CZ283890A3 - Acylated derivative of epipodophylotoxin and antitumor active pharmaceutical preparation in which said derivative is comprised - Google Patents

Description

?u břzf' fo

Acylovaný derivát epipodofylotoxinu ^ γ^cí/^c/eéc; Meťýjej c?6s<>£*<j<.

Oblast techniky - .í

Vynález se týká derivátu epipodofylotoxinu, způsobu jeho výroby a jeho použití, jakožto protinádorových činidel, a farmaceutických prostředků obsahujících tuto sloučeninu jakožto účinnou látku* Zvláště se vynález týká nových adylderi-vátů 4 ^-demthyippipod.ofylotoxin-glukosidů

Dosavadní stav techniky

Etoposid a teniposid jsou klinicky používanými proti-nádorovými činidly, odvozenými od přírodního lignanu podofylo-toxin, V současné době je etoposid na trhu ve Spojených státech pod obchodním označením Vepesid a je určen pro léčbu plicnich nádorů z malých buněk a nádorů varlat* Příznivé farmakologie ké vlastnosti etoposidu a teniposidu stimulovaly aktivitu.; při hledání dalších aktivních analogů v této skupině sloučenin. 4'-G-demethylepipodofylotoxin-glukosidy, v nichž jsou hyd-roxylové skupiny na cukerném zbjtku vázány, jsou popsány v literatuře jakožto meziprodukty pro přípravu odpovídajících 4/-demethylepipodořylotoxin-glukosidů; tyto známé sloučeniny' však obsahují rovněž chráněnou fenolovou skupinu. V kanadském patentovém spise číslo 556939 jsou popsány sloučeniny obecného vzorce I t o/fa /af* vu umo

o ve kterém ....... ~ .....................~ R^· představuje alkylovou skupinu s 1 až 5 atomy uhlíku, R znamená acetylovou nebo formylovou skupinu a R"* představuje fenylovou skupinu nebo substituovanou fenylovou skupinu, přičemž jako možné substituované fenylové skupiny jsou uvedeny, nikoli vSak příklady dťplóženy, p-nitrofenylová skupina a p-methoxyfenylo-vá skupina. “ “V^am^iclcéin-patenťovém-apisu-č-rT-^Sé^-S^^-dsou-po—- . " ' '_ -v řl ^ ' '. ' . •‘iíi.V V * \ ‘ t. r‘ *- ^ ,, ,!~*:

psány\sloučeniny obecného vZorce.'II;;>V T~ ‘ --— ' ; L ^— r" , : : .'· .—: T-i - ř^ -f ^ h- v- ·" . M*· V?*‘; "r ->/. í · <-·**/.« . v v£S·.. v«í;-'· ..·* ' *. J·. ;. -aiu~-. .Λ .

4ň<L

ve kterém R představuje ataipinu -CCOÍCHgC, kde X znamená atom halogenu.

Ve zveřejněné evropské patentové přihlášce č. 162 701 jsou popsány sloučeniny obecného vzorce III - 5 -

(III)

ve lcterém 1 2 R a R 3sou stejné nebo rozdílné a znamenají vždy skupinu -0(0)010^ nebo -CÍOJCX^, lede X znamená atom halogenu.

Ve zveřejněných japonských patentových přihláškách δ. 58/225 096 (Derwent Abst. δ. 84-834268/06) a 58/219 196 (Derwent Abst. δ. 84-027495/05) jsou popsány sloučeniny obecných vzorců IV a V

- 7 - v nichž A představuje zbytek: vzorce '-ΙΧ^-Οϊ^-ΟίΗΪ^Χ)^, **—· -* kde X- znamená atom-hai.ogehuV m má hodnotu 0~až 2 a n má hodnotu 1 až 3 s tím, že součet m + n = 3 a

Ac

znamená acylovou skupinu." O . ->* r~ "''‘s.-. i" , .'ί ιΛ

Ve zveřejněné evropské-patentové přihlášce č. 226 202 je popsán meziprodukt pro syntézu etoposidu, odpovídající vzorci VI v

v němž A znamená acetylovou skupinu.

-""ΐ ' ís. r Mi - „i.tx.vi* - «··" *·— , . μ: λ v,^·Α , ,_ u. mulr. ‘«w J '

OH Ί 2 ve kterém jeden ze symbolů R a R znamená atom vodíku a druhý představujeskupinu -00((^ ^COgH. Tyto sloučeniny se používají k navazování etoposidu na albumin hovězího séra. 4'-fosfát etoposidu, odpovídající vzorci - 9 - - 9 -

*7 I " xÁireo v \:3ΐν.'.·'·Λ °ad dvso μ 1 3CSPA'

i -......- I 1 3 Ó S S 5 0 i

• Y 'eho hláčc a

CJ dvojsodné soli jsou popsány vynálezu č. 63/192 793. ve zveřejněné japonské při-

Pods ta ta- vynále zu~

řcdstatcu vynálezu jsou sloučeniny obecného vzorce VIII /

OR5 ve kterém * v o i R* představuje.atom vodíku a R znamená alkylovou ;skupinu s 1 až 10 atomy; uhlíku, alkenylovQU skupinu se 2 až 10 atomy uhlíku, cýkloalkylovou skupinu s 5 až 6 atomy uhlíku, 2-furylovou skupinu, 2-thie nylovou skupinu, arylovou skupinu se 6 až 10 atomy uhlíku nebo aralkylovou skupinu se 7 až 14 atomy uhlíku, nebo R1 a R^ znamenají vždy alkylovou sku- 12 pinu s 1 až 10 atomy uhlíku nebo R a R spolu s uhlíkovým atomem, na který jsou navázány, tvoří cykloalkylovou skupinu s 5 až 6 atomy uhlíku, jeden ze symbolů R^ a R* představuje atom vodíku a druhý znamená alkanoylovou skupinu s 1 až 5.atomy uhlíku nebo benzoylovou skupinu, nebo a R* jsou stejné a jsou vybrány ze skupiny zahrnující alkanoýlové skupinyts^l„až_5^atomyuhlíku a benzoylovou skupinu a R^ znamená atom vodíku nebo fosfátovou skupinu. Dále vynález popisuje farmaceutické prostředky ob- . sáhující protinádorově účinné množství sloučeniny obecného vzorce VIII a farmaceuticky upotřebitelný nosič.

Vynález rovněž popisuje způsob inhibice růstu nádorů u savců, vyznačující se tím, že se takovémuto savci podá proti-nádorově účinné množství sloučeniny obecného vzorce VIII. V souladu s jedním výhodným provedením popisuje vy- 2 nález sloučeniny obecného vzorce VIII, v němž R představuje atom vodíku a R1 znamená methylovou, 2-thienylovou nebo feny-- 1-ovou. skupinu, nejvýhodně ji . skupinu methylovou.

Podle dalšího výhodného provedení popisuje vynález sloučeniny obecného vzorce VIII, v němž a R* znamenají alkanoýlové skupiny s 1 až 5 atomy uhlíku, nejvýhodněji pak oba tyto symboly formylovou skupinu.

