CZ281165B6 - Trifluormethylmerkaptanové a merkaptoacylové deriváty a způsob jejich přípravy a použití - Google Patents

Trifluormethylmerkaptanové a merkaptoacylové deriváty a způsob jejich přípravy a použití Download PDF

Info

Publication number
CZ281165B6
CZ281165B6 CS91765A CS76591A CZ281165B6 CZ 281165 B6 CZ281165 B6 CZ 281165B6 CS 91765 A CS91765 A CS 91765A CS 76591 A CS76591 A CS 76591A CZ 281165 B6 CZ281165 B6 CZ 281165B6
Authority
CZ
Czechia
Prior art keywords
ethyl acetate
mmol
carbon atoms
group
give
Prior art date
Application number
CS91765A
Other languages
English (en)
Inventor
Norma G. Delaney
George C. Rovnyak
Melanie Loots
Original Assignee
E.R. Squibb & Sons, Inc.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by E.R. Squibb & Sons, Inc. filed Critical E.R. Squibb & Sons, Inc.
Publication of CS9100765A2 publication Critical patent/CS9100765A2/cs
Publication of CZ281165B6 publication Critical patent/CZ281165B6/cs

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C323/00—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups
    • C07C323/50—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups containing thio groups and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton
    • C07C323/51—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups containing thio groups and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton having the sulfur atoms of the thio groups bound to acyclic carbon atoms of the carbon skeleton
    • C07C323/60—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups containing thio groups and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton having the sulfur atoms of the thio groups bound to acyclic carbon atoms of the carbon skeleton with the carbon atom of at least one of the carboxyl groups bound to nitrogen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C319/00—Preparation of thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides
    • C07C319/02—Preparation of thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides of thiols
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/185—Acids; Anhydrides, halides or salts thereof, e.g. sulfur acids, imidic, hydrazonic or hydroximic acids
    • A61K31/19—Carboxylic acids, e.g. valproic acid
    • A61K31/195—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having an amino group
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/02—Drugs for disorders of the urinary system of urine or of the urinary tract, e.g. urine acidifiers
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/10—Antioedematous agents; Diuretics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/08—Vasodilators for multiple indications
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/12—Antihypertensives
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C319/00—Preparation of thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides
    • C07C319/14—Preparation of thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides of sulfides
    • C07C319/20—Preparation of thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides of sulfides by reactions not involving the formation of sulfide groups
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C321/00—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides
    • C07C321/02—Thiols having mercapto groups bound to acyclic carbon atoms
    • C07C321/04—Thiols having mercapto groups bound to acyclic carbon atoms of an acyclic saturated carbon skeleton
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C327/00—Thiocarboxylic acids
    • C07C327/20—Esters of monothiocarboxylic acids
    • C07C327/32—Esters of monothiocarboxylic acids having sulfur atoms of esterified thiocarboxyl groups bound to carbon atoms of hydrocarbon radicals substituted by carboxyl groups
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D207/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D207/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D207/30—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having two double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D207/32—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having two double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with only hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D207/33—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having two double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with only hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, directly attached to ring carbon atoms with substituted hydrocarbon radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D207/337—Radicals substituted by carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D209/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings, condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D209/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings, condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom condensed with one carbocyclic ring
    • C07D209/04—Indoles; Hydrogenated indoles
    • C07D209/10—Indoles; Hydrogenated indoles with substituted hydrocarbon radicals attached to carbon atoms of the hetero ring
    • C07D209/18—Radicals substituted by carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C07D209/20—Radicals substituted by carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals substituted additionally by nitrogen atoms, e.g. tryptophane
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D209/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings, condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D209/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings, condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom condensed with one carbocyclic ring
    • C07D209/44—Iso-indoles; Hydrogenated iso-indoles
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D213/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/04—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D213/24—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with substituted hydrocarbon radicals attached to ring carbon atoms
    • C07D213/36—Radicals substituted by singly-bound nitrogen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D213/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/04—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D213/24—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with substituted hydrocarbon radicals attached to ring carbon atoms
    • C07D213/54—Radicals substituted by carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C07D213/56—Amides
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D213/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/04—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D213/24—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with substituted hydrocarbon radicals attached to ring carbon atoms
    • C07D213/54—Radicals substituted by carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C07D213/59—Radicals substituted by carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals with at least one of the bonds being to sulfur
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D213/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/04—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D213/60—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D213/78—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms, with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C07D213/79—Acids; Esters
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D231/00—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazole or hydrogenated 1,2-diazole rings
    • C07D231/54—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazole or hydrogenated 1,2-diazole rings condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D231/56—Benzopyrazoles; Hydrogenated benzopyrazoles
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D257/00—Heterocyclic compounds containing rings having four nitrogen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D257/02—Heterocyclic compounds containing rings having four nitrogen atoms as the only ring hetero atoms not condensed with other rings
    • C07D257/04—Five-membered rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D307/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom
    • C07D307/77—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D307/78—Benzo [b] furans; Hydrogenated benzo [b] furans
    • C07D307/79—Benzo [b] furans; Hydrogenated benzo [b] furans with only hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, directly attached to carbon atoms of the hetero ring
    • C07D307/81—Radicals substituted by nitrogen atoms not forming part of a nitro radical
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
    • C07D403/06—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings linked by a carbon chain containing only aliphatic carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C07K5/06191—Dipeptides containing heteroatoms different from O, S, or N

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Reproductive Health (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Indole Compounds (AREA)
  • Pyrrole Compounds (AREA)
  • Steroid Compounds (AREA)
  • Furan Compounds (AREA)
  • Pyridine Compounds (AREA)

Abstract

Trifluormethylmerkaptanové a merkaptoacylové deriváty představující inhibitory neutrální endopeptidázy, které jsou použitelné jako kardiovaskulační činidla, mají obecný vzorec I. Sloučeniny obecného vzorce I se připraví tak, že se na aktivovanou formu karboxylové kyseliny obecného vzorce II aduje sloučenina obecného vzorce H.sub.2.n.N-X nebo hydrochloridová sůl této sloučeniny.ŕ

