CZ299818B6

CZ299818B6 - Deriváty 2-aminopyridinu, farmaceutické kompozices jejich obsahem a použití derivátu jako léciva

Info

Publication number: CZ299818B6
Application number: CZ20010086A
Authority: CZ
Inventors: de Lassauniere@Pierre-Etienne Chabrier; Auvin@Serge; Harnett@Jerry; Pons@Dominique; Ulibarri@Gérard; Bigg@Dennis
Original assignee: Societe De Conseils De Recherches Et D'applications Scientifiques (S. C. R. A. S.)
Priority date: 1998-07-08
Filing date: 1999-07-05
Publication date: 2008-12-03
Also published as: JP2002520317A; DE69927033T2; EP1095020A1; CZ200186A3; ATE303363T1; PL345354A1; IL140525A; HUP0105073A2; US6762176B1; NO20010031D0; EP1095020B1; AU756221B2; WO2000002860A1; NO20010031L; ES2249015T3; MY128840A; US6727239B1; IL140525A0; DE69927033D1; RU2226527C2

Abstract

Rešení se týká nových derivátu 2-aminopyridinu, které mají inhibicní aktivitu na NO-syntázové enzymy, produkující oxid dusnatý NO a/nebo aktivitu zachytávání reaktivních forem kyslíku (reactive oxygen species - ROS). Rešení se dále týká zpusobu prípravy derivátu 2-aminopyridinu, farmaceutických prípravku s jejich obsahem a jejich použití pro terapeutické úcely, obzvlášte jejich použití jako inhibitoru NO-syntázy a selektivních nebo neselektivních lapacu reaktivních forem kyslíku.

Description

Oblast techniky

Předložený vynález se týká nových derivátů 2-aminopyridinů, které mají inhibiční aktivitu na NO-syntázové enzymy, produkující oxid dusnatý NO a/nebo aktivitu zachytávání reaktivních forem kyslíku (reactive oxygen species - ROS). Předložený vynález se týká derivátů obecného vzorce (I) definovaných dále, způsobů jejich přípravy, farmaceutický přípravků s jejich obsahem io a jejich použití pro terapeutické účely, obzvláště jejich použití jako inhibitorů NO-syntázy a selektivních nebo neselektivních lapačů reaktivních forem kyslíku.

Dosavadní stav techniky

S uvážením potenciální role NO a ROS v ťyziopatologii mohou nové deriváty obecného vzorce (I) přinášet příznivé účinky při léčení patologických stavů, při nichž jsou tyto chemické látky účastny. Obzvláště mohou být použity:

- při léčení kardiovaskulárních a cerebrovasku lamích poruch, zahrnujících například aterosklerózu, migrénu, arteriální hypertenzi, septický šok, ischemické nebo hemoragické srdeční nebo mozkové infarkty, íschemie a trombózy,

- při léčení poruch centrálního nebo periferálního nervového systému, jako jsou například neurodegenerativní onemocnění, z nichž mohou být obzvláště uvedeny cerebrální infarkty, subarachnoídálnt krvácení, stárnutí, senilní demence včetně Alzheimerovy nemoci, Huntingtonova chorea, Parkinsonovy nemoci, Creutzfeld-Jacobsovy nemoci a príonových onemocnění, amyotrofilní laterální sklerózy, ale také bolesti, mozkových traumat a traumat kostní dřeně, návyku na opiáty, alkohol a návykové látky, erektivních a reprodukčních poruch, kognitivních poruch, encefalopatií, encefalopatií virového nebo toxického původu,

- při léčení poruch skeletálních svalů a neuromuskulámích spojů (myopatie, myóza) stejně tak jako onemocnění kůže,

- při léčení proliferativních a zánětlivých onemocnění, jako jsou například ateroskleróza, pulmonární hypertenze, respiraění distress, glomerulonefritida, portální hypertenze, psořiáza, artróza a revmatická artróza, fibrózy, amyloidózy, záněty gastro-intestinálního systému (kolitida, Crohnova nemoc) nebo pulmonámího systému a dýchacích cest (astma, sinusitida, rhinitida), . -při léčení stavů souvisejících s transplantacemi orgánů, .....35 - při léčení autoimunitních a virových onemocnění, jako jsou například lupus, AIDS, parazitální a virové infekce, diabetes, roztroušená skleróza, ^T

- při léčení rakoviny,

- při léčení neurologických onemocnění, souvisejícími s intoxikacemi (otrava kadmiem, inhalace n-hexanu, pesticidů, herbicidů), s jinou léčbou (radioterapie) nebo poruchami genetického půvo40 du (Wilsonova nemoc),

- pří léčení všech patologií, charakterizovaných nadměrnou produkcí nebo dysfunkcí NO a/nebo ROS.

Ve všech těchto patologiích existují experimentální poznatky, dokazující spolupůsobení NO nebo ROS (J. Med. Chem. (1995) 38, 4343-4362; Free Radíc. Biol. Med. (1996) 20, 675-705; The

Neuroscientist (1997) 3, 327-333).

Kromě toho byly inhibitory NO syntázy a jejich použití již popsány přihlašovateli v předchozích patentech (patent US 5 081 148; patent US 5 360 925), byly také popsány kombinace těchto

-1 CZ 299818 B6 inhibitorů s produkty, které mají antioxidační nebo antiradikálové vlastnosti (patentová přihláška WO 98/09653). Nedávno byly také popsány deriváty amidinu, které mají vlastnosti inhibice NO syntázy a/nebo antioxidační nebo antiradikálové vlastnosti, v patentových- přihláškách WO 98/42696 a WO 98/58934.

Podstata vynálezu

Předložený vynález se týká nové třídy sloučenin, které mají inhibiční aktivitu NO-syntáz a/nebo aktivitu zachytávání reaktivních forem kyslíku (ROS). Tyto sloučeniny obecného vzorce I definovaného dále jsou deriváty 2-aminopyridinů.

io

Sloučeniny podle předloženého vynálezu jsou následující sloučeniny:

- 6-amino-N-[3,5-bis-( 1 J-dimethylethyl)-4-hydroxyfěnyl]-4-methyl-2-pyridinpentanamid;

- N-[(6-am incM-methyl-2-pyrid iny l)butyl]-2,5-d ihydroxy-3-( l-methyl etby l)benzamid:

- 6-amino-N-[4-(dimethylamino)fenyt]-4-methyl-2-pyridinhexanamid;

- 6-amino-N-[4-(dimethylamino)fenyl]M-methyl-2-pyridinpentananamid;

-6-amino-N-[3-(4-hydroxy-3-methoxy-fenyl)-2-propenyl]M-methyl-2-pyridinbutanamid;

-2-({[4-(6-amino-4-methyl-2-pyridinyl)butyl]amino}methyl)-4,5-dimethoxyfenol;

nebo adíční soli těchto sloučenin s organickými nebo anorganickými kyselinami nebo bázemi.

Sloučeniny podle předloženého vynálezu mohou existovat jako báze nebo jako adiční soli obzvláště s organickými nebo anorganickými kyselinami nebo bázemi a obzvláště jako hydráty.

V některých případech sloučeniny podle předloženého vynálezu (to jest obzvláště sloučeniny obecných vzorců I, II a III popsaných dále) mohou obsahovat asymetrické atomy uhlíku a proto mají dvě možné enantiomerické formy, tedy konfigurace „R“ a „S“. Předložený vynález se týká obou enantiomerických forem a všech jejich kombinací, v to počítaje „RS“ racemické směsi. Pro zjednodušení se v případě, že není ve strukturním vzorci sloučeniny uvedena specifická konfigurace, znamená to, že vzorec zahrnuje obě enantiomerické formy i jejich všechny směsi.

Předložený vynález se také týká jako léčiv sloučenin obecného vzorce I popsaných výše nebo jejich farmaceuticky přijatelných solí. Vynález se také týká farmaceutických kompozic, obsahující tyto sloučeniny nebo jejich farmaceuticky přijatelné soli a použití těchto sloučenin nebo jejich farmaceuticky přijatelných solí pro přípravu léčiv, určených pro inhibicí neuronální NO

... syntázy nebo inducibilní NO syntázy;pro inhibicí lipidové peroxidace· nebo pro vytvoření dvojí funkce inhibice NO syntázy a inhibice lipidové peroxidace.

Pod farmaceuticky přijatelnými solemi se rozumí obzvláště adiční soli anorganických kyselin jako jsou hydrochlorid, síran, fosforečnan, hydrogenfosforečnan, hydrobromid a dusičnan nebo adiční soli organických kyselin, jako jsou octan, maleát, fumarát, vínan, jantaran, citronan, mléč40 nan, methansulfonát, p-toluensulfonát, palmitan, šťavelan a stearan. Soli vytvořené z bází jako jsou hydroxid sodný nebo draselný také spadají do rozsahu předmětu předloženého vynálezu, pokud mohou být použity. Další příklady farmaceuticky přijatelných solí mohou být nalezeny v „Pharmaceutical salts“, J. Pharm. Sci. 66:1 (1977).

Farmaceutické kompozice mohou být ve formě pevných látek, například prášky, granule, tablety, želatínové kapsle, liposomy nebo čípky. Vhodné pevné nosiče mohou být například fosforečnan vápenatý, stearan hořečnatý, talek, cukry, laktóza, dextrin, škrob, želatina, celulóza, methylcelulóza, sodná sůl karboxymethylcelulózy, polyvinylpyrrolidin a vosk,

Farmaceutické kompozice obsahující sloučeninu předloženého vynálezu mohou být vytvořeny ve formě kapaliny, například jako roztoky, emulze, suspenze nebo sirupy. Vhodné kapalné nosiče

-2CZ 299818 B6 mohou být například voda, organická rozpouštědla jako jsou glycerol nebo glykoly a nebo jejich směsí v různých poměrech ve vodě.

Léčivo podle předloženého vynálezu může být podáváno topicky, orálně nebo parenterálně, 5 intramuskulámí injekcí a podobně.

Předpokládaná dávka pro podávání léčiva podle předloženého vynálezu je v rozmezí od 0,1 mg do 10 g v závislosti na typu použité účinné sloučeniny.

Sloučeniny podle předloženého vynálezu spadají do rozsahu obecného vzorce I

pro vhodné hodnoty substituentů A, X, Y a R₁₀.

Podle předloženého vynálezu mohou být sloučeniny obecného vzorce I připraveny z mezipro15 duktů obecného vzorce II nebo meziproduktů obecného vzorce III a IV postupem podle diagramu

1.

Diagram 1

'20' Výsledné molekuly obecného vzorce I se získají po odstranění ochranné skupiny 2,5-dimethylpyrrol ze sloučenin obecného vzorce II zahříváním v přítomnosti hydrochloridu hydroxylaminu při teplotě v rozmezí od 60 do 100 °C, v rozpouštědle jako je například ethanol, postupem podle experimentálního protokolu popsaného v J. Chem. Soc. Perkin Trans. (1984), 2801-2807. Pokud sloučeniny obecného vzorce I nesou amin chráněný skupinou, která je labilní v kyselém prostředí (například terc-butylkarbamát), uvolní se tato skupina během závěrečného kroku salifikace, který se v tomto případě provádí použitím silné kyseliny, obzvláště HCI.

Alternativně mohou být sloučeniny obecného vzorce I získány zahříváním alkinů obecného vzorce III s halogenpyridinovými meziprodukty obecného vzorce IV, buď v přítomnosti derivátů paládia(O), jako je Pd(PPh₃)₄ a pracujíce pod inertní atmosférou v n-butylaminu, nebo v přítomnosti derivátu paládia II, jako je Pd(OAc)₂ a PPH₃ v píperidinu (J. Med. Chem., (1996), 36 (16), 3179-3187). Acetylenové deriváty obecného vzorce I získané tímto způsobem mohou být popřípadě přeměněny na jejich ethylenové deriváty redukcí buď pod vodíkovou atmosférou v přítomnosti katalyzátoru Lindlarova typu nebo redukcí v přítomnosti hydridu jako je RedAl (J. Org. Chem., (1988), 53, 3845). Acetylenové sloučeniny obecného vzorce I mohou také být

-3CZ 299818 B6 redukovány pomocí Pd/C pod vodíkovou atmosférou v alkoholovém rozpouštědle jako je ethanol což vede přímo na odpovídající alkany.

!]

Pokud sloučeniny obecného vzorce III nesou chráněný amin (principiálně ve formě terč-butyl- ή karbamátú), pak se uvolní po kondenzaci III + IV v průběhu závěrečného kroku salifikace íj molekul v přítomnosti silné kyseliny (například HCI).

Příprava sloučenin obecného vzorce II, III a IV (viz diagram 1):

A) Sloučeniny obecného vzorce II mohou být připraveny následujícími způsoby:

Prekurzory v syntéze, které vedou k meziproduktům obecného vzorce II jsou připraveny ze sloučenin obecného vzorce (II. 1), jako je například 2-(2,5-dimethylpyrrol-l-yl)-4,6-dimethylpyridin. Ten se získá z komerčního 6-amino-2,4-lutidinu postupem podle experimentálního protokolu, který je popsán v J. Chem. Soc. Perkin Trans., (1984), 12, 2801-2807. Zpracování sloučenin obecného vzorce (11.1) silnou bází jako je například nBuLi, při teplotě v rozmezí od -50 do -30 °C v bezvodém rozpouštědle jako je ethylether, pod inertní atmosférou a popřípadě v přítomnosti Ν,Ν,Ν',Ν'-tetramethylethylendiaminu umožňuje vytvoření lithiovaného derivátu (meziprodukt II.2), který v přítomnosti elektrofilu E vede k vytvoření aduktu obecného vzorce (II.X).

Jako elektrofily E⁺, které mohou reagovat v lithiovaném typu obecného vzorce If.2 mohou být * uvedeny například CO₂, halogen-estery, halogen-orthoestery, paraformaldehyd, chráněné halogen-alkoholy (například ve formě tetrahydropyranacetalu) nebo chráněné halogen-aminy.

1) Způsob získání substituovaných 2-(2,5-dimethylpyrrol-l-yl)pyridinů obecného vzorce II.X: Tl) Příprava alkoholů obecného vzorce 11.3:

Působení derivátu 11.2 na paraformaldehyd nebo na chráněné halogen-alkoholy umožňuje vytvořit po případné deprotekci alkoholy obecného vzorce II.3, ve kterém Y a R₎₀ jsou jak bylo 'definováno výše. .

