CZ2013436A3 - Salophenové komplexy železa s heterocyklickými N-donorovými ligandy, způsob jejich přípravy a jejich použití jako léčiv v protinádorové terapii - Google Patents
Salophenové komplexy železa s heterocyklickými N-donorovými ligandy, způsob jejich přípravy a jejich použití jako léčiv v protinádorové terapii Download PDFInfo
- Publication number
- CZ2013436A3 CZ2013436A3 CZ2013-436A CZ2013436A CZ2013436A3 CZ 2013436 A3 CZ2013436 A3 CZ 2013436A3 CZ 2013436 A CZ2013436 A CZ 2013436A CZ 2013436 A3 CZ2013436 A3 CZ 2013436A3
- Authority
- CZ
- Czechia
- Prior art keywords
- salophen
- complex
- aryl
- alkyl
- butanol
- Prior art date
Links
- 239000003446 ligand Substances 0.000 title claims abstract description 20
- 239000003814 drug Substances 0.000 title claims abstract description 8
- 125000000623 heterocyclic group Chemical group 0.000 title claims abstract description 8
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 10
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims description 10
- 150000002505 iron Chemical class 0.000 title claims description 7
- 230000008569 process Effects 0.000 title claims description 7
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 title description 6
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 title description 2
- TWIIVLKQFJBFPW-UHFFFAOYSA-N acetaminosalol Chemical compound C1=CC(NC(=O)C)=CC=C1OC(=O)C1=CC=CC=C1O TWIIVLKQFJBFPW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 52
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 claims abstract description 18
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 claims abstract description 18
- 125000001078 azanylylidene group Chemical group *N=* 0.000 claims abstract description 16
- 125000001434 methanylylidene group Chemical group [H]C#[*] 0.000 claims abstract description 16
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 claims abstract description 14
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims abstract description 8
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 claims abstract description 7
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 claims abstract description 6
- 125000003342 alkenyl group Chemical group 0.000 claims abstract description 5
- 150000002506 iron compounds Chemical class 0.000 claims abstract description 5
- 125000000547 substituted alkyl group Chemical group 0.000 claims abstract description 5
- 125000004435 hydrogen atom Chemical class [H]* 0.000 claims abstract description 3
- 125000003107 substituted aryl group Chemical group 0.000 claims abstract description 3
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N iron Substances [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 53
- LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N N-Butanol Chemical compound CCCCO LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 44
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 19
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 17
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 15
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims description 12
- 229910002589 Fe-O-Fe Inorganic materials 0.000 claims description 11
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims description 11
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims description 11
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- 238000001816 cooling Methods 0.000 claims description 9
- 239000000047 product Substances 0.000 claims description 8
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N Vilsmeier-Haack reagent Natural products CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 claims description 4
- 125000001183 hydrocarbyl group Chemical group 0.000 claims description 4
- LQNUZADURLCDLV-UHFFFAOYSA-N nitrobenzene Chemical compound [O-][N+](=O)C1=CC=CC=C1 LQNUZADURLCDLV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 150000003536 tetrazoles Chemical class 0.000 claims description 3
- 150000003852 triazoles Chemical class 0.000 claims description 3
- 125000003903 2-propenyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])=C([H])[H] 0.000 claims description 2
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 claims description 2
- 238000009835 boiling Methods 0.000 claims description 2
- 239000011203 carbon fibre reinforced carbon Substances 0.000 claims description 2
- 239000000969 carrier Substances 0.000 claims description 2
- 125000004356 hydroxy functional group Chemical group O* 0.000 claims description 2
- 150000002460 imidazoles Chemical class 0.000 claims description 2
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 2
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 claims description 2
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 claims description 2
- 150000003138 primary alcohols Chemical class 0.000 claims description 2
- 238000010992 reflux Methods 0.000 claims description 2
- 150000003333 secondary alcohols Chemical class 0.000 claims description 2
- 239000012453 solvate Substances 0.000 claims description 2
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 claims description 2
- 125000000391 vinyl group Chemical group [H]C([*])=C([H])[H] 0.000 claims description 2
- 229920002554 vinyl polymer Polymers 0.000 claims description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 239000008196 pharmacological composition Substances 0.000 claims 3
- 239000013543 active substance Substances 0.000 claims 1
- 150000004698 iron complex Chemical group 0.000 claims 1
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 abstract description 5
- 229940079593 drug Drugs 0.000 abstract description 3
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 abstract description 2
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 abstract 1
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 abstract 1
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 abstract 1
- -1 nausea Chemical class 0.000 description 18
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 13
- DQLATGHUWYMOKM-UHFFFAOYSA-L cisplatin Chemical compound N[Pt](N)(Cl)Cl DQLATGHUWYMOKM-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 10
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 9
- 229960004316 cisplatin Drugs 0.000 description 8
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 7
- 238000001669 Mossbauer spectrum Methods 0.000 description 6
- RAXXELZNTBOGNW-UHFFFAOYSA-N imidazole Natural products C1=CNC=N1 RAXXELZNTBOGNW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 6
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 6
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 5
- 206010033128 Ovarian cancer Diseases 0.000 description 4
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 4
- BASFCYQUMIYNBI-UHFFFAOYSA-N platinum Chemical compound [Pt] BASFCYQUMIYNBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000013522 chelant Substances 0.000 description 3
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 3
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 3
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 3
- BOLDJAUMGUJJKM-LSDHHAIUSA-N renifolin D Natural products CC(=C)[C@@H]1Cc2c(O)c(O)ccc2[C@H]1CC(=O)c3ccc(O)cc3O BOLDJAUMGUJJKM-LSDHHAIUSA-N 0.000 description 3
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 3
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 3
- 238000012982 x-ray structure analysis Methods 0.000 description 3
- NSPMIYGKQJPBQR-UHFFFAOYSA-N 4H-1,2,4-triazole Chemical compound C=1N=CNN=1 NSPMIYGKQJPBQR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- MARUHZGHZWCEQU-UHFFFAOYSA-N 5-phenyl-2h-tetrazole Chemical compound C1=CC=CC=C1C1=NNN=N1 MARUHZGHZWCEQU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 description 2
- PGLIUCLTXOYQMV-UHFFFAOYSA-N Cetirizine hydrochloride Chemical compound Cl.Cl.C1CN(CCOCC(=O)O)CCN1C(C=1C=CC(Cl)=CC=1)C1=CC=CC=C1 PGLIUCLTXOYQMV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 2
- 208000009956 adenocarcinoma Diseases 0.000 description 2
- 201000008274 breast adenocarcinoma Diseases 0.000 description 2
- 208000019065 cervical carcinoma Diseases 0.000 description 2
