CZ292673B6 - Způsob přípravy klavamů - Google Patents
Způsob přípravy klavamů Download PDFInfo
- Publication number
- CZ292673B6 CZ292673B6 CZ19971771A CZ177197A CZ292673B6 CZ 292673 B6 CZ292673 B6 CZ 292673B6 CZ 19971771 A CZ19971771 A CZ 19971771A CZ 177197 A CZ177197 A CZ 177197A CZ 292673 B6 CZ292673 B6 CZ 292673B6
- Authority
- CZ
- Czechia
- Prior art keywords
- urease
- ammonia
- fermentation
- clavam
- clavams
- Prior art date
Links
- WSHJJCPTKWSMRR-RXMQYKEDSA-N penam Chemical compound S1CCN2C(=O)C[C@H]21 WSHJJCPTKWSMRR-RXMQYKEDSA-N 0.000 title claims abstract description 30
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title claims abstract description 7
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 79
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 claims abstract description 41
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 claims abstract description 41
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 claims abstract description 39
- 108010046334 Urease Proteins 0.000 claims abstract description 38
- 244000005700 microbiome Species 0.000 claims abstract description 23
- 230000001629 suppression Effects 0.000 claims abstract description 4
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 37
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 28
- HZZVJAQRINQKSD-UHFFFAOYSA-N Clavulanic acid Natural products OC(=O)C1C(=CCO)OC2CC(=O)N21 HZZVJAQRINQKSD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 28
- HZZVJAQRINQKSD-PBFISZAISA-N clavulanic acid Chemical group OC(=O)[C@H]1C(=C/CO)/O[C@@H]2CC(=O)N21 HZZVJAQRINQKSD-PBFISZAISA-N 0.000 claims description 28
- 229960003324 clavulanic acid Drugs 0.000 claims description 27
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 claims description 15
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 14
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 claims description 14
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical group [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 12
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 11
- 241000187433 Streptomyces clavuligerus Species 0.000 claims description 4
- 230000001376 precipitating effect Effects 0.000 claims description 3
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 6
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 6
- 239000002585 base Substances 0.000 description 4
- BAVYZALUXZFZLV-UHFFFAOYSA-O Methylammonium ion Chemical compound [NH3+]C BAVYZALUXZFZLV-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 3
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 3
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 2
- CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N Carbon dioxide Chemical compound O=C=O CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 2
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 2
- 230000009615 deamination Effects 0.000 description 2
- 238000006481 deamination reaction Methods 0.000 description 2
- 238000010353 genetic engineering Methods 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- 239000012429 reaction media Substances 0.000 description 2
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 2
- WTLKTXIHIHFSGU-UHFFFAOYSA-N 2-nitrosoguanidine Chemical compound NC(N)=NN=O WTLKTXIHIHFSGU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930186147 Cephalosporin Natural products 0.000 description 1
- 229920001353 Dextrin Polymers 0.000 description 1
- 239000004375 Dextrin Substances 0.000 description 1
- 108090000204 Dipeptidase 1 Proteins 0.000 description 1
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 1
- 108010073771 Soybean Proteins Proteins 0.000 description 1
- 241000187747 Streptomyces Species 0.000 description 1
- 241000424942 Streptomyces clavuligerus ATCC 27064 Species 0.000 description 1
- 241000187180 Streptomyces sp. Species 0.000 description 1
- 229910021536 Zeolite Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 1
- 150000008044 alkali metal hydroxides Chemical class 0.000 description 1
- MXZRMHIULZDAKC-UHFFFAOYSA-L ammonium magnesium phosphate Chemical compound [NH4+].[Mg+2].[O-]P([O-])([O-])=O MXZRMHIULZDAKC-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 1
- 102000006635 beta-lactamase Human genes 0.000 description 1
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 1
- 230000006696 biosynthetic metabolic pathway Effects 0.000 description 1
- 235000010633 broth Nutrition 0.000 description 1
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001569 carbon dioxide Substances 0.000 description 1
