CZ297917B6

CZ297917B6 - Zpusob výroby suchých amorfních produktu, amorfnímikroskopicky homogenní produkty a jejich pouzitía pouzití smesi látek ke stabilizaci biologicky aktivního materiálu

Info

Publication number: CZ297917B6
Application number: CZ0348798A
Authority: CZ
Inventors: Gabel@Rolf-Dieter; Mattern@Markus; Winter@Gerhard; Wirl@Alexander; Woog@Heinrich
Original assignee: Roche Diagnostics Gmbh
Priority date: 1997-11-03
Filing date: 1998-10-30
Publication date: 2007-04-25
Also published as: PL196456B1; CA2253154C; ZA9810002B; JPH11228389A; TR199802204A2; SA99191068B1; TR199802204A3; ID21204A; KR19990044951A; HUP9802516A3; CA2253154A1; SG66499A1; KR100629378B1; BR9804739A; NO985096D0; MA26561A1; HRP980575A2; US6689755B1; CN1222403A; AR015998A1

Abstract

Zpusob výroby suchých amorfních produktu, které vedle biologicky aktivního materiálu obsahují smesilátek pro stabilizaci. Pripraví se roztok nebo suspenze biologického materiálu a smesi látek sestávající ze a) sacharidu a alespon jednoho obojetnéhoiontu s polární nebo nepolární skupinou nebo jehoderivátu a/nebo b) alespon dvou obojetných iontu s polárními nebo nepolárními skupinami nebo jejichderivátu a/nebo c) alespon jednoho obojetného iontu s polární nebo s nepolární skupinou nebo nekolika obojetných iontu s polárními nebo nepolárními skupinami nebo jejich derivátu a ten se susí konvekcním susením pri vstupní teplote od 100 do 180 .degree.C za pouzití specifické technologie susení s nastavením relativního obsahu vlhkosti ve stacionární fázi pod 70 %. Amorfní mikroskopicky homogenníprodukty s teplotou prechodu do skelného stavu .>=. 20 .degree.C a se zbytkovým obsahem vlhkosti < 8 % (g/g) pripravené tímto zpusobem a jejich pouzití k výrobe diagnostických a terapeutických prostredku. Pouzití smesi látek ke stabilizaci biologicky aktivního materiálu.

Description

Způsob výroby suchých amorfních produktů, amorfní mikroskopicky homogenní produkty a jejich použití a použití směsi látek ke stabilizaci biologicky aktivního materiálu (57) Anotace:

Způsob výroby suchých amorfních produktů, které vedle biologicky aktivního materiálu obsahují směsi látek pro stabilizaci. Připraví se roztok nebo suspenze biologického materiálu a směsi látek sestávající ze a) sacharidu a alespoň jednoho obojetného iontu s polární nebo nepolární skupinou nebo jeho derivátu a/nebo b) alespoň dvou obojetných iontů s polárními nebo nepolárními skupinami nebo jejich derivátů a/nebo c) alespoň jednoho obojetného iontu s polární nebo s nepolární skupinou nebo několika obojetných iontů s polárními nebo nepolárními skupinami nebo jejich derivátů a ten se suší konvekčním sušením při vstupní teplotě od 100 do 180 °C za použití specifické technologie sušení s nastavením relativního obsahu vlhkosti ve stacionární fázi pod 70 %. Amorfní mikroskopicky homogenní produkty s teplotou přechodu do skelného stavu > 20 °C a se zbytkovým obsahem vlhkosti < 8 % (g/g) připravené tímto způsobem a jejich použití k výrobě diagnostických a terapeutických prostředků. Použití směsi látek ke stabilizaci biologicky aktivního materiálu.

O

Z 297917 B6

Způsob výroby suchých amorfních produktů, amorfní mikroskopicky homogenní produkty a jejich použití a použití směsi látek ke stabilizaci biologicky aktivního materiálu

Oblast techniky

Vynález se týká rychlého a snadno reprodukovatelného způsobu výroby suchých, amorfních produktů, které jsou biologicky aktivním a zvláště terapeuticky aktivním materiálem a obsahují směsi látek ke stabilizaci konvekčním sušením. Vynález se také týká amorfních, mikroskopicky homogenních produktů, získaných tímto způsobem, jež jsou ve formě prášků a mají rovnoměrný geometrický, zejména kulový tvar. Vynález se dále týká použití směsí látek ke stabilizaci biologicky aktivního materiálu, zejména proteinů pro rozprašovacím sušení.

Dosavadní stav techniky

Je dobře známo, že proteiny, obzvláště lidské proteiny, mohou být stabilizovány velkým počtem látek, zejména cukry nebo kombinací cukrů a aminokyselin.

Bylo popsáno mnoho různých postupů a formací k výrobě suchých, biologicky a terapeuticky aktivních materiálů. Pod pojmem suchý materiál se míní látky a směsi látek, které mají zbytkový hmotnostní obsah vlhkosti nepřesahující 8 % (g/g), s výhodou nepřesahující 4 % (g/g), obzvlášť nepřesahující 2 %. K výrobě takových formulací se v široké míře používá sušení vymrazování (F. Franks, Cryo, Lett. 11, str. 93 až 100, 1990; M. J. Pikal Biopharm. 3 (9), str. 26 až 30; 1990; M. Ilora, Pharm. Research 8 (3), str. 285 až 291, 1992); F. Franks. Jap. J. Freezing Drying 38, 15 až 16, 1992), které však má nedostatky specifické pro vymrazovací sušení. Způsoby vymrazovacího sušení spotřebují velké množství energie, některé z nich jsou škodlivé vůči životnímu prostředí (chladivá) ajsou časově náročné a často je nutné odstranit velké množství ledu sublimací. Zmrazovací operace pro sušení vymrazováním může být destabilizující pro velký počet látek, zejména pro proteiny. Tento způsob je proto nepoužitelný pro všechny nebo alespoň některé biologické materiály.

Alternativou sušení vymrazováním pro výrobu proteinových prostředků jsou způsoby, při kterých se materiál suší teplem a/nebo vakuem. (F. Franks, R.M.H. Hatley: Stability adn Stabilization of Enzymes, vydavatelé W.J.J. von den Telí, A. Harder, R.M. Butllar, Elsevier Sci. Publ., str. 45 až 54, 1993; B. Roser, Biopharm., 4 (9) str. 47 až 53, 1991; J. F. Carpenter, J. H. Crowe, Cryobiol. 25, str. 459 až 470, 1988). V této souvislosti lze jmenovat vakuové sušení s použitím nebo bez použití zvýšených teplot, různé varianty rozprašovacího sušení, včetně kombinovaného použití vakuové a rozprašovací techniky a bubnové sušení a jiné způsoby sušení v tenké vrstvě.

