CZ287050B6 - Modified oligodeoxyribonucleotides, pharmaceutical preparations containing thereof and intermediates - Google Patents

Modified oligodeoxyribonucleotides, pharmaceutical preparations containing thereof and intermediates Download PDF

Info

Publication number
CZ287050B6
CZ287050B6 CZ1994190A CZ19094A CZ287050B6 CZ 287050 B6 CZ287050 B6 CZ 287050B6 CZ 1994190 A CZ1994190 A CZ 1994190A CZ 19094 A CZ19094 A CZ 19094A CZ 287050 B6 CZ287050 B6 CZ 287050B6
Authority
CZ
Czechia
Prior art keywords
group
formula
atom
benzyloxy
oxygen
Prior art date
Application number
CZ1994190A
Other languages
English (en)
Other versions
CZ19094A3 (en
Inventor
Hidehiko Furukawa
Kenji Momota
Hitoshi Hotoda
Makoto Koizumi
Masakatsu Kaneko
Original Assignee
Sankyo Co
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Sankyo Co filed Critical Sankyo Co
Publication of CZ19094A3 publication Critical patent/CZ19094A3/cs
Publication of CZ287050B6 publication Critical patent/CZ287050B6/cs

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H19/00—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof
    • C07H19/02—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof sharing nitrogen
    • C07H19/04—Heterocyclic radicals containing only nitrogen atoms as ring hetero atom
    • C07H19/16—Purine radicals
    • C07H19/20—Purine radicals with the saccharide radical esterified by phosphoric or polyphosphoric acids
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H21/00—Compounds containing two or more mononucleotide units having separate phosphate or polyphosphate groups linked by saccharide radicals of nucleoside groups, e.g. nucleic acids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7042—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings
    • A61K31/7052—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides
    • A61K31/706—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom
    • A61K31/7064—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines
    • A61K31/7076—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines containing purines, e.g. adenosine, adenylic acid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H21/00—Compounds containing two or more mononucleotide units having separate phosphate or polyphosphate groups linked by saccharide radicals of nucleoside groups, e.g. nucleic acids
    • C07H21/04—Compounds containing two or more mononucleotide units having separate phosphate or polyphosphate groups linked by saccharide radicals of nucleoside groups, e.g. nucleic acids with deoxyribosyl as saccharide radical
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
    • C12N15/113—Non-coding nucleic acids modulating the expression of genes, e.g. antisense oligonucleotides; Antisense DNA or RNA; Triplex- forming oligonucleotides; Catalytic nucleic acids, e.g. ribozymes; Nucleic acids used in co-suppression or gene silencing
    • C12N15/1131—Non-coding nucleic acids modulating the expression of genes, e.g. antisense oligonucleotides; Antisense DNA or RNA; Triplex- forming oligonucleotides; Catalytic nucleic acids, e.g. ribozymes; Nucleic acids used in co-suppression or gene silencing against viruses
    • C12N15/1132—Non-coding nucleic acids modulating the expression of genes, e.g. antisense oligonucleotides; Antisense DNA or RNA; Triplex- forming oligonucleotides; Catalytic nucleic acids, e.g. ribozymes; Nucleic acids used in co-suppression or gene silencing against viruses against retroviridae, e.g. HIV
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
    • C12N2310/30—Chemical structure
    • C12N2310/32—Chemical structure of the sugar
    • C12N2310/321—2'-O-R Modification
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
    • C12N2310/30—Chemical structure
    • C12N2310/33—Chemical structure of the base
    • C12N2310/336—Modified G
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
    • C12N2310/30—Chemical structure
    • C12N2310/35—Nature of the modification
    • C12N2310/351—Conjugate

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • AIDS & HIV (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Saccharide Compounds (AREA)

