DD142804A3

DD142804A3 - Verfahren zur herstellung von na-alkyl-bzw.na-aryl-sulfonylierten omega-amidinophenyl-alpha-aminoalkylcarbonsaeureamiden

Info

Publication number: DD142804A3
Application number: DD77201898A
Authority: DD
Inventors: Guenther Wagner; Peter Richter; Heidemarie Horn; Bernd Voigt; Helmut Vieweg; Fritz Markwardt; Peter Walsmann; Hans-Georg Kazmirowski; Hellmut Landmann; Joerg Stuerzebecher; Joerg Hauptmann; Ingrid Lischke
Original assignee: Wagner Guenter; Peter Richter; Heidemarie Horn; Bernd Voigt; Helmut Vieweg; Fritz Markwardt; Peter Walsmann; Kazmirowski Hans Georg; Hellmut Landmann; Joerg Stuerzebecher; Joerg Hauptmann; Ingrid Lischke
Priority date: 1977-11-07
Filing date: 1977-11-07
Publication date: 1980-07-16
Also published as: SE7811454L; FR2407915B1; FR2407915A1; DE2845941A1; GB2007663A; JPS54106448A

Description

Anwendupgsgebiet der Erfindung

Die Erfiüdung betrifft Verfahren zur Herstellung von N<^-- alkyl- bzw. i^g-arylsulfonyliertenw-Araidinoplienyl-^-arainoalky!carbonsäureamiden, die unter anderem als Thrombininhibitoren und damit als direkte Antikoagulantien vorteilhaft angewendet werden können·

Charakteristik der bekannten technischen Lösungen Zur Therapie und Prophylaxe thrombotischer !Erkrankungen werden bisher in der Medizin direkte und indirekte Antikoagulantien vom Typ des Heparins und der Cumarin- und Indandionderivate angewandt. Beide Antikoagulantientypen weisen gewisse Nachteile auf. Die Wirkung der Cumarinderivate 1st auf die Biosynthese der vitatnin-K-abhängigen Gerinnungsfaktoren II,VII,IX und X gerichtet und ihre Wirkung, die einer Reduzierung des Gerinnungspotentials im Patientenblut gleichkommt, tritt erst einige Zeit nach Applikation ein. Die Therapie bedarf einer laboratoriumstnäßigen Überwachung, da es bei einer Überdosierung zu Blutungen kommen kann. Heparin, das aufgrund seiner Polysaccharidstruktur nur parenteral angewandt werden kann, greift als Katalysator in körpereigene Inaktivierungsmechanismen ein. Durch seine polyvalente Affinität kann seine Wirkung durch Reaktion mit anderen Blutbestandteilen (Lipoproteide, Plättchenfaktor IV usw.) neutralisiert oder abgeschwächt werden. Seine Wirkung ist abhängig von einem normalen funktionstüchtigen Antithrombinspiegel des Blutes·

Kleinmolekulare Enzyminhibitoren haben gegenüber Heparin den Vorteil, daß sie direkt wirken und auoh oral applizierbar sind» Ihre Wirkung erfolgt erst nach Aktivierung des normalerweise unwirksamer] Zymogens Prothrombin zum aktiven Enzym Thrombin. Für die Wirkung derartiger Inhibitoren sind keine anderen Blutbestandteile erforderlich, wie z.B. das Antithrombin für die Heparinwirkung« Gegenüber den Antikoagulantien vom Cumarlntyp ha.ben sie den besonderen Vorteil, sofort nach Applikation ihre Wirkung entfalten zu können. Die bisher bekannten, vom Benzamidin abgeleiteten Enzyminhibitoren, wie ZcBe p-Amidinopheny!brenztraubensäure (Riehter,P«_ ™LJ2£B£LiJhjL ^{wp c} 07c/87029 (DDR, 1972); Pharmazie 28, 514, 585 (1973)) zeigen eine polyvalente inhibitorische Wirkung gegenüber Serlnproteinasen (Märlavardt , ' F., Walsmann ,P^ und Klp^oJci^g^J^P,^ WP A 61k/92302 (DDR, 1972)). Sie hemmen neben Thrombin u. a. auch Trypsin, Plasmin, Faktor Xa und Serumkallikrein mit beträchtlicher Wirkungsstärke (Geratz, J.D._t Arch.Biochem.Biophys. 118,90 (1967); Crgratz^j«^, Experientia-,25, 483 (1969); Geratz, J. D., Arner. J. Physiol. 21$ 1812 (1969); Mar kwar djbjF^, La.n.dmann _?Η_Λ und Walsmann, P., European J, ' Biochem. _6, 502 (1968); Markwardt ^ F. und Y/alsmann,p. ₉ Experientia 24, 25 (1968); Ma^tovarJt^j^F^, Walsmann,P₀ und Drawerty J«, Aota biol_e raed. germ_o ^24, 401 (1970); Stürzebeeher,

Walsmann, P«, _s Thrombos. Res« 2

(1976))«

Bei anderen bekannten, vom Benzamidin abgeleiteten Enzyminhibitoren, wie z«B_e Bis-(amidinobenzyliden)-cycloalkanonen und Bis-(amidinobenzyl)-oycloalkanonen .(Wagner, G.,

^ulld ii2ÜLi„Ss.i Pharmazie 3_2, 141 (1977)) 1st die Toxizität so groß, daß sie für eine Anwendung in vivo ungeeignet sind. (WaIsmann, P., Horn^^H^, Markwardt, F«, Richter, P_?i, Stürze- _£^, yieweg,. H₈ und Wagner, G., Acta biol. med· germ„

35,· K 1 (1976); I^£tjnan£₁__J_i>, ,H^ffman^^J^ und Markwardt, F. _t Acta biol. med_e germ. 35,? 635 (1976)).

