CZ309380B6 - Sloučeniny pro inhibici fibroblastového aktivačního proteinu - Google Patents

Sloučeniny pro inhibici fibroblastového aktivačního proteinu Download PDF

Info

Publication number
CZ309380B6
CZ309380B6 CZ2020177A CZ2020177A CZ309380B6 CZ 309380 B6 CZ309380 B6 CZ 309380B6 CZ 2020177 A CZ2020177 A CZ 2020177A CZ 2020177 A CZ2020177 A CZ 2020177A CZ 309380 B6 CZ309380 B6 CZ 309380B6
Authority
CZ
Czechia
Prior art keywords
pyrrolidin
quinoline
glycyl
oxoacetyl
oxo
Prior art date
Application number
CZ2020177A
Other languages
English (en)
Other versions
CZ2020177A3 (cs
Inventor
Adéla Šimková
Adéla Mgr. Šimková
Pavel Šácha
Šácha Pavel RNDr., Ph.D.
Natan SIDEJ
Natan Sidej
Tereza ORMSBY
Ormsby Tereza Mgr., Ph.D.
Original Assignee
Ústav organické chemie a biochemie AV ČR v. v. i
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Ústav organické chemie a biochemie AV ČR v. v. i filed Critical Ústav organické chemie a biochemie AV ČR v. v. i
Priority to CZ2020177A priority Critical patent/CZ309380B6/cs
Priority to AU2021248368A priority patent/AU2021248368B2/en
Priority to US17/913,128 priority patent/US12371416B2/en
Priority to CA3166572A priority patent/CA3166572C/en
Priority to JP2022560141A priority patent/JP7368637B2/ja
Priority to PCT/CZ2021/050036 priority patent/WO2021197519A1/en
Priority to IL295197A priority patent/IL295197B2/en
Priority to EP21726038.9A priority patent/EP4126841B1/en
Priority to KR1020227037963A priority patent/KR102917649B1/ko
Publication of CZ2020177A3 publication Critical patent/CZ2020177A3/cs
Publication of CZ309380B6 publication Critical patent/CZ309380B6/cs

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C07K5/06008—Dipeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/06017—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
    • C07K5/06026—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic the side chain containing 0 or 1 carbon atom, i.e. Gly or Ala
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/47—Quinolines; Isoquinolines
    • A61K31/4709—Non-condensed quinolines and containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K51/00—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo
    • A61K51/02—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo characterised by the carrier, i.e. characterised by the agent or material covalently linked or complexing the radioactive nucleus
    • A61K51/04—Organic compounds
    • A61K51/0474—Organic compounds complexes or complex-forming compounds, i.e. wherein a radioactive metal (e.g. 111In3+) is complexed or chelated by, e.g. a N2S2, N3S, NS3, N4 chelating group
    • A61K51/0478—Organic compounds complexes or complex-forming compounds, i.e. wherein a radioactive metal (e.g. 111In3+) is complexed or chelated by, e.g. a N2S2, N3S, NS3, N4 chelating group complexes from non-cyclic ligands, e.g. EDTA, MAG3
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K51/00—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo
    • A61K51/02—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo characterised by the carrier, i.e. characterised by the agent or material covalently linked or complexing the radioactive nucleus
    • A61K51/04—Organic compounds
    • A61K51/0497—Organic compounds conjugates with a carrier being an organic compounds
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing three or more hetero rings
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/569—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for microorganisms, e.g. protozoa, bacteria, viruses
    • G01N33/56966—Animal cells
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/575—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for cancer
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/58—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving labelled substances

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Optics & Photonics (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)

Abstract

Řešení popisuje sloučeniny obecného vzorce I, které svojí afinitou a schopností inhibice vysoce přesahují doposud známé inhibitory FAP. Tyto látky je možné použít ke specifickému cílení na nádory pro účely diagnostiky a terapie nebo pro laboratorní účely při studiu endogenní exprese FAP.

