CZ289067B6 - Způsob přípravy rostlin odolných vůči kořenové nádorovitosti - Google Patents
Způsob přípravy rostlin odolných vůči kořenové nádorovitosti Download PDFInfo
- Publication number
- CZ289067B6 CZ289067B6 CZ19942103A CZ210394A CZ289067B6 CZ 289067 B6 CZ289067 B6 CZ 289067B6 CZ 19942103 A CZ19942103 A CZ 19942103A CZ 210394 A CZ210394 A CZ 210394A CZ 289067 B6 CZ289067 B6 CZ 289067B6
- Authority
- CZ
- Czechia
- Prior art keywords
- plant
- root
- molecule
- gene
- cells
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 22
- 241000243785 Meloidogyne javanica Species 0.000 title abstract description 5
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims abstract description 27
- 230000001969 hypertrophic effect Effects 0.000 claims abstract description 10
- 108091026890 Coding region Proteins 0.000 claims abstract description 8
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 claims description 49
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims description 23
- 241001143352 Meloidogyne Species 0.000 claims description 12
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims description 11
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 claims description 10
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 claims description 7
- 244000061176 Nicotiana tabacum Species 0.000 claims description 6
- 235000002637 Nicotiana tabacum Nutrition 0.000 claims description 6
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims description 5
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims description 5
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 claims description 5
- 230000019522 cellular metabolic process Effects 0.000 claims description 4
- 230000017074 necrotic cell death Effects 0.000 claims description 4
- 235000013311 vegetables Nutrition 0.000 claims description 4
- 229920000742 Cotton Polymers 0.000 claims description 3
- 240000003768 Solanum lycopersicum Species 0.000 claims description 3
- 235000013399 edible fruits Nutrition 0.000 claims description 3
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 3
- 244000000626 Daucus carota Species 0.000 claims description 2
- 206010020880 Hypertrophy Diseases 0.000 claims description 2
- 230000001627 detrimental effect Effects 0.000 claims description 2
- 235000021374 legumes Nutrition 0.000 claims description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 claims description 2
- 230000001902 propagating effect Effects 0.000 claims description 2
- 108020005544 Antisense RNA Proteins 0.000 claims 2
- 239000003184 complementary RNA Substances 0.000 claims 2
- 239000000835 fiber Substances 0.000 claims 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 claims 1
- 102000042567 non-coding RNA Human genes 0.000 claims 1
- 235000014571 nuts Nutrition 0.000 claims 1
- 230000002747 voluntary effect Effects 0.000 claims 1
- 241000244206 Nematoda Species 0.000 description 32
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 23
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 14
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 11
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 10
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 9
- 239000000047 product Substances 0.000 description 7
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 108020004635 Complementary DNA Proteins 0.000 description 4
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 4
- 238000009396 hybridization Methods 0.000 description 4
- KWGKDLIKAYFUFQ-UHFFFAOYSA-M lithium chloride Chemical compound [Li+].[Cl-] KWGKDLIKAYFUFQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 4
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 4
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 240000001766 Mycetia javanica Species 0.000 description 3
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N Phenol Chemical compound OC1=CC=CC=C1 ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 3
- 230000000692 anti-sense effect Effects 0.000 description 3
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 3
- 238000010804 cDNA synthesis Methods 0.000 description 3
- 230000037406 food intake Effects 0.000 description 3
- 235000012631 food intake Nutrition 0.000 description 3
- 238000011065 in-situ storage Methods 0.000 description 3
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 3
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 3
- 241000589158 Agrobacterium Species 0.000 description 2
- 102000016911 Deoxyribonucleases Human genes 0.000 description 2
- 108010053770 Deoxyribonucleases Proteins 0.000 description 2
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ZHNUHDYFZUAESO-UHFFFAOYSA-N Formamide Chemical compound NC=O ZHNUHDYFZUAESO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108700039691 Genetic Promoter Regions Proteins 0.000 description 2
- 108091034057 RNA (poly(A)) Proteins 0.000 description 2
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 description 2
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 2
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 2
- 208000031513 cyst Diseases 0.000 description 2
- 239000011536 extraction buffer Substances 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- 230000003137 locomotive effect Effects 0.000 description 2
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 2
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 2
- 108091008146 restriction endonucleases Proteins 0.000 description 2
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 2
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 2
- 239000002689 soil Substances 0.000 description 2
- 241000894007 species Species 0.000 description 2
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 2
- 230000009261 transgenic effect Effects 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 244000105624 Arachis hypogaea Species 0.000 description 1
- 244000241235 Citrullus lanatus Species 0.000 description 1
- 235000012828 Citrullus lanatus var citroides Nutrition 0.000 description 1
- 102000012410 DNA Ligases Human genes 0.000 description 1
- 108010061982 DNA Ligases Proteins 0.000 description 1
- 230000004544 DNA amplification Effects 0.000 description 1
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010021033 Hypomenorrhoea Diseases 0.000 description 1
- 235000007688 Lycopersicon esculentum Nutrition 0.000 description 1
- 241000243784 Meloidogyne arenaria Species 0.000 description 1
- 241000243787 Meloidogyne hapla Species 0.000 description 1
- 241000243786 Meloidogyne incognita Species 0.000 description 1
- 240000001140 Mimosa pudica Species 0.000 description 1
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 description 1
