CZ216399A3 - Heterocyklické sloučeniny obsahující dusík a farmaceutický prostředek obsahující tyto sloučeniny - Google Patents

Heterocyklické sloučeniny obsahující dusík a farmaceutický prostředek obsahující tyto sloučeniny Download PDF

Info

Publication number
CZ216399A3
CZ216399A3 CZ992163A CZ216399A CZ216399A3 CZ 216399 A3 CZ216399 A3 CZ 216399A3 CZ 992163 A CZ992163 A CZ 992163A CZ 216399 A CZ216399 A CZ 216399A CZ 216399 A3 CZ216399 A3 CZ 216399A3
Authority
CZ
Czechia
Prior art keywords
group
compound
substituents
carbon atoms
alkyl
Prior art date
Application number
CZ992163A
Other languages
English (en)
Other versions
CZ299600B6 (cs
Inventor
Guy W. Bemis
Francesco Gerald Salituro
John Patrick Duffy
John E. Cochran
Edmund Martin Harrington
Mark Murcko
Keith P. Wilson
Michael Su
Vincent P. Galullo
Original Assignee
Vertex Pharmaceuticals Incorporated
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Priority claimed from US08/822,373 external-priority patent/US5945418A/en
Application filed by Vertex Pharmaceuticals Incorporated filed Critical Vertex Pharmaceuticals Incorporated
Publication of CZ216399A3 publication Critical patent/CZ216399A3/cs
Publication of CZ299600B6 publication Critical patent/CZ299600B6/cs

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D213/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/04—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D213/60—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D213/62—Oxygen or sulfur atoms
    • C07D213/70—Sulfur atoms
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/08—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P23/00—Anaesthetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/18—Antipsychotics, i.e. neuroleptics; Drugs for mania or schizophrenia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/02—Antithrombotic agents; Anticoagulants; Platelet aggregation inhibitors
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D213/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/04—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D213/24—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with substituted hydrocarbon radicals attached to ring carbon atoms
    • C07D213/54—Radicals substituted by carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C07D213/56—Amides
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D213/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/04—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D213/60—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D213/72—Nitrogen atoms
    • C07D213/75—Amino or imino radicals, acylated by carboxylic or carbonic acids, or by sulfur or nitrogen analogues thereof, e.g. carbamates
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D237/00—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazine or hydrogenated 1,2-diazine rings
    • C07D237/02—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazine or hydrogenated 1,2-diazine rings not condensed with other rings
    • C07D237/06—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazine or hydrogenated 1,2-diazine rings not condensed with other rings having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D237/10—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazine or hydrogenated 1,2-diazine rings not condensed with other rings having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D237/18—Sulfur atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D241/00—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings
    • C07D241/02—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings not condensed with other rings
    • C07D241/10—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings not condensed with other rings having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D241/12—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings not condensed with other rings having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with only hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D241/00—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings
    • C07D241/02—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings not condensed with other rings
    • C07D241/10—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings not condensed with other rings having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D241/14—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings not condensed with other rings having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D241/20—Nitrogen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/02—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings
    • C07D405/04—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/02—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings
    • C07D405/12—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D409/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D409/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings
    • C07D409/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C07D471/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D471/04—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
    • C07D487/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D487/04—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
    • C07F9/00—Compounds containing elements of Groups 5 or 15 of the Periodic Table
    • C07F9/02—Phosphorus compounds
    • C07F9/547—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom
    • C07F9/6561—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom containing systems of two or more relevant hetero rings condensed among themselves or condensed with a common carbocyclic ring or ring system, with or without other non-condensed hetero rings

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Psychiatry (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Anesthesiology (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)