Description

Oblast techniky
Vynález se týká skupiny nových modifikovaných oligodeoxyribonukleotidů s velmi dobrým protivirovým účinkem. Vynález se týká rovněž způsobu výroby těchto látek a farmaceutických prostředků, které tyto látky obsahují a které jsou určeny k léčení a profylaxi virových infekcí, zvláště infekcí virem HTV, který způsobuje AIDS a také k inhibici proliferace nádorových buněk.
Dosavadní stav techniky
Je známo, že oligodeoxyribonukleotidy (antimediátorové oligodeoxyribonukleotidy) s řetězcem, komplementárním k řetězci určitého genu působí inhibici funkční exprese tohoto genu. Jsou také uváděny zprávy o tom, že tyto látky komplementární ke genu viru nebo onkogenu mohou způsobit inhibici replikace viru nebo inhibici množení nádorové buňky tak, že působí inhibici funkce odpovídajících genů, jak bylo popsáno v publikacích P.C. Zamecnik, M. L Stephenson, proč. Nati. Acad. Sci., USA, 75, (1), 280, 1978 a P.C. Zamecnik, J. Goodchild, Y. Taguchi, Sarin, Proč. Nati. Acad. Sci., USA, 83, (6), 4143, 1986.
Dříve bylo předpokládáno, že ktomu, aby antimediátorové oligodeoxyribonukleotidy měly uvedený účinek, měly by být schopné vytvářet in vivo stálý hydris s cílovou RNA nebo DNA a měly by tedy mít délku řetězce alespoň 15 nukleotidů. Obecně však je obtížné syntetizovat takové látky s výtěžkem a čistotou, která by umožnila jejich praktické použití. Mimoto nejsou antimediátorové oligodeoxyribonukleotidy dostatečně účinné ktomu, aby mohly způsobit takovou inhibici replikace viru nebo takovou inhibici množení buněk, aby bylo možno je použít k léčebným účelům. Mimoto je toxicita těchto buněk vzhledem ke zdravým buňkám hostitele poměrně vysoká.
Přestože jsou známé oligodeoxynukleotidy s krátkým řetězcem, bylo dříve předpokládáno, že tyto látky mají jen nízký inhibiční účinek. Z tohoto důvodu se většina vědeckých pracovníků soustředila na výzkum oligodeoxyribonukleotidů s poměrně dlouhým řetězcem. Například v PCT patentové přihlášce, zveřejněné pod číslem WO 88/87544, které je nejbližším známým stavem techniky se popisují oligonukleotidy s obsahem pouze čtyř jednotek bází. V praxi však byly zkoušeny pouze látky s podstatně větším počtem jednotek.
Nyní bylo zjištěno, že některé modifikované oligodeoxyribonukleotidy, které jsou tvořeny různými řetězci bází a které jsou připraveny zavedením různých substituentů na 5'- a/nebo 3'zakončení mají velmi dobrou účinnost proti viru, který vyvolává onemocnění AIDS, přičemž toxicita těchto látek vzhledem k normálním buňkám hostitele je nízká. Mimoto, což má velký praktický význam, lze takto modifikované oligodeoxyribonukleotidy snadno syntetizovat při použití jednoduchých a známých postupů.
Podstata vynálezu
Podstatu vynálezu tvoří skupina nových modifikovaných oligodeoxynukleotidů, které mají některé zajímavé farmakologické účinky při poměrně nízké toxicitě proti normálním buňkám hostitelského organismu.
-1 CZ 287050 B6
Podstatu vynálezu tvoří zvláště takové modifikované oligodeoxyribonukleotidy, které jsou schopné způsobit inhibici replikace cizorodých nukleových kyselin v normálních buňkách a které je proto možno použít k léčení a profylaxi virových infekcí včetně AIDS a celé řadě nádorových onemocnění.
Podstatu vynálezu tvoří také způsoby výroby těchto nových modifikovaných oligodeoxyribonukleotidů a meziprodukty, které se užívají v průběhu způsobu výroby těchto nových sloučenin.
Podstatu vynálezu tvoří rovněž farmaceutické prostředky, které tyto nové látky obsahují a které jsou určeny k profylaxi a k léčení některých virových a nádorových onemocnění.
Podstatu vynálezu tvoří zejména modifikované oligodeoxyribonukleotidy, které je možno vyjádřit obecným vzorcem I
5*
Rz-Z-Yi—B » r3
H m
(I) kde
Ri, Ri a R3 se nezávisle volí ze skupiny atom vodíku, alkylové skupiny, obsahující 1 až 4 atomy uhlíku, arylové spiny ve významu, který bude dále uveden a antrichinonylové skupiny, které jsou nesubstituované nebo jsou substituovány alespoň jedním substituentem, který se s výhodou volí ze skupiny substituentů 1, tak jak bude dále definována a
Z znamená atom uhlíku nebo atom křemíku, nebo
R2, R3 a Z společně tvoří fluorenylovou nebo xynthenylovou skupinu,
Ri znamená atom vodíku, nesubstituovanou alkylovou skupinu obsahující 1 až 4 atomy uhlíku, substituovanou alkylovou skupinu, obsahující 1 až 4 atomy uhlíku a substituovanou alespoň jedním substituentem, který se s výhodou volí ze skupiny substituentů 2, tak jak bude dále definována, arylovou skupinu v dále uvedeném významu nebo aralkylovou skupinu v dále uvedeném významu,
Y], Y3 a Y4 se nezávisle volí ze skupiny atom kyslíku, atom síry nebo skupinu vzorce >NH,
Y2 znamená atom kyslíku, atom síiy, skupinu vzorce >NH, alkylenovou skupinu, obsahující 1 až 4 atomy uhlíku nebo fenylovou skupinu,
X znamená nesubstituovanou alkylovou skupinu, obsahující 1 až 10 atomů uhlíku nebo alkylovou skupinu, která obsahuje 1 až 10 atomů uhlíku a je substituována alespoň jednou hydroxyskupinou, man nezávisle znamenají 0 nebo celé číslo v rozmezí 1 až 10, a
B znamená oligodeoxyribonukleotid, jehož délka řetězce jev rozmezí 3 až 9, přičemž arylovou skupinou je aromatická skupina s uhlíkovým kruhem, která obsahuje 6 až 20 atomů uhlíku v 1 až 5 kruzích a která je nesubstituovaná nebo substituovaná alespoň jedním substituentem, kteiý se volí ze skupiny substituentů 1, tak jak bude dále definováno, aralkylovou
-2CZ 287050 B6 skupinou je alkylová skupina, která obsahuje 1 až 10 atomů uhlíku a která je substituována alespoň jednou arylovou skupinou ve svrchu uvedeném významu, skupinu substituentů 1 tvoří alkylové skupiny, obsahující 1 až 4 atomy uhlíku, halogenalkylové skupiny, obsahující 1 až 4 atomy uhlíku, atomy halogenu, nitroskupiny, kyanoskupiny, aminoskupiny, alkoxyskupiny, obsahující 1 až 4 atomy uhlíku, alkylthioskupiny, obsahující 1 až 4 atomy uhlíku, arylové skupiny, tak jak byly svrchu definovány, aryloxyskupiny, v nichž arylová část byla svrchu definována aralkyloxyskupiny, v nichž aralkylová část má svrchu definovaný význam za předpokladu, že v případě, že substituent ze skupiny substituentů 1 znamená aiylovou skupinu nebo skupinu, která obsahuje arylovou skupinu, která je substituována další arylovou skupinou nebo skupinou, která aiylovou skupinu obsahuje, pak tato další skupina j iž není substituována arylovou skupinou nebo skupinou, která arylovou skupinu obsahuje a substituenty 2 se volí ze skupiny tvořené aminoskupinami, alkoxyskupinami, které obsahují 1 až 4 atomy uhlíku a atomy halogenu, jakož i farmaceuticky přijatelné soli těchto sloučenin.
Farmaceutické prostředky, které rovněž tvoří součást podstaty vynálezu a které jsou určeny pro léčení a profylaxi virových infekcí obsahují jako svou účinnou složku alespoň jeden oligodeoxyribonukleotid, který se volí ze skupiny nových sloučenin, tak jak byly svrchu vyjádřeny obecným vzorcem 1.
Při podávání těchto farmaceutických prostředků k léčení nebo profylaxi virových infekcí u savců včetně člověka se postupuje tak, že se savci podá takové množství farmaceutického prostředku podle vynálezu, které obsahuje účinnou dávku alespoň jednoho oligodeoxyribonukleotidu, který se volí ze skupiny nových sloučenin, vyjádřených obecným vzorcem 1.
Podstatu vynálezu tvoří také meziprodukty, které je možno použít při uskutečnění způsobu výroby nových sloučenin podle vynálezu. Tyto postupy budou včetně požitých meziproduktů dále podrobněji popsány.
Nové modifikované oligodeoxyribonukleotidy podle vynálezu je ke svrchu uvedeným účelům nutno získat ve formě, která je prosta případných vedlejších produktů, které mohou při reakci vzniknout.
Ve sloučeninách podle vynálezu v případě, že symboly Rj, R2 nebo R3 znamenají alkylové skupiny, může jít o alkylové skupiny s přímým nebo rozvětveným řetězcem, které obsahují 1 až 4 atomy uhlíku, příkladem těchto skupin mohou být methyl, ethyl, propyl, izopropyl, butyl, izobutyl, sek. butyl a také terč, butyl. Z uvedených skupin je zvláště výhodná terc.butylová skupina.
V případě, že symboly Rb R2 nebo R3 ve sloučeninách podle vynálezu znamenají arylové skupiny, může jít o aromatické skupiny s uhlíkovým kruhem, které obsahuje 6 až 20 atomů uhlíku v kruhu, s výhodou obsahují 6 až 16 atomů uhlíku v kruhu, ještě výhodněji mohou obsahovat 6 až 10 atomů uhlíku v kruhu, a nej výhodnější počet je 6 až 10 atomů uhlíku v kruhu, přičemž tento kruh je nesubstituovaný nebo může být substituován alespoň jedním substituentem, který se volí ze skupiny, tvořené skupinou substituentů 1, tak jak byla svrchu uvedena a jak bude dále osvětlena příklady jednotlivých použitelných skupin. Příkladem nesubstituovaných skupin mohou být fenyl, 1-naftyl, 2-naffyl, fenanthren-A-yl, anthracen-9-yl, anthracen-2-yl a pyrenyl. Z těchto skupin jsou velmi výhodnými skupinami naftylová a fenylová skupina, nejvýhodnější skupinou je fenylová skupina. Substituovanými skupinami mohou být kterékoli z uvedených skupin, přičemž substituentem může být jeden nebo větší počet substituentů ze skupiny 1, tak jak byla tato skupina svrchu definována a jak bude dále osvětleno
-3CZ 287050 B6 na jednotlivých příkladech. Neexistuje žádné zvláštní omezení, týkající se počtu substituentů až na to, které může být tvořeno počtem substituovatelných poloh (například 5 z případě fenylové skupiny nebo 7 v případě naftylové skupiny) a popřípadě prostorovými zábranami. Obvykle je však výhodně použití 1 až 5 takových substituentů, s výhodou 1 až 3 substituenty a zvláště 1 nebo 2 substituenty. Specifickými příklady substituentů ze skupiny 1 mohou být následující skupiny:
alkylové skupiny, obsahující 1 až 4 atomy uhlíku, například methyl, ethyl, propyl, izopropyl, butyl, izobutyl, sek.butyl a terc.butyl, z těchto skupin jsou výhodné methylová a terc.butylová skupina, halogenalkylové skupiny, obsahující 1 až 4 atomy uhlíku, například fluormethyl, trifluormethyl, trichlormethyl, 2,2,2-trifluorethyl, 2,2,2-trichlorethyl, 2-fluorethyl, 2chlorethyl, 2-jodiethyl, 2-chlorpropyl, 4—fluorbutyl a 6-jodhexyl, z těchto skupin jsou výhodné zejména 2,2,2-trichlorethylová a trifluormethylová skupina, atomy halogenu, například atom fluoru, chloru, bromu a jodu, z těchto atomů jsou výhodné zejména atom chloru a fluoru, nitroskupiny, kyanoskupiny, aminoskupiny, alkoxyskupiny, obsahující 1 až 4 atomy uhlíku, například methoxy-, ethoxy-, propoxy-, izopropoxy-, butoxy-, izobutoxy-, sek.butoxy- a terc.butoxyskupina, z těchto skupin jsou zvláště výhodné methoxyskupina a terc.butoxyskupina, alkylthioskupiny, obsahující 1 až 4 atomy uhlíku, například methylthio-, ethylthio-, propylthio-, izopropylthio-, butylthio-, izobutylthio-, sek.butylthio- a terc.butylthioskupina, z těchto skupin jsou výhodné zvláště methylthioskupina a terc.butylthioskupina, arylové skupiny, tak jak byl svrchu definovány, nejvýhodnější je fenylová skupina, aryloxyskupina, v nichž arylová část má svrchu definovaný význam, nejvýhodnější skupinou je fenoxyskupina a aralkyloxyskupiny, v nichž aralkylová část má svrchu definovaný význam, jde například o benzyloxyskupinu a dibenzyloxybenzyloxyskupinu, zvláště výhodná je 3,5-dienzyloxybenzyloxyskupina.
Je zřejmé, že zatímco arylová skupina nebo skupina, která arylovou skupinu obsahuje, může být substituována další takovou skupinou, další substituce je již omezena v tom smyslu, že v případě, že substituent 1 znamená arylovou skupinu nebo skupinu, obsahující arylovou skupinu, která je substituována další arylovou skupinou nebo skupinou, která arylovou skupinu obsahuje, pak tato další skupina již nemůže být substituována arylovou skupinou nebo skupinou, která arylovou skupinu obsahuje.
Specifickými příklady substituovaných arylových skupin mohou být 4—methylfenyl, 4terc.butylfenyl, 2-fenylfenyl, 4-fenylfenyl, 4-fluorfenyl, 2-chlorfenyl, 4-chlorfenyl, 4bromfenyl, 4-jodfenyl, 2,4-difluorfenyl, 4-nitrofenyl, 4-terc.butoxyfenyl, 4-methoxyfenyl, 4ethoxyfenyl, 3-fenoxyfenyl, 4-fenoxyfenyl, 2-benzyloxyfenyl, 4-benzyoxyfenyl, 3,4-dibenzyloxyfenyl, 3,5-dibenzyloxyfenyl, a 3,5-bis(3,5-dibenzyloxybenzyloxy)fenyl. Ze substituovaných a nesubstituovaných arylových skupin je zvláště výhodnou skupinou fenyl, 4-methoxyfenyl, 3,4dibenzyloxyfenyl, 3,5-dibenzyloxyfenyl a 3,5-bis(3,5-dibenzyloxybenzyloxy)fenylová skupina.
-4CZ 287050 B6
V případě, že Rj, R2 nebo R3 znamenají antrachinonylovou skupinu, může tato skupina být nesubstituovaná nebo může být substituována jedním nebo větším počtem substituentů ze skupiny 1, tak jak byla svrchu definována a uvedena příklady. V případě, že skupina je substituována, může být substituována alespoň jedním substituentem, který se volí ze svrchu definované skupiny substituentů 1. Neexistuje žádné zvláštní omezení, týkající se počtu přítomných substituentů až na to, které je tvořeno počtem substituovaných poloh a popřípadě prostorovými zábranami. Výhodné je použít 1 až 5 substituentů, s výhodou se užijí 1 až 3 substituenty, nejvýhodnější je jeden substituent. Příkladem vzniklých skupin mohou být 9,10antrachinon-l-yl, 9,10-antrachinon-2-yl, 4-methyl-9,10-antrachinon-l-yl, 5-methoxy-9,10antrachinon-l-yl, 7-chlor-9,10-antrachinon-l-yl, 8-fluor-9,10-antrachinon-2-yl, 6-ethyl9,10-antrachinon-2-yl, 8-ethoxy-9,10-antrachinon-2-yl, a 6-hydroxy-9,10-antrachinon-l-yl. Z těchto skupin je zvláště výhodná nesubstituovaná antrachinonylová skupina.
R2, R3 a Z mohou společně tvořit také fluorenylovou nebo xanthenylovo skupinu, v tomto případě jde s výhodou o fluoren-9-ylovou nebo xanthen-9-ylovou skupinu.
V případě, že R4 znamená alkylovou skupinu, může jít o některou ze skupin, které byly svrchu uvedeny ve významu symbolu Rj, skupiny mohou být nesubstituované nebo substituované.
V případě, že jde o substituované skupiny, mohou tyto skupiny být substituovány alespoň jedním substituentem ze svrchu uvedené skupiny 2. Příkladem substituentů ze skupiny 2 mohou být aminoskupiny, alkoxyskupiny o 1 až 4 atomech uhlíku atomy halogenu, stejně jako v případě substituentu 1. Specifickými příklady takových substituovaných a nesubstituovaných alkylových skupin mohou být methyl, ethyl, 2-aminoethyl, 2-methoxyethyl, propyl, izopropyl, butyl, izobutyl, sek.butyl a terc.butyl. Z těchto skupin jsou zvláště výhodné methyl, ethyl, 2aminoethyl, 2-methoxyethyl a propyl.
V případě, že R4 znamená arylovou skupinu, může jít o jakoukoliv z arylových skupin, které byly svrchu uvedeny jako příklady skupin ve významu Rj, přičemž může jít o substituované nebo nesubstituované skupiny. Jako příklad těchto skupin je možno uvést fenyl, alkylfenyl, například 2-methylfenyl nebo 3-ethylfenyl, halogenovaný fenyl, například 2-fluorfenyl, 2-chlorfenyl, 4chlorfenyl, 2-bromfenyl nebo 2-jodfenyl, nitrofenylové skupiny, jako 2-nitrofenyl nebo 4nitrofenyl, alkoxyfenylové skupiny, například 4-methoxyfenyl nebo 4-ethoxyfenyl, alkylthiofenylové skupiny, například 4-methylthiofenyl nebo 4-ethylthiofenyl a dále naftyl, fenanthrenyl, anthracenyl a pyrenyl. Z těchto skupin je zvláště výhodné nesubstituovaný fenyl, halogenovaný fenyl a nitrofenyl.
V případě, že R4 znamená aralkylovou skupinu, jde o alkylovou skupinu, obsahující 1 až 4 atomy uhlíku a substituovanou alespoň jedním, s výhodou 1, 2 nebo 3, s výhodou jedním substituentem, kterým je arylová skupina ve svrchu uvedeném významu. Příkladem takových skupin mohou být benzyl, methylbenzyl, ethylbenzyl, methoxybenzyl, ethoxybenzvl, fluorbenzyl, chlorbenzyl, brombenzyl, chlomaftylmethyl, indenylmethyl, fenanthrenylmethyl, anthracenylmethyl, difenylmethyl, trifenylmethyl, 1-fenethyl, 2-fenethyl, 2,2-difenylethyl, 2,2,2-trifenylethyl, 3,3,3—trifenylpropyl, l-naftylethyl, 2-naftylethyl, 1-fenylpropyl, 2-fenylpropyl, 3-fenylpropyl, 1-naftylpropyl, 2-naftylpropyl, 3-naftylpropyl, 1-fenylbutyl, 2-fenylbutyl, 3-fenylbutyl, 4-fenylbutyl, 1-nafty lbutyl, 2-naftylbutyl, 3-naftylbutyl, 4-naftylbutyl, 1-fenylpentyl, 2-fenylpentyl, 3fenylpentyl, 4-fenylpentyl, 5-fenylpentyl, 1-naftylpentyl, 2-naftylpentyl, 3-naftylpentyl, 4naftylpentyl, 5-naftylpentyl, 1-fenylhexyl, 2-fenylhexyl, 3-fenylhexyl, 4-fenylhexyl, 5-fenylhexyl, 6-fenylhexyl, 1-naftylhexyl, 2-naftylhexyl, 3-naftylhexyl, 4-naftyihexyl, 5-naftylhexyl a 6-naftylhexyl. Z těchto skupin je výhodný zejména nesubstituovaný benzyl nebo 2-fenethyl.
V případě, že Y2 znamená alkylenovou skupinu, může jít o methylenovou, ethylenovou, propylenovou, tetramethylenvou nebo pentamethylenvou skupinu. Z těchto skupin je výhodná zejména methylenová skupina.
-5CZ 287050 B6
Yi, Y3 a Y4 s výhodou znamená atomy kyslíku.
*
Y2 s výhodou znamená atom kyslíku nebo atom síry.
Z s výhodou znamená atom uhlíku.
V případě, že X znamená alkylenovou skupinu s přímým nebo rozvětveným řetězcem, popřípadě substituovanou hydroxyskupinou, je možno jako příklady těchto skupin uvést methylenovou, methylmethylenovou, ethylenovou, propylenovou, tetramethylenovou, methylethylenovou, 1methyltrimethylenovou, 2-methyltrimethylenovou, 2-methyltetramethylenovou, 3-methyltrimethylenovou, pentamethylenovou, hexamethylenovou, heptamethylenovou, oktamethylenovou, nonamethylenovou, dekamethylenovou, 2-hydroxytrimethylenovou nebo 2-hydrox\tetramethylenovou skupin. Z těchto skupin je výhodná zejména methylenová, methylmethylenová, ethylenová nebo methylethylenová skupina.
Výhodnými hodnotami pro každý ze symbolů m a n je celé číslo 0 až 6. Zvláště výhodným významem pro symbol m je celé číslo 0 až 4.
Oligodeoxyribonukleotidy ve významu B mají s výhodou délku řetězce 4 až 8 a zvláště 5 nebo 6. Mimoto je výhodné, aby čtvrtým deoxyribonukleotidem od 5'-zakončení yl guanindeoxyribonukleotid.
Typickými výhodnými oligodeoxyribonukleotidy jsou ty sloučeniny, které jsou dále uvedeny ve skupině alfa, výhodnější z nich jsou uvedeny v následující skupině beta, přičemž použité zkratky v obou skupinách alfa a beta mají následující význam:
A: adenindeoxyribonukleotid,
G: guanindeoxyribonukleotid,
C: cytosindeoxyribonukleotid,
T: thymindeoxyribonukleotid, mC: 5-methylcytosindeoxyribonukletodi, mG: O6-methylguanindeoxyribonukleotid.
Pod pojmem „levý konec“ se rozumí 5'-zakončení a pod pojmem „pravý konec“ se rozumí 3'zakončení za předpokladu, že na žádném z těchto zakončení v oligodeoxyribonukleotidu se nenachází hydroxyskupina.
Skupina alfa:
TGGGAG, TGGGA, TGGG, TGGG, TGGGAGG, CGGGAGG, TTGGAGG, TTGGGAGG, TGCGAGG, GGGGAGG, mCGGGAGG, mCGmCGAGG, CTGGGAGG, GGGCGGGGC, TAGGAGG, TGGCAGGT, TGGGCGCAG, CCG, TCGGAGG, TGmCGAGG, CTGGGAGG, TG, TGGGAmGG, TGGGAGA, AATGGGAGG, TTGGGG, TGGGGG, CGGGG, CGCGG, CGGGT, TGGGC, TGGGT.
Skupina beta:
TGGGAG, TGGGA, TGGGG, TGGG, TGGGAGG, CGGGAGG, TTGGAGG, TTGGGAGG, TGCGAGG, GGGGAGG, mCGGGAGG, mCGmCGAGG, CTGGGAGG, TTGGGG, TGGGGG, CGGGG, CGCGG.
Výhodnou skupinou obecného vzorce R]R2R3-Y] na 5'-zakončení je trifenylmethyloxy-, 3,4(dibenzyloxy)benzyloxy-, 3,5-(dibenzyloxy)benzyloxy-, 3,5-bis/3,5(dibenzyIoxy)benzyl
-6CZ 287050 B6 oxy/benzyloxy-, terc.butyldifenylsilyloxy-, fenylfluorenyloxy- nebo fenylxanthenylxyskupina, zvláště výhodná je trifenylmethoxy-, 3,4-(dibenzyloxy)benzyloxy- nebo 3,5-(dibenzyloxy)benzyloxyskupina.
Výhodou skupinou z obecného vzorce /P(O)(Y2R4)-Y3-(X-Y4)n/mH na 3'-zakončení je atom vodíku, methylfosforyl, 2-chlorfenylfosforyl, O-methylthiofosforyl, methylfosfonyl, methylthiofosfonyl, fenylfosfonyl, 2-hydroxyethylfosforyl, 0-(2-hydroxyethyl)thiofosfoiyl, fenylfosforyl, 4-chlorfenylfosfoiyl, 2-nitroenylfosforyl, 4-nitrofenylfosforyl, ethylfosforyl nebo O-ethylthiofosforyl, zvláště atom vodíku, methylfosforyl, 2-chlorfenylfosforyl, 0methylthiofosforyl, methylfosfonyl, methylthiofosfonyl, fenylfosfonyl, 2-hydroxyethylfosforyl nebo 0-(2-hydroxyethyl)thiofosfoiyl.
Výhodnými sloučeninami podle vynálezu jsou ty látky, v nichž
1) délka řetězců B je 4 až 8,
2) délka řetězců B je 5 nebo 6,
3) délka řetězců B je 4 až 8 a čtvrtým deoxyribonukleotidem od 5'-zakončení B je guanidin deoxyribonukleotid,
4) skupinou vzorce RiR2R3Z-Yi na 5'-zakončení je trienylmethyloxy-, 3,4—(dibenzyloxy)benzyloxy-, 3,5-(dibenzyloxy)benzyloxy-, 3,5-bis-/3,5-(dibenzyloxy)benzyloxy/benzyloxy-, terc.butyldifenylsilyloxy-, fenylfluorenyloxy- nebo fenylxanthenyloxyskupina, skupinou vzorce /P(0)(Y2Ri)-Y3-(X-Y4)n/mH na 3'-zakončení je atom vodíku, methylfosforyl, 2-chlorfenylfosforyl, -O-methylthiofosforyl, methylfosfonyl, methylthiofosfonyl, fenylfosfonyl, 2-hydroxyethylfosfonyl, -0-(2-hydroxyethyl)thiofosforyl, fenylfosforyl, 4chlorfenylfosforyl, 2-nitrofenylfosforyl, 4-nitrofenylfosforyl, ethylfosforyl, nebo -0ethylthiofoforyl a symbol B znamená TGGGAG, TGGGA, TGGGG, TGGG, TGGGAGG, CGGGAGG, TTGGAGG, TTGGGAGG, TGCGAGG, GGGGAGG, mCGGGAGG, mCGmCGAGG, CTGGGAGG, GGGCGGGGC, TAGGAGG, TGGGAGGT, TGGGGCGCAG, CCG, TCGGAGG, TGmCGAGG, CTGGGAGG, TGG, TGGGAmGG, TGGGAGA, AATGGGAGG, TTGGGG, TGGGGG, CGGGG, CGCGG, CGGGT, TGGGC, TGGGT;
5) skupina vzorce RiR2R3Z-Yj na 5'-zakončení je trifenylmethyloxy-, 3,4-(dibenzyloxy)benzyloxy-, 3,5-(dibenzyloxy)benzyloxy-, 3,5-bis/3,5-(dibenzyloxy)benzyloxy/benzyloxy-, terc.butyldifenylsilyloxy-, fenylfluorenyloxy- nebo fenylxanthenyloxyskuina, skupina vzorce /P(0)(Y2R4)-Y3-(X-Y4)n/raH na 3'-zakončení je atom vodíku, mehylfosforyl, 2-chlorfenylfosforyl, -O-methylthiosfosforyl, methylfosfonyl, methylthiofosfonyl, fenylfosfonyl, 2hydroxyethylfosforyl, -0-(2-hydroxyethyl)thiofosforyl, fenylfosforyl, 4-chlorfenylfosforyl, 2-nitrofenylfosforyl, 4-nitrofenylfosforyl, ethylfosforyl nebo -O-ethyithiofosforyl a řetězec v symbolu B znamená skupinu TGGGAGG, TGGGA, TGGGG, TGGG, TGGGAGG, CGGGAGG, TTGGAGG, TTGGGAGG, TGCGAGG, GGGGAGG, mCGGGAGG, mCGmCGAGG, CTGGGAGG, TTGGGG, TGGGGG, CGGGG, CGCGG;
6) skupina vzorce R^RjZ-Yi na 5'-zakončení je trifenylmethyloxy-, 3,4(dibenzyloxy)benzyloxy-, 3,5-(dibenzyloxy)benzyloxy-, 3,5-bis-/3,5-(dibenzyloxy)benzyloxy/benzyloxy-, terc.butyldifenylsilyloxy-, fenylfluorenyloxy- nebo fenylxanthenyloxyskupina, skupina vzorce /P(0)(Y2R4)-Y3-(X-Y4)n/mH na 3'-zakončení je atom vodíku, methylfosforyl, 2
-7CZ 287050 B6 chlorfenylfosforyl, -O-methylthiofosforyl, methylfosfonyl, methylthiofosfonyl, fenylfosfonyl, 2hydroxyethylfosforyl nebo -0-(2-hydroxyethyl)thiofosforylová skupina a symbol B znamená TGGGGAG, TGGGA, TGGGG, TGG, TGGGAGG, CGGGAGG, TTGGAGG, TTGGGAGG, TGCGAGG, GGGGAGG, mCGGGAGG, mCGmCGAGG, CTGGGAGG, TTGGGG, TGGGGG, CGGGG, CGCGG;
7) skupina vzorce R1R2R3Z-Y1 na 5'-zakončení znamená trifenylmethyloxy-, 3,4(dibenzyloxy)benzyloxy- nebo 3,5-(dibenzyloxy)benzyloxyskupinu, skupina vzorce /(P(0)(Y2R4)-Y3-(X—Y-On/mH na 3'-zakončení je atom vodíku, methylfosforyl, 2-chlorfenylfosforyl, O-methylthiofosforyl, methylfosfonyl, methylthiofosfonyl, fenylfosfonyl, 2-hydroxyethylfosforyl, -0-(2-hydroxyethyl)thiofosforyl, fenylfosforyl, 4-chlorfenylfosforyl, 2-nitrofenylfosforyl, 4-nitrofenylfosforyl, ethylfosforyl nebo -O-ethylthiofosforylová skupina a řetězec symbolu B je TGGGAG, TGGGA, TGGGG, TGGG, TGGGAGG, CGGGAGG, TTGGAGG, TTGGGAGG, TGCGAGG, GGGGAGG, mCGGGAGG, mCGmCGAGG, CTGGGAGG, TTGGGG, TGGGGG, CGGGG, CGCGG;
8) skupina vzorce R1R2R3Z-Y1 na 5'-zakončení znamená trifenylmethyloxy-, 3,4-(dibenzyloxy)benzyloxy- nebo 3,5-(dibenzyloxy)benzyloxyskupinu, skupina vzorce /P(0)(Y2Rr)-Yr-(XYúnAnH na 3'-zakončení znamená atom vodíku, methylfosforyl, 2-chlorfenylfosforyl, -0methylthiofosforyl, methylfosfonyl, methylthiofosfonyl, fenylfosfonyl, 2-hydroxyethylfosforyl nebo -0-(2-hydroxyethyl)thiofosforylovou skupinu a B je TGGGAG, TGGGA, TGGGG, TGGG, TGGGAGG, CGGGAGG, TTGGAGG, TTGGGAGG, TGCGAGG, GGGGAGG, mCGGGAGG, mCGmCGAGG, CTGGGAGG, TTGGGG, TGGGGG, CGGGG, CGCGG.
Příklady sloučenin podle vynálezu, které však nemají sloužit k omezení rozsahu vynálezu jsou uvedeny v následující tabulce 1:
V tabulce jsou k označení některých skupin užity následující zkratky:
2-Anq antrachinon-2-yl,
2-Ant anthracen-2-yl,
9-Ant anthracen-9-yl,
Bdbbp 3,5-b is/3,5-(dibenzy loxy)benzy loxy/benzy loxy,
Bu butyl
tBu terc.butyl.
Bz benzyl,
3,4-Dbp 3,4-(dibenzyloxy)fenyl,
3,5-Dbp 3,5-(dibenzyloxy)fenyl,
Decm dekamethylen /—(CH2)io—Λ
Et ethyl,
Ete ethylen /-CH2CH2-/,
Hepm heptamethylen /-CHi )7-/,
Hexm hexamethylen /-(CItyjó-/,
Hpr 2-hydroxypropylen /-CH2C(OH)(CH3)-/,
Me methyl,
Mee methylen, /-CH2-/,
Nonm nonamethylen /-(CH2)9-/,
Npe naftalenyl /např. 2-Npe je naftalen-2-yl nebo 1-Npe je naftalen-l-yl/,
Octm oktamethylen, /-(CPyg-/,
Penm pentamethylen /—(CH2)5—/,
Ph fenyl,
Pha fenanthrenyl /např. 4-Pha je fenanthren-4—yl/,
Phe 1,4-fenylen
-8CZ 287050 B6
Pr propyl,
Pre propylen /-CH2CH(CH3)-/,
1-Pyr pyren-l-yl.
Tetm tetramethylen /-(CH2)4-/,
Trim trimethylen /-(CH2)3-,
Řetězec B ve vzorci 1 má následující kódová čísla:
1 TGGGASG
2 TGGGA
3 TGGGG
4 TGGG
5 TGGGAGG
6 CGGGAGG
7 TTGGAGG
8 TTGGGAGG
9 TGCGAGG
10 GGGGAGG
n mCGGGAGG
12 mCGmCGAGG
13 CTGGGAGG
14 GGGCGGGC
15 TAGGAGG
16 TGGGAGGT
12 TGGGAGCAG
18 CCG
19 TCGGAGG
20 TGmCGAGG
21 CTGGGAGG
22 TGG
23 TGGGAmGG
24 TGGGAGA
25 AATGGGAGG
26 TTGGGG
27 TGGGGG
28 CGGGG
29 CGCGG
30 CGGGT
31 TGGGC
32 TGGGT.
Tam, kde je v tabulce uveden fluorenyl nebo xanthenyl, je společně tvořen symbol R2, R3 a Z.
Tabulka 1
slouč. č. Ri R2 Rj Z Yi Y2 R» Y3 X Y4 n m B
1 3,4-Dbp H H C 0 O H O Ete O 1 1 1
2 3,4-Dbp H H C O s H O Ete O 1 1
3 3,4-Dbp H H C O - - - - 0 0
4 3,4-Dbp H H C O 0 Me O - 0 1
5 3,4-Dbp H H C O 0 Me s - 0 1
6 3,4-Dbp H H C O O 2-ClPh O - 0 1
7 3,4-Dbp H H C O Mee H O - 0 1
8 3,4-Dbp H H C O Mee H s - 0 1
9 3,4-Dbp H H C O Phe H O - - 0 1
10 3,4-Dbp H H C O NH Pr O Ete O 1 1
11 3,4-Dbp H H C O O Me NH Trim - 1 l
12 Ph Ph Ph C O O H O Ete O 1 1
13 Ph Ph Ph C O s H O Ete O 1 1
-9CZ 287050 B6
Tabulka 1 - pokračování
slouč. č. Ri R2 Rj Z ¥1 Yj R4 Ys X Y4 n m B
14 Ph Ph Ph c o - - - - - 0 1 1
15 Ph Ph Ph c 0 o Me 0 - - 0 1 1
16 Ph Ph Ph c 0 o Me s - - 0 1 1
17 Ph Ph Ph c 0 0 2-ClPh 0 - - 0 1 1
18 Ph Ph Ph c 0 Mee H 0 - - 0 1 1
19 Ph Ph Ph c o Mee H s - - 0 1 1
20 Ph Ph Ph c 0 Phe H 0 - - 0 1 1
21 Ph Ph Ph c o NH Pr 0 Ete 0 1 1 1
22 Ph Ph Ph c 0 O Me NH Trim - 1 1 1
23 3,5-Dbp H H c o O H 0 Ete o 1 1 1
24 3,5-Dbp H H c 0 s H 0 Ete 0 1 1 1
25 3,5-Dbp H H c 0 - - - - - 0 0 1
26 3,5-Dbp H H c o o Me 0 - - 0 l 1
27 3,5-Dbp H H c 0 0 Me s - - 0 l 1
28 3,5-Dbp H H c 0 0 2-CIPh o - - 0 1 1
29 3,5-Dbp H H c o Mee H 0 - - 0 1 1
30 3,5-Dbp H H c 0 Mee H s - - 0 1 1
31 3,5-Dbp H H c o Ph H 0 - - 0 1 1
32 3,5-Dbp H H c o NH Pr 0 Ete o 1 1 1
33 3,5-Dbp H H c o O Me NH Trim - 1 1 1
34 4-MeOPh 4-MeOPh Ph c 0 O H O Ete o 1 1 1
35 4-MeOPh 4-MeOPh Ph c 0 S H 0 Ete 0 1 1 1
36 4-MeOPh 4-MeOPh Ph c 0 - - - - - 0 0 1
37 4-MeOPh 4-MeOPh Ph c o 0 Me o - - 0 0 1
38 4-MeOPh 4-MeOPh Ph c o o Me s - - 0 0 1
39 4-MeOPh 4-MeOPh Ph c o o 2-ClPh 0 - - 0 0 1
40 4-MeOPh 4-MeOPh Ph c 0 Mee H o - - 0 0 1
41 4-MeOPh 4-MeOPh Ph c o Mee H s - - 0 0 1
42 4-MeOPh 4-MeOPh Ph c o Phe H 0 - - 0 0 1
43 4-MeOPh 4-MeOPh Ph c 0 NH Pr 0 Ete 0 1 1 I
44 4-MeOPh 4-MeOPh Ph c o O Me NH Trim - 1 1 i
45 4-MeOPh Ph Ph c 0 O H 0 Ete 0 l 1 Ϊ
46 4-MeOPh Ph Ph c o s H O Ete 0 1 1 ΐ
47 4-MeOPh Ph Ph c o - - - - - 0 0 ΐ
48 4-MeOPh Ph Ph c 0 0 Me 0 - - 0 1 1
49 4-MeOPh Ph Ph c 0 0 Me s - - 0 1 1
50 4-MeOPh Ph Ph c o o 2-ClPh 0 - - 0 1 ΐ
51 4-MeOPh Ph Ph c o Mee H o - - 0 1 1
52 4-MeOPh Ph Ph c o Mee H s - - 0 1 1
53 4-MeOPh Ph Ph c 0 Phe H 0 - - 0 1 1
54 4-MeOPh Ph Ph c 0 NH Pr o Ete 0 1 1 ϊ
55 4-MeOPh Ph Ph c o O Me NH Trim - 1 1 1
56 tBu Ph Ph Si 0 O H 0 Ete 0 1 1 1
57 tBu Ph Ph Si 0 s H 0 Ete o 1 1 1
58 tBu Ph Ph Si 0 - - - - - 0 0 1
59 tBu Ph Ph Si 0 0 Me 0 - 0 1 1
60 tBu Ph Ph Si o o Me 0 - - 0 1 1
61 tBu Ph Ph Si 0 o 2-ClPh s - - 0 1 1
62 tBu Ph Ph Si 0 Mee H 0 - - 0 1 1
63 tBu Ph Ph Si 0 Mee H 0 - - 0 1 1
64 tBu Ph Ph Si 0 Phe H s - - 0 1 1
65 tBu Ph Ph Si 0 NH Pr 0 - - 1 1 1
66 tBu Ph Ph c s O Me 0 Et 0 1 1 1
67 Ph Ph Ph c S O Me NH Trim - 1 1 1
68 Ph Ph Ph c S S H 0 Ete 0 1 1 1
69 Ph Ph Ph c S - - 0 Ete 0 0 0 1
70 Ph Ph Ph c S o Me - - - 0 1 1
71 Ph Ph Ph c s 0 Me 0 - - 0 l i
72 Ph Ph Ph c S 0 2-ClPh s - 0 l 1
73 Ph Ph Ph c s Mee H 0 - - 0 l 1
74 Ph Ph Ph c S Mee H s - - 0 1 1
75 Ph Ph Ph c s Phe H 0 - - 0 1 1
76 Ph Ph Ph c s NH Pr 0 Ete 0 1 1 1
77 Ph Ph Ph c S O Me NH Trim - 1 1 1
78 4-BzOPh H H c o O H 0 Ete o 1 1 1
79 4-BzOPh H H c 0 s H 0 Ete 0 1 1 1
-10CZ 287050 B6
Tabulka 1 - pokračování
slouč. č Ri Rz r3 Z Y| Yz R4 Y3 X Y4 n m B
80 4-BzOPh H H C 0 - - - - - 0 0 1
81 4-BzOPh H H c 0 0 Me 0 - - 0 1 1
82 4-BzOPh H H c 0 0 Me s - - 0 1 1
83 4-BzOPh H H c 0 0 2-ClPh 0 - - 0 1 1
84 4-BzOPh H H c 0 Mee H 0 - - 0 1 1
85 4-BzOPh H H c 0 Mee HS s - - 0 1 1
86 4-BzOPh H H c 0 Phe H 0 - - 0 1 1
87 4-BzOPh H H c 0 NH Pr 0 Ete o 1 1 ΐ
88 4-BzOPh H H c 0 O Me NH Trim - 1 1 1
89 Ph Xanthen-9-yl 0 O H 0 Ete 0 1 1 1
90 Ph Xanthen-9-yl 0 s H 0 Ete 0 1 1 1
91 Ph Xanthen-9-yl o - - - - - 0 0 1
92 Ph Xanthen-9-yl 0 0 Me 0 - - 0 1 1
93 Ph Xanthen-9-yl 0 0 Me s - - 0 1 1
94 Ph Xanthen-9-yl 0 0 2-ClPh 0 - - 0 1 1
95 Ph Xanthen-9-yl 0 Mee H 0 - - 0 1 1
96 Ph Xanthen-9-yl 0 Mee H s - - 0 1 1
97 Ph Xanthen-9-yl 0 Phe H 0 - - 0 1 1
98 Ph Xanthen-9-yl 0 NH Pr 0 Ete 0 1 1 1
99 Ph Xanthen-9-yl 0 O Me NH Trim - l 1 1
100 Ph Fluoren-9-yl 0 O H O Ete o 1 1 1
101 Ph Fluoren-9-yl 0 s H 0 Ete 0 1 1 1
102 Ph Fluoren-9-yl 0 - - - - - 0 0 1
103 Ph Fluoren-9-yI 0 o Me 0 - - 0 1 1
104 Ph Fluoren-9-yl 0 0 Me s - - 0 1 1
105 Ph Fluoren-9-yl 0 0 2-ClPh 0 - - 0 1 1
106 Ph Fluoren-9-yl 0 Mee H 0 - - 0 1 1
107 Ph Fluoren-9-yl 0 Mee H s - - 0 1 1
108 Ph Fluoren-9-yl 0 Phe H 0 - - 0 1 1
109 Ph Fluoren-9-yl 0 NH Pr 0 Ete o 1 1 1
110 Ph Fluoren-9-yl o O Me NH Trim - 1 1 1
111 3,4-Dbp H H c 0 O H 0 Ete 0 1 1 2
112 3,4-Dbp H H c 0 s H 0 Ete 0 1 1 2
113 3,4-Dbp H H c 0 - - - - - 0 0 2
114 3,4-Dbp H H c 0 0 Me 0 - - 0 1 2
115 3,4-Dbp H H c 0 0 Me s - - 0 1 2
116 3,4-Dbp H H c 0 o 2-ClPh o - - 0 1 2
117 3,4-Dbp H H c 0 Mee H 0 - - 0 1 2
118 3,4-Dbp H H c 0 Mee H s - - 0 1 2
119 3,4-Dbp H H c 0 Phe H 0 - - 0 1 2
120 3,4-Dbp H H c 0 NH Pr 0 Ete 0 1 1 2
121 3,4-Dbp H H c 0 O Me NH Trim - 1 1 2
122 Ph Ph Ph c 0 O H O Ete 0 1 1 2
123 Ph Ph Ph c 0 S H 0 Ete o 1 1 2
124 Ph Ph Ph c 0 - - - - - 0 0 2
125 Ph Ph Ph c 0 0 Me 0 - - 0 1 2
126 Ph Ph Ph c 0 0 Me s - - 0 1 2
127 Ph Ph Ph c 0 0 2-ClPh 0 - - 0 1 2
128 Ph Ph Ph c 0 Mee H 0 - - 0 1 2
129 Ph Ph Ph c 0 Mee H s - - 0 1 2
130 Ph Ph Ph c 0 Phe H o - - 0 1 2
131 Ph Ph Ph c 0 NH Pr o Ete o 1 1 2
132 Ph Ph Ph c 0 O Me NH Trim - 1 1 2
133 3,5-Dbp H H c 0 O H 0 Ete 0 1 1 2
134 3,5-Dbp H H c 0 S H o Ete 0 1 1 2
135 3,5-Dbp H H c 0 - - - - 0 0 2
136 3,5-Dbp H H c 0 O Me 0 - - 0 1 2
137 3,5-Dbp H H c 0 O Me s - - 0 1 2
138 3,5-Dbp H H c 0 0 2-ClPh 0 - - 0 1 2
139 3,5-Dbp H H c 0 Me H o - - 0 1 2
140 3,5-Dbp H H c 0 Me H s - - 0 1 2
141 3,5-Dbp H H c 0 Phe H o - - 0 1 2
142 3,5-Dbp H H c 0 NH Pr 0 Ete 0 1 1 2
143 3,5-Dbp H H c 0 O Me NH Trim - 1 1 2
144 4-MeOPh 4-MeOPh Ph c 0 O H O Ete 0 1 1 2
145 4-MeOPh 4-MeOPh Ph c o s H 0 Ete 0 1 1 2
146 4-MeOPh 4-MeOPh Ph c 0 - - - - - 0 0 2
147 4-MeOPh 4-MeOPh Ph c 0 o Me 0 - - 0 1 2
-11CZ 287050 B6
Tabulka 1 - pokračování
slouč. č. Ri R: r3 Z Y| Y2 R4 Y3 X Y4 n rn
148 4-MeOPh 4-MeOPh Ph C 0 0 Me S - - 0 1
149 4-MeOPh 4-MeOPh Ph C 0 0 2-ClPh O - 0 1
150 4-MeOPh 4-MeOPh Ph C 0 Mee H O - - 0 1
151 4-MeOPh 4-MeOPh Ph C 0 Mee H S - - 0 1
152 4-MeOPh 4-MeOPh Ph C 0 Phe H O - - 0 1
153 4-MeOPh 4-MeOPh Ph C 0 NH Pr O Ete O 1 1
154 4-MeOPh 4-MeOPh Ph C o O Me NH Trim - 1 1
155 4-MeOPh Ph Ph C 0 O H O Ete 0 1 1
156 4-MeOPh Ph Ph C 0 s H O Ete O 1 1
157 4-MeOPh Ph Ph C 0 - - - - - 0 0
158 4-MeOPh Ph Ph C 0 0 Me O - - 0 1
159 4-MeOPh Ph Ph C 0 o Me S - - 0 1
160 4-MeOPh Ph Ph C o 0 2-ClPh O - - 0 1
161 4-MeOPh Ph Ph C 0 Mee H O - - 0 1
162 4-MeOPh Ph Ph C 0 Mee H s - - 0 1
163 4-MeOPh Ph Ph C 0 Phe H O - - 0 1
164 4-MeOPh Ph Ph C 0 NH Pr O Ete O 1 1
165 4-MeOPh Ph Ph C 0 O Me NH Trim- - 1 1
166 tBu Ph Ph c 0 O H O Ete O 1 1
167 tBu Ph Ph c o s H O Ete O 1 1
168 tBu Ph Ph c o - - - - 0 0
169 tBu Ph Ph c 0 0 Me 0 - - 1 1
170 tBu Ph Ph Si 0 o Me s - - 0 1
171 JBu Ph Ph Si 0 0 2-ClPh O - - 0 1
172 íBu Ph Ph Si 0 Mee H O - - 0 1
173 tBu Ph Ph Si 0 Mee H s - - 0 1
174 tBu Ph Ph Si 0 Phe H O - - 0 1
175 tBu Ph Ph Si 0 NH Pr O Ete 0 1 1
176 tBu Ph Ph Si 0 O Me NH Trim - 1 1
177 Ph Ph Ph C S O H 0 Ete 0 1 1
178 Ph Ph Ph C s s H O Ete 0 1 1
179 Ph Ph Ph c s - - - - - 0 0
180 Ph Ph Ph c s 0 Me 0 - - 0 1
181 Ph Ph Ph c s o Me s - - 0 1
182 Ph Ph Ph c s 0 2-ClPh 0 - - 0 1
183 Ph Ph Ph c s Mee H 0 - - 0 1
184 Ph Ph Ph c s Mee H s - - 0 1
185 Ph Ph Ph c s Phe H O - - 0 1
186 Ph Ph Ph c s NH Pr O Ete 0 1 1
187 Ph Ph Ph c s O Me NH Trim - 1 1
188 4-BzOPh H H c 0 O H O Ete O 1 1
189 4-BzOPh H H c 0 S H O Ete 0 1 1
190 4-BzOPh H H c 0 - - - - - 0 0
191 4-BzOPh H H c 0 0 Me O - - 0 1
192 4-BzOPh H H c 0 0 Me s - - 0 1
193 4-BzOPh H H c 0 o 2-ClPh O - - 0 1
194 4-BzOPh H H c 0 Mee H O - - 0 1
195 4-BzOPh H H c 0 Mee H s - - 0 1
196 4-BzOPh H H c 0 Phe H O - - 0 1
197 4-BzOPh H H c 0 NH Pr O Ete 0 1 1
198 4-BzOPh H H c 0 O Me NH Trim - 1 1
199 Ph Xanthen-9-yl 0 O H O Ete 0 1 1
200 Ph Xanthen-9-yl 0 s H O Ete O 1 1
201 Ph Xanthen-9-yl 0 - - - - - 0 0
202 Ph Xanthen-9-yl 0 0 Me O - - 0 1
203 Ph Xanthen-9-yI 0 0 Me s - - 0 1
204 Ph Xanthen-9-yl 0 0 2-CIPh 0 - - 0 1
205 Ph Xanthen-9-yl 0 Mee H 0 - 0 1
206 Ph Xanthen-9-yl 0 Mee H s - - 0 1
207 Ph Xanthen-9-yl 0 Phe H O - - 0 1
208 Ph Xanthen-9-yl 0 NH Pr 0 Ete O 1 1
209 Ph Xanthen-9-yl 0 O Me NH Trim - 1 1
210 Ph Fluoren-9-yl 0 O H 0 Ete O 1 1
|K> IbJ |K> |N> 1N) ItU |K> |hJ INJ INJ IhJ |NJ INJ IK> |M INJ |N> INJ INJ INJ INJ INJ JNJ |N> INJ INj IM |NJ INJ INJ INJ INJ |N) INJ INJ |N> INJ |N> |N) INJ |N> INJ INJ INJ INJ INJ INJ INJ INJ |NJ |N> INJ |N> IM |N> INJ INJ INJ INJ INJ INJ INJ
-12CZ 287050 B6
Tabulka 1-pokračování
slouč. č. Ri Rj Rs Z Y| Yz R4 Ys X Y4 n m
211 Ph Fluoren-9-yl 0 s H 0 Ete O 1 í
212 Ph Fluoren-9-yl 0 - - - - - 0 0
213 Ph Fluoren-9-yI o o Me 0 - - 0 1
214 Ph Fluoren-9-yl 0 o Me s - - 0 1
215 Ph Fluoren-9-yl 0 0 2-ClPh 0 - - 0 1
216 Ph FIuoren-9-yl 0 Mee H 0 - - 0 1
217 Ph Fluoren-9-yl 0 Mee H s - - 0 1
218 Ph Fluoren-9-yl 0 Phe H 0 - - 0 1
219 Ph Fluoren-9-yl o NH Pr 0 Ete 0 l 1
220 Ph Fluoren-9-yI 0 O Me NH Trim - i 1
221 3,4-Dbp H H C 0 O H O Ete 0 l 1
222 3,4-Dbp H H C 0 s H O Ete 0 1 1
223 3,4-Dbp H H C o - - - - - 0 0
224 3,4-Dbp H H C 0 0 Me O - - 0 1
225 3,4-Dbp H H c 0 0 Me s - - 0 1
226 3,4-Dbp H H c 0 0 2-ClPh 0 - - 0 1
227 3,4-Dbp H H c 0 Mee H 0 - - 0 1
228 3,4-Dbp H H c 0 Mee H s - - 0 1
229 3,4-Dbp H H c 0 Phe H 0 - - 0 1
230 3,4-Dbp H H c 0 NH Pr 0 Ete 0 1 1
231 3,4-Dbp H H c 0 O Me NH Trim - 1 1
232 Ph Ph Ph c 0 O H O Ete 0 1 1
233 Ph Ph Ph c 0 s H 0 Ete 0 1 1
234 Ph Ph Ph c 0 - - - - - 0 0
235 Ph Ph Ph c 0 0 Me 0 - - 0 1
236 Ph Ph Ph c o 0 Me s - - 0 1
237 Ph Ph Ph c o 0 2-ClPh o - - 0 1
238 Ph Ph Ph c 0 Mee H 0 - - 0 1
239 Ph Ph Ph c 0 Mee H s - - 0 1
240 Ph Ph Ph c 0 Phe H o - - 0 1
241 Ph Ph Ph c 0 NH Pr o Ete 0 1 1
242 Ph Ph Ph c 0 O Me NH Trim - 1 1
243 3,5-Dbp H H c 0 O H 0 Ete 0 1 1
244 3,5-Dbp H H c 0 S H o Ete 0 1 1
245 3,5-Dbp H H c o - - - - 0 0
246 3,5-Dbp H H c 0 0 Me 0 - - 0 1
247 3,5-Dbp H H c 0 0 Me s - - 0 1
248 3,5-Dbp H H c 0 0 2-CIPh 0 - - 0 1
249 3,5-Dbp H H c 0 Mee H 0 - - 0 1
250 3,5-Dbp H H c 0 Mee H s - - 0 1
251 3,5-Dbp H H c 0 Phe H 0 - - 0 1
252 3,5-Dbp H H c 0 NH Pr 0 Ete 0 1 1
253 3,5-Dbp H H c 0 O Me NH Trim - 1 1
254 4-MeOPh 4-MeOPh Ph c 0 O H O * Ete o 1 1
255 4-MeOPh 4-MeOPh Ph c o S H O Ete 0 1 1
256 4-MeOPh 4-MeOPh Ph c 0 - - - - - 0 0
257 4-MeOPh 4-MeOPh Ph c 0 0 Me o - - 0 1
258 4-MeOPh 4-MeOPh Ph c 0 0 Me s - - 0 1
259 4-MeOPh 4-MeOPh Ph c 0 0 2-ClPh 0 - - 0 1
260 4-MeOPh 4-MeOPh Ph c 0 Mee H 0 - - 0 1
261 4-MeOPh 4-MeOPh Ph c 0 Mee H s - - 0 1
262 4-MeOPh 4-MeOPh Ph c 0 Phe H 0 - - 0 1
263 4-MeOPh 4-MeOPh Ph c 0 NH Pr 0 Ete 0 1 I
264 4-MeOPh Ph Ph c 0 O Me NH Trim - 1 1
265 4-MeOPh Ph Ph c 0 O H O Ete 0 1 1
266 4-MeOPh Ph Ph c 0 S H O Ete 0 1 1
267 4-MeOPh Ph Ph c 0 - - - - - 0 0
268 4-MeOPh Ph Ph c 0 0 Me s - - 0 1
269 4-MeOPh Ph Ph c 0 0 Me s - - 0 1
270 4-MeOPh Ph Ph c 0 0 2-CÍPh 0 - - 0 1
271 4-MeOPh Ph Ph c 0 Mee H 0 - - 0 1
272 4-MeOPh Ph Ph c 0 Mee H s - - 0 1
273 4-MeOPh Ph Ph c 0 Phe H 0 - - 0 1
274 4-MeOPh Ph Ph c 0 NH Pr 0 Ete 0 1 1
275 4-MeOPh Ph Ph c 0 O Me NH Trim - 1 1
276 tBu Ph Ph c o O H O Ete 0 1 1
277 tBu Ph Ph c 0 s H 0 Ete o 1 1
278 tBu Ph Ph c 0 - - - - - 0 0
<Nl (NI ΓΊΙ <ni <NI (NI (NI (NI (NI (NI ml ml ml ml ml ml mi ml ml mi ml ml ml ml ml ml ml ml ml ml ml ml ml ml ml ml ml ml ml ml ml ml ml ml ml ml ml ml mi ml ml ml ml ml ml ml ml ml ml ml ml ml ml m| ml ml ml ml
-13CZ 287050 B6
Tabulka 1 - pokračování
slouč. č. Rt Rt Rs Z Y| ¥1 R4 Yj X Yr n m B
279 tBu Ph Ph C 0 0 Me 0 - - 0 1 3
280 tBu Ph Ph C 0 o Me S - - 0 1 3
281 tBu Ph Ph C 0 o 2-ClPh O - - 0 1 3
282 tBu Ph Ph Si 0 Mee H 0 - - 0 1 3
283 tBu Ph Ph Si 0 Mee H s - - 0 1 1
284 tBu Ph Ph Si 0 Phe H 0 - - 0 1 1
285 tBu Ph Ph Si o NH Pt o Ete 0 1 1 2
286 tBu Ph Ph Si 0 O Me NH Trim - 1 1 2
287 Ph Ph Ph C s O H O Ete 0 1 1 2
288 Ph Ph Ph C s s H O Ete 0 1 1 2
289 Ph Ph Ph C s - - - - - 0 0 3
290 Ph Ph Ph C s 0 Me 0 - - 0 1 3
291 Ph Ph Ph C s o Me s - - 0 1 3
292 Ph Ph Ph C s 0 2-ClPh o - - 0 1 3
293 Ph Ph Ph C s Mee H 0 - - 0 1 2
294 Ph Ph Ph C s Mee H s - - 0 1 3
295 Ph Ph Ph C s Phe H 0 - - 0 1 3
296 Ph Ph Ph C s NH Pr 0 Ete 0 1 1 2
297 Ph Ph Ph c s O Me NH Trim - 1 1 2
298 4-BzOPh H H c o O H O Ete 0 1 1 2
299 4-BzOPh H H c 0 S H 0 Ete 0 1 1 2
300 4-BzOPh H H c 0 - - - - - 0 0 2
301 4-BzOPh H H c 0 0 Me 0 - - 0 1 2
302 4-BzOPh H H c 0 0 Me s - - 0 1 3
303 4-BzOPh H H c 0 0 2-ClPh 0 - - 0 1 3
304 4-BzOPh H H c 0 Mee H 0 - - 0 1 3
305 4-BzOPh H H c 0 Mee H s - - 0 1 3
306 4-BzOPh H H c 0 Phe H 0 - - 0 1 3
307 4-BzOPh H H c 0 NH Pr 0 Ete 0 1 1 3
308 4-BzOPh H H c 0 O Me NH Trim - 1 1 2
309 Ph Xanthen-9-yl 0 O H O Ete o 1 1 2
310 Ph Xanthen-9-yl 0 S H o Ete 0 1 1 3
311 Ph Xanthen-9-yl 0 - - - - - 0 0 3
312 Ph Xanthen-9-yl 0 o Me 0 - - 0 1 2
313 Ph Xanthen-9-yl 0 0 Me s - - 0 1 3
314 Ph Xanthen-9-yl 0 0 2-ClPh 0 - - 0 l 2
315 Ph Xanthen-9-yl 0 Mee H 0 - - 0 1 3
316 Ph Xanthen-9-yl o Mee H s - - 0 1 3
317 Ph Xanthen-9-yl 0 Phe H 0 - - 0 1 2
318 Ph Xanthen-9-yl 0 NH Pr 0 Ete 0 1 1 3
319 Ph Xanthen-9-yl 0 O Me NH Trim - 1 1 2
320 Ph Fluoren-9-yl 0 O H O Ete 0 1 1 2
321 Ph Fluoren-9-yl 0 S H O Ete 0 1 1 2
322 Ph Fluoren-9-yl o - - - - 0 0 3
323 Ph Fluoren-9-yl 0 0 Me O - - 0 1 3
324 Ph Fluoren-9-yl 0 0 Me s - - 0 1 3
325 Ph Fluoren-9-yl 0 0 2-ClPh 0 - - 0 1 3
326 Ph Fluoren-9-yl 0 Mee H 0 - - 0 1 3
327 Ph Fluoren-9-yl o Mee H s - - 0 1 2
328 Ph Fluoren-9-yl o Phe H 0 - - 0 1 3
329 Ph Fluoren-9-yl 0 NH Pr 0 Ete 0 1 1 3
330 Ph Fluoren-9-yl o O Me NH Trim - 1 1 3
331 3,4-Dbp H H c 0 O H 0 Ete 0 l 1 4
332 3,4-Dbp H H c 0 S H O Ete 0 1 1 4
333 3,4-Dbp H H c o - - - - - 0 0 4
334 3,4-Dbp H H c 0 0 Me 0 - - 0 1 4
335 3,4-Dbp H H c 0 0 Me s - - 0 1 4
336 3,4-Dbp H H c 0 0 2-ClPh 0 - - 0 1 4
337 3,4-Dbp H H c 0 Mee H o - - 0 1 4
338 3,4-Dbp H H c 0 Mee H s - - 0 1 4
339 3,4-Dbp H H c 0 Phe H 0 - - 0 1 4
340 3,4-Dbp H H c 0 NH Pr 0 Ete o 1 1 4
341 Ph Ph Ph c 0 O Me NH Trim - 1 1 4
342 Ph Ph Ph c 0 O H O Ete 0 1 1 4
343 Ph Ph Ph c 0 s H 0 Ete 0 1 1 4
344 Ph Ph Ph c 0 - - - - - 0 0 4
345 Ph Ph Ph c 0 0 Me 0 - - 0 1 4
346 Ph Ph Ph c 0 0 Me s - - 0 1 4
-14CZ 287050 B6
Tabulka 1 - pokračování
slouč. č. Ri Rj Rs Z Y| Y2 R4 Y3 X Y4 n m
347 Ph Ph Ph C 0 0 2-CIPh O - - 0 1
348 Ph Ph Ph C 0 Mee H O - - 0 1
349 Ph Ph Ph C 0 Mee H S - - 0 1
350 Ph Ph Ph C 0 Phe H 0 - - 0 1
351 Ph Ph Ph C 0 NH Pr O Ete 0 1 1
352 3,5-Dbp H H C 0 O Me NH Trim - l 1
353 3,5-Dbp H H C 0 O Me NH Ete o 1 1
354 3,5-Dbp H H C 0 s H O Ete 0 1 1
355 3,5-Dbp H H C 0 - - - - - 0 0
356 3,5-Dbp H H C 0 0 Me o - - 0 1
357 3,5-Dbp H H C 0 0 Me s - - 0 1
358 3,5-Dbp H H C 0 0 2-CIPh 0 - - 0 1
359 3,5-Dbp H H c 0 Mee H 0 - - 0 1
360 3,5-Dbp H H c 0 Mee H s - - 0 1
361 3,5-Dbp H H c 0 Phe H 0 - - 0 1
362 3,5-Dbp H H c 0 NH Pr H Ete 0 1 1
363 3,5-Dbp H H c 0 O Me NH Trim - 1 1
364 4-MeOPh 4-MeOPh Ph c 0 O H O Ete 0 1 1
365 4-MeOPh 4-MeOPh Ph c 0 s H 0 Ete 0 1 1
366 4-MeOPh 4-MeOPh Ph c o - - - - 0 0
367 4-MeOPh 4-MeOPh Ph c o o Me 0 - - 0 1
368 4-MeOPh 4-MeOPh Ph c o 0 Me s - - 0 1
369 4-MeOPh 4-MeOPh Ph c o 0 2-CIPh o - - 0 1
370 4-MeOPh 4-MeOPh Ph c 0 Mee H o - - 0 1
371 4-MeOPh 4-MeOPh Ph c o Mee H s - - 0 1
372 4-MeOPh 4-MeOPh Ph c 0 Phe H 0 - - 0 1
373 4-MeOPh 4-MeOPh Ph c 0 NH Pr 0 Ete 0 1 1
374 4-MeOPh 4-MeOPh Ph c 0 O Me NH Trim 1 1
375 4-MeOPh Ph Ph c 0 O H O Ete 0 1 1
376 4-MeOPh Ph Ph c 0 s H O Ete 0 1 1
377 4-MeOPh Ph Ph c 0 - - - - - 0 0
378 4-MeOPh Ph Ph c 0 0 Me 0 - - 0 1
379 4-MeOPh Ph Ph c o o Me s - - 0 1
380 4-MeOPh Ph Ph c 0 0 2-CIPh o - - 0 1
381 4-MeOPh Ph Ph c 0 Mee H 0 - - 0 1
382 4-MeOPh Ph Ph c 0 Mee H s - - 0 1
383 4-MeOPh Ph Ph c 0 Phe H 0 - - 0 1
384 4-MeOPh Ph Ph c 0 NH Pr 0 Ete o 1 1
385 tBu Ph Ph c o O Me NH Trim - 1 1
386 tBu Ph Ph Si 0 O H O Ete 0 1 1
387 tBu Ph Ph Si 0 s H 0 Ete 0 1 1
388 tBu Ph Ph Si 0 - - - - - 0 0
389 tBu Ph Ph Si 0 0 Me o - - 0 1
390 tBu Ph Ph Si 0 0 Me s - - 0 1
391 tBu Ph Ph Si 0 0 2-CIPh 0 - - 0 1
392 tBu Ph Ph Si 0 Mee H o - - 0 1
393 tBu Ph Ph Si 0 Mee H s - - 0 1
394 tBu Ph Ph Si o Phe H 0 - - 0 1
395 tBu Ph Ph Si 0 NH Pr 0 Ete 0 1 1
396 tBu Ph Ph Si 0 0 Me NH Trim - 1 1
397 Ph Ph Ph C s O H O Ete 0 I 1
398 Ph Ph Ph C s s H O Ete 0 1 1
399 Ph Ph Ph C s - - - - - 0 0
400 Ph Ph Ph C s 0 Me 0 - - 0 1
401 Ph Ph Ph C s 0 Me s - - 0 1
402 Ph Ph Ph c s 0 2-CIPh 0 - - 0 1
403 Ph Ph Ph c s Mee H 0 - - 0 1
404 Ph Ph Ph c s Mee H s - - 0 1
405 Ph Ph Ph c s Phe H 0 - 0 1
406 Ph Ph Ph c s NH Pr 0 Ete o 1 1
407 Ph Ph Ph c s O Me NH Trim - 1 1
408 4-BzOPh H H c 0 O H 0 Ete 0 1 1
409 4-BzOPh H H c 0 s H O Ete 0 1 1
410 4-BzOPh H H c 0 - - - - - 0 0
411 4-BzOPh H H c 0 0 Me 0 - - 0 1
412 4-BzOPh H H c o 0 Me s - - 0 1
413 4-BzOPh H H c 0 0 2-CIPh 0 - - 0 1
414 4-BzOPh H H c 0 Mee H 0 - 0 1
415 4-BzOPh H H c 0 Mee H s - - 0 1
416 4-BzOPh H H c 0 Phe H 0 - - 0 1
14* |4* |4* 14· |4* 14* 14· 14^· 14* 14* 14* 14* 14. 14» 14* 14* 14* 14· 14* 14* 14* 14* 14* 14* 14* 14* 14* 14- 14- 14- 14- 14- 14* 14* 14* 14* 14* 14· 14* 14* 14- 14- 14* 14* 14* 14* 14- 14* 14* 14* 14* 14* |4* 14- 14* 14* 14* 14* 14* 14* 14* 14* 14* 14* 14* 14* 14- 14* 14* 14*
-15CZ 287050 B6
Tabulka 1 - pokračování
slouč. č. Ri r2 Rj Z Y1 Y2 R| Y) X Ϊ4 n m B
417 4-BzOPh H H C o NH Pr O Ete 0 1 1 4
418 4-BzOPh H H C o 0 Me NH Trim - l 1 4
419 Ph Xanthen-9-yl 0 0 H O Ete 0 1 1 4
420 Ph Xanthen-9-yl 0 s H O Ete o 1 l 4
421 Ph Xanthen-9-yl 0 - - - - - 0 0 4
422 Ph Xanthen-9-yl o 0 Me O - - 0 1 4
423 Ph Xanthen-9-yl o 0 Me s - - 0 1 4
424 Ph Xanthen-9-yl 0 0 2-CIPh 0 - - 0 1 4
425 Ph Xanthen-9-yl 0 Mee H 0 - - 0 1 4
426 Ph Xanthen-9-yl o Mee H s - - 0 1 4
427 Ph Xanthen-9-yl 0 Phe H 0 - - 0 1 4
428 Ph Xanthen-9-yl 0 NH Pr 0 Ete 0 1 1 4
429 Ph Xanthen-9-yl 0 0 Me NH Trim - 1 1 4
430 Ph Fluoren-9-yl 0 O H 0 Ete 0 1 1 4
431 Ph Fluoren-9-yl 0 s H 0 Ete o 1 1 4
432 Ph Fluoren-9-yl 0 - - - - - 0 0 4
433 Ph Fluoren-9-y! 0 o Me 0 - - 0 1 4
434 Ph Fluoren-9-yl 0 0 Me s - - 0 1 4
435 Ph Fluoren-9-yl o 0 2-CIPh o - - 0 1 4
436 Ph Fluoren-9-yl o Mee H 0 - - 0 1 4
437 Ph Fluoren-9-yl 0 Mee H s - - 0 1 4
438 Ph Fluoren-9-yl 0 Phe H 0 - - 0 1 4
439 Ph Fluoren-9-yl 0 NH Pr 0 Ete 0 1 1 4
440 Ph Fluoren-9-yl 0 O Me NH Trim - 1 1 4
441 3,4-Dbp H H C o O H 0 Ete 0 1 1 5
442 3,4-Dbp H H C 0 S H 0 Ete 0 1 1 5
443 3,4-Dbp H H C o - - - - - 0 0 5
444 3,4-Dbp H H C 0 0 Me o - - 0 1 5
445 3,4-Dbp H H C o 0 Me s - - 0 1 5
446 3,4-Dbp H H C 0 o 2-CIPh o - - 0 1 5
447 3,4-Dbp H H C 0 Mee H 0 - - 0 1 5
448 3,4-Dbp H H C 0 Mee H s - - 0 1 5
449 3,4-Dbp H H C 0 Phe H 0 - - 0 1 5
450 3,4-Dbp H H C 0 NH Pr 0 Ete 0 1 1 5
451 3,4-Dbp H H C 0 O Me NH Trim - 1 1 5
452 Ph Ph Ph C 0 O H 0 Ete 0 1 1 5
453 Ph Ph Ph c o s H 0 Ete 0 1 1 5
454 Ph Ph Ph c 0 - - - - - 0 0 5
455 Ph Ph Ph c 0 0 Me 0 - - 0 1 5
456 Ph Ph Ph c o 0 Me s - - 0 1 5
457 Ph Ph Ph c o 0 2-CIPh 0 - - 0 1 5
458 Ph Ph Ph c o Mee H 0 - - 0 1 5
459 Ph Ph Ph c 0 Mee H s - - 0 1 5
460 Ph Ph Ph c 0 Phe H 0 - - 0 1 5
461 Ph Ph Ph c 0 NH Pr 0 Ete 0 1 1 5
462 Ph Ph Ph c o O Me NH Trim - 1 1 5
463 3,5-Dbp H H c 0 O H 0 Ete 0 1 1 5
464 3,5-Dbp H H c o S H 0 Ete 0 1 1 5
465 3,5-Dbp H H c 0 - - - - - 0 0 5
466 3,5-Dbp H H c 0 0 Me 0 - - 0 1 5
467 3,5-Dbp H H c o 0 Me s - - 0 1 5
468 3,5-Dbp H H c 0 0 2-CIPh 0 - - 0 1 5
469 3,5-Dbp H H c 0 Mee H 0 - - 0 1 5
470 3,5-Dbp H H c 0 Mee H s - - 0 1 5
471 3,5-Dbp H H c 0 Phe H 0 - - 0 1 5
472 3,5-Dbp H H c 0 NH Pr 0 Ete 0 1 1 5
473 3,5-Dbp H H c 0 0 Me NH Trim - 1 1 5
474 4-MeOPh 4-MeOPh Ph c 0 0 H O Ete 0 1 1 5
475 4-MeOPh 4-MeOPh Ph c o s H o Ete 0 1 1 5
476 4-MeOPh 4-MeOPh Ph c 0 - - - - - 0 0 5
477 4-MeOPh 4-MeOPh Ph c 0 0 Me o - - 0 1 5
478 4-MeOPh 4-MeOPh Ph c 0 0 Me s - - 0 1 5
479 4-MeOPh 4-MeOPh Ph c 0 0 2-CIPh 0 - - 0 1 5
480 4-MeOPh 4-MeOPh Ph c o Mee H 0 - 0 1 5
481 4-MeOPh 4-MeOPh Ph c 0 Mee H s - - 0 1 5
482 4-MeOPh 4-MeOPh Ph c o Phe H 0 - - 0 1 5
483 4-MeOPh 4-MeOPh Ph c 0 NH Pr 0 Ete 0 1 1 5
484 4-MeOPh 4-MeOPh Ph c 0 O Me NH Trim - 1 1 5
485 4-MeOPh Ph Ph c 0 O H 0 Ete 0 1 1 5
486 4-MeOPh Ph Ph c o s H O Ete 0 1 1 5
-16CZ 287050 B6
Tabulka 1 - pokračování
slouč. č. Ri R2 Rj Z Yi Y2 R4 Y3 X Y4 n m
487 4-MeOPh Ph Ph C 0 - - - - - 0 0
488 4-MeOPh Ph Ph C o 0 Me o - - 0 1
489 4-MeOPh Ph Ph C 0 0 Me s - - 0 1
490 4-MeOPh Ph Ph C o 0 2-ClPh o - - 0 1
491 4-MeOPh Ph Ph C o Mee H o - - 0 1
492 4-MeOPh Ph Ph C 0 Mee H s - - 0 1
493 4-MeOPh Ph Ph C o Phe H o - 0 1
494 4-MeOPh Ph Ph C o NH Pr o Ete 0 1 1
495 4-MeOPh Ph Ph C 0 O Me NH Trim - 1 1
496 tBu Ph Ph Si 0 O H O Ete 0 1 1
497 tBu Ph Ph Si o s H o Ete 0 1 1
498 tBu Ph Ph Si o - - - - - 0 0
499 tBu Ph Ph Si o o Me o - - 0 1
500 tBu Ph Ph Si 0 0 Me s - - 0 1
501 tBu Ph Ph Si 0 0 2-ClPh o - - 0 1
502 tBu Ph Ph Si 0 Mee H 0 - - 0 1
503 tBu Ph Ph Si o Mee H s - - 0 1
504 tBu Ph Ph Si 0 Phe H o - 0 1
505 tBu Ph Ph Si 0 NH Pr 0 Ete 0 1 1
506 tBu Ph Ph Si o O Me NH Trim - 1 1
507 Ph Ph Ph C s O H O Ete 0 1 1
508 Ph Ph Ph C s S H o Ete o 1 1
509 Ph Ph Ph C s - - - - - 0 0
510 Ph Ph Ph C s 0 Me 0 - - 0 1
511 Ph Ph Ph C s 0 Me s - - 0 1
512 Ph Ph Ph C s o 2-ClPh o - - 0 1
513 Ph Ph Ph C s Mee H 0 - - 0 1
514 Ph Ph Ph C s Mee H s - - 0 1
515 Ph Ph Ph C s Phe H 0 - - 0 1
516 Ph Ph Ph c s NH Pr 0 Ete 0 1 1
517 Ph Ph Ph c s O Me NH Trim - 1 1
518 4-BzOPh H H c 0 O H O Ete 0 1 1
519 4-BzOPh H H c o S H 0 Ete 0 1 1
520 4-BzOPh H H c 0 - - - - - 0 0
521 4-BzOPh H H c 0 0 Me o - - 0 1
522 4-BzOPh H H c 0 0 Me s - - 0 1
523 4-BzOPh H H c 0 0 2-CIPh 0 - - 0 1
524 4-BzOPh H H c 0 Mee H o - - 0 1
525 4-BzOPh H H c o Mee H s - - 0 1
526 4-BzOPh H H c o Phe H o - - 0 l
527 4-BzOPh H H c 0 NH Pr 0 Ete 0 1 l
528 4-BzOPh H H c 0 O Me NH Trim - 1 1
529 Ph Xanthen-9-yl 0 O H O Ete 0 1 1
530 Ph Xanthen-9-yl o s H o Ete 0 1 1
531 Ph Xanthen-9-yl 0 - - - - - 0 0
532 Ph Xanthen-9-yl 0 0 Me 0 - - 0 1
533 Ph Xanthen-9-yl o o Me s - - 0 1
534 Ph Xanthen-9-yl 0 0 2-ClPh 0 - - 0 1
535 Ph Xanthen-9-yl 0 Mee H 0 - - 0 1
536 Ph Xanthen-9-yl 0 Mee H s - - 0 1
537 Ph Xanthen-9-yl 0 Phe H 0 - - 0 1
538 Ph Xanthen-9-yl 0 NH Pr 0 Ete 0 1 1
539 Ph Xanthen-9-yl 0 O Me NH Trim - 1 1
540 Ph Fluoren-9-yl o O H O Ete 0 1 1
541 Ph Fluoren-9-yl 0 s H 0 Ete 0 1 1
542 Ph Fluoren-9-yl 0 - - - - - 0 0
543 Ph Fluoren-9-yl o o Me 0 - - 0 1
544 Ph Fluoren-9-yl 0 0 Me s - - 0 1
545 Ph Fluoren-9-yl o o 2-ClPh 0 - - 0 1
546 Ph Fluoren-9-yl 0 Mee H 0 - - 0 1
547 Ph Fluoren-9-yl 0 Mee H s - - 0 1
548 Ph Fluore n-9-yl 0 Phe H 0 - - 0 1
549 Ph Fluore n-9-yl 0 NH Pr 0 Ete 0 1 1
550 Ph Fluore n-9-yl 0 O Me NH Trim - 1 1
551 3,4-Dbp H H c 0 O H O Ete 0 1 1
552 3,4-Dbp H H c o s H o Ete 0 1 1
553 3,4-Dbp H H c 0 - - - - - 0 0
554 3,4-Dbp H H c 0 0 Me 0 - - 0 1
555 3,4-Dbp H H c 0 0 Me s - - 0 1
556 3,4-Dbp H H c 0 0 2-ClPh 0 - - 0 1
1Q> |Q> |Q\ |O\ |<-Λ |CA |U> |c/i |<-Λ |'-Λ |V» |C/i |^Λ Μ ΚΛ |CA |CA |U» |<-r. Ι'-Λ |LA |Vi |V> Ι'-Λ |Mt |C/1 l'-A |V» |Uft |CA |V» |Vi |iy» |V» |d |Uh |CA |Mi l<-h IVi |Ví |U» |U/i |LA |CZ> |CA |LZi |Vi |Ch |Mi 1CA |CZi |tZi |CA |LA |v> |Lh |<_*i |U» |CA |Czi |'_Λ |'-Λ
-17CZ 287050 B6
Tabulka 1 - pokračování
slouč. č. R1 R’ Rs Z Yi Y2 R» Yt X Yr n m B
557 3,4-Dbp H H C 0 Mee H O - - 0 1 6
558 3,4-Dbp H H C 0 Mee H s - - 0 1 6
559 3,4-Dbp H H C 0 Phe H 0 - - 0 1 6
560 3,4-Dbp H H C o NH Pr O Ete o 1 1 6
561 3,4-Dbp H H c 0 O Me NH Trim - 1 1 6
562 Ph Ph Ph c 0 O H O Ete o 1 1 6
563 Ph Ph Ph c 0 s H O Ete 0 1 1 6
564 Ph Ph Ph c 0 - - - - - 0 0 6
565 Ph Ph Ph c 0 0 Me o - - 0 1 6
566 Ph Ph Ph c o o Me s - 0 l 6
567 Ph Ph Ph c 0 o 2-ClPh 0 - - 0 1 6
568 Ph Ph Ph c 0 Mee H o - - 0 1 6
569 Ph Ph Ph c 0 Mee H s - - 0 1 6
570 Ph Ph Ph c o Phe H o - - 0 1 6
571 Ph Ph Ph c 0 NH Pr o Ete 0 1 1 6
572 Ph Ph Ph c 0 O Me NH Trim - 1 1 6
573 3,5-Dbp H H c 0 O H O Ete 0 1 1 6
574 3,5-Dbp H H c 0 s H 0 Ete 0 1 1 6
575 3,5-Dbp H H c o - - - - - 0 0 é
576 3,5-Dbp H H c o 0 Me 0 - - 0 1 6
577 3,5-Dbp H H c 0 0 Me s - 0 1 6
578 3,5-Dbp H H c 0 0 2-ClPh 0 - - 0 1 6
579 3,5-Dbp H H c o Mee H 0 - - 0 1 6
580 3,5-Dbp H H c 0 Mee H s - - 0 1 6
581 3,5-Dbp H H c o Phe H o - - 0 1 6
582 3,5-Dbp H H c 0 NH Pr 0 Ete 0 1 1 6
583 3,5-Dbp H H c o O Me NH Trim - 1 1 6
584 4-MeOPh 4-MeOP Ph c 0 O H O Ete 0 l 1 6
585 4-MeOPh 4-MeOP Ph c o s H o Ete 0 1 1 6
586 4-MeOPh 4-MeOP Ph c o - - - - - 0 1 6
587 4-MeOPh 4-MeOP Ph c 0 0 Me 0 - - 0 1 Ž
588 4-MeOPh 4-MeOP Ph c 0 0 Me s - - 0 1 6
589 4-MeOPh 4-MeOP Ph c o o 2-ClPh o - 0 1 6
590 4-MeOPh 4-MeOP Ph c 0 Mee H 0 - 0 1 6
591 4-MeOPh 4-MeOP Ph c 0 Mee H s - - 0 1 6
592 4-MeOPh 4-MeOP Ph c 0 Phe H o - - 0 I 6
593 4-MeOPh 4-MeOP Ph c 0 NH Pr 0 Ete 0 1 1 6
594 4-MeOPh 4-MeOP Ph c 0 O Me NH Trim - 1 1 6
595 4-MeOPh Ph Ph c 0 O H 0 Ete 0 l 1 6
596 4-MeOPh Ph Ph c 0 S H O Ete 0 1 1 6
597 4-MeOPh Ph Ph c o - - - - - 0 0 ě
598 4-MeOPh Ph Ph c 0 0 Me 0 - - 0 1 6
599 4-MeOPh Ph Ph c 0 o Me s - 0 1 6
600 4-MeOPh Ph Ph c 0 0 2-ClPh 0 - - 0 1 6
601 4-MeOPh Ph Ph c 0 Mee H 0 - - 0 1 6
602 4-MeOPh Ph Ph c o Mee H s - - 0 1 6
603 4-MeOPh Ph Ph c 0 Phe H 0 - - 0 1 6
604 4-MeOPh Ph Ph c 0 NH Pr o Ete o 1 1 6
605 4-MeOPh Ph Ph c 0 O Me NH Trim - 1 1 6
606 tBu Ph Ph Si 0 O H O Ete 0 1 1 6
607 tBu Ph Ph Si 0 s H o Ete 0 1 1 6
608 tBu Ph Ph Si 0 - - - - - 0 0 6
609 tBu Ph Ph Si 0 0 Me o - - 0 1 6
610 tBu Ph Ph Si 0 0 Me s - - 0 1 6
611 tBu Ph Ph Si o 0 2-ClPh o - - 0 1 6
612 tBu Ph Ph Si 0 Mee H 0 - - 0 1 6
613 tBu Ph Ph Si 0 Mee H s - - 0 1 6
614 tBu Ph Ph Si 0 Phe H 0 - - 0 1 6
615 tBu Ph Ph Si o NH Pr 0 Ete 0 1 1 6
616 tBu Ph Ph Si 0 O Me NH Trim - 1 1 6
617 Ph Ph Ph c S O H 0 Ete 0 1 1 6
618 Ph Ph Ph c s s H 0 Ete 0 1 1 6
619 Ph Ph Ph c S - - - - 0 0 6
620 Ph Ph Ph c s 0 Me 0 - - 0 1 6
621 Ph Ph Ph c S 0 Me s - - 0 1 6
622 Ph Ph Ph c s 0 2-ClPh o - - 0 1 6
623 Ph Ph Ph c S Mee H 0 - - 0 1 6
624 Ph Ph Ph c s Mee H s - - 0 1 6
625 Ph Ph Ph c s Phe H 0 - - 0 1 6
626 Ph Ph Ph c S NH Pr 0 Ete 0 1 1 6
-18CZ 287050 B6
Tabulka 1 - pokračování
slouč. č. Ri r2 r3 Z Yl Y2 Ri Yj X Y4 n m B
627 Ph Ph Ph C s 0 Me NH Trim - 1 1 6
628 4-BzOPh H H C 0 0 H O Ete 0 1 1 6
629 4-BzOPh H H C 0 s H O Ete 0 1 1 6
630 4-BzOPh H H C 0 - - - - 0 0 6
631 4-BzOPh H H C o 0 Me 0 - - 0 l 6
632 4-BzOPh H H C 0 o Me s - - 0 1 6
633 4-BzOPh H H C 0 0 2-ClPh 0 - - 0 l 6
634 4-BzOPh H H C 0 Mee H 0 - - 0 I 6
635 4-BzOPh H H C 0 Mee H s - - 0 1 6
636 4-BzOPh H H C 0 Phe H 0 - - 0 1 6
637 4-BzOPh H H C 0 NH Pr o Ete 0 1 1 6
638 4-BzOPh H H C 0 O Me NH Trim - 1 1 6
639 Ph Xanthen-9-yl 0 O H O Ete 0 1 1 6
640 Ph Xanthen-9-yl 0 s H 0 Ete 0 1 1 6
641 Ph Xanthen-9-yl 0 - - - - - 0 0 6
642 Ph Xanthen-9-yl 0 0 Me O - - 0 1 6
643 Ph Xanthen-9-yl 0 0 Me s - - 0 1 6
644 Ph Xanthen-9-yl 0 0 2-ClPh 0 - - 0 1 6
645 Ph Xanthen-9-yl 0 Mee H 0 - - 0 1 6
646 Ph Xanthen-9-yl 0 Mee H s - - 0 1 6
647 Ph Xanthen-9-yl 0 Phe H 0 - - 0 1 6
648 Ph Xanthen-9-yl 0 NH Pr 0 Ete 0 1 1 6
649 Ph Xanthen-9-yl 0 O Me NH Trim - 1 1 6
650 Ph Fluoren-9-yl 0 O H 0 Ete 0 1 1 6
651 Ph Fluoren-9-yl 0 s H O Ete 0 1 1 6
652 Ph Fluoren-9-yl 0 - - - - - 0 0 6
653 Ph Fluoren-9-yl 0 0 Me 0 - - 0 1 6
654 Ph Fluoren-9-yl 0 0 Me s - - 0 1 6
655 Ph Fluoren-9-yl 0 0 2-ClPh 0 - - 0 1 6
656 Ph Fluoren-9-yl 0 Mee H 0 - - 0 1 6
657 Ph Fluoren-9-yl o Mee H s - - 0 1 6
658 Ph Fluoren-9-yl 0 Phe H 0 - - 0 1 6
659 Ph Fluoren-9-yl 0 NH Pr 0 Ete o 1 1 6
660 Ph Fluoren-9-yl 0 O Me NH Trim - 1 1 6
661 3,4-Dbp H H C 0 O H 0 Ete 0 I 1 7
662 3,4-Dbp H H C 0 S H O Ete 0 1 1 7
663 3,4-Dbp H H C 0 - - - - - 0 0 7
664 3,4-Dbp H H c 0 O Me O - - 0 1 7
665 3,4-Dbp H H c 0 O Me s - - 0 1 7
666 3,4-Dbp H H c 0 0 2-ClPh 0 - - 0 1 7
667 3,4-Dbp H H c 0 Mee H 0 - - 0 1 7
668 3,4-Dbp H H c 0 Mee H s - - 0 1 7
669 3,4-Dbp H H c 0 Phe H 0 - - 0 1 7
670 3,4-Dbp H H c 0 NH Pr 0 Ete 0 1 1 7
671 3,4-Dbp H H c 0 O Me NH Trim - 1 1 7
672 Ph Ph Ph c 0 O H O Ete 0 1 1 7
673 Ph Ph Ph c 0 S H O Ete 0 1 1 7
674 Ph Ph Ph c 0 - - - - - 0 0 7
675 Ph Ph Ph c 0 0 Me 0 - - 0 1 7
676 Ph Ph Ph c 0 0 Me s - - 0 1 7
677 Ph Ph Ph c 0 0 2-ClPh 0 - - 0 1 7
678 Ph Ph Ph c 0 Mee H 0 - 0 1 7
679 Ph Ph Ph c 0 Mee H s - 0 1 7
680 Ph Ph Ph c 0 Phe H o - - 0 1 7
681 Ph Ph Ph c 0 NH Pr 0 Ete 0 1 1 7
682 Ph Ph Ph c 0 O Me NH Trim - 1 1 7
683 3,5-Dbp H H c 0 O H 0 Ete o l 1 7
684 3,5-Dbp H H c 0 s H 0 Ete 0 1 1 7
685 3,5-Dbp H H c 0 - - - - - 0 0 7
686 3,5-Dbp H H c 0 0 Me 0 - - 0 1 7
687 3,5-Dbp H H c 0 o Me s - - 0 I 7
688 3,5-Dbp H H c 0 0 2-ClPh 0 - - 0 1 7
689 3,5-Dbp H H c 0 Mee H 0 - - 0 1 2
690 3,5-Dbp H H c 0 Mee H s - - 0 1 7
691 3,5-Dbp H H c 0 Phe H 0 - - 0 1 7
692 3,5-Dbp H H c 0 NH Pr 0 Ete o 1 1 7
693 3,5-Dbp H H c 0 O Me NH Trim - 1 1 7
694 4-MeOPh 4-MeOPh Ph c 0 O H 0 Ete 0 1 1 7
695 4-MeOPh 4-MeOPh Ph c 0 s H 0 Ete o 1 1 7
696 4-MeOPh 4-MeOPh Ph c o - - - - - 0 0 7
-19CZ 287050 B6
Tabulka 1 - pokračování
slouč. č. Ri Rz Rt Z Yi Y2 R4 Y; X Yj n m B
697 4-MeOPh 4-MeOPh Ph C 0 0 Me O - - 0 l 7
698 4-MeOPh 4-MeOPh Ph C o o Me O - - 0 1 7
699 4-MeOPh 4-MeOPh Ph C 0 0 2-ClPh 0 - - 0 1 7
700 4-MeOPh 4-MeOPh Ph C o Mee H O - - 0 1 7
701 4-MeOPh 4-MeOPh Ph C 0 Mee H S - - 0 1 7
702 4-MeOPh 4-MeOPh Ph C 0 Phe H O - - 0 1 7
703 4-MeOPh 4-MeOPh Ph C 0 NH Pr O Ete o 1 1 7
704 4-MeOPh 4-MeOPh Ph C 0 O Me NH Trim - 1 1 7
705 4-MeOPh Ph Ph C 0 O H O Ete 0 1 1 7
706 4-MeOPh Ph Ph C 0 S H O Ete 0 1 1 7
707 4-MeOPh Ph Ph C 0 - - - - - 0 0 7
708 4-MeOPh Ph Ph C 0 0 Me o - - 0 1 7
709 4-MeOPh Ph Ph C 0 0 Me s - - 0 1 7
710 4-MeOPh Ph Ph C 0 0 2-ClPh 0 - - 0 1 7
711 4-MeOPh Ph Ph C 0 Mee H o - - 0 1 7
712 4-MeOPh Ph Ph C 0 Mee H s - - 0 1 7
713 4-MeOPh Ph Ph C 0 Phe H o - - 0 1 7
714 4-MeOPh Ph Ph C 0 NH Pr 0 Ete 0 1 1 7
715 4-MeOPh Ph Ph C o O Me NH Trim - 1 1 7
716 jBu Ph Ph Si 0 O H O Ete 0 1 1 7
717 jBu Ph Ph Si 0 S H 0 Ete 0 1 1 7
718 tBu Ph Ph Si o - - - - - 0 0 7
719 tBu Ph Ph Si 0 0 Me 0 - - 0 1 7
720 tBu Ph Ph Si 0 0 Me s - - 0 1 7
721 tBu Ph Ph Si 0 0 2-CIPh 0 - - 0 1 7
722 tBu Ph Ph Si 0 Mee H 0 - - 0 1 7
723 tBu Ph Ph Si 0 Mee H s - - 0 1 7
724 tBu Ph Ph Si 0 Phe H 0 - - 0 1 7
725 tBu Ph Ph Si 0 NH Pr 0 Ete o 1 1 7
726 tBu Ph Ph Si 0 O Me NH Trim 1 1 7
727 tBu Ph Ph Si 0 O H O Ete 0 1 1 7
728 Ph Ph Ph C s S H O Ete 0 1 1 '1
729 Ph Ph Ph C s - - - - - 0 0 7
730 Ph Ph Ph C s 0 Me 0 - - 0 1 7
731 Ph Ph Ph C s 0 Me s - - 0 1 7
732 Ph Ph Ph c s 0 2-ClPh o - - 0 1 7
733 Ph Ph Ph c s Mee H 0 - - 0 1 7
734 Ph Ph Ph c s Mee H s - - 0 1 7
735 Ph Ph Ph c s Phe H 0 - - 0 1 7
736 Ph Ph Ph c s NH Pr 0 Ete 0 1 1 7
737 Ph Ph Ph c s O Me NH Trim o 1 1 7
738 4-BzOPh H H c 0 O H O Ete 0 1 1 7
739 4-BzOPh H H c 0 s H O Ete o 1 1 7
740 4-BzOPh H H c 0 - - - - - 0 0 7
741 4-BzOPh H H c 0 0 Me 0 - - 0 1 7
742 4-BzOPh H H c 0 0 Me s - - 0 1 2
743 4-BzOPh H H c 0 o 2-ClPh 0 - - 0 1 2
744 4-BzOPh H H c 0 Mee H 0 - - 0 1 7
745 4-BzOPh H H c 0 Mee H s - - 0 1 2
746 4-BzOPh H H c 0 Phe H 0 - - 0 1 2
747 4-BzOPh H H c 0 NH Pr 0 Ete o 1 1 7
748 4-BzOPh H H c 0 O Me NH Trim - 1 1 7
749 Ph Xanthen-9-yl 0 O H O Ete o l 1 2
750 Ph Xanthen-9-yl 0 s H O Ete o 1 1 2
751 Ph Xanthen-9-yl 0 - - - - - 0 0 7
752 Ph Xanthen-9-yl 0 0 Me 0 - - 0 1 2
753 Ph Xanthen-9-yl 0 0 Me s - - 0 1 7
754 Ph Xanthen-9-yl 0 0 2-ClPh o - 0 1 2
755 Ph Xanthen-9-yl 0 Mee H 0 - - 0 1 2
756 Ph Xanthen-9-yl 0 Mee H s - - 0 1 7
757 Ph Xanthen-9-yl 0 Ph H 0 - - 0 1 7
758 Ph Xanthen-9-yl 0 NH Pr 0 Ete 0 1 1 2
759 Ph Xanthen-9-yl 0 O Me NH Trim - 1 1 2
760 Ph Fluoren-9-yI 0 O H O Ete o 1 1 2
761 Ph Fluoren-9-yl 0 s H O Ete 0 1 1 2
762 Ph Fluoren-9-yl 0 - - - - - 0 0 2
763 Ph Fluoren-9-yl 0 0 Me 0 - - 0 1 2
764 Ph Fluoren-9-yl 0 0 Me s - - 0 1 2
765 Ph Fluore n-9-yl 0 0 2-ClpH 0 - - 0 1 7
766 Ph Fluoren-9-yl 0 Mee H 0 - - 0 1 7
-20CZ 287050 B6
Tabulka 1 - pokračování
slouí. č. R. R2 Rj Z Yi Y2 Y3 X Y<l n m
767 Ph Fluoren-9-yl 0 Mee H s - - 0 1
768 Ph Fluoren-9-yl 0 Phe H 0 - 0 1
769 Ph Fluoren-9-yl 0 NH Pr 0 Ete 0 1 1
770 Ph Fluoren-9-yl 0 0 Me NH Trim - 1 1
771 3,4-Dbp H H C 0 0 H O Ete 0 1 1
772 3,4-Dbp H H C 0 S H 0 Ete 0 1 1
773 3,4-Dbp H H C 0 - - - - - 0 0
774 3,4-Dbp H H C 0 o Me 0 - - 0 I
775 3,4-Dbp H H C 0 0 Me s - - 0 1
776 3,4-Dbp H H C o 0 2-ClPh 0 - - 0 1
777 3,4-Dbp H H C 0 Mee H 0 - - 0 1
778 3,4-Dbp H H C 0 Mee H s - - 0 1
779 3,4-Dbp H H C 0 Phe H 0 - - 0 1
780 3,4-Dbp H H C 0 NH Pr 0 Ete 0 1 1
781 3,4-Dbp H H C 0 O Me NH Trim - 1 1
782 Ph Ph Ph C 0 O H 0 Ete 0 1 1
783 Ph Ph Ph C 0 S H 0 Ete 0 1 1
784 Ph Ph Ph C o - - - - - 0 0
785 Ph Ph Ph C 0 0 Me 0 - - 0 1
786 Ph Ph Ph C 0 0 Me s - - 0 1
787 Ph Ph Ph C 0 o 2-ClPh 0 - - 0 1
788 Ph Ph Ph C o Mee H o - - 0 1
789 Ph Ph Ph C 0 Mee H s - - 0 1
790 Ph Ph Ph c 0 Phe H 0 - - 0 1
791 Ph Ph Ph c 0 NH Pr 0 Ete 0 1 1
792 Ph Ph Ph c 0 0 Me NH Trim - 1 1
793 3,5-Dbp H H c 0 0 H 0 Ete 0 1 1
794 3,5-Dbp H H c 0 S H 0 Ete 0 1 l
795 3,5-Dbp H H c 0 - - - - - 0 0
796 3,5-Dbp H H c 0 o Me 0 - - 0 1
797 3,5-Dbp H H c o o Me s - - 0 1
798 3,5-Dbp H H c 0 0 2-ClPh 0 - - 0 1
799 3,5-Dbp H H c 0 Mee H o - - 0 1
800 3,5-Dbp H H c 0 Mee H s - . - 0 1
801 3,5-Dbp H H c 0 Phe H 0 - - 0 1
802 3,5-Dbp H H c 0 NH Pr o Ete 0 1 1
803 3,5-Dbp H H c 0 0 Me NH Trim - 1 1
804 4-MeOPh 4-MeOPh Ph c o 0 H 0 Ete 0 1 1
805 4-MeOPh 4-MeOPh Ph c 0 S H 0 Ete 0 1 1
806 4-MeOPh 4-MeOPh Ph c 0 - - - - - 0 0
807 4-MeOPh 4-MeOPh Ph c 0 o Me 0 - - 0 1
808 4-MeOPh 4-MeOPh Ph c 0 0 Me s - - 0 1
809 4-MeOPh 4-MeOPh Ph c 0 o 2-ClPh 0 - - 0 1
810 4-MeOPh 4-MeOPh Ph c 0 Mee H 0 - - 0 l
811 4-MeOPh 4-MeOPh Ph c 0 Mee H S - - 0 1
812 4-MeOPh 4-MeOPh Ph c 0 Phe H 0 - - 0 1
813 4-MeOPh 4-MeOPh Ph c o NH Pr 0 Ete 0 1 1
814 4-MeOPh 4-MeOPh Ph c 0 O Me NH Trim - 1 1
815 4-MeOPh Ph Ph c 0 O H 0 Ete 0 1 1
816 4-MeOPh Ph Ph c 0 s H 0 Ete 0 1 1
817 4-MeOPh Ph Ph c 0 - - - - - 0 0
818 4-MeOPh Ph Ph c 0 0 Me 0 - - 0 1
819 4-MeOPh Ph Ph c 0 o Me s - - 0 1
820 4-MeOPh Ph Ph c o o 2-ClPh 0 - - 0 1
821 4-MeOPh Ph Ph c 0 Mee H 0 - - 0 1
822 4-MeOPh Ph Ph c 0 Mee H s - - 0 1
823 4-MeOPh Ph Ph c 0 Phe H 0 - - 0 1
824 4-MeOPh Ph Ph c 0 NH Pr 0 Ete 0 1 1
825 4-MeOPh Ph Ph c o 0 Me NH Trim - 1 1
826 tBu Ph Ph Si 0 0 H 0 Ete 0 1 1
827 tBu Ph Ph Si 0 S H 0 Ete 0 1 1
828 tBu Ph Ph Si 0 - - - - - 0 0
829 tBu Ph Ph Si 0 0 Me 0 - - 0 1
830 tBu Ph Ph Si 0 0 Me s - - 0 1
831 tBu Ph Ph Si 0 0 2-ClPh 0 - - 0 1
832 tBu Ph Ph Si 0 Mee H 0 - - 0 1
833 tBu Ph Ph Si 0 Mee H s - - 0 1
834 tBu Ph Ph Si 0 Phe H 0 - - 0 1
835 tBu Ph Ph Si o NH Pr o Ete 0 1 1
836 tBu Ph Ph Si 0 0 Me NH Trim - 1 1
loo |0O lOO |OO |OO 100 IQO IOO 100 100 loo loo 100 loo (00 IOO 100 loo loo loo loo loo loo loo IOO IOO 100 loo 100 100 loo 100 loo loo loo loo loo loo too 100 loo loo loo 100 100 100 IOO IOO 100 loo IOO loo loo 100 loo I0O 100 loo IOO loo lOO IOO IOO 100 IOO 100 I--J l-J l-J 1--4
-21CZ 287050 B6
Tabulka 1 - pokračování
slouC. č. Ri Ri r3 Z Yi Y2 Rr Y3 X Y« n ΓΠ B
837 Ph Ph Ph C s o H O Ete O 1 1 s
838 Ph Ph Ph C s s H O Ete o 1 1 8
839 Ph Ph Ph C s - - - - - 0 0 8
840 Ph Ph Ph C s o Me 0 - - 0 1 8
841 Ph Ph Ph C s o Me s - - 0 1 8
842 Ph Ph Ph C s o 2-CIPh 0 - - 0 1 8
843 Ph Ph Ph C s Mee H 0 - 0 1 8
844 Ph Ph Ph C s Mee H s - - 0 1 8
845 Ph Ph Ph C s Phe H 0 - - 0 1 8
846 Ph Ph Ph C s NH Pr 0 Ete 0 1 1 8
847 Ph Ph Ph C s O Me NH Trim - 1 1 8
848 4-BzOPh H H C o O H O Ete 0 1 1 8
849 4-BzOPh H H C 0 s H 0 Ete 0 1 1 8
850 4-BzOPh H H C 0 - - - - - 0 0 8
851 4-BzOPh H H c 0 0 Me 0 - - 0 1 8
852 4-BzOPh H H c 0 o Me s - 0 1 8
853 4-BzOPh H H c o o 2-CIPh 0 - - 0 1 8
854 4-BzOPh H H c 0 Mee H 0 - - 0 1 8
855 4-BzOPh H H c 0 Mee H s - - 0 1 8
856 4-BzOPh H H c 0 Phe H 0 - - 0 1 8
857 4-BzOPh H H c 0 NH Pr 0 Ete 0 1 1 8
858 4-BzOPh H H c 0 O Me NH Trim - 1 1 8
859 Ph Xanthen-9-yl 0 O H 0 Ete 0 1 1 8
860 Ph Xanthen-9-yl 0 s H 0 Ete 0 1 1 8
861 Ph Xanthen-9-yl 0 - - - - - 0 0 8
862 Ph Xanthen-9-yl 0 0 Me 0 - - 0 1 8
863 Ph Xanthen-9-yl 0 o Me s - - 0 1 8
864 Ph Xanthen-9-yl o 0 2-CIPh 0 - - 0 1 8
865 Ph Xanthen-9-yl 0 Mee H 0 - - 0 1 8
866 Ph Xanthen-9-yl o Mee H s - - 0 1 8
867 Ph Xanthen-9-yl 0 Phe H 0 - - 0 1 8
868 Ph Xanthen-9-yl 0 NH Pr 0 Ete o 1 1 8
869 Ph Xanthen-9-yl 0 O Me NH Trim - 1 1 8
870 Ph Fluoren-9-yl 0 O H 0 Ete 0 1 1 8
871 Ph Fluoren-9-yl 0 s H 0 Ete o 1 1 8
872 Ph Fluore n-9-yl 0 - - - - - 0 0 8
873 Ph Fluoren-9-yl 0 o Me 0 - - 0 1 8
874 Ph Fluoren-9-yl 0 o Me s - - 0 1 8
875 Ph Fluoren-9-yl 0 0 2-CIPh 0 - - 0 1 8
876 Ph Fluoren-9-yl 0 Mee H 0 - - 0 1 8
877 Ph Fluoren-9-yl 0 Mee H s - - 0 1 8
878 Ph Fluoren-9-yl 0 Phe H 0 - - 0 1 8
879 Ph Fluoren-9-yl 0 NH Pr 0 Ete 0 1 1 8
880 Ph Fluoren-9-yl 0 O Me NH Trim - 1 1 8
881 3,4-Dbp H H c 0 O H 0 Ete 0 1 1 9
882 3,4-Dbp H H c 0 s H 0 Ete o 1 1 9
883 3,4-Dbp H H c 0 - - - - - 0 0 9
884 3,4-Dbp H H c 0 0 Me 0 - - 0 1 9
885 3,4-Dbp H H c 0 0 Me s - - 0 1 9
886 3,4-Dbp H H c 0 o 2-CIPh 0 - - 0 1 9
887 3,4-Dbp H H c 0 Mee H 0 - - 0 1 9
888 3,4-Dbp H H c 0 Mee H s - - 0 1 9
889 3,4-Dbp H H c 0 Phe H 0 - - 0 1 9
890 3,4-Dbp H H c 0 NH Pr o Ete o 1 1 9
891 3,4-Dbp H H c 0 O Me NH Trim - 1 1 9
892 Ph Ph Ph c 0 O H 0 Ete o 1 1 9
893 Ph Ph Ph c 0 s H 0 Ete 0 1 1 9
894 Ph Ph Ph c 0 - - - - - 0 0 9
895 Ph Ph Ph c 0 0 Me 0 - - 0 1 9
896 Ph Ph Ph c 0 o Me s - - 0 1 9
897 Ph Ph Ph c 0 o 2-CIPh 0 - - 0 1 9
898 Ph Ph Ph c 0 Mee H 0 - - 0 1 2
899 Ph Ph Ph c o Mee H s - - 0 1 9
900 Ph Ph Ph c o Phe H 0 - - 0 1 9
901 Ph Ph Ph c 0 NH Pr 0 Ete o 1 1 9
902 Ph Ph Ph c 0 O Me NH Trim - 1 1 9
903 3,5-Dbp H H c 0 0 H 0 Ete 0 1 1 9
904 3,5-Dbp H H c 0 s H 0 Ete o 1 1 9
905 3,5-Dbp H H c 0 - - - - - 0 0 9
906 3,5-Dbp H H c 0 0 Me 0 - - 0 1 9
-22CZ 287050 B6
Tabulka 1 - pokračování
slouč. č. Ri Rz Rs Z Y| Y2 R4 Y3 X Y< n m B
907 3,5-Dbp H H C 0 0 Me S - - 0 1 9
908 3,5-Dbp H H C 0 0 2-ClPh O - - 0 1 9
909 3,5-Dbp H H C o Mee H O - - 0 1 9
910 3,5-Dbp H H C o Mee H S - - 0 1 9
911 3,5-Dbp H H C o Phe H O - - 0 1 9
912 3,5-Dbp H H C 0 NH Pr O Ete 0 1 1 9
913 3,5-Dbp H H C o O Me NH Trim - 1 1 9
914 4- MeOPh 4-MeOPh Ph C o O H O Ete o 1 1 9
915 4MeOPh 4-MeOPh Ph C o s H O Ete 0 1 1 9
916 4MeOPh 4-MeOPh Ph C o — — - — — 0 0 9
917 4MeOPh 4-MeOPh Ph C o 0 Me 0 — — 0 1 9
818 4MeOPh 4-MeOPh Ph C 0 0 Me s — — 0 1 9
919 4— MeOPh 4-MeOPh Ph C 0 0 2-ClPh 0 — — 0 1 9
920 4MeOPh 4-MeOPh Ph C o Mee H 0 — — 0 1 9
921 4— MeOPh 4-MeOPh Ph c o Mee H s — — 0 1 9
922 4MeOPh 4-MeOPh Ph c 0 Phe H 0 — - 0 1 9
923 4MeOPh 4-MeOPh Ph c o NH Pr 0 Ete 0 1 1 9
924 4MeOPh 4-MeOPh Ph c o O Me NH Trim — 1 1 9
925 4MeOPh Ph Ph c o O H O Ete 0 1 1 9
926 4MeOPh Ph Ph c 0 s H 0 Ete 0 1 1 9
927 4MeOPh Ph Ph c o — — — — 0 0 9
928 4MeOPh Ph Ph c o o Mee 0 — — 0 1 9
929 4MeOPh Ph Ph c o 0 Mee s — — 0 1 9
930 4MeOPh Ph Ph c o 0 2-ClPh o — - 0 1 9
931 4— MeOPh Ph Ph c 0 Mee H 0 — - 0 1 9
932 4MeOPh Ph Ph c o Mee H s — - 0 1 9
933 4MeOPh Ph Ph c 0 Phe H o — - 0 1 9
934 4MeOPh Ph Ph c o NH Pr o Ete 0 1 1 9
935 tBu Ph Ph Si 0 O Me NH Trim - I 1 9
936 tBu Ph Ph Si o O H O Ete 0 1 1 9
937 tBu Ph Ph Si o S H O Ete 0 1 1 9
938 tBu Ph Ph Si o - - - - - 0 0 9
939 tBu Ph Ph Si 0 0 Me 0 - 0 1 9
940 tBu Ph Ph Si 0 0 Me s - - 0 1 9
941 tBu Ph Ph Si o 0 2-ClPh 0 - - 0 1 9
942 tBu Ph Ph Si 0 Mee H 0 - - 0 1 9
943 tBu Ph Ph Si o Mee H s - - 0 1 9
944 tBu Ph Ph Si 0 Phe H 0 - - 0 1 9
945 tBu Ph Ph Si 0 NH Pr 0 Ete 0 1 1 9
946 tBu Ph Ph Si o O Me NH Trim - 1 1 9
947 Ph Ph Ph c s O H O Ete o 1 1 9
948 Ph Ph Ph c S S H 0 Ete 0 1 1 9
949 Ph Ph Ph c s - - - - - 0 0 9
950 Ph Ph Ph c s o Me o - - 0 1 9
951 Ph Ph Ph c s 0 Me s - - 0 1 9
952 Ph Ph Ph c s o 2-ClPh 0 - - 0 1 9
953 Ph Ph Ph c s Mee H 0 - - 0 1 9
954 Ph Ph Ph c s Mee H s - - 0 1 9
955 Ph Ph Ph c s Phe H 0 - - 0 1 9
-23CZ 287050 B6
Tabulka 1 - pokračování
slouč. č Ri R2 r3 Z Y1 Y2 Rr Y3 X Y4 n m B
956 Ph Ph Ph C s NH Pr 0 Ete 0 1 1 9
957 Ph Ph Ph C s o Me NH Trim - 1 1 9
958 4BzOPh H H C 0 0 H 0 Ete 0 1 1 9
959 4- BzOPh H H C o s H 0 Ete 0 1 1 9
960 4BzOPh H H C 0 — — “* 0 0 9
961 4BzOPh H H C 0 o Me 0 — — 0 1 9
962 4BzOPh H H c 0 o Me s ~~ 0 1 9
963 4BzOPh H H c 0 0 2-ClPh 0 — 0 1 2
964 4- BzOPh H H c 0 Mee H 0 0 1 9
965 4- BzOPh H H c 0 Mee H s 0 1 9
966 4BzOPh H H c 0 Phe H o — — 0 1 9
967 4BzOPh H H c 0 NH Pr 0 Ete 0 1 1 9
968 4- BzOPh H H c o O Me NH Trim - 1 1 9
969 Ph Xanthen-9-yl 0 O H 0 Ete o 1 l 9
970 Ph Xanthen-9-yl 0 s H 0 Ete 0 1 1 2
971 Ph Xanthen-9-yl 0 - - - - - 0 0 2
972 Ph Xanthen-9-yl o 0 Me 0 - - 0 1 2
973 Ph Xanthen-9-yl 0 0 Me s - - 0 1 9
974 Ph Xanthen-9-yl 0 0 2-CIPh 0 - - 0 1 9
975 Ph Xanthen-9-yl O Mee H O - - 0 1 9
976 Ph Xanthen-9-yl O Mee H S - - 0 1 9
977 Ph Xanthen-9-yl O Phe H O - - 0 1 9
978 Ph Xanthen-9-yl O NH Pr 0 Ete 0 1 1 2
979 Ph Xanthen-9-yl O O Me NH Trim - 1 1 2
980 Ph Fluoren-9-yl O O H O Ete 0 1 1 9
981 Ph Fluoren-9-yl O s H O Ete 0 1 1 9
982 Ph Fluoren-9-yl O - - - - - 0 0 2
983 Ph Fluore n-9-yl O 0 Me 0 - - 0 1 9
984 Ph Fluoren-9-yl O o Me s - - 0 1 9
985 Ph Fluoren-9-yl O 0 2-ClPh 0 - - 0 1 2
986 Ph Fluoren-9-yl 0 Mee H 0 - - 0 l 9
987 Ph Fluoren-9-yl 0 Mee H s - - 0 1 9
988 Ph Fluoren-9-yi 0 Phe H 0 - - 0 1 9
989 Ph Fluoren-9-yI 0 NH Pr 0 Ete 0 1 1 9
990 Ph Fluoren-9-yl 0 O Me NH Trim - 1 1 9
991 3,4-Dbp H H c O O H O Ete o 1 1
992 3,4-Dbp H H c O S H O Ete o 1 1
993 3,4-Dbp H H c 0 - - - - - 0 0
994 3,4-Dbp H H c o O Me O - - 0 1
995 3,4-Dbp H H c o O Me s - 0 1
996 3,4-Dbp H H c 0 0 2- 0 - - 0 1
ClPh
997 3,4-Dbp H H c o Mee H s - - 0 1
998 3,4-Dbp H H c o Mee H 0 - - 0 1
999 3,4-Dbp H H c 0 Phe H 0 - - 0 1
1000 3,4-Dbp H H c 0 NH Pr 0 Ete 0 1 1
1001 3,4-Dbp H H c 0 O Me NH Tri - 1 1
1002 Ph Ph Ph c 0 O H O m Ete o 1 1
1003 Ph Ph Ph c 0 s H O Ete o 1 1
1004 Ph Ph Ph C 0 - - - - - 0 0 10
1005 Ph Ph Ph C 0 0 Me O - - 0 1 10
1006 Ph Ph Ph C o 0 Me S - - 0 1 10
1007 Ph Ph Ph C 0 0 2-ClPh O - - 0 1 10
1008 Ph Ph Ph C 0 Mee H 0 - - 0 1 io
1009 Ph Ph Ph C 0 Mee H s - - 0 1 10
1010 Ph Ph Ph C 0 Phe H 0 - - 0 1 io
1011 Ph Ph Ph C 0 NH Pr 0 Ete O 1 1 Ifi
1012 Ph Ph Ph C 0 O Me NH Trim - 1 1 10
-24CZ 287050 B6
Tabulka 1 - pokračování
slouč. č. Rt Rz r3 Z Y| Yz R> Ys X Y4 Π m B
1013 3,5-Dbp H H C 0 0 H O Ete 0 Γ 1 10
1014 3,5-Dbp H H C 0 s H O Ete 0 1 1 IQ
1015 3,5-Dbp H H c 0 - - - - - 0 0 10
1016 3,5-Dbp H H c 0 0 Me 0 - - 0 1 10
1017 3,5-Dbp H H c 0 0 Me s - - 0 1 10
1018 3,5-Dbp H H c 0 0 2-ClPh 0 - - 0 1 10
1019 3,5-Dbp H H c 0 Mee H 0 - - 0 1 io
1020 3,5-Dbp H H c 0 Mee H s - 0 1 io
1021 3,5-Dbp H H c 0 Phe H 0 - - 0 1 io
1022 3,5-Dbp H H c 0 NH Pr 0 Ete 0 1 1 10
1023 3,5-Dbp H H c 0 0 Me NH Trim - 1 1 10
1024 4— MeOPh 4-MeOPh Ph c 0 O H O Ete 0 1 1 io
1025 4MeOPh 4-MeOPh Ph c 0 S H 0 Ete 0 1 1 io
1026 4MeOPh 4-MeOPh Ph c 0 — — — - — 0 0 10
1027 4MeOPh 4-MeOPh Ph c 0 0 Me 0 - — 0 1 10
1028 4MeOPh 4-MeOPh Ph c 0 0 Me s - — 0 1 10
1029 4MeOPh 4-MeOPh Ph c 0 0 2-ClPh o — - 0 1 IQ
1030 4MeOPh 4-MeOPh Ph c 0 Mee H 0 — - 0 1 IQ
1031 4— MeOPh 4—MeOPh Ph c 0 Mee H s - — 0 1 IQ
1032 4MeOPh 4-MeOPh Ph c 0 Phe H 0 — 0 1 IQ
1033 4- MeOPh 4-MeOPh Ph c 0 NH Pr 0 Ete 0 1 1 IQ
1034 4MeOPh 4-MeOPh Ph c 0 O Me NH Trim - 1 1 IQ
1035 4MeOPh Ph Ph c 0 0 H O Ete 0 1 1 10
1036 4- MeOPh Ph Ph c 0 S H O Ete 0 1 1 IQ
1037 4MeOPh Ph Ph c 0 — — - — — 0 1 IQ
1038 4- MeOPh Ph Ph c 0 0 Me 0 - — 0 I IQ
1039 4MeOPh Ph Ph c 0 0 Me s - — 0 1 IQ
1040 4MeOPh Ph Ph c 0 0 2-ClPh 0 - — 0 1 IQ
1041 4MeOPh Ph Ph c 0 Mee H 0 — 0 1 IQ
1042 4MeOPh Ph Ph c 0 Mee H s - — 0 1 IQ
1043 4MeOPh Ph Ph c 0 Phe H 0 — - 0 1 IQ
1044 4MeOPh Ph Ph c 0 NH Pr 0 Ete 0 1 1 IQ
1045 4— MeOPh Ph Ph c 0 0 Me NH Trim — 1 1 IQ
1046 tBu Ph Ph Si 0 0 H O Ete 0 1 1 IQ
1047 tBu Ph Ph Si 0 S H O Ete 0 1 1 IQ
1048 tBu Ph Ph Si 0 - - - - - 0 0 IQ
1049 tBu Ph Ph Si 0 0 Me 0 - - 0 1 IQ
1050 tBu Ph Ph Si 0 0 Me s - - 0 1 IQ
1051 tBu Ph Ph Si 0 0 2-ClPh 0 - - 0 1 IQ
1052 tBu Ph Ph Si 0 Mee H 0 - - 0 1 IQ
1053 tBu Ph Ph Si 0 Mee H s - - 0 1 IQ
1054 tBu Ph Ph Si 0 Phe H 0 - - 0 1 10
1055 tBu Ph Ph Si 0 NH Pr 0 Ete 0 1 1 IQ
1056 tBu Ph Ph Si 0 O Me NH Trim - 1 1 io
1057 Ph Ph Ph c s O H O Ete 0 1 1 IQ
1058 Ph Ph Ph c s S H 0 Ete 0 1 1 IQ
1059 Ph Ph Ph c s - - - - - 0 0 jo
1060 Ph Ph Ph c s 0 Me 0 - - 0 1 '10
-25CZ 287050 B6
Tabulka 1 - pokračování
slouč. č. Rl R2 R; Z Yi Yj R4 Y3 X Y4 n m B
1061 Ph Ph Ph c s 0 Me s - - 0 1 IQ
1062 Ph Ph Ph c s o 2-ClPh 0 ' - - 0 1 IQ
1063 Ph Ph Ph c s Mee H 0 - - 0 1 10
1064 Ph Ph Ph c s Mee H s - - 0 1 10
1065 Ph Ph Ph c s Phe H 0 - - 0 1 IQ
1066 Ph Ph Ph c s NH Pr 0 Ete o 1 1 IQ
1067 Ph Ph Ph c s 0 Me NH Trim - 1 1 IQ
1068
4— BzOPh
Ete
1069 4- BzOPh H H C 0 s H O Ete
1070 4- BzOPh H H C 0 — — —
1071 4- BzOPh H H C o o Me 0 —
1072 4BzOPh H H C o 0 Me s —
1073 4- BzOPh H H C 0 0 2-CIPh 0 —
1074 4- BzOPh H H C o Mee H 0 —
1075 4- H H C 0 Mee H s -
BzOPh
1076 4— BzOPh H H C o Phe H 0
1077 4BzOPh H H C 0 NH Pr 0 Ete
1078 4- BzOPh H H C 0 0 Me NH Trim
1079 Ph Xanthen-9-yI 0 0 H 0 Ete
1080 Ph Xanthen-9-yl 0 s H 0 Ete
1081 Ph Xanthen-9-yl 0 - - - -
1082 Ph Xanthen-9-yl o o Me 0 -
1083 Ph Xanthen-9-yl 0 0 Me s -
1084 Ph Xanthen-9-yI 0 0 2-ClPh o -
1085 Ph Xanthen-9-yl o Mee H 0 -
1086 Ph Xanthen-9-yl 0 Mee H s -
1087 Ph Xanthen-9-yl o Phe H 0 -
1088 Ph Xanthen-9-yl 0 NH Pr 0 Ete
1089 Ph Xanthen-9-yl o 0 Me NH Trim
1090 Ph Fluoren-9-yl o O H 0 Ete
1091 Ph Fluoren-9-yl 0 S H 0 Ete
1092 Ph Fluoren-9-yi 0 0 - - -
1093 Ph Fluoren-9-yi 0 0 Me O -
1094 Ph Fluoren-9-yl 0 0 Me s -
1095 Ph Fluoren-9-yl o 0 2-ClPh o -
1096 Ph Fluoren-9-yl 0 Mee H o -
1097 Ph Fluoren-9-yl 0 Mee H s -
1098 Ph Fluoren-9-yl 0 Phe H 0 -
1099 Ph Fluoren-9-yl 0 NH Pr 0 Ete
1100 Ph Fluoren-9-yl 0 0 Me NH Trim
1101 3,4-Dbp H H C o 0 H O Ete
1102 3,4-Dbp H H C 0 S H 0 Ete
1103 3,4-Dbp H H C 0 - - - -
1104 3,4-Dbp H H C 0 0 Me 0 -
1105 3,4-Dbp H H C 0 o Me s -
1106 3,4-Dbp H H C 0 0 2-ClPh 0 -
1107 3,4-Dbp H H C 0 Mee H 0 -
1108 3,4-Dbp H H C 0 Mee H s -
1109 3,4-Dbp H H C o Phe H 0 -
1110 3,4-Dbp H H C 0 NH Pr 0 Ete
1111 3,4-Dbp H H C 0 0 Me NH Trim
1112 Ph Ph Ph c 0 0 H 0 Ete
1113 Ph Ph Ph c o s H O Ete
1114 Ph Ph Ph c o - - - -
1115 Ph Ph Ph c 0 0 Me 0 -
1116 Ph Ph Ph c 0 0 Me s -
1117 Ph Ph Ph c o 0 2-ClPh 0 -
1 o o o o o o o
1 o o o o o o o o o o o o o o 1
1 1 o o o o
IQ io
IQ
IQ
IQ IQ IQ IQ IQ IQ IQ IQ IQ IQ IQ 10 IQ IQ IQ IQ IQ IQ IQ IQ IQ 10 H U H U 11 u 11 H ii ii li li li H 11 H 11
-26CZ 287050 B6
Tabulka 1 - pokračování
slouč. č. Ri Ri Rs Z Yi Y2 R4 Y3 X Yr n m B
1118 Ph Ph Ph C o Mee H O - - 0 1 u
1119 Ph Ph Ph C 0 Mee H s - - 0 1 11
1120 Ph Ph Ph C o Phe H o - - 0 1 u
1121 Ph Ph Ph C 0 NH Pr o Ete 0 1 1 n
1122 Ph Ph Ph C o O Me NH Trim - 1 1 n
1123 3,5-Dbp H H C o O H O Ete 0 1 1 H
1124 3,5-Dbp H H C 0 s H 0 Ete 0 1 1 li
1125 3,5-Dbp H H C 0 - - - - - 0 0 li
1126 3,5-Dbp H H C o 0 Me o - - 0 1 11
1127 3,5-Dbp H H C 0 0 Me s - - 0 1 Η
1128 3,5-Dbp H H C o 0 2-ClPh o - - 0 1 11
1129 3,5-Dbp H H C 0 Mee H o - - 0 1 u
1130 3,5-Dbp H H C o Mee H s - - 0 1 u
1131 3,5-Dbp H H C o Phe H o - - 0 1 H
1132 3,5-Dbp H H C 0 NH Pr 0 Ete 0 1 1 H
1133 3,5-Dbp H H C 0 O Me NH Trim - 1 1 H
1134 4-MeOPh 4-MeOPh Ph C o O H 0 Ete 0 1 1 H
1135 4-MeOPh 4-MeOPh Ph C o S H 0 Ete o 1 1 u
1136 4-MeOPh 4-MeOPh Ph C o - - - - - 0 0 H
1137 4-MeOPh 4-MeOPh Ph C 0 0 Me 0 - - 0 1 u
1138 4-MeOPh 4-MeOPh Ph C o o Me s - - 0 1 H
1139 4-MeOPh 4-MeOPh Ph c o 0 2-ClPh o - - 0 1 H
1140 4-MeOPh 4-MeOPh Ph c 0 Mee H 0 - - 0 1 u
1141 4-MeOPh 4-MeOPh Ph c o Mee H s - - 0 1 H
1142 4-MeOPh 4-MeOPh Ph c o Phe H 0 - - 0 1 u
1143 4-MeOPh 4-MeOPh Ph c o NH Pr o Ete 0 1 1 u
1144 4-MeOPh 4-MeOPh Ph c 0 O Me NH Trim - 1 1 u
1145 4-MeOPh Ph Ph c 0 O H O Ete 0 1 1 11
1146 4-MeOPh Ph Ph c o S H o Ete 0 1 1 11
1147 4-MeOPh Ph Ph c 0 - - - - - 0 0 11
1148 4-MeOPh Ph Ph c 0 0 Me 0 - - 0 1 H
1149 4-MeOPh Ph Ph c 0 0 Me s * - 0 1 u
1150 4-MeOPh Ph Ph c 0 0 2-ClPh 0 - - 0 1 u
1151 4-MeOPh Ph Ph c 0 Mee H O - - 0 1 11
1152 4-MeOPh Ph Ph c o Mee H S - - 0 1 11
1153 4-MeOPh Ph Ph c 0 Phe H 0 - - 0 1 11
1154 4-MeOPh Ph Ph c o NH Pr O Ete 0 1 I 11
1155 4-MeOPh Ph Ph c 0 0 Me NH Trim - 1 1 11
1156 tBu Ph Ph Si 0 O H 0 Ete 0 1 1 11
1157 tBu Ph Ph Si 0 S H O Ete 0 1 i li
1158 tBu Ph Ph Si 0 - - - - - 0 0 11
1159 tBu Ph Ph Si 0 0 Me 0 - - 0 1 11
1160 tBu Ph Ph Si o 0 Me s - - 0 1 11
1161 tBu Ph Ph Si 0 o 2-ClPh 0 - - 0 1 11
1162 tBu Ph Ph Si 0 Mee H 0 - - 0 1 11
1163 tBu Ph Ph Si 0 Mee H s - - 0 1 11
1164 tBu Ph Ph Si 0 Phe H o - - 0 i 11
1165 tBu Ph Ph Si o NH Pr 0 Ete 0 1 1 11
1166 tBu Ph Ph Si o O Me NH Trim - 1 1 11
1167 Ph Ph Ph c s O H o Ete 0 1 1 11
1168 Ph Ph Ph c s S H 0 Ete 0 1 1 11
1169 Ph Ph Ph c s - - - - - 0 0 11
1170 Ph Ph Ph c s o Me o - - 0 i 11
1171 Ph Ph Ph c s 0 Me s - - 0 1 11
1172 Ph Ph Ph c s o 2-ClPh o - - 0 1 11
1173 Ph Ph Ph c s Mee H 0 - - 0 I 11
1174 Ph Ph Ph c s Mee H s - - 0 1 11
1175 Ph Ph Ph c s Phe H o - - 0 1 11
1176 Ph Ph Ph c s NH Pr 0 Ete 0 1 1 11
1177 Ph Ph Ph c s O Me NH Trim - 1 1 11
1178 4-BzOPh H H c 0 O H 0 Ete 0 1 1 11
1179 4-BzOPh H H c 0 S H 0 Ete 0 1 1 11
1180 4-BzOPh H H c 0 - - - - 0 0 11
1181 4-BzOPh H H c 0 0 Me 0 - - 0 1 11
1182 4-BzOPh H H c 0 0 Me s - 0 1 11
1183 4-BzOPh H H c o 0 2-ClPh 0 - - 0 1 11
1184 4-BzOPh H H c 0 Mee H 0 - - 0 1 11
1185 4-BzOPh H H c 0 Mee H s - - 0 1 11
-27CZ 287050 B6
Tabulka 1 - pokračování
slouč. č. Ri Rz R3 Z Yl Yz Rr Y3 X Yr n m B
1186 4-BzOPh H H C o Phe H O - - 0 1 11
1187 4-BzOPh H H C o NH Pr O Ete o 1 1 u
1188 4-BzOPh H H C o o Me NH Trim - 1 1 u
1189 Ph Xanthen-9- yl o o H 0 Ete o 1 1 u
1190 Ph Xanthen-9-yl 0 s H 0 Ete 0 1 1 11
1191 Ph Xanthen-9-yl o - - - - 0 0 li
1192 Ph Xanthen-9-yl o o Me O - 0 1 H
1193 Ph Xanthen-9-yl o o Me s - 0 1 n
1194 Ph Xanthen-9-yl 0 o 2-CIPh o - 0 1 H
1195 Ph Xanthen-9-yI 0 Mee H 0 - 0 1 11
1196 Ph Xanthen-9-y] o Mee H s - 0 1 H
1197 Ph Xanthen-9-yl o Phe H o - 0 1 H
1198 Ph Xanthen-9-yl 0 NH Pr 0 Ete 0 1 1 11
1199 Ph Xanthen-9-yl o O Me NH Trim - 1 1 11
1200 Ph Fluoren-9-yI 0 O H O Ete 0 1 1 H
1201 Ph Fluoren-9-yl o s H o Ete o 1 1 Ϊ1
1202 Ph Fluoren-9-yl 0 - - - - - 0 0 H
1203 Ph Fluoren-9-yl 0 0 Me 0 - - 0 1 u
1204 Ph Fluoren-9-yl 0 0 Me s - - 0 1 li
1205 Ph Fluoren-9-yl o 0 2-ClPh o - - 0 1 u
1206 Ph Fluoren-9-yl o Mee H 0 - - 0 1 11
1207 Ph Fluoren-9-yl o Mee H s - - 0 1 n
1208 Ph Fluoren-9-yl 0 Phe H 0 - - 0 1 u
1209 Ph Fluoren-9-yI 0 NH Pr o Ete 0 1 1 u
1210 Ph Fluoren-9-yI 0 O Me NH Trim - 1 1 11
1211 3,4-Dbp H H C 0 O H 0 Ete 0 1 1 12
1212 3,4-Dbp H H C 0 S H O Ete 0 1 1 12
1213 3,4-Dbp H H C 0 - - - - - 0 0 Ϊ2
1214 3,4-Dbp H H C 0 0 Me 0 - - 0 1 12
1215 3,4-Dbp H H C o 0 Me s - - 0 1 12
1216 3,4-Dbp H H C 0 0 2-ClPh 0 - - 0 1 12
1217 3,4-Dbp H H C 0 Mee H o - - 0 1 12
1218 3,4-Dbp H H C 0 Mee H s - - 0 1 12
1219 3,4-Dbp H H C 0 Phe H o - - 0 1 12
1220 3,4-Dbp H H C 0 NH Pr 0 Ete 0 1 1 12
1221 3,4-Dbp H H C 0 O Me NH Trim - 1 1 12
1222 Ph Ph Ph C o O H O Ete o 1 1 12
1223 Ph Ph Ph C 0 S H 0 Ete 0 1 1 12
1224 Ph Ph Ph C 0 - - - - - 0 0 12
1225 Ph Ph Ph C 0 0 Me 0 - - 0 1 12
1226 Ph Ph Ph C 0 0 Me s - - 0 1 12
1227 Ph Ph Ph C 0 o 2-CIPh o - - 0 1 12
1228 Ph Ph Ph C 0 Mee H 0 - - 0 1 12
1229 Ph Ph Ph C 0 Mee H s - - 0 1 12
1230 Ph Ph Ph c o Phe H 0 - - 0 1 12
1231 Ph Ph Ph c 0 NH Pr 0 Ete 0 1 1 12
1232 Ph Ph Ph c 0 O Me NH Trim - 1 1 12
1233 3,5-Dbp H H c 0 O H 0 Ete 0 1 1 12
1234 3,5-Dbp H H c 0 s H 0 Ete 0 1 1 12
1235 3,5-Dbp H H c 0 - - - - - 0 1 12
1236 3.5-Dbp H H c 0 o Me o - - 0 1 12
1237 3.5-Dbp H H c o o Me s - - 0 1 12
1238 3,5-Dbp H H c 0 o 2-ClPh o - - 0 1 12
1239 3,5-Dbp H H c 0 Mee H 0 - - 0 1 Ϊ2
1240 3,5-Dbp H H c 0 Mee H s - - 0 1 12
1241 3,5-Dbp H H c 0 Phe H 0 - - 0 1 12
1242 3,5-Dbp H H c 0 NH Pr 0 Ete 0 1 1 12
1243 3,5-Dbp H H c 0 O Me NH Trim - 1 1 12
1244 4-MeOPh 4-MeOP Ph c 0 0 H 0 Ete 0 1 1 12
1245 4-MeOPh 4-MeOP Ph c o s H o Ete 0 1 1 12
1246 4-MeOPh 4-MeOP Ph c o - - - - - 0 0 12
1247 4-MeOPh 4-MeOP Ph c 0 0 Me 0 - — 0 1 12
1248 4-MeOPh 4-MeOP Ph c o o Me s - - 0 1 12
1249 4-MeOPh 4-MeOP Ph c o 0 2-ClPh o - - 0 1 12
1250 4-MeOPh 4-MeOP Ph c o Mee H o - - 0 1 12
1251 4-MeOPh 4-MeOP Ph c 0 Mee H s - - 0 1 12
1252 4-MeOPh 4-MeOP Ph c 0 Phe H 0 - - 0 1 12
1253 4-MeOPh 4-MeOP Ph c 0 NH Pr 0 Ete 0 1 1 12
1254 4-MeOPh 4-MeOP Ph c o O Me NH Trim - 1 1 12
1255 4-MeOPh Ph Ph c o O H 0 Ete o 1 1 12
-28CZ 287050 B6
Tabulka 1 - pokračování
slouč. č. Ri Rz Rs Z Yi Yz Ra Y3 X Ya Π m B
1256 4-MeOPh Ph Ph C o s H 0 Ete 0 1 1 Π
1257 4-MeOPh Ph Ph c o - - - - - 0 0 12
1258 4-MeOPh Ph Ph c 0 o Me 0 - - 0 1 12
1259 4-MeOPh Ph Ph c 0 0 Me s - - 0 1 12
1260 4-MeOPh Ph Ph c 0 o 2-ClPh 0 - - 0 1 12
1261 4-MeOPh Ph Ph c 0 Mee H 0 - - 0 1 12
1262 4-MeOPh Ph Ph c 0 Mee H s - - 0 1 12
1263 4-MeOPh Ph Ph c 0 Phe H 0 - - 0 1 í 2
1264 4-MeOPh Ph Ph c o NH Pr o Ete 0 1 1 12
1265 4-MeOPh Ph Ph c o O Me NH Trim - 1 1 12
1266 tBu Ph Ph Si 0 O H 0 Ete 0 1 1 12
1267 tBu Ph Ph Si o s H 0 Ete o 1 1 12
1268 tBu Ph Ph Si 0 - - - - - 0 0 12
1269 tBu Ph Ph Si 0 o Me 0 - - 0 1 12
1270 tBu Ph Ph Si 0 o Me s - - 0 1 12
1271 tBu Ph Ph Si 0 0 2-ClPh 0 - - 0 1 12
1272 tBu Ph Ph Si 0 Mee H o - - 0 1 12
1273 tBu Ph Ph Si o Mee H s - - 0 1 12
1274 tBu Ph Ph Si 0 Phe H 0 - - 0 1 12
1275 tBu Ph Ph Si 0 NH Pr 0 Ete 0 1 1 12
1276 tBu Ph Ph Si 0 O Me NH Trim - 1 1 12
1277 Ph Ph Ph C S O H O Ete 0 1 l 12
1278 Ph Ph Ph c S s H 0 Ete 0 1 1 12
1279 Ph Ph Ph c s - - - - - 0 0 12
1280 Ph Ph Ph c s o Me 0 - - 0 1 12
1281 Ph Ph Ph c s o Me s - 0 1 12
1282 Ph Ph Ph c s o 2-ClPh o - - 0 1 12
1283 Ph Ph Ph c s Mee H o - - 0 1 12
1284 Ph Ph Ph c s Mee H s - - 0 1 12
1285 Ph Ph Ph c s Phe H o - 0 1 12
1286 Ph Ph Ph c s NH Pr 0 Ete 0 1 1 12
1287 Ph Ph Ph c s O Me NH Trim - 1 1 12
1288 4-BzOPh H H c 0 O H 0 Ete 0 1 1 12
1289 4-BzOPh H H c o s H 0 Ete o 1 1 12
1290 4-BzOPh H H c 0 - - - - - 0 0 12
1291 4-BzOPh H H c 0 o Me o - - 0 1 12
1292 4-BzOPh H H c 0 0 Me s - - 0 1 12
1293 4-BzOPh H H c o o 2-ClPh o - - 0 1 12
1294 4-BzOPh H H c 0 Mee H o - - 0 1 12
1295 4-BzOPh H H c 0 Mee H s - - 0 1 12
1296 4-BzOPh H H c 0 Phe H o - - 0 1 12
1297 4-BzOPh H H c 0 NH Pr o Ete 0 1 1 12
1298 4-BzOPh H H c 0 O Me NH Trim - 1 1 12
1299 Ph Xanthen-9-yl 0 O H O Ete 0 1 1 12
1300 Ph Xanthen-9-yl 0 s H 0 Ete 0 1 1 12
1301 Ph Xanthen-9-yl o - - - - - 0 0 12
1302 Ph Xanthen-9-yl o o Me o - - 0 1 12
1303 Ph Xanthen-9-yl 0 o Me s - - 0 1 12
1304 Ph Xanthen-9-yl 0 0 2-ClPh 0 - - 0 1 12
1305 Ph Xanthen-9-yl 0 Mee H 0 - - 0 1 12
1306 Ph Xanthen-9-yl o Mee H s - - 0 1 12
1307 Ph Xanthen-9-yl o Phe H 0 - - 0 1 12
1308 Ph Xanthen-9-yl o NH Pr 0 Ete 0 1 1 12
1309 Ph Xanthen-9-yl o O Me NH Trim - 1 1 12
1310 Ph Fluoren-9-\l 0 0 H O Ete 0 1 1 12
1311 Ph Fluoren-9-yl 0 s H 0 Ete 0 1 1 12
1312 Ph Fluoren-9-yl 0 - - - - - 0 0 12
1313 Ph Fluoren-9-yl o 0 Me o - - 0 1 12
1314 Ph Fluoren-9-yl 0 0 Me s - - 0 1 12
1315 Ph Fluoren-9-yl 0 o 2-ClPh 0 - - 0 1 12
1316 Ph Fluoren-9-yl o Mee H o - - 0 1 12
1317 Ph Fluoren-9-yl o Mee H s - - 0 1 12
1318 Ph Fluoren-9-yl 0 Phe H 0 - - 0 1 12
1319 Ph Fluoren-9-vI 0 NH Pr o Ete 0 1 1 12
1320 Ph Fluoren-9-yl o O Me NH Trim - 1 1 12
-29CZ 287050 B6
Tabulka 1 - pokračování
slouč. C. R| Rt r3 Z Yl Y2 Rt Y3 X Yí n m B
1321 3,4-Dbp H H C 0 0 H O Ete 0 1 1 13
1322 3,4-Dbp H H C 0 s H 0 Ete o 1 1 13
1323 3,4-Dbp H H C 0 - - - - - 0 0 13
1324 3,4-Dbp H H C o o Me o - - 0 1 13
1325 3,4-Dbp H H C 0 0 Me s - - 0 1 J3
1326 3,4-Dbp H H C 0 0 2-ClPh 0 - - 0 1 13
1327 3,4-Dbp H H C 0 Mee H 0 - - 0 1 13
1328 3,4-Dbp H H C 0 Mee H s - - 0 1 13
1329 3,4-Dbp H H C o Phe H 0 - - 0 1 13
1330 3,4-Dbp H H C 0 NH Pr 0 Ete 0 1 1 13
1331 3,4-Dbp H H C o O Me NH Trim - 1 1 13
1332 Ph Ph Ph C o O H O Ete o 1 l 13
1333 Ph Ph Ph C 0 s H 0 Ete 0 1 1 13
1334 Ph Ph Ph C 0 - - - - - 0 0 13
1335 Ph Ph Ph C o 0 Me 0 - - 0 1 13
1336 Ph Ph Ph C 0 0 Me s - - 0 1 13
1337 Ph Ph Ph C 0 0 2-ClPh 0 - - 0 1 13
1338 Ph Ph Ph c 0 Mee H 0 - - 0 1 13
1339 Ph Ph Ph c 0 Mee H s - - 0 1 13
1340 Ph Ph Ph c o Phe H 0 - - 0 1 13
1341 Ph Ph Ph c 0 NH Pr 0 Ete o 1 1 13
1342 Ph Ph Ph c o O Me NH Trim - 1 1 13
1343 3,5-Dbp H H c 0 0 H 0 Ete 0 1 1 Ϊ3
1344 3,5-Dbp H H c 0 s H 0 Ete 0 1 1 13
1345 3,5-Dbp H H c o - - - - - 0 0 13
1346 3,5-Dbp H H c 0 0 Me 0 - - 0 1 13
1347 3,5-Dbp H H c o 0 Me s - - 0 1 13
1348 3,5-Dbp H H c o 0 2-ClPh o - - 0 1 13
1349 3,5-Dbp H H c 0 Mee H 0 - - 0 1 13
1350 3,5-Dbp H H c 0 Mee H s - - 0 1 13
1351 3,5-Dbp H H c 0 Phe H 0 - - 0 1 13
1352 3,5-Dbp H H c 0 NH Pr 0 Ete 0 1 1 13
1353 3,5-Dbp H H c 0 O Me NH Trim - 1 1 13
1354 4-MeOPh 4-MeOPh Ph c o O H 0 Ete 0 1 1 13
1355 4-MeOPh 4-MeOPh Ph c 0 s H O Ete 0 1 1 13
1356 4-MeOPh 4-MeOPh Ph c 0 - - - - - 0 0 13
1357 4-MeOPh 4-MeOPh Ph c 0 0 Me 0 - - 0 1 13
1358 4-MeOPh 4-MeOPh Ph c o 0 Me s - - 0 1 13
1359 4-MeOPh 4-MeOPh Ph c 0 0 2-ClPh 0 - - 0 1 13
1360 4-MeOPh 4-MeOPh Ph c 0 Mee H 0 - - 0 1 13
1361 4-MeOPh 4-MeOPh Ph c o Mee H s - - 0 1 13
1362 4-MeOPh 4-MeOPh Ph c 0 Phe H 0 - - 0 1 13
1363 4-MeOPh 4-MeOPh Ph c 0 NH Pr 0 Ete o 1 1 13
1364 4-MeOPh 4-MeOPh Ph c 0 O Me NH Trim 1 1 13
1365 4-MeOPh Ph Ph c o O H O Ete 0 1 1 13
1366 4-MeOPh Ph Ph c 0 s H 0 Ete 0 1 1 13
1367 4-MeOPh Ph Ph c o - - - - - 0 0 13
1368 4-MeOPh Ph Ph c 0 0 Me 0 - - 0 1 1'3
1369 4-MeOPh Ph Ph c 0 0 Me s - - 0 1 13
1370 4-MeOPh Ph Ph c o o 2-ClPh 0 - - 0 1 13
1371 4-MeOPh Ph Ph c 0 Mee H 0 - - 0 1 13