- 238000012408 PCR amplification Methods 0.000 description 1
- 108091000080 Phosphotransferase Proteins 0.000 description 1
- 108010021757 Polynucleotide 5'-Hydroxyl-Kinase Proteins 0.000 description 1
- 102000008422 Polynucleotide 5'-hydroxyl-kinase Human genes 0.000 description 1
- 239000013614 RNA sample Substances 0.000 description 1
- 239000012506 Sephacryl® Substances 0.000 description 1
- 244000061456 Solanum tuberosum Species 0.000 description 1
- 235000002595 Solanum tuberosum Nutrition 0.000 description 1
- 208000037065 Subacute sclerosing leukoencephalitis Diseases 0.000 description 1
- 206010042297 Subacute sclerosing panencephalitis Diseases 0.000 description 1
- JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N [3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-hydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methyl [5-(6-aminopurin-9-yl)-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] hydrogen phosphate Polymers Cc1cn(C2CC(OP(O)(=O)OCC3OC(CC3OP(O)(=O)OCC3OC(CC3O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)C(COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3CO)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)O2)c(=O)[nH]c1=O JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 230000001679 anti-nematodal effect Effects 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 238000010805 cDNA synthesis kit Methods 0.000 description 1
- 230000032823 cell division Effects 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 239000002361 compost Substances 0.000 description 1
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 1
- 238000011109 contamination Methods 0.000 description 1
- 244000038559 crop plants Species 0.000 description 1
- 230000002939 deleterious effect Effects 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 239000011152 fibreglass Substances 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 1
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 1
- 238000001502 gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 210000004907 gland Anatomy 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 238000007901 in situ hybridization Methods 0.000 description 1
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 1
- 238000000386 microscopy Methods 0.000 description 1
- 239000004570 mortar (masonry) Substances 0.000 description 1
- 239000005645 nematicide Substances 0.000 description 1
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 1
- 235000020232 peanut Nutrition 0.000 description 1
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 1
- 230000035515 penetration Effects 0.000 description 1
- 102000020233 phosphotransferase Human genes 0.000 description 1
- 239000013600 plasmid vector Substances 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 235000021251 pulses Nutrition 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 230000001850 reproductive effect Effects 0.000 description 1
- 230000000717 retained effect Effects 0.000 description 1
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 1
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 description 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 1
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 230000001360 synchronised effect Effects 0.000 description 1
- 239000008399 tap water Substances 0.000 description 1
- 235000020679 tap water Nutrition 0.000 description 1
- 238000012800 visualization Methods 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
- C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
- C12N15/82—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for plant cells, e.g. plant artificial chromosomes (PACs)
- C12N15/8241—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology
- C12N15/8261—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield
- C12N15/8271—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield for stress resistance, e.g. heavy metal resistance
- C12N15/8279—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield for stress resistance, e.g. heavy metal resistance for biotic stress resistance, pathogen resistance, disease resistance
- C12N15/8285—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield for stress resistance, e.g. heavy metal resistance for biotic stress resistance, pathogen resistance, disease resistance for nematode resistance
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/415—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from plants
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
- Y02A40/00—Adaptation technologies in agriculture, forestry, livestock or agroalimentary production
- Y02A40/10—Adaptation technologies in agriculture, forestry, livestock or agroalimentary production in agriculture
- Y02A40/146—Genetically Modified [GMO] plants, e.g. transgenic plants
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Botany (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Zp sob p° pravy rostlin odoln²ch v i ko°enov n dorovitosti, vyvolan nematodem Meloidogyne spp., p°i n m se identifikuje gen, kter² je exprimov n v obrovsk²ch bu k ch a/nebo doprovodn²ch bu k ch ko°enov²ch n dor rostliny infikovan nematodem Meloidogyne spp., promotor takov ho genu se odebere a f·zuje s k duj c sekvenc za vzniku chimerick ho genu, kter² k duje molekulu, je je kodliv pro obrovsk bu ky ko°enov ho n doru a/nebo hypertrofn bu ky ko°enov ho n doru a/nebo nematody Meloidogyne spp. a potom se dal rostlina transformuje t mto chimerick²m genem.\
Description
Vynález se týká způsobu přípravy rostlin odolných vůči kořenové nádorovitosti, vyvolané nematodem (hlísticemi) Meloidogyne spp.
Dosavadní stav techniky ·
Hlístice nádorovitosti kořenů (Meloidogyne spp.) jsou hlavními patogeny mnoha kulturních plodin, například zeleniny, jedlých luštěnin, tabáku, rajčat, vodních melounů, révy, podzemnice a bavlníku.
Chemická kontrola, kultivační praxe a použití odolných odrůd jsou hlavní možnosti kontroly hlístic, které jsou v současnosti dostupné a často se používají integrovaným způsobem proti hlísticím nádorovitosti kořenů. Existuje požadavek zlepšení kontroly hlístic, neboť současná řešení poskytují neodpovídající ochranu plodin. Nematicidy jsou problematické z hlediska životního prostředí a nejsou vždy účinné. Kontrola kultur umožňuje zabránit ztrátám na rostlinách různými způsoby. Široký rozsah hostitelů hlístic nádorovitosti kořenů využitelnost ekonomicky čistých nehostitelských kulturních rostlin. Účinné rezistentní kultivary jsou často nedostupné a ty, které pěstitel může použít, jsou často citlivými kultivary při nízkých hustotách hlístic nádorů kořenů. Ztráta odolnosti také může vzniknout při vysokých půdních teplotách, které se objevují v tropickém a subtropickém prostředí.
