CZ309217B6 - Lipidované peptidy jako neuroprotektiva - Google Patents
Lipidované peptidy jako neuroprotektiva Download PDFInfo
- Publication number
- CZ309217B6 CZ309217B6 CZ2014-364A CZ2014364A CZ309217B6 CZ 309217 B6 CZ309217 B6 CZ 309217B6 CZ 2014364 A CZ2014364 A CZ 2014364A CZ 309217 B6 CZ309217 B6 CZ 309217B6
- Authority
- CZ
- Czechia
- Prior art keywords
- palm
- disease
- prrp31
- mice
- acid
- Prior art date
Links
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 title claims description 8
- 239000004090 neuroprotective agent Substances 0.000 title description 4
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 title description 4
- 108010087786 Prolactin-Releasing Hormone Proteins 0.000 claims abstract description 57
- 102000009087 Prolactin-Releasing Hormone Human genes 0.000 claims abstract description 51
- 239000002877 prolactin releasing hormone Substances 0.000 claims abstract description 49
- IPCSVZSSVZVIGE-UHFFFAOYSA-N hexadecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O IPCSVZSSVZVIGE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 25
- 230000002093 peripheral effect Effects 0.000 claims abstract description 12
- 208000024827 Alzheimer disease Diseases 0.000 claims abstract description 10
- 208000018737 Parkinson disease Diseases 0.000 claims abstract description 10
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims abstract description 10
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 claims abstract description 10
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims abstract description 10
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 claims abstract description 10
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 claims abstract description 10
- 206010012289 Dementia Diseases 0.000 claims abstract description 9
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 claims abstract description 9
- 208000030886 Traumatic Brain injury Diseases 0.000 claims abstract description 8
- 230000004770 neurodegeneration Effects 0.000 claims abstract description 8
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 claims abstract description 5
- 235000021314 Palmitic acid Nutrition 0.000 claims description 12
- NOMPPIJZIIJXEM-QMMMGPOBSA-N (2s)-2-(dichloroamino)-3-phenylpropanoic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N(Cl)Cl)CC1=CC=CC=C1 NOMPPIJZIIJXEM-QMMMGPOBSA-N 0.000 claims description 7
- 208000028698 Cognitive impairment Diseases 0.000 claims description 7
- 208000010877 cognitive disease Diseases 0.000 claims description 7
- 230000006806 disease prevention Effects 0.000 claims description 7
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 3
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N phenylalanine group Chemical group N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)O COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 claims description 3
- MLPDTMRJYAUQSV-NETXQHHPSA-N (2S)-2,3-dichloro-2-(dichloroamino)-3-phenylpropanoic acid Chemical compound ClC([C@](N(Cl)Cl)(C(=O)O)Cl)C1=CC=CC=C1 MLPDTMRJYAUQSV-NETXQHHPSA-N 0.000 claims description 2
- FQRURPFZTFUXEZ-MRVPVSSYSA-N (2s)-2,3,3,3-tetrafluoro-2-(n-fluoroanilino)propanoic acid Chemical compound OC(=O)[C@](F)(C(F)(F)F)N(F)C1=CC=CC=C1 FQRURPFZTFUXEZ-MRVPVSSYSA-N 0.000 claims description 2
- IYKLZBIWFXPUCS-VIFPVBQESA-N (2s)-2-(naphthalen-1-ylamino)propanoic acid Chemical compound C1=CC=C2C(N[C@@H](C)C(O)=O)=CC=CC2=C1 IYKLZBIWFXPUCS-VIFPVBQESA-N 0.000 claims description 2
- OPOTYPXOKUZEKY-QMMMGPOBSA-N (2s)-2-nitramido-3-phenylpropanoic acid Chemical compound [O-][N+](=O)N[C@H](C(=O)O)CC1=CC=CC=C1 OPOTYPXOKUZEKY-QMMMGPOBSA-N 0.000 claims description 2
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 claims description 2
- TUNFSRHWOTWDNC-UHFFFAOYSA-N Myristic acid Natural products CCCCCCCCCCCCCC(O)=O TUNFSRHWOTWDNC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 2
- HWYCFZUSOBOBIN-AQJXLSMYSA-N (2s)-2-[[(2s)-1-[(2s)-5-amino-2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-5-oxopentanoyl]pyrrolidine-2-carbonyl]amino]-n-[(2s)-1-[[(2s)-1-amino-1-oxo-3-phenylpropan-2-yl]amino]-5-(diaminome Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(N)=O)C1=CC=CC=C1 HWYCFZUSOBOBIN-AQJXLSMYSA-N 0.000 abstract description 31
- RLWIQKPYEREBED-YZZKORDDSA-N prrp20 Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@H](C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(N)=O)[C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@@H](N)[C@@H](C)O)[C@@H](C)CC)C1=CC=C(O)C=C1 RLWIQKPYEREBED-YZZKORDDSA-N 0.000 abstract description 14
- 108090000189 Neuropeptides Proteins 0.000 abstract description 5
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 abstract description 3
- 230000007278 cognition impairment Effects 0.000 abstract 1
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 55
- LPUQAYUQRXPFSQ-DFWYDOINSA-M monosodium L-glutamate Chemical compound [Na+].[O-]C(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O LPUQAYUQRXPFSQ-DFWYDOINSA-M 0.000 description 41
- 235000013923 monosodium glutamate Nutrition 0.000 description 41
- NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N insulin Chemical compound N1C(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(NC(=O)CN)C(C)CC)CSSCC(C(NC(CO)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CSSCC(NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(C)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2NC=NC=2)NC(=O)C(CO)NC(=O)CNC2=O)C(=O)NCC(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)N3C(CCC3)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C)C(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C1CSSCC2NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)CC1=CN=CN1 NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 30
- 102000013498 tau Proteins Human genes 0.000 description 27
- 108010026424 tau Proteins Proteins 0.000 description 27
- 230000026731 phosphorylation Effects 0.000 description 25
- 238000006366 phosphorylation reaction Methods 0.000 description 25
- 101710087617 Prolactin-releasing peptide Proteins 0.000 description 19
- 102100028850 Prolactin-releasing peptide Human genes 0.000 description 18
- 108010019598 Liraglutide Proteins 0.000 description 17
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 17
- 238000001262 western blot Methods 0.000 description 16
- 102000004877 Insulin Human genes 0.000 description 15
- 108090001061 Insulin Proteins 0.000 description 15
- YSDQQAXHVYUZIW-QCIJIYAXSA-N Liraglutide Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCCNC(=O)CC[C@H](NC(=O)CCCCCCCCCCCCCCC)C(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CC=1NC=NC=1)[C@@H](C)O)[C@@H](C)O)C(C)C)C1=CC=C(O)C=C1 YSDQQAXHVYUZIW-QCIJIYAXSA-N 0.000 description 15
- 229940125396 insulin Drugs 0.000 description 15
- 229960002701 liraglutide Drugs 0.000 description 15
- 208000001072 type 2 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 14
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 13
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 13
- 238000000034 method Methods 0.000 description 10
- 102000019058 Glycogen Synthase Kinase 3 beta Human genes 0.000 description 9
- 108010051975 Glycogen Synthase Kinase 3 beta Proteins 0.000 description 9
- 206010022489 Insulin Resistance Diseases 0.000 description 9
- IPCSVZSSVZVIGE-UHFFFAOYSA-M hexadecanoate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O IPCSVZSSVZVIGE-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 9
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 9
- 238000012347 Morris Water Maze Methods 0.000 description 8
- 208000008589 Obesity Diseases 0.000 description 8
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 8
- 230000037406 food intake Effects 0.000 description 8
- 235000012631 food intake Nutrition 0.000 description 8
- 235000020824 obesity Nutrition 0.000 description 8
- 230000009822 protein phosphorylation Effects 0.000 description 8
- 101001123492 Homo sapiens Prolactin-releasing peptide receptor Proteins 0.000 description 7
- 102100029002 Prolactin-releasing peptide receptor Human genes 0.000 description 7
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 7
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 7
- 238000002991 immunohistochemical analysis Methods 0.000 description 7
- WQEPLUUGTLDZJY-UHFFFAOYSA-N n-Pentadecanoic acid Natural products CCCCCCCCCCCCCCC(O)=O WQEPLUUGTLDZJY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 230000019491 signal transduction Effects 0.000 description 7
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 7
- 210000001320 hippocampus Anatomy 0.000 description 6
- 230000006951 hyperphosphorylation Effects 0.000 description 6
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 6
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 6
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 5
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 5
- 210000003295 arcuate nucleus Anatomy 0.000 description 5
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 5
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 5
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 5
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 5
- 238000001543 one-way ANOVA Methods 0.000 description 5
- 150000002942 palmitic acid derivatives Chemical class 0.000 description 5
- 230000001817 pituitary effect Effects 0.000 description 5
- 238000010152 Bonferroni least significant difference Methods 0.000 description 4
- 108091000080 Phosphotransferase Proteins 0.000 description 4
- 210000003016 hypothalamus Anatomy 0.000 description 4
- 238000013421 nuclear magnetic resonance imaging Methods 0.000 description 4
- 102000020233 phosphotransferase Human genes 0.000 description 4
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 4