1372 4-MeOPh Ph Ph c 0 Mee H s - - 0 1 13
1373 4-MeOPh Ph Ph c 0 Phe H 0 - - 0 1 13
1374 4-MeOPh Ph Ph c 0 NH Pr 0 Ete 0 1 1 13
1375 4-MeOPh Ph Ph c o O Me NH Trim - 1 1 13
1376 tBu Ph Ph Si 0 0 H 0 Ete 0 1 1 Í3
1377 tBu Ph Ph Si 0 S H 0 Ete 0 1 1 13
1378 tBu Ph Ph Si 0 - - - - - 0 0 13
1379 tBu Ph Ph Si 0 0 Me 0 - - 0 1 13
1380 tBu Ph Ph Si 0 0 Me s - - 0 1 13
1381 tBu Ph Ph Si 0 o 2-ClPh 0 - - 0 1 13
1382 tBu Ph Ph Si 0 Mee H 0 - - 0 1 13
1383 tBu Ph Ph Si 0 Mee H s - - 0 1 13
1384 tBu Ph Ph Si 0 Phe H 0 - - 0 1 13
1385 tBu Ph Ph Si 0 NH Pr o Ete 0 1 1 13
1386 tBu Ph Ph Si 0 O Me NH Trim - 1 1 13
1387 Ph Ph Ph C S O H 0 Ete 0 1 1 13
1388 Ph Ph Ph c s s H 0 Ete o 1 1 13
1389 Ph Ph Ph c s - - - - - 0 0 13
1390 Ph Ph Ph c s 0 Me 0 - - 0 1 13
-30CZ 287050 B6
Tabulka 1 - pokračování
slouč. č. Ri Ri R-, Z ¥> Y2 R4 Y3 X Y4 n m B
1391 Ph Ph Ph C s 0 Me s - - 0 1 13
1392 Ph Ph Ph C s o 2-ClPh 0 - - 0 1 13
1393 Ph Ph Ph C s Mee H 0 - - 0 1 13
1394 Ph Ph Ph C s Mee H s - - 0 1 13
1395 Ph Ph Ph C s Phe H o - - 0 1 13
1396 Ph Ph Ph C s NH Pr 0 Ete 0 1 1 13
1397 Ph Ph Ph C s O Me NH Trim - 1 1 13
1398 4-BzOPh H H C o O H O Ete 0 1 1 13
1399 4-BzOPh H H C 0 S H 0 Ete o 1 1 13
1400 4-BzOPh H H C o - - - - - 0 0 13
1401 4-BzOPh H H C 0 0 Me 0 - - 0 1 13
1402 4-BzOPh H H C o o Me s - - 0 1 13
1403 4-BzOPh H H C 0 0 2-ClPh o - - 0 1 13
1404 4-BzOPh H H C o Mee H 0 - - 0 1 13
1405 4-BzOPh H H C o Mee H s - - 0 1 13
1406 4-BzOPh H H C 0 Phe H 0 - - 0 1 13
1407 4-BzOPh H H c o NH Pr 0 Ete 0 1 1 13
1408 4-BzOPh H H c 0 O Me NH Trim - 1 1 13
1409 Ph Xanthen-9-yl 0 O H 0 Ete 0 1 1 13
1410 Ph Xanthen-9-jl o s H o Ete 0 1 1 13
1411 Ph Xanthen-9-yl 0 - - - - - 0 0 13
1412 Ph Xanthen-9-yl 0 o Me 0 - - 0 1 13
1413 Ph Xanthen-9-yl o o Me s - - 0 1 13
1414 Ph Xanthen-9-yl 0 0 2-ClPh 0 - - 0 1 13
1415 Ph Xanthen-9-yi o Mee H 0 - - 0 1 13
1416 Ph Xanthen-9-vl o Mee H s - - 0 1 13
1417 Ph Xanthen-9-yl 0 Phe H o - - 0 1 13
1418 Ph Xanthen-9-'.! o NH Pr 0 Ete 0 1 1 13
1419 Ph Xanthen-9-\l 0 O Me NH Trim - 1 1 13
1420 Ph Fluoren-9-\l 0 O H O Ete o 1 1 13
1421 Ph Fluoren-9-'.l o s H 0 Ete o 1 1 13
1422 Ph Fluoren-9-\I 0 - - - - 0 0 13
1423 Ph Fluoren-9-\l 0 0 Me 0 - - 0 1 13
1424 Ph Fluoren-9-yl o 0 Me s - - 0 1 13
1425 Ph Fluoren-9-'. 1 0 0 2-ClPh 0 - - 0 1 13
1426 Ph Fluoren-9-\ 1 0 Mee H 0 - - 0 1 13
1427 Ph Fluore n-9-vl 0 Mee H s - - 0 1 13
1428 Ph Fluoren-9-\l 0 Phe H 0 - - 0 1 13
1429 Ph Fluoren-9-\l o NH Pr 0 Ete 0 1 1 13
1430 Ph Fluoren-9-vI 0 O Me NH Trim - 1 1 13
1431 3.4-Dbp H H c 0 O H 0 Ete 0 1 1 14
1432 3.4-Dbp H H c 0 S H 0 Ete 0 1 1 14
1433 3.4-Dbp H H c 0 - - - - - 0 0 14
1434 3.4-Dbp H H c 0 0 Me 0 - - 0 1 14
1435 3.4-Dbp H H c 0 0 Me s - - 0 1 14
1436 3.4-Dbp H H c 0 0 2-ClPh 0 - - 0 1 14
1437 3.4-Dbp H H c 0 Mee H 0 - - 0 1 14
1438 3.4-Dbp H H c 0 Mee H s - - 0 1 14
1439 3.4-Dbp H H c 0 Phe H 0 - - 0 1 14
1440 3.4-Dbp H H c 0 NH Pr 0 Ete 0 1 1 14
1441 3.4-Dbp H H c o O Me NH Trim - 1 1 14
1442 Ph Ph Ph c 0 O H 0 Ete 0 1 1 14
1443 Ph Ph Ph c 0 S H o Ete 0 1 1 14
1444 Ph Ph Ph c o - - - - - 0 0 14
1445 Ph Ph Ph c 0 0 Me 0 - - 0 1 14
1446 Ph Ph Ph c 0 0 Me s - - 0 1 14
1447 Ph Ph Ph c 0 0 2-ClPh 0 - - 0 1 14
1448 Ph Ph Ph c 0 Mee H 0 - - 0 1 14
1449 Ph Ph Ph c 0 Mee H s - - 0 1 14
1450 Ph Ph Ph c 0 Phe H 0 - - 0 1 14
1451 Ph Ph Ph c 0 NH Pr o Ete 0 1 1 14
1452 Ph Ph Ph c o O Me NH Trim - 1 1 14
1453 3,5-Dbp H H c 0 O H 0 Ete 0 1 1 14
1454 3,5-Dbp H H c 0 S H o Ete 0 1 1 14
1455 3.5-Dbp H H c 0 - - - - - 0 0 14
1456 3,5-Dbp H H c 0 O Me 0 - - 0 1 14
1457 3,5-Dbp H H c 0 0 Me s - - 0 1 14
1458 3,5-Dbp H H c 0 0 2-ClPh 0 - - 0 1 14
1459 3,5-Dbp H H c 0 Mee H 0 - 0 1 14
1460 3,5-Dbp H H c o Mee H s - - 0 1 14
-31CZ 287050 B6
Tabulka 1 - pokračování
slouč. i. Ri R2 Rs Z Y1 Yl Rs Ys X Ys n m B
1461 3,5-Dbp H H C 0 Phe H O - - 0 1 14
1462 3,5-Dbp H H C o NH Pr O Ete 0 1 1 14
1463 3,5-Dbp H H C 0 o Me NH Trim - 1 1 14
1464 4-MeOPh 4-MeOPh Ph C 0 o H O Ete o 1 1 14
1465 4-MeOPh 4-MeOPh Ph C 0 s H O Ete 0 1 1 14
1466 4-MeOPh 4-MeOPh Ph C 0 - - - - - 0 0 14
1467 4-MeOPh 4-MeOPh Ph C o o Me 0 - - 0 1 14
1468 4-MeOPh 4-MeOPh Ph C 0 0 Me s - - 0 1 14
1469 4-MeOPh 4-MeOPh Ph C o 0 2-CIPh 0 - - 0 1 14
1470 4-MeOPh 4-MeOPh Ph C 0 Mee H 0 - - 0 1 14
1471 4-MeOPh 4-MeOPh Ph C 0 Mee H s - - 0 1 14
1472 4-MeOPh 4-MeOPh Ph C 0 Phe H o - - 0 1 14
1473 4-MeOPh 4-MeOPh Ph c 0 NH Pr 0 Ete 0 1 1 14
1474 4-MeOPh 4-MeOPh Ph c 0 O Me NH Trim - 1 1 14
1475 4-MeOPh Ph Ph c o O H O Ete o 1 1 14
1476 4-MeOPh Ph Ph c 0 s H 0 Ete o 1 1 14
1477 4-MsOPh Ph Ph c 0 - - - - 0 0 14
1478 4-MeOPh Ph Ph c 0 0 Me 0 - - 0 1 14
1479 4-MeOPh Ph Ph c 0 0 Me s - - 0 1 14
1480 4-MeOPh Ph Ph c 0 0 2-ClPh 0 - - 0 1 14
1481 4-MeOPh Ph Ph c 0 Mee H 0 - - 0 1 14
1482 4-MeOPh Ph Ph c o Mee H s - - 0 1 14
1483 4-MeOPh Ph Ph c 0 Phe H 0 - - 0 1 14
1484 4-MeOPh Ph Ph c 0 NH Pr 0 Ete 0 1 1 14
1485 4-MeOPh Ph Ph c 0 O Me NH Trim - 1 1 14
1486 tBu Ph Ph Si 0 O H O Ete 0 1 1 14
1487 tBu Ph Ph Si 0 s H 0 Ete o 1 1 14
1488 tBu Ph Ph Si 0 - - - - - 0 0 i*
1489 tBu Ph Ph Si o 0 Me 0 - - 0 1 14
1490 tBu Ph Ph Si 0 0 Me s - - 0 1 14
1491 tBu Ph Ph Si 0 0 2-ClPh 0 - - 0 1 '14
1492 tBu Ph Ph Si 0 Mee H 0 - - 0 1 14
1493 tBu Ph Ph Si 0 Mee H s - - 0 1 14
1494 tBu Ph Ph Si 0 Phe H 0 - - 0 1 14
1495 tBu Ph Ph Si 0 NH Pr 0 Ete 0 l 1 14
1496 tBu Ph Ph Si 0 O Me NH Trim - 1 1 14
1497 Ph Ph Ph c S O H O Ete 0 1 1 14
1498 Ph Ph Ph c S s H 0 Ete o 1 1 14
1499 Ph Ph Ph c S - - - - - 0 0 14
1500 Ph Ph Ph c S 0 Me o - - 0 1 Ϊ4
1501 Ph Ph Ph c S 0 Me s - - 0 1 14
1502 Ph Ph Ph c S 0 2-ClPh 0 - - 0 1 14
1503 Ph Ph Ph c s Mee H 0 - - 0 1 14
1504 Ph Ph Ph c S Mee H s - - 0 1 14
1505 Ph Ph Ph c s Phe H 0 - - 0 1 14
1506 Ph Ph Ph c s NH Pr 0 Ete 0 1 1 14
1507 Ph Ph Ph c s O Me NH Trim - 1 1 14
1508 4-BzOPh H H c 0 O H O Ete 0 1 I 14
1509 4-BzOPh H H c 0 s H 0 Ete 0 1 1 14
1510 4-BzOPh H H c 0 - - - - - 0 0 14
1511 4-BzOPh H H c 0 o Me 0 - - 0 1 14
1512 4-BzOPh H H c 0 0 Me s - - 0 1 14
1513 4-BzOPh H H c 0 0 2-ClPh 0 - - 0 1 14
1514 4-BzOPh H H c 0 Mee H 0 - - 0 1 14
1515 4-BzOPh H H c 0 Mee H s - - 0 1 14
1516 4-BzOPh H H c 0 Phe H 0 - - 0 1 14
1517 4-BzOPh H H c 0 NH Pr 0 Ete o I 1 14
1518 4-BzOPh H H c 0 O Me NH Trim - 1 1 14
-32CZ 287050 B6
Tabulka 1 - pokračování
slouč. č. Ri R2 r3 Z Y| Yl R4 Y3 X Y4 n m B
1519 Ph Xanthen-9-yl 0 0 H 0 Ete 0 1 7 14
1520 Ph Xanthen-9-yl 0 s H 0 Ete 0 1 1 14
1521 Ph Xanthen-9-yl 0 - - - - - 0 0 14
1522 Ph Xanthen-9-yl 0 o Me 0 - - 0 1 14
1523 Ph Xanthen-9-yl 0 o Me s - - 0 I 14
1524 Ph Xanthen-9-yl 0 0 2-CIPh 0 - - 0 1 14
1525 Ph Xanthen-9-yl 0 Mee H 0 - - 0 1 14
1526 Ph Xanthen-9-yl 0 Mee H s - - 0 1 14
1527 Ph Xanthen-9-yl 0 Phe H 0 - 0 1 14
1528 Ph Xanthen-9-yl o NH Pr 0 Ete 0 1 1 14
1529 Ph Xanthen-9-yl 0 O Me NH Trim - 1 1 14
1530 Ph Fluoren-9-yl 0 O H 0 Ete 0 1 1 14
1531 Ph Fluoren-9-yl 0 s H o Ete 0 1 1 14
1532 Ph Fluoren-9-yl 0 - - - - - 0 0 14
1533 Ph Fluoren-9-yI 0 o Me 0 - - 0 1 14
1534 Ph Fluoren-9-yl 0 0 Me s - - 0 1 14
1535 Ph Fluoren-9-yl 0 o 2-CIPh 0 - - 0 1 14
1536 Ph Fluoren-9-yl 0 Mee H 0 - - 0 1 14
1537 Ph Fluoren~9-yl 0 Mee H s - - 0 1 14
1538 Ph Fluoren-9-yl 0 Ph H 0 - - 0 1 14
1539 Ph Fluoren-9-yl 0 NH Pr 0 Ete 0 1 1 14
1540 Ph Fluoren-9-y) 0 O Me NH Trim - 1 1 14
1541 3,4-Dbp H H C o O H O Ete 0 1 1 15
1542 3,4-Dbp H H C 0 s H 0 Ete 0 1 1 15
1543 3,4-Dbp H H C 0 - - - - - 0 0 15
1544 3,4-Dbp H H C 0 o Me 0 - - 0 1 15
1545 3,4-Dbp H H C 0 o Me s - - 0 1 15
1546 3,4-Dbp H H C 0 o 2-CIPh 0 - 0 1 15
1547 3,4-Dbp H H C 0 Mee H 0 - - 0 1 15
1548 3,4-Dbp H H C 0 Mee H s - - 0 1 15
1549 3,4-Dbp H H C 0 Phe H 0 - - 0 1 15
1550 3,4-Dbp H H C 0 NH Pr 0 Ete 0 1 1 15
1551 3,4-Dbp H H C 0 O Me NH Trim - 1 1 15
1552 Ph Ph Ph C 0 O H 0 Ete 0 1 1 15
1553 Ph Ph Ph C 0 s H 0 Ete 0 1 1 15
1554 Ph Ph Ph C 0 - - - - - 0 0 15
1555 Ph Ph Ph C 0 0 Me 0 - - 0 1 15
1556 Ph Ph Ph C 0 0 Me s - - 0 1 15
1557 Ph Ph Ph C 0 o 2-CIPh 0 - - 0 1 15
1558 Ph Ph Ph C 0 Mee H 0 - - 0 1 15
1559 Ph Ph Ph C 0 Mee H s - - 0 1 15
1560 Ph Ph Ph C 0 Phe H 0 - - 0 1 15
1561 Ph Ph Ph C 0 NH Pr 0 Ete 0 1 1 15
1562 Ph Ph Ph C 0 O Me NH Trim - 1 1 15
1563 3,5-Dbp H H C 0 O H 0 Ete 0 1 1 15
1564 3,5-Dbp H H C 0 s H 0 Ete 0 1 1 15
1565 3,5-Dbp H H c 0 - - - - - 0 0 15
1566 3,5-Dbp H H c 0 0 Me 0 - - 0 1 15
1567 3,5-Dbp H H c 0 o Me s - - 0 1 15
1568 3,5-Dbp H H c 0 0 2-CIPh 0 - - 0 1 15
1569 3,5-Dbp H H c 0 Mee H 0 - - 0 1 15
1570 3,5-Dbp H H c 0 Mee H s - - 0 1 15
1571 3,5-Dbp H H c 0 Phe H 0 - - 0 1 15
1572 3,5-Dbp H H c 0 NH Pr 0 Ete 0 1 1 15
1573 3,5-Dbp H H c 0 O Me NH Trim - 1 1 15
1574 4-MeOPh 4-MeOPh Ph c 0 O H 0 Ete 0 1 1 15
1575 4-MeOPh 4-MeOPh Ph c 0 s H 0 Ete 0 1 1 15
1576 4—MeOPh 4-MeOPh Ph c 0 - - - - - 0 0 15
1577 4-MeOPh 4-MeOPh Ph c o 0 Me 0 - - 0 1 15
-33CZ 287050 B6
Tabulka 1 - pokračování
slouč. č. Ri Rt Rs Z Y| Yt Ri Ys X Yí n m B
1578 4-MeOPh 4-MeOPh Ph C 0 o Me S - - 0 1 15
1579 4-MeOPh 4-MeOPh Ph C 0 o 2-ClPh O - - 0 1 Í5
1580 4-MeOPh 4-MeOPh Ph C 0 Mee H O - - 0 1 15
1581 4-MeOPh 4-MeOPh Ph C 0 Mee H S - - 0 1 15
1582 4-MeOPh 4-MeOPh Ph C 0 Phe H O - - 0 1 15
1583 4-MeOPh 4-MeOPh Ph C 0 NH Pr 0 Ete 0 1 1 15
1584 4-MeOPh 4-MeOPh Ph C 0 O Me NH Trim - 1 1 15
1585 4-MeOPh Ph Ph C 0 O H O Ete 0 1 1 15
1586 4-MeOPh Ph Ph C 0 s H O Ete 0 1 1 Ϊ5
1587 4-MeOPh Ph Ph C 0 - - - - - 0 0 15
1588 4-MeOPh Ph Ph C o o Me 0 - - 0 1 15
1589 4-MeOPh Ph Ph C 0 o Me s - - 0 1 Ϊ5
1590 4-MeOPh Ph Ph C 0 0 2-CIPh 0 - - 0 1 15
1591 4-MeOPh Ph Ph C 0 Mee H 0 - - 0 1 15
1592 4-MeOPh Ph Ph C 0 Mee H s - - 0 1 Ϊ5
1593 4-MeOPh Ph Ph C 0 Phe H 0 - - 0 1 15
1594 4-MeOPh Ph Ph C 0 NH Pr 0 Ete 0 1 1 ii
1595 4-MeOPh Ph Ph c 0 O Me NH Trim - 1 1 15
1596 tBu Ph Ph Si 0 O H P Ete 0 1 1 15
1597 tBu Ph Ph Si 0 s H 0 Ete 0 1 1 15
1598 tBu Ph Ph Si o - - - - - 0 0 15
1599 tBu Ph Ph Si o o Me o - - 0 1 15
1600 tBu Ph Ph Si 0 0 Me s - - 0 1 ii
1601 tBu Ph Ph Si 0 0 2-ClPh 0 - - 0 1 15
1602 tBu Ph Ph Si 0 Mee H o - - 0 1 i 5
1603 tBu Ph Ph Si 0 Mee H s - - 0 1 15
1604 tBu Ph Ph Si 0 Phe H 0 - - 0 1 15
1605 tBu Ph Ph Si 0 NH Pr 0 Ete 0 1 1 ii
1606 tBu Ph Ph Si o O Me NH Trim - 1 1 15
1607 Ph Ph Ph C s O H O Ete 0 1 1 15
1608 Ph Ph Ph C s s H 0 Ete 0 1 1 15
1609 Ph Ph Ph C s - - - - - 0 0 15
1610 Ph Ph Ph C s o Me 0 - - 0 1 15
1611 Ph Ph Ph C s 0 Me s - - 0 l 15
1612 Ph Ph Ph C s o 2-CIPh 0 - - 0 1 15
1613 Ph Ph Ph C s Mee H 0 - 0 1 15
1614 Ph Ph Ph c s Mee H s - 0 1 Í5
1615 Ph Ph Ph c s Phe H 0 - - 0 1 15
1616 Ph Ph Ph c s NH Pr 0 Ete 0 l 1 15
1617 Ph Ph Ph c s O Me NH Trim - 1 1 15
1618 4-BzOPh H H c 0 O H 0 Ete 0 1 1 15
1619 4-BzOPh H H c o s H O Ete 0 1 1 15
1620 4-BzOPh H H c 0 - - - - - 0 0 15
1621 4-BzOPh H H c 0 0 Me 0 - 0 1 15
1622 4-BzOPh H H c 0 0 Me s - - 0 1 15
1623 4-BzOPh H H c 0 o 2-ClPh 0 - - 0 1 15
1624 4-BzOPh H H c 0 Mee H 0 - - 0 1 15
1625 4-BzOPh H H c 0 Mee H s - - 0 1 15
1626 4-BzOPh H H c 0 Phe H 0 - - 0 1 15
1627 4-BzOPh H H c 0 NH Pr 0 Ete 0 1 1 15
1628 4-BzOPh H H c 0 O Me NH Trim - 1 1 15
1629 Ph Xanthen-9-yl 0 O H 0 Ete 0 1 1 15
1630 Ph Xanthen-9-yl o s H 0 Ete o 1 1 15
1631 Ph Xanthen-9-yl 0 - - - - - 0 0 15
1632 Ph Xanthen-9-yl 0 0 Me 0 - - 0 1 15
1633 Ph Xanthen-9-yl 0 0 Me s - - 0 1 15
1634 Ph Xanthen-9-yl 0 0 2-ClPh 0 - - 0 1 15
1635 Ph Xanthen-9-yl 0 Mee H 0 - - 0 1 15
1636 Ph Xanthen-9-yl 0 Mee H s - - 0 1 15
1637 Ph Xanthen-9-yl 0 Phe H 0 - - 0 1 15
1638 Ph Xanthen-9-yl 0 NH Pr 0 Ete 0 1 1 15
1639 Ph Xanthen-9-yl 0 0 Me NH Trim - 1 l 15
1640 Ph Fluoren-9-yl o O H O Ete 0 1 1 15
1641 Ph Fluoren-9-yl 0 s H 0 Ete 0 1 1 J5
1642 Ph Fluoren-9-yl 0 - - - - - 0 0 15
1643 Ph Fluoren-9-yl 0 o Me 0 - - 0 1 15
1644 Ph Fluoren-9-yl 0 0 Me s - - 0 1 15
1645 Ph Fluoren-9-yl 0 0 2-ClPh o - - 0 1 15
1646 Ph Fluoren-9-yl 0 Mee H 0 - - 0 I 15
1647 Ph Fluoren-9-yI 0 Mee H s - - 0 1 15
-34CZ 287050 B6
Tabulka 1 - pokračování
slouč. č. Ri Rz r3 Z Yl Yz R4 Y3 X Y4 n m B
1648 Ph Fluoren-9-yl o Phe H O - - 0 1 15
1649 Ph Fluoren-9-yl 0 NH Pr 0 Ete 0 1 1 15
1650 Ph Fluoren-9-yl o o Me NH Trim - 1 1 15
1651 3,4-Dbp H H C 0 0 H O Ete o 1 1 15
1652 3,4-Dbp H H C 0 s H O Ete 0 1 1 15
1653 3,4-Dbp H H C 0 - - - - - 0 0 16
1654 3,4-D;bp H H C 0 0 Me 0 - - 0 1 16
1655 3,4-Dbp H H C 0 o Me s - - 0 1 16
1656 3,4-Dbp H H C 0 0 2-ClPh 0 - - 0 1 16
1657 3,4-Dbp H H C 0 Mee H o - - 0 1 16
1658 3,4-Dbp H H C o Mee H s - - 0 1 16
1659 3,4-Dbp H H C 0 Phe H 0 - - - 0 1 16
1660 3,4-Dbp H H C 0 NH Pr 0 Ete 0 1 1 16
1661 3,4-Dbp H H C o O Me NH Trim - 1 1 16
1662 Ph Ph Ph C 0 O H 0 Ete 0 1 1 16
1663 Ph Ph Ph C o s H o Ete o 1 1 16
1664 Ph Ph Ph C o - - - - - 0 0 16
1665 Ph Ph Ph C o o Me 0 - - 0 1 16
1666 Ph Ph Ph C o 0 Me s - - 0 1 16
1667 Ph Ph Ph C 0 0 2-ClPh 0 - - 0 1 16
1668 Ph Ph Ph c o Mee H o - - 0 1 16
1669 Ph Ph Ph c o Mee H s - - 0 1 16
1670 Ph Ph Ph c 0 Phe H 0 - - 0 1 16
1671 Ph Ph Ph c o NH Pr 0 Ete 0 1 1 16
1672 Ph Ph Ph c 0 O Me NH Trim - 1 1 16
1673 3,5-Dbp H H c o O H 0 Ete o 1 1 16
1674 3,5-Dbp H H c o S H O Ete 0 1 1 16
1675 3,5-Dbp H H c 0 - - - - - 0 0 16
1676 3,5-Dbp H H c o 0 Me 0 - - 0 1 16
1677 3,5-Dbp H H c 0 o Me s - - 0 1 16
1678 3,5-Dbp H H c o 0 2-ClPh 0 - - 0 1 16
1679 3,5-Dbp H H c 0 Mee H 0 - - 0 1 16
1680 3,5-Dbp H H c 0 Mee H s - - 0 1 16
1681 3,5-Dbp H H c o Phe H 0 - - 0 1 16
1682 3,5-Dbp H H c 0 NH Pr 0 Ete 0 1 1 16
1683 3,5-Dbp H H c 0 O Me NH Trim - 1 1 16
1684 4-MeOPh 4-MeOPh Ph c o O H 0 Ete 0 1 1 16
1685 4-MeOPh 4-MeOPh Ph c 0 s H 0 Ete 0 1 1 16
1686 4-MeOPh 4-MeOPh Ph c 0 - - - - - 0 0 16
1687 4-MeOPh 4-MeOPh Ph c 0 o Me 0 - - 0 1 16
1688 4-MeOPh 4-MeOPh Ph c 0 0 Me s - - 0 1 16
1689 4-MeOPh 4-MeOPh Ph c 0 o 2-ClPh 0 - - 0 1 16
1690 4-MeOPh 4-MeOPh Ph c 0 Mee H 0 - - 0 1 16
1691 4-MeOPh 4-MeOPh Ph c 0 Mee H s - - 0 1 16
1692 4-MeOPh 4-MeOPh Ph c 0 Phe H 0 - - 0 1 16
1693 4-MeOPh 4-MeOPh Ph c 0 NH Pr 0 Ete 0 1 1 16
1694 4-MeOPh 4-MeOPh Ph c 0 O Me NH Trim - 1 1 16
1695 4-MeOPh Ph Ph c 0 O H O Ete 0 1 1 16
1696 4-MeOPh Ph Ph c 0 s H 0 Ete 0 1 1 16
1697 4-MeOPh Ph Ph c 0 - - - - - 0 0 16
1698 4-MeOPh Ph Ph c 0 0 Me 0 - 0 1 16
1699 4-MeOPh Ph Ph c 0 0 Me s - - 0 1 16
1700 4-MeOPh Ph Ph c 0 0 2-ClPh o - - 0 1 16
1701 4-MeOPh Ph Ph c 0 Mee H 0 - - 0 1 16
1702 4-MeOPh Ph Ph c 0 Mee H s - - 0 1 16
1703 4-MeOPh Ph Ph c 0 Phe H 0 - - 0 1 16
1704 4-MeOPh Ph Ph c 0 NH Pr 0 Ete 0 1 1 16
1705 4-MeOPh Ph Ph c 0 O Me NH Trim - 1 1 16
1706 tBu Ph Ph Si 0 0 H 0 Ete 0 1 1 16
1707 tBu Ph Ph Si 0 s H O Ete 0 1 1 16
1708 tBu Ph Ph Si 0 - - - - - 0 0 16
1709 tBu Ph Ph Si o 0 Me 0 - - 0 1 Í6
1710 tBu Ph Ph Si 0 0 Me s - - 0 1 16
1711 tBu Ph Ph Si 0 0 2-CIPh 0 - - 0 1 16
-35CZ 287050 B6
Tabulka 1 - pokračování
slouí č. Ri
1712 tBu
1713 tBu
1714 tBu
1715 tBu
1716 tBu
1717 Ph
1718 Ph
1719 Ph
1720 Ph
1721 Ph
1722 Ph
1723 Ph
1724 Ph
1725 Ph
1726 Ph
1727 Ph
1728 4BzOPh
1729 4BzOPh
1730 4- BzOPh
1731 4BzOPh
1732 4BzOPh
1733 4BzOPh
1734 4- BzOPh
1735 4BzOPh
1736 4BzOPh
1737 4BzOPh
1738 4- BzOPh
1739 Ph
1740 Ph
1741 Ph
1742 Ph
1743 Ph
1744 Ph
1745 Ph
1746 Ph
1747 Ph
1748 Ph
1749 Ph
1750 Ph
1751 Ph
1752 Ph
1753 Ph
1754 Ph
1755 Ph
1756 Ph
1757 Ph
1758 Ph
r2 r3 Z Yt Y2 R4 Y3 X Yr Π m B
Ph Ph Si 0 Mee H O - - ó 1 16
Ph Ph Si 0 Mee H s - - 0 1 16
Ph Ph Si o Phe H o - - 0 1 16
Ph Ph Si 0 NH Pr 0 Ete o 1 1 16
Ph Ph Si 0 O Me NH Trim - 1 1 16
Ph Ph C s O H O Ete o 1 1 16
Ph Ph C s S H O Ete o 1 1 16
Ph Ph C s - - - - 0 0 16
Ph Ph C s 0 Me 0 - - 0 1 16
Ph Ph C s o Me s - - 0 1 16
Ph Ph C s o 2-ClPh 0 - - 0 1 16
Ph Ph C s Mee H 0 - - 0 1 16
Ph Ph C s Mee H s - - 0 1 16
Ph Ph C s Phe H o - - 0 1 16
Ph Ph c s NH Pr 0 Ete o 1 1 16
Ph Ph c s O Me NH Trim - 1 1 16
Η H c 0 O H O Ete o 1 1 16
Η H c 0 s H 0 Ete o 1 1 16
Η H c 0 - - - - - 0 0 16
Η H c 0 0 Me 0 - - 0 1 16
Η H c 0 o Me s - - 0 1 16
Η H c o o 2-ClPh o - - 0 1 16
Η H c 0 Mee H o - - 0 1 16
Η H c 0 Mee H s - - 0 1 16
Η H c 0 Phe H 0 - - 0 1 16
Η H c 0 NH Pr o Ete 0 1 1 16
Η H c 0 O Me NH Trim - 1 1 16
Xanthen-9-yl 0 O H O Ete 0 1 1 16
Xanthen-9-yl 0 s H O Ete o 1 1 16
Xanthen-9-yl 0 - - - - - 0 0 16
Xanthen-9-yI 0 0 Me 0 - - 0 1 16
Xanthen-9-yl 0 0 Me s - - 0 1 16
Xanthen-9-yl 0 0 2-ClPh 0 - - 0 1 16
Xanthen-9-yI 0 Mee H 0 - - 0 1 16
Xanthen-9-yl 0 Mee H s - - 0 1 16
Xanthen-9-yl 0 Phe H 0 - - 0 1 16
Xanthen-9-yl 0 NH Pr 0 Ete o 1 1 16
Xanthen-9-yl 0 O Me NH Trim - 1 1 16
Xanthen-9-yl 0 O H O Ete o 1 1 16
Fluoren-9-yl o s H O Ete o 1 1 16
Fluore n-9-yl 0 - - - - - 0 0 16
Fluoren-9-yl 0 o Me 0 - - 0 1 16
Fluoren-9-yl 0 0 Me s - - 0 1 16
Fluoren-9-yl 0 0 2-ClPh 0 - - 0 1 16
Fluoren-9-yl 0 Mee H 0 - - 0 1 16
Fluoren-9-yl 0 Mee H s - - 0 1 16
Fluoren-9-yl 0 Phe H 0 - - 0 1 16
-36CZ 287050 B6
Tabulka 1 - pokračování
slouč. č. Ri R2 Rs Z Yi Y2 R4 Y3 X Y4 n m B
1759 Ph Fluoren-9->l o NH Pr o Ete O l 1 16
1760 Ph Fluoren-9-yl 0 O Me NH Trim - 1 1 16
1761 1-Pyr H H C o O H 0 Ete 0 1 1 1
1762 1-Pyr H H C 0 S H 0 Ete o 1 1 1
1763 1-Pyr H H C o - - - - - 0 0 1
1764 1-Pyr H H C 0 0 Me 0 - - 0 1 1
1765 1-Pyr H H C 0 0 Me s - - 0 1 1
1766 2-Npe H H C o o H o Ete o 1 1 1
1767 2-Npe H H c o s H 0 Ete 0 1 1 1
1768 2-Npe H H c 0 - - - - - 0 0 1
1769 2-Npe H H c 0 0 Me 0 - - 0 I 1
1770 2-Npe H H c 0 o Me s - - 0 1 1
1771 Ph Ph H c 0 0 H 0 Ete o 1 1 1
1772 Ph Ph H c 0 s H 0 Ete o 1 1 1
1773 Ph Ph H c 0 - - - - - 0 0 1
1774 Ph Ph H c 0 0 Me 0 - - 0 1 1
1775 Ph Ph H c 0 o Me s - - 0 1 1
1776 4-PhPh H H c 0 o H 0 Ete o 1 1 1
1777 4-PhPh H H c 0 s H 0 Ete o 1 1 1
1778 4-PhPh H H c 0 - - - - 0 0 1
1779 4-PhPh H H c 0 0 Me 0 - - 0 1 1
1780 4-PhPh H H c 0 o Me s - - 0 1 1
1781 4-PhPh H H c 0 0 H 0 Ete o 1 1 1
1782 4-PhPh H H c o s H 0 Ete o 1 1 1
1783 4-PhPh H H c 0 - - - - - 0 0 1
1784 4-PhPh H H c 0 0 Me 0 - - 0 1 1
1785 4-PhPh H H c 0 o Me s - - 0 1 1
1786 Ph Ph H c s o H 0 Ete 0 1 1 1
1787 Ph Ph H c s s H 0 Ete 0 1 1 1
1788 Ph Ph H c s - - - - - 0 0 1
1789 Ph Ph H c s o Me 0 - - 0 1 Ϊ
1790 Ph Ph H c s o Me s - 0 1 ΐ
1791 Ph Ph Ph c NH 0 H 0 Ete 0 1 1 i
1792 Ph Ph Ph c NH s H 0 Ete 0 1 1 i
1793 Ph Ph Ph c NH - - - - - 0 0 Ϊ
1794 Ph Ph Ph c NH 0 Me 0 - - 0 1 Ϊ
1795 Ph Ph Ph c NH 0 Me s - - 0 1 i
1796 1-Pyr H H c O 0 H o Ete 0 1 1 2
1797 1-Pyr H H c 0 s H 0 Ete 0 1 1 2
1798 1-Pyr H H c o - - - - - 0 0 2
1799 1-Pyr H H c 0 0 Me 0 - - 0 1 2
1800 1-Pyr H H c 0 0 Me s - - 0 1 2
1801 2-Npe H H c 0 o H 0 Ete o 1 1 2
1802 2-Npe H H c 0 s H 0 Ete 0 1 1 2
1803 2-Npe H H c o - - - - 0 0 2
1804 2-Npe H H c 0 o Me 0 - - 0 1 2
1805 2-Npe H H c 0 0 Me s - - 0 1 2
1806 Ph Ph H c 0 0 H 0 Ete 0 1 1 2
1807 Ph Ph H c o s H 0 Ete o 1 1 2
1808 Ph Ph H c 0 - - - - - 0 0 2
1809 Ph Ph H c 0 0 Me 0 - - 0 1 1
1810 Ph Ph H c 0 0 Me s - - 0 l 2
1811 4-PhPh H H c 0 0 H 0 Ete 0 1 1 2
1812 4-PhPh H H c 0 s H 0 Ete o 1 1 2
1813 4-PhPh H H c 0 - - - - 0 0 2
1814 4-PhPh H H c 0 0 Me 0 - - 0 1 2
1815 4-PhPh H H c 0 0 Me s - - 0 1 2
1816 2-PhPh H H c 0 0 H o Ete o 1 1 2
1817 2-PhPh H H c 0 s H 0 Ete o 1 1 2
1818 2-PhPh H H c 0 - - - - - 0 0 2
1819 2-PhPh H H c 0 0 Me 0 - - 0 1 2
1820 2-PhPh H H c 0 0 Me s - - 0 1 2
1821 Ph Ph H c s 0 H o Ete 0 1 1 2
1822 Ph Ph H c s s H 0 Ete o 1 1 2
1823 Ph Ph H c s - - - - - 0 0 2
1824 Ph Ph H c s o Me o - - 0 1 2
1825 Ph Ph H c s 0 Me s - - 0 1 2
1826 Ph Ph Ph c NH 0 H 0 Ete 0 1 1 2
1827 Ph Ph Ph c NH s H o Ete o 1 1 2
1828 Ph Ph Ph c NH - - - - - 0 0 2
-37CZ 287050 B6
Tabulka 1 - pokračování
slouč. č. Ri Rj Rs Z Y. Y2 R4 Ys X Y4 Π m B
1829 Ph Ph Ph C NH 0 Me 0 - - θ 1 2
1830 Ph Ph Ph C NH o Me s - - 0 1 2
1831 1-Pyr H H C 0 0 H 0 Ete 0 1 1 3
1832 1-Pyr H H C 0 s H o Ete 0 1 1 3
1833 1-Pyr H H C 0 - - - - - 0 0 3
1834 1-Pyr H H C 0 0 Me 0 - - 0 l 3
1835 1-Pyr H H C 0 0 Me s - - 0 1 3
1836 2-Npe H H C 0 0 H 0 Ete 0 1 1 3
1837 2-Npe H H C 0 s H o Ete o 1 1 3
1838 2-Npe H H C 0 - - - - - 0 0 3
1839 2-Npe H H c 0 0 Me 0 - - 0 I 3
1840 2-Npe H H c 0 o Me s - - 0 1 3
1841 2-Npe H H c 0 0 H 0 Ete 0 1 1 3
1842 Ph Ph H c 0 s H 0 Ete 0 1 1 3
1843 Ph Ph H c 0 - - - - - 0 0 3
1844 Ph Ph H c 0 0 Me 0 - - 0 1 3
1845 Ph Ph H c 0 o Me s - - 0 1 3
1846 4-PhPh H H c 0 0 H 0 Ete 0 1 1 3
1847 4-PhPh H H c 0 s H 0 Ete 0 1 1 3
1848 4-PhPh H H c 0 - - - - 0 0 3
1849 4-PhPh H H c 0 0 Me 0 - - 0 1 3
1850 4-PhPh H H c 0 o Me s - - 0 1 3
1851 2-PhPh H H c 0 0 H o Ete o 1 1 3
1852 2-PhPh H H c 0 s H o Ete o 1 l 2
1853 2-PhPh H H c 0 - - - - 0 0 2
1854 2-PhPh H H c 0 0 Me 0 - 0 1 3
1855 2-PhPh H H c 0 o Me s - - 0 1 2
1856 Ph Ph H c s 0 H 0 Ete 0 l 1 2
1857 Ph Ph H c s s H o Ete 0 l 1 2
1858 Ph Ph H c s - - - - - 0 0 2
1859 Ph Ph H c s 0 Me 0 - - 0 1 3
1860 Ph Ph H c s 0 Me s - - 0 1 3
1861 Ph Ph H c NH 0 H 0 Ete 0 1 1 3
1862 Ph Ph H c NH s H 0 Ete 0 1 1 3
1863 Ph Ph H c NH - - - - - 0 0 2
1864 Ph Ph H c NH 0 Me 0 - - 0 1 2
1865 Ph Ph H c NH 0 Me s - - 0 1 2
1866 1-Pyr H H c 0 0 H 0 Ete 0 1 1 4
1867 1-Pyr H H c 0 s H 0 Ete 0 1 1 4
1868 1-Pyr H H c 0 - - - - - 0 0 4
1869 1-Pyr H H c 0 0 Me 0 - - 0 1 4
1870 1-Pyr H H c 0 0 Me s - - 0 1 4
1871 2-Npe H H c 0 0 H 0 Ete 0 1 1 4
1872 2-Npe H H c 0 s H 0 Ete 0 1 1 4
1873 2-Npe H H c 0 - - - - - 0 0 4
1874 2-Npe H H c 0 o Me 0 - - 0 1 4
1875 2-Npe H H c 0 0 Me s - - 0 1 4
1876 Ph Ph H c 0 0 H 0 Ete 0 1 1 4
1877 Ph Ph H c 0 s H 0 Ete 0 1 1 4
1878 Ph Ph H c 0 - - - - - 0 0 4
1879 Ph Ph H c 0 0 Me 0 - - 0 1 4
1880 Ph Ph H c 0 0 Me s - - 0 1 4
1881 4-PhPh H H c 0 o H 0 Ete o 1 1 4
1882 4-PhPh H H c 0 s H 0 Ete 0 1 1 4
1883 4-PhPh H H c 0 - - - - - 0 0 4
1884 4-PhPh H H c 0 0 Me 0 - - 0 1 4
1885 4-PhPh H H c 0 0 Me s - - 0 1 4
1886 2-PhPh H H c 0 0 H o Ete 0 1 1 4
1887 2-PhPh H H c 0 s H 0 Ete 0 1 1 4
1888 2-PhPh H H c 0 - - - - - 0 0 4
1889 2-PhPh H H c 0 0 Me 0 - - 0 l 4
1890 2-PhPh H H c 0 0 Me s - - 0 1 4
1891 Ph Ph H c s 0 H 0 Ete 0 1 1 4
1892 Ph Ph H c s s H 0 Ete o 1 1 4
1893 Ph Ph H c s - - - - - 0 0 4
1894 Ph Ph H c s 0 Me 0 - - 0 I 4
1895 Ph Ph H c s 0 Me s - - 0 1 4
1896 Ph Ph H c s o H 0 Ete 0 1 1 4
1897 Ph Ph H c s s H 0 Ete 0 1 1 4
1898 Ph Ph H c s - - - - - 0 0 4
-38CZ 287050 B6
Tabulka 1 - pokračování
slouč. č. Ri r2 r3 Z Yi Y2 R. Y3 X Y4 n m B
1899 Ph Ph H C s 0 Me 0 - - 0 1 4
1900 Ph Ph H C s o Me S - - 0 1 4
1901 3,4-Dbp H H C 0 0 H 0 Ete 0 1 1 17
1902 3,4-Dbp H H C o s H 0 Ete 0 1 1 17
1903 3,4-Dbp H H C 0 - - - - - 0 0 17
1904 3,4-Dbp H H C 0 o Me 0 - - 0 1 17
1905 3,4-Dbp H H C 0 0 Me s - 0 1 12
1906 Ph Ph Ph C 0 0 H 0 Ete 0 1 1 12
1907 Ph Ph Ph C 0 s H 0 Ete 0 1 1 12
1908 Ph Ph Ph C 0 - - - - - 0 0 17
1909 Ph Ph Ph C 0 0 Me 0 - - 0 1 17
1910 Ph Ph Ph C o o Me s - - 0 1 12
1911 3,5-Dbp H H C 0 o H o Ete 0 1 1 12
1912 3,5-Dbp H H C 0 s H 0 Ete 0 1 1 12
1913 3,5-Dbp H H C 0 - - - - - 0 0 12
1914 3,5-Dbp H H C 0 0 Me 0 - - 0 1 12
1915 3,5-Dbp H H C 0 0 Me s - - 0 1 12
1916 3,5-Dbp H H C 0 o H 0 Ete 0 1 1 18
1917 3,5-Dbp H H C 0 s H 0 Ete 0 1 1 18
1918 3,5-Dbp H H C o - - - - - 0 0 18
1919 3,5-Dbp H H C 0 0 Me 0 - - 0 1 18
1920 3,5-Dbp H H C 0 0 Me s - - 0 1 18
1921 Ph Ph Ph C 0 o H 0 Ete 0 1 1 18
1922 Ph Ph Ph C 0 s H 0 Ete 0 1 1 1S
1923 Ph Ph Ph C 0 - - - - - 0 0 1S
1924 Ph Ph Ph c 0 o Me o - - 0 1 18
1925 Ph Ph Ph c 0 0 Me s - - 0 1 18
1926 3,5-Dbp H H c o o H 0 Ete 0 1 1 18
1927 3,5-Dbp H H c 0 s H 0 Ete 0 1 1 18
1928 3,5-Dbp H H c 0 - - - - - 0 0 18
1929 3,5-Dbp H H c o 0 Me 0 - - 0 1 18
1930 3,5-Dbp H H c 0 o Me s - - 0 1 18
1931 3,4-Dbp H H c 0 o H 0 Ete 0 1 1 19
1932 3,4-Dbp H H c 0 s H 0 Ete 0 1 1 19
1933 3,4-Dbp H H c o - - - - - 0 0 19
1934 3,4-Dbp H H c 0 0 Me 0 - - 0 1 19
1935 3,4-Dbp H H c 0 0 Me s - - 0 1 19
1936 Ph Ph Ph c 0 o H 0 Ete 0 1 1 19
1937 Ph Ph Ph c 0 s H 0 Ete 0 1 1 Ϊ9
1938 Ph Ph Ph c 0 - - - - - 0 0 19
1939 Ph Ph Ph c 0 0 Me 0 - - 0 1 19
1940 Ph Ph Ph c 0 0 Me s - - 0 1 19
1941 3,5-Dbp H H c 0 o H 0 Ete 0 1 1 19
1942 3,5-Dbp H H c 0 s H 0 Ete 0 1 1 19
1943 3,5-Dbp H H c 0 - - - - - 0 0 12
1944 3,5-Dbp H H c o 0 Me 0 - - 0 1 19
1945 3,5-Dbp H H c 0 0 Me s - - 0 1 19
1946 3,4-Dbp H H c 0 o H 0 Ete 0 1 1 20
1947 3,4-Dbp H H c 0 s H 0 Ete 0 1 1 20
1948 3,4-Dbp H H c 0 - - - - - 0 0 20
1949 3,4-Dbp H H c 0 0 Me 0 - - 0 1 20
1950 3,4-Dbp H H c 0 0 Me s - - 0 1 20
1951 Ph Ph Ph c 0 o H o Ete 0 1 1 20
1952 Ph Ph Ph c o s H 0 Ete 0 1 1 20
1953 Ph Ph Ph c 0 - - - - - 0 0 20
1954 Ph Ph Ph c o o Me 0 - - 0 1 20
1955 Ph Ph Ph c o o Me s - - 0 1 20
1956 3,5-Dbp H H c 0 o H 0 Ete 0 1 1 20
1957 3,5-Dbp H H c o s H 0 Ete 0 1 1 20
1958 3,5-Dbp H H c 0 - - - - - 0 0 20
1959 3,5-Dbp H H c 0 0 Me 0 - - 0 1 20
1960 3,5-Dbp H H c o 0 Me s - - 0 1 20
1961 3,4-Dbp H H c 0 NH Me 0 Ete 0 1 1 i
1962 3,4-Dbp H H c o O Phe 0 - - 0 1 i
1963 3,4-Dbp H H c 0 O 4-ClPh 0 - - 0 1 1
1964 3,4-Dbp H H c 0 NH 2-NH2Et 0 Ete 0 1 1 1
1965 3,4-Dbp H H c o NH 2-MeOEt 0 Ete 0 1 1 1
1966 3,4-Dbp H H c 0 S Me 0 - - 0 0 1
1967 3,4-Dbp H H c o s H o - - 0 I 1
1968 3,4-Dbp H H c 0 0 H s Ete 0 1 1 1
-39CZ 287050 B6
Tabulka 1 - pokračování
slouč. i. Ri Rj Rs Z Yl Yl Ri Y5 X Y4 n m B
1969 3,4-Dbp H H C 0 0 Et O - - 0 1 1
1970 3,4-Dbp H H C 0 o Et S - - 0 1 1
1971 3,4-Dbp H H C 0 0 Bu O - - 0 1 ΐ
1972 3,4-Dbp H H C 0 0 Bu S - - 0 1 1
1973 3,4-Dbp H H C 0 0 H O Ete 0 6 1 1
1974 3,4-Dbp H H C 0 0 H O Ete 0 6 2 1
1975 3,4-Dbp H H C 0 0 H O Ete 0 6 3 1
1976 3,4-Dbp H H C 0 o H O Ete o 6 4 1
1977 3,4-Dbp H H C 0 o H O 2-Hpr NH 6 4 1
1978 Ph Ph Ph C 0 NH Me O Ete O 1 1 1
1979 Ph Ph Ph C 0 0 Ph O - - 0 1 1
1980 Ph Ph Ph C 0 0 4-ClPh O - - 0 1 1
1981 Ph Ph Ph C 0 NH 2-NHjEt O Ete 0 1 1 1
1982 Ph Ph Ph C 0 NH 2-MeOEt O Ete 0 1 1 1
1983 Ph Ph Ph C 0 s Me O - - 0 1 1
1984 Ph Ph Ph C 0 s H O - - 0 1 1
1985 Ph Ph Ph C 0 0 H S Ete o 1 1 1
1986 Ph Ph Ph C 0 0 Et O - - 0 1 i
1987 Ph Ph Ph C 0 0 Et S - - 0 1 1
1988 Ph Ph Ph C 0 0 Bu O - - 0 1 1
1989 Ph Ph Ph C 0 0 Bu S - - 0 1 1
1990 Ph Ph Ph c 0 0 H O Ete 0 6 1 1
1991 Ph Ph Ph c 0 0 H 0 Ete 0 6 2 1
1992 Ph Ph Ph c 0 o H 0 Ete 0 6 3 1
1993 Ph Ph Ph c 0 ' 0 H 0 Ete 0 6 4 1
1994 Ph Ph Ph c 0 o H o 2-Hpr NH 1 1 1
1995 3,5-Dbp H H c 0 NH Me 0 Ete O 1 1 1
1996 3,5-Dbp H H c 0 0 Ph 0 - - 0 1 1
1997 3,5-Dbp H H c 0 0 4-ClPh 0 - - 0 1 1
1998 3,5-Dbp H H c 0 NH 2-NHjEt 0 Ete o 1 1 1
1999 3,5-Dbp H H c 0 NH 2-MeOEt 0 Ete 0 1 1 1
2000 3,5-Dbp H H c 0 s Me 0 - - 0 1 1
2001 3,5-Dbp H H c 0 s H 0 - - 0 1 i
2002 3,5-Dbp H H c 0 0 H s Ete 0 1 1 1
2003 3,5-Dbp H H c 0 o Et 0 - - 0 1 1
2004 3,5-Dbp H H c 0 0 Et s - - 0 1 1
2005 3,5-Dbp H H c 0 o Bu 0 - - 0 1 1
2006 3,5-Dbp H H c 0 0 Bu s - - 0 1 1
2007 3,5-Dbp H H c 0 0 H 0 Ete 0 6 1 1
2008 3,5-Dbp H H c 0 0 H 0 Ete 0 6 2 1
2009 3,5-Dbp H H c 0 0 H 0 Ete 0 6 3 1
2010 3,5-Dbp H H c 0 0 H 0 Ete 0 6 4 1
2011 3,5-Dbp H H c 0 0 H 0 2-Hpr NH 1 1 1
2012 3,4-Dbp H H c 0 NH Me 0 Ete O 1 1 2
2013 3,4-Dbp H H c 0 0 Ph 0 - - 0 1 2
2014 3,4-Dbp H H c 0 0 4-ClPh 0 - - 0 l 2
2015 3,4-Dbp H H c 0 NH 2-NHjEt 0 Ete o 1 1 2
2016 3,4-Dbp H H c 0 NH 2-MeOEt o Ete o 1 1 2
2017 3,4-Dbp H H c 0 s Me 0 - - 0 1 2
2018 3,4-Dbp H H c 0 s H 0 - - 0 1 2
2019 3,4-Dbp H H c 0 0 H s Ete 0 1 1 2
2020 3,4-Dbp H H c 0 0 Et 0 - - 0 1 2
2021 3,4-Dbp H H c 0 0 Et s - - 0 1 2
2022 3,4-Dbp H H c 0 0 Bu 0 - - 0 1 2
2023 3,4-Dbp H H c 0 0 Bu 0 - - 0 1 2
2024 3,4-Dbp H H c 0 0 H 0 Ete 0 6 1 2
2025 3,4-Dbp H H c 0 0 H 0 Ete 0 6 2 2
2026 3,4-Dbp H H c 0 0 H 0 Ete 0 6 3 2
2027 3,4-Dbp H H c 0 0 H 0 Ete 0 6 4 2
2028 3,4-Dbp H H c 0 0 H 0 2-Hpr NH 1 1 2
2029 Ph Ph Ph c 0 NH Me 0 Ete O 1 1 2
2030 Ph Ph Ph c 0 0 Ph 0 - - 0 1 2
2031 Ph Ph Ph c 0 0 4-ClPh 0 - - 0 1 2
2032 Ph Ph Ph c 0 NH 2-NHzEt 0 Ete 0 1 1 2
2033 Ph Ph Ph c 0 NH 2-MeOEt 0 Ete 0 1 1 2
2034 Ph Ph Ph c 0 S Me 0 - - 0 1 2
2035 Ph Ph Ph c 0 S H 0 - - 0 1 2
2036 Ph Ph Ph c 0 O H s Ete 0 1 1 2
2037 Ph Ph Ph c 0 O Et 0 - - 0 1 2
2038 Ph Ph Ph c 0 O Et s - - 0 1 2
-40CZ 287050 B6
Tabulka I - pokračování
slouč. ¢. Rt Rz Rj Z ¥1 Y2 R4 Ys X Y4 n m B
2039 Ph Ph Ph C o 0 Bu O - - 0 1 2
2040 Ph Ph Ph C 0 o Bu S - - 0 1 2
2041 Ph Ph Ph C 0 0 H 0 Ete 0 6 1 2
2042 Ph Ph Ph C 0 o H 0 Ete 0 6 2 2
2043 Ph Ph Ph C 0 0 H 0 Ete 0 6 3 2
2044 Ph Ph Ph C 0 0 H 0 Ete 0 6 4 2
2045 Ph Ph Ph C o o H 0 2-Hpr NH 1 1 2
2046 3,5-Dbp H H C 0 NH Me 0 Ete O 1 1 2
2047 3,5-Dbp H H C o 0 Ph 0 - - 0 1 2
2048 3,5-Dbp H H C 0 o 4-ClPh 0 - - 0 1 2
2049 3,5-Dbp H H C 0 NH 2-NH2Et O Ete 0 1 1 2
2050 3,5-Dbp H H C 0 NH 2-MeOEt 0 Ete o 1 1 2
2051 3,5-Dbp H H C 0 s Me 0 - - 0 1 2
2052 3,5-Dbp H H c 0 s H 0 - - 0 1 2
2053 3,5-Dbp H H c o o H s Ete 0 1 1 2
2054 3,5-Dbp H H c 0 0 Et 0 - - 0 1 2
2055 3,5-Dbp H H c o 0 Et s - - 0 1 2
2056 3,5-Dbp H H c o o Bu 0 - - 0 1 2
2057 3,5-Dbp H H c o 0 Bu s - - 0 1 2
2058 3,5-Dbp H H c o 0 H 0 Ete 0 6 1 2
2059 3,5-Dbp H H c 0 0 H 0 Ete 0 6 2 2
2060 3,5-Dbp H H c 0 0 H 0 Ete 0 6 3 2
2061 3,5-Dbp H H c o 0 H 0 Ete 0 6 4 2
2062 3,5-Dbp H H c 0 0 H 0 2-Hpr NH 1 1 2
2063 3,4-Dbp H H c 0 NH Me 0 Ete 0 1 1 3
2064 3,4-Dbp H H c o o Ph 0 - - 0 1 3
2065 3,4-Dbp H H c 0 0 4-ClPh 0 - - 0 1 3
2066 3,4-Dbp H H c o NH 2-NHzEt 0 Ete 0 1 1 3
2067 3,4-Dbp H H c o NH 2-MeOEt 0 Ete 0 1 1 3
2068 3,4-Dbp H H c 0 s Me 0 - - 0 1 3
2069 3,4-Dbp H H c o s H s Ete 0 1 1 3
2070 3,4-Dbp H H c 0 0 Et 0 - - 0 1 3
2071 3,4-Dbp H H c o 0 Et s - - 0 1 3
2072 3,4-Dbp H H c 0 0 Et s - - 0 1 3
2073 3,4-Dbp H H c 0 0 Bu 0 - - 0 1 3
2074 3,4-Dbp H H c o o Bu s - - 0 1 3
2075 3,4-Dbp H H c 0 0 H 0 Ete 0 6 1 3
2076 3,4-Dbp H H c o 0 H 0 Ete 0 6 2 3
2077 3,4-Dbp H H c o 0 H 0 Ete 0 6 3 3
2078 3,4-Dbp H H c 0 o H 0 Ete 0 6 4 3
2079 3,4-Dbp H H c o 0 H 0 2-Hpr NH 1 1 3
2080 Ph Ph Ph c 0 NH Me 0 Ete 0 1 1 3
2081 Ph Ph Ph c 0 0 Ph 0 - - 0 1 3
2082 Ph Ph Ph c o 0 4-ClPh 0 - - 0 1 3
2083 Ph Ph Ph c o NH 2-NH2Et 0 Ete 0 1 1 3
2084 Ph Ph Ph c 0 NH 2-MeOEt 0 Ete 0 1 1 3
2085 Ph Ph Ph c 0 S Me 0 - - 0 1 3
2086 Ph Ph Ph c o S H 0 - - 0 1 3
2087 Ph Ph Ph c o O H s Ete 0 1 I 3
2088 Ph Ph Ph c o O Et 0 - - 0 1 3
2089 Ph Ph Ph c 0 O Et s - - 0 1 3
2090 Ph Ph Ph c 0 O Bu 0 - - 0 1 3
2091 Ph Ph Ph c o o Bu s - - 0 1 3
2092 Ph Ph Ph c 0 0 H o Ete 0 6 1 3
2093 Ph Ph Ph c 0 0 H 0 Ete 0 6 2 3
2094 Ph Ph Ph c 0 o H o Ete 0 6 3 3
2095 Ph Ph Ph c o o H o Ete 0 6 4 3
2096 Ph Ph Ph c 0 0 H 0 2-Hpr NH 1 1 3
2097 3,5-Dbp H H c o NH Me o Ete O 1 1 3
2098 3,5-Dbp H H c 0 0 Ph 0 - - 0 1 3
2099 3,5-Dbp H H c 0 0 4-ClPh o - - 0 1 3
2100 3,5-Dbp H H c o NH 2-NHzEt 0 Ete 0 1 1 3
2101 3,5-Dbp H H c 0 NH 2-MeOEt o Ete 0 1 1 3
2102 3,5-Dbp H H c 0 S Me 0 - - 0 1 3
2103 3,5-Dbp H H c 0 s H 0 - 0 1 3
2104 3,5-Dbp H H c 0 0 H s Ete 0 1 1 3
2105 3,5-Dbp H H c 0 0 Et 0 - - 0 1 3
2106 3,5-Dbp H H c 0 0 Et s - - 0 1 3
2107 3,5-Dbp H H c 0 0 Bu 0 - - 0 1 3
2108 3,5-Dbp H H c 0 0 Bu s - - 0 1 3
-41CZ 287050 B6
Tabulka 1 - pokračování
slouí. č. Ri Rz Rz Z Y| Yz R4 Yj X Y4 n m B
2109 3.5-Dbp H H C o o H O Ete O 6 1 3
2110 3.5-Dbp H H c 0 0 H O Ete O 6 2 3
2111 3.5-Dbp H H c 0 o H O Ete O 6 3 3
2112 3.5-Dbp H H c 0 o H O Ete o 6 4 3
2113 3.5-Dbp H H c 0 0 H •O 2-Hpr NH 1 1 3
2114 3.4-Dbp H H c o NH Me 0 Ete O 1 1 3
2115 3,4-Dbp H H c o o Ph 0 - - 0 1 1
2116 3.4-Dbp H H c 0 o 4-ClPh O - - 0 1 4
2117 3.4-Dbp H H c 0 NH 2-NHzEt O Ete o 1 1 4
2118 3.4-Dbp H H c 0 NH 2-MeOEt 0 Ete 0 1 1 4
2119 3,4-Dbp H H c o s Me o - - 0 1 4
2120 3.4-Dbp H H c o s H 0 - - 0 1 4
2121 3.4-Dbp H H c 0 0 H s Ete 0 1 1 4
2122 3.4-Dbp H H c o o Et 0 - - 0 1 4
2123 3.4-Dbp H H c o o Et s - - 0 1 4
2124 3.4-Dbp H H c o 0 Bu o - - 0 1 4
2125 3.4-Dbp H H c o o Bu s - - 0 1 4
2126 3.4-Dbp H H c 0 0 H 0 Ete 0 6 1 4
2127 3.4-Dbp H H c 0 o H o Ete 0 6 2 4
2128 3,4-Dbp H H c 0 0 H 0 Ete 0 6 3 4
2129 3,4-Dbp H H c o 0 H 0 Ete o 6 4 4
2130 3,4-Dbp H H c 0 o H 0 2-Hpr NH 1 1 4
2131 Ph Ph Ph c 0 NH Me 0 Ete O 1 1 4
2132 Ph Ph Ph c 0 o Ph 0 - - 0 1 4
2133 Ph Ph Ph c o o 4-ClPh 0 - - 0 1 4
2134 Ph Ph Ph c 0 NH 2-NHzEt 0 Ete 0 1 1 4
2135 Ph Ph Ph c 0 NH 2-MeOEt 0 Ete 0 1 1 4
2136 Ph Ph Ph c 0 s Me o - - 0 1 4
2137 Ph Ph Ph c 0 s H 0 - - 0 1 4
2138 Ph Ph Ph c 0 o H s Ete 0 1 1 4
2139 Ph Ph Ph c 0 0 Et 0 - - 0 1 4
2140 Ph Ph Ph c o o Et s - - 0 1 4
2141 Ph Ph Ph c 0 o Bu 0 - - 0 1 4
2142 Ph Ph Ph c o o Bu s - - 0 1 4
2143 Ph Ph Ph c 0 o H 0 Ete o 6 1 4
2144 Ph Ph Ph c 0 0 H 0 Ete 0 6 2 4
2145 Ph Ph Ph c o o H 0 Ete 0 6 3 4
2146 Ph Ph Ph c o o H o Ete 0 6 4 4
2147 Ph Ph Ph c 0 o H 0 2-Hpr NH 1 1 4
2148 3.5-Dbp H H c o NH Me 0 Ete O 1 1 4
2149 3.5-Dbp H H c 0 0 Ph o - - 0 1 4
2150 3.5-Dbp H H c 0 o 4-CIPh 0 - - 0 l 4
2151 3.5-Dbp H H c 0 NH 2-NHzEt 0 Ete o 1 1 4
2152 3.5-Dbp H H c 0 NH 2-MeOEt 0 Ete 0 1 1 4
2153 3.5-Dbp H H c o s Me o - - 0 1 4
2154 3,5-Dbp H H c o s H 0 - - 0 1 4
2155 3.5-Dbp H H c o 0 H s Ete 0 1 1 4
2156 3,5-Dbp H H c o o Et o - 0 1 4
2157 3.5-Dbp H H c 0 0 Et s - - 0 1 4
2158 3.5-Dbp H H c o o Bu 0 - - 0 1 4
2159 3.5-Dbp H H c 0 o Bu s - - 0 1 4
2160 3.5-Dbp H H c 0 0 H o Ete 0 6 1 4
2161 3.5-Dbp H H c o o H o Ete 0 6 2 4
2162 3,5-Dbp H H c 0 0 H 0 Ete 0 6 3 4
2163 3.5-Dbp H H c 0 0 H 0 Ete 0 6 4 4
2164 3.5-Dbp H H c 0 o H 0 2-Hpr NH 1 1 4
2165 4-MePh Ph Ph c 0 0 H 0 Ete O 1 1 1
2166 4-MePh 4-MePh Ph c 0 o H 0 Ete O 1 1 1
2167 4-MePh 4-MePh 4-MePh c 0 0 H 0 Ete 0 1 1 1
2168 4-tBuPh Ph Ph c 0 0 H 0 Ete 0 1 1 1
2169 4-tBuPh 4-tBuPh Ph c 0 o H o Ete 0 1 1 1
2170 4-tBuPh 4-tBuPh 4-tBuPh c 0 0 H 0 Ete 0 1 1 i
2171 4NOjPh Ph Ph c 0 0 H 0 Ete 0 1 1 1
2172 4NOjPh 4-NOzPh Ph c 0 0 H 0 Ete 0 l 1 l
2173 4-FPh Ph Ph c 0 0 H 0 Ete 0 1 1 1
2174 4-FPh 4-FPh Ph c 0 0 H 0 Ete 0 1 1 i
2175 2,4diFPh Ph Ph c 0 0 H 0 Ete 0 1 1 1
-42CZ 287050 B6
Tabulka 1 - pokračování
slouč. č. Ri R2 Rs Z ¥> Y2 Rj Y3 X Y4 n m B
2176 2-ClPh Ph Ph C 0 0 H O Ete O 1 1 1
2177 4-ClPh Ph Ph C 0 o H 0 Ete O 1 1 1
2178 4-ClPh 4-ClPh Ph C 0 0 H 0 Ete O 1 1 1
2179 4-BrPh Ph Ph C 0 o H 0 Ete O 1 1 1
2180 4-BrPh 4-BrPh Ph C 0 0 H 0 Ete O 1 1 1
2181 4—IPh Ph Ph C 0 0 H 0 Ete O 1 1 1
2182 4tBuOPh Ph Ph C 0 0 H 0 Ete O 1 1 1
2183 4-EtOPh Ph Ph C 0 o H o Ete O 1 1 1
2184 4-EtOPh 4-EtOPh Ph C 0 0 H o Ete O 1 1 1
2185 2BzOPh H H C 0 0 H 0 Ete O 1 1 1
2186 4BzOPh Ph Ph C 0 0 H 0 Ete O 1 1 1
2187 4- BzOPh 4-BzOPh Ph C 0 0 H o Ete O 1 1 1
2188 4MeOPh 4-MeOPh 4MeOPh C 0 o H 0 Ete O 1 1 1
2189 9-Ant H H C 0 o H 0 Ete O 1 1 1
2190 2-Ant H H C 0 o H 0 Ete O 1 1 i
2191 1-Npe H H C 0 0 H 0 Ete O 1 1 i
2192 3PhOPh H H C 0 o H 0 Ete O 1 1 1
2193 4- PhOPh H H C 0 o H 0 Ete O 1 1 1
2194 2-Anq H H C 0 o H 0 Ete O 1 1 i
2195 4-Pha H H C 0 o H 0 Ete O 1 1 Ϊ
2196 3,4-Dbp H H C o s H 0 Ete O 6 1 1
2197 3,4-Dbp H H C 0 NH Et 0 Ete O 6 1 1
2198 3,4-Dbp H H C 0 NH Pr 0 Ete O 6 1 1
2199 3,4-Dbp H H C 0 NH 2-NH2Et 0 Ete O 6 1 1
2200 3,4-Dbp H H C 0 o H o Ete O 2 1 1
2201 3,4-Dbp H H c 0 s H 0 Ete 0 2 1 1
2202 3,4-Dbp H H c 0 0 2-NO2Ph 0 - - 0 1 1
2203 3,4-Dbp H H c 0 0 4-NO2Ph o - - 0 1 1
2204 3,4-Dbp H H c 0 0 2-FPh 0 - - 0 1 1
2205 3,4-Dbp H H c 0 0 2-BrPh 0 - - 0 1 1
2206 3,4-Dbp H H c 0 0 2-IPh 0 - 0 1 1
2207 3,4-Dbp H H c 0 o 4-MeOPh o - - 0 1 1
2208 3,4-Dbp H H c o 0 4-MeSPh o - - 0 1 I
2209 3,4-Dbp H H c 0 o 4~MeSPh 0 - - 0 1 1
2210 3,4-Dbp H H c 0 0 H 0 Trim 0 1 1 1
2211 3,4-Dbp H H c 0 0 H 0 Tetm 0 1 1 1
2212 3,4-Dbp H H c 0 o H o Penm 0 1 I 1
2213 3,4-Dbp H H c 0 0 H 0 Hexm 0 1 1 1
2214 3,4-Dbp H H c 0 0 H o Hepm 0 1 1 1
2215 3,4-Dbp H H c 0 0 H 0 Octm 0 1 1 1
2216 3,4-Dbp H H c 0 o H o Nonm 0 1 1 1
2217 3,4-Dbp H H c 0 0 H o Decm 0 1 1 1
2218 3,4-Dbp H H c 0 0 H 0 Pre 0 1 1 1
2219 3,4-Dbp H H c 0 0 H o 1-Me- Trim 0 1 1 1
2220 3,4-Dbp H H c o 0 H o 2-MeTetm 0 1 1 1
2221 3,4-Dbp H H c 0 s H 0 Trim 0 1 1 1
2222 3,4-Dbp H H c 0 s H 0 Tetm 0 1 1 1
2223 3,4-Dbp H H c 0 s H 0 Penm 0 1 1 1
2224 3,4-Dbp H H c 0 s H 0 Hexm 0 1 1 1
2225 3,4-Dbp H H c 0 s H 0 Hepm 0 1 1 1
2226 3,4-Dbp H H c 0 s H 0 Octm 0 1 1 1
2227 3,4-Dbp H H c 0 s H 0 Nonm 0 1 1 1
2228 3,4-Dbp H H c 0 s H 0 Decm 0 1 1 1
2229 3,4-Dbp H H c 0 s H 0 Pre 0 1 1 1
2230 3,4-Dbp H H c 0 s H 0 1-MeTrim 0 1 1 1
2231 3,4-Dbp H H c 0 s H 0 2-MeTetm 0 l 1 1
2232 3,4-Dbp H H c 0 NH Ph 0 Ete 0 1 1 1
2233 3,4-Dbp H H c 0 NH 2-ClPh o Ete 0 1 1 1
2234 3,4-Dbp H H c o NH Me 0 Trim 0 1 1 1
-43CZ 287050 B6
Tabulka 1 - pokračování
slouč. č. Ri R: Rj Z Yi Y2 Ri Y? X Y4 n m B
2235 3,4-Dbp H H C o NH Pr 0 Trim 0 1 1 1
2236 3,4-Dbp H H C 0 NH 2-NH2Et 0 Trim 0 1 1 1
2237 3,4-Dbp H H C 0 NH 2-MeOEt 0 Trim 0 1 1 1
2238 3,4-Dbp H H C 0 NH Ph o Trim 0 1 1 1
2239 3,4-Dbp H H C 0 NH 2-ClPh 0 Trim 0 1 1 1
2240 3,4-Dbp H H C 0 NH Pr o Tetm o 1 1 1
2241 3,4-Dbp H H C 0 NH Pr 0 Penm 0 1 1 1
2242 3,4-Dbp H H C 0 NH Pr 0 Hexm 0 1 1 1
2243 3,4-Dbp H H C o NH Pr 0 Hepm 0 I 1 1
2244 3,4-Dbp H H C 0 NH Pr 0 Octm 0 1 1 1
2245 3,4-Dbp H H C o NH Pr o Nonm 0 1 1 1
2246 3,4-Dbp H H C o NH Pr 0 Decm o 1 1 1
2247 3,4-Dbp H H C 0 NH Pr 0 Pře 0 1 1 1
2248 3,4-Dbp H H C 0 NH Pr 0 1-MeTrim 0 1 1 1
2249 3,4-Dbp H H C 0 NH Pr 0 2-MeTetm 0 1 1 1
2250 Ph Ph Ph C NH 0 H 0 Ete 0 6 1 1
2251 3,4-Dbp H H C o O H 0 Ete 0 1 1 21
2252 3,4-Dbp H H C 0 s H 0 Ete o 1 1 21
2253 3,4-Dbp H H C 0 - - - - - 0 0 21
2254 3,4-Dbp H H C o o Me 0 - 0 1 21
2255 3,4-Dbp H H C 0 o Me s - - 0 1 21
2256 Ph Ph Ph C o o H 0 Ete o 1 1 21
2257 Ph Ph Ph c 0 s H 0 Ete 0 1 1 21
2258 Ph Ph Ph c 0 - - - - 0 1 21
2259 Ph Ph Ph c 0 o Me 0 - - 0 1 ϋ
2260 Ph Ph Ph c o 0 Me s - - 0 1 21
2261 3,5-Dbp H H c 0 o H 0 Ete 0 1 1 21
2262 3,5-Dbp H H c o s H 0 Ete 0 1 1 21
2263 3,5-Dbp H H c 0 - - - - - 0 0 21
2264 3,5-Dbp H H c 0 o Me 0 - - 0 1 21
2265 3,5-Dbp H H c o o Me s - - 0 1 21
2266 3,4-Dbp H H c o 0 H 0 Ete 0 1 1 22
2267 3,4-Dbp H H c 0 s H 0 Ete 0 1 1 22
2268 3,4-Dbp H H c 0 - - - - - 0 1 22
2269 3,4-Dbp H H c 0 o Me o - - 0 1 22
2270 3,4-Dbp H H c o o Me s - - 0 1 22
2271 Ph Ph Ph c 0 o H 0 Ete 0 1 1 22
2272 Ph Ph Ph c o s H 0 Ete o 1 1 22'
2273 Ph Ph Ph c o - - - - - 0 0 22
2274 Ph Ph Ph c 0 o Me 0 - - 0 1 22
2275 Ph Ph Ph c 0 0 Me s - - 0 1 22
2276 3,5-Dbp H H c 0 0 H 0 Ete 0 1 1 22
2277 3,5-Dbp H H c 0 s H 0 Ete 0 1 1 22
2278 3,5-Dbp H H c o - - - - - 0 0 22
2279 3,5-Dbp H H c 0 0 Me o - - 0 1 22
2280 3,5-Dbp H H c 0 o Me s - - 0 1 22
2281 3,4-Dbp H H c 0 0 H 0 Ete 0 1 1 23
2282 3,4-Dbp H H c o s H o Ete o 1 I 23
2283 3,4-Dbp H H c 0 - - - - - 0 0 23
2284 3,4-Dbp H H c o 0 Me 0 - - 0 I 23
2285 3,4-Dbp H H c 0 o Me s - - 0 1 23
2286 Ph Ph Ph c 0 0 H 0 Ete 0 1 1 23
2287 Ph Ph Ph c 0 s H 0 Ete 0 1 1 23
2288 Ph Ph Ph c 0 - - - - - 0 0 23
2289 Ph Ph Ph c 0 0 Me 0 - - 0 1 23
2290 Ph Ph Ph c 0 o Me s - - 0 1 23
2291 3,5-Dbp H H c 0 0 H 0 Ete 0 1 1 23
2292 3,5-Dbp H H c 0 s H 0 Ete 0 1 1 23
2293 3,5-Dbp H H c 0 - - - - - 0 0 22
2294 3,5-Dbp H H c 0 0 Me 0 - - 0 1 22
2295 3,5-Dbp H H c 0 o Me s - - 0 1 22
2296 3,4-Dbp H H c 0 o H 0 Ete 0 1 1 24
2297 3,4-Dbp H H c 0 s H 0 Ete 0 1 1 24
2298 3,4-Dbp H H c 0 - - - - - 0 0 24
2299 3,4-Dbp H H c o 0 Me o - - 0 1 24
2300 3,4-Dbp H H c o o Me s - - 0 1 24
2301 Ph Ph Ph c 0 0 H o Ete o 1 1 24
2302 Ph Ph Ph c 0 s H 0 Ete 0 1 1 24
-44CZ 287050 B6
Tabulka 1 - pokračování
slouč. č. Ri Rz Rj Z ¥1
2303 Ph Ph Ph C O
2304 Ph Ph Ph C O
2305 Ph Ph Ph C 0
2306 3,5-Dbp H H C 0
2307 3,5-Dbp H H C O
2308 3,5-Dbp H H C 0
2309 3,5-Dbp H H C O
2310 3,5-Dbp H H C o
2311 3,4-Dbp H H C O
2312 3,4-Dbp H H C o
2313 3,4-Dbp H H C 0
2314 3,4-Dbp H H C O
2315 3,4-Dbp H H C o
2316 Ph Ph Ph C o
2317 Ph Ph Ph C 0
2318 Ph Ph Ph C 0
2319 Ph Ph Ph C O
2320 Ph Ph Ph C O
2321 3,5-Dbp H H C 0
2322 3,5-Dbp H H C 0
2323 3,5-Dbp H H C 0
2324 3,5-Dbp H H C o
2325 3,5-Dbp H H C O
2326 4MeOPh 4-MeOPh Ph c 0
2327 4— MeOPh 4—MeOPh Ph c O
2328 4MeOPh 4-MeOPh Ph c O
2329 4MeOPh 4-MeOPh Ph c o
2330 4MeOPh 4-MeOPh Ph c o
2331 4— MeOPh 4-MeOPh Ph c O
2332 4MeOPh 4-MeOPh Ph c 0
2333 4MeOPh 4-MeOPh Ph c O
2334 4MeOPh 4-MeOPh Ph c O
2335 3,4-Dbp H H c 0
2336 3,4-Dbp H H c 0
2337 3,4-Dbp H H c O
2338 3.4-Dbp H H c 0
2339 3,4-Dbp H H c O
2340 3,4-Dbp H H c O
2341 3,4-Dbp H H c O
2342 3,4-Dbp H H c O
2343 3,4-Dbp H H c 0
2344 3,4-Dbp H H c O
2345 3,4-Dbp H H c O
2346 Ph Ph Ph c 0
2347 Ph Ph Ph c o
2348 Ph Ph Ph c 0
2349 Ph Ph Ph c O
2350 Ph Ph Ph c 0
2351 Ph Ph Ph c 0
2352 Ph Ph Ph c O
2353 Ph Ph Ph c 0
2354 Ph Ph Ph c O
2355 Ph Ph Ph c 0
2356 Ph Ph Ph c 0
2357 3,5-Dbp H H c 0
2358 3,5-Dbp H H c 0
2359 3,5-Dbp H H c 0
2360 3,5-Dbp H H c o
2361 3,5-Dbp H H c 0
2362 3,5-Dbp H H c o
2363 3,5-Dbp H H c O
Y2 R4 Y3 X Y4 n ID B
- - - - - 0 0 24
O Me 0 - - 0 1 24
O Me s - - 0 1 24
o H o Ete 0 1 1 24
s H 0 Ete o 1 1 24
- - - - - 0 0 24
o Me 0 - - 0 1 24
o Me s - - 0 1 24
O H 0 Ete 0 1 1 25
s H o Ete o 1 1 25
- - - - - 0 0 25
O Me 0 - - 0 1 25
O Me s - - 0 1 25
O H o Ete 0 1 1 25
s H 0 Ete o 1 1 25
- - - - - 0 0 25
O Me o - - 0 1 25
o Me s - - 0 1 25
0 H 0 Ete 0 1 1 25
s H o Ete 0 1 1 25
- - - - - 0 0 25
O Me o - - 0 1 25
O Me s - - 0 1 25
- - - - - 0 0 1Ϊ
- - - - - 0 0 18
- - - - - 0 0 19
- - - - - 0 0 20
- - - - - 0 0 21
- - - - - 0 0 22
- - - - - 0 0 23
- - - - - 0 0 24
- - - - - 0 0 25
0 H 0 Ete 0 1 1 26
s H o Ete o 1 1 26
- - - - - 0 0 26
0 Me 0 - - 0 1 26
o Me s - 0 1 26
o 2-ClPh 0 - - 0 1 26
Mee H 0 - - 0 1 26
Mee H s - - 0 1 26
Phe H 0 - - 0 1 26
NH Pr 0 Ete 0 1 1 26
O Me NH Trim - 1 1 26
O H 0 Ete 0 1 1 26
S H 0 Ete 0 1 1 26
- - - - - 0 0 26
0 Me o - - 0 1 26
o Me s - - 0 1 26
0 2-ClPh 0 - - 0 1 26
Mee H 0 - - 0 1 26
Mee H s - - 0 1 26
Phe H o - 0 1 26
NH Pr 0 Ete 0 1 1 26
O Me NH Trim - 1 1 26
O H 0 Ete 0 1 I 26
S H o Ete 0 1 1 26
- - - - - 0 0 26
o Me 0 - - 0 1 26
0 Me s - - 0 1 26
o 2-ClPh 0 - - 0 I 26
Mee H 0 - - 0 l 26
-45CZ 287050 B6
Tabulka 1 - pokračování slouč. č.
2364
2365
2366
2367
2368
2369
2370
2371
2372
2373
Ri
3,5-Dbp
3,5-Dbp
3,5-Dbp
3,5-Dbp
4MeOPh
4MeOPh
4MeOPh
4MeOPh
4MeOPh
4MeOPh
Ri
H
H
H
H
4-MeOPh
4-MeOPh
4-MeOPh
4-MeOPh
4-MeOPh
4-MeOPh
2374
4-MeOPh
2375
MeOPh 4MeOPh
4-MeOPh
2376
4-MeOPh
2377
2378
2379
2380
2381
2382
MeOPh
4MeOPh
4MeOPh
4MeOPh
4MeOPh
4MeOPh
4MeOPh
4-MeOPh
4—MeOPh
Ph
Ph
Ph
Ph
2383
Ph
2384
2385
2386
2387
2388
MeOPh
4MeOPh
4MeOPh
4MeOPh
4MeOPh
4MeOPh
4MeOPh jBu
Ph
Ph
Ph
Ph
Ph
Rr H H H H Ph
Ph
Ph
Ph
Ph
Ph
Ph
Ph
Ph
Ph
Ph
Ph
Ph
Ph
Ph
Ph
Ph
Ph
Ph
Ph
Ph
Z V.
C
C
C
C
C
O O O O O
Yr Mee Phe NH
O O
Mee
Mee
Phe
NH
Mee
Mee
Phe
NH
Ra
H H Pr Me
H
Me
Me
2-ClPh
Pr
Me
Me
Me
2-ClPh
Pr
Y;
S
O
O NH
O
NH
Ete Trim
Ete
Ete
Ete
Trim
Ete
Ete
Ete
Yj n m B
2389
C
Ph
Ph
O
O
NH
Trim
Me
2390
Si
O
Ph
Ph
O
H
O
Ete
O
2391 tBu Ph Ph Si 0 s H O Ete O 1 1 26
2392 tBu Ph Ph Si 0 - - - - - 0 0 26
2393 tBu Ph Ph Si 0 0 Me O - - 0 1 26
2394 JBu Ph Ph Si 0 0 Me s - - 0 1 26
2395 tBu Ph Ph Si 0 0 2-ClPh 0 - - 0 1 26
2396 tBu Ph Ph Si 0 Mee H 0 - - 0 1 26
2397 tBu Ph Ph Si 0 Mee H s - - 0 l 26
2398 tBu Ph Ph Si 0 Phe H o - - 0 1 26
2399 tBu Ph Ph Si o NH Pr o Ete O 1 1 26
2400 tBu Ph Ph Si o O Me NH Trim - 1 1 26
2401 Ph Ph Ph C S O H O Ete O 1 1 26
2402 Ph Ph Ph C S S H o Ete o 1 1 26
2403 Ph Ph Ph c s - - - - - 0 0 26
2404 Ph Ph Ph c s O Me 0 - - 0 1 26
2405 Ph Ph Ph c s 0 Me s - - 0 1 26
2406 Ph Ph Ph c s 0 2-PICh 0 - - 0 1 26
2407 Ph Ph Ph c s Mee H 0 - - 0 1 26
2408 Ph Ph Ph c s Mee H s - - 0 1 26
2409 Ph Ph Ph c s Phe H 0 - - 0 1 26
2410 Ph Ph Ph c s NH Pr 0 Ete 0 1 1 26
2411 Ph Ph Ph c s O Me NH Tnm - 1 1 26
-46CZ 287050 B6
Tabulka 1 - pokračování
siouč. ¢. Ri R; Rs Z Y1 Y2 R4 Ys X Y4 n m B
2412 4-BzOPh H H C o 0 H o Ete O 1 1 26
2413 4-BzOPh H H C 0 s H 0 Ete 0 1 1 26
2414 4-BzOPh H H C 0 - - - - - 0 0 26
2415 4-BzOPh H H C o o Me o - - 0 1 26
2416 4-BzOPh H H C 0 o Me s - - 0 1 26
2417 4-BzOPh H H C o 0 2-PlCh o - - 0 1 26
2418 4-BzOPh H H C o Mee H 0 - - 0 ] 26
2419 4-BzOPh H H C 0 Mee H s - - 0 1 26
2420 4-BzOPh H H C o Phe H o - - 0 1 26
2421 4-BzOPh H H C o NH Pr 0 Ete 0 1 1 26
2422 4-BzOPh H H C 0 0 Me NH Trim - 1 1 26
2423 Ph Xanthen-9-y) 0 O H O Ete 0 1 1 26
2424 Ph Xanthen-9-yl o s H o Ete 0 1 1 26
2425 Ph Xanthen-9-yl 0 - - - - - 0 0 26
2426 Ph Xanthen-9-yl o 0 Me 0 - - 0 1 26
2427 Ph Xanthen-9-yl 0 0 Me s - - 0 1 26
2428 Ph Xanthen-9-yl 0 0 2-ClPh o - - 0 1 26
2429 Ph Xanthen-9-yl 0 Mee H 0 - - 0 1 26
2430 Ph Xanthen-9-yl 0 Mee H s - - 0 1 26
2431 Ph Xanthen-9-yl o Phe H 0 - - 0 1 26
2432 Ph Xanthen-9-yl 0 NH Pr 0 Ete 0 1 1 26
2433 Ph Xanthen-9-yl o O Me NH Trim - 1 1 26
2434 Ph FIuoren-9-yl o O H 0 Ete 0 1 1 26
2435 Ph Fluoren-9-yl 0 S H 0 Ete 0 1 1 26
2436 Ph Fluoren-9-yl 0 - - - - 0 0 26
2437 Ph Fluoren-9-yl o o Me 0 - 0 1 26
2438 Ph Fluoren-9-yl 0 0 Me s - - 0 1 26
2439 Ph Fluoren-9-yl 0 0 2-ClPh o - - 0 1 26
2440 Ph Fluoren-9-yl 0 Mee H 0 - - 0 1 26
2441 Ph Fluoren-9-yl 0 Mee H s - - 0 1 26
2442 Ph Fluoren-9-yl 0 Phe H 0 - - 0 1 26
2443 Ph Fluoren-9-yl 0 NH Pr 0 Ete 0 1 1 26
2444 Ph Fluoren-9-yl 0 O Me NH Trim - 1 1 26
2445 3,4-Dbp H H c 0 O H 0 Ete 0 1 1 27
2446 3,4-Dbp H H c 0 s H 0 Ete 0 1 1 27
2447 3,4-Dbp H H c 0 - - - - - 0 0 27
2448 3,4-Dbp H H c 0 0 Me 0 - - 0 1 27
2449 3,4-Dbp H H c o 0 Me s - - 0 1 27
2450 3,4-Dbp H H c 0 0 2-ClPh 0 - - 0 1 27
2451 3,4-Dbp H H c o Mee H o - - 0 1 27
2452 3,4-Dbp H H c 0 Mee H s - - 0 1 27
2453 3,4-Dbp H H c 0 Phe H 0 - - 0 ] 27
2454 3,4-Dbp H H c o NH Pr o Ete 0 1 1 27
2455 3,4-Dbp H H c o O Me NH Trim - 1 1 27
2456 Ph Ph Ph c 0 O H O Ete 0 1 1 27
2457 Ph Ph Ph c 0 S H o Ete 0 1 1 27
2458 Ph Ph Ph c 0 - - - - - 0 0 22
2459 Ph Ph Ph c 0 0 Me o - - 0 1 11
2460 Ph Ph Ph c o 0 Me s - - 0 1 ii
2461 Ph Ph Ph c o o 2-CIPh 0 - - 0 0 27
2462 Ph Ph Ph c o Mee H o - - 0 1 27
2463 Ph Ph Ph c 0 Mee H s - 0 1 27
2464 Ph Ph Ph c 0 Phe H 0 - - 0 1 ii
2465 Ph Ph Ph c o NH Pr o Ete 0 1 1 27
2466 Ph Ph Ph c 0 O Me NH Trim - 1 1 27
2467 3,5-Dbp H H c 0 O H 0 Ete 0 1 l 27
2468 3,5-Dbp H H c o s H o Ete 0 1 1 27
2469 3,5-Dbp H H c o - - - - - 0 0 27
2470 3,5-Dbp H H c o 0 Me 0 - - 0 0 27
2471 3,5-;Dbp H H c 0 0 Me s - - 0 1 22
2472 3,5-Dbp H H c 0 0 2-ClPh 0 - - 0 1 27
2473 3,5-Dbp H H c o Mee H o - - 0 0 27
2474 3,5-Dbp H H c o Mee H s - - 0 1 27
2475 3,5-Dbp H H c 0 Phe H 0 - - 0 1 27
2476 3,5-Dbp H - H c 0 NH Pr 0 Ete 0 1 1 27
2477 3,5-Dbp H H c o O Me NH Trim - 1 1 27
2478 4-MeOPh 4-MeOPh Ph c 0 0 H O Ete 0 1 1 27
2479 4-MeOPh 4-MeOPh Ph c o S H 0 Ete 0 1 1 22
2480 4-MeOPh 4-MeOPh Ph c o - - - - - 0 0 27
-47CZ 287050 B6
Tabulka 1 - pokračování
slouč. č. Ri r2 Rs Z Yl Y2 R4 Y3 X Y4 n m B
2481 4-MeOPh 4-MeOPh Ph c 0 0 Me O - - 0 0 27
2482 4-MeOPh 4-MeOPh Ph c 0 0 Me s - - 0 1 27
2483 4-MeOPh 4-MeOPh Ph c 0 0 2-CIPh 0 - - 0 1 27
2484 4-MeOPh 4-MeOPh Ph c 0 Mee H o - - 0 0 27
2485 4-MeOPh 4-MeOPh Ph c 0 Mee H s - - 0 1 27
2486 4-MeOPh 4-MeOPh Ph c 0 Phe H 0 - - 0 1 27
2487 4-MeOPh 4-MeOPh Ph c o NH Pr 0 Ete 0 1 1 27
2488 4-MeOPh 4-MeOPh Ph c 0 O Me NH Trim - 1 1 27
2489 4-MeOPh 4-MeOPh Ph c 0 0 H O Ete 0 1 1 27
2490 4-MeOPh 4-MeOPh Ph c 0 s H o Ete o 1 1 27
2491 4-MeOPh 4-MeOPh Ph c 0 - - - - 0 0 22
2492 4-MeOPh 4-MeOPh Ph c 0 0 Me 0 - - 0 1 27
2493 4-MeOPh 4-MeOPh Ph c 0 0 Me s - - 0 1 27
2494 4-MeOPh 4-MeOPh Ph c 0 0 2-CIPh 0 - - 0 0 27
2495 4-MeOPh 4-MeOPh Ph c 0 Mee H 0 - - 0 1 27
2496 4-MeOPh 4-MeOPh Ph c 0 Mee H s - - 0 1 27
2497 4-MeOPh 4-MeOPh Ph c 0 Phe H 0 - - 0 l 27
2498 4-MeOPh 4-MeOPh Ph c 0 NH Pr 0 Ete o 1 1 27
2499 4-MeOPh 4-MeOPh Ph c 0 O Me NH Trim - 1 1 27
2500 tBu Ph Ph Si 0 O H O Ete 0 1 1 27
2501 tBu Ph Ph Si 0 s H 0 Ete 0 1 1 27
2502 tBu Ph Ph Si 0 - - - - - 0 0 27
2503 tBu Ph Ph Si 0 0 Me 0 - - 0 0 27
2504 tBu Ph Ph Si 0 0 Me s - - 0 1 27
2505 tBu Ph Ph Si 0 0 2-CIPh 0 - 0 1 27
2506 tBu Ph Ph Si 0 Mee H 0 - - 0 0 27
2507 tBu Ph Ph Si 0 Mee H s - - 0 1 27
2508 tBu Ph Ph Si 0 Phe H 0 - - 0 1 27
2509 tBu Ph Ph Si o NH Pr 0 Ete 0 1 1 27
2510 tBu Ph Ph Si 0 O Me NH Trim - 1 1 27
2511 Ph Ph Ph c S O H O Ete 0 1 1 27
2512 Ph Ph Ph c s S H 0 Ete 0 1 1 27
2513 Ph Ph Ph c s - - - - - 0 0 27
2514 Ph Ph Ph c s 0 Me 0 - - 0 0 27
2515 Ph Ph Ph c s 0 Me s - - 0 1 27
2516 Ph Ph Ph c s 0 2-CIPh 0 - - 0 1 27
2517 Ph Ph Ph c s Mee H 0 - - 0 0 22
2518 Ph Ph Ph c s Mee H s - - 0 1 22
2519 Ph Ph Ph c s Phe H 0 - - 0 1 27
2520 Ph Ph Ph c s NH Pr 0 Ete 0 1 1 27
2521 Ph Ph Ph c s O Me NH Trim - 1 1 27
2522 4-BzOPh H H c 0 O H O Ete 0 1 1 22
2523 4-BzOPh H H c o s H o Ete o 1 1 27
2524 4-BzOPh H H c 0 - - - - - 0 0 27
2525 4-BzOPh H H c 0 0 Me 0 - - 0 1 27
2526 4-BzOPh H H c 0 0 Me s - - 0 0 27
2527 4-BzOPh H H c o 0 2-CIPh 0 - - 0 1 22
2528 4-BzOPh H H c 0 Mee H 0 - - 0 1 22
2529 4-BzOPh H H c 0 Mee H s - 0 0 27
2530 4-BzOPh H H c 0 Phe H 0 - - 0 1 27
2531 4-BzOPh H H c 0 NH Pr 0 Ete o 1 1 22
2532 4-BzOPh H H c 0 O Me NH Trim - 1 1 27
2533 Ph Xanthen-9-yl 0 O H O Ete 0 1 1 22
2534 Ph Xanthen-9-yl o s H O Ete o 1 1 27
2535 Ph Xanthen-9-yl 0 - - - - - 0 0 27
2536 Ph Xanthen-9-yl 0 0 Me O - - 0 1 22
2537 Ph Xanthen-9-yl 0 0 Me s - - 0 0 27
2538 Ph Xanthen-9-yl 0 0 2-CIPh 0 - - 0 1 22
2539 Ph Xanthen-9-yl 0 Mee H 0 - - 0 1 22
2540 Ph Xanthen-9-yl 0 Mee H s - - 0 0 22
2541 Ph Xanthen-9-yl 0 Phe H 0 - - 0 l 22
2542 Ph Xanthen-9-yl 0 NH Pr 0 Ete 0 1 1 22
2543 Ph Xanthen-9-yl 0 O Me NH Trim l 1 22
2544 Ph Fluoren-9-yl 0 O H O Ete 0 1 1 22
2545 Ph Fluoren-9-yl 0 S H 0 Ete 0 1 1 22
2546 Ph Fluoren-9-yl 0 - - - - - 0 0 22
2547 Ph Fluoren-9-yl 0 0 Me 0 - - 0 1 22
-48CZ 287050 B6
Tabulka 1 - pokračování
slouč. ¢. Ri r2 Ri Z Yi Y2 Rr Y3 X Yt n m B
2548 Ph Fluoren-9-yl 0 0 Me S - - 0 0 27
2549 Ph Fluoren-9-yl 0 0 2-CIPh O - - 0 1 27
2550 Ph Fluoren-9-yl 0 Mee H 0 - - 0 1 27
2551 Ph Fluoren-9-yl 0 Mee H S - 0 0 27
2552 Ph Fluoren-9-yl 0 Phe H 0 - 0 1 27
2553 Ph Fluoren-9-yl 0 NH Pr 0 Ete 0 1 1 27
2554 Ph Fluoren-9-yl 0 O Me NH Trim - 1 1 27
2555 3,4-Dbp H H C 0 O H 0 Ete 0 1 1 28
2556 3,4-Dbp H H C 0 s H 0 Ete 0 1 l 28
2557 3,4-Dbp H H C o - - - - - 0 0 28
2558 3,4-Dbp H H C 0 0 Me 0 - - 0 i 28
2559 3,4-Dbp H H C 0 0 Me s - - 0 1 28
2560 3,4-Dbp H H C 0 o 2-CIPh 0 - - 0 1 28
2561 3,4-Dbp H H C 0 Mee H 0 - - 0 1 28
2562 3,4-Dbp H H C 0 Mee H s - - 0 1 28
2563 3,4-Dbp H H C 0 Phe H 0 - - 0 1 28
2564 3,4-Dbp H H C 0 NH Pr 0 Ete 0 1 1 28
2565 3,4-Dbp H H C 0 O Me NH Trim - 1 1 28
2566 Ph Ph Ph C 0 O H 0 Ete 0 1 1 28
2567 Ph Ph Ph C 0 s H 0 Ete 0 1 1 28
2568 Ph Ph Ph C 0 - - - - - 0 0 28
2569 Ph Ph Ph C 0 0 Me 0 - - 0 1 28
2570 Ph Ph Ph C 0 o Me s - - 0 1 28
2571 Ph Ph Ph C 0 0 2-CIPh 0 - - 0 1 28
2572 Ph Ph Ph C 0 Mee H 0 - - 0 1 28
2573 Ph Ph Ph C 0 Mee H s - - 0 1 28
2574 Ph Ph Ph c 0 Phe H 0 - - 0 1 28
2575 Ph Ph Ph c 0 NH Pr o Ete 0 1 1 28
2576 Ph Ph Ph c 0 O Me NH Trim - 1 1 28
2577 3,5-Dbp H H c 0 O H 0 Ete 0 1 1 28
2578 3,5-Dbp H H c 0 s H O Ete 0 1 1 28
2579 3,5-Dbp H H c 0 - - - - - 0 0 28
2580 3,5-Dbp H H c 0 0 Me 0 - - 0 1 28
2581 3,5-Dbp H H c 0 0 Me s - - 0 1 28
2582 3,5-Dbp H H c 0 o 2-CIPh 0 - 0 1 28
2583 3,5-Dbp H H c 0 Mee H 0 - - 0 1 28
2584 3,5-Dbp H H c 0 Mee H s - - 0 1 28
2585 3,5-Dbp H H c 0 Phe H 0 - - 0 1 28
2586 3,5-Dbp H H c 0 NH Pr 0 Ete 0 1 1 28
2587 3,5-Dbp H H c 0 O Me NH Trim - 1 1 28
2588 4-MeOPh 4-MeOPh Ph c 0 O H 0 Ete 0 1 1 28
2589 4-MeOPh 4-MeOPh Ph c 0 s H 0 Ete 0 1 1 28
2590 4-MeOPh 4-MeOPh Ph c o - - - - 0 0 28
2591 4-MeOPh 4-MeOPh Ph c 0 0 Me 0 - - 0 1 28
2592 4-MeOPh 4-MeOPh Ph c o o Me s - - 0 1 28
2593 4-MeOPh 4-MeOPh Ph c 0 0 2-CIPh 0 - - 0 1 28
2594 4-MeOPh 4-MeOPh Ph c 0 Mee H 0 - 0 1 28
2595 4-MeOPh 4-MeOPh Ph c 0 Mee H s - - 0 1 28
2596 4-MeOPh 4-MeOPh Ph c 0 Phe H 0 - - 0 1 28
2597 4-MeOPh 4-MeOPh Ph c 0 NH Pr 0 Ete 0 1 1 28
2598 4-MeOPh 4-MeOPh Ph c 0 O Me NH Trim 1 1 28
2599 4-MeOPh Ph Ph c 0 O H O Ete 0 1 1 28
2600 4-MeOPh Ph Ph c 0 s H o Ete 0 1 1 28
2601 4-MeOPh Ph Ph c 0 - - - - 0 0 28
2602 4-MeOPh Ph Ph c 0 0 Me 0 - - 0 1 28
2603 4-MeOPh Ph Ph c 0 0 Me s - - 0 1 28
2604 4-MeOPh Ph Ph c 0 0 2-CIPh 0 - - 0 1 28
2605 4-MeOPh Ph Ph c 0 Mee H 0 - - Ό 1 28
2606 4-MeOPh Ph Ph c 0 Mee H s - - 0 1 28
2607 4-MeOPh Ph Ph c 0 Phe H 0 - - 0 1 28
2608 4-MeOPh Ph Ph c 0 NH Pr o Ete 0 1 1 28
2609 4-MeOPh Ph Ph c 0 O Me NH Trim - 1 1 28
2610 tBu Ph Ph Si 0 O H O Ete 0 1 1 28
2611 tBu Ph Ph Si 0 s H O Ete 0 1 1 28
2612 tBu Ph Ph Si 0 - - - - - 0 0 28
2613 tBu Ph Ph Si 0 o Me 0 - - 0 l 28
2614 tBu Ph Ph Si 0 o Me s - - 0 1 28
2615 tBu Ph Ph Si 0 0 2-CIPh 0 - - 0 1 28
2616 tBu Ph Ph Si 0 Mee H 0 - - 0 1 28
2617 tBu Ph Ph Si 0 Mee H s - - 0 1 28
-49CZ 287050 B6
Tabulka 1 - pokračování
slouč. ¢. Ri Rz Rz Z Yl Yz Ra Yz X Ya Π m B
2618 tBu Ph Ph Si 0 Phe H O - - 0 1 28
2619 tBu Ph Ph Si 0 NH Pr O Ete 0 1 1 28
2620 tBu Ph Ph Si 0 o Me NH Trim - 1 1 28
2621 Ph Ph Ph C S 0 H O Ete 0 1 1 28
2622 Ph Ph Ph C S s H O Ete 0 1 1 28
2623 Ph Ph Ph C S - - - - - 0 0 28
2624 Ph Ph Ph C S 0 Me o - - 0 1 28
2625 Ph Ph Ph c s 0 Me s - - 0 1 28
2626 Ph Ph Ph c s 0 2-ClPh 0 - - 0 1 28
2627 Ph Ph Ph c S Mee H o - - 0 1 28
2628 Ph Ph Ph c s Mee H s - - 0 1 28
2629 Ph Ph Ph c s Phe H o - - 0 1 28
2630 Ph Ph Ph c s NH Pr 0 Ete 0 1 1 28
2631 Ph Ph Ph c s O Me NH Trim - 1 1 28
2632 4-BzOPh H H c 0 O H O Ete o 1 1 28
2633 4-BzOPh H H c 0 s H O Ete 0 1 1 28
2634 4—BzOPh H H c 0 - - - - - 0 0 28
2635 4-BzOPh H H c 0 0 Me 0 - - 0 1 28
2636 4-BzOPh H H c 0 o Me s - - 0 1 28
2637 4—BzOPh H H c o o 2-ClPh 0 - - 0 1 28
2638 4—BzOPh H H c 0 Mee H o - - 0 1 28
2639 4-BzOPh H H c o Mee H s - - 0 1 28
2640 4-BzOPh H H c 0 Phe H 0 - - 0 1 28
2641 4-BzOPh H H c 0 NH Pr o Ete 0 1 1 28
2642 4-BzOPh H H c 0 O Me NH Trim - 1 1 28
2643 Ph Xanthen-9-yl 0 O H O Ete 0 1 1 28
2644 Ph Xanthen-9-yl 0 s H 0 Ete 0 1 1 28
2645 Ph Xanthen-9-yl 0 - - - 0 0 28
2646 Ph Xanthen-9-yl 0 o Me 0 - - 0 1 28
2647 Ph Xanthen-9-yl 0 o Me s - - 0 1 28
2648 Ph Xanthen-9-yl 0 0 2-ClPh 0 - - 0 1 2i
2649 Ph Xanthen-9-yl o Mee H 0 - - 0 1 2S.
2650 Ph Xanthen-9-yl 0 Mee H s - - 0 1 28
2651 Ph Xanthen-9-yl 0 Phe H 0 - - 0 1 28
2652 Ph Xanthen-9-yl 0 NH Pr 0 Ete o 1 1 28
2653 Ph Xanthen-9-yl o O Me NH Trim - 1 1 28
2654 Ph Fluoren-9-yl 0 O H O Ete o 1 1 28
2655 Ph Fluoren-9-yl 0 s H 0 Ete 0 1 1 2S
2656 Ph Fluoren-9-yl 0 - - - - - 0 0 28
2657 Ph Fluoren-9-yl 0 0 Me o - - 0 1 28
2658 Ph Fluoren-9-yl 0 0 Me s - 0 1 23
2659 Ph Fluoren-9-yl o 0 2-CIPh o - - 0 1 28
2660 Ph Fluoren-9-yl 0 Mee H 0 - - 0 1 28
2661 Ph Fluoren-9-yl 0 Mee H s - - 0 1 28
2662 Ph Fluoren-9-yl o Phe H o - - 0 1 28
2663 Ph Fluoren-9-yl o NH Pr 0 Ete 0 1 1 28
2664 Ph Fluoren-9-yl o O Me NH Trim - 1 1 28
2665 3,4-Dbp H H c 0 O H O Ete 0 1 1 28
2666 3,4-Dbp H H c 0 S H 0 Ete 0 1 1 29
2667 3,4-Dbp H H c 0 - - - - - 0 0 29
2668 3,4-Dbp H H c o O Me 0 - - 0 1 29
2669 3,4-Dbp H H c 0 O Me s - - 0 1 29
2670 3,4-Dbp H H c o o 2-ClPh 0 - - 0 1 29
2671 3,4-Dbp H H c 0 Mee H 0 - - 0 1 29
2672 3,4-Dbp H H c 0 Mee H s - - 0 1 29
2673 3,4-Dbp H H c o Phe H 0 - - 0 1 29
2674 3,4-Dbp H H c 0 NH Pr 0 Ete 0 1 1 29
2675 3,4-Dbp H H c 0 O Me NH Trim - 1 1 29
2676 Ph Ph Ph c 0 0 H 0 Ete 0 1 1 29
2677 Ph Ph Ph c 0 s H 0 Ete 0 1 1 29
2678 Ph Ph Ph c 0 - - - - - 0 0 29
2679 Ph Ph Ph c 0 0 Me 0 - - 0 1 29
2680 Ph Ph Ph c o o Me s - - 0 1 29
2681 Ph Ph Ph c 0 0 2-ClPh 0 - - 0 1 29
2682 Ph Ph Ph c 0 Mee H o - - 0 1 29
2683 Ph Ph Ph c 0 Mee H s - - 0 1 29
2684 Ph Ph Ph c 0 Phe H 0 - - 0 1 29
2685 Ph Ph Ph c 0 NH Pr o Ete 0 1 1 29
2686 Ph Ph Ph c 0 O Me NH Trim - 1 1 29
2687 3,5-Dbp H H c 0 O H O Ete 0 1 1 29
-50CZ 287050 B6
Tabulka 1 - pokračování
slouč. č. Ri r2 Rj Z Y| Y2 Ri Y3 X Y4 n Π) B
2688 3,5-Dbp H H C o s H o Ete O 1 1 29
2689 3,5-Dbp H H C 0 - - - - - 0 0 29
2690 3,5-Dbp H H C 0 o Me 0 - - 0 1 29
2691 3,5-Dbp H H C 0 o Me s - - 0 1 29
2692 3,5-Dbp H H C 0 o 2-ClPh 0 - - 0 1 29
2693 3,5-Dbp H H C 0 Mee H 0 - - 0 1 29
2694 3,5-Dbp H H C 0 Mee H s - - 0 1 29
2695 3,5-Dbp H H C 0 Phe H 0 - - 0 1 29
2696 3,5-Dbp H H C o NH Pr o Ete o 1 1 29
2697 3,5-Dbp H H C o O Me NH Trim - 1 1 29
2698 4-MeOPh 4-MeOPh Ph C 0 O H 0 Ete 0 1 1 29
2699 4-MeOPh 4-MeOPh Ph C 0 s H 0 Ete 0 1 1 29
2700 4-MeOPh 4-MeOPh Ph C 0 - - - - 0 0 29
2701 4-MeOPh 4-MeOPh Ph C o o Me o - - 0 1 29
2702 4-MeOPh 4-MeOPh Ph C 0 o Me s - - 0 1 29
2703 4-MeOPh 4-MeOPh Ph C 0 0 2-ClPh 0 - - 0 1 29
2704 4-MeOPh 4-MeOPh Ph C o Mee H 0 - - 0 1 29
2705 4-MeOPh 4-MeOPh Ph C o Mee H s - - 0 1 29
2706 4-MeOPh 4-MeOPh Ph C o Phe H 0 - - 0 1 29
2707 4-MeOPh 4-MeOPh Ph C o NH Pr 0 Ete o 1 1 29
2708 4-MeOPh 4-MeOPh Ph C 0 O Me NH Trim 1 1 29
2709 4-MeOPh Ph Ph C o O H 0 Ete 0 1 1 29
2710 4-MeOPh Ph Ph C o s H o Ete 0 1 1 29
2711 4-MeOPh Ph Ph c 0 - - - - - 0 0 29
2712 4-MeOPh Ph Ph c o o Me o - - 0 1 29
2713 4-MeOPh Ph Ph c o o Me s - - 0 1 29
2714 4-MeOPh Ph Ph c 0 0 2-CIPh o - - 0 1 29
2715 4-MeOPh Ph Ph c o Mee H 0 - - 0 1 29
2716 4-MeOPh Ph Ph c 0 Mee H s - - 0 1 29
2717 4-MeOPh Ph Ph c 0 Phe H o - 0 1 29
2718 4-MeOPh Ph Ph c o NH Pr o Ete 0 1 1 29
2719 4-MeOPh Ph Ph c 0 O Me NH Trim - 1 1 29
2720 tBu Ph Ph Si o O H 0 Ete 0 1 1 29
2721 tBu Ph Ph Si 0 s H 0 Ete 0 1 1 29
2722 tBu Ph Ph Si 0 - - - - - 0 0 29
2723 tBu Ph Ph Si o o Me o - - 0 1 29
2724 tBu Ph Ph Si 0 o Me s - 0 1 29
2725 tBu Ph Ph Si 0 o 2-ClPh o - - 0 1 29
2726 tBu Ph Ph Si o Mee H 0 - 0 1 29
2727 tBu Ph Ph Si 0 Mee H s - - 0 1 29
2728 tBu Ph Ph Si 0 Phe H o - - 0 1 29
2729 tBu Ph Ph Si 0 NH Pr 0 Ete 0 1 1 29
2730 tBu Ph Ph Si 0 O Me NH Trim 1 1 29
2731 Ph Ph Ph C S O H 0 Ete o 1 1 29
2732 Ph Ph Ph C s s H O Ete o 1 1 29
2733 Ph Ph Ph C s - - - - - 0 0 29
2734 Ph Ph Ph C s 0 Me 0 - - 0 1 29
2735 Ph Ph Ph C s 0 Me s - - 0 1 29
2736 Ph Ph Ph C s 0 2-ClPh 0 - 0 1 29
2737 Ph Ph Ph C s Mee H o - - 0 1 29
2738 Ph Ph Ph C s Mee H s - - 0 1 29
2739 Ph Ph Ph C s Phe H o - - 0 1 29
2740 Ph Ph Ph C s NH Pr o Ete 0 1 1 29
2741 Ph Ph Ph c s O Me NH Trim - 1 1 29
2742 4-BzOPh H H c 0 O H 0 Ete 0 1 1 29
2743 4-BzOPh H H c 0 s H 0 Ete 0 1 1 29
2744 4-BzOPh H H c 0 - - - - - 0 0 29
2745 4-BzOPh H H c o o Me 0 - - 0 1 29
2746 4-BzOPh H H c 0 o Me s - - 0 1 29
2747 4-BzOPh H H c 0 0 2-ClPh 0 - - 0 1 29
2748 4-BzOPh H H c 0 Mee H 0 - 0 1 29
2749 4-BzOPh H H c 0 Mee H s - - 0 1 29
2750 4-BzOPh H H c 0 Phe H o - - 0 1 29
2751 4-BzOPh H H c 0 NH Pr 0 Ete 0 1 1 29
2752 4-BzOPh H H c 0 O Me NH Trim - 1 1 29
2753 Ph Xanthen-9-yl 0 O H 0 Ete 0 1 1 29
2754 Ph Xanthen-9-yl 0 s H O Ete 0 1 1 29
2755 Ph Xanthen-9-yl o - - - - - 0 0 29
-51CZ 287050 B6
Tabulka 1 - pokračování
slouč. Č. Ri Rj r3 Z Yl Y2 Rj Y3 X Yj n rn B
2756 Ph Xanthen-9-yl 0 o Me 0 - - 0 1 29
2757 Ph Xanthen-9-yl 0 o Me S - - 0 1 29
2758 Ph Xanthen-9-yl 0 o 2-ClPh O - - 0 1 29
2759 Ph Xanthen-9-yl 0 Mee H O - - 0 1 29
2760 Ph Xanthen-9-yl 0 Mee H S - - 0 1 29
2761 Ph Xanthen-9-yl 0 Phe H O - - 0 1 29
2762 Ph Xanthen-9-yl 0 NH Pr O Ete 0 1 1 29
2763 Ph Xanthen-9-yl 0 O Me NH Trim - 1 1 29
2764 Ph Fluoren-9-yl 0 O H O Ete 0 1 1 29
2765 Ph Fluoren-9-yi 0 s H 0 Ete o 1 1 29
2766 Ph Fluoren-9-yl 0 - - - - 0 0 •29
2767 Ph Fluoren-9-yl 0 o Me s - - 0 1 29
2768 Ph Fluoren-9-yl 0 0 Me s - - 0 1 29
2769 Ph Fluoren-9-yl 0 0 2-ClPh o - - 0 1 29
2770 Ph Fluoren-9-yl o Mee H o - - 0 1 29
2771 Ph Fluore n-9-yl o Mee H s - - 0 1 22
2772 Ph Fluoren-9-yl 0 Phe H o - - 0 1 22
2773 Ph Fluoren-9-yl 0 NH Pr 0 Ete o 1 1 22
2774 Ph Fluoren-9-yl 0 O Me NH Trim - 1 1 29
2775 3,4-Dph H H C s O H 0 Ete 0 1 1 22
2776 3,4-Dph H H C s s H 0 Ete 0 1 1 22
2777 3,4-Dph H H C s - - - - - 0 0 1
2778 3,4-Dph H H C s 0 Me 0 - - 0 1 1
2779 3,4-Dph H H C s o Me s - 0 1 1
2780 3,4-Dph H H C s o 2-ClPh 0 - - 0 1 1
2781 3,4-Dph H H C s Mee H 0 - - 0 1 1
2782 3,4-Dph H H C s Mee H s - - 0 1 1
2783 3,4-Dph H H C s Phe H 0 - - 0 1 1
2784 3,4-Dph H H C s NH Pr 0 Ete o 1 1 1
2785 3,4-Dph H H C s O Me NH Trim - 1 1 1
2786 9-Ant H H C s O H 0 Ete 0 1 1 1
2787 9-Ant H H c s S H o Ete 0 1 1 1
2788 9-Ant H H c s - - - - - 0 0 1
2789 9-Ant H H c s 0 Me o - - 0 1 ΐ
2790 9-Ant H H c s 0 Me s - - 0 1 1
2791 9-Ant H H c s 0 2-ClPh 0 - - 0 1 i
2792 9-Ant H H c s Mee H o - 0 1 1
2793 9-Ant H H c s Mee H s - - 0 1 Ϊ
2794 9-Ant H H c s Phe H 0 - - 0 1 1
2795 9-Ant H H c s NH Pr 0 Ete 0 1 1 1
2796 9-Ant H H c s O Me NH Trim - 1 1 1
2797 2-Npe H H c s O H 0 Ete 0 1 1 1
2798 2-Npe H H c s s H o Ete 0 1 1 1
2799 2-Npe H H c s - - - - - 0 0 1
2800 2-Npe H H c s o Me 0 - - 0 1 1
2801 2-Npe H H c s 0 Me s - - 0 1 1
2802 2-Npe H H c s 0 2-ClPh 0 - - 0 1 1
2803 2-Npe H H c s Mee H 0 - - 0 1 1
2804 2-Npe H H c s Mee H s - - 0 1 1
2805 2-Npe H H c s Phe H 0 - - 0 1 1
2806 2-Npe H H c s NH Pr 0 Ete o 1 1 1
2807 2-Npe H H c s 0 Me NH Trim - 1 1 1
2808 Bdbbp H H c s O H O Ete 0 1 1 1
2809 Bdbbp H H c s S H 0 Ete 0 1 1 1
2810 Bdbbp H H c s - - - - - 0 0 i
2811 Bdbbp H H c s o Me o - - 0 1 1
2812 Bdbbp H H c s 0 Me s - - 0 1 1
2813 ' Bdbbp H H c s 0 2-ClPh 0 - - 0 1 1
2814 Bdbbp H H c s Mee H o - - 0 1 1
2815 Bdbbp H H c s Mee H s - - 0 1 1
2816 Bdbbp H H c s Phe H 0 - - 0 1 1
2817 Bdbbp H H c s NH Pr 0 Ete 0 1 l 1
-52CZ 287050 B6
Tabulka 1 - pokračování
slouč. č. Ri Rz Rz Z Y| Yz R4 Yz X Y4 n m B
2818 Bdbbp H H C s o Me NH Trim - 1 1 1
2819 3,4-Dbp H H C s 0 H 0 Ete 0 1 1 28
2820 3,4-Dbp H H C s s H 0 Ete 0 1 1 28
2821 3,4-Dbp H H C s - - - - - 0 0 28
2822 3,4-Dbp H H c s 0 Me 0 - - 0 1 28
2823 3,4-Dbp H H c s 0 Me s - 0 1 28
2824 3,4-Dbp H H c s 0 2-ClPh 0 - - 0 1 28
2825 3,4-Dbp H H c s Mee H 0 - - 0 1 28
2826 3,4-Dbp H H c s Mee H s - - 0 1 28
2827 3,4-Dbp H H c s Phe H o - - 0 1 28
2828 3,4-Dbp H H c s NH Pr 0 Ete 0 1 1 28
2829 3,4-Dbp H H c s O Me NH Trim - 1 1 28
2830 9-Ant H H c s O H 0 Ete 0 1 1 28
2831 9-Ant H H c s s H 0 Ete 0 1 1 28
2832 9-Ant H H c s - - - - 0 0 28
2833 9-Ant H H c s 0 Me 0 - - 0 1 28
2834 9-Ant H H c s o Me s - - 0 1 28
2835 9-Ant H H c s 0 2-ClPh 0 - - 0 1 28
2836 9-Ant H H c s Mee H 0 - - 0 1 28
2837 9-Ant H H c s Mee H s - - 0 1 28
2838 9-Ant H H c s Phe H 0 - - 0 1 28
2839 9-Ant H H c s NH Pr 0 Ete o 1 1 28
2840 9-Ant H H c s O Me NH Trim - 1 1 28
2841 2-Npe H H c s O H 0 Ete 0 1 1 28
2842 2-Npe H H c s s H 0 Ete o 1 1 28
2843 2-Npe H H c s - - - - - 0 0 28
2844 2-Npe H H c s 0 Me 0 - - 0 1 28
2845 2-Npe H H c s o Me s - - 0 1 23
2846 2-Npe H H c s 0 2-ClPh 0 - - 0 1 23
2847 2-Npe H H c s Mee H 0 - - 0 1 28
2848 2-Npe H H c s Mee H s - - 0 1 28
2849 2-Npe H H c s Phe H 0 - - 0 1 28
2850 2-Npe H H c s NH Pr 0 Ete 0 1 1 23
2851 2-Npe H H c s O Me NH Trim - 1 1 23
2852 Bdbbp H H c s O H O Ete 0 1 1 28
2853 Bdbbp H H c s s H 0 Ete 0 1 1 28
2854 Bdbbp H H c s - - - - - 0 0 28
2855 Bdbbp H H c s 0 Me o - - 0 1 28
2856 Bdbbp H H c s 0 Me s - - 0 1 28
2857 Bdbbp H H c s 0 2-ClPh 0 - - 0 1 28
2858 Bdbbp H H c s Mee H 0 - - 0 1 28
2859 Bdbbp H H c s Mee H s - - 0 1 28
2860 Bdbbp H H c s Phe H 0 - - 0 1 23
2861 Bdbbp H H c s NH Pr 0 Ete 0 1 1 28
2862 Bdbbp H H c s O Me NH Trim - 1 1 28
2863 3,4-Dbp H H c s O H 0 Ete 0 1 1 29
2864 3,4-Dbp H H c s S H 0 Ete 0 1 1 29
2865 3,4-Dbp H H c s - - - - - 0 0 29
2866 3,4-Dbp H H c s 0 Me 0 - - 0 1 29
2867 3,4-Dbp H H c s 0 Me s - - 0 1 29
2868 3,4-Dbp H H c s 0 2-CtPh 0 - - 0 1 29
2869 3,4-Dbp H H c s Mee H 0 - - 0 1 29
2870 3,4-Dbp H H c s Mee H s - - 0 1 29
2871 3,4-Dbp H H c s Phe H 0 - - 0 1 29
2872 3,4-Dbp H H c s NH Pr 0 Ete 0 1 1 22
2873 3,4-Dbp H H c s O Me NH Trim - 1 1 22
2874 9-Ant H H c s O H 0 Ete o 1 1 29
2875 9-Ant H H c s s H 0 Ete 0 1 1 22
2876 9-Ant H H c s - - - - - 0 0 29
2877 9-Ant H H c s 0 Me 0 - - 0 1 29
2878 9-Ant H H c s 0 Me s - - 0 1 29
2879 9-Ant H H c s o 2-ClPh 0 - 0 1 22
2880 9-Ant H H c s Mee H 0 - - 0 1 22
2881 9-Ant H H c s Mee H s - - 0 1 29
2882 9-Ant H H c s Phe H 0 - - 0 1 22
2883 9-Ant H H c s NH Pr 0 Ete 0 1 1 29
2884 9-Ant H H c s O Me NH Trim - 1 1 29
2885 2-Npe H H c s O H 0 Ete 0 1 1 29
2886 2-Npe H H c s S H o Ete 0 1 1 29
2887 2-Npe H H c s - - - - - 0 0 29
-53CZ 287050 B6
Tabulka 1 - pokračování
slouč. č. R) R2 Rs Z Y1 Y2 R. Y3 X Y« Ω m B
2888 2-Npe H H C s o Me O - - 0 1 29
2889 2-Npe H H C s o Me S - - 0 1 29
2890 2-Npe H H C s o 2-CIPh O - - 0 1 29
2891 2-Npe H H C s Mee H O - - 0 1 29
2892 2-Npe H H C s Mee H S - - 0 1 29
2893 2-Npe H H C s Phe H O - - 0 1 29
2894 2-Npe H H C s NH Pr O Ete o 1 1 29
2895 2-Npe H H C s O Me NH Trim 1 1 29
2896 Bdbbp H H C s O H O Ete o 1 1 29
2897 Bdbbp H H C s s H O Ete 0 1 1 29
2898 Bdbbp H H C s - - - - - 0 0 29
2899 Bdbbp H H C s 0 Me o - - 0 1 29
2900 Bdbbp H H C s 0 Me s - - 0 1 22
2901 Bdbbp H H C s o 2-CIPh o - - 0 1 29
2902 Bdbbp H H C s Mee H 0 - - 0 1 29
2903 Bdbbp H H C s Mee H s - - 0 1 29
2904 Bdbbp H H C s Phe H o - - 0 1 29
2905 Bdbbp H H C s NH Pr 0 Ete 0 1 1 29
2906 Bdbbp H H C s O Me NH Trim - 1 1 29
2907 Bdbbp H H C s O H O Ete 0 I 1 29
2908 3,4-Dbp H H C 0 s H o Ete o 1 1 30
2909 3,4-Dbp H H C 0 - - - - - 0 0 30
2910 3,4-Dbp H H C 0 0 Me 0 - - 0 1 30
2911 3,4-Dbp H H c 0 0 Me s - - 0 1 30
2912 3,4-Dbp H H c 0 0 2-CIPh o - - 0 1 32
2913 3,4-Dbp H H c 0 Mee H 0 - - 0 1 32
2914 3,4-Dbp H H c 0 Mee H s - - 0 1 32
2915 3,4-Dbp H H c 0 Phe H 0 - - 0 1 32
2916 3,4-Dbp H H c 0 NH Pr 0 Ete o 1 1 32
2917 3,4-Dbp H H c 0 O Me NH Trim - 1 1 30
2918 3,4-Dbp H H c 0 O H O Ete o 1 1 31
2919 3,4-Dbp H H c 0 s H 0 Ete 0 1 1 31
2920 3,4-Dbp H H c 0 - - - - - 0 0 31
2921 3,4-Dbp H H c 0 o Me o - - 0 l 31
2922 3,4-Dbp H H c 0 0 Me s - - 0 1 31
2923 3,4-Dbp H H c 0 0 2-CIPh 0 - - 0 1 31
2924 3,4-Dbp H H c 0 Mee H o - - 0 1 31
2925 3,4-Dbp H H c 0 Mee H s - - 0 1 31
2926 3,4-Dbp H H c 0 Phe H 0 - - 0 1 31
2927 3,4-Dbp H H c 0 NH Pr 0 Ete o 1 1 31
2928 3,4-Dbp H H c 0 O Me NH Trim - 1 1 31
2929 3,4-Dbp H H c o O H O Ete o 1 1 32
2930 3,4-Dbp H H c 0 s H o Ete o 1 1 32
2931 3,4-Dbp H H c 0 - - - - - 0 0 32
2932 3,4-Dbp H H c 0 o Me o - - 0 1 32
2933 3,4-Dbp H H c 0 0 Me s - - 0 1 32
2934 3,4-Dbp H H c 0 0 2-CIPh 0 - - 0 1 32
2935 3,4-Dbp H H c 0 Mee H o - - 0 1 32
2936 3,4-Dbp H H c 0 Mee H s - - 0 1 32
2937 3,4-Dbp H H c 0 Phe H o - - 0 1 32
2938 3,4-Dbp H H c 0 NH Pr 0 Ete 0 1 1 32
2939 3,4-Dbp H H c 0 O Me NH Trim - 1 1 32
Ze svrchu uvedených sloučenin jsou výhodné zejména sloučeniny č. 1 až 440, 454, 476, 586,
696, 806, 916, 1026, 1136, 1246, 1356, 1466, 1576, 1686, 1763, 1773, 1793, 1979, 1980, 1990 až 1994, 2250 a 2326 až 2906.
Zvláště výhodné jsou sloučeniny č. 1 až 110, 113,221 až 330, 333,454, 1763, 1773, 1793, 1979, 1980, 1990 až 1994,2250 a 2334 až 290610
Nejvýhodnějšímí sloučeninami jsou sloučeniny č. 1, 2, 3, 4, 12, 13, 14, 15, 2555, 2556, 2557, 2558, 2566, 2567,2568, 2569, 2665, 2666, 2667,2668, 2676, 2677, 2678 a 2679.
Sloučeniny podle vynálezu mohou mít formu solí, zvláště solí skationty, přijatelnými 15 z farmaceutického hlediska. Příkladem vhodných solí s alkalickými kovy, jako sodíkem nebo
-54CZ 287050 B6 draslíkem, s kovy alkalických zemin, například s vápníkem, dále může jít o amonné soli a soli s bazickými aminokyselinami, jako lysinem nebo arginem a soli s alkylaminy, například s triethylaminem. Výhodnými solemi jsou soli s alkalickými kovy, například soli sodné nebo draselné.
V následujících reakčních schématech budou znázorněny některé způsoby pro výrobu sloučenin podle vynálezu.
Obecně je možno připravit sloučeniny obecného vzorce I kodenzací vhodných způsobů derivatizovaných nukleotidů, které se budou nacházet na příštím 5'-zakončení požadované látky, s chráněným nukleotidem, jemuž 5'-zakončení chybí, přičemž 5'-zakončení použitého nukleotidu přivádí do výsledné látky příslušný nukleotidový řetězec požadované oligodeoxyribonukleotidové sloučeniny a chráněný nukleotid je vázán na polymemí nosič. Způsob typicky spočívá v tom, že se uvede do reakce sloučenina obecného vzorce R1R2R3Z-Y'-/nukleotid 5'zakončení/ se sloučeninou, jíž 5'-zakončení chybí, která je chráněná a vázána na polymemí nosič.
Při provádění způsobu podle vynálezu se tedy kondenzuje sloučenina následujícího obecného vzorce 2 se sloučeninou typu (chráněný derivát)-O-E-W, kde F je oligonukleotid bez 5'zakončení a W je vazný řetězec a polymemí nosič. V případě, že se jako chráněný derivát užije DMT, je možno uvést jako příklady sloučenin pro reakci se sloučeninou obecného vzorce 2 sloučeniny se vzorci DMT-O-F-Wj (3), DMT-O-F-W2a (4a), DMT-O-F-W2b (4b), DMT-OF-W3 (5), DMT-O-F-W4a (6a), DMT-O-F-W4b (6b), DMT-O-F-W4c (6c), DMT-O-F-W4d (6d), DMT-O-F-Wsa (7a) a DMT-O-F-W5b (7b), reakce se provádí způsobem podle postupu C—1, C-2 nebo C-3. Reakční složka vzorce 2, použitá v této reakci může být získána způsobem A-l nebo A-2 a reakční složky obecných vzorců 3, 4a, 4b, 5, 6a až 6d, 7a a 7b mohou být připraveny některým z postupů B-l, B-2, B-3, B-4 nebo B-5.
(2)
-55CZ 287050 B6
Metoda A-l
stupeň 5
Stupen 1
-56CZ 287050 B6
Metoda A-2
stuosň 5
Metoda B-l
O
O (3-1) stupeň 7 syntéza pomocí syntetizátoru Π.ΊΛ
0MT’O-F-Wi (3)
-57CZ 287050 B6
Metoda B-2
HOCHaZCH) OH —►DMTOCHV CH\ OH —► DMT-OCHj 'E Λ stup.8 \ E /| stup.9 (4-1) (4-2)
Zch\occh2ch2cooh \e 4 O (•4-3)
(4-4)
DMT-OCHjZ CřA OCCHjCHjf NbP'— 'E AÓ O (4-5) stupeň 11 1'
DMT-O-F-Wja -------stupeň 12 (4-a)
HOCHj/ CH\ OfCHzCHjf Ve /, O o (4-6) stupeň pK) QtJCHjCbfyf ΝΗ*—— (4-7) stupeň 14 ,r
DMT-O-F-Wjj» (4-b)
-58CZ 287050 B6
Metoda B-3
HOCH2/ CH\ Of CH2CH2f
Ve ή ° o (54) stupeň
(5-2)
o—p-och2 H / CH\ Of Ve /, O O (5-3) stupeň 16
QCH2/ CH\
Ve ή o o (5-4) stupeň 17
DMT-O-F-Wj (5)
-59CZ 287050 B6
Metoda B-4
H(OCHzCHj)tOH (6-1)
CJ-P?
omhoch^oh D;.,r,ocHg,.c.p:v stupeň 20 1
OMT-íOCH.CHjJjOOCCHjCHjCOOH (6-4) stupeň 21 I (S.S
DMT-(OCKjCH2)tOOCCH2CHjCONH (6-6) stupeň 22
V
DMT-O-F-W4a (6a) “’23 H-íOCH2CH2)tOOCCH2CH2CONH (6-7) stupeň 24 (6-3)
O
DMT-íOCHjCHp.OP-fOCHjCHjJjOOCCHiCH.CONH
V (6-8) stupeň 25
DMT-O-F-W4b (6b) stup.26
O
H{OCH2CH2)íOP.(OCH2CHj)tOOCCH2CHjCONH
V (6-9) stupeň 27 (6-3)
DMT-O*F-W4C (6c)
-*------ H (OCHjCHjLOP.
Stup.28 ý i
?· t (OCHjCHjJjOOCCHjCHjCCNH ·—-<£££> ’ ’ (6-10)
DMT-O-F-W4d (6d) stupeň 2?|(6-3) ^[(OGfjCHjJjOP.j(OCHjCHjJgOOCCHjCHjCCNH —— V 3 (6-11)
-60CZ 287050 B6
Metoda B-5
OMT-O
OMT-C
D-
O-P-R, <?
(7-5) ' \
O
O
OCHjCHjSCHjCHjOP-V •p
O” stupeň 35
DMT-O-F-Wja συ o
O-fOCHjCHiŠCHjCHjOP-V D_ K ‘ σ-η
CCCHjCHjCNH O O ,, stuoeň 33
DMT-O-r-Ws3 (7b)
-61CZ 287050 B6
Metoda C-l
V-P-U (8) stupen 37
DMT-O-F-Wj (3)
W5 (7a-b)
Metoda C-2
•O-p.Q stupen 39 ’ r
DMT-O-F-W, (3)
W5 (7a~b)
-62CZ 287050 B6 (2)----------►
Metoda C-3 stupeň 40
O-P:0
H s tupen
OMT-O-F-W, (3) l
W5 (7a-b)
ΓΟ
Rj-Ž-Yí— B^-o--P-Y3-(x-y4)n H *3
Ý2-R4
Ve sloučeninách obecného vzorce 2 mají symboly Rb R2, R3, Y] a Z význam, uvedený v obecném vzorci 1, D' znamená bázi, která se volí z následujících ,,5'-skupin bází“ nebo zodpovídajících chráněných bází, přičemž jde o bázi na 5'-zakončení řetězce (dále bude tato báze označována jako 5'- koncová část nebo jako 5'-koncová báze), jde o adenin, guanin, cytosin, thymin, nebo 5-methylcytosin.
io
Postup B-l zahrnuje přípravu sloučeniny obecného vzorce 3, jíž chybí jeden nukleotidový fragment na 5'-zakončení účinného řetězce, tato látka se syntetizuje porézním sklem (dále bude označeno CPG), na chráněný nukleosid je navázán vazný řetězec, použitelný pro syntézu DNA na 3'-zakončení účinného řetězce báze (dále bude tato část označována jako nukleosid 3'15 zakončení) a dále se užije nukleotidová jednotka, běžně dodávaná pro syntetizační zařízení pro
DNA (dále bude označováno jako nukleotidová jednotka).
Při postupu B-2 je možno připravit sloučeninu obecného vzorce 4a, obsahující krátký nukleotidový fragment z 5'-zakončení účinného řetězce, syntéza se uskuteční ochranou jedné 20 terminální hydroxylové skupiny v alkylendiolu o 2 až 10 atomech uhlíku s hydroxylovými skupinami na koncových polohách, ochrana se provádí dimethoxytritylovou skupinou (DMT), pak se uvede do reakce druhá hydroxylová skupina s anhydridem kyseliny jantarové za vzniku monoesteru se naváže na CPG, koncová skupina DMT se odstraní a nakonec se uvede do reakce nukleotidová jednotka s alkylenalkoholem (4-6), vázaným na CPG v syntetizátoru DNA. Metoda 25 B2 zahrnuje rovněž přípravu sloučeniny vzorce 4b tak, že se na CPG vázaný alkylenalkohol (46) převede na fosforthiolát 3'-koncového nukleosidu na CPG (4-7) běžným způsobem pro výrobu thiolátu nukleotidu na syntetizátor DNA a pak se provádí reakce při použití nukleotidové jednotky stejným způsobem jako svrchu.
Postup B-3 se týká výroby sloučeniny obecného vzorce 5, obsahující jeden krátký nukleotidový fragment z 5-zakončení účinného řetězce, syntéza se provádí kondenzací fosfonátu 3
-63CZ 287050 B6 koncového nukleosidu, připraveného reakcí hydroxylové skupiny v poloze 3' tohoto nukleosidu s fosfonovou kyselinou za vzniku esterové vazby, s ethylenglykol, vázaným na CPG (5-1), tato látka se získá při použití anhydridu kyseliny jantarové podle postupu B-2 a reakcí s alkylaminem za vzniku fosforamiditu 3'-koncového nukleosidu, vázaného na CPG (5-4) s konečnou reakcí při použití nukleotidové jednotky a syntetizátoru DNA.
Postup B-4 se týká přípravy nové sloučeniny (6—3) M. Durand a další, Nucleic Acids Res., 18, 6353, 1990, reakce se provádí tak, že se nejprve chrání jedna z hydroxylových skupin hexaethylenglykolu skupinou DMT a pak se druhá hydroxylová skupina uvede do reakce s reakčním činidlem pro přípravu fosforamiditové skupiny.
Analogickým způsobem jako v postupu B-3 je možno připravit glykol, chráněný DMT a vázaný na CPG (6-6) kondenzací hexaethylenglykolu, chráněného skupinou DMT (6-2) s CPG při použití kyseliny jantarové.
Po odstranění skupiny DMT z glykolu, chráněného skupinou DMT a vázaného na CPG (6—6) na syntetizátoru DNA se glykol uvede do reakce s nukleotidovou jednotkou za vzniku požadované sloučeniny 6a, obsahující jeden krátký nukleotidový fragment z 5'-zakončení účinného řetězce. Glykol, vázaný na CPG a získaný odstraněním skupiny DMT z glykolu, vázaného na CPG (6-6) běžným způsobem na syntetizátoru DNA se uvede jednou, dvakrát nebo třikrát do reakce s fosforamiditem s následnou reakcí s nukleotidovou jednotkou, obsahující jeden krátký nukleotidový fragment z 5'-zakončení účinného řetězce bází za vzniku sloučenin vzorců 6b, 6c nebo 6d.
Postup B-5 zahrnuje přípravu sloučeniny (7-3) tak, že se odstraní skupina DMT zběžně dodávaného chráněného 2'-deoxynukleosidu, vázaného na CPG vazným řetězcem (dále bude označován D'”-CPG) s následnou reakcí s (2-kyanethoxy)-2-(2'-0-4,4'-dimethoxy-trityloxyethylsulfonyl)ethoxy-N,N-diizopropylaminofosfmem (7-1), popsaným v publikaci T. Hom a další, Tetrahedron Letters, 27, 4705, 1986. Podle tohoto postupu je pak možno připravit sloučeninu vzorce (7-5) tak, že se odstraní skupina DMT ze sloučeniny vzorce (7-3) připravené svrchu uvedeným způsobem a sloučenina, zbavená ochranné skupiny se kondenzuje se sloučeninou vzorce (7-4), obsahující arylfosfát nebo alkylfosfát hydroxylové skupiny v poloze 3' použitého 3'-koncového nukleosidu při použití kondenzačního činidla. Postup rovněž zahrnuje výrobu sloučeniny vzorce 7a reakcí sloučeniny (7-5), připravené svrchu uvedeným způsobem s nukleotidovou jednotkou, obsahující krátký nukleotidový fragment z 5'-zakončení účinného řetězce.
Obdobným způsobem je možno připravit také sloučeninu vzorce Ί-Ί tak, že se uvede do reakce sloučenina 7-3, zbavená skupiny DMT se sloučeninou 7-6, obsahující v poloze 3' použitého 3'koncového nukleosidu alkyl- nebo arylfosforamiditovou skupinu, dále se materiál zpracovává obdobně jako při výrobě triesteru kyseliny fosforečné nebo fosforthioátového esteru na syntetizátor DNA. Takto získaný produkt se uvede do reakce s nukleotidovou jednotkou běžným způsobem za vzniku sloučeniny 7a s jedním krátkým nukleotidovým fragmentem v poloze 5' účinného řetězce bází.
Postup C-l se týká výroby požadované sloučeniny obecného vzorce 1 reakcí sloučeniny vzorce 2 s fosfítylačním činidlem za vzniku 3'-fosfátového derivátu vzorce 8 a takto získaný produkt se uvede do reakce s oligomery vzorců 3, 4a, 4b, 5, 6a a 6d, 7a a 7b, vázanými na CPG a připravenými podle postupů B-l až B-5 po odstranění ochranné skupiny DMT, kondenzovaný produkt se oxiduje oxidačním činidlem, nukleotidový řetězec se odštěpí z CPG a nakonec se odstraní ochranné skupiny s výjimkou skupiny, vázané na atom uhlíku v poloze 5' v 5'koncovém nukleosidu.
-64CZ 287050 B6
Postup C-2 zahrnuje výrobu požadované sloučeniny vzorce 1 reakcí sloučeniny 2 s fosforylačním činidlem za vzniku 3'-derivátu kyseliny fosforečné vzorce IX, produkt se kondenzuje se sloučeninami 3, 4a, 4b, 5, 6a až 6d, 7a a 7b, po odstranění skupiny DMT za vzniku triesteru kyseliny fosforečné, nukleotidový řetězec se odštěpí z CPG, odstraní se ochranné skupiny s výjimkou substituentu, vázaného na atom uhlíku v poloze 5' v 5'-koncovém nukleosidu a nakonec se produkt čistí běžným způsobem.
Postup C-3 zahrnuje výrobu sloučeniny vzorce 1 tak, že se zavádí zbytek kyseliny fosfonové do polohy 3' ve sloučenině vzorce 2 za vzniku sloučeniny vzorce X, získaný produkt se kondenzuje se sloučeninami vzorců 3, 4a, 4b, 5, 6a až 6d, 7a a 7b, při použití halogenidu kyseliny v přítomnosti báze, kondenzovaný produkt se oxiduje působením oxidačního činidla za vzniku diesteru kyseliny fosforečné, nukleotid se odštěpí z CPG, odstraní se ochranné skupiny s výjimkou substituentu na atomu uhlíku v poloze 5' v 5'-koncovém nukleosidu a nakonec se produkt čistí běžným způsobem.
Dále budou podrobněji popsány postupy A až C.
V reakčních schématech shrnujících postupy A až C mají symboly Ri, R?, R3, R», Z, Yb Y2, Y3, Y4, X, n, m a 8 svrchu uvedený význam, Ai znamená tritylovou skupinu Tr, monomethoxytritylovou skupinu MMT nebo dimethoxytritylovou skupinu DMT, která se obvykle užívá specificky pro ochranu primární hydroxylové skupiny nukleosidu a A2 znamená trisubstituovanou silylovou skupinu, například terc.butyldimethylsilyl TBDMS nebo triizopropylsilyl TIPS, trihalogenethoxykarbonylovou skupinu, jako trichlorethoxykarbonyl Troc, nebo aralkyloxykarbonylovou skupinu, jako benzyloxykarbonyl Z.
D' znamená bázi na 5'-koncovém nukleotidu, jejíž aminoskupina je chráněna acylovou skupinou pro syntézu DNA účinného řetězce bází, D znamená bázi na 3'-zakončení nukleotidu a D' znamená skupinu případné nukleotidové jednotky, použité při syntéze DNA, to znamená bázi, která se volí z 5-koncové skupiny nebo zodpovídajícím způsobem chráněné 5-koncové skupiny.
F je oligonukleotidová část, obsahující krátký nukleotidový fragment z 5'-zakončení účinného řetězce a představuje základní část nebo odpovídající nukleotid, chráněný ochrannou skupinou na bázi kyseliny fosforečné, tak jak se obvykle užívá při syntéze DNA. Tato oligonukleotidová část neobsahuje žádnou hydroxylovou skupinu v poloze 5' v 5'-koncovém nukleosidu ani v poloze 3'. V znamená ochrannou skupinu na bázi kyseliny fosforečné, užívanou při syntéze DNA.
U znamená aminoskupinu amiditové části. Wi až W5 znamenají fragmenty, zasahující od CPG k atomu kyslíku hydroxylové skupiny v poloze 3' v 3'-koncovém nukleotidu oligonukleotidu F v požadované výsledné sloučenině při provádění postupů B-l až 8-5. Symbol L znamená celé číslo 1 až 9, E znamená atom vodíku nebo hydroxylovou skupinu, která může být chráněna, nebo aminoskupinu a K znamená atom kyslíku nebo atom síry.
R5 znamená methyl, ethyl, propyl, butyl, fenyl, methoxy-, ethoxy-, propoxy-, butyoxy-, kyanoethyloxy- nebo fenyloxyskupinu, která může být substituována.
Dále budou podrobněji popsány jednotlivé stupně uvedených postupů. V případě, že některé ze stupňů jsou prováděny analogicky s předchozími reakcemi, bude první reakce popsána jako reprezentativní.
-65CZ 287050 B6
Stupně 1, 8 a 18
V těchto stupních je možno připravit sloučeninu vzorce 2-2, v níž je selektivně chráněna hydroxylová skupina v poloze 5' tak, že se uvede do reakce sloučenina vzorce 2-1 s reakčním činidlem pro ochranu hydroxylové skupiny v inertním rozpouštědle. V případě, že házeje A, G nebo C, chrání se aminoskupiny této báze acylací v předchozím stupni a ochranná reakce může být prováděna známým způsobem, například způsobem, kteiý byl popsán v publikaci J. Am. Chem. Soc., 104, 1316, 1982. Z ochranných skupin na aminoskupinu padají obvykle v úvahu nižší alifatické acylové skupiny nebo aromatické acylové skupiny. Příkladem mohou být nižší alifatické acylové skupiny, jako formyl, acetyl, propionyl, butyryl, izobutyryl, pentanoyl, pivaloyl, valeryl nebo izovaleryl, z aromatických acylových skupin je možno uvést benzoyl, 4acetoxybenzoyl, 4-methoxybenzoyl, 4-methylbenzoyl nebo 1-naftoyl, v případě, že použitou bází je A nebo C, je výhodná zejména benzoylová skupina a v případě báze G izobutyrylová skupina.
Příkladem výhodných rozpouštědel mohou být aromatické uhlovodíky, například benzen, toluen nebo xylen, halogenované uhlovodíky, jako dichlormethan, chloroform, tetrachlormethan, dichlorethan, chlorbenzen nebo dichlorbenzen, dále estery, jako ethylmravenčan, ethylacetát, propylaceát, butylacetát nebo diethylkarbonát, ethery, jako diethylether, diizopropylether, tetrahydrofuran, dioxan, dimethoxyethan nebo diethylenglykoldimethylether, ketony, například aceton, methylethylketon, methylizobutylketon, izoforon nebo cyklohexanon, nitrosloučeniny, jako nitroethan nebo nitrobenzen, nitrily, jako acetonitril nebo izobutyronitril, amidy, jako formamid, dimethylformamid DMF, dimethylacetamid nebo trianid kyseliny hexamethylfosforečné, sulfoxidy, například dimethylsulfoxid nebo sulfolan, alifatické terciární aminy, jako trimethylamin, triethylamin nebo N-methylmorfolin a aromatické aminy, jako pyridin nebo pikolin, výhodné jsou zejména halogenované uhlovodíky, zvláště dichlormethan a amidy, zvláště DMF.
Neexistuje žádné zvláštní omezení, týkající se povahy reakčního činidla, užitého k zavedení ochranné skupiny za předpokladu, že činidlo je možno použít pro specifickou ochranu hydroxylové skupiny v poloze 5', kterou je pak možno odstranit v kyselém nebo neutrálním prostředí. Příkladem výhodných reakčních činidel mohou být triarylmethylhalogenidy, jako tritylchlorid, monomethoxytritylchlorid nebo dimethoxytritylchlorid.
V případě, že reakčním činidlem pro zavedení ochranné skupiny je triarylmethylhalogenid, provádí se reakce obvykle v přítomnosti báze.
Příkladem vhodných bází mohou být heterocyklické aminy, například pyridin, dimethylaminopyridin nebo pyrrolidinpyridin a alifatické terciární aminy, jako trimethylamin nebo triethylamin, s výhodou se užijí organické báze, zvláště pyridin, dimethylaminopyridin a pyrrolidinpyridin.
V případě, že se jako rozpouštědlo užijí organické aminy, není zapotřebí použít další deacidifikační činidlo vzhledem k tomu, že organické aminy samy o sobě působí jako takové činidlo.
Reakční teplota se může měnit v závislosti na povaze výchozích látek a použitých rozpouštědel a na ostatních reakčních podmínkách, avšak obvykle se reakce provádí při teplotě 0 až 150, s výhodou 20 až 100 °C.
Doba, jíž je zapotřebí pro ukončení reakce, se rovněž může měnit v širokém rozmezí v závislosti na povaze výchozích látek, na použitém rozpouštědle a na reakční teplotě, obvykle je však reakce ukončena v průběhu 1 až 100, s výhodou 2 až 24 hodin.
-66CZ 287050 B6