- 229910002092 carbon dioxide Inorganic materials 0.000 description 1
- 229940124587 cephalosporin Drugs 0.000 description 1
- 150000001780 cephalosporins Chemical class 0.000 description 1
- 229940090805 clavulanate Drugs 0.000 description 1
- 238000004737 colorimetric analysis Methods 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 235000019425 dextrin Nutrition 0.000 description 1
- HNPSIPDUKPIQMN-UHFFFAOYSA-N dioxosilane;oxo(oxoalumanyloxy)alumane Chemical compound O=[Si]=O.O=[Al]O[Al]=O HNPSIPDUKPIQMN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000009977 dual effect Effects 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 1
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 description 1
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 1
- 235000012054 meals Nutrition 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 1
- 238000010369 molecular cloning Methods 0.000 description 1
- 238000002703 mutagenesis Methods 0.000 description 1
- 231100000350 mutagenesis Toxicity 0.000 description 1
- 239000003471 mutagenic agent Substances 0.000 description 1
- 231100000707 mutagenic chemical Toxicity 0.000 description 1
- 230000003505 mutagenic effect Effects 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 238000010979 pH adjustment Methods 0.000 description 1
- 150000002960 penicillins Chemical class 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000001718 repressive effect Effects 0.000 description 1
- 238000012552 review Methods 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000002002 slurry Substances 0.000 description 1
- 229940001941 soy protein Drugs 0.000 description 1
- 235000013619 trace mineral Nutrition 0.000 description 1
- 239000011573 trace mineral Substances 0.000 description 1
- 150000003672 ureas Chemical class 0.000 description 1
- 235000015112 vegetable and seed oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000008158 vegetable oil Substances 0.000 description 1
- 239000010457 zeolite Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P17/00—Preparation of heterocyclic carbon compounds with only O, N, S, Se or Te as ring hetero atoms
- C12P17/18—Preparation of heterocyclic carbon compounds with only O, N, S, Se or Te as ring hetero atoms containing at least two hetero rings condensed among themselves or condensed with a common carbocyclic ring system, e.g. rifamycin
- C12P17/188—Heterocyclic compound containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen atoms and oxygen atoms as the only ring heteroatoms
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/8215—Microorganisms
- Y10S435/822—Microorganisms using bacteria or actinomycetales
- Y10S435/886—Streptomyces
Landscapes
- Organic Chemistry (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
- Nitrogen And Oxygen Or Sulfur-Condensed Heterocyclic Ring Systems (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
- Transition And Organic Metals Composition Catalysts For Addition Polymerization (AREA)
- Catalysts (AREA)
Abstract
Je popsán zlepšený způsob přípravy klavamů fermentací mikroorganismu produkujícího klavam ve vhodném médiu, při kterém podmínky ve fermentoru jsou takové, že hladiny amoniaku jsou udržovány nízké během fermentace za účelem vyloučení potlačení ureázy.ŕ
Description
Vynález se týká způsobu přípravy klavamů fermentací mikroorganismu produkujícího klavam ve vhodném médiu.
Dosavadní stav techniky
Mikroorganismy, zejména Streptomyces sp. produkují mnoho antibiotik, zahrnujících klavulanovou a jiné klavamy, cefalosporiny a peniciliny.
Kyselina klavulanová je důležitým inhibitorem beta-laktamázy, který je klíčovou složkou antibiotika dostupného na trhu pod názvem AUGMENIIN (ochranná známka SmithKline Beecham plc.). Komerční způsob, kterým je kyselina klavulanová produkována, je přes fermentaci Streptomyces clavuligerus. Vhodné fermentační médium pro produkci kyseliny klavulanové je popsáno v UK patentovém popisu č. 1 508 977.
I když kyselina klavulanová a jiné klavamy mohou být připraveny v přijatelných množstvích existujícími metodami, zbývá zde stále potřeba zlepšení titru klavulanové kyseliny, ve fermentační břečce proto, aby produkt mohl být vyráběn ekonomičtěji. Jednou cestou jak směrovat tento problém je hledání mutantních kmenů Streptomyces clavuligerus ATCC 27064 nebo jiných mikroorganismů produkujících kyselinu klavulanovou, které poskytují vyšší titr. Do současnosti bylo publikováno relativně málo prací, týkajících se zlepšení způsobu, kde by bylo možno dosáhnout vyššího titru kyseliny klavulanové pomocí měnících se podmínek ve fermentoru.