Podle ještě dalšího výhodného provedení popisuje . vynález sloučeniny obecného vzorce VIII, v němž jeden ze symbolů a R* představuje atom vodíku a druhý znamená alkanoylo-vou skupinu s 1 až 5 atomy uhlíku nebo benzoylovou skupinu. s -1-2- '1

i ' ... .. ... .... i ---Použí-vaným-vý-razem—fosfát—ne sp.—fosfát o vá-s k-u---— —- j pina" se.·mini. seskupení .P0-,Ho a jeho farmaceuticky upotřebí- ‘ffl!

ch3o

0Ϊ

IXa: Y 1 chránící skupina IXb: Y 1 H 1

. _ 2 1 ·1- ·.-· .i %. -b . .f. . >_ i , · 1, i. .. m ,^λ ..Jv - _ . „ . Λ . . .1,.. I jak normální soli tak monohýdrogen-soli, které jako kationty obsahují,, bez jakéhokoli omezení pouze na tyto případy, lca- ,r ' '3 ' . · /«I ' · "'V ·1 ‘ i Λ i : “J ··_. -.·.►· “ 1“ · 2

____· _. . ~ -..... . ... ._ . _ ;_ zZřOSVC telné soli. Tyto farmaceuticky-upotřebitelné soli zahrnují - 3 ‘ - 1+ - K ' v 1 ·. l_. i ^ tionty odvozené od alkalického kovu, například sodíku, drašli ku nebo lithia, kationty odvožené ód koi^ alkalických zemin, ’ t- ‘ f 1 ·;. ·<1 ^ ·"' · i··1’ .· „ 1. .y, j . .·. například" hořčíku, vápníku nebo baria á kationty amonné, -včetně-kati ont&~od-vózených-od-orgariickýcfa-aminů. --»·---

Nové sloučeniny podle vynálezu je možno vyrobit reakcí 4'-demethylépipodofylotoxin-glukosidu s chráněnou 4'-tenolickou skupinou, odpovídajícího obecnému vzorci IXa - 13 - 3 příslušnou karboxyl6v^u|íýselinou nebo jejím acylačním . •^‘ůu.mí.z.^SXTUJ· ·. .'^:w_Tr^^rs;-*^T 5i~·..,· ekvivalentem, s násléďiíjídíin^odStěpením chránící skupiny fe* -nollcké-fun-kce.-— — .. ·. ~ * v.a ií ^f·Λ

Hozsah použitelných chráničích skupin fenolické

5 ΐ? Λ. 1 ‘-V funkce není nijak zvláSt-omězen a k danému účelu lze použít libovolnou chránicí "skupinu, kterou je možno zavést a odště-pit s jen malým nebo vůtTec žádným nepříznivým účinkem na '. · 'VJÍ*Í jiné části molekuly. Tuto chránící skupinu fenolicke funkce <Í. by zejména mělo být"možno odštěpit za použití metod, jimiž by nebyly napadeny acylóxylové funkce v cukerném zbytku fi-nálních produktů. Způsoby ochrany fenolické funkce jsou v oboru zhámé a jako příklady obecných skupin chránících zbytků fenolické funkce lze uvést ethery, acetaly, estery a karbonáty. Bylo zjištěno, že pro účely vynálezu je možno použít účelně benzyloxykarbonylovou" skupinu. V souladu s tím se tedy *“*r éakcí "4 "-demethýlépipo'dbfýlotoxin-glukošidu "obecného “vzor ce-' IXb s benzyl-chlorformiátem při nízké teplotě, například při teplotě -15 °C, v inertním organickém rozpouštědle, jako v methylenchloridu a v přítomnosti terciární organické báze, 4 jako pyridinu, získá odpovídající 4 ,-0-benzyloxykarbonyl-4 -demethylepipodofylotoxin-glukósid . Sloučeniny obecného vzorce IXb a jejich syntéza jsou popsány v americkém patentovém spisu č. 3 524 844*

Acylaci hydroxylových skupin v cukerném zbytku sloučenin obecného vzorce IXa je možno uskutečnit za použití - 14 - příslušné karboxylové kyselíny^ngbo^acylačního Činidla ob . ' .. ' ? · ·'> ‘ . ί&· /r · :..·· ·. . . . . 1 · 1 · · hí·1 2 odvozeného,V například halogénidu2.kyseliny, .jako chloridu ku,.benzoová~kyselina a jew____M ” ' 1 ·· · r . ‘ 2 · · i -+'-V ·“··.· · 2 ‘ ·.#«. .. ·. ’ί·. % popsány výše2 Mezi alkanové2kyseliny náležejí, bez jakéhokoli . '' · . ' ' \· ·. ·' ^4-1'pji vš; .V *' v2 e, ·>. 2f··, .... omezování pouze na tyto případy, kyselina mravenčí, kyselina octová, kyselina propionová,. kyselina máselná, pentanová kyselina a alkanové kyseliny s rozvětvenými řetězci, jako 2-met- 1 ‘v· »>’·. «·2’ 1 - "»l t. hylpropionová kyselina a 3-methylbutanová kyselina. 1 • ♦ : · ·2 · 2·^·» ' _ ' 5^;;2^. · ' · 2 · - · kyseliny, aktivního'esteru cdyozenétíóVód. N-hydroxysukcinimidu ' ; - - ·· - nebo 1-hydroxytriazolu, nebo symetrického Či smíšeného anhydri 2 - v. .r - v, v · 2 ; v r - - . · , sjř · .- 2 ·2 . . ’· f 2 2 ·2 2 · 2 -w-v '«•jr.i T-τα ·♦ v6· =>> ·./·2ί —du.—Poknid^se—jak-o-ae-y-lační^č-in-idlo -používá-kar-boxylová-kyseli- ·. v 2 ·Τ 2 .'2 ·2 ~ 2 · ' . v% ^r’;· ν-'Χ. 'ffe ^¾1 J. ..... 2 j 2" < 2 •-‘.i’2 — '2·- ·2\.3·~ 2t »2···. · .··. · > .'e^ ; - ",-v\>vJ rf·,? ς. . . «. v .a. ,· . > na, používá:se s výhodou v kombinaci s kondenzačním činidlem, například s karbodiimidem, jakordicyklohexylkarbodiimidem. - - V · ../-'V •v2.--'n: ...-I 85·". ο:5'7Ϊ .- í . 3 4A;Cylačriími~činidly jsou ..alkánové;: kyseliny. s..l .až . 5„atomy,uhlí- 1 , .2 2. ‘Á .7; v.-wy V,V2 '·Ufr .r . : 2-... t2 2 j s ^kViTalWtyT^jak^bylý'"

Acylační reakční: je. možno provádět v inertním organickém rozpouštědle, jako v pyridinu, přičemž v případě, že jako vedlejší produkt bude vznikat kyselina, přidává se k reakční směsi s výhodou akceptor kyseliny. Vhodnými akceptory kyseliny jsou například terciární aminové báze, jako pyridin, triethylamin, diisoprqpylethylamin apod., nebo anorganické báze, jako uhličitan sodný a draselný. Reakci je možno uskutečňovat při teplotě umožňující vznik žádaných produktů,, která se může pohybovat zhruba od -15 °C do 50 °C. V závislosti na charakteru reakčiiích složek a na volbě reakčních podmínek, jako na teplotě, může být reakce ukončena v době pohybující se od - 15 - několika minut do několika dnů.

