroformu a bylo přidáno 300 ml trifluoroctové kyseliny. Směs byla míchána 10 minut při laboratorní teplotě. Pak byla odpařena do sucha za sníženého tlaku a zbytek byl rozpuštěn ve 300 ml vody. Bylo přidáno 3,69 g (10,19 mmol) komplexu gadolinia a směs byla 5 hodin míchána při teplotě 80 °C. Roztok byl odpařen ve vakuu do sucha a zbytek byl čištěn pomocí chromatografie na silikagelu (RP-18; Mobilní fáze: Gradient voda/ethanol/acetonitril). Výtěžek: 11,0 g (37,0 % teoretického množství) bezbarvé a amorfní tuhé látky.

Obsah vody :11,3 %.

Elementární analýza: (spočteno na bezvodou látku):

Spočteno: C 34,62 H 3,87 N 7,69 F 22,16 S 2,20 Gd 10,97 Nalezeno: C 34,57 H 3,95 N 7,60 F 22,05 S 2,13 Gd 10,90

Příklad 25

a) 6-N-[3,6,9-Tris(karboxymethyl)-3,6,9-triazaundekandiová kyselina-l-karboxy-ll-oyl] -2-N- [ 1-O-ct-D-karbonylmethyl• · • · · · « · · • fcfc

119 • · fc ·· e • · · · · « « ·· ···· · · · · mannopyranosa]-L-lysin-[1-(4-perfluoroktylsulfonyl)piperazin]-amid

Ke 24,0 g (26.19 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 21e) , rozpuštěném ve smési 100 ml dimethylformamidu a 30 ml Pyridinu, bylo přidáno 12,10 g (30,0 mmol) 3-N-(2,6dioxomorfolinoethyl)-6-N-(ethoxykarbonylmethyl)-3,6diazaoktandiové kyseliny a směs byla míchána 5 hodin při teplotě 50 °C. Reakční směs byla odpařena do sucha za sníženého tlaku. Zbytek byl rozpuštěn ve 200 ml vody a pH roztoku bylo nastaveno na hodnotu 13 pomocí přídavku 20% vodného roztoku hydroxidu sodného. Směs byla míchána 8 hodin při teplotě 22 °C a při pH 13. Roztok byl pomocí přídavku koncentrované kyseliny chlorovodíkové okyselen na hodnotu pH 7,2 a byl odpařen ve vakuu. Zbytek byl chromatografován na silikagelu RP-18 (Mobilní fáze: Gradient voda/ethanol/ acetonitril).

Výtěžek : 17,26 g (51,0 % teoretického množství) bezbarvé tuhé látky. Obsah vody: 9,3 %.

Elementární analýza (spočteno na bezvodou látku):

Spočteno: C 37,19 H 4,21 N 7,59 F 25,00 S 2,48

Nalezeno: C 37,10 H 4,30 N 7,48 F 25,07 S 2,42

b) 6-N-[3,6,9-Tris(karboxylátomethyl)-3,6,9-triazaundekandiová kyselina-l-karboxy-ll-oyl] -2-N- [ 1-O-cc-D-karbonylmethyl-mannopyranosa]-L-lysin-[1-(4-perfluoroktylsulfonyl)piperazin]-amid, Gd-Komplex, sodná sůl

K 10,0 g (7,74 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 25a) ve 100 ml vody bylo přidáno 1,40 g (3,87 mmol) oxidu gadolinia a směs byla míchána 2 hodiny při 70 °C. Roztok byl zfiltrován. Filtrát byl pomocí přídavku 2N hydroxidu sodného nastaven na hodnotu pH 7,4 a poté byl lyofilizován.

« · · · · · • ·

120 • · · · ..

«· ···· ·· ··

Výtěžek: 11,36 g (kvantitativně) amorfní tuhá látka. Obsah vody : 10,5 % .

Elementární analýza (spočteno na bezvodou látku):

Spočteno: C 32,72 H 3,43 N 6,68 S 2,18 Gd 10,71 Na 1,57 F 22,00

Nalezeno: C 32, 65 H 3,51 N 6,77 S 2,08 Gd 10,61 Na 1,68 F 21,87

Příklad 26

a) ' 6-N-Benzyloxykarbonyl-2-N-[1,4,7-tris(karboxylatomethyl)1,4,7,10-tetraazacyklododekan]-10-(pentanoyl-3-aza-4-oxo-5methyl-5-yl)]-L-lysin-[1-(4-perfluoroktylsulfonyl)piperazin]-amid, Gd-Komplex

50,0 g (60,20 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 21c), 6,93 g (60,20 mmot) N-hydroxysukcinimidu, 5,09 g (120,0 mmol) chloridu lithného a 37,91 g (60,20 mmol) l,4,7-tris[ karboxylatomethyl)-1,4,7,10-tetraazacyklododekan-10(pentanoyl-3-aza-4-oxo-5-methyl-5-yl), Gd-Komplex bylo rozpuštěno za slabého zahřívání ve 400 ml dimethylsulfoxidu. Při teplotě 10 °C bylo přidáno 20,63 g (100,0 mmol) N,Ndicyklohexylkarbodiimidu a směs byla míchána přes noc při laboratorní teplotě. Roztok byl nalit do 3000 ml acetonu a směs byla míchána 10 minut. Vyloučená sraženina byla odfiltrována a poté chromatografována na silikagelu (silikagel RP-18; Mobilní fáze: Gradient voda / ethanol /acetonitril).

Výtěžek: 75,53 g (87,0 % teoretického množství) bezbarvé tuhé látky. Obsah vody :10,1 %.

Elementární analýza (spočteno na bezvodou látku):

Spočteno: C 37,48 H 3,84 N 8,74 S 2,22 F 22,39 Gd 10,90 Nalezeno: C 37,39 H 4,02 N 8,70 S 2,16 F 22,29 Gd 10,75 • · · ·

121 ·· ··· ·

b) 2-N- [1,4,7-Tris(karboxylátomethyl]-1,4,7,10-tetraazacyklododekan-Gd-Komplex,10-(pentanoyl-3-aza-4-oxo-5-methyl-5yl)-L-lysin-[1-(4-perfluoroktylsulfonyl)-piperazin]-amid

70,0 g (48,53 mmol titulní sloučeniny z Příkladu 21d) bylo rozpuštěno ve směsi 500 ml vody a 100 ml ethanolu, pak bylo přidáno 5,0 g paladiového katalyzátoru (10% Pd/C) a bylo hydrogenováno při laboratorní teplotě pod atmosférou vodíku (1 atm), až do doby,kdy nebyla pozorována žádná spotřeba vodíku. Katalyzátor byl poté odfiltrován, promyt dobře s ethanolem (dvakrát se 75 ml) a byl odpařen ve vakuu do sucha. Titulní sloučenina byla získána ve formě bezbarvého a silně viskózního oleje.

Výtěžek: 63,5 g (kvantitativně), obsah vody: 9,8 %.

Elementární analýza (spočteno na bezvodou látku):

Spočteno:	C	37	, 48	H 3,	84	N	8,74 S 2,22 F	22,39 Gd 10,90
Nalezeno:	C	37,	39 H	4,03	N	8,	65 S 2,20 F 22,31	Gd 10,78
Nalezeno:	C	37,	39 H	4,03	N	8,	65 S 2,20 F 22,31	Gd 10,78

c) 6-N-(l-O-a-D-Karbonylmethyl-2,3,4,6-tetra-O-benzylmannopyranosa}-2-N- [1,4,7-tris(karboxylatomethyl)-1,4,7,10tetraazacyklododekan, Gd-Komplex-10-(pentanoyl-3-aza-4-oxo-5methyl-5-yl)]-L-lysin-[1-(4-perfluoroktylsulfonyl)piperazin]amid

50,0 g (38,22 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 26b), 4,40 g (38,22 mmol) N-hydroxysukcinimidu, 3,39 g (80,0 mmol) chloridu lithného a 22,88 g (38,22 mmol) 1-O-a-Dkarboxymethyl-2,3,4,6-tetra-O-benzyl-mannopyranosa bylo rozpuštěno za mírného ohřátí (30 až 40 °C) ve 400 ml dimethylsulfoxidu. Při teplotě 10°C bylo přidáno 10,32 g (50,0 mmol) N,N-dicyklohexylkarbodiimidu a směs byla míchána přes noc při laboratorní teplotě. Roztok byl nalit do 3000 ml acetonu a směs byla míchána 10 minut. Vyloučená sraženina • · · · • · ·· • · · · • · · • ·

122 byla odfiltrována a poté čištěna pomocí chromatografie na silikagelu (silikagel RP-18, Mobilní fáze: Gradient voda /ethanol/acetonitril).

Výtěžek: 64,25 g (89,0 % teoretického množství) bezbarvé tuhé látky. Obsah vody:10,9 % .

Elementární analýza (spočteno na bezvodou látku):

Spočteno: C 46,42 H 4,54 N 6,67 S 1,70 F 17,10 Gd 8,33 Nalezeno: C 46,36 H 4,71 N 6,60 S 1,61 F 17,19 Gd 8,21

d) 6-N-(l-O-a-D-Karbonylmethyl-2,3,4,6-tetra-O-benzylmannopyranosa)-2-N-[1,4,7-tris(karboxylátomethyl)-1,4,8,10tetraazacyklododekan-10-(pentanoy-13-aza-4oxo-5-methyl-5yl)]-L-lysin-[1-(4-perfluoroktylsulfonyl)-piperazin]amid, GdKomplex

60,0 g (31,77 mmo) titulní sloučeniny z Příkladu 26c) bylo rozpuštěno ve 500 ml ethanol a bylo přidáno 6,0 g paladiového katalyzátoru (10% Pd/C). Směs byla hydrogenována při laboratorní teplotě pod atmosférou vodíku (1 atm), až do doby, kdy nebyla pozorována žádná spotřeba vodíku. Poté byl katalyzátor odfiltrován, promyt s ethanolem (dvakrát se 150 ml) a byl odpařen do sucha ve vakuu.

Výtěžek: 48,55 g (kvantitativně) bezbarvé tuhé látky. Obsah vody : 3,9 %.

Elementární analýza (spočteno na bezvodou látku):

Spočteno: C 35,37 H 4,02 N 8,25 S 2,10 F 21,13 Gd 10,29 Nalezeno: C 35,28 H 4,13 N 8,17 S 2,03 F 21,05 Gd 10,20

Příklad 27

a) 1,7-Bis-(benzyloxykarbonyl)-4-[2-(N-ethyl-N-perfluoroktylsulfonyl] -amino]-acetyl]-1,4,7,10-tetraazacyklododekan)

K 50,0 g (13,5 mmol) 1,7-bis(benzyloxykarbonyl)1,4,7,10-tetraazacyklododekanu a 66, 42 g (113,5 mmol) 2-(NA A AAAA

A A • A A A

123 ethyl-N-perfluoroktylsulfonyl)-aminooctové kyseliny (připravené podle DE 196 03 033) ve 300 ml tetrahydrofuranu, bylo přidáno při teplotě 0 °C 49, 46 g (200,0 mmol) EEDQ (ethylester kyseliny 2-ethoxy-l,2-dihydrochinolin-lkarboxylové) a směs byla míchána přes noc při laboratorní teplotě. Reakční směs byla odpařena do sucha a zbytek byl chromatografován na silikagelu (Mobilní fáze: dichlormethan /methanol =20:1). Výtěžek: 65,2 g (57 % teoretického množství) bezbarvé tuhé látky.

Elementární analýza:

Spočteno: C 42,91 H 3,80 N 6,95 F 32,05 S 3,18

Nalezeno: C 42,85 H 3,90 N 6,87 F 31,98 S 3,15

b) 1,7-Bis-(benzyloxy)-4-[2-(N-ethyl-N-perfluoroktylsulfonyl) -amino]-acetyl-10-[l-O-a-D-karbonylmethyl-2,3,4,6tetra-O-benzyl-mannopyranosa)-1,4,7,10-tetraazacyklododekan

K 60,0 g (59,53 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 27a) a 35,64 g (59,53 mmol) 1-O-a-D- karboxymethyl-2,3,4,6-tetraO-benzyl-mannopyranosy, připravené podle DE 19728954., ve 300 ml tetrahydrofuranu, bylo při 0°C přidáno 24,73 g (100 mmol EEDQ (ethylester 2-ethoxy-l,2-dihydrochinolin-l-karboxylové kyseliny) a směs byla míchána přes noc při laboratorní teplotě. Směs byla odpařena do sucha a byla chromatografována na silikagelu (Mobilní fáze : dichlormethan/methanol = 20:1). Výtěžek: 76,6 g (81,0 % teoretického množství) bezbarvé tuhé látky. Elementární analýza:

Spočteno: C 54,4.4 H 4,70 N 4,41 F 20,33 S 2,02

Nalezeno: C 54,37 H 4,81 N 4,35 F 20,27 S 1,96

c) 1-[2-(N-Ethyl-N-perfluoroktylsulfonyl)-amino]-acetyl-7-(1Ο-α-D-karbonylmethyl-mannopyranosa)-1,4,7,10- tetraazacyklododekan • · · · • · ·· ··· ·

124

ΊΟ g (44,07 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 27b bylo rozpuštěno v 800 ml ethanolu a bylo přidáno 8 g paladiového katalyzátoru (10% Pd/C). Směs byla hydrogenována při laboratorní teplotě. Katalyzátor byl zfiltrován a filtrát byl odpařen do sucha.

Výtěžek: 42,3 g (kvantitativně) bezbarvé tuhé látky.

Elementární analýza:

Spočteno: C 35,04 H 3,99 N 7,30 F 33,65 S 3,34

Nalezeno: C 35,15 H 4,13 N 7,13 F 33,48 S 3,26 2s

d) 1,7-Bis-[1,4,7-tris(karboxylátomethyl)-1,4,7,10tetraazacyklododekan-Gd-komplex-10-(pentanoyl-3-aza-4-oxo-5methyl-5-yl)-4-[2-(N-ethyl-N-perfluoroktylsulfonyl)-amino]acetyl-10-(1-O-a-D-karbonylmethyl-mannopyranosa)-1,4,7,10tetraazacyklododekan g (20,84 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 27c), 5,09g (120 mmol) chloridu lithného a 37,78 g (60 mmol) 1,4,7Tris(karboxylatomethyl)-10-pentanoyl-3-aza-4-oxo-5-methyl-5yl)-1,4,7,10-tetraazacyklododekan, Gd-Komplex bylo za slabého zahřátí rozpuštěno ve 400 ml dimethylsulfoxidu. Při teplotě 0 °C bylo přidáno 29,67 g (120 mmol) EEDQ a směs byla míchána přes noc při laboratorní teplotě. Reakční směs byla nalita do 3000 ml acetonu a byla míchána 10 minut. Vypadnutá tuhá látka byla zfiltrována a čištěna pomocí chromatografie na silikagelu (Silikagel RP-18, Mobilní fáze: Gradient voda/ethanol/acetonitril).

Výtěžek : 13,2 g (29,0 % teoretického množství) bezbarvé tuhé látky.

Obsah vody: 11,8% .

Elementární analýza (spočteno na bezvodou látku):

Spočteno: C 36,31 H 4,34 N 9,62 S 1,47 F i4,79 Gd 14,41 Nalezeno: C 36,24 H 4,27 N 9,58 S 1,51 F 14,85 Gd 14,25 ti·· · • ti ti

125 • ti titititi titi •ti · · · · • ti ti ti ti • titi tititi ti ti ti titi

Příklad 28

a) 1,7-Bis(benzyloxykarbonyl)-4-[2-(N-ethyl-N-perfluoroktylsulfonyl) -amino]acetyl-10-[pentanoyl-3-aza-4-oxo-5-methyl-5yl-[1,4,7-tris(karboxylatomethyl)-Gd-Komplex. 1,4,7,10-tetraazacyklododekan-10-yl]-1,4,7,10-tetraazacyklododekan.

50,0 g (49,61 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 27a), 5,71 g (49,61 mmol) N-hydroxysukcinimidu, 4,24 g (100 mmol) chloridu lithného a 31,24 g (49,61 mmol) a 1,4,7Tris(karboxylátomethyl)-10-(pentanoyl-3-aza-oxo-5-methyl-5yl)'-l, 4,7,10-tetraazacyklododekan, Gd-Komplex byly rozpuštěny za slabého zahřátí ve 350 ml dimethylsulfoxidu. Při teplotě 10°C bylo přidáno 15,47 g (75 mmol) N,N-dicyklohexylkarbodiimidu a směs byla míchána přes noc při laboratorní teplotě. Roztok byl nalit do 2000 ml acetonu a směs byla míchána 10 minut. Vyloučená tuhá látka byla odfiltrována a čištěna pomocí chromatografie na silikagelu (Kieselgel RP-18, Mobilní fáze : Gradient voda/ethanol/acetonitril).

Výtěžek : 65,1 g (81,0 % teoretického množství) bezbarvé tuhé látky. Obsah vody : 7,9 %.

Elementární analýza (spočteno na bezvodou látku):

Spočteno: C 40,79 H 4,11 N 8,65 S 1,98 F i9,94 Gd 9,72 Nalezeno: C 40,71 H 4,20 N 8,58 S 2,03 F 19,87 Gd 9,68

b) 1-[2-(N-Ethyl-N-perfluoroktylsulfonyl)-amino]-acetyl-7{(pentanoyl-3-aza-4-oxo-5-methyl-5-yl)-10-[1,4,7-tris(karboxylatomethyl )-1,4,7,10-tetraazacyklododekan, Gd-Komplex]}1,4,7,10-tetraazacyklododekan.

60,0 g (37,05 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 28a) bylo rozpuštěno v 600 ml ethanolu a bylo přidáno 6,0 g paladiového katalyzátoru (10% Pd/C). Směs byla hydrogenována při laboratorní teplotě. Katalyzátor byl zfiltrován a filtrát byl odpařen do sucha za sníženého tlaku.

·· ···· ·· ··· ·

126

Φ Φ · • · · ·· ····

Výtěžek: 50,06 g (kvantitativně) vody : 3,9%.

Elementární analýza (spočteno na Spočteno: C 34,67 H 4,03 N 10,37 Nalezeno: C 34,58 H 4,15 N 10,28 bezbarvé tuhé látky. Obsah bezvodou látku):

S 2,37 F 23, 90 Gd 11,64 S 2,30 F 23,84 Gd 11,57

c) 1-[2-(N-Ethyl-N-perfluoroktylsulfonyl)-amino]-acetyl-4,10 -bis[1-O-a-D-karbonylmethyl-2,3,4,6-tetra-O-benzyl-mannopyranosa] -7-{(pentanoyl-3-aza-4-oxo-5-methyl-5-yl)-[1,4,7tris(karboxylatomethyl)-1,4,7,10-tetraazacyklododekan-10-yl]Gd-komplex} -1,4,7,10-tetraazacyklododekan

40,0 g (29,60 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 28b), 2,54 g (60,0 mmol) chloridu lithného a 44,9 g (75,0 mmol) 1O-a-D-karboxymethyl-2,3,4,6-tetra-O-benzyl-mannopyranosy bylo za slabého zahřátí rozpuštěno ve 300 ml dimethylsulfoxidu. Při teplotě 10°C bylo přidáno 24,73 g (100,0 mmol) EEDQ a směs byla míchána přes noc při laboratorní teplotě. Roztok byl nalit do 3000 ml acetonu a směs byla míchána 10 minut. Vyloučená sraženina byla odfiltrována a byla čištěna pomocí chromatografie na silikagelu (silikagel RP-18, Mobilní fáze : Gradient voda/ ethanol/acetonitril).

Výtěžek: 31,98 g (43,0 % teoretického množství) bezbarvé tuhé látky. Obsah vody : 3,5 % .

Elementární analýza (spočteno na bezvodou látku):

Spočteno: C 53,06 H 5,05 N 5,57 S 1,28 F 12,85 Gd 6,26 Nalezeno: C 52,95 H 5,19 N 5,48 S 1,23 F 12,77 Gd 6,14

d) 1-[2-(N-Ethyl-N-perfluoroktylsulfonyl)-amino]-acetyl-4,10-bis[l-O-a-D-karbonylmethyl-2,3,4,6-tetra-O-benzyl-mannopyranosa]-7{(pentanoyl-3-aza-4-oxo-5-methyl-5-yl)-[1,4,7-tris-

• fc fcfcfcfc

127 • fc · ·· · • · · · · · • ··«· • · ·»·· ···· ·· ·« (karboxylatomethyl)-1,4,7,10-tetraazacyklododekan-10-yl]-Gdkomplex)-1,4,7,10-tetraazacyklododekan

30,0 g (11,94 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 28c) bylo rozpuštěno ve 300 ml ethanolu a 30 ml vody a bylo přidáno 4,0 g paladiového katalyzátoru (10% Pd/C). Směs byla hydrogenována při laboratorní teplotě, katalyzátor byl odfiltrován a filtrát byl odpařen do sucha za sníženého tlaku. Výtěžek: 21,39 g (kvantitativně) bezbarvé tuhé látky. Obsah vody: 3,4 %.

Elementární analýza (spočteno na bezvodou látku):

Spočteno: C 36,87 H 4,39 N 7,82 S 1,79 F 18,03 Gd 8,78 Nalezeno: C 36,80 H 4,50 N 7,85 S 1,68 F 17,91 Gd 8,70

Příklad 29

a) 6-N-[3,β-Bis(karboxymethyl)-oktan-1,8-dikarboxylová kyselina-l-karboxy-8-oyl]-2-N-(1-0-a-D-karboxymethyl-mannopyranosa)-lysin-[1-(4-perfluoroktylsulfonyl)-piperazin]-amid K 27,5 g (30,0 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 21e), rozpuštěné ve 300 ml dimethylformamidu a 100 ml pyridinu bylo přidáno 25,62 g (100,0 mmol) ethylendiamin-N, Ν,Ν',Ν'tetracetátdianhydridu a směs byla míchána 5 hodin při teplotě 50 °C. Směs byla odpařena do sucha ve vakuu. Zbytek byl rozpuštěn ve 300 ml vody, a pH směsi bylo upraveno pomocí přídavku 20% vodného roztoku hydroxidu sodného na hodnotu 10. Poté byl bazický roztok upraven na hodnotu pH 3 pomocí přídavku koncentrované kyseliny chlorovodíkové a směs byla odpařena za sníženého tlaku do scuha. Zbytek byl čištěn chromatografii na silikagelu RP-18 (Mobilní fáze : Gradient voda / ethanol / acetonitril).

Výtěžek : 18,22 g (51,0 % teoretického množství) bezbarvé tuhé látky. Obsah vody : 7,9 % .

Elementární analýza (spočteno na bezvodou látku):

44 4 •4 4444

4 4

4 4 4

44

Spočteno: C 36,31 H 3,98 N 7,06 F 27,12 S 2,69

Nalezeno: C 36,23 H 4,07 N 6,98 F 27,05 S 2,62

b) 6-N-[3,6-Bis (karboxylatomethyl)-oktan-1,8-dikarboxylová kyselina -l-karboxyláto-8-oyl-] -2-N- (1-O-oc-D-karboxymethyl -mannopyranosa)-L-lysin-[1-(4-perfluoroktylsulfonyl)piperazin]-amid , Μη-komplex, sodná sůl g (8,397 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 29a} bylo rozpuštěno ve 200 ml vody. Bylo přidáno 965 mg (8,397 mmol) uhličitanu manganatého a směs byla míchána 3 hodiny při teplotě 60 °C. Roztok byl pomocí přídavku vodného roztoku hydroxidu sodného na hodnotu pH 7,4, byl zfiltrován a nakonec lyofiizován.

Výtěžek : 10,52 g (99,0 % teoretického množství) bezbarvé tuhé látky. Obsah vody : 7,8 % .

Elementární analýza (spočteno na bezvodou látku):

Spočteno: C 34,16 H 3,50 N 6,64 S 2,53 F 25,52 Mn 4,34 Na 1, 82

Nalezeno: C 34,06 H 3,61 N 6,58 S 2,47 F 25, 47 Mn 4,30 Na 1, 97

Příklad 30

a) 1,2,3,4,6-Penta-O-acetyl-a,β-D-mannopyranosa

Analogickým způsobem k postupu popsanému v literatuře [M. L. Wolfrom a A. Thompson v Methods in Carbohydrate Chemistry (R.L. Whistler, M.L. Wolfrom and J. N. BeMiller, Eds.), Academie Press, New York, Vol. 11, 53 , str. 211-215, (1963)] poskytlo nasazení 150 g (832,5 mmol) a,β-D-Mannopyranosy se směsí absolutního pyridinu a 1500 ml anhydridu kyseliny octové po zpracování 315 g (96,7 %) výše zmíněné titulní sloučeniny ve formě surového produktu jako viskozní bezbarvý olej. Pomocí NMR spektroskopického měření bylo zjištěno, že fc fcfcfcfc • · · · fc fc · « 3 • fcfcfc fc fcfc ···· • fc ··*-»

129 • · • · • · • · • · *· fcfc·· • fcfc ··· fc fc fcfc · ·· fcfc titulní sloučenina obsahuje oba isomery a a β v poměru 4:1. Oddělení a,b anomerů titulní sloučeniny může být provedeno provedením následujících reakcí.

Elementární analýza:

Spočteno: C 49,21 H 5,68

Nalezeno: C 49,12 H 5,78

b) 1-0-a-D-(5-Ethoxykarbonyl)-pentyl-2,3,4,6-tetra-O-acetylmannopyranosa

Analogickým způsobem jako je v literatuře popsáno pro syntézu aryl glycopyranosidů [J. Conchie a G.A. Levvy in Methods in Carbohydrate Chemistry (R.L. Whistler, M.L. Wolfrom and J.N. BeMiller, Eds.), Academie Press, New York, Voi.tl , 90, str. 345-347, (1963)] vedlo použití 156,2 g (400 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 21a) jako směsi α,β anomerů se 67 ml (400 mmol) ethylesteru 6-Hydroxy-hexanové kyseliny a 60,8 ml (520 mmol) chloridu cíničitého v 600 ml 1,2-dichlorethanu po chromatografickém čištění na sloupci silikagelu (Eluent: Hexan/ethylacetát 2:1) ke vzniku 100,05 g (51% teoretického množství) výše jmenované titulní sloučeniny jako bezbarvého viskózního oleje. Pomocí ÍH NMR spektroskopie bylo zjištěno, že titulní sloučeninu lze považovat za výlučně α-anomer.

Elementární analýza:

Spočteno: C 52,94 H 6,77

Nalezeno: C 52,80 H 6,78

c) 1-0-a-D-(5-Karboxy)-pentyl-2,3,4,6-tetra-O-benzylmannopyranosa

Míchaná suspenze 141,0 g (289 mmol) titulní sloučeniny z Přikladu 30b) ve 200 ml dioxanu bylo při laboratorní teplotě • 0 * 0

0000

130 e e

0

0 ·

«000 •0 «»·0

0 0 0 0 «

0 0 0 «0 00 necháno reagovat za intenzivního míchání po částech s celkem 238,5 g (4,26 mol) jemně práškovaného hydroxidu draselného. Ke zvýšení účinnosti míchání bylo do reakční směsi přidáno dalších 200 ml dioxanu a takto získaná suspenze byla zahřáta k varu a při této teplotě bylo během dvou hodin přikapáno 372 ml (3,128 mol) benzylbromidu. Po 4 hodinách při teplotě 110 °C byla reakce míchána 12 hodin při laboratorní teplotě a poté byla kvůli zpracování pomalu nalita do 2,5 litru ledové vody a vodná fáze byla na závěr dobře extrahována s diethyletherem. Po promytí takto získané etherové fáze byla organická fáze sušena nad síranem sodným a diethylether byl odpařen za sníženého tlaku. Přebytečný benzylbromid byl z reakční směsi kvantitativně oddestilován při teplotě olejové lázně 180 °C. Takto získaný olejovitý zbytek byl čištěn chromatografií na sloupci silikagelu s využitím eluentu ethylacetát/hexan 1:10. Výtěžek: 172,2 g (91% teoretického množství) výše jmenované titulní sloučeniny ve formě bezbarvého a velmi viskózního oleje.

Elementární analýza:

Spočteno: C 75,68 H 7,16

Nalezeno: C 75,79 H 7,04

d) 6-N-Benzyloxykarbonyl-2-N-[1-0-a-D-(5-karbonyl)-pentyl2,3,4,6-tetra-0-benzyl-mannopyranosa)-L-lysin-[1-(4perfluoroktylsulfonyl)-piperazin]amid

100,0 g (134,0 mmol) karboxylové kyseliny získané v Příkladu 30c) a 32,4 g (281,4 mmol) N-hydroxysukcinimidu bylo rozpuštěno ve 500 ml dimethylformamidu a při teplotě 0 °C bylo po částech přidáno celkem 58,0 g (281,4 mmol) N,Ν'Dicyklohexylkarbodiimidu a směs byla míchána 3 hodiny při této teplotě. K přípravě roztoku aktivovaného esteru byl přikapán roztok 111,3 g (134,0 mmol) titulní sloučeniny z

131

Příkladu 21c), rozpuštěného v 300 ml dimethylformamidu ochlazeného na 0 °C během 2 hodin při teplotě 0°C a směs byla poté míchána 12 h při laboratorní teplotě. Při zpracování byla vyloučená dicyklohexylmočovina odfiltrována a rozpouštědlo bylo odpařeo do sucha. Získaný zbytek byl na závěr chromatografován na silikagelu (Mobilní fáze: dichlormethan/ethanol 20:1; přičemž chromatografie byla provedena za podmínek kontinuálního gradientu s přídavkem ethanolového podílu). Výtěžek: 132,5 g (67,4% teoretického množství) titulní sloučeniny ve formě bezbarvého a silně viskózního oleje.

Elementární analýza:

Spočteno: C 54.02 H 4.88 N 3.82 E 22.01 S 2.19

Nalezeno: C 53.87 H 4.85 N 4.02 F 22.55 S 2.06

e) 2-N-[1-0-a-D-(5-Karbonyl)pentyl-mannopyranosa]-L-lysin[1-(4-perfluoroktylsulfonyl)-piperazin]-amid

V 800 ml ethanolu bylo rozpuštěno 120,0 g (81,77 mmol) sloučeniny získané v Příkladu 30d), bylo přidáno 4,5 g Pearlman-katalyzátoru (Pd 20 %, C) a msěs byla hydrogenována při laboratorní teplotě pod atmosférou vodíku (1 atm), až do doby, kdy nebyla pozorována žádná další spotřeba vodíku (cca. 8 hodin). Katalyzátor byl odfiltrován, dobře promyt s ethanolem (cca. 200 ml) a filtrát byl odpařen za sníženého tisku do sucha. Titulní sloučenina byla získána jako silně viskozní a bezbarvý olej.

Výtěžek: 78,5 g (98,7 % teoretického množství).

Elementární analýza:

Spočteno: C 37.04 H 4.25 N 5.76 F 33.20 S 3.30

Nalezeno: C 36.96 H 4.85 N 5.41 F 34.13 S 3.22 • · · · • « • · · ·

132

f) 2-N-[1-0-a-D-(5-Karbonyl)pentyl-mannopyranosa]-6-N[1,4,7-tris(karboxylatomethyl)-10-(-3-aza-4-oxo-5-methyl-5yl-pentanoyl)-1,4,7,10-tetraazacyklododekan]-L-lysin-[1-(4perfluoroktylsulfonyl)-piperazin]-amid, Gd-komplex

99,8 g (158,4 mmol; 2,2 molárního ekvivalentu z výše uvedené aminové komponenty z Příkladu 30e) Gd-komplexu 10-(4karboxy-l-methyl-2-oxo-3-azabutyl)-1,4,7,10-tetraazacyklododekan-1,4,7-trioctové kyseliny, popsaném v patentové přihlášce DE 197 28 954 pod Příkladem 31 h) a 6,7 g bezvodého chloridu lithného (158,4 mmol) bylo rozpuštěno při teplotě 40 C° v 800 ml absolutního dimethylsulfoxidu za míchání. Při této teplotě bylo přidáno celkem 18,2 g (158,4 mmol) Nhydroxysukcinimidu a 70,0 g (71,96 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 30e), rozpuštěné ve 250 ml absolutního dimethylsulfoxidu. Po ochlazení na laboratorní teplotu bylo přidáno 32,7 g (158,4 mmol) N,N'-dicyklohexylkarbodiimidu a směs byla míchána 12 hodin při laboratorní teplotě. Získaná suspenze byla zpracována s přebytkem acetonu až do úplného vysrážení titulní sloučeniny, sloučenina byla odfiltrována, vysušena, rozpuštěna ve vodě, nerozpuštěná dicyklohexylmočovina byla odfiltrována a nízkomolekulární látky byly odstraněny na AMICON® YM-3 ultrafiltrační membráně (limitní mez : 3000 Da). Zbytek byl na závěr lyofilizován. Výtěžek: 93,0 g (81,6 % teoretického množství) jako bezbarvý lyofilizát.

Obsah vody (Karl-Fischer): 9,53%.

Elementární analýza (spočteno na bezvodou látku):

Spočteno: C 37.15 H 4.39 N 7.96 F 20.38 S 2.02 Gd 9.92 Nalezeno: C 36.92 H 4.50 N 7.68 F 19.77 S 1.91 Gd 10.08

Příklad 31

133

a) 2-N-[1-0-a-D-(5-Karbonyl)pentyl-mannopyranosa]-6-N-{2-[4(3-oxapropionyl)-fenyl]-2-[1,4,7-tris-(karboxylatomethyl)1,4,7,10-tetraazacyklododekan-10-yl]-octová kyselina}-Llysin-[1-(4-perfluoroktylsulfonyl)-piperazin]-amid, Gdkomplex, sodná sůl

Míchaná suspenze 5,0 g (9.06 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 23e) v 15 ml absolutního dimethylsulfoxidu bylo při teplotě 70 °C necháno reagovat s 0,68 g (15,9 mmol) chloridu lithného. Směs byla míchána 30 minut při teplotě 70°C a čirý reakční roztok byl po částech nechán reagovat celkem s 1,83 g (15,9 mmol) N-hydroxysukcinimidu a reakční směs byla míchána daalší hodinu při této teplotě. Po ochlazení na teplotu 0 °C bylo přidáno 4,52 g (23,85 mmol) dicyklohexylkarbodiimidu a reakční směs byla míchána další hodinu při teplotě 0°C, následované 12 hodinami při teplotě 22°C. K takto získanému reakčnímu roztoku N-hydroxysukcinimidesteru titulní sloučeniny z Příkladu 3e) byl při teplotě 22 °C přikapán roztok 4,0 g (4,12 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu lOAe) v 15 ml absolutního dimethylsulfoxidu a reakční směs byla míchána 12 hodin při laboratorní teplotě. Pro zpracování byla reakční směs při teplotě 22 °C přikapána do 900 ml acetonu, přičemž titulní sloučenina byla získána jako bezbarvá sraženina. Sraženina byla odsáta, rozpuštěna ve 200 ml destilované vody a byla nechána reagovat s 1 molárním roztokem hydroxidu sodného až do pH 7,2. Takto získaný vodný roztok produktu byl třikrát ultrafiltrován na ultrafiltrační membráně YM3 (AMICON © : mezní limit : 3000 Da) kvůli odstranění solí a nížemolekulárního podílu. Takto získaný zbytek byl lyofilizován.

Výtěžek: 6,33g (92,4 % teoretického množství, spočteno na použitou aminovou složku) jako bezbarvý lyofilizát s obsahem vody 7,38 %.

tt to toto to

	134	• to · • · · • to · ·· ·	• «· · • · ·	• · · • · · « · · · ·· ·*
• • ·	• to ····
Elementární	analýza (spočteno na	bezvodou látku):
Spočteno: C	38.48 H 4.13 N 6.65	F 19.16 S 1.90	Gd	9.33	Na
1.36
Nalezeno: C	39.52 H 4.12 N 6.67	F 19.70 S 1.89	Gd	9.30	Na

I. 41

Příklad 32

a) N-(3-oxa-lH, 1H, 2H,2H,4H,4H,5H,5H-perfluortridecyl)-amid 3,5-Bis-benzyloxykarbonylamino-benzoové kyseliny

Ve směsi rozpouštědel vzniklé ze 125 ml suchého tetrahydrofuranu a 125 ml suchého dioxanu bylo rozpuštěno 20g (47,5 mmol) 3,5-bisbenzyloxykarbonylamino-benzoové kyseliny (Syntéza provedena podle postupu známého v literatuře: Skulnick, Harvey I.; Johnson, Paul D.; Aristoff, Paul A.; Morris, Jeanette K.; Lovasz, Kristině D.; et al.;

J. Med.Chem.; 40; 7; 1997; 1149-1164) a 4,78 g (47,5 mmol) triethylaminu. Po ochlazení na -15 °C byl za míchání pomalu přikapán roztok 6,56g (48 mmol) isobutylesteru chlormravenčí kyseliny ve 30 ml suchého tetrahydrofuranu, tak aby teplota reakční směsi byla držena pod -10 °C. Po 15 minutách při teplotě -15 °C byl přikapán roztok 58,6 g (47,5 mmot) 1amino-ΙΗ,1H,2H,2H,4H,4H,5H,5H-3-oxo-perfluortridekanu a 4,78 g (47,5 mmol) triethylaminu ve 100 ml suchého tetrahydrofuranu při teplotě -20 °C. Po jedné hodině při teplotě -15°C byla reakční směs míchána 2 hodiny při laboratorní teplotě a reakční směs byla odpařena do sucha za sníženého tlaku. Zbytek byl rozpuštěn ve 300 ml ethylesteru kyseliny octové a byl dvakrát promyt s 200 ml nasyceného roztoku hydrogenuhličitanu sodného a s 300 ml vody. Po vysušení organické fáze nad síranem sodným byl odfiltrován od solí a čištěn chromatografií na silikagelu s využitím eluentu φφ Φ··· ·· ·· ·· ···· φ φ φ φφ·· ·· ·

135 >·· φ·· «φ·· · dichlormethan/hexan/2-propanol (10:5:1). Výtěžek: 36,2 g (82,5% teoretického množství) titulní sloučeniny ve formě olej e.

Elementární analýza:

Spočteno: C 46,82 H 3,27 N 4,55 F 34,97

Nalezeno: C 47,21 H 3,31 N 4,61 F 34,48

b) N-(3-oxa-lH,IH,2H,2H,4H,4H,5H,5H-perfluortridecyl)]-amid 3,5-diamino-benzoové kyseliny

Ve 300 ml ethanolu bylo rozpuštěno 30,0 g (32,4 mmol) amidu připraveného v Příkladu 32a) a bylo přidáno 1,2 g Pearlman katalyzátoru (Pd 20 %, C) . Reakční směs byla hydrogenována při laboratorní teplotě pod atmosférou vodíku (1 atm), až do doby, kdy nebyla pozorována žádná další spotřeba vodíku. Katalyzátor byl odsát, promyt dobře s ethanolem (cca. 300 ml) a rozpouštědlo bylo odpařeno za sníženého tlaku. Titulní sloučenina byla získána jako silně viskózní, nažloutlého oleje.

Výtěžek: 20,12 g (94,8 % teoretického množství).

Elementární analýza:

Spočteno: C 36,66 H 2,77 N 6,41 F 49,28

Nalezeno: C 36,07 H 2,87 N 6,23 F 49,43

c) N-(3-oxa-lH,IH,2H,2H,4H,4H,5H,5H-perfluortridecyl)-amid 3N-[-(l-O-a-D-Karbonylmethyl-2,3,4,6-tetra-O-benzylmannopyranosa)-5-amino-benzoové kyseliny

10,95 g (18,30 mmol) l-Karboxymethyloxy-2,3,4,-tetra-Obenzyl-a-D-mannopyranosidu [připraveného podle popisu v patentové přihlášce DE 197 28 954 Cl] bylo rozpuštěno ve 150 ml dimethylformamidu a bylo necháno reagovat s 2,09 g (18,3 mmol) N-hydroxysukcinimidu. Směs byla ochlazena na teplotu 0 °C a bylo přidáno 3,78 g (18,3 mmol) • · · ·· · · · · · • · · · · · ·

136 dicyklohexylkarbodiimidu . Reakční směs byla míchána 1 hodinu při teplotě 0 °C a poté 4 hodiny při laboratorní teplotě. Směs byla ochlazena na teplotu 0°C a byl během 3 hodin roztok 24,0 g (36,6 mmol, 2 molární ekvivalenty spočtené na jmenovanou karboxylovou kyselinu) diaminosloučeniny připravené v Příkladu 32b), rozpuštěné ve 350 ml dimethylformamidu. Reakční směs byla míchána 1 hodinu při teplotě 0°C, a poté přes noc pří laboratorní teplotě. Reakční směs byla odpařena do sucha za sníženého tlaku a zbytek byl rozpuštěn ve 300 ml ethylesteru octové kyseliny. Vyloučená močovina byla odfiltrována a filtrát byl dvakrát promyt s 5% vodným roztokem sody (2 x 100 ml). Organická fáze byla sušena nad síranem hořečnatým a byla odpařena do sucha za sníženého tlaku. Zbytek byl chromatografován na silikagelu (Mobilní fáze: n-Hexan/isopropanol 13:1). Bylo získáno 16,8 g (74,3 % teoretického množství, spočteno na použitou karboxylovou kyselinu) titulní sloučeniny ve formě bezbarvého oleje. Zvýšením polarity mobilní fáze na n-Hexan/isopropanol 5:1 bylo při chromatografii znovu získáno 10,15 g nezreagované diaminosloučeniny 32b), která může být opět použita do výše uvedeného reakčního kroku.

Elementární analýza:

Spočteno: C 54,42 H 4,40 N 3,40 F 26,13

Nalezeno: C 54,32 H 4,49 N 3,48 F 25,94

d) N-(3-oxa-lH,1H,2H,2H,4H,4H,5H,5H-perfluortridecyl)-amid 3N-[(1-0-a-D-Karbonylmethyl-mannopyranosa)]-5-amino-benzoové kyseliny

Analogický postup jako bylo popsáno při syntéze titulní sloučeniny z Příkladu 32b), poskytl hydrogenolýzou 12,0 g (9,70 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 32c), v přítomnosti 0,5 g Pearlman katalyzátoru (Pd 20 %, C) ve směsi • ·· · « · • ·· · « Λ

137

ethanol/voda (9:1) po zpracování 8,08 g (96,7% teoretického množství) der výše uvedené titulní sloučeniny ve formě žlutého bezbarvého viskózního oleje.

Elementární analýza:

Spočteno: C 37,64 H 3,28N 4,88 F 37,49

Nalezeno: C 37,32 H 3,17N 4,97 F 37,55

e) N-(3-oxa-lH,1H,2H,2H, 4H, 4H, 5H,5Hperfluortridecy!)-amid kyseliny 3-N- (1-O-cc-D-Karbonylmethyl-mannopyranosa) -5-N- { 2[4-‘(3-oxapropionyl) -fenyl] -2 - [ 1, 4,7-tris- (karboxylatomethyl) 1,4,7,10-tetraazacyklododekan-10-yl]-octovákyselina}benzoové, Gd-komplex, sodná sůl

13,6 g (19,2 mmol; 2.2 molárního ekvivalentu spočteno na použitou aminovou složku z Příkladu 32d) Gd-komplexu popsaného v Příkladu 23Ae) a 0,81 g bezvodého chloridu lithného (19,2 mmol) bylo za míchání rozpuštěno při 40 C° ve 100 ml absolutního dimethylsulfoxidu a při této teplotě bylo přidáno celkem 2,2 g (19,2 mmol) N-hydroxysukcinimidu a 7,5g (8,7 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 32d), rozpuštěné v 50 ml absolutního dimethylsulfoxidu. Po ochlazení na laboratorní teplotu byl reakční roztok nechán reagovat s 3,96 g (19,2 mmol) N,N'-dicyklohexylkarbodiimidu a byl míchán 12 hodin při laboratorní teplotě. Získaná suspenze byla zpracována s přebytkem acetonu až do úplného vysrážení uvedené titulní sloučeniny, sraženina byla odfiltrována, vysušena, rozpuštěna ve vodě, nerozpuštěná dicyklohexylmočovina byla odfiltrována a byla čištěna od nízkomolekulárního podílu na ultrafiltrační membráně AMICON® YM-3 (mezní limit: 3000 Da). Zbytek byl lyofilizován.

Výtěžek: 11,51 g (84,5 % teoretického množství) jako bezbarvý lyofilizát. Obsah vody (Karl-Fischer): 6,77 % .

Elementární analýza (spočteno na bezvodou látku):

• · • ·

138

Spočteno: C 40,05 H 3,94 N 6,29 F 20,71 Gd 10,08 Na 1,47 Nalezeno: C 39.98 H 4.00 N 6,31 F 20,73 Gd 10.11 Na 1,42

Příklad 33

a) 3,5-Bis-(benzyloxykarbonylamino)-1-{N-[1-(4-perfluoroktylsulfonyl )piperazin]}-benzamid

Ve směsi rozpouštědel z 60 ml suchého tetrahydrofuranu a 70 ml suchého Ddioxanu bylo rozpuštěno lOg (23,75 mmol) 3,5-bisbenzyloxykarbonylaminobenzoové kyseliny (syntetizované podle postupu uvedeného v literatuře: Skulnick, Harvey L; Johnson, Paul D. ; Aristoff, Paul A.; Morris, Jeanette K.; Lovasz, Kristině D. ; et al.; J.Med.Chem.; 40; 7; 1997; 1149-1164) a 2,39 g (23,75 mmol) triethylaminu. Po ochlazení na teplotu 15°C byl za míchání pomalu přikapán roztok 3,28g (24 mmol) isobutylesteru chlormravenčí kyseliny ve 20 ml suchého tetrahydrofuranu, přičemž vnitřní teplota nepřestoupila -10 °C. Po 15 minutích při teplotě -15°C byl přikapán roztok 23,0 g (23,75 mmol) perfluoroktylsulfonylpiperazinu a 2,39 g (23,75 mmol) triethylaminu v 50 ml suchého tetrahydrofuranu při teplotě -20 °C. Reakční směs byla míchána hodinu při 15°C a poté dvě hodiny při laboratorní teplotě a byla odpařena do sucha za sníženého tlaku. Získaný zbytek byl rozpuštěn ve 200 ml ethylacetátu a byl promyt dvakrát se 100 ml nasyceného roztoku hydrogenuhličitanu sodného a poté s 300 ml vody. Po vysušení organické fáze nad síranem sodným byly soli odfiltrovány a ethylacetát byl odstraněn za sníženého tlaku. Získaný zbytek byl čištěn chromatografii na silikagelu s využitím směsi dichlormethan/hexan/2-propanol (15:5:1) jako eluentu.

Výtěžek: 18,35 g (79,6 % teoretického množství) titulní sloučeniny ve formě oleje.

Elementární analýza:

• φ · φ •Φ φφφφ

139

Spočteno: C 43,31 Η 2,80 Ν 5,77 F 33,27 S 3,30

Nalezeno: C 43,21 Η 2,75 Ν 5,61 F 33,38 S 3,22

b) 3,5-Di-amino-l-{N-[1-(4-perfluoroktylsulfonyl)piperazin]}-benzamid

Ve 100 ml ethanolu bylo rozpuštěno 9,70 g (10,0 mmol) amidu připraveného v Příkladu 33a) a bylo přidáno 0,4 g Pearlman katalyzátoru (Pd 20 %, C). Reakční směs byla hydrogenována při laboratorní teplotě pod atmosférou vodíku (1 -atm), až do doby, kdy nebyla pozorována žádná spotřeba vodíku. Katalyzátor byl odfiltrován, promyt dobře s ethanolem (cca. 150 ml) a směs byla odpařena do sucha za sníženého tlaku. Titulní sloučenina byla získána jako silně viskózní, žlutavý olej.

Výtěžek: 6,9 g (98,2 % teoretického množství).

Elementární analýza:

Spočteno: C 32,49 H 2,15 N 7,98 F 45,98 S 4,56

Nalezeno: C 32,56 H 2,17 N 8,09 F 45,63 S 4,61

c) N-(1-(4-perfluoroktylsulfonyl)- piperazin]-amid kyseliny 5-Amino-3-N-(l-O-a-D-Karbonylmethyl-2,3,4, 6-tetra-O-benzylmannopyranosa}-benzoové

5,48 g (9,15 mmol) l-Karboxymethyloxy-2,3, 4; tetra-Obenzyl-a-D-mannopyranosidu [Příprava provedena podle patentové přihlášky DE 197 28 954 Cl] bylo rozpuštěno ve 100 ml dimethylformamidu a bylo necháno reagovat s 1,04 g (9,15 mmol) N-hydroxysukcinimidu. Směs byla ochlazena na teplotu 0 °C a bylo přidáno 1,89 g (9,15 mmol) dicyklohexylkarbodiimidu. Reakční směs byla míchána hodinu při teplotě 0 °C a poté 4 hodiny při laboratorní teplotě. Směs byla opět ochlazena na teplotu 0°C a byl během 3 hodin pomalu přikapán roztok 12,85 g (18,30 mmol, 2 molární

140

4444 ·* ·· • 4 4 ©444

4 4 4 4 4

4 4 >04 4

4 4 · 4 4

4 44 4444 ekvivalenty spočteno na použitou karboxylovou kyselinu) diaminosloučeniny připravené v Příkladu 33b), rozpuštěné ve 250 ml dimethylformamidu. Reakční směs byla míchána hodinu při teplotě 0°C, a poté přes noc při laboratorní teplotě. Směs byla odpařena do sucha za sníženého tlaku a zbytek byl rozpuštěn ve 100 mi ethylacetátu. Vyloučená močovina byla odfiltrována a filtrát byl dvakrát promyt se 100 ml 5% vodného roztoku sody. organická fáze byla sušena nad síranem hořečnatým a byla odpařena do sucha za sníženého tlaku. Zbytek byl chromatografován na silikagelu (mobilní fáze: nhexan/isopropanol 13:1). Bylo získáno 8,14 g (69,4 % teoretického množství, spočteno na použitou karboxylovou kyselinu) titulní sloučeniny ve formě bezbarvého oleje. Zvýšením polarity během chromatografie na poměr 6:1 (nhexan/isopropanol) bylo získáno celkem 4,36 g nezreagované sloučeniny 33b), která může být opět použita do výše zmíněného reakčního kroku.

Elementární analýza:

Spočteno: C 51,49 H 4,01 N 4,37 F 25,17 S 2,50

Nalezeno: C 51,60 H 4,19 N 4,28 F 25,14 S 2,44

d) N-[1-(4-perfluoroktylsulfonyl)- piperazin]-amid kyseliny 5-amino-3-N-(1-O-a-D-Karbonylmethyl-mannopyranosa]-benzoové

Analogickým způsobem jako bylo popsáno pro syntézu titulní sloučeniny z Příkladu 33b), poskytla hydrogenolýza 6,4 g (5,0 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 33c), za působení 0,3 g Pearlman katalyzátoru (Pd 20 %, C) ve směsi ethanol/voda (8:1) po zpracování 4,43 g (96,2 % teoretického množství) výše zmíněné titulní sloučeniny ve formě žlutavě zbarveného viskózního oleje.

Elementární analýza:

Spočteno: C 35,15 H 2,95 N 6,07 F 35,01 S 3,48

141 «· ··«·

Nalezeno: C 35,32 H 3,02 N 5,89 F 35,05 S 3,58

e) N-[1-(4-perfluoroktylsulfonyl)- piperazin]amid kyseliny 3N- (l-O-oc-D-Karbonylmethyl-mannopyranosa) -5-N- [1,4,7tris(karboxylatomethyl)-10-(3-aza-4-oxo-5-methyl-5-ylpentanoyl)-1,4,7,10-tetraazacydododekan]-benzoové, Gd-Komplex

5,54 g (8,8 mmol; 2,2 molárních ekvivalentů, spočteno na aminovou komponentu z Příkladu 33d) Gd-komplexu s 10-(4karboxy-l-methyl-2-oxo-3-azabutyl)-1,4,7,10-tetraazacyklododěkan-1,4,7-trioctovou kyselinou popsanou v patentové přihlíšce DE 197 28954 Cl pod Příkladem 31 h) a 0,37 g bezvodého chloridu lithného (8,8 mmol) bylo při teplotě 40 C° rozpuštěno za míchání v 60 ml absolutního dimethylsulfoxidu a při této teplotě bylo přidáno celkem 1,01 g (8.8 mmol) Nhydroxysukcinimidu a 3,7 g (4,0 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 13Ad), rozpuštěné ve 40 ml absolutního dimethylsulfoxidu. Po ochlazení na laboratorní teplotu bylo do reakčního roztoku přidáno 1,82 (8,8 mmol) N,N'dicyklohexylkarbodiimidu a směs byla míchána 12 hodin při laboratorní teplotě. Získaná suspenze byla zpracována s přebytkem acetonu až do vysrážení veškeré zmíněné titulní sloučeniny, sraženina byla odfiltrována, vysušena, rozpuštěna ve vodě, nerozpuštěná dicyklohexylmočovina byla odfiltrována a byla čištěna od nízkomolekulárního podílu na ultrafiltrační membráně AMICON® YM-3 (mezní limit: 3000 Da). Zbytek byl lyofilizován. Výtěžek: 5,36 g (87,4 % teoretického množství) jako bezbarvý lyofilizát.

Obsah vody (Karl-Fischer): 6,77 % .

Elementární analýza (spočteno na bezvodou látku):

Spočteno: C 36,01 H 3,61 N 8,22 F 21,05 Gd 10,25 S 2,09 Nalezeno: C 35,87 H 3,70 N 8,22 F 20,91 Gd 10,18 S 2,16 ·· ··«· ·· ····

142

Příklad 34

a) 1,4,7-Triazaheptan-l,7-bis-(2-N-trifluoracetyl-6-Nbenzyloxykarbony1-L-lysin)-diamid

100 g (107,9 mmol) karboxylové kyseliny získané v Příkladu 21a) a 26,1 g (226,59 mmol) N-hydroxysukcinimidu bylo rozpuštěno v 500 ml dimethylformamidu a při teplotě 0°C bylo přidáno po částech celkem 46,7 g (226,59 mmol) N,N'dicyklohexylkarbodiimidu a reakční směs byla míchána 3 hodiny při této teplotě. K přípravě roztoku aktivního esteru byl kreakční směsi přikapán roztok 5,57 g (53,95 mmol) diethylentriaminu, rozpuštěný v 60 ml dimethylformamidu ochlazený na teplotu 0 °C a reakční směs byla 2 hodiny míchána při 0°C a poté 12 h při laboratorní teplotě. Vyloučená sraženina dicyklohexylmočoviny byla odfiltrována a rozpouštědlo bylo odpařeno do sucha. Takto získaný zbytek byl poté chromatografován na silikagelu (Mobilní fáze: dichlormethan/ethanol 15:1; přičemž chromatografie byla prováděna s gradientem tak, že se kontinuálně zvyšoval podíl ethanolu).

Výtěžek: 26,0 g (58,8 % teoretického množství, spočteno na použitou aminovou komponentu) titulní sloučeniny ve formě bezbarvého a silně viskózního oleje.

Elementární analýza:

Spočteno: C 52,74 H 5,78 N 11,96 F 13,90

Nalezeno: C 52,66 H 5,89 N 11,88 F 14,02

b) 1,4,7-Triazaheptan-l,7-Bis-(2-N-trifiuoracetyl-6-Nbenzyloxykarbonyl-L-lysin)-diamid-4-[2-(N-ethyl-Nperf luoroktylsulfonyl ) -amino]-acetyl

K roztoku 20 g (24,4 mmol) diamidu připraveného v

Příkladu 34a), rozpuštěného ve směsi 150 ml tetrahydrofuranu a 15 ml chloroformu, byl při teplotě 0 °C pod dusíkovou

9· ···«

143 atmosférou přidán roztok 16,18 g (27,0 mmol) 2-(N-ethyl-Nperfluoroktylsulfonyl)- aminooctové kyseliny (připravené podle: DE 196 03 033), rozpuštěné v 50 ml tetrahydrofuranu. Pak bylo při teplotě 0 °C po částech přidáno celkem 18,0 g (36,6 mmol) EEDQ [ 2-ethoxy-l-ethoxykarbonyl-l,2dihydrochinolinu] a směs byla míchána přes noc při laboratorní teplotě a poté odpařena do sucha ve vakuu. Získaný zbytek byl chromatografován na silikagelu (Mobilní fáze: n-hexan/isopropanol 15:1). Bylo získáno 24,74 g (72,4 % teoretického množství, spočteno na použitý sekundární amin) titulní sloučeniny ve formě bezbarvého oleje.

Elementární analýza:

Spočteno: C 42,01 H 3,96 F 31,19 N 8,00 S 2,29

Nalezeno: C 41,92 H 4,07 F 31,22 N 7,87 S 2,34

c) 1,7-Bis-(6-N-benzyloxykarbonyl-L-lysin)-diamid-4-[2-(Nethyl-N-perfluoroktylsulfonyl)-amino)-acetyl-1,4,7triazaheptan

Ve 100 ml ethanolu bylo rozpuštěno 22,0 g (15,7 mmol) titulní sloučeniny připravené v Příkladu 34b) a při teplotě 0 °C byl do reakční směsi zaváděn 40 minut plynný amoniak. Reakční směs pak byla 4 hodiny míchána při 0°C a poté 3 hodiny při laboratorní teplotě a poté byla při teplotě lázně 40°C odpařena za sníženého tlaku do sucha. Zbylý olejovitý zbytek byl čištěn chromatografii na silikagelu s využitím směsi dichlormethan/hexan/2-propanol (20:10:1) jako eluentu. Výtěžek: 12.92 g (98,4 % teoretického množství) výše zmíněné titulní sloučeniny ve formě bezbarvého a silně viskózního oleje.

Elementární analýza:

Spočteno: C 44,22 H 4,64 N 9,38 S 2,68 F 27,03

Nalezeno: C 44,31 H 4,72 N 9,30 S 2,74 F 26,99 • fc fcfcfcfc • · • fc fcfcfcfc

144 fcfc • · ·····♦· · fcfcfc fcfc fcfcfc · ··· fcfcfc fcfcfcfc · fcfcfc · · » fcfcfcfc • fc fc fcfc fc··· fcfc ··

d) 1,7-Bis-[6-N-benzyloxykarbonyl-2-N-(1-0-a-Dkarbonylmethyl-2,3,4,6-tetra-O-benzyl-mannopyranosa)-Llysin]-diamid-4-[2-(N-ethyl-N-perfluoroktylsulfonyl)-amino]acetyl-1,4,7-triazaheptan

5,47 g (9,15 mmol) l-Karboxymethyloxy-2,3,4,-tetra-Obenzyl-a-D-mannopyranosid [Příprava podle patentové přihlášky DE 197 28954 Cl] bylo rozpuštěno v 80 ml dimethylformamidu a bylo přidáno celkem 1,05 g (9,15 mmol) Nhydroxysukcinimidu. Směs byla ochlazena na teplotu 0°C a bylo přidáno 1,9 g (9,15 mmol) dicyklohexylkarbodiimidu. Reakční směs byla míchána hodinu při teplotě 0 °C a poté byla míchána 4 hodin při laboratorní teplotě. Směs byla ochlazena na teplotu 0 °C a pak byla pomalu přikapána během 3 h roztok 7,65 g (9,15 mmol) aminosloučeniny připravené v Příkladu 34e) rozpuštěné v 50 ml dimethylformamidu. Reakční směs pak byla ještě hodinu míchána při teplotě 0 °C, a poté byla míchána při laboratorní teplotě. Reakce byla odpařena do sucha za sníženého tlaku a zbytek byl rozpuštěn ve 100 ml ethylacetátu. Vyloučená močovina byla odfiltrována a filtrát byl dvakrát promyt s 50 ml 5% vodného roztoku sody. Organická fáze byla sušena nad síranem hořečnatým a byla odpařena ve vakuu do sucha. Zbytek byl chromatografován na silikagelu (Mobilní fáze: n-hexan/isopropanol 20:1). Bylo získáno 17,01 g (78,9 % teoretického množství, spočteno na použitou karboxylovou kyseliny) titulní sloučeniny ve formě bezbarvého olej e.

Elementární analýza:

Spočteno: C 59,13 H 5,43 N 4,76 F 13,71 S 1,36

Nalezeno: C 59,22 H 5,39 N 4,85 F 13,70 S 1,40 ·· ···» ·« ···« ·» ·· + » · · » * ·

e) 1,7-Bis- [2-N- (1-0-a-D-karbonylmethyl-mannopyranosa) -Llysin]-diamid-4-[2-(N-ethyl-N-perfluoroktylsulfonyl)-amino]acetyl-1,4,7-triazaheptan

Ve 150 ml ethanolu bylo rozpuštěno 15,0 g (6,36 mmol) amidu připraveného v Příkladu 34d) a bylo přidáno 0,5 g Pearlman katalyzátoru (Pd 20%, C) . Reakční směs byla hydrogenována při laboratorní teplotě pod atmosférou vodíku (1 atm), dokud byla pozorována spotřeba vodíku. Katalyzátor byl poté odfiltrován, promyt dobře s ethanolem (cca. 100 ml) a -roztok odpařen dosucha za sníženého tlaku. Titulní sloučenina byla získána ve formě viskózního žlutavého oleje. Výtěžek: 8,54 g (97,2% teoretického množství).

Elementární analýza:

Spočteno: C 39,13 H 5,04 N 8,11 F 23,38 S 2,32

Nalezeno: C 39,07 H 4,98 N 8,18 F 23,40 S 2,30

f) 1,7-Bis-[2-N-(1-0-a-D-karbonylmethyl-mannopyranosa)-6-N[1,4,7-tris(karboxylatomethyl)-10-(3-aza-4-oxo-5-methyl-5-ylpentanoyl)-1,4,7,10-tetraazacyklododekan]-L-lysin]-diamid-4[2-(N-ethyl-N-perfluoroktylsulfonyl)amino]-acetyl-1,4,7triazaheptan, Digadolinitý komplex

Do míchané suspenze 5,7 g (9.06 mmol) Gd-komplexu s 10(4-karboxy-l-methyl-2-oxo-3-azabutyl)-1,4,7,10-tetraazacyklododekan-1,4,7-trioctovou kyselinou získanou podle patentové přihlášky DE 197 28 954 Cl pod Příkladem 31 h) v 75 ml absolutního dimethylsulfoxidu bylo při teplotě 70°C přidáno 0,68 g (15,9 mmol) chloridu lithného. Po 30 minutách míchání při teplotě 70 °C bylo po částech přidáno celkem 1,83 g (15,9 mmol) N-hydroxysukcinimidu a reakční směs byla míchána další hodinu při této teplotě. Po ochlazení na teplotu 0 °C bylo přidáno 4,52 g (23,85 mmol) dicyklohexylkarbodiimidu a reakční směs byla míchána další hodinu při teplotě 0 °C, a « · • · · · • ·

146

poté 12 hodin při teplotě 22°C. K takto získané reakční směsi N-hydroxysukcinimidesteru Gd-komplexu 10-(4-karboxy-l-methyl2-oxo-3-azabutyl)-1,4,7,10-tetraazacyklododekan-l,4,7tríoctové kyseliny byl při teplotě 22 °C přikapán roztok 2,84 g (2,06 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 34e) v 15 ml absolutního dimethylsulfoxidu a reakce byla míchána 12 hodin při laboratorní teplotě. Při zpracování bylo do reakčního roztoku přikapáno při 22 °C 500 ml acetonu, přičemý titulní sloučenina vypadla jako bezbarví sraženina. Sraženina byla odsáta, rozpuštěna ve 200 ml destilované vody a byla třikrát ultrafiltrována přes ultrafiltrační membránu YM3- (AMICON ® : mezní limit : 3000 Da) kvůli odstranění solí a nízkomolekulárního podílu. Získaný filtrát byl čištěn pomocí lyofilizace.

Výtěžek: 4,80g (89,6 % teoretického množství, spočteno na aminovou komponentu) jako bezbarvý lyofilizát s obsahem vody 8,98 %.

Elementární analýza (spočteno na bezvodou látku):

Spočteno: C 38,28 H 4,84 N 9,68 F 12,40 S 1,23 Gd 12,07 Nalezeno: C 38,20 H 4,91 N 9,77 F 12,45 S 1,19 Gd 12,10

Příklad 35

a) 1,7-Bis(benzyloxykarbonyl)-4-{3-oxa-pentan-l,5dikarboxylová kyselina-l-oyl-5[1-(4-perfluoroktylsulfonyl)piperazin]-amid}-l,4,7,10-tetraazacyklododekan

K roztoku 10,75 g (24,4 mmol) 1,7-bis-[benzyloxykarbonyl]-1,4,7,10-tetraazacyklododekan, rozpuštěné ve směsi 150 ml tetrahydrofuranu a 15 ml chloroformu, bylo při 0 °C a pod dusíkovou atmosférou přidáno 16,56 g (24,4 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 35e), rozpuštěné ve 150 ml tetrahydrofuranu. Poté bylo při teplotě 0°C přidáno celkem 18,0 g (36,6 mmol) EEDQ [2-ethoxy-l-ethoxykarbonyl-l,2·· ···· ·· titi ·· ··· • · · · · · · · ·

	147	• ti ti • · · • · ·	titi til tititi • ti titititi
dihydrochinolinu] a směs	byla míchána	přes	noc při
laboratorní teplotě a poté	odpařeno do sucha za	sníženého
tlaku. Získaný olej byl	chromatografován	na	silikagelu

(Mobilní fáze: n-hexan/isopropanol 12:1). Bylo zíksáno 17,22 g (64,3% teoretického množství, spočteno na použitý sekundární amin) monoamidu společně s 3,8 g (8,8 % teoretického množství) diamidu jako vedlejšího produktu. Titulní sloučenina byla izolována jako bezbarvý olej. Elementární analýza:

Spočteno: C 43,41 H 3,92 F 29,18 N 7,59 S 2,60

Nalezeno: C 43,52 H 4,07 F 29,24 N 7,67 S 2,55

b) 1,7-Bis(benzyloxykarbonyl)-4-{3-oxa-pentan-l,5dikarboxylová kyselina-l-oyl-5[1-(4-perfluoroktylsulfonyl)piperazin]-amid]-10-[1-0-a-D-(5-karbonyl)-pentyl-2,3,4,6tetra-O-benzyl-mannopyranosa]-1,4,7,10-tetraazacyklododekan

10,0 g (13,4 mmol) karboxylové kyseliny z Příkladu 30c) a 3,24 g (28,1 mmol) N-hydroxysukcinimidu bylo rozpuštěno ve 100 ml dimethylformamidu a při teplotě 0°C bylo po částech přidáno celkem 5,8 g (28,1 mmol) N, N'-dicyklohexylkarbodiimidu a směs byla při této teplotě míchána 3 hodiny. K takto získanému roztoku aktivného etheru byl přikapán roztok 14,83 g (13,4 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 35a) rozpuštěné ve 100 ml dimethylformamidu ochlazený na 0 °C a směs byla míchána 2 hodiny při teplotě 0°C a poté 12 h při laboratorní teplotě. Při zpracování byla vyloučená sraženina dicyklohexylmočoviny odfiltrována a rozpouštědlo bylo odpařeno do sucha za sníženého tlaku. Takto získaný zbytek byl chromatografován na silikagelu (Mobilní fáze: dichlormethan/ethylacetát 20:1; přičemž chromatografie byla prováděna s postupným gradientem rozpouštědla, kdy se postupně zvyšoval podíl ethylacetátu).

• ·

148

Výtěžek: 18,3 g (78,2 % teoretického množství) titulní sloučeniny ve formě bezbarvého a silně viskózního oleje. Elementární analýza:

Spočteno: C 55,11 H 5,03 N 4.82 F i 8,52 S 1,84

Nalezeno: C 54.87 H 4.85 N 4.92 F 18.55 S 1,86

c) 1-{3-oxa-pentan-l,5-dikarboxylová kyselina-l-oyl-5-[1-(4perfluoroktytsulfonyl)-piperazin]-amid}-7-[1-0-a-D-(5karbonyl)-pentyl-mannopyranosa]-1,4,7,10-tetraazacyklododekan

Ve 150 ml ethanolu bylo rozpuštěno 17,0 g (9,75 mmol) sloučeniny připravené v Příkladu 34b), bylo přidáno 1,0 g Peartman katalysátiru (Pd 20%, C) a reakční směs byla hydrogenována při laboratorní teplotě pod atmosférou vodíku (1 atm), až do doby, kdy nebyla pozorována žádná další spotřeba vodíku. Katalyzátor byl odfiltrován, promyt s ethanolem (dvakrát se 75 ml) a rozpouštědlo bylo odpařeno za sníženého tlaku. Titulní sloučenina byla získána ve formě silně viskózního bezbarvého oleje. Výtěžek: 10,76 g (99,0 % teoretického množství).