Je obvyklé zahrnout amoniak jako zdroj dusíku, protože nastavení vstupu dusíku do fermentace je podstatné pro výtěžek kyseliny klavulanové. Nicméně bylo zjištěno, že fermentační metody produkce kyseliny klavulanové jsou zvlášť citlivé na koncentraci amoniaku v systému.
Podstata vynálezu
Předmětem tohoto vynálezu je způsob přípravy klavamů fermentací mikroorganismy produkujícího klavam ve vhodném médiu, jehož podstata spočívá v tom, že podmínky ve fermentoru jsou takové, že hladiny amoniaku jsou udržovány nízké během fermentace za účelem vyloučení potlačení ureázy.
Podle výhodného provedení vynálezu hladiny amoniaku jsou menší než asi 50 pg/ml.
Předmětem tohoto vynálezu je způsob přípravy klavamů fermentací mikroorganismu produkujícího klavam ve vhodném médiu, jehož podstata spočívá v tom, že močovina produkovaná během fermentačního procesuje přinucena reagovat s enzymem ureázou.
Podle výhodného provedení vynálezu ureáza je vnější, to znamená přidaná k fermentaci.
Výhodné provedení tohoto vynálezu spočívá v tom, že se při způsobu upraví hodnota pH při fermentaci jakoukoliv vhodnou bází jinou amoniak. Zvláště výhodné je, pokud bází je hydroxid sodný.
Podle jiného výhodného provedení způsobu poté, co se objeví deprese a je exprimována ureáza, pH se pak řídí amoniakem k zajištění dostatečného dodávání dusíku.
-1 CZ 292673 B6
Při výhodném provedení vynálezu amoniak se získává z komplexního zdroje dusíku.
Výhodné provedení způsobu spočívá v tom, že se do fermentace přidává sloučenina, která přímo nebo nepřímo ovlivňuje koncentraci amoniaku nebo močoviny ve fermentaci nebo zvyšuje expresi ureázy. Zvláště výhodné je, pokud sloučeninou je sloučenina adsorbující amoniak nebo srážející sloučenina.
Předmětem tohoto vynálezu je způsob přípravy klavamů fermentaci mikroorganismu produkujícího klavam ve vhodném médium, jehož podstata spočívá v tom, že geneticky manipulovaný zlepšený kmen mikroorganismu produkuje vyšší hladiny vnitřní ureázy.
Předmětem tohoto vynálezu také je způsob přípravy klavamů fermentaci mikroorganismu produkujícího klavam ve vhodném médiu, jehož podstata spočívá v tom, že mikroorganismus je podstatný pro expresi ureázy.
Podle výhodného provedení způsobu klavamem je kyselina klavulanová.
Podle jiného výhodného provedení způsobu mikroorganismem je Streptomyces clavuligerus.
Dále se uvádí podrobnější popis tohoto vynálezu.
Kdekoliv v tomto popise se uvádí v souvislosti s provedením nárokovaného způsobu výraz organismus, vždy tím je míněn mikroorganismus.
Podle předloženého vynálezu je tedy poskytnut způsob přípravy klavamů fermentaci klavam-produkujícího mikroorganismu ve vhodném médiu, při kterém množství amoniaku ve fermentaci je udržováno na nízké hladině během fermentace za účelem vyloučení potlačení (represe) jednoho nebo více klíčových enzymů amoniakem.
Nízkou hladinou je míněno asi 50 pg/ml. Hladina amoniaku by měla být udržována pod 50 pg/ml po dostatečnou dobu, vhodně mezi 1 a 10 hodinami, aby se umožnila, dereprese a biosyntéza klíčových enzymů potlačitelných amoniakem. Za běžných fermentačních podmínek (s hladinou amoniaku přesahující 100 pg/ml) bylo zjištěno, že amoniak působí potlačení mnoha enzymů zahrnutých v metabolismu dusíku včetně ureázy, která katalyzuje konverzi močoviny na amoniak a oxid uhličitý (viz V. Bascaran a spol., J. Gen. Microbiol. 1989, sv.135, str. 2465 až 2474). Nicméně pozdější studie nebyly spojeny s antibiotickým titrem a neposkytují náznak jakéhokoliv spojení se zlepšením produkce klavamů nebo klavulanové kyseliny.