Jestliže hlístice kořenové nádorovitosti napadne kořen rostliny, migruje intracelulámě, dokud nedosáhne kořenového meristemu. Faryngeální žlázové sekrece jsou pak injektovány ostnem hlístice do buněk v oblasti meristemu. To způsobí přerušení normálního vývoje těchto buněk, přičemž se objevuje dělení jádra bez dělení buňky. Vytvářejí se tak více jaderné buňky známé také jako obrovské buňky („Giant cells“). S tvorbou obrovských buněk je spojena jejich expanze do okolních buněk, známých jako hypertrofní buňky, které hlístice přímo neatakovala penetrací ostnem. Obrovské buňky a okolní buňky spolu vytvářejí místo, kde hlístice kořenové nádorovitosti žijí. Pozorovaný nádor, vytvářený na infikovaném kořenu, obsahuje takové obrovské buňky ve spojení s hypertrofními buňkami, které jsou výsledkem násobnosti infekcí hlísticemi. Mechanismus produkce obrovských buněk je podobný u všech citlivých rostlinných druhů.
Po indukci obrovských buněk hlístice kořenové nádorovitosti ztrácejí lokomotorickou schopnost jak probíhá příjem potravy hlístice na obrovské buňce a hlístice přijímá potravu, vyvíjí a reprodukuje se v místě příjmu potravy.
V mezinárodní patentové přihlášce WO 92/04453 je popsána metoda kontroly kořenových cyst hlístic. Ve článku, nazvaném „Gene Exprassion in Nematode-Infected Plant Roots“ Gurra a kol. (1191), je popsána vzhledem k hlísticím cyst brambor metoda, obsahující cDNA z mRNA, která byla zjištěna jako syncitium rostliny, která byla infikována hlísticemi kořenové nádorovitosti.
Podstata vynálezu
Předmětem vynálezu je způsob přípravy rostlin odolných vůči kořenové nádorovitosti, vyvolané nematodem Meloidogyne spp., jehož podstata spočívá v tom, že se identifikuje gen, který je exprimován v obrovských buňkách a/nebo doprovodných buňkách kořenových nádorů rostliny infikované nematodem Meloidogyne spp., promotor takového genu se odebere a fúzuje s kódující sekvencí za vzniku chimérického genu, který kóduje molekulu, jež je Škodlivá pro obrovské
-1 CZ 289067 B6 buňky kořenového nádoru a/nebó hypertrofhí buňky kořenového nádoru a/nebo nematody Meloidogyne spp. a potom se další rostlina transformuje tímto chimetrickým genem.
Rostliny, u kterých může být v souladu s předloženým vynálezem zlepšena odolnost vůči hlísticím kořenových nádorů zahrnují zeleninové rostliny, jedlé luštěniny, tabák, rostliny, plodící jedlé ovoce a bavlník. Například pokud jde o zeleninu, může být předložený vynález aplikován na rostliny mrkve a pokud jde o ovocné rostliny, může být aplikován na rostliny rajčat.
Tím, že mechanismus produkce obrovských buněk je podobný pro všechny náchylné rostlinné druhy, je metoda podle vynálezu aplikovatelná ve skutečnosti na všechny takové druhy, které jsou také transformovatelné v souladu s transformačním stupněm metody.
Metoda podle vynálezu je aplikovatelná na druhy Meloidogyne, zahrnující-ale neomezující se tak - M. incognita, M.javanica, M.arenaria a M.hapla.
Gen, identifikovaný a vybraný z infikované rostliny, je výhodně takový, jehož exprese neprobíhala před tím, než hlístice ztratila v podstatě lokomotorickou schopnost.
Sekvence (v chimérickém genu), exprimované pod kontrolou uvedeného promotoru zahrnují jednu nebo více z:
1. Kódující sekvence pro molekulu, která působí nekrózu obrovských buněk a/nebo hypertrofních buněk.
2. Kódující sekvence pro molekulu, která působí nekrózu hlístice kořenové nádorovitosti.
3. Kódující sekvenci pro jakýkoliv z mnoha enzymů, které jsou aktivní v poškození metabolismu rostlinných buněk.
4. „Antisense“ specifického genu místa příjmu potravy.
5. ,,Antisense“ kódující sekvence pro enzymy kritické pro metabolismus rostlinných buněk.
Je obecně nezbytné zajistit, aby byl vybrán gen, přičemž tento je genem, který je exprimován pouze v obrovských buňkách a/nebo připojených hypertrofiiích buňkách, protože je-li gen exprimován na jiném místě, expresní produkt chimérického genu, produkovaný na jiném místě, by mohl nežádoucím způsobem ovlivnit transformovanou rostlinu.
Výhodou předloženého vynálezu je, že odolnost vůči hlísticím nádorovitosti kořenů je možno udělit rostlinám bez potřeby produkovat produkt antinematodové infekce, jak je uveden výše v 1-5.
Nyní bude popsán preferovaný postup provedení vynálezu.
