DD243932A5 - Verfahren zur herstellung von n,n'-dialkylguanidino-dipeptiden - Google Patents

Abstract

Die Erfindung betrifft ein Verfahren zur Herstellung von NG,NG-Dialkylguanidino-dipeptiden. Diese Dipeptide, die Prolin und Prolinanaloge als Komponenten enthalten, hemmen das Angiotensin-Converting-Enzym und sind daher antihypertensiv wirkende Arzneistoffe.

Description

Titel der Erfindung:

Verfahren zur Herstellung von N,N'-Dialkylguanidinodipeptiden:

Anwendungs-gebiet der Erfindung.:

Die Anwendung der vorliegenden Erfindung erfolgt auf dem Gebiet der Arzneimittel mit antihypertensiver Wirkung.

Charakteristik der bekannten technischen Lösungen:

Eine Senkung des Blutdrucks lässt sich durch Angiotensin-Converting-Enzyme (ACE)-Inhibitoren erreichen. Beispiele für derartige Arzneistoffe sind in EP-A-12401, 65301 und 79022, in Chem. Abstracts 9525634 J (1981) sowie in US-A-4 046 889 (Ondetti et al.) beschrieben. '

Die erfindungsgemäss hergestellten ACE-Inhibitoren stellen Dipeptide dar, die «C-Aminosäuren

ppi

mit N ,N -Dialkylguanidinogruppen enthalten.

21.3.86- 334417

McGregor et al., J. Cardiovasc. Pharmacol., Bd. 7 (Supp. 1) (1985), S. 582, erörtern die Wirkung von ACE-Inhibitoren in Kombination mit herkömmlichen Antihypertensiva, einschliesslich des Calciumblockers (calcium entry blocker) Nifedipin. Brunner et al., J. Cardiovasc. Pharmacol., Bd. 7 (Supp 1) (1985), S. 52 erörtern·die Wirksamkeit einer Reihe von verschiedenen ACE-Inhibitoren.

Ziel der Erfindung: 10

Ziel der Erfindung ist es, neue Arzneistoffe zur Bekämprfung von Bluthochdruck bereitzustellen.

Darlegung des Wesens -der Erfindung:

Der Erfindung liegt die Aufgabe zugrunde, neue Arzneistoffe zur Bekämpfung von Bluthochdruck bereitzustellen, die sich durch eine besonders günstige pharmakologische Wirkung auszeichnen.

Die Erfindung betrifft ein Verfahren zur Herstellung von Verbindungen der allgemeinen Formel (A)

f R⁴ R⁵ Ri-CO-CH-NH-CH-CO-N-CH-CO-R (A)

'2 R^

in der „_ R Hydroxy, nieder-Alkoxy-,Benzyloxy oder ggf. durch

ein oder zwei nieder-Alkylreste substituiertes Amino.bedeutet; R² und R³ .

(1) Wasserstoff oder vorzugsweise nieder-Alkyl

(ggfi durch Phenyl oder Naphthyl ^/-substituiert; 35

weniger bevorzugt durch Di-nieder-alkylguanidino 4)-substituiert); oder

_/N-R⁷

NHR⁸,

R4	R5
I	I
-N-	CH-

• 2 3 bedeutet, wobei einer der Reste R und R die Bedeutung

(1) und der andere die Bedeutung (2) hat; und der Rest

. _c

R⁴ R⁵

-N-CH-CO-R⁰

einen Aminosäurerest aus der Gruppe der Iminosäurereste bedeutet* vorzugsweise aus der Gruppe der cyclischen Iminosäurereste, bei denen die Untergruppe

einen heterocyclischen Rest mit 1 Stickstoffatom und bis zu 9 Ringkohlenstoffatomen bildet, wobei die cyclischen Iminosäurereste sich insbesondere von Prolin, Hydroxyprolin oder Prolinanalogen ableiten;

R Hydroxy, nieder-Alkoxy, Benzyloxy oder ggf. durch ein oder zwei niedere Alkylreste substituiertes Amino bedeutet;

. γ 8

R und R unabhängig voneinander ggf. durch 1 bis 5 Fluoratome substituiertes nieder-Alkyl bedeuten; 'und η eine ganze Zahl von 3 bis 5, vorzugsweise 4, ist;, sowie von deren pharmakologisch verträglichen, nichttoxischen Salzen, gekennzeichnet durch

(a) Hydrolyse einer Verbindung der Formel

=5 Λ 5

R¹* CO-CH-NH-CH-CO-N-CH-CO- R⁶*

(nachstehend abgekürzt mit

R^S*>,

1 * 6* worin R und R Hydroxy, nieder-Alkoxy, Benzyloxy oder

ggf. durch ein oder zwei niedere Alkylreste substitu-

iertes Amino bedeuten und mindestens einer der Reste R

6* und R nieder-Alkoxy oder Benzyloxy bedeutet, zu einer

1 ft

Verbindung der Formel A, in der R und R Hydroxy bedeuten ;

(b) Hydrogenolyse (reduktive Spaltung) einer Verbindung der Formel

1 * 6* R ' R

1 * 6* in der R und R Hydroxy, nieder-Alkoxy, Benzyloxy oder

ggf. durch ein oder zwei niedere Alkylreste substituier-

tes Amino bedeuten und mindestens einer der Reste R und

6* R Benzyloxy bedeutet, zu einer Verbindung der Formel A,

1 ft

in der mindestens einer der Reste R und R Hydroxy bedeutet;

(c) Reduktion einer Verbindung der Formel

R³* R⁴ R⁵ 1 III

R CO - CH - NH - CH - CO - N - CH - CO - R

2* Ί*

in der einer Reste R oder R oxosubstituiertes nieder-Alkyl, das ggf. durch Phenyl oder Maphthyl uJ-substituiert ist, und der andere de; stehende Bedeutung (2) hat;

2* 3 * iert ist, und der andere der Reste R und R die vor-

(d) Umsetzung einer Verbindung der Formel A mit einer Base unter Bildung eines Salzes der Verbindung der Formel

(e) Umsetzung einer Verbindung der Formel A mit einer Säure unter Bildung eines Säureadditionssalzes der Verbindung der Formel A;

Cf) Kondensation eines Aminosäurederivats der Formel 15

R¹ CO-CH- NH₀

^fflit einem _r <^-Ketosäurederivat der Formel

R³ R⁴ R⁵

• · 1 6

' 0 = C - CO - N - CH - CO - R

unter reduktiven Bedingungen unter Bildung einer Verbindung der Formel A;

(g) Reduktion einer Schiffsehen Base der Formel R³ R⁴R⁵

R¹ CO - CH - N = C - CO - N - CH - CO - R 2

zu einer Verbindung der Formel A;

- 6 (h) Kondensation eines <X-Ketosäurederivats der Formel

R¹ - CO - CO

mit einem Dipeptid der Formel

R³ R⁴ R⁵

ί I ' H₉N-CH-CO-N-CH-CO-R

unter reduktiven Bedingungen;

(i) Kondensation eines Aminosäurederivats der Formel ·

f R¹ CO-CH- NH - CH - COOH

mit Prolin oder einem prolinanalogen Derivat der Formel

R⁴ R⁵

HN - CH-CO-R⁶

unter Bildung einer Verbindung der Formel A; (j) Alkylierung eines Dipeptids der Formel

R³* R⁴ R³

R¹ CO-CH- NH - όΉ - CO - N - CH - C - R⁶ R²*

2* 3* in der einer der Reste R und E die Bedeutung -(CH₂) NHp und der andere die vorstehende Bedeutung (1) hat, mit einem Alkylierungsmittel der Formel

-< 5 ·ί 3

.N-R⁷ Z - C^

NHR⁸

in der Z Chlor, Brom oder Jod oder einen riieder-Alkylmercaptorest bedeutet;

(k) Veresterung einer Verbindung der Formel i* ,*. .

1 * 2*

in der mindestens einer der Reste R und R Hydroxy und der. andere Hydroxy, nieder-Alkoxy oder Benzyloxy bedeutet, mit einem niederen Alkanol oder Benzylalkohol;

(1) Alkylierung einer Verbindung der Formel

f* R⁴ R⁵ _Rl CO '- CH - NH - CH - CO - N - CH - CO - R⁶

2*

2* ^* in der einer der Reste R und R einen tiT-guanidinsubstituierten Alkylenrest mit 3 bis 5, vorzugsweise 4, Kohlenstoffatomen und der andere die Bedeutung (1) hat, mit einem nieder-Alkyl-Alkylierungsmittel, das ggf. durch 1 bis 5 Fluoratome substituiert ist;

(m) Alkylierung eines Dipeptidderivats der Formel

R³ R⁴ R⁵ I Il 6 H₂N - CH - CO - N - CH -CO-R

mit einem Alkylierungsmittel der Formel

R¹ - CO - CH - P R²

in der P Halogen aus der Gruppe Chlor, Brom oder Jod

oder eine Sulfonyloxygruppe bedeutet;

(n) Alkylierung eines Aminosäurederivats der Formel

R¹

R¹ - CO - CH -

mit einem Alkylierungsmittel der Formel

'

R⁵ R⁴ R⁵ ! Il

P - CH - CO - N - CH-CO-R

20 in der P die gleiche Bedeutung wie in Stufe (m) hat; (o) Alkylierung eines Guanidinoderivats der Formel

NR⁷

H_?N - c'

^{2 N} a NHR⁸

mit einem Alkylierungsmittel der Formel

f* R⁴ R⁵

R¹ CO - CH - NH - CH - CO - N - CH - COR⁶ (I)

2*

2* Ί* 35 in der einer der Reste R und R eine alkylierende

Gruppe der Formel

i -i '' /-.

- ^(CH2>n -

bedeutet und P die gleiche Bedeutung wie in Stufe (m) hat, und der andere d deutung (1) hat;

2* "3*

und der andere der Reste R und R die vorstehende Be-

(p) Umwandlung eines Säureadditionssalzes des Dipeptids der Formel A mit einer Base zu einem Dipeptid. der. Formel A oder einem Salz davon mit dieser Base;

(q) Umwandlung eines Salzes eines Dipeptids der Formel A (von einer Base abgeleitet) mit einer Säure zum freien Dipeptid der Formel A oder einem Säureadditionssalz davon;

(r) Umwandlung eines Salzes eines Dipeptids der Formel A, vorzugsweise eines löslichen S.alz-es', in ein anderes Salz dieses Dipeptids, das vorzugsweise weniger löslich als das genannte lösliche Salz ist;

(s). Acylierung von Ammoniak, einem nieder-Alkylamin oder einem Di-nieder-alkylamin mit einem Dipeptidderivat der Formel

1*6* R¹ R^D

1 * 6*

worin R und R . Hydroxy, Chlor, Brom, nieder-Alkoxy, Benzyloxy, nieder-Alkanoyloxy oder ggf. durch ein oder zwei nieder-Alkylreste substituiertes'Amino bedeutet und

1*6*

mindestens einer der Reste R und R Hydroxy, Chlor,

Brom, nieder-Alkoxy, .Benzyloxy oder nieder-Alkanoyloxy bedeutet

35

Nachstehend werden die erfindungsgeraäss herstellbaren Verbindungen in die Gruppen 1 bis 14 eingeteilt.

1. Diese Gruppe umfasst die Verbindungen der vorstehend definierten allgemeinen Formel A.

2. Bevorzugt sind Verbindungen der Formel A, in der einer

2 3 der Reste R und R^J nieder-Alkyl, Benzyl oder 2-Phenyl-

ethyl bedeutet. ' ·

3. Besonders bevorzugt sind Verbindungen, in denen einer

2 λ der Reste R und.R nieder-Alkyl oder 2-Phenethyl bedeutet; und der Rest der Formel

R f

-n-Ch-co-r⁶

einen Prolinrest (I) oder einen prolinanalogen Rest bedeutet, in dem der Pyrrolidinring durch eine 0xogruppe (IV), durch Hydroxy, Mercapto, nieder-Alkylmercapto oder nieder-Alkoxy (V) substituiert ist oder der Prolinrest durch die Reste II, III oder VI ersetzt ist:

COR

9:

COR⁶ (V)

und R Hydroxy oder Benzyloxy bedeutet; und X Wasserstoff, Nitro, nieder-Alkyl, Chlor oder Brom bedeutet.

4. Bevorzugte Untergruppen der Gruppen T bis 3 sind Verbindungen, worin R

Rest (2) bedeutet.

5. Eine weitere bevorzugte Untergruppe der Gruppen 1 bis 10

bindungen, worin R den dialkylguanidino-substituierten

2 3 sind Verbindungen, worin R 2-Phenylethyl bedeutet.

6. Eine Untergruppe der Gruppen. 1 bis 4 sind Verbindungen, worin R nieder-Alkyl mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen bedeutet.

7. 'Eine bevorzugte Untergruppe der Gruppe 6 umfasst die Bedeutungen Methyl, Ethyl oder n-Propyl.

8. In einer weiteren bevorzugten Untergruppe der Gruppen 1 bis 7 bildet der Rest

'

R⁴ R⁵

-N-CH-CO-R⁶

einen Prolinrest

25

9. Besonders bevorzugt sind Verbindungen, worin der Rest

R⁴ f

- A - CH - CO - R⁶

einen Prolinrest bedeutet oder aus den Gruppen II, III oder VI ausgewählt ist und R Hydroxy bedeutet.

10. Eine wichtige Untergruppe der Gruppen 1 bis 7 oder 9 sind Verbindungen, worin der Prolinrest durch II ersetzt ist.

3 7 3 '2

11. Eine besonders bevorzugte Untergruppe der Gruppe 10 umfasst Verbindungen, worin X Wasserstoff bedeutet.

12. Ferner sind in sämtlichen Gruppen Verbindungen be-

7 8 vorzugt, in denen R und -R

Kohlenstoffatomen bedeuten.

7 8 vorzugt, in denen R und -R nieder-Alkyl mit 1 bis

,13· Eine besonders bevorzugte Untergruppe der.Gruppe 12

7 R umfasst Verbindungen, worin R und R Methyl, Ethyl, 2,2,2-Trifluorethyl, n-Propyl oder η-Butyl bedeuten.

14. Eine besonders bevorzugte Untergruppe der Gruppe 13 umfasst V bedeuten.

7 8 umfasst Verbindungen, worin R und R Ethyl

Aus den erfindungsgemäss hergestellten Verbindungen lassen sich Arzneipräparate herstellen, die eine pharmazeutisch wirksame Menge einer Verbindung einer der vorstehenden Gruppen und einen pharmazeutisch:verträglichen Trägerstoff enthalten. Diese Arzneimittel eignen sich insbesondere zur Behandlung von Hochdruck. Vorzugsweise umfassen die Arzneimittel Diuretika oder andere Antihypertensiva, z.B. Calciumblocker, insbesondere Nicardipin.