1.2) Příprava aldehydů obecného vzorce II.4:

Aldehydy obecného vzorce II.4, ve kterém Y a Ri₀ jsou jak bylo definováno výše, mohou být 35 připraveny oxidací alkoholů obecného vzorce II.3 a použitím například oxalylchloridu v DMSO (Swemova oxidace) nebo komplexu pyridinu a oxidu sírového v přítomnosti báze jako je triethylamin (Tetrahedron Lett., (1982), 23, 807):

-4CZ 299818 B6

Nebo je také možno tyto aldehydy získat kondenzací meziproduktů obecného vzorce ΓΓ.2 s deriváty halogenacetalového typu, následovanou standardním deprotekčním krokem v kyselém prostředí;

1.3) Příprava karboxylových kyselin obecného vzorce IL6; Působení meziproduktu ΓΓ.2 na CO₃ a na halogen-esterové nebo orthoesterové deriváty umožňuje po případné deprotekce získat io karboxylové kyseliny obecného vzorce II.6, ve kterém Y a Rjsou jak bylo definováno výše;

Tyto kyseliny mohou také být získány oxidací aldehydů obecného vzorce II.4 dusičnanem 15 stříbrným postupem podle experimentálního protokolu, který je popsán v I Org. Chem., (1985),

50, 2981-2987.

1.4) Příprava aminů obecného vzorce 11.7;

Alkoholy obecného vzorce II.3, popsané výše, umožňují získat aminy obecného vzorce II.7, ve 20 kterém Q, Y a R₍₀ jsou jak bylo definováno výše. Alkoholová funkční skupina se aktivuje standardním způsobem ve formě sulfonátového derivátu obecného vzorce 11.8 před její záměnou aminem a obzvláště heterocyklickým aminem. Kondenzace se provádí v přítomnosti uhličitanu česného Lil při teplotě 70 až 100 ^qC a obzvláště za teploty zpětného toku butanonu. Heterocykly jako je piperazin se používají v mono-chráněné formě (například Boc) během kondenzace a dodatečná selektivní deprotekce je potom nutná pro uvolnění druhé aminové funkční skupiny;

-5CZ 299818 B6 au)

deprotekce

Ve zvláštním případě, když Q je vazba a Y = -HN(R₁₃)-(CH2)p- aminy obecného vzorce IL7 se připraví z meziproduktu II.2, který je kondenzován na chráněné halogen-aminy (například ve formě silylovaných nebo ftalimidových derivátů) za podmínek popsaných výše. Primární aminy obecného vzorce Π.7 se nakonec získají po deprotekci za podmínek popsaných v literatuře (T. W. Greene a P. G. M. Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, druhé vydání (WileyInterscience, 1991)).

¹⁰

2) Způsoby přípravy sloučenin obecného vzorce II:

2.1) Karboxamidy obecného vzorce II:

2.1.1) Karboxamidy obecného vzorce II, ve kterém A, X, Y a Rj₀ jsou jak bylo definováno výše, se připraví kondenzací aminů obecného vzorce A.l's kyselinami obecného vzorce II.ó, popsaný15 mi výše, postupem standardními způsoby, používanými v peptidové kondenzaci (M. Bodanszky a A. Bodanszky, The Practice of Peptide Synthesis (Springer-Verlag, 1984)). Syntéza aminů obecného vzorce A.l, které nejsou komerčně dostupné, bude popsána dále.

2.1.2) Karboxamidy obecného vzorce II, ve kterém A, X, Y a Ri₀ jsou jak bylo definováno výše, mohou také být připraveny kondenzací karboxylových kyselin obecného vzorce A.2 s aminy obecného vzorce 11,7 za podmínek popsaných výše. Syntéza karboxylových kyselin obecného vzorce A.2, které nejsou komerčně dostupné, bude popsána dále.

(Π)

-6CZ 299818 B6 a-x-co₂h + (A.2)

2.2) Aminy obecného vzorce Π:

2.2.1) Aminy obecného vzorce II, ve kterém A, X, Y a R₁₀ jsou jak bylo definováno výše, se připraví kondenzací aminu obecného vzorce A.l nebo A.3 s aldehydem obecného vzorce 11,4 v průběhu kroku redukční aminace v přítomnosti redukčního činidla, jako je například borohydríd sodný nebo triacetoxyborohydrid sodný a v rozpouštědle jako je například 1,2-dichlorethan. Syntéza aminů obecného vzorce A.3 bude popsána dále.

2.2.2) Aminy obecného vzorce II, ve kterém A, X, Y a R_l0 jsou jak bylo definováno výše, mohou také být připraveny kondenzací aldehydů obecného vzorce A.4 nebo cinnamaldehydových derivátů obecného vzorce A.5 s aminy obecného vzorce ΪΪ.7 za podmínek popsaných výše:

-7CZ 299818 B6

3) Způsoby přípravy meziproduktů obecného vzorce A.X:

3.1) Syntéza aminů obecného vzorce A. 1: ^!

Ve zvláštním případě, kdy A je fenolový derivát, aniliny obecného vzorce A. 1 se získají hydroge- 4 nací, v přítomnosti katalytického množství Pd/C, odpovídajících nitrofenolových derivátů, které 3 samy se syntetizují způsobem, popsaným v literatuře (J. Org. Chem., (1968), 33 (1), 223-226). j i

Amino-difenylaminy obecného vzorce A,1 se získají způsoby popsanými v literatuře (Synthesis ;

(1990) 430; Indián J. Chem. (1981) 20B, 611-613; J. Med. Chem. (1915) 18(4), 386-391). Nitro-difenylamíny získané jako meziprodukt vedou buď katalytickou hydrogenaci, nebo použito tím SnCI₂ (J. Heterocyklic Chem. (1987), 24,921-930; Tetrahedron Letters (1984), 25, (8), 839842) na amino-difenylaminy obecného vzorce A.l.

3.2) Syntéza karboxylových kyselin obecného vzorce A.2:

Karboxylové kyseliny obecného vzorce A.2 mohou být připraveny způsoby popsanými v literatuře: Can. J. Chem. (1972), 50, 1276-1282, J. Org. Chem. (1961) 26, 1221-1223 nebo Acta Chem, Scandinavica (1913) 27, 888-890.

3.3) Syntéza aminů obecného vzorce A.3:

Aminy obecného vzorce A.3, ve kterém A, X a n jsou jak bylo popsáno výše, se připraví ve dvou krocích kondenzací aminů obecného vzorce A.l skomerčně dostupnými chráněnými aminokyselinami obecného vzorce A.6 za standardních podmínek syntézy peptidů popsaných výše.

Deprotekce termínálního aminu meziproduktu obecného vzorce A.7 se potom provádí během posledního kroku a například v silně kyselém prostředí pro odstranění Zm-butoxykarbonylové funkční skupiny:

(A-l) A-NH, + --- A-X*(CH^g—Pg -► A-X-(CH^-NH_2: ’ ‘ (A.6) ÍD₂C-(CHj)-N—Pg (A.7) (Aj) «Η

B) Sloučeniny obecného vzorce III mohou být připraveny následujícími způsoby:

Acetylenové sloučeniny obecného vzorce IH, ve kterém A, Q, W, Y a m jsou jak bylo definováno výše, se připraví nukleofilní substitucí komerčně dostupných acetylenových derivátů obecného vzorce B.l, ve kterém Gp je labilní skupina jako jsou halogen nebo sulfonové deriváty, aminu obecného vzorce (B.2) způsobem, který byl popsán v J. Med, Chem., (1996), 39 (16), 3179—

3187.

<3ρ-Υ-=-Η + A-(CI^C(«W)-QH ’-- (ΠΙ) (B-l) (B.2)

Aminy obecného vzorce B.2 se snadno získají způsoby popsanými v literatuře (například: J. Med.

Chem., (1992), 35 (23), 4464-4472).

C) Sloučeniny obecného vzorce IV mohou být připraveny následujícími způsoby:

Halogenované deriváty 2-aminopyridinu obecného vzorce IV ve kterém R,_o je jak byl definován výše a které nejsou komerčně dostupné, mohou být připraveny způsoby popsanými v literatuře a obzvláště způsoby popsanými v J. Org. Chem., (1962), 27, 2473-2478, Rec. Trav. Chim., (1966),

85, 803 nebo Aust. J. Chem., (1982), 25, 2025-2034.

Pokud nejsou přímo definovány, všechny technické a vědecké výrazy zde používané mají své obvyklé významy, pod kterými je chápe odborník v oboru, do kterého předložený vynález spadá.

-8CZ 299818 B6

Podobně všechny publikace, patentové přihlášky, patenty a další reference, které jsou zde uvedeny, jsou zahrnuty jako reference.

Následující příklady jsou podány jako ilustrace výše uvedených procedur a v žádném případě nemohou být považovány za omezení rozsahu předmětu předloženého vynálezu.

Příklady provedeni vynálezu

Příklad 1,

6-amino-N~[3,5-bis-( 1, l-dimethylethyl}-4-hydroxyfenyI]-4-methyl-2-pyridinpentanamid, hydrochlorid; 1

l. 1) methyl 6-(2,5-dimethylpyrrol-l -yl}-4-methyl-2-pyridmpentanoát: 15 0,4 g (2 mmol) 2-(2,5-dimethylpyrrol-1--yl)—4,6—dimethylpyridin (připraven z 6-amino-2,4lutidinu postupem podle J. Chem. Soc. Perkin Trans. (1984), 12, 2801-2807) se rozpustí v 5 ml bezvodého ethyletheru pod argonovou atmosférou. Reakční směs se ochladí na teplotu -25 °C a 0,9 ml (2,2 mmol) 2,5M roztoku BuLt v hexanu se . přidá po kapkách. Po uplynutí 10 minut při teplotě -25 °C se přidá 0,35 ml (2 mmol) trimethyl 4-brombutyrátu. Teplota se potom nechá vrátit pomalu na 23 °C přes noc, 10 ml nasyceného roztoku chloridu amonného se přidá do reakční směsi a nakonec se provádí zředění 10 ml ethylaeetátu. Organická fáze se dekantuje a promývá postupně 10 ml vody a 10 ml solanky, suší nad síranem sodným, filtruje se a koncentruje se za vakua. Získané residuum se čistí na koloně oxidu křemičitého (vymývaeí rozpouštědlo: heptan/ethylacetát; 95/5) pro získání žlutého oleje s výtěžkem 55 %.

NMR Ή (CDCI,, 400 MHz, δ): 1,70 (m, 2H, CH₂); 1,80 (m, 2H, CH₂); 2,10 (s, 6H, 2 CH₃pyrrol); 2,35 (m, 5H, CH₂ + CH₃); 2,80 (m, 2H, CH₂); 3,65 (s, 3H, O-CH₃); 5,90 (s, 2H, pyrrol); 6,85 (s, IH, pyridin); 6,95 (s, IH, pyridin).

1.2) 6—<2,5—di methy lpyrrol-1-y l)-4-methyl-2-pyridÍnpan lanová kyselina:

Roztok 0,37 g (6,6 mmol) K.OH v 10 ml směsi voda/methanol (1/1) se přidá po kapkách do roztoku 0,98 g (3,3 mmol) meziproduktu 1.1 v 10 ml methanolu. Směs se míchá po dobu 15 hodin při teplotě 23 °C a nakonec se zředí 20 ml ethylaeetátu. Po ukončení dekantace se vodná fáze promývá 20 ml ethylaeetátu a potom okyselí za studená 2M roztokem kyseliny chlorovodíkové. Produkt se potom extrahuje dvakrát 20 ml ethylaeetátu, Po sušení nad síranem sodným a filtraci se organický roztok koncentruje za vakua. Residuum odpařování se čistí na koloně 'oxidu křemičitého (vymývaeí rozpouštědlo: heptan/ethylacetát: 7/3). Očekávaný produkt se získal ve formě bezbarvého oleje s výtěžkem 64 %.

NMR Ή (CDCh, 400 MHz, δ): 1,70 (m, 2H, CH₂); 1,85 (m, 2H, CH₂); 2,10 (s, 6H, 2 CH₃pyrrol); 2,40 (m, 5H, CH₂ + ČH₃); 2,80 (m, 2H, CH₂); 5,90 (s, 2H, pyrrol); 6,85 (s, IH, pyridin);

7,00 (s, IH, pyridin).

1.3) 2,6-di-/erc-butyl-4-nitrofenol:

2,6-di-Zerc-butylfenol (8 g, 39 mmol) se rozpustí v 25 ml cyklohexanu při teplotě 10 °C. Směs (1/1) kyselina dusičná/kyselina octová (5 ml) se přidá po kapkách do reakční směsi udržované při této teplotě. Potom se míchání provádí po dobu 15 minut při teplotě okolí, pak se vytvořený precipitát filtruje, následuje proplachování vodou a pentanem. Získaný 2,6-di-terč-butyl-4nitrofenol (6,34 g, 65 %) se suší v peci a používá se bez dalšího čištění v následujících krocích. Bledě žlutý prášek.

Teplota tání; 167 až 168 °C.

NMR 'H (CDCh, 100 MHz, δ); 1,48 (s, 18H, 2tBu); 5,93 (s, IH, OH); 8,13 (s, 2H, arom. H.).

-9CZ 299818 B6

1.4) 2,6-di-/m?-butyM-aminofénok

2,6~di-fórc-butyl-4-nitrofenol (6,3 g, 25 mmol) se rozpustí v methanolu (100 ml). Přidá se 0,6 g paládia na uhlí (10%) a směs se umístí pod vodíkovou atmosférou za tlaku 0,2 MPa (2 barů). Katalyzátor se odfiltruje a rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku. Residuum se vyjme v hep5 tanu a filtruje. Takto se získá 2,6-di-terc-butyM-aminofenol (2,7 g, 48 %), který se používá bez dalšího čištění v následujících krocích. Růžový prášek.

Teplota tání: 123 až 124 °C.

NMR 'H (CDCb, 100 MHz, δ): 6,60 (s, 2H, Ph); 4,65 (široký s, IH, OH); 3,15 (široký s, 2H, NH₂); 1,42 (s, 18H, 2xtBu).

1.5) N-[3,5-bís-( 1, l-dimethylethyl>-4-hydroxyfenyI]-6-(2,5-dimethylpyrrol-l -yl)-4-methyl2-pyridinpentanamid:

0,47 g (2,27 mmol) 1,3-dicyklohexytkarbodíimiďu se přidá v jedné dávce do roztoku 0,59 g (2,06 mmol) meziproduktu 1.2, 0,46 g (2,06 mmol) 2,6-di-Zerc-butyM-aminofenol a 0,31 g (2,27 mmol) hydroxybenzotriazolu v 20 ml dichlormethanu. Reakční směs se míchá přes noc při teplotě 23 °C, vytvořený precipitát se filtruje a filtrát se koncentruje do sucha za vakua. Residuum se rozpustí v 20 ml ethylacetátu a promývá postupně 20 ml vody a 20 ml solanky. Organický roztok se suší nad síranem sodným, filtruje se, koncentruje se za vakua a residuum odpařování se čistí na koloně oxidu křemičitého (vymývací rozpouštědlo: dichlormethan/metha20 nol: 98/2). Čisté frakce se odeberou a odpaří za vakua pro získání průhledného oleje s výtěžkem 39 %.