Příklady provedení vynálezu
Růst a infekce tabákových rostlin
Semena C319 tabáku klíčí na Fisons FI kompostu za následujících podmínek. Intenzita světla 4 500 až 5 000 lux se 16 hodinovou světelnou periodou, následovanou 8 hodinami tmy a teplotou mezi 20 a 25 °C. Po asi 3 týdnech se semenáčky šetrně omyjí ve vodovodní vodě pro odstranění půdy a přenesou do váčků (2 rostliny na váček, Northrup-king) a rostou další týden v Conviron při 25 °C a při intenzitě světla 5 000 lux po 16 h a tato perioda je následována 8 hodinovou periodou tmy. Kořeny jsou vybaveny ze zadní strany váčku a podloženy na svých koncích
-2CZ 289067 B6
Whatman CF/A papírem se skelnými vlákny. Tři dny staré hlístice (M.javanica) se pak doručí ke špičkám těchto kořenů v 10 ul (50 hlístic) podílech a druhý kousek CF/A papíru se umístí nahoru, aby špička kořenu byla zcela uzavřena. 24 hodin po infekci se GF/A papír odstraní pro umožnění synchronní infekce. 3 dny po infekci se nádorky odříznou (ponechá se zdravý kořen a zadní tkáň kořenové špičky) a ihned se zmrazí v kapalném dusíku. Z 80 inokulovaných rostlin se získá přibližně 0,5 až 1 g infikované kořenové tkáně.
Vybarvení pro vizualizaci hlístic v infikovaných kořenech
Pro stanovení kvality infekce se stanoví počet hlístic (infikujících) na špičku kořenu. Kořeny se odeberou třetí den po infekci rostlin a ponoří se na 90 sekund do laktofenolu, obsahujícího 0,1 % Cotton Blue při 95 °C. Po 5 sekundách omývání vodou se kořeny umístí v laktofenolu při teplotě místnosti (RT) na 3 - 4 dny pro vyčištění. Vybarvené hlístice jsou pak vizualizovány za použití světelné mikroskopie.
Izolace RNA ze zdravé a infikované kořenové tkáně
Kořenová tkáň se rozdrtí na jemný prášek ve vymraženém (kapalný dusík) hmoždíři s tloučkem. Asi 100 mg podíly se pak přenesou do stejně vymražených Eppendorfových zkumavek a přidá se 300 ul horkého fenolového extrakčního pufru (50 % fenol, 50 % extrakční pufr: 0,1 N chlorid lithný, 0,1 M Tris-Hcl pH 8,0 (RT), 10 mM EDTA, 1 % SDS) a inkubuje se při 80 °C 5 minut. Potom se přidá stejný objem chloroformu a homogenát se v mikru odstřeďuje 15 minut při 4 °C. Vodná fáze se pak extrahuje 600 ul fenol/chloroformu a mikroodstředí jako výše. Potom se vodná fáze opět odstraní a pak se RNA vysráží stejným objemem chloridu lithného při 4 °C přes noc. Sraženina se peletuje mikroodstředěním po 15 min. při RT a promyje se v 70 % ethanolu. Peleta se lyofilizuje, resuspenduje ve vodě zpracované s DEPC a hodnotí pomocí spektrofotometru. RNA kvalita je hodnocena znečištěním podle gelové elektroforézy. (Upraveno podle Shirzedegana a kol. 1991).
Subtraktivní klonování cDNA specifických pro infekci
Poly(A)+ RNA (mRNA) se izoluje z 200 ug vzorků celé RNA ze zdravé a infikované C319 kořenové tkáně za použití magnetických „dt Dynabeads“ podle instrukcí výrobce. Syntéze prvního řetězce cDNA se provádí in sítu na Dynabead navázané póly (A)+ frakci ze zdravé tkáně. Toto je řídicí („driver“) DNA. Syntéza prvního a druhého řetězce se provádí in šitu na Dynabead navázané póly (A)+ frakci z infikované tkáně. Toto je cílová („target“) DNA. Všechny cDNA reakce se provádějí za použití kitu pro syntézu cDNA Pharmacia a podle instrukcí výrobce. Tři oligonukleotidy SUB21 (5‘CTCTTGCTTGAATTCGGACTA3‘), SUB25(5’TAGTCCGAATTCAAGCAAGAGCACA3‘) (sekvence od Duduid-Dinauer, 1990) aLDT15 (5’GACAGAAGCGGATCCd(T)153‘) (O‘Reilly a kol., 1991), se kinasují T4 polynukleotidovou kinásou podle Maniatise a kol. (1982). SUB21 a Sub25 jsou pak anetovány za vzniku linkeru, který se pak liguje k cílové DNA pomocí T4 DNA ligásy podle Kinga a Blakesleye (1986). Potom se kuličky, nesoucí cíl, intenzivně promyjí pomocí TE a druhý řetězec cDNA se eluuje při 95 °C v 5 x SSC.
RNA navázána k Dynabead navázané řídící DNA se odstraní zahřátím a eluovaná cílová DNA hybridizuje k řídící DNA při 55 °C v 5 x SSC po 5 hodin. Nehybridizující cílová DNA se oddělí od řídící DNA navázané na kuličkách při teplotě místnosti podle instrukcí výrobce, a pak se hybridizuje k řídící DNA při 55 °C v 5 x SSC po 5 hodin. Nehybridizující cílová DNA se oddělí od řídicí DNA navázané ke kuličkám při teplotě místnosti podle instrukcí výrobce a potom se hybridizující cílová DNA podobně oddělí od řídicí DNA navázané ke kuličkám při 95 °C. Při RT eluovaná cílová DNA se pak přidá nazpět k řídicí DNA a hybridizace se opakuje. Tento proces se opakuje dokud množství cílové hybridizující k řídicí již nepřesahuje množství, které nehybridizuje. DNA koncentrace se stanoví pomocí Invitrogen‘s DNA Dipstick podle instrukcí výrobce.