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 4
- 230000011664 signaling Effects 0.000 description 4
- 238000007619 statistical method Methods 0.000 description 4
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108010088406 Glucagon-Like Peptides Proteins 0.000 description 3
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102000016267 Leptin Human genes 0.000 description 3
- 108010092277 Leptin Proteins 0.000 description 3
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 3
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 3
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 3
- 210000000593 adipose tissue white Anatomy 0.000 description 3
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 3
- NRYBAZVQPHGZNS-ZSOCWYAHSA-N leptin Chemical compound O=C([C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC(C)C)CCSC)N1CCC[C@H]1C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CS)C(O)=O NRYBAZVQPHGZNS-ZSOCWYAHSA-N 0.000 description 3
- 229940039781 leptin Drugs 0.000 description 3
- 238000010172 mouse model Methods 0.000 description 3
- 210000002569 neuron Anatomy 0.000 description 3
- 230000000324 neuroprotective effect Effects 0.000 description 3
- 210000000496 pancreas Anatomy 0.000 description 3
- 231100000915 pathological change Toxicity 0.000 description 3
- 230000036285 pathological change Effects 0.000 description 3
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 3
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000003771 C cell Anatomy 0.000 description 2
- 208000002705 Glucose Intolerance Diseases 0.000 description 2
- 206010018429 Glucose tolerance impaired Diseases 0.000 description 2
- 229940122355 Insulin sensitizer Drugs 0.000 description 2
- 102000015494 Mitochondrial Uncoupling Proteins Human genes 0.000 description 2
- 108010050258 Mitochondrial Uncoupling Proteins Proteins 0.000 description 2
- 238000011785 NMRI mouse Methods 0.000 description 2
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 102100024819 Prolactin Human genes 0.000 description 2
- 108010057464 Prolactin Proteins 0.000 description 2
- 108091008611 Protein Kinase B Proteins 0.000 description 2
- 101001117144 Saccharomyces cerevisiae (strain ATCC 204508 / S288c) [Pyruvate dehydrogenase (acetyl-transferring)] kinase 1, mitochondrial Proteins 0.000 description 2
- DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M Sodium laurylsulphate Chemical compound [Na+].CCCCCCCCCCCCOS([O-])(=O)=O DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 238000000692 Student's t-test Methods 0.000 description 2
- 210000003486 adipose tissue brown Anatomy 0.000 description 2
- 210000001943 adrenal medulla Anatomy 0.000 description 2
- 210000004727 amygdala Anatomy 0.000 description 2
- 238000000540 analysis of variance Methods 0.000 description 2
- 230000002891 anorexigenic effect Effects 0.000 description 2
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 2
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 2
- 210000000133 brain stem Anatomy 0.000 description 2
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 2
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 description 2
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 2
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 2
- 230000037149 energy metabolism Effects 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 239000003925 fat Substances 0.000 description 2
- 210000001879 hippocampal ca1 region Anatomy 0.000 description 2
- 201000001421 hyperglycemia Diseases 0.000 description 2
- 230000001771 impaired effect Effects 0.000 description 2
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 2
- 210000001767 medulla oblongata Anatomy 0.000 description 2
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- 239000004223 monosodium glutamate Substances 0.000 description 2
- 229940097325 prolactin Drugs 0.000 description 2
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 2
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 2
- 102000034285 signal transducing proteins Human genes 0.000 description 2
- 108091006024 signal transducing proteins Proteins 0.000 description 2
- 230000006886 spatial memory Effects 0.000 description 2
- 235000000891 standard diet Nutrition 0.000 description 2
- 238000010972 statistical evaluation Methods 0.000 description 2
- 210000000211 third ventricle Anatomy 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000000044 Amnesia Diseases 0.000 description 1
- 208000037259 Amyloid Plaque Diseases 0.000 description 1
- 102000013455 Amyloid beta-Peptides Human genes 0.000 description 1
- 108010090849 Amyloid beta-Peptides Proteins 0.000 description 1
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 1
- 206010003694 Atrophy Diseases 0.000 description 1
- 208000014644 Brain disease Diseases 0.000 description 1
- 208000024172 Cardiovascular disease Diseases 0.000 description 1
- 238000001061 Dunnett's test Methods 0.000 description 1
- 102100021238 Dynamin-2 Human genes 0.000 description 1
- 102000002254 Glycogen Synthase Kinase 3 Human genes 0.000 description 1
- 108010014905 Glycogen Synthase Kinase 3 Proteins 0.000 description 1
- 108010051696 Growth Hormone Proteins 0.000 description 1
- 101000817607 Homo sapiens Dynamin-2 Proteins 0.000 description 1
- 208000035150 Hypercholesterolemia Diseases 0.000 description 1
- 206010060378 Hyperinsulinaemia Diseases 0.000 description 1
- 206010020710 Hyperphagia Diseases 0.000 description 1
- 206010063743 Hypophagia Diseases 0.000 description 1
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 1
- 229940122199 Insulin secretagogue Drugs 0.000 description 1
- LRQKBLKVPFOOQJ-YFKPBYRVSA-N L-norleucine Chemical compound CCCC[C@H]([NH3+])C([O-])=O LRQKBLKVPFOOQJ-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- 208000026139 Memory disease Diseases 0.000 description 1
- 208000001145 Metabolic Syndrome Diseases 0.000 description 1
- 229910020700 Na3VO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 102000003797 Neuropeptides Human genes 0.000 description 1
- 229930040373 Paraformaldehyde Natural products 0.000 description 1
- 102000056271 Prolactin-releasing peptide receptors Human genes 0.000 description 1
- 108700024163 Prolactin-releasing peptide receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000005765 Proto-Oncogene Proteins c-akt Human genes 0.000 description 1
- 102100038803 Somatotropin Human genes 0.000 description 1
- 229920004890 Triton X-100 Polymers 0.000 description 1
- 239000013504 Triton X-100 Substances 0.000 description 1
- 201000000690 abdominal obesity-metabolic syndrome Diseases 0.000 description 1
- OIPILFWXSMYKGL-UHFFFAOYSA-N acetylcholine Chemical compound CC(=O)OCC[N+](C)(C)C OIPILFWXSMYKGL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960004373 acetylcholine Drugs 0.000 description 1
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 1
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 description 1
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000000637 arginyl group Chemical group N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)* 0.000 description 1
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 1
- 230000037444 atrophy Effects 0.000 description 1
- 230000037424 autonomic function Effects 0.000 description 1
- 235000013405 beer Nutrition 0.000 description 1
- 230000003542 behavioural effect Effects 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- 230000036760 body temperature Effects 0.000 description 1
- UDSAIICHUKSCKT-UHFFFAOYSA-N bromophenol blue Chemical compound C1=C(Br)C(O)=C(Br)C=C1C1(C=2C=C(Br)C(O)=C(Br)C=2)C2=CC=CC=C2S(=O)(=O)O1 UDSAIICHUKSCKT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 1
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 1
- 230000005754 cellular signaling Effects 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 description 1
- 239000000544 cholinesterase inhibitor Substances 0.000 description 1
- 238000005352 clarification Methods 0.000 description 1
- 230000003920 cognitive function Effects 0.000 description 1
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 230000034994 death Effects 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 1
- 229960003964 deoxycholic acid Drugs 0.000 description 1
- KXGVEGMKQFWNSR-LLQZFEROSA-N deoxycholic acid Chemical compound C([C@H]1CC2)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC(O)=O)C)[C@@]2(C)[C@@H](O)C1 KXGVEGMKQFWNSR-LLQZFEROSA-N 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 230000003831 deregulation Effects 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 1
- 238000012137 double-staining Methods 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- DNJIEGIFACGWOD-UHFFFAOYSA-N ethyl mercaptane Natural products CCS DNJIEGIFACGWOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 239000007850 fluorescent dye Substances 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 230000006870 function Effects 0.000 description 1
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 description 1
- 239000000122 growth hormone Substances 0.000 description 1
- 208000013403 hyperactivity Diseases 0.000 description 1
- 230000003451 hyperinsulinaemic effect Effects 0.000 description 1
- 201000008980 hyperinsulinism Diseases 0.000 description 1
- 230000002267 hypothalamic effect Effects 0.000 description 1
- 238000005286 illumination Methods 0.000 description 1
- 230000002055 immunohistochemical effect Effects 0.000 description 1
- 208000021267 infertility disease Diseases 0.000 description 1
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 1
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 238000000185 intracerebroventricular administration Methods 0.000 description 1
- 238000011813 knockout mouse model Methods 0.000 description 1