Description

(54) Název přihlášky vynálezu:
Heterocyklické sloučeniny obsahující dusík a farmaceutický prostředek obsahující tyto sloučeniny (57) Anotace:
Jsou popsány inhibitory p38, savčí proteinová kinasa působící buněčnou proliferaci, zánik buněk a odezvu na extracelulární stimuly. Jsou také popsány způsoby přípravy těchto inhibitorů. Dále jsou popsány farmaceutické prostředky obsahující inhibitory podle vynálezu a způsoby použití těchto prostředků k ošetřování a prevenci různých chorob.
177 067/HK
Heterocyklicjčé sloučeniny obsahující dusík a farmaceutický prostředek obsahující tyto sloučeniny
Oblast techniky
Vynález se týká inhibitorů p38, savčí proteinové kinasy působící buněčnou proliferaci, zánik buněk a vyvolávající odezvu na extracelulární stimuly. Vynález se také týká způsobů přípravy těchto inhibitorů. Vynález se dále týká farmaceutických prostředků obsahujících inhibitory podle vynálezu a způsobů použití těchto prostředků pro ošetřování a prevenci různých chorob.
Dosavadní stav techniky
Proteinové kinasy působí různé buněčné odezvy na extracelulární signály. Byla již objevena řada mitogenem aktivovaných proteinových kinas (MAPK). Členy této skupiny jsou Ser/Thr kinasy, které aktivují své substráty fosforylací [B. Stein a j., Ann. Rep. Med. Chem. , 31, str. 289 až 298 (1966)]. MAPK jsou samy aktivovány různými signály, včetně růstových faktorů, cytokinů, UV záření a činidel vyvolávajících stres.
Obzvláště zajímavou látkou MAPK je p38. Látka p38 je také známa jako cytokin potlačující protizánětlivá látka vázající protein (CSBP) a RK, a byla isolována z myších pre-B buněk, které byly transfektovány receptorem CD14 lipopolysacharidu (LPS) a indukovány LPS. Látka p38 byla až dosud isolována a byla stanovena její sekvence tak, jak je cDNA zakódována u lidí a myší. Aktivace p38 byla pozorována v buňkách stimulovaných stresy, jako jsou reakce na lipopolysacharidy
-29 «· ·♦ ·· ·· ·· ·· t · · · · · · · • · · · · · · ·· · · · · • · ···· · · • ·· · ·Ο 9 9 9 9 , ·· (LPS) , UV záření, anisomycin nebo osmotický šok, a cytokiny, jako jsou IL-1 a TNF.
Inhibice p38 kinasy vede k blokádě tvorby jak IL-1 tak TNF. IL-1 a TNF stimulují tvorbu ostatních prozánětlivých cytokinů, jako jsou IL-6 a IL-8 a mají za následek akutní a chronická zánětlivá onemocnění a postmenopausální osteoporosu [R. B. Kimble a j., Endocrinol. , 136, str. 3054 až 3061 (1995) ] .
Na základě toho se předpokládá, že p38 spolu s dalšími MAPK hrají roli při zprostředkování buněčné odezvy na zánětlivé stimuly, jako jsou akumulace leukocytů, aktivace makrofág/monocyt, resorpce tkáně, horečka, akutní fázové odezvy.a neutrofilie. Kromě toho MAPK, jako je p38, způsobují rakovinu, thrombinem vyvolanou agreaci destiček, poruchy imunity, autoimunní poruchy, zánik buněk, alergie, osteoporosu a neurodegenerativní choroby. Inhibitory p38 také působí v oblasti léčby bolesti inhibicí vyvolávání prostaglandinové endoperoxid synthasy-2. Další choroby spojené s nadprodukcí IL-1, IL-6, IL-8 nebo TNF jsou uvedeny v WO 96/21654.
Bylo již započato s vývojem léků, které specificky inhibují MAPK. Například PCT publikace WO 95/31451 popisuje sloučeniny pyrazolu, které inhibují MAPK a zejména p38. Avšak účinnost těchto inhibitorů in vivo se stále zkoumá.
Tedy stále je velká poptávka po vývoji dalších silných p38 specifických inhibitorů, které jsou použitelné při ošetřování různých stavů spojených s aktivaci p38.
Podstata vynálezu Předložený vynález řeší tento problém přípravou sloučenin, které vykazují silnou a specifickou inhibici p38.
Podstatou vynálezu jsou sloučeniny obecných vzorců Ia nebo .Ib
-3s 4 · 4 4 4 · • 4 4 4 · · » · 4 4 4 4 · · · • 4 · · · 44 444' • 4 4 4 « · |ί 4»·4 · ·
4
4
(Ia) kde každý ze substituentu Qx a Q2
(Ib) je nezávisle vybrán ze šestičlenné aromatické, kruhově systémy skupiny zahrnující pětičlenné až karbocyklické nebo heterocyklické osmičlenné až desetičlenné bicyklické kruhové systémy obsahující aromatické karbocyklické kruhy, aromatické heterocyklické kruhy nebo kombinaci aromatického karbocyklického kruhu a aromatického heterocyklického kruhu.
Kruhy, které tvoří Qlz jsou substituovány 1 až 4 substituenty, z nichž každý je nezávisle vybrán ze skupiny zahrnující atom halogenu, alkylovou skupinu s 1 až 3. atomy uhlíku, popřípadě substituovanou skupinami NR'2, OR', C02R' nebo CONR'2, skupinu O-alkyl, kde alkylová část má 1 až 3 atomy uhlíku, popřípadě substituovanou skupinami NR'2, OR', CO2R' nebo CONR'j, dále skupiny NR'2, OCF3, CF3, N02, CO2R', CONR', SR', S(O2)N(R')2, SCF3, CN, N(R')C(O)R4, N(R')C(O)OR4,
N(R')C(O)C(O)R4, N(R')S(O2)R4,. N(R')R4, N(R4)2, OR4, 0C(0)R4,
OP(O)3H2, nebo N=C-N(R')2.
Kruhy, které tvoří Q2, jsou popřípadě substituovány až 4 substituenty, z nichž každý je nezávisle vybrán ze skupiny zahrnující atom halogenu, alkylovou skupinu s 1 až 3 atomy rozvětveným řetězcem, popřípadě NR'2, OR', CO2R', S(O2)N(R')2, skupinu O-alkyl, kde alkylová část má 1 až 3 atomy uhlíku, skupinu O-alkyl, kde alkylová část má 1 až 3 atomy uhlíku, popřípadě substituovanou skupinami NR'2, OR'., CO2R', S(O2)N(R')2, N=C-N(R')2, R3 nebo CONR'2, dále skupiny NR'2, OCFj, CF3z N02z CO2R', CONR', R3, OR3, NR3, SR3, C(O)R3, nebo uhlíku s přímým nebo substituovanou skupinami N=C-N(R')2, R3 nebo CONR'2,
-4·
• · • · · · • · « · • • · · • · • · • 4 4 ·
« · • <· ♦ •
• · · · * » 4 4 • · • ·
nitroskupinu, skupinu. nebo pětičlenné až heterocyklické
C(O)N(R')R3, C(0)0R3, SR', S (·02)N (R ' ) 2, SCF3, N=C-N(R')2, nebo
CN.
R' je vybráno ze skupiny zahrnující atom vodíku, alkylovou skupinu s 1 až 3 atomy uhlíku, alkenylovou skupinu se 2 až 3 atomy uhlíku nebo alkinylovou skupinu, fenylovou skupinu nebo fenylovou skupinu, popřípadě substituovanou 1 až 3 substituenty nezávisle vybranými ze skupiny zahrnující atom halogenu, methoxyskupinu, kyanoskupinu, aminoskupinu, hydroxyskupinu, methylovou ethylovou skupinu.
R3 je vybráno ze skupiny zahrnující šestičlenné aromatické karbocyklické nebo kruhové systémy.
R4 je alkylová skupina s 1 až 4 atomy uhlíku, popřípadě substituovaná skupinami N(R')2, OR', CO2R', CON(R')2 nebo SO2N(R2)2, nebo pětičlenný až šestičlenný karbocyklický nebo heterocyklický kruhový systém, popřípadě substituovaný skupinami N(R')2, OR', CO2R', CON(R')2 nebo SO2N (R2
X je vybráno ze skupiny zahrnující -S-, -0-,
-S (02
-S(0)
-S (02) -N(R2)
-N (R2)-S (02) - , -N(R2) -0(0)0-,
-0-C(0) -N(R2) -,
-C(0)
-C(0)0-0-C(0)
-C(0) -N(R2) -,
-N(R2) -C(0)-, -N (R2) - , -C (R2) 2- nebo -C(OR2)2-.
Každé R je nezávisle vybráno ze skupiny zahrnující atom vodíku, -R2, -N(R2)2, -OR2, -SR2, -C(0)-N(R2)
-S (02) -N(R2) 2 nebo
-C(0)-0R2, přičemž dvě' přilehlá R jsou popřípadě vázána jedno na druhé a spolu s každým Y, ke kterým jsou vázána, tvoří čtyřčlenný až osmičlený karbocyklický nebo heterocyklický kruh,
R2 je vybráno ze skupiny zahrnující atom vodíku, alkylovou skupinu s 1 až 3 atomy uhlíku nebo alkenylovou skupinu se 2 až 3 atomy uhlíku, které jsou obě popřípadě substituovány skupinami -N(R')2, -OR', -SR', -C (0) -N (R') 2, -S (02) -N (R') 2,
-C(0)-0R', nebo R3.
Y je N nebo C,
-5• · ·· • · · · · · · ,« · · · · • · · · ♦ · · · • 9 ·· • · · · • · · · φ · · · ··· • »
9·» ··
A, je-li přítomno, je N nebo CR, n je 0 nebo 1,
Rr je vybráno ze skupiny zahrnující atom vodíku, alkylovou skupinu s 1 až 3 atomy uhlíku, OH, nebo -O-alkyl, kde alkylová část má 1 až 3 atomy uhlíku.
Dále jsou podstatou vynálezu farmaceutické prostředky, které obsahují inhibitory p38 podle vynálezu. Tyto prostředky lze použít při léčení nebo prevenci různých onemocnění, jako jsou rakovina, zánětlivá onemocnění, aútoimunní onemocnění, destruktivní poruchy kostí, proliferační poruchy, infekční onemocnění, virová onemocnění a neurodegenerativní onemocnění. Tyto prostředky lze také použít pro prevenci zániku buněk a hyperplasie a proto se mohou použít k ošetření nebo . prevenci reperfuse nebo ischemie při mrtvici.., srdečním záchvatu a hypoxii orgánů. Tyto prostředky lze také použít pro prevenci thrombinem vyvolané agregaci destiček. Všechna tato použití jsou také součástí předloženého vynálezu.
Podstatou vynálezu jsou inhibitory p38 obecných vzorců Ia nebo Ib
Q2 až je nezávisle vybrán ze
Šestičlenné aromatické kruhové systémy nebo kde každý ze substituentů Qx a skupiny zahrnující pětičlenné karbocyklické nebo heterocyklické osmičlenné až desetičlenné bicyklické kruhové systémy obsahující aromatické karbocyklické kruhy, aromatické heterocyklické kruhy nebo kombinaci ’ aromatického karbocyklického kruhu a aromatického heterocyklického kruhu.
• · · • · · · · ♦ » · · 1 ♦ · » I • · · · » · 9 1 • « · · · I • 4 » «·
Kruhy, které tvoří Qlz jsou substituovány 1 až 4 substituenty, z nichž každý je nezávisle vybrán ze skupiny zahrnující atom halogenu, alkylovou skupinu s 1 až 3 atomy uhlíku, popřípadě substituovanou skupinami NR'2, OR', CO2R' nebo CONR'2, skupinu O-alkyl, kde alkylová část má 1 až 3 atomy uhlíku, popřípadě substituovanou skupinami NR'
OR'
CO.R' nebo CONR'2, dále skupiny NR'2, OCF3, CF3, N02, CO2R', CONR',
SR', S(O2)N(R')2, SCF3, CN, N(R')C(O)R4, N(R') C(O)OR4,
N(R')C(0)C(0)R4, N(R')S(O2)R4, N(R')R4, N(R4)2, OR4, OC(O)R4,
QP(O)3H2, nebo N=C-N(R')2·
Kruhy, které tvoří Q2, jsou popřípadě substituovány až 4 substituenty, z nichž každý je nezávisle vybrán ze skupiny zahrnující atom halogenu, alkylovou skupinu s 1 až 3 atomy rozvětveným řetězcem, popřípadě NR'2, OR', CO2R', S(O2)N(R')2, skupinu O-alkyl, kde alkylová část má 1 až 3 atomy uhlíku, skupinu O-alkyl, kde alkylová část má 1 až 3 atomy uhlíku, popřípadě substituovanou skupinami NR'2, OR', CO2R', S(O2)N(R')2, N=C-N(R')2, R3 nebo CONR'2, dále skupiny uhlíku s přímým nebo substituovanou skupinami N=C-N(R')2,' R3 nebo CONR
NR' ocf3, cf3., no2, CO2R'
CONR'
R3, OR3, NR3, SR3,· C(O)R3,
C(O)N(R')R3, C(O)OR3, SR', S(O2)N(R')2, SCF3, N=C-N(R')2, nebo CN.
R' je vybráno ze skupiny zahrnující atom vodíku, alkylovou skupinu s 1 až 3 atomy uhlíku, alkenylovou skupinu se 2 až 3 atomy uhlíku nebo alkinylovou skupinu, fenylovou skupinu nebo fenylovou skupinu, popřípadě substituovanou 1 až 3 substituenty nezávisle vybranými ze skupiny zahrnující atom halogenu, methoxyskupinu, kyanoskupinu, aminoskupinu, hydroxyskupinu, methylovou ethylovou skupinu.
R3 je vybráno ze skupiny zahrnující šestičlenné. aromatické karbocyklické nebo kruhové systémy.
nitroskupinu, skupinu nebo pětičlenné až heterocyklické
9 ·» • · .< · 9 9 99
• 9 • · • 9 9 9 9
• 9 9 · * · • · · 9 9 9 9
• 9 9 * 9 • 9 9 9
9 9 99 99 9 9 9 · 99
R4 je alkylová skupina s 1 až 4 atomy uhlíku, popřípadě substituovaná skupinami N(R')2, OR', CO2R', CON(R')2 nebo SO2N(R2)2, nebo pětičlenný až šestičlenný karbocyklický nebo heterocyklický kruhový systém, popřípadě substituovaný skupinami N(R')2, OR', CO2R', CON(R')2 nebo SO2N (R2) 2 .
X je vybráno ze skupiny zahrnující -S-, -0-, -S(02)-,
-S(0)-, -S (02) -N (R2) - , -N (R2) -S (02) - , -N (R2) -C (0) 0-,
-0-C(0) -N(R2) -, -C(0)-z -0(0)0-, -O-C(O)-, -C (0) -N (R2) -,
-N (R2)-C (0) - , -N(R2)-, -C(R2)2- nebo -C(OR2)2-.
Každé R je nezávisle vybráno ze skupiny zahrnující atom vodíku, -R2, -N(R2)2, -OR2, -SR2, -C (0)-N (R2) 2, -S (02)-N (R2) 2 nebo -C(O)-OR2, přičemž dvě přilehlá R jsou popřípadě vázána jedno na druhé a spolu s každým Y, ke kterým jsou vázána, tvoří čtyřčlenný až osmičlený karbocyklický nebo heterocyklický kruh.
Jestliže obě R tvoří spolu dohromady se skupinami Y, ke kterým jsou. připojeny, kruh, je odborníkovi zřejmé, že z každého nekonděnsovaného R se ztratí atom vodíku. Například, je-li kruhová struktura tvořena vazbou obou R dohromady, kdy jedna je -NH-CH3 a druhá je -CH2CH3, jeden koncový atom vodíku se z každého R ztratí (je.vyznačeno tučné). Proto vzniklá část kruhové struktury má vzorec -NH-CH2-CH2-CH2-.
R2 je'vybráno ze skupiny zahrnující atom vodíku, alkylovou skupinu s 1 až 3 atomy uhlíku nebo alkenylovou skupinu se 2 až 3 atomy uhlíku, přičemž každá tato skupina je popřípadě substituována skupinami -N(R')2, -OR', -SR', -C (0.)-N (R') 2,
-S (02)-N(R')2, -C(O)-OR', nebo R3.
Y je N nebo C,
A, je-li přítomno, je N nebo CR', n je C nebo 1,
Rx je vybráno ze skupiny zahrnující atom vodíku, alkylovou skupinu s 1 až 3 atomy uhlíku, OH, nebo -0-alkyl, kde alkylová část má 1 . až 3 atomy uhlíku. Odborníkovi je zřejmé, že ·· ·
-8•· · · · » ·· *· • · · * 4« · · 4 ··· « · ··* · * · · · « · » · » · · · ·»· ··· «**··* · * • ·· 4l * *· ♦* ** jestliže Rj. je OH, vzniklý inhibitor.se múze tautomerisovat na sloučeninu, vzorce
což jsou též inhibitory p38 pódle tohoto vynálezu.
Podle dalšího výhodného provedení vynálezu je Qx vybráno ze skupiny zahrnující fenylovou nebo pyridylovou skupinu obsahující l až 3 substituenty, kde alespoň jeden z těchto substituentů je v ortho poloze a tyto substituenty jsou nezávisle vybrány, ze skupiny zahrnující atom chloru, atom fluoru, atom bromu, skupiny -CH3, -OCH3, -OH, -CF3, -OCF3, -O(CH2)2CH3, NH2, 3,4-methylendioxyskupinu, -N(CH3)2,.
-NH-S (02)-fenyl, -NH-C (O) O-CH2-4-pyridin, -NH-C (O) CH2-morf olin, -NH-C(O) CH2-N(CH3)2, -NH-C (O) CH2-piperazin, -NH-C (Ό) CH2-pyrrolidin, -NH-C(O)C(O)-morfolin, -NH-C(O)C(O)-piperazin,
-NH-C (O) C (O)-pyrrolidin, -0-C (O) CH2-N (CH3) 2 nebo
-O-(CH2) 2-N(CH3)2.
Ještě výhodněji Q3 je fenylová nebo pyridylová skupina obsahující alespoň dva z výše uvedených substituentů, přičemž oba jsou v poloze ortho.
Určitými specifickými příklady výhodného Qx jsou:
-94 44 · · · 4 4 4 4 • 4 · 4 4 444·
4 4.4 4 44 4
4 4 · 4 4
444 ·· «4 44
-ΙΟ-
Ν
• w · · ta a • 9 • ' M • - ·· ♦ a • a a a
• a • a • • • ·· a a • a
• 1 a • • z ··» a· a
• aa a * • * • a a ·
Nejvýhodněji je Qx vybráno ze skupinyzahrnující2-fluor- 6-trifluormethylfenyl, 2,6-difluorfenyl, 2,S-dichlorfenyl,
2-chlor-4-hydroxyfenyl, 2-chlor-4-aminofenyl, 2,6-dichlor-4-aminofenyl, 2,6-dichlor-3-aminofenyl, 2,6-dimethyl-4-hydroxyfenyl, 2-methoxy-3,5-dichlor-4-pyridyl, 2-chlor-4,5-methylendioxyfenyl nebo 2-chlor-4-(N-2-morfolinoacetamido)fenyl.
Podle výhodného provedení vynálezu je Q2 fenylová nebo pyridylová skupina obsahující 0 až 3 substituenty, kde každý substituent. je nezávisle vybrán ze skupiny zahrnující atom chloru, atom fluoru, atom bromu, methylovou skupinu, ethylovou skupinu, isopropylovou skupinu, skupiny -OCH3, -OH, -NH2, -CF3, -OCF3, -SCH3z -OCH3z -C(O)OH, -C(O)OCH3z -CH2NH2, -N(CH3)2, -CH2-pyrrolidin a -CH2OH.
Určitými specifickými příklady výhodného Q2 jsou:
* ·» ·· ·· ·· ·· •« · a a · >♦·· • ··· « · ·»· · a a a a a « a · a » a · • a a a« · a «9 a · a».
t t
t t
9 • ♦· ·· ·· ·· ·♦ «·· »»» « · · * *«·« · ···· · · · ·
nesubstituovaný 2-pyridyl nebo nesubstituóvaný fenyl.
Nejvýhodnější jsou sloučeniny, kde Q2 je vybráno ze skupiny zahrnující fenyl, 2-isopropylfenyl, 3,4-dimethylfenyl, • 44 • 4 «* 4 4
·· · 4 4 4 • 4 4 4
4 444 4 4 444 4 4 4 4
• 4 « 4 4 4. · 4 4
444 4« 4 · 4 4 4 4 • 4
2-ethylfenyl, 3-fluorfenyl, · 2-methylfenyl, 3-chlor-4-fluorfenyl, 3-chlorfenyl, 2-methoxykarbonýlfenyl, 2-karboxyfenyl,
2-methyl-4-chlorfenyl, 2-bromfenyl, 2-pyridyl, 2-methylenhydroxyfenyl, 4-fluorfenyl, 2-methyl-4-fluorfenyl, . 2-chlor-4-fluorfenyl, 2,4-difluorfenyl, 2-hydroxy-4-fluorfenyl nebo
2-methylenhydroxy-4-fluorfenyl.
Podle dalšího výhodného provedení je X -S-, -0-,.-S(02)-,
-S(0)-, -NR-, -C(R2)- nebo -C(0)-. Nejvýhodněji je X -S-.
Podle dalšího výhodného provedení jenlaAjeN.
Podle dalšího výhodného provedení je každé Y C.
Podle ještě výhodnějšího provedení je každé Y C a R připojené k těmto skupinám Y je vybráno ze skupiny zahrnující atom vodíku nebo methylovou skupinu.
Určité specifické inhibitory podle vynálezu jsou shrnuty v tabulce 1 níže.
-15* 44 • 4 * • ··· • 4 4 4 • 4 4
444 ··
4· ♦ 4 • · • 4
4
4» ··» «· 44
4 4 4 · 4 · β ·44 4··
4
4 , 44
Tabulka 1 Sloučeniny obecných vzorců Ia a Ib
-16♦ ·♦ ·· * • ··· • · « • · « ··· ·· • * • · « · • · ·· • »· ·♦ ·· « · · « • · · · *·· ♦·· ♦ · • · · ·
-17* ·· ·· · • . »·· « · · · • · « ··· »· ·· ·· « · · • · · ♦· • · · · • » · · • · ♦· ·· ··
4» · » 4>
• · · · • ··· ··· < · • * β ·
• ·· «· 9 • ··· • · · 9 • · · ·· · « 9 • 9 • 9 99
999 9 9
9
9
999 9
9
9 • « • ·
999 sl.č.
struktura sl .č.
struktura
OK
NH .
N S
H,N
,CH ,
CH,
· *
9 ·9 • 9 99 · · ·
9 999 9 9 9 9 *9 9 9 9 «9 sl.č.
struktura
O—\
.41
I H,N.
-19si.e.
; ; · 99 99 99 999 999 • 9 9 9 99 9 9 · ·ϊ· 9· 99 99 99 99 struktura
n<^nxn·
CH,
-20. 4 ' 4 ··· • 44 •
4
4 4 4 4 4
4444 4 44 4
44 444 444
4 4 4 4
4444
sl. č. struktura sl. i. struktura
o-CH’ /Ua-ch, 0 «JÍ
r^YF ίίΊ
43 49 Clx A vAýA
N<x -Αχ tr s— v A
CHj /VCH> Ϊ Cl-^^ 0. N< /CH: ,r X I 1 A CH, χΑ
44 A/%ASA> 50 A /= NS_v J —F
0 ϊ H3C N Í A
C!^ y Cl
M Ο,χ, Aa v -F
51 53 n^n^nAsA> J
F
N s x# F
cÁX 0 Aa
52
X/X/A
N<^/Nx A ΛΛ N sAbF .
k ·· 4 * .4 4 4 4
I · » 4
4
-21Dále jsou podstatou vynálezu způsoby přípravy inhibitorů p38 obecného vzorce Ia, uvedeného výše. Tyto způsoby spočívají v reakci sloučeniny obecného vzorce II
kde každý substituent v tomto vzorci má význam uvedený výše pro inhibitory podle vynálezu, s reakčním činidlem s odstupující skupinou obecného vzorce Ila R’
Lt
L3 (Ila) L2 kde R' má výše uvedený význam, nebo s reakčním- činidlem s odstupující skupinou obecného vzorce lib (Tib) kde každá ze skupin Llz L2 a L>3 nezávisle znamená odstupující skupinu.
Činidlo s odstupující skupinou se v této reakci přidává v nadbytku, buď čisté nebo s korozpouštědlem, jako je toluen. Reakce se provádí při teplotě mezi 25 °C a 150 °C.
Jako činidla s odstupující skupinou obecného vzorce Ila, která lze použít při přípravě inhibitorů p38 podle vynálezu, lze uvést dimethylacetal dimethylformamidu, dimethylacetal dimethylacetamidu, trimethylorthoformiát, diethylacetal dimethylformamidu a další příbuzná činidla. Výhodným činidlem s odstupující skupinou obecného vzorce Ila při přípravě inhibitorů podle vynálezu je dimethylacetal dimethylformamidu.
Jako činidla s odstupující skupinou obecného vzorce lib, která lze použít při přípravě inhibitorů p38 podle vynálezu,
-22• · · ··· · · · ··· ··. .·· .·♦’ ·· ·* lze uvést fosgen, karbonyldiimidazol, diethylkarbonát a trifosgen.
Ještě výhodnější způsoby přípravy sloučenin podle vynálezu používají sloučeniny obecného vzorce II, kde každý z uvedených substituentů má významy uvedené u výše jmenovaných výhodných a nejvýhodnějších sloučenin podle vynálezu.
Protože zdrojem je činidlo s odstupující skupinou (C-R' nebo C=0), jeho identita samozřejmě závisí na struktuře tohoto činidla. Proto u, sloučenin, kde Ri je OH, musí být tímto činidlem sloučenina vzorce lib, Podobně, je-li Rj atom vodíku nebo alkylová skupina s 1 až 3 atomy uhlíku, použitým činidlem musí být sloučenina vzorce Ha. K.získání inhibitorů, kde Rr je O-alkyl, kde alkylová část má 1 až 3 atomy uhlíku, se nejdříve připraví sloučenina, kde Rx je OH a potom se tato hydroxyskupina alkyluje standardními technikami, jako je reakce s hydridem sodným v DMF, s methyljodidem a ethyljodidem.
Bezprostřední, předchůdce inhibitorů podle vynálezu obecného vzorce Ia (to je sloučeniny obecného vzorce II) lze připravit podle obou schémat syntesy popsaných níže:
·· Schéma 1
•23··· ·· ·· *
··· ·» ·< > « · » · ···
Ve schématu 1 lze pořadí stupňů 1) a 2) obrátit. Také výchozí nitril lze nahradit odpovídající kyselinou nebo esterem. Alternativně lze též použít místo nitrilu jiné známé latentní karboxylové skupiny nebo karboxamidové skupiny (viz schéma 2) . Do tohoto schématu lze začlenit obměny, jako jsou karboxylové kyseliny, estery karboxylových kyselin, oxazoliny nebo oxazolidinony, za použití následného odstranění chránících skupin a funkcionalisace, což jsou metody známé ze stavu techniky.
Jako base se v prvním stupni schématu 1 (a ve schématu 2 níže) používají hydrid sodný, amid sodný, LDA, lithiumhexamethyldisilazid, hexamethyldisilazid sodný nebo jakákoliv z ostatních nenukleofilních basí, které deprotonují polohu alfa na·nitril.
Také přidání HX-Q2 v jednom stupni, jak je výše naznačeno, lze nahradit dvěma stupni - přidáním chráněného nebo nechráněného X derivátu . a potom adicí Q2 derivátu v následujícím stupni.
Schéma 2
1)base 2>\ / Y—Y
Cl< > N=(A)n
-a
base + HX-Q2
odstranění Q2 chránící skupiny funkcionalisace \ /R Y—Y
N=(A)n
-24• · ·· ·* ·· »· ··· » · * ·«·· • ·»· · · ··· · · · · ·· *·· ·· ·· ··· ··· ······· » · ••e »· ·· ·· ·· ··
Ve schématu 2 je Z vybráno ze skupiny zahrnující COOH, COOR', CON(R')2, oxazolin, oxazolidinon nebo CN. R' má s výhodou výše uvedený význam.
Dále se vynález týká způsobu přípravy inhibitorů p38 obecného vzorce Ib, jak je uveden výše. Tyto způsoby spočívají v reakci sloučeniny obecného vzorce III
kde různé' substituenty mají významy uvedené inhibitory podle vynálezu, s činidlem obsahujícím skupinu obecného vzorce Ha nebo lib výše pro odstupuj ící
R’
Lr
L-2
1-3 (Ha)
O
L—1‘1-2 (lib) jak jsou popsána výše.
Níže jsou uvedena dvě schémata úplné syntesy inhibitorů p38 obecného vzorce Ib podle Vynálezu.
Schéma 3 stupeň 1
(Ib)
stupeň .4 cyklisace stupeň 2 p zavedení Q2 Qi Y—Y
DMF-acetal stupeň 3
-25* · · e · · · · · · · • · · · · · ··· • · · · * · · · · · · ·
Ve schématu 3 lze Qx substituovaný derivát nechat reagovat s basí, jako je hýdrid sodný, amid sodný, LDA, líthíumhexamethyldisilazid, hexamethyldisilazíd sodný nebo jakákoliv jiná nenukleofilní base, která deprotonuje polohu alfa na Z skupině, což je maskovaná amidová skupina. Alternativně je Z karboxylová kyselina, ester karboxylové kyseliny, oxazolin nebo oxazolidinon. Anion vzniklý z deprotonace se potom uvede ve styk s dusíkatou heterocyklickou sloučeninou, která , obsahuje dvě odstupující skupiny nebo latentní odstupující skupiny, v přítomnosti palladiového katalysátoru. Jako příklad takové sloučeniny lze uvést 2,6-dichlorpyridin.
Ve stupni 2 se zavádí Q2 kruhová část. To lze provádět,za použiti mnoha reakcí známých ze stavu techniky, které vedou ke tvorbě diarylových sloučenin. Jedním příkladem může být reakce arylové lithiové sloučeniny s pyridinovým meziproduktem vzniklým ve stupni 1. Alternativně se arylkovová sloučenina, jako je arylstannan nebo arylboronová kyselina, nechá reagovat s aryihalogenidovou částí pyridinového meziproduktu v přítomnosti kovového palladiového katalysátoru.
Ve stupni 3 se ze skupiny Z odštěpí chránící skupina a/nebo se tato skupina funkcionalisuje za vzniku amidové sloučeniny. Je-li Z karboxylová kyselina, ester karboxylové kyseliny, oxazolin nebo oxazolidin, lze pro přípravu amidu použit různé způsoby odštěpení chránící skupiny a funkcionalisace, které jsou známé ze stavu techniky. Nakonec ’ se ve Stupni 4 amidová sloučenina cyklisuje na konečný produkt za použití reakčních činidel, jako jsou acetal DMF nebo t
* podobná činidla, buď v čisté formě nebo v organickém , rozpouštědle.
• * ¢.
• ··« · · · · · ······· · 4 ····· »4 *4 ·· ·*
Schéma 4
Ib
Schéma 4 je podobné s výjimkou, že diarylový meziprodukt se nejprve uvolní před reakcí s Qx výchozí látkou.
Podstatou vynálezu jsou dále inhibitory’ p38 podobné inhibitorům obecných vzorců Ia a Ib výše, ale kde C=N v kruhu nesoucím substituent Q1 je redukována. Tyto inhibitory mají obecné vzorce Ic nebo Id
kde A, Qlz Q2, R, R, X, Y a n mají význam uvedený výše pro sloučeniny obecných vzorců Ia a Ib. Tyto definice platí pro všechna provedení každé z těchto možností (to je pro významy základní, výhodné, výhodnější a nejvýhodnější). R5 je vybráno ze skupiny zahrnující atom vodíku, skupiny -CR2OH, -C(O)R“, -C(O)OR4, -CR'2OPO3H2, -PO3H2 a soli -PO3H2.
• · »
-27- • · · ··· ·· « · ·· ··
Jestliže Rs není atom vodíku, očekává se, že vzniklé
sloučeniny budou ve formě profarmak , která mohou být štěpena
in vivo za vzniku sloučeniny, kde R5 je atom vodíku
V dalším výhodném provedení ve sloučeninách obecného vzorce Ic je A s výhodou atom dusíku, n je s výhodou 1 a X je s výhodou atom síry. Ve sloučeninách obecného vzorce Ic nebo Id jsou Qx a Q2 s výhodou stejné substituenty uvedené výše u sloučenin obecných vzorců Ia a Ib.
Sloučeniny obecných vzorců.Ic a Id lze připravit přímo ze sloučenin obecného, vzorce Ia nebo Ib, které 'obsahují atom vodíku, alkylovou skupinu s í až 3 atomy uhlíku nebo alkenylovou skupinu se 2 až 3 atomy uhlíku nebo alkinylovou skupinu v poloze substituentu Rx (to je, kde Rx = R). Schémata syntesy těchto sloučenin jsou znázorněna ve schématech 5 a 6 níže.·
Schéma 5
Ib
Id «· · · * · ♦ ·· · • ··· * · · · · · ,· · 9
-28· · · · ♦ · « 9 '9 999 99 » ♦ · 9 · 9
V těchto schématech se sloučeniny obecného vzorce Ia nebo Ib redukují reakcí s nadbytkem diisobutylaluminiumhydridu nebo s ekvivalentním činidlem, čímž se získá kruhová redukovaná sloučenina obecného vzorce Ic nebo Id.
Zavedení jiné skupiny R5 než je atom vodíku na kruhový atom dusíku se provádí reakcí sloučenin vzorce Ic nebo Id uvedených výše s příslušným činidlem nebo s příslušnými činidly. Příklady těchto modifikací jsou uvedeny níže v příkladech provedení vynálezu.
Určité , specifické inhibitory -podle vynálezu obecného vzorce Ic jsou shrnuty v tabulce 2 níže. ·
-29Tabulka-2 Sloučeniny obecného vzorce Ic • »· «· 9 t
9 9 9 9 * * · · · · e 9 ·
• · «« «·
CN
NH,
♦ *»
Cl
ι ·* · · ·· · t · · • a · · a a a a a a aa a a a * · a · a a a a ta aa a a a a a a aa
-34« «« *· ·» ·· ·· 99 9 9 9 9 9.9· • 999 9 9999 9 9 9
Podstatou vynálezu jsou dále vzorců Ie, If, Ig nebo Ih
9» 9 9 9 9 9
9 9 99 9 9 9 9 9 9 9 9 inhibitory p38 obecných
kde A, Qi, Q2, R, X, Y a n mají význam uvedený výše u obecných vzorců Ia a Ib. Tyto definice platí pro všechna provedení každého z proměnných významů (to je pro základní, výhodné, ještě výhodnější a nejvýhodnější významy). Ještě výhodněji je ve sloučeninách obecného vzorce Ie Q2 nesubstituovaná fenvlová skupina.