Description

Trifluormethylmerkaptanové a merkaptoacylové deriváty a způsob jejich přípravy
Oblast techniky
Vynález se týká trifluormethylmerkaptanových a merkaptoacylových derivátů, které představují neutrální inhibitory endopeptidázy, a způsobu přípravy těchto sloučenin. Pokud se týče použití je možno tyto sloučeniny použít například jako kardiovaskulárních činidel a jako léčiv pro mnohá další použití.
Podstata vynálezu
Podstatu uvedeného vynálezu tvoří trifluormethylmerkaptanové a merkaptoacylové deriváty obecného vzorce I cf3 «=Η2)η
R3-S-CH2-CH-C-NH-X (I)
ve kterém X znamená skupiny
Tx 1 R, 0 1 II
CH -- * (CH2)p Y nebo 1 II - CH - C - Z
m
Y znamená -cor2 r
J
cor2
fenylovou skupinu, fenylovou skupinu substituovanou alkylovou
skupinou obsahuj ící 1 až 4 atomy uhlíku, alkoxyskupinou obsahují-
cí 1 až 4 atomy uhlíku, alkylthioskupinou obsahující 1 až 4 atomy uhlíku, hydroxyskupinou, atomem halogenu, nitroskupinou nebo trifluormethylovou skupinou, nebo znamená heterocyklickou skupinu vybranou ze souboru zahrnujícího thiazolylovou skupinu, 4,5-dihydrothiazolylovou skupinu, pyridylovou skupinu, oxazolylovou skupinu, isoxazolylovou skupinu, imidazolylovou skupinu, tetrazolylovou skupinu, benzimidazolyolovou skupinu, benzothiazolylovou skupinu nebo benzoxazolylovou skupinu, nebo shora uvedené heterocyklické skupiny substituované substituenty zvolenými ze souboru zahrnujícího alkylové skupiny obsahující 1 až 4 atomy uhlíku a fenylovou skupinu,
-iCZ 281165 B6
Z znamená skupinu
(L)
m je nula nebo 1, n je nula, 1 nebo 2, p je nula nebo 1 až 6, t je 2, 3 nebo 4, s tou podmínkou, že m a Y znamená skupinu p jsou oba nula, jestliže substituent
a dále s tou podmínkou, že m a p nejsou nula, jestliže substituentem Y je skupina -COR2,
R^_ a Rg jsou substituenty nezávisle vybrané ze souboru zahrnujícího atom vodíku, alkylové skupiny obsahující 1 až 7 atomů uhlíku, halogenem substituované alkylové skupiny obsahující 1 až 7 atomů uhlíku,
-2CZ 281165 B6
-(CH2)r-cykloalkylovou skupinu, kde cykloalkylová část představuje nasycený kruh obsahující 4 až 7 atomů uhlíku, -(CH2)r-(a-naftylovou) skupinu, -(CH2)r~(β-naftylovou) skupinu,
----(CH,)r-
H
-(CH2)r-NH2, -(CH2)r-SH, -(CH2)r-S-(alkylová skupina obsahující až 7 atomů uhlíku), -(CH2)r-OH,
-(CH2)r-O- (alkylová skupina obsahující 1 až 7 atomů uhlíku),
-3CZ 281165 B6
--- (CIÍ2>r
R2 a R9 představuji nezávisle hydroxyskupinu, alkoxyskupinu
obsahující 1 až 7 atomů uhlíku, fenylalkoxyskupinu, kde alkoxy část obsahuje 1 až 7 atomů uhlíku,
--OCH
-O~M+, kde M+ je kovový iont tvořící sůl,
II
-o-ch-oc-r7 nebo
-NRR' kde R a R* jsou vodíku, alkylovou nu nezávisle vybrány ze souboru zahrnujícího atom skupinu obsahující 1 až 7 atomů uhlíku a skupi-
R7 je atom vodíku nebo skupina Rc-CII o
R4 je atom vodíku, alkylová skupina obsahující 1 až 4 atomy uhlíku, alkoxyskupina obsahující 1 až 4 atomy uhlíku, alkylthioskupina obsahující 1 až 4 atomy uhlíku, atom halogenu, hydroxyskupina, CF3, fenylová skupina,
-4CZ 281165 B6
R5 znamená alkylovou skupinu obsahující 1 až 7 atomů uhlíku, skupinu
-(CH2)r-(α-naftylovou) skupinu, -(CH2)r-(β-naftylovou) skupinu, ~(CH2)r-cykloalkylovou skupinu, kde cykloalkylová část představuje nasycený kruh obsahující 4 až 7 atomů uhlíku,
---(CH2)q
---(CH2)q
Rg znamená atom vodíku, alkylovou skupinu obsahující 1 až 7 atomů uhlíku, nasycený cykloalkylový kruh obsahující 4 až 7 atomů uhlíku nebo fenylovou skupinu,
R7 znamená atom vodíku, alkylovou skupinu obsahující 1 až 7 atomu uhlíku, alkoxyskupinu obsahující 1 až 7 atomů uhlíku nebo fenylovou skupinu, r je celé číslo od 1 do 4, a g je celé číslo od 1 do 7.
Výhodnými trifluormethylmerkaptanovými a merkaptoacylovými deriváty obecného vzorce I podle uvedeného vynálezu jsou sloučeniny ve kterých znamená:
-5CZ 281165 B6
X skupiny
R-, O
I II (CH2)p — Y nebo - CH - C - Z
Y znamená -COR2z
fenylovou skupinu, fenylovou skupinu substituovanou alkylovou skupinou obsahující 1 až 4 atomy uhlíku, alkoxyskupinou obsahující 1 až 4 atomy uhlíku, alkylthioskupinou obsahující 1 až 4 atomy uhlíku, hydroxyskupinou, atomem halogenu, nitroskupinou nebo trifluormethylovou skupinou, nebo znamená heterocyklickou skupinu vybranou ze souboru zahrnujícího thiazolylovou skupinu, 4,5-dihydrothiazolylovou skupinu, pyridylovou skupinu, oxazolylovou skupinu, isoxazolylovou skupinu, imidazolylovou skupinu, tetrazolylovou skupinu, benzimidazolylovou skupinu, benzothiazolylovou skupinu nebo benzoxazolylovou skupinu, nebo shora uvedené heterocyklické skupiny substituované substituenty zvolenými ze souboru zahrnujícího alkylové skupiny obsahující 1 až 4 atomy uhlíku a fenylovou skupinu,
Z znamená
cor2 m je nula nebo 1, n je nula, 1 nebo 2, p je nula nebo 1 až 6, t je 2, 3 nebo 4, s tou podmínkou, že m a p jsou oba nula, jestliže substituent Y znamená skupinu
a dále s tou podmínkou, že m a p nejsou nula, jestliže substituent Y je skupina -COR2,
-6CZ 281165 B6
R^ a Rg jsou substituenty nezávisle vybrané ze souboru zahrnujícího atom vodíku, alkylové skupiny obsahující 1 až 7 atomů uhlíku, halogenem substituované alkylové skupiny obsahující 1 až 7 atomů uhlíku,
(CH2)r ----CORg ,
-(CH2)r-cykloalkylovou skupinu, kde cykloalkylová část představuje nasycený kruh obsahující 4 až 7 atomů uhlíku, -(CH2)r-(a-naftylovou) skupinu, -(CH2)r-(0-naftylovou) skupinu,
H
----(CH2)r-
-(CH2)r-NH2, -(CH2)r-SH, -(CH2)r-S-(alkylová skupina obsahující až 7 atomů uhlíku), -(CH2)r~OH,
-(CH2)r-O-(alkylová skupina obsahující 1 až 7 atomů uhlíku),
-7CZ 281165 B6 nebo (CH2)r
NH //
NH -- C \
nh2
R2 a Rg představují nezávisle hydroxyskupinu, alkoxyskupinu obsahující 1 část obsahuje až 7 atomů uhlíku, fenylalkoxyskupinu, kde
-0”M+, kde M+ je kovový iont tvořící sůl,
O
II
-o-ch-oc-r7 nebo -NRR', alkoxy kde R a R' jsou nezávisle vybrány ze souboru zahrnujícího atom vodíku, alkylovou skupinu obsahující 1 až 7 atomů uhlíku a skupinu
R-j je atom vodíku nebo skupina R5-CO
R4 je atom vodíku, alkylová skupina obsahující 1 až 4 atomy uhlíku, alkoxyskupina obsahující 1 až 4 atomy uhlíku, alkylthioskupina obsahující 1 až 4 atomy uhlíku, atom halogenu, hydroxyskupina, CF3, fenylová skupina,
R5 znamená alkylovou skupinu obsahující 1 až 7 atomů uhlíku, skupinu
-8CZ 281165 B6
-(CH2)r-(a-naftylovou) skupinu, -(CH2)r-(p-naftylovou) skupinu, -(CH2)r-cykloalkylovou skupinu, kde cykloalkylová část představuje nasycený kruh obsahující 4 až 7 atomů uhlíku,
---(CH2)q
R6 znamená atom vodíku, alkylovou skupinu obsahující 1 až 7 atomů uhlíku, nasycený cykloalkylový kruh obsahující 4 až 7 atomů uhlíku nebo fenylovou skupinu,
R7 znamená atom vodíku, alkylovou skupinu obsahující 1 až 7 atomů uhlíku, alkoxyskupinu obsahující 1 až 7 atomů uhlíku nebo fenylovou skupinu, r je celé číslo od 1 do 4, a g je celé číslo od 1 do 7,
Podstata postupu přípravy trifluormethylmerkaptoacylových derivátů obecného vzorce la:
Γ3 <CH2)n
-CH-C-NH-X * II o
II r5-c-s-ch2 (la)
-9CZ 281165 B6 ve kterém mají X, n a R5 stejný význam jako u shora uvedené skupiny výhodných sloučenin podle vynálezu, spočívá podle uvedeného vynálezu v tom, že se na karboxylovou kyselinu obecného vzorce II:
CF-.
I 3 jj (™2>n
R5-C-S-CH2-CH-COOH (II) ve kterém R5 a n mají stejný význam jako bylo uvedeno u shora uvedené skupiny výhodných sloučenin podle vynálezu, přičemž místo této karboxylové kyseliny obecného vzorce II může být také použit chlorid této kyseliny, aduje aminový meziprodukt obecného vzorce III:
h2n-x (III) nebo hydrochloridová sůl této sloučeniny, a tato adiční reakce se provádí v přítomnosti adičního činidla, kterým je například hydrochlorid 1-(3-dimethylaminopropyl) - 3-ethylkarbodiimidu.
Podstata merkaptanového druhé varianty postupu derivátu obecného vzorce přípravy trifluormethylIb:
(Ib) ve kterém mají X a n stejný význam jako u skupiny výhodných sloučenin podle vynálezu, spočívá podle že (a) na karboxylovou kyselinu obecného vzorce shora uvedených vynálezu v tom,
II:
II
r5-c-s-ch2-ch-cooh (II) ve kterém R^ a n mají stejný význam jako u shora uvedené výhodné skupiny sloučenin podle vynálezu, přičemž místo této karboxylové kyseliny může být také použit chlorid této kyseliny, se aduje aminový meziprodukt obecného vzorce III:
h2n-x (III) nebo hydrochloridová sůl této sloučeniny, přičemž se získá merkaptoacylová sloučenina:
-10CZ 281165 B6
9F3
Rr-C-S-CHo-CH-C-NH-X 5 2 * II o ve které mají R5, X a n stejný význam jako bylo uvedeno shora, a tato adiční reakce se provádí v přítomnosti adičního činidla, kterým je například hydrochlorid l-(3-dimethylaminopropyl)-3-ethylkarbodiimidu (b) a takto získaný produkt ze stupně (a) se potom zpracuje bazickou látkou, jako je například hydroxid sodný, hydroxylamin, nebo hydroxid amonný, čímž se získá požadovaný trifluormethylmerkaptanový derivát obecného vzorce I.
Ve výhodném provedení obou shora uvedených postupů se aminový meziprodukt obecného vzorce III zpracuje před reakcí s karboxylovou kyselinou obecného vzorce II bis(trimethylsilyl)trifluoracetamidem nebo bis(trimethylsilyl)acetamidem.
Sloučeniny podle uvedeného vynálezu představují neutrální inhibitory endopeptidázy, přičemž je možno obecně uvést, že se používají k léčeni poruch srdeční činnosti, ke kterým dochází v důsledku překrvení, dále ke snižování krevního tlaku a k vyvolání diuretázy a natriurézy, přičemž při tomto léčeni se podávají pacientům farmaceutické prostředky obsahující uvedené účinné sloučeniny. Podle uvedeného vynálezu bylo zcela neočekávané zjištěno, že sloučeniny obecného vzorce I s trifluormethylovými substituenty jsou o mnoho aktivnější jako neutrální endopeptidázové inhibitory než merkaptanové a merkaptoalkanoylové sloučeniny, které neobsahují tuto trifluormethylovu část.
Shora uvedeným terminem nižší alkylová skupina, který je použit v tomto textu k definováni různých zbytků, se míní uhlovodíkový řetězec s přímým nebo rozvětveným řetězcem obsahující až sedm atomů uhlíku, pokud nebude ve specifickém případě uvedeno jinak. Ve výhodném provedení podle uvedeného vynálezu jsou těmito nižšími alkylovými skupinami alkylové zbytky s přímým nebo rozvětveným řetězcem obsahující až čtyři atomy uhlíku. Podobně je možno uvést, že se termínem nižší alkoxyskupina a nižší alkylthioskupina, které jsou také uváděny v tomto textu, se míní nižší alkylové zbytky shora uvedeného typu připojené na kyslík nebo siru.
Shora uvedeným termínem cykloalkyl se míní nasycené cyklické skupiny, které obsahují 4 až 7 atomů uhlíku, přičemž podle nejvýhodnéjšího provedení podle vynálezu se touto cykloalkylovou skupinou mini cyklopentylová a cyklohexylová skupina.
Shora uvedeným termínem halogen se míní chlor, brom, fluor a jod.
Uváděným termínem nižší alkylová skupina substituovaná halogenem se mini shora uvedené nižší alkylové skupiny, u kterých je
-11CZ 281165 B6 jeden nebo více fluoru, přičemž f1uormethy1ovou v tomto směru, chlorethylovou skupinu, a další podobné skupiny.
nahrazeno atomem chloru, bromu nebo uvést tripředstavuje výhodnou skupinu atomů vodíku jako příklad těchto skupin je možno skupinu, která a dále pentafluorethylovou skupinu, 2,2,2-triskupinu, chlormethylovou skupinu, brommethylovou
Dále uvedenými strukturními vzorci:
atd., se míní to, že alkylenový můstek je připojen na přístupný atom uhlíku.
Jak již bylo uvedeno, sloučeniny obecného vzorce podle uvedeného vynálezu je možno připravit tak, že se na karboxylovou kyselinu obecného vzorce Ha:
cf3
R3-S-CH2-CH-COOH (Ha) ve kterém R3 znamená skupinu R5~CO a R5 a n mají stejný význam jako je uvedeno shora, aduje aminový derivát obecného vzorce III:
H2N-X (III)
Tento aminový derivát obecného vzorce III je možno použit pro tento postup bud ve formě volné bazické sloučeniny, nebo ve formě hydrochloridové soli. Karboxylová kyselina obecného vzorce II se ve výhodném provedení postupu podle vynálezu převede na svoji aktivovanou formu, jako je například chlorid kyseliny, směsný anhydrid a podobné.
Ve výhodném provedení postupu podle uvedeného vynálezu se aminová sloučenina obecného vzorce III nejdříve zpracuje bis(tri
-12CZ 281165 B6 methylsilyl)trifluoracetamidem nebo bis(trimethylsilyl)acetamidem v aprotickém rozpouštědle, jako je například tetrahydrofuran nebo acetonitril, přičemž potom následuje přídavek sloučeniny obecného vzorce II ve formě chloridu kyseliny.
Shora uvedená adiční reakce může být také provedena za použití chráněné formy sloučeniny obecného vzorce II, to znamená například sloučeniny lib:
cf3
Prot-S-CH2-CH-COOH (Hb) ve kterém znamená Prot chránící skupinu, jako je například p-methoxybenzylová skupina.
V následné fázi se potom odstranění chránící skupiny provede běžnými metodami podle dosavadního stavu techniky, jako je například postup uvedený v patentu Spojených států amerických č. 4 311 697, autor Krapcho.
V alternativním provedeni se tato reakce provádí v přítomnosti organické bazické sloučeniny, jako je například triethylamin. Pro tyto účely je možno použít dvou ekvivalentů aminového meziproduktu obecného vzorce III, která slouží jednak jako reakční složka a jednak jako bazická sloučeniny.
V případech, kdy aminový meziprodukt obecného vzorce III neobsahuje volnou karboxylovou kyselinu, je možno reakci kyseliny obecného vzorce II a aminové sloučeniny obecného vzorce III také provést za pomoci karbodiimidového reakčního činidla, které je rozpustné ve vodě, jako je například hydrochlorid 1-(3-dimethylaminopropyl)-3-ethylkarbodiimidu.
Takto získaný výsledný produkt, u něhož substituent X obsahuje skupinu -COR2 představující esterovou skupinu, se hydrolyzuje zpracováním s bazickou látkou, jako je například hydroxid sodný, za vzniku sloučeniny, ve které je substituentem R2 hydroxyskupina a substituentem R3 je atom vodíku, přičemž ovšem současně dochází k hydrolýze existující acylthioskupiny, to znamená sloučeniny, ve které R3 znamená skupinu
O
II r5c- .
S-acylové deriváty sloučenin obecného vzorce I (to znamená sloučeniny, ve kterých je substituentem R3 skupina
II r5cje možno zpracovat bazickou sloučeninou, jako je například hydroxid amonný, hydroxylamin, hydroxid sodný a podobné další látky,
-13CZ 281165 B6 za vzniku merkaptanových derivátů (to znamená sloučenin obecného vzorce I, ve kterých substituentem R3 je atom vodíku), přičemž se použije běžně známých metod podle dosavadního stavu techniky.
Předpokládá se jako samozřejmé, že dukt obecného vzorce I, to znamená sloučenina ve které je substituentem R3 atom vodíku, může ridem kyseliny obecného vzorce IV:
tento merkaptanový proobecného vzorce I, být acylován chlo- (IV) ve za které má R5 již shora uvedený význam, účelem zavedené dalších acylových skupin do uvedené sloučeniny.
Shora uvedené acylthiokarboxylové kyseliny obecného vzorce jsou popisovány v nejrůznějších publikacích, jak patentových, podle dosavadního stavu techniky. Například je že tyto karboxylové kyseliny, ve kterých n = 0, jsou patentu Spojených států amerických č. 4 154 935, a kol.
II tak literárních, možno uvést, popisovány v autor Ondetti
Chráněné připraví za amerických č.
thiokarboxylové kyseliny obecného vzorce lib se použití metody popisované v patentu Spojených států 4 311 097, autor Krapcho.
Sloučeniny obecného vzorce II, ve kterých má n jiný význam než nulu a substituentem R3 je skupina:
je možno připravit alkylaci esteru kyseliny malonové za pomoci sloučeniny obecného vzorce V:
(V) ve kterém L' znamená odštěpítelnou skupinu, jako je například jod nebo trifluormethansulfonyloxyskupina, přičemž se použije bazické sloučeniny, jako je například hydrid sodný nebo hexamethyldisilylazid draselný, v aprotickém rozpouštědle, jako je například tetrahydrofuran nebo dimethylformamid, za vzniku substituovaného ester kyseliny malonové obecného vzorce VI:
Saponifikací tohoto esteru kyseliny malonové obecného vzorce VI a provedením Mannichovy reakce s dimethylaminem a formaldehydem, se získá akrylová kyselina obecného vzorce VII:
(ch0)„cf3
(VII)
-14CZ 281165 B6 přičemž tato sloučenina potom reaguje s thiokyselinou za vzniku sloučeniny obecného vzorce II, ve které n je jiné číslo než nula a substituent R3 není vodík. Reakci sloučeniny obecného vzorce II, jak již bylo uvedeno, se získá S-acylový derivát a merkaptanový derivát obecného vzorce I, ve kterém n má jiný význam než nulu, také připraveny kondenzací aldehydu obecného vzorce Vlil:
cf3-(ch2)n_1-CHO (VIII) s malonovou kyselinou v přítomnosti acetylchloridu, za vzniku sloučeniny obecného vzorce IX:
CO,H /
CF3-(CH2)n_1-CH=C (IX) co2h
Katalytickou hydrogenaci za použití systému paladium/uhlík a provedením Mannichovy reakce a po přídavku thiokyseliny, jak již bylo podrobně shora uvedeno, se získá odpovídající sloučenina obecného vzorce II.
Ve shora uvedených reakcích, v případě, že substituenty R^ a R5 představuji skupiny:
-(CH2)r-NH2,
NH //
-(CH2)r-SH nebo -(CH2)r-NH-C nh2 potom aminová kyselina, imidazolylová skupina, merkaptanová skupina nebo guanidinylová skupina by měly být chráněny během prováděni adiční reakce. Mezi vhodné chránící skupiny je možno zařadit benzyloxykarbonylovou skupinu, t-butoxykarbonylovou skupinu, benzylovou skupinu, benzhydrylovou skupinu, tritylovou skupinu a podobné další skupiny, a dále nitroskupinu v případě guanidinylové skupiny. Tyto chránící skupiny se odstraní zpracováním konečného produktu s kyselinou nebo s jinými látkami za použiti jiných metod po dokončení shora uvedené reakce.
Esterový produkt obecného vzorce I, ve kterém substituent R9 znamená skupinu:
Z 0
II -0-CH-0-C-R-7
I R6
-15CZ 281165 B6 je možno získat zpracováním produktu je substituentem R, hydroxyskupina, XI obecného vzorce I, ve sloučeninou obecného kterém vzorce
(XI) ve kterém znamená L odštěpítelnou skupinu, jako je například chlor, brom, toluensulfonyloxyskupina a podobné další skupiny, přičemž se tato sloučenina použije v molárně ekvivalenntím množství a reakce se provede v přítomnosti bazické sloučeniny, jako je například triethylamin nebo uhličitan draselný, v polárním rozpouštědle, jako je například dimethylformamid.
Mezi další sloučeniny obecného vzorce I je možno zahrnout sloučeniny, ve kterých:
substituentem X jsou skupiny:
CH
T
--CH—COOH
--CH—COOH
--(CH2)2— COOH
Ý^COOH --CH—COOH ch3
--CH—COOH
---(CH2)2
N—N
N—N
-16CZ 281165 B6
nebo
substituentem R-, je atom vodíku nebo CHt-C-,
II o a n je nula nebo jedna, zejména jedna.
Sloučeniny obecného vzorce I, ve kterém znamená substituent R2 hydroxyskupinu, tvoří soli s různými anorganickými nebo organickými bazickými sloučeninami. Ve výhodném provedení podle uvedeného vynálezu jsou těmito solemi netoxické, farmaceuticky přijatelné soli, ovšem ostatní soli jsou také vhodné při isolování nebo čistění produktu. Mezi tyto farmaceuticky přijatelné soli je možno zahrnout soli odvozené od alkalických kovů, jako je například sodík, draslík nebo lithium, dále soli odvozené od kovů alkalických zemin, jako je například vápník nebo hořčík, a dále soli odvozené od aminokyselin, jako jsou například arginin, lysin, a podobné. Tyto soli se připraví reakcí uvedené sloučeniny v kyselinové formě s ekvivalentním množstvím bazické sloučeniny nahrazující požadovaný iont v prostředí, ve kterém tato sůl vypadává jako sraženina, nebo ve vodném prostředí, přičemž potom následuje lyofilizace.
Jak již bylo uvedeno shora, sloučeniny obecného vzorce I, ve kterém substituenty R·^ nebo Rg mají jiný význam než atom vodíku, obsahuji asymetrická centra, která jsou znázorněna křížkem (+) v obecném vzorci I. Další asymetrické centrum je přítomno v esterovém produktu, ve kterém substituent Rg má jiný význam než vodík. Ze shora uvedeného vyplývá, že sloučeniny podle uvedeného vynálezu obecného vzorce I mohou existovat v enantiomernich formách nebo v diastereoisomerních formách nebo jako směsi těchto forem. Ve shora uvedených postupech je možno použít racemáty, enantiomery nebo diastereomery jako výchozí sloučeniny. V případě, že se připravuji diastereomerni produkty, potom tyto produkty mohou být odděleny běžně známými chromatografickými metodami nebo postupem frakční krystalizace.
Sloučeniny obecného vzorce I podle uvedeného vynálezu inhibují aktivitu neutrální endopeptidázy (EC 3.4.24.11), což je membránová zinek-metalopeptidáza nacházející se v mnoha tkáních, včetně mozku a ledvin. Neutrální endopeptidáza hydrolyzuje peptidové vazby, které jsou na dusíkovém konci zbytků hydrofobních aminokyselin.
-17CZ 281165 B6
Aniž by byl nějakým způsobem omezován rozsah uvedeného vynálezu na konkrétní teoretické úvahy nebo na konkrétní mechanizmus působení sloučenin podle uvedeného vynálezu, předpokládá se, že inhibování neutrální endopeptidázy je výsledkem projevujícím se ve snížené inaktivaci exogenně podávaných nebo endogenně se vyskytujících atriálních natriuretických peptidů. Z tohoto důvodu je možno sloučeniny podle uvedeného vynálezu obecného vzorce I použít pro léčení hypertenze, při léčení poruch srdeční činnosti způsobených překrvením, při léčení selhání činnosti ledvin nebo při léčení cirhozy jater. Diurézy, natriurézy a snížení tlaku krve se dosáhne u savců, a zejména u lidí, při podání sloučenin podle uvedeného vynálezu v množství v rozmezí od asi 1 miligramu do asi 100 miligramů na kilogram tělesné hmotnosti za den, ve výhodném provedení při podání dávky těchto sloučenin podle uvedeného vynálezu v rozmezí od asi 1 miligramu do asi 50 miligramů na kilogram tělesné hmotnosti za den, přičemž v této souvislosti je nutno uvést, že k podání je možno použít jeden nebo více inhibitorů neutrální endopeptidázy obecného vzorce I podle uvedeného vynálezu nebo farmaceuticky přijatelných solí odvozených od uvedených sloučenin. Tyto inhibitory neutrální endopeptidázy obecného vzorce I podle uvedeného vynálezu se ve výhodném provedení podávají orálně, ovšem je možno použít i jiný způsob podávání, jako jsou například parenterálni způsoby, jako například subkutánni podávání, intramuskulárni podávání a intravenozni podávání. Tato uvedené denní dávka může být podávána jako jediná dávka nebo je možno tuto dávku rozdělit do dvou až čtyř dávek, které se podávají v průběhu dne.
Tyto inhibitory neutrální endopeptidázy obecného vzorce I podle uvedeného vynálezu je možno také podávat v kombinaci s dalšími činidly, které snižují tlak krve. Například je možno uvést, že tyto inhibitory neutrální endopeptidázy obecného vzorce I podle uvedeného vynálezu je možno kombinovat pro dvojité podání společně s inhibitorem angiotensin konvertujíciho enzymu (ACE), jako je například captopril, zofenopril, fosinopril, enalapril, lisinopril, a podobné další látky. Tuto kombinaci je možno připravit ve hmotnostním poměru uvedeného inhibitoru endopeptidázy k ACE-inhibitoru v rozmezí od asi 1 : 10 do asi 10 : 1.
Inhibitory neutrální endopeptidázy obecného vzorce I podle uvedeného vynálezu je možno také podávat v kombinaci s lidským ANF 99-126. Tato kombinace obsahuje inhibitor neutrální endopeptidázy obecného vzorce I v množství v rozmezí od asi 1 miligramu do asi 100 miligramů na kilogram tělesné hmotnosti, přičemž tento uvedený lidský ANF 99-126 je použit v hmot, množství v rozmezí od asi 0,001 miligramu do asi 0,1 miligramu na kilogram tělesné hmotnosti.
Inhibitory neutrální endopeptidázy obecného vzorce I podle uvedeného vynálezu nebo farmaceuticky přijatelné soli odvozené od těchto sloučenin je možno také podávat savcům, zejména lidem, k inhibování degradace endogenních opioidních pentapeptidů, [Met5]-enkephalin (Tyr-Gly-Gly-Phe-Met) a [Leu5]-enkephalin Tyr-y-Gly-Phe-Leu) nacházejících se v mozku nebo v periferálních tkáních.
-18CZ 281165 B6
Ze shora uvedeného důvodu jsou sloučeniny podle uvedeného vynálezu vhodné k použití pro takové therapeutické účely, jako jsou například léčení astma, léčení různých zánětlivých onemocnění, zmírňování bolestí, léčení epilepsie, zmírnění různých nepravidelností v lidském organizmu, k léčení demence a geriatrického poškození, k omezování obezity a k léčení gastrointestinálních poruch (zejména průjmu a iritabilního střevního syndromu), dále k modulování sekrece žaludečních kyselin a také k léčení hyperreninemie a leukemie.
Jako takové mohou být sloučeniny podle uvedeného vynálezu a farmaceuticky přijatelné soli odvozené od těchto sloučenin podávány pacientům orálně nebo parenterálně v účinných dávkách, které odpovídají dennímu dávkovému rozmezí pohybujícímu se od asi 0,1 miligramu do asi 25 miligramů sloučeniny na kilogram tělesné hmotnosti pacienta. Podávání těchto sloučenin je možno provádět jednou za den nebo ve formě dvou až čtyř rozdělených denních dávek.
Kromě toho je nutno uvést, že sloučeniny obecného vzorce I podle uvedeného vynálezu, ve kterých je substituentem X skupina
-CH-COOH také projevuje inhibiční účinek vůči angiotensin konvertujícímu enzymu. Ze shora uvedeného vyplývá, že tyto sloučeniny obecného vzorce I podle vynálezu představují dvojité inhibitory, přičemž mohou být použity pro takové therapeutické účely, pro které je uváděno, že je vhodné použit inhibitorů angiotensin konvertujícího enzymu, jako je například captopril. Do oblasti tohoto použití je možno zařadit léčeni kardiovaskulárních onemocněni, jako je například léčení hypertenze, léčení poruch srdeční činnosti v důsledku překrvení, snižování pre-ischemické a post-ischemické myokardiálni arytmie a fibrilace, a podobně, a také tak je možno těchto látek použit ke zlepšení poznávacích, respektive rozpoznávacích funkci, k léčení depresí a stavů úzkosti, a podobné.
Tyto inhibitory neutrální endopeptidázy obecného vzorce I podle uvedeného vynálezu a další farmaceuticky přijatelné složky mohou být formulovány za účelem přípravy nejrůznějších prostředků do různých forem pro shora popsaná farmaceutická použití. Vhodnými prostředky pro orální podávání jsou tablety, kapsle a elixíry, a vhodnými prostředky pro parenterálni podávání jsou sterilní roztoky a suspenze. Pro přípravu jednotkové dávkové formy, což je termín všeobecně známý a používaný farmaceutickými odborníky, je vhodné použít asi 10 miligramů až asi 50 miligramů aktivní látky a tuto látku smísit s fyziologicky přijatelným vehikulem, nosičovou látkou, excipientem, pojivovou složkou, konzervační přísadou, stabilizační látkou, aromatizačnim činidlem, a podobné.
Příklady provedení vynálezu
V následujících příkladech bude s pomocí praktických příkladů provedení ilustrován postup přípravy sloučenin podle uvedeného vynálezu a také zde bude uveden příklad těchto sloučenin samot
-19CZ 281165 B6 ných. Teploty jsou v těchto příkladech uváděny ve stupních Celsia.
Příklad 1
Postup přípravy l-[3,3,3-trifluor-2-(měrkaptomethyl)-1-oxopropyl]-L-fenylalaninu.
A. Postup přípravy N-[2-[(acetylthio)methyl]-3,3,3-trifluor-1-oxopropyl]-L-fenylalaninu.
Při provádění postupu podle tohoto provedení byl fenylalanin (v množství 0,825 gramu, což odpovídá 5 mmolům) suspendován v 10 mililitrech methylenchloridu, přičemž potom byl přidán bis(trimethylsilyl)trifluoracetamid (v množství 4 mililitry) a takto získaná směs byla promíchávána při teplotě místnosti po dobu 3 hodin. K takto získané směsi byly přidány potom další 4 mililitry bis(trimethylsilyl)trifluoracetamidu a tato směs byla potom promíchávána po dobu přes noc. K této směsi byly potom přidány další mililitry bis(trimethylsilyl)trifluoracetamidu, přičemž potom následoval přídavek 5 mililitrů dimethylformamidu. Všechny použité pevné látky se rozpustily během intervalu 3 hodin, přičemž byl získán čirý roztok, který byl potom ochlazen na teplotu 5 ’C. K této směsi byl potom přidán 2-trifluor-methyl-3-acetylthiopropionylchlorid (v množství 0,99 gramu, což odpovídá 4,22 mmolu) ve 2 mililitrech tetrahydrofuranu, přičemž tento přídavek byl proveden pomalu po kapkách, a takto získaná směs byla promíchávána po dobu přes noc. při teplotě místnosti. Takto získaná reakční směs byla potom zkoncentrována za použití rotačního odpařováku. K takto získanému zbytku byla potom přidána voda (v množství 20 mililitrů) a takto získaná směs byla potom pormíchávána po dobu 15 minut a potom byla rozdělena mezi ethylester kyseliny octové a 5 procentní hydrogensíran draselný. Takto získaný ethylacetátový roztok byl potom promyt solankou a zkoncentrován na olejovou formu. Takto získaný olej byl potom chromatograficky zpracováván v koloně naplněné 400 mililitry silikagelu, přičemž jako elučního čindla bylo použito systému methylenchlorid : methanol : kyselina octová v poměru 40 : 1 : 1. Tímto způsobem byla získána požadovaná konečná sloučenina ve formě oleje (v množství 0,94 gramu, což odpovídá 2,6 mmolu).
Chromatografie v tenké vrstvě Rf = 0,60 (methylenchlorid : methanol : kyselina octová v poměru 20:1:1).
B. Postup přípravy 1-[3,3,3-trifluor-2-(merkaptomethyl)-1-oxopropyl]-L-fenylalaninu.
Podle tohoto provedení byla sloučenina získaná shora uvedeným způsobem podle provedení A (v množství 890 miligramů, což odpovídá 2,45 mmolu) promíchávána při teplotě 0 ’C pod atmosférou argonu s 1,6 mililitru koncentrovaného hydroxidu amonného a 3,5 mililitru vody, přičemž toto promíchávání bylo prováděno po dobu minut, a po tomto intervalu bylo přidáno 100 mililitrů 5 procentního hydrogensíranu draselného. Takto získaný roztok byl potom extrahován ethylesterem kyseliny octové. Získané spojené ethylacetátové extrakty byly potom promyty solankou, potom bylo provedeno sušení za pomoci síranu sodného a tento podíl byl potom
-20CZ 281165 B6 zkoncentrován na žlutý olej, který byl potom chromatograficky zpracováván v koloně naplněné 300 mililitry silikagelu Měrek, přičemž jako elučního činidla bylo použito systému methylenchlorid : methanol : kyselina octová v poměru 40 : 1 : 1. Tímto způsobem byla získána konečná směs diastereoisomerů ve formě bílé pevné látky.
Výtěžek: 120 miligramů, teplota tání: 99 *C, chromatografie v tenké vrstvě Rf = 0,64 (methylenchlorid : methanol : kyselina octová v poměru 20:1:1), [a]D = +18,6* (c = 0,5, methanol).
Analýza: vypočteno pro C^3H14F3NO3S . 0,65 H20
C = 46,89, H = 4,63, N = 4,21,
F = 17,11, S = 9,63, SH = 9,92, nalezeno C = 46,56,
F = 17,50,
H = 4,39, N = 4,19, S = 9,61, SH = 10,18.
Přiklad 2
Postup přípravy l-[3,3,3-trifluor-2-(merkaptomethyl)-l-oxopropyl]-L-alaninu.
A. Postup přípravy N-[2-[(acetylthio)methyl]-3,3,3-trifluor-1-oxopropyl]-L-alaninu.
Při prováděni postupu podle tohoto provedení byl analin (v množství 445 miligramů, což odpovídá 5 mmolům) suspendován v 5 mililitrech methylenchloridu, přičemž potom byl přidán bis(trimethylsilyltrifluoracetamid (v množství 4 mililitry), a takto získaný roztok byl potom promíchávána- po dobu 3 hodin při teplotě místnosti. Potom byl k tomuto roztoku přidán dimethylformamid (v množství 4 mililitry) a takto vzniklá směs byla potom míchána po dobu přes noc. Veškerý použitý pevný materiál přešel do roztoku. Potom byl k tomuto roztoku přidán 2-trifluormethyl-3-acetylthiopropionylchlorid (v množství 1 gram, což odpovídá
4,26 mmolu) ve 2 mililitrech tetrahydrofuranu a takto získaná směs byla potom promíchávána po dobu přes noc při teplotě místnosti. Takto vzniklá reakční směs byla potom zkoncentrována na rotačním odpařováku. Tímto způsobem byl získán zbytek, který byl rozdělen mezi ethylester kyseliny octové a 5-ti procentní hydrogensíran draselný. Takto získané ethylacetátové podíly byly potom promyty 5-ti procentním hydrogensÍránem draselným a potom solankou a potom byl tento roztok zkoncentrován na světle hnědý olej. Takto získaný olej byl potom chromatograficky zpracován v koloně naplněné 400 mililitry silikagelu, přičemž jako elučního činidla bylo použito systému methylenchlorid-methanol-kyselina octová v poměru 40 : 1 : 1. Tímto postupem byla získána požadovaná sloučenina A ve formě žlutého oleje.
Výtěžek: 960 miligramů, chromatografie v tenké vrstvě Rf = 0,45
-21CZ 281165 B6 (methylenchlorid : methanol : kyselina octová v poměru 20:1:1).
B. Postup přípravy l-[3,3,3-trifluor-2-(merkaptomethyl)-1-oxo-propyl]-L-alaninu.
Při provádění postupu podle tohoto provedení byla sloučenina A připravená podle shora uvedeného postupu (v množství 960 miligramů, což odpovídá 3,3 mmolu) promíchávána při teplotě 0 °C pod atmosférou argonu s 2,2 mililitru koncentrovaného roztoku hydroxidu amonného přičemž potom bylo přidáno 4,7 mililitrů vody a míchání bylo prováděno po dobu 10 minut. Po tomto intervalu byl přidán 5% roztok hydrogensíranu draselného (v množství 100 mililitrů). Takto získaný výsledný roztok byl potom extrahován ethylesterm kyseliny octové. Takto získané spojené ethylacetátové extrakty byly potom promyty 5-ti procentním hydrogensíranem draselným a solankou, potom byl tento roztok sušen za pomoci síranu hořečnatého a nakonec byl zkoncentrován na formu oleje. Tento olej byl potom zpracován chromatografickým způsobem v koloně naplněné 200 mililitry silikagelu Měrek, přičemž jako elučního činidla bylo použito systému methylenchlorid : methanol : kyselina octová v poměru 40 : 1 : 1, čímž byla získána požadovaná sloučenina uvedená v záhlaví tohoto příkladu ve formě diastereomerů jako pevná látka.
Výtěžek: 720 miligramů teplota tání: 106 až 107 ’C chromatografie v tenké vrstvě = 0,40 (methylenchlorid : methanol : kyselina octová v poměru 20:1:1) [a]D = -27,1’ (c = 0,73, methanol),
Analýza: vypočteno pro C7H10F3NO3S
C =34,28, H = 4,11, N = 5,71,
F = 23,24, S = 13,07, SH = 13,49, nalezeno C = 34,52,
F = 23,20,
H = 4,25, N = 5,76,
S = 12,76, SH = 13,74.
Příklad 3
Postup přípravy N-[2-[(acetylthio)methyl]-3,3,3-trifluor-1-oxopropyl]-L-fenylalaninu, isomer A.
Při provádění postupu podle tohoto příkladu byla míchaná suspenze obsahující 1-fenylalanin (v množství 7,60 gramu, což odpovídá 46 mmolu) ve 45 mililitrech suchého acetonitrilu pod atmosférou argonu ochlazena na teplotu 0 ’C, přičemž potom byl přidán bis(trimethylsilyl)trifluoracetamid (v množství 24,7 gramu, což odpovídá 92 mmolu). Takto vzniklá reakční směs byla potom ponechána míchat, přičemž teplota pomalu stoupala na teplotu místnosti. Po 4 hodinách přešel veškerý podíl aminokyseliny do roztoku, přičemž zabarveni roztoku bylo světle žluté. Potom byl k tomuto roztoku přidán 2-trifluormethyl-3-acetylthiopropionylchlorid (v množství 4,69 gramu, což odpovídá 20 mmolům), který byl rozpuštěn v 10 mililitrech acetonitrilu, přičemž toto přidávání bylo
-22CZ 281165 B6 prováděno opatrně po kapkách během intervalu asi 45 minut a při teplotě 5 ”C, přičemž potom byla tato reakční směs ponechána ohřát na teplotu místnosti a potom byla tato reakční směs promíchávána po dobu přes noc. Takto vzniklá směs byla potom odpařena za sníženého tlaku, čímž byl získán světle žlutý olej. Tento olej byl potom rozdělen mezi vodu (v množství 75 mililitrů) a ethylester kyseliny octové (v množství 100 mililitrů). Celý podíl této směsi byl potom zfiltrován za účelem odstranění bílé sraženiny (fenylalanin), přičemž organická vrstva byla oddělena. Vodná fáze byla potom extrahována znovu ethylesterem kyseliny octové v množství 50 mililitrů. Takto byly získány ethylacetátové extrakty, které byly spojeny a promyty solankou, potom bylo provedeno sušení za pomoci bezvodého síranu hořečnatého a potom byl roztok odpařen, čímž bylo získáno 20,1 gramu surové směsi diastereomerů ve formě světle žluté pevné látky. Podíl v množství 2,0 gramy tohoto produktu byl podroben chromatografickému zpracování v koloně naplněné silikagelem (poměr silikagelu ke sloučenině 125 : 1), přičemž jako elučního činidla bylo použito systému ethylester kyseliny octové : hexany : kyselina octoví v poměru 100 : 100 : 1.
Tímto způsobem bylo získáno 0,370 gramu rychleji eluujícího diastereomeru (isomer A) a 0,383 gramu pomalu eluujícího diastereomeru (isomer B). Zbývajících 18,1 gramu surového materiálu bylo potom podrobeno zpracováni mžikovou chromatografickou metodou, přičemž podobným způosbem bylo získáno 2,67 gramu isomeru A a 2,92 gramu isomeru B.
Spojený výtěžek isomeru A : 3,04 gramu ve formě bílé krystalické látky;
teplota táni: 183 až 185 'C; chromatografie v tenké vrstvě Rf = 0,30 (ethylester kyseliny octové : hexany : kyselina octová v poměru 200 : 100 : 1);
[a]D = -98,8° (c = 1,00, methanol);
Analýza pro C15H16F3NO4S:
vypočteno C = 49,58, H = 4,44, N = 3,86,
F = 15,69, S = 8,82, nalezeno C = 49,63, H = 4,35, N = 3,70,
F = 15,35, S = 8,81.
Příklad 4
Postup přípravy N-[2-[(acetylthioJmethyl]-3,3,3-trifluor-1-oxopropyl]-L-fenylalaninu, isomer B.
Podle tohoto provedení se postupovalo tak, že surová směs diastereomerů získaná postupem podle příkladu 3 (v množství 20,1 gramu) byla podrobena mžikové chromatografii na silikagelu (poměr silikagel ke sloučenině 125 : 1), přičemž jako elučního činidla bylo použito systému ethylester kyseliny octové : hexany : kyselina octová v poměru 100 : 100 : 1. Tímto způsobem byl získán pomalu se eluující isomer (isomer B) v množství 0,38 gramu a 2,92
-23CZ 281165 B6 gramu. Tento podíl 2,92 gramu byl potom triturován pomocí hexanů, které obsahovaly 10 procent ethylesteru kyseliny octové, přičemž bílá krystalická pevná látka byla zfiltrována, čímž bylo získáno 0,72 gramu materiálu. Takto získaný filtrát byl zkoncentrován, čímž bylo získáno 2,1 gramu materiálu, který byl potom podroben mžikové chromatografii, provedené stejným způsobem jako je uvedeno shora, čímž bylo získáno přibližně 1,3 gramu materiálu, který byl potom spojen se shora uvedenými podíly 0,38 gramu a 0,72 gramu. Odpařením z methanolu bylo získáno 2,20 gramu požadovaného isomeru B, který je uveden v záhlaví tohoto příkladu, ve formě bílé krystalické pevné látky:
teplota tání: 134 až 136 ’C, chromátografie v tenké vrstvě = 0,14 (ethylester kyseliny octové : hexany .: kyselina octová v poměru 200 : 100 : 1);
[a]D = +118’ (c = 1,00, methanol);
Analýza pro C15H16F3NO4S:
vypočteno: C = 49,58, H = 4,44, N = 3,86,
F = 15,69, S = 8,82, nalezeno C = 49,58, H = 4,33, N = 3,78,
F = 15,54, S = 8,54.
V následujících příkladech 5a 6 bude popisován postup’ přípravy jednotlivých diastereoisomerů, isomerů A a B, které odpovídají směsi diastereomerů podle příkladu 1.
Přiklad 5
Postup přípravy N-[3,3,3-trifluor-2-(merkaptomethyl)-l-oxopropyl]-L-fenylalaninu, isomer A.
Při prováděni postupu podle tohoto příkladu byla suspenze obsahující sloučeninu připravenou postupem podle příkladu 3, isomer A (v množství 500 miligramů, což odpovídá 1,37 mmolu) v 0,9 mililitru koncentrovaného hydroxidu amonného a 2 mililitrech vody promíchávána při teplotě místnosti pod atmosférou dusíku po dobu v rozmezí od 5 do 6 minut, přičemž po tomto časovém intervalu byl získán čirý roztok. Takto získaný roztok byl potom zpracován 50 mililitry 5-ti procentního hydrogensíranu draselného, čímž se získal vodný roztok, který byl potom podroben extrahování čtyřmi 25-ti mililitrovými podíly ethylesteru kyseliny octové. Tímto způsobem byly získány čtyři ethylacetátové podíly extraktu, které byly spojeny a potom byly vysušeny za použití síranu horečnatého a nakonec bylo provedeno odpaření do sucha, přičemž tímto způsobem bylo získáno 0,43 gramu surového produktu. Tento produkt byl potom zpracován postupem mžikové chromatografie, přičemž bylo použito kolony naplněné silikagelem (poměr silikagelu ke sloučenině byl 125 : 1), přičemž jako elučniho činidla bylo použito systému dichlormethan/methanol/kyselina octová v poměru CH2C12 : CH3OH : HOAc 40 : 1 : 1 a tímto způsobem bylo získáno 370 mili
-24CZ 281165 B6 gramů produktu. Podobným způosbem bylo dalších 2,30 gramu (což odpovídá 6,3 mmolu) sloučeniny získané postupem podle příkladu 3, to znamená isomeru A, deacylováno a přečišťováno postupem mžikové chromatografie, čímž byly získány 2,00 gramy produktu. Takto získané dva podíly produktu byly potom spojeny a získaný pevný podíl byl potom triturován hexany a několika kapkami etheru. Použité rozpouštědlo bylo potom vydekantováno a oddělená pevná látka byla usušena za použití vakua, čímž bylo získáno 1,79 gramu požadované sloučeniny uvedené v záhlaví tohoto příkladu ve formě bílé krystalické pevné látky.
Teplota tání: 133 až 134 °C
Chromatografie v tenké vrstvě Rf = 0,30 (methylenchlorid : methanol : kyselina octová v poměru 40:1:1);
[a]D = -8,1’ (c = 1,00, methanol);
Analýza pro C13H14F3NO3S vypočteno C = 48,59, H = 4,39, N = 4,36,
F = 17,74, S = 9,98, SH = 10,29 nalezeno C = 45,47, H = 4,26, N = 4,30,
F = 17,49, S = 10,34, SH = 10,57.
Přiklad 6
Postup přípravy N-[ 3,3,3-trifluor-2-(merkaptomethyl)-1-oxoprpyl]-L-fenylalaninu, isomer B.
Při provádění postupu podle tohoto příkladu byla suspenze obsahující sloučeninu připravenou postupem podle příkladu 4, to znamená isomer B (v množství 2,05 gramu, což odpovídá 5,64 mmolu) ve 3,6 mililitru koncentrovaného hydroxidu amonného a 8,0 mililitrech vody, promíchávána pod atmosfrou argonu po dobu v rozmezí 7 až 10 minut. Tímto způsobem byl získán čirý světle žlutý roztok, který byl okyselen vodným 5-ti procentním roztokem hydrogensíranu draselného na hodnotu pH 2 a potom byl tento roztok extrahován čtyřmi 50-ti mililitrovými podíly ethylesteru kyseliny octové. Tímto způsobem byly získány organické extrakty, které byly spojeny a potom byly promyty 50-ti mililitry solanky, potom byl tento roztok sušen za pomoci bezvodého síranu hořečnatého a použité rozpouštědlo bylo odstraněno za sníženého tlaku, čímž bylo získáno 1,87 gramu žluté pevné látky. Tato pevná látka byla potom zpracována postupem mžikové chromatografie, čímž byl tento surový produkt přečištěn, a při tomto postupu bylo použito chromatografické kolony naplněné silikagelem (poměr silikagelu ke sloučenině byl 130 : 1), a jako elučního činidla systému methylenchlorid :
methanol : kyselina octová v poměru CH2C12 : CH3OH : HOAc 50 : 1 : 1. Tímto postupem bylo získáno 1,70 gramu požadované sloučeniny uvedené v záhlaví tohoto příkladu ve formě bílé pevné látky.
Teplota tání: 148 až 150 ’C; chromatografie v tenké vrstvě Rf = 0,29
-25CZ 281165 B6 (methylenchlorid : methanol : kyselina octová v poměru 40:1:1);
[a]D = +49/2° (c ~ 1,00, methanol);
Analýza pro C13H14F3NO3S:
vypočteno C = 48,59, H = 4,39, N = 4,36
F = 17,74, S = 9,98, SH = 10,29 nalezeno C = 48,43, H = 4,10, N = 4,21
F = 17,42, S = 10,27, SH = 10,09.
Příklad 7
Postup přípravy N-[2-[(acetylthio)methyl]-3,3,3-trifluor-1-oxopropyl]-L-tryptofanu, isomer A.
Při provádění postupu podle tohoto příkladu byla nejdříve suspenze obsahující L-tryptofan (v množství 4,08 gramu, což odpovídá 20 mmolům) v 50 mililitrech suchého acetonitrilu pod atmosférou argonu ochlazena na teplotu v rozmezí od 0 do 5 °C, přičemž potom byl k této suspenzi přidán bis(trimethylsilyl)-trifluoracetamid (v množství 5,3 mililitru, což odpovídá 20 mmolům). Takto získaná reakční směs byla potom ponchána promíchávat, přičemž se současně ponechala ohřát na teplotu místnosti. Po asi 3 hodinách byl takto vzniklý roztok ochlazen na teplotu 5 ’C a k tomuto roztoku byl potom pomalu přidáván roztok obsahující 2-trifluormethyl-3-acetylthiopropionylchlorid (v množství 4,69 gramu, což odpovídá 20 mmolům) v 7 mililitrech acetonitrilu, přičemž postupné přidávání tohoto roztoku trvalo 45 minut. Takto získaná reakční směs byla potom ponechána promíchávat po dobu přes noc, potom byla postupně ponechána ohřát na teplotu místnosti. Z tohoto roztoku bylo potom odpařeno použité rozpouštědlo, čímž vznikl zbytek, který byl rozdělen mezi ethylester kyseliny octové (v množství 50 mililitrů) a vodu (v množství 35 mililitrů). Získaná vodná fáze byla potom dále extrahována ethylesterem kyseliny octové (ve formě tři podílů po 50 mililitrech), a takto získané ethylacetátové extrakty byly potom spojeny a promyty solankou, potom byl tento podíl usušen (za pomoci síranu hořečnatého MgSO4) a potom bylo provedeno odpaření, čímž bylo získáno 14,15 gramu žlutého olejového zbytku. Podíl v množství 12,25 gramu tohoto produktu byl potom podroben zpracování metodou mžikové chromatografie v koloně naplněné silikagelem (v poměru silikagel ke sloučenině 120 : 1), přičemž jako elučního činidla bylo použito systému ethylesteru kyseliny octové, hexanů a kyseliny octové v poměru 150 : 100 : 1. Tímto způsobem bylo získáno 1,9 gramu rychleji eluujíciho diastereomeru (isomer A), 4,2 gramu obou diastereomerů a 1,5 gramu pomaleji eluujíciho diastereomeru (isomer B). Další elucí, prováděnou za použití systému ethylester kyseliny octové, hexany, kyselina octová v poměru 200 : 100 : 1 bylo získáno dalších 170 miligramů isomeru B. Takto získané spojené frakce byly potom opět podrobeny zpracování chromatografickým procesem, za použití stejných podmínek jako je uvedeno shora, přičemž tímto způsobem bylo získáno 1,65 gramu isomeru A a 1,76 gramu isomeru B. Takto získané podíly isomeru A, to znamená 1,9 gramu a 1,65 gramu, byly spojeny a podrobeny přečištěni rekrysta-26CZ 281165 B6 lováním tohoto produktu z toluenu, přičemž bylo získáno 2,8 gramu bělavého krystalického pevného produktu. Další podíl 360 miligramů isomeru A (získaný postupem mžikové chromatografické separace z výchozího 1,5 gramu surového produktu) bylo podrobeno opětné krystalizaci (rekrystalizaci) z toluenu, přičemž bylo získáno 260 miligramu bílé krystalické pevné látky.
Celkový výtěžek isomeru A jako konečného produktu:
3,06 gramu;
teplota tání: 140 až 143 °C; chromatografie v tenké vrstvě Rf = 0,46 (ethylester kyseliny octové, hexany a kyselina octová v poměru 300 : 100 : 1);
[a]D -96,0’ (c = 1,00, methanol);
Analýza pro C17H17F3N2O4S:
vypočteno C = 50,74, H = 4,26, N = 6,96,
F = 14,16, S = 7,97, nalezeno C = 50,47, H = 4,04, N = 6,86,
F = 13,82, S = 8,18.
Příklad 8
Postup přípravy N-[2-[(acetylthio)methyl]-3,3,3-trifluor-1-oxopropyl]-L-troptofanu, isomer B.
Při provádění postupu podle tohoto příkladu byly spojené podíly isomeru B, získané postupem podle předchozího příkladu 7 (v množství 3,62 gramu) podrobeny rekrystalizaci z toluenu, přičemž tímto způsobem bylo získáno 2,56 gramu požadované sloučeniny uvedené v záhlaví tohoto příkladu, t. zn. isomeru B, ve formě práškové pevné bílé látky.
Teplota tání: 148 až 151 °C; chromatografie v tenké vrstvě Rf = 0,35 (ethylester kyseliny octové, hexany, kyselina octová v poměru 300 : 100 : 1);
[a)D = +110,5’ (c = 1,00, methanol);
Analýza pro C17H17F3N2O4S . 0,1 H20:
vypočteno C = 50,51, H = 4,29, N = 6,93,
F = 14,10, S = 7,93, nalezeno C = 50,67, H = 4,08, N = 6,62,
F = 13,72, S = 7,82.
-27CZ 281165 B6
Přiklad 9
Postup přípravy N-[3,3,3-trifluor-2-(merkaptomethyl)-1-oxopropyl]-L-tryptofanu, isomer A.
Při provádění postupu podle tohoto příkladu byla suspenze obsahující produkt získaný postupem podle příkladu 7 (v množství 2,6 gramu, což odpovídá 6,5 mmolu) ve 4,25 mililitru koncentrovaného hydroxidu amonného a 9,3 mililitru vody, promíchávána při teplotě místnosti a pod atmosfrou argonu po dobu v rozmezí 12 až 15 minut. Takto získaný výsledný roztok byl potom okyselen 200 mililitry 5% roztoku hydrogensíranu draselného a tento roztok byl potom extrahován ethylesterem kyseliny octové (ve formě pěti podílů po 50 mililitrech). Tímto způsobem byly získány ethylacetátové extrakty, které byly spojeny a potom byl tento podíl promyt silankou, sušen za pomoci síranu hořečnatého MgSO4 a potom byl tento roztok odpařen, přičemž bylo získáno 2,4 gramu světle žluté pevné látky. Tato látka byla potom spojena s dalším podílem v možství 80 miligramů této sloučeniny a tento spojený produkt byl podroben zpracování mžikovou chromátografickou metodou v koloně naplněné 300 gramy silikagelu, přičemž jako elučního činidla bylo použito systému methylenchlorid : methanol : kyselina octová v poměru 40 : 1:1. Tímto způsobem bylo získáno 2,3 gramu bílé pevné látky. Takto získaná pevná látka byla potom triturována toluenem, který obsahoval přibližné 5 % ethylesteru kyseliny octové. Tímto způsobem bylo získáno 1,25 gramu bílé krystalické pevné látky, která byla oddělena filtraci. Tímto způsobem oddělený filtrát byl potom odpařen do sucha a získaný zbytek byl potom trituorován podobným způsobem, čímž bylo získáno dalších 560 miligramů materiálu, který byl potom spojen s počátečními 1,25 gramu podílu, čímž bylo získáno 1,81 gramu požadovaného isomeru, uvedeného v záhlaví tohoto příkladu ve formě bílé krystalické pevné látky.
Teplota tání: 148 až 150,5 ’C; chromatografie v tenké vrstvě Rf = 0,48 (ethylester kyseliny octové, hexany, kyselina octová v poměru 300 : 100 : 1);
[a]D = -10,3’ (c = 1,00, methanol);
Analýza pro ci5Hi5F3N2°3S: vypočteno C = 49,99, H = 4,20, N = 7,78,
F = 15,82, S = 8,90, SH = 9,18, nalezeno C = 49,98, H = 3,96, N = 7,54,
F = 15,42, S = 9,12, SH = 9,38.
-28CZ 281165 B6
Příklad 10
Postup přípravy N-[3,3,3-trifluor-2-(merkaptomethyl) -1-oxopropyl]-L-tryptofan, isomer B.
Při provádění postupu podle tohoto příkladu byla suspenze obsahující produkt připravený postupem podle příkladu 8 (v množství 2,41 gramu, což odpovídá 5,99 mmolů) ve 3,75 mililitru koncentrovaného hydroxidu amonného a 8,25 mililitru vody, promíchávána při teplotě místnosti pod atmosférou argonu po dobu v rozmezí od 12 do 15 minut. Tímto způsobem byl získán konečný roztok, který byl okyselen 200 mililitry 5% roztoku hydrogensíranu draselného a potom byl tento roztk extrahován ethylesterem kyseliny octové (ve formě pěti 50-ti mililitrových podílů). Tímto způsobem byly získány ethylacetátové extrakty, které byly spojeny a promyty solankou, potom byl tento roztok sušen síranem hořečnatým MgSO4 a potom byl odpařen, čímž bylo získáno 2,3 gramu žluté gumovité pevné látky. Tato látka byla potom podrobena zpracovávání mžikovou chromatografickou metodou v koloně naplněné 315 gramy silikagelu, přičemž jako elučního činidla bylo použito směsi methylenchloridu, methanolu a kyseliny octové v poměru 40 : 1 : 1. Tímto způsobem bylo získáno 2,1 gramu světle žlutého sklovitého zbytku, který byl potom triturován toluenem obsahujícím přibližně 5 % ethylesteru kyseliny octové. Tímto postupem bylo získáno