- 210000002429 large intestine Anatomy 0.000 description 1
- 201000003723 learning disability Diseases 0.000 description 1
- 230000029226 lipidation Effects 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 1
- 239000006166 lysate Substances 0.000 description 1
- 239000012139 lysis buffer Substances 0.000 description 1
- 210000003442 median eminence Anatomy 0.000 description 1
- 210000001073 mediodorsal thalamic nucleus Anatomy 0.000 description 1
- BUGYDGFZZOZRHP-UHFFFAOYSA-N memantine Chemical compound C1C(C2)CC3(C)CC1(C)CC2(N)C3 BUGYDGFZZOZRHP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960004640 memantine Drugs 0.000 description 1
- 230000015654 memory Effects 0.000 description 1
- 230000006984 memory degeneration Effects 0.000 description 1
- 208000023060 memory loss Diseases 0.000 description 1
- 208000030159 metabolic disease Diseases 0.000 description 1
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 1
- XZWYZXLIPXDOLR-UHFFFAOYSA-N metformin Chemical compound CN(C)C(=N)NC(N)=N XZWYZXLIPXDOLR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960003105 metformin Drugs 0.000 description 1
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 1
- 125000001360 methionine group Chemical group N[C@@H](CCSC)C(=O)* 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 125000001419 myristoyl group Chemical group O=C([*])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 230000000626 neurodegenerative effect Effects 0.000 description 1
- 208000015706 neuroendocrine disease Diseases 0.000 description 1
- 210000002682 neurofibrillary tangle Anatomy 0.000 description 1
- 230000000926 neurological effect Effects 0.000 description 1
- 230000002981 neuropathic effect Effects 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 210000001328 optic nerve Anatomy 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 230000036542 oxidative stress Effects 0.000 description 1
- 230000036284 oxygen consumption Effects 0.000 description 1
- 125000001312 palmitoyl group Chemical group O=C([*])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 239000012188 paraffin wax Substances 0.000 description 1
- 229920002866 paraformaldehyde Polymers 0.000 description 1
- 210000002963 paraventricular hypothalamic nucleus Anatomy 0.000 description 1
- 238000010647 peptide synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000000865 phosphorylative effect Effects 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 230000003938 response to stress Effects 0.000 description 1
- 239000012723 sample buffer Substances 0.000 description 1
- 210000000813 small intestine Anatomy 0.000 description 1
- 238000010532 solid phase synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 210000001679 solitary nucleus Anatomy 0.000 description 1
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 1
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 230000009182 swimming Effects 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 210000001550 testis Anatomy 0.000 description 1
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 1
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 1
- IHIXIJGXTJIKRB-UHFFFAOYSA-N trisodium vanadate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[O-][V]([O-])([O-])=O IHIXIJGXTJIKRB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000007492 two-way ANOVA Methods 0.000 description 1
- 230000003313 weakening effect Effects 0.000 description 1
- 239000013585 weight reducing agent Substances 0.000 description 1
- DGVVWUTYPXICAM-UHFFFAOYSA-N β‐Mercaptoethanol Chemical compound OCCS DGVVWUTYPXICAM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/575—Hormones
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/22—Hormones
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/575—Hormones
- C07K14/57554—Prolactin
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Zoology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Neurology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Neurosurgery (AREA)
- Public Health (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Hospice & Palliative Care (AREA)
- Immunology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Psychiatry (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Abstract
Neuropeptidy PrRP31, PrRP20, obsahující C14 a C16 mastnou kyselinu a jejich analogy, jejichž C-koncová sekvence IRPVGRF-NH2 může být obměněna v místě fenalalaninu; mastná kyselina je v případě PrRP31 či jeho analogu navázána v poloze 1 nebo 11, u PrRP20 či jeho analogu v poloze 1 nebo 7; vazba zahrnuje amidovou vazbu mezi aminokyselinou, mající nejméně jednu volnou NH2 skupinu, a karboxylovou skupinou mastné kyseliny a alternativně zahrnuje i vazbu prostřednictvím raménka X-2, kterým je γ-glutamová kyselina, pro použití po periferním podání k léčbě a prevenci chorobných stavů, kterými jsou Alzheimerova choroba, Parkinsonova choroba, zhoršení kognice, které není demencí, mozkové trauma a neurodegenerativní změny a poruchy.
Description
Lipidované peptidy jako neuroprotektiva
Oblast techniky
Nové analogy peptidu uvolňujícího prolaktin představují neuroprotektivní látky k perifernímu podání pro léčbu a prevenci chorob a stavů, kterými jsou Alzheimerova nemoc (AN), Parkinsonova choroba (PCh), zhoršení kognice, které není demencí (CIND), mozkové trauma a neurodegenerativní změny a poruchy.
Dosavadní stav techniky
AN je závažné neurodegenerativní onemocnění mozku, postihující zejména jedince staršího věku. Nejdříve se nemoc projevuje ztrátou paměti, poruchami učení, změnami v chování, zhoršenou orientací v čase a prostoru, ztrátou autonomních funkcí, až nakonec dochází k úplné demencí. Průměrně 9 let po stanovení diagnózy nastává smrt (Giordano et al., 2007; Gong and Iqbal, 2008).
Z neuropatologického hlediska dochází při AN ke dvěma patologickým změnám v mozku vznikají intracelulámí neurofibrilámí spleti hyperfosforylovaného proteinu Tau a extracelulámí senilní plaky (Planěl et al., 2007; Gonzalez-Burgos et al., 2009).
Bylo prokázáno, že v mozku pacientů s AN je porušena inzulínová signalizace související s inzulínovou rezistencí a rovněž že pacienti s diabetes mellitus 2. typu (T2DM) mají vyšší riziko rozvoje AN, dále bylo také pozorováno snížené využití glukózy v mozku a snížený energetický metabolizmus (Liu et al., 2011).
V posledním desetiletí 20. století byla objevena řada látek, které zásadně ovlivňují regulaci energetického metabolismu, a mezi nimi i neuropeptid PrRP (prolactin-releasing peptide, peptid uvolňující prolaktin, PrRP) (Hinuma et al., 1998).
V organismu se vyskytují dvě formy PrRP, obsahující 31 aminokyselin (PrRP/1-31/; PrRP31), anebo 20 aminokyselin (PrRP/12-31/; PrRP20) (Hinuma et al., 1998).
PrRP je tvořen v neuronech v mnoha částech mozku. Nejvíce se nachází v prodloužené míše (v nucleus tractus solitarius a ve ventrolaterálním retikulámím jádru) a v hypotalamu (v paraventrikulámím jádru a dorsomediálním jádru) (Maruyama et al., 1999; Lee et al., 2000), méně v předním i zadním laloku hypofýzy a v amygdale (Maruyama et al., 1999).
V periferních tkáních se PrRP nachází ve dřeni nadledvin, varlatech, slinivce břišní a v tenkém i tlustém střevě (Nieminen et al., 2000; Fujiwara et al., 2005).
Jeho receptor GPR10 je široce zastoupen v celém mozku. Neurony produkující receptor GPR10 byly objeveny v předním laloku hypofýzy, v amygdale, v hypotalamu i v mozkovém kmeni a v prodloužené míše. V periferii se GPR10 nachází v dřeni nadledvin a signifikantní množství PrRP mRNA bylo nalezeno v také potkaní i lidské slinivce (Fujii et al., 1999, Nieminen et al, 2000) (Maruyama et al., 1999; Lee et al., 2000; Nieminen et al., 2000; Fujiwara et al., 2005).
Prvním popsaným biologickým účinkem PrRP byla stimulace uvolňování prolaktinu z tumorových hypofýzámích buněk RC-4B/C (Hinuma et al., 1998). Díky objevu PrRP v hypotalamických jádrech, která jsou důležitá pro udržování energetické rovnováhy, se o PrRP začalo uvažovat též jako o faktoru ovlivňujícím příjem potravy a tedy i hmotnosti (Lawrence et
- 1 CZ 309217 B6 al., 2000). Výskyt PrRP a jeho receptoru v dalších oblastech mozku pak naznačil, že PrRP zřejmě působí i při regulaci odpovědi na stres a na bolestivé podněty (Onaká et al., 2010).
Anorexigenní efekt PrRP31 se u potkanů projevil po jeho injektování do třetí mozkové komory, jejíž přední stěna a dno jsou tvořeny hypotalamem. Kromě snížení příjmu potravy i hmotnosti (Lawrence et al., 2000; Lawrence et al., 2004) bylo zjištěno, že při negativní energetické bilanci dochází ke snížení transkripce genu pro PrRP. K redukci hmotnosti přispívá i pozorované zvýšení tělesné teploty a spotřeby kyslíku, což jsou nepřímé důkazy zvýšeného energetického výdeje. Vyšší je rovněž produkce mRNA pro tzv. uncoupling protein 1 (UCP-1) v hnědé tukové tkáni, což taktéž svědčí pro zvýšený energetický výdej (Ellacott et al., 2003).
U PrRP knock-out myší (tzv. PrRP KO), které trpí hyperfagií zapříčiňující obezitu, byla zjištěna i související vyšší hladina leptinu v krvi, později také glukózová intolerance a inzulínová rezistence (Takayanagi et al., 2008; Mochiduki et al., 2010). Rovněž myši s nefunkčním receptorem GPR10 vykazují vyšší příjem potravy a obezitu, přičemž u samic je obezita vyšší než u samců díky sníženému energetickému výdeji. S obezitou se pojí taktéž zvýšená hladina leptinu, cholesterolu a glukózová intolerance (Gu et al., 2004; Bjursell et al., 2007).
Pokud se týká strukturních požadavků, pro správnou funkci PrRP je nezbytně nutná přítomnost argininu v pozici 30. Pro vazbu PrRP k receptoru GPR10 je dále důležitá pozice 31, vyžadující přítomnost fenylalaninu či jiné aminokyseliny s aromatickou skupinou navázanou k minimálně jedné skupině CH2 postranního řetězce aminokyseliny (Boyle et al., 2005).