- 230000008859 change Effects 0.000 description 2
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 2
- 208000035250 cutaneous malignant susceptibility to 1 melanoma Diseases 0.000 description 2
- 230000036541 health Effects 0.000 description 2
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 2
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 2
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 2
- 201000001441 melanoma Diseases 0.000 description 2
- VMGAPWLDMVPYIA-HIDZBRGKSA-N n'-amino-n-iminomethanimidamide Chemical compound N\N=C\N=N VMGAPWLDMVPYIA-HIDZBRGKSA-N 0.000 description 2
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 2
- 201000008968 osteosarcoma Diseases 0.000 description 2
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 2
- 229920003023 plastic Polymers 0.000 description 2
- 229910052697 platinum Inorganic materials 0.000 description 2
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 2
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 2
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 2
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 2
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 2
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 2
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 2
- 125000004953 trihalomethyl group Chemical group 0.000 description 2
- 125000004178 (C1-C4) alkyl group Chemical group 0.000 description 1
- XKZQKPRCPNGNFR-UHFFFAOYSA-N 2-(3-hydroxyphenyl)phenol Chemical compound OC1=CC=CC(C=2C(=CC=CC=2)O)=C1 XKZQKPRCPNGNFR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ULRPISSMEBPJLN-UHFFFAOYSA-N 2h-tetrazol-5-amine Chemical compound NC1=NN=NN1 ULRPISSMEBPJLN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SFDGJDBLYNJMFI-UHFFFAOYSA-N 3,1-benzoxazin-4-one Chemical compound C1=CC=C2C(=O)OC=NC2=C1 SFDGJDBLYNJMFI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AZKSAVLVSZKNRD-UHFFFAOYSA-M 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide Chemical compound [Br-].S1C(C)=C(C)N=C1[N+]1=NC(C=2C=CC=CC=2)=NN1C1=CC=CC=C1 AZKSAVLVSZKNRD-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- XZGLNCKSNVGDNX-UHFFFAOYSA-N 5-methyl-2h-tetrazole Chemical compound CC=1N=NNN=1 XZGLNCKSNVGDNX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 241000238366 Cephalopoda Species 0.000 description 1
- 108020005199 Dehydrogenases Proteins 0.000 description 1
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 1
- CWYNVVGOOAEACU-UHFFFAOYSA-N Fe2+ Chemical compound [Fe+2] CWYNVVGOOAEACU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000005033 Fourier transform infrared spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 238000001157 Fourier transform infrared spectrum Methods 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 238000004566 IR spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 231100000002 MTT assay Toxicity 0.000 description 1
- 238000000134 MTT assay Methods 0.000 description 1
- 206010028813 Nausea Diseases 0.000 description 1
- 206010029155 Nephropathy toxic Diseases 0.000 description 1
- 206010033109 Ototoxicity Diseases 0.000 description 1
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 1
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 1
- 239000002262 Schiff base Substances 0.000 description 1
- 150000004753 Schiff bases Chemical class 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 230000001772 anti-angiogenic effect Effects 0.000 description 1
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 239000012298 atmosphere Substances 0.000 description 1
- 125000004429 atom Chemical group 0.000 description 1
- 125000000852 azido group Chemical group *N=[N+]=[N-] 0.000 description 1
- 239000002585 base Substances 0.000 description 1
- 125000005605 benzo group Chemical group 0.000 description 1
- QRUDEWIWKLJBPS-UHFFFAOYSA-N benzotriazole Chemical compound C1=CC=C2N[N][N]C2=C1 QRUDEWIWKLJBPS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 239000003560 cancer drug Substances 0.000 description 1
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 1
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 1
- 239000002738 chelating agent Substances 0.000 description 1
- 239000000306 component Substances 0.000 description 1
- 150000001879 copper Chemical class 0.000 description 1
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 238000013461 design Methods 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- MKYNHKOAYQRSBD-UHFFFAOYSA-N dioxouranium;nitric acid Chemical compound O=[U]=O.O[N+]([O-])=O.O[N+]([O-])=O MKYNHKOAYQRSBD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960004192 diphenoxylate Drugs 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 238000006073 displacement reaction Methods 0.000 description 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 1
- 238000000921 elemental analysis Methods 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 239000012894 fetal calf serum Substances 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 150000002391 heterocyclic compounds Chemical class 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 238000011065 in-situ storage Methods 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 230000005415 magnetization Effects 0.000 description 1
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 1
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 1
- 125000000956 methoxy group Chemical group [H]C([H])([H])O* 0.000 description 1
- 230000002438 mitochondrial effect Effects 0.000 description 1
- 230000008693 nausea Effects 0.000 description 1
- 231100000417 nephrotoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000007694 nephrotoxicity Effects 0.000 description 1
- 230000008520 organization Effects 0.000 description 1
- 231100000262 ototoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 1
- 239000005426 pharmaceutical component Substances 0.000 description 1
- 229940031826 phenolate Drugs 0.000 description 1
- 238000011197 physicochemical method Methods 0.000 description 1
- 150000003057 platinum Chemical class 0.000 description 1
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 238000012552 review Methods 0.000 description 1
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 1
- 238000002798 spectrophotometry method Methods 0.000 description 1
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 230000008467 tissue growth Effects 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 231100000167 toxic agent Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 239000003440 toxic substance Substances 0.000 description 1
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 1
- 229910000859 α-Fe Inorganic materials 0.000 description 1
Landscapes
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
Komplexní sloučeniny železa v oxidačních stupních +II a +III se salophenem {2,2´-((1E,1´E)-(1,2-fenylenbis(azanylyliden))bis(methanylyliden)difenolátor(2-) ligand} a doplňkovými N-donorovými heterocyklickými ligandy a jejich krystalosolváty, vyjádřené strukturními vzorci I a II, kde X.sub.1.n.-X.sub.4.n.představuje libovolnou kombinaci n methanylylidenových skupin a (4-n) azanylylidenových skupin, kde n může nabývat hodnot 1 až 2, R1-R8 představuje atom vodíku, alkyl, substituovaný alkyl, alkenyl, aryl, substituovaný aryl, hydroxy a amino skupinu. Způsob přípravy těchto sloučenin, farmakologický prostředek pro použití v lékařství a použití farmakologického prostředku jako léčiva pro léčbu nádorových onemocnění.
Description
Salophenové komplexy železa s heterocyklickými N-donorovými ligandy, způsob jejich přípravy a jejich použití jako léčiv v protinádorové terapii
Oblast techniky
Předložený vynález se týká komplexů železa v oxidačních stupních +11 nebo +111 obecného vzorce [Fe(salophen)(L)j, kde salophen {2,2’-((1 E, 1 'E)-(1,2- fenylenbis(azanylyliden))bis(methanylyliden)) difenolát(2-)} vystupuje jako „nosný“ chelátový ligand a L jsou doplňkové A/-donorové heterocyklické ligandy, způsobu přípravy uvedených komplexů a jejich použití v lékařské praxi jako léčiv nádorových onemocnění nebo součástí farmaceutických kompozic pro prevenci nebo léčbu nádorových onemocnění, které tyto komplexy obsahují jako účinnou látku.