Prostředky, které obsahují cukry nebo cukrům podobné látky jsou známy (J.F. Carpenter, J.H. Crowe, Biochemistry 28, str. 3916 až 3922, 1989); K. Tanaka, T. Taluda, K. Miyajima, Chem. Pharm. Bull, 39 (5), str. 10 až 94, 1991; patentové spisy DE 35 20 228, EP 0 229 810, WO 91/18 091, EP 0 383 569 a US 5 290 765). Avšak výroba suchých prostředků obsahujících uhlohydráty vymrazovacím nebo vakuovým sušením, zejména cukrových prostředků, je spojena podle stavu techniky s nevýhodami. Mezi ně patří kromě jiných, vysoká spotřeba energie na sušení do přijatelného obsahu zbytkové vlhkosti, dlouhé zpracovací doby při nízkých teplotách sušení, vytváření viskózních, vodu obsahujících hmot (nazývaných „guma“) nebo skelných tavenin, jejichž teploty do skelného stavu jsou blízké teplotám místnosti. Popsané nevýhody významně ovlivňují stabilitu biologických materiálů v takových prostředcích.

Z citované literatury rovněž vyplývá, že prostředky, vhodné ke stabilizaci proteinu, mají mít sklovitou, tedy amorfní, strukturu, jejíž teplota přechodu do skelného stavu je nad zamýšlenou teplotou skladování. Teplota přechodu do skelného stavu (Tg) je teplotou, při které amorfní nebo částečně krystalická pevná látka se mění ze sklovité stavu do kapalného stavu a naopak. To vyvolává drastické změny ve viskozitě a společně s tím v součiniteli difúze a v kinetické pohybli

- 1 CZ 297917 B6 vosti biologického stavu. Fyzikální vlastnosti, jako tvrdost a modul pružnosti se mění, jelikož jsou termodynamickými funkcemi objemu, entalpie a entropie. Teplota přechodu do skelného stavu, například prostředku obsahujícího cukr, ajejí zbytkový obsah vlhkosti jsou fyzikálně spolu svázány tak, že zvýšené množství zbytkové vody vede ke snížení teploty přechodu do skelného stavu a naopak. Je tedy možno usuzovat z měření teploty přechodu do skelného stavu, například diferenční řádkovou kalorimetrií (DSC), zda prostředek má zbytkový obsah vody vhodný pro stabilizaci, nebo, jak shora uvedeno, je sušicí proces úspěšný nebo nikoli. Vedle stanovení teploty přechodu do skelného stavu pomocí DSC, může se také prokázat přítomnost amorfní struktury rentgenovou difrakcí, elektronovou nebo světelnou mikroskopií.

Je proto žádoucí nalézt pomocné látky plně amorfní struktury pro biologicky nebo farmaceuticky účinné materiály, aby zahuštěné biologické materiály zůstávaly stabilní při teplotě místnosti i po dlouhou dobu skladování. Struktury pomocných látek mají mít nízký obsah vlhkosti, který lze záměrně nastavit a mají mít co možná nejvyšší teplotu přechodu do skelného stavu.

Patentový spis WO 97/15 288 popisuje proces stabilizování biologických materiálů sušením bez vymrazování, kterým se získávají částečně amorfní struktury pomocných látek. Sušení je vakuové (za mírně zvýšených teplot nižších než 50 °C), získají se však nehomogenní produkty.

Patentový spis WO 96/32 096 popisuje výrobu homogenního dispergovatelného prášku, který obsahuje lidský protein, uhlohydráty a/nebo aminokyseliny a jiné pomocné látky, k inhalaci pomocí rozprašovacího sušení. Ukázalo se však, že amorfní produkty se nezískají žádným z uvedených postupů.

Patentový spis číslo EP 0 682 944 Al popisuje lyofilizáty s farmaceuticky přijatelnými pomocnými látkami, obsahujícími fázi s proteinem v amorfním mannitolu a druhou fázi s krystalickým alaninem. Tyto formulace však nemohou dostatečně dobře po delší období stabilizovat biologické materiály.

Vynález je založen na vývoji šetrného, pohotového, snadno reprodukovatelného, rychlého a ekonomického způsobu sušení pro zapouštění biologických materiálů, obzvláště lidských proteinů a na nalezení stabilizujících matric vhodný k tomuto způsobu. Záměrem je umožnit tímto způsobem vyrábět plně amorfní a homogenní produkty, které umožní stabilizaci biologických materiálů na dlouhou dobu.

Vynález se týká účinného způsobu výroby amorfních prostředků obsahujících biologické materiály konvekčním sušením, zejména rozprašovacím sušením a směsí, používaných při tomto způsobu.

Podstata vynálezu

Předmětem vynálezu je způsob výroby suchých amorfních produktů, které vedle biologicky aktivního materiálu, zejména terapeuticky účinného materiálu, obsahují směsi látek pro stabilizaci, jehož podstata spočívá v tom, že se připraví roztok nebo suspenze biologického materiálu a směsi látek sestávající ze

a) sacharidu a alespoň jednoho obojetného iontu s polární nebo nepolární skupinou nebo jeho derivátu a/nebo

b) alespoň dvou obojetných iontů s polárními nebo nepolárními skupinami nebo jejich derivátů a/nebo

c) alespoň jednoho obojetného iontu s polární nebo s nepolární skupinou nebo několika obojetných iontů s polárními nebo nepolárními skupinami nebo jejich derivátů a tento roztok se suší konvekčním sušením při vstupní teplotě od 100 do 180 °C za použití technologie zvolené z rozprašovacího sušení, sušení ve fluidizované vrstvě, sušení ve stoupajícím vzduchu nebo sušení poletováním s nastavením relativního obsahu vlhkosti ve stacionární fázi na

- 2 CZ 297917 B6 hodnotu nižší než 70 %, s výhodou nižší než 40 % a zvláště pak nižší než 20 %. Tento způsob sušení je obzvláště výhodný se zřetelem na stabilitu biologických materiálů v prostředcích a zajišťuje výtěžky vyšší než 90 %.

Jako výhodná lze uvést především tato provedení způsobu podle vynálezu:

- roztok nebo suspenze, připravená podle odstavce (c) se nastaví na hodnotu pH 7,0 až 7,5 před konvekčním sušením;

- jako obojetných iontů s polárními a s nepolárními skupinami se použije aminokarboxylových kyselin;

-jako směsi látek podle odstavce (a) se použije látek ze souboru zahrnujícího monosacharidy, oligosacharidy, polysacharidy, arginin, asparagovou kyselinu, citrullin, glutamovou kyselinu, histidin, lysin, ethylester acetylfenylalaninu, alanin, cystein, glycin, izoleucin, leucin, methionin, fenylalanin, tryptofan, valin a/nebo jejich deriváty;

-jako směsi látek podle odstavce (b) se použije látek ze souboru zahrnujícího arginin, asparagovou kyselinu, citrullin, glutamovou kyselinu, histidin, lysin, ethylester acetylfenylalaninu, alanin, cystein, glycin, izoleucin, leucin, methionin, fenylalanin, tryptofan, valin a/nebo jejich deriváty;

-jako směsi látek podle odstavce (c) se použije směsi obsahující soli obojetných iontů;