Mit den erfindungsgemäss hergestellten Verbindungen lässt sich somit Hochdruck bei Säugetieren behandeln, indem man eine wirksame Menge einer Verbindung der Formel A oder eine pharmazeutische Zusammensetzung mit einem Gehalt an einer Verbindung der Formel A verabreicht/ Vorzugsweise werden die erfindungsgemäss hergestellten Verbindungen der Formel A zur Behandlung von Hochdruck eingesetzt.

Sofern nichts anderes angegeben ist, bedeutet der Ausdruck "nieder-Alkyl" verzweigte oder unverzweigte, gesättigte Kohlenwasserstoffketten mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen. Beispiele hierfür sind Methyl, Ethyl, Propyl, tert.-Butyl, n-Pentyl, n-Hexyl und dergl.

Der Ausdruck "Fluoralkyl" bedeutet verzweigte oder unverzweigte, gesättigte Alkylketten, die mit einem oder mehreren (bis zu 5) Fluoratomen substituiert sind. Beispiele hierfür sind 2,2,2-Trifluorethyl, 3,3,3,2,2-Penta-. fluorpropyl und dergl.

Der Ausdruck "nieder-Alkoxy" bedeutet die Gruppe -OR, worin R Alkyl gemäss vorstehender Definition bedeutet. Beispiele hierfür sind Methoxy, Ethoxy,' Propoxy, tert.-Butoxy, n-Hexyloxy und dergl.

- Der Ausdruck "gegebenenfalls" bedeutet, dass das im Zusammenhang damit angegebene Merkmal nur fakultativ verwirklicht ist und die Erfindung somit Fälle.umfasst, bei denen dieses Merkmal vorliegt oder nicht.

Der Ausdruck "gegebenenfalls ίιΓ-substituiertes nieder-Alky.l" bedeutet einen nieder-Alkylrest der vorstehend angegebenen Definition, der ggf. an dem Kohlenstoffatom, das vom Verknüpfungspunkt der restlichen Formel A am weitesten entfernt ist, substituiert ist.

Der Ausdruck "Aryl" bedeutet einen ggf. substituierten aromatischen Rest mit 6 bis 12 Ringkohlenstoffatomen, insbesondere ggf. substituiertes Phenyl oder Naphthyl.

Der Ausdruck "ggf. substituiertes Phenyl" bedeutet Phenyl, das mit 1 bis 3 Substituenten aus der Gruppe Halogen, nieder-Alkyl oder nieder-Alkoxy (jeweils mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen, Hydroxy oder Trifluormethyl substitu-" iert sein kann.

Der Ausdruck "pharmazeutisch verträgliche Salze" bedeutet Salze, bei denen die biologische Wirksamkeit und die Eigenschaften der freien Basen erhalten bleiben und die keine unerwünschten biologischen oder anderweitigen Wirkungen zeigen. Diese Säuren leiten sich von anorganischen

Säuren, z.B. Salzsäure, Bromwasserstoffsäure, Schwefelsäure, Salpetersäure, Phosphorsäure und dergl., und von organischen Säuren ab, z.B. Essigsäure, Propionsäure, Glykolsäure, Brenztraubensäure, Oxalsäure, Äpfelsäure, Malonsäure, Bernsteinsäure, Maleinsäure, Fumarsäure, Weinsäure, Citronensäure, Benzoesäure, Zimtsäure, Mandelsäure, Methansulfonsäure, Ethansulfonsäure, p-Toluolsulfonsäure, Salicylsäure und dergl.

Die Verbindungen der Formel A bilden auch Salze mit anorganischen Basen, wie Natriumhydroxid, Kaliumhydroxid, Calciumhydroxid , Aluminiumtrihydroxid, Magnesiumhydroxid, oder mit organischen Basen, wie Isopropylamin, Trimethylamin, Diethylamin, Ethanolamin, 2-Dimethylaminoethanol oder Tromethamin.

Der Ausdruck "Säurederivat" umfasst Ester (nieder-Alkyl-, Benzyl- oder Silylester), Amide, Säurechloride, Hydroxamsäuren und dergl., ist aber nicht hierauf beschränkt. 20

Der Ausdruck "Prolinanaloges" bedeutet,heterocyclische Verbindungen, von denen die vorerwähnten Reste II bis VI abgeleitet sind.

Der Ausdruck "SuIfonyloxy" bedeutet nieder-Alkylsulfonyloxyreste od'er C,- ..p-Arylsulf onyloxyreste.

Sofern nichts anderes definiert ist, bedeutet die Formel

1 * fi* R¹ R^D

ein Ausgangsmaterial für die Verbindungen der Formel A, das bereits die Dipeptidkette der Verbindungen der Formel

A enthält, aber bei dem mindestens einer der Reste R

6* 1 6

und R in R bzw. R überzuführen ist.

Die erfindungsgemäss hergestellten Verbindungen weisen einen alkylsubstituierten Guanidinrest an einem der Amino-

2 3

säurereste R oder R auf- Arginin, eine natürlich vorkommende Aminosäure, besitzt einen unsubstituierten Guanidinrest. In den erfindungsgemäss hergestellten Verbindungen mit Arginin als Bestandteil (Verbindungen der Formeln A mit η = 3) sind beide terminale Stickstoffatome am Guanidinorest des Arginins durch einen Alkylrest substituiert.

cc* cc*

Beispiele hierfür sind N , N -Dimethylarginin, N' , N

CC* Diethylarginin, N , N -Bis-(2,2,2-trifluorethyl)-arginin,

CC*

N -Methyl-N -ethylarginin und dergl. Ähnliche Verbindungen der vorstehend aufgeführten Gruppen 1 bis 14 werden aus den übrigen alkylguanidino-substituierten Amino-

C C *

säuren gebildet. Beispiele sind N ·, N -Dimethylhomoarginin, N , N -Diäthylhomoarginin, N , N -Bis-2,2,2-(tri-

P C *

fluorethyl)-homoarginin, N -Methyl-N -ethylhomoarginin und dergl. (Verbindungen der Formel A mit η = 4).

Die Alkylreste machen den Guanidinorest lipophiler und basischer und damit besser für eine stärkere Einwirkung auf zelluläre Membranen geeignet.

Bestimmte erfindungsgemäss hergestellte Verbindungen umfassen die Prolinanalogen II, III und VI. Zu diesen Prolinanalogen gehören 3-Carboxy-1,2,3,4-tetrahydroisochinolin (THIQ), 2-Carboxy-2,3-dihydroindol, 4,5-(Trimethylen)-prolin (identisch mit 3-Carboxy-2-aza-bicyclo- ]_ 3 · 3.0_/-octan) und dergl. Der am Prolin gebundene Kohlenwasserstoff rest macht diese Prolinanalogen lipophiler als.Prolin. Derartige Prolinanaloge eignen sich daher im Vergleich zu unsubstituiertem Prolin besser für eine starke Einwirkung auf zelluläre Membranen.

Die erfindungsgemäss hergestellten Verbindungen mit einem Gehalt an .Prolinanalogen II, III und VI werden fester an den Zellmembranen gebunden, was auf die vereinigte Wirkung des alkylsubstituierten Guanidinrests und des Kohlen-

- 16 wasserstoffrests des Prolinanalogen zurückzuführen ist.

. Dies bewirkt eine Depotbildung der Verbindung im Körper und bringt die erfindungsgemäss hergestellten Verbindungen mit einem Gehalt an den Prolinanalogen naher und für längere Zeit an die mutmassliche Wirkungsstelle, als dies bei ähnlichen Verbindungen ohne diese Merkmale der Fall ist. Infolgedessen weisen die erfindungsgemäss hergestellten Verbindungen eine stärkere und länger anhaltende pharmazeutische·Wirkung auf.

Die erfindungsgemäss hergestellten Verbindungen bilden Salze mit anorganischen und organischen Säuren und Basen. Die Herstellung dieser Salze ist ebenfalls Gegenstand der Erfindung. Beispiele für derartige Salze sind Ammoniumsalze, Alkalimetallsalze, wie Natrium- und Kaliumsalze, Erdalkalimetallsalze, wie Calcium- und Magnesiumsalze, Salze mit organischen Basen, z.B. Dicyclohexylaminosalze, n-Methyl-d-glucaminsalze, Salze mit Aminosäuren, wie Arginin und dergl. Es können auch Salze mit organischen oder anorganischen Säuren hergestellt werden, z.B. mit

20. HCl, HBr, JHpSO₁₊, H-PO₁,, Methansulf onsäure, Toluolsulf onsäure, Maleinsäure, Fumarsäure und dergl.

Die nicht-toxischen, physiologisch verträglichen Salze werden bevorzugt, wenngleich auch andere Salze wertvolle Verbindungen darstellen, beispielsweise zum Isolieren oder Reinigen der Produkte.

Wie nachstehend näher erläutert, lassen sich die Salze unter Anwendung herkömmlicher Massnahmen herstellen, beispielsweise durch Umsetzung der freien Säure oder freien Base mit eins oder mehr Äquivalenten der entsprechenden Base oder Säure in einem Lösungsmittel oder einem Medium, in dem das Salz unlöslich ist, oder in einem'Lösungsmittel, wie Wasser, das anschliessend unter vermindertem Druck oder durch Gefriertrocknung entfernt wird. Eine weitere Möglichkeit besteht im Austausch von Kationen eines vorliegenden Salzes durch ein anderes Kation an einem geeigneten Ionenaustauscherharz.

Verwendung und Verabreichung der erfindungsgemäss hergestellten Verbindungen:

Wie bereits erwähnt, stellen die erfindungsgemäss hergestellten Verbindungen ACE-Inhibitoren dar, die die Umwandlung des Decapeptids Angiotensin I zu Angiotensin II, einer stark blutdrucksteigernden Substanz, blockieren. Somit können ACE-Inhibitoren den Blutdruck durch Hemmung der' Biosynthese von Angiotensin II senken, insbesondere bei Tieren und Menschen, deren Hochdruck in Zusammenhang mit Angiotensin II steht. Ferner baut ACE die gefässerweiternde Substanz Bradykinin ab. Daher können ACE-Inhibitoren den Blutdruck senken, indem sie sowohl die Wirkung von Bradykinin erhöhen als auch Angiotensin II hemmen.

Obgleich die relative Bedeutung dieser und anderer möglicher Mechanismen noch klärungsbedürftig ist, ist es bekannt, dass ACE-Inhibitoren bei einer Reihe von Tieren wirksame antihypertensive Mittel sind und von klinischem Wert sind, beispielsweise bei zahlreichen Patienten mit malignem renovaskuMrem und essentiellem Hochdruck.

Es stehen eine Anzahl von in vitro- und in vivo-Modellen zur Ermittlung der biologischen Aktivität von ACE-Inhibitoren zur Verfügung (ve-rgl. E.W. Petrillo, Jr. und M.A.

Ondetti, Medical Res. Rev., Bd. 2 (1982), S. 1 sowie die darin zitierten Druckschriften). Ein besonders wertvoller in vitro-Test verwendet ein ACE-Präparat aus Kaninchenlunge (entweder roh oder gereinigt) und das synthetische Substrat Hippuryl-histidyl-leucin (D.W. Cushman und H.S.

Cheung, Biochem. Pharmacol., Bd. 20 (1971), S..1637).

Diese zu testenden Substanzen werden auf ihre Fähigkeit, die Spaltung des Substrats zu blockieren,untersucht, und die Dosen, die eine 50-prozentige Hemmung der Hydrolyse des Substrats bewirken,(ID™) werden ermittelt. Bei dieser und anderen Untersuchungen ist die Hinzunahme eines Literaturstandards (im allgemeinen Captopril) wertvoll.

Ein geeignetes in vivo-Modell setzt normotensive Ratten ein, die Angiotensin I-Gaben erhalten. Eine Verabreichung des zu testenden Arzneistoffs, entweder intravenös (i.v.) oder oral (p.o.) ergibt eine dosisabhängige Unterdrückung der hypertensiven Reaktion auf die Angiotensin I-Gabe (D.M. Gross et al., J. Pharmacol. Exp. Ther., Bd. 216 (1981), S. 552). Ein weiteres in vivo-Modell verwendet spontan hypertensive Ratten.

Die hier beschriebenen Verbindungen haben sich sowohl bei in vitro- als auch bei in vivo-Versuchen als starke und lang wirkende ACE-Inhibitoren erwiesen.

Somit stellen die erfindungsgemäss hergestellten Verbindüngen wertvolle antihypertensive Arzneistoffe zur Behandlung von hypertensiven Säugetieren, einschliesslich Menschen, dar. Sie können zur Blutdrucksenkung zu üblichen pharmazeutischen Zubereitungen, wie Tabletten, Kapseln, Elixieren für die orale Verabreichung oder zu sterilen Lösungen oder Suspensionen verarbeitet werden. Die spezielle Dosierung hängt von einer Reihe von Faktoren ab, z.B. vom Körpergewicht, der Schwere der Erkrankung und . dergl.

Die erfindungsgemäss hergestellten Verbindungen können in Kombination mit anderen Diuretika oder antihypertensiven Wirkstoffen verabreicht werden. Typischerweise handelt es sich dabei um Kombinationen, deren individuelle Tagesdosierungen von 1/5 der minimal empfohlenen klinisehen Dosen bis zu den maximal enpfohlenen Konzentrationen für diese Produkte bei einzelner Verabreichung

. ^x reichen, beispielsweise kann einer der erfindungsgemäss erhaltenen antihypertensiven Wirkstoffe, der klinisch im Bereich von 1 bis 200 mg pro Tag wirksam ist, in wirk-. 35 samer Weise in Konzentrationen von 3 bis 200 mg pro Tag mit folgenden antihypertensiven und diuretischen Wirkstoffen in den nachstehend angegebenen Bereichen kombiniert werden.

Hydrochlorthiazid (15 bis 200 mg), Chlorthiazid (125 bis 200 mg), Ethacrynsäure (15 bis 200 mg), Amilorid ( 5 bis 20 mg),. Furosemid (5 bis 80 mg), Propranolol (20 bis 480 mg), Timolol (5 bis 50 mg), Methyldopa (65 bis 2000 mg) und Nicardipin (5 bis 20 mg). Daneben stellen 3-fache Wirkstoffkombinationen, z.B. Hydrochlorthiazid (15 bis 200 mg) plus Amilorid (5 bis 20 mg) plus erfindungsgemäss erhaltene ACE-Inhibitoren (l bis 200 mg) wirksame Kombinationen zur Kontrolle _des Blutdrucks bei hypertensiven Patienten dar. Die vorgenannten Dosisbereiche werden auf einer Einheitsbasis je nach Bedarf eingestellt, um eine unterteilte tägliche Dosierung zu ermöglichen. Die Dosis hängt ferner von der Schwere der Erkrankung, dem Gewicht des Patienten und anderen Faktoren ab, die dem Fachmann

geläufig sind. '

Die Verbindungen der Formel A haben sich bei Standardlabortests als ACE-Inhibitoren erwiesen. Demgemäss können die Verbindungen der Formel A sowie deren Salze und Arzneimittel mit einem Gehalt an diesen Verbindungen zur Hemmung der Bildung von Angiotensin II eingesetzt werden, wodurch Hochdruck verhindert oder kontrolliert' wird.