1,55 gramu požadované sloučeniny, to znamená isomeru B, ve formě bílé krystalické pevné látky.
Teplota táni:.144 až 147 C; chromatografie v tenké vrstvě Rf = 0,44 (ethylester kyseliny octové, hexany, kyselina octová v poměru 300 : 100 : 1);
[a]D = +35,8’ (c = 1,00, methanol);
Analýza pro C15H 15F3N2°3S ’ 0,1 H20: vypočteno: C = 49,74, H = 4,23, N = 7,74,
F = 15,74, S = 8,85, SH = 9,13, nalezeno C = 50,04, H = 3,99, N = 7,45,
F = 15,36, S = 9,08, SH = 0,34.
Příklad 11
Postup přípravy 3-[[2-[(acetylthio)methyl]-3,3,3-trifluor-1-oxopropyl]amino]propanové kyseliny.
Při prováděni postupu podle tohoto přikladu byla suspenze obsahující α-alanin (v množství 1,34 gramu, což odpovídá 15 mmolu) ve 30 mililitrech suchého acetonitrilu pod atmosférou argonu ochlazena na teplotu v rozmezí od 0 do 5 °C, přičemž potom byl přidán bis(trimethylsilyl)trifluoracetamid (v množství 8,0 mililitrů, což odpovídá 30 mmolům). Takto získaná reakční směs byla potom ponechána postupně ohřívat na teplotu v rozmezí od 6 do 7 ’C, což probíhalo během 1 hodiny, přičemž během tohoto časového
-29CZ 281165 B6 intervalu přešla veškerá kyselina (tzn. aminokyselina) do roztoku. Potom byl 2-trifluormethyl-3-acetylthiopropionylchlorid (v množství 3,52 gramu, což odpovídá 15 mmolům) rozpuštěn v 6 mililitrech acetonitrilu a tato látka byla potom přidávána pomalu po kapkách k této výše uvedené směsi při teplotě 5 ’C, a toto přidávání bylo prováděno po dobu 45 minut. Po tomto časovém intervalu byla získaná reakční směs ponechána míchat a ohřát na teplotu místnosti. Po asi 1,5 hodině bylo použité rozpouštědlo odpařeno, čímž byla získána žlutá kapalina jako zbytek a tato žlutá kapalina byla rozdělena mezi vodu (v množství 50 mililitrů) a ethylester kyseliny octové (v množství 50 mililitrů), přičemž organická vrstva byla oddělena. Takto získaná vodná fáze byla potom dále extrahována ethylesterem kyseliny octové (ve formě tří podílů po 40 mililitrech) a spojené ethylacetátové extrakty byly potom promyty solankou, potom byl tento podíl sušen pomocí bezvodého síranu hořečnatého a potom byl odpařen, přičemž tímto postupem bylo získáno 6,7 gramu žluté pevné látky. Tato látka byla potom zpracována chromatografickým pocesem (mžiková chromatografická metoda) v koloně naplněné silikagelem (v poměru silikagel ke sloučenině 100 : 1), přičemž jako elučního činidla bylo použito systému methylenchlorid : methanol : kyselina octová v poměru 40 : 1 : 1. Tímto postupem bylo získáno 1,62 gramu materiálu, který byl homogenní po chromatografii v tenké vrstvě, a dále bylo získáno 1,62 gramu materiálu, který byl homogenní téměř a 1,16 gramu materiálu, který byl znečištěn, ale který obsahoval většinu požadovaného produktu. Tyto shora uvedené podíly 0,65 gramu a 1,62 gramu produktu byly potom spojeny a materiál byl triturován směsí hexanu a ethylesteru kyseliny octové (v poměru 4 : 1), přičemž tímto způsobem bylo získáno 2,21 gramu požadovaného racemického produktu, který je uveden v záhlaví přikladu, ve formě bílé krystalické pevné látky.
Teplota tání: 114 až 116 ’C; chromatografie v tenké vrstvě = 0,44 (methylenchlorid, methanol, kyselina octová v poměru 20 : 1 : 1);
Analýza pro CgH12F3NO4S:
vypočteno C = 37,63, H = 4,21, N = 4,88,
F = 19,84, S = 11,46, nalezeno C = 37,62, H = 4,12, N = 4,83,
F = 19,77, S = 11,38.
Příklad 12
Postup přípravy [3-[[2-(merkaptomethyl)-3,3,3-trifluor]-l-oxopropyllamino]propanové kyseliny.
Při provádění postupu podle tohoto příkladu byla suspenze obsahující sloučeninu připravenou postupem podle přikladu 11 (v množství 2,08 gramu, což odpovídá 7,24 mmolu) ve 4,2 mililitru koncentrovaného hydroxidu amonného a 9,3 mililitru vody, promíchávána při teplotě místnosti pod atmosférou argonu po dobu v rozmezí od 7 do 10 minut, přičemž během této časové periody se vytvořil čirý roztok. Takto získaný roztok byl potom okyselen na
-30CZ 281165 B6 hodnotu pH 2, přičemž k tomuto okyseleni bylo použito přibližné 200 mililitrů 5-ti procentního roztoku hydrogensíranu draselného. Tento roztok byl potom extrahován ethylesterem kyseliny octové (ve formě pěti podílů po 50 mililitrech). Takto byly získány ethylacetátové extrakty, které byly potom spojeny a spojený podíl byl promyt 50 mililitry solanky, a tento roztok byl potom sušen za pomoci bezvodého síranu hořečnatého a potom byl odpařen, čímž bylo získáno 1,74 gramu bělavé pevné látky. Tato látka byla potom podrobena mžikovému chromatografickému zpracování na silikagelu (poměr silikagelu ke sloučenině byl 120 : 1), přičemž jako elučního činidla bylo použito směsi methylenchloridu, methanolu a kyseliny octové v poměru 40 : 1:1, přičemž tímto způsobem bylo získáno 1,50 gramu požadované sloučeniny. Podobným způsobem jako je uvedeno shora bylo ze znečištěné frakce 1,2 gramu stejného výchozího materiálu (4,2 mmolu) po deacylaci a zpracováni chromatograf ickou mžikovou metodou získáno dalších 0,45 gramu požadovaného produktu. Tyto dvě frakce takto získaného prodktu byly potom spojeny, čímž bylo získáno 1,95 gramu racemické sloučeniny uvedené v záhlaví tohoto příkladu ve formě bílé krystalické pevné látky.
Teplota táni: 108 až 110 °C; chromatografie v tenké vrstvě Rf = 0,40 (methylenchlorid : methanol : kyselina octová v poměru 20:1:1);
Analýza pro C7H10F3NO3S:
vypočteno C = 34,28, H = 4,11, N = 5,71,
F = 23,24, S = 13,07, SH = 13,49, nalezeno C = 34,36, H = 4,04, N = 5,58,
F = 22,94, S = 13,07, SH = 13,64.
Příklad 13
Postup přípravy N-[3,3,3-trifluor-2-(merkaptomethyl)-1-oxopropyl]-L-asparagové kyseliny.
a) Postup přípravy N-[2-[(acetylthio)methyl]-3,3,3-trifluor-1-oxopropyl]-L-asparagové kyseliny.
Při provádění postupu podle tohoto provedení byla míchaná suspenze obsahující L-asparagovou kyselinou (v množství 2,66 gramu, což odpovídá 20 mmolům) ve 35 mililitrech suchého acetonitrilu pod atmosférou argonu ochlazena na teplotu 0 ’C, přičemž potom byl k této suspenzi přidán bis(trimethylsilyl)-trifluoracetamid (v množství 10,62 mililitru, což odpovídá 40 mmolům). Takto vzniklá reakční směs byla potom ponechána míchat a postupně se ohřát na teplotu místnosti, což bylo prováděno po dobu přes noc, přičemž potom bylo přidáno 5 mililitrů dimethylformamidu a takto vzniklá směs byla míchána po dobu 2 hodin. Takto získaný čirý, světle žlutý roztok byl potom ochlazen na teplotu 5 ’C a k tomuto roztoku byl potom přidán 2-trifluor-methyl-3-acetylthiopropionylchlorid (v množství 4,69 gramu, což odpovídá 20 mmolům), který byl rozpuštěn v 6 mililitrech acetonitrilu, přičemž tento přídavek byl proveden po kapkách. Takto získaná reakční směs byla po
-31CZ 281165 B6 tom ponechána míchat a ohřát na teplotu místnosti, což bylo povedeno po dobu přes noc. Potom bylo použité rozpouštědlo odpařeno. Tímto způsobem byl získán syrupovitý zbytek, který byl rozdělen mezi vodu (v množství 50 mililitrů) a ethylester kyseliny octové (v množství 50 mililitrů), přičemž organická vrstva byla oddělena. Takto získaná vodná fáze byla dále extrahována ethylesterem kyseliny octové (ve formě tří podílů po 50 mililitrech), přičemž byly získány ethylacetátové extrakční podíly a tyto byly spojeny a promyty solankou, přičemž tento podíl byl potom sušen za pomoci síranu hořečnatého MgSO4 a odpařen do sucha, čímž bylo získáno 12,2 gramu světle žlutého zbytku. Tento zbytek byl potom zpracován postupem mžikové chromatografie na silikagelu (v poměru silikagel ke sloučenině v rozsahu 125 : 1), přičemž jako elučního činidla bylo použito systému ethylester kyseliny octové : kyselina octová v poměru 15 : 1. Tímto postupem bylo získáno 5,25 gramu hlavní frakce, ve formě světle žluté lepkavé pevné hmoty a 0,63 gramu frakce, která byla po zpracování chromatografickým postupem v tenké vrstvě téměř homogenní, přičemž celkově bylo získáno 5,88 gramu požadované sloučeniny uvedené v záhlaví ve formě směsi diastereomerů.
b) Postup přípravy N-[3,3,3-trifluor-2-(merkaptomethyl)-l-oxopropyl]-L-asparagové kyseliny.
byla suspenze obsahující produkt pod4,68 gramu, což odpovídá 14,1 mmolu) amonného a 20,6 milimístnosti pod atmosférou minut. Takto získaný výsledný roztok roztoku hydrogensíranu draTakto získané a promyty solankou, sušen (za pomoci síranu hořečnatézpůsobem bylo získáno 3,41 gramu světle byla potom podrobena zpracováni 350 gramů silikagelu systému methylenchlorid : 15 :
Podle tohoto provedení le postupu a) (v množství v 8,25 mililitru koncentrovaného hydroxidu litru vody, promíchávána při teplotě argonu po dobu přibližné 10 byl potom okyselen 400 mililitry 5% selného a potom byl tento roztok extrahován ethylesterem kyseliny octové (ve formě čtyř podílu po 75 mililitrech), ethylacetátové extrakty byly potom spojeny přičemž tento podíl byl potom ho) a odpařen a tímto žluté pevné látky. Tato látka postupem mžikové chromatografie za použití a jako elučního činidla bylo použito methanol : kyselina octová v poměru 15 : 1 : 1. Tímto způsobem bylo získáno 2,4 gramu světle žluté pevné látky, která byla potom trituorvána methylenchloridem, který obsahoval několik kapek ethylesteru kyseliny octové a methanolu. Při provádění tohoto získáno 2,1 gramu požadované sloučeniny uvedené formě přibližně směsi diastereomerů v poměru 1:1) krystalické pevné látky.
postupu bylo v záhlaví (ve ve formě bílé
Teplota tání: 180 až 183 ’C; chromatografie v tenké vrstvě = 0,31 (methylenchlorid : methanol : kyselina octová v poměru 10:1:1);
[a]D = -1,9’ (c = 1,00, methanol);
Analýza pro C3H1QF3NO5S . 0,25 H20:
vypočteno C = 32,70, H = 3,60, N = 4,77,
F = 19,40, S = 10,91, SH = 11,26,
-32CZ 281165 B6 nalezeno C = 32,64, H = 3,20, N = 4,70, F = 19,23, S = 10,85, SH = 11,15.
• Příklad 14
Postup přípravy N-[2-[(acetylthio)methyl]-3,3,3-trifluor-l-oxopropyl]-L-(8)-naftylalaninu, isomer A.
Při provádění postupu podle tohoto příkladu byla suspenze, která byla promíchávána a která obsahovala L-naftylalanin (v množství 1,92 gramu, což odpovídá 8,92 mililitru) ve 40 mililitrech acetonitrilu pod atmosférou argonu, ochlazena na teplotu v rozmezí od 0 do 5 *C, přičemž potom byl k této suspenzi přidán bis(trimethylsilyl)trifluoracetamid (v množství 4,75 mililitru, což odpovídá 17,84 mmolu). Takto získaná reakční směs byla potom ponechána míchat a postupně se ohřívat až na teplotu místnosti. Potom bylo asi po 1,5 hodiny přidáno dalších 2,3 mililitru bis(trimethylsilyl)trifluoracetamidu (v množství 8,7 mmolu), čímž byl získán v průběhu asi 20 minut poměrně čirý roztok. Tato reakční směs byla potom ochlazena na teplotu 5 ’C a potom byla k tomuto roztoku přidán 2-trifluormethyl-3-acetylthiopropionylchlorid (v množství 2,09 gramu, což odpovídá 8,92 mmolu), který byl rozpuštěn v 6 mililitrech acetonitrilu, přičemž tento přídavek byl proveden pomalým způsobem po kapkách. Takto získaná směs byla potom postupné ohřátá na teplotu místnosti. Po asi jedné hodině byla tato reakční směs odpařena, a tím byl získán zbytek žluté pevné látky, který byl potom rozdělen mezi vodu (v množství 50 mililitrů) a ethylester kyseliny octové (v množství 75 mililitrů) a vzniklá organická vrstva byla oddělena. Vodná vrstva byla potom extrahována znovu ethylesterem kyseliny octové (ve formě tři podílů po 45 mililitrech) a získané spojené ethylacetátové extrakty ve formě spojeného podílu byly potom promyty solankou, tento podíl byl potom sušen síranem hořečnatým MgSO4 a použitý ethylester kyseliny octové byl odstraněn za použití vakua. Tímto způsobem bylo získáno 6,3 gramu světle žluté pevné látky jako zbytku. Tento surový materiál byl potom podroben zpracování mžikovou chromatografickou metodou, přičemž bylo použito 700 gramu silikagelu a jako elučniho činidla bylo použito systému ethylester kyseliny octové, hexany a kyselina octová v poměru 100 : 100 : 1. Tímto postupem bylo získáno 1,58 gramu rychle eluujícího isomeru A a 1,56 gramu pomalu eluujícího isomeru B. Potom byl podíl 300 miligramů isomeru A krystalován ze směsi hexanů a ethylesteru kyseliny octové (v pměru 2 : 1), přičemž bylo získáno 160 miligramů požadované sloučeniny uvedené v záhlaví tohoto příkladu, to znamená isomeru A, ve formě bílé krystalické pevné látky ve tvaru dlouhých jehliček.
Teplota tání: 162 až 164 ’C; chromatografie v tenké vrstvě = 0,29 (ethylester kyseliny octové, hexan, kyselina octová v poměru 100 : 50 : 1);
[a]D = -79,2° (c = 1,00, methanol);
Analýza pro C19H18F3NO4S:
-33CZ 281165 B6 vypočteno C = 55,20, H = 4,39, N = 3,39, F = 13,79, S = 7,76, nalezeno C = 55,02, H = 4,15, N = 3,29, F = 13,60, S = 7,54.
Příklad 15
Postup přípravy N-[2-[(acetylthio)methyl]-3,3,3-trifluor-l-oxopropyl]-L-(β)-naftylalaninu, isomer B.
Při provádění postupu podle tohoto příkladu byl produkt získaný postupem podle příkladu 14, to znamená isomer B, podroben mžikovému chromatografickému zpracováni, přičemž jako elučního činidla bylo použito systému ethylester kyseliny octové (v poměru 200 : 1,5) a směsi ethylesteru kyseliny octové, hexanů a kyseliny octové (v poměru 100 : 50 : 1), přičemž byl odstraněn isomer
A jako znečišťující složka a tímto způsobem bylo získáno 1,4 gramu požadované sloučeniny uvedené v záhlaví tohoto přikladu, tzn. isomer B.
Teplota tání: 166 až 169 °C; chromatografie v tenké vrstvě Rf = 0,15 (ethylester kyseliny octové, hexan a kyselina octová v poměru 100 : 50 : 1) ;
[a]D = +116,3° (c = 1,00, methanol);
Analýza pro C19H18F3NO4S:
vypočteno C = 55,20, H = 4,39, N = 3,39,
F = 13,79, S = 7,76, nalezeno C = 54,96, H = 4,39, N = 3,35,
F = 13,75, S = 7,83.
Přiklad 16
Postup přípravy (S)-a-[[3,3,3-trifluor-2-(merkaptomethyl)-1-oxopropyljamino]-2-naftalenpropanové kyseliny, isomer A.
Při prováděni postupu podle tohoto příkladu byla suspenze obsahující produkt získaný postupem podle příkladu 14 (v množství 2,01 gramu, což odpovídá 4,86 mmolu) ve 3,2 mililitru koncentrovaného hydroxidu amonného a 8,0 mililitru vody, promíchávána při teplotě místnosti pod atmosférou argonu po dobu 8 minut. Takto získaný čirý roztok byl potom okyselen 5% vodným roztokem hydrogensíranu draselného tak, aby hodnota pH tohoto roztoku byla asi 2 a potom bylo provedeno extrahováni ethylesterem kyseliny octové (ve formě čtyř podílů o objemu 50 mililitrů). Tímto způsobem byly získány ethylacetátové extrakty, které byly spojeny a společný podíl byl potom promyt solankou, potom byl sušen za pomoci síranu horečnatého a potom bylo provedeno odpaření tohoto roztoku, přičemž bylo získáno 1,72 gramu světle žluté voskovité pevné hmoty.
-34CZ 281165 B6
Tento materiál byl potom podroben zpracovávání postupem mžikové chromatografie za účelem přečištění tohoto surového produktu na silikagelu (přičemž poměr silikagelu ke sloučenině byl 150 : 1) a za použití systému ethylester kyseliny octové : hexany : kyselina octová v poměru 100 : 50 : 1 jako elučního činidla. Tímto postupem bylo získáno 1,42 gramu bílého krystalického produktu, který byl potom zpracován toluenem a potom byl sušen za použití vakua. Tímto postupem bylo získáno 1,24 gramu požadovaného produktu uvedeného v záhlaví tohoto příkladu, to znamená isomeru A, ve formě bílé pevné látky.
Teplota tání: 165 až 167 ’C; chromatografie v tenké vrstvě Rf = 0,26 (ethylester kyseliny octové : hexan : kyselina octová v poměru 100 : 50 : 1);
[a]D = +31,9’ (c = 1,00, methanol);
Analýza pro C17H16F3NO3S:
vypočteno C = 54,98, H = 4,34, N = 3,77, F = 15,35, S = 8,63, SH = 8,90, nalezeno C = 55,17, H = 4,29, N = 3,63,
F = 15,42, S = 8,68, SH = 9,18.
Přiklad 17
Postup přípravy (S)-a-[[3,3,3-trifluor-2-(merkaptomethyl)-1-oxopropyl]amino]-2-naftalenpropanové kyseliny, isomer B.
Při provádění postupu podle tohoto přiklad byl roztok obsahující produkt připravený postupem podle přikladu 15 v 10 mililitrech methanolu, zpracováván roztokem obsahujícím hydroxylaminhydrochlorid (v množství 0,552 gramu, což odpovídá 7,94 mmolu) v 7,9 mililitru 1 N roztoku hydroxidu sodného, a tato směs byla promíchávána při teplotě místnosti. Tato reakce byla potom dokončena v průběhu asi 35 minut, což bylo potvrzeno chromatografickou analýzou prováděnou v tenké vrstvě. Takto získaná reakční směs byla potom odpařena, přičemž byl získán výsledný bílý produkt v pevné formě a tento produkt byl potom vložen do 25 mililitrů vody a potom byl tento roztok extrahován ethylesterem kyseliny octové (ve formě čtyř podílů o objemu 35 mililitrů). Tímto způsobem byly získány ethylacetátové extrakty, které byly spojeny a takto spojený organický podíl byl potom promyt 50 mililitry solanky, přičemž tento roztok byl potom sušen za pomoci síranu hořečnatého a potom byl roztok odpařen, čímž bylo získáno 1,4 gramu bílé pevné látky. Tento surový produkt byl potom zpracováván postupem mžikové chromatografie na silikagelu (přičemž poměr silikagelu ke zpracovávané sloučenině byl 180 : 1) a jako elučního činidla bylo použito systému ethylester kyseliny octové : hexany : kyselina octová v poměru 100 : 50 : 1. Tímto způsobem bylo získáno 1,24 gramu požadované sloučeniny uvedené v záhlaví tohoto přikladu, to znamená isomeru B, ve formě bílé krystalické pevné látky.
-35CZ 281165 B6
Teplota tání: 172 až 179 °C;
chromátografie v tenké vrstvě = 0,19 (ethylester kyseliny octové : hexan : kyselina octová v poměru 100 : 50 : 1) ;
[a]D = +71,3’ (c = 1,00, methanol);
Analýza pro C17H16F3NO3S:
vypočteno C = 54,98, H = 4,34, N = 3,77,
F = 15,35, S = 8,63, SH = 8,90, nalezeno C = 55,02, H = 4,30 , N = 3,55,
F = 15,18, S = 8,64, SH = 9,09.
Příklad 18
Postup přípravy N-[2-[(acetylthio)methyl]-3,3,3-trifluor-1-oxopropyl]-L-leucinu, isomer A.
Pří provádění postupu podle tohoto přikladu byla mícháná suspenze, která obsahovala L-leucin (v množství 2,62 gramu, což odpovídá 20 mmolům) ve 35 mililitrech suchého acetonitrilu pod atmosférou argonu ochlazena na teplotu v rozmezí od 0 C do 5 ’C, přičemž potom byl k této suspenzi přidán bis(trimethylsilyl)trifluoracetamid (v množství 10,62 mililitru, což odpovídá 40 mmolúm). Takto získaná reakční směs byla potom promíchávána a ponechána pomalu se ohřát na teplotu místnosti. Potom bylo asi po 2 hodinách přidán další podíl bis(trimethylsilyl)trifluoracetamidu v množství 3,5 mililitru, čímž se vytvořil čistý roztok citrónového zabarvení, přičemž tento roztok byl potom promícháván po další jednu hodinu. Takto získaná reakční směs byla potom ochlazena na teplotu v rozmezí od 0 ’C do 5 ’C, a k tomuto roztoku byl potom přidán 2-trifluormethyl-3-acetylthiopropionylchlorid (v množství 4,69 gramu, což odpovídá 20 mmolům), který byl rozpuštěn v 8 mililitrech acetonitrilu, přičemž toto přidávání bylo provedeno opatrným způsobem po kapkách v průběhu 45 minut. Potom byla tato směs promíchávána po dobu 1,5 hodiny při teplotě v rozmezí od 0 ’C do 5 ’C při teplotě místnosti. Metodou chromatografické analýzy v tenké vrstvě bylo zjištěno ukončeni reakce. Tato reakční směs byla potom odpařena za sníženého tlaku, přičemž byl získán žlutý olejovitý zbytek, který byl v dalším postupu rozdělen mezi ethylester kyseliny octové (v množství 75 mililitrů) a vodu (v množství 50 mililitrů). Získaná vodná fáze byla potom dále extrahována ethylesterem kyseliny octové (ve formě čtyř podílů po 50 mililitrech), čímž byly získány ethylacetátové podíly extraktů, které byly spojeny a spojený podíl byl potom promyt 75 mililitry solanky a potom sušen síranem hořečnatým MgSO4. Potom byl tento roztok odpařen, čímž bylo získáno 10,3 gramu žlutého polopevného zbytku. Podíl 0,68 gramu tohoto surového materiálu byl potom podroben zpracování mžikovou chromatografickou metodou na 75 gramech silikagelu, přičemž jako elučního činidla bylo použito systému ethylester kyseliny octové : hexany : kyselina octová v poměru 100 : 100 : 1: Postupem podle tohoto příkladu by
-36CZ 281165 B6 lo získáno 0,15 gramu rychleji eluujícího diastereomeru (isomer A) a 0,12 gramu pomaleji eluujícího diastereomeru (isomer B). Zbývající podíl 9,6 gramu surového materiálu byl potom podroben podobným způsobem zpracovávání mžikovou chromatografickou metodou na silikagelu v množství 1 300 gramů, přičemž tímto postupem bylo získáno 2,5 gramu isomeru A, 2,7 gramu směsi obou uvedených diastereomerů a 1,5 gramu isomeru B. Smíchané frakce byly potom opětně podrobeny chromatografickému zpracování, přičemž bylo použito stejných podmínek jako je uvedeno shora, přičemž tímto způsobem bylo získáno 0,5 gramu isomeru A a 1,25 gramu isomeru B. Potom byly oba uvedené podíly 2,5 gramu a 0,5 gramu tohoto isomeru A spojeny, potom byla provedena triturace těchto podílů pomocí hexanů, ve kterých bylo obsaženo několik kapek ethylesteru kyseliny octové, potom byla takto získaná směs přefiltrována a získaný produkt byl usušen, čímž bylo získáno 2,57 gramu požadovaného produktu uvedeného v záhlaví tohoto přikladu, to znamená isomeru A, ve formě bílé krystalické pevné látky.
Teplota tání: 150 až 152 ’C; chromatografie v tenké vrstvě R^ - 0,40 (ethylester kyseliny octové : hexan : kyselina octová v poměru 100 : 50 : 1);
[a]D = -146,9’ (c = 1,00, methanol);
Analýza pro Ci2Hi8F3NO4S:
vypočteno C = 43,76, H = 5,51, N = 4,25,
F = 17,31, S = 9,73, nalezeno C = 43,79, H = 5,50, N = 3,96,
F = 17,10, S = 8,91.
Přiklad 19
Postup přípravy N-[2-[(acetylthio)methyl]-3,3,3-trifluor-1-oxopropyl]-L-leucinu, isomer B.
Při prováděni postupu podle tohoto příkladu byla část isomeru B, připraveného postupem podle příkladu 18 (v množství 2,61 gramu) triturována dvakrát s hexany, ve kterých bylo obsaženo několik kapek ethylesteru kyseliny octové, a jednou směsí hexanů a etheru v poměru 3:1, přičemž tato směs byla potom zfiltrována a získaný produkt usušen. Tímto postupem bylo získáno 1,6 gramu požadovaného produktu uvedeného v záhlaví tohoto příkladu, to znamená isomeru B, ve formě bílé pevné krystalické látky.
Teplota tání: 110 až 113 C chromatografie v tenké vrstvě Rf = 0,27 (ethylester kyseliny octové : hexany : kyselina octová v poměru 100 : 50 : 1), (a]D = +109,6’ (c = 1,00, methanol);
Analýza pro C12 H18F3NO4S:
-37CZ 281165 B6 vypočteno C = 43,76, H = 5,51, N = 4,25, F = 17,31, S = 9,73, nalezeno C = 43,80, H = 5,56, N = 3,92, F = 17,03, S = 9,42.
Příklad 20
Postup přípravy N-[3,3,3-trifluor-2-(merkaptomethyl)-l-oxopropyl]-L-leuc-inu, isomer A.
Při provádění postupu podél tohoto příkladu byla suspenze obsahující produkt připravený postupem podle příkladu 18 (v množství 2,3 gramu, což odpovídá 6,98 mmolu) ve 4,45 mililitru koncentrovaného hydroxidu amonného a 10 mililitrech vody, promíchávána při teplotě místnosti pod atmosférou argonu po dobu 8 minut. Tímto způsobem byl získán čirý roztok, který byl potom okyselen vodným roztokem hydrogensíranu draselného o koncentraci 5 % hmot, v množství takovém, aby hodnota pH roztoku dosahovala 2, přičemž potom byl tento roztok podroben extrahování 100 mililitry ethylesteru kyseliny octové, přičemž potom následovala další extrakce prováděná třemi podíly po 75 mililitrech tohoto ethylesteru kyseliny octové. Tímto způsobem byly získány ethylacetátové extrakty, které byly spojeny a celkový podíl byl potom promyt 100 mililitry solanky, potom byl tento roztok sušen za pomoci síranu hořečnatého MgSO4 a potom bylo provedeno odpaření do sucha, čímž bylo získáno 1,94 gramu bělavé pevné látky. Tato látka byla potom zpracovávána postupem mžikové chromatografie na 200 gramech silikagelu, přičemž jako elučního činidla bylo použito systému ethylester kyseliny octové : hexany : kyselina octová v poměru 100 : 100 : 1. Po tomto stupni bylo získáno 1,72 gramu požadovaného produktu uvedeného v záhlaví tohoto příkladu, to znamená isomeru A, ve formě bílé krystalické pevné látky.
Teplota tání: 143 až 145 °C; chromatografie v tenké vrstvě Rf = 0,38 (ethylester kyseliny octové : hexan : kyselina octová v poměru 100 : 50 : 1);
[a]D = -62,2’ (c = 1,00, methanol);
Analýza pro cioH16F3N03S: vypočteno C = 41,80, H = 5,61, N = 4,88,
F = 19,84, S = 11,16, SH = 11,51, nalezeno C = 41,89, H = 5,62, N = 5,12,
F = 19,51, S = 11,05, SH = 11,78.
-38CZ 281165 B6
Příklad 21
Postup přípravy N-[3,3,3-trifluor-2-(merkaptomethyl)-l-oxopropyl]-L-leucinu, isomer B.
Při provádění postupu podle tohoto příkladu byla suspenze obsahující produkt připravený postupem podle příkladu 19 (v množství 1,3 gramu, což odpovídá 3,95 mmolu) ve 2,52 mililitru koncentrovaného hydroxidu amonného a 5,6 mililitru vody, promíchávána při teplotě místnosti pod atmosférou argonu po dobu 8 minut. Tímto způsobem byl zíkán čirý roztok, který byl potom okyselen roztokem hydrogensíranu draselného o koncentraci 5 % hmot, (v množství 120 mililitrů) na hodnotu pH 2. Takto vzniklý roztok byl potom podroben extrahování, provedenému se 75 mililitry ethylesteru kyseliny octové, přičemž potom následovala další extrakce provedená třemi 40 mililitrovými podíly ethylesteru kyseliny octové. Tímto způsobem vznikly ethylacetátové extrakty, které byly spoeny a tento podíl byl potom promyt 50 mililitry solanky, potom byl roztok sušen síranem hořečnatým a nakonec byl odpařen, přičemž bylo získáno 1,04 gramu světle žluté pevné látky. Tato látka byla potom spojena se 35 miligramy produktu připraveného podobným způsobem. Tento spojený podíl produktu byl potom přečištěn postupem mžikové chromatografie na 200 gramech silikagelu, přičemž jako elučního činidla bylo použito směsi ethylesteru kyseliny octové, hexanů a kyseliny octové v poměru 100 : 100 : 1, přičemž tímto postupem bylo získáno 0,93 gramu požadované sloučeniny uvedené v záhlaví tohoto příkladu, to znamená isomeru B, přičemž tento produkt byl ve formě bílé krystalické pevné látky.
Teplota táni: 132 až 134 ’C; chromatografie v tenké vrstvě R^ = 0,33 (ethylester kyseliny octové : hexan : kyselina octová v poměru 100 : 50 : 1);
[a)D = +4,8’ (c = 1,00, methanol);
Analýza pro C10H16F-jNO3S:
vypočteno C = 41,80, H = 5,61, N = 4,88,
F = 19,84, S = 11,16, SH = 11,51, nalezeno C = 41,83, H = 5,66, N = 5,04,
F = 19,67, S = 11,13, SH = 11,79.
Příklad 22
Postup přípravy 2-(acetylthiomethyl)-3,3,3-trifluor-N-[2-(4-hydroxyfenyl)ethyl]propanamidu.
Při provádění postupu podle tohoto přikladu se postupovalo tak, že k míchanému roztoku, který obsahoval 4-(2-aminoethyl)fenol (v nmožstvi 4,60 gramu, což odpovídá 36,2 mmolu) ve 250 mililitrech suchého methylenchloridu, a který byl udržován na teplotě -10 °C, byl přidán roztok obsahující 2-trifluormethy-3-acetylthiopropionylchlorid (v množství 4,24 gramu, což odpovídá
-39CZ 231165 B6
18,1 mmolu) v 50 mililitrech suchého methylenchloridu, přičemž takto získaná reakční směs byla potom promíchávána při teplotě -10 °C po dobu 3 hodin. Takto získaná reakční směs byla potom promyta třikrát 1N roztokem kyseliny chlorovodíkové, přičemž organická vrstva byla oddělena a usušena bezvodým síranem hořečnatým, přičemž potom byl tento podíl zfiltrován a zkoncentrován za použití vakua. Tímto postupem bylo získáno 3,5 gramu žlutého oleje. Tento surový materiál byl potom podroben mžikovému chromatograf ickému zpracování na 400 mililitrech silikagelu LPS-1, přičemž jako elučního činidla bylo použito směsi hexanu a ethylesteru kyseliny octové v poměru 2:1. Potom byl eluován produkt, přičemž po oddělení bylo získáno 1,6 gramu požadované sloučeniny uvedené v záhlaví tohoto příkladu ve formě čistého oleje.
Chromatografie v tenké vrstvě R^ = 0,12 (ethylester kyseliny octové : methylenchlorid v poměru 4 : 1);
Analýza pro ci4Hi6F3NO3s . 1,1 H20:
vypočteno C = 49,61, H = 4,88, N = 4,13,
F = 16,82, S = 9,46, nalezeno C = 49,38, H = 4,77, N = 4,34,
F = 16,58, S = 9,51.
Příklad 23
Postup přípravy 2-(merkaptomethyl)-3,3,3-trifluor-N-[2-(4-hydroxyfenyl)ethylJpropanamidu.
Při provádění postupu podle tohoto příkladu byl roztok, který obsahoval sloučeninu připravenou postupem podle příkladu 22 ve 20 mililitrech methanolu, zpracováván roztokem 1N hydroxidu amonného (v množství 9 mililitrů, což odpovídá 9,0 mmolům), přičemž potom byl tento roztok promícháván při teplotě místnosti po dobu 3 hodin. Takto získaná reakční směs byla potom rozdělena mezi ether a 1N roztok kyseliny chlorovodíkové, přičemž vzniklé vrstvy byly odděleny. Takto získaná organická vrstva byla potom promyta bezvodým síranem hořečnatým, potom byla zfiltrována a nakonec byl tento roztok odpařen za použití vakua. Tímto způsobem bylo získáno 1,40 gramu sklovitého žlutého pevného materiálu. Takto získaný surový materiál byl potom podroben zpracovávání mžikovou chromatograf ickou metodou na 300 mililitrech silikagelu LPS-1, přičemž jako elučního činidla bylo použito směsi methylenchloridu a methanolu v poměru 97 : 3. Poostupem podle tohoto provedení bylo získáno 0,74 gramu požadované sloučeniony uvedené v záhlaví tohoto přikladu ve formě bílé pevné látky.
Teplota tání: 98 až 100 ’C;
Analýza pro titulní sloučeninu vypočteno C = 48,84, H = 4,85, N = 4,75,
F = 19,32, S = 10,87, SH = 11,23,
-40CZ 281165 B6 nalezeno C = 48,97, H = 4,63, N = 4,62, F = 18,96, S = 10,76, SH = 10,93.
Příklad 24
Postup přípravy 2-(acetylthiomethyl)-3,3,3-trifluor-N-[2-(4-pyridinyl)ethyl]propanamidu.
Při provádění postupu podle tohoto příkladu byl k promíchávané suspenzi obsahující 4-(2-aminoethyl)pyridin (v množství
4,60 gramu, což odpovídá 37,7 mmolu) ve 250 mililitrech suchého methylenchloridu, která byla udržována na teplotě -10 C, přidán roztok obsahující 2-trifluormethyl-3-acetylthiopropionylchlorid (v množství 4,38 gramu, což odpovídá 18,7 mmolu) v 50 mililitrech suchého methylenchloridu, přičemž takto vzniklá reakční směs byla ptom promíchávána při teplotě -10 °C po dobu 3 hodin. Takto získaná reakční směs byla potom promyta čtyřikrát roztokem hydrogenuhličitanu sodného o koncentraci 5 % hmot., přičemž vznikla organická vrstva, která byla oddělena a usušena za pomoci bezvodého síranu hořečnatého, potom byl tento roztok zfiltrován a zkoncentrován za použití vakua. Tímto postupem bylo připraveno 5,62 gramu materiálu žlutého zabarvení. Tato pevná látka žluté barvy představující surový produkt byla potom přečištěna postupem mžikové chromatografie na 700 mililitrech silikagelu LPS-1, přičemž jako elučního činidla bylo použito směsi ethylesteru kyseliny octové a methylenchloridu v poměru 4:1. Po isolování produktu činilo množství látky uvedené v záhlaví tohoto přikladu 4,42 gramu přičemž tento produkt byl ve formě světle žluté pevné látky.
Teplota táni: 87 až 89 ’C;
Analýza pro C13H15F3N2O2S:
vypočteno C = 48,74, H = 4,72, F = 17,79,
N = 8,75, S = 10,01, nalezeno C = 48,67, H = 4,64, F = 17,60,
N = 8,73, S = 10,04.
Příklad 25
Postup přípravy hydrochloridu 2-(merkaptomethyl)-3,3,3-trifluor-N-[2-(4-pyridinyl)ethyl]prpanamidu.
Při provádění postupu podle tohoto příkladu byl roztok obsahující produkt získaný postupem podle příkladu 24 (v množství 2,0 gramy, což odpovídá 6,2 mmolu) ve 30 mililitrech směsi methanolu a vody v poměru 1:1, rychle zchlazen na teplotu 0 C a potom byl tento roztok zpracováván 5 mililitry hydroxidu amonného (14,8 M roztok, množství 5 mililitrů, což odpovídá 74 mmolu) a tato směs byla potom promíchávána tak dlouho, dokud roztok nebyl čirý, což trvalo přibližné 10 minut. Takto získaná reakční směs byla potom zkoncentrována za použití vakua, přičemž vznikl zbytek, který byl potom vložen do minimálního objemu vody (do které byl přidán methanol kvůli zlepšení stability), přičemž potom byla prováděna lyofilizace tohoto roztoku po dobu přes noc.
-41CZ 281165 B6
Tímto postupem bylo získáno 1,9 gramu žluté pevné látky. Tento surový produkt byl potom podroben zpracování mžikovou chromátografickou metodou na 350 mililitrech silikagelu, přičemž jako elučního činidla bylo použito směsi methylenchloridu a methanolu v poměru 97 : 3. Při provádění tohoto postupu bylo získáno 1,43 gramu 2-(merkaptomethyl)-3,3,3-trifluor-N-[2-[4-pyridinyl]ethyl]propanamidu ve formě bílé pevné látky.
Teplota tání: 114 až 115 ’C; chromatografie v tenké vrstvě R^ = 0,21 (methylenchlorid a methanol v poměru 95 : 5);
Analýza pro C11 Hi3F3N20s: vypočteno C = 47,47, H = 4,71, F = 20,48,
N = 10,07, S = 11,52, SH = 11,88, nalezeno C = 47,62, H = 4,69, F = 20,16,
N = 9,88, S = 11,75, SH = 12,06.
Potom byl v další fázi roztok obsahující shora uvedený produkt (v množství 1,26 gramu, což odpovídá 4,53 mmolu) v 15 mililitrech acetonitrilu, zpracováván pomocí etherické kyseliny chlorovodíkové, která byla použita v přebytku, a tento roztok byl potom promícháván po dobu 5 minut, přičemž těkavé látky byly odstraněny za použití vakua, čímž vznikl čistý olej. Tento olej byl potom triturován hexany a tímto postupem bylo vyrobeno 0,978 gramu požadované sloučeniny uvedené v záhlaví tohoto příkladu ve formě bílé pevné látky.
Teplota tání: 155 až 156 “C; chromatografie v tenké vrstvě Rf = 0,17 (methylenchlorid a methanol v poměru 95 : 5);
Analýza pro C11H14C1F-jN2OS . 0,07 H2O:
vypočteno C = 41,81, H = 4,51, N = 8,87,
F = 18,04, S = 10,15, SH = 10,46, Cl = 11,22, nalezeno C = 42,02, H = 4,41, N = 8,77,
F = 17,64, S = 10,02, SH = 10,64, Cl = 10,94.
Příklad 26
Postup přípravy 2-[(acetylthio)methyl]-3,3,3-trifluor-N-[2-(1H-tetrazol-5-yl)ethyl]propanamidu.
A. Postup přípravy (N)-t-butoxykarbonyl-3-aminopropionitrilu.
Při provádění postupu podle tohoto provedení byl 3-aminopropionitrilmravenčan (v množství 1,28 gramu, což odpovídá 10 mmolům) rozpuštěn ve 40 mililitrech absolutního ethanolu, přičemž potom následoval přídavek diisopropylethylaminu (v množství 3,48 mililitru, což odpovídá 20 mmolům) při teplotě 0 ’C. Takto získaná směs byla potom promíchána, což bylo prováděno po dobu 10 mi
-42CZ 281165 B6 nut, a potom byl k této směsi přidán di-terc-butyldikarbonát (v množství 2,18 gramu, což odpovídá 10 mmolům) a tato reakční směs byla potom promíchávána při teplotě místnosti po dobu 48 hodin, přičemž potom bylo provedeno zkoncentrování za použití vakua a takto získaný zbytek byl rozpuštěn v ethylesteru kyseliny octové (v množství 200 mililitrů). Takto získaný ethylacetátový roztok byl potom prmyt vodou, potom nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného, potom byl tento roztok usušen za pomoci bezvodého síranu sodného a potom byl roztok zkoncentrován opět za použití vakua, čímž byla získána jako produkt pevná látka. Výtěžek této sloučeniny podle provedení A byl v tomto případě 1,68 gramu. Teplota tání: 44 až 45 °C.
B. Postup přípravy 5-(N)-t-butoxykarbonyl-2-aminoethyl)tetrazolu.
Při prováděni postupu podle tohoto provedení byly tri-n-butylcínazid a sloučenina získaná shora uvedeným postupem podle provedení A zahřívány při teplotě 115 ’C ve 100 mililitrech xylenu po dobu 48 hodin. Takto získaná reakční směs byla potom zkoncentrována za použití vakua a takto získaný zbytek byl potom rozpuštěn v systému (pyridin : kyselina octová : voda v poměru 20 : 6 : 11) a ethylesteru kyseliny octové v poměru 2:8. Potom byl k této směsi přidán silikagel (v množství 25 gramů) a tato směs byla potom promíchávána při teplotě místnosti po dobu přes noc. Takto získaná reakční směs byla potom zfiltrována a lože oxidu křemičitého bylo potom řádně promyto shora uvedenou směsí tvořící rozpouštédlový systém (pyridin : kyselina octová : voda v poměru 20 : 6 : 11) : ethylester kyseliny octové : voda v poměru 20 : 6 : 11) : ethylester kyseliny octové v poměru 2:8. Tímto způsobem byl získán filtrát, který byl zkoncentrován za použití vakua a vzniklý zbytek byl potom zkoncentrován z toluenu (tento stupeň byl proveden dvakrát). Takto získaný produkt byl ponechán ztuhnout po přídavku isopropyletheru. Získaný produkt byl zfiltrován, přičemž podle tohoto provedení bylo získáno 1,88 gramů požadované sloučeniny B uvedené v záhlaví tohoto provedeni.
Teplota tání: 121 až 126 °C.
C. Postup přípravy 5-(2-aminoethyl)tetrazolu ve formě hydrochloridu.
Při prováděni postupu podle tohoto provedení byla sloučenina získaná podle shora uvedeného provedení B (v množství 1,88 gramu, což odpovídá 8,8 mmolu) rozpuštěna ve 20 mililitrech ethylesteru kyseliny octové nasycené kyselinou chlorovodíkovou. Takto získaná reakční směs byla potom promíchávána po dobu 3 hodin a získaná sraženina byla potom zfiltrována, čímž byla získána požadovaná sloučenina uvedená v záhlaví tohoto provedení (v množství 1,04 gramu) ve formě pevné látky.
Teplota tání: 120 až 129 ’C (za rozkladu).
D. Postup přípravy 2-[(acetylthio)methyl]-3,3,3-trifluor-N-[2-(lH-tetrazol-5-yl)ethyl]propanamidu.
Při prováděni postupu podle tohoto provedení byla sloučenina získaná postupem podle shora uvedeného provedení C (v množství 0,92 gramu, což odpovídá 6,15 mmolu) suspendována v 15 mili
-43CZ 281165 B6 litrech suchého acetonitrilu pod atmosférou argonu. Potom byl k této suspenzi přidán bis(trimethylsilyl)trifluoracetamid (v množství 5,2 mililitru, což odpovídá 19,6 mmolu) a takto připravená směs byla promíchávána tak dlouho, dokud nebyl získán čirý roztok (což trvalo 2 hodiny). Takto získaná reakční směs byla potom ochlazena na teplotu 5 ’C, potom byl k této reakční směsi přidán 2-trifluormethyl-3-acetylthiopropionylchlorid (v množství
1,44 gramu, což odpovídá 6,14 mmolu), přičemž toto přidávání bylo prováděno opatrně po kapkách, a vzniklá směs byla potom promíchávána po dobu 2 hodin při teplotě v rozmezí od 5 ’C do 10 °C. Takto získaná reakční směs byla potom zkoncentrována za použití vakua, potom byla rozpuštěna v ethylesteru kyseliny octové (v množství 200 mililitrů) a získaný ethylacetátový roztok byl potom promyt vodou (celkem třikrát), potom byl přidán pH tlumič 4,02, potom byl tento roztok promyt solankou (celkem dvakrát) a nakonec byl roztok vysušen síranem sodným a zkoncentrován za použití vakua. Po přidání isopropyletheru bylo dosaženo ztuhnutí produktu. Takto získaný pevný produkt byl potom odfiltrován a usušen, čímž bylo získáno 1,38 gramů produktu.
Teplota tání: 157 až 160 °C;
Analýza pro Cgři^^NgC^S:
vypočteno C = 34,72, H = 3,89, N = 22,50,
F = 18,31, S = 10,30, nalezeno C = 34,41, H = 3,80, N = 21,39,
F = 18,64, S = 10,34.
Příklad 27
Postup přípravy 3,3,3-trifluor-2-(merkaptomethyl)-N-[2-(1Htetrazol-5-yl)ethyl]propanamidů.
Při prováděni postupu podle tohoto příkladu byla sloučenina získaná postupem podle shora uvedeného přikladu 26 (v množství 1,0 gram, což odpovídá 3,2 mmolu) rozpuštěna při teplotě 0 °C pod atmosférou argonu ve 2,5 mililitru roztoku obsahujícího koncentrovaný hydroxid amonný ve vodě v poměru 1:1. Takto získaná reakční směs byla potom promíchávána při teplotě 0 'C po dobu 5 minut a potom byla tato směs okyselena za použití 5 N roztoku kyseliny chlorovodíkové na pH 6, což bylo provedeno při teplotě 0 ’C. Takto získaný produkt byl potom extrahován ethylesterem kyseliny octové, který obsahoval 5 procent hmotnostních methanolu (přičemž tato extrakce byla prováděna celkem třikrát 200 mililitrovými podíly). Takto získaná organická vrstva byla potom promyta solankou, potom byla sušena síranem sodným a potom bylo provedeno zkoncentrování tohoto roztoku za použití vakua. Tímto způsobem byl získán surový produkt ve formě zbytku, který byl potom přečištěn chromátografickým způsobem za použití 50 gramů silikagelu Měrek, přičemž jako elučního činidla bylo použito systému methanol / kyselina octová / methylenchlorid v poměru 3 : 3 : 94. Odpovídající frakce byly potom spojeny a zkoncentrovány, čímž bylo získáno 0,56 gramů konečného produktu.
-44CZ 281165 B6
Teplota tání: 182 až 184 °C;
Analýza pro C7H1QN5OSF3 . 0,13 H2O:
vypočteno C = 30,95, H = 3,81, N = 25,78, F = 20,98,
S = 11,80, SH = 12,17, nalezeno C = 31,15, H = 3,66, N = 25,53, F = 20,58,
S = 11,83, SH = 12,21.
Příklad 28
Postup přípravy 3,3,3-trifluor-N-(3-hydroxyfenyl)-2-(merkaptomethy1)propanamidu.
a) Postup přípravy 3,3,3-trifluor-2-[(acetylthio)methyl]-N-(3-hydroxyfenol)propanamidu.
Při provádění postupu podle tohoto provedeni byl k roztoku, který obsahoval 3-aminofenol (v množství 4,02 gramu, což odpovídá
36,8 mmolu) ve 250 mililitrech methylenchloridu, přidán 2-trifluormethyl-3-acetylthiopropionylchlorid (v množství 4,29 gramu, což odpovídá 1,3 mmolu), přičemž tato směs byla potom promíchávána při teplotě -10 :C po dobu 5,5 hodiny. Takto získaná reakční směs byla potom promyta 1 N roztokem kyseliny chlorovodíkové (promytí bylo provedeno celkem třikrát) a potom solankou, přičemž potom byl roztok sušen (síranem horečnatým), zfiltrován a zkoncentrován za použití vakua, přičemž výtěžkem bylo 4,58 gramu požadované sloučeniny A uvedené v záhlaví tohoto provedeni ve formě bělavé pevné látky.
Teplota tání: 148 až 149 ’C; chromatografie v tenké vrstvě R^ = 0,73 (ethylester kyseliny octové a methylenchlorid v poměru 4 : 1),
b) Postup přípravy 3,3,3-trifluor-N-(3-hydroxyfenol)-2-(merkaptomethyl)propanamidu.
Při prováděni postupu podle tohoto provedeni byl hydroxid amonný NH^OH (14,8 M roztok v množství 2,6 mililitru, což odpovídá 38,8 mmolu) přidán k roztoku který obsahoval sloučeninu připravenou podle shora uvedeného stupně a), to znamená sloučeninu A (v množství 1,05 gramu, což odpovídá 3,42 mmolu) v 16 mililitrech směsi vody a methanolu v poměru 1 : 1 při teplotě 0 “C, přičemž takto získaný roztok byl potom promícháván po dobu 10 minut. Takto získaná reakční směs byla potom rychle ochlazena na teplotu 0 °C za pomoci 10% roztoku hydrogenuhličitanu draselného (hmotnostní koncentrace) a potom byl tento roztok extrahován za pomoci ethylesteru kyseliny octové (extrahování bylo prováděno celkem čtyřikrát). Takto získané organické extrakty byly potom spojeny, usušeny (za pomoci síranu horečnatého), potom byl tento roztok zfiltrován a zkoncentrován za použití vakua, přičemž výsledkem tohoto postupu bylo 1,17 gramu žluté pevné látky. Takto získaný surový produkt byl potom přečištěn mžikovou chromatografickou metodou na 250 mililitrech silikagelu EM-60, přičemž jako elučniho činidla bylo použito směsi methylenchloridu a methanolu
-45CZ 281165 B6 v poměru 98 : 2. Tímto postupem bylo získáno 0,68 gramu požadované sloučeniny uvedené v záhlaví tohoto provedení ve formě bělavé pevné látky.
Teplota tání: 147 až 151 C chromatografie v tenké vrstvě Rf = 0,36 (methylenchlorid a methanol v poměru 95 : 5);
Analýza pro cioHioF3N02S . 0,07 H20:
vypočteno C = 45,30, H = 3,85, N = 5,21, F = 21,20,
S = 11,93, SH = 11,90, nalezeno C = 45,26, H = 3,81, N = 5,09, F = 20,82,
S = 11,72, SH = 12,31.
Příklad 29
Postup přípravy N-[2-[(acetylthio)methyl]-3,3,3-trifluor-l-oxopropyl]-L-norleucinu, isomer A.
Při provádění postupu podle tohoto provedeni byl bis(trimethylsilyl ) trif luoracetamid (v množství 16 mililitrů, což odpovídá 60 mmolům) přidán k suspenzi L-norleucinu (v množství 2,62 gramu, což odpovídá 20 mmolům) ve 40 mililitrech acetonitrilu při teplotě 0 ”C. Takto získaná suspenze byla potom ponechána ohřát na teplotu místnosti a potom byla promíchávána po dobu 2,5 hodiny, přičemž po tomto časovém intervalu se téměř veškerý podíl pevné látky rozpustil. Takto získaná reakční směs byla potom znovu ochlazena na teplotu 0 °C a potom byl k této reakční směsi přidán 2-trifluormethyl-2-acetylthiopropionylchlorid (v množství 4,7 gramu, což odpovídá 20 mmolům), přičemž tento přídavek byl proveden opatrně po kapkách v intervalu 20 minut, ve formě roztoku v 10 mililitrech acetonitrilu. Takto získaná směs byla potom promíchána při teplotě místnosti, přičemž toto promíchávání bylo prováděno po dobu 18 hodin, a získaná reakční směs byla potom nalita do 200 mililitrů vody. Takto získaná směs byla potom extrahována ethylesterem kyseliny octové (v množství 500 mililitrů). Potom byla k tomuto roztoku přidána solanka k rozsažení emulze, která se vytvořila během prováděni shora uvedené extrakce. Takto získaná vodná fáze byla potom extrahována znovu ethylesterem kyseliny octové (v množství 100 mililitrů) a spojené organické vrstvy byly potom promyty solankou, potom byl tento podíl vysušen (za pomoci síranu hořečnatého MgSO4) a zkoncentrován, přičemž vznikl olejový zbytek, který byl potom předběžně absorbován na celitu. Takto získaný surový produkt a celitová směs byly potom vloženy do silikagelové kolony 8 x 30 centimetrů, která byla postupné eluována následujícím způsobem:
litrů rozpouštědlové směsi hexan : ethylester kyseliny octové : kyselina octová v poměru 750 : 250 : 25, 2 litry rozpouštědlové směsi hexan : ethylester kyseliny octové : kyselina octová v poměru 700 : 300 : 25, 2 litry rozpouštědlové směsi hexan : ethylester kyseliny octové : kyselina octová v poměru 500 : 500 : 25. Čisté méně polární frakce takto získané byly zkoncentrovány a současné odpařovány z heptanu, přičemž byla získána bílá pevná
-46CZ 281165 B6 látka, která byla potom rekrystalována dvakrát ze směsi ethylesteru kyseliny octové a hexanu. Takto získaný produkt byl potom sušen za použití vysokého vakua při teplotě místnosti po dobu 18 hodin, přičemž podle tohoto provedení bylo získáno 1,95 gramu požadované sloučeniny uvedené v záhlaví tohoto přikladu, to znamená isomeru A, ve formě bílého prášku.
Teplota tání: 176 až 178 °C;
chromatografie v tenké vrstvě Rf = 0,30 (ethylester kyseliny octové : hexan : kyselina octová v poměru 30:70:1);
[a)D = -133,3° (c = 0,6, methanol);
Analýza pro ci2Hi8F3NO4S: vypočteno C = 43,76, H = 5,51, N = 4,25, F = 17,31, S = 9,73, nalezeno C = 43,76, H = 5,45, N = 4,35, F = 17,57, S = 9,67.
Přiklad 30
Postup přípravy N-[2-((acetylthio)methyl]-3,3,3-trifluor-l-oxopropyl]-L-norleucinu, isomer B.
Při provádění postupu podle tohoto provedení bylo postupováno stejně jako v příkladu 29, přičemž čisté polárnější frakce byly zkoncentrovány za účelem získání bílé pevné látky, která byla potom rekrystalována dvakrát ze směsi ethylesteru kyseliny octové a hexanu. Po usušeni tohoto roztoku za vysokého vakua bylo získáno 1,953 gramu požadované sloučeniny uvedené v záhlaví tohoto příkladu, to znamená isomeru B.
Teplota tání: 123 až 125 °C; chromatografie v tenké vrstvě Rf = 0,19 (ethylester kyseliny octové, hexan, kyselina octová v poměru 30:70:1);
[a]D = +123“ (c = 0,63, methanol);
Analýza pro ci2Hi8F3NO4s: vypočteno C = 43,76, H = 5,51, N = 4,25, F = 17,31, S = 9,73, nalezeno C = 43,97, H = 5,45, N = 4,29, F = 17,13, S = 9,89.
Příklad 31
Postup přípravy N-[3,3,3-trifluor-2-(merkaptomethyl)-1-oxopropy1]-L-norleucinu, isomer A.
Při provádění postupu podle tohoto příkladu byl koncentrovaný roztok hydroxidu amonného (v množství 3 mililitry) přidán k suspenzi, která obsahovala produkt získaný postupem podle pří
-47CZ 281165 B6 kladu 29 ve 12 mililitrech odkysličené vody. Tato reakční směs, která se stala homogenní v intervalu kratším než jedna minuta, byla potom promíchávána po dobu 15 minut. Po tomto časovém intervalu byla hodnota pH tohoto roztoku upravena na asi 1,5 za pomoci hydrogensíranu draselného, a takto vzniklá výsledná vodná směs byla extrahována ethylesterem kyseliny octové (ve formě dvou podílů po 150 mililitrech). Získané organické vrstvy byly potom spojeny a tento podíl byl promyt solankou, potom byl tento roztok usušen síranem horečnatým MgSO4 a nakonec byl zkoncentrován, čímž vznikl olejový zbytek. Tento zbytek byl potom podroben přečištění mžikovou chromatografickou metodou, prováděnou v koloně naplněné silikagelem o rozměrech 5 x 12 centimetrů, přičemž jako elučního činidla bylo použito směsi hexanu, ethylesteru kyseliny octové a kyseliny octové v poměru 65 : 35 : 1. Takto získané čisté frakce byly potom zkoncentrovány a získaný zbytek byl společně odpařen z heptanu, což bylo prováděno několikrát a výsledkem byla bílá pevná látka. Tato bílá pevná látka byla potom triturována hexanem a potom byla sušena po dobu 18 hodin za vysokého vakua, čímž bylo získáno 1,175 gramu požadované sloučeniny uvedené v záhlaví příkladu, to znamená isomerů A, ve formě bílé pevné látky.
Teplota tání: 96 až 98 ’C;
chromatografie v tenké vrstvě R^ = 0,38 (ethylester kyseliny octové, hexan, kyselina octová v poměru 40:60:2);
[a]D -43,2° (c = 0,60, methanol);
Analýza pro cioH16F3N03s: vypočteno C = 41,37, H = 5,67, N = 4,83, F = 19,84,
S = 11,16, SH = 11,51, nalezeno C = 41,68, H = 5,42, N = 4,52, F = 19,53,
S = 10,89, SH = 11,78.
Příklad 32
Postup přípravy N-[3,3,3-trifluor-2-(merkaptomethyl)-1-oxopropyl]-L-norleucinu, isomer B.
Při provádění postupu podle tohoto příkladu byl nejdříve koncentrovaný roztok hydroxidu amonného (v množství 3 mililitry) přidán k suspenzi, která obsahovala produkt získaný postupem podle příkladu 30 ve 12 mililitrech odkysličené vody, což bylo provedeno při teplotě místnosti. Takto získaná reakční směs se potom stala homogenní během intervalu jedné minuty. Tato směs byla potom promíchávána po dobu 15 minut, potom byla tato reakční směs okyselena na pH 1,5 za pomoci koncentrovaného roztoku hydrogensiranu draselného a takto získaná okyselená směs byla extrahována ethylesterem kyseliny octové (extrakce byla prováděna dvakrát 150 mililitrovými podíly). Organické vrstvy byly spojeny a celkový podíl byl potom promyt solankou (v množství 100 mililitrů), potom byl roztok sušen (za pomoci síranu hořečnatého MgSO4) a po-48CZ 281165 B6 tom byl zkoncentrován, čímž byl získán světle žlutý zbytek. Tento zbytek byl potom podroben chromatografickému zpracování v koloně naplněné silikagelem o rozměrech 5 x 12 centimetrů, přičemž jako elučního činidla bylo použito směsi ethylesteru kyseliny octové, hexanu a kyseliny octové v poměru 40 : 60 : 1. Takto získané čisté frakce byly potom zkoncentrovány a společně odpařovány z heptanu, čímž byla získána bezbarvá pevná látka, která byla triturována s hexanem. Po filtraci a usušení bylo získáno 1,16 gramu bílé pevné látky. Tato látka byla potom podrobena rekrystalování, které bylo prováděno dvakrát ze směsi ethylesteru kyseliny octové a hexanu, přičemž tímto způsobem bylo získáno 632 miligramu požadované sloučeniny uvedené v záhlaví tohoto příkladu, to znamená isomeru B, ve formě bezbarvých jehliček.