S překvapením bylo zjištěno v pracech, které vedly až k předloženému vynálezu, že se močovina akumuluje ve fermentačních půdách klavulanové kyseliny. Močovina je produkována z klavulanového biosyntetického procesu, ale stejně tak mohou existovat jiné zdroje této močoviny.
Nyní bylo nalezeno v souladu s dalším aspektem předloženého vynálezu, že je-li močovina, která se vytváří během produkuje kyseliny klavulanové, přinucena reagovat s enzymem ureázou, jsou titry kyseliny klavulanové výrazně zlepšeny, například řádově o 10 %.
V souladu s tím je dalším aspektem vynálezu poskytují způsobu přípravy klavamů fermentaci klavam produkujícího mikroorganismu ve vhodném médiu, vyznačujícího se tím, že močovina produkovaná během fermentačního procesuje přinucena reagovat s enzymem ureázou.
Ureáza může být buď vnitřní (endogenní) nebo vnější (exogenní), to znamená buď je produkována mikroorganismem, produkujícím kyselinu klavulanovou (vnitřní ureáza) nebo je přidávána k systému (vnější ureáza).
>
t
Je-li žádoucí používat vnější ureázu, může být enzym získán z jakéhokoli vhodného zdroje a přidán k fermentační reakci. Je-li ureáza vnitřní, může podle jednoho z aspektů vynálezu, být uvolněna derepresí exprese ureázy mikroorganismem, produkujícím kyselinu klavulanovou.
Taková dereprese může být způsobena, například, úpravou pH jakoukoliv vhodnou bází jinou než amoniak. V tomto způsobu je koncentrace amoniaku ve fermentaci výhodně snížena až do objevení se dereprese. Taková dereprese může být sledována studováním změn v profilu pH reakčního média (viz příklady dále).
Ve výše uvedeném způsobu může být pH kontrolním činidlem jakákoliv vhodná báze jiná než amoniak, například hydroxidy alkalických kovů jako je hydroxid sodný. Jakmile se objeví dereprese a ureáza začne být exprimována, je výhodné kontrolovat pH obvyklým způsobem za účelem zajištění dostatečného přívodu dusíku. Popřípadě však může být jiná látka, regulující pH než amoniak, použita v průběhu celé fermentace.
Amoniak je obecně preferován jako živina v typické fermentaci, protože má dvojí účel-reguluje pH a zavádí do fermentace dusík. Působí také jako iontové vyrovnání klavulanátové akumulace. I když je výhodou dosáhnout dereprese amoniak represibilními enzymy, může jí být dosaženo použitím alternativního regulantu pH během části fermentace, je jí možno dosáhnout použitím alternativního regulantu pH a pak zavedením požadovaného dusíku do fermentace ve vsázce nebo napájením solí amoniaku.
V dalším způsobu dereprese ureázy může být úprava provedena množstvím komplexu zdroje dusíku vsazeného nebo napájeného do fermentace. Amoniak uvolněný deaminací komplexu zdroje dusíku bude potlačovat ureázu. Proto úprava množství zahrnutého ve fermentaci nebo jeho uvolňovací charakteristiky budou ovlivňovat derepresi ureázy.
Další způsob zvýšení titru klavulanové kyseliny je přidání k fermentační reakci jakéhokoli vhodné sloučeniny, která přímo nebo nepřímo ovlivňuje koncentraci amoniaku nebo močoviny ve fermentaci.
Jedním ze způsobů, jak tohoto dosáhnout, je přidání sloučeniny jako je zeolit, schopné adsorbovat a tak snižovat jako koncentraci, λ/hodná amoniak adsorbující činidla zahrnují ta, která jsou schopna vysrážet amoniak jako komplexní sůl, například jako fosforečnan hořečnatoamonný.
