CZ86696A3

CZ86696A3 - Novel oligosaccharide derivatives of 14-aminosteroidal compounds and novel diastereoselective process of aminosteroidal chemistry

Info

Publication number: CZ86696A3
Application number: CZ96866A
Authority: CZ
Inventors: Paul Michael Dybas; Roland Norman Johnson; Randy Stuart Muth; Song Liu; David Edward Portlock
Original assignee: Procter & Gamble
Priority date: 1993-09-24
Filing date: 1994-09-23
Publication date: 1996-10-16
Also published as: ES2146665T3; HUT74623A; WO1995008557A1; GR3034028T3; AU7841494A; NO961170D0; DK0721459T3; EP0863149A1; US5849889A; PL313620A1; CN1135758A; NO961170L; US5710259A; BR9407612A; HU9600734D0; CA2182530A1; EP0721459B1; ATE193538T1; JPH09502982A; AU692187B2

Description

Oblast techniky

Předkládaný vynález se týká nových o 1 igosacharidických derivátů 14-aminosteroťdních sloučenin. Dále se týká farmaceutických přípravků obsahujících tyto nové sloučeniny a rovněž postupu léčby městnavého srdečního selhání (CHF), který využívá předkládané sloučeniny. Tento vynález se také týká nového postupu zavedení aminoskupiny do polohy 14 steroidního skeletu.

Dosavadní stav techniky

CHF (městnavé srdeční selhání) je progresivní onemocnění, při němž se zvyšuje neschopnost srdce zajišťovat adekvátní minutový srdeční objem (cardiac output CO) a zásobovat periferní tkáně okysličenou krví. Od počátku srdeční nedostatečnosti, dochází ke kompenzování ztráty minutového objemu (CO) a kompenzační mechnismy mohou způsobit syndrom označovaný CHF (městnavé srdeční selhání). S postupem CHF nastávají strukturální a hemodynamická poškození. Makroskopicky se strukturální poškození manifestují jako ventri ku 1árηí hypertrofie myokardu, mikroskopicky jako intersticiální, per ivasku1ární a reparativní fibróza ventri kulární stěny, snížená hustota srdečních kapilár a úhyn srdečních buněk. Jakmile dojde k fibróze srdečních tkání, nastává oslabení srdeční činnosti, neboť jsou zbývající životaschopné srdeční buňky přetížené.

Z hemodynamického hlediska je při srdeční nedostatečnosti snížena schopnost vyvinout tlak během systoly (fáze srdečního cyklu během níž je ejektována krev z komor). Následkem toho je nutný větší konečný diastolický objem (během diastolické fáze srdečního cyklu dochází k plnění komor) k vykonání libovolné dané hladiny vnější práce. U srdeční nedostatečnosti je výsledkem snížené ejekce, způsobené nedostatečnou pracovní kapacitou a zatížením, vzrůst konečného diasto1 ického tlaku a plicního kapilárního tlaku. Často následuje překrvení plic a periferní edém. Pacient pociťuje s postupujícím CHF stále se zhoršující symptomy únavy a dušnost.

Účinná léčba CHF vyžaduje, pokud to lze, stanovení jeho eíiologie, protože CHF některých etiologií vyžadují své zvláštní způsoby léčby. CHF může mít různou etiologi, včetně srdečních chorob jako jsou choroby věnčitých tepen nebo myokarditida; onemocnění chlopní jako je prolaps mitrální chlopně nebo stenóza aorty; onemocnění perikardu; vrozená srdeční vada; plicní choroby, srdeční arytmie, hypertenze a diabetes. Pokud je například etiologií CHF myokarditida nebo arytmie, pak normální srdeční funkce pacienta může obnovit léčba antimikrobiálními respektive antiarytmickými látkami.

Pokud však pro etiologie neexistují vyhovující specifické léčebné postupy, zahájí se léčba podle jednoho nebo několika ze tří možných postupů: 1) zlepšení čerpací kapacity srdce podáním inotropní látky jako je digitalis, 2) zmenšení srdeční zátěže odpočinkem a/nebo podání captopril, a 3) ovlivňování vasodilatačních látek jako je retence sodných iontů a vody vhodnou nizko-sodikovou dietou nebo podáním diuretika jako je thiazid. Léčba CHF je individuální podle symptomů pacienta a jeho tolerance k určitým lékům. Někteří pacienti jsou například velmi citliví k toxicitě s mírnými symptomy, mohou být s které mají větší terapeutický index, soudí, že diuretika jsou prvořadými po léčbě diuretiky má následovat a digitalisu. Rovněž bylo pozorováno, digitalisu, zatímco jiní, výhodou léčeni diuretiky,

Navíc se v současné době léky při terapii CHF a že aplikace vasodilatátorů že léčba digitalisem je účinná u pacientů s těžkým CHF. Viz obecně Braunwald, Heart Oisease: A Textbook of Card iovascu lar Medicine, Vol. (3rd ed., 1988), Chung, E.K., Quick Reference to Card iovascu lar Disease, Chapter 27 (2nd ed., 1983) and Fowler, N.O., Cardiac Diagnosis and Treatment, Chapter 12, 2nd ed., 1976). Léčba digitalisem je vhodná pro případy zhoršujících se symptomů doprovázených hemodynamickými obtížemi těžkého CHF, avšak nízký terapeutický index digitalisu ve skutečnosti omezuje jeho terapeutickou použitelnost. Viz obecně Braunwald, Heart Disease: A Textbook of Cardiovascu lar Medicine, Vol. (3rd ed., 1988), Chung, E.K., Quick Reference to Cardiovascular Disease, Chapter 27 (2nd ed., 1983), Fowler, N.O., Cardiac D iagnos is and Treatment, Chapter 12, 2nd ed. 1976) and Goodman and Gilman, The Pharmacological Basis of Therapeutics, Chapter 34 (8th ed., 1990).

Problematika toxicity digitalisu podnítila vynálezce k vývoji bezpečnějších kardioaktivních sloučenin. Sloučeniny kol obsahující kardioaktivní steroidní v následujících patentech: Mezinárodní 87/04167, Chiodini a aminoglykosidové steroidní amino-cukerným zbytkem a Popis uvádí, že jsou vyd jádro byly popsány patentová přihláška WO 16.7 . 1987 pop i su.ie deriváty substituované v poloze 3 s acetalovou vazbou v poloze 14. tyto sloučeniny vhodné na léčbu stavů způsobených arterií. Guinovy inotropní látky, hypertenze. Francouzský patent 2 642 973, Guina, vyd. 17.8.1990 popisuje analog digitalisu, 2,3-dioxymethy1-6-methyl-3-l3-D-glukóza-strofantidin, který obsahuje steroidní jádro substituované v poloze 3 glukózovým zbytkem, v poloze 17 lakton a v poloze 14 hydroxylovou skupinu. Popis uvádí, že tato sloučenina je vhodná při prevenci patologických stavů vyvolaných srdeční nedostatečností, při níž je indikován digitalis a při prevenci patologických hypertenzí související s kalcifikací sloučeniny též působí jako pozitivní periferní vasodi 1atátory a antiarytmika. Mezinárodní patentová přihláška WO 87/04167, Chiodini a kol., vyd. 16.7.1987 popisuje aminoglykosidické deriváty steroidů, které mají v poloze 3 amino-cukr substituovaný alkylem, jako jsou např. zbytky 2-amino nebo 2-a 1 ky1amino-2-deoxy-hexopyranosy1,

3-amino nebo 3-alkylamino-3-deoxy-hexopyranosyl, 3-amino nebo

3-a 1 ky 1 amino-3,6-dideoxy-hexopyranosy1, 3-amino nebo 3—alkyl — amino-2,3,6-trideoxy-hexopyranosy1, 4-amino nebo 4-alkylamino-2,4,6-trideoxy-hexopyranosy1, a v poloze 17 cyklický amid (laktam). V poloze 14 je H. Popis uvádí, že tato

- 4 sloučenina je vhodná na léčbu hypertenze. Mezinárodní patentová přihláška WO 91/17176 Kenny a kol., vyd. 14.11.1991 popisuje steroidní glykosid, který má v poloze 3 cukerný zbytek, jako je např. pentóza, hexóza nebo jejich směs, a v poloze 17 laktonový kruh, poloha 14 je substituována OH, H nebo F, Cl, Br nebo NH2, tato látka působí na tlak; DD 296 502 A5 udělený 5.12.1991 popisuje steroidní amid určený na léčbu srdeční nedostatečnosti, jehož poloha 3 je substituována su1fony 1amino- skupinou a poloha 17 je substituována 5-ti nebo

6-ti členným laktónovým kruhem; poloha 14 je substituována OH. U.S. 5 144 017 LaBella, 1.9.1992 popisuje steroidní sloučeniny, jejichž poloha 3 je substituována glykosidovým radikálem jako je θ-D-g1 úkos id, α-L-ramnosid, tridigitoxosid a poloha 17 je substituována acetoxylovou nebo amino skupinou; v poloze 14 je OH, tyto látky jsou použitelné jako srdeční stimulanty; a U.S. 5 175 281 McCall, 29.12.1992 popisuje pyrimidiny1piperaziny1ové deriváty steroidú určené na léčbu spinálního traumatu, poranění hlavy a následného cerebrálního angiospazmu a určené na prevenci před poškozením doprovázejícím kardiopulmonární resuscitaci nebo srdeční infarkt, tyto deriváty mají v poloze 3 OH, CH3O, COOH nebo benzoxy, v poloze 14 H a v poloze 17 heterocyk1 ický amin. DD 256 134 A1 Wunderwald a kol., udělený 27.4.1988 popisuje postup přípravy kardioaktivních steroidú, v nichž je poloha 3 steroidní molekuly substituována morfolinoformyloxy zbytkem a poloha 17 steroidního jádra laktonovým kruhem; a poloha 14 je substituována OH, H nebo olefinem. Tyto sloučeniny zvyšují kontrakt i 1 i tu srdce. JP 4-290899 Ishikawa a kol., zveřejněná 15.10.1992, popisuje kardiotonické steroidní sloučeniny, v nichž poloha 3 steroidního jádra je substituována o 1 igosacharidem; přičemž tento o 1 igosacharid obsahuje tři glukopyranosylové jednotky, poloha 14 je substituována OH a poloha 17 laktonovým kruhem. Templeton a kol., J.Med.Chem. 42-45 (1993) popisuje syntézu derivátů 14-hydroxy-21-nor-50,140-pregnan a 50,140-pregnan C-3 α-L-ramnosidů a tris-0-D-digitoxosidů . Uvedené sloučeniny jsou účinnými kardiotoniky. Tyto sloučeniny obsahující skupinu C-170

COCHzOH, CH2OH, COOH, COOMe, CH2NH2 nebo CH2NO2, se váží k vazebnému místu digi ta 1 isového receptorů v srdečním svalu. Templeton a kol., Perkin.Trans., 2503-2517 (1992) popisuje syntézu 20a- a 200-acetamido-, amino-, nitroa hydroxy-30-glykosidu (α-L-ramnopyranosidu a tris-0-D-digitoxosidu) geninových derivátů odvozených od 14-hydroxy-21-nor-50,140-pregnanu s uhlíkem v poloze 20 der i vat izovaným oximem, hydrazonem a amidinohydrazonemTyto sloučeniny jsou účinnými kardiotoniky.

Dále úmrtnost pacientů s CHF snižují inhibitory angiotensin konvertujícího enzymu (ACEI). Viz Nicklas, J.M., Pitt,B. et al. (The SOLVD invest igators), Effect of Enalapríl on Survival in Patients with Reduced Left Ventr icu lar Ejection Fractions and Congestive Heart Failure, N.Eng1. J<Med.

325(5):293 (1991).

Nicméně čtyři miliony lidí trpí CHF. Úmrtost po pěti letech od diagnózy CHF je u mužů 60 % au žen 45 %. To je jasná známka potřeby lepší Parm ley, (f. W., Pa thophys i o logy Congestive Heart Failure, terapie zaměřené and Current J.Am. Co 1. Cardio 7.

na CHF. Viz Therapy of 13, 771-785 (1989); Francis, G.S. a kol., Congestive Heart Failure: Pathophysi lology and therapy, Cardiovascu lar Pharmaco logy,

3rd ed. (1990).

Bylo zjištěno, že 14-aminosteroidní sloučeniny lze použít při terapii CHF, protože zvyšují kontrakt i 1 i tu srdce. Tyto sloučeniny poskytují výhodný terapeutický účinek zvýšením kontrakti1ity srdce bez vedlejších účinků, jaké má digitalis. Tyto 14-aminosteroidy a postupy jejich příprav jsou popsány v následujících patentech, všechny zahrnuty v odkazech: U.S. patent 4 325 879, Jarreau a kol., vyd. 20.4.1982 (U.S. ’879) (ekvivalentní k francouzské patentové přihlášce 2 464 270); U.S. patent 4 552 868, Jarreau a kol., vyd. 12.11.1985 (U.S. ’868); U.S. patent 4 584 289, Jarreau a kol., vyd. 22.4.1986 (U.S. ’289) a U.S. patent 4 885 280, Jarreau a kol., vyd. 5.12.1989 (U.S. ’280). Tyto čtyři patenty popisují 14-ami nostero i dní sloučeniny s kardiotonickými účinky a postupy jejich příprav. Všechny dokumenty U.S. ’879; '868;

Mo leču le, Progesterone and Letters, 3717-3730 14B-amino funkce do ’289 a ’280 uvádějí použití azoimidu při tvorbě azidového derivátu v poloze 14, který je dále redukován na amin. Adeoti,S.B. et al., Introduct ion of a 140-Nitrated Function into the Steroid Ring to Prepare the Cardioactive

14-Ami no-50-Pregnan-30,200-Di o 1, from Deoxycholic Acid.“ 45(12) Tetrahedron (1989), popisuje dva postupy zavedení stero i dní molekuly, zpoč i va j íjsí v 1) cykíizací za pří tomnost i N3H, BF3Et2O nebo amoniaku nebo 2) reakci steroidního jádra s N3H, BF3Et20. Tyto postupy umožňují přípravu kardioaktivního 14|3-amino-5|3-pregnan-3|3,200-diolu. Naidoo,B.K., et al., “Cardioton ic steroids I: Importance of 140-hydroxy Group in Digitoxigenin, 63(9) Jnl Pharm. Sci. 1391-1394 (1974) popisuje pokus o přípravu 14(3-aminostero i dní sloučeniny s využitím jodoisokyanatanu. Výzkumníkům se však jodoisokyanatanovou chemií nepodařilo zavést amino skupinu do polohy 14 steroidního jádra. Použitelnost jodoisokyanatanové při syntéze steroidních sloučenin je obecně popsána et al.,“Gekoppelt Additionsreaktionen an Androstanen Einfluss des positiven chemie v práč i PonsoId, K. , 14, 15-ungesattigten

Halogens auf die Regi osel ekt i v itat, ” Journal f. prakt. Chemie,

Band 325, Heft 1, 1983, a 1., “Synthese und Peaktivitat heterocyc 1 ischen Vierringen prakt. Chemie, a Boh 1 ,M., et

Nyní bylo předkládaného

S.123-132; Ponsold, K., et von Estra-1,3, 5(10)-trienen mit in 14, 15-Stel lung“, Journal f. Band 328, Heft 5/6, 1986, S.673-681;

al., “Quant i tat i ve structure-act i v i ty re lat ionsh ips of estrogen ic steroids subst i tuted at 014,015“, Steroid Biochem. Vol. 26, No.5, pp.589-597 (1987).

objeveno, že 14-aminosteroidní sloučeniny vynálezu substituované v poloze 3 o 1 igosacharidickým zbytkem, jsou účinnějšími inotropy. Tyto oligosacharidické deriváty 14-aminostero idnich sloučenin mají vyšší resistenci vůči metabolickým změnám a proto poskytují déle trvající inotropní účinky než 14-aminosteroidní deriváty dosavadního stavu techniky. Rovněž bylo zjištěno, že amino skupinu lze zavést do polohy 14 steroidního jádra postupem jodoisokyanatanové chemie, který je bezpečnější a účinnější než postupy uváděné v dosavadním stavu techniky.

Podstata vynálezu

Předmětem předkládaného vynálezu jsou o 1 igosacharidické deriváty 14-aminosteroidních sloučenin a jejich farmaceuticky přijatelné soli nebo estery, obecného vzorce:

kde

a) Ri je (i) COORs, kde

Rs je vodík; nižší Ci-β alkyl; nižší Ci-β alkyl substituovaný amino skupinou; arylalkyl nebo heteroaryla1ky1 nebo cyklický uhlovodík; nebo (ii) CHReOH, kde

Re je vodík nebo nižší Ci-β alkyl; nebo (iii) COR’ ” , kde

R’” je vodík; nižší Ci-β alkyl; nižší Ci-β alkyl substituovaný amino skupinou; amino nebo dia1kylamino; a

b) R2 je -NR?Ra, kde

Rz a Re jsou stejné nebo odlišné a jsou vodík nebo nižší Ci-β alkyl; a

c) R3 je (i) oligosacharidický zbytek obecného vzorce:

kde R9 je vodík; methyl; hydroxy; karboxy; acetoxy; arylalkyloxy; heteroarylalkyloxy; nebo benzoxy; Rio je vodík; methyl; karboxy; acetoxy; arylalkyloxy; heteroarylalkyloxy; benzoxy; nebo hydroxy; Ri1 je kyslík; pokud je Ri i substituent terminálního monosacharidického zbytku je Ri 1 OH; methyl; acetoxy; heteroarylalkyloxy; arylalkyloxy; a R12 je vodík, methyl, methylhydroxymethy1; nebo acetoxymethy1; nebo (ii) o 1 igosacharidický zbytek obecného vzorce:

kde Ri4 a Ri5 jsou shodné nebo odlišné a jsou vodík; nižší Ci-β alkyl; arylalkyl; heteroary1 a 1kyl; heteroaryl nebo aryl; R17 je vodík, hydroxy; acetoxy nebo benzoxy; Ris a Ri9 jsou hydroxy; acetoxy nebo benzoxy;

nebo (iii) oligosacharidický zbytek obecného vzorce:

kde Ri 4 a Ris jsou shodné nebo odlišné a jsou vodík; nižší Ci-β alkyl; heteroary; ^: arylalkyl nebo aryl; Ri<a je kyslík; pokud je Ri4a substituent terminálního monosacharidického zbytku musí být Ri<a hydroxy; methyl; acetoxy; arylalkyloxy nebo heteroaryla1kyloxy; a

d) R< je (i) OH, nebo (i i) Η, nebo (iii) 0Ri3, kde R13 je monosacharidický zbytek; acetoxy; benzoxy; arylalkyl nebo heteroarylalkyl; a

e) Z je (i) -CH-, kde a a b jsou jednoduché vazby, nebo (ii) =C, kde buď a nebo b je dvojná vazba.