- jako směsi látek podle odstavce (c) se použije směsi obsahující soli argininu, asparagové kyseliny, citrullinu, glutamové kyseliny, histidinu, lysinu, ethylesteru acetylfenylalaninu, alaninu, cysteinu, glycinu, izoleucinu, leucinu, methioninu, fenylalaninu, tryptofanu, valinu a/nebo jejich derivátů;

-jako biologického materiálu se použije alespoň jedné látky ze souboru sestávajícího z proteinů, peptidů, glykoproteinů, lipoprotein, enzymů, koenzymů, protilátek, fragmentů protilátek, složek virů, buněk a složek buněk, vakcín, DNA, RNA, biologických terapeutických a diagnostických činidel nebo jejich derivátů;

- do roztoku se přidávají běžné pomocné látky, kterým jsou pufry, povrchově aktivní činidla, antioxidanty, izotonizující činidla a konzervační látky;

- sušení se provádí ve fluidizované vrstvě, ve stoupajícím vzduchu nebo poletováním;

- k sušení se použije rozprašovacího sušení nebo sušení ve fluodizované vrstvě.

Předmětem vynálezu jsou dále také amorfní, mikroskopicky homogenní produkty obsahující biologicky aktivní materiál a směs látek ke stabilizaci, s teplotou přechodu do skleného stavu > 20 °C a se zbytkovým obsahem vlhkosti < 8 % (g/g) připravené výše popsanými způsoby.

Tyto amorfní produkty podle vynálezu mají výhodně

- teplotu přechodu do skelného stavu > 40 °C a zbytkový obsah vlhkosti < 4 % (g/g); a/nebo

- formu prášku s velikostí částic 0,0005 až 1 mm, s výhodou 0,001 až 0,1 mm.

Předmětem vynálezu je dále také použití amorfních produktů podle nároku popsaných výše k výrobě diagnostických a terapeutických prostředků.

Předmětem vynálezu je dále také použití směsi látek sestávající ze

c) alespoň jednoho obojetného iontu s polární nebo s nepolární skupinou nebo několika obojetných iontů s polárními nebo nepolárními skupinami nebo jejich derivátů

- 3 CZ 297917 B6 ke stabilizaci biologicky aktivního, zejména terapeuticky aktivního materiálu konvekčním sušením při vstupní teplotě od 100 do 180 °C za použití technologie zvolené z rozprašovacího sušení, sušení ve fluidizované vrstvě, sušení ve stoupajícím vzduchu nebo sušení poletováním s nastavením relativního obsahu vlhkosti ve stacionární fázi na hodnotu nižší než 70 %.

Rozprašovacím sušením za podmínek podle vynálezu je možno modifikovat sacharidy, aminokyseliny nebo jejich deriváty, které se obtížně suší tak, že se mohou sušit, nebo se mohou uhlohydráty, aminokyseliny nebo jejich deriváty mísit s látkou nebo se směsí látek, které zvyšují teplotu přechodu do skelného stavu Tg, takže sušení je možné a výsledná pomocná látka má amorfní strukturu a vynikajícím způsobem se hodí k ukládání biologických materiálů. Sušení ve vakuu porovnatelných formulací má za následek nižší teploty přechodu do skelného stavu.

Zjistilo se, že v případě sacharidů, zejména cukrů, jako je například sacharóza a fruktóza, které skutečně vytvářejí amorfní struktury po rozprášení vodných nebo organických roztoků do horkého vzduchu, mají však nízké teploty přechodu do skelného stavu (nižší než 20 °C) a jejich výtěžky jsou proto při sušení extrémně ekonomicky nevýhodné a mají malou stálost při skladování, zejména se zřetelem na podrží amorfních struktur, se přísadou obojetných iontů nebo jejich derivátů Tg zvýší natolik (o 20 nebo více °C), že mohou být sušeny s dobrým výtěžkem a amorfní struktura sacharidů nebo formulace jako celku zůstane zachována nebo stabilizována.

Dále se s překvapením ukázalo, že je možno přísadou obojetných iontů nebo jejich derivátů získat sacharidy, jako je například mannitol, o rozprášení vodného nebo organického roztoku do horkého vzduchu v amorfní struktuře potřebné ke stabilizaci biologických materiálů. Současně se dosahuje dobrých výtěžků. Tento výsledek je překvapující, jelikož je-li způsob prováděn bez přísady obojetných iontů, nezískají se žádné amorfní struktury.

Na druhé straně se zjistilo, že i obojetné ionty nebo jejich deriváty, které, ačkoli mohou být sušeny po rozprašování vodných nebo organických roztok do horkého vzduchu, se nezískají v amorfní formě, přičemž se získají v plně amorfní formě po přidání sacharidů nebo jejich derivátů.

Amorfní struktury se také získají, jestliže obojetné ionty nebo jejich deriváty, které, ačkoli mohou být sušeny po rozprášení vodných nebo organických roztoků do horkého vzduchu, se žních nezískají v plně amorfní formě, mohou být však převedeny vhodnými příměsemi jednoho nebo několika obojetných iontů na plně amorfní formu. K vyrobení amorfní struktury je nutno pouze zvolit kombinaci obojetných iontů s polárními a apolámími skupinami; naopak je také možno použít kombinací obojetných iontů s pouze polárními nebo apolámími skupinami.

Dále se ukázalo, že jeden nebo několik obojetných iontů s polárními nebo s nepolárními skupinami nebo s jejich deriváty, které jakkoliv vysušeny rozprášením, se nezískají v amorfní formě, mohou být přeměněny specifickým nastavením hodnoty pH roztoku nebo suspenze, s výhodou na hodnotu pH 7,0 až 7,5 před konvekčním sušením na amorfní stav. Specifické nastavení hodnoty pH roztoku před rozprašovacím sušením může být také cenné v případech, (varianty podle odstavce (a) a (b)), kdy ačkoli se získají amorfní struktury, je třeba stabilitu proteinu v amorfní struktuře dále zlepšit, nebo se musí dále zvýšit amorfní struktura rozprášených produktů. Takové nastavení hodnoty pH může být také nutné z fyziologického hlediska.

Pracovník v oborou může vhodnou kombinací uvedených variant dále významně zvýšit již dosažené výsledky. Vynález mu může napomoci k volbě obojetných iontů s polárními nebo nepolárními skupinami tak, že vysušená směs látek má zvýšenou teplotu přechodu do skelného stavu a/nebo amorfní strukturu ve srovnání se směsemi látek bez odpovídající přísady.

Produkty získané způsobem podle vynálezu jsou amorfní a mikroskopicky homogenní prášky s velikostí částic 0,0005 mm až 1 mm, s výhodou 0,001 až 0,1 mm. Způsob podle vynálezu umožňuje s výhodou získávat kulové částice v rozsahu velikosti, který lze nastavit a může být

- 4 CZ 297917 B6 překvapivě dobře reprodukován. Výsledné produkty mají teplotu přechodu do skelného stavu > 20 °C, s výhodou > 40 °C a obsah zbytkové vlhkosti < 8 % (g/g), s výhodou < 4 % (g/g). Amorfní struktura je nadále udržována po dobu skladování přesahující 12 měsíců. V porovnání s lyofilizáty mají produkty vyšší zdánlivou hustotu nejméně 1,15 x (o 15 %) než lyofilizáty a v porovnání s produkty sušenými vymrazovacím nebo vakuovým sušením mají podstatně nižší krystalický obsah při stejné formulaci.