Popsány byly modifikace přirozeného neuropeptidů PrRP20, jejichž biologická aktivita in vitro je srovnatelná sPrRP31 (Langmead et al., 2000; Maixnerová et al., 2011). Kromě vazebné afinity k receptoru GPR10, srovnatelné s hodnotami pro PrRP31 i PrRP20 (Maletínská et al., 2011), zvyšovaly tyto analogy uvolňování prolaktinu z tumorových hypofyzámích buněk RC-4B/C do média. Po ICV podání způsobily analogy PrRP20 statisticky významné snížení příjmu potravy u hladových myší (Maletínská et al., 2011).
Následně byly připraveny neuropeptidy PrRP31 a PrRP20 i jejich analogy s obměněným aminokyselinovým složením, lipidizované mastnou kyselinou (např. myristoylem či palmitoylem) na A-konci peptidu. Oba typy neuropeptidů s rozdílnou délkou řetězce i jejich analogy se vázaly s vysokou afinitou k receptoru pro PrRP v podmínkách in vitro a vykázaly velmi signifikantní snížení příjmu potravy u hladových myší v závislosti na dávce nejen po centrálním, ale také po periferním (subkutánním, SC) podání. Lipidizace neuropeptidů ovlivňujících příjem potravy, které působí v hypotalamu a mozkovém kmeni, je novou možností, jak využít účinek těchto peptidu po periferním injekčním podání (WO 2014/009808).
Následně byl účinek zmíněných neuropeptidů a jejich analogů po periferním podání potvrzen po lipidizování nikoliv na A-konci, ale ve střední části peptidového řetězce, a to jak po navázání mastné kyseliny prostřednictvím amidické vazby, tak za použití raménka (US provis. 61/927944).
Neuropeptidy PrRP31 i PrRP20 a jejich analogy lipidované jak naN-konci, tak uprostřed řetězce, prokázaly také zvýšenou vazebnou afinitu k endogennímu receptoru GPR10 v podmínkách in vitro (WO 2014/009808, US provis. 61/927944).
V poslední době bylo popsáno použití lipidovaných neuropeptidů PrRP31 i PrRP20 a jejich analogů k léčbě pacientů s diagnostikovaným metabolickým syndromem (nebo náchylností k němu), charakterizovaným zvýšenou hladinou glukózy v krvi. Bylo prokázáno, že lipidizované formy PrRP20, PrRP31 a jejich analogů kromě anorexigeního účinku snižují hladiny glukózy v krvi a tento účinek byl doložen i při jejich periferním podání (US provis. 61/927944). Hyperglykémie je spojena s inzulínovou rezistencí a zvýšeným rizikem kardiovaskulárních chorob, přičemž může předcházet T2DM (Barr E. L. et al., Circulation 116 (2): 151-7, 2007) (Barr et al., 2007).
-2CZ 309217 B6
Mnohé studie ukazují, že T2DM má mnoho společných znaků s AN. Obě onemocnění jsou spojené s věkem, vyskytují se u nich vysoké hladiny cholesterolu, zvýšený oxidativní stres, zánětlivé reakce, metabolické poruchy, agregace amyloidního beta peptidu (A(3), hyperaktivita glykogen syntasy kinasy 3(3 (GSK-3P) a deregulace fosforylace proteinů buněčné signalizace (Schrijvers et al., 2010; Takeda et al., 2010). T2DM dokonce zvyšuje riziko vzniku AN, takže by mohla být nahlížena nejen jako neurologická, nýbrž také jako neuroendokrinní choroba (de la Monte and Wands, 2008).
Pro zmírnění příznaků AN se už nyní používají například inhibitory acetylcholinesterasy, které zvyšují koncentraci acetylcholinu v mozku a tím zlepšují kognitivní funkce. Dalším léčivem je memantin, který je inhibitororem A-methyl-D-aspartát receptoru a přispívá ke zlepšení paměti (Gong and Iqbal, 2008).
Vzhledem k popsané časté incidenci inzulínové rezistence u pacientů s AN se k léčbě nedá využít samotný inzulín. Předpokládá se však, že při léčbě by mohly účinkovat látky, zvyšující citlivost k inzulínu, jako je např. metformin (Kickstein et al., 2010; Li et al., 2012), či inzulínové sekretagogy, ke kterým patří glukagonu podobný peptid (GLP-1) (Long-Smith et al., 2013; Holscher, 2014), žaludeční inhibiční peptid (gastric inhibitory peptide, GIP) a jejich analogy (Faivre and Holscher, 2013).
Zcela nově bylo zjištěno, že neuroprotektivní účinek vykazují i mastnou kyselinou lipidované neuropeptidy PrRP31 i PrRP20 a jejich analogy s obměněným aminokyselinovým složením.
Podstata vynálezu
Předmětem vynálezu jsou lipidované neuropeptidy PrRP31, PrRP20, obsahující C14 a C16 mastnou kyselinu, a jejich analogy, jejichž C-koncovou sekvenci IRPVGRF-NH2 lze obměnit v místě fenalalaninu; mastná kyselina je v případě PrRP31 či jeho analogu navázána v poloze 1 nebo 11, u PrRP20 či jeho analogu v poloze 1 nebo 7; vazba zahrnuje amidovou vazbu mezi aminokyselinou, mající nejméně jednu volnou NH2 skupinu, a karboxylovou skupinou mastné kyseliny a alternativně zahrnuje i vazbu prostřednictvím raménka X2, kterým je γ-glutamová kyselina;
pro použití k léčbě a prevenci chorob, jako jsou Alzheimerova choroba, Parkinsonova choroba, zhoršení kognice, které není demencí, mozkové trauma a neurodegenerativní změny a poruchy, a to po periferním podání.
V sekvenci C-koncového heptapeptidu může být koncový fenylalanin nahrazen dichlorfenylalaninem, pentafluorfenylalaninem, nitrofenyalaninem, naftylalaninem nebo tetrachlorfenylalaninem.
Předmětem vynálezu jsou i lipidované neuropeptidy PrRP31, PrRP20 obecných vzorců (A-palm)SRTHRHSMEIRTPDINPAWYASRGIRPVGRF-NH2(5), (palm)TPDINPKWYASRGIRPVGRF-NH2 (6), SRTHRHSMEIK(palm)TPDrNPAWYASRGIRPVGRF-NH2 (7), TPDINPK(palm)WASRGIRPVGRF-NH2 (8), kde palm je kyselina hexadekanová, a vzorců
SRTHRHSMEIKTPDINPAWYASRGIRPVGRF-NH2 (9), a X2(palm)
-3 CZ 309217 B6
TPDINPKWYASRGIRPVGRF-NH2 (10);
X2(palm) kde palm je kyselina hexadekanová a X2 je γ-glutamová kyselina, pro použití k léčbě a prevenci chorob, kterými jsou Alzheimerova choroba, Parkinsonova choroba, zhoršení kognice, které není demencí, mozkové trauma a neurodegenerativní změny a poruchy, a to po periferním podání.
Dalším předmětem vynálezu je použití výše uvedených lipidovaných analogů peptidů uvolňujícího prolaktin pro výrobu léčiva pro periferní podání k léčení a prevenci chorob, kterými jsou Alzheimerova choroba, Parkinsonova choroba, zhoršení kognice, které není demencí, mozkové trauma a neurodegenerativní změny a poruchy.
V průběhu AN dochází ke dvěma patologickým změnám neuronů v mozku - vznikají nerozpustné extracelulámí plaky Αβ a dochází k hyperfbsforylaci intracelulámího cytoskeletálního proteinu tau (Planěl et al., 2007; Gonzalez-Burgos et al., 2009).
Mnohé studie popisují vztah mezi DM2T a AN. Inzulínová rezistence, hyperinzulinémie a hyperglykémie jsou tři hlavní charakteristiky DM2T, které zvyšují riziko vzniku AN (Schrijvers et al., 2010; Takeda et al., 2010; Liu et al., 2011).
V předkládaném vynálezu byl vzhledem k blízkému vztahu mezi AN a DM2T pro ověření neuroprotektivního účinku testovaných látek využit myší model obezity a inzulínové rezistence. Je to model, u kterého je obezita navozena glutamátem sodným (monosodium glutamate, MSG model).
Testované látky (zvyšující citlivost k inzulínu) byly hodnoceny vzhledem k jejich účinku na inzulínovou signalizační kaskádu a hyperfosforylaci proteinu tau v mozku (v oblasti hipokampu) MSG myší před a po aplikaci.