Elementární analýza:

Spočteno: C 38,78 H 4,61 N 7,54 F8,97 S 2,88

Nalezeno: C 38,86 H 4.65 N 7.41 F 29,02 S 2,92

d) 1,7-Bis-[1,4,7-tris(karboxylatomethyl)-1,4,7,10tetraazacyklododekan-Gd-Komplex-10-(pentanoy1-3-aza-4-oxo-5methyl-5yl)-4-[2-(N-ethyl-N-perfluoroktylsulfonyl]-amino]acetyl-2-oxa-acetyl]-10-[l-0-a-D-6-karbonylpentylmannopyranosa]-1,4,7,10 tetraazacyklododekan

24,86 g (39,46 mmol; 4,4 molárních ekvivalentů spočteno na aminovou komponentu 35c) Gd-komplexu 10-(4-karboxy-lmethyl-2-oxo-3-azabutyl)-1,4,7,10-tetraazacyklododekan-1,4,7trioctové kyseliny popsané v patentové přihlášce DE 1 97 28 • ti

149

954 Cl pod Příkladem 31 h) a 1,67 g bezvodého chloridu lithného (39,46 mmol) bylo při teplotě 40 C° rozpuštěno za míchán v 200 ml absolutního dimethylsulfoxidu a při této teplotě bylo přidáno 4,53g (39,46 mmol) N-hydroxysukcinimidu a 10,0 g (8,97 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 34c), rozpuštěné ve 100 ml absolutního dimethylsulfoxidu. Po ochlazení na laboratorní teplotu byl do reakčního roztoku přidáno 8,14 g (39, 46 mmol) Ν,N'-dicyklohexylkarbodiimidu a reakční směs byla míchána 12 hodin při laboratorní teplotě. Získaná suspenze byla slita s přebytkem acetonu až do úplného vysrýžení zmíněné titulní sloučeniny, sraženina byla zfiltrována, vysušena, rozpuštěna ve vodě, nerozpuštěná dicyklohexylmočovina byla odfiltrována a filtrát byl ultrafiltrován na ultrafiltrační membráně AMICON® YM-3 (mezní limit :3000 Da) kvůli odstranění nízkomolekulárního podílu. Zbytek byl lyofilizován.

Výtěžek: 16,37 g (79,3 % teoretického množství) jako bezbarvého lyofilizátu. Obsah vody (Karl-Fischer): 7,65 % . Elementární analýza (spočteno na bezvodou látku):

Spočteno: C 38,01 H 4,61 N 9,58 F 13,81 S 1,37 Gd 13,45 Nalezeno: C 37,92 H 4,55 N 9,58 F 13,77 S 1,31 Gd 13,48

e) mono-[1-(4-perfluoroktylsulfonyl)piperazin]-amid 3-0xapentan-1,5-díkarboxylové kyselina g (44,0 mmol) 1-Perfluoroktylsulfonylpiperazinu bylo rozpuštěno ve 150 ml tetrahydrofuranu a při laboratorní teplotě bylo přidáno celkem 5,1 g (44,0 mmol) anhydridu diglykolové kyseliny a takto získaná reakční směs byla zahřívána 12 h k refluxu. Po ochlazení na laboratorní teplotu byla reakční směs odpařena ve vakuu do sucha a zbytek byl čištěn pomocí chromatografie na silikagelu s využitím směsi dichlormethan/2-propanol (16:1) jako eluentu. Výtěžek: 27,94

150 g (92,8 % teoretického množství) výše zmíněné titulní sloučeniny ve formě bezbarvého viskózního oleje.

Elementární analýza:

Spočteno: C 58,52 H 4,27 N 1,98 S 2,26 F 22,80

Nalezeno: C58,42 H 4,41 N 1,80 S 2,28 F 23,02

Příklad 36

a) 1, 7-Bis(benzyloxykarbonyl)-4-{3-(oxa-pentan-1,5dikarboxylová kyselina-l-oyl-5-[1-(4-perfluoroktylsulfonyl)piperazin]-amid}-10-[l-0-a-D-6-karbonylpentyl-2,3,4,6-tetraO-benzyl-glukopyranosa]-1,4,7,10-tetraazacyklododekan)

Ve750 ml suchého tetrahydrofuranu bylo rozpuštěno 68,5 g (91,79 mmol) l-karboxymethyloxy-2,3,4,-tetra-O-benzyl-a-Dmannopyranosid [ připraven podle patentové přihlášky DE 197 28 954 Cl] a bylo přidáno 9,25 g (91,79 mmol) triethylaminu. Po ochlazení reakční směsi na teplotu -15°C až -20°C byl při této teplotě pomalu přikapán roztok 12,64 g (92,5 mmol) isobutylesteru chlormravenčí kyseliny ve 150 ml suchého tetrahydrofuranu, přičemž rychlost přikapávání byla taková, aby teplota reakční směsi nepřestoupila -10°C. Směs byla míchána 15 minut při -15 °C a poté byl přikapán roztok 101,6 g (91,79 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 35a) a 9,25 g (91,79 mmol) triethylaminu, rozpuštěných v 500 ml suchého tetrahydrofuranu při teplotě -20 °C. Reakční směs byla míchána hodinu při teplotě -15 °C a poté dvě hodiny při laboratorní teplotě, reakční směs byla poté odpařena do sucha za sníženého tlaku. Zbytek byl rozpuštěn ve 450 ml ethylacetátu a byl promyt dvakrát s 300 ml nasyceného roztoku hydrogenuhličitanu sodného a poté se 400 ml vody. Po vysušení organické fáze nad síranem sodným byla anorganika odfiltrována a ethylacetát byl odpařen do sucha za vakua.

151 • ·

Zbylý olej byl čištěn chromatografií na silikagelu s využitím směsi dichlormethan/hexan/2-propanol (10:20:1) coby eluentu. Výtěžek: 130,6 g (81,6 % teoretického množství) výše zmíněné

titulní sloučeniny	ve formě	bezbarvého	a silně viskózního
oleje.
Elementární analýza:
Spočteno: C 55,11 H	5,03 N 4,	82 F 18,52 S	1,84
Nalezeno: C 55,20 H	5,09 N 4,	91 F 18,48 S	1,80

b) -l-{3-0xa-pentan-l,5-dikarboxylová kyselina-l-oyl-5-[1-(4perfluoroktylsulfonyl)piperazin]-amid]-7-[1-0-a-D-(5karbonyl)-pentyl-mannopyranosa]-1,4,7,10-tetraazacyklododekan

V 1000 ml ethanolu bylo rozpuštěno 110,0 g (63,08 mmol) sloučeniny připravené v Příkladu 36a), bylo přidáno 5,0 g Peartman katalyzátoru (Pd 20%, C) a směs byla hydrogenována až do spotřebování všeho vodíku. Katalyzátor byl odfiltrován, promyt dobře s ethanolem a směs byla odpařena do sucha za sníženého tlaku. Titulní sloučenina byla získána ve formě bezbarvého oleje.

Výtěžek: 92,6i g (99,5 % teoretického množství).

Elementární analýza:

Spočteno: C 52,10 H 5,12 N 5,70 F 21,89 S 2,17

Nalezeno: C 52,20 H 5,09 N 5,71 F 21,87 S 2,20

c) 1,7-Bis- [1,4,7-tris(karboxylatomethyl)-10-(3-aza-4-oxo-5methyl-5-yl-pentanoyl)-4-{3-oxa-pentan-l,5-dikarboxylová kyselina-l-oyl-5-[1-(4-perfluoroktylsulfonyl)-piperazin]amid}-10-[1-0-a-D-(5-karbonyl)-pentyl-mannopyranosa]1,4,7,10-tetraazacyklododekan, Digadolinitý-komplex

55,4 g [ 88,0 mmol; 4,4 molárních ekvivalentů spočteno na diaminovou složku z Příkladu 33d)] Gd-komplexu 10-(4karboxy-l-methyl-2-oxo-3-azabutyl)-1,4,7,10-tetraazacyklo• · · · • ·

152 dodekan-1,4,7-trioctové kyseliny popsané v patentové přihlášce DE 197 28 954 Cl pod Příkladem 31 h) a 3,7 g bezvodého chloridu lithného (88,0 mmol) bylo při teplotě 40 C° rozpuštěno v 500 ml absolutního dimethylsutfoxidu za míchání a reakční směs byla při této teplotě nechána reagovat celkem s 10,1 g (88,0 mmol) N-hydroxysukcinimidu a 29,5 g (20,0 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 36b), rozpuštěné ve 200 ml absolutního dimethylsulfoxidu. Po ochlazení na laboratorní teplotu byl nechán reakční roztok reagovat s 18,2 g /88,0 mmol) N,N'-dicyklohexylkarbodiimidu a směs byla míchána 12 hodin při laboratorní teplotě. Získaná suspenze byla zpracována s přebytkem acetonu až do úplného vysrážení výše uvedené titulní sloučeniny, sraženina byla zfiltrována, vysušena, rozpuštěna ve vodě, nerozpuštěná dicyklohexylmočovina byla odfiltrována a filtrát byl ultrafiltrován na ultrafiltrační membráně AMICON® YM-3 (mezní limit :3000 Da) kvůli odstranění nízkomolekulárního podílu. Zbytek byl lyofilizován.

Výtěžek: 35,96 g (76,9 % teoretického množství) jako bezbarvého lyofilizátu. Obsah vody (Karl-Fischer): 5,98 % Elementární analýza (spočteno na bezvodou látku):

Spočteno: C 38,01 H 4,61 N 8,22 F 13,81 Gd 13,45 S 1,37 Nalezeno: C 37,87 H 4,70 N 8,22 F 13,90 Gd 13.48 S 1,36

Příklad 37

a) 5-(ethoxykarbonyl)pentyl-2,3,4,6-tetra-O-acetyl-a-Dmannopyranosid

Analogickým způsobem jako bylo popsáno v literatuře pro syntézu arylglykopyranosidů [J. Conchie a G. A. Levvy v Methods in Carbohydrate Chemistry (R. L. Whistler, M. L. Wolfrom a J. N. BeMiller, Eds.), Academie Press, New York, Vol.11 , 90, str. 34.5-347, (1963)) vedlo použití 156,2 g • · · ··

153 ·* (400 mmol) D-mannosapentaacetátu jako α,β-(a,β-poměr = 4:1) směs anomerů [pro syntézu 1,2,3,4,6-Penta-O-acetyl-a,β-Dmannopyranosy viz.: M. L. Wolfrom a A. Thompson v Methods in Carbohydrate Chemistry (R. L. Whistler, M. L. Wotfrom a J. N. BeMiller, Eds.), Academie Press, New York, Vol. 11, 53 , str. 211-215, (1963)] s 67 ml (400 mmol) ethylesteru 6-hydroxyhexanové kyseliny a 60,8 ml (520 mmol) chloridu cíničitého v 600 ml 1,2-dichlorethanu po chromatografickém čištění na sloupci silikagelu (Eluent: hexan/ ethylacetát 2:1) ke vzniku 100', 05 g (51% teoretického množství) výše uvedené titulní sloučeniny ve formě bezbarvého a viskózního oleje. Pomocí IH NMR spektroskopie bylo zjištěno, že titulní sloučenina může být považována za čistý ot-anomer.

Elementární analýza:

Spočteno: C 52,94 H 6,77

Nalezeno: C 52,80 H 6,78

b) 5-(Karboxy)pentyl-2,3,4,6-tetra-O-benzyl-a-Dmannopyranosid

Míchaná suspenze 141,0 g (289 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 37a) ve 200 ml dioxanu byla při laboratorní teplotě a za intenzivního míchání po částech nechána reagovat s celkem 238,5 g (4,26 mol) jemně práškového hydroxidu draselného. Kvůli zvýšení účinnosti míchání bylo do reakční směsi přidáno 200 ml dioxanu a takto získaná směs byla zahřáta k varu a při této teplotě bylo během dvou hodin přikapáno celkem 372 ml (3,128 mol) benzylbromidu. Reakční směs byla míchána 4 hodiny při teplotě 110 °C a poté 12 hodin při laboratorní teplotě. Reakční směs pak byla pomalu nalita do celkem 2,5 litru ledové vody a byla extrahována s diethylethrem. Etherová fáze byla promyta a sušena nad • · · ·

• · ·

W · 9

9 9

9 9 9 ·· ··· · síranem sodným. Anorganika byla odfiltrována a diethylether byl odpařen dosucha ve vakuu. Přebytečný benzylbromid byl oddestilován z reakční směsi při teplotě olejové lázně 180 °C. Takto získaný zbytek byl čištěn pomocí chromatografie na silikagelu s využitím směsi ethylacetát/hexan (1:10) jako eluentu.

Výtěžek: 172,2, g (91,0 % teoretického množství) výše uvedené titulní sloučeniny ve formě bezbarvé a silně viskózního oleje.

Elementární analýza:

Spočteno: C 75,68 H 7,16

Nalezeno: C 75,79 H 7,04

c) 5-[(Karboxy)-pentyl-2,3,4,6-tetra-O-benzyl-a-Dmannopyranosid-]N-hydroxysukcinamidester

60,0 g (91,5 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 37b) bylo rozpuštěno ve 750 ml dimethylformamidu a bylo přidáno celkem 10,4 g (91,5 mmol) N-hydroxysukcinimidu. Směs byla ochlazena na teplotu 0°C a bylo přidáno 18,9 g (91,5 mmol) dicyklohexylkarbodiimidu. Reakční směs byla míchána 4 hodiny při teplotě 0 °C a poté 4 hodiny při laboratorní teplotě. Rozpouštědlo bylo odpařeno dosucha a zbytek byl rozpuštěn ve 100 ml ethylacetátu a ochlazen na 0 °C. Vyloučení močovina byla odsáta a filtrát byl ve vakuu odpařen do sucha. Takto získaný zbytek byl čištěn sloupcovou chromatografií na silikagelu s využitím směsi ethylacetát/hexan (1:20) jako eluent.

Výtěžek: 61,23 g (89,0 % teoretického množství) výše uvedené titulní sloučeniny ve formě viskózního oleje.

Elementární analýza:

Spočteno: C 70,29 H 6,57 N 1,86

Nalezeno: C 70,39 H 5,64 N 1,91 • ·

155

d) 2,6-Bis-{ 6-Ν_ε-2-Ν_α- [- [l-O-a-D-6-karbonylpentyl- (2, 3,4,6tetra-O-benzyl)-mannopyranosa}-L-lysin}-methylester

K roztoku 4,26 g (18,30 mmol; 0,5 molárního ekvivalentu spočteno na karboxylovou kyselinu) L-Lysinmethylester dihydrochloridu (komerrčně dostupného od firmy Bachem) a 4,05 g (40,26 mmot) triethylaminu ve 100 ml dímethylformamidu ochlazeného na teplotu 0 °C byl přikapán roztok 27,51 g (36,6 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 37c) ve 150 ml dímethylformamidu. Po ukončení přidávání byla reakční směs míchána další hodinu oři teplotě 0°C a poté přes noc při laboratorní teplotě. Reakční směs byla odpařena do sucha za sníženého tlaku a zbytek byl rozpuštěn ve 300 ml ethylacetátu. Vyloučená močovina byla odfiltrována, filtrát byl dvakrát promyt se lOOml 5% vodného roztoku sody. Organická fáze byla sušena nad síranem hořečnatým a byla odpařena do sucha za sníženého tlaku. Zbytek byl chromatografován na silikagelu (Mobilní fáze: nhexan/isopropanol 25:1). Bylo získáno 39,56 g (75,4% teoretického množství) titulní sloučeniny ve formě bezbarvého olej e.

Elementární analýza:

Spočteno: C 72,8g H 7,31 N 1,95

Nalezeno: C 72,90 H 7,29 N 2,02

e) 2,6-Bis- [6-Ν_ε-2-Ν_α- [l-O-oc-D-6-karbonylpentyl- (2, 3,4,6tetra-O-benzyl)-mannopyranosa]]-L-lysin

Ve 150 ml ethanolu bylo rozpuštěno 30,0 g (20, 92 mmol) sloučeniny připravené v Příkladu 37d). Pak byl přidán roztok 4 g (100,0 mmol) hydroxidu sodného v 10 ml destilované vody a směs byla 3 hodiny míchána při teplotě 50 °C. Podle tenkovrstvé chromatografie byla reakce kvantitativní. Reakční směs byla odpařena do sucha ve vakuu a zbytek byl rozpuštěn ·» ····

156 •9 ·«·· ····

ve 300 ml ethylacetátu a organická fáze byla extrahována dvakrát se 100 ml ředěné vodné kyseliny citrónové. Po vysušení nad síranem sodným byl roztok odpařen do sucha za sníženého tlaku. Zbytek byl chromatografován na silikagelu (Mobilní fáze: n-hexan/isopropanol 13:1). Bylo získáno 25,56 g (88,5 % teoretického množství,) titulní sloučeniny ve formě bezbarvého oleje.

Elementární analýza:

Spočteno: C 72,88 H 7,31 N 1,95

Nalezeno: C 72,78 H 7,33 N 1,96

f) 2,6-Bis-[ 6-Ν_ε-2-Ν_α-[l-O-a-D-6-Karbonylpentyl-(2,3,4,6tetra-O-benzyl)-mannopyranosa]-L-lysin]-N-hydroxysukcinimidester

14,0 g (9,15 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 37e) bylo rozpuštěno ve 100 ml dimethylformamidu a bylo přidáno celkem 1,04 g (9,15 mmol) N-hydroxysukcinimidu. Směs byla ochlazena na teplotu 0°C a bylo přidáno 1,89 g (9,15 mmol) dicyklohexylkarbodiimidu. Směs byla míchána hodinu při teplotě 0 °C a poté 4 hodiny při laboratorní teplotě. Rozpouštědlo bylo odpařeno ve vakuu do sucha a zbytek byl rozpuštěn ve 100 ml ethylacetátu a ochlazen na 0 °C. Vyloučená močovina byla odfiltrována a filtrát byl odpařen do sucha za sníženého tlaku. Takto získaný zbytek byl čištěn chromatografii na silikagelu s využitím směsi ethylacetát/nhexan (1:20) jako eluentu.

Výtěžek: 12,94 g (92,4 % teoretického množství) výše jmenované titulní sloučeniny ve formě bezbarvého viskózního oleje.

Elementární analýza:

Spočteno: C 71,40 H 7,05 N 2,74

Nalezeno: C 71,39 H 7,14 N 2,81

4 •4 4444

157

4444

4

4444

g) 2, 6-N,Ν'-Bis[1-O-a-D-(6-karbonyl)-pentyl-2,3,4,6-tetra-0benzylmannopyranosa)-L-lysin-1,7-(1,4,7-triazaheptan)-diamid

Do roztoku (ochlazeného na teplotu 0°C) 0,47 g (4,57 mmol) diethylentriaminu ve 25 ml dimethytformamidu byl pomalu přikapán roztok 14,0 g (9,15 mmol; 2 molární ekvivalenty,spočteno na použitý amin) titulní sloučeniny z Příkladu 37f) ve 100 ml dimethylformamidu. Po ukončení přídavku byla reakční směs míchána ještě jednu hodinu při teplotě 0 °C a poté přes noc při laboratorní teplotě. Směs bylá poté odpařena do sucha za sníženého tlaku a zbytek byl rozpuštěn ve 200 ml ethylacetátu. Vyloučená sraženina močoviny byla odfiltrována a filtrát byl dvakrát promyt s 50 ml 5 % vodného roztoku sody. Organická fáze byla sušena nad síranem hořečnatým a byla odpařena do sucha za sníženého tlaku. Zbytek byl chromatografován na silikagelu (Mobilní fáze: n-hexan/isopropanol 25:1). Bylo získáno 9,53 g (71,4 % teoretického množství) titulní sloučeniny ve formě bezbarvého oleje.

Elementární analýza:

Spočteno: C 72,79 H 7,42N 3,36

Nalezeno: C 72,90 H 7,39 N 3,32

h) 2-N-[2-(N-ethyt-N-perfluoroktylsulfonyl)-amino]-acetyl-6-N (benzyloxykarbonyl)-L-lysin-methylester

20,8 g (35,6 mmol) 2-[N-Ethyl-N-perfluoroktylsulfonyl)-aminooctové kyseliny a 3,60 g (35,6 mmol) triethylaminu bylo rozpuštěno ve 200 ml dimethylformamidu a bylo přidáno 4,09 g (35,6 mmol) N-hydroxysukcinimidu. Směs byla ochlazena na teplotu 0 °C a bylo přidáno 7,34 g (35,6 mmol) dicyklohexylkarbodiimidu. Reakční směs byla míchána 1 hodinu při teplotě 0 °C a poté byla míchána 4 hodiny při laboratorní teplotě. Směs byla ochlazena na teplotu 0 °C a poté byl během 10 minut přikapán roztok ll,77g (35,6 mmol) 6-N-benzyloxykarbonyl-L-lysin-methylester hydrochloridu a 4,0 g (40,0 mmol) triethylaminu ve 100 ml • 4 4444

158 ·· ·· ► 4 4 4

I 4 9

4444

4 4

4444 dimethylformamidu. Reakční směs byla míchána 1 hodinu při teplotě 0 °C, a potom přes noc při laboratorní teplotě. Reakční směs byla odpařena do sucha za sníženého tlaku a zbytek byl rozpuštěn ve 100 ml ethylacetátu. Vyloučená močovina byla odfiltrována a filtrát byl dvakrát promyt s 5% vodným roztokem sody. Organická fáze byla sušena nad síranem hořečnatým a byla odpařena do sucha za sníženého tlaku. Zbytek byl chromatografován na silikagelu (Mobilní fáze: n-

hexan/ethylacetát 20:1)	•	Bylo	získáno	27,43 g	(88,0%
teoretického množství) bezbarvého	oleje.
Elementární analýza:
Spočteno: C 38,41 H 3,45	N	4,80 F	36,89 S	3,66
Nalezeno: C 38,45 H 3,38	N	4,88 F	37,02 S	3,71

i) 2-Na-{[2-(N-ethyl-N-perfluoroktylsulfonyl]-amino-acetyl}6-Νε-(benzyloxykarbonyl)-L-lysin

Ve 150 ml ethanolu bylo rozpuštěno 25,0 g (28,55 mmol) sloučeniny připravené v Příkladu 37h). Poté byl přidán roztok 4 g (100,0 mmol) hydroxidu sodného v 10 ml destilované vody a směs byla míchána 3 hodiny při teplotě 50°C. Podle tenkovrstvé chromatografie je zmýdelnění úplné. Reakční směs byla odpařena ve vakuu a zbytek byl rozpuštěn v 300 ml ethylacetátu a organická fáze byla extrahována dvakrát se 100 ml ředěného roztoku kyseliny citrónové. Po sušení nad síranem sodným byla anorganika zfiltrována a směs byla odpařena za sníženého tlaku do sucha. Zbytek byl chromatografován na silikagelu (Mobilní fáze: n-hexan/isopropanol 10:1). Bylo získáno 22,73g (92,4 % teoretického množství) titulní sloučeniny ve formě bezbarvého oleje.

Elementární analýza:

Spočteno: C 37,64 H 3,28 N 4,88 F 37,49 S 3,72

Nalezeno: C 37,65 H 3,38 N 4,88 F 37,52 S 3,73 <··· • to ····

159 • · • · • · • · • to to* toto • · · to • · to ··· « ··« *· toto·· * · · • toto • · · to • ·· · ·· ··

j) 1,4,7-Triazaheptan-4-{2-N-[2-(N-ethyl-N-perfluoroktylsulfonyl)-amino]-acetyl-6-N-benzyloxykarbonyl}-L-lysin-amid1,7-bis{2,6-N,N'-bis[1-0-a-D-(5-karbonyl)pentyl-2,3,4,6tetra-O-benzylmannopyranosa]-L-lysin-diamid)

Ve 250 ml suchého tetrahydrofuranu bylo rozpuštěno 15,33 g (17,8 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 37i) společně s 1,80 g (17,8 mmol) triehylaminu. Po ochlazení na teplotu 15°C až -20°C byl k reakční směsi za míchání pomalu přikapán roztok 4,92 g (35,6 mmol) isobutylesteru chlormravenčí kyseliny, rozpuštěné v 50 ml suchého tetrahydrofuranu, přičemž rychlost přidávání byla taková, aby teplota reakční směsi nepřesáhla -10 °C. Po 15 minut míchání při teplotě 15°C byl pomalu přikapán roztok 52,0 g (17,8 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 37g) a l,80g (17,8 mmol) triehylaminu, ve 300 ml suchého tetrahydrofuranu při teplotě -20°C. Reakční směs byla míchána hodinu při teplotě -15°C a poté byla míchána 2 hodiny při pokojové teplotě a byla odpařena do sucha za sníženého tlaku.

Zbytek byl rozpuštěn v 500 ml ethylacetátu a byl dvakrát promyt s 200 ml nasyceného roztoku hydrogenuhličitanu sodného a poté s 200 ml vody. Po sušení organické fáze nad síranem sodným byl ethylacetát odpařen ve vakuu. Záskaný olej ovitý zbytek byl čištěn chromatografií na sloupci silikagelu s využitím směsi ethylacetát/n-hexan (1:20) jako eluent. Výtěžek: 54,6 g (81,6% teoretického množství) výše zmíněné titulní sloučeniny ve formě bezbarvého silně viskózního olej e.

Elementární analýza:

Spočteno: C 65,09 H 6,45 N 3,72 F 8,58 S 0,85

Nalezeno: C 65,13 H 4,41 N 3,69 F 8,52 S 0,90 *

• · • ·

160

k) 1,4,7-Triazaheptan-4-{2-N-[2-(N-ethyl-N-perfluoroktylsulfonyl) -amino]-acetyl)-L-lysin-amid-1,7-bis{2,6-N,N'-bis[1O-a-D-(5-karbonyl)-pentyl-mannopyranosa]-L-lysin-diamid)

V 500 ml ethanolu bylo rozpuštěno 50,0 g (13,28 mmol) sloučeniny připravené v Příkladu 37j), bylo přidáno 4,0 g Pearlman katalyzátoru (Pd 20%, C) a směs byla hydrogenována při laboratorní teplotě pod atmosférou vodíku (1 atm), až do doby, kdy již nebyla pozorována spotřeba vodíku. Katalyzátor byl odfiltrován, dobře promyt s ethanolem (cca 400 ml) a směs bylá odpařena ve vakuu do sucha. Titulní sloučenina byla získána ve formě silně viskózního a bezbarvého oleje.

Výtěžek: 26,85 g (93,0 % teoretického množství).

Elementární analýza:

Spočteno: C 45,85 H 6,35 N 6,44 F 14,86 S 1,47

Nalezeno: C 45.76 H 6.35 N 6.41 F 14,92 S 1,39

l) 1,4,7-Triazaheptan-4-{2-N-[2-(N-ethyl-N-perfluoroktylsulfonyl) -amino]-acetyl-6-N-[1,4,7-tris(karboxylatomethyl)10-(3-aza-4-oxo-5-methyl-5-yl-pentanoyl)-1,4,7,10tetraazacyklododekan) -L-lysin-amid-1,7-bis{2,6-N,Ν'-bis[1-0α-D-(5-karbonyl)-pentyl-mannopyranosa]-L-lysin-diamid], Komplex gadolinia

5,54 g (8,8 mmol; 2,2 molárního ekvivalentu, spočteno na použitou aminovou komponentu z Příkladu 37k)) Gd-komplexu 10(4-karboxyl-methyl-2-oxo-3-azabutyl)-1,4,7,10-tetraazacyklododekan-l, 4, 7-trioctové kyseliny popsané v patentové přihlášce DE 197 28 954 Cl pod Příkladem 31 h) a 0,37 g bezvodého chloridu lithného (8,8 mmol) bylo rozpuštěno při teplotě 40 C° v 60 ml absolutního dimethylsulfoxidu za míchání a při této teplotě bylo přidáno celkem 1,01 g (8.8 mmol) N-hydroxysukcinimidu a 1,84 g (4,0 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 37k), rozpuštěné ve 40 ml absolutního ·· ···

161 dimethylsulfoxidu. Po ochlazení na laboratorní teplotu byl do reakční směsi přidáno 1,82 g (8,8 mmol) N,N'-dicyklohexylkarbodiimidu a směs byla míchána 12 hodin při laboratorní teplotě. Získaná suspenze byla smíchána s přebytkem acetonu až do úplného vysrážení titulní sloučeniny, sraženina byla zfiltrována, vysušena, rozpuštěna ve vodě, nerozpuštěná dicyklohexylmočovina byla odfiltrována a filtrát byl ultrafiltrován na ultrafiltrační membráně AMICON® YM-3 (mezní limit :3000 Da) kvůli odstranění nízkomolekulárního podílu. Zby-tek byl lyof ilizován.

Výtěžek: 8,77g (78,7 % teoretického množství) ve formě bezbarvého lyofilizátu. Obsah vody (Karl-Fischer): 4,43 % . Elementární analýza (spočteno na bezvodou látku):

Spočteno: C 43,98 H 5,97 N 7,54 F 11,59 Gd 5,64 S 1,15 Nalezeno: C 43,97 H 6,02 N 7,62 F 11,61 Gd 10,18 S 1,15

Příklad 38

a) 2-Na-6-Ns-Bis-[1-0-a-D -karbonylmethyl-2,3,4,6-tetra - O benzyl mannopyranosa] -L-lysin]-methylester

10,95 g (18,30 mmol) l-Karboxymethyloxy-2,3,4,-tetra-Obenzyl-a-D-mannopyranosid [připraven podle popisu v patentové přihlášce DE 197 28954 Cl] byla rozpuštěna ve 150 ml dimethylformamidu a bylo přidáno celkem 2,09 g (18,3 mmol) N-hydroxysukcinimidu. Směs byla ochlazena na teplotu 0°C a bylo přidáno 3,78 g (18,3 mmol) dicyklohexylkarbodiimidu . Směs byla míchána hodinu při teplotě 0 °C a poté 4 hodiny při laboratorní teplotě. Směs byla ochlazena na teplotu 0 °C a byl během hodiny přikapán roztok 2,13 g (9,15 mmol; 0,5 molárního ekvivalentu, spočteno na použitou karboxylovou kyselinu) L-lysinmethylester dihydrochloridu (komerčně dostupného od firmy Bachem) a 2,02 g (20,13 mmol) triehylaminu v 70 ml dimethylformamidu. Po ukončení přídavku ·· ··· byla reakční směs míchána hodinu při teplotě 0 °C a poté přes noc při laboratorní teplotě. Směs byla odpařena do sucha a zbytek byl rozpuštěn ve 300 ml ethylacetátu. Vyloučení sraženina byla odfiltrována a filtrát byl promyt se 100 ml 5% vodného roztoku sody. Organická fáze byla vysušena nad síranem hořečnatým a byla odpařena do sucha za sníženého tlaku. Zbytek byl chromatografován na silikagelu (Mobilní fáze: n-hexan/isopropanol 25:1). Bylo získáno 10,05 g (82,3 % teoretického množství) titulní sloučeniny ve formě bezbarvého olej e.

Elementární analýza:

Spočteno: C 71,94 H 6,79 N 2,10

Nalezeno: C 71,90 H 6,79 N 2,09

b) 2-Na-6-Ns-Bis-[1-0-a-D -karbonylmethyl-2,3,4,6-tetra - O benzyl-mannopyranosa]-L-lysin

Analogickým způsobem jako bylo popsáno v Příkladu 37e) pro syntézu odpovídající titulní sloučeniny, vedlo zmýdelnění 15 g (11,23 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 38a) ke vzniku 13,69 g (93,6 % teoretického množství) titulní sloučeniny ve formě bezbarvého a viskózního oleje.

Elementární analýza:

Spočteno: C 71,80 H 6,71 N 2,12

Nalezeno: C 71,84 H 6,69 N 2,15

c) 2-Να-β-Νε-Bis-[1-0-a-D - karbonylmethyl- 2,3,4,6-tetra - 0 - benzyl-mannopyranosa]-L-lysin-N-hydroxysukcinimidester

12,09 g (9,15 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 38b) bylo rozpuštěno ve 100 ml dimethylformamidu a bylo přidáno celkem 1,04 g (9,15 mmol) N-hydroxysukcinimidu. Směs byla ochlazena na teplotu 0 °C a bylo přidáno 1,89 g (9,15 mmol) dicyklohexylkarbodiimidu. Směs byla míchána hodinu při

163 • ··

4 4

44 teplotě 0 °C a poté 4 hodiny při laboratorní teplotě. Rozpouštědlo bylo odstraněno za sníženého tlaku a zbytek byl rozpuštěn ve 100 ml ethylacetátu a směs byla ochlazena na 0 °C. Vyloučená sraženina močoviny byla odfiltrována a filtrát byl odpařen do sucha za sníženého tlaku. Takto získaný olejovitý zbytek byl čištěn chromatografií na sloupci silikagelu s využitím směsi ethylacetát/n-hexan (1:20) jako eluentu. Výtěžek: 12,24 g (94,4 % teoretického množství) der výše uvedené titulní sloučeniny ve formě viskozního oleje. Elementární analýza:

Spočteno: C 70,27 H 6,47 N 2,96

Nalezeno: C 70,31 H 6,44 N 3,01

d) 6-N-Benzyloxykarbonyl-2-N-{[2,6-N,N'-bis(l-O-a-Dkarbonylmethyl-2 ,3,4,6-tetra-0-benzyl-mannopyranosa))-Llysyl-}-L-lysin-[1-(4-perfluoroktylsulfonyl)-piperazin]-amid 19,0 g (13,4 mmol) N-Hydroxysukcinimidesteru karboxylové kyseliny připravené v Příkladu 38c) bylo rozpuštěno v 75 ml dimethylformamidu a při teplotě 0°C byl přikapán roztok (ochlazený na teplotu 0°C) 11,13 g (13,4 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 21 c) rozpuštěné v 50,0 ml dimethylformamidu. Směs byla míchána další 2 hodiny při teplotě 0°C a poté zpracování byla dicyklohexylmočoviny h při laboratorní teplotě. Při odfiltrována vyloučená sraženina a rzpouštědlo bylo odstraněno za sníženého tlaku. Vzniklý zbytek byl čištěn chromatografií na silikagelu [Mobilní fáze: dichlormethan /ethanol 28:1 ;

přičemž chromatografie byla prováděna tak, že během chromatografie byla přidávána polárnější složka (zde ethanol).

Výtěžek: 25,28 g (88,4 % teoretické hodnoty) titulní sloučeniny ve formě bezbarvého a silně viskozního oleje.

• · · · • 9 ·· *

164

Elementární analýza:

Spočteno: C 59,10 H 5,34 N 3.94 F 15,13 S 1,50

Nalezeno: C 59,18 H 5.35 N 4.02 F 15.15 S 1.56

e) 2-N-{[2,6-N,Ν'-bis(l-O-a-D-karbonylmethylmannopyranosa)]-L-lysyl-L-lysin-[1-(4-perfluoroktylsulfonyl)piperazin]-amid

Ve 200 ml ethanolu bylo rozpuštěno 20,0 g (9,37 mmol) sloučeniny připravené v Příkladu 38d), bylo přidáno 1,5 g Pearlman katalyzátoru (Pd 20%, C) a reakční směs byla hydrogenována při laboratorní teplotě pod atmosférou vodíku (1 atm), až do doby, kdy již nebyla pozorována spotřeba vodíku. Katalyzátor byl odfiltrován, promyt dobře s ethanolem (dvakrát s cca 100 ml) a směs byla odpařena do sucha za sníženého tlaku. Titulní sloučenina byla získána ve formě silně viskózního a bezbarvého oleje.

Výtěžek: 11,62 g (97,0 % teoretického množství).

Elementární analýza:

Spočteno: C 38,50 H 4.65 N 6,57 F 25,25 S 2,51

Nalezeno: C 38.46 H 4.65 N 6.51 F 25.23 S 2,52

f) 6-N-[1,4,7-tris(karboxylatomethyl)-10-(3-aza-4-oxo-5methyl-5-yl-pentanoyl)-1,4,7,10-tetraazacyklododekan)-2-N{ [2, 6-N,Ν' -bis (1-O-cc-D-karbonylmethyl-mannopyranosa) ] -Llysyl}-L-lysin-[1-(4-perfluoroktylsulfonyl)-piperazin]-amid, Gd-komplex

9,98 g (15,84 mmol; 2,2 molárního ekvivalentu, spočteno na použitou aminovou složku z Příkladu 38e) Gd-komplexu 10-(4karboxy-l-methyl-2-oxo-3-azabutyl)-1,4,7,10-tetraazacyklododekan-1,4,7-trioctové kyseliny popsané v patentové přihlášce DE 197 28 954 Cl pod Příkladem 31 h) a 0,67 g bezvodého chloridu lithného (15,84 mmol) bylo rozpuštěno při

AAAA

AAA

•A AAAA

165

C° ve 100 ml absolutního dimethylsulfoxidu za míchání a při této teplotě bylo přidáno celkem 1,82 g (15,84 mmol) Nhydroxysukcinimidu a 9,19 g (7,19 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 38e), rozpuštěné v 50 ml absolutního dimethylsulfoxidu. Po ochlazení na laboratorní teplotu byla reakční směs nechána reagovat s 3,27 g (15,84 mmol) N, Ν'dicyklohexylkarbodiimidu a reakční směs byla míchána 12 hodin při laboratorní teplotě. Získaná suspenze byla smíchána s přebytkem acetonu až do úplného vysrážení titulní sloučeniny, sraženina byla zfiltrována, vysušena, rozpuštěna ve vodě, nerozpuštěná dicyklohexylmočovina byla odfiltrována a filtrát byl ultrafiltrován na ultrafiltrační membráně AMICON® YM-3 (mezní limit :3000 Da) kvůli odstranění případně přítomných nízkomolekulárních podílů. Zbytek byl lyofilizován.

Výtěžek: 11,85 g (87,2 % teoretického množství) jako bezbarvého lyofilizátu. Obsah vody (Karl-Fischer): 5,54 % Elementární analýza (spočteno na bezvodou látku):

Spočteno: C 38,12 H 4,64 N 8,15 F 20.38 S 1,70 Gd 8,32 Nalezeno: C 38,16 H 4.59 N 8,18 F 20,37 S 1.68 Gd 8,28

Příklad 39

a) 1,7-Bis(benzyloxykarbonyl)-4-(3-Oxa-2H, 2H,4H,4H,5H,5Hperfluortridekanoyl)-1,4,7,10-tetraazacyklododekan K roztoku 10,75 g (24,4 mmol) 1,7-bis-[benzyloxykarbonyl]1,4,7,10-tetraazacyklododekanu, rozpuštěného ve směsi 150 ml tetrahydrofuranu a 15 ml chloroformu, bylo při teplotě 0 °C a pod dusíkovou atmosférou přikapáno 12,74 g (24,4 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 39g), rozpuštěné ve 150 ml tetrahydrofuranu. Pak bylo při teplotě 0 °C přidáno po částech celkem 18,0 g (36,6 mmol) EEDQ [2-ethoxy-lethoxykarbonyl-l , 2-dihydrochinolin] a směs byla míchána pře ti ti ·· • ·· /ζ/ζ Z * · · · · · · · · « i OO · · · · · · tititi ·· · titi titititi ti« titi noc při laboratorní teplotě a poté odpařena do sucha za sníženého tlaku. Zbylý olej byl chromatografován na silikagelu (Mobilní fáze: n-hexan/isopropanol 16:1). Bylo získáno 15,89 g (69,0 % teoretického množství, spočteno na použitý sekundární amin) monoamidu společně s 3,8 g (8,8% teoretického množství) diamidu jako vedlejšího produktu. Titulní sloučenina byla izolována jako bezbarvý olej. Elementární analýza:

Spočteno: C 45,77 H 3,95 F 34,19 N 5,93

Nalezeno: C 45,72 H 4,01 F 34,22 N 5,88

b) 1,7-Bis(benzyloxykarbonyl)-4-(3-Oxa-2H,2H,4H,4H,5H,5Hperfluortridekanoyl)-10-[1-S-a-D-(2-karbonyl)-ethyl-2,3,4,6tetra-O-acetyl-mannopyranosa]-1,4,7,10-tetraazacyklododekan

7,09 g (13,4 mmol) N-hydroxysukcinimidesteru 3-(2,3,4,6tetra-O-acetyl-l-thio-a-D-mannopyranosyl)propionové kyseliny (příprava podle: J. Haensler et al., Bioconjugate Chem. 4, 85, (1993); Chipowsky, S., and Lee,Y.C (1973) , Synthesis of

1-thio-aldosides; Carbohydrate Research 31, 339-346) bylo rozpuštěno ve 100 ml dimethylformamidu a při teplotě 0 °C byl přikapán ochlazený roztok (0 °C) 12,65 g (13,4 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 39a), rozpuštěné ve 100 ml dimethylformamidu. Směs byla míchána 2 hodiny při teplotě 0°C a poté 12 h při laboratorní teplotě. Při zpracování bylo rozpouštědlo odstraněno za sníženého tlaku a zbytek byl chromatografovánden na sloupci silikagelu (Mobilní fáze: dichlormethan/ethylacetát 20:1; přičemž chromatografie byla prováděna s gradientem rozpouštědla se zvyšujícím se podílem ethylacetátu).

Výtěžek: 16,23 g (88,9 % teoretického množství) titulní sloučeniny ve formě bezbarvého a silně viskózního oleje. Elementární analýza:

« · • ·

167

Spočteno: C 46.70 H 4.36 N 4,11 F 23,69 S 2,35

Nalezeno: C 46,66 H 4.35 N 4.12 F 23,65 S 2,30

c) 1-(3-Oxa-2H,2H,4H,4H,5H,5H-perfluortridekanoyl)-7-[1-S-aD-(2-karbonyl)-ethyl-2,3,4,6-tetra-O-acetyl-mannopyranosa]1,4,7,10-tetraazacyklododekan

Ve 150 ml ethanolu bylo rozpuštěno 15,0 g (11,0 mmol) sloučeniny připravené v Příkladu 39b), bylo přidáno 1,0 g Pearlman katalyzátoru (Pd 20%, C) a reakční směs byla hydrogenována při laboratorní teplotě pod atmosférou vodíku (1 atm), až do doby, kdy již nebyla pozorována spotřeba vodíku. Katalyzátor byl odfiltrován, promyt dobře s ethanolem (dvakrát s cca 75 ml) a směs byla odpařena do sucha za sníženého tlaku. Titulní sloučenina byla získána ve formě silně viskózního a bezbarvého oleje.

Výtěžek: 11,56 g (96,0 % teoretického množství).

Elementární analýza:

Spočteno: C 40,59 H 4,33 N 5,12 F 29,50 S 2,93

Nalezeno: C 40,63 H 4.35 N 5,11 F 29;52 S 2,92

d) 1-(3-Oxa-2H,2H,4H,4H,5H,5H-perfluortridekanoyl)-7-[1-S-aD-(2-karbonyl)-ethyl-mannopyranosa]-1,4,7,10-tetraazacyklododekan

10,0 g (9,13 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 39c) bylo suspendováno ve 100 ml absolutního methanolu a při teplotě 5 °C bylo přidáno katalytické množství methanolátu sodného. Směs byla míchána 3h při laboratorní teplotě a kontrola pomocí tenkovrstvé chromatografie ukázala (Eluent: chloroform/methanol 4:1) kvantitativní průběh reakce. Čirý reakční roztok byl neutralizován s Amberlitem IR 120 (H+Forma) kationickým iontoměničem, byl odfiltrován od iontoměniče, promyt s methanolem a takto získaný methanolický • · « • · · · · ·

168 filtrát byl odpařen do sucha za sníženého tlaku. Získaný zbytek byl čištěn pomocí sloupcové chromatografie na silikagelu (mobilní fáze: dichlormethan/n-hexan/ethylacetát 15:20:1 ; chromatografie byla prováděna s gradientem rozpouštědla s kontinuálním přídavkem ethylacetátu). Po prozkoumání titulní látky pomocí IH NMR spektroskopie, bylo možné říci na základě velikosti interakční konstanty J_x,₂ = 0,9 Hz, že anomerní centrum D-mannopyranosy má akonfiguraci. Zmíněná α-konfigurace na anomerním centru je výlučnou konfigurací, to znamená, že množství případně vzniklého β-anomeru titulní sloučeniny leží pod rozpoznávací hranicí IH NMR spektroskopie. Výše zmíněná titulní sloučenina byla tedy připravena ve formě čistého a-anomeru.

Výtěžek: 8,28 g (98,0 % teoretického množství) titulní sloučeniny v formě bezbarvého a silně viskózního oleje. Elementární analýza :

Spočteno: C 37,59 H 4,24 N 6,05 F 34,85 S 3,46

Nalezeno: C 37,57 H 4,28 N 6,02 F 34,85 S 3,44

e) 1-(3-Oxa-2H,2H,4H,4H,5H,5H-perfluortridekanoyl)-7-[1-S-aD-(2-karbonyl)-ethyl-mannopyranosa]-4,10-bis[1,4,7-tris(karboxylatomethyl)-10-(3-aza-4-oxo-5-methyl-5-ylpentanoyl)]-1,4,7,10-tetraazacyklododekan, digadolinitýKomplex

Amid-konjugát 1,4,7,10-tetraazacyklododekanu s [1,7 — Bis[gadoliniumkomplexem 10-(4-karboxy-l-methyl-2-oxo-3azabutyl)-1,4,7,10-tetraazacyklododekan-l,4,7-trioctové kyseliny]; 3-(2,3,4,6-tetra-O-acetyl-l-thio-a-D-mannopyranosyl)-propionové kyseliny

2,48 g [(3,94 mmol); 4,4 molární ekvivalenty, spočteno na použitou diaminovou komponentu z Příkladu 39d)] Gd-komplexu ·· · ··

169

• φ ·

10-(4-karboxy-l-methyl-2-oxo-3-azabutyl)-1,4,7,10tetraazacyklododekan-1,4,7-trioctové kyseliny popsané v patentové přihlášce DE 197 28 954 Cl pod Příkladem 31 h) a 167 mg bezvodého chloridu lithného (3,94 mmol) bylo při teplotě 40 C° rozpuštěno za míchání ve 40 ml absolutního dimethylsulfoxidu a při této teplotě bylo přidáno celkem 453 mg (3,94 mmol) N-hydroxysukcinimidu a 980 mg (0,895 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 19Ad), rozpuštěné v 10 ml absolutního dimethylsulfoxidu. Po ochlazení na laboratorní teplotu byla reakční směs nechána reagovat s 814 mg (3,946 mmol) N,N'-dicyklohexylkarbodiimidu a směs byla míchána 12 hodin při laboratorní teplotě. Získaná suspenze byla smíchána s přebytkem acetonu až do úplného vysrážení titulní sloučeniny, sraženina byla zfiltrována, vysušena, rozpuštěna ve vodě, nerozpuštěná dicyklohexylmočovina byla odfiltrována a filtrát byl ultrafiltrován na ultrafiltrační membráně AMICON® YM-3 (mezní limit :3000 Da) kvůli odsolení a odstranění případně přítomných nízkomolekulárních podílů. Zbytek byl lyofilizován.

Výtěžek: 1,32 g (69,1 % teoretického množství) ve formě bezbarvého lyofilizátu. Obsah vody (Karl-Fischer): 7,65 % Elementární analýza (spočteno na bezvodou látku):

Spočteno: C 37,43 H 4,45 N 9,12 F 15,02 S 1,49 Gd 14,63 Nalezeno: C 37,42 H 4,50 N 9,18 F 15,07 S 1,51 Gd 14,58 20

f) terč.butylester 3-Oxa-2H,2H,4H,4H,5H,5H-perfluortridekanové kyseliny

25,0 g (53,8 mmol) 1H,1H,2H,2H-perfluoro-l-dekanol [komerčně dostupný od firmy Lancaster] byl rozpuštěn ve 250 ml absolutního toluenu a při laboratorní teplotě bylo přidáno katalytické množství (asi 0,75 g) tetra-n-butyl ammoniumhydrogensulfátu. Poté bylo při teplotě 0 °C celkem

170

přidáno 7,55 g (134,6 mmol; 2,5 ekv. spočteno na použitou alkoholickou složku) jemně práškovaný hydroxid draselný, následovaný 15,73 g (80,7 mmol; 1,5 ekv. spočteno na použitou alkoholickou složku) terc-butylesteru bromoctové kyseliny a směs byla míchána 2 hodiny při teplotě 0 °C. Takto získaná reakční směs byla míchána 12 h při laboratorní teplotě a poté bylo přidáno 500 ml ethylacetátu a 250 ml vody. Organická fáze byla oddělena a byla promyta dvakrát s vodou. Po vysušení organické fáze se síranem sodným byla anorganika odfiltrována a rozpouštědlo bylo odpařeno za sníženého tlaku. Získaný zbytek byl čištěn chromatografií na silikagelu s využitím směsi ethylacetát/hexan (1:10) jako eluentu. Výtěžek: 26,3 g (84,6% teoretického množství) výše uvedené titulní sloučeniny ve formě bezbarvého a silně viskózního olej e.

Elementární analýza:

Spočteno: C 33,23 H 2,61 F 55,85

Nalezeno: C 33,29 H 2,61 F 55,90

g) 3-Oxa-2H,2H,4H,4H,5H,5H-perfluortridekankarboxylová kyselina

20,0 g (34,58 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 39f) bylo suspendováno ve 200 ml směsi, skládající se z methanolu a 0,5 molárního vodného roztoku hydroxidu sodného v poměru 2:1 za míchání při laboratorní teplotě a poté bylo zahřáto na teplotu 60 °C. Reakční směs byla míchána 12 h při teplotě 60 °C a čirá reakční směs byla zpracována neutralizací pomocí přidání Amberlitu IR 120 (H⁺-forma)-kationického iontoměniče, odfiltrováním iontoměniče a odpařením methanolického filtrátu do sucha za sníženého tlaku. Získaný zbytek byl čištěn pomocí chromatografie na silikagelu s využitím směsi ethylacetáthexan (1:3) jako eluentu.

• · • fc fc

171 • fc • · • · · • fc fcfcfcfc

Výtěžek: 16,0 g (88,6% teoretického množství) výše uvedené titulní sloučeniny ve formě bezbarvého a silně viskózního olej e.

Elementární analýza:

Spočteno: C 27,60 H 1,35 F 61,85

Nalezeno: C 27,58 H 1,36 F 61,90

Příklad 40

a) 6-Benzyloxykarbonyl-2-[2-(N-ethyl-N-perfluoroktylsul-fonyl) -amino] -acetyl-L-lysin-methylester

K 8,0 g (24,4 mmol) ε-karbonyloxybenzyl-L-lysinmethylester hydrochloridu (komerčně dostupný od Firmy Bachem), rozpuštěný ve směsi 150 ml tetrahydrofuranu, 15 ml chloroformu a 2,62 g (26,0 mmol) triehylaminu, bylo při teplotě 0 °C a pod atmosférou dusíku přikapáno 16,18 g (27,0 mmol) kyseliny 2-[N-ethyl-N-perfluoroktytsulfonyl)aminooctové (připravené podle: DE 196 03 033), rozpuštěné v 50 ml tetrahydrofuranu. Poté bylo při teplotě 0 °C přidáno po částech celkem 18,0 g (36,6 mmol) EEDQ [2-ethoxy-lethoxykarbonyl-1,2-dihydrochinolin] a směs byla míchána přes noc při laboratorní teplotě. Směs byla odpařena do sucha za sníženého tlaku a zbytek byl chromatografován na silikagelu (mobilní fáze: n-hexan/isopropanol 15:1). Bylo získáno 17,0 g (79,6 % teoretického množství, spočteno na použitý primární amin) titulní sloučeniny ve formě bezbarvého oleje.

Elementární analýza:

Spočteno: C 38,41 H 3,45 F 36,89 N 4,80 S 3,66

Nalezeno: C 38,42 H 3,47 F 36,92 N 4,87 S 3,64

b) 2-[2-(N-ethyl-N-perfluoroktylsutfonyl)-amino]-acetyl-Llysin-methylester ♦

• · fcfc fcfcfc·

172

• fc • fc fc • fc fc fcfc

• · • fc fcfc

Ve 200 ml ethanolu bylo rozpuštěno 15,0 g (20,23 mmol) sloučeniny připravené v Příkladu 40a), bylo přidáno 800 mg Pearlman katalyzátoru (Pd 20%, C) a reakční směs byla hydrogenována při laboratorní teplotě pod atmosférou vodíku (1 atm), až do doby, kdy bylo spotřebováno vypočítané množství vodíku. Katalyzátor byl odfiltrován, promyt dobře s ethanolem a směs byla odpařena do sucha za sníženého tlaku. Titulní sloučenina byla získána ve formě bezbarvého oleje. Výtěžek:14,68 g (97,9 % teoretického množství)

Elementární analýza:

Spočteno: C 32,40 H 3,26 F 43,56 N 5,67 S 4,32

Nalezeno: C 32,42 H 3,27 F 43,60 N 5,67 S 4,34 30

c) 6-(l-O-a-D-karbonylmethyl-2,3,4,6-tetra-O-benzylmannopyranosa)-2-[2(N-ethyl-N-perfluoroktylsulfonyl)-amino]acetyl-L-lysin-methylester

V 500 ml suchého tetrahydrofuranu bylo rozpuštěno 21,31 g (35,6 mmol) l-karboxymethyloxy-2,3,4,-tetra-O-benzyl-a-Dmannopyranosidu [příprava podle patentové přihlášky DE 197 28 954 Cl] společně s 3,60 g (35,6 mmol) triethylaminu. Po ochlazení reakční směsi na teplotu -15°C až -20°C byl při této teplotě pomalu přikapán roztok 4,92 g (35,6 mmol) isobutylesteru chlormravenčí kyseliny v 75 ml suchého tetrahydrofuranu, přičemž rychlost přidávání byla taková, aby teplota reakční směsi nepřestoupila hodnotu -10 °C. Směs byla míchána 15 minut při teplotě -15 °C a poté byl pomalu přikapán roztok 26,39 g (35,6 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 40b) a 3,60g (35,6 mmol) triehylaminu, ve 100 ml suchého tetrahydrofuranu při teplotě -20 °C. Reakční směs byla míchána hodinu při teplotě -15 °C a poté dvě hodiny při laboratorní teplotě. Poté byla reakční směs odpařena do sucha za sníženého tlaku. Získaný zbytek byl rozpuštěn ve 250 ml • φ • » ·· φφφ φφφ φφφ

ΦΦΦΦ

173

ΦΦ ethylacetátu a byl promyt dvakrát se 100 ml nasyceného vodného roztoku hydrogenuhliěitanu sodného a poté s 200 ml vody. Po vysušení organické fáze pomocí síranu sodného byla anorganika odfiltrována a ethylacetát byl odstraněn za sníženého tlaku. Získaný zbytek byl čištěn pomocí chromatografie na silikagelu s využitím směsi ethylacetát/nhexan (1:10) jako eluentu.

Výtěžek: 38,12 g (81,0 % teoretického množství) výše uvedené

titulní sloučeniny	ve	! formě	bezbarvého	a silně viskózního
olej e.
Elementární analýza:
Spočteno: C 49,92 H	3,	92 N 2,	53 F 29,18 S	2,90
Nalezeno: C 49,99 H	4,	11 N 2,	69 F 29,22 S	3,01

d) 6-(l-O-a-D-karbonylmethyl-2,3,4,6-tetra-O-benzyl-mannopyranosa) 2-[2-(N-ethyl-N-perfluoroktylsulfonyl)-amino]-acetylL-lysin

Ve 250 ml methanolu bylo rozpuštěno 27,65 g (20,92 mmol) sloučeniny připravené v Příkladu 40c). Roztok byl poté přidán k roztoku 4,0 g (100,0 mmol) hydroxidu sodného v 10 ml destilované vody a směs byla míchána 3 hodiny při teplotě 50°C. Podle tenkovrstvé chromatografie je zmýdelnění methylesteru úplné. Reakční směs byla odpařena ve vakuu a zbytek byl rozpuštěn v 300 ml ethylacetátu a organická fáze byla extrahována dvakrát se 100 ml ředěného roztoku kyseliny citrónové. Po sušení nad síranem sodným byla anorganika zfiltrována a směs byla odpařena za sníženého tlaku do sucha. Zbytek byl chromatografován na silikagelu (Mobilní fáze: nhexan/chlorofom/isopropanol 15:10:1). bylo získáno 24,31 g (88,9 % teoretického množství,) titulní sloučeniny ve formě bezbarvého a viskózního oleje.

Elementární analýza:

9

9 99

174

♦ ♦ ·♦ • 9 9 9

9 9

9 9 ·· ····

Spočteno: C 51,46 H 4,70 N 3,21 F 24,71 S 2,45 Nalezeno: C 51,49 H 4,71 N 3,19 F 24,72 S 2,41

e) 6-(1-O-a-D-karbonylmethyl-mannopyranosa) 2-[2-(N-ethyl-Nperfluoroktylsulfonyl)-amino]-acetyl-L-lysin

20,0 g (15,30 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 40d) bylo rozpuštěno ve směsi složené z 250 ml 2-propanolu a 25 ml vody, a bylo přidáno 1,0 g paladiového katalyzátoru (10% Pd na aktivním uhlí) . Směs byla hydrogenována 12 hodin při laboratorní teplotě pod atmosférou vodíku. Katalyzátor byl odfiltrován a filtrát byl odpařen do sucha za sníženého tlaku. Zbytek byl rozpuštěn ve 200 ml methanolu a reakční produkt byl vysrážen přídavkem 800 ml diethyletheru. Po odfiltrování takto získané sraženiny byla tuhá látka sušena ve vakuu při 50 °C. Výtěžek: 14,32 g (99,0 % teoretického množství) amorfní tuhé látky.

Elementární analýza:

Spočteno: C 35,56 H 3,84 N 4,44 S 3,39 F 34,15

Nalezeno: C 35,58 H 3,81 N 4,45 S 3,40 F 34,17

f) 6- (1-O-oc-D-karbonylmethyl-mannopyranosa) -2- [2- (N-ethyl-Nperfluoroktylsulfonyl)-amino]-acetyl-L-lysin-N-{2-hydroxyprop-3-yl-[1,4,7-tris(karboxylatomethyl)-1,4,7,10tetraazacyklododekan-10-yl]}-amid, Gd komplex

7,48 g (7,91 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 40e) bylo při teplotě 40 °C rozpuštěno v 50 ml dimethylsulfoxidu a bylo přidáno 1,00 g (8,70 mol) N-hydroxysukcinimidu. Směs byla ochlazena na teplotu 20°C a poté bylo přidáno 1,795 g (8,7 mmol) dicyklohexylkarbodiimidu. Směs byla míchána hodinu při teplotě 20°C a poté 4 hodiny při teplotě 40 °C. Pak byl do reakce během 10 minut přikapán roztok 4,53 g (7,91 mmol) komplexu gadolinia s 10-(2-hydroxy-3-aminopropyl)-4,7,100 0 0 0

0 00

175 • 0

0 0

0 0 Φ 0 0 0000 tris(karboxymethyl)-1,4,7,10-tetraazacyklododekanin [příprava podle: WO 97/02051] ve 20 ml dimethylsulfoxidu. Směs byla míchána jednu hodinu při 40 °C, a poté přes noc při laboratorní teplotě. Získaná suspenze byla smíchána s přebytkem acetonu až do úplného vysrážení titulní sloučeniny, sraženina byla zfiltrována, vysušena, rozpuštěna ve vodě, nerozpuštěná dicyklohexylmočovina byla odfiltrována a filtrát byl ultrafiltrován na ultrafiltrační membráně AMICON® YM-3 (mezní limit :3000 Da) kvůli odsolení a odstranění případně přítomných nízkomolekulárních podílů. Zbytek byl lyofilizován.

Výtěžek: 9,71 g (81,7 % teoretického množství) ve formě bezbarvého lyofilizátu. Obsah vody (Karl-Fischer): 3,97 % Elementární analýza: (spočteno na bezvodou látku):

Spočteno: C 35,16 H 4,16 N 7,45 F 21,48 Gd 10,46 S 2,13 Nalezeno: C 35,17 H 4,20 N7,42 F 21,49 Gd 10.48 S 2,09

Příklad 41

a) 6-N-[1-0-a-D-(5-karbonyl)-pentyl-2,3,4, 6-tetra-O-benzylmannopyranosa]-2N-[2-(N-ethyl-N-pertluoroktyfsulfonyl)amino]-acetyl-L-lysin-methylester

5,23 g (8,0 mmol) 5-(karboxy)pentyl-2,3, 4,6-tetra-O-benzylα-D-mannopyranosidu popsaném v Příkladu 30c), 1,3 g (8,0 mmol) 1-hydroxybenzotriazolu a 2,6 g (8,0 mmol) 2-(lHBenzotriazol-l-yl)-1,1,3,3-tetramethyluronium-tetrafluorborátu (TBTU; Peboc Limited, UK) bylo rozpuštěno v 75 ml DMF a směs byla míchána 15 minut. Tento roztok byl nechán reagivat s 5,16 ml (30 mmol) N-ethyldiisopropylaminu a s 5,93 g (8,0 mmol) aminu popsaného v Příkladu 40b) a směs byla míchána 1,5 dne při laboratorní teplotě. Při zpracování bylo rozpouštědlo odpařeno do sucha a zbytek byl chromatografován na silikagelu (Mobilní fáze: dichlormethan/ethylacetát 30:1 ;

«« ·♦ • · 9

9

176

9 · ··

přičemž chromatografie byla prováděna za podmínek gradientově eluce s kontinuálním přídavkem ethylacetátu).

Výtěžek: 9,70 g (88,0 % d.Th.) titulní sloučenina byla získána ve formě bezbarvého a silně viskózního oleje. Elementární analýza:

Spočteno: C 52,29 H 4,97 N 3,05 F 23,43 S 2,33

Nalezeno: C 52,33 H 4.95 N 3,12 F 23,50 S 2,30

b) 6-N-[1-0-a-D-(5-karbonyl)-pentyl-2,3,4,6-tetra-O-benzyl manhopyranosa]-2N-[2-(N-ethyl-N-perfluoroktylsulfonyl)amino]-acetyl-L-lysin

Ve 150 ml methanolu bylo rozpuštěno 9,0 g (12,40 mmol) sloučeniny připravené v Příkladu 41a) . Pak byl přidán roztok 2,48 g (62,0 mmol) hydroxidu sodného v 15 ml destilované vody a směs byla 3 hodiny míchána při teplotě 50°C. Podle tenkovrstvé chromatografie je zmýdelnění methylesteru po uvedeném reakční době úplné. Reakční směs byla odpařena ve vakuu a zbytek byl rozpuštěn v 300 ml ethylacetátu a organická fáze byla extrahována dvakrát se 100 ml ředěného roztoku kyseliny citrónové. Po sušení nad síranem sodným byla anorganika zfiltrována a směs byla odpařena za sníženého tlaku do sucha. Zbytek byl chromatografován na silikagelu (Mobilní fáze: n-hexan/chloroform/isopropanol 25:10:1). Bylo získáno 15,88 g (93,9 % teoretického množství) titulní sloučeniny ve formě bezbarvého a silně viskózního oleje. Elementární analýza:

Spočteno: C 51,95 H 4,88 N 3,08 F 23,67 S 2,35

Nalezeno: C 51,99 H 4,91 N 3,09 F 23,70 S 2,33

c) 6-N-[1-0-a-D-(5-karbonyl)-pentyl-mannopyranosa]-2N-[2-(Nethyl-N-perfluoroktylsulfonyl)-amino]-acetyl-L-lysin • ·

177

13,0 g (9,52 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 41 b) bylo rozpuštěno ve směsi sestávající ze 150 ml 2-propanolu a 25 ml vody a bylo přidáno 1,0 g paladiového katalyzátoru (10% Pd na aktivním uhlí. Směs pak byla hydrogenována 12 hodin při atmosféře vodíku 1 atm a laboratorní teplotě. Katalyzátor byl odfiltrován a filtrát byl odpařen do sucha za sníženého tlaku. Získaný zbytek byl chromatografován na silikagelu (Mobilní fáze: n-hexan / chloroform / isopropanol 15:10:1). Bylo získáno 9,09 g (95,1 % teoretického množství,) titulní sloučeniny ve formě bezbarvého a silně viskózního oleje. Elementární analýza:

Spočteno: G 37,10 H 4,22 N 4,19 F 32,18 S 3,10

Nalezeno: C 37,09 H 4,21 N 4,19 F 32,20 S 3,13

d) 6-N-[1-0-a-D-(5-karbonyl)-pentyl-mannopyranosa]-2N-[2-(Nethyf-N-perfluoroktylsulfonyl)-amino]-acetyl-L-lysin-N-{2hydroxy-prop-3-yl-[1,4,7-tris(karboxylatomethyl)-1,4,7,10tetraazacyklododekan-10-yl]}-amid, Gd komplex

7,93 g (7,91 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 41 c) bylo při teplotě 40 °C rozpuštěno v 75 ml dimethylsulfoxidu a bylo přidáno 1,00 g (8,70 mof) N-hydroxysukcinimidu. Směs byla ochlazena na laboratorní teplotu a bylo přidáno celkem 1,795 g (8,7 mmol) dicyklohexylkarbodiimidu. Směs byla míchána hodinu při treplotě 20°C a poté 4 hodiny při teplotě 40°C. K takto získanému roztoku aktivního esteru titulní sloučeniny z Příkladu 41 c) byl poté přikapán při teplotě 40°C během 10 minut roztok, složený z 4,53 g (7,91 mmol) komplexu gadolinia s 10-(2-hydroxy-3-aminopropyl)-4,7,10 tris(karboxymethyl)-1,4,7,10-tetraazacyklododekaninu [přípravu viz: WO 97/02051], rozpuštěného ve 20 ml dimethylsulfoxidu. Směs byla míchána hodinu při teplotě 40°C, a poté přes noc při laboratorní teplotě. Takto získaná ·· ·«»·

·· ·· · ·<

178 • « · * · · ·· · suspenze byla zpracována s přebytkem směsi aceton/2-propanol (2:1) až do úplného sloučeniny, sraženina vysrážení výše uvedené titulní byla zfiltrována, promytas s ethylacetátem, vysušena, rozpuštěna ve vodě, nerozpuštěná dicyklohexylmočovina byla odfiltrována a filtrát byl ultrafiltrován na ultrafiltrační membráně AMICON® YM-3 (mezní limit: 3000 Da) kvůli odsolení a odstranění případně přítomných nízkomolekulárních podílů. Zbytek byl lyofilizován. Výtěžek: 9,71 g (78,8 % teoretického množství) jako bezbarvý lyofilizát. Obsah vody (Karl-Fischer): 6,65 % Elementární analýza (spočteno na bezvodou látku):

Spočteno: C 36,97 H 4,52 N 7,19 F 20,71 Gd 10,08 S 2,06 Nalezeno: C 37,02 H 4,50 N 7,22 F 20,69 Gd 10.08 S 2,09

Příklad 42

a) 6-N-{4-[2,3-Bis-(N,N-bis(terč.butyloxykarbonylmethy1)amino)-propyl]-fenyl}-3-oxa-propionyl-2-N-(1-a-D-karbonylmethyl-mannopyranosa)-L-lysin-[1-(4-perfluoroktylsulfonyl)piperazin]-amid

5,25 g (7,72 mmol) tetra-terc.butylesteru „Tyr-EDTAkarboxylové kyseliny a 781 mg (7,72 mmol) triehylaminu bylo rozpuštěno v 50 ml methylenchloridu. Při teplotě -15°C byl přikapán roztok 1,16 g (8,5 mmol) isobutylesteru chlormravenčí kyseliny v 10 ml methylchloridu během 5 minut a směs byla míchána dalších 20 minut při teplotě -15 °C. Roztok byl poté ochlazen na -25°C a byl k němu přikapán roztok skládající se z 7,07 g (7,72 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 30e) a 2,12 g (21,0 mmol) triehylaminu v 70 ml tetrahydrofuranu během 30 minut a směs byla poté míchána ještě 30 minut při 5° C a poté přes noc při laboratorní teplotě. Pro zpracování bylo rozpouštědlo odpařeno do sucha a zbytek byl rozpuštěn ve 250 ml chloroformu. Chloroformová ·· 4··4 *· · ·« fáze byla extrahována dvakrát se 100 ml 10% vodného roztoku chloridu amonného, organická fáze byla vysušena nad síranem hořečnatým a byla odpařena do sucha za sníženého tlaku. Zbytek byl chromatografován na silikagelu (Mobilní fáze: methylenchlorid/ethanol= 20:1).

Výtěžek: 9,60 g (79,0 % teoretického množství) bezbarvého a velmi tuhého oleje.

Elementární analýza:

Spočteno: C 46,39 H 5,55 N 5,32 F 20,45 S 2,03

Nal-ezeno: C 46, 42 H 5,51 N 5,29 F 20,49 S 2,09

b) 6-N-{4-[2,3-Bis-(Ν,Ν-bis(kaboxymethyl)-amino)-propyl]phenyl]-3-oxa-propionyl-2-N-(1-a-D-karbonylmethyl-mannopyranosa)-L-lysin-[1-(4-perfluoroktylsulfonyl)-piperazin]-amid

Ve 150 ml methanolu bylo rozpuštěno 9,0 g (5,70 mmol) sloučeniny z Příkladu 42a). Pak byl přidán roztok 4,0 g (100,0 mmol) hydroxidu sodného ve 25 ml destilované vody a směs byla míchána 6 hodin při teplotě 60°C. Kontrola pomocí tenkovrstvé chromatografie prokázala, že bylo kvantitativně dosaženo zmýdelnění tetra-terc.butylesteru po výš uvedené reakční době. Rozpouštědlo bylo odpařeno do sucha a zbytek byl rozpuštěn v 50 ml dimethylsulfoxidu za horka a poté bylo přidáno velké množství směsi aceton/ethylacetát (1:1) až du úplného vysrážení titulní sloučeniny. Takto získaná sraženina byla zfiltrována, promyta s ethylacetátem, vysušena, rozpuštěna ve vodě, pH roztoku bylo nastaveno na hodnotu 3,5 pomocí 1M vodné kyseliny chlorovodíkové, nerozpuštěné podíly byly odfiltrovány a filtrát byl ultrafiltrován na ultrafiltrační membráně AMICON® YM-3 (mezní limit: 3000 Da) kvůli odsolení a odstranění případně přítomných nízkomolekulárních podílů. Zbytek byl lyofilizován. Výtěžek:

·· ···· «*· «·«

180 ·« ·· ·· • · · · · · • · · · · • · · » «· · • · · · · · ·· ···· ·· ··

6,76 g (87,6 % teoretického množství) ve formě bezbarvého lyofilizátu.