Q3 je pětičlenný až šestičlenný aromatický karbocyklický nebo heterocyklický kruhový systém nebo osmičlenný až desetičlenný bicyklický kruhový, systém obsahující aromatické karbocyklické kruhy, aromatické heterocyklické kruhy nebo kombinaci aromatického karbocyklického kruhu a aromatického heterocyklickěho kruhu. Kruhy Q3 jsou substituovány 1 až 4 substituenty, které. jsou nezávisle vybrány ze zahrnující atom halogenu, alkylovou skupinu s 1 až uhlíku, popřípadě substituovanou skupinami NR'2/- ' OR' nebo CONR'2í skupinu O-alkyl, kde alkylová část má 1 až 3 atomy uhlíku, popřípadě substituovanou skupinami NR2, 0R>, CO2R' nebo CONR'2, dále skupiny NR'2, OCF3, CF3, N02, CO2R', CONR', SCF3, CN, N(R')C(O)R4, N(R')C(O)OR4, skupiny 3 atomy , CO2R'
SR
S(O2)N(R')
N (R' ) C (O) C (0) R4, N(R) S (O2)R4, N(R')R4, N(R4)2, OR4, 0C(0)R4,
OP(O)3H2 nebo N=C-N(R')2.
-35-4 «♦ 4 4 ·· ·· ··
4 4 4 4 4 4 4 4 · · * 4 444« 4 44 4
4» 4444 4 4 «44 4' 4 4 4 44 . 4 4 4»
Podle jednoho výhodného provedení je Q3 substituováno .2 až substituenty, kde alespoň jeden z těchto substituentů je přítomen v poloze ortho vzhledem k místu připojeni Q3 na zbytek inhibitoru. Jestliže Q3 je bicyklický kruh, jsou přítomny dva substituenty v poloze ortho na kruhu, který je nejblíže (to je, který je přímo připojen) ke zbytku molekuly inhibitoru.
Další dva případné substituenty mohou být přítomny na každém kruhu. Ještě výhodněji jsou obě ortho polohy substituovány jedním z těchto substituentů.
Podle dalšího výhodného provedeni je Q3 monocyklický karbocyklický kruh, kde každý ortho substituent je nezávisle vybrán ze skupiny zahrnující atom halogenu nebo methylovou skupinu. Podle dalšího výhodného provedení Q3 obsahuje 1 nebo 2 další substituenty nezávisle vybrané ze skupiny zahrnující skupiny NR%, OR, CO2R', CN, N(R')C(O)R4, N (R) C (0) OR4, N(R)C(0)C(0)R4, N(R')S(O2)R4, N(R)R4, N(R4)2, OR4, . OC (0) R4,
OP(O)3H2 nebo N=C-N(R')2.
Výhodně je Q3 vybráno z jakýchkoliv významů Q3 přítomných ve sloučeninách vzorce Ie shrnutých v tabulce 3 níže nebo z jakýchkoliv významů Q3 přítomných ve sloučeninách vzorce Ig shrnutých v tabulce 4 níže.
Pracovníkům v oboru je zřejmé, že sloučeniny obecného vzorce Ie jsou přímými prekursory určitých inhbitorů p38 podle vynálezu obecného vzoece Ia a Ic (to je, kde Qx = Q3) . Dále je též zřejmé, že sloučeniny obecného vzorce Ig jsou prekursory určitých inhibitorů p38 podle vynálezu obecného vzorce Ib a Id (to je, kde Qx = Q3) . Proto syntesa inhibitorů obecného vzorce Ie je znázorněna výše ve schématech 1 a 2, kde Qx se nahradí za Q3. Podobně syntesa inhibitorů obecného vzorce Ig je znázorněna ve schématech 3 a 4, kde Qx se nahradí ze Q3.
Syntesa inhibitorů obecného vzorce If a Ih je níže znázorněna ve schématech 7 a 8.
-36¢9 · * ·« · · · · « ··« 9 9··
9 9 9 9 99 9 9 9 0 4 • · * · β « 9 9
9 9 99 9999
Schema 7
Schéma 8
Qj-boronová kyselina palladium (0) ,,
Schéma 8 zobrazuje syntesu sloučenin typu Ih. Například reakcí výchozího dibromderivátu, jako je 2,β-dibrompyridin, s aminem v přítomnosti base, jako je hydrid sodný, se získá
2-amino-6-bromderivát. Reakcí tohoto meziproduktu s analogem fenylboronové kyseliny (Q2-boronová kyselina), jako je fenylboronová kyselina, v přítomnosti palladiového katalysátoru se získá disubstituovaný derivát, který se potom
-37• *» - ·♦ ·· ·· ·· ♦» · * * * · « * ♦ • « ·· · · »·· · · · · • · ··« · · « -9 999*99
9 9 9 9 9 9 · · «·· ·· ·· 9 9 9 9 · » může acylovat na konečný produkt. Pořadí prvních dvou stupňů této syntesy.se může obrátit.
Vynálezci předpokládají, aniž by byli vázáni na teorii, že diorthosubstituce v Q3 kruhu inhibitorů obecných vzorců Ie a Ig a přítomnost dusíku přímo připojeného na Qx kruh v inhibitorech obecných vzorců If a Ih způsobují zploštění sloučeniny, což umožňuje účinně inhibovat p38.
Výhodným inhibitorem podle vynálezu obecného vzorce Ie je sloučenina, kde A je atom uhlíku, n je 1, X je atom siry, každé Y je atom uhlíku, každé R je atom vodíku, Q3 je
2.6- dichlorfenyl a Q2 je fenyl, přičemž tato sloučenina je zde označena jako sloučenina 201. Výhodným inhibitorem podle vynálezu obecného vzorce Ig je sloučenina, kde Q3 je
2.6- dichlorfenyl, Q2 je fenyl, každé Y je atom uhlíku a každé R je atom vodíku. Tato sloučenina je zde označena jako sloučenina 202. Další výhodné sloučeniny podle vynálezu obecného vzorce Ig jsou shrnuty v tabulce 4 níže.
Výhodné sloučeniny podle vynálezu obecného vzorce Ih jsou shrnuty v tabulce 5 níže. Dalšími výhodnými sloučeninami obecného vzorce Ih jsou sloučeniny, kde Qx je fenyl nezávisle substituovaný v polohách 2 a 6 atomem chloru nebo fluoru, každé Y je atom uhlíku, každé R je atom vodíku a 'Q2 je 2-methylfenyl, 4-fluorfenyl, 2,4-difluorfenyl, 2-methylenhydroxy-4-fluorfenyl nebo 2-methyl-4-fluorfenyl.
Určité specifické inhibitory obecných vzorců Ie, Ig a Ih jsou shrnuty v tabulkách níže.·
-384 44 *4 44
4* 4
4444 4 4··· • · 4 4 · · · <
« 4 4 4 4 · 1
4 4 «4 4 4 44 *« • 4 * ·
4 4 4 •44 444
4
4 <4 4
Tabulka 3 Inhibitory obecného vzorce Ie
-39Tabulka 4
5l.Č.
302
303
304 • · * *
« ··· • · · » * * » ··· ··
Inhibitory obecného vzorce Ig struktura ·· ·· ♦ » ♦ • · ♦·» • · ♦ · ♦ • · « * ·* ·· ·« ·* β t * * • · · · ·«· ··· • · « ♦ 9 ·
202/
301
CH,
310
311
312
313 struktura
305
314
-40• «9 99 9« 99 99
9 9 9 9 9 9 9 9 • «·· · · 9·· 9 · · 9
9 · 9 · «9 99 9*9 999
9' * 9 9 99 9 · 9
9«9 99 .99 .99 9 9 9 9 -
-42· ο ·· ·· ·· ·· *« »· » **« » « · » ···» · ·«·» · · · · • · · · » « « · · ··· ··· 1····«« · » >···· ·· ·· ·· «· sl.č.
struktura sl.č.
struktura
337
346
338
Η2Ν O
347
339
348
340
349
341
350
342
351
· sl.č.
343
344
345 struktura
-43sl.č.
352
353
354 • · · · « · · • 46 ·· struktura
H,N ··· ř · · « ι · « 1 ·· ·♦
355
364 • ·
-44 • · · · * 44 4
4 « 4 4 4 · ··· 4· 4* ··
4 444
4
44
-45• · ·
• ·
-46• 44 • 4 · • · 44 • 4 4
4 · • « 4 · 4 ·· ·· • 4 · • 4 · 44 • 4 4 *
4 4 4 • 4 · 44
444
4
4« *
• 4
4 4 4
-4.Ί• ·· • * • · • 9 • 9 9 9 9 ·· » 9999 9 99 · • 99 9 9 999 999
9 9 9 9 ·
-99 99 99' 99
-48• 44
4» 4 • 4 4·
4 4 · • · ·
4 44
44
4 4
4 444
4 4 4
4 4 · «4 44
4
4
4 4
4
4
-49··· • ♦ · • · ··· ····*·· · · ·»· »· ·· ·· *· ··
Tabulka 5 Inhibitory obecného vzorce Ih
.5
-50·· ·* ·· • · · · ··· · · ··· • · » · · · • · * · · ο» ·· ·* ·· «· » · · · » · · ♦ ··· ··· ··
-514 44 ·ι ι· 44 44 · 4 · · · 4 · · 4 · · · · · · · · · ♦ · ·
4 4 4 4 ·· '· · ··· ·· ·· 49 44 ·4
Účinnost inhibitorů p38 podle vynálezu byla zkoušena in vitro, in vivo nebo v buněčné linii. Testy in vitro zahrnují testy, které stanoví inhibici buď účinnosti kinasy nebo účinnosti ATPasy aktivovaného p38. Alternativně testy in vitro stanovují schopnost inhibitoru, vázat se na p38 a lze to měřit buď radioaktivním značením inhibitoru před vázáním, isolováním komplexu inhibitor/p38 a stanovením množství radioznačeně vazby, nebo provedením pokusu, kdy se nové inhibitory inkubuji s p38 vazbou na známé radioligandy.
Testy, buněčné kultury na inhibiční účinnost sloučenin podle vynálezu mohou stanovit množství TNF, IL-1, IL-6 nebo IL-8 produkované v čisté krvi nebo v jejích buněčných frakcích v buňkách ošetřených inhibitorem ve srovnání s buňkami ošetřenými negativními kontrolami. Hladina těchto cytokinů se může stanovit použitím komerčně dostupných látek ELISA.
In vivo testem použitelným pro stanovení inhibiční účinnosti inhibitorů p38 podle vynálezu je potlačení otoku zadní tlapky u krys u arthritidy vyvolané pomocnou látkou Mycobacterium. butyricum. To je popsáno v práci J. C. Boehm a j J. Med. Chem., 39, str. 3929 až 3937 (1996), což je zde uváděno jako odkaz. Inhibitory p38 podle vynálezu lze také testovat na zvířecích modelech arthritidy, resorpce kostí, endotoxinového šoku a funkce imunity, jak je popsáno v práci A. M. Badger a j., J. Pharmacol. Experimental Therapeutics,
279, str. 1453 až 1461 (1996), což je zde uváděno jako odkaz.
Inhibitory p38 nebo jejich, farmaceutické soli lze formulovat do farmaceutických prostředků pro podávání zvířatům nebo lidem. Tyto farmaceutické prostředky, které obsahují množství inhibitoru p38 účinné k ošetření nebo prevenci stavu způsobeného p38, a farmaceuticky přijatelný nosič, tvoří též součást předloženého vynálezu.
Výraz stav způsobený p38, jak je zde používán, znamená jakékoliv onemocnění nebo jiný škodlivý stav, o kterém je známo, že při něm p38 hraje roli. Jedná se o stavy, o nichž je
-52autoimunní proliferačni degenerativní onemocněni, onemocnění, mrtvice, srdeční ' záchvaty, známo, že jsou způsobeny nadprodukcí IL-1, THF, IL-6 nebo IL-8. Těmito stavy, jsou, bez omezení, zánětlivá onemocnění, onemocnění, destruktivní choroby kostí, infekční onemocnění, neuroalergie, reperfuse/ischemie u angiogenní onemocnění, hypoxie.
orgánů, vaskulární hyperplasie,- srdeční hypertrofie, thrombinem vyvolané agregace destiček a stavy spojené s prostaglandinovou endoperoxidasa synthasou-2.
Jako zánětlivá onemocnění, která lze ošetřovat nebo před kterými lze se chránit, aniž by však to bylo omezeno pouze na ně, lze uvést akutní pankreatitidu, chronickou pankreatítidu, astma, alergie a syndrom respirační úzkosti u dospělých.
Jako autoimunní onemocnění, která lze ošetřovat nebo před kterými lze se chránit, aniž by však to bylo omezeno pouze na ně, lze uvést glomerulonefritidu, revmatickou arthritidu, systemický lupus erythematodes, sklerodermii, chronickou thyreoiditidu, Gravesovo onemocnění, autoimunní gastritidu, diabetes, autoimunní hemolytickou anemii, autoimunní neutropenii, thrombocytopeníí, atopickou dermatitidu, chronickou aktivní hepatitidu, těžkou myasthenii, sklerosu multiplex, zánětlivé střevní onemocnění, vředovou kolitidu, Crohnovo onemocnění, psoriasu nebo onemocnění způsobené reakcí štěp - hostitel.
Jako destruktivní poruchy.kostí, které lze ošetřovat nebo před kterými lze se chránit, aniž by však. to bylo omezeno pouze na ně, lze uvést osteoporosu, osteoarthritidu a mnohočetný myelom způsobený poruchou kostí.
Jako proliferačni onemocnění, která lze ošetřovat nebo před kterými lze se chránit, aniž by však to bylo omezeno pouze na ně, lze uvést akutní myelogeriní leukémii, chronickou myelogenní leukémii, metastatický melanom, Kaposiho sarkom a mnohočetný mýelom.
-53* · · ♦ » · · · · • · · · · · · ··· • · · · · · · · · · » · · • « · · · · · · · ··«<»· ·« ·· ·· ··
Jako angiogenní nemocnění, která lze ošetřovat nebo před kterými lze se chránit, lze uvést pevné nádory, oční neovaskulitidu, infantilní hemangiomy.
Jako infekční nemocnění, která lze ošetřovat nebo před kterými lze se chránit, aniž by však to bylo omezeno pouze na né, lze uvést sepsi, septický šok a ShigelLosu.
Jako virová nemocnění, která lze ošetřovat nebo před kterými lze se chránit, aniž by však to bylo omezeno pouze na ně, lze uvést akutní hepatitídovou infekci (včetně hepatitidy A, hepatitidy B a hepatitidy C), HIV infekci a CMV retinitidu.
Jako neurodegenerativní onemocněni, která lze ošetřovat nebo před kterými se lze pomocí sloučenin podle vynálezu chránit, aniž by to však bylo omezeno pouze na ně, lze uvést, Alzheimerovo onemocnění, Parkinsonovo onemocnění, cerebrální ischemie nebo neurodegenerativní onemocnění způsobené traumatickým poraněním.
Stavy způsobené p38 také zahrnují ischemii/reperfusi U . mrtvice, srdeční záchvaty, myokardiální ischemii, hypoxii orgánů, vaskulární hyperplasii, kardiální hypertrofii a thrombinem vyvolanou agregaci'destiček.
Kromě toho jsou inhibitory p38 podle vynálezu také schopny inhibovat expresi vyvolanou prozánštlivými proteiny, jako je prostaglandinová endoperoxid synthasa-2 (PGHS-2), také označovaná jako cyklooxygenasa-2 (COX-2). Proto dalšími stavy způsobenými p38 jsou otoky, analgesie, horečka a bolesti, jako jsou neuromuskulární bolesti, bolesti hlavy, rakovinové bolesti, bolesti zubů a bolesti při arthritidě.
Onemocnění, která lze ošetřovat nebo proti kterým se lze bránit inhibitory p38 podle vynálezu, lze také vhodně zařadit do skupiny c.ytokinů (IL-1, TNF, IL-6, IL-8) , o kterých se předpokládá, že způsobují tato onemocnění.
Tak onemocnění nebo stavy způsobené IL-1 zahrnují revmatickou arthritidu,. osteoarthritidu, mrtvici, syndrom endotoxemie a/nebo toxického šoku, zánětliou reakci vyvolanou
-54·· · · 9 · ·· · ·
9 9 9 · · 9 »
999 9 9 ··· ' 9 99 9
999 99 99 999 999
9 9 9 99 · 9 9
9 9 99 9 9 ·9 99 99 endotoxinem, zánětlivé střevní onemocnění, atherosklerosu, degeneraci svalů, kachexii, tuberkulosu, psoriatickou arthritidu,' ' Reiterův syndrom, dnu, traumatickou arthritidu, synovitidu, diabetes, rubeolovou arthritidu, akutní pankreatické onemocnění β-buněk a Alzheimerovo onemocnění.
Onemocněni nebo stavy způsobené TNF zahrnují revmatickou arthritidu, rhevmatickou spondylitidu, osteoarthritidu, dnovou· arthritidu a další arthritické stavy, sepsi, septický šok, endotoxický šok, gramnegativní sepsi, toxický šokový syndrom, syndrom respiračních chorob dospělých, cerebrální malarii, chronická pulmonární zánětlivá onemocnění, silikosu, pulmonární sarkoidosu, choroby resorpce kosti, reperfusní poranění, reakce štěp - hostitel, odmítání aloimplantátú, horečku a myalgii způsobenou infekcí, kachexii sekundární na infekci, AIDS, ARC nebo zhoubné bujení, keloidní formace, tvorbu zjizvené tkáně, Crohnovo onemocnění,. ulcerativní kolitidu nebo pyrexii. Onemocnění způsobená TNF také zahrnují virově infekce, jako je HIV, GMV, chřipka a herpes, a veterinární virové infekce, jako jsou lentivirové infekce, včetně, avšak nikoliv pouze, koňského infekčního viru anemie, viru kozlí ' arthritidy, viru visna nebo viru maedi, nebo retrovirové infekce, včetně viru kočičího deficitu imunity, viru hovězího deficitu imunity nebo viru psího deficitu imunity. ;
Onemocnění a stavy způsobené IL-8 zahrnují onemocnění charakterisovaná masivní neurofilní infiltrací, psoriasa,' zánětlivé střevní onemocnění, astma, ledvinová reperfusní poranění, syndrom respiračních chorob dospělých, thrombosa a glomerulonefritida.
Kromě toho lze sloučeniny podle vynálezu použít topicky k ošetření nebo k prevenci stavů způsobených nebo exacerbovaných IL-1 nebo TNF. Těmito stavy jsou zanícené klouby, ekzém, psoriasa, zánětlivé stavy kůže, jako je spálení sluncem, j ako j e srdeční a • · • · ·
-55• · · zánětlivé oční stavy, jako je konjunktivitida, pyrexie, bolest a další stavy spojené se znánětem.
Kromě toho lze také sloučeniny podle vynálezu a jejich farmaceuticky přijatelné soli použít v prostředcích pro ošetřování nebo prevenci výše uvedených onemocnění.
Farmaceuticky přijatelnými solemi sloučenin podle vynálezu jsou soli odvozené od farmaceuticky přijatelných anorganických a organických kyselin a basí. Jako příklady vhodných solí s kyselinami lze uvést acetát, adipát, alginát, aspartát, -benzoát, benzensulf o.nát, citrát, kafrát, kafrsulfonát, hydrogensiran, butyrát, cyklopentanpropionát, diglukonát, dodecylsulfát, ethansulfonát, formiát, fumarát, glukolát, hydrobromid, . maleinát, hemisulfát, hydroj odid, malonát, glukoheptanoát, glycerofosfát, heptanoát, hexanoát, hydrochlorid,
2-hydroxyethansulfonát, laktát, methansulfonát, 2-naftalensulfonát, nikotinát, nitrát, oxalát, palmoát, pektinát, persulfát, 3-fenylpropionát, fosfát, pikrát, pivalát, propionát, salicylát, sukcinát, sulfát, tartarát, thiokyanát, tosylát a undekanoát. Další kyseliny, jako je kyselina oxalová, byť. nejsou samy o sobě farmaceuticky přijatelné, lze použít při přípravě solí použitelných jako meziprodukty pro přípravu sloučenin podle vynálezu a jejich farmaceuticky přijatelných solí s kyselinami. Soli odvozené od příslušných basí zahrnují soli s alkalickými kovy (například sodné a draselné-) , s kovy alkalických zemin (například amoniové soli a soli N-(alkyl)4+ soli, kde 4 atomy uhlíku. Vynález také jakýchkoliv basických popsaných sloučeninách, kvarternisací lze získat ve vodě nebo v oleji rozpustné nebo dispergovatelné produkty.
Jako farmaceuticky přijatelné nosiče, které se mohou použít v těchto farmaceutických prostředcích, lze uvést, aniž by to znamenalo omezení pouze na ně, . iontoměniče, oxid hořečnaté) ' a alkylová části mají předpokládá obsahuj ících az kvarternisací skupin v dusík
Touto • · • 4
• · 4 4 hlinitý, stearát hlinitý, lecithin, .sérové proteiny, jako je albumin lidského séra, pufrovací látky, jako jsou fosfáty, glycin, kyselinu sorbovou, sorbát draselný, směsi parciálních glyceridů nasycených rostlinných mastných kyselin, vodu, soli nebo elektrolyty, jako je protaminsulfát, sekundární hydrogenfosforečnan sodný, hydrogenfosforečnan draselný, chlorid sodný, soli zinku, koloidní oxid křemičitý, trisilikát horečnatý, polyvinylpyrrolidon,, látky na basi celulosy,
polyoxypropylenu, polyethylenglykol a tuk z vlny.
Prostředky podle vynálezu se mohou podávat orálně, parenterálně, inhalováním spreje, topicky, rektálně, nasálně, bukálně, vaginálně nebo přes implantovaný reservoár. Výrazem parenterálně se míní podkožní, intravenosní, intramuskulární, intraartikulární, intrasynoviální, intrasternální, intratekální, intrahepatální, intralesionální a intrakraniální injekce nebo infuse. Výhodně se prostředky podle vynálezu podávají orálně, intraperitoneálně nebo intravenosně.
Sterilními injikovatelnými formami prostředků podle vynálezu mohou být vodné nebo olej ovité suspense. Tyto suspense lze připravovat známými způsoby za použití vhodných dispergačních nebo smáčecích činidel a suspendačních činidel. Sterilními injikovatelnými přípravky mohou být také sterilní injikovatelné roztoky nebo suspense v netoxickém parenterálně přijatelném ředidle nebo rozpouštědle, například jako roztok v 1,3-butandiolu. Z těchto' přijatelných nosičů a rozpouštědel, která lze používat, lze uvést vodu, Ringerův roztok a isotonický roztok chloridu sodného. Kromě toho se běžně používají sterilní stálé oleje jako rozpouštědlové nebo suspendační prostředí. Pro tento účel lze použít jakýkoliv nedráždivý stálý olej, včetně syntetických monoglyceridů nebo diglyceridů. Při přípravě injikovatelných přípravků, jako jsou přírodní farmaceuticky přijatelné oleje, jako je olivový olej
57• 4 ·* «4 «4 «4 • 44« 444« • · · « · · · » 4 4 4. 4
4 4 4 4 4 4 « ·
444 4 4 »4 4 4 4 4 4 4 nebo ricinový olej, zejména v jejich polyoxyethylovaných formách, lze použít mastné kyseliny, jako je kyselina olejová a její glyceridové deriváty. Tyto olejové roztoky nebo suspense mohou také obsahovat ředidlo nebo dispergační činidlo s dlouhým alkoholovým řetězcem, jako je karboxymethylcelulosa nebo podobná dispergační činidla, která se běžně používají při přípravě farmaceuticky, přijatelných dávkových forem, včetně emulsí nebo suspensí. Pro účely přípravy těchto prostředků lze také použít další běžně používané povrchově aktivní látky, jako jsou Tweeny, Spaný a jiná emulgační činidla nebo činidla zvyšující biologickou snášitelnost běžně používaná při přípravě farmaceuticky přijatelných pevných, kapalných nebo jiných dávkových forem.
Farmaceutické prostředky podle vynálezu lze podávat orálně v jakékoliv orálně přijatelné formě, včetně, avšak nikoliv pouze takto, kapslí, tablet, vodných suspensí nebo roztoků. V případě tablet pro orální použití se jako nosiče obvykle používají laktosa a kukuřičný škrob. Typicky se také přidávají mazadla, jako je stearát hořečnatý. Pro' orální podávání ve formě kapslí jsou použitelnými ředidly laktosa a vysušený kukuřičný škrob. Jsou-li pro orální podávání požadovány vodné suspense, účinná látka se kombinuje s emulgačními nebo suspendačnimi činidly. V případě potřeby lze také přidávat určitá sladící, chuťová nebo barvicí činidla.
Alternativně lze podávat farmaceutické prostředky podle vynálezu ve formě čípků pro rektální podávání. Čípky lze připravit smísením účinné látky s vhodnou nedráždivou pomocnou látkou, která je pevná při teplotě místnosti, ale je kapalná při rektální teplotě a proto taje v konečníku, čímž se uvolňuje léčivá látka. Pomocnými látkami mohou být kakaové . máslo, včelí vosk a polyethylenglykoly.
Farmaceutické prostředky podle vynálezu lze také podávat topicky, zejména jestliže jsou plochy nebo orgány vyžadující toto ošetření přístupné topickou. aplikací··, včetně onemocnění
-58«·» ·· • 1» · » očí, kůže nebo nižšího intestinálního traktu. Pro každou z těchto ploch nebo pro každý orgán se vhodné topické přípravky připraví snadno.
Topická aplikace na nižší intestinální trakt se provádí pomocí rektálních šípkových přípravků (viz výše) nebo vhodným přípravkem ve formě střevního nálevu. Lze také použít topické trarísdermální náplasti.
Pro topické aplikace se farmaceutické prostředky mohou formulovat ve formě vhodné masti, která obsahuje účinnou složku suspendovanou nebo rozpuštěnou v jednom nebo více nosičích. Nosiče pro topické podávání sloučenin podle vynálezu zahrnují, avšak nejsou omezeny pouze na ně, minerální olej, kapalnou technickou vaselinu, bílou vaselinu, propylenglykol, polyoxyethylen, polyoxypropylenovou sloučeninu, emulgační vosk a vodu. Alternativně lze farmaceutické prostředky formulovat ve vhodné tekuté lékové formě nebo ve formě krému, které obsahují účinnou složku suspendovanou nebo rozpuštěnou v jednom nebo více farmaceuticky přijatelných nosičích. Vhodně nosiče zahrnují, avšak nejsou omezeny pouze na ně, minerální olej, sorbitanmonostearát, polysorbát 60, voskové cetylestery, cet.earylaikohol, 2-oktyldodekanol., benzylalkohol a vodu.
Pro oftalmické použití se farmaceutické prostředky mohou formulovat jako mikronisované suspense v isotonickém sterilním solném roztoku s upraveným pH nebo s výhodou jako roztoky v isotonickém solném roztoku s upraveným pH, bud' s ochrannými látkami, jako je benzylalkoniumchlorid, nebo bez nich. Alternativně se pro oftalmické použití mohou farmaceutické prostředky formulovat ve formě mastí, jako je vaselina.
Farmaceutické prostředky podle vynálezu lze také podávat formou nasálního aerosolu nebo inhalací. Tyto prostředky se připravují podle známých technik přípravy farmacetických přípravků a lze jé připravit jako roztoky v solném roztoku, za )
použití benzylalkoholu nebo jiných vhodných ochranných přísad, absorpčních promotorů .ke zvyšování biosnášitelnosti,
-59* «« «« »» «« *» ··· ♦ * « · ·· · ···· · 9 999 9 99 9 '9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9
9 9 9 Λ 9 ♦ * 9
9 9 9 · · * 9 · * · * * fluorovaných uhlovodíků a/nebo dalších běžných solubilisačních nebo dispergačních činidel.
Množství inhibitoru p38, které se má spojit s nosičovými materiály za vzniku jednotkové dávkové formy, se mění v závislosti na ošetřovaném hostiteli a na zvláštním způsobu podávání. S výhodou tyto prostředky se formulují tak, že se pacientovi, který přijímá tyto přípravky, podává dávka inhibitoru mezi 0,01 a 100 mg/kg tělesné hmotnosti na den.
Je samozřejmé, že specifická dávka a ošetřovací režim pro jednotlivé pacienty závisí na mnoha faktorech, včetně účinnosti specifické podávané sloučeniny, na věku, tělesné hmotnosti, celkovém zdravotním stavu, pohlaví, dietě, době podávání, rychlosti vylučování, kombinaci· léčiv a na názoru ošetřujícího lékaře a na vážnosti konkrétního onemocnění, které má být ošetřeno. Množství inhibitoru také závisí na specifické sloučenině v prostředku.
Dále se vynález týká způsobů ošetřování nebo prevence stavů způsobených p3 8, který spočívá v tom, že se pacientovi podává jeden z výše popsaných farmaceutických prostředků. Výrazem' pacient se zde míní živočich, s výhodou člověk.
S výhodou se tohoto způsobu používá k ošetřování nebo k prevenci stavů zahrnujících zánětlivá onemocnění, autoimunní onemocnění, destruktivní poruchy kostí, proliferační poruchy, infekční onemocnění, degenerativní onemocnění, alergie, reperfusi/ischemii u mrtvice, srdeční záchvaty, angiogenní poruchy, hypoxii orgánů, vaskulární 'hyperplasii, srdeční hypertrofii a thrombinem vyvolanou agregaci destiček.
Dále se vynález týká inhibitorů podle vynálezu pro použití k ošetřování nebo k prevenci onemocnění a stavů způsobených IL-1, IL-6, IL-8 nebo TNF. Tyto stavy jsou popsány výše.
V závislosti na jednotlivých stavech zprostředkovaných p38, které mají být ošetřeny nebo kterým má být předcházeno, lze obvykle podávat další léčiva, která se obvykle podávají
-60• · 4 ♦·♦ · # 4 · ♦ . 4 · » 4 ···» · 4· 4 • ' » · - .· 4 · 4 4 «4 4 ♦ 4 4 4 4 4 4 4 ·ϊ při- ošetřování nebo prevenci těchto stavů, spolu s inhibitory podle vynálezu. Například pro ošetřování proliferačních onemocnění lze kombinovat chemoterapeutické látky nebo další 'antiproliferační látky s inhibitory p38 podle vynálezu.
Tyto další látky lze podávat odděleně od prostředků obsahujících inhibitory p38 jako součást smíšeného dávkového režimu. Alternativně mohou být tyto .látky součástí jednotlivých dávkových forem smíšených s inhibitorem p38 do jednoho prostředku.
Pro objasnění vynálezu slouží následující příklady provedení vynálezu. Tyto příklady slouží pouze pro ilustraci předloženého výnálezu a ne pro jakékoliv jeho omezení.
-61Příklady provedení vynálezu
Příklad 1
9 9 9 9 9 • 9 9 9 9 9 9 9 99 9 9 9 9 9 9 9
9 • 9 9 9 9
9 9 9
9 • 9 • 9 · 9 9
9 O 9 9 9 9 ' · · 9 9 9 9
Příprava inhibitoru p38 - sloučeniny 1
Příklady přípravy několika sloučenin obecného vzorce Ia jsou uvedeny dále v následujících 4 příkladech.
A.
K suspensi amidu .sodného, 90% (1,17 g, 30 mmol) v bezvodém tetrahydrofuranu (20 ml) se při teplotě místnosti přidá roztok benzylkyanidu (2,92 g, 25,0 mmol) v bezvodém tetrahydrofuranu (10 ml) . Směs se míchá při teplotě místnosti po dobu 3 0 minut. K reakční směsi se přidá roztok 3,6-dichlor-. pyridazinu (3,70 g,. 25,0 mmol) v bezvodém tetrahydrofuranu (10 ml) . Reakční směs se míchá po dobu 30 minut a potom se zředí nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu'sodného. Potom se reakční směs extrahuje ethylacetátem. Vrstvy se oddělí a organická vrstva se promyje vodou, roztokem,chloridu sodného, vysuší se nad síranem horečnatým, přefiltruje se a zahustí se za sníženého tlaku.
Zbytek se čistí chromatografii na. silikagelu (eluční činidlo: 30% ethylacetát v n-hexanu), čímž se získá 3,71 g (16,20 mmol ~ 54 %) produktu ve formě bílé pevné látky.
-62Β.
Cl « t» • * · * »· · * »· · « · ♦ » » · »
