DD160594A3 - PROCESS FOR OBTAINING SINGLE-CELL PROTEIN - Google Patents

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DD160594A3
DD160594A3 DD22872381A DD22872381A DD160594A3 DD 160594 A3 DD160594 A3 DD 160594A3 DD 22872381 A DD22872381 A DD 22872381A DD 22872381 A DD22872381 A DD 22872381A DD 160594 A3 DD160594 A3 DD 160594A3
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biomass
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methanol
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Karl Placht
Hans-Frieder Listewnik
Kurt Reiter
Guenter Franke
Lothar Peisker
Uwe Barthel
Thomas Hinze
Klaus Sobek
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Karl Placht
Listewnik Hans Frieder
Kurt Reiter
Guenter Franke
Lothar Peisker
Uwe Barthel
Thomas Hinze
Klaus Sobek
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  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)

Abstract

Die Erfindung betrifft ein Verfahren zur Gewinnung von mikrobiellen Eiweiss aus Alkoholen vorzugsweise auf der Basis von Methanol. Der Erfindung liegt die Aufgabe zugrunde, den Fermentations- und Extraktionsprozess durch geeignete Mittel dahingehend zu beeinfluessen,dass die Eiweissmenge der Biomasse bezogen auf den Rohstoffeinsatz erhoeht wird.Die Aufgabe wird dadurch geloest, dass eine auf der Basis von Alkohol gezuechtete Biomasse extraktiv mit Alkohol oder einem Alkohol-Kohlenwasserstoffgemisch, das vorzugsweise im Siedebereich von 40-120 Grad C liegt, aufgearbeitet und danach der zur Extraktion benutzte Alkohol vom Extrakt bzw. vom Kohlenwasserstoffgemisch abgetrennt und anschliessend der mit Fermentationshilfsmitteln beladene Alkohol ganz oder teilweise in die Fermentation als Kohlenstoffquelle eingesetzt wird, wobei die im Alkohol enthaltenen Zellinhaltstoffe als Fermentationshilfsmittel dienen.The invention relates to a process for obtaining microbial protein from alcohols, preferably based on methanol. The object of the invention is to influence the fermentation and extraction process by suitable means in such a way that the protein quantity of the biomass is increased in relation to the use of raw materials. The object is achieved by extracting a biomass grown on the basis of alcohol extractively with alcohol or alcohol an alcohol-hydrocarbon mixture, which is preferably in the boiling range of 40-120 degrees C, worked up and then the alcohol used for extraction separated from the extract or hydrocarbon mixture and then the loaded with fermentation aids alcohol is used wholly or partly in the fermentation as a carbon source, wherein the cell contents contained in the alcohol serve as a fermentation aid.

Description

a) Titel der Erfindunga) Title of the invention

Verfahren zur Gewinnung, von EinzellerproteinMethod for obtaining single-celled protein

b) Anwendungsgebiet der Erfindungb) Field of application of the invention

Die. Erfindung betrifft ein Verfafaren zur Gewinnung . von mikrobiallem Eiweiß aus Alkoholen vorzugsweise auf der Basis von Methanol.The. The invention relates to a method for obtaining. of microbial protein from alcohols, preferably based on methanol.

Die Erfindung kann in Anlagen eingesetzt werden, in denen Biomassen, die unter Verwendung von Alkohol oder Lösungsmittelgemischen, dessen eine Komponente Ί0 ein Alkohol ist, extraktiv aufbereitet werden und in denen Alkohol gleichzeitig als Ausgang sr ohst off für die Biomas se erzeugung dient.The invention can be used in plants in which biomasses which are prepared using alcohol or solvent mixtures whose one component Ί0 is an alcohol, are prepared by extraction and in which alcohol at the same time as the output sr ohst off for the Biomas se generation serves.

c) Charakteristik der bekannten technischen Losungenc) Characteristics of the known technical solutions

Es sind verschiedene Verfahren bekannt, in denen ^5 Bakterien und Hefen auf der Basis von Methanol als Eohlenstoffquelle gezüchtet werden. Fach der Ernte aus dem lermentor werden diese Mikroorganismen durch Separation, Sindampfung und '!Trocknung von der die Mhr- und Spurensalze enthaltenden wässrigen Suspension abgetrennt und liegen dann in fester ,!Form für dan Einsatz als. butter eiweiß, vor« Die Zusammensetzung der Biomasse ist dabei abhängig von den Fermentationsparametem und den eingesetztenVarious methods are known in which yeasts and yeasts are grown on the basis of methanol as a source of carbon dioxide. In the field of harvesting from the lermentor, these microorganisms are separated from the aqueous suspension containing the Mhr and trace salts by separation, evaporation and drying, and are then in a solid form for use as. butter protein, before "The composition of the biomass is dependent on the fermentation parameters and the used