Weitgehend thromblnspezifische Inhibitoren wurden von 0kamot£ und Mitarb, mit den I^-Arylsulfonylarginlnestern und -amiden, insbesondere entsprechenden Dansy!derivaten gefunden ( S^ u. a. OS (BRD) 2 438 851 (1975), Jap. Pat. 76 125 259 (1976), 76 125 262 (1976)* 76 131 864 (1976);

A., Kiη Jo _ιΛ K^,

^und Taraao', Y., Kobe J. Med. Sei. _21_, 43 (1973); S«, Mori^ Jg._i? Kin jo? K«, Klkunipto-, R. , Tonomura, S,

Tamao, Y. und Hara, H.₉ Thromb. Res., Suppl* II, 8, 83 (1976); ^S^, Hljikata, A« ₈ Ikezav;a_? K₆₅ Kinjo, K., Kikumoto ^R₁

Tonotnura, S. und Tamao_T Y,, Thromb« Res., Suppl. II, _8, 77 (1976)). Nachteilig bei der Darstellung dieser Verbindungen, ist, daß in der Regel die Guanidingruppierung des Arginins mit einer sciiv/er entfernbaren Schutzgruppe blockiert v/erden muß, ehe weitere Umsetzungen am Arginin durchgeführt werden können. Bei den Dansylderivaten bereitet außerdem die Isolierung reiner Umsetzungsprodukte größere Schwierigkeiten·

Ziel der Erfindung

Die Erfindung hat das Ziel, die Nachteile der bisher bekannten Antikoagulantien von der Art des Heparins, des Curaa- " rins, der Indandione und aller ihrer Derivate, bisher bekannter vom Benzamidin abgeleiteter kleinmolekularer Enzyminhibitoren sowie der I^-Arylsulfonylargininester und -amide zu überwinden. Es sollen entscheidende Fortschritte in der Herstellung und Handhabbarkeit von Thrombininhibitoren erzielt werden.

Darlegung des Wesens der Erfindung

Die Erfindung hat die Aufgabe, möglichst spezifisch wirksame Thrombininhibitoren aufzufinden. Des v/eiteren sollen Syntheseverfahren aufgefunden werden, die die Herstellung dieser Inhibitoren in technisch vergleichsweise, einfacher Art ermöglichen.

Der Erfindung liegt die wissenschaftliche Erkenntnis zugrunde, daß Verbindungen der Struktur

HN ^ /, V-(P-SjI^f CM "~C& -M

und ihre Salze Thrombininhibitoren hoher Spezifität darstellen. In der Formel kann die Amidinogruppe ia p- bzw. m-Stellung stehen, η = O, 1, 2, 3, R = Alkyl- bzw. Arylsulfonyl,

R² = H, Alkyl, Aryl bzw. Aralkyl und R⁵ = Alkyl, Aryl bzw,

2 3 Aralkyl sein. R und R können mit dem N-Atom, an das sie ge

a 9 0

bunden sind, einen heteroaliphatischen Ring bilden, der weitere Heteroatome enthalten und substituiert sein kann.

Die Aufgabe wird erfindungsgemäß dadurch, gelöst, daß Verbindungen der Stoffklasse der 1^,-alkyl- bzw. 1%^-arylsulfony·- lierteni^~Amidinophenyl^S~aminoalky!carbonsäureamide synthetisiert werden, wozu verschiedene,"im. folgenden beschriebene Verfahrensvarianten dienen_c

Die erste erfinduagsgemäße Verfahrensweise besteht darin, daß ein Halogenphenylalkylhalogenid mit einem Acy!aminomalonsäurediester zu einetn^fii-(E[alogenphenyl)-alkylacy!aminomalonsäurediester der allgemeinen Formel

umgesetzt wird, worin η = 1, 2, 3, R = Alkyl, R⁵ = Alkyl und X = Halogen bedeuten.

Die so erhaltene Verbindung wird mit einer Mischung aus gleichen Teilen 6 N HCl und Eisessig unter Rüokflußbedingungen zu einemS^-(Halogenphenyl)-^-a,minoalkylcarbonsäurehydrochlorid umgesetzt, das durch Acylierung mit einem Sulfonsäurechlorid in Gegenv/art einer Base in eine I^-Alkylsulfonyl- bzw. l·^- Arylsulfonylverbindung übergeführt wird. Die so erhaltene Verbindung wird zum Säurechlorid umgesetzt. Aus diesem wird das Säureamid der nachfolgenden Struktur erhalten,

worin η = 1, 2, 3, X = Halogen, R = Alkylsulfonyl bzw. Aryl-

sulfonyl, R² « Hj Alkyl, Aryl bzw. Aralkyl und R⁵ - Alkyl,

2 3

Aryl bzw,» Aralkyl bedeuten oder R und R mit dem N-Atom, an das sie gebunden sind, einen

heteroaliphatischeo Ring bilden können:, der weit exe Heteroatome enthalten und substituiert sein kann'· Im folgenden Syntheseschritt wird das kernständige Halogenatom durch Umsetzung rait Kupfer(l)~cyanld in Dimethylformamid in Gegenwart von Pyridin gege.n eine Cyaaogruppe ausgetauscht«

Die dergestalt erhaltene Cyanoverbindung wird mit einem wasserfreien niederen Alkohol sowie Wasserfreiem Halogenwasserstoff in ein Iraidsäureestersalz der Struktur

^ /TV (CH₂VCH -CO -H Ja

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übergeführt, wobei R , R und R die oben genannten Bedeutungen besitzen, η = 1, 2, 3, R = Alkyl und I = Halogen sind. Dabei ist die Säurekonzentration niedrig zu halten, um die Alkoholyse der Säureamidbindung weitgehend zurückzudrängen.