Amorfní produkty, které obsahují s výhodou jako biologické materiály proteiny, se podle vynálezu získávají konvekčním sušením, zejména rozprašovacím sušením nebo rozprašovací granulací, přípravou roztoku nebo suspenze biologického materiálu a směsi látek, a provedením konvekčního sušení při teplotě přiváděného vzduchu 50 až 300 °C, s výhodou < 200 °C a ukazuje se, že se relativní obsah vlhkosti ve stacionární fázi musí nastavovat na < 70 %, s výhodou na < 40 % k získání obsahu vlhkosti v hotovém produktu < 4 %. Způsob podle vynálezu tedy umožňuje záměrně nastavovat požadovaný obsah zbytkové vlhkosti ve finálních produktech.

Podle vynálezu se může konvekční sušení realizovat ve fluidizované vrstvě, sušením ve stoupajícím vzduchu nebo poletováním. Rozprašovací sušení nebo sušení ve fluidizované vrstvě je podle vynálezu obzvlášť výhodné.

Při sušení rozprašováním se sušený materiál rozprašuje v podobě roztoku nebo suspenze tryskami nebo rychle se otáčejícím kotoučem atomizéru, čímž vzniká mlhovina kapiček u horního konce široké válcové nádoby. Výsledná mlhovina kapiček se směšuje s horkým vzduchem nebo inertním plynem, který se přivádí kolem atomizační zóny do sušáku. Je-li roztok atomizován za jinak stejných podmínek pomocí dvousložkových trysek nebo kotoučem, ačkoli rozdělení velikosti částic je užší u atomizace kotoučem než při atomizaci tryskami, posouvá se do hrubší oblasti.

Vhodnými rozprašovacími zařízeními jsou tlakové vířivé trysky, pneumatické trysky (dvousložkové, třísložkové trysky) nebo odstředivé rozprašovače. Ačkoli pneumatické trysky vyžadují největší spotřebu energie na rozprášení 1 kg kapaliny, jsou tyto trysky obzvlášť výhodné vzhledem ke své přizpůsobivosti, například k dosažení určitého rozmezí velikosti částic, nebo zvláštního tvaru částic. Způsob se může provádět také za použití techniky třísložkových trysek. Tím je možno rozprašovat dvě kapaliny současně.

Tak jsou umožněny dvě varianty rozprašování:

Varianta 1

Obě tekutiny se připraví odděleně před rozprášením, smísí se a rozpráší. Této varianty se s výhodou používá, když jsou obě složky směsi stabilní jen po krátkou dobu v jedné tekuté fázi.

Varianta 2

Obě tekutiny se připraví odděleně, odděleně se rozpráší a smísí se před vstupem do otvoru trysky. Této varianty lze použít pro dva nemísitelné roztoky nebo tam, kdy stabilita složek je zaručena pouze v pevném stavu.

Obou specifických typů rozprašování bylo použito pro vynález stejně jako klasického dvousložkového rozprašování.

Způsob podle vynálezu je optimální, jestliže teplota vstupního vzduchuje 100 až 180°C. Jelikož existuje nebezpečí rozkladu ukládaného spreje, jestliže se teplota zvýší, nejsou zpravidla výhodné teploty > 200 °C, ačkoli mohou někdy připadat v úvahu pro specifické aplikace. Je překvapující, že stabilita biologického materiálu ve formulacích je velmi dobrá, ačkoli teplota sušení podle vynálezu je s výhodou > 100 °C.

Rozprašování roztoku po sušení vede k přednostně kulovým částicím v nastavitelném a reprodukovatelném rozmezí velikosti částic. Kulový tvar s příznivými vlastnostmi tečení a s příslušným rozmezím velikosti částic jsou přesně to, co je výhodné pro mnohé farmaceutické aplikace.

- 5 CZ 297917 B6

Doba sušení při způsobu podle vynálezu nepřesahuje jednu minutu.

Je také možno podle vynálezu vyrábět granule rozprašováním roztoku biologického materiálu a směsí látek na nosič o velikosti částic 0,010 až 10 mm, s výhodou 0,1 až 1 mm.

Způsobem podle vynálezu lze tudíž, za použití uvedených směsí látek, zlepšit rozhodujícím způsobem sušení prostředků obsahujících sacharidy. Formulace podle vynálezu obsahují jako hlavní složku sacharid, s výhodou cukr, a jeden nebo několik obojetných iontů s polárními nebo s nepolárními skupinami nebo jejich deriváty, s teplotou přechodu do skelného stavu cukru zřetelně zvýšenou přísadou těchto obojetných iontů.

Formulace, ve kterých jsou hlavní složkou obojetné ionty s polárními nebo s nepolárními skupinami nebo jejich deriváty, mohou být převedeny do svých amorfních forem přísadou sacharidů.

Jako alternativy sacharidů je možno použít též obojetných iontů s polárními nebo s nepolárními skupinami nebo jejich deriváty nebo jejich směsi. Tyto formulace mohou obsahovat nejméně dva obojetné ionty nebo jejich deriváty s polárními skupinami, nejméně dva obojetné ionty nebo jejich deriváty s nepolárními skupinami nebo alespoň jeden obojetný iont s polární nebo s nepolární skupinou.

Amorfní a suché formulace lze také získat specifickým nastavením hodnoty pH roztoku obojetných iontů s polárními nebo s nepolárními skupinami nebo jejich derivátů samotných nebo v kombinaci.

Směsi látek, kterých lze podle vynálezu s výhodou použít, sestávají alespoň ze dvou látek, volených ze souboru zahrnujícího cukr, L-arginin, L-fenylalanin, L-asparagovou kyselinu, L-izoleucin ajejich deriváty.

Vedle kompozic uvedených v příkladech se osvědčily jako obzvlášť výhodné směsi jako matrice pro vytváření rozprašovaných produktech podle vynálezu:

směs (formulace) 1:

sacharóza, L-arginin a L-fenylalanin, směs (formulace) 2:

L-arginin, L-asparagová kyselina a L-izoleucin, směs (formulace) 3:

L-artinin a L-fenylalanin, směs (formulace) 4:

L-arginin, L-fenylalanin a L-asparagová kyselina.

Vynález se také týká použití amorfních produktů podle vynálezu pro výrobu diagnostických nebo terapeutických prostředků dalším zpracováním popřípadě s běžnými pomocnými látkami a excipienty.

Vynález objasňují, nijak však neomezují následující příklady praktického provedení. Procenta jsou míněna hmotnostně, pokud není uvedeno jinak.