-3CZ 289067 B6
Podíly finální při RT eluované frakce se použijí v PCR amplifikaci (Eckert a kol., 1990) pro generování dvojřetězcové cDNA pro klonování do plasmidového vektoru. Amplifikace cílové DNA se dosáhne použitím primerů SUB21 a LTD 15 a zařízení Hybaid Thermal Cycler za podmínek, popsaných Frohmanem a kol., 1988. PCR produkty se pak ligují do Smál štěpeného pBluescript vektoru podle Kinga a Blakesleye (1986).
Screening subtraktivní knihovny Reverse Northem analýzou
Rekombinanty jsou identifikovány sloupcovou PCR (Gussow a Clackson, 1989). Amplifikované inzerty jsou Southem blotovány trojnásobně na Pall Biodyne membránách podle návodu výrobce membrán. Prehybridizace a hybridizace se provádí při stejné teplotě a pufru, které jsou 42 °C a 5 x SSPE, 0,05 % BLOTTO, 50 % formamid. Hybridizují odděleně k cDNA sondám (viz dále) ze zdravé a infikované tkáně a k sondě, obsahující amplifikovanou cílovou DNA z konečné subtrakce. Klony, které vykazují hybridizační signál pouze k sondě infikované cDNA nebo které vykazují hybridizační signál k subtraktované sondě ale ne k cDNA sondám jsou zvoleny pro další analýzu.
Generace cDNA sondy
Pro dosažení vysoké specifické aktivity sond po difereneciální screening, se cDNA syntéze provádí „za studená“ na celkové RNA a syntéza produktů potom je značena oligoznačením. Vzorky 10 ug celkové RNA ze zdravé a infikované tkáně se nejprve ošetří 2,5 jednotkami DNasy 1 při 37 °C po 15 minut. DNasa se pak denaturuje při 95 °C 10 minut před provedením cDNA syntézy (standardní Pharmacia protokol). RNA se pak odstraní za přítomnosti 0,4M hydroxidu sodného po 10 minut při RT a DNA se čistí přes kolomnu Sephacrylu 400HR. Výtěžek cDNA a koncentrace se stanoví za použití DNA Dipsticks (Invitrogen). cDNA produkty se značí podle Pharmacia standardního protokolu pro oligoznačení (c. 35 ug sonda).
Northem blotting
Pro stanovení profilu exprese cDNA vybraných a Reverse Northems v různých tkáních rostliny, se klony použijí jako sondy v Northem analýze buď celkové, nebo póly (A)+RNA ze zdravých a infikovaných kořenů, stonků, listů a květů. Bloty celkové RNA obsahují 25 ug RNA na dráhu, zatímco poly(A)‘bloty obsahují 0,5 až 1 ug RNA na dráhu. RNA je elektroforézována na formaldehylové gely a blotována na Pall Biodyne B membránu, jakje popsáno Foumeyem a kol. (1988). Sondy jsou značeny a hybridizovány k blotům, jak je popsáno výše.
Southem blotting
Pro stanovení, zda cDNA jsou rostlinného nebo hlísticového původu, se připraví C319 aM.javanica DNA podle Gawela a Jarreta (1991). Southem bloty se připraví tak, že obsahují 10 ug EcoRI a Hind ΙΠ štěpené DNA na dráhu. Bloty se hybridizují k oligoznačeným sondám, jakje popsáno výše.
Hydridizace in šitu
Pro stanovení lokality exprese zajímavých cDNA v místě krmení se provedou hybridizace in šitu. Tkáně z infikovaných a zdravých kořenů se uloží do vosku, rozdělí a hybridizují k sondám, jak je popsáno Jacksonem (1991).
Izolace 5‘konce mRNA
5‘konce RNA, které jsou středem zájmu, se stanoví před izolací jejich promotorových sekvencí. Tohoto se dosáhne použitím 5‘RACE, jak je popsáno Frohmanem a kol. (1988).
-4CZ 289067 B6
Izolace promotorových oblastí
Promotorové oblasti genů, které jsou středem zájmu, se izolují postupem, nazvaným VectorLigated PCR. 100 ug vzorky restrikční endonukleásou štěpené C319 genomové DNA se ligují 4 hodiny při RT (King a Blakesley, 1986) se 100 ug vzorky pBluescript (štěpené restrikčním enzymem, produkujícím kompatibilní konec). Typicky jsou použitými enzymy EcoRI, BamHI, HindlII, BG1II, Xhol, Clal, Sáli, KpnI, Pstl, a Sstl. PCR se pak provede na ligacích použitím vektorového primeru jako je -40 sekvenční (Sequencing) primer a primer komplementární k 5'konci mRNA. PCR produkty se pak klonují a sekvenují. Je-li to nezbytné, proces se opakuje s novým primerem komplementárním k 5‘konci promotorového fragmentu pro zajištění toho, že jsou kontrolní sekvence izolovány.
Konstrukce chimemích genů v binárních vektorech pro transformaci rostlin
Izolované promotory se ligují 5‘ sekvenci, která je jednou ze sekvencí tříd 1.-5., jak byly uvedeny výše. Příklady jsou „antisense“ samotného genu (třída 4) nebo bamasový gen (Hartley a kol., 1972) (třída 1 a/nebo třída 3). Tyto jsou konstruovány v binárních vektorech (Bevan, 1984).
Produkce transgenních rostlin
Transgenní rostliny, například tabák, mohou být produkovány standardní Agrobacteriem zprostředkovanou metodou listových disků, popsanou Horschem a kol. (1985), která poskytne rostliny, odolné k hlísticové kořenové nádorovitosti. Semena nebo jiný rozmnožovací materiál rostlin, které jsou produktem předloženého vynálezu, mohou být uchována pro budoucí použití.
