CZ327599A3 - Zařízení pro tvorbu vzduchové clony ve dveřních otvorech, zejména u vozidel místní hromadné dopravy - Google Patents

Description

Pyrido[2,3-d]pyrimidiny pro inhibit protein tyrosin kinasou zprostředkované buněčné proliferace

Oblast techniky

Předložený vynález se týká inhibice protein tyrosin kinasou (PTK) zprostředkované buněčné proliferace. Specifičtěji se tento vynález týká pyrIdo(2.3-d]pyri»idinů a jejich použití Při inhibici buněčné proliferace a protein tyrosin kinasy enzymatické aktivity.

Dosavadní stav techniky

Mnoho chorobných stavů je charakterizováno nekontrolovanou proliferací a diferenciací! buněk. Tyto stavy zahrnují různé buněčné typy a nemoci jako je rakovina, atherosklerosa a restenosa. Stimulace růstového faktoru, autofosforylace a fosforlace intracelulárních proteinových substrátů jsou důležitými biologickými událostmi v pathomechanismu proliferativních chorob.

V normálních buňkách má fosforylace tyrosinových zbytků kritickou funkci v intracelulárním růstu signální dráhy iniciované stimulovanými extracelulárními receptory. Například spojení růstových faktorů jako je od destiček odvozený růstový faktor (PDGF), fibroblastový růstový faktor (FGF) a epidermální růstový faktor (EGF) s jejich odpovídajícími extracelulárními receptory aktivuje intracelulární tyrosin kinása enzymové domény těchto receptorů,“ čímž katalyzují fosforylaci bud intracelulárních substrátů nebo receptorů samotných. Fosforylace receptorů růstových faktorů v odpovědi k ligandové vazbě je známá jako autofosforylace.

Například EGF receptor má jako své dva nejdůležitejsí ligandy EGF a transformační růstový faktor a, (Transformin Growth Factor a -TGFa). Receptory se jeví jako mající pouze malé funkce u normálních dospělých lidí, ale jsou implikováy v chorobných procesech u velké části všech rakovin, zejména rakoviny střeva a prsu. Blízce příbuzné Erb-2 a Erb-3 receptory mají rodinu Heregulins jako své hlavní ligandy a receptorová nadměrná exprese a mutace nepochybně demonstrovány jako hlavní rizikový faktor ve špatné prognóze rakoviny prsu.

Proliferace a řízená migrace vaskulárních hladkých svalových buněk (VSMC- vascular smooth muscle cells) jsou důležitými složkami v takových proceseh jako je vaskulární přestavba, restenoza a atheroskleroza. Od destiček odvozený růstový faktor byl identifikován jako jeden z nejpotentnejších endogenních VSMC mitogenů a chemoatraktantů. Zvýšená vaskulární mRNA exprese PDGF-A a -B řetězců a PDGF receptorů byla pozorována v balónkem poškozených krysích arteriích carotis ťJ.Cel 1.Biol.. 1 1 1:2149-2158 (1990)). V tomto modelu poškození infuze PDGF také silně zvyšuje intimální ztluštění a migraci VSMC (J.Clin.Invest.. 89:507-511 (1992)). Dále PDGF-neutralizující protilátky výrazně redukují intimální ztluštění po balónkovém poškození (Science^ 253:1129-1132(1991)). Tyrphostin receptor tyrosin kinasa inhibitorů, které blokují PDGF signální transdukční dráhu byly zjištěny jako vykazující inhibici PDGF stimulované receptor tyrosin kinasa fosforylace in vivo v modelu poškození krysí manžety (Prus Develop.Res ,_29:158-166 (1993)).

Jak acidický fibroblastový růstový faktor (aFGF) a bázický fibroblastový růstový faktor (bFGF) mají mnoho biologických aktivit, zahrnujících schopnost promotovat buněčnou proliferaci a diferenciaci. Přímá evidence podpory FGF zahrnutí do VSMC byla uvedena Lindnerem a Reidym ťProc.Nati.Acad.Sci-USA. 88:3739-3743 (1991)), kteří demonstrujíce systémová injekce neutralizující protilátky proti bFGF před balónkovou angiplastií krysích arteria carotis inhibuje poškození vyvolané mediální SMC proliferaci z více než 80 % měřeno 2 dny po poškození. Je pravděpodobné, že bFGF uvolněný z poškozených buněk působí parakrinálním způsobem pro vyvolání VSMC růstu. V poslední době Lindner a Reidy (Cir.Res., 73:589-595 (1993)) demonstrovali zvýšenou expresi jak mRNA pro bFGF tak FGFR-1 v replikaci VSMC a endothelu v en face preparacích balónkem poškozených kysích arteria carotis. data poskytují zjištění, že poškozeneé arterie 1igand/receptor systému bFGF a FGFR-lmohou být zahrnuty do kontinuální proliferativní odezvy VSMA vedoucí k formaci neointimy.

Buchdunger a spol., Proc.Natl.Acad.Sci., Vol. 92, březen 1995, 2558-2562, uvádějí inhibici PDGF signální transdukční dráhy jak in vitro tak in vivo PDGF receptor tyrosin protein kinasovým inhiitorem. Sloučenina vykazuje protinádorovou aktivitu v nádorových modelech za použití astrocytoma buněčných linií.

Tak EGF, PDGF, FGF a jiné růstové faktory hrají pivotální úlohy v patomechanisrnu buněčných proliferativních chorob jako je rakovina, atheroskleroza a restenoza. Po spojení s jejich odpovídajícími receptory stimulují tyto růstové faktory aktivitu tyrosin kinasy jako jedné i počátečních biochemických událostí, vedoucích k DNA syntéze a buněčnému dělení. Z toho vyplývá, že sloučeniny, které inhibují protein tyrosin kinasy spojené s transdukčními dráhami intracelulárního růstového faktoru jsou vhodnými činidly pro léčení buněčných proliferativních chorob.

Nyní bylo objeveno, že určité pyr ido [2,3-d] pyr imidiny. inhibují protein tyrosin kinasy a jsou vhodné pro léčení a prevenci atherosklerosy, restenosy a rakoviny.

Některé pyrido[2,3-d]pyrimidiny jsou známé. Například US patent 3534039 popisuje serie 2,7-diamino-6-arylpyrido[2,3-d]pyrimidinových sloučenin jako diuretických činidel; US patent 3639401 popisuje serie 6-ary1-2,7-bis[(trialkylsilyl)amino]pyrido[2,3-d]pyrimidinových sloučenin jako diuretických činidel; US patent 4271164 popisuje serie 6—substituovaných—arylpyrido[2,3—d]pyrimidin—7— aminů a jejich derivátů jako antihypertenzivních činidel; evropská zveřejněná přihláška 0537463 A2 popisuje serie substituovaných-pyrido[2,3-d]pyrimidinu vhodných jako herbicidy. Žádný z předcházejících odkazů nepopisuje sloučeniny podle předloženého vynálezu nebo nenaznačuje, že takové sloučeniny jsou vhodné pro léčení atherosklerosy, restenosy, psoriasy a rakoviny.

Podstata vynálezu

Předložený vynález poskytuje nové sloučeniny charakterizované jako pyrido[2,3-d]pyrimidiny, které jsou vhodné pro inhibici protein tyrosin kinas a jsou tak účinné při léčení buněčných proliferativních chorob atherosklerosy, restenosy, psoriasy a rakoviny. Předložený vynález je podrobněji veden na sloučeniny obecného vzorce I

kde

X je NH, N-acyl, O nebo S;

Ri je NR3R4, S(0)o,i nebo 2-R3 nebo OR3;

R2, R3 a R4 jsou nezávisle vodík, (CH2)nPh, kde Ph je fenyl nebo substituovaný fenyl a n je 0, 1, 2 nebo 3; heteroaromatické skupiny, cykloalkyl, Ci-Cealkyl, Cj-Csalkenyl a Cz-Csalkinyl, kde alkyl, alkenyl a alkinylskupiny mohou být substituovány substituentem ze skupiny NR5R6, fenyl, substituovaný fenyl, thioalkyl, alkyloxy, hydroxy, karboxy, halogen, cykloalkyl a kde Rs a Rs jsou nezávisle vodík, Ci-Cealkyl, C2^-C6alkeny1, C2-Csalkinyl, (CH2)nPh, kde Ph je fenyl nebo substituovaný fenyl a n je 0, 1, 2 nebo 3; cykloalkyl, heteroaromatický zbytek, a Rs a Rs mohou spolu s dusíkem, ke kterému jsou připojeny tvořit kruh, mající 3 až 7 atomů uhlíku a popřípadě obsahující 1, 2 nebo 3 heteroatomy vybrané z dusíku, substituovaného dusíku, kyslíku a síry;

Ra může dále být -C(=O)R3, -C(=O)OR3, -SO2R3, -SO2NR5R6, -C(=O)NR₅R6, -C(=S)NR₅R6, -C(=NH)R₃, -C(=NH)NR₅R6 a R3 a Ra mohou společně s dusíkem, ke kterému jsou připojeny tvořit kruh, mající 3 až 7 atomů uhlíku a popřípadě obsahující 1,2 nebo 3 heteroatomy vybrané z dusíku, kyslíku a síry;

Ar je fenyl, substituovaný fenyl nebo heteroaromatický zbytek;

a jejich farmaceuticky přijatelné soli.

Preferované sloučeniny mají výše uvedený vzorec, kde Ar je fenyl nebo fenyl substituovaný 1 nebo 2 skupinami vybranými z Ci-C&alkylu nebo halogenu, zejména halogenu jako je chlor nebo brom.

Další preferované sloučeniny jsou ty, kde Ra je Ci-Csalkyl, C2-C&alkeny1, (CHzínPh jako je fenyl a benzyl, nebo C3^_C6cykloalky1 jako je cyklopropyl.

Zvláště preferovaná skupina sloučenin má výše uvedený vzorec, kde X je 0.

Jiná preferovaná skupina sloučenin jsou ty, kde X je NH. Toto jsou iminy a jsou zejména vhodné jako meziprodukty, vedoucí ke sloučeninám, kde X je 0.

Další preferované sloučeniny mají výše uvedený vzorec, kde Ri je NH2 nebo NHR3, kde R3 je Ci-Ctalkyl popřípadě substituovaný NRíRř.

Zvláště preferovaná skupina sloučenin podle vynálezu má vzorec

kde Ri je NR3R4, OR3 nebo SR3 , kde R3 je vodík nebo Ci-Cealkyl a R4 je vodík nebo Ci-C6alkanoyl; R2 je Ci-Cealkyl a R7 a Re nezávisle jsou Ci-Cealkyl nebo halogen, zejména chlor, fluor nebo brom. Preferované alkylové skupiny jsou substituovány NR5R6, kde R5 a Re jsou vodík nebo alkyl, nebo spolu s dusíkem, e kterému jsou připojeny tvoří cyklický kruh, mající 2 heteroatomy, například

R₉N kde R9 je vodík, Ci-Cealkyl nebo (CHzínPh.

Další preferovaná skupina sloučenin má vzorec

kde Ri , R2, R7 a Re mají výše definovaný význam.

Další preferovaná skupina sloučenin má vzorec

kde Ri , R2, R7 a Re mají výše definovaný význam.

Je třeba vzít na vědomí, že jestliže R2 je vodík, sloučeniny mohou existovat v tautomerní formě jak je uvedena dále

Nejpreferovanější sloučeniny podle vynálezu mají vzorec

kde Ri, Rz, R7 a Re mají výše definovaný význam. Ideálně je Rz alkyl jako je methyl nebo ethyl a R7 a Rs je halogen jako je chlor nebo brom. Nejpreferovanější Ar skupina je fenyl, ideálně fenyl substituovaný jednou, dvěma nebo třemi skupinami vybranými z halogenu, Ci-Csalkylu, hydroxy, Ci-Csalkoxy, karboxy, Ci-Csalkoxykarbonylu a Ci-Csalkylu substituovaného hydroxy, karboxy, alkoxykarbonylem, amino, Ci-Ctalkylamino a di-Ci-Cealkylamino. Zvláště preferovaná skupina takových sloučenin má vzorec

kde R10 je fenyl, chlor, brom, methyl, methoxy, hydroxy, hydroxymethyl, 2-diethylaminoethoxy, methoxykarbonylmethyl, karboxy, karboxymethyl, ethoxykarbonyl, 2~karboxyethy1 nebo

2-ethoxykarbonylethyl.

Tento vynález také poskytuje farmaceutické formulace, obsahující sloučeninu obecného vzorce I společně s farmaceuticky přijatelným nosičem, ředidlem nebo přísadou.

Sloučeniny v rozsahu předloženého vynálezu mají specifickou afinitu prroti jednomu nebo více substrátovým místům tyrosin kinasa domén EGF nebo jiné EGF rodiny receptorů jako je erb B2, 3 a 4; FGF, PDGF, V-src a C-src. Sloučeniny v rozsahu předloženého vynálezu účinně inhibují PDGF autofosforylaci receptorů a inhibují proliferaci a migraci vaskulárních hladkých svalových buněk.

Jako inhibitory protein kinas, sloučeniny pdle předloženého vynálezu jsou vhodné pro kontrolu proliferativních chorob, zahrnujících leukémii, rakovinu, psoriasu, proliferaci vaskulárních hladkých svalů a postchirurgickou vaskulární stenosu a restenosu u savců.

Dalším provedením tohoto vynálezu je způsob léčení subjektů, postižených chorobami vyvolanými proliferaci vaskulárních hladkých svalů. Způsob poskytuje inhibici proliferace a/nebo migrace vaskulárních hladkých svalů podáním účinného množství sloučeniny obecného vzorce I subjektu v případě potřeby takové léčby.

Sloučeniny podle předloženého vynálezu mohou existovat v nesolvatované formě jakož i v solvatovaných formách, zahrnujících hydratované formy. Obecně jsou solvatované formy, zahrnující hydratované formy, ekvivalentní nesolvatovaným formám a jsou zahrnuty do rozsahu předloženého vynálezu.

j Ve sloučeninách obecného vzorce I výraz Ci-Cealkyl j znamená přímý nebo rozvětvený uhlovodíkový radikál, mající 1 j až6 atomů uhlíku.a zahrnuj ící’,_ř například methy 1, . ethy 1, >

ή-propyl? isopropyl; n-butyl; sek:butyl, isobuty1,Ktercíbutyl, n-pentyl, n-hexyl a‘podobně τ ; t .

; · - y ‘ j ’^L mu. ’ git ύ - f v¹ . ? ’ -· i· -i’·, * ‘ \jHalogen zahrnuješluor, chlor, brom a jod.

j Cz-Cfealkenyďůipředstavuje;.přímé a rozvětvené 'V'-h;

' uhlovodíkové radikály, mající’od 2.ído 6\atomů uhLíkum**!

dvojnou vazbu?· a zahrnující ethenyl, 3-buten-l-yl, ť '>

í Ž^ethenyIbutyR, 3-hexen-l-yl <a. podobněTypicky ’·

L .... . Cj-.C&.alkinýl.ové skupiny zahrnuj íůpropinyl, 2-butin-l-yl,

J ₍ 3-pentin-l-yl· a podobně. -, * jí ' 'V: . ' .. - ’ » f C i I I’ í Ca-Cscykloalkyl znamená cyklickou hydrokarbylovou : skupinu jako je cyklopropyl, cyklobutyl, cýklohexyl i a cyklopentyl.

( Ci-Csalkoxy. znamená alkylové skupiny uvedené výše ) navázané přes kyslík, jejich příklady zahrnují methoxy,

J ; éthoxy,'isopropoxy, terč.butoxy a podobně.

[ j ^; -v . n . J ' ' ^;' ! ^/.-Ci-Csarkanoyl, skupiny jsou alkyl připojený přes 'karbony Γ’,ν í ř nvi¹111 y ' .

í / ii ,ΐί y i ^A ' i ' < b i ’ ¹ ' <» ' např.' Ci-Csalkyl' C-.^: Takové· skupiny zahrnují formyl, acetyl, ; propiony 1butyrylva úsobutyrýl J '».....· c . .

. i c.' > 3 ” ''ý ¹ a r ο· \ ; Acyl znamená alkyl nebo aryl (Ar) skupinu navázanou

Ϊ i ^Ll· i Ij iS ΐ

O

Η přes karbonylovou skupinu (-C-). Například acyl zahrnuje Ci-Csalkanoyl, zahrnující substituovaný alkanoyl, kde alkylová část může být substituována NRsRs nebo karbocyklickou nebo heterocyklickou sksupinu. Typické acylové skupiny zahrnují acetyl, benzoyl a podobně.

Alkylové, alkenylové, alkoxylové a alkinylové skupiny popsané výše mohou být substituovány. Skupiny substituentů, které mohou být částí alkylových, alkenylových, alkoxylových a alkrnylových skupin jsou NRsŘs, fenyl, substituovaný fenyl, thioalkyl (Ci-Cs), Ci-Csalkoxy, hydroxy, karboxy, Ci-C₆alkoxykarbonyl, halogen, cykloalkyl a 5- nebo 6-ti členný karbocyklický kruh nebo heterocyklický kruh, mající 1 nebo 2 heteroatomy vybrané z dusíku, substituovaného dusíku, kyslíku a síry. Substituovaný dusík znamená dusík, nesoucí Ci-Cealkyl nebo (CHzjnPh.

Příklady substituovaných alkylových skupin tak zahrnují 2-aminoethy1, 2-diethylaminoethyl, 2-dimethylaminopropyl, ethoxykarbonylmethyl, 3-fenylbutyl, methylsulfanylmethyl, methoxymethyl, 3-hydroxypentyl, 2-karboxybuty1, 4-chlorbutyl, 3-cyklopropylpropyl, 3-morfolinopropyl, piperazinylmethy1 a 2-(4-methylpiperazinyl)ethyl.

Příklady substituovaných alkenylových skupin tak zahrnují 2-diethylaminoetheny1, 3-amino-2-butenyl, 3-(l-piperazinyl)-lpropenyl, 3-hydroxy-l-propenyl, 2-(1-s-triazinyl)ethenyl, 3-feny1-3-penteny1 a podobně.

ύ 2 Příklady., substituovaných alkinylskupin zahrnují í 2-methoxyethny 12-ethyIsulfanylethinyl , , .

4r(1 —piperaziny1)^3—(butiny1),.3-feny1—5—hexiny1, t. »io λ 3-diethylamino-ř3-but:inyl ,'4r'chlor-3-butinyl, *-s > v, ; 4-cyklobutýlř4-hexinyl' a· podobně . . t ,

C* ikj»» ůj¹ 9- ϊ ,v’ -5 1; i s'-’ί ' Cii ; *. íy^ro *

J Typické substituované alkoxyskupiny zahrnují aminomethoxy, trifluormethoxy, 2-díethylaminoethoxy, 2-ethoxykarbonylethoxy, 3-hydroxypropoxy, 6-karboxyhexyloxy a podobně J π -.s# ’ - í · * ’’ ·»( .: . u .; i_; , '' .

I 'í. Λ/L J *'ίΛ,. i i tvř'·· Η M.yl * , * j Dále zahrnují příklady substituovaných alkyl, alkenyl a alkinylskupin di.methylaminomethy.l., karboxyme.thy 1,..... 4rdiethylamino“3-bútěn-l-yl’', 5-ethylmethy lamino-3-pent in-l-yl, 4-morfolinobutyl, 4-tetrahydropýridinyIbutyl-SHmidazolidin-l-ylpropyl, 4-ťétrahydrothiazol-3-yl-butyl·, fenylmethy1, 3-chlorfenylmethyl á, podobně.< ¹. .

tytr. ' ' _ř fj f

Výraz. .Aroznačilje nesubstituované a substituované aromatické atheteroaromatické skupiny. Heteroaromatické skupiny mají!; od. 4 do’ 9 atomů v„ kruhu,. z ni chž jeden až čtyři jsou’vybrány/z 0, S a N.>Preferované skupiny mají· 1 nebo 2 hétěřoatomy! γ, 5H nebo, ó-člennémí aromatickém i kruhu. .Mono a bicykl i cké> kruhové systémy, sem¹-rovněž spadaj ί .’ ι Typické. Aří skupiny zahrnují fenyl, 3-chlorfenyl, 2,6-dibromfenyl, pyridyl, 3-methyIpyridyl, benzothienyl, 2,4,6-tribromfeny1, 4-ethylbenzothienyl, -furaňyl ·, '3,4-diethylfuranyl, naftyl, 4 jV-dichlornaf tyh a-t podobně·.* , vt-íů-b. .....· - . ·:> '-.OVJIV /'-«T 1ϊ< d ΗΊόΛ· - S t λ . Preferované 'Ar skupiny’ j sou. f ehyl^L a <f eny 1 substituovaný

1, 2 nebo 3 skupinami nezávisle vybranými z halogenu, alkylu, alkoxylu, thio, thioalkylu, hydroxy, alkanoylu, -CN, -NO2, -COORe, -CF3, alkanoyloxy neboo amino vzorce -NR5R6. Alykl a alkoxyskupiny mohou býtsubstituovány jak je definováno výše. Například typické skupiny jsou karboxyalkyl, tj.

Ci-Cealkyl, alkoxykarbonylalkyl Ci-Cealkyl, hydroxyalkyl a

COOH COOalkyl hydroxyalkoxy, (O)o nebo i-Ci-Csalkyl a alkoxyalkyl, tj. Ci-Cealkyl. Disubstituovaný fenyl je preferován a alkyl

2,6- disubstituovaný fenyl je zejména preferován.

Typické Ar substituované fenyl skupiny, které jsou preferovány zahrnují 2-aminofenyl,3-chlor-4-methoxyfenyl, 2,6-dimethylfenyl, 2,6-diethylfenyl, 2-n-hexyl-3-fluorfenyl, 3-hydroxyfenyl, 4-hydroxymethy1fenyl, 3,4-dimethoxyfenyl, 2,6-dichlorfenyl, 4-(3-aminopropoxy)fenyl-, 2,6-difluorfeny1, 2-chlor-6-methylfenyl, 2,4,6-trichlorfeny1, 2,6-dimethoxyfenyl, 4-(dÍethylamioethoxy)fenyl, 2,6-dihydroxyfenyl, 2,6-dibromfenyl, 2,6-dinitrofeny1, 2,6-di(trifluormethyl)fenyl, 3-(dimethylaminoethyl)fenyl, 2,6-dimethylfenyl, 2,3,6-trimethy1feny1, 2,6-dibrom-4-methy1fenyl a podobně.

V preferovaném provedení Ri ve vzorci I je skupina NR3R4, kde R3 a R₄ jsou vodík, Ci-Cs-alkyl, Ci-Cs-alkyl substituovaný skupinou NR5R6 a kde R3 je vodík a R₄ je Ci-Cs-alkanoyl nebo alkanoyl substituovaný COOH.

Příklady takových NR3R4 skupin zahrnují amino, methylamino, di-isopropylamino, acetylamino, propionylamino, 3-aminopropy lamino, 3-ethylaminobutylamino, 3-di-n-propylamino-propylamino, 4-diethylaminobutylamino, a 3-karboxypropionylamino. R3 a R4 mohou spolu s dusíkem, ke kterému jsoupřipojeny tvořit kruh, který může obsahovat 2 nebo více heteroatomu, výhodně dusík. Příklady takových cyklických NR3R4 skupin zahrnují pyrrolidinyl, piperazinyl, 4-methylpiperazinyl, 4-benzylpiperaziny1, pyridinyl, piperidinyl, pyrazinyl, morfolinyl a podobně. R3 a R₄ může navíc tvořit cyklický kruh, který je substituován 1 nebo 2 o xo skup i nam i.- Např í k l ad j e s ťl i ž e R 3 j e vodí k á R 4 je á 1 kanby Γ' 0 tl (tj. Ct-Cs-alkyl C), kde alkyl nese substituent jako je karboxy nebo halogen, mohou být takové skupiny cyklizovány za vzniku cyklických ketonů. Typické skupiny zahrnují 2-ketopyrrolidinyl a 1-pyrrolidinyl-2,5-dion. Jak je uvedeno výše, preferovanou skupinou sloučenin jsou ty, kde R3 je vodík a R4 je aryl, zejména fenyl a fenyl substituovaný skupinami jako je aminoalkyl a aminoalkoxy, např. dimethylaminoethyl a dimethylaminoethoxy.

Sloučeniny vzorce I jsou schopny dále tvořit jak farmaceuticky přijatelné adiční sole s kyselinami a/nebo bázemi. Všechny tyto formy jsou v rozsahu předloženého vynálezu.

Farmaceuticky přijatelné adiční sole s kyselinami sloučenin vzorce I zahrnují sole odvozené od anorganických kyselin jako je kyselina chlorovodíková, dusičná, fosforitá, sírová, bromovodíková, jodovodíková, fosforečná a podobně jakož í sole odvozené od organických kyselin, fenyl-substituovaných alkanových kyselin, hydroxyalkanových kyselin, alkandiových kyselin, aromatických kyselin, alifatických a aromatických sulfonových kyselin atd. Takové sole zahrnují sulfáty, pyrosulfáty, bisulfáty, sulfity, bisulfity, nitráty, fosfáty, monohydrogenfosfáty, dihydrogenfosfáty, metafosfáty, pyrofosfáty, chloridy, bromidy, jodidy, acetáty, propionáty, kapryláty, isobutyráty, oxaláty, malonáty, sukcináty, suberáty, sebakáty, fumaráty, maleáty, mandláty, benzoáty, chlorbenzoáty, methylbenzoáty, dinitrobenzoáty, ftaláty, benzensulfonáty, toluensulfonáty, fenylacetáty, citráty, laktáty, maleáty» tartráty, methansulfonáty a podobně. Zahrnuty rovněž jsou sole aminokyselin jako jsou argináty a podobně a glukonáty, galaktouronáty (viz např. Berge S.M. a spol., Pharmaceutical Salts, J. of Fharmaceutiical Science. 66:1-19 (1977)).

Adiční sole bázických sloučenin s kyselinami se připraví kontaktem formy volné báze s dostatečným množstvím požadované kyseliny za vzniku soli běžným způsobem. Forma volné báze může být regenerována stykem solné formy s bází a izolací volné báze běžným způsobem. Formy volné báze se poněkud liší od svých odpovídajících solných forem určitými fyzikálními vlastnostmi jako je rozpustnost v polárních rozpouštědlech, ale jinak jsou sole ekvivalentní jejich odpovídající volné bázi pro účely předloženého vynálezu.

Farmaceuticky přijatelné adiční sole bází se tvoří s ovy nebo aminy jako jsou sole alkalických kovů a kovů alkalických zemin nebo organických aminů. Příklady kovů použitých jako kationty jsou sodík, draslík, hořčík, vápník a podobně. Příklady vhodných aminů jsou N,N'-dibenzy1ethlendiamin, chlorprokain, cholin, diethanolamin, ethylendiamin, N-methyIglukamin a prokain (viz např.Berge S.M. a spol., Pharmac eut i ca1 Salts, J.of Pharmaceutical Science, 66:1-19 (1977)).

Adiční sole s bázemi kyselých sloučenin (například když R3 je karboxy alkylskupina jako je karboxymethy1 nebo 3-karboxybutyl) se připraví stykem formy volné kyseliny s dostačujícím množstvím požadované báze za získání sole běžným způsobem. Forma volné kyseliny může být regenerována kontaktem solné formy s kyselinou a izolací volné kyseliny obvyklým způssobem. Formy volné kyseliny se liší od svých odpovídajících solí poněkud v určitých fyzikálních vlastnostech jako je rozpustnost v polárních rozpouštědlech, ale jinak jsou sole ekvivalentní jejich odpovídající volné kyselině pro účely předloženého vynálezu.

Zatímco zde uvedené formy vynálezu tvoří preferovaná provedení, je možných i mnoho jiných. Není možno zde uvést všechny možné ekvivalentní formy nebo rozvětvení vynálezu. Je třeba chápat, že zde používané výrazy jsou spíše popisné než omezující a že je možno provést různé změny aniž by byl narušen rozsah a myšlenka vynálezu.

Sloučeniny vzorce I mohou být připraveny podle syntéz uvedených ve schematech I až VII. I když tato schemata často uvádějí přesné struktury, jsou metody široce aplikovatelné na analogické sloučeniny vzorce I, za pomoci vhodného chránění nebo deprotekce reaktivních skupin metodami, které jsou v

oboru organické chemie standardní. Například hydroxyskupiny, za účelem prevence před neočekávanými vedlejšími reakcemi, obecně vyžadují, aby byly převedeny na ethery nebo estery během chemických reakcí na jiných místech molekuly. Hydroxy-chránící skupina se snadno odstraní za poskytnutí volné hydroxyskupiny. Aminoskupiny a karboxylové kyselé skupiny jsou podobně derivatizovány pro jejich ochranu proti neočekávaným vedlejším reakcím. Typické chránící skupiny a metody pro jejich připojení a odštěpení jsou plně popsány v práci Greene a Wuts v Protective Groups in Organic Synthesis, John Wiley and Sons, New York (2.vyd;1991) a McOmie, Protective Groups in Organic Chemistry, Plenum Press, New York, 1973.

Schema I popisuje typickou metodu přípravy pyrido[2,3-d]pyrimidin-7(8H)-onú a 7-(8H)-imidů podle vynálezu, sloučenin vzorce I, kde X je 0 nebo NH. Syntéza začíná reakcí kyanoacetátu jako je ethylethoxymethylenkyanoacetát s thiopseudomočovinou jako je 2-methyl-2-thiopseudomočovina-sulfát Za získání 5-kyano-4-hydroxy-2-(methylsulfanyl)pyrimidinu. Tato reakce je podrobněji popsána v Helv.Chím.Acta.,42:763-772 (1959). 4-Hydroxypyrimidin v následujícím stupni reaguje s halogenačním činidlem jako je fosforoxychlorid nebothionylchlorid za získání 4-halogenpyrimidinu, například 5-kyano-4-chlor-2-(methylsulfanyl)pyrimidinu. Halogenpyrimidin pak reaguje s aminem R2NH2 za poskytnutí 5-kyano-4-subst ituováného amino-2-(methy1 sulfanyl)pyrimidinu. Použitý amin muže mít R2, která je skupinou požadovanou v konečném produktu vzorce I, například alkyl jako je methyl nebo R2 může být skupina, která se později odstraní.například benzyl nebo podobně, za vzniku sloučeniny vzorce I, kde R2 je vodík. Sloučeniny, kde Rz je vodík mohou být alkylovány nebo acylovány standardními metodami.

Reakce mezi halogenpyrimidinem a aminem R2NH2 se typicky provádí smísením ekvimolárních množství halogenpyrimidinu a aminu v nereaktivním organickém rozpouštědle jako je toluen, xylen, methylenchlorid nebo podobně, při teplotě od asi 50 ⁰C do asi 150 °C.Přebytek aminu je možno použít, je-li to potřeba. 4-Aminopyrimidin, který je získán, pak reaguje s hydrazinem nebo substituovaným hydrazinem pro nahrazení 2-methylsulfanylskupiny za získání 2-hydraz ino-4-subst ituováného amino-5-kyano-pyrimidinuHydrazino-pyrimidin reaguje s dusitanem sodným ve vodné anorganické kyselině pro provedení diazotace hydrazinové skupiny za poskytnutí 2-azido-4-(substituovaný amino)-5“kyano-pyrimidinu. Reakce této sloučeniny s redukčním činidlem jako je Raney nikl probíhá hydrogenace jak kyanoskupiny tak azidoskupiny za získání 2-amino-4-(substituovaný amino)-5-pyrimidinkarboxaldehydu.

4-(Substituovaný amino)-5-pyrimidinkarboxaldehydy mohou být alternativně připraveny tak, že se vyjde z komerčně dostupného esteru 4-halogen-5-pyrimidinkarboxylové kyseliny. Například ethylester kyseliny 2-methylsulfanyl-4-chlor-5-pyrimidinkarboxylové (dostupný od Aldrich Co.) může reagovat s aminem R2NH2 jako je methylamin, benzylamin, nebo podobně, k nahrazení 4-chlorskupiny a poskytnutí odpovídajícího ethylesteru kyseliny 2-methylsulfanyl-4-(substituovaný amino)-5-pyrimidinkarboxylové. Esterová skupina se redukuje na alkohol, například reakcí s 1 ithiumaluminiumhydridem v tetrahydrofuranu a alkoholová skupina se pak oxiduje na aldehyd reakcí s oxidantem jako je dichromát sodný, oxid manganatý nebo podobně, za získání odpovídajícího 2-methylsulfayl-4~(substi tuovaný amino)-5-pyrimÍdinkarboxaldehydu. 2-Methylsulfanylová skupina se vytěsní hydrazinem a hydrazinoskupina se diazotizuje a následně redukuje jak je popsáno výše za poskytnutí požadovaného 2-amino-4-(subst i tuovaný amino)-S-pyrimidinkarboxaldehydu.

