CZ299879B6 - Zpusob prípravy cyklického pentapeptidu cyklo(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal) a lineární pentapeptidy, jako meziprodukty - Google Patents

Zpusob prípravy cyklického pentapeptidu cyklo(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal) a lineární pentapeptidy, jako meziprodukty Download PDF

Info

Publication number
CZ299879B6
CZ299879B6 CZ20013214A CZ20013214A CZ299879B6 CZ 299879 B6 CZ299879 B6 CZ 299879B6 CZ 20013214 A CZ20013214 A CZ 20013214A CZ 20013214 A CZ20013214 A CZ 20013214A CZ 299879 B6 CZ299879 B6 CZ 299879B6
Authority
CZ
Czechia
Prior art keywords
nmeval
dphe
asp
arg
gly
Prior art date
Application number
CZ20013214A
Other languages
English (en)
Other versions
CZ20013214A3 (cs
Inventor
Jonczyk@Alfred
Arnold@Markus
Original Assignee
Merck Patent Gmbh
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Merck Patent Gmbh filed Critical Merck Patent Gmbh
Publication of CZ20013214A3 publication Critical patent/CZ20013214A3/cs
Publication of CZ299879B6 publication Critical patent/CZ299879B6/cs

Links

Classifications

    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C07ORGANIC CHEMISTRY
    • C07KPEPTIDES
    • C07K7/00Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K7/04Linear peptides containing only normal peptide links
    • C07K7/06Linear peptides containing only normal peptide links having 5 to 11 amino acids
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00Antineoplastic agents
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C07ORGANIC CHEMISTRY
    • C07KPEPTIDES
    • C07K5/00Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06Dipeptides
    • C07K5/06086Dipeptides with the first amino acid being basic
    • C07K5/06095Arg-amino acid
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C07ORGANIC CHEMISTRY
    • C07KPEPTIDES
    • C07K5/00Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/08Tripeptides
    • C07K5/0819Tripeptides with the first amino acid being acidic
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C07ORGANIC CHEMISTRY
    • C07KPEPTIDES
    • C07K7/00Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K7/64Cyclic peptides containing only normal peptide links
    • YGENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02PCLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
    • Y02P20/00Technologies relating to chemical industry
    • Y02P20/50Improvements relating to the production of bulk chemicals
    • Y02P20/55Design of synthesis routes, e.g. reducing the use of auxiliary or protecting groups

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Abstract

Zpusob prípravy cyklického pentapeptidu cyklo(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal) cyklizací lineárního pentapeptidu voleného ze souboru sestávajícího z H-Arg(Pbf)-Gly-Asp(OBzl)-DPhe-NMeVal-OH, H-Gly-Asp(OBzl)-DPhe-NMeVal-Arg(Pbf)-OH, H-Asp(OBzl)-DPhe-NMeVal-Arg(Pbf)-Gly-OH, H-DPhe-NMeVal-Arg(Pbf)-Gly-Asp(OBzl)-OH a H-NMeVal-Arg(Pbf)-Gly-Asp(OBzl)-DPhe-OH, následným odstranením chránicích skupin a poprípade další konverzí na fyziologicky prijatelné soli. Lineární pentapeptidy jako meziprodukty pro jeho prípravu.