228723 1228723 1

Mikroorganismen»microorganisms »

Weiterhin sind.verschiedene Verfahren bekannt, in denen Biomasse, die auf der Basis von Kohlenwasserstoffen, wie z· B·. reinen η-Paraffinen oder n-Paraffine enthaltende Srdöldestillatfraktionen gezüchtet wurden, zur Entfernung der der Biomasse noch anhaltenden Sohlenwasserstoff e und zur Entfernung von unerwünschten lipophilen Stoffwechselprodukten mit Lösungsmitteln extrahiert -wird*. Als. Sxtraktionsmittal dienen demgemäß vorzugsweise Kohlenwasserstoffe oder polare Lösungsmittel einzeln oder in lischung. Die zur Verwendung vorgeschlagenen Lösungsmittel neuen. Hexan, Heptan.und leichten bis mittleren Benzinfraktionen als unpolare Lösungsmittel bzw. Lösungsmittelkomponenten sind vor"allem niedere Alkohole G. bis Go, Aceton und Chlorkohlenwasserstoffe als polare Lösungsmittel bzw· Lösnngsmittelanteilev Neuere Verfahren zur Entfernung von Kohlenwasserstoffen und biogenen lipophilen ZeHinhältstoffan. durch Extraktion beruhen.darauf, daß entweder Gemische aus Kohlenwasserstoff en und Methanol oder reines Methanol" als Extraktionsmittel. Verwendung finden. Den genannten Verfahren ist gemeinsam, daß nach der.'Extraktion eine destillative Aufarbeitung dar Miszella erfolgt und die gereinigten Lösungsmittel wieder für die Extraktion genutzt werden· .Furthermore, various processes are known in which biomass based on hydrocarbons, such as eg. pure η-paraffins or n-paraffins containing Srdöldestillatfraktionen were bred, to remove the biomass still persistent hydrocarbon e and for the removal of undesirable lipophilic metabolites extracted with solvents -wird *. When. Accordingly, preferably, hydrocarbons or polar solvents are used singly or in mixture. The solvents proposed for use are new. Hexane, heptane and light to medium gasoline fractions as non-polar solvents or solvent components are based on "lower alcohols G. to Go, acetone and chlorinated hydrocarbons as polar solvents or solvents." Newer processes for the removal of hydrocarbons and biogenic lipophilic zeamine contents by extraction. that either mixtures of hydrocarbon en and methanol or pure methanol "as an extractant. Find use. The said process has in common that after the 'extraction, a distillative workup of Miszella takes place and the purified solvents are used again for the extraction.

Alle diese Verfahren haben die Nachteile, daß sie einen hohen Substratverbrauch, einen hohen·Aschegehalt in der Biomasse sowie einen hohen energetischen und apparativen Aufwand für die Lösungsmittelrückgewinnung aufweisen und dia Biomasse durch den hohen Gehalt an Fettsäuren in der Lagerfähigkeit stark eingeschränkt ist.All of these methods have the disadvantages that they have a high substrate consumption, a high · ash content in the biomass and a high energy and equipment expense for solvent recovery and dia biomass is greatly limited by the high content of fatty acids in the shelf life.

-3- 228723 1--3- 228723 1-

d) Ziel der Erfindungd) Object of the invention

Ziel der Erfindung ist es, die Ausbeute an Futtereiweiß zu erhöhen, den Roh- und Hilfsstoffeinsatz zu senken und den Futterwert der Biomasse zu verbessern«The aim of the invention is to increase the yield of feed protein, to reduce the use of raw materials and adjuvants and to improve the feed value of the biomass. "

e) Darlegung des Wesens der Erfindunge) Presentation of the essence of the invention

Der Erfindung liegt die Aufgabe zugrunde, dan Fermentations- und. Extraktionsproζeß -durch geeignete Mittel dahingehend zu beeinflußen, daß die Eiweißmenge der Biomasse bezogen auf den Rohstoff einsatz erhöht wird·The invention is based on the object dan fermentation and. To influence extraction process by suitable means in such a way that the protein quantity of the biomass is increased in relation to the raw material use.