Acylace neprobíhá co do polohy selektivně a může)5^:r • , —Ť ’ · · při"·ní*"vznikat?směs-2"-mónoáčylovaného-produktu, -3"-monoácý- . lovaného produktu a 2",3"-bisacylovaného produktu. Použijí-li se nejméně dva ekvivalenty acylačního činidla vzhledem k výchozímu epipodofylotoxinu, vzniká převážně bisacylovaný . . . . .£„<:...... derivát. Vzájemný poměř monoacylovaného produktu a bisacýló- vaného produktu je možno do určité míry-regulovat změnou * ' reakčních parametrů podle principů obvykle používaných v daném oboru, například obměnou vzájemných množství reakčních složek nebo změnou reakčních podmínek, jako jsou teplota a reakční doba. Obecně platí, že při použití ekvimolárních množství reakčních složek vede snížení reakční teploty a zkrácení reakční doby k zvýšení množství vznikajících mono-acylovaných produktů. Alternativně je možno mohoacylovane produkty získat tak,’ Že· se nejprve- chrání jedna .z hydroxylo-vých skupin cukerného zbytku výchozího epipodofylotoxin--glukosidu s chráněnou 4 -fenolickou skupinou. Chrániči skupinou pro tuto hydroxylovou skupinu cukerného zbytku je s výhodou objemná chránicí skupina, například terc.butyldi-methyls^lylová skupina, aby se na minimum snížila možnost reakce s oběma hydroxylovými skupinami. Ani toto chránění hydroxylových skupin cukerného zbytku neprobíhá co do polohy selektivně, je-li to však žádoucí, lze výsledné 2"-chráněné a 3*-chráněné sloučeniny snadno oddělit chromatograficky. Autoři tohoto vynálezu provedli formylaci etoposidu, nepodá iMio-se-j-im^však—i-zolova-t-žádn-ý—z-očekávaných-monoformylde-- . · VŘ-S-ŤÍ»··’-.Tít;l,·.- · « r f'· j· ^'^ΛΙΆ.· χϊΤτvfrV'. " rivátůCétoposidu* -. Λ, .·. vt«»3eS^Steí^í>íA·*···. *·( — ?> <- . produktů, obsahující acylované deriváty s ^ ·~ i i >t - í" ., ' . -- ·.., .·. , chráněnou fenolickou funkcí je možno rozdělit na individuální rkonp.ori^nÝy5r:bS.2nýBi-i3;d8P-4-.c-í-in-i-inetodaiai-j—jakorsloupcovou-r-chroma·-^p^afil^iOdStěpeníiQi ch^áňicí skupiny 2 fenolické hydroxylové . funkc§?,á^v případě potřeby z hydroxylové skupiny cukerného ,zbytku^3,e'izíska jí T:slouč eniny.. podle ^vynálézu . Toto odš t ěpová- - · ; . ^.yp-iť.’'·*” · ' ·* '.- · - ' . ; ... níTj.^Sožho*'usWt^čnit^buá“přecl nebo po Izolaci^Lndividuá 1-nich* komponent; V daném* pří pádě nehraje pořadí, rozhodující úlohu; Chrániči skupina se odštěpuje za použití metody vhodné pro tu kterou vybranou chránící skupinu. Tyto metody jsou v:oboru obecně známé. Tak například benzyloxykarbonylo-vou .chrániči:skupinu, je možno odštěpit katalytickou hydrogena cí za atmosférického tlaku, za použití paladia na uhlí jako katalyzátoru. Chránící' ter.c.butyldimethylsHýlovou- skupinu je možno odštěpit záhřevem ve vodně alkoholickém roztoku nebo působením fluoridového aniontu nebo vodné kyseliny oc- ·»· , ψ tové.

Po odštěpení chránicí skupiny fenolické funkce, je možno tuto 4'-fenolickou skupinu dále převádět na žádaný 4'-fosfát odpovídající obecnému vzorci VIII. Fosforylaci 4'-fenolu je možno uskutečnit běžnými metodami. Ták napří- klad je možno sloučeninu obecného vzorce VIII, ve kterém R představuje atom vodíku, podrobit reakci s fosforyíačním 5 - 17 - činidlem, jako s oxychloridem fosforečným., Intermediární fósforylčhlorid se pak in šitu hyďrolýzuje na příslušný "^'-fosfát'" Hydrolýzou1 v - přítomnosti’-báze,- například hydrou genuhličitanu sodného, se získá odpovídající sůl. Tento postup, jakož i jiné možné upotřebitelné fosforylační metody jsou popsány v americké patentové přihlášce GB2 207 674.

Je třeba zdůraznit, že syntéza sloučenin podle vynálezu není omezena na postupy a činidla popsané výše, ale že je možno použít i jiné metody acylace hydroxylových sku-‘ ' +, pin na cukerné části 4 -demethylepipodofylotoxin-glukosidů.

Reakční'podmínky se v závislosti na volbě výchozích látek bu.dou pochopitelně měnit, jejich volba však odborníkům nebude činit potíže.

Protinádorová účinnost reprezentativních sloučenin podle vynálezu byla hodnocena na transplantovatelné myší leukémii P388. Pět týdnů starým myším samicím (CDF^) se intraperitoneálně aplikuje 0,4 ml zředěné ascitické tekutiny obsahující 10^ buněk leukémie P388. Testované sloučeniny se podávají intrapeřitomeálnš v jednorázové dávce ve dnu 1 a pokusná zvířata se pozorují 50 dnů. Zjištuje se procentické zvýšení střední doby přežití (MST) ošetřených 2vířat v porovnání s neošetřenými kontrolními zvířaty, které se zaznamenává v hodnotách T/C {%). Sloučeniny, které mají hodnoty T/C (#) rovné nebo vyšší než 125, se považují za látky vyká- ' . τ ..,·*· -.-Γ-χβ - 1 zuj rc r~výraznou-protinaďo rovou—ucinnos tT “Výsledky tohoto tes- tu in vivo jsou uvedeny v následující tabulce I. Uvádějí se pouze maximální hodnoty T/C (%) a dávky, při nichž dochází . k maximálnímu účinku. ' A ' ’ :t * " ' * . i • . i T a b u· 1 k a , I . ... .....Pro_tinádor.o.yá účinnostJ.proti:.mySí leukémii P388 sloučenina příkladu č. z dávka (mg/kg/den) MST [T/C (%)] 1 30 165 3 . .30 240 4 3° 210 etoposid 30 182 6 120 >500 (3/4)x) 8 120 145 9 60 " 420,(1/4) 1° 120 125 etoposid 120 >390 (6/12) Legenda: x) počet, přežívajících exemplářů/počet pokusných • - exemplářů ve dnu 50 - 19 - . CytotoxicitafsIouČenin podle vynálezu in vitro by- • · · i’ . --fj V c /. lá hodnocena na myšícíumelanbaiu B16-P10 a na Mosérově karci- .1 ·. .. ' ‘ ·. ‘t ......... nomu~ tlus tého-střeva^ člověka.-.Exponenciálně., rostoucí^ buňky _ B-16-F10 a Moserova karcinomu se odeberou, spočítají se a v .n )’ h í. - v koncentraci 1,5 x ΚΓ resp. 3 x 10* buněk/ml se suspendují v kultivačním prostředí. Buněčná suspenze se v dávkách 180/il . ý. - " -y·., záďúg:pr ... , ^ . vnese do jamek v mikro.titrační destičce s 96 jamkami, do každé jamky se přidá 20/Ul.testované látky a destičky se 72 ho-diny inkubují. Po obarvení, živých buněk roztokem neutrální červeně se kolorimetricky (při 540 nm) zjistí cytotoxická aktivita proti nádorovým buňkám. Dosažené výsledky jsou uvedeny v následující tabulce II.