Im folgenden Syntheseschritt wird durch Einwirkung von Ammoniak in alkoholischer Lösung auf das Imidsäureestersalz das Endprodukt erhalten, das ein Amidiosalz der nachfolgenden Struktur ist,

W/· HNi^ £ V(CHj_n-CW-CO-N

worin die Amidinogruppe in p- bzv/· m~Stellung stehen kann₅ η - 1, 2, 3, Y = Halogen, R = Alkylsulfonyl oder Ary!sulfonyl, R² = H, -Alkyl, Aryl oder ÄraIky1 und R³ = Alkyl, Aryl

2 3 oder Aralkyl sind. R und R können mit dem N-Atοm, .an das sie gebunden sind, einen heteroaliphatischen Ring bilden, der weitere Heteroatome enthalten und substituiert sein kann.

Andere Amidinsalze mit physiologisch verträglichen anorganischen oder organischen Säuren werden erhalten, indem die imidoesterhydrohalogenide nach Gewinnung der Iraidoesterbasen in andere Imidoestersalze übergeführt v/erden, die in oben

beschriebener V/eise mit alkoholischer Ammoniaklösung zu den entsprechenden Araidinsalzen umgesetzt werden.

V/eiterhin können Amidinsalze erhalten werden, indem die Imidoesterbasen mit dem Ammoniumsalz physiologisch verträglicher anorganischer oder organischer Säuren au entsprechenden Amidinsalze α umgesetzt werden.

Eine dritte Möglichkeit besteht darin, aus Amidinsalzen nach Freisetzung der Amidinbase und Umsetzung mit physiologisch verträglichen anorganischen oder organischen Säuren andere Araidinsalze zu erhalten.

In einer zweiten Ausführungsform der Erfindung wird Cyanophenylalkylhalogenid zu*»i-(Cyaaophenyl)-alkylaoy!aminomalonsäurediester umgesetzt. Die so erhaltene Verbindung wird unter Erwärmen in einem Gemisch aus gleichen Teilen Eisessig. und 6 N HCl gelöst und unter Rückfluß erhitzt. Die als Hydrochlorid erhaltene4d-(Carboxamidophenyl)-«&-aminoaHey!carbonsäure der Strukturformel

HCI

ia der. η = 1, 2, 3 ist, wird durch Acylierung mit einem SuI-fonsäurechlorid in Gegenwart einer Base in eine 1^-Alkylsulfonyl- bzw. N^g-Arylsulfony!verbindung übergeführt. Die so erhaltene Verbindung wird mit einem geringen Überschuß an Thionylchlorid umgesetzt, wobei.ein Gemisch von Cyanoverbindung (X = CN) und Säureamid (X = CONH₂) der folgenden Struktur

entsteht, worin R = Alkyl- bzw. Ary!sulfonyl ist. Daraus wird durch Reaktion mit einem Arain in abs. Benzol ein Gemisch der Verbindungen mit X = CN und X = CONHp der allgemeinen Struktur

VÖ1©

« y ß ·

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erhalten, worin α, R , R und R die oben genannten Bedeutungen besitzen»

Aus diesem Gemisch, wird mit Phospitoroxidchlorid in Dimethylformamid die reine Cyanoverbindung erhalten ("E 1-Ke r dav/y, M« und El-Agamey, M.N. T. A. ₉ Acta Pharm· Jugoslav» 2_6_? 141 (1976)). ^

Bei dieser zweiten Ausführungsform der Erfindung erv/eist es sich deshalb als besonders zweckmäßig, die Carboxamidoverbindung

mit η a 1, 2, 3 und R = Alkyl- bzw. Arylsulfonyl mit einem anorganischen Säurechlorid wie Thionylchlorid im Überschuß zu behandeln (Th^rj5£nj)_JL_J_:i>i_C_ae_j, Chem. and Ind„ 1964-, 752), so daß neben der Säurechloridbildung quantitative Dehydrati sierung der primären Säureamidgruppierung unter Bildung der folgenden Cyanoverbindung erfolgt*

μ A ^₄ ^°

Dieses Säurechlorid wird ohne .Isolierung direkt in das entsprechende Säureamid übergeführt· Das Säureamid v/ird in der in der ersten Ausführungsform beschriebenen erfinderischen Weise über das Iraidsäureestersalz zum Amidinsalz der folgenden Formel umgesetzt _}

v/orin die Amidinοgruppe in ρ- bzw. m-Stellung steheο kann, D s 1, 2, 3, Υ·« Halogen, R = Alkyl- oder Ary!sulfonyl, R - H, Alkyl, Aryl oder Aralkyl und R = Alkyl, Aryl oder