Příklady provedení vynálezu

Příklad 1

Sacharid a aminokyselina (AA) se rozpustí ve vodě při teplotě místnosti. Nastavení hodnoty pH může být potřebné v závislosti na použitém biologickém materiálu. Tento roztok se pak suší rozprašováním.

- 6 CZ 297917 B6

Z následující tabulky vyplývá, že například sacharóza a glukóza nemohou být sušeny s ekonomicky dobrým výtěžkem, pro nízkou teplotu přechodu do skelného stavu (1.1 a 1.5), zatímco roztok s přísadou AA vede po vysušení kjemnozmnému suchému prášku s dobrým výtěžkem (1.2 až 1.4 a 1.6). Z tabulky dále vyplývá, že sacharidy, jako například mannitol, které po 5 vysušení normálně nevytvářejí amorfní struktury a ekonomicky příznivé výtěžky (1.7), při přidání obojetných iontů nebo jejich derivátů vytvářejí amorfní struktury a vedou k dobrým výtěžkům, jaké jsou nutné ke stabilizaci biologických materiálů (1.8).

Sacharidy s přísadou obojetných iontů s polárními nebo nepolárními skupinami.

Příklad Sacharid mg/ml	Aminokyselina mg/ml	Zbytkový obsah vody %	Teplota přechodu do skelného stavu Krystal.struktura stav agregace
sacharóza	L-arginin
(1.1) 275 sacharóza	0 L-argínin	2,8	<20 *C rtg. amorfní lepkavá hmota
(1.2)* 100 sacharóza	5 L-fenylalanin	2,4	>20 ”C rtg. amorfní prášek
(1.3) 100	5	2,8	>20 *C rtg. amorfní prášek
(1.4) 100 f ruktóza	20 L-fenylalanin	2,5	>20 'C rtg. amorfní prášek
(1.5) 275	0	2,3	<20 “C rtg. amorfmí lepkavá hmota
(1.6) 100 mannitol	5 L-arginin/ L-fenylalanin	4,0	>20 *C rtg. amorfní prášek
(1.7) 55	0	0,4	krystal i cký prášek
(1.8)* 100	10/10	2,5	>20 *C rtg. amorfní prášek

* Hodnota pH nastavena na 7,3 ± 0,2

- 7 CZ 297917 B6

Příklad 2

Aminokyselina a sacharid se rozpustí ve vodě při teplotě místnosti a vysuší se rozprašováním. Z následující tabulky vyplývá, že čistý AA vede ke krystalinické krystalové struktuře (2.1 a 2.4), avšak amorfní struktury se získají přísadou sacharidu (2.2, 2.3 a 2.5).

Obojetné ionty s polámími/nepolámími skupinami při přísadě sacharidů.

Příklad	Aminokyselina mg/ml	Sacharid mg/ml	Zbytkový obsah vody %	Teplota přechodu do skelného stavu Krystal.struktura, stav agregace
	L-arginin	Methy1hydroxypropy1celulóza 2910
(2.1)	55	0	10,2	krystalinický prášek
(2.2)	20 L-arginin	4 Sacharóz a	7,2	>20 *C rtg. amorfní prášek
(2.3)	20 L-feny1alanin	4 Sacharóza	6,4	>20 C rtg. amorfní prášek
(2.4)	55	0	0,4	krystalinický prášek
(2.5)	20	4	4,6	>20 ‘C rtg. amorfní prášek

Příklad 3

Aminokyseliny se rozpustí ve vodě při teplotě místnosti a vysuší se rozprašováním. Z následující tabulky vyplývá, že čistý AA vede ke krystalinické struktuře (3.1 až 3.4), avšak amorfní struktury se získají přísadou druhého AA (3.5 až 3.8). V příkladech 3.9 až 3.11 jsou vyznačeny hodnoty teplot Tg po vakuovém sušení. Hodnoty Tg po vakuovém sušení porovnatelných formulací jsou výrazně pod hodnotami při použití způsobu podle vynálezu.

Obojetné ionty s polámími/nepolámími skupinami při dalším přidání obojetných iontů s polámími/nepolámími skupinami

- 8 CZ 297917 B6

Příklad Aminokyselina Aminomg/ml kyselina mg/ml

Zbytkový obsah vody %

Teplota přechodu do skelného stavu Krystal.struktura, stav agregace

(3.1)	L-arginin 55	0
(3.2)	L-izoleucin 21,7	0
(3.3	L-fenylalanin 55	0
(3.4)	L-asparagová kyselina 6,7	0

10,2 krystalický prášek

0,4 krystalický prášek

0,3 (3.5)

L-fenylalanin

L-izoleucin

1,2

	L-arginin	L-f enylalanin
(3.6)	20	4 5,7

krystalický prášek >20 ’C rtg. amorfní prášek >20 'C rtg. amorfní prášek (3.7)

L-arginin

L-asparagová kyše lina

5,5

L-argínin (3.8) 40

L-asparagová kyselina L-izoleucin

4,2 >20 ‘C rtg. amorfní prášek >20 *C rtg. amorfní prášek

Vakuové sušení

Příklad	Aminokyselina Amino-	Zbytkový obsah vody %	Teplota přechodu do skelného stavu *C
mg/ml	kyše 1ina mg/ml
	L-arginin	L-fenylalanin
3.9	33,4	7,9	9,9	1,3
3.10	34,8	6,6	10,7	0,0
3.11	35,8	5,6	10,0	1,3

- 9 CZ 297917 B6

Příklad 4

Aminokyselina se rozpustí ve vodě při teplotě místnosti a vysuší se rozprašováním. Z následující tabulky vyplývá, že specifickým nastavením hodnoty pH (4.1 až 4.3) se získá rtg-amorfní struktura, jinak se získá pouze krystalická struktura (4.2 a 4.4)

Obojetné ionty s polámími/nepolámími skupinami

Příklad	Aminokyselina mg/ml	Aminokysel ina mg/ml	Zbytkový obsah vody %	Teplota přechodu do skelného stavu Krystal.struktura, stav agregace
(4.1)	L-arginin 55	O	5,1	>20 *C
(4.2)	pH 7,2 nastavena H3 PO4 L-arginin 55	O	10,2	rtg. amorfní prášek
(4.3)	L-asparagová kyselina 8,3	O	0,5	krystalický prášek >20 ’C
(4.4)	pH 7,2 nastavena NaOH L-asparagová kyše lina 6,7	O	0,3	rtg. amorfní prášek
				krystalický prášek

Příklad 5

Sacharid, AA a ostatní pomocné látky se rozpustí ve vodě při teplotě místnosti a hodnota pH se nastaví na 7,3 ± 0,2 a suší se rozprašováním.

Následující tabulka ukazuje optimalizované formulace drogy způsobem podle vynálezu (5.2 až 5.6) Formulace placebo (5.1) je použita pro porovnání. U žádné z formulací se po vysušení nevyskytují produkty rozkladu, přičemž lze detekovat agregáty s vysokou molekulovou hmotností (HMW) a EPO dimery nepřesahují 0,2 % ve formulacích 5.2 až 5.6. Tato hodnota se nezvýší ani po tříměsíčním skladování (viz příklad 5.3).