Tabulka II

Cytotoxicita—in' vitro-proti- .buňkám. pyš.í ho... a . lidského nádoru

sloučenina z příkladu Č. IC50 B16-F10 (^ug/ml) Moser 3 1,6 1,1 4 1,4 NDx) 1 1,3 <.0,8 8 0,92 ND 9 0,17 0,83 10 4,4 ND 6 2,0 0,84 etoposid 0,45 ND -=-20--

Legenda-. x-) ^ _ nestanovováno Ύ souladu s tím popisuje vynález způsob inhibování’ nádorového bujení u savců, spočívající v tom, že se savci trpícími nádorem, podá účinná inhibiční dávka přotináďorově . aktivní‘sloučeniny obecného vzorce VIII..K shora uvedenému účelu je možno sloučeninu podle vynálezu aplikovat” běžnými cestami, zahrnujícími bez jakéhokoli omezování aplikaci intravenosníintramuskulární. ihtratumoráíni ΐ ~ intraárt eriál-ní, intralymfatickou a orální. Dále vynález popisuje farmaceutické prostředky obsahující sloučeninu obecného vzorce VIII a farmaceuticky upotřebitelný nosič. Tyto protinádorově účinné prostředky je možno zpracovávat na libovolné lékové formy vhodné pro Žádaný způsob'podání. Jako příklady zmíněných prostředků ' je možno, uvést ..pevné prostředky pro orální podání, jako tablety, kapsle, pilulky, prášky, a granule, kapalné prostředky pro orální podání, jako roztoky, suspenze, sirupy a elixíry, a prostředky pro parenterální podání, jako sterilní roztoky, suspenze a emulze. Popisované prostředky lze rovněž vyrábět jako sterilní pevné preparáty, které lze bezprostředně před použitím rozpustit ve sterilní vodě, ve fyziologickém solném roztoku nebo v jiném sterilním injekčním prostředí. - 21 Výběr optimálních dávek a režimu dávkování pro. léčeného savce nebude odborníicůmyčinit potíže.. Je pbchopirifp·';’ •tělně , .>Že^používaná.dávlcá;se„buďe , m Čni t_v^ závisí os ti na fcha-. rakteru použitého prostředku, na účinné látce, na způsobu podání, na ošetřovaném místě, na ošetřovaném pacientovi a na typu a závažnosti onemocnění . Je„ třeba mít na zřeteli i četně další faktory modifikující působením účinné látky, jako. jsou věk, hmotnost, pohlaví, výživa, doba podání, způsob podání, rychlost vyměšování, stav pacienta, kombinace účinných látek, citlivost pacienta na účinnou látku a závažnost onemocnění*

Vynález ilustrují následující příklady provedení, jimiž se však 'rozsah vynález v žádném směru neomezuje*. Příprava 4 "-O-benzvloxykarbonyletoposidu ' X'!'směsT..’5','88''g','(l'0"mmol)-'etoposidu·'a -10-ml pyridinu — ve 100 ml methylenchloridu se za udržování teploty na -15 °C přidá během 30 minut 1,93 ml (15 mmol) benzyl-chlorformiátu.

Směs se další hodinu míchá při teplotě -15 °C, pak se postupně promyje 5% kyselinou chlorovodíkovou, vodným roztokem hydrogenuhličitanu.sodného a vodou, vysuší se bezvodým síranem sodným a rozpouštědlo se odpaří. Získá se 8,05 g surového produktu, který se vyčistí chromatografií na sloupci silikagelu za použití 5% methanolu v methylenchloridu jako elučního činidla. Získá se 6,93 g (96 %) 4 -O-benzyloxykarbonyletoposidu - 22 - ve formě bezbarvé.polotuhé látky o teplotě táni 152 až 155 °C. ' ' * * Γί-λ c ^; ; ,IČ .(nujol) j__„: 3200-3600 (OH), 1760 ®ĚSfa;4 '-0-benzyl- *· *v max »·· * -=* ·»·--··- . .. · · v-v. · *s> "" oxykarbonyl), 1600 ("aromátika) .r. - 1 H-NMH (60 MHz, deuterochloroform, hodnoty^ač):^7,36 (5H, s,

-0e02GH-2Ph-)t-6T81--(4Hv--s--5-H v 50.,-(-lHy - s ,-8-H-)-r- 6,25 (2H, 3,2'- á' 6 *-H), 594p (2¾¾ šs ,· 0-CH?-0),. - _ _ .....‘ " .... - ; ; - 5,23 (2H, .sy -OCOgCH^Ph), 4^8Sv;(ÍHi-(dj;J =.4 Hz, 4-H), 3,66 (6H, ^ ,:^/:, 5^00^),:12,8 .-^3,0^ (2H,.,mr. .. “2H73'3Hrfcd77iJ“S^*Hž7“ „ ·Λ.: . · Příklad 1 Příprava 2",3"-di-0-acetyletoposidu (vzorec VIII, = CH^, R2 = H, R3 = R4 = CH3C0-) (a) Příprava 2”, 2"-di-0-acetátu 4 -O-benzyloxykarbonyletoposidu K roztoku 500 mg (0,69 mmol) 4'-O-benzyloxykarbonyl-etoposidu v 10 ml pyridinu se přidá 1 ml acetanhydridu a směs se 4 hodiny míchá při teplotě místnosti. Reakce se přeruší přidáním 2 ml methanolu, reakční směs se zředí dichlormethanem a postupně se promyje vodou, 5% kyselinou chlorovodíkovou a znovu vodou. Organická vrstva se vysuší síranem sodným, zfil-truje se a filtrát se zahustí ve vakuu. Získá se 551 mg - 23 - (99 %) bezbarvé pevné látky. Tento surový pevný produkt poskytne po překrystalování. z methanolu 2",3"-di-0-acetát 4 -0---benzyloxykarbonyletoposidu J(pryní^po<ttl^ 395. mg»^ d^jiý podíl 60 mg) ve formě bezbarvých krystalů, o teplotě tání 236 až 238 °C. IČ (KBr-technika) -Jmax: 3500 (široký pás), 1770, 1610 cm UV (methanol) ^max nm (£); 290 (3950).