Předkládaný vynález se rovněž týká postupu diastereoselektivního zavedení amino skupiny do polohy 14 steroidního jádra adicí jodoisokyanatanu, přičemž tento postup zahrnuje následující kroky:

a) adici jodoisokyanatanu na dvojnou vazbu v poloze 14-15 steroidního jádra; a

b) dehalogenaci; a

c) převedení isokynatanu na amino skupinu v poloze 14 steroidního jádra.

•Λ

Definice a použité výrazy

Následující část shrnuje seznam definic používaných výrazů.

Aminosteroid je steroidní sloučenina nesoucí amino skupinu na stero i dním jádře.

Alkyl je nesubstituovaný nebo substituovaný přímý, cyklický nebo rozvětvený nasycený Ci-a uhlovodíkový řetězec, výhodně, pokud není určeno jinak C1-4 uhlovodíkový řetězec. Výhodné alkylové skupiny jsou (ne výhradně): methyl, ethyl, propyl, isopropyl a butyi; monovalentní radikál odvozený od alifatického uhlovodíku odtržením jednoho H; jako např. methyl. Nižší alkyiová skupina obsahuje 1 až 6 atomů uhlíku.

Heteroalkyl je nesubstituovaný nebo substituovaný nasycený tří- až osmičlenný řetězec obsahující atomy uhlíku a jeden nebo dva heteroatomy.

Alkenyl je nesubstituovaný nebo substituovaný přímý nebo rozvětvený C2-8 uhlovodíkový řetězec, výhodně C2-4, obsahující nejméně jednu olefinickou dvojnou vazbu.

Alkinyl je nesubstituovaný nebo substituovaný přímý nebo rozvětvený C2-8 uhlovodíkový řetězec, výhodně C2-4 , obsahující nejméně jednu trojnou vazbu,

Acetát: sůl kyseliny octové obsahující radikál CH3COO-.

Acetoxy: Acetyloxy. Radikál CH3COO-.

Acetyl: Acylový radikál CH3CO-.

Aglykon: Necukerná část glykosidu, např. rostlinný p i gment.

Cyklický uhlovodík“ je nesubstituovaný nebo

Heteroaryl je heteroary1ové skupiny pyrrolyl, pyridinyl, chinolinyl, pyrimidinyl substituovaný, nasycený, nenasycený nebo aromatický uhlovodíkový kruh zahrnující 3 až 8, výhodně 5 až 7 atomů.

Heterocyklický kruh nebo heterocyklus je nesubstituovaný nebo substituovaný, nasycený, nenasycený nebo aromatický kruh obsahující atomy uhlíku a jeden nebo několik heteroatomů. Heterocyklické kruhy obvykle obsahují 3 až 8 atomů, výhodně 5 až 7. Pokud není uvedeno jinak, je heteroatom volen z atomů dusíku, síry a kyslíku.

Aryl“ je aromatický uhlovodíkový kruh. Arylové skupiny zahrnují (ne výhradně) skupiny: fenyl, tolyl, xylyl, kumenyl a naftyl; organický radikál odvozený od aromatického uhlovodíku odtržením jednoho atomu; např. fenyl odvozený od benzénu.

aromatický heterocyklus. Výhodné jsou (ne výhradně) thienyl, íuryi, pyrazinyl, oxazolyl, thiazolyl, a tetrazolyl.

Alkoxy je kyslíkový atom nesoucí uhlovodíkový řetězec, přičemž tímto řetězcem může být alkyl nebo alkenyl (např. -O-alkyl nebo -O-alkenyl); “Alkoxy je alkylový radikál připojený přes atom kyslíku ke zbytku molekuly; např. methoxy. Výhodné alkoxylové skupiny jsou (ne výhradně) methoxy, ethoxy, propoxy a alkyloxy.

uhlovodíkový řetězec substituovaný (-0H), případně ještě dalšími hydroxyalkylové skupiny jsou (ne výhradně) hydroxyethy1, hydroxypropy1, fenylhydroxyalkyl.

Karboxya1ky1 je uhlovodíkový řetězec substituovaný (-COOH), případně ještě dalšími karboxya1kylové skupiny jsou (ne karboxyethy1,

Hydroxya1ky1 je hydroxylovou skupinou substituenty. Výhodné karboxylovou skupinou substituenty. Výhodné výhradně) karboxymethy! a estery.

“Aminoalkyl“ je substituovaný amino dimethylaminoalky1.

Alkylamino je amino skupina s alkylovými substituenty (např. —N—alkyl).

a jejich kysel i ny jedním nebo dvěma uhlovodíkový řetězec (alkyl) skupinou (NH-alkyl-), jako např.

Alkenylamino“ je amino skupina s jedním nebo dvěma alkenylovými substituenty (např. -N-alkenyl).

A1kiny1ami no je amino skupina s jedním nebo dvěma alkinylovými substituenty (např. -N-alkinyl).

Alkylimino je iminoskupina s jedním nebo dvěma alkylovými substituenty (např. N=alkinyl).

Arylalkyloxy“ je kyslíkový atom nesoucí ary laikylový substituent, např. fenoxymethy 1; feny 1methy1enoxy.

ch₂o “Heteroary1 a 1ky1oxy je kyslíkový atom nesoucí heteroarylalkylovýsubstituent, např.

Arylalkyl je aikylová skupina substituovaná arylem. Výhodné arylalkylové skupiny jsou benzy! a fenylethyl.

Heteroarylaiky 1 je aikylová skupina substituovaná heteroarylem.

Arylamino je amino skupina substituovaná arylem (např. -NH-ary1).

Aryloxy je kyslíkový atom nesoucí arylový substituent (např. -O-ary1).

Acyl nebo “karbony! je skupina odvozená od karboxylové kyseliny odstraněním hydroxylu (např. R-C(=O)-. Výhodné alkylacylové skupiny jsou (ne výhradně) acetyl, propionyl a butanoyl.

Acyloxy je kyslíkový atom nesoucí acylový substituent (např. -O-acyl); například -O-C(=0)-a 1 ky 1 .

Acylamino je amino skupina substituovaná acylem (např. -N-acyl); například -NH-C(=0)-a 1ky 1.

radikál benzoyloxy.

arylový radikál CeHsCO- odvozený

Benzoxy'

Benzoy1' benzoové.

Benzoyloxy¹kyseliny benzoové.

Karbamát“ sůl karbamové kyseliny; obsahuje radikál -NCOO-; též známý jako urethan nebo ester kys. karbamové.

Karboxy: předpona naznačující přítomnost kyselé karboxylové skupiny.

Ester: Organická sůl tvořená z organické kyseliny eliminací vody;

karboxylových kyselin jsou sloučeniny, od kyseliny

Benzoxy. Radikál CeHsCOO- odvozený od alkoholu funkčn i které (báze) a der i váty přecházejí jednoduchou hydrolýzou na karboxylové kyseliny. Nejznámějšími funkčními deriváty jsou estery, tj. sloučeniny v nichž hydroxylová skupina karboxylu byla nahrazena alkoxylem, cj.

O li

RC-OR

Glykosid: sloučenina přirozeného původu obsahující cukernou a necukernou složku, hydrolýzou glykosidu vzniká cukerná a necukerná část: (např. hydrolýzou koniferinu vzniká glukóza a koniferylalkohol jako necukerná část; hydrolýzou glukosidů vzniká glukóza, fruktosidů fruktóza, galaktosidů galaktóza atd.; cyklický acetal uhlovodíku.

Halo“, halogen nebo halogenid je chlor-, brom-, fluor- nebo jod- radikál. Výhodné halogenidy jsou chlor-, brom-, fluor-.

Lakton: třída vnitřních esterů hydroxykarboxy1ových kyselin; sloučeniny vzniklé ztrátou molekuly vody z hydroxylové a karboxylové skupiny kyseliny, obsahují charakteristické karbonyl-oxy seskupení atomů -0C0- v kruhu; lze je třídit podle polohy hydroxylové skupiny v příslušné kyselině; cyklické estery.

Farmaceuticky přijatelná sůl je kationtová sůl libovolné kyselé skupiny (napr. karboxylové) nebo aniontové sůl libovolné bazické skupiny (např. aminu). V oblasti techniky je známa řada solí, jak je uvedeno v Mezinárodní patentové přihlášce 87/05297, Johnson a kol., vyd. 11.9.1987, uvedeno v odkazech. Výhodné kationtové soli jsou soli alkalických kovů (tj. sodné a draselné), soli kovů alkalických zemin (hořečnaté a vápenaté). Výhodné aniontové soli jsou halogenidy (např. chloridy).

Soli: produkty reakce kyselin a baží; sloučenina kovového (pozitivního) a nekovového (negativního) radikálu:

M . OH (báze) + HX (kyselina) = MX (sůl) + H2O (voda)

Steroidní jádro“: druhový název rodiny lipidických sloučenin zahrnující steroly, žlučové kyseliny, srdeční glykosidy, saponiny a pohlavní hormony.

Substituent: libovolný atom nebo skupina nahrazující vodíkový atom příslušné sloučeniny.

Substituovat: nahradit prvek nebo radikál ve sloučenině substituentem.

Substituovaný: označení sloučeniny, která byla substituována.

Substituce: reakce při níž je atom nebo skupina atomů (obvykle organické) molekuly nahrazen jiným atomem nebo skupinou.

Substituenty samy o sobě mohou být substituovány jedním nebo několika substituenty. Příkladem je soubor substituentů uvedený v C. Hansch, A. Leo, Substituent Constants for Correlation Analysis in Chemistry and Biology (1979) zahrnuto v odkazech. Výhodné substituenty jsou (ne výhradně) alkyl, hexóza, 2-deoxyg1ukóza, atd., ramnóza, glukóza, aikenyl, alkoxy, hydroxy, oxo, amino, aminoalkyl (např. aminomethyl, atd.), kyano, halo, karboxy, alkoxyacetyl (např. karboethoxy, atd.), thio, aryl, cykloalkyl, heteronryl, heterocykloalkyl (např. piperidinyl, morfolinyl, piperazinyl, pyrro1idiny1, atd.), imino, thioxo, hydroxya 1 ky 1, aryloxy, arylalkyl a kombinace uvedených skupin.

Monosacharid“ je jednoduchý cukerný zbytek; např.

6-deoxyhexóza, 2,6-dideoxysexóza, arabinóza, digitoxóza, fruktóza, galaktóza; ramnopyranóza, mannóza, cymaróza, xylóza, lyxóza, ribóza, digitalóza, 4-amino-2,4,6-trideoxy1yxohexopyranóza, 4-amino-4,6-dideoxyglukopyranóza, 2,3-d ideoxyramnopyranóza,

4-methoxy-4,6-dideoxyramnopyranóza.

01igosacharid je cukr obsahující 2 až 8 monosacharidických zbytků, výhodně 2 až 3. Poslední monosacharidický zbytek bývá označován jako terminální monosacharidický zbytek. 01 igosacharid může obsahovat jednotné i různé monosacharidické zbytky. Tyto monosacharidické zbytky jsou spojeny glykosidickou vazbou mezi hydroxylem jednoho monosacharidického zbytku a anomerním atomem uhlíku sousedního monosacharidického zbytku.

Monosacharidický nebo oligosacharidický zbytek lze graficky znázornit jako kruh nebo v prostorové židličkové konfiguraci. Například glukózu následujícími způsoby:

(monosachartid) lze znázornit

kruh

židi ička

Podrobný popis vynálezu

Předkládaný vynález zahrnuje některé o 1 igosacharidické deriváty 14-aminostero idních sloučenin, postupy jejich příprav, farmaceutické přípravky obsahující tyto sloučeniny a léčebné postupy používající uvedené nové sloučeniny a přípravky na léčbu městnavého srdečního selhání u lidí i dalších savců. Konkrétní sloučeniny a přípravky předkládaného vynálezu tedy musí být farmaceuticky přijatelné. Výraz farmaceuticky přijatelná složka označuje látku, která při podání lidem a/nebo jiným savcům nemá nežádoucí vedlejší účinky (jako je toxicita, dráždivost a alergická reakce) a má přiměřený poměr prospěchu k míře ohrožení.

Účinné látky

01igosacharidické deriváty 14-aminosteroidních sloučenin a jejich farmaceuticky přijatelné soli nebo estery, obecného vzorce:

kde

a) Rí je (i) COORs, kde

Rs je vodík; nižší Ci-s alkyl; nižší Ci-e alkyl substituovaný amino skupinou; arylalkyl nebo heteroary la1ky 1 nebo cyklický uhlovodík; nebo (ii) CHReOH, kde

Re je vodík nebo nižší Ci-e alkyl; nebo (iii) COR” ’, kde

R” ’ je vodík; nižší Ci-β alkyl; nižší Ci-β alkyl substituovaný amino skupinou;

• amino nebo dialkylamino; a

b) R2 je -NR7R8, kde R7 a Ra jsou stejné nebo odlišné a jsou vodík nebo nižší Ci-β alkyl;

c) R3 je (i) ol igosacharidický zbytek obecného vzorce:

kde R9 je vodík; methyl; hydroxy; karboxy; acetoxy; ary 1 a 1ky1oxy; heteroarylalkyloxy; nebo benzoxy; R10 je vodík; methyl; karboxy; acetoxy; arylalkyloxy; heteroarylalkyloxy; benzoxy nebo hydroxy; Ri 1 je kyslík; pokud je R1 1 substituent terminálního monosacharidického zbytku je R11 OH; methyl; acetoxy; heteroarylalkyloxy; arylalkyloxy; a R12 je vodík, methyl, methylhydroxymethyl; nebo acetoxymethy 1; nebo (ii) oligosacharidický zbytek obecného vzorce:

kde Ri4 a Ri5 jsou shodné nebo odlišné a jsou vodík; nižší Ci-β alkyl; heteroarylalkyl; arylalkyl; heteroaryl nebo aryl; R17 je vodík, hydroxy; acetoxy nebo benzoxy; R1a a R19 jsou hydroxy; acetoxy nebo benzoxy; nebo (iii) o 1 igosacharidicky zbytek obecného vzorce:

R

kde R14 a Ri5 jsou shodné nebo odlišné a jsou vodík; nižší C1-6 alkyl; heteroarylalkyl; arylalkyl; heteroaryl nebo aryl; Ri4a je kyslík; pokud je Ri4a substituent terminálního monosacharidického zbytku musí být Ri4a hydroxy; methyl; acetoxy; arylalkyloxy nebo heteroary1 a 1 ky 1 oxy; a

d) R4 je (i) OH, nebo (i i) Η, nebo (i i i) OR13, kde R13 je monosacharidický zbytek; acetoxy; benzoxy; arylalkyl nebo heteroary1 a 1ky 1; a

e) Z je (i) (ii)

-CH-, kde a a b jsou jednoduché vazby, nebo =C, kde buď a nebo b je dvojná vazba.

Vazby znázorněné vlnovkou naznačují, že nebyla stanovena jejich stereochemie a že substituenty na steroidním jádře mohou být v a nebo β konfiguraci. Výhodná konfigurace substituentů steroidního jádra je β-konfigurace. Dále monosacharidové jednotky obsažené v o 1 igosacharidickém zbytku mohou být buď v a nebo β konfiguraci. Odborníkovi v oboru chemie uhlovodíků je zřejmé, že konfigurace subst iíucr, lu určitého cukerného zbytku je dána konkrétním použitým cukrem.

b) dehalogenaci; a

c) převedení isokyanatanu na amino skupinu v poloze 14 steroidního jádra.

Ol igosacharidické deriváty 14-aminosteroidních sloučenin předkládaného vynálezu

Steroidní jádro

Nové o 1 igosacharidické deriváty 14-aminosteroidních sloučenin předkládaného vynálezu obsahují steroidní jádro, které je různorodě substituované.

Substituenty steroidního jádra

Substituenty Ri

Substituenty Ri jsou v poloze 17 steroidního jádra. Existují tři vhodné typy substituentů Ri. Ri je buď ester karboxylové kyseliny COORs, kde Rs je vodík, nižší Ci-s alkyl; nižší Ci-β alkyl substituovaný amino skupino^ arylalkyl nebo heteroarylalkyl nebo cyklický uhlovodík. Výhodné substituenty Rs jsou nižší Ci-β alkyly, nejvýhodněší je methyl; Ri je tedy COOCH3 (karboxymethylester).

Nebo R1 je CHReOH, kde Rs je vodík nebo nižší Ci-s alkyl; výhodný substituent Rs je H nebo CH3; R1 je tedy CHzOH nebo CH(CH3)OH.

Konečně R1 je COR’’’, kde R’’’ je vodík; nižší C1-6 alkyl; methylamino, amino nebo di a 1ky1ami no. Výhodný substituent R’’’ je amino nebo methylamino. Nejvýhodnější R’’’ je amino; R1 je tedy CONH2.

Nejvýhodnějším substituentem R1 steroidního jádra je ester karboxylové kyseliny COORs, kde Rs je methyl (COOCH3).

Substituent R2

Substituent R2 je v poloze 14 steroidního jádra. Existuje jeden vhodný typ substituentu R2. R2 je -NR7Ra, kde R7 a Rs jsou stejné nebo odlišné a jsou vodík nebo nižší Ci-s alkyl.

Výhodné skupiny R7 a Ra jsou	H; R2 je tedy	NH2 .
Substituenty R3
Substituenty R3 jsou	v poloze 3	steroidního jádra
Existují tři vhodné typy	substituentů	R3. R3 je bu
01 igosacharidický zbytek obecného vzorce:

i.a kde R9 je vodík; methyl; hydroxy; karboxy; acetoxy; arylalkyloxy nebo benzoxy; R10 je vodík; methyl; karboxy; acetoxy; arylalkyloxy; heteroarylalkyloxy; benzoxy nebo hydroxy; Rii je kyslík; pokud je Ri1 substituent terminálního monosacharidického zbytku je Ri1 OH; methyl; acetoxy; heteroarylalkyloxy; arylalkyloxy; a R12 je vodík, methyl, methy 1 hydroxymethy1 nebo acetoxymethy!. Pokud v předkládaných sloučeninách je R11 kyslík, je tento kyslík glykosidické vazby mezi sousedními monosacharidickými zbytky. Oligosacharidický zbytek může obsahovat dvě nebo tri monosacharidické jednotky. Monosacharidické jednotky jsou stejné nebo odlišné. Výhodné monosacharidické jednotky jsou dideoxyribohexopyranóza a ramnopyranóza.

Výhodné substituenty R9 jsou vodík, methyl a hydroxy. Nejvýhodnější R9 je vodík. Výhodné substituenty R10 jsou vodík, methyl a hydroxy. Nejvýhodnější Ri o je hydroxy. Ri1 je kyslík, kromě případu, kdy je R11 substituentem terminálního monosacharidického zbytku. Výhodným R11 terminálního monosacharidického zbytku je hydroxy.

Výhodné substituenty R12 jsou vodík a methyl. Nejvýhodnější R12 je methyl.