Description

Oblast techniky
Vynález se týká nového způsobu přípravy cyklického pentapeptidu cyklo(Arg-Gly-Asp-DPheNMeVal) a lineárních pentapeptidů, jako meziproduktů pro tuto přípravu.
Dosavadní stav techniky
Cyklické pentapeptidy například také cyklo(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal) a jejich fyziologicky přijatelné soli jsou popsány v patentovém spise číslo EP 0 770 622. Tento vynález je výběrovým vynálezem se zřetelem na EP 0 770 622.
Obecně se cyklické peptidy získávají cyklizací lineární prekurzorové molekuly za obvyklých podmínek syntézy peptidů. Aby mohla být zaručena selektivní vazba dvou aminokyselin nebo dvou segmentů sestávajících z několika aminokyselin, nebo alternativně cyklizace lineárního peptidu, je třeba blokovat vhodnými chránícími skupinami odpovídající funkční části aminokyselin, které se nemají na reakci podílet. Byly proto vyvinuty různé typy chránících skupin pro aminoskupiny, pro skupiny karboxylové, hydroxylové, thiolové nebo karboxamidoskupiny a také pro guanidinové skupiny nebo pro imidazolový dusík, které ve svých kombinacích umožňují velkou možnost obměn se zřetelem na optimalizaci shora uvedených reakcí. Syntéza lineárních prekurzorových molekul, lineárních peptidu se může nadto provádět dvěma způsoby, jednak syntézou peptidu v pevné fázi, jednak v roztoku. V tomto případě jsou možné postupné kopulace aminokyselin nebo fragmentové kondenzace segmentů aminokyselin. Příslušné kopulační stupně se mohou opět provádět za pomoci různých kondenzačních činidel, jako jsou karbodiimidy, karbod i imidazol, sloučeniny uroniového typu, jako TBTU, nebo způsoby používajícími směsné anhydridy nebo aktivní estery.
Vynález je založen na vyvinutí nového zlepšeného způsobu přípravy cyklo(Arg-Gly-AspDPhe-NMeVal) v porovnání s dosud známými způsoby.
S překvapením se zjistilo, že při syntéze cyklopeptidu cyklo(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal) cyklizací lineární prekurzorové molekuly, kombinace chránících skupin 2,2,4,6,7-pentamethyldihydrobenzofuran-5-sulfonylové (Pbf) pro guanidinoskupinu ve vedlejším řetězci argininu a benzylové (Bzl) pro karboxylovou skupinu ve vedlejším řetězci asparagové kyseliny vede k optimalizaci výtěžku.
Podstata vynálezu
Podstatou vynálezu je způsob přípravy cyklického pentapeptidu, 45 cyklo(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal) cyklizací lineárního pentapeptidu voleného ze souboru zahrnující ho
H-Arg(Pbf)-Gly-Asp(OBzl}-DPhe-NMeVal~OH,
H-Gly-Asp(OBzl)-DPhe-NMeVal-Arg(PbO-OH, H-Asp(OBzl)-DPhe-NMeVal-Arg(Pbť)-Gly-OH, H-DPhe-NMeVal-Arg(Pbf)-Gly-Asp(OBzl)-OH nebo H-NMeVal-Arg(Pbf)-G1y-Asp(OBzl)-DPhe-OH,
-1 CZ 299879 B6 následným odstraněním chránící skupiny a popřípadě další konverzí na fyziologicky přijatelné soli.
Vynález se dále tyká způsobu přípravy cyklického pentapeptidu cyklo(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal) který spočívá v tom, že lineární pentapeptid H-Asp(OBzl)-DPhe-NMeVal-Arg(Pbf}-Gly-OH se cyklízuje.
io Reakční podmínky této cyklizace lineárních pentapeptidů volených ze souboru zahrnujícího
H-Arg(Pbf)-Gly-Asp(OBzl)-DPhe-NMeVal-OH, H-Gly-Asp(OBzl}-DPhe-NMeVal-Arg(Pbf)-OH, H-Asp(OBzl)-DPhe-NMeVaí-Arg(Pbf)-G1y-OH, H-DPhe-NMeVal-Arg(Pbf)~Gly-Asp(OBzl)-OH nebo
H-NMeVal-Arg(Pbf)-Gly-Asp(OBzl)-DPhe-OH, s ohledem na volbu dehydratačního činidla, inertního rozpouštědla a reakční teploty a další převádění na jejich fyziologicky přijatelné soli jsou popsány v EP 0 770 622.
Benzy lová chránící skupina na vedlejším řetězci asparagové kyseliny může byt odstraněna za obvyklých podmínek (například T.W. Greene, P.G.M. Wuts, Protective Groups in Organic Chemistiy, 2. vydání, vydavatel Wiley, New York 1991; nebo P.J. Kocienski, Protecting Groups 1. vydání, nakladatel George Thieme Verlag, Stuttgart-New York, 1994; H. Kunz, H. Waldmann, Comprehensive Organic Synthesis, sv. 6,. (vydavatel B.M. Trošt, I. Fleming, E. Winterfeldt), Pergamen, Oxford str. 631 až 701, 1991) například zpracováním vodíkem v přítomnosti kataly25 zátoru (například vzácného kovu, jako je palladium na uhlí). Vhodnými rozpouštědly jsou například ethanol nebo methanol nebo amidy jako dimethylformamid nebo směsi s dalšími inertními rozpouštědly, jako jsou například směsi s vodou. Hydrolýza se provádí zpravidla při teplotách přibližně 0 až 100 °C a tlacích přibližně 0,1 až 20 MPa, s výhodou 20 až 30 °C a 0,1 až 1 MPa.
Chránící skupina Pbf, kterou zavedl do chemie peptidů L.A. Carpino a kol. (Tet. Let. 34, str. 7829-7832, 1993), se odstraňuje například 95% trifluoroctovou kyselinou (TFA). Chrániči skupina Pbf vykazuje v tomto případě větší labilitu se zřetelem na TFA než strukturálně podobné chránící skupiny 4-methoxy-2,3,6-trimethylfenyl sulfony lová (Mtr) a 2,2,5,7,8-pentamethylchroman-6-sulfonylová (Pmc), které jsou také možnými chránícími skupinami vedlejšího řetězce při přípravě cyklo(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal).
Trifluoroctové kyseliny se s výhodou používá v nadbytku bez přísady dalšího rozpouštědla. Trifluoroctová kyselina se může také použít jako směs s inertním rozpouštědlem, jako je například kombinace TFA/dichlormethan v poměru 6:4. TFA se může kromě toho použít také s přísadou 1 až 10.%, s výhodou 2 % vody. Reakční teplota pro odštěpení je výhodně přibližně 0 až 50 °C a reakce se s výhodou provádí při teplotě 15 až 30 °C (při teplotě místnosti).
Shora a dále uvedené zkratky aminokyselin mají následuj i-význam:
Asp asparagová kyselina
Arg arginin
Gly glycin
Phe fenylalanin
Val valin
Kromě toho se ještě uvádějí zkratky, které mají následující vyznám:
BOC terc-butoxykarbonyl
Bzl benzyl
-2Cl 299879 B6
CHA cyklohexylamin
D charakterizace D-aminokyseliny
DCC1 dicyklohexylkarbodiimid
DMAP dimethylaminopyridin
5 DMF dimethylformamid
EDC1 N-ethyl-N,N'-(3-diroethylaminopropyl)karbodiimid, hydrochlorid
