CZ300927B6 - Syntetický peptid monomerního typu, prostredek, který ho obsahuje, zpusob imunologické in vitro kvantifikace a diagnostický kit pro použití v biologických testech pro identifikaci infekcí zpusobených viry HIV - Google Patents
Syntetický peptid monomerního typu, prostredek, který ho obsahuje, zpusob imunologické in vitro kvantifikace a diagnostický kit pro použití v biologických testech pro identifikaci infekcí zpusobených viry HIV Download PDFInfo
- Publication number
- CZ300927B6 CZ300927B6 CZ0357599A CZ357599A CZ300927B6 CZ 300927 B6 CZ300927 B6 CZ 300927B6 CZ 0357599 A CZ0357599 A CZ 0357599A CZ 357599 A CZ357599 A CZ 357599A CZ 300927 B6 CZ300927 B6 CZ 300927B6
- Authority
- CZ
- Czechia
- Prior art keywords
- peptide
- leu
- peptides
- formula
- hiv
- Prior art date
Links
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 title claims abstract description 189
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 title claims abstract description 6
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title claims description 14
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 12
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 title claims description 4
- 238000011002 quantification Methods 0.000 title claims description 4
- 238000009007 Diagnostic Kit Methods 0.000 title claims description 3
- 238000012360 testing method Methods 0.000 title abstract description 10
- 238000001514 detection method Methods 0.000 title abstract description 9
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 title abstract description 6
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 claims abstract description 80
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims abstract description 79
- 241000713772 Human immunodeficiency virus 1 Species 0.000 claims description 30
- MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N (2S)-2-Amino-3-hydroxypropansäure Chemical compound OC[C@H](N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N 0.000 claims description 12
- 238000004166 bioassay Methods 0.000 claims description 8
- 208000031886 HIV Infections Diseases 0.000 claims description 6
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 claims description 5
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 claims description 5
- 241000713340 Human immunodeficiency virus 2 Species 0.000 claims description 4
- 125000001931 aliphatic group Chemical group 0.000 claims description 4
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 claims description 3
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 125000004191 (C1-C6) alkoxy group Chemical group 0.000 claims description 2
- 125000000637 arginyl group Chemical group N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)* 0.000 claims description 2
- 125000004057 biotinyl group Chemical group [H]N1C(=O)N([H])[C@]2([H])[C@@]([H])(SC([H])([H])[C@]12[H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C(*)=O 0.000 claims description 2
- 125000002485 formyl group Chemical class [H]C(*)=O 0.000 claims description 2
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 claims description 2
- 125000004435 hydrogen atom Chemical class [H]* 0.000 claims description 2
- 125000000341 threoninyl group Chemical group [H]OC([H])(C([H])([H])[H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 claims description 2
- KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N L-valine Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N 0.000 claims 1
- KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N Valine Natural products CC(C)C(N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 125000002777 acetyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)=O 0.000 claims 1
- 125000003342 alkenyl group Chemical group 0.000 claims 1
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 claims 1
- 125000003396 thiol group Chemical group [H]S* 0.000 claims 1
- 239000004474 valine Substances 0.000 claims 1
- 125000003088 (fluoren-9-ylmethoxy)carbonyl group Chemical group 0.000 description 50
- BDNKZNFMNDZQMI-UHFFFAOYSA-N 1,3-diisopropylcarbodiimide Chemical compound CC(C)N=C=NC(C)C BDNKZNFMNDZQMI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 50
- BGRWYRAHAFMIBJ-UHFFFAOYSA-N diisopropylcarbodiimide Natural products CC(C)NC(=O)NC(C)C BGRWYRAHAFMIBJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 50
- NPZTUJOABDZTLV-UHFFFAOYSA-N hydroxybenzotriazole Substances O=C1C=CC=C2NNN=C12 NPZTUJOABDZTLV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 49
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 46
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 46
- BCAVNDNYOGTQMQ-AAEUAGOBSA-N Ser-Trp-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=C1C=CC=C2)C(=O)NCC(O)=O BCAVNDNYOGTQMQ-AAEUAGOBSA-N 0.000 description 23
- TUIOUEWKFFVNLH-DCAQKATOSA-N Leu-Val-Cys Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CS)C(O)=O TUIOUEWKFFVNLH-DCAQKATOSA-N 0.000 description 20
- WQOHKVRQDLNDIL-YJRXYDGGSA-N Tyr-Thr-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O WQOHKVRQDLNDIL-YJRXYDGGSA-N 0.000 description 20
- 108010069495 cysteinyltyrosine Proteins 0.000 description 20
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 16
- CIVXDCMSSFGWAL-YUMQZZPRSA-N Cys-Lys-Gly Chemical compound C(CCN)C[C@@H](C(=O)NCC(=O)O)NC(=O)[C@H](CS)N CIVXDCMSSFGWAL-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 14
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N Trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 14
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 14
- 241001430294 unidentified retrovirus Species 0.000 description 14
- CEZSLNCYQUFOSL-BQBZGAKWSA-N Cys-Arg-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(O)=O CEZSLNCYQUFOSL-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 13
- DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N L-asparagine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N 0.000 description 13
- RXGLHDWAZQECBI-SRVKXCTJSA-N Leu-Leu-Ser Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O RXGLHDWAZQECBI-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 13
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- GRQCSEWEPIHLBI-JQWIXIFHSA-N Trp-Asn Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O)=CNC2=C1 GRQCSEWEPIHLBI-JQWIXIFHSA-N 0.000 description 12
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 11
- 241000880493 Leptailurus serval Species 0.000 description 10
- 125000000999 tert-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 10
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 101800001690 Transmembrane protein gp41 Proteins 0.000 description 9
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 9
- JSIQVRIXMINMTA-ZDLURKLDSA-N Glu-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O JSIQVRIXMINMTA-ZDLURKLDSA-N 0.000 description 8
- CJDZKZFMAXGUOJ-IHRRRGAJSA-N Val-Cys-Tyr Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(C=C1)O)C(=O)O)N CJDZKZFMAXGUOJ-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 8
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 8
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 8
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 8
- AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N L-threonine Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N 0.000 description 7
- IXEGQBJZDIRRIV-QEJZJMRPSA-N Trp-Asn-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CNC2=C1C=CC=C2)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O IXEGQBJZDIRRIV-QEJZJMRPSA-N 0.000 description 7
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N ether Substances CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 description 7
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 7
- RTKIYNMVFMVABJ-UHFFFAOYSA-L thimerosal Chemical compound [Na+].CC[Hg]SC1=CC=CC=C1C([O-])=O RTKIYNMVFMVABJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 7
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- YZACQYVWLCQWBT-BQBZGAKWSA-N Gly-Cys-Arg Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O YZACQYVWLCQWBT-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 6
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N L-Cysteine Chemical compound SC[C@H](N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N 0.000 description 6
- IAJFFZORSWOZPQ-SRVKXCTJSA-N Leu-Leu-Asn Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O IAJFFZORSWOZPQ-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 6
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N Phenol Chemical compound OC1=CC=CC=C1 ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- MEJHFIOYJHTWMK-VOAKCMCISA-N Thr-Leu-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](N)[C@@H](C)O MEJHFIOYJHTWMK-VOAKCMCISA-N 0.000 description 6
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 6
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 6
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 6
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 6
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 6
- VXDXZGYXHIADHF-YJRXYDGGSA-N Cys-Tyr-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O VXDXZGYXHIADHF-YJRXYDGGSA-N 0.000 description 5
- IEZVHOULSUULHD-XGEHTFHBSA-N Thr-Ser-Val Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O IEZVHOULSUULHD-XGEHTFHBSA-N 0.000 description 5
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 5
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 5
- 229920000136 polysorbate Polymers 0.000 description 5
- 230000009257 reactivity Effects 0.000 description 5
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 5
- ILXAOQAXSHVHTM-UHFFFAOYSA-M sodium;2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;chloride Chemical compound [Na+].[Cl-].OCC(N)(CO)CO ILXAOQAXSHVHTM-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 5
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- OVSKVOOUFAKODB-UWVGGRQHSA-N Gly-Arg-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CN)CCCN=C(N)N OVSKVOOUFAKODB-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 4
- HOMFINRJHIIZNJ-HOCLYGCPSA-N Leu-Trp-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=C1C=CC=C2)C(=O)NCC(O)=O HOMFINRJHIIZNJ-HOCLYGCPSA-N 0.000 description 4
- 229920000361 Poly(styrene)-block-poly(ethylene glycol) Polymers 0.000 description 4
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 4
- 238000007363 ring formation reaction Methods 0.000 description 4
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 4
- DHBXNPKRAUYBTH-UHFFFAOYSA-N 1,1-ethanedithiol Chemical compound CC(S)S DHBXNPKRAUYBTH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- JXYMPBCYRKWJEE-BQBZGAKWSA-N Gly-Arg-Ala Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O JXYMPBCYRKWJEE-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 3
- LGQZOQRDEUIZJY-YUMQZZPRSA-N Gly-Cys-Lys Chemical compound NCCCC[C@H](NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)CN)C(O)=O LGQZOQRDEUIZJY-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 3
- VBOBNHSVQKKTOT-YUMQZZPRSA-N Gly-Lys-Ala Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O VBOBNHSVQKKTOT-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 3
- 241000725303 Human immunodeficiency virus Species 0.000 description 3
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 3
- PDQDCFBVYXEFSD-SRVKXCTJSA-N Leu-Leu-Asp Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O PDQDCFBVYXEFSD-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 3
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 3
- 239000007979 citrate buffer Substances 0.000 description 3
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 3
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 3
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 3
- 238000004811 liquid chromatography Methods 0.000 description 3
- 108010064235 lysylglycine Proteins 0.000 description 3
- -1 p16 Proteins 0.000 description 3
- 235000020183 skimmed milk Nutrition 0.000 description 3
- 125000004213 tert-butoxy group Chemical group [H]C([H])([H])C(O*)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 3
- HNKJADCVZUBCPG-UHFFFAOYSA-N thioanisole Chemical compound CSC1=CC=CC=C1 HNKJADCVZUBCPG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- BXKLGDDYHDKOIO-UHFFFAOYSA-N 3-methyl-5-(3-methyl-1,2,3a,4-tetrahydropyrrolo[2,3-b]indol-8b-yl)-8b-[3-methyl-8b-[3-methyl-8b-[3-methyl-5-(3-methyl-1,2,3a,4-tetrahydropyrrolo[2,3-b]indol-8b-yl)-1,2,3a,4-tetrahydropyrrolo[2,3-b]indol-8b-yl]-1,2,3a,4-tetrahydropyrrolo[2,3-b]indol-5-yl]-1,2,3a,4-tetrahydropyrrolo[2,3-b]indol-5-yl]-1,2,3a,4-tetrahydropyrrolo[2,3-b]indole Chemical compound CN1CCC2(C1Nc1ccccc21)c1cccc2c1NC1N(C)CCC21c1cccc2c1NC1N(C)CCC21c1cccc2c1NC1N(C)CCC21C12CCN(C)C1Nc1c2cccc1C12CCN(C)C1Nc1ccccc21 BXKLGDDYHDKOIO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CCDFBRZVTDDJNM-GUBZILKMSA-N Ala-Leu-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O CCDFBRZVTDDJNM-GUBZILKMSA-N 0.000 description 2
- USFZMSVCRYTOJT-UHFFFAOYSA-N Ammonium acetate Chemical compound N.CC(O)=O USFZMSVCRYTOJT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000005695 Ammonium acetate Substances 0.000 description 2
- HQIZDMIGUJOSNI-IUCAKERBSA-N Arg-Gly-Arg Chemical compound N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O HQIZDMIGUJOSNI-IUCAKERBSA-N 0.000 description 2
- UHFUZWSZQKMDSX-DCAQKATOSA-N Arg-Leu-Asn Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)N UHFUZWSZQKMDSX-DCAQKATOSA-N 0.000 description 2
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 2
- RGTVXXNMOGHRAY-WDSKDSINSA-N Cys-Arg Chemical compound SC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCN=C(N)N RGTVXXNMOGHRAY-WDSKDSINSA-N 0.000 description 2
- 108010001336 Horseradish Peroxidase Proteins 0.000 description 2
- WKSHBPRUIRGWRZ-KCTSRDHCSA-N Ile-Trp-Gly Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=CC=CC=C21)C(=O)NCC(=O)O)N WKSHBPRUIRGWRZ-KCTSRDHCSA-N 0.000 description 2
- MLTRLIITQPXHBJ-BQBZGAKWSA-N Leu-Asn Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC(N)=O MLTRLIITQPXHBJ-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 2
- ZFNLIDNJUWNIJL-WDCWCFNPSA-N Leu-Glu-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O ZFNLIDNJUWNIJL-WDCWCFNPSA-N 0.000 description 2
- QJUWBDPGGYVRHY-YUMQZZPRSA-N Leu-Gly-Cys Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)N QJUWBDPGGYVRHY-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 2
- IRNSXVOWSXSULE-DCAQKATOSA-N Lys-Ala-Val Chemical compound CC(C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CCCCN IRNSXVOWSXSULE-DCAQKATOSA-N 0.000 description 2
- GQZMPWBZQALKJO-UWVGGRQHSA-N Lys-Gly-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O GQZMPWBZQALKJO-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 2