Description

Sloučeniny pro inhibici fibroblastového aktivačního proteinu
Oblast techniky
Cílem práce bylo nalezení nových sloučenin, vhodných pro zacílení nádorové terapie a diagnostiky.
Dosavadní stav techniky
Fibroblastový aktivační protein (FAP) je serinová proteáza exprimovaná v mnohých rychle proliferujících tkáních, zejména ve fibroblastech epiteliálních nádorů. Vzhledem k nízké či nedetekovatelné expresi ve zdravých dospělých tkáních je FAP slibnou platformou pro cílení nádorové terapie a diagnostiky. Přestože FAP podle mnohých studií přispívá k proliferaci nádoru, nebylo zatím prokázáno, že by jeho inhibice vedla ke zpomalení jejich růstu (shrnuto v Busek et al. 2018. Front. Biosci., 1933).
Díky specifickému výskytu v patologických tkáních a jeho ukotvení na vnější straně plazmatické membrány aktivovaných fibroblastů je FAP ideální molekulární adresou, díky níž je možné nádorovou tkáň přesně zacílit. První studie ukázaly, že tento přístup je relevantní pro diagnostiku nádorů pomocí PET/CT. Konjugáty selektivního inhibitoru FAP s chelátorem DOTA nesoucím radioaktivní izotop 68Ga umožnily srovnatelně citlivé zobrazení nádorových tkání jako aktuálně používaná (18F)-fluordeoxyglukosa (FDG). Velkou výhodou tohoto přístupu oproti stávající metodě je eliminace falešně pozitivních signálů generovaných tkáněmi s vysokou spotřebou glukosy (Lindner et al. 2018. J. Nucl. Med., 1415).
Ačkoliv se využití molekulárního rozpoznávání FAP jakožto platformy pro zacílení nádorů ukazuje jako relevantní, přirozená exprese tohoto enzymu v cílených tkáních je i tak velmi nízká a je proto nezbytné použití vysoce selektivních inhibitorů či substrátů s mimořádně vysokou afinitou. Kvůli nízkým koncentracím endogenně exprimovaného FAP je tento enzym náročný i na studium v laboratorních podmínkách, proto jsou využívány téměř výhradně modely s nadměrnou expresí FAP.
Pro cílení FAP jsou momentálně používány látky vzorce A a B (viz níže), které vykazují doposud nejlepší vlastnosti, co se týče afinity i selektivity (Jansen et al. 2014, J. Med. Chem., 3053). Látka vzorce B je výsledkem rozsáhlého výzkumu studujícího vztah struktury a aktivity inhibitorů FAP, během něhož byla každá část její struktury vysoce optimalizována (např. Jansen et al. 2013, ACS Med. Chem. Lett., 491; Poplawski et al. 2013, Med. Chem., 3467; Ryabtsova et al. 2012, Bioorg. Med. Chem. Lett., 3412). Molekula je odvozena od peptidového substrátu FAP X-Gly-Pro-Y (kde X a Y jsou libovolné peptidové sekvence). Motiv Gly-Pro je pro afinitu látky k aktivnímu místu FAP nezbytný (Edosada et al. 2006, FEBS Lett., 1581). A-koncový 4-karbonylchinolin je výsledkem rozsáhlé optimalizace a představuje nejvhodnější substituent zmíněného dipeptidu GlyPro. Peptidová vazba za prolinem v substrátu enzymu FAP může být nahrazena pro účely inhibice aktivní hlavicí, tj. skupinou, která bude mít elektrofilní centrum a bude schopná podlehnout nukleofilnímu ataku katalytického místa enzymu.
-1 CZ 309380 B6
IN
Pro tento účel byly doposud použity pouze následující funkční skupiny: kyselina boronová, chloromethylketon a nitril. Právě nitrilová skupina se doposud osvědčila nejvíce a nitrilové inhibitory FAP byly použity pro cílení nádoru in vivo (Lindner et al. 2018, J. Nucl. Med., 1415). Selektivní a specifické inhibitory FAP jsou popsány také v přihláškách vynálezu US 20140357650 (2014) a WO 2019154859 (2019). Kromě toho byly navrženy vysoce selektivní substráty pro FAP (De Decker et al. 2019, ACS Med. Chem. Lett., 1173) apolymemí konjugáty nesoucí inhibitor FAP (Dvořáková et al. 2017, J. Med. Chem., 8385).
Jak již bylo zmíněno, pro optimální cílení FAP in vivo a in vitro je nezbytná mimořádná afinita inhibitoru. Přestože A-koncová část molekuly inhibitoru byla již vysoce optimalizována, Ckoncová část zůstala doposud neprozkoumána. Optimalizací také této části molekuly se tedy otevírá možnost dosáhnout dalšího zvýšení požadované afinity inhibitoru.
V předkládaném vynálezu prokazujeme, že při použití substituovatelné aktivní hlavice, konkrétně a-ketoamidu, je možné nečekaně rozšířit množství interakcí inhibitoru s aktivním místem enzymu a výrazně tak zlepšit afinitu tohoto inhibitoru k FAP.
Z rozsáhlé studie vztahu struktury a aktivity jsme získali řadu látek, které svojí afinitou a schopností inhibice vysoce přesahují doposud známé inhibitory FAP. Tyto látky je možné použit k analogickým aplikacím, které již byly zmíněny, tj. ke specifickému cílení na nádory pro účely diagnostiky a terapie, nebo pro laboratorní účely při studiu endogenní exprese FAP.
Podstata vynálezu
Podstatou vynálezu je použití nové aktivní hlavice, konkrétně α-ketoamidu, k vytvoření nové a nečekaně vysoce účinné sloučeniny pro inhibici fibroblastového aktivačního proteinu (FAP). Zde navržené substituce na dusíku α-ketoamidové skupiny dramaticky zvyšují afinitu látek k FAP. Popsané látky lze použít při cílení na nádorové tkáně pro diagnostické či terapeutické účely.
-2 CZ 309380 B6
Předkládaný vynález poskytuje chinolinkarboxamidové sloučeniny, vykazující vysokou inhibiční aktivitu vůči fibroblastovému aktivačnímu proteinu (FAP). mající obecný vzorec I (I), kde Ri a R2 jsou nezávisle na sobě zvoleny ze skupiny, zahrnující H, D, F,
R3 je zvolen ze skupiny, zahrnující H, D nebo C1-C5 alkyl.
R4 a R5 jsou nezávisle na sobě zvoleny ze skupiny, zahrnující H, D, -OH, C1-C3 alkoxy a strukturu
-X-Y-Z, kde X je atom kyslíku nebo -NH-, Y je nebo nebo kde kje celé číslo od 5 do 15 am je celé číslo od 1 do 3, aZ je nebo
-3 CZ 309380 B6 nebo
Re je zvolen ze skupiny, zahrnující H, D, Cl-CIO alkyl, C3-C10 cykloalkyl, adamantyl, substituovaný či nesubstituovaný aryl nebo C7-C20 alkylaryl, v nichž aryl je
kde R? a Rn jsou nezávisle na sobě zvoleny ze skupiny, zahrnující H, D, halogen, C1-C3 alkyl, C1-C3 alkoxy, -CF3, -C(=O)-ORi2, kde R12 zvolen ze skupiny, zahrnující H, D, halogen, ClC4 alkyl,
Rs, R9 a R10 jsou nezávisle na sobě zvoleny ze skupiny, zahrnující H, D, halogen, -OMe, ClC3 alkyl, C1-C3 alkoxy, -CF3, -C(=O)-ORi2, nebo je Re
či
kde Rb je zvolen ze skupiny, zahrnující -OR12, -NHR12, -N(-CH3)Ri2, pyrrolidin, morfolin,
Ri4 a R15 jsou nezávisle na sobě zvoleny ze skupiny, zahrnující H, D, C1-C5 alkyl, fenyl, 3,4dimethoxyfenyl, benzyl, 3,4-dimethoxybenzyl a nesubstituovaný C3-C8 alkylheteroaryl, jehož heteroaryl je zvolen z pyrrolu, furanu, thiofenu, imidazolu, thiazolu, oxazolu, indolu a pyridinu,
Rie a Rn jsou nezávisle na sobě zvoleny ze skupiny, zahrnující H, D, C1-C6 alkyl, fenyl, benzyl, 4-hydroxybenzyl, nesubstituovaný C3-C8 alkylheteroaryl, jehož heteroaryl je zvolen z pyrrolu, furanu, thiofenu, imidazolu, thiazolu, oxazolu, indolu a pyridinu, -(CH2)n-C(=O)OR18, -(CH2)n-C(=O)-NRi9R20 a -(CH2)n-NR2iR22, kde n má hodnotu celého čísla od 1 do 4,
Ris je zvolen ze skupiny zahrnující H, D, C1-C3 alkyl a benzyl,
Riga R20 jsou nezávisle na sobě zvoleny ze skupiny, zahrnující H, D, C1-C3 alkyl, benzyl a 3,4-dimethoxybenzyl, a
R21 a R22 jsou nezávisle na sobě zvoleny ze skupiny, zahrnující H, D a (benzyloxy)karbonyl.
Tak, jak jsou zde popsány a pokud není uvedeno jinak, mají jednotlivé substituenty následující významy:
alkyl je rovný nebo rozvětvený uhlovodíkový řetězec, obsahující počet uhlíku, uvedený v místě použití tohoto termínu a konkrétně zahrnuje methyl, ethyl, propyl, isopropyl, butyl, isobutyl, s-butyl. /-butyl, pentyl, isopentyl, neopentyl, hexyl, isohexyl, cyklohexyl, cyklohexylmethyl, 3-methylpentyl, 2,2-dimethylbutyl, 2,3-dimethylbutyl a podobně;
cykloalkyl je cyklický uhlovodíkový řetězec, obsahující počet uhlíků, uvedený v místě použití tohoto termínu a konkrétně zahrnuje cyklopropyl, cyklopentyl, cyklohexyl, a podobně;
heterocykloalkyl je cyklický uhlovodíkový řetězec, obsahující počet uhlíku, uvedený v místě použití tohoto termínu a obsahující alespoň jeden atom dusíku nebo kyslíku a konkrétně zahrnuje pyrrolidin, piperidin, tetrahydrofuran, tetrahydropyran, piperazin, morfolin, aryl j e uhlovodíková skupina obsahuj icí j edno nebo více aromatických j ader, obsahuj icí počet uhlíků, uvedený v místě použití tohoto termínu a může být nesubstituovaný, nebo substituovaný jedním či více substituenty, vybranými ze skupiny, zahrnující D, -OH, alkoxy, NH2, -NO2, -CN, -C(=O)-O-alkyl, halogen, alkylheteroaryl je alkylová skupina nesoucí alespoň jedno aromatické jádro obsahující počet uhlíků, uvedený v místě použití tohoto termínu, a alespoň jeden heteroatom ze skupiny zahrnující kyslík, dusík a síru, přičemž heteroaryl je vybrán ze skupiny pyrrol, furan, thiofen, imidazol, thiazol, oxazol, indol a pyridin, a může být nesubstituovaný, nebo substituovaný jedním či více substituenty, vybranými ze skupiny, zahrnující -OH, -O(aryl), -O(arylalkyl), C(O)-, -CN, halogen;
alkylaryl označuje alkylovou skupinou, která je substituována jednou nebo více arylovými skupinami, nesubstituovanými nebo substituovanými jedním nebo více ze substituentů, vybraných ze skupiny, zahrnující D, -OH, alkyl, alkoxy, -O(aryl), - O(arylalkyl). -C(=O)-, C(=O)-O-alkyl, -CN, halogen;
alkoxy znamená nasycený, přímý nebo rozvětvený, Ci až C10 uhlovodíkový řetězec přímo navázaný přes atom kyslíku a konkrétně zahrnuje skupinu methoxy, ethoxy, propoxy, isopropoxy, butoxy, isobuoxy, /-butoxy, pentyloxy, isopentyloxy, neopentyloxy, hexyloxy, isohexyloxy a podobně.
Předmětem vynálezu jsou dále sloučeniny podle obecného vzorce I, zvolené ze skupiny, zahrnující:
(S)-JV-(2-(2-(2-(Benzylamino)-2-oxoacetyl)pyrrolidin-l-yl)-2-oxoethyl)chinolin-4-karboxamid, (S)-JV-(2-(2-(2-((3,4-Dimethoxybenzyl)amino)-2-oxoacetyl)pyrrohdin-l-yl)-2-oxoethyl)-chinolin4-karboxamid, (S)-JV-(2-(2-(2-((4-Fluorbenzyl)amino)-2-oxoacetyl)pyrrolidin-l-yl)-2-oxoethyl)chinolin-4karboxamid, (S)-JV-(2-Oxo-2-(2-(2-oxo-2-(fenethylamino)acetyl)pyrrolidin-l-yl)ethyl)chinolin-4-karboxamid,
-5 CZ 309380 B6 (5)-JV-(2-(2-(2-((3,4-Dimethoxyfenethyl)amino)-2-oxoacetyl)pynOlidin-l-yl)-2-oxoethyl)chinolin4-karboxamid, (5)-JV-(2-(2-(2-((4-Methoxyfenyl)amino)-2-oxoacetyl)pyrrolidin-l-yl)-2-oxoethyl)chinolin-4karboxamid,
Methyl(5)-4-(2-oxo-2-(l-((chinolin-4-karbonyl)glycyl)pyrrolidin-2-yl)acetamido)benzoát, (5)-JV-(2-(2-(2-(Cyklopropylamino)-2-oxoacetyl)pyrrolidin-l-yl)-2-oxoethyl)chinolin-4karboxamid, (5)-JV-(2-(2-(2-(Isopropylamino)-2-oxoacetyl)pyrrolidin-l-yl)-2-oxoethyl)chinolin-4-karboxamid, (5)-JV-(2-Oxo-2-(2-(2-oxo-2-(pentylamino)acetyl)pyrrolidin-l-yl)ethyl)chinolin-4-karboxamid,
Methyl (5)-(2-oxo-2-( 1 -((chinolin-4-karbonyl)glycyl)pyrrolidin-2-yl)acetyl)glycinát, terc-Butyl (5)-(2-oxo-2-(l-((chinolin-4-karbonyl)glycyl)pyrrolidin-2-yl)acetyl)glycinát,
Methyl (2-oxo-2-((5)-l-((chinolin-4-karbonyl)glycyl)pyrrolidin-2-yl)acetyl)alaninát, (5)-JV-(2-(2-(2-((2-(Dimethylamino)-2-oxoethyl)amino)-2-oxoacetyl)pyrrolidin-l-yl)-2oxoethyl)chinolin-4-karboxamid, (5)-JV-(2-(2-(2-((2-(Ethyl(propyl)amino)-2-oxoethyl)amino)-2-oxoacetyl)pyrrolidin-l-yl)-2oxoethyl)chinolin-4-karboxamid, (5)-JV-2-(2-(2-((2-(Isopropylamino)-2-oxoethyl)amino)-2-oxoacetyl)pyrrolidin-l-yl)-2oxoethyl)chinolin-4-karboxamid, (5)-JV-(2-(2-(2-((2-(Benzylamino)-2-oxoethyl)amino)-2-oxoacetyl)pyrrolidin-l-yl)-2oxoethyl)chinolin-4-karboxamid,
Methyl (2-oxo-2-((5)-1 -((chinolin-4-karbonyl)glycyl)pyrrolidin-2-yl)acetyl)glycyl-L-leucinát,
Methyl (2-oxo-2-((5)-1 -((chinolin-4-karbonyl)glycyl)pyrrolidin-2-yl)acetyl)glycyl-Lfenylalaninát,
Methyl (2-oxo-2-((5)-1 -((chinolin-4-karbonyl)glycyl)pyrrolidin-2-yl)acetyl)glycyl-L-glutaminát.
5-Benzyl 1-methyl (2-oxo-2-((5)-l-((chinolin-4-karbonyl)glycyl)pynOlidin-2-yl)acetyl)-glycyl-Lglutamát,
Benzyl JV6-((benzyloxy)karbonyl)-JV2-((2-oxo-2-((5)-l-((chinolin-4-karbonyl)glycyl)-pyrrolidin2-yl)acetyl)glycyl)-L-lysinát, (5)-S-(62-((4-((2-(2-(2-((3,4-dimethoxybenzyl)amino)-2-oxoacetyl)pyrrolidin-l-yl)-2oxoethyl)karbamoyl)chinolin-7-yl)oxy)-2,5,8,ll,61-pentaoxo15,18,21,24,27,30,33,36,39,42,45,48,51,54,57-pentadekaoxa-3,6,9,12,60-pentaazadohexakontyl) -ethanthioát, (5)-JV-(2-(2-(2-((3,4-dimethoxybenzyl)amid)-2-oxoacetyl)pyrrolidin-l-yl)-2-oxoethyl)-7-(2-(6hydrazinylnikotinamido)ethoxy)chinolin-4-karboxamid.
Předmětem vynálezu jsou dále sloučeniny podle obecného vzorce I pro použití jako léčiva.
-6 CZ 309380 B6
Předmětem vynálezu jsou dále sloučeniny podle obecného vzorce I pro použití pro použití jako léčiva k léčení rakoviny.
Předmětem vynálezu jsou také sloučeniny podle obecného vzorce I pro použití pro použití k léčení epiteliálních nádorů.
Předmětem vynálezu jsou také sloučeniny obecného vzorce I pro použití k cílené diagnostice nádorové tkáně, zejména epiteliálních nádorů.
Dále je předmětem vynálezu farmaceutický prostředek, který obsahuje terapeuticky účinné množství sloučeniny obecného vzorce I a případně alespoň jeden farmaceuticky přijatelný nosič, plnivo a/nebo ředidlo.
Předmětem vynálezu je rovněž farmaceutický prostředek, který obsahuje terapeuticky účinné množství sloučeniny obecného vzorce I a případně alespoň jeden farmaceuticky přijatelný nosič, plnivo a/nebo ředidlo, pro použití k léčbě rakoviny, zejména epiteliámích nádorů.
Předmětem vynálezu je také diagnostický prostředek, který obsahuje diagnosticky účinné množství sloučeniny obecného vzorce I a případně alespoň jeden diagnosticky přijatelný nosič, plnivo a/nebo ředidlo.
Předmětem vynálezu je také diagnostický prostředek, který obsahuje diagnosticky účinné množství sloučeniny obecného vzorce I a případně alespoň jeden diagnosticky přijatelný nosič, plnivo a/nebo ředidlo, pro použití k cílené diagnostice nádorové tkáně, zejména epiteliámích nádorů.
Pro ověření použitelnosti látek v in vivo aplikacích, tj. jak pro farmaceutickou inhibici enzymu FAP, tak i pro použití konjugátů látek pro diagnostické a terapeutické účely, byla pro vybrané látky měřena selektivita vůči příbuzným proteinům, dále stabilita v myší a lidské plazmě, stabilita v myších mikrosomech a cytotoxicita na lidských nádorových liniích.
IC5o (hodnota střední inhibiční koncentrace) vybraných látek byla měřena vůči enzymům dipeptidylpeptidáze IV a prolylendopeptidáze (DPPIV a PREP), pro zjištění případné interference předkládaných látek s těmito enzymy. Bylo potvrzeno, že interference s DPPIV nehrozí vzhledem k vysoké hodnotě IC5o, předkládané látky se tedy na enzym vážou výrazně hůře než na FAP. Na PREP se tyto látky sice vážou srovnatelně dobře jako na FAP, ale PREP je přítomna zejména v cytosolu, proto je interference nevýznamná - látky se in vivo s tímto enzymem nedostanou do kontaktu.
Nejlepší z předkládaných látek je více než 20x potentnější než dříve uvedená látka „B“ (tj UAMC1110), která se obecně považuje za nejlepší stav techniky. Nicméně ještě relevantnější je srovnání s látkou „A“ (bez dvou atomu fluoru), jejíž složení je nejpodobnější předkládaným sloučeninám. Nejpotentnější z nich jsou totiž vůči FAP více než o dva řády citlivější (150x).
Nejúčinnější sloučenina 3b vykazuje mimořádnou stabilitu v plazmě i v mikrosomech. Je tedy vhodná pro in vivo aplikace cílící na enzym FAP. Je důležité, že díky vysoké stabilitě v myší plazmě a mikrosomech bude možné během vývoje těchto aplikací používat myší modely. Obecně nízká cytotoxicita předkládaných látek (včetně nejpotentnější sloučeniny 3b) naměřená při dvou koncentracích (lišících se o 1 řád) ve čtyřech liniích lidských nádorových buněk je klíčová pro budoucí možné využití látek tohoto typu pro in vivo aplikace.
Zmíněné látky mohou být syntetizovány podle schémat 1 až 4 z Boc-L-prolinalu, Cbz-glycinu a příslušného isonitrilu Passeriniho reakcí. Vzniklý α-acyloxyamid je dále kysele odechráněn a bazicky transacylován za vzniku příslušného a-hydroxyamidu. Tato sloučenina může být podrobena modifikacím prostřednictvím peptidotvomých kondenzací a šetrným zaváděním a
-7 CZ 309380 B6 odstraňováním chránících skupin. Výsledný a-hydroxyamid je následně oxidován na finální aketoamid. V případě derivátů 12 a 15 musela být oxidace provedena před zavedením hydrazinonikotinové kyseliny (HYNIC) či merkaptoacetyltriglycinu (MAG3) kvůli nekompatibilitě těchto struktur s oxidačním krokem.
Syntetický přístup je znázorněn na následujících schématech:
Schéma 1
Schéma 2
Schéma 3
-8 CZ 309380 B6
Schéma 4
Reakční podmínky platné pro schémata 1 až 4:
a: 1) DCM, rt, 2) DCM, TFA, rt, 3) DCM, Et3N, rt, b: H2, Pd(OH)2/C, MeOH, rt, c: Chinolin-4karboxylová kyselina, TSTU, DIPEA, DMF, rt, d: IBX, DMSO, rt, e: 1% KOH, 90% MeOH, f: 1) TSTU, DIPEA, DMF, 2) R‘-NH-R“, DMF; X = -CH(COOMe)(CH2)4NHPříklady uskutečnění vynálezu
Seznam zkratek
Bd rozšířený dublet
Bn benzyl
Boc terc-butyloxykarbonyl
Bt rozšířený triplet
Cbz benzyloxykarbonyl
CCRF-CEM lidská nádorová buněčná linie lymfoblastoidní leukémie
Cp cyklopropyl
CT počítačová tomografie
D dublet
DCM dichlormethan
Dd dublet dubletu
Ddd dublet dubletu dubletu
DIPEA diisopropylethylamin
DMF dimethylformamid
DMSO dimethylsulfoxid
DOTA 1,4,7,10-tetraazacyklododekan-1,4,7,10-tetraoctová kyselina
DPPIV dipeptidylpeptidáza IV
Ekv. molámí ekvivalent
FAP fibroblastový aktivační protein
FDG (18F)-fluordeoxyglukosa
Gly glycin