Die Verabreichung der Wirkstoffe der Formel A und ihrer Salze kann nach beliebigen anerkannten Wegen für die Verabreichung von ACE-Inhibitoren erfolgen. Hierzu gehören orale, parenterale.und anderweitig systemische Verabreichungswege .

Je nach der beabsichtigten Verabreichungsart können die Arzneimittel in Form von festen, halbfesten oder flüssigen Dosierungsformen verwendet werden, z.B. in Form von Tabletten, Suppositorien, Pillen, Kapseln, Pulvern, Flüssigkeiten, Suspensionen oder dergl. Vorzugsweise werden sie in Einheitsdosierungsformen bereitgestellt, die sich für die einmalige Verabreichung von präzisen Dosen eignen. Die Arzneimittel enthalten herkömmliche pharmazeutische

Trägerstoffe oder Verdünnungsmittel und einen Wirkstoff der Formel A oder pharmazeutisch verträgliche Salze davon. Sie können zusätzlich weitere Arzneistoffe, pharmazeutische Mittel, Trägerstoffe, Hilfsstoffe und dergl. enthalten.

Beispiele für herkömmliche, nicht-toxische, feste Trägerstoffe für feste Präparate sind Mannit, Lactose, Stärke, Magnesiumstearat, Saccharinnatrium, Talcum, Cellulose, Glucose, Saccharose, Magnesiumcarbonat und dergl. in pharmazeutischer Qualität. Der vorstehend definierte Wirkstoff kann beispielsweise unter Verwendung von Polyalkylenglykolen, z.B. Propylenglykol, als Trägerstoff zu Suppositorien formuliert werden. Flüssige, pharmazeutisch verabreichbare Präparate können -beispielsweise hergestellt werden, indem man einen Wirkstoff der vorstehend definierten Art und ggf. verwendete pharmazeutische Hilfsmittel in einem Trägerstoff, wie Wasser, Kochsalzlösung, wässrige Dextrose, Glycerin, Ethanol und dergl., löst, dispergiert und dergl., wodurch man eine Lösung oder Suspension erhält. Ggf. kann das zu verabreichende pharmazeutische Präparat auch untergeordnete Mengen an nichttoxischen Hilfssubstanzen enthalten, z.B. Netz- oder Emulgiermittel, pH-puffernde Mittel und dergl., wie Natriumacetat, Sorbitanmonolaurat, Triethanolamin Natriumacetat, Triethanolaminoleat und dergl. Verfahren zur Herstellung derartiger Dosierungsformen sind bekannt oder liegen für den Fachmann auf der -Hand; vergl.. z.B. Remingtons Pharmaceuticals Sciences, Mack Publishing Company,

Easton,® Pennsylvania, 15. Auflage, 1975. Das zu verabreichende Präparat enthält auf jeden Fall eine Menge an Wirkstoff(en), die ausreicht, die Symptome des zu behandelnden Subjekts zu lindern.

Für die Verbindungen der Formel A werden je nach Art der zu behandelnden Störung entweder die orale oder die intravenöse Verabreichung bevorzugt.

Für die orale Verabreichung wird eine pharmazeutisch verträgliche nicht-toxische Zusammensetzung durch Einverleibung von beliebigen normalerweise verwendeten Trägerstoffen, z.B. Mannit, Lactose, Stärke, Magnesiumstearat, Saccharinnatrium, Talcum, Cellulose, Glucose, Saccharose, Magnesiumcarbonat und dergl. in pharmazeutischer Qualität, gebildet. Diese Präparate können in Form von Lösungen, Suspensionen, Tabletten, Pillen, Kapseln, Pulvern, Präparaten zur verzögerten Wirkstoffabgabe und dergl. vorliegen. Sie können 1 bis 95 Prozent und vorzugsweise 25 bis 70 Prozent.Wirkstoff enthalten.

Die minimale wirksame orale Dosis für spontan hypertensive Ratten beträgt bei den erfindungsgemäss erhältlichen Verbindungen etwa 0,01 bis 10 mg/kg Körpergewicht. Die exakte Dosis hängt von der behandelten Spezies, der Schwere der Erkrankung, der Art der Verabreichung, der Beurteilung durch den Arzt und anderen dem Fachmann geläufigen Faktoren ab. Beim Menschen beträgt eine minimale wirksame Dosis bei "einer Person von 70 kg Körpergewicht etwa 1 bis 700 mg. Bei oraler Verabreichung an spontan hypertensive Ratten in einem überschuss vom 10-fachen der minimal wirksamen oralen Dosis wurden keine toxischen Wirkungen beobachtet.

.

Wie bereits erwähnt, lassen sich die Verbindungen der Formel A nach einer Reihe von Verfahren herstellen, die bei der Synthese von Oligopeptiden an sich bekannt sind. Die Synthesewege sind aus den gestrichelten Linien (1 bis

16) in der nachstehenden Formel A und der unterhalb der

ρ Formel angegebenen Substruktur, die die Substituenten R und R näher angibt, ersichtlich. Die gestrichelten Linien führen in schematischer Weise zu den entsprechenden Reak- ' tionsstellen. Die anschliessende Tabelle gibt eine kurze Erläuterung der verschiedenen chemischen Methoden, die später näher beschrieben werden. Die in der letzten Spalcte der Tabelle in. Klammern angegebenen Buchstaben beziehen sich auf die entsprechende Stufe gemäss der Beschreibung

1 und dem Erfindungsanspruch.

Verfahren

13 bis

ι 12 ι

(14)

R²oder

-R

2 '

NH

Λ--6 J R⁴ R⁵ CH - CO-!- N - CH

'9' 4 ι I I I

10

- (CH₀)

₂)_ι -!-NH ! C^i-

- CO r R

13 bis

-12

Verfahrensweg

Methode

1	Kondensation	(Kupplung)
2	Kondensation	(reduktiv)
	Alkylierung
3	Kondensation	(reduktiv)
	Alkylierung
4	Alkylierung
5, 6	Oxoreduktion
'7, 8	Hydrolyse
	Hydrogenolyse
	Veresterung
	.Salzbildung

Stufe

(f) (n) Ch) (m)

(J) (c) (a) (b) (k) (d)

4 3 $ -i .

- 23 Weg Methode Stufe

9 Reduktion (g)

10 Alkylierung (1)

11 Alkylierung (o)

12 Säureadditionssalzbildung · (e)

13 Bildung von Salzen mit Basen (p) und von freien Peptiden

14 Bildung von Salzen mit Basen (q) und von freien Peptiden

15 Salzumwandlung (r)

16 Amidbildung (s)

Im Grunde verläuft die Herstellung in drei Stufen. Zunächst müssen die Amino- oder Carboxylgruppen, die an der Syn-

thesereaktion nicht teilnehmen, chemisch blockiert werden.

Dies gilt auch für andere Gruppen im Molekül, die während der Synthese des Dipeptids reagieren können (z.B. die Hydroxy-, Mercapto- oder Oxogruppe im prolinanalogen Substituenten_r (V) bzw. im Prolinanalogen (IV)). Zu den Eigen-

^r

schäften von potentiellen Blockierungsmitteln, aufgrund derer sie zur Synthese der Dipeptide der Formel Ageeignet sind, gehören:

(1) Ihre Einführung soll quantitativ und, wenn optisch, aktive Aminosäure verwendet werden, ohne Razemisierung der Aminosäuren erfolgen.

(2) Die blockierte Aminosäure muss gegenüber den bei den Synthesereaktionen angewandten Reaktionsbedingungen stabil sein.

(3) Die blockierende Gruppe muss leicht unter Bedingungen,

bei denen die Peptidbindung stabil ist und bei denen im Fall von optisch reinen Aminosäuren keine Razemisierung des Dipeptids eintritt, entfernbar sein können.

Nachstehend sind die üblichsten blockierenden Gruppen für die Dipeptidsynthese zusammengestellt.

- 24 -

Carboxylgruppen werden im allgemeinen durch Bildung der entsprechenden nieder-Alkylrester, Silylester , z.B. Trinieder-alkylsilyl oder Tri-/- _1?-arylsilylester z.B. ggf. substituierte Triphenylsilylester, oder Benzylester blockiert. Diese Veresterungsreaktionen werden mit herkömmlichen Massnahmen, die nachstehend näher beschrieben sind, durchgeführt. Nach dem die Dipeptidstruktur entsprechend der Formel A gebildet ist, werden die niederen Alkylreste durch Hydrolyse unter basischen oder milden sauren Bedingungen entsprechend den nachstehenden detaillierten Ausführungen hydrolysiert. Die Benzylgruppe kann durch Hydrolyse, vorzugsweise durch Hydrierung, insbe- . sondere durch katalytische Hydrierung über Palladium, gemäss den folgenden detaillierten Ausführungen entfernt werden.

Für die Blockierung der Aminofunktion kommt eine grössere Auswahl an Reagentien in Frage. Vertreter für entsprechende blockierende Gruppen sind Halogencarbonate, wie C,- _1?- Aryl-nieder-alkylhalogencarbonate, z.B. Benzylhalogencarbonate oder Biphenylalkylhalogencarbonate, insbesondere Benzylchlorcarbonat; tert.-Alkylhalogencarbonate, z.B. tert.-Butylhalogencarbonate, insbesondere tert.-Butylchlorcarbonat , (BOC)-Cl, oder Di-nieder-alkyldicarbonate, insbesondere Di-tert.-butyl-dicarbonat; Triphenylmethylhalogenide, wie Triphenylmethylchlorid; und Trifluoressigsäureanhydrid. · Die Umsetzung der Aminogruppe mit C^- Arylhalogencarbonaten, insbesondere mit Benzylchlorcarbonat, e'rgibt die entsprechenden Carboaryloxyderivate, insbesondere das Benzyloxycarbonylderivat (oder Carbobenzoxyderivat, symbolisiert durch CBZ):

ArCH₂-O-C-Cl

0 H ArCH₂-O-C-N

J -j -j

Die Aralkyloxycarbonylfunktion, insbesondere die CBZ-Funktion,lässt sich leicht durch Behandlung mit Säuren, z.B.HBr in Eisessig, katalytische Reduktion, z.B. katalytische Hydrierung über Palladium, oder mit Natrium in flüssigem Ammoniak, entfernen.

Triphenylmethylderivate (Tritylderivate) der Aminogruppe werden unter Verwendung von Triphenylmethylchlorid gemäss folgender Reaktionsgleichung verwendet:

(Ph)₃C-Cl + H₂N- (Ph)₃C-NH-.... + HCl

Diese Gruppe lässt sich leicht durch Hydrierung, insbesondere durch katalytische Hydrierung über Palladium, oder hydrolytisch mit Säuren auf an sich bekannte Weise entfernen. Entsprechende Reaktionen stehen für die Einführung und Entfernung von anderen Mitteln für die Blockierung von Aminogruppen zur Verfügung.

In den Verbindungen der Formel A ist das Kohlenstoffatom, an das der Rest R gebunden ist, asymmetrisch. Ferner ist definitionsgemäss eines der Kohlenstoffatome, an die

2 S R und R gebunden sind, ebenfalls asymmetrisch. Bei be-

2 λ vorzugten Verbindungen der Formel A bedeuten R oder R einen von Wasserstoff abweichenden Substi'tuenten, d.h. einen ggf. durch Phenyl oder Naphthyl 6O-substituierten niederen Alkylrest. Bei diesen Verbindungen ist das

2 ? dritte Kohlenstoffatom, an das R oder R^J gebunden sind, ebenfalls asymmetrisch. Diese Verbindungen liegen demgemäss in diastereoisomerer Formen oder in Gemischen davon vor. Zur Synthese der Dipeptide können Razemate, Enantiomere oder Diastereoisomere als Ausgangsmaterialien verwendet werden. Entstehen bei der Synthese diastereoisomere Produkte, lassen sich diese nach herkömmlichen Verfahren, z.B. durch chromatographische Verfahren oder fraktionierende Kristallisation, auftrennen.

Im allgemeinen werden die Aminosäure-Substrukturen mit zwei oder mehr asymmetrischen. Kohlenstoffatomen in den Verbindungen der Formel A in der S-Konfiguration bevorzugt

Bei sämtlichen an Aminosäurederivaten, aus denen das Dipeptid der Formel A zusammengesetzt ist,durchgeführten Reaktionen, bei sämtlichen für die Herstellung dieser Dipeptide gewählten Reaktionsbedingungen und bei der Umwandlung der Dipeptidderivate in andere Dipeptidderivate (z.B. Ester in Amide oder Ester in freie Säuren) muss die Temperaturabhängigkeit oder relative thermodynamische Instabilität der" beteiligten Aminosäuren und Dipeptidderivate berücksichtig werden. Daher liegen die in den Stufen ,(a) bis (s) angewandten Reaktionstemperaturen im' allgemeinen im Bereich von -30 bis 100 C und vorzugsweise nicht über 5O⁰C.