Pyrimidinkarboxaldehyd pak reaguje s arylacetonitrilem za přítomnosti báze a v rozpouštědle jako je xylen, 2-ethoxyethanol, dioxan nebo podobně jak je uvedeno ve schématu I. Typické báze, které mohou být použity zahrnují hydrid sodný, methoxid sodný, kovový sodík, uhličitan draselný a podobně. Pyrimidinkarboxaldehydy a arylacetonitrily jsou typicky používány v přibližně ekvimolárních množstvích. Typické arylacetonitrily, které mohou být použity zahrnují fenylacetoni trii, 2,6-dichlorfenylacetonitri1, 2,6-dimethylfenylacetonitril, o-tolylacetonitril, pyridylacetonitri 1, furanylacetonitri1, naftylacetonitri 1 a podobně. Reakce se typicky provádí v nereaktivním rozpouštědle jako je methyl nebo ethylcellosolve, diglym, dimethylformamid nebo podobně a při zvýšené teplotě asi 50 ⁰C až asi 200 °C a obecně je v podstatě hotová během asi 2 až asi 24 hodin. Produkt 6-aryl-7-imino-8-substituovaný-7,8-dihydro-pyrido[2,3-d]pyrimidin-2-ylamin vzorce I, kde X je NH a Ri je NR3R4, se snadno izoluje přídavkem vody k reakční směsi, což obecně působí vysráení produktu. Produkt imin může být dále čištěn, je-li to

potřeba rekrystali žací z rozpouštědel jako je ethylacetát, aceton, isopropanol a podobně, nebo chromatografií přes pevné nosiči jako je silikagel.

6-Aryl-7-imino-8-substituovaný-7,8-dihydro-pyrido[2,3-d]pyrimidin-2-ylamin takto připravený má vzorec

kde Ra, R3, Ra a Ar mají výše definovaný význam. Typické iminy takto získané zahrnují následující:

Ra	Rs	R4	Ar
ch3	H	ch3	f enyl
cyklopropyl	ch3	ch3	3-methoxyfeny1
3-butinyl	Et	acetyl	1-naftyl
3-chlorf enyl	H	H	3-pyridyl
3-aminopropyl	H	2-furyl	2-thienyl
benzyl	-CHa-CHa-	-CHa-CHa	2,3,5-tribrom-
			fenyl.HC1
Et	Et	Et	f enyl
Et	H	f	fenyl

—^CB3 ·

Pokračování r^=\

Et H v—> 2-jodfenyl

Me H _ch₃ 2,6-dibrom—och₂ch₂n feny¹

------------------- \_CH3--------------------*

6-Aryl-7-imino-8-substi tuované-7,8-dihydropyrido[2,3-d]pyrimidin-2-ylaminy jsou vhodné jako terapeutická činidla, stejně jako meziprodukty, protože jsou snadno konvertovatelné na odpovídající 7-ketoderiváty jednoduchým zahřátím v anorganické kyselině nebo podobně. Hydrolýza je v podstatě úplná po asi 5 až 24 hodinách, jestliže se provádí při asi 60 °C až asi 200 °C. Produkt, 2-amino-6-ary1-8-substituovaný -pyrido[2,3-d]pyrimidin-7(8H)-on se snadno izoluje odstraněním reakčního rozpouštědla, například odpařením za sníženého tlaku a krystalizací z běžných rozpouštědel jako je ethylacetát, aceton, tetrahydrofuran a podobně.

7-Oxo-pyrido[2,3-d]pyrimidiny podle vynáezu mohou být připraveny jednoduchou hydrolýzou 7-amino-pyridopyrimidinů v anorganické kyselině jak je ilustrováno ve schema II. 7-Aminopyridopyrimidiny jsou snadno dostupné metodami ppsanými v US patentu 3534039. 7-Aminopyridopyrimidiny se jednoduše rozpustí v anorganické kyselině jako je koncentrovaná kyselina chlorovodíková, kyselina sírová, kyselina fosforečná nebo podobně. Hydrolyzační reakce je obecně úplná po asi 12 až asi 24 hodinách,jestliže se provádí při asi 80 °C až asi 200 °C.

Produkt se snadno izoluje odstraněním reakčního rozpouštědla a krystalizací z rozpouštědla jako je dimethylsulfoxid, dimethylformamid, dioxan nebo podobně.

7-oxo-pyrido[2,3-d]pyrimidiny mohou být alternativně připraveny reakcí 2,4-diamino-5-pyrimidinokarboxaldehydu s arylacetoesterem jak je uvedeno dále:

kde R2, R3, Ra a Ar mají výše definovaný význam a alkyl je nižší alkylskupina jako je methyl, ethyl, isobutyl a podobně. Reaktanty jsou obecně smíseny s nerreaktivním rozpouštědlem jako je dimethylformamid, tetrahydrofuran nebo ethylcellosolve a arylacetoester je obecně používán v přebytku, například v 0,5 až 1,0 molárním přebytku vzhledem k pyrimidinu. Reakce se provádí za přítomnosti báze jako je methoxid sodný nebo hydrid sodný a obecně je úplná během asi 2 až 24 hodin, provádí-li se při zvýšené teplotě od asi 50 do asi 120 °C. Produkt 7-oxo-pyrido[2,3-d]pyrimidiny se získají odstraněním rozpouštědel a krystalizací produktu z organického rozpouštědla jako je methanol, ethylacetát nebo podobně. Proces může být proveden se 2-oxy (Ri= -OR3) a 2-thio (Ri= -SR3) 4-amino-5-pyrimidinkarboxaldehydy za poskytnutí odpovídajících 7-oxo~2-oxy- a 2-thio pyrido[2,3-d]pyrimidinů podle vynálezu.

Sloučeniny podle vynálezu, kde Rz ve vzorci I je jiný než vodík, se připraví snadno použitím substituovaného aminu R2NH2 v reakci popsané výše, nebo alternativně alkylací pyridopyrimidinů, kde Rz je vodík, například jak je ilustrováno ve schématu II. Reakce je obecně provádí smísením pyridopyrimidinů s ekvimolárním množstvím nebo přebytkem alkylaačního činidla, například alkylhalogenídu jako je methyljodid, benzylbromid, 3-hexen-l-yl-jodid nebo podobně ve vzájemném rozpouštědle jako je toluen, xylen, dimethylformamid nebo podobné. Báze jako je hydrid sodný muže být přidána pro katalýzu reakce a pro působení jako lapač kyseliny. Produkt 8-substituovaný pyridopyrimidin se snadno izoluje odstraněním reakčních rozpouštědel a dále se čistí, je-li to žádoucí chromatografií nebo krystalizací z toluenu, acetonu nebo podobně.

Schema III ilustruje reakci 2-aminopyridopyrimidinů s acyyačními činidly a diacylačními činidly za vzniku amidů a cyklických amino systémů. Například 2-aminopyridopyrimidiny vzorce kde Rz je jiný než odík, X je 0 nebo S a Ar má výše definovaný význam, mohou reagovat s ekvimolárním množstvím nebo slabým přebytkem halogenidu kyseliny nebo anhydridu kyseliny za dosažení acylace 2-aminoskupiny. Typické halogenidy kyseliny zahrnují acetylchlorid, benzoyIbromid, propionyljodid a podobně. Běžně používané anhydridy zahrnují acetanhydrid, propionylanhydrid a směsné anhydridy jako anhydrid kyseliny octové a máselné. Acylační činidla jako je anhydrid kyseliny jantarové a podobně, mohou být použita za vzniku cyklických imidů jak je popsáno ve schématu III.

Sloučeniny podle vynálezu, kde X je S mají vzorec

kde Ri, Rz a Ar mají výše definovaný význam. Tyto pyridopyrimidinthiony se připraví reakcí odpovídajících 7-oxosloučenin (tj. kde X = 0) s ekvivalentním množstvím Lawessonova činidla nebo sulfisu fosforečného v rozpouštědle, výhodně pyridinu nebo toluenu, při zvýšené teplotě asi 90 °C až asi 125 C po dobu asi 1 až asi 24 hodin. Produkt se snadno izoluje jednoduchým odstraněním všeho reakčního rozpouštědla a dále je možno provést, je-li to žádoucí, čištění, rutinními metodami jako je krystalizace, chromatografie a podobně.

2-0xy, 2-thio a 2-amino-pyridopyrimidiny podle vynálezu, sloučeniny vzorce

mohou alternativně být připraveny jak je popsáno ve schematech IV a V.

Schema IV popisuje způsob syntézy sloučenin, majících bázický řetězec ve 2-poloze pyrido[2,3-d]pyrimidinového kruhového ystému, například, kde Ri je NR3R4 a R3 je vodík nebo Ci-Csalkyl, substituovaný NR5R6 a R4 je vodík. V prvním stupni kondenzuje aldehyd jako je 4-methylamino-2-methylsulfanyl-pyrimidin-5-karbaldehyd s arylacetonitrilovým derivátem jako je 2,6-dichlorfenylacetonitril, ve vzájemném rozpouštědle jako je N,N-dimethy1formamid a za přítomnosti 1 až 5 molárního přebytku báze, výhodně práškovaného uhličitanu draselného nebo uhličitanu cesia, při teplotách výhodně v rozmezí 110 °C až 153 °C po dobu 0,5 až 25 hodin. Výsledné 7-imino-2-methylsulfanylové deriváty jsou použitelné pro přípravu různých 2-aminoderivátů. Například zpracováním se 100 až 500 procentním molárním přebytkem primárního aminu jako je Ν,Ν-diethylaminopropylamin, při teplotě v rozmezí 100 °C až 150 °C po asi 1 až asi 24 hodin, se získají odpovídající 2-substituované aminoderiváty. V případě aminů, které vrou pod méně než asi 100 °C, např. methylaminu, ethylaminu, propylaminu a podobně, může být použita vhodná tlaková bomba pro dosažení požadovaných reakčních teplot. Výsledné 2-amino-7-iminoderiváty jsou snadno hydrolyzovatelné, je-li to žádoucí, na 2-amino-7-oxoderiváty reakcí se silnou anorganickou kyselinou, jako je koncentrovaná kyselina chlorovodíková nebo kyselina sírová, při teplotě refluxu po prodlouženou dobu, v rozmezí 6 hodin až 7 dnů.

Alternativně 7-imino-2-methylsulfanylderiváty mohou být acylovány reakcí s acylhalogenidem nebo acylanhydridem, například acetylchloridem nebo anhydridem kyseliny propionové, za získání odpovídajících

7-acylimino-2-methylsulfanylpyridopyrimidinú. Tyto sloučeniny mohou reagovat s aminem jak je popsáno výše pro uskutečnění odstranění 2-methylsulfanylskupiny a poskytnutí 2-amínopyridopyrimidinů, majících acy1iminoskupinu v poloze 7 (tj. X = N acyl). 7-Acylimidoderiváty mohou reagovat se silnou kyselinou jak je popsáno výše za dosažení hydrolýzy 7-acyliminoskupiny na 7-oxóskupinu.

Sulfanylsloučeniny vzorce I, tj, kde Ri je SR₃, se snadno oxidují na odpovídající sulfoxidy a sulfony reakcí s Činidly jako je kyselina m-chlorperbenzoová, peroxid vodíku, perboritan sodný, hydrogenpersíran draselný a podobně. Jak je uvedeno výše, sulfanyl, sulfinyl a sulfonylderiváty vzorce I jsou zejména vhodné pro výrobu odpovídajících aminoderivátú, protože snadno reagují s aminy (HNR3R4) po té, co byly podrobeny nukleofilnímu odstranění. Toto je zvláště výhodná metoda pro výrobu 2-arylamino- a 2-heteroarylaminosloučenin podle vynálezu (např. kde R3 je fenyl nebo pyridyl). Předchozí oxidační a nukleofilní odstraňovači reakce jsou ilustrovány ve schématu VI.

Oxidace sulfanylsloučeniny vzorce I se provede její reakcí s ekvimolárním množstvím oxidantu, výhodně kyseliny m-chlorperbenzoové, za získání odpovídajícího sulfoxidu nebo se dvěma molárními ekvivalenty za získání odpovídajícího sulfonu. Oxidace se typicky provádí v organickém rozpouštědle jako je chloroform nebo dichlormethan, a typicky je kompletní během 1 až 24 hodin, jestliže se provádí při 25 °C až 45 °C. Velká množství oxidantu a delší reakční doby zajišťují úplnou tvorbu sulfonu. Odpovídající sulfoxid nebo sulfon se snadno izoluje filtrací nebo odstraněním reakčního rozpouštědla odpařením za sníženého tlaku.

Aminy snadno nahrazují sulfanyl, sulfinyl a sulfonylskupiny za vzniku sloučenin vzorce I, kde Ri je NR3R4. Toto je zvláště preferovaná metoda pro výrobu arylaminosloučenin, tj. fenylamino, substituovaných fenylamino, heteroarylamino (např. pyridylamino, thienylamino) a substituovaných heteroarylamino (např. ethylpyridylamino). Vytěsnění se provádí smísením sulfanyl, sulfinyl nebo sulfonylsloučeniny s aminem, výhodně primárním nebo sekundárním aminem. Amin se obecně používá v přebytku, například od asi 20 do 500 molárním přebytku vzhlem k sulfanyl, sildinyl nebo sulfonylsloučenině. Reaktanty se obecně mísí čisté nebo ve vzájemný organických rozpouštědlech, například jako je dimethylformamid, (ethoxyethyl)ether, ledová kyselina octová, dimethylsulfoxid a podobně. Reakce je obecně kopletní po asi 5 minutách až asi 6 hodinách, jestliže se provádí při zvýšené teplotě asi 100 °C do asi 250 °C. Produkt, sloučenina vzorce I, kde Ri je NR3R4, se snadno izoluje filtrací nebo odstraněním reakčního rozpouštědla odpařením, produkt může být dále čištěn, je-li to žádoucí, krystalizací,

chromatografií nebo podobně. . _v , • ’’’U ',v: , .

2-Aminopyridopyrimidiny- Ppdle vynálezu (vzorce I,. kdeRi je NR3R4) mohou být alternativně připraveny, reakcí .

2,4-diamino-5-pyrimidinkarboxaldehydu.₁s. ary lacetoni tri lem ₍ (ArCHzCN). 2,4-Diamino-5-pyrimidinkarboxaldehydy^mohou být připravena ze snadno dostupných 2-sulfanyl nebo, * - _v . J v 1 m. v ^{i | ?^u,^Áⁿy di nú .nukl eof i ním vytěsněním aminem .jak·, je popsáno výše. Napříkladt2“SulfanyI-4-sunstituovaný amino₇ 5-alkoxykarbonylpyrimidin může· reagovat, s. oxidačním činidlem jako _t j e ₍.oxaziridin z,a. získání^ odpovídaj í čího sulf oxidu nebo ^su.K^onu-^Su^lfoxid^ový-nebo sulfonový substituent še, snadno * ř í vytěsní, reakcí s aminem (HNR3R4),, za získání odpovídalícího 2,4-diami no-5~alkoxykarbonylpyrimidinu. Alkoxykarbonylová skupina může být převedena,, na aldehydovou„skupinu.standardními metodami (tj. redukcí na alkohol a oxidací alkoholu na aldehyd). ,2,4-Diamino-5-pyrimidinkarboxaldehyd snadno reaguje s arylacetonitri lem za získání2-9mino-6-aryl-pyridopyrimidinu podle vynálezu. Přecházející reakce jsou znázorněny ve schémat VIÍ........ ............. , . . .

¹ · * · ' : > k । , * / ‘

Jak jejuvedeno.dříve, některé ze sloučenin podle vynálezu jsou bázického; charakteru, díky substituentové skupině, která je bázická, jako jsou například aminoskupiny. Sloučeniny vzorce I, kde Ri je NR3R4, jsou typicky bázické. Takové bázické sloučeniny šnadnotvoří farmaceuticky přijatelné sole s jakýmkoliv množstvím anorganických a organických kyselin. Sole jsou typicky krystalické a jsou tak dobře vhodné pro orální podání a podobně.

Schema V popisuje syntézu 2-oxypyridopyriidinú

2-Methylsulfanylové meziprodukty, jak jsou popsány výše, mohou reagovat s alkoholáty jako je ethoxyethanolová sodná sůl, která se obecně připraví s ekvivalentním množstvím hydridu sodného a alkoholu. Jako reakční rozpouštědlo setypicky používá ethoxyethanol. Reakce se nejlépe provádí při zvýšené teplotě asi 100 °C až asi 150 °C a normálně je kompletní za asi 15 min až 6 hodin. Výsledný 2-(2-ethoxy)-ethoxyether se snadno převede na 2-hydroxysloučeninu reakcí se silnou anorganickou kyselinou, výhodně 6N kyselinou chlorovodíkovou, po asi 5 min až asi 1 hodina. 2-Hydroxy-7-iminoderivát může být hydrolyzován na 7-oxo-sloučeninu prodlouženou reakcí se silnou anorganickou kyselinou, výhodně koncentrovanou kyselinou chlorovodíkovou, při teplotě refluxu po dobu 6 hodin až 7 dnů. Alkylace a aralkylace 2-hydroxyderivátu (výhodně je-li Ra jiný než vodík), může být provedena jak je požadováno reakcí s alkylačním činidlem jako je methyljodid, benzylbromid, diethylaminoethylchlorid a podobně ve vzájemném rozpouštědle, výhodně dimethylformamidu, typicky za přítomnosti báze jako je práškovaný uhličitan draselný. Takové reakce jsou normálně kompletní během asi 2 hodin, jestliže se provádějí při teplotě asi 25 °C až 100 ‘C. Produkt se snadno izoluje odstraněním reakčních rozpouštědel a další čištění může být provedeno krystal i žací, chromatografií nebo podobně.

Schema I

CO₂Et

Ar

Schema II χχχ H2N N N z NaH, r2-x -->

32 · i* : : : ♦ · V · · · H JOX R2

Schema III

C C- c. ft;

c ¹ c ’ O c Cý

Schema IV >

^C1 — Cgalkyl ^NR5^R6 nr₅r₆

Schema V ΓΎΥτ Μ Χ'Χ C1 MeS Ν Ν ^ΝΗ r2 Cl ,/χ. ίΎγτ , L I 1 * 6Ν HC1 C1 -------- ° 6 Ν ? . ™ reflux CB2 ' R 1 Ζ Κ2 CH0 1 OEt ei : ιΎΥι *^· R3o ν ν xo 1 R2

EtOCH2CH2OH/NaH G1 X i jOXXX H° N N NH C1 R2 Konc.HCl reflux ▼ jOXtt JO^N^n^o C1 R2

Schema VII

redukce

Schema VII (pokrač.)

Následující podrobné příklady blíke ilustrují syntézu sloučenin podle vynálezu. Příklady jsou pouze .lustra xvní a nejsou míněny jako omezující vynález z jakéhokol.v hled.ska.

Příklady provedení vynálezu

Příklad 1

5-Kyano-4-hydroxy-2-(methyl sulfany1) pyrimidin

K roztoku čerstvě destilovaného ethyl-ethoxymethylen-kyanoacetátu (118,99 g) v methanolu (800 1) při 5 °C se přidá 2-methy1-2-thiopseudomoČovina (107,69 g). K této směsi se přidá roztok methoxidu sodného v methanolu připravený rozpuštěním kovového sodíku (35,59 g) v methanolu (800 ml). Reakční směs se nechá ohřát na teplotu místnosti a míchá se 6 hodin. Po stání přes noc se rozpouštědlo odstraní za sníženého tlaku, zbytek se rozpustí v 1500 ml vody při 50 °C za míchání a roztok se za horka zfiltruje.Filtrát se okyselí na pH 2 koncentrovanou HC1 a ponechá stát přes noc při teplotě místnosti. Produkt se shromáždí filtrací a sušením se získá 48,33 g 5-kyano-4-hydroxy-2-methylsulfanyl-pyrimidinu. Tento produkt se použije v následujícím stupni bez dalšího čištění.

Příklad 2

4-Ch1or-S-kyano-2-me thy1su1f any1-pyr i mi d i n

Směs 5-kyano-4-hydroxy.-2-methylsulfanyl-pyrimidinu (48,33 g) z příkladu 1 a fosforoxychloridu (150 ml) se zahřívá pod τί i - ' se nechá zchladnout na teplotu refluxem 3 hodiny, ea θ“¹ _zahustí dosucha ve vakuu, místnosti. zfiltruje a ' ‘ _{a ledovou vodu}.

Zbytek se rozdělí mezí ne _{sušI se nad} odpaří za sníženého tlaku.

Organická vrstva se oddělí síranem horečnatým, filtruje a

Zbytek se zahřívá pod refluxem v

Horký hexanový roztok ponechá zchladnout na se slije hexanu (750 ml) za míchání, nerozpustného materiálu a teplotu místnosti, získá se 32 g titulní sloučeniny 4-chlor-5-kyano-2-methylsulfanyl-Pyrimidinu.

příklad 3 ₅-Ky_ano-4-methylamino-2-methylsul_fanyl-pyri™idin

Studeným (5 ’O roztokem 4-chlor-S-kyano-2-methylsulfanyl-pyrimidxnu z přikladu diethyletheru (700 ní) se Probuhlává plynný nethylamin po dobu 20 minut. Reakční směs se míchá 30 min při 5 °C, pak se ne ohřát na teplotu místnosti a míchá se přes noc. Chromatografle na tenké vrstvě ukazuje, že reakce není Upiná. Reakční snes znovu ochladí na 5 °C a Plynný methylamin se probublává suspenzí za míchání dalších 20 minut. Reakční směs se m chá při 25 °C 6 hodin, pak se nechá stát přes noc. Nerozpustný produkt se oddělí a suspenduje se ve vodě za míchám. Suspenze se zfiltruje ve vakuu za získání 25,87 g titulní sloučeniny 5-kyano-4-methylamino-2-methylsulfanyl-pyrimidinu, t.t. 185 až 187 °C.

Elementární analýza pro C7H8N4S: vypočteno 46,65 % C,4„47 % H, 31.09 X N, nalezeno 46,62 % C, 4,61 X H, 31,43 % N.

Příklad 4 ₅-_Kyano-2-hydrazino-4-methyl₃mino-pyrimidin hodiny.

Reakčni směs se ochladl na teplotu místnosti a nerozpustný produkt se odstraní filtrací, promyje studeným vodným ethanolem (1:1) za získání 23 g titulní sloučeniny.

Krystalizací z ethanolu se získá analyticky čistý vzorek 5-kyano-2-hydrazino-4-methylamino-pyrimidinu, t.t. 247 až 249 °C.

Elementární analýza pro CsHeNe:

vypočteno 43,90 % C, 4,91 % H, 51,21 % N, nalezeno 44,05 % C, 4,92 % H, 51,39 % N.

Příklad 5

2-Az ido-5-kyano-4-methylamino-pyrimidin ke studenému (5 °C) roztoku 5-kyano-2-hydrazÍno-4-methylamino-pyrimidinu (21,7 g) z příkladu 4 ve směsi vody (260 ml) a koncentrované HC1 (26,5 ml) se po kapkách přidá roztok NaNOz (10,03 g) ve vodě (25 ml) s horním mechanickým mícháním. Vytvoří se bílá sraženina a po ukončení přidávání se reakčni směs míchá dalších 20 minut při 5 °C. Nerozpustný produkt se zfiltruje a promyje se studenou vodou za získání 22,4 g titulní sloučeniny po sušení při 23 °C za vysokého vakua přes noc. Krystalizací z ethanolu se získá analyticky čistý vzorek ^azido-s-kyano^-methylanino-pyri- 1 · Elementární analýza P^r0 55,99 % N, toi % c ót % η,

t.t. 225 až 230 °C.

vypočteno nalezeno

Příklad 6

2-Amino-4-methylamino-5-pyrimidinkarboxaldehyd

K suspenzi 2-azido-5-kyano-4-methylaminopyrimidinu (22,24 _g) z příkladu 5 ve 400 ml 50% vodné kyseliny mravenčí se Přidá Baney-niklový katalyzátor (5 g). Keakčnl směs se třepe pod _ stmosférou vodíku (40,1 psi) v Parrově hydrogenačni apara ure. Při třepání směsi Při teplotě místnosti došlo k íntenzivn vývoji Plynu. Po 30 minutách bylo zařízeni odcetráno, y přidán další Raney-nikl (5 g), -řízení znovu naplněno vodíkem a směs třepána přes noc. Katalyzátor byl odstraněn filtrát byl odpařen za vysokého vakua. Zbytek byl suspendován ve vodě a filtrován. Nerozpustný materiál byl oddelen a rozpuštěn ve 450 ml vroucí vody. Vodný roztok byl ^a pH filtrátu bylo upraveno na 7 1N hydroxidem sodným. Vysrářeny produkt byl oddělen filtraci a rekrystalizován z ethanolu za získání 5,0 g 2-amino-4-methylamino-5-pyrimidinkarboxaledehydu.

Příklad 7 é-(2,6-Dimethylfenyl)-7-imino 8 methyl 7,8 dihydro pyrido[2,3-d]pyrimidin-2-ylamin

Ke 2-ethoxyethanolu (7 ml) při 10 C se přidá opatr i 'i S3 mg * 2,08 _hydrid sodný (60% suspendovaný vmístnosti a mmol) --^‘-^Kenylacetonitril (1,5 8. ’ ’ ^P _PX 2-am'ino-4--methylamino-5-pyriniidinkarboxaldehyd (1.5 8. 9,86 mmol z příkladu 6 refluxem 2 hodiny, nechá se o

Výsledná reakční směs se zahřívá pod chladit na teplotu místnosti a urový produkt se oddělí a suší na nalije do vody. Nerozpustný s filtru. Produkt se čistí rozpuštěním ve vroucím přidáním horkého hxanu těsné v momentě před srážením roztok se filtruje a po ochlazení vysráženého produktu se získá 1,22 g

6-(2,6-dimethylfenyl)-7-imino-8-methyl-7,8-dihydropyrido[2,3-d]pyrimidin-2-ylaminu; t.t. 197 až

Elementární analýza pro CisHi7N5.0,TSHzO vypočteno 68.14 % C. 6.18 X H, 24,83 % N nalezeno 68,19 X C, 6,14 X H, 24,60 % N.

Příklad 8 )

6-(2-Methylfenyl)-7-imino-8-methyl-7,8-dihydropyrido[2,3-d]pyrimidin-2-ylamin

Titulní sloučenina se připraví podobným způsobem jak je g, 5,19 popsán v přikladu 7 výše, vychází se ze 2-methylfenylacetonitrilu (0,72 s, 5,45 mmol) a 2-amino-4-methylamino-5-pyrimidinkarboxaldehydu (0,79 mmol). Jak je popsáno výše jako Příslušná báze a rozpouštědlo se použijí hydrid sodný (60% suspenze v minerálním oleji, 0,083 8, 2,08 mmol) a 2-ethoxyethanol. Produkt se čistí krystalizací z ethylacetátu-hexanu a získá se 0,68 8

6-(2-methylfenyl)-7-imino-8-methy 1-7,8-dihydropyrido[2,3-d]pyrimidin-2-ylaminu, t.t. 189 až 190 C. Elementární analýza pro C15H15N5:

vypočteno 67,91 % C, 5,70 0 H, 26,40 % N, nalezeno 67,52 % C, 5,71 % H, 26,33 % .

Příklad 9

6-Fenyl-7-imino-8-methy1-7,8-dihydro-pyrido[2,3-d]pyrimidin2-ylamin

Titulní sloučenina se připraví podobným způsobem jak je ppsán výše v příkladu 7, vychází se z fenylacetonitrilu (6,5 ml) a 2-amíno-4-methylániino-5-pyrimidinkarboxaldehydu (8,10 g). V této reakci se však použije methoxid sodný (0,5 g) místo hydridu sodného. Produkt se čistí rekrystali žací z isopropylalkoholu za získání 9,2 g 6-fenyl-7-imino-8-methyl-7,8-dihydro-pyrido[2,3-d]pyrimidin2-ylaminu, t.t. 201 až 203 °C. Elementární analýza pro C14H13N5: vypočteno 66,91 % C, 5,21 % H, 27,87 λ N, nalezeno 66,74 % C, 5,22 % H, 27,90 % N.

Příklad 10

2,7- Diamino-6-(2,6-dichlorfenyl)-pyrido[2,3-d]pyrimidin (Příprava metodou podle US patentu 3534039). K roztoku 2-ethoxyethoxidu sodného připraveného z 0,14 g sodíku a 60 ml 2-ethoxyethanolu se přidá 2,07 g 2,4-diamino-5-pyrimidinkarboxaldehydu a 2,79 g

2,6— dičhlorfeny1 acetonitrilu. Směs se zahřívá nateplotu refluxu 4 hodiny, nechá ochladit na teplotu místnosti a vysrážený produkt se zfiltruje a promyje diethyletherem za získání

2,7- diamino-6-(2,6-dichlorfenyl)-pyrido[2,3-d]pyrimidinu, t.t. 325-332 °C.

Příklad 11

2-Amino-6-(2,6-dichlorfenyl)-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-ol

Roztok

2,7-diamino-6-(2,6-dichlorfenyl)-pyrido[2,3-d]pyrimidinu (30,6 g) z příkladu 10 v koncentrované HC1 (200 ml) se zahřívá pod refluxem 24 hodin. Reakční směs se nechá vychladnout na teplotu místnosti, filtruje, promyje se vodou a sušením ve vakuu se získá 16,5 g surového produktu. Filtrát se refluxuje dalších 24 hodin a po ochlazení se získá dalších 8,8 g produktu. Tyto dva výtěžky se spojí, promyjí se dvakrát diethyl etherem a sušením ve vakuu se získá 5,9 g 2-amino-6-(2,6-dichlorfenyl)-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-olu, t.t. rozkl. 410 °C.

Elementární analýza pro C13H8CI2N4O: vypočteno 50,84 % C, 2,62 % H, 18,24 % N, nalezeno 50,45 % C, 2,87 % H, 18,09 % N.

Příklad 12

2-Amino-6-(2,6-dichlorfenyl)-8-methy1-pyrido[2,3-d]pyrimidin7(8H)-on

Ke směsi 2-amino6-(2,6-dichlorfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-olu (3,7 g) příkladu 11 v dimethylformamidu se přidá NaH (50% suspenze v minerálním oleji, 0,64 g). Výsledná kaše se zahřívá ma 65 °C 0,5 hodiny do vytvoření roztoku. Tento se pak ochladí na 50 °C a k reakční směsi se po kapkách přidá roztok methyljodidu (2,0 g) v dimethylformamidu (10 ml). Reakční směs se ohřeje a udržuje mezi 60 °C až 80 °C po 3 hodiny. Po ochlazení na teplotu místnosti se reakční směs nalije do ledové vody. Nerozpustný bílý produkt se zfiltruje, promyje se vodou a rekrystaluje z ethanolu za použití aktivního uhlí, získá se 1,9 g 2-amino-6-(2,6-dichlorfenyl)-8-methyl-pyrido[2,3—d]pyrimidin7(8H)-onu, t.t. 235 až 237 °C. Elementární analýza pro Ci4H1oCl2N4O: vypočteno 52,36 % C, 3,14 % H, 17,44 % N, nalezeno 52,03 % C, 3,24 % H, 17,46 % N.

Příklad 13

2-Amino-6-(2,6-dimethylfenyl)-8-methy1-pyrido[2,3-d]pyrimidin7(8H)-on

Směs 6-(2,6-dichlorfenyl)-7-imino-8-methyl-7,8-dihydropyrido[2,3-d]-pyrimidin-2-ylaminu (0,96 g) z příkladu 7 a vodné 6N HC1 (25 ml) se zahřívá pod refluxem 2 dny. Směs se nechá vychladnout na teplotu místnosti. Nerozpustná bílá pevná látka se oddělí filtrací, promyje se vodou a suší vzduchem. Surový produkt se rozpustí v horkém ethanolu, za přidání horkého ethylacetátu těsně před krystalizací a horký roztok se zfiltruje. Po ochlazení se surový produkt krystaluje za získání 25 mg 2-amino-6-(2,6-dimethylfenyl)-8-methylpyrido[2,3-d]pyrimidin-7(8H)-onu, t.t. postupně rozkl. nad 235 °C.

Elementární analýza pro CisHisNaO.! HCl.0,15 H2O: vypočteno 59,38 % C, 5,53 % H, 17,31 % N, nalezeno 59,42 % C, 5,37 % H, 17,53 % N.