Et ethyl
Fmoc 9-fluorenylmethoxykarbonyl
HOBt 1-hydroxybenzotriazol
10 Me methyl
MTBE ., methy lterc-buty lether
Mtr 4-methoxy-2,3,6-trimethylfenyísulfonyl
NMe N-methylovaná a-aminoskupina
NMP N-methylpyrrolidon
15 OtBu terc-butylester
OMe methyl ester
OEt ethylester
Pbf 2,2,4,6,7-pentamethyldihydrobenzofuran-5-sulfonyl
Pmc 2,2,5,7,8-pentamethylchroman-6-$ulfonyl
20 POA fenoxyacetyl
Pr propyl
. Su sukcinimid
TBTU 2-( 1 H-benzotriazol-1 —y 1)— 1,1,3,3-tetra-methyluroniumtetrafluorborát
TFA trifluoroctovou kyselinu
25 Z benzyloxykarbonyl
Také se s překvapením zjistilo, že specifická volba chránících skupin vedlejších řetězců Pbf na Arg a Bzl na Asp i při syntéze lineárních peptidů, které, jak bylo dříve zmíněno, jsou meziprodukty v syntéze cyklo(Arg-Oly-Asp-ĎPhe-NMeVal), vede ke zlepšeným výtěžkům v příslušných stupních syntézy. Výsledkem je, že výtěžek cyklo(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal) je obecně zvýšen a z toho plyne snížení nákladů na syntézy.
Zlepšení výtěžku se dosahuje v tomto případě jak při syntéze peptidů v pevné fázi, tak v roztoku lineárních peptidů
H-Arg(Pbf)-Gly-Asp(OBzl)-DPhe-NMeVal-OH, H-Gly-Asp(OBzl)-DPhe-NMeVal-Arg(Pbf)-OH, H-Asp(OBzI)-DPhe-NMeVal”Arg(Pbf)-GIy-OH,. H~DPhe-NMeVal-Arg(Pbf)-Gly-Asp(OBzl)-OH nebo H-NMeVal-Arg(Pbf)-Gly-Asp(OBzl)-DPhe-OH, zvláště H-Asp(OBzl)-DPhe-NMeVal-Arg(Pbf)-Gly-OH.
Chráněné aminokyseliny nebo fragmenty aminokyselin, používané v obou způsobech syntézy, se připravují obvykle způsoby syntézy aminokyselin a peptidů popsanými ve standardních publikacích (Principles of Peptide Synthesis, vydavatel M.Bodansky, Springer Verlag Berlin 1984;
Houben Weyl, Methoden der organischen Chemie [Methods of Organic Chemistry], sv. 15/11, str.l až 806 1974, Georg Thieme Verlag, Stuttgart; Calbiochem/Novablochem Catalogue and Synthesis Handbook 1999; Synthesis Notes or Peptide Synthesis Protocoís, vydavatel M.W. Pennington a B.M. Dunn, Methods in Molecular Biology, sv 35, Humana Press Totowa N.J. 1994), a to za reakčních podmínek, které jsou pro jmenované reakce známy a vhodné. Přitom se může také používat o sobě známých, zde blíže nepopisovaných variant.
Základní principy syntézy peptidů v pevné fázi vypracovali B.F Gysin a R.B. Merrifield (J. Am. Chem. Soc. 94, od str. 3102, 1972). Shora popsaná syntéza lineárních peptidů v pevné fázi, jejich izolace a čištění se provádí způsobem, který popsal A. Jonczyk a J. Meienhofer (Pepides, o Am.
-3 CZ 299879 B6
Pept. Symp., vydavatel V. Hrubý a G.H. Rich, Pierce Comp. III, str. 73 až 77, 1983) nebo obdobně způsoby popsanými v Angew. Chem. 104, str. 375 až 391, 1992.
Obzvlášť výhodně se lineární peptidy syntetizují, jak je shora popsáno, konvergentně fragmen5 tovou kondenzací.
Vynález se proto dále tyká způsobu přípravy cyklického pentapeptidu cyklo(Arg-Gly-AspDPhe-NMeVal), který spočívá v tom, že syntéza lineárního peptidu H-Asp(OBzl)-DPheNMeVal-Arg(Pbf)-Gly-OH se provádí konvergentně fragmentovou kondenzací tripeptidu
R'-Asp(OBzl)-DPhe-NMeVal-OH, kde znamená R1 skupinu chránící aminoskupinu s dipeptidem H-Arg(Pbf>-Gly-R2, kde znamená R2 skupinu chránící karboxylovou skupinu a chránící skupiny R1 a R2 se pak odstraní.
Symbol R1 znamená skupinu chránící aminoskupinu. Vyraz „skupina chránící aminoskupinu“ je obecně znám a jde o skupiny, které jsou vhodné k ochraně (k blokování) aminoskupiny před chemickými reakcemi, které jsou však snadno odstranitelné, když je žádoucí reakce na jiném místě molekuly provedena. Typické pro takové skupiny jsou zvláště nesubstituované nebo substituované skupiny acylové, arylové, aralkoxymethylové nebo aralkylové. Jelikož se skupiny, chránící aminoskupinu, po žádoucí reakci (nebo po sledu reakcí) odstraňují, nemá jejich druh a veli20 kost rozhodující vyznám. Výhodnými jsou však skupiny s 1 až 20 atomy uhlíku. Výraz „acylová skupina“ je zde vždy míněn v nej širším slova smyslu. Zahrnuje acylové skupiny odvozené od alifatických, aralifatických, aromatických nebo heterocykl ických karboxy lových nebo su Honových kyselin, jakož zvláště skupiny alkoxykarbonylové, alkeny loxykarbony lové, aryloxykarbonylové a především aralkoxykarbonylové. Jakožto příklady takových acylových skupin se uvádě25 jí skupiny formylová nebo alkanoylové skupiny jako skupina acetylová, propionylová, butyrylová skupina; aralkanoylové jako fenylacetylová skupina; aroylové jako benzoylová nebo toluylová skupina; ary loxyalkanoy lové jako fenoxyacetylová skupina; alkoxykarbonylové, jako skupina methoxykarbonylová, ethoxykarbonylová, 2,2,2-trichlorethoxykarbonylová, terc-butoxykarbonylová (BOC), 2-jodethoxykarbonylová; alkeny loxykarbony lové jako aryloxykarbonylová (Aloe); aralkyloxykarbonylové jako skupina benzyloxy karbony lová (CBZ, synonymum Z), 4-methoxvbenzy loxykarbony lová (MOZ), 4-nitrobenzy loxykarbony lová nebo 9-fluorenylmethoxykarbonylová (FMOC), 2-(fenylsulfonyl)ethoxykarbonylová; trimethylsilylethoxykarbonylová skupina (Teoc); a arylsulfonylová skupina jako skupina 4—methoxy-2,3,6-trimethylfeny Isulfony lová skupina (Mtr). Jakožto skupina chránící aminoskupinu je dále známa trity lová skupina (Tri). Výhodnými skupinami, chránícími aminoskupinu, jsou skupiny BOC a Fmoc a Aloe, dále Z, benzylová a acetylová skupina. Zvláště výhodnou je skupina Boc.