K suspensi hydridu sodného, 95% (0,14 g, 6,0 mmol) v bezvodém tetrahydrofuranu (10 ml) se při teplotě místnosti přidá thiofenol (0,66 g, 6,0 ml) . Reakční směs se potom míchá po dobu 10 minut. K reakční směsi se přidá roztok produktu ze stupně A (1,31 g., 5,72 mmol) v absolutním ethanolu (20 ml). Reakční směs se potom zahřívá a míchá pod zpětným chladičem po dobu 1 hodiny. Ochlazena reakční směs se zahustí za sníženého tlaku. Zbytek se zředí roztokem 1 N hydroxidu sodného (10 ml), potom se extrahuje methylenchloridem. Organická fáze se promyje vodou, roztokem chloridu sodného, vysuší se nad síranem hořečnatým a zahustí se za sníženého tlaku.
Zbytek se čistí chromatografií na silikagelu (eluční činidlo: 20% ethylacetát v n-hexanu), čímž se získá 0,66 g (2,19 mmol ~ 40 %) produktu ve formě bílé pevné látky.
C.
l|
nh2 prekursor sloučeniny 1
-63• t · a· aa ·· · ♦ ar· ·«· aaaa a a·· a a a a· a aa a a a a·* aa *» aaa · · · aaa aaa a a a a a a a a ·· ·· aa aa
Směs produktu ze stupně B (0,17 g, 0,69 mrnol) a koncentrované kyseliny sirové (5 ml) se zahřívá na teplotu 100 °C po dobu 1 hodiny. Roztok se ochladí a upraví se na pH 8 nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného. Reakční' směs se extrahuje methylenchloridem. Organická vrstva se promyje vodou, roztokem chloridu sodného, vysuší se nad síranem horečnatým a zahustí se za sníženého tlaku, čímž se získá 0,22 g (0,69 mrnol ~ 100 %) prekursoru sloučeniny 1 ve formě oranžového oleje. XH NMR (500 MHz., CD3OD) d 7,7 (d) , 7,5 (d) ,
7,4 (m), 7,3-7,2 (m) .
D.
prekusor sloučeniny 1
Roztok prekursoru sloučeniny 1 ze stupně C (0,22 g, 0,69 mrnol) a dimethylacetalu N,N-dimethylformamidu (0,18 g, 1,5 mrnol) v toluenu (5 ml) se zahřívá na teplotu 100 °C po dobu 1 hodiny. Po ochlazení' se vzniklá pevná látka odfiltruje a rozpustí se v teplém ethylacetátu. Produkt se vysráží přidáváním diethyletheru po kapkách. Potom se produkt odfiltruje a promyje se diethyletherem, čímž se získá 0,038 g sloučeniny 1 (která je uvedena v tabulce 1)' ve formě žluté pevné látky. XH NMR (500 MHz, CDC13) d 8,63 (s) , 7,63-7,21 (m) , 6,44 (d).
-64Příklad 2
Příprava inhibitoru p38 - sloučeniny 2
A.
N
První meziprodukt uvedený způsobem jako v příkladu 1A acetonitrilu, čímž se získá 1,4 g
B.
9 ·
9 9
9 99
9 9 * 9 »
9 9 9 9
9 . 9 9
9 9
9 9 99
9 9 9 '9 . 9 9
N
9« • 9 9 9
9 9 9 výše se připraví podobným za použití 4-fluorfenyl(5,7 mmol, ~ 15 %) produktu.
Výše uvedený meziprodukt se jako v příkladu 1B. Získá se 0,49 g připraví podobným způsobem (1,5 mmol, 56 %) produktu.
N.
prekursor sloučeniny 2
-654 ·4
4 ♦ »♦· »·» 4444 4 4
444,4 4 44' · 4 44 '44
Výše uvedený meziprodukt se připraví podobným způsobem. jako v příkladu 1C. ,, Získá se 0,10 g (0,29 mmol, 45 %) prekursoru sloučeniny 2. τΗ NMR (500 MHz, CDCl3) d 7,65-7,48 (m) , 7,47-7,30 (m) , 7,29-7,11 (m) , 7,06 - 6,91 (m) , 5,85 (s, široký).
D.
Sloučenina 2 (která je uvedena v tabulce 1) se připraví z prekursoru sloučeniny 2 podobným způsobem jako v příkladu ID. Získá se 0,066 g produktu. XH NMR (500 MHz, CDCl3) d 8,60 (s) , 7,62-7,03 (m), 6,44 (d).
Příklad 3
Příprava inhibitoru p38 - sloučeniny 6 A.
N
První meziprodukt při přípravě sloučeniny 6 se připraví podobným způsobem, jak je popsáno v příkladu 1A, za použití
-66• ·· • * ♦
'· ♦ * » • « · · * « * • ·♦*
2,6-dichlorfenylacetonitrilu, čímž 28 %) produktu.
B.
se získá 2,4 9 g (8,38 mmol,
N
ci
Následující stupeň přípravy sloučeniny 6 se provádí podobným způsobem, jak je popsáno v příkladu 1B. Získá se 2,82 g (7,6 mmol, 91 %) produktu.
C.
N
Cl
O N H2
Konečný meziprodukt, prekursor sloučeniny 6, se připraví podobným způsobem, jak je popsáno v příkladu 1C. Získá se 0,89 g· (2,3 mmol), 85 %) produktu. Ή NMR (500 MHz, CD3OD) d 7,5-7,4 (dd) , 7,4 (m), 7,3 (d), 7,2 (m), 7,05 (d).
D.
sloučenina 6 prekursor sloučeniny 6
4 «4 4 « 4 4 44 44
4 · 4 • • 4 4 4 4
4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4
4 · 4 • 4 4 · 4 4
44 44 44 4 4 44 44
Konečný stupeň přípravy sloučeniny 6 (která je uvedena v tabulce 1) se provádí podobně, jak je popsáno v příkladu ID. Získá se 0,06 g produktu. NMR (500 MHz, CDC13) d 8,69 (s) ,
7,65-7,59 (d) , 7,58-7,36 (m) , 7,32-7,22 (m) , 6,79 (d) , 6,53 (d) .
Příklad 4
Příprava inhibitoru p38 - sloučeniny 5
A.
První meziprodukt při. přípravě sloučeniny 5 se připraví podobným způsobem, jak je popsán v příkladu IA, za použití 2,4-dichlorfenylacetonitrilu, čímž se . získá 3,67 g (12,36 mmol, 49 %) produktu.
B.
Druhý meziprodukt se připraví podobným způsobem, jak je popsán v příkladu IB. Získá se 3,82 g (9,92 mmol, 92 %) produktu. C.
4 «4 44 4 4 44 44
• 4 4 4 4 4 4 4 4
4 444 • 4. • 4« 4 4 • 4
4 4 4 4 4 4 4 4 4
44 44 44 4 · 4 4 44
prekursor sloučeniny 5
Konečný meziprodukt, prekursor sloučeniny 5, se připraví podobným způsobem, jak je popsán v příkladu IC. Získá se 0,10 g (0,24 mmol, 92 %) produktu. NMR (500 MHz, CD3OD) d 7,9 (d) , 7,7 (d) , 7,6-7,5 (dd) , 7,4-7,3 (m) , 2,4 (s) .
D.
sloučenina 5
Konečný stupeň při přípravě sloučeniny 5 (která je uvedena v tabulce' 1) se provádí podobným způsobem, jak je popsán v příkladu ID. Získá se 0,06 g produktu. XH NMR (500 MHz, CDC13) d 8,64 (s) , 7,51-7,42 (m) , 7,32-7,21 (m) , 6,85 (d) , 6,51 (d), 2,42 (s).
Další sloučeniny obecného vzorce Ia podle vynálezu se mohou připravit, podobným způsobem za použití příslušných výchozích sloučenin.
Příklad 5
Příprava inhibitoru A p3 8 - sloučeniny obecného vzorce Ib
Příklad přípravy inhibitoru p38 podle vynálezu obecného vzorce Ib je uveden níže.
69»· ·· r » · * » · · ·
A.
/=\_c, \ v c stupeň 1 1)·base ' \
Cl / NC
2)
Clrx
Cl
Y_/ ' ' \ /1 \
NC N=\
Cl
Cl
K suspensi amidu sodného, 90% (1,1 ekv) v bezvodém tetrahydrofuranu se při teplotě místnosti přidá roztok 2,6-dichlorbenzylkyanidu (1,0 ekv) v bezvodém tetrahydrofuranu. Směs se míchá při teplotě místnosti po dobu 30 minut. K reakční směsi se přidá.roztok 2,6-dichlorpyridinu (1 ekv) v bezvodém tetrahydrofuranu. Reakce se monitoruje pomocí TLC a jakmile je skončena, reakční směs se zředí nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného. Potom se reakční směs extrahuje ethylacetátem. Vrstvy se oddělí a organická vrstva se promyje. vodou, roztokem chloridu sodného, vysuší se nad síranem hořečnatým, přefiltruje se a zahustí se za sníženého tlaku. Zbytek se čistí chromatografií na silikagelu, čimž se získá čistý produkt.
Cl /“V-Cl Y_Z c ' / \ // \ /—\ / NC N=\
Cl /—\_cl f c'_ / v /—\ / NC Ν=ξ
Cl
K roztoku 4-fluorbrombenzenu (1 tetrahydrofuranu se při teplotě -78 °C ekv) v bezvodém přidá terc.butyllithium (2 ekv, roztok v hexanech) . Reakční směs se potom
-70• 99 ·
• ··· • •9 9999 · 9
9 9 9 9 9 9 » 9 99 99 míchá po dobu 3 0 minut. K reakční směsi se přidá roztok produktu ze stupně A (1 ekv) v bezvodém THF. Reakční směs se potom monitoruje a pomalu se. nechá ohřát na teplotu místnosti. Reakční směs se ochladí vodou a potom se extrahuje methylenchloridem. Organická fáze se promyje vodou, roztokem chloridu sodného, vysuší se nad síranem hořečnatým a zahustí se za sníženého tlaku. Zbytek se chromatografuje na silikagelu, čímž se získá produkt..
C. '
Cl / \_c, \ / Cl ^~\ //~\ /“Vc,
Λ // _
NC .0:
-/_W
-\ \-/
NH\_ // \ \__/ \
Směs produktu ze stupně B a koncentrované kyseliny sírové se zahřívá na teplotu 100 °C po dobu 1 hodiny. Roztok se ochladí a upraví se na pH . 8 nasyceným roztokem ,hydrogenuhličitanu sodného. Reakční směs se extrahuje methylenchloridem. Organická vrstva se promyje vodou, roztokem chloridu sodného, vysuší se nad síranem hořečnatým a ,.zahustí se za sníženého tlaku, čímž se získá produkt. Konečný produkt se čistí rychlou chromatografii na silikagelu.
-71· · ···· · · • · · · · · ·· ··
D.
Cl /~\_cl // /—χ //~\
0=( N=/
ΝΠ2 \_/
inhibitor p3 8
Roztok produktu ze stupně C (1 ekv) a dimethylacetalu N,N-dimethylformamidu (2 ekv) v toluenu se zahřívá na teplotu 100 °C po dobu 1 hodiny. Po ochlazení se vzniklá směs přefiltruje a rozpustí se v teplém ethylacetátu. Produkt se vysráží přidáváním diethyletheru po kapkách. Produkt se potom odfiltruje a' promyje se diethyletherem, čímž se získá inhibitor p38 obecného vzorce Ib. Konečný produkt se čistí chromatografii na silikagelu.
Další sloučeniny obecného vzorce Ib podle vynálezu se mohou připravit podobným způsobem za použití příslušných výchozích sloučenin.
Příklad 6
Příprava inhibitoru p38 - sloučeniny 103
-Ί2-
• · * · • • · * ♦
• *·· • · C · • ·
• · · • '· • · • •
·♦ ·· • 0 • · 4· ··
Tento J příklad popisuje typickou přípravu sloučeniny obecného vzorce Ic. .
A.
Inhibitor p38, sloučenina 12, se připraví podobně jako v příkladu 4, s výjimkou toho, že se ve stupni B použije 4-fluorthiofenyl.
B.
Sloučenina 12 se rozpustí v bezvoděm THF (5 ml) při teplotě místnosti. K tomuto roztoku se přidá diisobutylaluminiumhydrid (1 M roztok v toluenu, 5 ml, 5 mmol) a reakční směs se míchá při teplotě místnosti po dobu 1 hodiny. Reakční směs- se potom zředí ethylacetátem a ochladí se přidáním Rochellovy soli. Vrstvy se oddělí a organická vrstva se isoluje, promyje se vodou, roztokem chloridu sodného, vysuší se nad síranem hořečnatým a přefiltruje se, čímž se získá surová sloučenina 103. Surový produkt se chromatografuje na silikagelu elucí 2% methanolem v methylenchloridu. Takto se získá čistá sloučenina 103 (210 mg, výtěžek 50 %) : *H NMR (500
MHz, CDC13) 7,51 (m, IH) , 7,38 (d, 2H) , 7,20 (t, 2H) , 7,08 (t, 2H), 6,70 (široký s, IH), 6,30 (dd, 2H), 5,20 (s, 2H).
Příklad 7
Příprava inhibitoru p38 - sloučeniny 201
* 44 * «> 4 · ·· 44
• · * • 4 • • 4 4 ' 4
• 44« • 9 >44 • · 4 9
• · · 4 9 4 4 4 9
• 44 4 * ' 99 »* • 4 9 9.
A.
Ph = fenyl
Výchozí nitril uvedený výše .(5,9 g, 31,8 mmol) se rozpustí při teplotě místnosti v DMF (20 ml) . Potom se přidá hydrid sodný (763 mg, 31,8 mmol) a vznikne světle žlutě zbarvený roztok. Po 15 minutách se přidá roztok 2,5-dibrompyridinu (5,0 g, 21,1 mmol) v DMF (10 ml) a potom palladiumtetrakis(trifenylfosfin) (3 mmol). Roztok se potom zahřívá k varu pod zpětným chladičem po dobu 3 hodin. Reakční směs se ochladí na teplotu místnosti a zředí se ethylacetátem. Organická vrstva se potom isoluje, promyje se vodou a potom roztokem chloridu sodného, vysuší se nad síranem horečnatým, přefiltruje se a odpaří se za sníženého tlaku na surový olej. Rychlou chromatografií na koloně se 10% ethylacetátem v hexanu eluuje požadovaný produkt (5,8 g, 84 %) ve formě špinavě bílé pevné látky.
B.
Bromid připravený ve stupni A (194,8 mg, 0,57 mmol) se rozpustí v xylenu (15 ml) . K tomuto, roztoku se přidá
-74··' »·
9 9 9 9 • ··· · · 999
9 9 9 9 9 9 9 9 • · 9 9 · · 9 ··· 9· ·· ··
9
9
999 ' 99 9 9
9
999 thiofenylsGannan (200 μΐ, 587 mmol) a palladiumtetrakis(trifenylfosfin) (25 mg) . Roztok se zahřívá k varu pod zpětným chladičem přes noc, ochladí se, přefiltruje se a odpaří za sníženého tlaku. Surový produkt se chrornatografuje na silikagelu a eluuje se methylenchloridem, čímž se získá čistý produkt (152 mg, 72 %) ve formě žlutého oleje.
C.
sloučenina 201
Nitril připravený ve stupni B (1,2 g, 3,37 mmol) se rozpustí v ledové kyselině octové (30 ml). K tomuto roztoku se přidá voda (120 μΐ, 6,67 mmol) a potom chlorid titaničitý (760 μΐ, 6,91 mmol), čímž se směs stane exotermní. Roztok se potom zahřívá k varu pod' zpětným chladičem po dobu 2 hodin, ochladí se a naleje se do 1 N HCl. Vodná vrstva se extrahuje methylenchloridem. Organická vrstva se znovu promyje 1 N NaOH, vysuší se nad síranem hořečnatým a přefiltruje se přes ucpávku silikagelu. Ucpávka se nejprve eluuje methylenchloridem, čímž se odstraní nezreagovaná výchozí látka, a potom ethylacetátem, čímž se získá sloučenina 201. Ethylacetát se odpaří, čímž se získá čistá sloučenina 201' (1,0 g, 77 %).
Příklad 8
Příprava inhibitoru p38 - sloučeniny 110
-75A.
Výchozí nitril (3,76 g, 11,1 mmol) se nejprve rozpustí v ledové kyselině octové (20 ml) . K tomuto roztoku se přidá chlorid titaničitý (22,2 mmol) a voda (22,2 mmol) a směs se zahřívá k varu pod zpětným chladičem po dobu 1 hodiny. Reakční směs se potom ochladí a zředí se směsí vody a ethylacetátu. Organická vrstva se potom isoluje, promyje se roztokem chloridu sodného a 'vysuší se nad síranem hořečnatým. Organická vrstva se potom odfiltruje a odpaří se za sníženého tlaku. Vzniklý surový produkt se chromatografuje na silikagelu a eluuje se 5% methanolem v methylenchloridu, čímž se získá čistý produkt ve formě žluté pěny (2,77 g, 70 %).
B.
Amid připravený ve stupni A (1,54 g, 4,3 mmol) se rozpustí v toluenu (20 ml) . Potom se přidá dimethylacetal N,N-dimethylformamidu (1,53 g, 12,9 mmol), vzniklý roztok se zahřívá po dobu 10 minut, načež se nechá ochladit na teplotu místnosti. Reakční směs se potom odpaří za sníženého tlaku a zbytek se chromatografuje na silikagelu a eluuje se 2 až 5% methanolem v methylenchloridu. Získaná látka se potom rozpustí v horkém ethylacetátu. Roztok se nechá vychladnout, čímž
-769 9 · · · *· ·« · 9 9 9 • ··· 9 9 99 9
9 9 9 9 · · ·
9 9 9 9 9 9
9 9 9 9 9 9 9 vykrystaluje čistý produkt ve formě,žluté pevné látky (600 .40 %). Další produkt (-800 mg) se získá z matečného louhu.
C.
mg,
Bromid ze stupně B (369 mg, 1 mmol) se rozpustí v THF (10 ml). Potom se přidá diisobutylaluminiumhydrid (1,0 M roztok, 4 mmol) , reakční směs se míchá při teplotě místnosti po dobu 10 minut a potom se směs ochladí methanolem (1 ml) . Pak se přidá nasycený roztok1 Rochellovy soli a směs se extrahuje ethylacetátem. Organická vrstva se isoluje, vysuší se nad síranem hořečnatým, odpaří se a zbytek se chromatografuje na silikagelu a eluuje se 1 až 3% methanolem v methylenchloridu, čímž se získá jasně oranžová pevná látka (85 mg, výtěžek 23 %) .
D.
sloučenina 110
Bromid připravený ve stupni C (35,2 mg, 0,1 mmol) se rozpustí v xylenu (12 ml). K tomuto roztoku se přidá thiofenol (0,19 mmol) a potom tributylcínmethoxid (0,19 mmol). Vzniklý roztok se zahřívá k varu pod zpětným chladičem po dobu 10 minut, načež se přidá palladiumtetrakis(trifenýlfosfin) (0,020
-77mmol) . Reakční směs se z-ahřívá a .monitoruje se na vymizení bromidové výchozí látky. Potom se reakční směs ochladí na teplotu místnosti a proleje se ucpávkou silikagelu. Ucpávka se eluuje nejprve methylenchloridem, čímž se odstraní nadbytek cínového reakčního činidla a potom 5% methanolem v ethylacetátu, čímž se eluuje inhibitor p38. Filtrát se zahustí a potom se znovu chromatografuje na silikagelu za použití 5% methanolu v ethylacetátu jako elučního činidla, čímž se získá čistá sloučenina 110 (20 mg, 52 %).
Příklad 9
Příprava inhibitoru p38 - sloučeniny 202
A.
Pd(PPh3)4
Výchozí nitril (2,32 g, 12 mmol) se při teplotě místnosti rozpustí v DMF (10 ml) . Potom se přidá hydrid sodný (12 mmol) a vznikne jasně žlutě zbarvený roztok. Po 15 minutách se přidá roztok 2,6-dibrompyridinu (2,36 g, . 10 mmol) v DMF (5 ml) a potom palladiumtetrakis(trifenylfosfin) (1,0 mmol). Roztok se potom zahřívá k varu pod zpětným chladičem po dobu 3 hodin. Pak se reakční směs ochladí na teplotu místnosti a zředí se ethylacetátem. Organická vrstva, se isoluje, promyje se vodou a roztokem chloridu sodného, vysuší se nad síranem hořečnatým,
-78AA ·* ··
A A A A
A A A A ♦ A A · • A A A * · *
A A A A A « ·· A· AA přefiltruje se a odpaří se za sníženého tlaku, čímž se získá surový olej. Rychlou chromatografií na koloně se eluuje 10% ethylacetátem v hexanu produkt (1,45 g, 42 %) ve .formě bílé pevné látky.
3.
Br fenylboronová kyselina
Ph(P3)4
Bromová sloučenina připravená ve stupni A (1,77 g, 5,2 mmol) se rozpustí v toluenu (20 ml) a vzniklý roztok se odplyní. V atmosféře dusíku se přidá roztok fenylboronové kyseliny (950 mg, 7,8 mmol) v ethanolu (4. ml) a roztok uhličitanu sodného (1,73 g, 14 mmol) ve vodě (4 ml) . Reakční směs se zahřívá k varu pod zpětným chladičem po dobu 1 hodiny a potom se ochladí na teplotu místnosti. Reakční směs se zředí ethylacetátem a promyje se vodou a roztokem chloridu sodného. Organická . vrstva se potom vysuší síranem hořečnatým, přefiltruje se a zahustí se za sníženého tlaku. Zbytek se čistí na silikagelu a eluuje se 30% ethylacetátem v -hexanu, čímž se získá produkt ve formě bílé pevné látky (1,56 g, 88 %) ·
-79c.
Nitril ze stupně B (700 mg, 2,07 mmol) se rozpustí v koncentrované.kyselině sírové (10 ml) a zahřívá se na teplotu 80 °C po dobu 1 hodiny. Reakční směs se potom ochladí na teplotu místnosti a pH se upraví na 8 za použití 6 N hydroxidu sodného. Směs se pak extrahuje ethylacetátem. Organická vrstva se isoluje, vysuší se síranem hořečnatým a odpaří se za sníženého tlaku, čímž se získá sloučenina 202 ve formě žlutě pěny (618 mg, 84 %) .
Příklad 10
Příprava sloučeniny 410
F F
Plamenem vysušená 100 ml baňka s kulatým dnem se naplní 2,28 g (93,8 mmol) kousků hořčíku a 50 ml bezvodého tetrahydrofuranu. Přidá se jeden krystal jodu, čímž vznikne světle hnědé zabarvení. K tomuto roztoku se přidá 1,5 ml z 10,0 ml (79,1 mmol) vzorku 2-brom-5-fluortoluenu. Roztok se zahřívá k varu pod zpětným chladičem. Hnědé zabarvení zeslábne a var se udržuje až se vnější zdroj tepla odstraní, což ukazuje tvorbu Grignardova činidla. Když var skončí, .přidá se
-80• 44
další 1,0 až 1,5 ml dávka bromidu, čímž vznikne prudký var. Postup se opakuje, až se přidá všechen bromid. Olivově zelený roztok se zvnějšku zahřívá k varu po dobu 1 hodiny, čímž se zajistí ukončení reakce. Roztok se ochladí v lázni s. ledem a injekční stříkačkou se k němu přidá 9,3 ml (81,9 mmol) trimethylborátu. ve 100 ml tetrahydrofuranu při teplotě -78 °C. Po přidání Grinardova činidla se baňka odstraní z chladicí lázně a roztok se míchá přes noc při teplotě místnosti. Šedobílá suspense se naleje do 300 ml vody a těkavé látky se odpaří za sníženého tlaku. Přidá se HCl (400 ml 2 N roztoku) a mléčně bílá směs se míchá při teplotě místnosti po dobu 1 s hodiny. Vysráží se bílá pevná látka. Směs se extrahuje diethyletherem a organický, extrakt se vysuší (MgSO4) a odpaří se za sníženého tlaku, čímž se získá 11,44 g (94 %) boronovš kyseliny ve formě bílé pevné látky.
Br
Br
Br
Ve 100 ml baňce s kulatým dnem se rozpustí 7,92 g (33,4 mmol) 2,6-dibrompyridinu v 50 ml bezvodého toluenu, . čímž vznikne čirý bezbarvý roztok. Přidá se 4-fluor-2-methylbenzenboronová kyselina (5,09 g, 33,1 mmol) připravená ve stupni A, čímž vznikne bílá suspense. Pak se přidá uhličitan thalia (17,45 g, 37,2 mmol) a potom katalytické množství (150 mg) Pd(PPh3)4. Směs se zahřívá k varu pod zpětným chladičem přes noc, ochladí se a přefiltruje se přes sloupec silikagelu. Silikagel se promyje CH2C12 a filtrát se odpaří, čímž se získá bílá pevná látka. Ta se rozpustí v minimálním množství 50% CH2C12 v hexanu a ehromatografuje se na krátké koloně silikagelu za použití 30% CH2C12 v hexanu, čímž se získá 6,55 g (74 %) 2-brom-6-(4-fluor-2-methylfenyl)pyridinu ve formě bílé pevné látky.
-81c.
» *· ♦ ♦ · • · · «· 4·
V 50 ml baňce s kulatým dnem se rozpustí 550 mg (2,07 mmol) 2-brom-6-(4-fluor-2-me'thylfenyl) pyridinu připraveného ve stupni B v 30 ml bezvodého tetrahydrofuranu, přičemž se vytvoří čirý bezbarvý roztok. Přidá se 2,6-difluoranilin (2,14 ml, 2,14 mmol) a potom 112 mg (2,79 mmol) 50% NaH suspense v minerálním oleji. Během mírně exútermní reakce se pozoruje vývin plynu. Roztok se zahřívá k varu pod zpětným chladičem přes noc a potom se ochladí. Reakční směs se naleje do 10% NH4C1 a extrahuje se CH2C12. Organický extrakt se vysuší (MgSO4) a odpaří se za sníženého tlaku, čímž se získá hnědý olej, t
který je směsí produktu a výchozí látky.. Směs se chromatografuje na krátké koloně silikagelu za použití 50% CH2C12 v hexanu, čímž se získá 262 mg (40 %) 2-(2,6-difluorfenyl)-6-(4-fluor-2-methylfenyl)pyridinu ve formě bezbarvého oleje.
D.
V 100 ml baňce s kulatým dnem se rozpustí 262 mg . (834 mmol) 2-(2,6-difluorfenyl)-6-(4-fluor-2-methylfenyl)pyridinu připraveného ve stupni C v 30 ml bezvodého CHC13 a vznikne čirý bezbarvý roztok. Přidá se chlorsulfonylisokyanát (1,0 ml, 11,5 • · · · · . ο» · ···· · · · · · · ·
-82- : :··..: : ······« » ··» «* 9 ·> < · ·»·· mrnol) a světle žlutý roztok se míchá při teplotě místnosti přes noc. Přidá se voda (—30 ml), čímž se reakce stane mírně exotermní a vyvíjí se intensivně plyn. Po míchání přes noc'se organická vrstva, oddělí, vysuší se (MgSOj a odpaří se za sníženého tlaku, čímž se získá hnědý olej, který je směsí produktu a výchozí látky. Tato směs se chromatografuje na krátké koloně silikagelu zá použití 10% EtOAc v CH2C12. Isolovaná výchozí látka se znovu podrobí reakčním podmínkám a vyčistí se stejným způsobem, čímž se získá celkově 205 mg (69 %) močoviny ve formě bílé pevné látky.
Příklad 11
Příprava sloučeniny 138
sloučenina 138
Sloučenina 103 (106 mg, 0,25 mrnol) se rozpustí v THF (0,5 ml) a k tomuto roztoku se přidá triethylamin (35 μΐ, 0,25 mrnol) a potom nadbytek formaldehydu (37% vodný roztok, 45 mg). Reakční směs se nechá míchat při teplotě místnosti přes noc. Reakční směs se. potom odpaří v rotačním odpařováku za sníženého tlaku a zbytek se rozpustí v methylenchloridu a aplikuje se na rychlou kolonu se silikagelem. Kolona se eluuje 2% methanolem v methylenchloridu, čímž se získá čistý produkt (78 mg, výtěžek 70 %).
-83«· · « · · * · . Σ • ··· · · ··· 4 · ·. * > « · · · · » ·« ··· ··· ··· · · · · · Α * « · » « 4 · * * * · · * '*
Příklad 12
Příprava profarmaka sloučeniny 103
A.
sloučenina 138 fosfátové profarmakum sloučeniny 103
Sloučenina 138 (1 ekvivalent) se.rozpustí v methylenchloridu a k roztoku se přidá triethylamin (1 ekvivalent) a potom dibenzylfosfonylchlorid (1 ekvivalent). Roztok se míchá při teplotě místnosti a monitoruje se pomocí TLC na spotřebu výchozí' látky. Methylenchloridová vrstva se potom zředí ethylacetátem a promyje se 1 N HCl, nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným roztokem NaCl. Organická vrstva se potom vysuší, odpaří se v rotačním odpařováku a surový produkt se čistí na silikagelu. Čistý, produkt se potom rozpustí v methanolu a dibenzylesterové chránící skupiny se odstraní 10% palladiem na uhlí v atmosféře vodíku. Když je reakce skončena, katalysátor se odfiltruje přes celit a filtrát se odpaří, čímž se získá fosfátový produkt.
Sloučenina 103 (210 mg., 1,05 mmol) se rozpustí v THF (2 ml) a ochladí se v atmosféře dusíku na -50 °C. K. tomuto roztoku, se přidá lithiumhexamethyldisilazan (1,1 mmol) a potom chloracetylchlorid (1,13 mmol). Reakční směs se odstraní z chladící lázně a nechá se ohřát na teplotu místnosti, načež se zředí ethylacetátem a ochladí se vodou. Organická vrstva se promyje roztokem chloridu sodného, vysuší se a odpaří se v rotačním odpařováku k suchu. Surový produkt se čistí rychlou chromatografii na silikagelu za použití 25% ethylacetátu v hexanu jako elučriího činidla, čímž se získá 172 mg (70 %) čistého požadovaného produktu, který se použije takový, jaký je, v;následujících reakcích.
C.
dimethylaminoacetalové profarmakum sloučeniny 103
-85«· ·♦ ·· ·· ·· * «♦· · · * * ··« · *··· · · · * • · · · · · · · ··· »·· , ·· *·«« · · ··· ·« ·♦ «» ·♦ ··
Chloracetylová sloučenina se rozpustí v methylenchloridu a nechá se reagovat s nadbytkem dimethylaminu. Reakce se monitoruje pomocí TLC a jakmile je skončena, všechny těkavé látky se odstraní, čímž se získá požadovaný produkt.
Příklad 13 • Příprava sloučenin 34 a 117
A.
NO2
Nitril z příkladu 5 stupně A (300 mg, 1,0 mmol) se rozpustí v ethanolu (10 ml) a k tomuto roztoku se přidá thiomočovina (80,3 mg, 1,05 mmol). Reakční směs se zahřívá k varu pod zpětným chladičem po dobu 4 hodin a potom TLC ukazuje, že veškerá výchozí látka je spotřebována. Reakční směs se ochladí a všechny těkavé látky se odstraní za sníženého tlaku a zbytek se rozpustí v acetonu (10 ml).
K roztoku se potom přidá 2,5-dif'luornitrobenzen (110 μΐ, 1,01 mmol) a pak uhličitan draselný (200 mg, 1,45 mmol) a voda (400 μΐ) . Reakční směs se nechá míchat při teplotě místnosti přes noc. Potom se reakční směs zředí methylenchloridem (25 ml) a přefiltruje se přes vatovou ucpávku. Všechny těkavé látky se odstraní .za sníženého tlaku a zbytek se čistí rychlou chromatografií na silikagelu elucí gradientem od 10% až 25% ethylacetátu v hexan.u, čímž se získá požadovaný produkt (142 mg, 3 3 %) .
• » · * 44 4 • 4 4 4 4 '4 4 44 4
• ·»» • 4 • 4 · • 4 •
• · · • · a · 4 • 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4«
Β.
Νθ2 Νθ2
Nitrilový produkt ze stupně A . (142 mg, 0,33 mmol) se smísí s koncentrovanou kyselinou sírovou (2 ml), zahřívá se k varu pod zpětným chladičem po dobu 1' hodiny a potom se nechá ochladit na teplotu místnosti. Potom se. směs zředí ethylacetátem a opatrně se neutralisuje nasyceným vodným roztokem uhličitanu draselného. Vrstvy se rozdělí a organická vrstva se promyje vodou, roztokem chloridu sodného a vysuší se nad síranem hořečnatým. Směs se přefiltruje a odpaří se k suchu. Zbytek se, použije v následujícím stupni bez dalšího čištění (127 mg, výtěžek 85 %) ...
C.
NO2
NOj sloučenina 34
Amid ze stupně B (127 mg, 0,28 mmol) se rozpustí v THF (3 ml) a k tomuto roztoku se přidá dimethylacetal dimethylformamidu (110 μΐ, .0,83 mmol). Reakční směs se zahřívá k varu pod zpětným chladičem po dobu 5 minut a potom se ochladí na
-87teplotu místnosti. Všechny těkavé látky se odstraní za sníženého tlaku a zbytek se čistí rychlou chromatografií na silikagelu elucí 2,5% methanolem v methylenchloridu, čímž získá čistá požadovaná sloučenina 34 (118 mg, 92 %).
D.
se
NO2
sloučenina 34 nh2 sloučenina 117
K roztoku sloučeniny 34 (100,8 mg, 0,22 mmol) v benzenu (3,4 ml) se přidá roztok chloridu nikelnatého hexahydrátu (103 mg, 0,44 mmol) ve směsi benzenu a methanolu (0,84 ml/0,84 ml) a vzniklý roztok se ochladí na 0 °C. K tomuto roztoku se potom přidá borohydrid sodný (4 9 mg, 1,3 mmol). Reakční směs se míchá, přičemž se nechá ohřát na teplotu místnosti. Potom se reakční směs odpaří za sníženého tlaku a zbytek se čistí rychlou chromatografií elucí 2% methanolem v methylenchloridu, čímž se získá čistý požadovaný produkt, sloučenina 117, (21 mg, výtěžek 25 %).