Analýza; pro C^H^O^y vypočteno 61,04 % C, 5,25 % H,* nalezeno 60,64 % C, 5,36 % H. (b) Příprava 2",3"-di-0-acetyletoposidu

Roztok 405 mg (0,5 mmol) produktu připraveného ve — stupni (a):. v,-.15.,ml.*směsi....ethanolu_a acetonu (4:1) se 1,5 hodiny hydrogenuje za tlaku 100 kPa v přítomnosti 400 mg 10% paladia na uhlí. Katalyzátor se odfiltruje a filtrát se zahustí ve vakuu. Získá se 360 mg (cca 100 %) bezbarvého pevného pro- csměsi duktu, který po překrystalování ze/ethylacetátu a methanolu poskytne 204 mg sloučeniny uvedené v názvu, ve formě bezbarvé krystalické látky o teplotě tání 287 až 289 °C, jejíž čistota je podle vysoce dčinné kapalinové chromatografie 90%. IČ (KBr-technika) S) Ββχ: 3500 (široký pás), 1760, 1610 cm”1. UV (methanol) Vn._ nn (1): 240 (rameno. 12780). 285 (4060). —1— »»—v^r fflSX -"--:---: -: j; Analýzá^prMCí^H^O.c. Λ i; -výpqčťeric$5:8)93^% 0, 5,39 % Hj nalezeno5’*58;56.% 0,:5,41 % H. /.¾. aí^í P ř í klad .Prí-prava^S^-O-acetátu -^--O^acětétu:^^-O^benzylóxykar-bpnyl-·-· -etoposidu K roztoku 142 mg (0,2 mmol) 4 -O-benzyloxykarbonyl-etoposidu v 8 ml pyridinu se za udržování teploty na -10 °C přidá 20^ul (0,18 mmol) acetanhydridu a 5 mg.^-dimethylamino-pyridinu. Směs se 30 minut míchá při teplotě -10 °G, načež se k ní přidá'dalších 20 ^ul (0,18 mmol) acetanhydridu. Reakční směs se dalších 30 minut míchá při teplotě -10 °C, načež se zředí dichlormethanem‘a postupně se promyje vodou, 5% kyselinou chlorovodíkovou, vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a znovu vodou. Organická fáze se vysuší síranem sodným, zfiltruje se a filtrát se zahustí ve vakuu. Získá se bezbarvý práškový materiál (117 mg), který obsahuje 4 složky, jež mají při chromatografii na tenké vrstvě silikagelu v rozpouštědlo-vém systému tvořeném směsí stejných dílů a acetonu R^, 0,56, 0,46, .0,34 a 0,24. Tato směs se rozdělí chromátografií na , sloupci silikagelu za použití 2,5% methanolu v dichlormethanu

- 25 - - 25 -

jako elučního činidla.^Frakce obsahující materiál o R„ 0,56 ·>.v‘· se spojí a odpařífř^^e^vákuu,' Čímž se získá 1 mg (1 %) , - ’'*βίτ.·? / *&-)rf. T-říf- : ‘ 2., '',3"“di-0-acetylr4^r0^benzyloxykarbonyletoposiclu (4). Obdob- . 1 .. .-.;·’!·.. ^ -v ” ·~"τ ^=. .. r . aW. ně se z frakcí obsahujících látky o R^ 0,46, 0,34 resp. 0,24 f *·, ... získají 3"-0-acetyl-4 >0-benzyloxykarbonyletoposid (3), * ·»4* ;'.·'·· 2H-0-acetyl-4"-OTbenzyioxykarbonyletoposid (2) a 4 -O-benzyl- ';-··! . * ’.Λ ·*$*#£$)’’- · · ' oxykarbonyletoposid (1) (60 mg, 42 %) ve formě bezbarvého • 'i í f prášku. Z mezilehlých frakcí se rovněž získá 18 mg směsí produktů 3 a 4, 15 mg směsi produktů 2 a 3 a 6 mg směsi pro- duktů 1 a 2. ::ή Ό.. ‘ Λ ' 2., -Q-acetvl-4 '-O-benzyloxykarbonyletoposid Teplota tání 224 až5227 °C. IČ (KBr-technika) 3400 (široký pás), 1740, 1600 cm"1. UV (methanol) ^ωχ- nm (g.): 291 (4200).

Analýza: pro C39^4Q^l6·Ó>5 H^O ~ .....---- .... vypočteno 61,25 % C, 5,27 % Hj nalezeno 60,84 % C, 5,25 % H. 3n-0-acetvl-4 -O-behzyloxykarbonvletoposid Teplota tání 139 až 145 °C. IČ (KBr-technika) ^max: 3500 (široký pás), 1770, 1600 ca-1. UV (methanol) A/max nm (£) 291 (3920).

--26- • τ - Ana lý-Z a.:_pr.o—Η400Γ6-1 2-0-,-5^Η2° vypočteno 60,54 % C, 5,34% Hj nalezeno 60,27 % C, 5,26 % H. ___ P ř í_k lad. 3 · _ Příprava 2%0-acetyÍ’etoposidu (vzorec VIII, = CH-j, R2 = H,..R3..=^CH3C0-, R4 = H) . 1

Postup popsaný v odstavci (b) příkladu 1. se opakuje za použití 25 mg (0,03mmol) 2",0-acetyl-4'-O-benzyloxykarbo-nyletoposidu. Získá se 21 mg (cca 100 %) sloučeniny uvedené v názvu, jejíž Čistota je podle vysoce účinné kapalinové chro-matografie 90%. , 2

Teplota tání 144 až 147 °C. IČ (KBr-technika) .^max2 3450 (široký Pás)» 1770, Π40, 1610 cnT1 UV (methanol) ^Ε&χ nm (£.):. 240 (rameno, 12900), 284 (4030).

Analýza: pro ^31^34^4 vypočteno 59,04 % C, 5,43 % H; nalezeno 58,65 % C, 5,46 % H. Příklad. 4 1 p Příprava 3"-0“acetyletoposidu~ (vzorec VIII, R = CH^, R c H, R3 « H, R4 = CH^CO) - 27 -

Postup popsaný v odstavci (b) příkladu 1 se opakuje . L 'VV*' . -· za použití 10 mg (0,01 mmol) 3"“0-acetyl-4 -O-benžyloxyka^ir bonyletoposidu.r Získá se 9. mg . (cca 100 %) sloučeniný^uý^ene ’ —* * - -v -JM*«4 -»»>··>-.» VK "Ot <* - *j»wfwÍ· ·> , v názvu, ve formě bezbarvého prášku, jehož čistota je podlé vysoce účinné kapalinové chromatografie 85%.

Teplota tání 226 až 228 °C. IČ (KBr-technika) ^,^.3450 (široký pás); 1760, 1610 cm-1. UV (methanol) ^max na (£.): 240 (rameno, 12610), 285 (3960).