Dosavadní stav techniky
Nádorová onemocnění jsou dlouhodobě ve zdravotnických statistikách World Health Organization (WHO) na druhém místě v morbiditě i mortalitě zejména v rozvinutějších krajinách. Proto je silným společenským imperativem hledání nových, účinnějších a bezpečnějších sloučenin pro použití v terapeutické praxi těchto nemocí.
Je obecně přijímaným poznatkem, že regulace hladin železa v cílových tkáních hraje významnou roli při metabolické regulaci růstu nádorových tkání (Zhou, T. et al. Dalton Trans. 41, 2012, 6371-6389; Visca, P. et al. Antimicrob. Agents Chemother. 57, 2013, 2432-2433). Dále bylo zjištěno, že chelatační činidla vázající nechelatované železo do stabilních komplexních sloučenin působí antiangiogenně (Terman, A. and Kurz, T. Antioxid. Redox. Signál. 18, 2013, 888-898), přičemž některé nízkomolekulové látky na bázi komplexů železa v oxidačních stupních +II nebo +III s ligandy odvozenými od Schiffových bází působí jiným mechanizmem, založeným na interakci s DNA a dalšími významnými biomolekulami a tak působí jako vysoce účinné protinádorové látky in vitro (Herchel, R. et al. Dalton Trans. 44, 2009, 9870-9880).
• ·
Nízkomolekulové komplexy železa v oxidačních stupních +11 nebo +111 s vhodnými ligandy proto tvoří viabilní alternativu k již používaným komplexním sloučeninám platiny, k jejichž stále ještě celosvětově nejhojněji používaným zástupcům patří např. c/s-diamindichlorido-platnatý komplex (cisplatina) obecného vzorce (viz Schéma A), postrádají ale nedostatky v podobě rezistence na působení derivátů cisplatiny a některé nežádoucí účinky spojené s terapeutickým používáním derivátů cisplatiny, např. nevolnost, nefrotoxicita, ototoxicita a podobně.
V uplynulých letech bylo zjištěno, že aqua-, chlorido- a acetáto-komplexy s nosnými chelátovými ligandy typu Schiffových bází, zejména pak salophenu (viz
Schéma B) h3n Cl d X z
Pt z X h3n Cl (A)z
a jeho methoxy-, hydroxy-, C1-C4-alkyl-, C1-C4-alkoxy- a trihalomethyl-derivátů s centrálními atomy železa v oxidačních stupních +II nebo +III vykazují vysokou protinádorovou aktivitu in vitro a in vivo (WO 200^90081 A1; EP 1^949^99 A1; US 2009326061 A1; Hille, A. et al. J. Biol. Inorg. Chem. 14, 2009, 711-725; Hille, A. et al.
Arch. Pharm. Chem. Life Sci. 11, 2011, 217-223; Lange, T.S. et al. Plos ONE 3, 2008, e2303; Lange, T.S. et al. Drug Des. Dev. Ther. 3, 2009, 17-26) , která je až 50£krát vyšší jako aktivita cisplatiny za srovnatelných experimentálních podmínek (Hille, A. et al. J. Biol. Inorg. Chem. 14, 2009, 711-725) a byly popsány mechanizmy, kterými tyto látky působí na různé linie lidských nádorových buněk i mechanizmy, kterými tyto látky překonávají rezistenci proti léčivům odvozeným od cisplatiny (Kim, K.K. et al. Plos ONE 6, 2011, e19049; Azani, M.R. et al. Russ. J. Phys. Chem. A 84, 2010, 2284-2289; Ansari, K.l. et al. J. Biomol. Screen. 16, 2011, 26-35; Lee, S.Y et al. Leuk. Pes.
35, 2011, 387-393).
Z patentových dokumentů (WO 200^090081 A1; EP 1^94^899 A1; US 200^326 061 A1) a vědeckých prací (Ross, T.M. et al. Dalton Trans. 2003, 149-159; Leeuwenkamp, O.R. et al. Polyhedron 6, 1987, 295-302; Nishida, Y. et al. J. Chem. Soc., Dalton Trans. 1987, 1157-1161; Choudhury, H.K. and Medhi, O.K. Indián J. Chem. Séct A-lnorg. Bio-lnorg. Phys. Theor. Anal. Chem. 32A, 1993, 351—354; Hernandez-Molina, R. et al. Inorg. Chem. 37,1998, 5102-5108; Jana, S. et al. Polyhedron 48, 2012, 189-198; Nichols, P.J. etal. Inorg. Chem. 27, 1988, 2795-2800; Nabei, A. et al. Inorg. Chim. Acta 361, 2008, 3489-3493; Herchel R. et al. Dalton Trans. 40, 2011, 11896-11903), popisujících přípravu a biologickou aktivitu komplexů s nosným chelátovým ligandem salophenem a jeho methoxy-, hydroxy-, C1-C4-alkyl-, C1-C4-alkoxy- a trihalomethyl-deriváty s centrálními atomy železa v oxidačních stupních +II nebo +III a doplňkovými O-, S-, N- nebo halogeno-Wgandy nebo jejich kombinací je patrné, že i malá změna jejich struktury vede k dramatické změně účinnosti, což potvrzuje i práce Hille, A. and Gust, R. Eur. J. Med. Chem. 45, 2010, 5486-5492 popisující vliv methoxy-substituce na nosném ligandu salophenu na intenzitu a selektivitu protinádorového účinku látek. Z výše uvedeného je tedy zřejmé, proč jsou v současnosti hledány nejen vhodné možnosti substituce základního salophenového skeletu, ale také hledány vhodné doplňkové N-donorové ligandy do koordinační sféry atomu železa, vedoucí ke vzniku komplexních sloučenin železa, u kterých by byla výrazně vyšší protinádorová aktivita, než je tomu u v současnosti využívaných léčiv na bázi komplexů platiny.
Z literární rešerše je potom zřejmé, že mezi dosud známými salophenovými komplexními sloučeninami železa v oxidačních stupních +II nebo +III zcela absentují komplexy se čtvercově-pyramidální geometrií, obsahující ve své koordinační sféře kromě salophenového derivátu také jeden doplňkový N-donorový heterocyklický ligand. Příprava, charakterizace a zjištění výrazných protinádorových účinků na úrovni in vitro, je potom předmětem předkládaného vynálezu.