Hela lidská nádorová buněčná linie karcinomu děložního čípku
HepG2 lidská nádorová buněčná linie jatemího karcinomu
HL-60 lidská nádorová buněčná linie myeloidní leukémie
Hm./hm. podíl hmotnostních jednotek
HPLC vysoce účinná kapalinová chromatografie
HR MS HYNIC IBX IC50 LC-MS m MG3 MeOH NMR obj./obj. PDA PET Ph PREP Pro QDA Ri s SPÉCT TFA TSTU UHPLC-MS hmotnostní spektrum s vysokým rozlišením hydrazinonikotinová kyselina jodoxybenzoová kyselina střední inhibiční koncentrace tandem kapalinové chromatografie a hmotnostní spektrometrie multiplet merkaptoacetyltriglycin methanol nukleární magnetická rezonance podíl objemových jednotek světelný detektor s diodovým polem positronová emisní tomografie fenyl prolylendopeptidáza prolin hmotnostní detektor s Daltonovým kvadrupólem retenční čas singlet jednofotonová emisní výpočetní tomografie trifluorooctová kyselina WM,A-Tetramethyl-O-(A-sukcinimidyl)uroniumtetrafluoroborát tandem ultra-vysokoúčinné kapalinové chromatografie a hmotnostní spektrometrie
UV ultrafialové záření.
Přístroje použité při syntéze sloučenin, připravených v následujících příkladech
NMR spektra byla naměřena na stroji Bruker Avance III 500 MHz spectrometer (Ή při 500 MHz a 13C při 125,7 MHz). Hmotnostní spektra s vysokým rozlišením (HR MS) byla naměřena na stroji LTQ Orbitrap XL hybrid mass spectrometer (Thermo Fisher Seientilic, Waltham, MA, USA) za využití elektrosprejové ionizace.
Látky byly během syntézy čištěny pomocí FLASH chromatografie na reverzní fázi (silica gel C18 230 až 400 mesh) na stroji Teledyne ISCO CombiFLASH Rf+ s duálním UV detektorem (210 a 254 nm) za použití gradientu 0,1% (obj./obj.) vodný roztok kyseliny trifluorooctové^acetonitril.
Čistota látek a konverze během reakcí byla sledována pomocí UHPLC-MS na stroji Waters Acquity H-elass UPLC s detektory PDA (diodové pole, 190 až 800 nm) a QDA (100 až 1250 m/z) za použití kolony Bischoff ProntoSIL HPLC column (100 x 2,0 mm, Prontopearl TPP 120-2,2-C18 SH 2,2 pm) a gradientu voda^-acetonitril s přídavkem 0,1% (obj./obj.) kyseliny mravenčí o průtoku 0,5 ml/min.
Přehled sloučenin připravených v následujících příkladech
- 10CZ 309380 B6
- 11 CZ 309380 B6
myíSčól 444W! sdiss·' 1 vij'SKv oí®4w4ss^
Ϊ O'44A ' : p' 'x.\ ír ' S η X'!
OyAM>0ú W ? DííwAíWy Ěsšišíhyt^^^^
U MAíWíšíÚS·' > - 54 ý2··· (4ý4’4.VO4^ y Sssíy^^ e«:waeMy4^^^
- 12CZ 309380 B6
- 13 CZ 309380 B6
iĚ í fi í hwfessy išgš X> isM -;
; yšhodyshýys^j j
í 4MyhýX'4-4 i' h44úxsUso4^^ í :py4'íyúús>'2'ys^^^ \ú 5' '* ' · ' S
·. í ' ϋ' 4 a x ?
íýwWh^
Wšíš®^ ξ ^Ošs<;thyU^ i sswstteipsaí^^^ í íwxrtsitOi -x-Šl·2 ; tsiWíbYW^wiúl·ii 0ýW-O 4242 ^2' $ 'h ho '> \s ϊ ! i> ’ ' í sxwhWlWosM ϊ <ssíiWhí¥ý?íOXřshid>Sí h ' Vb-s··' í , x «xhxKš i ' - 4 X i' S 5s?
- 14CZ 309380 B6
e .OO'J! 2 , x x c.® hp,n> A® 'ií
Λι®·5®\ Β!?ι·::®::ίϊ·4 Lii
Memys f i(ahĚní4i®--4·y:týíí?í4¥sM y:í:y l· 1-'3^
- 15 CZ 309380 B6
- 16CZ 309380 B6
Obecný postup 1: sekvence Passeriniho reakce, kyselého odchránění a bazické transacylace
Boc-L-prolinal (1 ekv.), N-Cbz-glycin (1 ekv.) a příslušný isonitril (1 ekv.) byly rozpuštěny v bezvodém DCM a vzniklá směs byla míchána 4 hodiny za teploty místnosti. Při plné konverzi (LCMS) byla přidána kyselina trifluorooctová a směs byla míchána další hodinu. Směs byla zahuštěna
- 17CZ 309380 B6 za sníženého vakua a poté znovu rozpuštěna v DCM. Za stálého míchání a chlazení na 0 °C byl ke směsi přikapán triethylamin. Směs byla dále míchána za teploty místnosti do plné konverze (LCMS, nejvíce 3 hodiny). Kapalné části směsi byly odpařeny za sníženého tlaku a odparek byl znovu rozpuštěn v DCM. Polární části směsi byly extrahovány do vody (3x) a organická fáze byla sušena solankou a síranem sodným. Po odpaření rozpouštědla byl získán a-hydroxyamid 4, který byl bez čištění použit do další reakce. Výtěžky reakcí jsou počítány vzhledem k množství použitého BocL-prolinalu. Obecným postupem 1 byla vždy získána směs diastereomerů, jejichž retenční časy jsou uvedeny jako Rt,i a Rt,2
Obecný postup 2: debenzylace
Látka chráněná skupinou Cbz nebo Bn byla rozpuštěna v methanolu a ke směsi byl přidán hydroxid paladnatý na uhlí. Směs byla vybavena vodíkovou atmosférou a míchána 3 hodiny. Katalyzátor byl ze směsi oddělen filtrací a kapalná část byla zahuštěna za sníženého tlaku. Zbytky rozpouštědla a vody byly ze směsi odstraněny pomocí vysokého vakua. Takto získaná látka byla použita bez dalšího čištění do následující reakce.
Obecný postup 3: peptidotvomá kondenzace za použití TSTU
Karboxylová kyselina (1 ekv.). TSTU (1 ekv.) a DIPEA byly rozpuštěny v bezvodém DMF. Po hodině míchání za teploty místnosti byl ke směsi přidá roztok aminu (1,1 ekv.) v bezvodém DMF a vzniklá směs byla míchána přes noc. Ze surové směsi byl produkt izolován pomocí FLASH chromatografie na reverzní fázi. Lyofilizací frakcí obsahujících žádaný produkt byla získána jeho trifluoroacetátová sůl. Výtěžky reakcí jsou počítány vzhledem k množství použitého prekurzoru 4. Obecným postupem 3 byla vždy získána směs diastereomerů, jejichž retenční časyjsou reportovány jako Rt,i a Rt,2.
Obecný postup 4: oxidace
Směs α-hydroxyamidu (1 ekv.) a IBX (1,5 ekv.) v DMSO byla míchána přes noc. Při plné konverzi (podle LC-MS) byl ze surové směsi izolován produkt pomocí FLASH chromatografie na reverzní fázi. Lyofilizací frakcí obsahujících žádaný produkt byla získána jeho trifluoroacetátová sůl. Výtěžky reakcí jsou počítány vzhledem k množství použitého a- hydroxyamidu 5. Podle NMR a LC-MS analýz jsou produkty Obecného postupu 4 přítomny jako směs rotamerů. Ve výpisech NMR je vždy uvedena pouze sada signálu patřící dominantnímu rotamerů. Retenční časy obou rotamerů jsou uvedeny jako Rt,i a Rt 2
Příprava prekurzoru 7
Methylester 2k (500 mg, 926 pmol) byl rozpuštěn v 9 ml methanolu a 1 ml 10% (hmotn./hmotn.) vodného KOH. Po 5 hodinách míchání za teploty místnosti byla směs neutralizována přikapáním 10% (hmotn./hmotn.) HC1 do pH mezi 7 a 8 a koncentrována za sníženého tlaku. Produkt byl ze směsi izolován přímo pomocí FLASH chromatografie. Lyofilizací frakcí obsahujících žádaný produkt (LC-MS) byla získán trifluoroacetát produktu jako bílá pevná látka (350 mg, 72%; LC-MS R,i 2,64 min, Rt,2 2,71 min, m/z 415,30 [M + H]+).
Příklad 1 (S)-A-(2-(2-(2-(Benzylamino)-2-oxoacetyl)pyrrolidin-l-yl)-2-oxoethyl)chinolin-4-karboxamid
Obecným postupem 1 byl získán prekurzor la (1163 mg, 79% výtěžek; LC-MS Rt.i 3,98 min, Rt,2 4,03 min, m/z 426,36 [M+H+). Prekurzor la byl následně debenzylován Obecným postupem 2 a vzniklý amin byl kondenzován s chinolin-4-karboxylovou kyselinou Obecným postupem 3 za vzniku prekurzoru 2a (825 mg, 71% výtěžek; LC-MS Rt,i 3,36 min, Rt2 3,45 min, m/z 447,26 [M+H]+). Prekurzor 2a byl Obecným postupem 4 oxidován na finální a-ketoamid 3a (107 mg, 47%
- 18CZ 309380 B6 výtěžek).
Ή NMR (500 MHz, DMSO-d6): 9,31 (bt, 1H, Jnh,ch2 = 6,4 Hz, COCONH); 9,04 (m, 1H, NH-2'); 9,04 (d, 1H, J2,3 = 4,5 Hz, H-2); 8,35 (bdd, 1H, J5,6 = 8,5 Hz, J5,7 = 1,5 Hz, H-5); 8,11 (bd, 1H, J87 = 8,5 Hz, H-8); 7,87 (ddd, 1H, J78 = 8,5 Hz, J87 = 6,9 Hz, J75 = 1,5 Hz, H-7); 7,70 (ddd, 1H, J6,5 8,5 Hz, J6:7= 6,9 Hz, J6,8 = 1,3 Hz, H-6); 7,63 (d, 1H, J3,2 = 4,5 Hz, H-3); 7,35 - 7,18 (m, 5H, Ho,m,p-Bn); 5,23 (dd, 1H, JI72„ = 9,1 and 4,7 Hz, H-l); 4,36 a 4,32 (2xdd, 2xlH, Jgem = 14,8 Hz, Jch2,nh = 6,4 Hz, CH2-Bn); 4,28 a 4,17 (2xdd, 2xlH, Jgem = 16,8 Hz, J2>NH = 6,0 Hz, H-2'); 3,743,62 (m, 2H, H-4); 2,25 (m, 1H, H-2b); 2,03 (m, 1H, H-3b); 1,97 -1,80 (m, 2H, H-3a, 2a);
13C NMR (125,7 MHz, DMSO-d6): 195,57 (COCONH); 166,92 (CO-1'); 166,56 (CO-3'); 160,60 (COCONH); 149,80 (CH-2); 146,60 (C-8a); 143,79 (C-4); 138,75 (C-z-Bn); 130,85 (CH-7); 128,56 (CH-m-Bn); 128,32 (CH-8); 127,97 (CH-6); 127,57 (CH-o-Bn); 127,20 (CH-p-Bn); 126,24 (CH5); 124,58 (C-4a); 119,41 (CH-3); 60,47 (CH-1); 46,12 (CH2-4); 42,31 (CH2-Bn); 41,56 (CH22'); 27,94 (CH2-2); 24,81 (CH2-3);
LC-MS Rt,i 3,49 min, R,2 3,60 min, m/z 445,27 [M+H]+;
HR MS pro C25H25N4O4 [M+H]+ vypočteno 445,18703; nalezeno 445,18668.
Příklad 2 (S)-/V-(2-(2-(2-((3,4-Dimethoxybenzyl)amino)-2-oxoacetyl)pyrrolidin-l-yl)-2-oxoethyl)chinolin4-karboxamid
Obecným postupem 1 byl získán prekurzor 4d (1176 mg, 88% výtěžek; LC-MS Rt,i 3,79 min, Rt2 3,85 min. m/z 486,16 [M+H]+). Prekurzor 4d byl následně debenzylován Obecným postupem 2 a vzniklý amin byl kondenzován s chinolin-4-karboxylovou kyselinou Obecným postupem 3 za vzniku prekurzoru 2b (130 mg, 92% výtěžek; LC-MS Rt,i 3,00 min, R,2 3,07 min. m/z 507,25 [M+H]+). Prekurzor 2b byl Obecným postupem 4 oxidován na finální a-ketoamid 3b (20 mg, 53% výtěžek).
Ή NMR (500 MHz, DMSO-d6): 9,22 (bt, 1H, Jnh,ch2 = 6,3 Hz, COCONH); 9,03 (m, 2H, NH-2’, H-2); 8,32 (dd, 1H, J5,6 = 8,4 Hz, .hj = 1,4 Hz, H-5); 8,09 (bd, 1H, J87 = 8,5 Hz, H-8); 7,83 (ddd, 1H, J78 = 8,5 Hz, J87 = 6,9 Hz, J75 = 1,4 Hz, H-7); 7,66 (ddd, 1H, J6,5 = 8,5 Hz, J6,7 = 6,9 Hz, J6,8 = 1,2 Hz, H-6); 7,57 (d, 1H, J3,2 = 4,5 Hz, H-3); 6,91 (d, 1H, J2,6 = 2,0 Hz, H-2-Ph); 6,86 (d, 1H, J5,6 = 8,3 Hz, H-5-Ph); 6,79 (dd, 1H, J6,5 = 8,2 Hz, J6,2 = 2,0 Hz, H-6-Ph); 5,23 (dd, 1H, JI72„ = 9,2 a 4,7 Hz, H-l”); 4,33 - 4,21 (m, 3H, CH2-Ph, H-2'b); 4,15 (dd, 1H, Jgem = 16,7 Hz, J2^,NH = 5,9 Hz, H-2'a); 3,70 (s, 3H, CH3O-3-Ph); 3,69 (s, 3H, CH3O-4-Ph); 3,70 - 3,62 (m, 2H, H-4); 2,24 (m, 1H, H-2b); 2,01 (m, 1H, H-3b); 1,90 (m, 1H, H-3a); 1,84 (m, 1H, H-2a);
13C NMR (125,7 MHz, DMSO-d6): 195,66 (COCONH); 167,08 (CO-1'); 166,56 (CO-3'); 160,48 (COCONH); 150,15 (CH-2); 148,75 (C-3-Ph); 148,05 (C-4-Ph); 147,42 (C-8a); 142,98 (C-4); 131,10 (C-l-Ph); 130,40 (CH-7); 128,89 (CH-8); 127,69 (CH-6); 126,14 (CH-5); 124,49 (C-4a); 119,75 (CH-6-Ph); 119,33 (CH-3); 111,84 (CH-5-Ph); 111,69 (CH-2-Ph); 60,40 (CH-1); 55,70 a 55,58 (CH3O); 46,12 (CH2-4); 42,08 (CH2-Ph); 41,54 (CH2-2'); 27,95 (CH2-2''); 24,81 (CH2-3);
LC-MS Rt,i 3,32 min, R,2 3,44 min, m/z 505,22 [M+H]+;
HR MS pro C27H2gN4O6 [M+H]+ vypočteno 505,20816; nalezeno 505,20740.
Příklad 3 (S)-/V-(2-(2-(2-((4-Fluorobenzyl)amino)-2-oxoacetyl)pynOlidin-l-yl)-2-oxoethyl)chinolin-4- 19CZ 309380 B6 karboxamid
Obecným postupem 1 byl získán prekurzor 1c (113 mg, 51% výtěžek; LC-MS Rt,i 4,08 min. Rt2 4,14 min, m/z 444,06 [M+H]+), Prekurzor 1c byl následně debenzylován Obecným postupem 2 a vzniklý amin byl kondenzován s chinolin-4-karboxylovou kyselinou Obecným postupem 3 za vzniku prekurzoru 2c (70 mg. 74% výtěžek; LC-MS Ri 3,52 min, Rt2 3,61 min, m/z 465,01 [M+H]+). Prekurzor 2c byl Obecným postupem 4 oxidován na finální a-ketoamid 3c (37 mg, 65% výtěžek).
‘HNMR (500 MHz, DMSO-d6): 9,32 (bt, 1H, Jnh,ch2 = 6,4 Hz, COCONH); 9,05 (t, 1H, JNH,2'= 6,0 Hz, NH-2'); 9,04 (dd, 1H, J2,3 = 4,5 Hz, H-2); 8,34 (dd, 1H, J5,6 = 8,5 Hz, J5,7 = 1,4 Hz, H-5); 8,11 (dm, 1H, J8,7 = 8,5 Hz, H-8); 7,87 (ddd, 1H, J78 = 8,5 Hz, J8,7 = 6,9 Hz, J75 = 1,5 Hz, H-7); 7,70 (ddd, 1H, J6:5 = 8,5 Hz, J6,7 = 6,9 Hz, J6,8= 1,3 Hz, H-6); 7,62 (d, 1H, J3,2 = 4,5 Hz, H-3); 7,31 (m, 2H, H-o-Ph); 7,13 (m, 2H, H-w-Ph); 5,22 (dd, 1H, JI72„= 9,2 and 4,7 Hz, H-l); 4,32 (bd, 2H, Jch2nh = 6,5 Hz, CH2-Ph); 4,27 and 4,17 (2xdd, 2xlH,, Jgem = 16,9 Hz, J2,NH = 6,0 Hz, H-2'); 3,71 - 3,62 (m, 2H, H-4); 2,24 (m, 1H, H-2b); 2,01 (m, 1H, H-3b); 1,89 (m, 1H, H-3a); 1,86 (m, 1H, H-2a);
13 C NMR (125,7 MHz, DMSO-d6); 195,56 (COCONH); 166,98 (CO-L); 166.61 (CO-3'); 161,50 (d, Jc,f =242,6 Hz, C-p-Ph); 160,54 (COCONH); 149,87 (CH-2); 146,71 (C-8a); 143,72 (C-4); 134,99 (d, Jc,f = 3,0 Hz, C-z-Ph); 130,84 (CH-7); 129,69 (d, Jc,f = 8,2 Hz, CH-o-Ph); 128,33 (CH8); 127,98 (CH-6); 126,25 (CH-5); 124,60 (C-4a); 119,43 (CH-3); 115,34 (d, Jc,f = 21,3 Hz, CHm-Ph); 60,51 (CH-1); 46,16 (CH2-4); 41,66 (CH2-Ph); 41,59 (CH2-2'); 27,97 (CH2-2); 24,85 (CH2-3);
LC-MS Rtji 3,65 min, R,2 3,78 min, m/z 462,99 [M+H]+;
HR MS pro C25H24FN4O4 [M+H]+ vypočteno 463,17761; nalezeno 463,17741.
Příklad 4 (S)-/V-(2-Oxo-2-(2-(2-oxo-2-(fenethylamino)acetyl)pyrrolidin-l-yl)ethyl)chinohn-4-karboxamid
Obecným postupem 1 byl získán prekurzor Id (380 mg, 85% výtěžek; LC-MS Rt,i 4,08 min, Rt>2 4,14 min, m/z 440,32 [M+H]+). Prekurzor Id byl následně debenzylován Obecným postupem 2 a vzniklý amin byl kondenzován s chinolin-4-karboxylovou kyselinou Obecným postupem 3 za vzniku prekurzoru 2d (286 mg, 68% výtěžek; LC-MS Rt,i 3,49 min, Rt,2 3,59 min, m/z 461,30 [M+H]+). Prekurzor 2d byl Obecným postupem 4 oxidován na finální a-ketoamid 3d (74 mg, 67% výtěžek).
Ή NMR (500 MHz, DMSO-d6): 9,02 (t, 1H, JNH,2’ = 6,0 Hz, NH-2’); 9,01 (dd, 1H, J2,3 = 4,4 Hz, H-2); 8,83 (t, 1H, Jnh,ch2 = 6,0 Hz, COCONH); 8,34 (dm, 1H, J5,6 = 8,5 Hz, H-5); 8,09 (dm, 1H, J8,7 = 8,5 Hz, H-8); 7,84 (ddd, 1H, J78 = 8,5 Hz, J87 = 6,9 Hz, J75 = 1,5 Hz, H-7); 7,68 (ddd, 1H, J6,5 = 8,5 Hz, J6,7 = 6,9 Hz, J6,8 = 1,3 Hz, H-6); 7,58 (d, 1H, J3,2 = 4,4 Hz, H-3); 7,28 (m, 2H, H-mPh); 7,23 - 7,16 (m, 3H, H-o,p-Ph); 5,20 (dd, 1H, Ji„2„ = 9,1 a 4,6 Hz, H-l); 4,26 a 4,16 (2xdd, 2xlH, Jgem = 16,8 Hz, J2’NH = 6,0 Hz, H-2'); 3,70 - 3,62 (m, 2H, H-4); 3,42 (m, 2H, CH2CH2-Ph); 2,78 (t, 2H, JCH2cH2 = 7,7 Hz, CH2CH2-Ph); 2,21 (m, 1H, H-2b); 2,00 (m, 1H, H-3b); 1,87 (m, 1H, H-3a); 1,77 (m, 1H, H-2a);
13C NMR (125,7 MHz, DMSO-d6): 195,54 (COCONH); 167,10 (CO-L); 166,58 (CO-3'); 160,39 (COCONH); 150,12 (CH-2); 147,29 (C-8a); 143,21 (C-4); 139,27 (C-z-Ph); 130,53 (CH-7); 128,88 (CH-o-Ph); 128,78 (CH-8); 128,61 (C H-m-Ph): 127,76 (CH-6); 126,44 (CH-p-Ph); 126,19 (CH-5); 124,53 (C-4a); 119,35 (CH-3); 60,51 (CH-1); 46,11 (CH2-4); 41,58 (CH2-2'); 40,44 (CH2CH2Ph); 34,83 (CH2CH2-Ph); 27,83 (CH2-2); 24,72 (CH2-3);
-20CZ 309380 B6
LC-MS Rtji 3,63 min, Rt2 3,73 min, m/z 459,25 [M+H]+;
HR MS pro C26H25N4O4 [M+H]+ vypočteno 459,20268; nalezeno 459,20258.
Příklad 5 (S)-/V-(2-(2-(2-((3,4-Dimethoxyfenethyl)amino)-2-oxoacetyl)pynOlidin-l-yl)-2oxoethyl)chinolin-4-karboxamid
Obecným postupem 1 byl získán prekurzor le (LC-MS Rti 3,85 min, Rtj2 3,91 min, m/z 500,28 [M+H]+). Prekurzor le byl následně debenzylován Obecným postupem 2 a vzniklý amin byl kondenzován s chinolin-4-karboxylovou kyselinou Obecným postupem 3 za vzniku prekurzoru 2e (260 mg, 59% výtěžek; LC-MS Rti 3,28 min, Rtj2 3,38 min, m/z 521,27 [M+H]+). Prekurzor 2e byl Obecným postupem 4 oxidován na finální a-ketoamid 3e (88 mg, 88% výtěžek).
Ή NMR (500 MHz, DMSO-d6): 9,04 (d, 1H, J2,3 = 4,5 Hz, H-2); 9,04 (m, lH,NH-2'); 8,78 (bt, 1H, Jnh,ch2 = 6,0 Hz, COCONH); 8,36 (bdd, 1H, Js,6 = 8,5 Hz, .hj = 1,5 Hz, H-5); 8,11 (bd, 1H, J8,7 = 8,4 Hz, H-8); 7,87 (ddd, 1H, J78 = 8,5 Hz, J87 = 6,9 Hz, J75 = 1,5 Hz, H-7); 7,71 (ddd, 1H, J6,5 = 8,5 Hz, J6:7 = 6,9 Hz, J6,8 = 1,3 Hz, H-6); 7,62 (d, 1H, J3,2 = 4,5 Hz, H-3); 6,84 (d, 1H, J5,6 = 8,2 Hz, H-5-Ph); 6,78 (d, 1H, J2,6 = 2,0 Hz, H-2-Ph); 6,70 (dd, 1H, J6,5 = 8,2 Hz, J6,2 = 2,0 Hz, H-6-Ph); 5,21 (dd, 1H, JI72„ = 9,3 a4,7 Hz, H-l); 4,25 a4,17 (2xdd, 2xlH, Jgem = 16,8 Hz, J2'NH = 6,1 Hz, H-2'); 3,71 (s, 3H, CH3O-3-Ph); 3,69 (s, 3H, CH3O-4-Ph); 3,70 - 3,60 (m, 2H, H-4); 3,35 (m, 2H, CH2CH2-Ph); 2,72 (t, 2H, Janan = 7,4 Hz, CH2CH2-Ph); 2,21 (m, 1H, H-2b); 2,00 (m, 1H, H3b); 1,85 (m, 1H, H-3a); 1,77 (m, 1H, H-2a);
13C NMR (125,7 MHz, DMSO-d6): 195,57 (COCONH); 166,92 (CO-L); 166,54 (CO-3'); 160,37 (COCONH); 149,80 (CH-2); 148,78 (C-3-Ph); 147,45 (C-4-Ph); 146,60 (C-8a); 143,82 (C-4); 131,67 (C-l-Ph); 130,86 (CH-7); 128,22 (CH-8); 127,97 (CH-6); 126,26 (CH-5); 124,59 (C-4a); 120,65 (CH-6-Ph); 119,40 (CH-3); 112,60 (CH-2-Ph); 112,03 (CH-5-Ph); 60,52 (CH-1); 55,68 (CH3O-4-Ph); 55,54 (CH3O-3-Ph); 46,10 (CH2-4); 41,58 (CH2-2'); 40,57 (CH2CH2-Ph); 34,33 (CH2CH2-Ph); 27,82 (CH2-2); 24,70 (CH2-3);
LC-MS Rt,i 3,41 min, Rt 2 3,52 min, m/z 519,23 [M+H]+;
HR MS pro C2sH3iN4O6 [M+H]+vypočteno 519,22381; nalezeno 519,22360.
Příklad 6 (S)-/V-(2-(2-(2-((4-Methoxyfenyl)amino)-2-oxoacetyl)pyrrolidin-l-yl)-2-oxoethyl)chinolin-4karboxamid
Obecným postupem 1 byl získán prekurzor If (325 mg, 79% výtěžek; LC-MS Rti 3,97 min, Rt>2 4,04 min, m/z 464,26 [M+Na]+). Prekurzor If byl následně debenzylován Obecným postupem 2 a vzniklý amin byl kondenzován s chinolin-4-karboxylovou kyselinou Obecným postupem 3 za vzniku prekurzoru 2f (171 mg, 40% výtěžek; LC-MS Rt,i 3,32 min, Rt>2 3,45 min, m/z 463,25 [M+H]+). Prekurzor 2f byl Obecným postupem 4 oxidován na finální α-ketoamid 3f (77 mg, 63% výtěžek).
ΉNMR (500 MHz, DMSO-d6): 10,56 (s, 1H, NH-Ph); 9,04 (bt, 1H, J7Nh,2’= 6,0 Hz, NH-2'); 9,01 (d, 1H, J23 = 4,4 Hz, H-2); 8,33 (bdd, 1H, J5,6 = 8,5 Hz, .hj = 1,5 Hz, H-5); 8,09 (dm, 1H, J87 = 8,5 Hz, H-8); 7,83 (ddd, 1H, J78 = 8,5 Hz, J8,7 = 6,9 Hz, J75 = 1,5 Hz, H-7); 7,74 (m, 2H, H-o-Ph); 7,68 (ddd, 1H, J6,5 = 8,5 Hz, J6,7 = 6,9 Hz, J6,8 = 1,3 Hz, H-6); 7,58 (d, 1H, J3,2 = 4,4 Hz, H-3); 6,93 (m, 2H, H-m-Ph); 5,30 (dd, 1H, Λ ;2^ = 9,0 a 4,6 Hz, H-l”); 4,27 a 4,20 (2xdd, 2xlH, Jgem = 16,9
-21 CZ 309380 B6
Hz, J2’NH = 6,0 Hz, H-2'); 3,73 (s, 3H, CH3O-3-Ph); 3,76 - 3,65 (m, 2H, H-4); 2,29 (m, 1H, H2b); 2,04 (m, 1H, H-3b); 2,00 - 1,89 (m, 2H, H-3a, H-2a);