Die Salze der Verbindungen der Formel A können auf herkömmliche Weise gebildet werden. Vorzugsweise werden die freien Säuren oder freien Basen der Verbindungen der Formel A mit 1 oder mehr (bis zu 2) Äquivalenten der entsprechenden salzbildenden Base o.der Säure in einem Lösungsmittel oder einem Medium, in dem das Salz unlöslich ist, oder in einem Lösungsmittel, das unter vermindertem Druck oder durch Gefriertrocknung en.tfernt werden kann, umgesetzt. Eine weitere Möglichkeit zur Salzbildung besteht im Austausch des Kations eines vorliegenden Salzes gegen ein anderes Kation an einem geeigneten Austauscherharz. Die herkömmliche Salzbildung wird bei Temperaturen von -20 bis 5O⁰C tür durchgeführt.

von -20 bis 5O⁰C und vorzugsweise etwa bei Raumtempera-

Die Stufe (a) der Wege 7 und 8 umfasst die Hydrolyse von einer oder beiden niederen Alkoxy- oder Benzylestergruppen

1 f\

der SubStrukturen R-CO- oder -CO-R . Beliebige herkömmliche hydrolytische Bedingungen können angewandt werden, unter denen die Peptidbindung -CO-N (R )- nicht beein-

trächtigt und, sofern als Endprodukte diastereoisomere Produkte erwünscht sind, das Dipeptid nicht razemisiert • werden. Die Hydrolyse von Stufe (a) wird unter sauren oder basischen Bedingungen durchgeführt und führt zur Disäureform, von. der angenommen, wird, dass es sich um die biologisch-aktive Form handelt. Die Reaktionstemperatur für die Hydrolyse liegt im' Bereich von 0 bis 7O⁰C. Die Reaktion wird in einem inerten Lösungsmittel mit einem Gehalt an Wasser oder in Wasser durchgeführt. Im allgemeinen ist die verwendete Säure 0,1 bis 2 normal. Wird die Umsetzung, unter basischen Bedingungen durchgeführt, so ist die Lösung in bezug auf.die eingesetzte Base 0,1" bis 2 normal. Bei Durchführung der Umsetzung unter basischen Bedingungen zur Bildung einer Disäure muss das Reaktionsgemisch mit Säure, z.B. Salzsäure, Essigsäure oder Schwefelsäure, angesäuert werden. Die Ansäuerung wird bei -20 bis 4O⁰C durchgeführt, da die Peptidbindung temperaturempfindlich ist, insbesondere wenn das Dipeptid in enantiomerer Form vorliegt. Temperaturen von -20 bis 3O⁰C werden bevorzugt.

Für die Säurehydrolyse von Stufe (a) eignen sich anorganische und organische Säuren. Es können folgende anorganische Säuren verwendet werden: Salzsäure, Bromwasserstoffsäure, Schwefelsäure, Salpetersäure, Phosphorsäure und dergl.

Folgende organischen Säuren können für die Säurehyd'r.olyse eingesetzt werden: Tri'fluoressigsäure, Trichloressigsäure, Citronensäure, Oxalsäure und dergl. Die folgenden anorganischen Basen können für die basische Hydrolyse verwendet werden: Natriumhydroxid, Kaliumhydroxid, Calciumhydroxid und dergl. Die folgenden organischen Basen können für die basische Hydrolyse eingesetzt werden: Tri-Diethylamin, Triethylamin, Dicyclohexylamin und dergl.

3 9

Die Amide der Formel A können auf an sich übliche Weise zu den Dipeptiden der Formel A in Wasser oder inerten Lösungsmitteln mit einem Gehalt an Wasser unter Verwendung von Basen oder Säuren"als Katalysatoren hydroly-

siert werden. Die Reaktion verläuft bei -20 bis 100⁰C.

Die Stufe (b) des Herstellungswegs 7 und 8 umfasst die Hydrogenolyse von Benzylestern. Es ist selbstverständlich, dass .die Hydrogenolyse die Methode der Wahl für die Her-. stellung der beiden Monoester der Formel A darstellt: Verbindungen, in den R Hydroxy und R nieder-Alkoxy bedeutet, und Verbindungen, in denen R nieder-Alkoxy und R Hydroxy bedeutet, da die nieder-Alkoxyreste durch die Hydrogenolyse nicht, entfernt werden. Die Monoester gelten

als Vorarzneistoffe. . .

Die Hydrogenolyse wird im allgemeinen katalytisch mit . • Sauerstoff in Gegenwart eines Edelmetalls, vorzugsweise auf einem Träger, wie. Palladium, Platin oder Rhodium auf einem Träger, wie Kohlenstoff, oder mit Wasserstoff in Gegenwart von Raney-Nickel durchgeführt. Der inerte Träger, z.B. Kohlenstoff, enthält im allgemeinen 5 bis 30 und insbesondere 10 Prozent Edelmetall, insbesondere Palladium. Die Reaktion wird bei 0 bis 40 C, vorzugsweise etwa bei Raumtemperatur, unter atmosphärischem oder überatmosphärischem Druck (bis zu 10 bar) durchgeführt. Die Reaktionszeiten betragen im allgemeinen 30 Minuten bis Stunden.

Die Stufe (c) der Verfahrenswege 5 und 6 umfasst die Reduktion einer ' Carboxylgruppe in einer der Seitenketten

2 3

R und R . Verschiedene Reduktionsbedingungen und Reduktionsmittel können zur Anwendung kommen. Ist die Bildung von enantiomeren Produkten erwünscht, dürfen diese Bedingungen nicht zur Razemisierung des Dipeptids führen.

1 6 Ist R oder R eine Benzyloxygruppe, die entfernt werden muss, stellt die katalytische Hydrierung das Verfahren

der Wahl dar. Durch katalytische Hydrogenolyse unter den vorstehend beschriebenen Bedingungen, z.B. durch Kontakt mit molekularem Wasserstoff und 10 % Palladium-auf-Kohlenstoff, wird nicht nur die Oxofunktion reduziert, sondern auch die Benzyiestergruppe unter Bildung der Verbindung der Formel A entfernt. Jedoch sind auch andere reduktive Bedingungen unter milden Temperaturen, z.B. modifizierte Wolff-Kishner-Reduktionen mit Hydrazin, anwendbar.

-

Die Stufe (f) des Verfahrenswegs 2. und die Stufe (h) des Verfahrenswegs 3 umfassen reduktive Kondensationen. In beiden Stufen wird ein cx-Ketosäurederivat mit einer freien Aminogruppe (einer Aminosäure in Stufe (f) oder'eines Dipeptids in Stufe (h)) kondensiert. Die Reaktion wird entweder in wässriger Lösung, optimalerweise in einer annähernd neutralen wässrigen Lösung, oder in einem geeigneten organischen Lösungsmittel durchgeführt. Folgen- . de Lösungsmittel sind geeignet, z.B. Nitrile, wie Acetonitril, Propdonitril, cyclische Ether, wie THF oder Dioxan, niedere Alkanole, wie Methanol, Ethanol und Isopropanol, Kohlenwasserstoffe, wie Benzol, Toluol und dergl., und Gemische dieser Lösungsmittel. Die Reaktionsbedingungen entsprechen denen der Schiffschen Kondensation.'

Um die als Zwischenprodukt gebildete Schiffsche Base, die als Kondensationsprodukt erhalten wird, direkt zu reduzieren, kann die Reaktion in Gegenwart eines Reduktionsmittels, wie einem Borhydridkomplex, z.B. Natriumcyanoborhydrid, durchgeführt werden. Die Reaktion verläuft bei 0 bis 4O⁰C und vorzugsweise bei etwa Raumtemperatur.

Gemäss einer bevorzugten Ausführungsform der reduktiven Kondensationsstufe (f) wird die Aminosäure von Stufe (f) in Form ihres Esters mit einem oc-Ketosäurederivat auf folgende Weise kondensiert:

- 30 - - ,

3 . Δ 5

ι I Ι' 6

R¹CO - CH - NH₂ + 0 = C - CO - N - CH - CO - R

(CH } "

^ν ι 2 η g Trocknungsmittel

NH R= Benzyloxy oder

J ' nieder-Alkoxy

NHR⁸

ι I I > 6

R¹CO -CH-NH-CH-CO-N-CH-CO-R⁰

Hydrolyse y^ >^ Hydrierung des

Benzylesters

Disäure ' Monosäure (Mönoester)

Die Reaktion wird in Gegenwart eines Trocknungsmittels, z.B. CaSO₁., 4 A-Molekularsieben oder dergl., durchgeführt. Durch Hydrogenolyse oder Hydrierung unter Verwendung von Wasserstoff über Pd werden Benzylgruppen von Prolin oder dem Prolinanalogen entfernt. Hat R die Bedeutung nieder-Alkoxy, so wird· die Monosäure (Mönoester) gebildet. Milde, saure oder basische Hydrolyse liefert die Disäure.

Wird alternativ die Kondensation ohne anfängliche Anwesenheit eines Reduktionsmittels durchgeführt, so wird die Schiffsche Base von Stufe (g) gebildet, die ein Enamin darstellt, das katalytisch durch Wasserstoff unter den vorstehend beschriebenen Bedingungen reduziert werden kann, beispielsweise unter Verwendung eines Palladiumoder Platin-auf-Kohlenstoff-Katalysators oder von Raney-Nickel und dergl. Auch in.diesem Fall sind 10 % Palladiumauf-Kohlenstoff . oder Raney-Nickel die Katalysatoren der Wahl.

? ] 3 9 3 S

. Die Stufe (i) von Verfahrensweg 1 stellt die klassische Bildung der Peptidbindung dar. Dies kann durch Aktivierung der Carboxylgruppe auf verschiedene Weise erreicht werden. Die Hauptstörung, die vermieden werden muss, besteht in der Razemisierung der Aminosäuren während der Reaktion. Durch Razemisierung erhält man verschiedene Produkte, die häufig schwierig zu trennen sind. Zu den in geeigneter Weise aktivierten Formen der Carboxylgruppe gehören Carbonsäurechloride (wo jedoch gelegentlich· Razemisierung eintritt), nitrosubstituierte Cg *p-Arylester, insbesondere p-Nitrophenylester, Cyanomethylester und Thioester. In jedem dieser Fälle reagieren die aktivierten Derivate glatt mit der Aminofunktion oder der Iminofunktion von Prolin, einem Prolinderivat, einem Prolinanalogen oder dessen Derivaten.

Ferner stehen weitere Verfahren zur Verfügung, bei denen die Synthese von carboxylaktivierten Zwischenprodukten vermieden wird. Vorzugsweise werden bei diesem Verfahren Carbodiimide, wie Di-C-, y-cycloalkylcarbodiimide, insbesondere Dicyclohexylcarbodiimid· (DCCI),. als Entwässerungsmittel verwendet. Es wird angenommen, dass diese Synthese folgendermassen abläuft:

R COOH +

Q- N = C = N -Q —* .Q-M - C = N-Q

0 - COR

R⁴ R⁵

^ H-C . N-Q) ₊ HN-CH- COR⁶

0 - COR

0 R ·»

< r- NH - C - NH -O + · R CO - N - CH - COR⁶

.-' ¹ H - 32 -

R³

R R¹CO - CH - NH - CH

FT

Weitere Kondensations- oder Entwässerungsmittel sind Diarylphosphorylazide (mit 6 bis 12 Kohlenstoffatomen im Arylrest), insbesondere Diphenylphosphorylazid (DPPA), oder es kann die Carboxylfunktion des Aminosäurederivats von Stufe (i) mit Estern, die sich von 1-Hydroxybenzotriazol und dergl. ableiten, aktiviert werden. Die Kondensationsstufe wird bei 0 bis 40 C und vorzugsweise etwa

bei Raumtemperatur durchgeführt

15

Die Dipeptide der Formel A können auch unter Anwendung von bekannten Festphasentechniken hergestellt werden, insbesondere unter Verwendung von Festphasen-Polyamidharzen, die durch polare Lösungsmittel, wie Wasser, quellbar

^r

sind. Nach Beendigung der Synthese wird das Dipeptid durch Hydrolyse, Hydrogenolyse oder Umesterung vom Polyamid entfernt.

• Im allgemeinen entsprechen die Bedingungen der Kondensationsreaktion den Bedingungen bekannter Verfahren, die für temperatur- und razemisierungsempfindliche Verbindungen angewandt werden.

Bei der Alkylierungsstufe (n) des Verfahrenswegs 2, der

Alkylierungsstufe (m) des Verfahrenswegs 3 und der Alkylierungsstuf e (j) des Verfahrenswegs 4 werden ein Aminosäurederivat oder ein Dipeptid mit einer freien Aminogruppe mit einem geeigneten Alkylierungsmittel alkyliert. In Stufe (1) von Verfahrensweg 10 wird ein guanidinosubstituiertes Dipeptid alkyliert. Bei der Alkylierungsstuf e (o) von Verfahrensweg, 11 wird ein dialkylsubstituiertes Guanidin durch ein als Alkylierungsmittel dienendes Dipeptid alkyliert.

3 9 3

* In Stufe (η) handelt es sich beim Alkylierungsmittel um ein o^-Halogenacyl- oder OL-Sulfonyloxyacylaminosäurederivat, und die Reaktion wird unter basischen Bedingungen in Wasser oder einem anderen Lösungsmittel, das das zu alkylierende

° Substrat enthält, und unter Zugabe des Alkylierungsmittels durchgeführt. Die Reaktionstemperatur wird auf -20 bis 70 C und vorzugsweise etwa bei Raumtemperatur gehalten. Die Art der Acylgruppe hängt von der Wahl des Substituenten R ab. Beispielsweise können <x.-chlor- oder oi-bromacetylierte Aminosäuren als Alkylierungsmittel verwendet werden. In Stufe (m) wird ein Dipeptid in einem geeigneten Lösungsmittel gelöst und mit der geeigneten (X -Halogensäure (Ester oder Amid) oder CC-Sulfonyloxysäure (Ester 'oder Amid) unter basischen Bedingungen in Wasser oder einem organischen Lösungsmittel alkyliert. Die. Temperatur wird auf 0 bis 70 C und vorzugsweise bei etwa Raumtemperatur gehalten. Beim OC-Halog.en handelt es sich um Chlor, Brom oder Jod oder P kann einen nieder-Alkylsulfonyloxy- oder Cg_₁p-Aryl-sulfonyloxyrest bedeuten.

· '

In Stufe (j) wird das Dipeptid mit einem alkylierenden Guanidino derivat, das durch Halogen, z.B. Chlor*, Brom oder Jod, oder einen niederen Alkylmercaptores't substituiert ist (Guanylierungsmittel),alkyliert. Vorzugsweise wird die Reaktion durch Umsetzung des Dipeptids mit 'einem S-Alkylisothioharnstoffderivat unter Bildung der Verbindungen der Formel A durchgeführt. Besonders bevorzugt ist S-Methylisothioharnstoff. Bei der Alkylierung mit

• S-Methylisothioharnstoff stellt die Methylmercaptogruppe die austretende Gruppe dar. Die Reaktion wird in einem geeigneten wässrigen oder organischen Lösungsmittel oder Lösungsmittelgemisch unter basischen Bedingungen (pH-Wert über 9, vorzugsweise bei etwa 10,5) bei 0 bis 70 C durchgeführt. Die Alkylierungsstufe (1) wird durchgeführt,' indem man das Dipeptid dieser Stufe mit einem nieder-Alkyl-Alkylierungsmittel, das ggf. mit 1 bis 5 Fluoratomen substi-. tuiert ist, alkyliert. Das nieder-Alkyl-Alkylierungsmittel

weist als austretende Gruppe entweder Chlor, Brom oder Jod oder Sulfonyloxy auf. Beispiele für derartige Alkylierungsmittel sind Methylbromid, Methyljodid, 2,2,2-Trifluor-1-bromethan, n-Hexylbromid und dergl. Diese Umsetzung wird unter basischen Bedingungen in Wasser oder in einem organischen Lösungsmittel in Gegenwart einer Base, die die unter den Alkylierungsbedingungen gebildete Chlorwasserstoff säure , Bromwasserstoffsäure oder Jodwasserstoffsäure aufnimmt, durchgeführt. Die Temperatur liegt zwischen 0 und 70 C und vorzugsweise etwa bei Raumtemperatur.