• · « · • · · · • · · ·
-4Podstata vynálezu
Podstatou vynálezu jsou komplexní sloučeniny železa v oxidačních stupních +11 a +111 s jedním salophenovým ligandem {2,2'-((1E,1'e)-(1,2-fenylenbis(azanylyliden))bis(methanylyliden))di-fenoláto(2-)} a jedním doplňkovým A/-donorovým heterocyklickým ligandem a jejich krystalosolváty, vyjádřené strukturními vzorci ^1 fa
R3
R2
R7
R6
(II), kde
X1-X4 představuje kombinaci n methanylylidenových skupin a (4-n) azanylylidenových skupin, kde n může nabývat hodnot 1 až 2,
R1-R8 představuje atom vodíku, alkyl, substituovaný alkyl, alkenyl, aryl a substituovaný aryl, hydroxy a amino skupinu, kde termín:
- alkyl jako takový nebo jako součást jiné skupiny představuje rozvětvený nebo nerozvětvený uhlovodíkový řetězec z až 4, především pak z 1 až 2, atomů uhlíku,
- alkenyl jako takový nebo jako součást jiné skupiny představuje rozvětvený nebo nerozvětvený uhlovodíkový řetězec z až 4 atomů uhlíku obsahující alespoň jednu dvojnou vazbu mezi atomy uhlíku, zejména pak vinyl a allyl,
- aryl jako takový nebo jako součást jiné skupiny představuje skupinu obsahující alespoň jeden aromatický kruh, • · · ·
-5• · · · · • · · ·· · · • · · · · ·· • · · · ·· ·· ·· ··
- substituovaný alkyl a aryl jako takové nebo jako součásti jiných skupin představují alkyl a aryl substituovaný ve kterékoli pozici substituenty z množiny alkyl, alkenyl a aryl, nebo anelované s arylem.
Další podstatou vynálezu jsou krystalosolváty komplexů obecného složení [Fe(salophen)(L)] xSo/v, kde x=1 až 6 a Solv představuje molekulu konkrétního rozpouštědla a/nebo jednu z reakčních komponent vybranou ze skupiny voda, primární alkohol, sekundární alkohol, aceton, N,N -dimethylformamid, dimethylsulfoxid, chloroform, dichlormethan, acetonitril, nitrobenzen, nebo diethylether, a to buď samostatně nebo v kombinaci uvedených solvátových molekul.
Také je podstatou vynálezu způsob přípravy sloučenin strukturních vzorců a g-oxo-bis(2,2'-((1 E, 1 '£)-( 1,2difenolátoželezitého) komplexu s heterocyklickými sloučeninami to reakcí
-fenylenbis(azanylyliden))bis(methanylyliden)) [(salophen)Fe-O-Fe(salophen)] buď přímo obsahujícími dusík, nebo nepřímo z východiskové látky azido-(2,2'-((1 E, 1 'E)-(1,2-fenylenbis(azanylyliden))bis(methanylyliden))difenolátožele-zitého) komplexu [Fe(salophen)(N3)j a vhodného adiční činidla, které vytvoří vhodný heterocyklický ligand in šitu.
Ve výhodném provedení se sloučenina obecného vzorce ^připraví tak, že k jednomu molárnímu ekvivalentu komplexu [(salophen)Fe-O-Fe(salophen)] rozpuštěného v minimálním množství n-butanolu se přidá čtyřicetinásobný nadbytek příslušného derivátu imidazolu, poté se vytvořená směs přivede k varu a z reakční soustavy se oddestilují asi 2/3 původního objemu rozpouštědla, načež se ochlazením
V směsi na 4Q|°C vyloučí v n-butanolu téměř nerozpustný produkt, který se oddělí filtrací za sníženého tlaku.
Ve výhodném provedení se sloučenina obecného vzorce (II) připraví tak, že k jednomu molárnímu ekvivalentu komplexu [(salophen)Fe-O-Fe(salophen)] rozpuštěného v minimálním množství n-butanolu se přidá třicetinásobný nadbytek příslušného derivátu triazolu nebo tetrazolu, poté se vytvořená směs přivede k varu a • 9 • ·
9 · 9
-6z reakční soustavy se oddestilují asi 3/5 původního objemu rozpouštědla, načež se ochlazením směsi na laboratorní teplotu vyloučí v n-butanolu téměř nerozpustný produkt, který se oddělí filtrací za sníženého tlaku.
Ve výhodném provedení se sloučenina obecného vzorce s doplňkovým ligandem 5-methyl-tetrazol-1-idem(1-) připraví tak, že jeden molární ekvivalent komplexu [Fe(salophen)(N3)j se rozpustí v 3000£hásobném molárním nadbytku acetonitrilu a refluxuje se 30 hodin, poté se ochlazením reakční směsi na laboratorní teplotu se vyloučí produkt (5-methyltetrazol-1 -ido)-2,2'-((1E,1'E)-(1,2-fenylenbis(azanylyliden))bis(metha0iylyliden))difenoláto(2-)železitý komplex, který se oddělí filtrací za sníženého tlaku.
Nedílnou součástí podstaty vynálezu je také použití komplexů v lékařské praxi jako léčiv nádorových onemocnění nebo součástí farmaceutických kompozic, s jedním či více přijatelnými nosiči a pomocnými látkami pro prevenci nebo léčbu nádorových onemocnění, které tyto komplexy obsahují jako účinnou látku.
Přehled obrázků na připojených výkresech
Konkrétní příklady provedení vynálezu jsou doloženy připojenými výkresy, kde
- obr. 1 je molekulová struktura komplexu [Fe(salophen)(imz)J vyřešená užitím monokrystalové rentgenové strukturní analýzy
- obr. 2 je znázornění spektra komplexu [Fe(salophen)(imz)] měřeného v střední infračervené oblasti (4000-400 cm-1) v KBr tabletě, identifikující všechny specifické vibrace vazeb a skupin odpovídající určenému složení komplexu [Fe(salophen)(imz)]
- obr. 3 je znázornění měření teplotní závislosti efektivního magnetického momentu komplexu [Fe(salophen)(imz)j na teplotě, potvrzující přítomnost centrálního iontu železa v oxidačním stupni +II
- obr. 4 je znázornění Móssbauerova spektra komplexu [Fe(salophen)(imz)] při teplotě 300 K, přičemž hodnoty izomerního posunu δ = 0,851(3) mm/s a kvadrupólového štěpení EQ = 2,085(5) mm/s potvrzují přítomnost centrálního iontu železa v oxidačním stupni +II ve spinovém stavu S=2
- obr. 5 je znázornění Móssbauerova spektra komplexu [Fe^ísalophenj^riz)] při teplotě 300 K, přičemž hodnoty izomerního posunu δ = 0,3905(17) mm/s a kvadrupólového štěpení Eq = 1,2375(34) mm/s potvrzují přítomnost centrálního iontu železa v oxidačním stupni +III ve spinovém stavu S=5/2
Příklady provedení vynálezu
V následující části je vynález doložen, nikoli však limitován, konkrétními příklady jeho uskutečnění. Rozsah vynálezu je pak jednoznačně určen patentovými nároky.
V níže uvedených příkladech byly připravené látky charakterizovány následujícími fyzikálně-chemickými metodami:
- elementární analýza s procentovým zastoupením prvků C, H a N (Thermo Scientific Flash 2000)
- infračervená spektroskopie v oblasti 400 až 4000 cm'1 byla provedena technikou KBr tablet (FT-IR spektrometr Perkin-Elmer Spectrum One B)
- monokrystalová rentgenová strukturní analýza (Xcalibur2, Oxford Diffraction Ltd.)