- ZOKVLMBYDSIDKG-CSMHCCOUSA-N Lys-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCCCN ZOKVLMBYDSIDKG-CSMHCCOUSA-N 0.000 description 2
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- YBAFDPFAUTYYRW-UHFFFAOYSA-N N-L-alpha-glutamyl-L-leucine Natural products CC(C)CC(C(O)=O)NC(=O)C(N)CCC(O)=O YBAFDPFAUTYYRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- BELBBZDIHDAJOR-UHFFFAOYSA-N Phenolsulfonephthalein Chemical compound C1=CC(O)=CC=C1C1(C=2C=CC(O)=CC=2)C2=CC=CC=C2S(=O)(=O)O1 BELBBZDIHDAJOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NQRYJNQNLNOLGT-UHFFFAOYSA-N Piperidine Chemical compound C1CCNCC1 NQRYJNQNLNOLGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 2
- 102000007056 Recombinant Fusion Proteins Human genes 0.000 description 2
- 108010008281 Recombinant Fusion Proteins Proteins 0.000 description 2
- LDEBVRIURYMKQS-WISUUJSJSA-N Ser-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CO LDEBVRIURYMKQS-WISUUJSJSA-N 0.000 description 2
- 241000270295 Serpentes Species 0.000 description 2
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- UKINEYBQXPMOJO-UBHSHLNASA-N Trp-Asn-Ser Chemical compound C1=CC=C2C(=C1)C(=CN2)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)O)N UKINEYBQXPMOJO-UBHSHLNASA-N 0.000 description 2
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 2
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 description 2
- 229940043376 ammonium acetate Drugs 0.000 description 2
- 235000019257 ammonium acetate Nutrition 0.000 description 2
- 239000012472 biological sample Substances 0.000 description 2
- 244000309466 calf Species 0.000 description 2
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 2
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 2
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 2
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 2
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 2
- 108010015792 glycyllysine Proteins 0.000 description 2
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 2
- 239000012452 mother liquor Substances 0.000 description 2
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 2
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 2
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 2
- JPMIIZHYYWMHDT-UHFFFAOYSA-N octhilinone Chemical compound CCCCCCCCN1SC=CC1=O JPMIIZHYYWMHDT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000001175 peptic effect Effects 0.000 description 2
- 229960003531 phenolsulfonphthalein Drugs 0.000 description 2
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 2
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 2
- 230000002335 preservative effect Effects 0.000 description 2
- 238000004366 reverse phase liquid chromatography Methods 0.000 description 2
- 230000000405 serological effect Effects 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 2
- 125000006850 spacer group Chemical group 0.000 description 2
- 108010072986 threonyl-seryl-lysine Proteins 0.000 description 2
- 125000002221 trityl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C1C([*])(C1=C(C(=C(C(=C1[H])[H])[H])[H])[H])C1=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C1[H] 0.000 description 2
- 108010038745 tryptophylglycine Proteins 0.000 description 2
- 102000040650 (ribonucleotides)n+m Human genes 0.000 description 1
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 1
- GEYOCULIXLDCMW-UHFFFAOYSA-N 1,2-phenylenediamine Chemical compound NC1=CC=CC=C1N GEYOCULIXLDCMW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000030507 AIDS Diseases 0.000 description 1
- BOKLLPVAQDSLHC-FXQIFTODSA-N Ala-Val-Cys Chemical compound C[C@@H](C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)N BOKLLPVAQDSLHC-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- PHHRSPBBQUFULD-UWVGGRQHSA-N Arg-Gly-Lys Chemical compound C(CCN)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)N PHHRSPBBQUFULD-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 1
- WYBVBIHNJWOLCJ-IUCAKERBSA-N Arg-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCCNC(N)=N WYBVBIHNJWOLCJ-IUCAKERBSA-N 0.000 description 1
- JEXPNDORFYHJTM-IHRRRGAJSA-N Arg-Leu-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N JEXPNDORFYHJTM-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 1
- GFFRWIJAFFMQGM-NUMRIWBASA-N Asn-Glu-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O GFFRWIJAFFMQGM-NUMRIWBASA-N 0.000 description 1
- XHTUGJCAEYOZOR-UBHSHLNASA-N Asn-Ser-Trp Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=C1C=CC=C2)C(O)=O XHTUGJCAEYOZOR-UBHSHLNASA-N 0.000 description 1
- DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N Asparagine Natural products OC(=O)C(N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100021277 Beta-secretase 2 Human genes 0.000 description 1
- 101710150190 Beta-secretase 2 Proteins 0.000 description 1
- 125000000882 C2-C6 alkenyl group Chemical group 0.000 description 1
- 101100505161 Caenorhabditis elegans mel-32 gene Proteins 0.000 description 1
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L Carbonate Chemical compound [O-]C([O-])=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- LHMSYHSAAJOEBL-CIUDSAMLSA-N Cys-Lys-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O LHMSYHSAAJOEBL-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- YYOBUPFZLKQUAX-FXQIFTODSA-N Glu-Asn-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O YYOBUPFZLKQUAX-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- RVKIPWVMZANZLI-UHFFFAOYSA-N H-Lys-Trp-OH Natural products C1=CC=C2C(CC(NC(=O)C(N)CCCCN)C(O)=O)=CNC2=C1 RVKIPWVMZANZLI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N Hydrogen peroxide Chemical compound OO MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N L-tryptophane Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- WQWSMEOYXJTFRU-GUBZILKMSA-N Leu-Glu-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O WQWSMEOYXJTFRU-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- ORWTWZXGDBYVCP-BJDJZHNGSA-N Leu-Ile-Cys Chemical compound SC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)CC)NC(=O)[C@@H](N)CC(C)C ORWTWZXGDBYVCP-BJDJZHNGSA-N 0.000 description 1
- QNBVTHNJGCOVFA-AVGNSLFASA-N Leu-Leu-Glu Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(O)=O QNBVTHNJGCOVFA-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- XOWMDXHFSBCAKQ-SRVKXCTJSA-N Leu-Ser-Leu Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC(C)C XOWMDXHFSBCAKQ-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- GAOJCVKPIGHTGO-UWVGGRQHSA-N Lys-Arg-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(O)=O GAOJCVKPIGHTGO-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 1
- ZQCVMVCVPFYXHZ-SRVKXCTJSA-N Lys-Asn-Lys Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCCN ZQCVMVCVPFYXHZ-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- NKKFVJRLCCUJNA-QWRGUYRKSA-N Lys-Gly-Lys Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCCN NKKFVJRLCCUJNA-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 1
- RMOKGALPSPOYKE-KATARQTJSA-N Lys-Thr-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O RMOKGALPSPOYKE-KATARQTJSA-N 0.000 description 1
- BVRNWWHJYNPJDG-XIRDDKMYSA-N Lys-Trp-Asn Chemical compound C1=CC=C2C(=C1)C(=CN2)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCCN)N BVRNWWHJYNPJDG-XIRDDKMYSA-N 0.000 description 1
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 1
- WYBVBIHNJWOLCJ-UHFFFAOYSA-N N-L-arginyl-L-leucine Natural products CC(C)CC(C(O)=O)NC(=O)C(N)CCCN=C(N)N WYBVBIHNJWOLCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BQVUABVGYYSDCJ-UHFFFAOYSA-N Nalpha-L-Leucyl-L-tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(NC(=O)C(N)CC(C)C)C(O)=O)=CNC2=C1 BQVUABVGYYSDCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 1
- KRYSMKKRRRWOCZ-QEWYBTABSA-N Phe-Ile-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O KRYSMKKRRRWOCZ-QEWYBTABSA-N 0.000 description 1
- 239000004793 Polystyrene Substances 0.000 description 1
- 208000005074 Retroviridae Infections Diseases 0.000 description 1
- 206010070834 Sensitisation Diseases 0.000 description 1
- SVWQEIRZHHNBIO-WHFBIAKZSA-N Ser-Gly-Cys Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CS)C(O)=O SVWQEIRZHHNBIO-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- GVIGVIOEYBOTCB-XIRDDKMYSA-N Ser-Leu-Trp Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](N)CO)CC(C)C)C(O)=O)=CNC2=C1 GVIGVIOEYBOTCB-XIRDDKMYSA-N 0.000 description 1
- LZLREEUGSYITMX-JQWIXIFHSA-N Ser-Trp Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](NC(=O)[C@H](CO)N)C(O)=O)=CNC2=C1 LZLREEUGSYITMX-JQWIXIFHSA-N 0.000 description 1
- LGIMRDKGABDMBN-DCAQKATOSA-N Ser-Val-Lys Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CO)N LGIMRDKGABDMBN-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- GXDLGHLJTHMDII-WISUUJSJSA-N Thr-Ser Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O GXDLGHLJTHMDII-WISUUJSJSA-N 0.000 description 1
- AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N Threonine Natural products CC(O)C(N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 description 1
- MHCLIYHJRXZBGJ-AAEUAGOBSA-N Trp-Gly-Cys Chemical compound N[C@@H](CC1=CNC2=CC=CC=C12)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O MHCLIYHJRXZBGJ-AAEUAGOBSA-N 0.000 description 1
- QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N Tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CWOSXNKDOACNJN-BZSNNMDCSA-N Val-Arg-Trp Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=CC=CC=C21)C(=O)O)N CWOSXNKDOACNJN-BZSNNMDCSA-N 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 1
- KOSRFJWDECSPRO-UHFFFAOYSA-N alpha-L-glutamyl-L-glutamic acid Natural products OC(=O)CCC(N)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(O)=O KOSRFJWDECSPRO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 1
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960001230 asparagine Drugs 0.000 description 1
- 235000009582 asparagine Nutrition 0.000 description 1
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 1
- 239000012964 benzotriazole Substances 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 238000001311 chemical methods and process Methods 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 238000004040 coloring Methods 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 125000004122 cyclic group Chemical group 0.000 description 1
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 1
- 125000000151 cysteine group Chemical group N[C@@H](CS)C(=O)* 0.000 description 1
- 238000007865 diluting Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 108700004025 env Genes Proteins 0.000 description 1
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 1
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 1
- 230000006870 function Effects 0.000 description 1
- 108700004026 gag Genes Proteins 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- 108010055341 glutamyl-glutamic acid Proteins 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 238000009396 hybridization Methods 0.000 description 1
- 125000004356 hydroxy functional group Chemical group O* 0.000 description 1
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 1
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 1
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 239000012212 insulator Substances 0.000 description 1
- 239000006166 lysate Substances 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 1
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 1
- 125000000913 palmityl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 108010091748 peptide A Proteins 0.000 description 1
- 238000010647 peptide synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 1
- 108700004029 pol Genes Proteins 0.000 description 1
- 229920002223 polystyrene Polymers 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 1
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 1
- 239000012047 saturated solution Substances 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 230000008313 sensitization Effects 0.000 description 1
- 239000001509 sodium citrate Substances 0.000 description 1
- NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K sodium citrate Chemical compound O.O.[Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 238000010532 solid phase synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 125000005931 tert-butyloxycarbonyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(OC(*)=O)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- WROMPOXWARCANT-UHFFFAOYSA-N tfa trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F.OC(=O)C(F)(F)F WROMPOXWARCANT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000003573 thiols Chemical group 0.000 description 1
- 238000004448 titration Methods 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ODVKSTFPQDVPJZ-UHFFFAOYSA-N urinastatin Chemical compound C1C=CCCC11COC(C=2OC=CC=2)OC1 ODVKSTFPQDVPJZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000001262 western blot Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/005—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from viruses
- C07K14/08—RNA viruses
- C07K14/15—Retroviridae, e.g. bovine leukaemia virus, feline leukaemia virus human T-cell leukaemia-lymphoma virus
- C07K14/155—Lentiviridae, e.g. human immunodeficiency virus [HIV], visna-maedi virus or equine infectious anaemia virus
- C07K14/16—HIV-1 ; HIV-2
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/005—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from viruses
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/04—Immunostimulants
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N7/00—Viruses; Bacteriophages; Compositions thereof; Preparation or purification thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2740/00—Reverse transcribing RNA viruses
- C12N2740/00011—Details
- C12N2740/10011—Retroviridae
- C12N2740/16011—Human Immunodeficiency Virus, HIV
- C12N2740/16111—Human Immunodeficiency Virus, HIV concerning HIV env
- C12N2740/16122—New viral proteins or individual genes, new structural or functional aspects of known viral proteins or genes
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Virology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Oncology (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- AIDS & HIV (AREA)
- Hematology (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
Abstract
Syntetický peptid monomerního typu se 16 až 33 aminokyselinami v lineární forme nebo v cyklizované forme pomocí intercysteinových disulfidických mustku použitelný v biologických testech pro detekci infekcí zpusobených viry HIV, kity obsahující takové peptidy a biologické testy provádené in vitro s takovými peptidy.