Nebo substituent R3 je též oligosacharidický zbytek obecného vzorce:

kde Ri4 a Ri5 jsou shodné nebo odlišné a jsou vodík; nižší C1-6 alkyl; heteroarylalkyl; arylalkyl; heteroaryl nebo aryl; R17 je vodík; hydroxy; acetoxy nebo benzoxy; Ria a R19 jsou hydroxy; acetoxy nebo benzoxy.

01igosacharidický zbytek může obsahovat dvě nebo tři monosacharidické jednotky, výhodně tři. Monosacharidické jednotky jsou stejné nebo odlišné. Výhodné monosacharidické jednotky jsou dideoxyribohexopyranóza a ramnopyranóza.

Výhodné substituenty R14 jsou vodík a nižší Ci-β alkyl. Výhodnější R14 je nižší Ci-β alkyl. Nejvýhodnější R14 je methyl. Výhodné substituenty R15 jsou vodík a nižší C1-6 alkyl. Výhodnější R15 je nižší Ci-a alkyl. Nejvýhodnější R15 je methyl. Výhodné substituenty R17 jsou vodík, hydroxy a acetoxy. Nejvýhodnějši R17 je vodík. Výhodné substituenty Rie jsou hydroxy a acetoxy. Nejvýhodnější Ria je hydroxy. Výhodné substituenty Ri9 jsou hydroxy a acetoxy. Nejvýhodnější R19 je hydroxy.

Konečně R3 je oligosacharidický zbytek obecného vzorce;

kde Ri4 a R15 jsou shodné nebo odlišné a jsou vodík; nižší

Ci-e alkyl; heteroaryla1ky1; arylalkyl; heteroaryl nebo aryl; Ri<a je kyslík; pokud je Rua substituent terminálního monosacharidického zbytku musí být Ri4a hydroxy; methyl; acetoxy; arylalkyloxy nebo heteroary1 a 1ky 1 oxy. Pokud v předkládaných sloučeninách je Ri4a kyslík, je tento kyslík součástí glykosidické vazby mezi sousedními monosacharidickými zbytky.

igosacharidický zbytek může obsahovat dvě nebo tři monosacharidické jednotky, výhone tři. Monosacharidické jednotky jsou stejné nebo odlišné. Výhodné monosacharidické jednotky jsou dideoxyribohexopyranóza a ramnopyranóza.

Výhodné Rí 4 a Ris jsou nižší Ci-e alkyl, nejvýhodnější R14 a Rí5 jsou methyl. Pokud je Ri4a substituent terminálního monosacharidického zbytku je nejvýhodnější Ri4a hydroxyl.

Substituenty R4

Substituenty R4 jsou v poloze 12 steroidního jádra. R4 může být OH, H nebo OR13, kde R1 3 je monosacharidický zbytek, acetoxy; benzoxy; arylalkyl nebo heteroary1 a 1ky1. Výhodné substituenty R4 jsou H nebo OR13, kde R13 je monosacharidický zbytek. Tento monosacharidický zbytek je volen ze skupiny zahrnující hexózu, 2-deoxyg 1 ukózu, 6-deoxyhexózu, 2,6-dideoxyhexózu, ramnózu, glukózu a arabinózu, digitózu, fruktózu, galaktózu, ramnopyranózu, hexopyranózu, 6-deoxyg1ukózu, 4,6-dideoxy-g1ykopyranózu, mannózu, cymarózu, xylózu, lyxózu, ribózu, digitalózu, glukozamin, 4-amino-2,4,6-trideoxylyxohexopyranózu, 4-ami no-4,6-dideoxyg1ykopyranózu, 2,3-dideoxyramnopyranózu, 4-methoxy-4,6-dideoxyramnopyranózu, výhodně β-D nebo a-L-anomery.

Nejvýhodnější substituent R4 je H.

Z

Z je -CH-, kde a a b jsou jednoduché vazby, nebo = C, kde buď a nebo b je dvojná vazba. Výhodné Z je -CH-, kde a a b jsou jednoduché vazby.

Výhodné oligosacharidické deriváty 14-ami nosteroidních sloučenin předkládaného vynálezu jsou sloučeniny:

(30,50,140,170)-14-Amino-3-[(O-2,6-dideoxy-0-D-ribo-hexopyranosyl-(1->4)-O-2,6-dideoxy-0-D-ribo-hexopyranosyl-(1->4)-0-2,6-dideoxy-0-D-ribo-hexopyranosyl)oxy]-N-methy1androstan-17-karboxam i d

(30,50,140,170)-14-Amino-3-[((0-2,6-dideoxy-0-D-ribo-hexopyranosyl-(1->4)-0-6-deoxy-2,3-0-(1-methylethyli den)-a-L-mannopyranosy1]oxy] androstan-17-karboxy1ová kyselina, methylester

(3I3,5|3,140,17β) —14—Amino — 3 — [ (O-2,6-dideoxy-0-D-ribo-hexť pyranosy1-(1->4)-0-2,6-dideoxy-0-D-ribo-hexopyranosy1-(1->4)-0-2,6-dideoxy-(3-D-ribo-hexopyranosy1 )oxy]androstaň-17-karboxamid

(30,50,140,170)-14-Amino-3-[(0-2,6-dideoxy-0-D-r ibohexopyranosyl-(1->4)-O-2,6-dideoxy-0-D-ribo-hexopyranosyl)oxy]androstan-17-karboxylová kyselina, methylester

Ol

CH

OH

OH (33,50,140,170)-14-Ami no-3- [ (0-2,6-d ideoxy-0-D-r i bo-hexopyranosyl-(1->4)-0-2,6-di deoxy-B-D-r ibo-hexopyranosyl-(1->4)-O-2,6-dideoxy-|3-D-ribo-hexopyranosyl)oxy]androstan-17-karboxylová kyselina, methylester

140-Amino-3|3-[a-L-ramnopyranosy loxy-( 1->4)-a-L-ramnopyranosy loxy ] -5|3-androstan-17|3-karboxy1ová kyselina, methylester

140-Amino-30-[a-L-ramnopyranosyloxy-(1->4)“2’,3’-O“isonropv!iden -α-L-ramnopyranosy loxy ]-5(3-androstan-1 70-kar boxy lová kyselina', methy Tester

X X l40-Amino-30-[2’’,3’’-O-isopropyliden-a-L-ramnopyranosyloxy— (1 — >4) —2’,3’-0-isopropyliden-a-L-ramnopyranosyloxy]-50-androstan -170-karboxy 1ová kyselina, methylester

14B-Am ino-30-[2’ ’ , 3 ’ ’ , 4 ’ ’-tr i-O-acety1-α-L-ramnopyranosyloxy-(1 — > 4) — 2 ’ ,3’-O-isopropyl i den-a-L-ramnopy ranosy 1 oxy ] - 5|3-andr ostaň -1ϊβ-karboxy 1ová kyselina, methylester

X X

140-Am i ηο-3β-[4 ’ ’-0-acetyl-2’ ’ ,3’ ’-0-isopropyliden-|3-L-ramnopyranosyloxy-(1-> 4) — 2’,3’-0-isopropyli den-a-L-ramnopyranosy1oxy]-5B-androstan-170-karboxylová kyselina, methylester

(30,50,140,170)-14-Amino — 3 — £(0-2,6-dideoxy-0-D-r i hohexopyranosyl-(1->4)-O-6-deoxy-a-L-mannopyranosy1)oxy]androstan-17-karboxylová kyselina, methylester

Příprava ol igosacharidických derivátů 14-aminosteroidních sloučenin předkládaného vynálezu:

Předkládaný vynález se také týká způsobu zavedení amino skupiny do polohy 14 steroidního jádra. Postupy dosavadního stavu techniky, podle U.S. 4 325 879; U.S. 4 552 868; U.S. 4 584 289 a U.S. 4 885 280, zahrnuty v odkazech, používaly azoimid k zavedení azidu do polohy 14 steroidního jádra. Azid byl v dalším stupni redukován na amin v poloze 14 steroidního jádra. Předkládaný postup používající jodoisokyanatan je ve svém oboru přínosem pro stav techniky, neboť se vyhýbá práci s nebezpečným azoimidem; lze jej přizpůsobit přípravám ve větším měřítku; dává vyšší výtěžky 14-aminosteroidních sloučenin; a umožňuje zavedení amino skupiny do polohy 14 v přítomnosti dalších aci do-1abi 1 ηích funkčních steroidním jádře. 01 igosacharidický zbytek v steroidního jádra je acido-labi lni skupina, působením azoimidu se odštěpuje. Iodoisokyanatanový postup tedy řeší problém odštěpování oligosacharidického zbytku ze steroidního jádra.

Předkládaný postup diastereoselektivně zavádí amino skupinu do polohy 14 steroidního jádra adicí jodoisokyanatanu na dvojnou vazbu v poloze 14-15 steroidního jádra a následnou dehalogenací a převedením isokyanatanu na amino skupinu. Po adici jodoisokyanatanu na dvojnou vazbu v poloze 14-15 je jód odstraněn dehalogenací a isokyanatan převeden na amino skupinu v poloze 14.

Předkládaný postup konkrétně zahrnuje kroky:

skupin na poloze 3

a) In šitu tvorba jodoisokyanatanu výhodně z (ne výhradně) kyanatanu stříbrného a jódu ve vhodném rozpouštědle jako jsou (ne výhradně) např. estery jako octan ethylnatý, octan isopropy1natý nebo octan propylnatý, nitrily jako acetonitril nebo prop i on itri 1, halogenované uhlovodíky jako dichlormethan, chloroform nebo dich lorethan, ethery jako tetrahydrofuran nebo terč.butyImethy1 ether, nebo směsi uvedených rozpouštědel. Výhodná rozpouštědla jsou směsi nitrilů, výhodněji acetonitril, s estery nebo ethery, nejvýhodněji s octanem ethylnatým nebo terc.butyl-methyletherem. Reakční teplota jodoisokyanatanové adice se pohybuje v rozmezí -30 až 100 °C, nejvýhodněji -10 až 5 °C. Doba jodoisokyanatanové adice se pohybuje v rozmezí 1 až 6 h, výhodně 1 až 3 h. Reakční složky ί lze přidávat do reakční směsi v libovolném pořadí a libovolnou rychlostí, nejvýhodnější je přidávat jód jako roztok ke směsi steroidu a kyanatanu stříbrného během 3^ až 60 min.

b) dehalogenace se provádí výhodně účinkem organocín. hydridového činidla jako jsou alkylcín hydridy, např. tri-n-butylcín hydrid nebo arylcín hydridy, např. difenylcín hydrid nebo trifenylcín hydrid, a radikálového iniciátoru jako je (ne výhradně) 2,2’-azobisisobutyronitri 1 (AIBN) nebo peroxidy jako benzoylperoxid nebo terč.laurylperoxsJ i vhodném rozpouštědle jako jsou (ne výhradně) estery jako octan ethylnatý, octan isopropyInatý nebo octan propylnatý, nitrily jako acetonitril nebo propionitril, halogenované uhlovodíky jako dichlormethan, chloroform nebo dichlorethan, ethery jako diethyiether, tetrahydrofuran nebo terč .buty1-methylether , uhlovodíky jako hexany nebo heptany, aromáty jako benzen nebo toluen, nebo směsi uvedených rozpouštědel. Výhodná rozpouštědla jsou aromáty, výhodněji toluen a halogenované uhlovodíky, nejvýhodněji d imethyleh lor id. Reakční teplota dehalogenace se pohybuje v rozmezí 0 až 100 °C, nejvýhodněji 15 až 30 °C. Doba reakce se pohybuje v rozmezí 1 až 6 h, nejvýhodněji 2 až 4 h; a

c) hydrolýza isokyanatanové skupiny na amin se provádí účinkem silných kyselin jako jsou (ne výhradně) kyselina chlorovodíková, sírová, bromovodíková nebo trifluoroctová, nebo účinkem baží jako jsou (ne výhradně) hydroxid lithný, hydroxid sodný, hydroxid draselný, uhličitan lithný, uhličitan draselný a další baze schopné generovat ve vodném prostředí hydroxidový iont, jako je např. triethyíamin nebo pyridin. Vhodná doprovodná rozpouštědla pro hydrolytickou reakci jsou (ne výhradně) nitrily mísitelné s vodou jako je acetonitril nebo propion itri 1, ethery mísitelné s vodou jako je tetrahydrofuran, dimethoxyethan nebo dioxan, nebo další rozpouštědla mísitelná s vodou jako je Ν,N’-dimethy1 formamid nebo dimethylsulfoxid a jejich směs. Výhodná rozpouštědla jsou nitrily mísitelné s vodou, výhodně acetonitril a ethery mísitelné s vodou, nejvýhodněji tetrahydrofuran, dimethoxyethan nebo dioxan. Reakční teplota hydrolýzy se pohybuje v rozmezí 0 ^ž 60 °C, pro kysele kata 1yzovanou hydrolýzu, nejvýhodněji 15 až 30 °C a pro bazicky kata 1yzovanou hydrolýzu v rozmezí laboratorní teploty a 100 °C, nejvýhodněji 80 až· 100 °C. Doba reakce pro kyselou katalýzu se pohybuje v rozmezí 4 až 72 h nejvýhodněji 12 až 36 h; pro bazickou katalýzu v rozmezí 2 až 48 h, nejvýhodněji 2 až 12 h.

Následující příklady, neomezující rozsah vynálezu, ilustrují jodoisokyanatanový postup zavedení amino skupiny do polohy 14 steroidního jádra.

Příklady provedení vynálezu

Příklad 1 (30,50,140,1713)-14-Ami no-3-[(O-2,6-dideoxy-0-D-ribo-hexopyranosyl-(1->4)-O-2,6-dideoxy-0-D-ribo-hexopyranosyl-(1->4)-O-2,6-dideoxy-0-D-ribo-hexopyranosyl)oxy]androstan-17-karboxylová kyselina, methylester

mA 933,07

8.

c,

CH

CH.

OAc

OAc mk 696,02

Aeoy-OAc

mA 891,03

OAc

F,

AgOCN, 1«

m.h. 934,0«

Ote

Η.

ΟΗ

A.

(30,50)-3-[(O-3,4-Di-O-acetyl-2,6-d i deoxy-0-D-r ibo-hexopyran·“ osy 1 - (1 -> 4)-0-3-0-acety l-2,6-dideoxy-0-D-ribo-hexopyranosyl-(1 —>4)-0-3-0-acety1-2, 6-d ideoxy-0-D-r ibo-hexopyranosyl)oxy]-14-hydroxykard-20(22)-enolid

Digitoxin (2,0 g, 0,0026 mol) byl rozpuštěn v bezvodém pyridinu (50 ml). K roztoku byl přidán bezvodý anhydrid kyseliny octové (25 ml) a roztok zahříván na 80 °C 3 h. Po ochlazení na laboratorní teplotu byla reakční směs vlita do směsi ledu s vodou (500 ml) za vzniku žluté sraženiny. Směs byla extrahována dichlormethanem (2 x 100 ml) a organické extrakty spojeny. Organická fáze byla promyta nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného (2 x 100 ml) nasyceným vodným roztokem chloridu sodného (1 x 100 ml), vysušena (síran hořečnatý), odbarvena aktivním uhlím (darco) a přefiltrována. Filtrát byl za sníženého tlaku odpařen do sucha. Stopy pyridinu byly odstraněny azeotropní destilací s toluenem (2 x 20 ml) a methanolem (2 x 20 ml) s výtěžkem 1,8 g (74 % hmot.) sloučeniny 1 ve formě pevné bílé pěny.

B.

(30,50,140,170)-3-[(O-3,4-D i-0-acety1-2,6-d i deoxy-0-D-r ibohexopyranosyl-(1->4)-0-3-0-acety1-2,6-d i deoxy-0-D-r i bo-hexopyrano syl-(1->4)-0-3-0-acety1-2,6-d ideoxy-0-D-r ibo-hexopyranosy1)oxy ]14,21-dihydroxy-pregnan-20-on

Sloučenina 1 (0,93 g, 0,001 mol) byla rozpuštěna v dichlormethanu (100 ml) a roztok ochlazen na -78 °C. Studený roztok byl probubláván ozonem 8 min za tvorby trvalého modrého zbarvení. V tomto bodě byla dodávka ozonu přerušena a reakční směs byla míchána další 0,5 h. Poté byl směsí probubláván kyslík mírnou rychlostí 15 min a dusík až do vymizení modrého zbarvení. Teplota reakční směsi se nechala vystoupit na laboratorní hodnotu, do reakční směsi byl přidán nasycený vodný roztok uhličitanu draselného (50 ml) a směs byla míchána hod. Po oddělení fází byla organická fáze promyta vodou (1 x 50 ml), nasyceným vodným roztokem chloridu sodného (1 x 50 ml), vysušena (síran hořečnatý) a přefiltrována. Filtrát byl za sníženého tlaku odpařen do pevné bílé pěny. Produkt byl chromatografován na silikagelu (230-400 mesh) eluční směsí dichlormethan/methanol 97/3. Frakce obsahující čistý produkt byly spojeny, odpařeny za sníženého tlaku a sušeny ve vakuu 24 h s výtěžkem 0,6 g (62 % hmot.) sloučeniny 2 ve formě pevné* bílé látky. NMR a hmotnostní spektra odpovídala struktuře.

Tato sloučenina byla použita do dalšího stupně.

C.

(3|3,5S,14S,170)-3-[(O-3,4-Di-O-acetyl-2,6-dideoxy-(3-D-ribohexopyranosyl-( 1-> 4)-0-3-0-acety1-2,6-d i deoxy-(3-D-r ibo-hexonvrahosy l-( 1 - >4)-0-3-0-acety 1 - 2,6-d i deoxy-13-D-r ibo-hexopyranosy 'i >oxy j- i4hydroxyandrostan-17-karboxylová kyselina

K roztoku sloučeniny 2 (17 g, 0,187 mol) v acetonu (200 ml) byl přidán roztok uhličitanu draselného (3,88 g,

0,028 mol) ve vodě (25 ml) a roztok jodistanu sodného (12 g,

0,056 mol) ve vodě (50 ml). Výsledná směs byla míchána při laboratorní teplotě 24 h. Reakční směs byla zředěna vodou (250 ml) a okyselena 1 N kyselinou chlorovodíkovou na pH 1. Okyselený roztok byl rychle extrahován dichlormethanem (2 x 300 ml) a extrakty spojeny. Organická fáze byla promyta 5 % obj. kyselinou chlorovodíkovou (1 x 200 ml), vodou (1 x 200 ml), vysušena (síran hořečnatý) a přefiltrována. Filtrát byl za sníženého tlaku odpařen do pevné bílé pěny. Produkt byl chromatografován na silikagelu eluční směsí dichlormethan/ methanol 97,5/2,5. Frakce obsahující čistý produkt byly spojeny, odpařeny za sníženého tlaku s výtěžkem 16,2 g (97 % hmot.) sloučeniny 3 ve formě pevné bílé látky. Tato sloučenina bylapoužitadodalšíhostupně.