Příklad 14

2-Amino-6-(2-methylfeny1)-8-methy1-pyrido[2,3-d]pyrimid in7(8H)-on

Ke směsi 6-(2,6-dimethylfenyl)-7-imino-8-methyl-7,8dihydro-pyrido[2,3-d]pyrimidin-2-ylaminu (0,30 g) z příkladu·8 a koncentrované HC1 (0,6 ml) se přidá voda (11 ml). Reakční. směs se refluxuje 20 hodin, pak se nechá vychladnout na teplotu místnosti. Bílá sraženina z reakční směsi se zfiltruje a promyje vodou. Produkt se suší ve vakuu a získá se 0,21 g 2-amino-6-(2-methylfenyl)-8-methy1-pyrido[2,3-d]pyrimidin7(8H)-onu, t.t. 239 až 241 °C. Elementární analýza pro Ci5H14N4O.1,46 HC1: vypočteno 56,45 % C, 4,88 % H, 17,55 % N, nalezeno 56,47 % C, 4,68 % H, 17,59 % N.

Příklad 15

N-[6-(2,6-Dichlorf enyl)-8-methyl-7-oxo-7,8-dihydropyrido[2,3-d]pyrimidin-2-yl]acetamid

Směs 64,2 mg (0,20 mmol) 2-amino-6-(2,6-dichlorfenyl)8-methyl-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7(8H)-onu (z příkladu 12) a 1

acetanhydridu se zahřívá k refluxu. Výsledný roztokse

Zuje pod refluxem 20 minut a zahustí se při atmosférickém u na objem asi 0,25 ml. Roztok se ochladí na 25 °C a zředí diethyletherem (1 ml). Oddělené krystaly se odfiltrují a myjí se diethyletherem (1 ml). Oddělené krystaly se iltrují a promyjí se diethyletherem a získá se j

6-(2,6-dichlorfenyl)-8-methyl-7-oxo-7,8-dihydro-;

i’do[2,3-d]pyrimidin-2-yl]acetamid, hmotn. 44,0 mg, t.t. 258'

260 °C.!

(‘Cl) 363 (M+ + 1). mentární analýza pro Ci₆Hi₂C12N4O2: očteno 52,91 % C, 3,33 % H, 15,43 % N ezeno 52,73 % C, 3,47 % H, 15,09 % N.

klad +ž _aZ elina N-[[6-(2,6-dichlorfenyl)-7-oxo-8-methyl-7,8-dihydroido[2,3-d]pyrimidin-2~yl]-suke inámi nová

Směs 0,40 g (1,25 mmol) 2-amino-6-(2,6-dichlorfenyl)ethyl-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7(8H)-onu (z příkladu 12) a ' g (10,0 mmol) anhydridu kyseliny jantarové se nechá govat při 145 °C. Po 10 minutách se homogenní tavenina ladí a trituruje se 25 ml vody. Směs se zahřívá na teplotu u 5 minut pro hydrolýzu přebytku anhydridu. Směs se za ka zfiltruje a koláč se promyje 10 ml vroucí vody. Sušený >dné ác (hmotn. 0,50 g) se trituruje s 8 mliho hanolu:chloroformu (1:20). Nerozpustná pevná látka sese iítruje a promyje se 1 ml stejného rozpouštědla za získáníZa g čisté titulní sloučeniny, t.t. 214 až 218 °C.1 vysrážení pevných látek (pH je ještě kyselé; _PH asi 5). Pevné látky se extrahují do 200 ml ethylacetátu a roztok se suší (uhličitan draselný), filtruje a zahustí; hmotn. 2,30 g (57 %); t.t. 98 až 100 °C; tle (1:1 hexan:ethylacetát) jedna skvrna Rf 0,5.

Hmotové spektrum (Cl) 184 (M+l).

Elementární analýza pro C7H9N3OS: vypočteno 45,89 % C, 4,95 % H, 22,93 % N, nalezeno 46,24 % C, 4,88 % H, 23,11 % N.

Příklad 18A

Alternativní syntéza 4-methyamino-2~methy1 sulfany1-pyrimidin5-karboxaldehýdu

K roztoku 4-chlor-2-methylsulfanyl-5-pyrimidinkarboxylátethylesteru (18,66 g, 80,4 mmol) ve 260 ml tetrahydrofuranu se přidá triethylamin (34 ml, 244 mmol), následovaný 30 ml 40% vodného roztoku methylaminu.Roztok se míchá 30 min při 25 °C a pak se zahustí ve vakuu a rozdělí se mei chloroform a nasycený vodný hydrogenuhličitan sodný. Organická vrstva se promyje solankou, suší nad síranem horečnatým, filtruje a zahuštěním se získá bílá pevná látka. Pevná látka se suspenduje v hexanu a filtrací se získá 14,70 g (81 %) 4-methylamino-2-methylsulfanyl-5-pyrimidinkarboxylát-ethylesteru; t.t. 91 až 93 °C.

Elementární analýza pro C9H13N3O2S: vypočteno 47,56 % C? 5,76 % H, 18,49 % N, nalezeno 47,93 % C, 5,67 % H, 18,58 % N_t

Roztok 4-methylamino-2-methylsulfanyl~5-pyrimidinkarboxylát-ethylesteru (4,36 g, 19,3 mmol) v 60 ml tetrahydrofuranu se přidá po kapkách při teplotě místnosti k suspenzi 1 ithiumaluminiumhydridu (1,10 g, 29,0 mmol) ve 40 ml tetrahydrofuranu. Po 10 minutách se reakce opatrně přeruší 2 ml vody, 2 ml 15% NaOH a dalšími 7 ml vody. Směs se míchá 1 hodinu a vytvořená bílá sraženina se odstraní filtrací a promyje se ethylacetátem. Filtrát se zahustí ve vakuu a přidá se 3:1 hexan:ethylacetát. Pevnélátky sse oddělí a získá se 2,99 g (84 %) 4-methylamino-2-methylsulfanyl-5-pyrimidinmethanolu; t.t. 155 až 157 °C. Elementární analýza pro C7H11N3OS: vypočteno 45,39 % C, 5,99 % H, 22,68 % N nalezeno „45,42..% C,_ 5,93.% H, 22,42 % N,

4-Methylamino-2-methylsulfanyl-5-pyrimidin-methanol (2,40 g, 13,0 mmol) v 7 ml kyseliny octové se přidá k roztoku dihydrátu dvojchromanu sodného (1,30 g, 4,6 mmol) v 6 ml kyseliny octové. Po 2 hodinách při teplotě místnosti se přidá další dihydrát dvojchromanu sodného (0.3 g , 1,0 mmol) v 1 ml kyseliny octové. Po 3,5 hodinách reakce celkem se odstraní jasně zelená pevná látka filtrací. K filtrátu se přidá voda (30 ml) následovaná vodným hydroxidem amonným až do alkality (pH 9,0). Směs se chladí v chladničce po 30 min. Sraženina se oddělí a rozpustí v ethylacetátu a roztok se suší nad síranem horečnatým. Filtrací a zahuštěním ve vakuu se získá 0,72 g (30 %) 4-methylamino-2-methylsulfanyl-5-pyrimidinkarboxaldehydu; t.t. 99 až 101 °C.

Elementární analýza pro C7H9N3OS: vypočteno 45,89 % C, 4,95 % H, 22,93 % N, nalezeno 45,80 % C, 4,96 % H, 22,86 % N.

Příklad 19

6-(2,6-Dichlorfenyl)-8-methyl-2-methyl sulfany1-8Hpyri do[2,3-d]pyrimidin-7-y1idenamin

Práškovaný uhličitan draselný (0,8 g; 5,8 mmol) se přidá k roztoku 0,220 g (1,2 mmol) aldehydu z příkladu 10 a 0,235 g (1,26 mmol) (asi 5% přebytek) 2,6-dichlorfenylacetonitrilu v 2,0 ml dimethylformamidu. Směs se zahřívá za míchání na 125 °C 6 hodin. K ochlazené směsi se přidá ethylacetát (5 ml) a pevné látky se odfiltrují a promyjí se ethylacetátem. Filtrát se zahustí za sníženého tlaku. Zbylá guma se trituruje s 10 ml vody a výsledná pevná látka se odfiltruje, dobře se promyje vodou a suší. Tento surový materiál se chromatografuje nanesením chloroformového roztoku na silikagelový sloupec zvlhčený chloroformem. Sloupec se eluuje 1:1 (obj./obj.) hexanem:ethylacetátem, oddělí se frakce, které podle tle obsahují skvrnu Rf 0,25 (1:1 hexan:ethylacetát). Odpařením rozpouštědla se získá pevná látka. Pevný produkt se rozpustí v asi 0,5 ml methylenchloridu. Vyvinou se krystaly. Přidá se petrolether (asi 2 ml) a. krystaly seodfiltrují za získání 0,168 g (40 %) 6-(2,6-dichlorfenyl)-8-methyl-2-methylsulfanyl-8H-pyrido[2,3“d]pyrimidin-7-ylidenaminu, t.t. 198 až 200 °C. Hmotové spektrum (Cl) 351 (M+1). Elementární analýza pro CisHj2CI2N4S: vypočteno 51,29 % C, 3,44 % H, 15,95 % N nalezeno 51,31 % C, 3,41 % H, 15,73 % N.

Příklad 20

[6-(2,6-Dichlorfenyl)-7-imino-8-methyl-7,8-dihydropyrido[2,3“d]pyrimidin-2-yl]-(3“diethylami nopropy1)amin

Roztok 0,275 g (0,78 mmol) methylsulfanylového derivátu z příkladu 19 ve 3 ml Ν,Ν-diethylaminopropylaminu se zahřívá za míchání v olejové lázni na 135 °C (t nádoby asi 125 °C) po 16 hodin. Přebytek aminu se odpaří za sníženého tlaku a zbylý olej se rozpustí v 10 ml diethyletheru. Kalný roztok se vyčeří celitem¹, filtruje a zahustí se. Zbytek se trituruje s petro1 etherem a filtruje; hmotn. 0,288 g (85% výtěžek). Rekrystalizací z ethylacetátu-petr.oletheru se získá, čistý produkt identifikovaný jako [6-(2,6-dichlorfenyl)-7-imino-8-methyl-7,8-dihydropyrido[2,3-d]pyrimidin-2-y1]-(3-diethy1 aminopropyl)amin; t.t. 154. až 156 °C.

Hmotové spektrum (Cl) 433 (M⁺).

Elementární analýza pro C₂1H26CI₂N&.0,25 H₂0 vypočteno 57,60 % C, 6,10 % H, 19,19 % N, nalezeno 57,46 % C, 5,85 % H, 19,16 % N.

Příklad 21

[6-(2, 6-Dichlorfenyl)-8-methyl-7-oxo-7,8-dihydropyrido[2,3-d]pyrimidin-2-yl]-(3-diethyl aminopropyl)amin

Roztok 0,111 g (0,25 mmol) iminoderivátu z příkladu 20 v 5 mi koncentrované kyseliny chlorovodíkové se zahřívá pod refluxem 6 dnů. Vodná kyselina se odpaří za sníženého tlaku a zbytek se rozpustí v 1,0 ml vody. Pro úplné vysrážení gumy se přidá vodný 10% roztok uhličitanu draselného. Rozpouštědlo se slije, a guma se rozpustí v 15 ml methylenchloridu. Roztok se suší nad bezvodým uhličitanem draselným, filtruje a filtrát se odpaří. Zbylá guma se rozpustí v 0,5 ml diethyletheru. Krystalický produkt, který vznikl, se odfiltruje a sušením se získá

[6-(2,6-di chi orf eny1)-8-me thyl-7~oxo-7,8-dihydropyrido[2,3—d]pyrimidin-2-yl]-(3-diethylaminoproyl)-amin. Hmotové spektrum (Cl) 434 (M⁺).

Příklad 22

6-(2,6-Dichlorfenyl)-2-(2-ethoxy-ethoxy)-8-methyl8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-ylidenamin

40,0 mg (1,0 mmol) 60% hydridu sodného v minerálním oleji se přidá za míchání k 5,0 ml ethoxyethanolu. Po ukončení uvolňování vodíku se přidá 0,351 g (1,0 mmol) methylsulfanylového derivátu z příladu 19. Roztok se zahřívá na 135 °C 15 minut. Reakční směs se ochladí. Pro vysrážení gumovité pevné látky se přidá ledová voda (50 ml). Tento materiál se extrahuje do diethyletheru, roztok se suší (uhličitan draselný) a zahustí se na objem 15 ml. Oddělené krystaly se odfiltrujé a promyjí se diethyletherem za získání produktu identifikovaného jako 6-(2,6-dichlorfenyl)-2-(2-ethoxy-ethoxy)-8-methyl-8Hpyrido[2,3-d]pyrimidin-7-y1idenaminu; t.t. 133 až 135 °C. Hmotové spektrum (Cl) 393 (M+l).

Elementární analýza pro CieHisc 12N4O2: vypočteno 54,97 % C, 4,61 % H, 14,25 % N nalezeno 55,05 % C, 4,65 % H, 14,15 % N.

Příklad 23

6-(2,6-Dichlorfeny 1)-2-hydroxy-8-methyl-8Hpyrido[2,3-d]pyrimidin-7-ylidenamin

Roztok 78,0 mg (0,20 mmol) ethoxyethyletheru z příkladu 22 v 1,0 ml 6N kyseliny chlorovodíkové se zahřívá pod refluxem 5 minut. Rozpouštědlo se odstraní odpařením za sníženého tlaku. Zbylá pevná hydrochloridová sůl se rekrystaluje z ethanolu-ethylacetátu a získá se krystalický 6-(2,6-dichlorfenyl)-2-hydroxy-8-methyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-ylidenamin, hydrochlorid; t.t. 255 až 260 °C. Hmotové spektrum (Cl) 321 (M+l). Elementární analýza pro Ci4H1oCl2N4O.HCI.0,3 C2H5OH: vypočteno 47,21 % C, 3,48 % H, 15,08 % N nalezeno 47,21 % C, 3,40 % H, 14,73 % N.

Příklad 24

6-(2,6-Dichlorfeny1)-2-hydroxy-8-methy1-8Hpyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on

Roztok 76,0 mg (0,19 mmol) iminoderivátu z příkladu 23 v 5,0 ml koncentrované kyseliny chlorovodíkové se zahřívá pod refluxem 3 dny a rozpouštědlo se pak odpaří. Zbytek se trituruje s vodou, filtruje a suší. Získá se 6-(2,6-dichlor fenyl)-2-hydroxy-8-methyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on jako hydrát.

Hmotové spektrum (Cl) 322 (M⁺).

Elementární analýza pro Ci4H9CI2N3O2.1,25 H2O: vypočteno 48,78 % C, 3,37 % H, 12,19 % N, nalezeno 48,68 % C, 3,25 % N, 11,96 % N.

Příklad 25

6-(2,6-Dichlorfenyl)-2-[2-(diethylamino)ethoxy]-8methyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on

Směs 0,173 g (0,5 mmol) 2-hydroxyderi vátu z příkladu 24, 0,086 g (0,5 mmol) hydrochlpridu 2-diethylaminoethylchlori.du, 3 ml dimethylformamidu a 1,0 g práškovaného bezvodého uhličitanu draselného se míchá při teplotě místnosti 24 hodin. Přidá se voda (25 ml) pro vysrážení surového produktu. Čištění se provede si 1ikagelovou chromatografií za získání požadované sloučeniny identifikované jako 6—(2,6-dichiorfenyl)-2-[2-(diethylamino)ethoxy]-8-methyl-8Hpyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on.

Příklad 26

2-Amino-6-fenyl-8-methy1-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7(8H)-on

Tato sloučenina se připraví ze 6-fenyl-7-imino-8methyl-7,8-dihydro-pyrido[2,3-d]pyrimidin-2-ylaminu z příkladu 9 postupem kyselé hydrolýzy podobným postupu z příkladu 14; t.t. 250 až 255 °C.

Příklad 27

2“Amino-6-(2·, 6-dichlorf eny 1)-8-methy 1-pyrido [2,3-d] pyrimidine 7(8H)-thion

Směs 0,321 g (1,0 mmol)

2-^atnino-6-(2,6-di chlorf eny 1)-8-methyl~pyrido [2,3.-d] pyr imidin7(8H)-onu z příkladu 12 a 0,404 g (1,0 mmol) Lawessonova činidla v 10 ml pyridinu se zahřívá pod refluxem za míchání 24 hodin. Rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku a zbytek se trituruje se 20 ml vody, filtruje a koláč se dobře promyje vodou. Čištěním chromatografií na silikagelu se získá požadovaná sloučenina identifikovaná jako2-amino-6-(2,6.dichlorfenyl)-8-methyl-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7(8H)-thion.

Příklad 28

N-[6-(2,6-Dichlorfenyl)-8-methyl-2-methylsulfanyl-8Hpyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yliden]-acetamid

Směs 0,161 g (0,46 mmol)

6—(2,6-dichlorfenyl)-8-methyl~2-methylsulfanyl-8Hpyrido[2,3-d]pyrimidin-7-ylídenaminu z příkladu 19 a 1,0 ml acetanhydridu se zahřívá do roztoku při teplotě varu. Po 2 minutách refluxu se roztok zahustí na jednu polovinu objemu Přičemž se vytvoří krystaly. Směs se ochladí, přidají se 2 ml etheru a produkt se odfiltruje a promyje se etherem; t.t. 229 až 231 °C.

Hmotové spektrum (Cl) 393 (M⁺).

Elementární analýza pro Ci7H14CI2N4OS:

vypočteno 51,92 % C, 3,59 % H, 14,25 % N nalezeno 52,12 % C, 3,62 % H, 14,20 % N.

Příklad 29

N-[6-(2,6-Dichlorfenyl)-2-(4-diethylaminobutylamino)8-methyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yliden]~acetamid

Směs 0,112 g (0,29 mmol) ^NEt2

N“[6-(2,6-dichlorfenyl)-8-methyl-2-methylsulfanyl-8Hpyrido[2,3—d]pyrimidin-7-yliden]-acetamidu z příkladu 28 a 1,0 ml (velký přebytek) 4-(diethylamino)butylaminu se zahřívá ve’ 135 °C olejové lázni za míchání. Po 1 hodině se roztok zahustí za sníženého tlaku a zbytek se trituruje s 1 ml ethylacetátu. Přidá se petrolether (1 ml) a produkt se filtruje.

Hmotové spektrum (Cl) 489 (M+a.

Příklad 30

2^_Amino“6-(2,6-dichlorfeny1)-8-ethyl-pyrido[2,3-d]pyrimidin7(8H)-on

K suspenzi NaH (60% v minerálním oleji, 27 mg) v 5 ml dimethylformamidu se přidá 2-amino-6-(2,6-dichlorfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7(8H)-on (172 mg, 0,56 mmol) z příkladu 11. Směs se zahřívá na 50 °C 1 hodinu za vzniku čirého roztoku. Přidá se ethyljodid (60 μΐ, 0,75 mmol) a roztok se míchá při 50 °C 3,5 hodiny, ochladí se na teplotu místnosti a nalije do 30 ml ledové vody. Výsledná sraženina se odstraní filtrací a rozdělí se mezi ethylacetát a vodu. Organická vrstva se oddělí a suší se nad síranem horečnatým, filtruje a zahustí se ve vakuu. Rychlá chromatografie za eluce ethylacetátem poskytne 104 mg (55 %) 2-amino-6-(2,6-dichlorfenyl)-8-ethyl-pyrido[2,3-d]pyrimidin7(8H)-onu; t.t. 207 až 209 °C.

Elementární analýza pro Ci5H12CI2N4O: vypočteno 53,75 % C, 3,61 % H, 16,71 % N, nalezeno 53,84 % C, 3,67 % H, 16,57 % N.

Příklad 31

2-Amino-6-(2,6-dichlorfeny1)-8-propy1-8Hpyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on

K suspenzi NaH (60% v minerálním oleji, 31 mg) v 6 ml dimethylformamidu se přidá 2-amino 6-(2,6-dichlorfenyl) pyrido[2,3-d]pyrimidin-7(8H)-on z příkladu 11 (205 mg, 0,67 mmol). Směs se zahřívá na 50 ⁰C 1 hodinu za získání čirého roztoku. Přidá se 1-jodpropan (100 μΐ, 1,03 mmol) a roztok se míchá při 50 °C 10 minut, pak se ochladí na teplotu místnosti a nalije na 400 ml ledové vody. Výsledná sraženina se odstraní filtrací a promyje se vodou. Zbytek se suší a čistí rychlou chromatografií za eluce 1:1 hexanem:ethylacetátem za získání 159 mg (68 %) 2-amino-(2,6-dichlorfenyl)-8-propy1-8Hpyrido[2,3-d]pyrimidin-7-onu; t.t. 196 až 197 °C.

Elementární analýza pro Ci₆Hi₄C12N4O: vypočteno 55,03 % C, 4,04 % H, 16,04 % N, nalezeno 55,28 % C, 4,22 % H, 15,81 % N.

Příklad 32 ........

2-Amino-8-buty1-6-(2,6-dichlorfenyl)-8Hpyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on

K suspenzi NaH (60% v minerálním oleji, 34 mg) v 6 ml dimethylformamidu se přidá 2-amino-6-(2,6-dichlorfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7(8H)-on (202 mg, 0,66 mmol). Směs se zahřívá na 50 °C, vznikne čirý roztok. Přidá se 1-jodbutan (105 μΐ, 0,92 mmol) a roztok se míchá při 50 °C 30 minut,potom se ochladí na teplotu místnosti a nalije se na 40 ml ledové vody. Výsledná sraženina se odstraní filtrací a promyje se vodou. Zbytek se suší a čistí rychlou chromatografií, eluuje se gradientem 1:1 hexan:ethylacetát až pouze ethylacetát za získání 152 mg (64 %) 2-amino-8-butyl-6-(2,6-dichlorfeny1)8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-onu; t.t. 202 až 205 °C.

Elementární analýza pro Ci7H1₆C12N4O.0,08 EtOAC: vypočteno 56,18 % C, 4,52 % H, 15,13 % N nalezeno 56,39 % C, 4,64 % H, 14,99 % N.

Příklad 33

2-Amino-6-(2,6-dichlorfenyl)-8-i sobutyl-8Hpyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on

K suspenzi NaH (60% v minerálním oleji, 36 mg) v 8 ml dimethylformamidu se přidá 2-amino-6-(2,6-dichlorfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7(8H)-on (205 mg, 0,67 mmol). Směs se zahřívá na 60 °C po 20. minut za vzniku čirého roztoku. Přidá se l-jod-2-methylpropan (110 μΐ, 0,94 mmol) a roztok se míchá při 50 C 30 minut. Přidá se další množství 1-jod-2-methylpropanu (40 μΐ, 0,34 mmol) a roztok se míchá při 50 °C 40 minut, potom se ochladí na teplotu místnosti a nalije se na 40 ml ledové vody. Vzniklá sraženina se odfiltruje a promyje se vodou. Gumovitý zbytek se rozpustí v ethylacetátu a promyje vodou. Organická vrstva se suší nad síranem hořecnatým, filtruje a zahustí se ve vakuu. Výsledná pevná látka se čistí rychlou chromatografií, eluce 1:1 hexanem:ethylacetátem poskytne 123 mg (51 %) 2-amino-6-(2,6-dichlorfenyl)-8-isobutyl-8Hpyrido[2,3-d]pyrimidin-7-onu; t.t. 193 až 195 °C.

Elementární analýza pro Ci7H1eCi2N4O: vypočteno 56,21 % C, 4,44 % H, 15,42 % N, nalezeno 56,60 % C, 4,59 % H, 15,11 % N.

Příklad 34

Ami no-6-(2,6-dichlorfenyl)-8-(3—dimethy1 amino— propyl)~8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-οη

K suspenzi NaH (60% v minerálním oleji, 50 mg) v 8 ml dimethylformamidu se přidá 2-amino-6-(2,6-dichlorfenyl)pyrido [2,3-d]pyrimidin-7(8H)-on (319 mg,.1,04 mmol).. Směs se zahřívá na 70 °C 1,5 hodiny za vzniku čirého roztoku. Do druhé baňky, obsahující NaH (60% v minerálním oleji, 68 mg) v 6 ml dimethylformamidu se přidá hydrochlorid 3-dimethylaminopropalchloridu (248 mg, 1,56 mmol). Tato suspenze se míchá při teplotě místnosti 30 minut, pak se ..zahřívá, na 70 °C 10 minut a-přidá se k výše uvedenému roztoku sodné sole

2-amino-6-(2,6-dichlorfenyl)-pyrido[2,3-d] pyrimidin-7(8H)onu. Výsledná suspenze se zahřívá na 70 °C 3 hodiny, pak se ochladí na teplotu místnosti a filtruje za promytí ethylacetátem.

Filtrát se zahustí ve vakuu a přidá se ethylacetát a hexan. Výsledná pevná látka se oddělí filtrací a sušením ve vakuu se získá 216 mg (53 %) 2-amino-6-(2,6-dichlorfenyl)-8-(3-dimethylaminopropy1)-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-onu; t.t. 136 až 141 °C.

Elementární analýza pro CieHi9CI2N5O: vypočteno 55,11 % C, 4,88 % H, 17,85 % N, nalezeno 55,07 % C, 5,00 % H, 17,53 % N.

Příklad 35

Methylester kyseliny [2—amino—6—(2,6—dichlorfenyl)—7—oxo—

7H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-8-yl]-octové

K suspenzi NaH (60% v minerálním oleji, 38 mg) v 6 ml dimethylformamidu se přidá 2-amino-6-(2,6-dichlorfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7(8H)-on (203 mg, 0,66 mmol). Směs se zahřívá na 50 °C 40 minut za vzniku čirého roztoku. Přidá se • methylchloracetát (90 μΐ, 1,03 mmol) a roztok se zahřívá na 50 °C 20 minut, potom se ochladí na teplotu místnosti a nalije se ’ na 30 ml ledové vody. Výsledná sraženina se odstraní filtrací s promyje se vodou. Vodný filtrát se extrahuje ethylacetátem a organická vrstva se suší nad síranem horečnatým, filtruje a zahustí. Pevné látky se spojí a čistí rychlou chromatografií za eluce gradientem 1:1 hexan:ethylacetát až pouze ethylacetát _f ^{za zís}kání 152 mg (61 %) methylesteru kyseliny

[2-amino-6-(2,6-dichlorfenyl)-7-oxo-7H-pyrido[2,3-d]_Pyrimidin-8-yl]-octové; t.t. 188 až 190 °C.

Elementární analýza pro Ci₆Hi₂C12N4O3: vypočteno 50,68 % C, 3,19 % H, 14,77 % N nalezeno 50,74 % C, 3,31 % H, 14,39 % N.

Příklad 36 terč.Butylester kyseliny [2-amino-6-(2,6-dichlorfenyl)-7-oxo7H-pyrido [2,3-d]pyrimidin-8-yl]octové

K suspenzi NaH (60% v minerálním oleji, 7 mg) v 10 ml dimethylformamidu se přidá 2-amino-6-(2,6-dichlorfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7(8H)-on (398 mg, 1,30 mmol). Směs se zahřívá na 45 °C až 55 °C 40 minut za vzniku čirého roztoku. Přidá se terc.butýlbromacetát (250 μΐ, 1,69 mmol) a roztok se míchá při 50 °C několik minut, potom se ochladí na teplotu ₍ místnosti a nalije se na 60 ml ledové vody. Výsledná sraženina se ostraní filtrací a promyje se vodou. Pevná látka se čistí rychlou chromatografií, eluce gradientem 1:2 hexan:ethylacetát až pouze ethylacetát za získání 165 mg (30 %) terc.butylesteru kyseliny [2-amino-6-(2,6-dichlorfenyl)-7-oxo-7Hpyrido[2,3-d]pyrimidin-8-yl]-octové; t.t. 171 až 173 °C. Elementární analýza pro Ci 9H1 sCl2N4O3: vypočteno 54,17 % C, 4,31 % H, 13,30 % N > nalezeno 54,17 % C, 4,34 % H, 13,08 % N.

V I

Příklad 37

6-(2,6-Dichlorfenyl)-8-methy1-2-methylsulfanyl-8Hpyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on

Roztok 0,20 g (0,51 mmol) N-[6-(2,6-dichlorfenyl)8-methy1-2-methylsulfanyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yliden]-acetamidu z příkladu 28 ve 2,0 ml 6N kyseliny chlorovodíkové se zahřívá za míchání na teplotu varu. Ihned se j vylučují krystaly. Hustá směs se zahřívá další 2 minuty na teplotu varu, ochladí a filtruje. Koláč se promyje dobře vodou a suší; hmotn- 0,175 g (92 %); t.t. 249 až 251 °C. Hmotové spektrum (Cl) 352 (M⁺) .

Elementární analýza pro Ci5H1iCl2N3OS.1,4 H₂O: vypočteno 47,58 % C, 3,57 % H, 11,16 % N , nalezeno 47,60 % C, 3,12 % H. 11,14 % N.

* * Příklad 38

6-(2,6-Dichlorfenyl)-8-meťhyl-2-[3-(4-methylpiperazin-l-yl)propylamino]-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on

I _s Směs 0,152 g (0,43 mmol) 6-(2,6-dichlorfenyl)-8~methyl2-methy1sulfanyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-onu z příkladu 37 a 1,0 g (6,40 mmol) l-(3-aminopropyl)-4-methylpiperazinu se zahřívá za míchání ve 170 °C olejové lázni (T nádoby = asi 160 C) po 3 hodiny. Přebytek aminu se odpaří za sníženého tlaku.

Přidá se voda (5 ml) a oddělená guma se extrahuje do 50 ml 10% i methylenchloridu-etheru. Organická fáze se promyje třikrát 10 . ml vody, suší (uhličitan draselný), čistí aktivním uhlím, , filtruje a zahustí. Zbylá guma se rozpustí ve 3 ml etheru.

‘ Krystaly, které se vytvoří, se odfiltrují a promyjí se etherem; hmotn. 0,033 g; t.t. 170 až 172 °C.

Hmotové spektrum (Cl) 461 (M⁺a

Elementární analýza pro Ca2H26CI₂N₆0: vypočteno 57,27 % C, 5,68 % H, 18,21 % N ’ nalezeno 57,39 % C, 5,70 % H, 18,10 % N.

* Příklad 39

6-(2,6-Dichlorfeny1)-2-methansulfony1-8-methy1-8H_t pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on

0,346 g (1,00 mmol) 50% až 60% m-chlorbenzoové kyseliny (celkem přítomno 50 % kyseliny) se přidá při 25 °C k míchanému roztoku 0,165 g (0,47 mmol) 6-(2,6-dichlorfenyl)-8-methyl2-methylsulfanyl-8H-pyrÍdo[2,3-d]pyrimidin-7-onu z příkladu 37 * ^{v 15} ml chloroformu a roztok se míchá přes noc. Pro odstranění jakéhokoliv přebytku kyseliny se přidá 0,25 g (3,20 mmol) . dimethylsulfoxidu. Po 15 minutách se chloroformový roztok promyje 30 ml nasyceného hydrogenuhličitanu sodného a pak vodou. Oddělená organická vrstva se suší nad síranem sodným, filtruje a zahustí na asi 5 ml objem. Oddělí se krystaly.

Přidá se asi 5 ml petroletheru a filtruje; hmotn. 0165 g (92 %); t.t. > 290 °C.

Hmotové spektrum (Cl) 384 (M⁺)

Elementární analýza pro C_t5H1iCl2N3O3S: vypočteno 46,89 % C, 2,89 % H, 10,94 % N nalezeno 47,14 % C, 2,96 % H, 10,87 % N.

Příklad 40

6-(2,6-Dichlormethyl)-8-methyl-2-methylamino-8Hpyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on

0,165 g (0,47 mmol)

6-(2-, 6-dichlorf enyl)-8-methyl-2-methy 1 sul f any l-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-onu z příkladu 37 se umístí do tlakové trubky s magnetickou míchací tyčinkou. TRubka se ochladí v lázni suchý led-aceton a v trubce kondenzuje asi 3 ml monoethylaminu. Přidá se-dimethylformamid (1,0 ml) a trubka se uzavře a ponechá ohřát na teplotu místnosti. Za míchání se reakční směs zahřívá za štítem ve 110 °C olejové lázni. Po 10 minutách je veškerá pevná látka v roztoku. Roztok se zahřívá v olejové lázni 20 hodin. Trubka se ochladí v lázni led-aceton, otevře se a ohřeje se na teplotu místnosti pro odvětrání přebytku aminu. Většina dimethylformamidu se odpaří za sníženého tlaku a získají se krystaly. Pevná látka se trituruje s 5 ml vody, filtruje, promyje se vodou a suší; hmotn. 0,128 g. Čištění se provede rekrystalizací z ethylacetátu-petroletheru za získání 0,081 g čistého produktu; t.t. 243 až 244 °C.

Hmotové spektrum (Cl) 335 (M+)

Elementární analýza pro Ci5H12CI2N4O:

u vypočteno 53,75 % C, 3,61 % H, 16,71 % N nalezeno 53,91 % C, 3,64 % H, 16,80 % N.

