DD270078A5 - Verfahren zur herstellung stickstoffhaltiger derivate von epipodophyllotoxinglucosiden - Google Patents

Abstract

Die vorliegende Erfindung betrifft Verfahren zur Herstellung von neuartigen stickstoffhaltigen Epipodophyllotoxinglucosid-Derivaten. Die ueber das erfindungsgemaesse Verfahren hergestellten Verbindungen sind als Antitumormittel therapeutisch anwendbar.

Description

Anwendungsgebiet der Erfindung

Die vorliegende Erfindung betrifft Verfahren zur Herstellung von neuartigen stickstoffhaltigen Epipodophyllotoxinglucosld-Derivaten.

Charakteristik des bekannten Standes der Technik

Etoposid (VP-16,1 a) und Teniposid (VM-26,1 b) sind klinisch anwendbare Antikrebsmittel, welche von natürlich vorkommendem Lignan, Podophyllotoxin (II), abgeleitet sind. Zum besseren Verständnis der Nomenklatur ist P rmel Il teilweise durchnumeriert.

CB

OCB,

IaA = CH₃ lbA = 2-Thienyl

Etoposid und Teniposid sind Epipodophyllotoxin-Derivate; Epipodophyllotoxin ist eine epimere Form des Podophyllotoxin an dessen 4-Postion. Etoposid und Teniposid zeigen eine Antitumorwirkung bei der Behandlung verschiedener Krebsarten, wie dem («!einzeiligen Lungenkarzinom, der nichtlymphozytischen Leukämie und dem nicht-seminomatösen Hodenkrebs (AMA Drug Evaluation, 5th Edition, American Medical Association, 1983, Chicago, Illinois, S. 1554-1555).

Etoposid undTeniposid sowie deren Herstellungsverfahren sind in der US-PS 3 524844 beschrieben. Etoposid-3',4'-chinon (III a) wird durch elektrochemische Oxidation von Etoposid hergestellt (J. J.M.Holthuis, et al, J. Electroanal. Chem. Interfacial Electrochem., 1985,184 [2]: 317-329). Die Herstellung der Chinone III durch chemische Oxidation ist in der US-PS 4609644 beschrieben. Epipodophyllotoxin-3',4'-chinon-Derivate III, worin A und Y der für Formel IV angegebenen Definitionen entsprechen, dienen als Ausgangsmaterial zur Herstellung der erfin Jungsgemäßen stickstoffhaltigen Epipodophyllotoxin-Derivate.

Ilia A = CH,; Y=H

Podophyllotoxin der aligemeinen Formel

wird von Ayres und Lim in „Cancer Chemother. Pharmacol.", 1982,7:99-101, beschrieben.

Ziel der Erfindung

Ziel der Erfindung ist die Bereitstellung von stickstoffhaltigen Epipodophyllotoxinglucosid-Derivaten der allgemeinen Formel IV, welche als Antitumormittel therapeutisch anwendbar sind.

Darlegung des Wesens der Erfindung

Der Erfindung liegt die Aufgabe * jgrunde, ein Verfahren zur Herstellung von stickstoffhaltigen Epipodophyllotoxinglucocld-Derivaten der folgenden allgemeinen Formel IV zur Verfügung zu stellen:

IV

B '

Y ein Wasserstoffatom bedeutet und A aus der Gruppe folgender Reste ausgewählt ist:

einem C,-₁₀-Alkyl-, C₂_2₀-Alkenyl-, C^-Cycloalkyl-Rest; einem 2-Furyl- oder 2-Thienylrest; einem Aryl-, Aralkyl- und Aralkenylrest,wobei jeder aromatische Ring unsubstituiert oder substituiert sein kann mit einem odar mehreren Gruppen, ausgewählt untereinem Halo-, C,_a-Alkyl-, Ci-e-Alkoxy·, Hydroxyd-, Nitro- oder einem Aminorest; oder

A und Y jeweils einen Ct-g-Alkylrest bedeuten; oder A und Y und das Kohlenstoffatom, an welches sie gebunden sind, eine C^-Cycloalkylgruppe bilden; und B ausgewählt ist aus der Gruppe folgender Reste:

IVa

IVb

und

NHR

.11

IVC '

R* eine Ci-io-Alkyl-, C^-Cycloalkyl-, C₂-io-Alkenyl- oder C₂-io-Alkinylgruppe bedeutet, wobei jede der oben angegebenen Gruppen unsubstituiert oder mit einem oder mehreren Z substituiert sein kann; oder eine Aryl-, Heteroaryl-, Aralkyl- oder Hateroaralkylgmppe bedeutet, wobei der in den oben genannten Gruppen, enthaltene Ring unsubstituiert oder mit einer oder

mehreren Gruppen ausgewählt unter einem C^-Alkylrest oder Z substituiert ist; wobei Z aus der Gruppe folgender Resteausgewählt ist: Halo-, Cn-Alkoxy-, Amino-, Nitro-, Cyano-, Hydroxy- und Mercaptorest;

R² ein Wasserstoffatom oder eine Methylgruppe bedeutet;

R¹¹ ein Wasserstoffatom, einen -CH-, -CR¹⁰-, -COR¹⁰- oder

Il Il Il

0 0 0 -CNhR -Rest bedeutet; worin R eine C₁ ,--Alkylgruppe,

welche unsubstituiert vorliegt oder substituiert ist mit einem oder mehreren Z, oder einen Aryl-C|-6-alky!rest bedeutet; R³ ein Wasserstoffatom oder eine Phenolschutzgruppe bedeutet; R⁴ und R⁶ jeweils unabhängig voneinander R'¹ oder R* bedeuten; oder R⁴ ein Wasserstoffatom bedeutet und R⁵ eine Sulfonylgruppe

I« V< ₁₃

oder -CH-

bedeutet,

worin R" ein Wass'jrstoffatom oder eine C^-Alkylgruppe bedeute¹; P¹³ ein Wasserstoffatom, R¹, oder -S-R¹ bedeutet;η Hr 2 oder 3 und vorzugsweise 2 steht; oder

R³, R⁴ und R⁶ zusammen -CHR¹⁴= bedeuten, worin R¹⁴ ein Wasser?loffatom odei einen Ci-s-Alkylrest bedeutet; oder NR⁴R⁵ eine Nitro-oder Azidogriippe bedeutet; oder N JX" bedeutet, unter der Bedingung, daß R³ kein Wasserstof.'atom bedeutet

und worin X^- ein anionischo Gruppe darstellt;

NR⁴R⁶ einen N=CHR⁸-, N=CHNR⁷R⁸- oder N=NNHR⁹-Rest bedeutet, worin R⁸ der Definition für R¹ entspricht, R⁷ und R⁸ jeweils

unabhängig voneinander ein Wasserstoffatom odor eine C_K-Alkylgruppe bedeuten und R⁹ eine Ct-e-Alkylgruppe darstellt; ader

R³und NR⁴R⁵zusammen ein inneres Diazoniumhydroxidsalzdarstellen. In Mner bevorzugten Ausführungsform bedeutet Y ein Wasserstoffatom und A eine Methyl- oder 2-Thlenylgruppe, wobei eine Methylgruppe am meisten bevorzugt tat. Der in der Beschreibung und In den Ansprüchen verwendete Ausdruck NR⁴R⁸ bedeutet, wenn nicht anders angegeben, daß R⁴

und R⁵ an Stickstoff gebunden sind. Alkyl bedeutet eine unverzweigte oder verzweigte gesättigte Kohlenstoffkitte, wie einen

Methyl-, Ethyl-, n-Propyl- oder Isopropylrest. Acyl bedeutet einen organischen Rest, welcher eine C=O-Gruppe enthält uM einen Formyl-, Alkanoyl- oder substituierten Alkanoyl·, Arylcarbonyl-, Alkoxycarbonyl- oder substituierten Alkoxycarbcnyl- uni' einen

(Ära) alkylaminocarbonyl- odersubstituierten (Ara)alkylaminocarbonylrest darstellt, jedoch nicht auf diese Beispiele beschränktist. Sulfonyl bedeutet einen organischen Rest mit einer-SO₂-Gruppe. Halo bedeutet Fluor, Chlor, Brom oder Jod.

Heteroaryl bedeutet einen aromatischen Ring mit wenigstens einem Nicht-Kohlenstoffringatom; Beispiele hierfür sind Pyridin, Pyrrol, Thiophen und Furan. Aryl bzw. ara bedeutet vorzugsweise phenyl, aralkyl bedeute« vorzugsweise phenyl-C)-C_e-alkyl. Die vorliegende Erfindung betrifft außerdem pharmazeutische Mittel, welche eine Antitumorverbindung der allgemeinen Formel IV sowie einen pharmazeutisch verträglichen, nichttoxischen Träger umfassen. Die vorliegende Erfindung betrifft außerdem ein Verfahren zivTumorinhibition bei Säugetieren, einschließlich des Menschen,

welches die Verabreichung einer wirksamen Menge einer Antitumorvarbindung der ι !!gemeinen Formel IV an denlumorerkrankten Säuger umfaßt.

Das Ausyangsprodukt für die erfindungsgemäßen Verbindungen, das Orthochinon III, kann durc*i Umsetzung eines

4'-Dimethylepipodophyllotoxin-ß-D-glii'-osid-Derivates I mit einem Oxidationsmittel hergebe Ti werden. Dieses Verfahren ist inder üben erwähnten US-PS 4609644 beschrieben.