2 3

Aralkyl sind» R und R können mit dem N~Atom, an das sie gebunden sind, einen heteroaliphatischen Ring bilden, der v/eitere Heteroatome enthalten und substituiert sein kann. In einer dritten Ausführungsform der Erfindung werden zunächst aus am aromatischen Kern halogen- oder oyanosubstituierten Phenylalky!halogeniden in der in der ersten und zweiten Ausführungsform beschriebenen Weise die es-(Cyano-

säureamide hergestellt« An diese Verbindung der Struktur

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mit n=1, 2, 3 und R , R , R in der oben genannten Bedeutung, wird in Triäthylamin/Pyx-idin Schwefelwasserstoff addiert, 'Wobei die Thiocarboxaraidoverbindung entsteht. Diese v/ird mit einem Alkylhalogenid umgesetzt. Das erhaltene Thioimidsäureestersals

VT

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rait η = 1>.2, 3 und R , R , R in der oben genannten Bedeutung, X = C(SR⁶)=NH . HT, R⁶ = Alkyl und Ϋ = Halogen, wird mit Ammoniumacetat zum Atnidiosalz umgesetzt (Baker,_ι B« R» ^und Eri_cksoη _?j E.__H._, J» med. Chem. ;[θ', 1123 (1967)). Entsprechend einer vierten Ausführungsform der Erfindung wird Halogenphenylglycin durch. l^Alkyisulfonylierung bzw· N₀^-ArJ 1 su lfony lie rung in eine Verbindung der Struktur

CH-Q30B

mit R = Alliylsulfonyl oder Arjlsulfonyl übergeführte Die so erhaltene Verbindung wird mit einem anorganischen Säurechlorid wie Thionylchlorid in das Säurechlorid übergeführt und dieses zum Säureamid umgesetzt. Anschließend v/ird diese Verbindung mit Kupfer(I)-cyanid in einem organischen Lösungsmittel wie Dimethylformamid io Anwesenheit einer organischen Base wie Pyridin unter Rückfluß erhitzt» Wach einer Reaktionsdauer von ca„ 30 Stunden werden Produkte der Strukturformel

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rait R , R , R in den oben genannten Bedeutungen erhalten. Die in der vorstehend beschriebenen· Weise erhaltenen Cyanοverbindungen'."werden z.B. gemäß dem in der dritten Ausführungsform angegebenen Reaktionsweg über die Thiocarboxamidoverbindungen und nachfolgend über die Thioimidsäureestersalze zu I^-Alkyl- bzw. Nc^rArylsulfonyl-ÄÄ-amidinophenyl-eir-aminoalkyloarbonsäureamiden umgesetzt, v/obel im Falle der Notwendigkeit die Weiterreaktion zu einem anderen Salz mit einer physiologisch verträglichen anorganischen oder organischen Säure entsprechend dem in der ersten Ausführungsform der Erfindung beschriebenen Weise erfolgen kann*

Es ist zweckmäßig, im vorstehend beschriebenen Syntheseverfahrea das Kupfer(l)-c;yanid in mehreren Portionen nach jeweils 8 Stunden Urasetzungsdauer zuzugeben· Es ist ferner vorteilhaft, unter Inertgasatmosphäre zu arbeiten· Zweckmäßigerweise werden die nach einer der vier erfindungsgeraäßen Ausführungsformen hergestellten !^substituierten ce-Amidinophenyl-e^-aminoalkylcarbonsäureatnide als solche oder als Salze mit einer physiologisch verträglichen anorganischen oder organischen Säure unter Verwendung geeigneter pharmazeutischer Hilfsstoffe in geeignete Applikationsformen wie z.B. Tabletten, Dragees, Kapseln, Suppositoren, Lösungen usf. übergeführt.

Die Erfindung soll nachstehend an drei Ausführungsbeispielen näher erläutert werden *

6.5 g 4~Brombenzylbromid werden in 25 ml abs. Dioxan mit

5,7 g Acetaminomalonsäurediäthylester, 0,3 g Kaliumiodid und einer aus 0,65 g Natrium und 15 ml abs. Äthanol hergestellten Äthylatlösung umgesetzt. Zur Aufarbeitung wird die Suspension mit reichlich Wasser versetzt und das Produkt nach Kristallisation abgesaugt, mit Wasser gewaschen und aus Methanol umkristallisiert (Schmp. 131-133⁰C, Subl. ab 115⁰C). 7jO g 4-Brombenzylacetamlnomalonsäurediäthylester werden unter Erwärmen in 35 ml Eisessig gelöst und die Lösung nach Zugabe von 35 ml 6 N Salzsäure 6 Std. unter Rückfluß erhitzt. Nach dem Erkalten kristallisiert das Reaktionsprodukt aus· Es wird abgesaugt und getrocknet. Erforderlichenfalls kann aus Methanol/Äther umgefällt werden (Schmp. ab 216⁰C).