Obsah vody (Karl-Fischer): 3,30 % .

Elementární analýza: (spočteno na bezvodou látku):

Spočteno: C 39,89 H 4,09 N 6,20 F 23,84 S 2,37

Nalezeno: C 39,92 H 4,15 N 6,22 F 23,92 S 2,29

c) 6-N-{4-[2,3-Bis-(Ν,Ν-bis(karboxylatomethyl)-amino)propyl]-fenyl}-3-oxapropionyl-2-N-(1-a-D-karbonylmethylmannopyranosa)-L-lysin-[1-(4-perfluoroktylsulfonyl)piperazin]-amid, Μη-komplex, disodná sůl

3,0 g (2,22 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 42b) bylo rozpuštěno ve 150 ml směsi voda/ethanol (3:1) za varu a při teplotě 80°C bylo po částech přidáno 0,25 g (2,22 mmol) uhličitanu manganatého. Takto získaný reakční roztok byl zahříván 5 hodin k refluxu. Po ochlazení na laboratorní teplotu bylo rozpouštědlo odstraněno ve vakuu a získaný zbytek byl rozpuštěn ve 200 ml destilované vody a n-butanolu (1:1). Za intenzivního míchání bylo pH reakční směsi nastaveno na hodnotu 7,2 pomocí IN roztoku hydroxidu sodného. Po úplném odstranění n-butanolu za sníženého tlaku byla vodná fáze ultrafiltrována přes ultrafiltrační membránu AMICON® YM3 (mezní limit: 3000 Da) čímž byl vyčištěn od nízkomolekulárních nečistot. Zbytek byl lyofilizován. Výtěžek: 3,19 g (99,0 % teoretického množství) ve formě bezbarvého lyofilizátu.

Obsah vody (Karl-Fischer): 5,08 % .

Elementární analýza (spočteno na bezvodou látku):

Spočteno: C 37,23 H 3,54 F 22,25 Mn 3,78 N 5,79 Na 3,17 S 2,21

Nalezeno: C 37,30 H 3,49 F 22,29 Mn 3,81 N 5,76 Na 3,19 S 2, 18 • ·

181

Příklad 43

a) [1-(4-Perfluoroktylsulfonyl)-piperazin]monoamid 3benzyloxykarbonylamino-glutarové kyseliny

Intenzivně míchaný roztok 25,0 g (94,96 mmol) 3-N(benzyloxykarbonyl)glutaranhydridu [syntéza podle: Hatanaka, Minoru; Yamamoto, Yu-ichi; Nitta, Hajime; Ishimaru, Toshiyasu; TELEAY; Tetrahedron Lett.; EN; 22; 39; 1981; 38833886;] ve 150 ml absolutního tetrahydrofuranu byl za míchání přikapán do roztoku 53,97 g (95,0 mmol) 1-perfluoroktylsulfonylpiperazínu ve 150 ml tetrahydrofuranu a takto vzniklá reakční směs byla zahřívána 12 h k varu. Po ochlazení na laboratorní teplotu byla směs odpařena do sucha a zbylý olejovitý zbytek byl čištěn chromatografií na silikagelu s využitím směsi dichlormethan/2-propanol (20:1) jako eluentu.

Výtěžek: 75,80 g (96,0% teoretického množství) výše zmíněné titulní sloučeniny ve formě bezbarvého a viskózního oleje. Elementární analýza:

Spočteno: C 36,11 H 2,67 N 5,05 S 3,86 F 38,84

Nalezeno: C 36,12 H 2,61 N 5,08 S 3,88 F 38,82

b) [1-(4-perfluoroktylsulfonyl)-piperazin]-monoamid 3-aminoglutarové kyseliny

Ve 300 ml ethanolu bylo rozpuštěno 31,50 g (37,88 mmol) sloučeniny připravené v Příkladu 43b), bylo přidáno 2,5 g Pearlman katalyzátoru (Pd 20%, C) a směs byla hydrogenována v atmosféře vodíku (1 atm) až do kvantitativní spotřeby vodíku. Katalyzátor byl odfiltrován, promyt s ethanolem a ve vakuu bylo rozpouštědlo odstraněno do sucha. Titulní sloučenina byla získána ve formě bílo-žlutavého, viskózního oleje.

Výtěžek: 25,22 g (95,5 % teoretického množství) ·· 9999

182

Elementární analýza:

Spočteno: C 29,28 H 2,31 N 6,03 S 4,06 F 46,31 Nalezeno: C 29,32 H 2,29 N 6,08 S 4,08 F 46,28

c) [1-(4-perfluoroktylsulfonyl)-piperazin]-monoamid 3-N-(la-D-karbonylmethyl-2,3,4,6-tetra-O-benzyl-mannopyranosa)glutarové kyseliny

21,52 g (18,96 mmol) l-karboxymethyloxy-2,3,4,-tetra-Obenzyl-a-D-mannopyranosidu [připraven podle patentové přihlášky: DE 197 28 954 Cl] byl při laboratorní teplotě rozpuštěn ve 100 ml absolutního dimethylformamidu a při teplotě 0 °C bylo přidáno 2,56 g (22,2 mmol) Nhydroxysukcinimidu, následovaný přídavkem 4,55 g (22,2 mmol) dicyklohexylkarbodimidu. Reakční směs byla míchána 60 minut při teplotě 0 °C a poté 3 hodiny při teplotě 22 °C, nerozpustná dicyklohexylmočovina byla odfiltrována a takto získaný čirý roztok aktivního esteru výše uvedené titulní sloučeniny byl při teplotě 0 °C přikapán k míchanému roztoku 13,22 g (18,96 mmol) sloučeniny z Příkladu 43b), rozpuštěné ve 100 ml dimethylformamidu. Reakční směs byla míchána 12 hodin při laboratorní teplotě a rozpouštědlo bylo odstraněno za sníženého tlaku, zbytek byl rozpuštěn ve 300 ml ethylacetátu, vyloučená sraženina močoviny byla odfitlrována a organický filtrát byl dvakrát promyt se 100 ml nasyceného roztoku hydrogenuhličitanu sodného a poté 100 ml 10% vodného roztoku kyseliny citrónové a poté 200 ml vody. Po vysušení organické fáze nad síranem sodným byl ethylacetát odstraněn za sníženého tlaku. Získaný olejový zbytek byl čištěn chromatogfrafií na silikagelu s využitím směsi ethylacetát/ n-hexan (1:15) jako eluentu.

183

Výtěžek: 2i ,39 g (88,3 % teoretického množství) výše uvedené titulní sloučeniny ve formě bezbarvého a silně viskózního oleje.

Elementární analýza:

Spočteno: C 49,81 H 4,10 N 3,29 F 25,27 S 2,51

Nalezeno: C 49,89 H 4,11 N 3,32 F 25,22 S 2,51

d) [1-(4-perfluoroktylsulfonyl)-piperazin]-monoamid 3-N-(lα-D-karbonylmethyl-mannopyranosa}-glutarové kyseliny

19,55 g (15,30 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 43c) bylo rozpuštěno ve směsi složené z 250 mi 2-propanolu a 25 ml vody, bylo přidáno 1,5 g paladiového katalyzátoru (10 % Pd na aktivním uhlí). Směs byla hydrogenována 12 hodin při laboratorní teplotě a v atmosféře vodíku při tlaku 1 atm. Katalyzátor byl odfiltrován, filtrát byl odpařena do sucha za sníženého tlaku. Zbytek byl rozpuštěn ve 200 ml methanolu a reakční produkt byl vysrážen přídavkem 800 ml diethyletheru. Po odfiltrování vysrážené látky byla takto získaná tuhá látka sušena ve vakuu při teplotě 40 °C.

Výtěžek: 17,49 g (97,5 % teoretického množství) amorfní tuhé látky.

Spočteno: C 32,73 H 3,08 N 4,58 S 3,49 F 35,20

Nalezeno: C 32,68 H 3,15 N 4,55 S 3,50 F 35,17

e) [1-(4-perfluoroktylsulfonyl)-piperazin]-amid-5-N-{2hydroxyprop-3-yl-[1,4,7-tris(karboxylatomethyl)-1,4,7,10tetraazacyklododekan-10-yl] }-amid 3-N-(1-oc-D-karbonylmethylmannopyranosa)-glutarové kyseliny, Gd-komplex

14,43 g (15,84 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 43d) a 0,67 g bezvodého chloridu lithného (15,84 mmol) bylo při teplotě 40 C° rozpuštěno ve 100 ml absolutního dimethylsulfoxidu za míchání a při této teplotě bylo přidáno toto·· toto · · • · ·«·· » ·· ·· ···· to · ·· to··* • *

184 ♦ to celkem 1,82 g (15,84 mmol) N-hydroxysukcinimidu a roztok 9,08 g (15,84 mmol) komplexu gadolinia s 10-(2-hydroxy-3aminopropyl)-4,7,10-tris(karboxymethyl)-1,4,7,10-tetraazacyklododekaninu [syntézu viz: WO 97/02051], v 50 ml dimethytsulfoxidu. Po ochlazení na laboratorní teplotu bylo do reakčního roztoku přidáno 3,27 g (15,84 mmol) N,N'dicyklohexylkarbodiimid a směs byla míchána 12 hodin při laboratorní teplotě. Získaná suspenze byla smíchána s přebytkem acetonu až do úplného vysrážení titulní sloučeniny, sraženina byla zfiltrována, vysušena, rozpuštěna ve vodě, nerozpuštěná dicyklohexylmočovina byla odfiltrována a filtrát byl ultrafiltrován na ultrafiltrační membráně AMICON® YM-3 (mezní limit :3000 Da) kvůli odsolení a odstranění případně přítomných nízkomolekulárních podílů. Zbytek byl lyofilizován.

Výtěžek: 18,71 g (80,2 % teoretického množství) ve formě bezbarvého lyofilizátu.

Obsah vody (Karl-Fischer): 4,87 % .

Elementární analýza: (spočteno na bezvodou látku):

Spočteno: C 34,24 H 3,83 N 7,61 F 21,92 S 2,18 Gd 10,67 Nalezeno: C 34,26 H 3,79 N 7,58 F 21,87 S 2,18 Gd 10,68

Příklad 44

a) 1,7-Bis(benzyloxykarbonyl)-4-{3-oxa-pentan-l,5dikarboxylová kyselina-l-oyl-5-[1-(4-perfluoroktylsulfonyl)piperazin)-amid}-10-[2,6-N,Ν'-bis(1-O-a-D-karbonylmethyl2,3,4,6-tetra-O-benzyl-mannopyranosa)]-L-lysyl-1, 4,7,10tetraazacyklododekan

K roztoku 27,0 g (24,4 mmol) sekundárního aminu připraveného v Příkladu 35a) ve směsi složené ze 150 ml tetrahydrofuranu a 15 ml chloroformu, bylo při teplotě 0°C a pod dusíkovou atmosférou 33,04g přidáno (25,0 mmol) titulní • · · ·

sloučeniny z Příkladu 18c), rozpuštěné ve 250 ml tetrahydrofuranu. Pak bylo při teplotě 0°C po částech přidáno 18,0 g (36,6 mmol) EEDQ [2-ethoxy-l-ethoxykarbonyl-l,2dihydrochinolinu] a směs byla míchána přes noc při laboratorní teplotě. Reakční směs byla odpařena do sucha a zbylý olej byl chromatografován na silikagelu (Mobilní fáze: n-hexan/isopropanoi 25:1). Bylo získáno 45,87 g (78,0% teoretického množství, spočteno na použitý sekundární amin) titulní sloučeniny ve formě bezbarvého oleje.

Elementární analýza:

Spočteno: C 59,30 H 5,39 F 13,40 N 4,65 S 1,33

Nalezeno: C 59,32 H 5,37 F 13,37 N 4,70 S 1,34

b) 1-(3-oxa-pentan-l,5-dikarboxylová kyselina-l-oyl-5-[1-(4perfluoroktylsulfonyl)piperazin]-amid]-7-[2,6-N,Ν'-bis(1-0α-D-karbonylmethyl-mannopyranosa)]-L-lysyl-1,4,7,10tetraazacyklododekan

Ve 250 ml ethanolu bylo rozpuštěno 24,1 g (10,0 mmol) sloučeniny připravené v Příkladu 44a), bylo přidáno 1,4 g Pearlman katalyzátoru (Pd 20%, C) a směs byla hydrogenována v atmosféře vodíku (1 atm) až do kvantitativní spotřeby vodíku. Katalyzátor byl odfiltrován, promyt s ethanolem a ve vakuu bylo rozpouštědlo odstraněno do sucha. Titulní sloučenina byla získána ve formě žlutavého, vysoce viskózního oleje.

Výtěžek:12,80 g (90,1 % teoretického množství).

Elementární analýza:

Spočteno: C 39,72 H 4,89 F 22,73 N 7,88 S 2,26

Nalezeno: C 39,72 H 4,87 F 22,77 N 7,90 S 2,24

c) 1-{3-oxa-pentan-l,5-dikarboxylová kyselina-l-oyl-5-[1-(4perfluoroktylsulfonyl)piperazin]-amid}-7-[2,6-N,Ν'-bis(1-0» · » · · · • fc

186 α-D-karbonylmethyl-mannopyranosa)]-L-lysyl-4,10-bis[1,4,7tris(karboxylatomethyl)-10-(3-aza-4-oxo-5-methyl-5ylpentanoyl)]-1,4,7,10-tetraazacyklododekan, digadolinitý komplex

5,54 g [8,8 mmol; 2,2 molární ekvivalenty, spočteno na použitou aminovou komponentu z Příkladu 44b)] Gd-komplexu 10(4-karboxy-l-methyl-2-oxo-3-azabutyl)-1,4,7,10-tetraazacyklododekan-1,4,7-trioctové kyseliny popsané v patentové přihlášce DE 197 28 954 Cl pod Příkladem 31 h) a bezvodého chloridu lithného (0,37 g , 8,8 mmol) bylo při teplotě 40 C° rozpuštěno v 60 ml absolutního dimethylsulfoxidu a za míchání bylo při této teplotě přidáno 1,01 g (8.8 mmol) Nhydroxysukcinimidu a 5,68 g (4,0 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 44b), rozpuštěné ve 40 ml absolutního dimethylsulfoxidu. Po ochlazení na laboratorní teplotu bylo do reakční směsi přidáno 1,82 g (8,8 mmol) N,Ν'dicyklohexylkarbodiimidu a reakční směs byla míchána 12 hodin při laboratorní teplotě. Získaná suspenze byla smíchána s přebytkem acetonu až do úplného vysrážení titulní sloučeniny, sraženina byla zfiltrována, vysušena, rozpuštěna ve vodě, nerozpuštěná dicyklohexylmočovina byla odfiltrována a filtrát byl ultrafiltrován na ultrafiltrační membráně AMICON® YM-3 (mezní limit :3000 Da) kvůli odsolení a odstranění případně přítomných nízkomolekulárních podílů. Zbytek byl lyofilizován. Výtěžek: 8,52g (80,6 % teoretického množství; spočteno na použitou diaminovou komponentu) jako bezbarvý lyofilizát.

Obsah vody (Karl-Fischer): 6.09 % .

Elementární analýza: (spočteno na bezvodou látku):

Spočteno: C 38,61 H 4,76 N 9,53 F 12,21 Gd 11.89 S 1,12 Nalezeno: C 38,57 H 4,82 N 9,52 F 12,21 Gd 11,93 S 1,15

·· ··« · • 4>

187

Příklad 45

a) 1,7-Bis(benzyloxykarbonyl)-4-{3-oxa-pentan-l, 5dikarboxylová kyselina-l-oyl-5-[1-(4-perfluoroktylsulfonyl)piperazin]-amid )-10-(2,6-N,Ν'-bis(1-0-a-D-(5karbonyl)pentyl-2,3,4,6-tetra-O-benzyl-mannopyranosa)}-Llysyl-1,4,7,10-tetraazacyklododekan

K roztoku 27,0 g (24,4 mmol) sekundárního aminu připraveného v Příkladu 35a) ve směsi složené ze 150 ml tetrahydrofuranu a 15 ml chloroformu, bylo při teplotě 0°C a pod atmosférou dusíku přidáno 35,80 g (25,0 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 37e), rozpuštěné ve 250 ml tetrahydrofuranu. Pak bylo při teplotě 0°C po částech přidáno celkem 18,0 g (36,6 mmol) EEDQ [2-ethoxy-l-ethoxykarbonyl1,2-dihydrochinolin] a směs byla míchána přes noc při laboratorní teplotě. Reakční směs byla odpařena do sucha za sníženého tlaku a zbylý olej byl chromatografován na silikagelu (Mobilní fáze: n-hexan/isopropanol 20:1). Bylo získáno 49,48 g (80,4 % teoretického množství, spočteno na použitý sekundární amin) titulní sloučeniny ve formě bezbarvého oleje.

Elementární analýza:

Spočteno: C 60,47 H 5,79 F 12,80 N 4,44 S 1,27

Nalezeno: C 60,52 H 5,77 F 12,77 N 4,50 S 1,30

b) 1-{3-oxa-pentan-l,5-dikarboxylová kyselina-l-oyl-5-[1-(4pertluoroktylsulfonyl)piperazin]-amid)-7-[2,6-N,Ν'-bis(1-0a-D- (5-karbonyl)-pentylmannopyranosa)]-L-lysyl-1,4,7,10tetraazacyklododekan

Ve 250ml ethanolu bylo rozpuštěno 25,2 g (10,0 mmol) titulní sloučeniny připravené v Příkladu 45a), bylo přidáno 1,8 g Pearlman katalyzátoru (Pd 20 %, C) . Směs byla hydrogenována v atmosféře vodíku (1 atm) až do kvantitativní spotřeby

9999

188

9 9

9

9 9 9 9 9 9

9999 99 99 vodíku. Katalyzátor byl odfiltrován, promyt s ethanolem a ve vakuu bylo rozpouštědlo odstraněno do sucha. Titulní sloučenina byla získána ve formě žlutavě zbarveného, vysoce viskózního oleje.

Výtěžek: 14,11 g (92,5 % teoretického množství)

Elementární analýza:

Spočteno: C 49, 60 H 7,20 F 21,17 N 7,34 S 2,10

Nalezeno: C 49,62 H 7,17 F 21,20 N 7,30 S 2,14

c) Ί-{3-oxa-pentan-l,5-dikarboxylová kyselina-l-oyl-5-[1-(4perfluoroktylsulfonyl)piperazin]-amid]-7-[2,6-N,N'-bis(1-0a-D- (5-karbonyl)-pentyl-mannopyranosa)]L-lysyl-4,10bis[1,4,7-tris(karboxylatomethyl)-10-(3-aza-4-oxo-5-methyl-5ylpentanoyl)]-1,4,7,10-tetraazacyklododekan, digadolinitý komplex

5,54 g [8,8 mmol; 2,2 molárního ekvivalentu, spočteno na použitou aminovou složku z Příkladu 45b)] Gd-komplexu s 10(4-karboxyl-methyl-2-oxo-3-azabutyl)-1, 4,7,10-tetraazacyklododekan-1,4,7-trioctovou kyselinou popsané v patentové přihlášce DE 197 28 954 Cl pod Příkladem 31h) a bezvodý chlorid lithný (0,37 g , 8,8 mmol) bylo při teplotě 40 C° rozpuštěno v 60 ml absolutního dimethylsulfoxidu za míchání a při této teplotě bylo přidáno celkem 1,01 g (8.8 mmol) Nhydroxysukcinimidu a 6,10 g (4,0 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 45b), rozpuštěné ve 40 ml absolutního dimethylsulfoxidu. Po ochlazení na laboratorní teplotu bylo do reakční směsi přidáno 1,82 g (8,8 mmol) N,N'dicydohexylkarbodiimidu a směs byla míchána 12 hodin při laboratorní teplotě. Získaná suspenze byla smíchána s přebytkem acetonu až do úplného vysrážení titulní sloučeniny, sraženina byla zfiltrována, vysušena, rozpuštěna ve vodě, nerozpuštěná dicyklohexylmočovina byla odfiltrována *· ····

189 a filtrát byl ultrafiltrován na ultrafiltrační membráně AMICON® YM-3 (mezní limit :3000 Da) kvůli odsolení a odstranění případně přítomných nízkomolekulárních podílů. Zbytek byl lyofilizován.

Výtěžek: 9,26 g (84,0 % teoretického množství; spočteno na použitou diaminovou složku) ve formě lyofilizátu.

Obsah vody (Karl-Fischer): 5,89 % .

Elementární analýza (spočteno na bezvodou látku):

Spočteno: C 40,52 H 5,16 N 9,15 F 11,72 Gd 11.41 S 1,16 Nalezeno: C 40,57 H 5,20 N 9,12 F 11,69 Gd 11,43 S 1,18 (50,0 mmol) triehylaminu,

Příklad 46

a) 6-N-t-Butyloxykarbonyl-2-N-benzyloxykarbonyl-L-lysin-[1(4-perfluoroktylsulfonyl)-piperazin]-amid

19,02 g (50,0 mmol) ct-N-(Benzyloxykarbonyl)-ε-Ν' (terc.butyloxykarbonyl)-L-lysinu (komerčně dostupný od firmy Bachem) bylo rozpuštěno ve 150ml absolutního tetrahydrofuranu. Bylo přidáno 8,31 g karbonyldiimidazolu a 5,03 g (50,0 mmol) rozpuštěné v 75 ml suchého tetrahydrofuranu při teplotě 0°C a reakční směs byla míchána 10 minut při této teplotě.

Pak byl přikapán roztok 48,42 g (50,0 mmol) perfluoroktylsulfonylpiperazinu a 5,03 g (50,0 mmol) triehylaminu ve 250 ml suchého tetrahydrofuranu při teplotě 0°C. Směs byla míchána přes noc, tetrahydrofuran byl odpařen do sucha ve vakuu a zbytek byl chromatografován na silikagelu (Mobilní fáze: n-hexan/isopropanol 15:1). Bylo získáno 49,48 g (80,4 % teoretického množství, spočteno na sekundární amin) titulní sloučeniny v formě bezbarvého oleje.

Elementární analýza (spočteno na bezvodou látku):

Spočteno: C 40,01 H 3,79 N 6,02 F 34,70 S 3,45 Nalezeno: C 40,07 H 3,82 N 6,02 F 34,67 S 3,48

190

b) 6-N-terc.Butyloxykarbonyl-L-lysin-[1-(4perfluoroktylsulfonyl)-piperazin]-amid

30,0 g (32,2 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 46a) bylo rozpuštěno ve 300ml isopropanolu a bylo přidáno 1,5 g Pearlman katalyzátoru (20%paldium-hydroxid na uhlí). Směs byla míchána 10 hodin při laboratorní teplotě, přičemž kontrola pomocí tentkovrstvé chromatografíe prokázala, že výše zmíněný reakční čas vedl ke kvantitativnímu odstranění benzyloxy chránících skupin. Katalyzátor byl odfiltrován a filtrát byl odpařen za vakua. Zbytek byl chromatografován na silikagelu. (Mobilní fáze:n-hexan/isopropanol Bylo získáno 25,13g (98,0% teoretického množství) titulní sloučeniny ve formě bezbarvého oleje.

Elementární analýza:

Spočteno: C 34,68 H 3,67 F 40,55 N 7,03 S 4,03

Nalezeno: C 34,72 H 3,70 F 40,60 N 7,01 S 3,98

c) 6-N-terc.Butyloxykarbonyl-2-N-[1-S-a-D-(2-karbonyl)ethyl-2,3,4,β-tetra-O-acetyl-mannopyranosa]-L-lysin-[1-(4perfluoroktylsulfonyl)-piperazin]-amid

Ve 300 ml suchého tetrahydrofuranu bylo rozpuštěno 15,53 g (35,60 mmol) 3-(2,3,4,6-Tetra-O-acetyl-l-thio-a-Dmannopyranosyl)-propionové kyseliny (příprava podle: J.

Haensler etal., Bioconjugate Chem. 4,85, (1993); Chipowsky,

S., a Lee,Y.C (1973), Synthesis of 1-thio-aldosides; Carbohydrate Research 31,339346 , společně s 3,60 g (35,60 mmol) triehylaminu. Po ochlazení reakční směsi na teplotu 15°C až -20°C byl při této teplotě za míchání pomalu přikapán roztok 4,92g (35,60 mmol) isobutylesteru chlormravenčí kyseliny ve 75 ml suchého tetrahydrofuranu, Přičemž rychlost přidávání byla taková aby teplota reakční směsi nepřestoupila -10 °C. Reakční směs byla míchána 15 minut při teplotě -15°C • * φφφφφφφ ·

J · · · φ «φφφ

191 φφφ «φφ «φφφ ♦ · « ·· <>>> ·« φφ a poté byl pomalu přikapán roztok 28,35 g (35,60 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 42b) a 3,60 g (35,60 mmol) triehylamin ve 200 ml suchého tetrahydrofuranu při teplotě 20°C. Reakční směs byla míchána při teplotě -15°C a poté 2 hodiny při laboratorní teplotě. Reakční směs byla poté odpařena do sucha za sníženého tlaku. Získaný zbytek byl rozpuštěn ve 250 ml ethylacetátu a byl dvakrát promyt se 100 ml nasyceného hydrogenuhličitanu sodného a poté byl promyt s 200 ml vody. Po vysušení organické fáze nad síranem sodným bylethylacetát odpařen ve vakuu. Zbývající olejovitý zbytek byl čištěn chromatografií na silikagelu s využitím směsi ethylacetát/n-hexan (1:25) jako eluentu. Výtěžek: 34,21 g (79,1% teoretického množství) výše uvedené titulní sloučeniny ve formě bezbarvého a silně viskózního oleje.

Elementární analýza:

Spočteno: C 39,54 H 4,23 N 4,61 F 26,58 S 5,28

Nalezeno: C 39,49 H 4,21 N 4,59 F 26,52 S 5,31

d) 6-N-t-Butyloxykarbonyl-2-N-[1-S-a-D-(2-karbonyl)-ethylmannopyranosa] -L-lysin-[1-(4-perfluoroktytsulfonyl)piperazin]-amid

29,93 g (24,64 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 46c) bylo suspendováno ve 400 ml absolutního methanolu a při teplotě 5 °C bylo přidáno katalytické množství methanolátu sodného. Reakční směs byla míchána 3h při laboratorní teplotě přičemž kontrola pomocí tenkovrstvé chromatografie ukázala (Eluent: chloroform/ methanol = 9:1), že průběh reakce je kvantitativní. Čirá reakční směs byla zpracována neutralizací pomocí přidání Amberlitu® IR 120 (H⁺-forma)-kationického iontoměniče, odfiltrováním iontoměniče a odpařením methanolického filtrátu do sucha za sníženého tlaku. Získaný amorfní zbytek byl čištěn pomocí chromatografie na silikagelu • Ml « « ·· · · s využitím směsi 2-propanol/ethylacetát/n-hexan (1:1:15) jako eluentu. Výtěžek: 23,42 g (90,8 % teoretického množství) bezbarvého a viskózního oleje.

Elementární analýza :

Spočteno: C 36,72 H 4,14 N 5,35 F 30,85 S 6,13

Nalezeno: C 36,69 H 4,11 N 5,35 F 30,82 S 6,11

e) 2-N-[1-S-a-D-(2-karbonyl)-ethyl-mannopyranosa]-L-lysin[1-(4-perfluoroktytsulfonyl)-piperazin]-amid

20,93 g (20,0 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 46d) bylo za intenzivného míchání rozpuštěno ve směsi složené z 50 ml trifluoroctové kyseliny a 100 ml dichlormethanu při teplotě 0°C a směs byla při této teplotě 10 minut míchána. Reakční směs byla odpařena do sucha za sníženého tlaku a zbytek byl rozpuštěn ve 150 ml vody. pH vodného roztoku produktu bylo přídavkem 2 molárního vodného roztoku hydroxidu sodného nastaveno na hodnotu 9,5. Vodný roztok produktu byl čištěn filtrací přes ultrafiltrační membránu AMICON® YM-3 (mezní limit : 3000 Da) kvůli odsolení a odstranění případně přítomných nízkomolekulárních složek. Zbytek byl lyofilizován.

Výtěžek: 17,79 g (94,2 % teoretického množství) volného aminu ve formě lyofilizátu. Obsah vody (Karl-Fischer): 3,09 %. Elementární analýza (spočteno na bezvodou látku):

Spočteno: C 34,26 H 3,73 N 5,92 F 34,12 S 6,77

Nalezeno: C 34,26 H 3,79 N 5,88 F 34,07 S 6,80

f) 2-N-[1-S-a-D-(2-karbonyl)-ethyl-mannopyranosa]-6-N[1,4,7-tris(karboxylatomethyl)-10-(3-aza-4-oxo-5-methyl-5-ylpentanoyl)-1,4,7,10-tetraazacyklododekan]-L-lysin-[l—(4— perfluoroktylsulfonyl)-piperazin]-amid, komplex gadolinia

193 φφφφ • « φφ φφφφ φφ

5,54 g 1(8,8 mmol, 2,2 molárního ekvivalentu spočteno na aminovou sloučeninu z Příkladu 46e)] Gd-komplexu 10-(4karboxy-l-methyl-2-oxo-3-azabutyl)-1,4,7,10-tetraazacyklododekan-1,4,7-trioctové kyseliny popsané v patentové přihlášce DE 197 28 954 Cl pod Příkladem 31h) a 0,37 g bezvodého chloridu lithného (8,8 mmol) bylo při teplotě 40°C rozpuštěno v 60 ml absolutního dimethylsulfoxidu za míchání a při této teplotě bylo přidáno celkem 1,01 g (8,8 mmol) Nhydroxysukcinimidu a 3,78 g (4,0 mmol) titulní sloučeniny z Pří'kladu 46e) , rozpuštěné ve 40 ml absolutního dimethylsulfoxidu. Po ochlazení na laboratorní teplotu bylo do reakčního roztoku přidáno 1,82 g (8,8 mmol) N,Ν'dicyklohexylkarbodiimidu a směs byla míchána 12 hodin při laboratorní teplotě. Získaná suspenze byla smíchána s přebytkem acetonu až do úplného vysrážení titulní sloučeniny, sraženina byla zfiltrována, vysušena, rozpuštěna ve vodě, nerozpuštěná dicyklohexylmočovina byla odfiltrována a filtrát byl ultrafiltrován na ultrafiltrační membráně AMICON® YM-3 (mezní limit :3000 Da) kvůli odsolení a odstranění případně přítomných nízkomolekulárních podílů. Zbytek byl lyofilizován. Výtěžek: 5,17 g (83,0% teoretického množství) ve formě bezbarvého lyofilizátu. Obsah vody (KarlFischer) : 4,43 % .

Elementární analýza (spočteno na bezvodou látku):

Spočteno:C 35,45 H 4,07 N 8,09 F20,72 Gd 10,09 S 4,11 Nalezeno:C 35,50 H 4,01 N 8,12 F 20,6 Gd 10,13 S 4,i4

Příklad 47

a) 6-N-Benzyloxykarbonyl-2-N-(1-O-a-D-karbonylmethyl2,3,4,6-tetra-O-benzylglukopyranosa)-L-lysin-[1-(4perfluoroktylsulfonyl)-piperazin]-amid

4444

4444 >« 44 • « 4444 44 4 ♦ 4 44 4444

	194	• 4 4 44 4	• ♦ 4 4*44 ·· 4444 44 44
8,02 g (13,4	mmol)	titulní	sloučeniny	popsané v	patentové
přihlášce DE	197	28 954	Cl pod	Příkladem	46a) [1-

karboxymethyloxy-2,3,4,6-tetra-O-benzyl-a-D-glukopyranosid] a 3,24 g (28,14 mmol) N-hydroxysukcinimidu bylo rozpuštěno ve 100 ml dimethylformamidu a při teplotě 0°C bylo po částech přidáno celkem 5,80 g (28,14 mmol) N,Ν'dicyklohexylkarbodiimidu. Reakční směs byla míchána další 3 hodiny při této teplotě. K takto získanému roztoku aktivného esteru byl při teplotě 0°C přikapán ochlazený roztok 11,13 g (13)4 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 21 c), rozpuštěné v 50 ml dimethylformamidu, a směs byla míchána 2 hodiny při teplotě 0°C a poté 12 hodin při laboratorní teplotě. Vyloučená sraženina dicyklohexylmočoviny byla odfiltrována a filtrát byl odpařen do sucha za sníženého tlaku. Získaný zbytek byl čištěn chromatografií na silikagelu s využitím mobilní fáze: dichlormethan/ethanol, 20:1; přičemž chromatografie byla prováděna za podmínek gradientu s postupným zvyšováním podílu ethanolu).

Výtěžek: 12,67 g (67,0 % teoretického množství) titulní sloučeniny ve formě bezbarvého a silně viskozního oleje. Elementární analýza:

Spočteno:C 52,77 H 4,50 N 3,97 F 22,89 S 2,27

Nalezeno:C 52,75 H 4,6i N 3,98 F 22,94 S 2,26

b) 2-N- (1-O-cc-D-karbonylmethyl-glukopyranosa) -L-lysin- [1- (4perfluoroktylsulfonyl)-piperazin]-amid

Ve 100 ml ethanolu bylo rozpuštěno 11,52 g (8,17 mmol) sloučeniny získané v Příkladu 47a), bylo přidáno 0,5 g Pearlman katalyzátoru (Pd 20% , C) a směs byla hydrogenována při laboratorní teplotě pod atmosférou vodíku (1 atm), až do doby, kdy není pozorována žádná další spotřeba ovdíku. Katalyzátor byl odfiltrován, katalyzátor byl promyt • ti ···· • ti · · · ·

195 • · · <·· ···· 11 1 tititi··· ·· ·· s ethanolem (třikrát 40 ml ethanolu). Titulní sloučenina byla získána ve formě silně viskózního a bezbarvého oleje.

Výtěžek: 7,36 g (98,4 % teoretického množství).

Elementární analýza:

Spočteno:C 34,07 H 3,63 N 6,11 F 35,24 S 3,50

Nalezeno:C 34,11 H 3,59 N 6,08 F 35,23 S 3,52

c) 2-N-(1-0-a-D-karbonylmethyl-glukopyranosa)-6-N-[1,4,7 tris(karboxylatomethyl)-10-(aza-4-oxo-5-methyl-5-ylpentanoyl)-1,4,7,10-tetraazacyklododekan]-L-lysin-[1-(4perfluoroktytsulfonyl)-piperazin]-amid, Gd-komplex

9,98 g [(15,84 mmol; 2,2 molárního ekvivalentu spočteno na použitou aminovou složku z Příkladu 47b)] Gd-komplexu 10(4-karboxy-l-methyl-2-oxo-3-azabutyl)-1,4,7,10-tetraazacyklododekan-1,4,7-trioctové kyseliny popsané v patentové přihlášce DE 197 28 954 Cl pod Příkladem 31h) a 0,67 g (15,84 mmol) bezvodého chloridu lithného bylo při teplotě 40°C rozpuštěno v 80 ml absolutního dimethylsulfoxidu a při této teplotě bylo přidáno celkem 1,82 g (15,84 mmol) Nhydroxysukcinimidu a 7,25 g (7,19 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 47b), rozpuštěné ve 30 ml absolutního dimethylsutfoxidu. Po ochlazení na laboratorní teplotu byla reakční směs nechána reagovat s 3,27 g (15,84 mmol) N,N'dicyklohexylkarbodiimidu a byla míchána 12 hodin při laboratorní teplotě. Získaná suspenze byla smíchána s přebytkem acetonu až do úplného vysrážení titulní sloučeniny, sraženina byla zfiltrována, vysušena, rozpuštěna ve vodě, nerozpuštěná dicyklohexylmočovina byla odfiltrována a filtrát byl ultrafiltrován na ultrafiltrační membráně AMICON® YM-3 (mezní limit :3000 Da) kvůli odsolení a odstranění případně přítomných nízkomolekulárních podílů. Zbytek byl lyofilizován.

0« 0000 «0

196 *·· 000 0000 ·· « «0 0000 0« ··

Výtěžek: 9,11 g (83,0% teoretického množství) ve bezbarvého lyofilizátu.

Obsah vody (podle Karl-Fischer): 4,02 %.

Elementární analýza (spočteno na bezvodou látku): Spočteno: C 35,37 H 4,02 N 8,25 F 21,13 S 2,10 Gd 10,29 Nalezeno:C 35,42 H 4,07 N 8,18 F 21,09 S 2,06 Gd 10,34 formě

Příklad 48

a) 2-N-Trifluoracetyl-L-lysin-[1-(4-perfluoroktylsulfonyl)pip-erazin] -amid

Ve 100 ml ethanolu bylo rozpuštěno 10,0 g (11,46 mmol) sloučeniny připravené v Příkladu 21 b) , bylo přidáno 1,0 g Pearlman katalyzátoru (Pd 20% / C) a směs byla hydrogenována v atmosféře vodíku (1 atm) až do kvantitativní spotřeby vodíku. Katalyzátor byl odfiltrován, promyt s ethanolem a ve vakuu bylo rozpouštědlo odstraněno do sucha. Titulní sloučenina byla získána ve formě bezbarvého oleje.

Výtěžek: 8,85 g (97,5 % teoretického množství).

Elementární analýza:

Spočteno: C 30,31 H 2,54 N 7,07 F 47,95 S 4,05

Nalezeno: C 30,36 H 2,50 N 7,11 F 47,99 S 4,00

b) 2-N-Trifluoracetyl-6-N-[1-0-a-D-(5-karbonyl)-pentyl2,3,4,6-tetra-0-benzyl-mannopyranosa]-L-lysin-[1-(4perfluoroktylsulfonyl)-piperazin]-amid

K roztoku 29,0 g (36,6 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 48a) a 4,05 g (40,26 mmol) triehylaminu ve 100 ml dimethylformamidu ochlazeném na 0 °C byl přikapán roztok 27,51 g (36,6 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 37c) ve 150 ml dimethylformamidu. Po ukončení přídavku byla směs míchána hodinu při teplotě 0°C a poté byla míchána přes noc při laboratorní teplotě. Reakce byla odpařena do sucha za

197

9999

sníženého tlaku a zbytek byl rozpuštěn ve 300 ml ethylacetátu. Nerozpuštěný podíl byl odfiltrován a filtrát byl promyt dvakrát se 100 ml 5% vodného roztoku sody. Organická fáze byla sušena nad síranem hořečnatým a poté byla odpařena do sucha za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatografii na silikagelu {mobilní fáze: n-hexan/ isopropanol 25:1). Bylo získáno 42,05 g (80,4 % teoretického množství) titulní sloučeniny ve formě bezbarvého oleje. Elementární analýza:

Spočteno: C 50,42 H 4,51 N 7,96 F 26,59 S 2,24

Nalezeno: C 50,38 H 4,50 N 7,91 F 26,62 S 2,20

c) 6-N-[1-0-a-D-(5-karbonyl)-pentyl-2,3,4,6-tetra-0-benzylmannopyranosa]-L-lysin-[1-(4-perfluoroktylsulfonyl)piperazin]-amid

Ve 150 ml ethanolu bylo rozpuštěno 20,0 g (14,0 mmol) sloučeniny připravené v Příkladu 48b). Pak byl přidán roztok 2,8 g (70,0 mmol) hydroxidu sodného ve 25 ml destilované vody a směs byla míchána 0,5 hodiny při teplotě 50°C. Podle tenkovrstvé chromatografie je odstranění chránících skupin v tomto reakčním čase kvantitativní. Reakční směs byla odpařena do sucha za sníženého tlaku a zbytky vody byly odstraněny opakovanou destilací s ethanolem. Zbytek byl chromatografován na silikagelu (Mobilní fáze: n-hexan/ isopropanol 20:1). Bylo získáno 16,66 g (89,3% teoretického množství) titulní sloučeniny ve formě bezbarvého oleje. Elementární analýza:

Spočteno: C 52,25 H 4,91 N 4,20 E 24,22 S 2,41

Nalezeno: C 52,30 H 4,90 N 4,18 F 24,22 S 2,38

d) 6-N- [1-0-a-D- (5-Karbonyl) -pentyl-mannopyranosa] -L-lysin[1-(4-perfluoroktylsulfonyl)-piperazin]-amid ·· ···· ·· («Μ

198

Ve 150 ml směsi 10:1 ethanolu a vody bylo rozpuštěno 15,0 g (11,25 mmol) sloučeniny získané v Příkladu 48c) a bylo přidáno 1,0 g Pearlman katalyzátoru (Pd 20%/C) a směs byla hydrogenována v atmosféře vodíku (1 atm) při laboratorní teplotě až do kvantitativní spotřeby vodíku. Katalyzátor byl odfiltrován, promyt směsí ethanol/voda 10:1 a ve vakuu bylo rozpouštědlo odstraněno do sucha. Titulní sloučenina byla získána ve formě bezbarvého oleje.

Výtěžek: 10,77 g (98,4% teoretického množství).

Elementární analýza:

Spočteno: C 37,04 H 4,25 N 5,76 F 33,20 S 3,30

Nalezeno: C 37,06 H 4,20 N 5,81 F 33,19 S 3,30

e) 6-N-[1-O-a-D-(5-Karbonyl)-pentyl-mannopyranosa]-2-N[1,4,7-tris(karboxylatomethyl)-10-(3-aza-4-oxo-5-methyl-5-ylpentanoyl)-1,4,7,10-tetraazacyklododekan]-L-lysin-[l—(4— perfluoroktylsulfonyl}-piperazin]-amid, Gd-komplex

5,54 g [(8,8 mmol; 2,2 molárního ekvivalentu spočteno na použitou aminovou komponentu z Příkladu 48d)] Gd-komplexu 10(4-karboxy-l-methyl-2-oxo-3-azabutyl)-1,4,7,10-tetraazacyklododekan-1,4,7-trioctové kyseliny popsané v patentové přihlášce DE 197 28 954 Cl pod Příkladem 31h) a 0,37 g (8,8 mmol) bezvodého chloridu lithného bylo při teplotě 40° C ropzuštěno v 60 ml absolutního dimethylsulfoxidu za míchání a při této teplotě bylo přidáno 1,01 g (8,8 mmol) Nhydroxysukcinimidu a 3,89 g (4,0 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 48d), rozpuštěné v 60 ml absolutního dimethylsulfoxidu. Po ochlazení na laboratorní teplotu bylo do reakčního roztoku přidáno 1,82 g (8,8 mmol) N,Ν'dicyklohexylkarbodiimidu a směs byla míchána 12 hodin při laboratorní teplotě. Získaná suspenze byla smíchána s přebytkem acetonu až do úplného vysrážení titulní ·· ····

199 « · 0 • · · ♦ · · *· a ·· ·9·· ·· ·« « a a a • · · · t a a a aaaa a aaa aaaa aa aaaa aa aa sloučeniny, sraženina byla zfiltrována, vysušena, rozpuštěna ve vodě, nerozpuštěná dicyklohexylmočovina byla odfiltrována a filtrát byl ultrafiltrován na ultrafiltrační membráně AMICON® YM-3 (mezní limit :3000 Da) kvůli odsolení a odstranění případně přítomných nízkomolekulárních podílů. Zbytek byl lyofilizován. Výtěžek: 4,81 g (75,9 % teoretického množství) ve formě bezbarvého lyofilizátu. Obsah vody (KarlFischer) : 8,98 % .

Elementární analýza (spočteno na bezvodou látku):

Spočteno: C 37,15 H 4,39 N 7,96 F 20,38 Gd 9,92 S 2,02 Nalezeno: 0 37,27 H 4,40 N 8,02 F 20,31 Gd 10.00 S 1,98

Příklad 49

a) 1,7-Bis(benzyloxykarbonyl)-4-(1-O-a-D-karbonylmethyl2,3,4,6-tetra-O-benzyl-galaktopyranosa)-10-{3-oxa-pentan-l,5dikarboxylová kyselina-l-oyl-5-[1-(4-perfluoroktylsulfonyl)piperazin]-amid}-l,4,7,10-tetraazacyklododekan

Do roztoku 27,0 g (24,4 mmol) sekundárního aminu získaného v Příkladu 35a) ve směsi 150 ml tetrahydrofuranu a 15 ml chloroformu, bylo při teplotě 0°C a pod dusíkovou atmosférou přikapáno 35,80 g (25,0 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 37e) , rozpuštěné ve 250 ml tetrahydrofuranu. Pak bylo při teplotě 0°C po částech přidáno celkem 18,0 g (36,6 mmol) EEDQ [2-ethoxy-l-ethoxykarbonyl-l,2-dihydrochinolin] a směs byla míchána přes noc při laboratorní teplotě. Reakční směs byla odpařena do sucha za sníženého tlaku a zbylý olej byl chromatografován na silikagelu (Mobilní fáze: n-hexan/ isopropanol 20:1). Bylo získáno 32,11 g (78,0 % teoretického množství, spočteno na použitý sekundární amin) titulní sloučeniny ve formě bezbarvého oleje.

Elementární analýza:

Spočteno: C 54,09 H 4,72 F 19,14 N 4,98 S 1,90 • · ···· ·· ··

200

Nalezeno: C 54,12 H 4,77 F 19,17 N 5,03 S 1,90

b) 1- (1-O-oc-D-karbonylmethyl-galaktopyranosa) -7-{ 3-oxapentan-1,5-dikarboxylová kyselina-l-oyl-5-[1-(4-perfluoroktylsulfonyl) -piperazin]-amid)-1,4,7,10-tetraazacyklododekan Ve 250 ml ethanolu bylo rozpuštěno 30,0 g (17,77 mmol) titulní sloučeniny připravené v Příkladu 49a) a bylo přidáno 3,0 g Pearlman katalyzátoru (Pd 20%/C) a směs byla hydrogenována v atmosféře vodíku (1 atm) při laboratorní teplotě až do kvantitativní spotřeby vodíku. Katalyzátor byl odfiltrován, promyt ethanolem a ve vakuu bylo rozpouštědlo odstraněno do sucha. Titulní sloučenina byla získána ve formě bezbarvého a velmi viskózního oleje.

Výtěžek: 17,89 g (95,1 % teoretického množství).

Elementární analýza:

Spočteno: C 36,30 H 4,09 F 30,50 N 7,94 S 3,03

Nalezeno: C 36,26 H 4,12 F 30,46 N 7,90 S 3,04

c) 1-(1-0-(3-D-karbonyImethyl-galaktopyranosa)-7-{3-oxapentan-1,5-dikarboxylová kyselina-l-oyl-5-[1-(4-perfluoroktylsulfonyl) -piperazin]-amid}-4,10-bis[1,4,7-tris(karboxylatomethyl) -10-(3-aza-4-oxo-5-methyl-5-yl-pentanoyl)1,4,7,10-tetraazacyklododekan]-1,4,7,10-tetraazacyklododekan, di-gadolinium komplex

5,54 g [8,8 mmol; 4,4 molárního ekvivalentu spočteno na použitou aminovou složku z Příkladu 49b)] Gd-komplexu 1-0-(4karboxyl-methyl-2-oxo-3-azabutyl)-1,4,7,10-tetraazacyklododekan-1,4,7-trioctové kyseliny popsané v patentové přihlášce DE 197 28 954 Cl pod Příkladem 31 h) a 0,37 g (8,8 mmol) bezvodého chloridu lithného bylo při teplotě 40 C° rozpuštěno za míchání v 60 ml absolutního dimethylsulfoxidu a při této teplotě bylo přidáno 1,01 g (8.8 mmol) N··«·

201 hydroxysukcinimidu a 2,11 g (2,0 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 49b), rozpuštěné v 25 ml absolutního dimethylsulfoxidu. Po ochlazení na laboratorní teplotu byl reakční roztok nechán reagovat s 1,82 g (8,8 mmol) N, Ν'dicyklohexylkarbodiimidu a reakce byla míchána 12 hodin při laboratorní teplotě. Získaná suspenze byla smíchána s přebytkem acetonu až do úplného vysrážení titulní sloučeniny, sraženina byla zfiltrována, vysušena, rozpuštěna ve vodě, nerozpuštěná dicyklohexylmočovina byla odfiltrována a 'filtrát byl ultrafiltrován na ultrafiltrační membráně AMICON® YM-3 (mezní limit :3000 Da) kvůli odsolení a odstranění případně přítomných nízkomolekulárních podílů. Zbytek byl lyofilizován. Výtěžek: 3,29 g (72,2 % teoretického množství; spočteno na použitou aminovou komponentu) ve formě bezbarvého lyofilizátu.

Obsah vody (Karl-Fischer): 5,99%. Elementární analýza (spočteno na bezvodou látku):

Spočteno: C 36,84 H 4,37 N 9,82 F i4,15 Gd 19,63 S 1,40

Nalezeno: C 36;87 H 4,40 N 9,82 F 14,09 Gd 19,59 S 1,38

a) 3-(l-O-a-D-2,3,4,6-Tetra-O-benzyl-mannopyranosa)-2-Nbenzyloxykarbony1-L-serin-methylester

V 500 ml suchého acetonitrilu bylo rozpuštěno 21,42 g (39,61 mmol) 2,3,4,6-tetra-O-benzyl-a-D-mannopyranosa (příprava podle: F. Kong et al., J. Carbohydr. Chem. ; 16; 6; 1997; 877-890). Po ochlazení reakční směsi na 5°C byl při této teplotě za míchání přikapán roztok 13,23 g (59,52 mmol) trimethylsilylester trifluormethansulfonové kyseliny ve 30 ml acetonitrilu, následovaný roztokem 20,06 g (79,21 mmol) Nbenzyloxykarbonyl-L-serinmethylesteru (komerčně dostupné od firmy Bachem) v 50 ml acetonitrilu, přičemž rychlost přidávání byla taková, aby teplota reakce nepřestoupila 10 • · « · • · · · · ·

• · · ·· · ··· · · ·· °C. Reakce byla míchána 15 hodin při labortaorní teplotě a reakce pak byla odpařena do sucha za sníženého tlaku. Zbytek byl rozpuštěn ve 250 ml ethylacetátu a byl promyt dvakrát se 100 ml nasyceného roztoku hydrogenuhličitanů sodného a poté s 200 ml vody. Po vysušení organické fáze nad síranem sodným byla anorganika odfiltrována a ethylacetát byl odstraněn ve vakuu. Získaný olejovitý zbytek byl čištěn chromatografií na siikagelu s využitím směsi ethylacetát/n-hexan (1:5) jako eluentu.

Výtěžek: 23,60 g (76,8% teoretického množství) výše uvedené titulní sloučeniny ve formě bezbarvého oleje.

Elementární analýza:

Spočteno: C 71,21 H 6,37 N 1,81

Nalezeno: C 71,19 H 6,41 N 1,79

b) 3-(l-O-a-D-2,3,4,6-Tetra-O-benzyl-mannopyranosa)-2-Nbenzyloxykarbonyl-L-serin

Ve směsi skládající se ze 20 ml methanolu, 20 ml vody a 50 ml tetrahydrofuranu bylo rozpuštěno 10,0 g (12,90 mmol) sloučeniny připravené v Příkladu 50a). Pak bylo přidáno 0,47 g (19,35 mmol) hydroxidu lithného, rozpuštěného ve 25 ml destilované vody při laboratorní teplotě a směs byla poté míchána 6 hodin při teplotě 60 °C. Kontrolou pomocí tenkovrstvé chromatografie (Eluent: methylenchlorid/methanol 10:1) bylo zjištěno, že zmýdelnění methylesteru z Příkladu 30a) po výše zmíněné reakční době je kvantitativní, ro zpracování byl reakční produkt odpařen do sucha a zbytek byl rozpuštěn ve 250 ml ethylacetátu při zahřátí (cca 60°C). Takto získaná ethylacetátová fáze byla promyta dvakrát s 50 ml 15% vodné kyseliny chlorovodíkové, poté se 100 ml destilované vody. Organická fáze byla sušena nad síranem hořečnatým, zfiltrována a byla odpařena do sucha za sníženého • 9

tlaku. Zbytek byl chromatografován na silikagelu (Mobilní fáze: n-hexan/ethylacetát 5:1). Bylo získáno 8,40 g (85,7 % teoretického množství) titulní sloučeniny ve formě bezbarvého oleje.

Elementární analýza:

Spočteno: C 70,94 H 6,22 N 1,84

Nalezeno: C 70,97 H 6,30 N 1,78

c) 3-(l-O-a-D-2,3,4,6-Tetra-0-benzyl-mannopyranosa-2-Nbenžyloxykarbonyl-L-serin-[1-(4-perfluoroktylsuffonyl)piperazin]-amid

Ke 13,86 g (24,40 mmol) 1- perfluoroktylsulfonylpiperazinu (připraveném podle DE 19603033), rozpuštěné ve směsi 150 ml tetrahydrofuranu a 15 ml chloroformu, bylo při teplotě 0°C a pod atmosférou dusíku po kapkách přidáno 20,57 g (27,0 mmol) karboxylové kyseliny připravené v Příkladu 50b) , rozpuštěné v 50 ml tetrahydrofuranu. Poté bylo při teplotě 0 °C celkem po částech přidáno 18,0 g (36,60 mmol) EEDQ [2-ethoxy-l-ethoxykarbonyl-l,2-dihydrochinolin] a poté byla směs míchána přes noc při laboratorní teplotě. Kvůli zpracování byla reakční směs odpařena do sucha a zbytek byl čiětěn chromatografii na silikagelu s využitím směsi n-hexan /isopropanol (15:1) jako elučního systému. Bylo získáno 17,0 g (79,6 % teoretického množství, spočteno na použitý primární amin) titulní sloučeniny ve formě bezbarvého viskózního oleje.

Elementární analýza:

Spočteno: C 51,53 H 4,23 N 3,15 F 25,65 S 2,41

Nalezeno: C 51,48 H 4,27 N 3,10 F 25,71 S 2,35

d) 3- (1-O-oc-D-Mannopyranosa) -L-serin- [1- (4-perfluoroktylsulfonyl )piperazin]amid • ·· ·

Ve 200 ml ethanolu bylo rozpuštěno 15,0 g (11,41 mmol) sloučeniny připravené podle Příkladu 50c), bylo přidáno 1,5 g Pearlman katalyzátoru (Pd 20%,C) a směs byla hydrogenována v atmosféře vodíku (1 atm) při laboratorní teplotě až do doby, kdy nebyla pozorována žádná spotřeba vodíku (8 hodin). Katalyzátor byl odfiltrován, promyt ethanolem (dvakrát 100 ml) a ethanolický roztok obsahující produkt byl odpařen do sucha za sníženého tlaku. Titulní sloučenina byla získána ve formě bezbarvého a viskózního oleje.

Výtěžek: 8,79 g (94,0 % teoretického množství). Elementární analýza:

Spočteno: C 30,78 H 3,20 N 5,13 F 39,41 S 3,91

Nalezeno: C 30,87 H 3,14 N 5,19 F 39,50 S 3,88

e) 3-(1-0-a-D-Mannopyranosa)-2-N- [1,4,7tris(karboxylatomethyl)-10-(3-aza-4-oxo-5-methyl-5-ylpentanoyl)-1,4,7,10-tetraazacyklododekan]-L-serin-[1-(4perfluoroktylsulfonyl)-piperazin]-amid, Gd-komplex

Míchaná suspenze 5,7 g [9,06 mmol ; odpovídající 1,5 molárnímu ekvivalentu odpovídající titulní sloučenině (primární amin) z Příkladu 50d)] Gd-komplexu 10-(4-karboxy-lmethyl-2-oxo-3-azabutyl)-1,4,7,10-tetraazacyklododekan-l,4,7trioctové kyseliny popsané v patentové přihlíšce DE 197 28 954 Cl pod Příkladem 31h) v 75 ml absolutního dimethylsulfoxidu byla nechána reagovat při teplotě 70 °C s 0,68 g (15,9 mmol) chloridu lithného. Směs byla míchána 30 minut pří teplotě 70 °C a poté bylo po částech přidáno celkem 1,83 g (15,9 mmol) N-hydroxysukcinimidu a reakční směs byla míchána ještě hodinu při teplotě 70 °C. Po ochlazení reakční směsi na teplotu 10°C bylo přidáno 4,52 g (23,85 mmol) dicyklohexylkarbodiimidu a reakční roztok byl míchán ještě hodinu při teplotě 0 °C, a poté 12 hodin při teplotě 22°C.

• · • ·

205

Takto získaný roztok N-Hydroxysukcinimidesteru Gd-komplexu 10-(4-karboxy-l-methyl-2-oxo-3-azabutyl)-1,4,7,10-tetraazacyklododekan-1,4,7-trioctové kyseliny byl nechán při teplotě 22 °C reagovat s roztokem 4,94 g (6,03 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 30d) v 15 ml absolutního dimethylsulfoxidu a směs byla míchána 12 hodin při laboratorní teplotě. Ke zpracování byla reakční směs pomalu přikapána při teplotě 22°C do směsi rozpouštědel složené z 250 ml acetonu a 250 ml 2-propanolu, přičemž titulní sloučenina se po 12 hodinách při teplotě 10 °C oddělila jako světle žlutavě zbarvený olej. Přebytečná směs rozpouštědel byla dekantována a olejový produkt byl dán do 200 ml destilované vody, přičemž olej se zcela rozpustil, takže vznikl světle žlutavě zbarvený roztok výše uvedené titulní sloučeniny. Nakonec byl vodný roztok produktu čištěn trojnásobnou ultrafiltraci přes ultrafiltrační membránu (AMICON® mezní limit: 3000 Da) , kvůli odstranění anorganických solí a nízkomolekulárních podílů. Takto získaný roztok byl lyofilizován. Výtěžek: 8,63 g (80,2 % teoretického množství, spočteno na titulní sloučeninu z Příkladu 30d) ve formě bezbarvého lyofilizátu s obsahem vody 7,65 %. Elementární analýza (spočteno na bezvodou látku):

Spočteno: C 33,57 H 3,80 N 7,83 F 22,57 Gd 10,99 S 2,24 Nalezeno: C 33,57 H 3,76 N 7,82 F 22,63 Gd 11,06 S 2,18

Příklad 51

a) 6-N-Benzyloxykarbonyl-2-N-[Ο-β-D-galaktopyranosyl (l->4)glukonosyl]-L-lysin-[1-(4-perfluoroktylsulfonyl)-piperazin]amid

K míchanému roztoku 4,98 g (6,0 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 21c) ve 40 ml absolutního dimethylsulfoxidu byl při laboratorní teplotě přikapán roztok 13,3 g (37,2 mmol) Ο-β-D• · • · · · « · · · · · · ·· ···· · · · · galaktopyranosyl-(1—>4)-D-glukono-1,5-lakton [Laktobionolakton ; připraveno podle: (a) Williams, T. J.; Plessas, N. R., Goldstein, I. J. Carbohydr. Res. 1978, 67,

Cl. (b) Kobayashi, K.; Sumitomo, H.; Ina, Y. Polym. J. 1985, 17, 567, (c) Hiromi Kitano,Katsuko Sohda, a Ayako Kosaka,

Bioconjugate Chem. 1995, 6, 131-134] ve 40 ml absolutního dimethylsulfoxidu. Takto získaný reakční roztok byl míchán 14 hodin při teplotě 40°C. Ke zpracování byla reakční směs nechána reagovat s 500 ml absolutního 2-propanolu a vyloučená bezbarvá sraženina byla pomocí G4-frity odfiltrována a dobře promyta s celkem 250 ml absolutního 2-propanolu. Takto získaná tuhá látka byla rozpuštěna ve 300 ml destilované vody a čištěn trojnásobnou ultrafiltraci přes ultrafiltrační membránu (AMICON® mezní limit: 3000 Da) , kvůli odstranění přebytečného laktobionolaktonu a nízkomolekulárních podílů. Zbytek po ultrafiltraci byl rozpuštěn ve 300 ml destilované vody a byl lyofilizován. Výtěžek: 6,51 g (92,7 % teoretického množství) jako bezbarvého lyofilizátu. Obsah vody: 10,03 % Elementární analýza (spočteno na bezvodou látku):

Spočteno: C 38,98 H 4,05 N 4,79 F 27,58 S 2,74

Nalezeno: C 39,04 H 4,09 N 4,82 F 27,61 S 2,71

b) 2-N-[Ο-β-D-galaktopyranosyl (l->4)-glukonosyl]-L-lysin-[1(4-perfluoroktylsulfonyl)-piperazin]-amid

Ve 100 ml ethanolu bylo rozpuštěno 5,0 g (4,27 mmol) sloučeniny připravené v příkladu 51 a), bylo přidáno 0,5 g Pearlman katalyzátoru (Pd 20 %, C). Reakční směs byla hydrogenována při laboratorní teplotě pod atmosférou vodíku (1 atm), až do doby, kdy nebyla pozorována žádná spotřeba vodíku. Katalyzátor byl odfiltrován, promyt s ethanolem a • · φφ

207

Φ Φ · φφφφ φφ · φ φ φ Φ· φφ směs byla odpařena do sucha za sníženého tlaku. Titulní sloučenina byla získána jako viskózní, bezbarvý olej.

Výtěžek: 4,36 g (98,5 % teoretického množství).

Elementární analýza :

Spočteno: C 34,76 H 3,99 N 5,40 F 31,51 S 3,09

Nalezeno: C 34,78 H 4,04 N 5,34 F 31,51 S 3,15

c) 2-N-[Ο-β-D-galaktopyranosyl (l->4)-gluconosyl]-6-N-[1,4,7tris(karboxylatomethyl)-10-(3-aza-4-oxo-5-methyl-5-ylpentanoyl)-1,4,7,10-tetraazacyklododekan]-L-lysin-[1-(4perfluoroktylsulfonyl)-piperazin]-amid, Gd-komplex 5,54 g j(8,8 mmol; 2,2 molárního ekvivalentu spočteno na minovou sloučeninu z Příkladu 51b)] Gd-komplexu 10-(4karboxy-l-methyl-2-oxo-3-azabutyl)-1,4,7,10tetraazacyklododekan-l, 4, 7-trioctové kyseliny popsané v patentové přihlášce DE 197 28 954 Cl pod Příkladem 31h) a 0,37 g (8,8 mmol) bezvodého chloridu lithného bylo při teplotě 40° C rozpuštěno za míchání v 60 ml absolutního dimethylsulfoxid a při této teplotě bylo přidáno celkem 1,01 g (8,8 mmol) N-hydroxysukcinimidu a 3,85 g (4,0 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 31Ab), rozpuštěné v 60ml absolutního dimethylsulfoxidu. Po ochlazení na laboratorní teplotu byla reakční směs nechána reagovat s 1,82 g (8,8 mmol) N,N'dicyklohexylkarbodiimidu a reakční směs byla míchána 12 hodin při laboratorní teplotě. Získaná suspenze byla zpracována s přebytkem směsi aceton/2-propanol (1:1) až do vysrážení veškeré zmíněné titulní sloučeniny, odfiltrována, vysušena, rozpuštěna ve nerozpuštěná dicyklohexylmočovina byla odfiltrována a filtrát byl trojnásobně čištěn od nízkomolekulárního podílu ultrafiltrací na ultrafiltrační membráně AMICON® YM-3 (mezní limit: 3000 Da). Během ultrafiltrace byla titulní sloučenina sraženina byla 300 ml vody,

208 • · «·« · • · ····

zbavena přebytečného Gd-komplexu a případně přítomných

nízkomolekulárních	podílů.	Zbytek	po	ultrafiltraci byl
rozpuštěn	v 500 ml	destilované vody a	byl	lyofilizován.
Výtěžek:	4,64 g	(70,4	%d.Th.)	ve	formě bezbarvého

lyofilizátu.

Obsah vody (Karl-Fischer): 10,08 % .

Elementární analýza (spočteno na bezvodou látku):

Spočteno: C 35,70 H 4,22 N 7,65 F 19,59 Gd 9,54 S 1,95 Nalezeno: C 35,77 H 4,17 N 7,71 F 19,61 Gd 9,60 S 1,99

Příklad 52

a) 2-N-Trifluoracetyl-6-N-benzyloxykarbonyl-lysin

100 g (356,7 mmol) 6-N-Benzyloxykarbonyl-lysin byl rozpuštěn ve směsi 1000 ml ethylesteru trifluoroctové kyseliny a 500 ml ethanolu a směs byla míchána 24 hodin při laboratorní teplotě. Reakční směs byla odpařena do sucha a zbytek byl krystalizován z diisopropyletheru.

Výtěžek:128,9 g (96 % teoretického množství) bezbarvého krystalického prášku.

Elementární analýza:

Spočteno: C 51,07 H 5,09 F 15,14 N 7,44

Nalezeno: C 51,25 H 5,18 F 15,03 N 7,58

b) 2-N-Trifluoracetyl-6-N-benzyloxykarbonyl-lysin-[1-(4perfluoroktylsulfonyl)piperazin]-amid

Ke 125 g (332 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 52a) a 188,7g (332 mmol) 1-perfluoroktylsulfonyl-piperazinu, (připraveného podle DE 19603033) v 800 ml tetrahydrofuranu, bylo při teplotě 0 °C přidáno 164,2 g (0, 664 mmol) EEDQ (ethLesteru 2-ethoxy-l,2-dihydrochinolin-l-karboxylové kyseliny) a směs byla míchána přes noc při laboratorní teplotě. Reakční směs byla odpařena od sucha za sníženého ·· ···· ·· ···· tlaku a zbytek byl chromatografován na silikagelu (Mobilní fáze : dichlormethan/methanol =20:1). Výtěžek: 286 g (93 % teoretického množství) bezbarvé tuhé látky.

Elementární analýza:

Spočteno: C 36,30 H 2,83 F 41,01 N 6,05 S 3,46

Nalezeno: C 36,18 H 2,94 F 40,87 N 5,98 S 3,40

c) 6-N-Benzyloxykarbonyl-lysin-[1-(4-perfluoroktylsulfonyl)piperazin] amid

Do -roztoku 280 g (302,2 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 52b) ve 2000 ml ethanolu, byl přu teplotě 0 °C zaváděn plynný amoniak po dobu 1 hodiny. Směs pak byla míchána 4 hodiny při teplotě 0 °C. Reakční směs pak byla odpařena do sucha a zbytek byl promíchán s vodou. Tuhá látka byla odfiltrována a sušena ve vakuu při teplotě 50 °C. Výtěžek : 243,5 g (97 % teoretického množství) bezbarvá amorfní sloučenina.

Elementární analýza:

Spočteno: C 37,60 H 3,28 F 38,89 N 6,75 S 3,86

Nalezeno: C 37,15 H 3,33 F 38,78 N 6,68 S 3,81

d) 6-N-Benzyloxykarbonyl-2-N-(3,6,9,12,15-pentaoxahexadekanoyl) -lysin-[1-(4-perfluoroktylsulfonyl)-piperazin]-amid

K 50 g (60,20 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 52c) a 7,10 g (70 mmol) triehylaminu, rozpuštěné ve 350 ml dichlormethanu, byl při teplotš 0° C přikapán roztok 79,93 g (70 mmol) 3,6,9,12,15-pentaoxahexadekanoylchloridu [přípraven podle Liebigs Ann. Chem, (1980), (6), 852-62] v 50 ml dichlormethanu a směs byla míchána 3 hodiny při teplotě 0 °C. Bylo přidáno 200 ml 5% vodné kyseliny chlorovodíkové a směs byla míchána 5 minut při laboratorní teplotě. Organická fáze byla oddělena, sušena nad síranem hořečnatým a byla odpařena

210

Φ· φ··φ φ φ φ φφφ φ« φ* φ φ · φφφφ · φ · ··· ··· φφφφ φφ φ φφφφφφ φ φ φ φ ve vakuu. Zbytek byl chromatografován na silikagelu (Mobilní fáze: dichlormethan/aceton =15:1

Výtěžek: 53,7 g (93% teoretického množství) bezbarvého tuhého olej e.

Elementární analýza:

Spočteno: C 33,83 H 4,94 F 3,34 N 5,84 S 33,69

Nalezeno: C 33,75 H 5,05 F 3,29 N 5,78 S 33,75

e) 2-N-(3,6,9,12,15-pentaoxahexadekanoyl)-lysin-[1-(4perfluoroktylsulfonyl)-piperazin]- amid g (52,15 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 52d) bylo rozpuštěno v 500 ml ethanolu a bylo přidáno 6 g palladiového katalyzátoru (10% Pd/C). Směs byla hydrogenována při laboratorní teplotě. Katalyzátor byl odfiltrován a filtrát byl odpařen do sucha za sníženého tlaku.

Výtěžek: 43,0 g (kvantitativně) bezbarvá tuhá látka.