- teplotní závislost magnetizace (5-300 K) a efektivní magnetický moment při teplotě 300 K (SQUID magnetometr model XL-7 od firmy Quantum Design)
- Móssbauerova spektra byla měřena na přístroji s 57Co(Rh) zdrojem při teplotě 300 K. Hodnoty isomerního posunu byly kalibrovány vůči hodnotám kovového a-Fe.
Vynález využívá g-oxo-bis(2,2'-((1E,rE)-(1,2-fenylenbis(azanylyliden))bis(methanylyliden))difenolátoželezitý) komplex, [(salophen)Fe-O-Fe(salophen)], nebo azido(2,2'-((1£:,r£)-(1,2-fenylenbis(azanyl£yliden))bis(methanylyliden))difenolátoželezitý) komplex, [Fe(salophen)(N3)J, jako výchozí látky pro přípravu sloučenin uvedených v patentových nárocích. Uvedené výchozí sloučeniny nejsou komerčně dostupné, nicméně lze je připravit dosud publikovanými postupy (Mitchell, P.C.H. and Parker D.A. J. Chem. Soc., Dalton Trans. 1976, 1821-1824; Jana, S. et al. Polyhedron 48, 2012, 189-198).
• »
Příklad 1: Syntéza [(imidazol-KA/3)-(2,2'-((1E,1'E)-(1,2-fenylenbis(azanylyliden))bis(methanylyliden))difenoláto(2-)]železnatého] komplexu, dále jen Fe(salophen)(imz)J
Jeden molární ekvivalent komplexu [(salophen)Fe-O-Fe(salophen)] (0,1 g; 0,26 mmol) byl rozpuštěn v 30 ml n-butanolu a byl k němu přidán čtyřicetinásobný molární nadbytek imidazolu (0,54 g; 8 mmol). Vytvořená §měs se přivedla k varu (asi
V M tyC) a z reakční soustavy se oddestilovalo 15*20 ml původního objemu rozpouštědla. Ochlazením směsi na 40^0 se vyloučily krystaly v n-butanolu téměř nerozpustného produktu, který se oddělil od nadbytku imidazolu rozpuštěného v n-butanolu filtrací za sníženého tlaku. Výtěžek: 0,07 g, t.j. 66 % (počítáno na Fe).
Získané krystaly byly vhodné pro monokrystalovou rentgenovou strukturní analýzu. Molekulová struktura komplexu [Fe(salophen)(imz)j je znázorněna v obrázku 1.
Procentové zastoupení prvků C, Η, N ve formě: vypočtená hodnota (v závorce nalezená hodnota) pro C23Hi7FeN4O2: C, 63,18 (63,13); H, 3,92 (4,1); N, 12z81 (12,84^/q. UV-Vis (vNujol/cm-1): 761, 560, 435. IR (vKBr/crrT1): 3437, 3134, 3050, 2927, 2856, 1606, 1579, 1536, 1464, 1446, 1381, 1315, 1183, 1149, 1068, 922, 757, 658, 538. Záznam FT-IR spektra je předložen na obrázku 2. Magnetické vlastnosti: efektivní magnetický moment při laboratorní teplotě je peff/B.M. = 5,1, což společně s výsledky měření teplotní závislosti na teplotě (záznam předložen na obrázku 3) a Móssbauerova spektra (záznam předložen na obrázku 4) potvrzují přítomnost centrálního iontu železa v oxidačním stupni +II a spinovém stavu S=2.
Příklad 2: Syntéza sesquihydrátu [(1,2,4-triazol-1-ido)-(2,2'-((1 E, 1 'E)-(1,2’-fenylenbis(azanylyliden))-bis(methanylyliden))difenoláto(2-)]železitého] komplexu, dále jen [Fe(salophen)(triz)j
Jeden molární ekvivalent komplexu [(salophen)Fe-O-Fe(salophen)] (0,1 g; 0,26 mmol) byl rozmíchán v 30 ml n-butanolu a byl k němu přidán čtyřicetinásobný molární nadbytek 1,2,4-triazolu (0,55 g; 8 mmol). Vytvořená směs se přivedla k varu v
(asi 11^0) a z reakční soustavy se oddestilovalo asi 18 ml původního objemu rozpouštědla. Ochlazením směsi na 4C^C se vyloučily krystaly v n-butanolu téměř nerozpustného produktu, který se oddělil od nadbytku 1,2,4-triazolu rozpuštěného v n- butanolu filtrací za sníženého tlaku. Výtěžek: 0,08 g, t.j. 70 % (počítáno na Fe).
-9• · ·· ·· ····« ····· ·· · ·· ····· · · ········ · · ·· · · · · · · · • · ·· ·· · · · ··
Procentové zastoupení prvků C, Η, N ve formě: vypočtená hodnota (v závorce nalezená hodnota) pro C22H16FeN5O2: C, 60,29 (59,25); H, 3,68 (3,75); N, 15,98 (15,23)^/o. UV-Vis (vNujol/cm-1): 761, 560, 435. IR (vKBr/crrr1): 3428, 1606, 1579, 1535, 1462, 1136, 1310, 1191, 1150, 607, 751, 537. Magnetické vlastnosti: efektivní magnetický moment při laboratorní teplotě je peff/B.M. = 5,67, což společně s výsledky měření Móssbauerova spektra (záznam předložen na obrázku 5) jednoznačně potvrzuje přítomnost centrálního iontu železa v oxidačním stupni +III a spinovém stavu S=5/2.
Příklad 3: Syntéza sesquihydrátu [(benzo[c/][1,2,3]triazol-1 -ido)-(2,2'-((1 E, 1 Έ)-(1,2-fenylenbis(azanylyliden))-bis(methanylyliden))difenoláto(2-)]železitého] komplexu, dále jen [Fe(salophen)(btriz)J
Jeden molární ekvivalent komplexu [(salophen)Fe-O-Fe(salophen)] (0,1 g; 0,26 mmol) byl rozmíchán v 30 ml n-butanolu a byl k němu přidán čtyřicetinásobný molární nadbytek benzo[d][1,2,3]triazolu (0,95 g; 8 mmol). Vytvořená směs se přivedla v k varu (asi 11 §/°C) a z reakční soustavy se oddestilovalo asi 18 ml původního objemu rozpouštědla. Ochlazením směsi na 4(^C se vyloučily krystaly v n-butanolu téměř nerozpustného produktu, který se oddělil od nadbytku benzo[d][1,2,3]triazolu rozpuštěného v n-butanolu filtrací za sníženého tlaku. Výtěžek: 0,08 g, t.j. 63 % (počítáno na Fe).
Procentové zastoupení prvků C, Η, N ve formě: vypočtená hodnota (v závorce nalezená hodnota) pro C26H23FeN5O3.5: C, 60,60 (60,29); H, 4,11 (3,68); N, 1^.59 (15,67pó. UV-Vis (vNujol/cm-1): 650, 570, 420. IR (vKBr/cm-1): 3047, 1606, 1579, 1534, 1489, 1461, 1444, 1381, 1321, 1190, 1150, 1126, 921, 809, 746, 610, 537. Magnetické vlastnosti: efektivní magnetický moment při laboratorní teplotě je peff/B.M. = 4,78., což společně s výsledky měření Móssbauerových spekter (záznam předložen na obrázku 6) naznačuje na přítomnost centrálního iontu železa v oxidačním stupni +III.