Erfindungsgemäß werden Verbindungen der allgemeinen Formel IVa hergestellt,

IVa

worin A, Y und R¹ der nben angegebenen Definition entsprechen.

In einer bevorzugten Ausführungsform werden Verbindungen der allgemeinen Formel IVa hergestellt, worin R¹ einen Ci-10-Alkyl-, Phenyl-, Phenyl-Ct-to-alkyl- oder enisn ringsubstituierten Phenyl-C_t-i₀-alkylrest bedeutet. Die 3'-Oximether der allgemeinen Formel IVa können dadurch erhalten weiden, daß die entsprechenden ortho-Chinone der

allgemeinen Formel III mit einem U-substituierten Hydroxylamin oder einem Säureadditionssalz hiervon in einem geeignetenorganischen Lösungsmittel, wie z. B. Pyridin, umgesetzt werden. Die Reaktion wird vorzugsweise bei Zimmertemperatur undeinerGesarntdauervon etwa 3Or ήη bis etwa 1h durchgeführt, einem Zeitraum, derausreicht, um den Monooximether zu bilden.

Die hierbei gebildeten Produkte können isoliert und z. B. durch Fl&^hchromatographie gereinigt werden. Als Alternative hierzu

können diese ohne vorherige Isolierung direkt zu den entsprechenden Aminen der allgemeinen Fon~n4l V reduziert werden

Erflndungigemflß werden Verbindungen der allgemeinen Formel V hergestellt,

Va

B, Methyl

worin A und Y der oben angegebenen Definition entsprochen.

Amine der allg'.melnen Formel V kennen durch Reduktion der Oxlne der allgemeinen Formel IVa hergestellt werden; und wie oben bereits erwähnt, kann hierzu entweder eine gereinigte Verbindung der allgemeinen Formel IVa oder das entsprechende Rohprodukt verwendest werden. Die Reduktion der Tximether kann unter konventionellen Bedingungen z. B. mit einem milden chemischen Reduktionsmittel oder durch Hydrierung In Gegenwart eines geeigneten Katalysators, wiu Pt, Pd, Ni, Ru oder Rh, erfolgen. Vorzugsw >se wird eine katalytisch Hydrierung durchgeführt. Aminverbindungen der allgemeinen Formol V können außerdem direkt aus den ortho-Chinonen III durch Umsetzung mit Ammoniak oder einem Alkylamin bei Raumtemperatur hergestellt werden; eine Umsetzung mit teuerem führt sowohl zu Aminen der allgemeinen Formel V als auch zu den entsprechenden alkylsubsti uierten Ammer. Die bevorzugte Ausfuhrungsform ist die Reduktion des Oximethers der allgemeinen Formel IVa.

Die Aminoverbindungen der alicemeinen Formel V können mit unterschiedlichen Reagenzien zu Verbindungen der allgemeinen Fcnel IVb (R² bedeutet eine Methylgruppe und R⁴ und R^s können nicht gleichzeitig ein Wasseretoffatom bedeuten) umgesetzt werden. Die Reaktionen werden allgemein in einem inerten, organischen Lösungsmittel, wie z.B. Tetrahydrofuran, Dichlormethan oder chloroform, sowie unter den für das jeweilige Produkt geeigneten Bedingungen durchgeführt. Die Produkte können mit Hilfe herkömmlicher Methoden, wie Umkristallisation sowie verschiedenen chromaicgraphiscneii Techniken Isoliert und gereinigt werden

Somit betrifft die vorliegende Erfindung außerdem Verbindungen der allgemeinen Formel Vl,

nrV

worin A, Y und R³ der oben angegebenen Definition entsprechen; R⁴ ein Wasserstoffatom bedeutet und R⁵ einen Sulfonyl-,

~£^H~' ~»^R "' ~£^0R ~ oder -CNHR _; .Restbedeutet,worinR¹⁰einen(WAlkylwstbedeutet, OOO Ö

welcher unsubstituiert oder mit ein ;m oder mehreren Z substituiert ist, oder einen

Ara(C₁.₁₀)alkyl-_f-p_H-I^^H2⁾n oder -QH-Nj) " ^Rest

^^2n oder -QH-Nj) ¹² C)V³ R¹² J

bedeutet, worin n, R¹² und R¹³ den oben angegebenen Definitionen entsprechen.

Eine bevorzugte Ausführungsform betrifft Verbindungen der allgemeinen Formel Vl, worin R³ ein Wasserstoffatom bedeutet. Verschiedene Acylverbindungen der allgemeinen Formel Vl können mit Hilfe von Standardmethoden hergestellt werden. Beispielsweise können Amidderivate durch Acylierung der 3'-Aminogruppe der Verbindung V durch Umsetzung mit einer Carbonsäure, vorzugsweise in Gegenwart von kondensierenden Verbindungen, wie Dicyciohexyicarbodiimid (DCC), umgesetzt werden. Weiterhin ist eine Umsetzung mit einem Säurehaiogenid, mit einem symmetrischen oder unsymmetrischen Anhydrid, einem reaktiven Ester oder einem Amid möglich. Ähnlich wie die Amide, können auch Sulfonamide durch Umsetzung einer Verbindung der allgemeinen Formel V mit einem Sulfonsäurederivat, wie z. B. einem Sulfonylhatogenid, hergestellt werden. Die Herstellung von Amiddei Vaten unter Verwendung eines Säurehalogenids oder eines Anhydrids sowie dio Herstellung von Sulfonamidderivaten wird vorzugsweise unterhalb Zimmertemperatur in einem Bereich von etwa -20°C bis etwa +5⁰C durchgeführt. In Verbindungen der allgemeinen Formel V kann durch Behandlung mit Chlorformiaten oder Kohlensäureestern die 3'-Aminogruppe in einen Carbamatrest überführt werden. Durch Umsetzung mit substituierten Isocyanaten können die entsprechenden Harnstoffderivate hergestellt werden. In den vorangegangenen Beispielen ist es oft dann von Vorteil, eine Aminbase dem Reaktionsgemisoh zuzugeben, wenn eine starke Säure als Reaktionsnebenprodukt erwartet wird; geeignete Aminbasen sind z. B. Pyridin, Triethylamin, Diisopropylethylamin und Dimeihylaminopyrldin. Wenn eine Maskierung der 4'-Hydroxygruppe der Verbindungen mit der allgemeinen Formel Vl gewünscht wird, kann unter einer Reihe von Phenolschutzgruppen ausgewählt werden, z. B. einer Benzyl- oder einer Acylgruppe, oder einem Acetal. Die Auswahl des jeweiligen Reagens, die Einfügung sowie die Entfernung der Schutzgruppe werden in allgemeinen Lehrbüchern, z. B. Theodore Greene's „Protective Groups in Organic Synthesis" (John Wiley and Sons, 1981), diskutiert. Im allgemeinen ist das Verfahren zum Schutz von Phenolgruppen auf alle Verbindungen der allgemeinen Formel IVb anwendbar. Aminaiverbindungen der Formel Vl, worin R⁵ einen

-CH-

oder

-CH-N j)

-Rest bedeutet, können durch Umsetzung des Amids der

¹³

allgemeinen Formel V mit einem cyclischen Imid in Gegenwart von mindestens einem Äquivalent eines Aldehyds hergestelltwerden.

Gegenstand der vorliegenden Erfindung sind weiterhin Verbindungen der allgemeinen Formel Vl,

Vl

worin A, Y und R³ der oben angegebenen Definition entsprechen, R* und R⁶ jeweils unabhängig voneinandär ein Wasserstoffatom oder eine C_t-io-Alkylgruppe bedeuten, wobei R⁴ und R⁶ nicht gleichzeitig ein Wasserstoffatom sind. Eine bevorzugte Ausführungsform stellen Verbindungen der allgemeinen Formel Vl dar, worin R³ und R⁴ jeweils Wasserstoff bedeuten.

N-Alky llerte Derivate der allgemeinen Formel Vl können auf verschiedenen Wegen hergestellt werden. Das Amin V kann z. B. mit einem Alkylhalogenid direkt alkyliert werden, wobei mono- oder disubstituierte Derivate entstehen. Wie oben bereits erwähnt, kann auch das Chinon III mit einem Alkylamin umgesetzt werden, wobei man das Alkylderivat zusätzlich zum Amin V erhält. Die Reduktion von Amiden, Iminoderivaten und Amlnalen unter Verwendung von chemischen Reduktionsmitteln oder durch katalytische Hydrierung kann ebenso zur Herstellung monoalkylierter Derivate von V verwendet werden. Gegebenenfalls kann ein weiterer Alkylierungsschritt mit der gleichen oder einer anderen Ail.ylgruppe erfolgen. Diese Methoden sind aus dem Stand der Technik bekannt und von einem Fachmann auf dem uebiet der organischen Synthese ohne Schwierigkeiten durchzuführen. Gegenstand der Erfindung sind außerdem Verbindungen der allgemeinen Formel VII ₍

VII

N-CHR

worin A, Y, R³ und R⁴ der oben angegebenen Definition entsprechen.

Eine bevorzugte Ausführungsform beschreibt Verbindungen der allgemeinen Formel VII, worin R⁶ einen Aryl-, substituierten Aryl-, Heteroaryl- oder substituierten Heteroarylrest bedeutet. Iminoverbindungen der al.gemeinen Formel VII können durch Umsetzung von Verbindungen der allgemeinen Formel V mit

einem Aldehyd bei Raumtemperatur und vorzugsweise in Gegenwart eines Säurekatalysators, wie z. B. p-Toluolsulfonsäure,sowie vorzugsweise unter Verwendung einer Methode zur Wasserabtrennung hergestellt werden. Geeignete Verfahrenbeinhalten deshalb eine Verwendung von dehydratisierenden Zusätzen, wie z. B. von Molekularsieben, oder eine azeotrope

Destillation. Verbindungen der allgemeinen Formel VII sind häufig labil und werden vorzugsweise durch Chromatographie über

neutralem Aluminiumoxid isoliert.