Analýza: pro C-j-jH^O^.O, 5 HgO vypočteno 58,21 % C, 5,52 % H; nalezeno 58,22 % C, 5,42 % H. Příklad 5 Příprava 2"-0-acetyletoposidu a 3"-0-acetyletoposidu ze směsi shora popsaných produktů 2 a 3 -

SmČ3 látek 2 a 3 (60 mg; 0,08 mmol) se rozpustí v 5 ml směsi ethanolu a acetonu (4:1) a roztok se za míchání 1,5 hodiny hydrogenuje za tlaku 100 kPa v přítomnosti 30 mg -10% paladia na uhlí jako katalyzátoru. Katalyzátor se odfiltruje a filtrát se zahustí, čímž se získá 50 mg (cca 100 %) směsi polohových isomerů, která se dělí chromatografií na sloupci silikagelu. Získá se 10 mg (20 %) 2"-0-acetyletoposidu, 4 mg (8 %) 3"-0-acetyletoposidu a 30 mg (61 %) směsi těchto látek, ve formě bezbarvého prášku. 28 - 28 -

Příprava 2"J3"-di-0-formyletoposi<3u (vzorec VIII, = CH^, R2 - H,. R3 = R4 = CH0-) (a) Příprava 2M ,3"-di-0~formiátu 4'-O^benzyloxykarbonyleto-... posidu ' . _r-0-z t olw*T(X)*mg^(O7r4^^T)^4'^0-TDeh"žyl oxylcarbonyl” etoposidu v 0,7 ml pyridinu se při.teplot? 0 °C přikape směs. 1,4 ml 99% kyseliny mravenčí a 0,56 ml acetanhydridu. Reakční směs se 4 hodiny míchá při teplotě místnosti, pak se zředí di-chlormethanem a promyje se vodou. Organická fáze se vysuší síranem sodným, zfiltruje se a filtrát se zahustí ve vakuu. Získá se 122 mg bezbarvého práškového materiálu, který po vypištění ehromatbgrafií na sloupci silikagelu, ’za'použití směs: methanolu a dichlormethanu (1:50) jako elučního činidla, poskytne 91 mg (84 %) 2"i3"-di-0-formiátu 4#-Q-benzyloxykar-Jbonyletoposidu vepormě bezbarvého prášku. ^H-NMR (deuterochloroform, hodnoty ): 8,04 a 7,80 (vždy 1H, s, CHO), 7,36 (5H, s, PhCHjCO), 6,72 (1H, s, H-5), 6,53 (1H, s, H-8), 6,23 (2H, s, 2',6'-H), 5,97 (2H, s, 0CH20), 5,23 (2H, s, PhCH2C0), 5,4 - 4,0 · (9H, m), 3,66 (6H, s, 3',5^-00¾). 3,6 - 2,6 (6H, m), 1,35 (3H, d, J = 5 Hz, 8"-ÓH-j). (b) Příprava 2",3"-di-0-formyletoposidu „____Míchaný.roztok /71.mg (0,009, mmpl) produktu z od stavce (a) ve 2,5 Dl směsi ethanolu a acetonu (4:1) se 1,5 hodiny hydrogenuje za tlaku 100 kPa v přítomnosti 50 mg 10% paladia na uhlí'jako katalyzátoru. Po odfiltrování katalyzátoru se filtrát zahustí ve vakuu, čímž se získá 59 mg (cca 100 %) sloučeniny uvedené v názvu, ve formě bezbarvého prášku, jehož čistota je podle vysoce účinné kapalinové chro-matografie 80%.

Teplota tání 278 až 280 °C. IČ (KBr-tefchnika) .· Jmax:· 3400, 1760, 1740, 1610 cm"1. UV (methanol ^max nai t£): 236 (rameno, 14100), 285 (4230). ^H-NMR (deuterochlorofora,. hodnoty cT) ·* 8,04 a 7,83 (vždy 1H, ...... .........;..s,. CHQ),^ 6,72 „(1H, js,53JIH, s, H-8) , 6,23 (2H, s, 2',6'-H), 5,98 (2H, s, 0CH20), 5,6 - 4,1 (9H, m), 3,76 (6H, s, 3',5'-0CH3), 3,7 - 2,6 (6H, m 1,35 (3H, d, J = 5 Hz, 8"-CH3).

Analýza: pro C3iH320i5 -vypočteno 57,26 % C, 5,00 % H; nalezeno 57,09 % C, 5,00 % H. —30—^

Příklad ; í ·Ι·ί’ ' A·, -t- ,..·Λ ftr ,*· 'v' jí

"Příprava 2"-0-benzoá"tu, 3”-0-benzoátuta~-2", 3*-di-0-'benzoátu , »*£ v. s · »v . v-: . . " · ... -.· V 4 -O-benzyloxýkárbonyletóposidu, •av ; * · ' · " " ~*+*-4l·** Λ. * i . K roztoku;500 mg (0,7 mmol) 4 -O-behzyloxykarbo- v v ' ·’*' "”.· '·' “ ? -£i4& *:.>. * í.v, ' : nyletoposidu v 5 ml pyridinu se přidá'100)ul (0.86 mmol) - ·· * ^ .*·&· - - .·; ···'.. iszSigh.fe . . ·> ,.· benzoyíchloridu. Reakční směs se 3 dny míchá při teplotě míst Λ . 4.. ...... nosti j, : pjak ;se ; zředí, dichlormethanem a postupně se promyje ,νο-τ vV^^w '7 ÍC*.’.» *r dou, 5% kyselinou chlorovodíkovou a znovu vodou. Organická -*%*J · · vrstva se vysuší síranem sodným, zfiltruje se a filtrát se zahustí ve vakuu. Získá se světle Slutý olejovitý materiál, která obsahuje 3 nové komponenty, jež mají při chromatografii na tenké vrstvě silikagelu v rozpouštědlovém systému dichlor-methan-methanol (100:1) R^ 0,50, 0,38 a 0,21. Tato směs se > rozdělí..chromatografii na sloupci silikagelu za. použití V »·. 40% hexanu v acetonu jako elučního činidla. Získá se 30 mg ' · * (5 %) 2";3"rdi-0-benzoátu (7).(Rf 0,50) 227 mg (40 %) 3"-0-bénzoátu (6) (R^ 0,38), 70 mg (12 %) 2M,0-benzoátu (5) (R^ 0,21) a 215 mg (43 %) nezreagovaného 4 -O-benzyloxykar-bonyletopbsidu (1). S^-O-benzoét 4 *-Q-benzvloxvkarbonyletoposidu (5) IČ (KBr-technika) ^max: 3400 (široký pás), 1700, 1720, 1600 UV (methanol) /t^max nm (£): 281 (4050). - 31 - - 31 - ¢-,. lH-NMR (deuterochloroform, hodnoty cT): 7,3 - 79 (10H, m, . •ssKSs&ař*»** >«" . t -"· ^^151^)/5,17 ílii; t,'J = 8 H2, 2"-HO), 5,01 (1H, -mt. -*·* Í^E^8'-Ha,. i:rH),. 4,77 (1H, q, J - 5 Hz, 7"-H), -^3/1-^3,8 (1H, m, 3"-H), 2,75 (1H, δ, 3"-0H), 1,31 (3H, d, J= 5 Hz, 7w-CH3).