Symbol R2 znamená skupinu chránící karboxylovou skupinu. Vyraz „skupina chránící karboxylovou skupinu“ je obecně znám a jde o skupiny, které jsou vhodné k ochraně hydroxylové skupiny karboxylové kyseliny před chemickými reakcemi. Typickými skupinami tohoto typu jsou shora uvedené nesubstituované nebo substituované skupiny aiylové, aralkylové, aroylové nebo acylové, dále také skupiny alkylové, arylové a aralkylsilylové. Jelikož se skupiny, chránící karboxylovou skupinu, po žádoucí reakci (nebo po sledu reakcí) odstraňují, nemá jejich druh a velikost rozhodující význam. Výhodnými jsou však skupiny s 1 až 20 a zvláště s 1 až 10 atomy uhlíku. Jakožto příklady skupin, chránících hydroxylovou skupinu, se uvádějí skupiny aralkylové jako benzylová, 4-methoxybenzylová nebo 2,4-dimethoxy benzylová skupina; aroylové jako benzoylová nebo p-nitrobenzoylová skupina; acylové jako acetylová nebo pivaloylová skupina; p-toluen sul fony lová skupina; alkylové jako methylová nebo terc-butylová skupina; avšak také allylová skupina; alkylsilylové jako trimethylsilylová (TMS), triizopropylsilylová (TIPS), terc50 butyldimethylsilylová (TBS), triethy lsily lová nebo tri methyl si lylethy lová skupina; nebo aralkylsilylové jako terc-butyldifenylsilylová (TBDPS) skupina. Výhodnými skupinami, chránícími karboxylovou skupinu, jsou skupina methylová, benzylová, acetylová, terc-butylová nebo TBS. Obzvláště výhodnou je skupina methylová a terc-butylová skupina.
-4CZ 299879 B6
Obecně výhodnými chránícími skupinami pro karboxylovou skupinu asparagové kyseliny jako vedlejšího řetězce jsou lineární nebo rozvětvené alkylové skupiny, jako skupina methylová, ethylová nebo terc-butylová, nebo aralalkylové skupiny, jako skupina benzylová. Při způsobu podle vynálezu je výhodnou skupina benzylová.
Obecně výhodnými chránícími skupinami pro guanidinoskupinu argininového vedlejšího řetězce jsou například skupina Z, Boc, Mtr nebo Pmc. Při způsobu podle vynálezu je výhodnou skupina . Pbf.
Uvolňování chránící skupiny použité v kterémkoliv případě je známé z literatury (například T.W.
Greene, P.G.M. Wuts, Protective Groups in Organic Chemistry, druhé vydání, Wiley, New York, 1991; nebo P.J, Kocienski, Protective Groups, 1. vyd. Georg Thieme Verlag, Stuttgart - New York, 1994). Přitom se může také používat o sobě známých, zde blíže nepopisovaných variant.
Vynález se tyká shora popsaného způsobu, který spočívá v tom, že tripeptid R -Asp(OBzl)15 DPhe-NMeVal-OH, kde znamená R1 skupinu chránící aminoskupinu, se připraví lineární syntézou reakcí Z-DPhe-OH s H-NMeVal-OMe na H-DPhe~NMeVal-OMe a pak jeho reakcí s aktivovaným derivátem R-Asp(OBzl)-OH a štěpením methyle steru.
Výhodným derivátem R-Asp(OBzl)-OH je sukeinimid Rl-Asp(OBzl)-OSu. Další aktivní estery, kterých je možno použít, jsou známy z obecné literatury o peptidech, uvedené shora.
Vynález se dále tyká shora popsaného způsobu, při kterém dipeptid H-Arg(Pbf)-G1y-R2, kde znamená R2 supinu chránící karboxylovou skupinu, se připraví lineární syntézou reakcí Z-Arg(Pbf)-OH s H-Gly-R2 a chránící skupina Z se odstraní.
Podobně se vynález týká lineárních pentapeptidů, volených ze souboru zahrnujícího
H-Arg(Pbf)-Gly-Asp(OBzl)-DPhe-NMeVal-OH,
H-Gly-Asp(OBzl)-DPhe-NMeVal-Arg(Pbf)-OH,
H-Asp(OBzl)-DPhe-NMeVal-Arg(Pbf)-Gly-OH,
H-DPhe-NMeVal-Arg(Pbf)-Gly-Asp(OBzt)-OH nebo H-NMeVal-Arg(Pbf)-Gly-Asp(OBzl)-DPhe-OH, jako meziproduktů pro syntézu cyklo(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal).
Vynález se tyká způsobu přípravy cyklického pentapeptidů cyklo(Arg-G1y-Asp-DPhe35 NMeVal),
a) reakcí dipeptidu H-Arg(Pbf)-Gly-R2, připraveného lineární syntézou Z-Arg(Pbf)-OH s H-Gly-R2 a následným odstraněním chránící skupiny Z,
b) s tripeptídem R’-Asp(OBzl)-DPhe-NMeVal-OH, připraveným lineární syntézou Z-DPheOH s H-NMeVal-OMe a odstraněním chránící skupiny Z za získání H-DPhe-NMeVal-OMe a následnou kopulací tohoto peptidu na aktivní ester R1-Asp(OBzl)-OH a následným štěpením methyl esteru, konvergentně za získání lineárního pentapeptidů R-Asp(OBzl)-DPhe-NMeVaIArg(Pbf)-Gly-R2,
c) odstraněním chránících skupin R1 a R2,
d) cyklizací uvolněného pentapeptidů H-Asp(OBzl)-DPhe-NMeVal-Arg(PbfFGly-OH, za získání cyklo(Arg(Pbf)-Gly-Asp(OBzl)-DPhe-NMeVal),
e) odstraněním benzy lové chránící skupiny,
ť) odstraněním chránící skupiny Pbf trifluoroctovou kyselinou a popřípadě převedením trifluoroacetátu cyklo(Arg-Oly-Asp-DPhe—NMeVal), připraveného ve stupních a) až f) na další fyziologicky přijatelné soli.
-5CZ 299879 Bó
Dalšími fyziologicky přijatelnými solemi jsou například soli anorganických kyselin, jako je kyselina sírová, siřičitá, dithionová, dusičná, hydrohalogenidové kyseliny, jako kyselina chlorovodíková nebo bromovodíková, fosforečné kyseliny, jako je kyselina ortofosforečná, sulfamová kyselina, dále organických kyselin, jakojsou obzvláště alifatické, alicyklické, aralifatické, aromatické nebo heterocyklické jednosytné nebo několikasytné karboxylové, sulfonové nebo sírové kyseliny, například kyselina mravenčí, octová, propionová, hexanová, oktanová, děkanova, hexadekanová, oktadekanová, pivalová, diethyloctová, malonová, jantarová, pimelová, fumarová, maleinová, mléčná, vinná, jablečná, citrónová, glukonová, askorbová, nikotinová, izonikotinová, methansulfonová nebo ethansulfonová, benzensulfonová, terimethoxybenzoová, adamantankarboxylová, p-toluensulfonová, glykolová, embonová, chlorofenoxyoctová, asparagová, glutamová, prolin, glyoxylová, palmitová, parachlorofenoxyizomáselná, cyklohexankarboxylová, glukózo-l-fosfát, naftalenmonosulfonová a disulfonová a laurylsírová kyselina.
Obzvlášť výhodnými fyziologicky přijatelnými solemi jsou hydrochlorid nebo interní soli cyklo(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal).
Jestliže znamená R1 Boc a R2 terc-butylovou skupinu, mohou byt tyto terč-butylu podobné koncové chránící skupiny štěpeny mravenčí kyselinou, bez napadení chránících skupin Pbt a Bzl vedlejšího řetězce.
Další příklady popisují specifická provedení jednotlivých syntézních stupňů. Všechny teploty jsou ve °C.
Příklady provedení vynálezu .
Příklad 1
Syntéza Boe-Asp(OBzlfyDPhc-NMeVal-OH