ErfindungsgemäB wird die Aufgabe dadurch gelöst, daß als Kohlenstoffquelle-der Fermentation zur Gewinnung von Einzellerprotein ein Alkohol eingesetzt wird, der vorher ganz oder teilweise als Lösungsmittel oder als Komponente im Lösungsmittelgemisch der Lösungsmittelextraktion fungiert und derart mit der Biomasse kontaktiert wird, daß der Alkohol die die Fermentation fördernden Fermentationshilf smittel" aufnimmt *According to the invention, the object is achieved in that as the carbon source of the fermentation for the production of protozoal an alcohol is used, which previously acts wholly or partially as a solvent or as a component in the solvent mixture of the solvent extraction and is contacted with the biomass such that the alcohol is the Fermentation-promoting fermentation aid "absorbs *

Das geschieht erfindungsgemäß dadurch, daß das Substrat als Lösungsmittel oder Lösungsmitte!komponente in der Lösungsmittelextraktion zur Reinigung der Biomasse eingesetzt, mit der Biomasse in üblicher Weise kontaktiert und aas dem Extraktor als Miszella abgezogen wird. Nach dem Extraktionsprozeß einschließlich mechanischer und thermischer 'Trennung von Lösungsmittel und Biomasse wird die Alkohol und ZeIlinhaltsstoffe enthaltende Miszella ganz oder teilweise dem Fermentationsprozeß zugeführt.This is done according to the invention in that the substrate is used as solvent or solvent component in the solvent extraction for the purification of the biomass, contacted with the biomass in the usual way and aas extracted from the extractor as Miszella. After the extraction process, including mechanical and thermal separation of solvent and biomass, the Miszella containing alcohol and cellulases is wholly or partly fed to the fermentation process.

Bei Te.r^ndung eines,, Alkohol enthaltenden Lö.sung.smitte!gemisches erfolgt dia Abtrennung das Lösungs-When a mixture containing alcohol is dissolved, the separation takes place

LLKILS \LLKILS \

mittels aus der Miszella durch Brechung mit Wasser und/oder Kühlung, wobei die schwere Phase nahezu den gesamten. Alkohol und. die aus der Biomasse entfernten Zellinhaltastoffe enthält. Die den Alkohol, und die Zeilinhaltsstoffe enthaltende schwere Phase, wird der Fermentation zugeführt. Die vorzugsweise im Siedebereich von 40—120° G liegenden Kohlewasser stoff e. der leichten Phase werden wieder aufbereitet und dienen erneut, zur Extraktion· In diesem Falle wird die aus der Extraktion ablaufende Hszellä destillativ in Extrakt, der aus dem Prozeß zur Weiterverwendung ausgeschleust werden kann,- und in die Kohlenwasserstoffkomponente des Lösungsmittels, die wieder für die Srtraktion aufbereitet wird, getrennt. Die Hauptmenge des zugesetzten Alkohols geht aufgrund der höheren Affinität an die Biomasse. Sach. einer zunächst auf1 mechanischem" Wege' erfolgenden Biomasse abtrennung, erfolgt eine thermische Lösungsmittelabtrennung, wobei die entstehenden Brüden mit Wasser gebrochen und die wässrige, von der Kohlenstoff komponente des Lösungsmittels befreite, Alkohol und Zeilinhaltsstoffe enthaltende Phase ganz oder teilweise zur Fermentation geführt wird. ' Gegebenenfalls kann, zur Aufrechterhaltung der Substratkonzentration, nicht erfindungsgemäß behandeltes Substrat aus anderer Quelle der Fermentation zugegeben werden*by means of the Miszella by refraction with water and / or cooling, the heavy phase almost the entire. Alcohol and. contains the Zellinhaltastoffe removed from the biomass. The heavy phase containing the alcohol, and the Zeilinhaltsstoffe is fed to the fermentation. The preferably in the boiling range of 40-120 ° G lying carbon dioxide e. In this case, the Hszellä running out of the extraction is removed by distillation in extract, which can be discharged from the process for re-use, - and in the hydrocarbon component of the solvent, which again for the Srtrktion recycled, separately. The majority of the added alcohol goes to the biomass due to the higher affinity. Zech. a first on 1 mechanical "pathways" occurring biomass separation, carried out a thermal solvent removal, wherein the resulting vapors are broken with water and the aqueous, from the carbon component of the solvent-free, alcohol and Zeilinhaltsstoffe containing phase is wholly or partially led to the fermentation. Optionally, to maintain the substrate concentration, substrate not treated according to the invention may be added from another source of fermentation *