Description
Syntetický peptid monomerního typu, prostředek, který ho obsahuje, způsob imunologické in vitro kvantifikace a diagnostický kit pro použití v biologických testech pro identifikaci infekcí způsobených viry HIV
Oblast techniky
Vynález se týká syntetických peptidů použitelných v biologických testech pro detekci infekcí způsobených viry HIV-1 skupiny 0, způsobů přípravy těchto peptidů, kitů obsahujících tyto io peptidy a biologických zkoušek za použití těchto peptidů, farmaceutických prostředků, které tyto peptidy obsahují a biologických zkoušek, prováděných za použití těchto peptidů.
Dosavadní stav techniky 15
Retroviry HIV-1 skupiny 0 jsou známy. Evropský patentový spis číslo 0 345 375 a zveřejněná evropská přihláška vynálezu číslo EP 0 657 532 popisují izoláty ANT 70 a ANT 70 NA izolované od kamerunských nemocných jedinců. Uvedené spisy se zvláště týkají antigenů sloučenin antigenních obsahujících lyzáty nebo proteiny z těchto ízolátů, nukleových kyselin odpovídají20 cích genomickým RNA, způsobů hybridizace za získání těchto nukleových kyseliny, způsobů přípravy shora uvedených ízolátů a způsobů přípravy proteinů p!2, pl6, p25, gp41, gpl20 těchto retro virů.
Zveřejněná evropská přihláška vynálezu číslo EP 0 591 914 popisuje izolát MVP 5180/91. Tento izolát, charakterizovaný způsobem Western Blot, jako předchozí izolát, uvádí rozdíly ve vztahu k izolátům retrovíru HIV-1, již známým. Zveřejněná evropská přihláška vynálezu číslo EP 0 591 914 popisuje přesně sekvenci DNA izolátu MVP 5180/91 a vyznačuje přesně umístění genů gag, pol a env. V této přihlášce vynálezu EP 0 591 914 se také popisují syntetické peptidy smyčky V3 a imunodominantní oblast (gp41). Tyto oblasti se hodí pro biologické zkoušky, zvláště pro detekci in vitro protilátek HIV-1 skupiny 0.
Zveřejněná evropská přihláška vynálezu číslo EP 0 673 948 popisuje syntetické nebo rekombinované peptidy sestávající z 15 až 50 aminokyselin (AA) se sekvencí -VWGIRQLRARLQALETLIQNQQRLNLWGXKGKLIXYTSVKWNTSWSGR35 kde znamená X zbytek cysteinu nebo šeřinu. Těchto peptidů se používá v diagnostice pro detekci infekcí způsobovaných určitými izoláty retroviru HIV-1 skupiny 0.
Rovněž je známa zveřejněná evropská přihláška vynálezu číslo EP 0 727 483, která popisuje izolát MVP 2901/94, který je rovněž součástí retroviru z rodiny HIV-1 skupiny 0. Tato přihláška vynálezu popisuje určité antigeny mající peptidové dobře vymezené sekvence. Tyto peptidové sekvence odpovídají části sekvence gpI20 a části sekvence gp4l (imunodominantní oblasti) izolátu MVP 2901/94.
Zveřejněná přihláška vynálezu WO 96/12809 popisuje dva nové izoláty příslušející do rodiny
HIV-1 skupiny 0. Jde o izoláty VAU a DUR. Jsou popsány určité peptidové sekvence pocházející ze dvou popisovaných vírů, vhodné k detekci protilátek rozeznávajících peptidové sekvence HIV-1 VAU a DUR.
Zveřejněná přihláška vynálezu WO 96/32293 popisuje dva antigeny pocházející ze sekvence izolátu ANT 70. Jde o antigen nazvaný MDL061 a antigen MDL056 imunodominantní oblasti gp41. Uvádí se, že k detekci 100 % vzorků jedné omezené kolekce sér nemocných, infikovaných virem HIV-1 skupiny 0, je třeba použít sloučenin obsahujících tyto dva peptidy, jelikož každý izolovaný peptid neumožňuje sám o sobě získat uspokojivé výsledky.
Ve skutečnosti je téměř nemožné, vzhledem ke genetické variabilitě, kterou se vyznačují izoláty viru skupiny 0, zaručit sérologické vystopování jedinců kontaminovaných zavedením antigenů pocházejících zjednoho a téhož izolátu. To znamená, že není možno získat reagencie, které zaručují 100% citlivost. Skupina 0 tak představuje především významný problém: jde o nepřimě5 řenost některých sérologických reagencií k rozeznání jedinců kontaminovaných obzvlášť divergentními skupinami nebo podskupinami. To přesně je případ H1V-1 skupiny 0.
Zveřejněná přihláška vynálezu WO 96/40763 také trvá na velké divergenci skupiny 0. Popisují se peptidy, které začleňují do přírodní sekvence HIV-1 typu B některé drobné modifikace (náhradu ío jedné nebo dvou aminokyselin). Uvádějí se hybridní peptidy schopné reagovat s protilátkami proti skupině 0.
Ve zveřejněné přihlášce vynálezu WO 96/27013 se popisuje řada nových virů HIV skupiny 0, označovaných BCF 01, BCF 02, BCF 03, BCF 06, BCF 07, BCF 08, BCF 09, BCF 11, BCF 12,
BCF 13 a BCF 14 a řada peptidů dominantní oblasti odpovídajících gp41, pojmenovaných
ESS/BCF02, FAN/BCF01, LOB/BCF06, MAN/BCF07, NKO/BCF08, POC/BCF03,
NAN/BCFU, BCF09, BCF 12, BCF13, BCF 14. Určitý počet tčchto peptidů je špatně zpracovatelný při diagnostice vzhledem kjejich slabé rozpustnosti, zejména peptid BCF13.
Zcela neoěekávatelně se nyní zjistilo, že určité syntetické peptidy jsou diagnosticky hodnotněji reaktivní a umožňují dostatečným způsobem identifikovat nemocné nakažené retrovirem HIV-1 skupiny 0. Tyto peptidy sestávají z rozmanitých sekvencí seskupených kolem velmi Zachovalých krátkých sekvencí, obsažených v izolátech retroviru HIV-1 skupiny 0. Peptidy podle vynálezu umožňují dosahovat lepších výsledků, než jakých se dosahovalo se syntetickými peptidovými nosiči imunodominantních epitopů gp41 (env) určitých izolátů HIV-1 skupiny 0.
V dalším textuje k pojmenování aminokyselin použito trípísmenových kódů.
Podstata vynálezu
Podstatou vynálezu jsou syntetické peptidy monomemího typu obecného vzorce I
A-Z-TrpG(yCy8-0-CysTyrThr6er-Q kde znamená
Δ skupinu biotinylovou, biocytinylovou, atom vodíku, skupinu cetylovou (CH3CO)-, alifalický řetězec s 1 až 6 atomy uhlíku, obsahující popřípadě jednu nebo dvě skupiny thiolové, aldehy dové nebo aminové funkční skupiny, přičemž alifatickým řetězcem je zvláště řetězec alkylový s 1 až 6 atomy uhlíku, nebo řetězec alkenylový se 2 až 6 atomy uhlíku nebo řetězec amino alkyl karbony lový se 2 až 6 atomy uhlíku,
Z peptidovou sekvenci obecného vzorce LeuLeuGInSerLeuLeuSerSer-,
LeuLeuSerLeuLeuLeuAsnSerArgLeuAsnSer-,
AlaLeuGluThrLeuLeuGlnAsnGlnGlnLeuLeuAsnSerAlaUeuGluThrLeuLeuGlnAsnGlnGlnLeuLeuAspLeu50 AlaLeuGluThrLeuLeuGlnAsnGlnGlnLeuLeuAsnlleLeuAsnGlnGlnArgLeuLeuAsnSer- nebo ArgAlaLeuGluThrLeuLeuAsnGlnGlnArgLeuLeuAsnSer
Θ peptidovou sekvenci vzorce -LysGlyArgLeuVal- nebo -ArgG ly ArgLeu V al5 Ω skupinu -ψ, peptidovou sekvenci -Val-ψ, nebo peptidovou sekvenci -Val-Σ-ψ, kde znamená ψ vázaný na skupinu -CO- šeřinu, vatinu nebo volné aminokyselny (AAg), skupinu hydroxy lovou (-OH), aminoskupinu (-NH2) nebo alkoxyskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku,
Σ peptidovou sekvenci vzorce -{AA6)-TrpAsn-{AA7)(AAg), kde znamená (AA$) glutaminový nebo argininový zbytek, (AA?) aminokyselinu a (AA8) serinový nebo threoninový zbytek.
Přednost se dává peptidům obecného vzorce I zahrnujícím jednu z následujících sekvencí (tyto peptidy mohou být monomemího nebo dímemího typu, jak shora uvedeno). V dalším textu je k pojmenování aminokyselin použito třípísmenových kódů.
Sekvence δ. 1
-LLSLWGCRGKAVCYTSVQWNETnebo
-Leu Leu Ser Leu Trp Gly Cys Arg Gly Lys Ala Val Cys Tyr Thr Ser Val Gin Trp Asn 1 6 10 15 20
Glu Thr22
Sekvence δ. 2
-LLSLWGCRGRLVCYTSVQWNETnebo
-Leu Leu Ser Leu Trp G|y Cys Arg Gly Arg Leu Val Cys Tyr Thr Ser Val Gin Trp Asn 1 5 10 15 20
GluThr22
Sekvence č. 3
-LLSSWGCKGRLVCYTSVQWNETnebo
-Leu Leu Ser Ser Trp Gly Cys Lys Gly Arg Leu Val Cys Tyr Thr Ser Val Gin Trp Asn
5 10 15 20
Glu Thr22 _ 7 CZ 300927 B6
Sekvence č. 4
-LLSSWGCKGRLVCYTSVQWNSTnebo
-Leu Leu Ser Ser Trp Gly Cys Lys Gly Arg Leu Val Cys Tyr Thr Ser Val Gin Trp Asn 15 10 15 20
Ser Thr22
Sekvence č. 5
-LLQSWGCKGRLVCYTSVQWNSTnebo
-Leu Leu Gin Ser Trp Gly Cys Lys Gly Arg Leu Val Cys Tyr Thr Ser Val Gin Trp Asn 1 5 10 15 20
Ser Thr22
Sekvence č. 6
-LLNSWGCRGKAVCYTSVQWNETnebo
-Leu Leu Asn Ser Trp Gly Cys Arg Gly Lys Ala Val Cys Tyr Thr Ser Val Gin Trp Asn 15 10 15 20
Glu Thr22
Sekvence č. 7
-LLSLWGCRGRAVCYTSVQWNETnebo
-Leu Leu Ser Leu Trp Gly Cys Arg Gly Arg Ala Val Cys Tyr Thr Ser Val Gin Trp Asn 1 5 10 15 20
Glu Thr22
Sekvence č. &
-LLSSWGCRGRLVCYTSVQWNETnebo
-Leu Leu Ser Ser Trp Gly Cys Arg Gly Arg Leu Val Cys Tyr Thr Ser Val Gin Trp Asn
5 10 15 20
Glu Thr22
Λ .