Po ukončení reakce je možno požadovanou sloučeninu z reakční směsi izolovat například tak, že se reakční směs vlije do vody, roztok se extrahuje rozpouštědlem, nemísitelným s vodou, jako benzenem, etherem, nebo ethylacetátem a pak se rozpouštědlo z extraktu oddestiluje. Takto získaný produkt je možno v následující reakci použít bez dalšího čištění, avšak je možno jej čistit běžným způsobem, jako chromatografií nebo překrystalováním.
Stupeň 2
V tomto stupni je možno připravit sloučeninu vzorce 2-3 reakcí sloučeniny 2-2 s reakčním činidlem pro zavedení ochranné skupiny na hydroxylové skupině v přítomnosti inertního rozpouštědla.
Jako příklady výhodných rozpouštědel je možno uvést aromatické uhlovodíky, například benzen, toluen nebo xylen, halogenované uhlovodíky, jako dichlormethan, chloroform, tetrachlormethan, dichlorethan, chlorbenzen nebo dichlorbenzen, estery, jako ethylmravenčan, ethylacetát, propylacetát, butylacetát, diethylkarbonát, dále ethery, například diethylether, diizopropylether, tetrahydrofuran, dioxan, dimethoxyethan nebo diethylenglykoldimethylether, ketony, například aceton, methylethylketon, methylizobutylketon, izoforon nebo cyklohexanon, nitroskupiny, jako nitroethan nebo nitrobenzen, nitrily, jako acetonitril nebo izobutyronitril, amidy, jako formamid, dimethylformamid, dimethylacetamid nebo triamid kyseliny hexamethylfosforečné, sulfoxidy, například dimethylsulfoxid nebo sulfolan, výhodné jsou zvláště ethery a z nich tetrahydrofuran, halogenované uhlovodíky, zvláště dichlormethan, aromatické uhlovodíky, zvláště toluen a amidy, zvláště DMF.
Neexistuje žádné zvláštní omezení, týkající se povahy reakčního činidla, užitého pro zavedení hydroxylové skupiny za předpokladu, že tato skupina může být odstraněna způsobem, odlišným od odstranění ochranné skupiny v poloze 5'. Příkladem uvedených činidel mohou být silylhalogenidy, například terc.butyldimethylsilylchlorid nebo triizopropylsilylchlorid, halogenalkoxykarbonylhalogenidy, například trichlorethoxykarbonylchlorid a aralkyloxykarbonylhalogenidy, například benzyloxykarbonylchlorid.
V případě, že se jako činidlo užije silylhalogenid, halogenalkoxykarbonylhalogenid nebo aralkyloxykarbonylhalogenid, je možno reakci pro zavedení ochranné skupiny provádět i za přítomnosti báze.
Jako příklady vhodných bází je možno uvést organické báze, zvláště triethylamin, pyridin, H-methylmorfolin, DBU a imidazol.
Teplota při reakci se může měnit podle povahy reakčního činidla, výchozí látky a rozpouštědla i v závislosti na ostatních reakčních podmínkách, avšak obvykle se reakce provádí při teplotě v rozmezí -20 až 150, s výhodou v rozmezí -10 až 50 °C.
Reakční doba rovněž závisí na povaze výchozích látek a použitém rozpouštědle a také na reakční teplotě, obvykle je však reakce ukončena v průběhu 1 až 100, s výhodou 1 až 24 hodin.
Po ukončení reakce je možno požadované sloučeniny ze směsi izolovat. Je například možno postupovat tak, že se reakční směs vlije do vody, extrahuje rozpouštědlem, nemísitelným s vodou, jako benzenem, etherem nebo ethylacetátem a pak se rozpouštědlo z extraktu oddestiluje. Takto získaný produkt je obvykle možno užít v následující reakci bez dalšího čištění avšak je také možno jej čistit chromatografií, překrystalováním a podobně.
-67CZ 287050 B6
Stupeň 3,11,22 a 25
V těchto stupních je možno připravit sloučeniny vzorce 2—4, 4-6, 6-7 a 6-9 reakcí sloučenin 23, 4-5, 6-6, a 6-8 s činidlem k odstranění ochranné skupiny v inertním rozpouštědle, čímž se selektivně odstraní ochranná skupina na hydroxylové skupině v poloze 5'.
Příkladem výhodných rozpouštědel mohou být aromatické uhlovodíky, jako benzen, toluen nebo xylen, halogenované uhlovodíky, jako dichlormethan, chloroform, tetrachlormethan, dichlorethan, chlorbenzen nebo dichlorbenzen, estery, jako ethylmravenčan, ethylacetát, propylacetát, butylacetát nebo diethylkarbonát, ethery, jako diethylether, diizopropylether, tetrahydrofuran, dioxan, dimethoxyethan nebo diethylenglykoldimethylether, alkoholy, jako methanol, ethanol, n-propanol, izopropanol, n-butanol, izobutanol, terc.butanol, izoamylalkohol, diethylenglykol, glycerol, oktanol, cyklohexanon nebo methylcellosolve, ketony, jako aceton, methylethylketon, methylizobutylketon, izoforon nebo cyklohexanon, nitrosloučeniny, jako nitroethan nebo nitrobenzen, nitrily, jako acetonitril nebo izobutyronitril, amidy, jako formamid, dimethylformamid, dimethylacetamid nebo triamid kyseliny hexamethylfosforečné a sulfoxidy, jako dimethylsulfoxid nebo sulfolan, zvláště výhodné jsou alkoholy, zejména methanol a ethanol a dichlormethan a v případě, že se k odstranění ochranné skupiny užije kyselina octová, také směs této kyseliny s vodou.
Neexistuje žádné omezení povahy činidla pro odstranění ochranné skupiny za předpokladu, že je možno je běžně použít. V případě, že ochrannou skupinou je triarylmethylová skupina, je možno ji odstranit kyselinou, jako kyselinou octovou, dichloroctovou, trifluoroctovou, chlorovodíkovou nebo Lewizovou kyselinou, jako bromidem zinečnatým, výhodná je kyselina octová, dichloroctová nebo trifluoroctová.
Reakční teplota závisí na povaze reakčního činidla, výchozích látek, rozpouštědle a ostatních reakčních podmínkách, běžná teplota je -10 až 100, s výhodou 0 až 50 °C. Doba, potřebná k ukončení reakce se rovněž mění podle povahy výchozích látek a použitého rozpouštědla a také v závislosti na reakční teplotě, obvykle je však reakce ukončena, v průběhu 1 minuty až 50 hodin, s výhodou 1 minuty až 24 hodin.
Po ukončení reakce je možno požadovanou sloučeninu z reakční směsi izolovat. Ve stupni 3 je například možno postupovat tak, že se reakční směs neutralizuje, vlije se do vody, směs se extrahuje rozpouštědlem, nemísitelným s vodou, jako benzenem, etherem nebo ethylacetátem a pak se rozpouštědlo z extraktu oddestiluje. Získaný produkt je možno použít při následující reakci bez dalšího čištění, avšak je možno jej čistit různými chromatografickými postupy, překrystalováním a podobně. Ve stupních 11, 22 a 25 je například možno postupovat tak, že se výsledná látka odfiltruje a promyje se methylenchloridem.
Stupně 4 a 6
V těchto stupních je možno získat sloučeninu vzorce 2-6 nebo vzorce 2 reakcí sloučeniny vzorce 2-4 nebo 2-1 se sloučeninou vzorce 2-5, v němž Hal znamená atom halogenu, v přítomnosti inertního rozpouštědla a báze. Halogenidovou skupinou sloučeniny 2-5 může být atom chloru, bromu nebo jodu, s výhodou chloru nebo bromu.
Příkladem výhodného rozpouštědla může být aromatický uhlovodík jako benzen, toluen, nebo xylen, halogenovaný uhlovodík, jako dichlormethan, chloroform, tetrachlormethan, dichlorethan, chlorbenzen nebo dichlorbenzen, estery, jako ethylmravenčan, ethylacetát, propylacetát, butylacetát nebo diethylkarbonát, ethery, jako diethylether, diizopropylether, tetrahydrofuran, dioxan, dimethoxyethan nebo diethylenglykoldimethylether, ketony, jako aceton, methylethylketon, methylizobutylketon, izoforon nebo cyklohexanon, nitrosloučeniny, jako nitroethan
-68CZ 287050 B6 nebo nitrobenzen, nitrily, jako acetonitril nebo izobutyronitril, amidy, jako formamid, dimethylformamid, dimethylacetamid nebo triamid kyseliny hexanmethylfosforečné a sulfoxidy, jako dimethylsulfoxid nebo sulfolan, výhodné jsou zejména ethery, zvláště tetrahydrofuran, ketony, zvláště aceton, halogenované uhlovodíky, zvláště dichlormethan, amidy, zvláště DMF a aromatické aminy, zvláště pyridin.
Výhodnými bázemi jsou například organické báze, zvláště triethylamin, pyridin, Nmethylmorfolin, DBU a podobně, hydridy alkalických kovů, zvláště hydrid sodíku a uhličitany alkalických kovů, zvláště uhličitan sodný a lithný a v případě Z ve sloučenině vzorce 2-5 ve významu atomu křemíku je nejvýhodnější bází imidazol.
Reakční teplota není kritická, reakce probíhá při teplotě 0 až 100, s výhodou 20 až 60 °C.
Reakční doba se obvykle pohybuje v rozmezí 5 minut až 30 hodin. V případě, že se reakce provádí při teplotě 50 °C, je ukončena za 10 hodin.
Po ukončení reakce je možno požadovanou sloučeninu z reakční směsi izolovat například tak, že se reakční směs nejprve neutralizuje, pak se jakýkoliv přítomný nerozpustný podíl odfiltruje, k reakční směsi se přidá voda a s vodou nemísitelné organické rozpouštědlo, například ethylacetát, organická vrstva s obsahem požadované látky se oddělí, extrakt se promyje vodou, vysuší se bezvodým síranem hořečnatým a pak se rozpouštědlo oddestiluje. Takto získanou sloučeninu je možno v případě potřeby dále čistit běžnými postupy, například překrystalováním, opakovaným srážením, chromatografií a podobně.
Stupeň 5
V tomto stupni je možno připravit sloučeninu vzorce 2 tak, že se nechá reagovat sloučenina vzorce 2-6 s činidlem pro odstranění ochranné skupiny v inertním rozpouštědle.
1) V případě, že ochrannou skupinou na hydroxylové skupině v poloze 3'je silylová skupina, je možno ji snadno odstranit působením sloučeniny, schopné uvolnit fluoridový ion, například působením tetrabutylamoniumfluoridu.
Neexistuje žádné zvláštní omezení, týkající se povahy použitého rozpouštědla za předpokladu, že nemá nepříznivý vliv na průběh reakce. S výhodou je možno použít ethery, jako tetrahydrofuran nebo dioxan.
Reakční teplota není kritická, reakce se obvykle nechá probíhat při teplotě v rozmezí -30 až 100, s výhodou 0 až 30 °C.
Doba, nutná pro ukončení reakce je obvykle 5 minut až 30 hodin. V případě, že se reakce provádí při teplotě 20 °C, je ukončena do 10 hodin.
Po ukončení reakce je možno požadovanou sloučeninu z reakční směsi izolovat například neutralizací reakční směsi, odfiltrováním případného nerozpustného podílu, přidáním vody a s vodou nemísitelného organického rozpouštědla, například ethylacetátu, oddělením organické vrstvy s obsahem požadované sloučeniny, promytím extraktu vodou, jeho vysušením bezvodým síranem hořečnatým a podobně a nakonec oddestilováním rozpouštědla. Takto získaný produkt je možno čistit běžným způsobem, například překrystalováním, opakovaným srážením, chromatografií a podobně.
2) V případě, že ochrannou skupinou na hydroxylové skupině v poloze 3' je halogenalkoxykarbonylová skupina, je možno ji snadno odstranit působením práškového zinku.
-69CZ 287050 B6
Neexistuje žádné zvláštní omezení, týkající se povahy použitého rozpouštědla za předpokladu, že rozpouštědlo nemá nepříznivý vliv na průběh reakce. Příkladem výhodných rozpouštědel mohou být kyselina octová, alkoholy nebo směsi vody a jednoho nebo většího počtu těchto rozpouštědel.
Také reakční teplota není kritická, reakci je možno běžně provádět při teplotě v rozmezí 0 až 100 °C, výhodná je teplota místnosti.
Doba, jíž je zapotřebí pro ukončení reakce se obvykle pohybuje v rozmezí 5 minut až 30 hodin. V případě, že se reakce provádí při teplotě místnosti, je obvykle ukončena do doby 10 hodin.
Po ukončení reakce je možno požadovanou sloučeninu z reakční směsi izolovat. Je například možno postupovat tak, že se reakční směs nejprve neutralizuje nebo se odfiltruje jakýkoliv přítomný nerozpustný podíl, přidá se voda a s vodou nemísitelné organické rozpouštědlo, například ethylacetát, organická vrstva, která obsahuje požadovaný výsledný produkt se oddělí, extrakt se promyje vodou, vysuší se například bezvodým síranem hořečnatým a nakonec se rozpouštědlo oddestiluje. Takto získaný reakční produkt je možno dále čistit běžným způsobem, například překrystalováním, opakovaným srážením, chromatografickými postupy a podobně.
3) V případě, že ochrannou skupinou na hydroxylové skupině v poloze 3' je aralkyloxykarbonylová skupina, je možno ji běžně odstranit katalytickou redukcí nebo oxidací.
Neexistuje žádné zvláštní omezení, týkající se povahy katalyzátoru, použitelného pro redukci za předpokladu, že katalyzátor je běžně použitelný pro katalytickou redukci. Příkladem vhodných katalyzátorů mohou být paladium na aktivním uhlí, Raneyův nikl, oxid platičitý, platinová čerň, rhodium na oxidu hlinitém, kombinace trifenylfosfínu a chloridu rhodia a paladium na síranu bamatém.
Tlak vodíku, při němž se reakce nechá probíhat není zvlášť kritický, reakce se obvykle provádí při tlaku v rozmezí 0,1 až 1 MPa.
Reakční teplota a doba, jíž je zapotřebí pro ukončení reakce se může do značné míry měnit v závislosti na povaze použitých výchozích látek a použitého rozpouštědla, ale také na typu katalyzátoru a na ostatních reakčních podmínkách, obecně je však možno uvést, že reakce může probíhat při teplotě v rozmezí 0 až 100 °C a je obvykle ukončena v době 5 minut až 24 hodin.
Neexistuje žádné zvláštní omezení, týkající se povahy rozpouštědla, které je možno použít při odstranění ochranné skupiny oxidací za předpokladu, že rozpouštědlo nemá nepříznivý účinek na průběh reakce. Jako výhodná rozpouštědla je možno uvést směsi vody a jednoho nebo většího počtu organických rozpouštědel.
Příkladem výhodných organických rozpouštědel mohou být ketony, například aceton, halogenované uhlovodíky, například dichlormethan, chloroform nebo tetrachlormethan, nitrily, například acetonitril, ethery, například diethylether, tetrahydrofuran nebo dioxan, amidy, jako dimethylformamid, dimethylacetamid nebo triamid kyseliny hexamethylfosforečné a sulfoxidy, například dimethylsulfoxid.
Neexistuje žádné zvláštní omezení, týkající se použitého oxidačního činidla za předpokladu, že toto činidlo může být použito při běžné oxidaci. Výhodnými příklady těchto činidel mohou být persíran draselný, persíran sodný, amoniumceriumnitrát CAN a 2,3-dichlor-5,6-dikyano-pbenzochinon DDQ.
-70CZ 287050 B6
Reakční teplota a doba, jíž je zapotřebí pro ukončení reakce se může do značné míry měnit v závislosti na povaze výchozích látek a na povaze rozpouštědla a také na typu použitého katalyzátoru a na ostatních reakčních podmínkách, obecně je však možno reakci uskutečnit při teplotě v rozmezí 0 až 150 °C, reakce je obvykle ukončena v průběhu 10 minut až 24 hodin.
Ochrannou skupinu na hydroxylové skupině je možno také odstranit působením alkalických kovů, například kovového lithia nebo kovového sodíku v kapalném amoniaku nebo v alkoholech, například v methanolu nebo ethanolu při teplotě -78 až -20 °C.
Ochrannou skupinu je možno odstranit také použitím kombinace chloridu hlinitého a jodidu sodného nebo alkylsilylhalogenidů, například trimethylsilyljodidu v rozpouštědle.
Neexistuje žádné zvláštní omezení povahy použitého rozpouštědla za předpokladu, že rozpouštědlo nemá nepříznivý vliv na průběh reakce. Výhodnými rozpouštědly jsou například nitrily, například acetonitril, halogenované uhlovodíky, jako dichlormethan nebo chloroform a směsi dvou nebo většího počtu těchto rozpouštědel.
Reakční teplota a doba, jíž je zapotřebí k ukončení reakce se mění podle povahy výchozích látek, rozpouštědla a pole dalších reakčních podmínek, reakce běžně probíhá při teplotě v rozmezí 0 až 50 °C a je obvykle ukončena v průběhu 5 minut až 3 dnů.
V případě, že substrát obsahuje atom síry, je možno odstranění ochranných skupin s výhodou uskutečnit při použití kombinace chloridu hlinitého a jodidu sodného.
Po ukončení reakce je možno výsledný produkt z reakční směsi izolovat například tak, že se reakční směs neutralizuje nebo se odfiltruje případný nerozpustný podíl, přidá se voda a s vodou nemísitelné organické rozpouštědlo, například ethylacetát, organická vrstva s obsahem požadovaného výsledného produktu se oddělí, promyje se vodou, vysuší se například bezvodým síranem hořečnatým a nakonec se rozpouštědlo oddestiluje. Takto získaný produkt je v případě potřeby dále čištěn někteiým zběžných postupů, například překrystalováním, opakovaným srážením, chromatografickými postupy a podobně.
Stupně 7, 12,14, 17, 23, 26, 28, 30, 33 a 35
V těchto stupních se na CPG vázané oligodeoxyribonukleotidy vzorců 3,4a, 4b, 5, 6a až 6d, 7a a 7b připravují při použití na CPG vázaných nukleosidů, obsahujících 3'-koncové nukleosidy účinného řetězce bází opakovaným prodloužením řetězce DNA pomocí syntetizátoru DNA, nakonec se připraví krátký fragment nukleotidu z 5'-zakončení účinného řetězce.
Prodloužení řetězce DNA pomocí syntetizátoru DNA bude vysvětleno na „fosforamiditovém“ postupuje však zřejmé, že tato metoda je uvedena pouze pro ilustraci a nikoliv pro omezení.
Ve stupni 7 se zpracovává běžně dodávaná sloučenina vzorce 3-1, kterou je na CPG-vázaný D působením činidla pro odstranění ochranné skupiny DMT na systetizátoru DNA, čímž se odstraní 5'-terminální skupina DMT, načež se provádí kompenzace s nukleotidovou jednotkou, běžně dodávanou pro syntetizátor DNA za vzniku triesteru kyseliny fosforité, který se pak oxiduje na triester kyseliny fosforečné vhodným oxidačním činidlem. Po získání krátkého fragmentu nukleotidu 5'-zakončení účinného řetězce opakováním těchto postupů se připraví na CPG-vázaný ODN vzorce 3 s 5'-terminální skupinou DMT. Na CPG-vázaný ODN, s požadovaným řetězcem nukleotidových bází, jehož 5'-terminální zakončení je chráněno skupinou DMT, je možno získat podle publikace H. Koster a další, Nucleic Acid. Res., 12, 4539, 1984 nebo podle modifikovaného postupu při použití syntetizátoru na bázi fosforamiditového postupu, jako je Model 3908 (Applied Biosystems lne.) nebo Cyclen Plus (Milligen/biosearch).
-71CZ 287050 B6
Základní skupinou nukleotidové jednotky pro použití při přípravě ODN je skupina, chráněná acylovou skupinou. Výhodnou acylovou skupinou je benzoylová skupina v případě, že základní skupinou je A nebo C a izobutyrylová skupina v případě G.
Příkladem látky kyselé povahy pro použití jako katalyzátor při kondenzační reakci jsou například tetrazoly, s výhodou tetrazol.
Neexistuje žádné zvláštní omezení povahy použitého rozpouštědla za předpokladu, že rozpouštědlo nemá nepříznivý účinek na průběh reakce. Výhodnými rozpouštědly jsou acetonitril a tetrahydrofuran.
Reakce se provádí při teplotě -30 až 50 °C, obvykle při teplotě místnosti.
Doba, jíž je zapotřebí pro ukončení reakce se mění v závislosti na reakční teplotě, obvykle však reakce trvá jednu minutu až 20 hodin. V případě, že se provádí při teplotě místnosti, je ukončena do 10 minut.
Neexistuje žádné zvláštní omezení povahy použitého oxidačního činidla za předpokladu, že toto činidlo může být použito při běžných oxidačních postupech. Příkladem výhodného oxidačního činidla mohou být činidla na bázi kovů, včetně manganu a jeho oxidů, jako manganistan draselný, nebo oxid manganičitý, oxidy ruthenia, jako oxid rutheničelý, sloučeniny selenu, jako oxid seleničitý, sloučeniny železa, jako chlorid železitý, sloučeniny osmia, jako oxid osmičelý, sloučenin stříbra, jako oxid stříbrný, sloučeniny mědi, jako octan měďnatý, oxidy olova, jako oxid olovnatý nebo olovičitý, sloučeniny chrómu, jako chroman draselný, komplex síranu chromitého a kyseliny sírové nebo kyseliny chromové a pyridinu, sloučeniny ceru, jako ceriumamoniumnitrid CAN, anorganická oxidační činidla včetně halogenů, jako molekuly chloru, bromu nebo jodu, jodistanu, jako jodistan sodný, ozon, peroxid vodíku, kyselina dusitá, chlornan draselný nebo sodný, soli kyseliny persírové, jako persíran draselný nebo sodný a také organická oxidační činidla včetně činidel, užitých při oxidaci DMSO (komplex dimethylsulfoxidu a dicyklohexylkarbodiimidu, oxalylchlorid, anhydrid kyseliny octové nebo oxid fosforečný nebo komplex pyridinu a oxidu sírového), peroxidy, například tercbutylhydroperoxid, stabilní kationty, například trifenylmethylový kation, sukcinimidy, jako Nbromsukcinimid, chlornany, jako terc.butylhydrochlorid, deriváty azodikarboxylové kyseliny, například azodikarboxyláty, kombinace trifenylfosfinu a disulfidů, například dimethyldisulfídu nebo difenyldisulfidu, estery kyseliny dusité, jako methylnitrit a tetrahalogenované uhlovodíky, jako tetrabrommethan, chinony, například 2,3-dichlor-5,6-dikyano-p-benzochinon DDQ, výhodnýjejod.
Neexistuje žádné zvláštní omezení, týkající se povahy použitého rozpouštědla za předpokladu, že rozpouštědlo nemá nepříznivý vliv na průběh reakce. Příkladem výhodných rozpouštědel mohou být například aromatické uhlovodíky, jako benzen, toluen nebo xylen, halogenované uhlovodíky, například dichlormethan nebo chloroform, ethery, jako ether, tetrahydrofuran, dioxan nebo dimethoxyethan, amidy, jako dimethylformamid, dimethylacetamid nebo triamid kyseliny hexamethylfosforečné, sulfoxidy, například dimethylsulfoxid, alkoholy, například methanol, ethanol, n-propanol, izopropanol, n-butanol, izobutanol nebo izoamylalkohol, zředěné kyseliny, jako vodná kyselina sírová, zředěné báze, například vodný roztok hydroxidu sodného, voda, ketony, například aceton nebo methylethyketon, heterocyklické aminy, jako pyridin a nitrily, jako acetonitril, výhodné jsou heterocyklické aminy, zvláště pyridin, nitrily, zvláště acetonitril, ethery, zvláště tetrahydrofuran a také halogenované uhlovodíky, zvláště dichlormethan.
Reakce se provádí při teplotě -50 až 100 °C. Doba, jíž je zapotřebí pro ukončení reakce se může měnit v závislosti na reakční teplotě a také na povaze použitých výchozích látek a rozpouštědla, obecně je možno uvést, že se reakce provádí při teplotě -50 až 100 °C a je obvykle ukončena
-72CZ 287050 B6 v průběhu 30 minut až 15 hodin. Svrchu popsanou oxidační reakci je možno urychlit přidáním katalyzátoru pro přenos fáze, například triethylbenzylamoniumchloridu nebo tributylbenzylamoniumbromidu.
Stupně 12, 14, 17, 23, 26, 28, 30, 33 a 35 se provádějí obdobným způsobem.
Stupně 9 a 20
V těchto stupních je možno připravit hemiester dikarboxylové kyseliny reakcí volné hydroxylové skupiny ve sloučenině vzorce 4-2 nebo 6-2 s anhydridem dikarboxylové kyseliny, například anhydridem kyseliny jantarové v přítomnosti bazického katalyzátoru.
Neexistuje žádné zvláštní omezení povahy použité dikarboxylové kyseliny. Výhodné dikarboxylové kyseliny obsahují 2 až 10 atomů uhlíku, nejvýhodnější kyselinou je kyselina jantarová nebo glutarová. Příkladem vhodných bazických katalyzátorů mohou být aminopyridiny, jako dimethylaminopyridin nebo pyrrolidinpyridin, terciární aminy, jako trimethylamin nebo triethylamin, hydrogenuhličitan sodný a uhličitany alkalických kovů, jako uhličitan draselný, nej výhodnějšími látkami jsou dimethylaminopyridin nebo pyrrolidinpyridin.
Neexistuje žádné zvláštní omezení, týkající se povahy použitého rozpouštědla za předpokladu, že rozpouštědlo nemá nepříznivý vliv na průběh reakce a je schopné alespoň do určité míry rozpouštět výchozí látky. Příkladem výhodných rozpouštědel mohou být aromatické uhlovodíky, jako benzen, toluen nebo xylen, halogenované uhlovodíky, jako dichlormethan nebo chloroform, ethery, jako diethylether, tetrahydrofuran, dioxan nebo dimethoxyethan, amidy, jako dimethylformamid, dimethylacetamid nebo triamid kyseliny hexamethylfosforečné, sulfoxidy, například dimethylsulfoxid, alkoholy, jako methanol, ethanol, n-propanol, izopropanol, nbutanol, izobutanol nebo izoamylalkohol, zředěné kyseliny, jako vodná kyselina sírová, zředěné báze, jako vodný roztok hydroxidu sodného, voda, ketony, jako aceton nebo methylethyketon, heterocyklické aminy, jako pyridin a nitrily, jako acetonitril, zvláště výhodné jsou nitrily, zejména acetonitril, ethery, zvláště tetrahydrofuran a halogenované uhlovodíky, zvláště dichlormethan.
Reakce se provádí při teplotě -50 až 100 °C. Doba jíž je zapotřebí pro ukončení reakce se mění převážně v závislosti na reakční teplotě a na povaze výchozích látek a použitého rozpouštědla, reakce je však obvykle ukončena v rozmezí 30 minut až 15 hodin.
Stupně 10 a 21
V těchto stupních je možno získat požadované produkty 4-5 a 6-6 tak, že se nechá reagovat hemiester kyseliny jantarové 4-3 a 6-4, připravený ve stupních 9 a 20 s fenolem, například pentachlorfenolem v přítomnosti kondenzačního činidla za vzniku aktivovaného esteru a tento produkt se pak nechá reagovat s CPG-aminem vzorce 4-4 a 6-5 v přítomnosti báze.
Neexistuje žádné zvláštní omezení povahy užitých fenolů v průběhu této reakce, výhodnými fenoly jsou pentachlorfenol a 4-nitrofenol.
Neexistuje rovněž žádné zvláštní omezení povahy použitého rozpouštědla za předpokladu, že rozpouštědlo nemá nepříznivý vliv na průběh reakce a alespoň do určité míry rozpouští výchozí látky. Jako příklady vhodných rozpouštědel je možno uvést amidy, jako dimethylformamid, dimethylacetamid nebo triamid kyseliny hexamethylfosforečné, sulfoxidy, jako dimethylsulfoxid, ketony, jako aceton nebo methylethyketon, heterocyklické aminy, jako pyridin a nitrily, například acetonitril, výhodné jsou zejména amidy, jako dimethylformamid.
-73CZ 287050 B6
Povaha použité báze rovněž není omezena za předpokladu, že bázi je možno užít v běžných reakcích jako bazickou látku. Jako příklady výhodných bází pro toto použití je možno uvést některé organické báze, například triethylamin, tríbutylamin, diizopropylethylamin, N-methylmorfolin, pyridin, 4-(N,N-dimethylamino)pyridin, Ν,Ν-dimethylanilin, N,N-diethylanilin, 1,55 diazabicyklo/4,3,0/non-5-en, l,4-diazabicyklo/2,2,2/oktan DABCO nebo 1,8-diazabicyklo /5,4,0/undec-7-en DBU, zvláště výhodné jsou organické báze a z nich zvláště triethylamin, pyridin, N-methylmorfolin a DBU.
Reakce se provádí při teplotě v rozmezí -50 až 100 °C. Doba, jíž je zapotřebí k ukončení reakce io se může měnit převážně v závislosti na použité reakční teplotě a také na povaze použitých výchozích látek a rozpouštědla, avšak v případě, že se reakce provádí při teplotě místnosti, je obvykle ukončena v průběhu 30 až 50 hodin.
Stupně 13 a 32
Ve stupni 13 se připravuje na CPG-vázaný nukleosid 4-7 s obsahem thioátové skupiny tak, že se uvede do reakce sloučenina vzorce 4-6, připravená ve stupni lis běžně dodávaným 5'-OOMT-nukleosid-3'-fosforamiditem jako reakčním činidlem v syntetizátoru DNA a pak se produkt uvede do reakce s činidlem pro zavedení thioátové skupiny.
Neexistuje žádné zvláštní omezení povahy použitého činidla pro zavedení thioátové skupiny za předpokladu, že je schopno uvedenou skupinu vytvořit reakcí s trojvazným fosforem. Příkladem výhodných činidel pro toto použití mohou být síra, tetraethylthiuramdisulfid TETD (Applied Biosystems lne.) a Beaucageovo reakční činidlo (MilliGen/Biosearch). Požadovaná sloučenina 25 vzorce 4-7, v níž je 3'-koncový nukleosid účinného řetězce bází vázán na CPG pomocí thioátové skupiny je možno připravit působením tetraethylthiuramdisulfidu TETD způsobem podle Tetrahedron Letters, 32, 3005, 1991 nebo působením Beaucageova činidla způsobem podle J. Am. Chem. Soc., 112, 1253, 1990 nebo modifikací těchto postupů.
Ve stupni 32 je možno získat na CPG-vázaný nukleosid 7-7 jako triester kyseliny fosforečné nebo s obsahem thioátové skupiny reakcí sloučeniny 7-3 s fosforamiditovým reakčním činidlem, pak se sloučenina zpracovává běžným způsobem nebo činidlem pro zavedení thioátové skupiny.
Stupeň 15
Ve stupni 15 je možno připravit na CPG-vázanou sloučeninu 5-3 sdiesterovou skupinou fosfonové kyseliny reakcí na CPG-vázané sloučeniny 5-1, zbavené skupiny DMT, získané analogickým způsobem pro výrobu na CPG-vázané sloučeniny 4-6, s běžně dodávaným monoesterem fosfonové kyseliny 5-2 v přítomnosti kondenzačního činidla a činidla pro 40 odštěpení kyselé funkce. Neexistuje žádné zvláštní omezení, týkající se povahy kondenzačního činidla za předpokladu, že činidlo může vytvořit anhydrid kyseliny s monoesterem kyseliny fosfonové. Příkladem výhodných kondenzačních činidel mohou být adamantan-1karbonylchlorid nebo pivaloylchlorid. Neexistuje rovněž žádné zvláštní omezení povahy použitého deacidifíkačního činidla za předpokladu, že je toto činidlo možno použít v případě, že 45 se acylace provádí s použitím chloridu kyseliny. Příkladem výhodných činidel tohoto typu mohou být aromatické aminy, jako pyridin. Neexistuje rovněž žádné zvláštní omezení povahy použitého rozpouštědla za předpokladu, že rozpouštědlo nemá nepříznivý vliv na průběh reakce. Příkladem výhodných rozpouštědel mohou být nitrily, například bezvodý acetonitril. V případě, že se reakce provádí při teplotě místnosti, je ukončena v průběhu 5 až 60 minut.
-74CZ 287050 B6
Stupeň 16
V tomto stupni se mění diesterová skupina fosfonové kyseliny ve sloučenině 5-3, vázané na DPG na fosforamidátovou skupinu reakcí s alkylaminem a tetrachlormethanem. Jako alkylamin se v tomto případě použije požadovaný výsledný alkylamin. Pokud jde o rozpouštědlo, nepodléhá jeho povaha zvláštnímu omezení za předpokladu, že rozpouštědlo nemá nepříznivý vliv na průběh reakce. Příkladem výhodných rozpouštědel mohou být běžná nepolární rozpouštědla jako tetrachlormethan. Reakční teplota není kritická, reakce dobře probíhá při teplotě -50 až 100 °C. V případě, že se reakce provádí při teplotě místnosti, je ukončena v průběhu 1 až 10 hodin.
Stupně 19 a 36
V těchto stupních je možno připravit deriváty kyseliny 3'-fosforité vzorce 6-3 a 8 tak, že se nechá reagovat sloučenina vzorce 6-2 a 2 s chlorfosforamiditem 6-3', který se užije jako fosfítylační činidlo v přítomnosti inertního rozpouštědla a deacidifikační činidla. Symbol U, použitý v definici sloučeniny 6-3' znamená dialkylaminoskupinu, například dimethylaminoskupinu nebo diizopropylaminoskupinu nebo heterocyklickou skupinu, obsahující v kruhu 1 nebo 2 atomy kyslíku a/nebo dusíku. Symbol V, užitý v definici sloučeniny 6-3' může být jakákoliv skupina za předpokladu, že je možno ji odstranit po vytvoření fosfátové vazby. Příkladem těchto skupin jsou s výhodou nižší alkoxyskupiny, jako methoxyskupina a kyanoalkyloxyskupiny, jako kyanoethyloxyskupina. Sloučeninou 6-3 jsou zvláště fosfiny, například chlormorfolinmethoxyfosfin, chlormorfolinkyanoethoxyfosfm, chlordimethylaminomethoxyfosfin, chlordimethylaminokyanoethoxyfosfin, chlordiizopropylaminomethoxyfosfin a chlordiizopropylaminokyanoethoxyfosfin, výhodnými sloučeninami jsou zejména chlormorfolinmethoxyfosfm, chlormorfolinkyanoethoxyfosfm, chlordiizopropylaminomethoxyfosfm a chlordiizopropylaminokyanoethoxyfosfin.
Neexistuje žádné zvláštní omezení povahy použitého rozpouštědla za předpokladu, že nemá nepříznivý vliv na průběh reakce. Výhodné jsou etheiy, jako tetrahydrofuran, diethylether nebo dioxan. Příklady deacidifikačních činidel zahrnují heterocyklické aminy, jako pyridin nebo dimethylaminopyridin a alifatické aminy, jako trimethylamin, triethylamin nebo diizopropylethylamin, výhodné jsou alifatické aminy, zvláště diizopropylethylamin.
Reakční teplota není kritická, reakce se obvykle provádí při teplotě -50 až +50 °C, s výhodou při teplotě místnosti.
Doba, jíž je zapotřebí pro ukončení reakce se může měnit v závislosti na výchozích látkách a reakčním činidle a také na reakční teplotě, obvykle je však reakce ukončena v průběhu 5 minut až 30 hodin. V případě, že se reakce provádí při teplotě místnosti, je obvykle ukončena do 30 minut.
Požadovanou sloučeninu je možno z reakční směsi izolovat například tak, že se reakční směs neutralizuje, případný nerozpustný podíl se odfiltruje, přidá se voda a s vodou nemísitelné rozpouštědlo, například ethylacetát, organická vrstva, která obsahuje požadovaný výsledný produkt se oddělí, extrakt se promyje vodou, vysuší se například bezvodým síranem hořečnatým a nakonec se rozpouštědlo oddestiluje.
Získaný výsledný produkt je v případě potřeby možno dále čistit některým z běžných postupů, například překrystalováním, opakovaným srážením, některých z chromatografických postupů a podobně.
-75CZ 287050 B6
Stupeň 24
Podle tohoto stupně je možno připravit sloučeninu 6-8, vázanou na CPG a obsahující triesterovou skupinu kyseliny fosforečné analogickým způsobem jako při provádění postupu, který byl popsán ve stupni 7, s tím rozdílem, že se užije sloučenina 6-3 místo nukleosidfosforamiditu, užitého jako nukleotidová jednotka v syntetizátoru DNA.
Stupně 27 a 29
V těchto stupních je možno získat sloučeniny 6-10 a 6-11, vázané na CPG a obsahující dvě nebo tři triesterové skupiny kyseliny fosforečné, jako výchozí látka se užije sloučenina 6-9, vázaná na CPG, připravená ve stupni 25, postup se provádí způsobem, který byl popsán ve stupni 24.
Stupeň 31
V tomto stupni je možno připravit sloučeninu 7-3, vázanou na CPG a obsahující 4,4'dimethoxytrityloxyethylsulfonylethoxyskupinu tak, že se na běžně dodávanou sloučeninu 7-2, vázanou na CPG a zbavenou skupiny 5-DMT působí (2-kyanoethoxy)-2-/2'-0-(4,4'dimethoxytrityloxyethyl)sulfonyl/ethoxy-N,N-diizopropylaminofosfinem vzorce 7-1 podle publikace T. Hom a další, Tetrahedron Letters, 27, 4705, 1986 obdobným způsobem jako ve stupni 24.
Stupeň 34
V tomto stupni je možno získat sloučeninu 7-5, vázanou na CPG tak, že se odstraní skupina DMT ze sloučenina 7-3, vázané na CPG a připravené ve stupni 31 s následnou kondenzací s nukleotidem 7-4 se skupinou DMT v poloze 5' a s alkylfosfátovou, fenylfosfátovou, alkylfosfonátovou nebo fenylfosfonátovou skupinou v poloze 3' při použití kondenzačního činidla.
Neexistuje žádné zvláštní omezení povahy použitého rozpouštědla v případě, že rozpouštědlo nemá nepříznivý vliv na průběh reakce. Výhodnými rozpouštědly jsou aromatické aminy, například pyridin. Z kondenzačních činidel padá v úvahu dicyklohexylkarbodiimid DCC, mesitylensulfonylchlorid Ms-Cl, triizopropylbenzensulfonylchlorid, dále mesitylensulfonyltriazol MST, mesitylensulfonyl-3-nitrotriazol MSNT, triizopropylbenzensulfonyltetrazol TPSTe, triizopropylbenzensulfonylnitroimidazol TPS-NI a triizopropylbenzensulfonylpyridyltetrazol, výhodnými látkami jsou MSNT, TPS-Te a TPS-NI.
Reakční teplota není kritická, obvykle se reakce provádí při teplotě v rozmezí -10 až 100 °C. Doba, jíž je zapotřebí pro ukončení reakce závisí na povaze použitého rozpouštědla a na reakční teplotě. V případě, že se reakce provádí při teplotě místnosti při použití pyridinu jako rozpouštědla, je ukončena do 30 minut.
Stupeň 37
V tomto stupni je možno připravit výsledný produkt vzorce 1 kondenzací sloučeniny vzorce 3, připravené ve stupni 36 s ODN, vázaným na CPG, vzorce 3, 4a, 4b, 5, 6a až 6d, 7a nebo 7b, tato látka se syntetizuje v syntetizátoru DNA a odstraní se pouze 5'-terminální skupina DMT při použití kyselého katalyzátoru za vzniku fosfitového triesteru, načež se tento materiál oxiduje při použití příslušného oxidačního činidla za vzniku triesteru kyseliny fosforečné, který se odštěpí od CPG, ochranné skupiny se odstraní a produkt se čistí.
-76CZ 287050 B6
Kyselým katalyzátorem, použitým při kondenzační reakci mohou být různé látky kyselé povahy, například tetrazoly, s výhodou tetrazol.
Neexistuje žádné zvláštní omezení, týkající se povahy použitého oxidačního činidla za předpokladu, že činidlo je možno použít při oxidačních reakcích. Příkladem výhodných oxidačních činidel mohou být oxidy kovů, například oxid mangan ičitý a další sloučeniny kovů, například manganistan draselný, oxidy ruthenia, například oxid rutheničelý, oxidy selenu, jako oxid seleničitý, sloučeniny železa, jako chlorid železitý, sloučeniny osmia, jako oxid osmičelý, sloučeniny stříbra, jako oxid stříbrný, měďnaté sloučeniny, například octan měďnatý, oxidy olova, například oxid olovičitý nebo tetraoxid olova, deriváty kyseliny chromové, například chroman draselný, komplex kyseliny chromové a kyseliny sírové nebo komplex kyseliny chromové a pyridinu a také sloučeniny ceru, například ceiumamonimnitrát CAN, dále je možno použít také anorganická oxidační činidla včetně molekul halogenů, například molekul chloru, bromu nebo jodu, jodistany, jako jodistan sodný, ozon, peroxid vodíku, deriváty kyseliny dusité, jako samotnou kyselinu dusitou, deriváty kyseliny chlorité, jako chloritan sodný, persírany, například persíran draselný nebo sodný, použít je možno také organická oxidační činidla, například činidla, užívaná při oxidaci typu DMSO (kombinace dimethylsulfoxidu a dicyklohexykarbodiimidu, oxalylchloridu, anhydridu kyseliny octové a chloridu fosforečného nebo komplex pyridinu a anhydridu kyseliny sírové, peroxidy, například terc.butylhydroperoxid, stabilní kationty, například trifenylmethylový kation, sukcinimidy, jako N-bromsulcinimid, chlornany, jako terc.butylhypochlorit, deriváty azodikarboxylové kyseliny, například azodikarboxyláty, disulfidové sloučeniny, jako dimethyldisulfid, difenyldisulfid nebo dipyryldisulfid, zvláště v kombinaci s trifenylfosfínem, nitrity, zvláště methylnitrit, tetrahalogenované sloučeniny, jako tetrabrommethan a chinonové deriváty, jako 2,3-dichlor-5,6dikyano-p-benzochinon DDQ, zvláště výhodný je jod.
Neexistuje žádné zvláštní omezení týkající se použitého rozpouštědla za předpokladu, že nemá nepříznivý vliv na průběh reakce a že je schopné alespoň do určité míry rozpouštět výchozí materiály. Příkladem vhodných rozpouštědel mohou být aromatické uhlovodíky, například benzen, toluen nebo xylen, halogenované uhlovodíky, například dichlormethan nebo chloroform, ethery, například diethylether, tetrahydrofuran, dioxan nebo dimethoxyethan, amidy, například dimethylformamid, dimethylacetamid nebo triamid kyseliny hexamethylfosforečné, sulfoxidy, například dimethylsulfoxid, alkoholy, například methanol, ethanol, n-propanol, izopropanol, nbutanol, izobutanol nebo izoamylalkohol, zředěné kyseliny, například vodná kyselina sírová, zředěné báze, například vodný roztok hydroxidu sodného, voda, ketony, například aceton nebo methylethylketon, heterocyklické aminy, například pyridin, nitrily, například acetonitril, zvláště vhodné jsou heterocyklické aminy, zejména pyridin, nitrily, zvláště acetonitril, etheiy, zvláště tetrahydrofuran a halogenované uhlovodíky, zvláště dichlormethan.
Reakce se obvykle provádí při teplotě v rozmezí -50 až 100 °C. Doba, jíž je zapotřebí pro ukončení reakce se mění převážně v závislosti na použité reakční teplotě a také na povaze použitých výchozích materiálů a může se pohybovat v rozmezí 30 minut až 15 hodin. Oxidační reakci, tak jak byla svrchu popsána, je možno urychlit tak, že se do reakční směsi přidá katalyzátor pro přenos fáze, například triethylbenzylamoniumchlorid nebo tributylbenzylamoniumbromid.
Stupeň 38
V tomto stupni je možno připravit mononukleotid vzorce 9 jako meziprodukt tak, že se uvede do reakce sloučenina obecného vzorce 2 s fosforylačním činidlem, například s bistriazolidem v přítomnosti inertního rozpouštědla, k reakční směsi se přidá voda a směs se zpracovává běžným způsobem.
-77CZ 287050 B6
Neexistuje žádné zvláštní omezení, týkající se povahy použitého rozpouštědla za předpokladu, že rozpouštědlo nemá nepříznivý vliv na průběh reakce. Rozpouštědlo se obvykle volí ze skupiny aromatických aminů, například je možno užít pyridin. Neexistuje rovněž žádné zvláštní omezení, týkající se povahy symbolu V, užitého v definici fosforylačního činidla za předpokladu, že tuto skupinu je možno odstranit za podmínek, při nichž dochází k odstranění ochranné skupiny po ukončení kondenzační reakce ve stupni 39. Symbol V obvykle znamená o-chlorfenoxyskupinu.
Přestože reakční teplota není zvláště kritická, provádí se reakce obvykle při teplotě v rozmezí -20 až 100 °C, nejčastěji při teplotě místnosti. Doba, jíž je zapotřebí pro ukončení reakce se bude měnit v závislosti na povaze použitého rozpouštědla a na reakční teplotě. V případě, že se reakce provádí při teplotě místnosti a při použití pyridinu jako rozpouštědla, je obvykle ukončena v průběhu 1 hodiny.
Stupeň 39
V tomto stupni je možno připravit výsledný produkt vzorce 1 kondenzací mononukleotidu 9 s ODN, vázaným na CPG, vzorce 3, 4a, 4b, 5, 6a až 6d, 7a nebo 7b, který se syntetizuje na syntetizátoru DNA, načež se odstraní 5'-terminální skupina DMT, sloučenina obsahuje ochranné skupiny v základním řetězci a na zbytku kyseliny fosforečné, reakce se provádí v přítomnosti kondenzačního činidla za vzniku triesteru kyseliny fosforečné, pak se sloučenina odštěpí od CPG běžným způsobem, odstraní se ochranná skupina a materiál se čistí. Neexistuje žádné zvláštní omezení, týkající se povahy použitého rozpouštědla, za předpokladu, že rozpouštědlo nemá žádný nepříznivý vliv na průběh reakce.
Jako příklady kondenzačních činidel je možno uvést dicyklohexylkarbodiimid DCC, mesitylensulfonylchlorid Ms-Cl, triizopropylbenzensulfonylchlorid, mesitylensulfonyltriazol MST, mesitylensulfonyl-3-nitrotriazol MSNT, triizopropylbenzensulfonyltetrazol TPS-Te, triizopropylbenzensulfonylnitroimidazol TPS-NI a triizopropylbenzensulfonylpyridyltetrazol, výhodné jsou zejména MSNT, TPS-Te a TPS-NI.
Reakční teplota není příliš kritická, obvykle se reakce provádí při teplotě v rozmezí -10 až 100 °C, nejčastěji při teplotě místnosti. Doba, jíž je zapotřebí pro ukončení reakce se bude měnit v závislosti na povaze použitého rozpouštědla a na reakční teplotě. V případě, že se reakce provádí při teplotě místnosti a při použití pyridinu jako rozpouštědla, je obvykle ukončena v průběhu 30 minut.
Odštěpení ODN z nosiče CPG a odstranění ochranných skupin s výjimkou 5'-terminálního substituentu je možno uskutečnit známým způsobem například podle J. Am. Chem. Soc. 103, 3185, 1981. Reakční směs sobsahem sloučenin obecného vzorce 1 se čistí některým zběžných postupů, například chromatograficky včetně chromatografie v reverzní fázi a chromatografie na iontoměniči a vysokotlaké kapalinové chromatografie za vzniku čistých sloučenin obecného vzorce 1.
Stupeň 40
V tomto stupni se tris(l,2,4-triazolyl)fosfit, předem připravený z chloridu fosforitého a 1,2,4triazolu způsobem podle publikace B. C. Freohler, P. G. Ng a M. D. Matteucci, Nucleic Acids Res., 14, 5399, 1986 nechá reagovat se sloučeninou vzorce 2 v inertním rozpouštědle, reakce se zastaví přidáním vody a reakční směs se zpracuje za vzniku nukleosid-3'-H-fosfonátu vzorce 10. Neexistuje žádné zvláštní omezení, týkající se povahy použitého rozpouštědla za předpokladu, že nemá nepříznivý vliv na průběh reakce. Výhodným rozpouštědlem jsou halogenované uhlovodíky, například dichlormethan. Reakční teplota není kritická, obvykle se reakce provádí při teplotě v rozmezí -20 až 100 °C, nejčastěji při teplotě místnosti.
-78CZ 287050 B6
Doba, jíž je zapotřebí pro ukončení reakce se rovněž může široce měnit v závislosti na povaze požitého rozpouštědla a na zvolené reakční teplotě. V případě, že se reakce provádí při teplotě místnosti a při použití dichlormethanu jako rozpouštědla, je obvykle ukončena v průběhu 30 minut.
Stupeň 41
Podle tohoto stupně je možno připravit výsledný produkt vzorce 1 tak, že se uvede do reakce nukleosid-3'-H-fosfonát vzorce 10, připravený ve stupni 40 s ODN, vázaným na CPG, vzorce 3, 4a, 4b, 5, 6a až 6d, 7a nebo 7b, který byl syntetizován na syntetizátoru DNA, načež byla odstraněna pouze 5'-terminální skupina DMT, produkt obsahuje ochranné skupiny v základním řetězci na zbytku kyseliny fosforečné, reakce se provádí při použití kondenzačního činidla, například pivaloylchloridu v přítomnosti deacidifikačního činidla za vzniku diesteru Hfosfonové kyseliny, tato skupina se pak převádí na diesterovou skupinu kyseliny fosforečné při použití oxidačního činidla, načež se ODN odštěpí z nosiče CPG a současně se odstraní ochranné skupiny za bazických podmínek a nakonec se výsledný produkt čistí. Neexistuje žádné zvláštní omezení, týkající se povahy použitého rozpouštědla za předpokladu, že rozpouštědlo nemá žádný nepříznivý vliv na průběh reakce. Výhodným rozpouštědlem je vodný acetonitril. Jako příklady kondenzačních činidel je možno uvést chlorid fosforečný a další chloridy kyselin, s výhodou pivaloylchlorid.
Neexistuje žádné zvláštní omezení, týkající se povahy oxidačního činidla, užitého pro oxidaci zbytku kyseliny H-fosfonové na ODN na diesterovou skupinu kyseliny fosforečné za předpokladu, že činidlo je možno použít k provádění oxidačních reakcí. Jako příklad vhodného oxidačního činidla je možno uvést oxidy kovů včetně oxidu manganičitého a další sloučeniny kovů, například manganistan draselný, oxidy ruthenia, například oxid rutheničelý, oxidy selenu, například oxid seleničitý, sloučeniny železa, například chlorid železitý, sloučenina osmia, jako oxid osmičelý, sloučeniny stříbra, například oxid stříbrný, měďnaté sloučeniny, například octan měďnatý, oxidy olova, jako oxid olovičitý nebo tetraoxid olova, deriváty kyseliny chromové, jako chroman draselný, komplex kyseliny chromové a kyseliny sírové nebo komplex kyseliny chromové a pyridinu a sloučeniny ceru, například ceriumamoniumnitrát CAN, z anorganických oxidačních činidel je možno uvést také molekuly halogenů, jako molekuly chloru, bromu nebo jodu, jodistany, například jodistan sodný, ozon, peroxid vodíku, deriváty kyseliny dusité, jako samotnou kyselinu dusitou, deriváty kyseliny chlorité, jako chloritan sodný a persírany, jako persíran draselný nebo persíran sodný. Z organických oxidačních činidel je možno užít reakční činidla, užívaná spolu s DMSO při oxidačních reakcích (kombinace dimethylsulfoxidu a dicyklohexylkarbodiimidu, oxalylchloridu, anhydridu kyseliny octové nebo chloridu fosforečného nebo komplex pyridinu a anhydridu kyseliny sírové, peroxidy, jako terc.butylhydroperoxid, stabilní kationty, jako trifenylmethylový kation, sukcinimidy, jako N-bromsulcinimid, deriváty kyseliny chlomé, jako terc.butylhypochlorid, deriváty azodikarboxylové kyseliny, jako azodikarboxyláty, kombinace disulfidů s dalšími látkami, například kombinace dimethyldisulfídu, difenyldisulfidu nebo dipyridyldisulfidu s trifenylfosfinem, nitrity, jako methylnitrit, tetrahalogenované sloučeniny, jako tetrabrommethan a chinonové sloučeniny, například 2,3-dichlor-5,6-dikyano-p-benzochinon DDQ, výhodný je zejména jod.
Z deacidifikačních činidel pro uvedené použití je možno uvést heterocyklické aminy, například pyridin nebo dimethylaminopyridin a alifatické aminy, jako trimethylamin, triethylamin nebo diizopropylethylamin, výhodné jsou alifatické aminy a zvláště diizopropylethylamin. Reakční teplota není kritická, reakci je možno provést při teplotě -50 až 50 °C, nejčastěji se reakce provádí při teplotě místnosti.
-79CZ 287050 B6
Doba, jíž je zapotřebí pro ukončení reakce se může měnit v závislosti na povaze výchozích látek a na povaze rozpouštědla a také na reakční teplotě, obvykle trvá reakce 5 minut až 30 hodin.
V případě, že se reakce provádí při teplotě místnosti, je obvykle ukončena v průběhu 30 minut.
Odštěpení ODN z nosiče CPG a odstranění ochranných skupin s výjimkou 5'-terminálního substituentu je možno uskutečnit známým způsobem, například podle J. Am. Chem. Soc., 103, 3185, 1981.
Reakční směs obsahující sloučeniny obecného vzorce 1 se čistí běžnými čisticími postupy, 10 například chromatografíí v reverzní fázi, chromatografíí na iontoměniči a vysokotlakou kapalinovou chromatografíí za získání čistých produktů vzorce 1.
Podstatu vynálezu tvoří také nový způsob syntézy oligodeoxyribonukleotidů oligodeoxyribonukleotidových derivátů. Nové oligodeoxyribonukleotidy vzorce 11, připravené tímto novým 15 postupem typicky zahrnují nové sloučeniny obecného vzorce 1. Mimoto tvoří součást podstaty vynálezu také nové meziprodukty, které je při tomto postupu možno použít, jak bude dále uvedeno.
V následujícím popisu reakcí se užívá pro skupiny substituentů různých definicí, avšak je 20 zřejmé, že jednotlivé skupiny substituentů si odpovídají. Je například zřejmá podobnost mezi skupinou substituentů RiR2R3Z-, tak jak se tato skupina uvádí v případě sloučenin obecného vzorce 1 a skupinou substituentů R4R5R6Z-, jak se tato skupina uvádí při popisu nového postupu. Mimoto je zapotřebí poznamenat, že skupiny, jejichž indexy jsou uvedeny níže než symbol, označený velkým písmenem, například Rb R2, Yi a podobně, nejsou vždy totožné se skupinami, 25 jejichž označení je uvedeno výše než označení symbolu velkým písmenem, například ve skupinách R1, R2, Y1 a podobně.
Způsobem podle vynálezu je možno připravit oligodeoxyribonukleotid se substituovanou fosfátovou skupinou na 3'-zakončení. Vynález se také týká nových vazných řetězců (spojovníků) 30 pro použití k navázání materiálu na pevný polymemí nosič při syntéze oligodeoxyribonukleotidů na pevné fázi. Materiály, tvořící pevnou fázi mohou obsahovat na konci vazného řetězce chráněnou hydroxyskupinu, která pak může být odstraněna tak, aby bylo možno navázat nukleotidy.
Vynález tedy uvádí vazné sloučeniny, například dále uvedené sloučeniny 12, které spolu s polymemím nosičem dávají vznik chráněné pevné fázi 14, odstraněním ochranných skupin pak vznikají sloučeniny 22 a po přidání nukleotidů sloučeniny 24,25 a 27.
Podstatu vynálezu tedy tvoří také způsob výroby sloučenin obecného vzorce 11:
40 R4 X3
1 5' 3' II
R5-Z-Y2-D-O-P-OH (11)
45 i, i3 7 R6 Y3-R7
kde
R4, R5 a R6, stejné nebo různé nezávisle znamenají atom vodíku, alkyl o 1 až 4 atomech uhlíku, aryl, který může být substituovaný nebo antrachinonyl, který může být substituován,
Z znamená atom uhlíku nebo atom křemíku nebo
-80CZ 287050 B6
R5, R6 a Z společně tvoří fluorenyl nebo xanthenyl nebo
R4, R5, R6 a Z společně znamenají atom vodíku,
R7 znamená atom vodíku, alkyl o 1 až 4 atomech uhlíku, kteiý může být substituován, arylovou skupinu, která může být substituována nebo aralkylovou skupinu, která může být substituována,
Y2 stejné nebo různé, znamenají O, S nebo NH,
Y3 znamená O, S, NH, alkylenovou skupinu o 1 až 4 atomech uhlíku nebo fenylenovou skupinu,
X3 znamená atom kyslíku nebo síry a
D je oligodeoxyribonukleotid s délkou řetězce 2 až 30, přičemž hydroxylové skupiny v polohách 5' a 3' nejsou zahrnuty, postup spočívá v tom, že se nechá reagovat sloučenina 12
kde
R1, R2, R3, stejné nebo různé nezávisle znamenají atom vodíku nebo alkoxyskupinu o 1 až 4 atomech uhlíku,
X1 znamená -S-, -SO- nebo -SO2,
A znamená skupinu -<CH2)n-, kde h znamená celé číslo 1 až 16, -(CH2)hO-, kde h je celé číslo 1 až 16, -(CH2)j-O-CO-(CH2)k-, kde j je kladné celé číslo, k znamená O nebo kladné celé číslo aj + kje2ažl6, nebo -(CH2)j-NH-CO-(CH2)k-, kde j je kladné celé číslo, k znamená O nebo kladné celé číslo a j + k je 2 až 16, -(CH2)—S-CO-(CH2)k-, kde j je kladné celé číslo, k znamená O nebo celé kladné číslo a j + kje 2 až 16 nebo -(CH2)n-O-CO-CH2(OCH2CH2)p-OCH2-, kde n je celé číslo, p znamená 0 nebo kladné celé číslo, n + p = 2až 100 a
-81CZ 287050 B6
Y1 znamená hydroxyskupinu, fenyloxyskupinu, která může být substituována nebo ethyloxyskupinu, která může být substituována halogenem, s polymemím materiálem vzorce 13
kde X2 znamená O, S nebo NH a P polymemí materiál, za předpokladu, že v případě, že Y1 ve vzorci 12 je hydroxylová skupina, nechá se sloučenina 12 reagovat před reakcí s polymemím materiálem 13 s aktivačním činidlem za vzniku polymemího materiálu obecného vzorce 14
kde R1, R2, R3, X1, A, X2 a P mají svrchu uvedený význam, načež se výsledný polymemí materiál obecného vzorce 14 podrobí v syntetizátoru DNA prodloužení řetězce za vzniku požadovaného produktu.
Způsob podle vynálezu je podrobněji znázorněn v následujících schématech:
-82CZ 287050 B6 stupeň 1 o
ΧΆ’-CCH
-J stupen 3 stupeň 2
HCCH2CH2-X'5 | stupeň ?Q\-C-O-CH2CH2-X'-A-C-Y’
..Ji© fQ\c-O-CH2CH2.X'-A-C-X* (14) R,-@
stu peň 6 ^(p) (13)
OMTO dtupeň 5 stupeň 7
O
H0-CH2CH2-X'-a-C-X2 (22)
OMTQ
OMTO
stup, a (23)
O R” r7-y3'P'n<v v
DMTO (239
O R” Q=p-Y3-R7 I o*
(23*)
O R?* H-?=O i
C‘ 0 . «
X^P-OCHjCHj-X^A-CX2
Ý3-R7 (24)
-83CZ 287050 B6
DMTO
DMTO
O
I
O x3 :P-OCH2CH2-x’-A-C -X2---Ý3-R7 stupeň (24)
O R o-p-o
, , ° , /-> (25)
X^P-OCHzCHj-ť-A-C-X2 — ýa-R7 stupeň
R4 r5_2_y2 bj. Yy (16) O R9*
stupeň 11
X3 :P- och2ch2-x’-a-c -x2 Ý®~R7
R4 r5-Ž-y2 (27)
R* ..
R5_Z_Y2_1 R*
0—0 (U)
-84CZ 287050 B6
/ \_
X(CHJ|OH (29) stupeň 12 \
O
Χ-Α’-CGH (15) (28) XfCH^SH (30)
O
Χ'-A-COH (31) (19) (18)
Dále budou podrobněji popsány jednotlivé stupně reakčního schématu:
Stupeň 1:
V tomto stupni se popisuje příprava sloučeniny vzorce 17 reakcí 2-merkaptoethanolu vzorce 16 s kyselinou omega-halogenkarboxylovou vzorce 15 v inertním rozpouštědle v přítomnosti látky, která váže kyseliny.
Rozpouštědlo, které je možno použit, není nijak omezeno, pokud neovlivní průběh reakce a zahrnuje aromatické uhlovodíky, například benzen, toluen a xylen, halogenované uhlovodíky, jako methylenchlorid a chloroform, ethery, jako diethylether, tetrahydrofuran, dioxan a dimethoxyethan, amidy, jako dimethylformamid, dimethylacetamid a triamid kyseliny hexamethylfosforečné, sulfoxidy, jako dimethylsulfoxid, alkoholy, jako methanol, ethanol, npropanol, izopropanol, n-butanol, izobutanol a izoamylalkohol, zředěné kyseliny, například vodnou kyselinu sírovou, zředěné báze, například vodný roztok hydroxidu sodného, dále je možno použít vodu, ketony, například aceton nebo methylethylketon, heterocyklické aminy, jako pyridin a nitrily, například acetonitril, zvláště výhodné jsou ketony, například aceton a alkoholy, jako ethanol a propanol.
Činidlem pro vazbu kyseliny mohou být uhličitany alkalických kovů, jako uhličitan sodný nebo draselný, hydrogenuhličitany alkalických kovů, například hydrogenuhličitan sodný, hydroxidy
-85CZ 287050 B6 alkalických kovů, například hydroxid sodný a hydroxid draselný a organické aminy, jako triethylamin, výhodné jsou zejména uhličitany alkalických kovů a zvláště uhličitan draselný.
Reakční doba a reakční teplota se mohou měnit v závislosti na užitém rozpouštědle, na činidle pro vazbu kyseliny a podobně. V případě, že se užije uhličitan draselný, provádí se reakce po dobu 8 hodin při teplotě varu pod zpětným chladičem.
Po ukončení reakce je možno požadovanou látku z reakční směsi izolovat některým z běžných postupů.
Je například možno postupovat tak, že se reakční směs neutralizuje a případný nerozpustný podíl se odfiltruje, načež se k reakční směsi přidá s vodou nemísitelné organické rozpouštědlo, například ethylacetát. Pak se reakční směs promyje vodou, organická vrstva s obsahem požadovaného produktu se oddělí a vysuší bezvodým síranem hořečnatým, načež se rozpouštědlo odpaří, čímž se získá požadovaný výsledný produkt.
Takto získaný produkt je možno ještě dále čistit běžnými postupy, například překrystalováním, opakovaným srážením, chromatografií a podobně v případě potřeby.
Stupeň 2
V tomto stupni se popisuje příprava sloučeniny vzorce 18, která odpovídá sloučenině vzorce 17 s chráněnou hydroxylovou skupinou a získá se tak, že se sloučenina vzorce 17 uvede do reakce s vhodným činidlem pro zavedení ochranné skupiny. Ochrannou skupinu, s výhodou dimethoxytritylchlorid je pak možno opět odstranit v kyselém prostředí v inertním rozpouštědle v přítomnosti činidla pro vazbu kyseliny.
Neexistuje žádné zvláštní omezení pro použité rozpouštědlo, pokud rozpouštědlo neovlivní průběh reakce a je schopno alespoň do určité míiy rozpouštět výchozí látky, použít je možno aromatické uhlovodíky, například benzen, toluen a xylen, halogenované uhlovodíky, například methylenchlorid a chloroform, ethery, například diethylether, tetrahydrofuran, dioxan a dimethoxyethan, amidy, například dimethylformamid, dimethylacetamid a triamid kyseliny hexamethylfosforečné, sulfoxidy, například dimethylsulfoxid, ketony, jako aceton nebo methylethylketon, heterocyklické aminy, například pyridin a nitrily, jako acetonitril, výhodné jsou zejména heterocyklické aminy a zvláště pyridin.
Činidlem pro zavedení ochranné skupiny mohou být například tritylhalogenidy, jako tritylchlorid, monomethoxytritylchlorid, dimethoxytritylchlorid a trimethoxytritylchlorid, výhodný je zejména dimethoxytritylchlorid.
Činidlo pro vazbu kyseliny není nijak zvláště omezeno, pokud neovlivní průběh reakce nebo nezpůsobí rozklad produktu nebo výchozích látek, s výhodou jde o aromatické aminy, například pyridin a dimethylaminopyridin.
Reakční teplota a reakční doba se mohou měnit v závislosti na typu použitého činidla pro zavedení ochranné skupiny a použitého činidla pro vazbu kyseliny, v případě, že se jako činidlo pro zavedení ochranné skupiny užije dimethoxytritylchlorid a jako rozpouštědlo a současně jako činidlo pro vazbu kyseliny se užije pyridin, probíhá reakce 2 hodiny při teplotě místnosti.
Po ukončení reakce je možno požadovaný výsledný produkt z reakční směsi izolovat při použití některého z běžných postupů.
Je například možno postupovat tak, že se reakční směs neutralizuje a případný nerozpustný podíl se odfiltruje. Pak se ke směsi přidá s vodou nemísitelné organické rozpouštědlo, například
-86CZ 287050 B6 ethylacetát. Pak se směs promyje vodou, organická vrstva, obsahující požadovaný výsledný produkt se oddělí a vysuší bezvodným síranem hořečnatým, načež se rozpouštědlo odpaří, čímž se získá požadovaný výsledný produkt.
Takto získaný výsledný produkt je možno dále čistit některým z běžných postupů, například překrystalováním, opakovaným srážením, chromatografii nebo jinými postupy.
Stupeň 3
Podle tohoto stupně je možno připravit sloučeninu vzorce 18 tak, že se uvede do reakce sloučenina vzorce 19 s anhydridem dikarboxylové kyseliny vzorce 20 v inertním rozpouštědle.
Použitelné rozpouštědlo není nijak zvláště omezeno, pokud neovlivní průběh reakce a pokud může rozpouštět alespoň do určitého stupně výchozí látky. Je možno použít aromatické uhlovodíky, jako benzen, toluen a xylen, halogenované uhlovodíky, například methylenchlorid a chloroform, ethery, například diethylether, tetrahydrofuran, dioxan a dimethoxyethan, amidy, jako dimethylformamid, dimethylacetamid a triamid kyseliny hexamethylfosforečné, sulfoxidy, například dimethylsulfoxid, ketony, jako aceton, methylethylketon, heterocyklické aminy, jako pyridin a nitrily, jako acetonitril, výhodné jsou halogenované uhlovodíky, například methylenchlorid.
Činidlo pro vazbu kyseliny zahrnuje pyridiny, jako pyridin, dimethylaminopyridin a 4pyrrolidinpyridin, výhodný je dimethylaminopyridin.
Použitelný anhydrid dikarboxylové kyseliny není zvláště omezen, vhodné jsou anhydridy alfa,omega-alkyldikarboxylových kyselin o 3 až 16 atomech uhlíku, zvláště výhodný je anhydrid kysel iny j antarové.
Reakční teplota a doba reakce se mohou měnit v závislosti na použitém anhydridu kyseliny, činidle pro vazbu kyseliny a podobně, v případě, že se užije anhydrid kyseliny jantarové a dimethylaminopyridin jako činidlo pro vazbu kyseliny, je reakce ukončena v průběhu 30 minut při teplotě místnosti.
Po ukončení reakce je možno výsledný produkt z reakční směsi izolovat při použití některého z běžných izolačních postupů.
Je například možno postupovat tak, že se reakční směs neutralizuje a případný pevný podíl se odfiltruje. Pak se k reakční směsi přidá s vodou nemísitelné rozpouštědlo, například ethylacetát. Pak se reakční směs promyje vodou, organická vrstva s obsahem požadovaného výsledného produktu se oddělí a vysuší bezvodým síranem hořečnatým, načež se rozpouštědlo odpaří, čímž se získá požadovaný výsledný produkt.
Takto získaný výsledný produkt je v případě potřeby možno dále čistit některým z běžných postupů, například překrystalováním, opakovaným srážením, chromatografii a podobně.
Stupeň 4
V tomto stupni je možno získat aktivní ester vzorce 12 tak, že se nechá reagovat karboxylová skupina sloučeniny vzorce 18, obsahující volnou karboxylovou skupinu s činidlem pro torbu esteru s následnou reakcí s fenolem, který může být substituován.
Použitelné rozpouštědlo není nijak zvláště omezeno, pokud neovlivní průběh reakce a zahrnuje aromatické uhlovodíky, jako benzen, toluen a xylen, halogenované uhlovodíky, jako methylenchlorid, chloroform, tetrachlormethan, dichlorethan, chlorbenzen a dichlorbenzen,
-87CZ 287050 B6 estery, jako ethylmravenčan, ethylacetát, propylacetát, butylacetát a diethylkarbonát, ketony, jako aceton, methylethylketon, methylizobutylketon, izoforon a cyklohexanon, nitrosloučeniny, jako nitroethan a nitrobenzen, nitrily, jako acetonitril a izobutyronitril, amidy, jako formamid, dimethylformamid DMF, dimethylacetamid a triamid kyseliny hexamethylfosforečné a také sulfoxidy, jako dimethylsulfoxid a sulforan, výhodné jsou halogenované uhlovodíky, zvláště methylenchlorid a amidy, zvláště dimethylformamid.
Použitelný fenol není zvláště omezen, pokud je možno jej užít jako aktivní ester, použít je možno například 4-nitrofenon, 2,4-dinitrofenon, 2,4,5-trichlorfenon, pentachlorfenon a 2,3,5,6-tetrafluorfenol, výhodný je zejména pentachlorfenon.
Reakční činidlo pro tvorbu esteru zahrnuje například N-hydroxysloučeniny, jako N-hydroxysukcinimid, 1-hydroxybenzotriazol a N-hydroxy-5-norbomen-2,3-dikarboxyimid, dále diimidazolové sloučeniny, například Ι,Γ-oxalyldiimidazol a N,N'-karbonyldiimidazol, disulfidové sloučeniny, jako 2,2'-dipyridyldisulfid, deriváty kyseliny jantarové, jako N,N'disukcinimidylkarbonát, deriváty fosfinchloridu, jako N,N'-bis(2-oxo-3-oxazolidinyl)fosfinchlorid, oxalátové sloučeniny, jako Ν,Ν'-disukcinimidyloxalát DSO, N,Ndiftalimidyloxalát DPO, N,N'-bis(norbomenylsukcinimidyl)oxalát BNO, l,l'-bis(benzotriazolyl)oxalát BBTO, l,l'-bis(6-chlorbenzotriazolyl)oxalát BCTO a l,r-bis(6-trifluormethylbenzotriazolyl)oxalát BTBO a také karbodiimidy, například dicyklohexylkarboxiimid DCC, výhodné jsou diimidazolové sloučeniny a karbodiimidy, zvláště výhodnou látkou je DCC.
Reakční teplota a doba reakce se mohou měnit v závislosti na typu použitého činidla pro tvorbu esteru a použitého rozpouštědla, obecně se reakce provádí 5 až 50 hodin při teplotě 0 až 100 °C a v případě, že se užije pentachlorfenol a DCC v DMF, trvá reakce 18 hodin při teplotě místnosti.
Po ukončení reakce se požadovaná výsledná látka z reakční směsi izoluje některým z běžných postupů.
Je například možno postupovat tak, že se reakční směs neutralizuje a případný nerozpustný podíl se odfiltruje, pak se k reakční směsi přidá s vodou nemísitelné organické rozpouštědlo, například ethylacetát. Pak se směs promyje vodou, organická vrstva s obsahem produktu se oddělí a vysuší bezvodým síranem hořečnatým, načež se rozpouštědlo odpaří, čímž se získá požadovaný produkt.
Takto získaný výsledný produkt je v případě potřeby možno dále čistit některým z běžných postupů, například překrystalováním, opakovaným srážením nebo chromatografickými postupy.
Stupeň 5
V tomto stupni je možno získat sloučeninu vzorce 12, tak, že se uvede do reakce sloučenina vzorce 19 se sloučeninou vzorce 21 v inertním rozpouštědle v přítomnosti činidla pro vazbu kyseliny.
Použitelné rozpouštědlo není nijak zvláště omezeno v případě, že neovlivní průběh reakce a zahrnuje aromatické uhlovodíky, jako benzen, toluen a xylen, halogenované uhlovodíky, jako methylenchlorid, chloroform, tetrachlormethan, dichlorethan, chlorbenzen a dichlorbenzen, estery, jako ethylmravenčan, ethylacetát, propylacetát, butylacetát a diethylkarbonát, ketony, jako aceton, methylethylketon, methylizobutylketon, izoforon a cyklohexanon, nitrosloučeniny, například nitroethan a nitrobenzen, nitrily, jako acetonitril a izobutyronitril, amidy, jako formamid, dimethylformamid DMF, dimethylacetamid a triamid kyseliny hexamethylfosforečné, sulfoxidy, například dimethylsulfoxid a sulforan, výhodnými sloučeninami jsou halogenované uhlovodíky, zvláště methylenchlorid.
-88CZ 287050 B6
Použitelné činidlo pro vazbu kyseliny zahrnuje organické báze, jako triethylamin, tributylamin, diizopropylethylamin, N-methylmorfolin, pyridin, 4-(N,N-dimethylamino)pyridin, N,Ndimethylanilin, Ν,Ν-diethylaniIin, l,5-diazabicyklo/4.3.0/non-5-en, l,4-diazabicyklo/2.2.2/oktan DABCO a l,8-diazabicyklo/5.4.0/undec-7-en DBU, výhodné jsou organické báze, zvláště pyridin nebo N-methylmorfolin.
Reakční teplota a doba reakce se mohou měnit v závislosti na použitém činidle pro vazbu kyseliny, obvykle reakce probíhá 1 až 5 hodin při teplotě 10 až 40 °C.
Po ukončení reakce je možno požadovaný výsledný produkt z reakční směsi izolovat některým z běžně používaných postupů.
Je například možno postupovat tak, že se reakční směs nejprve neutralizuje a případný nerozpustný podíl se odfiltruje a pak se k reakční směsi přidá s vodou nemísitelné organické rozpouštědlo, například ethylacetát. Výsledná směs se promyje vodou, organická vrstva s obsahem požadovaného výsledného produktu se oddělí a vysuší bezvodým síranem hořečnatým, načež se rozpouštědlo odpaří, čímž se získá výsledný produkt.
Takto získaný výsledný produkt je v případě potřeby možno dále čistit některým z běžně užívaných postupů, například překrystalováním, opakovaným srážením nebo chromatografn'.
Stupeň 6
Podle tohoto stupně je možno připravit polymemí derivát vzorce 14, použitelný jako nosič pro přípravu oligonukleotidu tak, že se nechá reagovat sloučenina vzorce 12 s aktivovanou karboxylovou skupinou, získaná ve stupni 5 s polymemím materiálem vzorce 13, například porézním sklem CPG, na něž byla navázána aminoskupina, hydroxylová skupina, sulfhydrylová skupina a podobně přes alkylenovou skupinu v inertním rozpouštědle.
Polymemí materiál vzorce 13 není nijak zvláště omezen, pokud je možno jej běžně použít jako nosič, podle potřeby je možno volit velikost částic, povrch trojrozměrné síťové struktury, podíl hydrofilních skupin, chemické složení, odolnost proti tlaku a další vlastnosti nosiče.
Použitelným nosičem jsou polysacharidové deriváty, jako celulosa, dextran a agaróza, syntetické polymery, jako polyakrylamidový gel, polystyrénové pryskyřice nebo polyethylenglykol, použít je možno také anorganické materiály, jako silikagel, porézní sklo a oxidy kovů, jako typické neomezující příklady těchto látek je možno uvést běžně dodávané nosiče, například aminopropyl CPG a aminoalkyl s dlouhým řetězcem-CPG (CPG lne.), Cosmosil NH2 a Cosmosil Diol (Nakarai Tesuku), CPC-nosič na bázi oxidu křemičitého se silanovým povlakem, AminopropylCPG-550A, Aminopropyl-CPG-1400A a polyethylenglykol 5000 monomethylether (Furuka CO.), pryskyřice na bázi p-alkoxybenzylalkoholu, aminomethylové pryskyřice a hydroxymethylové pryskyřice (Kokusan Kagaku K. K.), a polyethylenglykol 14000 monomethylether (Union Carbide).
Funkční skupina, vázaná na nosič s výhodou zahrnuje aminoskupinu, sulfhydrylovou skupinu a také hydroxylovou skupinu.
Rozpouštědlo, použité pro tento typ reakce není nijak zvláště omezeno, pokud neovlivní nepříznivě průběh reakce a pokud rozpouští alespoň do určité míry použité výchozí materiály, s výhodou je možno použít aromatické uhlovodíky, například benzen, toluen nebo xylen, dále halogenované uhlovodíky, například methylenchlorid, chloroform, tetrachlormethan, dichlorethan, chlorbenzen nebo dichlorbenzen, estery, například ethylmravenčan, ethylacetát, propylacetát, butylacetát nebo diethylkarbonát, ketony, například aceton, methylethylketon,
-89CZ 287050 B6 methylizobutylketon, izoforon nebo cyklohexanon, nitrosloučeniny, například nitroethan nebo nitrobenzen, nitrily, například acetonitril nebo izobutyronitril, amidy, například formamid, dimethylformamid, dimethylacetamid a triamid kyseliny hexamethylfosforečné, sulfoxidy, například dimethylsulfoxid nebo sulforan, výhodnými sloučeninami jsou halogenované uhlovodíky, zvláště methylenchlorid a také amidy, zvláště dimethylformamid.
Reakční teplota se obvykle pohybuje v rozmezí -20 až 150, s výhodou 0 až 50 °C.
Doba reakce závisí převážně na použitých výchozích látkách, rozpouštědle a na reakční teplotě, obvykle se pohybuje v rozmezí 1 až 200, s výhodou 24 až 100 hodin.
Po ukončení reakce je možno požadovaný výsledný produkt z reakční směsi izolovat některým z běžně užívaných postupů.
Je například možno požadovaný polymemí nosič z reakční směsi odfiltrovat, promýt jej organickým rozpouštědlem, například methylenchloridem a pak jej sušit za sníženého tlaku.
Stupeň 7
V tomto stupni je možno připravit sloučeninu vzorce 22 tak, že se nechá reagovat sloučenina vzorce 14 s činidlem pro odstranění ochranné skupiny v inertním rozpouštědle, čímž selektivně dojde k odstranění ochranné skupiny na hydroxylové skupině.
Stupeň 7 až stupeň 11 je běžně možno provádět na syntetizátoru DNA.
Použité rozpouštědlo s výhodou zahrnuje aromatické uhlovodíky, například benzen, toluen a xylen, halogenované uhlovodíky, například methylenchlorid, chloroform, tetrachlormethan, dichlorethan, chlorbenzen a dichlorbenzen, estery, například ethylmravenčan, ethylacetát, propylacetát, butylacetát a diethylkarbonát, ethery, jako diethylether, diizopropylether, tetrahydrofuran, dioxan, dimethoxyethan a diethylenglykoldimethylether, alkoholy, například methanol, ethanol, n-propanol, izopropanol, n-butanol, izobutanol, terc.butanol, izoamylalkohol, diethylenglykol, glycerol, oktanol, cyklohexanol a methylcellosolve, ketony, jako aceton, methylethylketon, methylizobutylketon, izoforon a cyklohexanon, nitrosloučeniny, jako nitroethan a nitrobenzen, nitrily, například acetonitril a izobutyronitril, amidy, jako formamid, dimethylformamid, dimethylacetamid a triamid kyseliny hexamethylfosforečné, sulfoxidy, jako dimethylsulfoxid a sulforan, výhodné jsou alkoholy, zvláště methanol a ethanol a také methylenchlorid, v případě, že se jako činidlo k odstranění ochranné skupiny užije kyselina octová, je vhodným rozpouštědlem směs kyseliny octové a vody.
Použitelné činidlo k odstranění ochranné skupiny není nijak omezeno, pokud se běžně užívá.
V případě, že ochrannou skupinou je triarylmethylová skupina, je možno užít kyselinu octovou, dichloroctovou, trifluoroctovou, chlorovodíkovou a Lewizovy kyseliny, jako bromid zinečnatý, výhodná je kyselina octová, dichloroctová a trifluoroctová.
Reakční teplota se mění v závislosti na použitých reakčních činidlech, výchozích látkách a rozpouštědle a obvykle je v rozmezí -10 až 100, s výhodou 0 až 50 °C.
Doba reakce závisí na výchozích látkách, rozpouštědle a reakční teplotě a je obvykle v rozmezí 1 minuta až 50 hodin, s výhodou 1 minuta až 24 hodin.
Po ukončení reakce je možno požadovaný produkt z reakční směsi izolovat běžným způsobem.
Je například možno postupovat tak, že se polymemí nosič z reakční směsi odfiltruje, promyje se organickým rozpouštědlem, například methylenchloridem a pak se usuší za sníženého tlaku.
-90CZ 287050 B6
Stupeň 8
V tomto stupni je možno připravit sloučeninu vzorce 24 tak, že se nechá reagovat sloučenina vzorce 23, 23' nebo 23 s dimethoxytritylovou skupinou na 5'-hydroxylové skupiny se základní bazickou skupinou na 3'-terminálním konci požadovaného řetězce, přičemž na 3'-hydroxylové skupině je přes atom fosforu vázána alkyloxyskupina, fenyloxyskupina, aralkyloxyskupina, alkyl, aralkyl nebo fenyl, s polymemím materiálem vzorce 22 s následnou thioací nebo alkylaminací v případě potřeby, za vzniku sloučeniny vzorce 24 s 3'-terminální nukleotidovou jednotkou vázanou na polymemí materiál, například CPG.
Použitelné sloučeniny vzorce 23,23' a 23 budou dále podrobněji popsány.
a) V případě, že se do reakce uvádí sloučenina vzorce 23, použije se materiál kyselé povahy.
Jako materiály kyselé povahy, použitelné v tomto stupni je možno uvést například tetrazolové deriváty, s výhodou tetrazol. Oxidační činidlo, použitelné při oxidační reakci v tomto stupni není nijak zvláště omezeno, pokud se obvykle používá při běžných oxidačních reakcích, s výhodou jde o anorganická oxidační činidla s obsahem kovu, například oxidy manganu, může jít například o oxid manganičitý nebo manganistan draselný, oxidy ruthenia, jako oxid rutheničelý, deriváty selenu, jako oxid seleničitý, sloučeniny železa, například chlorid železitý, sloučeniny osmia, například oxid osmičelý, sloučeniny stříbra, například oxid stříbrný, sloučeniny mědi, jako octan měďnatý, oxidy olova, například oxid olovičitý a tetroxid olova, deriváty kyseliny chromové, jako chroman draselný, komplex kyseliny chromové a kyseliny sírové a komplex kyseliny chromové a pyridinu, sloučeniny ceru, například ceriumamoniumnitrát CAN, použít je možno také anorganická oxidační činidla, jako molekuly halogenu, například molekulu chloru, molekulu bromu a molekulu jodu, deriváty kyseliny jodisté, jako jodistan sodný, ozon, vodný peroxid vodíku, sloučeniny kyseliny dusité, například kyselinu dusitou, kyselinu chlomou, chlornan draselný a chlornan sodný, deriváty kyseliny persírové, jako persíran sodný a persíran draselný a také organická oxidační činidla, například činidla, použitelná k oxidaci spolu s DMSO (komplex dimethylsulfoxidu a dicyklohexylkarbodiimidu, oxalylchloridu, anhydridu kyseliny octové nebo oxidu fosforečného nebo komplex pyridinu a anhydridu kyseliny sírové), peroxidy, jako terc.butylhydroperoxid, stálé kationty, jako trifenylmethylový kation, sukcinimidy, jako Nbrom-sukcinimid, sloučeniny kyseliny chlomé, jako terc.butylhypochlorid, deriváty azodikarboxylové kyseliny, například její estery, disulfídy, jako dimethyldisulfíd, difenyldisulfid, a dipyridyldisulfit nebo trifenylfosfm, estery kyseliny dusité, jako methylnitrit, tetrahalogenidy uhlíku, jako tetrabrommethan a chinonové sloučeniny, jako 2,3-dichlor-5,6dikyano-p-benzochinon DDQ, výhodný je jod. Rozpouštědlo, použitelné pro tuto reakci není nijak zvláště omezeno, pokud nepříznivě neovlivní průběh reakce a pokud může alespoň do určité míry rozpouštět použité výchozí látky, může jít zejména o aromatické uhlovodíky, jako benzen, toluen a xylen, halogenované uhlovodíky, jako methylenchlorid a chloroform, ethery, například diethylether, tetrahydrofuran, dioxan a dimethoxyethan, amidy, například dimethylformamid, dimethylacetamid a triamid kyseliny hexamethylfosforečné, sulfoxidy, například dimethylsulfoxid, ketony, například aceton nebo methylethylketon, heterocyklické aminy, jako pyridin a nitrily, jako acetonitril, výhodné jsou heterocyklické aminy, zvláště pyridin, nitrily, zvláště acetonitril, ethery, zvláště tetrahydrofuran a halogenované uhlovodíky, zvláště methylenchlorid.
Reakce se provádí při teplotě -50 až 100 °C, doba reakce závisí převážně na reakční teplotě, typu výchozích látek a typu použitého rozpouštědla a pohybuje se obvykle v rozmezí 5 minut až 15 hodin.
b) Rozpouštědlo, užité v případě, že reakční složkou je sloučenina vzorce 23' není zvláště omezeno, pokud neovlivní průběh reakce, výhodné jsou aromatické aminy, například pyridin.
-91CZ 287050 B6
V případě, že se užije sloučenina vzorce 23', užije se obvykle kondenzační činidlo.
Z použitelných kondenzačních činidel je možno uvést dicyklohexylkarbodiimid DCC, chlorid kyseliny mesitylensulfonové Ms-Cl, chlorid kyseliny triizopropylbenzensulfonové, triazolid kyseliny mesitylensulfonové MST, 3-nitrotriazolid kyseliny mesitylensulfonové MSNT, tetrazolid kyseliny triizopropylbenzosulfonové TPS-Te, nitroimidazolid kyseliny triizopropylbenzensulfonové TPC-NI a pyridyltetrazolid kyseliny triizopropylbenzensulfonové, s výhodou se užije MSNT, TPS-Te a TPS-NI. Reakční teplota není zvláště omezena a pohybuje se mezi -10 až 100 °C, reakce se obvykle provádí při teplotě místnosti. Reakční doba se mění v závislosti na použitém rozpouštědle a na použité reakční teplotě a je 30 minut v případě, že se reakce provádí při teplotě místnosti a při použití pyridinu jako rozpouštědlo.
c) Rozpouštědlo, použitelné spolu se sloučeninou 23 jako reakční složkou, není zvláště omezeno, pokud neovlivní reakci, výhodný je vodný acetonitril. Z kondenzačních činidel je možno uvést chloridy karboxylových a fosforečných kyselin, s výhodou pivaloylchlorid.
Oxidační činidla pro oxidaci oligonukleotidu s H-fosfonátovou vazbou na oligonukleotid fosfodiesterového typu není zvláště omezeno, pokud se běžně užívá pro obvyklé oxidační reakce, s výhodou jde o anorganická oxidační činidla, která obsahují kov, jako oxid manganičitý nebo manganistan draselný, oxidy ruthenia, například oxid rutheničelý, sloučeniny selenu, například oxid seleničitý, sloučeniny železa, například chlorid železitý, sloučenina osmia, například oxid osmičelý, sloučenina stříbra, například oxid stříbrný, sloučeniny mědi, jako octan měďnatý, oxidy olova, například oxid olovičitý a tetroxid olova, sloučeniny kyseliny chromové, jako chroman draselný, komplex kyseliny chromové a kyseliny sírové nebo komplex kyseliny chromové a pyridinu, sloučeniny ceru, jako ceriumamoniumnitrát CAN, anorganická oxidační činidla, jako molekuly halogenu, například molekuly chloru, molekuly bromu nebo molekuly jodu, soli kyseliny jodisté, například jodistan sodný, ozon, vodný roztok peroxidu vodíku, deriváty kyseliny dusité, jako kyselina dusitá, deriváty kyseliny chlorečné, jako chlorečnan draselný nebo sodný a soli kyseliny persírové, jako persíran sodný nebo draselný a také organická oxidační činidla, například činidla, použitelná při oxidaci spolu sDMSO (komplex dimethylsulfoxidu a dicyklohexylkarbodiimidu, oxalylchloridu, anhydridu kyseliny octové nebo oxidu fosforečného nebo komplex pyridinu a anhydridu kyseliny sírové), peroxidy, jako terc.butylhydroperoxid, stálé kationty, jako trifenylmethylový kation, sukcinimidy, jako Nbromsukcinimid, deriváty kyseliny chlomé, jako terc.butylhypochlorid, deriváty azodikarboxylové kyseliny, jako methylazodikarboxylát, disulfídy, jako dimethyldisulfid, difenyldisulfid a dipyridyldisulfid, trifenylfosfin, estery kyseliny dusité, jako methylnitrit, tetrahalogenidy uhlíku, jako tetrabrommethan a chinonové sloučeniny, jako 2,3-dichlor-5,6dikyano-p-benzochinon DDQ, výhodná je molekula jodu.
Použitelné činidlo pro vazbu kyseliny zahrnuje heterocyklické aminy, jako pyridin a dimethylaminopyridin a alifatické aminy, jako trimethylamin, triethylamin a diizopropylethylamin, výhodné jsou heterocyklické aminy, zvláště pyridin. Reakční teplota není zvláště omezena, obvykle se pohybuje v rozmezí -50 až 50 °C, výhodná je teplota místnosti.
Doba reakce závisí na použitých výchozích látkách, reakčních činidlech, teplotě a podobně, obvykle je v rozmezí 5 minut až 30 hodin, v případě, že se reakce provádí při teplotě místnosti, je doba reakce 30 minut.
Thioace, kterou je možno provádět v tomto stupni probíhá tak, že se nejprve naváže sloučeninu vzorce 23 na sloučeninu vzorce 22 a pak se produkt uvede do reakce sthioačním činidlem k dosažení thioace místo oxidace působením molekuly jodu nebo jiným oxidačním činidlem za vzniku sloučeniny vzorce 24, typu polymemího nosiče s thioátovou vazbou, například CPG.
-92CZ 287050 B6
Reakční činidlo pro toto použití není nijak zvláště omezeno, pokud může zajistit tvorbu thioátu reakcí strojvazným fosforem, obvykle jde o síru a také o tetraethylthiuramdisulfid TETD (Applied Biosystems) nebo také o Beaucageovo činidlo (MilliGen/Biosearch). V případě, že se použije druhá z uvedených látek, je možno použít postup, popsaný v Tetrahedron Letters, 32, 3005,1991 nebo jeho variace a v případě použití posledního z uvedených činidel způsob podle J. Am. Chem. Soc., 112, 1253, 1990 nebo jeho variace.
Alkylaminaci, kterou je rovněž možno uskutečnit v tomto stupni je možno provést tak, že se nejprve sloučenina vzorce 23 naváže na sloučeninu vzorce 22 a pak se s produktem nechá reagovat požadovaný alkylamin při teplotě místnosti místo oxidačního činidla, například místo molekuly jodu. Tímto postupem je možno získat sloučeninu vzorce 24, v níž je 3'-terminální nukleotid s požadovaným řetězcem bází navázán na polymemí materiál, například na CPG prostřednictvím fosforamidátové vazby.
Stupeň 9
V tomto stupni se postupuje tak, že se
1) zpracovává polymemí materiál vzorce 24, získaný ve stupni 8 kyselinou k odstranění skupiny DMT,
2) takto zpracovaný polymemí materiál se uvede do reakce s amiditovým reakčním činidlem a kyselým katalyzátorem, načež se
3) výsledný materiál podrobí oxidační reakci při použití oxidačního činidla a
4) nezreagovaná skupina se vyplní při použití anhydridu kyseliny octové.
Stupně 1 až 4 se opakují za získání sloučeniny vzorce 25, v níž pouze 5'-terminální nukleotid s požadovaným řetězcem bází není vázán. Prodloužení řetězce na syntetizátoru DNA v tomto stupni se provádí například podle Stec, J. Am. Chem. Soc., 106, 6077 - 6089, 1984 při použití fosforamiditové povahy a Applied Biosystems Model 3808 nebo podle H. Koester a další, Nucleic Acids Res., 12, 4539, 1984 s použitím syntetizátoru DHA Cyclone Plus (MilliGen/Biosearch), je však možno postupovat i jiným způsobem.
Stupeň 10
V tomto stupni je možno připravit polymemí materiál vzorce 27 s požadovaným řetězcem bází a substituenty a také s ochrannou skupinou tak, že se odštěpí 5'-terminální skupina DMF zpolymemího materiálu 25 ze stupně 9 postupem podle stupně 7 s následným zpracováním podle stupně 8 při použití sloučenin vzorce 26, 26' a 26, místo sloučenin vzorce 23, 23' a 23. Sloučeniny vzorce 26, 26' a 26 jsou 2'-deoxyribonukleosidy s bazickou skupinou, v níž je 5'terminální nukleotid požadovaného řetězce chráněn, nebo jde o ribonukleosid schráněnou hydroxyskupinou v poloze 2' a s požadovanou modifikovanou skupinou v poloze 5. Sloučenina vzorce 26 má v poloze 3' fosforamiditovou vazbu včetně ochranné skupiny na fosfátové skupině pro použití při běžné syntéze DNA. Sloučenina vzorce 26' má fosfodiesterovou vazbu a sloučenina vzorce 26' H-fosfonátovou vazbu.
Stupeň 11
V tomto stupni se získává oligonukleotid vzorce 11 odštěpením oligonukleotidové části z polymemího materiálu 27, užívá se chráněný polymemí materiál ze stupně 10 s požadovaným řetězcem bází a substituenty na 5'- a 3'-zakončení a odstraní se ochranné skupiny s výjimkou požadovaných substituentů na 5'- a/nebo 3'-zakončení. Odstranění se provádí známým způsobem podle J. Am. Chem. Soc., 103, 3185, 1981.
-93CZ 287050 B6
Získaná reakční směs s obsahem sloučeniny vzorce 11 se čistí běžným způsobem pro čištění nukleových kyselin, například chromatografíí v reverzní fázi a/nebo na iontoměniči včetně vysokotlaké kapalinové chromatografie a podobně za získání čisté sloučeniny vzorce 11.