Odborníkům v oboru bude zřejmé, ve kterých třídách rostlin může být vhodné nebo nezbytné transformovat rostlinu použitím metody jiné, než je Agrobacteriem zprostředkovaná metoda.
Odborníkům v oboru rovněž bude zřejmé, že při infekci produktem podle vynálezu přestanou rostliny trpět uvedenými škodlivými účinky takové infekce a reprodukční kapacita hlístic kořenových nádorů je snížena v místě rostlin na ekonomicky nevýznamnou míru.
Odolnost vůči hlísticím kořenových nádorů může být udělena v souladu s předloženým vynálezem všem jednoděložným, dvouděložným, rostlinným a dřevnatým druhům, náchylným k hlísticové kořenové nádorovitosti.
-5CZ 289067 B6
Odkazy
BEVAN, M. (1984) Nucleic Acids Research 12(22) : 8711-8721.
DEGUID, J.R. - DINAUER, M.C. (1990) Nucleic Acids Research 18 (9) : 2789-2792.
ECKERT, K.A. - KUNKEL, T.A. (1990) Nucleic Acids Research (18)13 : 3737-3744.
FOURNEY, R.M. , MIYAKOSHI, J. , DAY III, R.S. - PATERSON, M.C. (1988) Focus 10(1) : 5-7.
FROHMAN, M.A., DUSH, M.K. - MARTIN, G.R. (1988)Proceedings of the National Academy of Sciences USA 85 : 8998-9002.
GAWEL, N.J. - JARRET, R.L. (1991). Planat Molecular Biology Reportér 9(3) : 262-266.
GUSSOW, D., - CLACKSON, T. (1989). Nucleic Acids Research 17 : 4000.
GURR, S.J., McPHERSON, M.J., SCOLLAN, S., ATKINSON, H.J. BOWLES, D.J. (1991) Gene Expression in Nematode - Infected Plant Roots, Mol. Gen. Genet, 226 : 361-366.
HARTLEY, R.W. , ROGERSON, D.L. , - SMEATON, J.R. (1972)
Preparative Biochemistry 2 : 243-250.
HORSCH, R.B., FRY, J.E., HOFFMANN, N.L. , EICHHOLT2, D. , ROGERS, S.G. - FRALEY, R.T., (1985) Science 227 : 1229-1231. JACKSON, D. (1991). Molecular Plant Pathology : A Practical Approach. IRL Press, Oxford.
KING, P.V. - BLAKESLEY, R.W. (1986). Focus 8 (1) : 1-3.
MANIATIS, T., FRITSCH, E.F. - SAMBROOK, J. (1982) Molecular Cloning : A Laboratory Manual. NY. Cold Spring Harbour Laboratory.
0'REILLY, D. , THOMAS, C.J.R. - COUTTS, R.H.A. (1991) Joumal of Generál Virology 72 : 1-7.
SHIRZADEGAN, M. CHRISTIE, P. - SEEMANN, J.R. (1991) Nucleic Acids Research 19 (21) : 6055.
Claims (14)
- PATENTOVÉ NÁROKY1. Způsob přípravy rostlin odolných vůči kořenové nádorovitosti, vyvolané nematodem Meloidogyne spp., vyznačující se tím, že se identifikuje gen, který je exprimován v obrovských buňkách a/nebo dobrovolných buňkách kořenových nádorů rostliny infikované nematodem Meloidogyne spp., promotor takového genu se odebere a fúzuje s kódující sekvencí za vzniku chimérického genu, který kóduje molekulu, jež je škodlivá pro obrovské buňky kořenového nádoru a/nebo hypertrofiií buňky kořenového nádoru a/nebo nematody Meloidogyne spp. a potom se další rostlina transformuje tímto chimérickým genem.
- 2. Způsob podle nároku 1,vyznačující se tím, že uvedenou molekulou je molekula schopná způsobit nekrózu obrovských buněk a/nebo hypertrofních buněk.
- 3. Způsob podle nároku 1,vyznačující se tím, že uvedenou molekulou je molekula schopná způsobit nekrózu nematodu Meloidogyne spp.
- 4. Způsob podle nároku 1,vyznačující se tím, že uvedenou molekulou je molekula enzymu účinného pro poškození metabolismu rostlinných buněk.
- 5. Způsob podle nároku 1, vyznačující se tím, že uvedenou molekulou je antimediátorová RNA uvedeného genu, identifikovaného v uvedené infikované rostlině.
- 6. Způsob podle nároku 1, vyznačující se tím, že uvedenou molekulou je antimediátorová RNA genu, kódujícího enzym, který je kritický pro metabolismus rostlinné buňky.
- 7. Rostlina odolná ke kořenové nádorovitosti kořenů vyvolané nematodem Meloidogyne spp., připravená způsobem podle nároku 1.
- 8. Rostlina podle nároku 7, kterou je rostlina zvolená ze skupiny sestávající z rostliny zeleniny, jedlých luštěnin, ovoce a ořechů a rostlin pěstovaných pro vlákna.
- 9. Rostlina podle nároku 7, kterou je rostlina tabáku.
- 10. Rostlina podle nároku 8, kterou je rostlina rajčete.
- 11. Rostlina podle nároku 8, kterou je rostlina mrkve.
- 12. Rostlina podle nároku 8, kterou je bavlník.
- 13. Rozmnožovací materiál rostliny podle nároku 7.