Elementární analýza:

Spočteno: C 27,68 H 5,01 F 39,17 N 6,79 S 3,89

Nalezeno: C 27,60 H 5,13 F 39,09 N 6,68 S 3,81

f) 6-N-[1,4,7-Tris(karboxylatomethyl)-1,4,7,10tetraazacyklododekan-10-(pentanoyl-3-aza-4-oxo-5-methyl-5yl)]-2-N-(3,6,9,12,15-pentaoxahexadekanoyl)-lysin-[1-(4perfluoroktylsulfonyl)-piperazin]-amid, Gd-komplex g (24,25 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 52e) , 2,79 g (24,25 mmol) N- hydroxysukcinimidu, 2,12 g (50 mmol) chloridu lithného a 15,27g (24,25 mmol) 1,4,7tris(karboxylatomethyl)-10 -[(3-aza- 4- oxo- 5- methyl- 5-yl) ]pentanová kyselina]-1,4,7,10-tetraazacyklododekan, Gdkomplex bylo za slabého zahřátí rozpuštěno ve 200 ml dimethytsulfoxidu. Při teplotě 10° C bylo přidáno 8,25 g (40 mmol) N,N-dicyklohexylkarbodiimidu a směs byla míchána přes φφ φ* φφφφ φ φ · φφ φφφφ φφ φ*φφ

211

ΦΦΦ φφ φ φφφ φφφφ φφ φφφφ φφ ·Φ noc při laboratorní teplotě. Roztok byl vylit do 3000 ml acetonu a byla míchána 10 minut. Vyloučená tuhá látka byla zfiltrována a byla čištěna chromatografií na silikagelu (Silikagel RP-18, Mobilní fáze: Gradient voda/ethanol/ acetonitril).Výtěžek: 28,21 g (81 % teoretického množství) bezbarvé tuhé látky.

Obsah vody: 11,0 % Elementární analýza (spočteno na bezvodou látku)

Spočteno: C 31,78 H 4,84 F 22,49 N 8,78 S 2,23 Gd 10,95 Nalezeno: C 31,74 H 4,98 F 22,39 N 8,69 S 2,15 Gd 10,87

Příklad 53

a) bis(terč. butylester)-6-karbonylmethyl]-2-N-[3,6,9,12,15pentaoxahexa-dekanoyl)-lysin-[1-(4-perfluoroktylsulfonyl)piperazin]-amid 6-N-[3,9-bis(terc.butyloxykarbonylmethyl)3.6.9- triazaundekan-1,11-dikarboxylové kyseliny

K roztoku 20 g (24,08 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 52e), 14,88 g (24,08 mmol) bis (terč. butylester)

3.9- bis(terč. butyloxy-karbonylmethyl-3, 6, 9-triazaundekan1,11-dikarboxylové kyseliny a 2,77 g (24,08 mmol) Nhydroxysukcinimidu, rozpuštěnému ve 150 ml dimethylformamidu, bylo při teplotě 0 °C přidáno 8,25 g (40 mmol) N,Ndicyklohexylkarbodiimidu. Směs byla míchána 3 hodin při teplotě 0 °C, a poté přes noc při laboratorní teplotě.

Vyloučená sraženina byla odfiltrována, filtrát byl odpařen ve vakuu do sucha a zbytek byl chromatografován na silikagelu (Mobilní fáze: = dichlormethan/ethanol = 20:1).

Výtěžek: 31,61 g (91 % teoretického množství) tuhého oleje. Elementární analýza :

Spočteno: C 40,80 H 6,71 F 22,39 N 6,80 S 2,22

Nalezeno: C 40,72 H 6,82 F 22,30 N 6,75 S 2,14 • fc fcfcfcfc fcfc fcfcfcfc

212 ·* fcfc fcfc · Cfcfcfc fcfc fc • fcfc ··· «fcfc· · •fcfc fcfcfc ···· fcfc fc fcfc fcfcfcfc fcfc fcfc

b) 6-N-[6-Karbonylmethyl-3,9-bis(karboxylatomethyl)-3,6,9triazaundekandikarboxylové kyselina-1-karboxy-ll-karboxylato]-2-N-(3,6,9,12,15-pentaoxahexadekanoyl)-lysin- [1-(4perfluoroktylsulfonyl)-piperazin)-amid, Gd-komplex, sodná sůl, g (20,8 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 53a) bylo rozpuštěno ve 300 ml trifluoroctové kyseliny a směs byla míchána 5 hodin při laboratorní teplotě. Reakční směs byla odpařena do sucha, zbytek byl rozpuštěn ve 300 ml vody a pH roztoku bylo nastaveno na hodnotu 2,5 pomocí 10% vodného roztoku hydroxidu sodného. Poté bylo přidáno 3,77 g (10,4 mmol) oxidu gadolinia a směs byla míchána 3 hodiny při teplotě 60 °C. Reakční směs pak byla nechána ochladit na laboratorní teplotu a pH bylo upraveno na hodnotu 7,4 pomocí přídavku hydroxidu sodného. Směs byla odpařena do sucha za sníženého tlaku a zbytek byl čištěn chromatografií na silikagelu RP18. (Mobilní fáze: Gradient voda/acetonitril). Výtěžek: 19,18 g (67% teoretického množství (bezbarvá amorfní tuhá látka). Obsah vody 9,8 %

Elementární analýza: (spočteno na bezvodou látku)

Spočteno: C 28,80 H 4,25 F 23,47 N 7,12 S 2,33 Gd 11,48 Na 1,67

Nalezeno: C 28,67 H 4,34 F 23,38 N 7,03 S 2,27 Gd 11,37 Na

1,74

Příklad 54

a) Lysin-[1-(4-perfluoroktylsulfonyl-piperazin]-amid g (24,08 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 52c) bylo rozpuštěno ve 300 ml ethanolu a bylo přidáno 4 g palladiového katalyzátoru (10% Pd/C). Směs byla hydrogenována při laboratorní teplotě. Katalyzátor byl odfiltrován, filtrát • · · ·

213

byl odpařen do sucha ve vakuu. Výtěžek: 16,77 g (kvantitativně) bezbarvé tuhé látky.

Elementární analýza :

Spočteno: C 31,04 H 3,04 F 46,38 N 8,04 S 4,60

Nalezeno: C 30,97 H 3,15 F 46,31 N 7,98 S 4,51

b) 2,6-N,N'-Bis[1,4,7-tris(karboxylatomethyl)-1,4,7,10tetraazacyklododekan-10-(pentanoy1-3-aza-4-oxo-5-methyl-5yl)]-lysin-[1-(4-perfluoroktylsulfonylpiperazin]-amid, Gdkomplex (kovový komplex XVI) g (14,36 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 54a), 3,34 g (29 mmol) N-hydroxysukcinimidu, 2,54 g (mmol) chloridu lithného a 18,26 g (29 mmol) 1,4,7-tris(karboxylato-methyl)10-(3-aza-4-oxo-5-methyl-5-yl-)-1,4,7,10-tetraazacyklododekan-Gd-komplex bylo za slabého zahřátí rozpuštěno ve 200 ml dimethylsulfoxidu. Při teplotě 10 °C bylo přidáno 12,38 g (60 mmol) N,N-dicyklohexylkarbodiimidu a směs byla poté míchána přes noc při laboratorní teplotě. Směs byla nalita do 3000 ml acetonu a byla míchána 10 minut. Vyloučená sraženina byla odfiltrována a byla čištěna chromatografií na silikagelu (silikagel RP-18, Mobilní fáze: Gradient voda/ ethanol/acetonitril). Výtěžek :19,02 g (69% teoretického množství) bezbarvé tuhé látky.

2o Obsah vody : 11,3 %

Elementární analýza: (spočteno na bezvodou látku)

Spočteno: C 35,03 H 4,04 F 16,82 N 10,21 S 1,67 Gd 16,38 Nalezeno: C 34,96 H 4,13 F 16,74 N 10,16 S 1,61 Gd 16,33

Příklad 55

a) 2-[4-(3-Oxapropionová kyselina-ethylester)]-fenyloctová kyselina-methýlester

214

Ke 200 g (1,204 mol) methylesteru 4-hydroxyfenyloctové kyseliny, 212 g (2 mol) uhličitanu sodného ve 2000 ml acetonu bylo přidáno 233,8 g (1,4 mol) ethylesteru 2-bromoctové kyseliny a směs byla zahřívána 5 hodin k varu. Tuhá látka byla odfiltrována a zbytek byl odpařen do sucha za sníženého tlaku. Zbytek byl chromatografován na silikagelu (mobilní fáze: n-hexan/ethylacetát = 15:1).

Výtěžek : 288,5 g (95 % teoretického množství) bezbarvého oleje.

Elementární analýza:

Spočteno: C 61,90 H 6,39

Nalezeno: C 61,75 H 6,51

b) 2-[4-(3-Oxapropionová kyselina-ethylester)]-fenyl-2bromoctová kyselina-ethylester

Ke 285 g (1,13 mol) titulní sloučeniny z Příkladu 55a), rozpuštěné ve 2000 ml tetrachlormethanu bylo přidáno 201 g (1,13 mol) N-bromsukcinimidu a 100 mg dibenzylperoxidu a směs byla zahřívána 8 hodin za refluxu. Reakční směs byla ochlazena v ledové lázni, vyloučený sukcinimid byl odfiltrován a filtrát byl odpařen do sucha za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatografii na silikagelu (Mobilní fáze: n-hexan/aceton =15:1).

Výtěžek : 359,2 g (96% teoretického množství) bezbarvého tuhého oleje.

Elementární analýza :

Spočteno: C 47,28 H 4,57 Br 24,16 Nalezeno: C 47,19 H 4,71 Br 24,05

c) 2-[4-(3-0xapropionová kyselina-ethylester)]-fenyl-2-[1(1,4,7,10-tetraazacyklododekan-7-yl]-octová kyselinamethylester • ··

215 • · *··· ·· ·* ·· · · · ·

Κ 603 g (3,5 mol) 1,4,7,10-tetraazacyklododekanu v 6000 ml chloroformu bylo přidáno 350 g (1,057 mol) titulní sloučeniny z Příkladu 55b) a směs byla míchána přes noc při laboratorní teplotě. Směs byla extrahována třikrát s 3000 ml vody, organická fáze byla vysušena nad síranem hořečnatým a byla odpařena ve vakuu do sucha. Zbytek byl použit v následující kroku (reakce 3d) bez dalšího čištění.

Výtěžek: 448 g (kvantitativně) tuhého oleje.

Elementární analýza: :

Spočteno: C 59,70 H 8,11 N 13,26

Nalezeno: C 59,58 H 8,20 N 13,18

d) 2-[ 4-(3-Oxapropionová kyselina)]-fenyl-2-[1,4,7-tris(karboxymethyl)-1,4,7,10-tetraaza-cyklododekan-10-yl]-octová kyselina

445 g (1,053 mol) titulní sloučeniny z Příkladu 55c) a 496 g (5,27 mol) chloroctové kyseliny bylo rozpuštěno ve 4000 ml vody. pH roztoku bylo nastaveno na hodnotu 10 pomocí 30% vodného roztoku hydroxidu sodného. Směs byla zahřáta na 70 °C a byla míchána 8 hodin. Poté bylo pH nastaveno na hodnotu 13 a směs byla míchána 30 minut za refluxu. Roztok byl ochlazen v ledové lázni a pomocí přídavku koncentrované vodné kyseliny chlorovodíkové bylo pH nastaveno na hodnotu 1. Reakční směs byla odpařena do sucha a zbytek byl rozpuštěn ve 4000 ml methanolu a byl míchán 1 hodinu při laboratorní teplotě. Sůl byla odfiltrována a filtrát byl odpařen do sucha za sníženého tlaku a zbytek byl čištěn chromatografií na silikagelu RP-18 (mobilní fáze: Gradient voda/ethanol/ acetonitril). Výtěžek: 403 g (69 % teoretického množství) bezbarvé tuhé látky. Obsah vody: 10,2 %

Elementární analýza:: (spočteno na bezvodou látku)

Spočteno: C 51,98 H 6,18 N 10,10 • · · ·

216

Nalezeno: C 51,80 H 6,31 N 10,01

e) 2-[4-(3-Oxapropionová kyselina)]-fenyl-2-[1,4,7tris(karboxymethyl)-1,4,7,10-tetraaza-cyklododekan-10-yl]octová kyselina, Gd-komplex

Ke 400 g (721,3 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 55d) ve 2000 ml vody bylo přidáno 130,73 g (360,65 mmol) komplexu gadolinia a směs byla míchána 5 hodin při teplotě 80 °C.

Roztok byl zfiltrován a filtrát byl lyofilizován.

Výtěžek: 511 g (kvantitativně) amorfní tuhá látka.

Obsah vody: 11,0 %

Elementární analýza: (spočteno na bezvodou látku)

Spočteno: C 40,67 H 4,41 Gd 22,19 N 7,98

Nalezeno: C 40,51 H 4,52 Gd 22,05 N 8,03

f) 2, 6-N,Ν'-Bis{2-[4-(3-oxapropionyl)-fenyl]-2- [1,4,7tris(karboxylatomethyl)-1,4,7,10-tetraazacyklododekan-10-yl]octová kyselina)-lysin-[4-perfluor-oktylsulfonyl)piperazin] amid, Digadolinitý-komplex, disodná sůl g (14,36 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 54a) 3,45 g (30 mmol) N-hydroxysukcinimidu, 2,54 g (60 mmol) chloridu lithného a 21,26 g (30 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 4Be bylo za slabého zahřátí rozpuštěno ve 250 ml dimethylsulfoxidu. Při teplotě 10 °C bylo přidáno 16,51 g (80 mmol) N,N-dicyklohexylkarbodiimidu a směs byla poté míchána přes noc při laboratorní teplotě. Roztok byl nalit do 2000 ml acetonu a byl míchán 10 minut. Vyloučená tuhá látka byla odfiltrována a byla čištěna chromatografií na silikagelu (silikagel RP-18, Mobilní fáze: Gradient voda/ethanol/ acetonitril). Látka byla rozpuštěna v malém množství vody, pH bylo nastaveno na hodnotu 7,4 pomocí hydroxidu sodného a směs byla lyofiizována.

• tititi • ti • tititi *

217 • ti

Výtěžek: 21,02 g (69% teoretického množství) bezbarvé tuhé látky. Obsah vody: 11,2 %

Elementární analýza: (spočteno na bezvodou látku)

Spočteno: C 37,36 H 3,66 F 15,22 Gd 14,82 N 7,92 Na 2,17 S 1,51

Nalezeno: C 37,28 H 3,74 F 15,14 Gd 14,75 N 8,03 Na 2,23 S 1,46

Příklad 56

a) ' 2,6-N,N'-Bis[6-karbonylmethyl-3,9-bis{terč. butyloxykarbonylmethyl)-3,6,9-triazaundekan-l,11-dikarboxylová kyselinabis(terč. butylester)]-lysin-[1-(4-perfluoroktylsulfonyl) piperazin]-amid

K roztoku 10 g (14,36 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 54a), 18,53 g (30 mmol) bis(terč. butylesteru) kyseliny 3,9-bis(terč. butyloxykarbo-nylmethyl)-6karboxymethyl-3,6,9-triazaundekan-l,11-dikarboxylové a 3,45 g (30 mol) N-hydroxysukcinimidu rozpuštěných ve 150 ml dimethylformamidu bylo při teplotě 0 °C přidáno 10,32 g (50 mmol) N,N-dicyklohexylkarbodiimidu. Směs byla míchána 3 hodiny při teplotě 0 °C, a poté byla míchána přes noc při laboratorní teplotě. Vyloučená sraženina močoviny byla odfiltrována, filtrát byl odpařen do sucha za sníženého tlaku a byl chromatografován na silikagelu (Mobilní fáze: dichlormethan/ethanol = 20:1)

Výtěžek: 19,60 g (72 % teoretického množství) tuhého oleje. Elementární analýza

Spočteno: C 49,41 H 6,75 F 17,03 N 7,39 S 1,69

Nalezeno: C 49,35 H 6,82 F 16,92 N 7,32 S 1,62

b) 2,6-N,N-Bis[6-karbonylmethyl-3,9-bis(karboxylatomethyl)3,6,9-triazaundekandikarboxylová kyselina-l-karboxy-ll-karbo*·

218 xylato-lysin-[1-(4-perfluoroktylsulfonyl}-piperazin]-amid, Gd-komplex, sodná sůl] g (7,91 mol) titulní sloučeniny z Příkladu 56a) bylo rozpuštěno v 50 ml chloroformu a bylo přidáno 200 ml trifluoroctové kyseliny. Směs byla míchána 10 minut při laboratorní teplotě. Poté byla odpařena ve vakuu do sucha a zbytek byl rozpuštěn ve 150 ml vody. Bylo přidáno 2,87g (7,91 mmol) komplexu gadolinia a směs byla míchána 5 hodin při teplotě 80 °C. Reakční směs byla ponechána ochladit na laboratorní teplotu a pH bylo upraveno na hodnotu 7,4 pomocí 2N hydroxidu sodného. Roztok byl odpařen do sucha za sníženého tlaku a zbytek byl čištěn chromatografii na silikagelu RP-18 (mobilní fáze: Gradient voda/ethanol/ acetonítril).

Výtěžek: 8,11 g (57% teoretického množství) bezbarvá amorfní tuhá látka. Obsah vody: 9,6%

Elementární analýza: (spočteno na bezvodou látku)

Spočteno: C 30,70 H 3,08 Gd 17,48 N 7,78 Na 2,56 S 1,78 Nalezeno: C 30,58 H 3,19 Gd 17,42 N 7,71 Na 2,68 S 1,72

Příklad 57

a) 6-N-Benzyloxykarbonyl-2-N-[6-karboxylmethyl-3,9-bis(terč. butyloxykarbonylmethyl)-3,6,9-triazaundekan-l,11-dikarboxylová kyselina-bis(terč.butylester)]-lysin-[1(4-perfluoroktylsulfonyl) -piperazin]-amid

K roztoku 20 g (24,08 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 52c), 14,88 g (24,08 mmol) 3,9-bis(terč.

butyloxykarbonylmethyl)-6-karboxymethyl-3, 6, 9-triazaundekan1,11-dikarboxylová kyselina-bis(terč.butylesteru) a 2,88 g (25 mol) N-hydroxysukcinimidu rozpuštěných ve 100 ml dimethylformamidu bylo při teplotě 0 °C přidáno 8,25 g 40 mol) N,N-dicyklohexylkarbodiimidu. Směs byla míchána 3 hodin • · • · * ·

219 • · · · · · · • · ···· · · ·· při teplotě 0 °C, a poté byla míchána přes noc při laboratorní teplotě. Vyloučená sraženina byla odfiltrována a filtrát byl odpařen do sucha za sníženého tlaku a zbytek byl

chromatografovánam na silikagelu	(Mobilní	fáze:	dichlormethan
/ethanol = 20:1). Výtěžek:	27,21 g	(79%	teoretického
množství) tuhého oleje.
Elementární analýza :
Spočteno: C 47,03 H 5,64 F 22,58	N 6,85 S	2,24
Nalezeno: C 46,94 H 5,58 F 22,65	N 6,84 S	2,31

b) 2-N- [KarbonyImethy1-3,9-bis(terč.butyloxykarbonylmethyl)3,6,9-triazaundekan-l,11-dikarboxylová kyselina-bis(terč.

butylester)]-lysin-[1-(4-perlfluoroktylsulfonyl)-piperazin]amid g (17,48 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 57a) bylo rozpuštěno v 350 ml ethanolu a bylo přidáno 5 g palladiového katalyzátoru (10% Pd/C). Směs byla hydrogenována při laboratorní teplotě. Katalyzátor byl odfiltrován a filtrát byl odpařen ve vakuu do sucha.

Výtěžek: 22,66 g (kvantitativně) bezbarvé tuhé látky. Elementární analýza :

Spočteno: C 44,48 H 5,75 F 24,92 N 7,56 S 2,47

Nalezeno: C 44,59 H 5,81 F 25,03 N 7,46 S 2,52

c) 6-N-[1,4,7-Tris(karboxylatomethyl)-1,4,7,10-tetraazacyklododekan-10-(pentanoyl-3-aza-4-oxo-5-methyl-5-yl)]-2-N-[6karbonylmethyl-3,9-bis (terc.butyloxykarbonytmethyl)-3,6,9triazaundekan-1,11-dikarboxylová kyselina bis (terč.butylester) ]-lysin-[1- (4-perfluoroktylsulfonyl)-piperazin]-amid,

Gd - komplex g (15,43 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 57b), 1,78 g (15,43 mmol) N-hydroxysukcininmidu, 1,48 g (35 mmol) • ·

220 chloridu lithného a 9,72 g (15,43 mmol) 1,4,7-Tris(karboxylatomethyl) -10-(3-aza-4oxo-5methyl-5-yl)-pentanová kyselina1,4,7,10-tetraazacyklododekan, Gd-komplex bylo za slabého zahřívání rozpuštěno ve 150 ml dimethylsulfoxidu. Při teplotě 10° C bylo přidáno 5,16 g (25 mmol) N,N-dicyklohexylkarbodiimidu a směs byla poté míchána přes noc při laboratorní teplotě. Roztok byl nalit do 2500 ml acetonu a byla míchána 10 minut. Vyloučená tuhá látka byla odfiltrována a byla čištěna chromatografií na silikagelu (silikagel RP-18, mobilní fáze: Gradient voda/ethanol/acetonitril).

Výtěžek: 22,94 g (78 % teoretického množství) bezbarvé tuhé látky. Obsah vody: 7,9 %

Elementární analýza: (spočteno na bezvodou látku)

Spočteno: C 42,22 H 5,29 F 16,95 Gd 8,25 N 8,82 S 1,68 Nalezeno: C 42,15 H 5,41 F 16,87 Gd 8,13 N 8,70 S 1,60

d) 6-N-[1,4,7-Tris(karboxylatomethyl)-1,4,7,10-tetraazacyklododekan-10-(3-aza-4-oxo-5-methyl-5-yl-pentanoyl)]-2-N-[6karbonylmethyl-3,9-bis(karboxylatomethyl) 3,6,9-triazaundekan dikarboxylová kyselina-karboxy-ll-karboxylato-z]-lysin-[1-(4perfluoroktylsulfonyl)-piperazin]-amid, digadolinium komplex, sodná sůl g (10,49 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 57c) bylo rozpuštěno ve 200 ml trifluoroctové kyseliny. Směs byla míchána 60 minut při laboratorní teplotě. Reakční směs byla odpařena do sucha za sníženého tlaku a zbytek byl rozpuštěn ve 150 ml vody. Bylo přidáno 1,90 g (5,25 mmol) komplexu gadolinia a směs byla míchána 5 hodin při teplotě 80 °C.

Reakce byla ponechána ochladit na laboratorní teplotu a pH bylo nastaveno na hodnotu 7,4 pomocí přídavku hydroxidu sodného. Roztok byl odpařen dosucha a byl čištěn

221 • ·

chromatografií na silikagelu RP-18. (Mobilní fáze : Gradient voda/ethanol/acetonitril)

Výtěžek: 11,89 g (61 % teoretického množství) bezbarvé amorfní tuhé látky. Obsah vody: 10,2 %

Elementární analýza: (spočteno na bezvodou látku)

Spočteno: C 32,97 H 3,47 F 17,39 Gd 16,93 N 9,05 Na 1,24 S 1, 73

Nalezeno: C 32,90 H 3,53 F 17,31 Gd 16,87 N 8,92 Na 1,33 S 1,67

Příklad 58

a) terč. butylester 5,6-bis(benzyloxy)-3-oxahexanové kyseliny

100 g (376,2 mmol) 1,2-di-O-benzyl-glycerin [připravený podle Chem. Phys. Lipids (1987), 43(2), 113-277] a 5 g tetrabutylammonium-hydrogensulfátu bylo rozpuštěno ve směsi složené ze 400 ml toluenu a 200 ml 50% vodného roztoku hydroxidu sodného. Při teplotě 0 °C bylo během 30 minut přikapáno 78g (400 mmol) terč. butylesteru 2-bromoctové kyseliny a směs byla míchána 3 hodiny při teplotě 0 °C. Organická fáze byla oddělena, sušena nad síranem hořečnatým odpařena do sucha za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatografií na silikagelu. (Mobilní fáze: n-hexan/ aceton=20:1) .

Výtěžek: 133,4 g (94 % teoretického množství) bezbarvého olej e.

Elementární analýza:

Spočteno: C 71,48 H 7,82

Nalezeno: C 71,61 H 7,92

b) 5,6-Bis(benzyloxy)-3-oxa-hexanová kyselina

130 g (336,4 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 58a) bylo rozpuštěno ve 200 ml dichlormethanu a při teplotě 0 °C

9999

9 99

222

bylo přidáno 100 ml trifluoroctové kyseliny. Směs byla míchána 4 hodiny při laboratorní teplotě a poté byla odpařena do sucha za sníženého tlaku. Zbytek byl krystalizován ze směsi pentan/diethylether.

Výtěžek: 102,2 g (92 % teoretického množství) voskovité tuhé látky.

Elementární analýza:

Spočteno: C 69,07 H 6,71

Nalezeno: C 69,19 H 6,82

c) 6-N-Benzyloxykarbony1-2-N-[1,4,7-tris(karboxylatomethyl)1,4,7,10-tetraazacyklo-dodekan-10-(pentanoyl-3-aza-4-oxo-5methyl-5-yl)]-lysin-[1-(4-perfluoroktylsulfonyl)-piperazin]amid, Gd-komplex g (60,20 m mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 52c) 6,93 g (60,20 mmol) N-hydroxysukcinimidu, 5,09 g (120 mmol) chloridu lithného a 37,91 g (60,20 mmol) 1,4,7-tris (karboxylatomethyl)-1,4,7,10-tetraazacyklododekan-10pentanoyl-3-aza-4-oxo-5-methyt-5-yl), Gd-komplex bylo za slabého zahřátí rozpuštěno ve 400 ml dimethylsulfoxidu. Při teplotě 10 °C bylo přidáno 20, 63 g (100 mmol) N,Ndicyklohexylkarbodiimidu a směs byla poté míchána přes noc při laboratorní teplotě. Roztok byl nalit do 3000 ml acetonu a směs byla míchána 10 minut. Vyloučená tuhá látka byla odfiltrována a byla čištěna pomocí chromatografie na silikagelu (silikagel RP-18, Mobilní fáze: Gradient voda/ ethanol/acetonitril) . Výtěžek: 75, 53 g (87 % teoretického množství) bezbarvé tuhé látky.

Obsah vody: 10,1 %

Elementární analýza: (spočteno na bezvodou látku)

Spočteno: C 37,48 H 3,84 F 22,39 Gd 10,90 N 8,74 S 2,22 Nalezeno: C 37,39 H 4,02 F 22,29 Gd 10,75 N 8,70 S 2,22 fcfc ···· ·« ·» • · · · · ·

223

d) 2-N-[1,4,7-Tris(karboxylatomethyl)-1,4,7,10-tetraazacyklododekan-10-(pentanoyl-3-aza-4-oxo-5-methyl-5-yl]-lysin-[l—(4— perfluoroktylsulfonyl)piperazin]-amid, Gd-komplex g (48,53 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 58c) bylo rozpuštěno ve směsi 500 ml vody/100 ml ethanolu a bylo přidáno 5 g palladiového katalyzátoru (10% Pd/C). Směs byla hydrogenována při laboratorní teplotě. Katalyzátor byl odfiltrován a filtrát byl odpařen do sucha.

Výtěžek: 63,5 g (kvantitativně) bezbarvé tuhé látky. Obsah vody : 9,8 %

Elementární analýza: (spočteno na bezvodou látku)

Spočteno: C 37,48 H 3,84 F 22,39 Gd 10,90 N 8,74 S 2,22 Nalezeno: C 37,39 H 4,03 F 22,31 Gd 10,78 N 8,65 S 2,20

e) 6-N-[5,6-Bis(benzyloxy)-3-oxahexanoyl]-2-N-[1,4,7-tris (karboxylatomethyl)-1,4,7,10-tetraazacyklododekan-10(pentanoyl-3-aza-4-oxo-5-methyl-5-yl)]-lysin-[1-(4-perfluoroktylsulfonyl) -piperazin]-amid, Gd-komplex g (7,64 mmoi) titulní sloučeniny z Příkladu 58d) ,

3,30 g (10 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 7b, 0,85 g (20 mmol) chloridu lithného a 1,15 g (10 mmol) Nhydroxysukcinimidu bylo za slabého zahřátí rozpuštěno v 50 ml dimethylsulfoxidu. Při teplotě 10 °C bylo přidáno 3,10 g (15 mmol) N,N'-dicyklohexylkarbodiimidu a směs byla míchána 8 hodin při laboratorní teplotě. Reakční roztok byl nalit do 2000 ml acetonu a vyloučená sraženina byla izolována filtrací. Titulní sloučenina byla čištěna chromatografii na silikagelu RP-18 (Mobilní fáze : Gradient voda/ethanol/ acetonitril).

Výtěžek: 11,14 g (90% teoretického množství) bezbarvé, amorfní tuhé látky. Obsah vody: 4,3 %.

4 994

4949

Elementární analýza: (spočteno na bezvodou sloučeninu) Spočteno: C 41,51 H 4,29 F 19,93 N 7,78 Gd 9,70 S 1,98 Nalezeno: C 41,45 H 4,38 F 19,84 N 7,70 Gd 9,58 S 1,90

f) 6-N-(5,6,-Dihydroxy-3-oxahexanoyl)-2-N-[1,4,7-tris karboxylatomethyl)-1,4,7,10-tetraazacyklododekan-10pentanoyl-3-aza-4-oxo-5-methyl-5-yl)]-lysin-[l—(4— perfluoroktylsulfonyl)-piperazin]-amid, Gd-komplex lOg (6,17 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 58e) bylo rozpuštěno ve 200 ml ethanolu a bylo přidáno 3 g palladiového katalyzátoru (10% Pd/C). Směs byla hydrogenována při laboratorní teplotě. Katalyzátor byl odfiltrován a zbytek byl odpařen dosucha za sníženého tlaku. Výtěžek: 8,89 g (kvantitativně) bezbarvé tuhé látky.

Obsah vody: 3,1 %

Elementární analýza: (spočteno na bezvodou látku)

Spočteno: C 35,03 H 3,99 F 22,42 Gd 10,92 N 8,75 S 2,23 Nalezeno: C 34,95 H 4,12 F 22,30 Gd 10,78 N 8,71 S 2,18

Příklad 59

a) 6-N-Benzyloxykarbonyl-2-N[-5,6-bis(benzyloxy)-3-oxahexanoyl]-lysin-[1-(4-perfluor-oktylsulfonyl)-piperazin]-amid

K roztoku 20 g {24,08 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 52c), 9,91 g (30 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 7b a 3,45 g (30 mmol) N-hydroxysukcinimidu, rozpuštěných ve 100 ml dimethylformamidu, bylo při teplotě 0 °C přidáno 9,28 g (45 mmol) N,N-dicyklohexylkarbodiimidu. Směs byla míchána 3 hodiny při teplotě 0 °C, a poté byla míchána přes noc při laboratorní teplotě. Vyloučená sraženina močoviny byla odfiltrována, filtrát byl odpařen do sucha a byl chromatografován na silikagelu (Mobilní fáze : Dichlormethan • fc fcfcfcfc ·« fcfc • fc fc fcfcfcfc ·· · • fc* fcfc fc · fc fc • fcfc fcfcfc fcfcfcfc fcfc · fcfc fcfcfcfc fcfc ·· • fc fcfcfcfc /ethanol = 20:1). Výtěžek:24, 50 g (89% teoretického množství) tuhého oleje.

Elementární analýza:

Spočteno: C 47,29 H 4,14 F 28,26 N 4,90 S 2,81.

Nalezeno: C 47,14 H 4,26 F 28,17 N 4,91 S 2,69

b) 2-N-(5,6-Dihydroxy-3-oxahexanoyl)-lysin-[1-(4-perfluoroktylsulfonyl) piperazin]-amid g (17,5 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 52d) bylo rozpuštěno ve 300 ml ethanolu a bylo přidáno 5 g paladiového katalyzátoru (10% Pd/C). Reakční směs byla hydrogenována při laboratorní teplotě. Katalyzátor byl odfiltrován, filtrát byl odpařen ve vakuu do sucha. Výtěžek: 17,65 g (kvantitativní) bezbarvé tuhé látky.

Elementární analýza:

Spočteno: C 44,05 H 4,10 F 32,02 N 5,55 S 3,18

Nalezeno: C 43,96 H 4,21 F 31,94 N 5,48 S 3,24

c) 6-N-[1,4,7-tris(karboxylatomethyl)-1,4,7,10-tetraazacyklododekan-10-(pentanoyl-3-aza-4-oxo-5-methyl-5-yl)]-lysin-[1(4-perfluoroktylsulfonyl)-piperazin]-amid , Gd-komplex g (14,87 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 59b) 1,73 g (15 mmol) N-hydroxysukcinimidu, 1,27 g (30 mmol) chloridu lithného a 9,48 g (15 mmol) 1,4,7-tris (karboxylatomethyl)-10-(3-aza-4-oxo-5-methyl-5-yl)-pentanová kyselina-1,4,7,10-tetraazacyklododekan, Gd-komplex bylo za slabého zahřátí rozpuštěno ve 100 ml dimethylsulfoxidu. Při teplotě 10 °C bylo přidáno 5,16 g (25 mol) N,Ndicyklohexylkarbodiimidu a směs byla poté míchána přes noc při laboratorní teplotě. Roztok byl nalit do 1500 ml acetonu a směs byla míchána 10 minut. Vyloučená tuhá látka byla odfiltrována a byla čištěna chromatografií na silikagelu • · · ·

226 (silikagel RP-18, Mobilní fáze: Gradient voda/ethanol/ acetonitril).

Výtěžek: 19,28 g (80 % teoretického množství) bezbarvé tuhé látky. Obsah vody: 10,3%.

Elementární analýza: (spočteno na bezvodou látku)

Spočteno: C 41,51 H 4,29 F 19,93 Gd 9,70 N 7,78 S 1,98 Nalezeno: C 41,37 H 4,40 F 19,88 Gd 9,58 N 7,67 S 1,85

Příklad 60

a) 6-N-Benzyloxykarbonyl-2-N-[2,6-N,N'-bis(benzyloxykarbonyl) -lysyl]-lysin-[1(4-perfluoroktylsulfonyl)-piperazin]-amid g (24,08 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 52c) a 2,53 g (25 mmol) triehylaminu bylo rozpuštěno ve 200 ml tetrahydrofuranu (THF) a bylo přidáno 14,46 g (27 mmol) diN,N'-Z-Lysinparanitrofenolesteru. Směs byla míchána 5 hodin při teplotě 50 °C. Směs byla odpařena do sucha a byla chromatografována na silikagelu. Mobilní fáze: dichlormethan /methanol = 20:1).

Výtěžek: 28,07 g (95% teoretického množství) bezbarvé tuhé látky.

Elementární analýza:

Spočteno: C 46, 99 H 4,19 F 26, 32 N 6,85 S 2,61

Nalezeno: C 47,08 H 4,32 F 26,21 N 6,75 S 2,54

b) 2-N-(Lysyl)-lysin-[1-(4-perfluoroktylsulfonyl)piperazin]-amid, Trihydrobromid

K 25 g (20,37 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 60a) bylo přidáno 100 ml bromovodíku v kyselině octové (48 %) a směs byla míchána 2 hodiny při teplotě 40 °C. Směs byla ochlazena na teplotu 0 °C, bylo přikapáno 1500 ml diethyletheru a vyloučená tuhá látka byla odfiltrována. Po vysušení ve vakuu (60 °C) bylo získáno 21,52 g (99%

227 » ·· teoretického množství) světle žlutě zbarvené, krystalické tuhé látky.

Elementární analýza:

Spočteno: C 27,01 H 3,40 Br. 22,46 F 30,26 N 7,87 S 3,00 Nalezeno: C 26,92 H 3,53 Br. 22,15 F 30,14 N 7,69 S 2,87

c) 6-N-[1,4,7-Tris(Karboxylatomethyl)-1,4,7,10-tetraazacyklododekan-10-(pentanoyl-3-aza-4-oxo-5-methyl-5-yl)]-2-N-]-2,6N,N'-bis[1,4,7-tris(karboxylatomethyl)-1,4,7,10-tetraazacyk'lododekan-10- (pentanoyl-3-aza-4-oxo-5-methyl-5yl) ] -lysyl] lysin-[1-(4-perfluoroktylsulfonyl)-piperazin]-amid, Trigadolinium-komplex

31,49 g (50 mmol) 1,4,7-Tris(karboxylatomethyl)-10-(3aza-4-oxo-5-methyl-)-5-yl)-pentanová kyselina, Gd-komplex 6,91 g (60 mmol) N-hydroxysukcinimidu a 4,24 g (100 mmol) chloridu lithného bylo rozpuštěno ve 350 ml dimethylsulfoxidu za slabého zahřátí. Při teplotě 10 °C bylo přidáno 16,51 g (80 mmol) N,N- dicyklohexylkarbodiimidu a směs byla míchána 5 hodin při teplotě 10 °C. K této směsi bylo přidáno 10 g (9,37 mmol) titulní sloučeniny Příklad 60b) a 3,03 g (30 mmol) triehylaminu a směs byla míchána 12 hodin při teplotě 60 °C. Směs byla nechána ochladit na laboratorní teplotu a směs byla vylita do 3000 ml acetonu. Vyloučená sraženina byla odfiltrována a byla čištěna chromatografií na silikagelu RP18 (Mobilní fáze: Gradient voda/ethanol/acetonitril).

Výtěžek: 16,7 g (67% teoretického množství) bezbarvé tuhé látky. Obsah vody: 7,9 %

Elementární analýza: (spočteno na bezvodou látku)

Spočteno: C 36,58 H 4,43 F 12,14 Gd 17,74 N 11,06 S 1,14 Nalezeno: C 36,47 H 4,54 F 12,03 Gd 17,65 N 10,95 S 1,21

Příklad 61 • · • · « · • * • · · ·

228

a) 1,7-Bis(benzyloxykarbonyl)-4-(3,6,9,12,15-pentaoxahexadekanoyl)-1,4,7,10-tetraazacyklododekan

K 18,13 g (68,1 mmol) 3,6,9,12,15-pentaoxahexadekanové kyseliny a 30 g (68,1 mmol) 1,7 di-Z-Cyklenu připraveného podle Z. Kovacs a A. D. Sherry, J. Chem. Soc. Chem. Commun. (1995), 2, 185, ve 300 ml tetrahydrofuranu, bylo při teplotě °C přidáno 24,73 g (100 mmol) EEDQ (ethylester 2-ethoxy1,2-dihydrochinolin-l-karboxylové kyseliny) a směs byla míchána přes noc při laboratorní teplotě. Reakční směs byla odpařena do sucha za sníženého tlaku a zbytek byl chromatografován na silikagelu (Mobilní fáze: dichlormethan/ methanol = 20:1) Výtěžek: 19,13 g (42% teoretického množství) bezbarvé tuhé látky.

Elementární analýza:

Spočteno: C 61,03 H 7,61 N 8,13

Nalezeno: C 60,92 H 7,75 N 8,04

b) 1,7-Bis(benzyloxykarbonyl)-4-(3,6,9,12,15-pentaoxahexadekanoyl)-10-(2H,2H,4H,5H,5H-3-oxa-perfluortridekanoyl)1,4,7,10-tetraazacyklododekan

K 18 g (26,91 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 61 a) a 14,05 g (26,91 mmol) 2H,2H,4H,4H,5H,5H-3-Oxa-perfluortridekanové kyseliny, připravené podle DE 19603033, ve 300 ml tetrahydrofuranu, bylo při teplotě 0 °C přidáno 12,36 g (50 mmol) EEDQ (ethylesteru 2-ethoxy-l,2-dihydrochinolin-lkarboxylové kyseliny) a směs byla míchána přes noc při laboratorní teplotě. Reakce byla odpařena do sucha za sníženého tlaku a zbytek byl chromatografován na silikagelu (Mobilní fáze : dichlormethan/methanol = 20:1). Výtěžek:

21,51 g (67% teoretického množství) bezbarvé tuhé látky. Elementární analýza:

Spočteno: C 47,32 H 4,82 F 27,07 N 4,70 • · • · · · • ·

229

Nalezeno: C 47,26 H 5,01 F 26,94 N 4,59

c) 1-3,6,9,12,15-Pentaoxahexadekanoyl)-7-(2H,2H,4H,4H,5H,5H3-oxaperfluortridekanoyl)-1,4,7,10-tetraazacyklododekan g (16,77 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 52d) bylo rozpuštěno ve 200 ml ethanolu a bylo přidáno 2,5 g paladiového katalyzátoru (10% Pd/C). Reakční směs byla hydrogenována při laboratorní teplotě. Katalyzátor byl odfiltrován a filtrát byl odpařen do sucha za sníženého tlaku.

Výtěžek:15,5 g (kvantitativně) bezbarvé tuhé látky.

Elementární analýza :

Spočteno: C 40,27 H 4,90 F 34,93 N 6,06

Nalezeno: C 40,15 H 4,99 F 34,87 N 5,94

d) 1,7-Bis(1,4,7-tris(karboxylatomethyl)-1,4,7,10-tetraazacyklododekan-10-(pentanoyl-3-aza-4-oxo-5-methyl-5-yl)]-4(3,6,9,12,15-pentaoxahexadekanoyl)-10-(2H,2H,4H,4H,5H,5H,-3oxaperfluortridekanoyl)-1,4,7,10-tetraazacyklododekan, Gdkomplex g (16,22 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 61 c) , 4,60 g (40 mmol) N-hydroxysukcinimidu, 3,39 g (80 mmol) chloridu lithného a 25,19 g (40 mmol) 1,4,7-tris(karboxylatomethyl) -10- (3-aza-4-oxo-5-methyl-5-yl) pentanové kyseliny, Gdkomplex bylo za slabého zahřátí rozpuštěno ve 300 ml dimethylsulfoxidu. Při teplotě 10 °C bylo přidáno 24,73 g (100 mmol) EEDQ a směs byla míchána přes noc při laboratorní teplotě. Roztok byl nalit do 3000 ml acetonu a směs byla míchána 10 minut. Vyloučená sraženina byla odfiltrována a poté byla čištěna chromatografií na silikagelu RP-18). Mobilní fáze: Gradient voda/ethanol/acetonitril).

230 • · · · · a ··«« • · · ·· a··· ·· φφ

Výtěžek: 19.86 g (57 % teoretického množství) bezbarvé tuhé látky. Obsah vody: 11,3 %

Elementární analýza: (spočteno na bezvodou látku)

Spočteno: C 38,58 H 4,74 F 15,04 Gd 14,64 N 9,13

Nalezeno: C 38,47 H 4,91 F 14,95 Gd 14,57 N 9,04

Příklad 62

a) 1-[(4-Perfluoroktysulfonyl)-piperazin]-amid 3,5-dinitrobenzoové kyseliny

- Ke 20 g (35,2 mmol) a 8,1 g (80 mmol) triehylaminu, rozpuštěných ve 200 ml dichlormethanu byl při teplotě 0 °C přikapán roztok 8,76 g (38 mmol) 3,5-dinitrobenzoylchloridu v 55 ml dichlormethanu a směs byla míchána 3 hodiny při teplotě 0 °C. Bylo přidáno 200 ml 5% vodné kyseliny chlorovodíkové a směs byla míchána 5 minut při laboratorní teplotě. Organická fáze byla oddělena, vysušena nad síranem hořečnatým a odpařena do sucha ve vakuu. Zbytek byl chromatografován na silikagelu (Mobilní fáze: dichlormethan/aceton =15:1)

Výtěžek: 24,96 g (93% teoretického množství) bezbarvé tuhé látky.

Elementární analýza:

Spočteno: C 29,35 H 1,45 F 42,37 N 7,35 S 4,21

Nalezeno: C 29,28 H 1,61 F 42,15 N 7,25 S 4,15

b) [1-(4-perfluoroktylsulfonyl)-piperazin]-amid 3,5-diaminobenzoové kyseliny g (26,23 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 62a) bylo rozpuštěno ve 400 ml ethanolu a bylo přidáno 6 g paladiového katalyzátoru (10% Pd/C). Směs byla hydrogenována při laboratorní teplotě. Katalyzátor byl odfiltrován a filtrát byl odpařen do sucha za sníženého tlaku.

Výtěžek: 18,43 g (kvantitativně) krémově zbarvená tuhá látka.

231 í ··· ··· « ·« ·· · ·· ···· ··

Elementární analýza:

Spočteno: C 32,49 H 2,15 F 45,98 N 7,98 S 4,57

Nalezeno: C 32,29 H 2,35 F 45,69 N 7,81 S 4,40

c) [1-(4-perfluoroktylsulfonyl)-piperazin]-amid kyseliny 3,5-N,N'-Bis[1,4,7-tris(karboxylatomethyl)-1,4,7,10-tetraazacyklododekan-10-(pentanoyl-3-aza-4-oxo-5-methyl-5-yl-)]benzoové, Gd-komplex g (14,24 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 62b), 3,45 g (30 mmol) N-hydroxysukcinimidu, 2,54 g (60 mol) chloridu lithného a 18,89 g (30 mmol) 1,4,7-tris(karboxylatomethyl) -10-(3-aza-4-oxo-5-methyl-5-yl)-pentanová kyselina, Gd-komplex bylo za slabého zahřátí rozpuštěno ve 200 ml dimethylsulfoxidu. Při teplotě 10 °C bylo přidáno 10,32 g (50 mmol) N,N-dicyklohexylkarbodiimidu a směs byla poté míchána přes noc při laboratorní teplotě. Roztok byl nalit do 2000 ml acetonu a směs byla míchána 10 minut. Vyloučená tuhá látka byla odfiltrována s poté chromatografována na silikagelu (silikagel RP-18, Mobilní fáze: Gradient voda/ethanol/ acetonitril). Výtěžek: 19,74 g (72% teoretického množství) bezbarvé tuhé látky.

Obsah vody: 11,8%

Elementární analýza: (spočteno na bezvodou látku)

Spočteno: C 35,55 H 3,72 F 16,77 Gd 16,33 N 10,18 S 1,67 Nalezeno: C 35,48 H 3,84 F i6,58 Gd 16,24 N 10,07 S 1,58

Příklad 63

25,0 g (53,8 mmol) 1H,1H,2H,2H-perfluoro-l-dekanolu [komerčně dostupného od firmy Lancaster] bylo rozpuštěno ve 250 ml absolutního toluenu a směs byla míchána při laboratorní teplotě s katalytickým množstvím (cca 0,75 g) tetra-n-butylammonium-hydrogensulfátu. Poté bylo přidáno při

232 teplotě 0 °C celkem 7,55 g (134,6 mmol; 2,5 ekvivalentu spočteno na použitou alkoholovou složku) jemně práškovaného hydroxidu draselného, následované přídavkem 15,73 g (80,7 mmol; 1,5 ekvivalentu spočteno na použitou alkoholovou složku) terc.-butylesteru kyseliny 2-bromoctové a směs byla míchána ještě 2 hodiny při teplotě 0 °C. Takto získaný reakční roztok byl míchán 12 h při laboratorní teplotě a kvůli zpracování bylo přidáno celkem 500 ml ethylesteru kyseliny octové a 250 ml vody. Organická fáze byla oddělena a byla dvakrát promyta s vodou. Po vysušení organické fáze nad síranem sodným bylo rozpouštědlo odpařeno do sucha za sníženého tlaku. Získaný olejovitý zbytek byl čištěn chromatografíi na silikagelu s využitím směsi ethylacetát/ hexan (1:10) jako eluentu. Výtěžek: 26,3 g (84,6% teoretického množství) výše uvedené titulní sloučeniny ve formě bezbarvého a silně viskózního oleje.

Elementární analýza:

Spočteno: C 33,23 H 2,61 F 55,85

Nalezeno: C 33,29 H 2,61 F 55,90

b) 3-Oxa-2H,2H,4H,4H,5H,5H-perfluortridekankarboxylová kyselina

20,0 g (34,58 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 63a) bylo suspendováno ve 200 ml směsi složené z methanol a 0,5 molárního roztoku hydroxidu sodného v poměru 2:1 zamíchání při laboratorní teplotě a směs byla zahřáta na teplotu 60 °C. Směs byla míchána 12 h při teplotě 60 °C a čirý reakční roztok byl zpracován neutralizací přídavkem kationického iontoměniče Amberlite® IR 120 (H⁺-forma), odfiltrováním iontoměniče a odpařením získaného methanol-vodného filtrátu do sucha za sníženého tlaku. Získaný amorfní zbytek byl • φ

233 čištěn chromatografií na silikagelu s využitím směsi ethylacetát/n-hexan (1:3) jako eluentu.

Výtěžek: 16,0 g (88,6% teoretického množství) výše uvedené titulní sloučeniny ve formě silně viskózního oleje. Elementární analýza:

Spočteno: C 27,60 H 1,35 F 61,85

Nalezeno: C 27,58 H 1,36 F 61,90

c) 1,7-Bis{[1,4,7-tris(karboxylatomethyl)-10-(3-aza-4-oxo-5methyl-5-yl-pentanoyl)]-1,4,7,10-tetraazacyklododekan}diethylentriamin, Digadolinium komplex

2,48 g [(3,94 mmol); 2,05 molárního ekvivalentu spočteno na použitý diethylentriamin] Gd-komplexu 10-(4-karboxy-lmethyl-2-oxo-3-azabutyl)-1,4,7,10-tetraazacyklododekan-l, 4,7trioctové kyseliny popsané v patentové přihlášce DE 197 28 954 Cl pod Příkladem 31 h) a 167 mg bezvodého chloridu lithného (3,94 mmol) bylo při teplotě 40 °C rozpuštěno ve 40 ml absolutního dimethylsulfoxidu a za míchání bylo při této teplotě přidáno celkem 453 mg (3,94 mmol) Nhydroxysukcinimidu. Po ochlazení na laboratorní teplotu byl reakční roztok nechán reagovat s 814 mg (3, 946 mmol) N,Ν'dicyklohexylkarbodiimidu a směs byla míchána 2 hodiny při laboratorní teplotě. Z9skaná suspenze aktivného esteru byla poté nechána reagovat se 198,3 mg (1/92 mmol) absolutního hodin při zpracována diethytentriaminu rozpuštěného v 5 ml dimethylsulfoxidu a směs byla míchána 12 laboratorní teplotě. Získaná suspenze byla s přebytkem acetonu až do vysrážení veškeré zmíněné titulní sloučeniny, sraženina byla odfiltrována, vysušena, rozpuštěna ve vodě, nerozpuštěná dicyklohexylmočovina byla odfiltrována a filtrát byl zbaven solí a vyčištěn od nízkomolekulárního podílu na ultrafiltrační membráně AMICON® YM-3 (mezní limit:

• · • ti ti · ti ti

234

3000 Da) . Zbytek byl lyofilizován. Výtěžek: 1,85 g (72,7 % teoretického množství) ve formě bezbarvého lyofilizátu. Obsah vody (Karl-Fischer): 3.89 % .

Elementární analýza (spočteno na bezvodou látku):

Spočteno: C 38,03 H 5,24 N 13,73 Gd 23,71

Nalezeno: C 37,98 H 5,20 N 13,69 Gd 23,78

d) 1,7-Bis{[1,4,7-tris(karboxylatomethyl)-10-(3-aza-4-oxo-5methyl-5-yl-pentanoyl)]-1,4,7,10-tetraazacyklododekan)-4-(3oxa-2H,2H,4H,4H,5H,5H-perfluortridekanoyl)-diethylentriamin, Digadolinium-komplex

K roztoku 3,23 g (2,44 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 63c), ve směsi složené ze 30 ml dimethylsulfoxidu a 3 ml tetrahydrofuranu, bylo při teplotě 50 °C a pod dusíkovou atmosférou přkapáno 1,27 g (2,44 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 63b), rozpuštěné ve směsi 15 ml tetrahydrofuranu a 15 ml dimethylsulfoxidu. Poté bylo při teplotě 0 °C přidáno po částech celkem 1,80 g (3,66 mmol) EEDQ [2-ethoxy-lethoxykarbonyl-l , 2-dihydrochinolin] a směs byla míchána přes noc při laboratorní teplotě. Získaná reakční směs byla poté zpracována s přebytkem acetonu až do úplného vysrážení titulní sloučeniny, sraženina byla odfiltrována, vysušena, rozpuštěna ve vodě, nerozpuštěná dicyklohexylmočovina byla odfiltrována a filtrát byl zbaven solí a vyčištěn od nízkomolekulárního podílu na ultrafiltrační membráně AMICON® YM-3 (mezní limit: 3000 Da). Zbytek byl lyofilizován.

Výtěžek: 3,54 g (79,4 % teoretického množství) ve formě bezbarvého lyofilizátu. Obsah vody (Karl-Fischer): 5,87 % . Elementární analýza (spočteno na bezvodou látku):

Spočteno: C 35,43 H 4,07 N 9,95 F 17,64 Gd 17,18

Nalezeno: C 35,42 H 4,01 N 9,89 F 17,67 Gd 17,18

235 ·· ··· · • · · ·· · • · · · · · • · · · · * tt

Příklad 64

a) 2-N-Trifluoracetyl-6-N- benzyloxykarbonyl-L-lysin

100,0 g (356,7 mmol) 6-N-benzyloxykarbonyl-L-lysinu bylo rozpuštěno ve směsi 1000 ml ethylesteru trifluoroctové kyseliny a 500 ml ethanolu a směs byla míchána 24 hodin při laboratorní teplotě. Reakční směs byla odpařena do sucha za sníženého tlaku a zbytek byl krystalizován z diisopropyletheru.

Výtěžek: 128,9 g (96 % teoretického množství) bezbarvého krystalického prášku. Teplota tání: 98,5 °C .

Elementární analýza :

Spočteno: C 51,07 H 5,09N 7,44 F 15,14

Nalezeno: C 51,25 H 5,18N 7,58 F 15,03

b) 2-N-Trifluoracetyl-6-N-benzyloxykarbonyl-L-lysin [1—(4— perfluoroktylsulfonyl)piperazin]-amid

K 125,0 g (332,0 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 52a) a 188,7 g (332,0 mmol) 1-perfluoroktylsulfonylpiperazinu (připravenému podle DE 19603033) v 750 ml tetrahydrofuranu bylo při teplotě 0°C přidáno 164,2 g (0,664 mmol) EEDQ (ethytesteru 2-ethoxy-l,2-dihydrochinolin-l-karboxylové kyseliny) a směs byla míchána přes noc při laboratorní teplotě. Reakční směs byla odpařena do sucha za sníženého tlaku a zbytek byl chromatografován na silikagelu (Mobilní fáze: dichlormethan/methanol = 20:1) . Výtěžek : 286,0 g (93% teoretického množství) bezbarvé tuhé látky.

Teplota tání: 92 °C .

Elementární analýza:

Spočteno: C 36,30 H 2,83 N 6,05 F 41,01 S 3,46

Nalezeno: C 36,18 H 2,94 N 5,98 F 40,87 S 3,40 ···· ·· ·· 00 ···· • · · · · · · · · ·

236 • · · 0 0 · 0 0 0 0 ·· · ·· ·<·· »0 00

c) 6-N-Benzyloxykarbonyl-L-lysin-[1-(4-perfluoroktylsulfonyl) -piperazin]-amid

Do roztoku 280,0 g (302,2 mol) titulní sloučeniny z Příkladu 52b) ve 2000 ml ethanolu, byl při teplotě 0 °C přiváděn plynný amoniak po dobu 1 hodiny. Směs byla odpařena do sucha a zbytek byl rozmíchán s vodou. Tuhá látka byla odfiltrována a byla vysušena ve vakuu při teplotě 50 °C.

Výtěžek: 243,5 g (97,0 % teoretického množství) amorfní tuhé látky. Elementární analýza:

Spočteno: C 37,60 H 3,28 N 6,75 E 38,89 S 3,86

Nalezeno: C 37,55 H 3,33 N 6,68 F 38,78 S 3,81

d) L-Lysin-[1-(4-pertluoroktylsulfonyl)-piperazin]-amid

V 1000 ml ethanolu bylo rozpuštěno 200,0 g (240,8 mmol) sloučeniny připravené v Příkladu 64c) a bylo přidáno 5,0 g Pearlman katatyzátoru (Pd 20%/C) a směs byla hydrogenována při laboratorní teplotě pod atmosférou vodíku (1 atm), až do doby, kdy již nebyla pozorována spotřeba vodíku. Katalyzátor byl odfiltrován, dobře promyt s ethanolem (třikrát 100 ml) a směs byla odpařena ve vakuu do sucha. Titulní sloučenina byla získána ve formě silně viskózního a žlutavě zbarveného oleje.

Výtěžek: 162,5 g (96,9 % teoretického množství).

Elementární analýza:

Spočteno: C 31,04 H 3,04 N 8,05 F 46,38 S 4,60

Nalezeno: C 31,11 H 3,09 N 8,08 E 46,33 S 4,62 e} 6N-2N-Bis-{4-[2,3-bis-(N,N-bis(terč.butyloxykarbonylmethyl)-amino)-propyl]fenyl}-3-oxa-propionyl-L-lysin-[1- (4perfluoroktylsulfonyl)-piperazin]-amid

5,25 g (7,72 mmol) 4-[2,3-Bis-(N,N-bis(terč.butyloxykarbonylmethyl)-amino)propyl]-fenyl}-3-oxa-propionové ·· ··· ·

237 kyseliny a 781,0 mg (7,72 mmol) triehylaminu bylo rozpuštěno v 50 ml methylenchloridu. Při teplotě -15 °C byl přikapán roztok 1,16 g (8,5 mmol) isobutylesteru chlormravenčí kyseliny v 10 ml methylchloridu během 5 minut a směs byla míchána dalších 20 minut při teplotě -15 °C. Reakční roztok byl poté ochlazen na teplotu -25 °C a byl přikapán roztok složený z 2,68 g (3,86 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 64d) a 2,12 g (21,0 mmol) triehylaminu, v 70 ml tetrahydrofuranu během 30 minut a směs byla míchána ještě 30 minut při teplotě -15° C a poté přes noc při laboratorní teplotě. Pří zpracování byla reakční směs odpařena za sníženého tlaku a získaný olejovitý zbytek byl rozpuštěn ve 250 ml chloroformu. Chloroformová fáze byla dvakrát extrahována se 100 ml 10% vodného roztoku ammonium chloridu, byla vysušena nad síranem hořečnatým a poté byla odpařena do sucha ve vakuu. Zbytek byl chromatografován na silikagelu (Mobilní fáze: methylenchlorid/ethanol = 20:1). Výtěžek: 5,37 g (68,8 % teoretického množství) bezbarvého a velmi tuhého oleje. Elementární analýza:

Spočteno: C 52,27 H 6,43 N 5,54 F 15,97 S 1,59

Nalezeno: C 52,22 H 6,51 N 5,49 F 15,99 S 1,63

f) 6N-2N-BÍS-{4-[2,3-bis-(N,N-bis(karboxylatomethyl)-amino)propyl]-fenyl}-3-oxa-propionyl-L-lysin-[1-(4-perfluoroktylsulfonyl) -piperazin] -amid, oktasodná sůl

5,0 g (2,47 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 64e) bylo rozpuštěno v 60 ml absolutního dichlormethanu. Poté bylo při teplotě 0 °C přikapáno 75 ml trifluoroctové kyseliny. Reakce byla míchána 12 hodin při laboratorní teplotě a poté byla odpařena do sucha za sníženého tlaku. Získaný zbytek byl rozmíchán se 100 ml vody a byl opět odpařen do sucha ve vakuu. Takto získaný zbytek byl rozpuštěn ve 200 ml fcfcfcfc • · · • fc fcfcfcfc

238 • fc fc · • fcfc • fc · • fcfc • fc fcfcfcfc • fcfc • fcfc · • fc fcfc destilované vody a vodný roztok výše uvedené titulní sloučeniny byl dvakrát extrahován s 60 ml diethyletheru. Vzniklý vodný roztok produktu byl doplněn vodou na celkový objem 300 ml, byl zbaven nerozpuštěných podílů pomocí filtrace, filtrát byl zbaven solí a vyčištěn od nízkomolekulárního podílu na ultrafiltrační membráně AMICON® YM-3 (mezní limit: 3000 Da). Filtrát byl doplněn vodou na celkový objem 200 ml a pH bylo upraveno pomocí 15% vodného roztoku hydroxidu sodného na hodnotu 10,0. Bazický vodný roz'tok produktu byl na závěr lyofiizován. Bylo získáno 4,0 g (92,8% teoretického množství) titulní sloučeniny ve formě oktasodné soli jak amorfní lyofilizát. Obsah vody: 5,37 % Elementární analýza (spočteno na bezvodou látku):

Spočteno: C 38,46 H 3,28 N 6,41 F 18,47 S 1,83 Na 10,52 Nalezeno: C 38,42 H 3,31 N 6,39 F 18,51 S 1,87 Na 10,38 g) 6N-2N-Bis-{4-[2,3-bis-(N,N-bis(karboxymethyl)-amino)propyl]-fenyl}-3-oxa-propionyl-L-lysin-[1-(4-perfluoroktylsulfonyl) -piperazin] -amid, komplex dimanganu, tetrasodná sůl

1,94 g (1,11 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 64f) bylo rozpuštěno ve 100 ml destilované vody a vzniklý roztok byl nechán reagovat s 1 molární vodnou kyselinou chlorovodíkovou až do pH hodnoty 4,0. Při teplotě 80 °C bylo po částech přidáno 0,25 g (2,22 mmol) uhličitanu manganatého. Reakční směs byla míchána 5 hodin pod refluxem. Po ochlazení na laboratorní teplotu byla hodnota pH vodného roztoku produktu nastavena za intenzivního míchání pomocí přídavku 1 N hydroxidu sodného na 7,2 a roztok byl čištěn ultrafiltrací na ultrafiltrační membráně AMICON® YM-3 (mezní limit 3000 Da), čímž byl produkt odsolen a byl zbaven nizkomolekulárního podílu. Roztok byl poté lyofilizován. Výtěžek: 1,80 g (92,0 % teoretického množství) titulní sloučeniny ve formě bezbarvého lyofilizátu. Obsah vody (Karl-Fischer): 7,28 % .

·· ·««· ·· · · ··

Elementární analýza (spočteno na bezvodou látku):

Spočteno: C 38,07 H 3,25 F 18,28 Mn 6,22 N 6,34 Na 5,20 S 1,81

Nalezeno: C 38,01 H 3,29 F 18,29 Mn 6,21 N 6,36 Na 5,28 S 1,78

Příklad 65

a) 6-N-(Benzyloxykarbonyl)-2-N-[(N-pteroyl)-L-glutaminyl]lysin-[1-(4-perfluoroktylsulfonyl)-piperazin]-amid g (45,31 mmol) kyseliny listové bylo rozpuštěno ve 300 ml dimethylsulfoxidu a při teplotě 10 °C bylo přidáno 9,49 g (46 mmol) N,N-dicyklohexylkarbodiimidu. Směs byla míchána přes noc při laboratorní teplotě. K této směsi bylo přidáno 29,1 g (35 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 52c) a 20 ml Pyridin a směs byla míchána 3 hodiny při teplotě 50 °C. Reakční směs pak byla odpařena do sucha a byla zpracována se směsí 1500 ml diethyletheru a 1500 ml acetonu. Vyloučená sraženina byla odfiltrována a byla čištěna chromatografií na silikagelu (RP-18) (Mobilní fáze = Gradient voda/ethanol/ tetrahydrofuran). Výtěžek: 21,59 g (38% teoretického množství), žlutá tuhá látka.

Obsah vody: 2,1 %.

Elementární analýza : (spočteno na bezvodou látku).

Spočteno: C 43,10 H 3,54 F 25,76 N 11,29 S 2,56

Nalezeno: C 43,02 H 3,62 F 25,68 N 11,21 S 2,48

b) 2-N-[(N-Pteroyl)-L-glutaminyl]-lysin-[1-(4- perfluoroktylsulfonyl) piperazin]-amid

Ke 20 g (15,95 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 65a) bylo přidáno 200 ml roztoku bromovodíku v kyselině octové (48 %) a směs byla míchána 2 hodiny při teplotě 40 °C. Směs byla ochlazena na teplotu 0 °C, bylo přikapáno 2000 ml ·· ····

240

*· 0· • * · « • * · • * * • · * *· <··· ·· *·0· • 0 · • · · « · · · • · * · ·· *0 diethyletheru a vyloučená sraženina byla odfiltrována. Po vysušení ve vakuu při 60 °C bylo získáno 18,96 g, 99% teoretického množství) žlutě zbarvené, krystalické tuhé látky.

Elementární analýza:

Spočteno: C 37,01 H 3,27 Br 6,65 F 26,90 N 12,83 S 2,67 Nalezeno: C 36,91 H 3,42 Br 6,31 F 29,75 N 12,72 S 2,56

c) 6-N-[1,4,7-Tris(karboxylatomethyl)-1,4,7,10 tetraazacyklododěkan-10-(pentanoyl-3-aza-4oxo-5-methyl-5-yl]-2-N-[(Npteroyl]-L-glutaminyl]-lysin-[1-(4-perfluoroktylsulfonylpiperazin)-amid , Gd-komplex

0,92 g (8 mmol) N-hydroxysukcinimidu, 0,68 g (16 mol) chloridu lithného a 5,04 g (8 mmol) 1,4,7-tris(karboxylatomethyl-O-(3-aza-4-oxo-5-methyl-5-yl)-1,4,7-10-tetraazacyklododekan, Gd-komplexu bylo rozpuštěno za mírného zahřátí v 80 ml dimethylsulfoxidu. Při teplotě 10 °C bylo přidáno 2,06 g (10 mol) N,N-dicyklohexylkarbodiimidu a byla poté míchána 3 hodiny při laboratorní teplotě. K tomuto reakčnímu roztoku bylo přidáno 5 g (4,16 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 65b) a 10 ml pyridinu. Směs byla míchána přes noc při laboratorní teplotě. Roztok byl nalit do 1000 ml acetonu a byla míchána 10 minut. Vyloučená tuhá látka byla odfiltrována a na závěr čištěna pomocí chromatografie na silikagelu (silikagel RP-18, Mobilní fáze : Gradient voda/ethanol /acetonitril. Látka byla rozpuštěna v troše vody, pH roztoku bylo nastaveno na hodnotu 7,4 a byla lyofilizována.

Výtěžek : 3,87 g (53% teoretického množství) žluté tuhé látky. Obsah vody: 5,8 %.

Elementární analýza: (spočteno na bezvodou látku)

Spočteno: C 38,36 H 3,74 F 18,42 Gd 8,97 N 12,78 Na 1,31 S 1, 83 ·· ····

9999

241 ·*

9 9 9 9 9 9 9 9 9

9 99 9999 99 99

Nalezeno: C 38,28 H 3,85 F 18,33 Gd 8,85 N 12,69 Na 1,42 S 1,75

Příklad 66

a) N-(2,3-dihydroxypropyl)-amid 2H, 2H,4H,4H,5H,5H-3-oxaperfluortridekanové kyseliny

Ke 30 g (57,45 mmol) 2H,2H,4H,4H,5H,5H-3-oxaperfluortridekanové kyseliny ve 300 ml dichlormethanu bylo přidáno 8,90 g (70 mmol) oxalylchloridu a směs byla míchána 12 -hodin při laboratorní teplotě. Reakční směs byla odpařena do sucha za sníženého tlaku. Zbytek byl rozpuštěn ve 100 ml dichlormethanu a při teplotě 0 °C byl přikapán k roztoku 5,47 g (60 mmol) 2,3-dihydroxypropylaminu a 6,07 g (60 mmol) triehylaminu, rozpuštěného ve 200 ml dichlormethanu. Směs byla míchána 3 hodiny při teplotě 0 °C, a poté 6 hodin při laboratorní teplotě. Bylo přidáno 300 ml 5% vodného roztoku chlorovodíkové kyseliny a směs byla bobře míchána 15 minut. Organická fáze byla oddělena, sušena nad síranem hořečnatým a byla odpařena do sucha za sníženého tlaku. Zbytek byl chromatografován na silikagelu (Mobilní fáze: dichlormethan/ ethanol=15:1).

Výtěžek: 29,70 g (87 % teoretického množství) bezbarvé tuhé látky.

Elementární analýza:

Spočteno: C 30,32 H 2,20 N 2,36 F 54,35

Nalezeno: C 30,12 H 2,41 N 2,18 F 54,15

b) N-(2,3-Dihydroxypropyl)-N-(ÍH,ÍH,2H,2H,4H,4H,5H,5H-3oxaperfluortridecyl)-amin g (48,8 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 66a bylo rozpuštěno ve 300 ml tetrahydrofuranu a bylo přidáno 50 ml 10M roztok borandimethylsulfidu (v tetrahydrofuranu). Směs

242 byla zahřívána 16 hodin pod refluxem. Směs byla ochlazena na teplotu 0 °C a bylo přikapáno 300 ml methanolu, a poté byla směs odpařena do sucha za sníženého tlaku. Zbytek byl rozmíchán ve směsi 300 ml ethanolu a 50 ml 10% vodné kyseliny chlorovodíkové a směs byla 8 hodin míchána při teplotě 60°C. Směs byla odpařena do sucha za sníženého tlaku, zbytek byl rozmíchán se 300 ml 5% vodného roztoku hydroxidu sodného a byl extrahován třikrát se 300 ml dichlormethanu. Organická fáze byla sušena nad síranem hořečnatým, byla odpařena do sucha za sníženého tlaku a zbytek byl čištěn chromatografií na silikagelu (Mobilní fáze: dichlormethan/methanol=15:1). Výtěžek: 24,07 g (85 % teoretického množství) bezbarvé tuhé látky.