5.6 g 4-BromphenylalaninhydrοChlorid werden in 60 ml N Natronlauge gelöst und mit einer Lösung von 4,0 g Tosylohlorid in 20 ml Äther 6 bis 8 Std. bei Raumtemperatur gesohüttolt. Nach Abtrennung der ätherischen Phase wird die wäßrige Lösung nach Ansäuern mit 6 N Salzsäure mit Chloroform ausgeschüttelte Beim Waschen der Chloroformlösung mit Wasser fällt bereits ein Teil des Produktes aus, der durch Absaugen abgetrennt wird« Der nach dem Einengen der getrockneten

-11- £ U I O 7 O

Chloroforralösung erhaltene Teil wird mit ersterem vereinigt und aus Methanol umkristallisiert (Sohmp.. 185-188⁰C, Tröpfchen ab 179°C)_e

6*3 g ]%£-Tosyl-4~bromphenylalanin werden mit 20 ml Thionylchlorid übergössen. Das Gemisch wird 45 Min« auf dem siedenden Wasserbad erhitzt. Das überschüssige Thionylchlorid wird danach abdestilliert und der verbliebene Rückstand zweimal mit etwa 25 ml abs. Benzol kodestilliert· Das Säurechlorid verbleibt als fester, gelblicher Rückstand. Dieser wird in abs. Benzol gelöst und unter Rühren zu einer auf 0 bis 5⁰C abgekühlten Lösung von 3,0 g Piperidin in 20 ml abs. Benzol zugetropft. Nach beendeter Zugabe wird bei Raumtemperatur noch 1 Std. nachgerührt. Anschließend wird zweimal mit Wasser ausgeschüttelt j wobei N^-To sy 1-4-broraphenylalaüi.apiperidid in der Benzolphase bereits auszukristallisieren beginnt* Es wird abgesaugt, getrocknet und zur Urakristallisation mit der aus der Benzollösung nach Abdestillieren des Lösungsmittels erhaltenen Fraktion vereinigt (Schrnp_o 181-183⁰C)* 3j5 g i^-Tosyl-4~bromphenylalaninpiperidid werden in 27 ml Dimethylformamid unter Zusatz von 8 Tropfen abs. iyridin ge- löst. Nach Zugabe von 0,81 g Kupfer(l)-oyanid wird die Lösung 16 Stde unter Rückfluß erhitzt. Nach dem Erkalten wird in eine Mischung von ca. 30 g Eis und 30 ml 25-proz. Ammoniak gegossen und 15 Std. bei Raumtemperatur stehengelassen. Anschließend wird die Suspension 30 Min. mit 50 ml Chloroform gerührt. Die Chloroformphase wird abgetrennt, mit Wasser und verdünnter Salz säure gewaschen und nach dem Neutralwaschen über Natriumsulfat getrocknet. Der nach dem Abdestillieren des Lösungsmittels verbliebene Rückstand wird aus Äthanol umkristallisiert (Sohmp. 221⁰C).

0,41 g der Cyanoverbindung werden in 8 ml abs. Dioxan unter Erwärmen gelöst. Nach Zusatz von 0,3 g abs. Methanol werden in die auf 0 bis 5 C abgekühlte Lösung 0,5 g getrocknetes Chlorwasserstoffgas eingeleitet« Der Ansatz bleibt 3 Tage bei Raumtemperatur stehen«. Anschließend wird das Imidsäureester~ salz durch Zusatz von reichlich Äther gefällt, nach Kristall!-

^5 S% A

sation abgesaugt und in Methanol aufgenommen. Nach Versetzen der Lösung mit methanolisoher Ammoniaklösung v/ird 3 Std· auf 70 bis 80⁰C erwärmt. Zur Aufarbeitung v/ird die Lösung i. Vak» zur Trockne eingeengt und der verbleibende Rückstand in wenig Methanol aufgenommen. Die nach kurzer Zeit beginnende Kristallisation wird durch 15-stündiges Aufbewahren bei 0 bis 5⁰C vervollständigt· Die Mutterlauge wird mit Äther bis zur starken Trübung versetzt und das Produkt nach Kristallisation abgesaugt. Zur Reinigung wird die Verbindung erneut in Methanol gelöst«» Nebenprodukt durch Zusatz von wenig Äther als erste · Fraktion abgeschieden und N^-Tosyl~4~amidinophenylalaninpiperididhydrochlorid nach Filtration mit Äther gefällt. Danach wird nochmals aus Methanol/Äther.umgefällt. (Schmp. 151-152⁰C). Beispiel 2:

9,8 g 4-Cyanobenzylbromid werden in 50 ml abs* Dioxan mit 10,9 g Acetaminomalonsäurediäthy!ester, 0,5 g Kaliumiodid und einer aus 1,2 g Natrium und 20 ml abs. Äthanol hergestellten Äthylat lösung umgesetzt. Zur Aufarbeitung v/ird die Suspension mit reichlich Wasser versetzt und das Produkt nach Kristallisation abgesaugt und aus Methanol umkristallisiert (Schmp. 168-17O⁰C).

7j6 g 4-Cyanobenzylacetaminomalonsäurediäthylester werden unter Erwärmen in einem Gemisch von 15 ml Eisessig und 15 ml 6 N Salzsäure gelöst und die Lösung 3 Std. am Rückfluß erhitzt. Der nach dem Erkalten auskristallisierte Teil des Reaktionsproduktes wird abgesaugt und das Filtrat i. Vak. zur Trockne eingeengt, wobei zuletzt mit einem siedenden Wasserbad erhitzt wird. Der verbleibende Rückstand v/ird in Methanol aufgenommen und die filtrierte Lösung mit Äther bis zur starken Trübung versetzt. Die auskristallisierte Verbindung wird abgesaugt, getrocknet und mit der ersten Fraktion vereinigt (Schmp. ab ca. 200⁰C (Zers.)).