Příklad 14
Příprava sloučenin 53 a 142
Á.
F
-88• 9 9 · · · 9 · · • 999 9 9999
9 9 9 ·9 9
999 99 9 9 99 • 9 99
9 9 ♦
9 9 9
9
9 99
Produkt naznačený ve výše uvedené reakci se syntetisuje za použití postupu podle příkladu 1 stupně B za použití chlorpyridazinu (359 mg, 1,21 mmol) a 2,4-difluorthiofenolu (176 mg, 1,21 mmol). Produkt se získá po rychlé chromatografii na silikagelu (451 mg, 92 %) .
B.
F
F
Výše uvedená reakce se provádí postupem popsaným v příkladu 1 stupni C za použití 451 mg výchozí látky a 5 ml koncentrované kyseliny sírové, čímž se získá uvedený produkt (425 mg, 90 %).
C.
F F sloučenina 53
Výše uvedená reakce se provádí postupem popsaným v příkladu 1 stupni D za použití výchozího amidu (410 mg, 0,96 mmol) a dimethylacetalu dimethylformamidu (3 mmol). Reakční směs se zahřívá na teplotu 50 °C po dobu 30 minut a pak se zpracuje dříve popsaným způsobem. Získá se sloučenina 53 (313 mg, 75 %) .
-89D.
*φ ’φ* • · ·
CI
C
F
F
F sloučenina 53 sloučenina 142
Sloučenina 34 (213 mg, 0,49 mmol) se rozpustí v THF (10 ml), ochladí se na 0 °C a k tomuto roztoku se přidá boran v THF (1 M, 0,6 mmol) . Reakční směs se míchá po dobu 30 minut, potom se ochladí vodou a zředí se ethylacetátem. Organická vrstva se promyje vodou a roztokem chloridu sodného, vysuší se a odpaří se v rotačním odpařováku. Zbytek se čistí na silikagelu elucí gradientem 1% až 5% methanolem v methylenchloridu, čímž se získá sloučenina 142 (125 mg, 57 %) .
Příklad 15
Klonování p38 kinasy v hmyzích buňkách
Byly identifikovány dvě spojené varianty’ lidské p38 kinasy, GSBP1 a CSBP2. Pro zesílení kódování oblasti CSBP2 cDNA za použití HeLa buňkové sbírky (Strategene) jako matrice byly použity specifické oligonukleotidové iniciátory. Reakční produkt řetězové polymerasy byl klonován na pET-15b vektor (Novagen). Baculovirový přenosový vektor, pVL-(His)6-p38 byl zhotoven subklonováním Xhal-BamUI fragmetnu pET15b-(His) 6-p38 na komplementární místa v plasmidu pVL1392 (Pharmingen).
Plasmid pVL-(His)6-p38 směroval syntesu rekombinantního proteinu sestávajícího ze 23-zbytku peptidu (MGSSHHHHHHSSGLVPRGSHMLE. kde LVPRGS znamená štěpící místo thrombinu) kondensovaného do konstrukce na N-konec p38, jak
90A AA • <
• <
* A A A
A A A
A A A AA
A A A A
A A A A
A A A A
A A A A
A A A *
A A A A
AAA A A A A A
AA AA bylo potvrzeno DNA sekvencí ? a N-koncovou sekvencí exprimovaného proteinu.· Monovrstvová kultura Spodoptera frugiperda (Sf9) hmyzích buněk (ATCC) byla udržována v TNM-FH prostředí (Gibeo BRL) doplněném 10% fetálním hovězím sérem v 27 °C. Buňky Sf9 v log fázi byly lineární virovou DNA nukleárního mňohostěnného viru Autographa californica (Pharmihgen) a přenosovým vektorem pVL-(His)6-p38 za použití Lipofectinu (Invitrogen). Jednotlivé rekombinantní baculovirové klony byly čištěny plakovým testem za použití 1% nízkotající agarosy.
T-baňce při teplotě ko-transfektovány s
Příklad 16
Exprese a čištění rekombinantní p38 kinasy
Buňky Trichoplusia ni (Tn-368) High-Five™ (Invitrogen) se pěstují v suspensi v Excel-405 mediu prostém proteinů (JRH Bioscience) v třepací baňce při teplotě 27 °.C. Buňky při hustotě 1,5 x 106 buněk/ml se infikují rekombinatním baculovirem popsaným výše při multiplicitě infekce 5. Expresní hladina rekombinantu p38 se monitoruje imunoznačením za použití králičí antilátky anti-p38 (Santa Cruz Biotechnology). Hmota buněk se sklidí za 72 hodin po infekci, kdy expresní hladina p38 dosáhne svého maxima.
Zmrazená pasta buněk z buněk exprimuj ících (His).s-značený p3 8 se rozmrazí v 5 objemech pufru A (50 mM NaH2PO4 pH 8,0, 200 mM NaCl, 2 mM β-merkaptoethanol, 10% glycerol a 0,2 mM PMSF) . Po mechanickém rozbití buněk v. mikrofluidiséru se lysát centrifuguje při 30 000 x g po dobu 30 minut. Supernatant 'Se inkubuje po dávkách po dobu 3 až 5 hodin při teplotě 4 °C Talon™ (Clontech) pryskyřicí s afinitou na kov v poměru 1 ml pryskyřice na 2 až 4 mg očekávaného p38. Pryskyřice sedimentuje centrifugací při 500 x g po dobu 5 minut a jemně se promyje po dávkách pufrem A. Pryskyřice se suspenduje a
ΦΦ • φφφ • * • ·
ΦΦ ΦΦ φ φ · • · φφφ • φ · · · φ · φ φ φ φ φ
naleje se na kolonu (přibližně 2,6 x 5,0 cm) a promyje se pufrem A + 5 mM imidazolem.
(His)6-p38 se eluuje pufrem A + 100 mM imidazolem a následně se dialysuje přes noc při teplotě 4 °C proti 2 litrům pufru B (50 mM HEPES, pH 7,5, 25 mM β-glycerofosfát, 5% glycerol, 2 mM DTT) . His6 značeni se odstraní přidáním 1,5 jednotek thrombinu (Calbiochem) na mg p38 a inkubací při teplotě 2 0 °C. po dobu 2 až 3 hodin. Thrombin se ochladí přidáním 0,2 mM PMSF a potom se celý vzorek naplní do 2 ml benzamidinagarosové (American International Chemical) kolony.
Průběžná průtoková frakce se naplní do 2,6 x 5,0 cm kolony Q-Sepharose (Pharmacia) předem ekvilibrované v pufru B + 0,2 mM PMSF. p38 se eluuje lineárním gradientem 20 kolonovým objemem na 0,6 M NaCl v pufru B, Eluovaný proteinový pík se spojí a dialysuje se přes noc při teplotě 4 °C proti pufru C (50 mM HEPES pH 7,5, 5% glycerol, 50 mM NaCl, 2 mM DTT, 0,2 mM PMSF).
Dialysovaný protein se zahustí v Centriprep (Amicon) na 3 až 4 ml a aplikuje se na 2,6.x 100 cm kolonu Sephacryl S-100HR (Pharmacia). Protein se eluuje rychlostí 35 ml/hodina. Hlavní pík se spojí, upraví se na 20 mM DTT!, zahustí se na 10 až 80 mg/ml a zmrazí se na alikvotní podíly při teplotě -70 °C nebo se ihned použije.
Příklad 17
Aktivace p38
P38 se aktivuje slučováním 0,5 mg/ml p38 s 0,005 mg/ml DD-dvojitý mutant MKK6 v pufru B + 10 mM MgCl2, 2 mM ATP, 0,2 mM Na2VO4 po dobu 30 minut při teplotě 20 °C. Aktivační směs se potom naplní do 1,0 x 10 cm MonoQ kolony (Pharmacia) a eluuje se lineárním gradientem 20 kolonovým objemem na 1,0 M NaCl v pufru B. Aktivovaný p38, se eluuje po ADP a ATP. Aktivovaný, pík p3 8 se spojí a dialysuje se proti pufru B + 0,2 mM Na2VO4, čímž
• · * • · ♦·· • · · · • · · · ·· • « · ··· ··· • · ·· ·· se odstraní NaCl. Dialysovaný protein se upraví na koncentraci 1,1 M fosforečnanu draselného přidáním 4,0 M zásobního roztoku a naplní se do 1,0 x .10 cm HIC kolony (Rainin Hydropore) předem ekvilibrované v pufru D (10% glycerol, 20 mM β-glycerofosf át, 2,0 mM DTT) + 1,1 M K2HPO4. Protein se eluuje lineárním gradientem 20 kolonovým objemem na pufr D + 50 mM K2HPO4 ( Dvojitě fosforylovaný p3 8 se eluuje jako hlavní pík a spojí se pro dialysu proti pufru B + 0,2 mM Na2VO4. Aktivovaný p38 se skladuje při teplotě -70 °C.
Příklad 18
Testy inhibice p38
A. Inhibice fosforylace EGF peptidového receptoru
Test se provádí v přítomnosti. 10 mM MgCl2, 25 mM β-glycerofosfátu, 10% glycerolu a 100 mM HEPES pufru při pH 7,6. Pro typické stanovení IC50 se připraví zásobní roztok obsahující všechny výše uvedené složky a aktivovaný p38 (5 nM). Alikvotní podíly zásobního roztoku se naplní do lahviček. Do každé lahvičky se vloží stanovený objem DMSO nebo inhibitoru v DMSO (konečná koncentrace DMSO při reakci je 5 %) , smísí se a inkubuje se při teplotě místnosti po dobu 15 minut. Do každé, lahvičky se přidá EGF peptidový receptor, KRELVEPLTPSGEAPNQALLR, fosforylový akceptor reakce p38 katalysováné kiriasy (1) , na konečnou koncentraci 200 μΜ. Reakce kinasy se iniciuje ATP (100 μΜ) a lahvičky se inkubují při teplotě 30 °C. Po 30 minutách se reakce zastaví stejným objemem 10% trifluoroctové kyseliny (TFA).
Fosforylovaný peptid se stanoví HPLC analysou. Oddělení fosforylovaného peptidu od nefosforylovaného peptidu se provádí na koloně s obrácenými fázemi (Deltapak, 5 μπϊ, C18 100D, ·, díl č. 011795) s binárním gradientem vody a acetonitrilu, každý s obsahem 0,1 % TFA. IC50 (koncentrace
9 9 9
-939 9 ·
9 9
999
9 inhibitoru poskytující 50% inhibici) se stanoví vynesením % zbylé účinnosti proti koncentraci inhibitoru.
B. Inhibice účinnosti ATPasy
Tento test se provádí v přítomnosti 10 mM MgCl2, 25 mM β-glycerofosfátu, 10% glycerolu a 100 mM HEPES pufru při pH 7,6. Pro typické stanovení Ki, se Km pro ATP účinnosti ATPasy aktivované reakcí p38 stanoví bez přítomnosti inhibitoru a v přítomnosti dvou koncentrací inhibitoru. Připraví se zásobní roztok obsahující všechny výše uvedené složky a aktivovaný p38 (60 nM) . Alikvotní podíly zásobního roztoku se naplní do lahviček. Do každé lahvičky se vloží stanovený objem DMSO nebo inhibitoru v DMSO (konečná koncentrace DMSO při reakci je 2,5 %) , smísí se a inkubuje se při teplotě místnosti po dobu 15 minut. Reakce se iniciuje přidáním různých koncentrací ATP a potom.se inkubuje při teplotě 30 °C. Po 30 minutách se reakce zastaví 50 μΐ EDTA (0,1 M, konečná . koncentrace) , pH 8,0. Produkt působení p38;ATPasy, ADP, se stanoví HPLC analysou.
Oddělení ADP od ATP se provádí na koloně s obrácenými fázemi (Supelcosil, LC-18, 3 μιη, díl č. 5-8985) za použití binárního, rozpouštědlového gradientu následujícího složení: rozpouštědlo A - 0,1 M fosfátový pufr obsahující 8 mM tetrabutylamoniumhydrogensíran (Sigma Chemical Co., katalog č. T-7158), rozpouštědlo B - rozpouštědlo A s 30 % methanolu.
Ki se stanoví , z rychlostních údajů jako funkce inhibitoru a koncentrací ATP. Výsledky pro několik inhibitorů podle vynálezu jsou shrnuty v tabulce 6 níže. Tabulka 6 sloučenina kl (μΜ) >20
2,9
0,4
-94• ·»· • · · • · · ·· · · » ··
Další inhibitory p38 podle' vynálezu také inhibují účinnost ATPasy p38.
C. Inhibice:IL-1, TNF, IL-6 a IL-8
Produkce v LPS-stimulovaných PBMC
Inhibitory se sériově zředí v DMSO z 20 mM zásobního roztoku. Připraví se alespoň 6 sériových zředění. Potom se připraví 4x inhibitoróvé zásobní roztoky přidáním 4 μΐ inhibitorového zředění na 1 ml RPMI1640 media/10% fetální hovězí sérum. 4x inhibitorové zásobní roztoky obsahují inhibitor v koncentracích 80 μΜ, 32 μΜ, 12,8 μΜ, 5,12 μΜ, 2,048 μΜ, 0,819 μΜ, 0,328 μΜ, 0,131 μΜ, 0,052 μΜ, 0,021 μΜ atd. 4χ inhibitorové zásobní roztoky se před použitím předehřeji na 37 °C.
Buňky ze sražených leukocytů z lidské čerstvé, krve se oddělí od ostatních buněk ve Vacutaineru CPT od firmy Becton & Dickinson (obsahující 4 ml krve a dostatek DPBS bez Mg2+/Ca2+ k naplnění trubice) centrifugací při 1500 x g po dobu 15 minut. Periferní krevní mononukleární buňky ' (PBMC) umístěné na vrcholu gradientu ve Vacutaineru se odstraní a promyji se dvakrát RPMI1640 mediem/10% fetálním hovězím sérem. PBMC se shromáždí centrifugací při 500 x g po dobu 10 minut. Celkový počet buněk se stanoví za použití Neubauerovy komory buněk a buňky se upraví na koncentraci 4,8 x 106 buněk/ml v mediu kultury buněk (RPMI1640 doplněném 10% fetálním hovězím sérem) .
Alternativně se při testu použije přímo celá krev obsahující antikoagulační činidlo.
Do každé jamky 96-jamkové desky pro buněčnou kulturu se umístí 100 μΐ buněčné suspense nebo celá krev. Potom se k buňkám přidá 50 μΐ 4x inhibitorového zásobního roztoku. Nakonec se přidá 50 μΐ lipopolysacharidového (LPS) pracovního zásobního roztoku (16 ng/ml v mediu buněčné kultury), čímž se získá konečná koncentrace 4 ng/ml LPS v testu. Celkový testovací objem nosičové kontroly se tak upraví na 200 μΐ přidáním 50 μΐ media buněčné kultury. PBMC buňky nebo celá ·· ·· • · » · • · · 9
999 999
9
9 9 9
-95• ·
4« • ·· r· : ·* • ·
999 9-9 9
9 9
99 krev se potom inkubuje přes noc (po dobu 12 až 15 hodin) při teplotě 37 °C s 5 % C02 ve vlhké atmosféře.
Následující den se buňky misi v třepačce po dobu 3 až 5 minut před centrifugací při 500 x g po dobu 5 minut. Sklidí se
supernatanty buněčné kultury a analysuj i se pomocí ELISA pro
hladiny IL-lb (R & D Systems, Quantikine kits, #DBL50), THN-a
(BioSource, #KHC3012), IL-6 (Endogen, #EH2 -IL6) / a IL-8
(Endogen, #EH2-IL8) podle instrukcí výrobce. ELISA údaje se
použij i pro vytvoření křivek dávka-odezva, z nichž se odvodí
hodnoty IC50.
Výsledky pro test kinasy ( kinasa, pododstavec A výše),
IL-1 a TNF v LPS-stimulovaných PBMC (buňky) a IL-1, TNF a
IL-6 v celé krvi (WB) pro různé p38 inhibitory podle
vynálezu jsou uvedeny v tabulce 7 níže:
Tabulka 7
sl. kinasa buňka IL-1 buňka TNF WB IL- 1 WB TNF WB IL-6
č. ic50 IC50 ic50 ICSQ IC so IC5Q
2 + N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
3 + N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
5 + N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
6 ++ ++ + N.D. N.D. N.D.
7 + 4. + N.D. N,D. N.D.
8 + + N.D. N.D. N.D.
9 + + + N.D. N.D. N.D.
10 + N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
11 + + + N.D. N.D. N.D.
12 ++ ++ ++ + + +
13 + + + N.D. N.D. N.D.
14 + ++ + N.D. N.D. N.D.
15 + ++ ++ N.D. N.D. N.D.
-96• · • ·· ·· * • ··· • · · • · ·
Λ·· ·· ·· • ♦· • · ··· • * · • · · · ·· ·· ·· ·· • · · · • · · · ··· ··· • ·
sl. kinasa buňka IL-1 buňka TNF WB IL-1 WB TNF WB IL-6
č. ic50 ' ig50 ic50 IC50 I.C50 IC50
16 ++ + ++ N.D. N.D. N.D.
17 + + N.D. N.D. N.D.
18 + + + N.D: N.D. N.D.
19 + . + + N.D. N.D. N.D.
20 ++ + + N.D. N.D. N.D.
21 ++ ++ + N.D. N.D. N.D.
22 + + + N.D. N.D. N.D.
23 ++ ++ + + + +
24 ++ ++ ++ + + N.D.
25 ++ ++ + N.D. N.D. N.D.
26 + +++ ++ + . + +
27 ++ + + + + +
28 ++ ++ ++ N.D. N.D. N.D.
29 ++ ++ ++ N.D. N.D. N.D.
30 + + + + N.D. N.D.
31 + + + N.D. N.D. N.D.
32 ++ + ++ + + +
33 ++ ++ ++ + ' +
34 + + + N.D. N.D. N.D.
35 ++ ++ + + + +
36 + + + + + +
37 ++ ++ + + + +
38 +++ +++ ++ ++ ++ ++
39 ++ + + N.D. N.D. N.D.
40 ++ ++ + N.D. N.D. N.D.
41 +++ +++ +++ N.D. N.D. N.D.
42 + N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
43 ++ + + N.D. N.D. N.D.
44 ++ + + N.D. N.D. N.D.
45 ++ N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
46 ++ + + N.D. N.D. N.D.
• · • ·
·· · · · · • · • · β ·
1. kinasa buňka IL-1 buňka TNF WB IL-1 WB TNF icso WB IL-6 icso
• IC50 icso IC50 IC50
47 ++ ++ + ' N.D: N.D. N.D.
48 ++ ++ + N.D. N.D. N.D.
49 ++ 4-4-4- , + + + +
50 + N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
51 ++ N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
52 ++ N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
53 +++ +++ +++ +++ +++ +++
101 ++ +++ +++ + + ++
102 +++ +++ +++ + ++ ++
103 +++ +++ +++ + ++ ++
104 ++ ++ ++ + + +
105 ++ + + . N.D. N.D. N.D.
106 +++ +++ ,+++ + ++ ++
107 ++ + + N.D. N.D. N.D.
109 +++ +++ +++ + + ++
108 +++ ++ +++ ++ +++ +++
110 ++ + + N.D. N.D. N.D.
111 ++ + + N.D. . N.D. N.D.
112 ++ ++ + + + +
113 +++ +++ ++ + +
114 +++ +++ +++ ++ ++ +++
115 +++ +++ +++ + + +
116 +++ +++ ++ + + +
117 +++ +++ +++ ++ ++ +++
118 ++ ++ ++ + + +
119 ++ N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
120 N.D. ++ + + + +
121 - +++ +++ ++ + + +
122 ++ ++ + + + +
123 ++ - ++ ++ + + +
-98• · ·
sl. kinasa buňka IL-1 ic50 buňka TNF ic50 WS IL-1 ic50 WS TNF IC50' WB IL- ICs
č. ICso
124 + + + N.D. N.D. N.D.
125 +++ +++ +++ + + +
126 + ++ + N.D. N.D. N.D.
127 +++ +++ +++ ++ ++ +++
128 + + + N.D. N.D. N.D.
129 +++ +++ +++ ++ + ++
130 +++ ++ + N.D. N.D. N.D.
131 +++ +++ +++ N.D. N.D. N.D.
132 +++ +++ ++ N.D. N.D. N.D.
133 +++ +++ +++ N.D. N.D. N.D.
134 +++ ++ + N.D. N.D. N.D.
135 +++ ++ + + + +
136 +++ +++ +++ + + ++
137 +++ +++ ++ + + ++
138 ++ +++ ++ + + +++
139 +++ ++ + + + + +
140 +++ +++ +++ ++ + ++
141 +++ ++ + +++ + + +
142 +++ +++ +++ +++ +++ +++
143 +++ +++ ++ + + +
144 +++ +++ ++ + + ++
145 +++ +++ +++ +++ +++ +++
201 ++ + + + +++ +
203 + N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
204 + N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
205 + N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
206 ++ + + N.D. N.D. N.D.
207 + N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
208 N.D. ++ N.D. N.D; N.D. N.D.
209 N.D. + N.D. N.D. N.D. N.D.
202/ +++ ++ ++ + + +
-99·· · · · · · ·· · • ·<· · · ··· · · · · • · · 9 ·· & · · e« · ·9 ·· · · · · ··
sl. kinasa buňka IL-1 buňka TNF WB IL- 1 WB TNF WB IL-6
č. ICS0 ic50 ic50 IC50 ic50 icso
301
302 +++ +++ ++ + + +
303 + + + + + +
304 + + + + + +
305 +++ +++ + + + +
306 ++ ++ + + + +
307 +++ ++ + + + +
308 + N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
309 ++ ++ + + +
310 + + N.D. N.D. N.D.
311 + + N.D. N.D. N.D.
312 +++ ++ + + + +
313 ++ + + N.D. N.D. N.D.
314 + , N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
315 + N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
316 + N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
317 + + + N.D. N.D. N.D.
318 N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
319 + N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
320 +++ ++ ++ N.D. N.D. N.D.
321 + N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
322 ++ + + N.D. N.D. N.D.
323 ++ ++ ++ N.D. N.D. N.D.
324 ++ ++ + N.D. N.D. N.D.
325 +++ +++ ++ + + +
326 + N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
327 ++ N.D. N.D. N.D; N.D. N.D.
328 + N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
329 ++ ++ + + + +
330 + N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
331 + N.D. N.D. N.D. ’ N.D. N.D.
-100- • • • · • · · · • · * • · · · · • · · * · · • · · · · · · · • · · · · ·· ·· ·»
sl. cinasa buňka IL-1 buňka TNF WB IL-1 WB TNF WB IL-6
č. icso ic50 ic50 IC50 IC50 IC50
332 ++ ++ + + + + '
333 ++ + + N.D. N.D. N.D.
334 + N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
335 ++ + + + + +
336 + N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
337 + N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
338 + N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
339 + N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
340 + N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
341 ++ ++ ++ N.D. N.D. N.D.
342 + N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
343 + N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
344 + N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
345 + N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
346 ++ + + + + + ' .
347 + N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
348 + N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
349 + ++ + + + +
350 + ++ + N.D. N.D. N.D.
351 + + + N.D. N.D. N.D.
352 + + , N.D. N.D. N.D. N.D.
353 ++ + + N.D. N.D. N.D.
354 + N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
355 + N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
356 + N.D. N.D. N.D: N.D. N.D.
357 + N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
358 ++ + + N.D. N.D. N.D.
359 + N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
360 + N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
-101• · ♦ * ♦ *» .
··· · . · · ···* • · · · » ···« · · · · • · · -* · · · · · ·· · · · · * ·* · · * ·
sl. kinasa buňka IL-1' buňka TNF WB IL-1 WB TNF WB IL-6 ic50
č. IC50 IC5O IC50 IC50 IC50
361 ++ ++ + N.D. N.D. N.D.
362 +++ ++ ++ + + +
363 +++ +++ ++ + + +
364 +++ +++ ++ + + +
365 N.D. N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
366 + N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
367 N.D. N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
368 N.D. N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
369 N.D. N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
370 N.D. N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
371 N.D. N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
372 N.D. N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
373 N.D. N.D. n.d: N.D. N.D. N.D.
374 ++ N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
375 +++ N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
376 +++ N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
377 +++ N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
378 +++ N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
379 +++ N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
380 ++ N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
381 ++ . N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
382 +++ N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
383 +++ N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
384 ++ N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
385 ++ N.D. . N.D. N.D: N.D. N.D.
386 + N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
387 + N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
388 +++ N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
389 ++ N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
390 + N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
-102- • ·· «· · • · ·' · • · · ··» «4 *« ·* • · 9 · • · · · · · 9 9 · · 99 99
sl. kinasa buňka IL-1 buňka TNF WB IL- 1 WB TNF WB IL-6
č. IC50 ic50 ic50 IC5O ic50 ic50
391 ++ N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
392 ++ N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
393 ++ N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
394 +++ N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
395 +++ N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
396 +++ N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
397 + N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
398 N.D. N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
399 +++ N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
1301 +++ N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
401 +++ ++ ++ + + +
402 +++ +++ +++ + + +
403 +++ +++ +++ + + ++
404 +++ +++ +++ + + +
405 +++ 4·++ ++ N.D. N.D. N.D.
406 ++ ++ + N.D. N.D. N.D.
407 ++ ++ + N.D. N.D. N.D.
408 +++ +++ ++ N.D. N.D. N.D.
409 +++ +++ +++ + + ++
410 +++ +++ +++ ++ ++ ++
411 +++ +++ +++ ψ + · +
412 N.D. N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
4' 44 • * • » • 4 4 4 • * • · • 4 • 4 4 • 4 •
* · • · • 4 • 4 • 4
* · • • « • · • •
4 · 4· • 4 • 4 4 4 44
IC50 hodnoty pro kinasu, + + + znamená <0., 1 μΜ, + + znamená mezi 0,1 a 1,0 μΜ a + znamená >1,0 μΜ. Pro- buněčný IL-1 a TNF hodnoty, + + + znamená <0,1 μΜ, + + znamená mezi 0,1 a 0,5 μΜ a + znamená >0,5 μΜ. Pro celou krev (WB) hodnoty, + + + znamená <0,25 μΜ, ++ znamená mezi 0,25 a 0,5 μΜ a + znamená >0,5 μΜ. Ve všech testech uvedených v tabulce níže N.D. znamená, že hodnoty nebyly, stanoveny.
Další p38 inhibitory podle . vynálezu také inhibuji fosforylaci EGF peptidového receptoru a produkci IL-1, TNF a IL-6, jakož i IL-8 v .LPS-stimulovaných PBMC nebo v celé krvi.
D. Inhibice IL-6 a IL-8
Produkce v IL-l-stimulovaných PBMC
Tento test se provádí na PBMC přesně takových, jak bylo uvedeno výše, kromě toho, že se k testu přidá 50 μΐ IL-lb pracovního zásobního roztoku (2 ng/ml media buněčné kultury) místo LPS pracovního zásobního roztoku.
Supernatanty buněčné kultury se sklidí, jak je popsáno výše, a analysují se pomocí ELISA na hladiny IL-6 (Endogen, #EH2-IL6), a IL-8 (Endogen, #EH2-IL8) ‘podle instrukcí výrobce. ELISA údaje se použijí pro vytvoření křivek dávka-odezva, z
nichž se odvodí hodnoty IC50. sloučeniny 6, jsou uvedeny v
Výsledky p38 inhibitoru,
tabulce 8 níže:
Tabulka 8
testovaný cytokin IC50 (μΜ)
IL-6 0,6
IL-8 0, 85
E. Inhibice LPS vyvolané prostaglandinové endoperoxid
syntasy-2 (PGHS-2 nebo COX-2) Indukce PBMS
Lidské periferní mononukleární buňky se isolují ze sražených leukocytů Čerstvé lidské krve centrifugací ve Vacutainer CPT (Becton & Dickinsoň). 15 x 106 buněk se naočkuje
-104-
• «4 «* 44 • 4 4 4
• 4 9 • 4 4 4 4
4 · 4 4 • • 4 4 4 ' 4 · 4 4
4 4 · 4 4 4 4 • 4
4 · '* 9 4 · 4 4 4 · 4 4
do 6-jamkové desky pro tkáňovou kulturu obsahující RPMI 1640 doplněný 10% fetálním hovězím sérem, 50 U/ml penicilinu, 50 μ9/κι1 streptomycinu a 2 mM L-glutaminem. Přidá se sloučenina 6 (výše) na 0,2, 2,0 a 2 0 μΜ konečné koncentrace v DMSO. Potom se přidá LPS na konečnou koncentraci 4 ng/ml, Čímž se vyvolá exprese enzymu. Konečný objem kultury je 10 ml na jamku.
Po inkubaci při teplotě 3 7 °C a 5 % C02 přes noc. se sklidí buňky, seškrábáním a následnou centrifugac.í, potom se odstraní supernataht . a buňky se promyjí dvakrát ledově studeným DPBS (Dulbecco fosfátem pufrovaný solný roztok, BioWhittaker) . Buňky se lysuj í na ledu po dobu 10 minut v 50 μΐ studeného lysového pufru (20 mM Tris-HCl, pH 7,2, 150 mM
NaCl, 1% Triton-X-100, 1% deoxycholová kyselina, 0,1% SDS, 1 mM EDTA, 2% aprotinin (Sigma), . 10 μg/ml pepstatin, 10 μ9/τη1 leupeptin, 2 mM PMSF, lmM benzamidin, 1 mM DTT) obsahujícím 1 μΐ Benzonasy (DNAasa od firmy Merck). Koncentrace proteinu v každém vzorku se stanoví za použití BCA testu .(Piercej a albuminu hovězího séra jako standardu. Potom se koncentrace proteinu v každém vzorku upraví na 1 mg/ml studeným lysovým pufrem. Ke 100- μΐ lysátu se přidá stejný objem 2xSDS PAGE pufru a vzorek se vaří po dobu 5 minut. Proteiny (30 mg/proužek) se frakcionují podle velikosti na 4 až 20% SDS PAGE gradientových gelech (Novex) a potom se elektroforeticky přenášejí na nitrocelulosovou membránu po dobu 2 hodin při 100 mA v Towbinově přenosovém pufru (25 mM Tris, 192 mM glycin) obsahujícím 20 % methanolu. Membrána se předem zpracovává po dobu 1 hodiny při teplotě místnosti blokovacím pufrem (5% netučné sušené mléko v DPBS doplněné 0,1% Tweenem-20) a promyje se třiktrát v DPBS/0,1% Tween-20. Membrána se inkubu.je přes noc při teplotě '4 °C s 1:250 ředěnou morioklonální protilátkou anti-COX-2 (Transduction Laboratories) v blokovacím pufru. Po 3 promytích v DPBS/0,1% Tween-20 se membrána inkubuje 1:1000 ředěnou křenovou peroxidasou spojenou s ovčím antisérem na myši Ig (Amersham) v blokovacím pufru po
-105-
• · • · • v • « • • « « ·· • · • 9 • · • * • 9
• * • • • • • *
• • • • . · 9 •
♦ » 99 ♦ · • * 9 9 • ·
dobu 1 hodiny při teplotě místnosti. Potom se membrána promyje třikrát v DPBS/0,'1% Tween-20 a pro stanovení hladiny exprese COX-2 se použije ECL detekční systém (SuperSignal™ CL-HRP Substráte System, Pierce) ·
Výsledky výše uvedeného testu naznačují, že sloučenina 6 inhibuje LPS vyvolanou PGHS-2 expresi v PBMC.
I když je zde uvedena řada provední podle vynálezu, je samzřejmé, že základní smysl lze měnit, čímž se získají další provedení použitelná při způsobu podle vynálezu.
-106·
• »4 < 4 β 4 « 4 44
• 4 4 « • 4 4 4 4
• 4 44 • • 4 4 4 • 4 4 4
• 4 · 4 4 4 4 4 4
♦ · 44 4 * 4 4 • · 4 4
PATENTOVÉ
NÁROKY