Elementární analýza:

Spočteno: C 31,05 H 2,61 N 2,41 F 55,66

Nalezeno: C 31,91 H 2,78 N 2,33 F 55,47

c) 1,4,7-Tris(karboxylatomethyl)-10-[(3-aza-4-oxo-hexan-5yl)-kyselina-N-(2,3-dihydroxypropyl)-N-(1H,1H,2H,2H,4H,4H,5H, 5H-3-oxa)-perfluortridecyl)-amid]-1,4,7,10-tetraazacyklododekan, Gadolinium komplex g (i5,88 mmol) komplexu gadolinia 10-[1-(karboxymethylkarboamoyl) -ethyl]-1,4,7,10-tetraazacyklododekan-l,4,7trioctové kyseliny a 1,35 g (31,76 mmol) chloridu lithného bylo při teplotě 60 °C rozpuštěno ve 100 ml dimethylsulfoxidu. Směs byla ochlazena na teplotu 15 °C a bylo přidáno 9,21 g (15,88 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 66b. Směs byla míchána 10 minut a bylo přidáno 7,42 g (30 mmol) 2-ethoxy-l-ethoxykarbonyl-l, 2-dihydrochinolinu. Reakční směs byla míchána 12 hodin při laboratorní teplotě. Reakční roztok byl nalit do směsi 200 ml acetonu a 1300 ml diethyletheru a byl míchán 2 hodiny při laboratorní teplotě.

243

Vyloučená sraženina byla zfiltrována, byla rozpuštěna ve troše směsi ethanol/voda a byla chromatografována na silikagelu RP-18 (Mobilní fáze: Gradient tetrahydrofuran/ acetonitril/voda).

Výtěžek: i 6,09 g (85 % teoretického množství) bezbarvého, amorfního prášku. Obsah vody: 6,3 %.

Elementární analýza (spočteno na bezvodou látku):

Spočteno: C 34,26 H 3,64 N 7,05 F 27,10 Gd 13,19 Nalezeno: C 34,12 H 3,83 N 6,91 F 26,88 Gd 12,93

Příklad 67

1,4, 7-Tris(karboxylatomethyl)-10-[(3-aza-4-oxo-hexan-5-yl)kyselina-N-(1H,1H,2H,2H,4H,4H,5H,5H-3-oxa-perfluortridecyl)amid]-1,4,7,10-tetraazacyklododekan, gadolinium komplex g (15,88 mmol) komplexu gadolinia 10—[l— (karboxymethylkarboamoyl)-ethyl]-1,4,7,10-tetraazacyklododekan-1,4,7-trioctové kyseliny a 1,35 g (31,76 mmol) chloridu lithného a 3,66 g (31,76 mmol) N-hydroxysukcinimidu bylo při teplotě 60 °C rozpuštěno ve 100 ml dimethylsulfoxidu. Směs byla ochlazena na teplotu 15 °C a bylo přidáno 3,51 g (17 mmol) N,N'-dicyklohexylkarbodiimidu a směs byla míchána 5 hodin při teplotě 15 °C. Pro odstranění močoviny byl roztok zfiltrován. K filtrátu bylo přidáno 8,63 g (15,88 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 68b a 5,06 g (50 mmol) triehylaminu a směs byla míchána 12 hodin při laboratorní teplotě. Roztok byl nalit do 1500 ml diethyletheru a 100 ml acetonu a byla míchána 30 minut. Vyloučená tuhá látka byla odfiltrována a byla čištěna chromatografii na silikagelu RP-18 (Mobilní fáze: Gradient tetrahydrofuran/acetonitril/voda). Výtěžek: 13,86 g (78 % teoretického množství) bezbarvého, amorfního prášku Obsah vody: 9,3 %.

• · · ·

244 •* ·♦ ·· ···· • · o · · · · • · · · ♦ ··«· · * · · · · · · to · • · · ©· · · · to toto to»

Elementární analýza (spočteno na bezvodou látku):

Spočteno: C 33,28 H 3,42 N 7,51 F 28,87 Gd 14,05

Nalezeno: C 33,12 H 3,61 N 7,37 F 28,69 Gd 13,89

Příklad 68

a) Amid 2H,2H,4H,4H,5H,5H-3-oxa-perfluortridekanové kyseliny

Ke 30 g (57,45 mmol) 2H,2H, 4H, 4H, 5H, 5H-3-oxa-perfluortridekanové kyseliny ve 300 ml dichlormethanu bylo přidáno 8,90 g (70 mmol) oxalylchloridu a směs byla míchána 12 hodin při- laboratorní teplotě. Reakční směs byla odpařena do sucha za sníženého tlaku. Zbytek byl rozpuštěn ve 200 ml dichlormethanu. Pak byl při teplotě 0 °C zaváděn do reakční směsi plynný amoniak po dobu 2 hodin. Směs byla míchána 4 hodin při teplotě 0 °C, a poté byla míchána 2 hodiny při laboratorní teplotě. Pak bylo přidáno 300 ml 5% vodné kyseliny chlorovodíkové a směs byla míchána 15 minut. Organická fáze byla oddělena, sušena nad síranem hořečnatým a byla odpařena do sucha za sníženého tlaku. Zbytek byl chromatografován na silikagelu (Mobilní fáze: dichlormethan/ aceton= 20:1) .

Výtěžek: 27,85 g (93 % teoretického množství)

Elementární analýza:

Spočteno: C 27,66 H 1,55 N 2,69 F 61,97

Nalezeno: C 27,49 H 1,72 N 2,54 F 61,81

b) 1H,1H,2H,2H,4H,4H,5H,5H-3-oxa-perfluortridecylamin hydrochlorid g (51,8 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 68a bylo rozpuštěno ve 300 ml tetrahydrofuranu a bylo přidáno 31 ml 10M roztoku borandimethylsulfidu (v tetrahydrofuranu). Reakční směs byla vařena 16 hodin za refluxu. Směs byla ochlazena na teplotu 0 °C a bylo přikapáno 200 ml methanolu, • · · ·

245 • ·

a směs byla odpařena do sucha za sníženého tlaku. Zbytek byl rozpuštěn ve 400 ml ethanolu a 100 ml 10% vodné kyseliny chlorovodíkové a směs byla míchána 8 hodin při teplotě 60 °C. Směs byla odpařena do sucha a zbytek byl krystalizován ze směsi ethanol/diethylether.

Výtěžek: 26,75 g (95 % teoretického množství) bezbarvé, krystalické tuhé látky.

Elementární analýza:

Spočteno: C 26,51 H 2,04 N 2,58 F 59,41 Cl 6,52

Nalezeno: C 26,37 H 2,21 N 2,46 F 59,25 Cl 6,38

c) N-(IH,IH,2H,2H,4H,4H,5H,5H-3-oxa)-perfluortridecyl)-amid 3,6,9,12,15-Pentaoxahexadekanové kyseliny

K 26,5 g (48,74 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 68b a 14,8 g (146,2 mmol) triehylaminu, rozpuštěné ve 300 ml dichlormethanu bylo při teplotě 0 °C přikapáno 14,24 g (50 mmol) 3,6,9,12,15-pentaoxahexadekanoylchloridu a směs byla míchána 3 hodiny při teplotě 0 °C. Bylo přidáno 300 ml 5% vodné kyseliny chlorovodíkové a směs byla dobře míchána 30 minut. Organická fáze byla oddělena, vysušena nad síranem hořečnatým a byla odpařena do sucha za sníženého tlaku. Zbytek byl chromatografován na silikagelu (Mobilní fáze: dichlormethan/aceton: 20:1).

Výtěžek: 32,03 g (87 % teoretického množství) bezbarvého olej e.

Elementární analýza:

Spočteno: C 36,57 H 4,00 N 1,85 F 42,75

Nalezeno: C 36,46 H 4,12 N 1,76 F 42,53

d) N-(3, 6, 9,12, 15-Pentaoxahexadecyl)-N-(IH,IH,2H,2H,4H,4H-3oxa)perfluortridecyl)-amid ·· ··· · • ·

246 g (41,03 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 68c bylo rozpuštěno ve 300 ml tetrahydrofuranu a bylo přidáno 25 ml 10M roztoku borandimethylsulfidu (v tetrahydrofuranu). Směs byla vařena 16 hodin za refluxu. Poté byla ochlazena na teplotu 0 °C a bylo přikapáno 200 ml methanolu, a poté byla odpařena do sucha za sníženého tlaku. Zbytek byl rozmíchán ve 300 ml ethanolu a 50 ml 10% vodné kyseliny chlorovodíkové a byla 8 hodin míchána při 40 °C. Směs byla odpařena ve vakuu, zbytek byl rozpuštěn ve 300 ml 5% vodného roztoku hydroxidu sodného a byla extrahována třikrát s 300 ml dichlormethanu. Organická fáze byla sušena nad síranem hořečnatým, odpařena ve vakuu do sucha a zbytek byl chromatografován na silikagelu (Mobilní fáze: dichlormethaN2 propanol=15:1).

Výtěžek: 27,68 g (91 % teoretického množství)

Elementární analýza:

Spočteno: C 37,26 H 4,35 N 1,89 F 43,56

Nalezeno: C 37,11 H 4,51 N 1,73 F 43,41

e) 1,4,7-Tris(karboxylatomethyl)—10—{(3-aza-4-oxo-hexan-5yl)-kyselina-[N-3,6,9,12,15-pentaoxa)-hexadexyl)-N-(ÍH,ÍH,2H, 2H,4H,4H,5H,5H-3-oxa)-perfluortridecyl]-amid}-l,4,7,10tetraazacyklododekan, gadolinium komplex g (15,88 mmot) komplexu gadolinia 10-[1(karboxymethylkarbamoyl)-ethyl]-1,4,7,10-tetraazacyklododekan-1,4,7-trioctové kyseliny a 1,35 g (31,76 mmol) chloridu lithného bylo rozpuštěno při teplotě 60 °C ve 100 ml dimethylsulfoxidu. Směs byla ochlazena na teplotu 15 °C a bylo přidáno 11,77 g (15,88 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 68d. Směs byla míchána 10 minut a poté bylo přidáno 7,42 g (30 mmol) 2-ethoxy-l-ethoxykarbonyl-l,2-dihydrochinolinu. Směs byla míchána 12 hodin při laboratorní teplotě. Reakční roztok byl nalit do směsi 200 ml acetonu a • · ···* · · ·· · · ·· · «··· · ·

247

1300 ml diethyletheru a byla míchána 2 hodiny při laboratorní teplotě. Vyloučená sraženina byla zfiltrována, rozpuštěna v malém množství směsi ethanol/voda a byla chromatografována na silikagelu RP-18 (Mobilní fáze: Gradient tetrahydrofuran/ acetonitril/voda).

Výtěžek: 18,05 g (84 % teoretického množství) bezbarvého, amorfního prášku. Obsah vody: 6,2 %.

Elementární analýza: (spočteno na bezvodou látku):

Spočteno: C 37,28 H 4,47 N 6,21 F 23,87 Gd 11,62 Nalezeno: C 37,11 H 4,6i N 6,03 F 23,64 Gd 11,42

Příklad 69

a) N-(5-hydroxy-3-oxapentyl)-amid 2H,2H,4H,4H,5H,5H-3~oxaperfluortridekanové kyseliny

Ke 30 g (57,45 mmol) 2H,2H,4H,4H,5H,5H-3-oxaperfluortridekanové kyseliny ve 300 ml dichlormethanu bylo přidáno 8,90 g (70 mmol) oxalylchloridu a směs byla míchána 12 hodin při laboratorní teplotě. Reakční směs byla odpařena do sucha za sníženého tlaku. Zbytek byl rozpuštěn ve 100 ml dichlormethanu a při teplotě 0 °C byl přikapán roztok 6,25 g (60 mmol) 5-hydroxy-3-oxa-pentylaminu a 6,07 g (60 mmol) triehylaminu, rozpuštěných ve 200 ml dichlormethanu. Směs byla míchána 3 hodiny při 0 °C, a poté 6 hodin při laboratorní teplotě. Pak bylo přidáno 300 ml 5% vodné kyseliny chlorovodíkové a směs byla míchána 15 minut. Organická fáze byla oddělena, sušena nad síranem hořečnatým a byla odpařena do sucha za sníženého tlaku. Zbytek byl chromatografován na silikagelu (Mobilní fáze: dichlormethan/ aceton= 15:1).

Výtěžek: 32,20 g (92 % teoretického množství) bezbarvé tuhé látky.

Elementární analýza:

248 ·· ····

Spočteno: C 31,54 H 2,65 N 2,30 F 53,01

Nalezeno: C 31,61 H 2,84 N 2,14 F 52,85

b) N- (5-Hydroxy-3-oxa-pentyl)-Ν-(IH,1H,2H,2H,4H,4H,5H, 5H-3oxaperfluortridecyl)-amin g (49,24 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 69a bylo rozpuštěno ve 300 ml tetrahydrofuranu a bylo přidáno 31 ml 10M roztoku borandimethylsulfidu (v tetrahydrofuranu). Směs byla zahřívána 16 hodin pod refluxem. Poté byla ochlazena na teplotu 0 °C a bylo přikapáno 200 ml methanolu, a poté byla směs odpařena do sucha za sníženého tlaku. Zbytek byl rozpuštěn ve směsi 300 ml ethanolu a 50 ml 10% vodné kyseliny chlorovodíkové a reakční směs byla míchána 10 hodin při teplotě 50 °C. Směs byla odpařena do sucha, zbytek byl rozpuštěn ve 300 ml 50 vodného roztoku hydroxidu sodného a byl třikrát extrahován s 300 ml dichlormethanu. Organická fáze byla sušena nad síranem hořečnatým, byla odpařena do sucha za sníženého tlaku a zbytek byl chromatografován na silikagelu. (Mobilní fáze: dichlormethan/2-propanol= 20:1). Výtěžek: 26,09 g (89 % teoretického množství) bezbarvé tuhé látky.

Elementární analýza:

Spočteno: C 32,28 H 3,05 N 2,35 F 54,25

Nalezeno: C 32,12 H 3,21 N 2,18 F 54,09

c) 1,4,7-Tris(karboxylatomethyl)-10-[(3-aza-4-oxo-hexan-5yl)-kyselina-N-(5-hydroxy-3-oxa-pentyl)-Ν-(IH,IH,2H,2H,4H,4H, 5H,5H-3-oxa)perfluortridecyl)-amid]-1,4,7,10-tetraazacyklododekan, gadolinium komplex g (15,88 mmol) komplexu gadolinia 10-[1(karboxymethylkarbamoyl)-ethyl]-1,4,7,10-tetraazacyklododekan-1,4,7-trioctové kyseliny a 1,35 g (31,76 mmol)

249 • · · « · · ·· · ·« 9999 chloridu lithného bylo při teplotě 60 °C rozpuštěno ve 100 ml dimethylsulfoxidu. Směs byla ochlazena na teplotu 5 °C a bylo přidáno 9,45 g (15,88 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 69b. Směs byla míchána 10 minut a poté bylo přidáno 7,42 g (30 mmol) 2-ethoxy-l-ethoxykarbonyl-l,2-dihydrochinolinu. Reakční směs pak byla 12 hodin míchána při laboratorní teplotě. Reakční roztok byl nalit do směsi z 200 ml acetonu a 1300 ml diethyletheru a byla míchána 2 hodiny při laboratorní teplotě. Vyloučená sraženina byla zfiltrována, rozpuštěna ve směsi ethanol/voda a byla chromatografována na silikagelu RP18 (Mobilní fáze: Gradient tetrahydrofuran/acetonitril/voda). Výtěžek: 16,10 g (84 % teoretického množství) bezbarvého amorfního prášku.

Obsah vody: 5,7 %

Elementární analýza (spočteno na bezvodou látku):

Spočteno: C 34,83 H 3,84 N 6,96 F 26,76 Gd 13,03

Nalezeno: C 34,65 H 3,96 N 6,84 F 26,62 Gd 12,91

Příklad 70

a) 1,2,3,4,6-Penta-O-acetyl-a,β-D-mannopyranosa

Analogickým způsobem, jako bylo popsáno v literatuře [M. L. Wolfrom a A. Thompson v Methods in Carbohydrate Chemistry (R.L. Whistler, M. L. Wolfrom a J. N. BeMiller, Eds.), Academie Press, New York, Vol.11, 53 , str. 211-215, (1963)] poskytlo použití 150 g (832,5 mmol) a,β-D-mannopyranosy se směsí 1500 ml absolutního Pyridinu a 1500 ml anhydridu kyseliny octové po zpracování 315 g (96,7 %) výše uvedené titulní sloučeniny ve formě viskózního a bezbarvého oleje. IH NMR spektroskopie prokázala, že se jedná o směs α a β anomerů v poměru 4:1. Oddělení α a β anomerů výše uvedené titulní • · · · • · ·· ··· ·

250

9 9 9 9 9 9 9 9 9 •· · 9· 9999 99 99 sloučeniny lze dosáhnout provedením následných reakčních kroků.

Elementární analýza:

Spočteno: C 49,21 H 5,68

Nalezeno: C 49,12 H 5,78

b) 6-[l-0-α- (2,3,4,6-Tetra-O-acetyl-D-mannopyranosyl)hexanová kyselina-ethylester]

Analogickým způsobem jako je v literatuře popsána syntéza aryl glykopyranosidů [J. Conchie a G. A. Levvy v Methods in Carbohydrate Chemistry (R.L. Whistler, M.L. Wolfrom a J. N. BeMiller, Eds.), Academie Press, New York, Vol.11 , 90 , str. 345-347, (1963)] vedlo použití 156,2 g (400 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 70a jako α,βanomerní směsi se 67 ml (400 mmol) ethylesteru 6-hydroxyhexanové kyseliny a 60,8 ml (520 mmol) cloridu cíničitého v celkem 600 ml 1,2-dichlorethanu po čištění sloupcovou chromatografii na silikagelu (Eluent: hexan/ethylacetát 2:1) ke vzniku 100,05 g (51 % teoretického množství) výše uvedené titulní sloučeniny ve formě bezbarvého a viskózního oleje. 1H NMR spektroskopie prolézala, že lze titulní sloučeninu pokládat za čistý a anomer.

Elementární analýza:

Spočteno: C 52,94 H 6,77

Nalezeno: C 52,80 H 6,78

c) 6-[l-0-α-(2,3,4,6-Tetra-O-benzyl-D-mannopyranosyl)hexanová kyselina

K míchané suspenzi 141,0 g (289 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 70b ve 200 mi dioxan bylo při laboratorní teplotě a za intenzivního míchání přidáno po částech celkem 235,5 g ·· ··· ·

251 • · · *· ♦ (4,26 mol) jemně práškového hydroxidu draselného. Kvůli zvýšení účinnosti míchání bylo do reakční směsi přidáno dalších 200 ml a takto získaná suspenze byla zahřáta k varu a při této teplotě bylo po kapkách přidáno celkem 372 ml (3,128 mol) benzylbromidu během dvou hodin. Reakční směs byla míchána 4 hodiny Při teplotě 110 °C a poté 12 hodin při laboratorní teplotě. Kvůli zpracování byla reakční směs nalita pomalu do 2,5 litru ledové vody a vodná fáze byla extrahována s diethyletherem. Po promytí takto získané etherové fáze a jejím vysušení nad síranem sodným, byla anorganika odfiltrována a rozpouštědlo bylo dpařeno za sníženého tlaku. Přebytečný benzylbromid byl poté z reakční směsi oddestilován na vakuové pumpě při teplotě oleje 180 °C. Takto získaný olejovitý zbytek byl čištěn chromatografii na silikagelu s využitím směsi ethylacetát/hexan (1:10) jako elučního činidla.

Výtěžek:172,2, g (91,0 % teoretického množství) výše uvedené titulní sloučeniny ve formě bezbarvého a velmi viskózního olej e.

Elementární analýza:

Spočteno: C 75,68 H 7,16

Nalezeno: C 75,79 H 7,04

d) N-(3-oxa-lH,1H,2H,2H,4H,4H,5H,5H-perfluortridecyl)-amid 6[l-0-α-(2,3,4,6-Tetra-O-benzyl-D-mannopyranosyl)-hexanové kyseliny

Ve 1200 ml suchého tetrahydrofuranu bylo rozpuštěno lOOg (134 mmol) kyseliny popsané v Příkladu 70c a poté 13,5 g (134 mmol) triehylaminu. Po ochlazení směsi na teplotu -15 °C byl za míchání přikapán roztok 18.45 g (135 mmol) isobutylesteru chlormravenčí kyseliny ve 200 ml suchého tetrahydrofuranu, přičemž teplota směsi nepřestoupila -10 °C. Směs byla míchána ·· ···· • · · ·

4 · 4 •ti ····

252 minut při teplotě -15 °C a poté byl přikapán roztok 165,5 g (134 mmol) 1-amino-lH,1H,2H,2H-perfluorodekanu a 13,5 g (134 mmol) triehylaminu ve 250 ml suchého tetrahydrofuranu při teplotě -20 °C. Reakční směs byla míchána hodinu při teplotě -15 °C a poté 2 hodiny při laboratorní teplotě a směs byla poté odpařena do sucha za sníženého tlaku. Získaný zbytek byl rozpuštěn ve 300 ml ethylacetátu a byl dvakrát promyt 400 ml nasyceného vodného roztoku hydrogenuhličitanu sodného a poté jedenkrát s 500 ml vody. Po vysušení organické fáze nad síranem sodným byly soli odfiltrovány a ethylacetát byl odpařen za vakua. Získaný zbytek byl čištěn chromatografií na silikagelu s využitím směsi dichlormethan/ hexan/2-propanol (10:5:1) jako eluentu.

Výtěžek: 143,8 g (86,9 % teoretického množství)

Elementární analýza:

Spočteno: C 57,38 H 4, 98 N 1,13 F 26,15

Nalezeno: C 57,30 H 5,44 N 1,01 F 26,25

e) N-(3-oxa-lH,1H,2H,2H,4H,4H,5H,5H-perfluortridecyl)-amid kyseliny 6- [ 1-O-cc-D-mannopyranosyl) -hexanové

40,0 g (32,38 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 70d bylo rozpuštěno v 750 ml 2-propanolu a bylo přidáno 2,0 g paladiového katalyzátoru (10% Pd/C). Reakční směs byla hydrogenována 12 hodin při teplotě 22 °C a tlaku 1 atm pod vodíkovou atmosférou. Katalyzátor byl odfiltrován a zbytek byl odpařen dosucha. Získaný zbytek byl rozpuštěn ve 300 ml dimethylsulfoxidu a takto získaný roztok produktu byl nechán reagovat s celkem 1000 ml diethyletheru, vyloučená sraženina byla odfiltrována a bylo získáno 21,52 g (88,0 % teoretického množství) výše uvedené titulní sloučeniny ve formě bezbarvého krystalického prášku s teplotou tání 88,5 °C.

Elementární analýza :

253

Φ· φ··· φφ φφ φφφ φ φ φ « Φφφφ φφ φφφφ

99« ΦΦΦ «φφφ · Φ ΦΦ ΦΦΦΦ ΦΦ φφ

Spočteno: C 36,01 Η 5,92 Ν 1,75 F 40,34 Nalezeno: C 36,07 Η 6,08 Ν 1,76 F 40,66

f) Výroba přípravku z kovového komplexu I H,2H,2H,4H,4H,5H,5H-perfluortridecyl)-amidu a N-(3-oxa-lH,1 kyseliny 6-[1-0α-D-mannopyranosyl)-hexanové

Ke 35 ml roztoku kovového komplexu I (280 mmol/1) rozpuštěném v 0,45% vodném roztoku chloridu sodného (pH 7,4; 0,25 mg/1 CaNajDTPA) bylo přidáno 3,17 g (4,2 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 70e a byl přidán 0,9% vodný roztok chloridu sodného až do celkového objemu 98 ml. Reakční směs byla míchána 2 hodiny při teplotě 60 °C na ultrazvukové lázni. Roztok byl ochlazen na laboratorní teplotě a pH bylo nastaveno na hodnotu 7,4 pomocí 2N roztoku hydroxidu sodného. Roztok byl zfiltrován přes 0,2 μιη filtr a filtrát byl naplněn do vialek. Takto připravený roztok může být přímo použit pro biologické experimenty, (koncentrace je přibližně 100 mmol Gd/1).

Příklad 71

a) 1-0-a-D-[(1-Perfluoroktylsulfonylpiperazin-4-karbonyl)pentyl-5]-2,3,4,6-tetra-O-benzyl-mannopyranosa V 800 ml směsi tetrahydrofuran/acetonitril (v poměru 7:3) bylo rozpuštěno 74,59 g (100 mmol) kyseliny připravené v Příkladu 71c a bylo přidáno 10,11 g (100 mmol) triehylaminu.

přikapán 500 ml (102,0 mmol) 1g (100 mmol)

Nakonec byl při laboratorní teplotě tetrahydrofuranového roztoku 58,0 g rerfluoroktylsulfonylpiperazinu, 10,11 triehylaminu a 16.84 g (110 mmol) 1-hydroxybenzotriazolu. Takto získaný reakční rozok byl při teplotě -5 °C nechán reagovat s roztokem 22,7 g (110 mmol) dicyklohexylkarbodiimidu, rozpuštěném ve 100 ml tetrahydrofuranu, a směs ·· ····

254 ·· ·· ♦ 9 9 9 9 9

9 9 9 9 9

999 9 99 9 9 byla poté míchána při teplotě -5 °C další dvě hodiny. Po rozpuštění reakční směsi byla reakce míchána při laboratorní teplotě dalších 12 hodin, vyloučená dicyklohexylmočovina byla zfiltrována a filtrát byl odpařen ve vakuu do sucha. Získaný zbytek byl rozpuštěn v 600 ml ethylacetátu a byl dvakrát promyt 300 ml nasyceného roztoku hydrogenuhličitanu sodného a dvakrát s 300 ml vody. Po vysušení organické fáze nad síranem sodným byl ethylacetát odpařen do sucha za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatografií na silikagelu s využitím smě-si dichlormethan/aceton/2-propanol (16:2:1) jako eluentu. Výtěžek: 113,01 g (79,8 % teoretického množství) bezbarvého a viskózního oleje.

Elementární analýza:

Spočteno: C 58,52 H 4,27 N 1,98 S 2,26 F 22,80

Nalezeno: C 58,42 H 4,41 N 1,80 S 2,28 F 23,02

b) 1-O-a-D-[(1-Perfluoroktylsulfonyl-piperazin-4-karbonyl)pentyl-5]mannopyranosa g (35,30 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 71a bylo rozpuštěno ve směsi 500 ml 2-propanolu a 50 ml vody a bylo přidáno 2 g paladiového katalyzátoru (10 % Pd na aktivním uhlí). Směs byla hydrogenována 12 hodin při laboratorní teplotě. Katalyzátor byl odfiltrován a filtrát byl odpařen do sucha za sníženého tlaku. Zbytek byl rozpuštěn ve 200 ml methanolu a reakční produkt byl nechán reagovat celkem s 800 ml diethyletheru kvůli vysrážení. Po odfiltrování sraženiny byla látka sušena ve vakuu při teplotě 50 °C.

Výtěžek: 29,51 g (99 % teoretického množství) amorfní tuhé látky.

Elementární analýza:

Spočteno: C 34,13 H 3,46 N 3,32 S 3,80 F 38,23

Nalezeno: C 34,28 H 3,81 N 3,25 S 3,80 F 38.01 • * ΦΦ·· φφ ····

255 • Φ φφ φφ φ φφφφ φφ · ··· φφ φφφφ ··· · · φ φφφφ · φφφ φφφ φφφφ φφ φ φφ φφφφ φφ φφ

c) Výroba přípravku z kovového komplexu II a 1-0-a-D-[(1Perfluoroktylsulfonyl-piperazin-4-karbonyl)-pentyl-5]mannopyranosy

Ke 47 ml roztoku kovového komplexu II (250 mmol/1) v 0,45% vodném roztoku chloridu sodného bylo přidáno 9,92 g (11,75 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 71 b a směs byla zahřívána 10 minut v mikrovlnách. Roztok byl ochlazen na laboratorní teplotě, byl zfiltrován přes 0,2 μιη filtr a filtrát byl plněn do viálek. Takto připravený roztok může být přímo použit pro biologické experimenty. (koncentrace je přibližně 250 mmol Gd/1).

Příklad 72

a) 2-Acetamido-2-deoxy-l,3,4,6-(tetra-O-benzyl)-a,β-Dglukopyranosa

K míchané suspenzi 20,16 g (700 mmol; 80% suspenze v minerálním oleji) hydridu sodného ve 150 ml dimethylsulfoxidu bylo při laboratorní teplotě přidáno celkem 24,0 g (108,5 mmol) 2-acetamido-2-deoxy-a,β-D-glukopyranosy, rozpuštěné v 500 ml absolutního dimethylsulfoxidu. Směs pak byla míchána 120 minut při laboratorní teplotě a k roztoku bylo přikapáno 159,5 g (1,26 mol) benzylchloridu. Takto připravený reakční roztok byl poté míchán dalších 12 hodin při laboratorní teplotě. Pro zpracování byl reakční roztok nalit do 1,5 litru ledové vody a směs byla extrahována s diethyletherem. Spojené etherové fáze byly dvakrát promyty s 600 ml nasyceného roztoku hydrogenuhličitanu sodného a poté dvakrát s 800 ml vody. Po vysušení organické fáze nad síranem sodným a po odfiltrování soli bylo rozpouštědlo odpařeno do sucha ve vakuu. Získaný olejovitý zbytek byl čištěn

256 fc fcfc fc fc · fcfc fcfcfcfc • fcfcfcfc • fc fcfcfcfc fcfc fcfcfcfc fcfc fcfc chromatografií na silikagelu s využitím směsi ethylacetát/ hexan (1: 5) jako eluentu.

Výtěžek: 48,68 g (73,6 % teoretického množství) výše uvedené titulní sloučeniny ve formě viskózního a bezbarvého oleje. Elementární analýza:

Spočteno: C 70,92 H 6,45 N 6,89

Nalezeno: C 71,43 H 6,44 N 7,02

b) l-O-Benzyl-3,4,6-tri-0-benzyl-2-amino-2-deoxy-a,β-Dglukopyranosa

30,0 g (49,2 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 72a bylo suspendováno ve směsi 750 ml methanoíu a 215 ml vody a při laboratorní teplotě bylo celkem přidáno 44.0 ml (49,2 mmol) 0,112 molárního vodného roztoku chloristé kyseliny. Po ukončení přídavku byla směs míchána 10 minut při laboratorní teplotě a takto získaná homogenní reakční směs byla odpařena ve vakuu do sucha. Zpracováním se směsí složené ze stejného dílu hexanu a dichiormethanu byla směs přivedena ke krystalizaci. Krystalický reakční produkt byl odfiltrován, promyt s hexanem a sušen ve vakuu při laboratorní teplotě. Výtěžek: 27,08g (86 % teoretického množství) výše uvedené titulní sloučeniny ve formě bezbarvé krystalické sloučeniny. Teplota tání : 180,5 - 181,5 °C

Elementární analýza:

Spočteno: C 63,68 H 5,98 N 2,19 Cl 5,54

Nalezeno: C 63,43 H 6,04 N 2,02 Cl 5,71

c) 1,3,4,6-Tetra-0-benzyl-2-dezoxy-2-[acetyl-(2-amino-Nethyl-N-perfluoroktylsulfonyl)-amino]-1-a,β-D-glukopyranosa

Ve 350 ml suchého tetrahydrofuranu bylo rozpuštěno 20,8 g (35,6 mmol) 2-[N-ethyl-N-perfluoroktylsulfonyl)-aminooctové kyseliny a 3,60 g (35,6 mmol) triehylaminu. Po ochlazení φφ φφφφ

257 • φ φ φ· φ φ φ φφφφ φφ φφφφ φφ φφ

C až -20 °C byl při této (35,6 mmol) ml suchého reakční směsi na teplotu -15 teplotě přikapán za míchání roztok 4,92 g isobutylesteru chlormravenčí kyseliny v 75 tetrahydrofuranu, přičemž přidávání bylo tak rychlé, aby tplota nevystoupila nad -10 °C. Směs byla míchána 15 minut při teplotě -15 °C a poté byl přikapán roztok 22,78 g (35,6 mmol) perchlorátu (titulní sloučenina z Příkladu 72b a 3, 60g (35,6 mmol) triehylaminu ve 100 ml suchého tetrahydrofuranu při tpelotě -20 °C. Směs byla míchána hodinu při teplotě -15 °C -a poté 2 hodiny při laboratorní teplotě a směs byla poté odpařena do sucha za sníženého tlaku. Získaný zbytek byl rozpuštěn ve 250 ml ethylacetátu a byl dvakrát promyt se 100 ml nasyceného roztoku hydrogenuhličitanu sodného a poté jednou s 200 ml vody. Po vysušení organické fáze nad síranem sodným byly soli odfiltrovány a ethylacetát byl odpařen ve vakuu. Získaný olejovitý zbytek byl čištěn chromatografií na silikagelu s využitím směsi ethylacetát/hexan (1:5) jako elučního činidla.

Výtěžek: 33,3 g (84,6% teoretického množství) výše uvedené titulní sloučeniny ve formě bezbarvého a silně viskózního oleje.

Elementární analýza:

Spočteno: C 49,92 H 3,92 N 2,53 F 29,18 S 2,90

Nalezeno: C 49,99 H 4,11 N 2,69 F 29,22 S 3,01

d) 2-Desoxy-2-[acetyl-(2-amino-N-ethyl-N-perfluoroktylsulfonyl) -amino]-1-a,β-D-glukopyranosa

20,0 g (18,06 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 72c bylo rozpuštěno ve 250 ml 2-propanol a bylo přidáno 1,5 g paladiového katalyzátoru (10% Pd/C). Reakční roztok byl hydrogenován 12 hodin při teplotě 22°C a tlaku 1 atm vodíkové atmosféry. Katalyzátor byl odfiltrován a filtrát byl odpařen • 0 00«·

0000 do sucha. Z9skaný zbytek byl rozpuštěn ve 300 ml dimethylsulfoxidu a takto vzniklý roztok produktu byl smíchán se 750 ml směsi složené ze stejných dílů diethyletheru a ethylesteru octové kyseliny. Po odfiltrování vyloučené sraženiny bylo získáno 12,65 g (93,8 % teoretického množství) výše zmíněné titulní sloučeniny ve formě bezbarvého a krystalického prášku. Výše zmíněná titulní sloučenina se vyskytuje jako směs α a β anomerů, přičemž jejich vzájemný poměr byl stanoven pomocí 1H NMR spektroskopie jako přibližně 1:1', 2. Titulní sloučenina je tedy považována za směs přibližně stejných dílů α a β anomerů. Teplota tání: 132,5 133 °C.

Elementární analýza:

Spočteno: C 28,97 H 2,57 N 3,75 F 43,27 S 4,30

Nalezeno: C 29,09 H 2,56 N 3,84 F 43,36 S 4,42

e) Výroba přípravku z kovového komplexu XIV a 2-desoxy-2[acetyl-(2-amino-N-ethyl-N-perfluoroktylsulfonyl)-amino]-Ια, β-D-glukopyranosy

K 51 ml roztoku kovového komplexu XIV (300 mmol/1), rozpuštěného v 0,45% vodném roztoku chloridu sodného (pH 7,4/ 0,25 mg/1 CaNasDTPA) byl přidán roztok 4,90 g (6,57 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 3d, rozpuštěné ve 200 ml ethanolu, a směs byla míchána 2 hodiny při teplotě 50 °C. Roztok byl odpařen do sucha ve vakuu a zbytek byl doplněn destilovanou vodou na celkový objem 153 ml. Směs byla míchána 10 minut při teplotě 40 °C a byla zfiltrována přes 0,2 μπι filtr. Filtrát byl plněn do viálek. Takto vzniklý roztok může být přímo použit pro biologické experimenty. (Koncentrace přibližně 100 mmol Gd/1).

259 • fc ···· ·· ·· ·· • · · * · · · · · « » · · · · · · · · ··· ··· ···< < • · · ··· ···· ·· · ·· ···· ·· ·· • •fcfc

Příklad 73

a) 1,2,3,4,6-Penta-O-acetyl-a -D-glucopyranosa

Analogickým způsobem jako bylo popsáno pro syntézu titulní sloučeniny popsané v Příkladu 70a, poskytlo použití 100 g (555, 0 mmol) oc-D-glukopyranosy se směsí 1000 ml absolutního pyridinu a 1000 ml anhydridu kyseliny octové po zpracování a krystalizaci z 95% vodného ethanolu 190,6 g (88,0 %) výše uvedené titulní sloučeniny ve formě bezbarvé krystalické sloučeniny. Pomocí 1H NMR spektroskopie bylo zjištěno, že titulní sloučenina je směsí α a β anomerů v poměru 98:2. Titulní sloučenina byla tedy považována za výlučně aanomerní konfiguraci.

Teplota tání: 110,5 ° C

Elementární analýza:

Spočteno: C 49,21 H 5,68

Nalezeno: C 49,24 H 5,68

b) 5-(ethoxykarbonyl)pentyl-2,3,4,6-tetra-O-acetyl-oc-Dglukopyranosid

Analogickým způsobem jako bylo popsáno pro syntézu titulní sloučeniny z Příkladu 70b, poskytlo použití 130,0 g (332,8 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 4a) s 55.8 ml (332,8 mmol) ethylesteru 6-hydroxyhexanové kyseliny a 50,6 ml (520 mmol) chloridu cíničitého v 500 ml 1,2-dichlorethanu po čištění na sloupcové chromatografií (eluent: hexan/ ethylacetát 2:1) 101,85 g (62,4 % teoretického množství) titulní sloučeniny ve formě bezbarvého a viskózního oleje. Pomocí 1H NMR spektroskopie bylo s využitím velikosti interakční konstanty J₂,₂ =8,8 Hz zjištěno, že titulní sloučenina vykazuje konfiguraci β na anomerním uhlíku a že je • 9 ···«

260 ·· ·· ··· <··· • » * fcfcfcfc fcfc 9 • fcfc ·· fcfc·· ··* ··· ·>-«· r ··· ♦·· ··«· fcfc · fcfc ···* ·« fcfc to jediná konfigurace anomerního centra. Titulní sloučenina má tedy výlučně β-konfiguraci anomerního centra.

Elementární analýza:

Spočteno: C 52,94 H 6,77

Nalezeno: C 52,77 H 6,70

c) 5-(Karboxy)pentyl-2,3,4,6-tetra-O-benzyl-a-Dglukopyranosid

K míchané suspenzi 100,0 g (204,96 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 73b ve 150 ml dioxanu bylo při laboratorní teplotě a za intenzivního míchání po částech přidán celkem 169,14 g (3,02 mol) jemně práškovaného hydroxidu draselného. Kvůli zvýšení účinnosti míchání bylo do reakční směsi přidáno dalších 150 ml a takto získaná suspenze byla zahřáta k varu a při této teplotě bylo po kapkách přidáno celkem 264 ml (2,218 mol) benzylbromidu během dvou hodin. Reakční směs byla míchána 4 hodiny Při teplotě 110 °C a poté 12 hodin při laboratorní teplotě. Kvůli zpracování byla reakční směs nalita pomalu do 2,0 litru ledové vody a vodná fáze byla extrahována s diethyletherem. Po promytí takto získané etherové fáze a jejím vysušení nad síranem sodným, byla anorganika odfiltrována a rozpouštědlo bylo odpařeno za sníženého tlaku. Přebytečný benzylbromid byl poté z reakční směsi oddestilován na vakuové pumpě při teplotě oleje 180 °C. Takto získaný olejovitý zbytek byl čištěn chromatografii na silikagelu s využitím směsi ethylacetát/hexan (1:10) jako elučního činidla.

Výtěžek: 128,8 g (84,3 % teoretického množství) výše zmíněné titulní sloučeniny ve formě silně viskózního oleje. Elementární analýza:

Spočteno: C 75,68 H 7,16

Nalezeno: C 75,66 H 7,23

4 · 4 4 4 4

261

4

3s d) 2,3,4,6-Tetra-O-benzyl-l-O-[1-D-[6-hexannová kyselinaN-(3-oxa-lH,1H,2H,2H,4H,4H,5H,5H-perfluortridecyl)-amid]glukopyranosa

V 825 ml suchého tetrahydrofuranu bylo rozpuštěno 68,5 g (91,79 mmol) titulní sloučeniny popsané v Příkladu 73c společné s 9,25 g (91,79 mmol) triehylaminu. Po ochlazení reakční směsi na teplotu -15 °C až -20 °C byl za míchání přikapán při této teplotě roztok 12,64 g (92,5 mmol) isobutylesteru chlormravenčí kyseliny ve 150 ml suchého tetrahydrofuranu, přičemž rychlost přidávání je taková, aby teplota směsi nepřesáhla -10 °C. Směs byla míchána 15 minut při teplotě -15 °C a poté byl pomalu přikapán roztok 46.40 g (91,79 mmol) IH,IH,2H,2H-heptadekafluor-1-(2-aminoethyoxy)děkanu a 9,25 g (91,79 mmol) triehylaminu, rozpuštěných ve 200 ml suchého tetrahydrofuranu při teplotě -20 °C. Směs byla míchána hodinu při teplotě -15 °C a poté 2 hodiny při laboratorní teplotě a směs byla poté odpařena do sucha za sníženého tlaku. Získaný zbytek byl rozpuštěn ve 250 ml ethylacetátu a byl dvakrát promyt s 300 ml nasyceného roztoku hydrogenuhličitanu sodného a poté jednou se 400 ml vody. Po vysušení organické fáze nad síranem sodným byly soli odfiltrovány a ethylacetát byl odpařen ve vakuu. Získaný olejovitý zbytek byl čištěn chromatografií na silikagelu s využitím směsi dichlormethan/hexan/2-propanol (10:5:1) jako elučního činidla.

Výtěžek: 104,7 g (92,4% teoretického množství) výše zmíněné titulní sloučeniny ve formě bezbarvého a viskozního oleje. Elementární analýza:

Spočteno: C 57,38 H 4,98 N 1,13 F 26,15

Nalezeno: C 57,27 H 5,09 N 1,11 F 26,08 • · · · · · • ·

262

e) Ι-Ο-β-D-[6-hexanová kyselina-N-(3-oxa-lH,IH,2H,2H,4H,4H, 5H,5H-perfluortridecyl)-amid]-glukopyranosa

40,0 g (32,38 mmoi) titulní sloučeniny z Příkladu 73d bylo rozpuštěno v 750 ml 2-propanolu a bylo přidáno 2,0 g paladiového katalyzátoru (10% Pd/C). Reakční směs byla hydrogenována 12 hodin při teplotě 22°C a tlaku 1 atm vodíkové atmosféry. Katalyzátor byl odfiltrován a filtrát byl odpařen do sucha. Získaný zbytek byl rozpuštěn ve 300 ml dimethylsulfoxidu a takto získaný roztok produktu byl vysrážen přídavkem celkem 1000 ml diethyletheru a vyloučená sraženina byla odfiltrována za vzniku 22,05 g (90,2% teoretického množství) titulní sloučeniny ve formě bezbarvého a krystalického prášku s teplotou tání 122-124 °C.

Elementární analýza : ...

Spočteno: C 36,01 H 5,92 N 1,75 F 40,34

Nalezeno: C 36,07 H 6,08 N 1,76 F 40,66

f) Výroba přípravku z titulní sloučeniny příkladu 12 z WO 99/01161 (1,4,7-Tris{1,4,7-tris(N-karboxylatomethyl)-10-(N-lmethyl-3-aza-2,5-dioxo-pentan-l,5-diyl] -1,4,7,10tetraazacyklododekan, Gd-Komplex}-10-[2-(N-ethyl-Nperfluoroktylsulfonyl)-amino]-acetyl-1,4,7,10-tetraazacyklododekan) a Ι-Ο-β-D-[6-hexanové kyseliny-N-(3-oxa1H,IH,2H,2H,4H,4H,5H,5H-perfluortridecyl)-amid]-glukopyranosa

K roztoku 37 ml roztoku 1,4,7-tris (1,4,7-tris(Nkarboxylatomethyl)-10-(N-l-methyl-3-aza-2,5-dioxo-pentan-l,5diyl]-1,4,7,10-tetraazacyklododekan, Gd komplex]-10-[2-(Nethyl-N-perfluoroktylsulfonyl}-amino]-acetyl-1,4,7,10tetraazacyklododekanu (300 mmol/1) rozpuštěném v 0,45 % vodného roztoku chloridu sodného (pH 7,4; 0,25 mg/1

CaNa₃DTPA) bylo přidáno 20,29 g (25,9 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 73e a směs byla pomocí 0,9% vodného • ·

263 • J» φ • · · «· e roztoku chloridu sodného na celkový objem 111 ml. Směs byla 2 hodiny míchána na 60 °C v ultrazvukové lázni. Roztok byl ochlazen na laboratorní teplotu a hodnota pH byla nastavena pomocí přídavku 2N hydroxidu sodného na 7,4. Směs byla zfiltrována přes 0,2 μιη filtr a filtrát byl plněn do viálek Získaný roztok může být přímo použit pro biologické experimenty. (Koncentrace přibližně 100 mmol Gd/1).

Příklad 74

a) 1-0-(1H,1H,2H,2H-Perfluorodecyl)-(2,3,4,6-tetra-O-acetyl)a-D-mannopyranosa

Použití 50 g (128,09 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 70a, která byla určena jako směs 4:1 α a β anomerů, s roztokem 75,84 g (128,1 mmol) 1-hydroxy-lH,1H,2H,2Hperfluorodekanu ve 150 ml 1,2-dichlorethanu a 19,47 g (166,53 mmol) chloridu cíničitého, analogickým způsobem jako při syntéze titulní sloučeniny z Příkladu lb) a 4b) , vedlo po zpracování pomocí sloupcové chromatografie (Eluent: hexan/ethylester kyseliny octové 2:1) ke vzniku 74,2 g (63.4% teoretického množství) výše uvedené titulní sloučeniny ve formě viskózního a bezbarvého oleje. 1H NMR spektroskopie s využitím velikosti interakční konstanty Ji,₂ = 1,3 Hz zjistila, že titulní sloučenina má na anomerním centru konfiguraci a, takže může být považována za čistý a-anomer titulní sloučeniny.

Elementární analýza:

Spočteno: C 44,65 H 2,53 F 35,32

Nalezeno: C 44,77 H 2,61 F 35,09

b) 1-0-(1H,1H,2H,2H-Perfluorodecyl)-a-D-mannopyranosa • · • · · ·

264 • · · · ·· · · neutralizován kationického g (27,33 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 74a bylo suspendováno ve 400 ml absolutního methanolu a při teplotě 5 °C bylo přidáno katalytické množství methanolátu sodného. Směs byla míchána 3h při laboratorní teplotš a podle kontroly pomocí tenkovrstvé chromatografie (eluent: chloroform/methanol 9:1) bylo zjištěno, že průběh reakce je kvantitativní. Kvůli zpracování byl čirý reakční roztok s iontoměničem Amberlite IR 120 iontoměniče, iontoměnič byl vzn-iklý methanolický roztok byl odpařen do sucha za sníženého tlaku. Získaný krystalický zbytek byl dvakrát krystalizován z ethanolu. ^ΧΗ NMR spektroskopie na základě velikosti interakční konstanty J_x,₂ = 1,0 Hz zjistila, že titulní sloučenina má na anomerním centru konfiguraci a. Jmenovaná je výlučnou konfigurací na anomerním centru, že případně vzniklá β-konfigurace titulní pod hranicí rozpoznání pomocí ÍH NMR (H -forma) odfiltrován a konfigurace a to znamená, sloučeniny je spektroskopie. Titulní sloučenina tedy byla připravena jako čistý α-anomerní izomer.

Výtěžek: 16,2 g (94,6 % teoretického množství) bezbarvé a krystalické tuhé látky.

Teplota tání: 172-174 °C za rozkladu.

Elementární analýza :

Spočteno: C 30,69 H 2,41 F 51,57 Nalezeno: C 30,57 H 2,48 F 51,65

c) Výroba přípravku z kovového komplexu II a 1-0(1H,ÍH,2H,2H-Perfluorodecyl)-a-D-mannopyranosy K 50 ml roztoku kovového komplexu II (150 mmol/1), rozpuštěném v 0,45% vodném roztoku chloridu sodného (pH 7,4/ 0,25 mg/l CaNa₃DTPA), byl přidán roztok 2,01 g (3,21 mmol) ·· ··· · • · · · • ·

	265	• · · «· ·	ti * • ·	• ««titi ···· «· ··
titulní	sloučeniny z	Příkladu	74b, rozpuštěné ve	200	ml
ethanolu	a směs byla	míchána 2	hodiny při teplotě	50	°C.

Roztok byl odpařen ve vakuu a zbytek byl doplněn destilovanou vodou na celkový objem 75 ml. Směs byla míchána 10 minut při teplotě 40 °C a byla zfiltrována přes 0,2 μπι filtr. Filtrát byl nalit do viálek. Připravený roztok je vhodný pro přímé použití při biologických experimentech. (Koncentrace přibližně 100 mmol Gd/1).

Pří-klad 7 5

a) 1-0-(1H,1H,2H,2H-Perfluorododecyl)-2,3,4,6-tetra-O-acetyla-D-mannopyranosa

Použití 35 g (89,66 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 70a, která je směsí 4:1 příslušných α a β anomerů, s roztokem 50,60 g (89,7 mmol) 1-hydroxy-lH,1H,2H,2H-perfluorododekanu ve 100 ml 1,2-dichlorethanu a celkem 13,63 g (16,61 mmol) chloridu cíničitého, analogickým způsobem jako bylo popsáno u syntézy titulní sloučeniny z Příkladů lb) , 4b) a 5b) , vedlo po zpracování a čištění pomocí sloupcové chromatografie (Eluent: hexan/ethylacetát = 2:1) ke vzniku 62.49 g (68.7 % teoretického množství) výše zmíněného viskózního a bezbarvého oleje. ^XH NMR spektroskopie na základě velikosti interakční konstanty Ji,₂ = 1,4 Hz zjistila, že titulní sloučenina má na anomerním centru konfiguraci a, která je výlučnou konfigurací titulní sloučeniny na anomerním centru. Titulní sloučenina tedy může být připravena jako čistý a-anomerní izomer.

Elementární analýza:

Spočteno: C 42,62 H 2,28 F 39,32

Nalezeno: C 42,55 H 2,38 F 39,40 • · · · « ·

266 • « * · φ <·· · · ·· · · ··

b) 1-0-(ÍH,ÍH,2H,2H-Perfluorododecyl)-a-D-mannopyranosa g (24,64 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 75a bylo suspendováno ve 400 ml absolutního methanolu a při teplotě 5 °C bylo přidáno katalytické množství methanolátu sodného. Reakce byla míchána 3h při laboratorní teplotě a na základě kontroly reakční směsi pomocí tenkovrstvé chromatografie (Eluent: chloroform/methanol-9:1) bylo zjištěno, že průběh reakce je kvantitativní. Kvůli zpracování byl čirý reakční roztok neutralizován s iontoměničem Amberlite IR 120 (H⁺forma) kationického iontoměniče, iontoměnič byl odfiltrován a vzniklý methanolický roztok byl odpařen do sucha za sníženého tlaku. Získaný krystalický zbytek byl dvakrát krystalizován ze směsi 2-propanol/ethanol (1:1). ²H NMR spektroskopie na základě velikosti interakční konstanty J_i(2 = 1,0 Hz zjistila, že titulní sloučenina má na anomerním centru konfiguraci a. Jmenovaná konfigurace a je výlučnou konfigurací na anomerním centru, to znamená, že případně vzniklá β-konfigurace titulní sloučeniny je pod hranicí rozpoznání pomocí ³H NMR spektroskopie. Titulní sloučenina tedy byla připravena jako čistý α-anomerní izomer.

Výtěžek: 16,96 g (90,8% teoretického množství) bezbarvé krystalické tuhé látky.

Teplota tání: 187-188 °C za rozkladu.

Elementární analýza :

Spočteno: C 29,77 H 2,08 F 54,93 Nalezeno: C 29,70 H 2,28 F 54,83

c) Výroba přípravku z kovového komplexu VI a 1-0(1H,ÍH,2H,2H-Perfluorododecyl)-a-D-mannopyranosy

K 52 ml roztoku kovového komplexu VI (180 mmol/1) rozpuštěné v 0,45% vodného roztoku chloridu sodného, bylo přidáno 1,70 g • ··· «·

			•	• · ···* ·· ·
		267	•	• · · to · · to * · ·· « ·· ···· · · · ·
(2,34 mmol)	titulní	sloučeniny z Příkladu	75b	a směs byla
zahřívána 10	minut	v mikrovlnách. Roztok	byl	ochlazen na
laboratorní	teplotu,	byl zfiltrován přes	0,2	μιη filtr a

filtrát byl plněn do viálek. Takto připravený roztok může být přímo použit pro biologické experimenty. (Koncentrace přibližně 180 mmol Gd/1).

Příklad 76

a) 2,3,4,6-Tetra-O-acetyl) -1-O-a-D- [3, 6, 9-trioxa- (C12-C19heptadekafluor)nonadecyl]-mannopyranosa

Použití 20 g (51,23 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 70a, která je směsí 4:1 příslušných a a β anomerů, s roztokem 30,54 g (51,23 mmol) 1-hydroxy- tris-(1H,1H,2H,2H-O)-1H,1H,2H,2H-perfluorodekanu ve 100 ml 1,2-dichlorethanu a celkem 5,98 g (51,23 mmol) chloridu cíničitého, analogickým způsobem jako bylo popsáno pro syntézu titulní sloučeniny z Příkladů lb) , 4b) a 5b) , vedlo po zpracování a čištění sloupcovou chromatografií (Eluent : hexan/ethylacetát= 1:1) ke vzniku 34,22 g (72,1 % teoretického množství) výše uvedené titulní sloučeniny ve formě bezbarvého a viskózního oleje. ^XH NMR spektroskopie na základě velikosti interakční konstanty Ji,₂ = 1,1 Hz zjistila, že titulní sloučenina má na anomerním centru konfiguraci a. Jmenovaná konfigurace je výlučnou konfigurací na anomerním centru. Titulní sloučenina tedy může být připravena jako čistý α-anomerní izomer.

Elementární analýza:

Spočteno: C 38,89 H 3,81 F 34,86

Nalezeno: C 39,02 H 3,77 F 34,90

b) 1-O-a-D- [3, 6, 9-Trioxa- (C^-Cig-heptadekaf luor) -nonadecyl) mannopyranosa • ·

268 neutralizován kationického g (21,58 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 76a bylo suspendováno v 350 ml absolutního methanol a při teplotě 5 °C bylo přidáno katalytické množství methanolátu sodného. Reakce byla míchána 3h při laboratorní teplotě a na základě kontroly reakční směsi pomocí tenkovrstvé chromatografíe (Eluent: chloroform/methanol = 6:1) bylo zjištěno, že průběh reakce je kvantitativní. Kvůli zpracování byl čirý reakční roztok s iontoměničem Amberlite IR 120 (H⁺-forma) iontoměniče, iontoměnič byl odfiltrován vzniklý methanolický roztok byl odpařen do sucha za sníženého tlaku. Získaný krystalický zbytek byl dvakrát krystalizován ze směsi ethylacetát/2-propanol/ethanol (1:0,5:1). ^XH NMR spektroskopie na základě velikosti interakční konstanty Ji,₂ = 1,0 Hz zjistila, že titulní sloučenina má na anomerním centru konfiguraci a. Jmenovaná konfigurace a je výlučnou konfigurací na anomerním centru, to znamená, že případně vzniklá β-konfigurace titulní sloučeniny je pod hranicí rozpoznání pomocí ¹H NMR spektroskopie. Titulní sloučenina tedy byla připravena jako čistý α-anomerní izomer.

Výtěžek: 15,20 g (92,9 % teoretického množství) bezbarvé krystalické tuhé látky.

Teplota tání: 141 °C .

Elementární analýza:

Spočteno: C 34.84 H 3.59 F 42.58 Nalezeno: C 34.72 H 3.66 F 42.67

c) Výroba přípravku z titulní sloučeniny Příkladu 68 a l-0-α -D- [3,6, 9-trioxa- (Ci₂-Ci₉-heptadekafluor) -nonadecyl] mannopyranosy

Ke 38 ml roztoku titulní sloučeniny z Příkladu 68 (300 mmol/1), rozpuštěné v 0,45% vodného roztoku chloridu sodného ·· ··· ·

269 • 0 0 0 0 ···· 00 00 (pH 7,4; 0,25 mg/1 CaNa₃DTPA) , bylo přidáno 3,71 g (4,89 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 76b a bylo pomocí 0,9% vodného roztoku chloridu sodného doplněno na celkový objem 114 ml. Směs byla míchána 2 hodiny při teplotě 60 °C v ultrazvukové lázni. Roztok byl ochlazen na laboratorní teplotu a pH roztoku bylo nastaveno na hodnotu 7,4 pomocí přídavku 2N hydroxidu sodného. Roztok byl zfiltrován přes 0,2 μιη filtr a filtrát byl plněn do viálek. Takto připravený roztok byl plněn do viálek. Roztok může být přímo použit pro biologické experimenty. (Koncentrace přibližně 100 mmol Gd/1).

Příklad 77

a) 2,3,4,6-Tetra-O-acetyl-l-a-D-[3-thiopropionová kyselinaN-(3-oxa-lH,1H,2H,2H,4H,4H,5H,5H-perfluortridecyl)-amid]mannopyranosa

V 500 ml suchého tetrahydrofuranu bylo rozpuštěno 25,0 g (57,28 mmol); [připraveno podle: Ponpipom, Mitree M. ;

Bugianesi, Robert L.; Robbins, James C.; Doebber, T. W.; Shen, Τ. Y.; J. Med. Chem.; 24; 12; 1981; 1388-1395] 3(tetra-O-acetyl-a-D-mannopyranosylmerkapto)-propionové kyseliny společné s 5,77g (57,28 mmol) triehylaminu. Směs byla ochlazena na teplotu -15 °C až -20 °C a při této teplotě byl za míchání přikapán roztok 7,82 g (57,28 mmol) isobutylesteru chlormravenčí kyseliny ve 100 ml suchého tetrahydrofuranu, přičemž rychlost přidávání byla taková, aby teplota směsi nepřestoupila -10 °C. Reakce byla míchána 15 minut při teplotě -15 °C a byl pomalu přikapán roztok 29,05 g (57,28 mmol) ΙΗ,ΙΗ,2H,2H-heptadekafluor-1-(2-aminoethyoxy)děkanu a 5,77g (57,28 mmol) triehylaminu, jako roztok ve 200 ml suchého tetrahydrofuranu při teplotě -20 °C. Směs byla míchána hodinu při teplotě -15 °C a poté 2 hodiny při

AAAA

AA AAAA

270 laboratorní teplotě a směs byla poté odpařena do sucha za sníženého tlaku. Získaný zbytek byl rozpuštěn ve 250 ml ethylacetátu a byl dvakrát promyt s 200 ml nasyceného roztoku hydrogenuhličitanu sodného a poté jednou se 300 ml vody. Po vysušení organické fáze nad síranem sodným byly soli odfiltrovány a ethylacetát byl odpařen ve vakuu. Získaný olejovitý zbytek byl čištěn chromatografií na silikagelu s využitím směsi dichlormethan/hexan/2-propanol (8:5:1) jako elučního činidla. Výtěžek: 44,90 g (84,7% teoretického množství) výše uvedené titulní sloučeniny ve formě bezbarvého a silně viskózního oleje.

Elementární analýza:

Spočteno: C 37,63 H 3,48 N 1,51 S 3,46 F 34,89

Nalezeno: C 37,77 H 3,37 N 1,61 S 3,57 F 35,21

b) Ι-α-D-[3-thíopropionová kyselina-N-(3-oxa1H,1H, 2H, 2H, 4H,4H,5H,5H-perfluortridecyl)-amid]-mannopyranosa 30 g (32,41 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 77a bylo suspendováno ve 400 ml absolutního methanolu a při teplotě 5 °C bylo přidáno katalytické množství methanolátu sodného. Reakce byla míchána 3h při laboratorní teplotě a na základě kontroly reakční směsi pomocí tenkovrstvé chromatografie (Eluent: chloroform/methanol = 9:1) bylo zjištěno, že průběh reakce je kvantitativní. Kvůli zpracování byl čirý reakční roztok neutralizován s iontoměničem Amberlite IR 120 (H⁺forma) kationického iontoměniče, iontoměnič byl odfiltrován a vzniklý methanolický roztok byl odpařen do sucha za sníženého tlaku. Získaný krystalický zbytek byl krystalizován ze směsi ethylacetát/methanol (0,5:1). ’Ή NMR spektroskopie na základě velikosti interakční konstanty J_i/2 = 1,1 Hz zjistila, že titulní sloučenina má na anomerním centru konfiguraci a. Jmenovaná konfigurace α je výlučnou konfigurací na anomerním • · · ·

271 • · φ · φ φφφφ φ· φφ centru, to znamená, že případně vzniklá β-konfigurace titulní sloučeniny je pod hranicí rozpoznání pomocí ^XH NMR spektroskopie. Titulní sloučenina tedy byla připravena jako čistý α-anomerní izomer.

Výtěžek: 23,76 g (96,8 % teoretického množství) bezbarvé krystalické tuhé látky. Teplota tání: 113 - 114,5 °C Elementární analýza :

Spočteno: C 33,30 H 3,19 N 1,85 S 4,23 F 42,64

Nalezeno: C 33,21 H 3,26 N 1,96 S 4,08 F 42,77

c) Výroba přípravku z titulní sloučeniny z Příkladu 66 a 1-a -D-[3-thiopropionová kyselina-N-(3-oxa-lH,1H,2H,2H,4H,4H,5H,5H-perfluortridecyl)-amid]-mannopyranosy

Ke 47 ml roztoku titulní sloučeniny z Příkladu 66 (330 mmol/1), rozpuštěnému ve 0,45% vodném roztoku chloridu sodného (pH 7,4 / 0,25 mg/1 CaNa₃DTPA), byl přidán roztok

27,41 g (36,19 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 77b, rozpuštěné ve 200 ml ethanolu, a směs byla míchána 2 hodiny při teplotě 50 °C. Roztok byl odpařen do sucha a zbytek byl naředěn pomocí destilované vody na celkový objem 155 ml. Směs byla míchána 10 minut při teplotě 40 °C a byla zfiltrována přes 0,2 μπι filtr. Filtrát byl naplněn do viálek. Získaný roztok může být přímo použit pro biologické experimenty, (koncentrace přibližně 100 mmol Gd/1).

Příklad 78

a) 2,3,4,6-Tetra-O-acetyl-l-p-D- [3, 6, 9-trioxa- (C12-C19heptadekafluor)-nonadecyl]-glukopyranosyluronová kyselina

20,2 g (50,85 mmol) methyl (l-brom-2,3,4-tri-0-acetyl-a -D-glukopyranosid)uronátu [připraveno podle: Pelzer; HoppeSeyler's Z. Physiol. Chem.; 314; 1949; 234, 237 popř. Goebel;

• ti ti «ti·· · · ti

272 • ti ti titi ti ti ti • ti titititi • titititi titititi titi titi

Babers; J. Biol. Chem.; 111; 1935; 347, 350 a Bollenback et al.; J. 7\mer. Chem. Soc.; 77; 1955; 3310, 3313.] a 60, 64 g (101,7 mmol) 3, 6,9-trioxa- (Ci₂-Ci₉-heptadekafluor) nonadekan-1olu bylo rozpuštěno ve 250 ml vodného acetonitrilu a při laboratorní teplotě bylo přidáno 13,0 g čerstvě vysráženého oxidu stříbrného. Reakce byla míchána 12 hodin při laboratorní teplotě a nerozpuštěná stříbrná sůl byla odfiltrována, soli byly dobře promyty s dichlormethanem a takto získaný filtrát byl odpařen do sucha ve vakuu. Získaný zbytek byl čištěn pomocí sloupcové chromatografie (Eluent: hexan/ethylacetát= 3:1).

Výtěžek: 22,99 g (53,3 % teoretického množství) výše uvedené titulní sloučeniny ve formě bezbarvého vysoce viskózního oleje.

Elementární analýza:

Spočteno: C 41,05 H 3,92 F 38,06

Nalezeno: C 41,20 H 3,76 F 38,22

b) 1-0- (3-D— [3, 6, 9-trioxa- (Ci₂-Ci₉-heptadekafluor) -nonadecyl] glukopyranosyluronová kyselina

10,0 g (11,78 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 78a bylo suspendováno ve 200 ml směsi, složené z methanolu a 0,5 molárního roztoku hydroxidu sodného v poměru 2:1 za míchání při laboratorní teplotě. Reakce byla míchána 12 h při laboratorní teplotě a kvůli zpracování byl čirý reakční roztok neutralizován s iontoměničem Amberlite IR 120 (H⁺forma) kationického iontoměniče, iontoměnič byl odfiltrován a vzniklý methanolický roztok byl odpařen do sucha za sníženého tlaku. Získaný krystalický zbytek byl čištěn krystalizaci ze směsi ethylacetát/methanol (0,25:1). ^XH NMR spektroskopie na základě velikosti interakční konstanty Ji,₂ = 9,2 Hz zjistila, že titulní sloučenina má na anomerním centru konfiguraci β.

φ ·· · φ * φφ φφφφ • Φ φ · φ · · φ φ ·

273 φφ· φφφ φφφφ φφ φ φ· φφφφ φφ φφ

Jmenovaná konfigurace β je výlučnou konfigurací na anomerním centru, to znamená, že případně vzniklá α-konfigurace titulní sloučeniny je pod hranicí rozpoznání pomocí ^ΧΗ NMR spektroskopie. Titulní sloučenina tedy byla připravena jako čistý β-anomerní izomer.

Teplota tání: 78,5 ° C

Elementární analýza:

Spočteno: C 34,21 H 3,26 F 41,81

Nalezeno: C 34,38 H 3,26 F 41,90

c) Výroba přípravku z kovového komplexu I a 1-0-[β—D—[3,6,9trioxa- (Ci2-Cig-heptadekafluor) -nonadecyl] glukopyranosyluronové kyseliny

Ke 38 ml roztoku kovového komplexu I (280 mmol/1), rozpuštěné v 0,45% vodného roztoku chloridu sodného (pH 7,4; 0,25 mg/1 CaNasDTPA), bylo přidáno 19,18 g (24,83 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 78b a směs byla doplněna pomocí 0,9% roztoku chloridu sodného na celkový objem 53,2 ml. Směs byla míchána 2 hodiny při teplotě 60 °C ultrazvukové lázni. Roztok byl ochlazen na laboratorní teplotu a pH roztoku bylo nastaveno na hodnotu 7,4 pomocí přídavku 2N hydroxidu sodného. Roztok byl zfiltrován přes 0,2 μιη filtr a filtrát byl plněn do viálek. Takto připravený roztok byl plněn do viálek. Roztok může být přímo použit pro biologické experimenty. (Koncentrace přibližně 200 mmol Gd/1).

Příklad 79

a) 6- (2-0xa-lH, IH, 3H, 3H, 4H, 4H-perfluordecyl) -0^Χ,0²,0³,0⁴diisopropyliden-a-D-galaktopyranosa

K míchané suspenzi 2,01 g (70,0 mmol; 80% suspenze v minerálním oleji) hydridu sodného v 25 ml dimethylformamidu • fc fcfcfcfc

274 fcfc · fcfcfcfc fcfc · • fcfc fcfcfc fcfcfcfc • fcfc fcfc fcfcfcfc fcfc fcfc bylo při laboratorní teplotě pomalu přikapáno celkem 12,15 g (46, 66 mmol) O¹,0²,0³,0⁴-diisopropyliden-oc-galaktopyranosy [příprava podle: Levene; Meyer; J. Biol. Chem.; 64; 1925; 473 popř. McCreath; Smith; J. Chem. Soc.; 1939; 387, 389 a Freudenberg; Hixon; Chem. Ber.; 56; 1923; 2119, 2122] rozpuštěné ve 200 ml absolutního dimethylformamidu. Směs byla míchána dalších 120 minut při laboratorní teplotě a poté bylo přikapáno celkem 30,09 g (48,0 mmol) 1-brom-lH,ÍH,2H,2Hperfluorododekanu, rozpuštěného ve 150 ml absolutního dimethylformamidu. Reakční roztok byl míchán dalších 12 hodin při laboratorní teplotě. Kvůli zpracování byla reakční roztok pomalu nalit do 1 litru ledové vody a směs byla extrahována s diethyletherem. Spojené organické fáze byla promyty dvakrát 200 ml nasyceného hydrogenuhličitanu sodného a poté dvakrát s 200 ml vody. Po vysušení organické fáze pomocí síranu sodného byly soli odfiltrovány a rozpouštědlo bylo odpařeno do sucha ve vakuu. Získaný olejovitý zbytek byl čištěn pomocí chromatografíe na silikagelu s využitím směsi ethylacetát/ hexan (1:10) jako eluentu.