Sekvence č. 9
-LLSSWGCKGRLVCYTSnebo
-Leu Leu Ser Ser Trp Gly Cys Lys Gly Arg Leu Val Cys Tyr Thr Ser15 10 15
Sekvence Č. 10
-LLNSWGCKGRLVCYTSnebo
-Leu Leu Asn Ser Trp Gly Cys Lys Gly Arg Leu Val Cys Tyr Thr Ser15 10 15
Sekvence č. 11
-ALETLLQNQQLLNSWGCRGRLVCYTSVRWNETnebo
-Ala Leu Glu Thr Leu Leu Gin Asn Gin Gin Leu Leu Asn Ser Trp Gly Cys Arg Gly 15 10 15
Arg Leu Val Cys Tyr Thr Ser Val Arg Trp Asn Glu Thr20 25 30
Sekvence fi. 12
-ALETLLQNGQLLNIWGCRGRLVCYTSVRWNETnebo
-Ala Leu Glu Thr Leu Leu Gin Asn Gin Gin Leu Leu Asn Ile Trp Gly Cys Arg Gly 15 10 15
Arg Leu Val Cys Tyr Thr Ser Val Arg Trp Asn Glu Thr20 25 30
Sekvence č. 13
-ALETLLQNQQLLDLWGCRGRLVCYTSVRWNETnebo
-Ala Leu Glu Thr Leu Leu Gin Asn Gin Gin Leu Leu Asp Leu Trp Gly Cys Arg Gly 15 10 15
Arg Leu Val Cys Tyr Thr Ser Val Arg Trp Asn Glu Thr20 25 30
-5 CZ 300927 B6
Sekvence Č. 14
-LNQQRLLNSWGCKGRLVCYTSVnebo
-Leu Asn Gin Gin Arg Leu Leu Asn Ser Trp Gly Cys Lys Gly Arg Leu Val Cys Tyr 15 10 15
Thr SerVal20
Sekvence č. 15
-RALETLLNQQRLLNSWGCKGRLVCYTSVnebo
- Arg Ala Leu Glu Thr Leu Leu Asn Gin Gin Arg Leu Leu Asn Ser Trp Gly Cys Lys 15 10 15
Gly Arg Leu Val Cys Tyr Thr Ser Val20 25
Sekvence Č. 16 -RLNSWGCKGRLVCYTSVnebo
- Arg Leu Asn Ser Trp Gly Cys Lys Gly Arg Leu Val Cys Tyr Thr Ser Val15 10 15
Obzvášté výhodnými jsou následující syntetické peptidy:
Peptid i. 1 (2B): SEQ ID N* 1 LLSLWGCRGKAVCYTSVQWNET nebo
Leu Leu Ser Leu Trp Gly Cys Arg Gly Lys Ala Val Cys Tyr Thr Ser Val Gin Trp Asn 15 10 15 20
Glu Thr
Peptid č. 2 (3B): SEQ ID N*2
LLSLWGCRGRLVCYTSVQWNET nebo
Leu Leu Ser Leu Trp Gly Cys Arg Gly Arg Leu Val Cys Tyr Thr Ser Val Gin Trp Asn 1 5 10 15 20
Glu Thr £
Peptid Č. 3 (4B): SEQ ID N° 3
LLSSWGCKGRLVCYTSVQWNET nebo
Leu Leu Ser Ser Trp Gly Cys Lys Gly Arg Leu Val Cys Tyr Thr Ser Val Gin Trp Asn 15 10 15 20
Glu Thr
Peptid č. 4f5B) : SEQ ID Ν°4
LLSSWGCKGRLVCYTSVQWNST nebo
Leu Leu Ser Ser Trp Gly Cys Lys Gly Arg Leu Val Cys Tyr Thr Ser Val Gin Trp Asn 15 10 15 20
Ser Thr 22
Peptid č. 5 (6B): SEQ ID N0 5
LLQSWGCKGRLVCYTSVQWNST nebo
Leu Leu Gin Ser Trp Gly Cys Lys Gly Arg Leu Val Cys Tyr Thr Ser Val Gin Trp Asn 15 10 15 20
Ser Thr
Peptid č. 6:SEQIDN»6
LLNSWGCRGKAVCYTSVQWNET nebo
Leu Leu Asn Ser Trp Gly Cys Arg Gly Lys Ala Val Cys Tyr Thr Ser Val Gin Trp Asn
5 10 15 20
Glu Thr 22
Peptid č. 7 : SEQ IP N° 7 LLSLWGCRGRAVCYTSVQWNET nebo
Leu Leu Ser Leu Trp Gly Cys Arg Gly Arg Ala Val Cys Tyr Thr Ser Val Gin Trp Asn
5 10 15 20
Glu Thr
-7CZ 300927 B6
Peptid č. 8(7B): SEQ ID N*8 LLSSWGCRGRLVCYTSVQWNET nebo
Leu Leu Ser Ser Trp Gly Cys Arg Gly Arg Leu Val Cys Tyr Thr Ser Val Gin Trp Asn 1 5 10 15 20
Glu Thr
Peptid č. 9 (12B): SEQ ID N* 9
LLSSWGCKGRLVCYTS nebo
Leu Leu Ser Ser Trp Gly Cys Lys Gly Arg Leu Val Cys Tyr Thr Ser 1 5 10 15
Peptid č, 10Π4Β): SEQ ID N* 10
LLNSWGCKGRLVCYTS nebo
Leu Leu Asn Ser Trp Gly Cys Lys Gly Arg Leu Val Cys Tyr Thr Ser 15 10 15
Peptid č, 11 (18BÍ: SEQ ID N° 11
ALETLLQNQQLLNSWGCRGRLVCYTSVRWNET nebo
Ala Leu Glu Thr Leu Leu Gin Asn Gin Gin Leu Leu Asn Ser Trp Gly Cys Arg Gly 1 5 10 15 '
Arg Leu Val Cys Tyr Thr Ser Val Arg Trp Asn Glu Thr 20 25 30
Peptid č. 12 (19B): SEQ ID N*12 ALETLLQNQQLLNIWGCRGRLVCYTSVRWNET nebo
Ala Leu Glu Thr Leu Leu Gin Asn Gin Gin Leu Leu Asn Ile Trp Gly Cys Arg Gly 15 10 15
Arg Leu Val Cys Tyr Thr Ser Val Arg Trp Asn Glu Thr 20 25 30
Peptid č. 13 (20B): SEQ ID N* 13 ALETLLQNQQLLDLWGCRGRLVCYTSVRWNET nebo o
-Ala Leu Glu Thr Leu Leu Gin Asn Gin Gin Leu Leu Asp Leu Trp Gly Cys Arg Gly 15 10 15
Arg Leu Val Cys Tyr Thr Ser Val Arg Trp Asn Glu Thr
25 30
Pep_t i d č. 14 (21B): SEQ ID N° 14
LNQQRLLNSWGCKGRLVCYTSV nebo
Leu Asn Gin Gin Arg Leu Leu Asn Ser Trp Gly Cys Lys Gly Arg Leu Val Cys Tyr 15 10 15
Thr Ser Val
Peptid č. -¾¾ (22B): SEQ ID N* 15
RALETLLNQQRLLNSWGCKGRLVCYTSV nebo
Arg Ala Leu Glu Thr Leu Leu Asn Gin Gin Arg Leu Leu Asn Ser Trp Gly Cys Lys
10 15
Gly Arg Leu Val Cys Tyr Thr Ser Val 20 25
Pept i d č. 16 (23B): SEQ ID N* 16
RLNSWGCKGRLVCYTSV nebo
Arg Leu Asn Ser Trp Gly Cys Lys Gly Arg Leu Val Cys Tyr Thr Ser Val
10 15
Syntetické peptidy obecného vzorce I podle vynálezu se získají syntézou v pevné fázi klasickými způsoby popsanými v literatuře (R.B. Merrifíeld J. Amer. Chem. Soc. 85, str. 2149 až 2154,
1963); R.C. Sheppard „Peptides 1971“, Nsvadba H. (vydavatel) North Holland Amsterdam str. 111; E. Atherton a R.L. Sheppard „Solid phase peptide synthesis, a practical approach“ IRL PRESS (1989), Oxford University Press, str. 25 až 34. Jako automatického syntetizátoru je možno použít syntetizátoru „9050 Plus Pep Synthetizer“ Millipore nebo rovnocenného zařízení.
ío Pevný nosič, kterého se při syntéze používá, má odpovídat použité chemické technice. Například pro syntézu na syntetizátoru „9050 Plus Pep Synthetizer“ se doporučuje pryskyřice přizpůsobená technice „ve vznosu“; těmto kriteriím vyhovují pryskyřice PEG PS. Nosiče jsou tvořeny mezemíkem („spacer“) na bázi polyethylenglykolu (PEG) mezi funkčními skupinami polystyrénových kuliček a místem styku s první aminokyselinou. Poloha tohoto místa styku se může měnit podle funkce zvoleného C-zakončení. V tomto případě se používá různých pryskyřic PEG-PS.
-oCZ 300927 B6
Výchozí pryskyřice a použité aminokyseliny jako surovina jsou obchodně dostupné (PerSeptiveB i osy stem, nebo Néosystem).
K syntéze peptidu se používá chránících skupin s následujícími řetězci:
Aminokyselina arginin asparagin, glutamin cystein šeřin, threonin tyrosin lysin, tryptofan
Chránící skupina pentamethy 1-2,2,4,6,7-dihydrobenzofuran-5-sulfonyl (Pbf) trityl (Trt) trityl (Trt) nebo acetamidomethyl (Acm) ether terc-butyl (tBu) terc-buty loxy karbonyl (Boc)
Dočasnou ochranou primární a aminoskupiny použitých aminokyselin je skupina 9-fluorenylmethyloxykarbonylová (Fmoc). Chránící skupinu je možno odstranit 20% roztokem piperidinu v dimethylformamidu.
Ke kopulaci se používá s výhodou nadbytku díisopropylkarbodiimidu (DIPCDI) a hydroxy-1benzotriazolu (HOB).
Po syntéze se pryskyřice promyje organickými rozpouštědly (postupně dimethylformamidem a 15 dichlormethanem) vysuší se ve vakuu, načež se zpracuje roztokem na bázi kyseliny trifluoroctové (TFA) ochlazené na teplotu 0 °C a obsahující vhodné zachycovače. Použít lze například reakčního činidla K obsahujícího 82 % trifluoroctové kyseliny, 5 % fenolu, 5 % vody, 5 % thioanisolu a 3 % ethandithiolu,
2o Po titraci pryskyřice se syntetické peptidy vysrážejt a propláchnou se etherem.
Syntetické peptidy se pak čistí kapalinovou chromatografií v inverzní fázi a jejich čistota se stanoví hmotovou spektrometrií. Jako pevné fáze je možno použít například fáze Bondapak C-18. Peptidy se eluují lineárním gradientem mezi dvěma pufrovými roztoky, prvním v podstatě vodným (například vodná 0,1% TFA) a druhým spíše organickým (například směsí obsahující 60 % acetonitrilu, 39,92 % vody a 0,08 % TFA). Čisté frakce se shromáždí, zkoncentrují se ve vakuu a lyofilizují se.
Kcyklizaci se vyčištěné syntetické peptidy rozpustí v roztoku octanu amonného (10 nM), hodnota pH se nastaví na 8,5 přísadou IM amoniaku. Roztok se intenzivně míchá. Cyklizace je ukončena po 18 hodinách. Hodnota pH se pak sníží na 6 přidáním kyseliny octové. Cyklizované peptidy se lyofilizují, čistí se kapalinovou chromatografií v inverzní fázi jak shora popsáno.
Imunoreaktivíta peptidu podle vynálezu se hodnotí pomocí séra nemocných jedinců převážně z Kamerunu, infikovaných retroviry HIV-1 skupiny 0. Různé provedené zkoušky ukázaly, že peptidy podle vynálezu samotné nebo ve spojení (peptidové prostředky) umožňují 100% detekci sér infikovaných virem HIV-1 skupiny 0.
Syntetické peptidy podle vynálezu nacházejí tudíž uplatnění v imunologických testech k vypátrá40 ní infekcí způsobených retrovirem HIV-1 skupiny 0. Je rovněž možno použít souboru několika syntetických peptidu obecného vzorce I, Tyto soubory, které mohou obsahovat dva nebo několik peptidu obecného vzorce!, jsou také předmětem vynálezu. Přednost se dává souborům obsahujícím peptidy č. 1 (2B) a č. 3 (4B).
Stejně je možno použít syntetických peptidů obecného vzorce I podle vynálezu ve spojení s rekombinovanými peptidy (rekombinantními proteiny) HIV-1 skupiny 0, které lze získat . in.
CZ 5UU927 Bó klasickými způsoby a majícími sekvence popsané v příkladu přihlášky vynálezu číslo EP
591 914. Také tyto sloučeniny spadají do rámce vynálezu.
Syntetických peptidů podle vynálezu je možno použít také ve spojení s jinými syntetickými nebo 5 rekombinovanými HIV-1 (rekobinantní proteiny) HIV-2 peptidy popsanými například v následujících patentových spisech: EP 0 387 914, EP 0 239 425, EP 0 220 273 nebo EP 0 267 802.
Prostředky obsahující jeden nebo několik syntetických peptidů obecného vzorce 1 a několik syntetických nebo rekombinovaných HIV-1 nebo HIV-2, nacházejí uplatnění v diagnostice io k vypátrání nemocných infikovaných různými retroviiy HIV. Také tyto prostředky spadají do rozsahu vynálezu.
Vynález se týká také způsobů imunizaěního dávkování používajících několika syntetických peptidů obecného vzorce I samotných nebo ve spojení s rekombinovanými peptidy HIV-1 skupiny 0 nebo syntetických peptidů nebo rekombinovaných HIV-1 a/nebo HIV-2.
Vynález se týká také kitů k zavádění imunitních dávek, které zahrnují peptid obecného vzorce I nebo prostředek obsahující alespoň jeden peptid obecného vzorce I.
Vynález objasňují, nijak však neomezují následující příklady praktického provedení.