U MSG myší, oproti stejně starým kontrolám, docházelo s rostoucím věkem k rozvoji inzulínové rezistence v mozku. Snížená aktivace inzulínové signalizační kaskády vedla, díky snížené fosforylaci na Ser9, ke zvýšení aktivity glykogensyntázykinázy-3p (GSK-3P), která je jednou z hlavních kináz fosforylujících protein Tau. Byla pozorována zvýšená fosforylace proteinu Tau na epitopech Ser396 a Thr231. Po 14 dnech aplikace látek zvyšující citlivost k inuzulínu, kterými byly kyselinou palmitovou lipidovaný analog PrRP31, palmitovou kyselinou lipidovaný analog PrRP31 s dichlorofenylalaninem v pozici 31a pro srovnání i analog GLP-1 liraglutid, došlo k vyšší aktivaci inzulínové signalizační kaskády, k vyšší fosforylaci GSK-3P na Ser9 a ke snížení hyperfbsforylace proteinu Tau na epitopech Ser396, Thr212aThr231.
Testované analogy PrRP, lipidované palmitovou kyselinou, zvýšily po 14 dnech injikace inzulínovou signalizační kaskádu v mozku 6 měsíčních MSG myší, které jsou inzulín rezistentní. Aplikací těchto látek se rovněž podařilo snížit hyperfosforylaci proteinu Tau na různých epitopech, přičemž hyperfbsforylace proteinu Tau je jednou z hlavních patologických změn v mozku u pacientů s AN.
Objasnění výkresů
Obrázek 1 znázorňuje čas potřebný k nalezení únikové plošinky v testu Morrisova vodního bludiště (MWM). Pokus byl prováděn 5 dní, každý den čtyřikrát, vždy z jiného startovacího místa u MSG myší a jejich kontrol. Data jsou průměr ± SEM, n = 10 myší na skupinu. Statistická
-4CZ 309217 B6 analýza byla prováděna dvoucestnou ANOVA s následným Bonferroniho post hoc testem. Signifikance je * P<0,05 a ** P < 0,01.
Obrázek 2 znázorňuje porovnání fosforylace GSK-3P na Ser9 a fosforylace proteinu Tau na Ser396 a Thr231 v hipokampech 2 a 6 měsíců starých MSG myší a jejich kontrol. Míra fosforylace v hipokampu byla stanovena pomocí metody Western blot (WB). Data jsou průměr ± SEM, n = 7 až 10 myší na skupinu. Statistická analýza byla prováděna jednocestnou ANOVA s následným Bonferroniho post hoc testem. Signifikance je * P<0,05 a * * * P < 0,001.
Obrázek 3 zobrazuje fosforylaci inzulínové signalizační kaskády v hipokampech 6 měsíců starých MSG myší po 14 dnech injikování liraglutidu a palmitovaného lidského PrRP31. Liraglutid (0,2 mg/kg) a palmitovaný lidský PrRP31 (5 mg/kg) byly subkutánně injikovány dvakrát denně, vždy ráno a večer. Jako kontroly sloužily myši, kterým byl injikován fyziologický roztok. Míra fosforylace byla stanovena pomocí metody WB. Data jsou průměr ± SEM. n = 10 myší na skupinu. Statistická analýza byla prováděna jednocestnou ANOVA s následným Bonferroniho post hoc testem. Signifikance je * P<0,05 a * * * P < 0,001.
Obrázek 4 zobrazuje fosforylaci proteinu Tau na různých epitopech v hipokampech 6 měsíců starých MSG myší po 14 dnech injikování liraglutidu a palmitovaného lidského PrRP31. Liraglutid (0,2 mg/kg) a palmitovaný lidský PrRP31 (5 mg/kg) byly subkutánně injikovány dvakrát denně, vždy ráno a večer. Jako kontroly sloužily myši, kterým byl injikován fyziologický roztok. Míra fosforylace byla stanovena pomocí metody WB. Data jsou průměr ± SEM, n = 10 myší na skupinu. Statistická analýza byla prováděna jednocestnou ANOVA s následným Bonferroniho post hoc testem. Signifikance je * P<0,05 a *** P < 0,001.
Obrázek 5 zobrazuje fosforylaci proteinu Tau na různých epitopech v hipokampech 6 měsíců starých MSG myší po 14 dnech injikování palmitovaného PrRP31 s dichlorofenylalaninem v pozici 31. Palmitovaný PrRP31 s dichlorofenylalaninem v pozici 31(5 mg/kg) byl subkutánně injikován dvakrát denně, vždy ráno a večer. Jako kontroly sloužily myši, kterým byl injikován fyziologický roztok. Míra fosforylace byla stanovena pomocí metody WB. Data jsou průměr ± SEM, n = 10 myší na skupinu. Statistická analýza byla prováděna Studentovým t-testem. Signifikance je * P<0,05 a *** P < 0,001.
Obrázek 6 předkládá imunohistochemickou analýzu zobrazující míru fosforylace proteinu Tau v hipokampální oblasti CA1 u 6 měsíců starých MSG myší a jejich kontrol a její ovlivnění po 14 denním injikování liraglutidu a palmitovaného PrRP31. Liraglutid (0,2 mg/kg) a palmitovaný lidský PrRP31 (5 mg/kg) byly subkutánně injikovány dvakrát denně, vždy ráno a večer. Jako kontroly sloužily myši, kterým byl injikován fyziologický roztok. Fosforylace byla stanovena dvojitým fluorescenčním barvením pomocí imunohistochemické analýzy.
Příklady uskutečnění vynálezu
Seznam použitých zkratek
ANOVA - analýza rozptylu
ARC - nucleus arcuatus
GSK-3P - glykogen syntáza kináza - 3β
MWM - Morrisovo vodní bludiště
PDK-1 - fosfoinositid dependentní kináza - 1
SDS - dodecylsulfát sodný
SEM - střední chyba průměru
WB - Western blot
Akt - proteinkináza B
-5CZ 309217 B6
Testované látky
Na základě strukturně-aktivitních studií byly navrženy analogy potkaního (identický s myším) a lidského PrRP31 a PrRP20, lipidované na aminoskupině nebo postranní skupině aminokyseliny pomocí C14 a C16 mastné kyseliny. Methionin v poloze 8 byl vPrRP31 byl případně nahrazen stabilnějším norleucinem.
Lipidizované analogy peptidu PrRP31 a PrRP 20 byly syntetizovány metodou syntézy na pevné fázi na ÚOCHB AV ČR, v.v.i., Praha, na oddělení peptidové syntézy dle postupu Maixnerové a kol. (Maletínská et al., 2007).
Peptid liraglutid byl komerčně získán od firmy Novo Nordisk A/S (Bagsvaerd, Dánsko).
Zvířata
Pro výzkum neuroprotektivních účinků se používají zvířecí modely rezistentní k inzulínu, jako je myší model obezity MSG. Tyto myši mají nedostatek růstového hormonu, atrofíi hypofýzy a optických nervů, a jsou neplodné (Olney, 1969). Vyznačují se zmenšenou oblastí nucleus arcuatus (ARC), rozšířením třetí mozkové komory a zúženým eminentia mediana. Celkový počet buněk v ARC u MSG myší je o 75 % nižší než u kontrolních myší, avšak v ostatních oblastech mozku MSG myší není počet buněk významně neovlivněn (Elefteriou et al., 2003).
U MSG myší dochází k nerovnováze mezi příjmem potravy a výdejem energie, což vede k hypofágii a ukládání tuků, oproti kontrolám mají až osmkrát více bílého tuku (Maletínská et al., 2006). Vykazují zvýšené hladiny leptinu a glukózy v krvi a jsou inzulín rezistentní (Maletínská et al., 2006).
MSG myši
Myší samci kmene NMRI (Harlan, Itálie) byli chováni v akreditovaném zvěřinci ÚOCHB AV ČR, v.v.i., Praha, v areálu ústavů akademie věd v Krči při teplotě 22 ± 2°C a měli volný přístup k potravě i k pití. Rytmus světlo/tma byl nastaven na 12/12 hodin, začátek světla v 6:00 hodin. Se zvířaty bylo zacházeno podle zákona o ochraně zvířat proti týrání (zákon č. 246/1992 Sb.). Samci sloužili jako kontroly, a byli krmeni standardní dietou St-1 (Mlýn Kocanda, Praha, ČR), která obsahovala 66 % sacharidů, 25 % proteinů a 9 % tuků a jejíž energetická hodnota byla 3,4 kcal/g.
K navození obezity byl novorozeným myším NMRI SC injikován glutamát sodný (Sigma, St. Louis, USA) v dávce 4 mg/g hmotnosti myši denně od 2. do 5. postnatálního dne. Tyto myši měly stejnou standardní dietu jako kontroly. Jejich potrava a hmotnost byly váženy vždy ráno jednou denně. Skupiny MSG a NMRI myší použitých pro stanovení byly ve věku 2 a 6 měsíců.
Injikování peptidu zvyšujících citlivost k inzulínu 6 měsíců starým MSG myším
Skupinám MSG myší (n=10), byly subkutánně injikovány peptidy liraglutid v dávce 0,2 mg/kg, nebo kyselinou palmitovou lipidizovaný analog PrRP31 v dávce 5 mg/kg, či kyselinou palmitovou lipidovaný PrRP31 s dichlorofenylalaninem v pozici 31 rozpuštěné ve fýziologickém roztoku, vždy 2x denně, ráno a večer, po dobu 14 dní. Kontrolním zvířatům, jak MSG myším (n=10), tak i NMRI myším (n=10), byl stejným způsobem podáván fyziologický roztok (vždy v objemu 0,2 ml/myš).