NMR ‘H (DMSO d6, 400 MHz, δ): 1,35 (s, 18H, 2 tBu); 1,60 (m, 2H, CH₂); 1,70 (m, 2H, CH₂); 2,00 (s, 6H, 2 CH₃ pyrrol); 2,25 (m, 2H, CH₂); 2,35 (s, 3H, CH₃); 2,70 (m, 2H, CH₂); 5,75 (s> 2H, pyrřol); 6,70 (s, IH, OH); 7,00 (s, IH, pyridin); 7,10 (s, ΙΉ, pyridin); 7,35 (s, 2H, Ph); 9,55 (s,

IH, CO-NH).

1.6) 6-amino-N-[3,5-bis-(l J -dimethy lethyl)-4-hydroxyfěnyl]^l-rnethyl-2-pyridin-pentanamid, hydrochlorid:

Meziprodukt 1.5 (0,43 g, 0,88 mmol) se rozpustí v 9 ml ethanolu s 3 ml přidané vody a přidá se

0,31 g (4,40 mmol) hydrochloridu hydroxylaminu. Reakční směs se zahřívá za teploty zpětného toku po dobu 24 hodin. Po návratu teploty na 22 °C se směs zředí 10 ml nasyceného roztoku hydrogenuhličitanu sodného a produkt se extrahuje 20 ml ethylacetátu. Po ukončení dekantace se organický roztok promývá postupně 20 ml nasyceného roztoku hydrogenuhličitanu sodného a 10 ml solanky, suší nad síranem sodným, filtruje se a koncentruje se za vakua. Residuum odpařo35 vání se vyjme vethyletheru a fdtruje se pro získání volné.báze ve formě béžové pevné látky š výtěžkem 76 %. Produkt se potom salifikuje zpracováním 0,27 g (0,67 mmol) volné báze v roztoku v 5 ml bezvodého methanolu působením 2,68 ml (2,68 mmol) bezvodého IN roztoku HCI v ethyletheru. Získá se béžový prášek.

Teplota tání: 162 až 164 °C.

NMR ’H (DMSO d6,400 MHz, δ): 1,35 (s, 18H, 2 tBu); 1,50 - 1,80 (m, 4H, 2 CH₂); 2,30 (s, 5H, CH₂ + CH₃); 2,70 (m, 2H, CH₂); 6,60 (s, 2H, pyridin); 6,70 (s, IH, OH); 7,40 (s, 2H, Ph); 7,75 (široký s, 2H, NH₂); 9,66 (s, JH, CO-NH); 13,95 (široký s, IH, NH⁺).

IR: v_c-_o(amid): 1657 cm^-1.

Příklad 2

6-amino-N-[3,5-bis-( 1,1 -dimethy lethyI)-4-hydroxyfenyl]-4-methyI-2-pyndinbutanamid, hydrochlorid: 2

2.1) 6-(2,5-dimethylpyrro(-l-yl)-4-methyl-2-[4-[(3,4,5,6-tetrahydro-2H-pyran-2-yl)oxy]butyl]—pyridin:

-10CZ 299818 B6

V tříhrdlé baňce se pod argonovou atmosférou rozpustí 2 g (10 mmol) 2-(2,5-dimethyl-pyrroll-yl)-4,6-dimethyl-pyridinu v 15 ml bezvodého ethyletheru, do kterého se přidá katalytické množství Nal. Reakční směs se ochladí na teplotu -25 °C před přidáním po kapkách 4,4 ml j (11 mmol) 2,5M roztoku BuLi v hexanu, po kterém následuje 15 minut později 1,65 ml | (10 mmol) 2-(3-chlorpropoxy)tetrahydro-2H-pyranu. Po míchání po dobu 10 minut při teplotě - ll ^QC se teplota reakční směsi ponechá pomalu navrátit se na 23 °C přes noc. Reakční směs se ,,l nakonec zředí 20 ml nasyceného roztoku chloridu amonného a následuje 30 ml ethylacetátu, Po $ ukončení dekantace se vodná fáze znovu extrahuje 20 ml ethylacetátu, organické fáze jsou potom shromáždí a promývají postupně 30 ml vody a 20 ml solanky. Organický roztok se suší nad síranem sodným, filtruje se a koncentruje se za vakua. Residuum odpařování se čistí na koloně oxidu křemičitého (vymývací rozpouštědlo: heptan/ethylacetát: 9/1). Očekávaný produkt se získal ve formě bledě žlutého oleje s výtěžkem 82 %.

NMR ‘H (CDClj, 400 MHz, δ): 1,51 - 1,85 (m, 10H, 5 CH₂); 2,11 (s, 6H, 2 CH₃ pyrrol); 2,38 (s,

3H, CHJ; 2,80 (t, 2H, CH₂₎ J = 7,64 Hz); 3,64 (m, 2H, CHJ; 3,80 (m, 2H, CHJ; 4,57 (m, IH,

CH-O); 5,87 (s, 2H, pyrrol); 6,84 (s, IH, pyridin); 6,97 (s, IH, pyridin).

2.2) 6-(2,5-dimethylpynOl-l-yl}-4-methy1-2-pyridinbutanol:

2,08 g (6,07 mmol) meziproduktu 2.1 se rozpustí v 10 ml (12,1 mmol) 5% roztoku HCI v methanolu. Po míchání po dobu 2 hodin při teplotě 23 °C se reakční směs neutralizuje přidáním nasyceného roztoku NaHCO₃, potom se částečně koncentruje za vakua a nakonec zředí 30 ml ethylacetátu. Organická fáze se dekantuje, promývá 20 ml vody a 10 ml solanky, suší nad síranem sodným, filtruje se a koncentruje se za vakua. Residuum odpařování se čistí na koloně oxidu křemičitého (vymývací rozpouštědlo: heptan/ethylacetát: 6/4). Čisté frakce se shromáždí a odpaří pro získání bezbarvého oleje s výtěžkem 77 %.

NMR 'H (CDClj, 400 MHz, δ): 1,60 (m, 2H, CHJ; 1,83 (m, 2H, CHJ; 2,11 (s, 6H, 2 CHj pyrrol); 2,39 (s, 3H, CHJ; 2,81 (t, 2H, CH₂, J = 7,63 Hz); 3,64 (t, 2H, CH₂, J - 6,38 Hz); 5,88 (s,

2H, pyrrol); 6,86 (s, IH, pyridin); 6,99 (s, IH, pyridin).

2.3) 6-(2,5-dimethylpyrrol-l-yl)-4-methyl-2-pyridmbutanal:

1,3 ml (9,2 mmol) triethylaminu a roztok 0,74 g (4,6 mmol) komplexu oxid siřičitý pyridin v 5 ml DMSO se přidají postupně do roztoku 0,4 g (1,54 mmol) meziproduktu 2.2 v 5 ml DMSO.

Po uplynutí jedné hodiny míchání při teplotě 30 °C se reakční směs vlije do 50 ml vody a produkt se extrahuje 20 ml ethylacetátu. Po ukončení dekantace se organická fáze promývá 20 ml vody a potom 10 ml solanky, suší nad síranem sodným, filtruje se a nakonec se koncentruje do sucha za vakua. Residuum se čistí na koloně oxidu křemičitého (vymývací rozpouštědlo: heptan/ethylacetát: 8/2), čisté frakce se shromáždí a odpaří za vakua pro získání bezbarvého oleje s výtěžkem 70 %.

NMR 'H (DMSO d6, 400 MHz, δ): 2,40 (m, 2H, CHJ; 2,50 (s, 6H, 2 CHj pyrrol); 2,83 (s, 3H,

CHJ; 2,93 (m, 2H, CHJ; 3,18 (t, 2H, CHj, J.= 7,36 Hz); 6,23 (s, 2H, pyrrol); 7,52 (s, IH, pyridin); 7,60 (s, IH, pyridin); 10,12 (s, IH, CHO).

2.4) 6-(2,5-dimethylpyrrol-l-yl)-4-methyl-2-pyridinbutanová kyselina:

Roztok 1,02 g (5,95 mmol) AgNO₃ v 4 ml vody a po kapkách roztok 1,73 g (31 mmol) KOH v 30 ml vody se přidají postupně do roztoku 0,61 g (2,38 mmol) meziproduktu 2.3 v 20 ml ethanolu. Rychle se vytváří černý precipitát a reakční směs se míchá po dobu 3 hodin při teplotě 22 °C. Reakční směs se filtruje a filtrát se okyselí molárnim roztokem HCI na pH = 3. Vodný roztok se extrahuje třikrát 20 ml dichlormethanu, organické fáze se shromáždí, filtrují přes papír a filtrát se promývá dvakrát 20 ml solanky. Organický roztok se suší nad síranem sodným, filtruje se a koncentruje se za vakua. Získá se tmavě žlutý olej s výtěžkem 92 %. Produkt se používá jak so byl získán v následuj ící reakci.

-11 CZ 299818 Bó

2.5) N-[3,5-bis-( 1,1-dimethy lethyl)-4-hydroxyfeny 1)-6-(2,5-dimethylpyrro 1-1-yl)-4-methyl2-pyridinbutanamid:

Byl použit stejný experimentální protokol jako byl protokol, popsaný pro meziprodukt 1.5, přičemž meziprodukt 2.4 nahradil meziprodukt 1.4. Očekávaný produkt se získal ve formě bílého prášku s výtěžkem 41 %.

Teplota tání = 78 az 80 °C.

NMR 'H (DMSO d6,400 MHz, 8): 1,34 (s, 18H, 2 tBu); 1,97 (m, 2H, CH₂); 2,04 (s, 6H, 2 CH, pyrrol); 2,27 (m, 2H, CH₂); 2,35 (s, 3H, CH₃); 2,73 (m, 2H, CH₂); 5,76 (s, 2H, pyrrol); 6,71 (s, IH, OH); 7,04(s, IH, pyridin); 7,13 (s, IH, pyridin); 7,38 (s, 2H, Ph); 9,56 (s, IH, CO-NH).

2.6) 6-amíno-N-[3,5-bis( 1,1-dimethy lethyl)-4-hydroxy feny l]-~4-methyl-2-pyridin-butananiid, hydrochlorid:

Byl použit stejný experimentální protokol jako byl. protokol, popsaný pro meziprodukt 1.6, přičemž meziprodukt 2.5 nahradil meziprodukt 1.5. Po salifikaci volné báze za podmínek ts popsaných výše se hydrochlorid získá ve formě nafialovělého prášku s výtěžkem 56 %, .

Teplota tání: 164 až 166 °C.

NMR 'H (DMSO dó, 400 MHz, δ): 1,34 (s, 18H, 2 tBu), 1,96 (m, 2H, CH₂), 2,24 (s, 3H, CH₃), 2,28 (m, 2H, CH₂), 2,68 (m, 2H, CH₂), 6,57 (s, IH, pyridin), 6,60 (s, IH, pyridin), 6,75 (s, IH, OH), 7,38 (s, 2H, Ph), 7,80 (široký s, 2H, NH₂), 9,69 (s, IH, CO-NH), 13,93 (široký s, IH, NH⁴).

IR: v_c=0 (amid): 1662 cm'¹.

Příklad 3

6-amino-N-[4-(dimethylamino)fenyl]^l-methyl-2-pyridinbutanamÍd, hydrochlorid: 3

3.1) N-[4-(dimethylamino)fenyI]-6-(2,5-dimethylpyrrol-l-y1)-4-methyl-2-pyridÍnbutanamid:

Experimentální protokol použitý pro kondenzaci N, N-d i methy 1-p-feny len diaminu s meziproduktem 2.4 byl stejný jako pro syntézu meziproduktu 1.5. Očekávaný produkt se získal ve formě fialového oleje s výtěžkem 52 %.

NMR Ή (CDCb, 400 MHz, 8): 2,11 (s, 6H, 2 CH₃ pyrrol); 2,14 (m, 2H, CH₂); 2,35 (m, 2H, CH₂); 2,42 (s, 3H, CH₃); 2,90 (m, 8H, N(CH,)2 4-CH₂); 5,92 (s, 2H, pyrrol); 6,66 (m, 2H, Ph); 6,94 (s, 1H, pyridin); 7,06 (s, IH, pyridin); 7,27 (m, 2H, Ph); 8,44 (s, IH, CO-NH).

3.2) 6-amino-N-[4-(dimethylamino)fenyl]74-methyl-2-pyridinbutanamid, hydrochlorid: 35 Byl použit stejný experimentální protokol jako byl protokol, popsaný pro meziprodukt 1.6, přičemž meziprodukt 3.1 nahradil meziprodukt 1.5. Získá se béžový prášek s výtěžkem 28 %. Teplota tání: 158 až 160 °C.

NMR Ή (DMSO d6, 400 MHz, 8): 2,00 (m, 2H, CH₂); 2,26 (s, 3H, CH₃); 2,40 (m, 2H, CH₂); 2,70 (m, 2H, CH₂); 3,06 (m, 6H, N(CH₃)2); 6,60 (m, 2H, Ph); 7,75 (m, 6H, Ph + pyridin H-NH₂;

10,4 (s, IH, CO-NH); 13,30 (široký s, IH.NhT); 14,05 (široký s, ΙΗ,ΝΗ*).

IR: ν,χ, (amid): 1661 cm'¹.

Příklad 4 l-[4-(2-amino-5-pyridinyí)-3-butinyl]^-[(3,4-díhydro-ó-hydroxy-2,5.7,8-tetramethyl-2H[l]-benzopyran-2-yl)karbonyl]-piperazin, hydrochlorid: 4

4.1) 1 —(3—but i ny 1)~4-[(3,4-dihydro-6-hydroxy-2,5,7,8-tetramethyl-2H-[ 1 ]-benzopyran-2-y 1)karbonyljpiperazin:

-12CZ 299818 B6

0,64 g (2 mmol) [(3,4-dihydro-6-hydroxy-2,5_í7,8-tetramethy1-2H-[l]-benzopyran-2-yl)karbonyljpiperazinu (J. Med. Chem., (1992), 35 (23), 4464-4472), 0,49 g (2,19 mmol) 3—butinyl p-toluensulfonátu a 0,18 g (2,19 mmol) práškového NaHCO₃ se vloží postupně do baňky obsahující 15 ml DNF. Reakční směs se zahřívá při teplotě 70 °C po dobu 16 hodin. Po ochlazení se reakční směs zředí 100 ml vody a 80 ml dichlormethanu. Organická fáze se dekantuje a promývá třikrát 50 ml vody, 50 ml solanky, suší nad síranem sodným, filtruje se a nakonec koncentruje se za vakua. Residuum odpařování se čistí na koloně oxidu křemičitého (vymývací rozpouštědlo: heptan/ethylacetát: 1/3). Získá se bílý prášek s výtěžkem 69 %.