Příklady provedení vynálezu
Příklad 1
Příprava sloučeniny podle vynálezu: peptid číslo 2 (3B)
LLSLWGCRGRLVCYTSVGWNET nebo |_eu Leu Ser Leu γφ G|y Cys Arg G|y Afg Leu Va| Cys Ty|. Thr Ser Vg| Q|n T(.p Asn 1 S 10 15 20
Glu Thr
Tento peptid se syntetizuje v pevné fázi. Použitý způsob, který zavedl v roce 1963 Merifield 30 (J. Am. Chem. Soc. 85, str. 2149 až 2154 (1963), je založen na fixování první aminokyseliny na pevném polymemím nosiči (pryskyřici) jeho kyselou skupinou a v prodloužení peptidické sekvence od první aminokyseliny, přičemž peptid zůstává během syntézy zakotven na pryskyřici.
K syntéze peptidu ě. 2 se použije jako syntetizátoru „9050 Plus Pep Synthetizer“ a jako pryskyři35 ce Fmoc Thr (OtBu) PEG PS.
Jednotlivé kroky syntézy vyplývají z následující tabulky I. (ve sloupci 1 je uveden zbytek aminokyseliny, ve sloupci II skupina chránící aminoskupinu NH2, ve sloupci III skupina chránící postranní skupinu, ve sloupci IV způsob kopulace a ve sloupci V počet ekvivalentů a doba kopulace, „eq“ znamená ekvivalent)
- II CZ 300927 B6
Tabulka 1
| I | II | III | IV | V |
| Glu | Fmoc | OtBu | DIPCDI/HOBt | 5 eq - 30 min |
| Asn | Fmoc | Trt | DIPCDI/HOBt | 5 eq - 30 min |
| . .„Trp | Fmoc | Boc | DIPCDI/HOBt | 5 eq - 30 min |
| Gin | Fmoc | Trt | DIPCOI/HOBt | 5 eq - 30 min |
| Val | Fmoc | DIPCDI/HOBt | 5 eq - 30 min | |
| Ser | Fmoc | tBu | DIPCDI/HOBt | 5 eq - 30 min |
| Thr | Fmoc | tBu | DIPCDI/HOBt | 5 eq - 30 min |
| „ Tyr | Fmoc | tBu | DIPCDI/HOBt | 5 eq - 30 min |
| Cys | Fmoc | Trt | DIPCDI/HOBt | 5 eq - 30 min |
| Val | Fmoc | DIPCDI/HOBt | 5 eq - 30 min | |
| Leu | Fmoc | DIPCDI/HOBt | 5 eq - 30 min | |
| Arg ..... | Fmoc | Pbf | DIPCDI/HOBt | 5 eq - 30 min |
| Gly | Fmoc | DIPCDI/HOBt | 5 eq - 30 min | |
| Arg | Fmoc | Pbf | DIPCDI/HOBt | 5 eq - 30 min |
| Cys | Fmoc | Trt | DIPCDI/HOBt | 5 eq - 30 min |
| Gly | Fmoc | DIPCDI/HOBt | 5 eq - 30 min | |
| IfP- „ | Fmoc | Boc | DIPCDI/HOBt | 5 eq - 30 min |
| Leu | Fmoc | DIPCDI/HOBt | 5 eq - 30 min | |
| Ser | Fmoc | tBu | DIPCDI/HOBt | 5 eq - 30 min |
| Leu | Fmoc | DIPCDI/HOBt | 5 eq - 30 min | |
| Leu | Fmoc | DIPCDI/HOBt | 5 eq - 30 min |
Po ukončení syntézy se pryskyřice promyje postupně dimethy Iformamidem a dichlormethanem a 5 vysuší se ve vakuu.
Pryskyřice se pak zpracuje reakčním činidlem K (82 % trifluoroctové kyseliny, 5 % fenolu, 5 % vody, 5 % thioanisolu a 3 % ethandithiolu). Peptid číslo 2 (3B) se izoluje vysrážením pomocí diethyloxidu a promyje se stejným rozpouštědlem. Získá se tak 140 mg peptidu číslo 2 (3B).
Peptid číslo 2 (3B) se čistí kapalinovou chromatografií v inverzní fázi. Jako pevné fáze se použije fáze Bondapak C-l 8. Peptid se eluuje gradientem mezi dvěma pufrovými roztoky, prvním v podstatě vodným (například vodným 0,1% TFA) a druhým spíše organickým (například směsí obsahující 60 % acetonitrilu, 39,92 % vody a 0,08 % TFA). Čisté frakce se shromáždí, zkoncentrují se is ve vakuu a lyofilizují se.
K cyklizaci se takto získaný vyčištěný syntetický peptid rozpustí v roztoku octanu amonného (10 mM), hodnota pH se nastaví na 8,5 přísadou ÍM amoniaku. Roztok se intenzivně míchá.
Cyklizace je ukončena po 18 hodinách. Hodnota pH se pak sníží na 6 přidáním kyseliny octové.
Cyklizovaný peptid se lyofi lizuj e, čistí se kapalinovou chromatografií v inverzní fázi, jak shora popsáno.
Ί
CZ 300927 Bó
Příprava sloučeniny podle vynálezu: peptid číslo 15 (22B)
Peptid se syntetizuje jako peptid Číslo 2 (3B), avšak s použitím pryskyřice FmocPAL PEG-PS.
Jednotlivé kroky syntézy vyplývají z následující tabulky II. (ve sloupci l je uveden zbytek aminokyseliny, ve sloupci II skupina chránící aminoskupinu NH2, ve sloupci III skupina chránící postranní skupinu, ve sloupci IV způsob kopulace a ve sloupci V počet ekvivalentů a doba kopulace, „eq“ znamená ekvivalent) io Tabulka II
| I | II | III | IV | V |
| • Val | Fmoc | DIPCDI/HOBt | 5 eq - 45 mn | |
| Ser | Fmoc | tBu | DIPCDI/HOBt | 5 eq- 45 mn |
| Thr | Fmoc | tBu | DIPCDI/HOBt | 5 eq- 45 mn |
| Tyr | Fmoc | tBu | DIPCDI/HOBt | 5 eq - 45 mn |
| Cys | Fmoc | Trt | DIPCDI/HOBt | 5 eq- 45 mn |
| Val | Fmoc | DIPCDI/HOBt | 5 eq- 45 mn | |
| Leu | Fmoc | DIPCDI/HOBt | 5 eq- 45 mn | |
| Arg | Fmoc | Pbf | DIPCDI/HOBt | 5 eq- 45 mn |
| Gly | Fmoc | DIPCDI/HOBt | 5 eq - 45 mn . | |
| Lys | Fmoc | Boc | DIPCDI/HOBt | 5 eq - 45 mn |
| Cys | Fmoc | Trt | DIPCDI/HOBt | 5 eq - 45 mn |
| Gly | Fmoc | DIPCDI/HOBt | 5 eq - 45 mn | |
| - Trp | Fmoc | Boc | DIPCDI/HOBt | 5 eq- 45 mn |
| Ser | Fmoc | tBu | DIPCDI/HOBt | 5 eq- 45 mn |
| Asn | Fmoc | Trt | DIPCDI/HOBt | 5 eq- 45 mn |
| Leu | Fmoc | DIPCDI/HOBt | 5 eq - 45 mn | |
| Leu | Fmoc | DIPCDI/HOBt | 5 eq - 45 mn | |
| Arg | Fmoc | Pbf | DIPCDI/HOBt | 5 eq- 45 mn |
| Gin | Fmoc | Trt | DIPCDI/HOBt | 5 eq- 45 mn |
| Gin | Fmoc | Trt | DIPCDI/HOBt | 5 eq- 45 mn |
| Asn | Fmoc | Trt | DIPCDI/HOBt | 5 eq- 45 mn |
| Leu | Fmoc | DIPCDI/HOBt | 5 eq- 45 mn | |
| Leu | Fmoc | DIPCDI/HOBt | 5 eq - 45 mn | |
| Thr | Fmoc | tBu | DIPCDI/HOBt | 5 eq - 45 mn |
| Glu | Fmoc | OtBu | DIPCDI/HOBt | 5 eq - 45 mn |
| Leu | Fmoc | DIPCDI/HOBt | 5 eq - 45 mn | |
| Ala | Fmoc | DIPCDI/HOBt | 5 eq- 45 mn | |
| Arg | Fmoc | Pbf | DIPCDI/HOBt | 5 eq- 45 mn |
_ n.
Po ukončení syntézy se pryskyřice promyje dimethylformámidem, pak dichlormethanem a vysuší se ve vakuu, Pryskyřice se pak zpracuje reakčním činidlem K (82 % trifluoroctové kyseliny, 5 % fenolu, 5 % vody, 5 % thioanisolu a 3 % ethandithiolu). Peptid číslo 7 (22B) se izoluje vysrá5 žením pomocí diethyloxidu a promyje se stejným rozpouštědlem. Získá se 140 mg peptidu číslo 15 (22B). Peptid číslo 15 (228) se čistí kapalinovou chromatografií v inverzní fázi, pak se cyklizuje, lyofilizuje a čistí jak popsáno shora u peptidu číslo 2 (3B).
Obdobným způsobem a za použití pryskyřic a vhodných aminokyselin se připravují ostatní i o sloučeniny podle vynálezu.
Tabulka lil udává molekulové hmotnosti určitých peptidů obecného vzorce I v necyklizované formě podle hmotové spektrometrie.
Tabulka III
Peptid číslo Molekulová hmotnost (daltony)
| 1 (2B) | 2512 |
| 2 (3B) | 2583 |
| 3 (4B) | 2528 |
| 4 (5B) | 2586 |
| 5 (6B) | 2527 |
| 9 (12B) | 1772 |
| 10 (14B) | 1799 |
| 11 (18B) | 3752 |
| 12 (19B) | 3778 |
| 13 (20B) | 3780 |
| 14 (21B) | 2538 |
| 15(22B) | 3222 |
| 16 (23B) | 1941 |
Příklad 2
Vyhodnocení imunoreaktivity peptidů podle vynálezu imunoenzymatickým testem: test číslo 1
Použitými séry ESS, DUR, VAU a HAD jsou séra nemocných Francouzů infikovaných retroviry HIV-1 skupiny 0. Ostatní vzorky sér nemocných infikovaných retrovirem HIV-1 skupiny 0 se získaly ze střediska Centre Pasteur de Yaoundé v Kamerunu a byly serotypovány skupinou 0 podle sérotogického algoritmu popsaného v literatuře (AIDSU, str. 445 až 453, 1977). Negativní séra HIV (n=48) byla získána od zdravých dobrovolníků.
Použité peptidy se rozpustí ve vodě v koncentraci 1 mg/ml (matečný roztok). K senzibilizaci pevné fáze (povlaku) se do každého důlku mikrotitrační destičky Microtiter™ (NUNC) vnese
110 μί roztoku vždy 2 μg/ml každého peptidu (získaného zředěním mateřského roztoku roztokem uhličitanového pufru (O,1M). Po inkubaci přes noc při teplotě okolí se mikrodestičky promyjí napřed pufrem Tris NaCl pH 7,4 obsahujícím 0,1 % TweenuR 20 a 0,001 % merthiolátu sodného, nasytí se roztokem PBS obsahujícím 0,5 % Regilaitu™ (sušené odstředěné mléko). Po odpaření nasyceného roztoku, se destičky udržují ohříváním na teplotě 50 °C po dobu 10 minut. Vzorky _ 14 _ sér se zředí na 1/5 roztokem odstředěného mléka (citrátový pufr s přísadou 0,01 % fenolové červeně, 0,25 % chloroformu a 0,25 % KathonuR) vneseného do důlků destiček a podrobí se inkubaci 30 minut při teplotě 40 °C.
Po promytí roztokem pufru Tris NaCI pH7,4, obsahujícím 0,1% TweenuR20 a 0,001 % merthiolátu sodného, se přidá 100 μΐ roztoku konjugovaných kozích protilátek IgG a lidských IgM za označení peroxidázou křenu, obsahujících jako konzervační látku 0,01 % merthiolátu sodného, v roztoku citrátového pufru s přísadou 30% glycerolu a 25% normálního telecího zárodečného séra do každého důlku destiček, načež se destičky inkubují 30 minut při 40 °C. Po ío promytí roztokem pufru Tris NaCI pH 7,4, obsahujícím 0,1 % TweenuR 20 a 0,001 % merthiolátu sodného, se získá vybarvení přísadou do každého důlku 100 μΐ O-fenylendiaminu v roztoku peroxidu vodíku. Mikrodestičky se pak inkubují 30 minut ve tmě při teplotě okolí. Barevná reakce se ukončí přísadou 100 μΐ 4N kyseliny sírové. Absorbance (A) se stanoví při 490 a
620 nm.