Gegenstand der vorliegenden Erfindung sind weiterhin Verbindungen der allgemeinen Formeln VIII und IX, welche durch Umsetzung von Aminen der allgemeinen Formel V mit einem Trialkylorthoester in Gegenwart eines Säurekatalysators bzw.

duich Umsetzung mit einem Amidacetal erhalten werden können. Eine bevorzugte Ausführungsform beinhaltet Verbindungender allgemeinen Formel Viii, worin R¹⁴ ein Wasserstoffatom bedeutet sowie Verbindungen der allgemeinen Formel IX, worin R⁷und R⁸ jeweils eine C^-Alkylgruppe bedeuten.

VIII worin A, Y, R³, R⁷, R⁸ und R¹⁴ jeweils der oben angegebenen Definition entsprechen.

Gegenstand der vorliegenden Erfindung sind außerdem Verbindungen der allgemeinen Formeln Xa und Xb

worin A, Y und X^- jeweils der oben angegebenen Definition entsprechen und R³ eine Phenolschutzgruppe darstellt. Verbindungen der allgemeinen Hormel V können in einem inerten organischen Lösungsmittel bei verminderter Temperatur unter Bildung eines stabilen inneren Diazoniumhydroxidsalzes Xa diazotiert werden, gefolgt von einer wäßrigen Aufarbeitung. Ein Diazoniumsalz Xb mit einem Gegenion kann dadurch hergestellt v/erden, daß vor dem Diazotierungsschrltt die 4'-Hydroxygruppe z.B. durch Einführung einer konventionellen Phenolschutzgruppe, derivatiniert wird. Weitere Gagenstände der vorliegenden Erfindung sind 3'-Azido- und 3'-Nitroderivate der allgemeinen Formeln Xl und XIL

XII

worin A, Y und R³ jeweils der oben angegebenen Definition entsprechen.

Die Azidoverbindung v/ird durch Substitution der Diazoniumgruppe mit einem Azidrest hergestellt. Die 3'-Nitrcvirbindung

erhält man durch Oxidation einer Verbindung der allgemeinen Formel V mit einer Persäure.

Gegenstand der vorliegenden Erfindung sind außerdem Verbindungen der allgemeinen Formel XIII, welche aus einer

phenolgeschütztoi. Uiazoniumverbindung der allgemeinen Formel X b durch Umsetzung mit einem Amin erhalten werden; eineanschließende entfernung der Schutzgruppe führt zur entsprechenden 4'-Hydroxy-3'-triazenverbindung.

XIII

N=N-NHR'

worin A, Y, R³ und R⁹ jeweils der oben angegebenen Csfinltion entsprechen.

Gegenstand der vorliegenden Erfindung sind außerdem Verbindungen der allgemeinen Formeln XIV und XV.

OH

XXV

XV

worin R¹¹ eine Acylgruppe bedeutet und A und Y jowells der oben angegebenen Definition entsprechen. Eine bevorzugte Ausführungsform stellen Verbindungen der allgemeinen Formeln XIV und XV dar, worin R¹¹ ein Wasserstoffatom, einen Formyl-, substituierten oder unsubstituierten Alkanoyl-, substituierten oder unsubstituierten Alkoxycarbonyl- oder einen substituierten oder unsubstituierten (Ära) alkylaminocarbonylrest bedeutet. Verbindungen der allgemeinen Formel XIV können durch Oxidation von Verbindungen der allgemeinen Formel Vl hergestellt werden, worin R³ und R⁴ jeweils ein Wasserstoffatom und R⁶ eine Acylgruppe bedeuten. Oxidierende Verbindungen, wie NalO4/CH₃CN/H₂O, NaNO₂/AcOH/THF, sowie andero herkömmliche Oxidationsmittel können hierzu verwendet werden. Verbindung ·· ι der allgomoinen Formel XIV können durch Reduktion mit einem geeigneten Reduktionsmittel, wie z. B. Natriummetabisulfit, oder durch katalytische Hydrierung direkt in die entsprechenden Hydrochinone XV überführt werden. Die vorliegende Erfindung betrifft weiterhin Verbindungen der allgemeinen Formeln XVhXIX, welche durch die im Schema gezeigte Reaktionssequenz hergestellt werden können. Die Acylgruppe des Hydrochinons der allgemeinen XV kann hierzu unter Verwendung herkömmlicher Methoden entfernt werden, wobei das 3',4'-Dihydroxy-5'-aminoderivat der allgemeinen Formel XVl entsteht; wenn z. B. R⁵ eine Trichlorethoxycarbonylgruppe darstellt, kann diese z. B. in Gegenwart von Zink und Essigsäure entfernt werden. Verbindungen der allgemeinen Formel XVI können dann in die entsprechenden 3', 4'-Dihydroxy-5'-azido-Derivate der allgemeinen Formel XVIII durch folgendes allgemeines Verfahren hergestellt werden. Rückflußkochen des Azidderivates in einem chlorierten Kohlenwasserstoff führt zum korrespondierenden 3'-Aminoorthochinon der allgemeinen Formel XIX. Ein Verfahren zur Umwandlung eines azidosubstituierten Benzohydrochinons in ein aminosubstituiertes Benzochinon ist in H.W.Moore und H.R.Shelden, „J. Org. Chem.", 1968,33:4019-24, beschrieLen.

XIX

XVIII

worin A und Y jeweils der oben angegebenen Definition entsprechen.

Repräsentative Verbindungen der vorliegenden Erfindung wurden in einem in vitro Cytotoxizitätstest gegen Human- und Mäusetumorzellinien auf ihre Antitumoraktivität getestet. Außerdem wurden in vivo-Experimente gegen transplantierbare Mäuse-P388-Leukämie durchgeführt.

P388-Leukämie

Weiblichen CDF_rMäusen wurde intraperitoneal ein Tumorinokulum mit 10* P388-Mäuseleukämie-Asciteszellen implantiert. Anschließend wurden sie mit unterschiedlichen Dosen einer Testverbindung behandelt. An jeweils vier Mäusen wurde eine

bestimmte Dusis getestet und zehn Mäuse wurden zur Kontrolle mit Saline behandelt. Die Verbindungen wurden am Tag S und8 durch intraperitoneale Injektion verabreicht (Tag 1 entspricht dem Tag der Tumorimplantation). Die Antitumoraktivität wurde

in %T/C-Werten berechnet; diese entsprechen dem Verhältnis der mittleren Überlebenszeit (MST, median survival time) der mitder Testsubstanz behandelten Gruppe zur MST der salinebehandelten Kontrollgruppe. Eine Verbindung mit einem % T/C-Wertgrößer als 125 wurde allgemein als signifikant antitumoraktiv im P388-Test eingestuft. Am Ende der Versuchsdauer von 31 Tagenwurde die Anzahl überlebender Mäuse notiert. Tabelle I beinhaltet die Ergebnisse der oben beschriebenen Bestimmung; hierinwurden jeweils nur die maximalen % T/C-Werte und diejenigen Dosen aufgeführt, weiche einen maximalen Effekt zeigten.

Tabelle I Antitumoraktivltät gegen Mäuse-Pj88-Leukamie

Verbindung	Dosis	MaxflT/C»
aus Beispiel	(mg/kg/in])·	200(444)
1	100	242
2	50	228(444)
3	60	170(275)
4	140(80)	135(275)
7	70(80)	110(275)
10	2:160 (80)	110(280)
11	a 160(60)	150(280)
12	140(60)	230(275)
13	> 200 (80)	195(280)
17	£140(60)	200(280)
13	2120(60)	230(280)
11	2:200(60)	175(275)
20	70-140(80)	225(280)
2i	> 200 (60)	235(275)
22	> 200 (80)	>140(>140)
24	140(25)	240(275)
25	> 200 (80)	165(280)
27	2120(60)	125 (> 140)
28	160(25)	135(275)
29	2 200(80)

* Die Zahlenangaben in Klammern entsprechen den Werten für Etoposid, welches als positive Kontrolle im gleichen Experiment eingesetzt wurde.

Der in vitro Cytotoxizitätstest beinhaltet die Züchtung verschiedener Säugertumorzellen, einschließlich menschlicher Tumorzellen, auf Mikrotiterplatten unterVerwendung konventionellerZellkulturtechniken. Die für jede Verbindung erforderliche Konzentration, welche eine 50%ige Inhibition (IC_n) des Zellwachstums bewirkt, wurde mit Hilfe der vierfachen Reihenverdünnungsmethode bestimmt. Die Relevanz dieser Methode wird durch einen Bericht in „Proceedings of the American Association for Cancer Research", 1984,25:1891 (Abst. No.328) bekräftigt. An folgenden Tumorzelltypen wurae jede Substanz getestet:B16-F10 Mäusemelanom; Moser menschlicher Dickdarm; SW900 menschliche Lunge; sowie drei menschliche Dickdarmtumorzellinien, nämlich HCT-116, HCT-VM und HCT-VP, wobei die beiden letzten resistant gegen Teniposid (VM) bzw. Etoposid (VP) sind. IC₆₀-WeIIe geringer als 500ug/ml gelten als positiver Indikator für Antitumoraktivität. Tabelle Il zeigt IC₆₀-WeHe für verschiedene Verbindungen der vorliegenden Erfindung bei Versuchen mit oben genannten Zellinien.