D.

(3β,5β,14β,17β)-3-[(Ο-3,4-Di-0-acety1-2,6-dideoxy-B-D-ribohexopyranosyl-(1-> 4)-0-3-0-acety1-2,6-d i deoxy-B-D-ri bo-hexopyrapo40 syl-(1->4)-0-3-0-acetyl-2,6-dideoxy-|3-D-ribo-hexopyranosyl)oxy]-14 hydroxyandrostan-17-karboxy1ová kyselina, methylester

K roztoku sloučeniny 3 (15 g, 0,017 mol) v bezvodém acetonitrilu (100 ml) byl přidán 1,8-diazabicyklo[5.4.0]undec-7-en (DBU, (1,18 ml, 2,7 g, při laboratorní

2,4 ml, 2,89 g, 0,019 mol) a methyljodid 0,.019 mol). Výsledný roztok byl míchán 20 h teplotě. Reakční sňěs byla zředěna vodou (1 1) a extrahována dichlormethanem (5 x 200 ml), extrakty spojeny. Organická fáze byla promyta nasyceným vodným roztokem· chloridu sodného (2 x 200 ml), vysušena (síran hořečnatý) a přefiltrována. Filtrát byl za

Produkt byl chromatografován na eluční směsí dich1ormethan/methano1 sníženého tlaku odpařen, silikagelu (230-400 mesh) 99/1. Frakce obsahující čistý produkt byly odpařeny za sníženého tlaku a sušeny ve vakuu s výtěžkem 13,68 g (90 % hmot.) sloučeniny 4 ve formě pevné bílé látky. Tato sloučenina byla použita do dalšího stupně.

E.

(3B,5B,17|3)-3-[(0-3,4-Di-0-acetyl-2,6-dideoxy-S-D-ribo-hexopyranosyl-(1->4)-0-3-0-acety1-2,6-d i deoxy-B-D-r ibo-hexopyranosyl-(1->4)-0-3-0-acetyl-2,6-di deoxy-|3-D-r i bo-hexopy ranosy 1 )oxy ]androst-14-en-17-karboxy1ová kyselina, methylester

Sloučenina 4 (4,02 g, 0,0044 mol) byla rozpuštěna v bezvodém pyridinu (20 ml) a roztok ochlazen na -5 °C lázní 1ed/methano1. K roztoku byl přikapán roztok thionylchloridu (5 ml) v bezvodém pyridinu (5 ml) během 25 min. Poté byla reakční směs vlita do směsi vody s ledem (400 ml) a míchána dokud led roztával (10 min). Výsledná směs byla extrahována octanem ethylnatým (3 x 150 ml), extrakty spojeny. Organická fáze byla promyta 1 N kyselinou chlorovodíkovou (1 x 100 ml), vodou (2 x 100 ml), nasyceným vodným roztokem hydrogenuh1 iči tanu sodného (2 x 100 ml), nasyceným vodným roztokem chloridu sodného (1 x 100 ml), hořečnatý) a přefiltrována.

vysušena (síran

Filtrát byl za sníženého tlaku odpařen do pevné pěny. Produkt byl chromatografován na silikagelu (230-400 mesh) eluční směsí octan ethy1natý/hexan 30/70. Frakce obsahující čistý produkt byly spojeny a odpařeny za sníženého tlaku s výtěžkem 3,26 g (83 X hmot.) sloučeniny 5 ve formě pevné bílé látky. Tato sloučenina byla použita do dalšího stupně.

F. λ (30,50,140,15α, 170)-3-(( 0-3,4-D i-0-acety 1 -2,6-dideoxy-0-Dribo-hexopyranosyl-(1->4)-O-3-O-acetyl-2,6-dideoxy-0-D-ribohexopyranosyl-(1->4)-0-3-0-acety1-2,6-d ideoxy-0-D-r ibo-hexopyran syl )oxy]-15-jodo-14-isokyanato-androstan-17-karboxylová kyselina methylester o>

Sloučenina 5 (0,27 g, 0,3 mmol) byla rozpuštěna v oceánu ethylnatém (1,35 ml) a acetonitrilu (2,7 ml) a roztok ochlazen na 1 °C lázní led/methano1 . K roztoku byl přidán kyanatan stříbrný (0,054 g, 0,36 mmol) a po kapkách jód (0,081 g, 0,32 mmol) v ethylacetátu (4 ml) během 20 min. Poté byla reakční směs míchána ještě 1,5 h. Reakční směs byla zředěna octanem ethylnatým (20 ml) a přefiltrována přes celit. Filtrát byl promyt 1 X hmot. vodným roztokem siřičitanů sodného (1 x 10 ml) a organická fáze odpařena za sníženého tlaku s výtěžkem 0,32 g (99 X hmot.) sloučeniny 6 ve formě pevné pěny. Tato sloučenina byla použita do dalšího stupně.

G.

(30,50,140,170)-3-[(O-3,4-Di-O-acetyl-2,6-dideoxy-0-D-ribohexopyranosyl-(1->4)-O-3-O-acetyl-2,6-dideoxy-0-D-ribo-hexopyranosy1-(1->4)-O-3-O-acetyl-2,6-dideoxy-0-D-ribo-hexopyranosyl)oxy]-14isokyanato-androstan-17-karboxylová kyselina, methylester

V aparatuře vysušené plamenem v dusíkové atmosféře byla rozpuštěna sloučenina 6 (0,32 g, 0,3 mmol) v bezvodém dichlormethanu (10 ml). K roztoku bylo přidáno katalytické množství 2,2’-azobisisobutyronitrilu (AIBN, 0,003 g) a tributylcín hydrid (0,085 ml, 0,091 g, 0,31 mmol). Výsledný roztok byl míchán při laboratorní teplotě 1 h a poté odpařen za sníženého tlaku do oleje. Olej byl triturován hexanem za vzniku bílé pevné látky, která byla odfiltrována a sušena r>a vzduchu s výtěžkem 0,25 g (89 % hmot.) sloučeniny 7. Tato sloučenina byla použita do dalšího stupně.

H.

(3 (3,50, 140, 170)-3-((0-3,4-Di-0-acetyl-2, 6-d i deoxy-0-D-r i bohexopyranosyl-(1->4)-0-3-0-acetyl-2,6-di deoxy-0-D-ribo-hexopyranosyl-(1->4)-O-3-O-acetyl-2,6-dideoxy-0-D-ribo-hexopyrano~ syl)oxy]-14-amino-androstan-17-karboxylová kyselina, methylester

K roztoku sloučeniny 7 (0,3 g, 0,32 mmol) v acetonitrilu (15 ml) byl přidán roztok uhličitanu draselného (0,66 g, 4,8 mmol, 15 ekv.) ve vodě (10 ml). Reakce byla za stálého míchání zahřívána k varu pod zpětným chladičem 4 h. Po ochlazení na laboratorní teplotu byl z reakční směs odpařen acetonitril za sníženého tlaku. K vodnému zbytku byla přidána voda (20 ml) a směs byla okyselena 1 N kyselinou chlorovodíkovou na pH 1. Poté byl rychle přidán koncentrovaný hydroxid amonný do alkalické reakce pH 9. Vodná směs byla extrahována dichlormethanem (2 x 30 ml) a spojené extrakty vysušeny (síran hořečnatý) a přefiltrovány. Filtrát byl odpařen za sníženého tlaku a odparek sušen ve vakuu s výtěžkem 0,23 g (79 % hmot.) surové sloučeniny 8. Tato látka byla přímo použita do dalšího stupně.

I. ' (30,50,140,170)-14-Amino-3-[(O-2,6-dideoxy-0-D-ribo-hexO” pyranosyl-(1->4)-O-2,6-dideoxy-0-D-ribo-hexopyranosyl-(1->4)-O-2,6-dideoxy-0-D-ribo-hexopyranosyl)oxy]androstan-17-karboxylová kyselina, methylester

V aparatuře vysušené plamenem v dusíkové atmosféře byla rozpuštěna sloučenina 8 (0,23 g, 0,3 mmol) v bezvodém methanolu (9 ml). K roztoku byl přidán roztok methanolátu sodného (0,063 g, 1,2 mmol, 4 ekv.) v bezvodém methanolu (2 ml) a reakční směs byla míchána 3 h při laboratorní teplotě. Poté byla reakční směs odpařena za sníženého tlaku do bílého odparku. Produkt byl rozpuštěn ve vodě (30 mΊ) a ochlazen v lázni led/voda. Roztok byl okyselen 1 N kyselinou chlorovodíkovou na pH 1. Poté byl rychle přidán koncentrovaný hydroxid amonný do alkalické reakce pH 9. Vodná směs byla extrahována dichlormethanem (2 x 30 ml) a spojené extrakty vysušeny (síran hořečnatý) a přefiltrovány. Filtrát byl odpařen za sníženého tlaku a odparek chromatografován na silikagelu (230-400 mesh) eluční směsí dichlormethan/methanol 9/1 s obsahem 0,5 % obj. konc. hydroxidu amonného. Frakce obsahující čistý produkt byly spojeny, odpařeny za sníženého tlaku a sušeny ve vakuu s výtěžkem methylesteru (30,50,140,170)-14-amino-3-[(O-2,6-dideoxy-0-D-ribo-hexopyranosyl-(1->4)-O-2,6-dideoxy-0-D-ribo-hexopyranosyl-( W 4)-u -2,6-dideoxy-0-D-ribo-hexopyranosyl)-oxy]androstan-17-karboxyl kyseliny, výsledné sloučeniny.

Příklad 2 (30,50,140,170)-14-Amino-3-[(O-2,6-dideoxy-0-D-ribohexopyranosyl-(1->4)-0-2,6-dideoxy-0-D-ribo-hexopyranosy1)oxy] androstan-17-karboxy1ová kyselina, methylester

A.

CH

mJi. 722,89

OH)—

OH

CH

E.

MH. 692,76

AcO

,c

m.h. 716,66

F,

SÁT 6 mh. 687,77

,c mA 761,88

Η.

nth. 736,89

CH

AcO

I.

HO

výsledný produkt

A.

(30.50.170) -3-[(O-2,6-di deoxy-0-D-r ibo-hexo-pyranosy1(1 — >4)—O—2,6 — di deoxy-0-D-r i bo-hexopyránosyl-(1->4)-O-2,6-dideoxy-0D-ribo-hexopyranosyl)oxy]androst-14-en-17-karboxylová kyselina, methylester

Příprava methylesteru (30.50.170) -3-[(O-3,4-Di-O-acetyl-2,6-d ideoxy-0-D-r i bo-hexopyranosy 1-(1->4)-0-3-0-acety1-2,6-dideoxy-0-D-r i bo-hexopyranosy 1 - (1->4)-0-3-0-acety 1-2,6-d i deoxy-0-D-r ibo-hexopyranosyl)oxy]aindrost-14-en-17-karboxylové viz výše.

kyseliny je uvedena v příkladu 1

V aparatuře vysušené rozpuštěn methylester plamenem v dusíkové atmosféí by í (30,50,170)-3-[(0-3,4-di-O-acety1-2,6-d i deoxy-0-D-r ibo-hexopyranosyl-(1->4)-0-3-O-acety1-2,6-dideoxy-0-D-ribo-hexopyranosyl-(1->4)-O-3-O-acetyl-2,6-dideoxy-0-D-ribo-hexopyranosyl)-oxy]androst-14-en-17-karboxylové kyseliny (2,29 g, 0,0025 mol) v bezvodém methanolu (50 ml).

K roztoku byl přidán roztok methanolátu sodného (0,72 g, 0,14 mol) v bezvodém methanolu (10 ml) a reakční směs byla míchána 3 h při laboratorní teplotě. Poté byla reakční směs odpařena za sníženého tlaku. Produkt byl rozpuštěn ve vodě (50 ml). Směs byla okyselena 1 N kyselinou chlorovodíkovou na pH 1. Poté byl rychle přidán koncentrovaný hydroxid amonný do alkalické reakce pH 9. Výsledná směs byla extrahována dichlormethanem (2 x 50 ml) a spojené extrakty vysušeny (síran hořečnatý) a přefiltrovány. Filtrát byl odpařen za sníženého tlaku a odparek sušen ve vakuu s výtěžkem 1,9 g (100 % hmot.) sloučeniny 1. NMR a hmotnostní spektra odpovídala struktuře. Tato sloučenina byla použita do dalšího stupně.

B .

(30,50,170)-3-[(O-2,6-dideoxy-4-O-[1-(1-methyl-2-oxoethoxy)3-oxopropy1]-0-D-ribo-hexo-pyranosyl-(1->4)-O-2,6-dideoxy-0-D-ribo-hexopyranosyl]oxy]androst-14-en-17-karboxylová kyselina, methylester

K roztoku sloučeniny 1 (1,9 g, 0,0012 mol) ve směsi ethanol/voda 95/5 (100 ml) byl přidán roztok jodistanu sodného (1)9 9) 0,009 mol) ve vodě (20 ml). Rekační směs byla míchána 20 h při laboratorní teplotě. Pak byla přefiltrována a filtrát odpařen za sníženého tlaku. Odparek byl rozpuštěn ve vodě (100 ml) a extrahován dichlormethanem (3 x 50 ml), extrakty spojeny. Organická fáze byla promyta 1 X hmot. vodaým roztokem siřičitanu sodného (1 x 50 ml), vodou (2 x 50 ml), vysušena (síran hořečnatý) a přefiltrována. Filtrát byl odpařen za. sníženého tlaku do pevné bílé pěny a pěna dále sušena ve vakuu s výtěžkem 1,81 g (96 X hmot.) sloučeniny 2. Tato sloučenina byla použita do dalšího stupně.

C.

(3|3,5S,17f3)-3-[(0-2,6-dideoxy-4-0-[3-hydroxypropy1-1-(2hydroxy-1-methylethoxy)]-0-D-ribo-hexopyranosyl-(1->4)-0-2,6d i deoxy-0-D-ribo-hexopyranosyl]oxy]androst-14-en-17-karboxylová kyselina,_f methylester

K roztoku sloučeniny 2 methano1/voda 95/5 (100 ml) (0,94 g, 0,025 mol) a roztok (1,81 g, 0,0025 mol) ve směsi byl přidán borohydrid sodný byl míchán při laboratorní teplotě 1 h. Poté byla přikapána kyselina octová do pH 7. Reakční směs byla odpařena za sníženého tlaku. Odparek byl rozpuštěn ve vodě (30 ml), extrahován dichlormethanem (3 x 25 ml), spojené extrakty a přefiltrovány. Filtrát byl a odparek sušen ve vakuu s vysušeny (síran hořečnatý) odpařen za sníženého tlaku výtěžkem 1,31 g (72 X hmot.) sloučeniny 3. Tato sloučenina byla použita do dalšího stupně.

D.

(33,53,173)-3-[(0-2,6-dideoxy-S-D-ribo-hexopyranosyl-(1->4)-0-2,6-dideoxy-B-D-ribo-hexopyranosyl]oxy]androst-14-en-17karboxylová kyselina, methylester

K roztoku sloučeniny 3 (1,3 g, 0,0018 mol) v methanolu (100 ml) byla přidána 0,05 N kyselina chlorovodíková (22,1 ml) a roztok byl míchán při laboratorní teplotě 3 h. Poté byla reakční směs neutralizována nasyceným vodným roztokem hydrogenuhiičitanu sodného a odpařena za sníženého tlaku. Odparek byl rozpuštěn ve vodě (50 ml), extrahován dichlormethanem (3 x 25 ml), spojené extrakty vysušeny (síran hořečnatý) a přefiltrovány Filtrát byl odpařen za sníženého tlaku a odparek sušen ve vakuu s výtěžkem 1,0 g (94 % hmot.) sloučeniny 4. Tato sloučenina byla použita do dalšího stupně.

E.

(30,50,170)-3-[(0-3,4-Di-O-acety1-2,6-dideoxy-0-D-r i bo-hexopyranosyl-(1->4)-0-3-0-acety1-2,6-d i deoxy-0-D-r i bo-hexopyranosv oxyJandrost-14-en-17-karboxylová kyselina, methylester )Sloučenina 4 (1,0 g, 0,0017 mol) byla rozpuštěna v bezvodém pyridinu (15 ml). K roztoku byl přidán bezvodý anhydrid kyseliny octové (15 ml) a roztok za stálého míchání zahříván na 80 °C 3 h. Po ochlazení na laboratorní teplotu byla reakční směs míchána dalších 18 h a poté vlita do vody (200 ml) a míchána 10 min. Vodná směs byla extrahována dichlormethanem (2 x 75 ml) a organické extrakty spojeny. Organická fáze byla promyta nasyceným vodným roztokem hydrogenuhiičitanu sodného (3 x 100 ml), vodou (1 x 100 ml), vysušena (síran hořečnatý) a přefiltrována. Filtrát byl za sníženého tlaku odpařen do pevné pěny, pěna sušena ve vakuu s výtěžkem 0,78 g (64 % hmot.) sloučeniny 5. Tato sloučenina byla použita do dalšího stupně.

F.

(30,50,140,15a,170)-3-(( O-3,4-Di-O-acetyl-2,6-dideoxy-0-Dribo-hexopyranosyl-(1->4)-0-3-0-acety1-2,6-dideoxy-0-D-ribohexopyranosyl)oxy]-l5-jodo-14-isokyanato-androstan-17-karboxylová kyselina, methylester

Sloučenina 5 (0,76 g, 0,001 mol) byla rozpuštěna v octanu ethylnatém (4,5 ml) a acetonitrilu (9 ml) a roztok ochlazen na 1 °C lázní 1 ed/methano 1 . K roztoku byl přidán kyanatan stříbrný (0,19 g, 0,0013 mol) a po kapkách roztok jódu (0,30 g, 0,0012 mol) v ethylacetátu (13,5 ml) během 20 min. Poté byla reakční směs míchána ještě 1 h. Reakční směs byla zředěna octanem ethylnatým (20 ml) a přefiltrována přes celit. Filtrát byl promyt 1 % hmot. vodným roztokem siřičitanu sodného (1 x 50 ml) a organická fáze odpařena za sníženého tlaku s výtěžkem 0,9 g (96 % hmot.) sloučeniny 6 ve formě pevné pěny. Tato sloučenina byla použita do dalšího stupně.

G.