Relativní absorbance (A490-A620) odečtená v každém důlku je úměrná imunoreaktivitě každého peptidů a indikuje schopnost každého peptidů reagovat se zkoušeným biologickým vzorkem. Prahová hodnota (cut-ofí) se stanoví jako absorbance rovná 0,15. Odpovídá průměru hodnot negativních (n=48) plus 12 odchylných typů. Reaktivita peptidů podle vynálezu (peptidů číslo 3 (4B), peptidů číslo 2 (3B) a peptidů číslo 1 (2B) všech v cyklizované formě) se porovnává s reaktivitou dvou syntetických peptidů majících jako sekvenci část sekvence přírodní obálky (env) izolátu V AU (retrovirus HIV-1 skupiny 0) a nesoucí imunodominantní epitop gp41.
Tyto dva peptidy mají následující sekvenci:
Leu Leu Asn Leu Trp Gly Cys Lys Asn Arg Ala tle Cys Tyr Thr Ser Val Lys Trp Asn 15 10 15 20
Lys Thr 22
VAU 35 AA
Arg Leu Leu Ala Leu Glu Thr Phe Ile Glu Glu Asn Glu Leu Leu Asn Leu Trp Gly Cys 1 5 10 15 20
Lys Asn Arg Ala Ile Cys Tyr Thr Ser Val Lys Trp Asn Lys Thr
30 35
Peptidy pro tuto studii se užívají vždy v cyklické formě.
Výsledky jsou uvedeny v tabulce IV (N° znamená číslo vzorku).
- 15CZ 300927 B6
Tabulka IV
| SÉRUM | ABSORBANCE | ||||
| Peptid . n° 3 (4B) | Peptid N® 2 (3B) | Peptid N® 1 (2B) | VAU22AA | VAU 35 AA | |
| ESS* | >** | > | 2,494 | > I | > |
| DUR* | > | > | 0,118 | 0,872 | |
| HAD | > | 0,518 | 0,041 | 0,789 i | 0,871 |
| VAU* | 1,342 | > | > | » .. 1 | > |
| 3935 | > | 0,893 | 0,307 | 0,138 i | 0,227 |
| 6891 | > | 0,614 | 0,062 | 0,359 | | 0,496 |
| 6512* | 0,746 | 0,785 | > | 0,120 ! | 0,174 |
| 1105* | 1,421 | 1,031 | > | 0,099 Ϊ | 0,129 |
| 4021* | 0,430 | 0,119 | > | 0,050 i | 1,957 |
| 5969* | > | 0,282 | > | 2,491 | > |
| 2700 | > | 0,274 | > | > | > |
| 5453 | 0,555 | 0,081 | > | 1,267 | 1,482 |
| 5931 | > | > | > | 0,202 | 2,225 |
| 3136 | > | 0,992 | 0,302 | > | > |
| 3653 | 1,352 | > | 0,044 | 1,441 | 1,322 |
| 2352 | > | > | 0,205 | > | > |
| 3016 | > | > | 0,243 | > | > |
| 3302 | > | > | 0,388 | > | > |
| 2294 | > | > | 0,447 | > | > |
| 3771 | > | > | 0,544 | > | > |
| 1581 | > | > | > | 1,112 | 0,894 |
| 5373 | > | > | > | 1,359 | 0,856 |
| 7443 | > | > | > | 0,920 | Γ 0,574 |
| 3637 | > | > | > | 0,779 | 1,647 |
| 6295* | 1,718 | 1,063 | 0,972 | > | |
| 6689* | 0,710 | > | > | > | |
| 1754 | > | > | > | 1,263 | 1,948 |
| 4489* | > | > | > | 1,318 | 1,718 |
| 4364 | > | > | 1,382 | > | > |
| 3884* | > | > | 1,839 | > | > |
| 3529 | > | > | 1,803 | > | > |
| 3482 | 2,402 | > | 1,473 | > | > |
| 1702 | > | > | 1j162 | > | > |
| 6487 | > | 1,017 | 2,887 | 2,889 | ?,891 |
| 5164 | > | > | > | > | > |
| 5766* | > | > | > | > | > |
| 3945 | > | > | > | > | > |
_ 1ή_
CZ 3WU927 Bb
| SÉRUM | ABSORBANCE | ||||
| Peptiď n*3(4B) | Peptid n* 2 (3B) | Peptid N* 1 (2B) | VAU-22AA | VAU 35 AA | |
| 4434 | > | > | > | 2,273 | > |
| 4288* | > | > | 2,802 | 2,337 | N.T.*** |
| 6782 | > | 2,091 | 2,462 | 2,190 | 2,214 |
| 2313 | > | > | > | > | > |
| 2312 | > | > | > | ||
| 1062 | > | > | > | > | > |
| 402 | > | > | > | > | > |
| 134 | > | > | > | > | > |
| 7120 | > | > | > | > | > |
| 7212 | > | > | > | > | > |
| 6976* | > | > | > | > | > |
| 3600* | > | > | 2,743 | > | > |
| 3236 | > | > | > | > | > |
| 323S | > | > | > | > | |
| 2551 | > | > | > | > | > |
| 5270* | > | > | > | > | > |
| 5210 | > | > | > | > | > |
| 5149* | > | > | > | > | > |
| 4477 | > | > | > | 2,511 | > |
| 3891 | > | > | 2,780 | > | > |
| 3627* | > | > | 2,910 | > | > |
| 7258* | > | > | 2,477 | > | > |
| 7007 | 2,136 | 2,334 | > | 2,151 | |
| 6697 | > | > | > | > | > |
| 6998 | > | > | > | > | > |
| 6627 | > | > | > | > | > |
| 6198* | > | > | > | > | > |
| 6165 | > | > | 2,714 | > | > |
| 7439 | > | > | > | > | > |
| 7297* | > | > | > | > | > |
| 6111 | > | > | > | > | > |
| 625 | > | > | > | > | 2,885 |
* sérotyp/genotyp * * > - signál převyšuj ící kapacitu čtení spektrometru *** nezkoušeno
Z tabulky IV je zřejmé, že peptid číslo 3 (4B) představuje nej lepší užitkové vlastnosti se zřetelem na užitkové vlastnosti ostatních peptidů. Tento peptid umožňuje nejlepší rozlišení sér nemocných lidí infikovaných retrovirem HIV-1 skupiny 0 oproti dvěma peptidům majícím část sekvence izolátu V AU odpovídajícího imunodominantnímu epitopu gp41. Kromě toho jsou peptidy číslo 2 ίο (3B) a číslo 1 (2B) podle vynálezu více imunoreaktivní než peptid V AU 22 AA, který má stejný počet aminokyselin.
Příklad 3
Vyhodnocení imunoenzymatických testů imunoreaktivity peptidů podle vynálezu: test číslo 2
-17CZ 300927 B6
Vzorky sér nemocných lidí infikovaných retrovirem HIV-1 skupiny 0 byly získány ze střediska Centre Pasteur de Yaoundé v Kamerunu a byly serotypovány skupinou 0 podle sérotogického algoritmu popsaného v AIDS 11, str. 445 až 453 (1977)). Jeden genotypovaný vzorek (Maryland) pocházel ze Spojených států. Vzorky byly předběžně zředěny v negativním lidském séru na ředění uvedená v tabulce V k získání postačujícího objemu k testům ímunoreaktivity.
Použité syntetické peptidy se rozpustí ve vodě na koncentraci 1 mg/ml (mateřský roztok). K etapě sensibilizace pevné fáze („coating“) se postupuje stejně jako podle příkladu 2.
io
Vzorky sér se zředí na 1/5 roztokem odstředěného mléka (citrátový pufr s přísadou 0,01 % fenolové červeně, 0,25 % chloroformu a 0,25 % KathonuR) vneseného do důlků destiček a podrobí se inkubaci po dobu 30 minut při teplotě 40 °C.
Po promytí roztokem pufru Tris NaCI pH 7,4, obsahujícím 0,1% TweenuR20 a 0,001% merthiolátu sodného, se přidá 100 μΙ roztoku konjugovaných kozích protilátek IgG a lidských IgM za označení peroxidázou křenu, obsahující jako konzervační látku 0,01 % merthiolátu sodného, v roztoku citrátového pufru s přísadou 30 % glycerolu a 25% normálního telecího zárodečného séra do každého důlku destiček, načež se destičky inkubují 30 minut při teplotě 40 °C.
Po promytí roztokem pufru Tris NaCI pH 7,4, obsahujícím 0,1 % TweenuR20 a 0,001 % merthiolátu sodného, se získá vybarvení jako podle příkladu 2.
Relativní absorbance (A490-A620) odečtená v každém důlku je úměrná imunoreaktivitě každého peptidu a indikuje schopnost každého peptidu reagovat se zkoušeným biologickým vzorkem.
Reaktivita peptidů podle vynálezu (peptidu číslo 10 (14B), peptidu číslo 12 (19B), peptidu číslo 14 (21B) a peptidu číslo 16 (23B) všech vcyklizované formě) se porovnává s reaktivitou tří homologů syntetických peptidů majících jako sekvenci ěást sekvence přírodní obálky (env) retroviru HIV-1 skupiny 0. Těmito peptidy jsou dva peptidy odvozené z izolátu VAU - peptid VAU 22 AA a peptid VAU 35 AA a peptid MVP 5180 (označený „MVP 5180“ v tabulce V). Peptidy VAU 22 AA a VAU 35 AA, (jejichž struktura je vyznačena v příkladu 2) a peptid MVP 5180 odpovídají imunodominantnímu epitopu gp41.
Všechny tyto peptidy jsou použity vcyklizované formě. Sekvence peptidu MVP 5180 je následující:
MVP 5180
Arg Leu Gin Ala Leu Glu Thr Leu Ile Gin Asn Gin Gin Arg Leu Asn Leu Trp Gly Cys
10 15 20
Lys Gly Lys Leu Ile Cys Tyr Thr Ser Val Lys Trp Asn Thr Ser 25 30 35
Výsledky této studie jsou uvedeny v tabulce V (N° znamená číslo vzorku).
o
CZ 3UU927 B6
Tabulka V
| R | RT1D * | ||||||||
| SÉRUM | W10 | Ne11 | N*12 | Ne 14 | N* 15 | W16 | MVP 5180 | VAU 35 AA | VAU 22 AA |
| ABSO | FtBANCE (DO) | ||||||||
| 4280 1/50 | 0,022 | 0,686 | 0,201 | 0,286 | 0,689 | 0,033 | 0,382 | 0,013 | 0,021 |
| NGO 1/50 | 0,067 | 0,335 | 0,193 | 0,157 | 0,315 | 0,110 | 0,184 | 0,055 | 0,040 |
| NJEM 1/100 | 0,032 | 0,811 | 0,391 | 0,277 | 0,939 | 0,025 | 0,146 | 0,159 | 0,024 |
| MBASSI 1/100 | 1,217 | 1,150 | 0,747 | 2,134 | 2,010 | 2,683 | 0,248 | 0,120 | 0,257 |
| WANG 1/50 | 0,698 | 0,234 | 0,124 | 2,397 | 2,680 | 1,290 | 0,075 | 0,025 | 0,041 |
| 258 OUDI 1/100 | 0,587 | 0,373 | 0,226 | 0,764 | 1,184 | 1,692 | 0,116 | 0,058 | 0,100 |
| DO15 1/100 | 1,613 | 0,859 | 1,286 | 3,357 | 3,693 | 3,038 | 0,673 | 0,036 | 0,075 |
| DJOU 1/100 | 1,268 | 0,482 | 0,419 | 1,998 | 2,088 | 2,166 | 0,203 | 0,022 | 0,042 |
| 3600 1/100 | 0,482 | 0,360 | 0,249 | 0,716 | 0,801 | 0,933 | 0,206 | 0,025 | 0,058 |
| 3613 1/400 | 1,108 | 0,837 | 0,773 | 1,508 | 1,627 | 1,679 | 0,478 | 0,250 | 0,396 |
| 6111 1/100 | 0,596 | 0,348 | 0,202 | 0,850 | 1,207 | 1,009 | 0,226 | 0,087 | 0,180 |
| 625 1/50 | 0,838 | 0,338 | 0,264 | 2,045 | 2,122 | 1,791 | 0,202 | 0,069 | 0,165 |
| Maryland 1/400 | 0,524 | 0,370 | 0,285 | 0,734 | 0,844 | 1,229 | 0,241 | 0.054 | 0,168 |
| 3653 1/10 | 0,347 | 0,337 | 0,247 | 0,072 | 0,380 | 0,406 | 0,401 | 0,021 | 0,310 |
* Pevná fáze: peptid 2 pg/ml
U každého testovaného peptidů se vzorky dělí do čtyř tříd (a,b,c,d) odpovídajících různým hodnotám relativní absorbance odečtené při vlnových délkách A492 a A620:
- v případě a: DO <0,100
- v případě b: 0,100 < DO < 0,500
- v případě c: 0,500 < DO < 1,000 ío - v případě d: DO > 1,000 což umožňuje hodnotit ímunoaktivitu peptidů. Nejvíce imunoreaktivními jsou peptidy, jejichž největší počet vzorkuje ve třídách odpovídajících nejvyšší absorbanci. Výsledky obsahuje tabulka VI (N° znamená číslo vzorku.)