-6CZ 309217 B6
Test prostorové paměti 6 měsíců starých MSG myší
Test prostorové paměti v Morrisově vodním bludišti (MWM) byl prováděn dle metodiky uvedené v článku Vorheese a Williamse (Vorhees and Williams, 2006) u šest měsíců starých MSG myší a jejich kontrol.
Odběr tkání pro další stanovení
MSG myši byly ponechány 15 hodin bez potravy, s volným přístupem k vodě. Myši byly zváženy, byla jim změřena glukóza pomocí glukometru, poté byly dekapitovány a na ledu jim byly odebrány mozky, které byly rozříznuty mezi hemisférami. Pro imunohistochemické analýzy byla polovina mozku fixována v roztoku 4% paraformaldehydu na 24 hodin. Poté byla vložena do roztoku 70% ethanolu, aby došlo k dehydrataci tkáně. Pro metodu western blot (WB) byl z druhé poloviny mozku odebrán hipokampus, který byly uložen do vychlazeného lyzačního pufiru (62,5 mmol.l1 Tris-HCl o pH 6,8 s přídavkem 1% deoxycholátu sodného, 1% Tritonu X-100 Complete, 50 mmol.l1 NaF, 1 mmol.l1 NasVO^, zhomogenizován, 10 minut sonikován a uchováván při -20 °C. Dále byla odebrána krev a připravena plasma, která byla skladována při -20 °C. Myším byl odebrán a zvážen hnědý tuk, bílá tuková tkáň (white adipose tissue, WAT), játra, slezina a slinivka břišní. Orgány byly uchovávány v tekutém dusíku při -70 °C.
Detekce proteinů inzulínové signalizační kaskády a hyperfosforylace proteinu Tau pomocí metody western blot (WB)
U zlyzovaných hipokampů byly stanoveny bílkoviny pomocí BCA kitu (Pierce, Thermo Fisher Scientific, Rockford, IL, USA), následně byly lyzáty naředěny vzorkovým pufrern (62,5 mmol/1 Tris-HCl pH 6,8, 10% glycerol, 2% SDS, 0,01% bromfenolová modř, 5% merkaptoethanol, 50 mmol/1 NaF a 1 mmol/1 Na3VO4) do finální koncentrace 1 pg/pl.
Metoda WB i následné vyhodnocení byly prováděny dle metodiky Nagelové a spol. (Nagelová et al., 2014). Seznam detekovaných proteinů s příslušným ředěním daných protilátek je uveden níže v tabulce 1.
-7 CZ 309217 B6
Tabulka 1
| ..Mkc. .. _____________________ | ||
| ................................................................. ř ís r - ft ftí· í : ft u í V: - ft -.x OL Um | Ústi ΜΛ USA Ústi MA USA | UI USA LI m |
| : kx č ft t fftNihUlft S>í>'U | <M Xpsxs XX $«!.< A'SJ Bw^MAJUSA | |
| Uknn | €«H rvxtiv mVw | |
| ku. K tp^pikUaahíS jxmnktk í iftvx CSU [ KrIíuU :¾ __ | ________________________________________________________________ CíJ’1 ..................... f ch SíRttasfti' UvraxLgy, | . A' |
| piv» ! | 1A (W· 5% aSATBS | |
| Krátcí ; prats Ista pokkkísuú i pratslstks ____________ | hx < íwd LUM· NY _____________________________________ Omsd Istiwi W» ________________________________ | 1 í W « 5%. BSA TOSA w-3i 5: PÁS; 5% USA A = |
PW íHS tapOO xLU WSsxymvíÚ dár'XH> M <'t»x-x asxrax 141^ FtiwL
Ki^'u i prtšsWks prt* ta^lh J
Xuis- Ssw Ct«»
Mvs -wk ]
MsiBj&m, BOW^ MAS USA
I : ta W> S%ís&s xr μ·*μ>«................' k.............
Detekce hyperfosforylace proteinu Tau pomocí imunohistochemické analýzy
Pro ověření výsledků hyperfosforylace proteinu Tau byla využita imunohistochemická analýza. Mozkové řezy byly připraveny metodou zalití do parafínu v laboratoři INSERM Lilie, ve Francii. Na mikrotomu byly připraveny řezy o tloušťce 10 um. Imunohistochemické analýzy byly prováděny dle metodiky uvedené v článku Violet a spol. (Violet et al., 2014).
Statistické vyhodnocení výsledků
K vyhodnocení metabolických parametrů myších modelů MSG, byla použita metoda jednocestná ANOVA s následným Dunnetovým testem v programu GraphPad (San Diego, CA, USA).
Pro statistické vyhodnocení stanovení fosforylace proteinů v hipokampech byla použita jednocestná ANOVA s následným Dunnetovým testem v programu GrafPad či Studentův t-test. Výsledky jsou prezentovány jako průměr ±SEM.
Výsledky:
MWM MSG myší 6 měsíců starých
MSG myším a kontrolním myším byl měřen čas, za který nalezly únikovou plošinku v plavacím prostoru pomocí záchytných bodů. Pokus byl každý den opakován 4x a byl prováděn po dobu 5
-8CZ 309217 B6 dní. Z obrázku 1 je patrno, že u MSG myší byl čas potřebný k nalezení únikové plošinky v testu MWM signifikantně delší než u kontrol.
Porovnání signalizace inzulínové kaskády a množství fosforylovaného proteinu tau v hipokampech 2 a 6 měsíců starých MSG myší a jejich kontrol
Signalizace inzulínové kaskády a množství proteinu tau bylo detekováno pomocí metody WB v hipokampech MSG myší a jejich kontrol NMRI ve věku 2 a 6 měsíců.
Měřena byla fosforylovaná GSK-3P na Ser9. Jak je patrno z obrázku 2A, fosforylace této kinasy byla nižší u MSG myší oproti kontrolám již ve věku dvou měsíců, a dále se snižovala s narůstajícím věkem. Snížená fosforylace GSK-3P na Ser9 zřejmě zapříčinila u 6 měsíců starých MSG myší zvýšenou fosforylaci proteinu tau na Ser396 a také na Thr231, což ukazují grafy na obr. 2B a 2C. MSG myši ve věku 6 měsíců tak byly potvrzeny jako vhodný model pro výzkum látek zvyšujících citlivost inzulínu.
Signalizace inzulínové kaskády v hipokampech u 6 měsíců starých MSG myší po 14 denním injikování lipidizovaného palmitovaného analogu PrRP31 a liraglutidu
Jak je patrno z obrázku 3, docházelo v hipokampech MSG myší, kterým byl čtrnáct dní podáván kyselinou palmitovou lipidovaný analog PrRP31 nebo liraglutid, k aktivaci inzulínové signalizační kaskády. Liraglutid významně zvýšil fosforylaci PDK-1, p-Akt (Thr308) a p-GSK3p (Ser9); u posledních dvou jmenovaných kináz došlo k ještě vyšší fosforylci po podání PrRP31 lipidováného kyselinou palmitovou.
Ovlivnění fosforylace proteinu tau v hipokampech 6 měsíců starých MSG myší po 14 denním injikování lipidizovaného palmitovaného analogu PrRP31 a liraglutidu
Ovlivnění fosforylace proteinu tau bylo detekováno v hippokampech 6 měsíců starých MSG myší metodou WB. Ve shodě s předchozími výsledky bylo prokázáno, že zvýšení fosforylace GSK-30 na Ser9 vyvolalo snížení fosforylace proteinu tau na Ser396, Thr231 a také Thr212. Z grafů na obrázku 4A, 4B a 4C je patrné, že docházelo ke statisticky významnému snížení fosforylace proteinu tau po podání jak lipidizovaného palmitovaného analogu PrRP31, tak i po podání liraglutidu. Dále byla detekována protilátka proti nefosforylovanému proteinu tau (Taul). Rozdíly v množství nefosforylovaného proteinu tau po podání PrRP31 a liraglutidu nebyly signifikantní (obr. 4D), ač podání prvé z uvedených látek mělo zřetelně větší účinek.
Ovlivnění fosforylace GSK-3P a proteinu tau na Thr231 v hipokampech 6 měsíců starých MSG myší po 14 denním injikování lipidizovaného palmitovaného analogu PrRP31 s dichlorofenylalaninem v pozici 31
Fosforylace GSK-3P na Ser9 i fosforylace proteinu tau na Thr231 byla detekována v hippokampech 6 měsíců starých MSG myší metodou WB. Jak je patrno z obrázku 5, bylo prokázáno, že po 14 denním podávání látky zvyšující citlivost k inzulínu došlo ke zvýšení fosforylace GSK-3P na Ser9, což zřejmě dále vyvolalo snížení fosforylace Tau na Thr231.
Imunohistochemické fluorescenční dvojité barvení hipokampální oblasti CA1 u 6 měsíců starých MSG myší po 14 denním injikování lipidizovaného palmitovaného analogu PrRP31 a liraglutidu
Imunohistochemická analýza sloužila jako doplňková metoda k WB. Jak je patrno z obrázku 6, došlo u MSG myší injikovaných fyziologickým roztokem ke zvýšení fosforylace proteinu Tau na epitopech Thr212 a Ser202/Thr205 oproti stejně starým kontrolám NMRI. Zvýšená fosforylace se projevila silnějším fluorescenčním zářením při osvícení řezu laserem o stejné intenzitě.