4,5 g 4-Aminocarbonylphenylalaninhydrochlorid v/erden in ^ ml N Kalilauge gelöst und mit einer Lösung von 3,6 g Tosylchlorid in 40 ml Äther 7 Std. bei Raumtemperatur geschüttelt. Danach wird ausgeschiedenes Kaliumsalz abgesaugt und die ätherische Phase des Filtrats abgetrennt. Die wäßrige Lösung

wird zweimal mit wenig Äther ausgeschüttelt und angesäuert. Der Niederschlag wird zusammen mit der aus dem Kaliumsalz durch Behandeln mit verdünnter Salzsäure freigesetzten Fraktion abgesaugt, mit Wasser gewaschen und getrocknet. Zur Reinigung wird die Substanz mit Äthanol versetzt und die Suspension zum Sieden erhitzt, wobei sich der größte Teil der Verbindung löst. Nach dem Abkühlen werden die ungelösten Anteile abgesaugt und das Filtrat allmählich mit Petroläther versetzt. Beim Anreiben beginnt die Kristallisation. Durch weiteren Petrolätherzusatz wird die Abscheidung von N₂^-Tosy1-4-aminocarbony!phenylalanin vervollständigt, (Schmp«. ab 230⁰C (Zers„), ab 200⁰C Sublimation))·

3,0 g davon werden mit 15 ml Thionylchlorid übergössen und das Gemisch 60 Min. auf dem siedenden Wasserbad unter Rückfluß erhitzt. Überschüssiges Thionylchlorid wird i„ Vak. abdestilliert und der verbleibende Rückstand zweimal mit abs. Benzol kodestilliert.

2,5 g des Säurechlorids werden in abs. Benzol gelöst und unter Rühren zu einer auf 0 bis 5⁰C abgekühlten Lösung von 1,2 g Piperidin in 10 ml abs. Benzol zugetropft» Nach beendeter Zugabe wird bei Raumtemperatur noch 1 Std. gerührt«, Die erhaltene Suspension wird mit 30 ml 3N Salzsäure geschüttelt, der verbliebene Kristallbrei abgesaugt, mit reichlich V/asser gewaschen und getrocknet« Die Reinigung erfolgt durch Umkristallisation aus Äthanol (Schmp. 221⁰C)* 0,8g NsirTosyl-4-cyanophenylalaninpiperidid werden in Pyridin gelöst, das einige Tropfen Triäthylamin enthält. Anschließend wird 4,5 Std. ein schwacher Schwefelwasserstoffstrom durch die Lösung geleitet. Nach 24-stündigein Stehen bei Raumtemperatur wird in eine Eis-Salzsäuremischung gerührt, wobei das Thioamid in fester Form anfällt· Es wird abgesaugt,.mit reichlich Wasser gewaschen und getrocknet. Für die weitere Umsetzung ist eine Umkristallisation nicht erforderlich (Schrap. 224-227⁰C, Tröpfchen ab 220⁰C).

0,4 g des Thioamids werden unter Erwärmen in Aceton gelöst und mit 1,2 g Methyljodid unter Lichtschutz 18 Std«, bei Raum-

temperatur geschüttelt. Das Thioimidsäureestersalz wird mit Petroläther gefällt und abgesaugt.

0,4 g des, Thioimidsäureesterhydrojodids werden in abs. Äthanol gelöst und die Lösung nach Zugabe von 0,06 g Ammoniutnacetat 2,5 Std« auf 70 bis SO⁰C erwärmt. Danach wird'filtriert und i„ Vak. weitgehend eingeengt. Der'Rückstand v/ird in wenig abs· Äthanol aufgenommen und Na£-Tos;yl-4-amidinophen,ylalaninpiperidid~ hydrojodid mit Petroläther gefällt. Zur Reinigung v/ird aus Methanol/Äther uragefällt (Schtnp. 220-224°C)· Beispiel 3}

11,0 g-4-Brombenzaldehyd, 6,0 g Natriumcyanid und 24,0 g Ammoniumcarbonat werden in einer Mischung von 100 ml Äthanol und 100 ml Wasser 1 Std. bei 6O⁰C gerührt. Anschließend v/ird 5 Min. unter Rückfluß erhitzt. Nach dem Abkühlen wird mit Salzsäure angesäuert und nochmals 5 Min. unter Rückfluß erhitzt. Nach dem Abkühlen v/ird 5T(4-Bromphenyl)-hydantoin abgesaugt und neutral gewaschen (Schtnp. 222-224⁰C). 10,0 g davon werden in 100 ml 60-proz. Schwefelsäure suspendiert und unter Rückfluß erhitzt bis sich die Substanz löst. Die heiße Lösung wird filtriert. Es kristallisiert 4-Bromphenylglycinhydrogensulfat aus (Schmp. 102-105⁰C). 12,0 g Aminosäure werden in 100 ml 2 N Natronlauge gelöst und mit einer Lösung von 8,0 g Tosylohlorid in 75 ml Äther 4-5 Std. geschüttelt. Der Niederschlag wird abgesaugt und in 60 ml 3 N Salzsäure durchgearbeitet. Ne^iTosyl-4-brotnphenylgLyoin v/ird abgesaugt, neutral gev/aschen und aus wässerigem Methanol umkristallisiert (Schmp. 195-198⁰C)»