Als Mikroorganismen für die Alkoholfermentation können aerobe Bakterienstämme wie Methylomonas methanolica, Pseudomonas methanica, verschiedene andere Pseudomonas— arten, Corynebakterien verschiedener Spezies, Mischkulturen methanolassiißilierender Bakterien, auch, in Mischung mit nichtmethanolverwertenden Bakterien,, obligat, methylotrophe Bakterien sowie alkoholassimilierende Hefe eingesetzt, werden«As microorganisms for alcohol fermentation, aerobic bacterial strains such as Methylomonas methanolica, Pseudomonas methanica, various other Pseudomonas species, corynebacteria of various species, mixed cultures of methanolassiililizing bacteria, also, in mixture with non-methanol-utilizing bacteria, "obligate, methylotrophic bacteria and alcohol-assimilating yeast are used."

Die so gewonnene Biomasse enthält außer dem hohen Proteingehalt, einen erhöhten Anteil an wertvollen Inhalts-The biomass thus obtained contains, in addition to the high protein content, an increased proportion of valuable content.

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stoffen and weist eine bedeutend verbesserte Verdaulichkeit auf·.and significantly improved digestibility.

Ein weiterer Torteil des beschriebenen Verfahrens besteht darin, daß durch die Extraktion der Biomasse auf eine Sterilisation verzichtet werden kann,, da durch das· Lösungsmittel eine Abtötung von Keimen erfolgt·"Außerdem wird durch die Entfernung ungesättigter fettsäuren, die Haltbarkeit des Bndproduktes verbessert-Another goal part of the method described is that can be dispensed by the extraction of the biomass on a sterilization, since the solvent is a killing of germs · "In addition, by the removal of unsaturated fatty acids, the durability of the Bendproduktes improved-

d) Alisführungsbeispield) Alisführungsbeispiel

Die Erfindung, soll nachstehend an zwei Ausführungsbeispielen erläutert werden·The invention will be explained below with reference to two exemplary embodiments.

Beispiel 1example 1

In einem kontinuierlich arbeitenden Bührwerksko— lonnenexferaktor von 150 mm Durchmesser und 6 m Länge werden pro Stunde 20 kg sprühgetrocknete Biomasse, die durch Züchtung vom Methylobacter acidophilus auf Methanol erhalten wurde, im. Gegenstrom im Verhältnis 1:1 mit Sästhanol extrahiert. Sxtraktphase und Brüden wurden vereinigt, mit 15 kg/h Wasser versetzt und die ca. 60 % äfethanol enthaltende wässrige Phase einem 'Bioreaktor von 700 1 Volumen, der nach einem Umwälzrpri η zip arbeitet,In a continuously operating Bührwerkskolonnenexferaktor of 150 mm diameter and 6 m in length, 20 kg per hour of spray-dried biomass, which was obtained by breeding of Methylobacter acidophilus on methanol, in. Countercurrent in the ratio 1: 1 extracted with Sästhanol. The extract phase and vapors were combined, mixed with 15 kg / h of water and the aqueous phase containing about 60 % ethanol containing a bioreactor of 700 l volume, which works according to a Umprälzprpri η zip,

zugeführt· Bei einer Durchflußrate v-on 0,25-kg . h- ,fed · at a flow rate v-on 0.25-kg. H- ,

—1—1 einer Produktivität von 12,5g·! · h , einem-1-1 of a productivity of 12.5g ·! · H, one

Systemdruck.von 1,5 at und einem pH-Wert.von 4,3 wurde der Gleichgewichtszustand erhalten,, wobei noch 22 kg/h Methanol zusätzlich zum Fermentor zugegeben wurden· Die wässrigen Phasen aus der machanischen 3Q Abtrennung werden zu ca. 50 % in den Fermentor zurückgeführt;· Der aus,.der msthaiiplh,altigen.;P.has,B teilweise abgeschiedene Ssrtrakt konnte der Weiter-System pressure of 1.5 at and a pH of 4.3, the equilibrium state was maintained, with still 22 kg / h of methanol were added in addition to the fermentor · The aqueous phases from the machanic 3Q separation are about 50 % returned to the fermentor; ; P.has, B partly separated Ssrtrakt could the further

— β ~m - β ~ m

228 723 1228 723 1

verarbeitung zugeführt werden· .processing.

Hack: der !Erocknung wurde ein Feststoff erhalten, der aus 75 % Sohprotein, 3,7 % aus Fett und 3,5 % aus Asche bestand·.Hack: The drying was a solid obtained, which consisted of 75 % soy protein, 3.7% of fat and 3.5% of ash ·.