Na rozdíl od toho, formulace, které nejsou připraveny způsobem podle vynálezu, vykazují velmi vysoký obsah agregátů s vysokou molekulovou hmotností (HMW) a EPO dimerů dokonce bezprostředně po vysušení (5.7).

- 10CZ 297917 B6

Příklad	EPO	Amino-	Zbytkový	Teplota přechodu
	u/	kyselina	obsah	do skelného stavu
	Sacharid	pomocné	vody %	Krystal.struktura,
	mg/ml	látky mg/ml		stav agregace
	—	L-arginin/
	sacharóza	L-fenylalanin/ Tween 20
(5.1)	-	20/	2,8	>20 *C
	100	20/		rtg. amorfní

0,2 prášek

EPO/sacharóza L-arginin

		L-fenylalanin/ Tween 20
(5.2)	7000/	10/	3,5	>20 *C
	50	10/		rtg. amorfní prášek
(5.3)	7010/	10/	2,4	>20 ’C
	50	10/		rtg. amorfní
		0,1		prášek
	EPO/sacharóza	L-arginin/ L-fenylalanin/ Tween 20
(5.4)	14020/	20/	2,9	>20 *C
	100	20/		rtg. amorfní
		0,2		prášek
	EPO/	L-arginin/
		L-fenylalanin/ Tween 20
(5.5)	5010/	30/	4,3	>20 *C
		10/		rtg. amorfní
		10/		prášek
		0,1
	EPO/	L-arginin/ l-asparagová	kys./
		L-fenyl- alanin/
		Tween 20
(5.6)	5010	30/	4,4	>20 *C
		10/		rtg. amorfní
		10/		prášek
		0,1

Stálost při skladování prostředku podle příkladu 5.3 v chladničce, při teplotě místnosti a při teplotě 40 °C po dobu tří měsíců

-11 CZ 297917 B6

Agregáty HMW			Dimery EPO
chlad.	tepl. míst.	40 ’C	chlad.	tepl. míst.	40 *C
(4-6 ”C)	(20-22 C)		(4-6 °C)	(20-22 “O
5.3
Počáteční	< 0,1%			< O, 1%
Po 2
měsících <0,1%	<O, 1%	<O, 1%	<O, 1%	<O, 1%	<O, 1%
Po 3
měsí cích <0,1%	<O, 1%	<O, 1%	<0,1%	<O, 1%	<O, 1%

Obsah agregátů HMW a dimerů EPO ve formulaci nepřipravené způsobem podle vynálezu bezprostředně po vysušení

Příklad	EPO Zbytkový obsah	Agregáty HMW	Dimery EPO
	U/ vody % Sacharid mg/ml EPO/ 1 akt óz a	%	%
(5.7)	7010/50 3,4	9	2

Příklad 6

Následující příklady 6 až 12 objasňují účinek zvolených podmínek při způsobu podle vynálezu na konečné produkty. Zkoumají se následující formulace 1 až 4:

směs (formulace) 1:

sacharóza, L-arginin a L-fenylalanin (5:1:1), směs (formulace) 2:

L-arginin, L-asparagová kyselina a L-izoleucin (3:1:1).

směs (formulace) 3:

L-arginin a L-fenylalanin (1:1), směs (formulace) 4:

L-arginin a L-fenylalanin a L-asparagová kyselina (3:1:1).

Rozprašovací sušení směsí 1-4

Výchozí materiál Složení roztoku

Směs	1	2	3	4
sacharóza	50 mg/ml
L-arginin	10 mg/ml	30 mg/ml	20 mg/ml	30 mg/ml
L-fenylalanin	10 mg/ml		20 mg/ml	10 mg/ml
L-asparagová
kyselina		10 mg/ml		10 mg/ml
L-izoleucin		10 mg/ml

Příklad 7

Sušení rozprašováním při různých teplotách vstupního vzduchu

- 12CZ 297917 B6

Uvedené čtyři směsi se uší při různých teplotách vstupního vzduchu, jmenovitě 100, 140 a 180 °C. Velmi významným parametrem při sušení rozprašováním je relativní obsah vlhkosti ve stacionární fázi sušení rozprašováním. Stacionární fáze se považuje za úsek sušení, při kterém je ukončen proces sušení rozprášených částic a dosáhne se největšího teplotního napětí na částicích sušených rozprašováním. Relativní obsah vlhkosti ve stacionární fázi určuje obsah vlhkosti produktu po vysušení. Volený relativní obsah vlhkosti záleží v tomto případě na složení formulace. Relativní obsah vlhkosti ve stacionární fázi pro uvedené čtyři směsi je volen podle vynálezu velmi nízký, menší než 40% (specificky přibližně 10% v tomto případě). To určuje, zdaje skutečně vysušení rozprašováním směsí 1 až 4 možné. Vysušení rozprašováním čtyř směsí je uspokojivě možné za shora uvedených podmínek. Ve všech případech se získají jemnozmná prášková rozprašovací uložení (SE) v dobrém výtěžku (> 90 %). Na kuželové hlavě kolony ani v potrubí nejsou žádné úsady a vypouštění produktů je uspokojivě možné přes poměrně nízký poměr prášek/vzduch («50 g/Nm³ (SPT)).

Relativní obsah vlhkosti 10 %

Teplota vstupního	Relativní obsah	Rychlost	Pevné částice
vzduchu	vlhkost i	odpařování	(ze 7% roztoku)
•c	stacionární
	fáze %	přibl. g/h	přibl. g/h
60	10	ÍOO	7,5
1OO	10	600	45,2
140	10	1OOO	75,3
180	10	1400	105,4

Příklad 8

Testy produktů zapuštěných rozprašováním (SE)

a) pH, hustota, obsah vody, osmolalita

Směs	Teplota vstupní ho vzduchu *C	SE obsah vody %	PH počáteč. roztoku/SE	Hustota počáteč. roztoku/SE g/cm³	Osmolali ta počáteč. roztoku/SE mOsm/kg
1	ÍOO	3,2	7,4/7,44	1,025/ 1,023	270/272
1	140	3,0	7,4/7,44	1,025/ 1 ,022	270/270
1	180	3,0	7,4/7,43	1,025/ 1 ,020	270/273
2	100	3,9	7,4/7,44	1,017/ 1 ,021	292/270
2	180	2,6	7,4/7,44	1,017/ 1 ,022	292/279
3	100	2,4	7,4/7,43	1,013/ 1,010	216/213
3	180	2,7	7,4/7,43	1,013/ 1,011	216/212
4	ÍOO	3,6	7,4/7,38	1,018/ 1 ,023	274/254
4	180	2,7	7,4/7,37	i,018/ 1 ,023	274/254