Příklad 41

6-(2,6-Dichlorfenyl)-2-dimethylamíno-8-methy1-8Hpyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on *

^Tato sloučenina se připraví podobným postupem jak je popsán v příkladu 40, vychází se ze

6-(2,6-dichlorfenyl)-8-methyl-(2,6-dichlorfenyl)-8-methy12-methylsulfanyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-onu z příkladu 37 a dimethylaminového plynu; t.t. 256 až 258 °C.

M Hmotové spektrum (Cl) 349 (M+) ...........

Elementární analýza pro Ci&Hi₄C12N4O: vypočteno 55,03 % C, 4,04 % H, 16,06 % N nalezeno 55,13 % C, 4,06 % H, 16,03 % N.

Příklad 42 i

6-(2,6-Dichlorfenyl)-2-ethylamino-8-methyl-8Hpyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on

Tato sloučenina se připraví podobným postupem jak je popsán v příkladu 46, vychází se ze 6-(2,6-dichlorfenyl)8-methyl-2-methylsulfanyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-onu z příkladu 37 a plynného ethylaminu; t.t. 180 až 182 °C.

Hmotové spektrum (Cl) 349 (M⁺)

Elementární analýza pro Ci₆Hi4CI2N4O:

vypočteno 55,03 % C, 4,04 % H, 16,04 % N nalezeno 55,17 % C, 4,08 % H, 16,07 % N.

Příklad 43

6-(2,6 Dichlorfenyl)-2-(2-hydroxyethylamino)-8-methyl-8Hpyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on

Směs 0,165 g (0,47 mmol)

6-(2,6-dichlorfenyl)-8-methyl-2-methylsulfanyl-8H-pyrido. [2,3-d]pyrimidin-7-onu z příkladu 37, 1,0 g (16,4 mmol) v· ethanolaminu a 0,5 ml dimethylformamidu se zahřívá ve 125 °C ► olejové lázni za míchání 1,5 hodiny. Výsledný roztok se zahusti ve vakuu a zbylá guma se trituruje s 5 ml vody. Lepivá pevná látka se zfiltruje, dobře se promyje vodou a rekrystaluje z acetonu/petroletheru za získání 0,071 g čistého produktu; t.t. 128 až 131°C.

Hmotové spektrum (Cl) 365(M

Elementární analýza pro Ci₆Hi4CI2N4O2.0,7 C₃HsO:

vypočteno 53,56 % C, 4,52 % H, 13,81 %N nalezeno 53,88 % C, 4,46 % H, 14,17 %N.

Příklad 44

6-(2,6-Dichlorfenyl)-2-i sopropylamino-g-methyl-SHpyrido [2,3-d]pyrimidin-7-on

Tato sloučenina se připraví podobným postupem, jak je popsán v příkladu 40, vychází se ze 6-(2,6-dichlorfenyl)-8methy1-2-methylsulfanyl-8H-_Pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-onu z příkladu 37 a isopropylaminu; t.t. 194 až 196 °C.

Hmotové spektrum (Cl) 363 (M⁺)

Elementární analýza pro Ci7H1 ₆C12N4O' vypočteno 56,21 % C, 4,44 % H, 15,42 % N

Ί¹ nalezeno 56,17 % C, 4,48 % Η, 15,43 % N.

Příklad 45

2-Butylamino-6-(2,6-dichlorfenyl)-8-methy1-8Hpyrido[2,3-d]pyrimidin-7-onu

Směs 0,177 g (0,50 mmol) 6-(2,6-dichlorfenyl)-8-methyl2-methylsulfanyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-onu z příkladu 37, 10 ml n-butylaminu a 1,0 ml dimethylformamidu se zahřívá za mícháním pod refluxem (110 °C olejová lázeň). Po 1 hodině je roztok kompletní. Po 20 hodinách refluxu se odpaří přebytek aminu a dimethylformamidu, a zbytek se trituruje s vodou, filtruje, promyje se-vodou a suší; hmotn. 0,180 g.

Rekrystali žací z ethylacetátu/petroletheru se získá čistý produkt; hmotn. 0,116 g; t.t. 184 až 186 °C.

Hmotové spektrum (Cl) 377 (M⁺)

Elementární analýza pro CisHi₈C12N4O: vypočteno 57,31 % C, 4,81 % H, 14,85 % N nalezeno 57,41 % C, 4,81 % H, 14,83 % N.

Příklad 46

2-Benzylamino-6-(2,6-di chlorf enyl)-8-methyl-8Hpyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on

Směs 0,165 g (0,47 mmol) 6-(2,6-dichlorfeny1)-8-methyl2-methylsulfanyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-onu z příkladu 37, 0,50 g (4,70 mmol) benzylaminu a 0,5 ml dimethylformamidu se zahřívá za míchání ve 120 °C olejové lázni. Po 5 minutách je roztok kompletní. Po 5 hodinách se za sníženého tlaku

1/·

odpařL.přebytek aminu a dimethylformamidu a zbytek se trituruje s roztokem 1 ml acetonu a 2 ml petro1 etheru. Lepivá pevná^látka _Tsejfiltruje ,a- rekrys talujexz1y* *” ethylacetátu/petroletheru* za_L zí. s.kání')0; 092 ig. či stého produktu; t.t. 217 až 219 °C.

Hmotové^spektrum(Cl) ‘41 LuW) ě í C ,4 dlsihM;rf ) -b-txthylElementární ^analýza pro iCi.7Hi 4CT2N4O5 > i i ir 7 -r*íťu Z Γ r HU vypoěteno-61 ,-33(1- G_iu3,9'2 Λ .Hrťl.3,62 XíNiry ML· wlu a 0 * nalezeno.^61,30.Λ ,C,i 4,02 A íH,\M13,5911N^ v oí , ovť IVrj i.-'S Po 2 r.i.. Uch j® rozr Uní Po 5 ř.odirKh

Příklad 1.47- iru JiuUb υ ofueiii í hViít γ<'τγ ' \ I- ” 4uIř bj . »<·· v ri m iu* - s ’ ii z i. u y. v Λ^; u ’ ·.. rf·'ί'-ι,··, l

6y(2,6-Dichlorf enyl j.^S-methy 1-2-^ (3-morf o 1: in-4-ý!-propylamino) 8H-pýridb_t[2/Sýd] pyrimídin-7-ohi~ r-”ýn‘íi; Av''’M ⁷C,|r*ot P-Γ t t 7 V '· ^%· ' q? f·-Ί „x h'.Smes 0,165 gi(0,47 mmol-) 6-((2,6-dichlorfenyl)-8-methyl2-methy.ls;ulfanylr8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-onu z příkladu 37/iH'Op g (6, gOjimmp.l) N-(3-aminopropyl)morfolinu a 0,5 ml dimethylformamidu se zahřívá za míchání ve 125 °C olejové lázni.;. Po,2 minutách’ je' rozpuštění úplné. Po 1,5 hodině se odpaří,přebytek aminu a dimethylformamidu za sníženého tlaku a zbytek^se₄tritUřuje/s 5 ml vody. Guma se rozpustí ve 25 ml ethylacetátua)roztok se pfomyje 2 x 5 ml vody, suší se (uhličitan draselný) a zahustí. Po rozpuštění v 5 ml etheru se oddělí-krystaly čistého produktu; hmotn. 0,101 g; t.t. 140 až 142 °C.

Hmotové-spektrum,(Cl) 448 (M⁺) Elementárnípanalýzá,pro’C21H23CI2N4O2: vypočteno 56,26 % C, 5,17 % H, 15,62 % N nalezeno^ ,56,48.’%iC;05; 24 H, 15(53t%<N'. ’ ’ ¹ ’ ri .fan· 1-8 *-f ··< d]py Příklad 48

6-(2,6-Dichiorfeny1)-2-[2-(3,4-dimethoxyfenyl Ιέ thy lamino] -8-methyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on

Směs 0,165 g (0,47 mmol) 6-(2,6-dichlorfenyl)-8-methyl2-methylsulfanyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-onu z příkladu 37, 0,80 g (4,40 mmol) 2-(3,4-dimethoxyfenyl)ethylaminu a 0,5 ml dimethylformamidu se zahřívá za míchání v olejové lázni 125 °C. Po 2 minutách je rozpuštění úplné. Po 5 hodinách se přebytek aminu a dimethylformamidu odpaří za sníženého tlaku a --zbytek—^“tr Γturuj'e“sτ~l·0~mdv’VQdy-Ť~Guma—se—rozpus t4—75^ml—~~—. etheru a roztok- se promyje 2 x 10 ml vody a suší se (uhličitan draselný). Hydrochloridová sůl se připraví průchodem pynného chlorovodíku tímto etherovým roztokem za vysrážení gumy. Ether se slije, a guma se rozpustí ve 2,0 ml 2-propanolu. Vyvolá se vysrážení krystalů. Ether (10 ml) se přidá a čisté krystaly se odfiltrují a promyjí se etherem; hmotni 0,034 g; t.t. 152 až 15ř °C.

Hmotové spektrum (Cl) 485 (M⁴).

Elementární analýza pro C24H22CI2N4O3.HC1.0,75 C3H8O: vypočteno 55,61 % C, 5,16 % H, 9,88 % N nalezeno 55,32 % C, 5,28 % H, 9,50 % N.

Příklad 49

6-(2,6-Dichlorfenyl)-8-methy1-2-[(pyridin-2-ylmethyl)amino]-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on

Směs 0,165 g (0,47 mmol) 6-(2,6-dichlorfenyl)-8-methyl2-methylsulfanyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on z příkladu 37,

1,08 g (10,0 mmol) 2-(aminoethyl)pyridinu a 0,5 ml dimethylformamidu se zahřívá za míchání ve 130 °C olejové lázni. Po 2 minutách je rozpuštění úplné. Po 2 hodinách se přebytek aminu a dimethylformamidu odpaří za sníženého tlaku. Ke zbytku se přidá ether (5 ml). Ihned se vytvoří krystaly. Přidá se voda (5 ml) a celá směs se zfiltruje. Koláč se promyje 5 ml etheru, 5 mlvody a pak se suší; hmotn. 0,164 g. Rekrystalizací z ethylacetátu se získá 0,075 g čistého produktu; t.t. 198 až 201 °C. Hmotové spektrum (Cl) 412 (M⁺). Elementární analýza pro C20H15CI2N5O:

--—---. v-ypočt eno 58,27 - % - C, - 3,67 % Η,. 16,99 .% .N........ —------ nalezeno 58,36 % C, 3,82 % H, 16,82 % N.

Příklad 50

6-(2,6-Dichlorfenyl)-8-methy1-2-[(pyridin-3-ylmethyl)amino]-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on

Tato sloučenina se připraví postupem podobným postupu popsanému v příkladu 49, vychází se z 0,165 g (0,47 mmol) 6-(2,6-dichlorfenyl)-8-methyl-2-methylsulfanyl-8Hpyrido[2,3-d]pyrimidin-7-onu z příkladu 37 a 1,08 g ¢10,0 .....- — mmol) 3-(aminOmethy-l)pyridinu za získání 0<053 g čistéhoproduktu; t.t. 224 až 226 °C. Hmotové spektrum (Cl) 412 (M⁺). Elementární analýza pro C20H15CI2N5O: vypočteno 58,27 % C, 3,67 % H, 16,99 % N nalezeno 58,36 % C, 3,78 % H, 16,79 % N.

Příklad 51

6-(2,6-Dichlórfenyl)-8-methýl-2-(pyridin-2-yl-ethylamino)-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on

Tato sloučenina se připraví postupem podobným postupu popsanému v příkladu 49, vychází se z 0,165 g (0,47 mmol) 6-(2,6-dichlorfenyl)-8-methyl-2-methylsulfanyl-8Hpyrido[2,3-d]pyrimidin-7-onu z příkladu 37 a 1,00 g (8,20 mmol) 2-(2-aminomethyl)pyridinu*za získání 0,082 g čistého produktu; t.t. 473 až 174 °C. -Hmotové—spe^t-Fum^-^—~———'---.—?·

Elementární analýza pro CziHi?C12N5O: vypočteno 59,17 % C, 4,02 % H, 16,43 % N nalezeno 59,28 % C, 4,11 % H, 16,29 % N.

Příklad 52

6-(2,6-Dichlorfenyl)-2-{3-[4-(2-methoxyfenyl)-piperazin-lyl]-l-propylamino}-8-methyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on

Tato sloučenina se připraví postupem podobným postupu popsanému v příkladu 49, vychází se z 0,165 g (0,47 mmol) 6-(2,6-ďichlorf enyl )-8-met-hy1-2-me thy l su-1-f-any 1-8H-.............

pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-onu z příkladu 37 a 1,00 g (4,00 mmol) l-(3-aminopropyl)-4-(2-methoxyfenyl)piperazinu za získání 0,103 g čistého produktu; t.t. 187 až 188 °C. Hmotové spektrum (Cl) 553 (M⁺). Elementární analýza pro C28H3oCl2N6O2: vypočteno 60,76 % C, 5,46 % H, 15,18 % N nalezeno 61,04 % C, 5,41 % H, 15,20 % N.

Příklad 53

6-(2,6-Di chlorfeny1)-2-methansulfinyl-8-methyl-8Hpyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on

Tato sloučenina se izoluje jako vedlejší produkt při oxidaci _s.. 6—(2,6-dichlorf enyl)-8-methyl-2-methylsul fanyl-8H- .

pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-onu z příkladu 37 kyselinou .·. m-chlorperbenzoovou v jednom postupu, který je podobný příkladu 39, ale kde reakční doba je zkrácena; t.t. 244 až 247 °C.

Hmotové spektrum (Cl) 368 (M⁺).

Elementární analýza pro Ct5H1iCl2N3O2S:- vypočteno 48,93 % C, 3,01 % H, 11,41 % N nalezeno 48,42 % C, 3,20 % H, 11,05 % N. f

Příklad 54 -i.

6-(2,6-Di chlorfenyl)-8-methy1-2-fenylamino-8H-pyri do[2,3-d]pyrimidin-7-on

Roztok 0,113 g (0,29 mmol)

6-(2,6-dichlorf eny1)-2-methansu1f onyl-8-methyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-onu z příkladu 39 v 1,00 g (10,70 mmol) anilinu se . udržuje pod refluxem (184 °C) 3 minuty. Většina přebytku • anilinu se odstraní za sníženého tlaku. Zbylá guma se rozpustí v 1,0 ml ethylacetátu. Vyvinou se krystaly; hmotn. 0,088 g.

* Další čištění pro odstranění tmavé barvy se provede si 1ikagelovou chromatografií, elucí chloroformem a pak 50% hexanem-ethylacetátem za získání čistého krystalického

produktu;hmotn. 0,046 g; t.t. 247 až 249 C. Hmotové spektrum (Cl) 397 (M⁺).

Elementární analýza pro C20H14CI2N4O: vypočteno 60,47 % C, 3,55 % H, 14,10 % N nalezeno 60,25 % C, 3,64 % H, 14,00 % N.

Příklad 55

2-(3-Bromfenylamino)-6-(2,6-dichlorfeny1)-8-methy1-8Hpyrido[2,3—d]pyrimidin-7-on

Roztok 0,155 g (0,40 mmol)

6-(2,6-dichlorfenyl)-2-methansulfonyl-8-methyl-8Hpyrido[2,3“d]pyrimidin-7-onu z příkladu 39 v. 0,50 g (2,90 mmol) 3-bromani1 inu se udržuje pod refluxem (251 °C) 5 minut. Většina přebytku 3-bromani1 inu se odpaří za sníženého tlaku. Ochlazením vzniklá guma se trituruje s 1,0 ml etheru. Fialové krystaly, které se vyvinuly, se odfiltrují a promyji 2 ml etheru; hmotn. 0,186 g. Dálší čištění pro odstranění tmavé barvy se provede si 1ikagelovou chromatografi i, elucí chloroformem a pak 50% hexanem/ethylacetátem za získání čistého krystalického produktu; hmotn. 0,104 g; t.t. 246 až 248 °C.

Hmotové spektrum (Cl) 447 (M⁺) .

Elementární analýza pro C20H1aBrClzNiO: vypočteno 50,45 % C, 2,75 % H, 11,77 % N nalezeno 50,53 % C, 2,76 % H, 11,52 % N.

Příklad 56

2-(4-Chlorfenylamí no)-6-(2,6-dichlorfenyl)-8-methyl-8H pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on

Směs 0,113 g (0,29 mmol)

6-(2,6-dichlorfenyl)-2-methansulfonyl-8-methyl-8Hpyri do[2,3-d]pyrimidin-7-onu z příkladu 39 v 0,50 g (3,90 mmol) 4-chlorani1 inu se zahřívá za míchání na teplotu yaru (238 °C) 5 minut. K ochlazenému tmavě modrému reakčnímu roztoku se přidá ethylacetát (3 ml). Přidá se petrolether (3 ml) pro úplné vysrážení tmavé pevné látky. Tato se odfiltruje, promyje se 50% hexanem-ethylacetátem; hmotn. 0,078 g. Surová pevná látka se Čistí pro odstranění tmavé barvy si 1ikagelovou chromatografií, eluuje se chloroformem a pak 50% hexanem-ethylacetátem za získání čistého krystalického produktu; hmotn.. 0,056 g; t. t.. 255 až 256 °C. --

Hmotové spektrum (Cl) 431 (M⁺).

Elementární analýza pro CzoHi3CI3N4O: vypočteno 55,64 % C, 3,04 % H, 12,98 % N nalezeno 55,75 % C, 3,04 % H, 12,97 % N.

Příklad 57

2-(Benzo[1,3]dioxo-5-ylamino)-6-(2,6-dichlorfenyl)8-methyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on

Směs 0,113 g (0,29 mmol)

6-(2,6-dichlorfenyl)-2-methansu1fony1-8-methy1-8Hpyrido[2,3-d]pyrimidin-7-onu z příkladu 39 a 0,50 g (3,70 mmol) 3,4-methylendioxyani1 inu se zahřívá za míchání na 200 °C olejové lázni. Výsledný roztok se zahřívá 5 minut a ochladí se na teplotu místnosti. Přidá se ethylacetát (2 ml) a stopy pevné látky se odfiltrují. Krystaly, které se pomalu vyvíjejí

I- • ♦ v « 4 . * í * & · β ; s 4 • · 6 « * * ·····**· « * b ^ * *· * - v í ,1 í ...

I ve filtrátu,- se odfiltruji a promyji se. 2 ml ethylacetátu;

i ” hmotu. 0,080-g. Pevná-látka,se čistí pro odstranění tmavého zbarvení si 1ikagelovou chromatografií,..za eluce chloroformem a i pak 50% hexanem/ethylacetátem za získání čistého krystalického

I produktu; hmotu; 0,054_1S;.t.t.,240 až 241 °C.

I Hmotové spektrum (Cl) 441 (M*).

[ , Elementární analýza pro Cz 1H1 4CI2N4O3.:

! » vypočteno 57,16 % C, 3,20 % H, 12,70 % N i _M nalezeno'> 56,95p%í C,^. 3,11^j

I j, )., /: t ·. ' 4-.- Ji·. , Aý,·' ?-(· J: r. ·’ ' Příklad 58 j ' > G i $' ‘ 6-(2,6-Dichlorfenyl)-8Tmethyl-2-(pyridin-4-ylamino)-8H_·.........i^.yri do (.2 ,.3-d.^ ____________..... ......... ...

'~ ' - Směs 0,550 g (1,25 mmol) ' ₆_(2,6-dichlorfenyl)-2-methansulfonyl-8-methyH8H'pyrido [2,3-d]pyrimidin-7-onu z příkladu 39 a 1,50 g (16,00 ‘mmol) 4-aminopyridinu se zahřívá za míchání na 150 °C olejové lázni. Výsledný roztok se zahřívá 10 minut a ochladí se na ' teplotu: místnosti. Ztvrdlá tavenina se trituruje se 3 ml méthanolu. Po 24 hodinách stánice vyvinutá granulární pevná látka odfiltruješ promyje se 2 ml méthanolu a 2 ml’ etheru;

hmo'tn. 0!471ν§·/Ί ^ř. ₍

Hydřochloridová sul,se připraví, následovně: Výše uvedená suroá .nbtie^e'susoenduie.vcs ml_fmethanolu. _hZa míchání se přidá 1 ml < 2N-kyseIiny chlorovodíkové z,získání .kompletního roztoku.

Í Další kyselina chlorovodíková se přidává až je roztok slabé

-zakálený. Krystaly se pak valouči, odfiltruji a promyjí 10 ml 10% methánolu-etheru a pak etherem; hmotu. 0,485 g.

Rekrys tal izací - z methanolu/etheru se ,Hská čistý krystalický

produkt; hmotn. 0,405 g; t.t. 338 až 340 °C. Hmotové spektrum (Cl) 398 (M⁺).

Elementární analýza pro C19H13CI2N5O.HCI.H2O: vypočteno 50,40 % C, 3,56 % H, 15,47 % N nalezeno 50,78 % C, 3,18 % H, 15,50 % N.

Příklad 59

6-(2,6-Dichlorfenyl)-8-methy1-2-(4-(4-methylpiperazin-l-ylíbu ty lamino] -8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin~7-on

Směs 0,152 g (0,43 mmol)___.

6-(2,6-dichlorfenyl)-8-methy1-2-methylsulfanyl-8Hpyrido[2,3-d]pyrimidin-7-onu z příkladu 37 a 0,50 g (2,90 mmol) 1-(4-aminobuty1)-4-methylpiperazinu se zahřívá za míchání ve 170 °C olejové lázni. Po 2 minutách je rozpuštění kompletní. Po 2 hodinách se roztok ochladí na teplotu místnosti a tmavá guma se rozpustí ve 25 ml etheru. Roztok se promyje 4 x 5 ml vody. Většina zabarvení přejde do vody pro promývání. Etherový roztok se suší nad uhličitanem draselným, filtruje a zahustí se na asi 2 ml objemu. Krystaly, které se vyloučí, se odfiltrují a promyjí se etherem; hmotn. 0,063 g;t.t. 130 až 132 °C;

Hmotové spektrum (Cl). 47.5, (M⁺) .......................

Elementární analýza pro C23H2eCl₂NeO: vypočteno 58,11 % C, 5,94 % H, 17,68 % N nalezeno 58,39 % C, 5,99 % H, 17,53 % N.

Příklad 60

2-Cyklohexylamino-6-(2,6-dichlorfeny1)-8-methy1-8H-

pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on •Λ

Směs 0,100 g (0,26 mmol) 6-(2,6-dichlorfeny1)-2-methansulfonyl-8-methyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-onu z příkladu 39 a 0,300 g (3,00 mmol) cyklohexylaminu se zahřívá na teplotu varu (134 °C). Výsledný roztok se zahřívá pod refluxem 2 minuty. Většina přebytku aminu se odpaří za sníženého tlaku.

• Zbývající guma se rozpustí ve 2 ml ethylacetátu za horka.

Přidá se petrolether (2 ml) a krystaly, které se vyloučí z ‘ ochlazeného roztoku se odfiltrují a promyjí se vodou; hmotn.

0,090 g. Rekrystalizací z ethylacetátu se získá čistý krystalický produkt; 0,048 g, t.t. 242 až 244 °C.

Hmotové spektrum (Cl) 403 (M⁺).

. .. Elementární analýza pro C20H20CI2N40: ... . ..

vypočteno 59,56 % C, 5,00 % H, 13,89 % N nalezeno 59,92 % C, 5,03 % H, 13,86 % N.

Příklad 61 ^1 terč.Butylester kyseliny

6-[6-(2,6-dichlorfeny1)-8-methyl-7-oxo-7,8-dihydropyrido[2,3-d]pyrimidin-2-ylamino]-hexanové

Směs 0,152 g (0,40 mmol)

6-(2,6-dichlorfeny1)-2-methansulfonyl-8-methyl-8H- pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-onu z příkladu 39 a 0,750 g (4,00 mmol) terč.butylesteru kyseliny 5-aminohexanové se zahřívá za míchání na 120 °C olejové lázni do úplného rozpuštění. Po 10 minutách se roztok ochladí na teplotu místnosti a přidá se 20 ml 10% hydrogensiřičitanového roztoku s přítomnými ledovými lupínky. Oddělená guma se extrahuje do 30 ml etheru. Organická

ji.

í fáze se promyje 3 x.S.ml vody, suší (síran horečnatý), filtruje a zahustí se na objem 2 ml Krystaly, které se vyloučí, se odfi 1 trují>a?promyjí se 1 ml etheru; hmotn. 0,150 g; t, t7.0, až 75.ýC.?-tJ, ύ.....u ϊχ }

Hmotové spektrum _t(CI)r_r'491.,(M ⁺ )^ 0 i, s ¹ r . < 75

Elementární analýza pro?C₂4H2eCi2N4O3-.O^iHzO:

- vypočteno .58ý22 X.C,<5,-78 ,%1H-,M 1,3'2 UtJ.

*. nalezeno;,.'57,84 %; C i 5, ^7.1 % H, 11 ,04g% Ν'. i. ’/ve·’ , v 1 tUi/UvUp X, v. h i» , · ·.

^{r r} ./. I 1, * Příklad .62 i oku .s f H tr?; í _A njt jy u t, '] j.j · <6-[6-(2,6rDi chlorfenyl)-8-methyl-7-oxó-7,8-dihydrokpyrido[2,3-d]pyrimidin-2-ylamino]-hexanová kysel ina 1. 1 - ,. . .. , . . . _ .... 111 t -L u.. . κ-φ* ~ X - . *. · . . — —. II .1 — . . . _ __ „ .— - .

d vTř - Roztok 0,095 (g (0/19 mmol)' terč.butylesteru kyseliny '6“L6-(2,6-di,chlorfenyl)—8-méthyl-7-oxo-7,8-dihydropyrido [2,3-d]pyrimidin-2-ylamino]-hexanové z příkladu 61 v 75 , ^rml'’kyseliny trifluoroctové při 25 °C se nechá stát 1 hodinu.

Většina kyseliny trifluoroctové se odpaří. Zbylá guma se trituruje. se 2 ml· vody- a s l.ňje.Y'Pro· rozpuštění většiny gumy se přidá^-methanob (I,.ml)f,í čímž se vyvinou dobře definované krystaly, přidá se voda (1 ml) a pevná látka se filtruje a suší ;'hmotn J .0,100'g ; ýt. t240 až 242 °C.

íHmotové.ispektrum\(CI^ t.nv f

Elemenťárníranalýza' pro^T C₂oH₂oC1 2N4O3vCF.3CO2H‘. 0- 75 CH3OH: vypočteno· 47,65··.% C,-:4,22 % H;; .9-, 77ř %> N ř v a ~ ¹ nalezeno. Y47V38 %. C,. 4,.28 %.Ή,i'9_;)72j%.. ^ ' '1 1 . a'.u ^k

Pr 1 k 1 ad .63 «á t u . 1 v . s.< > . t *·t » .* í ? ’T£M; , i . i í\. 1; ;:t;.

'6-.(2,.6-DichlorfenyD.-S-methyl-Srprtolylamino-SH-p, pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on

Směs 0,113 g (0,29 mmol) (2,6-dichlorfenyl)-2-methansulfonyl-8-methyl-8Hpyrido[2,3 d]pyrimidin-7-onu z příkladu 39 a 0,50 g (4,70 mmol) 4 methylam1 inu se zahřívá za míchání ve 180 °C olejové L_h LL^{roztok se zahflvá 10 minut}·^Větsina methylam1 inu se odpaří za sníženého tlaku. Zbytek se rozpustí v 1 ml ethylacetátu. Krystaly, které se oddělí ze tmavého roztoku etheru; hmotn.

se filtrují a promyjí 2 ml ethylacetátu čistý produkt; hmotn.

g. Rekrystal izací a pak z ethylacetátu se získá

Hmotové spektrum (Cl) 411 (M+),

Elementární analýza pro C₂iHi₆C12N4O: vypočteno 61,33 % C, 3,92 % H, 13,62 % N nalezeno 61,11 % C, 4,00 % H, 13,41 % N.

Příklad 64 ^“^,6-Dichlorfenyl)-2-(4-methoxyfenylamino)-8-methyl8H-_Pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on

Směs 0,113 g (0,29 mmol)

LP - ⁶’^d * ch.l orf eny 1)-2-me..thansu-l f ony 1-8-^^ pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-onu z příkladu 39 a 0,50.g mmol) 4-methoxyani1 inu se za míchání zahřívá ve 180 lázni. Výsledný roztok se zahřívá 10 minut. Většina anilinu se odpaří za sníženého tlaku. Zbytek (4,10 ^q C olejové Přebytku _lidRU. zoyrek se rozpustí ve 2 s odf t ^KryStalí’ ^{Se Vyl}°^UČ‘ “ “° ^toku se odfiltruji a promyji 2 ml ethylacetátu, hmotn. 0,102 g Rekrystalizací z ethylacetátu se získá čistý produkt; hmotn °·°47 g; t.t. 221 až 223 °C.

Hmotové spektrum (Cl) 427 (M+).

Elementární analýza pro C₂iHj₆C1₂N₄O₂: vypočteno 59,03 % C, 3,77 % H, 13,11 % N nalezeno 59,19 % C, 3,84 % H, 13,07 % N

Příklad 65

6-(2.6-Dichlorfenyl)-8-ethyl-2-methylsultanyl-8Hpyrido[2,3-d]pyrimidin-7-ylidenamin g, t.t.

²⁰ * Práškovaného bezvodéh^uM.iz.i.t_an^^^---Přidá k roztoku 4,95 g (0,025 mol) * 5 25 g (0,028 mol) 2,6-dichlorfenylacetonitrilu v 50 ml n-ethylformamídu. Směs se zahřívá za míchaní ve 130 C olejové lázni (teplota nádoby = asi 120 Cl 16 h.i „ ochladí a filtruje K„_lá· ^1η' ^{SmSs se}

K filtrát., Γ “ ^{Pr0 y}’^{e 30 011} “^‘hylformamidu. které se odd'/ ^ta_Iy„ se oddělí, se nrifiifmíí

,. _x ’ ^{e oatl}ltrují, promyjí _se 20 ml 50% dimethylformamidu/vody a pak 20 mi λ

217 _až 219 7 ^{y a SUŠi Se: ta0tn}- ⁴·³⁰

Hmotové spektrum (Cl) 365 (M⁺).

Příklad 66

N-fý-fý^bíorfenyiJ-s-ethy^-methy^^^ Pyrido[2,3 d]pyrimidin-7-yliden]-acetamid

Směs 2,70 g (7,40 mmol) 6-(2,6-dichlorfenyl)-8-ethyl-2 methylsulfanyl-8H-pyridol2 3 dUv ^{Wyi 2} pyrido12,3-d]pyrimidin-7-ylídenaminu z příkladu 65 a 15 ml acetanhydridu se zahřívá za míchání na teplotu varu. Výsledný roztok se zahřívá pod refluxem 5 minut a zahustí se za sníženého tlaku na objem asi 8 ml. Roztok se ochladí a přidá se ether (8 ml). Dobře definované krystaly, které se oddělí, se odfiltrují a promyjí se 5 ml etheru a 10 ml petroletheru; hmotn. 2,68 g; t.t. 175 až 177 °C.

Hmotové spektrum (Cl) 407 (M⁺),

Příklad 67

6-(2,6-Dichlorfenyl)-8-ethyl-2-methylsulfanyl-8Hpyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on .2,40 g. .(5,90 mmol) N- [6-(2,6-dichlorf enyl) -8-ethyl- ‘ 2-methylsulfanyl-8H~pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yliden]-acetamidu z příkladu 66 se rozpustí ve 35 ml 6N kyseliny chlorovodíkové při 25 C. Roztok se zahřívá za míchání na teplotu varu. Po 1 minutě se oddělí krystaly produktu. Po dalších 5 minutách při teplotě varu se směs ochladí, filtruje a koláč se postupně promyje 5 ml 6N kyseliny chlorovodíkové, 15 ml vody, 5 ml 2-propanolu a 5 ml etheru; hmotn. 2,11 g (98 %). Čistý produkt se izoluje za použití silikagelové chromatografie s elucí 50 % chloroformu/ethylacetátu; t.t. 233 až 236 °C.

Elementární analýza pro Ci&Hi₃C12N3OS.0,1 0^802.0,25 H2O: vypočteno 51,89 % 0, 3,80 % H, 11,07 % N nalezeno 51,89 % C, 3,58 % H, 10,99 % N.