Teplota tání; 150 až 152 °C. io

4.2) l-[4-(2-amino-5-pyridinyl)-3-butinyl]-4-[(3,4-dÍhydro-6-hydroxy-2,5,7,8-tetramethyl2H-[l]-benzopyran-2-yl)karbonyl]-piperazin, hydrochlorid:

Roztok 0,24 g (1,35 mmol) 2-amino-5-brom-pyridinu a 0,50 g (1,35 mmol) meziproduktu 4.1 v 10 ml n-butylaminu se zbavuje plynů po dobu 30 minut použitím proudu argonu před přidáním

0,096 g (0,083 mmol) Pd(PPh₃)₄. Reakční směs se potom zahřívá po dobu 16 hodin pod argonovou atmosférou. Po koncentraci do sucha za vakua se reziduum, vyjme v 100 ml 1/1 směsi dichlormethanu a vody. Organická fáze se dekantuje, promývá postupně dvakrát 50 ml vody, 50 mí solanky, suší nad síranem sodným, filtruje se a koncentruje se za vakua. Residuum se čistí na koloně oxidu křemičitého (vymývací rozpouštědlo: dichlormethan/ethanol: 15/1). Volná báze se získá ve formě žlutého prášku s výtěžkem 48 %.

Potom se 0,15 g (0,32 mmol) volné báze rozpustí v 7 ml bezvodého ethanolu a roztok se ochladí použitím ledové lázně před přidáním po kapkách 1,3 ml IN roztoku HCI v bezvodém ethyletheru. Po míchání po dobu 30 minut při teplotě 23 °C se roztok koncentruje do sucha za vakua. Pevná látka, která se objeví, se vyjme v 10 ml bezvodého ethyletheru a filtruje se přes Búchner, po promývání dvakrát 10 ml bezvodého ethyletheru se pevná látka odstraní a suší přes noc v peci při teplotě 60 °C. Takto se získá hydrochlorid ve formě světle béžového prášku s výtěžkem 69 %. Teplota tání: 210 až 212 °C.

ŇMR ^l3C (DMSO d6, 100 MHz, 5); 12,02; 12,23; 13,00; 14,63; 20,55; 24,80; 25,00; 30,98; 42,72; 50,80; 53,34; 77,44; 78,28; 87,85; 107,23; 113,66; 117,17; 120,83; 120,85; 123,16; 139,76; 143,60; 145,21; 146,35; 153,80; 171,15.

MS (%): 463,2 (ΜΗΊ, 100).

IR: Voo (amid): 1670 cm'¹.

Příklad 5 l-[4-(2-amino-5-pyridÍnyl)butyl]-4-[(3,4-dihydro-6-hydroxy-2_?5_;7_J8-tetramethyl-2H-[l]benzopyran-2-yl)karbonyl]-piperazin, hydrochlorid: 5

V autoklávu z nerezové oceli se 0,15 g (0,32 mmol) sloučeniny 4.2 (volná báze) rozpustí v 10 ml ethanolu v přítomnosti 0,1 g Pd/C s koncentrací 10%. Reakční směs se míchá pod vodíkovou atmosférou 0,15 MPa (1,5 bar) po dobu 1,5 hodiny při teplotě 23 °C. Katalyzátor se potom odstraní filtrací a ethanol o vý roztok se koncentruje za vakua. Residuum se čistí na koloně oxidu křemičitého (vymývací rozpouštědlo: dichlormethan/ethanol: 5/1). Takto se získá volná báze ve formě bílého prášku s výtěžkem 54 %. Produkt se salifikuje za podmínek popsaných výše. Bílý prášek.

Teplota tání: 221 až 223 °C.

NMR ^,3C (DMSO d6, 100 MHz, δ): 12,04; 12,25; 13,04; 20,58; 22,28; 23,83; 25,12; 27,01; 29,84; 30,64; 31,07; 42,67; 50,75; 51,02; 55,07; 78,30; 113,59; 117,18; 120,84; 120,88; 123,18; 125,48; 133,51; 143,63; 145,31; 146,35; 153,12; 171,14.

MS (%): 467,3 (M+l, 100).

IR: v_c=o(amid): 1671 cm’¹.

-13 CZ 299818 Bó

Příklad ó

-[2-(6-am ino-4-methy 1-2-py ridiny l)ethy 1 ]t4-[(3 ,4-dihydro-6-hydroxy-2,5,7,8-tetramethy 1- ¹

2H-[l]benzopyran-2-yl)karbonyl]-ptperazin, hydrochlorid: 6 ;

;

6.1) 6—(2,5—dimethy 1 pyrrol-l-yl)-4~methyl-2-pyridinethanol: j l

Roztok 1 g (5 mmol) 2.-(2,5-dimethylpyrrol~ 1-y l)-4,6-dimethy]pyridinu (připraven z ó-amino2,4-lutidinu postupem podle J. Chem. Soc. Perkin Trans., (1984), 12, 2801-2807) v 5 ml bezvodého ethyletheru se přidá po kapkách do roztoku, ochlazeného na teplotu -20 °C, 2,47 ml ío (6,15 mmoí) BuLí (2,5M v hexanu) v 10 ml bezvodého ethyletheru. Po míchání po jednu hodinu při teplotě mezi -20 a -15 °C se vnitřní teplota zvýší na 23 °C a míchání se udržuje po dobu půl hodiny při této teplotě, během této doby se objeví precipitát. Reakční směs se potom zředí 3,5 ml bezvodého THF a jeho teplota se sníží na -20 °C před přidáním v jedné dávce 0,6 g paraformaldehydu. Teplota média se potom zvýší na 23 °C a míchání se udržuje po dobu další půl hodiny.

Nakonec se reakční směs neutralizuje přidáním 20 ml nasyceného vodného roztoku NHC1. Po ukončení dekantace se vodná fáze extrahuje dvakrát 30 ml ethylacetátu. Organické fáze se shromáždí a promývají dvakrát 20 ml solanky. Po sušení nad síranem sodným se organický roztok suší, filtruje se a koncentruje se za vakua. Residuum odpařování se čistí na silikagelové koloně (vymývací rozpouštědlo: heptan/ethylacetát: 2/1). Získá se bezbarvého oleje s výtěžkem 24 %.

NMR *H (CDClj, 400 MHz, 8); 1,27 (s, IH, OH); 2,14 (s, 6H, 2 CHj pyrrol); 2,41 (s, 3H, C1I₃);

3,03 (m, 2H, CH₂); 4,03 (m, 2H, CH₂-OH); 5,90 (s, 2H, pyrrol); 6,91 (s, I H, pyridin); 7,01 (s,

ÍH, pyridin),

6.2) 6-(2,5-d i methyl pyrrol-l-yl)-4-methyl-2-pyrid i neth ano 1, p-toluensulfonát:

Roztok 1,65 g (8,69 mmol) p-toluensulfonylchlorídu v 3 ml dichlormethanu se přidá do směsi g (8,69 mmol) meziproduktu 6.1 a 0,87 g (8,69 mmol) triethylamínu v roztok v 15 ml dichlormethanu, ochlazeného v ledové lázni. Reakční směs se míchá pří teplotě 23 °C po dobu 16 hodin, koncentruje se za vakua a residuum se zředí 40 ml ethylacetátu. Po promývání třikrát 20 ml vody a potom 20 ml solanky se organický roztok se suší nad síranem sodným, filtruje se a koncentruje se za vakua. Residuum se čistí na koloně oxidu křemičitého (vymývací rozpouštědlo: heptan/ethylacetát: 4/1). Získá se béžový prášek s výtěžkem 71 %.

NMR 'H (CDClj, 100 MHz, δ): 2,10 (s, 6H, 2 CHj pyrrol); 2,39 (s, 3H, CHj); 2,42 )s, 3H, CHj);

3.14 (m, 2H,CH₂); 4,40 (m, 2H, Cil, A)); 5,78 (s, 2H, pyrrol); 6,91 (s, IH, pyridin); 7,00 (s, IH, pyridin); 7,56 (m, 4H, Ph).

6.3) ί-[(dimethylethoxykarbonyl]~4-[2-[ó-(2,5-dimethylpyrrol-l-yl)-4-methyl-2-pyridinyl]ethyl)piperazin:

2.15 g (5,6 mmol) meziproduktu 6.2, 0,73 g (3,9 mmol) N-Boc-piperazinu, 3,65 g (11,2 mmol) uhličitanu česného a 0,037 g (0,28 mmol) Lil se rozpustí postupně v 10 ml butanomi. Směs se zahřívá za teploty zpětného toku po dobu 16 hodin. Po návratu teploty na 23 °C se přidají 50 ml vody a 50 ml ethylacetátu. Organická fáze se dekantuje, promývá dvakrát 20 ml vody a 20 ml solanky, suší nad síranem sodným, filtruje se a koncentruje se za vakua. Residuum se čistí na koloně oxidu křemičitého (vymývací rozpouštědlo: heptan/ethylacetát; 1/1). Získá se tmavě žlutý olej s výtěžkem 65 %.

NMR ¹H (CDClj, 100 MHz, δ): 1,44 (s, 9H, tBu); 2,12 (s, 6H, 2 CH, pyrrol); 2,41 (s, 3H, CHj);

2,44 (m, 4H, 2 CH₂); 2,90 (rn, 4H, 2 CH₂); 3,41 (m, 4H, 2 CH₂); 5,86 (s, 2H, pyrrol); 6,91 (s, IH, pyridin); 7,00 (s, 1H, pyridin).

6.4) l-{2-[6-(2,5-dimethylpyrrol-l-yI)-4-methyl-2-pyridinyl]ethyl}pÍperazin:

1 00 ml 6N vodného roztoku HCI se přidá po kapkách do roztoku 5,3 g (16,5 mmol) meziproduktu 6.3 v 150 ml ethylacetátu. Po míchání po jednu hodinu při teplotě 23 °C se reakční

- 14CZ 299818 B6 směs dekantuje. Vodná fáze se sebere, alkalizuje na pH = 11 přidáním 2N vodného roztoku sody a produkt se nakonec extrahuje dvakrát 100 ml dichlormethanu. Organická fáze se shromáždí a promývají dvakrát 50 ml solanky. Po ukončení dekantace se organický roztok se suší nad síranem sodným, filtruje se a koncentruje se za vakua. Získá se oranžový olej s výtěžkem 87 %.

NMR 'H (CDC1₃, 100 MHz, 5); 2,12 (s, 6H, 2 CH₃ pyrrol); 2,40 (s, 3H, CH₃), 2,50 (m, 4H, 2 CH₂); 2,86 (m, SH, 4 CH₂); 5,84 (s, 2H, pyrrol); 6,84 (s, IH, pyridin); 7,00 (s, IH, pyridin).

6.5) l-[(3,4-dihydrO”6-hydroxy-2,5,7,8-tetramethyl~2H-[ 1 ]-benzopyran-2-yl)karbonyI]^F{2—[6—(2,5—dímethylpyrrol—1 —yl)-^4—methyl—2—pyridinyljethyl} pipcrazin:

ίο 1,65 g (10,2 mmol) 1,1 -karbony ld i imidazol u se přidá do roztoku 2,5 g (10 mmol) 3,4-dihydro6-hydroxy-2,5,7,8-tetramethyl-2H-[l]-benzopyran-2-karboxylové kyseliny (Trolox) v 20 ml THF. Po míchání po jednu hodinu při teplotě 23 °C se přidá roztok 2,2 g (10 mmol) meziproduktu 6.4 v 10 ml THF po kapkách během 10 minut. Reakční směs se míchá při teplotě 23 °C po dobu 16 hodin a nakonec koncentruje se za vakua. Residuum se potom rozpustí v lOOml směsi dichlormethan/voda (2/1). Po ukončení dekantace se organický roztok postupně promývá dvakrát 20 ml vody, 20 ml solanky, suší nad síranem sodným, filtruje se a nakonec koncentruje se za vakua. Residuum odpařování se čistí na koloně oxidu křemičitého (vymývaeí rozpouštědlo: heptan/ethylacetát: 1/5). Získá se bílá prášek s výtěžkem 70 %.

Teplota tání: 82 až 84 °C.

NMR^ CCDCIs, 100 MHz, S): 1,58-3,04 (m, 30H, Trolox + 2 CHj pyrrol + 4 CH₂), 3,60 (m, 2H, CH₂), 4,00 (m, 2H, CH₂), 5,88 (s, 2H, pyrrol), 6,84 (s, IH, pyridin), 6,98 (s, IH, pyridin),

6.6) l-[2-(6-amino-4-methyl-2-pyrídÍnyl)ethyl]-4-[(3,4-dihydro-6-hydroxy-2,5,7,8tetramethyl-2H-[ 1 ]-benzopyran-2-yl)karbonyl]-piperazin, hydrochlorid:

Byl použit stejný experimentální protokol jako byl protokol, popsaný pro meziprodukt 1.6, přičemž meziprodukt 6.5 nahradil meziprodukt 1.5. Očekávaný produkt se získal ve formě bílého prášku s výtěžkem 40 % po salifikaci.

Teplota tání: 179 až 182 °C.

NMR ‘H (pyridin d5,400 MHz, δ): 0,97 - 1,93 (m, 16H, Trolox), 1,35 (s, 3H, CH, pyridin), 2,10 (m, 3H, CH₂ + 1/2 CH₂), 2,30 (m, 2H, CH₂), 2,40 (m, 3H, CH₂ + 1/2 CH₂), 2,95 (široký s, IH,

1/2 CH₂), 3,19 (široký s, IH, 1/2 CH₂), 3,59 (široký s, 2H, CH₂), 5,67 (s, IH, pyridin), 5,85 (s, 1H, pyridin).

IR: v_c_₀ (amid): 1662 cm^-1.

Příklad 7 l-[4-(2-amino-6-pyridÍnyI)-3-butinyl]-4—[(3,4-dihydro-6-hydroxy-2,5,7,8-tetramethyl-2H[l]-benzopyran-2-yl)karbonyl]-piperazin, hydrochlorid: 7 f

Byl použit stejný experimentální protokol jako byl protokol, popsaný pro meziprodukt 4.2, přitom 2-amino-6-brompyridin nahradil 2-amino-5-brompyridin. Očekávaný produkt se získal ve formě bledě žlutého prášku.

Teplota tání: 172 až 175 °C.