Teplota tání: 131 až 133 ’C; chromatografie v tenké vrstvě Rf = 0,26 (ethylester kyseliny octové, hexan, kyselina octová v poměru 40:60:2);
[a]D = +21,3’ (c = 0,71, methanol);
Analýza pro C^qH-^qF-jNO-jS . 0,1 H2O:
vypočteno C = 41,53, H = 5,65, N = 4,84, F = 19,71,
S = 11,09, SH = 11,44, nalezeno C = 41,55, H = 5,61, N = 4,85, F = 19,14,
S= 10,99, SH = 13,66.
Příklad 33
Postup přípravy (S)-N-[3,3,3-trifluor-2-(merkaptomethyl)-1-oxopropyl ]-L-isoleucinu.
a) Postup přípravy N-[2-[(acetylthio)methyl]-3,3,3-trifluor-1-oxopropyl]-L-isoleucinu.
Při provádění tohoto postupu byl nejdříve bis(trimethylsilyl ) trif luoracetamid (v množství 16 mililitrů, což odpovídá 60 mmolům) přidán k suspenzi, která obsahovala L-isoleucin (v množství 2,62 gramu, což odpovídá 20 mmolům) ve 40 mililitrech acetonitrilu při teplotě 0 C. Takto získaná suspenze byla potom ponechána ohřát na teplotu místnosti a potom byla promíchávána po dobu 2 hodin. Po tomto časovém intervalu se přibližně třetina podílu pevné látky rozpustila. Potom bylo přidáno další množství bis(trimethylsilyl)trifluoracetamidu (množství 4 mililitry, což odpovídalo 15 mmolům) a takto získaná směs byla potom promíchávána po dobu 45 minut. Takto vzniklá směs byla potom ochlazena na teplotu 0 ’C a potom byl přidán 2-trifluormethyl-3-acetylthiopropionylchlorid (v množství 4,7 gramu, což odpovídá 20 mmolům), přičemž tento přídavek byl proveden opatrným způsobem po kapkách během intervalu 15 minut, ve formě roztoku v 10 mililitrech acetonitrilu. Takto vzniklá směs byla potom promíchávána po dobu 18 hodin při teplotě místnosti, přičemž touto reakční směsí byl čirý světle žlutý roztok. Potom bylo k tomuto roztoku přidáno přibližně 150 mililitrů vody a výsledná směs byla extrahována ethyl
-49CZ 281165 B6 esterem kyseliny octové (ve formé dvou podílů po 150 mililitrech). Tímto způsobem byly získány organické vrstvy, které byly spojeny a spojený podíl byl potom promyt solankou (v množství 100 mililitrů), potom byl tento podíl sušen síranem horečnatým MgSO4 a zkoncentrován, čímž byl získán olejovitý zbytek, který byl potom předběžně naadsorbován na celit k provedení chromatograf ického zpracování. Chromatografické zpracovávání bylo provedeno několikrát, přičemž takto získaná látka byla triturována a rekrystalována, čímž bylo získáno 1,41 gramu (R)-N-(2-[(acetylthio)methyl]-3,3,3-trifluor-l-oxopropyl]-L-isoleucinu.
Teplota tání: 81 až 85 ’C;
[a)D = -105,5’ (c = 0,38, methanol);
Tento produkt byl oddělen, přičemž dále bylo získáno 1,56 gramu (S)-N-[2-(/acetylthio/methyl)-3,3,3-trifluor-l-oxopropyl]-L-isoleucinu.
Teplota tání: 111 až 112 ’C;
[a]D = +122,6’ (c = 0,38, methanol).
b) Postup přípravy (S)-N-[3,3,3-trifluor-2-(merkaptomethyl)-1-oxopropyl]-L-isoleucinu.
Při provádění' postupu podle tohoto provedení byl přidán koncentrovaný roztok hydroxidu amonného (v množství 3 mililitry) k suspenzi obsahující (S)-diastereomerní produkt získaný postupem podle shora uvedené části (a) (v množství 1,5 gramu, což odpovídá
4,55 mmolu) ve 12 mililitrech odkysličené vody. Rozpuštění proběhlo během několika sekund, přičemž takto získaná reakční směs byla potom ponechána míchat pod atmosférou argonu po dobu 5 minut. Takto získaná reakční směs byla potom okyselena na pH 1,5 za pomoci roztoku hydrogensÍránu draselného a potom byl takto získaný roztok extrahován ethylesterem kyseliny octové (ve formě dvou podílů po 150 mililitrech). Tímto způsobem byly získány ethylacetátové podíly, které byl spojeny a promyty solankou, potom byl tento podíl vysušen (za pomoci síranu hořečnatého) a zkoncentrován. Takto získaný zbytek byl potom podroben zpracování v chromátografické koloně o rozměrech 5 x 15 centimetrů, která byla naplněna silikagelem, přičemž jako elučního činidla bylo použito systému hexan : ethylester kyseliny octové : kyselina octová v poměru 75 : 25 : 1. Tímto způsobem byly získány čisté frakce, které byly zkoncentrovány a potom byly podrobeny společnému odpařování z heptanu. Tímto shora uvedeným postupem bylo získáno 1,285 gramu bílé pevné látky. Tato pevná látka byla potom rekrystalována třikrát, přičemž bylo získáno 0,834 gramu sloučeniny uvedené v záhlaví tohoto příkladu ve formě (S) diastereomeru.
Teplota táni: 130 až 131 ’C; chromatografie v tenké vrstvě Rf = 0,43 (ethylester kyseliny octové : hexan : kyselina octová v poměru 40:60:1) ;
[a)D = +35,8’ (c = 0,45, methanol);
-50CZ 281165 B6
Analýza pro C1QH16F3NO3S . 0,10 H20:
vypočteno pro C = 41,55, H = 5,65, N = 4,85, F = 19,72,
S = 11,09, SH = 11,44, nalezeno C = 41,74, H = 5,62, N = 4,76, F = 19,33,
S = 10,95, SH = 13,47.
Příklad 34
Postup přípravy (R)-N-[3,3,3-trifluor-2-(merkaptomethyl)-1-oxopropyl]-L-isoleucinu.
Při provádění postupu podle tohoto příkladu byl koncentrovaný roztok hydroxidu amonného (v množství 2,6 mililitru) přidán k suspenzi obsahující (R) diastereomerní produkt připravený postupem podle přikladu 33 (a) (v množství 1,3 gramu, což odpovídá 3,95 mmolu) v 10 mililitrech vody. Rozpuštění této látky trvalo během jedné minuty, přičemž takto získaná reakční směs byla potom ponechána promíchávat pod atmosférou argonu po dobu 5 minut při teplotě místnosti. Takto získaná směs byla potom okyselena na pH
1,5 pomocí roztoku hydrogensíranu draselného a potom byla prováděna extrakce tohoto roztoku (pomocí ethylesteru kyseliny octové ve formě dvou podílů po 100 mililitrech). Tímto způsobem byly získány ethylacetátové podíly, které byly spojeny a potom byl tento společný podíl promyt solankou, usušen (pomoci síranu hořečnatého MgSO4) a zkoncentrován. Tímto způsobem byl získán zbytek, který byl podroben chromatografickému přečištěni prováděnému v koloně o rozměrech 5 x 25 centimetrů, přičemž jako elučního činidla bylo použito systému hexan : ethylester kyseliny octové : kyselina octová v poměru 75 : 25 : 1. Takto získané čisté frakce byly potom zkoncentrovány a tento podíl byl potom současně odpařován z heptanu. Tímto postupem bylo získáno 1,01 gramu bílé pevné látky. Tato látka vyžadovala velice intenzivní a pracnou trituraci heptanem, hexanem a pentanem k tomu aby byl odstraněn stopový zůstatek ethylesteru kyseliny octové. Po konečné filtraci byl tento materiál usušen za použiti vysokého vakua při teplotě 100 °C, přičemž tímto způsobem bylo získáno 0,79 gramu požadovaného (R)-diastereomeru jako produktu tohoto postupu ve formě bílé pevné látky.
Teplota tání: 140 až 142 ’C; chromatografie v tenké vrstvě R^ = 0,39 (ethylester kyseliny octové : hexan : kyselina octová v poměru 40:60:2) ;
[a]D = -37,3’ (c = 0,55, methanol);
Analýza pro cioH16F3N03S vypočteno C = 41,80, H = 5,61, N = 4,88, F = 19,84,
S = 11,16, SH = 11,51, nalezeno C = 42,18, H = 5,67, N = 5,02, F = 19,36,
S = 11,48, SH = 12,29.
-51CZ 281165 B6
Příklad 35
Postup přípravy (S,R)-3-[[2-[(acetylthio)methyl]-3,3,3-trifluor-1-oxoproyl]amino]-5-methylhexanové kyseliny.
Při provádění postupu podle tohoto příkladu byl roztok methylesteru 3-[[(2,2-dimethylethyl)oxy]karbonyl]amino-5-methylhexanové kyseliny, který byl připraven podle Arndt-Eistertova reakčního schéma, viz. Ondetti a kol., J. Med. Chem., Vol. 19, str. 761 (1975) a použit v množství 5,26 gramu, což odpovídá 20,3 mmolu, ve 100 mililitrech methanolu, zpracováván roztokem 1 N hydroxidu sodného (v množství 40 mililitru, což odpovídá 40 mmolům) a takto získaný roztok byl potom promícháván při teplotě místnosti po dobu 3 hodin. Takto vzniklá reakční směs byla potom zkoncentrována za použití vakua a vzniklý zbytek byl potom vložen do vody. Takto získaný vodný roztok byl potom promyt jednou ethylesterem kyseliny octové a potom byl okyselen 6 N roztokem kyseliny chlorovodíkové, přičemž potom následovala extrakce ethylesterem kyseliny octové (provedená celkem čtyřikrát). Tímto způsobem byly získány organické extrakty, které byly spojeny a získaný společný podíl byl potom sušen za pomoci síranu hořečnatného, potom byl zfiltrován a zkoncentrován za použití vakua, přičemž tímto způsobem bylo získáno 5,68 gramu 3-[[(2,2-dimethylethyl)oxyjkarbonyl]amino-5-methylhexanové kyseliny ve formě čirého oleje·
V dalším postupu byl roztok této kyseliny (v množství 0,63 gramu, což odpovídá 2,57 mmolu) v ethylesteru kyseliny octové (v množství 5 mililitrů) zpracováván kyselinou chlorovodíkovou (ve formě 3,2 M roztoku v ethylesteru kyseliny octové, v množství 25 mililitrů, což odpovídá 80 mmolům) a takto vzniklý roztok byl potom promícháván při teplotě místnosti po dobu 3 hodin. Takto získaná reakční směs byla potom proplachována dusíkem a potom byla zkoncentrována za použití vakua, přičemž tímto postupem byla získána bílá pevná látka, která byla potom triturována ethylesterem kyseliny octové, přičemž tímto způsobem bylo získáno 0,37 gramu hydrochloridu 3-amino-5-methylhexanové kyseliny.
Teplota tání: 125 až 126 ’C.
V další fázi tohoto postupu byl roztok hydrochloridu shora uvedené kyseliny (v množství 2,7 gramu, což odpovídá 14,9 mmolu) v suchém acetonitrilu udržován při teplotě 0 ’C, přičemž potom byl tento roztok zpracován diisopropylaminem (v množství 2,6 mililitru, což odpovídá 14,9 mmolu) a bis(trimethylsilyl)trifluoracetamidem (v množství 8 mililitrů, což odpovídá 30,1 mmolu) a potom byl tento roztok promícháván při teplotě 0 ’C po dobu 30 minut. Potom byl k tomuto roztoku přidán roztok obsahující 2-trifluormethyl-3-acetylthiopropionylchlorid (v množství 3,46 gramu, což odpovídá 14,7 mmolu) v 15 mililitrech suchého acetonitrilu, přičemž tento roztok byl přidáván opatrně po kapkách během intervalu 15 minut a potom byla tato směs ponechána se ohřát na teplotě prostředí, což bylo prováděno po dobu přes noc. Takto získaná reakční směs byla potom zkoncentrována za použití vakua a vzniklý zbytek byl potom vložen do ethylesteru kyseliny octové a potom byl promyt 1 N roztokem kyseliny chlorovodíkové (což bylo provedeno třikrát), a potom následovalo promyti solankou. Takto vzniklá organická vrstva byla potom usušena síranem hořečnatým MgSO4,
-52CZ 281165 B6 potom byla zfiltrována a potom byla podrobena zpracování mžikovou chromatografickou metodou na 1 800 mililitrech silikagelu, přičemž jako elučního činidla bylo použito systému hexan : ethylester kyseliny octové : kyselina octová v poměru 2 : 1 : 0,01 za účelem oddělení 2,33 gramu S,R-isomeru jako rychleji se pohybujícího isomeru. Takto získaný surový materiál byl potom triturován několikrát systémem hexan : ethylester kyseliny octové a nakonec byla tato látka zpracována dekolorizačním uhlíkem. Tímto postupem bylo získáno 1,7 gramu požadovaného (S,R)isomeru jako produktu postupu.
Teplota tání: 102 až 103 ’C;
chromatografie v tenké vrstvě Rf = 0,34 (hexan : ethylester kyseliny octové : kyselina octová v poměru 100 : 100 : 1);
[a]D = -124’ (c = 0,78, methanol);
Analýza pro ci3H20F3NO4 . 0,3 H2O vypočteno C = 44,78, H = 5,95, N = 4,02, F = 16,35, S = 9,20, nalezeno C = 45,02, H = 5,82, N = 3,78, F = 16,62, S = 9,51.
Příklad 36
Postup přípravy (S,S)-3-[ [ 2-[(acetylthio)methyl]-3,3,3-trifluor-1-oxopropyl]amino]-5-methylhexanové kyseliny.
Při provádění postupu podle tohoto příkladu byly frakce obsahující pomalu se pohybující isomer z postupu mžikové chromatografie prováděné v předchozím příkladu 35 shromážděny a zkoncentrovány za použití vakua, přičemž byl získán oranžový olej, který byl potom triturován několikrát s hexanem a ethylesterem kyseliny octové a nakonec byla tato látka zpracována dekolorizačním uhlíkem. Postupem podle tohoto příkladu bylo získáno 1,2 gramu požadovaného (S,S)-isomeru jako produktu postupu ve formě bílé pevné látky.
Teplota tání: 124 až 125 ’C; chromatografie v tenké vrstvě R^ = 0,78 (hexan : ethylester kyseliny octové : kyselina octová v poměru 100 : 100 : 1);
[<x]D = +98,4’ (c = 0,89, methanol);
Analýza pro ci3H20F3NO4S . 0,08 H20 vypočteno C = 45,28, H = 5,89, N = 4,06, F = 16,53, S = 9,30, nalezeno C = 45,35, H = 5,98, N = 3,99, F = 16,35, S = 9,18.
-53CZ 281165 B6
Přiklad 37
Postup přípravy (S,R)-3-([3,3,3-trifluor-2-(merkaptomethyl)-l-oxopropyl]amino]-5-methylhexanové kyseliny.
Při provádění postupu podle tohoto příkladu byla suspenze obsahující (S,R)-isomer, jako produkt postupu podle příkladu 35, (v množství 1,0 gram, což odpovídá 2,9 mmolu) ve vodě udržovaná na teplotě 0 ’C pod atmosférou argonu, zpracovávána hydroxidem amonným (ve formě 5 M roztoku, množství 10 mililitrů, což odpovídá 50 mmolům) a potom byla tato směs promíchávána po dobu 5 minut. Tato reakční směs byla potom rychle zchlazena na teplotu 0 °C přídavkem 140 mililitrů roztoku hydrogensíranu draselného o koncentraci 10 % hmot, a potom byla tato směs extrahována ethylesterem kyseliny octové (celkem čtyřikrát). Tímto způsobem byly získány organické extrakty, které byly spojeny a potom byl tento spojený podíl sušen (pomocí síranu hořečnatého MgSO4), zfiltrován a zkoncentrován za použití vakua, přičemž bylo získáno 1,0 gram žluté pevné látky. Takto získaný žlutý surový produkt byl potom podroben zpracováváni mžikovou chromatografickou metodou na 200 mililitrech silikagelu, přičemž jako elučního činidla bylo použito směsi hexanu a ethylesteru kyseliny octové v poměru 2 : 1, a tímto způsobem bylo isolováno 0,61 gramu požadovaného (S,R)isomeru, uvedeného v záhlaví tohoto přikladu, jako produktu postupu.
Teplota táni: 155 až 156 ’C; chromatografie v tenké vrstvě R^ = 0,19 (hexan, ethylester kyseliny octové, kyselina octová v poměru 100:100:1) ;
[a]D = -55,5° (c = 0,89, methanol);
Analýza pro C-^H^F-jNO^S:
vypočteno C = 43,84, H = 6,02, N = 4,65, F = 18,92,
S = 10,64, SH = 10,97, nalezeno C = 43,81, H = 6,08, N = 4,79, F = 18,52,
S = 10,62, SH = 11,37.
Přiklad 38
Postup přípravy (S,S)-3-([3,3,3-trifluor-2-(merkaptomethyl)-l-oxopropy1]amino]-5-methylhexanové kyseliny.
Při provádění podle tohoto přikladu byla suspenze obsahující (S,S)-isomer, to znamená produkt připravený postupem podle příkladu 36 (v množství 0,91 gramu, což odpovídá 2,7 mmolu) ve vodě, udržovaná na teplotě 0 C, zpracovávána pod atmosférou argonu hydroxidem amonným (ve formě 5 M roztoku, množství 10 mililitrů, což odpovídá 50 mmolům) a potom byla tato směs promíchávána po dobu 5 minut. Takto získaná reakční směs byla potom rychle ochlazena na teplotu 0 ’C přídavkem 140 mililitrů roztoku hydrogensíranu draselného o koncentraci 10 % hmot, přičemž potom byla ta
-54CZ 281165 B6 to směs extrahována ethylesterem kyseliny octové (celkem čtyřikrát). Tímto způsobem byly získány organické extrakty, které byly spojeny a tento spojený podíl byl usušen (za pomoci síranu horečnatého), zfiltrován a zkoncentrován za použití vakua. Tímto postupem byl vyroben 1,0 gram žluté pevné látky. Tento surový reakční produkt byl potom triturován směsí hexanu a ethylesteru kyseliny octové, přičemž výsledkem tohoto postupu bylo 0,78 gramu požadovaného produktu, tzn. (S,S)-isomeru, který je uveden v záhlaví tohoto příkladu, ve formě bílé pevné látky.
Teplota tání: 155 až 156 °C; chromatografie v tenké vrstvě Rf = 0,18 (ethylester kyseliny octové, hexan, kyselina octová v poměru 100:100:1) ;
[a]D = +26,1’ (c = 0,81, methanol);
Analýza pro C11HlgF3NO3S:
vypočteno C = 43,84, H = 6,02, N = 4,65, F = 18,92,
s = = 10,64, SH = 10,97,
nalezeno C = = 44,26, H = 6,26, N = 4,62, F = 18,34,
S = 10,22, SH = 10,71.
Příklad 39
Postup přípravy (S,R)-3,3,3-trifluor-2-(merkaptomethyl)-N-[3-methyl-1-(lH-tetrazol-5-yl)butyl]propanamidu.
a) Postup přípravy N-[(fenylmethoxy)karbonylJ-L-leucinamidu.
Při provádění postupu podle tohoto provedení byl k roztoku, který obsahoval N-[(fenylmethoxy)-karbonyl]-L-leucin (v množství 3 gramy, což odpovídá 11,3 mmolu) v 60 mililitrech methylenchloridu při teplotě -20 ’C a pod atmosférou argonu, přidán N-methylmorfolin (v množství 1,24 mililitru, což odpovídá 11,3 mmolu), přičemž potom následoval přídavek isobutylchlormravenčanu (v množství 1,47 mililitru, což odpovídá 11,3 mmolu). Takto získaná výsledná suspenze byla potom promíchávána při teplotě -20 ’C po dobu 15 minut, přičemž po tomto časovém intervalu byl přidán roztok amoniaku v methanolu (asi 5,6 M roztok v množství 20 mililitrů, což odpovídá 113 mmolu). Po asi 30 minutách, při kterých byla tato shora uvedená směs udržována při teplotě -20 ’C, byla tato reakční směs ochlazena vodou a potom byla ponechána ohřát na teplotu místnosti. Tímto způsobem se vytvořily vrstvy, které byly odděleny a vzniklá vodná vrstva byla extrahována methylenchloridem (celkem dvakrát). Spojené organické extrakty byly potom sušeny (za pomoci síranu horečnatého MgSO4) a potom byl tento podíl odpařen, přičemž podle tohoto provedení bylo získáno 2,82 gramu požadované sloučeniny A uvedené v záhlaví tohoto příkladu.
-55CZ 281165 B6
b) Postup přípravy N-[(fenylmethoxy)karbonyl]-L-leucinnitrilu.
Při provádění postupu podle tohoto provedení byl k roztoku, který obsahoval sloučeninu A připravenou postupem podle shora uvedeného provedení a) (v množství 9,25 gramu, což odpovídá
219,86 mmolu) ve 100 mililitrech bezvodého tetrahydrofuranu při teplotě místnosti a pod atmosférou argonu, přidán methoxykarbonylsulfamoyltriethylamoniumhydroxid jako inertní sůl (v množství 11,83 gramu, což odpovídá 49,65 mmolu) ve formě pěti stejných podílů přičemž tento přídavek byl uskutečněn během dvou hodin. Tato reakční směs byla potom zpracovávána mžikovou chromatograf ickou metodou v koloně, kde jako elučního činidla bylo použito směsi hexanů, ethylesteru kyseliny octové v poměru 60:40. Tímto postupem bylo získáno 4,6 gramu požadované sloučeniny B uvedené v záhlaví tohoto příkladu ve formě oleje.
chromatografie v tenké vrstvě Rf = 0,57 (ethylester kyseliny octové : hexan v poměru 1 : 1);
[a]D = -49,7’ (c = 0,82, methanol);
c) Postup přípravy fenylmethylesteru (S)-[3-methyl-l-(lH-tetrazol-5-yl)butyl]karbamové kyseliny.
Při provádění postupu podle tohoto provedení byl roztok obsahující sloučeninu B, která byla připravena podle shora uvedeného provedení b) (v množství 2,98 gramu, což odpovídalo 12,10 mmolu), a tributylcinazid (v množství 6,1 gramu, což odpovídalo
18.14 mmolu) ve 100 mililitrech xylenů, promícháván při teplotě
100 ’C po dobu 2 hodin. Takto získaná směs byla potom ochlazena na teplotu okolí přičemž potom byla tato reakční směs přímo nalívána do chromatografické kolony k provedení mžikové chromatografie, přičemž jako elučního činidla bylo použito 1 litru směsi hexanů a ethylesteru kyseliny octové v poměru 60 : 40, a dále 2 litrů hexanů a ethylesteru kyseliny octové v poměru 60 : 40 s přídavkem 2% kyseliny octové, přičemž tímto shora uvedeným postupem bylo získáno 2,23 gramu požadované sloučeniny C, která je uvedena v záhlaví tohoto provedení, ve formě vizkozního oleje.
d) Postup přípravy hydrochloridu (S)-a-(2-methylpropyl)-1H-tetrazol-5-methanaminu.
Při provádění postupu podle tohoto provedení byla suspenze obsahující sloučeninu C, získanou postupem podle shora uvedeného provedení c) (v množství 2,84 gramu, což odpovídá 9,1 mmolu) ve 100 mililitrech methanolu obsahujícímu acetylchlorid (v množství
1.14 mililitru, což odpovídá 19,62 mmolu) a dále 20% paladium na aktivním uhlí jako katalyzátoru (v množství 0,28 gramu), promíchávána pod atmosférou vodíku (v prostředí balonu) při teplotě místnosti. Po dalších 4 hodinách bylo přidáno další množství 20% paladia na aktivním uhlí jako katalyzátoru (v množství 0,28 gramu) a dále acetylchlorid (v množství 1,14 mililitru). Po dalších 22 hodinách byla tato reakční směs zfiltrována a odpařena. Potom byla provedena triturace této látky pomocí hexanů, přičemž bylo získáno 1,88 gramu požadované sloučeniny D, uvedené v záhlaví tohoto příkladu ve formě bílé pěny.
-56CZ 281165 B6
e) Postup přípravy (S,R)-2-[(acetylthio)mehyl]-3,3,3-trifluor-N-[3-methyl-l-(lH-tetrazol-5-yl)butyl]-propanamidu.
Při provádění postupu podle tohoto provedení byl k roztoku, který obsahoval sloučeninu D, připravenou podle shora uvedeného postupu d) (v množství 1,73 gramu, což odpovídá 9,9 mmolu) ve 22 mililitrech acetonitrilu při teplotě 0 C pod atmosférou argonu přidán bis(trimethylsilyl)trifluoracetamid (v množství 7,67 mililitru, což odpovídá 31,36 mmolu), přičemž tímto způsobem byl získán zakalený roztok, který byl promícháván při teplotě místnosti po dobu 2 hodin. Takto získaná reakční směs byla potom zpětně ochlazena na teplotu 0 ’C, přičemž v tomto okamžiku byl přidán 2-trifluormethyl-3-acetylthiopropionylchlorid (v množství 2,1 gramu, což odpovídá 9,8 mmolu) v acetonitrilu (v množství 6 mililitrů) . Tato směs byla potom promíchávána po dobu 2 hodin při teplotě 0 “C a po tomto časovém intervalu byl tento světle žlutý roztok rychle ochlazen tak že byl nalit do 200 mililitrů vody a potom byla tato směs podrobena extrahováni ethylesterem kyseliny octové (ve formě dvou podílů po 250 mililitrech). Tímto způsobem byly získány organické extrakty, které byly spojeny, přičemž spojený podíl byl podroben zpracování mžikové chromatografické metodě v koloně o rozměrech 90 milimetrů x 25,4 centimetru, přičemž jako elučního činidla bylo použito směsi hexanů a ethylesteru kyseliny octové s přídavkem 2 % hmot. kyseliny octové, v poměru 60:40, dále zpracováváni v chromatografické koloně o rozměrech 90 milimetrů x 17,8 centimetru, kde jako elučního činidla bylo použito směsi hexanů a ethylesteru kyseliny octové s přídavkem 0,5 % hmot, kyseliny octové, v poměru 1:1, dále v koloně o rozměrech 90 milimetrů x 30 centimetrů, kde jako elučního činidla bylo použito směsi hexanů a ethylesteru kyseliny octové s přídavkem 0,5 % hmot, kyseliny octové v poměru 1 : 1, a dále v koloně o rozměrech 50 milimetrů x 25,4 centimetru, kde jako elučního činidla bylo použito směsi hexanů a ethylesteru kyseliny octové s přídavkem 0,5 % hmot, kyseliny octové v poměru 1 : 1, přičemž následovala rekrystalizace ze směsi ethylesteru kyseliny octové a hexanů a po této rekrystalizaci bylo získáno 1,10 gramu (S,R)-isomeru jako produktu E, uvedeného v záhlaví tohoto příkladu.
Teplota tání: 188 až 191 ’C chromatografie v tenké vrstvě Rf = 0,22 (hexany a ethylester kyseliny octové s přídavkem 0,5 % kyseliny octové);
a [a]D = -163,8’ (c = 0,53, methanol), a dále 1,15 gramu (S,S)-2-[(acetylthio)methyl]-3,3,3-trifluor-N-[3-methyl-l-(lH-tetrazol-5-yl)butyl]propanamidu.
Teplota tání: 180 až 184 ’C; chromatografie v tenké vrstvě Rf = 0,16 (hexany a ethylester kyseliny octové s přídavkem 0,5 % kyseliny octové);
[a]D = +60,6’ (c = 0,51, methanol).
-57CZ 281165 B6
f) Postup přípravy (S,R)-3,3,3-trifluor-2-(merkaptomethyl)-N-[3-methyl-1-(lH-tetrazol-5-yl)butyl]propanamidu.
Při provádění postupu podle tohoto provedení byla k suspenzi, která obsahovala produkt E, to znamená (S,R-isomer připravený postupem podle shora uvedeného provedení e) (v množství 0,98 gramu, což odpovídá 2,8 mmolu) v 5,65 mililitru odkysličené vody při teplotě místnosti a pod atmosférou argonu, přidán roztok koncentrovaného hydroxidu amonného (v množství 1,85 mililitru) ve vodě (v množství 1,85 mililitru). Tato reakční směs byla potom ponechána reagovat po dobu dvou minut, přičemž po tomto intervalu byla získaná reakční směs rychle ochlazena přídavkem nasyceného roztoku hydrogensíranu draselného (o hodnotě pH 1,5), přičemž potom byla takto získaná látka extrahována ethylesterem kyseliny octové. Tímto způsobem byl získán organický extrakt, který byl sušen, přičemž potom byl takto získaný produkt přečištěn postupem mžikové chromatografie (toto zpracovávání mžikovou chromatografickou metodou bylo prováděno v koloně o rozměru 50 milimetrů x 15 centimetrů, přičemž jako elučního činidla bylo použito směsi hexanu a ethylesteru kyseliny octové v poměru 1 : 1 s přídavkem
0,5 % hmot, kyseliny octové), a tímto shora uvedeným postupem bylo získáno 0,72 gramu produktu ve formě bílé pevné látky. Tato látka byla potom triturována heptanem a potom byla sušena za použiti vysokého vakua při teplotě 100 ’C. Postupem podle tohoto provedení bylo nakonec získáno 0,7 gramu požadovaného produktu, to znamená (S,R)-sloučeniny uvedené v záhlaví tohoto provedení.
Teplota tání: 189 až 193 °C (za rozkladu); chromatografie v tenké vrstvě R^ = 0,18 (ethylester kyseliny octové : hexan v poměru 1:1 s přídavkem 0,5 % hmot, kyseliny octové);
[a]D = -97,7’ (c = 0,57, methanol);
Analýza pro cioH16F3N5OS . 0,1 CH3COOC2H5:
vypočteno C = 39,02, H = 5,29, N = 21,88, F = 17,80,
S = 10,01, SH = 10,33, nalezeno C = 39,25, H = 5,35, N = 21,54, F = 17,60,
S = 10,17, SH = 10,62;
Příklad 40
Postup přípravy (S,S )-3,3,3-trifluor-2-(merkaptomethyl)-N-[3-methyl-l-(lH-tetrazol-5-yl)butyl]propanamidu.
Při provádění postupu podle tohoto příkladu se postupovalo tak, že k suspenzi, která obsahovala (S,S)-2-[(acetylthio)-methyl]-3,3,3-trifluor-N-[3-methyl-l-(lH-tetrazol-5-yl)butyl]propanamid, který byl připraven postupem podle shora uvedeného přikladu 39 (e), v množství 1,034 gramu, což odpovídá 2,95 mmolu, v 6 mililitrech odkysličené vody při teplotě místnosti a pod atmosférou argonu, byla přidána směs koncentrovaného hydroxidu amonného NH^OH (v množství 1,95 mililitru) a vody (v množství 1,95 mililitru). Po asi dvou minutách, kdy byly tyto látky pone-58CZ 281165 B6 chány reagovat, byla takto získaná reakční směs rychle ochlazena přídavkem nasyceného roztoku hydrogensíranu draselného (o hodnotě pH 1,5), přičemž potom byla tato látka podrobena extrakci ethylesterem kyseliny octové. Tímto shora uvedeným způsobem byly získány organické extrakty, které byly spojeny a tento spojený podíl byl potom sušen a přečištěn mžikovou chromatografickou metodou (tato mžiková chromatografie byla prováděna v koloně o rozměru 50 milimetrů x 15 centimetrů, přičemž jako elučního činidla bylo použito směsi hexanu a ethylesteru kyseliny octové v poměru 1 : 1 s přídavkem 0,5 % hmot, kyseliny octové), přičemž tímto shora uvedeným postupem bylo získáno 0,76 gramu produktu ve formě bílé pevné látky. Tento podíl produktu byl potom spojen s 25 miligramy z předchozího postupu a tento spojený podíl byl potom podroben rekrystalizaci ze směsi ethylesteru kyseliny octové a hexanů, přičemž bylo získáno 0,69 gramu požadovaného (S,S)-isomeru jako produktu postupu, který je uveden v záhlaví tohoto příkladu, ve formě bílé pevné látky.
Teplota tání: 183 až 184 “C; chromatografie v tenké vrstvě = 0,14;
(hexany a ethylester kyseliny octové v poměru 1 : 1 s přídavkem
0,5 % hmotnostního kyseliny octové);
[a]D = -39,8“ (c = 0,57, methanol);
Analýza pro cioH16F3N5OS: vypočteno C = 38,58, H = 5,18, N = 22,50, F = 18,31,
S = 10,30, SH = 10,62 nalezeno C = 38,70, H = 5,27, N = 22,43, F = 17,67,
S = 10,28, SH = 11,52.
Příklad 41
Postup přípravy (S ,R) -β-[ [2-[(acetylthio)methyl]-3,3,3-trifluor-1-oxopropyl]amino]fenylbutanové kyseliny.
a) Postup přípravy 3-[[[(l,l-dimethylethyl)oxy]karbonyl]amino]-2-oxo-l-diazo-4-fenylbutanu.
Při provádění postupu podle tohoto provedení byl roztok obsahuj icí N-[[(1,1-dimethylethyl)oxy]karbonyl]-L-fenylalanin (v množství 20,01 gramu, což odpovídá 75 mmolu) ve 150 mililitrech suchého tetrahydrofuranu, byl rychle ochlazen na teplotu -25 “C a potom byla takto získaná reakční směs zpracovávána N-methylmorfolinem (v množství 8,3 mililitru, což odpovídá 75 mmolu) a isobutyl-chlormravenčanem (v množství 9,8 mililitru, což odpovídá 75 mmolu), přičemž potom byla tato reakční směs promíchávána při teplotě -25 “C po dobu 10 minut. Tato reakční směs byla potom zfiltrována a přemístěna do nádoby obsahující roztok diazomethanu (tato látka byla připravena z N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidinu v množství 35,48 gramu, což odpovídá 240 milimolum) ve 300 mililitrech bezvodého etheru o teplotě -78 “C, přičemž tato reakční směs byla potom ponechána ohřát na teplotu -5 “Ca potom byla promíchávána po dobu přes noc. Tímto způsobem
-59CZ 281165 B6 byla získána chladná reakční směs, která byla potom zfiltrována a získaný filtrát byl promyt vodou, potom nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a potom solankou. Tímto způsobem byla získána organická vrstva, která byla usušena pomocí síranu horečnatého MgSO4, potom byla zfiltrována a zkoncentrována za použiti vakua, přičemž tímto způsobem byl získán červeno-hnědý olej. Tento olej byl potom triturován s chladným petroletherem, přičemž tímto způsobem bylo získáno 14,42 gramu světlé červenohnědé pevné látky. Matečné louhy, získané shora uvedeným způsobem byly potom zkoncentrovány a potom byly ponechány stát, přičemž byl získán druhý podíl produktu v množství 1,96 gramu. Tímto druhým podílem byly světle žluté krystalky, přičemž celkový výtěžek činil 16,38 gramu požadované sloučeniny A uvedené v záhlaví tohoto příkladu ve formě hnédočervené pevné látky.
Teplota tání: 87 až 90 ’C;
[a]D = -32,2° (c = 1,15, methanol);
b) Postup přípravy methylesteru 3-[[[(2,2-dimethylethyl)oxy] -karbonyl]amino]-4-fenylbutanové kyseliny.
Při provádění postupu podle tohoto provedeni bylo postupováno tak, že k roztoku, obsahujícímu sloučeninu A získanou postupem podle shora uvedeného provedení a) (v množství 13,35 gramu, což odpovídá 45,9 mmolu) v methanolu (v množství 300 mililitrů), byl přidán roztok obsahující benzoát stříbrný (v množství 1,57 gramu, což odpovídá 6,85 mmolu) v triethylaminu (v množství 200 mililitrů), přičemž tento přídavek byl proveden opatrným způsobem po kapkách, a takto získaná směs byla potom promíchávána po dobu 3 hodin. V další fázi tohoto postupu bylo potom k takto získané směsi přidáno 5 gramů aktivního uhlí a tato směs byla promíchávána po dobu 15 minut při teplotě místnosti, přičemž potom byla tato směs přefiltrována a takto získaný filtrát byl potom zkoncentrován za použití vakua. Tímto postupem byl získán červenavě-hnědý olej. Tento olej byl potom vložen do etheru a potom bylo provedeno promývání vodou, dále hydrogensÍránem draselným o koncentraci 10 % hmot., potom nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nakonec solankou. Takto získaná organická vrstva byla potom sušena síranem hořečnatým MgSO4, potom byla přefiltrována a potom byla zkoncentrována za použití vakua, přičemž výtěžkem tohoto provedení bylo 11,71 gramu požadovaného produktu B uvedeného v záhlaví tohoto příkladu ve formě béžové pevné látky.
Teplota tání: 50 až 52 ’C;
[a]D = -2,0’ (c = 1,15, methanol);
Analýza pro C16H23NO4: vypočteno C = 65,50, H = 7,90, N = 4,78, nalezeno C = 65,47, H = 8,04, N = 4,86.
c) Postup přípravy 3-[[[(2,2-dimethylethyl)oxy]karbonyl]amino]-4-fenylbutanové kyseliny.
Při provádění postupu podle tohoto provedení byl roztok obsahující sloučeninu B, která byla připravena shora uvedeným
-60CZ 281165 B6 postupem podle provedení b) , v množství 11,0 gramu, což odpovídá
37,5 mmolu, v methanolu (v množství 200 mililitrů), zpracovávána 1 N roztokem hydroxidu sodného (v množství 75 mililitrů, což odpovídá 75 mmolu), přičemž potom byla tato směs promíchávána při teplotě místnosti po dobu 3,5 hodiny. Takto získaná reakční směs byla potom zkoncentrována za použití vakua a takto získaný zbytek byl potom vložen do vody, potom byla tato látka promyta dvakrát ethylesterem kyseliny octové a získaná vodná vrstva byla potom oddělena. Tato vodná vrstva byla potom okyselena 6 N roztokem kyseliny chlorovodíkové a potom byla extrahována ethylesterem kyseliny octové (což bylo provedeno celkem čtyřikrát). Tímto způsobem byly získány organické extrakty, které byly spojeny a tento spojený podíl byl potom sušen za pomoci síranu hořečnatého MgSO4 potom byl tento podíl zfiltrován a zkoncentrován za použití vakua, přičemž výtěžkem tohoto postupu bylo 9,97 gramu požadovaného produktu C uvedeného v záhlaví tohoto provedení ve formě bílé pevné látky.
Teplota tání: 95 až 97 °C;
[a]D = -13,5’ (c = 0,77, methanol);
Analýza pro ci5H21NO4 * °'48 H20: vypočteno C = 62,56, H = 7,79, N = 4,86, nalezeno C = 62,65, H = 7,45, N = 4,77.
d) Postup přípravy hydřochloridu 3-amino-4-fenylbutanové kyseliny.
Při provádění postupu podle tohoto provedení byl roztok sloučeniny C, která byla získána shora uvedeným způsobem podle provedeni c) (v množství 9,45 gramu, což odpovídá 33,8 mmolu) v ethylesteru kyseliny octové (v množství 100 mililitru), zpracováván 310 mililitry směsi kyseliny chlorovodíkové a ethylesteru kyseliny octové (roztok 3,2 M, což odpovídá 992 mmolu) a potom byla takto získaná směs promíchávána při teplotě místnosti po dobu 3 hodin. Takto získaná reakční směs byla potom proplachována dusíkem a potom byla zfiltrována. Tímto způsobem byl získán podíl odfiltrované pevné látky, který byl promyt etherem a potom byla tato pevná látka sušena, přičemž bylo získáno 5,96 gramu požadovaného produktu D, uvedeného v záhlaví tohoto provedení, ve formě bílé pevné látky.
Teplota tání: 204 až 205 °C);
[a]D = +6,7° (c = 1,43, methanol);
Analýza pro c10H14clNO2 · θ'1 h20: vypočteno C = 55,24, H = 6,58, N = 6,37, Cl = 16,31, nalezeno C = 55,54, H = 6,45, N = 6,37, Cl = 16,01.
e) Postup přípravy (S,R)-β-[[2-[(acetylthio)methyl]-3,3,3-trifluor-l-oxopropyl]amino]fenylbutanové kyseliny.
Při provádění postupu podle tohoto provedení bylo postupováno tak, že roztok, obsahující sloučeninu D připravenou podle sho
-61CZ 281165 B6 ra uvedeného provedení d) (v množství 5,0 gramů, což odpovídá
23,2 mmolu) v acetonitrilu (v množství 200 mililitrů), byl rychle ochlazen na teplotu 0 °C a potom byla takto vzniklá směs zpracována ethyldiisopropylaminem (v množství 4,05 mililitru, což odpovídá 23,3 mmolu a potom bis(trimethylsilyl) trifluoracetamidem (v množství 12,3 mililitru, což odpovídá 46,3 mmolu), a takto získaná směs byla potom promíchávána při teplotě 0 °C po dobu 30 minut. V další fázi tohoto provedení byl k této směsi přidán roztok obsahující 2-trifluormethyl-3-acetylthiopropyonylchlorid (v množství 5,45 gramu, což odpovídá 23,2 mmolu) a acetanitrilu (v množství 20 mililitrů), přičemž tento přídavek byl proveden opatrným způsobem po kapkách, a takto získaná reakční směs byla ponechána ohřát na teplotu místnosti, což bylo prováděno po dobu přes noc. Tímto způsobem získaná reakční směs byla potom zkoncentrována za použití vakua a získaný zbytek byl potom vložen do ethylesteru kyseliny octové, tato látky byla promyta 1 N roztokem kyseliny chlorovodíkové (což bylo provedeno celkem dvakrát), potom vodou a nakonec solankou. Tímto způsobem vznikla organická vrstva, která byla usušena pomocí síranu hořečnatého MgSO4, potom byla zfiltrována a nakonec zkoncentrována za použiti vakua, přičemž tímto způsobem bylo získáno 14,8 gramu tmavě žlutého oleje. Takto získaný surový produkt byl potom triturován třikrát směsí hexanu a ethylesteru kyseliny octové a potom byla tato látka zpracována dekolorizačním uhlíkem v ethylesteru kyseliny octové. Tímto shora uvedeným způsobem bylo získáno 8,96 gramu světle žluté pevné látky. Tato surová pevná látka byla potom podrobena zpracováváni mžikovou chromatografickou metodou na 2 litrech silikagelu, přičemž bylo použito jako elučního činidla směsi hexanu, ethylesteru kyseliny octové a kyseliny octové v poměru 125 : 75 : 1, a tímto způsobem byl eluován (S,R)-isomer, přičemž v další fázi bylo jako elučního činidla použito směsi ethylesteru kyseliny octové, hexanu a kyseliny octové v poměru 150 : 75 : 1 a tímto způsobem byl eluován (S,S)-isomer. Tímto shora uvedeným způsobem bylo získáno 1,2 gramu (S,R)-isomeru, 2,1 gramu směsných frakcí a 1,68 gramu (S,S)-isomeru. Takto získaný (5.5) -isomer a (S,R)-isomer byly potom triturovány za použití směsi hexanu a ethylesteru kyseliny octové, přičemž tímto způsobem bylo získáno 1,04 gramu (S ,R)-isomeru a 1,65 gramu (5.5) -isomeru. Matečné louhy z této triturace (S,S)-isomeru a ze směsných frakcí byly potom spojeny a podrobeny přečištění mžikovou chromatografickou metodou, která byla provedena stejným způsobem jako je uvedeno shora, přičemž tímto způsobem bylo isolováno 0,41 gramu (S,R)-isomeru a 0,9 gramu (S,S)-isomeru a dále
1,25 gramu směsných frakci. Tyto směsné frakce a matečné louhy z (S,R)-triturací byly potom znovu podrobeny zpracováváni mžikovou chromatografickou metodou, která byla prováděna stejným způsobem jako je uváděno shora, přičemž tímto postupem bylo isolováno 1,34 gramu (S,R)-isomeru, 0,31 gramu (S,S)-isomeru a 0,6 gramu směsných frakcí. Potom byly takto získané různé (S,R)-frakce spojeny, přičemž výtěžkem bylo 2,22 gramu tohoto produktu, a dále byly různé (S,S)-frakce spojeny, přičemž výtěžkem bylo 2,47 gramu tohoto produktu. Takto získaný (S,R)-isomer byl potom triturován směsí hexanu a ethylesteru kyseliny octové, potom byla tato látka zpracována dekolorizačním uhlíkem v ethylesteru kyseliny octové a nakonec byla podrobena rekrystalizačnímu procesu ze směsi ethylesteru kyseliny octové a hexanu, přičemž výtěžkem tohoto
-62CZ 281165 B6 postupu bylo 1,31 gramu požadovaného (S,R)- isomeru, který je uveden v záhlaví tohoto příkladu ve formě bílé pevné látky.
Teplota tání: 171 až 172 ’C;
chromatografie v tenké vrstvě R^ = 0,28 (hexan, ethylester kyseliny octové a kyselina octová v poměru
100 : 100 : 1);
[a]D = -111,5’ (c = 0,75, methanol);
Analýza pro C16H18F3NO4S:
Vypočteno C = 50,92, H = 4,81, N = 3,71, F = 15,10, S = 8,50, nalezeno C = 50,63, H = 4,74, N = 3,87, F = 14,91, S = 8,16.
Příklad 42
Postup přípravy (S,S)-β-[[2-[(acetylthio)methyl]-3,3,3-trifluor-1-oxopropyl]amino]fenylbutanová kyselina.
Při prováděni postupu podle tohoto příkladu byl (S,S)-isomer získaný postupem podle shora uvedeného příkladu 41 (e) (v množství 2,47 gramu) podroben triturování se směsí hexanu a ethylesteru kyseliny octové, přičemž potom byla takto získaná látka zpracovávána dekolorizačnim uhlíkem v ethylesteru kyseliny octové a nakonec byla provedena rekrystalizace ze směsi ethylesteru kyseliny octové a hexanu, přičemž výtěžkem tohoto postupu bylo
1,39 gramu (S,S)-isomeru jako produktu, který je uveden v záhlaví tohoto příkladu, ve formě bílé pevné látky.
Teplota tání: 160 až 162 °C; chromatografie v tenké vrstvě Rf = 0,17 (hexan, ethylester, kyseliny octové a kyselina octová v poměru 100 : 100 : 1);
[a]D = +103,2’ (c = 0,69, methanol);
Analýza pro C16H18NF3O4S . 0,25 H20:
vypočteno C = 50,31, H = 4,88, N = 3,67, F = 14,92, S = 8,39, nalezeno C = 50,57, H = 4,67, N = 3,90, F = 14,53, S = 8,05.
Přiklad 43
Postup přípravy (S,R)-β-[[3,3,3-trifluor-2-(merkaptomethyl)-1-oxopropyl]amino]fenylbutanové kyseliny.
Při provádění postupu podle kaný postupem podle příkladu 41 vídá 2,1 mmolu) rozpuštěn v (v množství 10 mililitrů, což 0 ’C a pod atmosférou argonu, tohoto příkladu byl produkt zísv množství 0,81 gramu, což odpo5M roztoku hydroxidu amonného odpovídá 50 mmolům) při teplotě přičemž takto získaná směs byla
-63CZ 281165 B6 promíchávána po dobu 5 minut. Tato reakční směs byla potom rychle ochlazena na teplotu 0 °C za pomoci 150 mililitrů hydrogensíranu draselného o koncentraci 10 % hmot, a potom byla tato směs extrahována ethylesterem kyseliny octové (což bylo provedeno celkem čtyřikrát). Tímto způsobem byly získány organické extrakty, které byly spojeny a tento spojený podíl byl potom usušen (pomocí síranu horečnatého MgSO4), potom byl zfiltrován a zkoncentrován za použití vakua, přičemž výtěžkem tohoto postupu bylo 0,94 gramu žluté pevné látky. Takto získaný surový produkt byl potom podroben zpracovávání mžikovou chromatografickou metodou na 300 mililitrech silikagelu, přičemž jako elučního činidla bylo použito směsi hexanu a ethylesteru kyseliny octové v poměru 1 : 1 s přídavkem 0,5 % hmot, kyseliny octové. Tímto shora uvedeným způsobem bylo získáno 0,46 gramu bílé pevné látky, která představovala směs požadovaného (S,R)-produktu a odpovídajícího (S,S)-produktu. Takto získaná směs byla potom rozdělena chromatografickou metodou prováděnou za vysokého tlaku s reverzní fází, přičemž jako elučního činidla bylo použito směsi o složení 50 % složky (90 % voda, 10 % methanol s přídavkem 0,1 % trifluoroctové kyseliny) a 50 % složky (90 % methanol, 10 % voda s přídavkem 0,1 % trifluoroctové kyseliny) a průtoková rychlost činila 63 mililitrů za minutu, a tímto způsobem bylo isolováno 0,36 gramu požadovaného (S,R)-isomerů ve formě hnědožluté pevné látky.
Teplota tání: 208 až 210 °C; chromatografie v tenké vrstvě R^ = 0,19 (hexan, ethylester kyseliny octové a kyselina octová v poměru 100:100: 1) ;
[a]D = -38,9’ (c = 0,70, methanol);
Analýza pro C14H16F3NO3S.0,25 H2O:
vypočteno C = 49,47, H = 4,90, N = 4,12, F = 16,77, S = 9,43, SH = 9,73, nalezeno C = 49,21, H = 4,48, N = 4,04, F = 16,40, S = 9,52, SH = 9,49.
Příklad 44
Postup přípravy (S,S)-β-[[3,3,3-trifluor-2-(merkaptomethyl)-1-oxopropy1]amino]fenylbutanové kyseliny.
Při provádění postupu podle tohoto příkladu byl (S,S)-isomer, to znamená produkt připravený postupem podle příkladu 42 (v množství 1,26 gramu, což odpovídá 3,3 mmolu), rozpuštěn v 5 M roztoku hydroxidu amonného (v množství 20 mililitrů, což odpovídá 100 mmolům) a takto získaná reakční směs byla potom promíchávána při teplotě 0 ’C po dobu 5 minut, přičemž potom byla tato reakční směs rychle ochlazena hydrogensÍránem draselným o koncentraci 10 % hmot. Takto získaná reakční směs byla potom extrahována ethylesterem kyseliny octové (což bylo prováděno čtyřikrát) a takto získané organické extrakty byly spojeny a tento podíl byl usušen (za pomoci síranu hořečnatého MgSO4), potom byla tato lát
-64CZ 281165 B6 ka zfiltrována a zkoncentrována za použití vakua, přičemž výsledkem tohoto procesu bylo 1,16 gramu žlutého zbytku. Tento surový produkt byl potom podroben přečištění mžikovou chromatografickou metodou na 200 mililitrech silikagelu, přičemž jako elučního činidla bylo použito směsi hexanu, ethylesteru kyseliny octové a kyseliny octové v poměru 100 : 100 : 1, a tímto způsobem bylo isolováno 800 miligramů bílé pevné látky. Takto získaný produkt byl potom triturován pomocí směsi hexanu a ethylesteru kyseliny octové, který je uveden v záhlaví tohoto příkladu, ve formě bílé pevné látky.
Teplota tání: 177 až 178 ’C; chromatografie v tenké vrstvě Rf = 0,10 (hexan, ethylester kyseliny octové a kyselina octová v poměru 100:100:1);
[a]D =+41,6’ (c = 0,55, methanol);
Analýza pro C14H16F2NO3S.0,06 H2O:
vypočteno C = 49,98, H = 4,83, N = 4,16, F = 16,94, S = 9,53, SH = 9,83, nalezeno C = 50,11, H = 4,85, N = 4,03, F = 16,56, S = 9,47, SH = 9,74
Příklad 45
Postup přípravy (S)-3-hydroxy-N-[3,3,3-trifluor-2-(merkaptomethyl)-1-oxopropyl]-L-tyrosinu.
a) Postup přípravy (S)-3-hydroxy-N-[2-[(acetylthio)-methyl]-3,3,3-trifluor-l-oxopropyl]-L-tyrosinu.
Při provádění postupu podle tohoto provedení byl bis(trimethylsilyl)trifluoracetamid (v množství 16 mililitrů, což odpovídá 60 mmolům) přidán k suspenzi obsahující 3-hydroxy-L-tyrosin (v množství 2,37 gramu, což odpovídá 12 mmolům) ve 25 mililitrech acetonitrilu při teplotě 0 °C. Takto získaná suspenze byla potom promíchávána po dobu 6 hodin při teplotě místnosti, přičemž po tomto časovém intervalu byla tato směs opětně ochlazena na 0 ’C. Potom byl k této látce přidán 2-trifluormethyl-3-acetylthiopropionylchlorid (v množství 2,81 gramu, což odpovídá 12 mmolům) ve formě roztoku v 5 mililitrech acetonitrilu, přičemž takto získaná reakční směs byla potom promíchávána při teplotě místnosti po dobu 20 hodin. Potom byla tato reakční směs nalita do asi 150 mililitrů 0,1 N roztoku kyseliny chlorovodíkové, přičemž vznikla dvoufázová směs, která byla potom promíchávána při teplotě místnosti po dobu 30 minut. Po tomto časovém okamžiku byla tato směs extrahována ethylesterem kyseliny octové (v množství 2 podíly po 200 mililitrech) a tímto způsobem byly získány organické vrstvy, které byly spojeny a tento spojený podíl byl potom promyt vodou (v množství 200 mililitrů) a potom solankou (v množství 100 mililitrů), přičemž potom byla tato látka usušena (za pomoci síranu hořečnatého MgSO4) a potom byla zkoncentrována, čímž byl získán olejový zbytek. Tento olejový zbytek byl potom
-65CZ 281165 B6 několikrát přečišťován chromátografickou metodou, přičemž bylo získáno 1,17 gramu (R)-3-hydrosy-N-[2-[(acetylthio)methyl]-3,3,3-trifluor-l-oxopropyl]-1-oxopropyl]-L-tyrosinu;
[a]D = -6,5’ (c = 0,15, methanol), ve formě bílé pěny, a dále bylo isolováno 1,63 gramu (S)-3-hydroxy-N-[ 2- [ (acetylthio)methyl]-3,3,3-trifluor-l-oxopropyl]-L-tyrosinu;
Teplota tání: 175 až 184 °C;
[a)D = +106,3’ (c = 0,49, methanol); ve formě bělavé amorfní pevné látky.
b) Postup přípravy (S)-3-hydroxy-N-[3,3,3-trifluor-2-(merkaptomethyl)-1-oxopropyl]-L-tyrosinu.
Při provádění postupu podle tohoto provedení byl koncentrovaný roztok hydroxidu amonného (v množství 2,5 mililitru) přidán k suspenzi obsahující (S)-isomerní produkt, získaný shora uvedeným postupem a) (to znamená A-produkt) (v množství 1,4 gramu, což odpovídá 3,54 mmolu) v odkysličené vodě při teplotě místnosti. Tato reakční směs byla promíchána, přičemž byla získána zakalená reakční směs po promíchávání prováděném po dobu jedné minuty, a potom byl k této směsi přidán nasycený roztok hydrogensiranu draselného v takovém množství aby pH této směsi bylo 1,5. Takto získaná okyselená směs byla potom extrahována ethylesterem kyseliny octové (ve formě dvou podílů po 125 mililitrech), přičemž byly získány organické podíly, které byly spojeny a tento spojený podíl organických vrstev byl potom promyt solankou, potom byl usušen (za pomoci síranu hořečnatého MgSO4) a nakonec byl tento podíl zkoncentrován. Tímto způsobem byl získán zbytek, který byl zpracován chromatografickou metodou v koloně o rozměrech 5 x 12 centimetrů naplněné silikagelem, přičemž jako mobilní fáze bylo použito systému ethylester kyseliny octové, hexan a kyselina octová v poměru 55 : 45 : 2. Takto získané nejčistší frakce byly potom zkoncentrovány, čímž bylo získáno 997 miligramů bílé pěny a tato látka byla potom podrobena opětnému chromatografickému přečištění v koloně o rozměrech 5 x 12 centimetrů, která byla naplněna silikagelem, přičemž jako mobilní fáze bylo použito systému ethylester kyseliny octové, hexan a kyselina octová v poměru 40 : 60 : 2. Tímto způsobem byly získány nejčistší frakce, které byly spojeny a spojený podíl byl zkoncentrován, čímž byl získán zbytek ve formě pěny, který byl potom podroben současnému odpařování z toluenu, heptanu, methylenchloridu a hexanu. Takto získaná látka byla potom triturována intenzivním způsobem za použití hexanu a pentanu a získaný produkt byl potom sušen po dobu přes noc za použití vysokého vakua a při teplotě místnosti, přičemž tímto shora uvedeným způsobem bylo získáno 780 miligramů požadovaného (S)-isomeru jako produktu tohoto postupu, který je uveden v záhlaví tohoto přikladu, ve formě amorfní pevné látky.
Teplota tání: 103 až 107 ’C (za rozkladu);
[a]D = +52,5’ (c = 0,55, methahol);
Analýza pro C13H14F2NO5S . 0,42 H2O:
-66CZ 281165 B6 vypočteno C = 43,28, H = 4,14, N = 3,88, F = 15,80, S = 8,89, SH = 9,17 nalezeno C = 43,51, H = 4,40, N = 3,65, F = 15,63, S = 8,90, SH = 9,67.
Příklad 46
Postup přípravy (R)-3-hydroxy-N-[3,3,3-trifluor-2-(merkaptomethyl)-1-oxopropyl]-L-tyrosinu.
Při provádění postupu podle tohoto příkladu byl koncentrovaný hydroxid amonný (v množství 2,6 mililitru) přidán do suspenze obsahující (R)-3-hydroxy-N-[2-[(acetylthio)methyl]-3,3,3-trifluor-1-oxopropyl]-L-tyrosin (v množství 1,5 gramu, což odpovídá 3,8 mmolů), který byl získán postupem podle příkladu 45 (a), v odkysličené vodě při teplotě místnosti. Potom byla tato směs promíchávána po dobu jedné minuty, přičemž potom byl do této směsi přidán nasycený roztok hydrogensíranu draselného a tento přídavek byl proveden v takovém množství aby hodnota pH byla asi 1,5. Takto získaná okyselená směs byla potom extrahována ethylesterem kyseliny octové (ve formě dvou podílů po 125 mililitrech), přičemž získané organické vrstvy byly spojeny a tento spojený podíl organických vrstev byl potom promyt solankou, potom byl usušen (za pomoci síranu hořečnatého) a nakonec byl zkoncentrován. Tímto způsobem byl získán zbytek, který byl zpracován chromatografickou metodou v koloně o rozměrech 5 x 15 centimetrů, která byla naplněna silikagelem, přičemž jako mobilní fáze bylo použito systému ethylester kyseliny octové, hexan a kyselina octová v poměru 55 : 45 : 2. Po tomto zpracování byly odděleny čisté frakce, přičemž tento podíl byl zkoncentrován a podroben současnému odpařování z hexanu, a tímto způsobem byla připravena bílá látka, která byla potom v dalším postupu triturována za použití hexanu a potom byla provedena rekrystalizace této látky ze směsi isopropanolu a hexanu. Tímto způsobem byla získaná krystalická pevná látka, která byla rozmělněna na jemný prášek a tento jemný prášek byl rozmíchán v heptanu. Toto promícháváni trvalo 3 hodiny a bylo prováděno za účelem odstranění zachyceného isopropanolu. Takto získaný materiál byl potom přefiltrován, promyt hexanem a usušen při teplotě 95 ’C a za použití vysokého vakua, což bylo prováděné po dobu 24 hodin. Tímto shora uvedeným postupem bylo připraveno 586 miligramů požadovaného (R)-isomeru jako produktu postupu, který je uveden v záhlaví tohoto příkladu, ve formě bílého práškovitého materiálu.