4,0 g davon werden in 20-30 ml abs. Benzol mit 8 ml Thionylchlorid 1 Std. unter Rückfluß erhitzt. Anschließend wird auf dem \Yasserbad Benzol und überschüssiges Thionylchlorid i. Yak. abdestilliert* Der Rückstand wird zweimal mit 30 ml abs. Benzol kodestilliert, in 30 ml abs. Benzol gelöst und die benzolische Lösung.unter Eiskühlung und Rühren zu einer Mischung von 2,0 g Piperidin und 30 ml abs. Benzol zugetropft· Nach einstündigem Rühren unter Eiskühlung wird N₃^-To sy 1-4-bromphenyl-glycinpiperidid abgesaugt und aus wässerigem Methanol

urakristallisiert (Schrnp. 162-164⁰G) <, 3,5 g davon und 3,5 g Kupfer(I)-cyanid In 30-40 ml Dimethylformamid und 1 ml Pjridin werden unter Stickstoffbegasuag am Rückflußkühle χ erhitzt. Nach jeweils 8 St d. Umsetzungsdauer y/erden 3,5 g Kupfer(I)-cyanid zugesetzt und das Erhitzen fortgesetzt. Die heiße Lösung wird .in Sis/konz. Ammoniak eingerührt und die Suspension mit 200 ml Chloroform 1 Std* gerührt. Die Chloroformphase wird abgetrennt und die wässerige Phase mehrmals mit Chloroform ausgeschüttelt. Die vereinigten Ghloroforraphas.en v/erden nacheinander mit 3 N Salzsäure und Wasser ausgeschüttelt und getrocknet (Na₂SO^). Das Lösungsmittel wird i. Yak. abdestilliert und der Rückstand aus Methanol umkristallisiert (Schmp. 157-159⁰C).

2,5 g Cyanoverbindung werden in 15 ml Pyridin und einigen Tropfen Triäthylamin gelöst. In die Lösung wird 3 Std. ein Schwefelwasserstoffstroraieingeleitet. Nach 12-stünd. Aufbewahren bei Raumtemperatur wird die Lösung auf Eis/Salzsäure gegossen. Der Niederschlag wird abgesaugt, mit Wasser neutral gewaschen und aus Methanol uraki-istallisiert (Schmp. 99-101⁰C). 1,0g Thioamid werden in Aceton gelöst und mit 3,0 g Methyljodld versetzt. Nach 2-tägigem Aufbewahren unter Lichtschutz bei Raumtemperatur wird das Thioimidsäureestersalz mit Äther oder Petroläther gefällt, abgesaugt, mit Äther gewaschen und aus Methanol/Äther umgefällt (Schrap, 134-136⁰C). 0,8 g Thioimidsäureestersalz und 0,12 g Ammoniumacetat wer-. den in 20 ml abs. Methanol gelöst. Die Lösung wird 3 Std« bei 60⁰C gehalten und anschließend i. Vak. auf die Hälfte des Volumens eingeengt. l^-Tosyl-4-ämidinophenyl-glycinpiperidhydrojodid wird mit Äther gefällt und aus Methanol/Äther umgefällt (Schmp. 162-165⁰C).

Es wurden entsprechend den Beispielen 2 und 3 die folgenden Verbindungen erhalten:

	C	D	R¹	NH-R		R³	O
Stellung der Ami dino gruppe *	0	Tosyl	R²		α
4	0	Tosyl		O
4	O	losyl
4	0	Naphthyl-2- sulfonyl
4	O	Naphthyl-2- sulfonyl
4	0	Naphthyl-2- sulfonyl
4	1	Tosyl
3	1	Tosyl
3

Schmp [⁰C]

162-165

218-222

158-162

103-107

161-165

159-165

245-250

251-253

Fortsetzung der Tabelle:

Stellung π der Amidi η ο gruppe

R¹

1 Tosyl

Sohrap

261-265

1 Tosyl H (CH₂)₃-GH₃ 169-171

1 Naphthyl-2-sulfonyl

157-159

1 Naphthyl-2-sulfonyl

256-262

1 Naphthyl-2-sulfonyl

220-228

1 Naphthyl-2-sulfonyl

111-121

1 Tosyl

220-224

1 Tosyl

ab 89 (Zers·)

1 Tosyl V-/

ab 95 (Zers.)

1 Tosyl

- CH-2

ab 85 (Zers.)

1 Tosyl

133-143

ab 108 (Zers,)

Fortsetzung	der	Tabelle:	fs
Stellung der Ami- aiDogruppe	□	R¹	R²
4	1	Naphthyl-1- sulfonyl
	1	Naphthyl-1- sulfonyl
4	1	Naphthyl-1- sulfonyl

R Sohrap,

O ab 142.5

(Zers.;

Dab 192 (Zers.)

V ab 84

\J]* (Zers.)

1 Naphthyl-1- H (CH₉)^-CH, ab 85,5 sulfonyl . . (Zers.)

4 1 Naphthyl-1- H -\ J 148-155

sulfonyl

1 Naphthyl-2- /~\ ab 236

sulfonyl V—r "(

. 1 Naphthyl-2-suifonyl

D ab 152v

(,Zers.)

Claims

Erfindupgsanspruoh.