Analýza: pro. C44H42°l6 vypočteno 63,92 % C, 5,12 % H; nalezeno 63,80 % C, 5,17 % H. ^n-0-benzoát 4 *-Q-benzyloxvkarbonvletoposldu (6) -1 IČ (XBr-technika) Vmax: ^^00 (široký pás), 1770, 1600 cm UV (methanol) ) nm (£j: 225 (rameno, 30890), 281 (4300). /V lUaA . 1H-NMR (deuterochloroform, hodnoty (T*): 7,4 - 8,0 (10H, m., 2x C6H5), 5,34 (1H, t, J = 9 Hz, 3"-H), 4,74 í.lH, d, J = 8 Hz, Γ·-Η), 4,68 (1H, q, J = 5 Hz, 7"-H), 3,60 (ÍH, tá; 2"-Η), 1,28’ (3H,’ d, J- = 5 Hz, - 7^-(¾)

Analýza: pro C44H42°16 vypočteno 62,55 % C, 5,25 % H; nalezeno 62,73 % C, 5,29 % H. 2".3"-di-0-benzoét 4'-O-benzvloxvkarbonyletoposidu. Lil IČ (KBr-technika) 1770, 1730, 1600 cm"1. UV (methanol) i. _ nm (£·): 227 (rameno, 40270), 282 (4550). /vtnax - 32 - Ττ—hodnot y-eC-)-:—?-^—-7—9—(ΊΘΗ—πχ- - 32 - ϊ ' -gS^ft^PsIsl·.5’'55 (U)- 1 2’.2 8 Hz> 3"-H), 5,32 (1H, tXiuS-.-Y. = 8 Hz,:_2--H)f· 4,93 (1H, d, J = 8 Hz, 1"-H), ^Γ%50 (1H, q, 7"-H), 1,31 (3H,-d, J - '5 Hz, 7"-CH3).

Analýzar.pro '"'ř,·/ . vypočteno 65,80 % C, 4,55 % H; ; nalezeno;--6.5, 2£L% -C, 4 >-98 JS,-H. ^ 1 . - P ř í k 1 ad·; 8 - ' ,W,. 2!> .3 1 ' . Příprava 2"-O-benzoyletoposidu (VIII, R1 = CH^, R2 = H, R3 = PhCO-, R4 = H) 2 . 2 3 Míchaný roztok 54 mg (0,07 mmol) 2"-0-benzoátu ·; ... 4‘'-O-benzyloxykarbonyletoposidu ve 3 ml· směsi ethanolú a acetonu (2:1) se v přítomnosti 50 mg 10% paladia na uhlí 2 hodiny hydrogenuje za tlaku 100 kPa. Katalyzátor se odfiltruje a filtrát se zahustí, čímž se získá 40 mg (88 %) sloučeniny uvedené v názvu, ve formě bezbarvého prášku, jehož čistota je podle vysoce účinné kapalinové chromátografie 95%.

Teplota tání 289 až 292 °C. IČ (KBr-technika) ^max: 3450, 1760, 1730 cm-1. UY (methanol) ^ nm (£): 283 (4470). - 33 - ^H-NMR (deuteročhloroform, hodnoty í):^7,4^^:7,8 (5H, m, " : ' COC^H5ÍVf5jÓ7. (ΪΗΤ dd, J = 7'tS^p^H'z:, 2"-H), ~ 4^89;(lHjtdi-J‘= 7T7 Hz, 1?-H) ^8g>(lH, -q ,-~..... . J = 5,1 Hz, 7"-H), 4,23 (1H, dd, J„= 4,8 = 10,3 Hz, 6”-H ekv.), 3,98 (1H, dt, J =3,3 a 9,2 Hz, 3"-H), 3,64 (1H, t, J = 10,3 Hz, 6"-H ax.), 3,47 (1H, t, J = 9,2HZ, 4"-H), 3,40 (1H, dt, J = 4,8 a 10 Hz, 5”-H), 2,74 (1H, d, J = 3,3 Hz, 3"-0H), 1,41 (3H, d, J =5,1 Hz, 7"-CH3).

Analýza: pro C^gH^gO^.^O ' > i. vypočteno 60,84 % C, 5,11 % H; . nalezeno 61,10 % C, 5,40 % Ή. Příklad .9 "Příprava’'3”-O-benzoy 1 etópoxidu"'(vzor"šc ΥΙΙΙΓ*"CEj" R2 = H, R3.= H, R4 = PhCO) 34 mg (0,04 mmol) 3"-0-benzoátu 4 -O-benzyloxykar-bonyletoposidu se hydrogenuje postupem popsaným v příkladu 8, za vzniku 27 mg (95 %) sloučeniny uvedené v názvu, ve formě bezbarvé pevné.látky, která po vysušení sloupcovou chromato-grafií poskytne bezbarvý krystalický produkt, jehož čistota je podle vysoce účinné kapalinové chromatografie 95%. —34- . _T.ep.lb_t.ů_tání_188_až-19-l—C..- -1 . ; C: ΐδ .(KBr-techriikk),··: : .'340.0,(5iroký?pás), 1730 c® f,;t \#£’.(®etriánol·)^^ 280 (4030)· .^H-NMR^ (deuteTocKrobofořm^ 'hódriótý ‘ (^T: 7,4 - .7.»® ®v " " ' ·;^;Γ\ COPti), 5, 38Ϊ( 1H,’: Λ / j '« 9,2 Hz, 3’ -H) , 4,79 (1H, = T,7'Hz, Γ'^Η);, Hi72HlHf qv J*-5,3. HzV 7M-H), ΤΓ22"(1Η, ;dď;: V ="5/a 1Ó Hz, ), : :

Hz, 6”-H ax,), 3, 59 (ÍH, t, J “ 9,4 Hz, 4"“H), 3,47 (1H, m, 5"-H) ,· 2,.58-.(1H, š, 2”-0H),-1,31 (3H, d, J = 5,1 Hz, 7m-CH3).

Analýza: pro C36H36014-2H2° - vypočteno 59,31 % C, 4,98 % H; nalezeno :59,14% C, 5,10 % H. .“·'·* Λ ‘ . . * t · * · . * . · ;-/V' ; ' P ř í k 1 a ;d ' 10' Příprava 2",3M-0-di-benzoyletoposidu (vzorec VIII, R^· = CH^, rÁ R2 - H, R3

PhCO-)

Roztok 130 mg (0,14 mmol).2",3M-di-0-benzoátu 4 -O-benzyloxykarbonyletoposidu ve 4,5 ml směsi ethylacetátu, ethanolu a acetonu (4:4:1) se za míchání hydrogenuje postupem podle příkladu 8. Získá se 112 mg (cca 100,.%) sloučeniny uve- - 35 - děné v názvu., ve formě bezbarvé práškovité látky, jejíž . čistota jě podle, vysoce dčinné, kapalinové .chromátografie 90%. -Teplota tání..vyšší než .295 ... .. __________ .„ ... ...... IČ (KBr-technika) \ 1770, 1730 cm v max UV (methanol) \ nm (£.): 226 (rameno, 24200), 281 (3470). Λ-max . ^H-KMR (deuterochloroform, hodnoty ^*): 7,3 -.8,0 (10H, m, 2 x C0C6H5), 5,67 (1H, t, J = 9,5 Hz, 3"-«), 5,35 . (1H, dd, J - 8,1 a 9,7 Hz, 2"-H), 4,98 (1H, d, J = 8,1 Hz, 1"-H>, 4,73 (1H, q, J = 4,8 Hz, 7"-H), 4,28 (1H, dd, J = 4,4 a 10,3 Hz, 6"-H ekv.), 3,69 (1H, t, J = 9,5 Hz; 4"“H), 3,67 (1H, t, J = 10 Hz, , 6"-H ax.), 3,56 (1H, dt, J = 9,5 a 10 Hz, 5"-H), 1,33 (3H, d, J = 4,8 Hz, 7"-CH3).