Teplota tání: 176 až 177 ’C;
[a]D = +2,5’ (c = 0,32, methanol);
Analýza pro C13H14F3NO5S . 0,16 H2O:
vypočteno C = 43,85, H = 4,05, N = 3,93, F = 16,00, S = 9,00,
SH = 9,29, nalezeno C = 43,99, H = 4,22, N = 3,79, F = 15,60, S = 8,87,
SH = 10,52.
-67CZ 281165 B6
Příklad 47
Postup přípravy (S,S)-a-[[3,3,3-trifluor-2-(merkaptomethyl)-1-oxopropyl]amino]cyklohexanpropanové kyseliny
a) Postup přípravy N-[2-[(acetylthio)methyl]-3, 3,3-trifluor-1-oxopropyl]-L-cyklohexylalaninu.
Při provádění postupu podle tohoto provedení byl bis(trimethylsilyl)trifluoracetamid (v množství 12,2 mililitru, což odpovídá 45,6 mmolu) přidán k suspenzi obsahující L-cyklohexylamin (v množství 2,6 gramu, což odpovídá 2,6 gramu, což odpovídá 15,2 mmolu) ve 35 mililitrech acetonitrilu při teplotě 0 °C. Takto získaná suspenze byla potom promíchávána po dobu 6 hodin při teplotě místnosti. Tímto zpracováváním zůstával v roztoku stále ještě významný podíl pevné látky. V dalším postupu byla tato směs ochlazena a reakční směs byla ochlazena na teplotu 0 °C, přičemž potom byl přidán 2-trifluormethyl-3-acetylthiopropionylchlorid, přičemž tento přídavek byl proveden opatrně po kapkách a uvedená látka byla ve formě roztoku v 10 mililitrech acetonitrilu. Potom byla takto získaná reakční směs promíchávána po dobu 24 hodin při teplotě místnosti, přičemž reakční směs přešla na čirý žlutě zabarvený roztok. Tento roztok byl potom rozdělen mezi ethylester kyseliny octové (v množství 150 mililitrů) a 1 N roztok kyseliny chlorovodíkové (v množství 150 mililitrů). Tímto způsobem byla získána vodná vrstva, která byla extrahována dalším přidaným množstvím ethylesteru kyseliny octové v množství 150 mililitrů. Potom byly organické vrstvy shora uvedeným postupem spojeny a spojený podíl byl potom promyt vodou (ve formě dvou podílů v množství 400 mililitrů) a solankou (v množství 200 mililitrů), přičemž potom byl tento materiál sušen (za pomoci síranu hořečnatého) a zkoncentrován za vzniku olejového zbytku. Tento olejový zbytek byl potom podroben zpracovávání chromatografickým způsobem, přičemž toto chromatografické přečišťování bylo provedeno dvakrát, a potom byla provedena několikanásobná krystalizace, přičemž po těchto postupech bylo získáno 1,7 gramu (R)-N-[2-[(acetylthio)methyl]-3,3,3-trifluor-l-oxopropyl]-L-cyklohexylalaninu,
Teplota tání: 142 až 145 °C;
[α]θ = -135,1° (c = 0,37, methanol);
a dále 2,19 gramu (S)-N-[2-[(acetylthio)methyl]-3,3,3-trifluor-1-oxopropyl]-L-cyklohexyl-alaninu: teplota tání: 106 až 109 °C;
[a]D =+97,2 (c = 0,36, methanol).
b) Postup přípravy (S,S)-a-[[3,3,3-trifluor-2-(merkaptomethyl)-l-oxopropyl]amino]cyklohexanpropanové kyseliny.
Při provádění postupu podle tohoto provedení byl koncentrovaný roztok hydroxidu amonného (v množství 3,1 mililitru) přidán k suspenzi (S)-isomeru jako produktu postupu podle shora uvedeného provedeni a) (v množství 1,734 gramu, což odpovídá 4,69 mmolu) v odkysličené vodě a při teplotě místnosti. Rozpuštění této látky
-68CZ 281165 B6 nastalo téměř okamžitě, přičemž potom byla takto získaná reakční směs promíchávána po dobu 10 minut při teplotě místnosti. V dalším postupu potom byla hodnota pH tohoto roztoku upravena na asi
1,5 za pomoci nasyceného roztoku hydrogensíranu draselného, přičemž takto získaná směs byla potom podrobena extrahování za použití ethylesteru kyseliny octové (v množství 200 mililitrů). Tímto způsobem byla získána organická vrstva, která byla promyta solankou, potom byla tato látka usušena (za použití síranu hořečnatého MgSO4) a nakonec byla zkoncentrována, přičemž byl získán zbytek, který byl potom zpracován chromatografickou metodou v koloně o rozměrech 5 x 15 centimetrů, která byla naplněna silikagelem. Jako elučniho činidla bylo použito systému hexan, ethylester kyseliny octové a kyselina octová v poměru 80 : 20 : 2, přičemž tímto způsobem byly získány čisté frakce, které byly zkoncentrovány a potom byly podrobeny současnému odpařování z heptanu, přičemž tímto postupem byla získána bílá pevná látka. Tato látka byla potom triturována za pomoci hexanu. Tímto způsobem byla získána pevná látka, která byla usušena za použití vysokého vakua, což probíhalo po dobu 18 hodin, a výsledkem tohoto postupu bylo 1,28 gramu požadovaného (S,S)-isomeru jako produktu, který je uveden v záhlaví tohoto příkladu.
Teplota tání: 141 až 143 °C;
[a]D = +13,6’ (c = 0,85, methanol);
Analýza pro ci3H20F3NO3S: vypočteno C = 47,70, H = 6,16, N = 4,28, F = 17,41, S = 9,79,
SH = 10,10, nalezeno C = 47,61, H = 6,15, N = 4,12, F = 17,24, S = 9,49,
SH = 11,77.
Přiklad 48
Postup přípravy (S,R)-a-[[3,3,3-trifluor-2-(merkaptomethyl)-1-oxopropyl]amino]cyklohexanpropanové kyseliny.
Při provádění postupu podle tohoto příkladu byl koncentrovaný hydroxid amonný (v množství 2,6 mililitru) přidán k suspenzi obsahující (R)-N-[2-[(acetylthio)-methyl]-3,3,3-trifluor-l-oxopropyl]-L-cyklohexylalanin, který byl připraven postupem podle příkladu 47 (a), v 10,5 mililitru odkysličené vody při teplotě místnosti. K rozpuštěni došlo téměř okamžitě, přičemž takto získaný výsledný roztok byl potom promícháván po dobu 5 minut. Po tomto časovém intervalu byla získana reakční směs okyselena na hodnotu pH 1,5, přičemž bylo použito nasyceného roztoku hydrogensiranu draselného. Takto získaná výsledná suspenze byla extrahována ethylesterem kyseliny octové (v množství asi 250 mililitrů) . Tímto způsobem byla získána organická vrstva, která byla potom promyta solankou, potom byl tento podíl usušen (za pomoci síranu hořečnatého MgSO4) a potom bylo provedeno zkoncentrování až vznikla bělavá pevná látka. Tato látka byla potom chromatografíčky zpracovávána v koloně o rozměru 2,5 x 20 centimetrů, která byla naplněna silikagelem, přičemž jako elučniho činidla bylo použito systému ethylester kyseliny octové, hexan, kyselina octová
-69CZ 281165 B6 v poměru 80 : 20 : 2. Potom byly oddělený čisté frakce, které byly zkoncentrovány, potom byly podrobeny současnému odpařování s heptanem a nakonec byla provedena triturace hexanem, přičemž tímto postupem bylo připraveno 858 miligramů požadovaného (S,R)-isomeru, který je uveden v záhlaví tohoto příkladu ve formě bílé pevné látky.
Teplota tání: 116 až 118 ’C;
[a]D = -47,2’ (c = 0,65, methanol);
Analýza pro C13H20F3NO3S:
vypočteno C = 47,69, H = 6,16, N = 4,28, F = 17,41, S = 9,79, SH = 10,10 nalezeno C = 47,89, H = 6,29, N = 4,15, F = 16,76, S = 9,66,
SH = 10,30.
Příklad 49
Postup přípravy (R)-N-[2-[(acetylthio)methyl]-3,3,3-trifluor-l-oxopropyl]-L-tyrosinu.
Při prováděni postupu podle tohoto příkladu byla suspenze obsahující L-tyrosin (v množství 2,72 gramu, což odpovídá 15 mmolům) v 50 mililitrech suchého acetonitrilu pod atmosférou argonu ochlazena na teplotu pohybující se v rozmezí od 0 ’C do 5 ’C, přičemž potom byl k této směsi přidán bis(trimethylsilyl)trifluoracetamid (v množství 12 mililitrů, což odpovídá 45 mmolům).' Takto připravená reakční směs byla potom ponechána míchat a postupně ohřívat na teplotu okolí. Po asi 2 hodinách byly k této reakční směsi přidány 3 mililitry dimethylformamidu a potom byla tato reakční směs promíchávána po dobu přes noc při teplotě místnosti. Vzhledem k tomu, že tato reakční směs představovala stále ještě suspenzi, byly přidány další 2 mililitry dimethylformamidu, přičemž potom byla tato reakční směs promíchávána znovu po dobu 2 hodin při teplotě místnosti a potom byly přidány 3 mililitry bis(trimethylsilyl)trifluoracetamidu a výsledkem tohoto postupu byl čirý roztok, který se vytvořil po 2,5 hodinách. Takto získaná reakční směs byla potom ochlazena na teplotu v rozmezí od 0 do 5 ’C, přičemž potom byl přidán 2-trifluor-3-acetylthiopropionylchlorid (v množství 3,52 gramu, což odpovídá 15 mmolům), který byl rozpuštěn v 7 mililitrech acetonitrilu, přičemž tento přídavek byl proveden opatrným způsobem po kapkách a takto vzniklá reakční směs byla potom ponechána k postupnému ohřívání na teplotu místnosti. Tato reakční směs byla potom odpařena, čímž byl získán žlutý sirupovitý zbytek, který byl potom v další fázi tohoto postupu rozdělen mezi ethylester kyseliny octové (v množství 100 mililitrů) a vodu (v množství 100 mililitrů). Tímto způsobem byla získána vodná vrstva, která byla dále extrahována dalším podílem ethylesteru kyseliny octové (extrakce byla prováděna celkem čtyřikrát po 75 mililitrech), čímž byly získány ethylacetátové extrakty, které byly spojeny a tento spojený podíl byl potom promyt solankou (v množství 75 mililitru), přičemž potom byl tento materiál usušen (za pomoci síranu hořečnatého) a odpařen, čímž bylo získáno 10,5 gramu žlutého pevného zbytku. Tato pevná látka žluté barvy byla potom spojena s 2,5 gramy surového materiálu,
-70CZ 281165 B6 který byl připraven stejným způsobem při dalším postupu. Tento celkový podíl 13 gramů surového materiálu byl potom přečištěn zpracováním mžikovým chromatografickým způsobem v koloně naplněné silikagelem (přičemž poměr silikagelu k uvedené sloučenině byl 120 : 1), přičemž jako elučního činidla bylo použito systému ethylesteru kyseliny octové, hexanů a kyseliny octové v poměru 100 : 100 : 1, a tímto způsobem bylo získáno 2,29 gramu rychleji eluujícího diastereomeru (to znamená isomeru A), dále 2,31 gramu směsi obou těchto diastereomerů, a 1,88 gramu pomaleji eluujícího diastereomeru (to znamená isomeru B). Tento podíl 2,29 gramu byl triturován ethylesterem kyseliny octové a hexany ve formě směsi v poměru 1 : 1, přičemž bylo získáno 1,25 gramu čistého isomeru
A a 0,83 gramu matečného louhu, který obsahoval oba tyto uvedené isomery. Podobným způsobem byl potom zpracováván podíl 1,88 gramu materiálu směsí ethylesteru kyseliny octové a hexanů v poměru 1 : 2, přičemž bylo získáno 1,2 gramu čistého isomeru B a 0,38 gramu matečného louhu, který obsahoval převážně isomer B. Krystalizací shora uvedené frakce 2,31 gramu ze směsi ethylesteru kyseliny octové a hexanů (v poměru 1:1) bylo získáno 0,8 gramu čistého isomeru A a 1,5 gramu směsného isomeru A a B, respektive směsi isomerů A a B. Tyto spojené směsné frakce představovaly celkem
2,71 gramu, přičemž tyto frakce byly potom znovu chromatograficky zpracovány stejným způsobem jako je uvedeno shora, přičemž toto chromatografické zpracovávání bylo provedeno dvakrát, přičemž bylo získáno 0,41 gramu čistého isomeru A a 1,14 gramu čistého isomeru B. Takto získaná frakce 0,8 gramu, 1,25 gramu a 0,41 gramu čistého isomeru A byly potom spojeny, přičemž nejdříve byly zpracovány triturací za použití hexanů obsahujících několik kapek ethylesteru kyseliny octové, a potom byla provedena rekrystalizace této látky ze směsí ethylesteru kyseliny octové a hexanů (v poměru 1 : 1), přičemž tímto shora uvedeným způsobem bylo získáno 1,8 gramu požadovaného (R)-isomeru jako produktu tohoto postupu, který je uveden v záhlaví tohoto příkladu, ve formě bílé krystalické pevné látky.
Teplota tání: 202 až 204 °C [a]D = -85,7’ (c = 1,0, methanol).
Analýza pro C15H16F3NO5S: vypočteno: C = 47,49, H = 4,25, N = 3,69, F = 15,02, S = 8,45, nalezeno C = 47,55, H = 4,16, N = 3,62, F = 14,70, S = 8,25.
Přiklad 50
Postup přípravy (S)-N-[2-[(acetylthio)methyl]-3,3,3-trifluor-l-oxopropyl]-L-tyrosinu.
Při prováděni tohoto postupu podle tohoto příkladu se postupovalo tak, že podíly 1,2 gramu a 1,15 gramu čistého isomeru B, získaného postupem podle příkladu 49, byly spojeny a potom byly podrobeny triturování za pomoci hexanu, který obsahoval několik kapek ethylesteru kyseliny octové, přičemž tímto způsobem bylo získáno 2,2 gramu požadované sloučeniny, tzn. (S)-isomeru, jako produktu reakce uvedeného v záhlaví tohoto příkladu, ve formě bílé pevné látky.
-71CZ 281165 B6
Teplota tání: 170 až 173 °C;
[a]D = +11,8° (c = 1,0, methanol);
Analýza pro C15H16F3NO5S: vypočteno C = 47,49, H = 4,25, N = 3,69, F = 15,02, S = 8,45, nalezeno C = 47,49, H = 4,22, N = 3,67, F = 14,67, S = 8,27.
Příklad 51
Postup přípravy (R)-N-[3,3,3-trifluor-2-(merkaptomethyl)-1-oxopropyl]-L-tyrosinu.
Při provádění postupu podle tohoto příkladu byla suspenze obsahující (R)-isomer, jako produkt vyrobený postupem podle příkladu 49, (v množství 1,66 gramu, což odpovídá 4,4 mmolu) ve 2,8 mililitrech koncentrovaného hydroxidu amonného a 6,2 mililitru vody, promíchávána při teplotě místnosti pod atmosférou argonu po dobu 7 minut. Takto získaný výsledný čirý roztok byl potom okyselen roztokem hydrogensíranu draselného o koncentraci 5 % hmot, na hodnotu pH 1,5, přičemž potom následovala extrakce tohoto roztoku 75 mililitry ethylesteru kyseliny octové a potom další extrakce třemi podíly (v množství 50 mililitrů) ethylesteru kyseliny octové. Tímto způsobem byly získány ethylacetátové extrakty, které byly spojeny a celý podíl byl potom promyt solankou (v množství 75 mililitrů), potom bylo provedeno sušení tohoto roztoku (za pomoci síranu hořečnatého MgSO4) a odpaření, čímž bylo získáno
1,48 gramu krystalického podílu bílé pevné látky. Tato pevná bílá látka byla potom podrobena přečištění chromatografickou metodou v koloně naplněné silikagelem (přičemž poměr silikagelu ke zpracovávané sloučenině byl 240 : 1), kde jako elučniho činidla bylo použito systému ethylester kyseliny octové, hexany, kyselina octová v poměru 100 : 100 : 1, přičemž z tohoto surového produktu bylo tímto způsobem získáno 1,32 gramu požadovaného (R)-isomeru jako produktu, který je uveden v záhlaví tohoto přikladu, ve formě bílé krystalické pevné látky.
Teplota tání: 204 až 206 °C; [a]D=+5,2° (c = 1,0, methanol);
Analýza pro C13H14F3NO4S:
vypočteno C = 46,29, H = 4,18, N = 4,15, F = 16,90,
S = 9,50, SH = 9,80, nalezeno C = 46,32, H = 4,02, N = 4,04, F = 16,60,
S = 9,52, SH = 9,86.
-72CZ 281165 B6
Příklad 52
Postup přípravy (S) -N-[ 3,3,3-trifluor-2-(merkaptomethyl)-1-oxopropyl]-L-tyrosinu.
Při provádění postupu podle tohoto provedení byla suspenze obsahující (S)-isomer, což je produkt připravený postupem podle příkladu 50 (v množství 2,05 gramu, což odpovídá 5,4 mmolu) ve
3,5 mililitrech koncentrovaného hydroxidu amonného a 7,6 mililitru vody, promíchávána při teplotě místnosti pod atmosférou argonu po dobu 7 minut. Po tomto časovém intervalu byl získán čirý roztok, který byl potom okyselen pomocí 150 mililitrů hydrogensíranu draselného ve formě roztoku o koncentraci 5 % hmot., přičemž potom byla tato směs extrahována pomocí 75 mililitrů ethylesteru kyseliny octové, a potom následovala další extrakce čtyřmi podíly po 50 mililitrech ethylesteru kyseliny octové. Takto byly získány ethylecetátové podíly, které byly spojeny a spojený podíl byl potom promyt solankou (v množství 100 mililitrů), potom byl usušen (pomocí síranu hořečnatého MgSO4) a nakonec bylo provedeno odpaření za sníženého tlaku, přičemž tímto způsobem bylo získáno 1,95 gramu špinavé bílé pevné látky. Tato pevná látka byla potom přečištěna mžikovou chromatografickou metodou na 400 gramech silikagelu, přičemž jako elučního činidla bylo použito systému ethylesteru kyseliny octové, hexanů a kyseliny octové v poměru 100 : 100 : 1. Tímto postupem bylo získáno 1,56 gramu požadovaného (S)-isomeru, který je uveden v záhlaví tohoto příkladu, ve formě bílé krystalické pevné látky.
Teplota tání: 184 až 187 ’C;
[a]D = +59,0’ (c = 1,0, methanol);
Analýza pro C13H14F3NO4S:
vypočteno C = 46,29, H = 4,18, N = 4,15, F = 16,90,
S = 9,50, SH = 9,80, nalezeno C = 46,38, H = 4,13, N = 4,12, F = 16,73,
S = 9,37, SH = 9,44.
Příklad 53
Postup přípravy (S,S)-3,3,3-trifluor-2-(merkaptomethyl)-N-[2-(1H-indol-3-yl)-l-(lH-tetrazol-5-yl)ethylIpropanamidu.
a) Postup přípravy hydrochloridu (S)-a-(lH-tetrazol-5-yl)-lH-indol-3-ethanaminu.
Při prováděni postupu podle tohoto provedení byl k roztoku, který obsahoval N-[(1,1-dimethylethoxy)-karbonyl]-L-tryptofan (v množství 7,74 gramu, což odpovídá 25,42 mmolu) v methylenchloridu (v množství 150 mililitrů) při teplotě -20 °C a pod atmosférou argonu přidán N-methylmorfolin (v množství 2,79 mililitru, což odpovídá 25,42 mmolu), přičemž potom následoval přídavek isobutylchlormravenčanu (v množství 3,31 mililitru, což odpovídá 25,42 mmolu). Takto získaná výsledná suspenze byla potom promíchávána při teplotě -20 ’C po dobu 15 minut, přičemž po tom
-73CZ 281165 B6 to časovém intervalu byl přidán 5,6 M roztok amoniaku v methanolu (v množství 45 mililitrů, což odpovídá 252 mmolu). Po asi 30 minutách, kdy byla tato směs udržována při teplotě -20 ’C, byla tato reakční směs rychle ochlazena vodou a potom byla ponechána ohřát na teplotu místnosti. Takto vzniklé vrstvy byly potom odděleny a vodná vrstva byla extrahována dvakrát methylenchloridem. Spojené organické vrstvy byly potom sušeny (za pomoci síranu hořečnatého MgSO4) a potom byla tato látka odpařena, přičemž bylo získáno 8,0 gramů bílé pevné látky. Tato bílá pevná látka byla potom rekrystalována ze směsi ethylesteru kyseliny octové a hexanů, přičemž bylo získáno 6,6 gramu N-[(1,1-dimethylethoxy)karbonyl]-L-tryptofanamidu.
Dále bylo postupováno tak, že k roztoku triethylaminu (v množství 10,5 mililitru, což odpovídá 75,16 mmolu) v benzenu (v množství 40 mililitrů) při teplotě 10 C a pod atmosférou argonu, byl přidán chlorsulfonylmethylkarbamát (v množství 6,5 gramu, což odpovídá 37,58 mmolu), který byl rozpuštěn v benzenu (v množství 70 mililitrů), přičemž tento přídavek byl proveden během 30 minut. Takto získaná reakční směs byla potom promíchávána po dobu dalších 30 minut při teplotě místnosti, přičemž po tomto časovém intervalu byl přidán N-[(1,1-dimethylethoxy)-karbonyl]-L-tryptofanamid (v množství 5,7 gramu, což odpovídá
18,79 mmolu), který byl rozpuštěn v bezvodém tetrahydrofuranu (v množství 100 mililitrů), což bylo provedeno během intervalu 10 minut. Takto získaná výsledná směs byla promíchávána po dobu jedné hodiny a potom byla nalita ke zpracováváni do chromatografické kolony, za účelem provedení mžikového chromatografického postupu, přičemž tato kolona měla rozměry 50 milimetrů x 15,2 centimetru a jako elučního činidla bylo použito směsi hexanů a ethylesteru kyseliny octové v poměru 60 : 40. Tímto shora uvedeným způsobem bylo získáno 4,22 gramu N-[(1,1-dimethylethoxy)karbonyl]-L-tryptofanylnitrilu ve formě bílé pevné látky.
Chromatografie v tenké vrstvě = 0,47 (ethylester kyseliny octové a hexany v poměru 1 : 1); [a)D = -35,8° (c = 0,57, methanol);
Potom byl roztok této shora uvedené nitrilové sloučeniny (v množství 2,42 gramu, což odpovídá 8,48 mmolu) a tributylcínazidu (v množství 4,25 gramu, což odpovídá 12,72 mmolu) v xylenech (v množství 20 mililitrů) promícháván při teplotě 90 °C po dobu jedné hodiny. Takto vzniklá reakční směs byla potom ochlazena na teplotu místnosti a potom byla nalita přímo do chromatografické kolony k provedení mžikové chromatografie (rozměr této kolony byl 50 milimetrů x 20,3 centimetru, přičemž jako elučního činidla bylo použito 2 litrů směsi hexanů a ethylesteru kyseliny octové v poměru 60 : 40 s přídavkem 2 % hmot, kyseliny octové a dále 1 litru směsi ethylesteru kyseliny octové a hexanů v poměru 3 : 1 s přídavkem 2 % hmot, kyseliny octové), přičemž tímto postupem bylo získáno 1,91 gramu 1,1-dimethylethylesteru (S)-[2-(lH-indol-3-yl)-1-(lH-tetrazol-5-yl)ethylJkarbamové kyseliny, ve formě bílé pevné látky.
Chromatografie v tenké vrstvě Rf = 0,09
-74CZ 281165 B6 (hexany, ethylester kyseliny octové v poměru 60 : 40 s přídavkem 2 % hmot, kyseliny octové);
[α]θ = +2,23’ (c = 0,71, methanol).
V dalším postupu byl ethylester kyseliny octové (v množství 30 mililitrů) nasycen plynným chlorovodíkem při teplotě 0 °C, přičemž potom byl přidán anisol (v množství 7,4 mililitru a potom následoval přídavek 1,1-dimethylethylesteru kyseliny (S)-(2-(1H-benzimidazol-3-yl)-l-(lH-tetrazol-5-yl)ethyl]karbamové (v množství 1,24 gramu, což odpovídá 3,77 mmolu), který byl rozpuštěn v ethylesteru kyseliny octové (v množství 7 mililitrů). Takto získaný výsledný roztok byl potom promícháván při teplotě 0 'C po dobu jedné hodiny, přičemž po tomto časovém intervalu bylo chromatograf ickou analýzou v tenké vrstvě potvrzeno, že se v tomto roztoku nevyskytuje žádný výchozí materiál. Tato reakční směs byla potom odpařena a potom byl zbytek rozředěn methylenchloridem a etherem a potom byly opět páry odčerpány, přičemž tímto postupem bylo získáno 0,95 gramu hydrochloridu (S)-a-(lH-tetrazol-5-yl)-lH-indol-3-ethanaminu ve formě světle hnědé pevné látky.
b) Postup přípravy efedrinové soli (2S)-trifluormethyl-3-acetylthiopropionové kyseliny.
Při provádění postupu podle tohoto provedení byla 2-trifluormethyl-3-acetylthiopropionová kyslina (v množství 7,18 gramu, což odpovídá 33,2 mmolu) v etheru (v množství 100 mililitrů) zpracovávána (1S,2R)-(+)-efedrinem (v množství 2,73 gramu, což odpovídá 16,6 mmolu) v etheru (v množství 100 mililitrů) a potom byl tento roztok ponechán v klidu po dobu 18 hodin. Takto získaná reakční směs byla potom zfiltrována, a tímto způsobem bylo získáno 5,37 gramu pevné látky, která byla potom rekrystalována z ethylesteru kyseliny octové (ve formě čtyř podílů po 40 mililitrech) , přičemž tímto shora uvedeným postupem bylo získáno
3,47 gramu efedrinové soli (2S)-trifluormethyl-3-acetylthiopropionové kyseliny.
Teplota táni: 139 až 140 ’C;
(a]D = +100,0’ (c = 1,0, methanol).
c) Postup přípravy (S,S)-2-((acetylthio)methyl]-3,3,3-trifluor-N-(2-(lH-indol-3-y1)-1-(lH-tetrazol-5-yl)ethyl]-propanamidu.
Při provádění postupu podle tohoto provedení byla efedrinová sůl, představující produkt postupu podle shora uvedeného provedeni b) (v množství 2,2 gramy, což odpovídá 5,74 mmolu), protřepávaná v separační nálevce s ethylesterem kyseliny octové (v množství 50 mililitrů) a s vodou (v množství 50 mililitrů), která obsahovala 1 N kyselinu chlorovodíkovou (v množství 5,75 mililitru). Tímto způsobem vznikla organická vrstva, která byla potom oddělena a usušena za pomoci síranu hořečnatého MgSO4, přičemž tato látka byla potom odpařena a podrobena azeotropické destilaci s methylenchloridem. Tímto způsobem byla získána volná karboxylová kyselina, která byla rozpuštěna v methylenchloridu (v množství 14 mililitrů) a k této směsi byl potom přidán oxalylchlorid (v množství 0,5 mililitru, což odpovídá 5,74 mmolu), přičemž potom následoval opatrný přídavek dimethylformamidu (v množství
-75CZ 281165 B6
0,05 mililitru), který byl proveden po kapkách. Takto získaná výsledná směs byla potom promíchávána při teplotě místnosti po dobu 2 hodin. Po tomto intervalu byl k suspenzi obsahující produkt A, připravený podle shora uvedeného provedení a) (v množství
1,73 gramu, což odpovídá 5,74 mmolu) v acetonitrilu (v množství 30 mililitrů) při teplotě 0 ’C a pod atmosférou argonu, přidán bis(trimethylsilyl)trifluoracetamid (v množství 6,3 mililitru, což odpovídá 24,12 mmolu), přičemž takto získaný výsledný zakalený roztok byl potom promícháván při teplotě místnosti po dobu 2 hodin. Takto získaný roztok byl potom ochlazen na teplotu -25 ’C, přičemž k tomuto roztoku byl potom přidán chlorid (2S)-trifluormethyl-3-acetylthiopropionové kyseliny, připravený podle shora uvedeného postupu, přičemž tento přídavek byl proveden po kapkách během intervalu 15 minut. Tímto způsobem byl získán světle žlutý roztok, který byl promícháván po dobu 2 hodin při teplotě v rozmezí od -25 ’C do -15 ’C, přičemž potom byla tato reakční směs rychle ochlazena nalitím do vody (v množství 75 mililitrů) a potom byl tento roztok extrahován ethylesterem kyseliny octové (ve formě dvou podílů o objemu 75 mililitrů). Tímto způsobem byly získány spojené organické extrakty, které byly promyty solankou (v množství 75 mililitrů), potom byl tento podíl usušen (pomocí síranu sodného Na2SO4), a potom byla tato látka odpařena, cimž byla získána pevná látka. Tato pevná látka byla potom přečištěna mžikovou chromatografickou metodou v koloně o rozměrech 50 milimetrů x 20,3 centimetru, přičemž jako elučního činidla bylo použito:
litrů směsi hexanu a ethylesteru kyseliny octové v poměru 1 :
s přídavkem 1 % hmot, kyseliny octové, 1 litru ethylesteru ky- seliny octové a hexanů v poměru 3 : 1 s přídavkem 2 % hmot, kyseliny octové, 1 litru ethylesteru kyseliny octové a hexanů v poměru 4 : 1 s přídavkem 2 % hmot, kyseliny octové, 1 litru ethylesteru kyseliny octové a hexanů v poměru 9:1 s přídavkem 2 % hmot, kyseliny octové, přičemž takto získaná látka byla potom rekrystalována ze směsi ethylesteru kyseliny octové a hexanů a tímto způsobem bylo získáno 1,52 gramu požadované sloučeniny C uvedené v záhlaví tohoto příkladu jako (S,S)-isomerniho produktu ve formě bílé pevné látky.
Teplota tání: 208 až 213 ’C (za rozkladu), chromatografie v tenké vrstvě Rf = 0,13 (hexany, ethylester kyseliny octové v poměru 60 : 40 s přídavkem % hmot, kyseliny octové);
[a]D = -163,8’ (c = 0,53, methanol).
d) Postup přípravy (S,S)-3,3,3-trifluor-2-(merkaptomethyl)-N-[2-
-(lH-indol-3-yl)-1-(lH-tetrazol-5-yl)ethyl]propanamidu.
Při provádění tohoto postupu byla k suspenzi, která obsahovala sloučeninu C, připravenou podle shora uvedeného provedení c) (v množství 1,14 gramu, což odpovídá 2,67 mmolu) v odkysličené vodě (v množství 5,3 mililitru) při teplotě místnosti a pod atmosférou argonu, přidána směs obsahující koncentrovaný hydroxid amonný (v množství 1,76 mililitru) a vodu (v množství 1,76 mililitru). Po asi dvou minutách byla takto připravená reakční směs rychle ochlazena nasyceným roztokem hydrogensÍránu draselného
-76CZ 281165 B6 (hodnota pH byla upravena na 1,5) a vzniklé pevné látky byly odfiltrovány, přičemž potom byl tento podíl pevných látek přečištěn triturací za pomoci směsi ethylesteru kyseliny octové, ethylesteru a hexanů, přičemž tímto způsobem bylo získáno 0,73 gramu (S,S)-isomeru, jako produktu tohoto postupu, ve formě bílé pevné látky.
Teplota: 218 až 223 ’C (za rozkladu); chromatografie v tenké vrstvě Rf = 0,13 (hexany, ethylester kyseliny octové v poměru 60 : 40 s přídavkem 2 % hmot, kyseliny octové);
[a]D = +54,8’ (c = 0,54, methanol).
Analýza pro C15H15F3N6OS:
vypočteno C = 46,87, H = 3,93, N = 21,86, F = 14,83,
S = 8,34, SH = 8,60, nalezeno C = 47,22, H = 3,80, N = 21,71, F = 14,99,
S = 8,05, SH = 12,35.
Příklad 54
Postup přípravy (S,R)-3,3,3-trifluor-2-(merkaptomethyl)-N-[2-(1H-indol-3-yl)-1-(lH-tetrazol-5-yl)ethyljpropanamidu.
a) Postup přípravy efedrinové soli (2R)-trifluormethyl-3-acetylthiopropionové kyseliny.
Při provádění postupu podle tohoto provedeni byl filtrát, získaný postupem podle příkladu 53 (b) odpařen a potom byl zpracován vodným roztokem kyseliny chlorovodíkové, přičemž následovala extrakce tohoto roztoku pomocí ethylesteru kyseliny octové, sušení a odpaření, přičemž tímto způsobem bylo připraveno 3,8 gramu oleje. Tento olej byl potom rozpuštěn v etheru (v množství 40 mililitrů) a tato látka byla potom spojena s (IR,2S)-(-)-efedrinem (v množství 2,9 gramu, což odpovídá 17,6 mmolu), který byl rozpuštěn v etheru (v množství 40 mililitrů) a potom byla tato směs ponechána v klidu po dobu 16 hodin. Tímto způsobem se vydělila pevná látka, která byla odfiltrována a podrobena rekrystalováni z ethylesteru kyseliny octové (dva podíly po 40 mililitrech). Tímto způsobem byly získány 4,0 gramy efedrinové soli (2R)-trifluormethyl-3-acetylthiopropionové kyseliny.
Teplota tání: 138 až 139 ’C;
[a]D = -100,3’ (c = 1,0, methanol).
b) Postup přípravy (S,R)-2-[(acetylthio)methyl]-3,3,3-trifluor-N-[2-(lH-indol-3-y1)-1-(lH-tetrazol-5-yl)ethyl]propanamidu.
Při provádění postupu podle tohoto příkladu byla efedrinová sůl, představující produkt získaný postupem podle shora uvedeného provedeni a), tzn. produkt A (v množství 1,53 gramu, což odpovídá 4,0 mmoly) protřepáván v rozdělovači nálevce s ethylesterem kyseliny octové (v množství 50 mililitrů) a s vodou (v množství 50
-77CZ 281165 B6 mililitrů), která obsahovala 1 N roztok kyseliny chlorovodíkové (v množství 4,0 mililitry). Tímto způsobem se vytvořila organická vrstva, která byla oddělena, potom byla usušena (za pomoci síranu hořečnatého), potom byla tato směs odpařena a azeotropicky destilována společné s methylenchloridem. Tímto způsobem byla získána volná karboxylové kyselina, která byla rozpuštěna v methylenchloridu (v množství 10 mililitrů), a k tomuto roztoku byl potom přidán oxylylchlorid (v množství 0,35 mililitru, což představuje 4,0 mmoly), přičemž potom následoval přídavek dimethylformamidu (v množství 0,035), který byl proveden opatrným způsobem po kapkách. Takto získaná výsledná směs byla promíchávána při teplotě místnosti po dobu 2 hodin. Současně byl k suspenzi obsahující (S)-(lH-tetrazol-5-yl)-lH-indol-3-ethanamin ve formě hydrochloridové soli (v množství 1,73 gramu, což odpovídá 5,74 mmolu) v acetonitrilu (v množství 21 mililitrů) při teplotě 0 °C a pod atmosférou argonu přidáván bis(trimethylsilyl)trifluoracetamid (v množství 4,4 mililitru, což odpovídá 16,8 mmolu) a takto získaný výsledný zakalený roztok byl potom promícháván při teplotě místnosti po dobu 2 hodin. Takto získaný roztok byl potom ochlazen na teplotu -25 ’C, přičemž potom byl přidán roztok chloridu kyseliny, přičemž tento přídavek byl proveden opatrným způsobem po kapkách v intervalu 15 minut. Tímto způsobem byl získán světle žlutý roztok, který byl potom promícháván po dobu dvou hodin při teplotě pohybující se v rozmezí od -25 do -15 ’C, přičemž takto získaná reakční směs byla potom rychle ochlazena tak, že byla nalita do vody (v množství 50 mililitrů) a potom byla provedena extrakce této látky ethylesterem kyseliny octové (v množství 2 podíly po 50 mililitrech), dále byly organické extrakty spojeny a tento spojený podíl organických extraktů byl potom promyt solankou (v množství 50 mililitrů), potom byl tento podíl usušen (za pomoci síranu sodného Na2SO4) a potom byl tento materiál odpařen, přičemž byl získán pevný podíl. Tento pevný podíl byl potom přečištěn postupem mžikové chromatografie, provedené v koloně naplněné silikagelem o rozměrech 50 milimetrů x 20,3 centimetru, přičemž jako elučního činidla bylo použito 2 litrů směsi hexanů a ethylesteru kyseliny octové v poměru 1 : 1 s přídavkem 1 % hmot, kyseliny octové, a dále bylo jako elučního činidla použito 1 litru směsi ethylesteru kyseliny octové a hexanů v poměru 3 : 1 s přídavkem 2 % hmot, kyseliny octové, přičemž při provádění postupu podle tohoto provedení bylo po rekrystalizaci, která byla provedena ve směsi ethylesteru kyseliny octové a hexanů, získáno 0,68 gramů požadovaného produktu, uvedeného v záhlaví tohoto příkladu, tzn. produktu B, ve formě bílé pevné látky. Matečný louh byl potom odpařen a opětně podroben chromatografickému zpracovávání v koloně o rozměrech 25 milimetrů x 15,2 centimetru, přičemž jako elučního činidla bylo použito 2 litrů směs hexanů a ethylesteru kyseliny octové v poměru 1 : 1 s přídavkem 1 % hmot, kyseliny octové, přičemž tímto postupem bylo po rekrystalizaci, která byla prováděna ze směsi ethylesteru kyseliny octové a hexanů, připraveno dalších 0,26 gramu bílé pevné látky, takže celkový výtěžek byl 0,96 gramu produktu uvedeného v záhlaví tohoto příkladu, tzn. produktu B.
Teplota tání: 206 až 213 °C (za rozkladu); chromatografie v tenké vrstvě Rf = 0,23 (hexany a ethylester kyseliny octové v poměru 60 : 40 s přídavkem
-78CZ 281165 B6 % hmot, kyseliny octové);
[a]D = -93,3’ (c = 0,52, methanol).
c) Postup přípravy (S,R)-3,3,3-trifluor-2-(merkaptomethyl)-N-[2-(lH-indol-3-yl)-1-(lH-tetrazol-5-yl)ethyl]propanamidu.
Při provádění postupu podle tohoto příkladu byla k suspenzi, obsahující (S,R)-produkt získaný postupem podle shora uvedeného provedení b), to znamená produkt B (v množství 0,9 gramu, což odpovídá 2,1 mmolu) v odkysličené vodě (v množství 4,2 mililitru) při teplotě místnosti pod atmosférou argonu, přidána směs koncentrovaného hydroxidu amonného (v množství 1,39 mililitru) a vody (v množství 1,39 mililitru). Po 2 minutách byla takto vzniklá reakční směs rychle ochlazena přídavkem nasyceného roztoku hydrogensíranu draselného (na hodnotu pH 1,5), přičemž takto získaná reakční směs byla potom extrahována za pomoci ethylesteru kyseliny octové. Tímto způsobem byla získána organická vrstva, která byla promyta vodou a solankou, přičemž potom byla usušena a odpařena, za vzniku pevné látky. Tato pevná látka byla potom přečištěna postupem mžikové chromatografie (provedené v koloně naplněné silikagelem o rozměrech 50 milimetrů x 17,8 centimetru, přičemž jako elučního činidla bylo použito směsi ethylesteru kyseliny octové a hexanů v poměru 1 : 1 s přídavkem 1 % hmot, kyseliny octové). Takto získaný pevný materiál byl potom rekrystalován ze směsi ethylesteru kyseliny octové a hexanu, přičemž bylo získáno 0,59 gramu (S,R)-produktu, uvedeného v záhlaví tohoto příkladu, ve formě bílé pevné látky.
Teplota tání: 206 až 213 ’C (za rozkladu); chromatografie v tenké vrstvě Rf = 0,11 (hexany, ethylester kyseliny octové v poměru 60 : 40 s přídavkem 2 % hmot, kyseliny octové);
[a]D = -38,6’ (c = 0,42, methanol);
Analýza pro C15H15F3N6OS · θ'1 H20: vypočteno C = 46,66, H = 3,97, N = 21,76, F = 14,76,
S = 8,30, SH = 8,56, nalezeno C = 46,93, H = 3,80, N = 21,38, F = 15,06,
S = 8,38, SH = 15,40.
Příklad 55
Postup přípravy (S)-N-[4,4,4-trifluor-2-(merkaptomethyl)-1-oxobutyl]-L-leucinu.
a) Postup přípravy 2-[[(fenylmethyl)thioJmethyl]-4,4,4-trifluormáselné kyseliny.
Při provádění postupu podle tohoto provedení byl k roztoku, který obsahoval diisopropylamin lithný (tato látka byla připravena za použití čerstvého destilací získaného diisopropylaminu /v množství 4,47 gramu, což odpovídá 44,4 mmolu/ a n-butyllithia v hexanu /v množství 18 mililitrů, což odpovídá 45 mmolům, roztok
-79CZ 281165 B6 o koncentraci 2,5 M/) v suchém tetrahydrofuranu (v množství 35 mililitrů), přidán roztok obsahující 4,4,4-trifluormáselnou kyselinu (v množství 3,0 gramy, což odpovídá 21,0 mmolům) v tetrahydrofuranu (v množství 25 mililitrů). Tato směs byla potom promíchána, což bylo prováděno při teplotě 0 ’C a po dobu 1,5 hodiny, přičemž získaný roztok byl ochlazen na teplotu -78 ’C a potom byl tento roztok zpracován roztokem obsahujícím benzylbrommethylthioether v tetrahydrofuranu (v množství 10 mililitrů). Takto získaný roztok byl potom promícháván po dobu přes noc, přičemž teplota postupně stoupla na teplotu okolí. Těkavé látky byly odstraněny za použití vakua a získaný zbytek byl potom rozpuštěn v ethylesteru kyseliny octové a potom byl tento roztok podroben extrahování, provedenému pomocí 1N roztoku hydroxidu sodného (v množství 50 mililitrů) a vody (v množství 2 x 20 mililitrů). Tímto způsobem byly získány bazické extrakty, které byly spojeny a okyseleny koncentrovaným roztokem kyseliny chlorovodíkové (v množství 8 mililitrů) a potom byl tento roztok podroben extrakci ethylesterem kyseliny octové (ve formě dvou podílů po 100 mililitrech). Tímto způsobem byly získány organické extrakty, které byly spojeny, potom byl společný podíl promyt vodou a solankou, a usušen za pomoci síranu hořečnatého MgSO4 a nakonec bylo provedeno zkoncentrování tohoto materiálu za použití vakua, čímž bylo získáno 3,82 gramu oleje. Tento olej byl potom zpracován mžikovou chromatografickou metodou na 350 mililitrech silikagelu, přičemž jako elučního činidla bylo použito systému ethylester kyseliny octové hexany : kyselina octová v poměru 50 : 100 : 1, a tímto zpracováním bylo získáno 1,36 gramu požadované sloučeniny uvedené v záhlaví tohoto provedení, to znamená produktu A.
chromatografie v tenké vrstvě = 0,38 (ethylacetát : hexany : kyselina octová v poměru 50 : 50 : 1).
b) Postup přípravy N-[2-[[(fenylmethyl)thiojmethyl)-4,4,4-trifluor-l-oxobutyl]-L-leucinu.
Při provádění postupu podle tohoto příkladu byl kyselý produkt, získaný podle shora uvedeného provedeni a) (v množství
2,26 gramu, což odpovídá 8,1 mmolu) převeden na chlorid kyseliny tak, že tato látka byla zahřívána s thionylchloridem (v množství 8 mililitrů) při teplotě 90 ’C po dobu 2,5 hodiny, přičemž potom byl odstraněn přebytkový thionylchlorid destilací a v další fázi byl odčerpán vzniklý zbytek za vysokého vakua při teplotě 70 °C, což bylo prováděno několik hodin. Tento chlorid kyseliny byl rozpuštěn v suchém acetónitrilu (v množství 5 mililitrů) a potom byl přidán k roztoku acetónitrilu, chlazenému na ledu, obsahujícímu L-leucin a bis(trimethylsilyl)trifluoracetamid [tato látka byla připravena z L-leucinu (v množství 1,12 gramu, což odpovídá 8,5 mmolu) a bis(trimethylsilyl)trifluoracetamidu (v množství 4,85 mililitru, což odpovídá 4,7 gramu, a 18,27 mmolu) ve 45 mililitrech suchého acetónitrilu při teplotě 0 “C, přičemž reakce probíhala po dobu přes noc za zvyšování teploty této směsi na teplotu okolí). Takto připravená směs byla potom promíchávána po dobu 5 hodin, přičemž těkavé složky byly odstraněny za použití vakua a vzniklý zbytek byl potom rozpuštěn v ethylesteru kyseliny octové, potom bylo provedeno promytí pomocí roztoku hydrogensíranu draselného o koncentraci 5 % hmot., potom vodou a nakonec
-80CZ 281165 B6 solankou. Takto získaný organický roztok byl potom sušen síranem horečnatým MgSO4 a potom byl tento roztok zkoncentrován za použití vakua, přičemž tímto způsobem bylo získáno 4,5 gramu oleje. Tento olej byl potom zpracován chromatografickým způsobem na 500 mililitrech silikagelu, přičemž jako elučního činidla bylo použito systému ethylester kyseliny octové : hexany : kyselina octová v poměru 80 : 120 : 0,5, přičemž podle tohoto provedení bylo získáno 2,56 gramu produktu, který obsahoval určitý podíl vedlejšího produktu.
V dalším postupu byla provedeno zpracovávání chromatografickou kapalinovou metodou prováděnou za vysokého tlaku, přičemž bylo použito 400 miligramových vzorkových injekcí (celkové množství bylo 2,85 gramu) nastřikovaných na kolonu 30 x 500 milimetrů, typu YMC S-10, za isokratických podmínek, přičemž jako elučního činidla bylo použito směsi 70 : 30 (B - methanol a voda v poměru 90/10 s přídavkem 0,1 % hmot, kyseliny trifluoroctové, A - methanol a voda v poměru 10/90 s přídavkem 0,1 % hmot, kyseliny trifluoroctové), přičemž průtokové množství bylo 50 mililitrů za minutu, a shromážděné frakce, které obsahovaly požadovaný produkt byly potom zkoncentrovány za použití vakua za účelem odstranění methanolu a výsledný vodný koncentrát byl potom podroben extrahování ethylesterem kyseliny octové (provedeno celkem 3x). Tímto způsobem byly získány organické frakce, které byly promyty vodou a potom solankou, přičemž tyto frakce byly spojeny a usušeny za použiti síranu hořečnatého. Potom byla tato látka zkoncentrována za použiti vakua, přičemž tímto postupem bylo získáno 2,43 gramu požadované sloučeniny uvedené v záhlaví tohoto provedení, to znamená produktu B.
c) Postup přípravy (S)-N-[4,4,4-trifluor-2-(merkaptomethyl)-l-oxobutyl]-L-leucinu.
Při provádění postupu podle tohoto provedení bylo ke kapalnému čpavku (v množství 100 mililitrů) při teplotě -78 ’C přidáno malé množství částečkovitého sodíku (v množství 527 miligramů, což je 22,9 mg.atomu). Po 10 minutách byl k této látce (zbarvené modře, přičemž toto zabarvení se vytvořilo okamžitě) přidán roztok produktu B, to znamená látky vyrobené postupem podle shora uvedeného provedení b) (v množství 1,53 gramu, což odpovídá 3,9 mmolu) v suchém tetrahydrofuranu (v množství 3,9 mmolu), přičemž potom po 10 minutách byl přidán pevný chlorid amonný (v množství 5 gramů, což odpovídá 94 mmolu) za účelem rychlého zchlazení reakční směsi, která potom se nechala ohřát na teplotu -33 “C (modré zabarvení zmizelo). Potom byl z této látky odstraněn přebytečný amoniak (proháněním argonu touto látkou) a získaný zbytek byl potom rozdělen mezi ethylester kyseliny octové a hydrogensíran draselný o koncentraci 10 % hmot. Takto získaná organická vrstva byla potom oddělena a promyta vodou a solankou, přičemž potom bylo provedeno sušení síranem hořečnatým MgSO4, a tímto postupem bylo získáno 1,2 gramu materiálu (který byl potom spojen s jiným podílem, takže celkové množství bylo 1,88 gramu).
Takto získané diastereomery byly odděleny postupem mžikové chromatografie prováděné na 500 mililitrech silikagelu, přičemž jako elučního činidla bylo použito systému ethylester kyseliny octové : hexan : kyselina octová v poměru 60 : 140 : 0,5 a potom
-81CZ 281165 B6 v poměru 80 : 100 : 0,5. Potom byla prováděna opětně chromatografie s různými směsnými frakcemi a získané látky byly podrobeny triturování za pomoci hexanu (a ethylesteru kyseliny octové), přičemž po těchto krocích bylo získáno 700 miligramů požadovaného (S)-isomeru, který je uveden v záhlaví tohoto příkladu, přičemž tento produkt byl ve formě bílé pevné látky.
Teplota tání: 102 až 105 °C chromatografie v tenké vrstvě Rf = 0,29 (ethylester kyseliny octové : hexan : kyselina octová v poměru 100 : 100 : 1);
[a]D = —42,6’ (c = 0,97, methanol);
Analýza pro cHH18F3NO3S:
vypočteno C = 43,85, H = 6,02, N = 4,65, F = 18,91,
S = 10,64, SH = 10,97, nalezeno C = 43,72, H = 5,62, N = 4,70, F = 18,94,
S = 10,45, SH = 11,94.
Přiklad 56
Postup přípravy (R)-N-[4,4,4-trifluor-2-(merkaptomethyl)-l-oxobutyl]-L-leucinu.
Při provádění postupu podle tohoto příkladu bylo navázáno na postup podle předchozího příkladu 55, přičemž byly dále zpracovávány vhodné chromatografické frakce a tímto způsobem bylo získáno 578 miligramů požadovaného produktu, který je uveden v záhlaví tohoto příkladu, který představoval pomaleji se pohybující isomer, ve formě bílé pevné látky.
Teplota tání: 78 až 81 ’C; chromatografie v tenké vrstvě Rf = 0,23 (ethylester kyseliny octové : hexan : kyselina octová v poměru 100 : 100 : 1), [a]D = -9,6’ (c = 0,53, methanol).
Analýza pro C11H18F3NO3S: vypočteno C = 43,85, H = 6,02, N = 4,65, F = 18,91,
S = 10,64, SH = 12,64, nalezeno C = 43,84, H = 6,04, N = 4,62, F = 18,93,
S = 10,48, SH = 12,64.
-82CZ 281165 B6
Příklad 57
Postup přípravy (S,R)-a-[[3,3,3-trifluor-2-(merkaptomethyl)-l-oxopropyl ]amino]-2-benzofuranopropanové kyseliny.
a) Postup přípravy benzofuran-2-methanolu.
Při provádění postupu podle tohoto provedení byla benzofuan-2-karboxylová kyselina (v množství 4,59 gramu, což odpovídá
28,3 mmolu) ve formě roztoku v suchém ethyletheru (v množství 100 mililitrů) přidávána k suspenzi obsahující lithiumaluminiumhydrid (v množství 4,3 gramu, což odpovídá 113 mmolům) v ethyletheru (v množství 180 mililitrů) při teplotě 0 ”C, přičemž tento přídavek byl prováděn opatrným způsobem po kapkách během intervalu 15 minut. Takto získaná směs byla potom promíchávána po dobu 2 hodin, přičemž byla ponechána ohřát postupně na teplotu místnosti. Potom byla tato reakční směs opětně ochlazena na teplotu 0 °C, přičemž potom bylo přidáno 4,3 mililitry vody s extrémní opatrností. Potom byl k této reakční směsi přidán hydroxid sodný (v množství 4,3 mililitru, ve formě 15% roztoku ve vodě), přičemž potom následoval další přídavek vody v množství 12,9 mililitru. Potom byl k této reakční směsi přidán síran hořečnatý (v množství asi 10 gramů), čímž byla získána hustá bílá suspenze, která byla potom promíchávána intenzivním způsobem po dobu asi 30 minut. Takto získaná suspenze byla potom zfiltrována za pomoci silikagelu a takto vzniklý filtrační koláč byl potom promyt řádným způsobem ethylesterem kyseliny octové. Takto získaný filtrát byl potom zkoncentrován a usušen za použiti vakua (vysoké vakuum), přičemž tímto způsobem bylo získáno 4,15 gramu požadované sloučeniny uvedené v záhlaví tohoto přikladu, označované jako produkt A, ve formě světle žlutého oleje.
b) Postup přípravy 2-(brommethyl)benzofuranu.
Při provádění postupu podle tohoto provedení byl trifenylfosfin (v množství 10,83 gramu, což odpovídá 41,3 mmolu) přidán do roztoku, který obsahoval produkt A, to znamená sloučeninu připravenou podle shora uvedeného provedeni a) (v množství 4,08 gramu, což odpovídá 27,5 mmolu) a bromid uhličitý (v množství
13,93 gramu, což odpovídá 42 mmolům) v dimethylformamidu (v množství 85 mililitrů) při teplotě 0 ’C. Potom byla tato směs promíchána, což bylo prováděno po dobu 30 minut, a potom byl přidán k této reakční směsi nasycený roztok hydrogenuhličitanu sodného (v množství 50 mililitrů) ve vodě (v množství 50 mililitrů). Takto získaná reakční směs byla potom rozdělena mezi hexan a vodu. Tímto způsobem vznikla organická vrstva, která byla promyta vodou a potom solankou, a potom byl tento podíl usušen za pomoci síranu hořečnatého MgSO4, přičemž v další fázi byl tento roztok zkoncentrován za vzniku žluté kapaliny. Tento materiál byl potom podroben chromatografickému zpracováváni v koloně naplněné silikagelem (rozměry kolony 5 x 20 centimetrů), přičemž jako mobilní fáze bylo použito hexanu. Potom byly čisté frakce shromážděny a zkoncentrovány, přičemž tímto způsobem bylo získáno 4,32 gramu (2-brommethyl)benzofuranu ve formě bílé krystalické pevné látky.
-83CZ 281165 B6
c) Postup přípravy 2,2-dioxidu [3aS-[3a,6a,73]-l-[[[bis(methylthio)methylen]amino]acetyl]hexahydro-3H-3a,6-methano-2,1-benzisothiazolu.
Při provádění postupu podle tohoto provedení byl sulfid uhličitý (v množství 6,3 mililitrů, což odpovídá 105 mmolu) přidán ke směsi obsahující hydrochlorid glycinmethylesteru (v množství 12,5 gramu, což odpovídá 100 mmolu) v chloroformu (v množství 100 mililitrů) při teplotě místnosti. Potom byl k této reakční směsi přidán triethylamin (v množství 14,6 mililitru, což odpovídá 105 mmolu) a reakční teplota byla zvýšena z 22 °C na 37 *C. Potom byla tato reakční směs promíchávána po dobu jedné hodiny, přičemž po tomto promíchávání byl přidán methyljodid (v množství 6,8 mililitru, což odpovídá 110 mmolu), přičemž tento přídavek byl proveden opatrným způsobem po kapkách, a v další fázi byla tato reakční směs podrobena zahřívání při teplotě varu rozpouštědla po dobu jedné hodiny (refluxování pod zpětným chladičem) . Takto získaná reakční směs byla potom ochlazena na teplotu místnosti, přičemž potom byla promyta vodou (ve formě dvou podílů po 50 mililitrech) a roztok byl odpařen. Takto získaný zbytek byl potom vložen do ethyletheru (v množství 60 mililitrů) a potom byl tento zbytek promyt vodou (ve formě dvou podílů po 20 mililitrech). Potom byla takto získaná látka usušena pomocí síranu sodného a potom byla zkoncentrována, přičemž tímto způsobem bylo získáno 9 gramů meziproduktu, to znamená glycinátu monomethylbisthiomethylenu, ve formě oleje.
V dalším postupu byla směs tohoto oleje, rozmělněného uhličitanu draselného (v množství 10,3 gramu, což odpovídá 75 mmolu) a methyljodidu (v množství 3,4 mililitru, což odpovídá 55 mmolu) v acetonu (v množství 30 mililitrů) zahřívána pod zpětným chladičem při teplotě varu a pod atmosférou argonu po dobu 2 hodin. Potom byl přidán další podíl methyljodidu (v množství 0,5 mililitru, což odpovídá 8,1 mmolu) a takto získaná reakční směs byla potom zahřívána pod zpětným chladičem při teplotě varu po dobu další jedné hodiny. Po ochlazení byla tato reakční směs zfiltrována a takto získaný filtrační koláč byl potom promyt acetonem. Tímto způsobem získaný filtrát byl potom zkoncentrován a získaný zbytek byl potom rozpuštěn v ethyleteru (v množství 30 mililitrů). Takto získaný roztok byl potom promyt vodou (ve formě dvou podílů po 10 mililitrech), potom byl roztok sušen pomocí síranu sodného a nakonec bylo provedeno zkoncentrování tohoto roztoku, přičemž bylo získáno 9,12 gramu methylesteru N-[bis(methylthio)methylen]glycinátu ve formě žlutého oleje.
Dále byl roztok trimethylaluminia (v množství 11,95 mililitru, což odpovídá 23,9 mmolu, ve formě 2M roztoku v toluenu) přidán po kapkách během intervalu 30 minut k roztoku obsahujícímu D-2,10-kafrsultam v toluenu (v množství 120 mililitrů) při teplotě místnosti. Potom byla tato reakční směs promíchávána po dobu 15 minut, přičemž potom byl k této reakční směsi přidán methylester N-[bis/methylthio)methylenjglycinát (v množství 4,2 gramu, což odpovídá 19,8 mmolu) ve formě roztoku v toluenu (v množství 80 mililitrů), přičemž tento přídavek byl proveden opatrným způsobem po kapkách po dobu 30 minut. Takto získaná reakční směs byla potom zahřívána při teplotě 50 ’C po dobu 24 hodin. Po ochlazeni na teplotu místnosti bylo přidáno 7 mililitrů vody, což bylo provedeno s nejvyšší opatrností. Po dokončení přídavku této vody
-84CZ 281165 B6 byl přidán k této reakční směsi síran hořečnatý. Potom byla tato reakční směs míchána po dobu 15 minut, přičemž takto získaná suspenze byla zfiltrována přes celit a získaný filtrát byl potom zkoncentrován na olej oranžové barvy. Takto získaný zbytek byl potom rekrystalován z absolutního ethanolu, přičemž tímto způsobem bylo získáno 5,86 gramu požadovaného produktu C, který je uveden v záhlaví tohoto provedení, ve formě bezbarvých krystalků.
Teplota tání: 106 až 108 ’C.
d) Postup přípravy 2,2-dioxidu [3aS-[3aa,6a,7p]-l-[3-(2-benzofuranyl-2-[[bis(methylthio)methylen]amino]-1-oxopropyl]hexahydro-3H-3a,6-methano-2,1-benzisothiazolu.
Při provádění postupu podle tohoto provedení byl roztok obsahující produkt C, to znamená sloučeninu připravenou podle shora uvedeného provedení c) (v množství 0,94 gramu, což odpovídá