Příklad 68

6~(2,6-Dichlorfenyl)-8-ethyl-2-methansulfony1-8Hpyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on

RoztokO,66 g (1,80 mmol)

6-(2,6-dichlorfeny1)-8-ethyl-2-methansu Ifonyl-8Hpyrido[2,3-d]pyrimidin-7-onu z příkladu 67 v 50 ml chloroformu se zpracuje za míchání s 1,50 g (4,32 mmol) 50% až 60% kyseliny m-chlorperbenzoové (celkem 50 % perkyseliny Přítomno). Roztok se nechá stát při teplotě místnosti 16 hodin. Pro snížení přebytku perkyseliny se přidá é,50 g (6,80 mmol) dimethylsulfoxidu. Po 15 minutách se roztok promyje 2 x 30 ml nasyceného roztoku hydrogenuhličitanu a pak 30 ml vody. Chloroformový roztok se suší nad bezvodým síranem sodným, filtruje a zahustí na objem 10 ml. Přiává se petrolether až do slabého zákalu. Vyloučené krystaly se odfiltrují a promyjí se etherem; hmotn. 0,401 g; t.t. 214 až 216 °C.

Hmotnové spektrum (Cl) .3.98 (M.⁺ ) .

Elementární analýza pro Ci₆Hi₃C12N3O3S.0,25 H2O: vypočteno 47,70 % C, 3,38 % H, 10,43 % N nalezeno 47,41 % C, 3,17 % H, 10,23 % N.

Příklad 69

6-(2,6-Dichlorfenyl)-8-ethyl-2-fenylamÍno-8Hpyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on

Směs 0,134 g (0,33 mmo) 6-(2,6-dichlorfenyl)-8-ethyl-2^methansulfonyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-onu z příkladu 68 a 0,500 g (5,40 mmol) anilinu se zahřívá za míchání ve 195 °C olejové lázni pod refluxem. Výsledný roztok se udržuje pod refluxem 5 minut. Většina přebytku anilinu se odaří za sníženého tlaku. Zbylá guma se rozpustí v 15 ml ethylacetátu. Po odfiltrování relativně malého množství nerozpustného materiálu se roztok filtruje přes vrstvu silikagelu pro

, odstraněrií fialové barvy. Filtrát se zahustí na objem 2 ml. Přidává se petrolether do slabého zákalu. Krystaly, které se odděl í „Dse,<odf i l truj íŽaCpromyj í_; 50%_Ketherem7pe-troletherém; hmotni {0,068] g; r t·. t .j 223-až 225 °C.

Hmotnové spektrum (Cl) 411 (M⁺).

Elemehtárňíianalýza.přorxC^MCJ^ _lhun.

vypóč-teňoU0.7 98y%’CH4:U9^^^. , ' nalezeno^ ·61ζ 19] % <;^29-%_;.Η>ο^.%

-Uchto! tw Hi,d. VýU _t, ¹ > 4 Λ * 0.; 1 , _z .

í Příklad >70$chlad( sř na ti p’ 4 ^f i ’ ·£♦ : »*.

íJ). Vylpuč.**^ myitijy .<,..

. (2,6pDichlorfenyl)-8-ethy1-2-[3-(4-methy1-piperazin-l-y1)propy1ámino]-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on

.....____cJll£ti.iXťLi .ÍU.u. . i. i :j. _ . .. _„t..—~ _ _________ — .- - .

h.uátňSměs 10,150 g (0,41 mmol) 6-(2,6-dichlorfenyl )-8-ethy 1-2methylšulfanyl-8H-pyrído[2,3-d]pyrimidin-7-onu z příkladu 67 a °' 5.00ig\ (3; 20. mmol) l-(3-aminopropyl)-4-methylpiperazinu se * zahřívá:; ve/·180 °C olejové lázni. Výsledný roztok se zahřívá

0', 5,‘-hodiny .^Většina přebytku aminu se odpaří za sníženého „ . tlaku. Zbylá uma se trituruje se 2 ml vody a slije. Guma se rozpustí*v 15 ml etheru. Roztok se promyje 3 x 5 ml vody, suší (síran sodný),, filtruje a zahustí na objem 2 ml. Přidává se petrolether*do!slabého zákalu. Vyloučené krystaly se odfiltrují-a]promyjí; se 2,ml 75% etheru/petroletheru; hmotn. 0,90 g; t.t. 126 až 128 °C.

j Hmotnové:. spektrum (Cl)'·’ 475 ^ (M⁺) .

- Elementárníi anal.ýzA pro;C2 3H28Cl 2N6O. 0,4 H₂0:

- vypóčteňo-’57>2-4 % C„ J 6,01 %! H ,a 1-7,42 % N. nalezeno/c; 57,33ů%; 04,· %, H;a F7¹,07.: % N.

. v^jitjdoy > o, ok sí·· 5 min-jt ^0' / „ . íHsino<»1 Ϊ Mťá se the, U _tJ

Příklad 71

6-(2,6-Dichi orfeny1)-2-(2-methoxyfenylamino)-8-methy1-8Hpyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on

Směs ,113 g (0,29 mmol) 6-((2,6-dichlorfenyl)-2-methansulfony1-8-methy1-lH-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-onu z příkladu 39 a 0,50 g (4,10 mmol) 2-methoxyani1 inu se zahřívá, za míchání na 175 °C olejové lázni. Výsledný roztok se 5 minut zahřívá a ochladí se na teplotu místnosti. Přidá se ether (2 ml). Vyloučené krystaly se odfiltrují a promyjí se 1 ml etheru; hmotn. 0,070 g. Pevná látka se čistí pro odstranění tmavé barvy chromatografií na silikagelu za eluce chloroformem. Rekrystalizací z etheru se získá čistý produkt; hmotn. 0,029 g; t.t. 200 až 201 °C. Hmotové spektrum (Cl) 427 (M⁺). Elementární analýza pro C21H1&C12N4O2: vypočteno 59,03 % C, 3,77 % H, 13,11 % N nalezeno 59,09 % C, 3,87 % H, 13,02 % N.

Přiklad 72

6-(2,6-Dichlorfeny1)-2-(3-methoxyfeny 1amino)-8-methyl-8Hpyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on

Směs 0,113 g (0,29 mmol) 6-(2,6-dichlorfenyl)-2-methansulfony1-8-methyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin—7^—onu z příkladu 39 a 0,50 g (4,10 mmol) 3-methoxyani1 inu se zahřívá, za míchání na 175 °C olejové lázni. Výsledný roztok se 5 minut zahřívá a ochladí se na tep 1 o tu mí s t no š ti““ Př idá s e “e ťhéř^-<2 mlT^Vy 1 ouc enT kr yš ’faly^- ~ se odfiltrují a promyjí 2 ml etheru; hmotn. 0,083 g. Pevná ' látka se čistí pro odstranění tmavé barvy chromatografií na silikagelu, eluce chloroformem. Rekrystalizací z etheru se získá čistý produkt; hmotn. 0,037 g; t.t. 203 až 204 °C. Hmotové spektrum (Cl) 427 (M⁺).

Elementární analýza pro C21H1&C12N4O2.0,5HzO: vypočteno 57,81 % C, 3,93 % H, 12,84 % N > Ji nalezeno 57,98 % C, 3,82 % H, 12,71 % N. Příklad 73

6“(2,6—Di chlorf enyl)-2-(4-methoxy-3-methy1feny lamino)-8• * methyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on ř Směs 0,113 g (0,29 mmol)

6-(2,6-dichlorfenyl)-2-methansulfonyl-8-methyl-8H-pyrido[2,3-d] * pyrimidin-7-onu z příkladu 39 a 0,40 g (2,90 mmol)

3-methyl-4-methoxyani1 inu se zahřívá, za míchání na 165 °C I olejové lázni. Výsledný roztok se 5 minut zahřívá a ochladí se na teplotu místnosti. Přidá se ether (1 ml). Vyloučené krystaly se odfiltrují a promyjí 2 ml etheru; hmotn. 0,109 g. Pevná látka se čistí pro odstranění tmavé barvy chromatografií na silikagelu, eluce chloroformem pak ethylacetátem. Ethylacetátový eluent se zahustí na objem 3 ml. Po ochlazení se oddělí čisté krystaly produktu; hmotn. 0,060 g; t.t. 218 až 220 °C. $ ,, Hmotové spektrum (Cl) 441 (M⁺) .

Elementární analýza pro C22H1eel2N4O2:

* vypočteno 59,88 % C, 4,11 % H, 12,70 % N nalezeno 59,88 % C, 4,14 % H, 12,57 % N.

*1

Příklad 74

6-(2,6-Di chlorf enyl)-8-ethy1-2-(4-methoxyf enylamino)-8Hpyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on

Roztok 0,100 g (0,25 mmol)

6-(2,6-dichlorfenyl)-8-ethyl-2-methansulfonyl-8H-pyrido[2,3-d]~ pyrimidin-7-onu z příkladu 68 a 0,061 g (0,50 mmol) 4-methoxyani1 inu v 0,5 ml dimethylformamidu se zahřívá pod refluxem 10 minut. Přidají se tři kapky vody. Vyloučí se krystaly. Pro vysrážení další lepkavé pevné látky se přidají další 3 kapky vody. Po dekantaci se pevná látka trituruje s 0,5 ml ethylacetátu a 0,5 ml petro1 etheru. Pevné látky se odfiltrují a promyjí 50% ethylacetátem/petroletherem a suší se; hmotn. 0,080 g. Čištění se proádí filtrací ethylacetátového roztoku přes vrstvu silikagelu. Zahuštěním filtrátu na objem 1 ml se získá čistý krystalický produkt; hmotn. 0,033 g; t.t. 213 až 215 °C.

Hmotové spektrum (Cl) 441 (M⁺).

Elementární analýza pro C22H1eCi2N4O2: vypočteno 59,88 % C, 4,11 % H, 12,70 % N nalezeno 59,52 % C, 4,17 % H, 12,56 % N.

Příklad 75

6-(2,6-Dichlorfenyl)-8-ethyl-2-(4-hydroxyfenylamino)-8Hpyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on

Směs 0,048 g (0,11 mmol) 6-(2,6-dichlorfenyl)-8-ethyl2-(4-methoxyfenylamino)-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-onu z

---př í-k-1 adu-7-4-a—1-5-m-L· konc en t r o váné -(-48-%-)^ky seTiny · bromo vodí kové—·

4» se zahřívá za míchání pod refluxem 3 hodiny. Výsledný roztok poskytne po ochlazení krystaly; hmotn. 0,033 g; t.t. 255 až 258 °C.

Hmotové spektrum (Cl) 427 (M⁺).

Elementární analýza pro C21Hi6Cl2N4O2.HBr.H2O: vypočteno 47,93 % C, 3,64 % H, 10,65 % N nalezeno 47,78 % C, 3,29 % H, 10,46 % N.

Příklad 76

6Ό ----τ' λ ,. *

- -^“^^^“JO-^-^-ecnoxyienyiaminoj-S-ethyl-SHpyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on

..Směs 0.,150 g (0,.38.-mmol) 6-(2,6-dichlorfenyl)-8-ethyl-2^methansulfonyl-8H-_Pyrido[2,3-d]_Pyrimidin-7-onu z příkladu 68 a 0,500 g (3,60 mmol) 4-ethoxyani1 inu se kondenzuje na 160 °C olejové lázni 10 minut. Tmavě fialová tavenina se ochladí a rozpustí v i ml teplé ledové kyseliny octové. Tento roztok se zředí na objem 10 ml vodou pro vysrážení pevné látky. Pevná látka se odfiltruje, promyje se dobře vodou a suší se; hmotn. 0,140 g. Čištění se provede filtrací ethylacetátového roztoku pres vrstvu silikagelu a promytím silikagelu ethylacetátem. Filtrát se zahustí na objem 2 ml a přidají se 2 ml petroletheru. Krystaly, které se vyloučí, se odfiltrují a promyjí etherem; hmotn. 0,094 g; t.t. 192 až 194 °C Hmotové spektrum (Cl) 455 (M⁺).

Elementární analýza pro C23H20CI2N4O2: vypočteno 60,67 % C, 4,43 % H, 12,30 % N nalezeno 60,62 % C, 4,53 % H, 12,11 % N.

Příklad 77

6-(2,6 Dichlorfenyl)-2-(3,4-dimethoxyfenylamino)-8-ethyy1-8Hpyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on

Směs 0,150 g (0,38 mmol) 6-(2,6-dichlorf enyl).-8-ethyl2-methansulfonyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-onu z příkladu 68 a 0,500 g (3,30 mmol) 3,4-dimethoxyani1 inu se zahřívá na 160

C olejové lázni 5 minut. Tmavě modrý roztok se ochladí a rozpustí ve 2 ml teplé ledové kyseliny octové. Tento roztok se zreďí na sbj-em 18 mi vodou pro vysrážení pevné látky. Pevná látka se odfiltruje, dobře se promyje vodou a suší se; hmotn. 0.200 g. Čištění se provede filtrací ethylacetátového roztoku (25 ml) přes ..vrstvu silikagelu a promytím silikagelu....... ethylacetátem. Filtrát se zahustí na objem 3 ml. Krystaly se vyloučí a odfiltrují a promyjí se 1 ml ethylacetátu a pak 1 ml etheru; hmotn, 0,116 g; t.t. 221 až 223 °C.

Hmotové spektrum (Cl) 471 (M⁺).

Elementární analýza pro C₂₃H₂oCl₂N₄O₃: vypočteno 58,61 % C, 4,28 % H, 11,89 % N nalezeno 58,31 % C, 4,31 % H, 11,71 % N.

Příklad 78

6-(2,6-Di chlorf enyl )-8-ethy 1-2-(3,4,5-trimethoxyf enylamino) 8H-pyrido [2,3-d]pyrimidin-7-on

Směs 0,150 g (0,38 mmol)

6-(2,6-dichlorfenyl)-8-ethyl-2-methánsulfonyl-8H-pyrido [2,3-d]pyrimidin-7-onu z příkladu 68 a 0,500 g (2,70 mmol)

3.4,5- trimethoxyani1 inu se zahřívá na 160 °C na olejové

Í1 6 /lázni^5i minuti 2ahřívá\HgTmavý;rroztokl se· (ochladí’ a YozpusFílfse J) ve. 2 ml teplé ledové kyseliny octové. Tento roztok se zředí na 'í (objenvil5_Ymh vodouóp™ fialové pevné látky. Pevná ί llátkarsegodf il ťru^ vodou a suší se; hmotn.

; 0.,4,40 gvj; Ciš.těhP se_n provede If,i Hrací ^řeťhylacetátového (30 ml) roztoku: přes.yrštvu, sTTikagelu á* .promytím silikágelu * ethylacetátem. Filtrát se zahustí na objem 3 ml. Krystaly, í * které^še^vyloučí, se odfiltrují a promyjí 1 ml ethylacetátu a « ^{1 ml} etheru; hmotn. 0,054 g; t.t. 275 až 278 °C.

• , Hmofpva^pékt rúm^(CT)2'5OT· *(Mt)Uniy 1 iWi rumbo

----—-E4emerif-ár.n;í^anaTý^^^^ vypočteno 57,50 % C, 4,42 % H, 11,17 % N nalezeno: '57’,^1 X G;

------s-------^----1--1^ □—nrtT--—pr-f TtTnjn Přiklaď 7%, (ť.Sí v Ϊ mihoty ) íd l ΐ>.> a * o (t h*< * re lhř^! ' Hr f * ' { : - ' ’ · « _r <

6--:.(2,6-Dichlorfenyl)-8-me.thyl-2-(pyridin-3-ýlamino)8a-pyrido[2.i.3-ď]pyrim'idin-7-on ' vySIjuSí λλ ’dv ^!l b » Př , ’vá’·* . e * oc* *' ; 6/ * - i> * $ _a Směs',.0,165_? g»t(0[,'47: pro. _Y. ť / <_ítt .

ó-^.ó-dichlořfenylíBTměthyl^ŤmethylsulfánylěSH^./ -μ» .

pyrido [2,3!Ta]pyřimidÝn-7-onuLzyj^ _gi/(5 _ý30 mmóDrJ^aminopýridinov.é bázel aV0.;066r g> <0,50tmmol·) pro * 4·» .

hydrochLoridu^Araminopyridinul šeAizahříváv· zarifní cháni na 210 °C nažolejové lázňitIphodinuJiPřidátšeuvoda^(54ml) k*ochlazené ^{j rea}kční, směsitípřo* vysřáženít pevnér látky. ‘Pevná látka·”· se • odf iltrujég^promýjésše,. dobře, vodou a suší &e; hmotn. 0,147 g.

ΐ Čištění seifprovede.’silikagelovou chromatografií za eluce > ^hloroformem/aApakr.ethylacetátém.AEthylacetátový eluent, obsahující/čistý, produkt > se zahustí na objem 2 ml. Krystaly, které-se vyloučí; še ddf 11 triijí ?á,promyjí se 0,5 ml ethylacetátu a 1 ml etheru; hmotn. 0,810 g; t.t. 247 až 248 °C. Hmotové spektrum (CI) 398 (M⁺).

Elementární analýza pro Ci9H13CI2N5O: vypočteno 57,30 % C, 3,29 % H, 17,59 % N nalezeno 57,33 % C, 3,38 % H, 17,43 % N.

_Φ Příklad 80

6-(2,6-Dichlorfenyl)-2-[4-(2-diethylaminoethoxy)fenylamino]-8-methyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on

Směs 0,155 g (0,40 mmol) 6-(2,6-dichlorfenyl)-8-methyl2-methylsulfanyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-onu z příkladu * 37, 0,167 g (0,80 mmol) 4-(2-diethylaminoethoxy)ani1 inu a 1 ml (2-methoxyethyl)etheru (t.v. 162 °C) se zahřívá za míchání na 150 °C na olejové lázni. Postupně se během 10 minut rozpustí všechna pevná látka. Roztok se zahřívá dalších 10 minut a ochladí na 100 °C. Přikapává se voda do slabého zákalu. Oddělené krystly se odfiltrují, promyjí 0,5 ml etheru a 2 ml vody a suší; hmotn. 0,105 g. Čištění se provádí chromatografií za eluce chloroformem, pak ethylacetátem a nakonec 10% methanolem/chloroformem za získání frakce s čistým produktem. Eluent se odpaří dosucha. Zbylá amorfní pevná látka se rozpustí v 1 ml tepléhi ethylacetátu. Krystaly, které se vyloučí, se odfiltrují a šetrně promyjí ethylacetátem a * etherem; hmotn. 0,042 g; t.t. 141 až 143 °C.

Hmotové spektrum (Cl) 512 (M⁺).

* Elementární analýza pro C26H27CI2N5O2:

vypočteno 60,94 % C, 5,31 % H, 13,67 % N “ - “náleženo“ 60,96' %13-, 52-% -N.“ —------------'----------

Příklad 81

Λ

6-(2,6-Dichlorfenyl)~8-methyl-2-[5-(4-methylpiperazin1-yl)-pentylamino]-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on

Směs 0,165 g (0,47 mmol) 6-(2,6-dichlorfenyl)-8-methyl2-methy1 sulfnyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-onu z příkladu 37 _a 0,50 g (2,70 mmol) l-(5-aminopentyl)-4-methylpiperazinu se zahřívá za míchání na 180 °C až 185 °C na olejové lázni. Po 2 minutách je roztok úplný. PO 0,5 hodině se roztok ochladí na teplotu místnosti a přidá se 5 ml vody pro vysrážení gumy podobné karamele. Guma se dekantuje se a trituruje s 5 ml vody. Dekantuje se a guma se vyjme do 35 ml etheru. Etherový roztok se promyje 2 x 50 ml vody, suší (uhličitan draselný) a / zahustí na objem 5 ml. Do slabého zákalu se přidává petrolether. Vyloučené krystaly se odfiltrují a promyjí se 80% r etherem/petroletherem; hmotn. 0,060 g; t.t. HO až 112 °C.

Hmotové spektrum (Cl) 489 (M⁺).

Elementární analýza pro C24H30CIzNtO: . vypočteno 58,90 % C, 6,18 % H, 17,17 % N nalezeno 58,75 % C, 6,14 % H, 16,96 % N.

Příklad 82

6-(2,6-Dichlorfenyl)-2-(3-hydroxymethylfenylamino)-8-methyl8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on

Směs 0,155 g (0,40 mmol)

6-(2,6-dichlorfenyl)-2-methansulf onyl-8-methyl-8Hpyrido[2,3-d]pyrimidin-7-onu z příkladu 39 a 0,500 g (4,10 mmol) 3-TtoďrV^TtRyl) ani l inů ’še zahřívá’ ve’ 180° C' olejové lázni 10 minut. Na asi 120 °C se přidají 2 ml ledové kyseliny octové pro rozpuštění gumy. Pro vysrážení pevné látky se přidá voda (20 ml). Směs se zfiltruje. Koláč se dobře promyje vodou a suší; hmotn. 0,130 g. Čištění se provede silikagelovou chromatografií za eluce chloroformem a pak ethylacetátem za získání fraakce, obsahující čistý produkt. Ethylacetátový eluent se zahustí na objem 1 ml. Krystaly, které se vyloučí, se odfiltrují a promyjí 0,5 ml ethylacetátu a pak 1 ml etheru; í/ hmotn. 0,059 g; t.t. 215 až 217 C.

_t Hmotové spektrum (Cl) 427 (M⁺).

Elementární analýza pro Cz1H1&C12N4O2: vypočteno 59,03 % C, 3,77 % H, 13,11 % N nalezeno 59,14 % C, 3,91 % H, 12,78 % N.

f Příklad 83 * 6-(2,6-Dichlorfenyl)-2-(3,5-dimethoxyfenylamino)-8-methyl-8Hpyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on

Směs 0,155 g (0,40 mmol)

6-(2,6—dichlorfenyl)-2-methansulfonyl-8-methyl-8Hpyrido[2,3-d]pyrimidin-7-onu z příkladu 39 a 0,400 g (2,60 mmol) 3,5-dimethoxyanilinu se zahřívá ve 160 °C olejové lázni 5 minut. Při asi 100 °C se prodá 1 ml ledové kyseliny octové pro rozpuštění taveniny. Pro vysrážení gumy se přidá voda (10 ml). Dekantuje se a guma se rozpustí ve 35 ml

(. methylenchloridu. Roztok se promyje 2 x 20 ml vody, susí se nad síranem horečnatým, zpracuje se s aktivním uhlím, filtruje , a zahustí. Vzniklá guma se čistí silikagelovou chromatografi i za eluce chloroformem a pak 2:1 hexan:ethylacetátem za získání ------- frakce, obsahujícTči stý produkt; Eluent-se- odpaří téměř'......dosucha, kdy se vyloučí krystaly. Krystaly se odfiltrují a promyjí 0,5 ml etheru; hmotn. 0,059 g; t.t. 228 až 230 °C. Hmotové spektrum (Cl) 457 (M⁺).

Elementární analýza pro C22H1eCi2N4O3: vypočteno 57,78 % C, 3,97 % H, 12,25 % N nalezeno 57,93 % C, 4,07 % H, 12,16 % N.

_t, Příklad 84 . «ή

Methylester kyseliny {4-(6-(2,6-di chi orf enyl)-8-methyl-7-oxo-7,8-d ihydropy r i do [2,3-d]pyrimidin-2-ylamino]f enyl}octové

Směs 0,226 g (0,58 mmol) 6-(2,6-dichlorfenyl)-2-methan. sulfonyl-8-methyl-8H-pyrido [2,3-d]pyrimidin-7-onu z příkladu 39 a 0,40 g (2,80 mmol) báze methylesteru kyseliny ¹ 4-aminofenyloctové se zahřívá na 160 °C až 165 °C olejové lázni. Výsledný roztok se 10 minut zahřívá a ochladí se na teplotu místnosti. Roztok se zpracuje s 1 ml ledové kyseliny octové pro rozpuštění. Pro vysrážení gumy se přidá voda (10 ml). Směs se dekantuje a zbylá guma se rozpustí ve 20 ml chloroformu. Chloroformový roztok se promyje 25 ml vody, suší se (síran horečnatý), filtruje a zahustí. Čištění se provádí si 1ikagelovou chromatografií za eluce chloroformem a pak 50% hexanem/ethylacetátem za získání frakce, obsahující čistý.

i produkt. Eluent se zahustí dosucha za získání pevné látky;

* hmotn. 0,141 g. Rekrystali žací z ethylacetátu se získají

- krystaly; hmotn. 0,054 g; t.t. 224 až 226 °C.

* Hmotové spektrum (Cl) 469 (M⁺).

Elementární analýza pro C23H1gCl2N4O3:

----------- vypočteno- 58,-86-%- C, 3,-87- %- H-, —1-1— 94- % -N -----------— -------- ·------- nalezeno 59,10 % C, 3,94 % H, 11,85 % N. >

Příklad 85

6-(2,6-Dichlorfenyl)-2-(6-methoxypyridin-3-ylamino)8-methyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on j Směs 0,155 g (0,40 mmol) 6-(2,6-dichlorfenyl)-2~methansulfonyl-8-methyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-onu z příkladu , 39 a 0,50 g (4,00 mmol) 5-amino-2-methoxypyridinu se zahřívá za míchání na 160 °C olejové lázni. Výsledný roztok se zahřívá 10 minut a ochladí se na teplotu místnosti. Pro vysrážení gumy se přidá voda (10 ml). Směs se dekantuje a zbylá guma se trituruje s 5 ml vody. Vzniklá pevná hnědá látka se ‘ odfiltruje, dobře se promyje vodou a suší; hmotn. 0,135 g. Čištění se provádí si 1ikagelovou chromatografií za eluce * chloroformem a pak ethylacetátem za získání frakce, obsahující čistý produkt. Eluent se. zahustí na objem 2 ml. Krystaly, které se vyloučí se odfiltrují a promyjí 0,2 ml ethylacetátu a pak 0,5 ml etheru; hmotn. 0,045 g; t.t. 233 až 235 °C. Hmotové spektrum (Cl) 428 (M⁺). Elementární analýza pro C20H15CI2N5O2: vypočteno 56,09 % C, 3,53 % H, 16,35 % N nalezeno 56,07 % C, 3,53 % H, 16,06 % N.

Příklad 86

Kyselina {4-(6-(2,6-dichlorfenyl)-8-methyl-7-oxo-7,8-dihydro’ pyrido[2,3-d]pyrimidin-2-ylamino]fenyl}octová —,—....--------- -0—065—g- (-0> 14 mmol ) -met-hy-l-e s-teru-kysel i-ny- ----------------. {4-(6-(2,6-dichlorfenyl)-8-methyl-7-oxo-7,8-dihydropyrido[2,3-d]pyrimidin-2-ylamino]fenyljoctové z příkladu 84 se rozpustí za míchání ve 25 ml horkého methanolu. Při teplotě varu se přidá 1 ml 2N hydroxidu sodného. Po 1 hodině refluxu se roztok zahustí na objem 5 ml ( z roztoku se odstraní pevná látka). Přidá se voda (10 ml) pro získání kompletního roztoku.

„ Pro vysrážení volné kyseliny jako pevného produktu se přidá * ledová kyselina octová (0,25 ml). Pevná látka se odfiltruje, dobře se promyje vodou a suší; hmotn. 0,060 g. Čištění se * provádí rozpuštěním v 60 ml 50% methanolu/methylenchloridu.

<!^ιΛην 1Λ.Α1... -- - .-'.c · ·· ·. - «... .....

se uůmcruji a nitrát se zahustí za míchání ^na ohjem 2 ml. Oddělené pevné látky se odfiltrují a promyjí vodou s 0,5 ml methanolu a etherem; hmotn. 0,050 g; t.t. 286 až 290 °C.

¹ Hmotové spektrum (Cl) 455 (M+).

Elementární analýza pro Ca2H1sCl2N4O3: vypočteno 58,04 % C, 3,54 % H, 12,31 % N nalezeno 58,28 % C, 3,59 % H, 12,19 % N.

Příklad 87

6-(2,6-Dichlorfenyl)-2-(3-hydroxyfenylamino)-8methyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on

Směs 0,155 g (0,40 mmol) 6-(2,6-dichlorfeny1)-2-methani sulfonyl-8-methyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-onu z příkladu 39 a 0,50 g (4,60 mmol) 3-aminofenolu se kondenzuje na 160 °C

- olejové lázni 10 minut. Tavenina se ochladí na asi 100 °C a přidá se *5 ml ledové kyseliny octové pro rozpuštění. Přidává se voda do dosažení slabého zákalu. Vyloučené krystaly se . odfiltrují, dobře se promyjí vodou a suší; hmotn. 0,104 g.

•h

Rekrystalizací z ethylacetátu/petroletheru se získá čistý krystalický produkt; hmotn. 0,035 g; t.t. 290 až 292 °C Hmotové spektrum (Cl) 413 (M⁺).

Elementární analýza pro C20H14CI2N4O2.0,25 H₂O: vypočteno 57,50 % C, 3,50 % H, 13,41 % N nalezeno 57,68 % C, 3,50 % H, 13,36 % N.

Příklad 88 ⁴ Kyselina 4-[6-(2,6-dichlorfeny1)-8-methyl-7-oxo-7,8dihvdro-υντ i dn r? .

umum-z-) lamino]-oenzoová

Směs 0,226 g (0,58 mmol) 6-(2,6-dichlorfenyl)-2. ^methansulfonyl-8-methyl-8H-_Pyrido [2 ,.3-d]pyrimidin-7-onu z ‘ Příkladu 39 a 0,40 g (2,42 mmol) ethylesteru kseliny

4-aminobenzoové se kondenzuje na 170 °C olejové lázni za získám čiré taveniny. Po 15 minutách se v horké tavenině začnou vylučovat krystaly. Reakční směs se ochladí a trituruje se 2 ml ethylacetátu. Přidá se petrolether (1 ml). Směs se odfiltruje ^{a koláe} se promyje 2 ml etheru; hmotn. 0,200 g. Rekrystalizací z ethylacetátu se získá čistý produkt; hmotn. 0,078 g; t.t. 278 až 280 °C.

Hmotové spektrum (Cl) 469 (M⁺).

Elementární analýza pro C₂3H1₈C12N4O3.0,1 H₂O: vypočteno 58,63 % C, 3,89 % H, 11,89 % N ; nalezeno 58,43 % C, 4,01 % H, 11,61 % N.

Příklad 89

Ethylester kyseliny 3-[6-(2,6-dichlorfenyl)-8-methyl-7-oxo* ⁷’⁸~^dihýdro-pyri do[2,3-d]pyrimidin-2-ylamino]benzoové

I _Λ ^{Směs 0}’226 g (0,58 mmol) 6-(2,6-dichlorfenyl)-2-methansulfony1-8-methyl-8H-pyrido [2,3-d]pyrimidin-7-onu z příkladu 39 a 0,40 g (2,42 mmol) ethylesteru kyseliny 3-aminobenzoové se kondenzuje na 170 °C olejové lázni za získání čiré taveniny. Po 6 minutách se tavenina ochladí na asi 100 °C. Pro rozpuštění taveniny se přidá ledová kyselina octové (1 ml).

. Pro vysrážení pevné látky se přidá voda (5 ml). Pevná látka se odfiltruje, dobře se promyje vodou a trituruje se 2 ml methanolu. Směs se zfiltruje a koláč se promyje 1 ml methanolu ' a pak etherem; hmotn. 0,194 g. Rekrystali žací z ethylacetátu

------ _uuiuLn. u,u/0 g; r. τ. 238 až 240 °C. Hmotové spektrum (Cl) 469 (M⁺).

Elementární analýza pro C23H1eCi2N4O3: vypočteno 58,86 % C, 3 ,87 % H, . 11, 94 % N ....

‘ nalezeno 58,91 % C, 3,96 % H, 11,87 % N.

Příklad 90

Kyselina 3-[6-(2,6-dichlorfenyl)-8-methyl-7-oxo-7,8_t dihydro-pyrido[2,3-d]pyrimidin-2-ylamino]benzoová

0,065 g (0,139 mmol) ethylesteru kyseliny 3-(6-(2,6-di chlorfenyl)-8-methyl-7-oxo-7,8dihydro-pyrido[2,3-d]pyrimidin-2-ylamino]benzoové z příkladu 89 se rozpustí v 75 ml vroucího methanolu. Přidá se hydroxid sodný 2N (2 ml) a čirý roztok se udržuje pod refluxem 2 hodiny. Roztok se zahustí za míchání na objem asi 15 ml. Kalný roztok se zfiltruje za horka pro odstranění stop pevných ^látek‘ ^Flltrát se zahustí na objem asi 4 ml. Přidá se voda (5 ml) za získání kalné směsi. Pro vysrážení vločkovitých pevných látek se přidá ledová kyselina octová (1 ml). Pevné látky se

0,048 g.

odfiltrují, dobře se promyjí vodou a suší; hmotn. Čistění se provede rozpuštěním ve 4 ml teplého dimethylformamidu a přídavkem 20 ml etheru. Krystaly, které se pomalu vyloučí z čirého roztoku se odfiltruji a promyjí se e erem a pak vodou (pro odstraněni jakýchkoliv stop octanu sodného); hmotn. 0,025 g; t.t. > 300 °C.