- 13CZ 297917 B6

Rozprášený zapuštěný prášek rozpuštěný ve vodě dává stejné hodnoty pH, hustoty a osmolality jako výchozí roztok. Obsah vody rozprášeného zapuštěného prášku mírně klesá s rostoucí teplotou vstupního vzduchu, ačkoli relativní obsah vlhkosti ve stacionární fázi zůstává konstantní. Zejména směs 1 vykazuje téměř konstantní obsah vody při všech teplotách vstupního vzduchu.

b) Krystalická struktura

Nezávisle na teplotách vstupního vzduchu, jsou všechny rozprášené uložené prášky rtg. amorfní ve srovnání s výchozími směsmi.

c) Elektronové mikrografy

Snímky rozprášených zapuštěných prášků ze směsi 1, pořízené elektronovou mikrografií, vykazují částice SE většinou ve tvaru dokonalých koulí, jejich vzhled se mění od vztahu golfového míčku k hladkému povrchu se stoupající teplotou vstupního vzduchu. K předvedení, že jde skutečně o dokonalé koule, se rozprášené uložené prášky rozemelou. Z úlomků bez pochyby lze odvodit tvar dokonalých koulí. Způsob rozprašování, ať tryskou nebo rotujícím kotoučem nemá žádný vliv na tvar částic SE.

d) Granulometrie částic

K doložení, že rozdělení velikosti částic zůstává přibližně konstantní při různých rychlostech rozprašování, je použito směsi 1.

Teplota	Relat ivní	Rychlost	Vel ikost	Velikost
vstupní ho	obsah	rozprašo-	části c	část ic
vzduchu	vlhkosti ve stač.	vání	dl0/d50/d90	RRSB-ď
	fázi
’C	%	g/h	pm	pm
1OO	1O	640,0	0,8/3,7/9,7	5,7
140	1O	1035,0	0,6/5,3/12,6	6,6
180	1O	1455,0	0,7/4,0/11,9	6,3

Také se zjišťuje, že se získá téměř identické rozdělení velikosti částic při stejné teplotě vstupního vzduchu a při přibližně stejné rychlosti rozprašování.

Teplota	Relativní	Rychlost	Ve 1ikost	Ve 1ikost
vstupního	obsah	rozprašo-	část i c	částic
vzduchu	vlhkosti	vání	dl0/d5O/d90	RRSB-d'
	ve stač.
	fázi
•c	%	g/h	pm	pm
100	10	566,0	0,7/4,0/10,5	5,8
1OO	10	640,0	0,8/3,7/9,7	5,7
140	1O	1067,5	0,8/4,0/11,6	6,2
140	10	1035,0	0,6/5,3/12,6	6,6

- 14CZ 297917 B6

Příklad 9

Měření teploty přechodu do skelného stavu (Tg) diferenční řádkovou kalorimetrií (DSC]

Ke zjištění přechodu do skelného stavu vysušených vzorků a vrcholů krystalizace a tavení se použije přístroje DSC 7 (společnost Perkin-Elemer, Uberlingen) s CCA 7 řízení nízké teploty tekutým dusíkem (Messer, Giesheim) a s TAC 7/DX přenosem signálu. Hmotnost vzorků je 5 až 20 mg podle zjištění vážením v hliníkových kelímcích (Perkin-Elmer) napřed zvážených automatickou váhou AD4 mikrováha (Perkin-Elmer). Kelímky se těsně uzavřou víčkem (Cover, Perkin-Elmer) pomocí univerzálního uzavíracího lisu (Perkin-Elmer), umístěného v měřicí buňce, obklopené dusíkem a měřené při rychlosti ohřevu 10 °C/min.

Teplota Tg směsi 1 se zjišťuje pomocí DSC. Při obsahu vody < 4 %, jsou příslušné Tg s výhodou daleko nad teplotou místnosti, což znamená, že směsi jsou velmi vhodné pro stabilizaci biologických materiálů, zejména lidských proteinů.

Teplota vstupního	Obsah vody	Tg
vzduchu ’C	SE %	c
1OO	3,2	57,6
140	3,0	58,8
1OO	3,8	57,0
140	7,5	28,2

Příklad 10

Rozdíly relativního obsahu vlhkosti ve stacionárním stavu

U směsi 1 je ukázáno, jak dalece ovlivňuje relativní obsah vlhkosti stacionární fáze, za jinak stejných podmínek, obsah vlhkosti produktu a tudíž i Tg.

Teplota vstupního	Rel. obsah	Obsah vody	Tg
vzduchu	vlhkosti
°c	stač, fáze	% %	*c
140	4	1,5	67,7
140	10	3,0	58,8
140	25	5,9	31,7
140	33	6,5	29,1
140	36	7,5	28,2

- 15CZ 297917 B6

Příklad 11

Vliv počáteční koncentrace roztoku na zapouštění rozprášení

Teoreticky je možno zvyšovat koncentraci roztoku v zásadě až do meze rozpustnosti určované pomocnými látkami a vede k téměř stejným fyzikálním vlastnostem zapouštění rozprašováním jako ze 7% roztoku, jak dokládá následující tabulka za použití směsi 1.

Teplota vstup, vzduchu •c	Koncentrace Tg/obsah	Velikost část i c dlO/d5O/d9O pm	Ve 1ikost částic RRSB-ď gm
roztoku %	vody pH *C/%
1OO	15	57,3/3,6/7,50	0,8/4,6/12,9	6,7
100	15	52,8/3,4/7,44	0,7/4,6/10,8	6,0
1OO	7	57,6/3,2/7,38	0,8/3,7/ 9,7	5,7

Příklad 12

a) Testování různých rozprašovacích jednotek (dvousložkové trysky, rozprašovacího kotouče) při použití směsi 1

Použití různých rozprašovacích jednotek má vliv na rozdělení velikosti částic zapuštěných rozprašovacím sušením

Teplota	Rozpraš.	Rozpraš.	Velikost	Ve 1ikost	Gradient
vstup.	jednotka	tlak nebo	částic	částic	čáry
vzduchu		otáčky	dlO/d5O/d9O	RRSB-d'	v mřížce
•c	pm	MPa/min	um	Um	RRSB 1
1OO	dvousložk tryska	. 0,3 MPa	0,8/3,7/ 9,7	5,7	1,018
140	dvousložk tryska	. 0,3 MPa	0,6/5,3/12,6	6,6	1,052
180	dvousložk tryska	. 0,3 MPa	0,7/4,0/11,9	6,3	0,994
100	kotouč	max.	1,7/11,9/23,3	15,3	1,238

Rozprašování kotoučem je nevhodné pro plicní používání produktů SE, které vyžadují velikosti částic <10 μηι. Kromě toho je pohotovost dvousložkové trysky podstatně větší než kotouče pro posouvání granulometrických rozsahů. Nevýhodou je, že při sterilní práci s dvousložkovým rozprašováním je nutná pro rozprašované médium sterilizace filtrací. Ostatní fyzikální parametry produktů SE nezávisí na způsobu rozprašování, včetně vzhledu. Rozprašovacím prostředím mohou být známá média, jako stlačený vzduch, nebo inertní plyny, jako jsou například vzácné plyny (například neon, argon), nebo oxid uhličitý.