Tabellen In vitro Cytotoxizitatstest ICw-Werte (Mg/ml)"

B-16-F10

HCT-116

HCT/VM34

HCT/VP35

MOSER

SW900

Beispiel 4 Beispiel 7 Beispiel 10 Beispiel 11 Beispiel 12 Beispiel 13 Beispiel 17 Beispiel 18

13,9 17,9	16,2 15,7	co co CM CO	40 47	56 49	63 63
54 63	60 63	63 65	O CO O) CO	>188 82	78 >188
57 87	71 78	81 100	CM CO O) O	121 >250	116 >250
44 40	58 98	24 26	30 31	89 93	74 84
61 54	54 62	59 >188	88 132	90	>188 >188
5,5 8,7	3,6 4,1	IV CO cm" ei	3,4 3,3	12,3 12,1	11.0 8,6
6,7 8,4	12,3 10,1	23 24	31 44	45 45	22 44
12,5 15,3	29 18,4	37 >125	55 >125	40 37 v	40

Tabelle II Fortsetzung: B-16-F10 HCT-116 HCT/VM34 HCT/VP35 MOSER SW900

Beispiel 19	16,9	Beispiel 20	13,3	Beispiel 21	5,3	Beispiel 22	10,9	Beispiel 24	41	Beispiel 25	29	Beispiel 27	5,3	Beispiel 26	72	Beispiel 29	39	13,9	21	71	38	42
16,4	19,8	4,3	14,1	60	25	4,3	81	38	12,7	19,3	>188	32	28
9,6	92	35	74	>188
5,6	>188	61	>188	78
10,0	14	26	25	76
39	10,6	15,6	27	33
17,0	21	36	>250	>250
13,3	16,2	43	>250	>250
43	56	>188	92	66
53	82	92	84	90
24	38	78	>250	76
38	43	102	120	>250
10,0	14	26	25	76
39	10,6	15,6	27	33
66	58	84	87	80
68	64	70	71	>188
53	55	77	71	>188
46	53	70	77	>188

* Die Werte für Eloposid im gleichen Ansatz (außer Beispiele 24 und 28) sind 2,7,1,9 (B16-F10); 2,1,2,7 (HCT-116); 6.1,3,1 (HCT-VM 34); 30,41

(HCT/VP35); 38,39 (MOSER) und 67,12,5 (SW900)

1 D[eWertef0rEtopostdimgleichenAnsatzs!nd7,0,4,e|B16-F10);9,6,10,2(HCT-1ie);31,33(HCT/VM34);92,51(HCT/VP35); 128,112(MOSER)und 25,65(SWSOO).

Den oben gezeigten Ergebnissen der Tierversuche ist zu entnehmen, daß Verbindungen der allgemeinen Formel IV eine inhibitorische Wirkung gegen Säugertumorzellen aufweisen. Die Erfindung betrifft folglich auch eine Methode zur Inhibierung von Säugertumoren, welche die Verabreichung einer wirksamen tumorinhibierenden Menge eines Antitumormittels der allgemeinen Formel IV an dem jeweiligen Tumorträger umfaßt.

Gegenstand der vorliegenden Erfindung sind außerdem pharmazeutische Mittel, welche eine wirksame tumorinhibierende Menge eines Antitumormittels der allgemeinen Formel IV sowie einen pharmazeutisch verträglichen Träger umfassen. Diese Mittel können in unterschiedlicher pharmazeutischer Form verabreicht werden. Beispiele fürsolche Mittel beinhalten feste Mittel zur oralen Verabreichung, wie z. B. Tabletten, Kapseln, Pillen, Pulver und Granulate, flüssige Mittel zur oralen Verabreichung, wie Lösungen, Suspensionen, Sirups oder Elixiere und Präparate zur parenteralen Verabreichung, wie sterile Lösungen, Suspensionen oder Emulsionen. Diese Mif el können auch in Form steriler Feststoffe vorliegen, welche unmittelbar vor dem Gebrauch in sterilem Wasser, physiologischer Saline oder in irgendeinem anderen sterilen injizierbaren Medium gelöst werden. Optimale Dosierungen und Bedingungen für das jeweilige Säugetier können von einem Fachmann rasch bestimmt werden. Hierbei ist natürlich zu berücksichtigen, daß die aktuelle Dosis je nach Formulierung des Mittels, je nach verwendeter Verbindung, sowie in Abhängigkeit von der Applikationstechnik und dem jeweiligen Situs, sowie je nach Patient und der behandelten Erkrankung variiert. Hierzu ist eine ganze Reihe von Faktoren, welche die Wirkung des Mittels beeinflussen, zu berücksichtigen. Diese beinhalten: Alter, Gewicht, Geschlecht, Ernährung, Zeitpunkt der Verabreichung, Form der Verabreichung, Ausscheidungsrate, Zustand des Patienten, Medikamentenkombinationen, Reaktionsempfindlichkeit und Stärke der Erkrankung.

Die folgenden Beispiele dienen lediglich der Veranschaulichung und sind als nicht limitierende Beispiele für die vorliegende Erfindung gedacht.

In den folgenden Beispielen erfolgen sämtliche Temperaturangaben in ⁰C. Schmelzpunkte sind unkorrigiert und wurden in einer Thomas-Hoover-Kapillarschmelzpunkt-Apparatur bestimmt.'H-NMR-Spektren wurden entweder auf einem Bruker WM 360- oder einem Varian VX2 200-Spektrophotometer (unter Verwendung von CDCI₃ als interner Standard) aufgenommen. Chemische Verschiebungen sind in δ-Einheiten und Kopplungskonstanten in Hertz angegeben. Die Signalaufspaltung wird wie folgt angegeben: s, Singulett; d, Dublett; t, Triplett; q, Quartett; m, Multiple«; bp, breiter Peak; und dd, Dublett eines Dubletts. Infrarotspektren wurden entweder auf einem Beckman Modell 4240 oder einem Perkin-Elmer 1800 Fourier Transform )r .'rarotspektrometer aufgenommen und sind in reziproken Zentimetern (cm*') angegeben. Dünnschichtchromatographie (TLC) wurde auf vorbeschichteten Silikagelplatten (60F-254) durchgeführt und mit Hilfe von UV-Licht und/oder Joddämpfen sichtbar Ijemacht. Massenspektren hoher und niedriger Auflösung wurden auf einem KRATOS MS 50- bzw. KRATOS MS 25RFA-üpektrophotometer aufgenommen. „Flashchromatographie" bezieht sich auf das Verfahren von Still (W. C. Still et al. .J. Org. Jhem.", 1978,43:2923) und wurde entweder unter Verwendung von E.Merck-Silikagel (200-400 mesh) oder von Woelm-Silikagel (32-63Mm) durchgeführt. Lösungsmittel wurden unter reduziertem Druck abgedampft.

Beispiel 1

Etoposld-ortho-chinon-S'-O-methyloxlm

(IVa; A = R¹ »Methyl; Y - H)

Eine Lösung von Etoposld-ortho-chlnon III a (350mg, 0,611 mMol) In Pyrldln (20ml) wird mit einer Lösung von Methoxylaminhydrochlorid (350mg, 4,19mMol) in Pyridin (10ml) behandelt. Die resultierende orange Lösung wird 30min lang bei Raumtemperatur gerührt und das Pyridin im Vakuum entfernt. Der Rückstand wird in CHaCI₂ (50 ml) gelöst und mit Wasser (20 ml) und 1N HCI (10 ml) partitioniert. Die wäßrige Phase wird nochmals mit CH₂CI₂ (25ml) extrahiert und die vereinigten organischen Extrakte werden über MgSO₄ getrocknet. Das Lösungsmittel wird im Vakuum abgedampft, wobei ein dunkeloranges Ol entsteht.

Flashchromatographie über Silikag?! (14g) mit 5% CH₃OH In CH₂CI₂ ergibt 243mg (66%) der Titelverbindung als orangen Feststoff. Verreiben mit Et₂O liefert die analytische Probe. Für große Ansätze wurde dieses Oxim im allgemeinen nicht gereinigt, sondern direkt zum AmIn Va mit einer Ausbeute ^ on etwa >/>'« hydrogeniert.

IR (KBr) 3480,1775,1670,1625,1488,1237,1040Cm"¹.

¹HNMR (CDCI₃) δ 6,82 (s, 1 H), 6,56 (s, 1 H), 6,48 (d, 1 H), 6,07 (d, 1 H), 6,01 (d, 1 H), 5,75 (d, 1 H), 4,92 (d, 1 H), 4,76 (q, 1 H), 4,66 (d, 1 H), 4,50 (dd, 1 H), 4,38 (dd, 1 K), m,27 (d, 1 H), 4,22-4,17 (m, 1 H), 4,15 (s, 3 H), 3,79 (s, 3 H), 3,78-3,74 (m, 1 H), 3,63-3,58 (m, 1 H), 3,44 (dd, 1 H), 3,38-3,30 (m, 3H) l',95 -2,87 (m, 1 H), 1.40 (d, 3H),

Analyse für C29H31NO13:	h	N
C	5,19	2,33
ber.: 57,90	5,04	2,41
gef.: 56.01

Beispiel 2

Etoposid-ortho-chinon-S'-O-benzyloxim

(IVa; A = Methyl; Y = H; R¹ = Benzyl)

Hierzu wird die allgemeine Methode von Beispiel 1 angewendet, wobei O-Benzylhydroxylamin-hydrochlorid anstelle von Methyloxylamin-hydrochlorid unter Bildung der Titelverbindung eingesetzt wird.