Hmotové spektrum (Cl) 441 (M⁺), Elementární analýza pro Cz1H1.ClzN.Oj: vypočteno 57,16 % C, 3,20 i H, 12,70 t N nalezeno 56,88 % C, 3,42 X H, 12,52 X N.

Příklad 91 ^E‘^hyj-‘er kyseliny 4-(4^^ , ihydro pyrido[2,3-d]Pyrimidin-2-ylamino)máselné

Směs 0,452 g (1,16 mmol) 6-(2,6-dichlorfenyl)-2-methanf°n^y1—8—me thy1—8H—pyrido[2,3—d]pyrimidin—7—onu z Příkladu 39 a 1,00 g (4,83 mmol) ethylesteru kyseliny 4-aminofenylmáselné, báze, se zahřívá na 160 °C olejové lázni Po 1 minutě _Je roztok kompletní. Po 10 minutách se reakce ochladl na asi 100 °C a přidají se 2 ml ledové kyseliny octové pro rozpustem viskozního materiálu. Pro vysráíení gumy se Přidá voda (20 ml). _{Smés se slije a zbylá se} x ml vody. Guma se rozpustí ve 25 ml methylenchloridu a roztok se promyje 25 ml vody, suší (síran horečnatý), filtruje a odpaří. Zbylý materiál se rozpustí ve 2 ml horkého ethylacetátu. Vyloučené krystaly se odfiltrují a promyjí 2,4 etheru; hmotn. 0,358.g. Další čištění silikátovou chromatografií bylo nezbytné pro odstraněni stop nečistot Chloroformový roztok sloučeniny se umísti na kolonu a produkt

1U1

se eluuje 50% hexanem/ethylacetátem. Eluent se zahustí a guma se rozpustí v 5 ml teplého etheru. Po naočkování se oddělí čisté krystaly; hmotn. 0,256 g; t.t. 169 až 170 °C.

Hmotové spektrum (Cl) 511 (M⁺).

Elementární analýza pro C₂&H₂₄C12N4O3: vypočteno 61,06 % C, 4,73 % H, 10,96 % N nalezeno 61,19 % C, 4,76 % H, 10,86 % N.

Příklad 92

Kyselina 4-{4-[6-(2,6-dichlorfenyl)-8-methyl-7-oxo-7,8dihydro-pyrido[2,3-d]pyrimidin-2-ylamino]-fenyl}máselná ml 2N hydroxidu sodného se přidá k horkému roztoku 0,170 g (0,33 mmol) ethylesteru kyseliny 4-Í4-[6-(2,6-dichlorfenyl)-8-methyl-7-oxo-7,8-dihydropyrido[2,3-d]pyrimidin-2-ylamino]-fenylJmáselné z příkladu 91. Roztok se udržuje pod refluxem 1 hodinu. Přidá se ledová kyselina octová (1 ml) a reakční roztok se odpaří na objem asi 25 ml. Pro vysrážení pevné látky se přidá voda (50 ml). Směs se filtruje a koláč se dobře promyje vodou a suší; hmotn. 0,130 g. Hydrolýza není za těchto podmínek úplná. Produkt se Čistí pro odstranění výchozího esteru chromatografií na silikagelu za eluce 1:20 methanolem:chloroformem za získání 55 mg čisté kyseliny; t.t. 169 až 171 °C.

Hmotové spektrum (Cl) 483 (M*).

Elementární analýza pro C₂4H₂oCl2N4O3: vypočteno 59,64 % C, 4,17 % Η, 11,59 % M nalezeno 59,77 % C, 4,24 % H, 11,44 % N.

Příklad 93 (2,6 Dichlorfenyl)-8-ethyl-2-(pyridin-4-ylamino)-8Hpyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on

Směs 0,126 g (0,31 mmol) 6-(2,6-dichlorfenyl)-2-methansulfony1-8-ethyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-onu, 0,25 mol hydrátu, z příkladu 68 a 0,300 g (3,20 mmol) 4-aminopyridinu se zahřívá za míchání, na 150 °C olejové lázni 10 minut. Po 3 minutách se oddělí krystaly. Směs se ochladí a přidá se 1 ml methanolu. Pevná látka se odfiltruje, promyje se 1 ml methanolu a pak etherem; hmotn. 0,100 g. Hydrochloridová sůl se připraví následovně: výše uvedená surová báze se suspenduje ve 2 ml methanolu.' Přidá se jeden ml 2N kyseliny chlorovodíkové a směs se ohřeje do úplného rozpuštění. Přidají se další 2 ml 2N kyseliny chlorovodíkové. Krystaly, které se vyloučí, se odfiltrují a promyjí postupně 1 ml 2N kyseliny chlorovodíkové, 2 ml ethylacetátu a pak etherem; hmotn. 0,110 g. Rekrystalizací z methanolu/etheru se získá čistý krystalický produkt; hmotn. 0,063 g; t.t. 325 až 330 ⁰C Hmotové spektrum (Cl) 412 (M⁺).

Elementární analýza pro C₂oHi_SC12N5O.HC1: vypočteno 53,53 % C, 3,59 % H, 15,61 % N nalezeno 53,48 % C, 3,74 % H, 15,38 % N.

Příklad 94

4-Ethylamino-2-methy1thio-5-primidinkarboxy1át ethylester

K roztoku 4-chlor-2-methy1thio-5-pyrimidinkarboxylátu ethylesteru (10,00 g, 43,10 mmol) ve 150 ml tetrahydrofuranu se při teplotě místnosti přidá triethylamin (18,5 1, 133 mmol) následovaný 9 ml 70% vodného roztoku ethylaminu. Roztok se míchá 30 minut, pak se zahustí ve vakuu a rozdělí se mezi chloroform a nasycený vodný hydrogenuhličitan. Organická vrstva se suší nad síranem horečnatý, filtruje a zahuštěním se získá 9,32 g (90 %)

4-ethy1amino-2-methylthio-5-pyrimidinkarboxylát-ethylester j ako olej.

Elementární analýza pro C1OH15N3O2S:

vypočteno 49,77 % C, 6,27 % H, 17,41 % N nalezeno 49,77 % C, 6,24 % H, 17,30 % N.

Příklad 96 .....

4-Ethylamino-2-methylthio-5-pyrimidinmethanol

Roztok

4-ethylamino-2-methylthio-5-pyrimidinkarboxylát-ethylesteru (8,93 g, 37,1 mmol) ve 100 ml tetrahydrofuranu se přikape při teplotě místnosti k suspenzi 1 ithiumaluminiumhydridu (2,30 g, 60,5 mmol) ve 100 ml tetrahydrofuranu. Po 10 minutách se reakce opatrně přeruší 4,5 ml vody, 4,5 ml 15% NaOH a 16 ml vody a směs se 1,5 hodiny míchá. Bílá sraženina se odstraní filtrací za promytí ethylacetátem. Filtrát se zahustí ve vakuu a přidá se 1:1 hexan:ethylacetát. Pevné látky se oddělí za získání 6,77 g (92 %)

4-ethylamino~2-methylthio-5-pyrimidinmethanolu; t.t. 152 až 156 °C.

Elementární analýza pro C8H13N3OS:

vypočteno 48,22 % C, 6,58 % N, 21,09 % N

-IU4 t 4 β · t έ ο ο

Ο Ci G G . C η 1' (!' ο

G € <ι C Č G » » ι> ς « *» ι* G · (· ^ c- ι* <* ι* C ' Ú G nalezeno 48,14 % Cr 6 ,61' % Η ,* 20,85 .% Ν. , <

·

Příklad 96 ’ .^f . 'r > f «.T i ' . — ' ' c, 5 s z ί ,; m

4-Ethy1amino-2-methy1thi o-5-formylpyřimidin *1. Ke 4,-ethylamino-2-methyl thio-5-pyrimidinmethanolu (6,44 g, 32,4 mmol) v 600 ml chloroformu se přidá během 3 minut oxid ;hořecnatý (2b;0i g’,v 241 -mmOl)'.-iSuspenzejse .míchá při teplotě _______'2 ^h°(iiny _a pfidá se dalších 5,5 g oxidu horečnatá _:

V míchání se pokračuje 4,5 hodiny. Směs se pyk zfiltruje přes celit za.promytí- chloroformem. Filtrát se zahustí ve vakuu a získá se 6,25 g (97 %) .

4-ethy1amino-2-methyíthio-5-fbrmylpyrimidinu; t.t· 58 až 61 °C Elementární analýza pro Cs&i 1N3OS:

' ‘Vypočteno 48,71 % C, 5,62 % H, 21,30 % N nalezeno 48,62 % C, 5,60 % H, 21,28 % N.

Příklad 97

Ethylester kyseliny 4-ethylamino-2-methansulfinyl-pyrimidin-5karboxylovéi.

Při teplotě místnosti se*k roztoku ethyl ester-4-ethylamino-2Tmethylthio-5-pyrimidinarboxylátu (2,011 g,' 8,34 mmol) v 70 .ml chloroformu -přidá’ (±) -trans-2-(f eriy 1 sul f ony 1 ).-3^f enyůoxaz i r id i n- (2,70: g, 10,34 'mmol) místnosti 7^hodin, pak se zahustí tvé vakuu. «Zbytek Jse čistí, rychlou chromatograf ií za eluce gradientem ethylacetát táž 3 měthanolu„v..ethylacetátu> za z í skáni l2,07 'g 1(97> %) ethy.lesteru kyseliny

4-ethylamino-2-methansulf inyl-pyrimidin-5-karboxylové ; t.t. 54 až 56 °C.

Elementární analýza pro C10H15N3O3S: vypočteno 48,68 % C, 5,88 % H, 16,33 % N nalezeno 48,56 % C, 5,68 % H, 16,23 % N.

Příklad 98

Ethylester kyseliny 4-ethylamino-2-fenylamino-pyrimidin-5karboxylové

Roztok ethylesteru kyseliny

4-ethylamino-2-methansulfinyl-pyrimidin-5-karboxylové (166 mg, mmol) ve 4 ml anilinu se zahřívá na 110 °C 30 minut. Roztok se ochladí na teplotu místnosti a zahustí se ve vakuu. Rychlá chromatografie za eluce 2:1 hexanem:ethylacetátem poskytne 158 g (87 %) bílé pevné látky, která podle NMR je převážně požadovaný produkt.

Příklad 99 (4-Ethylamino-2-fenylamino-pyrimidin-5-yl)methanol

Roztok ethylesteru kyseliny

4-ethy1amino-2-fenylamino-pyrimidin-5-karboxylové (109 mg, 0,38 mmol) v 6 ml tetřahydrofuranu se přidá po kapkách při teplotě místnosti k suspenzi 1 ithiumaluminiumhydridu (35 mg, 0,92 mmol) v 5 ml tetrahydrofuranu. Po 25 minutách se přidá další 1 ithiumaluminiumhydrid a v míchání se pokračuje 30 minut. Reakce se opatrně přeruší 120 μΐ vody, 200 μΐ 15% NaOH a 3ÓŮ μΐ Vody. Po 1 hodině míchání se bílá sraženina oddělí

IUD filtraci za promytí ethylacetátem. Filtrát se zahusti ve vakuu a surový materiál se čistí rychlou chromatografií za eluce ethylacetátem za získání 36 mg (39 %) (4-ethylamino-2-fenylamino-pyrÍmidin-5-yl)methanolu; t.t. 174 až 176 °C.

Elementární analýza pro C13H16N4O:

vypočteno 63,92 % C, 6,60 % H, 22,93 % N nalezeno 63,97 % C, 6,58 % H, 22,79 % N.

Příklad 100

4-Ethylamino-2-fenylamino-pyrimidin-5-karbaldehyd

K roztoku (4~ethylamino-2-fenylamino-pyrimidin-5-ylJmethanolu (173 mg, 0,71 mmol) v 15 ml chloroformu se přidá oxid horečnatý (600 mg, 6,89 mmol). Po míchání přes noc při teplotě místnosti se směs filtruje přes sloupeček Celitu, promyje se chloroformem. Filtrát se zahustí ve vakuu za získání 170 mg (99 %) 4-ethylamino-2-fenylamino-pyrimidin-5-karbaldehydu;

t.t. 155 až 157 °C.

Elementární analýza pro C13H14N4O:

vypočteno 64,45 % C, 5,82 % H, 23,12 % N nalezeno 64,31 % C, 6,01 % H, 22,98 % N.

Příklad 101 (8-Ethyl-7-imino-6-thiofen-3-yl-7,8-dihydropyrido[2,3-d]pyrimidin-2-yl)-fenylamin

K suspenzi NaH (60% v minerálním oleji, 27 mg) v 5 ml

107

2-ethoxyethanolu se přidá 3-thiofenacetonitril (168 mg, 1,36 mmol). Po 5 minutách míchání při teplotě místnosti se přidá 4-éthylamino-2-fenylamino-pyrimidin-5-karbaldehyd (300 mg, 1,24 mmol) a reakce se zahřívá na 120 °C 2 hodiny, vznikne tmavě hnědý, roztok/ Po>ochlazeníse roztok nalije do vody, což vyvolá výsrážení .; Výsledná sraženina se odstraní filtrací a promyje se vodou. Surový produkt se čistí rychlou chromatografií» za/eluce 5% methaňolem/methylenčhloridern &. následovaným. 10%, methanolem/methylenchl.oridem. Zahuštěním.¢, —f-rak-c-í-, — obs ahu>í-cí čh-j produk-t— se hZ-í ská ^34 0 , mg _· (78--%-)..j-š- - '(8-ethyl-7-imino-6-thiof en-3-yl.-7 , S-dihydror^ , ‘ pyrido [2,3-d]pyrirnidin-2~yl)-f enyaminu; t.t; 220 až 222 °C. Hmotové spektrum. (Cl) 348 (M⁺) . _ ........ ...........__________

Elementární analýza, pro C19H17N5S:

.vypočteno 65,8 % C, 4,93 % H, 20_;, 16 % N nalezeno 64,42 % C, 4,86 % H, 19,78 % N.

Λ 1 r .

Příklad 102

S—*· * by I -

8-Ethyl-2-fenylamino-6-thiofen-3-yl-8Hpyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on

-v . v - · . (c., .

i ; . Sloučenina jse- připraví. zý(8-ethyl-7-imino-6-thiofen-3-yl.7,8-d i hydr dr py r i d o [ 2,3,-d ] p ýr i m i d i n-2 -y 1) - f eny 1 am i nu podle ipostupu z ipříkladuM 16.7 Produkt: ^?s.e· čistí, rychlou chromatografií za eluce 5% methanolem/methylenchloridem, 'následovaným 10% methanolem/methylenchloridem; t.t. 223 až 225 °c. ------------------- --------------------— .‘Hmotové spektrum, (Cl);-349 (Mt) Λ ΒΕΙ ementární; analýza, pro; G19H16N4OS: vypočteno 65,49 % C, 4,63 % H, 16,08 % C ιυο nalezeno 65,33 % C, 4,49 % H, 15,73 % N.

Příklad 103 (8-Ethyl-7-imino-6-thiof en-2-y1-7,8-dihydropyrido[2,3-d]pyrimidin-2-yl)-fenylamin

K suspenzi NaH (60% v minerálním oleji, 27 mg) v 5 ml 2-ethxyethanolu se přidá 2-thiofenacetonitri 1 (168 mg, 1,36 mmol). Po 5 minutách míchání při teplotě místnosti se’přÍdá 4-ethylamino-2-fenylamino-pyrimidin-5-karbaldehyd (300 mg, 1,24 mmol) a reakce se zahřívá na 120 °C 2 hodiny, vznikne' tmavě hnědý roztok. Po ochlazení se roztok nalije do vody, což vyvolá srážení. Výsledná sraženina se odstraní filtrací a promyje se vodou. Surový proukt se čistí rychlou chromatografi 1 za eluce 5% methanolem/methylenchloridem, následovaným 10% methanolem/methylenchloridem. Zahuštěním frakcí, obsahujících produkt se získá 370 mg (85 %) (8-ethyl-7-imino-6-thiofen-2-yl7’S-dihydro-pyrido[2,3-d]pyrimidin-2-yl)-fenylaminu; t.t 204 až 205 °C.

Hmotové spektrum (Cl) 348 (M⁺). Elementární analýza pro C19H17N5S: vypočteno 65,68 % C, 4,93 % H, 20,16 % N nalezeno 64,38 % C, 4,90 % H, 19,78 % N.

Příklad 104

8-Ethyl-2-fenylamino-6-thiofen-2-yl-8Hpyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on

109

Sloučenina se připraví z (8-ethyl-7-imino-6-thiofen-2-yl-7,8-dihydro-pyrido[2,3-d]pyrimidin2-yl)-fenylaminu postupem podle příkladu 116. Produkt se čistí rychlou chromatografií za eluce 5% methanolem/methylenchloridem, následovaným 10% methanolem/methylenchloridem; t.t. 223 až 225 °C. Hmotové spektrum (Cl) 349 (M⁺).

Elementární analýza pro C19H16N4OS: vypočteno 65,49 % C, 4,63 % H, 16,08 % N nalez-eno. 65,36 %. C, 4,7-8 % H, 15,72 % N.

Příklad 105 (6-(2-Brom-6-chlorfenyl)-8-ethyl-7-imino-7,8-dihydropyr ido [2,3-d]pyrimidin-2-yl)-fenylamin

K suspenzi NaH (60% v minerálním oleji, 12 mg) v 5 ml 2-ethoxyethanolu se přidá 2-brom-6-chlorfenylacetonitri 1 (286 mg, 1,24 mmol). Po 5 minutách míchání při teplotě místnosti se přidá 4-ethylamino-2-fenylamino-pyrimidin-5-karbaldehyd (200 mg, 0,83 mmol) a reakce se zahřívá 3 hodiny na 130 °C, vznikne tmavě hnědý roztok. Po ochlazení se vytvořená sraženina trituruje se 20 1 vody. Sraženina se odfiltruje a promyje se etherem za získání 178 mg (6-(2-brom-6-chlorfenyl)-8-ethyl-7imino-7,8-dihydro-pyrido[2,3-d] pyrimidin-2-yl)-fenylaminu.

Příklad 106

6-(2-Brom-6“Chlorf eny1)-8-ethy1-2-f enylamino-8Hpyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on

C i; e c <*:

G r ·:. ή' «; »·*:·ιιγ í α « « »:«’ <

h rC b· ÓCÓG cc c'· C f i ♦· ‘ «1·;

? (6-(2-Brom-6-chlorfenyl)-8-ethyl-7.-imino-7,8-dihydropyrido[2,3~d]pyrimidin-2-y1)-fenylamin (150/mg)· se přidá k 1 ml acetanhydridu? avžahřívá! se pod^ ref luxem 5 minut·. Reakční i směs 'se ochladí á ;zahustí za*získání oleje, který se zahřívá pod ref luxem s lOmUóN HCP 101'minut. . Reakce se ochladí a přidá<se 30 ml vody, coživyvolá, srážení. Sraženina se odstraní ⁴ filtrací á> promyje? sel vodou.' Výsledná¹ pevná látka se suší za získání 130 mg 6-(2-brom-6-chlorfenyl)-8-ethyl-2-fenylaminopyrido[2,3--d] pyrimidin-7-onu; t.t. měkne při 195 °C a taje při ______2J_O__až_ 214^1.0..-^.......... . ______________.____________________ . .. __________________

Hmotové‘Spektrum (Cl). 457. (M⁺)\- ηΆ, ’ _Λ < Elementární; analýza?pro C₂iHi&N4OBrCl.HC1:

vypočteno 51,24 % C, 3,48 % H, 11,38 % N_

- nalezeno 50,58 % C, 3,51 % H, -11,32 % N.

n í * ’ „ . Přiklaď 107 . J »

Kysel i na [2-amino-6-(2,6-dichlorf enyl)-7-oxo-7Hpyrido[2;3-d]pyrimidin-8-yl]-octová v

. K roztoku terč.butylesteru kyseliny [2-amino-6-(2,6-dichlorfenyl)-7-oxo-7H-pyrido[2,3-d]pyrimidin8-yl].-octové (157 mg,. 0,37/ mmol) z příkladu 36 ve 4 ml methylenchlorIdu seipřidají 2 ml kyseliny trifluoroctové. ‘Roztok ’se-míchá přň teplotě místnosti^ 5_; hodin,, pak se zahustí ve vakuu. ťVýsEedný olej se rozdělí mezi methylenchlorid a ^solanku. Vodná vrstva se'promyje_? ethylacetátem a organické --------vrstvy-se+spojíλ suší-seínádtsÍránem horečnatým, filtruj í a zahustí ve'tvakuu za získání gumovité pevné látky. Přidá se diethylether a výsledná sraženina, se oddělí. K filtrátu se přidá hexan avyloučená sraženina se oddělí. Pevné látky se spojí a suší vevakuu při 80 °C za získání 71 mg (52 %) kyseliny [2-amino-6-(2,6-dichlorfenyl)-7-bxo-7Hpyrido[2,3-d]pyrimidin-8-yl]-octové, které je podle HPLC >97% čistoty; t.t. 297 až 300 °C rozkl.

Elementární analýza pro Ci5H1oCl2N4O3: vypočteno 49,34 % C, 2,76 % H, 15,34 % N nalezeno 46,01 % C, 2,77 % H, 13,28 % N.

Příklad 108

2-Amino-8-benzy1-6-(2,6-dichlorfenyl)-8Hpyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on

K suspenzi NaH (60% v minerálním oleji, 34 mg) v 6 ml dimethylformamidu se přidá 2-amino-6-(2,6-dichlorfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7(8H)-on (200 mg, 0,65 mmol). Směs se zahřívá na 50 °C za vzniku čirého roztoku. Přidá se benzylbromid (110 μΐ, 0,92 mmol) a roztok se zahřívá na 50 °C 5 minut, míchá se při teplotě místnosti 2 hodiny, pak se nalije do 40 ml ledové vody. Výsledná sraženina se oddělí filtrací a promyje se vodou. Pevná látka se čistí rychlou chromatografií, eluuje ethylacetátem za získání 181 mg produktu. Druhou chromatografií za eluce ethylacetátem následovanou sušením ve vakuu se získá 110 mg (43 %) 2-amino8-benzy1-6-(2,6-dichlorfenyl)-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-onu; t.t. 220 až 222 °C.

Elementární analýza pro C20H14CI2N4O: vypočteno 60,47 % C, 3,55 % H, 14,10 % N nalezeno 60,55 % C, 3,69 % H, 13,93 % N.

112

Příklad 109

2-Amino-8-(3-brombenzyl)-6-(2,6-dichlorfenyl)-8Hpyr ido[2,3-d]pyrimidin-7-on

K suspenzi NaH (60% v minerálním oleji, 38 mg) v 8 ml dimethylformamidu se přidá 2-amino-6-(2,6~dichlorfeny1)pyrido[2,3-d]_Pyrimidin-7(8H)-on (200 mg, 0,65 mmol). Směs se zahřívá na 50 °C 20 minut za vzniku čirého roztoku. Odstraní se topný plášť a přidá se 3-b.romb.enz.yIbromid (240 μΐ, 0,96 mmol). Po 10 minutách se reakční směs nalije do 30 ml ledové vody. Výsledná sraženina se oddělí filtrací a promyje se vodou. Pevná látka se čistí rychlou chromatografií za eluce 1:1 hexanem:ethylacetátem, pak se suší ve vakuu a získá se 178 mg (58 %) 2-amino-8-(3-brombenzyl)-6-(2,6-dichlorfenyl)-8Hpyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on; t.t. měkne při 195 °C, taje při 215 °C.

Elementární analýza pro C20H1aBrCl2N4O: vypočteno 50,45 % C, 2,75 % H, 11,77 % N nalezeno 50,82 % C, 2,91 % H, 11,63 % N.

Příklad 110

Methylester kyseliny 4-[2-amino-6-(2,6-dichlorfenyl)-7-oxo7H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-8-yl-methyl]benzoové

K suspenzi NaH (60% v minerálním oleji, 36 mg) v 7 ml dimethylformamidu se přidá 2-amino-6-(2,6-dichlorfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7(8H)-on (195 mg, 0,64 mmol). Směs se zahřívá na 40 °C až 50 °C 20 minut, vznikne čirý roztok. Přidá se methyl-4-(brommethyl)benzoát (206 mg, 0,90 mmol) a reakční

113 směs se zahřívá na 40 °C až 50 °C 15 minut, pak se nalije do 30 ml ledové vody. Výsledná sraženina se odstraní filtrací a promyje se vodou. Pevná látka se čistí rychlou chromatografií za eluce gradientem 1:1 hexan:ethylacetát až 1:2 hexan:ethylacetát, pak se sušením ve vakuu získá 204 mg methylesteru kyseliny 4-[2-amino-6-(2,6-dichlorfenyl)-7-oxo7H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-8-yl-methyl]benzoové, obsahujícího 0,16 ekvivalentl ethylacetátu; t.t. 235 až 237 °C.

Elementární analýza pro C₂₂Hi₆C12N4O3.0,16 C4H₈O₂: vypočteno 57,95 % C, 3,68 % H, 11,93 % N nalezeno 57,87 % C, 3,74 % H, 11,67 % N.

Příklad 111

2-Amino-8-(2,6-dichlorbenzyl)-6-(2,6-dichlorfenyl)8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on

K suspenzi NaH (60% v minerálním oleji, 36 mg) v 8 ml dimethylformamidu se přidá 2-amino-6-(2,6-dichlorfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7(8H)-on (208 mg, 0,68 mmol). Směs se zahřívá na 70 °C 10 minut a pak na 50 ⁰C 30 minut, vznikne čirý roztok. Přidá se a-brom-2,6-dichlortoluen (215 mg, 0,90 mmol) a reakční směs se zahřívá na 50 ⁰C 25 minut, pak se nalije do ledové vody. Výsledná sraženina se odstraní filtrací a promyje se vodou. Pevná látka se čistí rychlou chromatografií, eluuje 1:1 hexanem:ethylacetátem a pak suší ve vakuu za získání 112 mg (35 %) 2-amino-8-(2,6-dichlorbenzyl)6-(2,6-dichlorfenyl)-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-onu; t.t. 274 až 276 °C.

Elementární analýza pro C20H1 ₂C14N4O: , vypočteno 51,53 % C, 2,59 % H, 12,02 % N nalezeno 51,92 % C, 2,68 % Η, 11,84 % N.

Příklad 112

2-Amino-6-(2,6-dichlorfenyl)-8-(4-methoxybenzyl)-8Hpyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on

K suspenzi NaH (60% v minerálním oleji, 38 mg) v 8 ml dimethyIformamidu se přidá 2-amino-6-(2,6-dichlorfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7(8H)-on (208 mg, 0,68 mmol). Směs se zahřívá na 50 ⁰C 1 hodinu, vznikne čirý roztok. Přidá se 4-methoxybenzylchlorid (130 μΐ,- 0,95 mmol). a reakční. „směs ..se. . zahřívá na 50 °C 30 minut, pak se nalije do ledové vody. Výsledná sraženina se oddělí filtrací a promyje se vodou. Pevná látka se čistí rychlou chromatografií za eluce 1:1 hexanem:ethylacetátem, pak se suší ve vakuu za získání 208 (72 %) mg 2-amino-6-(2,6-dichlorfenyl)-8^(4-methoxybenzyl)-8Hpyrido[2,3—d]pyrimidin-7-onu; t.t. 208 až 209 °C. Elementární analýza pro CziHi&C1zN₄O₂: vypočteno 59,03 % C, 3,77 % H, 13,11 % N nalezeno 59,39 % C, 3,92 % H, 12,88 % N.

Příklad 113

2-Amino-6-(2,6-dichlorfenyl)-8-_Pyridin-4-ylmethyl-8Hpyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on

K suspenzi NaH (60% v minerálním oleji, 32 mg) v 6 ml dimethylformamidu se přidá 2-amino-6-(2,6-dichlorfenyl)pyrido [2,3—d]pyrimidin-7(8H) -on (200 mg, 0,65 mmol) a směs se zahřívá na 70 °C. Do druhé baňky, obsahující triethylamin (220

1 o μΐ, 1,59 mmol) ve 4 ml dimethylformamidu se přidá hydrochlorid 4-pikolylchloridu (137 mg, 0,84 mmol). Tato tmavě červená směs se přidá k výše uvedenému roztoku sodné soli 2-amino-6(2,6-dichlorfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7(8H)-onu. Směs se zahřívá na 70 °C, pak ochladí na teplotu místnosti. Směs se nalije do 20 ml leové vody a výsledná sraženina se odstraní filtrací a promyje se vodou. Tato pevná látka se promyje 10% methanolem v ethylacetátu za získání 96 mg surového produktu. Filtrát se zahustí za získání dalších 77 mg surového produktu. Analytický vzorek se získá čištěním rychlou chromatografií, eluce gradientem ethylacetátu až 10 % methanolu v ethylacetátu -----zazískání 2-amino-6-(2,6-dichlorfenyl)-8-pyridin-4-yl- ..........

methyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-onu; t.t. 268 až 270 °C (rozkl.)

Elementární analýza pro Ci9H13CI2N5O:

vypočteno 57,30 % C, 3,29 % H, 17,59 % N nalezeno 57,62 % C, 3,57 % H, 17,31 % N.

Příklad 114

2-Amino-6- (2,6-dichlorfenyl)-8-(3-f enylpropyl)-8Hpyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on

K suspenzi NaH (60% v minerálním oleji, 58 mg) v 10 ml dimethylformamidu se přidá 2-amino-6-(2,6-dichlorfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7(8H)-on (320 mg, 1,04 mmol). Směs se zahřívá na 60 °C za vzniku čirého roztoku. Přidá se 1-chlor3~fenylpropan (260 μΐ, 1,81 mmol) a reakční směs se zahřívá na 60 °C 35 minut, pak se nalije do ledové vody. Výsledná gumovitá pevná látka se rozpustí v ethylacetátu, promyje se vodou a suší nad síranem hořečnatým. Filtrací následovanou

116 zahuštěním ve vakuu se získá olej, který se čisti rychlou chromatograf i í , eluce 1:3 hexanem: ethylacetátem za získán 345 mg surového produktu. Rekrystalizaci z ethylacetátu a hexanu s následujícím sušením ve vakuu se získá 253 mg (57 Ϊ) 2-amino-6- (2,6-dichlorf eny 1 )-8-(3-f enylpropyl )-8Hpyrido[2,3-d]pyrimidin-7-onu; t.t. 161 až 163 C.

Elementární analýza pro Cz2H1eCl2N4O: vypočteno 62,13 % C, 4,27 % H, 13,17 % N nalezeno 62,08 % C, 4,37 % H, 13,15 % N.

Příklad 115 (8-Ethyl-7-imino-6-fenyl-7,8-dihydro-pyrido[2,3-d]pyrimidin2-yl)-2-fenylamin

K suspenzi NaH (60% v minerálním oleji, 8 mg) v 5 ml 2-ethoxyethanolu se přidá fenylacetonitri 1 (100 μΐ, 0,87 mmol). Po 5 minutách míchání při teplotě místnosti se přidá 4-ethylamino-2-fnylamino-pyrimidin-5-karbaldehyd (200 mg, 0,83 mmol) a reakce se zahřívá na 90 °C 24 hodin, vznikne tmavěhnědý roztok. Tento se ochladí na telotu místnosti a pak, se nalije do 20 ml vody. Výsledná sraženina se oddělí filtrací a promyje se vodou. Zbytek se suší a čistí rychlou chromatografií za eluce 3% methanolem/methylenchloridem. Získá se 145 mg (51 %) (₈-ethyl-7-imino-6-fenyl-7,8-dihydropyrido[2,3-d]pyrimidin2-yl)-2-fenylaminu; t.t. 196 až 197 C.

Hmotové spektrum (Cl) 342 (M⁺)Elementární analýza pro C21H19N5: vypočteno 73,88 % C, 5,61 % H, 20,51 % N .... ....... .....

nalezeno 73,22 % C, 5,59 % H, 20,29 % N.,

Příklad 116

8-Ethyl-6-feny1-2-fenylamino~8H-pyrido[2,3 d]pyrimidin 7-on

[8-Ethyl-7-imino-6-fenyl-7,8-dihydropyrido[2,3-d]pyrimidin-2-yl)-2-fenylamin (150 mg) se přidá ke 2 ml acetanhydridu a zahřívá se pod refluxem 2 minuty. Reakční směs se ochladí a zahustí, vznikne olej, který se zahřívá pod refluxem s 10 ml 6N HC1 po 10 minut. Reakční směs se ochladí a přidá se 20 ml vody, což vyvolá vysrážení. Sraženina se odstraní filtrací a promyje se vodou. Výsledná-.pevná.látka se, suší ve vakuové sušárně při 45 °C 2 hodiny za získání 122 mg (81 %) 8-ethyl-6-feny1-2-fenylamino-8H-_Pyrido[2,3-d]_Pyrimidin7-onu; t.t. 197 až 200 °C rozkl.