13C NMR (125,7 MHz, DMSO-d6): 195,68 (COCONH); 167,07 (CO-1'); 166,68 (CO-3'); 158,54 (COCONH); 156,35 (C-p-Ph); 150,06(CH-2); 147,16 (C-8a); 143,28 (C-4); 130,75 (C-z-Ph); 130,57 (CH-7); 128,68 (CH-8); 127,79 (CH-6); 126,18 (CH-5); 124,52 (C-4a); 122,19 (CH-o-Ph); 119,36 (CH-3); 114,11 (C H-m-Ph): 60,38 (CH-1''); 55,42 (CH3O-Ph); 46,19 (CH2-4); 41,56 (CH22'): 28,12 (CH2-2); 24,94 (CH2-3);
LC-MS Rt,i 3.48 min, Rt 2 3,62 min, m/z 461,24 [M+H]+;
HR MS pro CmH^N^Os [M+H]+vypočteno 461,18195; nalezeno 461,18205.
Příklad 7
Methyl (5)-4-(2-oxo-2-( 1 -((chinolin-4-karbonyl)glycyl)pyrrolidin-2-yl)acetamido)benzoát
Obecným postupem 1 byl získán prekurzor Ig (LC-MS Rt,i 4,03 min, Rtj2 4,1 1 min, m/z 492,20 [M+Na]+). Prekurzor Ig byl následně debenzylován Obecným postupem 2 a vzniklý amin byl kondenzován s chinolin-4-karboxylovou kyselinou Obecným postupem 3 za vzniku prekurzoru 2g (137 mg, 32% výtěžek; LC-MS Ri 3,42 min. Rj2 3,57 min, m/z 491,21 [M+H]+). Prekurzor 2g byl Obecným postupem 4 oxidován na finální a-ketoamid 3g (76 mg, 72% výtěžek).
Ή NMR (500 MHz, DMSO-d6): 10,98 (s, 1H, COCONH); 9,04 (t, 1H, Jnh,ch2 = 6,0 Hz, NH-2'); 9,00 (d, 1H, J2,3 = 4,4 Hz, H-2); 8,30 (dm, 1H, J5,6 = 8,5 Hz, H-5); 8,08 (dm, 1H, J8,7 = 8,5 Hz, H8); 8,00 - 7,93 (m, 4H, H-o,m-Ph); 7,82 (ddd, 1H, J78 = 8,5 Hz, J87 = 6,9 Hz, J75 = 1,4 Hz, H-7); 7,65 (ddd, 1H, J6,5 = 8,5 Hz, J6,7 = 6,9 Hz, J6,8 = 1,3 Hz, H-6); 7,57 (d, 1H, J3,2 = 4,4 Hz, H-3); 5,26 (dd, 1H, J172„ = 8,9 a 4,7 Hz, H-l); 4,27 (dd, 1H, Jgem = 16,9 Hz, J2i,NH = 5,9 Hz, H-2'b); 4,20 (dd, 1H, Jgem = 16,7 Hz, J2b,NH = 6,1 Hz, H-2'a); 3,83 (s, 3H, CH3OOO); 3,78 - 3,67 (m, 2H, H4); 2,29 (m, 1H, H-2b); 2,09 - 1,94 (m, 3H, H-3, H-2a);
13C NMR (125,7 MHz, DMSO-d6): 195,08 (COCONH); 167,09 (CO-L); 166,81 (CO-3'); 165,98 (CH3COO); 159,46 (COCONH); 150,08 (CH-2); 147,23 (C-8a); 143,14 (C-4); 142,16 (C-z-Ph); 130,51 (CH-7); 130,41 (C H-m-Ph): 128,74 (CH-8); 127,74 (CH-6); 126,15 (CH-5); 125,49 (C-pPh); 124,50 (C-4a); 120,32 (CH-o-Ph); 119,35 (CH-3); 60,36 (CH-1); 52,28 (CH3COO); 46,21 (CH2-4); 41,53 (CH2-2'); 28,16 (CH2-2); 25,07 (CH2-3);
LC-MS Rt,i 3,60 min, Rt 2 3,70 min, m/z 489,18 [M+H]+;
HR MS pro C26H2sN4O6 [M+H]+ vypočteno 489,17686; nalezeno 489,17664.
Příklad 8 (S)-/V-(2-(2-(2-(Cyklopropylamino)-2-oxoacetyl)pyrrolidin-l-yl)-2-oxoethyl)chinolin-4karboxamid
Obecným postupem 1 byl získán prekurzor Ih (1608 mg, 75% výtěžek; LC-MS Rt,i 3,51 min, Rj2 3,58 min, m/z 376,34 [M+H]+). Prekurzor Ih byl následně debenzylován Obecným postupem 2 a vzniklý amin byl kondenzován s chinolin-4-karboxylovou kyselinou Obecným postupem 3 za vzniku prekurzoru 2h (176 mg. 78% výtěžek; LC-MS Ri 2,85 min, Rj2 2,94 min, m/z 397,36 [M+H]+). Prekurzor 2h byl Obecným postupem 4 oxidován na finální a-ketoamid 3h (67 mg, 77% výtěžek).
Ή NMR (500 MHz, CDC13): 8,91 (d, IH, J2,3 = 4,3 Hz, H-2); 8,36 (bd, IH, J5,6 = 8,5 Hz, H-5);
-22CZ 309380 B6
8,12 (dm, 1H, J8,7 = 8,5 Hz, H-8); 7,74 (ddd, 1H, J7,8 = 8,5 Hz, J87 = 6,9 Hz, J75 = 1,4 Hz, H-7); 7,60 (ddd, 1H, J6,5 = 8,5 Hz, J6,7 = 6,9 Hz, J6,8 = 1,3 Hz, H-6); 7,48 (d, 1H, J3,2 = 4,3 Hz, H-3); 7,14 (bt, 1H, JNH,2 = 4,3 Hz, NH-2'); 7,00 (bd, 1H, Jnh,ch = 3,9 Hz, NH-cp); 5,33 (dd, 1H, J,„2„ = 9,0 a 5,5 Hz, H-l); 4,39 (dd, 1H, Jgem = 17,7 Hz, J2KNH = 4,6 Hz, H-2'b); 4,29 (dd, 1H, Jgem = 17,7 Hz, J2'O,nh = 4,0 Hz, H-2'a); 3,72 - 3,57 (m, 2H, H-4); 2,76 (m, 1H, H-cp); 2,39 (m, 1H, H-2b); 2,16 - 1,94 (m, 3H, H-2a, H-3); 0,86 - 0,76 a 0,64 - 0,51 (2xm, 2x2H, CH2-cp);
13C NMR (125,7 MHz, CDC13): 194,42 (CO-1; 167,15 (CO-1'); 166,11 (CO-3'); 160,47 (CONHcp); 149,73 (CH-2); 148,58 (C-8a); 141,07 (C-4); 129,99 (CH-7); 129,77 (CH-8); 127,73 (CH-6); 125,26 (CH-5); 124,36 (C-4a); 118,78 (CH-3); 60,85 (CH-1); 46,35 (CH2- 4); 42,30 (CH22');28,33 (CH2-2); 24,93 (CH2-3); 22,38 (CH-cp); 6,37 and 6,34 (CH2-cp);
LC-MS Rt,i 2,91 min, Rt 2 3,04 min, m/z 395,34 [M+H]+;
HR MS pro C2iH23N4O4 [M + H]+vypočteno 395,17138; nalezeno 395,17106.
Příklad 9 (S)-/V-(2-(2-(2-(Isopropylamino)-2-oxoacetyl)pyrrolidin-l-yl)-2-oxoethyl)chinolin-4-karboxamid
Obecným postupem 1 byl získán prekurzor li (225 mg, 60% výtěžek; LC-MS Rt. i 3,66 min, Rj2 3,73 min, m/z 378,38 [M+H]+). Prekurzor li byl následně debenzylován Obecným postupem 2 a vzniklý amin byl kondenzován s chinolin-4-karboxylovou kyselinou Obecným postupem 3 za vzniku prekurzoru 2i (80 mg, 48% výtěžek; LC-MS Rt,i 3,00 min, Rj2 3,10 min, m/z 399,36 [M+H]+). Prekurzor 2i byl Obecným postupem 4 oxidován na finální a-ketoamid 3i (27 mg, 39% výtěžek).
Ή NMR (500 MHz, DMSO-d6): 9,06 (m, 1H, NH-2'); 9,05 (d, 1H, J2,3 = 4,5 Hz, H-2); 8,58 (bd, 1H, Jnh,ch = 8,2 Hz, COCONH); 8,35 (dm, 1H, J5,6 = 8,5 Hz, H-5); 8,12 (dm, 1H, J8,7 = 8,5 Hz, H8); 7,89 (ddd, 1H, J78 = 8,5 Hz, J76 = 6,9 Hz, J75 = 1,5 Hz, H-7); 7,73 (ddd, 1H, J6,5 = 8,5 Hz, J6,7 = 6,9 Hz, J6,8 = 1,3 Hz, H-6); 7,64 (d, 1H, J3,2 = 4,5 Hz, H-3); 5,21 (dd, 1H, JI72-= 9,2 a 4,3 Hz, H1); 4,25 (dd, 1H, Jgem = 16,9 Hz, J2KNH = 5,9 Hz, H-2'b); 4,17 (dd, 1H, Jgem = 16,9 Hz, J^,NH = 6,0 Hz, H-2'a); 3,98 - 3,87 (m, 1H, (CH3)2CH); 3,72 - 3,61 (m, 2H, H-4); 2,23 (m, 1H, H-2b); 2,00 (m, 1H, H-3b); 1,91 - 1,77 (m, 2H, H-2a, H-3a); 1,11 a 1,10 (2xd, 2x3H, (CH3)2CH);
13C NMR (125,7 MHz. DMSO-d6): 195,80 (COCONH); 166,94 (CO-1'); 166,54 (CO-3'); 159,66 (COCONH); 149,82 (CH-2); 146,58 (C-8a); 143,89 (C-4); 130,92 (CH-7); 128,21 (CH- 8); 128,00 (CH-6); 126,28 (CH-5); 124,61 (C-4a); 119,42 (CH-3); 60,56 (CH-1); 46,13 (CH2-4); 41,60 (CH2-2'); 41,02 ((CH3)2CH); 27,95 (CH2-2); 24,74 (CH2-3); 22,07 ((CH3)2CH);
LC-MS Rtji 3,11 min, Rt 2 3,22 min, m/z 397,35 [M+H]+;
HR MS pro C2iH2sN4O4 [M+H]+vypočteno 397,18703; nalezeno 397,18665.
Příklad 10 (S)-/V-(2-Oxo-2-(2-(2-oxo-2-(pentylamino)acetyl)pyrrolidin-l-yl)ethyl)chinolin-4-karboxamid
Obecným postupem 1 byl získán prekurzor Ij (370 mg, 90% výtěžek; LC-MS Rt. i 4,11 min, Rj2 4,17 min, m/z 406,39 [M+H]+). Prekurzor Ij byl následně debenzylován Obecným postupem 2 a vzniklý amin byl kondenzován s chinolin-4-karboxylovou kyselinou Obecným postupem 3 za vzniku prekurzoru 2j (291 mg, 64% výtěžek; LC-MS Ri 3,50 min, Rj2 3,61 min, m/z 427,39 [M+H]+). Prekurzor 2j byl Obecným postupem 4 oxidován na finální a-ketoamid 3j (98 mg, 70% výtěžek).
-23 CZ 309380 B6
Ή NMR (500 MHz, DMSO-d6): 9,03 (d, 1H, J2,3 = 4,5 Hz, H-2); 9,03 (m, 1H, NH-2'); 8,74 (bt, 1H, Jnh,ch2 = 6,0 Hz, COCONH); 8,35 (bdd, 1H, Js,6 = 8,5 Hz, .hj = 1,5 Hz, H-5); 8,11 (bd, 1H, J8,7 = 8,5 Hz, H-8); 7,86 (ddd, 1H, J78 = 8,5 Hz, J87 = 6,9 Hz, J75 = 1,5 Hz, H-7); 7,71 (ddd, 1H, J6:5 = 8,5 Hz, J6,7 = 6,9 Hz, J6,8 = 1,3 Hz, H-6); 7,61 (d, 1H, J3,2 = 4,5 Hz, H-3); 5,23 (bdd, 1H, JI72 = 9,3 a 4,5 Hz, H-l); 4,26 a 4,22 (2xdd, 2xlH, Jgem = 16,8 Hz, J2'NH = 6,0 Hz, H-2'); 3,70 - 3,62 (m, 2H, H-4); 3,19 - 3,06 (m, 2H, CH2(CH2)3CH3); 2,24 (m, 1H, H-2b); 2,00 (m, 1H, H-3b); 1,92 - 1,74 (m, 2H, H-3a,2a); 1,46 (m, 2H, CH2CH2(CH2)2CH3); 1,32 - 1,17 (m, 4H, (CH2)2CH2CH2CH3); 0,84 (t, 3H, JCH3,CH2 = 7,1 Hz, (CH2)4CH3);
13C NMR (125,7 MHz, DMSO-d6): 195,66 (COCONH); 166,96 (CO-1'); 166,52 (CO-3'); 160,42 (COCONH); 149,89 (CH-2); 146,81 (C-8a); 143,61 (C-4); 130,74 (CH-7); 128,39 (CH-8); 127,88 (CH-6); 126,23 (CH-5); 124,57 (C-4a); 119,38 (CH-3); 60,46 (CH-1); 46,11 (CH2-4); 41,57 (CH2-2); 38,79 (CH2(CH2)3CH3); 28,75 ((CH2)2CH2CH2CH3); 28,58 (CH2CH2(CH2)2CH3); 27,91 (CH2-2); 24,73 (CH2-3); 22,00 ((CH2)3CH2CH3); 14,12 ((CH2)4CH3);
LC-MS Ry 3,63 min, Ry 3,76 min, m/z 425,34 [M+H]+;
HR MS pro C23H2gN4O4 [M+H]+vypočteno 425,21833; nalezeno 425,21812.
Příklad 11
Methyl (5)-(2-oxo-2-( 1 -((chinoIin-4-karbonyl)glycyl)pyrrolidin-2-yl)acetyl)glycinát
Obecným postupem 1 byl získán prekurzor Ik (800 mg, 95% výtěžek; LC-MS Ry 3,46 min, Ry 3,51 min, m/z 408,32 [M+H]+)· Prekurzor Ik byl následně debenzylován Obecným postupem 2 a vzniklý amin byl kondenzován s chinolin-4-karboxylovou kyselinou Obecným postupem 3 za vzniku prekurzoru 2k (500 mg, 75% výtěžek; LC-MS Ry 2,84 min, Ry 2,91 min, m/z 429,30 [M+H]+). Prekurzor 2k byl Obecným postupem 4 oxidován na finální a-ketoamid 3k (15 mg, 46% výtěžek).
Ή NMR (500 MHz, DMSO-d6): 9,10 (bt, 1H, Jnh,ch2 = 6,1 Hz, COCONH); 9,03 (t, 1H, JNH,2' = 6,1 Hz, NH-2'); 9,02 (d, 1H, J2,3 = 4,4 Hz, H-2); 8,34 (dm, 1H, J5,6 = 8,5 Hz, H-5); 8,10 (dm, 1H, J8,7 = 8,5 Hz, H-8); 7,85 (ddd, 1H, J78 = 8,5 Hz, J87 = 6,9 Hz, J75 = 1,4 Hz, H-7); 7,71 (ddd, 1H, J6:5 = 8,5 Hz, J6:7 = 6,9 Hz, J6,8 = 1,3 Hz, H-6); 7,60 (d, 1H, J3,2 = 4,4 Hz, H-3); 5,22 (dd, 1H, J,y= 9,2 a 4,5 Hz, H-l); 4,28 (dd, 1H, Jgem = 16,9 Hz,, J2mh = 6,1 Hz, H-2'b); 4,17 (dd, 1H, Jgem = 16,9 Hz, J2'a,NH = 6,0 Hz, H-2'a); 3,99 - 3,87 (m, 2H, CH3COOCH2); 3,72 - 3,60 (m, 2H, H-4); 3,65 (s, 3H, CH3COOCH2); 2,25 (m, 1H, H-2b); 2,02 (m, 1H, H-3b); 1,88 (m, 1H, H-3a); 1,84 (m, 1H, H-2a);
13C NMR (125,7 MHz, DMSO-d6): 194,92 (COCONH), 169,62 (CH3COO); 167,05 (CO-1'); 166,63 (CO-3'); 160,80 (COCONH); 150,02 (CH-2); 147,12 (C-8a); 143,31 (C-4); 130,58 (CH-7); 128,63 (CH-8); 127,82 (CH-6); 126,19 (CH-5); 124,53 (C-4a); 119,37 (CH-3); 60,52 (CH-1); 52,18 (CH3COO); 46,10 (CH2-4); 41,57 (CH2-2'); 40,78 (CH3COOCH2); 27,79 (CH2-2); 24,72 (CH2-3);
LC-MS Ry 2,90 min, Ry 3,00 min, m/z 427,29 [M+H]+;
HR MS pro C2iH23N40e [M+H]+ vypočteno 427,16121; nalezeno 427,16096.
Příklad 12 terc-Butyl (5)-(2-oxo-2-( 1 -((chinolin-4-karbonyl)glycyl)pyrrolidin-2-yl)acetyl)glycinát
-24CZ 309380 B6
Obecným postupem 1 byl získán prekurzor 11 (212 mg, 46% výtěžek; LC-MS Rt. i 3,51 min, Rt2 3,57 min, m/z 472,28 [M+Na]+). Prekurzor 11 byl následně debenzylován Obecným postupem 2 a vzniklý amin byl kondenzován s chinolin-4-karboxylovou kyselinou Obecným postupem 3 za vzniku prekurzoru 21 (140 mg, 62% výtěžek; LC-MS Ri 3,40 min, Rj2 3,48 min, m/z 471,30 [M+H]+). Prekurzor 21 byl Obecným postupem 4 oxidován na finální a-ketoamid 31 (55 mg, 50% výtěžek).
Ή NMR (500 MHz, DMSO-d6): 9,07 (m, 1H, NH-2'); 9,06 (d, 1H, J2,3 = 4,5 Hz, H-2); 9,00 (bt, 1H, Jnh,ch2 = 6,2 Hz, COCONH); 8,37 (bdd, 1H, Js,6 = 8,5 Hz, .hj = 1,5 Hz, H-5); 8,12 (dm, 1H, J8,7 = 8,5 Hz, H-8); 7,88 (ddd, 1H, J78 = 8,5 Hz, J87 = 6,9 Hz, J75 = 1,5 Hz, H-7); 7,74 (ddd, 1H, J6:5 = 8,5 Hz, J6,7 = 6,9 Hz, J6,8 = 1,3 Hz, H-6); 7,65 (d, 1H, J3,2 = 4,5 Hz, H-3); 5,23 (dd, 1H, = 9,2 a 4,3 Hz, H-l); 4,29 (dd, 1H, Jgem = 16,8 Hz, J2W1 = 6,1 Hz, H-2'b); 4,17 (dd, 1H, Jgem = 16,8 Hz, J2'atNH = 5,9 Hz, H-2'a); 3,86 - 3,74 (m, 2H, CH2COO); 3,72 - 3,62 (m, 2H, H-4); 2,26 (m, 1H, H-2b); 2,02 (m, 1H, H-3b); 1,92 - 1,78 (m, 2H, H-3 a,2a); 1,41 (s, 9H, (CH3)3C);
13C NMR (125,7 MHz, DMSO-d6): 195,02 (COCONH), 168,18 (CH2COO); 166,90 (CO-1'); 166,59 (CO-3'); 160,76 (COCONH); 149,67 (CH-2); 146,27 (C-8a); 144,14 (C-4); 131,05 (CH-7); 128,13 (CH-6); 127,95 (CH-8); 126,32 (CH-5); 124,65 (C-4a); 119,46 (CH-3); 81,31 ((CH3)3C); 60,52 (CH-1); 46,12 (CH2-4); 41,61 (CH2-2'); 41,52 (CH2COO); 27,92 ((CH3)3C); 27,83 (CH22); 24,71 (CH2-3);
LC-MS Rt,i 3,53 min, Rt 2 3,62 min, m/z 469,29 [M+H]+;
HR MS pro C24H29N4O6 [M+H]+ vypočteno 469,20816; nalezeno 469,20798.
Příklad 13
Methyl (2-oxo-2-((S)-1 -((chinolin-4-karbonyl)glycyl)pyrrolidin-2-yl)acetyl)alaninát
Obecným postupem 1 byl získán prekurzor Im ((2-((5)-l-(((benzyloxy)karbonyl)glycyl)pyrrolidin2-yl)-2-hydroxyacetyl)alanin; 237 mg, 82% výtěžek; LC-MS Ri 3,24 min, Rj2 3,34 min, m/z 408,27 [M+H]+), který byl esterifikací odpovídající Obecnému postupu 3 za použití nadbytku methanolu namísto aminu převeden na methylester (prekurzor Im; 100 mg, 44% výtěžek; LC-MS Ri 3,60 min, Rt,2 3,66 min, m/z 422,36 [M+H]+). Prekurzor Im byl následně debenzylován Obecným postupem 2 a vzniklý amin byl kondenzován s chinolin-4-karboxylovou kyselinou Obecným postupem 3 za vzniku prekurzoru 2m (76 mg, 58% výtěžek; LC-MS Rt. i 2,95 min, Rt>2 3,03 min, Rtj2 3,05 min, m/z 443,28[M+H]+). Prekurzor 2m byl Obecným postupem 4 oxidován na finální α-ketoamid 3m (49 mg, 87% výtěžek).
Ή NMR (500 MHz, DMSO-d6): 9,13 a 9,12 (2xbd, 2xlH, Jnh,ch = 7,5 Hz, COCONH); 9,06 (m, 2H, NH-2'); 9,06 (2xd, 2xlH, J23 = 4,5 Hz, H-2); 8,38 a 8,36 (2xdm, 2xlH, .hr, = 8,6 Hz, H-5); 8,12 (2xdm, 2xlH, J8,7 = 8,5 Hz, H-8); 7,89 a 7,88 (2xddd, 2xlH, J78 = 8,5 Hz, J87 = 6,9 Hz, J75 = 1,5 Hz, H-7); 7,75 a 7,73 (2xddd, 2xlH, J6,5 = 8,5 Hz, J6,7 = 6,9 Hz, J6,8 = 1,3 Hz, H-6); 7,65 a 7,64 (2xbd, 2xlH, J3,2 = 4,5 Hz, H-3); 5,24 (dd, 1H, JI72 = 9,2 a 4,5 Hz, H-l); 5,20 (dd, 1H, = 9,3 a 4,2 Hz, H-l); 4,40 a 4,39 (2xpent, 2xlH, Jch,nh = Jch.nhs = 7,4 Hz, CH3CH); 4,28 a 4,27 (2xdd, 2xlH, Jgem = 16,8 Hz, , J27},nh = 6,0 Hz, H-2'b); 4,19 (2xdd, 2xlH, Jgem = 16,8 Hz, J2'a,NH = 5,9 Hz, H-2'a); 3,75 - 3,60 (2xm, 2x2H, H-4); 3,64 (2xs, 2x3H, CH3COO); 2,30 - 2,20 (m, 2xlH, H-2b); 2,06 - 1,96 (m, 2xlH, H-3b); 1,93 - 1,77 (m, 4xlH, H-3a, H-2a); 1,36 a 1,34 (2xd, 2x3H, JCH3,ch = 7,3 Hz, CH3C);
13C NMR (125,7 MHz, DMSO-d6): 195,25 a 195.17 (COCONH); 172,49 (CH3COO); 167,10 (CO1'); 166,86 a 166,79 (CO-3'); 160,85 a 160,48 (COCONH); 149,90 a 149,88 (CH-2); 146,54 a 146,50 (C-8a); 144,39 a 144,29 (C-4); 131,27 a 131,24 (CH-7); 128,32 a 128,29 (CH-6); 128,22 a
-25 CZ 309380 B6
128,16 (CH-8); 126,55 a 126,50 (CH-5); 124,86 a 124,85 (C-4a); 119,66 (CH-3); 61,10 a 60,62 (CH-1); 52,59 a 52,56 (CH3COO); 48,10 a 48,04 (CH3CH); 46,32 (CH2-4); 41,84 a 41,80 (CH22'); 28,03 a 27,96 (CH2-2): 24,94 a 24,88 (CH2-3); 16,95 a 16,84 (CH3CH);
LC-MS Ry 3,07 min, Ry 3,15 min. m/z 441,25[M+H]+;
Příklad 14 (S)-A-(2-(2-(2-((2-(Dimethylamino)-2-oxoethyl)amino)-2-oxoacetyl)pyrrolidin-l-yl)-2oxoethyl)chinolin-4-karboxamid
Po sobě jdoucími Obecnými postupy 3 a 4 byl z prekurzoru 7 a ethanolického roztoku dimethylaminu (5,6 mol.l1) připraven a-ketoamid 5a (29 mg, 69% výtěžek).
Ή NMR (500 MHz, DMSO-d6): 9,04 (m, 1H, NH-2'); 9,02 (d, 1H, J2,3 = 4,5 Hz, H-2); 8,50 (bt, 1H, Jnh,ch2 = 5,5 Hz, COCONH); 8,34 (dm, 1H, J5,6 = 8,5 Hz, H-5); 8,10 (dm, 1H, J8,7 = 8,5 Hz, H-8); 7,85 (ddd, 1H, J78 = 8,5 Hz, J87 = 6,9 Hz, J75 = 1,5 Hz, H-7); 7,71 (ddd, 1H, J6,5 = 8,5 Hz, Jej = 6,9 Hz, J6:8 = 1,3 Hz, H-6); 7,61 (d, 1H, J3,2 = 4,5 Hz, H-3); 5,24 (dd, 1H, JI72= 9,2 a 4,2 Hz, H-l); 4,29 (dd, 1H, Jgem = 16,8 Hz, J^nh = 6,2 Hz, H-2'b); 4,16 (dd, 1H, Jgem = 16,8 Hz, J2^,NH = 5,8 Hz, H-2'a); 4,03 - 3,98 (2xdd, 2xlH, Jgem = 17,0 Hz, JCH2,nh = 5,7 Hz, CH2CON); 3,72 - 3,61 (m, 2H, H-4); 2,96 a 2,83 (2xs, 2x3H, (CH3)2N); 2,25 (m, 1H, H-2b); 2,02 (m, 1H, H-3b); 1,93 - 1,81 (m, 2H, H-3'a, 2a);
13C NMR (125,7 MHz, DMSO-d6): 195,18 (COCONH), 167,25 (CH2CON); 167,05 (CO-1'); 166,64 (CO-3'); 160,26 (COCONH); 149,98 (CH-2); 146,99 (C-8a); 143,45 (C-4); 130,68 (CH-7); 128,53 (CH-8); 127,90 (CH-6); 126,22 (CH-5); 124,56 (C-4a); 119,41 (CH-3); 60,46 (CH-1); 46,13 (CH2-4); 41,59 (CH2-2'); 40,68 (CH2CON); 35,86 a 35,34 ((CH3)2N); 27,77 (CH2-2); 24,72 (CH2-3);
LC-MS Ry 2,79 min, Ry 2,88 min m/z 440,26 [M+H]+;
HR MS pro C^H^NsOs [M+H]+ vypočteno 440,19285; nalezeno 440,19275.
Příklad 15 (S)-/V-(2-(2-(2-((2-(Ethyl(propyl)amino)-2-oxoethyl)amino)-2-oxoacetyl)pyrrolidin-l-yl)-2oxoethyl)chinolin-4-karboxamid
Po sobě jdoucími Obecnými postupy 3 a 4 byl z prekurzoru 7 a pyrrolidinu připraven a-ketoamid 5b (18 mg, 50% výtěžek).
Ή NMR (500 MHz, DMSO-d6): 9,02 (m, 1H, NH-2'); 9,00 (d, 1H, J2,3 = 4,4 Hz, H-2); 8,56 (bt, 1H, Jnh,CH2 = 5,7 Hz, COCONH); 8,33 (bdd, 1H, Js,6 = 8,5 Hz, J.j = 1,5 Hz, H-5); 8,09 (dm, 1H, J8,7 = 8,5 Hz, H-8); 7,84 (ddd, 1H, J78 = 8,5 Hz, J87 = 6,9 Hz, J75 = 1,5 Hz, H-7); 7,70 (ddd, 1H, J6:5 = 8,5 Hz, J6,7 = 6,9 Hz, J6,8 = 1,3 Hz, H-6); 7,58 (d, 1H, J3,2 = 4,4 Hz, H-3); 5,23 (dd, 1H, = 9,2 a 4,3 Hz, H-l); 4,28 (dd, 1H, Jgem = 16,8 Hz, J2W1 = 6,1 Hz, H-2'b); 4,15 (dd, 1H, Jgem = 16,8 Hz, J2'a,NH = 5,8 Hz, H-2'a); 3,98 - 3,87 (m, 2H, CH2CONH); 3,72 - 3,62 (m, 2H, H-4); 3,41 a 3,29 (2xt, 2x2H, Jan.an = 6,9 Hz; CH2-2,5-C4H8N); 2,24 (m, 1H, H-2b); 2,01 (m, 1H, H-3b); 1,92 - 1,71 (m, 6H, H-3a,2a, H-3,4-C4H8N);
13C NMR (125,7 MHz, DMSO-d6): 195,21 (COCONH), 167,14 (CO-1'); 166,66 (CO-3'); 165,62 (CH2CONH); 160,35 (COCONH); 150,17 (CH-2); 147,39(C-8a); 143,06 (C-4); 130,47 (CH-7); 128,86 (CH-8); 127,77 (CH-6); 126,17 (CH-5); 124,51 (C-4a); 119,38 (CH-3); 60,52 (CH-1);
-26CZ 309380 B6
46,14 (CH2-4); 45,89 a 45,15 (CH2-2,5-C4H8N); 41,59 (CH2-2'); 41,41 (CH2CON); 27,78 (CH22); 25,81 (CH2-3-C4H8N nebo CH2-4-C4H8N); 24,73 (CH2-3); 23,94 81 (CH2-3-C4H8N nebo CH2-4-C4H8N);
LC-MS Rt,i 2,98 min, Rt 2 3,03 min, m/z 466,26 [M+H]+;
Příklad 16 (S)-/V-(2-(2-(2-((2-(Isopropylamino)-2-oxoethyl)amino)-2-oxoacetyl)pynOlidin-l-yl)-2oxoethyl)chinolin-4-karboxamid
Po sobě jdoucími Obecnými postupy 3 a 4 byl z prekurzoru 7 a isopropylaminu připraven aketoamid 5c (21 mg, 66% výtěžek).
Ή NMR (500 MHz, DMSO-d6): 9,02 (t, 1H, Jnh,2’= 6,0 Hz, NH-2'); 9,00 (d, 1H, J2,3 = 4,4 Hz, H2); 8,67 (t, 1H, Jnh,ch2 = 6,0 Hz, COCONH); 8,33 (ddd, 1H, Js,6 = 8,5 Hz, J5,7 = 1,5 Hz, J5,8 = 0,6 Hz, H-5); 8,09 (dm, 1H, J8,7 = 8,5 Hz, H-8); 7,84 (ddd, 1H, J78 = 8,5 Hz, J87 = 6,9 Hz, J7S = 1,5 Hz, H-7); 7,83 (m, 1H, (CH3)2CHNH); 7,69 (ddd, 1H, J6:5 = 8,5 Hz, J6,7 = 6,9 Hz, J6,8 = 1,3 Hz, H-6); 7,58 (d, 1H, J3,2 = 4,4 Hz, H-3); 5,23 (dd, 1H, JI72 = 9,2 a 4,2 Hz, H-l); 4,28 (dd, 1H, Jgem = 16,8 Hz, J2i>,nh = 6,1 Hz, H-2'b); 4,17 (dd, 1H, Jgem = 16,8 Hz, J2'a,NH = 5,9 Hz, H-2'a); 3,81 (m, 1H, (CH3)2CHNH); 3,76 - 3,62 (m, 4H, CH2CONH, H-4); 2,23 (m, 1H, H-2b); 2,01 (m, 1H, H3b); 1,90 - 1,83 (m, 2H, H-3a,2a); 1,04 a 1,03 (2xd, 2x3H, Jchs.ch = 6,6 Hz, (CH3)2CHNH);