Stupeň 12
V tomto stupni je možno připravit hemiester dikarboxylové kyseliny, to znamená sloučeninu vzorce 15, jde o výchozí materiál podle vynálezu. Postupuje se tak, že se volná hydroxylová skupina ve sloučenině vzorce 29 nebo volná sulfhydrylová skupina ve sloučenině 30 uvede do reakce s anhydridem dikarboxylové kyseliny, například sloučeninou vzorce 28 v inertním rozpouštědle v přítomnosti bazického katalyzátoru.
Anhydrid dikarboxylové kyseliny není nijak zvláště omezen, s výhodou jde o anhydridy o 1 až 16 atomech uhlíku, zvláště o anhydrid kyseliny jantarové nebo glutarové. Bazickým katalyzátorem je s výhodou aminopyridin, jako dimethylaminopyridin nebo pyrrolidinpyridin, terciární amin, jako trimethylamin a triethylamin nebo uhličitan alkalického kovu, jako hydrogenuhličitan sodný nebo uhličitan draselný, zvláště dimethylaminopyridin a pyrrolidinpyridin.
Použité rozpouštědlo není zvláště omezeno, pokud nepříznivě neovlivní průběh reakce a alespoň do určité míry rozpouští výchozí materiál, s výhodou jde aromatické uhlovodíky, například benzen, toluen a xylen, halogenované uhlovodíky, například methylenchlorid a chloroform, ethery, jako diethylether, tetrahydrofuran, dioxan a dimethoxyethan, amidy, jako dimethylformamid, dimethylacetamid, a triamid kyseliny hexamethylfosforečné, sulfoxidy, jako dimethylsulfoxid, alkoholy, například methanol, ethanol, n-propanol, izopropanol, n-butanol, izobutanol a izoamylalkohol, zředěné kyseliny, jako vodná kyselina sírová, zředěné báze, jako vodný hydroxid sodný, voda, ketony, jako aceton, methylethylketon, heterocyklické aminy, jako pyridin a nitrily, jako acetonitril, výhodné jsou nitrily, zvláště acetonitril, ethery, zvláště tetrahydrofuran a halogenované uhlovodíky, zvláště methylenchlorid.
Reakce se provádí při teplotě -50 až 100 °C, doba reakce závisí na reakční teplotě a na typu použitých výchozích látek rozpouštědla a obvykle se pohybuje v rozmezí 30 minut až 15 hodin.
Po ukončení reakce se požadovaný produkt z reakční směsi izoluje běžným způsobem.
Je možno postupovat tak, že se reakční směs nejprve neutralizuje a případný nerozpustný podíl se odstraní filtrací. Pak se k reakční směsi přidá s vodou nemísitelné rozpouštědlo, například ethylacetát. Výsledná směs se promyje vodou, organická vrstva, která obsahuje požadovaný výsledný produkt se oddělí a vysuší se bezvodým síranem hořečnatým a rozpouštědlo se odpaří, čímž se získá výsledný produkt.
Takto získaný produkt je v případě potřeby možno dále čistit běžnými postupy, například překrystalováním, opakovaným srážením, chromatografíí a podobně.
Stupeň 13
V tomto stupni je možno získat sloučeninu vzorce 18 tak, že se nechá reagovat sloučenina vzorce 19 s dikarboxylovou kyselinou vzorce 31 v inertním rozpouštědle v přítomnosti činidla pro tvorbu esteru.
Použité rozpouštědlo není nijak zvláště omezeno v případě, že nepříznivě neovlivní průběh reakce, je možno použít aromatické uhlovodíky jako benzen, toluen a xylen, halogenované uhlovodíky, jako methylenchlorid, chloroform, tetrachlormethan, dichlorethan, chlorbenzen a
-94CZ 287050 B6 dichlorbenzen, estery, jako ethylmravenčan, ethylacetát, propylacetát, butylacetát a diethylkarbonát, ketony, jako aceton, methylethylketon, methylizobutylketon, izoforon a cyklohexanon, nitrosloučeniny, jako nitroethan a nitrobenzen, nitrily, například acetonitril a izobutyronitril, amidy, jako formamid, dimethylformamid DMF, dimethylacetamid a triamid kyseliny hexamethylfosforečné a také sulfoxidy, jako dimethylsulfoxid a sulforan, výhodnými rozpouštědly jsou halogenované uhlovodíky, zvláště methylenchlorid a amidy, zvláště dimethylformamid.
Reakční činidlo pro tvorbu esteru zahrnuje například N-hydroxysloučeniny, jako jsou Nhydroxysukcinimid, 1-hydroxybenzotriazol nebo N-hydroxy-5-norbomen-2,3-dikarboxyimid, dále diimidazolové sloučeniny, například l,l'-oxalyldiimidazol nebo N,N'-karbonyldiimidazol, disulfídové sloučeniny, například 2,2'-dipyridyldisulfid, deriváty kyseliny jantarové, jako N,N'disukcinimidylkarbonát, deriváty fosfinchloridu, jako N,N'-bis(2-oxo-3-oxazolidinyl)fosfmchlorid, deriváty kyseliny šťavelové, například Ν,Ν'-disukcinimidyloxalát DSO, N,Ndifralimidyloxalát DPO, N,N'-bis(norbomenylsukcinimidyl)oxalát BNO, l,l'-bis(norbomenylsukcinimidyl)oxalát BNO, l,l'-bis(benzotriazolyl)oxalát BBTO, l,l-bis(6-chlorbenzotriazolyl)oxalát BCTO a l,l'-bis(6-trifluormethylbenzotriazolyl)oxalát BTBO a také karbodiimidy, například dicyklohexylkarbodiimid OCC, výhodné jsou zejména diimidazolové deriváty a karbodiimidy, zvláště DCC.
Doba, jíž je zapotřebí k ukončení reakce a reakční teplota se budou měnit v závislosti na použitém typu reakčního činidla pro tvorbu esteru a v závislosti na rozpouštědle, reakce obvykle probíhá při teplotě 0 až 100 °C po dobu 5 až 50 hodin.
Po ukončení reakce je možno požadovaný výsledný produkt z reakční směsi izolovat při použití některého z běžných postupů.
Je například možno postupovat tak, že se reakční směs nejprve neutralizuje, případný nerozpustný podíl se odstraní filtrací a pak se k reakční směsi přidá s vodou nemísitelné organické rozpouštědlo, například ethylacetát. Výsledná směs se promyje vodou, organická vrstva, která obsahuje požadovaný výsledný produkt se oddělí a vysuší bezvodým síranem hořečnatým a rozpouštědlo se odpaří, čímž se získá požadovaná výsledná látka.
Takto získaný výsledný produkt je v případě potřeby možno dále čistit některým z běžných postupů, například překrystalováním, opakovaným srážením, chromatografickými postupy a podobně.
Způsobem podle vynálezu je možno připravit modifikovaný oligonukleotid, který obsahuje požadovaný substituent na 3'-terminální zakončení oligonukleotidu přes fosfát při použití syntetizátoru DNA. Takto získaný modifikovaný oligonukleotid je možno získat ve značném množství a s vysokou čistotou při použití jednoduchých čisticích postupů bez velkých nákladů. Použitelné oligonukleotidy se substituentem na 3'-terminálním zakončení byly popsány ve zveřejněné japonské patentové přihlášce č. Hei-301744, kde se také uvádí jejich účinnost proti viru AIDS.
Sloučeniny podle vynálezu mají specifickou cytopathickou účinnost proti viru HTV-1, který u člověka způsobuje syndrom AIDS, tyto sloučeniny jsou schopné způsobit specifickou inhibici proliferace viru v infikovaných buňkách. Sloučeniny podle vynálezu je tedy možno použít k léčení i k prevenci AIDS.
Účinnost nových sloučenin podle vynálezu bude osvětlena v následujících farmaceutických příkladech.
-95CZ 287050 B6
Farmakologický příklad
Měření účinnosti modifikovaných oligodeoxyribonukleotidů proti viru HIV-1 f
Účinnost proti viru HTV-1 byla stanovena způsobem podle publikace R. Pauel a další, J. Virological Methods, 20, 309 - 321, 1988. Postupuje se tak, že se buňky MT—4 v exponenciální růstové fázi odstředí 5 minut při 150 g. Usazenina buněk se uvede do suspenze v živném prostředí a infikuje se virem HTV-1, typ ΙΠΒ jednu hodinu při 37 °C v koncentraci 10 CCID50Infikované buňky se odstředí v prostředí RPMI-1640 s 10 % fetálního telecího séra (dále živné prostředí s obsahem séra).
Infikované a neinfikované buňky MT-4 se uvedou do suspenze v živném prostředí s obsahem séra v množství 4xl05 buněk/ml. Pak se do každého vyhloubení mikrotitrační plotny s 98 vyhloubeními vloží vždy 100 mikrolitrů postupně ředěného vzorku účinné látky v prostředí s obsahem séra. Pak se do každého vyhloubení přidá 100 mikrolitrů suspenze buněk a buňky se pěstují 6 dnů v přítomnosti 5 % plynného oxidu uhličitého.
Kontrolou jsou infikované a neinfikované buňky MT—4, k nimž nebyla přidána žádná účinná látka.
Po ukončené kultivaci se stanoví počet živých buněk metodou na bázi MTT, což je 3-(4,5dimethylthiazol-2-yl)-2,5-difenyltetrazoliumbromid podle publikace L. M. Green a další, J. Immunol. Methods, 70, 257-268, 1984. Pak se stanoví cytopathický účinek na HIV-1. Stav buněk MT-4, infikovaných HTV-1 a inkubovaných bez účinné látky se považuje za 100% a cytopathická účinnost na buňkách MT-4 bez infekce virem a bez účinné látky se považuje za 0 %. Z těchto hodnot se vypočítá koncentrace účinné látky ve vzorku, v němž došlo k 50% cytopathickému účinku, IC50. Cytotoxicita sloučeniny ve vzorku je stanovena jako koncentrace, snižující pomnožení neinfikovaných buněk MT-4 na 50 %, CC50. Výsledky uvedených měření jsou shrnuty v následující tabulce 2.
Tabulka 2
příklad č. IC50 / pg/ml/ CC50 / pg/ml/
1 2,1 61
2 5,9 >100,0
4 1,5 >100,0
5 2,3 >100,0
6 1,3 >100,0
7 1,0 >100,0
8 4,3 >100,0
9 8,4 >100,0
10 1,5 >100,0
11 4,7 >100,0
12 0,6 >100,0
13 1,4 >100,0
14 0,7 >100,0
16 4,7 >100,0
17 3,7 >100,0
18 4,7 >100,0
19 6,25 >100,0
20 4,0 >100,0
21 1,2 100,0
22 0,55 50
-96CZ 287050 B6
Tabulka 2 - pokračování
příklad č. IC50 / pg/ml/ CC50 / pg/ml/
23 0,8 75
24 0,45 75
25 4,0 >100,0
26 6,0 80,0
27 5,0 95,0
28 5,0 >100,0
29 3,0 >100,0
30 1,0 >100,0
31 1,1 90,0
32 3,8 >100,0
33 5,0 >100,0
34 5,0 >100,0
35 5,5 >100,0
36 1,5 100,0
37 6,0 >100,0
43 3,0 100,0
45 0,45 >100,0
48 0,58 >100,0
57 1,5 100,0
58 1,0 50,0
70 1,0 60,0
71 1,0 37,0
72 1,8 >100,0
73 3,0 >100,0
74 4,4 >100,0
75 6,0 40,0
76 7,0 >100,0
77 9,0 >100,0
78 9,0 >50,0
79 9,4 >100,0
80 9,5 >100,0
81 10,0 >100,0
82 0,35 100,0
83 0,55 >50,0
84 0,5 >50,0
85 0,8 60,0
86 0,4 >100,0
87 0,25 >100,0
88 0,7 75,0
89 0,5 38,0
90 0,15 >100,0
91 0,15 >100,0
92 0,29 >100,0
93 0,35 >100,0
94 0,19 >100,0
95 0,5 >100,0
98 0,15 >100,0
99 0,15 >100,0
100 0,25 >100,0
Tabulka 2 - pokračování
příklad č. IC50 / pg/ml/ CC5o / pg/ml/
101 1,5 >100,0
102 0,7 >100,0
103 5,0 >100,0
104 7,0 >100,0
105 3,0 >100,0
106 5,0 >100,0
107 2,5 >100,0
108 3,5 >100,0
109 2,0 >100,0
110 2,3 >100,0
Z výsledků je zřejmé, že všechny modifikované oligodeoxyribonukleotidy, které jsou uvedeny v tabulce 2, mají zvláště silnou účinnost proti viru HIV-1 v koncentraci nižší než 10 mikrogramů/ml.
Není-li uvedeno jinak, znamená řetězec bází, například TGGGAGG, použitý v následujících chemických strukturách sůl příslušného oligodeoxyribonukleotidu s triethylaminem, která neobsahuje hydroxylovou skupinu ani na jednom z 5'- a 3'-zakončení.
Praktické provedení vynálezu bude osvětleno následujícími příklady. V příkladové části jsou všechny údaje, uvedené v jednotkách mesh, uvedeny podle Tylerova standardu, NMR-spektra byla získána při použití trimethylsilanu jako vnitřního standardu, což je označeno zkratkou TMS. Množství oligodeoxyribonukleotidového derivátu, které bylo připraveno v jednotlivých příkladech, bylo měřeno na základě optické hustoty vzorku při 260 nm.
Příklady provedení vynálezu
Příklad 1
a) 5'-0-tritylthymidin-2-kyanoethyl-N,N-diizopropylfosforamidit
NCCH-jCHiO-pť
N(/Pr)2
-98CZ 287050 B6
Azeotropickou destilací se třikrát suší 969 mg, 2 mmol 5'-O-tritylthymidinu (J. Am. Chem. Soc., 80, 6212, 1958) s pyridinem. Po rozpuštění v 10 ml tetrahydrofuranu se do roztoku přidá
1,39 ml, 8 mmol N,N-diizopropyl-N-ethylaminu a 0,822 ml, 4 mmol 2-kyanoethyl-N,Ndiizopropylchlorfosforamiditu a vzniklá sloučenina se 30 minut míchá v atmosféře argonu při teplotě místnosti. Sraženina se odstraní filtrací. Po destilaci za sníženého tlaku se zbytek rozpustí ve 100 ml ethylacetátu a roztok se dvakrát promyje 50 ml ledem chlazeného 10% vodného roztoku uhličitanu sodného. Roztok se suší nad bezvodým sulfátem sodným a rozpouštědlo se odstraní destilací za sníženého tlaku. Po absorpci na 40 g sloupec silikagelu (70 až 230 mesh) se vzniklý zbytek čistí chromatografii při eluci směsí methylenchloridu, ethylacetátu a triethylaminu v poměru objemů 45 : 45 : 10. Vzniklo 1,35 g výsledné sloučeniny s výtěžkem 98 %.
'H-NMR (CDCb, 270 MHz, TMS), ppm:
7,62, 7,57 (dohromady 1H, dva singlety),
7,46-7,20 (15H, multiplet),
6.46 - 6,37 (1H, multiplet),
4,68 (1H, široký singlet),
4,19, 4,15 (dohromady 1H, dva široké singlety),
3,90-3,30 (6H, multiplet),
2,63-2,28 (4H, multiplet),
1.47 (3H, singlet),
1,23 - 1,00 (12H, multiplet).
lb) Sloučenina vzorce lb)
Syntéza se provádí za použití Cyclone Plus (výrobní značka) DNA/RNA syntetizačního zařízení (MilliGen/Search, Millipore Ltd., Japonsko). Do syntetizačního zařízení se vloží chemické složky odpovídající nukleotidovým zbytkům uvedeným ve vzorci lb). Programovaná vložka se vloží do zařízení a k syntéze se použije stupnice odpovídající 15 mikromol složek. Za tímto účelem se namísto 2-kyanoethylfosforamiditového roztoku, který odpovídá thymidinu použije 35 mM roztoku 5'-0-tritylthymidin-2-kyanoethyl-N,N-diizopropylfosforamiditu, jehož příprava je popsána v části la). Reakční sloupec byl sloupec pro použití 15,0 mikromol reakčních složek. Tento sloupec se naplní 5 mol G-CPG, tj. guanindeoxyribonukleosid/G/, vázaný na porézní sklo CPG. Koncentrace nukleotidů na skleněné výplni byla 35 až 44 mikromol/g a výplň CPG měla průměrnou velikost pórů 50 nm. Požadovaný řetězec bází TGGGAG se vloží (sekvence bází uvedená zde, tak jako dále uvedené, zahrnují báze, které byly vázány na CPG) a program začne bez působení kyseliny po vytvoření vazby s terminálním T. Vzniklý derivát, v němž žádaný oligonukleotid je vázán na porézní sklo CPG. Po sušení ve vakuu se sloupec vyjme a ponoří do asi 10 ml 29% vodného amoniaku. Reakce probíhá dva dny v uzavřené nádobě při teplotě místnosti. Pak se CPG odstraní filtrací a promyje se dvakrát 10 ml vody. Filtrát a promývací podíly se sloučí a vzniklá směs se třikrát promyje 30 ml diethyletheru. Amoniak a diethylether se odstraní odpařováním ve vakuu. Vzniklý roztok se zahustí přibližně
-99CZ 287050 B6 na objem 3 ml odpařováním za sníženého tlaku a zahuštěný roztok se filtruje za pomoci filtru millipore (0,45 μτη). Filtrát se rozdělí na tři části a každá část se po absorpci na sloupec 20,0 x 250 mm, Inertsil PREP - ODS (výrobní značka) čistí pomocí vysokotlaké kapalinové chromatografie, sloupec je v rovnovážném stavu v 0,1 M vodném pufru s triethylamoniumacetátem TEAA při pH 7,3 s obsahem 20 % objemových acetonitrilu, eluce se sleduje při 254 nm. Vzniklý produkt se eluuje za použití 0,1 M TEAA obsahující acetonitril s lineárním gradientem koncentrací od 20 do 50 % objemových s průtokem 8 ml/min po dobu 30 minut. Frakce, získané elucí po 17,2 min se sloučí a z roztoku se odstraní acetonitril odpařováním za sníženého tlaku. Vzniklý vodný roztok se lyofilizuje a takto vzniklý produkt se rozpustí v 50 ml vody a opět se lyofilizuje. Vznikla amorfní pevná výsledná látka s 94,8 OD, 260 nm.
UV-spektrum (voda), lambdamax nm: 254.
Doba retence: 23,3 minut.
Vysokotlaká kapalinová chromatografie (YMC-Pack A-312, S-5, 120A, ODS, eluční činidlo A: 0,1 M TEAA, pH 7,3, eluční činidlo B: acetonitril, 20 až 50 % objemových B, 30 minut, lineární gradient, 1 ml/min, 254 nm.
Příklad 2
2a) 5'-tritylamino-5'-deoxythymidin
Do roztoku 560 mg, 2 mmol 3'-O-acetyl-5'-deoxythymidinu, jehož příprava je popsána J. P. Horwitz a další, J. Org. Chem., 27, 3045, 1962, ve 20 ml suchého pyridinu se přidá 557 mg tritylchloridu a vzniklá směs se vaří pod zpětným chladičem jednu hodinu do odstranění vody. Po vymizení výchozí sloučeniny se ověří chromatografií na tenké vrstvě (za použití methylenchloridu, obsahujícího methanol v koncentraci 5% objemových, jako vyvíjejícího roztoku). Po odstranění rozpouštědla z reakční směsi destilací za sníženého tlaku se zbytek smíchá s 10 ml methanolu a 10 ml vody a směs se zahustí destilací za sníženého tlaku. Tento postup se opakuje třikrát a pak se zbytek rozpustí ve 30 ml ethylacetátu a vzniklý roztok se promyje 20 ml nasyceného vodného roztoku chloridu sodného, 20 ml 0,2 N vodné kyseliny chlorovodíkové a 20 ml 5% vodného roztoku uhličitanu sodného. Organický roztok se suší nad bezvodým sulfátem hořečnatým a pak se odpařuje do sucha za sníženého tlaku. Zbytek se rozpustí ve 30 ml methanolu nasyceného plynným amoniakem a baňka obsahující roztok se pevně uzavře. Reakce probíhá přes noc při teplotě místnosti, a pak se po destilaci za sníženého tlaku zbytek rozpustí v 10 ml methylenchloridu. Po absorpci na sloupec silikagelu se roztok čistí chromatografií při elucí methylenchloridem, obsahujícím 5 % objemových methanolu. Frakce, obsahující požadovanou sloučeninu se sloučí a po odpařování do sucha za sníženého tlaku a po lyofilizaci zbytku vznikne 338 mg bílého prášku výsledné sloučeniny.
1 H-NMR (CDC13, 270 MHz, TMS), ppm:
8,38 (1H, široký singlet),
7,48-7,18 (15H, multiplet),
7,04 (1H, multiplet),
6,67 (1H, triplet, J = 6,60 Hz),
4,35 - 4,29 (1H, multiplet),
4,01 - 3,95 (1H, multiplet),
2,62 - 2,06 (5H, multiplet),
1,84 (3H, singlet).
-100CZ 287050 B6
2b) 5'-tritylamino-5'-deoxythymidin-2-kyanoethyl-N,N-diizopropylfosforamidit
Azeotropickou destilací s pyridinem bylo sušeno 0,15 g, 0,31 mmol 5'-tritylamino-5'deoxythymidinu, jehož příprava je popsána v části a). Po rozpuštění ve 2 ml methylenchloridu se do vzniklého roztoku přidá 0,23 ml, 1,2 mmol N,N-diizopropyl-N-ethylaminu. Během 2 minut se v proudu dusíku přidá 2-kyanoethyl-N,N-diizopropylfosforamidit a vzniklá směs se míchá 60 minut při teplotě místnosti. Po provedení chromatografie na tenké vrstvě, která potvrdí vymizení výchozí sloučeniny, se reakční směs ředí 30 ml ethylacetátu. Vzniklý organický roztok se promyje nasyceným vodným roztokem uhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného. Organická vrstva se filtruje přes 1PS (výrobní značka) filtrační papír (Whatman) a filtrát se zbaví rozpouštědla destilací za sníženého tlaku. Po absorpci na 15 g sloupec silikagelu (70 až 230 mesh) byl vzniklý zbytek čištěn chromatografií při eluci ethylacetátem. Vzniklo 0,19 g výsledné sloučeniny jako pěnovité látky s výtěžkem 89 %.
‘H-NMR (CDC13, 270 MHz, TMS), ppm:
7,50-7,19 (15H, multiplet),
7,15, 7,06 (dohromady 1H, dva singlety),
6,30 - 6,26 (1H, multiplet),
4,55 - 4,35 (1H, multiplet),
4,12-4,07 (1H, multiplet), 3,84-3,53 (4H, multiplet), 2,64 - 2,09 (6H, multiplet), 1,86, 1,84 (dohromady 3H, dva singlety),
1,19-1,10 (12H, multiplet).
2c) Sloučenina vzorce 2c)
Postupuje se obdobným způsobem jako v příkladu lb) avšak užije se 5'-tritylamino-5'-deoxythymidin-2-kyanoethyl-N,N-diizopropylfosforamidit, připravený podle přípravy 2b), místo 5'-0-tritylthymidin-2-kyanoethyl-N,N-diizopropylfosforamiditu, čímž se získá výsledný produkt. Tento reakční produkt se pak čistí chromatografií na sloupci silikagelu v reverzní fázi (preparativní Cl8, Waters, 1,5x15 cm, 50 mM vodný pufr s trimethylamoniumhydrogenuhličitanem TEAB o pH 7,5, 20% až 50% acetonitril, lineární gradient, 254 nm). Eluát se pak zpracuje obdobným způsobem jako v příkladu lb), čímž se získá produkt jako amorfní pevná látka. Analýzou pomocí vysokotlaké kapalinové chromatografie v reverzní fázi (Inertsil ODS, 6 x 150 mm, eluční činidlo A: 0,1 Μ TEAA, pH 7,5, eluční činidlo B: acetonitril, 10 až 60 % objemových B, 20 minut, lineární gradient, 1 ml/min., 260 nm) bylo prokázáno, že doba retence vzorku byla 19,20 minut.
UV-absorpční spektrum (voda): lambdamax nm: 254.
-101CZ 287050 B6
Příklad 3
3a) 5'-O-benzhydrylthymidin
Do roztoku 1,426 g, 4 mmol 3'-O-/(l,l-dimethylethyl)dimethylsilyl/thymidinu, (Can. J. Chem., 56, 2768, 1978) v 8 ml tetrahydrofuranu se v atmosféře argonu přidá 350 mg, 7 mmol hydridu sodného jako 55% disperze v minerálním oleji, a vzniklá směs se 2 hodiny míchá při teplotě 60 °C. Po zchlazení na teplotu místnosti se do směsi po kapkách přidá roztok 988 mg, 4 mmol benzylbromidu ve 2 ml tetrahydrofuranu a pak 300 mg, 2 mmol jodidu sodného. Reakční směs se míchá 17 hodin při teplotě místnosti. Rozpouštědlo se odstraní destilací za sníženého tlaku a zbytek je rozpuštěn v 50 ml ethylacetátu. Vzniklý roztok se promyje dvakrát 50 ml nasyceného vodného roztoku chloridu sodného. Po sušení nad bezvodým sulfátem hořečnatým se rozpouštědlo odstraní destilací za sníženého tlaku. Zbytek se rozpustí ve 4 ml tetrahydrofuranu a do vzniklého roztoku se přidají 4 ml 1M tetrahydrofuranového roztoku tetrabutylamoniumfluoridu. Směs se míchá dvě hodiny při teplotě místnosti a rozpouštědlo se pak odstraní destilací za sníženého tlaku. Zbytek se rozpustí v 50 ml ethylacetátu a vzniklý roztok se dvakrát promyje, pokaždé 50 ml nasyceného vodného roztoku chloridu sodného. Směs se suší nad bezvodým sulfátem hořečnatým a rozpouštědlo se odstraní destilací za sníženého tlaku. Po absorpci na 60 g sloupec silikagelu se zbytek čistí chromatografií při eluci roztokem methylenchloridu obsahující gradient koncentrací od 1 do 2,5 % objemových methanolu. Vzniklo 377,7 mg výsledné sloučeniny s výtěžkem 23 %.
‘H-NMR-spektrum (CDC13,270 MHz, TMS), ppm:
9,85 (1H, široký singlet),
7,56 (1H, singlet),
7,38-7,20 (10H, multiplet),
6,45 (1H, triplet, J = 6,92 Hz),
5,40 (1H, singlet),
4,62 - 4,58 (1H, multiplet),
4,17 - 4,15 (1H, multiplet),
3,75-3,58 (2H, multiplet), 2,47-2,22 (2H, multiplet),
1,36 (3H, singlet).
3b) 5'-0-Benzhydrylthymidin-2-kyanoethyl-N,N-diizopropylfosforamidit
-102CZ 287050 B6
Azeotropickou destilací s pyridinem se třikrát suší 204,2 mg, 0,5 mmol 5'-Obenzhydrylthymidinu, jehož syntéza je popsána v části a). Po rozpuštění ve 2,5 ml tetrahydrofuranu se v atmosféře argonu přidá 0,348, 2 mmol N,N-diizopropyl-N-ethylaminu a 0,233 ml, 1 mmol 2-kyanoethyl-N,N-diizopropylchlorfosforamiditu a vzniklá směs se 30 minut míchá při teplotě místnosti. Po filtraci reakční směsi se filtrát odpařuje za sníženého tlaku. Po rozpuštění v 50 ml ethylacetátu se vzniklý roztok dvakrát promyje, po každé 50 ml chlazeného 10% vodného roztoku uhličitanu sodného a pak suší nad bezvodým sulfátem sodným. Rozpouštědlo se odstraní destilací za sníženého tlaku a vzniklý zbytek se čistí po absorpci na sloupec 30 g silikagelu (70 až 230mesh) chromatografií při eluci směsí methylenchloridu, ethylacetátu a triethylaminu v poměru objemů 45:45:10. Frakce obsahující požadovanou sloučeninu se sloučí a rozpouštědlo se oddestiluje. Postup chromatografie se znovu opakuje za vzniku 213,4 mg výsledné sloučeniny s výtěžkem 70 %.
’Η-NMR (CDClj, 270 MHz, TMS), ppm:
7,55, 7,51 (dohromady, 1H, dva singlety),
7,43 - 7,22 (10H, multiplet),
6,48 - 6,42 (1H, multiplet),
5,44, 5,42 (dohromady 1H, dva singlety),
4,73 - 4,64 (1H, multiplet),
4,25, 4,19 (dohromady 1H, dva široké singlety),
3,90-3,55 (6H, multiplet),
2,68 - 2,24 (4H, multiplet),
1,39 (3H, singlet),
1,30-1,10 (12H, multiplet).
3c) Sloučenina vzorce 3c):
'CH-O—TGGGAG-OH
3(c)
Podle postupu uvedeného v příkladě lb) a za použití 5'-0-benzylhydrylthymidin-2-kyanoethylΝ,Ν-diizopropylfosforamiditin, jehož příprava je popsána v části 3b) a který se použije namísto 5'-0-tritylthymidin-2-kyanoethyl-N,N-diizopropylfosforamiditu. Reakční produkt se rozdělí na tři části a každá z nich se čistí vysokotlakou kapalinovou chromatografií (HPLC) v reverzní fázi (Inertsil REP-ODS, 20,0 x 250 nm, eluční činidlo A: 0,1 Μ TEAA, pH 7,3, eluční činidlo B: acetonitril, 15 až 45 % objemových B, 30 minut, lineární gradient, 7 ml/min, 254 nm). Frakce získané eluci ve 20,2 minutě se sloučí a zpracují podle postupu uvedeného v příkladě 15. Vzniklo 76 OD (260 nm) amorfní pevné látky výsledné sloučeniny.
UV-spektrum (H2O), lambdaraax nm: 255,
Dobaretence: 17,3 minut
HPLC (YMC-Pack A-312, S-5, 120A, ODS, eluční činidlo A: 0,1 M TEAA, pH7,3, eluční činidlo B: acetonitril, 10 až 40 % objemových B, 30 minut, lineární gradient, 2 ml/min, 254 nm).
-103CZ 287050 B6
Příklad 4
4(a)
Sloučenina byla vyrobena podle postupu uvedeného v příkladě 1b), ale do automatického syntetizačního zařízení DNA/RNA se vloží řetězec bází T666A66. Produkt reakce se čistí chromatografií v reverzní fázi po absorpci na sloupec silikagelu (preparativní Cl8, Waters, 1,5x15 cm, 50 mM REAB, pH 7,5, 20 až 50% acetonitril, lineární gradient, 254 nm). Po zpracování, uvedeném v příkladě lb) vznikla amorfní pevná látka s 180 OD (260 nm). Analýza vysokotlakou kapalinovou chromatografií v reverzní fázi (Inertsil ODS, 6x150 mm, eluční činidlo A: 0,1Μ TEAA, pH 7,5, eluční činidlo B: acetonitril, 10 až 60% objemových B, 20 minut, lineární gradient, 1 ml/min, 260 nm) prokázala, že doba retence sloučeniny je 18,22 minut.
UV-spektrum (voda), lambdamax nm: 255.
Příklad 5
5a) 5'-O-/(l,l-dimethylethyl)difenylsilyl/thymidin
Do roztoku 1,21 g, 5 mmol thymidinu a 0,749,11 mmol imidazolu v 10 ml dimethylformamidu se přidá 1,43 ml, 5,5 mmol terc.butyldifenylsilylchloridu v atmosféře argonu a vzniklá reakční směs se míchá 140 minut při teplotě místnosti. Po odstranění rozpouštědla destilací za sníženého tlaku se vzniklý zbytek rozpustí ve 100 ml methylenchloridu. Roztok se pětkrát promyje 100 ml vody. Po sušení nad bezvodým sulfátem hořečnatým se rozpouštědlo odstraní destilací za sníženého tlaku. Po adorpci na sloupec 100 g silikagelu (70 až 230mesh) se zbytek čistí chromatografií při eluci směsí methylenchloridu s gradientem koncentrací methanolu od 0,5 do 3 % objemových. Vzniklo 1,5 g výsledné sloučeniny s výtěžkem 62 %.
Ή-NMR (CDC13, 270 MHz, TMS), ppm:
10,52 (1H, široký singlet),
7,73-7,32(1 OH, multiplet),
7,57 (1H, singlet),
6,53 - 6,47 (1H, multiplet),
4,63 (1H, široký singlet),
4,48 (1H, široký singlet),
4,11 (IH, široký singlet),
4,04-3,85 (2H, multiplet), 2,58-2,16 (2H, multiplet), 1,59 (3H, singlet), 1,10 (9H, singlet).
-104CZ 287050 B6
5b) 5'-O-/( 1, l-dimethylethyl)difenylsilyl/thymidin-2-kyanoethyl-N,N-diizopropylfosforamidit
Sloučenina se vyrobí podle postupu uvedeného v příkladě 3b, ale za použití 240 mg, 0,5 mmol 5'-O-/(l,l-dimethylethyl)difenylsilyl/thymidinu, jehož syntéza je uvedená v části 5a). Vzniklo 254,4 mg výsledné sloučeniny s výtěžkem 74,7 %.
'H-NMR-spektrum (CDC13, 270 MHz, TMS), ppm:
7,69-7,36 (11H, multiplet),
6,43-6,38 (1H, multiplet),
4,70 - 4,62 (1H, multiplet),
4,16 - 4,09 (1H, multiplet),
4,04 - 3,55 (6H, multiplet),
2,67 -2,15 (4H, multiplet),
1,61 (3H, singlet),
1,22- 1,05( 12H, multiplet).
5c) Sloučenina vzorce 5c:
5(c)
Sloučenina se vyrobí podle postupu uvedeného v příkladě lb), ale namísto 5'-O-tritylthymidin2-kyanoethyl-N,N-diizopropylfosforamiditu se použije 5'—O—/(l,l—dimethylethyl)difenylsilyl/thymidin-2-kyanoethyl-N,N-diizopropylfosforamidit, jehož příprava je popsána v části 5b). Reakční směs se rozdělí na tři části a každá z nich se čistí vysokotlakou kapalinovou chromatografíí v reverzní fázi (Intersil) PREP-ODS, 20,0x250 mm, eluční činidlo A: 0,lM TEAA, pH 7,3, eluční činidlo B: acetonitril, 20 až 50 % objemových B, 30 minut, lineární gradient, 7 ml/min, 254 nm). Frakce získané elucí po 22,4 minutách se sloučí a zpracují podle postupu uvedeného v příkladě lb). Vzniklo 5400 (260 nm) amorfní pevné látky výsledné sloučeniny.
UV-spektrum (voda), lambdamax nm: 255.
Doba retence: 22,0 minut.
HPLC (YMC-Pack A-312, S-5, 120A, ODS, eluční činidlo A: 0,1 Μ TEAA, pH 7,3, eluční činidlo B: acetonitril, 20 až 50 % B objemových, 30 minut, lineární gradient, 1 ml/min, 254 nm).
Příklad 6
6a) 5 '-O-(3,5-dibenzyloxybenzyl)thym idin
-105CZ 287050 B6
Do roztoku 713 mg, 2 mmol 3'-O-/(l,l-dimethylethyl)dimethylsilyl/thymidinu (Can. J. Chem. 56, 2768, 1978), ve 4 ml tetrahydrofuranu se přidá v atmosféře argonu 175 mg, 4 mmol hydridu sodného, (55% disperze v minerálním oleji) a vzniklá směs se 2 hodiny míchá při teplotě 60 °C. Směs se pak zchladí na teplotu místnosti a do roztoku se po kapkách přidá 767 mg, 2 mmol 3,5dibenzyloxybenzylbromidu (Chem. Ber., 102, 2887, 1969) v 1 ml tetrahydrofuranu. Po 16 hodinách míchání při teplotě místnosti se rozpouštědlo odstraní destilací za sníženého tlaku a zbytek se rozpustí v 50 ml ethylacetátu. Vzniklý roztok s dvakrát promyje 50 ml 0,01 N vodné kyseliny chlorovodíkové. Roztok se suší nad sulfátem hořečnatým a rozpouštědlo se odstraní destilací za sníženého tlaku. Zbytek se po adsorpci na sloupec 100 g silikagelu (230 až 400 mesh) čistí chromatografií při eluci směsí methylenchloridu obsahující gradient koncentrací od 0,5 do 3 % methanolu. Vzniká 637,3 mg směsi obsahující 3'-O-/(l,l-dimethylethyl)dimethylsilyl/-5'-O-(3,5-dibenzyloxybenzyl)thymidin.
Po rozpuštění celkového množství této směsi v 1,93 ml tetrahydrofuranu se do roztoku přidá 1,93 ml 1M tetrahydrofuranového roztoku tetrabutylamoniumfluoridu a vzniklá směs se míchá 30 minut při teplotě místnosti. Po odstranění rozpouštědla destilací za sníženého tlaku a rozpuštění vzniklého zbytku v 50 ml ethylacetátu se roztok dvakrát promyje vždy 50 ml nasyceného vodného roztoku chloridu sodného. Po sušení nad bezvodým sulfátem hořečnatým se rozpouštědlo odstraní destilací za sníženého tlaku. Po adsorpci na sloupec 30 g silikagelu (230 až 400 mesh) se vzniklý zbytek čistí chromatografií při eluci směsí obsahující methylenchlorid a gradient koncentrací od 1 do 3 % methanolu. Vzniklé 258,5 mg výsledné sloučeniny s výtěžkem 23,7 %.
’Η-NMR-spektrum (CDC13, 270 MHz, TMS), ppm:
7,87 (1H, singlet),
7,52 (1H, singlet),
7,43-6,52 (13H, multiplet),
6,37 (1H, triplet, J = 6,75 Hz),
5,03 (4H, singlet),
4.51 (2H, dublet, J = 3,30 Hz),
4,50-4,44 (1H, multiplet), 4,06-4,03 (1H, multiplet), 3,77-3,63 (2H, multiplet), 2,32-2,12 (2H, multiplet), 1,67 (3H, singlet).
6b) 5'-0-(3,5-dibenzyloxybenzyl)thymidin-2-kyanoethyl-N,N-diizopropylfosforamidit
Syntéza sloučeniny se provede podle postupu popsaného v příkladě 3b) za použití 258,5 mg, 9,475 mmol 5'-O-(3,5-dibenzyloxybenzyl)thymidin, jehož příprava je popsána v části 6a). Vznikne 307,7 mg výsledné sloučeniny s výtěžkem 87 %.
‘H-NMR-spektrum (CDC13,270 MHz, TMS), ppm:
7,56, 7,53 (dohromady, 1H, dva singlety),
7,42 - 6,56 (13H, multiplet),
6,40 (1H, triplet, J = 6,60 Hz),
5,02 (4H, singlet),
4,67-4,58 (1H, multiplet),
4.53.4.51 (dohromady 2H, dva singlety),
4,23, 4,17 (dohromady 1H, dva široké singlety),
3,90-3,52 (6H, multiplet),
-106CZ 287050 B6
2,68 - 2,53 (2H, multiplet),
2,49 - 2,12 (2H, multiplet),
1,65 (3H, singlet),
1,18 (12H, dublet, J = 5,94 Hz).
6c) sloučenina vzorce 6c)
Sloučenina byla vyrobena podle postupu uvedeného v příkladě lb), ale za použití 5'-O-(3,5dibenzyloxybenzyl)thymidin-2-kyanoethyl-N,N-diizopropylfbsforamiditu, jehož syntéza je popsána v předchozí části 6b) namísto 5'-0-tritylthymidino-2-kyanoethyl-N,N-diizopropylfosforamiditu. Reakční směs se rozdělí na tři části a každá z nich se čistí vysokotlakou kapalinovou chromatografii v reverzní fázi (Intersil PREP-ODS, 20,0 x 250 mm, eluční činidlo: 0,1Μ TEAA, pH 7,3, eluční činidlo B: acetonitril, 20 až 50 % objemových B, 30 minut, lineární gradient, 7 ml/minutu, 254 nm). Frakce získané elucí po 19,8 minutách se sloučí a zpracují podle postupu uvedeném v příkladě lb. Vznikne 64,6 OD (260 nm) amorfní pevné látky výsledné sloučeniny.
UV-spektrum (voda), lambdamax nm: 255.
Doba retence: 22,8 minut
HPLC (YMC-Pack A-312, S-5, 120A, ODS, eluční činidlo A: 0,1 M TEAA, pH 7,3, eluční činidlo B: acetonitril, 20 až 50 % objemových B, 30 minut, lineární gradient, 1 ml/min, 254 nm).
Příklad 7
7a) 5'-O-(3,4-dibenzyloxybenzyl)thymidin
V 5 ml tetrahydrofuranu se rozpustí 713 mg, 2 mmol 3'-O-/(l,l-dimethylethyl)dimethylsilyl/thymidinu, (Can. J. Chem., 56, 2768, 1978) a do vzniklého roztoku se v atmosféře argonu přidá 175 m, 4 mmol hydridu sodného (55% disperze v anorganickém oleji). Směs se míchá 2 hodiny při teplotě 60 °C. Po zchlazení teploty na teplotu místnosti se do směsi přidá 678 mg, 2 mmol 3,4-dibenzyloxybenzylchloridu a pak 149,9 mg, 1 mmol jodidu sodného. Vzniklá směs se míchá 19 hodin při teplotě místnosti a pak 5 hodin při teplotě 60 °C. Rozpouštědlo se odstraní destilací za sníženého tlaku a zbytek se rozpustí v 50 ml ethylacetátu. Po promytí 2x50 ml 0,01 N vodnou kyselinou chlorovodíkovou a sušení nad sulfátem hořečnatým se rozpouštědlo odstraní destilací za sníženého tlaku. Zbytek se rozpustí ve 4 ml tetrahydrofuranu a do roztoku se přidá 4 ml 1M roztoku tetrabutylamoniumfluoridu v tetrahydrofuranu. Směs se míchá 2 hodiny při teplotě místnosti. Rozpouštědlo se odstraní destilací za sníženého tlaku a zbytek se rozpustí v 50 ml ethylacetátu. Vzniklý roztok se dvakrát promyje 50 ml nasyceným vodným roztokem chloridu sodného a suší se nad bezvodým sulfátem hořečnatým. Rozpouštědlo se odstraní destilací za sníženého tlaku a zbytek se čistí chromatografii (LiChropreo /výrobní značka/ Si60,
-107CZ 287050 B6 až 63 mikrometrů, Grosse C, Měrek) při eluci směsí methylenchloridu obsahující gradient koncentrací od 1 do 4 % methanolu. Vzniká 345,4 mg výsledné sloučeniny s výtěžkem 31,7 %.
‘H-NMR-íCDClj, 270 MHz, TMS), ppm:
8,26 (1H, singlet),
7,50 (1H, singlet),
7.47 - 7,23 (10H, multiplet),
6,91-6,79 (3H, multiplet),
6.36 (1H, triplet, J = 6,75 Hz),
5.17 (4H, singlet),
4,47,4,45 (dohromady 2H, dva singlety),
4,41-4,36 (1H, multiplet), 4,04 - 4,01 (1H, multiplet), 3,72-3,56 (2H, multiplet), 2,31-2,05 (2H, multiplet), 1,62 (3H, singlet).
7b) 5'-0-(3,4-dibenzyloxybenzyl)thymidin-2-kyanoethyl-N,N-diizopropylfosforamidit
Azeotropickou destilací s pyridinem se třikrát suší 271 mg, 0,499 mmol 5'-0-(3,4-dibenzyloxybenzyl)thymidin, jehož syntéza je popsána v části 7a). Po rozpuštění ve 2,5 ml tetrahydrofuranu se do vzniklé směsi přidá 0,348 ml, 2 mmol N,N-diizopropyl-N-ethylaminu a 0,223 ml, 1 mmol 2-kyanoethyl-N,N-diizopropylchlorfosforamiditu a směs se míchá dvě hodiny při teplotě místnosti v atmosféře argonu. Po odstranění rozpouštědla destilací za sníženého tlaku se zbytek rozpustí v 50 ml ethylacetátu a vzniklý roztok se promyje 2 x 50 ml chlazeného 10% vodného roztoku uhličitanu sodného, a pak suší nad bezvodým sulfátem sodným. Rozpouštědlo se odstraní destilací za sníženého tlaku a zbytek se po adsorpci na sloupec 30 g silikagelu (70 až 230 mesh) čistí chromatografií při eluci směsí methylenchloridu, ethylacetátu a triethylaminu v poměru objemů 45:45:10. Frakce obsahující požadovanou sloučeninu se sloučí a rozpouštědlo se odstraní destilací za sníženého tlaku. Vzniklý zbytek se po adsorpci na sloupec 30 g silikagelu (70 až 230 mesh) čistí chromatografií při eluci směsí methylenchloridu, ethylacetátu a triethylaminu. Vznikne 286,9 mg výsledné sloučeniny s výtěžkem 77 %.
’Η-NMR (CDC13, 270 MHz, TMS), ppm:
8,07 (1H, široký singlet),
7,53, 7,51 (dohromady 1H, dva singlety),
7,45-7,25(1 OH, multiplet),
6,92 - 6,81 (3H, multiplet),
6.37 (1H, triplet, J = 6,60 Hz),
5,15 (4H, singlet),
4,62-4,53 (1H, multiplet),
4.47 (2H, singlet),
4,22,4,14 (dohromady 1H, dva široké singlety),
3,90 - 3,53 (6H, multiplet),
2,68 - 2,53 (2H, multiplet), 2,47-2,05 (2H, multiplet),
1,58 (3H, singlet),
1.17 (12H, dublet, J = 5,94 Hz).
-108CZ 287050 B6
7c) Sloučenina vzorce 7c)
Syntéza se provádí podle postupu uvedeného v příkladě lb), ale za použití 5'-O-(3,4-dibenzyloxybenzyl)thymidin-2-kyanoethyl-N,N-diizopropylfosforamiditu, příprava je popsána v příkladě 7b), namísto 5'-O-tritylthymidin-2-kyanoethyl-N,N-diizopropylfosforamiditu. Reakční produkt byl rozdělen do tří částí a každá část byla čištěna vysokotlakou kapalinovou chromatografíí v reverzní fázi (Inertsil-ODS, 20,0 x 250 nm, eluční činidlo A: 0,1 Μ TEAA, pH 7,3, eluční činidlo B: acetonitril, 20 až 50 % objemových B, 30 minut, lineární gradient, 7 ml/min, 254 nm). Frakce získané eluci po 22,5 minutách se sloučí a zpracuje podle postupu uvedeného v příkladě lb). Vzniká 55,7 OD (260 nm) amorfní pevné látky výsledné sloučeniny.
UV-spektrum (voda), lambdamax nm: 254.
Dobaretence: 13,6 minut.
HPLC (YMC-Pack A-312, S-5, 120A, ODS, eluční činidlo A: 0,1 M TEAA, pH 7,3, eluční činidlo B: acetonitril, 20 - 50 % objemových B, 30 minut, lineární gradient, 2 ml/min, 254 nm).
Příklad 8
8a) Sloučenina vzorce 8a)
8(a)
Syntéza je popsána v příkladě lb, ale na místo 5'-0-tritylthymidin-2-kyanoethyl-N,Ndiizopropylfosforamiditu se použije 5'-O-(3,4-dibenzyloxybenzyl)thymidin-2-kyanoethylΝ,Ν-diizopropylfosforamiditu, jehož příprava je popsána v příkladě 7b). K přípravě se použije sloupec naplněný 5 mikromoly A-CPG (adenindeoxyribonukleosidu (A) vázaného na porézní sklo s řízeným obsahem pórů a do syntetizátoru DNA/RNA se vloží řetězec bází TGGA za vzniku výsledné sloučeniny. Produkt reakce se rozdělí na tři části a každá z nich se čistí vysokotlakou kapalinovou chromatografíí v reverzní fázi (Inertsil PREP-ODS, 20,0 x 250 nm, eluční činidlo A: P,1 M TEAA, pH 7,3, eluční činidlo B: acetonitril, 20 až 50% objemových, 30 minut, lineární gradient, 7 ml/min, 254 nm). Frakce získané eluci po 23,3 minutách se sloučí a zpracují podle příkladu lb. Vznikne 86,2 OD (260 nm) amorfní pevné látky výsledné sloučeniny.
UV-spektrum (voda), lambdamax: 256 nm.
Doba retence: 14,2 minut.
-109CZ 287050 B6
HPLC (YMC-Pack A-312, S-5, 120A, ODS, eluční činidlo A: 0,1 Μ TEAA, pH 7,3, eluční činidlo B: acetonitril, 20 až 50 % objemových B, 30 minut, lineární gradient, 2 ml/min., 254 nm).
Příklad 9
9a) Sloučenina vzorce 9a)
9(a)
Syntéza je popsána v příkladě lb, ale na místo 5'-0-tritylthymidin-2-kyanoethyl-N,Ndiizopropylfosforamiditu se použije 5'-O-(3,4-dibenzyloxybenzyl)thymidin-2-kyanoethylΝ,Ν-diizopropylfosforamidit, jehož příprava je popsána v příkladě 7b). Do syntetizátoru DNA/RNA se vloží řetězec bází TGGG za vzniku výsledné sloučeniny. Produkt reakce se rozdělí na tři části a každá z nich se čistí vysokotlakou kapalinovou chromatografn' v reverzní fázi (Inertsil PREP-ODS, 20,0 x 250 nm, eluční činidlo A: 0,1 Μ ΊΈΑΑ, pH 7,3, eluční činidlo B: acetonitril, 25 až 55 % objemových B, 30 minut, lineární gradient, 7 ml/min, 254 nm). Frakce získané eluci po 19,5 minutách se sloučí a zpracují podle příkladu lb). Vznikne 77,5 OD (260 nm) amorfní pevné látky výsledné sloučeniny.
UV-spektrum: (voda), larnbdamax nm: 255.
Doba retence: 14,8 minut.
Vysokotlaká kapalinová chromatografie (YMC-Pack A-312, S-5, 120A, ODS, eluční činidlo A: 0,1 M TEAA, pH 7,3, eluční činidlo B: acetonitril, 20 až 50 % objemových 8, 30 minut, lineární gradient, 2 ml/min, 254 ppm).
Příklad 10
10a) Sloučenina vzorce 10a)
Syntéza je popsána v příkladě lb), ale na místo 5'-O-tritylthymidin-2-kyanoethyl-N,Ndiizopropylfosforamiditu se použije 5'-O-(3,4-dibenzyloxybenzyl)-thymidin-2-kyanoethylΝ,Ν-diizopropylfosforamidit, jehož příprava je popsána v příkladě 7b). Do syntetizátoru DNA/RNA se vloží řetězec bází TGGGG za vzniku výsledné sloučeniny. Produkt reakce se rozdělí na tři části a každá z nich se čistí vysokotlakou kapalinovou chromatografn' v reverzní
-110CZ 287050 B6 fázi (Inertsil PREP-ODS, 20,0 x 250 nm, eluční činidlo A: Ο,ΙΜ TEAA, pH 7,3, eluční činidlo B: acetonitril, 20 až 50 % objemových B, 30 minut, lineární gradient, 7 ml/min, 254 nm). Frakce získané eluci po 22,9 minutách se sloučí a zpracují podle příkladu lb). Vznikne 19,8 OD (260 nm) amorfní pevné látky výsledné sloučeniny.
UV-spektrum (voda): lambdamax 254 nm.
Dobaretence: 14,1 minut.
Vysokotlaká kapalinová chromatografie (YMC-Pack A-312, S-5, 120A, ODS, eluční činidlo A: 1M TEAA, pH 7,3, eluční činidlo B: acetonitril, 20 až 50 % objemových B, 30 minut, lineární gradient, 2 ml/min, 254 nm).
Příklad 11
I la) 5'-O-/(pyren-l-yl)methyl/thymidin
Směs 875 mg hydridu sodného (jako 55% disperze v minerálním oleji), v 5 ml dimethylsulfoxidu 20 se míchá 30 minut při teplotě místnosti v atmosféře dusíku. Do vzniklého roztoku se po kapkách přidá roztok 2,42, 10 mmol thymidinu v 5 ml dimethylsulfoxidu. Směs se míchá 30 minut při teplotě místnosti a pak se přidá suspenze 2,51 g, 10 mmol l-(chlormethyl)pyrenu /Acta Chem. Scand., 10, 1362, 1956/ v 15 ml dimethylsulfoxidu. Po 90 minutách míchání při teplotě místnosti se reakční směs vlije do 100 ml chlazené vody a vodná směs se extrahuje 100 ml ethylacetátu a 25 100 ml methylenchloridu. Extrakt se suší nad bezvodým sulfátem hořečnatým a rozpouštědlo se odstraní destilací za sníženého tlaku. Vzniklý zbytek se čistí po absorpci na sloupec 150 g silikagelu (230 až 400 mesh) chromatografií při eluci směsí methylenchloridu s gradientem koncentrací od 0 do 4 % methanolu. Vznikne 292,4 mg výsledné sloučeniny s výtěžkem 6,4 %.
’Η-NMR-spektrum (hexadeuterovaný dimethylsulfoxid, 270 MHz, TMS), ppm:
8.44 - 8,07 (9H, multiplet),
7.44 (1H, singlet),
6.19 (1H, triplet, J = 6,75 Hz),
5,33 (1H, dublet, J = 5,4 Hz),
5,29 (2H, singlet),
4,37-4,38 (1H, multiplet),
4,00 - 3,96 (1H, multiplet),
3,92 - 3,79 (2H, multiplet),
2,10- 2,04 (2H, multiplet),
1.20 (3H, singlet).
II b) 5'-0-/(pyren-l-yl)methyl/thymidin-2-kyanoethyl-N,N-diizopropylfosforamidit
Azeotropickou destilací s pyridinem se 91,3 mg, 0,2 mmol 5'-O-/(pyren-l-yl)methyl/thymidinu třikrát suší a po rozpuštění ve 2 ml tetrahydrofuranu se v atmosféře argonu přidá 139 mikrolitrů, 0,8 mmol N,N-diizopropyl-N-ethylaminu a 81 mikrolitrů, 0,4 mmol 2-kyanethyl-N,Ndiizopropylhlorfosforamiditu a vzniklá směs se 30 minut míchá při teplotě místnosti. Po odstranění sraženiny filtrací a destilaci za sníženého tlaku se vzniklý zbytek rozpustí ve 20 ml 50 ethylacetátu. Roztok se dvakrát promyje vždy 20 ml chlazeného 10% vodného roztoku uhličitanu sodného. Roztok se suší nad bezvodým sulfátem hořečnatým a rozpouštědlo se odstraní destilací za sníženého tlaku. Vzniklý zbytek se po adsorpci na sloupec 30 g silikagelu (70 až 230 mesh)
-111CZ 287050 B6 čistí chromatografíí při eluci směsí methylenchloridu, ethylacetátu a triethylaminu v poměru objemů 6:3:1. Vzniklo 100,2 mg výsledné sloučeniny s výtěžkem 76 %.
'H-NMR spektrum (CDClj, 270 MHz, TMS): ppm:
8,36-7,99 (9H, multiplet),
7,50, 7,46 (dohromady 1H, dva singlety),
6,35 (1H, triplet, J = 6,68 Hz),
5,38 - 5,22 (2H, multiplet),
4,60 - 4,50 (1H, multiplet),
4,25-4,17 (1H, multiplet),
4,01-3,77 (2H, multiplet),
3,73 - 3,44 (4H, multiplet),
2,78 - 2,09 (4H, multiplet),
1,31, 1,29 (dohromady 3H, dva singlety),
1,10-1,05 (12H, multiplet).
lc) Sloučenina vzorce 1 lc)
Syntéza je popsána v příkladě lb), ale na místo 5'-O-tritylthymidin-2-kyanoethyl-N,Ndiizopropylfosforamiditu se použije 5'-O-/(pyren-l-yl)methyl/thymidin-2-kyanoethyl-N,Ndiizopropylfosforamidit, jehož příprava je popsána v příkladě 1 lb). Produkt reakce se rozdělí na tři části a každá z nich se čistí vysokotlakou kapalinovou chromatografíí v reverzní fázi (Inertsil PREP-ODS, 20,0 x 250 nm, eluční činidlo A: 0,1Μ TEAA, pH 7,3, eluční činidlo B: acetonitril, 20 až 50 % objemových B, 30 minut, lineární gradient, 7 ml/min, 254 nm). Frakce získané eluci po 15,4 minutách se sloučí a zpracují podle příkladu lb). Vznikne 80 OD (260 nm) amorfní pevné látky výsledné sloučeniny.
UV-spektrum (voda): lambdamax 243 nm.
Doba retence: 16,4 minut.
Vysokotlaká kapalinová chromatografie (YMC-Pack A-312, S-5, 120A, ODS, eluční činidlo A: 0,1 M TEAA, pH 7,3, eluční činidlo B: acetonitril, 20 až 50 % objemových B, 30 minut, lineární gradient, 1 ml/min, 254 nm).
Příklad 12
12a) O-dimethoxytritylethylenglykol
Azeotropickou destilací s pyridinem se suší 3,1 g, 50 mmol ethylenglykolu. Po rozpuštění ve 40 ml pyridinu se do vzniklého roztoku přidá 3,38 g, 10 mmol 4,4'-dimethoxytritylchloridu a vzniklá směs se dvě hodiny míchá při teplotě místnosti. Chromatografíí na tenké vrstvě se potvrdí vymizení míchané sloučeniny a po přidání 5 ml methanolu do reakční směsi se směs zahustí na polovinu objemu destilací za sníženého tlaku. Po rozpuštění ve 100 ml
-112CZ 287050 B6 methylenchloridu se vzniklý roztok promyje nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného. Organický roztok se zfiltruje přes 1PS filtrační papír (Whatman) a filtrát se destiluje za sníženého tlaku. Po adsorpci na sloupec 100 g silikagelu (70 až 230 mesh) se vzniklý zbytek čistí chromatografií při eluci směsí methylenchloridu obsahující 1 % objemové methanolu. Vznikne
1,97 g výsledné sloučeniny ve formě pryžovité látky.
'H-NMR-spektrum (CDC13, 270 MHz, TMS), ppm:
7,45 - 6,82 (13H, multiplet),
3,79 (6H, singlet),
3,75 (2H, triplet, J = 4,95 Hz),
3,25 (2H, triplet, J = 4,62 Hz),
1,95 (1H, triplet).
12b) Sloučenina vzorce 12b)
DMT-OCH2CH2OCCH7CH2CNHCH2CH2CH2--|CPG[12(b)
IIII oo
Azeotropickou destilací s pyridinem se čistí 0,13 g, 0,5 mmol o-dimethoxytritylethylenglykolu, jehož příprava je popsána v příkladě 12a), a pak se rozpustí ve 2 ml methylenchloridu. Do roztoku se přidá 75 mg, 0,75 mmol anhydridu kyseliny jantarové a 92 mg, 0,75 mmol 4(dimethylamino)pyridinu. Vzniklá směs se jednu hodinu míchá. Chromatografií na tenké vrstvě se potvrdí vymizení výchozí látky a pak se reakční směs ředí methylenchloridem a zředěný roztok se promyje 0,5 M vodným roztokem dihydrogenfosforečnanu draselného (pH 5,0) a vodou. Organická část se suší nad bezvodým sulfátem sodným a rozpouštědlo se odstraní destilací za sníženého tlaku. Vznikne O-dimethoxytritylethylenglykolmonosukcinát. Celkové množství této sloučeniny se suší azeotropickou destilací s pyridinem a pak se rozpustí ve 3 ml dimethylformamidu. Do roztoku se přidá 0,16 g, 0,75 mmol pentachlorfenolu a 0,16 g, 0,75 mmol 1,3-dicyklohexylkarbodiimidu a vzniklá směs se míchá 42 hodin při teplotě místnosti. Pak se nerozpustný podíl sloučeniny odstraní filtrací a filtrát se zahustí destilací za sníženého tlaku. Zbytek se smíchá s benzenem a vzniklý nerozpustný podíl se odstraní filtrací. Rozpouštědlo se odstraní destilací za sníženého tlaku.
0,25 g, 0,2 mmol vzniklého zbytku se rozpustí ve 4 ml dimethylformamidu a do roztoku se přidá 60 mikrolitrů, 0,44 mmol triethylaminu a 2,0 g (3-aminopropyl)-CPG (s obsahem 0,129 nnol/g aminoskupin). Vzniklá směs se nechá stát 36 hodin při teplotě místnosti. CPG nosič se oddělí filtrací, promyje methylenchloridem a suší ve vakuu. Po smíchání s 10 ml roztoku cap A a B (Millipore Ltd., Japonsko) se směs nechá stát 10 minut k acylaci zbývajících aminoskupin. Reakční směs se promyje pyridinem a methylenchloridem a pak se suší ve vakuu za vzniku sloučeniny vzorce 12b). Cap A roztok je směs anhydridu kyseliny octové a tetrahydrofuranu v poměru objemů 1:9a Cap B je směs N-methylimidazolu a tetrahydrofuranu v poměru objemů 1 : 4.
Kvantitativní analýza podílu zbytků odvozených z O-dimethoxytritylethylenglykolu a zavedených do sloučeniny příkladu 12b) se provádí podle dále uvedeného postupu. Směs 9,6 mg sloučeniny příkladu 12b) a roztoku, k odstranění ochranných skupin (roztok kyseliny dichloroctové v methylenchloridu, Millipore Ltd., Japonsko), byla 3 minuty míchána a pak se do roztoku přidá roztok methylenchloridu, tak, aby výsledný objem byl 20 ml. Do zkumavky se vloží 0,4 ml tohoto roztoku k měření. Vzorek roztoku se po destilaci za sníženého tlaku rozpustí ve směsi kyseliny perchloroctové a ethanolu v poměru objemů 3 :2. Absorbance dimethoxytritylového kationtu roztoku se určí při 500 nm.
-113CZ 287050 B6
Bylo prokázáno, že množství zavedených dimethoxytritylových skupin bylo 40,0 mikromol/g.
12c) Sloučenina vzorce 12c):
I2(c)
Sloučenina se vyrobí podle postupu uvedeného v příkladě lb) a za použití sloupce naplněného 125 mg/5 mikromol (sloučeniny z příkladu 12b). Do syntetizátoru se vloží řetězec bází TGGGAGZ (,Z“ má význam z příkladu 17). Reakční produkt se čistí chromatografií v reverzní fázi na sloupci silikagelu (preparativní C18, Waters, 1,5x15 cm, 50 mM vodný uhličitan trimethylamonný jako pufr (TEAB), pH 7,5, 20 až 50 % acetonitrilu, lineární gradient, 254 nm). Eluát se zpracuje podle postupu uvedeného v příkladě lb) za vzniku 165 OD (260 nm) amorfní pevné látky výsledné sloučeniny. Analýza vysokotlakou kapalinovou chromatografií v reverzní fázi (Inertsil ODS, 6xl50nm, eluční činidlo A: 0,1Μ TEAA, pH 7,5, eluční činidlo B: acetonitril, 10 až 60 % objemových B, 20 minut, lineární gradient, 1 ml/min, 260 nm) prokázala dobu retence 18,76 minut.
UV-spektrum (voda): lambdamax: 254 nm.
Příklad 13
13a) Sloučenina vzorce 13a)
13(a)
Syntéza se provádí podle postupu uvedeného v příkladě 12c), za použití 151 mg, 5 mikromol 3'amino-ON CPG (výrobní značka pro výrobek firmy Clontech). Reakční sloučenina se čistí chromatografií v reverzní fázi na sloupci silikagelu (preparativní Cl8, Waters, 1,5x15 cm, 50 mM, vodný uhličitan trimethylamonný jako pufr (TEAB), pH 7,5, 20 až 50 % acetonitril, lineární gradient, 254 nm). Eluát se zpracuje podle postupu uvedeného v příkladě lb) za vzniku 165 OD (260 nm) amorfní pevné látky výsledné sloučeniny. Analýza vysokotlakou kapalinovou chromatografií v reverzní fázi (Inertsil ODS, 6 x 150 nm, eluční činidlo A: 0,1 M TEAA, pH 7,5, eluční činidlo B: acetonitril, 10 až 60 % objemových B, 20 minut, lineární gradient, 1 ml/min, 260 nm) prokázala dobu retence 18,76 minut.
-114CZ 287050 B6
UV-spektrum (voda) lambdamax 255 nm.
Příklad 14
Sloučenina vzorce 14a)
I4(a)
Opakuje se postup podle příkladu 12c) s následující modifikací. Sloučenina z příkladu 12b) se nejprve naváže na guanindeoxyribonukleotid-beta-amidit v poloze 3'- na 3'-terminálním zakončení a pak se sloupec vyjme ze syntetizátoru bez oxidace oxidačním roztokem. Pak se do sloupce přidá 5 ml acetonitrilového roztoku tetraethylthiuramdisulfidu TEDT (Applied Biosystems) a sloupec se nechá 15 minut stát při teplotě místnosti. Pak se sloupec promyje acetonitrilem a vrátí do syntetizátoru.
Reakční sloučenina se čistí chromatografií v reverzní fázi na sloupci silikagelu (preparativní Cl8, Waters, 1,5 x 15 cm, 50 mM, vodný uhličitan trimethylamonný jako pufr (TEAB), pH 7,5, 20 až 50% acetonitril, lineární gradient, 254 nm). Eluát se zpracuje podle postupu uvedeného v příkladě lb) za vzniku amorfní pevné látky s 33 OD (260 nm). Analýza vysokotlakou kapalinovou chromatografií v reverzní fázi (Inertsil ODS, 6 x 150 mm, eluční činidlo A: 0,1 M TEAA, pH 7,5, eluční činidlo B: acetonitril, 10 až 60% objemových B, 20 minut, lineární gradient, 1 ml/min, 260 nm) prokázala dobu retence 18,92 minut.
UV-absorpční spektrum (voda), lambdamax: 254 nm.
Příklad 15
15a) 5'-0-trityl-N-benzyl-2'-deoxycytidin
Do 25 ml pyridinu se přidá 3,31 g, 10 mmol N-benzoyl-2'-deoxycytidinu a do vzniklé suspenze se přidá 3,07 g, 11 mmol tritylchloridu. Po jedné hodině míchání při teplotě 100 °C se suspenze nechá zchladit na teplotu místnosti a pak se odstraní pyridin destilací za sníženého tlaku. Vzniklý zbytek se rozpustí ve směsi ethylacetátu a nasyceného vodného roztoku chloridu sodného. Organická část se odstraní a dvakrát promyje nasyceným vodným roztokem chloridu sodného. Po sušení nad bezvodým sulfátem hořečnatým se rozpouštědlo odstraní destilací za sníženého tlaku. Zbytek se čistí po absorpci na sloupec silikagelu (Lober column Si-60, velikost C) při eluci gradientem objemů směsi methanolu a methylenchloridu od 2 :98 do 5 :95. Vznikne 1,47 g výsledné sloučeniny s výtěžkem 26 %.
’Η-NMR (CDCb, 270 MHz, TMS), ppm:
-115CZ 287050 B6
8,72 (1H, široký singlet),
8.26 (1H, dublet, J = 7,3 Hz),
7,89 (1H, dublet, J = 7,3 Hz),
7.26 - 7,64 (20H, multiplet),
6,29 (1H, triplet, J = 5,9 Hz),
4.48 - 4,53 (1H, multiplet),
4,12-4,16 (1H, multiplet), 3,42-3,57 (2H, multiplet),
2.23 - 2,77 (2H, multiplet),
2.51 (1H, široký singlet).
15b) 5'-0-trityl-N-benzoyl-2'-deoxycytidin-2-kyanoethyl-N,N-diizopropylfosforamidit
Azeotropickou destilací s pyridinem se suší 402 mg, 0,7 mmol 5'-O-trityl-N-benzoyl-2'-deoxycytidinu, jehož syntéza je popsána v části 15a). Po rozpuštění ve 3,5 ml methylenchloridu se do vzniklého roztoku přidá 60 mg, 0,35 mmol tetrazolidu diizopropylamonného. V atmosféře argonu se po kapkách přidá 245 mikrolitrů, 0,77 mmol 2-kyanoethyl-N,N,N',N'tetraizopropylfosfordiamiditu a vzniklá směs se 3,5 hodiny ve stejné atmosféře míchá při teplotě místnosti. Po rozpuštění v ethylacetátu se roztok promyje 10% vodným roztokem uhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, a pak se suší nad bezvodým sulfátem hořečnatým. Rozpouštědlo se odstraní destilací za sníženého tlaku a vzniklý zbytek se čistí chromatografií po adsorpci na sloupec 23 g silikagelu (70 až 230 mesh) při eluci ethylacetátem. Vznikne 337 mg výsledné sloučeniny jako pěny s výtěžkem 62 %.
’Η-NMR (CDCIj, 270 MHz, TMS), ppm:
8,87 (1H, široký singlet),
8.52 a 8,43 (1H, dublet, J = 7,3 Hz),
8,12 a 8,11 (1H, dublet, J = 7,3 Hz),
7.23 - 7,86 (20H, multiplet),
6.49 - 6,55 (1H, multiplet), 4,79-4,91 (1H, multiplet), 4,46-4,47 (1H, multiplet), 3,60-4,10 (6H, multiplet),
2,46 - 3,08 (4H, multiplet), 1,29- 1,40 (12H, multiplet).
15c) Sloučenina vzorce 15c)
Sloučenina se vyrobí podle postupu uvedeného v příkladě 1 za použití 35 mM roztoku acetonitrilu sloučeniny příkladu 15b), který byl vložen do amiditové baňky (označovaný jako „X“) a do syntetizátoru se vloží řetězec bází XGGGG. 90% vodný roztok formamidu, obsahující výslednou sloučeninu byl zahříván 5 minut při teplotě 95 °C a pak rychle zchlazen ledem.
-116CZ 287050 B6
Reakční směs byla rozdělena do čtyř částí, a každá z nich čištěna vysokotlakou kapalinovou chromatografíí v reverzní fázi (Inertsil PREP-ODS, 20,0 x 250 nm, eluční činidlo A: 0,1 M
TEAA, pH 7,0, eluční činidlo B: acetonitril, 10 až 60% objemových B, 30 minut, lineární gradient, 7 ml/min, 254 nm, teplota sloupce 60 °C). Frakce získané eluci po 20,9 minutách se sloučí a zpracují podle příkladu lb). Vznikne amorfní pevná látka s 68 OD (260 nm).
UV-spektrum (voda), lambdamax nm: 254.
Dobaretence: 13,25 minut.
Vysokotlaká kapalinová chromatografie (Inertsil ODS-2, eluční činidlo A: 0,1 M TEAA, pH 7,5, eluční činidlo B: acetonitril, 10 až 60 % objemových B, 20 minut, lineární gradient, 1 ml/min., 260 nm).
Příklad 16
16a) Sloučenina vzorce 16a):
DMT-O(CH2CH2O)6CCH2CH2CNHCH2CH2CH2pg
16(a)
Azeotropickou destilací s pyridinem se suší 0,26 g, 0,5 mmol o-dimethoxytritylhexaethylenglykolu (Nucleic Acids Res., 18, 6353, 1990) a pak se rozpustí ve 2 ml methylenchloridu. Do roztoku se přidá 75 mg, 0,75 mmol anhydridu kyseliny jantarové a 92 mg, 0,75 mmol 4(dimethylamino)pyridinu a vzniklá směs je míchána dvě hodiny. Chromatografíí na tenké vrstvě se potvrdí vymizení výchozí látky a pak se reakční směs ředí methylenchloridem a zředěný roztok se promyje 0,5 M vodným roztokem dihydrogenfosforečnanu draselného (pH 5,0) a vodou. Organická část se suší nad bezvodým sulfátem sodným a rozpouštědlo se odstraní destilací za sníženého tlaku. Vznikne O-dimethoxytritylhexaethylenglykolmonosukcinát.
Celkové množství sloučeniny se suší azeotropickou destilací s pyridinem a pak se rozpustí ve 3 ml dimethylformamidu. Do roztoku se přidá 0,23 g, 0,37 mmol pentachlorfenolu a 0,12 g, 0,56 mmol 1,3-dicyklohexylkarbodiimidu a vzniklá směs se míchá 16 hodin při teplotě místnosti. Pak se nerozpustný podíl odstraní filtrací a filtrát se zahustí destilací za sníženého tlaku. Zbytek se smíchá s benzenem a vzniklý nerozpustný podíl se odstraní filtrací. Rozpouštědlo se odstraní destilací za sníženého tlaku.
Do roztoku 0,23 g, 0,18 mmol zbytku v 5 ml dimethylformamidu se přidá 30 mikromol, 0,22 mmol triethylaminu a 1,0 g (3-aminopropyl)-CPG, jenž obsahuje 0,129 mmol/g aminoskupin. Vzniklá směs se nechá stát 24 hodin při teplotě místnosti. CPG nosič se oddělí filtrací, promyje methylenchloridem a suší ve vakuu. Po smíchání s 3 ml roztoku Cap A a B (Millipore Ltd., Japonsko) se směs nechá stát 10 minut. Reakční směs se promyje pyridinem a methylenchloridem a pak se suší ve vakuu za vzniku sloučeniny vzorce 12b). Cap A roztok je směs anhydridu kyseliny octové a tetrahydrofuranu v poměru objemů 1:9a Cap B je směs Nmethylimidazolu a tetrahydrofuranu v poměru objemů 1 : 4.
Kvantitativní analýza podílu zbytků odvozených z O-dimethoxytritylethylenglykolu a zavedených do sloučeniny příkladu 16a) se provádí podle dále uvedeného postupu.
Směs 9,7 mg sloučeniny příkladu 16a) a roztoku k odstranění ochranných skupin, roztok kyseliny dichloroctové v methylenchloridu (Millipore Ltd., Japonsko), byla 3 minuty míchána a pak se do
-117CZ 287050 B6 roztoku přidá roztok methylenchloridu, tak, aby výsledný objem byl 20 ml. Do zkumavky se vloží 0,4 ml tohoto roztoku k měření. Vzorek 3 ml roztoku se po destilaci za sníženého tlaku rozpustí ve směsi kyseliny perchloroctové a ethanolu v poměru objemů 3 :2, a absorbance dimethoxytritylového kationtu v roztoku se určí při 500 nm. (epsilon se rovná 71.700).
Množství zavedených dimethoxytritylových skupin bylo 29,1 mikromol/g.
16b) Sloučenina vzorce 16b)
16(b)
Sloučenina se vyrobí podle postupu popsaného v příkladě 12b) za použití sloupce naplněného B5 mg, 5 mikromol sloučeniny, jejíž syntéza je popsána v příkladě 16b). Reakční sloučenina se čistí chromatografií v reverzní fázi na sloupci silikagelu (preparativní Cl8, Waters, 1,5 x 15 cm, 50 mM vodný uhličitan trimethylamonný jako pufr (TEAB), pH 7,5, 5 až 50 % acetonitril, lineární gradient, 254 nm. Eluát se zpracuje pole postupu uvedeného v příkladě lb) za vzniku amorfní pevné látky se 151 OD (260 nm). Analýza vysokotlakou kapalinovou chromatografií v reverzní fázi (Inertsil ODS, 6 x 150 mm, eluční činidlo A: 0,1 Μ TEAA, pH 7,5, eluční činidlo B: acetonitril, 10 až 60% objemových 8, 20 minut, lineární gradient, 1 ml/min, 260 nm) prokázala dobu retence 18,50 minut.
UV-absorpční spektrum (voda), lambdamax: 254 nm.
Příklad 17
17a) Sloučenina vzorce 17a)
H 17(a)
Sloučenina se vyrobí podle postupu popsaného v příkladě lb), za použití sloupce naplněného 85 mg, 5 mikromol sloučeniny, jejíž příprava je popsána v příkladě 16b) a 35 mM roztoku Odimethoxytritylhexaethylenglykol-0-(2-kyanoethyl-N,N-diizopropylfosforamiditu) v acetonitrilu (Nucleic Acids Res., 18, 6353, 1990). Sloučeniny se umístí do amiditové baňky (a jsou zde označeny „X“). Do syntetizačního zařízení se vloží řetězec bází TGGGAGXZ. V tomto
-118CZ 287050 B6 příkladě a v následujících je X definováno, jakje shora uvedeno a Z znamená „hluchý“ kód, to znamená kód, který nezavádí po přívodu do syntetizátoru určitou bázi. Při jeho přívodu do syntetizátoru může dojít k přivedení A, G, C, T nebo X, avšak k řetězci není navázána žádná báze. Reakční produkt se čistí chromatografii v reverzní fázi na sloupci silikagelu (preparativní C18, Waters, 1,5 x 15 cm, 50 mM vodný uhličitan trimethylamonný jako pufr (TEAB), pH 7,5, 5 až 50 % acetonitril, lineární gradient 254 nm). Eluát se zpracuje podle postupu uvedeného v příkladě lb) za vzniku 136 OD (260 nm) amorfní pevné látky výsledné sloučeniny. Analýza vysokotlakou kapalinovou chromatografii v reverzní fázi (Inertsil ODS, 6x150 mm, eluční činidlo A: Ο,ΙΜΤΕΑΑ, pH 7,5, eluční činidlo B: acetonitril, 10 až 60% objemových B, 20 minut, lineární gradient, 1 ml/min, 260 nm) prokázala dobu retence 18,32 minut.
UV-absorpční spektrum (voda), lambdamax: 254 nm.
Příklad 18
18a) Sloučenina vzorce 18a)
H 18(a)
Sloučenina se vyrobí podle postupu uvedeného v příkladě 17. Do syntetizačního zařízení se vloží řetězec bází TGGGAGXXZ, kde Za X jsou definovány ve shora uvedeném příkladě 17. Uvedený reakční produkt se čistí chromatografii v reverzní fázi na sloupci silikagelu preparativní Cl8, Waters, 1,5 x 15 cm, 50 mM vodný uhličitan trimethylamonný jako pufr (TEAB), pH 7,5, 5 až 50 % acetonitril, lineární gradient, 254 nm). Eluát se zpracuje podle postupu uvedeného v příkladě lb) za vzniku 136 OD (260 nm) amorfní pevné látky výsledné sloučeniny. Analýza vysokotlakou kapalinovou chromatografii v reverzní fázi (Inertsil ODS, 6x150 mm, eluční činidlo A: Ο,ΙΜΤΕΑΑ, pH 7,5, eluční činidlo B: acetonitril, 10 až 60% objemových B, 20 minut, lineární gradient, 1 ml/min, 260 nm) prokázala dobu retence 18,20 minut.
UV-absorpční spektrum (voda), lambdamax: 255 nm.
Příklad 19
19a) Sloučenina vzorce 19a)
I9(a)
-119CZ 287050 B6
Sloučenina se vyrobí podle postupu uvedeného v příkladě 17. Do syntetizačního zařízení se vloží řetězec bází TGGGAGXXXZ, kde Za X jsou definovány ve shora uvedeném příkladě 17. Výsledná reakční sloučenina se čistí chromatografií v reverzní fázi na sloupci silikagelu (preparativní Cl8, Waters, 1,5x15 cm, 59 mM vodný uhličitan trimethylamonný jako pufr (TEAB), pH 7,5, 5 až 50 % acetonitril., lineární gradient, 254 nm). Eluát se zpracuje podle postupu uvedeného v příkladě lb) za vzniku 110 OD (260 nm) amorfní pevné látky výsledné sloučeniny. Analýza vysokotlakou kapalinovou chromatografií v reverzní fázi (Inertsil ODS, 6 x 150 mm, eluční Činidlo A: 0,1 Μ TEAA, pH 7,5, eluční Činidlo B: acetonitril, 10 až 60 % objemových B, 20 minut, lineární gradient, 1 ml/min, 260 nm) prokázala dobu retence 17,99 minut.
UV-absorpční spektrum (voda), lambdamax: 255 nm.
Příklad 20
Sloučenina vzorce 20a)
20(a)
Sloučenina se vyrobí podle postupu uvedeného v příkladě 2c). Do syntetizačního zařízení se vloží řetězec bází TGGGAGZ, kde Z je definováno ve shora uvedeném příkladě 17. Výsledný reakční produkt se čistí chromatografií v reverzní fázi na sloupci silikagelu (preparativní Cl8, Waters, 1,5 x 15 cm, 50 mM vodný uhličitan trimethylamonný jako pufr (TEAB), pH 7,5, 20 až 50 % acetonitril, lineární gradient, 254 nm). Eluát se zpracuje podle postupu uvedeného v příkladě lb) za vzniku amorfní pevné látky se 177 OD (260 nm). Analýza vysokotlakou kapalinovou chromatografií v reverzní fázi (Inertsil ODS, 6 x 150 mm, eluční činidlo A: 0,1 M TEAA, pH7,5, eluční činidlo B: acetonitril, 10 až 60% objemových B, 20 minut, lineární gradient, 1 ml/min, 260 nm) prokázala dobu retence 19,10 minut.
UV absorpční spektrum (voda), lambdamax: 254 nm.
Příklad 21
Sloučenina vzorce 21a)
-120CZ 287050 B6
T II
DMT—OCH,CH,SCH,CH,0-P—O o
ncch2ch2o
Do syntetizačního zařízení se vloží 250 mg 5'-fosfátu ON (výrobní značka firmy Clontech) v 5,2 ml acetonitrilu a sloupec naplněný 15 mikromolů C-CPG (Millipore Ltd., Japonsko). Podle postupu uvedeného v příkladě lb) se vyrobí výsledná sloučenina.
Sloučenina vzorce 21b)
D sloupce s filtrem a obsahujícího 115 mg, 4 mikromol výsledné sloučeniny z předchozí části 21a) bylo přidáno 5 ml roztoku k odštěpení ochranné skupiny (Millipore Ltd, Japonsko). Reakční směs se nechá 1 minutu stát, promyje se 5 ml methylenchloridu a pak se nechá jednu minutu působit uvedený roztok. Směs se promyje 5 ml methylenchloridem a 5 ml pyridinem a pak se destiluje azeotropickou destilací s pyridinem. Do destilátu se přidá roztok 20 mg 5'-Odimethoxytrityl-2-N-izobutyryl-2'-deoxyguanosin-3'-0-(2-chlorfenyl)fosfátu triethylamonného (Nucleic Acids Res., 8, 5461, 1980) v 0,5 ml pyridinu. Po odstranění rozpouštědla destilací za sníženého tlaku se do vzniklého zbytku přidá 40 mg 2,4,6-trimethylbenzensulfonyl-3nitrotriazolu v 0,5 ml pyridinu a vzniklá směs se 30 minut zahřívá na teplotu 40 °C. Reakční směs se promyje třikrát 5 ml pyridinu a do směsi se přidá 2,5 ml Cap A roztoku (Millipore Ltd.,
-121CZ 287050 B6
Japonsko) a 2,5 ml Cap B roztoku (Millipore Ltd., Japonsko). Směs se nechá 3 minuty stát, promyje se třikrát 5 ml methylenchloridu za vzniku výsledné sloučeniny.
Sloučenina vzorce 21c)
Sloučenina se vyrobí podle postupu uvedeného v příkladě 1 b), za použití sloupce naplněného 115 mg, 4 mikromol sloučeniny, jejíž syntéza je popsána v příkladě 21b) a místo 5'-Otritylthymidin-2-kyanoethyl-N,N-diizopropylfosforamiditu se použije thymindeoxynukleotidbeta-amidit (Millipore Ltd., Japonsko). Výsledný reakční produkt se čistí chromatografií v reverzní fázi na sloupci silikagelu (preparativní Cl8, Waters, 1,5 x 15 cm, 50 mM vodný uhličitan trimethylamonný jako pufr (TEAB), pH 7,5 až 50% acetonitril, lineární gradient, 254 nm). Eluát se zpracuje podle postupu uvedeného v příkladě lb) za vzniku 85 OD (260 nm) amorfní pevné látky výsledné sloučeniny. Analýza vysokotlakou kapalinovou chromatografií v reverzní fázi (Inertsil ODS, 6 x 150 mm, eluční činidlo A: 0,1 M TEAA, pH 7,5, eluční činidlo B: acetonitril, 10 až 50% objemových B, 20 minut, lineární gradient, 1 ml/min, 260 nm) prokázala dobu retence 21,5 minut.
UV absorpční spektrum (voda): lambdamax: 254 nm.
Příklad 22
22a) 5'-0-dimethoxytrityl-2-N-izobutyryl-2'-deoxyguanosin-3'-0-triethylamoniumfenylfosfát
Azeotropickou destilací s pyridinem se suší 0,8 g, 11,55 mmol 1,2,4-triazolu a po přidání 10 ml dioxanu se do vzniklé reakční směsi přidá 0,52 ml, 3,5 mmol fenylfosfordichloridátu. Během chlazení a míchání se přidá 1,0 ml, 7,35 mmol triethylaminu, a pak se teplota nechá zvýšit na teplotu místnosti. Směs se míchá 2 hodiny a po odstranění chlorovodíku filtrací vznikne roztok dioxanu obsahující 0,35 mmol/ml fenylfosforbis(triazolidátu).
ml, 0,35 mmol tohoto dioxanového roztoku se přidá do 0,15 g, 0,23 mmol 5'-0-dimethoxytrityl-2-N-izobutyryl-2'-deoxyguanosinu (Methods Enzymol., 65, 610, 1980) a vzniklá směs se 3 hodiny míchá při teplotě místnosti. Po přidání 10 ml 30% vodného roztoku pyridinu se reakční směs extrahuje 30 ml methylenchloridu a vzniklý extrakt se promyje 0,1 M TEAB. Rozpouštědlo se odstraní destilací za sníženého tlaku a vzniklý zbytek se rozpustí v 1 ml methylenchloridu a rozetře s 30 ml směsi hexanu a diethyletheru v poměru objemů 1 : 1, obsahující 1 % objemové triethylaminu. Vznikne 81 mg výsledné sloučeniny jako prášku s výtěžkem 40 %.
‘H-NMR-spektrum (CDCI3, 270 MHz, TMS), ppm:
-122CZ 287050 B6
12,07 (1H, široký singlet),
9,67 (1H, široký singlet), 7,80 - 7,64 (1H, multiplet),
7.47 - 6,91 (18H, multiplet),
6.12- 6,10 (1H, multiplet),
5.48 - 5,45 (1H, multiplet), 4,64 - 4,58 (1H, multiplet), 4,28 (1H, multiplet),
3,74 (6H, multiplet), 3,38-3,18 (2H, multiplet), 2,98-2,89 (6H, multiplet), 2,73-2,51 (2H, multiplet), 2,34 - 2,29 (1H, multiplet), 1,25-1,19 (9H, multiplet),
1.12- 0,99 (6H, multiplet).
22b) Sloučenina vzorce 22b)
Postup syntézy je uveden v příkladě 21b). Použije se 143 mg, 5 mikromol výsledné sloučeniny příkladu 21a) a výsledné sloučeniny příkladu 22a) za vzniku výsledné sloučeniny.
22c) Sloučenina vzorce 22c)
-123CZ 287050 B6
Sloučenina se vyrobí podle postupu uvedeného v příkladě lb), za použití sloupce naplněného 143 mg, 5 mikromol sloučeniny, jejíž syntéza je popsána v příkladě 22b). Výsledný reakční produkt se čistí chromatografíí v reverzní fázi na sloupci silikagelu (preparativní Cl8, Waters,
1,5 x 15 cm, 50 mM vodný uhličitan trimethylamonný jako pufr (TEAB), pH 7,5, 20 až 50 % acetonitril, lineární gradient, 254 nm). Eluát se zpracuje podle postupu uvedeném v příkladě lb) za vzniku 66 OD (260 nm) amorfní pevné látky výsledné sloučeniny. Analýza vysokotlakou kapalinovou chromatografíí v reverzní fázi (Inertsil ODS, 6x 150 mm, eluční činidlo A: 0,1 M TEAA, pH7,5, eluční činidlo B: acetonitril, 10 až 60% objemových B, 20 minut, lineární gradient, 1 ml/min, 260 nm) prokázala dobu retence 18,22 min.
UV absorpční spektrum (voda), lambdamax: 255 nm.
Příklad 23
23a) Sloučenina vzorce 23a)
23(a)
Sloučenina se vyrobí podle postupu uvedeného v příkladě lb), za použití sloupce naplněného 115 mg, 4 mikromol sloučeniny, jejíž syntéza je popsána v příkladě 21b). Výsledný reakční produkt se čistí chromatografíí v reverzní fázi na sloupci silikagelu (preparativní Cl8, Waters,
1,5 x 15 cm, 50 mM vodný uhličitan trimethylamonný jako pufr (TEAB), pH 7,5, 20 až 50 % acetonitril, lineární gradient 254 mm). Eluát se zpracuje podle postupu uvedeného v příkladě lb) za vzniku 56 OD (260 nm) amorfní pevné látky výsledné sloučeniny. Analýza vysokotlakou kapalinovou chromatografíí v reverzní fázi (Inertsil ODS, 6 x 150 mm, eluční činidlo A: 0,1 M TEAA, pH 7,5, eluční činidlo B: acetonitril, 10 až 60% objemových B, 20 minut, lineární gradient, 1 ml/min, 260 nm) prokázala dobu retence 18,38 minut.
UV absorpční spektrum (voda), lambdamax: 255 nm.
Příklad 24
24a) Sloučenina vzorce 24a)
-124CZ 287050 B6
Sloučenina byla vyrobena podle postupu uvedeného v příkladě 21b), za použití 143 mg, 5 mikromol sloučeniny příkladu 21a) a triethylamonium 5'-0-dimethoxytrityl-2-N,Nizobutyryl-2'-deoxyguanosin-3'-(4-chlorfenyl)fosfátu (Methods Enzymol., 65, 610,1980).
24b) Sloučenina vzorce 24b)
Sloučenina se vyrobí podle postupu uvedeného v příkladě lb), za použití sloupce naplněného 143 mg, 4 mikromol sloučeniny, jejíž syntéza je popsána v příkladě 24b). Výsledná reakční sloučenina se čistí chromatografií v reverzní fázi na sloupci silikagelu (preparativní C18, Waters,
1,5 x 15 cm, 50 mM vodný uhličitan trimethylamonný jako pufr (TEAB), pH 7,5, 20 až 50 % acetonitril, lineární gradient, 254 nm). Eluát se zpracuje podle postupu uvedeného v příkladě lb) za vzniku 55 OD (260 nm) amorfní pevné látky výsledné sloučeniny. Analýza vysokotlakou kapalinovou chromatografií v reverzní fázi (Inertsil ODS, 6x150 mm, eluční činidlo A: 0,1 Μ TEAA, pH 7,5, eluční činidlo B: acetonitril, 10 až 60 % objemových B, 20 minut, lineární gradient, 1 ml/min, 260 nm) prokázala dobu retence 18,55 minut.
UV absorpční spektrum (voda), lambdamax: 255 nm.
-125CZ 287050 B6
Příklad 25
DMT-O-TGGGAG-OH
Požadovaný řetězec bází (5-TGGGAG-3') se vloží do 38OB syntetizátoru (výrobek firmy Applied Biosystems lne.) a řízený sloupec porézního skla (1 mikromol škála) se napojí na 3'konci. Syntéza se provede v množství 1 mikromol. Zařízení se nastaví tak, aby nedošlo k odštěpení ochranné DMT skupiny. Za vzniku oligodeoxyribonukleotidů jako amonného roztoku byl produkt obsahující DMT skupinu automaticky odštěpen od pryskyřice. Roztok byl umístěn do lahvičky a zahříván 8 hodin na teplotu 55 °C. Amoniak se odstraní odpařováním v proudu dusíku. Vzniklý zbytek se rozpustí v malém množství 0,1 M TEAA (pH 7,0). Roztok se filtruje přes millipore-fíltr (02 mikrometru) a filtrát se čistí vysokotlakou kapalinovou chromatografíí v reverzní fázi (Cosmosil 4C18-AR, 20x250 mm) za níže uvedených podmínek. Z frakcí získaných eluci po 13,5 minutách se odstraní rozpouštědlo (acetonitril) destilací za sníženého tlaku. Vzniklo 800 mikrogramů výsledné sloučeniny.
Doba eluce: 17,0 minut.
Podmínky vysokotlaké kapalinové chromatografie v reverzní fázi:
pufrový roztok A: 0,lM triethylamonium acetátový pufr (pH 7,0),
roztok pufru B: 100% acetonitril,
rychlost průtoku: 9 ml/min
čas (min) pufr A (%) pufrB(%)
0 80 20
15 55 45
20 55 45
Příklady 26 až 38
Způsobem, popsaným v příkladu 25 byly připraveny také sloučeniny z příkladů 26 až 38. Názvy sloučenin a doby jejich eluce jsou uvedeny v následující tabulce 3.
Tabulka 3
příkl. č. název produktu doba retence
26 DMT-O-TGGG-OH 17,5 min
27 DMT-O-TGGGA-OH 16,7 min
28 DMT-O-TGGGG-OH 16,8 min
29 DMT-O-CGGGAGG-OH 16,3 min
30 DMT-O-TGGGAGG-OH 16,2 min
31 DMT-O-TTGGAGG-OH 18,0 min
32 DMT-O-TGCGAGG-OH 17,2 min
33 DMT-O-GGGGAGG-OH 15,3 min
34 DMT-O-mCGGGAGG-OH 16,3 min
35 DMT-O-mCGmCGAGG-OH 16,6 min
36 DMT-O-TTGGGAGG-OH 17,1 min
37 DMT-O-CTGGGAGG-OH 17,7 min
38 DMT-O-CTGGT-OH 17,2 min
39 DMT-O-CTGGC-OH 17,1 min
40 DMT-O-CTCGT-OH 17,6 min
-126CZ 287050 B6
Tabulka 3 - pokračování
příkl. č. název produktu doba retence
41 DMT-O-CTCGC-OH 17,4 min
42 DMT-O-CTCGG-OH 17,5 min
43 DMT-O-CGGGT-OH 16,1 min
44 DMT-O-CGGGC-OH 16,1 min
45 DMT-O-CGGGG-OH 16,2 min
46 DMT-O-CGCGT-OH 17,8 min
47 DMT-O-CGCGC-OH 17,5 min
48 DMT-O-CGCGG-OH 18,0 min
49 DMT-O-TTGGA-OH 18,6 min
50 DMT-O-TTGGT-OH 18,6 min
51 DMT-O-TTGGC-OH 18,4 min
52 DMT-O-TTGGG-OH 17,7 min
53 DMT-O-TTCGA-OH 18,9 min
54 DMT-O-TTCGT-OH 18,7 min
55 DMT-O-TTCGC-OH 18,6 min
56 DMT-O-TTCGG-OH 18,8 min
57 DMT-O-TGGGT-OH 17,6 min
58 DMT-O-TGGGC-OH 17,4 min
59 DMT-O-TGCGA-OH 17,8 min
60 DMT-O-TGCGT-OH 17,7 min
61 DMT-O-TGCGC-OH 18,3 min
62 DMT-O-TGCGG-OH 17,6 min
63 DMT-O-CTCG-OH 17,9 min
64 DMT-O-TTCG-OH 19,1 min
65 DMT-O-CTGG-OH 17,1 min
66 DMT-O-CGCG-OH 18,2 min
67 DMT-O-TGCG-OH 18,0 min
68 DMT-O-CGGG-OH 16,2 min
69 DMT-O-TTGG-OH 18,2 min
70 DMT-O-GGGCGGGGC-OH 15,4 min
71 DMT-O-TAGGAGG-OH 17,7 min
72 DMT-O-TGGGAGGT-OH 16,2 min
73 DMT-O-TGGGCGCAG-OH 17,1 min
74 DMT-O-CCG-OH 16,7 min
75 DMT-O-TCGGAGG-OH 17,5 min
76 DMT-O-TGmCGAGG-OH 16,6 min
77 DMT-O-GTGGGAGG-OH 15,7 min
78 DMT-O-TGG-OH 15,4 min
79 DMT-O-TGGGAmGG 16,3 min
80 DMT-O-TGGGAGA-OH 16,7 min
81 DMT-O-AATGGGAGG-OH 14,9 min
-127CZ 287050 B6
Příklad 82
82a) Sloučenina vzorce 82a):
Reakční činidla pro syntézu, která budou dále podrobněji popsána, byla dodána do syntetizátoru DNA/RNA Cyclone Plus (Milligen/Biosearch, Millipore Ltd., Japonsko). Do syntetizátoru byla rovněž uložena kazeta, programovaná na amiditovou metodu s obsahem 15 mikromol materiálu. Byl užit přibližně 35 mM acetonitrilový roztok 5'-0-dimethoxytrityl-2-N-izobutyryl-2'deoxyguanosin-3'-O-(methyl-N,N-diizopropyl)fosforamiditu (Sigma) místo beta-kyanoethylamiditu pro guanosin. Výsledný produkt byl získán tak, že byl použit prázdný sloupec (15,0 mikromol), který byl naplněn 143 mg, 5 mikromoly sloučeniny z příkladu 21a), pak byl do syntetizátoru uložen řetězec bází GX a program probíhal po navázání báze bez působení kyseliny.
82b) Sloučenina vzorce 82b)
82(b)
Postupuje se obdobným způsobem jako v příkladu lb), avšak užije se sloupec s náplní 143 mg, 5 mikromol sloučeniny z příkladu 82a), čímž se získá výsledný produkt. Tento produkt se pak čistí chromatografií na sloupci silikagelu v reverzní fázi (Preparativní Cl8, Waters, 1,5 x 15 cm, 50 mM TEAB, pH 7,5, 20 až 50 % acetonitrilu, lineární gradient, 254 nm). Produkt se pak zpracovává obdobným způsobem jako produkt z příkladu lb), čímž se získá výsledný produkt,
-128CZ 287050 B6 který má při 269 nm optickou hustotu OD 66 jako amorfní pevná látka. Analýzou vysokotlakou kapalinovou chromatografii na sloupci v reverzní fázi (Inertsil ODS, 6 x 250 mm, eluční činidlo
A: 0,1 M TEAA, pH 7,5, eluční činidlo B: acetonitril, 10 až 60% objemových B, 20 minut, lineární gradient, 1 ml/min, 260 nm) je možno prokázat, že vzorek má dobu retence 17,54 minut.
UV-absorpční spektrum (voda), lambdamax nm: 254.
Příklad 83
83a) Sloučenina vzorce 83a)
Postupuje se obdobným způsobem jako v příkladu 82a), avšak užije se 143 mg, 5 mikromol sloučeniny z příkladu 21a), čímž se získá požadovaný výsledný produkt. Postupuje se tak, že se nejprve naváže 5'-0-dimethoxytrityl-2-n-izobutyiyl-2'-deoxyguanosin-3'-0-(methyl-N,Ndiizopropyl)fosforamidit, pak se sloupec vyjme ze syntetizátoru DNA/RNA bez oxidace pomocí oxidačního roztoku. Pak se do sloupce přidá 5 ml acetonitrilového roztoku tetramethylthiuramdisulfidu TETD (Applied Biosystems) a sloupec se nechá stát 15 minut při teplotě místnosti. Pak se sloupec promyje acetonitrilem a vloží zpět do syntetizátoru.
b) Sloučenina vzorce 83 b)
83(b)
-129CZ 287050 B6
Postupuje se obdobným způsobem jako v příkladu 1 b), avšak užije se sloupec s náplní 143 mg, 5 mikromol sloučeniny z příkladu 83a), čímž se získá výsledný produkt. Tento reakční produkt se pak čistí chromatografií na sloupci silikagelu v reverzní fázi (preparativní Cl8, Waters, 1,5x15 cm, 50 mM TEAB, pH 7,5, 20 až 50% acetonitrilu, lineární gradient, 1 ml/min, 260 nm). Výsledný produkt se pak zpracovává obdobným způsobem jako v příkladu lb), čímž se získá produkt s OD 111 při 260 nm jako amorfní pevná látka. Analýzou vysokotlakou kapalinovou chromatografií v reverzní fázi (Inertsil ODS, 6 x 150 mm, eluční činidlo A: 0,1 M REAA, pH 7,5, eluční činidlo B: acetonitril, 10 až 60% objemových B, 20 minut, lineární gradient, 1 ml/min, 260 nm) je možno prokázat, že vzorek má dobu retence 17,72 minuty.
UV-absorpční spektrum (voda), lambdamax nm: 254.
Příklad 84
84a) Sloučenina vzorce 84a)
Požadovaná reakční činidla pro syntézu, tak jak budou dále podrobněji uvedena, byla uložena do syntetizátoru DNA/RNA Cyclone Plus (Millipore Ltd., Japonsko). Do zařízení byla také uložena programovaná kazeta pro amiditovou metodu (15 mikromol). Byl užit přibližně 35 mM tetrahydrofuranový roztok deoxyguanosin (N-iBu) methylfosfonamiditu (Američan Bionetic lne.) místo roztoku beta-kyanoethylamiditu, užitého v případě guanosinu. Byl použit prázdný sloupec (15,0 mikromol), naplněný 143 mg, 15 mikromol sloučeniny z příkladu 21a) jako pevného nosiče, pak byl do přístroje uložen řetězec bází GZ, v němž Z má význam, uvedený v příkladu 17 a program proběhl po navázání báze G bez zpracování kyselinou, čímž byl získán výsledný produkt.
-130CZ 287050 B6
84b) Sloučenina vzorce 84b)
84(b)
Postupuje se obdobným způsobem jako v příkladu lb), avšak užije se sloupec s náplní 143 mg, 5 mikromol sloučeniny z příkladu 84a), čímž se získá požadovaný výsledný produkt. Tento reakční produkt se pak čistí chromatografn' na sloupci silikagelu v reverzní fázi (preparativní Cl8, Waters, 1,5x15 cm, 50 mM TEAB, pH 7,5, 20 až 50% acetonitrilu, lineární gradient, 254 nm). Výsledný produkt se pak zpracovává obdobným způsobem jako v příkladu lb), čímž se získá produkt s optickou hustotou OD 159 při 260 nm jako amorfní pevná látka. Při analýze vysokotlakou kapalinovou chromatografn' v reverzní fázi (Inertsil ODS, 6x150 mm, eluční činidlo A: 0,1 M TEAA, pH 7,5, eluční činidlo B: acetonitril, 10 až 60% objemových B, 20 minut, lineární gradient, 1 ml/min, 260 nm) je možno prokázat, že vzorek má dobu retence 18,03 minut.
UV-absorpční spektrum (voda), larnbdamax nm: 254.
Příklad 85
85a) Sloučenina vzorce 85a)
DNÍT
OCH2CH2SCH2CH2O-P—o—
Ϊ
NCCH2CH2O j__/
Postupuje se obdobným způsobem jako v příkladu 84a), avšak užije se sloupec s náplní 143 mg, 5 mikromol sloučeniny z příkladu 21a), čímž se získá výsledný produkt. Postupuje se tak, že se
-131CZ 287050 B6 po navázání deoxyguanosin (N-iBu)-methylfosfonamiditu sloupec vyjme ze syntetizátoru bez oxidace oxidačním roztokem a pak se do sloupce přidá 5 ml acetonitrilového roztoku tetraethylthiuramdisulfídu TETO (Applied Biosystems). Sloupec se nechá stát 15 minut při teplotě místnosti, pak se promyje acetonitrilem a znovu se vloží do syntetizátoru.
85b) Sloučenina vzorce 85b)
Postupuje se obdobným způsobem jako v příkladu lb), avšak užije se sloupec s náplní 143 mg, 5 mikromol sloučeniny z příkladu 85a), čímž je možno získat požadovaný výsledný produkt. Reakční produkt se čistí chromatografií v reverzní fázi na sloupci silikagelu (preparativní Cl8, Waters, 1,5 x 15 cm, 50 mM TEAB, pH 7,5, 20 až 50 % acetonitrilu, lineární gradient, 254 nm). Získaný produkt se pak zpracovává obdobným způsobem jako produkt v příkladu lb), čímž se získá výsledná látka s optickou hustotou OD 124 při 260 nm jako amorfní pevná látka. Při analýze vysokotlakou kapalinovou chromatografií v reverzní fázi (Inertsil ODS, 6x 150 mm, eluční činidlo A: 0,1 M TEAA, pH 7,5, eluční činidlo B: acetonitril, 10 až 60 % objemových B, 20 minut, lineární gradient, 1 ml/min, 260 nm) je možno prokázat, že vzorek má dobu retence 18,07 minut.
UV-absorpční spektrum (voda), lambdamax nm: 254.
Příklad 86
Sloučenina se vzorcem 86a):
S6(a)
Následujícím postupem, který je stejný jako je popsáno v příkladu lb), byla připravena titulní sloučenina, ale bylo užito sloupce se 143 mg, 5 mikromol sloučeniny z příkladu 21a) a do DNA/RNA syntetizátoru byl vložen řetězec bází TGGGAGZ, kde Z je definováno v příkladu 17. Produkt reakce byl čištěn chromatografií v reverzní fázi na sloupci silikagelu (preparativní Cl8, Waters, 1,5 x 15 cm, 50 mM TEAB, pH 7,5, 20 až 50 % acetonitrilu, lineární gradient, 254 nm). Produkt byl zpracován stejným způsobem jako je popsáno v příkladu lb), čímž se získala titulní sloučenina mající OD 54 (260 nm) ve formě bezbarvé amorfní pevné látky. Analýzou
-132CZ 287050 B6 vysokotlakou kapalinovou chromatografií v reverzní fázi (Inertsil ODS, 6xl50nm, eluční činidlo A: 0,1 M TEAA, pH 7,5, eluční činidlo B: acetonitril, 15 až 65 % objemových, 20 minut, lineární gradient, 1 ml/min., 269 nm) bylo prokázáno, že vzorek má dobu retence 15,20 minut.
UV-absorpční spektrum (voda), nm: 255.
Příklad 87
Sloučenina se vzorcem 87a):
87(a)
Následujícím postupem, který je stejný jako je popsáno v příkladu 86, byla připravena titulní sloučenina, ale bylo užito sloupce se 143 mg, 5 mikromol sloučeniny z příkladu 21a). Detailněji, po prvním navázání G-beta-amidinu na 3'-zakončení byl sloupec vyjmut zDNA/RNA syntetizátoru, aniž by byl oxidován nějakým oxidačním roztokem. 5 ml roztoku acetonitrilu v tetraethylthiurandisulfídu (TETD) (Applied Biosystems) bylo ke sloupci přidáno a sloupec byl 15 minut ponechán při teplotě místnosti, pak byl promyt acetonitrilem a umístěn do syntetizátoru.
Produkt reakce byl čištěn chromatografií v reverzní fázi na sloupci silikagelu (preparativní Cl8, Waters, 1,5 x 15 cm, 50 mM TEAB, pH 7,5, 20 až 50 % acetonitrilu, lineární gradient, 254 nm). Pak byl produkt zpracován stejným způsobem jako je popsáno v příkladu lb), čímž se získala titulní sloučenina mající OD 136 (260 nm) ve formě amorfní pevné látky. Analýza vysokotlakou kapalinovou chromatografií v reverzní fázi (Inertsil ODS, 6 x 150 nm, eluční činidlo A: 0,1 M TEAA, pH7,5, eluční činidlo B: acetonitril, 10 až 60% objemových B, 20 minut, lineární gradient, 1 ml/min., 260 nm) prokázala, že vzorek má dobu retence 18,02 minut.
UV-absorpční spektrum (voda), lambda^ nm: 254.
Příklad 88
Sloučenina se vzorcem 88a)
88(a)
-133CZ 287050 B6
Iontoměničová pryskyřice Dowex 50W-X2 (obchodní značka pro výrobek Dow Chemical Co., H-forma, přibližně 1 ml) byla vložena do sloupce a 3 ml 20 % (% obj.) vodného pyridinu se nechaly projít sloupcem, který byl pak promyt vodou, aby byla ve sloupci připravena pyridinová forma pryskyřice. Podle stejného postupu, ale za použití 3 ml 1M vodného roztoku hydroxidu sodného, byla na jiném sloupci připravena sodná forma pryskyřice. Sloučenina z příkladu lb) mající OD 27, byla přidána ke sloupci s pyridiniovou formou pryskyřice a ke sloupci se sodnou formou pryskyřice, v popsaném pořadí. Pak byly sloupce podrobeny eluci vodou, čímž se získala titulní sloučenina (sodná sůl) mající OD 27 (260 nm) ve formě amorfní pevné látky. Analýza vysokotlakou kapalinovou chromatografíí v reverzní fázi (Inertsil ODS, 6xl50nm, eluční činidlo A: 0,1 M TEAA, pH 7,5, eluční činidlo B: acetonitril, 10 až 60% objemových B, 20 minut, lineární gradient, 1 ml/minutu, 260 nm) prokázala, že vzorek má dobu retence 18,12 minut.
UV-absorpční spektrum (voda), lambdamax nm: 256.
Příklad 89
Sloučenina se vzorcem 89a)
89(a)