Hmotové spektrum (Cl) 343 (M⁺).

Elementární analýza pro CziHibNaO.0,5 HC1 vypočteno 69,94 % C, 5,17 % H, 15,53 % N, 4,92 % Cl nalezeno 69,30 % C, 5,07 % H, 15,44 % N, 5,21 % Cl.

Příklad 117 (6-(3,5-Dimethylfeňyl)-8-ethyl-7-imino-7,8-dihydropyrido[2,3-d]pyrimidin-2-yl)-2-fenylamin

K suspenzi NaH (60% v minerálním oleji, 16 mg) v 5 ml 2-ethoxyethanolu se přidá 3,5-dimethylfenylacetonitril (126 mg, 0,87 mmol). Po 5 minutách míchání při teplotě místnosti se přidá 4-ethylamino-2-fenylamino-pyrimidin-5-karboxaldehyd (200 mg, 0,83 mmol) a. reakční. směs se zahřívá na 115 °C 2 hodiny za získání tmavě hnědého roztoku. Po ochlazení pevná látka ztuhne a trituruje se se 30 ml vody. Výsledná sraženina se odfiltruje a promyje se diethyletherem. Zbytek se suší za získání 232 mg (76 %) (6-(3,5-dimthylfenyl)-8-ethyl-7-imino-7,8-dihydropyrido[2,3-d]pyrimidin-2-y1)-2-fenylaminu; t.t. 243 až 244 C. Elementární analýza pro C23H23N5: vypočteno 74,77 % C, 6,27 % H, 18,95 % N nalezeno 73,84 % C, 6,30 % H, 18,72 % N.

Příklad 118

6-(3,5-Dimethy1fenyí)-8-ethy1-2-fenylamino-8Hpyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on —- ----------- . . . .

(6-(3,5-Dimethylfenyl)-8-ethyl-7-imino-7,8-dihydropyrido[2,3-d]pyrimidin-2-yl)-2-fenylamin (150 mg) se přidá k 1 ml acetanhydridu a zahřívá se pod refluxem 2 minuty. Reakční směs se ochladí a zahustí za získání oleje, který se zahřívá pod refluxem s 10 ml 6N HC1 10 minut. Reakční směs se ochladí a přidá se 20 ml vody, což vyvolá srážení. Sraženina se odfiltruje a promyje se vodou. Výsledná pevná látka se suší ve vakuové sušárně při 45 °C 2 hodiny za získání 140 mg (93 %) 6-(3,5-dimethylfenyl)-8-ethyl-2-fenylamino-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-onu; t.t. 220 až 223 C. Hmotové spektrum (Cl) 371 (M⁺).

Elementární analýza pro C23H22N4O.HCI: vypočteno 67,89 % C, 5,70 % H, 13,77 % N nalezeno 67,58 % C, 5,68 % H, 13,59 % N.

Příklad 119 (8-Ethyl-7“imino-6-pyridin-4-yl-7,8-dihydro-

pyrido[2,3-d]pyrimidin-2-yl)-2-fenylámin ' ^h * t

Připraví se.v-80% výtěžku ’ze ^pýridýlacétonitři lu a 4-ethylamino-^-fenylamino-pyrimidin-S-karbaldehydu'postupem podlé příkladu¹1Ί5*.· . ’ ^{J v} '· ’’ - ‘ *4 *‘^r * ¹ · . - . k ^: 7 - fhirv } 7 j hy-^{1 j}

Příklad 120*' ’·- ’-c-v,-⁴- *’4 *i O’ ' 8-Ethý1—2-fenýlámíno-6-Kyřidin-4-yl-8H-pyrido[2,3-d]pýrimidin-7-on * >.· ' 1 < i ‘__

.. . ' 7)

Připraví se v 60% výtěžku z /(8-ethyl-7-imino-6-pyridin-4-yl-7, 8-dihydro-pyrido[2,3-d]pyrimidin-2-yl)-2-fenylaminu postupem podle příkladu 116; t ..t. měkne při'230 ’C.

-Hmotové>spektrum (Cl) 344 (M⁺).

Elementární analýza pro C20H17N5O.HCI:

vypočteno 63,24 % C, 4,78 % H, 18,44 % N nalezeno * 63,92 % C, 4,70 % H, 18,66 % N.

l - * ¹ p ,. /

Příklad’ 121 - ' ^J ‘

M ’ >*. Μ ‘ i ^:>‘·· · . .. 4 J·.· . . h ' - ť’ .

f (8-Éthy l“7-imino~6-náf ťaleři-2-yr47 ’8-dihydró- ^{; u} i ^ř‘“ ' pyridó [2,3-d] pyrimidin-2-yl )-f énylámin --^{7 f} κ ύ⁵1 m * ' - ' '*··'? - * . , _t . J - 1 4’ : t by '< .. : i ' ₄h· ·.·..’·;·

K suspenzi>NaH 1(60% v minerálním oleji, 27 mg)' v 5 ml2-ethoxyethanolu se přidá 2-naftylacetonitri 1 (227 mg, 1,36 ’mmol). Pói5Mminutách michání-při teplotě místnosti se přidá 4-ethylami'nó-2-fenylamiňo-pyrimidin-5-karbaldehyd (300 mg, '1,24 mmol)’a’reakdni “směs se -zahřívá ha? 110 °C 1 hodinu, získá ^'se· tmavě hnědý roztok'/ Po 'Vychladnutí se roztok nalije do 30 zu ml vody, což vyvolá vysrážení. Výslená sraženina se odstraní filtrací a promyje se vodou. Surový produkt se čistí rychlou chromatografií za eluce 5% methanolem/methylenchloridem následovaným 10% methanolem/methylenchloridem. Zahuštěním frakcí, obsahujících produkt se získá 400 mg (82 %) žluté pevné látky, (8-ethyl-7-imino-6-naftalen-2-yl-7,8-dihydropyrido[2,3-d]pyrimidin-2-yl)-fenylaminu; t.t. 236 až 242 °C. Hmotové spektrum (Cl) 392 (M⁺).

Elementární analýza pro C25H21N5'.

vypočteno 76,70 % C, 5,41 % H, 17,89 % N nalezeno 75,58 % C, 5,49 % H, 17,58 % N.

Příklad 122

8-Ethy1-6-naf talen-2-yl-2~f enylamino-SHpyrido [2,3—d ]pyrimidin-7-on (8-Ethyl-7-imino-6-naftalen-2-yl-7,8-dihydro~ pyrido[2,3-d]pyrimidin-2~yl)-fenylamin (150 mg) se přidá k 1 ml acetanhyridu a zahřívá se pod refluxem 2 minuty. Reakce se ochladí a zahustí, získá se olej, který se zahřívá pod refluxem s 10 ml 6N HC1 10 minut. Reakční směs se ochladí a přidá se 40 ml vody, což vyvolá vysrážení. Sraženina se odstraní filtrací a promyje se vodou. Výsledná pevná látka se suší ve vakuové sušárně za získání 8-ethyl-6-naftalen-2-yl-2fenylamino-8H-pyrido [2,3-d]pyrimidin-7-onu; t.t. 254 až 256 °C. Hmotové spektrum (Cl) 393 (M*).

Elementární analýza pro CzsHzoNáO.HCl: vypočteno 70,00 % C, 4,94 % H, 13,06 % N nalezeno 68,61 % C, 4,97 % H, 12,83 % N.

Příklad 123 (6-Bifeny1-4-y1-8-ethyl-7-imino-7,8-dihydropyrido[2,3-d]pyrimidin-2-yl)-feny lamin

K suspenzi NaH (60% v minerálním olej i, 27 mg) v 5 ml 2-ethoxyethanolu se přidá 4-bifenylacetonitri 1 (263 mg, 1,36 mmol). Po 5 minutách míchání při teplotě místnosti se přidá 4-ethy1amino-2-fenylamaino-pyrimidin-5-karboxaldehyd (300 mg, 1,24 mmol) a reakční směs se zahřívá na 110 °C 1 hodinu, získá se tmavě hnědý roztok. Po ochlazení se roztok nalije do vody, což vyvolá vysrážení. Výsledná sraženina se odstraní filtrací a promyje se vodou. Surový produkt se čistí rychlou chromatograf i í, eluuje se. 5%· methanolem/methylenchloridem, -pak 10% methanolem/methylenchloridem. Zahuštěním frakcí, obsahujících produkt se získá 427 mg (83 %) (6-bifenyl-4-yl-8ethyl-7-imino-7,8-dihydro-pyrido[2,3-d]pyrimidin-2-yl)-feny 1aminu; t.t. 245 až 249 °C. Hmotové spektrum (Cl) 418 (M⁺). Elementární analýza pro C27H23N5: vypočteno 77,67 % C, 5,55 % H, 16,78 % N nalezeno 76,16 % C, 5,54 % H, 16,36 % N.

Příklad 124

6-Bifenyl-4-yl~8-ethyl-2-fenylamino-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin7-on ' Připraví se ze (6-bifényl-4-yl-8-ethyl-7-imiho-7,8-dihydro-pyrido[2,3-d]pyrimidin-2-yl)-fenylaminu postupem podle Příkladu 116; t.t. měkne při 235 °C.

122

Hmotové spektrum (Cl) 419 (M⁺).

Elementární analýza pro C27H22N4O.HCI: vypočteno 71,28 % C, 5,10 % H, 12,32 % N nalezeno 69,22 % C, 5,10 % H, 11,85 % N.

Sloučeniny vzorce I jsou cennými nhibitory protein tyrosin kinasy a jsou terapeuticky cenné jako buněčná antiprolíferativní činidla pro léčení proliferatívních poruch. Tyto sloučeniny jsou potentními inhibitory protein kinas, PDGF, FGF, EGF, virální-src fV-src) a celnUrní-crr ---------------- O · Sločeniny podle vynálezu jsou tak vhodné pro léčení atherosklerosy, restenosy a rakoviny. Specifické tumory pro léčení sloučeninami zahrnují malobuněčný plicní karcinom jako je popsán v an. Rev.Respir. Dis. 142:554-556 (1990); karcinom lidského prsu jak je popsán v Cancer Research. 52:4773-4778 (1992);karciomy lidského měchýře typu popsaného v Cancer Research, 52: 1457-1462 (1992); lidský kolorektální karcinom jak je diskutován v J. Cl in, Invest.. 91:53-60 (1993) a v USurg-Res. . 54:293-294 (1993).

Sloučeniny podle předloženého vynálezu byly hodnoceny ve standardních zkouškách, které se používají pro stanovení inhibice tyrosin kinas. Zkoušky byly provedeny následovně:

Čištění epidermální růstový faktor receptor tyrosin kinasy

Lidská EGF receptor tyrosin kinasy byla izolována z A431 epidermoidních karcinomových buněk následujícími metodami. Buňky rostly v otočných lahvích v 50% Dulbeccově modifikovaném Eagle mediu a 50% HAM F-12 živném mediu (Gibco), obsahujícím 10 % fetálního telecího sera. Přibližně 109 buněk bylo í ¢- ft 0 Γ ^Γ' C ή c i] f> fl f ^r' * Č * lyžováno -ve dvou objemech puffuů obsahujíčího 20 mM

2-(4N-[2-hydroxymethyl ]-piperazin-l-y 1) ethatisul f onové kyseliny;,pH 7,4·, ’5 mM'ethylenglykol-bis(2-aminoethylether)Ν,Ν,Ν’,Ν'-tetraoctové kyseliny, 1 % Tritonu X-100, 10 % Glycerolu, 0 ;T mM orthovánadátu sodného,* 5 mM fluoridu

I sodného, 4 mM pyrofosfátu, 4 mM benzamidu, 1 mM dithiothreitólu, 80 ^g/ml*aprotiniriuΛ 40 pg/ml TéupepťinU a 1 mM fenylmethylsulfonylfluóridu.^Po odstřelování při 25000'x g po 10 minut ?byl· supernatant^ekvTíibYóváh *2' hodiny' při 4'° C s

L______, JQ ^ag 1 i i i-nin ,-sepharo.sy 'pšeni čných k 1 JLčkůk.terX_;,.by’ La.„pxe.dém..

j ekvilibrována s 50 imM Hepes 10. % glycerolu, 0,1 % Tritonu í ⁴ X-lOé a 150 mMNaCl, pH 7,5 (ekvi1ibrační pufr). Kontaminující ' proteiny byly vymyty z pryskyřice 1M NaCl^y ekvi1ibračním ‘ pufru a enzym byl eluován Ό,5M N-acety1-1-D- glukosmainem v ekvi1ibračním pufru. ' * ^Γ·: *

Stanovení IC50 hodnot ' ' Enzymové zkoušky pro stanovení IC50 byly provedeny v Ecelkovém objemu 0,1 ml, obsahujícím 25 mM Hepes, pH 7,4, 5mM

MgClzů 2. mM MnClz, 50 μΜ vanadátu sodného,* 5-10 ng. EGF receptor tyrosin kinasy, 200 μΜ substrátu peptidů (Ac-Lys-His-Lys-LysLeu-Ala-GIuTGly-Ser-AlaťTyr⁴⁷2-Gl^ získaného z * aminokyseliny (.Týn⁴⁷²! byl z j ištěnďjako' 1 ze 4 Tyros inu-v - u PLC-g, .které“ jšnw fosforylóvány EGF' réčeptbi> tyrošin kinasou *

YWahl M\ I:.v, a. spo 1 J. rJ . Bi or. Cheml / 265:1944-394® (1990)) a'-ó ¹ peptidy získaných* z. enzymové sekvence , obklopující to t o mí s't o, - Js ou ivyni kaYí c íř subs-trátý^ro^e pCi [³²P]ATP. a’.inkubovány TOvmihut při teplotě místnosti'.

Reakce .byla' ukončenai přídavkem 2 miř*75'mM kysel iny fosforečné a ponechána pro j í t přesi2.,5 cm· ^!f osf oce lul ozový filtrační disk z** pro navázáni peptidů. Filtr byl promyt 5x 75 mM kyseliou fosforečnou a umístěn do lahvičky spolu s 5 ml scintilacm kapaliny (Ready gel Beckman).

PDGF a FGF receptor tyrosin kinasové zkoušky

Plná délka cDNA pro myši PDGF-B a lidskoé FGF-1 (f18) receptor tyrosin kinasy byly získány od J.Ecobeda a připraveny jak je popsáno v JJi°l .Chem. . 262: 1482-1487 (1991) a PCR pimery byly sestaveny pro amplifikaci fragmentu DNA, který kóduje intracelulárni tyrosin kinasa doménu. Fragment byl vnesen do bakulovirového vektoru, kotransfektován AcMNPV DNA a rekombinantní virus byl izolován. SF9 hmyzí buňky byly . infektovány virem pro nadměrnou expresi proteinu a buněčné lyzáty byly použity pro zkoušku. Zkouška byla provdena v 96-jamkových plotnách (100 pl/inkubace/jamka) a podmínky byly optimalizovány pro měření inkorporace ”P z gamatžP-ATP do glutamát-tyrosin kopolymerového substrátu. Stručně, do každé jamky bylo přidáno 82,5 μΐ inkubačniho pufru, obsahujícího 25 mM Hepes (pH 7,0), 150 mM NaCl, 0,1 % Tritonu X-100, 0,2 mM PMSF, 0,2 mM NaiVOa, 10 mM MnClz a 750 μ/ml Póly (4.1) glutamáz-tyrosinu a následovalo 2,5 μΐ inhibitoru a 5 μΐ enzymového lyzátu (7,5 μ«/μ1 FGF-TK nebo 6,0 μ₈/μ1 PDGF-TK) k iniciaci reakce. Po 10 minutách inkubace při 25 bylo do každé jamky přidáno 10 μΐ gamaiiP-ATP (0,4 pCi plus 50 μΜ ATP) a vzorky byly inkubovány dalších 10 minut při 25 C. Reakce byla ukončena přídavkem 100 μΐ 1 30% kyseliny trichloroctové (TCA), obsahující 20 mM pyrofosforečnanu sodného a srážením materiálu na podložkách ze skelných vláken (Wallac). Filtry byly promyty 3krát 15% TCA, obsahující 100 mM pyrofosforečnanu sodného a radioaktivita zachycená na filtrech byla spočtena ve Wallac zo

1250 Betaplate čtečce. Nespecifická aktivita byla definována jako radioaktivita zachycená na filtrech po inkubací vzorků se samotným pufrem (bez enzymu). Specifická enzymatická aktivita byla definována jako celková aktivita (enzym plus pufr) mínus nespecifická aktivita. Koncentrace sloučeniny, která inhibuje specifickou aktivitu z 50 % (IC50) byla stanovena na základě inhibiční křivky.

V-src a C-src kinasové zkoušky

V-src nebo C-src kinasa se čistí z bakulovirem infikovaných hmyzích buněčných lyzátů za použití antipeptidické monoklonální protilátk řízené proti N-terminálním 2-17 aminokyselinám. Protilátka, kovalentně navázaná k 0,65pm latexovým kuličkám, se' přidá k suspenzi hmyzího buněčného lyzového pufru, obsahujícího 150 mM NaCl, 50 mM Tris _PH 7,5, 1 mM DTT, 1 % NP-40, 2 mM EGTA, 1 mM vanadátu sodného, 1 mM PMSF, 1 pg/ml každého z leupeptinu, pepstatinu a aprotininu. Hmyzí buněčný lyzát, obsahující bud C-src nebo V-src protein se inkubuje s těmito kuličkami 3 až 4 hodiny při 4 °C za otáčení. Na konci inkubace lyzátu se kuličky promyjí 3krát v lýzovém pufru, resuspendují se v lýzovém pufru, obsahujícím 10 % glycerolu a zmrazí. Tyto latexové kuličky se nechají roztát, promyjí se 3krát ve zkušebním pufru, který obsahuje 40 mM tris pH 7,5, 5 mM MgClz a suspendují ve stejném pufru. Na Millipore 96-jamkovou plotnu s 0,65 pm polyvinyliden membránovým dnem se přidají reakční složky: 10-pl.V-src nebo C-src kuličky,, 10 μ 1 2,5 mg/ml póly GluTyr substrátu, 5 μΜ ATP, obsahujícího 0,2 pCi značeného ³²P-ATP, 5 μΐ DMSO, obsahujícího inhibitory nebo jako rozpouštědlová kontrola a pufr pro úpravu konečného objemu na

125 μΐ. Reakce se nastartuje při teplotě místnosti přídavkem ATP a přeruší se o 10 minut později přídavkem 125 pl 30% TCA, 0, ÍM pyrofosforečnanu sodného po 5 minut na ledu. Plotna se pak filtruje a jamky se promyjí dvěma 250 μΐ podíly 15% TCA, 0,lM pyrofosforečnanem. Filtry se vyklepnou, spočtou v kapalninovém scintilačním čítači a data se hodnotí na inhobiční aktivitu ve srovnání se známým inhibitorem jako je erbstatin. Metoda je podrobněji popsána v J.Med.Chem., 37:598-609 (1994).

Buněčná kultura

Buňky hladkých svalů krysí aorty (RASMC) byly izolovány z thorakální aorty krys a zpracovány podle metody Rosse, J.Cell.Bio 1., 30:172-186 (1971). Buňky rostly v Dulbeccově modifikovaném Eagleově mediu (DMEM, Gibco), obsahujícím 10 % fetálníhotelcího séra (FBS, Hyclone, Logan, Utah), 1 % glutaminu (Gibco) a 1 % pěnici 1inu/streptomycinu (Gibco). Buňky byly identifikovány jako buňky hladkých svalů podle jejich tvaru růstu vrcholky a prohlubně a fluorescentního vybarvení s monoklonální protilátkou specifickou pro SMC «-aktin (Sigma). RASMC byly/oužity mezi pasážemi 5 a 20 pro všechny pokusy. Zkoušené sloučeniny byly připraveny v dimethy1 sulfoxidu (DMSO) za účelem dosažení konzistence ve vehikulu a pro zajištění rozpustnosti sloučeniny. Vhodné DMSO kontroly byly podobně hodnoceny se zkoušenými sloučeninami.

Zkouška inkorporace [³H]-thymidinu

RASMC byly umístěny na 24-jamkovo plotnu (30000 buněk/jamka) v DMEM s 10% FBS. Po 4 dnech buňky dosáhly

127 konfluence a byly zklidněny inkubací v DMEM/F12 mediu (Gibco), obsahujícím 0,2 % FBS po další 2 dny. DNA syntéza byla vyvolána inkubací buněk po 22 hodin s bud PDGF-BB, bFGF nebo FBS, plus testovaná sloučenina v 0,5 ml/jamka serum obsahujícího media (DMEM/F12 + 1 % CPSR-2 od Sigma). Po 18 hodinách bylo přidáno 0,25 μΟί/ίβωΚυ [³H]-thymidinu. O čtyři hodiny později byla inkubace ukončena odstraněním radioaktivního media, promytím buněk dvakrát 1 ml studeného fosfátem pufrovaného salinického roztoku a pak promytím 2krát studenou SX kyselinou tri chlor octovou, Kyselá nerozpustná, frakce byla lyžovány v 0,75 ml 0,25N NaOH a radioaktivita byla stanovena kapalinovým scintilačním počtem. Graficky byly stanoveny hodnoty IC50.

PDGF receptor autofosforylace

RASMC rostly do konfluence ve 100mm miskách. Růstové medium bylo odstraněno a nahrazeno sera prostým mediem a buňky byly inkubovány při 37 °C po dalších 24 hodin. Testované sloučeniny byly pak přidány přímo do media a buňky inkubovány po další 2 hodiny. Po 2 hodinách byl přidáván PDGF-BB v konečné koncentraci 30 ng/ml po 5 minut při 37 °C pro stimulaci sutofosforylace PGF receptoru. Po zpracování s růstovým faktorem bylo medium odstraněno a buňky byly promyty studeným fosfátem pufrovaným salinickým roztokem a ihned lyžovány s 1 ml lýzového pufru (50 mMHEPES (pH 7,5), 150 mM NaCl, 10 % glycerolu, 1 % tritonu X-100, 1 mM EDTA, 1 mM EGTA, ° 5é mM NaF, 1 mM orthovanadátu sodného, 30 mM , p-nitrofenylfosfátu, 10 mM pyrofosforečnanu sodného, 1 mM fenylmethylsulfonylfluoridu, 10 pg/ml aprotininu a 10 μg/ml leupeptinu). Lyzáty byly odstředovány při 10000 x g po 10

128

minut. Supernatanty byly inkubovány s 10 μΐ králičí anti-humánní PDGF typ AB receptor protilátky (1:1000) po 2 hodiny. Po inkubaci byly přidány kuličky protein-A-sepharosy po 2 hodiny za kontinuálního míchání a imunní komplexy nyvázané na kuličky promyty čtyřikrát s 1 ml lýzového promývacího pufru. Imunní komplexy byly solubi1izovány ve 30 μΐ Laemml vzorkového pufru a e1ektroforezovány ve 4-20% SDS polyakrylamidových gelech. Po elektroforéze byly oddělené proteiny přeneseny na nitrocelulozu a imunoblottovány s + 4 _KM i nVnHcs n i c a 11 I X XVOXVUJAVOXUVVJUl Ull i. X J V X < X xz * λ M

[125]i-proteinem-A byly koncentrace tyrosin fosforylovaných proteinů detegovány fosfor zobrazovací analýzou a proteinové pásy kvantifikovány, densitometrícky. IC50. hodnoty byly generovány z denzitometrických dat.

Zkouška transplantovaného tumoru

Některé ze sloučenin podle vynálezu (např. sloučeniny z příkladů 54 a 80) zvyšovaly dobu přežití u zvířat infikovaných transplantovanými tumory. Ve zkoušce bylý použity F1 hybridní, myši. Myš v den 0 dostala ascitickou kapalinu nebo ředění tumorových zlomů. Vzorek inokula se inkubuje ve thioglykolátovém mediu pro ověření kontaminace tumorovým materiálem. Po inokulaci všech testovaných zvířat tumory, se tato náhodně rozdělí pro test. Kontrolní zvířata dostávají vehikulum, zatímco ošetřená zvířata dostávají sloučeninu podle vynálezu rozpuštěnou ve vehikulu, obecně infuzí do ocasního upevnění. Všechna zvířata se sledují denně’na akutní toxicitu a jiné klinické znaky. Přežití se kontroluje denně v kontrolní i ošetřené skupině. Zkouška se obecně provádí 60 dnů a pak se přežívající zvířata usmrtí.

129

Následující tabulky I a II představují biologická data reprezentativních sloučenin podle vynálezu po analýze předchozích zkoušek.

Tabulka I

Inhibice protein tyrosin kinas (IC50 pM nebo % inhibice při 50 pM)

Příklad	PDGFr-TK	FGFr-TK	C-src TK	EGF-FL
7	42%	28%
8	48.0	48.0
9	35%	34%
10	21.2	3.0	0.225
: 12	4.87	1.32	0.262	5.6
13	2.56	6.20	0.29	88%
14	1.41	7.65	3.92	65%
15	5.18	5.79	4.22
16	5.45	6.49	3.1
17	16.5	56.7
19	16%	20%
20	27%	21.9
21	8.85	1.97	0.963	93%
22	13%	17%
23	16%	34%
. 24	13%	16%
' 26	11.3	19.8
28	0%	0%
29	32%	17.2
30	0.98	0.54	0.155	77%
/31	1.2	0.46	100%	100%
32	0.875	0.737	33%	100%
33	1.84	0.426	0.89	95%
34	2.73	1.2	0.037	2.9
35	3.57	1.91	0.34	1.2
36	7.53	1.45	0.56
37	33%	29%	33%	42%
38	1.09	0.23	0.003	8.7

131

Tabulka I

Inhibi ce (IC50 μΜ	protein tyrosin kinas nebo % inhibice při 50	μΜ)
Příklad	PDGFr-TK	FGFr-TK	c-src TK	EGF-FL
39	19%	5.5	26%	24%
40	3.22	1.45
41	16%	0%	12%	52%
42	4.49	0.8	0.588	82%
43	5.35	1.35	0.325	67%
44	2.09	0.88	1.57	64%
Λ 45	.5.68	4.04	2.39	85%
46	17.6	18.1
47	5.98	1.26	36%	70%
48	17.9	19.6	2.54	64%
49	4.65	4.01	0.813	61%
50	7.31	4.17	3.24	59%
51	7.16	8.03	1.57	55%
52	5.36	3.61	1.05	46%
53	20%	45%	15%	0.85
54	0.231,	0.84	0.024	0.078
55	1.8	2.20	0.059	0.308
56	1.68	3.01	0.070
57	0.44	0.646	0.050	0.089
58	0.071	0.159'	’ 0.023-	0.119
59	0.853	0.201	0.12	0.21
60	9.38	6.52	1.64
61	26.5	8.6	64%
62	0.736	0.453	0.365	1.0
63	1.01 .	1.05	0.033	0.14
64	0.546	0.403	0.020	0.065
67	31%	27%
68	29%	12.5

132

Tabulka I

Inhibice protein tyrosin kinas (ICgo μΜ nebo % inhibice při 50 μΜ)

	Příklad	PDGFr-TK.	FGFr-TK	C-src TK	EGF-FL
	69	0.593	0.214	0.079	0.12
-1'	70	0.475	0.109	0.070
	71	1.14	3.46	6.0	0.54
	72,	0.259	0.365	0.052	0.033
	73	1.3	0.45	0.037	0.16
	74	0.76	0.277	0.079	0.13
	. ...: 75	. 0.353 ..	. 0.141	0%	.0.021
	76	2.38	0.466	33%	0.3
	77	lili	0.124	0.019	0.094
	78	1.69	0.143	46%	0.097
	79	0.102	0.172	0.044	.0.11
	80	0.105	0.045	0.006	0.035
	81	0.743	0.279	94%	4.5
	82	0.14	0.122	0.004
	83	1.18	0.333	0.019	0.059
	84	0.39	0.25	0.023	0.63
	85	0.37	0.56	0.013	1.32
*·	86	0.07	0.061	0.009	0.13
	87	0.35	0.17	0.020	0.14
	88	38.0	69.0	0.095
	- 89	.1.48	1.49	0.014
ó·	90	0.14	0.11	0.006	0.15
	93	0.076	0.087	0.009	0.25
	102	0.355	28%
	103	0.15	1.06
	104	0.373	58.0
	106	1.23	0.415
	107	43%	9.24	52%

133

Tabulka I

Inhibice protein tyrosin kinas (IC50 pM nebo % inhibice při 50 μΜ)

Příklad	PDGFr-TK .	FGFr-TK	C-src TK	EGF-FL
108	5.05	1.19	0.158	87%
109	9.29	3.37	0.240	0.062
110	25%	20.3	17.19	64%
111	3.15	Ί c	0.0 Λ-Ί	1 '4
112	11.2	9.1	1.16	19%
113	1.76	0.97	87%	6.7
114	5.17	3.31	1.09	3.2
.115 c	0.17	0.097
!116	0.152 .	1.96	1.38	0.18
117	38.0	0.8
118	12%	29%	0%
120	1.83	2%	29%
121	44%	29.0
122	33.0	20.0
123	24%	26%
124	38%	15%	11%

134

Tabulka I

Buněčné zkoušky (IC50 = μΜ)

Příklad inhibice PDGF-stimulované receptor autofosforylace v buňkách hladkých svalů krysí aorty

9,4 0,016 0,06 0,013

0,026

Sloučeniny podle vynálezu byly také hodnoceny ve zkouškách, používajících buňky z různých adenokarcinomů lidského kolonu. Tři takové lidské buněčné linie byly identifikovány jako HCT-8, SW-620 a HT-29. V typické zkoušce jsou buňky suspendovány v 0,3% měkkém aagaru, obsahujícím sloučeninu podle vynálezu v různých koncentračních hladinách a jsou umístěnyna plotnu do Šestijamkových ploten, kde každá plotna obsahuje 1% agarový čep. Buněčné plotny se inkubují při 37 °C ve zvlhčeném oxidu uhličitém (5%)v inkubátoru obecně 2 týdny. Na konci inkubační periody jsou kolonie buněk detegovány vybarvením jamek s 1 mg/ml p-jodnitrotetrazoliové violeti. Buňky jsou spočteny na optickém čítači kolonií. Koncentrace testované sloučeniny vyžadovaná pro inhibici tvorby buněčných kolonií v koncentraci 50 % vzhledem ke kontrolním plotnám, neobsahujícím žádnou testovanou sloučeninu se zaznamenává jako IC50. IC50 pro některé sloučeniny podle vynálezu proti buňkám adenokarcinomu lidského kolonu jsou

uvedeny v tabulce III·

Tabulka III

Inhibice adenokarcinomu lidského kolonu IC50 (μΜ)
Sloučenina z příkladu č.	HCT-8	SW-620	HT-29
-38	3.15
54	0.52	0.14	0.49
55	0.11	0.12	0.43
56		1.1
57	0.25	0.52	0.74
58	0.17	0.13	0.38
63	1.0
69			1.11
70			3.5

Jak je uvedeno výše, jsou sloučeniny vzorce I vhodné pro léčení rakoviny a jiných _Proliferativnich chorob jako je lupenka, restenosa a atherosklerosa.

Sloučeniny podle vynálezu jsou zvlášť restenosy po balónkové angioplastii okludovaných arterií. Restenosa se objevuje u asi 40 % jedinců, kteří byli podrobeni angioplastii kalcifi kovaných arterií a je hlavním problémem spojeným s touto formou léčbyy pacientů postižených takovým srdečním stavem. Sloučeniny podle vynálezu demonstrují dobrou aktivitu, jsou-li hodnoceny ve standardních testech jak jsou popsány dále.

Balónková angioplastie krysích arterií carotida

Samci krys Sprague-Dawley (350 až 450 g) byli rozděleni na 2 ošetřované skupiny: 1 skupina krys (n = 10) je ošetřena léčivem (100 mg/kg PO, BID) a druhá skupina dostala vehikulum (2 ml/kg PO, Bid (n=10)). Všechna zvířata byla předem ošetřena 2 ny před chirurgickým zákrokem a v dostávala denně po zákroku léčivo až do usmrcení.