In der Alkylierungsstufe (o) enthält das Dipeptid eine alkylierende Gruppe mit einem ^-Halogen- oder co-Sulfonyl-• oxyrest zur Alkylierung des Guanidinoderivats. Die Reaktion wird unter stark.basischen Bedingungen vorzugsweise in Gegenwart eines geeigneten organischen Lösungsmittels, wie Dimethylformamid, Acetonitril, Propionitril, Dioxan und dergl., durchgeführt.

Die Veresterungsstufe (k) wird nach klassischen Veresterungsverfahren durchgeführt. Bei der Umsetzung reagieren niedere Alkanole oder Benzylalkohol mit dem Dipeptid der Formel A in Gegenwart von starken anorganischen oder organischen Säuren unter Entfernung von Wasser. Folgende anorganische Säuren können verwendet werden: Salzsäure, Bromwasserstoffsäure, Schwefelsäure und dergl., können folgende organische Säuren verwendet werden: Trif luoressigsäure, Sulfonsäure, wie Perfluorsulfonsäure, Toluolsulfonsäure und dergl. Jedoch können die Ester der Formel A auch unter Verwendung von Diazoalkenen, insbesondere Diazomethan, das den Methylester ergibt, hergestellt werden. Die Reaktion wird im allgemeinen in. einem inerten Lösungsmittel durchgeführt. Ein weiteres Verfahren, das angewandt werden kann, ist die Umsetzung eines Metallsalzes einer Verbindung der Formel A, das mit_t einem nieder-Alkyl- oder Benzylhalogenid unter Bildung eines entsprechenden niederen Alkyl- oder Benzylesters reagiert. Das Natrium- oder Cäsiumsalz des

Dipeptids oder andere Metallsalze können zur Bildung des Esters in guten Ausbeuten verwendet werden. Ferner können Salze von tertiären Aminen, wie 1 ,8-Diazabicyclo_/_ 5.4._0/-undec-7-en, oder Tri-nieder-alkylaminen, insbesondere Triethylarain, aufgrund ihrer besseren Löslichkeit verwendet werden.

Gemäss einer weiteren Modifikation von Stufe (k) kann die Veresterung durchgeführt werden, indem man ein Acylhalogenid oder Diacylhalogenid einer. Verbindung der Formel A mit einem nieder-Alkanol oder mit Benzylalkohol umsetzt. Dies führt zu einer raschen Bildung des Esters. Bei der Reaktion werden 1 Mol Acylhalogenid mit mindestens 2 Mol nieder-Alkanol oder Benzylalkohol umgesetzt. Die Reaktion verläuft glatt unter Bildung des entsprechenden Diesters. Gemäss einer bevorzugten Ausführungsform wird die Reaktion durch Bildung eines Addukts mit Thionylchlorid und dem nieder-Alkanol oder Benzylalkohol be'i Temperaturen unter 0 C

reagiert, erleichtert.

Temperaturen unter 0 C, das rasch unter Bildung des Esters

Gemäss einer weiteren Modifikation des Verfahrens wird ein gemischtes Säureanhydrid des Dipeptids der Formel A mit einem Alkanol oder Benzylalkohol umgesetzt. Die Reaktion wird durch tertiäre organische Basen, wie Pyridin, katalysiert.

Es ist darauf hinzuweisen, dass in der Kondensationsstufe (f) und (h) unter reduktiven Bedingungen das <x -Ketosäurederivat in Form der freien Säure oder eines Esters vorliegen kann. Das Aminosäurederivat oder das Dipeptidderivat kann in Form der freien Säure oder des Esters, Amids oder der Hydroxamsäure vorliegen. '

In ,den Alkylierungsstufen kann das Alkylierungsmittel von Stufe (n) und (o) in Form der freien Säure, des Esters oder des Amids vorliegen. Das Aminosäure- oder Dipeptid-

" ; % Cj 3 *>.

derivat in allen diesen Alkylierungsstufen kann ebenfalls in Form der Ester oder Amide vorliegen.

Die Amide der Peptide der Formel A, in denen mindestens einer der Reste R und R . eine ggf. mit 1 oder 2 nieder-Alky.lresten substituierte Aminogruppe darstellt, werden nach üblichen Verfahren zur Herstellung von Amiden h.erge- ' stellt. Wenn nur einer der Reste R und R eine ggf. substituierte Aminogruppe darstellt, handelt es sich bei den Verbindungen um Monoamide, während, wenn beide Reste R¹ und R ggf. substituierte Aminogruppen bedeuten, diese Dipeptide Diamide sind.

Ammoniak oder niedere Alkyl- oder Dialkylamine können .

'direkt mit Derivaten der Formel A, insbesondere nieder-Alkylestern oder Säurechloriden oder Säureanhydriden, die als acylierende Derivate wirken, umgesetzt werden. Ammoniak und die niederen Alkylamine (primäre Amine) sowie Di-nieder-alkylamine (sekundäre Amine) reagieren sehr glatt mit diesen Acylierungsmitteln. Mit Anhydriden kann die Reaktion auch in wässriger Lösung durchgeführt werden. Die Reaktion mit Acylhalogeniden erfordert 2 Mol Amin oder Ammoniak, von denen nur eines acyliert wird, da das zweite Mol sich mit dem bei der Reaktion gebildeten Halogenwasserstoff vereinigt. Handelt es sich beim Acylierungsmittel um ein Anhydrid, so reicht die Verwendung von nur 1 Mol Amin oder Ammoniak aus, da die gebildete freie Säure eine schwache Säure darstellt und das Salz einer schwachen Base und der schwachen Säure beim Erhitzen in überschüssigem Anhydrid unter Bildung des acylierten Amins dissoziiert. Daher wird bei diesem Verfahren das gesamte Amin in das Amid übergeführt. Werden Ester als Acylierungsmittel verwendet, werden eben-' falls das Amin und der Ester in einem Molverhältnis von etwa 1:1 umgesetzt. Die Acylierung kann in nicht-wässriger Lösung, d.h. in inerten Lösungsmitteln, wie Dimethylformamid, niederen Alkanolen, z.B. Methanol (oder Ethanol),

und dergl., durchgeführt werden. Die Reaktionsteraperaturen betragen -20 bis +40⁰C und· vorzugsweise etwa 35 C.

Die Umwandlungen der Stufen (p), (q) und (r) werden üblicherweise in inerten Lösungsmitteln bei Temperaturen von -20 bis 50 C und vorzugsweise von -10 bis 3O⁰C durchgeführt. In Stufe (p) wird das Säureadditionssalz des Dipeptids (das mono- oder dibasisch sein kann) mit der entsprechenden äquivalenten Basenmenge unter Bildung des monobasischen Salzes, des freien Dipeptids oder des Salzes mit der Base behandelt. In Stufe (q) ist das Dipeptidsalz mit einer Base das Ausgangsmaterial, das mit der entsprechenden äquivalenten Säuremenge unter Bildung des monobasischen Salzes, des freien Dipeptids oder des Säureadditionssalzes (das 1 oder 2 protonierte Stickstoffatome aufweist) behandelt wird.

Es ist festzustellen, dass die freien Dipeptide der Formel A in Zwitterionenform vorliegen, wobei die Carboxylgruppen dissoziiert sind (-C00~) und die Iminogruppe(n) oder die =N-R -Gruppe mit Protonen assoziiert sind. . · '

In der Stufe· (r) wird ein Salz eines Dipeptids mit einem' anorganischen oder organischen Salz unter Ausfällung eines weniger löslichen Salzes (Doppelzersetzung) umgesetzt. Eine andere Möglichkeit zur Durchführung dieses Austausches besteht in der Verwendung von entsprechend geladenen Ionenaustauscherharzen

30

Die Ausgangsmaterialien der Stufen (c), (f), (g), (h), (i), (j), (1)> (m), (n). und (o) sind entweder aus der Literatur bekannt oder lassen sich aus bekannten Ausgangsmaterialien nach bekannten Verfahren herstellen (vergl. beispielsweise EP-A-12401, 65301' und 79022). Beispielsweise lässt sich die oxosubstituierte Verbindung von Stufe (c) gemäss folgendem Reaktionsschema herstellen

- 38 Reaktionsschema I

R⁸HN

<f^H2>n

BOCN-CH-COOH

R⁴R⁵ DCCI ' 6

HN-CH-COR *

R⁸HN NR⁷

NH ¹ Δ 5

ι ^{2 η} ι ι _{

BOCN-CH CON-CH-^-COR

HCl

R⁸HN .NR⁷ C NH

R⁴R⁵

I ^{ζ η} Ι'

* H₂N-CH :—CON-CH-COR

O = C

R¹CO

R⁸HN NR⁷

NH

J 4 5

(CH₀) RR

» ^{2 η} I I

R¹CO-CH-NH-CH-CO-N-CH-COr

35 R^y bedeutet C^^-Alkyl, Phenyl, Naphthyl.

- 39 - .

Im Reaktionsschema I wird zunächst die BOC-geschützte guanidinosubstituierte Aminosäure an einen Prolinester oder einen prolinanalogen Ester (z.B. Benzylprolinat oder ein Benzylprolinatanaloges) beispielsweise unter Verwendung von DCCI als Entwässerungsmittel unter Bildung eines Dipeptids gekuppelt. Vom Dipeptid werden sodann die Schutzgruppen mit HCl/Essigsäureethylester entfernt

Die erhaltene freie Aminogruppe wird in einer Michaelähnlichen Umsetzung mit einem gesättigten Michael-Akzeptor, z.B. einem durch nieder-Alkyl (Benzoyl, Naphthoyl oder nieder-Alkanoyl) substituierten Acrylat oder einem entsprechenden Benzyläcrylat, umgesetzt. Ethyl-3-benzoylacrylat wird als Michael-Akzeptor bevorzugt. Die Michaelä'hnliche Addition ergibt das geschützte Ausgangsmaterial für Stufe (c).

Das Ausgangsmaterial von Stufe (c) kann auch durch

2*

• Mannich-Kondensation eines Ketons der Formel R -COCH-

P* J

(worin R · Phenyl, Naphthyl oder nieder-Alkyl mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen bedeutet) mit einem Glyoxylsäurederivat (insbesondere einem Glyoxylsäureester) und dem Dipeptidderivat von Stufe (m) erhalten werden. Die Mannich-Kondensation wird bei Temperaturen von 20 bis'50 C und vorzugsweise von 40 bis 50 C in Gegenwart eines Entwässerungsmittels, wie Eisessig, durchgeführt.

Die Ausgangsmaterialien der Stufen (f), (g) und.(h) lassen sich auch unter Anwendung der Verfahren gemäss EP-A-12401 und 65301 herstellen oder können aus bekannten Verbindungen erhalten werden. Beispielsweise lässt sich das Aminosäurederivat von Stufe (f) auf folgende Weise herstellen:

?-ΐ-3 9 3 %

S-Me R¹CO -CH- NH₂ t

/γη ϊ + Ν^^Ν*

R¹CO - CH - NH₂

R⁸ NH

NH₂ κ ^R -

η = 3 - 5

Eine oC, W -Diaminocarbonsäure wird mit einem S-Methyl-.10 isothioharnstof fderivat unter Bildung einer pe -Am:j.no-iJ (di-nieder-alkyl-guanidino)-carbonsäure alkyliert. Wenn η den Wert 4 hat, handelt es sich bei der cc, U) -Diaminocarbonsäure um Lysin. Wird Lysin verwendet, so handelt es sich bei der erhaltenen guanylierten Säure um ein Homologes der natürlich vorkommenden Aminosäure Arginin. Gemäss einer bevorzugten Ausführungsform bedeutet R Hydroxy. Die öC -Amino- (/J -(di-nieder-alkyl-guanidino ^carbonsäure kann in den entsprechenden nieder-Alkyl- oder Benzyl ester übergeführt werden, beispielsweise durch Umsetzung bei niedrigen Temperaturen mit dem niederen Alkanol (oder Benzylalkohol) und Thionylchlorid oder dem niederen Alkanol (oder Benzylalkohol) und Oxalylchlorid (vergl. P.A. Sadler-, HeIv. Chim. Acta, Bd. 61 (1978), S. 1675 und die dort zitierten Druckschriften).

Die Prolinanalogen von Stufe (i) sind entweder bekannte Verbindungen oder nach bekannten Verfahren leicht erhältliche natürliche Aminosäuren oder Iminosäuren (EP-A-65301 und 79022). Das alkylierte Aminosäurederivat von Stufe (i) wird durch Alkylierung der Aminosäure H₅N-

QH(Fr)-COOH mit einem geeigneten Alkylierungsmittel R CO-CH(R )-P erhalten, wobei P die vorerwähnten Bedeutungen hat. Diese Umsetzung wird unter normalen Alkylierungsbedingungen zwischen 0 und 4O⁰C auf die vorstehend beschriebene Weise durchgeführt. Eine andere Möglichkeit besteht darin-, das alkylierte Aminosäurederivat von Stufe (i) durch entsprechende Alkylierung der Aminosäure

- ⁴¹ - R³ " R'C0-CH(R²)-NH₂ mit P-CH-COOH gemäss den vorstehend beschriebenen Verfahren herzustellen.

Das Dipeptid von Stufe (j) wird gemäss den in EP-A-12401, 65301 und 79022 beschriebenen Verfahren erhalten. Die Alkylierungsmittel von Stufe (j) sind bekannte Verbindungen. In "entsprechender Weise wird die Herstellung des Dipeptids von Stufe (1) in EP-A-12401 und 79022 beschrieben .

Das Dipeptidderivat von Stufe (m) wird durch klassische Peptidkondensationsreaktionen, wie sie beispielsweise in EP-A-12401 und 65301 beschrieben sind, erhalten. Die Alkylierungsmittel von Stufe (m) stellen bekannte Verbin- · düngen dar.

Die Ausgangsmaterialien von Stufe (n) können nach Verfahren gemäss EP-A-12401 hergestellt werden.

Die Guanidinderivate von Stufe (o) sind bekannte Verbindungen. Das Alkylierungsmittel von Stufe (o) kann aus den in EP-A-12401, 65301 und 79022 beschriebenen Verbindungen durch SN2-Reaktionen hergestellt werden. Durch Ersetzen einer tü-Hydroxygruppe mit Halogen aus der Gruppe Chlor, Brom und Jod oder einer SuIfonyloxygruppe in der Seitenkette (R² ( Stufe (o).