Výtěžek: 29,8 g (79,3 % teoretického množství) výše uvedené titulní sloučeniny ve formě viskózního bezbarvého oleje. Elementární analýza:

Spočteno: C 35,75 H 2,87 F 49,47

Nalezeno: C 35,64 H 2,98 F 49,54

b) 6-(2-0xa-lH,ÍH,3H,3H,4H,4H-perfluordecyl)-a-D-galaktopyranosa g (24,8 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 79a bylo mícháno s 300 ml 1% vodné kyseliny sírové a směs byla 3 hodiny míchána při teplotě 80 °C. Po ochlazení na laboratorní teplotu byla reakční směs neutralizována s roztokem hydroxidu barnatého a vyloučený síran barnatý byl odfiltrován. Čirý φ φ φ * φ φ

··· φφφ φ φ φ φ • φ φ φφ φφφφ φφ φφ

275 vodný filtrát byl lyofilizován. IH NMR spektroskopie prokázala, že titulní sloučenina je směsí α a b anomerů a že jejich poměr je 1:1,4. Výše jmenovaná titulní sloučenina tedy byla izolována jako směs α a b anomerů v poměru 1:1,4 a rozdělení anomerů nebylo provedeno.

Výtěžek: 15,28 g (98,4 % teoretického množství) výše uvedené titulní sloučeniny ve formě bezbarvého lyofilizátu. Elementární analýza (spočteno na bezvodou sloučeninu): Spočteno: C 35,75 H 2,87 F 49,47

Nalezeno: C 35,64 H 2,98 F 49,54

c) Výroba přípravku z titulní sloučeniny z Příkladu 67 a 6(2-0xa-lH, IH, 3H, 3H, 4H, 4H-perfluordecyl) -a-D-galaktopyranosy Ke 43 ml roztoku titulní sloučeniny z Příkladu 67 (250 mmol/1), rozpuštěné v 0,45% vodném roztoku chloridu sodného (pH 7,4 / 0,25 mg/1 CaNa₃DTPA), byl přidán roztok 1,68 g (2,69 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 79b, rozpuštěné ve 200 ml ethanolu, a směs byla 2 hodiny zahřívána na teplotu 50 °C. Roztok byl odpařen do sucha za sníženého tlaku a zbytek byl naředěn s destilovanou vodou na celkový objem 107,5 ml. Směs byla míchána 10 minut při teplotě 40 °C a by.l zfiltrován přes 0,2 μπι filtr. Filtrát byl plněn do viálek. Zéskaný roztok může být přímo použit do biologických experimentů. (Koncentrace přibližně 100 mmol Gd/1).

Příklad 80

a) 1-O-a-D-[(1-perfluoroktylsulfonylpiperazin-4-karbonyl-)methyl]mannopyranosa g (52,8 mmol) 1-Perfluoroktylsulfonylpiperazinu (připraveno podle popisu v DE 196 03 033) a 31,73 g (53 mmol) 2,3,4,6-tetra-O-benzyl-a-D-karboxymethyl-mannopyranosy

99

9 9 9 9 9 9 9 9 9 *· ··«·

276 • ♦ · · · · 9

9 9 9 99 99 9 9 (příprava podle popisu v DE 197 28 954) bylo rozpuštěno ve 300 ml tetrahydrofuranu. Při teplotě 0 °C bylo přidáno 24,73 g (100 mmol) EEDQ (ethylester 1,2-dihydro-2-ethoxychinolin-lkarboxylové kyseliny) a směs byla míchána 3 hodiny při teplotě 0 °C, a poté byla směs 6 hodin míchána při laboratorní teplotě. Získaný roztok byl odpařen do sucha za sníženého tlaku a zbytek byl čištěn chromatografií na silikagelu (Mobilní fáze: hexan/ethylacetát = 10:1). Frakce obsahující produkt byly odpařeny do sucha, zbytek byl rozpuštěn ve směsi 200 ml methanolu a 150 ml dichlormethanu a směs byla hydrogenována 8 hodin v přítomnosti paladia na uhlí (10 % Pd/C 2 g) . Hydrogenační katalyzátor byl odfiltrován a filtrát byl odpařen do sucha. Zbytek byl krystalizován ze směsi aceton/diethylether.

Výtěžek: 30,39 g (73% teoretického množství) voskovité tuhé látky.

Elementární analýza:

Spočteno: C 30,47 H 2,68 F 40,96 N 3,55 S 4,07

Nalezeno: C 30,61 H 2,75 E 41,10 N 3,46 S 4,12

b) Výroba přípravku z kovového komplexu I a 1-0-a-D-[(1perfluoroktylsulfonylpiperazin-4-karbonyl-)-methyl]mannopyranosy

Ke 32 ml roztoku kovového komplexu I (280 mmol/1), rozpuštěného v 0,45% vodném roztoku chloridu sodného (pH 7,4; 0,25 mg/1 CaNasDTPA), bylo přidáno 4,71 g (5,97 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 80a a směs byla doplněna pomocí 0,9% vodného roztoku chloridu sodného na celkový objem 55 ml. Směs byla zahřívána 2 hodiny při teplotě 60 °C v ultrazvukové lázni. Roztok byl ochlazen na laboratorní teplotu a hodnota pH byla nastavena na 7,4 pomocí přídavku 2N hydroxidu sodného. Směs byla zfiltrována přes 0,2 μπι filtr a filtrát ·· ·· ♦ · · ···· · β « ·« ···· ·· ····

277 • · · · ♦ · · » · » ·♦ · ·♦ ··*· ·· ·Φ byl naplněn do viálek. Připravený roztok je možné přímo použít pro biologické experimenty, (koncentrace přibližně 200 mmol Gd/1).

Příklad 81

a) 3-Oxa-2H,2H,4H,4H,5H,5H-perfluortridekanová kyselina, sodná sůl g (38,3 mmol) 3-Oxa-2H, 2H, 4H, 4H,5H,5H-perfiuortridekanové kyseliny (připravené podle popisu v DE 196 03 033) bylo rozpuštěno ve 300 ml ethanolu a bylo přidáno 7,7 ml 5N vodného hydroxidu sodného. Směs byla odpařena do sucha a zbytek byl sušen ve vakuu (8 hodin 60°C).

Výtěžek: 20,85 g (kvantitativně) bezvodého, krystalického prášku.

Elementární analýza:

Spočteno: C 26,49 H 1,11 F 59,35 Na 4,22

Nalezeno: C 26,60 H 1,19 F 59,47 Na 4,30

b) Výroba přípravku z titulní sloučeniny I a 3-0xa2H,2H,4H,4H,5H,5H-perfluortridekanové kyseliny, sodné soli

Ke 32 ml roztoku kovového komplexu I (280 mmol/1), rozpuštěného v 0,45% vodném roztoku chloridu sodného (pH 7,4; 0,25 mg/1 CaNa₃DTPA), bylo přidáno 2,09 g (3,84 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 81a a směs byla doplněna pomocí 0,9% vodného roztoku chloridu sodného na celkový objem 90 ml. Směs byla zahřívána 2 hodiny při teplotě 60 °C v ultrazvukové lázni. Roztok byl ochlazen na laboratorní teplotu a hodnota pH byla nastavena na 7,4 pomocí přídavku 2N hydroxidu sodného. Směs byla zfiltrována přes 0,2 μιη filtr a filtrát byl naplněn do viálek. Připravený roztok je možné přímo použít pro biologické experimenty. (Koncentrace přibližně 100 mmol Gd/1).

• fc fcfcfc· fcfc fcfc

I fcfc ·

I · · •fc fcfcfcfc

278 fc • fc • fc • fc fcfcfcfc fcfc « fcfcfc

c) Výroba přípravku z kovového komplexu I a 3-0xa2H,2H,4H,4H,5H,5H-perfIuortridekanové kyselině, sodná sůl

Ke 32 ml roztoku kovového komplexu I (280 mmol/1), rozpuštěného v 0,45% vodném roztoku chloridu sodného (pH 7,4; 0,25 mg/1 CaNa₃DTPA), bylo přidáno 1,00 g (1,84 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 81a a směs byla doplněna pomocí 0,9% vodného roztoku chloridu sodného na celkový objem 90 ml. Směs byla zahřívána 2 hodiny při teplotě 60 °C v ultrazvukové lázni. Roztok byl ochlazen na laboratorní teplotu a hodnota pH byla nastavena na 7,'4 pomocí přídavku 2N hydroxidu sodného. Směs byla zfiltrována přes 0,2 μιη filtr a filtrát byl naplněn do viálek. Připravený roztok je možné přímo použít pro biologické experimenty. (Koncentrace přibližně 100 mmol Gd/1).

d) Výroba přípravku z kovového komplexu I a 3-0xa2H,2H,4H,4H,5H,5H-perfIuortridekanové kyseliny, sodná sůl

Ke 32 ml roztoku kovového komplexu I (280 mmol/1), rozpuštěného v 0,45% vodném roztoku chloridu sodného (pH 7,4; 0,25 mg/1 CaNa₃DTPA) , bylo přidáno 0,54 g (1,00 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 81a a směs byla doplněna pomocí 0,9% vodného roztoku chloridu sodného na celkový objem 90 ml. Směs byla zahřívána 2 hodiny při teplotě 60 °C v ultrazvukové lázni. Roztok byl ochlazen na laboratorní teplotu a hodnota pH byla nastavena na 7,4 pomocí přídavku 2N hydroxidu sodného. Směs byla zfiltrována přes 0,2 gm filtr a filtrát byl naplněn do viálek. Připravený roztok je možné přímo použít pro biologické experimenty. (Koncentrace přibližně 100 mmol Gd/1).

Příklad 82 •9 «*·» • fc fcfcfcfc ♦ fc fcfc • · ···*·♦· fc • fcfc fcfc · 9, 9 9

279 ··· *···’*···· • fc 9 ·· fcfcfcfc fc· fcfc

a) 1-Perfluoroktylsulfonyl-4-(3,6,9,12,15-pentaoxahexadekanoyl)-piperazin g (35,2 mmol) Perfluoroktylsulfonylpiperazinu (viz Příklad 80a) bylo rozpuštěno ve 300 ml dichlormethanu a bylo přidáno 5,06 g (50 mmol) triehylaminu. Směs byla ochlazena na teplotu 0 °C a během 20 minut byl přikapán roztok 14,24 g (50 mmol) 3,6,9,12,15-pentaoxahexanoylchloridu a směs byla míchána 3 hodiny při teplotě 0 °C. Pak bylo přilito 400 ml 5% vodné kyseliny chlorovodíkové a směs byla promíchána. Organická fáze byla oddělena, sušena nad síranem hořečnatým a byla odpařena do sucha za sníženého tlaku. Zbytek byl chromatografován na silikagelu (Mobilní fáze= dichlormethan/ methanol: 15:1).

Výtěžek: 26,44 (92 % teoretického množství) voskovité tuhé látky.

Elementární analýza:

Spočteno: C 33,83 H 3,58 N 3,43 F 39,55 S 3,93

Nalezeno: C 33,96 H 3,66 N 3,50 F 39,67 S 3,82

b) Výroba přípravku z kovového komplexu I a 1-perfluoroktylsulfonyl-4- (3,6,9,12,15-pentaoxahexadekanoyl)-piperazinu

Ke 47 ml roztoku kovového komplexu I (280 mmol/1), rozpuštěného v 0,45% vodném roztoku chloridu sodného (pH 7,4; 0,25 mg/1 CaNasDTPA), bylo přidáno 4,61 g (5,64 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 82a a směs byla doplněna pomoci 0,9% vodného roztoku chloridu sodného na celkový objem 66 ml. Směs byla zahřívána 2 hodiny při teplotě 60 °C v ultrazvukové lázni. Roztok byl ochlazen na laboratorní teplotu a hodnota pH byla nastavena na 7,4 pomocí přídavku 2N hydroxidu sodného. Směs byla zfiltrována přes 0,2 μιη filtr a filtrát byl naplněn do viálek. Připravený roztok je možné přímo • · • ·

280 použít pro biologické experimenty. (Koncentrace přibližně 200 mmol Gd/1).

Příklad 83

a) 1 Η,Ι Η,2H,2H-Perfluordecylester p-toluolsulfonové kyseliny g (43,1 mmol) 1H,1H,2H,2H-Perfluordekanolu bylo rozpuštěno ve 200 ml pyridinu a při teplotě 0 °C bylo po částech přidáno 9,53 g (50 mmol) p-toluensulfonylchloridu. Směs byla míchána 5 hodin při laboratorní teplotě. Roztok byl nalit do 1000 ml ledové vody a směs byla míchána 10 minut. Sloučenina byla odfiltrována, promyta s vodou a na závěr byla krystalizována z acetonem.

Výtěžek: 22,04 g (97 % teoretického množství) bezbarvé krystalické tuhé látky.

Elementární analýza:

Spočteno: C 22,78 H 0,76 F 61,26 S 6,08

Nalezeno: C 22,89 H 0,70 F 61,39 S 6,15

b) Ci8^-C₂5-heptadekafluor-3, 6, 9,12,15-pentaoxa-pentakosan-l-ol g (37,94 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 83a, 35,74 g (150 mmol) pentaethylenglycolu a 1 g 18-crown-6 bylo rozpuštěno ve 300 ml tetrahydrofuranu a bylo přidáno 10,1 g (180 mmol) jemně práškového hydroxidu draselného. Směs byla míchána 10 hodin při laboratorní teplotě. Tuhá látka byla odfiltrována a filtrát byl odpařen ve vakuu do sucha. Zbytek byl chromatografován na silikagelu (Mobilní fáze: dichformethan/methanol= 15:1).

Výtěžek: 5,45 g (21 % teoretického množství) bezbarvého viskózního oleje.

Elementární analýza:

Spočteno: C 35,10 H 3,68 F 47,19 • ·

281

Nalezeno: C 35,22 H 3,77 F 47,10

c) Výroba přípravku z titulní sloučeniny Příkladu 69 a Ci₈C25~heptadekafluor-3,6,9,12,15-pentaoxa-pentakosan-l-olu

K 53 ml roztoku titulní sloučeniny z Příkladu 69 (310 mmol), rozpuštěné v 0,45 % vodném roztoku chloridu sodného, bylo přidáno 44,98 g (65,72 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 83b a směs byla zahřívána 10 minut v mikrovlnné troubě. Roztok byl ochlazen na laboratorní teplotu, zfiltrován přes 0,2 pm filtr a filtrát byl naplněn do viálek. Připravený roztok je možné přímo použít pro biologické experimenty. (Koncentrace přibližně 310 mmol Gd/1).

Příklad 84

a)Ν,Ν-Bis(8-hydroxy-3,6-dioxa-oktyl) perfluoroktylsulfonyl amid g (29,23 mmol) Perfluoroktylsulfonylamidu a 22,16 g (87,7 ml) 9-(tetrahydropyran-2-yl)-3,6,9-trioxa-nonylchloridu bylo rozpuštěno 200 ml acetonitrilu. Bylo přidáno 41,46 g (300 mmol) uhličitanu draselného a bylo přidáno 1 g (6 mmol) jodidu draselného a směs byla vařena 10 hodin pod refluxem. Tuhá látka byla odfiltrována a filtrát byl odpařen do sucha za sníženého tlaku. Zbytek byl rozpuštěn 400 ml ethanolu a bylo přidáno 30 ml 10% vodné kyseliny chlorovodíkové. Směs byla míchána 2 hodiny při laboratorní teplotě. pH bylo nastaveno pomocí hydroxidu sodného na hodnotu 7 a roztok byl odpařen do sucha. Zbytek byl chromatografován na silikagelu (Mobilní fáze: dichlormethan/methanol=10:1).

Výtěžek: y 1,38 g (51 % teoretického množství) bezbarvého viskozního oleje.

Elementární analýza:

Spočteno: C 31,46 H 3,43 N 1,83 F 42,30 S 4,20 • · · · • · • · · ·

282

Nalezeno: C 31,59 H 3,50 N 1,90 F 42,46 S 4,08

b) Výroba přípravku z komplexu I a N,N-Bis(8-hydroxy-3,6,dioxa-oktyl)-perfluoroktylsulfonylamidu

Ke 37 ml roztoku kovového komplexu I (280 mmol/1), rozpuštěného v 0,45% vodném roztoku chloridu sodného (pH 7,4; 0,25 mg/l CaNasDTPA), bylo přidáno 7,91 g (10,36 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 84a a směs byla doplněna pomocí 0,9% vodného roztoku chloridu sodného na celkový objem 104 ml. Směs byla zahřívána 2 hodiny při teplotě 60 °C v ultrazvukové lázni. Roztok byl ochlazen na laboratorní teplotu a hodnota pH byla nastavena na 7,4 pomocí přídavku 2N hydroxidu sodného. Směs byla zfiltrována přes 0,2 μπι filtr a filtrát byl naplněn do viálek. Připravený roztok je možné přímo použít pro biologické experimenty. (Koncentrace přibližně 100 mmol Gd/1).

Příklad 85

a) N,N-Bis(terc.butyloxykarbonylmethyl)-perfluoroktylsulf onyl amidu g (38,97 mmol) Perfluoroktylsulfonylamidu a 20,73 g (150 mol) uhličitanu draselného bylo suspendováno ve 200 ml acetonu a bylo přidáno 17,56 g (90 mmol) terč.butylesteru bromoctové kyseliny. Směs byla zahřívána 3 hodiny pod refluxem. Tuhá látka byla odfiltrována a filtrát byl odpařen do sucha za sníženého tlaku. Zbytek byl chromatografován na silikagelu (Mobilní fáze: n-hexan/ethylacetát=10:1).

Výtěžek: 23,53 g (83 % teoretického množství) bezbarvé voskovité tuhé látky.

Elementární analýza:

Spočteno: C 33,02 H 3,05 F 44,40 N 1,93 S 4,41

Nalezeno: C 33,19 H 3,11 F 44,30 N 1,99 S 4,32 • 999

283

9 999 *999

99 9999 99 9 ·

b) Ν,N-Bis(karboxymethyl)-perfluoroktylsulfonylamid, disodná sůl

23g (31,62 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 85a bylo rozpuštěno ve 300 ml trifluoroctové kyseliny a směs byla míchána 5 hodin při laboratorní teplotě. Směs byla odpařena do sucha a zbytek byl krystalizován z acetonu. Krystaly byly odfiltrovány a byly sušeny ve vakuu při teplotě 50°C.

Výtěžek: 17,7 g (91 % teoretického množství) bezbarvého krystalického prášku.

g (27,63 mmol) takto získané disodné soli bylo rozpuštěno ve 100 ml vody a 300 ml ethanolu a bylo přidáno 9,2 ml 3N vodného roztoku hydroxidu sodného. Směs byla míchána 20 minut při laboratorní teplotě a byla odpařena do sucha za sníženého tlaku. Zbytek byl sušen ve vakuu při 60 °C po dobu 8 hodin.

Výtěžek: 18,2 g bezbarvého krystalického prášku.

Elementární analýza:

Spočteno: C 21,87 H 0,61 N 2,12 E 49,00 S 4,86 Na 6,98 Nalezeno: C 22,00 H 0,70 N 2,20 F 49,17 S 4,93 Na 7,10

c) Výroba přípravku z kovového komplexu II a N,Nbis(karboxymethyl)-perfluoroktylsulfonylamidu, disodné soli

Ke 41 ml roztoku kovového komplexu II (280 mmol/1), rozpuštěného v 0,45% vodném roztoku chloridu sodného (pH 7,4; 0,25 mg/1 CaNa₃DTPA), bylo přidáno 2,89 g (4,39 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 85b a směs byla doplněna pomocí 0,9% vodného roztoku chloridu sodného na celkový objem 52 ml. Směs byla zahřívána 2 hodiny při teplotě 60 °C v ultrazvukové lázni. Roztok byl ochlazen na laboratorní teplotu a hodnota pH byla nastavena na 7,4 pomocí přídavku 2N hydroxidu sodného. Směs byla zfiltrována přes 0,2 gm filtr a filtrát byl naplněn do viálek. Připravený roztok je možné přímo • ·

284 • · · · · · · · · · · · · použít pro biologické experimenty. (Koncentrace přibližně 200 mmol Gd/1).

Příklad 86

a) ÍH,ÍH,2H,2H-Perfluordodecylmonoester sírové kyseliny sodná sůl g (17,73 mmol) ÍH,ÍH,2H,2H-Perfluordodekanolu bylo rozpuštěno ve 300 ml chloroformu a při teplotě 0 °C bylo přidáno 2,82 g (17,73 mmol) komplexu oxidu sírového s pyridinem. Směs byla míchána hodinu při teplotě 0 °C a byla odpařena do sucha ve vakuu. Zbytek byl rozpuštěn ve 300 ml ethanolu a bylo přidáno 17,8 ml IN vodného roztoku hydroxidu sodného. Roztok byl odpařen do sucha a zbytek byl sušen ve vakuu (60 °C/2 h).

Výtěžek: 11,81 g (kvantitativně), Elementární analýza:

Spočteno:	C 21,64 H 0,61 F 59,89	Na 3,45 S	4,81
Nalezeno:	C 21,70 H 0,72 F 60,00	Na 3,57 S	4,92
b) Výroba	přípravku z kovového	komplecu	VI a	ÍH,ÍH,2H,2H
perfluordodecylmonoesteru sírové	kyseliny,	sodné	soli

Ke 38 ml roztoku kovového komplexu VI (290 mmol/1), rozpuštěného v 0,45% vodném roztoku chloridu sodného (pH 7,4; 0,25 mg/1 CaNa₃DTPA), bylo přidáno 4,90 g (7,35 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 86a a směs byla 10 minut zahřívána v ultrazvukové lázni. Roztok byl ochlazen na laboratorní teplotu a směs byla zfiltrována přes 0,2 μτη filtr a filtrát byl naplněn do viálek. Připravený roztok je možné přímo použít pro biologické experimenty. (Koncentrace přibližně 290 mmol Gd/1) .

Příklad 87 • · • ·

285 • · ti · * ti titi ti ti ti · · ti titi

a) 2H,2H,4H,4H,5H,5H-3-Oxa-perfluorpentadekanové kyseliny, sodná sůl g-(16,07 mmol) 2H,2H,4H,4H,5H,5H-3-Oxa-perfluorpentadekanové kyseliny bylo rozpuštěno ve 300 ml ethanolu a bylo přidáno 16,1 ml IN vodného roztoku hydroxidu sodného. Roztok byl odpařen do sucha za sníženého tlaku a zbytek byl sušen ve vakuu ( 60 °C/2h) .

Výtěžek: 10,35 g (kvantitativně) bezbarvého amorfního prášku. Elementární analýza:

Spočteno: C 26,10 H 0,94 F 61,94 Na 3,57

Nalezeno: C 26,22 H 1,00 F 62,05 Na 3,66

b) Výroba přípravku z titulní sloučeniny z Příkladu 66 a 2H,2H,4H,4H,5H,5H-3-oxa-perfluorpentadekanové kyseliny, sodné soli

Ke 45 ml titulní sloučeniny z Příkladu 66 (270 mmol/1) , rozpuštěného v 0,45% vodném roztoku chloridu sodného (pH 7,4; 0,25 mg/1 CaNaaDTPA) , bylo přidáno 3,36 g (5,21 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 87a rozpuštěné ve 200 ml ethanolu a směs byla zahřívána 2 hodiny při teplotě 50 °C. Roztok byl odpařen do sucha a zbytek byl doplněn na objem 122 ml pomocí defilované vody. Směs byla míchána 10 minut při 40 °C a byla zfiltrována přes 0,2 μπι filtr a filtrát byl naplněn do viálek. Připravený roztok je možné přímo použít pro biologické experimenty. (Koncentrace přibližně 100 mmol Gd/1) .

Příklad 88

a) N-(1H,1H,2H,2H,4H,4H,5H,5H-3-oxaperfluortridecyl)-monoamid ethylendiamin-N,N-tetraoctové kyseliny

Ke 30 g (117,1 mmol) EDTA-Bisanhydridu suspendovaném ve 200 ml dimethylformamidu a 50 ml pyridinu bylo při teplotě 50 °C • A α··α ·· «· AA AAAA ·· A A A · A AA A

286 • AAAA

AAA A A A A po částech přidáno 10,14 g (20 mmol) 1H, 1H, 2H,2H,4H,4H, 5H,5H-3-oxa-perfluortridecylaminu a směs byla míchána 6 hodin při teplotě 50 °C. Bylo přidáno 10 ml vody, směs byla míchána 10 minut při 50 °C a byla odpařena do sucha. Zbytek byl rozpuštěn v malém množství vody a byl pomocí kyseliny octové nastaven na hodnotu 4. Nerozpuštěná sraženina byla odfiltrována a byla chromatografována na silikagelu RP-18 (Mobilní fáze: acetonitril/voda/gradient).

Výtěžek: 9,58 g (61 % teoretického množství) bezbarvé tuhé látky, obsah vody: 8 %

Elementární analýza:

Spočteno: C 33,64 H 3,59 N 5,35 F 41,12

Nalezeno: C 33,51 H 3,69 N 5,44 F 41,24

b) N-(1H,1H,2H,2H,4H,4H,5H,5H-3-oxaperfluortridecyl)-monoamid ethylendiamin-N,N-tetraoctové kyseliny, vápenatá sůl, sodná sůl

9,0 g (11,46 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 88a bylo suspendováno ve 300 ml vody a bylo přidáno 11,4 ml IN hydroxidu sodného. Poté bylo přidáno 1,15 g (11,46 mmol) uhličitanu vápenatého a směs byla míchána 5 hodin při teplotě 50 °C. Roztok byl zfiltrována filtrát byl odpařen do sucha. Výtěžek: 9,7 g (100 % teoretického množství) bezbarvé, amorfní tuhé látky. Obsah vody: 7,5 %

Elementární analýza:

Spočteno: C 31,25 H 2,98 N 4,97 F 38,20 Na 2,72 Ca 4,74

Nalezeno: C 31,40 H 3,09 N 5,10 F 38,07 Na 2,81 Ca 4,82

c) Výroba přípravku z kovového komplexu I a N(1H,1H,2H,2H,4H,4H,5H,5H-3-oxa-perfluortridecyl)monoamidu ethylendiamin-N,N-tetraoctové kyseliny, vápenatá sůl, sodná sůl • · • · Β · • · • ·

287 • · · · ♦ · · • · · * · · • · * · ti · · • * · · « <» · * · ···» ti · « ·

Ke 43 ml roztoku kovového komplexu I (280 mmol/1), rozpuštěného v 0,45% vodném roztoku chloridu sodného (pH 7,4; 0,25 mg/1 CaNa₃DTPA), bylo přidáno 2,54 g (3,01 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 88b a směs byla doplněna pomocí 0,9% vodného roztoku chloridu sodného na celkový objem 121 ml. Směs byla zahřívána 2 hodiny při teplotě 60 °C v ultrazvukové lázni. Roztok byl ochlazen na laboratorní teplotu a hodnota pH byla nastavena na 7,4 pomocí přídavku 2N hydroxidu sodného. Směs byla zfiltrována přes 0,2 pm filtr a filtrát byl naplněn do viálek. Připravený roztok je možné přímo použít pro biologické experimenty. (Koncentrace přibližně 100 mmol Gd/1).

Příklad 89

a) 1H,1H,2H,2H-Perfluordecyl-(2,2-dimethyl-5-hydroxy-l,3dioxepan-6-yl)ether g (64,64 mmol) 1H,1H,2H,2H-Perfluordekanolu bylo rozpuštěno ve 200 ml tetrahydrofuranu a přiteplotě 0 °C bylo přidáno 1,68 g (70 mmol) hydridu sodného. Směs byla míchána 2 hodiny při laboratorní teplotě, a poté 4 hodiny při teplotě 60 °C. Roztok byl dán do kovového autoklávu, potom bylo přidáno 9,31 g (64,64 mmol) 2,2-dimethyl-l,3,6-trioxabicyklo[5.1.O]oktanu a směs byla zahřívána 10 hodin na teplotu 150 °C. Reakční roztok byl nalit do ledové vody a byl dvakrát extrahován s diethyletherem. Spojené organické fáze byly odpařeny do sucha a zbytek byl chromatografován na silikagelu (Mobilní fáze: dichlormethan/Aceton=10:1).

Výtěžek: 16,12 g (41 % teoretického množství) bezbarvé tuhé látky.

Elementární analýza:

Spočteno: C 33,57 H 2,82 F 53,10

Nalezeno: C 33,69 H 2,90 F 53,35 • · · · « · • · · ·

288 • · · « · « # * · • · · » · · · · .» to • · φ «· ·*«· «a tf ·

b) 1H,1H,2H,2H-Perfluordecyl-(1-hydroxymethyl-2,3-dihydroxypropyl)-ether g (24,66 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 89a bylo rozpuštěno ve 300 ml ethanolu a bylo přidáno 30 ml 10% vodné kyseliny chlorovodíkové. Směs byla zahřívána 5 hodin pod refluxem. Hodnota pH byla nastavena na 7 pomocí hydroxidu sodného, poté byl odpařen do sucha a byl chromatografován na silikagelu RP-18 (Mobilní fáze: acetonitril/voda/gradient). Výtěžek: 12,75 g (91 % teoretického množství) bezbarvé tuhé látky

Obsah vody: 4,5 %

Elementární analýza:

Spočteno: C 29,59 H 2,31 F 56,84

Nalezeno: C 29,48 H 2,37 F 56,99

c) Výroba přípravku z titulní sloučeniny Příkladu 12 z WO

99/01161 (1,4,7-Tris{1,4,7-tris(N-karboxylatomethy1)-10-(N—l— methyl-3-aza-2,5-dioxo-pentan-l,5-diyl]-1,4,7,10-tetraazacyklododekan, Gd-Komplex}-10-[2-(N-ethyl-N-perfluoroktylsulfonyl)-amino]-acetyl-1,4,7,10-tetraazacyklododekan) a

1H,1H,2H,2H-Perfluordecyl-(1-hydroxymethyl-2,3-dihydroxypropyl)-etheru

Ke 37 ml roztoku 1,4,7-tris{1,4,7-tris(Nkarboxylatomethyl)-10-(N-l-methyl-3-aza-2,5-dioxo-pentan-l,5diyl]-1,4,7,10-tetraazacyklododekan, Gd-komplex}-10-[2-(Nethyl-N-perfluoroktylsulfonyl)-amino]-acetyl-1,4,7,10tetraazacyklododekanu (300 mmol/1), rozpuštěném v 0,45% vodného roztoku chloridu sodného (pH 7,4; 0,25 mg/1

CaNasDTPA), bylo přidáno 9,46 g (16,65 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 89b a směs byla doplněna pomocí 0,9% vodného roztoku chloridu sodného na celkový objem 111 ml.

• « · · « ·

289

Směs byla zahřívána 2 hodiny při teplotě 60 °C v ultrazvukové lázni. Roztok byl ochlazen na laboratorní teplotu a hodnota pH byla nastavena na 7,4 pomocí přídavku 2N hydroxidu sodného. Směs byla zfiltrována přes 0,2 pm filtr a filtrát byl naplněn do viálek. Připravený roztok je možné přímo použít pro biologické experimenty. (Koncentrace přibližně 100 mmol Gd/1).

Příklad 90

a) ÍH,ÍH,2H,2H-Perfluordecyl-[1,2-bis(2,2-dimethyl-1,3dioxolan-4-yl)-2-hydroxyethyl]-ether g (64,64 mmol) ÍH,ÍH,2H,2H-Perfluordekanolu bylo rozpuštěno ve 200 ml tetrahydrofuranu a při teplotě 0 °C bylo přidáno 1,68 g (70 mmol) hydridu sodného. Směs byla míchána 2 hodiny při laboratorní teplotě, a poté 4 hodiny při teplotě 60 °C. Roztok byl dán do kovového autoklávu, a bylo přidáno 15,78 g (64,64 mmol) 1,2-bis-(2,2-dimethyl-l,3-dioxolan-4yl)-oxiranu a reakce byla 10 hodin zahřívána na teplotu 150 °C. Reakční směs byla nalita do ledové vody a byla dvakrát extrahována s diethyletherem. Spojené organické fáze byla odpařeny ve vakuu do sucha a zbytek byl chromatografován na silikagelu (Mobilní fáze: dichlormethan/Aceton=10:1)

Výtěžek: 14,2 g (31% teoretického množství) bezbarvé tuhé látky.

Elementární analýza:

Spočteno: C 37,30 H 3,56 F 45,59

Nalezeno: C 37,48 H 3,66 F 45,71

b) ÍH,1H,2H, 2H-Perfluordecyl-[1,2-bis(1,2-dihydroxy-ethyl)-2hydroxyethyl]-ether g (19,76 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 90a bylo rozpuštěno ve 300 ml ethanolu a bylo přidáno 30 ml 10% vodné φ* · · ····

290 kyseliny chlorovodíkové. Směs byla zahřívána 5 hodin pod refluxem. Pomocí hydroxidu sodného bylo pH nastaveno na hodnotu 7, reakční směs byla odpařena do sucha a byla chromatografována na silikagelu RP-18 (Mobilní fáze: acetonitril/voda/ Gradient).

Výtěžek: 10,55 g (85 % teoretického množství) bezbarvé tuhé látky.

Obsah vody: 3,2 %

Elementární analýza:

Spočteno: C 30,59 H 2,73 F 51,41

Nalezeno: C 30,73 H 2,81 F 51,58

c) Výroba přípravku z kovového komplecu II a 1H,1H,2H,2Hperfluordecyl-[1,2-bis(1,2-dihydroxy-ethyl)-2-hydroxyethyl]etheru

Ke 41 ml roztoku kovového komplexu II (300 mmol/1), rozpuštěného v 0,45% vodném roztoku chloridu sodného (pH 7,4; 0,25 mg/1 CaNa₃DTPA), bylo přidáno 11,98 g (19,07 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 90b a směs byla doplněna pomocí 0,9% vodného roztoku chloridu sodného na celkový objem 64 ml. Směs byla zahřívána 2 hodiny při teplotě 60 °C v ultrazvukové lázni. Roztok byl ochlazen na laboratorní teplotu a hodnota pH byla nastavena na 7,4 pomocí přídavku 2N hydroxidu sodného. Směs byla zfiltrována přes 0,2 pm filtr a filtrát byl naplněn do viálek. Připravený roztok je možné přímo použít pro biologické experimenty. (Koncentrace přibližně 200 mmol Gd/1).

Příklad 91

a) Perfluoroktylsulfonová kyselina-N,N-bis[(8-sírovákyselina-monoester, sodná sůl)-3,6-dioxaoktyl]-amid ····

13,54 g (17,73 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 84a bylo rozpuštěno ve 300 ml chloroformu a při teplotě 0 °C bylo přidáno 2,82 g (17,73 mmol) komplexu pyridinu a oxidu sírového. Směs byla míchána hodinu při teplotě 0 °C a byla na závěr odpařena do sucha. Zbytek byl rozpuštěn ve 300 ml ethanolu a bylo přidáno 17,8 ml IN vodného roztoku hydroxidu sodného. Roztok byl odpařen dosucha a zbytek byl sušen ve vakuu (60°C / 2 h). Výtěžek: 17,15 g (kvantitativní) Elementární analýza:

Spočteno: C 24,83 H 2,50 F 33,83 N 1,45 S 9,94 Na 4,75 Nalezeno: C 24,96 H 2,62 F 33,97 N 1,53 S 10,05 Na 4,86

b) Výroba přípravku z kovového komplexu I a perfluoroktylsulfonová kyselina-N,N-bis[(8-sírová kyselinamonoester, sodná sůl)-3,6dioxaoktyl]-amid

Ke 43 ml roztoku kovového komplexu I (380 mmol/1), rozpuštěného v 0,45% vodném roztoku chloridu sodného (pH 7,4; 0,25 mg/1 CaNa₃DTPA), bylo. přidáno 142,29 g (147,06 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 91a a směs byla doplněna pomocí 0,9% vodného roztoku chloridu sodného na celkový objem 164 ml. Směs byla zahřívána 2 hodiny při teplotě 60 °C v ultrazvukové lázni. Roztok byl ochlazen na laboratorní teplotu a hodnota pH byla nastavena na 7,4 pomocí přídavku 2N hydroxidu sodného. Směs byla zfiltrována přes 0,2 μιη filtr a filtrát byl naplněn do viálek. Připravený roztok je možné přímo použít pro biologické experimenty. (Koncentrace přibližně 100 mmol Gd/1).

Příklad 92

a) Diethylester 2-(2H,2H,3H,3H,5,5H,6H,6H-1,4,-dioxaperfluortetradec-l-yl)-jantarové kyseliny • ·· ·

292 g (59,03 mmol) 1H,1H,2H,2H,4H,4H,5H,5H-3-oxaperfluortridekanolu bylo rozpuštěno ve 300 ml tetrahydrofuranu a při teplotě 0 °C bylo přidáno 1,68 g (70 mmol) hydridu sodného. Směs byla míchána hodinu při teplotě 0 °C, a poté 5 hodin při teplotě 40°C. K tomuto roztoku bylo při teplotě 40 °C během 10 minut přikapán roztok 20,25 g (80 mmol) diethylesteru 2-brom-jantarové kyseliny a směs byla míchána 12 hodin při této teplotě. Bylo přidáno 500 ml ledové vody a směs byla dvakrát extrahována s 300 ml diethyletheru. Spojené organické fáze byly odpařeny do sucha za sníženého tlaku a zbytek byl chromatografován na silikagelu (Mobilní fáze: n-hexan/ethanol=20:1).

Výtěžek: 12,05 g (30 % teoretického množství)

Elementární analýza:

Spočteno: C 35,31 H 3,11 F 47,47

Nalezeno: C 35,19 H 3,20 F 47,59

b) 2-(2H,2H,3H,3H,5H,5H,6H,6H-1,4-dioxa-perfluortetradec-1yl)-jantarová kyselina, disodná sůl

K 11,5 g (16,90 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 92a, rozpuštěné ve 300 ml methanolu, bylo přidáno 50 ml 3N vodného roztoku hydroxidu sodného a směs byla refluxována 8 hodin. Směs byla odpařena do sucha a zbytek byl rozpuštěn ve 300 ml vody. Vodná fáze byla extrahována dvakrát s 300 ml diethyletheru. Organická fáze byla okyselena s kyselinou chlorovodíkovou na pH 1 a byla dvakrát extrahována s 300 ml chloroformu. Spojené organické vrstvy byly sušeny nad síranem hořečnatým a odpařeny do sucha. Zbytek byl rozpuštěn ve 300 ml vody a byl pomocí 5% vodného roztoku hydroxidu sodného na staven na pH 7,4. Na závěr byl roztok lyofilizován.

Výtěžek: 10,50 g (93 % teoretického množství) bezbarvé amorfní tuhé látky.

·· ····

293

Obsah vody: 5,7 %

Elementární analýza:

Spočteno: C 28,76 H 1,66 F 48,33 Na 6,88

Nalezeno: C 28,88 H 1,71 F 48,25 Na 6,95

c) Výroba přípravku z kovového komplexu II a 2-(2H,2H, 3H, 3H, 5H,5H,6H,6H-1,4-dioxa-perfluortetradec-l-yl}-j antarové kyseliny, disodná sůl

K 57 ml roztoku kovového komplexu II (300 mmol/1), rozpuštěného v 0,45% vodném roztoku chloridu sodného (pH 7,4; 0,25 mg/1 CaNa₃DTPA), bylo přidáno 1,14 g (3,01 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 92b a směs byla doplněna pomocí 0,9% vodného roztoku chloridu sodného na celkový objem 154 ml. Směs byla zahřívána 2 hodiny při teplotě 60 °C v ultrazvukové lázni. Roztok byl ochlazen na laboratorní teplotu a hodnota pH byla nastavena na 7,4 pomocí přídavku 2N hydroxidu sodného. Směs byla zfiltrována přes 0,2 μπι filtr a filtrát byl naplněn do viálek. Připravený roztok je možné přímo použít pro biologické experimenty. (Koncentrace přibližně 100 mmol Gd/1).

Příklad 93

a) N-(sukcin-2-yl)-amid 2H, 2H, 4H,4H,5H,5H-3-Oxa-perfluortridekanové kyseliny

Ke 20 g (38,30 mmol) perfluortridekanové kyseliny a hydroxysukcinimidu rozpuštěných ve 150 ml dimethylformamidu bylo při teplotě 0 °C přidáno 16,51 g (80 mmol) N,Ν'dicyklohexylkarbodiimidu a směs byla míchána 3 hodiny při této teplotě. K tomuto roztoku aktivního esteru byl přidán na 0 °C ochlazený roztok 5,10 g (38,30 mmol) L-asparaginové kyseliny rozpuštěné ve 300 ml 5% vodného roztoku uhličitanu

2H,2H,4H,4H,5H,5H-3-oxa9,21 g (80 mmol) N·· 44 4· ·· 4444

294 sodného a směs byla 2 hodiny míchána při teplotě 0 °C. Roztok byl nalit do 500 ml ledové vody, vyloučená dicyklohexylmočovina byla odfiltrována a pH roztoku bylo nastaveno na hodnotu 1 pomocí koncentrované kyseliny chlorovodíkové. Směs byla extrahována třikrát se 300 ml chloroformu. Spojené organické fáze byla odpařeny do sucha a zbytek byl čištěn chromatografií na silikagelu RP-18 (Mobilní fáze: acetonitril/voda/gradient). Takto získaná dikyselina byla rozpuštěna ve 400 ml vody a pH bylo nastaveno na hodnotu 7,4' pomocí přídavku IN vodného roztoku hydroxidu sodného. Směs byla odfiltrována a filtrát byl lyofilizován. Obsah vody: 6,3 %

Výtěžek: 21,13 g (81% teoretického množství) bezbarvého amorfního prášku.

Elementární analýza:

Spočteno: C 28,21 H 1,48 N 2,06 F 47,41 Na 6,75

Nalezeno: C 28,30 H 1,53 N 2,11 F 47,53 Na 6,83

b) Výroba přípravku z titulní sloučeniny XIV a N-(sukcin-2yl)-amid 2H,2H,4H,4H,5H,5H-3-Oxa-pertluortridekanové kyseliny

Ke 37 ml roztoku kovového komplexu XIV (300 mmol/1), rozpuštěného v 0,45% vodném roztoku chloridu sodného (pH 7,4; 0,25 mg/1 CaNasDTPA), bylo přidáno 422 mg (0,62 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 93a a směs byla doplněna pomocí 0,9% vodného roztoku chloridu sodného na celkový objem 111 ml. Směs byla zahřívána 2 hodiny při teplotě 60 °C v ultrazvukové lázni. Roztok byl ochlazen na laboratorní teplotu a hodnota pH byla nastavena na 7,4 pomocí přídavku 2N hydroxidu sodného. Směs byla zfiltrována přes 0,2 μπι filtr a filtrát byl naplněn do viálek. Připravený roztok je možné přímo použít pro biologické experimenty. (Koncentrace přibližně 100 mmol Gd/1).

····

295 • ·

9

> I ··

Příklad 94

Výroba přípravku z titulní sloučeniny Příkladu 67 a perfluoroctansulfonové kyseliny, sodné soli

Ke 43 ml roztoku titulní sloučeniny z Příkladu 67 (250 mmol/1), rozpuštěného v 0,45% vodném roztoku chloridu sodného (pH 7,4; 0,25 mg/1 CaNa₃DTPA), bylo přidáno 1,34 g (2,69 mmol) perfluoroktansulfonové kyseliny, sodné soli, rozpuštěné ve 200 ml ethanolu a směs byla míchána 2 hodiny při 50 °C. Roz'tok byl odpařen do sucha a zbytek byl doplněn pomocí destilované vody na celkový objem 108 ml. Směs byla zahřívána 10 minut při teplotě 40 °C a byl zfiltrován přes 0,2 μπι filtr a filtrát byl naplněn do viálek. Připravený roztok je možné přímo použít pro biologické experimenty. (Koncentrace přibližně 100 mmol Gd/1).

Příklad 95

Výroba přípravku z titulní sloučeniny z Příkladu 68 a Perfluordekansulfonové kyseliny, sodné soli

Ke 49 ml roztoku titulní sloučeniny z Příkladu 68 (310 mmol), rozpuštěné v 0,45% vodného roztoku chloridu sodnéh, bylo přidáno 3,03 g (5,06 mmol) perfluordekansulfonové kyseliny, sodné soli a směs byla 10 minut zahřívána v mikrovlnách. Roztok byl ochlazen na laboratorní teplotu, byl zfiltrován přes 0,2 μπι filtr a filtrát byl naplněn do viálek. Připravený roztok je možné přímo použít pro biologické experimenty. (Koncentrace přibližně 310 mmol Gd/1).

Příklad 96

a) (IH,IH,2H,2H-Perfluordecyl)-5-[(1,3-dikarboxy, sůl)-fenyl]ether disodná

♦ · 9 9

9 9 9 ·» 9999

296

9 9

9999

Ke 20 g (80,62 mmol) trisodné soli 5-hydroxy-isoftalové kyseliny ve 300 ml dimethylformamidu bylo přidáno 42,5 g (80,62 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 14a a směs byla míchána 10 hodin při teplotě 60 °C. Reakční směs byla nalita do 1500 ml ledové vody a pH roztoku bylo pomocí koncentrované kyseliny sírové nastaveno na hodnotu 1. Směs byla extrahována třikrát se 300 ml chloroformu. Spojené organické fáze byly odpařeny do sucha a zbytek byl čištěn pomocí chromatografie na silikagelu RP-18 (Mobilní fáze: acetonitril/voda/ gradient). Takto vyčištěná dikyselina byla rozpuštěna ve 400 ml vody a pH bylo pomocí přídavku IN hydroxidu sodného nastaveno na pH 7,4. Směs byla zfiltrována a filtrát byl lyofilizován.

Výtěžek: 20,05 g (37 % teoretického množství) bezbarvé amorfní tuhé látky.

Obsah vody: 5,0 %

Elementární analýza:

Spočteno: C 32,16 H 1,05 F 48,05 Na 6,84

Nalezeno: C 32,30 H 1,15 F 48,20 Na 6,95

b) Výroba přípravku z titulní sloučeniny u Příkladu 12 z WO 99/01161 (1,4,7-Tris{1,4,7-tris(N-karboxylatomethyl)-10-(N—l— methyl-3-aza-2,5-dioxo-pentan-l,5-diyl]-1,4,7,10tetraazacyklododekan, Gd-Komplex]-10-[2-(N-ethyl-Nperfluoroktylsulfonyl)-amino]-acetyl-1,4,7,10tetraazacyklododekan) a (1H,1H,2H,2H-perfluordecyl)-5-[(1,3dikarboxy, disodná sůl)-fenyl]-etheru

K 51 ml roztoku 1,4,7-tris{1,4,7-tris(N-karboxylatomethyl)-10-(N-l-methyl-3-aza-2,5-dioxo-pentan-l,5-diyl]1,4,7,10-tetraazacyklododekan, Gd-komplex)-10-[2-(N-ethyl-Nperfluoroktylsulfonyl)-amino]-acetyl-1,4,7,10tetraazacyklododekanu (300 mmol/1), rozpuštěné v 0,45% vodném • 6

·· ·<»·

297 roztoku chloridu sodného (pH 7,4; 0,25 mg/1 CaNa₃DTPA), bylo přidáno 6,86 g (10,2 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 96a a směs byla pomocí 0,9% vodného roztoku chloridu sodného doplněna na celkem 153 ml. Směs byla zahřívána 2 hodiny při teplotě 60 °C v ultrazvukové lázni. Roztok byl ochlazen na laboratorní teplotu a hodnota pH byla nastavena na 7,4 pomocí přídavku 2N hydroxidu sodného. Směs byla zfiltrována přes 0,2 μιη filtr a filtrát byl naplněn do viálek. Připravený roztok je možné přímo použít pro biologické experimenty. (Koncentrace přibližně 100 mmol Gd/1).

Příklad 97

Výroba přípravku z kovového komplexu XIV a 3-Oxa-2H,2H, 4H,4H,5H,5H-perfluortridekanové kyseliny, sodné soli

Ke 4 ml roztoku kovového komplexu XIV (320 mmol/1) , rozpuštěného v 0,45% vodném roztoku chloridu sodného (pH 7,4; 0,25 mg/1 CaNa₃DTPA) , bylo přidáno 434 mg (0,55 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 80a a směs byla doplněna pomocí 0,9% vodného roztoku chloridu sodného na celkový objem 12,8 ml. Směs byla zahřívána 2 hodiny při teplotě 60 °C v ultrazvukové lázni. Roztok byl ochlazen na laboratorní teplotu a hodnota pH byla nastavena na 7,4 pomocí přídavku 2N hydroxidu sodného. Směs byla zfiltrována přes 0,2 μιη filtr a filtrát byl naplněn do viálek. Připravený roztok je možné přímo použít pro biologické experimenty. (Koncentrace přibližně 100 mmol Gd/1).

Příklad 98

a) terc.butylester (adamant-l-yl)-3-oxa-propionové kyseliny K 15,22 g (100 mmol) 1-adamantanolu ve 300 ml 50% vodného roztoku hydroxidu draselného, 200 ml toluenu bylo při teplotě 0 °C přidánpo 29,26 g (150 mmol) terč. butylesteru bromoctové fcfc fcfcfcfc ·· fcfcfcfc kyseliny a směs byla 2 hodiny intenzivně míchána. Reakce byla nalita do 1500 ml vody a byla extrahována dvakrát se 300 ml diethyletheru. Spojené organické fáze byly sušeny nad síranem hořečnatým a byly odpařeny do sucha za sníženého tlaku. Zbytek byl chromatografován na silikagelu (Mobilní fáze: nhexan/díethylether 20:1).

Výtěžek: 21,58 g (81 % teoretického množství) viskózního, bezbarvého oleje.

Elementární analýza:

Spočteno: C 72,14 H 9,84 Nalezeno: C 72,26 H 9,95

b) (Adamant-l-yl)-3-oxa-propionová kyselina g (75 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 98a bylo při teplotě 0 °C rozpuštěno ve 200 ml trifluoroctové kyseliny a směs byla míchána 8 hodin při laboratorní teplotě. Reakce byla odpařena do sucha a zbytek byl krystalizován z diisopropyletherm Výtěžek: 14,68 g (93 % teoretického množství) bezbarvé destičkovité krystaly.

Elementární analýza:

Spočteno: C 68,55 H 8,63

Nalezeno: C 68,41 H 8,74

c) 1-(Perfluoroktylsulfonyl)-4-[(adamant-l-yl)-oxapropionyl]piperazin g (66,6 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 98b a 37,50 g (66,6 mmoi) 1-perfluoroktylsulfonyl-piperazinu bylo rozpuštěno ve 300 ml tetrahydrofuranu a při teplotě 0 °C bylo přidáno 32,15 g (130 mmol) ethylesteru 1,2-dihydro-2ethoxychinolin-l-karboxylové kyseliny (EEDQ). Směs byla míchána 5 hodin při laboratorní teplotě. Roztok byl odpařen

299

• · · · • t · · ·» ·« ·· «»·♦ • · · do sucha za sníženého tlaku a zbytek byl chromatografován na silikagelu (Mobilní fáze: dichlormmethan/diethylether= 30:1). Výtěžek: 43,05 g (85 % teoretického množství) bezbarvé tuhé látky.

Elementární analýza:

Spočteno: C 37,90 H 3,31 N 3,68 S 4,22 F 42,47

Nalezeno: C 38,04 H 3,42 N 3,49 S 4,11 F 42,30

d) Výroba přípravku z 0,5 dílu kovového komplexu I a 0,5 dílu klathrátu cyklodextrin-Hhydrátu a 1-(perfluoroktylsulfonyl)4-[(adamant-l-yl)-oxapropionyl]-piperazinu

Ke 32 ml roztoku kovového komplexu I (280 mmol/1), rozpuštěného v 0,45% vodném roztoku chloridu sodného (pH 7,4; 0,25 mg/1 CaNaaDTPA), bylo přidáno 6,81 g (8,96 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 98c z β-cyklodextrin hydrátu a směs byla doplněna pomocí 0,9% vodného roztoku chloridu sodného na celkový objem 98 ml. Směs byla zahřívána 2 hodiny při teplotě 60 °C v ultrazvukové lázni. Roztok byl ochlazen na laboratorní teplotu a hodnota pH byla nastavena na 7,4 pomocí přídavku 2N hydroxidu sodného. Směs byla zfiltrována přes 0,2 μιη filtr a filtrát byl naplněn do viálek. Připravený roztok je možné přímo použít pro biologické experimenty. (Koncentrace přibližně 100 mmol Gd/1).

Příklad 99

a) N-(1-adamantyl)-amid kyseliny 3-oxa-2H,2H,4H,4H,5H,5Hperfluortridekanové

K 15,12 g (100 mmol) 1-Aminoadamantanu, 52,21 (100 mmol) 3-Oxa-2H,2H,4H,4H,5H,5H-Perfluortridekanové kyseliny a 11,51 g (100 mmol) N-hydroxysukcinimidu, rozpuštěného ve 300 ml tetrahydrofuranu bylo při teplotě 0 °C přidáno 30,95 g (150 mmol) N,N-dicyklohexylkarbodiimidu. Směs byla míchána 2 hodin

300

při teplotě 0 °C, a poté 6 hodin při laboratorní teplotě.

Vyloučená močovina byla odfiltrována, filtrát byl odpařen do sucha a zbytek byl chromatografován na silikagelu (Mobilní fáze: dichlormethan/aceton= 30:1). Výtěžek: 54,4 g (83 % teoretického množství) voskovité tuhé látky.

Elementární analýza:

Spočteno: C 40,32 H 3,38 N 2,14 F 49,28

Nalezeno: C 40,47 H 3,49 N 2,03 F 49,09

b) Výroba přípravku z 0,6 dílů kovového komplexu II a 0,4 dílů klathrátu cyclodextrin hydrátu a N-(1-adamantyl)-amid 3oxa-2H,2H,4H,4H,5H,5H-perfluortridekanové kyseliny

Ke 41 ml roztoku kovového komplexu II (250 mmol/1), rozpuštěného v 0,45% vodném roztoku chloridu sodného (pH 7,4; 0,25 mg/l CaNa₃DTPA), bylo přidáno 4,48 g (6,83 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 99a a 7,87 g (6,83 mmol) β-cyklodextrin monohydrátu a směs byla doplněna pomocí 0,9% vodného roztoku chloridu sodného na celkový objem 103 ml. Směs byla zahřívána 2 hodiny při teplotě 60 °C v ultrazvukové lázni. Roztok byl ochlazen na laboratorní teplotu a hodnota pH byla nastavena na 7,4 pomocí přídavku 2N hydroxidu sodného. Směs byla zfiltrována přes 0,2 pm filtr a filtrát byl naplněn do viálek. Připravený roztok je možné přímo použít pro biologické experimenty. (Koncentrace přibližně 100 mmol Gd/1).

Příklad 100

a) N-(adamantyl)amid 2-[N-(Ethyl)-N-(perfluoroktylsulfonyl)amino]-octové kyseliny

K 15,12 g (100 mmol) 1-aminoadamantanu, 58,52 g (100 mmol) N-(ethyl)-N-(perfluoroktylsulfonyl)-aminooctové kyseliny a 11,51 g (100 mmol) N-hydroxysukcinimidu,

301

rozpuštěného ve 300 ml tetrahydrofuranu bylo při teplotě 0 °C přidáno 30,95 g (150 mmol) N,N-dicyklohyexylkarbodiimidu. Směs byla míchána 2 hodiny při teplotě 0 °C, a poté 6 hodin při laboratorní teplotě. Vyloučená močovina byla odfiltrována, filtrát byl odpařen do sucha a zbytek byl chromatografován na silikagelu (Mobilní fáze: dichlormethan/ aceton= 30:1 ).

Výtěžek: 55,65 g (79 % teoretického množství) amorfní tuhé látky.

Elementární analýza:

Spočteno: C 37,51 H 3,29 F 45,85 N 1,99 S 4,55

Nalezeno: C 37,64 H 3,41 F 45,99 N 2,12 S 4,43

b) Výroba přípravku z 0,6 dílů kovového komplexu I a 0,4 dílů klathrátu z N-(1-adamantyl)-amid β-cyklodextrin-hydrátu a 2[N-(ethyl)-N-(perfluoroktylsulfonyl)-amino]-octové kyseliny.

Ke 32 ml roztoku kovového komplexu I (280 mmol/L) rozpuštěném ve 0,45% vodného roztoku chloridu sodného (pH 7,4; 0,25 mg/L CaNa₃DTPA) bylo přidáno 4,20 g (5,97 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 100a a 6,88 g (5,97 mmol) a βcyklodextrinmonohydrátu a směs byla doplněna pomocí 0,9% vodného roztoku chloridu sodného na celkový objem 90 ml. Směs byla zahřívána 2 hodiny při teplotě 60 °C v ultrazvukové lázni. Roztok byl ochlazen na laboratorní teplotu a hodnota pH byla nastavena na 7,4 pomocí přídavku 2N hydroxidu sodného. Směs byla zfiltrována přes 0,2 μιη filtr a filtrát byl naplněn do viálek. Připravený roztok je možné přímo použít pro biologické experimenty. (Koncentrace přibližně 100 mmol Gd/1).

Příklad 101 • · · ·

• · · ·

302 • · · 4 · · · ·· ··«· «« « «

a) 6-N-a)Benzyloxykarbonyl-2-N-(3,6,9,12-tetraoxatridekanoyl) -lysin-[1-(4-perfluoroktylsulfonyl)-piperazin]-amid

K 50 g (60,20 mmol ) titulní sloučeniny z Příkladu lc a 7,10 g (70 mmol) triehylaminu, rozpuštěných ve 350 ml dichlormethanu, byl při teplotě 0 °C přikapán roztok 16,85 g (70 mmol) 3,6,9,12-tetraoxatrídekanoylchloridu v 50 ml dichlormethanu a směs byla míchána 3 hodiny při teplotě 0 ⁰C. Bylo přidáno 200 ml 5% vodné kyseliny chlorovodíkové a směs byla míchána 5 minut při laboratorní teplotě. Organická fáze byla oddělena, sušena nad síranem hořečnatým a odpařena do sucha za sníženého tlaku. Zbytek byl chromatografován na silikagelu ( Mobilní fáze: dichlormethan/aceton =15:1 Výtěžek: 30,94 g (92% teoretického množství) bezbarvého tuhého oleje.

Elementární analýza:

Spočteno: C 40,63 H 4,19 F 31,21 N 5,41 S 3,10

Nalezeno: C 40,75 H 4,08 F 31,29 N 5,58 S 3,25

b) 2-N-(3,6,9,12-tetraoxatridekanoyl)-lysin-[1-(4- perfluoroktylsulfonyl)piperazin]

53,96 g (52,15 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 101a bylo rozpuštěno v 500 ml ethanolu a bylo přidáno 6 g paladiového katalyzátoru (10% Pd/C ). Směs byla hydrogenována při laboratorní teplotě. Katalyzátor byl odfiltrován a zbytek byl odpařen do sucha za sníženého tlaku.

Výtěžek: 43,0 g (kvantitativně) bezbarvé tuhé látky.

Elementární analýza:

Spočteno: C 36,01 H 4,14 F 35,86 N 6,22 S 3,56

Nalezeno: C 36,20 H 4,23 F 35,99 N 6,38 S 3,71

c) 6-N-[1,4,7-Tris(karboxylatomethyl)-1,4,7,10- tetraazacyklododekan-10-(pentanoyl-3-aza-4-oxo-5-methyl-5-yl)]-2-N*

303

99 9 (3,6,9,12-tetraoxatridekanoyl)-lysin-[1-(4-perfluoroktylsulfonyl }-piperazin]-amid, Gd-komplex

21,84 ( 24,25 mmol ) titulní sloučeniny z Příkladu 101b,

2,79 g (24,25 mmol ) N-hydroxysukcinimidu, 2,12 g (50 mmol) chloridu lithného a 15,27g (24,25 mmol) 1,4,7-tris(karboxylatomethyl) -10- [ (3-aza-4-oxo-5-methyl-5-yl)]- pentanová kyselina]-1,4,7,10- tetraazacyklododekan, Gd-komplex bylo za slabého zahřívání rozpuštěno ve 200 ml dimethylsulfoxidu. Při teplotě 10 °C bylo přidáno 8,25 g (40 mmol) N,Ndicyklohexylkarbodiimidu a směs byla míchána přes noc při laboratorní teplotě. Reakční roztok byl nalit do 3000 ml acetonu a směs byla míchána 10 minut. Vyloučená tuhá látka byla odfiltrována a byla čištěna pomocí chromatgrafie na silikagelu (silikagel RP-18, Mobilní fáze: Gradient voda/ ethanol/acetonitril). Výtěžek: 28,21 g (81 % teoretického množství ) bezbarvé tuhé látky.

Obsah vody: 11,0 %

Elementární analýza (spočteno na bezvodou látku)

Spočteno: C 36,53 H 4,33 F 21,36 N 8,34 S 2,12 Gd 10,40 Nalezeno: C 36,64 H 4,48 F 21,39 N 8,29 S 2,15 Gd 10,57

Příklad 102

a) 6-N-Benzyloxykarbonyl-2-N-(propyl-3-sulfonová kyselina)lysin [1-(4-perfluoroktylsulfonyl}-piperazin)-amid

K 50 g (60,20 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu lc a 7,10 g (70 mmol) triehylaminu, rozpuštěných ve 250 ml suchého tetrahydrofuranu, byl při teplotě 50 °C přikapán roztok 7,33 g (60 mol) propansultonu v 50 ml tetrahydrofuranu a směs byla míxhána 3 hodiny při teplotě 60° C. Bylo přidáno 200 ml 5% vodného roztoku chlorovodíkové kyseliny a směs byla míchána 5 minut při laboratorní teplotě. Organická fáze byla oddělena, sušena nad síranem hořečnatým a byla odpařena ve vakuu do

304 : :

• ·· · ·»·· sucha. Zbytek byl chromatografován na silikagelu (Mobilní fáze: dichlormethan/aceton =15:1

Výtěžek: 45,16 g (79 % teoretického množství) bezbarvého tuhého oleje.

Elementární analýza:

Spočteno: C 36,56 H 3,49 F 33,90 N 5,88 S 6,73

Nalezeno: C 36,72 H 3,35 F 33,79 N 5,78 S 6,75

b) 2-N-(propyl-3-sulfonová kyselina)-lysin[1-(4-perfluoroktýlsulfonyl)piperazin]-amid

49, 68 g ( 52,15 mmol ) titulní sloučeniny z Příkladu

102a bylo rozpuštěno v 500 ml ethanolu a bylo přidáno 6 g paladiového katalyzátoru (10% Pd/C). Směs byla hydrogenována při laboratorní teplotě. Katalyzátor byl odfiltrován a filtrát byl odpařen do sucha za sníženého tlaku.

Výtěžek: 42,69 g (kvantitativně) bezbarvé tuhé látky. Elementární analýza:

Spočteno: C 30,81 H 3,32 F 39,46 N 6,84 S 7,83

Nalezeno: C 30,64 H 4,1 F 39,29 N 6,68 S 7,89

c) 6-N-[1,4,7-Tris(karboxylatomethyl)-1,4,7,10-tetraazacyklododekan-10-(pentanoyl-3-aza-4-oxo-5-methyl-5-yl)]-2-N(propyl-3-sulfonová kyselina)-lysin-[1-(4-pertluoroktylsulfonylpiperazin]-amid, Gd-komplex

19,85 g (24,25 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 102b,

2,79 g (24,25 mmol) N-hydroxysukcinimid, 2,12 g (50 mmol) chloridu lithného a 15,27g (24,25 mmol) 1,4,7-tris (karboxylatomethyl)-10-[(3-aza-4-oxo-5-methyl-5-yl)]pentanová kyselina]-1,4,7,10-tetraazacyklododekan, Gd-komplex bylo za slabého zahřátí rozpuštěno ve 200 ml dimethylsulfoxidu. Při teplot 10 °C bylo přidáno 8,25 g (40 mmol) N,N-dicykohexylkarbodiimidu a směs byla poté míchána * ·

305

0·0 · · 0 «0 · 00 0000 přes noc při laboratorní teplotě. Roztok byl nalit do 3000 ml acetonu a směs byla míchána 10 minut. Vyloučená sraženina byla odfiltrována a byla čištěna chromatografií na silikagelu (silikagel RP-18, Mobilní fáze: Gradient voda/ethanol/ acetonitril).

Výtěžek: 28, 13 g (81 % teoretického množství ) bezbarvé tuhé látky. Obsah vody: 11,0 %

Elementární analýza (spočteno na bezvodou látku)

Spočteno: C 33,27 H 3,70 F 22,36 N 8,73 S 4,44 Gd 10,89 Nalezeno: C 32,41 H 3,88 F 22,49 N 8,69 S 4,35 Gd 10,97

Příklad 103

a) 6-N-Benzyloxykarbonyl-2-N,N-bis(propyl-3-sulfonová kyselina)-lysin-[1-(4-perfluoroktylsulfonyl)-piperazin]-amid K 50 g (60,20 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu lc a 12,14 g (120 mmol) triehylaminu, rozpuštěné ve 250 ml suchého tetrahydrofuranu bylo při teplotě 50 °C přilit roztok 14,65 g (120 mmol) 1,3-propansultonu ve 100 ml tetrahydrofuranu a směs byla míchána 3 hodiny při teplotě 60 °C. Bylo přidáno 400 ml 5% vodného roztoku chlorovodíkové kyseliny, směs byla míchána 5 minut při laboratorní teplotě, byl přidán chlorid sodný, oddělená organická fáze byla vysušena nad síranem hořečnatým a byla odpařena ve vakuu do sucha. Zbytek byl chromatografován na silikagelu (Mobilní fáze: dichlormethan/ aceton = 15:1, Výtěžek: 52,24 g (81 % teoretického množství) bezbarvého a tuhého oleje.

Elementární analýza:

Spočteno: C 35,76 H 3,66 F 30,05 N 5,21 S 8,95

Nalezeno: C 35,75 H 3,55 F 30,19 N 5,08 S 9,04

b) 2-N,N-bis(propyl-3-sulfonová kyselina)-lysin-[1-(4perfluoroktylsulfonyl)piperazin]- amid ·· ···· · a ·· ·· ···· • · « · · · · · a «

53,74 g (52,15 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 103a bylo rozpuštěno v 500 ml ethanolu a bylo přidáno 6 g paladiového katalyzátoru (14% Pd/C). Směs byla hdrogenována při laboratorní teplotě. Katalyzátor byl odfiltrován a filtrát byl odpařen do sucha za sníženého tlaku.

Výtěžek: 49,06 g (kvantitativně) bezbarvé tuhé látky. Elementární analýza:

Spočteno: C 30,64 H 3,54 F 34,33 N 5,96 S 10,23

Nalezeno: C 30,69 H 3,71 F 34,19 N 6,08 S 10,38

c) 6-N-[1,4,7-Tris(carboxylatomethyl)-1, 4,7,10- tetraazacyklododekan-10-(pentanoyl-3-aza-4-oxo-5-methyl-5-yl)]-2-N,Nbis(propyl-3-sulfonová kyselina)-lysin- [1-(4-perfluoroktylsulf onyl ) -piperazin] -amid, Gd-komplex, disodná sůl

38,76 g (24,25 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 103b

2,79 g (24,25 mmol) N-hydroxysukcinimidu, 2,12 g (50 mmol) chloridu lithného a 15,27g (24,25 mmol) 1,4,7-tris (karboxylatomethyl) -10-[ (3-aza-4-oxo-5-methyl-5-yl)]-pentanová kyselina]-1,4,7,10-tetraazacyklododekan, Gd-komplexu bylo za slabého zahřátí rozpuštěno ve 200 ml dimethylsulfoxidu. Při teplotě 10 °C bylo přidáno 8,25 g (40 mmol) N,N-dicyklohexylkarbodiimidu a směs byla míchána přes noc při laboratorní teplotě. Roztok byl nalit do 3000 ml acetonu a směs byla míchána 10 minut. Vyloučená tuhá látka byla odfiltrována a byla čištěna pomocí chromatografie na silikagelu (silikagel RP-18, Mobilní fáze: Gradient voda/ethanol/acetonitril). Výtěžek: 31,63 g (81 % teoretického množství ) bezbarvé tuhé látky. Obsah vody: 11,0 %

Elementární analýza (spočteno na bezvodou látku)

Spočteno: C 32,07 H 3,57 F 20, 06 N 7,83 S 5,97 Gd 9,76 Na 2,86 • · ··· · «· • ·· ·

307

Nalezeno: C 31,94 H 3,48 F 20,19 N 7,69 S 5,85 Gd 9,87 Na 2, 99

Příklad 104

a) 5-benzylester Ν-Trifluoracetyl- L-glutaminové kyseliny

100 g (421,5 mmol ) 5-benzylesteru L-glutaminové kyseliny bylo rozpuštěno ve směsi 1000 ml ethylesteru trifluroctové kyseliny a 500 ml ethanolu a směs byla míchána 24 hodin při laboratorní teplotě. Reakce byla odpařena do sucha za sníženého tlaku a zbytek byl krystalizován z diisopropyletheru. Výtěžek: 140,47 g (96 % teoretického množství) bezbarvého krystalického prášku.