• · · ·
Příklad 4: Syntéza [(5-aminc$etrazol-1-ido)-(2,2’-((1 Ε,ΓΕ)-(1,2-fenylenbis(azanylyliden))bis(methanylyliden))difenoláto(2-)]železitého] komplexu, dále jen [Fe(salophen)(atz)]
Jeden molární ekvivalent komplexu [(salophen)Fe-O-Fe(salophen)] (0,1 g; 0,26 mmol) byl rozmíchán v 30 ml n-butanolu a byl k němu přidán čtyřicetinásobný molární
O nadbytek 5-aming+tetrazolu (0,68 g; 8 mmol). Vytvořená směs se přivedla k varu (asi υ
11§j°C) a z reakční soustavy se oddestilovalo asi 18 ml původního objemu rozpouštědla. Ochlazením směsi na 4$C se vyloučily krystaly v n-butanolu téměř nerozpustného produktu, který se oddělil od nadbytku 5-amino-tetrazolu rozpuštěného v n-butanolu filtrací za sníženého tlaku. Výtěžek: 0,08 g, t.j. 68 % (počítáno na Fe).
Procentové zastoupení prvků C, Η, N ve formě: vypočtená hodnota (v závorce nalezená hodnota) pro C2iH16FeN7O2: C, 55,53 (54,81); H, 3,55 (3,19); N, 21,.58 (21,99)1%. UV-Vis (vNujol/cm-1): 800, 640, 460. IR (vKBr/cnr1): 1627, 1599, 1542, 1467, 1446, 1341, 1304, 1085, 760, 616, 419. Magnetické vlastnosti: efektivní magnetický moment při laboratorní teplotě je μείί/Β.Μ. = 5,86, což jednoznačně dokazuje přítomnost centrálního iontu železa v oxidačním stupni +III a spinovém stavu S=5/2.
Příklad 5: Syntéza [(5-fenyJ/tetrazol-1-ido)-(2,2'-((1 Ε,ΓΕ)-(1,2-fenylenbis(azanylyliden))bis(methanylyliden))difenoláto(2-)]železitého] komplexu, dále jen [Fe(salophen)(phtz)j
Jeden molární ekvivalent komplexu [(salophen)Fe-O-Fe(salophen)] (0,1 g; 0,26 mmol) byl rozmíchán v 30 ml n-butanolu a byl k němu přidán čtyřicetinásobný molární nadbytek 5-fenyl-tetrazolu (1,17 g; 8 mmol). Vytvořená směs se přivedla k varu (asi
V
118TC) a z reakční soustavy se oddestilovalo asi 18 ml původního objemu
V rozpouštědla. Ochlazením směsi na 4QJ°C se vyloučily krystaly v n-butanolu téměř nerozpustného produktu, který se oddělil od nadbytku 5-fenyl-tetrazolu rozpuštěného v n-butanolu filtrací za sníženého tlaku. Výtěžek: 0,09 g, t.j. 67 % (počítáno na Fe).
-11 • · · · · · ····· ····· ·· · • · ····· · *
Procentové zastoupení prvků C, Η, N ve formě: vypočtená hodnota (v závorce nalezená hodnota) pro C27Hi9FeN6O2: C, 62,93 (62,78); H, 3,72 (3?65); N, 16,31 (16,38)^/o. UV-Vis (vNujol/cm-1): 670, 450. IR (vKBr/cm-1): 3064, 3016, 1605, 1579, 1539, 1463, 1437, 1382, 1313, 1192, 1146, 815, 742, 698, 623, 538. Magnetické vlastnosti: efektivní magnetický moment při laboratorní teplotě je peff/B.M. = 6,0, což jednoznačně dokazuje přítomnost centrálního iontu železa v oxidačním stupni +III a spinovém stavu S=5/2.
Příklad 6: Syntéza [(5-methy|íletrazol-1-ido)-(2,2'-((1E,1'E)-(1,2-fenylenbis(azanylyliden))bis(methanylyliden))difenoláto(2-)]železitého] komplexu, dále jen [Fe(salophen)(mtz)J
Jeden molární ekvivalent komplexu [Fe(salophen)(N3)j (0,5 g, 1,37 mmol) byl rozpuštěn v 40 ml acetonitrilu a refluxován 30 hodin. Ochlazením reakční směsi na laboratorní teplotu se vyloučil produkt (5-methyltetrazol-1-ido)-2,2'-((1E,1'E)-(1,2~fenylenbis(azanylyliden))bis(methanylyliden))difenoláto(2-)železitý komplex, který byl oddělen ze směsi filtrací za sníženého tlaku a vysušen v exsikátoru nad kusovým KOH. Výtěžek: 0,4 g, t.j. 72 % (počítáno na Fe).
Procentové zastoupení prvků C, Η, N ve formě: vypočtená hodnota (v závorce nalezená hodnota) pro C22Hi7FeN6O2 : C, 58,30 (57,90); H, 3,78 (3,81); N, 18,54 (18,20^/o. IR (vKBr/cm-1): 3436, 1606, 1578, 1534, 1461, 1445, 1380, 1316, 1189, 1149, 808, 751, 608, 508. Magnetické vlastnosti: efektivní magnetický moment při laboratorní teplotě je peff/B.M. = 5,89, což jednoznačně dokazuje přítomnost centrálního iontu železa v oxidačním stupni +III a spinovém stavu S=5/2.
Příklad 7: In vitro cytotoxická aktivita mědnatých komplexů na lidských nádorových liniích
Pro stanovení cytotoxické aktivity připravených komplexů byl použit MTT test. Metoda je založena na schopnosti metabolicky aktivních buněk redukovat žlutou sůl
3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-difenyltetrazolium bromid (MTT) za vzniku modrého formazanového barviva. Jelikož k této přeměně dochází pouze v živých buňkách, lze ··· ···· ··· ··· ·· ·· ·· ··· ·· tímto způsobem stanovit cytotoxicitu různých chemických látek. V rámci buňky jsou za redukci zodpovědné mitochondriální dehydrogenasy. Vznikající formazanové barvivo je nerozpustné a je následně kvantifikováno po rozpuštění v DMSO s amoniakem za použití spektrofotometrie ve viditelné oblasti.
ln vitro testy cytotoxické aktivity byly provedeny na sedmi lidských nádorových buněčných liniích: lidský osteosarkom (HOS), lidský prsní adenokarcinom (MCF-7), lidský epiteliální adenokarcinom (A549), cervikální karcinom (HeLa), lidský ovariální karcinomu (A2780), lidský ovariální karcinom rezistentní na cisplatinu (A2780cis) a lidský maligní melanom (G-361). Linie byly udržovány v plastikových lahvích v DMEM médiu (5 g/l glukosy, 2 mM glutaminu, 100 U/ml penicilinu, 100 pg/ml streptomycinu, 10% fetálního telecího séra a hydrogenuhličitanu sodného) pro buněčné kultury.