(30.50.140.170) -3-[(O-3,4-Di-O-acetyl-2,6-dideoxy-0-D-ribohexopyranosyl-(1->4)-0-3-0-acetyl-2,6-dideoxy-0-D-ribo-hexopyrano syl)oxy]-14-isokyanato-androstan-17-karboxylová kyselina, methy1 ester

V aparatuře vysušené plamenem v dusíkové atmosféře byla rozpuštěna sloučenina 6 (0,9 g, 0,001 mol) v bezvodém dichlormethanu (18 ml). K roztoku bylo přidáno katalytické množství 2,2’-azobisisobutyronitrilu (AIBN, 0,001 g) a tributylcín hydrid (0,3 ml, 0,32 g, 0,001 mol). Výsledný roztok byl míchán při laboratorní teplotě 3 h a poté odpařen za sníženého tlaku do oleje. Olej byl triturován hexanem za vzniku bílé pevné látky, která byla odfiltrována a sušena na vzduchu s výtěžkem 0,65 g (84 % hmot.) sloučeniny 7. Tato sloučenina byla použita do dalšího stupně.

H.

(30.50.140.170) -3-[(0-3,4-0 i-0-acety1-2,6-d i deoxy-0-D-r i bohexopyranosyl-(1->4)-O-3-O-acetyl-2,6-dideoxy-0-O-ribo-hexopyranosy1)oxy]-14-amino-androstan-17-karboxylová kyselina, methy 1 ester

K roztoku sloučeniny 7 (0,65 g, 0,00085 mol) v acetonitrilu (25 ml) byl přidán roztok uhličitanu draselného (1,8 g, 0,013 mol, 15 ekv.) ve vodě (10 ml). Reakce byla za stálého míchání zahřívána k varu pod zpětným chladičem 4 h. Po ochlazení na laboratorní teplotu byl z reakční smés odpařen acetonitril za sníženého tlaku. K vodnému zbytku byla přidána voda (10 ml) a směs byla okyselena 1 N kyselinou chlorovodíkovou na pH 1. Poté byl rychle přidán koncentrovaný hydroxid amonný do alkalické reakce pH 9. Vodná směs byla extrahována dichlormethanem (2 x 50 ml) a spojené extrakty vysušeny (síran hořečnatý) a přefiltrovány. Filtrát byl odpařen za sníženého tlaku a odparek sušen ve vakuu s výtěžkem 0,6 g (96 % hmot.) surové sloučeniny 8. Tato látka byla přímo použita άφ dalšího stupně.

I.

(30,50,140,170)-14-Amino-3-[(0-2,δ-dideoxy-0-D-ribo-hexopyranosyl-( 1 - >4)-0-2,6-dideoxy-0-D-ribo-hexopyranosyl)oxyjčiiitíto stan-17-karboxy 1ová kyselina, methylester

V aparatuře vysušené plamenem v dusíkové atmosféře byla rozpuštěna sloučenina 8 (0,60 g, 0,0082 mol) v bezvodém methanolu (25 ml). K roztoku byl přidán roztok methanolátu sodného (0,35 g, 0,007 mol) v bezvodém methanolu (10 ml) a reakční směs byla míchána 1 h při laboratorní teplotě. Poté byla reakční směs odpařena za sníženého tlaku do bílého odparku. Odparek byl rozpuštěn ve vodě (50 ml) a ochlazen v lázni led/voda. Roztok byl okyselen 1 N kyselinou chlorovodíkovou na pH 1. Poté byl rychle přidán koncentrovaný hydroxid amonný do alkalické reakce pH 9. Vodná směs byla extrahována dichlormethanem (2 x 25 ml) a spojené extrakty vysušeny (síran hořečnatý) a přefiltrovány. Filtrát byl odpařen za sníženého tlaku a odparek chromatografován na silikagelu (230-400 mesh) eluční směsí dichlormethan/methanol 9/1 s obsahem 0,5 % obj. koncentrovaného hydroxidu amonného. Frakce obsahující čistý produkt byly spojeny, odpařeny za sníženého tlaku a sušeny ve vakuu s výtěžkem methylesteru (30,50,140,170)-14-amino-3-[(O-2,6-dideoxy-0-D-ribo-hexopyranosyl-(1->4)-0-2,6-d i deoxy-0-D-r ibo-hexopyranosy1)oxy]andro stan-17-karboxylove kyseliny, výsledné sloučeniny.

Příklad 3 (30,50,140,170)-14-Amino-3-hydroxy-androstan-17-karboxylová kyselina, methylester

A.

Β.

C.

A.

(30,50,140,15a,170)-3-Acetyloxy-15-jodo-14-isokyanato-androstan-17-karboxylová kyselina, methylester

Příprava methylesteru (30,50,170)-3-acetyloxy-androst-14-en-17-karboxy1ové kyseliny je popsána v U.S. 4 855 280; U.S. 4 584 289; 4 325 879, dokumenty zahrnuty v odkazech.

Methylester (30,50,170)-3-acetyloxy-androst-14-en-17-karboxylové kyseliny (50 g, 0,134 mol) byl rozpuštěn v octanu ethylnatém (160 ml) a acetonitrilu (320 ml) a roztok ochlazen na 1 °C lázní 1ed/methano 1. K roztoku byl přidán kyanatan stříbrný (23,7 g, 0,158 mol) a po kapkách roztok jódu (37,2 g, 0,147 mol) v ethylacetátu (480 ml) během 20 min.

Rakční směs byla dále míchána ještě 1 h a přefiltrována. Filtrát byl promyt 1 X hmot. vodným roztokem siřičitanu sodného (1 x 500 ml) a organická fáze odpařena za sníženého tlaku s výtěžkem 70 g (96 X hmot.) sloučeniny 1 v olejovité formě. Tato sloučenina byla použita do dalšího stupně.

B.

(30,50,140, 170)-3-A cetyloxy-14 - i sokya^iato-androstan-17* karboxylová kyselina, methylester

Sloučenina 2 (65 g, 0,121 mol) byla rozpuštěna v bezvodém dichlormethanu (325 ml). K roztoku bylo přidáno katalytické množství 2,2’-azobisisobutyronitri1u (AIBN, 0,005 g) a tributylcín hydrid (33,3 ml, 36 g, 0,126 mol). Výsledný roztok byl míchán při 29 °C 2,5 h a poté odpařen za sníženého tlaku do oleje. Olej byl triturován hexanem (350 ml) za vzniku bílé pevné látky, která byla odfiltrována a sušena na vzduchu s výtěžkem 38,3 g (77 X hmot.) sloučeniny 2. Tato sloučenina byla použita do dalšího stupně.

C.

(30,50,170)-14-Amino-3-hydroxy-androstan-17-karboxylová kyselina, methylester

Ke sloučenině 2 byl přidán acetonitril (247 ml) a koncentrovaná kyselina chlorovodíková (Ί33 ml) a roztok byl míchán při laboratorní teplotě 3 h. Poté byla reakční směs zředěna vodou (133 ml) a míchání pokračovalo ještě 48 h při laboratorní teplotě. Reakční směs byla ochlazena lázní led/voda a teplota během neutralizace udržována pod 25 °C. Neutralizace byla provedena přikapáním koncentrovaného hydroxidu amonného do bazického pH (pH 9). Výsledá směs byla extrahována dichlormethanem (4 x 200 ml), spojené extrakty promyty vodou (1 x 250 ml), vysušeny (síran hořečnatý) a přefiltrovány. Filtrát byl odpařen za sníženého tlaku a odparek sušen ve vakuu s výtěžkem methylesteru (3β,5β, 14Θ, 1713)-14-amin o-3-hydroxy-a ndrostan-17-karboxylové kyseliny, výsledného produktu.

Estery karboxylových kyselin v poloze 17, sloučenin připravených postupy jodoisokyanatanové chemie viz příklady 1,2a 3 uvedené výše, lze převést na karboxamidové deriváty v poloze 17, viz příklady 4, 5, 6 a 7.

Λ

Příklad 4 (3β,5β,14β,17β)-14-Amino-3-[(0-2,6-d i deoxy-B-D-r i bohexopyranosyl-(1->4)-0-2,6-dideoxy-B-D-ribo-hexopyranosyl)oxy] -N-methyl-androstan-17-karboxamid

V nerezovém autoklávu byla sloučenina A,(30,50,140,170)-14-amino-3-[(O-2,6-dideoxy-0-D-ribo-hexopyranosyl-(1->4)“O2,6-d ideoxy-0-D-r ibo-hexopyranosy1)oxy]androstan-17-karboxylová kyselina, methylester (0,61 g, 0,001 mol) rozpuštěna v methanolu (15 ml) a roztok byl ochlazen v lázni led/voda. Roztokem byl probubláván plynný methylamin až do nasycení (15 min), reakční nádoba byla uzavřena a zahřívána na 90 °C 10 dní. Po ochlazení na laboratorní teplotu byla reakční nádoba otevřena a její obsah odpařen za sníženého tlaku. Odparek byl chromatografován na silikagelu eluční směsí dich1ormethan/ /methanol 80/20 s obsahem 1 % obj. koncentrovaného hydroxidu amonného. Frakce obsahující čistý výsledný produkt byly spojeny, odpařeny za sníženého tlaku a sušeny ve vakuu.

Příklad 5 (30,50,140,170)-14-Amino-3-[(O-2,6-dideoxy-0-D-ribo-hexopyranosyl-(1->4)-O-2,6-dideoxy-0-D-ribo-hexopyranosyl)oxy]androstan-17 karboxam i d

V nerezovém autoklávu byla sloučenina A, (30,50,140,170)-l4-amino-3-[(0-2,6-dideoxy-0-D-ribo-hexopyranosyl-(1->4)-02,6-di deoxy-0-D-ribo-hexopyranosyl)oxy]androstan-17-karboxylová kyselina, methylester (0,61 g, 0,001 mol) rozpuštěna v methanolu (15 ml) a roztok byl ochlazen v lázni led/voda. Roztokem byl probubláván plynný amoniak až do nasycení (15 min), reakční nádoba byla uzavřena a zahřívána na 90 °C 10 dní. Po ochlazení na laboratorní teplotu byla reakční nádoba otevřena a její obsah odpařen za sníženého tlaku. Odparek byl chromatografován na silikagelu eluční směsí dichlormethan/ /methanol 75/25 s obsahem 1 % obj. koncentrovaného hydroxidu amonného. Frakce obsahující čistý výsledný produkt byly spojeny, odpařeny za sníženého tlaku a sušeny ve vakuu.

Příklad 6 (30,50,140,170)-14-Amino-3-[(0-2,6-dideoxy-0-D-ribo-hexopyranosyl-(1->4)-0-2,6-dideoxy-0-D-ribo-hexopyranosy1-(1->4)-O-2,6-dideoxy-0-D-ribo-hexopyranosyl)oxy]androstan-17-karboxamid

CH.

CH,

OH

CH,

CH.

výsledný produkt

QH

Do nerezového autoklávu byla dána sloučenina 1, (30,50,

140,170)-14-ami no-3-[(0-2,6-d i deoxy-0-D-r ibo-hexopyranosyl(1->4)-O-2,6-dideoxy-0-D-ribo-hexopyranosyl-(1->4)-O-2,6-dideoxy -0-D-ribo-hexopyranosy1)oxy]androstan-17-karboxylové kyselina, methylester (0,298 g, 0,0004 mol) a methanol (10 ml) a roztok byl ochlazen v lázni led/voda. Roztokem byl probubláván plynný amoniak až do nasycení (15 min), reakčni nádoba byla uzavřena a zahřívána na 90 °C 10 dní. Po zkončení reakce, podle TLC, byla světle žlutá reakční směs odpařena na rotační vakuové odparce. Špinavě bílý odparek byl chromatografován (flash) eluční směsí dichlormethan/methanol 75/25 s obsahem hydroxidu amonného. Odebírané frakce byly monitorovány TLC. Frakce (43-81) dávající jednotnou skvrnu o Rf 0,23 byly spojeny, odpařeny na rotační vakuové odparce a sušeny ve vakuu při 55 °C přes noc s výtěžkem čistého výsledného produktu.

Λ

Příklad 7 (30,50,140,170)-14-Amino-3-[(0-2,6-dideoxy-0-D-ribo-hexopyranosyl-(1->4)-O-2,6-dideoxy-0-D-ribo-hexopyranosyl-(1-> 4)-0 -2,6-dideoxy-0-D-ribo-hexopyranosy1)oxy]-N-methylandrostan-17-karboxamid

COOCHa

Do nerezového autoklávu byla dána sloučenina 1, (30,50,

140,170)-14-ami no-3-[(O-2,6-dideoxy-0-D-ribo-hexopyranosyl~ (l->4)-0-2,6-dideoxy-0-D-r ibo-hexopyranosyl-(1->4)-0-2,6-d i deoxy-0-D-ribo-hexopyranosyl)oxy]androstan-17-karboxylová kyselina, methylester (0,298 g, 0,0004 mol) a methanol (10 ml) a roztok byl ochlazen v lázni led/voda. Roztokem byl probubláván plynný methylamin až do nasycení (15 min), reakční nádoba byla uzavřena a zahřívána na 90 °C 10 dní. Zahřívání bylo přerušeno, autokláv ochlazen, otevřen a provedena TLC analýza. Jakmile již v reakční směsi podle TLC nebyla přítomna výchozí látka, světle žlutá reakční směs byla odpařena na rotační vakuové odparce za vzniku polotuhého odparku. Tento odparek byl chromatografován (flash) eluční směsí dichlormethan/ /methano1/hydroxid amonný, počáteční poměr 80/20/0,9; konečný poměr 80/20/1,8. Frakce (22-98) dávající jednotnou skvrnu na TLC o Rf 0,43 (20 % obj. MeOH/CH2Cl2 + NH4OH) byly spojeny, odpařeny na rotační vakuové odparce za vzniku špinavě bílého odparku. Odparek byl triturován studeným etherem a odfiltrován za vzniku špinavě bílé pevné látky. Produkt byl sušen ve vakuu při 55 °C 48 h s výtěžkem čistého výsledného produktu.

Nové sloučeniny předkládaného vynálezu lze rovněž připravit chemickými postupy dosavadního stavu techniky, U.S.

325 879; U.S. 4 552 868; U.S. 4 584 289 a U.S. 4 885 280, dokumenty zahrnuty v odkazech. Následují některé příklady příprav sloučenin předkládaného vynálezu podle postupů dosavadního stavu techniky.

Příklad 8 (30,50,140,170)-14-Amino-3-[[(O-2,6-dideoxy-0-D-ribo-hexopyranosyl-(1->4)-0-6-deoxy-2,3-0-(1-methylethyli den)-a-L-mannopyranosy 1 ]oxy]androstan-17-karboxy1ová kyselina, methylester

X

H,C CH,

X

V CH,

H,C CH,

Ke směsi A, (1,125 g, 2,1 mmol) (30,50,140,170)-14-amino-3-[[6-deoxy-2,3-0-(1-methy1ethy1iden)-a-L-mannopyranosy1]oxy]androstan-17-karboxy1ová kyselina, methylester,

885 280, uvedeno 2,6-dideoxy-1,3,4-Dv dichlormethanu připravený postupem uvedeným v U.S. v odkazech, a (1,250 g, 2,1 mmol)

-(4-n itrobenzoy1)-D-r ibohexanopyranosidu (60 ml) byla přidána molekulová síta (3 g; 4 A, 8-12 mesh). Směs byla míchána 15 min při laboratorní teplotě a ochlazena v lázni suchý led/aceton; po kapkách přidán roztok trimethylsilyl trif1uormethy1su1fonátu (Lancaster) (2,0 ml) v dichlormethanu (10 ml). Směs byla míchána při -80 °C 6 h, pak ještě za chlazení přidán triethylamin (8,0 ml) a směs byla míchána ještě 10 min. Poté teplota reakční směsi pomalu vystoupila na laboratorní hodnotu (přes noc v lednici).

Rozpouštědlo bylo odstraněno ve vakuu a odparek chromatografován na silikagelu. Vedlejší složky byly eluovány dichlormethanem, frakce obsahující žádaný produkt eluční směsí octan ethy1natý/dich1ormethan (1:4) s výtěžkem 1,98 g.

K roztoku výše uvedeného p-nitrobenzoylovaného disacharidu (400 mg, 0,415 mmol) v bezvodém methanolu (1 ml) (Aldrich) byl přidán injekční stříkačkou roztok NaOCHa v bezvodém methanolu (7.2 ml, 0,1217 mmol). Směs byla míchána při 0 °C 6 h a výsledný produkt syntézy (3(3,5(3,14β, 17(3)-14-amino-3-[[(0-2,6-di deoxy-0-D-r i bo-hexopyranosy1-(1->4)-0-6-deoxy-2,3-0-(1-methylethyliden)-a-L-mannopyranosyl]oxy]androsian-17-karboxylová kyselina, methylester, precipitován z reakční* směs i.

Příklad 9

140-Ami no-3S-[a-L-ramnopyranosyloxy-(1->4)-2’,3’-O-i sopropy1 i de -α-L-ramnopyranosyloxy]-50-androstan-170-karboxy 1ová ky · u·, methylester n-

14B-Azido-30-(2’,3’-O-isopropyliden-a-L-ramnopyranosyloxy]-5B-androstan-170-karboxylová kyselina, methylester (260 mg), připravený podle U.S. 4 885 280 a U.S. 4 325 875, zahrnuto v odkazech, byl rozpuštěn v acetonitrilu (12 ml) a roztok míchán 15 min s molekulovými síty (130 mg, 3 A), poté byl přidán tri-O-acety1-ramnosyl bromid (325 mg). Dále byl přidán kyanid rtuťnatý (232 mg) a reakční směs míchána 3 h při laboratorní teplotě.

Dále byl přidán nasycený roztok hydrogenuhli čítánu sodného, směs přefiltrována, extrahována toluenem a chromatografována na sloupci silikagelu s přetlakem (50 kPa) eluční směsí octan ethy1natý/hexan (1:2), s výtěžkem 252 mg 14|3-az i do-3[3-[ tr i-2 ’ ’ , 3 ’ ’ , 4 ’ ’-0-acety 1 -a-L-ramnopyranosy1oxy-(1->4)-23’-O-i sopropy1 i den-a-L-ramnopyranosy1oxy]-5|3-androstan-17|3-karboxy lové kyseliny, methy 1 esteru .

Tento di-ramnosyl-14-azido derivát lze překrysta1 izovat ze směsi diethylether / petrolether.

Směs obsahující absolutní ethanol odkysličený argonem (8,5 ml), telurový prach (99,5 mg), borohydrid sodný (74 mg) a výše popsaný di-ramnosy1-14-azi do derivát (250 mg) byla míchána 24 h při laboratorní teplotě.

Reakční směs byla přefiltrována přes Celit, odpařena, extrahována octanem ethylnatým, extrakt promyt vodou a zbytek chromatografován na sloupci silikagelu s přetlakem eluční směsí chloroform/ethanol/hydroxid ampnný (89:10:1) s výtěžkem 14(3-amino-3(3-[a-L-ramnopyranosyloxy-(1->4)-2’,3’-Q-isopropyliden -a-L-ramnopyranosyloxy]-5S-androstan-173-karboxylové kyseliny, methylesteru.