2 3 kette (R oder R) erhält man die Alkylierungsmittel von

Die wichtigsten Dipeptide der Erfindung leiten sich von 1 ^,S^-Tetrahydroisochinolin-S-CSi-carbonsäure (THIQ) ab. Bezugnehmend auf Formel A hat in dieser Gruppe η den

2 Wert 3 oder vorzugsweise 4, R bedeutet den di-niederalkylguanidino-substituierten Rest (2), R bedeutet einen niederen Alkylrest und R und R bedeuten Hydroxygruppen. Besonders bevorzugte Dipeptide dieser Gruppe lassen sich folgendermassen charakterisieren:

η = 4; R bedeutet eine N ,N -Diethylguanidinobutylgruppe (ggf. in beiden Ethylgruppen mit bis zu 3 Fluoratomen substituiert); R ·bedeutet Methyl oder Ethyl.

Besonders bevorzugte Verbindungen sind:

(1) N[2-(N^G,N^GI-L-Di-ethylhomoargin-N^a-yl)-propionyl3-THIQ und Salze davon;

(2) N[2-(N^G _lN^G'-L-Bis-(2,2,2,-trifluorethyl)-homoargin-N^a-yl)propionyl3-L-T.HIQ und Salze davon;

(3) NC2-(L-(N^G-Methyl,N^G'n-butyl)-homoargin-N^a-yl)-propionyl3-L-THIQ und Salze davon; und

(4) N[2-(N^G,N^G'-L-Di-ethylhomoargin-N^a-yl) · butanoyl]-THIQ und Salze davon.

Die folgenden Verbindungen sind von besonderem Interesse:

(5) N[2-(N^G,N^GI-L-Di-ethylargin-N^a-yl)-propionyl]-THIQ und Salze davon;

(6) . N[2-(N^G,N^G'-L-Di-ethylhomoargin-N^a-yl)-propionyl]-7-methyl-THIQ und Salze davon;

(7) N[2-(N^G,N^GI-L-Di-ethylhomoargin-N^a-yl)-propionyll-T-chlor -THIQ und Salze davon;

(8) N[2-(N^G,N^G'-L-Bis-(2,2,2,-trifluor- . ethyD-homoargin-N^-yDpropanoylj-prolin und Salze davon;

(9) NC2-(N^G _lN^G'-L-Diethylhomoargin-N^ct-yl) ]-4-phenylbutanoyl-prolin und Salze davon; und

(10) N[2-(N^G,N^G'-L-Diethylhomoargin-N^a-yl)3-propanoyl-2-(S)-carboxy-2,3-dihydroindol und Salze davon,

Die Verbindungen (1) bis (10) sowie die anderen gemäss den nachstehenden Beispielen hergestellten Verbindungen lassen sich unter Anwendung der Methoden der Stufen (i), (f), (n), (h), (m), (j), (c), (a), (b), (g), (1), (o),

(p) und (q) herstellen. Die bevorzugten Methoden zur Herstellung von bevorzugten Verbindungen sind die Methoden der Stufen (i), (f), (n) , (h), (m), (c),(a)und (b).

3 y 3

Besonders bevorzugt sind die Methoden der Stufen (i), (f), (h), (c) und (a) insbesondere in bezug auf Verbindung (1 ).

In den besonders bevorzugten Verbindungen von Formel A liegt eine Kohlenstoffkette vor, die zwischen dem N ,N -Dialkylguanidinosubstituenten (ein Substituent mit unverminderter Basizität) und der Carboxylgruppe R CO- (in der R Hydroxy bedeutet) bei einer Kettenlänge von nicht weniger als 4 und nicht mehr als 6 Kohlenstoffatomen nicht durch Heteroatome unterbrochen ist. Eine Kettenlänge von 5 Kohlenstoffatomen ergibt.Verbindungen mit der stärksten ACE-Hemmung.

Ausführungsbeispiele: Präparation 1

13,17 g Benzyl-1, 2 , 3 , ^-tetrahydroisochinoline-(S )-carboxylat-tosylat (N. Yoneda et al., Chem. Pharm. Bull., Bd. 31 (1983), S. 312) werden in 30 ml CHCl₀ suspendiert.

r j

N-Methylmorpholin wird bis zum Erreichen des pH-Werts 7 zugesetzt. 6,8 g·Dicyclohexylcarbodiimid und 3,17 g Brenztraubensäure werden bei -5 C zugegeben. Sodann wird das Reaktionsgemisch 1 Stunde bei -50 C und 48 Stunden bei 0 C gerührt. Hierauf wird das Reaktionsgemisch filtriert. Das Filtrat wird unter Bildung eines halbfesten Produkts zur Trockne eingeengt. Der Feststoff wird an einer Kieselgelsäule unter Elution mit Essigsäureethylester : Hexan (1:1) gereinigt. Man erhält Benzyl-N-

als gelbes öl.'/oc I²⁵ -10,3°

pyru voyl-( 3) -1 ,2,3, 4-tetrahydroisochinolin-S-carboxylat

D Beispiel 1 .

ρ pt

Dieses Beispiel zeigt die Herstellung von N_/_2-(N ,N L-Diethylhomoargin-N**- -yl)-propionyl 7-1,2,3,^-tetrahydro-

OO —

isochinolin-3-(S)-carbonsäure und erläutert den Ver- fahrensweg 2, Stufe (f), den Verfahrensweg 8, Stufe (a) und den Verfahrensweg 7, Stufe (d).

1,8 g (5,34 mMol) Benzyl-N-pyruvoyl-( 3)-1,2,3,4-tetrahydroisochinolin-3-(S)-carboxylat (1), 1,65 g (5,34 mMol) Ethyl-N ,.N -Diethyl-L-homoarginat-hydrochlorid (bezüglich der Synthese vergl. J.J. Nestor, Jr. et al., "Peptides-Structure and Function", Proc. Eighth Amer.

Peptide Symposium, V.J. Hruby und D.H. Rich, Eds., Pierce Chem. Co., Rockford IL, 1984, S. 861-864), 0,58 g (5,87 mMol) Kaliumacetat und 1 g Calciumsulfat werden in 10 ml wasserfreiem Ethylalkohol miteinander vermischt und 48 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Anschliessend werden 0,37 g (5,87 mMol) Natriumcyanoborhydrid in 5 ml Ethylalkohol bei Raumtemperatur innerhalb von 3 Stunden zugesetzt. Das Reäktionsgemisch wird weitere 3 Stunden bei Raumtemperatur gerührt, und .sodann mit 1 η Salzsäure auf einen pH-Wert von etwa 4 angesä-uert. Sodann wird das Reaktionsgemisch durch Celite filtriert und zur Trockne eingedampft. Der Rückstand wird zwischen einer organischen Phase aus Essigsäureethylester und einer wässrigen Phase aus 1 η Salzsäure ausgeschüttelt. Die Salzsäurelösung wird über eine mit Amberlite XAD-2-Harz gepackte Säule gegeben und zunächst mit Wasser und sodann mit einem Gradienten von Wasser zu Ethanol eluiert. Durch Einengen der entsprechenden Fraktionen erhält man etwa 1,5 g eines gelblichen Öls. Das gelbe Öl wird weiter gereinigt durch umgekehrte HPLC an einer 2,5 x 100 cm-Säule von Lichroprep RP-18 (20 bis 40 μια Durchmesser, E. Merck) unter Verwendung von 80% CH₃CN : 20% H₃O (0,03 m in NH₄OAe, pH-Wert 7) als Elutionsmittel (17 ml/min) unter Bildung-von 1,4 g gelben Öl. Das gelbe Öl wird mit 0,25 g Natriumhydroxid in 10 ml Wasser hydrolysiert. Das Reaktionsgemisch wird 1 Stunde bei Raumtemperatur gerührt und sodann mit Salzsäure auf einen pH-Wert von etwa 4 angesäuert. Anschliessend wird das Reaktionsgemisch wieder über XAD unter Elution mit Wasser und anschliessend mit einem Gradienten Wasser zu Ethanol eluiert. Das erhaltene Rohprodukt wird weiter gereinigt durch präparative HPLC an der vorstehend beschriebenen Säule, jedoch unter Verwendung von 18% CH-,CN : 72%

H₂O (0,3 m in NH₄OAc, pH-Wert 7) als Elutionsmittel. Man erhält 350 mg des gewünschten Produkts vom F. 14O bis 15O⁰C.

5 In entsprechender Weise werden gemäss diesem Verfahren folgende Verbindungen erhalten:

N[2-(L-N^G,N^G'-Diethylhomoargin-N^a-yl)-propionyl]-L-proline acetat; N[2-(L-N^G,N^G'-Diethylhomoargin-N^a-yD-

propionyI]-L-1,2,3,A-tetrahydroisoquinoline-3-(S)-carbonsäureacetat.

N[2-(L-N^G,N^G1-^iethylhomoargin-N^a-yl)-propionyl]-L-2,3-dihydro-indole-2-(S)-carbonsäure- acetat; _ .

N[2-(L-N^G,N^G'-Diethylhomoargin-N^ct-yD-propionyll-L-l-aza-bic-ycloC 3.3.0 ]octan-2-(S)-carbonsäureacetat;

N[2-(L-N^G,N^G'-Bis-(2,2,2-trifluotoethyl))-homoargin->4^a-yi)propionyi:i-L-l,2,3,4-tetrahydro- isochinoline-3-(S)-carbonsäure-acet-ö.t: m/s [MH⁺H₂O] 565; und

N[2-(L(-N^G-Methyl,N^G'-n-butyl)-homoargin-N^a-

yl)-propionyl]-L-l,2,3,4-tetrahydroisoquinoline-3-(S)-carbonsäure-acetat.

Wird die Verseifung am Schluss mit NaOH nicht durchgeführt, so erhält man die entsprechenden Ethylester.

Präparation 2

Diese Präparation zeigt die Synthese von Benzyl- W*~-

ρ ρ τ .

tert.-butoxycarbonyl-N ,N -diethyl-L-homoargin- yl L-prolinat.

35

; :'S 9 3 '2

• ' - 46 -

.1 760 mg (2 mMol) N²-tert .'-Butoxycarbonyl-N^G, N^G'-diethyl-L-homoarginin-hydrochlorid werden in 5 ml Dimethylformamid gelöst. 450 mg (2,2 mMol) Dicyclohexylcarbodiimid und 299 mg (2,2 mMol) 1-Hydroxybenzotriazol (HOBT) werden zur Dimethylformamidlösung gegeben. 531 mg (2,2 mMol) Benzylpr.olinat-hydrochlorid. werden der Lösung zugesetzt. Der pH-Wert wird mit N-Methylmorpholin auf 8 bis 9 einge-. stellt. Das. Reaktionsgemisch wird über Nacht gerührt und filtriert. Das Filtrat wird zur Trockne eingedampft. Der Rückstand wird zwischen Essigsäureethylester und Wasser ausgeschüttelt. Die Wasserphase wird zur Trockne eingedampft und über eine mit Kieselgel gepackte Säule unter Verwendung eines Gradienten aus Dichlormethan/Methanol (9:1) bis Dichlormethan/Methanol (4:1) als Elutionsmittel gegeben. Die eingeengten Fraktionen ergeben das

25 ο

Produkt in Form eines weissen Schaums. J_oC_/j, -52,9 · In entsprechender Weise erhält man unter Anwendung dieses Synthese.verf ahrens folgende Verbindungen:

Benzyl-N-/~N-tert.-butoxycarbonyl-N^G,N^G'-bis-(2,2,2-trifluorethyl )-homoargin- y_l/-prolinat ; Benzyl-N-_/_ N-tert.-butoxycarbonyl-N ,N -dimethylhomoargin-.' y_l7-prolinat;

Benzyl-N-_/_ N-tert.-butoxycarbonyl-N -methyl-N -n-butylhomoarginyl7-prolinat; und

Benzyl-N-_/W-tert. -butoxyca

homoargin- y_l/-prolinat.

Präparation 3

Diese Präparation erläutert die Synthese von Benzyl-N-

J ρ ρ f

J_ N-1-ethoxycarbonyl-3-oxo-3-phehylpropyl)-L-(N ,N diethylhomoargin- yl)_7-L-prolinat.

.1,3 g (2,2 mMol) Benzyl-N-/"N-tert. -butoxycarbonyl-N^G, N^G diethyl-L-homoarginin-, y2_/-L-prolinat werden unter Verwendung von 3 ml gesättigter Salzsäure in Essigsäure·

Benzyl-N-_^N-tert.-butoxycarbonyl-N ,N -di-n-propyl-

ethylester von Schützgruppen befreit- Das von Schutzgruppen befreite Peptid wird mit Diethylether verrieben. Der Ether wird dekantiert, und der Rückstand wird zu 1,1 g eines Öls getrocknet. Das Öl wird in 5 ml absolutem Ethylalkohol gelöst. Der pH-Wert wird'mit Triethylamin auf 8 bis 9 eingestellt. 0,53 g (2,5.9 mMol) Ethyl-3-benzoylacrylat werden zugegeben. Das Reaktionsgemisch wird 2 Stunden bei Raumtemperatur gerührt und sodann zur Trockne eingedampft. Der Rückstand wird zwischen Wasser und Essigsäureethylester ausgeschüttelt. Die Wasserphase wird zur Trockne eingedampft und über eine mit Kieselgel gepackte Säule gegeben und mit Dichlormethan/Methanol 4:1 eluiert. Die entsprechenden Fraktionen werden eingeengt. Man erhält das Produkt in Form eines weissen Schaums. In entsprechender Weise werden unter Anwendung dieses Syntheseverfahrens folgende Verbindungen erhalten:

3enzyl-N-[N-(l-ethoxycarbonyl-3-oxo-3-phenylpropyl)-

L-(N ,N -bis-(2,2,2-trifluoroethyl)-homoarginyl)]-L-prolinat;

Benzyl N-[N-(l-ethoxycarbonyl-3-oxo-3-phenylpropyl)-L-(N^G-methyl, N^G-n-butyl)homoargin- yl) ]-L-prolInat ;

Benzyl-N-CN-(1-ethoxycarbonyl-3-oxo-3-phenylpropyI)-l_-(-N^G,N^GI-dimethyl)homoarginyl) ]-L-prolinat ; und

Benzyl N-[N-(1-ethoxycarbonyl-3-oxo-3-phenylpropyl)-L-(-N^G,N^G* -di-n-propyl)homoargin- yl]-L-prolinat .

Diese Verbindungen stellen Ausgangsmaterialien für Beispiel 2 dar.