NMR ‘H (DMSO d6, 400 MHz, δ): 1,50 (s, 3H, CH₃); 1,95 (s, 3H, CH₃); 2,00 (m, 2H, Ω CH₂CH₂); 2,05 (s, 6H, 2 x CH₃); 2,55 (m, 2H, Ω CHz-CH₂); 3,15 (m, 4H, CH₂N); 3,35 (m, 4H,

CH₂N); 3,50 (m, 4H, CH2-CH₂-C...C-); 6,80 (m, 2H, pyridin); 7,55 (široký s, IH, NH⁺); 7,80 (m, IH, pyridin); 8,00 (široký s, IH, NH~).

IR: v_c_o(amid): 1656 cm^-1.

Příklad 8

N-[(6-amino-4-methyl-2-pyridinyl)butyl]-2-hydroxy-5-methoxybenzamid, hydrochlorid: 8 j| '(

- 15CZ 299818 B6

8,1) 6-(2,5—dimethyl—I H-pyrroI-l-yl)-4-methyl-2-pyridínbutanamÍn:

Byl použit stejný experimentální protokol jako byl protokol, popsaný pro meziprodukt 1.1, přitom 1-{3-brompropy 1)-2,2,5,5-tetramethyl-l-aza-2,5-disilacyklopentan nahradil trimethy 1

4-brombutyrát. Získá se žlutý olej s výtěžkem 62 %.

NMR Ή (CDCIj, 400 MHz, δ): 1,52 (m, 2H, CH₂); 1,78 (m, 2H, CH₂); 2,11 (s, 6H, 2 x CHj pyrrol); 2,39 (s, 3H, CHj pyridin); 2,72 (t, 2H, CH₂, J - 7,02 Hz); 2,79 (t, 2H, CH₂, J = 7,62 Hz); 5,87 (s, 2H, pyrrol); 6,85 (s, IH, pyridin); 6,98 (s, IH, pyridin).

io 8.2) N-[4[6-(2,5-dimethyl-lN-pyrroI-l-yl)-4-methyl-2-pyridinyl]butyl]-2-hydroxy-5methoxy benzamid:

0,515 g (2 mmol) meziproduktu 8.1, 0,3 ml triethylaminu, 0,27 g (2 mmol) hydroxybenzotriazolu a 0,383 g (2 mmol) hydrochloridu HJ^dimethylaminopropylj-S-ethylkarbodiimidu se přidají postupně do roztoku 0,336 g (2 mmol) 2-hydroxy-5-methoxy-benzoové kyseliny v 20 ml dichlormethanu. Po míchání reakční směsi přes noc při teplotě 25 °C se směs zředí 40 ml vody a míchání se udržuje po dobu dalších 10 minut. Produkt se nakonec extrahuje dvakrát 50 ml dichlormethanu. Organický roztok se suší nad síranem sodným, filtruje se a koncentruje se za vakua. Residuum odpařování se čistí na koloně oxidu křemičitého (vymývací rozpouštědlo ethylaeetát/heptan: 7/3) pro získání žlutého oleje s výtěžkem 47 %,

NMR 'H (DMSO d6, 400 MHz, δ): 1,56 (m, 2H, CH₂); 1,71 (m, 2H, CH₂); 2,00 (s, 6H 2 x CH, pyrrol): 2,34 (s, 3H, CHj pyridin); 2,73 (m, 2H, CH₂); 3,30 (m, 2H, CH₂); 3,71 (s, 3H, OCHj); 5,75 (s, 2H, pyrrol); 6,80 - 7,38 (m, 5H, arom.); 8,83 (široký t, 1H, CONH, J = 5,44 Hz); 12,20 (široký s, IH, arom. OH).

8.3) N-[(6-amino-4-methyl-2-pyridinyl)butyl]-2-hydroxy-5-methoxybenzamid, hydroehlorid:

Byl použit stejný experimentální protokol jako byl protokol, popsaný pro sloučeninu 1.6, přičemž meziprodukt 8.2 nahradil meziprodukt 1.5. Získá se nafialovělá pevná látka s výtěžkem 29 %. Teplota tání: 131 až 134 °C.

NMR 'H (DMSO d6, 400 MHz, δ): 1,55 (m, 2H, CH₂); 1,69 (m, 2H, CH₂); 2,27 (s, 3H, CHj pyridin); 2,69 (t, 2H, CH₂, J = 7,4 Hz); 3,31 (m, 2H, CH₂); 3,73 (s, 3H, OCHj); 6,59 - 7,45 (m, 5H, arom.); 7,74 (široký s, 2H, NH₂); 8,96 (t, IH, CONH, J= 5,36 Hz), 12,20 (široký s, IH, NH*); 13,93 (široký s, 1H, arom. OH).

IR: v_c=0 (amid): 1640 až 1660 cm’¹.

. · : · ·

Příklad 9

N-[(6-amino-4-methyl-2-pyridinyl)butyl]-2,6-dihydroxybenzamÍd: 9

Byl použit stejný experimentální protokol, jako byl protokol, který byl popsán v Příkladu 8,

2,6-dihydroxybenzoová kyselina nahradila 2-hydroxy-5-methoxy-benzoovou kyselinu. Volná báze se získá ve formě bledě růžové pevné látky s výtěžkem 41 %.

Teplota tání: 158 až 159 °C.

NMR 'H (DMSO d6,400 MHz, δ): 1,06-1,62 (m, 4H, 2 x CH₂); 2,07 (s, 3H, CHj pyridin); 2,45 (m, 2H, CH₂); 3,34 (m, 2H, CH₂); 5,75 (široký s, 2H, NH₂); 5,73 - 6,40 (m, 5H, arom.); 7,13 (široký s, IH, CONH); 9,00 (široký s, IH, OH); 12,00 (široký s, IH, OH).

Přikladlo

N-[(6-amino-4-methyl-2~pyridinyl)butyl]-2,5-dihydroxybenzamid, hydroehlorid: W

-16CZ 299818 B6

Byl použit stejný experimentální protokol, jako byl protokol, který byl popsán v Příkladu 8, 2,5— dihydroxybenzoová kyselina nahradila 2-hydroxy-5-methoxy-benzoovou kyselinu. Získá se bílá pevná látka s výtěžkem 45 %.

Teplota tání: 105 až 106 °C.

NMR ’H (DMSO d6, 400 MHz, δ): 1,54 (m, 2H, CH₂); 1,67 (m, 2H, CH₂); 2,27 (s, 3H, CH₃pyridin); 2,69 (m, 2H, CH₂); 3,29 (m. 2H, CH₂); 6,59 - 7,24 (m, 5H, arom.); 7,73 (široký s, 2H, NH₂); 8,76 (t, IH, CONH, J= 5,16 Hz); 9,06 (široký s, IH, NH⁺); 11,80 (široký s, IH, OH);

. 13,86 (široký s, IH, OH).

IR: v_c<) (amid): 1658 cm'¹.

Příklad 11

5-amino-N-[(6-amÍno-4-methyl-2-pyridinyl)butyl]-2-hydroxybenzamid, hydrochlorid: JT

11.1) 5-[(l, l-dimethylethoxykarbonyl]amino-N-[4-[6-(2,5-dimethyl-l H-pyrrol-l-yl)-4methyl-2-pyridinyI]butyl)-2-hydroxy benzamid:

Byl použit stejný experimentální protokol jako byl protokol, popsaný pro meziprodukt 8.2, 5-Zeř'c-butoxykarbonylamino-2-hydroxy benzoová kyselina (J. Med. Chem., (1994), 37 (6), 845-859) nahradila 2-hydroxy-5-methoxy-benzoovou kyselinu. Získá se bílá pěna s výtěžkem

33 %.

NMR 'H (DMSO d6, 400 MHz, δ): 1,45 (s, 9H, tBu); 1,54 (m, 2H, CH₂); 1,65 (m, 2H, CH₂); 2,01 (s, 6H, 2 x CH, pyrrol); 2,44 (s, 3H, CH, pyridin); 2,67 (m, 2H, CH₂); 3,29 (m, 2H, CH₂); 5,75 (s, 2H, pyrrol); 6,79 - 7,85 (m, 5H, arom.); 8,71 (t, 1H, CONH, J = 5,48 Hz); 9,11 (široký s,

IH, NH-Boc); 11,89 (široký s, 1H, OH).

II. 2) 5-amino-N-[(6-amino-4-methyl-2-pyndinyl)butyl]-2-hydroxybenzamid, hydrochlorid:

Byl použit stejný experimentální protokol jako byl protokol, popsaný pro sloučeninu 1.6, přičemž meziprodukt 11.1 nahradil meziprodukt 1.5. Oddělení řerc-butylkarbamátu se provádí v ethanolu v přítomnosti 3N vodného roztoku HCI. Hydrochlorid se získá ve formě světle béžové pevné ' látky s výtěžkem 15 %.

Teplota tání; dekompozice při teplotě 180 °C.

NMR 'H (DMSO d6, 400 MHz, δ): 1,58 (m, 4H, CH₂); 2,37 (s, 3H, CH, pyridin); 2,59 (m, 2H, CHj); 3,34 (m, 2H, CH₂); 6,62 (s, 2H, pyridin); 7,08- 7,85 (m, 3H, arom.); 7,76 (široký s, 2H, NH₂); 8,85 (t, IH, CONH, J = 5,48 Hz); 10,09 (široký s, IH, NH*); 10,29 (široký s, 2H, NH₂ anilín); 12,28 (široký s, IH, OH).

IR; v_c=0 (amid); 1662 cm“'.

Příklad 12

N-[(6-amino-4-methyl-2-pyridinyl)butvl]-2,5-dihydroxy-3-methylbenzamid, hydrochlorid: J2

Byl použit stejný experimentální protokol jako byl protokol, který byl popsán v Příkladu 8, 2,5dihydroxy-3-methyl benzoová kyselina (Can. J. Chem., (1972), 50, 1276-82) nahradila 2-hydroxy-5-methoxy-benzoovou kyselinu. Získá se béžová pevná látka s výtěžkem 43 %.

Teplota tání: 189 až 190 °C.

NMR 'H (DMSO d6, 400 MHz, δ): 1,53 (m, 2H, CH₂); 1,67 (m, 2H, CH₂); 2,07 (s, 3H, CH, fenol); 2,27 (s, 3H, CH, pyridin); 2,67 (m, 2H, CH₂); 3,26 (m, 2H, CH₂); 6,58- 7,05 (m, 4H, arom.); 7,74 (široký s, 2H, NH₂); 8,80 (široký s, IH, CONH); 8,93 (široký s, IH, OH); 12,47 (s, IH, OH); 13,90 (široký s, IH, NH*).

IR: Voo (amid): 1630 cm“'.

-17CZ 299818 B6

Příklad 13

N-[(6-amino-4-methyl-2-pyridinyl)butyl]-2,5-dihydroxy-3-( 1 -methy lethyl)-benzamid: 13

Byl použit stejný experimentální protokol jako byl protokol, který byl popsán v Příkladu 8, 2,5-dihydroxy-3-isopropyl benzoová kyselina (připravena způsobem popsaným v Can. J. Chem., (1972), 50, 1276-82) nahradila 2-hydroxy-5-methoxy-benzoovou kyselinu. Získá se bledě růžová pevná látka s výtěžkem 14 %.

Teplota tání: 164 až 165 °C.

io NMR *H (DMSO d6, 400 MHz, δ): 1,13 (d, 6H, CH₃ (isopropyl), J = 6,5 Hz); 1,52 - 1,60 (m, 4H, 2 x CH₂); 2,08 (s, 3H, CH₃ pyridin); 2,44 (m, 2H, CH₃); 3,19 (m, IH, CH); 3,26 (m, 2H, CH₂); 5,66 (s, 2H, NH₂); 6,05 (s, IH, pyridin); 6,18 (s, IH, pyridin); 6,82 (s, IH, arom.); 7,04 )s, IH, arom.); 8,74 (široký s, IH, CONH); 8,8 (široký s, IH, OH); 12,69 (široký s, IH, OH).

Příklad 14

N-f(6-amino-4-methy]-2-pyridinyl)butyl]-2-hydroxy-4,6-dimethoxybenzamid, hydrochlorid: _14

Byl použit stejný experimentální protokol jako byl protokol, který byl popsán v Příkladu 8,

2,4-<iimethoxy-6-hydroxy benzoová kyselina nahradila 2-hydroxy-5-methoxybenzoovou kyselinu. Získá se bílá pevná látka s výtěžkem 27 %.

Teplota tání: 183 až 184 ’C.

NMR 'H (DMSO d6, 400 MHz, δ): 1,52 (m, 2H, CH₂); 1,65 (m, 2H, CH₂); 2,25 (s, 3H, CH, pyridin); 2,67 (m, 2H, CH₂); 3,31 (m, 2H, CH₂); 3,74 (s, 3H, OCH₃); 3,86 (s, 3H, OCH₃); 6,05 (s,

IH, pyridin); 6,10 (s, IH, pyridin); 7,60 (m, 2H, arom.); 7,76 (široký s, 2H, NH₂); 8,57 (široký t, IH, CONH, J = 5,37 Hz); 14,02 (široký s, IH, NH⁺); 14,40 (s, IH, OH).

IR: v_c._o (amid): 1661 cm^-1.

Příklad 15

N~[(6-am i no-methyl-2-pyridiny i)butyl]-3,5-bis-(l ,1-d imethy lethyl)-4-hydroxybenzamid, hydrochlorid: j_5

Byl použit stejný experimentální protokol, jako byl protokol, který byl popsán v Příkladu 8, 35 3,5-dÍ-/erobutyl-4-hydroxybenzoová kyselina nahradila 2-hydroxy-5-methoxy-benzoovou kyselinu. Získá se bílá pevná látka s výtěžkem 53 %.

Teplota tání: 259 až 260 °C.

NMR 'H (DMSO d6, 400 MHz, δ): 1,38 (s, 18H, 2 x tBu); 1,55 (m, 4H, 2 x CH₂); 2,36 (s, 3H, CH₃ pyridin); 2,57 (m, 2H, CH₂); 3,23 (m, 2H, CH₂); 6,60 (s, 2H, pyridin); 7,39 (s, IH, NH*);

7,56 (s, 2H, arom.); 7,73 (široký s, 2H, NH₂); 8,31 (t, 1H, CONH, J = 5,6 Hz); 13,91 (s, 1H, OH).

IR: vco (amid): 1662 cm¹.

Příklad 16

6-amino-N-[3,5-bis(l ,1 -dimethy lethyl)-4-hydroxy feny l]~4-methyl-2-pyridinheptanamid, hydrochlorid: 16

16.1) 6-(2,5-d imethy 1-1 H-pyrrol-l-yl)-4-methyl-2-pyridinheptanol

Byl použit stejný experimentální protokol jako byl protokol, popsaný pro meziprodukt 2.1, 50 trimethylsilylovaný derivát 6-brom-l-hexanolu (J. Org. Chem., (1988), 53 (12), 2732-7) nahradil 2-(3-chlorpropoxy)tetrahydro-2H-pyran. Surový získaný produkt se potom rozpustí

- 18CZ 299818 B6 v THF a zpracovává roztokem (ÍM v THF) tetrabutylamoniumfluoridu (1,2-1,5 ekv.) při teplotě 20 ^ŮC. Po míchání po jednu hodinu se přidá nasycený roztok chloridu amonného po kapkách.