1. Verfahren zur Herstellung von l^alkyl- bzw. fonylierteno-Araidinophenyl-^Crarninoalkv'lcarbonsäurearniden. der allgem. Formel I dadurch gek., daß

a) naoh einer ersten Ausführungsform der Erfindung ein Halogenphenylalkylhalogenid zumca-(Halogenphenyl)-alkylaoy!aminomalonsäurediester umgesetzt wird, aus diesem dasCa-(HaIogen™ piieny^-c^-aminoalkylcarbonsäurehjdrochlorid erhalten wird, das in die i^Alkyl- bzw« N^-Arylsulfoaylverbindung übergeführt wird, woraus über das Säurechlorid das —amid erhalten wird, das nach Austausch des kernständigen Halogenatoras gegen eine Cyanogruppe mit einem niederen Alkohol und Halogenwasserstoff unter Wasserausschluß in ein Imidsäureestersalz übergeführt wird, woraus durch AmmoniakeinY/irkung in alkoholischer Lösung ein !^^-substituiertes ca-Amidinophenyl-^c- · aminoalkylcarbonsäureamidsalz entsteht, das die allgemeine Formel

HY« HhK /TV(OHj_n-CH-CO -Nf- -Σ!/

hat, in der die Arnidinogruppe in p- bzw. m~Stellung stehen kann_? Y ·- Halogen, η = 1, 2, 3, R = Alkyl- bzw. Ary!sulfonyl,

R² = H, Alkyl, Aryl oder Aralkyl und R⁵ = Alkyl, Aryl oder

2 3

Aralkyl sind, bzw. R und R mit dem N-Atom, an das sie gebunden sind, einen heteroaliphatischen Ring bilden können, der weitere Heteroatome enthalten und substituiert sein kann;

-.20- 4

b) nach einer zweiten Ausführungsform der Erfindung· ein Cyanophenylalkylhalogenid zu einem Cyanobenzylacylarninomalonsäurediester umgesetzt wird, dieser nach Reaktion in einem Geraisch aus Eisessig und HGl in der Wärme daso-(Carboxa(nidophenyl)-<^aminoalkylcarbonsäurehyd'rochlorid ergibt, das durch Acylierung mit einem Sulfonsäureohlorid in eine Ne«rAlkylsulfonyl- bzw. N^Arylsulfony!verbindung übergeführt wird, die nach Umsetzung mit einem Überschuß eines organischen Säure-Chlorids durch Dehydratisierung und Säureohlornfildung in einem Schritt eine Cyanopheny!verbindung mit Säureohloridstruktur . ergibt, die in das Säurearaid und weiter durch Umsetzung mit einem niederen Alkohol und Halogenwasserstoff unter Wasserausschluß in ein Imidsäureestersalz übergeführt wird, woraus durch Ammoniakeinwirkung in alkoholischer Lösung ein K₀^-SUbstituiertesco-Amidinophenyl-ofc-aminoalkylcarbonsäureamidsals entsteht;

c) nach einer dritten Ausführungsform der Erfindung ein zunächst nach der ersten oder zweiten Ausführungsform der Erfindung hergestelltes «-(Cyanophenyl)-^3£-alkylsulfonyl- bzWe-i^- arylsulfonylaminoalkylcarbonsäureamid in Triäthylamin/I^yridin gelöst und mit HpS zur Thiocarboxaraidoverbindung umgesetzt wird, die nach Reaktion mit einem Alkylhalogenid ein Thioimidsäureestersalz liefert, woraus durch Erwärmen mit Ammoniumacetat in Äthanol und nach Abziehen des Lösungsmittels das i^- substituierte«~Amidinophenyl-<^raminoalkyloarbonsäurearnidsalz erhalten wird;

d) nach einer vierten Ausführungsform der Erfindung ein Halogenpheny!glycin durch I^-Alkyl- bzw. i^-Arylsulfonyüerung in ein Halogenphenyl-^^alkyl- bzw.-Mo^-arylsulfonylglycin umgewandelt wird, das nach Säurechloridbildung in das Säurearaid übergeführt wird, woraus sich durch Umsetzen mi<t CuCN in einem organischen Lösungsmittel in Anwesenheit einer organischen Base das Cyanophenyl-I^-alkyl bzw.-f^-arylsulfooylglycinärnid bildet, das in Triäthylarain/Pyridin gelöst und mit H2S zur Thiooarboxamidoverbindung umgesetzt wird, die nach Reaktion mit einem Alky !halogenid ein Thioitnidsäure ester salz

Λ η

liefert, woraus durch Erwärmen mit Ammoniumacetat· in Äthanol Noc-substituiertes ω-Amidinophenyiglycinamid erhalten wird.
2. Verfahren nach Punkt 1, dadurch gekennzeichnet, daß das !^-substituierte ω-Amidinophenyl-oc-aminoftlky !carbonsäureamidsalz in ein anderes Salz einer physiologisch verträglichen anorganischen oder organischen Säure wie HCl o.dgl. übergeführt wird» '
3. Verfahren nach Punkt 1 , dadurch gekennzeichnet, daß Cyanobenzylacylaminomalonsäurediester in einer Mischung gleicher Teile Eisessig und 6 N Salzsäure unter Rückflußbedingungen zumoü -(CarboxamidophenyD-oG-aminoalkylcarbonsäurehydrochlorid umgesetzt wird«, _t
4. Verfahren nach Punkt 1, dadurch gekennzeichnet, daß der Austausch des kernständigen Halogenatoms gegen eine Cyanogruppe unter Verwendung von CuCN erfolgt, v/obei das CuCN in mehreren Portionen nach jeweils 6-8 Stunden Reaktionsdauer zugefügt wird.