- 19CZ 300927 B6
Tabulka VI
| CLASSE | P | EPTIDES - | |||||||
| Ne 10 | N’ 11 | Ne 12 | Ne 14 | Ne15 | Ne16 | MVP 5180 | VAU 35 AA | VAU 22 AA | |
| Nombre ďéchantiltons | |||||||||
| a | 3 | 0 | 0 | 1 | 0 | 2 | 1 | 11 | 7 |
| b | 2 | 9 | 11 | 3 | 2 | 2 | 12 | 3 | 7 |
| c | 5 | 4 : | 2 | 4 | 4 | 1 | 1 | 0 | 0 |
| d | 4 | 1 | 1 | 6 | Θ | 9 | 0 | 0 | 0 |
* Pevná fáze: peptid 2 pg/ml
Výsledky ukazují, že všechny testované peptidy podle vynálezu vykazují lepší imunoreaktivní účinnost než peptidy odpovídající dosavadnímu stavu techniky, které pocházejí z přírodních izolantů (MVP 5180, VAU). Jako nejvíce imunoreaktivní se jeví peptidy podle vynálezu číslo 15 (228), číslo 14 (218) a číslo 16 (238).
io Příklad 4
Vyhodnocení imunoreaktivity prostředků obsahujících peptidy podle vynálezu imunoenzymatickými testy
Při této studii se postupuje podle stejně jako podle příkladu 2 a je použito stejných sér. Použité mikrodestičky jsou sensibilizovány jednak cyklizovaným peptidem číslo 1 (2B), cyklizovaným peptidem číslo 3 (4B), jednak prostředkem obsahujícím oba peptidy (1:1 p/p). Do každého důlku se vnese 100 μί roztoku obsahujícího 2 pg/ml peptidu číslo 1 (2B) nebo 100 μΐ roztoku obsahujícího 2pg/ml peptidu číslo 3 (4B) nebo 100 μΐ roztoku obsahujícího 1 pg/ml peptidu číslo 1 (2B) a 1 pg/ml peptidu číslo 3 (4B).
Výsledky jsou v tabulce Vil (N° znamená číslo vzorku).
Tabulka VII
| SÉRUM | ABSORBANCE | ||
| Ρερτιο .νΊ (2B) (2 yg/ml) | Peptid n*3(4B) (2 Μβ/ml) | Peptjc n· 1 (2B) (1yg/ml) + Peptjc Ne 3 (4B) (1 ug /ml i | |
| 3529 | 1,803 | >* | > |
| 1106 | > | 1,421 | > |
| 3891 | 2,780 | > | > |
| 3235 | > | > | > |
| 2700 | > | > | > |
| 5931 | > | > | > |
| 3935 | 0,307 | > | > |
| 7443 | > | > | > |
| 1062 | > | > | > |
| 1754 | > | > | > |
| 3136 | 0,302 | > | > |
| 6891 | 0,062 | > | > |
| 5149 | > | > | |
| 5270 | > | > | > |
| 2551 | > | > | > |
| 3600 | 2,743 | > | > |
| 6976 | > | > | > |
| 4489 | > | > | > |
| 6165 | 2,714 | > | > |
| 6198 | > | > | > |
| 6627 | > | > | > |
| 6998 | > | > | > |
| 6697 | > | > | > |
| 7258 | 2,477 | > | > |
| 3627 | 2,910 | > | > |
| 4477 | > | > | > |
| 3771 | 0,544 | > | > |
| 1702 | 1,016 | > | > |
| 2294 | 0,447 | > | > |
| 2352 | 0^05 | > | |
| 3016 | 0^43 | > | > |
| 3302 | 0,386 | > | > |
| 3482 | 1.473 | > | |
| 3653 | 0,044 | 1,322 | 1,105 |
| 4364 | 1,382 | > | > |
| 3637 | > | > | > |
| 4288 | 2.802 Ί | > | > |
| 5969 | > | > | > |
| 258 | > | > | > |
| 6111 | > | > | |
| 626 | > | > | > |
| 6853 | > | 2.769 | > |
| 3136 | 0,302 | > | > |
| 6669 | > | 0.710 | > |
| 6298 | > | 1,718 | > |
| 4021 | > | 0,430 | 2,381 |
| 3884 | 1,839 | > | > |
| 6512 | > | 0,746 | > |
| 6487 | 2,687 | > | > |
| ESS | 2.494 | > | > |
| HAD | 0,041 | > | |
| DUR | > | > | > |
* > = signál převyšující kapacitu čtení spektrometru
Výsledky uvedené v tabulce VII ukazují, že jc—li v diagnostice použito prostředků s peptidy podle vynálezu, docílí se detekce všech sér nemocných infikovaných retrovirem H1V-1 skupiny 0.
ío Seznam sekvencí (1) Všeobecná informace (i) Původ:
(A) Jméno: Pasteur Sanofi Diagnostics (B) Ulice: 3 boulevard Raymond Poincaré (C) Město: Mames la Coquette (D) Stát: Francie (E) Pošta: 92430 (F) Telefon: 0153774000 (G) Fax: 0153774133
-21 CZ 300927 B6 (ii) Název vynálezu: Syntetické peptidy použitelné v biologických testech pro detekci infekcí způsobených viry HIV-1 skupiny 0.
(iii) Počet sekvencí: 16 (iv) čitelná forma pro objednatele:
(A) Nosič: floppy disk (B) Objednatel: IBM PC compatible (C) Systém exploatace: PC-DOS/MS-DOS (D) LOGICIEL: Patentln Release # 1,0, verze # 1,25 (OEB) io (2) Informace o sekvenci SEQ ID č. 1:
(1) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 22 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (ii) Typ molekuly: peptid (xi) Popis sekvence; SEQ ID č. I
Leu Leu Ser Leu Trp Gly Cys Arg Gly Lys Ala Val Cys Tyr Thr Ser 15 10 15
Val Gin Trp Asn Glu Thr 20 (2) Informace o sekvenci SEQ ID č. 2:
(1) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 22 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (ii) Typ molekuly: peptid (xi) Popis sekvence: SEQ ID č. 2
Leu Leu Ser Leu Trp Gly Cys Arg Gly Arg Leu Val Cys Tyr Thr Ser ' 5 io 15
Val Gin Trp Asn Glu Thr (2) Informace o sekvenci SEQ ID č. 3:
(1) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 22 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina 30 (ii) Typ molekuly: peptid (xi) Popis sekvence: SEQ ID č. 3
Leu Leu Ser Ser Trp Gly Cys Lys Gly Arg Leu Val Cys Tyr Thr Ser 15 10 15
Val Gin Trp Asn Glu Thr 20 (2) Informace o sekvenci SEQ ID č. 4:
(i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 22 aminokyselin
CL .wuyz 7 tíb (B) Typ: aminokyselina (ii) Typ molekuly: peptid (xi) Popis sekvence: SEQ ID č. 4
Leu Leu Ser Ser Trp Gly Cys Lys Gly Arg Leu Val Cys Tyr Thr Ser 1 5 10 15
Val Gin Trp Asn Ser Thr 20 (2) Informace o sekvenci SEQ ID č. 5:
(1) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 22 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina io (ii) Typ molekuly: peptid (xi) Popis sekvence: SEQ ID č. 5
Leu Leu Gin Ser Trp Gly Cys Lys Gly Arg Leu Val Cys Tyr Thr Ser
10 15
Val Gin Trp Asn Ser Thr (2) Informace o sekvenci SEQ ID č. 6:
(i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 22 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (ii) Typ molekuly: peptid (xi) Popis sekvence: SEQ ID č. 6
Leu Leu Asn Ser Trp Gly Cys Arg Gly Lys Ala Val Cys Tyr Thr Ser 15 10 15
Val Gin Trp Asn Glu Thr (2) Informace o sekvenci SEQ ID č. 7:
(i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 22 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (ii) Typ molekuly: peptid (xi) Popis sekvence: SEQ ID č, 7
Leu Leu Ser Leu Trp Gly Cys Arg Gly Arg Ala Val Cys Tyr Thr Ser 15 10 15
Val Gin Trp Asn Glu Thr 20 (2) Informace o sekvenci SEQ ID č. 8:
(i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 22 aminokyselin • 23CZ 300927 B6 (B) Typ: aminokyselina (ii) Typ molekuly: peptid (xi) Popis sekvence: SEQ ID č. 8
Leu Leu Ser Ser Trp Gly Cys Arg Gly Arg Leu Val Cys Tyr Thr Ser 15 10 15
Val Gin Trp Asn Glu Thr 20 (2) Informace o sekvenci SEQ ID č. 9:
(1) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 22 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina io (ii) Typ molekuly: peptid (xi) Popis sekvence: SEQ ID č. 9
Leu Leu Ser Ser Trp Gly Cys Lys Gly Arg Leu Val Cys Tyr Thr Ser 1 5 10 15 (2) Informace o sekvenci SEQ ID č. 10:
is (i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 16 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (ii) Typ molekuly: peptid (xi) Popis sekvence: SEQ ID č. 10
Leu Leu Asn Ser Trp Gly Cys Lys Gly Arg Leu Val Cys Tyr Thr Ser 1 S 10 15 (2) Informace o sekvenci SEQ ID č. Ϊ1;
(i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 32 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (ii) Typ molekuly: peptid (xi) Popis sekvence: SEQ ID č. 11
Ala Leu Glu Thr Leu Leu Gin Asn Gin Gin Leu Leu Asn Ser Trp Gly 15 10 15
Cys Arg Gly Arg Leu Val Cys Tyr Thr Ser Val Atg Trp Asn Glu Thr 20 25 30 (2) Informace o sekvenci SEQ ID č. 12:
(i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 32 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (ii) Typ molekuly: peptid (xi) Popis sekvence: SEQ ID č. 12
Ala Lea Glu Thr Leu Leu Gin Asn Gin Gin Leu Leu Asn Ile Trp Gly 15 10 15
Cys Arg Gly Arg Leu Val Cys Tyr Thr Ser Val Arg Trp Asn Glu Thr 20 25 30 (2) informace o sekvenci SEQ ID č. 13:
(i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 32 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (ii) Typ molekuly: peptid (xi) Popis sekvence: SEQ ID č. 13
Ala Leu Glu Thr Leu Leu Gin Asn Gin Gin Leu Leu Asp Leu Trp Gly 15 10 15
Cys Arg Gly Arg Leu Val Cys Tyr Thr Ser Val Arg Trp Asn Glu Thr 20 25 30 (2) Informace o sekvenci SEQ ID č. 14:
(i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 22 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (ii) Typ molekuly: peptid (xí) Popis sekvence: SEQ ID é. 14
Leu Asn Gin Gin Arg Leu Leu Asn Ser Trp Gly Cys Lys Gly Arg Leu 15 10 15
Val Cys Tyr Thr Ser Val 20 (2) Informace o sekvenci SEQ ID č. 15:
(1) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 28 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (ii) Typ molekuly: peptid (xi) Popis sekvence: SEQ ID č. 15
Arg Ala Leu Glu Thr Leu Leu Asn Gin Gin Arg Leu Leu Asn Ser Trp 1 5 10 15
Gly Cys Lys Gly Arg Leu Val Cys Tyr Thr Ser Val 20 25 (2) Informace o sekvencí SEQ ID č. 16:
(i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka; 17 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina
-25 CZ 300927 B6 (ii) Typ molekuly: peptid (xi) Popis sekvence: SEQ ID č. 16
Arg Leu Asn Ser Trp .Gly Cys Lys Gly Arg Leu Val Cys Tyr Thr Ser I 5 10 15
Průmyslová využitelnost
Syntetické peptidy pro výrobu kitů pro biologické testy k detekci infekcí způsobených viry HIV1 skupiny 0.