1. Do roztoku 26,5 g Z-NMeVal-OH ve 200 ml methanolu se přikape 25,3 ml trimethyl30 chlorsilanu a směs se míchá přes noc. Reakční směs se zbaví rozpouštědla a zbytek se vyjme do methyIterc-butyletheru (MTBE) a promyje se 5% roztokem uhličitanu sodného a vodou. Po odstranění rozpouštědla se zbytek vyjme do methanolu a IN kyseliny chlorovodíkové, smísí se s vodou navlhčeným 10% palladiem na uhlí a hydrogenuje se v mírném proudu vodíku. Po ukončení reakce se katalyzátor odfiltruje, filtrát se zbaví rozpouštědla a zbytek se překrystaluje z ethylacetátu. Získá se hydrochlorid H-NMeVal-OMe v 75% výtěžku,
2. Roztok 16,1 g Z-DPhe-OH, 10 g hydrochloridu H-NMeVal-OMe a 10,1 ml dtisopropylethylaminu ve 100 ml dichlormethanu se ochladí na teplotu 0 až 5 °C a přidá se 1,1,35 g EDCI, Směs se napřed míchá jednu hodinu při teplotě 0 až 5 °C, pak přes noc při teplotě místnosti.
Rozpouštědlo se odstraní a zbytek se vyjme do MTBE a promyje se uhličitanem sodným (5% roztok), IN kyselinou chlorovodíkovou a vodou a usuší se. Po odstranění rozpouštědla se získá Z-DPhe-NMeVal-OMe v 84,5% výtěžku.
3. Rozpustí se 12 g Z-DPhe-NMeVal-OMe v 80 ml THF a 20 ml vody, smísí se slOmg thymolftaleinu a přidává se 10M roztok hydroxidu sodného až do modrého zbarvení indikátoru.
Po odbarvení indikátoru se směs opakovaně zpracuje přikapáním 10 M roztoku hydroxidu sodného. Pokud se už odbarvování indikátoru nepozoruje, nastaví se roztok na hodnotu pH 2 10% roztokem hydrogensíranu draselného, methanol se odstraní a produkt se extrahuje MTBE. Po vysušení síranem sodným se sůl CHA z filtrátu vysráží přidáním 2,9 ml CHA. Získá se Z-DPhe50 NMeVal-OH x CHA v 90% výtěžku.
4. Míchá se 16,4 g Z-DPhe-NMeVal-OH x CHA (cyklohexylamoniové soli) ve 250 ml MTBE a 100 ml kyseliny fosforečné (10%) až do úplného rozpuštění. Po odstranění vodné fáze se .6CZ 299879 B6 organická fáze promyje vodou a nasyceným roztokem chloridu sodného a vysuší se. Rozpouštědlo se odstraní a zbytek se vyjme do 15,2 ml 2N roztoku hydroxidu sodného a 150 ml THF a po přidání většiny katalyzátoru (1 g 10% palladia na uhlí) se hydrogenuje v mírném proudu vodíku. Katalyzátor se odfiltruje a čirý roztok se zpracuje 12,1 g Boc-Asp(OBzl)-OSu a 4,5 ml triethylaminu a míchá se přes noc při teplotě místnosti. Po odstranění rozpouštědla se zbytek vyjme do MTBE a promyje se kyselinou fosforečnou (10%), vodou a nasyceným roztokem chloridu sodného. Organická fáze se zpracuje 3,3 ml CHA. Výsledná sůl Boc-Asp(OBz1)-DPheNMeVal-OH x CHA se odfiltruje a vysuší se ve vakuu. Výtěžek je 93%.
Příklad 2
Syntéza H-Arg(Pbf)-Gly-OtBu
1. Míchá se 33,0 g Z-Arg(Pbf)-OH x CHA ve 300 ml octové kyseliny a 300 ml kyseliny fosfo15 řečné až do rozpuštění. Po odstranění vodné fáze se organická fáze promyje vodou a nasyceným roztokem chloridu sodného a vysuší se. Rozpouštědlo se odstraní a zbytek se rozpustí ve 250 ml dichlormethanu s 8,38 g H-Cly-OtBu x HCI a ochladí se na teplotu 0 °C. Přidá se 17,12 ml diizopropylethylaminu a 16,05 g TBTU a směs se míchá 60 minut při teplotě 0 °C a přes noc při teplotě místnosti. Rozpouštědlo se odstraní a nahradí se 250 ml ethylacetátu. Po promytí roztokem uhličitanu sodného (5%), vodou a nasyceným roztokem chloridu sodného se rozpouštědlo odstraní. Získá se Z-Arg(Pbf)-Xjly-OtBu v 86% výtěžku,
2. Roztok 30 g Z-Arg(Pbf)-Gly-OtBu ve 350 ml THF se smísí se 3 g vodou navlhčeného 10% palladia na uhlí a Z-skupina se odstraní hydrogenací mírným proudem vodíku. Katalyzátor se odfiltruje a rozpouštědlo se odstraní. Zbytek se vyjme do ethylacetátu a zpracuje se dále jako v příkladu 2.1. Získá se H-Arg(Pbf)-Gly-OtBu v 86% výtěžku,
Příklad 3
Syntéza H-Asp(OBzl)-DPhe-NMeVal-Arg(Pbf)-G]y-OH
1. Převede se 1,23 g Boc-Asp(OBzl)-DPhe-NMeVaI-OH x CHA obvyklým způsobem na volnou kyselinu, která se rozpustí ve 12,5 ml dichlormethanu s 0,81 g H-Arg(Pbf)-Gly-OtBu a 0,22 g DMAP. Roztok se ochladí na 0 až 5 °C a zpracuje se 0,345 g EDC1. Míchá se dvě hodiny při teplotě 0 až 5 °C a přes noc při teplotě místnosti. Rozpouštědlo se odstraní, zbytek vyjme do MTBE a zpracuje se dále jako v příkladu 2.1. Získá se Boc-Asp(OBzl)-DPhe-NMeValArg(Pbí)-Gly-OtBu v 82% výtěžku.
2. Rozpustí se 2,3 g Boc-Asp(OBzl)-DPhe-NMeVal-Arg(Pbf)-Gly-OtBu ve 23 ml 95% mra40 věnci kyseliny k odstranění koncových chránících skupin a zkoncentruje se ve vakuu v průběhu minut. Produkt se tritruje s etherem, odfiltruje se a vysuší se ve vakuu. Získá se H-Asp(OBzl)-DPhe-NMeVal-Arg(Pbf)-Gly-OH x HCOOH v 95% výtěžku.
Příklad 4 . Syntéza cyklo(Arg(Pbf)-<jly-Asp(OBzl)-DPhe-NMeVal)
Roztok 11,9 g H-Asp(OBzl)-DPhe-NMeVal-Arg(Pbf)-Gly-OH x HCOOH v 60 ml MNMP se přikape do míchaného roztoku 7,25 g TBTU a 7,45 ml N-methylmorfolinu ve 180 ml
N-methylpyrrolidonu. Reakční roztok se míchá 20 hodin, načež se přikape do roztoku 47,5 g hydrogenuhličitanu sodného ve 1800 ml vody. Sraženina se odfiltruje a vysuší se ve vakuu. Získá se cyklo(Arg(Pbf)-Gly-Asp(OBzl)-DPhe-NMeVal) v 73,4% výtěžku.
-7CZ 299879 Bó
Příklad 5
Syntéza cyklo(Arg-Oly-Asp-DPhe-NMeVal)
1. Roztok 2 g cyklo(Arg(Pbf)-Gly-Asp(OBzl)-DPhe-NMeVal) ve 26 ml THF se smísí s 0,5 g
10% palladia na uhlí. Nechá se probublávat dvě hodiny vodík, směs se zbaví katalyzátoru a rozpouštědlo se odstraní ve vakuu. Produkt vykrystaluje po přidání 32 ml acetonu, odfiltruje se a vysuší. Získá se cyklo-(Arg(Pbf)~Gly-Asp-DPhe-NMeVal) v 83% výtěžku.
io 2. Rozpustí se 1,5 g cyklo(Arg(Pbf)-Gly-Asp-DPhe-NMeVal) v 15 ml 95% TFA. Po jedné hodině se roztok prikape do 150 ml izopropyletheru a pevná látka se odfiltruje a vysuší. Vysušený produkt se rozpustí ve 30 ml směsi izopropanol/voda 1:2 a zpracuje se iontoměničem ΠΙ (acetátová forma; Merck KGaA). Zfiltrovaný roztok se zkoncentruje a vysuší se vymrazováním. Získá se cyklo(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal) v podobě vnitřní soli v 96% výtěžku.
Průmyslová využitelnost
Způsob přípravy cyklického pentapeptidu cyklo(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal) v daleko větším výtěžku než dosud známými způsoby.