-9CZ 309217 B6
Po 14 denním injikování lipidizováného palmitováného PrRP31 a liraglutidu docházelo v oblasti CA1 k poklesu fosforylace, která se projevila zeslabením signálu při osvícení laserem o stejné intenzitě.
Průmyslová využitelnost
Nové analogy peptidu uvolňujícího prolaktin představují neuroprotektivní látky k perifernímu podání pro léčbu a prevenci chorob a stavů, jako je Alzheimerova nemoc (AN), Parkinsonova choroba (PCh), zhoršení kognice, které není demencí (CIND), mozkového traumatu a neurodegenerativních změn a poruch.
Citovaná literatura
Barr EL, Zimmet PZ, Welborn TA, Jolley D, Magliano DJ, Dunstan DW, Cameron AJ, Dwyer T, Taylor HR, Tonkin AM. Wong TY, McNeil J a Shaw JE (2007), Circulation 116:151-157.
Bjursell M, Lenneras M, Goransson M, Elmgren A Bohlooly YM (2007), Biochem Biophys Res Commun 363:633-638. Boyle R, Downham R, Ganguly T, Humphries J, Smith J a Travers S (2005), JPept Sci 11:161-165.
de la Monte SM a Wands JR (2008), Journal of diabetes science and technology 2:1101-1113.
Elefteriou F, Takeda S, Liu X, Armstrong D a Karsenty G (2003), Endocrinology 144:38423847.
Ellacott K, Lawrence C, Pritchard L a Luckman S (2003), Am J Physiol Regul Integr Comp P/Vs/O/285:R1005-1010.
Faivre E a Holscher C (2013), JAlzheimers Dis 35:267-283.
Fujiwara K, Matsumoto H, Yada T a Inoue K (2005), RegulPept 126:97-102.
Giordano V, Peluso G, lannuccelli M, Benatti P, Nicolai R a Calvani M (2007), Neurochem Res 32:555-567.
Gong CX a Iqbal K (2008), Current medicína! chemistry 15:2321-2328.
Gonzalez-Burgos I, Velazquez-Zamora DA a Beas-Zarate C (2009), International journal of developmental neuroscience: the official journal of the International Society for Developmental Neuroscience 27:741-745.
Gu W, Geddes BJ, Zhang C, Foley KP a Stricker-Krongrad A (2004), JMolNeurosci 22:93-103.
Hinuma S, Habata Y, Fujii R, Kawamata Y, Hosoya M, Fukusumi S, Kitada C, Masuo Y, Asano T, Matsumoto H, Sekiguchi M, Kurokawa T, Nishimura O, Onda H a Fujino M (1998), Nature 393:272-276.
Holscher C (2014), J Endocrinol 221 :T31-41.
Kickstein E, Krauss S, Thornhill P, Rutschow D, Zeller R, Sharkey J, Williamson R, Fuchs
M, Kohler A, Glossmann H, Schneider R, Sutherland C a Schweiger S (2010), Proc Natl Acad Sci USA 107:21830-21835.
- 10 CZ 309217 B6
Langmead C, Szekeres P, Chambers J, Ratcliffe S, Jones D, Hirst W, Price G a Herdon H (2000), BrJPharmacol 131:683-688.
Lawrence C, Celsi F, Brennand J a Luckman S (2000), Nat Neurosci 3:645-646.
Lawrence C, Liu Y, Stock M a Luckman S (2004), Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol 286:R101-107.
Lee Y, Yang SP, Soares MJaVoogtJL (2000), Brain Res Bull 51:111-116.
Li J, Deng J, Sheng W aZuo Z (2012), Pharmacol Biochem Behav 101:564-574.
Liu Y, Liu F, Grundke-Iqbal I, Iqbal K a Gong CX (201 J. Pathol 225:54-62.
Long-Smith CM, Manning S, McClean PL, Coakley MF, O'Halloran DJ, Holscher C a O'Neill C (2013), Neuromolecular Med 15:102-114.
Maixnerová J, Spolcová A, Pýchová M, Blechová M, Elbert T, Řezáčova M, Železná B a Maletínská L (2011), Peptides 32:811-817.
Maletínská L, Maixnerová J, Matýskova R, Haugvicová R, Sloncová E, Elbert T, Slaninová J a Železná B (2007), Eur J Pharmacol 559:109-114.
Maletínská L, Špolcová A, Maixnerová J, Blechová M a Železná B (2011), Peptides 32:18871892.
Maletínská L, Toma RS, Pimik Z, Kiss A, Slaninová J, Haluzík M a Železná B (2006), Regul Pept 136:58-63.
Maruyama M, Matsumoto H, Fujiwara K, Kitada C, Hinuma S, Onda H, Fujino M a Inoue K (1999), Endocrinology 140:2326-2333.
Mochiduki A, Takeda T, Kaga S a Inoue K (2010), JNeuroendocrinol 22:576-584.
Nagelová V, Pimik Z, Železná B a Maletínská L (2014), Brain Res 1547:16-24.
Nieminen ML, Brandt A, Pietila P a Panula P (2000), Peptides 21:1695-1701.
Olney JW (1969), Science 164:719-721.
Onaka T, Takayanagi Y a Leng G (2010), Trends EndocrinolMetab 21:287-293.
Planěl E, Tatebayashi Y, Miyasaka T, Liu L, Wang L, Herman M, Yu WH, Luchsinger JA, Wadzinski B, Duff KE a Takashima A (2007), JNeurosci 27:13635-13648.
Schrijvers EM, Witteman JC, Sijbrands EJ, Hofman A, Koudstaal PJ a Breteler MM (2010), Neurology 75:1982-1987.
Takayanagi Y, Matsumoto H, Nakata M, Mera T, Fukusumi S, Hinuma S, Ueta Y, Yada T, Leng G a Onaka T (2008), J Clin Invest 118:4014-4024.
Takeda S, Sato N, Uchio-Yamada K, Sawada K, Kunieda T, Takeuchi D, Kuřinami H, Shinohara M, Rakugi H a Morishita R (2010), Prox Natl Acad Sci USA 107:7036-7041.
-11 CZ 309217 B6
Violet M, Delattre L, Tardivel M, Sultán A. Chauderlier A, Caillierez R, Talahari S, Nesslany F, Lefebvre B, Bonnefoy E, Buee L a Galas MC (2014), Frontiers in cellular neuroscience 8:84.
Vorhees CV a Williams MT (2006), Natureprotocols 1:848-858.
Claims (2)
- PATENTOVÉ NÁROKY1. Lipidované analogy peptidu uvolňujícího prolaktin obecných vzorců: (X)SRTHRHSMEIRTPDINPAWYASRGIRPVGRF-NH2 (1), (X)SRAHQHSMETRTPDINPAWYTGRGIRPVGRF-NH2(2), (X)TPDINPAWYASRGIRPVGRF-NH2 (3), (X)TPDINPAWYTGRGIRPVGRF-NH2 (4), kde X = X1 nebo X'X2; X1 je tetradekanová nebo hexadekanová kyselina, navázaná u vzorců (1) a (2) v poloze 1 nebo 11 a u vzorců (3) a (4) v poloze 1 peptidového řetězce amidovou vazbou mezi volnou NH2 skupinou aminokyseliny a karboxylovou skupinou mastné kyseliny nebo prostřednictvím raménka X2, jímž je g-glutamová kyselina, přičemž koncový fenylalanin může být nahrazen dichlorfenylalaninem, pentafluorfenylalaninem, nitrofenyalaninem, naftylalaninem nebo tetrachlorfenylalaninem, dále vzorcůA-palm)SRTHRHSMEIRTPDINPAWYASRGIRPVGRF-NH2 (5), (palm)TPDINPKWYASRGIRPVGRF-NH2 (6),SRTHRHSMEIK(palm)TPDINPAWYASRGIRPVGRF-NH2(7), TPDINPK(palm)WYASRGIRPVGRF-NH2 (8), kde palm je kyselina hexadekanová, a vzorcůSRTHRHSMEIKTPDINPAWYASRGIRPVGRF-NH2 (9), aX2(palm)TPDINPKWYASRGIRPVGRF-NH2 (10);X2(palm) kde palm je kyselina hexadekanová a X2 je g-glutamová kyselina, pro použití k léčbě a prevenci chorob, kterými jsou Alzheimerova choroba, Parkinsonova choroba, zhoršení kognice, které není demencí, mozkové trauma a neurodegenerativní změny a poruchy, a to po periferním podání.
- 2. Použití lipidováných analogů peptidu uvolňujícího prolaktin podle nároku 1 pro výrobu léčiva pro periferní podání k léčení a prevenci chorob, kterými jsou Alzheimerova choroba, Parkinsonova choroba, zhoršení kognice, které není demencí, mozkové trauma a neurodegenerativní změny a poruchy.