2,5 mmolů) v suchém tetrahydrofuranu (v množství 3,75 mililitru), přidáván do roztoku n-butyllithia (v množství 0,92 mililitru, což odpovídá 2,3 mmolů, ve formě 2,5 M roztoku v hexanu) v suchém tetrahydrofuranu (v množství 6,25 mililitru) při teplotě -78 ’C, přičemž toto přidávání bylo prováděno po dobu 10 minut. Takto získaná reakční směs byla potom promíchávána po dobu jedné hodiny při teplotě -78 ’C, přičemž po tomto časovém intervalu byl do této reakční směsi přidán 2-(brommethyl)benzofuran, přičemž toto přidávání bylo prováděno po kapkách během intervalu 10 minut a přidávaná shora uvedená látka byla ve formě roztoku v suchém tetrahydrofuanu (v množství 1,25 mililitru) a v triamidu hexamethylfosforečné kyseliny (v množství 1,25 mililitru). K takto získané reakční směsi byl potom přidán tetrabutylamoniumjodid (v množství 50 miligramů) a tato reakční směs byla potom promíchávána při teplotě pohybující se v rozmezí od -78 do -20 ’C po dobu 2 hodin. Potom byla k této reakční směsi přidána voda a tato směs byla extrahována ethylesterem kyseliny octové (v množství 150 mililitrů). Tímto způsobem byla získána organická vrstva, která byla promyta vodou (v množství 100 mililitrů) a solankou (v množství 100 mililitrů), přičemž potom byl tento roztok sušen (pomocí síranu hořečnatého MgSO4) a zkoncentrován, čímž se získal olejovitý zbytek, který byl potom podroben krystalizaci z asi 4 mililitrů absolutního ethanolu. Tímto způsobem byly získány bezbarvé krystalky, které byly zfiltrovány a promyty ethanolem (v množství 10 mililitrů), který byl ochlazen na -20 ’C. Takto získané krystalky byly potom sušeny za použiti vysokého vakua, přičemž bylo získáno 1,08 gramu požadovaného produktu D uvedeného v záhlaví tohoto provedení, ve formě bezbarvé krystalické pevné látky.
Teplota tání: 145 až 148 ’C; chromatografie v tenké vrstvě Rf = 0,18 (methylenchlorid);
[a]D = -86,5’ (c = 0,40, chloroform).
-85CZ 281165 B6
e) Postup přípravy 2,2-dioxidu [3aS-[3aa,6a,7p]]-l-[2-amino-3-(2-benzofuranyl)-1-oxopropyl]hexahydro-3H-3a,6-methano-2,1-benzisothiazidu.
Při provádění postupu podle tohoto provedení byla směs obsahující produkt D, to znamená sloučeninu připravenou postupem podle shora uvedeného provedení d) (v množství 1,05 gramu, což odpovídá 2,07 mmolu), dále 0,5 N roztok kyseliny chlorovodíkové (v množství 11 mililitrů, což odpovídá 5,6 mmolu) a tetrahydrofuranu (v množství 11 mililitrů), promíchávána při teplotě 40 °C po dobu 18 hodin. Potom byla takto získaná reakční směs upravena přídavkem 6 N roztoku hydroxidu sodného na zásaditou směs, která měla pH 12, a potom byla tato reakční směs podrobena extrahování ethylesterem kyseliny octové. Tímto způsobem byla získána organická vrstva, která byla promyta solankou, potom byla sušena síranem sodným a potom byl tento roztok zkoncentrován, přičemž byl získá olejový zbytek. Tento olejový zbytek byl potom rozpuštěn v asi 2,5 mililitru ethylesteru kyseliny octové a hexanu, přičemž tento hexan byl přidáván tak dlouho, dokud se v roztoku neobjevil mírný zákal. Potom byly do tohoto roztoku přidány očkovací krystaly a potom byla získaná pevná látka odfiltrována a sušena za použití vysokého vakua, přičemž tímto shora uvedeným postupem bylo získáno 0,71 gramu požadované sloučeniny E, která je uvedena v záhlaví tohoto přikladu, ve formě bezbarvé krystalické pevné látky.
Teplota tání: 123 až 125 “C;
[a]D = -52,8’ (c = 0,29, chloroform);
chromatografie v tenké vrstvě Rf = 0,16 (ethylester kyseliny octové, hexan v poměru 1 : 1).
f) Postup přípravy hydrochloridu (S)-a-amino-2-benzofuranpropanové kyseliny.
Při provádění postupu podle tohoto provedení byl monohydrát hydroxidu lithného (v množství 336 miligramů, což odpovídá 8 mmolům) přidán ve formě roztoku ve vodě (v množství 10 mililitrů) k roztoku produktu E, to znamená sloučenině připravené podle shora uvedeného provedení e) v tetrahydrofuranu (v množství 20 mililitrů) při teplotě místnosti. Potom byla tato dvoufázová reakční směs promíchávána po dobu jedno hodiny, přičemž po tomto intervalu byla přidána voda (v množství 30 mililitrů) a tato reakční směs byla potom extrahována methylenchloridem (ve formě dvou podílů po 25 mililitrech). Potom byla vodná vrstva okyselena na hodnotu pH 1,5 za pomoci 1 N roztoku kyseliny chlorovodíkové a použité rozpouštědlo bylo potom odstraněno za použití vakua, přičemž byla získána bílá pevná látka. Tato bílá pevná látka byla potom smísena s vodou za vytvoření suspenze, která byla potom zpracována v koloně HP-20, přičemž jako elučního činidla bylo použito vody (v množství 500 mililitrů), směsi vody a methanolu v poměru 1 : 1 (v množství 500 mililitrů) a směsi vody a methanolu v poměru 2 : 3 (v množství 250 mililitrů). Potom byly frakce obsahující produkt spojeny, potom byly znovu okyseleny na hodnotu pH 1,5 za pomoci 1 N roztoku kyseliny chlorovodíkové a potom byl tento podíl zkoncentrován, přičemž bylo získáno 465 miligramů požadovaného produktu F, který je uveden v záhlaví tohoto příkladu,
-86CZ 281165 B6 ve formě bílého prášku.
Teplota tání: 190 ’C (za ztmavnutí),
225 až 230 ’C (za rozkladu); chromatografie v tenké vrstvě = 0,36 (butanol, kyselina octová, voda, ethylester kyseliny octové v poměru 1:1:1:2), [a]D = -(9,5 ’ (c = 0,55, methanol).
g) Postup přípravy (S,R)-a-[[3,3,3-trifluor-2-[(acetylthio)methyl]-1-oxopropyl]amino]-2-benzofuranpropanové kyseliny.
Při provádění postupu podle tohoto provedení byl produkt získaný postupem podle přikladu 54(a), to znamená uvedená efedrinová sůl (v množství 393 miligramů, což odpovídá 1,03 mmolu), rozdělen mezi ethylester (v množství 100 mililitrů) a zředěný roztok kyseliny chlorovodíkové (v množství 1,03 mililitru 1 N kyseliny chlorovodíkové ve 100 mililitrech vody). Takto získaná eterová vrstva byla potom promyta vodou (ve formě dvou podílů po 100 mililitrech), potom byla tato látka sušena (pomocí síranu hořečnatého MgSO4) a nakonec byla zkoncentrována. Takto získaný zbytek byl potom odpařován z methylenchloridu (dva podíly po 20 mililitrech). Tímto způsobem byla získána volná kyselina, která byla rozpuštěna v methylenchloridu (v množství 3. mililitry) a oxalylchloridu (v množství 0,09 mililitru, což odpovídá 1,03 mmolu). K takto získané reakční směsi byl potom přidán dimethylformamid (v množství 0,009 mililitru, což odpovídá 0,01 mmolu) a takto získaná směs byla potom promíchávána při teplotě místnosti po dobu 2 hodin. Současně byl bis(trimethylsilyl)trifluoracetamid přidán k suspenzi produktu F, to znamená produktu získanému postupem podle shora uvedeného provedení f), v acetonitrilu. Takto získaná reakční směs byla potom promíchávána po dobu 2,5 hodiny, přičemž vzniklá suspenze přešla na světle žlutý roztok. Tento roztok byl potom ochlazen na teplotu 0 C a potom byl do tohoto roztoku přidán roztok shora uvedeného chloridu kyseliny ve formě jednorázového přídavku. Potom byla tato směs ohřátá na teplotu místnosti a dále byla tato směs promíchávána po dobu 18 hodin. Takto vzniklá reakční směs byla potom rozdělena mezi ethylester kyseliny octové (v množství 75 mililitrů) a IN roztok kyseliny chlorovodíkové (v množství 75 mililitrů) a 1N roztok kyseliny chlorovodíkové (v množství 75 mililitrů). Takto získaná vodná vrstva byla potom extrahována dalším podílem ethylesteru kyseliny octové (v množství 25 mililitrů) a spojené organické vrstvy byly potom promyty IN roztokem kyseliny chlorovodíkové (v množství 50 mililitrů), přičemž potom následovalo promytí solankou (v množství 25 mililitrů). Získaná organická vrstva byla potom usušena (pomocí síranu hořečnatého MgSO4), potom byla zkoncentrována a potom byla podrobena současnému odpařování z toluenu (dva podíly po 10 mililitrech). Získaný zbytek byl potom podroben chromatograf ickému přečištění v koloně o rozměrech 2,5 x 20 centimetrů, která byla naplněna silikagelem, přičemž jako elučniho činidla (čili mobilní fáze) bylo použito systému hexan : ethylester kyseliny octové : kyselina octová v poměru 60 : 40 : 2. Takto získané čisté frakce byly potom zkoncentrovány a získaný zbytek byl potom
-87CZ 281165 B6 podroben současnému odpařování s heptanem, přičemž tímto způsobem bylo získáno 259 miligramů bílé pevné látky, která byla potom rekrystalována ze směsi ethylesteru kyseliny octové a hexanu, přičemž podle tohoto provedení bylo získáno 224 miligramů požadovaného (S,R)-produktu, který je uveden v záhlaví tohoto příkladu, to znamená produktu G.
Teplota tání: 147 až 149 ’C; chromatografie v tenké vrstvě Rf = 0,26 (ethylester kyseliny octové : hexan : kyseliny octová v poměru 60:40:2),
h) Postup přípravy (S,R)-a-[[3,3,3-trifluor-2-(merkaptomethyl)-1-oxopropyl]amino]-2-benzofuranpropanové kyseliny.
Při provádění postupu podle tohoto provedení byl koncentrovaný hydroxid amonný (v množství 1 mililitr) přidán k suspenzi obsahující produkt G, to znamená látku připravenou podle shora uvedeného provedení g) (v množství 200 miligramů, což odpovídá 0,5 mmolu) ve vodě (v množství 4 mililitry). Rozpuštění této látky nastalo během jedné minuty a takto získaná reakční směs byla potom promíchána po celkovou dobu 2 minuty. Po tomto intervalu byla hodnota pH této směsi upravena na 1,5 pomoci nasyceného roztoku hydrogensíranu draselného, přičemž takto získaná reakční směs byla potom extrahována ethylesterem kyseliny octové (ve formě dvou podílů po 30 mililitrech). Tímto způsobem byly získány organické vrstvy, které byly spojeny a promyty solankou (v množství 30 mililitrů), potom byl tento podíl sušen (za pomoci síranu hořečnatého MgSO4) a potom byl zkoncentrován, čímž byla získána žlutohnědá pevná látka, která byla podrobena chromatografickému zpracování v koloně o rozměrech 2,5 x 15 centimetrů, která byla naplněna silikagelem, přičemž jako mobilní fáze bylo použito směsi hexanu, ethylesteru kyseliny octové a kyseliny octové v poměru 60 : 40 : 1: Získané čisté frakce byly potom zkoncentrovány a podrobeny současnému odpařováni z heptanu, přičemž byla získána bílá pevná látka, která byla potom podrobena trituraci za pomoci pentanu, a tímto způsobem bylo připraveno 161 miligramu požadovaného (S,R)-produktu, který je uveden v záhlaví tohoto příkladu ve formě bílé pevné látky.
Teplota tání: 143 až 145 °C; chromatografie v tenké vrstvě Rf = 0,31 (ethylester kyseliny octové: hexan: kyselina octová v poměru 60:40:2);
[a]D = -2,4 ’ (c = 0,45, methanol);
Analýza pro C15H14F3NO4S:
vypočteno C = 49,86, H = 3,91, N = 3,88, F = 15,77, S = 8,87,
SH = 9,15, nalezeno C = 49,82, H = 4,12, N = 4,22, F = 15,90, S = 8,64,
SH = 9,68.
-88CZ 281165 B6
Příklad 58
Postup přípravy (S,S)-a-[[3,3,3-trifluor-2-(merkaptomethyl)-l-oxopropyl]amino]-2-benzofuranpropanové kyseliny.
a) Postup přípravy (S,S)-a-[[3,3,3-trifluor-2-[(acetylthio)methyl]-l-oxopropyl]amino-2-benzofuranpropanové kyseliny.
Při provádění postupu podle tohoto provedení byla efedrinová sůl, to znamená produkt připravený postupem podle příkladu 53 (b) (v množství 425 miligramů, což odpovídá 1,22 mmolu) rozdělena mezi ethyleter (v množství 100 mililitrů) a zředěný roztok kyseliny chlorovodíkové (v množství 1,22 mililitru 1 N roztoku kyseliny chlorovodíkové ve 100 mililitrech vody). Takto vzniklá eterová vrstva byla potom promyta vodou (ve formě dvou podílů po 100 mililitrech), potom byl tento podíl sušen (za pomoci síranu hořečnatého MgSO4) a potom zkoncentrován. Takto získaný zbytek byl potom podroben současnému odpařování s methylenchloridem (ve formě dvou podílů po 20 mililitrech). Volná kyselina se rozpustila v methylenchloridu (v množství 3 mililitry) a potom byl přidán oxalylchlorid (množství 0,107 mililitru, což odpovídá 1,22 mmolu). K této reakční směsi byl potom přidán dimethylformamid (v množství 0,011 mililitru, což odpovídá 0,012 mmolu) a tato směs byla potom promíchávána při teplotě místnosti po dobu 2 hodin. Současně byl bis(trimethylsilyl)trifluoracetamid (v množství 0,75 mililitru, což odpovídá 2,8 mmolu) přidán k suspenzi produktu, který byl získán postupem podle příkladu 57 (f) v acetonitrilu. Tato reakční směs byla potom promíchávána po dobu 2,5 hodiny, přičemž tato suspenze se změnila na světle žlutý roztok. Potom byl tento roztok ochlazen na teplotu 0 °C a k tomuto roztoku byl potom přidán shora uvedený roztok chloridu kyseliny ve formě jednorázového přídavku. Potom byla tato směs promíchávána po dobu 18 hodin. Tato reakční směs byla potom rozdělena mezi ethylester kyseliny octové (v množství 75 mililitrů) a 1 N roztok kyseliny chlorovodíkové (v množství 75 mililitrů). Takto získaná ethylacetátová vrstva byla potom promyta 1 N roztokem kyseliny chlorovodíkové (v množství 75 mililitrů), potom vodou (v množství 75 mililitrů) a potom solankou (v množství 75 mililitrů). Takto získaná organická vrstva byla potom sušena síranem hořečnatým MgSO4, potom byla zkoncentrována a potom byla podrobena současnému odpařováni z toluenu (ve formě dvou podílů po 10 mililitrech). Takto získaný zbytek byl potom podroben chromatografickému zpracování v koloně o rozměrech 2,5 x 20 centimetrů, která byla naplněna silikagelem, přičemž jako mobilní fáze bylo použito 1 litru směsi hexan : ethylester kyseliny octové: kyselina octová (v poměru 70 : 30 :
2) a 1 litru směsi hexan : ethylester kyseliny octové : kyselina octová (v poměru 60 : 40 : 2). Takto získané čisté frakce byly potom zkoncentrovány a získaný zbytek byl potom podroben současnému odpařování z heptanu, přičemž tímto způsobem bylo získáno 270 miligramů žlutohnědé pevné látky, která byla potom rekrystalována ze směsi ethylesteru kyseliny octové a hexanu. Vzniklý produkt byl potom odfiltrován a promyt heptanem, přičemž tímto postupem bylo získáno 203 miligramů požadovaného (S,S)-produktu, to znamená sloučeniny A uvedené v záhlaví tohoto příkladu, ve formě bílé pevné látky.
-89CZ 281165 B6
Teplota tání: 139 až 140 ’C; chromatografie v tenké vrstvě Rf = 0,10 (ethylester kyseliny octové: hexan: kyselina octová v poměru 50:50:2).
b) Postup přípravy (S,S)-a-[[3,3,3-trifluor-2-(metkaptomethyl-l-oxopropyl]amino]-2-benzofuranpropanové kyseliny.
Při provádění postupu podle tohoto provedení byl koncentrovaný hydroxid amonný (v množství 0,9 mililitru) přidán k suspenzi obsahující produkt A, to znamená látku připravenou postupem podle shora uvedeného provedení a) (v množství 180 miligramů, což odpovídá 0,45 mmolu) ve vodě (v množství 3,6 mililitru). Rozpuštění nastala během jedné minuty, přičemž takto získaná reakční směs byla potom ponechána míchat po celkem 2 minuty. Po tomto časovém intervalu byla hodnota pH upravena na asi 1,5 pomocí nasyceného roztoku hydrogensíranu draselného a takto získaná reakční směs byla potom extrahována ethylesterem kyseliny octové (v množství 50 mililitrů). Takto získaná organická vrstva byla potom promyta solankou (v množství 50 mililitrů), potom byla sušena síranem hořečnatým (MgSO4) a nakonec byl tento podíl zkoncentrován. Tímto způsobem byl získán zbytek, který byl spojen se zbytkem z jiného postupu (18 miligramů) a tento spojený podíl byl potom zpracováván chromatografickým způsobem v koloně o rozměrech 2,5 x 15 centimetrů, která byla naplněna silikagelem, přičemž jako mobilní fáze bylo použito směsi hexanu, ethylesteru kyseliny octové a kyseliny octové v poměru 60 : 40 : 1. Potom byly odděleny čisté frakce, které byly spojeny a zkoncentrovány a potom byl tento podíl podroben současnému odpařování s heptanem za vzniku bílé pevné látky, která byla potom triturována za použití pentanu a tímto způsobem bylo získáno 146 miligramů (S,S)-produktu, to znamená požadovaného produktu, který je uveden v záhlaví tohoto provedení, ve formě bílé pevné látky.
Teplota tání: 141 až 142 ’C; chromatografie v tenké vrstvě Rf = 0,30 (ethylester kyseliny octové: hexan: kyselina octová v poměru 60:40:2) ;
[a]D = +45,7’ (c = 0,37, methanol);
Analýza pro C15H14F3NO4S:
vypočteno C = 49,86, H = 3,91, N = 3,88, F = 15,77, S = 8,87,
SH = 9,15 nalezeno C = 49,80, H = 3,90, N = 3,88, F = 15,99, S = 8,96,
SH = 9,24.
-90CZ 281165 B6
Příklad 59
Postup přípravy (S)-l-[N-[3,3,3-trifluor-2-(merkaptomethyl)-1-oxopropyl]-L-alanyl]-L-prolinu.
a) Postup přípravy (S)-l-[N-[3,3,3-trifluor-2-[(acetylthio)-methyl]-1-oxopropyl]-L-analyl]-L-prolinu.
Při provádění postupu podle tohoto provedení byla efedrinová sůl, to znamená produkt připravený postupem podle přikladu 53 (b) (v množství 1,64 gramu, což odpovídá 4,3 mmolu) rozdělena mezi ethylester kyseliny octové a vodný roztok kyseliny chlorovodíkové (v množství 6 mmolů). Tímto způsobem byla získána organická vrstva, která byla promyta vodou a solankou, potom byla sušena (za pomoci síranu hořečnatého) a potom byl tento roztok zkoncentrován za použití vakua, přičemž tímto postupem bylo získáno 0,94 gramu volné kyseliny. Tato látka byla potom rozpuštěna v methylenchloridu (v množství 10 mililitrů) při teplotě místnosti a tento roztok byl potom zpracován oxalylchloridem (v množství 400 μΐ, což je 573 miligramů, a 4,51 mmolu) a dále byla přidána jedna kapka dimethylformamidu. Po 1,5 hodině byl do tohoto roztoku přidán roztok obsahující L-alanyl-L-prolin a bis(trimethylsilyl)trifluoracetamid v acetonitrilu [tato látka byla připravena z tosylátu L-alanyl-L-prolinu (v množství 1,54 gramu, což odpovídá 4,3 mmolu), diisopropylethylaminu (v množství 0,75 mililitru, 554 miligramu, což odpovídá 4,3 mmolu) a bis(trimethylsilyl)triluoracetamidu (v množství 2,3 mililitru, což je 2,21 gramu, což odpovídá 8,6 mmolu) v 15 mililitrech acetonitrilu, přičemž tato reakční směs byla promíchávána po dobu dvou hodin při teplotě 0 ’C, potom byla teplota ponechána stoupnout na teplotu místnosti, čímž byl získán homogenní roztok], a tato reakční směs byla potom ponechána míchat po dobu přes noc. Potom byly těkavé látky odstraněny za použití vakua a takto vznikl zbytek, který byl potom rozpuštěn v ethylesteru kyseliny octové, potom byl tento roztok promyt hydrogensÍránem sodným o koncentraci 10 % hmot., vodou a solankou. Organická frakce byla potom sušena (za pomoci síranu hořečnatého MgSO4) a zkoncentrována za použití vakua, přičemž vznikla olejovitá látka. Tato látka byla potom podrobena mžikové chromátografické metodě na 250 mililitrech silikagelu, přičemž jako elučního činidla bylo použito ethylesteru kyseliny octové, hexanu, methanolu a kyseliny octové v poměru 10 : 6 : 2 : 0,2.
Tímto postupem bylo získáno 1,2 gramu požadovaného produktu A, to znamená látky uvedené v záhlaví tohoto provedení, ve formě pěny.
Chromátografie v tenké vrstvě = 0,29 (ethylester kyseliny octové: hexan: methanol: kyselina octová v poměru 10 : 4 : 2 : 0,2).
b) Postup přípravy (S)-1-[N-[3,3,3-trifluor-2-(merkaptomethyl)-1-oxopropyl]-1-oxopropyl]-L-alanyl]-L-prolinu.
Při provádění postupu podle tohoto provedení byl produkt A, to znamená sloučenina připravená podle shora uvedeného provedení a) (v množství 1,2 gramu, což odpovídá 3,12 mmolu) pod atmosférou argonu a při teplotě 0 ’C zpracovávána hydroxidem amonným (v množství 7 mililitrů ve formě 5 M roztok, který byl připraven
-91CZ 281165 B6 zředěním koncentrovaného hydroxidu amonného s odkysličenou vodou). Po 10 minutách byla takto získaná reakční směs rychle ochlazena přídavkem hydrogensÍránem draselného o koncentraci 10 % hmot, (v množství 50 mililitrů). Takto získaná reakční směs byla extrahována ethylesterem kyseliny octové a vzniklá organická frakce byla potom promyta vodou a potom solankou, přičemž potom byl tento podíl usušen (za pomoci síranu hořečnatého MgSO4) a potom zkoncentrován za použití vakua, přičemž tímto postupem byl získán 1,0 gram pevné látky. Tato látka byla potom zpracovávána metodou mžikové chromatografie na silikagelu (v množství 200 mililitrů), čímž jako elučního činidla bylo v tomto provedení použito směsi ethylesteru kyseliny octové, hexanu, methanolu a kyseliny octové v poměru 10 : 6 : 2 : 0,2, čímž byl získán produkt ve formě pěny. Tento produkt byl potom podroben triturování za pomoci hexanu. (který obsahoval několik kapek ethylesteru kyseliny octové), přičemž podle tohoto postupu bylo získáno 750 miligramů požadovaného (S)-isomerního produktu uvedeného v záhlaví tohoto provedení.
Teplota táni: 100 až 110 ’C; chromatografie v tenké vrstvě Rf = 0,37 (ethylester kyseliny octové, hexan, methanol, kyselina octová v poměru 10 : 6 : 2 : 0,2);
[a]D = -65,8’ (c = 0,8, methanol);
Analýza pro ci2Hi7F3N2°4s* °/25 H20: vypočteno C = 41,53, H = 5,09, N = 8,08, F = 16,42, S = 9,24,
SH = 9,53, nalezeno C = 41,75, H = 4,87, N = 7,85, F = 16,41, S = 9,24,
SH = 11,92.
Příklad 60
Postup přípravy (R)-l-[N-[3,3,3-trifluor-2-(merkaptomethyl)-1-oxopropyl]-L-alanyl]-L-prolinu.
a) Postup přípravy (R)-l-[N-[3,3,3-trifluor-2-[(acetylthio)methyl]-1-oxopropyl]-L-alanyl]-L-prolinu.
Při provádění postupu podle tohoto provedení byla efedrinová sůl, to znamená produkt připravený postupem podle příkladu 54 (a) (v množství 1,66 gramu, což odpovídá 4,53 mmolu) převedena na volnou kyselinu a potom na chlorid kyseliny, přičemž potom tato látka byla uvedena do reakce s roztokem obsahujícím L-alanyl-L-prolin a bis(trimethylsilyl)-trifluoracetamid v acetonitrilu, což bylo provedeno stejným způsobem jako je uvedeno v příkladu 59 (a), přičemž tímto způsobem bylo vyrobeno 1,2 gramu požadovaného produktu A, který je uveden v záhlaví tohoto příkladu, ve formě pěny.
Chromatografie v tenké vrstvě Rf = 0,37
-92CZ 281165 B6 (ethylester kyseliny octové, hexan, methanol, kyselina octová v poměru 12 : 6 : 2 : 0,2).
b) Postup přípravy (R)-l-[N-[3,3,3-trifluor-2-(merkaptomethyl)-l-oxopropyl]-L-alanyl]-L-pyrolinu.
Při provádění postupu podle tohoto příkladu byl produkt A, to znamená látka připravená podle shora uvedeného provedení (a) (v množství 1,25 gramu, což odpovídá 3,25 mmolu), zpracovávána hydroxidem amonným, což bylo prováděné stejným způsobem jako je uvedeno v postupu podle příkladu 59 (b), přičemž potom byl získaný produkt podroben zpracovávání chromatografickou metodou a v dalším byl tento produkt triturován za pomoci hexanu (který obsahoval několik procent hmot, ethylesteru kyseliny octové), čímž bylo získáno 740 miligramů požadovaného (R)-isomeru uvedeného v záhlaví tohoto příkladu.
Chromatografie v tenké vrstvě Rf = 0,37 (ethylester kyseliny octové, hexan, methanol, kyselina octová v poměru 12 : 6 : 2 : 0,2);
[a]D = -124,2’ (c = 1,1, methanol);
Analýza pro ci2H17F3N2°4S ' 0/25 H20:
vypočteno C = 41,53, H = 5,09, N = 8,07, F = 16,42, S = 9,25, SH = 9,53, nalezeno C = 41,75, H = 4,95, N = 8,01, F = 16,59, S = 9,36,
SH = 11,01.
Příklad 61
Postup přípravy (R,S)-a-[[3,3,3-trifluor-2-(merkaptomethyl)-1-oxopropyl]amino]-lH-indazol-3-propanové kyseliny.
a) Postup přípravy 3-methyl-lH-indazolu.
Při provádění postupu podle tohoto provedení byla kyselina chlorovodíková (v množství 23 mililitrů) přidána k čistému 2-aminoacetofenonu při teplotě -10 °C. Takto získaná hustá suspenze byla potom promíchávána rychlým způsobem, přičemž se ohřála na teplotu -5 ’C. Potom byl k této reakční směsi přidán dusitan sodný (v množství 5,8 gramu, což odpovídá 84 mmolu), přičemž tento přídavek byl učiněn pomalým způsobem po kapkách během intervalu 15 minut a tato látka byla ve formě roztoku ve 13 mililitrech vody, přičemž teplota byla udržována v rozmezí od -5 do 3 ’C. Takto získaná reakční směs byla potom promíchávána po dobu dalších 15 minut při teplotě 0 °C, přičemž během tohoto časového intervalu byl získán oranžový roztok. Potom byla takto získaná reakční směs nalita do roztoku siřičitanu sodného a hydrogensíranu sodného při teplotě 5 ’C [tento roztok byl připraven rozpuštěním siřičitanu sodného (v množství 21,12 gramu, což odpovídá 160 mmolům) v minimálním množství vody (v množství asi 75 mililitrů), přičemž potom byl přidán hydrogensíran sodný v takovém množství, že se již dále nerozpouštěl, přičemž potom bylo přidáno
-93CZ 281165 B6 malé množství vody za účelem rozpuštění veškerého zbývajícího podílu pevných látek]. Tímto způsobem byl získán žlutý roztok, který byl potom míchán po dobu 15 minut, přičemž po tomto časovém intervalu byla vysrážena pevná látka. Takto získaná suspenze byla potom ponechána stát při teplotě místnosti po dobu přes noc, přičemž během tohoto časového intervalu byla sraženina nahražena červeným olejem, který plaval na hladině vodné vrstvy. Tato celá směs byla potom převedena do zásaditého stavu za pomoci 1 N roztoku hydroxidu sodného a potom byla tato směs extrahována ethyleterem. Tímto způsobem byla získána organická vrstva, která byla promyta solankou, potom byla tato látka sušena (za pomoci síranu hořečnatého MgSO4), potom byla odbarvena a zkoncentrována na světle žlutou pevnou látku, která byla potom rekrystalována ze směsi ethyletheru a pentanu, a tímto způsobem bylo získáno 3,83 gramu požadovaného produktu A, který je uveden v záhlaví tohoto provedení, ve formě žlutohnědé krystalické pevné látky.
Teplota tání: 110 až 113 °C;
b) Postup přípravy fenylesteru 3-methyl-lH-indazol-l-sulfinové kyseliny.
Při provádění postupu podle tohoto provedení byl benzensulfonylchlorid (v množství 4,2 mililitru, což odpovídá 33 mmolům) přidán k suspenzi obsahující produkt A, to znamená sloučeninu připravenou podle shora uvedeného postupu (a) (v množství 3,5 gramu, což odpovídá 26,5 mmolu) a dále 26,5 mmolu hydroxidu draselného ve formě prášku (v množství 7,5 gramu, což odpovídá 133 mmolu) v dimethoxyethanu (v množství 110 mililitru) při teplotě 0 “C. Takto získaná reakční směs byla potom ohřátá na teplotu místnosti a potom byla promíchávána po dobu jedné hodiny. Po tomto časovém intervalu byla tato reakční směs nalita do toluenu (v množství 850 mililitrů) a takto vzniklá suspenze byla potom zfiltrována přes celit. Získaný filtrát byl potom promyt solankou, potom byl sušen síranem hořečnatým MgSO4 a potom byl tento podíl zkoncentrován až vznikla pevná látka, která byla potom rekrystalována ze směsi ethylesteru kyseliny octové a hexanu, přičemž tímto způsobem bylo získáno 5,6 gramu požadovaného produktu B, který je uveden v záhlaví tohoto příkladu, ve formě bezbarvé krystalické pevné látky.
Teplota tání: 141 až 143 “C.
c) Postup přípravy fenylesteru 3-(brommethyl)-lH-indazol-l-sulfinové kyseliny.
Při provádění postupu podle tohoto příkladu byla směs obsahující produkt B, to znamená sloučeninu připravenou podle shora uvedeného provedení (b) (v množství 3 gramy, což odpovídá 11 mmolům), dále N-bromsukcinimid (v množství 1,95 gramu, což odpovídá 11 mmolům) a benzoylperoxid (v množství 12 miligramů) v chloridu uhličitém (v množství 160 mililitrů), zahřívána pod zpětným chladičem při teplotě varu rozpouštědla po dobu 7 hodin. Potom byla tato reakční směs ochlazena na teplotu místnosti, tato reakční směs byla zfiltrována přes celit a získaný filtrát byl potom zkoncentrován, přičemž byla získána oranžová pevná látka. Tato pevná látka byla potom podrobena zpracovávání v chromatografické
-94CZ 281165 B6 koloně o rozměrech 5 x 20 centimetrů naplněné silikagelem, přičemž jako mobilní fáze bylo použito směsi hexanu a ethylesteru kyseliny octové v poměru 95 : 5. Všechny frakce obsahující produkt byly potom zkoncentrovány, čímž byla získána pevná látka, která byla potom podrobena rekrystalování ze směsi ethylesteru kyseliny octové a hexanu, čímž bylo získáno 2,46 gramu produktu C, což je požadovaná sloučenina uvedená v záhlaví tohoto příkladu, ve formě bezbarvé pevné krystalické látky.
d) Postup přípravy 2,2-dioxidu [3aS-[3aa,6a,7p]]—1—[2—[[bis- (methylthio)methylen]amino]-l-oxo-3-[1-(fenoxysulf inyl)-1H-indazol-3-yl]propyl]-3H-3a,6-methano-2,1-benzisothiazolu.
Při provádění postupu podle tohoto provedeni byl roztok obsahující 2,2-dioxid [3aS-[3a,6α,7β-1-[[bis(methylthio)methylen]amino]acetyl]hexahydro-3H-3a,6-methano-2,1-benzisothiazolu (v množství 1,13 gramu, což odpovídá 3 mmolům), to znamená produkt, který byl připraven postupem podle příkladu 57 (c), v tetrahydrofuranu (v množství 4,5 mililitru) přidáván po kapkách k roztoku n-butyllithia (v množství 1,13 mililitru 2,5 M roztoku v hexanech, což odpovídá 2,82 mmolu) v tetrahydrofuranu (v množství 7,5 mililitru) při teplotě -78 ’C. Takto získaná reakční směs byla potom promíchávána po dobu jedné hodiny při teplotě -78 °C, přičemž po tomto časovém intervalu přidán byl produkt C, to znamená sloučenina připravená podle shora uvedeného provedení (c) (v množství 1,29 gramu, což odpovídá 2,82 mmolu), přičemž tento přídavek byl proveden opatrným způsobem po kapkách ve formě roztoku v tetrahydrofuranu (v množství 1,5 mililitru) a potom byl k této reakční směsi přidán triamid hexamethylfosforečné kyseliny (v množství 1,5 mililitru). K této reakční směsi byl potom přidán tetrabutylamoniumjodid (získaný roztíráním) a potom byla takto získaná reakční směs promíchávána při teplotě v rozmezí od -78 ’C do 0 'C po dobu 2 hodin. Tato reakční směs byla potom rozdělena mezi vodu (v množství 250 mililitrů) a ethylester kyseliny octové (v množství 250 mililitrů). Takto získaná organická vrstva byla potom promyta vodou (ve formě dvou podílů po 100 mililitrech) a solankou (v množství 100 mililitrů), přičemž potom byl tento produkt sušen (za pomoci síranu hořečnatého MgSO4) a potom byl zkoncentrován. Takto získaný zbytek byl potom podroben zpracovávání chromatografickou metodou v koloně naplněné silikagelem o rozměrech 5 x 20 centimetrů, přičemž jako elučního činidla bylo použito 2 litrů směsi hexanu a ethylesteru kyseliny octové v poměru 8 : 2 a 2 litrů směsi hexanu a ethylesteru kyseliny octové v poměru 7:3. Takto získané čisté frakce byly spojeny, přičemž spojený podíl byl zkoncentrován a tímto způsobem bylo získáno
1,58 gramu požadovaného produktu D, to znamená látky uvedené v záhlaví tohoto příkladu, ve formě bezbarvé olejovité látky.
e) Postup přípravy 2,2-dioxidu [3aS-[3aa,6α,7β]]-l-[2-amino-l-oxo-3-[1-(fenoxysulfinyl)-lH-indazol-3-yl]propyl]-3H-3a,6-methano-2,1-benzisothiazolu.
Při provádění postupu podle tohoto provedení byla směs obsahující produkt D, to znamená látku připravenou podle shora uvedeného provedení (d) (v množství 1,53 gramu, což odpovídá 2,25 mmolu) v 0,5 N roztoku kyseliny chlorovodíkové (v množství 15 mililitrů) zahřívána při teplotě 50 °C po dobu 20 hodin. Po tomto ča-95CZ 281165 B6 sovém intervalu byla tato směs převedena do zásaditého stavu, přičemž hodnota pH byla upravena na 12 pomoci 1N roztoku hydroxidu sodného, která byla (v množství solankou, potom byla sušena (pomocí přičemž tímto způsobem byla získána bazická vrstva, potom extrahována ethylesterem kyseliny octové
100 mililitrů). Organická vrstva byla potom promyta síranu sodného Na2SO4) a potom byl tento roztok zkoncentrován, přičemž byla získána pevná látka, která byla rekrystalována ze směsi ethylesteru kyseliny octové a hexanu, čímž bylo získáno 1,19 gramu požadovaného produktu E, což je sloučenina uvedená v záhlaví tohoto příkladu, ve formě bezbarvé krystalické pevné látky.
Teplota tání: 187 až 188 ’C.
f) Postup přípravy hydrochloridu (S)-a-amino-lH-indazol-3-propanové kyseliny.
Při provádění postupu podle tohoto provedení byla směs obsahující produkt E, to znamená sloučeninu připravenou shora uvedeným postupem (e) (v množství 1,14 gramu, což odpovídá 2,1 mmolu), dále hydrát hydroxidu lithného (v množství 550 miligramů, což odpovídá 12,5 mmolu), vodu (v množství 12,5 mililitrů) a tetrahydrof uran, promíchávána po dobu 96 hodin při teplotě místnosti. Potom byl k této reakční směsi přidán druhý podíl hydroxidu lithného (v množství 100 miligramů, což odpovídá 2,5 mmolu) ve formě roztoku ve 3 mililitrech vody. Po dalších 18 hodinách byla takto získaná reakční směs zředěna vodou (v množství 50 mililitrů) a tato vodná směs byla potom extrahována methylenchloridem (ve formě dvou podílů po 30 mililitrech). Vodná vrstva byla potom okyselena na pH 1,5 za pomoci 1 N roztoku kyseliny chlorovodíkové a potom byl tento podíl extrahován ethylesterem kyseliny octové (v množství 50 mililitrů). Takto získaná vodná vrstva byla potom nalita do kolony HP-20 (o rozměrech 5 x 10 centimetrů), přičemž tato kolona byla potom eluována následujícím způsobem:
400 mililitrů vody,
200 mililitrů směsi vody a methanolu v poměru 9:1, 200 mililitrů směsi vody a methanolu v poměru 8:2, 200 mililitrů vody a methanolu v poměru 7:3, 200 mililitrů vody a methanolu v poměru 6:4, 200 mililitrů vody a methanolu v poměru 5:5.
Takto získané čisté frakce byly potom zkoncentrovány na objem přibližné 10 mililitrů a hodnota pH byla potom znovu upravena na
1,5 za pomoci 1 N roztoku kyseliny chlorovodíkové. Tento roztok byl potom zkoncentrován do sucha a potom byl podroben současnému odpařování z methanolu, ethylesteru kyseliny octové a hexanu. Tímto způsobem byla získána pevná látka, která byla potom promíchávána ve formě suspenze v ethylesteru kyseliny octové po dobu 24 hodin, přičemž po tomto intervalu byla tato suspenze zfiltrována a promyta hexanem. Po usušení bylo získáno 598 miligramů požadovaného produktu F, to znamená sloučeniny uvedené v záhlaví tohoto přikladu, ve formě amorfní pevné látky.
[a)D = +21,4’ (c = 0,44, methanol).
-96CZ 281165 B6
g) Postup přípravy (R,S)-a-[[3,3,3-trifluor-2-[(acetylthio)-methyl]-1-oxopropyl]amino]-l-indazol-3-propanové kyseliny.
Při provádění postupu podle tohoto provedení byla efedrinová sůl, to znamená produkt připravený postupem podle příkladu 54 (a) (v množství 265 miligramů, což odpovídá 0,76 mmolu), rozdělena mezi ethylether (v množství 60 mililitrů) a zředěnou kyselinu chlorovodíkovou (v množství 0,76 mililitrů 1 N roztoku kyseliny chlorovodíkové v 60 mililitrech vody). Takto získaná etherová vrstva byla potom promyta vodou (ve formě dvou podílů po 60 mililitrech), potom byla sušena (za pomoci síranu hořečnatého MgSO4) a nakonec byl tento podíl zkoncentrován. Takto získaný zbytek byl potom podroben současnému odpařování z methylenchloridu (ve formě dvou podílů po 10 mililitrech). Takto získaná volná kyselina byla potom rozpuštěna v methylenchloridu (v množství 2 mililitry) a v oxalylchloridu (v množství 0,066 mililitru, což odpovídá 0,76 mmolu). Potom byl k této reakční směsi přidán dimethylformamid (v množství 5 μ.1) a tato reakční směs byla potom promíchávána při teplotě místnosti po dobu 2 hodin. Současné byl prováděn postup, při kterém byl bis(trimethylsilyl)trifluoracetamid (v množství 0,64 mililitru, což odpovídá 2,27 mmolu) přidán k suspenzi obsahující produkt F, to znamená látku připravenou postupem podle shora uvedeného provedení (f) (v množství 150 miligramů, což odpovídá 0,54 mmolu) v acetonitrilu (v množství 2 mililitry). Potom byla tato reakční směs promíchávána po dobu
2,5 hodiny, přičemž potom se tato suspenze změnila na světle žlutý zakalený roztok. Tato směs byla potom ochlazena na teplotu 0 “Ca potom byl k této reakční směsi přidán roztok chloridu kyseliny, připravený shora uvedeným postupem, ve formě jednorázového přídavku. Takto získaná směs byla potom ponechána ohřát na teplotu 10 °C během intervalu 2 hodin. Potom byl k této reakční směsi přidán roztok 1N kyseliny chlorovodíkové (v množství 2 mililitry) a tato reakční směs byla potom rozdělena mezi ethylester kyseliny octové (v množství 75 mililitrů) a vodu (v množství 75 mililitrů). Takto získaná ethylacetátová vrstva byla potom promyta solankou (v množství 75 mililitrů). Získaná organická vrstva byla potom sušena (pomocí síranu hořečnatého MgSO4), potom byl tento podíl zkoncentrován a potom bylo prováděno současné odpařování z toluenu (ve formě tří podílů po 15 mililitrech). Takto získaný zbytek byl potom podroben chromatografickému zpracovávání v koloně naplněné silikagelem, přičemž kolona měla rozměry 2,5 x 20 centimetrů, a jako elučního činidla bylo použito 1 litru směsi ethylesteru kyseliny octové, heptanu a kyseliny octové v poměru 80 : 20 : 2 a 1 litru směsi ethylesteru kyseliny octové a kyseliny octové v poměru 98 : 2. Takto získané čisté frakce byly spojeny a zkoncentrovány, přičemž tímto způsobem bylo získáno 127 miligramů požadovaného (R,S)-isomeru, to znamená produktu G, který je uveden v záhlaví tohoto příkladu, ve formě bílé pevné látky.
Teplota tání: 198 až 204 °C (za rozkladu).
h) Postup přípravy (R,S)-a-[[3,3,3-trifluor-2-(merkaptomethyl)-1-oxopropyl]amino]-lH-indazol-3-propanové kyseliny.
Při provádění postupu podle tohoto provedení byl koncentrovaný hydroxid amonný (v množství 0,6 mililitru) přidán k suspenzi
-97CZ 281165 B6 obsahující (R,S)-isomer, to znamená produkt G připravený shora uvedeným způsobem podle provedení (g) (v množství 120 miligramů, což odpovídá 0,3 mmolu) v odkysličené vodě (v množství 2,4 mililitru) . Takto získaná výsledná suspenze byla potom promíchávána po dobu 2,5 minut, přičemž po tomto časovém intervalu byla tato reakční směs okyselena nasyceným roztokem hydrogensíranu draselného na pH pod 2. Takto získaná acidická vrstva byla potom extrahována ethylesterem kyseliny octové (v množství 50 mililitrů) a tato ethylacetátová vrstva byla potom promyta solankou. Organická vrstva byla potom sušena (pomocí síranu sodného Na2SO4), potom byla zkoncentrována a předem absorbována na celitu. Potom bylo provedeno chromatografické zpracovávání tohoto produktu v koloně naplněné silikagelem, přičemž tato kolona měla rozměry
2,5 x 10 centimetrů, přičemž jako mobilní fáze bylo použito směsi ethylesteru kyseliny octové, heptanu, kyseliny octové v poměru 75 : 25 : 2, a tímto provedením byl získán pevný zbytek, který byl potom podroben současnému odpařování prováděnému několikrát z heptanu. Tímto postupem bylo získáno 78 miligramů (R,S)-isomeru, což je požadovaný produkt uvedený v záhlaví tohoto příkladu, ve formě bílé amorfní pevné látky.
Teplota tání: 218 až 220 ’C; chromatografická analýza v tenké vrstvě Rf = 0,17 (ethylester kyseliny octové, hexan v poměru 8 : 2 s přídavkem % hmot, kyseliny octové);
[a]D = -15,0’ (c = 0,11, methanol);
Analýza pro C14H14F3N3O-jS . 0,2 H20:
vypočteno C = 47,09, H = 4,30, N = 11,21, F = 15,20,
S = 8,55, SH = 8,82, nalezeno C = 47,10, H = 4,02, N = 10,85, F = 15,39,
S = 8,20, SH = 10,11.
Příklad 62
Postup přípravy (S,S)-a-[[3,3,3-trifluor-2-(merkaptomethyl)-l-oxopropyl]amino]-lH-indazol-3-propanové kyseliny.
a) Postup přípravy (S,S)-a-[[3,3-trifluor-2-[(acetylthio)methyl]-1-oxopropyl]amino]-lH-indazol-3-propanové kyseliny.
Při prováděni postupu podle tohoto provedeni bylo postupováno stejným způsobem jako v příkladu 61 (g), přičemž bylo na rozdíl od tohoto shora uvedeného provedeni použito chloridu kyseliny, získaného z efedrinové soli jako produktu postupu podle příkladu 53 (b), a tímto způsobem byl získán požadovaný (S,S)-isomer, který je uveden v záhlaví tohoto provedení jako produkt A.
b) Postup přípravy (S,S)-a-[[3,3,3-trifluor-2-(merkaptomethyl)-1-oxopropyl]amino]-lH-indazol-3-propanové kyseliny.
-98CZ 281165 B6
Při provádění postupu podle tohoto provedení byl produkt A, připravený shora uvedeným způsobem podle provedení (a) zpracováván koncentrovaným hydroxidem amonným, přičemž bylo použito stejného postupu jako v příkladu 61 (h), a podle tohoto provedení byl získán požadovaný (S,S)-isomer uvedený v záhlaví tohoto příkladu.
Příklad 63
Postup přípravy (a S)-a-[[3,3,3-trifluor-2-(merkaptomethyl)-l-oxopropyl]amino]-lH-tetrazol-5-propanové kyseliny.
a) Postup přípravy (2S)-[[(fenylmethoxy)karbonyl]amino]-3-kyanopropanové kyseliny.
Při provádění postupu podle tohoto provedení byl bis(trimethylsilyl)trifluoracetamid (v množství 9,4 mililitru, což odpovídá 35 mmolům) přidán k suspenzi (a S)-amino-3-kyanopropanové (v množství 2,0 gramů, což odpovídá 17,5 mmolu) ve 10 mililitrech suchého acetonitrilu a takto získaná reakční směs byla potom promíchávána po dobu 3 hodin. Potom byl k této reakční směsi přidán benzylchlormravenčan (v množství 2,5 mililitru, což odpovídá
17,5 mmolu) a tato reakční směs byla potom promíchávána po dobu přes noc, potom byla zkoncentrována za použití vakua a potom byla takto získaná látka rozpuštěna v ethylesteru kyseliny octové (v množství 200 mililitrů). Takto získaný organický roztok byl potom promyt vodou (dvakrát) a potom solankou, přičemž potom byla tato látka sušena (pomocí síranu sodného Na2SO4) a zkoncentrována za použití vakua. Získaný podíl byl potom rekrystalován z isopropyletheru, přičemž tímto postupem bylo získáno 3,82 gramu požadovaného produktu A, který je uveden v záhlaví tohoto provedeni .
b) Postup přípravy 1,1-dimethylethylesteru kyseliny (2S)-[[(fenylmethoxy)karbonyl]amino]-3-kyanopropanové.
Při prováděni postupu podle tohoto provedeni byla k roztoku obsahujícímu produkt A, to znamená sloučeninu připravenou podle shora uvedeného provedení (a) (v množství 3,42 gramu, což odpovídá 13,8 mmolu) a t-butanol (v množství 5,2 gramu, což odpovídá 70 mmolům) v suchém methylenchloridu (v množství 20 mililitrů) přidána hydrochloridová sůl ethyl-3-(3-dimethylamino)propylkarbodiimidu (v množství 2,64 gramu, což odpovídá 13,8 mmolu) a dimethylaminopyridin (v množství 0,2 gramu). Takto získaná reakční směs byla potom zředěna methylenchloridem (v množství 100 mililitrů) a potom byla promyta 0,5 M roztokem kyseliny chlorovodíkové, potom nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a solankou, přičemž potom byla takto získaná látka sušena (za pomoci síranu sodného Na2SO4) a nakonec byla zkoncentrována za použiti vakua. Takto získaný surový produkt byl potom přečištěn zpracováním chromatografickou metodou v koloně naplněné silikagelem (v množství 100 gramů), přičemž jako elučního systému bylo použito ethylesteru kyseliny octové a hexanu v poměru 1 : 1. Vhodné frakce byly spojeny a tento podíl byl potom zkoncentrován, přičemž bylo získáno 2,3 gramu požadovaného produktu B, který je uveden v záhlaví tohoto provedeni.
-99CZ 281165 B6
c) Postup přípravy 1,1-dimethylesteru kyseliny (a S)-a-[[(fenylmethoxy)karbony1]amino]-lH-tetrazol-5-propanové kyseliny.
Při provádění postupu podle tohoto provedení byl produkt B, to znamená sloučenina připravená podle shora uvedeného provedení (b) (v množství 2,0 gramy, což odpovídá 6,57 mmolu) a tri-n-butylcínazid (v množství 2,7 gramu, což odpovídá 8,0 mmolům) zahříván při teplotě 135 °C v xylenu (v množství 30 mililitrů) po dobu přes noc. Takto získaná reakční směs byla potom zkoncentrována za použití vakua, potom byl tento produkt rozpuštěn v 50 mililitrech směsi methanolu, kyseliny octové a chloroformu v poměru 1:1:8a potom byla tato směs promíchávána s 20 gramy silikagelu po dobu přes noc. Takto získaná reakční směs byla zkoncentrována za použití vakua, potom byla umístěna nahoru do chromatograf ické kolony naplněné silikagelem (v množství 100 gramů) a potom bylo prováděno chromatografické přečištění za pomoci rozpouštédlového systému methanol : kyselina octová : chloroform v poměru 3 : 3 : 96. Vhodné frakce byly potom spojeny a tento podíl byl zkoncentrován, čímž bylo získáno 1,45 gramu požadovaného produktu C uvedeného v záhlaví tohoto provedení.
d) Postup přípravy 1,1-dimethylethylesteru (a S)-a-amino-lH-tetrazol-5-propanové kyseliny.
Při provádění postupu podle tohoto provedení byla sloučenina C, což je produkt připravený postupem podle shora uvedeného provedení (c) v methanolu (v množství 40 mililitrů) hydrogenována po dobu přes noc za použití 0,1 gramu 20 % hydroxidu paladia na uhlíku jako kátalyzátoru. Tato reakční směs byla potom zfiltrována přes celit a lože celitu bylo potom řádně propláchnuto směsí methanolu a vody. Takto získaný filtrát byl potom zkoncentrován za použití vakua, přičemž bylo získáno 0,79 gramu produktu D, což je sloučenina uvedená v záhlaví tohoto provedení.
e) Postup přípravy 1,1-dimethylethylesteru kyseliny (a S)-a-[[3,3,3-trifluor-2-[(acetylthio)methyl]-1-oxopropyl]amino]-1H-tetrazol-5-propanové.
Při provádění tohoto postupu byl produkt D, to znamená sloučenina připravená podle shora uvedeného provedení (d) (v množství 0,78 gramu, což odpovídá 3,67 mmolu) suspendována v suchém acetonitrilu (v množství 8 mililitrů). Potom byl k této reakční směsi přidán bis(trimethylsilyl)trifluoracetamid (v množství 1,87 gramu, což odpovídá 7,34 mmolu) při teplotě 5 “C a takto vzniklá reakční směs byla potom promíchávána po dobu jedné hodiny, přičemž po tomto časovém intervalu byl získán čirý roztok. Potom byl k této reakční směsi přidán chlorid kyseliny 2-trifluormethyl-3-acetylthiopropionové (v množství 0,86 gramu, což odpovídá 3,67 mmolu), což bylo provedeno při teplotě 0 “Ca reakční směs byla promíchávána po dobu 2 hodin, potom byla zředěna ethylesterem kyseliny octové (v množství 150 mililitrů) a získaný výsledný roztok byl potom promyt vodou (dva podíly) a solankou. Potom byl tento produkt sušen (za pomoci síranu sodného Na2SO4) a potom byl zkoncentrován za použití vakua. Krystalizací z isopropyletheru bylo získáno 0,95 gramu požadovaného produktu E, což je sloučenina uvedená v záhlaví tohoto provedení ve formě směsi isomerú v poměru 1 : 1.
-100CZ 281165 B6
Teplota tání: 150 až 158 ’C.
f) Postup přípravy (a,S)-a-[[3,3,3-trifluor-2-[(acetylthio)methyl]-1-oxopropyl]amino]-lH-tetrazol-5-propanové kyseliny.
Při provádění postupu podle tohoto provedení byl produkt E, to znamená sloučenina připravená postupem podle shora uvedeného provedení (e) (v množství 0,9 gramu, což odpovídá 2,2 mmolu) a anisol (v množství 0,1 gramu) rozpuštěny v acetonitrilu (v množství 5 mililitrů). K této reakční směsi byla potom přidána trifluoroctová kyselina (v množství 4 mililitry) a takto získaná reakční směs byla potom míchána po dobu přes noc. Tato reakční směs byla potom zkoncentrována za použití vakua a potom byla takto získaná látka přečištěna chromatografickou metodou v koloně naplněné silikagelem (v množství 50 gramů), přičemž jako rozpouštědlového systému bylo použito směsi methanolu, kyseliny octové a chloroformu v poměru 7:5 : 88. Potom byly vhodné frakce spojeny a zkoncentrovány, přičemž podle tohoto provedení bylo získáno 0,68 gramu požadovaného produktu F, uvedeného v záhlaví tohoto provedení, ve formě směsi isomeru v poměru 1:1.
g) Postup přípravy (a S)-a-[[3,3,3-trifluor-2-(merkaptomethyl)-l-oxopropyl]amino]-lH-tetrazol-5-propanové kyseliny.
Při provádění postupu podle tohoto provedení byla suspenze obsahující produkt F, to znamená látku připravenou postupem podle shora uvedeného provedení F (v množství 0,4 gramu, což odpovídá
1,12 mmolu) v koncentrovaném hydroxidu amonném (v množství 0,72 mililitru) a vodě (v množství 1,6 mililitru) promíchávána při teplotě místnosti pod atmosférou argonu po dobu 15 minut. Takto získaný žlutavě zelený roztok byl potom okyselen za pomoci hydrogensíranu draselného o koncentraci 5 % hmot, na hodnotu pH 1,5 a potom byla tato látka extrahována ethylesterem kyseliny octové (ve formě čtyř podílů po 50 mililitrech). Tímto způsobem byly získány ethylacetátové extrakty, které byly spojeny a tento spojený podíl byl potom promyt vodou a solankou, potom byl tento podíl sušen síranem hořečnatým MgSO4 a odpařen za sníženého tlaku, přičemž bylo získáno 0,29 gramu světle žluté gumovité pevné látky. Tato látka byla potom zpracována chromatografickou metodou (mžiková chromatografie) v koloně naplněné silikagelem v množství 60 gramů, přičemž jako elučního činidla bylo použito směsi methylenchloridu a methanolu a kyseliny octové v poměru 15 : 1 : 1, a tímto způsobem bylo získáno 0,24 gramu světle žluté lepkavé pevné látky, která byla potom podrobena triturován! za použití hexanu obsahujícího několik kapek methylenchloridu, ethylesteru kyseliny octové a methanolu, přičemž tímto způsobem bylo získáno 0,17 gramu uvedeného produktu. Tento produkt byl potom znovu přečištěn preparativní chromatografickou metodou a potom byl triturován směsí hexanu a ethylesteru kyseliny octové, přičemž bylo získáno 0,07 gramu požadovaného produktu uvedeného v záhlaví tohoto příkladu, tzn. produktu G, ve formě bílé pevné látky.
Teplota táni: 158 až 161 °C; chromatografie v tenké vrstvě Rf = 0,26 (methylenchlorid : methanol : kyselina octová v poměru 10:1:1);
-101CZ 281165 B6 [a]D = 4,4’ (c = 0,5, methanol);
Analýza pro CgH10F3N5O3S . 0,08 hexan:
vypočteno C = 31,81, H = 3,50, N = 21,88, F = 17,80,
S = 10,01, SH = 10,56, nalezeno C = 31,39, H = 3,37, N = 21,35, F = 18,27,
S = 10,51, SH = 11,01.
Příklad 64
Podle tohoto příkladu bylo připraveno 1 000 tablet, přičemž každá obsahovala následující složky:
N-[3,3 ,3-trifluor-2-(merkaptomethyl)-1-oxopropyl]-L-tryptofan, isomer A 100 miligramů kukuřičný škrob 50 miligramů želatina 7,5 miligramů
Avicel (mikrokrystalická celulóza) 25 miligramu stearát hořečnatý 2,5 miligramu
185 miligramů
Při tomto postupu byl nejdříve zajištěn dostatečný objem uvedených složek a potom byla smíchána látka připravená postupem podle příkladu 9 s kukuřičným škrobem a s vodným roztokem želatiny. Tato směs byla potom usušena a získaný produkt byl rozemlet na prášek. Při granulování byl přimíchán Avicel a potom stearát hořečnatý. Takto získaná směs byla potom lisována do formy tablet, přičemž bylo vyrobeno 1 000 tablet, každá s obsahem 100 miligramů aktivní látky. Stejný postup byl použit k přípravě tablet obsahujících 50 miligramů účinné látky. Podobným způsobem je také možno připravit tablety obsahující 50 miligramů nebo 100 miligramů produktu získaného podle libovolného z příkladů 1 až 8 nebo 10 až 63.
Přiklad 65
Podle tohoto příkladu byly dva druhy želatinových kapslí naplněny směsí obsahující následující složky:
N-[3,3,3-trifluor-2-(merkaptomethyl)-
-1-oxopropyl]-L-leucin, isomer B stearát hořečnatý laktoza 100 miligramů 7 miligramů 193 miligramů 300 miligramů
Podobným způsobem je možno připravit kapsle obsahující 100 miligramů produktu připraveného postupem podle příkladů 1 až 20 a 22 až 63.