Claims (6)

  1. 25 PATENTOVÉ NÁROKY
    1. Způsob přípravy cyklického pentapeptidu cyklo(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal)
    30 . vyznačující se tím, že se cyklizuje lineární pentapeptid zvolený ze souboru sestávajícího z
    H-Arg(Pbf)-Gly-Asp(OBzl)-DPhe-NMeVal-OH,
    H-Gly-Asp(OBzl)-DPhe-NMeVal-Arg(Pbf)-OH,
    H-Asp(OBzl)-DPhe-NMeVal-Arg(Pbf)-GIy-OH,
    35 H-DPhe-NMeVal-Arg(Pbf)-Gly-Asp(OBzl)-OH a H-NMeVal-Arg(Pbf)-Gly-Asp(OBzl)-DPhe-OH, poté se odstraní chránící skupiny a výsledný produkt se popřípadě převede na fyziologicky přijatelnou sůl.
    40
  2. 2. Způsob podle nároku 1, vyznačující se tím, že se cyklizuje pentapetid
    H-Asp(OBzl)-DPhe-NMeVal-Arg(Pbf)-Gly-OH.
  3. 3. Způsob podle nároku l nebo 2, vyznačující se tím, že se syntéza lineárního peptidů H-Asp(OBzl)-DPhe-NMeVal-Ařg(Pbf)-Gly-OH provádí konvergentně fragmentovou
    45 kondenzací tripeptídu R!-Asp(OBzl)-DPhe-NMeVal-OH, kde znamená R1 skupinu chránící aminoskupinu, s dipeptidem H-Arg(Pbf)-Gly-R2, kde znamená R2 skupinu chránící karboxylovou skupinu a chránící skupiny R1 a R2 se odstraní.
  4. 4. Způsob podle nároku3, vyznačující se tím, že tripeptid Rj-AspCOBzlj-DPhe50 NMeVal-OH, kde R? znamená skupinu chránící aminoskupinu, se připravuje lineární syntézou reakcí Z-DPhe-OH s H-NMeVal-OMe za vzniku H-DPhe-NMeVal-OMe, po níž následuje reakce H-DPhe-NMeVal-OMe s aktivovaným derivátem Rl-Asp(OBzl)-OH za vzniku
    -8CZ 299879 B6
    R-Asp(OBzl)-DPhe-NMeVal-OMe a poté štěpení methylesteru v posledně uvedené sloučenině.
  5. 5. Způsob podle nároku 3 nebo4, vyznačující se tím, že dipeptid H-Arg(Pbf)5 Gly-R2, kde R2 znamená skupinu chránící karboxylovou skupinu, se připraví lineární syntézou reakcí Z-Arg(Pbf)-OH s H-Gly-R3 a odstraněním chránící skupiny Z.
  6. 6. Lineární pentapeptidy zvolené ze souboru sestávajícího z
    H-Arg(Pbf)-Gly-Asp(OBzl)-DPhe-NMeVal-OH, ío H-Gly-Asp(OBzl>DPhe-NMeVal~Arg(Pbf)-OH,
    H-Asp(OBzl)-DPhe-NM.eVal-Arg(Pbf)~Gly-OH, H-DPhe-NMeVal-Arg(Pbf)-Gly-Asp(OBzl)-OH a H-NMeVal-Arg(Pbf)-Gly-Asp(OBzl)-DPhe-OH jako meziprodukty pro syntézu cyklo(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal).
CZ20013214A 1999-03-11 2000-03-01 Zpusob prípravy cyklického pentapeptidu cyklo(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal) a lineární pentapeptidy, jako meziprodukty CZ299879B6 (cs)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DE19910727 1999-03-11