Priority Applications (8)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CZ2014-364A CZ309217B6 (cs) | 2014-05-27 | 2014-05-27 | Lipidované peptidy jako neuroprotektiva |
| PCT/CZ2015/000047 WO2015180698A1 (en) | 2014-05-27 | 2015-05-20 | Lipidated peptides as neuroprotective agents |
| AU2015266464A AU2015266464B2 (en) | 2014-05-27 | 2015-05-20 | Lipidated peptides as neuroprotective agents |
| EP15729749.0A EP3149029B1 (en) | 2014-05-27 | 2015-05-20 | Lipidated peptides as neuroprotective agents |
| CA2950416A CA2950416C (en) | 2014-05-27 | 2015-05-20 | Lipidated peptides as neuroprotective agents |
| US15/307,262 US20170051031A1 (en) | 2014-05-27 | 2015-05-20 | Lipidated peptides as neuroprotective agents |
| IL24837016A IL248370B (en) | 2014-05-27 | 2016-10-16 | Covalently modified peptides with lipid extensions as neuroprotective components |
| US16/550,654 US10751390B2 (en) | 2014-05-27 | 2019-08-26 | Lipidated peptides as neuroprotective agents |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CZ2014-364A CZ309217B6 (cs) | 2014-05-27 | 2014-05-27 | Lipidované peptidy jako neuroprotektiva |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CZ2014364A3 CZ2014364A3 (cs) | 2015-12-16 |
| CZ309217B6 true CZ309217B6 (cs) | 2022-06-01 |
Family
ID=53432908
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CZ2014-364A CZ309217B6 (cs) | 2014-05-27 | 2014-05-27 | Lipidované peptidy jako neuroprotektiva |
Country Status (7)
| Country | Link |
|---|---|
| US (2) | US20170051031A1 (cs) |
| EP (1) | EP3149029B1 (cs) |
| AU (1) | AU2015266464B2 (cs) |
| CA (1) | CA2950416C (cs) |
| CZ (1) | CZ309217B6 (cs) |
| IL (1) | IL248370B (cs) |
| WO (1) | WO2015180698A1 (cs) |
Families Citing this family (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP6573972B2 (ja) * | 2014-10-02 | 2019-09-11 | パウル・シェラー・インスティトゥート | 少なくとも１つの変異アミノ酸残基を有するヒトＧタンパク質αサブユニットＧαｉ１ |
| WO2023078478A1 (en) * | 2021-11-08 | 2023-05-11 | Ustav Organicke Chemie A Biochemie Av Cr, V. V. I. | Lipidized cocaine- and amphetamine-regulated transcript peptide analogues as anti-obesity and neuroprotective agents |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2003024472A2 (en) * | 2001-09-14 | 2003-03-27 | Stem Cell Therapeutics Inc. | Prolactin induced increase in neutral stem cell numbers and therapeutical use thereof |
| WO2006030956A1 (ja) * | 2004-09-15 | 2006-03-23 | Takeda Pharmaceutical Company Limited | ＰｒＲＰおよびその受容体の新規用途 |
| CZ2012476A3 (cs) * | 2012-07-12 | 2014-01-22 | Ústav organické chemie a biochemie Akademie věd ČR, v. v. i. | Lipidované peptidy jako antiobezitika |
Family Cites Families (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR20100057640A (ko) * | 2007-09-11 | 2010-05-31 | 몬도바이오테크 래보래토리즈 아게 | 치료제로서의 인슐린 ｃ-펩티드 단독 또는 ｇｌｐ-1과의 배합물의 용도 |
| ES2912042T3 (es) | 2011-06-24 | 2022-05-24 | Nono Inc | Terapia de combinación para isquemia |
| US20150196651A1 (en) | 2014-01-15 | 2015-07-16 | USTAV ORGANICKE CHEMIE A BIOCHEMIE AKADEMIE VED CR, v.v.i. | Lipidated peptides for lowering blood glucose |
-
2014
- 2014-05-27 CZ CZ2014-364A patent/CZ309217B6/cs unknown
-
2015
- 2015-05-20 AU AU2015266464A patent/AU2015266464B2/en active Active
- 2015-05-20 EP EP15729749.0A patent/EP3149029B1/en active Active
- 2015-05-20 WO PCT/CZ2015/000047 patent/WO2015180698A1/en not_active Ceased
- 2015-05-20 CA CA2950416A patent/CA2950416C/en active Active
- 2015-05-20 US US15/307,262 patent/US20170051031A1/en not_active Abandoned
-
2016
- 2016-10-16 IL IL24837016A patent/IL248370B/en active IP Right Grant
-
2019
- 2019-08-26 US US16/550,654 patent/US10751390B2/en active Active
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2003024472A2 (en) * | 2001-09-14 | 2003-03-27 | Stem Cell Therapeutics Inc. | Prolactin induced increase in neutral stem cell numbers and therapeutical use thereof |
| WO2006030956A1 (ja) * | 2004-09-15 | 2006-03-23 | Takeda Pharmaceutical Company Limited | ＰｒＲＰおよびその受容体の新規用途 |
| CZ2012476A3 (cs) * | 2012-07-12 | 2014-01-22 | Ústav organické chemie a biochemie Akademie věd ČR, v. v. i. | Lipidované peptidy jako antiobezitika |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| Sun B et al. Blockade of PrRP attenuates MPTP-induced toxicity in mice. Peptides, 2009, 30(7),1267-75. * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| AU2015266464A1 (en) | 2016-10-27 |
| IL248370A0 (en) | 2016-11-30 |
| CZ2014364A3 (cs) | 2015-12-16 |
| IL248370B (en) | 2019-11-28 |
| AU2015266464B2 (en) | 2017-08-17 |
| US10751390B2 (en) | 2020-08-25 |
| US20200016240A1 (en) | 2020-01-16 |
| CA2950416A1 (en) | 2015-12-03 |
| WO2015180698A1 (en) | 2015-12-03 |
| US20170051031A1 (en) | 2017-02-23 |
| EP3149029A1 (en) | 2017-04-05 |
| EP3149029B1 (en) | 2019-06-19 |
| CA2950416C (en) | 2021-03-02 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Gao et al. | Hypoglycemic effect of D-chiro-inositol in type 2 diabetes mellitus rats through the PI3K/Akt signaling pathway | |
| Pruett et al. | Mitochondrial function and oxidative stress in white adipose tissue in a rat model of PCOS: effect of SGLT2 inhibition | |
| Loncar et al. | Metabolism and the heart: an overview of muscle, fat, and bone metabolism in heart failure | |
| Tagashira et al. | Stimulation of σ1-receptor restores abnormal mitochondrial Ca2+ mobilization and ATP production following cardiac hypertrophy | |
| Johnson et al. | Investigation of tyrosine hydroxylase and BDNF in a low-dose rotenone model of Parkinson's disease | |
| Shinoda et al. | Haloperidol aggravates transverse aortic constriction-induced heart failure via mitochondrial dysfunction | |
| Tian et al. | Xinbao Pill attenuated chronic heart failure by suppressing the ubiquitination of β-adrenergic receptors | |
| Gargantini et al. | Obestatin promotes proliferation and survival of adult hippocampal progenitors and reduces amyloid-β-induced toxicity | |
| Ko et al. | Endothelial NOS activation induces the blood–brain barrier disruption via ER stress following status epilepticus | |
| Quadri et al. | Ceramide‐mediated orchestration of oxidative stress response through filopodia‐derived small extracellular vesicles | |
| Gong et al. | Cardio-protective role of Humanin in myocardial ischemia-reperfusion | |
| Kalkman et al. | Ceramides May play a central role in the pathogenesis of alzheimer’s disease: a review of evidence and horizons for discovery | |
| CZ309217B6 (cs) | Lipidované peptidy jako neuroprotektiva | |
| KR20190137786A (ko) | 뇌 오스테오칼신 수용체 및 인지 장애 | |
| Li et al. | Inhibition of calcium-sensing receptor by its antagonist promotes gastrointestinal motility in a Parkinson’s disease mouse model | |
| KR20230172930A (ko) | 신경 세포 성장 조절 인자 1(negr1) 유래 펩타이드를 유효성분으로 포함하는 비만 예방 또는 치료용 조성물 | |
| Yi et al. | Aβ dissociation by pectolinarin may counteract against Aβ-induced synaptic dysfunction and memory impairment | |
| US11447534B2 (en) | Peptide complex with immunodulatory and anti-inflammatory function | |
| Kavinda et al. | 2, 4′-Dihydroxybenzophenone Exerts Bone Formation and Antiosteoporotic Activity by Stimulating the β-Catenin Signaling Pathway | |
| Turan et al. | Zinc signaling in aging heart function | |
| Popelová | Impact of different types of antidiabetic interventions on the development of neurodegenerative changes in brains of diabetic mice and rats | |
| Charvát et al. | Neuroprotective potential of novel CARTp analogs in the hippocampus of THY-Tau22 mouse model of Tau pathology | |
| Jazzar | Physiopathology and hyperinsulinemia of human vascular smooth muscle cells of men and women | |
| Tetzner | Discovery and pharmacological characterisation of angiotensin-(1-7) receptors and identification of their importance in diabetes mellitus | |
| Wang et al. | Sea cucumber female gonad peptides improve bone metabolism in postmenopausal osteoporosis mice by activating muscle AMPK/FNDC5 signaling mediated irisin secretion |