13C NMR (125,7 MHz, DMSO-d6): 195,05 (COCONH), 167,13 (CO-L); 166,72 a 166,62 (CO-3', CH2CONH); 160,47 (COCONH); 150,16 (CH-2); 147,44 (C-8a); 143,01 (C-4); 130,42 (CH-7); 128,89 (CH-8); 127,73 (CH-6); 126,17 (CH-5); 124,50 (C-4a); 119,35 (CH-3); 60,40 (CH-1); 46,12 (CH2-4); 41,94 (CH2CONH); 41,57 (CH2-2'); 40,81 ((CH3)2CH); 27,75 (CH2-2); 24,72 (CH2-3); 22,58 ((CH3)2CH);
LC-MS Rt,i 3,05 min, Rt 2 3,11 min, m/z 454,24 [M+H]+;
HR MS pro C^H^NsOs [M+H]+ vypočteno 454,20850; nalezeno 454,20844.
Příklad 17 (S)-/V-(2-(2-(2-((2-(Benzylamino)-2-oxoethyl)amino)-2-oxoacetyl)pynOlidin-l-yl)-2oxoethyl)chinolin-4-karboxamid
Po sobě jdoucími Obecnými postupy 3 a 4 byl z prekurzoru 7 a benzylaminu připraven a-ketoamid 5d(10mg, 19% výtěžek).
Ή NMR (500 MHz, DMSO-d6): 9,01 (m, 1H, NH-2'); 8,99 (d, 1H, J2,3 = 4,4 Hz, H-2); 8,85 (bt, 1H, Jnh,ch2 = 6,0 Hz, COCONH); 8,48 (bt, 1H, Jnh,ch2 = 6,0 Hz, NH-CH2Bn); 8,33 (bdd, 1H, Js,6 = 8,5 Hz, J5J = 1,5 Hz, H-5); 8,09 (dm, 1H, J87 = 8,5 Hz, H-8); 7,83 (ddd, 1H, J78 = 8,5 Hz, J87 = 6,9 Hz, J75 = 1,5 Hz, H-7); 7,69 (ddd, 1H, J6,5 = 8,5 Hz, J6,7 = 6,9 Hz, J6,8 = 1,3 Hz, H-6); 7,57 (d, 1H, J3,2 = 4,4 Hz, H-3); 7,31 (m, 2H, H-m-Bn); 7,27 - 7,20 (m, 3H, H-o,p-Bn); 5,25 (dd, 1H, JI72 = 9,2 a 4,2 Hz, H-l); 4,28 (m, 2H, CH2-Bn); 4,27 (dd, 1H, Jgem = 16,8 Hz,32Κνη = 6,0 Hz, H-2'b); 4,16 (dd, 1H, Jgem = 16,8 Hz, J2'a,NH = 5,9 Hz, H-2'a); 3,86 (dd, 1H, Jgem = 16,4 Hz, Jchznh = 6,3 Hz, CH2CONH-b); 3,78 (dd, 1H, Jgem = 16,4 Hz, JCH2,nh = 6,0 Hz, CH2CONH-a); 3,71 - 3,62 (m, 2H, H-4); 2,24 (m, 1H, H-2b); 2,01 (m, 1H, H-3b); 1,94 - 1,84 (m, 2H, H-3a,2a);
13C NMR (125,7 MHz, DMSO-d6): 194,85 (COCONH); 168,01 (CH2CONH); 167,13 (CO-1'); 166,62 (CO-3'); 160,56 (COCONH); 150,19 (CH-2); 147,49 (C-8a); 142,97 (C-4); 139,44 (C-zBn); 130,39 (CH-7); 128,94 (CH-8); 128,49 (CH-m-Bn); 127,70 (CH-6); 127,40 (CH-o-Bn);
-27CZ 309380 B6
127,02 (CH-p-Bn); 126,14 (CH-5); 124,49 (C-4a); 119,33 (CH-3); 60,44 (CH-1); 46,11 (CH2-4); 42,28 (CH2-Bn); 41,19 (CH2CONH); 41,57 (CH2-2'); 27,70 (CH2-2); 24,70 (CH2-3);
LC-MS Rt.i 3,26 min, Rt,2 3,35 min, m/z 502,21 [M+H]+;
HR MS pro C27H28N5O5 [M+H]+ vypočteno 502,20850; nalezeno 502,20825.
Příklad 18
Methyl(2-oxo-2-((S)-l-((chinolin-4-karbonyl)glycyl)pyrrolidin-2-yl)acetyl)glycyl-L-leucinát
Po sobě jdoucími Obecnými postupy 3 a 4 byl z prekurzoru 7 a methyl-L-leucinátu připraven aketoamid 5e (33 mg, 77% výtěžek).
Ή NMR (500 MHz, DMSO-d6): 9,05 (m, 1H, NH-2'); 9,05 (d, 1H, J2,3 = 4,5 Hz, H-2); 8,77 (bt, 1H, Jnh,ch2 = 6,2 Hz, COCONH); 8,40 (bd, 1H, Jnh,ch = 7,9 Hz, CH3COOCHNH); 8,36 (dm, 1H, J5,6 = 8,5 Hz, H-5); 8,12 (dm, 1H, J87 = 8,5 Hz, H-8); 7,87 (ddd, 1H, J78 = 8,5 Hz, J87 = 6,9 Hz, J75 = 1,5 Hz, H-7); 7,74 (ddd, 1H, J6,5 = 8,4 Hz, J6,7 = 6,9 Hz, J6,8 = 1,3 Hz, H-6); 7,64 (d, 1H, J3,2 = 4,5 Hz, H-3); 5,25 (dd, 1H,J7 9,3 a 4,0 Hz, H-l); 4,31 (m, 1H, CH3COOCHNH); 4,28 (dd,
1H, Jgem = 16,8 Hz, J^h = 6,1 Hz, H-2'b); 4,17 (dd, 1H, Jgem = 16,8 Hz, J2^,NH = 5,8 Hz, H-2'a); 3,86 - 3,75 (m, 2H, CH2CONH); 3,72 - 3,62 (m, 2H, H-4); 3,62 (s, 3H, CH3COOCH); 2,23 (m, 1H, H-2b); 2,01 (m, 1H, H-3b); 1,92 - 1,83 (m, 2H, H-3a,2a); 1,60 (m, 1H, CH2CH(CH3)2); 1,55 a 1,48 (2xm, 2xlH, CH2CH(CH3)2); 0,87 and 0,83 (2xd, 2x3H, JCH3,ch = CH2CH(CH3)2);
13C NMR (125,7 MHz, DMSO-d6): 194,80 (COCONH); 173,16 (CH3COOCH); 168,13 (CH2CONH); 166,92 (CO-1'); 166,57 (CO-3'); 160,48 (COCONH); 149,74 (CH-2); 146,46 (C-8a); 143,96 (C-4); 130,93 (CH-7); 128,06 (CH-6); 128,00 (CH-8); 126,28 (CH-5); 124,62 (C-4a); 119,43 (CH-3); 60,47 (CH-1”); 52,14 (CH3COOCH); 50,45 (CH3COOCH); 46,12 (CH2-4); 41,75 (CH2CONH); 41,60 (CH2-2'); 40,12 (CH2CH(CH3)2); 27,64 (CH2-2); 24,65 (CH2-3”), 24,35 (CH2CH(CH3)2); 22,98 and 21,49 (CH2CH(CH3)2);
LC-MS Rt,i 3,46 min, R,2 3,52 min, m/z 540,26 [M+H]+;
HR MS pro CS-HuN^O- [M+H]+ vypočteno 540,24527; nalezeno 540,24499.
Příklad 19
Methyl(2-oxo-2-((S)-l-((chinolin-4-karbonyl)glycyl)pyrrolidin-2-yl)acetyl)glycyl-L-fenylalaninát
Po sobě jdoucími Obecnými postupy 3 a 4 byl z prekurzoru 7 a methyl-L-fenylalaninátu připraven α-ketoamid 5f (45 mg, 79% výtěžek).
Ή NMR (500 MHz, DMSO-d6): 9,04 (m, 1H, NH-2'); 9,04 (d, 1H, J2,3 = 4,5 Hz, H-2); 8,74 (bt, 1H, Jnh,ch2 = 6,2 Hz, COCONH); 8,50 (bd, 1H, Jnh,ch = 7,7 Hz, CH3COOCHNH); 8,35 (dm, 1H, J5,6 = 8,5 Hz, H-5); 8,11 (dm, 1H, J87 = 8,5 Hz, H-8); 7,87 (ddd, 1H, J78 = 8,5 Hz, J87 = 6,9 Hz, J75 = 1,5 Hz, H-7); 7,73 (ddd, 1H, J6,5 = 8,5 Hz, J6,7 = 6,9 Hz, J6,8 = 1,3 Hz, H-6); 7,63 (d, 1H, J3,2 = 4,5 Hz, H-3); 7,27 (m, 2H, H-m-Bn); 7,23 - 7,18 (m, 3H, H-o,p-Bn); 5,24 (dd, 1H, J172„ = 9,2 a 4,1 Hz, H-l); 4,47 (m, 1H, CH3COOCH); 4,28 (dd, 1H, Jgem = 16,8 Hz, J^nh = 6,1 Hz, H-2'b); 4,17 (dd, 1H, Jgem = 16,8 Hz, J2,α,ΝΗ = 5,9 Hz, H-2'a); 3,82 (dd, 1H, Jgem = 16,6 Hz, JCH2,nh = 6,3 Hz, CH2CONH-b); 3,72 (dd, 1H, Jgem = 16,6 Hz, JCH2,nh = 6,1 Hz, CH2CONH-a); 3,71 - 3,61 (m, 2H, H-4); 3,60 (s, 3H, CH3COO); 3,02 (dd, 1H, Jgem = 13,7 Hz, JCh2nh = 5,7 Hz, CH2-Bn-b); 2,91 (dd, 1H, Jgem = 13,7 Hz, Jch2.nh= 9,0 Hz, CH2-Bn-a); 2,24 (m, 1H, H-2b); 2,01 (m, 1H, H-3b); 1,90 - 1,82 (m, 2H, H-3a,2a);
-28CZ 309380 B6 13C NMR (125,7 MHz, DMSO-d6): 194,88 (COCONH); 172,09 (CH3COO); 168,08 (CH2CONH); 166,92 (CO-1'); 166,56 (CO-3'); 160,41 (COCONH); 149,75 (CH-2); 146,50 (C-8a); 143,89 (C4); 137,21 (C-z-Bn); 130,90 (CH-7); 129,34 (CH-o-Bn); 128,53 (CH-m-Bn); 128,13 (CH-8); 128,03 (CH-6); 126,86 (CH-p-Bn); 126,27 (CH-5); 124,60 (C-4a); 1 19,42 (CH- 3); 60,44 (CH-1); 53,94 (CH3COOCH); 52,16 (CH3COO); 46,10 (CH2-4); 41,67 (CH2CONH); 41,59 (CH2-2'); 36,85 (CH2-B11); 27,70 (CH2-2); 24,68 (CH2-3);
LC-MS Rt,i 3,52 min, R,2 3,59 min, m/z 574,28 [M+H]+;
HR MS pro C30H32N5O7 [M+H]+ vypočteno 574,22962; nalezeno 574,22949.
Příklad 20
Methyl(2-oxo-2-((S)-l-((chinolin-4-karbonyl)glycyl)pyrrolidin-2-yl)acetyl)glycyl-L-glutaminát
Po sobě jdoucími Obecnými postupy 3 a 4 byl z prekurzoru 7 a methyl-L-glutaminátu připraven aketoamid 5g (13 mg, 47% výtěžek; LC-MS Rt,i 2,69 min, Rtj2 2,78 min, m/z 555,25 [M+ H]+).
Příklad 21
5-Benzyl l-methyl(2-oxo-2-((S)-l-((chinolin-4-karbonyl)glycyl)pyrrolidin-2-yl)acetyl)glycyl-Lglutamát
Po sobě jdoucími Obecnými postupy 3 a 4 byl z prekurzoru 7 a 5-benzyl-1-methyl-L-glutamátu připraven a-ketoamid 5h (5 mg, 43% výtěžek: LC-MS Rt,i 3,68 min, Rtj2 3,78 min, m/z 646,28 [M+H]+.
Příklad 22
Benzyl A6-((benzyloxy )karbonyl)-A2-((2-oxo-2-((S)-1 -((chinolin-4-karbonyl)glycyl)pyrrolidin-2yl)acetyl)glycyl) -L-ly sinát
Po sobě jdoucími Obecnými postupy 3 a 4 byl z prekurzoru 7 a methyl-N6-Cbz-L-lysinátu připraven a-ketoamid 5i (15 mg, 60% výtěžek).
Ή NMR (500 MHz, DMSO-d6): 9,02 (m, 1H, NH-2'); 9,01 (d, 1H, J2,3 = 4,5 Hz, H-2); 8,76 (bt, 1H, Jnh,ch2 = 6,2 Hz, COCONH); 8,39 (bd, 1H, Jnh,ch = 7,5 Hz, CH3COOCHNH); 8,33 (dm, 1H, J5,6 = 8,5 Hz, H-5); 8,09 (dm, 1H, J87 = 8,5 Hz, H-8); 7,84 (ddd, 1H, J78 = 8,5 Hz, J87 = 6,9 Hz, J75 = 1,5 Hz, H-7); 7,70 (m, 1H, H-6); 7,59 (d, 1H, J3,2 = 4,5 Hz, H-3); 7,39 - 7,27 (m, 5H, Ho,m,p-Ph); 7,26 (m, 1H, NH-5'); 5,24 (dd, 1H, JI72„ = 9,2 a 4,0 Hz, H-l); 5,00 (s, 2H, COOCH2Ph); 4,28 (dd, 1H, Jgem = 16,9 Hz, Α2ΚΝΗ = 6,1 Hz, H-2'b); 4,22 (m, 1H, CH-1'); 4,16 (dd, 1H, Jgem = 16,9 Hz, J2b,NH = 6,0 Hz, H-2'a); 3,86 - 3,76 (m, 2H, CH2CONH); 3,70 - 3,61 (m, 2H, H-4); 3,62 (s, 3H, CH3COO); 2,97 (m, 2H, H-5'); 2,22 (m, 1H, H-2b); 2,00 (m, 1H, H-3b); 1,92 - 1,83 (m, 2H, H-3a,2a); 1,59 (m, 2H, CH2-2'); 1,38 (m, 2H, CH2-4'); 1,26 (m, 2H, CH23');
13C NMR (125,7 MHz, DMSO-d6): 194,84 (COCONH); 172,74 (CH3COO); 168,12 (CH2CONH); 167,05 (CO-Γ); 166,57 (CO-3'); 160,46 (COCONH); 156,30 (COOCH2Ph); 150,07 (CH-2); 147,17 (C-8a); 143,25 (C-4); 137,48 (C-z-Ph); 130,53 (CH-7); 128,67 (CH-8); 128,57 (CH-m-Ph); 127,97 (CH-o,p-Ph); 127,79 (CH-6); 126,18 (CH-5); 124,51 (C-4a); 119,34 (CH-3); 65,33 (COOCH2Ph); 60,43 (CH-1); 52,12 a 52,09 (CH3COO, CH-1'); 46,09 (CH2-4); 41,71 (CH2CONH); 41,57 (CH2-2'); 40,25 (CH2-5'); 30,82 (CH2-2'); 29,14 (CH2-4'); 27,65 (CH2-2); 24,65 (CH2-3), 22,75 (CH2-3');
-29CZ 309380 B6
LC-MS Ry 3,72 min, Ry 3,79 min. m/z 689,29 [M+H]+;
HR MS pro C35H41N6O9 [M+H]+ vypočteno 689,29295; nalezeno 689,29276.
Příklad 23 (S)-S-(62-((4-((2-(2-(2-((3,4-dimethoxybenzyl)amino)-2-oxoacetyl)pyrrolidin-l-yl)-2oxoethyl)karbamoyl)chinolin-7-yl)oxy)-2,5,8,l l,61-pentaoxo-15,18,21,24,27,30,33,36,39, 42,45,48,51,54,57-pentadekaoxa-3,6,9,12,60-pentaazadohexakontyl)ethanthionát
Prekurzor lb byl debenzylován Obecným postupem 2 a vzniklý amin byl kondenzován Obecným postupem 3 s derivátem kyseliny chinolin-4-karboxylové 10 za vzniku prekurzoru 11 (417 mg, 65% výtěžek; LC-MS Ry 3,76 min, Ry 3,82 min, m/z 642,59 [1/2(M - COOtBu)+H]+). Prekurzor 11 byl Obecným postupem 4 oxidován na a-ketoamid (229 mg, 55% výtěžek; LC-MS Ry 3,81 min, Ry 3,87 min, m/z 641,57 [1/2(M - COOtBu)+H]+). Produkt byl následně odchráněn v 10 ml 30% TFA v DCM. Kapalné složky byly odpařeny za sníženého tlaku a výsledný amin byl izolován pomocí FLASH chromatografie. Po lyofilizaci frakcí obsahujících produkt byl tento amin kondenzován Obecným postupem 3 s Boc-Gly-Gly-Gly (41 mg, 22% výtěžek; LC-MS Ry 3,51 min, Ry 3.57 min, m/z 727,06 [1/2(M - COOtBu)+H]+). Odchraňovací krok v podmínkách TFA/DCM zmíněný výše byl přesně zopakován a vzniklý amin byl kondenzován Obecným postupem 3 s S-acetyl-2-thiooctovou kyselinou za vzniku finálního produktu 12 (2,2 mg, 28% výtěžek; LC-MS Ry 3,42 min, Ry 3,47 min, m/z 785,10 [1/2M+H]+).
Příklad 24 (S)-N-(2-(2-(2-((3,4-dimethoxybenzyl)amino)-2-oxoacetyl)pynOlidin-l-yl)-2-oxoethyI)-7-(2-(6hydrazinylnikotinamido)ethoxy)chinolin-4-karboxamid
Prekurzor 1b byl debenzylován Obecným postupem 2 a vzniklý amin byl kondenzován Obecným postupem 3 s derivátem kyseliny chinolin-4-karboxylové 13 za vzniku prekurzoru 14 (170 mg, 46% výtěžek; LC-MS Ry 3,61 min, Ry 3,68 min, m/z 666,30 [M+H]+). Prekurzor 14 byl Obecným postupem 4 oxidován na a-ketoamid (121 mg, 72% výtěžek; LC-MS Ry 3,71 min, Ry 3,78 min, m/z 664,26 [M+H]+. Produkt byl následně odchráněn v 7 ml 30% TFA v DCM. Kapalné složky byly odpařeny za sníženého tlaku a výsledný amin byl izolován pomocí FLASH chromatografie. Po lyofilizaci frakcí obsahujících produkt byl tento amin kondenzován Obecným postupem 3 s NBoc-hydrazinonikotinovou kyselinou (24 mg, 59% výtěžek; LC-MS Ry 3,41 min, Rt2 3,48 min, m/z 799,31 [M+H]+). Odchraňovací krok v podmínkách TFA/DCM zmíněný výše byl přesně zopakován za vzniku finálního produktu 15 (1 mg, 8% výtěžek; LC-MS Ry 2,88 min, Ry 2,96 min, m/z 699,20 [M+H]+).
Příklad 25
Měření inhibiční aktivity α-ketoamidových inhibitorů
Lidský rekombinantní enzym FAP byl připraven podle dříve publikovaného postupu (Dvořáková et al. 2017, J. Med. Chem., 8365). Lidské rekombinantní enzymy DPP1V a PREP byly pořízeny od firmy R&D Systems (katalogová čísla 9168-SE-010 a 4308-SE-010). Hodnoty IC50 byly měřeny v duplikátech podle dříve publikovaného postupu (Dvořáková etal. 2017, JMed. Chem., 8365). Data byla analyzována prostřednictvím nelineární regrese programem GraphPrism (verze 8.3.1). Výsledky měření jsou uvedeny jako hodnoty střední inhibiční koncentrace IC50 a její linearizované formy prostřednictvím záporného dekadického logaritmu pICso. Nejaktivněji látky vykazují nejnižší hodnoty IC50 a pICso.
Výsledky měření inhibičních aktivit látek vůči FAP
-30CZ 309380 B6
i p<4® ssr&L® ; IC®wO<J Ά„ ^ξ,-ίΜ^ οθ4<ο\4 U x, hsnadj :j i
4 ho 'On
i 3a OUíW í STO i 4.® 44 : <437
3b s s, 1 5J544 1 34 55 í 3,2205
! 3« Ο y «i 1 4® : Ϊ i <'5la ; 5,373
4- 54 | 4,34 4. (ý® 1 4,605 í 4,0 .5474
5 a ή ajy 1,457 1,733: 5,735
M 7,1 7 a <® 3,814 5-,54,3 5 O i
V M 4 ,53 a 02 307 aa 1 3,0
07 a 03 4.5 5 5 <;' ' i 403
4 31 7,35 * ®< im 13,44 24,®
i IV 3ý 1 ŠJ3 y ®< 035 X X 3,534
1 1 3k <1 3 a 4,® 7.473 5,0 1<®
| O 3Í 5,37 a 3,® ; ř 'a <2445 0447
Ϊ Os 03 4 02 20 3 313 305
14 5 a 7,51 4 03 O 530 i '
1 5 5b 5,14 a 5,33 1 703 3® 4 7.5-^
i 1 & O 50 aO 3.55 ' ' a. 1 <75
| 17 4,33 a 03 3,374 <453
17 5« 7,43 ^3 O 320 27,43 3; 'a
55 O y 5,34 a ,ř ΐ X O® 3,234
5y 04 a 03 33.45 055 i 205
i 21 5b 03· a 05 5,3435 5,4544 4,73<1
:: Ό'· 51 O) a 04 s,O> 1 2,347
Výsledky měření inhibičních aktivit referenčních látek podle vzorců A a B vůči FAP, DPPIV a PREP
-31 CZ 309380 B6
OF ALFO FA A
Látka i e rve pí[wU'! ] líAs r^ssOF ]
A AS5 á OS >40® ®0
073 >40® 4®
Výsledky měření inhibičních aktivit vyhraných látek vůči DPPIV a PREP
mo : mm K 4= 1· tmi r VypSew jgto ICO PRff W>3 V AP i
·> » j >4F® ; FS AJ
4 > AW | <5 034
A) ...............í - í > :<í® ( NA i®: 3
O: 31 1 > so i o '> •X·: y «Sy:
O (VÍN*
í y M | i
A> ........ y > í o ty 54
Příklad 26
Měření stabilit α-ketoamidových inhibitorů
Stabilita v plazmě
Od každé testované látky byl připraven 10 mmol.l1 roztok v DMSO, 0,7 pl roztoku bylo přidáno k 1400 μΐ lidské (Biowest) nebo myší (Biosera) plasmy udržované při 37 °C, Po 0, 20, 60 a 120 minutách byly odebrány 40 μΐ alikvoty a analyzovány pomocí LC-MS:
Alikvot plazmy byl extrahován 120 μΐ methanolu obsahujícím kofein jako interní standard. Roztok byl promíchán (vortex; 5 min) a odstředěn (20500 g;10 min), Supernatant byl přenesen do vialky a 1 μΐ směsi byl použit pro LC-MS analýzu.
Stabilita v mikrosomech
Myší mikrosomy (Thermofísher) 0,5 mg/ml byly inkubovány s 5 pmol.l1 roztokem testované látky, čerstvě připraveným 2 mmol.l1 roztokem NADPH a 2 mmol.l1 MgCL ve 90 mmol.l1 Tris pufru (pH 7,4). Inkubace 37,5 μΐ směsi byla ukončena přídavkem 150 μΐ acetonitrilu s obsahem kofeinu jakožto interního standardu, vychlazeného na 0 °C. Směs byla promíchána (vortex; 5 min) a odstředěna (20500 g; 10 min). Supernatant byl přenesen do vialky a 1 μΐ směsi byl použit pro LCMS analýzu.
LC-MS analýza vzorku
Vzorky byly analyzovány na přístroji Sciex Qtrap 6550 a pro separaci byla použita kolona
-32CZ 309380 B6
Phenomex (50x2,l, 13 nm, 1,7 pm), průtok 0,3 ml/min, a gradient, kde byl podíl mobilní fáze B (0,1% (obj./obj.) kyselina mravenčí v acetonitrilu) plynule během 6 minut zvyšován z 5 do 100 % (obj./obj.) v mobilní fázi A (0,1% (obj./obj.) kyselina mravenčí ve vodě). Výsledky jsou prezentovány jako procentuální podíl testované látky oproti kontrole (alikvot, odebraný v čase 0).
Výsledky měření:
Stabilita byla testována pro vybrané inhibitory 3a, 3b, 3c, 5f a 5h,
V lidské plazmě jsou tyto látky stabilní. Nej vyšší míra degradace byla pozorována u látky 5f, kdy během 120 minut degradovalo 25 % látky. V myší plazmě jsou stabilní pouze látky 3a, 3b a 3c, zatímco látky 5f a 5h okamžitě degradují (během 20 minut degradovalo 100 % látky). V myších mikrozomech jsou látky 3a a 3b stabilní (během 120 minut degradovalo maximálně 20 % látky), látky 3c a 5f jsou částečně stabilní (během 120 minut degradovalo 40 až 50 % látky) a látka 5h je nestabilní (během 20 minut degradovalo 100 % látky).
Příklad 27
Měření cytotoxicit α-ketoamidových inhibitorů na nádorových buněčných liniích
Cytotoxicita látek byla měřena na čtyřech nádorových buněčných liniích: CCRF-CEM, HepG2, Hela, HL-60. Všechny buněčné linie byly pořízeny od firmy ATCC (Manassas, VA, USA). Buňky byly kultivovány v médiu RPMI-1640 nebo DMEM obsahujícím 10% (hmotn./hmotn.) FBS a 1 % (hmotn./hmotn.) GlutaMax. Buňky byly distribuovány po 2000 10 000 na jamku 384-jamkové destičky (Thermo Fisher Scientific, Waltham, USA) a inkubovány přes noc. Po 24 hodinách byly do jamek přidány roztoky testovaných látek (10 nebo 100 pmol.l1) a buňky byly spolu s testovanými látkami inkubovány ve 37 °C a 5% (obj ./obj.) CCE během dalších 72 h. Poté bylo podle protokolu výrobce do jamek přidáno barvivo XTT (XTT cell proliferation kit II, Roche Diagnostics GmbH, Mannheim, Germany). Po hodině inkubace s barvivém byla změřena absorbance při 495 nm a signál byl porovnán s kontrolou (100% viabilita buňky bez testované látky).
Výsledky testování cytotoxicity na lidských nádorových buněčných liniích lymfoblastoidní leukémie, karcinomu děložního čípku, jatemího karcinomu amyeloidní leukémie
I ..... ' § CFM lito 1 ikíaM |
1B l__________________________-------------------I i i M&íM * j/ípM ? 1 1 k , v ϊ
Tš i HO : 44 1 '94 1 UM i 114 í 46 | 1(0 : 141 j
-33 CZ 309380 B6
58 J O 338 s /8 3 47 8> i
5 fi x 8.5 -5 í 8ó 8 š 85 80 5
Jte — 148. “f O H i.Qm 88 --5 40 04 §
84 J i x.·’ N »\ $ í j^ x 94 --5 48 82 §
73 i ..4 . 93 89 .... 93
04 [ ξ 5 Ϊ ; 0 94 í 89 5 3 ! x ; 88 195
v < 'V -4- ’Ž ΐ .< 4 w 1 4 4 í 4
84 i 19 3 ·Ν ·ΐ 48 j 44 ' 44 .<.4 i
jk. í i 4 -···[-·- X X -·> SO 3 3 48 <14 <88 108 ·
31 ; -š i líM 3 i 3 ; 48 [40 £ (>4 ;
.3^ 4 8 í \ • ?- 102 124 < 1 >M 104 4k 1 i i8 :
44 1 $ 83' i 9U [05 i .48· $ 4 N k 43 4-4 í
Sb £[4 í 09 $ l Λ 80 j 93 13 3 í S3 [{88 s
& — $ 1 5 808 w 1111(1 1 1 ΐ ΐ4 44; 48 $ 3. &· ;
...... 84 i tř 7 8 4 ·> 4 s • -J· 45 44 82 40 š
Ob ? 00 — 1- i r- 85 44 [ :5¾ ‘‘’i 73 I i 8
...... 48 / --4-- 1 i 4 103 94 > x 44 ‘;4 44 j
.......... 5 10 HO i oo 15O v {4 8 3 8
1
8$ v < s ·» 4 V z 1 { íM 18 i $ 44. :4Ό 4-y Ϊ V í ;
Μ pwLt'
Průmyslová využitelnost
Látky uvedené v této přihlášce vynálezu jsou použitelné jako léčiva pro cílenou léčbu nebo diagnostické prostředky pro cílenou diagnostiku nádorového bujení.