Další cestou jak může být snížena koncentrace močoviny, je přidání sloučeniny, která přímo nebo nepřímo zvyšuje expresi ureázy z organismu, produkujícího kyselinu klavulanovou, k fermentačnímu médiu.
Genetické manipulace nebo způsoby,zlepšující kmen mohou být také použity pro zvýšení hladin vnitřní ureázy produkované mikroogranismem, produkujícím kyselinu klavulanovou. Například zlepšení kmene /např. mutagenezí a následným výběrem specifického média jako jsou ta, která zahrnují methylamonium (Microbial Reviews; 1989; 53, 85-108)/ může být použito pro přípravu mutantního kmene organismu, produkujícího kyselinu klavulanovou, který je podstatný pro expresi ureázy, tj. ureáza není podrobena významné represi za přítomnosti amoniaku. Podobné výsledky mohou být získány při cílené genetické manipulační technice, zahrnující manipulaci ureázového genu tak, že se ovlivní jeho regulace, například vyvoláním souladné exprese s enzymem zahrnutým ve dráze biosyntézy, kyseliny klavulanové.
Výše uvedené metody mají tu výhodu, že podstatně zvyšují titr klavulanové kyseliny, kterého může být dosaženo. Kyselina klavulanová může být oddělena a čištěna standardními technikami.
Následující příklady ilustrují vynález. V případech, pokud není uvedeno jinak, jsou použité metody a standardní techniky ty, které jsou uvedeny v práci Sambrooka a spol. (1989) Molecular Cloning: A Laboratory Manual, 2. vydání.
-3 CZ 292673 B6
Příklady provedení vynálezu
Příklad 1
Vliv úpravy pH regulantem na titr kyseliny klavulanové
Ve fermentaci Streptomyces v 100 litrovém měřítku (5 % očkovacího fermentačního inokula, protein sójové moučky mezi 20 a 60 g/1, dextrin mezi 1 až 3 %, rostlinný olej 1 až 5 % plus koktejl stopových prvků s pH udržovaným na 6,8) byl výstup kyseliny klavulanové zlepšen o 8 % úpravou pH regulantem.
Jestliže se použije 2,5N NaOH místo amoniaku pro udržování pH na 6,8 na počátku fermentace jsou pozorovány dva píky vpH profilu. První odpovídá deaminaci sójového proteinu, která uvolňuje amoniak a zvyšuje tak pH. Druhý je způsobem derepresí ureázy, která také uvolňuje amoniak. Poté, co je pozorován druhý pík (toto může být potvrzeno detekcí močoviny kolorimetrickým způsobem) je pH regulant převeden na amoniak pro zajištění dostatečného dodávání dusíku do reakčního média.
Příklad 2
Příprava organismů podstatných pro ureázu
Mohou být produkovány mutagenizované kmeny S.clavuligerus, které podstatně exprimují ureázu. Sporu, které byly podrobeny mutagenu (jako je UV záření nebo vystavení nitrosoguanidinu) se umístí na agarovou plotnu, obsahující methylamonium a močovinu. V agaru je močovina jediným zdrojem uhlíku a dusíku. Methylamonium nemůže být metabolizováno, aleje rozpoznáno organismem jako amoniak a proto má represivní vliv na expresi ureázy.
Mutantní spory schopné růst na tomto médiu mohou být vybrány a shledány jako exprimující ureázu podstatným způsobem ve fermentaci a poskytující vynikající výstup kyseliny klavulanové.
Claims (14)
- PATENTOVÉ NÁROKY1. Způsob přípravy klavamů fermentaci mikroorganismu produkujícího klavam ve vhodném médiu, vyznačující se tím, že podmínky ve fermentoru jsou takové, že hladiny amoniaku jsou udržovány nízké během fermentace za účelem vyloučení potlačení ureázy.
- 2. Způsob podle nároku 1, vyznačující se tím, že hladiny amoniaku jsou menší než asi 50 gg/ml.