Suspenze buněk (oa 1,25x105 buněk v 1 ml) byly rozpipetovány po 80 μΙ na 96jamkové plastové mikrotitrační destičky. Tyto byly preinkubovány při 3^C v atmosféře CO2 po dobu 24 hodin. Testované komplexy železa a cisplatina jako terapeutický standard byly rozpuštěny v Ν,Ν'-dimetylformamidu a tyto sloužily jako zásobní roztoky. Pro vlastní experiment byly zásobní roztoky ředěny 1 000/x v kultivačním
V*· médiu (max. koncentrace 1^0 μΜ u komplexů železa a 50 μΜ u cisplatiny) a po odsátí kultivačního média byla směs přidána k nádorovým buňkám po inkubační dobu 24 hodin. MTT analýza byla prováděna spektrofotometricky (TECAN, Schoeller Instruments LLC) při vlnové délce 540 nm. Koncentrace testovaných komplexů (μΜ) toxická pro 5θ|°/ο nádorových buněk (inhibiční koncentrace IC50) byla vypočtena z koncentračních křivek a jsou uvedeny v Tabulkách 1 a 2.
Tabulka 1: IC50 koncentrace in vitro testovaných komplexů (IC5o a směrodatná odchylka ze tří nezávislých měření (S.D.), μΜ) toxická pro 5Cji% lidských nádorových buněk (osteosarkom, HOS; prsní adenokarcinom, MCF-7; epiteliální adenokarcinom, A549; cervikální karcinom, HeLa; ovariální karcinom, A2780; ovariální karcinom rezistentní na cisplatinu, A2780c/s a maligní melanom, G-361) ve srovnání s cisplatinou.
| Komplex | Inhibiční koncentrace IC5o(S.D.) [μΜ] | ||||||
| HOS | MCF-7 | A549 | HeLa | A2780 | A2780cis | G-361 | |
| [Fe(salophen)(imz)] | 1,8(6) | 0,70(8) | 0,57(25) | 0,67(13) | 0,23(7) | 0,35(3) | 0,32(2) |
| [Fe(salophen)(triz)] | > 1 | 0,35(12) | > 1 | 0,43(9) | 0,29(7) | 0,32(4) | 0,43(13) |
| [Fe(salophen)(btriz)] | 1,8(4) | 0,38(16) | 1,9(7) | 1,29(27) | 0,352(5) | 0,32(2) | 0,42(10) |
| [Fe(salophen)(atz)] | > 1 | 0,64(27) | > 1 | 0,70(5) | 0,31(13) | 0,32(4) | 0,34(11) |
| [Fe(salophen)(phtz)] | 2,1(1) | 0,70(26) | 1,6(2) | 0,74(25) | 0,33(2) | 0,35(4) | 0,40(13) |
| [Fe(salophen)(mtz)J | > 1 | 0,38(11) | 0,47(6) | 0,50(11) | 0,058(10) | 0,30(2) | 0,33(5) |
| cisplatina | 34(6) | 20(4) | >50 | 40(5) | 12(2) | 30(6) | 7(2) |
Claims (8)
1. Komplexní sloučeniny železa v oxidačních stupních +II a +III se salophenem {2,2-
- ((1E,TE)-(1,2-fenylenbis(azanylyliden))bis(methanylyliden))difenoláto(2-) ligand} a doplňkovými heterocyklickými A/-donorovými ligandy a jejich krystalosolváty, vyjádřené strukturními vzorci {!) a {Ity, (l)z (Il)z kde
X1-X4 představuje kombinaci n methanylylidenových skupin a (4-n) azanylylidenových skupin, kde n může nabývat hodnot 1 až 2,
R1-R8 představuje atom vodíku, alkyl, substituovaný alkyl, alkenyl, aryl a substituovaný aryl, hydroxy a amino skupinu, kde termín:
- alkyl jako takový nebo jako součást jiné skupiny představuje rozvětvený nebo nerozvětvený uhlovodíkový řetězec z až 4, především pak z 1 až 2, atomů uhlíku,
- alkenyl jako takový nebo jako součást jiné skupiny představuje rozvětvený nebo nerozvětvený uhlovodíkový řetězec z až 4 atomů uhlíku obsahující alespoň jednu dvojnou vazbu mezi atomy uhlíku, zejména pak vinyl a allyl,
- aryl jako takový nebo jako součást jiné skupiny představuje skupinu obsahující alespoň jeden aromatický kruh,
-15• v
- substituovaný alkyl a aryl jako takové nebo jako součásti jiných skupin představují alkyl a aryl substituovaný ve kterékoli pozici substituenty z množiny alkyl, alkenyl a aryl, nebo anelované s arylem.
2. Krystalosolváty komplexů podle nároku 1, kde u sloučenin obecného složení [Fe(salophen)(L)] xSo/i/, kde x=1 až 6 a Solv představuje molekulu konkrétního rozpouštědla a/nebo jednu z reakčních komponent vybranou ze skupiny voda, primární alkohol, sekundární alkohol, aceton, Λ/,Λ/'-dimethylformamid, dimethylsulfoxid, chloroform, dichlormethan,. acetonitril, nitrobenzen, nebo diethylether, a to buď samostatně nebo v kombinaci uvedených solvátových molekul.
3. Způsob přípravy sloučenin dle nároku 1, vyznačující se tím, že se sloučenina obecného vzorce Xl)r připraví tak, že k jednomu molárnímu ekvivalentu komplexu [(salophen)Fe-O-Fe(salophen)] rozpuštěného v minimálním množství n-butanolu se přidá čtyřicetinásobný nadbytek příslušného derivátu imidazolu, poté se v
vytvořena směs přivede k vařila z reakční soustavy se oddestilují asi 2/3 původního objemu rozpouštědla, načež se ochlazením směsi na 40^C vyloučí v n- butanolu téměř nerozpustný produkt, který se oddělí filtrací za sníženého tlaku.
4. Způsob přípravy sloučenin dle nároku 1, vyznačující se tím, že se sloučenina obecného vzorce (II) připraví tak, že k jednomu molárnímu ekvivalentu komplexu [(salophen)Fe-O-Fe(salophen)] rozpuštěného v minimálním množství n-butanolu se přidá třicetinásobný nadbytek příslušného derivátu triazolu nebo tetrazolu, poté se vytvořená směs přivede k varu a z reakční soustavy se oddestilují asi 3/5 původního objemu rozpouštědla, načež se ochlazením směsi na laboratorní teplotu vyloučí v n-butanolu téměř nerozpustný produkt, který se oddělí filtrací za sníženého tlaku.