Claims (5)

1. Sloučenina obecného vzorce la nebo Ib (la) (Ib) kde každý ze substituentů Qx. a Q2 je nezávisle vybrán ze skupiny zahrnující pětičlenné až šestičlenné aromatické karbocyklické nebo heterocyklické kruhové systémy nebo osmičlenné až desetičlenné bicyklické kruhové systémy obsahující aromatické karbocyklické kruhy, aromatické heterocyklické kruhy nebo kombinaci aromatického karbocyklického kruhu a aromatického heterocyklického kruhu,
Qi- je substituováno 1 až 4 substituenty nezávisle vybránými ze skupiny, zahrnující atom halogenu, alkylovou skupinu, s 1 až 3 atomy uhlíku, popřípadě substituovanou skupinami NR'2, OR', CO2R' nebo CONR'2, skupinu 0-alkyl, kde alkylová část má 1 až 3 atomy uhlíku, popřípadě substituovanou skupinami NR'2, OR', C02R' nebo C0NR'2, dále skupiny NR'2, OCF3, CF3, N02, CO2R', CONR', SR', Š(O2)N(R')2, SCF3, CN, N(R')C(0)R4, N(R')C(0)0R4, N(R')C(.O)C(O)R4, N (R') S (02) R4, N(R')R4, N(R4)2, OR4, OC(O)R4, OP(O)3H2, nebo N=C-N(R')2 a
0.2 je popřípadě substituováno až 4 substituenty nezávisle vybránými ze skupiny zahrnující atom halogenu, alkylovou skupinu s 1 až 3 atomy uhlíku s přímým nebo rozvětveným řetězcem, popřípadě substituovanou skupinami NR'2, OR', CO2R', S(O2)N(R')2, N=C-N(R')2, R3 nebo C0NR'2, skupinu 0-alkyl, kde alkylová část má 1 až 3 atomy uhlíku, popřípadě substituovanou skupinami NR'2, OR', CO2R', S(O2)N(R')2, N=C-N(R<)2, R3 nebo
N=C-N(R<)2,
107·.· » nitroskupínu, skupinu nebo pětičlenné až heterocyklické
CONR'2, dále skupiny NR'2, OCF3, CF3, NO2, CO2R', CONR', R3, OR3, NR3, SR3, C(O)R3, C(O)N(R')R3, C(O)OR3, SR', S(O2)N(R')2, SCF3,
N=C-N(R')2, nebo CN, kde R' je vybráno ze skupiny zahrnující atom vodíku, alkylovou skupinu s 1 až 3 atomy'uhlíku, alkenylovou skupinu se 2 až 3 atomy uhlíku nebo alkinylovou skupinu, fenylovou skupinu nebo fenylovou skupinu substituovanou 1 až 3 substituenty nezávisle vybranými ze skupiny zahrnující atom halogenu, methoxyskupinu, kyanoskupinu, aminoskupinu, · hydroxyskupinu, methylovou ethylovou skupinu,
R3 je vybráno ze skupiny zahrnující šestičlenné aromatické karbocyklické nebo kruhové systémy, a
R4 je alkylová skupina s 1 až 4 atomy uhlíku, popřípadě substituovaná skupinami N(R')2, OR', CO2R', CON(R')2 nebo SO2N(R2)2, nebo pětičlenný až šestičlenný karbocyklický nebo heterocyklický kruhový systém, popřípadě substituovaný skupinami N(R')2, OR', CO2R', CON(R')2 nebo SO2N(R2)2,
X je vybráno, ze skupiny zahrnující -S-, -0-, -S(02)-,
-S(0)-, -S (02) -N(R2) -, -N (R2) -S (02) - , -N (R2)-C (0) 0-,
-0-C(0) -N(R2) -, . -C(0)-, -0(0)0-, -O-C(O)-', -C (0) -N (R2) - ,
-N(R2) -C (0)-, -N(R2)-, -C(R2)2- nebo -C.(OR2)2-, každé R je nezávisle vybráno ze skupiny zahrnující atom vodíku, -R2, -N(R2)2, -OR2, -SR2, -C (0) -N (R2) 2, -S (02) -N (R2) 2 nebo -C(0)-0R2, přičemž dvě přilehlá R jsou popřípadě vázána, jedno na druhé a spolu s každým Y, ke kterým jsou vázána, tvoří čtyřčlenný až osmičlený karbocyklický nebo heterocyklický kruh,.
R2 je vybráno ze skupiny zahrnující atom vodíku, alkylovou skupinu s 1 až 3 atomy uhlíku nebo alkenylovou skupinu se 2 až 3 atomy uhlíku, které jsou obě popřípadě substituovány skupinami -N(R')2, -OR', -SR', -C (0)-N (R') 2, -S (02)-N (R') 2, -0(0)-OR', nebo R3, .
-1089 «9 9 · 99 99 ·9
9 9 9 9 9 9 9 9 9 9
9 999 9 9 999 9 99'*
9 9 «99 99 99 999 9'9 9 «99 9999 9 9 • 9 9 -9 9 99 99 9· 99
Υ je Ν nebo C,
A, je-li přítomno, je Ν nebo CR, n j e 0 nebo 1, a Ri je vybráno ze skupiny zahrnující atom vodíku, alkylovou skupinu s 1 až 3 atomy uhlíku, OH, nebo -O-alkyl, kde alkylová část má 1 až 3 atomy uhlíku.
kde A, Qlř Q2; R, R', X, Y a n mají význam uvedený pro sloučeniny obecných vzorců Ia a Ib, a
R5 je vybráno, ze skupiny zahrnující atom vodíku, skupiny -CR'2OH, -C(O)R4, -C(O)OR4, -CR'2OPO3H2 a -PO3H2.
3. Sloučenina obecného vžorce Ie, If, Ig nebo Ih /
.Q,
X
Ie;
/Q2 (If)
O:
-109-
* »» 99 9 • 9 9 9 99 9 99 9 9 « · 9 9 9 * · • · 9 9 ' 9 9 « « · 9 · 9 9 * 9 9 9 « 9 9 9 9 • 9 9 · • · • ·
kde
Q3 je pětičlenný až šestičlenný aromatický karbocyklický nebo heterocyklický kruhový systém, nebo osmičlenný až desetičlenný bicyklický kruhový systém obsahující aromatické karbocyklické kruhy, aromatické heterocyklické’ kruhy nebo kombinaci aromatického karbocyklického kruhu a aromatického heterocyklického kruhu, kde Q3 je substituováno 1 až 4 substituenty, z nichž každý je nezávisle vybrán ze skupiny zahrnující atom halogenu, alkylovou skupinu s 1 až 3 atomy uhlíku, popřípadě substituovanou skupinami NR'2, OR', CO2R' nebo C0NR'2, skupinu O-alkyl, kde alkylová část má 1 až 3 atomy uhlíku, popřípadě substituovanou skupinami NR'2, OR', CO2R' nebo C0NR'2, dále skupiny NR'2/ OCF3, CF3, NO2, CO2R', CONR', SR', S(O2)N(R')2, SCF3, CN, N(R')C(0)R4, N(R') C(0)0R4,
N (R') C (0) C. (O) R4, N(R') S (02) R4, N(R')R4, N(R4)2, OR4, OC(O)R4,
OP(O)3H2z nebo N=C-N(R')2 a
A, Qlz Q2, R, Rl, X, Y a n mají význam uvedený v nároku 1.
4. Sloučenina podle kteréhokoliv z nároků 1 až 3, kde Q3 jě vybráno ze skupiny zahrnující fenylovou nebo pyridylovou skupinu obsahující 1 až 3 substituenty nezávisle vybrané ze skupiny zahrnující atom chloru, atom fluoru, atom bromu, -CH3, -0CH3, -OH, -CF3, -OCF3, -0 (CH2) 2CH3, -NH2, 3,4-methylendioxyskupinu, -N(CH3)2, -NH-S (02)-fenyl, -NH-C (O) O-CH2-4-pyridin, -NH-C (0) CH2-morfolin, -NH-C (0) CH2-N (CH3) 2, -NH-C (0) CH2-pÍperazin, -NH-C (0) CH2-pyrrolidin, -NH-C(0)C(0)-morfolin,
-NH-C(0)C(0)-piperazin, -NH-C(O)C(0)-pyrrolidin,
-O-C(O) CH2-N(CH3)2 nebo -0- (CH2) 2-N (CH3) 2 a kde alespoň jeden z těchto substituentů je v poloze ortho.
5. Sloučenina podle nároku 4, kde Q3 obsahuje alespoň dva substituenty, přičemž oba jsou v poloze ortho.
• 9
-110• 999 9 · ··* • 9 9 9 9 9 9 99 • 9 9 9 9 9 9
999 9 9 99 99
99 ·9 • 9 9 • 9 9
999 999
9 9
9 9 9 9
6. Sloučenina podle nároku 4, kde Q: je vybráno ze skupiny
-112-
• ·· ·· • 0 0· 00 • 0 • * 0 0 • 0 0 • 0 00 • 0 00« 0 0 • 0 » ě « 0 • • 0 0 0 00 ·· • 0 •0 0 0 0 0
7. Sloučenina podle nároku 6, kde Q3 je vybráno ze skupiny zahrnující 2-fluor-6-trifluormethylfenyl, 2,6-difluorfenyl,
2.6- dichlorfenyl, 2-chlor-4-hydroxyfenyl, 2-chlor-4-aminofenyl, 2,6-dichlor-4-aminofenyl, 2,6-dichlor-
3-aminofenyl,
2.6- dimethyl-4-hydroxyfenyl, 2-methoxy-3, 5-dichlor-4-pyridyl, 2-chlor-4,5-methylendioxyfenyl ' nebo 2-chlor-4-(N-2-morfolinoacetamido)fenyl.
8. Sloučenina podle kteréhokoliv z nároků 1 až 3, kde Q2 je vybráno ze skupiny zahrnující fenylovou nebo pyridylovou skupinu a kde Q2 popřípadě obsahuje až do 3 substituentů, z nichž každý je nezávisle vybrán ze skupiny zahrnující atom chloru, atom fluoru, atom bromu, methylovou skupinu, ethylovou skupinu, . isopropylovou skupinu, -OCH3, -OH, -NH2, -CF3, -OCF3( -SCH3, -OCH3, -C(O)OH, -C(O)OCH3, -CH2NH2, -N(CH3)2, -CH2-pyrrolidin a -CH2OH.
-113-
• · 9 · 9 9 9 9 9 • · · · 9 9 999 9 9 9 9 • · · • · 9 9 9 9 9 9 99 9 9 99 99 9 9
9. Sloučenina podle nároku 8, kde Q2 je vybráno ze skupiny zahrnuj ící:
t t f , t · /
-114• · 9 9 9 9 9 9 9 9
9 9 99 9 9 9 99 9 9 9 9
9 9 9 9 9 9 9 9 9
999 99 99 99 99 99
CHj
OH ,F, nesubstituovanou .2-pyridylovou fenylovou skupinu..
skupinu nebo nesubstituovanou
10. Sloučenina podle nároku 9, kde Q2 je vybráno ze skupiny zahrnující fenyl, 2-isopropylfenyl, 3,4-dimethylfenyl, 2-ethylfenyl, 3-fluorfenyl, 2-methylfenyl, 3-chlor-4-fluorfenyl, 3-chlorfenyl, 2-methoxykarbonylfenyl, 2-karboxyfenyl, 2-methyl-4-chlorfenyl, 2-bromfenyl, 2-pyridyl, 2-methylenhydroxyfenyl, 4-fluorfenyl, 2-methyl-4-fluorfenyl, 2-chlor-4-fluůrfenyl, 2,4-difluorfenyl, 2-hydroxy-4-fluorfenyl nebo 2-methylenhydroxy-4-fluorfenyl.
11. Sloučenina podle kteréhokoliv z nároků 1 až 3, kde X je vybráno ze skupiny zahrnující -S-, -0-, -S(02)-, -S(0)-,
-NR-, -C(R2-) nebo -C(0)-.
12. Sloučenina podle nároku 10, kde X je S.
13. Sloučenina podle kteréhokoliv z nároků 1 až 3, kde n je 1 a A je N. .
• 4 44 4 4 4 4 • 4 • 4 4 4 4 4 4 4 4 4 · • 4 4 4 444 4 4 4 4 4 4 4 4 ' 4 • 4 4 4 4 4 4 4 4 4 44 4 4 4 4
Sloučenina podle kteréhokoliv z nároků 1 až 3, kde každé Y je C.
15. Sloučenina podle nároku 14, kde každé R připojené k Y je nezávisle vybráno ze skupiny zahrnující atom vodíku nebo methylovou skupinu.
16. Sloučenina podle nároku 1, kde sloučenina je vybrána ze skupiny zahrnující kteroukoliv zě sloučenin 2 až 3 nebo 5 až 53, jak jsou uvedeny v tabulce 1.
17. Sloučenina podle nároku 2, kde sloučenina je vybrána ze skupiny zahrnující kteroukoliv ze sloučenin 101 až 145, jak jsou uvedeny v tabulce 2.
18. Sloučenina podle nároku 3, kde Q3 je substituováno 2 až 4 substituenty, přičemž alespoň jeden z těchto substituentů je přítomen v poloze ortho vzhledem v místu připojení Q3 na zbytek inhibitoru.
19. Sloučenina podle nároku 18, kde obě polohy ortho jsou obsazeny jedním Z uvedených nezávisle vybraných substituentů.
20. Sloučenina podle nároku 19, kde Q3 je monocyklický karbocyklický kruh a každý z uvedených orthosubstituentů na Q3 je nezávisle vybrán ze skupiny zahrnující atom halogenu nebo methylovou skupinu.
21. Sloučenina podle nároku 19, kde Q3 obsahuje 1 až 2 substituenty kromě uvedených orthosubstituentů, přičemž tyto další substituenty jsou nezávisle vybrány ze skupiny zahrnující NR2, OR, CO2R, CN, N (R) C (O) R4, N (R') C (O) OR4, N (R ) C (O) C (O) R4, N(R) S (O2)R4, N(R)R4, N(R4)2, OR4, OC(O)R4, OP(O)3H2, nebo N=C-N(R')2.
,-4 44 44 ·4
4 4 4 4 4 4
4 444 4 4444
44 44
4 4 4
-1174 4 4 4 4 4 4
444 44 44 44
22. Sloučenina podle nároku 3/ kde touto sloučeninou je sloučenina obecného vzorce Ie je vybrána z jakékoliv sloučeniny 201 nebo 203 až 209, jak jsou uvedeny v tabulce 3.
23., Sloučenina podle nároku 3, kde touto sloučeninou je sloučenina obecného vzorce Ig a je vybrána z jakékoliv sloučeniny 202/301, 302 až 399 nebo 1301, jako jsou uvedeny v tabulce 4 .
24. Sloučenina podle nároku 3, kde touto sloučeninou je sloučenina obecného vzorce Ih a je ,vybrána z jakékoliv sloučeniny 401 až 412, jak jsou uvedeny v tabulce 5.
25. Farmaceutický prostředek, vyznačující se t i m , že obsahuje množství sloučeniny podle kteréhokoliv z nároků 1 až 3, které účinně inhibuje p38, á farmaceuticky přijatelný nosič.
26. Způsob ošetřování nebo prevence zánětlivých onemocnění, autoimunních onemocnění, destruktivních poruch kostí, proliferačních poruch, infekčních onemocnění, neurodegenerativních onemocnění, alergií, reperfuse/ischemie při mrtvici, srdečních záchvatů, angiogenních poruch, hypoxie orgánů, vaskulární hyperplasie, srdeční hypertrofie, thrombinem vyvolané agregace destiček nebo stavů spojených s prostaglandinovou endoperixidasa syntasou-2 u pacientů, vyznačující s e tím, že se těmto pacientům podává prostředek podle nároku 25.
27. Způsob podle nároku 26, vyznačující se tím, že tento způsob se používá pro ošetřování nebo prevenci zánětlivých onemocnění vybraných ze skupiny zahrnující akutní pankreatitidu, chronickou pankreatitidu, astma, alergie nebo syndrom respirační úzkosti u dospělých.
-118·· ΦΦ φ φ· φ φ φ φ * · φ φ φ φ φ φ ··· · φ φφφ φ φφ φ • φφφφφ φ · ··· ·· φ* ΦΦ ΦΦ ΦΦ
28. Způsob podle nároku 26, vyznačující se tím, že tento způsob se používá k ošetřování nebo prevenci autoimunních onemocnění vybraných ze skupiny zahrnující glomerulonefritidu, revmatickou arthritidu, systemický lupus erythematodes, sklerodermii, chronickou thyroiditidu, Gravesovo onemocnění, autoimunní gastritidu, diabetes, autoímunní hemolytickou anemii, autoimunní neutropenii, thrombocytopenii, atopickou dermatítidu, chronickou aktivní hepatitidu, myastenii gravis, roztroušenou sklerosu, zánětlivé střevní onemocnění, vředovou kolitidu, Crohnovo onemocnění, psoriasu nebo onemocnění štěp versus hostitel.
29. Způsob podle nároku 26, vyznačující se t i m , že tento způsob se používá k ošetřování nebo prevenci destruktivních chorob kostí vybraných ze skupiny zahrnující osteoarthritidu, osteoporosu nebo mnohočetný myelom spojený s kostmi. ,
30. Způsob podle nároku 26, vyznačující se tím, že tento způsob se používá k ošetřování nebo prevenci· proliferačních onemocnění vybraných ze skupiny zahrnující akutní myelogenní leukémii, chronickou myelogenní leukémii, metastatický melanom, Kaposiho sarkom nebo mnohočetný myelom.
31. Způsob podle nároku 26, vyznačující se tím, že tento způsob se používá k ošetřování nebo prevenci infekčních chorob vybraných ze skupiny zahrnující sepsí, septický šok nebo Shigellosu.
32. Způsob podle nároku 26, vyznačující se tím, že tento způsob se používá k ošetřování nebo prevenci virových onemocnění vybraných ze skupiny zahrnující akutní hepatitickou infekci, HIV infekci nebo CMV retinitídu.
-11999 ·9 ·9 99 ' « 9 9 9 9 9 · • · »»I 9 9* 9
9 99 99 999 999
9 9 9 9 9 9
99 99 99 99 cerebrální způsobené
33. Způsob podle nároku 26, vyznačující se tím, že tento způsob se používá k ošetřování nebo prevenci neurodegenerativních chorob vybraných ze skupiny zahrnující Alzheimerovu chorobu, Parkinsonovu chorobu, ischemii nebo neurodegeneraticní poruchy traumatickým poraněním.
34. Způsob podle nároku 26, vyznačující se t í m , že tento způsob se používá k ošetřování nebo prevenci ischemie/reperfuse u mrtvice nebo myokardiální ischemie, renální ischemie, srdečních záchvatů, hypoxie orgánů nebo thrombinem vyvolané agregace destiček.
35. Způsob podle nároku 26, vyznačuj ící se tím, že tento způsob se používá k ošetřování nebo prevenci stavů spojených s prostaglandinovou endoperoxid synthasou-2 vybraných ze skupiny zahrnující otok, horečku, analgesii nebo bolest. ' .
36. Způsob podle nároku 35, vyznačující se tím, že touto bolestí je bolest vybraná ze skupiny zahrnující neuromuskulární bolest, bolest hlavy, bolest při rakovině, bolest zubů nebo bolest při arthritidě.
37. Způsob podle nároku 26, vyznačující se tím, že tento způsob se používá k ošetřování nebo prevenci, angiogeních onemocnění vybraných ze skupiny zahrnující pevné nádory, oční neovaskulisaci nebo infantilní hemangiomy.
CZ0216399A 1996-12-18 1997-12-17 Heterocyklické slouceniny obsahující dusík jako inhibitory p38 proteinkinázy a farmaceutické prostredky s jejich obsahem CZ299600B6 (cs)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US3428896P 1996-12-18 1996-12-18
US08/822,373 US5945418A (en) 1996-12-18 1997-03-20 Inhibitors of p38
US08/862,925 US6147080A (en) 1996-12-18 1997-06-10 Inhibitors of p38