Beispiel 3

3'-Amino-3'-desmethoxy-etoposid (V a)

Das ungereinigte Oxim, welches aus Etoposid-ortho-chinon (lila) (4,1 g, 7,2mMol) und Methoxylamin-hydrochlorid (4,1 g, 49mMol) mit Hilfe des Verfahrens nach Beispiel 1 erhalten wird, wird in Alkohol (275ml) gelöst und mit 20% Palladiumhydroxid auf Kohle (290mg) und 10% Palladium auf Kohle (1,6g) behandelt. Das Gemisch wird bei 40-50psi H₂ hydroyaniert. Nach 16h wird das Gemisch über Celite filtriert, mit Ethylacetat gewaschen und das Lösungsmittel abgedampft. Das Rohprodukt wird durch Flashchromatographie auf 300g E. Merck 230-400mesh Silikagel unter Verwen Jung von 8:2 EtOAc/Hexan als Elutionsmittel gereinigt, wobei 2,89g (insgesamt 70%) der Titelverbindung als weißer feststoff erhalten werden. Die analytische Probe wird in Ethanol umkristallisiert.

IR (KBr) 3455,1775,1615,1490,1235,1070,1030,1000,930cm"¹.

¹H NMR (CDCI₃) δ 6,76 (s, 1 H), 6,48 (s, 1 H), 6,37 (d, 1 H), 5,96 (ABq, 2 H), 5,65 (d, 1 H), 4,87 (d, 1 ri), 4,73 (q, 1 H), 4,61 (d, 1 H), 4,47 (d, 1 H), 4,38 (dd, 1 H), 4,23-4,16 (m, 2 H), 3,78 (s, 3 H), 3,76-3,72 (m, 1 H), 3,60-3,55 (m, 1 H), 3,42 (dd, 1 H), 3,37-3,30 (m, 2 H), 3,21 (dd, 1 H), 2,97-2,88 (m, 1 H), 1,37 (d, 3H).

Analyse für C28H31NO)2:	H	N
C	b.45	2,44
ber.: 58,63	5,76	2,35
gef.: 57,85

Beispiel 4

3'-Desmf hoxy-3'-methylamin-etoposid

(Vi; A = R⁵= Mothyl; Y = R³ = R⁴ = H)

Eine Lösung von 40% wäßrigem Methylamin (1 ml, 12,8OmMoI) in MeOH (4ml) wird innerhalb von 3min zu einer Lösung von Etoposid-ortho-chinon (lila) (0,25 g, 0,437 mMol) in MeOH (50ml) zugegeben und bei Raumtemperatur gerührt. Die dunkelrote Lösung wird dabei dunkelbraun. Nach 30min wird die Lösung konzentriert und durch präparative Chromatographie auf Silikagel unter Verwendung von 5% MeOH in CH₂CI₂ als Elutionsmittel gereinigt. Die Isolierung der beiden intensivsten UV-aktiven Banden ergibt die beiden Hauptprodukte des komplexen Gemisches. Die obere isolierte Bande ergibt die Titelverbindung (45mg; 18%) als weißlichen Feststoff.

¹H NMR (CDCI₃) δ 6,82 (s, 1 H), 6,38 (s, 1 H), 6,16 (s, 1 H), 5,94 (m, 2H), 5,85 (s, 1 H), 4,95 (d, J = 3,2Hz, 1 H), 4,75 (m, 1 H), 4,70-4,32 (m, 3 H), 4,21 (m, 2 H), 4,78 (s, 3 H), 4,75-2,85 (m, 7 H), 2,V 2 (s, 3 H), 1,40 (d, J = 5,0 Hz, 1 H).

Die untere isolierte .Bande (51 mg; 20%) ergibt die Verbi idung aus Beispiel 3.

Beispiel 5

3'-Butylamino-3'-desmethoxy-etoposid

(Vl; A - Methyl; Y = R³ - R⁴ - H; R⁶ = Butyl)

Die allgemeine Versuchsvorschrift von Beispiel 4 wird wiederholt, wsbei n-Butylamin verwendet wird und die Titelverbindung sowie die Verbindung aus Beispiel 3 entsteht.

MS(EI)M/e⁺ = 630(m + 1)⁺

Partielles 'H-Spektrum (CDCI₃): δ 6,80 (s, 1 H), 6,54 (s, 1 H), 6,14 (bs, 1 H), 5,94 (d, 2H). 5,78 (bs, 1 H), 3,75 (s, 3H), 1,36 (d, 3H), 0,89

Beispiele

3'-Desmethoxy-3'-formylamino-etoposid

(Vl; A = Methyl; R³ - R⁴ Y » H; R⁸ = Formyl)

Eine Lösung eines gemischten Anhydride von Essigsäure und Ameisensäure wird durch Zugabe von Ameisensäure (98%,

0,60ml, 16 mMol)2U Essigsäureanhydrid (1,23 ml, 13mMol) und gleichzeitigem Rühren bei Raumtemperatur und unter Stickstoffhergestellt. Die Lösung wird 1,6h lang bei 65⁰C gehalten und anschließend auf Raumtemperatur abgekühlt. Ein Teil dieses

Reagens (0,45ml) wird anschließend zu einer Lösung von 3'-Am!no-etoposid (Va) (0,26g, 0,454 mMol) in trockenem THF (4ml)

tropfenweise hinzugegeben, wobei bei 2⁰C und unter Stickstoff gerührt wird. Das Reaktionsgemisch wird 2 h lang bei 2'Cweitergerührt und innerhalb 1 h auf 10°C aufgewärmt. Das Reaktionsgemisch wird in Wasser (50ml) gegeben und mit 60ml

CH₂CI₂, gefolgt von 30 ml EtOAc extrahiert. Die vereinigten organischen Extrakte werden Im Vakuum getrocknet. Flashchromatographie auf Silikagel unter Verwendung von 3% und anschließend 4% MeOH in CH₂CI₂ als Elutionsmittel und Isolierung der Verbindung mit einem TLC-R_f-Wert etwas niedriger als der R_f-Wert des Aminausgangsproduktes in 10% MeOH in CH₂CI₂ ergibt 0,213g (78%) eines schwach pinkfarbenen Feststoffes; Fp = 216-22O⁰C.

IR (KBr) 3430 (b), 2940,1780,1690cm"¹.

¹H NMR (CDCI₃) δ 8,46 (bs, 1 H), 8,45,8,19 (Slngulett-Paar, 1H, Formyl H), 7,80 (bm, 2H), 6,95,6,85,6,71,6,58,6,53,6,15,(Singuletts, total integ. 4 H), 5,98 (bs, 1 H), 5,05 Im, 1 H), 4,78 (d, J = 4,9 Hz, 1 H), 4,69-4,40 (m, 3 H), 4,38-4,10 (m, 2 H), 3,86,3,83(s, 1 H), 3.80-3,51 (m, 2H), 3,60-3,30 (m, 4H), 3,02 (bm, 1 H), 1,39 (d, J = 4,9H, 3H).

FAB MS m/e (relative Intensität) 602 (MH⁺). Beispiel 7 S'-Acetylamino-S'-desmethoxy-etoposid

(Vl; A = Methyl; Y = ?.^? = R⁴ = H; R⁶ = Acetyl)

Essigsäureanhydrid (0,065ml, 0,69 mMol) wird tropfenweise zu einer Lösung von3'-Amino-etoposid (Va) (0,420^. 0',7OmMoI) in MmI trockenem CH₂CI₂ hinzugegeben, wobei bei 2⁰C unter Stickstoff gerührt wird. Das Reaktionsgemisch wird 5,. S lang bei 2⁰C

gerührt und anschließend mit weiteren 0,01 ml (0,11 mMol) Essigsäureanhydrid versetzt. Das Reaktionsgemisch wii 11 h lang bei2⁰C gerührt und anschließend in eine Lösung von 25ml H₂O und 25ml gesättigten wäßrigen NaHCO₃ überführt. Das Gemischwird dreimal mit 50ml CH₂CI₂ extrahiert, die vereinigten organischen Phasen werden mit gesättigter wäßriger NaCI gewaschenund über wasserfreiem MgSO₄ getrocknet. Aufkonzentrieren und Flashchromatographie auf Silikagel unter Verwendung von3% und anschließend 4% MeOH in CH₂CI₂ als Elutionsmittol ergeben 19,3mg eines nicht-identifizierten Nebenproduktes (TLC

R_F = 0,17; 5% MeOH in CH₂CI₂) und 0,328g (73%) der Titelverbindung als weißliches Pulver: TLC R_F = 0,14; 5% MeOH in CH₂CI₂; Fp = 225-227⁰C.

IR (KBr) 3350-3080,2960,1'770CnT¹.

¹H NMR (CDCI₃) δ 8,45 (s, 1 H), 8,23 (bs, 1 H), 6,76 (s, 1 H), 6,61 (s, 1 H), 6,49 (s, 1 H), 6,38 (s, 1 H), 5,84 (d, J = 8,6Hz, ?. H), 4,86 (d, J =3,2 Hz, 1 H), 4,63 (m, 1 H), 4,30-4,15 (m, 3 H), 4,15-4,05 (m, 2 H), 3,72 (s, 3 H), 3,6-3,4 (m, 2 H), 3,4-3,25 (m, 4 H), 2,86 (m, 1 H), 2,19(s, 3 H), 1,26 (d, J = 5,0 Hz, 3 H).