Směs se nakonec koncentruje se za vakua a residuum se vyjme v dichlormethanu. Organická fáze 4 se promývá vodou a potom solankou, suší se nad síranem sodným, filtruje se a koncentruje se za | vakua. Residuum se čistí na silikagelové koloně (vymývaeí rozpouštědlo dichlormethan/- j methanol: 98/2). Získá se čirý žlutý olej s výtěžkem 79 %.

i

16.2) 6-amino-N-[3,5-bis( 1,1-dimethy lethy l)-4-hydroxyfeny l]-4-methyl-2-pyrid i nhe ptán- ' amid, hydrochlorid:

ío Byl použit stejný experimentální protokol jako byl protokol, popsaný pro po sobě jsoucí meziprodukty 2.3 až 2.6, vycházejíce z alkoholového derivátu 16.1 namísto meziproduktu 2.2. Bílý prášek.

Teplota tání: 149 až 151 °C.

NMR ^lH (DMSO d6, 400 MHz, δ): 1,20 - 1,45 (m, 22H, 2 x tBu + 2 x CH₂); 1,56 (široký s, 2H,

CH₂); 1,64 (široký s, 2H, CH₂); 2,23 (t, 2H, CH₂); 2,27 (s, 3H, CH₃ pyridin); 2,63 (t, 2H, CH₂);

6,57 (s, IH, pyridin); 6,59 (s, IH); 7,39 (s, 2H, arom.); 7,72 (široký s, 2H, NH₂); 9,59 (s, IH);

13,78 (s, 1H,NH⁺).

IR: v_C o (amid): 1656 cm'¹.

Příklad 17

6-amino-N-[3,5-bis(l,l-dimethylethyl)M-hydroxyfenyl]-4-methyl-2-pyridinhexanamid, hydrochlorid: Γ7

Byl použit stejný experimentální protokol jako byl protokol, popsaný pro sloučeninu 16, trimethylsilylovaný derivát 5-chlor-l-pentanolu (připraven způsobem podle J. Org. Chem., (1988), (12), 2732-7) nahradil tr imethyl sily lovy derivát 6-brom-l-hexanolu. Bělavá pevná látka.

Teplota tání: 101 až 103 °C.

NMR 'H (DMSO d6,400 MHz, δ): 1,34 (m, 20H, 2 x tBu + CH₂); 1,57 (m, 2H, CH₂); 1,65 (m,

2H, CH₂); 2,25 (m, 5H, CH₂ + CH₃ pyridin); 2,65 (t, 2H, CH₂); 6,59 (s, 2H, pyridin h-OH); 6,72 (s, IH, pyridin); 7,39 (s, 2H, arom.); 7,74 (široký s, 2H, NH₂); 9,61 (s, IH, CO-NH); 13,82 (s,

IH, NH¹).

IR: v_e,o (amid): 1661 cm^-1.

Příklad 18

6-amino-N-[3,5-bis(l,l-dimethylethyl)~4-hydroxyfenyl]~4-methyl-2-pyridmacetarnid, hydrochlorid: £8

18.1) 6-(2,5-dimethyl-l H-pyrrol-1-yl)-4-methyl-2-pyrÍdinoctová kyselina:

Byl použit stejný experimentální protokol jako byl protokol, popsaný pro meziprodukt 2.1, oxid uhličitý nahradil 2-(3-chlorpropoxy)tetrahydro-2H-pyran. Surový získaný produkt se čistí na koloně oxidu křemičitého (vymývaeí rozpouštědlo: dichlormethan/ethanol: 95/5). Získá se bledě žlutý olej s výtěžkem 45 %.

NMR ' H (CDC1₃) 400 MHz, δ): 2,15 (s, 6H, 2 x CH₃); 2,50 (s, 3H, CH₃); 3,90 (s, 2H, CH₂); 5,90 (s, 2H, pyrrol); 7,00 (s, 1H, pyridin); 7,10 (s, 1H, pyridin); 8,0 - 9,0 (hump, CO₂H).

18.2) 6-amino-N-[3,5-bis( 1,1 -dimethyl ethy l)-4-hydroxyfeny l]-4-methyl-2-pyr i dinacetamid, hydrochlorid:

Byl použit stejný experimentální protokol jako byl protokol, popsaný pro meziprodukty 1.5 a 1.6.

Pevná látka bělavé barvy.

-19CZ 299818 B6

Teplota tání: 258 až 260 °C.

NMR Ή (DMSO d6,400 MHz, δ): 1,50 (s, 18H, 2 x tBu); 2,45 (s, 3H, CH₃ pyridin); 3,95 (s, 2H, CH₂); 6,80 (d, 2H, pyridin); 6,95 (s, IH, CO-NH); 7,55 (s, 2H, arom.); 8,00 (široký s, IH, OH); 10,40 (s, ΙΗ,ΝΐΓ).

Příklad 19 a-amino-N-[4-(dimethy1am ino)fenyl]-5-(6-amino-2-pyridinyl)-4-pentinamid, hydrochlorid: J9

19.1) N-(4-d imethy laminofenyl)-a-[( 1, l-dimethylethoxykarbonyl)amíno]-4-pentinamid:

0,73 ml (5,26 mmol) triethylaminu, 0,71 g (5,26 mmol) hydroxybenzotriazolu, 1,02 g (4,78 mmol) 2-terc-butoxykarbonylamino-pent-4-inové kyseliny a 2,014 g (10,52 mmol) hydrochloridu l-(3-dimethylamínopropyl)-3-ethylkarbodiimidu se přidají do suspenze 1 g (4,78 mmol) dihydrochtoridu N,N-dimethyl-l ,4-fenylendiaminu v 25 ml dichlormethanu.

Reakční směs se míchá po dobu 16 hodin při teplotě 23 °C a nakonec zředí 50 ml vody. Organická fáze se dekantuje a promývá 3 x 50 ml vody a potom 50 ml solanky. Po sušení nad síranem sodným se organický roztok filtruje a koncentruje se za vakua. Resíduum odpařování se čistí na koloně oxidu křemičitého (vymývací rozpouštědlo: dichlormethan/ethanol: 30/0,5). Získá se béžová pevná látka s výtěžkem 56 % (0,88 g).

NMR Ή (CDC1₃, 100 MHz, δ): 1,40 (s, 9H, tBu); 2,10 (m, IH, CH); 2,75 (m, 2H, CH₂); 2,90 (s, 6H, 2 x CH₃N); 4,40 (m, IH, CH-CO); 5,45 (široký d, IH, NH); ti.70 (m, 2H, arom.); 7,30 (m, 2H, arom.); 8,10 (široký s, IH, NH),

19.2) 5-(6-amino-2-pyridinyl)-N-(4-dimethylaminofenyl)-a-[( 1, l-dimethylethoxykarbonyl)25 amino]-4-pentinamid:

Meziprodukt 19.2 se připraví kondenzací meziproduktu 19.1 s 2-amino-6-brom-pyridinem za experimentálních podmínek stejných, jako byly podmínky popsané pro syntézu meziprodukt 4.2. Získá se béžová pevná látka s výtěžkem 35 % (0,4 g).

Teplota tání; 192 až 194 °C.

NMR 'H (CDCI₃, 100 MHz, 8): 1,45 (s, 9H, tBu); 2,90 (s, 6H, 2 x CH₃N); 3,00 (m, 2H, CH₂C...C-); 4,50 (m, 3H, NH, + CH-CO); 5,50 (široký d, IH, NH); 6,45 (d, IH, arom.); 6,70 (m, 3H arom.); 7,40 (m, 3H arom.); 8,10 (široký s, IH, NH).

19.3) a-amino-N-[4-(dimethylamino)fenyl]-5-(6-amino-2-pyridinyl)-4-pentinamid, hydro- 35 chlorid:

ml 3N vodného roztoku kyseliny chlorovodíkové se přidá do roztoku, ochlazeného ledovou lázní, 0,4 g (0,94 mmol) meziproduktu 19.2 ve směsi 15 ml ethanolu a 5 ml dichlormethanu. Po míchání po dobu 5 minut se reakční směs koncentruje za vakua. Res i duu m odpařování se vyjme v 25 ml vody a vodná fáze se promývá postupně 20 ml heptanu a 20 ml dichlormethanu. Po ukončení dekantace se vodný roztok lyofilizuje pro získání 0,13 g (30%) béžové pevné látky. Teplota tání > 250 °C.

NMR 'H (DMSO d6, 400 MHz, 8): 3,00 (s, 6H, 2 x CH₃); 3,30 (m, 2H, CH,-C...C-); 4,30 (m,

IH, CH-CO); 7,00 (m, 2H, arom.); 7,55 (m, 2H, arom.); 7,75 (m, 2H, arom.); 7,85 (m, IH, arom.).

IR: v_c=0 (amid): 1655 cm^-1.

A

Příklad 20 a,6-diamino-N-[4-(dimethylamino)fenyl]-2-pyridinyl-pentanamid, hydrochlorid: 20

-20CZ 299818 B6

20.1) 6-amino-a-[( 1, l-d i methy lethoxy karbony l)amino]-N-[4-(dimethylamino)fenyl]-2pyridinyl-pentanamid:

Byl použit stejný experimentální protokol jako byl protokol, popsaný pro sloučeninu 5, meziprodukt 19.2 nahradil sloučeninu 4.2. Získá se světle béžový prášek s výtěžkem 94 %.

Teplota tání: 63 až 66 °C.

NMR Ή (CDCI₃, 100 MHz, δ): 1,50 (s, 9H, tBu); 1,90 (m, 4H, CH-CH^-CH?): 2,70 (m, 2H, CH₂-arom.); 2,90 (s, 6Η, 2 x CH₃N); 4,20 (široký s, 1Η, CH-CO); 4,60 (široký s, 2H, NH₂); 5,80 (široký s, IH, NH); 6,40 (m, 2H, arom.); 6,70 (d, 2H, arom.); 7,40 (m, 3H, arom.); 8,10 (široký s, ΙΗ,ΝΗ).

io

20.2) a,6-diamino-N-[4-(dÍmethylamino)fenyip2-pyridinpentanarnid, hydrochlorid:

Byl použit stejný experimentální protokol jako byl protokol, popsaný pro meziprodukt 19.3, - přičemž meziprodukt 20.1 nahradil meziprodukt 19.2. Získá se velmi hygroskopický béžový prášek s výtěžkem 57 % (0,66 g).

NMR ^lH (DMSO, d6,400 MHz, δ): 1,85 (m, 4H, CH-CH_?~CHD; 2,75 (m, 2H, CH-arom,); 3,10 (s, 6H, 2 x CH₃N); 4,20 (široký s, IH, CH-CO); 6,70 (d, 2H, arom.); 7,70 (široký s, 2H, NH); 7,80 (m, 3H, arom. 4-NPf); 7,90 (široký s, 2H, NIT): 8,50 (široký s, 3H, arom.); 11,45 (široký s, ΙΗ,ΝΙ-f); 14,40 (široký s, ΙΗ,ΝΗ).

IR: v_c_o (amid): 1659 cm^-1.

Příklad 21

6-amino-N-[4-(dimethylamino)fenyl]-4-methyl-2-pyridinhexanamid, hydrochlorid: 21

Byl použit stejný experimentální protokol jako byl protokol, popsaný pro sloučeninu 17. N,Ndimethyl-p-fenýlendiamin nahradil 2,6-di-řerc-butyl-4-aminofenol. Hygroskopická šedá pevná látka.

NMR ^lH (CDC1₃, 100 MHz, δ): 1,43 (m, 2H, CH₂); 1,72 (m, 4H, 2 x CH₂): 2,18 (s, 3H, CH₃); 2,34 (t, 2H, CH₂); 2,55 (t, 2H, CH₂); 2,90 (s, 6H, 2 x CH₃); 6,25 (s, IH, pyridin); 6,36 (s„ IH, pyridin); 6,77 (d, 2H, arom.); 7,35 (d, 2H, arom.). MS: MH⁺ = 341,2.

Příklad 22 ,

6-amino-N-[4-(dimethylamÍno)fenyl]-4-methyl-2-pyridinheptanamid, hydrochlorid: 22.

Byl použit stejný experimentální protokol jako byl protokol, popsaný pro sloučeninu 16, N,Ndímethyl-p-fenylendiamin nahradil 2,6-di-terc-butyM-aminofenol. Hygroskopická žlutavá pevná látka.

NMR ‘H (CD30D, 400 MHz, δ): 1,48 (široký s, 4H, 2 x CH₂); 1,74 (m, 4H, 2 x CH₂): 2,37 (s, 40 3H, CH,); 2,44 (t, 2H, CH₂); 2,73 (t, 2H, CH₂); 3,30 (s, 6H, 2 x CH₃); 6,64 (s, IH, pyridin); 6,66 (s, IH, pyridin); 7,64 (d, 2H, arom.); 7,84 (d, 2H, arom.).

MS: MH⁺ = 355,2.

Příklad 23

N-[(6-amino-4-methyl-2-pyridinyl)buty 1]-1,3-benzodioxol-5-karboxamid, hydrochlorid: 23

Byl použit stejný experimentální protokol jako byl protokol, popsaný pro sloučeninu 8, kyselina piperonylová nahradila 2-hydroxy-5-methoxy-benzoovou kyselinu. Béžová pevná látka.

Teplota tání: 176 až 178 °C.

-21 CL 299818 B6

NMR 'H (DMSO d6, 400 MHz, δ): 1,51 (m, 2H, CH₂); 1,62 (m, 2H, CHJ: 2,27 (s, 3H, CH₃pyridin); 2,68 (m, 2H, CHJ; 3,26 (m, 2H, CHJ; 6,07 (s, 2H, CHJ; 6,58 (m, IH, arom.); 6,60 (s, IH, pyridin); 6,95 (d, IH, arom.); 7,39 (s, IH, pyridin); 7,45 (d, IH, arom.); 7,73 (široký s, 2H, NHJ; 8,35 (t, IH, CONH); 13,92 (široký s, IH, NH⁺).

MS: NH* = 328,2.

Příklad 24

6-amiiio-N-[4-(dimethylamino)fenyl]^-methyl-2-pyridinpentanamid, hydrochlorid: 24

Byl použit stejný experimentální protokol jako-byl protokol, popsaný pro sloučeninu 1, N,Ndimethyl-p-fenylendiamin nahradil 2,6-di-terc-butyl-4-amínofenol. Hygroskopická šedá pevná látka.