Elementární analýza:

Spočteno: C 50,46 H 4,23 F 17,10 N 4,20

Nalezeno: C 51,35 H 4,18 F 17,03 N 4,28

b) 2-N-Trifluoacetyl-L-glutaminová kyselina-5-benzylester-Nbis(2-hydroxyethyl)-amid

K roztoku 24,9 g (24,08 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 104a, 2,53 g (24,08 mmol) diethanolaminu a 2,77 g (24,08 mmol) N-hydroxysukcinimidu, rozpuštěných ve 150 ml dimethylformamidu, bylo při teplotě 0 °C přidáno 8,25 g (40 mmol) N,N-dicyklohexylcabodiimidu. Směs byla míchána 3 hodiny při teplotě 0 °C, a poté míchána přes noc při laboratorní teplotě. Vyloučená sraženina močoviny byla odfiltrována, filtrát byl odpařen do sucha za sníženého tlaku a zbytek byl chromatografován na silikagelu (Mobilní fáze: dichlormethan/ ethanol = 20:1).

Výtěžek: 9,11 g (90% teoretického množství) tuhého oleje. Elementární analýza :

Spočteno: C 51,43 H 5,51 F 13,56 N 6,66

Nalezeno: C 51,22 H 5,41 F 13,40 N 6,75 ·· · · · · · · · · · · φ · • ·· · • * ♦ · · · ···· « • 4« 4 · · « · · » «»··«· « · · ·

c) N-Trifluoracetyl-L-glutaminová kyselina-N-bis(2-hydroxyethyl-monoamid

21,92 g (52,15 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 104b bylo rozpuštěno v 500 ml ethanolu a bylo přidáno 3 g paldiového katalyzátoru (10% Pd/C). Směs byla hydrogenována při laboratorní teplotě. Katalyzátor byl odfiltrován a filtrát byl ve vakuu odpařen do sucha.

Výtěžek: 43,0 g (kvantitativně) bezbarvé tuhé látky.

Elementární analýza:

Spočteno: C 40,01 H 5,19 F 17,26 N 8,48

Nalezeno: C 39,84 H 5,13 F 17,09 N 8,68

c) Trifluoracetyl-L-glutaminová kyselina-N-bis(2-hydroxyethylamid-5-[1-(4-perfluoroktylsulfonyl)-piperazin]-amid

K 10,96g (33,2 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 104a a 18,87g (33,2 mmol) 1-perfluoroktylsulfonyl-piperazinu, (připraveného polde DE 19603033) v 80 ml tetrahydrofuranu, bylo při teplotě 0 °C přidáno 16,42 g (66,4 mmol) EEDQ (ethylesteru 2-ethoxy-l,2-dihydrochinolin-l-karboxylové kyseliny) a směs byla míchána přes noc při laboratorní teplotě. Reakční směs byla odpařena do sucha a byla chromatografována na silikagelu (Mobilní fáze : dichlormethan /methanol =20:1). Výtěžek: 30,93 g (93 % teoretického množství) bezbarvé tuhé látky.

Elementární analýza:

Spočteno: C 39,61 H 2,89 F 35,66 N 6,19 S 3,54

Nalezeno: C 39,68 H 2,74 F 35,81 N 6,13 S 3,40

e) L-Glutaminová kyselina-N-bis(2-hydroxyethyl)-amid-5-[1-(4perfluoroktylsulfonyl)-piperazin] ·· ···· ·· ·· «· ····

Do roztoku amidu ve 200 ml ethanolu, byl při teplotě 0° C zaváděn plynný amoniak po dobu 1 hodiny. Směs byla poté míchána 4 hodiny při teplotě 0 °C. Směs byla odpařena do

sucha za sníženého	tlaku	a zbytek byl zamíchán s vodou.	Tuhá
látka byla zfiltrována a	vysušena do sucha ve vakuu (50	°C) .
Výtěžek : 26,55 g	(97%	teoretického množství) amorfní	tuhé
látky.
Elementární analýza
Spočteno: C 41,12 H	2,89	F 35, 66 N 6,19 S 3,54
Nalezeno: C 41,15 H	2,83	F 35,78 N 6,28 S 3,71

f) Ν-[1,4,7-Tris(karboxylatomethyl)-1,4,7,10- tetraazacyklododekan-10-(pentanoyl-3-aza-4-oxo-5-methyl-5-yl)]-L-glutaminová kyselina-N-bis(2-hydroxyethylamid-5-[1-(4-perfluoroktylsulfonyl) -piperazin]-amid, Gd-komplex

211,96 g (24,25 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 104e, 2,79 g (24,25 mmol) N-hydroxysukcinimidu, 2,12 g (50 mmol) chloridu lithného a 15,27g (24,25 mmol) 1,4,7-tris (karboxylatomethyl)-10-[(3-aza-4-oxo-5-methyl-5-yl)]pentanová kyselina]-1,4,7,10-tetraazacyklododekan, Gd-komplex bylo za slabého zahřátí rozpuštěno ve 200 ml dimethylsulfoxidu. Při teplotě 10 °C bylo přidáno 8,25 g (40 mmol) N,N-dicyklohexylkarbodiimidu a směs byla míchána přes noc při laboratorní teplotě. Roztok byl nalit do 3000 ml acetonu a směs byla míchána 10 minut. Vyloučená tuhá látka byla odfiltrována a byla čištěna chromatografii (silikagel RP-18, mobilní fáze: Gradient voda/ethanol/acetonitril). Výtěžek: 27,43 g (81 % teoretického množství ) bezbarvé tuhé látky. Obsah vody: 11,0%.

Elementární analýza (spočteno na bezvodou látku)

Spočteno: C 34,41 H 3,83 F 23,13 N 9,03 S 2,30 Gd 11,26 Nalezeno: C 34,34 H 3,98 F 23,29 N 9,19 S 2,15 Gd 11,07 •φ φφφφ

310

Příklad 105

a) N-Trifluoracetyl-L-glutaminová dimethyl-bis(1,1-dihydroxymethyl)amid

K roztoku 8,03g (24,08 mmol) titulní sloučeniny z

Příkladu 104a, 3,98 g (24,08 mmol) dimethyl-bis(1,1dihydroxymethyl)-aminu a 2,77 g (24,08 mmol) N-hydroxysukcinimidu, rozpuštěných ve 150 ml dimethylformamidu, bylo při teplotě 0 °C přidáno 8,25 g (40 mmol) N,N-dicyklohexylkabodiimidu. Směs byla míchána 3 hodin při teplotě 0° C, a poté pře noc při laboratorní teplotě. Vyloučená sraženina močoviny byla odsáta, filtrát byl odpařen ve vakuu do sucha a zbytek byl chromatografován na silikagelu (Mobilní fáze: dichlormethan/ethanol = 20:1). Výtěžek: 110,53 g (91% teoretického množství) tuhého oleje.

Elementární analýza :

Spočteno: C 50,00 H 5,66 F 11,86 N 7,18

Nalezeno: C 50,17 H 5,82 F 11,80 N 7,15

b) N-Trifluoracetyl-L-glutaminová kyselina-5-benzylester-[l(4-perfluoroktylsulfonyl)-piperazin] -amid

25,05 g (52,15 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 105a bylo rozpuštěno v 500 ml ethanolu a bylo přiudáno 6 g paladiového katalyzátoru (10% Pd/C). Směs byla hydrogenována při laboratorní teplotě. Katalyzátor byl odfiltrován a filtrát byl odpařen ve vakuu do sucha.

Výtěžek: 20,36 g (kvantitativně) bezbarvé tuhé látky. Elementární analýza:

Spočteno: C 40,00 H 5,42 F 14,60 N 7,18

Nalezeno: C 40,10 H 5,53 F 14,69 N 7,28 kyselina-5-benzylester-N

311 « · · ·· fc

c) N-Trifluoracetyl-L-glutaminová kyselina-N-dimethylbis(1,1-dihydroxymethyl)-amid-5-[1-(4-perfluoroktylsulfonyl)piperazin]-amid

K 12,96 g (33,2 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 105b a 18,87g (33,2 mmol) 1-perfluoroktylsulfonyl-piperazinu, (připraveno podle DE 19603033) v 800 ml tetrahydrofuranu, bylo při teplotě 0 °C 16,42 g (66,4 mmol) EEDQ (ethylester 2ethoxy-1,2-dihydrochinolin-l-karboxylové kyseliny) a směs byla míchána přes noc při laboratorní teplotě. Směs byla odpařena ve vakuu do sucha a byla chromatografována na silikagelu (Mobilní fáze : dichlormethan/methanol =20:1) Výtěžek: 28,42 g (91% teoretického množství) bezbarvé tuhé látky.

Elementární analýza:

Spočteno: C 31,93 H 3,00 F 40,40 N 5,96 S 3,41

Nalezeno: C 32,08 H 2,94 F 40,57 N 5,88 S 3,31

d) L-Glutaminová kyselina-N-[dimethyl-bis(1,1-dihydroxymethyl )]-amid-5-((1-4-pertluoroktylsulfonyl)- piperazin]-amid

Do roztoku 28,41 g (30,2 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 105c ve 200 ml ethanolu, byl při teplotě 0 °C zaváděn jednu hodinu plynný amoniak. Směs byla poté míchána 4 hodiny při teplotě 0 °C. Směs byla odpařena do sucha za sníženého tlaku a zbytek byl rozmíchán s vodou. Tuhá látka byla sušena ve vakuu (50 °C).

Výtěžek : 24,74 g (97 % teoretického množství) amorfní tuhé látky.

Elementární analýza:

Spočteno: C 32,71 H 3,46 F 38,24 N 6,63 S 3,80

Nalezeno: C 32,75 H 3,33 F 38,38 N 6,68 S 3,81 ti ti titititi

312 • ti titi ti · titititi ti· ti titititi <>· ti • •ti titi titititi tititi tititi titititi • ti ti titi titititi titi ti·

e) 2-N-[1,4,7-Tris(karboxylatomethyl)-1,4,7,10- tetraazacyklododekan-10-(pentanoyl-3-aza-4-oxo-5-methyl-5-yl)]-Lglutaminová kyselina-N-[dimethyl-bis(1,1-dihydroxymethyl)amid]-5-[1-(4-perfluoroktylsulfonyl)-piperazin)-amid, Gdkomplex

20,48 g (24,25 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 105d 2,79 g (24,25 mmol) N-hydroxysukcinimidu, 2,12 g (50 mmol) chloridu lithného a 15,27g (24,25 mmol) 1,4,7-tris (karboxylatomethyl)-10-[(3-aza-4-oxo-5-methyl-5-yl)]pentanová kyselina]-1,4,7,10-tetraazacyklododekan, Gdkomplexu bylo za slabého zahřívání rozpuštěno ve 200 ml dimethylsulfoxidu. Při teplotě 10 °C bylo přidáno 8,25 g (40 mmol) N,N-dicyklohexylkarbodiimidu a směs byla míchána přes noc při laboratorní teplotě. Roztok byl nalit do 3000 ml acetonu a směs byla míchána 10 minut. Vyloučená tuhá látka byla odfiltrována a byla čištěna chromatografíi na silikagelu (silikagel RP-18, Mobilní fáze: Gradient voda/ethanol/ acetonitril).

Výtěžek: 29,05 g (83% teoretického množství) bezbarvé tuhé látky. Obsah vody: 11,0 %

Elementární analýza (spočteno na bezvodou sloučeninu) Spočteno: C 34,12 H 3,91 F 22,38 N 8,73 S 2,22 Gd 10,90 Nalezeno: C 34,24 H 3,98 F 22,39 N 8,69 S 2,15 Gd 10,87

Příklad 106

a) N-Trifluormethylacetyl-L-glutaminová kyselina-5benzylester-[1-(4-perfluoroktylsulfonyl)piperazin]-amid

K 11,06 g (33,2 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 104a a 18,87g (33,2 mmol) 1-perfluoroktylsulfonyl-piperazinu, (připraveného podle DE 19603033) v 80 ml tetrahydrofuranu, bylo při teplotě 0 °C 16,42 g (66,4 mmol) EEDQ (ethylesteru 2-ethoxy-l,2dihydmchinolin-l-karboxylové kyseliny) a směs fcfc fcfcfc· • · «fcfc · • · · · fc ♦ · ·· · • •fc · · fcfcfcfc

313 ··· · · * · «« · • fc fc ·· fc··· «· ·· byla míchána přes noc při laboratorní teplotě. Reakce byla odpařena do sucha za sníženého tlaku a zbytek byl chromatografován na silikagelu (Mobilní fáze : dichlormethan/ methanol =20:1)

Výtěžek: 27,28 g (93 % teoretického množství ) bezbarvé tuhé látky.

Elementární analýza:

Spočteno: C 35,35 H 2,40 F 43,01 N 4,76 S 3,63

Nalezeno: C 35,48 H 2,51 F 42,87 N 4,73 S 3,50

b) N-Trifluoracetyl-L-glutaminová kyselina-5-[1-[4perfluoroktylsulfonyl)piperazin]-amid

21,92 g ( 52,15 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 106a bylo rozpuštěno v 500 ml ethanolu a bylo přidáno 3 g paladiového katalyzátoru (10% Pd/C). Směs byla hydrogenována při laboratorní teplotě. Katalyzátor byl odfiltrován a filtrát

byl odpařen	do sucha ve vakuu.
Výtěžek: 41,	37 g (kvantitativně)	bezbarvé	tuhé látky
Elementární	analýza:
Spočteno: C	28,76 Η 1,91 F 47,89	N	5,30	S	4,04
Nalezeno: C	28,84 H 2,03 F 47,79	N	5,28	S	4,19

c) N-Trifluoacetyl-L-glutaminová kyselina-N-bis(2-hydroxyethyl)-amid-5-[1-(4-perfluoroktylsulfonyl)-piperazin]-amid

K roztoku 24,9 g (24,08 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 106a, 2,53 g (24,08 mmol) diethanolaminu a 2,77 g (24,08 mmol) N-hydroxysukcinimidu, rozpuštěných ve 150 ml dimethylformamidu, bylo při teplotě 0 °C přidáno 8,25 g (40 mmol) N,N-dicyklohexylkarbodiimidu. Směs byla míchána 3 hodiny při teplotě 0 °C, a poté přes noc při laboratorní teplotě. Vyloučená močovina byla odfiltrována, filtrát byl odpařen do sucha za sníženého tlaku a zbytek byl čištěn ti· titititi • ti titititi • ti · ti··· ti· · • titi titi titititi

314 ··· «·· ···· ·· · ·· «*·> ·· ·· chromatografií na silikagelu (Mobilní fáze: = dichlormethan/ ethanol = 20:1).

Spočteno: C 31,37 H 2,75 F 43,15 N 6,36 S 3,64

Nalezeno: C 31,22 H 2,61 F 43,30 N 6,25 S 3,81

d) L-Glutaminová kyselina-N-bis(2-hydroxyethyl)-amid-5-[1-(4pertluoroktylsulfonyl)piperazin]- amid

K roztoku 26,61 g (30,22 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 106c ve 200 ml ethanolu, byl při teplotě 0 °C jednu hodinu plynný amoniak. Směs byla míchána 4 hodiny při teplotě 0 °C. Reakční směs byla odpařena do sucha za sníženého tlaku a zbytek byl rozmíchán s vodou. Tuhá látka byla odfiltrována a filtrát byl sušen ve vakuu (50 °C). Výtěžek: 23,93 g (97% teoretického množství) amorfní tuhé látky.

Elementární analýza:

Spočteno: C 30,89 H 3,09 F 39,56 N 6,86 S 3,93

Nalezeno: C 30,75 H 3,13 F 39,78 N 6,75 S 3,81

e) N-[1,4,7-Tris(karboxylatomethyl)-1,4,7,10-tetraazacyklododekan-10-(pentanoyl-3-aza-4-oxo-5-methyl-5-yl)]-Lglutaminová kyselina-N-bis(2-hydroxyethyl)-amid-5-[1-(4perfluoroktylsulfonyl)-piperazin]-amid, Gd-komplex

16,43 g (24,25 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 106d, 2,79 g (24,25 mmol) N-hydroxysukcinimidu, 2,12 g (50 mmol) chloridu lithného a 15,27g (24,25 mmol) 1,4,7-Tris (karboxylatomethyl)-10-[(3-aza-4-oxo-5-methyl-5-yl)]pentanová kyselina]-1,4,7,10-tetraazacyklododekan, Gdkomplexu bylo za slabého zahřívání rozpuštěno ve 200 ml dimethylsulfoxidu. Při teplotě 10 °C bylo přidáno 8,25 g (40 mmol) N,N-dicyklohexylkarbodiimidu a směs byla poté míchána

315 ·· to··· ·· ·· ·« ···· • · · ···· ·· · ··· · · · · · · • · · ··· ««·· • · * ·· to to toto ·· ·· přes noc při laboratorní teplotš. Roztok byl nalit do 3000 ml acetonu a směs byla míchána 10 minut. Vyloučená tuhá látka byla odfiltrována a byla čištěna pomocí chromatografie na silikagelu (silikagel RP-18, Mobilní fáze: Gradient voda/ ethanol/acetonitril).Výtěžek: 28, 10 g (83% teoretického množství) bezbarvé tuhé látky.

Obsah vody: 11,0 %

Elementární analýza (spočteno na bezvodou sloučeninu) Spočteno: C 34,41 H 3,83 F 23,13 N 9,03 S 2,30 Gd 11,26 Nalezeno: C 34,44 H 4,98 F 23,19 N 8,89 S 2,15 Gd 11,17

Příklad 107

a) N-Trifluoracetyl-glutaminová kyselina-5-benzylester-[1-(4perfluoroktylsulfonyl)-piperazin]-amid

K ll,06g (33,2 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 104a a 18,87g (33,2 mmol) 1-perfluoroktylsulfonyl-piperazinu, (připraveného podle DE 19603033) v 80 ml tetrahydrofuranu, bylo při teplotě 0 °C přidáno 16,42 g (66,4 mmol) EEDQ (ethylesteru kyseliny 2-ethoxy-l,2-dihydrochinolin-lkarboxylové) a směs byla míchána přes noc při laboratorní teplotě. Reakční směs byla odpařena do sucha a byla chromatografována na silikagelu (Mobilní fáze : dichlormethan /methanol =20:1)

Výtěžek: 27,28 g (93 % teoretického množství) bezbarvé tuhé látky.

Elementární analýza:

Spočteno: C 35,35 H 2,40 F 43,01 N 4,76 S 3,63

Nalezeno: C 35,48 H 2,54 F 42,87 N 4,73 S 3,40

b) N-Trifluoracetyl-L-glutaminová kyselina-5-[1-[4-perfluoroktylsulfonyl) -piperazin] -amid • · ·· 9999

316 i : ϊ ·· ·

21,92 g (52,15 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 107a bylo rozpuštěno v 500 ml ethanolu a bylo přidáno 3 g paladiového katalyzátoru (10% Pd/C). Směs byla hydrogenována při laboratorní teplotě. Katalyzátor byl odfiltrován a filtrát byl odpařen do sucha za sníženého tlaku.

Výtěžek: 41,37 g (kvantitativně) bezbarvé tuhé látky. Elementární analýza:

Spočteno: C 28,76 H 1,91 F 47,89 N 5,30 S 4.04

Nalezeno: C 28,84 H 1,81 F 47,79 N 5,28 S 4.16

Příklad 108

a) 6-N-Benzyloxykarbonyl-2-N-(2,3,4,5-pentahydroxy-hexanoyl)L-lysin-[1-(4-perfluoroktylsulfonyl)-piperazin]-amid

K roztoku 100,0 g (120,4 mol) titulní sloučeniny z Příkladu 21c), v 500 ml suchého tetrahydrofuranu byl přikapán při teplotě 50 °C roztok 21,45 g (120,4 mol) 5-glukonolaktonu v 50 ml tetrahydrofuranu. Směs byla míchána 3 hodiny při teplotě 60 °C a poté byla míchána při laboratorní teplotě. Reakce byla odpařena do sucha za sníženého tlaku a zbytek byl chromatografován na silikagelu.

(Mobilní fáze: dichlormethan/ethanol = 20 :1). Výtěžek: 98,37 g (82 % teoretického množství) tuhého oleje.

Elementární analýza:

Spočteno: C 38,10 H 3,70 F 32,02 N 5,55 S 3,18

Nalezeno: C 38,22 H 3,79 F 32,02 N 5,42 S 3,29

b) 2-N-(2,3,4,5-pentahydroxy-hexanoyl)-L-lysin-1-[(4perfluoroktylsulfonyl)piperazin]-amid

100,9 g (100,0 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 108a) bylo rozpuštěno ve 2000 ml ethanolu a bylo přidáno 10,0 g paladiového katalyzátoru (10% Pd/C). Směs byla hydrogenována φφ ♦ φφ φ φφφφ ·· φφ • φ · φφφφ φφ φ • φ φ · φ φφφφ hodin při laboratorní teplotě. Katalyzátor byl odfiltrován a filtrát byl odpařen ve vakuu do sucha.

Výtěžek : 87,46 g (kvantitativně) bezbarvé tuhé látky.

Elementární analýza:

Spočteno: C 32,96 H 3,57 N 6,41 S 3,67 F 36,93

Nalezeno: C 32,91 H 3,72 N 6,34 S 3,50 F 36,78

f) 6-N-[1,4,7-Tris(karboxylatomethyl)]-1,4,7,10-tetraazacyklododekan-10-N-(pentanoyl-3-aza-4-oxo-5-methyl-5-yl)]-2-N[1-Ó-a-D-karbonylmethyl-mannopyranosa]-L-lysin-[1-(4perfluoroktylsulfonyl)-piperazin]-amid, Gd-komplex

50,0 g (54,55 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 21e),

6,28 g (54,55 mmol) N-hydroxysukcinimidu, 4,62 g (109,0 mol) chloridu lithného a 34,35 g (54,55 mol) 1,4,7-tris (karboxylatomethyl)-10-(karboxy-3-aza-4-oxo-5-methyl-pent-5yl)-1,4,7,10-tetraazacyklododekan, Gd-komplexu, bylo za slabého zahřívání rozpuštěno ve 400 ml dimethylsulfoxidu. Při teplotě 10 °C bylo přidáno 16,88 g (81,8 mol) N,Ndicyklohexylkarbodiimidu a směs byla míchána přes noc při laboratorní teplotě. Roztok byl nalit do 3000 ml acetonu a směs byla míchána 10 minut. Vyloučená sraženina byla odfiltrována a byla čištěna pomocí chromatografie na silikagelu (RP-18 Mobilní fáze: Gradient voda/ethanol/ acetonitril).

Výtěžek: 75,9 g (91,0 % teoretického množství) bezbarvé tuhé látky. Obsah vody : 8,6 % .

Elementární analýza (spočteno na bezvodou látku):

Spočteno: C 35,34 H 4,09 N 8,24 S 2,10 F 21,12 Gd 10,28 Nalezeno: C 35,28 H 4,15 N 8,19 S 2,15 F 21.03 Gd 10,14

Příklad 109 • φ ·· ·♦·· φφφφ

318 • « · ·· ·

K roztoku 100,0 g (120,4 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 21c), a 12,18 g (120,4 mmol) triehylaminu v 500 ml suchého tetrahydrofuranu byl při teplotě 50 °C přidán roztok 21,45 g (120,4 mol) 5-glukonolaktonu v 50 ml tetrahydrofuranu. Směs byla míchána 3 hodiny při teplotě 60 °C a poté byla míchána přes noc při laboratorní teplotě. Pak bylo přidáno 400 ml 5% vodné chlorovodíkové kyseliny a směs byla míchána 5 minut při laboratorní teplotě. Byl přidán chlorid sodný, oddělena organická fáze, organická fáze byla vysušena nad síranem hořečnatým a byla odpařena do sucha za sníženého tlaku a zbytek byl chromatografován na silikagelu.

(Mobilní fáze: dichlormethan/ethanol = 20 :1).

Výtěžek: 100,97 g (82 % teoretického množství) tuhého oleje. Elementární analýza:

Spočteno: C 37,58 H 3,45 F 31,58 N 5,48 S 3,14

Nalezeno: C 37,72 H 3,5 9 F 31,72 N 5,42 S 3,29

b) 2-N- (2,3,4,5-pentahydroxy-hexanoyl)-L-lysin-1-[(4perfluoroktylsulfonyl)-piperazin]-amid

100,9 g (100,0 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 108a) bylo rozpuštěno ve 2000 ml ethanolu a bylo přidáno 10,0 g paladiového katalyzátoru (10% Pd/C). Směs byla hydrogenována 12 hodin při laboratorní teplotě. Katalyzátor byl odfiltrován a filtrát byl odpařen do sucha za sníženého tlaku.

Výtěžek : 87,46 g (kvantitativně) bezbarvé tuhé látky.

Elementární analýza:

Spočteno: C 32,96 H 3,57 N 6,41 S 3,67 F 36,93

Nalezeno: C 32,91 H 3,72 N 6,34 S 3,50 F 36,78

319 φφ ·φφφ

ΦΦ *» • · · φ φ φ φ φφ * • · φ φφ φφφφ φφφ φ φ · * · φ · ϊ ·· φ φφ φφφφ φφ φφ φφ φφφφ

c) 6-Ν-[1,4,7-Tris(karboxylatomethyl)]-1,4,7,10-tetraazacyklododekan-10-N-(pentanoyl-3-aza-4-oxo-5-methyl-5-yl)]-2-N[1-0-a-D-karbonylmethyl-mannopyranosa]-L-lysin-[l—(4— perfluoroktylsulfonyl)-piperazin]-amid, Gd-komplex

50,0 g (54,55 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 21e),

6,28 g (54,55 mmol) N-hydroxysukcinimidu, 4,62 g (109,0 mol) chloridu lithného a 34,35 g (54,55 mol) 1,4,7-tris (karboxylatomethyl)-10-(karboxy-3-aza-4-oxo-5-methyl-pent-5yl)-1,4,7,10-tetraazacyklododekan, Gd-komplexu, bylo za slabého zahřívání rozpuštěno ve 400 ml dimethylsulfoxidu. Při teplotě 10 °C bylo přidáno 16,88 g (81,8 mol) N,Ndicyklohexylkarbodiimidu a směs byla míchána přes noc při laboratorní teplotě. Roztok byl nalit do 3000 ml acetonu a směs byla míchána 10 minut. Vyloučená tuhá látka byla odfiltrována a byla čištěna chromatografií na silikagelu (RP18 Mobilní fáze: Gradient voda/ethanol/acetonitril).

Elementární analýza (spočteno na bezvodou látku):

Příklad 110

a) 6-N-Benzyloxykarbonyl-2-N-[1-O-a-D-karbonylmethyl(2, 3, 4, 6-tetra-O-benzyl-glukopyranosa]-L-lysin-[1- (4perfluoroktylsulfonyl)-piperazin]-amid

K roztoku 100,0 g (120,4 mol) titulní sloučeniny z Příkladu 21c), 72,1 g (120,4 mol) 1-O-a-D-karboxymethyl2,3,4,6-tetra-O-benzyl-glukopyranosy a 13,86 g (120,4 mol) Nhydroxysukcinimídu, rozpuštěných v 500 ml dimethylformamidu, bylo při teplotě 0 °C přidáno 41,27g (200,0 mmol) N,Ndicyklohexylkarbodiimidu. Směs byla míchána 3 hodiny při ·· tt·»· •tt 9999

9 9 9 9 9 9 9 9

9 9 9 9 9 9 9 ₉

320 999 ···**··· teplotě 0 °C a poté byla míchána přes noc při laboratorní teplotě. Vyloučená sraženina byla odfiltrována, filtrát byl odpařen ve vakuu do sucha a zbytek byl chromatografován na silikagelu. (Mobilní fáze : dichlormethan/ethanol =20 :1). Výtěžek: 136,1 g (87% teoretického množství) tuhého oleje. Elementární analýza:

Spočteno: C 57,32 H 4,89 N 4,31 F 24,86 S 2,47

Nalezeno: C 57,48 H 5,04 N 4,20 F 24,69 S 2,38

b) 2-N- [ 1-O-cc-D-Karbonylmethylglukopyranosa] -L-lysin-1- [ (4perfluoroktylsulfonyl)piperazin]-amid

130,0 g (100,0 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 110a) bylo rozpuštěno ve 2000 ml ethanol a bylo přidáno 10,0 g paldiového katalyzátoru (10% Pd/C). Směs byla hydrogenována 12 hodin při laboratorní teplotě. Katalyzátor byl odfiltrován a filtrát byl odpařen do sucha ve vakuu.

Výtěžek : 91,7 g (kvantitativně) bezbarvé tuhé látky.

Elementární analýza:

Spočteno: C 34,07 H 3,63 N 6,11 S 3,50 F 35,24

Nalezeno: C 33,92 H 3,71 N 6,02 S 3,42 F 35,33

c) 6-N-[1,4,7-Tris(karboxylatomethyl)]-1,4,7,10-tetraazacyklododekan-10-N-(pentanoyl-3-aza-4-oxo-5-methyl-5-yl)]-2-N[1-O-a-D-karbonylmethyl-glukopyranosa]-L-lysin-[1-(4perfluoroktylsulfonyl)-piperazin]-amid, Gd-komplex

50,0 g (54,55 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 110b),

6,28 g (54,55 mmol) N-hydroxysukcinimidu, 4,62 g (109,0 mol) chloridu lithného a 34,35 g (54,55 mol) 1,4,7-tris (karboxylatomethyl)-10-(karboxy-3-aza-4-oxo-5-methyl-pent-5yl)-1,4,7,lOtetraazacyklododekan, Gd-komplexu, bylo za slabého zahřátí rozpuštěno ve 400 ml dimethylsulfoxidu. Při teplotě 10 °C bylo přidáno 16,88 g (81,8 mol) N,N»· ··*· ·· ····

321

4 4

9

99

9 9 9 4 4 9

9 4 4 9 9

9 4 4 4 4 4

9 4 9 4 9 4

4449 49 49 dicyklohexylkarbodiimidu a směs byla míchána přes noc při laboratorní teplotě. Roztok byl nalit do 3000 ml acetonu a směs byla míchána 10 minut. Vyloučená tuhá látka byla odfiltrována a byla čištěna chromatografií na silikagelu (RP18, Mobilní fáze: Gradient voda/ethanol/acetonitril).

Elementární analýza (spočteno na bezvodou sloučeninu): Spočteno: C 35,34 H 4,09 N 8,24 S 2,10 F 21,12 Gd 10,28 Nalezeno: C 35,26 H 4,18 N 8,14 S 2,158 F 21,01 Gd 10,13

Příklad 111

a) 6-N-Benzyloxykarbonyl-2-N-[1-0-a-D-karbonylmethyl(2,3,4,6-tetra-O-benzyl-galaktopyranosa]-L-lysin-[1-(4perfluoroktylsulfonyl)-piperazin]-amid

K roztoku 50,0 g (60,2 mol) titulní sloučeniny z Příkladu 21c), 36,05 g (60,2 mmol) 1-O-a-D-karboxymethyl2,3,4,6-tetra-0 benzyl-galaktopyranosy a 6,93 g (60,2 mmol) N-hydroxysukcinimidu, rozpuštěných v 500 ml dimethylformamidu, bylo při teplotě 0 °C přidáno 20,64 g (100,0 mmol) N,N-dicyklohexylkarbodiimidu. Směs byla míchána 3 hodiny při teplotě 0 °C a směs byla míchána přes noc při laboratorní teplotě. Vyloučená sraženina byla odfiltrována, filtrát byl odpařen do sucha a byl chromatografován na silikagelu. (Mobilní fáze : díchlormethan/ethanol = 20:1).

Výtěžek: 68,1 g (87 % teoretického množství) vysoce tuhého oleje.

Elementární analýza:

Spočteno: C 57,32 H 4,89 N 4,31 F 24,86 S 2,47

Nalezeno: C 57,47 H 5,05 N 4,19 F 24,72 S 2,29 • · · · · · • · · · • ·

322 *

b) 2-N-[1-0-a-D-Karbonylmethyl-galaktopyranosa]-L-lysin-1[ (4-perfluoroktylsulfonyl)piperazin]-amid

65,0 g 50,0 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu lila) bylo rozpuštěno v 1000 ml ethanolu a bylo přidáno 5,0 g paladiového katalyzátoru (10% Pd/C). Směs byla hydrogenována 12 hodin při laboratorní teplotě. Katalyzátor byl odfiltrován a filtrát byl odpařen do sucha za sníženého tlaku.

Výtěžek : 45,85 g (kvantitativně) bezvodé tuhé látky.

Elementární analýza:

Spočteno: C 34,07 H 3,63 N 6,11 S 3,50 F 35,24

Nalezeno: C 33,93 H 3,74 N 6,01 S 3,39 F 35,05

c) 6-N-[1,4,7-Tris(karboxylatomethyl)]-1,4,7,10-tetraazacyklododekan-10-N-(pentanoyl-3-aza-4-oxo-5-methyl-5-yl)]-2-Ntl-O-oc-D-karbonylmethyl-galaktopyranosa] -L-lysin- [1- (4perfluoroktylsulfonyl)-piperazin]-amid, Gd-komplex

50,0 g (54,55 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu Illb),

6,28 g (54,55 mmol) N-hydroxysukcinimidu, 4,62 g (109,0 mol) chloridu lithného a 34,35 g (54,55 mol) 1,4,7-tris (karboxylatomethyl-10-(karboxy-3-aza-4-oxo-5-methyl-pent-5yl)-1,4,7,10-tetraazacyklododekan, Gd-komplexu, bylo za slabého zahřívání rozpuštěno ve 400 ml dimethylsulfoxidu. Při teplotě 10 °C bylo přiáno 16,88 g (81,8 mol) N,N- dicyklohexylkarbodiimid a směs byla míchána přes noc při laboratorní teplotě. Roztok byl nalit do 3000 ml acetonu a směs byla míchána 10 minut. Vyloučená pevná látka byla odfiltrována a byla čištěna pomocí chromatogryfie na silikagelu (RP-18 Mobilní fáze: Gradient voda/ethanol/acetonitril).

Výtěžek: 37,95 g (91,0% teoretického množství) bezbarvé tuhé látky. Obsah vody: 8,6%.

Elementární analýza (spočteno na suchou sloučeninu):

Spočteno: C 35,34 H 4,09 N 8,24 S 2,10 F 21,12 Gd 10,28 • · · * · · ·

Nalezeno: C 35,22 H 4,17 N 8,18 S 2,19 F 20,91 Gd 10,12

Příklad 112

a) N-Trifluoracetyl-L-glutaminová kyselina-monobenzylester

100 g (421,5 mmol) L-Glutaminové kyselinymonobenzylesteru bylo rozpuštěno ve směsi 1000 ml ethylesteru trifkuoroctové kyseliny a 500 ml ethanolu a směs byla míchána 24 hodin při laboratorní teplotě. Směs byla odpařena do sucha za sníženého tlaku a zbytek byl krystalizován z diisopropyletheru.

Výtěžek:140,47 g (96 % teoretického množství) bezbarvého krystalického prášku.

Elementární analýza:

Spočteno: C 50,46 H 4,23 F 17,10 N 4,20

Nalezeno: C 51,35 H 4,18 F 17,03 N 4,28

b) 2-N-Trifluoacetyl-L-glutaminová kyselina-monobenzylester5-N-(methyl)-N-(2,3,4,5,6-pentahydroxyhexyl)-amid k roztoku 24,9 g (24,08 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 112a, 2x g (24,08 mmol) N-methylglukaminu a 2,77 g (24,08 mmol) N-hydroxysukcinimidu, rozpuštěných ve 150 ml dimethylformamidu, bylo při teplotě 0 °C přidáno 8,25 g (40 mmol) N,N-dicyklohexylcabodiimidu. Směs byla míchána 3 hodiny při teplotě 0 °C, byla míchána přes noc při laboratorní teplotě. Vyloučená sraženina byla odfiltrována, filtrát byl odpařen dosucha ve vakuu a zbytek byl čištěn chromatografií na silikagelu (Mobilní fáze: = dichlormethan/ethanol = 20:1). Výtěžek: 9,xx g (89% teoretického množství) tuhého oleje. Elementární analýza:

Spočteno: C 51,43 H 5,51 F 13,56 N 6,66

Nalezeno: C 51,22 H 5,41 F 13,40 N 6,75 • · • · · · tt ·

324

c) N-(methyl)-N-(2,3,4,5,6-pentahydroxyhexyl)-amid kyseliny N-Trifluoracetyl-L-glutaminové

21,9xxg (52,15 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 112b bylo rozpuštěno v 500 ml ethanolu a bylo přidáno 3 g paldiového katalyzátoru (10% Pd/C). Směs byla hydrogenována při laboratorní teplotě. Katalyzátor byl odfiltrován a filtrát byl odpařen do sucha za sníženého tlaku.

Výtěžek: 43,0 g (kvantitativně) bezbarvé tuhé látky.

Elementární analýza:

Spočteno: C 40,01 H 5,19 F 17,26 N 8,48

Nalezeno: C 39,84 H 5,13 F 17,09 N 8,68

d) Trifluoracetyl-L-glutaminová kyselina-5-N-(methyl)-N(2,3,4,5,6-pentahydroxyhexyl)-amid-[1(4-perfluoroktylsulfonyl) -piperazin)-amidpiperazin)-amid

K 10,96 g (33,2 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 112c a 18,87 g (33,2 mmol) 1-pertluoroktylsulfonyl-piperazinu, (připraveno podle DE 19603033 ) v 80 ml tetrahydrofuranu, bylo při teplotě 0 °C přidáno 16,42 g (66,4 mmol) EEDQ (ethylesteru 2-ethoxy-l,2dihydrochinolin-l-karboxylové kyseliny) a směs byla míchána přes noc při laboratorní teplotě. Směs byla odpařena do sucha za sníženého tlaku a byla chromatografována na silikagelu (Mobilní fáze: dichlormethan/methanol =20:1). Výtěžek: 28,67 g (92 % teoretického množství) bezbarvé tuhé látky.

Elementární analýza:

Spočteno: C 39,61 H 2,89 F 35,66 N 6,19 S 3,54

Nalezeno: C 39,68 H 2,74 F 35,81 N 6,13 S 3,40

e) L-Glutaminová kyselina-5-N-(methyl)-N-(2,3,4,5,6-pentahydroxyhexyl) -amid-(1-(4-perfluoroktylsulfonyl)-piperazin]amid • * · · · · • ·

325

K roztoku 28,36 g (30,22 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 112d ve 200 ml ethanolu, byl při teplotě 0 °C zaváděn 1 hodinu plynný amoniak. Směs pak byla míchána 4 hodiny při teplotě 0 °C. Reakční směs byla odpařena do sucha a zbytek byl rozmíchán s vodou. Tuhá látka byla odfiltrována a byla sušena ve vakuu (50 °C) . Výtěžek: 24,19 g (95 % teoretického množství) amorfní tuhé látky.

Elementární analýza:

Spočteno: C 41,12 H 2,89 F 35,66 N 6,19 S 3,54

Nalezeno: C 41,15 H 2,83 F 35,78 N 6,28 S 3,71

f) N-[1,4,7-Tris(karboxylatomethyl)-1,4,7,10- tetraazacyklododekan-10-(pentanoyl-3-aza-4-oxo-5-methyl-5-yl)]-Lglutaminová kyselina-5-N-(methyl)-N-(2,3,4,5,6-pentahydroxyhexyl)amid-5-[1-(4-perfluoroktylsulfonyl)-piperazin]-amid, Gd-Kkomplex

20,43 g (24,25 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 112e 2,79 g (24,25 mmol) N-hydroxysukcinimidu, 2,12 g (50 mmol) chloridu lithného a 15,27 g (24,25 mmol) 1,4,7-tris (karboxylatomethyl)-10-[(3-aza-4-oxo-5-methyl-5-yl)]pentanová kyselina]-1,4,7,10-tetraazacyklododekan, Gdkomplexu bylo za slabého zahřátí rozpuštěno ve 200 ml dimethylsulfoxidu. Při teplotě 10 °C bylo přidáno 8,25 g (40 mmol) N,N-dicyklohexylkarbodiimidu a směs byla míchána přes noc při laboratorní teplotě. Roztok byl nalit do 3000 ml acetonu a směs byla míchána 10 minut. Vyloučená tuhá látka byla odfiltrována a byla čištěna chromatografii na silikagelu (silikagel RP-18, Mobilní fáze: Gradient voda/ethanol/ acetonitril). Výtěžek: 28,45 g (79% teoretického množství) bezbarvé tuhé látky. Obsah vody: 11,0%.

Elementární analýza (spočteno na bezvodou sloučeninu) Spočteno: C 34,41 H 3,83 F 23,13 N 9,03 S 2,30 Gd 11,26

AA AA·» ·* • A

326 • A A A A ·

AA AAAA ·· «·

Nalezeno: C 34,34 H 3,98 F 23,29 N 9,19 S 2,15 Gd 11,07

Příklad 113

a) 6-N~Benzyloxykarbonyl-2-N-[1-O-a-D-karbonylmethyl-(2,3,4 -tri-O-benzyl-glukuronová kyselina-benzylester]-L-lysin-[1(4-perfluoroktylsulfonyl)-piperazin]-amid

K roztoku 100,0 g (120,4 mol) titulní sloučeniny z Příkladu 21c), 73,77 g (120,4 mol) benzylesterů 1-O-a-Dkarboxymethyl- 2,3,4-tri-O-benzyl-glukuronové kyseliny a 13,86 g (120,4 mol) N-hydroxysukcinimidu, rozpuštěných v 500 ml dimethylformamidu, bylo při teplotě 0 °C přidáno 41,27g (200,0 mmol) N,N-dicyklohexylkarbodiimidu. Směs byla míchána 3 hodiny při teplotě 0 °C a poté byla míchána přes noc při laboratorní teplotě. Vyloučená močovina byla odfiltrována, filtrát byl odpařen do sucha a byl chromatografován na silikagelu.

(Mobilní fáze : dichlormethan/ethanol = 20:1).

Výtěžek: 147,58 g (86 % teoretického množství) tuhého oleje. Elementární analýza:

Spočteno: C 52,25 H 4,31 N 3,93 F 22,66 S 2,45

Nalezeno: C 52,38 H 4,17 N 4,12 F 22,78 S 2,39

b) 2-N- [ 1-O-a-D-Karbonylmethyl-glukuronová kyselina] -Llysin-1-[(4-perfluoroktylsulfonyl)piperazin]-amid

142,52 g (100,0 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 113a) bylo rozpuštěno ve 2000 ml ethanolu a bylo přidáno 10,0 g paladiového katalyzátoru (10% Pd/C). Směs byla hydrogenována 12 hodin při laboratorní teplotě. Katalyzátor byl odfiltrován a filtrát byl odpařen do sucha.

Výtěžek: 93,06 g (kvantitatvině) bezbarvé tuhé látky.

Elementární analýza:

Spočteno: C 33,56 H 3,36 N 6,02 S 3,45 F 34,71

327 • · * · • to • · ····

Nalezeno: C 33,31 H 3,42 N 6,04 S 3,40 F 35,51

c) 6-N-[1,4,7-Tris(karboxylatomethyl)]-1,4,7,10-tetraazacyklododekan-10-N-(pentanoyl-3-aza-4-oxo-5-methyl-5-yl)]-2-N[1-O-a-D-karbonylmethyl-glukuronová kyselina]-L-lysin-[l-(4perfluoroktylsulfonyl)-piperazin]-amid, Gd-komplex, sodná sůl

50,76 g (54,55 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 113b), 6,28 g (54,55 mmol) N-hydroxysukcinimidu, 4,62 g (109,0 mol) chloridu lithného a 34,35 g (54,55 mol) 1,4,7triš(karboxylatomethyl)-10-(karboxy-3-aza-4-oxo-5-methylpent-5-yl)-1,4,7,10-tetraazacyklododekan, Gd-komplexu, bylo za slabého zahřívání rozpuštěno ve 400 ml dimethylsulfoxidu. Při teplotě 10 °C bylo přidáno 16,88 g (81,8 mol) N,Ndicyklohexylkarbodiimidu a směs byla poté míchána přes noc při laboratorní teplotě. Roztok byl nalit do 3000 ml acetonu a směs byla míchána 10 minut, vyloučená sraženina byla odfiltrována a byla čištěna chromatografií na silikagelu (RP18, Mobilní fáze: Gradient voda/ethanol/acetonitril).

Výtěžek: 75,14,9 g (8$,0 % teoretického množství) bezbarvé tuhé látky. Obsah vody : 8,6 % .

Elementární analýza (spočteno na bezvodou látku):

Spočteno: C 34,53 H 3,80 N 8,05 Na 1,47 S 2,05 F 20,63 Gd 10,05

Nalezeno: C 34,38 H 3,95 N 8,19 Na 1,63 S 2,15 F 20.83 Gd 10,14

Příklad 114

a) 6-N-Benzyloxykarbonyl)-2-[2-(N-ethyl-N-perfluoroktylsulfonyl] -amino]-acetyl-L-lysin

K 31,82,0 g (113,5 mmol) 6-N-Benzyloxykarbonyl)-L-lysinu a 66,42 g (113,5 mmol) 2-(N-ethyl-N-perfluoroktylsulfonyl)aminooctové kyseliny (připravené podle DE 196 03 033) ve 300 • · · ·

328 ml tetrahydrofuranu, bylo při teplotě 0 °C přidáno 49,46 g (200,0 mmol) EEDQ (ethylesteru 2-ethoxy-l,2-dihydrochinolin1-karboxylové kyseliny) a reakční směs byla míchána přes noc při laboratorní teplotě. Směs byla odpařena do sucha a byla chromatografována na silikagelu (mobilní fáze: dichlormethan /methanol =20:1).

Výtěžek: 55,79 g (58 % teoretického množství ) bezbarvé tuhé látky. Elementární analýza:

Spočteno: C 36.85 H 3,09 N 4,96 F 38,11 S 3,78

Nalezeno: C 36,85 H 3,19 N 4,87 F 38,28 S 3,95

b) 6-N-Benzyloxykarbonyl-2-N-[2-(N-ethyl-N-perfluoroktylsulfonyl) -amino]-acetyl-L-lysin-N-methyl-N-(2,3,4,5,6pentahydroxy-hexyl)-amid

K roztoku 51,02 g (60,2 mol) titulní sloučeniny z Příkladu 114a), 11,75 g (60,2 mol) N-methyl-glukaminu a 6,93 g (60,2 mol) N-hydroxysukcinimidu, rozpuštěných ve 250 ml dímethylformamidu, bylo při teplotě 0 °C přidáno 20,64 g (100,0 mmol) N,N-dicyklohexylkarbodiimidu. Směs byla míchána 3 hodiny při teplotš 0 °C a poté byla míchána přes noc při laboratorní teplotě. Vyloučená sraženina močoviny byla odfiltrována, filtrát byl odpařen do sucha ve vakuu a byl chromatografovánan na silikagelu.

(Mobilní fáze: dichlormethan/ethanol = 20 :1). Výtěžek: 53,05 g (86 % teoretického množství) tuhého oleje. Elementární analýza:

Spočteno: C 38,68 H 4,03 N 5,47 F 31,52 S 3,13

Nalezeno: C 38,49 H 4,17 N 5,32 F 31,70 S 3,29

c) 2-N-[2-(N-ethyl-N-pertluoroktylsulfonyl)-amino]-acetyl-Llysin-N-methyl-N- (2,3,4,5,6-pentahydroxy-hexyl)-amid • · ···· • ·

329

102,48g (100,0 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 114b) bylo rozpuštěno ve 2000 ml ethanolu a bylo přidáno 10,0 g paladiového katalyzátoru (10% Pd/C). Směs byla hydrogenována 12 hodin při laboratorní teplotě. Katalyzátor byl odfiltrován a filtrát byl odpařen do sucha za sníženého tlaku.

Výtěžek: 89,06 g (kvantitativně) bezbarvé tuhé látky.

Elementární analýza:

Spočteno: C 33,72 H 3,96 N 6,29 S 3,60 F 36,26

Nalezeno: C 33,91 H 3,82 N 6,14 S 3,47 F 36,31

d) 6-N-[1,4,7-Tris(karboxylatomethyl)]-1,4,7,10-tetraazacyklododekan-10-N-(pentanoyl-3aza-4-oxo-5-methyl-5-yl)]-2-N[2-(N-ethyl-N-perfluoroktylsulfonyl)-amino]-acetyl-L-lysin-Nmethyl-N-(2,3,4,5,6-pentahydroxy-hexyl)-amid, Gd-komplex

48,58 g (54,55 mmol) titulní sloučeniny z Příkladu 114), 6,28 g (54,55 mmol) N-hydroxysukcinimidu, 4,62 g (109,0 mol) chloridu lithného a 34,35 g (54,55 mol) 1,4,7-tris (karboxylatomethyl)-10-(karboxy-3-aza-4-oxo-5-methyl-pent-5yl)-1,4,7,10-tetraazacyklododekan, Gd-komplexu, bylo za slabého zahřívání rozpuštěno ve 400 ml dimethylsulfoxidu a při teplotě 10 °C bylo přidáno 16,88 g (81,8 mol) N,Ndicyklohexylkarbodiimidu a směs byla míchána přes noc při laboratorní teplotě. Roztok byl nalit do 3000 ml acetonu a směs byla míchána 10 minut. Vyloučená tuhá látka byla odfiltrována a byla čištěna chromatografií na silikagelu (RP18 Mobilní fáze: Gradient voda/ethanol/acetonitril).

Výtěžek: 73,27 g (89,4 % teoretického množství) bezbarvé tuhé látky. Obsah vody : 8,6 % .

Elementární analýza (spočteno na bezvodou látku):

Spočteno: C 35,18 H 4,23 N 4,23 S 2,13 F 21,50 Gd 10,47 Nalezeno: C 35,28 H 4,15 N 4,19 S 2,18 F 21,33 Gd 10,61

• · ···· · · · ·

Příklad 115

NMR zobrazování arteriosklerotického plaku po intravenosní dávce kovového komplexu podle tohoto vynálezu

U králíků s geneticky indukovanou arteriosklerozou (Watanabe králíci) bylo 6 až 60 minut stejně jako 24 hodin a 48 hodin po intravenosní aplikaci 25 pmol Gd/kg živé váhy sloučeniny podle tohoto vynálezu pozorováno zesílení při pozorování arteriosklerotického plaku při snímání Ti-váženého gradientového echa (TR 11,1 ms, TE 4,3 ms, úhel sklopení α = 15 °). Zdravé cévní stěny vykazovaly buď žádnou nebo pouze slabou absorpci kontrastního činidla a tím tedy vykazovaly buď žádné nebo slabé zvýšení signálu při Tl-váženém snímání. Na základě kontrastu mezi signálově bohatým plakem a signálově slabou cévní stěnou je tedy možná diagnosa arteriosklerotických změn cévních stěn.

Vyobrazení na obrázku 1 ukazuje NMR měření aorty 24 a 48 hodin po aplikaci 25 μιηοΐ Gd/kg živé váhy kovového komplexu XV u králíků Watanabe (geneticky indukovaná erterioskleroza). Měření Tl-váženého gradientového echa (1,5 T, TR: 11,1 ms, TE: 4,3 ms, NA: 2, matice: 213x256, tloušťka vrstvy: 1,0 mm) znázorňuje silný vzrůst signálu u arteriosklerotického plaku. Lokalizace plaku, obzvláště u oblouku srdečnice stejně jako u cévních defektů byla potvrzeno pomocí barviva Sudan 3.

Příklad 116

NMR zobrazování arteriosklerotického plaku u krys po intravenosní dávce kovového komplexu XV podle tohoto vynálezu, stejně jako korelace posmrtně získaných obrázků s barvivém Sudan III.

• «0 · ·· ····

331

Vyobrazení na Obrázku 2 ukazuje NMR snímky aorty 35 a 60 minut a 24 hodin po intravenosní aplikaci 10 pmol Gd/kg živé váhy kovového komplexu gadolinia CV u Watanabe králíků (geneticky indukovaná arterioskleroza). Měření Tl-váženého gradientového echa (1,5 T, TR: 11,1 ms, TE: 4,3 ms, NA: 2, matice: 213x256, tloušťka vrstvy: 1,0 mm) vykazuje silná vzrůst signálu u arteriosklerotického plaku. Lokalizace plaku obzvláště u oblouku srdečnice stejně jako u cévních defektů byla potvrzeno pomocí barviva Sudan 3. Poté bylo obnoveno NMR zobrazování preparátů uložených v agaru s využitím sekvence Tl-váženého gradientového echa (MPRage, 1,5 T, TR: 11,1 ms, TE: 4,3 ms, úhel sklonu α = 15 ’, NA: 2, matice: 213x256, tloušťka vrstvy: 1,0 mm) stejně jako se sekvencí spinového echa (1,5 T, TR: 400 ms, TE: 15 ms, NA: 16, matrice: 256x256) (posmrtně získané obrazy). Zde se projevila výborná korelace řezů aorty se silným vzrůstem signálu a vybarvením plaku, protože sloučeniny podle tohoto vynálezu se usazují v arterioskleerotickém plaku.

Příklad 117:

Zobrazení infarktu (MRT) po intravenózní dávce kovového komplexu XV u krys

Vyobrazení na Obrázku 3 ukazuje NMR zobrazení srdce (in vivo a post mortem) 24 hodin po intravenózní aplikaci 100 μιηοΐ Gd/kg živé váhy kovového komplexu XV u krys s akutně indukovaným srdečním infarktem. Měření Tl-váženého spinového echa (1,5 T, TR: 400 ms, TE: 6 ms, NA: 4, matrice: 128 x 128, tloušťka vrstvy: 2,5 mm) ukazuje silný vzrůst signálu v oblasti infarktu. Úspěšná indukce akutního infarktu myokardu byla potvrzena pomocí NBT zbarvení.

fc* fcfcfcfc fcfc fcfcfcfc

Kovový komplex XV, 100 μιηοΐ/kg i.v., Tl-SE, TR/TE 400/6 ms, infarkt myokardu.

Příklad 118

Zobrazení infarktu (MRT) po intravenózní dávce kovového komplexu I u krys

Vyobrazení na Obrázku 4 ukazuje NMR zobrazení srdce (in vivo a post mortem) 24 hodin po intravenózní aplikaci 100 μτηοΐ Gd/kg živé váhy kovového komplexu I u krys s akutně indukovaným srdečním infarktem. Měření Tl-váženého spinového echa (1,5 T, TR: 400 ms, TE: 6 ms, NA: 4, matrice: 128 x 128, tloušťka vrstvy: 2,5 mm) ukazuje silný vzrůst signálu v oblasti infarktu. Úspěšná indukce akutního infarktu myokardu byla potvrzena pomocí NBT zbarvení.

Příklad 119

Zobrazování lymfatických uzlin (MRT) po intravenózní dávce kovového komplexu XV u králíků nesoucích VX2-tumor

Vyobrazení na Obrázku 5 ukazuje NMR zobrazení iliakálních lymfatických uzlin před podáním kontrastního činidlo až 24 hodin po intravenózní aplikaci 200 μιηοΐ Gd/kg živé váhy kovového komplexu XV u králíků s i.m. implantovaným VX2-tumorem. Měření Tl-váženého gradientového echa (1,5 T, sekvence: MPRage, TR 11,1 ms, TE 4,3 ms, a- 15 °) vykazuje silný vzrůst signálu u zdravých lymfatických uzlin. Zóny bez zvýšení signálu uvnitř lymfatických uzlin byly diagnostikovány jako metastáze a byly histologicky potvrzeny (H/E-obarvení řezů lymfatických uzlin). U pozdějších časů (24 hodin) po aplikaci kontrastního činidla bylo oproti tomu překvapivě pozorováno signálové obrácení. Vzrůst signálu u ·« ·«<<

·· ·· ·· ····

333 zdravých lymfatických uzlin bylo snížené, kdežto u metastází je stále viditelné značné signálové zesílení.

Překvapivě, již bezprostředně po aplikaci bylo možné pozorovat významné zesílení primárního tumoru (obzvláště na okrajích). U pozdějších časů (24 hodin) se rozšiřuje toto zesílení také směrem k centru nádoru.

Příklad 120:

Zobrazování tumoru (MRT) po intravenosní dávce kovového komplexu I u králíků nesoucích VX-2 tumor.

Vyobrazení na Obrázku 6 ukazuje NMR zobrazení lymfatických uzlin stejně jako primárního tumoru (i.m. implantovaný VX2-tumor) pře podáním, 60 minut až 20 hodin po intravenosním podání 100 pmol Gd/kg živé váhy kovového komplexu I u králíků. Měření Tl-váženého gradientového echa (1,5 T, sekvence: MPRange, TR 11,1 ms, TE 4,3 ms, a = 15 °) vykazuje silný vzrůst signálu u zdravých lymfatických uzlin.

U brzkých časů po aplikaci (60 minut po aplikaci) může být pozorováno významné zvýšení primárního tumoru (obzvláště na periferii). V delších časech (20 hodin po aplikaci) se zvýšení signálu rozšiřuje také na centrální oblasti tumoru.

Obzvláště pozoruhodné je zesílení patologických struktur (popř. sekundárního tumoru nebo nekrosy) na kontralaterální straně, která je viditelná teprve při pozdějších měřeních („pozdní zesílení).

·· ·**· ·· ··· · ««

334

Kovový komplex X

Příklad 121:

Zobrazování infarktu (MRT) po intravenosní dávce kontrastního činidla u krys

Zobrazení na Obrázku 7 ukazuje NMR měření srdce (in vivo a post mortem) 6 hodin po aplikaci 100 μιηοΐ Gd/kg živé vody polárního Gd-chelátu s perfluorovaným postranním řetězcem (kovový komplex X) u krys s akutně indukovaným srdečním infarktem. Tl-vážené, EKG-spouštěné spinové echo (1,5 T, TR (efektivní) : 400 ms, TE: 12 ms, NA: 4, matrice: 128 x 128, tloušťka vrstvy: 2,5 mm) vykazuje silné zesílení signálu u oblasti infarktu. Úspěšná indukce akutního infarktu myokardu byla prokázána pomocí NBT barvení.

Příklad 122:

Orgánová distribuce (včetně obohacení lymfatických uzlin) po intravenozní dávce kontrastního činidla u krys

Po intravenosní aplikaci 100 μπιοί úhrnného gadolinia/kg živé váhy polárního Gd-chelátu s perfluorovaným postranním řetězcem (kovový komplex X) u krys byl určen 24 hodin po aplikaci obsah kovu v různých orgánech a lymfatických uzlinách (rozdělených jako mesenteriální a periferní lymfatické uzliny) (MW, n = 2).

«· ··*· ·· ·«*·

335

Orgán	μχηοΐ Gd/L	% Dávky
Játra	104	2,34
Femur	3	0,01
Ledviny	150	0,65
Mozek	1	0,01
Kostra	192	34,01
Krev	1	0, 01
Žaludek	49	0,18
Zažívací trakt	65	1,22
Slezina	54	0, 07
Pankreas	6	0,02
Srdce	3	0,01
Plíce	18	0, 05
Svaly	1	0,00
Mesenteriální
lymf. uzliny	19	0,01
Periferální
lymf. uzliny	11	0,01
Celkem		38.58

Příklad 123:

Zobrazení lymfatických uzlin (MRT) po intravenosní dávce kontrastního činidla u krys

Zobrazení na Obrázku 8 ukazuje NMR měření iliakálních lymfatických uzlin před podáním až 60 minut po intravenosním podání 100 pmol Gd/kg živé váhy kovového komplexu X u krys. Měření Tl-váženého gradientového echa (1,5 T, sekvence: MPRange, TR 11,1 ms, TE 4,3 ms, a = 15°) vykazuje silný vzrůst signálu u zdravých lymfatických uzlin již brzy po injekci. Zvýšení v časovém bodu 15 minut po aplikaci = 263% a v časovém bodu 60 minut po aplikaci = 254%.

φφ φφ φφφφ

336 ·* -»· * · · ΦΦΦΦ • · φ · ♦ · φφφ φφφ · φφφ φ φ · ·· * φφ φφφφ φ φ φ • · 9 • · Φ

Φ · · Φ

Φ* ΦΦ

Příklad 124:

Zobrazování lymfatických uzlin (MRT) po intravenózní dávce kontrastního činidla u králíků nesoucích VX2-tumor

Zobrazení na Obrázku 9 ukazuje NMR měření iliakálních lymfatických uzlin před aplikací a až 60 minut po intravenosní aplikaci 200 μιηοΐ Gd/kg živé váhy kovového komplexu X u králíků s i.m. implantovaným VX2-tumorem. Měření Tl-váženého gradientového echa (1,5 T, sekvence: MPRange, TR 11,1 ms, TE 4,3 ms, a= 15°) vykazuje silný vzrůst signálu u zdravých lymfatických uzlin. Zesílení u zdravých lymfatických uzlin dosahuje 382 % v časovém bodě 15 minut po aplikaci a 419% v časovém bodě 60 minut po aplikaci. Zóny bez zesílení signálu uvnitř lymfatických uzlin byly diagnostikovány jako metastázy a byly potvrzeny histologicky (H/E-obarvení lymfatických uzlin). Poměr intenzity signálu u zdravých lymfatických uzlin k metastázím činí 3,0 v časovém bodu 15 minut až 3,4 v časovém okamžiku 60 minut.

Překvapivě, jíž bezprostředně po aplikaci lze pozorovat významné zesílení nejen u lymfatických uzlin, ale také u primárního tumoru (obzvláště na periferii) (15 minut po aplikaci: intenzita 277%). U pozdějších časových okamžiků (až 24 hodin po aplikaci) se toto zesílení rozšiřuje také směrem do centra nádoru (24 hodin po aplikaci: 217 %).

337 • · · · • · • · · ·

Kovový komplex V

Příklad 125:

Vyobrazení na Obrázku 10 ukazuje NMR zobrazení srdce (in vivo a post mortem) 24 hodin po intravenosní aplikaci 100 μιηοΐ Gd/kg živé váhy polárního Gd-chelátu s perfluorovaným postranním řetezcem (kovový komplex V) u krys s indukovaným srdečním infarktem. Tl-vážené, EKG-spouštšné spinové echo (1,5 T, TR (efektivní): 400 ms, TE: 12 ms, NA: 4, matrice: 128 x 128, tloušťka vrstvy: 2,5 mm) vykazuje silné zesílení signálu u oblasti infarktu. Úspěšná indukce akutního infarktu myokardu byla prokázána pomocí NBT barvení.

Příklad 126:

Po intravenosní aplikaci 200 μιτιοί úhrnného gadolinia/kg živé váhy polárního Gd-chelátu s perfluorovaným postranním řetězcem (kovový komplex V) u krys byl určen 24 hodin po aplikaci obsah kovu v různých orgánech a lymfatických uzlinách (rozdělených jako mesenteriální a periferní lymfatické uzliny) (MW, n = 2) .

338

Orgán	μπιοί Gd/L	% Dávky
Játra	344	6, 34
Eemur	13	0,05
Ledviny	436	1,77
Mozek	4	0, 02
Kostra	268	37,93
Krev	15	0, 18
Žaludek	28	0,08
Zažívací trakt	113	1,56
Spleen	116	0,17
Pankreas	30	0,05
Srdce	14	0,02
Plíce	62	0,17
Svaly	9	0,02
Mesenteriální
lymf. uzliny	70	0,05
Periferální
lymf. uzliny	44	0, 02
Celkově		48,43

Příklad 127:

Zobrazení lymfatických uzlin kontrastního činidla u krys

Vyobrazení na Obrázku iliakálních lymfatických uzlin intravenosní komplexu V u T, sekvence: silný vzrůst (MRT) po intravenosní dávce zobrazení minut po kovového echa (1,5 vykazuje uzlin již ukazuje NMR před podáním a až 60 aplikaci 200 μιηοΐ Gd/kg živé váhy krys. Měření Tl-váženého gradientového MPRage, TR 11,1 ms, TE 4,3 ms, a= 15°) signálu u tkáně zdravých lymfatických

339 velmi brzo po nástřiku. Zvýšení v čase 15 minut je 147% po nástřiku a 230% v čase 60 minut po nástřiku.

Příklad 128:

Zobrazení lymfatických uzlin (MRT) po intravenózní dávce kontrastního činidla u králíků nesoucích VX2-tumor

Vyobrazení na Obrázku 12 ukazuje NMR měření iliakálních lymfatických uzlin před aplikací a až 60 minut po intravenosní aplikaci 200 gmol Gd/kg živé váhy kovového komplexu V u králíků s i.m. implantovaným VX2-tumorem. Měření Tl-váženého gradientového echa (1,5 T, sekvence: MPRange, TR 11,1 ms, TE 4,3 ms, cc = 15°) vykazuje silný vzrůst signálu u zdravých lymfatických uzlin. Zesílení u zdravých lymfatických uzlin dosahuje 246 % v časovém bodě 15 minut po aplikaci a 282% v časovém bodě 60 minut po aplikaci. Zóny bez zesílení signálu uvnitř lymfatických uzlin byly diagnostikovány jako metastázy a byly potvrzeny histologicky (H/E-obarvení lymfatických uzlin). Poměr intenzity signálu u zdravých lymfatických uzlin k metastázím činí 2,5 v časovém bodu 15 minut až 1,7 v časovém okamžiku 60 minut.

Překvapivě, již bezprostředně po aplikaci lze pozorovat významné zesílení nejen u lymfatických uzlin, ale také u primárního tumoru (obzvláště na periferii) (15 minut po aplikaci: intenzita 350%). U pozdějších časových okamžiků (až 24 hodin po aplikaci) se toto zesílení rozšiřuje také směrem do centra nádoru (24 hodin po aplikaci: 10.6 %) .

Kovový komplex XIV

Příklad 129:

340

Vyobrazení na Obrázku 13 ukazuje NMR zobrazení srdce (in vivo a post mortem) 3 hodiny po intravenosní aplikaci 100 μιηοΐ Gd/kg živé váhy polárního Gd-chelátu s perfluorovaným postranním řetezcem (kovový komplex XIV) u krys s indukovaným srdečním infarktem. Tl-vážené, EKG-spouštěné spinové echo (1,5 T, TR (efektivní): 400 ms, TE: 12 ms, NA: 4, matrice: 128 x 128, tloušťka vrstvy: 2,5 mm) vykazuje silné zesílení signálu u oblasti infarktu. Úspěšná indukce akutního infarktu myokardu byla prokázána pomocí NBT barvení.

Příklad 130:

Po intravenosní aplikaci 200 pmol úhrnného gadolinia/kg živé váhy polárního Gd-chelátu s perfluorovaným postranním řetězcem (kovový komplex XIV) u krys (Cop-Inzucht, kterým byl před 12 dny i.m. implantován karcinom prostaty R3327 MAT-Lu) byl určen 10 minut, 1 hodinu a 24 hodin po aplikaci obsah kovu v různých orgánech a lymfatických uzlinách (rozdělených jako mesenteriální a periferní lymfatické uzliny) (střední hodnota +/- standardní odchylka, n - 3).

« · ··· · · · · · ·

341 ··· ·*· ·«· «» « ·····» «· · ·

	Kovový komplex.	XIV
10mln p.i.	3d-!koncentracc 1h p.i.	fy/mol/I] 24hp	i.	10r	nin p.i.	% dávky 1h p.i.	24h p.i.
Játra	192 ± 12	147 ± 7	64 i	4	2.62	* 0.11	2.04 * 0.15	0.96 ± 0.05
Slezina	200 i 13	123 ± 10	69 ±	5	0.13	± 0.01	0.08 ± 0.01	0.06 ± 0.00
Pankrcas	191 ± 14	139 ± 26	25 ±	1	0.35	± 0.02	0.21 ± 0.05	0.03 ± 0.01
Ledvina	761 ± 60	1181 ± 232	338 ±	49	1.76	± 0.14	2.84 ± 0.61	0.81 ± 0.09
Plíce	603 ± 30	415 ± 39	44 ±	4	1.04	± 0.02	0.80 ± 0.06	0.09 * 0.01
Srdce	320 ± S	190 ± 15	19 λ	0	0.32	± 0.01	0.19 * 0.01	0.02 ± 0.00
Mozek	38 ± 6	22 ± 2	4 ±	4	0.10	± 0.03	0.06 ± 0.00	0.01 ± 0.01
Svaly***	93 ± 5	56 * 3	8 ±	1	0.06	± 0.02	0.04 ± 0.00	0.00 ± 0.00
Tumor	246 ± 25	266 t 87	56 ±	4	0.25	± 0.05	0.37 ± 0.14	0.04 ± 0.01
Femur	115 ± 3	81 ± 10	9 ±	1	0.39	± 0.02	0.28 ± 0.03	0.03 ± 0.00
rnes. Izmf. uzL	291 ± 29	179 ± 16	50 *	6	0.08	± 0.01	0.05 λ 0.01	0.02 ± 0.00
perif. lymf. uzL	284 ± 19	254 * 14	51 ±	5	0.13	± 0.00	0.14 ± 0.02	0.02 ± 0.00
Žaludek (prázdný)	244 ± 17	165 ± 21	19 ±	2	0.56	± 0.07	0.40 ± 0.05	0.05 i 0.00
Střevo (prázdné)	242 ± 15	201 ± 32	36 ±	5	1.55	± 0.09	1.16 ± 0.22	0.26 ± 0.04
Krev**	957 ± 38	575 ± 56	22 ±	1	26.73	± 0.84	16.13 ± 1.77	0.61 ± 0.03
Zbytek*	419 ± 27	392 ± 25	42 ±	0	70.71	± 2.74	64.27 ± 5.50	6.81 ± 0.16
Moři 0-24 h	-	-	619 ±	19		-	-	79.86 ± 3.13
Výměšky 0-24 h	-	-	781 ±	611		-	-	6.00 ± 4.91
		Součet všech orgánů“*	80.06 ± 2.84	72.94 ± 5.83	9.21 ± 0.27
		Bilance“*				95.07 ± 2.41

* Krevní vzorky ze zbytku těla ** 58 ml krve/kg živé váhy *** Bilance bez krevních údajů, které jsou zahrnuty v údajích o zbytku těla **** pouze alikvot tkáně

Příklad 131:

Zobrazení lymfatických uzlin (MRT) po intravenózní dávce kontrastního činidla u morčat

Vyobrazení na Obrázku. 14 ukazuje příklad NMR měření iliakálních lymfatických uzlin před aplikací a až 24 hodin po intravenosní aplikaci 200 μιηοΐ Gd/kg živé váhy kovového komplexu XIV u morčete se stimulovanými lymfatickými uzlinami (Ereund Adjuvant). Měření Tl-váženého gradientového echa (2,0 T, TR 10 ms, TE 5 ms, a= 40°) vykazuje silný vzrůst signálu u tkání zdravých lymfatických uzlin již velmi brzo po • · • · · ·

342 injekci. Zesílení dosahuje 127 % v časovém bodě 60 minut po aplikaci.