- 14. Chimérický gen, obsahující kódující sekvenci, která kóduje molekulu, jež je škodlivá k obrovským buňkám kořenových nádorů a/nebo hypertrofhím buňkám kořenových nádorů a/nebo nematodu Meloidogyne spp., kde uvedený gen dále obsahuje sekvenci promotoru odebranou z genu, který byl exprimován v obrovských buňkách a/nebo doprovodných hypertrofních buňkách kořenových nádorů rostliny infikované nematodem Meloidogyne spp., přičemž tento promotor je v rostlině transformované takovým chimetrickým genem schopen vyvolat expresi uvedené kódující sekvence v obrovských buňkách kořenových nádorů a/nebo hypertrofních buňkách kořenových nádorů.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| GB929205474A GB9205474D0 (en) | 1992-03-13 | 1992-03-13 | Root knot nematode resistance |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CZ210394A3 CZ210394A3 (en) | 1997-05-14 |
| CZ289067B6 true CZ289067B6 (cs) | 2001-10-17 |
Family
ID=10712053
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CZ19942103A CZ289067B6 (cs) | 1992-03-13 | 1993-03-11 | Způsob přípravy rostlin odolných vůči kořenové nádorovitosti |
Country Status (10)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN1080302C (cs) |
| CZ (1) | CZ289067B6 (cs) |
| GB (1) | GB9205474D0 (cs) |
| GE (1) | GEP20002245B (cs) |
| MD (1) | MD1400C2 (cs) |
| MY (1) | MY109599A (cs) |
| NZ (1) | NZ267026A (cs) |
| TJ (1) | TJ287B (cs) |
| TR (1) | TR28954A (cs) |
| WO (1) | WO1993018170A1 (cs) |
Families Citing this family (20)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| ATE276373T1 (de) * | 1991-10-04 | 2004-10-15 | Univ North Carolina State | Pathogenresistente transgene pflanzen |
| US6008436A (en) * | 1993-01-21 | 1999-12-28 | North Carolina State University | Nematode-resistant transgenic plants |
| US5612471A (en) * | 1994-05-25 | 1997-03-18 | The Regents Of The University Of California | Nematode-induced genes in tomato |
| US6262344B1 (en) | 1995-06-13 | 2001-07-17 | Syngenta Mogen B.V. | Nematode-inducible plant gene promoter |
| JP2000511427A (ja) * | 1996-06-04 | 2000-09-05 | モーヘン インターナショナル エヌ．ブイ． | 線虫誘導性植物遺伝子プロモーター |
| WO1998006750A2 (en) | 1996-08-09 | 1998-02-19 | Keygene N.V. | Resistance against nematodes and/or aphids |
| EP0823481A1 (en) * | 1996-08-09 | 1998-02-11 | Keygene N.V. | Resistance against nematodes |
| US6392119B1 (en) | 1997-01-24 | 2002-05-21 | Dna Plant Technology Corporation | Two component plant cell lethality methods and compositions |
| US7329670B1 (en) | 1997-12-22 | 2008-02-12 | Bayer Pharmaceuticals Corporation | Inhibition of RAF kinase using aryl and heteroaryl substituted heterocyclic ureas |
| GB0025225D0 (en) | 2000-10-14 | 2000-11-29 | Cambridge Advanced Tech | Plant cell death system |
| CN1317383C (zh) * | 2005-03-16 | 2007-05-23 | 云南大学 | 具有杀线虫功能的囊孢单顶孢菌剂及其制备方法和应用 |
| CN100372935C (zh) * | 2005-10-17 | 2008-03-05 | 华中农业大学 | 辣椒抗根结线虫基因的克隆及其应用 |
| NZ601341A (en) | 2010-01-22 | 2014-02-28 | Bayer Ip Gmbh | Acaricide and/or insecticide active substance combinations |
| CA2815117A1 (en) | 2010-11-02 | 2012-05-10 | Bayer Intellectual Property Gmbh | N-hetarylmethyl pyrazolylcarboxamides |
| US20130289077A1 (en) | 2010-12-29 | 2013-10-31 | Juergen Benting | Fungicide hydroximoyl-tetrazole derivatives |
| CN103717076B (zh) | 2011-08-10 | 2016-04-13 | 拜耳知识产权股份有限公司 | 含有特定特特拉姆酸衍生物的活性化合物组合物 |
| WO2014090765A1 (en) | 2012-12-12 | 2014-06-19 | Bayer Cropscience Ag | Use of 1-[2-fluoro-4-methyl-5-(2,2,2-trifluoroethylsulfinyl)phenyl]-5-amino-3-trifluoromethyl)-1 h-1,2,4 tfia zole for controlling nematodes in nematode-resistant crops |
| MX360582B (es) | 2012-12-13 | 2018-11-07 | Inst De Ecologia A C Star | Biocontrol de nemátodos fitoparásitos mediante paecilomyces. |
| MD719Z (ro) * | 2013-06-11 | 2014-08-31 | Институт Зоологии Академии Наук Молдовы | Procedeu de tratare a cartofului contra nematodului Ditylenchus destructor |
| MA45638A (fr) | 2015-08-07 | 2019-05-22 | BASF Agricultural Solutions Seed US LLC | Utilisation du promoteur de l'annexine pour améliorer le rendement de plantes soumises à des conditions de stress |