NMR 'H (CDjOD, 400 MHz, δ): 1,72 (m, 4H, 2 x CHJ; 2,18 (s, 3H, CHJ; 2,35 (t, 2H, CHJ; 2,56 (t, 2H, CHJ; 2,88 (s, 6H, 2 x CHJ; 6,24 (s, IH, pyridin); 6,35 (s, IH, pyridin); 6,76 (d, 2H, arom.); 7,34 (d, 2H, arom.).

MS: MH* = 327,2.

Příklad 25 {[4-(6-amino-4-methy]-2-pyridinyl)butyl]amino}-N-[(4-dimethylamino)fenyl]-acetamid, hydrochlorid: 25

25.1) 2-amino-N-[4-(dimethylamino)fenyl)]acetamÍd:

Meziprodukt 25.1 se získá po oddělení /erc-butoxykarbonylové funkční skupiny (viz T. W. Greene a P. G. M. Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, druhé vydání (Wiley-Inter25 science, 1991)) N-[4-(dimethylamino)fenyl)]-2-[(l, l-dimethylethoxykarbonyl)amino]-acetamidu, který byl sám připraven postupem podle experimentálního protokolu, který je popsán v Synth. Commun., (1993), 23 (9), 1339-1349. Bílá pevná látka.

Teplota tání: 166 až 168 °C.

. NMR 'H (CDCI₃, 100 MHz, δ): 1,60 (široký s, 2H, NHJ; 2,90 (s, 6H, 2 x CHJ; 3,45 (s, 2H,

CH₂); 6,70 (d, 2H, arom.); 7,45 (d, 2H, arom.); 9,10 (široký s, IH, NH).

25.2) 2-(3,3-dimethoxypropyl)-6-(2,5-dimethy]-l H-pyrrol-l-yl)-4-methyI pyridin:

Byl použit stejný experimentální protokol jako byl protokol, popsaný pro meziprodukt 1,1, bromacetaldehyd dimethylacetal nahradil tr imethy 1-4-brombutyrát. Získá se žlutý olej' s výtěžkem

72 %.

NMR *H (CDCh, 100 MHz, 6): 1,90 (m, 2H, CH2-CH(OCH₃)₂); 2,10 (s, 6H, 2 x CH₃ pyrrol): 2,40 (s, 3H, CH₃ pyridin); 2,80 (m, 2H, CHwrom.): 3,30 (s, 6H, 2 x CH₃-O); 4,40 (t, IH, CH(OCH₃)₂); 5,80 (s, 2H, pyrrol); 6,90 (d, 2H, pyridin).

25.3) 6-(2,5-dimethy 1-1 H-pyrrol-l-vl)-4-methyl-2-pyridin propanol:

Roztok 0,3 g (10,4 mmol) meziproduktu 25.2 ve směsi 20 ml kyseliny octové a 10 ml IN vodného roztoku HCI se míchá po dobu 18 hodin při teplotě 23 °C. Reakční směs se potom koncentruje se za vakua a residuum se rozpustí v 50 ml vody. Vodný roztok se alkalizuje na pH 9-10 přidáním NaHCO₃ a potom se extrahuje 2 x 100 ml ethylacetátu. Organické fáze se shromáždí a promývají lOOml vody a potom lOOml solanky. Po sušení nad síranem sodným, filtraci a koncentrace za vakua se residuum čistí mžikovou chromatografií na koloně oxidu křemičitého (vymývací rozpouštědlo: ethylacetát / heptan: 1/3). 0,1 g bezbarvého oleje (40 %).

NMR ‘H (CDCh, 100 MHz, δ): 2,10 (s, 6H, 2 x CH₃ pyrrol); 2,40 (s, 3H, CH₃ pyridin); 3,00 (m, 4H, CH₂-CH₂); 5,80 (s, 2H, pyrrol); 6,90 (d, 2H, pyridin); 9,80 (s, IH, CHO).

-22*

25.4) {{4-[6-(2,5-dimethyl-lH-pyrrol-l-yl)-4-methyl-2-pyridinyl]butyl}amino}-N-[(4dimethylamino)fenyl]acetamid:

l g aktivovaných práškových 4A molekulárních sít a 0,6 g (2,79 mmol) triacetoxyborohydridu sodného se přidají do roztoku 0,33 g (1,69 mmol) meziproduktu 25.1 v 20 ml bezvodého dichlor1,2-ethanu. Reakční směs se ochladí na teplotu -15 °C a po kapkách se přidá 0,45 g (1,86 mmol) aldehydu 25.3 rozpuštěného v 10 ml bezvodého dichlor-l,2-ethanu. Po míchání po dobu 18 hodin při teplotě 23 °C se směs zředí 50 ml nasyceného vodného roztoku NH4CI, následuje míchání a dekantace. Vodná fáze se znovu extrahuje 2 x 50 ml dichlormethanu. Nakonec se všechny organické fáze se shromáždí a promývají 100 ml solanky. Tento organický roztok se potom se suší nad síranem sodným, filtruje se a koncentruje se za vakua. Residuum odpařování se potom čistí na koloně oxidu křemičitého (vymývaeí rozpouštědlo; dichlormethan / ethanol: 20/1). Získá se bezbarvý olej s výtěžkem 15 % (0,12 g).

NMR *H (CDC1₃, 100 MHz, δ): 2,00 (m, 2H, CH, -pyridin); 2,10 (s, 6H, 2 xCH₃ pyrrol); 2,30 (s,

3H, CH₃ pyridin); 2,40 (široký s, IH, NH); 2,80 (m, 4H, CH₂-CHr-N); 2,90 (s, 6H, 2 x CH₃-N);

3,35 (s, 2H, N-CH₂-C=O); 5,80 (s, 2H, pyrrol); 6,70 (d, 2H, arom.); 6,90 (d, 2H, pyridin); 7,40 (d, 2H, arom.); 9,10 (široký s, IH, NHCO).

25.5) {[4-(6-amino-4-methyl-2-pyrÍdinyl)butyl]amino}-N-[(4-dimethylamino)fenyl]20 acetamid:

Byl použit stejný experimentální protokol jako byl protokol, popsaný pro sloučeninu 1.6, přičemž meziprodukt 25.4 nahradil meziprodukt 1.6. Po chromatografií na silikagelu (vymývaeí rozpouštědlo dichlormethan/ethanol/hydroxid amonný (20%); 20/0,5/0,5) se získá bílá pevná látka s výtěžkem 46 %.

25.6) {[4-(6-amino-4-methyl-2-pyridinyl)butyl]amino}-N-[(4-dimethylamino)fenylJacetamid, hydrochlorid:

Byl použit stejný experimentální protokol jako byl protokol, popsaný pro meziprodukt 19.3, přičemž meziprodukt 25.5 nahradil meziprodukt 19.2. Získá se velmi hygroskopický béžový prášek s výtěžkem 65 % (0,038 g).

NMR ^lH (DMSO d6, 400 MHz, δ): 2,10 (m, 2H, -CHt-CH^-CHt-); 2,30 (s, 3H, CH₃ pyridin); 2,80 (m, 2H, -CH₂-N); 3,15 (m, 2H, CH₂-arom.); 3,25 (s, 6H, 2 x CH₃-N); 4,10 (s, 2H, N-CH₂C=O); 6,60 (d, 2H, pyridin); 7,55 (d, 2H, arom.); 7,65 (d, 2H, arom.).

MS:MH⁺ = 341.

. .

Příklad 26

6-amino-N-[3-(4-hydroXý-3-methoxy-fenyl)-2-propenyl]-4-methyl-2-pyrÍdinbutanamin, hydrochlorid: 26

26.1) 6-(2,5—d i me thy 1—1 H-pyrrot-l-yl)-N-[3-(4-hydroxy-3-methoxy-ťenyl)-2-propenylpl~ methyl-2-pyridinbutanamin:

0,27 g (1,5 mmol) 4-hydroxy-3-methoxycinnamaldehydu a 2 g aktivovaných 3A molekulárních sít se přidají do roztoku 0,39 g (1,5 mmol) meziproduktu 8.1 v 15 ml methanolu. Reakční směs se míchá po dobu 24 hodin při teplotě 20 °C před přidáním, při teplotě 0 °C, 0,06 g (1,65 mmol) NaBH, míchání se udržuje při teplotě 20 °C po dobu dalších 24 hodin. Nakonec přebytek hydridu odstraní přidáním 5 ml vody a směs se filtruje fritou. Filtrát se koncentruje za vakua. Residuum odpařování se čistí na koloně oxidu křemičitého (vymývaeí rozpouštědlo: CH₂C1₂2/ MeOH/ NH4OH při 20%: 95/4,5/0,5). Získá se hnědý olej s výtěžkem 40 %.

26.2) 6-amino-N-[3-(4-hydroxy-3-methoxy-fenyl)-2-propenyl]^4-methyl-2-pyridinbutanamin, hydrochlorid:

-23CZ 299818 B6

Byl použit stejný experimentální protokol jako byl protokol, popsaný pro meziprodukt 1.6, přičemž meziprodukt 26.1 nahradil meziprodukt 1.5. Hnědá pevná látka.

Teplota tání: 60 až 62 °C.

NMR ‘H (DMSO d6, 400 MHz. δ): 1,65 (m, 2H, CH₂); 1,72 (m, 2H, CH₂); 2,28 (s, 3H, CH₃5 pyridin); 2,69 (široký s, 2H, CH₂); 2,94 (široký s, 2H, CH₂); 3,66 (široký s, 2H, CH₂); 3,72 (s,

3H, CHy-O); 6,10 (m, IH, -CH=CH₂-CH₂); 6,67 (d, IH, -CH=CH-CH₂; 6,82 (d, IH, arom.); 6,88 (d, IH, arom.); 7,00 (s, IH, arom.); 7,73 široký s, 2H, NH₂); 8,91 (široký s, 2H, NH + OH); 9,23 (s, IH,NH⁺).

MS: MH* = 342,3.

Příklad 27

6-arnino-N-[4-chlor-2-(fenylamino)fenyl]M-methyl-2-pyridinpentanamÍd, hydrochlorid: 27

Byl použit stejný experimentální protokol jako byl protokol, popsaný pro meziprodukt 1,5, 4chlor-2-(fenylamino)-fenylamin (Justus Liebigs Ann. Chem., (1909), 322) nahradil 2,6-di-tercbutyM-aminofenol. Béžový prášek.

Teplota tání: 176 až 178 °C.

NMR 'H (DMSO d6, 400 MHz, δ): 1,70 (široký s, 4H, 2 κ CH₂); 2,26 (s, 3H, CH₃); 2,62 (t, 2H,

CH₂); 2,95 (t, 2H, CH₂); 6,54 (s, IH, pyridin); 6,60 (s, 1H, pyridin); 7,32 (s, IH, arom.); 7,408,00 (m, 8H, arom.); 14,1 (široký s, IH, NHCO).

IR: v_c=o (amid): 1660 cm^-1.

Příklad 28

N-[(6-amino-4-methyl-2-pyridinyl)butyl]-l ,3-benzodioxol-5-acetamid, hydrochlorid: 28

Byl použit stejný experimentální protokol jako byl protokol, popsaný pro sloučeninu 8, 3,4(methylendioxy)fenyloctová kyseliny nahradila 2-hydroxy-5-methoxybenzoovou kyselinu.

Béžová pevná látka.

Teplota tání: 56 až 58 °C.

NMR 'H (DMSO d6, 400 MHz, δ): 1,42 (m, 2H, CH₂); 1,62 (m, 2H, CH₂); 2,27 (s, 3H, CH₃); 2,61 (t, 2H, CH₂); 3,05 (m, 2H, CH₂); 3,30 (s, 2H, CH,-CO); 5,95 (s, 2H, O-CH₂-O); 6,53 (s, IH, pyridin); 6,60 (s, IH, pyridin); 6,68 (d, IH, arom.); 6,79 (s, IH, arom.); 6,81 (d, IH, arom.);

7,76 (široký s, 2H,.NH₂); 8,05 (t, 1H, NH-CO); 13,99 (s, IH, NH⁴). .

MS: MH⁴ = 342,2.

Příklad 29

N-[4-(6-amino-4-methyl-2-pyridinyl)butyl]-N-( 1,3-benzodioxol-5-ylmethyl)amin, fumarát: 29

Byl, použit stejný experimentální protokol jako byl protokol, popsaný pro sloučeninu 26, piperonal nahradil 4-hydroxy-3-methoxycinnamaldehyd. Béžová pevná látka.

Teplota tání: 224 až 226 °C.

NMR Ή (DMSO d6, 400 MHz, δ): 1,58 (s, 4H, 2 x CH₂); 2,09 (s, 3H, CH₃); 2,43 (t, 2H, CH₂); 2,76 (t, 2H, CH₂); 3,93 (s, 2H, CHo-NHl: 5,95 (široký s, 3H, NH₂ 4- NH); 6,01 (s, 2H, O-CH₂O); 6,10 (s, IH, fumarát); 6,20 (s, IH, fumarát); 6,50 (s, 2H, pyridin); 6,91 (s, 2H, arom.); 7,05 (s, IH, arom.).

MS: MH⁴ = 314.

-24CZ 299818 B6

Příklad 30

N-[4_(6-amino-4-methyl-2-pyridÍnyl)butyl]-N-[( 10-3-fenyl_2-propenyl]amin, fumarát: 30

Byl použit stejný experimentální protokol jako byl protokol, popsaný pro sloučeninu 26, trans5 cinnamaldehyd nahradil 4-hydroxy-3-methoxycinnamaldehyd. Krémově zabarvená pevná látka.

Teplota tání: 163 až 165 °C.

NMR *H (DMSO dó, 400 MHz, δ): 1,61 (široký s, 4H, 2 x CH₂); 2,08 (s, 3H, CH₃); 2,45 (t, 2H, CH₂); 2,85 (t, 2H, CH₂); 3,63 (d, 2H, CH-CH-CH₂); 4,47 (široký s, IH, NH); 5,87 (široký s, 2H, NH₂); 6,10 (s, IH, fumarát); 6,21 (s, IH, fumarát); 6,31 (m, IH, CH-CH-CHT: 6,50 (s, 2H, pyridin); 6,72 (d, IH, CH=CH-CH₂); 7,20 - 7,50 (m, 5H, arom.).

MS: MH⁺ = 296.

Příklad 31 (E)-N-[4-(6-amino4-methyl-2-pyridinyl)butyl j-3-( 1,3-benzodioxo1-5-yl)-2-benzodioxol, fumarát: 31

Byl použit stejný experimentální protokol jako byl protokol, popsaný pro sloučeninu 8, kyselina 3,4-methylendioxyskořicová nahradila 2-hydroxy-5-methoxybenzoovou kyselinu. Krémově zabarvená pevná látka.