Analýza: pro C43H40°i5*a2° ..vypočtena.63,39 %'.C,^5.,.20 % H;. _..................... .. .. ....... ..........._ _______ nalezeno 62,99 %' C, 4,99 % H. Příklad 11

Pracuje ee postupem popsaným v příkladu 1, za použití 4 -O-benzyloxykarbonylteniposidu namísto 4*-0-benzyloxy-karbonyletoposidu. Získá se 2",3"-di-0-acetylteniposid.

6 - .Příklad 12 P03tup podle příkladu 2 až 4 se opakuje s tím, že'se místo 4 '-C-oensyloxykarbonyletoposidu· použije 4r-0-benzyl-oxyi^bonyrtěríiposidl^Zí^ka^í se 2"-0-acetylteniposid. a 3"-υ-scetylteniposid. ''. . - . - - V . .i ; __,_y______P ř í ti a d_ 1 3 . __—___!_— ..... Obecný, postup .podle příkladu 6 se opakuje, za. použití 4 -O-benzyloxykarbonylteniposidu místo 4,-0-benzýloxykarbo-. J&le/tópqeiáu·' Získáme 2*:if -di-p-formyltje.nlpps.id. r;...... 14 Příklad

Obecný postup podle příkladu 7 až 10 se opakuje za použití ^'-O-benzyloxjfkérbonýlfénipošidu místo 4/-C-benzyloxy-karbonyletoposidu. Získají se 2f"-G-benz3y,lteniposid, 3"-O- i* · ben%lteniposi& a 2 ,3"-di-0-benzoylteniposid.

Průmyslová - využitelnost acylovaný derivát e;oipo'doí“,yiotqxinu, určený oře iéčou plicnich nádorů 3 nádorů varlat, způsob jeho výroby a použití jakožto účinné látky protinádorovýcn prostředků'pro savce*

Claims (5)

1. -P A ϊ T O 7 b - J7 -í > o o<ci ct C/T <rt Γ* Zj ' : X 1 t\= ř - > ·: í> : m .-=· k ; . 1» Cl--'i -< n ; -i* í to» re i . i κ r

   0CK3 L\ ,2. v. 1 Λ a K3 a snsmsná z ten- vozíku--a — ,........ .. sikyiovcu skulinu s 1 až 10 s skupinu se 2 ez 10 steny uhlíku, skupinu s 5 až.. 6 atomy uhlíku, 2-thienylovou skupinu, aryiovou torny uhlíku nebo sralkylovou skupí;' zhlíku nebo 2 R. vždy aikýlovou skupinu s 1 až 10 atomy uhlíku nebo spolu s atomem uhlíku, na který jsou vázány, tvoří cykloaikylovců skupinu s 5 až 6 atomy uhlíku, jeden, znamená atom vodíku a druhý alkancylovcu skupinu s 1 až o atomy uhlíku nebo benzoylcvcu skupinu, v/ uhlíku, enylovou , cykloe^kylovcu 2-furylovou skupinu, slcupinu se 6 až 10 s- ipinu se 7 až. 14 atomy nebo vady stejnou skupinu r.oylcvou skupinu s 1 až 5 a 3kučinu a ze souboru zahrnujícího s-ima· r:v uhlíku benzoyiovou -1 -7 . O Q. i ' a ' 5 C_ · X c| 3 w 1 V m j ·< n j ÍO ' 1 Cfí ri N } —*J _I co -nt- atom vodíku nebo fosfátovou skuiinu. J
2. 2. Acylovaný. derivát epipodofylotoxinu podle nároku i dběer;,.. něho vzorce. VIII, kde znamená ě tom '-vodíku, r\‘metalo vou|M!^^·. "skupinu, 2RtlTieny±ovcu shuoinu nebo fěňvlovou skupinu a c’s;^t|£F7" tatni·, symboly; mg jí. v,-; nároku 1 uvedený význam, . pjvtá-á'·^··, 3. Acylovaný derivát epipodofylotoxinu podle nároku 2' o-becného vzorce. VIII, kde znamená R1' methylovou skupinu a os.-· tatní symboly mají v- nároku 2..uvedený význam· ' vy
3. 4. Acylovaný derivát epipodofylotoxinu podle nároku .1 Ό-. becného »vzorce-: -V-I-IL·,-,] kde·,, znamená rlč-i a; Ralkynoy-lb-ve- -skupiny ·1 > ·--s—l~sž—d^atomy^uh-l-í-ku-a^ostat-ní—symboly-nns-jí^v^nároku-l—uvede--ný význam. " . ’ ' y· Acylovaný derivát epipodofylotoxinu: podlé nároku, 1 o-becného vzorce VIII, kde znamená jeden ze symbolů ε atom vodíku s druhý alkanoylovou skupinu s i až 5 atomy uhlíku nebo benzoylovou skupinu a ostatní symboly mají v nároku • 1 uvedený význam. 6. «cylovený derivát epipódofylotoxinu podle nároku 4 c- •becného vzorce VIII,. kde .znamená· e! methylovou skupinu nebo 2-thienyicvou skupinu'a ostatní symboly mají v nároku <f uvedený význam. '
4. 7. Ecylovaný derivát epipodofylotoxinu podle nároku 6 o-oecriéhó vzorce VIII, kde znamená R^ methylovou skucinu, a 4 5 2 R vždy formylovcu skupinu, R' atom vodíku a 3 ' má význam, u-vedený v nároku 6.
5. 8. Acylovaný derivát epipodofylotoxinu podle nároku 6 o-oecnéhc vzorce VIII, kde znamená methylovou skupinu, R^ a R^ vždy acetylovou skupinu, atom vodíku a R^ má význam u-vedený v nároku o. . á. Acylovaný derivát epipodofylotoxinu podle nároku 3 o-becného vzorce VIII, kde znamená R a ΡΛ vždy benzoylovou

   skul inu, R-.stom vouixu ci ostatní symcciy a» 31 v nárcxu j u- .veoeny vyznám. *•-^1:» * "V ·Λ . Λ

   •1- j£iS£:. *'’"·''symbolů'pP · a atom - vo^íl^-a liruhý ''alkanoylovou 'skupinu-Š 2 až p atomy uhlíku a ostatní symboly mají v nároku· 3 uvedený význam. 11· Acyloveny derivát epipodofýlotoxmu podle' nárokuj- : : obecného vzorce VIII, kde znamená R atom vodíku·, jjeden že·;."' symbolů a R^ atom vodíku a druhý benzoylovou skupinu a ostatní symboly mají v nároku 3 uvedený' význam.-, 1 Irotinádorově účinný farmaceutický prostředek pro: savce, vyznačující x m, ie obsahuje účin né množství sloučeniny podle nároku i až 11, obecného vzorce VIII, kde jednotlivé symboly mají v nároku 1 až 11 uvedený význam, a farmaceuticky vhodný nosič.