Family Cites Families (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| ES2165345T3 (es) * | 1987-07-10 | 2002-03-16 | Syngenta Participations Ag | Resistencia virica inducible en plantas. |
| CN1033645A (zh) * | 1988-10-22 | 1989-07-05 | 中国科学院上海植物生理研究所 | 控制植物病毒病的基因工程方法 |
| DE69129540T2 (de) * | 1990-09-10 | 1998-10-01 | Advanced Technologies (Cambridge) Ltd., Cambridge | Pflanzliche parasitäre nematode bekämpfung |
| WO1992021757A1 (en) * | 1991-05-30 | 1992-12-10 | Plant Genetic Systems, N.V. | Nematode-responsive plant promoters |
| ATE276373T1 (de) * | 1991-10-04 | 2004-10-15 | Univ North Carolina State | Pathogenresistente transgene pflanzen |
| RU2143000C1 (ru) * | 1991-11-20 | 1999-12-20 | Моген Интернэшнл Н.В. | Способ получения растения с пониженной восприимчивостью к растительным паразитическим нематодам (варианты), рекомбинантная днк (варианты), трансформирующий растение вектор, штамм agrobacterium и способ снижения ущерба урожаю |
-
1992
- 1992-03-13 GB GB929205474A patent/GB9205474D0/en active Pending
-
1993
- 1993-03-09 MY MYPI93000414A patent/MY109599A/en unknown
- 1993-03-11 NZ NZ267026A patent/NZ267026A/xx not_active IP Right Cessation
- 1993-03-11 MD MD96-0266A patent/MD1400C2/ro unknown
- 1993-03-11 WO PCT/GB1993/000514 patent/WO1993018170A1/en not_active Ceased
- 1993-03-11 GE GEAP19932430A patent/GEP20002245B/en unknown
- 1993-03-11 CZ CZ19942103A patent/CZ289067B6/cs not_active IP Right Cessation
- 1993-03-11 TJ TJ96000329A patent/TJ287B/xx unknown
- 1993-03-12 TR TR00201/93A patent/TR28954A/xx unknown
- 1993-03-13 CN CN93104410A patent/CN1080302C/zh not_active Expired - Lifetime
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| NZ267026A (en) | 1995-08-28 |
| CN1080302C (zh) | 2002-03-06 |
| GEP20002245B (en) | 2000-09-25 |
| MD960266A (en) | 1998-01-31 |
| TJ287B (en) | 2000-12-13 |
| MY109599A (en) | 1997-03-31 |
| CZ210394A3 (en) | 1997-05-14 |
| WO1993018170A1 (en) | 1993-09-16 |
| MD1400B2 (en) | 2000-01-31 |
| MD1400C2 (ro) | 2000-10-31 |
| CN1077990A (zh) | 1993-11-03 |
| GB9205474D0 (en) | 1992-04-29 |
| TR28954A (tr) | 1997-08-04 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CZ210394A3 (en) | Resistance to roundworms of root tumors | |
| CA2269111C (en) | Genes encoding plant transcription factors | |
| JP2005516589A (ja) | 植物ポリペプチドおよびそれをコードするポリヌクレオチド | |
| Jenkins et al. | Dehiscence‐related expression of an Arabidopsis thaliana gene encoding a polygalacturonase in transgenic plants of Brassica napus | |
| MX2008015938A (es) | Generacion de plantas con resistencia a patogenos mejorada. | |
| RU2129373C1 (ru) | Способ борьбы с нематодами | |
| CA2262411C (en) | Resistance against nematodes and/or aphids | |
| CN101824433B (zh) | 控制拟南芥维管束发育的特异性基因及其应用 | |
| CN116590337B (zh) | 水稻转录因子OsbZIP13及其编码序列的应用 | |
| CN110627887B (zh) | SlTLFP8蛋白及其相关生物材料在调控番茄抗旱性中的应用 | |
| KR102194867B1 (ko) | 병 방어 억제 유전자 OsWRKY55, 벼 흰잎마름병균 이펙터 결합 프로모터 및 이의 용도 | |
| CN105985416A (zh) | 蜡质发育调控基因cflap1及其在植物抗旱上的应用 | |
| CN106191073A (zh) | Hox3基因在改良棉纤维伸长性状中的用途 | |
| CN102010864B (zh) | 玉米花粉组织特异性启动子及其表达载体 | |
| CN116218899B (zh) | 水稻特异调控粒宽基因slg2及其应用 | |
| KR100685520B1 (ko) | 종자 특이적 프로모터, 이의 증폭용 프라이머, 이를포함하는 발현벡터 및 형질전환세포 | |
| JP6294867B2 (ja) | 開花期を制御することが可能なイネ科植物体 | |
| CN1286979C (zh) | 细胞特异性坏死 | |
| CN103898129B (zh) | 控制植物分枝的K599-orf3基因及其应用 | |
| WO2007033587A1 (fr) | Procede d'isolement d'un promoteur de gene bidirectionnel et son utilisation | |
| CN110396125B (zh) | 拟南芥转录因子基因pif3在植物抗虫胁迫中的应用 | |
| CN114606260B (zh) | 一种提高番茄根结线虫温敏抗性的方法 | |
| CN113528533B (zh) | 二色补血草基因LbRSG及其应用 | |
| Nayakoti | Transcription factor networks regulating SAG21: An arabidopsis gene at the interface between stress and senescence | |
| WO2001014543A1 (fr) | Nouveau fragment d'adn elevant le niveau d'expression genique |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PD00 | Pending as of 2000-06-30 in czech republic | ||
| MK4A | Patent expired |
Effective date: 20130311 |