Claims (8)
- PATENTOVÉ NÁROKY1. Syntetický peptid monomemího typu se 16 až 33 aminokyselinami v lineární formě nebo v cyklizované formě pomocí intercysteinových disulfidických můstků, obecného vzorce IÁ-Z-TrpGlyCys-0~CysTyrThrSer-Q kde znamenáΔ skupinu biotinylovou, biocytiny lovou, atom vodíku, skupinu acetylovou (CH3CO)-, alifatický řetězec s 1 až 6 atomy uhlíku, obsahující popřípadě jednu nebo dvě skupiny thiolové, aldehy25 dové nebo aminové funkční skupiny, přičemž alifatickým řetězcem je zvláště řetězec alkylový s 1 až 6 atomy uhlíku, nebo řetězec alkenylový se 2 až 6 atomy uhlíku nebo řetězec amino alkylkarbonylový se 2 až 6 atomy uhlíku,Z peptidovou sekvenci obecného vzorce30 LeuLeuGlnSerLeuLeuSerSer-,LeuLeuSerLeu-,LeuLeuAsnSerArgLeuAsnSer35 AlaLeuGluThrLeuLeuGlnAsnGlnGlnLeuLeuAsnSerAlaLeuGluThrLeuLeuGInAsnGlnGInLeuLeuAspLeuAlaLeuGluThrLeuLeuGlnAsnGlnGlnLeuLeuAsnlleLeuAsnGlnGlnArgLeuLeuAsnSer-nebo ArgAIaLeuGluThrLeuLeuAsnGlnGlnArgLeuLeuAsnSer40Θ peptidovou sekvenci vzorce -LysGIyArgLeuVal- nebo -ArgGlyArgLeuVal45 Ω skupinu -ψ, peptidovou sekvenci -Val-ψ, nebo peptidovou sekvenci -Val-Σ-ψ, kde znamená ψ vázaný na skupinu -CO- šeřinu, valinu nebo volné aminokyselny (AA8), skupinu hy50 droxylovou (-OH), aminoskupinu (-NH3) nebo alkoxyskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku,CZ JUUVZ/ DOΣ peptidovou sekvenci vzorce -(AA^j-TrpAsn-lAAvXAAs), kde znamená (AAé) glutaminový nebo argininový zbytek, (AA7) aminokyselinu a (AA8) serinový nebo threoninový zbytek.
- 2. Syntetický peptid podle nároku 1, obecného vzorce I zahrnující jednu ze sekvencí ID NO 2, 3,4, 5, 8,9,10,11,12,13,14, 15,16 nebo tvořený jednou z těchto sekvencí.
- 3. Diagnostický prostředek, vyznačující se tím, že obsahuje jeden nebo několik io syntetických peptidů obecného vzorce I podle nároku 1 nebo 2.
- 4. Diagnostický prostředek, vyznačující se tím, že obsahuje jeden nebo několik syntetických peptidů obecného vzorce I podle nároku 1 nebo 2 a jeden nebo několik HIV-1 skupiny 0 rekombínantních peptidů.
- 5. Diagnostický prostředek, vyznačující se tím, že obsahuje jeden nebo několik syntetických peptidů obecného vzorce I podle nároku 1 nebo 2 a jeden nebo několik HIV-1 a/nebo HIV-2 rekombínantních nebo syntetických peptidů.20
- 6. Způsob imunologické in vitro kvantifikace, vyznačující se tím, že se používá alespoň jeden syntetický peptid obecného vzorce I podle nároku 1 nebo 2.
- 7. Způsob imunologické in vitro kvantifikace, vyznačující se tím, že se používá prostředek podle nároků 3 až 5.
- 8. Diagnostický kit pro použití v biologických testech pro identifikaci infekcí způsobených viiy HIV, vyznačující se tím, že obsahuje alespoň jeden syntetický peptid obecného vzorce I podle nároku 1 nebo 2 nebo prostředek podle nároků 3 až 5.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| FR9704356A FR2761993B1 (fr) | 1997-04-09 | 1997-04-09 | Peptides synthetiques utilisables dans les essais biologiques pour la detection des infections dues aux virus vih 1 groupe 0 |
| FR9802212A FR2775287B1 (fr) | 1998-02-24 | 1998-02-24 | Peptides synthetiques consensus utilisables dans les essais biologiques pour la detection des infections dues aux virus vih 1 du groupe o |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CZ357599A3 CZ357599A3 (cs) | 2000-06-14 |
| CZ300927B6 true CZ300927B6 (cs) | 2009-09-16 |
Family
ID=26233456
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CZ0357599A CZ300927B6 (cs) | 1997-04-09 | 1998-04-06 | Syntetický peptid monomerního typu, prostredek, který ho obsahuje, zpusob imunologické in vitro kvantifikace a diagnostický kit pro použití v biologických testech pro identifikaci infekcí zpusobených viry HIV |
Country Status (20)
| Country | Link |
|---|---|
| US (2) | US7053175B1 (cs) |
| EP (1) | EP0973802B1 (cs) |
| JP (1) | JP3560987B2 (cs) |
| KR (1) | KR100451312B1 (cs) |
| CN (1) | CN1215082C (cs) |
| AT (1) | ATE343590T1 (cs) |
| AU (1) | AU740231B2 (cs) |
| BR (1) | BRPI9809078B8 (cs) |
| CA (1) | CA2286344C (cs) |
| CZ (1) | CZ300927B6 (cs) |
| DE (1) | DE69836265T2 (cs) |
| ES (1) | ES2275305T3 (cs) |
| IL (2) | IL132166A0 (cs) |
| NO (1) | NO329149B1 (cs) |
| NZ (1) | NZ500015A (cs) |
| PL (1) | PL194863B1 (cs) |
| PT (1) | PT973802E (cs) |
| RU (1) | RU2184742C2 (cs) |
| TR (1) | TR199902757T2 (cs) |
| WO (1) | WO1998045323A1 (cs) |
Families Citing this family (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CZ300927B6 (cs) * | 1997-04-09 | 2009-09-16 | Bio-Rad Pasteur | Syntetický peptid monomerního typu, prostredek, který ho obsahuje, zpusob imunologické in vitro kvantifikace a diagnostický kit pro použití v biologických testech pro identifikaci infekcí zpusobených viry HIV |
| CA2676762C (en) * | 1998-11-30 | 2015-12-29 | Ortho-Clinical Diagnostics, Inc. | Peptides for the detection of hiv-1 group o |
| FR2874017B1 (fr) * | 2004-08-06 | 2006-11-24 | Bio Rad Pasteur Sa | Peptides vih-1 modifies et leur utilisation en detection d'anticorps anti-vih |
| ES2821654T3 (es) | 2012-06-22 | 2021-04-27 | Bio Rad Laboratories | Factor XIII humano como control de normalización para inmunoensayos |
| CN112481246B (zh) * | 2020-12-16 | 2022-03-29 | 熊猫乳品集团股份有限公司 | 一种生物活性多肽fspankkltpkky及其制备方法和应用 |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1995032293A1 (en) * | 1994-05-19 | 1995-11-30 | International Murex Technologies Corporation | Assay for hiv-1 group o using at least one gp41 peptide |
| WO1996012809A2 (fr) * | 1994-10-20 | 1996-05-02 | Institut Pasteur | Sequences nucleotidiques d'antigenes retroviraux vih-1 groupe (ou sous-groupe) o |
| WO1996027013A1 (fr) * | 1995-02-27 | 1996-09-06 | Institut National De La Sante Et De La Recherche Medicale-Inserm | Vih-1 de groupe o, fragments desdits virus, ainsi que leurs applications |
| EP0973802A1 (fr) * | 1997-04-09 | 2000-01-26 | Pasteur Sanofi Diagnostics | Peptides synthetiques utilisables dans les essais biologiques pour la detection des infections dues aux virus vih-1 du groupe o |
Family Cites Families (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5204259A (en) | 1988-05-06 | 1993-04-20 | Pharmacia Genetic Engineering, Inc. | Methods and systems for producing HIV antigens |
| JP3277045B2 (ja) | 1992-10-06 | 2002-04-22 | デイド・ベーリング・マルブルク・ゲゼルシヤフト・ミツト・ベシユレンクテル・ハフツング | Ｈｉｖ−グループのレトロウイルスおよびその使用 |
| DE4405810A1 (de) | 1994-02-23 | 1995-08-24 | Behringwerke Ag | Von einem Retrovirus aus der HIV-Gruppe abgeleitete Peptide und deren Verwendung |
| DE4430972A1 (de) | 1994-07-25 | 1996-02-01 | Boehringer Mannheim Gmbh | Bestimmung von spezifischem Immunglobulin unter Verwendung multipler Antigene |
| DE19505262C2 (de) | 1995-02-16 | 1998-06-18 | Behring Diagnostics Gmbh | Retrovirus aus der HIV-Gruppe und dessen Verwendung |
| AU5100696A (en) | 1995-03-02 | 1996-09-18 | Akzo Nobel N.V. | Specific hiv-1 group o antigens |
| US5569553A (en) | 1995-03-08 | 1996-10-29 | Wilson Greatbatch Ltd. | Battery design for achieving end-of-life indication during electrical discharge |
| DE19622088A1 (de) | 1996-05-31 | 1997-12-04 | Boehringer Mannheim Gmbh | Anti-HIV-Antikörper als Kontrollproben |
| WO1999004011A2 (en) | 1997-07-18 | 1999-01-28 | Innogenetics N.V. | Hiv-1 group o antigens and uses thereof |
-
1998
- 1998-04-06 CZ CZ0357599A patent/CZ300927B6/cs unknown
- 1998-04-06 US US09/147,362 patent/US7053175B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1998-04-06 IL IL13216698A patent/IL132166A0/xx active IP Right Grant
- 1998-04-06 NZ NZ500015A patent/NZ500015A/en not_active IP Right Cessation
- 1998-04-06 ES ES98920571T patent/ES2275305T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1998-04-06 WO PCT/FR1998/000691 patent/WO1998045323A1/fr not_active Ceased
- 1998-04-06 BR BRPI9809078A patent/BRPI9809078B8/pt not_active IP Right Cessation
- 1998-04-06 CN CNB988052024A patent/CN1215082C/zh not_active Expired - Lifetime
- 1998-04-06 CA CA2286344A patent/CA2286344C/fr not_active Expired - Lifetime
- 1998-04-06 JP JP54245598A patent/JP3560987B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 1998-04-06 AU AU73386/98A patent/AU740231B2/en not_active Expired
- 1998-04-06 TR TR1999/02757T patent/TR199902757T2/xx unknown
- 1998-04-06 EP EP98920571A patent/EP0973802B1/fr not_active Expired - Lifetime
- 1998-04-06 RU RU99123443/04A patent/RU2184742C2/ru active
- 1998-04-06 DE DE69836265T patent/DE69836265T2/de not_active Expired - Lifetime
- 1998-04-06 KR KR10-1999-7009296A patent/KR100451312B1/ko not_active Expired - Lifetime
- 1998-04-06 PL PL336115A patent/PL194863B1/pl unknown
- 1998-04-06 PT PT98920571T patent/PT973802E/pt unknown
- 1998-04-06 AT AT98920571T patent/ATE343590T1/de not_active IP Right Cessation
-
1999
- 1999-09-30 IL IL132166A patent/IL132166A/en not_active IP Right Cessation
- 1999-10-08 NO NO19994929A patent/NO329149B1/no not_active IP Right Cessation
-
2006
- 2006-04-13 US US11/402,876 patent/US7838001B2/en not_active Expired - Fee Related
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1995032293A1 (en) * | 1994-05-19 | 1995-11-30 | International Murex Technologies Corporation | Assay for hiv-1 group o using at least one gp41 peptide |
| WO1996012809A2 (fr) * | 1994-10-20 | 1996-05-02 | Institut Pasteur | Sequences nucleotidiques d'antigenes retroviraux vih-1 groupe (ou sous-groupe) o |
| WO1996027013A1 (fr) * | 1995-02-27 | 1996-09-06 | Institut National De La Sante Et De La Recherche Medicale-Inserm | Vih-1 de groupe o, fragments desdits virus, ainsi que leurs applications |
| EP0973802A1 (fr) * | 1997-04-09 | 2000-01-26 | Pasteur Sanofi Diagnostics | Peptides synthetiques utilisables dans les essais biologiques pour la detection des infections dues aux virus vih-1 du groupe o |
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| WO1987005399A1 (en) | Method of detecting antibody against htlv-iii | |
| US5480966A (en) | Peptides derived from the envelope glycoprotein of HIV viruses, their applications to the detection of infection caused by these viruses and to the vaccination against AIDS | |
| AU664828B2 (en) | Synthetic peptides and mixtures thereof for detecting HIV antibodies | |
| EP0247557A2 (en) | HTLV-III(LAV) Envelope peptides | |
| US7053175B1 (en) | Synthetic peptides useful in biological assays for detecting infections caused by group O HIV-1 viruses | |
| CA2090470A1 (en) | Peptide antigens and immunoassays, test kits and vaccines using the same | |
| CN1263536A (zh) | 检测hiv抗体的方法及该方法中使用的抗原 | |
| AU660752B2 (en) | Immunoassay using synthetic HTLV-11 peptides | |
| MXPA99009106A (en) | Synthetic peptides useful in biological assays for detecting infections caused by group o hiv-1 viruses | |
| US6210874B1 (en) | Synthetic peptides and mixtures thereof for detecting HIV antibodies | |
| US6214537B1 (en) | Synthetic peptides and mixtures thereof for detecting HIV antibodies | |
| CA2676762C (en) | Peptides for the detection of hiv-1 group o | |
| FR2761993A1 (fr) | Peptides synthetiques utilisables dans les essais biologiques pour la detection des infections dues aux virus vih 1 groupe 0 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PD00 | Pending as of 2000-06-30 in czech republic |