Dowex 50W-X2 iontoměničová pryskyřice (obchodní značka pro výrobek Dow Chemical Co., H-forma, přibližně 1 ml), byl vložen do sloupce a 3 ml 20 % objemových vodného pyridinu se nechaly projít sloupcem, který byl pak promyt vodou, aby byla ve sloupci připravena pyridiniová forma pryskyřice. Podle stejného postupu, ale za použití 3 ml IN vodného roztoku hydroxidu draselného, byla na jiném sloupci připravena sodná forma pryskyřice. Sloučenina z příkladu lb) mající OD 27, byla přidána ke sloupci s pyridiniovou formou pryskyřice a ke sloupci s draselnou formou pryskyřice a sloupce byly podrobeny eluci vodou, čímž se získala titulní sloučenina (draselná sůl) mající OD 27 (260 nm) ve formě amorfní pevné látky. Analýza vysokotlakou kapalinovou chromatografíí v reverzní fázi (Inertsil ODS, 6xl50nm, eluční činidlo A: 0,1 M TEAA, pH 7,5, eluční činidlo B: acetonitril, 10 až 60 % objemových B, 20 minut, lineární gradient, 1 ml/minutu, 260 nm) prokázala, že vzorek má dobu retence 18,18 minut.
UV-absorpční spektrum (voda), lambdamax nm: 254.
Příklad 90
Sloučenina se vzorcem 90a):
-134CZ 287050 B6
90(3)
Následujícím postupem, který je stejný jako je popsáno v příkladu 14a), byla připravena titulní sloučenina, ale bylo užito 5'-0-(3,4-dibenzyloxybenzyl)thymidin-2-kyanoethyl-N,Ndiizopropylfosforamiditu, připraveného jak je popsáno v příkladu 7b), namísto 5'-O—tritylthymidin-2-kyanoethyl-N,N-diizopropylfosfbramiditu. Produkt reakce byl čištěn chromatografií v reverzní fázi na sloupci silikagelu (preparativní Cl8, Waters, 1,5x15 cm, 50mMTEAB, pH 7,5, 20 až 50% acetonitrilu, lineární gradient, 254 nm). Pak byl produkt zpracován stejným způsobem jako je popsáno v příkladu lb), čímž se získá titulní sloučeniny mající OD 119 (260 nm) ve formě amorfní pevné látky. Analýza vysokotlakou kapalinovou chromatografií v reverzní fázi (Inertsil ODS, 6 xl50nm, eluční činidlo A: 0,1 M TEAA, pH 7,5, eluční činidlo B: acetonitril, 10 až 60% objemových B, 20 minut, lineární gradient, 1 ml/minutu, 260 nm) prokázala, že vzorek má dobu retence 19,20 minut.
UV-absorpční spektrum (voda), lambdamax nm: 254.
Příklad 91
H.—O-TGGGAG-O-P—OCH3
I OH (a)
Následujícím postupem, který je stejný jako je popsáno v příkladu 82b), byla připravena titulní sloučenina, ale bylo užito 5'-O-(3,4-dibenzyloxybenzyl)thymidin-2-kyanoethyl-N,N-diizopropylfosforamiditu, připraveného jak je popsáno v příkladu 7b), namísto 5'-O-tritylthymidin2-kyanoethyl-N,N-diizopropylfosforamiditu. Produkt reakce byl čištěn chromatografií v reverzní fázi na sloupci silikagelu (preparativní Cl8, Waters, 1,5x15 cm, 50 mM TEAB, pH7,5, 20 až 50 % acetonitrilu, lineární gradient, 254 nm). Pak byl produkt zpracován stejným způsobem jako je popsáno v příkladu lb), čímž se získala titulní sloučenina mající OD 50 (260 nm) ve formě amorfní pevné látky. Analýzou vysokotlakou kapalinovou chromatografií v reverzní fázi (Inertsil ODS, 5xl50nm, eluční činidlo A: 0,1 M TEAA, pH7,5, eluční činidlo B: acetonitril, 10 až 60% objemových B, 20 minut, lineární gradient, 1 ml/minutu, 260 nm) bylo prokázáno, že vzorek má dobu retence 10,15 minut.
UV-absorpční spektrum (voda), lambdamax nm: 254.
-135CZ 287050 B6
Příklad 92
Sloučenina se vzorcem 92a)
Následujícím postupem, který je stejný jako je popsáno v příklad 22c), byla připravena titulní sloučenina, ale bylo užito 5'-0-(3,4~dibenzyloxybenzyl)thymidin-2-kyanoethyl-N,Ndiizopropylfosforamiditu, připraveného jak je popsáno v příkladu 7b), namísto 5-O-trityl10 thymidin-2-kyanoethyl-N,N-diizopropylfosforamiditu. Produkt reakce byl čištěn chromatografií v reverzní fázi na sloupci silikagelu (preparativní Cl8, Waters, 1,5x15 cm, 50 mM TEAB, pH 7,5, 20 až 50 % acetonitrilu, lineární gradient, 254 nm). Pak byl produkt zpracován stejným způsobem jako je popsáno v příkladu lb), čímž se získala titulní sloučenina mající OD 67 (260 nm) ve formě amorfní pevné látky. Analýzou vysokotlakou kapalinovou 15 chromatografií v reverzní fázi (Inertsil ODS, 6 x 150 nm, eluční činidlo A: 0,1 Μ TEAA, pH 7,5, eluční činidlo B: acetonitril, 10 až 60 % objemových B, 20 minut, lineární gradient, 1 ml/minutu, 260 nm) bylo prokázáno, že vzorek má dobu retence 10,51 minut.
UV-absorpční spektrum (voda), lambdamix nm: 255.
Příklad 93
Sloučenina se vzorcem 93a)
Následujícím postupem, který je stejný jako je popsáno v příkladu 16b), byla připravena titulní sloučenina, ale bylo užito 5'-O-(3,4~dibenzyloxybenzyl)thymidin-2-kyanoethyl-N,N-diizo30 propylfosforamiditu, připraveného jak je popsáno v příkladu 7b), namísto 5'-O-tritylthymidin2-kyanoethyl-N,N-diizopropylfosforamiditu. Produkt reakce byl čištěn chromatografií v reverzní fázi na sloupci silikagelu (preparativní Cl8, Waters, 1,5x15 cm, 50 mM TEAB, pH 7,5, 20 - 50 % acetonitrilu, lineární gradient, 254 nm). Pak byl produkt zpracován stejným způsobem jako je popsáno v příkladu lb), čímž se získala titulní sloučenina mající 35 OD 96 (260 nm) ve formě amorfní pevné látky. Analýzou vysokotlakou kapalinovou chromatografií v reverzní fázi (Inertsil ODS, 6 x 150 nm, eluční činidlo A: 0,1 M TEAA, pH 7,5, eluční činidlo B: acetonitril, 10 až 60 % objemových B, 20 minut, lineární gradient, 1 ml/minutu, 260 nm) bylo prokázáno, že vzorek má dobu retence 19,26 minut.
UV-absorpční spektrum (voda), lambdamax nm: 254.
-136CZ 287050 B6
Příklad 94
O
II
H->—O—TGGGAG—O—P— OCH.CH.OH I ’ ’
OH
94(2)
Následujícím postupem, který je stejný jako je popsáno v příkladu 12b, byla připravena titulní sloučenina, ale bylo užito 5'-0-(3,4-dibenzyloxybenzyl)thymidin-2-kyanoethyl-N,Ndiizopropylfosforamiditu, připraveného jak je popsáno v příkladu 7b, namísto 5'-0—tritylthymidin-2-kyanoethyl-N,N-diizopropylfosforamiditu. Produkt reakce byl čištěn chromatografií v reverzní fázi na sloupci silikagelu (preparativní Cl8, Waters, 1,5x15 cm, 50 mM TEAB, pH 7,5, 20 až 50% acetonitrilu, lineární gradient, 254 nm). Pak byl produkt zpracován stejným způsobem jako je popsáno v příkladu lb), čímž se získala titulní sloučenina mající OD 97 (260 nm) ve formě amorfní pevné látky. Analýzou vysokotlakou kapalinovou chromatografií v reverzní fázi (Inertsil ODS, 6 x 150 nm, eluční činidlo A: 0,1 Μ TEAA, pH 7,5, eluční činidlo B: acetonitril, 10 až 60 % objemových B, 20 minut, lineární gradient, 1 ml/minutu, 260 nm) bylo prokázáno, že vzorek má dobu retence 19,16 minut.
UV-absorpční spektrum (voda), lambdamax nm: 254.
Příklad 95
Sloučenina se vzorcem 95a)
95(3)
Následujícím postupem, který je stejný jako je popsáno v příkladu 23a), byla připravena titulní sloučenina, ale bylo užito 5'-O-(3,4-dibenzyloxybenzyl)thymidin-2-kyanoethyl-N,N-diizopropylfosforamiditu, připraveného jak je popsáno v příkladu 7b), namísto 5'-O-tritylthymidin2-kyanoethyl-N,N-diizopropylfosforamiditu. Produkt reakce byl čištěn chromatografií v reverzní fázi na sloupci silikagelu (preparativní Cl8, Waters, 1,5x15 cm, 50 mM TEAB, pH 7,5, 20 až 50 % acetonitrilu, lineární gradient, 254 nm). Pak byl zpracován stejným způsobem jako je popsáno v příkladu lb), čímž se získala titulní sloučenina mající OD 83 (260 nm) ve formě amorfní pevné látky. Analýzou vysokotlakou kapalinovou chromatografií v reverzní fázi (Inertsil ODS, 6 x 150 nm, eluční činidlo A: 0,1 M TEAA, pH 7,5, eluční činidlo B: acetonitril, 10 až 60 % objemových B, 20 minut, lineární gradient, 1 ml/minutu, 260 nm), bylo prokázáno, že vzorek má dobu retence 19,80 minut.
UV-absorpční spektrum (voda), lambdamax nm: 255.
-137CZ 287050 B6
Příklad 96
Sloučenina se vzorcem 96a)
Následující postup je stejný jako je popsáno v příkladu 15c), aleje užito sloupce se 125 mg, 5 mikromol sloučeniny z příkladu 12b) a do syntetizátoru se vkládá řetězec bází XGGGGZ, kde Z je definováno v příkladu 17. Takto získaný roztok 90% objemových vodného formamidu obsahující titulní sloučeninu, byl pak 5 minut zahříván na teplotu 95 °C. Pak byl roztok rychle zchlazen. Reakční směs byla rozdělena na čtyři části a každá byla čištěna vysokotlakou kapalinovou chromatografií v reverzní fázi (Inertsil PREP-ODS, 20,0 x 250 nm, eluční činidlo A: 0,1 M TEAA, pH 7,0, eluční činidlo B: acetonitril, 10 až 60 % objemových B, 30 minut, lineární gradient, 7 ml/minutu, 260 nm, teplota sloupce 60 °C). Frakce eluované po
20,7 minutách byly odděleny a zpracovány stejným způsobem jako je popsáno v příkladu lb), čímž se získala titulní sloučenina s OD 79 (260 nm) ve formě amorfní pevné látky.
UV-absorpční spektrum (voda), lambdamax nm: 253.
Doba retence: 13,22 minuty
Vysokotlaká kapalinová chromatografie (Inertsil ODS, 6xl50nm, eluční činidlo A: 0,1 M TEAA, pH 7,5, eluční činidlo B: acetonitril, 10 až 60 % objemových, 20 minut, lineární gradient, 1 ml/minutu, 260 nm).
Příklad 97
Sloučenina se vzorcem 97a)
97(a)
Byl opakován postup stejný jako je popsáno v příkladu lb) až na to, že bylo užito 35 mM acetonitrilového roztoku sloučeniny z příkladu 15b) v amiditové baňce X a do syntetizátoru byly vloženy jako program báze s řetězcem XGCGG. Takto získaný 90% vodný roztok formamidu obsahující titulní sloučeninu byl 5 minut zahříván na teplotu 95 °C. Pak byl roztok rychle
-138CZ 287050 B6 zchlazen. Reakční směs byla rozdělena na čtyři části a každá byla čištěna vysokotlakou kapalinovou chromatografií v reverzní fázi (Inertsil PREP-ODS 20,0 x 250 nm, eluční činidlo A: 0,1 Μ TEAA, pH 7,0, eluční činidlo B: acetonitril, 10 až 60 % objemových B, 30 minut, lineární gradient, 7 ml/minutu, 260 nm, teplota sloupce 60 °C). Frakce eluované po 21,7 minutách byly odděleny a zpracovány stejným způsobem jako je popsáno v příkladu lb), čímž se získala titulní sloučenina mající 123 OD ve formě amorfní pevné látky.
UV-absorpční spektrum (voda), lambdamax nm: 255.
Dobaretence: 13,58 minuty
Vysokotlaká kapalinová chromatografie (Inertsil ODS-2, 6xl50nm, eluční činidlo A: 0,1 M TEAA, pH 7,5, eluční činidlo B: acetonitril, 10 až 60 % objemových B, 20 minut, lineární gradient, 1 ml/minutu, 260 nm).
Příklad 98
Sloučenina se vzorcem 98a)
98(a)
Následujícím postupem, který je stejný jako je popsáno v příkladu 83b), byla připravena titulní sloučenina, ale bylo užito 5'-O-(3,4-dibenzyloxybenzyl)thymidin-2-kyanoethyl-N,Ndiizopropylfosforamiditu, připraveného jak je popsáno v příkladu 7b), namísto 5'-O-tritylthymidin-2-kyanoethyl-N,N-diizopropylfosforamiditu. Produkt reakce byl čištěn chromatografií v reverzní fázi na sloupci silikagelu (preparativní C18, Waters, 1,5x15 cm, 50 mM TEAB, pH 7,5, 15 až 50 % acetonitrilu, lineární gradient, 254 nm). Pak byl zpracován stejným způsobem jako je popsáno v příkladu lb), čímž se získala titulní sloučenina mající OD 92 (260 nm) ve formě amorfní pevné látky. Analýzou vysokotlakou kapalinovou chromatografií v reverzní fázi (Inertsil ODS, 6 x 150 nm, eluční činidlo A: 0,1 M TEAA, pH 7,5, eluční činidlo B: acetonitril, 10 až 60 % objemových B, 20 minut, lineární gradient, 1 ml/minutu, 260 nm) bylo prokázáno, že vzorek má dobu retence 19,46 minut.
UV-absorpční spektrum (voda), lambdaraax nm: 254.
Příklad 99
-139CZ 287050 B6
Následujícím postupem, který je stejný jako je popsáno v příkladu 86b), byla připravena titulní sloučenina, ale bylo užito 5'-O-(3,4-dibenzyloxybenzyl)thymidin-2-kyanoethyl-N,Ndiizopropylfosforamiditu, připraveného jak je popsáno v příkladu 7b), namísto 5'-O—tritylthymidin-2-kyanoethyl-N,N-diizopropylfosforamiditu. Produkt reakce byl čištěn chromatografíí v reverzní fázi na sloupci silikagelu (preparativní C18, Waters, 1,5x15 cm, 50 mM TEAB, pH 7,5, 15 až 50 % acetonitrilu, lineární gradient, 254 nm). Pak byl zpracován stejným způsobem, jako je popsáno v příkladu lb) čímž se získá titulní sloučenina mající OD 43 (260 nm) ve formě amorfní pevné látky. Analýzou vysokotlakou kapalinovou chromatografíí v reverzní fázi (Inertsil ODS, 6 x 150 nm, eluční činidlo A: 0,1 M TEAA, pH 7,5, eluční činidlo B: acetonitril, 10 až 60 % objemových B, 20 minut, lineární gradient, 1 ml/min., 260 nm) bylo prokázáno, že vzorek má dobu retence 19,12 minut.
UV-absorpční spektrum (voda), larnbdamax nm: 254.
Příklad 100
lOOÍa)
Následujícím postupem, který je stejný jako je popsáno v příkladu 87b), byla připravena titulní sloučenina, ale bylo užito 5'-0-(3,4-dibenzyloxybenzyl)thymidin-2-kyanoethyl-N,Ndiizopropylfosforamiditu, připraveného jak je popsáno v příkladu 7b, namísto 5'-O-tritylthymidin-2-kyanoethyl-N,N-diizopropylfosforamiditu. Produkt reakce byl čištěn chromatografíí v reverzní fázi na sloupci silikagelu (Preparativní Cl8, Waters, 1,5x15 cm, 50 mM TEAB, pH7,5, 15 až 50% acetonitrilu, lineární gradient, 254 nm). Pak byl zpracován stejným způsobem jako je popsáno v příkladu lb), čímž se získá titulní sloučenina mající OD 36 (260 nm) ve formě amorfní pevné látky. Analýzou vysokotlakou kapalinovou chromatografíí v reverzní fázi (Inertsil ODS, 6 x 150 nm, eluční činidlo A: 0,1 M TEAA, pH 7,5, eluční činidlo B: acetonitril, 10 až 60 % objemových B, 20 minut, lineární gradient, 1 ml/minutu, 260 nm) bylo prokázáno, že vzorek má dobu retence 10,11 minut.
UV-absorpční spektrum (voda), lambda^, nm: 255.
Příklad 101
Hi O 11 GGGG—-Ό H
10l(a)
-140CZ 287050 B6
Zopakováním postupu stejného jako je popsáno v příkladu lb), byla připravena titulní sloučenina, s výjimkou toho, že bylo užito 35 mM acetonitrilového roztoku 5'-O-(3,4dibenzyloxybenzyl)thymidin-2-kyanoethyl-N,N-diizopropylfosforamiditu, připraveného jak je popsáno v příkladu 7b), v amiditové baňce X a do syntetizátoru byly vloženy jako program báze s řetězcem XTGGGG. Produkt reakce byl rozdělen na tři části a každá z nich byla čištěna vysokotlakou kapalinovou chromatografií v reverzní fázi (Inertsil PREP-ODS, 20,0 x 250 nm, eluční činidlo A: 0,1 Μ TEAA, pH 7,3, eluční činidlo B: acetonitril, 25 až 55 % objemových B, 30 minut, lineární gradient, 7 ml/minutu, 254 nm). Eluované frakce byly po 19,8 minutách odděleny a zpracovány stejným způsobem jako je popsáno v příkladu lb), čímž se získalo 173,1 OD (260 nm) titulní sloučeniny ve formě amorfní pevné látky.
UV-absorpční spektrum (voda), lambdamax nm: 255.
Dobaretence: 15,1 minuty.
Vysokotlaká kapalinová chromatografie (YMC-Pack A-312, S-5, 120A, ODS, eluční činidlo A: 0,1 M TEAA, pH 7,3, eluční činidlo B: acetonitril, 20 až 50 % objemových B, 30 minut, lineární gradient, 2 ml/minutu, 254 nm).
Příklad 102
Sloučenina se vzorcem 102a)
102(3)
Zopakováním postupu stejného jako je popsáno v příkladu lb), byla připravena titulní sloučenina, s výjimkou toho, že bylo užito 5'-O-(3,4-dibenzyloxybenzyl)thymidin-2kyanoethyl-N,N-diizopropylfosforamiditu, připraveného jak je popsáno v příkladu 7b), namísto 5'-O-tritylthymidin-2-kyanoethyl-N,N-diizopropylfosforamiditu a do syntetizátoru byly vloženy jako program báze s řetězcem TGGGG. Produkt reakce byl rozdělena na tři části a každá z nich byla čištěna vysokotlakou kapalinovou chromatografií v reverzní fázi (Inertsil PREPODS, 20,0 x 250 nm, eluční činidlo A: 0,1 M TEAA, pH, 7,3, eluční činidlo B: acetonitril, 25 až 55 % objemových B, 30 minut, lineární gradient, 7 ml/min., 254 nm). Eluované frakce byly po
19,8 minutách odděleny a zpracovány stejným způsobem jako je popsáno v příkladu lb), Čímž se získalo 120,2 OD (260 nm) titulní sloučeniny ve formě amorfní pevné látky.
UV-absorpční spektrum (voda), lambdamax nm: 254.
Dobaretence: 13,1 minuty
Vysokotlaká kapalinová chromatografie (YMC-Pack A-312, S-5, 120A, ODS, eluční činidlo A: 0,1 MTEAA, pH 7,3, eluční činidlo B: acetonitril, 20 až 50% objemových B, 30 minut, lineární gradient, 2 ml/minutu, 254 nm).
-141CZ 287050 B6
Příklad 103
103a) 5'-O-/(naftalen-2-yl)methyl/thymidin
Následující postup je stejný jako je popsáno v příkladu 6a), ale bylo užito 442 mg, 2 mmol 2brommethylnaftalenu. Bylo získáno 253,1 mg titulní sloučeniny (výtěžek 33 %).
’Η-NMR-spektrum (CDC13, 270 MHz, TMS), ppm:
8,12 (1H, široký singlet),
7,88 - 7,43 (8H, multiplet),
6.40 (1H, triplet, J = 6,75 Hz),
4,76 (2H, singlet),
4,61 -4,54(1H, multiplet),
4,12-4,10 (1H, multiplet),
3,88-3,72 (2H, multiplet),
2.40 - 2,20 (2H, multiplet),
2,05 (1H, široký singlet),
1,58 (3H, singlet).
103b) 5'-0-/(naftalen-2-yl)methyl/thymidin-2-cyanoethyl-N,N-diizopropylfosforamidit
Následují postup je stejný jako je popsáno v příkladu 1 lb), ale bylo užito 77 mg, 0,2 mmol 5'O-(naftylen-2-yl)thymidinu, připraveného jak je popsáno ve stupni a) výše. Bylo získáno 62,5 mg titulní sloučeniny (výtěžek 54 %).
‘H-NMR spektrum (CDC13, 270 MHz, TMS): ppm:
7,88 - 7,43 (8H, multiplet),
6,39 (1H, triplet, J = 7,26 Hz),
4,75 (2H, široký singlet),
4.68 - 4,60 (1H, multiplet),
4,25,4,20 (dohromady 1H, dva široké singlety),
3,90-3,53 (6H, multiplet),
2.68 - 2,18 (4H, multiplet),
1,57, 1,55 (dohromady 3H, dva singlety),
1,17 (12H, dublet, J = 6,60 Hz).
103c) Sloučenina se vzorcem 103c)
Zopakováním postupu stejného jako je popsáno v příkladu lb), byla připravena titulní sloučenina s výjimkou toho, že bylo užito 5'-O-/(nafitalen-2-yl)methyl/thymidin-2-kyanoethyl-N,Ndiizopropylfosforamiditu, připraveného jak je popsáno ve stupni b) výše, namísto 5'-O—tritylthymidin-2-kyanoethyl-N,N-diizopropylfosforamiditu. Produkt reakce byl rozdělen na tři části a každá z nich byla čištěna vysokotlakou kapalinovou chromatografíí v reverzní fázi (Inertsil PREP-ODS, 20,0 x 250 nm, eluční činidlo A: 0,1 M TEAA, pH 7,3, eluční činidlo B: acetonitril, 20 až 50 % objemových B, 30 minut, lineární gradient, 7 ml/minutu, 254 nm). Eluované frakce
-142CZ 287050 B6 byly po 12,8 minutách odděleny a zpracovány stejným způsobem jako je popsáno v příkladu lb), čímž se získala titulní sloučenina ve formě amorfní pevné látky, mající OD 257,5, 260 nm.
UV-absorpční spektrum (voda), lambdamax nm: 255.
Doba retence: 13,9 minuty
Vysokotlaká kapalinová chromatografie (YMC-Pack A-312, S-5, 120A, ODS, eluční činidlo A: 0,1 MTEAA, pH 7,3, eluční činidlo B: acetonitril, 10 až 40% objemových B, 30 minut, lineární gradient, 2 ml/minutu, 254 nm).
Příklad 104
104a) 5'-O-(4-fenylbenzyl)thymidin
Následující postup je stejný jako je popsáno v příkladu 6a), ale bylo užito 405 mg, 2 mmol 4fenylbenzylchloridu. Bylo získáno 387,8 mg titulní sloučeniny (výtěžek 47 %).
‘H-NMR-spektrum (CDC13 + CD3OD, 4:1, TMS, 270 MHz), ppm:
7,65 - 7,33 (10H, multiplet),
6,37 (1H, triplet, J = 7,26 Hz),
4,64 (2H, singlet),
4,55 - 4,48 (1H, multiplet),
4,13 -4,09 (1H, multiplet),
3,87 - 3,70 (2H, multiplet),
2,38-2,15 (2H, multiplet),
1,63 (3H, singlet).
104b) 5'-0-(4-fenylbenzyl)thymidin-2-kyanoethyl-N,N-diizopropylfosforamidit
Následující postup je stejný jako je popsáno v příkladu 1 lb), ale bylo užito 82 mg, 0,2 mmol 5'O-(4-fenylbenzyl)thymidinu, připraveného jak je popsáno ve stupni a) výše. Bylo získáno
71,8 mg (výtěžek 59 %) titulní sloučeniny.
'H-NMR-spektrum (CDC13, 270 MHz, TMS), ppm:
7.62 - 7,34 (10H, multiplet),
6,40 (1H, triplet, J = 6,60 Hz),
4,70 - 4,60 (3H, multiplet),
4,27, 4,20 (dohromady 1H, dva široké singlety),
3,90-3,55 (6H, multiplet),
2,67-2,57 (2H, multiplet),
2,53 - 2,16 (2H, multiplet),
1.63 (3H, singlet),
1,19 (12H, dublet, J = 6,60 Hz).
104c) Sloučenina se vzorcem 104c)
-143CZ 287050 B6
Zopakováním postupu stejného jako je popsáno v příkladu lb) byla připravena titulní sloučenina, s výjimkou toho, že bylo užito 5'-0-(4-fenylbenzyl)thymidin-2-kyanoethyl-N,N-diizopropylfosforamiditu, připraveného jak je popsáno ve stupni b) výše, místo 5'-O-tritylthymidin-2kyanoethyl-N,N-diizopropylfosforamiditu. Produkt reakce byl rozdělen na tři části a každá z nich byla analyzována vysokotlakou kapalinovou chromatografii v reverzní fázi (Inertsil PREP-ODS 20,0 x 250 nm, eluční činidlo A: 0,1 M TEAA, pH 7,3, eluční činidlo B: acetonitril, 20 až 50 % objemových B, 30 minut, lineární gradient, 7 ml/min., teplota 60 °C, 254 nm). Eluované frakce byly po 16,1 minutách odděleny a zpracovány stejným způsobem jako je popsáno v příkladu lb), čímž se získala ve formě amorfní pevné látky mající OD 281,0 (260 nm).
UV-absorpční spektrum (voda), lambdamax nm: 255.
Dobaretence: 7,1 minuty.
Vysokotlaká kapalinová chromatografie (YMC-Pack A-312, S-5, 120A, ODS, eluční činidlo A: 0,1 M TEAA, pH 7,3, eluční činidlo B: acetonitril, 20 až 50 % objemových B, 30 minut, lineární gradient, 2 ml/min, 254 nm).
Příklad 105
105a) 5'-O-(2-fenylbenzyl)thymidin
Následující postup je stejný jako je popsáno v příkladu 6a), ale bylo použito 365 mikrolitrů, 2 mmol 2-fenylbenzylbromidu. Bylo získáno 133,2 mg (výtěžek 16%) titulní sloučeniny. ’Η-NMR-spektrum (CDC13,270 MHz, TMS), ppm:
’Η-NMR-spektrum (CDC13, 270 MHz, TMS), ppm:
8,13 (1H, široký singlet),
7.50- 7,28(1 OH, multiplet),
6,34 (1H, triplet, J = 6,75 Hz),
4,57, 4,50 (2H, dva dublety, J = 13,0 Hz),
4,30 (1H, široký singlet),
3,98 1H, široký singlet),
3,73-3,52 (2H, multiplet),
2,32 - 2,05 (2H, multiplet),
1,90 (1H, široký singlet),
1,51 (3H, singlet).
105b) 5'-0-(2“íenylbenzyl)thymidin-2-kyanoethyl-N,N-diizopropylfosforamidit
Následující postup je stejný jako je popsáno v příkladu 11b), ale bylo užito 82 mg, 0,2 mmol 5'O-(2-fenylbenzyl)thymidinu, připraveného jako je popsáno ve stupni a) výše. Bylo získáno
89,9 mg (výtěžek 73 %) titulní sloučeniny.
’Η-NMR-spektrum (CDC13,270 MHz, TMS), ppm:
7.51- 7,29(1 OH, multiplet),
6,36 (1H, triplet, J = 7,92 Hz),
4,55-4,45 (3H, multiplet),
4,19,4,11 (dohromady 1H, dva singlety),
-144CZ 287050 B6
3,90-3,52 (6H, multiplet),
2,66 - 2,54 (2H, multiplet),
2,45-2,03 (2H, multiplet),
1,51 (3H, singlet),
1,19 (12H, dublet, J = 6,60 Hz).
105c) Sloučenina se vzorcem 105c)
105(c)
Zopakováním postupu stejného jako je popsáno v příkladu lb), byla připravena titulní sloučenina, s výjimkou toho, že bylo užito 5'-O-(2-fenylbenzyl)thymidin-2-kyanoethyl-N,Ndiizopropylfosforamiditu, připraveného jak je popsáno ve stupni b) výše, místo 5'-Otritylthymidin-2-kyanoethyl-N,N-diizopropylfosforamiditu. Produkt reakce byl rozdělen na tři části a každá z nich byla analyzována vysokotlakou kapalinovou chromatografií v reverzní fázi (Inertsil PREP-ODS 20,0 x 250 nm, eluční činidlo A: 0,1 M TEAA, pH7,3, eluční činidlo B: acetonitril, 20 až 50 % objemových B, 30 minut, lineární gradient, 7 ml/min., teplota 60 °C, 254 nm). Eluované frakce byly po 14,8 minutách odděleny a zpracovány stejným způsobem jako je popsáno v příkladu lb), čímž se získala titulní sloučenina ve formě amorfní pevné látky mající OD 172,2 (260nm).
UV-absorpční spektrum (voda), lambdamax nm: 255.
Doba retence: 6,1 minuty
Vysokotlaká kapalinová chromatografie (YMC-Pack A-312, S-5, 120A, ODS, eluční činidlo A: 0,1 M TEAA, pH 7,3, eluční činidlo B: acetonitril, 20 až 50 objemových % B, 30 minut, lineární gradient, 2 ml/minutu, 254 nm).
Příklad 106
106a) 3'-0-triizopropylsilyl-5'-0-(4,4'-dimethoxytrityl)thymidin
1,485 g, 2,73 mmol 5'-O-(4,4'-dimethoxytrityl)thymidinu a 0,37 g, 5,45 mmol imidazolu bylo nejdříve sušeno azeotropní destilací za sníženého tlaku a pak rozpuštěno v 6 ml dimethylformamidu. K tomuto roztoku bylo přidáno 875 mikrolitrů, 4,09 mmol triizopropylsilylchloridu a výsledná směs byla míchána při teplotě místnosti přes noc. Na konci této doby bylo ke směsi přidáno 875 mikrolitrů triizopropylsilylchloridu a 0,37 g imidazolu a směs byla míchána jeden den. Reakční směs byla zředěna 100 ml ethylacetátu a zředěná směs byla dvakrát promyta, vždy 100 ml 5% vodného roztoku hydrogenuhličitanu sodného. Organická vrstva byla sušena nad bezvodým síranem sodným a rozpouštědlo bylo odděleno destilací za sníženého tlaku. Výsledný zbytek byl čištěn chromatografií na sloupci silikagelu (70 až 230 mesh), za použití methylenchloridu obsahujícího 0 až 3 % objemová methanolu jako elučního činidla. Bylo získáno 1,861 g, (výtěžek 97 %) titulní sloučeniny.
’Η-NMR-spektrum (CDC13, 270 MHz, TMS), ppm:
-145CZ 287050 B6
8,08 (1H, singlet),
7,67 (1H, singlet),
7,42 - 6,80 (13H, multiplet),
6,39 (1H, triplet, J = 5,94 Hz),
4,69 - 4,55 (1H, multiplet), 4,06-4,03 (1H, multiplet),
3,79 (6H, singlet),
3,53 - 3,26 (2H, multiplet),
2,42-2,18 (2H, multiplet),
1,50 (3H, singlet),
1,03 - 0,90 (21H, multiplet).
106b) 3'-O-triizopropylsilyl)thymidin
1,6 ml trifluoroctové kyseliny bylo po kapkách přidáno k roztoku 1,861 g, 2,655 mmol 3'-Otriizopropylsilyl-5'-O-(4,4'-dimethoxytrityl)thymidinu, připravenému jak je popsáno ve stupni a) výše, v 80 ml chloroformu za stálého chlazení v ledové lázni a míchání. Výsledná směs byla 10 minut míchána a pak byly přidány 2 ml pyridinu. Reakční směs byla dvakrát promyta vždy 100 ml 5% vodného roztoku hydrogenuhličitanu sodného. Organická vrstva byla sušena nad bezvodým síranem sodným a rozpouštědlo bylo odděleno destilací za sníženého tlaku. Výsledný zbytek byl čištěn chromatografií na sloupci 50 g silikagelu (70 až 230 mesh), za použití methylenchloridu obsahujícího 4 % objemová methanolu jako elučního činidla. Bylo získáno 0,9965 g (výtěžek 94 %) titulní sloučeniny.
’Η-NMR-spektrum (CDC13, 270 MHz, TMS), ppm:
8,17 (1H, široký singlet),
7,36 (1H, singlet),
6,12 (1H, triplet, J = 5,94 Hz),
4,63 - 4,59 (1H, multiplet), 4,03-4,00 (1H, multiplet), 3,96-3,74 (2H, multiplet),
2,48 (1H, široký singlet),
2,45-2,21 (2H, multiplet), 1,91 (3H, singlet),
1,15 - 1,00 (21H, multiplet).
106c) 3'-O-triizopropylsilyl-5'-O-/(4-benzyloxy)benzyl/thymidin mg, 2 mmol hydridu sodného, jako 55% disperze v minerálním oleji, bylo přidáno k roztoku 398 mg, 1 mmol 3'-O-(triizopropylsilyl)thymidinu, připravenému jak je popsáno ve stupni b) výše, v 2,5 ml tetrahydrofuranu. Výsledná směs byla ponechána stát při 60 °C dvě hodiny a pak zchlazena na teplotu místnosti. Ke směsi bylo přidáno 232 mg, 1 mmol 4-benzyloxybenzylchloridu a 75 mg, 0,5 mmol jodidu sodného. Reakční směs byla pak míchána při teplotě místnosti přes noc a pak při 55 °C 8 hodin. Na konci této doby bylo rozpouštědlo odděleno destilací za sníženého tlaku a zbytek byl rozpuštěn ve 100 ml ethylacetátu. Výsledný roztok byl dvakrát promyt, vždy 100 ml 0,01 N vodnou chlorovodíkovou kyselinou. Organická vrstva byla sušena nad bezvodým síranem hořečnatým a rozpouštědlo bylo odděleno destilací za sníženého tlaku. Výsledný zbytek byl čištěn chromatografií na sloupci 30 g silikagelu (230 až 400 mesh), za použití methylenchloridu obsahujícího 1 až 2 % objemová methanolu jako elučního činidla. Bylo získáno 237 mg (výtěžek 40 %) titulní sloučeniny.
‘H-NMR-spektrum (CDC13,270 MHz, TMS), ppm:
-146CZ 287050 B6
8,00 (1H, široký singlet),
7,59 (1H, singlet),
7,48 - 6,90 (9H, multiplet),
6.36 (1H, triplet, J = 6,60 Hz),
5,07 (2H, singlet),
4.56 - 4,46 (1H, multiplet),
4,50 (2H, singlet),
4,07 - 4,03 (1H, multiplet),
3,80 - 3,60 (2H, multiplet),
2,33 - 2,08 (2H, multiplet),
1.56 (3H, singlet),
1.10- 0,97 (2IH, multiplet).
106d) 5'-0-/(4-benzyloxy)benzyl/thymidin
1,5 ml 1M tetrahydrofuranového roztoku tetrabutylamoniumfluoridu bylo přidáno k roztoku 237 mg, 0,4 mmol 3'-0-triizopropylsilyl-5'-0-/(4-benzyloxy)benzyl/thymidinu, připraveného jak je popsáno ve stupni c) výše, v 1,5 ml tetrahydrofuranu. Výsledná směs byla 3 hodiny míchána při teplotě místnosti. Na konci této doby bylo rozpouštědlo odděleno z reakční směsi destilací za sníženého tlaku a výsledný zbytek byl rozpuštěn ve 100 ml ethylacetátu. Tento roztok byl dvakrát promyt, pokaždé 100 ml nasyceného vodného roztoku chloridu sodného a byl sušen nad bezvodým síranem hořečnatým. Rozpouštědlo bylo odděleno destilací za sníženého tlaku. Výsledný zbytek byl čištěn chromatografn' na sloupci 30 g silikagelu (230 až 400 mesh), za použití methylenchloridu obsahujícího 1 až 4 % objemová methanolu jako elučního činidla. Bylo získáno 108,5 mg (výtěžek 61 %) titulní sloučeniny.
’Η-NMR-spektrum (CDC13, 270 MHz, TMS), ppm:
8,11 (1H, široký singlet),
7.56 (1H, singlet),
7,47 - 6,93 (9H, multiplet),
6,38 (1H, triplet, J = 7,26 Hz),
5,06 (2H, singlet),
4.57 - 4,47 (1H, multiplet),
4,52 (2H, singlet),
4.10- 4,06 (1H, multiplet),
3,80 - 3,64 (2H, multiplet),
2,38-2,15 (2H, multiplet),
1,67 (3H, singlet).
106e) 5'-O-/(4—benzyloxy)benzyl/thymidin-2-kyanoethyl-N,N-diizopropylfosforamidit
Následující postup je stejný jako je popsáno v příkladu 11b), ale bylo užito 88 mg, 0,2 mmol 5O-/(4-benzyloxy)benzyl/thymidinu, připraveného jak je popsáno ve stupni d) výše. Bylo získáno 104,8 mg (výtěžek 82 %) titulní sloučeniny.
'H-NMT-spektrum (CDC13,270 MHz, TMS), ppm:
7,58, 7,56 (dohromady 1H, dva singlety),
7,46-6,93 (9H, multiplet),
6.37 (1H, triplet, J = 6,60 Hz),
5,06 (2H, singlet),
4,64 - 4,54 (1H, multiplet),
-147CZ 287050 B6
4,60, 4,59 (2H, singlet),
4,25-4,15 (1H, multiplet),
3,90-3,50 (6H, multiplet),
2,66 - 2,54 (2H, multiplet),
2,50 - 2,10 (2H, multiplet),
1,65 (3H, singlet),
1,18 (12H, dublet, J = 7,26 Hz).
106f) Sloučenina se vzorcem 106f)
H2—-O—TGGGAG-OH l06(f)
Zopakováním postupu stejného jako je popsáno v příkladu lb) byla připravena titulní sloučenina, s výjimkou toho, že bylo užito 5'-O-/(4-benzyloxy)benzyl/thymidin-2-kyanoethyl-N,Ndiizopropylfosforamiditu, připraveného jak je popsáno ve stupni e) výše, namísto 5'-O-tritylthymidin-2-kyanoethyl-N,N-diizopropylfosforamiditu. Produkt reakce byl rozdělen na tři části a každá z nich byla analyzována vysokotlakou kapalinovou chromatografií v reverzní fázi (Inertsil PREP-ODS 20,0 x 250 nm, eluční činidlo A: 0,1 M TEAA, pH 7,3, eluční činidlo B: acetonitril, 20 až 50 % objemových B, 30 minut, lineární gradient, 7 ml/min., teplota 60 °C, 254 nm). Eluované frakce byly po 17,0 minutách odděleny a zpracovány stejným způsobem jako je popsáno v příkladu lb), čímž se získala titulní sloučenina ve formě amorfní pevné látky, mající OD 208,8 (260 nm).
UV-absorpční spektrum (voda), lambdamax nm: 254.
Doba retence: 8.1 minuty.
Vysokotlaká kapalinová chromatografie (YMC-Pack A-312, S-5, 120A, ODS, eluční činidlo A: 0,1 M TEAA, pH 7,3, eluční činidlo B: acetonitril, 20 až 50 % objemových B, 30 minut, lineární gradient, 2 ml/minutu, 254 nm).
Příklad 107
107a) 5'-O-(9-fenylxanthen-9-yl)thymidin
585 mg, 2 mmol 9-chlor-9-fenylxanthenu bylo přidáno k roztoku 484 mg, 2 mmol thymidinu ve 20 ml pyridinu a výsledná směs byla za stínění od světla jednu hodinu míchána při teplotě místnosti. Reakční směs byla zředěna 200 ml methylenchloridu a zředěná směs byla dvakrát promyta, vždy s 200 ml 5% vodného roztoku hydrogenuhličitanu sodného. Organická vrstva byla sušena nad bezvodým síranem sodným. Rozpouštědlo bylo odděleno destilací za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatografií na sloupci 35 g silikagelu (70 až 230 mesh), za použití methylenchloridu obsahujícího 0 až 2,5 % objemových methanolu jako elučního činidla. Bylo získáno 647,8 mg (výtěžek 65 %) titulní sloučeniny.
*H-NMR-spektrum (CDC13, 270 MHz, TMS), ppm:
8,33 (1H, široký singlet),
7,62 (1H, singlet),
7,45-7,02 (13H, multiplet),
6,36 (1H, triplet, J = 5,94 Hz),
-148CZ 287050 B6
4,49-4,41 (1H, multiplet),
4,02 - 3,96 (1H, multiplet),
3,29 - 3,12 (2H, multiplet),
2,52 -2,24 (2H, multiplet),
1,99 (1H, dublet, J = 3,96 Hz),
1,67 (3H, singlet).
107b) 5'-0-(9-fenylxanthen-9-yl)thymidin-2-kyanoethyl-N,N-diizopropylfosforamidit
Následující postup je stejný jako je popsáno vpříkladu 11b), aleje užito 100 mg, 0,2 mmol 5'O-(9-fenylxanthen-9-yl)thymidinu, připraveného jak je popsáno ve stupni a) výše. Bylo získáno 134,9 mg (výtěžek 99 %) titulní sloučeniny.
’Η-NMR-spektrum (CDC13, 270 MHz, TMS), ppm:
8,03 (1H, široký singlet),
7,69, 7,64 (dohromady 1H, dva singlety),
7.40 - 7,03 (13H, multiplet),
6.40 - 6,32 (1H, multiplet),
4,58 - 4,47 (1H, multiplet),
4.15 -4,05 (1H, multiplet),
3,90 - 3,10 (6H, multiplet),
2,82 - 2,28 (4H, multiplet),
1,63, 1,62 (dohromady, 3H, dva singlety),
1.16 (12H, dublet, J = 6,6 Hz).
107c) Sloučenina se vzorcem 107c)
Zopakováním postupu stejného jako je popsáno v příkladu lb) byla připravena titulní sloučenina s výjimkou toho, že bylo užito 5'-0-(9-fenylxanthen-9-yl)thymidin-2-kyanoethyl-N,Ndiizopropylfosforamiditu, připraveného jak je popsáno ve stupni b) výše, namísto 5'-0—tritylthymidin-2-kyanoethyl-N,N-diizopropylfosforamiditu. Produkt reakce byl rozdělen na tři části a každá z nich byla analyzována vysokotlakou kapalinovou chromatografií v reverzní fázi (Inertsil PREP-ODS 20,0 x250 nm, eluční činidlo A: 0,1 M TEAA, pH 7,3, eluční činidlo B: acetonitril, 20 - 50 % objemových 8, 30 minut, lineární gradient, 7 ml/minut, teplota 60 °C, 254 nm). Eluované frakce byly po 19,7 minutách odděleny a zpracovány stejným způsobem jako je popsáno v příkladu lb), čímž se získala titulní sloučenina ve formě amorfní pevné látky mající OD 145,8 (260 nm).
UV-absorpční spektrum (voda), larnbdamax nm: 249.
Doba retence: 10,9 minuty
-149CZ 287050 B6
Vysokotlaká kapalinová chromatografie (YMC-Pack A-312, S-5, 120A, ODS, eluční činidlo A:
0,1 M TEAA, pH 7,3, eluční činidlo B. acetonitril, 20 až 50 % objemových B, 30 minut, lineární gradient, 2 ml/min., 254 nm).
Příklad 108
108a) 5'-O-(9-fenylfluoren-9-yl)thymidin
770 mg, 2,4 mmol 9-brom-9-fenylfluorenu bylo přidáno k roztoku 242 mg, 1 mmol thymidinu v 10 ml pyridinu a výsledná směs byla 8 hodin míchána při 100 °C. Na konci této doby byla reakční směs koncentrována odpařováním za sníženého tlaku a odparek byl rozpuštěn ve 100 ml methylenchloridu. Roztok byl promyt 100 ml 5 % vodného roztoku hydrogenuhličitanu sodného a sušen nad bezvodým síranem sodným. Rozpouštědlo bylo odděleno destilací za sníženého tlaku. Výsledný zbytek byl čištěn chromatografíí na sloupci 30 g silikagelu (230 až 400 mesh), za použití methylenchloridu obsahujícího 1 až 3 % objemová methanolu jako elučního činidla. Bylo získáno 194,2 mg (výtěžek 37 %) titulní sloučeniny.
’Η-NMR-spektrum (CDC13, 270 MHz, TMS), ppm:
8,06 (1H, široký singlet),
7,76 (1H, singlet),
7,72 - 7,20 (13H, multiplet),
6,41 (1H, triplet, J = 6,60 Hz),
4,64 - 4,58 (1H, multiplet),
3,95 - 3,90 (1H, multiplet),
3,49-3,13 (2H, multiplet),
2,45-2,38 (2H, multiplet),
1,88 (1H, dublet, J = 3,96 Hz),
1,48 (3H, singlet).
108b) 5'-O-(9-fenylfluoren-9-yl)thymidin-2-kyanoethyl-N,N-diizopropylfosforamidit
Následující postup je stejný jako je popsáno v příkladu 11b), aleje užito 105 mg, 0,2 mmol 5'O-(9-fenylfluoren-9-yl)thymidinu, připraveného jako je popsáno ve stupni a) výše. Bylo získáno 110,8 mg (výtěžek 76 %) titulní sloučeniny.
'H-NMR-spektrum (CDCI3, 270 MHz, TMS), ppm:
8,00 (1H, široký singlet),
7,80 (1H, singlet),
7,78-7,20 (13H, multiplet),
6,44 - 6,37 (1H, multiplet),
4,72-4,62 (1H, multiplet),
4,10 - 4,00 (1H, multiplet),
3,90-3,10 (6H, multiplet),
2,75-2,34 (4H, multiplet),
1,46, 1,45 (dohromady 3H, dva singlety),
1,18 (12H, dublet, J = 6,60 Hz).
-150CZ 287050 B6
108c) Sloučenina se vzorcem 106c):
108(c)
Zopakováním postupu stejného jako je popsáno v příkladu lb), byla připravena titulní sloučenina, s výjimkou toho, že bylo užito 5'-O-(9-fenylfluoren-9-yl)thymidin-2-kyanoethylΝ,Ν-diizopropylfosforamiditu, připraveného jak je popsáno ve stupni b) výše, namísto 5'-Otritylthymidin-2-kyanoethyl-N,N-diizopropylfosforamiditu. Produkt reakce byl rozdělen na tři části a každá z nich byla analyzována vysokotlakou kapalinovou chromatografií v reverzní fázi (Inertsil PREP-ODS 20,0 x 250 nm, eluční činidlo A: 0,1 Μ TEAA, pH7,3, eluční činidlo B: acetonitril, 20 až 50 % objemových B, 30 minut, lineární gradient, 7 ml/min, teplota 60 °C, 254 nm). Eluované frakce byly po 19,1 minutách odděleny a zpracovány stejným způsobem jako je popsáno v příkladu lb), čímž se získala titulní sloučenina ve formě amorfní pevné látky, mající OD 291,2 (260 nm).
UV-absorpční spektrum (voda), larnbdamax nm: 255.
Doba retence: 10,4 minuty.
Vysokotlaká kapalinová chromatografie (YMC-Pack A-312, S-5, 120A, ODS, eluční činidlo A: 0,1 M TEAA, pH 7,3, eluční činidlo B: acetonitril, 20 až 50 % objemových B, 30 minut, lineární gradient, 2 ml/min., 254 nm).
Příklad 109
109a) 5'-(S-trifenylmethyl)-thio-5'-deoxythymidin-2-kyanoethyl-N,N-diizopropylfosforamidit
Následující postup je stejný jako je popsáno v příkladu 1 lb), aleje užito 100 mg, 0,2 mmol 5'(S-trifenylmethyl)thio-5'-deoxythymidinu /B. S. Sproate, B. Beijer, P. Rider, P. Neuner, Nucleotic Acids Res., 15, 12, 4837, 1987/. Bylo získáno 88 mg (výtěžek 62 %) titulní sloučeniny.
’Η-NMR-spektrum (CDC13, 270 MHz, TMS), ppm:
7,45-7,18 (16H, multiplet),
6,23 - 6,17 (1H, multiplet),
4,31 -4,20 (1H, multiplet),
4,11 - 4,00 (1H, multiplet),
3,85-3,43 (4H, multiplet),
2,62 - 1,98 (4H, multiplet),
1,56 (3H, singlet),
1,20- 1,05 (12H, multiplet).
-151CZ 287050 B6
109b) Sloučenina se vzorcem 109b)
!09(b)
Zopakováním postupu stejného jako je popsáno v příkladu lb) byla připravena titulní sloučenina, s výjimkou toho, že bylo užito 5'-(S-trifenylmethyl)thio-5'-deoxythymidin-2-kyanoethyl-N,Ndiizopropylfosforamiditu, připraveného jak je popsáno ve stupni a) výše, namísto 5'-0—tritylthymidin-2-kyanoethyl-N,N-diizopropylfosforamiditu. Produkt reakce byl analyzován na sloupci silikagelu chromatografií v reverzní fázi (Preparativní Cl8, Waters, 1,5 x 15 cm, eluční činidlo A: 50 mM TEAB, pH 7,5, eluční činidlo B: acetonitril, 20 až 50 % objemových B, lineární gradient, 254 nm). Pak byl zpracován stejným způsobem jako je popsáno v příkladu lb), čímž se získala titulní sloučenina ve formě amorfní pevné látky, mající OD 122,3 (260 nm).
UV-absorpční spektrum (voda), lambdamax nm: 254.
Doba retence: 19,0 minuty.
Vysokotlaká kapalinová chromatografie (Inertsil ODS 6x150 mm, eluční činidlo A: 0,1 M TEAA, pH 7,5, eluční činidlo B: acetonitril, 10 až 60 % objemových B, 20 minut, lineární gradient, 1 ml/min., 60 °C, 260 nm).
Příklad 110
Sloučenina se vzorcem 110a)
lI0(a)
Zopakováním postupu stejného jako je popsáno v příkladu lb), byla připravena titulní sloučenina, s výjimkou toho, že bylo užito 5'-O-(9-fenylfluoren-9-yl)thymidin-2-kyanoethylΝ,Ν-diizopropylfosforamiditu, připraveného jak je popsáno v příkladu 108b), místo 5'—O—tritylthymidin-2-kyanoethyl-N,N-diizopropylfosforamiditu a do syntetizátoru byl vložen řetězec bází TGGGG. Produkt reakce byl rozdělen na tři části a každá byla analyzována vysokotlakou kapalinovou chromatografií v reverzní fázi (Inertsil PREP-ODS, 20,0 x 250 mm, eluční činidlo A: 0,1 MTEAB, pH, 7,3, eluční činidlo B: acetonitril, 25 až 55% objemových B, lineární gradient, 7 ml/min., 60 °C, 254 nm). Frakce eluované po 14,6 minutách byly odděleny a
-152CZ 287050 B6 zpracovány stejným způsobem jako je popsáno v příkladu lb), čímž se získala titulní sloučenina ve formě amorfní pevné látky, mající OD 28,3 (260 nm).
UV-absorpční spektrum (voda), larnbdamax nm: 256.
Doba retence: 10,7 minuty.
Vysokotlaká kapalinová chromatografie (YMC-Pack A-312, S-5, 120A, ODS, eluční činidlo A: 0,1 M TEAA, pH 7,3, eluční činidlo B: acetonitril, 20 až 50 % objemových B, 30 minut, lineární gradient, 2 ml/min., 60 °C, 254 nm).
Příklad 111
Sloučenina se vzorcem lila)
lllfa)
Byl zopakován postup stejný jako je popsáno v příkladu 15c), ale bylo užito sloupce se 125 mg, 5 mikromol sloučeniny z příkladu 12b) a do DNA/RNA syntetizátoru, popsaného v příkladu lb), byl uložen řetězec bází XGCGGZ, kde Z je definováno v příkladu 17. Takto získaný 90% vodný roztok formamidu obsahujícího titulní sloučeninu, byl 5 minut zahříván na teplotu 95 °C. Po tomto zahřívání byl roztok rychle zchlazen. Reakční směs byla rozdělena na čtyři části a každá z nich byla analyzována vysokotlakou kapalinovou chromatografií v reverzní fázi (Inertsil PREP-ODS, 20,0x250 mm, eluční činidlo A: 0,1 M TEAA, pH, 7,0, eluční činidlo B: acetonitril, 10 až 60% objemových 8, 30 minut, lineární gradient, 7 ml/min., teplota sloupce 60 °C, 260 nm). Frakce eluované po 20,8 minutách byly odděleny a zpracovány stejným způsobem jako je popsáno v příkladu lb), čímž se získala titulní sloučenina ve formě amorfní pevné látky, mající OD 82 (260 nm).
UV-absorpční spektrum (voda), lambdamax nm: 254.
Doba retence: 13,38 minuty.
Vysokotlaká kapalinová chromatografie (Inertsil ODS-2, 6xl50nm, eluční činidlo A: 0,1 M TEAA, pH 7,5, eluční činidlo B: acetonitril, 10 až 60 % objemových B, 20 minut, lineární gradient, 1 ml/min., 260 nm).
-153CZ 287050 B6
Příklad 112
112a) 5-/(3,4-dibenzyloxy)benzylthio/-5'-deoxythymidin
258 mg, 1 mmol 5'-deoxy-5'-merkaptothymidinu bylo přidáno ke 20 ml acetonu. 406 mg,
1,2 mmol 3,4-dibenzyloxybenzylchloridu a 1 g bezvodého uhličitanu draselného bylo pak přidáno pod dusíkovou atmosférou. Výsledná směs byla jednu hodinu míchána za stálého varu pod zpětným chladičem. Na konci této doby byla sraženina odfiltrována z reakční směsi a od filtrátu bylo odděleno rozpouštědlo destilací za sníženého tlaku. Zbytek byl rozpuštěn v malém množství methylenchloridu a analyzován chromatografií na sloupci 10 g silikagelu při eluci směsí methanolu a methylenchloridu v poměru objemů 5 :95. Získalo se 452 mg titulní sloučeniny ve formě bezbarvého karamelovitého zbytku. Tento zbytek byl lyofilizován z benzenu, čímž se získalo 180 mg (výtěžek 32 %) titulní sloučeniny ve formě bílých krystalů.
’Η-NMR-spektrum (CDC13, 270 MHz, TMS), ppm:
8,26 (1H, široký singlet),
6,78 - 7,46 (14H, multiplet),
6,20 (1H, triplet, J = 6,6 Hz),
5.15 a 5,17 (dohromady 4H, dva singlety),
4,20-4,27 (1H, multiplet),
3,87 - 3,91 (1H, multiplet),
3,67-3,68 (2H, multiplet),
2,61 - 2,70 (2H, multiplet), 2,09 - 2,40 (2H, multiplet),
1,91-1,92 (3H, multiplet).
112b) 5'-/(3,4-dibenzyloxy)benzylthio/-5'-deoxythymidin-2-kyanoethyl-N,N-diizopropylfosforamidit
112 mg, 0,2 mmol 5-/(3,4-dibenzyloxy)benzylthio/-5'-deoxythymidinu, připraveného jak je popsáno ve stupni a) výše, bylo sušeno azeotropickou destilací s pyridinem a pak rozpuštěno v 1 ml methylenchloridu. Pak bylo k roztoku přidáno 17 mg, 0,1 mmol diizopropylamoniumtetrazolidu. Dále bylo ke směsi po kapkách pod argonovou atmosférou přidáno 70 mikrolitrů, 0,22 mmol 2-kyanoethyl-N,N,N',N-tetraizopropylfosforamiditu. Výsledná směs byla pod stejnou atmosférou 3 hodiny míchána při teplotě místnosti. Methylenchlorid byl pak oddělen destilací za sníženého tlaku. Výsledný zbytek byl rozpuštěn v 10 ml ethylacetátu a roztok byl promyt 10% vodným roztokem uhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, v popsaném pořadí. Roztok byl pak sušen nad bezvodým síranem sodným, po čemž bylo rozpouštědlo odděleno destilací za sníženého tlaku. Zbytek byl analyzován chromatografií na sloupci 10 g silikagelu (70 až 230mesh), za použití ethylacetátu jako elučního činidla. Vzniklo 115 mg (výtěžek 76 %) titulní sloučeniny ve formě karamelovité látky.
’Η-NMR-spektrum (CDCI3, 270 MHz, TMS), ppm:
8.16 (1H, široký singlet),
6,76 - 7,45 (14H, multiplet),
6,23 - 6,29 (1H, multiplet),
5,14-5,16 (4H, multiplet),
4,38 - 4,46 (1H, multiplet),
4,08 - 4,16 (1H, multiplet),
3,50 - 3,90 (6H, multiplet), 2,09 - 2,80 (6H, multiplet),
-154CZ 287050 B6
1,91-1,93 (3H, multiplet),
1,08- 1,58 (12H, multiplet).
112c) Sloučenina se vzorcem 112c)
U2(c)
Zopakováním postupu stejného jako je popsáno v příkladu lb), byla připravena titulní sloučenina, s výjimkou toho, že bylo užito 5-/(3,4-dibenzyloxy)benzylthio/-5'-deoxythymidin2-kyanoethyl-N,N-izopropylfosforamiditu, připraveného jak je popsáno ve stupni b) výše, namísto 5'-O-tritylthymidin-2-kyanoethyl-N,N-diizopropylfosforamiditu. Produkt reakce byl analyzován na sloupci silikagelu chromatografií v reverzní fázi (Preparative Cl8, Waters, 1,5 x 150 mm, eluční činidlo A: 50 mM vodného pufru hydrogenuhličitanu triethylamonného (TEAB), pH 7,5, eluční činidlo B; acetonitril, 15 až 50% objemových B, lineární gradient, 260 nm). Frakce obsahující titulní sloučeninu byly odděleny a zpracovány stejným způsobem jako je popsáno v příkladu lb), čímž se získala titulní sloučenina ve formě amorfní pevné látky, mající OD 57 (260 nm).
UV-absorpční spektrum (voda), lambdamax nm: 253.
Doba retence: 16,85 minuty.
Vysokotlaká kapalinová chromatografie (Inertsil ODS-2, 6x150 mm, eluční činidlo A: 0,1 M TEAA, pH 7,5, eluční činidlo B: acetonitril, 10 až 60 % objemových 8, 20 minut, lineární gradient, 1 ml/min., 260 nm).
Příklad 113
113a) 5'-/(Antracen-9-yl)methylthio/-5'-deoxythymidin
268 mg, 1 mmol 5'-deoxy-5'-merkaptopyridinu bylo přidáno ke 20 ml acetonu, 272 mg,
1,2 mmol 9-chlormethylantracenu a 1 g bezvodého uhličitanu draselného pak bylo přidáno pod dusíkovou atmosférou. Výsledná směs byla 2 hodiny míchána za stálého varu pod zpětným chladičem. Na konci této doby byla sraženina odfiltrována z reakční směsi a od filtrátu bylo odděleno rozpouštědlo destilací za sníženého tlaku. Zbytek byl krystalizován z 10 ml ethanolu, čímž se získalo 156 mg (výtěžek 35 %) titulní sloučeniny ve formě bledě žlutých krystalů.
’Η-NMR-spektrum (hexadeuterovaný dimethylsulfoxid, 270 MHz, TMS), ppm:
3,56 (1H, singlet),
8,40 (2H, dublet, J = 8,7 Hz),
8,09 (2H, dublet, J = 8,2 Hz),
7,51-7,61 (5H, multiplet),
6,24 - 6,28 (1H, multiplet),
5,43 (1H, široký singlet),
4,87-4,89 (2H, multiplet),
-155CZ 287050 B6
4,24 - 4,25 (1H, triplet, J = 2,7 Hz),
4,03-4,07 (1H, multiplet),
3,05 (2H, dublet, J = 6,5 Hz),
2,07 - 2,29 (2H, multiplet),
1,72- 1,73 (3H, multiplet).
113b) 5'-/(antracen-9-yl)methylthio/-5'-deoxythymidin-2-kyanoethyl-N,N-diizopropylfosforamidit ío 74 mg, 0,165 mmol 5'-/(antracen-9-yl)methylthio/-5'-deoxythymidinu, připraveného jak je popsáno ve stupni a) výše, bylo sušeno azeotropickou destilací s pyridinem a pak rozpuštěno v 1 ml tetrahydrofuranu. K roztoku bylo přidáno 0,115 ml, 0,659 mmol N,N-diizopropyl-Nethylaminu. Dále bylo ke směsi po kapkách pod argonovou atmosférou přidáno 49 mikrolitrů, 0,22 mmol 2-kyanoethyl-N,N-tetraizopropylchlorfosforamiditu. Výsledná směs byla pod stejnou atmosférou 1,75 hodiny míchána při teplotě místnosti. Tetrahydrofuran byl oddělen destilací za sníženého tlaku. Výsledný zbytek byl rozpuštěn v 10 ml ethylacetátu a roztok byl promyt 10% vodným roztokem uhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, v popsaném pořadí. Roztok byl pak sušen nad bezvodým síranem sodným, pak bylo rozpouštědlo odděleno destilací za sníženého tlaku. Zbytek byl analyzován chromatografií na sloupci 10 g silikagelu (70 až 230 mesh), za použití ethylacetátu jako elučního činidla. Vzniklo 85 mg (výtěžek 79 %) titulní sloučeniny ve formě pěnovité látky.
'H-NMR-spektrum (CDC13, 270 MHz, TMS), ppm:
7,26 - 8,43 (10H, multiplet),
6,26 - 6,33 (1H, multiplet),
4,74 - 4,93 (2H, multiplet),
4,32 - 4,42 (1H, multiplet),
4,20-4,28 (1H, multiplet),
3,49 - 3,80 (4H, multiplet),
2,89 - 3,11 (2H, multiplet),
1,93 - 2,68 (4H, multiplet), 1,71-1,76 (3H, multiplet), 1,08- 1,22( 12H, multiplet).
113c) Sloučenina se vzorcem 113c)
ll3(c)
Zopakováním postupu stejného jako je popsáno v příkladu lb), byla připravena titulní sloučenina, s výjimkou toho, že bylo užito 5'-/(antracen-9-yl)methylthio/-5'-deoxythymidin-2kyanoethyl-N,N-diizopropylfosforamiditu, připraveného jak je popsáno ve stupni b) výše, namísto 5'-O-tritylthymidin-2-kyanoethyl-N,N-diizopropylfosforamiditu. Produkt reakce byl analyzován na sloupci silikagelu chromatografií v reverzní fázi (Preparative Cl8, Waters,
1,5 x 140 mm, eluční činidlo A: 50 mM vodného pufru hydrogenuhličitanu triethylamonného (TEAB), pH7,5, eluční činidlo B: acetonitril, 15 až 50% objemových B, lineární gradient,
-156CZ 287050 B6
260 nm). Frakce obsahující titulní sloučeninu byly odděleny a zpracovány stejným způsobem jako je popsáno v příkladu lb), čímž se získala titulní sloučenina ve formě amorfní pevné látky, mající OD 30 (260 nm).
UV-absorpční spektrum (voda), lambdamax nm: 255.
Doba retence: 13,52 minuty.
Vysokotlaká kapalinová chromatografie (Inertsil ODS-2, 6xl50nm, eluční činidlo A: 0,1 M TEAA, pH 7,5, eluční činidlo B: acetonitril, 10 až 60 objemových % B, 20 minut, lineární gradient, 1 ml/min., 260 nm).
Příklad 114
114a) 5'-/(2-naftyl)methylthio/-5'-deoxythymidin
258 mg, 1 mmol 5'-deoxy-5'-merkaptopyridinu bylo přidáno ke 20 ml acetonu. 265 mg,
1,2 mmol 2-brommethylnaftalenu a 1 g bezvodého uhličitanu draselného bylo pak přidáno pod dusíkovou atmosférou. Výsledná směs byla 2 hodiny míchána za stálého varu pod zpětným chladičem. Na konci této doby byla sraženina odfiltrována z reakční směsi a od filtrátu bylo odděleno rozpouštědlo destilací za sníženého tlaku. Zbytek byl krystalizován z 10 ml ethanolu, čímž se získalo 100 mg (výtěžek 25 %) titulní sloučeniny ve formě bílých krystalů.
'H-NMR spektrum (hexadeuterovaný dimethylsulfoxid, 270 MHz, TMS), ppm:
7,84 - 7,90 (1H, široký singlet),
7,78 (1H, singlet),
7,46 - 7,53 (4H, multiplet),
6,16 - 6,19 (1H, multiplet),
5,34 (1H, dublet, J = 4,4 Hz),
4,14-4,19 (1H, multiplet),
3,92 - 3,99 (2H, multiplet),
3,83 - 3,87 (1H, multiplet),
2,62 - 2,78 (2H, multiplet), 2,02-2,23 (2H, multiplet), 1,75 - 1,79 (3H, multiplet).
114b) 5'-/(2-naftyl)methylthio/-5'-deoxythymidin-2-kyanoethyl-N,N-diizopropylfosforamidit
79,7 mg, 0,2 mmol 5'-/(2-naftyl)methylthio/-5'-deoxythymidinu, připraveného jak je popsáno ve stupni a) výše, bylo sušeno azeotropickou destilací s pyridinem a pak rozpuštěno ve 2,5 ml tetrahydrofuranu. K roztoku bylo přidáno 0,084 ml, 0,48 mmol diizopropylaminu. Dále bylo ke směsi po kapkách pod argonovou atmosférou přidáno 54 mikrolitrů, 0,24 mmol 2-kyanoethylΝ,Ν-diizopropylchlorfosforamiditu. Výsledná směs byla pod stejnou atmosférou 1,75 hodiny míchána při teplotě místnosti. Tetrahydrofuran byl pak oddělen destilací za sníženého tlaku. Výsledný zbytek byl rozpuštěn v 10 ml ethylacetátu a roztok byl promyt 10% vodným roztokem uhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, v popsaném pořadí. Roztok byl pak sušen nad bezvodým síranem hořečnatým, pak bylo rozpouštědlo odděleno destilací za sníženého tlaku. Zbytek byl analyzován chromatografií na sloupci 10 g silikagelu (70 až 230 mesh), za použití ethylacetátu jako elučního činidla. Vzniklo 67 mg (výtěžek 56 %) titulní sloučeniny ve formě pěnovité látky.
-157CZ 287050 B6 ’Η-NMR-spektrum (CDC13, 270 MHz, TMS), ppm:
8,32 (1H, široký singlet),
7.26 - 7,85 (8H, multiplet),
6.27 (1H, multiplet),
4,38 - 4,46 (1H, multiplet),
4,11-4,19 (1H, multiplet),
3,93 - 3,95 (2H, multiplet),
3,47 - 3,90 (4H, multiplet),
2,10 - 2,88 (6H, multiplet),
1,62 - 1,90 (3H, multiplet),
1,10-1,21 (12H, multiplet).
114c) Sloučenina se vzorcem 114c):
—S—TGGGAG—OH
114(c)
Zopakováním postupu stejného jako je popsáno v příkladu lb) byla připravena titulní sloučenina, s výjimkou toho, že bylo užito 5'-/(2-naftyl)methylthio/-5'-deoxythymidin-2-kyanoethyl-N,Ndiizopropylfosforamiditu, připraveného jak je popsáno ve stupni b) výše, namísto 5'-O-tritylthymidin-2-kyanoethyl-N,N-diizopropylfosforamiditu. Produkt byl analyzován na sloupci silikagelu chromatografíí v reverzní fázi (Preparative Cl8, Waters, 1,5 x 150 mm, eluční činidlo A: 50 mM vodného pufru hydrogenuhličitanu triethylamonného TEAB, pH 7,5, eluční činidlo B: acetonitril, 15 až 50% objemových B, lineární gradient, 260 nm). Frakce obsahující titulní sloučeninu byly odděleny a zpracovány stejným způsobem jako je popsáno v příkladu lb), čímž se získala titulní sloučenina ve formě amorfní pevné látky, mající OD 165 (260 nm).
UV-absorpční spektrum (voda), larnbdamax nm: 254.
Dobaretence: 12,07 minuty.
Vysokotlaká kapalinová chromatografie (Inertsil ODS-2, 6x150 mm, eluční činidlo A: 0,1 M TEAA, pH 7,5, eluční činidlo B: acetonitril, 10 až 60 % objemových B, 20 minut, lineární gradient, 1 ml/minutu, 260 nm).
Příklad 115
115a) 5'-/3,5-bis-/3,5-(dibenzyloxy)benzyloxy/benzylthio/-5'-deoxythymidin
258 mg, 1 mmol 5'-deoxy-5'-merkaptopyridinu bylo přidáno ke 20 ml acetonu. 969 m,
1,2 mmol 3,5-bis-/3,5-(dibenzyloxy)benzyIoxy/benzylbromidu a lg bezvodého uhličitanu draselného bylo pak přidáno pod argonovou atmosférou. Výsledná směs byla dvě hodiny míchána za stálého varu pod zpětným chladičem. Na konci této doby byla sraženina odfiltrována z reakční směsi a od filtrátu bylo odděleno rozpouštědlo destilací za sníženého tlaku. Zbytek byl lyofílizován z benzenu, čímž se získalo 365 mg (výtěžek 37 %) titulní sloučeniny ve formě bílého prášku.
’Η-NMR-spektrum (CDC13,270 MHz, TMS), ppm:
-158CZ 287050 B6
7,99 (1H, široký singlet),
7,23 - 7,42 (21H, multiplet),
6,49 - 6,68 (9H, multiplet),
4,98 - 5,03 (12H, multiplet),
4,18 - 4,26 (1H, multiplet),
3,87-3,91 (1H, multiplet),
3,64 - 3,71 (2H, multiplet),
2,67 (2H, dublet, J = 5,7 Hz),
2,00 - 2,64 (2H, multiplet),
1,86 - 1,92 (3H, multiplet).
115b) 5'-/3,5-bis/3,5-(dibenzyloxy)benzyloxy/benzylthio/-5'-deoxythymidin-2-kyanoethylN,N-diizopropylfosforamidit
197 mg, 0,2 mmol 5'-/3,5-bis/3,5-(dibenzyloxy)benzyloxy/benzylthio/-5'-deoxythymidinu, připraveného jak je popsáno ve stupni a) výše, bylo sušeno azeotropickou destilací s pyridinem a pak rozpuštěno v 1 ml methylenchloridu. K roztoku bylo přidáno 0,017 ml, 0,1 mmol diizopropylamoniumtetrazolidu. Dále bylo ke směsi po kapkách pod argonovou atmosférou přidáno 70 mikrolitrů, 0,24 mmol 2-kyanoethyl-N,N,N',N-tetraizopropylfosfordiamiditu. Výsledná směs byla pod stejnou atmosférou 3 hodiny míchána při teplotě místnosti. Tetrahydrofuran byl pak oddělen destilací za sníženého tlaku. Výsledný zbytek byl rozpuštěn v 10 ml ethylacetátu a roztok byl promyt 10% vodným roztokem uhličitanu sodného a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, v popsaném pořadí. Roztok byl pak sušen nad bezvodým síranem hořečnatým, pak bylo rozpouštědlo odděleno destilací za sníženého tlaku. Zbytek byl analyzován chromatografíí na sloupci 10 g silikagelu (70 až 230 mesh), za použití ethylacetátu jako elučního činidla. Vzniklo 103 mg (výtěžek 43 %) titulní sloučeniny ve formě karamelovité látky.
’Η-NMR-spektrum (CDC13, 270 MHz, TMS), ppm:
7,27 - 7,44 (20H, multiplet),
6,51 -6,69(1 OH, multiplet),
4,98 - 5,05 (12H, multiplet),
4,44-4,51 (1H, multiplet),
4,13 - 4,18 (1H, multiplet),
3,47 - 3,87 (6H, multiplet),
2,17-2,84 (6H, multiplet),
1,92 (3H, singlet),
1,08-1,34 (12H, multiplet).
115c) Sloučenina se vzorcem 115c):
-159CZ 287050 B6
Zopakováním postupu stejného jako je popsáno v příkladu lb), byla připravena titulní sloučenina, s výjimkou toho, že bylo užito 5'-/3,5-bis/3,5-(dibenzyloxy)benzyloxy/benzylthio/5'-deoxythymidin-2-kyanoethyl-N,N-diizopropylfosforamiditu, připraveného jak je popsáno ve stupni b) výše, namísto 5'-O-tritylthymidin-2-kyanoethyl-N,N-diizopropylfosforamiditu. Produkt reakce byl analyzován na sloupci chromatografií v reverzní fázi (Preparative Cl 8, Waters, 1,5 x 150 mm, eluční činidlo A: 1 Μ TEAA, pH 7,0, eluční činidlo B: acetonitril, 30 až 100 % objemových B, lineární gradient, 7 ml/minutu, 260 nm, teplota sloupce 60 °C). Eluované frakce byly po 26,5 minutách odděleny a zpracovány stejným způsobem jako je popsáno v příkladu lb), čímž se získala titulní sloučenina ve formě amorfní pevné látky, mající PD 86 (260 nm).
UV-absorpční spektrum (voda), lambdamax nm: 257.
Doba retence: 18,44 minuty.
Vysokotlaká kapalinová chromatografie (Inertsil ODS-2, 6x150 mm, eluční činidlo A: 0,1 MTEAA, pH 7,5, eluční činidlo B: acetonitril, 40 až 100 % objemových B, 25 minut, lineární gradient, 1 ml/minutu, 260 nm).
Přípravy
Následující přípravy popisují přípravu alternativních výchozích látek pro přípravu sloučenin podle vynálezu.
Příprava 1
2-/2-0-(4,4'-dimethoxytrityloxy)ethylsulfonyl/ethylmonosukcinát
1,37 g, 3,0 mmol 2-/2-0-(4,4'-dimethoxytrityloxy)ethylsulfonyl/ethanol (Tetrahedron Lett., 27, 4705, 1986), bylo sušeno azeotropickou destilací za sníženého tlaku s pyridinem a pak rozpuštěno ve 12 ml methylenchloridu. K výslednému roztoku bylo přidáno 315 mg, 3,15 mmol anhydridu kyseliny jantarové a 384 mg, 3,15 mmol 4-(dimethylamino)pyridinu a směs byla 30 minut míchána. Pak bylo dokončení reakce potvrzeno chromatografií na tenké vrstvě. K reakční směsi bylo přidáno 80 ml methylenchloridu. Výsledná směs byla promyta 0,5 M vodným roztokem dihydrogenfosforečnanu draselného a vodou, v popsaném pořadí. Organická vrstva byla sušena nad bezvodým síranem sodným. Rozpouštědlo bylo pak odděleno destilací za sníženého tlaku, čímž vzniklo 1,60 g, (výtěžek 96 %) titulní sloučeniny.
’Η-NMR-spektrum (CDC13, 270 MHz, TMS), ppm:
7,40-6,83 (13H, multiplet),
4,58 - 4,53 (2H, triplet, J = 5,94 Hz),
3,79 (6H, singlet),
3,68 - 3,64 (2H, triplet, J = 5,61 Hz),
3,50 - 3,45 (2H, triplet, J = 5,94 Hz),
3,18-3,14 (2H, triplet, J = 5,61 Hz),
2,71 -2,61 (4H, multiplet).
-160CZ 287050 B6
Příprava 2
Sloučenina se vzorcem 2(p):
O Ť
DMT-OCH2CH2SCH2CH2OCCH2CH2C.NH.(CH2)3—|ČPG]2(p)
4- IIII
00
1,60 g, 2,87 mmol 2-/2-0-(4,4'-dimethoxytrityloxy)ethylsulfonyl/ethylmonosukcinátu, připraveného jak je popsáno v přípravě 1, bylo rozpuštěno v 18 ml dimethylformamidu, 0,96 g,
3,6 mmol pentachlorfenolu a 0,96 g, 4,5 mmol 1,3-dicyklohexylkarbodiimidu bylo přidáno k výslednému roztoku, který byl potom 18 hodin míchán. Nerozpustné sraženiny byly odděleny filtrací a rozpouštědlo bylo odděleno od filtrátu odpařováním za sníženého tlaku. K odparku byl přidán benzen a další nerozpustné sraženiny byly odděleny filtrací. Rozpouštědlo bylo opět odděleno od filtrátu odpařováním za sníženého tlaku. Odparek 0,16 g, 0,2 mmol, byl rozpuštěn ve 4 ml dimethylformamidu. 15 mikrolitrů, 0,11 mol triethylaminu a 1,0 g aminopropyl-CPG (85,7 mikromol/g aminoskupin bylo tímto zavedeno), bylo přidáno k roztoku, který byl ponechán stát 24 hodiny při teplotě místnosti. Na konci této doby byl CPG nosič oddělen filtrací, promyt methylenchloridem a sušen vypařováním za sníženého tlaku. 5 ml každého, Cap A a B, roztoku (Nippon Millipore Limited) bylo přidáno k CPG nosiči a směs byla ponechána 5 minut stát. Směs pak byla promyta pyridinem a methylenchloridem, v popsaném pořadí, a sušena odpařováním za sníženého tlaku, čímž vznikla titulní sloučenina.
Množství sloučeniny z přípravy 1 převedené na titulní sloučeninu bylo určeno následujícím způsobem. Deblokující roztok (3% objemová dichloroctové kyseliny v methylenchloridu, Nippon Millipore Limited) byl přidán k 11,4 mg titulní sloučeniny, směs byla 3 minuty protřepávána, pak bylo přidáno takové množství methylenchloridu, aby celkové množství bylo 20 ml. 0,4 ml rozpouštědla bylo oddestilováno a pak byly ke zbytku přidány 3 ml roztoku kyseliny chloristé v ethanolu v poměru objemů 3 :2. Byla měřena absorbance dimethoxytritylového kationtu při 500 nm (= 71700).
Množství vložených dimethoxytritylových skupin bylo 53,1 mikromol/g.
Příprava 3
2-/2-0-(4,4 '-dimethoxytrityloxy)ethylsulfonyl/ethyl-2,2,2-trichlorethoxykarbonát
1,1 g, 2,4 mmol 2-/2-0-(4,4'-dimethoxytrityloxy)ethylsulfonyl/ethanol (Tetrahedron Lett., 27, 4705, 1986), bylo sušeno azeotropickou destilací za sníženého tlaku s pyridinem, a pak rozpuštěno ve 12 ml methylenchloridu. K výslednému roztoku bylo přidáno 0,35 ml, 2,6 mmol 2,2,2-trichlorethoxykarbonylchloridu a bylo pak dvě hodiny mícháno. Pak bylo dokončení reakce potvrzeno chromatografíí na tenké vrstvě. Reakční směs byla přidána ke 100 ml methylenchloridu a 100 ml 5% vodnému roztoku hydrogenuhličitanu sodného k docílení separace fází. Organické vrstvy byly promyty 5% vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného. Byly odděleny a sušeny nad bezvodým síranem sodným. Rozpouštědlo bylo pak odděleno destilací za sníženého tlaku a zbytek byl čištěn na sloupci chromatografíí v reverzní fázi (Preparative Cl8, Waters, 2,2 x 7,0 cm, rozpouštědlo, 60 objemových % vodný acetonitril), čímž vzniklo 1,35 g (výtěžek 89 %) titulní sloučeniny ve formě amorfního prášku.
‘H-NMR-spektrum (CDCI3, 270 MHz, TMS), ppm:
-161CZ 287050 B6
7,41 - 6,83 (13H, multiplet),
4,75 (2H, singlet),
4,70 - 4,66 (2H, triplet, J = 5,94 Hz),
3,80 (6H, singlet),
3,68 - 3,64 (2H, triplet, J = 5,28 Hz), 3,61 - 3,56 (2H, triplet, J = 6,27 Hz), 3,23 - 3,19 (2H, triplet, J = 5,28 Hz).
Příprava 4
Sloučenina se vzorcem 4(p)
O
Ť
DMT-OCH2CH2SCH2CH2OC.NH.(CH2)3—|CPG I4(p)
ΦII oo
0,126 g, 0,2 mmol 2-/2-0-(4,4'-dimethoxytrityloxy)ethylsulfonyl/ethyl-2,2,2-trichlorethoxykarbonátu, připraveného jak je popsáno v přípravě 3, bylo rozpuštěno v 5 ml dimethylformamidu. 15 mikrolitrů, 0,11 mmol triethylaminu a 1,0 g aminopropyl-CPG (85,7 mikromol/g bylo tímto vloženo) bylo přidáno k výslednému roztoku a promyto s 1% (% obj.) roztokem triethylaminu v dimethylformamidu. Směs byla ponechána 4 dny stát při teplotě místnosti. Na konci této doby byl CPG nosič oddělen filtrací a promyt methylenchloridem, pak byl sušen vypařováním za sníženého tlaku. 5 ml každého, Cap A a B, roztoku (Nippon Millipore Limited) bylo přidáno k CPG nosiči a směs byla ponechána 5 minut stát. Směs byla pak promyta pyridinem a methylenchloridem, v popsaném pořadí, a sušena vypařováním za sníženého tlaku, čímž vznikla titulní sloučenina.
Množství sloučeniny z přípravy 3 převedené na titulní sloučeninu bylo určeno následujícím způsobem. Deblokující roztok (3 % objemová kyseliny dichloroctové v methylenchloridu, Nippon Millipore Limited) bylo přidáno k 11,4 mg titulní sloučeniny, směs byla 3 minuty protřepávána, pak bylo přidáno takové množství methylenchloridu, aby celkové množství bylo 20 ml. 0,4 ml rozpouštědla bylo oddestilováno a pak byly ke zbytku přidány 3 ml roztoku kyseliny chloristé v ethanolu v poměru objemů 3 :2. Byla měřena absorbance dimethoxytritylového kationtu při 500 nm (= 71700).
Množství vložených dimethoxytritylových skupin bylo 24,0 mikromol/g.
Příprava 5
Sloučenina se vzorcem 5(p):
O
Ť
DMT-OCH2CH2SCH2CH2OCCH2CH2C.NH.(CH2)3—Isilikagel + II II ooo
5(p)
1,60 g, 2,87 mmol 2-/2-0-(4,4'-dimethoxytrityloxy)ethylsulfonyl/ethylmonosukcinátu, připraveného jak je popsáno v přípravě 1, bylo rozpuštěno v 18 ml dimethylformamidu. 0,98 g,
-162CZ 287050 B6
3,6 mmol pentachlorfenolu a 0,96 g, 4,5 mmol 1,3-dicyklohexylkarbodiimidu bylo přidáno k výslednému roztoku, který byl pak 18 hodin míchán. Nerozpustné sraženiny byly odděleny filtrací a rozpouštědlo bylo odděleno od filtrátu odpařováním za sníženého tlaku. K odparku byl přidán benzen a další nerozpustné sraženiny byly odděleny filtrací. Rozpouštědlo bylo opět odděleno od filtrátu odpařováním za sníženého tlaku. 1,0 g, 0,92 mmol odparku bylo použito v následujícím stupni.
1,0 g, 0,92 mmol tohoto odparku, 75 mikrolitrů, 0,55 mmol triethylaminu a Cosmosil 150 NH2300 (mající 450 mikromol aminoskupin na 1 g silikagelového povrchu, vyrobeno Nacalai Tesque Co., Ltd.), bylo přidáno ke 20 ml dimethylformamidu. Výsledná směs byla pak 20 hodin míchána při teplotě místnosti. Požadovaný nosič, jmenovitě substituovaný Cosmosil 150 NH2-300 byl oddělen, promyt methylenchloridem a sušen odpařováním za sníženého tlaku. 10 ml každého, Cap A a B, roztoku (Nippon Millipore Limited) bylo přidáno k nosiči a směs byla ponechána 10 minut stát. Směs byla pak promyta pyridinem a methylenchloridem, v popsaném pořadí a sušena opařováním za sníženého tlaku, čímž vznikla titulní sloučenina.
Množství sloučeniny z přípravy 1 převedené na titulní sloučeninu, bylo určeno následujícím způsobem. Deblokující roztok (3 % objemová kyseliny dichloroctové v methylenchloridu, Nippon Millipore Limited) bylo přidáno k 5,4 mg titulní sloučeniny, směs byla 3 minuty protřepávána, přičemž bylo přidáno takové množství methylenchloridu, aby celkové množství bylo 20 ml. 0,4 ml rozpouštědla bylo oddestilováno, a pak byly ke zbytku přidány 3 ml roztoku kyseliny chloristé v ethanolu v poměru objemů 3 :2. Byla měřena absorbance dimethoxytritylového kationtu při 500 nm (= 71700).
Množství vložených dimethoxytritylových skupin bylo 51,8 mikromol/g.
Příprava 6
Sloučenina se vzorcem 6(p):
1,60 g, 2,87 mmol 2-/2-0-(4,4'-dimethoxytrityloxy)ethylsulfonyl/ethylmonosukcinátu, připraveného jak je popsáno v přípravě 1, bylo rozpuštěno v 18 ml dimethylformamidu. 0,96 g,
3,6 mmol pentachlorfenolu a 0,96 g, 4,5 mmol 1,3-dicyklohexylkarbodiimidu bylo přidáno k výslednému roztoku, který byl potom 18 hodin míchán. Nerozpustné sraženiny byly odděleny filtrací a rozpouštědlo bylo odděleno od filtrátu odpařováním za sníženého tlaku. K odparku byl přidán benzen a další nerozpustné sraženiny byly odděleny filtrací. Rozpouštědlo bylo opět odděleno od filtrátu odpařováním za sníženého tlaku. 0,48 g, 0,6 mmol odparku bylo užito v následujícím stupni.
0,48 g, 0,6 mmol tohoto odparku, 110 mikrolitrů, 0,8 mmol 4-(diethylamino)pyridinu a 1,0 g palkoxybenzylalkoholové pryskyřice (mající 0,9 mmol aminoskupin na 1 g silikagelového povrchu, vyrobeno Kokusan Kagaku Co. Ltd.), bylo přidáno k 15 ml dimethylformamidu. Výsledná směs byla pak 25 hodin míchána při teplotě místnosti. Na konci této doby byl požadovaný nosič, jmenovitě substituovaná p-alkoxybenzylalkoholová pryskyřice, oddělena, promyta s methylenchloridem, s methanolem a diethyletherem v popsaném pořadí a sušena
-163CZ 287050 B6 odpařováním za sníženého tlaku. 10 ml každého, Cap A a B, roztoku (Nippon Millipore Limited) bylo přidáno k nosiči a směs byla ponechána 15 minut stát. Směs byla pak promyta methylenchloridem, methanolem a diethyletherem v popsaném pořadí a sušena odpařováním za sníženého tlaku, čímž vznikla titulní sloučenina.
Množství sloučeniny z přípravy 1 převedené na titulní sloučeninu, bylo určeno následujícím způsobem. Deblokující roztok (3 % objemová dichloroctové kyseliny v methylenchloridu, Nippon Millipore Limited) bylo přidáno k 10,6 mg titulní sloučeniny, směs byla 3 minuty protřepávána, pak bylo přidáno takové množství methylenchloridu, aby celkové množství bylo 10 20 ml. 0,4 ml rozpouštědla bylo oddestilováno a pak byly ke zbytku přidáno 6 ml roztoku kyseliny chloristé v ethanolu v poměru objemů 3 :2. Byla měřena absorbance dimethoxytritylového kationtu při 500 nm (= 71 700).
Množství vložených dimethoxytritylových skupin bylo 302 mikromol/g.
Příprava 7
Sloučenina se vzorcem 7(p):
O
Ť
DMT-OCH2CH2SCH2CH2OCCCH2(OCH2CH2)nOCH2COOH7(p)
III
OO
9,9 g, 3,3 mmol poly(oxyethylen)diglykolu bylo sušeno azeotropickou destilací s pyridinem a pak rozpuštěno v 10 ml methylenchloridu. K výslednému roztoku bylo za chlazení ledem přidáno 226 mg, 1,1 mmol 1,3-dicyklohexylkarbodiimidu. Výsledná směs byla pak za chlazení ledem 15 30 minut míchána. Na konci této doby byly k roztoku přidány 2 ml methylenchloridového roztoku obsahujícího 0,5 g, 1,1 mmol 2-/2-0-(4,4'-dimethoxytrityloxy)ethylsulfonyl/ethanolu (Tetrahedron Lett., 27, 4705, 1986) a 0,13 g, 1,1 mmol 4-(dimethylamino)pyridinu. Výsledná směs byla pak 18 hodin míchána při teplotě místnosti. Sraženina byla odfiltrována. Reakční směs byla zkoncentrována na 50 ml odpařováním za sníženého tlaku. Ke koncentrovanému roztoku bylo 35 potom přidáno 500 ml chladného diethyletheru. Získaná sraženina byla oddělena a sušena odpařováním za sníženého tlaku. Výsledná sraženina byla rozpuštěna v methylenchloridu a čištěna chromatografíí na sloupci 200 g silikagelu (70 až 230 mesh) při eluci směsi methanolu a methylenchloridu v poměru objemů 2 : 8, čímž se získalo 2,77 g (výtěžek 72 %) titulní sloučeniny.
’Η-NMR-spektrum (CDC13, 270 MHz, TMS), ppm:
7,09 - 7,43 (multiplet),
6,81 -6,88 (multiplet),
4,5 8 - 4,64 (multiplet),
3,65 (singlet),
3,50 - 3,53 (multiplet),
3,46 - 3,49 (multiplet),
3,31 -3,34 (multiplet).
-164CZ 287050 B6
Příprava 8
Sloučenina se vzorcem 8(p):
O
DMT—OCH2CH2SCH2Gl20CCH:(OCH:CH;)nOCH2COCH2——OCH2
O θ o
8(P)
0,7 g, 0,2 mmol sloučeniny z přípravy 7 bylo rozpuštěno v 6 ml methylenchloridu. 2 ml dimethylformamidového roztoku obsahujícího 63 mg, 0,24 mmol pentachlorfenolu a 64 mg. 0,3 mmol 1,3-dicyklohexylkarbodiimidu bylo za chlazení ledem k roztoku přidáno. Výsledný roztok byl pak 7 dní míchán při teplotě místnosti. Na konci této doby byla sraženina odfiltrována z reakční směsi a z filtrátu bylo odděleno rozpouštědlo za sníženého tlaku. Výsledný zbytek byl rozpuštěn v 10 ml methylenchloridu. 100 ml diethyletheru bylo k roztoku za chlazení ledem přidáno. Výsledná sraženina byla odfiltrována. Od filtrátu bylo odděleno rozpouštědlo destilací za sníženého tlaku. Filtrát, 37 mg, 0,3 mmol 4-(dimethylamino)pyridinu a 0,25 g palkoxybenzylalkoholové pryskyřice (mající 0,9 mmol aminoskupin na 1 g silikagelového povrchu, vyrobené Kokusan Kagaku Co. Ltd.), bylo přidáno k 6 ml dimethylformamidu. Výsledná směs byla 24 hodiny ponechána při teplotě místnosti. Požadovaný nosič, jmenovitě substituovaná p-alkoxybenzylalkoholová pryskyřice, byl oddělen, promyt pyridinem, methylenchloridem a diethyletherem v popsaném pořadí a sušen odpařováním za sníženého tlaku. 10 ml každého, Cap A a B, roztoku (Nippon Millipore Limited) bylo přidáno k nosiči a směs byla ponechána 15 minut stát. Směs byla pak promyta s methylenchloridem, methanolem a diethyletherem v popsaném pořadí a sušena odpařováním za sníženého tlaku, čímž vznikla titulní sloučenina.
Množství sloučeniny z přípravy 1 převedené na titulní sloučeninu, bylo určeno následujícím způsobem. Deblokující roztok (3 % objemová kyseliny dichloroctové v methylenchloridu, Nippon Millipore Limited) bylo přidáno k 6,7 mg titulní sloučeniny, směs byla 3 minuty protřepávána, a pak bylo přidáno takové množství methylenchloridu, aby celkové množství bylo 20 ml. 0,4 ml rozpouštědla bylo oddestilováno a pak bylo ke zbytku přidáno 20 ml roztoku kyseliny chloristé v ethanolu v poměru objemů 3 : 2. Byla měřena absorbance dimethoxytritylového kationtu při 500 nm (= 71 700).
Množství vložených dimethoxytritylových skupin bylo 16 mikromol/g.
Farmaceutický příklad 1
Injekční prostředek
Injekční prostředek se připraví tak, že se smísí 1,5 % hmotnostních sloučeniny z příkladu 25 s 10% objemovými propylenglykolu a přidá se dostatečné množství vody pro injekční použití k doplnění na konečný objem, načež se roztok sterilizuje.
-165CZ 287050 B6
Farmaceutický příklad 2
Tablety
složka množství v mg
1 sloučenina z příkladu 25 200
2 pyrofosforečnan sodný 5
3 Aerosil 200 5
4 stearan hořečnatý 5
5 laktóza 495
6 kukuřičný škrob 154
7 Apicel 123
8 HPL(L) 10
celkem 997
Tablety, z nichž každá obsahuje 100 mg složek se připraví tak, že se mletá směs složek 1 až 4 přidá k předem granulované směsi složek 5 až 8 a výsledná směs se lisuje na tablety na vhodném tabletovacím stroji.
Farmaceutický příklad 3
Kapsle
složka množství v mg
1 sloučenina z příkladu 25 200
2 fosforečnan vápenatý 200
3 křemičitan hlinitý 345
4 krystalická celulosa 250
5 stearan hořečnatý 2
celkem 997
Kapsle, které obsahují 200 mg svrchu uvedených složek se připraví běžným způsobem tak, že se nejprve ve vhodném mísícím zařízení připraví prášková směs všech uvedených složek, pak se směs protlačí sítem a znovu dobře promísí.
Farmaceutický příklad 4
Kapsle z tvrdé želatiny
Kapsle se připraví tak, že se smísí 100 mg práškové sloučeniny z příkladu 25, 150 mg laktózy, 50 mg celulosy a 6 mg stearanu hořečnatého, výsledná směs se plní do standardních dvoudílných kapslí z tvrdé želatiny, které se pak omyjí a suší. Kapsle obsahují jednotlivou dávku uvedené účinné látky.
Farmaceutický příklad 5
Kapsle z měkké želatiny
Kapsle z měkké želatiny, obsahující 100 mg účinné látky je možno připravit tak, že se uvedené množství sloučenin z příkladu 25 smísí s poživatelným olejem, například sojovým olejem,
-166CZ 287050 B6 olejem z bavlníkových semen nebo olivovým olejem, směs se plní do kapslí z měkké želatiny vhodné velikosti pomocí motorového čerpadla, kapsle se omyjí a usuší.
Farmaceutický příklad 6
Tablety
Podle obvyklého postupu se tablety připraví tak, že se granuluje směs 100 mg sloučeniny z příkladu 25, 0,2 mg koloidního oxidu křemičitého, 5 mg stearanu hořečnatého, 275 mg jemně krystalické celulosy, 11 mg škrobu a 98,8 mg laktózy a výsledná směs se lisuje na tablety.
Tabulka řetězců řetězec č.: 1 délka řetězce: 4 druh řetězce: nukleová kyselina typ řetězce: jednoduchý topologie: lineární hypotetický řetězec: 0 antimediátorový řetězec: 0 řetězec: TGGG.
řetězec č.: 2 délka řetězce: 5 druh řetězce: nukleová kyselina typ řetězce: jednoduchý topologie: lineární hypotetický řetězec: 0 antimediátorový řetězec: 0 řetězec: TGGGG řetězec č. 3 délka řetězce: 5 druh řetězce: nukleová kyselina typ řetězce: jednoduchý topologie: lineární hypotetický řetězec: 0 antimediátorový řetězec: 0 řetězec: TGGGA řetězec č.: 4 délka řetězce: 6 druh řetězce: nukleová kyselina typ řetězce: jednoduchý topologie: lineární hypotetický řetězec: 0 antimediátorový řetězec: 0 řetězec: TGGGAG
-167CZ 287050 B6 řetězec č.: 5 délka řetězce: 7 druh řetězce: nukleová kyselina typ řetězce: jednoduchý topologie: lineární hypotetický řetězec: 0 antimediátorový řetězec: 0 řetězec: TGGGAGG řetězec č. 6 délka řetězce: 7 druh řetězce: nukleová kyselina typ řetězce: jednoduchý topologie: lineární hypotetický řetězec: 0 antimediátorový řetězec: 0 řetězec: CGGGAGG řetězec č.: 7 délka řetězce: 7 druh řetězce: nukleová kyselina typ řetězce: jednoduchý topologie: lineární hypotetický řetězec: 0 antimediátorový řetězec: 0 řetězec: TTGGAGG řetězec č. 8 délka řetězce: 7 druh řetězce: nukleová kyselina typ řetězce: jednoduchý topologie: lineární hypotetický řetězec: 0 antimediátorový řetězec: 0 řetězec: TGCGAGG řetězec č.: 9 délka řetězce: Ί druh řetězce: nukleová kyselina typ řetězce: jednoduchý topologie: lineární hypotetický řetězec: 0 antimediátorový řetězec: 0 řetězec: GGGGAGG řetězec č.: 10 délka řetězce: 7 druh řetězce: nukleová kyselina
-168CZ 287050 B6 typ řetězce: jednoduchý topologie: lineární hypotetický řetězec: 0 antimediátorový řetězec: 0 řetězec: mCGGGAGG řetězec č.: 11 délka řetězce: 7 druh řetězce: nukleová kyselina typ řetězce: jednoduchý topologie: lineární hypotetický řetězec: 0 antimediátorový řetězec: 0 řetězec: mCGmCGAGG řetězec č.: 12 délka řetězce: 8 druh řetězce: nukleová kyselina typ řetězce: jednoduchý topologie: lineární hypotetický řetězec: 0 antimediátorový řetězec: 0 řetězec: TTGGGAGG řetězec č.: 13 délka řetězce: 8 druh řetězce: nukleová kyselina typ řetězce: jednoduchý topologie: lineární hypotetický řetězec: 0 antimediátorový řetězec: 0 řetězec: CTGGGAGG řetězec č.: 14 délka řetězce: 5 druh řetězce: nukleová kyselina typ řetězce: jednoduchý topologie: lineární hypotetický řetězec: 0 antimediátorový řetězec: 0 řetězec: CTCGT řetězec č.: 15 délka řetězce: 5 druh řetězce: nukleová kyselina typ řetězce: jednoduchý topologie: lineární hypotetický řetězec: 0 antimediátorový řetězec: 0
-169CZ 287050 B6 řetězec: CTCGC řetězec č.: 16 délka řetězce: 5 druh řetězce: nukleová kyselina typ řetězce: jednoduchý topologie: lineární hypotetický řetězec: 0 antimediátorový řetězec: 0 řetězec: CTCGG řetězec č. 17:
délka řetězce: 5 druh řetězce: nukleová kyselina typ řetězce: jednoduchý topologie: lineární hypotetický řetězec: 0 antimediátorový řetězec: 0 řetězec: CGGGT řetězec č.: 18 délka řetězce: 5 druh řetězce: nukleová kyselina typ řetězce: jednoduchý topologie: lineární hypotetický řetězec: 0 antimediátorový řetězec: 0 řetězec: CGGGC řetězec č.: 19 délka řetězce: 5 druh řetězce: nukleová kyselina typ řetězce: jednoduchý topologie: lineární hypotetický řetězec: 0 antimediátorový řetězec: 0 řetězec: CGGGG řetězec č.: 20 délka řetězce: 5 druh řetězce: nukleová kyselina typ řetězce: jednoduchý topologie: lineární hypotetický řetězec: 0 antimediátorový řetězec: 0 řetězec: CGCGT
-170CZ 287050 B6 řetězec č.: 21 délka řetězce: 5 druh řetězce: nukleová kyselina typ řetězce: jednoduchý topologie: lineární hypotetický řetězec: 0 antimediátorový řetězec: 0 řetězec: CGCGC řetězec č.: 22 délka řetězce: 5 druh řetězce: nukleová kyselina typ řetězce: jednoduchý topologie: lineární hypotetický řetězec: 0 antimediátorový řetězec: 0 řetězec: CGCGG řetězec č.: 23 délka řetězce: 5 druh řetězce: nukleová kyselina typ řetězce: jednoduchý topologie: lineární hypotetický řetězec: 0 antimediátorový řetězec: 0 řetězec: TTGGA řetězec č.: 24 délka řetězce: 5 druh řetězce: nukleová kyselina typ řetězce: jednoduchý topologie: lineární hypotetický řetězec: 0 antimediátorový řetězec: 0 řetězec: TTGGT řetězec č.: 25 délka řetězce: 5 druh řetězce: nukleová kyselina typ řetězce: jednoduchý topologie: lineární hypotetický řetězec: 0 antimediátorový řetězec: 0 řetězec: TTGGC řetězec: č.: 26 délka řetězce: 5 druh řetězce: nukleová kyselina
-171CZ 287050 B6 typ řetězce: jednoduchý topologie: lineární hypotetický řetězec: 0 antimediátorový řetězec: 0 řetězec: TTGGG řetězec: č.: 27 délka řetězce: 5 ío druh řetězce: nukleová kyselina typ řetězce: jednoduchý topologie: lineární hypotetický řetězec: 0 antimediátorový řetězec: 0 řetězec: TTCGA řetězec č.: 28 délka řetězce: 5 druh řetězce: nukleová kyselina typ řetězce: jednoduchý topologie: lineární hypotetický řetězec: 0 antimediátorový řetězec: 0 řetězec: TTCGT řetězec č.: 29 délka řetězce: 5
3o druh řetězce: nukleová kyselina typ řetězce: jednoduchý topologie: lineární hypotetický řetězec: 0 antimediátorový řetězec: 0 řetězec: TTCGC řetězec č.: 30 délka řetězce: 5 druh řetězce: nukleová kyselina typ řetězce: jednoduchý topologie: lineární hypotetický řetězec: 0 antimediátorový řetězec: 0 řetězec: TTCGG řetězec č.: 31 délka řetězce: 5 druh řetězce: nukleová kyselina typ řetězce: jednoduchý topologie: lineární hypotetický řetězec: 0 antimediátorový řetězec: 0
-172CZ 287050 B6 řetězec: TGGGT řetězec č.: 32 délka řetězce: 5 druh řetězce: nukleová kyselina typ řetězce: jednoduchý topologie: lineární hypotetický řetězec: 0 antimediátorový řetězec: 0 řetězec: TGGGC řetězec č.: 33 délka řetězce: 5 druh řetězce: nukleová kyselina typ řetězce: jednoduchý topologie: lineární hypotetický řetězec: 0 antimediátorový řetězec: 0 řetězec: TGCGA řetězec č.: 34 délka řetězce: 5 druh řetězce: nukleová kyselina typ řetězce: jednoduchý topologie: lineární hypotetický řetězec: 0 antimediátorový řetězec: 0 řetězec: TGCGT řetězec č.: 35 délka řetězce: 5 druh řetězce: nukleová kyselina typ řetězce: jednoduchý topologie: lineární hypotetický řetězec: 0 antimediátorový řetězec: 0 řetězec: TGCGC řetězec č.: 36 délka řetězce: 5 druh řetězce: nukleová kyselina typ řetězce: jednoduchý topologie: lineární hypotetický řetězec: 0 antimediátorový řetězec: 0 řetězec: TGCGG
-173CZ 287050 B6 řetězec č.: 37 délka řetězce: 5 druh řetězce: nukleová kyselina typ řetězce: jednoduchý topologie: lineární hypotetický řetězec: 0 antimediátorový řetězec: 0 řetězec: CTGGT řetězec č.: 38 délka řetězce: 5 druh řetězce: nukleová kyselina typ řetězce: jednoduchý topologie: lineární hypotetický řetězec: 0 antimediátorový řetězec: 0 řetězec: CTGGC řetězec č.: 39 délka řetězce: 4 druh řetězce: nukleová kyselina typ řetězce: jednoduchý topologie: lineární hypotetický řetězec: 0 antimediátorový řetězec: 0 řetězec: CTCG řetězec č.: 40 délka řetězce: 4 druh řetězce: nukleová kyselina typ řetězce: jednoduchý topologie: lineární hypotetický řetězec: 0 antimediátorový řetězec: 0 řetězec: TTCG řetězec č.: 41 délka řetězce: 4 druh řetězce: nukleová kyselina typ řetězce: jednoduchý topologie: lineární hypotetický řetězec: 0 antimediátorový řetězec: 0 řetězec: CTGG řetězec č.: 42 délka řetězce: 4 druh řetězce: nukleová kyselina
-174CZ 287050 B6 typ řetězce: jednoduchý topologie: lineární hypotetický řetězec: 0 antimediátorový řetězec: 0 řetězec: CGCG řetězec č.: 43 délka řetězce: 4 druh řetězce: nukleová kyselina typ řetězce: jednoduchý topologie: lineární hypotetický řetězec: 0 antimediátorový řetězec: 0 řetězec: TGCG řetězec ě.: 44 délka řetězce: 4 druh řetězce: nukleová kyselina typ řetězce: jednoduchý topologie: lineární hypotetický řetězec: 0 antimediátorový řetězec: 0 řetězec: CGGG řetězec č.: 45 délka řetězce: 4 druh řetězce: nukleová kyselina typ řetězce: jednoduchý topologie: lineární hypotetický řetězec: 0 antimediátorový řetězec: 0 řetězec: TTGG řetězec ě.: 46 délka řetězce: 9 druh řetězce: nukleová kyselina typ řetězce: jednoduchý topologie: lineární hypotetický řetězec: 0 antimediátorový řetězec: 0 řetězec: GGGCGGGGC řetězec č.: 47 délka řetězce: 7 druh řetězce: nukleová kyselina typ řetězce: jednoduchý topologie: lineární hypotetický řetězec: 0 antimediátorový řetězec: 0
-175CZ 287050 B6 řetězec: TAGGAGG řetězec č.: 48 délka řetězce: 8 druh řetězce: nukleová kyselina typ řetězce: jednoduchý topologie: lineární hypotetický řetězec: 0 antimediátorový řetězec: 0 řetězec: TGGGAGGT řetězec č.: 49 délka řetězce: 9 druh řetězce: nukleová kyselina typ řetězce: jednoduchý topologie: lineární hypotetický řetězec: 0 antimediátorový řetězec: 0 řetězec: TGGGCGCAG řetězec č.: 50 délka řetězce: 3 druh řetězce: nukleová kyselina typ řetězce: jednoduchý topologie: lineární hypotetický řetězec: 0 antimediátorový řetězec: 0 řetězec: CCG řetězec č.: 51 délka řetězce: 7 druh řetězce: nukleová kyselina typ řetězce: jednoduchý topologie: lineární hypotetický řetězec: 0 antimediátorový řetězec: 0 řetězec: TCGGAGG řetězec č.: 52 délka řetězce: 7 druh řetězce: nukleová kyselina typ řetězce: jednoduchý topologie: lineární hypotetický řetězec: 0 antimediátorový řetězec: 0 řetězec: TGmCGAGG
-176CZ 287050 B6 řetězec č.: 53 délka řetězce: 8 druh řetězce: nukleová kyselina typ řetězce: jednoduchý topologie: lineární hypotetický řetězec: 0 antimediátorový řetězec: 0 řetězec: GTGGGAGG řetězec č.: 54 délka řetězce: 3 druh řetězce: nukleová kyselina typ řetězce: jednoduchý topologie: lineární hypotetický řetězec: 0 antimediátorový řetězec: 0 řetězec: TGG řetězec č.: 55 délka řetězce: 7 druh řetězce: nukleová kyselina typ řetězce: jednoduchý topologie: lineární hypotetický řetězec: 0 antimediátorový řetězec: 0 řetězec: TGGGAmGG řetězec č.: 56 délka řetězce: Ί druh řetězce: nukleová kyselina typ řetězce: jednoduchý topologie: lineární hypotetický řetězec: 0 antimediátorový řetězec: 0 řetězec: TGGGAGA řetězec č.: 57 délka řetězce: 9 druh řetězce: nukleová kyselina typ řetězce: jednoduchý topologie: lineární hypotetický řetězec: 0 antimediátorový řetězec: 0 řetězec: AATGGGAGG
-177CZ 287050 B6