Claims (5)

1. Trifluormethylmerkaptanové a merkaptoacylové deriváty obecného vzorce I
CFt
I (ch2)n r7-s-ch0-ch-c-nh-x 3 2i II (I) ve kterém znamená
X skupinu
CH *
Y nebo
Y znamená -COR2, fenylovou skupinu, fenylovou skupinu substituovanou alkylovou skupinou obsahující 1 až 4 atomy uhlíku, alkoxyskupinou obsahující 1 až 4 atomy uhlíku, alkylthioskupinou obsahující 1 až 4 atomy uhlíku, hydroxyskupinou, atomem halogenu, nitroskupinou nebo trifluormethylovou skupinou, nebo znamená heterocyklickou skupinu vybranou ze souboru zahrnujícího thiazolylovou skupinu, 4,5-dihydrothiazolylovou skupinu, pyridylovou skupinu, oxazolylovou skupinu, isoxazolylovou skupinu, imidazolylovou skupinu, tetrazolylovou skupinu, benzimidazolylovou skupinu, benzothiazolylovou skupinu nebo benzoxazolylovou skupinu, nebo shora uvedené heterocyklické skupiny substituované substituenty zvolenými ze souboru zahrnujícího alkylové skupiny obsahující 1 až 4 atomy uhlíku a fenylovou skupinu,
Z znamená
-- ΝΗ -- CH — CORo * 2 cor2
-103CZ 281165 B6 nebo (L) m je nula nebo 1, n je nula, 1 nebo 2,
2 je nula nebo 1 až 6, t je 2, 3 nebo 4, s tou podmínkou, že m a p jsou oba nula, jestliže substituent Y znamená skupinu a dále s tou podmínkou, že map nejsou nula, jestliže substituentem Y je skupina -COR2,
R^ a Rg jsou substituenty nezávisle vybrané ze souboru zahrnujícího atom vodíku, alkylové skupiny obsahující 1 až 7 atomů uhlíku, halogenem substituované alkylové skupiny obsahující 1 až 7 atomů uhlíku, (CH2)r --- CORg ,
-(CH2)r-cykloalkylovou skupinu, stavuje nasycený kruh obsahující kde cykloalkylová část před4 až 7 atomů uhlíku, -(CH2)r -
-104CZ 281165 B6
-(α-naftylovou) skupinu, -(CH2)r~(β-naftylovou) skupinu,
---(CH2)7
H
--(Wr-
-(CH2)r-NH2, -(CH2)r~SH, -(CH2)r~S-(alkylová skupina obsahující 1 až 7 atomů uhlíku), -(CH2)r-OH,
-(CH2)r-O-(alkylová skupina obsahující 1 až 7 atomů uhlíku), (CH2)r
NH
NH /
\ nh2
R2 a Rg představuji nezávisle hydroxyskupinu, alkoxyskupinu obsahující 1 až 7 atomů uhlíku, fenylalkoxyskupinu, kde alkoxy
-105CZ 281165 B6 část obsahuje 1 až 7 atomů, uhlíku,
-O~M+, kde M+ je kovový iont tvořící sůl,
II
-O-CH-OC-R7 nebo -NRR' kde R a R’ jsou nezávisle vybrány ze souboru zahrnujícího atom vodíku, alkylovou skupinu obsahující 1 až 7 atomu uhlíku a skupinu
Rg je atom vodíku nebo skupina Rg-CjO
R4 je atom vodíku, alkylová skupina obsahující 1 až 4 atomy uhlíku, alkoxyskupina obsahující 1 až 4 atomy uhlíku, alkylthioskupina obsahující 1 až 4 atomy uhlíku, atom halogenu, hydroxyskupina, CF3, fenylová skupina,
R5 znamená alkylovou skupinu obsahující 1 až 7 atomů uhlíku, skupinu
-106CZ 281165 B6
-(CH2)r-(α-naftylovou) skupinu, -(CH2)r-(3-naftylovou) skupinu, -(CH2)r-cykloalkylovou skupinu, kde cykloalkylová část představuje nasycený kruh obsahující 4 až 7 atomů uhlíku,
S nebo
H
R6 znamená atom vodíku, alkylovou skupinu obsahující 1 až 7 atomů uhlíku, nasycený cykloalkylový kruh obsahující 4 až 7 atomů uhlíku nebo fenylovou skupinu,
R? znamená atom vodíku, alkylovou skupinu obsahující 1 až 7 atomů uhlíku, alkoxyskupinu obsahující 1 až 7 atomů uhlíku nebo fenylovou skupinu, r je celé číslo od 1 do 4, a g je celé číslo od 1 do 7.
2. Trifluormethylmerkaptanové a merkaptoacylové deriváty obecného vzorce I podle nároku 1, ve kterém znamená:
X skupinu
CH *
nebo
CH
Y znamená -COR2,
COR2
-107CZ 281165 B6 fenylovou skupinu, fenylovou skupinu substituovanou alkylovou skupinou obsahující 1 až 4 atomy uhlíku, alkoxyskupinou obsahující 1 až 4 atomy uhlíku, alkylthioskupinou obsahující 1 až 4 atomy uhlíku, hydroxyskupinou, atomem halogenu, nitroskupinou nebo trifluormethylovou skupinou, nebo znamená heterocyklickou skupinu vybranou ze souboru zahrnujícího thiazolylovou skupinu, 4,5-dihydrothiazolylovou skupinu, pyridylovou skupinu, oxazolylovou skupinu, isoxazolylovou skupinu, imidazolylovou skupinu, tetrazolylovou skupinu, benzimidazolylovou skupinu, benzothiazolylovou skupinu nebo benzoxazolylovou skupinu, nebo shora uvedené heterocyklické skupiny substituované substituenty zvolenými ze souboru zahrnujícího alkylové skupiny obsahující 1 až 4 atomy uhlíku a fenylovou skupinu,
Z znamená m je nula nebo 1, n je nula, 1 nebo 2, p je nula nebo 1 až 6, t je 2, 3 nebo 4, s tou podmínkou, že m a p jsou oba nula, jestliže substituent Y znamená skupinu a dále s tou podmínkou, že map nejsou nula, jestliže substituentem Y je skupina -COR2,
R^ a Rg jsou substituenty nezávisle vybrané ze souboru zahrnujícího atom vodíku, alkylové skupiny obsahující 1 až 7 atomů uhlíku, halogenem substituované alkylové skupiny obsahující 1 až 7 atomů uhlíku,
-(CH2)r-cykloalkylovou skupinu, kde cykloalkylová část představuje nasycený kruh obsahující 4 až 7 atomů uhlíku, -(CH2)r-(α-naftylovou) skupinu, -(CH2)r-(p-naftylovou) skupinu,
-108CZ 281165 B6
Η
-(CH2)r-NH2, -(CH2)r~SH, -(CH2)r~S-(alkylová skupina obsahující 1 až 7 atomů uhlíku), -(CH2)r-OH,
-(CH2)r-O-(alkylová skupina obsahující 1 až 7 atomů uhlíku),
NH //
---- (CHj)r ---- NH ---- C \ nh2
R2 a Rg představují nezávisle hydroxyskupinu, alkoxyskupinu obsahující 1 až 7 atomů uhlíku, fenylalkoxyskupinu, kde alkoxy část obsahuje 1 až 7 atomů uhlíku,
--OCH
-109CZ 281165 B6
-0-M+, kde M+ je kovový iont tvořící sůl,
O
II
-0-CH-0C-R7 nebo -NRR'
I R6 kde R a R' jsou nezávisle vybrány ze souboru zahrnujícího atom vodíku, alkylovou skupinu obsahující 1 až 7 atomů uhlíku a skupinu
R3 je atom vodíku nebo skupina Rg-C0
R4 je atom vodíku, alkylová skupina obsahující 1 až 4 atomy uhlíku, alkoxyskupina obsahující 1 až 4 atomy uhlíku, alkylthioskupina obsahující 1 až 4 atomy uhlíku, atom halogenu, hydroxyskupina, CF3, fenylová skupina,
R5 znamená alkylovou skupinu obsahující 1 až 7 atomu uhlíku, skupinu
-(CH2)r-(a-naftylovou) skupinu, -(CH2)r-(β-naftylovou) skupinu, -(CH2)r-cykloalkylovou skupinu, kde cykloalkylová část představuje nasycený kruh obsahující 4 až 7 atomů uhlíku,
-110CZ 281165 B6 nebo
R6 znamená atom vodíku, alkylovou skupinu obsahující 1 až 7 atomů uhlíku, nasycený cykloalkylový kruh obsahující 4 až 7 atomů uhlíku nebo fenylovou skupinu,
R7 znamená atom vodíku, alkylovou skupinu obsahující 1 až 7 atomů uhlíku, alkoxyskupinu obsahující 1 až 7 atomů uhlíku nebo fenylovou skupinu, r je celé číslo od 1 do 4, a g je celé číslo od 1 do 7.
3. Způsob přípravy trifluormethylmerkaptoacylových derivátů obecného vzorce Ia
CF->
I
0 (CH2)n
II I
Rc-C-S-CH^-CH-C-NH-X (Ia) 5 2 * II o
ve kterém mají X, n a R5 stejný význam jako v nároku 2, v y -
značující se tím, že na karboxylovou kyselinu obecného vzorce II CF-, 1 J 0 II (CH2)n li Rc-C-S -CHo-CH-C00H (II)
ve kterém R5 a n mají stejný význam jako bylo uvedeno v nároku 2, přičemž tato karboxylové kyselina obecného vzorce II může být ve formě chloridu této kyseliny, se aduje aminový meziprodukt obecného vzorce III
H2N-X (III)
-111CZ 281165 B6 nebo hydrochloridová sůl této sloučeniny, a tato adiční reakce se provádí v přítomnosti adičního činidla, kterým je například hydrochlorid 1-(3-dimethylaminopropyl)-3-ethylkarbodiimidu.
4. Způsob přípravy trifluormethylmerkaptanového derivátu obecného vzorce Ib cf3
O (Ib) ve kterém mají X a n stejný význam jako v nároku 2, vyznačující se tím, že (a) na karboxylovou kyselinu obecného vzorce II
O (II) ve kterém R5 a n má stejný význam jako v nároku 2, přičemž tato karboxylová kyselina může být ve formě chloridu této kyseliny , se aduje aminový meziprodukt obecného vzorce III h2n-x (III) nebo hydrochloridová sůl této sloučeniny, přičemž se získá merkaptoacylová sloučenina vzorce r5-c-s-ch2-ch-c-nh-x a tato adiční reakce se provádí v přítomnosti adičního činidla, kterým je například hydrochlorid l-(3-dimethylaminopropyl)-3-ethylkarbodiimidu (b) a takto získaný produkt ze stupně (a) se potom zpracuje bazickou látkou, jako je například hydroxid sodný, hydroxylamin, nebo hydroxid amonný, čímž se získá požadovaný trifluormethylmerkaptanový derivát obecného vzorce Ib.
-112CZ 281165 B6
5. Způsob podle nároků 3 nebo 4, vyznačující se tím, že se aminový meziprodukt obecného vzorce III zpracuje před reakcí s karboxylovou kyselinou obecného vzorce II bis(trimethylsilyl)trifluoracetamidem nebo bis(trimethylsilyl)acetamidem.
CS91765A 1990-03-22 1991-03-21 Trifluormethylmerkaptanové a merkaptoacylové deriváty a způsob jejich přípravy a použití CZ281165B6 (cs)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US49738690A 1990-03-22 1990-03-22
SG165394A SG165394G (en) 1990-03-22 1994-11-16 Mercapto-or acylthio-trifluoromethyl amide derivatives and their use