Beispiele S'-Desmethoxy-S'-trifluoracetylamino-etoposid

(Vl; A = Methyl; Y = R³ = R⁴ = H; R^s = Trifluoracetyl)

Trifluoressigsäure-anhydrid (76mg, 0,362 mMol) wird innerhall· 1 min tropfenweise zu einer Lösung von 3'-Aminoetoposid (Va)

(200 mg, 0,349 mMol) in trockenem CH₂CI₂ (10ml) und Pyridin (50μΙ) hinzugegeben, wobei bei O⁰C unter Stickstoff gerührtVvird.

Das Gemisch wird bei 0°C 30min lang und bei Raumtemperatur i h lang gerührt. Das Gemisch wird mit Phosphatpuffer pH7

(75ml) und CH₂CI₂ (75ml) partitioniert. Die organische Phase wird mit Brine (75ml) gewaschen, über Na₂SO₄ getrocknet und die

Lösung im Vakuum eingedampft. Präparative TLC auf Silikagel (5% CH₃OH in CH₂CI₂) ergibt 149,7 mg (64,1 %) der reinen Titelverbindung als weißen Feststoff; Fp = 208-212⁰C.

IR (KBr) 3420,1775,1735,1625,1510,1490,1237,1165,1082,1045,1010,940,878,702cm"¹.

¹H NMR (CDCI₃) δ 7,03 (d, 1 H), 6,99 (d, 1 H), 6,82 (s, 1 H), 6,49 (s, 1 H), 6,00 (br s, 2 H), 4,97 (d, 1 H), 4,74 (q, 1 H), 4,66 (d, 1 H), 4,57(d, 1 H), 4,42 (dd, 1 H), 4,30-4,14 (m, 2 H), 3,92 (s, 3 H), 3,75 (m, 1 H), 3,56 (m, 1 H), 3,49-3.-17 (m, 4 H), 3,09- 2,92 (m, 1 H), 1,38 (d, 3 H).

	C	H	N
ber.:	53,82	4,52	2,09
gef.:	53,62	4,44	1,96

Beispiel 9

3'-Desmethoxy-3'-[((2,2,2-trichlorethyl)-oxyl-carbonyl]-amino-etoposid

(IVb; A = Methyl; Y = R³ = R⁴ = H; R^s = 2,2,2-Trichlorethoxycarbonyl)

Trichlorethylchlorformiat (0,10ml, 0,73 mMol) wird über eine Spritze tropfenweise zu einer Lösung von 3'-Aminoetoposid (Va)

(0,4ug, 0,7OmMoI) und Pyridin (90μΙ, 1,11 mMol) in 5ml CH₂CI₂ hinzugegeben, wobei bei 2⁰C unter Stickstoff gerührt wird. Das

Reaktionsgemisch wird 5 h lang bei Temperaturen zwischen 2 und 10°C gerührt und anschließend mit weiteren 10 μΙ Trichlorethylchlorformiat versetzt. Das Reaktionsgemisch wird 15h lang bei Raumtemperatur gerührt. Das Reaktionsgemisch

wird in 50ml Wasser gegossen und dreimal mit jeweils 50 ml CH₂CI₂ extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen werden überwasserfreiem MgSO₄ getrocknet und anschließend durch Flashchromatographie auf Silikagel unter Verwendung von 3% MeOHin CH₂CI₂ als Elutionsmittel gereinigt. Eine Isolierung des weniger polaren Hauptproduktes ergibt 0,32g (62%) eines gelben

Feststoffes; Fp = Zersetzung über 220°C

IR (KBr) 3440,2910,1780 (b), 1625 1552Cm"¹.

¹HNMR (CDCI,)δ7,12 (m, 1 H),β,83 (m, 2H),6,49 (β, 1 H), 5,95 (m,2H),5,65(β, 1 H),4,94 (d, J - 3,28Hz, 1 H),4,80-4,60 (m,4H),4,54 (d, J - 5,3 Hz, 1 H), 4,38 (m, 1 H), 4,23-4,05 (m, 2 H), 3,94 (s, 3 H), 3,72 (m, 1 H), 3,52 (m, 1 H), 3,43 (m, 1 H), 3,32 (m, 2 H), 3,23 (dd, J - 14,2,5,4Hz, 1 H), 3,01 (m, 1 H), 2,68 (s, 1 H), 2,41 (s, 1 H), 1,38 (d, J - 2,4Hz,3H). MS (FAB) m/e 748 (M + H)⁺

Beispiel 10

3'-[(2-Chlorethylamlno)-carbonyl]-amlno-3'-desmethoxy-etoposid

(Vl; A = Methyl; Y = R³ = R⁴ = H; R⁶ = 2-Chlorethylaminocarbonyl)

Zu einer Lösung von 3'-Amlno-etoposld (Va) (0,40g, 0,69mMol) wird In 4ml trockenem CH₂CI₂ bei gleichzeitigem Rühren bei

2O⁰C und unter Stickstoff, 2-Chlorethylisocyanat (62 μΙ 0,76 mMol) tropfenweise über eine Spritze zugefügt. Auf die Zugabe folgtunmittelbar die Bildung eines weißen Niederschlages. Das Reaktionsgemisch wird 4 h lang bei 20°C und anschließend 15 minlang bei O⁰C gerührt. Absaugen über einen Filter und Vakuumtrocknung ergibt 0,32g (68%) eines weißlichen amorphen

Feststoffes; Fp = 195-197⁰C.

IR (KBr) 3400 (b), 2920,1770,1660cm'¹.

¹HNMR(CDCI₃/DMSO)ö8,97(bs,1H),7,87(s,1H),6,71 (s, 1H),6,54(t,J - 5,6Hz, 1H),6,33(s,1 H),6,31 (s, 1 H),6,24(s, 1 H),5,78(ABQ, Jab = 5,5 Hz, 2 H), 4,79 (d, J = 5,3 HZ, 1 H), 4,58 (m, 1 H), 4,51-4,24 (m, 4 H), 4,06-3,98 (m, 2 H), 3,61 (s, 3 H), 3,45-3,33 (m, 6 H),3,24-3,12 (m, 4 H), 2,80-2,76 (m, 1 H), 1,21 (d, J = 2,71 !*, 1 H).

MH⁺berechnet für C₃₁H₃₆O₁₃N₂CI: 678,1828

gef.: 678.1826.

Beispiel 11 S'-Desmethoxy-S'-lllphenylmethyO-aminol-charbor.yll-aminoetoposid

(Vl; A = Methyl; Y = R³ = R⁴ H; R^B = Benzylaminocarbonyl)

Triethylamin (0,25 ml), gefolgt von Benzylisocyanat (50 μΙ, 0,4OmMoI) wird langsam zu einer Lösung von 3'-Amlno-etoposid (Va)

(200mg, 0,349mMol) In 9:1 CH₂CI₂ZTHF hinzugefügt. Nach 20min wird der entstandene Niederschlag abfiltriert, mit kaltem

EtOAc gewaschen und getrocknet, wobei 150 ml (61 %) der Titelverbindung als farbloser Feststoff erhalten werden.

¹HNMR (CDCI₃) δ 7,33-7,18 (m, 6H)₁7,01 (s, 1 H), 6,55 (d, 1 H) 6,51 (s, 1 H), 6,00 (d, 2 H), 5,22 (d, 2 H), 4,92 (d, 1 H), 4,71 (q, 1 H), 4,59(d, 1H, J = 7,7 Hz), 4,49 (d, 1H, J = 5,5 Hz), 4,31-4,07 (m, 3 H), 3,67 (s, 3 H), 3,49-2,95 (m, 7 H), 1,37 (d, 3 ri).

Beispiel 12

3'-Desmethoxy-3'-methansulfonamido-etoposid

(Vl; A = Methyl; Y = R³ =R⁴ = H; R⁸ = Methansulfonyl)

Methansulfonylchlorid (31 μΙ, 0,384 mMol) wird tropfenweise zu einer Lösung von 3'-Amino-etoposid (Va) (0,22g, 0,384mMol)

und Pyridin (0,10ml, 1,24 mMol) in 9 ml trockenem CH₂CI₂ hinzugegeben, während bei -2O⁰C unter Stickstoff gerührt wird. Das

Reaktionsgemisch wird 3h lang bei -20°C gerührt und anschließend innerhalb von 1 h sowie unter Rühren auf 2O⁰C aufgewärmt. Das Reaktionsgemisch wird in 50ml Wasser gegossen und einmal mit 50 ml und zweimal mit 10ml CH₂CI₂ extrahiert. Die

vereinigten organischen Extrakte werden mit wasserfreiem MgSO₄ getrocknet und im Vakuum konzentriert.

Flashchromatographie unter Verwendung von 3% und anschließend 4% MeOH in CH₂CI₂ als Elutionsmittel ergeben 0,139g

(56%) eines weißlichen Feststoffes; Fp = 208-211⁰C (weißer Feststoff zu pinkfarbigem Schaum).

IR (KBr) 3460 (b), 2925,1779,1620,1340,1163cm"¹.