Claims (12)

  1. PATENTOVÉ NÁROKY
    1. Chinolinkarbonylové sloučeniny mající obecný vzorec I (I), kde Ri a R2 jsou nezávisle na sobě zvoleny ze skupiny, zahrnující H, D, F,
    R, je zvolen ze skupiny, zahrnující H, D nebo C1-C5 alkyl,
    Rt a R5 jsou nezávisle na sobě zvoleny ze skupiny, zahrnující H, D, -OH, C1-C3 alkoxy a strukturu -X-Y-Z, kde X je atom kyslíku nebo -NH-, Y je
    H í bk >x... i X nebo nebo
    15 kde kje celé číslo od 5 do 15 am je celé číslo od 1 do 3, aZ je nebo
    -35CZ 309380 B6 nebo
    Reje zvolen ze skupiny, zahrnující H, D, Cl-CIO alkyl, C3-C10 cykloalkyl, adamantyl, substituovaný či nesubstituovaný aryl nebo C7-C20 alkylaryl, v nichž aryl je
    kde R? a Rn jsou nezávisle na sobě zvoleny ze skupiny, zahrnující H, D, halogen, C1-C3 alkyl, C1-C3 alkoxy, -CF3, -C(=O)-ORi2, kde R12 je zvolen ze skupiny, zahrnující H, D, halogen, C1-C4 alkyl,
    Rs, Rg a R10 jsou nezávisle na sobě zvoleny ze skupiny, zahrnující H, D, halogen, -OMe, C1-C3 alkyl, C1-C3 alkoxy, -CF3, -C(=O)-ORi2, nebo je Re
    O « y u ó
    či o
    O ' kde R13 je zvolen ze skupiny, zahrnující -OR12, -NHR12, -N(-CH3)Ri2, pyrrolidin, morfolin,
    Ri4 a R15 jsou nezávisle na sobě zvoleny ze skupiny, zahrnující H, D, C1-C5 alkyl, fenyl, 3,4dimethoxyfenyl, benzyl, 3,4-dimethoxybenzyl a nesubstituovaný C3-C8 alkylheteroaryl, jehož heteroaryl je zvolen z pyrrolu, furanu, thiofenu, imidazolu, thiazolu, oxazolu, indolu a pyridinu,
    Rie a R17 jsou nezávisle na sobě zvoleny ze skupiny, zahrnující H, D, C1-C6 alkyl, fenyl, benzyl, 4-hydroxybenzyl, nesubstituovaný C3-C8 alkylheteroaryl, jehož heteroaryl je zvolen z pyrrolu, furanu, thiofenu, imidazolu, thiazolu, oxazolu, indolu a pyridinu, -(CH2)n-C(=O)-ORi8, -(CH2)nC(=O)-NRi9R20 a -(CH2)n-NR2iR22, kde n má hodnotu celého čísla od 1 do 4,
    -36CZ 309380 B6
    Ris je zvolen ze skupiny zahrnující H, D, C1-C3 alkyl abenzyl,
    Riga R20 jsou nezávisle na sobě zvoleny ze skupiny, zahrnující H, D, C1-C3 alkyl, benzyl a 3,4dimethoxybenzyl, a
    R21 a R22 jsou nezávisle na sobě zvoleny ze skupiny, zahrnující H, D a (benzyloxy)karbonyl.
  2. 2. Chinolinkarbonylové sloučeniny obecného vzorce I podle nároku 1, zvolené ze skupiny, zahrnující:
    (5)-JV-(2-(2-(2-(Benzylamino)-2-oxoacetyl)pyrrolidin-l-yl)-2-oxoethyl)chinolin-4-karboxamid, (5)-JV-(2-(2-(2-((3,4-Dimethoxybenzyl)amino)-2-oxoacetyl)pyrrolidin-l-yl)-2-oxoethyl)chinolin-4karboxamid, (5)-JV-(2-(2-(2-((4-Fluorobenzyl)amino)-2-oxoacetyl)pyrrolidin-l-yl)-2-oxoethyl)chinolin-4karboxamid, (5)-JV-(2-Oxo-2-(2-(2-oxo-2-(fenethylamino)acetyl)pyrrolidin-l-yl)ethyl)chinolin-4-karboxamid, (5)-JV-(2-(2-(2-((3,4-Dimethoxyfenethyl)amino)-2-oxoacetyl)pyrrolidin-l-yl)-2-oxoethyl)chinolin4-karboxamid, (5)-JV-(2-(2-(2-((4-Methoxyfenyl)amino)-2-oxoacetyl)pynOlidin-l-yl)-2-oxoethyl)chinolin-4karboxamid,
    Methyl(5)-4-(2-oxo-2-(l-((chinolin-4-karbonyl)glycyl)pyrrolidin-2-yl)acetamido)benzoát, (5)-JV-(2-(2-(2-(Cyklopropylamino)-2-oxoacetyl)pyrrolidin-l-yl)-2-oxoethyl)chinolin-4karboxamid, (5)-JV-(2-(2-(2-(Isopropylamino)-2-oxoacetyl)pyrrolidin-l-yl)-2-oxoethyl)chinolin-4-karboxamid, (5)-JV-(2-Oxo-2-(2-(2-oxo-2-(pentylamino)acetyl)pyrrolidin-l-yl)ethyl)chinolin-4-karboxamid,
    Methyl (5)-(2-oxo-2-( 1 -((chinolin-4-karbonyl)glycyl)pyrrolidin-2-yl)acetyl)glycinát, terc-Butyl (5)-(2-oxo-2-( 1 -((chinolin-4-karbonyl)glycyl)pyrrolidin-2-yl)acetyl)glycinát,
    Methyl (2-oxo-2-((5)-1 -((chinolin-4-karbonyl)glycyl)pyrrolidin-2-yl)acetyl)alaninát, (5)-JV-(2-(2-(2-((2-(Dimethylamino)-2-oxoethyl)amino)-2-oxoacetyl)pyrrolidin-l-yl)-2oxoethyl)chinolin-4-karboxamid, (5)-JV-(2-(2-(2-((2-(Ethyl(propyl)amino)-2-oxoethyl)amino)-2-oxoacetyl)pyrrolidin-l-yl)-2oxoethyl)chinolin-4-karboxamid, (5)-JV-(2-(2-(2-((2-(Isopropylamino)-2-oxoethyl)amino)-2-oxoacetyl)pynOlidin-l-yl)-2oxoethyl)chinolin-4-karboxamid, (5)-JV-(2-(2-(2-((2-(Benzylamino)-2-oxoethyl)amino)-2-oxoacetyl)pynOlidin-l-yl)-2oxoethyl)chinolin-4-karboxamid,
    Methyl (2-oxo-2-((5)-1 -((chinolin-4-karbonyl)glycyl)pyrrolidin-2-yl)acetyl)glycyl-L-leucinát,
    -37CZ 309380 B6
    Methyl (2-oxo-2-((S)-1 -((chinolin-4-karbonyl)glycyl)pyrrolidin-2-yl)acetyl)glycyl-Lfenylalaninát,
    Methyl (2-oxo-2-((S)-l-((chinolin-4-karbonyl)glycyl)pyrrolidin-2-yl)acetyl)glycyl-L-glutaminát,
    5-Benzyl 1-methyl (2-oxo-2-((S)-l-((chinohn-4-karbonyl)glycyl)pyrrolidin-2-yl)acetyl)-glycyl-Lglutamát,
    Benzyl A6-((benzyloxy)karbonyl)-A2-((2-oxo-2-((S)-1 -((chinolin-4-karbonyl)glycyl)-pyrrolidin-2yl)acetyl)glycyl) -L-ly sinát, (S)-S-(62-((4-((2-(2-(2-((3,4-dimethoxybenzyl)amino)-2-oxoacetyl)pyrrolidm-l-yl)-2oxoethyl)karbamoyl)chinolin-7-yl)oxy)-2,5,8,ll,61-pentaoxo15,18,21,24,27,30,33,36,39,42,45,48,51,54,57-pentadekaoxa-3,6,9,12,60-pentaazadohexakontyl)ethanthioát, (S)-A-(2-(2-(2-((3,4-dimethoxybenzyl)amino)-2-oxoacetyl)pyrrolidin-l-yl)-2-oxoethyl)-7-(2-(6hydrazinylnikotinamido)ethoxy)chinolin-4-karboxamid.
  3. 3. Chinolinkarbonylové sloučeniny obecného vzorce I podle nároku 1 nebo 2, pro použití jako léčiva.
  4. 4. Chinolinkarbonylové sloučeniny obecného vzorce I podle nároku 1 nebo 2, pro použití jako léčiva k léčení rakoviny.
  5. 5. Chinolinkarbonylové sloučeniny obecného vzorce I podle nároku 1 nebo 2, pro použití k léčení epiteliálních nádorů.
  6. 6. Chinolinkarbonylové sloučeniny obecného vzorce I podle nároku 1 nebo 2, pro použití k cílené diagnostice nádorové tkáně.
  7. 7. Chinolinkarbonylové sloučeniny obecného vzorce 1 podle nároku 1 nebo 2, pro použití k cílené diagnostice epiteliámích nádorů.
  8. 8. Farmaceutický prostředek, vyznačující se tím, že obsahuje terapeuticky účinné množství sloučeniny obecného vzorce I podle nároku 1 nebo 2 a případně alespoň jeden farmaceuticky přijatelný nosič, plnivo a/nebo ředidlo.
  9. 9. Farmaceutický prostředek podle nároku 8 pro použití k léčbě rakoviny, zejména epiteliámích nádorů.
  10. 10. Diagnostický prostředek, vyznačující se tím, že obsahuje diagnosticky účinné množství sloučeniny obecného vzorce 1 podle nároků 1 nebo 2 a případně alespoň jeden diagnosticky přijatelný nosič, plnivo a/nebo ředidlo.
  11. 11. Diagnostický prostředek podle nároku 10 pro použití k cílené diagnostice nádorové tkáně.
  12. 12. Diagnostický prostředek podle nároku 10 pro použití k cílené diagnostice epiteliámích nádorů.
CZ2020177A 2020-03-30 2020-03-30 Sloučeniny pro inhibici fibroblastového aktivačního proteinu CZ309380B6 (cs)