Claims (5)

    PATENTOVÉ NÁROKY
  1. (1) kde
    Ri, R2 a R3 se nezávisle volí ze skupiny atom vodíku, alkylové skupiny, obsahující 1 až 4 atomy uhlíku, arylové skupiny ve významu, který bude dále uveden a antrachinonylové skupiny, které jsou nesubstituované nebo jsou substituovány alespoň jedním substituentem, který se volí ze skupiny substituentů 1, tak jak bude dále definována a
    Z znamená atom uhlíku nebo atom křemíku, nebo
    R2, R3 a Z společně tvoří fluorenylovou nebo xanthenylovou skupinu,
    Rj znamená atom vodíku, nesubstituovanou alkylovou skupinu obsahující 1 až 4 atomy uhlíku, substituovanou alkylovou skupinu, obsahující 1 až 4 atomy uhlíku a substituovanou alespoň jedním substituentem, který se volí ze skupiny substituentů 2, tak jak bude dále definována, arylovou skupinu v dále uvedeném významu nebo aralkylovou skupinu v dále uvedeném významu,
    Yi, Y3 a Y4 se nezávisle volí ze skupiny atom kyslíku, atom síry nebo skupina vzorce >NH,
    Y2 znamená atom kyslíku, atom síry, skupinu vzorce >NH, alkylenovou skupinu, obsahující 1 až 4 atomy uhlíku nebo fenylenovou skupinu,
    X znamená nesubstituovanou alkylenovou skupinu, obsahující 1 až 10 atomů uhlíku nebo alkylenovou skupinu, která obsahuje 1 až 10 atomů uhlíku a je substituována alespoň jednou hydroxyskupinou, man nezávisle znamenají 0 nebo celé číslo v rozmezí 1 až 10, a
    B znamená oligodeoxyribonukleotid, jehož délka řetězce je v rozmezí 3 až 9, přičemž arylovou skupinou je aromatická skupina s uhlíkovým kruhem, která obsahuje 6 až 20 atomů uhlíku v 1 až 5 kruzích a která je nesubstituovaná nebo substituovaná alespoň jedním substituentem, který se volí ze skupiny substituentů 1, tak jak bude dále definována, aralkylovou skupinou je alkylová skupina, která obsahuje 1 až 10 atomů uhlíku a která je substituována alespoň jednou arylovou skupinou ve svrchu uvedeném významu, skupinu substituentů 1 tvoří alkylové skupiny, obsahující 1 až 4 atomy uhlíku, halogenalkylové skupiny, obsahující 1 až 4 atomy uhlíku, atomy halogenu, nitroskupiny, kyanoskupiny, aminoskupiny, alkoxyskupiny, obsahující 1 až 4 atomy uhlíku, alkylthioskupiny, obsahující 1 až 4 atomy uhlíku, arylové skupiny, tak jak byly svrchu definovány, aryloxyskupiny, v nichž
    -178CZ 287050 B6 arylová část byla svrchu definována a aralkyloxyskupiny, v nichž aralkylová část má svrchu definovaný význam za předpokladu, že v případě, že substituent ze skupiny substituentů 1 znamená arylovou skupinu nebo skupinu, která obsahuje arylovou skupinu, která je substituována další arylovou skupinou nebo skupinou, která arylovou skupinu obsahuje, pak tato další skupina již není substituována arylovou skupinou nebo skupinou, která arylovou skupinu obsahuje a substituenty 2 se volí ze skupiny tvořené aminoskupinami, alkoxyskupinami, které obsahují 1 až 4 atomy uhlíku a atomy halogenu, jakož i jejich farmaceuticky přijatelné soli, za předpokladu, že v případě, že Z znamená atom uhlíku, m = 0, Yj znamená atom kyslíku a Rh Ri a R3 znamenají fenylový zbytek, popřípadě substituovaný, pak B má význam, odlišný od skupin CGTCACACAATA, ACGCTCAATT, AATTCACCGTG, GCTGTTGACT, ATTTTACCTCT, GGCGGTGATA, ATGAGCAC, AATTGTGC, TCATTATCA, CCGCCAGAG, GTAAAATAGTCA a ACACGCACGGTG.
    1. Modifikované oligodeoxyribonukleotidy obecného vzorce I ro
    Ρ-Υ3-(Χ*Ϊ4)η
    Y2-R<
  2. 2-hydroxyethylfosfoiyl, -O-(2-hydroxyethyl)thiofosforyl, fenylfosfoiyl, 4-chlorfenylfosforyl, 2-nitrofenylfosforyl, 4-nitrofenylfosforyl, ethylfosforyl, nebo -O-ethylthiofosfoiyl a symbol B je vybrán ze skupiny
    20 TGGGAG, TGGGA, TGGGG, TGGG, TGGGAGG, CGGGAGG, TTGGAGG,
    TTGGGAGG, TGCGAGG, GGGGAGG, mCGGGAGG, mCGmCGAGG, CTGGGAGG, GGGCGGGGC, TGGAGG, TGGGAGGT, TGGGCGCAG, CCG, TCGGAGG, TGmCGAGG, CTGGGAGG, TGG, TGGGAmGG, TGGGAGA, AATGGGAGG.
    25 38. Modifikované oligodeoxyribonukleotidy obecného vzorce I podle nároku 33, v nichž
    R1R2R3Z-Y1 je trifenylmethyloxy-, 3,4-(dibenzyloxy)benzyloxy-, 3,5-(dibenzyloxy)benzyloxy, terc.butyldifenylsilyloxy-, fenylfluorenyloxy- nebo fenylxanthenyloxyskupina, skupina vzorce /P(O)(Y2R4)-Y3-(X—Υ-ΟηΑηΗ na 3'-zakončení je atom vodíku, methylfosforyl, 2chlorfenylfosforyl, -O-methylthiofosforyl, methylfosfonyl, methylthiofosfonyl, fenylfosfonyl, 30 2-hydroxyethylfosforyl, -0-(2-hydroxyethyl)thiofosforyl, fenylfosforyl, 4-chlorfenylfosforyl, 2-nitrofenylfosforyl, 4-nitrofenylfosforyl, ethylfosforyl nebo -O-ethylthiofosforyl a řetězec v symbolu B je vybrán ze skupiny
    TGGGAG, TGGGA, TGGGG. TGGG, TGGGAGG, CGGGAGG, TTGGAGG,
    35 TTGGGAGG, TGCGAGG, GGGGAGG, mCGGGAGG, mCGmCGAGG, CTGGGAGG.
    39. Modifikované oligodeoxyribonukleotidy obecného vzorce I podle nároku 33, v nichž R]R2R3Z-Y] je trifenylmethyloxy-, 3,4-(dibenzyloxy)benzyloxy-, 3,5-(dibenzyloxy)benzyloxy, terc.butyldifenylsilyloxy-, fenylfluorenyloxy- nebo fenylxanthenyloxyskupina, skupina vzorce
    40 /P(O)(Y2R4)-Y3-(X—Y-On/mH na 3'-zakončení je atom vodíku, methylfosforyl, 2chlorfenylfosfoiyl, -O-methylthiofosforyl, methylfosfonyl, methylthiofosfonyl, fenylfosfonyl, 2-hydroxyethylfosforyl nebo -0-(2-hydroxyethyl)thiofosforylová skupina a symbol B je vybrán ze skupiny
    45 TGGGAG, TGGGA, TGGGG, TGGG, TGGGAGG, CGGGAGG, TTGGAGG,
    TTGGGAGG, TGCGAGG, GGGGAGG, mCGGGAGG, mCGmCGAGG, CTGGGAGG.
    40. Modifikované oligodeoxyribonukleotidy obecného vzorce I podle nároku 33, v nichž RiR2R3Z-Yi znamená trifenylmethoxy-, 3,4-(dibenzyloxy)benzyloxy- nebo 3,5-(dibenzyl-
    50 oxy)benzyloxyskupinu, skupina vzorce /P(O)(Y2R4)-Y3-(X-Y4)n/mH na 3'-zakončení je atom vodíku, methylfosforyl, 2-chlorfenylfosforyl, -O-methylthiofosforyl, methylfosfonyl, methylthiofosfonyl, fenylfosfonyl, 2-hydroxyethylfosforyl, -O-(2-hydroxyethyl)thiofosforyl, fenylfosforyl, 4-chlorfenylfosforyl, 2-nitrofenylfosforyl, 4-nitrofenylfosforyl, ethylfosforyl nebo
    -190CZ 287050 B6
    -O-ethylthiofosforylová skupina a řetězec symbolu B je vybrána ze skupiny
    TGGGAG, TGGGA, TGGGG, TGGG, TGGGAGG, CGGAGG, TTGGAGG,
    TTGGGAGG, TGCGAGG, GGGGAGG, mCGGGAGG, mCGmCGAGG, CTGGGAGG.
    41. Modifikované oligodeoxyribonukleotidy obecného vzorce I podle nároku 33, v nichž R1R2R3Z-Y1 znamená trifenylmethyloxy-, 3,4-(dibenzyloxy)benzyloxy- nebo 3,5-(dibenzyloxy)benzyloxyskupinu, skupinu vzorce /P(O)(Y2Ri)-Y3-(X-Y4)n/inH na 3'-zakončení znamená atom vodíku, methylfosforyl, 2-chlorfenylfosforyl, -O-methylthiofosfoiyl, methylfosfonyl, methylthiofosfonyl, fenylfosfonyl, 2-hydroxyethylfosforyl nebo -O-(2-hydroxyethyl)thiofosforylovou skupinu a B je vybrán ze skupiny
    TGGGAG, TGGGA, TGGGG, TGGG, TGGGAGG, CGGGAGG, TTGGAGG,
    TTGGGAGG, TGCGAGG, GGGGAGG, mCGGGAGG, mCGmCGAGG, CTGGGAGG.
    42. Farmaceutický prostředek pro léčení a profylaxi virových infekcí, vyznačující se tím, že jako svou účinnou složku obsahuje účinné množství alespoň jednoho modifikovaného oligodeoxyribonukleotidu obecného vzorce I podle nároku 33.
    43. Modifikované oligodeoxyribonukleotidy obecného vzorce I podle nároku 33, v nichž skupina obecného vzorce R1R2R3Z-Y1 znamená 3,4-(dibenzyloxy)benzyloxyskupinu, Y2 znamená atom kyslíku, Y3 znamená atom kyslíku, Y4 znamená atom kyslíku, R4 znamená atom vodíku, X znamená ethylenovou skupinu, m znamená 1, n znamená 1 a B znamená řetězec TGGGAG.
    44. Modifikované oligodeoxyribonukleotidy obecného vzorce I podle nároku 33, v nichž skupina obecného vzorce R]R2R3Z-Yi znamená 3,4-(dibenzyloxy)benzyloxyskupinu, Y2 znamená atom síry, Y3 znamená atom kyslíku, Y4 znamená atom kyslíku, R4 znamená atom vodíku, X znamená ethylenovou skupinu, m znamená 1, n znamená 1 a B znamená řetězec TGGGAG.
    45. Modifikované oligodeoxyribonukleotidy obecného vzorce I podle nároku 33, v nichž skupina obecného vzorce R1R2R3Z-Y1 znamená 3,4-(dibenzyloxy)benzyloxyskupinu, m znamená 0, n znamená 0 a B znamená řetězec TGGGAG.
    46. Modifikované oligodeoxyribonukleotidy obecného vzorce I podle nároku 33, v nichž skupina obecného vzorce R1R2R3Z-Y1 znamená 3,4-(dibenzyloxy)benzyloxyskupinu, Y2 znamená atom kyslíku, Y3 znamená atom kyslíku, R4 znamená methylovou skupinu, m znamená 1, n znamená 0 a B znamená řetězec TGGGAG.
    47. Modifikované oligodeoxyribonukleotidy obecného vzorce I podle nároku 33, v nichž skupina obecného vzorce R1R2R3Z-Y1 znamená trifenylmethyloxyskupinu, Y2 znamená atom kyslíku, Y3 znamená atom kyslíku, Y4 znamená atom kyslíku, R4 znamená atom vodíku, X znamená ethylenovou skupinu, m znamená 1, n znamená 1 a B znamená řetězec TGGGAG.
    48. Modifikované oligodeoxyribonukleotidy obecného vzorce I podle nároku 33, v nichž skupina obecného vzorce RiRtRíZ-Y! znamená trifenylmethyloxyskupinu, Y2 znamená atom síry, Y3 znamená atom kyslíku, Y4 znamená atom kyslíku, R4 znamená atom vodíku, X znamená ethylenovou skupinu, m znamená 1, n znamená 1 a B znamená řetězec TGGGAG.
    49. Modifikované oligodeoxyribonukleotidy obecného vzorce I podle nároku 33, v nichž skupina obecného vzorce R^RsZ-Y] znamená trifenylmethyloxyskupinu, m znamená 0, n znamená 0 a B znamená řetězec TGGGAG.
    -191CZ 287050 B6
    50. Modifikované oligodeoxyribonukleotidy obecného vzorce I podle nároku 33, v nichž skupina obecného vzorce R1R2R3Z-Y1 znamená trifenylmethyloxyskupinu, Y2 znamená atom kyslíku, Y3 znamená atom kyslíku, R» znamená methylovou skupinu, m znamená 1, n znamená 0
    2. Modifikované oligodeoxyribonukleotidy obecného vzorce I podle nároku 1, v nichž oligodeoxyribonukleotid B má délku řetězce 4 až 8.
  3. 3. Modifikované oligodeoxyribonukleotidy obecného vzorce I podle nároku 2, v nichž oligodeoxyribonukleotid B má délku řetězce 5 nebo 6.
  4. 4. Modifikované oligodeoxyribonukleotidy obecného vzorce I podle nároku 2, v nichž čtvrtý deoxyribonukleotid od 5-terminálního zakončení B je guanindeoxyribonukleotid.
    5. Farmaceutický prostředek pro léčení a profylaxi virových infekcí, vyznačující se tím, že jako svou účinnou složku obsahuje účinné množství alespoň jednoho modifikovaného oligodeoxyribonukleotidu obecného vzorce I podle nároku 1.
    -179CZ 287050 B6
    6. Sloučeniny obecných vzorců 12, 14, 22, 24, 25 nebo 27 o
    HO-CH2CH2-X'-a—C-X2 (22)
    OMTO
    O χ3 :P -O CHjCHj· X’ -A-C X*
    Ý*-R7
    DMTO (24)
    O H 0=P-0 χ’ϊΡ-ΟΟΗ^-Χ’-Α-Ο-Χ2 ^-R7 (27)
    -180CZ 287050 B6 kde
    R1, R2 a R3, stejné nebo různé nezávisle znamenají atom vodíku nebo alkoxyskupinu o 1 až 4 atomech uhlíku,
    R4, R5 a R6, stejné nebo různé nezávisle znamenají atom vodíku, alkyl o 1 až 4 atomech uhlíku, arylovou skupinu v dále uvedeném významu nebo antrachinonylovou skupinu, popřípadě substituovanou nejméně jedním substituentem z dále uvedené skupiny 1,
    Z znamená atom uhlíku nebo křemíku,
    R5, R6 a Z mohou také společně znamenat fluorenylovou skupinu nebo xanthenylovou skupinu nebo
    R4, R5, R6 a Z mohou společně znamenat atom vodíku,
    R7 znamená atom vodíku alkyl o 1 až 4 atomech uhlíku, popřípadě substituovaný nejméně jedním substituentem z dále uvedené skupiny 2, arylovou skupinu, v dále uvedeném významu nebo aralkylovou skupinu v dále uvedeném významu, přičemž arylovou skupinou je aromatická skupina s uhlíkovým kruhem, která obsahuje 6 až 20 atomů uhlíku v 1 až 5 kruzích a která je nesubstituovaná nebo substituovaná alespoň jedním substituentem, který se volí ze skupiny substituentů 1, tak jak bude dále definována, aralkylovou skupinou je alkylová skupina, která obsahuje 1 až 10 atomů uhlíku a která je substituována alespoň jednou arylovou skupinou ve svrchu uvedeném významu, skupinu substituentů 1 tvoří alkylové skupiny, obsahující 1 až 4 atomy uhlíku, halogenalkylové skupiny, obsahující 1 až 4 atomy uhlíku, atomy halogenu, nitroskupiny, kyanoskupiny, aminoskupiny, alkoxyskupiny, obsahující 1 až 4 atomy uhlíku, alkylthioskupiny, obsahující 1 až 4 atomy uhlíku, arylové skupiny, tak jak byly svrchu definovány, aryloxyskupiny, v nichž arylová část byla svrchu definována a aralkyloxyskupiny, v nichž aralkylová část má svrchu definovaný význam za předpokladu, že v případě, že substituent ze skupiny substituentů 1 znamená arylovou skupinu nebo skupinu, která obsahuje arylovou skupinu, která je substituována další aiylovou skupinou nebo skupinou, která arylovou skupinu obsahuje, pak tato další skupina již není substituována arylovou skupinou nebo skupinou, která arylovou skupinu obsahuje a substituenty 2 se volí ze skupiny tvořené aminoskupinami, alkoxyskupinami, které obsahují 1 až 4 atomy uhlíku a atomy halogenu,
    R8 znamená methylovou skupinu, kyanoethylovou skupinu nebo fenylovou skupinu, popřípadě substituovanou atomem chloru,
    R8a znamená methylovou nebo kyanoethylovou skupinu,
    R8b znamená fenylovou skupinu, popřípadě substituovanou atomem chloru,
    R9a znamená atom vodíku,
    A znamená skupinu —(CH2)h—, kde h znamená celé číslo 1 až 16, skupinu -(CH2)hO-, kde h znamená celé číslo 1 až 16, skupinu obecného vzorce -(CH2)j-O-CO-(CH2)k-, kde j znamená kladné celé číslo, k znamená 0 nebo kladné celé číslo a j + k znamená 2 až 16, nebo skupinu -(CH2)j-NH-CO-(CH2)k-, kde j znamená kladné celé číslo, k znamená 0
    -181CZ 287050 B6 nebo kladné celé číslo a j + k je 2 až 16, skupinu -(CH2)j-S-CO-(CH2)k-, kde j znamená kladné celé číslo, k znamená 0 nebo kladné celé číslo a j + k je 2 až 16, nebo skupinu vzorce -(CH2)n-O-CO-CH2(OCH2CH2)p-OCH2-, kde n znamená kladné celé číslo, p znamená 0 nebo kladné celé číslo a j + k je 2 až 100,
    B, B', B znamenají základní skupinu adeninnukleotidu, guaninnukleotidu, thymidinnukleotidu nebo cytosinnukleotidu, která je chráněna na bazické a na fosfátové skupině,
    P znamená polymemí materiál,
    X znamená atom halogenu,
    XI znamená skupinu -S-, -SO- nebo -SO2,
    15 X2 znamená atom kyslíku, atom síry nebo skupinu NH,
    X3 znamená atom kyslíku nebo atom síry,
    Y1 znamená hydroxylovou skupinu, fenyloxyskupinu, popřípadě substituovanou nejméně 20 jedním substituentem ze skupiny nitroskupina, atom chloru nebo fluoru, nebo ethyloxyskupinu, popřípadě substituovanou atomem halogenu,
    Y2 znamená atom kyslíku, atom síry nebo skupinu NH,
    25 Y3 znamená atom kyslíku, atom síry, skupinu NH, alkylenovou skupinu o 1 až 4 atomech uhlíku nebo fenylenovou skupinu,
    DMT znamená dimethoxytritylovou skupinu
    30 jako meziprodukty pro výrobu modifikovaných oligodeoxyribonukleotidů podle nároku 1.
    -182CZ 287050 B6
    7. Sloučeniny obecných vzorců 12,14,22,24,25 nebo 27 podle nároku 6
    -XJ~ o
    (22)
    O II
    Θ
    DMTO
    ΟΜΤΟ-ι λ 8·
    OR’·
    XJsP-OCHjCHj.X^A-’
    X^P-OCHzCHrX^A-C-X2 ^-R7 (M) (27)
    -183CZ 287050 B6 kde
    R1, R2 a R3, stejné nebo různé nezávisle znamenají atom vodíku nebo alkoxyskupinu o 1 až 4 atomech uhlíku,
    R4, R5 a R6, stejné nebo různé nezávisle znamenají atom vodíku, alkyl o 1 až 4 atomech uhlíku, arylovou skupinu ve významu z nároku 6, popřípadě substituovanou benzyloxyskupinou nebo antrachinonylovou skupinu,
    Z znamená atom uhlíku nebo atom křemíku,
    R5, R6 a Z mohou také společně znamenat fluorenylovou skupinu nebo xanthenylovou skupinu nebo
    R4, R5, R6 a Z mohou společně znamenat atom vodíku,
    R7 znamená atom vodíku alkyl o 1 až 4 atomech uhlíku, arylovou skupinu ve významu z nároku 6, popřípadě substituovanou atomem chloru nebo aralkylovou skupinu, ve významu z nároku 6,
    R8 znamená methylovou skupinu, kyanoethylovou skupinu nebo fenylovou skupinu, popřípadě substituovanou atomem chloru,
    R8a znamená methylovou nebo kyanoethylovou skupinu,
    R8b znamená fenylovou skupinu, popřípadě substituovanou atomem chloru,
    R9a znamená atom vodíku,
    A znamená skupinu -(CH2)h-, kde h znamená celé číslo 1 až 16, skupinu -(CH2)hO-, kde h znamená celé číslo 1 až 16, skupinu obecného vzorce -ÍCH2)j-O-CO-(CH2)k-, kde j znamená kladné celé číslo, k znamená 0 nebo kladné celé číslo a j + k znamená 2 až 16, nebo skupinu -(CH2)j-NH-CO-(CH2X-, kde j znamená kladné celé číslo, k znamená 0 nebo kladné celé číslo aj + kje 2 až 16, skupinu -(CH^j-S-CO-íCH^-, kde j znamená kladné celé číslo, k znamená 0 nebo kladné celé číslo a j + kje 2 až 16, nebo skupinu vzorce -fCH2)n-O-C0-CH2(0CH2CH2)p-OCH2-, kde n znamená kladné celé číslo, p znamená 0 nebo kladné celé číslo aj + kje 2 až 100,
    B, B', B znamenají základní skupinu adeninnukleotidu, guaninnukleotidu, thymidinnukleotidu nebo cytosinnukleotidu, která je chráněna na bazické a na fosfátové skupině,
    P znamená polymemí materiál,
    X znamená atom halogenu,
    XI znamená skupinu -S-, -SO- nebo -SO2,
    X2 znamená atom kyslíku, atom síry nebo skupinu NH,
    X3 znamená atom kyslíku nebo atom síry,
    -184CZ 287050 B6
    Y znamená hydroxylovou skupinu, fenyloxyskupinu, popřípadě substituovanou nejméně jedním substituentem ze skupiny nitroskupina, atom chloru nebo fluoru, nebo ethyloxyskupinu, popřípadě substituovanou atomem halogenu, Y2 znamená atom kyslíku, atom síry nebo skupinu NH, Y3 znamená atom kyslíku, atom síry, skupinu NH, alkylenovou skupinu 0 1 až 4 atomech uhlíku nebo fenylenovou skupinu, DMT znamená dimethoxytritylovou skupinu
    jako meziprodukty pro výrobu modifikovaných oligodeoxyribonukleotidů podle nároku 1.
    8. Modifikované oligodeoxyribonukleotidy obecného vzorce I podle nároku 1,
    5'
    Ř3 (1) kde
    Ri, R2 a R3 se nezávisle volí ze skupiny atom vodíku, alkylové skupiny, obsahující 1 až 4 atomy uhlíku, arylové skupiny ve významu, který bude dále uveden a antrachinonylové skupiny, které jsou nesubstituované nebo jsou substituovány alespoň jedním substituentem, který se volí ze skupiny substituentů 1, tak jak bude dále definována a
    Z znamená atom uhlíku nebo atom křemíku, nebo
    R2, R3 a Z společně tvoří fluorenylovou nebo xanthenylovou skupinu,
    Ri znamená atom vodíku, nesubstituovanou alkylovou skupinu obsahující 1 až 4 atomy uhlíku, substituovanou alkylovou skupinu, obsahující 1 až 4 atomy uhlíku a substituovanou alespoň jedním substituentem, který se volí ze skupiny substituentů 2, tak jak bude dále definována, arylovou skupinu v dále uvedeném významu nebo aralkylovou skupinu v dále uvedeném významu,
    Yi, Y3 a Y4 se nezávisle volí ze skupiny atom kyslíku, atom síry nebo skupina vzorce >NH,
    Y2 znamená atom kyslíku, atom síry, skupinu vzorce >NH, alkylenovou skupinu, obsahující 1 až 4 atomy uhlíku nebo fenylenovou skupinu,
    X znamená nesubstituovanou alkylenovou skupinu, obsahující 1 až 10 atomů uhlíku nebo alkylenovou skupinu, která obsahuje 1 až 10 atomů uhlíku a je substituována alespoň jednou hydroxyskupinou, man nezávisle znamenají 0 nebo celé číslo v rozmezí 1 až 10, a
    B znamená oligodeoxyribonukleotid, jehož délka řetězce je v rozmezí 3 až 9, přičemž arylovou skupinou je aromatická skupina s uhlíkovým kruhem ze skupiny fenyl, indenyl, naftalenyl, fenanthrenyl, anthracenyl a pyrenyl a která je nesubstituovaná nebo je substituována
    -185CZ 287050 B6 alespoň jedním substituentem, který se volí ze skupiny substituentů 1, tak jak bude dále definována, aralkylovou skupinou je methylová nebo ethylová skupina, která je substituována alespoň jednou arylovou skupinou ve svrchu uvedeném významu, skupinu substituentů l tvoří alkylové skupiny, obsahující 1 až 4 atomy uhlíku, halogenalkylové skupiny, obsahující 1 až 4 atomy uhlíku, atomy halogenu, nitroskupiny, kyanoskupiny, aminoskupiny, alkoxyskupiny, obsahující 1 až 4 atomy uhlíku, alkylthioskupiny, obsahující 1 až 2 atomy uhlíku, fenylová skupina, fenoxyskupina, benzyloxyskupina a 3,5-(dibenzyloxy)benzyloxyskupina, substituenty 2 se volí ze skupiny tvořené aminoskupinami a methoxyskupinami, jakož i farmaceuticky přijatelné soli těchto sloučenin.
    9. Modifikované oligodeoxyribonukleotidy obecného vzorce I podle nároku 8, v nichž oligodeoxyribonukleotid B má délku řetězce 4 až 8.
    10. Modifikované oligodeoxyribonukleotidy obecného vzorce I podle nároku 9, v nichž oligodeoxyribonukleotid B má délku řetězce 5 nebo 6.
    11. Modifikované oligodeoxyribonukleotidy obecného vzorce I podle nároku 9, v nichž čtvrtý deoxyribonukleotid od 5-terminálního zakončení B je guanindeoxyribonukleotid.
    12. Modifikované oligodeoxyribonukleotidy obecného vzorce I podle nároku 8, v nichž R1R2R3Z-X1 je trifenylmethyloxy-, 3,4-(dibenzyloxy)benzyloxy-, 3,5-(dibenzyloxy)benzyloxy, terc.butyldifenylsilyloxy-, fenylfluorenyloxy- nebo fenylxanthenyloxyskupina, skupinou vzorce /P(O)(Y2R4)-Y3-(X-Y4)n/mH na 3'-zakončení je atom vodíku, methylfosforyl, 2chlorfenylfosforyl, -O-methylthiofosforyl, methylfosfonyl, methylthiofosfonyl, fenylfosfonyl, 2-hydroxyethylfosforyl, -0-(2-hydroxyethyl)thiofosforyl, fenylfosforyl, 4-chlorfenylfosforyl, 2-nitrofenylfosforyl, 4-nitrofenylfosforyl, ethylfosforyl, nebo -O-ethylthiofosforyl a symbol B je vybrán ze skupiny
    TGGGAG, TGGGA, TGGGG, TGGG, TGGGAGG, CGGGAGG, TTGGAGG, TTGGGAGE, TGCGAGG, GGGGAGG, mCGGGAGG, mCGmCGAGG, CTGGGAGG, GGGCGGGGC, TAGGAGG, TGGGAGGT, TGGGCGCAG, CCG, TCGGAGG, TGmCGAGG, TGG, TGGGAmGG, TGGGAGA, ATGGGAGG, TTGGGG, TGGGGG, CGGGG, CGCGG, TGGGC a TGGGT.
    13. Modifikované oligodeoxyribonukleotidy obecného vzorce I podle nároku 8, v nichž R1R2R3Z-Y1 je trifenylmethyloxy-, 3,4-(dibenzyloxy)benzyloxy-, 3,5-(dibenzyloxy)benzyloxy, terc.butyldifenylsilyloxy-, fenylfluorenyloxy- nebo fenylxanthenyloxyskupina, skupina vzorce /P(O)(Y2R4)-Y3-(X-Y4)n/mH na 3'-zakončení je atom vodíku, methylfosforyl, 2chlorfenylfosforyl, -O-methylthiofosforyl, methylfosfonyl, methylthiofosfonyl, fenylfosfonyl, 2-hydroxyethylfosforyl, -0-(2-hydroxyethyl)thiofosforyl, fenylfosforyl, 4-chlorfenylfosforyl, 2-nitrofenylfosforyl, 4-nitrofenylfosforyl, ethylfosforyl nebo -O-ethylthiofosforyl a řetězec v symbolu B je vybrán ze skupiny
    TGGGAG, TGGGA, TGGGG, TGGG, TGGGAGG, CGGGAGG, TTGGAGG, TTGGGAGG, TGCGAGG, GGGGAGG, mCGGGAGG, mCGmCGAGG, CTGGGAGG, TTGGGG, TGGGGG, CGGGG, CGCGG.
    -186CZ 287050 B6
    14. Modifikované oligodeoxyribonukleotidy obecného vzorce I podle nároku 8, v nichž R1R2R3Z-Y1 je trifenylmethyloxy-, 3,4-(dibenzyloxy)benzyloxy-, 3,5-(dibenzyloxy)benzyloxy, terc.butyldifenylsilyloxy-, fenylfluorenyloxy- nebo fenylxanthenyloxyskupina, skupina vzorce /P(O)(Y2Ri)-Y3—(X-Y4)n/mH na 3'-zakončení je atom vodíku, methylfosforyl, 2chlorfenylfosforyl, -O-methylthiofosforyl, methylfosfonyl, methylthiofosfonyl, fenylfosfonyl, 2-hydroxyethylfosforyl nebo -0-(2-hydroxyethyl)thiofosforylová skupina a symbol B je vybrán ze skupiny
    TGGGAG, TGGGA. TGGGG. TGGG, TGGGAGG, CGGGAGG, TTGGAGG,
    TTGGGAGG, TGCGAGG, GGGGAGG,mCGGGAGG, mCGmCGAGG, CTGGGAGG, TTGGGG, TGGGGG, CGGGG, CGCGG.
    15. Modifikované oligodeoxyribonukleotidy obecného vzorce I podle nároku 8, v nichž RiR2R3Z-Y] znamená trifenylmethyloxy- 3,4-(dibenzyloxy)benzyloxy- nebo 3,5-(dibenzyloxy)benzyloxyskupinu, skupina vzorce /P(O)(Y2R4)-Y3-(X-Y4)n/mH na 3'-zakončení je atom vodíku, methylfosforyl, 2-chlorfenylfosforyl, -O-methylthiofosforyl, methylfosfonyl, methylthiofosfonyl, fenylfosfonyl, 2-hydroxyethylfosforyl, -0-(2-hydroxyethyl)thiofosforyl, fenylfosforyl, 4—chlorfenylfosforyl, 2-nitrofenylfosfory 1, 4-nitrofenylfosforyl, ethylfosforyl nebo -O-ethylthiofosforylová skupina a řetězec symbolu B je vybrán ze skupiny
    TGGGAG, TGGGA, TGGGG, TGGG, TGGGAGG, CGGGAGG, TTGGAGG, TTGGGAGG, TGCGAGG, GGGGAGG, mCGGGAGG, mCGmCGAGG, CTGGGAGG, TTGGGG, TGGGGG, CGGGG, CGCGG.
    16. Modifikované oligodeoxyribonukleotidy obecného vzorce I podle nároku 8, v nichž skupina obecného vzorce R]R2R3Z-Y] znamená 3,4-(dibenzyloxy)benzyloxyskupiny, Y2 znamená atom kyslíku, Y3 znamená atom kyslíku, Y4 znamená atom kyslíku, R4 znamená atom vodíku, X znamená ethylenovou skupinu, m znamená 1, n znamená 1 a B znamená řetězec CGGGG.
    17. Modifikované oligodeoxyribonukleotidy obecného vzorce I podle nároku 8, v nichž skupina obecného vzorce R^^Z-Y] znamená 3,4-(dibenzyloxy)benzyloxyskupinu, Y2 znamená atom síry, Y3 znamená atom kyslíku, Y4 znamená atom kyslíku, FG znamená atom vodíku, X znamená ethylenovou skupinu, m znamená 1, n znamená 1 a B znamená řetězec CGGGG.
    18. Modifikované oligodeoxyribonukleotidy obecného vzorce I podle nároku 8, v nichž skupina obecného vzorce RiR2R3Z-Yi znamená 3,4-(dibenzyloxy)benzyloxyskupinu, m znamená 0, n znamená 0 a B znamená řetězec CGGGG.
    19. Modifikované oligodeoxyribonukleotidy obecného vzorce I podle nároku 8, v nichž skupina obecného vzorce RjR^Z-Yi znamená 3,4-(dibenzyloxy)benzyloxyskupinu, X2 znamená atom kyslíku, Y3 znamená atom kyslíku, R4 znamená methylovou skupinu, m znamená 1, n znamená 0 a B znamená řetězec CGGGG.
    20. Modifikované oligodeoxyribonukleotidy obecného vzorce I podle nároku 8, v nichž skupina obecného vzorce RiR2R3Z-Yi znamená trifenylmethyloxyskupinu, Y2 znamená atom kyslíku, Y3 znamená atom kyslíku, Y4 znamená atom kyslíku, R| znamená atom vodíku, X znamená ethylenovou skupinu, m znamená 1, n znamená 1 a B znamená řetězec CGGGG.
    21. Modifikované oligodeoxyribonukleotidy obecného vzorce I podle nároku 8, v nichž skupina obecného vzorce RiR2R3Z-Yi znamená trimethylfenyloxyskupinu, Y2 znamená atom síry, Y3 znamená atom kyslíku, Y4 znamená atom kyslíku, R4 znamená atom vodíku, X znamená ethylenovou skupinu, m znamená 1, n znamená 1 a B znamená řetězec CGGGG.
    -187CZ 287050 B6
    22. Modifikované oligodeoxyribonukleotidy obecného vzorce I podle nároku 8, v nichž skupina obecného vzorce RjR.2R.3Z-Y] znamená trimethylfenyloxyskupinu, m znamená 0, n znamená 0 a B znamená řetězec CGGGG.
    23. Modifikované oligodeoxyribonukleotidy obecného vzorce I podle nároku 8, v nichž skupina obecného vzorce R1R2R3Z-Y1 znamená trimethylfenyloxyskupinu, Y2 znamená atom kyslíku, Y3 znamená atom kyslíku, R4 znamená methylovou skupinu, m znamená 1, n znamená 0 a B znamená řetězec CGGGG.
    24. Modifikované oligodeoxyribonukleotidy obecného vzorce I podle nároku 8, v nichž skupina obecného vzorce R1R2R3Z-Y1 znamená 3,4-(dibenzyloxy)benzyloxyskupinu, Y2 znamená atom kyslíku, Y3 znamená atom kyslíku, Y4 znamená atom kyslíku, Rj znamená atom vodíku, X znamená ethylenovou skupinu, m znamená 1, n znamená 1 a B znamená řetězec CGCGG.
    25. Modifikované oligodeoxyribonukleotidy obecného vzorce I podle nároku 8, v nichž skupina obecného vzorce RiR2R3Z-Yi znamená 3,4-(dibenzyloxy)benzyloxyskupinu, Y2 znamená atom síry, Y3 znamená atom kyslíku, Y4 znamená atom kyslíku, Rj znamená atom vodíku, X znamená ethylenovou skupinu, m znamená 1, n znamená 1 a B znamená řetězec CGCGG.
    26. Modifikované oligodeoxyribonukleotidy obecného vzorce I podle nároku 8, v nichž skupina obecného vzorce R1R2R3Z-Y1 znamená 3,4-(dibenzyloxy)benzyloxyskupinu, m znamená 0, n znamená 0 a B znamená řetězec CGCGG.
    27. Modifikované oligodeoxyribonukleotidy obecného vzorce I podle nároku 8, v nichž skupina obecného vzorce R1R2R3Z-Y1 znamená 3,4-(dibenzyloxy)benzyloxyskupinu, Y2 znamená atom kyslíku, Y3 znamená atom kyslíku, Rj znamená methylovou skupinu, m znamená 1, n znamená 0 a B znamená řetězec CGCGG.
    28. Modifikované oligodeoxyribonukleotidy obecného vzorce I podle nároku 8, v nichž skupina obecného vzorce R]R2R3Z-Yi znamená trifenylmethyloxyskupinu, Y2 znamená atom kyslíku, Y3 znamená atom kyslíku, Y4 znamená atom kyslíku, R4 znamená atom vodíku, X znamená ethylenovou skupinu, m znamená 1, n znamená 1 a B znamená řetězec CGCGG.
    29. Modifikované oligodeoxyribonukleotidy obecného vzorce I podle nároku 8, v nichž skupina obecného vzorce RiR2R3Z-Yi znamená trifenylmethyloxyskupinu, Y2 znamená atom síry, Y3 znamená atom kyslíku, Y4 znamená atom kyslíku, Rj znamená atom vodíku, X znamená ethylenovou skupinu, m znamená 1, n znamená 1 a B znamená řetězec CGCGG.
    30. Modifikované oligodeoxyribonukleotidy obecného vzorce I podle nároku 8, v nichž skupina obecného vzorce RiR2R3Z-Y] znamená trifenylmethyloxyskupinu, m znamená 0, n znamená 0 a B znamená řetězec CGCGG.
    31. Modifikované oligodeoxyribonukleotidy obecného vzorce I podle nároku 8, v nichž skupina obecného vzorce RiR2R3Z-Yi znamená trifenylmethyloxyskupinu, Y2 znamená atom kyslíku, Y3 znamená atom kyslíku, Rj znamená methylovou skupinu, m znamená 1, n znamená 0 a B znamená řetězec CGCGG.
    32. Farmaceutický prostředek pro léčení a profylaxi virových infekcí, vyznačující se tím, že jako svou účinnou složku obsahuje účinné množství alespoň jednoho modifikovaného oligodeoxyribonukleotidu obecného vzorce I podle nároku 8.
    -188CZ 287050 B6
    33. Modifikované oligodeoxyribonukleotidy obecného vzorce I podle nároku 1 (I) kde
    Ri, R2 a R3 se nezávisle volí ze skupiny atom vodíku, alkylové skupiny, obsahující 1 až 4 atomy uhlíku, arylové skupiny ve významu, který bude dále uveden a antrachinonylové skupiny, které jsou nesubstituované nebo jsou substituovány alespoň jedním substituentem který se volí ze skupiny substituentů 1, tak jak bude dále definována a
    Z znamená atom uhlíku nebo atom křemíku, nebo
    R2, R3 a Z společně tvoří fluorenylovou nebo xanthenylovou skupinu,
    R) znamená atom vodíku, nesubstituovanou alkylovou skupinu obsahující 1 až 4 atomy uhlíku, substituovanou alkylovou skupinu, obsahující 1 až 4 atomy uhlíku a substituovanou alespoň jedním substituentem, který se volí ze skupiny substituentů 2, tak jak bude dále definována, arylovou skupinu v dále uvedeném významu nebo aralkylovou skupinu v dále uvedeném významu,
    Yi, Y3 a Y4 se nezávisle volí ze skupiny atom kyslíku, atom síry nebo skupina vzorce >NH,
    Y2 znamená atom kyslíku, atom síry, skupinu vzorce >NH, alkylenovou skupinu, obsahující 1 až 4 atomy uhlíku nebo fenylenovou skupinu,
    X znamená nesubstituovanou alkylenovou skupinu, obsahující 1 až 10 atomů uhlíku nebo alkylenovou skupinu, která obsahuje 1 až 10 atomů uhlíku a je substituována alespoň jednou hydroxyskupinou, man nezávisle znamenají 0 nebo celé číslo v rozmezí 1 až 10, a
    B znamená oligodeoxyribonukleotid, jehož délka řetězce jev rozmezí 3 až 9, přičemž arylovou skupinou je aromatická skupina s uhlíkovým kruhem ze skupiny fenyl, indenyl, naftalenyl, fenanthrenyl, anthracenyl nebo pyrenyl, která je nesubstituovaná nebo je substituována alespoň jedním substituentem, který se volí ze skupiny substituentů 1, tak jak bude dále definována, aralkylovou skupinou je methylová nebo ethylová skupina, která je substituována alespoň jednou arylovou skupinou ve svrchu uvedeném významu, skupinu substituentů 1 tvoří alkylové skupiny, obsahující 1 až 4 atomy uhlíku, halogenalkylové skupiny, obsahující 1 až 4 atomy uhlíku, atomy halogenu, nitroskupiny, kyanoskupiny, aminoskupiny, alkoxyskupiny, obsahující 1 až 4 atomy uhlíku, alkylthioskupiny, obsahující 1 až 2 atomy uhlíku, fenyl, fenoxyskupina nebo benzyloxyskupina, substituenty 2 se volí ze skupiny tvořené aminoskupinami a methoxyskupinou, jakož i farmaceuticky přijatelné soli těchto sloučenin.
    -189CZ 287050 B6
    34. Modifikované oligodeoxyribonukleotidy obecného vzorce I podle nároku 33, v nichž oligodeoxyribonukleotid B má délku řetězce 4 až 8.
    5 35. Modifikované oligodeoxyribonukleotidy obecného vzorce I podle nároku 34, v nichž oligodeoxyribonukleotid B má délku řetězce 5 nebo 6.
    36. Modifikované oligodeoxyribonukleotidy obecného vzorce I podle nároku 34, v nichž čtvrtý deoxyribonukleotid od 5-terminálního zakončení B je guanindeoxyribonukleotid.
    l
    37. Modifikované oligodeoxyribonukleotidy obecného vzorce I podle nároku 33, v nichž R1R2R3Z-Y1 je trifenylmethylmethoxy-, 3,4-(dibenzyloxy)benzyloxy-, 3,5-(dibenzyloxy)- » benzyloxy-, terc.butyldifenylsilyloxy-, fenylfluorenyloxy- nebo fenylxanthenyloxyskupina, skupinou vzorce /P(O)(Y2R|)-Y3-(X-Y4)n/mH na 3'-zakončení je atom vodíku, methylfosforyl, 15 2-chlorfenylfosfoiyl, -O-methylthiofosforyl, methylfosfonyl, methylthiofosfonyl, fenylfosfonyl,
  5. 5 a B znamená řetězec TGGGAG.
CZ1994190A 1993-01-29 1994-01-28 Modified oligodeoxyribonucleotides, pharmaceutical preparations containing thereof and intermediates CZ287050B6 (en)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP1350993 1993-01-29
JP13557393 1993-06-07
JP13851793 1993-06-10