¹H NMR (CDCI3/DMSO) δ 7,04 (s, 1 H), 6,97 (s, 1 H), 6,77 (s, 1 H), 6,66 (d, J = 1,7 Hz, 1 H), 6,41 (s, 1 H), 6,37 (d, J = 1,7Hz, 1 H), 5,89(m, 2 H), 4,89 (d, J = 3,4 Hz, 1 H), 4,67 (m, 1 H), 4,66 (m, 2 H), 4,40 (m, 1 H), 4,17 (m, 2 H), 3;82 (s, 3 H), 3,66 (t, J = 8,8 Hz, 1 H). 3,39-3,28(m, 4H), 2,90 (m, 1 H), 2,85 (s, 3H), 1,32 (d, J = 5,0Hz, 3H).

FAB MS m/e (relative Intensität) 652 (MH⁺). Beispiel 13 S'-Desmethoxy-S'-KN-succinimidol-methyll-amino-otoposid

(Vl; A = Methyl; Y = R³ = R⁴ = H; R^B = (N-SuccinimidoJ-methy!)

Eine Lösung von 3'-Amino-etoposid (Va) (0,30g, 0,52mMol) und Succinimid (0,052 g, 0,52mMol) in 4 ml wasserfreiem absolutem Ethanol wird unter Stickstoff auf Rüc'/fiußtemperatur gebracht und mit 0,040ml (0,52 mMol) einer 37%igen wäßrigen Formaldehydlösung versetzt. Das Reartionsgemisch wird 4 h lang rückflußgekocht, wobei sich ein v/eißer Niederschlag bildet. Das Reaktionsgemisch wird auf O⁰C abgekühlt, über einen Filter abgesaugt und der Rückstand mit 5 ml kaltem EtOH gewaschen,

wobei 0,272 g (76%) eines weißlichen Feststoffs erhalten werden; Fp = 210-212⁰C.

IR (KBr) 3435 (b), 2920,1780,1705,1620cm"¹.

¹HNMR (CDCI3/DMSO) δ 6,81 (s, 1 H), 6,40 (s, 2 H), 5,80 (d, J = 7,9 Hz, 2 H), 5,83 (s, 1 H), 5,82 (s, 1 H), 5,04-4,97 (m, 2 H)(1 austauschbar), 4,73-4,67 (m, 3H), 4,51 (d,J = 7,0Hz, 1H), 4,38 (m, 2H), 4,14 (t, J = 8,3Hz, 2H), 3,97 (d, J = 2,9Hz, 1H), 3,75 (s,3 H), 3,61 (t, J = 2,2 Hz, 1 H), 3,53 (t, J = 9,0 Hz, 1 H), 3,36-3,25 (m, 4 H)₁2,99 (bm, 1 H), 2,51 (m, 4 H), 1,32 (d, J = 5,C Hz, 3 H).

MH⁺berechnetfürC33H_3eO,4N₂: 684.2167 gef.: 684.2151.

Beispiel 14 S'-Desmethoxy-S'-lN-ß-octylthioJ-succinimidoJ-methylamino-etoposid

(Vl; A = Methyl; Y = R³ = R⁴ = H; R⁶ = IN-ß-Octylthiol-succinimidoJ-methyl)

Formalin (26μΙ, 0,35mMol) wird zu einer Lösung von 3'-Amino-etoposid (Va₁' (0,20g, 0,35mMol) und S-Octylthiosuccinimld

(0,085g, 0,35mMol) in 6ml EtOH bei gleichzeitigem Rühren und Rückflußkochen hinzugegeben. Das Reaktionsgemisch wird 3 h

lang rückflußgekocht und dann 14h lang bei Raumtemperatur gerührt. Es werden rit ;hrpals 5mg Succinimid und 5μΙ Formalin

hinzugefügt, nochmals 1 h lang rückKußgekocht und anschließend auf Raumtemperatur abgekühlt. Ethanol wird Im Vakuumentfernt und anschließend wird eine Flashchromatographie auf Sllikagel durchfloführt, wobei 4% MeOH in CH]CIi als

Elutionsmittel verwendet werden und ein weißes pulveriges Produkt (0,111 g, 38%) entsteht. Schmelzpunkt: Eine HPLC-Analyse

ergab das Vorliegen zweier Dlasteromerer (1:1>.

IR (KBr) 3480,2962,292S, 1781,1707,1621,1520,1490cm"¹.

¹H NMR (COCI₃) δ 6,83,6,81 (s, 1 H), 6,49,6,47 (s, 1 H), 6,45 (s, 1 H), 6,95 (m, 2 H), 5,84,5,81 (s, 1 H), 6,33 (s, 1 H), 6,01 (m, 2H),4,80-4,70 (m, 2 H), 4,62 (m, 1 H), 4,45 (m, 1 H), 4,37 (m, 1 H), 4,15 (m, 2 H), 3,80 (s, 3 H), 3,68 (m, 1 H), 3,67 (m, 2 H), 3,41 (m, 1 H), 3,19(m, 2H), 3,04 (m, 1 H), 3,02 (m, 2H), 2,R2 (m, 1 H), 2,62-2,30 (m, 4H), 1,60-1,40 (m, 2H), 1,37 (d, J - 2,4Hz, 3H), 0,36 (t, J - 6,3Hz,

Beispiel 15

3'-Desmethoxy-3'-l(N-malelmido)-methyl)-amlno-etoposld

(Vl; A = Methyl; Y = R³ = R⁴ = H; R* = Malelmidometh·, I)

Die allgemeine Versuchsvorschrift von Beispiel 14 wird wiederholt, wobei 3-Octylthlosuccinimid durch MaIeImId ersetzt wird

und nach Chromatographie in 68%iger Ausbeute ein schwach gelbliches Pulver entsteht.

IR (KBr) 3440,2918,1775,1710,1616,1605,1486Cm^-1.

¹HNMR (CDCI₃) δ 6,85 (s, 1 H), 6,67 (s, 1 H), 6,56 (s, 2 H), 6,45 (s, 1 H), 6,95 (m, 2 H), 6,76 (s, 1 H), 5,31 (s, 1 H), 5,01 (d, J - 3,3 Hz, 1 H),4,91 (m, 1 H), 4,78-4,66 (m, 3 H), 4,47 (d, J = 5,3 Hz, 1 H), 4,37 (m, 1 H), 4,18 (m, 2 H), 3.82 (s, 3 H), 3,74 (ni, 1 H), 3,56 (m, 1 H), 3,43(m, 1 H), 3,22 (m, 2H), 3,20 (dd, J = 7,0,5,26Hz, 1 H), 3,05 (m, 1 H), 2,68 (s, 1 H), 2,41 (s, 1 H), 1,38 (d, J - 4,9Hz, 3H).

MS (FAB) m/θ 682 IvI⁺. Beispiel 16

3'-Desmethoxy-3'-[N-(2-pyrldyl)-'iiio]-succinlmldol-methylamlno-etopo3id

(Vl; A = Methyl; Y = R³ = R⁴ = H; R⁵ (N-(3-(2-Pyridyl)-thlo|-8ucclnlm!do]-methyl)

Die allgemeine Versuchsvorschrift von Beispiel 14 wird wiederholt, wobei 3-Octylthiosuccinimld durch 3-(2-Pyrldyl)·

thiosuccinimid ersetzt wird und sich ein chremefarbener Feststoff bildet; Schmelzpunkt: langsame Zersetzung oberhalb 185'C.

Beispiel 17

3'-Desmethoxy-3'-[(3-thienyl)-methylenJ-amino-etoposid

(VII; A = Methyl; Y = R³ = H; R^e => 3-Thienyl)

Eine Mischung aus 3'-Amlno-etoposid (Va) (222mg, 0,38* mMol), wasserfreiem MgSO₄ (2,0g), aktivierten 4A-Molekularsieben

(2,7 g) und p-Toluolsulfonstfure-monohydrat (11 mg) wirJ unter Stickstoff mit trockenem CH]CI₂ (30ml) behandelt undanschließend über eine Spritze mit 3-Thiophencarboxaldehyd (3,37 g, 30,1 mMol) versetzt. Das Gemisch wird Im Dunkeln 7 Tagelang bei Raumtemperatur gerührt, filtriert und der dabei erhaltene Feststoff mit CH₂CI₂ (10ml) und EtOAc (25ml) gewaschen. Das

Filtrat wird auf etwa 15ml konzentriert und auf eine 3-cm-Säule gefüllt mit 4-Vi"Woelm neutralem Aluminiumoxid aufgetragen Elution mit CH₂CI. (250 ml), gefolgt von 5 % CH₃OH in CH₂CI₂ ergibt 95,0mg (37 %) der Titelverbindung als gelbbraunen Feststoff; Fp = 190-195⁰C (Zersetzung).

IR (KBr) 3445,1775.. 1630,1605,1510,1495,1290,1240,1165,1085,1045,1008,940,875,805,700cm¹.