Priority Applications (9)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CZ2020177A CZ309380B6 (cs) 2020-03-30 2020-03-30 Sloučeniny pro inhibici fibroblastového aktivačního proteinu
AU2021248368A AU2021248368B2 (en) 2020-03-30 2021-03-29 Compounds for inhibition of fibroblast activation protein
US17/913,128 US12371416B2 (en) 2020-03-30 2021-03-29 Compounds for inhibition of fibroblast activation protein
CA3166572A CA3166572C (en) 2020-03-30 2021-03-29 Compounds for inhibition of fibroblast activation protein
JP2022560141A JP7368637B2 (ja) 2020-03-30 2021-03-29 線維芽細胞活性化タンパク質を阻害するための化合物
PCT/CZ2021/050036 WO2021197519A1 (en) 2020-03-30 2021-03-29 Compounds for inhibition of fibroblast activation protein
IL295197A IL295197B2 (en) 2020-03-30 2021-03-29 Compounds to inhibit fibroblast activation protein
EP21726038.9A EP4126841B1 (en) 2020-03-30 2021-03-29 Compounds for inhibition of fibroblast activation protein
KR1020227037963A KR102917649B1 (ko) 2020-03-30 2021-03-29 섬유모세포 활성화 단백질을 저해하기 위한 화합물