- 4-8 Beispiel 2

Dieses Beispiel zeigt die Synthese von N-/~~N-( 1 -Ethoxy-

ρ ρ f

carbonyl-3-phenylpropyl)-L-(N ,N -diethylhomoargin- yl_/-L-prolin.und erläutert den Verfahrensweg 6, Stufe (c), den Verfahrensweg 7, Stufe (a), den Verfahrensweg 8, Stufen (a) und (b) und den Verfahrensweg 14, Stufe (q).

400 mg- des weissen Schaums gemäss Präparation 3 werden in 15 ml Eisessig mit 1,6 Prozent konzentrierter Schwefelsäure gelöst. 100 mg 10% Palladium-auf-Kohlenstoff werden zugegeben. Das Reaktionsgemisch wird bei Raumtemperatur unter atmosphärischem Druck 1 bis 1 1/2 Stunden hydriert, sodann durch Celite filtriert und mit verdünntem Ammoniak bei 0 C auf einen pH-Wert von 3 bis 4 neutralisiert. Das Filtrat wird über eine mit Amberlite XAD gepackte Säule gegeben und mit einem Gradienten von Wasser zu Ethylakohol eluiert. Durch Einengen der entsprechenden Fraktionen er-"hält man etwa 200 mg Öl. Das Öl wird durch umgekehrte präparative HPLC gemäss Beispiel 1 weiter gereinigt. Man erhält 80 mg eines Isomeren und '40 mg des anderen Isomeren. Die Verbindungen sind in bezug auf die 3-Stellung des Phenylpropylresta isomer und können entweder in razemischer oder aufgetrennter Form eingesetzt werden. In entsprechender Weise erhält man gemäss diesem Syntheseverfahren folgende Verbindungen:

N-[N-(l-Ethoxycarbonyl-3-phenylpropyl)-L-(N ,N -

bis-(2,2,2-trifluoroethyl)-homoa-rgin- yl) ]-L-prolin :.

N-[N-(l-Ethoxycarbonyl-3-phenylpropyl)-L-(N -methyl-N -n-butyDhomoargin- yl) 3-L-prolin ; N-[N-(l-Ethoxycarbonyl-3-phenylpropyl)-L-(-N ,N -

dimethyDhomoargin- yl) ]-L-prolin;" und N-[N-(l-Ethoxycarbonyl-3-phenylpropyl)-L-(-N ,N -

(ji-n-propyl)homoargin- yl3-L-prolinat j

-U₉-

In entsprechender Weise erhält man durch Hinzunahme einer herkömmlichen Verseifungsstufe die entsprechenden Disäuren.

Präparation 4

Diese Präparation erläutert die Synthese von Benzylprolinat-hydrochlorid.

30,2 ml Thionylchlorid werden bei -10 bis -5°C zu 300 ml Benzylalkohol gegeben. Das Reaktionsgemisch wird 15 Minuten bei -5 C" gerührt und sodann mit 23,0 g Prolin versetzt. Anschliessend wird das Reaktionsgemisch 1 weitere Stunde bei -5 bis -10 C und sodann bei Raumtemperatur gerührt. Zu diesem Zeitpunkt ist das. Reaktionsgemisch homogen. Anschliessend wird das Reaktionsgemisch zu 1,5 Liter Ethylether gegeben. Es bildet sich ein Feststoff. Das feste Benzylprolinat.HCl wird abfiltriert, mit Ether gewaschen und getrocknet.

Auf ähnliche Weise erhält man gemäss diesem Syntheseverfahren Ethy1-2-(S)-carboxylat-2,3-dihydroindol-hydrochlorid vom F. 163 "bis 165°C.

Präparation 5

Diese Präparation erläutert die Synthese von Benzyl-N-2-oxopentanoyl-prolinat.

8,8 g Benzylpropionat-hydrochlorid, 9,78 g Dicyclohexylcarbodiimid und 6,12 g Diisopropylethylamin werden in

ο 50 ml Dichlormethan bei 0 C miteinander umgesetzt. 5,51 g

2-Oxopentansäure in 10 ml Dichlormethan werden bei O⁰C zugetropft. Der pH-Wert des Reaktionsgemisches wird durch Zugabe von Diisopropylethylamin auf 8 bis 9 eingestellt.

Sodann wird das Reaktionsgemisch U Stunden bei 0 C und 35

anschliessend über Nacht bei Raumtemperatur gerührt. Am nächsten Tag wird das R-eaktionsgemisch filtriert, zur

Trockne eingedampft und zwischen Essigsäureethylester und Wasser ausgeschüttelt. Die organische Phase wird mit 5% Natriumbisulfid, 5% Natriumbicarbonat und gesättigter Natriumchloridlösung gewaschen und über Magnesiumsulfat getrocknet. Die organische Phase wird sodann zu einem gelben Öl eingeengt. Dieses Öl wird über eine mit Kieselgel gepackte Säule gegeben und mit Essigsäureehtylester:

Hexan (4:6) und Essigsäureethylester:Hexan (1 :1)eluiert.

26

Benzyl-N-2-oxopentanoyl-prolinat (_/ <X_/_D, -56,9) wird isoliert.

In entsprechender Weise erhält man unter Anwendung dieser Synthesemethode folgende Verbindungen:

25

Benzyl-N-, 2-oxobutanoyl-prolinat ^^a^D

-63,8), 25

Benzyl-N-2-oxopropanoyl-prolinat (C aJ_n

-62,0),

Benzyl-N-2-oxobutanoyl.-1,2,3,4-tetrahydroisochinolin -3-(S)-carboxylat- hydrochloric! ([α]?⁵ -9.87),

- - '

Benzyl-N-2-oxoethanoyi -1,2,3,4-tetrahydroisoohinolin -3-(S)-carboxylat- hydrochloric! (Cct3_D -14,4),

Benzyl-N-2-oxopropanoyl.-2-(S)-carboxylat-

15 dihydroindol .-hydrochloric! (Ca]₀ -101,7).

.

Beispiel 3 · .

Dieses Beispiel zeigt die Synthese von Benzyl-CN-2-O-ethyl-N ,N -L-diethylhomoargin-N^a-yl)-pentanoyl)-prolinat und erläutert den Verfahrensweg 2, Stufe (f).

G 2,5 g Benzyl-N-2-oxopentanoyl-prolinat, 2,3 g Ethyl-N ,-

G' N -diethyl-L-homoarginat-hydrochlorid und 3 g Calciumsulfat werden in 25 ml absolutem Ethanol miteinander vermischte Das erhaltene Gemisch wird 48 Stunden bei Raumtemperatuur gerührt. Anschliessend wird 0,5 g Natrium-

cyanoborhydrid in 10 ml absolutem Ethanol bei 0°C zugegeben. Das Reaktionsgemisch wird 2 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Sodann wird das Gemisch mit Essigsäure auf einen pH-Wert von etwa 4 angesäuert und filtriert. Das Lösungsmittel wird entfernt und der Rückstand zwischen Essigsäureethylester und Wasser ausgeschüttelt. Die organische Phase wird mit gesättigter Natriumchloridlösung, gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert und zu einem Öl eingeengt. Das Öl wird über eine mit Kieselgel gepackte Säule gegeben und mit Dichlormethan :Methylalkohol (8:1) und DichlormethanMethylalkohol (6:1) eluiert. ' ' .

In entsprechender Weise erhält man unter Verwendung dieses Syntheseverfahrens folgende Verbindungen:

Benzyl-(N-2-(0-ethyl N^G,N^G'-L-di-ethylhomoargin-N^ayl)butanoyl-prolinat ,

Benzyl-(N-2-(O-ethyl N^G,N^Gt-L-di-2,2,2-trifluoroethylhomoargin-N^a-yl )propanoyl-prolinat ,

Benzyl-(N-2-(o-ethyl N^G,N^G'-L-di-ethylhomoargin-N^ayl)butanoyl-l,2,3,A-tetrahydroisochinolin 3-(S)-carboxylat ,

Benzyl-(N-2-(O-ethyi N^G,N^G'-L-di-ethylhomoargin-· N^a- yl)ethanoyl-l,2,3,4-tetrahydroisochinolin 3-(S)-carboxylat , und

P P'

Benzyl-(N-2-(O-ethyl N ,N -L-di-ethylhomoargin-N^a-yl )propanoyl-2,3-dihydroindol -2-(S)-carboxylat .

Viele dieser Zwischenprodukte werden ohne weitere Reinigung und Charakterisierung eingesetzt.

Beispiel 4

Dieses Beispiel zeigt die Synthese von (N-2-(N ,N -L-Diethylhomoargin-N^-yl)-pentanoyl)-prolin und erläutert die Stufen (a) und (d) der Verfahrenswege 7 und 8 und die Stufe (h) von Verfahrensweg 14.

0,8 g Benzyl-(N-2-(O-ethYl-N^G,N^G'-L-diethylhomoargin-N^c><-at)-pentanoyD-prolinat werden mit 0,2 g Natriumhydroxid in 10 ml Wasser und 2 ml Ethanol 2 Stunden bei Raumtemperatur hydrolysiert. Nach 2 Stunden wird das Reaktionsgemisch 5 mit Essigsäure auf einen pH-Wert von etwa 4 angesäuert und filtriert. Das - Lösungsmittel wird entfernt. Das Pro-

P Pt

dukt wird durch präparative HPLC gereinigt. (N-_/_ 2-(N ,N L-Diethylhomoargin-N^-yD-pentanoyl)-prolin (_/~~M+H_7⁺ 442) wird isoliert

10

In entsprechender Weise erhält man unter Anwendung dieser Synthesemethode folgende Verbindungen:.

(N-2-(N^G,N^G'-L-Di-ethylhomoargin-N^-yl)-butanoyl-prolin ([M₊H]⁺ 448),

(N-2-(N^G,N^G'-L-Bis-(2,2,2-trifluoroethyl)-homoargin-N^a-yl)-propanoyl-prolin ([M+H] 522),

(N-2-(N^G,N^Gl.-L-Di-ethylhomoargin-N^ct-yl)-butanoy1-1,2,3,4-tetrahydroisochinoline-3-(S)-carbonsäure

20 - (CM₊H]⁺ 490),

(N-2-(N^G,N^G'-L-Di-ethylhomoargin-N^a-yl)-ethanoyl-l,2,3,4-tetrahydroisochinoline-3-(S)-carbon-.

säure'(die Identität dieser Verbindung wird durch NMR-Daten bestätigt),'und „P- (N-2-(N^G,N^GI-L-Di-ethylhomoargin-N^a-yl)-propanoyl-2-(S)-carboxy-2,3-dihydroindol ([M+H] 444).

Beispiel 5

Die nachstehend aufgeführten Verbindungen werden hergestellt. In der folgenden Aufstellung sind die angewandten Methoden zusammen mit den entsprechenden physikalischen Konstanten angegeben.

(R¹ = Hydroxy, R^z = -(CH,)_ANH-c'

INK

(R¹ = Hydroxy, R² = -(CHO.NH-/ )

-*- * V ft

CH,

CH

CH

CHj

C₂H₅

CHj

CH,

CHj

JR -N - CH-COOH R

CHj THIQ

C₂H₅

THIQ-

C₂H₅ THIQ

C₂H₅

j 7-CHj-THIQ C₂H₅

Ij 7-Cl-THIQ C₂H₅

Prolin-N-yl C₃H₅

Prolin-N-yl C₃H₅

Prolin-N-yl CF₃CH₂

2-Carboxy- C₃H₅

1,3-dihydro-

indol-N-yl

THIQ CHj

C₂H₅

CHj THIQ CHj H-C₄H₉

CFjCH₂ CFjCH₂

C₂H₅

C₂H₅

C₂H₅

C₂H₅. C₂H₅

CFjCH₂ C₂H₅

CH, Methode (i) (n) (h) (m) (b) (i) (n) (h) Gn) (b) (a) (i) (a)

(j) (n) (i) (0) (h)

Physikalische

Konstante'

F. 140-150⁰C NMR:m/s:[M+H] F. 142-152⁰C NMR-Bestätigung NMR-Bestätigung

m/s[MH⁺H₂0]

NMR-Bestätigung [M₊H]⁺

[M₊H]⁺

[M₊H]⁺

NMR-Bestätigung [M₊H]⁺

NMR-Bestätigung [M₊H]⁺

NMR-Bestäi; igung

Beispiel 6 - 54 -

Eine typische Tablette enthält N-_/~2-(N^G, N^G'-L-Diethyl- ' homoargin-2-yl)-propionyl7-1 ,2, 3,4-tetrahydroisochinolin-3-(S)-carbonsäure (25 mg), vorgelatinierte Stärke USP (50 mg), mikrokristalline Cellulose (100 mg) und-Magnesiumstearat (1 mg). In entsprechender Weise kann beispielsweise der Ethylester von N-V 2-(N ,N -L-Diethylhomoargin-2-yl )-propionyl7~-1 ,2,3, 4-tetrahydroisochinolin-

p ρ \

• 3-(S)-carbonsäure anstelle von N-_/ 2-(N ,N -L-Diethylhomoargin-2-yl )-propionyl_/-1 ,2,3, 4-tetrahydroisochinolin-3-(S)-carbonsäure mit der vorstehend beschriebenen Zusammensetzung aus vorgelatinierter Stärke, mikrokristalliner Cellulose und Magnesiumstearat zu einem Arzneimittel formuliert werden.

Eine Kombinationstablette mit einem Diuretikum, z.B.

ρ pt

Hydrochlorothiazid, enthält typischerweise N-_/_ 2-(N ,N L-Diethylhomoargin-2-yl )-propionyl_~-1 ,2,3, 4-tetrahydroisochinolin-3-(S)-carbonsäure (7,5 mg), Hydrochlorothiazid (50 mg), vorgelatinierte Stärke USP (50 mg), mikrokristalline Cellulose (100 mg) und Magnesiumstearat (1 mg).

— C C *

Tabletten mit einem Gehalt am Ethylester von N-_/ 2-(N ,N L-Diethylhomöargin-2-yl)-propionylJ7-1,2,3,4-tetrahydroisochinolin-3-(S)-carbonsäure und Hydrochlorothiazid (50 mg·) werden durch Verwendung der erstgenannten Verbin-

ppi

dung anstelle von N-_/_ 2-(N ,N -L-Diethylhomoargin-2-ylpropionyl7"-1 ,2,3, ^-tetrahydroisochinolin-S- (S) -carbonsäure im vorstehend beschriebenen Präparat hergestellt.