- 3. Způsob přípravy klavamů fermentaci mikroorganismu produkujícího klavam ve vhodném médiu, vyznačující se tím, že močovina produkovaná během fermentačního procesu se nechá reagovat s enzymem ureázou.
- 4. Způsob podle nároku 3, vyznačující se tím, že ureáza je vnější, to znamená přidaná k fermentaci.-4CZ 292673 B6 i
- 5. Způsob podle nároku 1, vyznačující se tím, že hodnota pH při fermentaci se upraví jakoukoliv vhodnou bází jinou než amoniak.
- 6. Způsob podle nároku 5, vyznačující se tím, že bází je hydroxid sodný.
- 7. Způsob podle nároku 5 nebo 6, vyznačující se tím, že poté, co se objeví dereprese a je exprimována ureáza, pH se pak řídí amoniakem k zajištění dostatečného dodávání dusíku.
- 8. Způsob podle nároku 1, vyznačující se tím, že amoniak se získává z komplexního zdroje dusíku.
- 9. Způsob podle nároku 1 nebo 2, vyznačující se tím, že do fermentace se přidává sloučenina, která přímo nebo nepřímo ovlivňuje koncentraci amoniaku nebo močoviny ve fermentaci nebo zvyšuje expresi ureázy.
- 10. Způsob podle nároku9, vyznačující se tím, že sloučeninou je amoniak adsorbující sloučenina nebo srážející sloučenina.
- 11. Způsob přípravy klavamů fermentaci mikroorganismu produkujícího klavam ve vhodném médiu, vyznačující se tím, že užívá geneticky manipulovaný zlepšený kmen mikroorganismu produkující hladiny vnitřní ureázy.
- 12. Způsob přípravy klavamů fermentaci mikroorganismu produkujícího klavam ve vhodném médiu, vyznačující se tím, že se užívá mikroorganismus podstatný pro expresi ureázy.
- 13. Způsob podle kteréhokoliv z předcházejících nároků, vyznačující se tím, že klavamem je kyselina klavulanová.
- 14. Způsob podle kteréhokoliv z předcházejících nároků, vyznačující se tím, že mikroorganismem je Streptomyces clavuligerus.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| GBGB9424950.5A GB9424950D0 (en) | 1994-12-10 | 1994-12-10 | Novel process |
| PCT/EP1995/004888 WO1996018743A1 (en) | 1994-12-10 | 1995-12-07 | Process for the fermentative preparation of clavam derivatives whereby the levels of ammonia and urea in the fermentation medium are kept low |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CZ177197A3 CZ177197A3 (en) | 1997-09-17 |
| CZ292673B6 true CZ292673B6 (cs) | 2003-11-12 |
Family
ID=10765725
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CZ19971771A CZ292673B6 (cs) | 1994-12-10 | 1995-12-07 | Způsob přípravy klavamů |
Country Status (21)
| Country | Link |
|---|---|
| US (2) | US5985624A (cs) |
| EP (1) | EP0796340B1 (cs) |
| JP (1) | JP3916251B2 (cs) |
| KR (1) | KR100411839B1 (cs) |
| CN (1) | CN1119423C (cs) |
| AT (1) | ATE233322T1 (cs) |
| AU (1) | AU702660B2 (cs) |
| BR (1) | BR9509878A (cs) |
| CA (1) | CA2207411A1 (cs) |
| CZ (1) | CZ292673B6 (cs) |
| DE (1) | DE69529765T2 (cs) |
| DK (1) | DK0796340T3 (cs) |
| ES (1) | ES2193207T3 (cs) |
| FI (1) | FI972446A0 (cs) |
| GB (1) | GB9424950D0 (cs) |
| HU (1) | HU221755B1 (cs) |
| MX (1) | MX9704279A (cs) |
| NO (1) | NO319278B1 (cs) |
| NZ (1) | NZ298035A (cs) |
| PL (1) | PL184403B1 (cs) |
| WO (1) | WO1996018743A1 (cs) |