Příklad 132:

Zobrazení lymfatických uzlin (MRT) po intravenózní dávce kontrastního činidla u králíků nesoucích VX2-t tumor

Vyobrazení na Obrázku 15 ukazuje NMR měření iliakálních lymfatických uzlin před aplikací a až 23 hodin po intravenosní aplikaci 200 jimol Gd/kg živé váhy kovového komplexu XIV u králíků s i.m. implantovaným VX2-tumorem. Měření Tl-váženého gradientového echa (1,5 T, sekvence: MPRange, TR 11,1 ms, TE 4,3 ms, a- 15°) vykazuje silný vzrůst signálu u zdravých lymfatických uzlin. Zesílení u zdravých lymfatických uzlin dosahuje 297 % v časovém bodě 10 minut po aplikaci a 269% v časovém bodě 60 minut po aplikaci. Zóny bez zesílení signálu uvnitř lymfatických uzlin byly diagnostikovány jako metastázy a byly potvrzeny histologicky (H/E-obarvení lymfatických uzlin). Poměr intenzity signálu u zdravých lymfatických uzlin k metastázím činí 5,1 v časovém bodu 10 minut až 1,9 v časovém okamžiku 60 minut.

Překvapivě, již bezprostředně po aplikaci lze pozorovat významné zesílení nejen u lymfatických uzlin, ale také u primárního tumoru (obzvláště na periferii) (15 minut po aplikaci: intenzita 594%). U pozdějších časových okamžiků (až 24 hodin po aplikaci) se toto zesílení rozšiřuje také směrem do centra nádoru (120 minut po aplikaci: 162 %).

343

Kovový komplex III

Příklad 133:

Vyobrazení na Obrázku 13 ukazuje NMR zobrazení srdce (in vivo a post mortem) 22 hodin po intravenosní aplikaci 100 μπιοί Gd/kg živé váhy polárního Gd-chelátu s perfluorovaným postranním řetezcem (kovový komplex III) u krys s akutně indukovaným srdečním infarktem. Tl-vážené, EKG-spouštěné spinové echo (1,5 T, TR (efektivní): 400 ms, TE: 12 ms, NA: 4, matrice: 128 x 128, tloušťka vrstvy: 2,5 mm) vykazuje silné zesílení signálu u oblasti infarktu. Úspěšná indukce akutního infarktu myokardu byla prokázána pomocí NBT barvení.

Příklad 134:

Orgánová distribuce (včetně obohacení lymfatických uzlin) po intravenózní dávce kontrastního činidla u krys

Po intravenosní aplikaci 200 μπιοί úhrnného gadolinia/kg živé váhy polárního Gd-chelátu s perfluorovaným postranním řetězcem (kovový komplex III) u krys byl určen 24 hodin po aplikaci obsah kovu v různých orgánech a lymfatických uzlinách (rozdělených jako mesenteriální a periferní lymfatické uzliny) (MW, n = 2).

• · · · • ·

344

Orgán	μκιοί Gd/L	% Dávky
Játra	1222	26,28
Femur	76	0, 32
Ledviny	489	1, 97
mozek	10	0, 05
Kostra	242	36,30
Krev	83	1, 15
Žaludek	165	0,57
Zažívací trakt	230	3,56
Slezina	464	0,89
Pankreas	203	0,48
Srdce	82	0,13
Plíce	338	0,96
Svaly	28	0,04
Mesenteriální
lymf. uzliny	455	0,33
Periferální
lymf. uzliny	279	0,18
Celkově		73,20

Příklad 135:

Zobrazení lymfatických uzlin (MRT) po intravenózní dávce kontrastního činidla u krys

Vyobrazení na Obrázku 17 ukazuje příklad NMR měření iliakálních lymfatických uzlin před aplikací a až 60 minut po intravenosní aplikaci 200 μπιοί Gd/kg živé váhy kovového komplexu III u krys. Měření Tl-váženého gradientového echa (1,5 T, sekvence: MPRange, TR 11,1 ms, TE 4,3 ms, a= 15°) vykazuje silný vzrůst signálu u tkání zdravých lymfatických uzlin již velmi brzo po injekci. Zesílení dosahuje 320 % • fcfcfc fcfc fcfcfcfc · · fcfc fcfc • fc · fcfcfcfc fcfc ·

345 v časovém bodě 15 minut po aplikaci a hodnotu 401% v časovém bodu 60 minut po aplikaci.

Příklad 136:

Vyobrazení na Obrázku 18 ukazuje NMR měření iliakálních lymfatických uzlin před aplikací a až 60 minut po intravenosní aplikaci 200 μιηοΐ Gd/kg živé váhy kovového komplexu III u králíků s i.m. implantovaným VX2-tumorem. Měření Tl-váženého gradientového echa (1,5 T, sekvence: MPRange, TR 11,1 ms, TE 4,3 ms, a = 15°) vykazuje silný vzrůst signálu u tkáně zdravých lymfatických uzlin. Zesílení u zdravých lymfatických uzlin dosahuje 195 % v časovém bodě 15 minut po aplikaci a 233% v časovém bodě 60 minut po aplikaci. Zóny bez zesílení signálu uvnitř lymfatických uzlin byly diagnostikovány jako metastázy a byly potvrzeny histologicky (H/E-obarvení lymfatických uzlin). Poměr intenzity signálu u zdravých lymfatických uzlin k metastázím činí 1,9 v časovém bodu 15 minut a 1,8 v časovém okamžiku 60 minut.

Překvapivě, již bezprostředně po aplikaci lze pozorovat významné zesílení nejen u lymfatických uzlin, ale také u primárního tumoru (obzvláště na periferii) (15 minut po aplikaci: intenzita 232%).

Claims

Patentové nároky

346

1. Použití kovových komplexů obsahujících perfluoralkylové zbytky, jejichž kritická micelární koncentrace je menší než 1CT³ mol/1, hydrodynamický micelární průměr (2 Rh) je větší než 1 nm a protonová relaxivita v plasmě (Rl) je větší než 10 1/mmol.s, k přípravě kontrastního činidla pro MR-imaging k zobrazování plaků.
2. Použití podle nároku 1 k přípravě kontrastního činidla pro MRI k zobrazování lymfatických uzlin.
3. Použití podle nároků 1 nebo 2 k přípravě kontrastního činidla pro MRI k zobrazování infarktovaných a nektrotických tkání.
4. Použití podle nároků 1 až 3 k přípravě kontrastního činidla pro MRI k nezávislému zobrazování nekróz a nádorů.
5. Použití podle nároku 1, při němž se používají kovové komplexy mající kritickou micelární koncentraci nižší než 10‘⁴ mol/1.
6. Použití podle nároku 1, při němž se používají kovové komplexy, jejichž hydrodynamický micelární průměr á 3 nm, s výhodou > 4 nm.

• fc ···· «fc ·· ·· ···· • · · ······ fc

347
7. Použití podle nároku 1,vyznačuj ící se tím, že se používají kovové komplexy, jejichž protonová relaxivita v plasmě je větší než 13 1/mmol.s, s výhodou větší než 15 1/mmol-s.
8. Použití podle nároků 1 až 7,vyznačuj ící se tím, že se jako kovové komplexy obsahující perfluoralkylové zbytky používají sloučeniny obecného vzorce I

R^F-L-K (I) kde

R^f je perfluorovaný rovný nebo rozvětvený uhlovodíkový řetězec vzorce C_nF_2nE, kde E je koncový fluorový atom, chlorový atom, bromový atom, jodový atom nebo vodíkový atom, a n je celé číslo od 4 do 30,

L je přímá vazba, methylenová skupina, skupina -NHCO-, skupina

R —^CH₂)-NHCOCH2—(CH,) n-so — kde p je celé číslo 0 až 10, q a u jsou nezávisle na sobě celá čísla 0 nebo 1 a

R^a je vodíkový atom, methylenová skupina, skupina -CH2-OH, skupina -CH²-CO2H nebo C₂-Ci₅ řetězec, který je případně přerušen 1 až 3 atomy kyslíku, 1 až 2 >C0 skupinami nebo je případně substituovaný arylovou skupinou a/nebo 1 až 4 hydroxylovými skupinami, 1 až 2 Ci-C₄ alkoxyskupinami, 1 až 2 karboxyskupinami, skupina -SO₃H.

nebo rovný, nasycený nebo nenasycený C₂-C₃₀ uhlovodíkový řetězec, který případně obsahuje 1 až 10 kyslíkových atomů, 1 ·· to· ·· · ···· ·· ·· ····

348 • · · · · ···· ·· ·· až 3 skupiny -NR^a-, 1 až 2 atomy síry, piperazin, skupinu CONR^a-, skupinu -NR^aCO-, skupinu -S02-, skupinu -NR^a-CO2-, 1 až 2 skupiny -C0-, skupinu -CO-N-T-N(R^a)-SO2-R^f nebo 1 až 2 případně substituované aryly a/nebo je těmito skupinami přerušen, a/nebo je případně substituovaný s 1 až 3 skupinami -ORa, 1 až 2 oxoskupinámi, 1 až 2 skupinami -NH-COR³, 1 až 2 skupinami -CONHR^a-, 1 až 2 skupiny - (CH2) _P-CO₂H, 1 až 2 skupiny - (CH₂) _p-(O) _q-CH₂CH₂-R^F, kde

R^a, R^£ a p a q mají výše uvedený význam a T je C₂-Cio řetězec, případně přerušený 1 až 2 atomy kyslíku nebo 1 až 2 skupinami -NHCO-.

K je komplexační činidlo nebo kovový komplex nebo jejich soli organických a/nebo anorganických bází nebo aminokyselin nebo amidů aminokyselin, kde komplexační činidlo nebo komplex má obecný vzorec II

CHjjCHj

N («) kde R^c, R¹ a B jsou navzájem nezávisle

R^c má význam R^a nebo je skupina - (CH₂)m-L-R^F, kde m je 0, 1 nebo 2 a L a R^f ma j i výše uvedený význam,

R¹ je navzájem nezávisle vodíkový atom nebo ekvivalent kovového iontu atomového čísla 22 až 29, 42 až 46 nebo 58 až 70,

B je -OR¹ nebo • ••4 4« 4» 44 4444

4 4444 44 4

349 • 4 4 4 · » 4444 44 4 4 ,CH,CH—L-R / \ —N< ^{2 2} „ebo — N N-SO₂-L-R^F kde R¹, L, R^f a R^c mají výše uvedený význam, nebo komplexační činidlo nebo komplex obecného vzorce III γ—co^z¹

CC^Z (HI) kde R^c a R¹ ma j i výše uvedený význam a R^b má význam R^anebo komplexační činidlo nebo komplex obecného vzorce IV (IV) kde R¹ má výše uvedený význam nebo komplexační činidlo nebo komplex obecného vzorce V • 0 fc*'·,· • fc fcfcfcfc fcfc fcfc • fc fc ···· fcfc ·

350 •fcfc fcfcfc fc··· fcfc « fcfc ···· ·· fcfc kde^R¹ má výše uvedený význam a o a q jsou čísla 0 nebo součet o + q = 1, nebo komplexační činidlo nebo komplex obecného vzorce VI /o₂c^\ /-\ /^C0₂Z¹ (VI) kde R¹ má výše uvedený význam nebo komplexační činidlo nebo komplex obecného vzorce VII kde R¹ a B maj £ výše uvedený význam nebo

COY (VII) komplexační činidlo nebo komplex obecného vzorce VIII

351 ·*· ···· ·· ·Φ » * « · · · · · · « #· ·*·· • · · ·· ···«

I * · Φ ·· ··

CHjjCHj,(VIII) kde R^c a R¹ ma j £ výše uvedený význam a R^b má výše uvedený význam R^a, nebo komplexační činidlo nebo komplex obecného vzorce IX z’o₂c^\ / \ X^co/ ² K > / ?^H( V⁷ /\

COgZ¹ R»c \ (IX) kde R^c a R¹ mají výše uvedený význam, nebo komplexační činidlo nebo komplex obecného vzorce X ;n n; / (X) kde R^c a R¹ mají výše uvedený význam, nebo komplexační činidlo nebo komplex obecného vzorce XI (XI)

352

W-_{χ K} CO₂Ž‘ [NH-CH^CH.

^-COfo-N^I k/^N

SQ^--ΛΛΛΛΛΛ kde R¹, p a q mají výše uvedený význam a R^b má význam R^a, nebo komplexačni činidlo nebo komplex obecného vzorce XII kde L, R^f a Z¹ mají výše uvedený význam, nebo komplexačni činidlo nebo komplex obecného vzorce XIII
9. Použití podle nároku 8,vyznačuj ící se tím, že se používají sloučeniny obecného vzorce I, kde L je ·· ···· ·· ·· ·· ···· ·· · · · · · · · · a-CHa-β α-ΟΗ₂-ΟΗ₂-β α-(CH₂) ₈-β, kde s = 3 až 15 α-αί₂-ο-θΗ₂-αί₂-β, a-CH₂-(O-CH₂-CH₂-) t-β, kde t = 2 až 6, a-CHa-NH-CO-β, α - CH₂ - NH - CO - CH₂ - N (CH₂ COOH) - S O₂ - β, a-CH₂-NH-CO-CH₂-N(C₂H₅) -εθ₂-β, a-CH₂-NH-CO-CH₂-N(Ci₀H₂₁) -SOs-β, a-CH₂-NH-CO-CH₂-N(C₆H₁₃) -5Ο₂-β, cc-CH₂-NH-CO- (CH₂) ₁₀-N(C₂H_s) -SOz-β, a-CH₂-NH-CO-CH₂-N (-CH₂-C₆H₅) -5Ο₂-β, a-CH₂-NH-CO-CH₂~N (-CH₂-CH₂-OH) -SOs-β, a-CH₂-NH-CO- (CH₂) _1o-S-CH₂CH₂^, α - CH₂ - NH - CO - CH₂ ~ O - CH₂ CH₂ - β, a-CH₂-NH-CO- (CH₂) ₁₀-Ο-ΟΗ₂ΟΗ₂-β, α-ΟΗ₂-Ο₆Η₄-Ο-ΟΗ₂-ΟΗ₂-β, a-CH₂-O-CH₂-C (CH₂-OCH₂CH₂-C₆F₁₃) ₂-ΟΗ₂-Ο-ΟΗ₂ΟΗ₂-β, a-CH₂-NH-CO-CH₂-CH₂-CON-CH₂-CH₂-NHCOCH₂-N (C₂H₅) SO₂C8F₁₇

CH₂-CH₂-NH-CO-CH₂-N(C₂H₅) -SOs-β, α - CH₂ - O - CH₂ - CH (OC₁₀H₂₁) - CH₂ -O - CH₂CH₂ - β, α- (CH₂-NHCO) ₄-ΟΗ₂0-ΟΗ₂ΟΗ₂-β , α-(CH₂-NHCO)₃-ΟΗ₂Ο-ΟΗ₂ΟΗ₂-β, a-CH₂-OCH₂C (CH₂OH)₂-ΟΗ₂-Ο-ΟΗ₂ΟΗ₂-β, a-CH₂-NH-CO-CH₂-N(C₆H₅) -δθ₂-β, ·· ···· A· AA AA

A· A · A « · « • · A ·

354 a-NH-CO-CH₂CH₂-p, a-NH-CO-CH₂-O-CH₂CH₂-p,

Ot-NH-CO-β, a-NH-CO-CH₂-N (CHzCOOH) -SO₂-p, a-NH-CO-CH₂-N(C₂H₅) -δθ₂-β, a-NH-CO-CH₂-N (Ci₀H₂₁) -βθ₂-β, a-NH-CO-CH₂-N(C₆H₁₃) -SO₂-p, α-NH-CO- (CH₂) _1o-N (C₂H_s) -SO₂-p, a-NH-CO-CH₂-N(-CH₂C₆H₅) -SO₂-p, a-NH-CO-CH₂-N (-CH₂-CH₂OH) -so₂-p, a-NH-CO-CH₂-β, a-CH₂-O-C₆H₄-O-CH₂-CH₂-p, a-CH₂-C₆H₄-O-CH₂-CH₂-p, a-N(C₂H₅) -SO₂-P, a-N(C₆H₅) -SO₂-P, a-N(C₁₀H₂₁) -SO₂-p, a-N(C₆H₁₃) -SO₂-p, a-N(C₂H₄OH) -SO₂-p, a-N (CH₂COOH) -SOz-β, a-N(CH₂C₆H₅) -SO₂-p, a-N [CH (CH₂OH) ₂] -SO₂-P, a-N [CH (CH₂OH) CH(CH₂OH) ] -βθ₂-β, a kde a je místo připojení ke komplexnímu činidlu nebo komplexu kovu K a β je místo připojení k fluorovanému zbytku.
10. Použití podle nároků 8a 9, vyznačující se tím, že se používají sloučeniny obecného vzorce I, kde n ve vzorci -C_nF_2nE je celé číslo 4 až 15 a/nebo E v tomto vzorci označuje atom fluoru.

a · · ·

355 • ·
11. Použití podle nároků 8 až 10,vyznačuj ící se tím, že se používají následující sloučeniny:

komplex gadolinia s 10-[l-methyl-2-oxo-3-aza-5-oxo-{4perfluoroktylsulfonyl-piperazin-l-yl}-pentyl]-1,4,7tris(karboxymethyl)-1,4,7,10-tetraazacyklododekanem, komplex gadolinia s 10-[2-hydroxy-4-aza-5-oxo-7-oxa10,10,11,11,12,12,13,13,14,14,15,15,16,16,17,17-heptadekafluorheptadecyl]-1,4,7-tris(karboxymethyl)-1,4,7,10tetřaazacyklododekanem, komplex gadolinia s 10-[2-hydroxy-4-aza-5,9-dioxo-9-{4perfluoroktyl)piperazin-l-yt}-nonyl]-1,4,7tris(karboxymethyl)-1,4,7,10-tetraazacyklododekanem, komplex gadolinia s 10-[2-hydroxy-4-aza-5-oxo-7-aza-7(perfluoroktylsulfonyl)-nonyl-1,4,7-tris(karboxymethyl)1,4,7,10-tetraazacyklododekanem, komplex gadolinia s 10-[2-hydroxy-4-oxa-lH,ÍH,2H, 3H,3H,5H,5H,6H,6H-perfluortetradecyl] -1,4,7tris(karboxymethyl)-1,4,7,10- tetraazacyklododekanem, komplex gadolinia s 10-[2-hydroxy-4-aza-5-oxo-7-oxa10,10,11,11,12,12,13,13,14,14,15,15,16,16,17,17,18,18,19,19heníkosafluornonadecyl]-1,4,7-tris(karboxymethyl)-1,4,7,10tetraazacyklododekanem, komplex gadolinia s 10-[2-hydroxy-4-aza-5-oxo-ll-aza-ll(perfluoroktylsulfonyl)-tridecyl]-1,4,7-tris(karboxymethyl)1,4,7,10-tetraazacyklododekanem, komplex gadolinia s 10- [2-hydroxy-4-aza-5-oxo-7-aza-7(perfluoroktylsulfonyl)-8-fenyl-oktyl]-1,4,7tris(karboxymethyl)-1,4,7,10-tetraazacyklododekanem.

12. Použití podle nároků 1 až 7, vyznačuj ící

356 • · 0 0 · · · ·· ···· <*· ·· tím, že se jako kovové komplexy obsahující perfluoralkylové zbytky se používají sloučeniny obecného vzorce Ia

A-R^F (Ia) kde • A je molekulová část, obsahující 2 až 6 kovových komplexů, připojená přímo nebo prostřednictvím spojky k dusíkovému atomu vázanému na kruhtvořící nosný řetězec a

• R^F je perfluorovaný rovný nebo rozvětvený uhlovodíkový řetězec vzorce C_nF_2nE, kde E je koncový fluorový atom, chlorový atom, bromový atom, jodový atom nebo vodíkový atom, a n je celé číslo od 4 do 30, kde molekulová část A má následující strukturu:

K

I

Y

P

K kde • q¹ je celé číslo 0, 1, 2 nebo 3, • K je komplexační činidlo nebo kovový komplex nebo jejich sůl s organickou a/nebo anorganickou bází nebo aminokyselinou nebo amidem aminokyseliny, • X je přímá vazba k perfluoralkylové skupině, fenylová skupina nebo Ci-C₁₀ alkylenový řetězec, který případně obsahuje 1 až 15 atomu kyslíku, 1 až 5 atomů síry, 1 až 10 karbonylú, 1 až 10 skupin (NR^d) -, 1 až 2 skupin NR^dSO₂-, 1 až 10 skupin CONR^d-, 1 piperidin, 1 až 3

357 skupiny S0₂-, 1 až 2 fenylenové skupiny nebo je substituovaný s 1 až 3 zbytky R^F, kde R^d je vodíkový atom, fenylová skupina, benzylová skupina nebo C1-C15 alkylová skupina, která případně obsahuje 1 až 2 skupiny NHCO-, 1 až 2 skupiny CO-, 1 až 5 atomů kyslíku a je případně substituován s 1 až 5 hydroxyskupinami, 1 až 5 methoxyskupinami, 1 až 3 karboxyskupinami, 1 až 3 zbytky R^f, • V je přímá vazba nebo řetězec obecného vzorce Ha nebo - lila:

O

II

3-NHÍCH₂)_k-(^,-(CH₂) -C— a

R’ (Ha)

O

II

β-N-CHL-C-N, 1 * 1 O Η H / — \ II 0 Vy (CH₂)^ -C a 11 / KbfN-CbL-C-hr 1 1 H i (lila) kde • R^e je vodíkový atom, fenylová skupina, benzylová skupina nebo Ci-C₇ alkylová skupina, případně

substituovaná s karboxyskupinou, methoxyskupinou nebo hydroxyskupinou, • W je přímá vazba, polyglykoletherová skupina s až 5 glykolovými jednotkami nebo molekulová část obecného vzorce IVa

-CH(R^h)- (IVa) ·· ·♦ fcfc · · · · · · · · « · · ·· ·

358 • · · « · » ···· ·· · ·· ···· fcfc ·· kde R^h je Ci-C₇ karboxylová kyselina, fenylová skupina, benzylová skupina nebo - (CH₂) 1-5-NH-Kskupina • a je místo připojení na dusíkový atom nosného řetězce, β místo připojení ke komplexaěnímu činidlu nebo kovovému komplexu K, • a proměnné kam jsou přirozená čísla mezi 0 a 10 a 1 je 0 nebo 1, a kde • D je skupina CO- nebo S0₂~.

13. Použití podle nároku 12,vyznačující se tím, že se používají sloučeniny obecného vzorce la, kde q je 1.
14. Použití podle nároku 12,vyznačující se tím, že se používají sloučeniny obecného vzorce la, kde molekulová část X alkylového řetězce obsahuje 1 až 10 skupin CH₂CH₂O- nebo 1 až 5 skupin COCH₂NH, přímá vazba nebo jedna z následujících struktur γ~CH₂-O-(CH₂)₂— § , γ -CH₂-N-SO₂—δ

O C₂H₅

II I^{2 5} y-(CH₂)₁₀-N-C -ch₂-n-so c₂h₅ _y-(CH₂)₁₀-O-(CH₂)₂- _δ • · · · • · • · · · <p^H5 ch₂-n-so₂—δ > γ-ch₂-n-so₂- §

359

Y-CH₂-N-SO₂— δ γ-0Η₂-Ν-?η —δ

CH.

kde^-· γ je místo vázání k D a δ je místo vázání k RF.
15. Použití podle nároku 12,vyznačuj ící se tím, že se používají sloučeniny obecného vzorce Ia, kde V je molekulová část jedné z následujících struktur oc—C-CH₂-NH- β , α - C-CH₂-N- β

CH,COOH ch₃ fH-NH—β , CH(CH₃)₂ il a-C-pH-NH-β (CH₂)₄-NH-K

360
16. Použití podle nároku 12,vyznačuj ící se tím, že se používají sloučeniny obecného vzorce Ia, K je komplex obecného vzorce Va, Via, Vila nebo Vlila kde

R 00'

ROOC

N N

I I—COOR⁴

-COOR’ (Vlila)

361 • · · ··· ·· ··· · kde • R¹ je navzájem nezávisle vodíkový atom nebo ekvivalent kovového iontu atomového čísla 23 až 29, 42 až 46 nebo 58 až 70, • R⁸ je vodíkový atom nebo rovný, rozvětvený, nasycený nebo nenasycený C1-C30 alkylový řetězec, který je případně substituovaný s 1 až 5 hydroxyskupinami, 1 až 3 karboxyskupinami nebo 1 fenylovou skupinou a/nebo je přerušen s 1 až 10 atomy kyslíku, 1 fenylenovou skupinou nebo 1 fenyloxyskupinou, • R⁶ je vodíkový atom, rovný nebo rozvětvený C1-C7 alkylový zbytek, fenylový nebo benzylový zbytek, • R⁷ je vodíkový atom, methylová nebo ethylová skupina, případně substituovaná s hydroxy- nebo karboxyskupinou, • U³ je rovná, rozvětvená, nasycená nebo nenasycená 0χ-0₃ο alkylenová skupina obsahující případně 1 až 5 iminoskupin, 1 až 3 fenylenových skupin, 1 až 3 fenylenoxy skupin, 1 až 3 fenylenimino skupin, 1 až 5 amidových skupin, 1 až 2 hydrazido skupiny, 1 až 5 karbonylových skupin, 1 až 5 ethylenoxyskupin, 1 močovinovou skupinu, 1 thiomočovinovou skupinu, 1 až 5 atomů síry nebo dusíku a/nebo případně substituovaná s 1 až 5 hydroxy skupinami, 1 až 2 merkapto skupinami, 1 až 5 oxo-skupinami, 1 až 5 thioxo-skupinami, 1 až 3 karboxy-skupinami, 1 až 5-karboxyalkyl-skupinami a/nebo

1 až 3 aminoskupinami, přičemž případně přítomné fenylové skupiny mohou být substituovány s 1 až 2 karboxy-skupinami, 1 až 2 sulfon-skupinami nebo 1 až 2 hydroxyskupinami, • T¹ je skupina -CO-β, skupina -NHCO-β nebo skupina -NHCSβ, kde β je místo připojení k V.

·· ··· ·

362 • · · « · ♦ ···· ·· · ······ ·· ··
17. Použití podle nároku 16,vyznačuj ící se tím, že Ci-C₂o alkylenový řetězec v U³ obsahuje skupiny -CH₂NHCO-, -NHCOCH₂O-, -NHCOCH₂OC₆H₄-, -N(CH₂CO₂H) -, -CH₂OCH₂-, -NHCOCH₂CgH₄-, -NHCSNHCgH₄-, -CH₂OC6H₄-, -CH₂CH₂O-, a/nebo je substituovaný skupinami -COOH, -CH₂COOH.
18. Použití podle nároku 16,vyznačující se tím, že U³ je skupina -CH₂-, -CH₂CH₂-, -CH₂CH₂CH₂-, -C₆H₄-, -C₆H₁₀-, -CH₂C₆H₄-, -CH₂NHCOCH₂CH(CH₂CO₂H)-c_sh₄-,

-CH₂NHCOCH₂OCH₂- , -CH₂NHCOCH₂C₆H₄- .
19. Použití podle nároku 12,vyznačující se tím, že se používají sloučeniny obecného vzorce Ia, kde K má jednu z následujících struktur:

ROO iQ ---j

N

ROOC □

II /—C—·

COOR⁴

I—COOR⁴ •COOR

Ň'^X'^X-COOR⁴ .COOR’

-N |\r CO— OOR⁴

ROOC / \ ll ’C— II o

Ch³¹

N

COOR

COOR’ ^COOR⁴

N-^2 OH 'COOR⁴ ·· ··· ·

363
20. Použití podle nároků 12 až 19, vyznačuj ící se t í m, že se používají sloučeniny obecného vzorce la, kde perfluoralkylovaný řetězec RF je -C₆Fi₃, -C₈F₁₇, -Ci₀F₂₁nebo -Ci₂F₂₅.
21. Použití podle nároků 12 až 20, vyznačuj ící se t í m, že se použije komplex gadolinia s 1,4,7tris{1,4,7-tris(N-(karboxylatomethyl)-10-[N-l-methyl-3,6diaza-2,5,8-trioxooctan-l,8-diyl]-1,4,7,10-tetraazacyklododekan, Gd-komplex}-10-[N-2H,2H,4H,4H,5H,5H-3-oxa-perfluortridekanoyl] -1,4,7,10-tetraazacyklododekanem.
22. Použití podle nároků 1 až 7,vyznačuj ící se tím, že se použije perfluoralkylový kovový komplex obecného vzorce lb

A

I F

K-N—L-R (lb) kde

K je komplexující činidlo nebo kovový komplex obecného vzorce lib kde

R¹ označuje vodíkový atom nebo ekvivalent iontu kovu atomového čísla 23 až 29, 42 až 46 nebo 58 až 70,

364 φφ ··*· φφ ·ΦΦ·

R² a R³ jsou vodíkový atom, alkylová skupina mající 1 až 7 atomů uhlíku, benzylová skupina, fenylová skupina, skupina -CH₂OH nebo skupina -CH₂-O-CH₃, a

U² označuje zbytek L¹, přičemž L¹ a U² mohou být navzájem nezávisle stejné nebo rozdílné,

A¹ označuje vodíkový atom, rovnou nebo rozvětvenou alkylovou skupinu mající 1 až 30 atomů uhlíku, případně přerušenou s 1 až 15 atomy kyslíku a/nebo případně substituovanou s 1 až 10 hydroxylovými skupinami, 1 až 2 skupinami COOH, fenylovou skupinou, benzylovou skupinou a/nebo 1 až 5 skupinami OR³, přičemž R³ je vodíkový atom nebo alkýlový zbytek mající 1 až 7 atomů uhlíku nebo zbytek -L¹*^F,

L¹ označuje rovnou nebo rozvětvenou alkylenovou skupinu mající 1 až 30 atomů uhlíku, případně přerušenou s 1 až 10 atomy kyslíku, 1 až 5 skupinami -NH-CO-, 1 až 5 skupinami CO-NH-, popřípadě fenylovou skupinou případně substituovanou se skupinou -COOH, 1 až 3 atomy síry, 1 až 2 skupinami N(B¹)-SO2-, a/nebo 1 až 2 skupinami -SO2-N(B¹)-, kde B¹ je skupina A¹, skupina -NHCO-, skupina -CONH-, skupina N(B¹)-SO2nebo skupina -SO₂-N(B¹)- a/nebo případně substituovaná se zbytkem R^F, a

R^p je rovný nebo rozvětvený perfluorovaný alkýlový zbytek vzorce C_nF_2nE, kde n je číslo 4 až 30 a

E je koncový fluorový atom, chlorový atom, bromový atom, jodový atom nebo vodíkový atom, a případně přítomné kyselé skupiny mohou být případně jako soli organických a/nebo anorganických bází nebo aminokyselin nebo amidů aminokyselin.
23. Použití podle nároku 22, vyznačuj ící ·· ···· ·· ···· tím, že se použijí sloučeniny obecného vzorce lb, kde R², R³ a R⁹ jsou navzájem nezávisle vodík nebo alkylová skupina mající 1 až 4 atomy uhlíku.
24. Použití podle nároku 22,vyznačuj ící se tím, že se použijí sloučeniny obecného vzorce lb, kde A¹ je vodík, alkylový zbytek mající 1 až 15 atomů uhlíku, zbytek C₂H₄-OCH₃, c₃h₆-o-ch₃,

C₂H₄-O- (C₂H₄-O) _t-C₂H₄-OH,

C₂H₄'-O- (C₂H₄-O) _t-C₂H₄-OCH₃,

C₂H₄OH, C₃H₆OH, C₄H₈OH, C5H10OH, C₆H₁₂OH, C₇H₁₄OH,

CH(OH)CH₂(OH) ,

CH (OH) CH (OH) CH₂OH, CH₂ [ CH (OH) ] ?ΟΗ₂ΟΗ,

CH [CH₂ (OH) ] CH (OH) CH₂OH,

C₂H₄CH(OH) ch₂oh, (CH₂)₅COOH,

C₂H₄-O-(C₂H₄-O)_t-CH₂COOH nebo

C₂H₄-O- (C₂H₄-O)_t-C₂H₄-C_nF_2nE, kde s je celé číslo 1 až 15, t je celé číslo 0 až 13, u¹ je celé číslo od 1 do 10, n je celé číslo od 4 do 20, a

E je vodík, fluor, chlor, brom nebo jod stejně jako jejich, jsou-li možné, rozvětvené izomery.
25. Použití podle nároku 22,vyznačuj ící se tím, že se použijí sloučeniny obecného vzorce lb, kde A¹ je vodík, alkylový zbytek mající 1 až 10 atomů uhlíku

C₂H₄-OCH₃, C₃H6-O-CH₃,

C₂H₄-O- (C₂H₄-O)_X-C₂H₄-OH, C₂H₄-O- (C₂H₄-0)_x-C₂H₄-0CH₃, c₂h₄oh, c₃h₆oh, ·· 44

4 4 4 4 4 4

44 4444

44 4 44 4

CH₂[CH(OH) ]_yCH₂OH,

CH [CH₂ (OH) ] CH (OH) CH₂OH, (CH₂)_WCOOH,

C₂H₄-O- (C₂H₄-O)_X-CH₂COOH, C₂H₄-O- (C₂H₄ - O) χ-C₂H₄ - CnF₂nE, kde

X je celé číslo 1 , v az 5, y je celé číslo 1 v az 6, w je celé číslo od 1 do 10, n je celé číslo od 4 do 15, E je atom fluoru,

stejně jako jejich, jsou-li možné, rozvětvené izomery.
26. Použití podle nároku 22,vyznačující se tím, že se použijí sloučeniny obecného vzorce lb, kde L¹ je a- (CH₂)_s-3 a-CH₂-CH₂- (O-CH₂-CH₂-) _γ-β, a-CH₂-(O-CH₂-CH₂-)γ-β, α-ΟΊ₂-ΝΗ-00-β, a-CH₂-CH₂-NH-SO₂^, a - CH₂ - NH - CO - CH₂ - N (CH₂ COOH) - S0₂ - β, a-CH₂-NH-CO-CH₂-N (C₂H₅) -δθ₂-β, a-CH₂-NH-CO-CH₂-N(C₁₀H₂₁) -δθ₂-β, a-CH₂-NH-CO-CH₂-N(C₆H₁₃) -δθ₂-β, a-CH₂-NH-CO- (CH₂) io-N(C₂H₅) -5Ο₂-β, a-CH₂-NH-CO-CH₂-N(-CH₂-C₆H₅) -δθ₂-β, a-CH₂-NH-CO-CH₂-N (-CH₂-CH₂OH) -SOz-β, a-CH₂-NH-CO- (CH₂)₁₀-S-CH₂CH₂^, a-CH₂-NH-CO-CH₂-O-CH₂CH₂^, a-CH₂-CH₂-NH-CO-CH₂-O-CH₂CH₂^, • fc ···· • fc «fcfcfc

367 • fc fcfc fcfc · ···· fcfc fc « fc fc ·· «··· ••fc * · · fcfcfcfc w fcfcfc fcfcfc fcfcfcfc ·· * fcfc fcfcfcfc fcfc fcfc a-CH₂- (CH₂-CH₂O)_t- (CH₂) ₃-NH-CO-CH₂-O-CH₂CH₂-p, a-CH₂-NH-CO- (CH₂) io-0-CH₂CH₂-p,

Ot-CH₂-CH₂-NH-CO- (CH₂) ₁₀-Ο-ΟΗ₂ΟΗ₂-β, a-CH₂-C₆H4-O-CH₂-CH₂-p, kde fenylenová skupina je substituovaná v polohách 1,4 nebo 1,3, ct-CH₂-O-CH₂-C (CH₂-OCH₂CH₂-C₆F₁₃) ₂-CH₂-O-CH₂CH₂-p, a-CH₂-NH-CO-CH₂-CH₂-CON-CH₂-CH₂-NHCOCH₂-N (C₂H_S) SO₂C₈F₁₇-p a-CH₂-CH₂-NH-CO-CH₂-N(C₂H₅) -SO₂-p, a - ČH₂ - 0 - CH₂ - CH (OCi ₀H₂₁) - CH₂ - 0 - CH₂CH₂ - β , a- (CH₂-NHCO) ₄-ΟΗ₂0-ΟΗ₂ΟΗ₂-β, a- (CH₂-NHCO)₃-CH₂O-CH₂CH₂^, a-CH₂-OCH₂C (CH₂OH) ₂-CH₂-O-CH₂CH₂^, a-CH₂-NH-CO-CH₂-N(C_eH₅) -βθ₂-β, α-ΝΗ-ΟΟ-ΟΗ₂ΟΗ₂-β, a-NH-CO-CH₂-O-CH₂CH₂^, a-NH-CO-β, a-NH-CO-CH₂-N(CH₂COOH) -S0₂^, a-NH-CO-CH₂-N(C₂H₅) -3Ο₂-β, a-NH-CO-CH₂-N(C₁₀H₂₁) -SOz-β, a-NH-CO-CH₂-N(C₆H₁₃) -δθ₂-β, a-NH-CO- (CH₂) _1o-N(C₂H₅) -δθ₂-β, a-NH-CO-CH₂-N (-CH₂C_eH₅) -3Ο₂-β, gc-NH-CO-CH₂-N (-CH₂-CH₂OH) -δθ₂-β, α-ΝΗ-ΟΟ-ΟΗ₂-β, a-CH₂-O-C₆H4-O-CH₂-CH₂^, • fc fcfcfcfc

368 · · · · · · «··· ·· * ·· ···· fc· ·· a-CH₂-C₆H4-O-CH₂-CH₂-P, oc-N(C₂H₅) -SOa-β, oc-N(C₆H₅) -5Ο₂-β, a-N(C₁₀H₂₁) -SOz-β, a-N(C₆Hi₃) -5Ο₂-β, oc-N(C₂H₄OH) -SOa-β, a-N(CH₂COOH) -SOs-β, a-N(CH₂C₆H_s) -SOa-β, α-N [CH (CH₂OH) ₂] -δθ₂-β, a-N [CH (CH₂OH) CH (OH) (CH₂OH) ] -δθ₂-β, kde s je celé číslo od 1 do 15 a y je celé číslo od 1 do 6.
27. Použití podle nároku 22,vyznačuj ící se tím, že se použijí sloučeniny obecného vzorce lb, kde L¹ je α-ΟΗ₂-0-ΟΗ₂-ΟΗ₂-β, cc-CH₂-CH₂- (O-CH₂-CH₂-) y-β, a-CH₂- (O-CH₂-CH₂-) _γ-β, oc-CH₂-CH₂-NH-S0₂-^, např. 10 α - CH₂ - NHCOCH₂ - O - CH₂ - CH₂ - β, α - ch₂ - ch₂nhcoch₂ - o - ch₂ - ch₂ - β, a-CH₂- (CH₂CH₂O)_y (CH₂) ₃NHCO-CH2-O-CH₂-CH₂^, a- ch₂ -nhco ( ch₂ ) ₁₀ - o - ch₂ - ch₂ - β , a-CH₂-CH₂-NHC0 (CH₂) ₁₀-O-CH₂-CH₂-P, a-CH₂-O-CH₂-CH(OC₁₀H₂₁) -CH₂-O-CH₂-CH₂-P, a-CH₂-O-C₆H₄-O-CH₂-CH₂^, a-CH₂-C₆H₄-O-CH₂-CH₂-p, kde y je celé číslo od 1 do 6.

• · · ·

369
28. Použití podle nároku 22,vyznačuj ící se tím, že se použijí sloučeniny obecného vzorce lb, kde R^F je rovný nebo rozvětvený perfluorovaný alkylový zbytek vzorce C_nF_2nE, kde n je číslo od 4 do 15 a E je koncový fluorový atom.
29. Použití podle nároků 22 až 28, vyznačuj ící se t í m, že se použijí následující sloučeniny:

1.4.7- Tris(karboxylátomethyl)-10-(3-aza-4-oxo-hexan-5yl)-kyselina-N-(2,3-dihydroxypropyl)-N-(1H,1H,2H,2H,4H,4H,

5H,5H-3-oxa)-perfluortridecyl)amid]-1,4,7,10-tetraazacyklododekan, komplex gadolinia

1.4.7- Tris(karboxylátomethyl)-10-{(3-aza-4-oxo-hexan-5yl)kyselina-[N(3,6,9,12,15-pentaoxa)-hexadecyl)-Ν-(ΙΗ,ΙΗ,2H, 2H,4H,4H,5H,5H-3-oxa)-perfluortridecyl]-amid}-1,4,7,10tetraazacyklododekan, komplex gadolinia

1,4,7-Tris(karboxylátomethyl)-10-{(3-aza-4-oxo-hexan-5yl)-kyselina-N-(5-hydroxy-3-oxa-pentyl)-N-(1H,1H,2H,2H,4H,

4H,5H,5H-3-oxa)perfluortridecyl]-amid}-1,4,7,10tetraazacyklododekan, komplex gadolinia

1.4.7- Tris(karboxylátomethyl)-10-{(3-aza-4-oxo-hexan-5yl) -sáure- [N-3,6,9,16-tetraoxa-13-aza-14-oxo-Ci7-C₂₆-heptadekafluor)hexakosyl]-amid}-1,4,7,10-tetraazacyklododekan, komplex gadolinia

1.4.7- Tris(karboxylátomethyl)-10-[(3-aza-4-oxo-hexan-5yl]-kyselina-N-(2methoxyethyl)-N-(1H,1H,2H,2H,4H,4H,5H,5H-3oxa)-perfluortridecyl]amid}-1,4,7,10-tetraaza-cyklododekan, komplex gadolinia.
30. Použití podle nároků 1 až 7,vyznačuj ící se tím, že se jako perfluoralkylové kovové komplexy s cukernými zbytky použijí sloučeniny obecného vzorce lc

370 (K),¹-G - (Z-R^F)_m’

I (lc) (Y-R)p' kde

R je mono- nebo oligosacharidovy zbytek připojený přes 1OH- nebo 1-SH- pozici,

R^f je polyfluorovaný, rovný nebo rozvětvený uhlovodíkový řetězec vzorce -C_nH_2nE, kde E je koncový atom fluoru, chloru, bromu, jódu nebo vodíku a n je číslo od 4 do 30,

K je kovový komplex obecného vzorce líc kde

R¹ označuje vodíkový atom nebo ekvivalent iontu kovu atomového čísla 23 až 29, 42 až 46 nebo 58 až 70, s tou výhradou, že alespoň dvě R¹ jsou ekvivalenty iontu kovu,

R² a R³ jsou nezávisle na sobě vodíkový atom, alkylová skupina mající 1 až 7 atomů uhlíku, benzylová skupina, fenylová skupina, skupina -CH₂OH nebo skupina -CH₂-O-CH₃, a U je skupina -C₆H₄-0~CH₂-co, skupina -(CH₂)i-₅-co, fenylová skupina, skupina -CH₂-NHCO-CH₂-CH (CH₂COOH) -Ο₆Η₄-ω, skupina -C₆H₄-(OCH₂CH₂) o-i-N (CH₂COOH) -CH₂-o>, nebo alkylenová skupina mající 1 až 12 atomů uhlíku nebo skupina C₇-Ci₂-C₆H₄-O-, případně přerušená s jedním nebo více atomy kyslíku, 1 až 3 skupinami -NHCO-, 1 až 3 skupinami -CO-NH- a/nebo

371 tttt • · · · substituovaná s 1 až 3 skupinami - (CH₂) 0-5COOH, kde ω je místo vázání na skupinu -C0-, nebo obecného vzorce IIIc kde R¹ má výše uvedený význam, R⁴ je vodík nebo ekvivalent kovového iontu uvedený v definici R¹ a U¹ je skupina -C₆H₄-OCH₂-co-, kde ω je vazebné místo ke skupině -CO-, nebo obecného vzorce IVc

ROOC (IVc) kde R¹ a R² mají výše uvedený význam, nebo obecného vzorce VcA nebo VcB

COv

COOR

ROOC n:

-COOR

-COOR (VcA)

372 • a a · · · a · /^x-COOR’

O Z ⁿ'-COOR’ / (VcB) m^-COOR^{1 zIN}^COOR¹ kde R¹ má výše uvedený význam, nebo obecného vzorce Víc nebo obecného vzorce VIlc

ROOC

R¹OOC

ROOC

ROOC

O (Vile) kde R¹ má výše uvedený význam,

U¹ je skupina -C₆H₄-0-CH₂-o-, kde ω je vazebné místo ke skupině -CO-, nebo obecného vzorce VIIIc kde R¹ má výše uvedený význam, (VIIIc) ·· ·· ·· ···· • · · · · · · • · · · · ·

373 ··· fc·· ···· ·· · ·· · · · · · · · · a kde případně volné karboxylové skupiny ve zbytku K mohou být ve formě solí organických a/nebo anorganických bází nebo aminokyselin nebo amidů aminokyselin,

G v případě, že K je kovový komplex líc až Vile, je alespoň třikrát funkcionalizovaný zbytek vybraný z následující skupiny obsahující zbytky a) až j)

a)

H _α (CH,)— C-CO —Y ^H NH i β

b)

Y -^CO-C-ÍCH^-N w- β I H

NH i

α

d) β

374 ti ti • ti titititi

e)

g) » ti ti tititi • ti ti ti ti ti ti«

H

NH -CO -C—(CH-^-N v^-a ' I H

N-^Y

NH

H

JM-CO -C-tCH^-N NH β

I

NH

NH-CO-CH-(CH₂)-NH-^3

N-CO-CH-(CH₂)4-NH-^<x

NH

I

NH-CO-CH-(CH₂)_Í-NH-^B NH • · « · • ·

h) —N-(CH₂)₄-S-N-co5—(CHjJj-N-«β π π | π <r° NH

Y i β

i)

j) <χτΜ~ΝΗ—CH —CO —Y β

a

G v případě, že K je kovový komplex VIIIc, je alespoň trojnásobně funkcionalizovaný zbytek vybraný z následující skupiny obsahující k) nebo 1)

k) p^NH-(CH₂)_rCH-CO-^a

NH i

Y

i) • fc

376 a^CO-CH-CH-CH_rCO~^Y

NH i

β kde a označuje vazebné místo G ke komplexu K, β označuje vazebné místo G ke zbytku Y a γ označuje vazebné místo G ke zbytku Z

Y je skupina -CH₂-, skupina δ- (CH₂) ₍₁_₅)00-β, 8-CH₂-CHOH-COβ, nebo skupina δ-CH (CHOH-CH₂OH)-CHOH-CHOH-CO-β, kde δ označuje vazebné místo k cukernému zbytku R a β je vazebné místo ke zbytku G,

Z je

Y—^N-SO₂-£

Y-COCH₂-N(C₂H₅)-SO₂-e,

Y-COCH₂-O-(CH₂)₂-SO₂-e,

0 0 ^n—SO^-S nebo γ -NHCH₂CH₂ - 0 - CH₂CH₂ - ε kde γ je místo připojení Z ke zbytku G a ε je místo připojení Z k perfluorovánému zbytku R^Fa l¹, m¹ jsou nezávisle na sobě celá čísla 1 nebo 2 a p je celé číslo 1 až 4.

• · β · ti · ti · ti · ti · · ti··· ti· ·

377
31. Použití podle nároku 30,vyznačuj ící se tím, že se používá sloučenina obecného vzorce Ic, kde R je monosacharidový zbytek s 5 až 6 atomy uhlíku nebo jejich desoxysloučeniny, s výhodou glukosa, mannosa nebo galaktosa.
32. Použití podle nároku 30, vyznačující se tím, že se používá sloučenina obecného vzorce Ic, kde R² a R³ jsou nezávisle na sobě vodík nebo alkyl mající 1 až 4 atomy uhlíku a/nebo E ve vzorci -C_nF_2nE je fluorový atom.
33. Použití podle nároku 30, vyznačující se tím, že se používá sloučenina obecného vzorce Ic, kde G je lysinový zbytek (a) nebo (b).
34. Použití podle nároku 30,vyznačuj ící se tím, že se používá sloučenina obecného vzorce Ic, kde Z je y—^n-so₂-e kde γ označuje vazebné místo Z ke zbytku G a ε označuje vazebné místo Z k perfluorovanému zbytku R^F a/nebo Y je 8CH2-CO-P, kde δ je vazebné místo k cukernému zbytku R a β je vazebné místo ke zbytku G.
35. Použití podle nároku 30,vyznačuj ící se tím, že se používá sloučenina obecného vzorce Ic, kde U v kovovém komplexu K je -CH₂- nebo -C₆H₄-0-CH₂-o), kde ω je vazebné místo ke skupině -CO-.
36. Použití podle nároku 30,vyznačuj ící se tím, že se používá komplex gadolinia s 6-N-[1,4,7tris(karboxylatomethyl)-1,4,7,10-tetraazacyklododekan-10-N·· ··· · ·· ·· • · · · · · · · • » · · · · · ·

378 (pentanoyl-3-aza-4-oxo-5-methyl-5-yl)]-2-N-[1-0-a-Dkarbonylmethyl-mannopyranosa]-L-lysin-l-[1-(4perfluoroktylsulfonyl)piperazin]-amidem.
37. Použití podle nároků 1 až 7,vyznačuj ící se tím, že se jako perfluoralkylové kovové komplexy s polárními zbytky použijí sloučeniny obecného vzorce Id (K),’-G - (Z-R^F)_m’

I (Id) (R)p² kde r^f je perfluorovaný, rovný nebo rozvětvený uhlovodíkový řetězec vzorce -C_nF_2nE, kde E je koncový fluor, chlor, brom, jod nebo vodíkový atom a n je číslo od 4 do 30,

K je kovový komplex obecného vzorce lid

ROOC

R³

N- (Hd) kde

R¹ je vodíkový atom nebo ekvivalent kovového iontu atomového čísla 23 až 29, 42 až 46 nebo 58 až 70,

R¹ a R³ jsou navzájem nezávisle vodík, alkyl mající 1 až 7 atomů uhlíku, benzylová skupina, fenylová skupina, skupina -CH₂OH nebo skupina -CH₂OCH₃, a

U je skupina -C₆H₄-0-CH₂-o, skupina - (CH₂) i-s-ω, fenylová skupina, skupina -CH₂-NHCO-CH₂-CH (CH₂COOH)-C₆H₄-m, skupina 379 • · « · ·· ····

C₆H₄-(OCH₂CH₂) o-i-N(CH₂COOH)-CH₂-c>, nebo alkylenová skupina mající 1 až 12 atomů uhlíku nebo skupina C₇-C₁₂-C₆H₄-O-, případně přerušená s jedním nebo více atomy kyslíku, 1 až 3 skupinami -NHCO-, 1 až 3 skupinami -CO-NH- a/nebo substituovaná s 1 až 3 skupinami - (CH₂) ₀-₅COOH, kde ω je místo vázání na skupinu -CO-, nebo obecného vzorce Illd

ROOC'

-N

N

COOR¹

ΝΛ COOR⁴ 0 _NuJ-u¹—

COOR¹ (Illd) kde R¹ má výše uvedený význam, R⁴ je vodík nebo ekvivalent iontu kovu uvedený pod R¹ a U¹ je skupina -C₆H₄-0-CH₂-co-, kde ω je vazebné místo ke skupině -C0nebo obecného vzorce IVd (IVd) kde R¹ a R² mají výše uvedený význam, nebo obecného vzorce VdA nebo VdB

380

ROOCT / ^,N^-COOR¹-N \ _n^-COOR¹ ^--COOR¹ (VdA) • fc · fcfcfc fc · •fc ···· • »· · ·· ··

O

II vw—C'“

VNr^C00R’

-COOR¹ kde R¹ má výše uvedený význam, (VdB) nebo obecného vzorce Vid

ROOCROOC)N n:

-CO— -COOR¹ (Vid) kde R¹ má výše uvedený význam, nebo obecného vzorce Vild

R¹OOCROOCROOCROOC:n :n (Vild) kde R¹ má výše uvedený význam a

U¹ je skupina -C₆H₄-O-CH₂-(0-, kde ω je vazebné místo ke skupině —CO-, a kyselé skupiny vyskytující se případně ve zbytku K mohou být přítomny ve formě solí organických a/nebo anorganických bází nebo aminokyselin nebo amidů aminokyselin, ·· ··*· ·« ·· ·· ···· • · β * · · · · · ·

G je alespoň třikrát funkcionalizovaný zbytek vybraný z následujících zbytků a) až i)

a)

H α-^N—C-CO —γ ^H NH

4 β

b)

LJ

Y ^CO-C-PAN β l H a

e) ·« ···· *· ····

382 ·« ·· • · · · · · · ·· · • · ♦ ·· · · · · • · · ♦ · · · · · · * ··· · · · · · · · ·· 4» «····· ·· ··

f)

Η H αν- N—(CH₂)₄-C-N-CO-C—(CH^-N-^β

Η Η | H

9° NH

g)

HN /-\

N NH

Oí

h) γ -co-(ch₂), ,-ρΗ-οο-'Ύβ

NH

I α

i) β C0-(CH₂), ₃-CH-CO~vay • to toto·· ·· ···· • t ·» toto · · · ♦ · · · · • · « · · ···· 383 ··· ··· ···· kde a označuje vazebné místo G ke komplexu K, β označuje vazebné místo G ke zbytku R a γ označuje vazebné místo G ke zbytku Z

Z je

Y—>-S0₂-£

Y-C(O)CH₂O(CH₂)_re, kde γ označuje vazebné místo Z ke zbytku G a ε označuje vazebné místo Z k perfluorovanému zbytku R^F

R je polární zbytek vybraný z komplexu K obecného vzorce lid až Vild, kde R¹ je vodíkový atom nebo ekvivalent iontu kovu atomového čísla 20, 23 až 29, 42 až 46 nebo 58 až 70, a zbytky R², R³, R⁴, U a U¹ mají výše uvedený význam nebo zbytek kyseliny listové nebo uhlovodíkový řetězec mající 2 až 30 uhlíkových atomů, rovný nebo rozvětvený, nasycený nebo nenasycený, vázaný ke zbytku G prostřednictvím skupiny -C0-, -S0₂- nebo přímo, případně přerušený s 1 až 10 kyslíkovými atomy, 1 až 5 skupinami -NHCO-, 1 až 5 skupinami -CONH-, 1 až 2 atomy síry,

1 až 5 -NH- skupinami nebo 1 až 2 fenylovými skupinami, které mohou být případně substituovány s 1 až 2 OH skupinami, 1 až

2 NH₂ skupinami, 1 až 2 -COOH skupinami nebo 1 až 2 -SO₃H skupinami nebo případně substituovaný s 1 až 8 hydroxy skupinami, s 1 až 5 skupinami -COOH, s 1 až 2 skupinami SO₃H, s 1 až 5 NH₂skupinami, s 1 až 5 Ci-C₄ alkoxyskupinami, • to to·*· ·· ···· ·· toto to · * «·«· ·· to a

l¹, m¹, p² jsou navzájem nezávisle celá čísla 1 nebo 2.
38. Použití podle nároku 37,vyznačuj ící se tím, že se používají sloučeniny obecného vzorce Id, kde K je kovový komplex obecného vzorce lid, Illd, VdB nebo Vild.
39. Použití podle nároku 37, vyznačující se tím, že se používají sloučeniny obecného vzorce Id, kde polární zbytek R má význam komplexu K, s výhodou komplexu obecného vzorce lid, Illd, VdA nebo Vild.
40. Použití podle nároku 37,vyznačuj ící se tím, že se používají sloučeniny obecného vzorce Id, kde polární zbytek je:

-C(O)CH₂CH₂SO₃H

-C (O) CH₂OCH₂CH2OCH₂CH₂OH

-C (O) CH₂OCH₂CH₂OH

-C (O) CH₂OCH₂CH (OH) CH₂OH

-C (O) CH₂NH-C (O) CH₂COOH

-C (O) CH₂CH (OH) CH₂OH

-C(O)CH₂OCH₂COOH

-so₂ch₂ch₂cooh

-C(O)-C₆H₃- (m-COOH) 2

-C (O) CH₂O (CH₂) 2-C₆H₃- (m-COOH) ₂

-C (O) CH₂O-C₆H₄-m-SO₃H

-C (O) CH₂NHC (O) CH₂NHC (O) CH₂OCH₂COOH

- C (O) CH₂OCH₂CH₂OCH₂COOH

-C (O) CH₂OCH₂CH (OH) CH₂O-CH₂CH₂OH

-C (O) CH₂OCH₂CH (OH) CH₂O-CH₂CH (OH) -CH₂OH

-C(O)CH₂SO₃H

-C(O)CH₂CH₂COOH ··

9 9 9 9

9 9 · ·» Φ·Ι5· ·« ·**»

385 • · · ·· 9 • · Φ ·· ··»· « · 9

9 9 9

9 9 · • · · · ·· 99

-C (Ο) CH (OH) CH (OH) CH₂OH

-C (O) CH₂O [ (CH₂) ₂O] i-₉-CH₃

-C(O)CH₂O[ (ch₂)₂0]₁.₉-h

-C(O)CH₂OCH(CH₂OH)₂

-C (O) CH₂OCH (CH₂OCH₂COOH) 2

-C (O) -C₆H₃- (m-OCH₂COOH) ₂

-C (O) -CH₂O- (ch₂) ₂o (ch₂) ₂o- (ch₂) ₂o (ch₂) ₂och₃ s výhodou -C(O)CH₂O[ (CH₂)₂O]₄-CH₃.
41. Použití podle nároku 37,vyznačující se tím, že se používají sloučeniny obecného vzorce Id, kde polární zbytek je kyselina listová.
42. Použití podle nároku 37, vyznačující se tím, že se používají sloučeniny obecného vzorce Id, kde G je lysinový zbytek (a) nebo (b).
43. Použití podle nároku 37, vyznačující se tím, že se používají sloučeniny obecného vzorce Id, kde U v kovovém komplexu K je skupina -CH₂- nebo -C₆H₄-O-CH₂-G), kde ω je místo vázání ke skupině -CO-.
44. Použití podle nároků 37 až 43, vyznačuj ící se t i m, že se používá komplex gadolinia s 2,6-N,Ν'bis[1,4,7-tris(karboxylátomethyl)-1,4,7,10-tetraazacyklododekan-10 - (pentanoyl-3-aza-4-oxo-5-methyl-5-yl)]-lysin[1-(4-perfluoroktylsulfonylpiperazin]-amidem.
45. Použití podle nároků 1 až 7,vyznačující se tím, že se jako galenický přípravek perfluoralkylového kovového komplexu použije přípravek obsahující paramagnetický perfluoralkylový kovový komplex obecného vzorce I, la, lb, lc • · · · • ·

386 a/nebo Id a diamagnetickou perfluoralkylovou látku, s výhodou rozpuštěné ve vodném rozpouštědle.
46. Použití podle nároku 45,vyznačuj ící se tím, že se jako diamagnetická perfluoralkylová látka použije sloučenina obecného vzorce XX:

R^f-L²-B² (XX) kde R^f je rovný nebo rozvětvený perfluoralkylový zbytek mající 4 až 30 atomů uhlíku, L² je spojka a B² je hydrofilní skupina.
47. Použití podle nároku 46,vyznačuj ící se tím, že spojka L² je přímé spojení, skupina -SO₂- nebo rovný nebo rozvětvený uhlovodíkový řetězec až s 20 uhlíkovými atomy, který může být substituován s jednou nebo více skupinami -OH, -COO-, -SO₃- a/nebo může případně obsahovat jednu nebo více skupin -0-, -S-, -CO-, -CONH-, -NHC0-,

CONR⁹-, -NR⁹CO~, -S0₂-, -PO4'-, -NH-, -NR⁹-, arylový kruh nebo piperazin, kde R⁹ je alkýlový zbytek mající 1 až 20 uhlíkových atomů, který může opět obsahovat jeden nebo více O atomů a/nebo může být substituovaný se skupinou -COO nebo skupinou -S0₃.
48. Použití podle nároku 46,vyznačující se tím, že hydrofilní skupina B² je mono- nebo disacharid, jedna nebo více sousedních -COO' nebo -SO₃'- skupin, dikarboxylová kyselina, isoftalová kyselina, pikolinová kyselina, benzensulfonová kyselina, tetrahydropyrandikarboxylová kyselina, 2,6-pyridindikarboxylová kyselina, kvartérní amoniová skupina, aminopolykarboxylová kyselina, aminodipolyethylenglykol-sulfonová kyselina, aminopolyethylenglykolová skupina, skupina SO₂-(CH₂) ₂-0H, • ·

387 polyhydroxyalkylový řetězec s minimálně dvěmi hydroxyskupinami nebo jeden nebo více polyethylenglykolových řetězců s alespoň dvěmi glykolovými jednotkami, kde polyethylenglykolový řetězec je ukončen skupinou -OH nebo skupinou OCH₃.
49. Použití podle nároku 45,vyznačuj ící se tím, že se jako diamagnetická perfluoralkylová látka použije konjugát α-, β- nebo γ-cyklodextrinu a sloučeniny obecného vzorce XXII:

A²-L³-R^f (XXII) kde A² je molekula adamantanu, molekula bifenylu nebo molekula anthracenu, L³ je spojka a R^F je rovný nebo rozvětvený perfluoralkylový zbytek mající 4 až 30 uhlíkových atomů, a kde spojka L³ je rovný uhlovodíkový řetězec mající 1 až 20 uhlíkových atomů, který může být přerušen jednou nebo více skupinami CO-, SO₂-, CONH-, NHCO-, CONR¹⁰-, NR¹⁰CO-, NH-, NR¹⁰ nebo piperazinem, přičemž R¹⁰ je alkylový zbytek mající 1 až 5 atomů uhlíku.
50. Použití podle nároku 45,vyznačující se tím, že se jako diamagnetická perfluoralkylová látka použije sloučenina obecného vzorce XXI:

R^f-X^x (XXI) kde R^f je rovný nebo rozvětvený perfluoralkylový zbytek mající 4 až 30 uhlíkových atomů a X¹ je zbytek vybraný ze skupiny obsahující následující substituenty (n je číslo od 1 do 10) :

388

Q h02 • · · · · ·

389

OH

390 ·· ···· o y-COO —S-N

O —COO'

COO‘ _Ca²⁺

N COO'

COO

391

OO'

COO' • ti ···· • ti titi • ti ti » · · · ·· ti • titi tititi titititi ti • titi tititi titititi titi ti ti* ti··· ·· titi ·· ····

1/18

OBR. 1 základní stav

24 h po aplikaci

48 h po aplikaci barveno (Sudan III)

Kovový komplex XV: 25 pmol/kg intravenosně; 3D-T,-MPRage, TR/TE 11,1/4,3 ms, a 15°; (králíci Watanabe; A = aorta, H = srdce, šipky = cévní defekty s plaky; projekce MPR; histologie po vybarvení barvivém Sudan III)

2/18

OBR. 2 základní 35 minut 60 minut 24 h stav po aplikaci po aplikaci po aplikaci

Kovový komplex XV: 10 pmol/kg intravenosně; 3D-T_rMPRange, TR/TE 11,1/4,3 ms, α 15°· (králíci Watanabe; A = aorta, H = srdce, šipky = cévní defekty s plaky) sekvence spino- barveno sekvence vého echa (Sudan III) MPRange

Kovový komplex XV: 10 μιυοΐ/kg intravenosně; 3 D-T,-MPRange, TR/TE 11,1/4,3 ms, α 15°; (králíci Watanabe; 24 h po aplikaci; preparát aorty; histologie po vybarvení barvivém Sudan ΠΙ) post mortem MRI aorty uložené v agaru

3/18

OBR. 3

Kovový komplex XV: 100 μηιοΐ/kg intravenosně; SE, TR/TE 400/6 ms; šipka = infarkt myokardu

4/18

OBR. 4

24 h po aplikaci post mortem, koronární

24 h po aplikaci in vivo, axiální

24 h po aplikaci post mortem, axiální

Kovový komplex I; 100 gmol/kg intravenosně; SE, TR/TE 400/6 ms; šipka = infarkt myokardu

5/18

OBR. 5 základní 5 min 30 min 60 min 24 h stav po aplikaci po aplikaci po aplikaci po aplikaci

Kovový komplex XV: 200 pmol/kg intravenosně; 3D-T_rMPRange, TR/TE 11,1/4,3 ms, α 15°; (šipka = metastáza; T = nádor) základní 30 minut 60 minut 24 h stav po aplikaci po aplikaci po aplikaci

Kovový komplex XV: 200 μιηοΐ/kg intravenosně; TR/TE 11,1/4,3 ms, α 15°; primární nádor

TV MOl ---W,

6/18

OBR. 6

Kovový komplex I: 100 pmol/kg intravenosně; 3D-Ij-MPRange, TR/TE 11,1/4,3 ms, a 15° (plná šipka = lymfatické uzliny; T = tumor; šipka = pozdější zvýšení)

TV &oe 2

7/18

OBR. 7

6 h po aplikaci 6 h po aplikaci 6 h po aplikaci in vivo, axiální post mortem, axiální post mortem, koronární

Kovový komplex X: 100 pmol/kg intravenosně; SE, TR/TE 400/12 ms; šipka = infarkt myokardu

-ÝIZ Z.

8/18

OBR. 8 základní 15 minut 60 min ^stav po aplikaci po aplikaci

Kovový komplex X: 100 pmol/kg intravenosně; 3D-T_rMPRange, TR/TE 11,1/4,3 ms, a 15° (šipka - popiiteální lymfatická uzlina)

9/18

OBR. 9

Kovový komplex X: 200 pmol/kg intravenosně; 3D-T_rMPRange, TR/TE 11,1/4,3 ms, a 15° (šipky, M = metastázy, T = tumor)

TV to>3 10/18

OBR. 10

Kovový komplex V: 100 pmol/kg intravenosně; SE, TR/TE 400/12 ms, šipka = infarkt myokardu pv

11/18

OBR. 11 základní 15 minut 60 min stav po aplikaci po aplikaci

Kovový komplex III: 200 gmol/kg intravenosně; 3D-Tj-MPRange, TR/TE 11,1/4,3 ms, a 15 (šipka = popliteální Iymfatická uzlina)

TV fsog,'

12/18

OBR. 12 barveno základní stav

15 minut po aplikaci

60 minut po aplikaci (H/E)

Kovový komplex V: 200 pmol/kg intravenosně; 3D-1j-MPRange, TR/TE 11,1/4,3 ms, a 15 (šipky, M = metastázy, T = tumor) pV Zoř! -37Z,

13/18

OBR. 13

3 h po aplikaci 3 h po aplikaci 3 h po aplikaci in vivo, axiální post mortem, axiální post mortem, koronární šipka = infarkt myokardu

14/18

OBR. 14

Kovový komplex XIV: 200 pmol/kg intravenosně; flash outhphase, TR/TE 10/5 ms, α 40° šipky = inguinální a iliakální lymfatické uzliny

15/18

OBR. 15 základní lOmin 30 min 23 h barveno stav po aplikaci po aplikaci po aplikaci (H/E)

Kovový komplex XIV: 200 pmol/kg intravenosně; MPRange, TR/TE 11,1/4,3 ms, α 15°· 80 řezů z králíka s nádorem VX2; šipky = metastázy

TV

16/18

OBR. 16

22 h po aplikaci 22 h po aplikaci 22 h po aplikaci in vivo, axiální post mortem, axiální post mortem, koronární

Kovový komplex III: i 00 μιηοΐ/kg intravenosně; SE, TR/TE 400/12 ms; šipka = infarkt myokardu

TV

17/18

OBR. 17 základní 15 minut 60 min stav po aplikaci po aplikaci

Kovový komplex V: 200 gmol/kg intravenosně; 3D-T,-MPRange, TR/TE 11,1/4,3 ms, α 15° (šípka = popliteální lymfatická uzlina)

-fy SLe>»

18/18

OBR. 18

Kovový komplex III: 200 μιυοΐ/kg intravenosně; 3D-T|-MPRange, TR/TE 11,1/4,3 ms, a 15° (šipky, M = metastázy, T = tumor)