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CZ2020177A CZ309380B6 (cs) 2020-03-30 2020-03-30 Sloučeniny pro inhibici fibroblastového aktivačního proteinu

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CZ2020177A3 CZ2020177A3 (cs) 2021-10-13
CZ309380B6 true CZ309380B6 (cs) 2022-10-26

Family

ID=75953813

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CZ2020177A CZ309380B6 (cs) 2020-03-30 2020-03-30 Sloučeniny pro inhibici fibroblastového aktivačního proteinu

Country Status (8)

Country Link
US (1) US12371416B2 (cs)
EP (1) EP4126841B1 (cs)
JP (1) JP7368637B2 (cs)
KR (1) KR102917649B1 (cs)
AU (1) AU2021248368B2 (cs)
CZ (1) CZ309380B6 (cs)
IL (1) IL295197B2 (cs)
WO (1) WO2021197519A1 (cs)

Families Citing this family (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
AU2023223808A1 (en) * 2022-02-22 2024-09-19 Osaka University RADIOLABELED FAPα-AFFINITY COMPOUND AND USE THEREOF
AU2023303082A1 (en) * 2022-07-05 2025-01-23 Alex Zounek Prodrug kit for multi-pronged chemotherapy
CN115304582B (zh) * 2022-07-20 2023-05-12 北京法伯新天医药科技有限公司 FAP-α特异性肿瘤诊断显像剂
CN121079109A (zh) * 2023-03-10 2025-12-05 普渡研究基金会 双特异性衔接子及其与通用car-t细胞在肿瘤治疗和癌症相关成纤维细胞抑制中的用途
WO2025037000A1 (en) 2023-08-17 2025-02-20 Universiteit Antwerpen Novel fibroblast activation protein inhibitors and medical uses thereof
WO2025102002A1 (en) * 2023-11-10 2025-05-15 Purdue Research Foundation Keto-amide-based fibroblast activation protein-targeted ligand linked to a pi3k inhibitor, compositions and methods of use
WO2025125621A1 (en) 2023-12-14 2025-06-19 Radiovaxx Gmbh Cancer-associated protein-targeted strong or covalently binding precursor compounds and radiotracers
WO2025179155A1 (en) * 2024-02-22 2025-08-28 Purdue Research Foundation Chemically stable keto-amide-based fibroblast activation protein-targeted conjugates, compositions, and methods of use
WO2025240868A1 (en) * 2024-05-16 2025-11-20 Purdue Research Foundation Method of using chemically stable keto-amide fibroblast activation protein-targeted conjugates and compositions comprising same to treat fibrosis
WO2025240871A1 (en) * 2024-05-16 2025-11-20 Purdue Research Foundation Chemically stable keto-amide-based fibroblast activation protein-targeted nanoparticle-based magnetic resonance imaging agent, compositions, and methods of use

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20140357650A1 (en) * 2012-01-17 2014-12-04 Fox Chase Cancer Center Novel fap inhibitors
WO2019154859A1 (en) * 2018-02-06 2019-08-15 Universität Heidelberg Fap inhibitor

Family Cites Families (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0709373B1 (en) * 1993-07-23 2001-10-17 Zaidan Hojin Biseibutsu Kagaku Kenkyu Kai Pyrrolidine derivative
PL2753334T3 (pl) * 2011-08-30 2022-12-12 Trustees Of Tufts College Aktywowane przez fap inhibitory proteasomu do leczenia guzów litych

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20140357650A1 (en) * 2012-01-17 2014-12-04 Fox Chase Cancer Center Novel fap inhibitors
WO2019154859A1 (en) * 2018-02-06 2019-08-15 Universität Heidelberg Fap inhibitor

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
De Decker, An, et al. "Novel small molecule-derived, highly selective substrates for fibroblast activation protein (FAP)." ACS medicinal chemistry letters 10.8 (2019): 1173-1179. Publication Date:July 9, 2019; https://doi.org/10.1021/acsmedchemlett.9b00191 *
Dvořáková, Petra, et al. "Inhibitor-decorated polymer conjugates targeting fibroblast activation protein." Journal of Medicinal Chemistry 60.20 (2017): 8385-8393.Publication Date:September 27, 2017; https://doi.org/10.1021/acs.jmedchem.7b00767 *
Jansen, Koen, et al. "Selective inhibitors of fibroblast activation protein (FAP) with a (4-quinolinoyl)-glycyl-2-cyanopyrrolidine scaffold." ACS medicinal chemistry letters 4.5 (2013): 491-496. Publication Date:March 18, 2013; https://doi.org/10.1021/ml300410d *

Also Published As

Publication number Publication date
JP7368637B2 (ja) 2023-10-24
KR102917649B1 (ko) 2026-01-23
WO2021197519A1 (en) 2021-10-07
IL295197B1 (en) 2023-01-01
JP2023519752A (ja) 2023-05-12
KR20220159468A (ko) 2022-12-02
US12371416B2 (en) 2025-07-29
IL295197A (en) 2022-09-01
CZ2020177A3 (cs) 2021-10-13
IL295197B2 (en) 2023-05-01
CA3166572A1 (en) 2021-10-07
AU2021248368A1 (en) 2022-09-08
EP4126841A1 (en) 2023-02-08
AU2021248368B2 (en) 2023-04-06
EP4126841B1 (en) 2023-09-27
US20230192647A1 (en) 2023-06-22

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CZ309380B6 (cs) Sloučeniny pro inhibici fibroblastového aktivačního proteinu
JP7100034B2 (ja) 多環式ペプチド及びそれらの調製方法
JP2018536702A (ja) Ｔｌｒ７アゴニストとしての７−（チアゾール−５−イル）ピロロピリミジン化合物
WO2020014489A2 (en) Dimeric immuno-modulatory compounds against cereblon-based mechanisms
JP2012510477A (ja) 放射性医用薬剤としての窒素含有大環状結合体
MX2014012991A (es) Derivado de benzamida.
EP3587426A1 (en) New alkylating agents
JP2024539268A (ja) Ｓｉｋ３阻害剤及びその中間体を調製する合成スキーム及び手順
CA3205844A1 (en) Ligands and their use
WO2024193464A1 (zh) 一种含氮三并环衍生物及其在医药上的应用
AU2019216757B2 (en) Mebendazole prodrugs with enhanced solubility and oral bioavailability
CA3166572C (en) Compounds for inhibition of fibroblast activation protein
Simonov et al. Synthesis of 4-substituted 3-[3-(dialkylaminomethyl) indol-1-yl] maleimides and study of their ability to inhibit protein kinase C-α, prevent development of multiple drug resistance of tumor cells and cytotoxicity
WO2012169785A2 (en) Symmetrically structured quinazoline derivatives
CZ298871B6 (cs) S-Nitrosothioly jako prostredky pro lécení obehových dysfunkcí
WO2024256574A1 (en) Process for preparing macrocyclic btk inhibitors
KR20250120302A (ko) 뉴로펩티드 y1 수용체(npy1r) 표적화 치료제 및 이의 용도
TW202329954A (zh) Ezh1/2抑制劑及其製備和抗腫瘤治療中的應用
WO2024077006A1 (en) Follicle-stimulating hormone receptor (fshr) targeted therapeutics and uses thereof
WO2024098115A1 (en) Compounds for radioimaging and treatment of a cancer
CN116891462A (zh) 一种山荷叶素衍生物及其制备方法和应用
HK40088304A (zh) Ezh1/2抑制剂及其制备和抗肿瘤治疗中的应用
CN109608524A (zh) 一种兼具dpp-4抑制及glp1r激活活性的多肽衍生物、制备和应用
KR20100073454A (ko) 트란스글루타미나제 억제제로 사용되는 신규한 피라졸로디아제핀계 화합물, 이의 제조방법 및 이를 포함하는 조성물