5. Způsob přípravy sloučenin dle nároku 1, vyznačující se tím, že se sloučenina o
obecného vzorce (II) s doplňkovým ligandem 5-methýl£tetrazol-1-idem(1-) pripravi tak, že jeden molární ekvivalent komplexu [Fe(salophen)(N3)j se rozpustí v 3000-16• · * · násobném molárním nadbytku acetonitrilu a refluxuje se 30 hodin, poté se ochlazením reakční směsi na laboratorní teplotu vyloučí produkt (5-methyltetrazol—1 -ido)-2,2'-((1 E, 1 Έ)-(1,2-fenylenbis(azanylyliden))bis(methanylyliden))difenoláto(2-)železitý komplex, [Fe(salophen)(mtz)], který se oddělí filtrací za sníženého tlaku.
6. Farmakologický prostředek, vyznačující se tím, že obsahuje terapeuticky účinné množství komplexů železa podle nároku 1 a/nebo farmaceutickou kompozici komplexu železa s jedním či více účinnými látkami, přijatelnými nosiči a pomocnými látkami.
7. Farmakologický prostředek podle nároku 6 pro použití v lékařství.
8. Použití farmakologického prostředku podle nároku 7 jako léčiva pro léčbu nádorových onemocnění.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CZ2013-436A CZ304883B6 (cs) | 2013-06-10 | 2013-06-10 | Salophenové komplexy železa s heterocyklickými N-donorovými ligandy, způsob jejich přípravy a jejich použití jako léčiv v protinádorové terapii |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CZ2013-436A CZ304883B6 (cs) | 2013-06-10 | 2013-06-10 | Salophenové komplexy železa s heterocyklickými N-donorovými ligandy, způsob jejich přípravy a jejich použití jako léčiv v protinádorové terapii |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CZ2013436A3 true CZ2013436A3 (cs) | 2014-12-17 |
| CZ304883B6 CZ304883B6 (cs) | 2014-12-29 |
Family
ID=52017860
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CZ2013-436A CZ304883B6 (cs) | 2013-06-10 | 2013-06-10 | Salophenové komplexy železa s heterocyklickými N-donorovými ligandy, způsob jejich přípravy a jejich použití jako léčiv v protinádorové terapii |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CZ (1) | CZ304883B6 (cs) |
Family Cites Families (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5696109A (en) * | 1992-12-07 | 1997-12-09 | Eukarion, Inc. | Synthetic catalytic free radical scavengers useful as antioxidants for prevention and therapy of disease |
| US8252780B2 (en) * | 2006-12-01 | 2012-08-28 | Women & Infants' Hospital | Organometallic complexes as therapeutic agents |
| EP1949899A1 (en) * | 2007-01-23 | 2008-07-30 | Freie Universität Berlin | Metal salophen complexes use in prevention and treatment of cancer |
-
2013
- 2013-06-10 CZ CZ2013-436A patent/CZ304883B6/cs not_active IP Right Cessation
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CZ304883B6 (cs) | 2014-12-29 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Wang et al. | Mitochondria-targeted platinum (II) complexes induce apoptosis-dependent autophagic cell death mediated by ER-stress in A549 cancer cells | |
| Deka et al. | Novel mitochondria targeted copper (II) complexes of ferrocenyl terpyridine and anticancer active 8-hydroxyquinolines showing remarkable cytotoxicity, DNA and protein binding affinity | |
| Corrêa et al. | Ruthenium (II) complexes of 1, 3-thiazolidine-2-thione: Cytotoxicity against tumor cells and anti-Trypanosoma cruzi activity enhanced upon combination with benznidazole | |
| Kate et al. | Monitoring cellular uptake and cytotoxicity of copper (II) complex using a fluorescent anthracene thiosemicarbazone ligand | |
| Komarnicka et al. | New copper (I) complexes bearing lomefloxacin motif: Spectroscopic properties, in vitro cytotoxicity and interactions with DNA and human serum albumin | |
| Lv et al. | Unlocking the potential of iridium and ruthenium arene complexes as anti-tumor and anti-metastasis chemotherapeutic agents | |
| CN110467633B (zh) | 主族金属配合物及其制备方法和应用 | |
| Sarkar et al. | Visible light-induced cytotoxicity of a dinuclear iron (III) complex of curcumin with low-micromolar IC50 value in cancer cells | |
| WO2017148193A1 (zh) | 一类含有生物活性基团的四价铂配合物及其制备方法 | |
| Gopalakrishnan et al. | Water soluble Ru (ii)–arene complexes of the antidiabetic drug metformin: DNA and protein binding, molecular docking, cytotoxicity and apoptosis-inducing activity | |
| Raja et al. | Biological activities of pyrenyl-derived thiosemicarbazone half-sandwich complexes | |
| CN107746418A (zh) | 一种靶向于肝癌的9‑氯‑1,2,3,4‑四氢吖啶‑铂(ii)配合物的合成及其应用 | |
| Das et al. | Visible light-induced cytotoxicity studies on Co (II) complexes having an anthracene-based curcuminoid ligand | |
| CN101948488A (zh) | 钌-硒配合物及其在制备荧光探针和抗肿瘤药物中的用途 | |
| CN116143842A (zh) | 氧化异阿朴菲生物碱与n-杂环卡宾的环金属铱配合物及其合成方法和应用 | |
| Yang et al. | Nickel complexes of aroylhydrazone ligand: synthesis, crystal structure and DNA binding properties | |
| Williams et al. | Acridine-decorated cyclometallated gold (III) complexes: synthesis and anti-tumour investigations | |
| Filak et al. | Ruthenium-and osmium-arene complexes of 8-substituted indolo [3, 2-c] quinolines: Synthesis, X-ray diffraction structures, spectroscopic properties, and antiproliferative activity | |
| Srivastava et al. | Luminescent naphthalimide-tagged ruthenium (II)–arene complexes: cellular imaging, photocytotoxicity and transferrin binding | |
| Boora et al. | From synthesis to bioactivity: characterization, crystallography, antimalarial and antimicrobial activities of hydrazone-derived organotin (IV) complexes | |
| Pantelić et al. | Synthesis, characterization and in vitro biological evaluation of novel organotin (IV) compounds with derivatives of 2-(5-arylidene-2, 4-dioxothiazolidin-3-yl) propanoic acid | |
| CN106854210B (zh) | 水溶性含邻硝基酚酮卟啉及其Schiff碱铜卟啉配合物、其合成方法与应用 | |
| Zmejkovski et al. | Palladium (II) complexes with R2edda-derived ligands. Part II. Synthesis, characterization and in vitro antitumoral studies of R2eddip esters and palladium (II) complexes | |
| Hu et al. | Immunostimulation with chemotherapy of a ruthenium-arene complex via blockading CD47 signal in chronic myelogenous leukemia cells | |
| Dorairaj et al. | Binding mode transformation and biological activity on the Ru (II)-DMSO complexes bearing heterocyclic pyrazolyl ligands |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | Patent lapsed due to non-payment of fee |
Effective date: 20200610 |