Families Citing this family (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| AR015825A1 (es) * | 1997-05-28 | 2001-05-30 | Gist Brocades Bv | Produccion fermentativa de acido clavulanico bajo condiciones controladas de fosfato |
| US6440708B1 (en) | 1998-09-29 | 2002-08-27 | Dsm N.V. | Fermentation of clavulanic acid at a controlled level of ammonia |
| EP1117820A1 (en) * | 1998-09-29 | 2001-07-25 | Dsm N.V. | Fermentation of clavulanic acid at a controlled level of ammonia |
| JP2003304893A (ja) * | 2002-04-16 | 2003-10-28 | Sumitomo Heavy Ind Ltd | 有機酸の製造方法及び製造装置並びに有機酸の保存方法 |
| US7790231B2 (en) * | 2003-07-10 | 2010-09-07 | Brewer Science Inc. | Automated process and apparatus for planarization of topographical surfaces |
Family Cites Families (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| GB1508977A (en) * | 1974-04-20 | 1978-04-26 | Beecham Group Ltd | Beta-lactam antibiotic from streptomyces clavuligerus |
| US4110165A (en) * | 1974-04-20 | 1978-08-29 | Beecham Group Limited | Process for the production of clavulanic acid |
| US5100635A (en) * | 1990-07-31 | 1992-03-31 | The Boc Group, Inc. | Carbon dioxide production from combustion exhaust gases with nitrogen and argon by-product recovery |
| ES2130392T3 (es) * | 1992-12-02 | 1999-07-01 | Smithkline Beecham Plc | Procedimiento para la preparacion de acido clavulanico. |
-
1994
- 1994-12-10 GB GBGB9424950.5A patent/GB9424950D0/en active Pending
-
1995
- 1995-12-07 AU AU43432/96A patent/AU702660B2/en not_active Ceased
- 1995-12-07 ES ES95942115T patent/ES2193207T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1995-12-07 AT AT95942115T patent/ATE233322T1/de not_active IP Right Cessation
- 1995-12-07 DK DK95942115T patent/DK0796340T3/da active
- 1995-12-07 US US08/860,043 patent/US5985624A/en not_active Expired - Lifetime
- 1995-12-07 PL PL95320662A patent/PL184403B1/pl not_active IP Right Cessation
- 1995-12-07 EP EP95942115A patent/EP0796340B1/en not_active Revoked
- 1995-12-07 HU HU9702106A patent/HU221755B1/hu not_active IP Right Cessation
- 1995-12-07 CZ CZ19971771A patent/CZ292673B6/cs not_active IP Right Cessation
- 1995-12-07 KR KR1019970703840A patent/KR100411839B1/ko not_active Expired - Fee Related
- 1995-12-07 DE DE69529765T patent/DE69529765T2/de not_active Revoked
- 1995-12-07 CN CN95196726A patent/CN1119423C/zh not_active Expired - Fee Related
- 1995-12-07 NZ NZ298035A patent/NZ298035A/xx unknown
- 1995-12-07 CA CA002207411A patent/CA2207411A1/en not_active Abandoned
- 1995-12-07 FI FI972446A patent/FI972446A0/fi not_active IP Right Cessation
- 1995-12-07 JP JP51825196A patent/JP3916251B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 1995-12-07 BR BR9509878A patent/BR9509878A/pt not_active Application Discontinuation
- 1995-12-07 WO PCT/EP1995/004888 patent/WO1996018743A1/en not_active Ceased
- 1995-12-07 MX MX9704279A patent/MX9704279A/es not_active IP Right Cessation
-
1997
- 1997-06-09 NO NO19972647A patent/NO319278B1/no unknown
-
1999
- 1999-09-29 US US09/408,340 patent/US6235506B1/en not_active Expired - Fee Related
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CA2207411A1 (en) | 1996-06-20 |
| DE69529765T2 (de) | 2003-10-16 |