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CZ216399A3 true CZ216399A3 (cs) 1999-09-15
CZ299600B6 CZ299600B6 (cs) 2008-09-17

Family

ID=27364615

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CZ0216399A CZ299600B6 (cs) 1996-12-18 1997-12-17 Heterocyklické slouceniny obsahující dusík jako inhibitory p38 proteinkinázy a farmaceutické prostredky s jejich obsahem

Country Status (28)

Country Link
US (1) US6147080A (cs)
EP (1) EP0951467B1 (cs)
JP (1) JP4171072B2 (cs)
CN (2) CN1284783C (cs)
AP (1) AP1136A (cs)
AT (1) ATE236165T1 (cs)
AU (1) AU738000B2 (cs)
BG (1) BG64533B1 (cs)
BR (1) BR9714415A (cs)
CA (1) CA2274825C (cs)
CZ (1) CZ299600B6 (cs)
DE (1) DE69720522T2 (cs)
DK (1) DK0951467T3 (cs)
EA (1) EA002855B1 (cs)
EE (1) EE04191B1 (cs)
ES (1) ES2202658T3 (cs)
HU (1) HUP0001125A3 (cs)
ID (1) ID21919A (cs)
IL (1) IL130349A0 (cs)
IS (1) IS5069A (cs)
NO (1) NO315047B1 (cs)
NZ (1) NZ336146A (cs)
PL (1) PL202464B1 (cs)
PT (1) PT951467E (cs)
SK (1) SK284578B6 (cs)
TR (1) TR199902194T2 (cs)
TW (1) TW521071B (cs)
WO (1) WO1998027098A1 (cs)