Balónková poškození v kraších arteriích carotida byla provedena podle následujícího protokolu. Krysy byly anestetizovány Telazolem (0,1 mllOO g IM) a arteria carotis odkryta řezem na krku. Artria carotis byla izolována bifurkací vnitřních a vnějších arterií carotis. 2F embo1ektomický katetr byl vsunut do vnější arteria carotis a stlačoval běžnou carotidu na hladinu aortického oblouku. Balónek se napustí a katetr se zasune zpět do bodu vstupu a pak vypustí. Tento postup se dvakrát opakuje. Embolektomický katetr se pak odstraní a vnější artera carotis se liguje za ponechání netknutého toku vnitřní arteria carotis. Chirurgické řezy byly uzavřeny a zvíře bylo ponecháno probrat z anesteze před tím, než bylo navráceno do své klícky.

J /

V různých časových bodech po zákroku byla zvířata usmrcena inhlacecí CO a arteria carotis byla perfuzně fixována a zpracována pro histologické hodnocení. Morfologicke stanovení velikostí lézí bylo provedeno měřením plochy arteria carotis intima vyjádřené jako poměr media u jednotlivých zvířat. AŽ 16 řezů bylo připrveno z každého zvířete pro získání jednotné eprezentace velikosti lézí po délce arteria carotis. Plochy průřezu hrevních cév byly kvantifikovány za použití programu zobrazovací áňaýzy od Priceton Gamma Tech (Princeton. New Jersey).

Sloučeniny pdle předloženého vynálezu mohou být formulovány a podávány v mnoha různých orálních a parenterálních dávkových formách, zahrnujících transdermální á rektální podání. Odborníkům v oboru bude zřejmé, že následující dávkové formy mohou obsahovat jako účinou složku bud sloučeninu vzorce I nebo odpovídající farmaceuticky přijatelnou sůl nebo solvát sloučeniny vzorce I.

Dalším provedením vynálezu je farmaceutická formulace, obsahující sloučeninu vzorce I spolu s jejím farmaceuticky přijatelným nosičem, ředidlem nebo přísadou. Pro přípravu farmaceutických kompozic se sloučeninami podle předloženeého vynálezů mohou být farmaceuticky přijatelné nosiče bud pevné nebo kapalné. Pevná forma přípravků zahrnuje prášky, tablety, pilule, kapsle, sáčky, čípky a dispergovatelné granule. Pevným nosičem může být jedna nebo více složek, které mohou také působit jako ředidla, ochucovací činidla, pojivá, chránící látky, tabletová dezintegrační činidla nebo zapouzdřovací materiál.

138

V prášcích je nosič jemně rozdělená pevná látka jako talek nebo škrob, která je ve směsi s jemně rozdělenou účinnou s1ožkou.

V tabletách je účinná složka smísena s nosičem, ajícím nezbytné vazebné vlastnosti ve vhodných poměrech a zhutněna do požadovaného tvaru a velikosti.

Formulace podle předloženého vynálezu výhodně obsahují od oč; ς ύ Ηλ aci 7Π 1 ne.hn vícr účinné sloučeniny. Vhodné nosiče zahrnují uhličitan horečnatý, stearát horečnatý, talek, cukr, laktozu, pektin, dextrin, škrob, želatinu, tragant, methylc.elulozu, sodnou karboxýmethylcelulozu, nízko tající vosk, kakaové máslo a podobné. Preferovaná forma pro orální použití jsou kapsle, které obsahují formulaci účinné sloučeniny se zapouzdřovacím materiálem jako je nosič, poskytující kapsli, ve které je účinná složka s nebo bez jiných nosičů, obklopena nosičem, který je tak ve spojení s ní. Podobně jsou zde zahrnuty sáčky a lozengy. Tablety, prášky, kapsle, pilulky, sáčky a lozengy mohou být použity jako pevné dávkové formy vhodné pro orální podání.

Pro přípravu čípků se nízko tající vosk,jako je směs glyceridů mastných kyselin nebo kakaového másla, nejprve roztaví a účinná složka se homogenně disperguje v tavenině za míchání. Roztavená homogenní směs se pak nalije do běžně tvarovaných forem, ochladí se a tím ztuhne.

Kapalné formy přípravků zahrnují roztoky, suspenze a emulze, například vodné nebo vodné-propy1englykolové roztoky. Pro parenterální injekci mohou být kapalné přípravky

. formulovány do roztoku ve vodném polyethylenglykolovém roztoku, isotonickém salinickém roztoku, 5% vodné glukóze a podobně.

Vodné roztoky vhodné pro orální podání mohou bbýt připraveny rozpuštěním účinné složky ve vodě a přídavkem vhodných barviv, příchutí, stabilizačních'a zahušťovacích činidel jak je to žádoucí.

Vodné suspenze vhodné pro orální použití mohou být vyrobeny dispergováním jemně rozďětené účinné složky ve vodě s viskozním materiálem jako jsou přírodní nebo syntetické gumy, pryskyřice, methylceluloza, sodná karboxymethylcelulóza a jiná , dobře známá suspendační činidla.

Zahrnuty jsou zde rovněž pevné formy přípravku, které jsou zamýšleny pro převedení, krátce před použitím, na kapalné formy přípravků pro orální podání. Takové kapaliny zahrnují roztoky, suspenze a emulze. Tyto přípravky mohou obsahovat, navíc k účinné složce, barviva, příchutě, stabilizátory, pufry, umělá a přírodní sladidla, disperganty, zahušťovadla, solubi1 i začni činidla a podobně. Vosky, polymery, mikročástice a podobně mohou být použity pro přípravu dávkových forem s udržovaným uvolňováním. Také mohou být použity osmotické pumpy pro doručování účinné sloučeniny jednotně po prodlouženou ; dobu.

j Farmaceutické přípravky podle vynálezu jsou výhodně v jednotkové dávkové formě. V takové formě je přípravek podrozdělen do jednotkových dávek, obsahujících vhodná j množství účinné složky. Jednotková dávková forma může být

balený přípravek, kde balení obsahuje oddělená množství přípravku jako jsou balené tablety, kapsle a prášky v lahvičkách nebo v ampulích. Také mohou být jednotkovou dávkovou formou kapsle, tableta, sáček nebo lozeng samotný, nebo jich může být odpovídající množství v balené formě.

Terapeuticky účinná dávka sloučeniny vzorce I bude obecně od asi 1 mg do asi 100 mg/kg tělesné hmotnosti na den. Typické dávky pro dospělé budou asi 50až asi 800 mg na den. Množství účinné složky v jednotkovém dávkovém přípravku se může měnit nebo být upraveno od asi 0,1 mg do asi 500 mg, výhodně asi 0,5 mg až asi 100 mg podle konkrétního použití a potence účinné složky. Kompozice může, je-li to žádoucí, také obsahovat jiná kompatibilní terapeutická činidla. Subjektu v případě potřeby ošetření sloučeninou vzorce I bude podávána dávka asi 1 až asi 500 mg na den, bud jako jednotlivá nebo násobná dávka během 24 hodinové periody.

Příklad 125

Farmaceutická formulace ve formě tvrdých želatinových kapslí pro orální podání se připraví za použití následujících složek:

množství ímg/kapsle]

účinná sloučenina	250
škrobový prášek	200
stearát horečnatý	10

celkem 460 mg

..«	Výše uvedené složky se smlsl a naplní se do tvrdých želatinových kapslí v množstvích 460 mg. Typickou . , zn fhvi-1-naftyl)-7-imino-8-isopropyl-7.8 složkou je ( o_viamin Kompozice se podává 2 dihydro-pyrido[2,3-d]pyrimidm 2 ylami . , až 4krát denně pro léčení postchirurgicke res
• l	Příklad 126
1	Formulace pro orální suspenzi množství o 1 U i
ř	2-(cyklopropylamino)-6-(2-brom- 5θθ rag 4-methoxy-5-ethyl.thiofenyl)-8-n-hexyl-
ύ	pyri do[2,3-d]pyrimidin-7(8H)-on roztok sorbitolu (70% N-F.) x , 150 mg ' benzoát sodný , 10 mg sacharin
βι.	třešňová příchuť 5θ mg destilovaná voda q.s. do 100 ml
Λ

	Roztok sorbitolu se přidá ke 40 ml destilované vody a v tomto se suspenduje pyridopyrimidin. Přidá se a rozpustí sacharin, benzoát sodný a příchuť. Objem se uupraví na 100 ml destilovanou vodou. Každý mililitr sirupu obsahuje 5 mg účinné
«ί	složky.

Příklad 127 Tablety, obsahující každá 60 mg účinné složky.

účinná složka	45 mg
škrob	35 mg
mkrokrystalická celulóza	4 mg
polyvinylpyrrolidon (jako 10% roztok ve vodě) sodný karboxymethylškrob	4,5 0,5	mg mg
stearát horečnatý talek	1,0	mg
celkem	150 mg

účinné složky, škrob a celulóza se protlačí sítem č. 45 mesh U.S. a pečlivě se promísí. Roztok polyvinylpyrrolidonu se smísí se vzniklými prášky a pak se protlačí sítem č. 14 mesh U.S. Granule se suší při 50 °C až 60 °C a protlačí se sítem č. 18 mesh U.S. Potom se ke granulím přidá sodný karboxymethylškrob, stearát horečnatý a talek, předem protlačené sítem č. 60 mesh U.S.. Granule se, po smísení slisují na tabletovacím zařízení na tablety o hmotnosti 150 mg každá.

Typickou účinnou složkou použitou ve výše uvedené přípravě je sloučenina z příkladu 12.

Příklad 128

Parenterální kompozice vhodná pro injekční podání se připraví rozpuštěním 100 mg 2-amino-6-(2,6-dichlorfenyl)7-thioxo-pyrido[2,3-d]pyrimidinu ve 250 ml 0,9% vodného roztoku chloridu sodného a úpravou pH roztoku na asi 7,0. Tato formulace je vhodná pro léčbu rakoviny prsu.

Příklad 129

Příprava čípků

Směs 500 mg 2-methylsulfanyl-6-(2,6-dichlorfenyl)pyrido[2,3-d]pyrimidin-7(8H)-onu a 1500 mg theobromového oleje se homognně smísí při 60 °C. Směs se ochladí na 24 °C ve zúžených formách, každý čípek budě mít hmotnost asi 2 g a může být podáván 1 až 2krát denně pro léčbu bakteriálních infekcí.

Příklad 130

Topický přípravek množství (mg)

2-ace tami do—6—(2—naftyl)—8-ethyl-20 pyrido[2,3-d]pyri midin-7(8H)-on propylenglykol bílá vazelína cetearylalkohol glycerylstearát100

PEG 100 stearát100

Ceteth-20 _ςη o u monobázický fosforečnan sodný gg celkem _1ΛΛΛ

Příklad 131

Přípravek s pomalým uvolňováním pětset miligramů 6-(2,6-dichlorfenyl)-2-[4-(2-diethyl^‘’^“^-fenylaminoW-methoxy7-on-hydrochloridu se umísti do osmotieké atletové podává se orálně pro léčbu a prevenci restenosy.

Claims (5)

1. pumpy a

   kde

   X je NH, N-acyl, O nebo S;

   R1 je NR3R4, S(0)o.i nebo 2-R3 nebo OR3;

   Rž, R3 a R₄ jsou nezávisle vodík, (CH₂)_nPh, kde Ph je fenyl nebo substituovaný fenyl a n je O, 1, 2 nebo 3; heteroaromatické skupiny, cykloalkyl, Ci-C₆alkyl, C₂-C₆alkenyl a C2-C6alkinyl, kde alkyl, alkenyl a alkinylskupiny mohou být substituovány substituentem ze skupiny NRsRt, fenyl, substituovaný fenyl, thioalkyl, alkyloxy, hydroxy, karboxy, halogen, cykloalkyl a kde R5 a Ré jsou nezávisle vodík, C_t-C₆alkyl, C₂-C₆alkenyl, C₂-C_&alkinyl, (CH₂)nPh, kde Ph je fenyl nebo substituovaný fenyl a n je 0, 1, 2 nebo 3; cykloalkyl, heteroaromatický zbytek, a R₅ a R₆ mohou spolu s dusíkem, ke kterému jsou připojeny tvořit kruh, mající 3 až ⁷ atomů uhlíku a popřípadě obsahující 1, 2 nebo 3 heteroatomy -vybrané^- z -dus’fku· sůbšTTťuováného’ dusiku,’ ky s”í í ku~ a”š’í ry;

   R₄ muže dále být -C(=0)R₃, -C(=0)0R₃, -S0zR₃, -SO2NR5R6, -C(=O)NR₅R6, -C(=S)NR₅R6, -C(=NH)R_3j -C(=NH)NR₅R6 a R₃ a R₄ mohou společně s dusíkem, ke kterému jsou připojeny tvořit kruh, mající 3 až 7 atomu uhlíku a popřípadě obsahující 1,2 nebo 3 heteroatomy vybrané z dusíku, kyslíku a síry;

   Ar je fenyl, substituovaný fenyl nebo heteroaromatický zbytek;

   a její farmaceuticky přijatelné soli.

   —------2. Sloučen-ina podle -nároku- 1 obecného-vzorce——-------kde R7 a Re jsou nezávisle Ci-Cs alkyl a halogen a Ri , R2 a X mají výše definovaný význam.

   3. Sloučenina pode nároku 2, kde Rz je Ci-Cs alkyl nebo substituovaný Ci-Cě alkyl.

   4. Sloučenina podle nároku 3, kde Ri je NR₃R₄.

   5. Sloučenina podle nároku 4, kde R₃ je vodík.

   6. Sloučenina podle nároku 5, kde R₄ je vodík.

   7. Sloučenina podle nároku 6, kde X je NH.

   8. Sloučenina podlee nároku 7, kterou je

   6-(2,6-dimethyl-fenyl)-7-imino-8-methyl-7,8-dihydropyrido[2,3-d]pyrimidin-2-ylamin;

   6-(2-methy1-f eny 1)-7-imino-8-methyl-7,8-dihydropyrido[2,3-d]pyrimid in-2-ylamin a

   6-f enyl-7-imino-8-methyl-7,8-dihydropyrido[2,3-d]pyrimidin-2-ylamin.

   '9 . Sloučenina podle nároku 2, obecného vzorce

   kde Rz je Ci-C& alkyl, R3 je vodík nebo C1-C6 alkyl, R4 je Ci~Ce alkyl nebo substituovaný Ci-Ce alkyl a R7 a Rs jsou C1-C6 alkyl nebo halogen.

   10. Sloučenina podle nároku 9, kterou je

   6-(2,6-di chlorf eny1)-8-methy1-2-[3-(4-methylpiperaz in- 1-y 1)propylamino]-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on;

   6-(2,6-dichlorfenyl)-8-methyl-2-methylamino-8Hpyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on;

   6-(2,6-dichlorf enyl)-2-dimethylamino-8-methy1-8Hpyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on;

   6-(2,6-dichlorfenyl)-2-ethylam ino-8-methyl-8H- \ pyrido[2 ,3-d]pyrimidin-7-on;

   6-(2,6-dichlorfenyl)-2-(2-hydroxyethylamino)-8-methylpyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on;

   ,6-di chlorfeny 1)-2-isopropylamino-8-methyl-8Hpyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on;
2. 2-buty1amino-6-(2,6-di chlor fenyl)-8-methyl-8Hpyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on;

   2“benzylamino-6-(2,6-dichlorfenyl)-8-methyl-8Hpyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on;

   6-(2,6-dichlorfenyl)-8-methyl-2-(3-morfolin-4-ylPropylamino)-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on;

   6~(2,6-dichlorfeny1)-2-(2-(3,4-dimethoxyfenyl)-ethylamino]8-methyl-8H-pyrido[2,3-d]_Pyrimidin-7-on;

   6-(2,6-dichlorfenyl)-8-methyl-2-[(pyridin-2-ylmethyl)amino]-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on;

   6-(2,6-dichlorfenyl)-8-methyl-2-[(pyridin-3-ylmethyl)-amino]8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on;

   6-(2,6-dichlorfenyl)-8-methyl-2-(2-pyridin-2-yl-ethylamino)8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on;

   6-(2,6-dichlorfenyl)-2-{4-[4-(2-methoxyfenyl)-_Pi_Perazin-l-_yl]propylamino}-8-methyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on;

   ,6-dichlorfen_yl)-8-meth_yl-2-[4-(4-mth_yl_Piperazin-l-_yl)butylamino]-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on;

   terč.butylester kyseliny 6-[6-(2,6-dichlorfenyl)-8-methyl7-OXO-7,8-dihydropyrido[2,3-d]pyrimidin-2-ylamino]-hexanové;

   6-(6-(2,6-dichlorfenyl)-8-methyl-7-oxo-7,8-dihydro- pyrido[2,3-d]pyrimidin-2-ylamino]hexanová kyselina;

   6-(2,6-dichlorfenyl)-8-ethyl-2-[3-(4-methyl-_Pi_Perazin-l-yl)Propylamino]-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on;

   6-(2,6-dichlorfenyl)-8-methyl-2-[5-(4-methylpiperazin-l-yl)pentylamino]-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on;

   ethylester kyseliny

   4~{4-[6- (2,6-dichlorfenyl)-8-methyl-7-oxo-7,8-dihydropyrido[2,3-d]pyrimidin-2-ylamino]-feny1}-máselné a kyselina 4-{4-[6-(2,6-dichlorfeny1)-8-methyl-7-oxo-7,8dihydro-pyrido [2,3-d]pyrimidin-2-ylamino]-f enyl}-máselná.

   11. Sloučenina podle nároku 6, kde X je 0.

   12. Sloučenina podle nároku 11, kterou je

   2-amino-6-(2,6-dichlorfenyl)-8-methyl-pyrido[2,3-d]pyrimidin7(8H)-on;

   2-amino-6-fenyl-8-methyl-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7(8H)-ón;

   2-amino-6-(2,6-dichlorfenyl)-8-ethy1-pyrido[2,3-d]pyrimidi n7(8H)-on;

   2-amino-6-(2,6-di chi orf enyl)-8-propyl-8Hpyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on;

   2-amino-8-butyl-6-(2,6-dichlorfenyl)-8Hpyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on;

   2-amino~6-(2,6-dichlorfenyl)-8-isobutyl-8Hpyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on;

   2-amino-6-(2,6-dichlorfenyl)-8-(3-dimethylaminopropl)-8Hpyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on;

   [2-amino~6-(2,6-dichlorf eny1)-7-oxo-7Hpyrido[2,3-d]pyrimidin-8-yl]-octová kyselina, methylester;

   [2-amino-6-(2,6-dichlorfeny1)-7-oxo-7H-pyrido[2,3-d]pyrimidin8-yl]octová kysel na,terč.butylester;

   [2-amino-6-(2,6-dichlorfenyl)-7-oxo-7H-pyrido[2,3-d]pyri mid i n8-yl]-octová kyselina;

   2-amino-8-benzyl-6-(2,6-dichlorfenyl)-8Hpyrido[2,3—djpyrimidin-7-on;

   2-amino-8-(3-brombenzy1)-6-(2,6-di chlorfenyl)-8Hpyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on;

   4-[2-amino-6-(2,6-dichlorfenyÍ)-7-oxo-7HPyr ido[2,3-d]pyr imidi n-8-yIme thy 1]-benzoová kyselina, methyl ester;

   2-amino-8-(2,6-dichlorbenzy1)-6-(2,6-dichlorfenyl)-8H pyrido[2,3-d]pyrimidÍn-7-on;

   2-amino-6-(2,6-dichlorfenyl)-8-(4-methoxybenzyl)-8Hpyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on;

   í² ’ l .Í^S-pyr.idin-4-y. 1 me_thy_l-8H~... < .

   pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on a

   2-amino-6-(2,6-di chlorfenyl)-8-(3-fenylpropyl)-8Hpyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on.

   13. Sloučenina podle nároku 11, kterou je 2-amino-6-(2,6-methy1f enyl)-8-methy1-pyrido[2,3-d]pyrimid in7(8H)-on.

   14. Sloučenina podle nároku 11, kterou je 2-amino-6-(2^me thy 1 f eny 1)-8-rnethy 1-pyr ido [2,3-d] pyr imidin-7 (8H)-on .

   15. Sloučenina podle nároku 5, kde R₄ je Ct-Ce alkyl substituovaný NRsR^.

   «

   16. Sloučenina podle nároku 15, kde R₅ a R₆ jsou oba C1-C& alkyl.

   17. Sloučenina podle nároku 16, kde X je NH.

   18. Sloučenina podle nároku 17, kterou je

   [6-(2,6-dichlorfenyl)-7-imino-8-methyl-7,8-dihydropyrido[2,3-d]pyrimidin-2-yl]-(3-diethyl aminopropyl)-amin

   19. Sloučenina podle nároku 16, kde X je O.

   20. Sloučenina podle nároku 19, kterou je [6-(2,6-dichlorfenyl)-8-methyl-7-oxo-7,8-dihydropyrido[2,3-d]pyrimidin-2-yl]-(3-diethylaminopropyl)-amin.

   21. Sloučenina podle nároku 19, kterou je

   N“ 16-(2.6-dichlnrfpn V 1 4 — fi—ma Hiv O_ J .· 1 .

   --------‘7*7 “ v v l.J X , ΜΛυ Ϊ,υ — Ulliyuiu — pyrido[2,3-d]pyrimidin-2-yl]acetamid.

   22. Sloučenina podle nároku .6, kde X je S.,

   23. Sloučenina podle nároku 22, kterou je 2-amino-6- (2,6-dichlorfeny1)-8-methy1-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7(8H)-thion.

   24. Sloučenina podle nároku 4, kde X je O.

   25. Sloučenina podle nároku 24, kterou je

   N-[[6-(2,6-dichlorfeny1)-7-oxo-8-methy1-7,8-dihydropyrido[2,3-d]pyrimidin-2-yl]-kyseina jantarová poloamid.

   26. Sloučenina podle nároku 24, kterou je l-[6-(2,6-dichlorfenyl)-7-oxo-8-methyl-7,8-dihydropyrido[2,3-d]pyrimidin-2-yl]-pyrrolidin-2,5-dion.

   27. Sloučenina podle nároku 3, kde Ri je OR3.

   28. Sloučenina podle nároku 27, kde X je NH.

   29. Sloučenina podle nároku 28, kterou je

   6-(2,6-dichlorfenyl)-2-hydroxy-8-methyl-8H~pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-ylidenamin.

   30. Sloučenina podle nároku 28, kterou je 6-(2,6-dichlorfenyl)2-(2-ethoxy-ethoxy)-8-methyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin7-ylidenamin.

   31. Sloučenina podle nároků 27, kde X je O.
3. 3-2- Sloučenina· psdl-e ná-ro-k-u 31,· kterou je.
4. 6-(2,6-dichlorfenyl)-2-hydroxy-8-methyl-8Hpyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on.

   33. Sloučenina podle nároku 31, kterou je

   6-(2,6-dichlorfeny 1)2-[2-(diethylamino)ethoxy]-8-methyl-8H~pyrido[2,3-d]pyrimidin7-on.

   34. Sloučenina podle nároku 3, kdee Ri je S(O)o. i nebo 2-R3·

   35. Sloučenina podle nároku 34, kde X je NH nebo 0.

   36. Sloučenina podle nároku 35, kterou je

   6-(2,6-dichlorfenyl)-8-methyl-2-methylsulfany1-8Hpyrido[2,3-d]pyrimidin-7-ylidenamin;

   6-(2,6-dichlorfenyl)-8-ethy1-2-methylsulfany1-8Hpyrido[2,3-d]pyrimidin-7-ylidenamin;

   6-(2,6-dichlorfenyl)-2-methansulfinyl-8-methyl-8Hpyri do[2,3-d]pyrimidin-7-on;

   6-(2,6-dichlorfenyl)-8-methy1-2-methylsulfany1-8H pyrido[2,3-d]pyrimidin-7 on, 6-(2,6-dichlorfenyl)-2-methansulfonyl-8-methyl-8Hpyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on;

   6-(2,6-dichlorfenyl)-8-methyl-2-methylsulfanyl-8Hpyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on a

   6-(2,6-dichlorfenyl)-8-ethyl-2-methansulfoňyl-8Hpyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on.

   37. Sloučenina podle nároku 34, kde X je N-acyl.

   38. Sloučenina podle nároku 37, kterou je

   N-[6-(2,6-dichlorfenyl)-8-methy1-2-methylsulfany1-8Hpyrido [2,3-d] pyrimidin-7-yl i den] -acetamid 'a t

   N-[6-(2,6-dichlorfenyl)-8-ethy1-2-methylsulfanyl-8Hpyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yliden]-acetamid.

   39. Sloučenina podle nároku 3, kterou je

   N-[₆-(2,6-dichlorfenyl)-2-(4-diethylaminobutylamino)8-methyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yliden]-acetamid

   R •2 r» c he ' ,r š fr· c o.

   ¢,1 pA

   U' . n<j 't <r t *' *1 c m noc*t

   6 fy . r kde Rz/je'Ci-Ct alkyl nebo substituovány Ci-Cs alkyl, X je O nebo NH a Ar je fenyl, substituovaný fenyl, pyridyl nebo substituovaný pyridyl. * < -j u 1 » »/ ^J ’ ' ' *' ^j '

   41 Sloučeni a podl e’nároku”40 , ‘ kterou ^N j e ^J '*

   6-(2,6-dichlorfenyl)-8-methýl-2-fenýlamino-8H- * ' ft ' * * 1 ^{1 J} V ’ ® M ^; *' ‘ ·«; _h . Ϊ f I pyrido[2_t3-d]pyrimidih-7-on;

   2-(3-bromf enyl amino )-6-(2., 6-dichlorfenyl)-8-methy1-8H1' i pyrido[2,3-d}pyrimidin-7-on; *

   2-(4tchlorfenylamino)-6-(2ζ 6—ďičhlorfeňy 1)-8-methy1-8H2;-(benzo [1,3] dioxol-5-ylamino)~6-(2,6-dichlorf enyl)-8methyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidih-7-on;

   6fC2-,-6tdi'chrorfenyl)-8-methyl-2--(pyridin-4-ylami-no)-8H-- - · pyrido[2,3-d]pýrimidin-7-on;

   6-(2.,6-dichlorfenyl)-8-meťhyl-2-p-tolylamino-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on;

   6-(2,6-ďichlorfenyl)^2-(4-methoxyfeňylamino)-8-methyl-8Hpyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on;

   6-(2,6-dichlorfenyl)-8-ethyl-2-feňylámiho-' ' ’ . ί $ - - * ¹

   -8H-pyrido [2,3-d] pyrimidin-7-on;

   * , <.* ^ILr '^x ‘ '

   6r(2;6rdi chlorfeny 1)-2-(2-methoxyfenylamino)-8-methy1-8Hrpyridó [2^h, 3-d]pyrimidiň-7-oň; ^:

   6-(2,6f-dichlorf enyl)-2- (3-methókyf enylamino)-8-methy 1-8H-pýr ido [23-d] pyrimidiň-7-oň; '¹ '*

   6-(2,6-dichlorfenyl)-2-(4-methoxy-3-methylfénylamino)-8methy l^-8H-pyr ido [2,3-d] pyrimidih-7-on;

   6-(2,6-dichlorfenyl)-8-ethyl-2-(4-methoxyfénylamino)-8H₇pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on;

   67(2,6-dichlorfenyl)-8-ethyr-2²(4-hydróxyfenylamino)-8H-py.rido [2,3rd] pyrimidih-7-on; ^{v V}

   6-(2,6-dicblorfenyl)-2-(4-ethoxyfenylan>ino)-8-ethyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on; _R__ethvl6-(2,6-dichlorfenyl)-2-(3,4-dimethoxyfenylamino)-8

   -8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on; , or _Pthvl-2-(3»4,5-trimethoxyfenyl

   6-(2,6-dichlorfenyl)-8-etnyi z š» » a_mino)-8H-pyrido[2,3-d]pyrinúdin-7-on;

   ₆-(2 6-diohlorfenyl)-8-methyl-2-(pyridin-3 ylamno)

   -8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin 7 on, {4-[6-(2,6-dichlorfenyl)“8-methyl-7-oxo-7,8-dihydropyrido[2,3-d]pyrimidin-2-ylamino] fenyl} octová yse

   Z^Xurfenyn-O^^

   -8H-pyrido[2,3-dlpyrimidin-7 on;

   .4-[6-(2,6-dichlorfenyl)-8-metbyl“7-oxo-7,8-dihydropyr ido [2,3-dlpyr imdin-2-ylamino]-f enyl} octová '

   6-(2,6-dichlorfeny1)2-(3-hydroxyfenylamino)-8-methy

   -8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on;

   . 4-[6-(2 ; 6-di.chlorf enyl_)-8-methyl^-7-oxo-7,8-dihydro- _ _ p_yrido[2,3-d]pytwidin-2-ylaroino]-benzoová kyselina, S-^ó-C^ó-dichlorf eny! )^-8-ni^et^hyl-7-⁰x^{0 7}» pyrido[2,3-d]pyrimidin-2-ylamino)-benzoová kyselina,

   6-dichlorf enyl)-8-methyl-7-oxo-7,8-dihydro.j. o~v1aminol—benzoová kyselina, pyrido[2,3-d]pyrimidin-2~ylaminoj ! ₆-(2,6-dichlorfenyl)-8-ethy1-2-(pyridin-4-ylamino)-8H' ’ pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on;

   í (6-(2-brom-6-chlorfenyl)-8-ethyl-7-imino-7,8-dihydroI pyrido [2,3-d]pyrimidin-8-ly]-fenylamin;

   i 6-(2-brom-6-chlorfenyl)-8-ethy1-2-fenylamino-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on;

   (8-ethyl-7-imio-6-f enyl-7,8-dihydropyrido [2,3-d]pyrimidin9-yl)-2-fenylamin;

   8-ethy l-6-fenyl-2-f enylamino—8H-pyrido(2,3-d] pyritnidin-7-on; ¢6-(3,5-dimethylfenyl)-8-ethyl-7-imino-7,8-dihydro______λ i nvr í mí d i n—2—vl Ί ^—2^—f eny 1 amin a -------6-(3,5-dimethylfenyl)-8-ethyl-2-fenylamino-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on.

   42. Sloučenina podle nároku 1 obecného vzorce

   kde Rz je Ci-C₆ alkyl nebo substutuovaný Ci-C₆ alkyl, X je NH nebo 0 a Ra je fenyl nebo substituovaný fenyl.

   43. Sloučenina podle nároku 42, kterou je

   8-ethyl-2-f enylamino-6-thiof en-3-yl—8H-pyrido [2,3-d] pyrimidin-7-on;

   8-ethyl-7-imino-6-thiofen-2-yl-7,8-dihydropyrido[2,3-d]pyrimidin-2-yl)-fenylamin;

   8—e thy1 — 2—feny1ami no-6-thi ofen-2-yl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on;

   (8-ethyl-7-imino-6-pyridin-4-yl-7,8-dihydropyrido[2,3-d]pyrimidin-2-yl)-2-fenylamin,

   8-_ethyl-2-fenylamino-6-pyridin-4-yl-8H-pyrido [2,3-d]pyrimidin-7-on;

   (8-ethyl-7-imino-6-naftalen-2-yl-7,8-dihydro-pyrido[2,3-d]pyrimidin-2-yl)-fenylamin;

   8-ethyl-6-naftalen-2-yl-2-fenylamino-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin·
5. 7-on;

   (6-bifenyl-4-yl-8-ethyl-7-iminó-7,8-dihydr&pyrido[2,3-d]pyrimidin-2-yl)-fenylamin a

   6-bifenyl-4-yl-8-ethyl-2-fenylamino-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on.

   44. Sloučenina podle nároku 1, kde R3 je vodík a R* je cykloalkyl.

   45 Sloučenina podle nároku 44. kterou je 2-cyklohexylamino6-(2,6-dichlorfenyl)-8-methyl-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on.

   46. Farmaceutická formulace, obsahující sloučeninu podle enároku 1 spolu s jejím farmaceuticky přijatelným nosičem.

   47. Formulace podle nároku 46, používající sloučeninu, kde Ar je fenyl nebo substituovaný fenyl.

   48. Formulace podle nároku 47, používající sloučeninu, kde X je NH nebo N-acyl.

   49. Formulace podle nároku 47, používající sloučeninu, kde

   X j e O.

   50. Formulace podle nároku 47, používající sloučeninu, kde X je S.

   51. Způsob léčení chorob zprostředkovaných buněčnou proliferací, zahrnující podání účinného množství sloučeniny podle nároku 1 savci v případě potřeby léčby.

   52. Způsob léčení rakoviny, zahrnující podání proti rakovinově _------------dnnřeninv nndle nároku 1 savci v případě potřeby léčby.

   53. Způsob léčení atherosklerosy, zahrnující podání účinného množství sloučeniny podle nároku 1 savci v případe potřeby léčby.

   54. Způsob léčení lupénky, zahrnující podání účinného množství sloučeniny podle nároku 1 savci v případě potřeby léčby.

   55. Způsob léčení restenosy, zahrnující podání účinného množství sloučeniny podle nároku 1 savci v případě potřeby léčby.