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CZ19094A3 CZ19094A3 (en) 1994-12-15
CZ287050B6 true CZ287050B6 (en) 2000-08-16

Family

ID=27280283

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CZ1994190A CZ287050B6 (en) 1993-01-29 1994-01-28 Modified oligodeoxyribonucleotides, pharmaceutical preparations containing thereof and intermediates

Country Status (18)

Country Link
US (2) US5674856A (cs)
EP (1) EP0611075B1 (cs)
KR (1) KR100318796B1 (cs)
CN (2) CN1039014C (cs)
AT (1) ATE146479T1 (cs)
AU (1) AU670154B2 (cs)
CA (1) CA2114355A1 (cs)
CZ (1) CZ287050B6 (cs)
DE (1) DE69401136T2 (cs)
DK (1) DK0611075T3 (cs)
ES (1) ES2098866T3 (cs)
FI (1) FI111265B (cs)
GR (1) GR3022821T3 (cs)
HU (1) HU222834B1 (cs)
IL (1) IL108467A (cs)
NO (1) NO309427B1 (cs)
NZ (2) NZ280616A (cs)
RU (1) RU2111971C1 (cs)

Families Citing this family (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CA2114355A1 (en) * 1993-01-29 1994-07-30 Hidehiko Furukawa Modified oligodeoxyribonucleotides, their preparation and their therapeutic use
US6291438B1 (en) 1993-02-24 2001-09-18 Jui H. Wang Antiviral anticancer poly-substituted phenyl derivatized oligoribonucleotides and methods for their use
CN1060177C (zh) * 1997-06-28 2001-01-03 中国科学院上海生物化学研究所 3′－单磷酸化寡核苷酸
GB9823646D0 (en) 1997-12-19 1998-12-23 Brax Genomics Ltd Compounds for mass spectrometry
US6995259B1 (en) * 1998-10-23 2006-02-07 Sirna Therapeutics, Inc. Method for the chemical synthesis of oligonucleotides
DE10041809A1 (de) * 2000-08-25 2002-03-07 Giesing Michael Arrays immobilisierter Biomoleküle, deren Herstellung und Verwendung
US7205399B1 (en) 2001-07-06 2007-04-17 Sirna Therapeutics, Inc. Methods and reagents for oligonucleotide synthesis
US9394167B2 (en) 2005-04-15 2016-07-19 Customarray, Inc. Neutralization and containment of redox species produced by circumferential electrodes
US20070065877A1 (en) * 2005-09-19 2007-03-22 Combimatrix Corporation Microarray having a base cleavable succinate linker
CN102666480B (zh) * 2009-12-08 2014-04-09 国立大学法人岐阜大学 芳香族化合物、低聚核苷酸衍生物合成用修饰载体、低聚核苷酸衍生物及低聚核苷酸构建物
US9927434B2 (en) 2010-01-20 2018-03-27 Customarray, Inc. Multiplex microarray of serially deposited biomolecules on a microarray
CN102766183B (zh) * 2011-05-05 2016-09-14 中国人民解放军军事医学科学院毒物药物研究所 具有抗hiv-1融合活性的修饰的核酸结构
CN116496335B (zh) * 2023-03-21 2024-03-08 中国药科大学 一种修饰核苷酸及其应用

Family Cites Families (17)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CA1159052A (en) * 1980-02-29 1983-12-20 University Patents, Inc. Process for making oligonucleotides
US4849513A (en) * 1983-12-20 1989-07-18 California Institute Of Technology Deoxyribonucleoside phosphoramidites in which an aliphatic amino group is attached to the sugar ring and their use for the preparation of oligonucleotides containing aliphatic amino groups
FR2568254B1 (fr) * 1984-07-25 1988-04-29 Centre Nat Rech Scient Application d'oligonucleotides lies a un agent intercalant, notamment a titre de medicament
US5252760A (en) * 1985-03-28 1993-10-12 Chiron Corporation Method of using colored phosphorylating reagents
DE3751468T2 (de) * 1986-10-30 1996-02-29 Daicel Chem Verfahren zur herstellung von oligonukleotiden und verbindungen zur bildung hochmolekularer schutzgruppen.
EP0290583B1 (fr) * 1986-12-02 1993-04-07 Centre National De La Recherche Scientifique (Cnrs) OLIGONUCLEOTIDES $g(a)
US5276019A (en) * 1987-03-25 1994-01-04 The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services Inhibitors for replication of retroviruses and for the expression of oncogene products
US4904582A (en) * 1987-06-11 1990-02-27 Synthetic Genetics Novel amphiphilic nucleic acid conjugates
WO1990012022A1 (en) * 1989-03-31 1990-10-18 University Patents, Inc. Polynucleotide phosphorodithioates as therapeutic agents for retroviral infections
HUT64554A (en) * 1990-11-20 1994-01-28 Sankyo Co A process for preparing nucleinic acide derivatives of anesthetic effect and pharmaceutical compositions containing them as active ingredient
US5672697A (en) * 1991-02-08 1997-09-30 Gilead Sciences, Inc. Nucleoside 5'-methylene phosphonates
US5220003A (en) * 1991-03-29 1993-06-15 The Regents Of The University Of California Process for the synthesis of 2',3'-dideoxynucleosides
JP3061659B2 (ja) * 1991-08-01 2000-07-10 ヤマサ醤油株式会社 ２−｛２−（モノメトキシトリチルオキシ）エチルチオ｝エチル基および該基の使用法
US5646261A (en) * 1992-01-22 1997-07-08 Hoechst Aktiengesellschaft 3'-derivatized oligonucleotide analogs with non-nucleotidic groupings, their preparation and use
IL104461A (en) * 1992-01-22 2001-05-20 Hoechst Ag Oligonucleotide analogs, their preparation and pharmaceutical compositions containing them
CA2114355A1 (en) * 1993-01-29 1994-07-30 Hidehiko Furukawa Modified oligodeoxyribonucleotides, their preparation and their therapeutic use
JPH09208729A (ja) * 1996-02-02 1997-08-12 Sekisui Chem Co Ltd 帯電防止プラスチックプレートもしくはシートの製造方法

Also Published As

Publication number Publication date
ATE146479T1 (de) 1997-01-15
NO940310L (no) 1994-08-01
KR100318796B1 (ko) 2002-06-20
HK1000191A1 (en) 1998-01-27
RU2111971C1 (ru) 1998-05-27
NO309427B1 (no) 2001-01-29
NO940310D0 (no) 1994-01-28
DK0611075T3 (da) 1997-07-07
FI940425A7 (fi) 1994-11-04
HK1016151A1 (en) 1999-10-29
FI111265B (fi) 2003-06-30
AU5473194A (en) 1994-08-04
ES2098866T3 (es) 1997-05-01
EP0611075B1 (en) 1996-12-18
CA2114355A1 (en) 1994-07-30
CZ19094A3 (en) 1994-12-15
CN1039014C (zh) 1998-07-08
US5807837A (en) 1998-09-15
AU670154B2 (en) 1996-07-04
HU9400246D0 (en) 1994-05-30
HU222834B1 (hu) 2003-11-28
DE69401136T2 (de) 1997-07-10
IL108467A (en) 1999-09-22
CN1098107A (zh) 1995-02-01
KR940018394A (ko) 1994-08-16
IL108467A0 (en) 1994-04-12
GR3022821T3 (en) 1997-06-30
NZ280616A (en) 1997-04-24
EP0611075A1 (en) 1994-08-17
US5674856A (en) 1997-10-07
CN1065238C (zh) 2001-05-02
NZ250795A (en) 1997-04-24
DE69401136D1 (de) 1997-01-30
HUT66266A (en) 1994-10-28
FI940425A0 (fi) 1994-01-28
CN1193013A (zh) 1998-09-16

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US5278302A (en) Polynucleotide phosphorodithioates
US5512668A (en) Solid phase oligonucleotide synthesis using phospholane intermediates
AU651289B2 (en) Process of linking nucleosides with a siloxane bridge
US8901289B2 (en) Preparation of nucleotide oligomer
US5869696A (en) Universal solid supports and methods for their use
MXPA96004355A (en) Oligonucleotides and used modified intermediaries in nucleic acids therapeuti
EP2370451A2 (en) Method for the synthesis of phosphorus atom modified nucleic acids
JPH09511250A (ja) 核酸治療に有用な修飾オリゴヌクレオチド及び中間体
EP0290583B1 (fr) OLIGONUCLEOTIDES $g(a)
JPH0787982A (ja) 修飾オリゴデオキシリボヌクレオチド
US5674856A (en) Modified oligodeoxyribonucleoditides
JPH10195098A (ja) 新規ヌクレオチド類縁体
JP2000506849A (ja) オリゴヌクレオチド類似体
JPWO1992001704A1 (ja) オリゴデオキシリボヌクレオチド類
WO1990012022A1 (en) Polynucleotide phosphorodithioates as therapeutic agents for retroviral infections
PL211566B1 (pl) Analog 2&#39;,5&#39;-oligoadenylanowy, kompozycja farmaceutyczna zawierająca analog 2&#39;,5&#39;-oligoadenylanowy oraz zastosowanie analogu 2&#39;,5&#39;-oligoadenylanowego
CA2118153A1 (en) Use of nucleosides and nucleoside derivatives provided with enzymatically cleavable protecting groups in the synthesis of oligonucleotides
RU2243231C2 (ru) Бициклические аналоги нуклеозидов, нуклеотидов и олигонуклеотидов
AU659078B2 (en) Polynucleotide phosphorodithioates as therapeutic agents for retroviral infections
CN120904263B (zh) 具有增加寡核苷酸体内稳定性的2&#39;核糖修饰的核苷酸化合物及其合成方法与应用
JPH0892275A (ja) 修飾オリゴデオキシリボヌクレオチド
HK1000191B (en) Modified oligodeoxyribonucleotides, their preparation and their therapeutic use
JP2000290185A (ja) Ｔｇｇｇ配列を持つ修飾オリゴデオキシリボヌクレオチドを含有する抗エイズ剤
AU742476B2 (en) Novel bicyclonucleoside and oligonucleotide analogue
JPH11246592A (ja) Ｔｇｇｇ配列を持つ修飾オリゴデオキシリボヌクレオチド

Legal Events

Date Code Title Description
IF00 In force as of 2000-06-30 in czech republic
MM4A Patent lapsed due to non-payment of fee

Effective date: 20060128