Příklad 10

14(3-Amino-3S- [2’’,3’’,4’’ - tr i-0-acety 1 -α-L-ramnopy ranosy 1 oxy-(1->4)-2’,3’-0-isopropyliden-a-L-ramnopyranosyloxy]-5|3-androstan-17B-karboxylová kyselina, methylester

Tri-hydroxy derivát připravený podle příkladu 8 (5,0 g) byl rozpuštěn v dichlormethanu (37 ml) a roztok υ·' hucm, v ledové lázni. Dále byl přidán anhydrid kyseliny octové (2,4 ml) a dimethylaminopyridin (313 mg) a reakční směs byla míchána přes noc při laboratorní teplotě.

K reakční směsi byl přidán vodný roztok hydroxidu sodného a míchání pokračovalo dalších 5 min, poté byla reakční směs extrahována dichlormethanem.

Organická fáze byla promyta H2O + NH4OH, vysušena Na2SO4 a odpařena do sucha. Surový produkt acetylace byl chromatografován na sloupci silikagelu eluční směsí dichlormethan/methanol/hydroxid amonný (97:2,7:0,27) s výtěžkem 140-amino-30-[2’ ’ ,3’ ’ ,4’ ’-tri-O-acetyl-a-L-ramnopyranosyloxy-(1->4)-2’, 3’-O-isopropy1 iden-a-L-ramnopyranosyloxy]-50-androstan-170-karboxylově kyseliny, methylesteru.

Příklad 11

140-Amino-30-[2’’,3’’-0-i sopropy1 i den-a-L-ramnopyranosy1oxy—(1—>4)—2*,3’-0-isopropyliden-a-L-ramnopyranosy1oxy]-50-androstan-170-karboxylová kyselina, methylester

K roztoku tri-hydroxy derivátu připraveného podle příkladu 8 (11,2 g) v acetonu (77 ml) byl přidán dimethoxypropan (97 ml) a kyselina p-to1uensu1fonová.H2O (3,5 g). Reakční směs byla míchána při laboratorní teplotě 1 h. Poté byl přidán vodný roztok hydroxidu sodného, směs míchána ještě několik minut a extrahována směsí dichlormethanu s methanolem.

Organická fáze byla promyta H2O + NH4OH, vysušena Na2S04 a odpařena do sucha. Surový produkt byl přečištěn krystalizaci z isopropyletheru s výtěžkem 140-amino-30-[2’’,3’’-O-isopropyliden-a-L-ramnopyranosyloxy-(1->4)-2’,3’-0-isopropyliden -α-L-ramnopyranosyloxy]-50-androstan-170-karboxy lově kyseliny, methylesteru.

Příklad 12

140-Amino-30-[a-L-ramnopyranosy loxy-( 1->4)-a-L-ramnopyrano·” syloxy]-50-androstan-170-karboxylová kyselina, methylester

Tri-hydroxy derivát připravený podle příkladu 8 (103 mg) byl rozpuštěn v chloroformu (2 ml) v přítomnosti kyseliny trifluoroctové (0,2 ml) a vody (1 % hmot.). Reakční směs byla ponechána při laboratorní teplotě 1 h.

Reakční směs byla extrahována směsí dichlormethan./ methanol (85:5), organická fáze promyta nasyceným roztokem hydrogenuhlíčitanu, vodou a odpařena do sucha. Surový zbytek byl chromatografován s přetlakem na sloupci silikagelu eluční směsí dichlormethan/methanol/hydroxid amonný (84:15:1) s výtěžkem 140-amino-30-[a-L-ramnopyranosyloxy-(1->4)-a-L-ramnopyranosyloxy]-50-androstan-17|3-karboxylově kysel iny, methy lesteru.

Stanovení farmakologické účinnosti

Bylo postulováno, že pozitivní inotropní účinek kardiotonické steroidní sloučeniny je vyvolán jejím působením na sodíko-dras1ikovou pumpu v buněčné membráně srdečních svalových vláken. Konkrétně, kardiotonické steroidy inhibují Na⁺,K*-aktivovaný adenosin trifosfát, což vede ke zvyšování množství mezibuněčného kalcia. Je tedy k dispozici více kalcia k aktivaci kontrakčního mechanismu. Viz všeobecně Goodman and Gilman, The Pharmaco logica 1 Basis of Therapeutics, Chapter 34, (8th Ed., 1990).

Pozitivní inotropní účinnost nového chemického individua je stanovována jak v izolovaných srdečních tkáních tak na zvířecím modelu. Na izolovaných tkání lze provádět přímé měření inotropního potenciálu studované sloučeniny, neboť takový systém nenarušují metabolické, neurohormonální ani absorpční vlivy, které též ovlivňují odpověď tkání. Testv in vivo umožňují stanovení, které zahrnuje právě tyto fyziologické parametry v izolované tkáni chybějící.

Test inotropní účinnosti se provádí na papilárních svalových vláknech z morčecích srdcí. Ačkoliv je papilární sval spjat více s funkcí chlopní, jeho základní kontrakční odpověď je srovnatelná s odpovědí ventrikulárního svalu. V testu je segment papilárního svalu, odebraný z morčecího srdce, suspendován v lázni, která zajišťuje kontrolovanou teplotu, vodné prostředí a obsah substrátů nezbytných pro konec svalového vlákna se připojí vlákno suspendováno mezi pevnou základnou a snímačem. Při elektrické stimulaci lze změřit zkrácení nebo kontrakci vlákna v závislosti na různých koncentracích testovaných sloučenin v mediu. V typických podmínkách je pozitivní inotropní účinek definován jako vzrůst kontrakčního napětí vyvolaný neznámým činidlem; data jsou obvykle udávána v hodnotách koncentrace léčiva nezbytné k vyvolání 50 % vzrůstu kontrakčního napětí od základní hodnoty (ECso).

Stanovení pozitivní inotropní účinnosti in vivo se provádí dvěma způsoby. První způsob velmi připomíná výše uvedený in v itro postup tím, že přístroj na měření napětí se připojí k srdečnímu svalu a zaznamenává Při druhém způsobu je snímač napětí vsunut komory, kde zaznamenává změny tlaku.

Kontrakční napětí srdečního svalu je korelováno s rychlostí růstu tlaku v levé komoře a vyjádřeno jako +dP/dt. V obou způsobech jsou data vyjadřována jako množství léčiva nezbytného k vyvolání 30 % vzrůstu kontrakčního napětí nebo +dP/dt (tj., EC30) a jsou udávána v mg léčiva na kg hmotnosti zví řete.

funkci buněk. Na volný snímač napětí, takže je z vnější strany kontrakční napětí, do levé srdeční

Farmaceutické přípravky

Nové o 1 igosacharidické deriváty 14-aminosteroidních sloučenin předkládaného vynálezu lze podávat lidem nebo ostatním savcům různými cestami, což zahrnuje (ne výhradně) perorální dávkové formy a intramuskulární, intraperitoneální injekce (intravenózní, a subkutánní). Odborník dalších dávkových forem pripravi nové řadu oligosachar idické v oboru snadno obsahujících

14-aminosteroidních sloučenin předkládaného s využitím vhodných farmaceutických excipientů, pojednáno dále. Z hlediska pohodlí pacienta jsou nejvýhodnější perorální dávkové formy.

Výraz farmaceutický přípravek představuje směs obsahující bezpečné a účinné množství oligosacharidického derivátu 14-aminosteroidní sloučeniny, nebo směsi s 1 ou< · :·.

jako účinné složky a farmaceuticky přijatelné excipienty.

Vyjádření bezpečné a účinné množství představuje dostatečně velké množství sloučeniny nebo přípravku, které podstatně pozitivně ovlivní léčené příznaky a/nebo stav, a současně množství dostatečně malé, aby nezpůsobovalo vážnější vedlejší účinky (přiměřený vztah prospěchu k míře ohrožení), v rámci spolehlivého lékařského posouzení. Bezpečné a účinné množství účinné složky ve farmaceutickém přípravku předkládaného vynálezu závisí na konkrétním léčeném stavu, na věku a fyzickém stavu pacienta, závažnosti onemocnění, trvání léčby, povahy souběžné terapie, na použité účinné složce, konkrétních použitých farmaceuticky přijatelných excipientech a na dalších faktorech známých ošetřujícímu lékaři.

Vyjádření farmaceuticky přijatelné excipienty představuje libovolné fyziologicky inertní, farmakologicky neúčinné látky, odborníkovi v oboru známé, které vyhovují fyzikálním a chemickým vlastnostem konkrétních oligosacharidických derivátů 14-aminosteroidních sloučenin, působících jako účinná složka přípravku. Farmaceuticky přijatelné excipienty jsou (ne výhradně) polymery, pryskyřice, pojivá, zvláčňovadla, glidanty, der i váty vynálezu, jak bude· plastifikátory, d i s integrátory, rozpouštědla, doprovodná rozpouštědla, pufrační systémy, povrchově aktivní látky, konzervační činidla, sladidla, aromatické přísady, farmaceuticky čistá barviva nebo pigmenty a činidla ovlivňující viskozitu.

Vyjádření perorální dávková forma představuje každý farmaceutický přípravek určený na systematické podávání ústy do zažívacího ústrojí. Účelům předkládaného vynálezu vyhovuje podávání přípravku ve formě tablety, potahované nebo nepotahované; roztoku, suspenze; nebo kapsle, potahované nebo nepotahované.

Výraz injekce představuje farmaceutický přípravek, určený na systematické podávání lidem nebo jiným savcům, -ve formě roztoku nebo emulze obsahující účinou složku, cestou vpichu do pokožky, aby se uvedený roztok nebo emulze dostal do oběhového systému pacienta; injekce může být intravenózní, intramuskulární, intraperitoneální nebo subkutánní.

Odborník v oboru může úspěšně ovlivňovat rychlost dodávání léčiva, v některém z následujících bodů:

(a) vlastní účinná složka;

(b) farmaceuticky přijatelné excipienty; lze volit libovolné varianty excipientů pokud negativně neovlivňují účinnost zvolené účinné složky;

(c) typ excipentu a průvodní požadovaná hustota a prostupnost (vlastnosti související s bobtnavostí) zvolených excipientů;

(d) časově závislé vlastnosti excipientů samého a/nebo v rámci ostatních excipientů;

(e) velikost částic granulované účinné složky; a (f) vlastnosti excipientů závislé na pH.

Jak bylo výše uvedeno farmaceuticky přijatelné excipienty zahrnují (ne výhradně) polymery, pryskyřice, plastifikátory, plnidla, pojivá, zvláčňovadla, glidanty, disintegrátory, rozpouštědla, doprovodná rozpouštědla, pufrační systémy, povrchově aktivní látky, konzervační činidla, sladidla, aromatické přísady, farmaceuticky čistá barviva nebo pigmenty a činidla ovlivňující viskozitu.

Výhodné rozpouštědlo je voda.

Aromatické přísady vhodné pro předkládané účely zahrnují obvykle 0

Barviva zahrnují látky

Excipients, pp. Associat ion uveženo v látky uvedené v Remington’s Pharmaceut ical Sciences, 18th Edition, Mack Pub 1 ish ing Company, 1990, pp. 1288-1300, uvedeno v odkazech. Předkládané farmaceutické přípravky obsahují až 2 % hmot. aromatických přísad.

nebo pigmenty vhodné pro předkládané účely uvedené v Handbook of Pharmaceutica 1 81-90, 1988, American Pharmaceut i ca 1 & the Pharmaceutical Society of Great Britain, odkazech. Předkládané farmaceutické přípravky obsahují obvykle 0 až 2 % hmot. barviv nebo pigmentů.

Výhodná doprovodná rozpouštědla jsou (ne výhradně) ethanol, glycerin, propyleng1yko1, polyethylenglykoly. Předkládané farmaceutické přípravky obsahují obvykle 0 až 50 % hmot. doprovodných rozpouštědel.

Výhodné pufrační systémy jsou (ne výhradně) draselné a amonné soli kyselin: octové, borité, uhličité, fosforečné, jantarové, maleinové, vinné, citrónové, benzoové, mléčné, glycerové, glukonové, glutarové a glutamové. Zvláště výhodné jsou soli kyselin fosforečné, vinné, citrónové a octové. Předkládané farmaceutické přípravky obsahují obvykle 0 až 5 % hmot. pufračních systémů.

Výhodné povrchově aktivní látky jsou (ne výhradně) polyoxyethylensorbitanové estery mastných kyselin, polyoxyethylen monoalkyl ethery, monoestery sacharózy a estery a ethery lanolinu, a 1ky1su1fátové soli, sodné, draselné a amonné soli mastných kyselin. Předkládané farmaceutické přípravky obsahují obvykle 0 až 2 % hmot. povrchově aktivních látek.

Výhodná konzervační činidla jsou (ne výhradně) fenol, alkylestery p-hydroxybenzoové kyseliny, o-fenylfenolbenzoová kyselina a její soli, kyselina boritá a její soli, kyselina sorbová a její soli, ch1orbutano1, benzyl^lkohol , thimerosal, octan a dusičnan feny1 rtuťnatý, cetylpyridinium chlorid Zvláště výhodné jsou chlorid, paraben.

cetylpyridinium chlorid, methyl nitromersol, benzalkonium methyl paraben a propyl soli kyseliny benzoové, paraben a propyl paraben.

Předkládané farmaceutické přípravky obsahují obvykle 0 až 2 % hmot. konzervačních činidel.

Výhodná sladidla jsou (ne výhradně) sacharóza, glukóza, sacharin, sorbit, mannit a aspartam. Zvláště výhodná je sacharóza a sacharin. Předkládané farmaceutické přípravky obsahují obvykle 0 až 5 X hmot. sladidel.

Výhodná činidla ovlivňující viskozitu jsou (ne výhradně) methylcelulóza, sodná sůl karboxymethy1ce1u1ózy, hydroxypropyImethy1cě1u1óza, hydroxypropylcelulóza, alginát sodný, carbomer, povidon, acacia, guarová guma, xanthanová guma a traganth. Zvláště výhodné jsou methylcelulóza,. carbomer, xanthanová guma, guarová guma, povidon, sodná sůl karboxymethyleelulózy a křemičitan hořečnato-hlinitý. Předkládané farmaceutické přípravky obsahují obvykle 0 až 5 % hmot. činidel ovlivňujících viskozitu.

Výhodná plnidla jsou (ne výhradně) laktóza, mannit, sorbit, fosforečnan vápenatý, hydrogenfosforečnan vápenatý, zahuštěný cukr, a m i krokrysta 1 ická síran vápenatý, dextróza Předkládané farmaceutické škrob, celulóza.

přípravky obsahují obvykle 0 až 75 % hmot. plnidel.

Výhodná zvláčňovadla jsou (ne výhradně) magnézium stearát, kyselina stearová a talek. Předkládané farmaceutické přípravky obsahují obvykle 0,5 až 2 % hmot. zv 1 áčňovade1.

Výhodné glidanty jsou (ne výhradně) talek a koloidní oxid křemičitý. Předkládané farmaceutické přípravky obsahují obvykle 1 až 5 % hmot. glidantů.

Výhodné disintegrátory jsou (ne výhradně) škrob, sodný škrobový glykolát, crospovidon, sodná croskarme1óza farmaceutické d i s i ntegrátorů .

acacia, traganth, škrob, želatina, a mikrokrystalická celulóza. Předkládané přípravky obsahují obvykle 4 až 15 % hmot.

Výhodná pojivá jsou (ne výhradně) hydroxypropylcelulóza, preželatinizovaný povidon, hydroxypropy1ce1u1óza, hydroxypropylmethylcelulóza, methylcelulóza, cukerné roztoky jako jsou roztok sacharózy a sorbitu a ethy1ce1u1óza. Předkládané farmaceutické přípravky obsahují obvykle 1 až 10 % hmot. pojiv.

Předkládané farmaceutické přípravky obsahují obvykle 0,1 až 99,9 % hmot., výhodně 20 až 80 % hmot. předkládaných účinných sloučenin, vzhledem k celkové hmotnosti přípravku.

Předkládané farmaceutické přípravky tedy obsahují 15 až 95 % hmot. o 1 igosacharidického derivátu 14-aminosteroidni sloučeniny nebo směsi sloučenin jako účinné složky; 0 až 2 % hmot. aromatických přísad; 0 až 50 % hmot. doprovodných rozpouštědel; 0 až 5 % hmot. pufračního systému; 0 až 2 % hmot. povrchově aktivních látek; 0 až 2 % hmot. konzervačních činidel; 0 až 5 % hmot. sladidel; 0 až 5 % hmot. činidel ovlivňujících viskozitu; 0 až 75 % hmot. plnidel; 0,5 až 2 % hmot. zvláčňovadel; 1 až 5 % hmot. glidantů; 4 až 15 % hmot. disintegrátorů a 1 až 10 % hmot. pojiv.

Na tomto místě jsou popsány výhodné farmaceutické přípravky. Odborník v oboru je schopnen snadno měnit uvedené příklady (neomezující rozsah vynálezu) a dosáhnout řady farmaceutických přípravků.

Volba farmaceuticky přijatelných excipientů, které mají být použity v kombinaci s předkládanými ol igosacharidickými deriváty 14-aminosteroidnich sloučenin, je v podstatě určena cestou podání přípravku. Pokud se jedná o injekci, výhodným farmaceutických nosičem je sterilní fyziologický roztok o pH 7,4. Vhodné farmaceuticky přijatelné nosiče pro povrchovou aplikaci jsou nosiče vyhovující použití v krémech, gelech, náplastech a pod.

Výhodná cesta podání oligosacharidických derivátů 14-aminosteroidních sloučenin předkládaného vynálezu je cesta perorální. Výhodné jednotkové dávkové formy jsou proto tablety, kapsle a pod., obsahující bezpečné a účinné množství oligosacharidických derivátů 14-aminosteroidních sloučenin předkládaného vynálezu. Farmaceuticky přijatelné nosiče vhodné pro přípravu jednotkových dávkových forem pro perorální podání jsou v oblasti techniky známé. Jejich volba závisí na druhotných rysech jako je chuť, cena a skladovací stabilita, což nejsou vlastnosti z hlediska cílů předkládaného vynálezu kritické ani problematické pro zkušeného odborníka v oboru.

Jako perorální dávkové formy lze použít různé typy pevných forem jako jsou tablety, kapsle, granule a prášky. Tyto perorální dávkové formy obsahují výhodně 0,25 až 5,0 mg oligosacharidického derivátu 14-aminosteroidni sloučeniny. Výhodněji tyto perorální dávkové formy obsahují 0,5 až 1,0 mg o 1 igosacharidického derivátu 14-aminosteroidni sloučeniny. Tablety mohou být komprimované, triturované, potahované enteroso1ventnim obalem, cukerným potahem, filmem, nebo vícenásobně komprimované, mohou obsahovat vhodná pojivá, zv láčňovadla, ředidla, disintegrátory, barviva, aromatické přísady, činidla indukující tekutost a rozpustnost. Kapalné perorální dávkové formy jsou vodné roztoky, emulze, suspenze, roztoky a/nebo suspenze rekonstituované z nešumivých granulí, šumivé preparáty připravené ze šumivých granulí, mohou obsahovat vhodná rozpouštědla, konzervační činidla, emulsifikátory, činidla podporující suspenze, sladidla, činidla ovlivňující rozpustnost, a aromatické přísady. Výhodné nosiče pro perorální podávání jsou želatina, propylenglykol, bavlníkový a sezamový olej.