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CS9100765A2 CS9100765A2 (en) 1991-10-15
CZ281165B6 true CZ281165B6 (cs) 1996-07-17

Family

ID=26664489

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CS91765A CZ281165B6 (cs) 1990-03-22 1991-03-21 Trifluormethylmerkaptanové a merkaptoacylové deriváty a způsob jejich přípravy a použití

Country Status (27)

Country Link
EP (1) EP0449523B1 (cs)
JP (1) JP2955051B2 (cs)
KR (1) KR0184876B1 (cs)
CN (1) CN1038505C (cs)
AT (1) ATE110056T1 (cs)
AU (1) AU632408B2 (cs)
CA (1) CA2038379C (cs)
CY (1) CY1820A (cs)
CZ (1) CZ281165B6 (cs)
DE (1) DE69103454T2 (cs)
DK (1) DK0449523T3 (cs)
EG (1) EG19711A (cs)
ES (1) ES2057761T3 (cs)
FI (1) FI112213B (cs)
HK (1) HK24295A (cs)
HU (1) HU210313B (cs)
IE (1) IE65539B1 (cs)
IL (1) IL97626A (cs)
MX (1) MX25035A (cs)
NO (1) NO175147C (cs)
NZ (1) NZ237534A (cs)
PL (1) PL165153B1 (cs)
PT (1) PT97121B (cs)
RU (1) RU2024504C1 (cs)
SG (1) SG165394G (cs)
SK (1) SK279617B6 (cs)
ZA (1) ZA912133B (cs)

Families Citing this family (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
IT1273455B (it) * 1995-01-27 1997-07-08 Zambon Spa Derivati tiolici ad attivita' inibitrice delle metallopeptidasi
IT1277736B1 (it) * 1995-12-28 1997-11-12 Zambon Spa Derivati tiolici ad attivita' inibitrice delle metallopeptidasi
FR2805259B1 (fr) * 2000-02-17 2002-03-29 Inst Nat Sante Rech Med Nouveaux derives d'aminoacides n-mercaptoacyles, leur procede de preparation et les compositions pharmaceutiques qui les contiennent
TW200519106A (en) 2003-05-02 2005-06-16 Novartis Ag Organic compounds

Family Cites Families (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
SE429374B (sv) * 1980-04-15 1983-08-29 Luxor Ab Feste
FR2480747A1 (fr) * 1980-04-17 1981-10-23 Roques Bernard Derives d'acides amines et leur application therapeutique
US4333943A (en) * 1980-04-24 1982-06-08 Miles Laboratories, Inc. Ethyl 3-(3-indolyl)-3-(5-tetrazolyl) propionate compounds used as anti-hypertensive agents
BE890948A (fr) * 1981-10-30 1982-02-15 Luitpold Werk Chem Pharm Derives de l'acide anthranilique
EP0361365A1 (en) * 1988-09-30 1990-04-04 E.R. SQUIBB &amp; SONS, INC. Aminobenzoic and aminocyclohexane-carboylic acid compounds, compositions, and their method of use

Also Published As

Publication number Publication date
DE69103454T2 (de) 1995-03-16
ATE110056T1 (de) 1994-09-15
JP2955051B2 (ja) 1999-10-04
PL165153B1 (pl) 1994-11-30
KR0184876B1 (ko) 1999-05-15
CY1820A (en) 1995-10-20
ES2057761T3 (es) 1994-10-16
FI112213B (fi) 2003-11-14
FI911399L (fi) 1991-09-23
SG165394G (en) 1995-04-28
IE910941A1 (en) 1991-09-25
NO175147B (no) 1994-05-30
CA2038379C (en) 2002-11-05
CS9100765A2 (en) 1991-10-15
DE69103454D1 (de) 1994-09-22
NO175147C (no) 1994-09-07
KR910016693A (ko) 1991-11-05
PT97121A (pt) 1991-11-29
HK24295A (en) 1995-03-03
SK279617B6 (sk) 1999-01-11
ZA912133B (en) 1991-12-24
PT97121B (pt) 1998-08-31
HU910956D0 (en) 1991-10-28
EP0449523A1 (en) 1991-10-02
IE65539B1 (en) 1995-11-01
IL97626A (en) 1995-08-31
AU7367291A (en) 1991-10-03
DK0449523T3 (da) 1994-09-19
HU210313B (en) 1995-07-28
CA2038379A1 (en) 1991-09-23
NO911149L (no) 1991-09-23
CN1038505C (zh) 1998-05-27
IL97626A0 (en) 1992-06-21
JPH04234842A (ja) 1992-08-24
MX25035A (es) 1994-01-31
EP0449523B1 (en) 1994-08-17
FI911399A0 (fi) 1991-03-22
CN1055735A (zh) 1991-10-30
PL289549A1 (en) 1991-10-21
NZ237534A (en) 1992-09-25
RU2024504C1 (ru) 1994-12-15
HUT57186A (en) 1991-11-28
EG19711A (en) 1995-09-30
NO911149D0 (no) 1991-03-21
AU632408B2 (en) 1992-12-24

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US5414013A (en) Trifluoromethyl mercaptan and mercaptoacyl derivatives and method of using same
DE69310475T2 (de) Benzokondensierte Lactame
EP0184550B1 (de) 5-Amino-4-hydroxyvalerylamid-Derivate
DK148711B (da) Analogifremgangsmaade til fremstilling af 1-(3-mercapto-2-methylpropanoyl)-prolyl-aminosyre-derivater, optiske isomere deraf eller farmaceutisk acceptable salte deraf
EP0657453A1 (en) Angiotensin converting enzyme (ace) inhibitors containing a fused multiple ring lactam
JPH08503475A (ja) 抗変性活性剤としてのカルボキシ−ペプチジル誘導体
US5523313A (en) Indole-containing peptide and process for preparing the same
DE69610145T2 (de) Benzo-kondensierte Azepinon-und Piperidinonverbindungen, nützlich als ACE-und NEP-Inhibitoren
RU2098424C1 (ru) Производные дипептидов или их фармацевтически приемлемые соли, способы их получения, антигипертоническая фармацевтическая композиция
CZ281165B6 (cs) Trifluormethylmerkaptanové a merkaptoacylové deriváty a způsob jejich přípravy a použití
KR940006770B1 (ko) 머캅토-아실아미노산 고혈압 치료제
CA1329680C (en) N-heterocyclic alcohol derivatives
DE3222779C2 (cs)
EP0099709A2 (en) Amide derivatives
US6063919A (en) Process for the synthesis of exochelins
DD239210A5 (de) Verfahren zur herstellung neuer 5-amino-4-hydroxyvaleryl-derivate
JPS621398B2 (cs)
JPH0689027B2 (ja) 薬理活性を有する化合物

Legal Events

Date Code Title Description
IF00 In force as of 2000-06-30 in czech republic
MM4A Patent lapsed due to non-payment of fee

Effective date: 20090321