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CZ20013214A3 CZ20013214A3 (cs) 2001-12-12
CZ299879B6 true CZ299879B6 (cs) 2008-12-17

Family

ID=7900511

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CZ20013214A CZ299879B6 (cs) 1999-03-11 2000-03-01 Zpusob prípravy cyklického pentapeptidu cyklo(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal) a lineární pentapeptidy, jako meziprodukty

Country Status (28)

Country Link
US (1) US6822074B1 (cs)
EP (1) EP1159296B1 (cs)
JP (1) JP4762418B2 (cs)
KR (1) KR100645002B1 (cs)
CN (1) CN1200947C (cs)
AR (1) AR022905A1 (cs)
AT (1) ATE267839T1 (cs)
AU (1) AU762540B2 (cs)
BR (1) BR0008863A (cs)
CA (1) CA2366694C (cs)
CZ (1) CZ299879B6 (cs)
DE (1) DE50006598D1 (cs)
DK (1) DK1159296T3 (cs)
ES (1) ES2221616T3 (cs)
HK (1) HK1044780B (cs)
HU (1) HUP0200369A3 (cs)
ID (1) ID30126A (cs)
MY (1) MY120083A (cs)
NO (1) NO330030B1 (cs)
PL (1) PL202996B1 (cs)
PT (1) PT1159296E (cs)
RU (1) RU2243974C2 (cs)
SE (1) SE1159296T5 (cs)
SK (1) SK285387B6 (cs)
TW (1) TWI269798B (cs)
UA (1) UA71608C2 (cs)
WO (1) WO2000053627A1 (cs)
ZA (1) ZA200108335B (cs)

Families Citing this family (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB0814519D0 (en) 2008-08-08 2008-09-17 Imp Innovations Ltd Process
EP2430162A4 (en) * 2009-05-15 2013-04-24 Ca Nat Research Council DNA SEQUENCES AND METHOD OF PROCESSING ENCODING CARYOPHYLLACEAE AND CARYOPHYLLACEAE-SIMILAR CYCLOPEPTIDE TREATMENTS
EP3085704A1 (en) * 2009-05-20 2016-10-26 Merck Patent GmbH Novel solid materials of {[(2s, 5r, 8s, 11s)-5-benzyl-11-(3-guanidino-propyl)-8-isopropyl-7-methyl-3,6,9,12,15-pentaoxo-1,4,7,10,13-pentaaza-cyclopentadec-2-yl]-acetic acid} and methods for obtaining them
PE20121359A1 (es) 2009-12-10 2012-10-15 Merck Patent Gmbh Composicion farmaceutica que comprende oligopeptidos
EP2717854B1 (en) 2011-06-09 2019-01-16 Merck Patent GmbH Treatment of cancers and metastases with suspensions of cilengitide in carrier
WO2019234108A1 (en) * 2018-06-05 2019-12-12 Dsm Ip Assets B.V. Methods for the synthesis of arginine-containing peptides