Families Citing this family (126)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US7091181B2 (en) 1994-12-12 2006-08-15 Omeros Corporation Method of inhibition of pain and inflammation during surgery comprising administration of soluble TNF receptors
US6608060B1 (en) * 1996-12-18 2003-08-19 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Inhibitors of p38
AU748334B2 (en) 1997-10-16 2002-05-30 Board Of Regents, The University Of Texas System Models and treatments for cardiac hypertrophy in relation with NF-AT3 function
US6335340B1 (en) 1997-12-19 2002-01-01 Smithkline Beecham Corporation compounds of heteroaryl substituted imidazole, their pharmaceutical compositons and uses
MY132496A (en) 1998-05-11 2007-10-31 Vertex Pharma Inhibitors of p38
WO1999061039A2 (en) * 1998-05-22 1999-12-02 MAX-PLANCK-Gesellschaft zur Förderung der Wissenschaften e.V. Novel composition for modulating ischemic cell death
US6858617B2 (en) 1998-05-26 2005-02-22 Smithkline Beecham Corporation Substituted imidazole compounds
EP1277740A1 (en) * 1998-06-12 2003-01-22 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Inhibitors of p38
WO1999064400A1 (en) 1998-06-12 1999-12-16 Vertex Pharmaceuticals Incorporated INHIBITORS OF p38
US6184226B1 (en) 1998-08-28 2001-02-06 Scios Inc. Quinazoline derivatives as inhibitors of P-38 α
AR023659A1 (es) * 1998-09-18 2002-09-04 Vertex Pharma Un compuesto inhibidor de p38, una composicion farmaceutica que lo comprende y el uso de dicha composicion en el tratamiento y prevencion de estados patologicos
JP2002526482A (ja) * 1998-09-18 2002-08-20 バーテックス ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド ｐ３８のインヒビター
AU1127700A (en) * 1998-10-20 2000-05-08 Omeros Medical Systems, Inc. Irrigation solution containing mapk inhibitors and their use for treating pain and inflammation
US6548503B1 (en) 1998-11-04 2003-04-15 Smithkline Beecham Corporation Pyridin-4-yl or pyrimidin-4-yl substituted pyrazines
UA73492C2 (en) * 1999-01-19 2005-08-15 Aromatic heterocyclic compounds as antiinflammatory agents
JP2002537397A (ja) 1999-02-22 2002-11-05 ベーリンガー インゲルハイム ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド 抗炎症剤としての多環ヘテロ環式誘導体
EP1163236B1 (en) 1999-03-12 2005-11-09 Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals Inc. Aromatic heterocyclic compounds as anti-inflammatory agents
HUP0202248A3 (en) 1999-03-12 2006-06-28 Boehringer Ingelheim Pharma Compounds useful as anti-inflammatory agents
JP2000281588A (ja) * 1999-03-30 2000-10-10 Sankyo Co Ltd ガンの予防又は治療薬及びそのスクリーニング方法
JP2003503456A (ja) * 1999-07-02 2003-01-28 スチュアート エイ． リプトン 神経傷害またはアポトーシスを軽減する方法
MXPA02000314A (es) 1999-07-09 2004-06-22 Boehringer Ingelheim Pharma Proceso novedoso para la sintesis de compuestos de urea substituidos con heteroarilo.
KR100523120B1 (ko) * 1999-10-21 2005-10-20 에프. 호프만-라 로슈 아게 Ｐ38 단백질 키나제 저해제로서 헤테로알킬아미노-치환된이환 질소 헤테로환
PL357494A1 (en) * 1999-10-21 2004-07-26 F.Hoffmann-La Roche Ag Alkylamino substituted bicyclic nitrogen heterocycles as inhibitors of p38 protein kinase
US6759410B1 (en) 1999-11-23 2004-07-06 Smithline Beecham Corporation 3,4-dihydro-(1H)-quinazolin-2-ones and their use as CSBP/p38 kinase inhibitors
JP2003528043A (ja) 1999-11-23 2003-09-24 スミスクライン・ビーチャム・コーポレイション ＣＳＢＰ／ｐ３８キナーゼ阻害剤としての３，４‐ジヒドロ−（１Ｈ）キナゾリン−２−オン化合物
WO2001038314A1 (en) 1999-11-23 2001-05-31 Smithkline Beecham Corporation 3,4-dihydro-(1h)quinazolin-2-one compounds as csbp/p38 kinase inhibitors
US6525046B1 (en) 2000-01-18 2003-02-25 Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals, Inc. Aromatic heterocyclic compounds as antiinflammatory agents
US6608052B2 (en) 2000-02-16 2003-08-19 Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals, Inc. Compounds useful as anti-inflammatory agents
US7235551B2 (en) 2000-03-02 2007-06-26 Smithkline Beecham Corporation 1,5-disubstituted-3,4-dihydro-1h-pyrimido[4,5-d]pyrimidin-2-one compounds and their use in treating csbp/p38 kinase mediated diseases
WO2001070695A1 (en) * 2000-03-22 2001-09-27 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Pyridine derivatives as inhibitors of p38
AU2001283237B2 (en) * 2000-08-11 2007-09-20 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Pyridine derivatives as inhibitors of p38
PE20020506A1 (es) * 2000-08-22 2002-07-09 Glaxo Group Ltd Derivados de pirazol fusionados como inhibidores de la proteina cinasa
US7998507B2 (en) * 2000-09-21 2011-08-16 Elan Pharma International Ltd. Nanoparticulate compositions of mitogen-activated protein (MAP) kinase inhibitors
EP2404603A1 (en) 2000-10-23 2012-01-11 Glaxosmithkline LLC Novel trisubstituted-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-one compounds for the treatment of CSBP/p38 kinase mediated diseases
US6867300B2 (en) * 2000-11-17 2005-03-15 Bristol-Myers Squibb Company Methods for the preparation of pyrrolotriazine compounds useful as kinase inhibitors
US6670357B2 (en) * 2000-11-17 2003-12-30 Bristol-Myers Squibb Company Methods of treating p38 kinase-associated conditions and pyrrolotriazine compounds useful as kinase inhibitors
JP2004521892A (ja) * 2000-12-20 2004-07-22 メルク　エンド　カムパニー　インコーポレーテッド （ハロ−ベンゾカルボニル）複素環縮合フェニル系ｐ３８キナーゼ阻害剤
HU229604B1 (en) * 2001-02-12 2014-02-28 Hoffmann La Roche 6-substituted pyrido-pyrimidines, process for their preparation and pharmaceutical compositions containing them
GB0112348D0 (en) * 2001-05-19 2001-07-11 Smithkline Beecham Plc Compounds
GB2375771A (en) * 2001-05-24 2002-11-27 Univ Leeds Decellularisation of tissue implant material
EP2036891A3 (en) 2001-06-11 2009-03-25 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Isoquinoline inhibitors of P38
US20030066998A1 (en) 2001-08-02 2003-04-10 Lee Howard Wing Hoon Quantum dots of Group IV semiconductor materials
US6794265B2 (en) 2001-08-02 2004-09-21 Ultradots, Inc. Methods of forming quantum dots of Group IV semiconductor materials
US6710366B1 (en) 2001-08-02 2004-03-23 Ultradots, Inc. Nanocomposite materials with engineered properties
US6819845B2 (en) 2001-08-02 2004-11-16 Ultradots, Inc. Optical devices with engineered nonlinear nanocomposite materials
US7005669B1 (en) 2001-08-02 2006-02-28 Ultradots, Inc. Quantum dots, nanocomposite materials with quantum dots, devices with quantum dots, and related fabrication methods
GB0124939D0 (en) * 2001-10-17 2001-12-05 Glaxo Group Ltd Chemical compounds
GB0124933D0 (en) * 2001-10-17 2001-12-05 Glaxo Group Ltd Chemical compounds
GB0124936D0 (en) * 2001-10-17 2001-12-05 Glaxo Group Ltd Chemical compounds
GB0124938D0 (en) * 2001-10-17 2001-12-05 Glaxo Group Ltd Chemical compounds
GB0124931D0 (en) * 2001-10-17 2001-12-05 Glaxo Group Ltd Chemical compounds
GB0124941D0 (en) * 2001-10-17 2001-12-05 Glaxo Group Ltd Chemical compounds
GB0124932D0 (en) * 2001-10-17 2001-12-05 Glaxo Group Ltd Chemical compounds
GB0124934D0 (en) * 2001-10-17 2001-12-05 Glaxo Group Ltd Chemical compounds
WO2003060102A2 (en) * 2002-01-11 2003-07-24 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Crystal structures of jnk-inhibitor complexes and binding pockets thereof
AU2003209321A1 (en) * 2002-01-18 2003-07-30 Pharmacia Corporation Substituted pyridazinones as inhibitors of p38
BRPI0307351B8 (pt) * 2002-02-12 2021-05-25 Smithkline Beecham Corp composto, composição farmacêutica, uso de um composto, e, processo para preparar um composto
US7041669B2 (en) 2002-02-25 2006-05-09 Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals, Inc. 1,4-benzofused urea compounds useful in treating cytokine mediated diseases
AU2003223579A1 (en) * 2002-04-18 2003-11-03 Pharmacia Corporation Combinations of cox-2 inhibitors and other agents for the treatment of parkinson's disease
MXPA04010267A (es) 2002-04-19 2005-02-03 Smithkline Beecham Corp Compuestos novedosos.
US7388009B2 (en) * 2002-04-23 2008-06-17 Bristol-Myers Squibb Company Heteroaryl-substituted pyrrolo-triazine compounds useful as kinase inhibitors
EP1497019B1 (en) 2002-04-23 2015-05-20 Bristol-Myers Squibb Company Pyrrolo-triazine aniline compounds useful as kinase inhibitors
JP2005529890A (ja) * 2002-04-23 2005-10-06 ブリストル−マイヤーズ　スクイブ　カンパニー キナーゼ阻害剤として有用なアリールケトンピロロトリアジン化合物
TW200400034A (en) * 2002-05-20 2004-01-01 Bristol Myers Squibb Co Pyrazolo-pyrimidine aniline compounds useful as kinase inhibitors
NZ537155A (en) * 2002-05-23 2006-09-29 Cytopia Pty Ltd Protein kinase inhibitors
WO2004004725A2 (en) 2002-07-09 2004-01-15 Boehringer Ingelheim Pharma Gmbh & Co. Kg Pharmaceutical compositions of anticholinergics and p38 kinase inhibitors in the treatment of respiratory diseases
GB0217757D0 (en) 2002-07-31 2002-09-11 Glaxo Group Ltd Novel compounds
AU2003299568B2 (en) 2002-11-27 2010-07-22 Ampio Pharmaceuticals, Inc. Treatment of diseases and conditions mediated by increased phosphorylation
GB0308201D0 (en) * 2003-04-09 2003-05-14 Smithkline Beecham Corp Novel compounds
GB0308185D0 (en) * 2003-04-09 2003-05-14 Smithkline Beecham Corp Novel compounds
GB0308186D0 (en) * 2003-04-09 2003-05-14 Smithkline Beecham Corp Novel compounds
ES2350837T3 (es) * 2003-05-01 2011-01-27 Bristol-Myers Squibb Company Compuestos de pirazol-amida sustituidos con arilo útiles como inhibidores de quinasas.
US7902192B2 (en) 2003-05-15 2011-03-08 Arqule, Inc. Inhibitors of P38 and methods of using the same
AU2004251668B2 (en) * 2003-06-03 2008-03-20 Triad Therapeutics, Inc 5-membered heterocycle-based p-38 inhibitors
ES2393950T3 (es) 2003-06-26 2013-01-02 Novartis Ag Inhibidores de la quinasa P38 con base en heterociclos de 5 miembros
WO2005007632A1 (en) * 2003-07-18 2005-01-27 Pharmacia Corporation Substituted pyridazinones as inhibitors of p38
DE602004017494D1 (de) 2003-07-25 2008-12-11 Novartis Ag Inhibitoren von p-38-kinase
GB0318814D0 (en) * 2003-08-11 2003-09-10 Smithkline Beecham Corp Novel compounds
US7419978B2 (en) * 2003-10-22 2008-09-02 Bristol-Myers Squibb Company Phenyl-aniline substituted bicyclic compounds useful as kinase inhibitors
PT2277865E (pt) 2003-12-03 2015-02-05 Ym Biosciences Australia Pty Heterociclos de azoto de anel de 6 membros fenil substituídos como inibidores de polimerização de microtúbulos
GB0402143D0 (en) * 2004-01-30 2004-03-03 Smithkline Beecham Corp Novel compounds
WO2006010082A1 (en) 2004-07-08 2006-01-26 Arqule, Inc. 1,4-disubstituted naphtalenes as inhibitors of p38 map kinase
US7504521B2 (en) * 2004-08-05 2009-03-17 Bristol-Myers Squibb Co. Methods for the preparation of pyrrolotriazine compounds
US20060035893A1 (en) 2004-08-07 2006-02-16 Boehringer Ingelheim International Gmbh Pharmaceutical compositions for treatment of respiratory and gastrointestinal disorders
TW200618803A (en) 2004-08-12 2006-06-16 Bristol Myers Squibb Co Process for preparing pyrrolotriazine aniline compounds useful as kinase inhibitors
WO2006021848A1 (en) * 2004-08-27 2006-03-02 Ranbaxy Laboratories Limited Anti-inflammatory agents
US20080051416A1 (en) * 2004-10-05 2008-02-28 Smithkline Beecham Corporation Novel Compounds
EP2258704A1 (en) 2004-10-19 2010-12-08 ArQule, Inc. Synthesis of imidazooxazole and imidazothiazole inhibitors of p38 map kinase
PE20060777A1 (es) 2004-12-24 2006-10-06 Boehringer Ingelheim Int Derivados de indolinona para el tratamiento o la prevencion de enfermedades fibroticas
US20060178388A1 (en) * 2005-02-04 2006-08-10 Wrobleski Stephen T Phenyl-substituted pyrimidine compounds useful as kinase inhibitors
TW200724142A (en) 2005-03-25 2007-07-01 Glaxo Group Ltd Novel compounds
US20090137550A1 (en) 2005-03-25 2009-05-28 Glaxo Group Limited Novel Compounds
PE20061351A1 (es) 2005-03-25 2007-01-14 Glaxo Group Ltd COMPUESTOS 8H-PIRIDO[2,3-d]PIRIMIDIN-7-ONA 2,4,8-TRISUSTITUIDOS COMO INHIBIDORES DE LA QUINASA CSBP/RK/p38
EP1865959A2 (en) 2005-03-25 2007-12-19 Glaxo Group Limited Process for preparing pyridoý2,3-d¨pyrimidin-7-one and 3,4-dihydropyrimidoý4,5-d¨pyrimidin-2(1h)-one derivatives
US20060235020A1 (en) * 2005-04-18 2006-10-19 Soojin Kim Process for preparing salts of 4-[[5-[(cyclopropylamino)carbonyl]-2-methylphenyl]amino]-5-methyl-N-propylpyrrolo[2,1-f][1,2,4]triazine-6-carboxamide and novel stable forms produced therein
GB0512429D0 (en) * 2005-06-17 2005-07-27 Smithkline Beecham Corp Novel compound
US7473784B2 (en) * 2005-08-01 2009-01-06 Bristol-Myers Squibb Company Benzothiazole and azabenzothiazole compounds useful as kinase inhibitors
JP5113751B2 (ja) * 2005-08-12 2013-01-09 メルク・シャープ・エンド・ドーム・コーポレイション ｐ３８キナーゼ阻害剤として有用な二環性複素環化合物
CA2627497C (en) 2005-10-28 2014-10-14 Takeda Pharmaceutical Company Limited Heterocyclic amide compound and use thereof
CA2645031A1 (en) * 2006-03-07 2007-09-13 Bristol-Myers Squibb Company Pyrrolotriazine aniline prodrug compounds useful as kinase inhibitors
JP2010508288A (ja) 2006-10-27 2010-03-18 ブリストル−マイヤーズ スクイブ カンパニー キナーゼ阻害剤として有用なヘテロサイクリックアミド化合物
US7943617B2 (en) * 2006-11-27 2011-05-17 Bristol-Myers Squibb Company Heterobicyclic compounds useful as kinase inhibitors
CA2681420A1 (en) * 2007-03-20 2008-09-25 Cadila Pharmaceuticals Limited P38 inhibitors
EP1992344A1 (en) 2007-05-18 2008-11-19 Institut Curie P38 alpha as a therapeutic target in pathologies linked to FGFR3 mutation
EP2108641A1 (en) * 2008-04-11 2009-10-14 Laboratorios Almirall, S.A. New substituted spiro[cycloalkyl-1,3'-indo]-2'(1'H)-one derivatives and their use as p38 mitogen-activated kinase inhibitors
EP2111861A1 (en) 2008-04-21 2009-10-28 Ranbaxy Laboratories Limited Compositions of phosphodiesterase type IV inhibitors
EP2307411B1 (en) * 2008-06-20 2014-01-01 Bristol-Myers Squibb Company Triazolopyridine compounds useful as kinase inhibitors
US8338604B2 (en) 2008-06-20 2012-12-25 Bristol-Myers Squibb Company Imidazopyridine and imidazopyrazine compounds useful as kinase inhibitors
WO2010038428A1 (ja) * 2008-09-30 2010-04-08 武田薬品工業株式会社 タキサン系抗がん剤の置き換え薬
US8450363B2 (en) 2009-02-06 2013-05-28 Elan Pharmaceuticals, Inc. Inhibitors of Jun N-terminal kinase
GB0902648D0 (en) * 2009-02-17 2009-04-01 Argenta Discovery Ltd Pharmaceutical compounds and compositions
GB0908317D0 (en) * 2009-05-14 2009-06-24 Argenta Discovery Ltd Pharmaceutical compounds and compositions
WO2012031057A1 (en) 2010-09-01 2012-03-08 Bristol-Myers Squibb Company Bms- 582949 for the treatment of resistant rheumatic disease
CN103842362B (zh) * 2011-05-09 2017-05-24 爱普制药有限责任公司 用于治疗阿尔茨海默氏病的组合物和方法
EP2799537B1 (en) 2011-12-28 2021-09-22 Kyoto Prefectural Public University Corporation Normalization of culture of corneal endothelial cells
CN103772392A (zh) * 2012-10-23 2014-05-07 杨子娇 一类治疗房角狭窄的化合物及其用途
CA2928626C (en) 2013-11-14 2023-03-14 The Doshisha Drug for treating corneal endothelium by promoting cell proliferation or inhibiting cell damage
EP3166610B1 (en) 2014-07-09 2022-11-02 Eip Pharma, LLC Methods for treating neurologic disorders
EP3368052B1 (en) 2015-10-27 2021-12-08 Children's Hospital Medical Center Use of mapk inhibitors to reduce loss of hematopoietic stem cells during ex vivo culture and genetic manipulation
US20190060286A1 (en) 2016-02-29 2019-02-28 University Of Florida Research Foundation, Incorpo Chemotherapeutic Methods
US11466008B2 (en) 2017-09-18 2022-10-11 Eip Pharma, Llc Co-crystals of neflamapimod (VX-745)
WO2019071144A1 (en) 2017-10-05 2019-04-11 Fulcrum Therapeutics, Inc. USE OF P38 INHIBITORS TO REDUCE DUX4 EXPRESSION
US10342786B2 (en) 2017-10-05 2019-07-09 Fulcrum Therapeutics, Inc. P38 kinase inhibitors reduce DUX4 and downstream gene expression for the treatment of FSHD
MD3762368T2 (ro) 2018-03-08 2022-07-31 Incyte Corp Compuși diol aminopirazină ca inhibitori ai PI3K-Y
US11046658B2 (en) 2018-07-02 2021-06-29 Incyte Corporation Aminopyrazine derivatives as PI3K-γ inhibitors
CN111253404B (zh) * 2018-11-30 2023-05-23 上海医药集团股份有限公司 含氮杂环类化合物及其组合物、制备方法和应用

Family Cites Families (15)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5716972A (en) * 1993-01-13 1998-02-10 Smithkline Beecham Corporation Pyridyl substituted imidazoles
IL110296A (en) * 1993-07-16 1999-12-31 Smithkline Beecham Corp Imidazole compounds process for their preparation and pharmaceutical compositions containing them
WO1995021654A1 (fr) * 1994-02-10 1995-08-17 Vladimir Ivanovich Ivanov Dispositif de phono-electrophorese
US5559137A (en) * 1994-05-16 1996-09-24 Smithkline Beecham Corp. Compounds
NZ302117A (en) * 1995-01-12 1999-10-28 Smithkline Beecham Corp 1-cycloalkyl or cycloalkylalkyl 4,5-trisubstituted imidazole derivatives and medicaments
DE69637948D1 (de) * 1995-10-06 2009-07-23 Merck & Co Inc Substituierte imidazole mit krebsremmender und cytokininhibierender wirkung
US5717100A (en) * 1995-10-06 1998-02-10 Merck & Co., Inc. Substituted imidazoles having anti-cancer and cytokine inhibitory activity
GB9523675D0 (en) * 1995-11-20 1996-01-24 Celltech Therapeutics Ltd Chemical compounds
ZA97175B (en) * 1996-01-11 1997-11-04 Smithkline Beecham Corp Novel substituted imidazole compounds.
EP0914450A1 (en) * 1996-05-20 1999-05-12 Signal Pharmaceuticals, Inc. MITOGEN-ACTIVATED PROTEIN KINASE p38-2 AND METHODS OF USE THEREFOR
EP0906307B1 (en) * 1996-06-10 2005-04-27 Merck & Co., Inc. Substituted imidazoles having cytokine inhibitory activity
GB9613021D0 (en) * 1996-06-21 1996-08-28 Pharmacia Spa Bicyclic 4-aralkylaminopyrimidine derivatives as tyrosine kinase inhibitors
CA2260213C (en) * 1996-07-11 2005-03-29 Pfizer Inc. Pyridylpyrrole compounds useful as interleukin- and tnf antagonists
JP2001506230A (ja) * 1996-08-09 2001-05-15 スミスクライン・ビーチャム・コーポレイション 新規ピペラジン含有化合物
US5945418A (en) * 1996-12-18 1999-08-31 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Inhibitors of p38

Also Published As

Publication number Publication date
ID21919A (id) 1999-08-12
ES2202658T3 (es) 2004-04-01
AP1136A (en) 2003-01-31
AP9901565A0 (en) 1999-06-30
CN1244867A (zh) 2000-02-16
DK0951467T3 (da) 2003-07-21
TW521071B (en) 2003-02-21
JP2001506266A (ja) 2001-05-15
NO992960L (no) 1999-08-17
CN1153770C (zh) 2004-06-16
EA199900559A1 (ru) 2000-02-28
PL334133A1 (en) 2000-02-14
PL202464B1 (pl) 2009-06-30
DE69720522D1 (de) 2003-05-08
SK80599A3 (en) 2000-01-18
US6147080A (en) 2000-11-14
BR9714415A (pt) 2000-04-18
CN1519240A (zh) 2004-08-11
EE9900252A (et) 1999-12-15
CZ299600B6 (cs) 2008-09-17
NO315047B1 (no) 2003-06-30
EP0951467A1 (en) 1999-10-27
JP4171072B2 (ja) 2008-10-22
SK284578B6 (sk) 2005-07-01
CA2274825A1 (en) 1998-06-25
EE04191B1 (et) 2003-12-15
AU5610598A (en) 1998-07-15
PT951467E (pt) 2003-08-29
ATE236165T1 (de) 2003-04-15
WO1998027098A1 (en) 1998-06-25
HUP0001125A3 (en) 2002-01-28
IL130349A0 (en) 2000-06-01
HUP0001125A2 (hu) 2000-10-28
BG103575A (en) 2000-06-30
BG64533B1 (bg) 2005-06-30
AU738000B2 (en) 2001-09-06
HK1023340A1 (en) 2000-09-08
EA002855B1 (ru) 2002-10-31
CN1284783C (zh) 2006-11-15
NZ336146A (en) 2000-09-29
IS5069A (is) 1999-06-07
DE69720522T2 (de) 2003-11-27
CA2274825C (en) 2008-08-26
EP0951467B1 (en) 2003-04-02
NO992960D0 (no) 1999-06-17
TR199902194T2 (xx) 2000-06-21

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EP0951467B1 (en) SUBSTITUTED NITROGEN CONTAINING HETEROCYCLES AS INHIBITORS OF p38 PROTEIN KINASE
JP4704560B2 (ja) ｐ３８の複素環式インヒビター
US8338412B2 (en) Inhibitors of P38
JP2012149085A (ja) Ｐ３８のインヒビターとしてのピリジン誘導体
AU2001283237A1 (en) Pyridine derivatives as inhibitors of p38
JP2004506042A5 (cs)
KR100559917B1 (ko) ｐ38 프로테인 키나아제의 저해제로서 치환된 질소를 함유하는헤테로사이클
HK1023340B (en) Substituted nitrogen containing heterocycles as inhibitors of p38 protein kinase
MXPA00011076A (en) Heterocyclic inhibitors of p38

Legal Events

Date Code Title Description
PD00 Pending as of 2000-06-30 in czech republic
MM4A Patent lapsed due to non-payment of fee

Effective date: 20091217