Teplota tání: 111 až 113 °C.

NMR ’H (DMSO d6, 400 MHz, δ): 1,45 (m, 2H, CH₂); 1,61 (m, 2H, CH₂); 2,12 (s, 3H, CH₃); 2,49 (m, 2H, CH₂); 3,18 (m, 2H, CH₂); 6,05 (s, 2H, O-CHr-O); 6,16 (s, IH, fumarát); 6,26 (s, IH, fumarát); 6,44 (d, IH, CH=CH-CO); 6,60 (s, 2H, pyr.); 6,93 (d, IH, arom.); 7,05 (d, IH, arom.); 7,11 (s, 1H, arom.); 7,31 (d, 1H, CHCH-CO); 7,97 (t, 1H, NH-CO).

MS:MH* = 354.

Příklad 32

2-( {[4-(6-am i no-4-tn ethy 1-2-pyrid iny l)butyl] am i no} methy 1 )-4-methoxyfen ol: 32

Byl použit stejný experimentální protokol jako byl protokol, popsaný pro meziprodukt 26.1, 2hydroxy-5-methoxybenzaldehyd nahradil 4-hydroxy-3-methoxycinnamaldehyd. Okrově zbarvený olej.

NMR ^JH (DMSO d6, 400 MHz, δ): 1,62 (m, 2H, CH₂); 1,74 (m, 2H, CH₂); 2,21 (s, 3H, CH₃); 2,57 (t, 2H, CH₂, J = 7,5 Hz); 2,72 (t, 2H, CH₂, J - 6,85 Hz); 3,74 (s, 3H, O-CH₃); 3,96 (s, 2H, CH₂-NH); 4,00- 5,00 (široký s, 3H, NH₂ H-NH); 6,20 (s, IH, pyridin); 6,34 (s, IH, pyridin); 6,60 (s, 1H, arom.); 6,75 (m, 2H, arom.).

MS:MřT = 3I6.

Příklad 33 .

N-[2~(benzyloxy)-4,5-diměthoxybenzyl]^l-[6-(2,5-dimethyl-1 H-pyrrol-1 -yl)-4-methyl-2pyridinylj-l-butanamin: 33

Byl použit stejný experimentální protokol jako byl protokol, popsaný pro meziprodukt 26.1, 2benzyloxy-4,5-dimethoxybenzaldehyd nahradil 4-hydroxy-3-methoxycinnamaldehyd. Hnědý olej.

NMR ‘H (DMSO d6,400 MHz, δ): 1,45 (m, 2H, CH₂); 1,67 (m, 2H, CH₂); 2,01 (s, 6H, CH₂); 2 x 50 CH₃ (pyrrol)); 2,34 (s, 3H, CH₃); 2,50 (m, 2H, CH₂); 2,66 (m, 2H, CH₂); 3,64 (s, 2H, CHr-NH);

-25CZ 299818 B6

3,66 (s, 3H, O-CH3); 3,74 (s, 3H, O-CH₃); 4,40 (široký s, IH, NH); 5,07 (s, 2H, O-CHr-Ph); 5,75 (s, 2H, pyridin); 6,70 - 7,50 (m, 9H, arom. + pyridin).

Příklad 34

6-(4-{[2-(benzyloxy)-A,5-dimethoxybenzyl]amino}butyl)-4-methyl-2-pyridinamin: 34

Byl použit stejný experimentální protokol jako byl protokol, popsaný pro meziprodukt 1.6, sloučenina 33 nahradila meziprodukt 1.5. Získá se volná báze ve formě hnědé pěny.

NMR ^lH (CDC1₃, 400 MHz, δ): 1,66 (m, 2H, CH₂); 1,80 (m, 2H, CH₂); 2,18 (s, 3H, CH₃); 2,43 (m, 2H, CH₂); 2,86 (m, 2H, CH₂); 3,82 (s, 3H, O-CH₃); 3,86 (s, 3H, O-CH₃); 4,14 (s, 2H, CřLNH); 5,05 (s, 2H, O-CH?-Fh); 5,20 - 6,10 (m, 3H, NH₂ + NH); 6,20 - 7,40 (m, 9H, arom. + pyridin).

MS:MH⁴ = 43Ó.

Příklad 35

2-({[4-(6-amino-4-methyl-2-pyridinyl)butyl]amino}methyl)-4,5-dimethoxyfenol: 35

Tato sloučenina se získá debenzylací sloučeniny 34 v přítomnosti vodíku a Pd/C za standardních podmínek. Béžová pěna.

NMR 'H (DMSO d6,400 MHz, δ): 1,67 (m, 4H, 2 x CH₂); 2,22 (s, 3H, CHj); 2,60 (m, 2H, CH₂); 2,86 (m, 2H, CH₂); 3,68 (s, 3H, O-CH₃); 3,70 (s, 3H, O-CH₃); 3,97 (s, 2H, CHr-NH): 6,50 7,00 (m, 4H, arom. + pyridin); 7,21 (široký s, IH, OH); 9,10 (široký s, 2H, NH₂); 14,00 (široký s, IH, NH).

Μ8:ΜΗ* = 346.

Příklad 36

N-[4-(6-amino-4~methyl-2-pyridinyl)butyl]-6-hydroxy-2,5,7,8-tetramethyl-2-chromankarboxamid, fumarát: 36

Byl použit stejný experimentální protokol jako byl protokol, popsaný pro sloučeninu 8, 3,4dihydro-6-hydroxy-2,5,7,8-tetramethyl-2H-[ 1 ]-benzopyran-2-karboxylová kyselina (Trolox) nahradila 2-hydroxy-5-methoxy-benzoovou kyselinu. Bílá pevná látka.

Teplota tání: 131 až 136 ^QC.

NMR Ή (DMSO d6, 400 MHz, δ): 1,30 - 1,35 (m, 2H, CH₂); 1,32 (s, 3H, Trolox); 1,42 (m, 2H, CH₂); 1,70 (m, IH, CH₂ Trolox); 1,90-2,10 (4 x s, 12H,3xCH₃ Trolox + CH₃ Pyr.); 2,15 (m, IH, CH₂ Trolox); 2,36 (m, 2H, CH₂); 2,50 (m, 2H, CH₂ Trolox); 3,08 (m, 2H, CH₂); 6,08 (široký s, 2H, NH₂); 6,11 (s, IH, pyridin); 6,16 (s, IH, pyridin); 6,58 (s, IH, OH); 7,25 (široký t, IH, NHCO, J = 5,2 Hz).

MS:MH⁺ = 412.

Farmakologické studie produktů podle předloženého vynálezu

Studie účinků na neuronální konstituční NO syntázu v krysím mozečku

Inhibiční aktivita produktů podle předloženého vynálezu se určí měřením jejich účinků na přeměna prostřednictvím NO syntázy [³H]L-argininu na [³H]L-citrulin modifikací způsobu, který popsali Bredt a Snyder (Proč. Nati. Acad. Sci. USA, (1990) 87: 682-685). Mozečky krys Sprague-Dawley (300 g - Charles River) se rychle odeberou, pitvají při teplotě 4 °C a homoge-26CZ 299818 B6 nizují v extrakčním pufru (HEPES 50 mM, EDTA 1 mM, pH 7,4, pepstatin A 10 mg/ml, leupeptin 10 mg/ml). Homogenáty se potom centrifugují při 21000 g po dobu 15 minut při teplotě 4 °Č, Dávkování se provádí ve skleněných testovacích trubicích, do kterých je distribuováno 100 μΐ inkubačního pufru, obsahujícího 100 mM HEPES pH 7,4, 2 mM EDTA, 2,5 mM CaCl₂,

2 mM dithiotreitolu, 2 mM redukovaného NADPH a Í0 pg/ml calmodulinu. Přidá se 25 μΐ roztoku, obsahujícího 100 nM [³H]L-argininu (specifická aktivita: 56,4 Ci/mmol, Amersham) a 40 μΜ neradioaktivního L-argininu, Reakce se iniciuje přidáním 50 μΐ homogenátu, konečný objem je 200 μΐ (zbývajících 25 μΐ je buď voda, nebo testovaný produkt). Po uplynutí 15 minut se reakce zastaví 2 ml ukončovacího pufru (20 mM HEPES, pH 5,5, 2 mM EDTA). Po průchodu ío vzorků 1 ml kolonou pryskyřice DOWEX se měří radioaktivita kapalinovým scintilačním spektrometrem. Sloučeniny z Příkladů 1, 3, 8, 10, 12, 13, 21, 23 to 26, 29 až 32, 34 a 35 popsaných výše vykazují ICso nižší než 5 μΜ.

Studie účinků na lipidovou peroxidaci mozkové kůry krys

Inhibiční aktivita produktů podle předloženého vynálezu se určí měřením jejich účinků na stupeň lipidové peroxidace, určené koncentrací malondialdehydu (MDA). MDA produkovaný peroxidací nenasycených mastných kyselin je dobrým indikátorem lipidové peroxidace (H. Esterbauer a K. H. Cheeseman, Meth. Enzymol. (1990) 186: 407^121). Samci krys Sprague Dawley o hmotnosti 200 až 250 g (Charles River) byly usmrceni, mozková kůra byla odebrána potom homoge20 nizována Thomasovým homogenizátorem v pufru 20 mM Tris-HCl, pH = 7,4. Homogenát se centrifuguje dvakrát při 5000 g po dobu 10 minut při teplotě 4 °C. Pelet se uchovává při teplotě -80 ^QC. V den experimentu se pelet suspenduje v koncentraci 1 g/15 ml a centrifuguje při 515 g po dobu 10 minut při teplotě 4 °C. Supematant se okamžitě použije pro určení lipidové peroxidace. Homogenát krysí mozkové kůry (500 μΐ) se inkubuje při teplotě 37 °C po dobu 15 minut v přítomnosti testovaných sloučenin nebo rozpouštědla (10 μΐ). Lipidová peroxidaění reakce se iniciuje přidáním 50 μΐ FeCl₂ 1 mM, EDTA 1 mM a kyseliny askorbové 4 mM, Po inkubaci po dobu 30 minut při teplotě 37 °C se reakce zastaví přidáním 50 μΐ roztoku hydroxy lo váného diřerc-butyltoluenu (BHT, 0,2 %). MDA se určuje pomocí kolorimetrického testu reakcí chromogenního reagentu (R), N-methyl-2-fenylindolu (650 μΐ) s 200 μΐ homogenátu po dobu 1 hodiny při teplotě 45 °C. Kondenzace molekuly MDA se dvěma molekulami reagentu R vytváří stabilní chromofor, který má vlnovou délku maximální absorpce rovnou 586 nm. (Caldwell a kol, European J. Pharmacol.,(1995) 285, 203-206). Sloučeniny podle Příkladů 1, 6, 13, 21, 24, 26 a 35 popsaných výše všechny vykazují IC₅₀ nižší než 30 μΜ.

Claims

PATENTOVÉ NÁROKY

1. Sloučenina zvolená ze souboru zahrnujícího následující sloučeniny: 6-amino-N-[3,5-bis-(l,l-dimethylethyl)“4-hydroxyfenyI]-4-methyl-2-pyridÍnpentanamid; N-[(6-amino-4-methyl-2-pyridinyl)butyl]-2,5-dihydroxy-3-(l-methylethyl)benzamÍd; 6-amino-N-[4_(dimethylamino)fenyl]-4-methyl-2-pyrÍdinhexanamid;

45 6-amino-N-[4-(dimethylamino)fenyl]-4“methyl-2-pyridinpentananamid;

6-amino-N-[3-(4-hydroxy-3-methoxy-fenyl)-2-propenyl]-4-methyl-2-pyridinbutanamin;
2-( {[4-(6-amino-4-methyl-2-pyridinyl)buty ljamino} methyl)-4,5-dÍmethoxyfenol;

nebo adiění sůl jedné z těchto sloučenin s organickými nebo anorganickými kyselinami nebo bázemi.

2. Sloučenina podle nároku 1 nebo farmaceuticky přijatelná sůl takové sloučeniny, jako léčivo.

-27CZ 299818 B6
3. Farmaceutická kompozice, vyznačující se tím, že obsahuje jako účinnou složku alespoň jednu sloučeninu podle nároku 1 nebo farmaceuticky přijatelnou sůl takové sloučeniny.
5 4. Použití sloučeniny podle nároku 1 nebo farmaceuticky přijatelné soli takové sloučeniny pro přípravu léčiva pro inhibicí NO syntázy.

5. Použití sloučeniny podle nároku 1 nebo farmaceuticky přijatelné soli takové sloučeniny pro přípravu léčiva pro inhibicí lipidické peroxidace.
6. Použití sloučeniny podle nároku 1 nebo farmaceuticky přijatelné soli takové sloučeniny pro přípravu léčiva, které má současně účinky inhibice NO syntázy a inhibice lipidické peroxidace.
7. Použití sloučeniny podle nároku 1 nebo farmaceuticky přijatelné soli takové sloučeniny pro 15 přípravu léčiva pro léčení patologií, zvolených ze souboru, který zahrnuje kardiovaskulární a cerebrovaskulámí poruchy, poruchy centrálního nebo periferálního nervového systému, poruchy kosterního svalstva a neuromuskulámích spojů, kožní onemocnění, proliferativní a zánětlivá onemocnění, autoimunitní a virová onemocnění a neurologická onemocnění související s intoxikací, léčení nebo poruchy genetického původu.
8. Použití podle nároku 7, kde připravené léčivo je určeno pro léčení kardiovaskulárních a cerebrovaskulámích poruch.
9. Použití podle nároku 8, kde kardiovaskulární a cerebrovaskulámí poruchy jsou zvoleny ze 25 souboru zahrnujícího atherosklerózu, migrénu, arteriální hypertenzi, septický šok, ischemický nebo hemoragický srdeční nebo mozkový infarkt, ischemie a trombózy.
10. Použití podle nároku 7, kde připravené léčivo je určeno pro léčení poruchy centrálního nebo periferního nervového systému.
11. Použití podle nároku 10, kde poruchy centrálního nebo periferního nervového systému jsou zvoleny ze souboru zahrnujícího mozkový infarkt, sub-arachnoidní krvácení, stárnutí, senilní demence, Alzheimerovu nemoc, Huntíngtonovu choreu, Parkinsonovu nemoc, Creutzfeld Jacobovu nemoc a prionová onemocnění, amyotrofní laterální sklerózu, bolest, mozková a míšní

35 traumata, návyk na opiáty, alkohol a návykové látky, erektivní a reprodukční poruchy, kognitivní poruchy a encefalopatie.
12. Použití podle nároku 7, kde připravené léčivo je určeno pro léčení roztroušené sklerózy.

Konec dokumentu