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0578083A2 (en) * 1992-07-06 1994-01-12 MERCK PATENT GmbH Cyclic adhesion inhibitors
EP0632053A2 (de) * 1993-04-01 1995-01-04 MERCK PATENT GmbH Cyclische Adhäsionsinhibitoren
EP0770622A2 (de) * 1995-09-15 1997-05-02 MERCK PATENT GmbH Cyclische Adhäsionsinhibitoren

Family Cites Families (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE1038741B (de) * 1956-09-14 1958-09-11 Eberhard Brecklinghaus Aus Gummi oder einem anderen elastischen Werkstoff bestehender Kantenschoner fuer Treppenstufen aus Beton od. dgl.
US3630660A (en) * 1968-10-31 1971-12-28 Burlington Industries Inc Process for removal of moisture and/or solvents from textile materials
JPH06263798A (ja) * 1993-01-13 1994-09-20 Takeda Chem Ind Ltd βターン及びγターンを有する環状ペンタペプチド、その製造方法および用途
EP0606881B1 (en) * 1993-01-13 1999-05-12 Takeda Chemical Industries, Ltd. Cyclic pentapeptides having a beta-turn and a gamma-turn
AU2671795A (en) * 1994-06-02 1996-01-04 Boehringer Mannheim Gmbh Process and intermediate products for preparing cardiodilatin fragments, and highly purified cardiodilatin fragments
DE19538741A1 (de) 1995-10-18 1997-04-24 Merck Patent Gmbh Cyclopeptidderivate
DE19613933A1 (de) 1996-04-06 1997-10-09 Merck Patent Gmbh Cyclische Adhäsionsinhibitoren
EP0951295B1 (en) * 1996-05-31 2010-06-09 The Scripps Research Institute Compositions for use in inhibiting of alpha-v-beta3 mediated angiogenesis
DE19728524A1 (de) * 1997-07-04 1999-01-07 Merck Patent Gmbh Cyclische Azapeptide

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0578083A2 (en) * 1992-07-06 1994-01-12 MERCK PATENT GmbH Cyclic adhesion inhibitors
EP0632053A2 (de) * 1993-04-01 1995-01-04 MERCK PATENT GmbH Cyclische Adhäsionsinhibitoren
EP0770622A2 (de) * 1995-09-15 1997-05-02 MERCK PATENT GmbH Cyclische Adhäsionsinhibitoren

Also Published As

Publication number Publication date
RU2243974C2 (ru) 2005-01-10
AU4103400A (en) 2000-09-28
ZA200108335B (en) 2003-01-10
CZ20013214A3 (cs) 2001-12-12
KR100645002B1 (ko) 2006-11-10
HUP0200369A3 (en) 2002-09-30
MY120083A (en) 2005-08-30
HK1044780A1 (en) 2002-11-01
SK12552001A3 (sk) 2002-05-09
WO2000053627A1 (de) 2000-09-14
DE50006598D1 (de) 2004-07-01
CA2366694C (en) 2010-07-20
PL202996B1 (pl) 2009-08-31
TWI269798B (en) 2007-01-01
NO20014383D0 (no) 2001-09-10
EP1159296B1 (de) 2004-05-26
HUP0200369A2 (en) 2002-06-29
HK1044780B (zh) 2005-08-26
SK285387B6 (sk) 2006-12-07
KR20010102503A (ko) 2001-11-15
JP4762418B2 (ja) 2011-08-31
AR022905A1 (es) 2002-09-04
CN1343220A (zh) 2002-04-03
SE1159296T5 (cs) 2004-09-07
DK1159296T3 (da) 2004-09-27
BR0008863A (pt) 2002-01-02
EP1159296A1 (de) 2001-12-05
SE1159296T3 (cs) 2004-08-24
PT1159296E (pt) 2004-10-29
NO330030B1 (no) 2011-02-07
US6822074B1 (en) 2004-11-23
UA71608C2 (en) 2004-12-15
ES2221616T3 (es) 2005-01-01
JP2002539137A (ja) 2002-11-19
CA2366694A1 (en) 2000-09-14
ID30126A (id) 2001-11-08
CN1200947C (zh) 2005-05-11
AU762540B2 (en) 2003-06-26
ATE267839T1 (de) 2004-06-15
NO20014383L (no) 2001-11-02

Similar Documents

Publication Publication Date Title
FI108113B (fi) Menetelmä HIV-proteaasi-inhibiittoreiden valmistamiseksi
RU2602042C2 (ru) Способ производства дегареликса и его промежуточных соединений
US8546530B2 (en) Process for the manufacture of persilylated peptides
US5977302A (en) Liquid phase process for the preparation of GnRH peptides
US5502035A (en) N-terminus modified analogs of LHRH
US9850285B2 (en) Process for preparing eptifibatide
CZ299879B6 (cs) Zpusob prípravy cyklického pentapeptidu cyklo(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal) a lineární pentapeptidy, jako meziprodukty
US5516759A (en) LHRH antagonists having lactam groups at the N-terminus
US4728725A (en) Retro-inverted peptides analogues of Bradykinin Potentiator BPP5a
EP1226158B1 (en) Process for preparing peptide intermediates
FI77874C (fi) Foerfarande foer framstaellning av nya, terapeutiskt anvaendbara peptider.
MXPA01009111A (es) Procedimiento para preparar ciclo (asp-dfen-nmeval-arg-gli)
JPH07316193A (ja) ペプチド誘導体およびその用途
昧人 SeeeSS SS
HK1193831B (zh) 模板-固定的肽模拟物作为fpr1的抑制物

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A Patent lapsed due to non-payment of fee

Effective date: 20140301