Eine Kombinationstablette mit einem Gehalt an" einem CaI-ciumblocker, z.B. Nicardipin,enthält typischerweise N-_/_ 2-(N ,N -L-Diethylhomoarginyl-2-yl )-propiony_l/-1,2,3,4-tetrahydroisochinolin-3-(S)-carbonsäure (7,5 mg), Nicardipin (15 mg), vorgelatinierte Stärke USP (50 mg), mikrokristalline Cellulose (10 mg) und Magnesiumstearat ,35 (1 mg).

- 55 1 Beispiel 7

Die ACE-Hemmwirkung der Dipeptide der Formel A wird in einem in vitro-Versuch unter Verwendung eines ACE-Präparats aus rohem Acetonpulver von Kaninchenlunge ermittelt. Hippuryl-histidyl-leucin (HHL) wird als synthetisches Substrat, das durch ACE zu spalten (hydrolysieren) ist,verwendet (D.W. Cushman und H.S. Cheung, Biochem. Pharmacol., Bd. (1971), S. 1637). Die nachstehenden Verbindungen der Formel.A, die durch, die vorstehend angegebenen arabischen Ziffern identifiziert sind, werden auf ihre Fähigkeit geprüft, die Hydrolyse von HHL unter Bildung des C-terminalen Dipeptids His-Leu durch das ACE-Präparat zu hemmen.' In der nachstehenden.Tabelle 1st dieses Hemmvermögen als IDj-n-Wert angegeben (d.h. die Dosis, die eine 50-prozentige

Hemmung der Hydrolyse bewirkt, wobei die Testverbindungen

-Q -4 in Konzentrationen von 10 bis 10 molar untersucht

werden). .

Verbindung Nr. 20 . *

25 ⁽¹⁰⁾

(11)

(12) (13)

(H) N[2-(L-N^G-Methyl-N^Gf-n-butylhomoargin-N^a-yl)-30

propionyl]-L-prolin

(12) N[2-(L-N^G,N^GI-Diethylhomoargin-N^a-yl)butanoyl]·

!.-prolin

(13) N[2-(L-N^G,N^G'-Diethylhomoargin-N -yl)-

_oe. pentanoyl]-L-prolin

ID50	(molar)
6 χ	ίο-8
9 χ	ίο'8
2.2	χ 10'7
6.5	χ 10'8
1.8	χ 10"7
2.8	χ 10'7
2.3	χ 10"7
6 χ	ΙΟ"8

Claims (21)

1. Y 2 43 - 66, _

   Erfindungsanspruch:

   1. Verfahren zur Herstellung von Verbindungen der allgemeinen Formel (A)
   .

   _R3 R* R⁵

   R¹ - CO - CH - NH - CH - CO - N - CH - CO - R (A) Io
   R^

   ⁱⁿ

   R Hydroxy, nieder-Alkoxy-,Benzyloxy oder ggf. durch ein oder zwei nieder-Alkylreste substituiertes Amino bedeutet; · . , R² und R³
   (1) Wasserstoff oder vorzugsweise nieder-Alkyl (ggf. durch Phenyl oder Naphthyl t^-substituiert; weniger bevorzugt durch Di-nieder-alkylguanidino co -substituiert); oder
2. 21.3.86- 33441

   (2)

   N-R⁷

   -(CH₂) η - ?f ^C\

   NHR⁸,

   2 λ bedeutet, wobei einer der Reste R und R^J die Bedeutung

   (1) und der andere die Bedeutung (2) hat; und der Rest

   - N - CH - CO - R⁶

   einen Aminosäurerest aus der Gruppe der Iminosäurereste bedeutet, vorzugsweise aus der Gruppe der cyclischen Iminosäurereste, bei denen die Untergruppe

   R⁴ R⁵
   I I
   .' -N-CH-

   einen heterocyclischen Rest mit 1 Stickstoffatom und bis zu 9 Ringkohlenstoffatomen bildet, wobei die cyclischen

   Iminosäurereste sich insbesondere von Prolin, Hydroxypro-25

   lin oder Prolinanalogen ableiten;

   R Hydroxy, nieder-Alkoxy, Benzyloxy oder ggf. durch ein oder zwei niedere Alkylreste substituiertes Amino bedeutet;
   γ 8

   R und R unabhängig voneinander ggf. durch 1 bis 5 Fluoratome substituiertes nieder-Alkyl bedeuten; und η eine ganze Zahl von 3 bis 5, vorzugsweise 4, ist; sowie von deren pharmakologisch verträglichen, nichttoxischen Salzen, gekennzeichnet durch

   (a) Hydrolyse einer Verbindung der Formel
3. 21.3.86- 334Ai 7

   * CO-CH-NH-CH-CO-N-CH-CO-R

   (nachstehend abgekürzt mit

   1*6*
   worin R und R Hydroxy, nieder-Alkoxy, Benzyloxy oder ggf. durch ein oder zwei niedere Alkylreste substitu-

   1 * i'ertes Amino bedeuten und mindestens einer der Reste R

   6*
   und R nieder-Alkoxy oder Benzyloxy bedeutet, zu einer Verbindung der Formel A, in der R und R Hydroxy bedeuten;

   (b) Hydrogenolyse (reduktive Spaltung) einer Verbindung der Formel

   1* 6*
   R' R⁰

   1*6*

   in der R und R Hydroxy, nieder-Alkoxy, Benzyloxy oder ggf. durch ein oder zwei niedere Alkylreste substituier-

   1 * tes Amino bedeuten und mindestens einer der Reste R und.

   6*

   R Benzyloxy bedeutet, zu einer Verbindung der Formel A, in der mindestens einer der Reste R und R Hydroxy bedeutet;

   (c) Reduktion einer Verbindung der Formel

   R·' R⁴ R⁵

   R^x CO - CH - NH - CH - CO - N - CH - CO - R
4. 21.3.86· 3344-17

   -.55 -

   2* -3* in der einer Reste R oder R oxosubstituiertes nieder-Alkyl, das ggf. durch Phenyl oder Naphthyl &J-substitu-

   2*3*

   iert ist, und der andere der Reste R und R die vorstehende Bedeutung (2) hat; ' ._.'·

   (d) Umsetzung einer Verbindung der Formel A mit einer Base unter Bildung eines Salzes der Verbindung der Formel A; .

   (e) Umsetzung einer Verbindung der Formel A mit einer Säure unter Bildung eines Säureadditionssalzes der Verbindung der Formel A;

   (f) Kondensation eines Aminosäurederivats der Formel 15

   R¹ CO - CH - NH« R²

   mit einem "o^-Ketosäurederivat der Formel

   R³ R⁴ R⁵

   0 = C. - CO - N - CH - CO - R⁶

   unter reduktiven Bedingungen unter Bildung einer Verbindung der Formel A;

   (g) Reduktion einer Schiffschen Base der Formel R³ R⁴ R⁵ R¹ CO - CH - N = C - CO - N - CH - CO - R

   zu einer Verbindung der Formel A;
5. 21.3.86- 334417

   - bo-

   (h) Kondensation eines >x-Ketosäurederivats der Formel

   R¹ - CO, - CO

   mit einem Dipeptid der Formel

   H₂N - CH - CO - N - CH - CO - R⁶ 10

   unter reduktiven Bedingungen;

   (i) Kondensation eines Aminosäurederivats der Formel

   R¹ CO - CH - NH - CH - COOH

   In ·

   R²

   mit Prolin oder einem prolinanalogen Derivat der Formel

   R⁴ R⁵

   HN- CH-CO- R⁶

   unter Bildung einer Verbindung der Formel A; (j) Alkylierung eines Dipeptids der Formel

   R³* R⁴ R⁵ 0

   ^3--CO -CH - NH - CH - CO - N - CH - C

   in der einer der Reste R und R die Bedeutung -(CHp) NHp und der andere die vorstehende Bedeutung (1) hat, mit einem Alkylierungsmittel der Formel
6. 21.3.86- 3344-17

   A"⁷

   ² - ^C _N

   NHR⁸

   in der Z Chlor, Brom oder Jod oder einen nieder-Alkylmercaptorest bedeutet;

   (k) Veresterung einer Verbindung der Formel

   1* 6*

   R¹ R⁶

   ι * . ρ*

   in der mindestens einer der Reste R und R Hydroxy und der andere Hydroxy, nieder.-Alkoxy oder Benzyloxy bedeutet, mit einem niederen Alkanol oder Benzylalkohol;

   (1) Alkylierung einer Verbindung der Formel

   R³^-CO '- CH-NH-CH-CO-N-CH-CO-R

   2* "3*

   in der einer der Reste R und R einen U7-guanidinsubstituierten Alkylenrest mit 3 bis 5, vorzugsweise 4, Kohlenstoffatomen und der andere die Bedeutung (1) hat, mit einem nieder-Alkyl-Alkylierungsmittel, das ggf.. durch 1 bis 5 Fluoratome substituiert ist;

   (m) Alkylierung eines Dipeptidderivats der Formel

   H₂N - CH - CO - N - CH - CQ - R⁶

   mit einem Alkylierungsmittel der Formel
7. 21.3.86- 334417

   R.¹ - CO - CH - P R²

   in der P Halogen aus der Gruppe Chlor, Brom oder Jod oder eine Sulfonyloxygruppe bedeutet;

   (η) Alkylierung eines Aminosäurederivats der Formel

   R¹ - CO - CH - NH₉

   •2 R.

   mit einem Alkylierungsmittel der Formel

   R³ R⁴ R⁵

   I ' I 6

   P - CH - CO - N - CH-CO-R⁶

   in der P die gleiche Bedeutung wie in Stufe (m) hat; (o) Alkylierung eines Guanidinoderivats der Formel

   H₉N - C

   NHR

   \ Q

   mit einem Alkylierungsmittel der Formel

   ff³* R⁴ R⁵

   R¹ CO-CH-NH-CH-CQ-N-CH- COR⁶ (I)

   2* λ* in der einer der Reste R und R eine alkylierende Gruppe der Formel
8. 21.3.86- 334417

   A3955

   - <^CH2>n-^p

   bedeutet und P die gleiche Bedeutung wie in Stufe (m) hat, und der andere el·
   deutung (1) hat;

   2* λ* und der andere der Reste R und R die vorstehende Be-

   (p) Umwandlung eines Säureadditionssalzes des Dipeptids der Formel A mit einer Base zu einem Dipeptid der Formel A oder einem Salz davon mit dieser Base;

   (iq) Umwandlung eines Salzes eines Dipeptids der Formel A (von-einer Base abgeleitet) mit einer Säure zum freien Dipeptid der Formel A oder einem Säureadditionssalz davon;

   (r) Umwandlung eines Salzes eines Dipeptids der Formel A, vorzugsweise eines löslichen Salzes, in ein anderes Salz dieses Dipeptids, das vorzugsweise weniger löslich als das genannte lösliche Salz ist;

   (s) Acylierung von Ammoniak, einem nieder-Alkylamin oder einem Di-nieder-alkylamin mit einem Dipeptidderivat der Formel

   1 * 6'*
   R- R^D

   1*6*
   worin R und R Hydroxy, Chlor, Brom, nieder-Alkoxy, · Benzyloxy, nieder-Alkanoyloxy oder ggf. durch ein oder zwei nieder-Alkylreste substituiertes Amino bedeutet und

   1 * 6 * mindestens einer der Reste R und R Hydroxy, Chlor,

   Brom, nieder-Alkoxy, Benzyloxy oder nieder-Alkanoyloxy bedeutet.
   35
9. 21.3.86- 33Mi 7
10. 2. Verfahren nach Punkt 1, gekennzeichnet dadurch, dass.

    2 3
    einer der Reste R und R nieder-Alkyl, Benzyl oder

    2-Phenylethyl bedeutet.

    .5 3. Verfahren nach Punkt'1 oder 2, gekennzeichnet dadurch,

    2 ^
    dass einer der Reste R und R nieder-Alkyl oder 2-Phenylethyl bedeutet; und die Gruppe

    R⁴ R⁵

    I '

    -N-CH-CO-R*

    Prolin (I) oder"ein Prolinanaloges bedeutet, in dem der Pyrrolidinring durch eine Oxogruppe (IV), durch Hydroxy, Mercapto, nieder-Alkylmercapto oder nieder-Alkoxy (V) substituiert ist oder die Prolinfunktion durch die Reste II, III oder VI ersetzt ist:

    -N I (I) COR⁶

    -N

    COR (V)

    und R Hydroxy oder Benzyloxy bedeutet; und X Wasserstoff, Nitro, nieder-Alkyl, Chlor oder Brom bedeutet.
11. 21.3.86- 334417

    ^ 4. Verfahren nach einem der vorstehenden Punkte, gekenn-

    2
    zeichnet dadurch, .dass R die Bedeutung (2) hat.
12. 5. Verfahren nach einem der Punkte 1 bis 3, gekennzeichnet . dadurch, dass R Phenylethyl bedeutet.
13. 6. Verfahren nach einem der Punkte 1 bis 4, gekennzeichnet -dadurch, dass R nieder-Alkyl mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen bedeutet.
14. 7. Verfahren nach Punkt 6, gekennzeichnet dadurch, dass R^ Methyl, .Ethyl oder n-Propyl bedeutet.

    '8. Verfahren nach einem der vorstehenden Punkte, gekennzeichnet dadurch, dass die Gruppe

    R⁴ R⁵
    - N - CH - COR⁶

    einen Prolinrest bildet.
15. 9. Verfahren nach einem der vorstehenden Punkte, gekennzeichnet dadurch, dass die Gruppe

    R⁴ R⁵

    .-N-CH- COR⁶
    30

    einen Prolinrest oder einen Rest bedeutet, der aus der Gruppe II, II
    Hydroxy bedeutet.

    der Gruppe II, III ,und VI ausgewählt ist, und R⁶
16. 213.86- 3344i
17. 10. Verfahren nach einem der Punkte 1 bis 7 oder 9, gekennzeichnet dadurch, dass die Gruppe

    ?⁴ f
    _K - N - CH - COR⁶

    die Bedeutung II hat.
18. 11. Verfahren nach Punkt 10, gekennzeichnet dadurch, dass X Wasserstoff bedeutet.
19. 12. Verfahren nach einem der vorstehenden Punkte, gekenn-

    7 8 zeichnet dadurch, dass R und R nieder-Alkyl mit

    1 bis 4 Kohlenstoffatomen bedeuten. 15

    13· Verfahren nach Punkt 12, gekennzeichnet dadurch, dass •R⁷ und R⁸ Methyl, Ethy
    oder η-Butyl bedeuten.

    •R⁷ und R⁸ Methyl, Ethyl, 2,2,2-Trifluorethyl, n-Propyl
20. 14. Verfahren nach Punkt 13, gekennzeichn.et dadurch, dass

    7 R
    R' und R Ethyl bedeuten.
21. 21.3.8fr 3344-17