| JPH10510426A (ja) | 1998-10-13 |
| DE69529765D1 (de) | 2003-04-03 |
| US6235506B1 (en) | 2001-05-22 |
| PL320662A1 (en) | 1997-10-13 |
| CN1169162A (zh) | 1997-12-31 |
| EP0796340A1 (en) | 1997-09-24 |
| NO972647D0 (no) | 1997-06-09 |
| FI972446L (fi) | 1997-06-09 |
| GB9424950D0 (en) | 1995-02-08 |
| US5985624A (en) | 1999-11-16 |
| CZ177197A3 (en) | 1997-09-17 |
| CN1119423C (zh) | 2003-08-27 |
| ES2193207T3 (es) | 2003-11-01 |
| JP3916251B2 (ja) | 2007-05-16 |
| FI972446A7 (fi) | 1997-06-09 |
| NO972647L (no) | 1997-06-09 |
| NO319278B1 (no) | 2005-07-11 |
| EP0796340B1 (en) | 2003-02-26 |
| AU702660B2 (en) | 1999-02-25 |
| FI972446A0 (fi) | 1997-06-09 |
| KR100411839B1 (ko) | 2004-02-18 |
| ATE233322T1 (de) | 2003-03-15 |
| DK0796340T3 (da) | 2003-05-05 |
| PL184403B1 (pl) | 2002-10-31 |
| WO1996018743A1 (en) | 1996-06-20 |
| BR9509878A (pt) | 1997-11-25 |
| NZ298035A (en) | 1999-01-28 |
| HUT77082A (hu) | 1998-03-02 |
| MX9704279A (es) | 1997-09-30 |
| AU4343296A (en) | 1996-07-03 |
| HU221755B1 (hu) | 2002-12-28 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Shapiro | Nitrogen assimilation in actinomycetes and the influence of nitrogen nutrition on actinomycete secondary metabolism | |
| JP3036930B2 (ja) | 発酵法によるｌ−イソロイシンの製造法 | |
| JP3151073B2 (ja) | 発酵法によるアミノ酸の製造法 | |
| RU2230114C2 (ru) | Мутантная глутаминсинтетаза, фрагмент днк, штамм escherichia coli - продуцент l-глутамина и способ получения l-аминокислот | |
| CA2262813A1 (en) | Novel strains of escherichia coli, methods of preparing the same and use thereof in fermentation processes for l-threonine production | |
| US6365381B2 (en) | Method for producing optically active compound | |
| JPH01317395A (ja) | アミノ酸の製造法 | |
| US4495283A (en) | Process for producing L-histidine by fermentation | |
| CZ292673B6 (cs) | Způsob přípravy klavamů | |
| EP0745679B1 (en) | A method for producing L-isoleucine with a fermentation process and L-homoserine as the sole nitrogen source | |
| Fernandez et al. | Stimulatory effect of growth in the presence of alcohols on biotransformation of penicillin G into cephalosporin-type antibiotics by resting cells of Streptomyces clavuligerus NP1 | |
| JPS6368091A (ja) | アミノ酸の製造法 | |
| US4601982A (en) | Method for producing L-tryptophan by fermentation with a brevibacterium flavum mutant | |
| WO2016056773A2 (ko) | L-글루타민을 생산하는 미생물 및 이를 이용한 l-글루타민 생산방법 | |
| US3880741A (en) | Method of producing L-serine | |
| US6277609B1 (en) | Method to produce biotin | |
| US4560652A (en) | Process for producing L-tryptophan by fermentation | |
| KR830001259B1 (ko) | 미생물에 의한 l-글루타민의 제조방법 | |
| KR100330706B1 (ko) | 5'-이노신산을 생산하는 미생물 및 그를 이용한5'-이노신산의 제조방법 | |
| KR910007822B1 (ko) | 미생물에 의한 l-글루타민의 제조방법 | |
| KR830001258B1 (ko) | 미생물에 의한 l-글루타민의 제조방법 | |
| JPS6324679B2 (cs) | ||
| JPH04271788A (ja) | 発酵法によるｌ−セリンの製造法 | |
| JPH07203982A (ja) | Ｄ−リボースの製造法 | |
| JPS61268175A (ja) | トリプトフアン・シンセタ−ゼ生産菌培養法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PD00 | Pending as of 2000-06-30 in czech republic | ||
| MM4A | Patent lapsed due to non-payment of fee |
Effective date: 20061207 |