Beispiel 2Example 2

Ebenfalls in' einem kontinuierlich arbeitenden Bührwerkskolonnenextraktor von 150 mm Durchmesser und 6 m Länge wurden pro Stunde 25 kg sprühgetrocknete Biomasse, die durch Züchtung von lethylobacter acidophilus, auf Methanol erhalten wurde, im Gegenstrom mit einem Gemisch aus 80 Ma-% Benzin und 20 Ma-% ~ Methanol, extrahiert·. Die ablaufende fiüsaella, die praktisch nur aus Benzin und Extrakt bestand und nur Spuren von Methanol enthält, wurde destillativ aufgearbeitet und als frisches Lösungsmittel dem Extraktionsprozeß wieder zugeführt. Die durch die thermische Lösungsmittelaustreibung nach der Extraktion freige— wordenen Brüden, die vorwiegend aus Methanol bestanden, wurden kondensiert und mit Wasser im Verhältnis 1:1 gemischt« Dabei entstanden awei flüssige Phasen, wobei die obere benzinreiche dem frischen Lösungsmittel zugesetzt wurden und die untere nur Methanol und Wasser enthaltende Phase dem Permentor zugeführt wurde. Die Fermentation wurde analog"Beispiel 1 durchgeführt, wobei die zusätzlich dem Fermentor zugegebene Methanolmenge erhöht wurde.Also, in a continuous working column column extractor of 150 mm diameter and 6 m length, 25 kg per hour of spray-dried biomass obtained by cultivating lethylobacter acidophilus on methanol was countercurrently mixed with a mixture of 80% by mass gasoline and 20 ml % ~ Methanol, extracted. The effluent fiüsaella, which consisted practically only of gasoline and extract and contains only traces of methanol, was worked up by distillation and recycled as fresh solvent to the extraction process. The vapors released by the thermal solvent expulsion after extraction, which consisted predominantly of methanol, were condensed and mixed with water in a ratio of 1: 1. Aqueous liquid phases were formed, with the upper benzine rich being added to the fresh solvent and the lower one only Methanol and water-containing phase was supplied to the perforator. The fermentation was carried out analogously to "Example 1, wherein the additional amount of methanol added to the fermentor was increased.

Das Endprodukt hatte.einen Bohproteingehalt von 80 %, einen Fettgehalt von 1,5 % und einen Aschegehalt von 4 %· 'The final product had a bohydrotein content of 80%, a fat content of 1.5 % and an ash content of 4%.

Claims (2)

-7- 228723- 7 - 228723 Erf indung s anspruchClaim 1. Verfahren zur Gewinnung von Einzellerprotein gekennzeichnet dadurch, daß eine auf der Basis von Alkohol gezüchteten Biomasse extraktiv mit Alkohol.oder einem Alkohol-Kohlenwasserstoffgemisch,. wobei die Kohlenwasserstoffe vorzugsweise im Bereich von 40 - 120° 0 liegen, aufgearbeitet, and danach der zur Extraktion benutzte Alkohol vom Extrakt bzw· vom Sohlenwasserstoff-Gemisch durch Wasserzugabe und/oder Kühlung abgetrennt und anschließend der "mit ffermentatioηshi If smitteIn beladene Alkohol· ganz'oder teilweise in die Fermentation als Kohlenstoffquelle eingesetzt wird, wobei die im Alkohol, gelösten Ze Hinhält sst off β als Permentationshilfsmittel dienen·1. A process for the production of protozoal protein, characterized in that a grown on the basis of alcohol biomass extractive with Alkohol.oder an alcohol-hydrocarbon mixture. the hydrocarbons are preferably in the range from 40 ° to 120 ° C., worked up, and then the alcohol used for the extraction is separated from the extract or from the hydrocarbon mixture by addition of water and / or cooling and then the alcohol laden with fermentation oil is completely or partially used in the fermentation as a carbon source, wherein the dissolved in the alcohol Zez sst off β serve as a Permentationshilfsmittel · 2. Verfahren nach Punkt 1, gekennzeichnet dadurch, daß zusätzlich zu, dem in der Extraktion eingesetzten Alkohol weiterer Alkohol, entsprechend den für. die fermentation erforderlichen Isngen direkt dem Permentor zugeführt wird»2. The method according to item 1, characterized in that in addition to, the alcohol used in the extraction further alcohol, according to the. the fermentation required is fed directly to the permentor »
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