-16CZ 297917 B6

b) Kombinace různých trysek

K napájení a rozprašování dvou kapalin současně se používá různých kombinací trysek (třísložkové trysky).

Zapuštění rozprašovacím sušením za použití obou variant třísložkové trysky poskytuje fyzikální vlastnosti stejné jako použití rozprašovacího sušení s dvousložkovou tryskou. Také Tg a rtg. amorfní forma jsou identické.

Příklad 13

Reprodukovatelnost s identickými/rozdílnými velikostmi dávek

Způsob podle vynálezu je reprodukovatelný se stejnými nebo rozdílnými velikostmi dávek, jak patrno v příkladu se směsí 1. Produkty SE získané ve všech případech mají fyzikální parametry zapuštěné rozprašovacím sušením ve velmi úzkých mezích. Je tedy možno aplikovat výsledky zkušebních dávek přímo na velké dávky a proces je vhodný pro provozní výrobu.

Teplota	Velikost	Krystalická	Ve 1ikost	Velikost	DSC Tg/
vstup.	dávky	struktura	část ic	část ic	obsah
vzduchu			dl0/d50/d90	RRSB-d'	vody
’C			pm	pm	•c/%
100	1000	rtg. amorfní	0,8/3,7/ 9,7	5,7	57,6/3,2
140	1000	rtg. amorfní	0,6/5,3/12,6	6,6	58,8/3,0
180	1000	rtg. amorfní	0,7/4,0/11,9	6,3	57,0/3,0
140	2000	rtg. amorfní	0,8/4,0/11,6	6,2	58,8/2,8
100	300	rtg. amorfní	0,7/4,0/10,5	5,8	57,0/3,2

Průmyslová využitelnost

Účinný způsob výroby amorfních prostředků obsahujících biologické materiály konvekčním sušením, zejména rozprašovacím sušením.

PATENTOVÉ NÁROKY

Claims

1. Způsob výroby suchých amorfních produktů, které vedle biologicky aktivního materiálu, zejména terapeuticky účinného materiálu, obsahují směsi látek pro stabilizaci, vyznačující se tím, že se připraví roztok nebo suspenze biologického materiálu a směsi látek sestávající ze

- 17CZ 297917 B6 a tento roztok se suší konvekčním sušením při vstupní teplotě od 100 do 180 °C za použití technologie zvolené z rozprašovacího sušení, sušení ve fluidizované vrstvě, sušení ve stoupajícím vzduchu nebo sušení poletováním s nastavením relativního obsahu vlhkosti ve stacionární fázi na hodnotu nižší než 70 %.

2. Způsob podle nároku 1, vyznačující se tím, že se roztok nebo suspenze, připravená podle odstavce (c), nastaví na hodnotu pH 7,0 až 7,5 před konvekčním sušením.

3. Způsob podle nároku 1 nebo 2, vyznačující se tím, že se jako obojetných iontů s polárními a s nepolárními skupinami použije aminokarboxylových kyselin.

4. Způsob podle nároků 1 až 3, vyznačující se tím, že se jako směsi látek, použité podle odstavce (a), použije látek ze souboru zahrnujícího monosacharidy, oligosacharidy, polysacharidy, arginin, asparagovou kyselinu, citrullin, glutamovou kyselinu, histidin, lysin, ethylester acetylfenylalaninu, alanin, cystein, glycin, izoleucin, leucin, methionin, fenylalanin, tryptofan, valin a/nebo jejich deriváty.

5. Způsob podle nároků 1 až 3, v y z n a č u j í c í se tím, že se jako směsi látek, použité podle odstavce (b), použije látek ze souboru zahrnujícího arginin, asparagovou kyselinu, citrullin, glutamovou kyselinu, histidin, lysin, ethylester acetylfenylalaninu, alanin, cystein, glycin, izoleucin, leucin, methionin, fenylalanin, tryptofan, valin a/nebo jejich deriváty.

6. Způsob podle nároků 1 až 3, vyznačující se tím, že se jako směsi látek, použije podle odstavce (c), použije směsi obsahující soli obojetných iontů.

7. Způsob podle nároku 6, v y z n a č u j í c í se tím, že se jako směsi látek, použité podle odstavce (c), použije směsi obsahující soli argininu, asparagové kyseliny, citrillinu, glutamové kyseliny, histidinu, lysinu, ethylesteru acetylfenylalaninu, alaninu, cysteinu, glycinu, izoleucinu, leucinu, methioninu, fenylalaninu, tryptofanu, valinu a/nebo jejich derivátů.

8. Způsob podle nároků laž7, vyznačující se tím, že se použije jako biologického materiálu alespoň jedné látky ze souboru sestávajícího z proteinů, peptidů, glykoproteinů, lipoproteinů, enzymů, koenzymů, protilátek, fragmentů protilátek, složek virů, buněk a složek buněk, vakcín, DNA, RNA, biologických terapeutických a diagnostických činidel nebo jejich derivátů.

9. Způsob podle nároků 1 až 8, vyznačující se tím, že se do roztoku přidávají běžné pomocné látky, kterými jsou pufry, povrchově aktivní činidla, antioxidanty, izotonizující činidla a konzervační látky.

10. Způsob podle nároků 1 až 9, vyznačující se tím, že se sušení provádí ve fluidizované vrstvě, sušením ve stoupajícím vzduchu nebo poletováním.

11. Způsob podle nároků 1 až 9, vyznačující se tím, že ksušení se použije rozprašovacího sušení nebo sušení ve fluidizované vrstvě.

12. Amorfní, mikroskopicky homogenní produkty obsahující biologicky aktivní materiál a směs látek ke stabilizaci, s teplotou přechodu do skelného stavu > 20 °C a se zbytkovým obsahem vlhkosti < 8 % (g/g) připravené způsobem podle nároků 1 až 11.

13. Amorfní produkty podle nároku 12, vyznačující se tím, že mají teplotu přechodu do skelného stavu > 40 °C a zbytkový obsah vlhkosti < 4 % (g/g).

14. Amorfní produkty podle nároku 12 nebo 13, vyznačující se tím, že mají formu prášku s velikostí částic 0,0005 až 1 mm, s výhodou 0,001 až 0,1 mm.

-18CZ 297917 B6

15. Použití amorfních produktů podle nároků 12 až 14 k výrobě diagnostických a terapeutických prostředků.

16. Použití směsi látek sestávající ze

c) alespoň jednoho obojetného iontu s polární nebo s nepolární skupinou nebo několika obojetných iontů s polárními nebo nepolárními skupinami nebo jejich derivátů ke stabilizaci biologicky aktivního, zejména terapeuticky aktivního materiálu konvekčním sušením při vstupní teplotě od 100 do 180 °C za použití technologie zvolené z rozprašovacího sušení, sušení ve fluidizované vrstvě, sušení ve stoupajícím vzduchu nebo sušení poletováním s nastavením relativního obsahu vlhkosti ve stacionární fázi na hodnotu nižní než 70 %.