Předkládané přípravky lze dále podávat topicky, tj. přímým přiložením nebo rozetřením na epidermální nebo epitheliální tkáň. Jsou to např. vymývací roztoky, krémy, i pevné látky. Tyto účinné množství, oligosacharidického derivátu Výhodněji obsahují 1,0 mg řed i dla, barviva roztoky, gely bezpečné a topické přípravky obsahují výhodně 0,5 až 2,0 mg 14-aminosteroidní sloučeniny, oligosacharidického derivátu Výhodné nosiče pro topické

14-aminosteroidní sloučeniny podávání jsou takové, které zajistí aby přípravek zůstal na pokožce jako souvislá vrstva odolávající odstranění pocením nebo ponořením do vody. Obecně jsou nosiče organické povahy a schopné dispergovat nebo rozpustit o 1 igosacharidický derivát

Mezi nosiče lze zahrnout emolienty, emu1sifikátory,

14-aminosteroidní sloučeniny, farmaceuticky přijatelné zahušťovadla a rozpouštědla.

Předkládané přípravky lze dále podávat cestou inhalace. Základní hmotu těchto přípravků tvoří rozpouštědlo jako je voda nebo glykol, konzervační činidlo jako je methyl nebo propyl paraben a nosný plyn jako je dusík nebo oxid uhličitý.

Dále lze předkládané přípravky podávat jako subkutánní implantáty připravené ze silikonových elastomerů, kopolymerů ethylen/vinylacetát nebo kys. mléčná/kys. glykolová.

Následující příklady ilustrují přípravu farmaceutických přípravků obsahujících nové sloučeniny předkládaného vynálezu, rozsah možností však nemají omezit.’

Příklady farmaceutických přípravků

Příklad 1

Perorální dávková forma (tableta) pro okamžitou úlevu obsahující (30,50,140,170)-14-amino-3-[(0-2,6-d ideoxy-0-D-r ibo-hexopyranosyl-(1->4)-0-2,6-dideoxy-0-D-n'bo-hexopyranosy1-(1->4)-0-2,6-dideoxy-0-D-ribo-hexopyranosyl )oxy]-N-methylandrostan-17-karboxamid má následující složení:

Účinná složka

Množství (30,50,140,170)-14-Amino-3- 1,0 mg [(O-2,6-dideoxy-0-D-ribo-hexopyranosyl-(1->4)-0-2,6-dideoxy-0-D-ribo-hexopyranosyl-(1->4)-0-2,6-d i deoxy-0-D-r ibo-hexopyranosyDoxy] -N-methylandrostan-17-karboxamid

Excipienty

Mikrokrystalická celulóza	28,5	mg
Laktóza, vodná	67,2	mg
Crospovidon	3,0	mg
Magnézium stearát	0,3	mg

Postup přípravy (10 000 tablet)

1) 10,0 g léčiva, 285 0 g

672,0 g laktózy a 30,0 g mikrokrysta1ické celulózy, crospovidonu bylo smícháno v mixeru Patterson-Ke1ley (PK) nebo jiném vhodném mísícím zařízení,

2) směs připravená v bodě 1) byla smíchána s 3,0 g magnézium stearátu v PK nebo jiném vhodném mísícím zařízení,

3) výsledná směs byla komprimována do 100,0 mg tablet na vhodném tabletovacím stroji.

A

Příklad 2

Parenterální dávková forma vhodná pro intravenózní (I.V.) injekci obsahující methylester (30,50, 140, 170) -14-am ino-3-[[(0-2,6-di deoxy-0-D-r i bo-hexop'- no syl-( 1->4)-0-6-deoxy-2,3-0-(1-methylethy1 i den)-a-L-mannopyranosy1]oxy]androstan-17-karboxylové kyseliny, má následující složení:

Účinnásložka Množství (30,50,140,170)-14-Amino-3-[[(O-2,6-dideoxy-0-D-ribo-hexopyranosyl-(1->4)-0-6-deoxy-2,3-0-(1-methy 1 ethy 1 iden)-a-L-mannopyranosy 1]oxy ]androstan-17-karboxylová kyselina, methylester

Exc ip ienty

Mann it

Kys. citrónová/ citrát sodný

1,0 mg

200,0 mg dostatečné množství adjustaci pH 5,5-6,5

Postup přípravy (1 000 ampulí)

1) 10,0 g léčiva, 200,0 g mannitu a vhodné množství citrátu sodného a kyseliny citrónové bylo rozpuštěno v 2200,0 ml sterilní deionizované vody pro injekce,

2) roztok z bodu 1) byl přefiltrován přes 0,22 um sterilní ^Λ membránový filtr,

3) 2,2 ml sterilního roztoku bylo plněno do skleněných ampulí typ I a lyofi 1izováno ve vhodném lyofi 1izátoru ,

4) ampule po lyofilizaci byly uzavřeny brombutylovými nebo jinými vhodnými zátkami a zapečetěny. Lyof i 1 i/<, t rekonstituuje přidáním 2,0 ml sterilní vody pro injekce přímo před upotřebením.

Příklad 3

Perorální dávková forma (tableta) s protrahovaným účinkem obsahující (30,50,140,170)-14-amino-3-[ (O-2,6-dideoxy-0-D-ribo-hexopyranosyl-(1->4)—0-2,6-di deoxy-0-D-r ibo-hexopyranosyl-(1->4)-0-2,6-dideoxy-0-D-r ibo-hexopyranosyl)oxy]androstan-17-karboxamid má následující složení:

Účinná složka

Množství (30,50,140,170)-14-Amino-3- 5,0 mg [(O-2,6-dideoxy-0-D-ribo-hexopyranosyl-(1->4)-0-2,6-dideoxy-0-D-ribo-hexopyranosyl-(1->4)-O-2,6-dideoxy-0-D-ribo-hexopyranosy 1 )oxy]androstan-17-karboxami d

Excipienty

HydroxypropyImethylcelulóza Laktóza, vodná Magnézium stearát Koloidní oxid křemičitý

120,0 mg 120,0 mg

12,0 mg 4,0 mg

Postup přípravy (10 000 tablet)

1) 50,0 g léčiva, 1,2 kg hydroxypropylmethylcelulózy a 1,2 kg laktózy bylo smícháno v dvoupláštovém mixeru Patterson-Ke1ley nebo jiném vhodném mísícím zařízení,

2) směs připravená v bodě 1) byla lehce smíchána s 120,0 g magnézium stearátu a 40 g koloidního oxidu křemičitého ve vhodném mísícím zařízení,

3) výsledná směs byla komprimována do 261,0 mg tablet na vhodném tabletovacím lisu.

Různé

Kromě výše uvedených příkladů může být účinná složka začleněna do řady různých dávkových forem:

1) farmaceutický aerosol obsahující rozpouštědlo (např. vodu, glykoly), konzervační látky (methyl nebo propyl paraben) a nosné plyny (dusík, oxid uhličitý) nebo další vhodné excipienty,

2) rektální čípek obsahující theobromový olej nebo polyethylen glykoly,

3) subkutánní kopo 1ymery m1éčná/kys po 1 ymery, implantát obsahující silikonové elastomery, ethy1en/vinylacetát, kopolymery kys.

glykolová a hydrogely nebo jiné vhodné

4) komerčně dostupný implantovatelný prostředek

5) transdermální systém obsahující silikonovou kapalinu v membráně ethylen/vinylacetátového kopolymerů nebo další vhodné složky sloužící k dodávání léčiva s nebo bez pomoci iontoforézy,

6) lícní mukoadhezívní náplast obsahující hydrokoloidní polymery (hydroxyethy1ce1u1ózu, hydroxypropyl celulózu, povidon) a další vhodné polymery.

Způsoby léčby

Výraz městnavé srdeční selhání (CHF), jak je zde používán, označuje progresivní onemocnění, při kterém se hemodynamická kapacita i vlastní strukturální integrita srdce postupně a nevratně zhoršují. Postup CHF podle příznaků pacienta byl klasifikován NYHA (New York Heart Association) do čtyř funkčních tříd.

New York Heart Association

Funkční klasifikace

Třída

I. Pacienti se srdečním onemocněním, které neomezuje jejich fyzickou aktivitu. Běžná fyzická aktivita nevyvolává únavnost, bušení srdce, dušnost nebo anginózní bolest.

II

Pacienti se srdečním onemocněním, které vyvolává lehké omezení fyzické aktivity. Při odpočinku se cítí pohodlně. Běžná fyzická aktivita vyvolává únavnost, bušení srdce, dusnost nebo anginózní bolest.

III. Pacienti se srdečním onemocněním, které vyvolává zřetelné omezení fyzické aktivity. Při odpočinku se cítí pohodlně. Nižší než běžná fyzická aktivita vyvolává únavnost, bušení srdce, dusnost nebo anginózní bolest.

Λ

IV. Pacienti se srdečním onemocněním, které vyvolává neschopnost podstoupit jakoukoliv fyzickou aktivitu bez pocitu nepohodlí. Příznaky srdeční nedostatečnosti nebo anginózního syndromu se projevují i při odpočinku. Při jakékoli fyzické aktivitě se pocit nepohodlí zvyšuje.

III. a IV. třída dle NYHA, označovány též jako zjevné městnavé srdeční selhání, jsou často léčeny podáním sloučenin, které svým pozitivním inotropním efektem zvyšují srdeční kontrakt i 1 i tu. Referenční sloučeninou pro zvyšování srdeční kontrakt i 1 i ty je perorální digoxin. Léčba symptomů zjevného CHF podáváním inotropních látek, které zvyšují CO (minutový srdeční objem) a tím vyhovují metabolickým požadavkům těla, zlepšuje kvalitu života pacienta, protože srdce lépe plní metabolické potřeby těla. Obecně se však soudí, že inotropní látky jako je digitalis, mohou zvyšovat stupeň úmrtnosti, protože inotropní efekt vede k pracovnímu přetížení srdce. Digitalis má dále nízký prospěch ku míře rizika a jeho dřívější podávání, než je III. třída NYHA podle funkční klasifikace, není moudré.

Dále bylo zjištěno, že bipyridinový inotrop Milrion, zhoršuje ventri ku 1árni arytmie a pravděpodobně zvyšuje úmrtnost. Viz DiBianco, R., et al., A Comparison of Oral Milrion, Digoxinm and Their Comb inat ion

Patients with Chronic Heart Failure

320:677 (1989).

Výraz '‘hemodynamický, jak je zde používán, se vztahuje in the Treatment of N. Engl. J. Med.

k mechanickým schopnostem srdce. První důsledek srdečního selhání je snížení objemu při srdečním stahu, což lze změřit jako množství krve ejektované při každém stahu srdce. Sdrce pak ztrátu nahrazuje zvýšením CO, aby byl zachován tok krve do životně důležitých orgánů. Jak srdeční selhání postupuje, tlak uvnitř srdce při plnění stále roste, stejně jako tlak v plicích a žílách. Srdce je stále méně schopné dodržet potřebný CO.

Výraz strukturální poškození, jak je zde používán, se týká mikroskopických a makroskopických změn na sdrci pacientů· trpících CHF. Na mikroskopické úrovni dochází k následujícím strukturálním změnám: při počátečním stadiu srdeční hypertrofie dochází morfologicky ke zvětšení myofibril a mitochondrií a k rozšíření mitochondrií a jader. Svalové buňky jsou větší převážně zachováno zřetelné zvětšení než je obvyklé, ale uspořádání bun

Ví

V pokročilejším stadiu hypertrofie, vede nebo zvýšení počtu specifických organel, jako např. mitochondrií, i nepravidelný přírůstek nových kontrakt i 1 ních elementů v lokalizovaných oblastech buněk, k nevýrazné změně v uspořádání buněk a jejich tvarů. Sousední buňky se mohou lišit stupněm zvětšení.

Buňky při dlouhodobé hypertrofii vykazují zřetelnější poruchy v uspořádání, jako jsou výrazně zvětšená jádra s vysoce laločnatými membránami, které nahrazují sousední myofibrily a vedou k zhroucení normálního uspořádání Z-proužku. Počáteční preferenční zvětšení mitochondrií je nahrazeno převážně objemem myofibril. Při pozdním stadiu hypertrofie dochází k úhynu buněk, ke ztrátě kontraktilnich prvků s výrazou poruchou Z-proužku, k vážnému poškození normálního paralelního uspořádání sarkomér, k rozšíření a výraznému zkroucení T-tubulů a k nahrazení kontrakt i 1ních prvků fibrózní tkání. Viz Braunwald, Heart Disease: A textbook of Cardiovascu lar Medicine, Vol. 1 (3rd ed. 1988). Tyto mikroskopické změny se na makroskopické úrovni projevují srdeční hypertrofii neboli zvětšením sdrce. Hypertrofické srdce se stává méně výkonným díky mikroskopickým změnám vyvolaným ztrátou kontraktilnich prvků a deponováním fibrózní tkáně. Klinické příznaky pacienta se s postupem do dalších tříd podle NYHA funkční klasifikace zhoršují.

Sloučeniny předkládaného vynálezu zvyšují kontrakti 1 i tu srdce. Doporučené denní dávky se pohybují v rozmezí 0,001 až 5 mg/kg jak určí ošetřující lékař v souladu se způsobem podávání, vážností CHF a trvání léčby.

Pro ilustraci konkrétního použití těchto nových o 1 igosacharidických derivátů 14-aminosteroidních sloučenin při léčbě CHF, je uvedeno několik klinických příkladů (rozsah použití neomezujících).

Kasuistiky

Příklad 1

Obézní 65-letá žena, běloška, s dvacetiletou anamnézou insu 1 inoindependentního diabetes mellitus a hypertenze, a dále s anamnestickým údajem o infarktu myokardu proběhlém před dvěma lety, je přijata na koronární jednotku s akutním infarktem myokardu spodní stěny po 12-ti hodinách trvání symptomů. Její pobyt v nemocnici je komplikován akutním plicním edémem, který se manifestuje těžkou klidovou dušností, ortopnoí, zvýšenou náplní jugulárních žil, bilaterálními chrůpky dosahujícími ke střední části skapuly; di laťovaným srdcem a oboustrannými infiltráty na Rtg. Její plicní tlak v zaklínění je 35 mmHg. Je léčena morfinem, kyslíkem, intravenózně podávaným nitroglycerinem, loop diuretikem a 0,25 mg látky (30,50,140,170)-14-amino-3-[(O-2,6-dideoxy-0-D-ribo-hexopyranosyl-(1->4)-O~2,6-dideoxy-0-D-ribo-hexopyranosyl-(1->4)-O-2,6-dideoxy-0-D-ribo-hexopyranosy1)oxy]-N-methylandrostan-17-karboxamid, podávanými intravenózně každé 4 hodiny po 3 dny a následně 0,25 mg látky (30,50,140,170)-14-amino-3-[(O-2,6-dideoxy-0-D-ribo-hexopyranosyl-(1->4)-O-2,6-dideoxy-0-D-ribo-hexopyranosy1-(1->4)-O-2,6-dideoxy-0-D-ribo-hexopyranosyl)oxy]-N-methylandrostan-17-karboxamid podávanými perorálně 1x denně. Při tomto režimu se lepší a je během deseti dnů propuštěna s dušností při mírné námaze (mírné městnavé srdeční selhání II. třída NYHA) a je sledována jako ambulantní pacientka léčená diuretikem, ACE inhibitorem, nitrog1ycerinem a 0,25 mg látky (30,50,140,170)-14-amino-3-[(O-2,6-dideoxy-0-D-ribo-hexopyranosyl-(1->4)-O-2,6-dideoxy -0-D-r ibo-hexopyranosy1-(l->4)-O-2,6-dideoxy-0-D-ribo-hexopyranosy1)oxy]-N-methylandrostan-17-karboxamid podávanými perorálně 1x denně.

Příklad 2

U 44-letého muže, černocha, s anamnézou dlouhotrvající nekontrolované hypertenze a jednoletou anamnézou mírného městnavého srdečního šlehání (III. třída dle NYHA) zjištěno během předchozích dvou týdnů několik presynkopálních záchvatů. Stěžuje si také na únavu a dušnost při oblékání. Léčba zahrnuje digoxin (0,25 mg/den), lasix a ACE inhibitor. Má trojdobý cval, perima1eorá1 ηí edém s tvořícími se důlky při pohmatu, hypertrofii levé komory a občasné komorové Dodatečné vyšetření odhaluje častý ektop ický na EKG. komorový rytmus a při Holterově komorové tachykardie, při frakci 30 %. Sérová podezření že arytmie toxicity digitalisu perorální podávání záchvat paroxysmální extrasystoly multifi kál ní monitorování rad ionuk1 idové ventrikulografi i ejekční hladina digoxinu je rovna 2,2 ng/ml. Je a presynkopické stavy jsou výsledkem a tato látka je vysazena. Je zahájeno

0,25 mg látky (30,50,140,170)-14-amino-3-[[(0-2,6-dideoxy-0-D-r ibo-hexopyranosy1-(1->4)-0-6-deoxy-2,3-O-(1-methy1ethyliden)-a-L-mannopyranosy1]oxy]androstan-17-karboxy1ová kyselina, methylester ix denně. Vzhledem k tomu, že přetrvává únavnost a dušnost, je během následujících šesti týdnů dávka zvýšena k 1 mg denně. Neobjevují se žádné další záchvaty presynkop, dochází k redukci komorových extrasystol a při opakovaném Holterově monitorování se vůbec neobjevuje paroxysmální komorová tachykardie a dochází ke zvýšení ejekční frakce na 38 %. Dušnost při samoobslužných činnostech jako je oblékání odezněla a pacient je schopen pracovat ve své zahradě s občasnou mírnou dusností (II. třída dle NYHA). Během ročního sledování se jeho stav nemění.

Příklad 3

24-letá dosud zdravá žena, číňanka, přichází s dvouměsíční anamnézou dusnosti při těžké námaze. Není zde rodinná zátěž ve smyslu srdeční choroby; je nekuřačka a nepije alkohol. Fyzikální vyšetření je normální s výjimkou tachykardie a laterálně posunutého bodu maximálního úderu. Na EKG je vidět srdeční frekvence 105 a nespecifické oploštění vlny T, Rtg odhaluje rozšířené srdce. Echokardiogram ukazuje rozšíření obou komor s celkovou hypokinézou a ejekční frakci 40 %. Chlopně vypadají normálně. Symptomy limitované vyšetření zátěžovou bicyklovou ergometrií ukazuje nepřítomnost ischemie. Je postavena diagnóza idiopatické dilatační kardiomyopatie, I. třída dle NYHA. Počáteční léčba ACE inhibitory vede k nesnesitelnému kašli, proto je přerušena. Je podávána látka (30,50,140,170)-14-ami no-3-[(0-2,6-di deoxy-0-D-r ibo-hexopyranosyl-(1->4)-O-2,6-dideoxy-0-D-ribo-hexopyranosyl-(1->4)-O-2,6-dideoxy-0-D-ribo-hexopyranosyl)oxy]androstan-17-karboxamid během příštího měsíce fyzická zde také zvýšení ejekční frakce % a zvýšení doby zátěže při v dávce 1 mg 2x denně a zdatnost pacientky stoupá. Je (dle echokardiogramu na 55 zátěžové ergometrii na 200 vt

Příklad 4

55-letý muž, běloch, který dosud prodělal dva infarkty myokardu a jehož otec zemřel náhle ve stáří .padesáti let, je se stabilní námahovou angínou pectoris udržován 2 roky v dobrém stavu, při léčbě isosorbid dinitrátem a beta blokátorem. Během předchozího měsíce se u něj nicméně vyvíjí dušnost v situaci, kdy vyjde jedno poschodí, dále noční perimaleorální otoky a občasná záchvatová noční dusnost.

Má klidový puls 90, lehké perima1eorá1 ηí otoky, trojdobý cval, rozšířené srdce a Kerlyho B linie na Rtg. Je postavena diagnóza mírného městnavého srdečního selhání (II. třída dle NYHA), způsobeného ischemickou srdeční nemocí. Jeho beta blokátor je postupně vyřazen a přidán ACE inhibitor a diuretikum, ale při tomto novém režimu se městnavé srdeční selhání zhoršuje. Je podávána perorálně látka (30,50,140,170)-14-ami n o-3 — [(0-2,6-d i deoxy-0-D-r i bo-hexopyranosy1 — (1 — >4)—0—

-2,6-d ideoxy-0-D-r ibo-hexopyranosy1)oxy]androstan-17-karboxy- . lová kyselina, methylester v dávce 4 mg 1x denně. Jeho dusnost a edém odeznívají (I. třída dle NYHA), srdeční frekvence klesá k 75, trojdobý cval mizí, velikost srdce se zmenšuje a městnání na Rtg ustupuje. Při bicyklovém zátěžovém testu provedeném o týden později dochází ke zvýšení doby zát-'?' -'íG 170 vteřin. Žádné zhoršení se během příštích dvou let neobjeví.

Příklad 5

60-letá žena, černoška, která má v anamnéze tři infarkty myokardu a následné těžké ' městnavé srdeční selhání (IV. třída dle NYHA), je hospitalizována pro akutní dekompenzaci proběhnuvší čtyřikrát během posledních šesti týdnů vzdor léčbě nejvyššími možnými dávkami lasixu, isosorbid dinitrátu, dioxinu a ACE inhibitoru. Její příznaky zahrnují edém, klidovou dusnost, ortopnoe i při podložení třemi polštáři, výraznou únavnost a zmatenost. Je učiněno rozhodnutí vysadit digoxin a zavést léčbu látkou (30,50,140,170)-14-amino-3-[(O-2,6-dideoxy-0-D-ribo-hexopyranosyl-(1->4)-O-2,6-dideoxy-0-D-r ibo-hexopyranosy1 — (1 — >4)—O—2,6-d ideoxy-0-D-r i bo-hexopyranosy 1 )oxy ]andr ostaň-1 7-karboxy 1 ová kyselina, methylester. Látka (30,50,140,170)-14-amino-3-[(O-2,6-dideoxy-0-D-ribo-hexopyranosyl-(1->4)-0-2,6-d i deoxy-0-D-r i bo-hexopyranosy1-(1->4)-O-2,6-d i deoxy-0-D-r ibo-hexopyranosyl)oxy]androstan-17-karboxylová kyselina, methylester je podávána v počáteční dávce 0,5 mg perorálně 1x denně, ale vybalancování dávky k 2 mg 3x denně si vyžádalo dobu dvou měsíců. Na konci dvouměsíčního období její ortopnoe, zmatenost a edém ustupují; a u pacientky se zvyšuje schopnost zvládat běžné denní činnosti jako je oblékání bez dušnosti (III. třída dle NYHA, mírné městnavé srdeční selhání). Také její ejekční frakce se zvyšuje z 20 na 35 %; Zůstává stabilizovaná během následujících tří měsíců.

Příklad 6

60-letý muž, běloch, alkoholik, v poslední době (2 měsíce) střízlivý, kuřák po dobu 30 let, je přijat do nemocnice s tříměsíční anamnézou progresivně se horšící dušnosti při námaze, únavnosti, ortopnoe, edému a záchvatové noční dušnosti. Je dušný při čištění zubů. Fyzikální vyšetření ukazuje kachetického mírně úzkostného muže s dechovou frekvencí 30 za minutu, se srdeční frekvencí 110 úderů za minutu, krevním tlakem 90/50, trojdobým cvalem, otokem kolen střední intenzity, zvýšenou náplní krčních žil, hepatomega1 i i, ascitem, s chrůpky při obou bazích a rozšířeným srdcem. Rozsáhlé vyšetření umožní diagnózu chronické alkoholické hepatitidy, chronické plicní obstruktivní choroby a lehkého městnavého srdečního selhání (III. dle NYHA) v důsledku toxické (alkoholické) kardiomyopatie. Je započata léčba hydrochlorothiazidem, ACE inhibitorem a látkou 140-amiηο-3β-[a-L-ramnopyranosyloxy-(1->4)-a-L-ramnopyranosyloxy]-50-androstan-1713-karboxylová kyselina, methylester v denní perorální dávce 0,25 mg/den. Rychle se lepší a je za týden propuštěn. Poté, co zhubl o 10 kg, je pacient schopen dojít k poštovní schránce s mírnou dušnosti (II. třída dle NYHA). Jeho dechová frekvence je 20, srdeční frekvence 90, trojdobý cval již není slyšitelný, edém a chrůpky ustupují. Hepatomega1 ie přetrvává nezměněna, ale ascites je lehce zmenšen. Ejekční frakce stoupá z 32 na 45 % a velikost srdce se zmenšuje.

Příklad 7

U 70-leté ženy, bělošky, žijící sedavým způsobem života, je na Rtg zjištěno rozšířené srdce. Rtg je prováděn před elektivní chirurgií katarakty. Popírá výskyt bolesti na hrudi, dušnost nebo hypertenzi v anamnéze, cukrovku nebo srdeční onemocnění. Její EKG ukazuje nespecifické změny ST úseku a T vlny; standartní klinická laboratorní normální. Bicyklový zátěžový test je ukončen by prokázal ischemickou chorobu srdeční ukazuje rozšíření obou komor, normální chlopně a ejekcní frakci 30 %. Dostává preventivní kůru látky 140-amino-3l3-[a-L-ramnopyranosyloxy-(1->4)-2’,3’-0-i sop ropy 1 iden-a-L-ramnopyranosy loxy]-5|3-androstan-17|3-karboxylová kyselina, methylester v dávce 0,25 mg perorálně 1x denně. Její ejekční f;·.· ’ ·<: se zvyšuje na 40 % a v době operace druhé katarakty o pět let později je asymptomatická.

vyšetření jsou pro únavu, aniž Echokard i ogram

Průmyslová využitelnost

Práce přináší nové oligosacharidické deriváty 14-aminosteroidních sloučenin a farmaceutické přípravky jež je obsahují, využitelné při léčbě městnavého srdečního selhání (CHF).

Dále přináší nový postup zavedení amino skupiny do polohy 14 steroidního skeletu, zpočívající v 1) adici jodoisokyanatanu na dvojnou vazbu, 2) dehalogenaci a 3) hydrolýze isokyanatanové skupiny na amin.

Claims

PATENTOVÉ

NÁROKY

1. Ol igosacharidické deriváty 14-aminosteroidních sloučenin a jejich farmaceuticky přijatelné soli nebo estery, obecného vzorce:

kde

a) Rí je (i) COORs , kde

Rs je vodík; nižší Ci-e alkyl; nižší Ci-e alkyl substituovaný amino skupinou; arylalkyl nebo heteroary 1 a 1ky1 nebo cyklický uhlovodík; výhodné nižší C1-6 alkyl; nebo (ii) CHReOH, kde

Re je vodík nebo nižší Ci-β alkyl; nebo (iii) COR” ’, kde

R’” je vodík; nižší Ci-e alkyl; nižší C1-6 alkyl substituovaný amino skupinou; amino nebo dialkylamino; a

b) R2 je -NR7R8, kde R7 a Ra jsou stejné nebo odlišné a jsou vodík nebo nižší Ci-β alkyl; výhodně vodík;

c) R3 je (i) o 1 igosacharidický zbytek obecného vzorce:

O kde. R9 je vodík; methyl; hydroxy; karboxy; acetoxy; ary 1 a 1ky1oxy; heteroarylalkyloxy; nebo benzoxy; Rio je vodík; methyl; karboxy; acetoxy; arylalkyloxy; heteroarylalkyloxy; benzoxy nebo hydroxy; Ri1 je kyslík; pokud je Rii substituent terminálního monosacharidického zbytku je Ri1 OH; methyl; acetoxy; heteroarylalkyloxy; arylal! '^i!oav; a R12 je vodík; methyl; methy1hydroxymethy1; nebo acetoxymethy1; nebo (ii) oligosacharidický zbytek obecného vzorce:

CH.

kde Ri 4 a Ri 5 jsou shodné nebo odlišné a jsou vodík; nižší Ci-β alkyl; heteroarylalkyl; arylalkyl; heteroaryl nebo aryl; Ri7 je vodík; hydroxy; acetoxy nebo benzoxy; Ria a R19 jsou hydroxy; acetoxy nebo benzoxy; nebo (iii) oligosacharidický zbytek obecného vzorce:

kde Ri4 a Ris jsou shodné nebo odlišné a jsou vodík; nižší Ci-β alkyl; heteroarylalkyl; arylalkyl; heteroary! nebo aryl; výhodné vodík; nižší Ci-β alkyl; arylalkyl nebo aryl; Ri4a je kyslík; pokud je Ri4a substituent terminálního monosacharidického zbytku musí být Ri4a hydroxy; methyl; acetoxy; arylalkyloxy nebo heteroarylalkyloxy; a

d) R4 je (i) OH, nebo (i i) H, nebo (iii) OR13, kde R13 je monosacharidický zbytek; acetoxy; benzoxy; arylalkyl nebo heteroaryla1ky 1; a

e) z je (i) (i i)

-CH-, kde a a b jsou jednoduché vazby, nebo =C, kde buď a nebo b je dvojná vazba.

Sloučenina podle nároku 1, kde Ri je COORs, kde Rs je nižší Ci-e alkyl; R2 je NH2 a R3 je o 1 igosacharidický zbytek obecného vzorce o

ΙΑ kde R9 je vodík; methyl; hydroxy; karboxy; acetoxy; heteroarylalkyloxy; arylalkyloxy nebo benzoxy; Rio je vodík; methyl; karboxy; acetoxy; arylalkyloxy; heteroarylalkyloxy; benzoxy nebo hydroxy; Rii je kyslík; pokud je Ri 1 substituent terminálního monosacharidického zbytku je R11 OH; methyl; acetoxy; arylalkyloxy; a Ri2 je vodík; methyl; methylhydroxymethyl; nebo acetoxymethyl.

3. Sloučenina podle kteréhokoliv z předcházejících nároků, kde R, je COORs, kde Rs je nižší C1-6 alkyl; R2 je NH2 a R3 je oligosacharidický zbytek obecného vzorce:

CH,

O kde R14 a R15 jsou shodné nebo odlišné a jsou vodík; nižší Ci-β alkyl; arylalkyl; heteroarylalkyl; heteroaryl nebo aryl; R17 je vodík; hydroxy; acetoxy nebo benzoxy; Ria a R19 jsou hydroxy; acetoxy a benzoxy.

4. Sloučenina podle kteréhokoliv z předcházejících nároků, kde R1 je COORs, kde Rs je nižší C1-6 alkyl; R2 je NH2 a R3 je oligosacharidický zbytek obecného vzorce:

Λ kde Ri4 a Ri5 jsou shodné nebo odlišné a jsou vodík; nižší Cí-β alkyl; arylalkyl nebo aryl; Ri4a je kyslík; pokud je Ri4a substituent terminálniho monosacharidického zbytku musí být Ri4a hydroxy; methyl; acetoxy; arylalkyloxy nebo heteroaryla1kyloxy.

5. Sloučenina podle kteréhokoliv z předcházejících nároků, kde R1 je COR’’’ a R’’’ je methylamino, amino nebo d i a 1ky1am i no.

6. Sloučenina podle kteréhokoliv z předcházejících nároků, volená ze skupiny látek zahrnující;

(30.50.140.170) -14-Am i no-3-[(0-2,6-d ideoxy-0-D-r i bo-hexo pyranosyl-(1->4)-0-2,6-di deoxy-0-D-r i bo-hexopyranosy1-(1->4)-O-2,6-dideoxy-0-D-ribo-hexopyranosyl)oxy]-N-methy1 -androstan-17-karboxamid;

(30.50.140.170) — 14—Ami no — 3 — [[(O-2,6-dideoxy-0-D-ribo-hexopyranosyl-(1->4)-0-6-deoxy-2,3-0-(1-methylethyliden)-a-L-mannopyranosy1]oxy]androstan-17-karboxylová kyselina, methylester;

(30.50.140.170) -14-Amino-3-[(0-2,6-d i deoxy-0-D-r i bo-hexopyranosyl-(1->4)-0-2,6-di deoxy-0-D-r i bo-hexopyranosy1-(1->4) -0-2,6-d i deoxy-0-D-r i bo-hexopyranosy1)oxy]androstan-17-karboxam i d;

4)(3 (3,513,140,170)-14-Ami η ο-3- [ (O-2,6-dideoxy-0-D-ribohexopyranosyl-(1->4)-0-2,6-dideoxy-8-D-ribo-hexopyranosyl) oxy]androstan-17-karboxylová kyselina, methylester;

(30,50,140,170)-14-Amino-3-[(0-2,6-dideoxy-0-D-ribo-hexopyranosyl-(1-> 4)-0-2,6-d i deoxy-0-D-r i bo-hexopyranosy1-(1-0-2,6-dideoxy-0-D-ribo-hexopyranosyl)oxy]androstan-17-karboxy1ová kyselina, methylester;

140-Amino-3B-[a-L-ramnopyranosyloxy-(1->4)-a-L-ramnopyranosyloxy]-50-androstan-170-karboxylová kyselina, methylester;

140-Am ino-30-[a-L-ramnopyranosyloxy-(1->4)-2’,3’-O-isopropy1 i den-a-L-ramnopyranosyloxy]-5B-androstan-170-karboxylová kyselina, methylester;

140-Amino-30-[2’’,3’’-0-isopropy1 iden-a-L-ramnopyranosy1oxy-(1->4)-2’,3’-0-isopropyli den-a-L-ramnopyranosy1oxy]-50-androstan-170-karboxy 1ová kyselina, methylester;

140-Amino-30-[ 2 ’’,3’’,4’’-tri-O-acetyl-a-L-ramnopyranosyloxy-(1->4)-2’,3’-O-isopropyliden-a-L-ramnopyranosyloxy]-50-androstan-170-karboxylová kyselina, methylester;

140-Amino-30-[4’’-0-acetyl-2’’,3’’-O-isopropy!iden-0-L-ramnopyranosyloxy-(1->4)-2’,3’-0-isopropyliden-a-L-ramnopyranosyloxy]-50-androstan-170-karboxylová kyselina, methylester.

7. Farmaceutický přípravek, vyznačující se tím, že obsahuje bezpečné a účinné množství 15 až % hmot. sloučeniny podle kteréhokoliv z předcházejících nároků nebo jejich směsi a 5 až 85 % hmot. farmaceuticky přijatelných excipientů, přičemž uvedené excipienty jsou voleny ze skupiny látek zahrnující polymery, pryskyřice, plastifikátory, plnidla, pojivá, zvláčňovadla, glidanty, disintegrátory, rozpouštědla, doprovodná rozpouštědla, pufrační systémy, i

o

70'.

r- 73 > C2> o* >

ZZ o

Ct >

O

u>- j o c/x o

povrchově aromat ické pigmenty a aktivní látky, k on zer vačrrř·-ě-i-n i-df4, s4-»di.ťU a , přísady, farmaceuticky čistá barviva nebo činidla ovlivňující viskozitu.

8. Farmaceutický přípravek podle nároku 7, vyznačující se tím, že obsahuje 15 až % hmot, sloučeniny podle kteréhokoliv z předcházejících nároků nebo (jejich směsi); 0 až 2 % hmot. aromatických přísad; 0 až 50 % hmot. doprovodných rozpouštědel, 0 až 5 % hmot. pufračního systému; 0 až 2 % hmot. povrchově aktivních látek; 0 až 2 % hmot. konzervačních Činidel; 0 až 5 % hmot. sladidel; 0 až 5 % hmot. činidel ovlivňujících viskozitu; 0 až 75 % hmot. plnidej; 0,5 až 2 % hmot. zv lácňovade1; 1 až 5 % hmot. glidantú; 4 až 15 % hmot. disintegrátorů a 1 až 10 % hmot. pojiv.

9. Oligosacharidické deriváty 14-aminosteroidních sloučenin obecného vzorce I podle nároku 1 až č pro použití jako léčiva pro léčení lidí nebo jiných savců postižených městnavým srdečním selháním.

10. Způsob diastereoselektivního zavedení amino skupiny do polohy 14 steroidního jádra postupy jodoisokyanatanové chemie, vyznačující se t í m , že zahrnuje stupně:

a) adicí jodoisokyanatanu na dvojnou vazbu v poloze 14-15 steroidního jádra, výhodně s vuyžitím kyanatanu stříbrného a jódu; a

b) deha 1-ogenac i, provedenou výhodně 3 využitím *

alkylcín hydridů, výhodně tri-N-buty1cínhydridu, a radikálových iniciátorů, výhodně benzoyIperoxidu ;

c) převedení isokynatanu na amino skupinu v poloze 14 steroidního jádra výhodně hydrolýzou, nejvýhodneji s využitím kyseliny chlorovodíkové nebo uhličitanu draselného.

Způsob přípravy o 1 igosacharidického derivátu

14-aminosteroidní sloučeniny podle nároku 1, která nese _Λ•v poloze 14 steroidního jádra diastereoselektivně zavedenou amino skupinu, postupem jodoisokyanatanové chemie, vyznačující se tím, že zahrnuje stupně:

a) adici jodoisokyanatanu na dvojnou vazbu v poloze 14-15 steroidního jádra; a

b) deha1ogenaci; a

c) převedení isokynatanu na amino skupinu v poloze 14 steroidního jádra.