¹H NMR (CDCI₃) δ 8,45 (s, 1 H), 7,77 (d, 1H, < = 2,9 Hz), 7,64 (d, 1H, J » 5,2 Hz), 7,35 (dd, 1H, J » 2,9 and 5,2 Hz), 6,81 (s, 1 H), 6,58 (d,1H,J = 1,6Hz),6,54(s,1H),6,40(d,1H,J = 1,6Hz),5,97(d,2H),4,91 (d,1H,J = 3,5Hz),4,75(q,1 H,J - 5,0Hz),4,65(d,1 H,

J = 7,D i Iz), 4,61 (d, 1H, J = 5,3 Hz), 4,41 (dd, 1 H), 4,22 (dd, 1 H), 4,16 (dd, 1 H), 3,81 (s, 3 H), 3,74 (dd, 1 H), 3,56 (dd, 1 H), 3,43 .(dd,

1 H), 3,34-3,31 (m, 2H), 3,26 (dd, 1H, J = 6,3 und 14,0Hz), 2,94-2,88 (m, 1 H), 1,38 (d, 3H, J = 5,0Hz).

Beispiel 18

3'-Desmethoxy-3'-I(2-furyl)-methylen)-amino-etoposid (VII; A = Methyl; Y = R³ = H; R^e = 2-Furyl)

Die allgemeine Versuchsvorschrift von Beispiel 19 wird hierzu verwendet, wobei 3'-Amino-etoposid (Va) (213 mg, 0,371 mMol), wasserfreier MgSO₄ (2,0g), aktiviortes 4 A Molekularsieb (2,5g), p-Toluolsulfonsäure-monohydrat (13mg), 2-Furancarboxaldehyd (3,39g, 35,2mMol) und CH₂CI₂ (30ml) eingesetzt werden. Nach 72 h bei Raumtemperatur wird das Gemisch wie in Beispiel 19 beschrieben weiterverarbeitet und gereinigt. 79,0 mg (33%) der Titelverbindung werden als gelboranger Feststoff ausgebeutet.

IR (KBr) 3440,1775,1630,1603,1508,1488,1285,1235,1162,1080,1023,935,893,765,705cm"¹.

¹HNMR(CDCI₃)Oe₁SO(S,!H),7,57(d,1H,J = 1,5Hz),6,95(d,1 H,J = 3,5Hz),6,80(s,1H),6,66(d,1H,J - 1,5Hz),6,53(s,1 H),6,34 (d,1H,J = 1,bHz),5,97(d,2H),4,89(d,1H,J = 3,4Hz), 4,73 (q,1 H, J = 5,0H*),4,65(d,1H,J = 7,5 Hz), 4,60 (d, 1h, J = 5,3Hz),4,41 (dd, 1 H), 4,23-4.13 (m, 2 H), 3,83 (s, 3 H), 3,75 (dd, 1 H), 3,56 (dd, 1 H), 3/'. (dd, 1 H), 3,34-3,31 (m, 2 H), 3,25 (dd, 1H, J = 5,3 and 14,1 Hz), 2,93-2,88 (m, 1 H), 1,38 (d, 3H, J = 5,0Hz)

Beispiel 19

3'-Desmethoxy-3'-((4-pyridyl)-methylen]-amino-etoposid

(VII; A = Methyl; Y = R³ = H; R^e = 4-Pyridyl)

Ein Gemisch von 3'-Amino-etoposid (Va) (215mg, 0,375mMol), aktiviertem 4A Molekularsieb (2,1 g) und 4- Pyridincarboxyaldehyd (3,8g,35,5mMol) werden bei Raumtemperatur? Tage lang gerührt und anschließend auf eine 2-cm· Säule, gefüllt mit 6-V2" Woelm neutralem Aluminiumoxid aufgetragen. Durch Elution mit CH₂CI₂ (250ml), gefolgt von 1:1 EtOAc

in CH₂CI₂ (250ml) wird der überschüssige Aldehyd entfernt; eine weitere Elution mit 5-6% CH₃OH in CH₂CI₂ ergibt 114,2mg (46%)der Titelverbindung als gelb-oranger Feststoff; Fp = 198~204^eC (Zersetzung).

IR (KBr) 3440,1775,1608,1490,1388,1292,1238,1165,1085,1040,1010,940,705cm"¹.

'HNMR (CDCI₃) δ 8,72 (d, 2 H, J = 4,5 Hz), 8,49 (s, 1 H), 7,70 (d, 2 H, J = 4,5Hz), 6,82 (s, 1 H), 6,65 (s, 1 H), 6,63 (d, 1H, J «1,7 Hz), 6,54 (s, 1 H), 6,49 (d, 1H, J = 1,7 Hz), 5,98 (d, 2 H), 4,92 (d, 1H, J = 3,5Hz), 4,73 (q, 1H, J = 5,0Hz), 4,66 (d, 1H, J = 7,6Hz), 4,62 (d, 1H, J = 5,3Hz)₁4,42 (dd, 1 H), 4,25-4,15 (m, 2 H), 3,82 (s, 3 H), 3,77 (m, 1 H), 3,56 (dd, 1 H), 3,44 (dd, 1 H), 3,34-3,20 (m, 3 H), 2,91-2,87 (m, 1 H), 1,38 (d, 3 H, J = 5,0 Hz).

Beispiel 20

3'-Desmethoxy-3'-[[(4-methoxy)-phenyl]-methylen]-amino-etoposid

(VII; A = Methyl; Y = R³ = H; R^e = p-Methoxyphenyl)

Eine Lösung von 3'-Amlno-etoposid (Va) (260mg, 0,453mMol), p-Anisaldehyd (4,1 g, 30,1 mMol) und p- Toluolsulfonsäuremonohydrat (7,0mg) in trockenem CH₂CI₂ (VOmI) wird in einem Kolben 6h lang rückflußgekocht, wobei der Kolben mit einem Soxhlet-Extraktor, gefüllt mit 4,8g aktiviertem 4 A Molekularsieb, ausgerüstet ist. Das Gemisch wird

anschließend mit 0,31 g aktiviertem 4A Molekularsieb behandelt und bei Raumtemperatur 13Tage lang gerührt. Das

Reaktionsgemisch wird direkt auf eine 2-cm-Säule, gefüllt mit 20,5g Woelm Elution mit CH₂CI₂ (400-500 ml, gefolgt von 2% CH₃OH in CH₂CI₂ ergibt 175 mg (56%) der Titelverbindung in Form eines analytisch reinen schwach-gelben Fuststoffes; Fp = 173—

178⁰C (Zersetzung).

IR (KBr) 3450,1775,1605,1390,1260,1235,116 3,1080,1040,940,840,705cm"¹.

¹H NMR (CDCI₃) δ 8,37 (s, 1 H), 7,81 (d, 2 H), 6,94 (d. 2 H), 6,81 (s, 1 H), 6,57 (d, 1 H), 6,55 (s, 1 H), 6,41 (d, 1 H), 5,97 (d,2»I), 4,91 (d,1 H),4,73 (q,1 H), 4,65 (d,1 H), 4,61 (d, 1 H), 4,41 (dd, 1H . 4,23-4,13 (m, 2 H), 3,85 (s, 3 H), 3,81 (s, 3 H), 3,74 (dd, 1 H), 3,56 (dd, 1 H),3,43 (dd, 1 H), 3,34-3,31 (m, 2H), 3,25 (dd, 1 H), 2,i 4-2,87 (m, 1 H), 1,37 (d, 3H).

Analyse für C₃OH₃₇NO)₃:

CHN ber.: 62,51 5,39 2,01 gef.: 62,48 5,67 2,11

Beispiel 21

3'-Desmethoxy-3'-(((3,4,5-trimethoxy)-phenyl]-methylen]-amino-etoposid

(VII; A = Methyl; Y = R³ = H; R^e = 3,4,5-Trimethoxyphenyl)

Ein Gemisch von 3'-Amino-etoposid (Va) (145mg, 0,253mMol), 3,4,5-Trimethoxybenzaldehyd (829mg, 4,23mMol),

p-Toluolsulfonsäure-monohydrat (2 mg) und wäßrgem MgSO₄ in CH₂C₂ (15 ml) wird 11 Tage lang bei Raumtemperatur gerührt.

Die festen Bestandteile werden abfiltriert und mit frischem CH₂CI₂ gewi sehen. Das hütrat wird im Vakuum eingedampft und der Rückstand über Woelm neutralem Aluminiumoxid (2-cm-Säule) chromatographiert. Elution mit 30% EtOAc in Hexan, gefolgt

von 3% CH₃OH in CH₂CI₂ ergibt 155,5 mg (82%) der Titelverbindung in Form eines hellgelben Feststoffes; Fp. = 192-196⁰C(Zersetzung).

IR (KBr) 3445,1776,1585,1490,1460,1380,1330,1235,1128,1038,1005,940,760,700cm"¹.

¹H NMR (CDCI₃) δ 8,39 (s, 1 H), 7,11 (s, 2H), 6,81 (s, 1 H), 6,53 (s, 1 H), 6,53-6,49 (m, 2H), 5,97 (d, 2H), 4,91 (d, 1 H), 4,73 (q, 1 H), 4,63(d, 1 H), 4,59 (d, 1 H), 4,41 (dd, 1 H), 4,24-4,08 (m, 2 H), 3,91 (br s, 9 H), 3,80 (s, 3H), 3,72 (dd, 1 H), 3,55 (dd, 1 H), 3,42 (dd, 1 H),3,32-3,17 (m, 3H), 2,94-2,88 (m, 1 H), 1,37 (d, 3H).

Beispiel 22

3'-Desmethoxy-3'-|((3-nitro)-phenyl)-methylen]-amino-etoposid

(VII; A = Methyl; Y = R³ = H; fl^e = 3-Nitrophenyl)

Eine Lösung von 3'-Amino-etoposid (V a) (200 mg, 0,349 mMol) und m-Nitrobenzaldehyd (83 mg, 0,55 mMol) in EtOH (10 ml) wird

mit p-Toluolsulfonsäure-monohydrat (3mg) behandelt. Nach 15min wird der entstandene Niederschlag abfiltriert und mitkaltem CH₃OH gewaschen, wobei 20 mg eines gelben kristallinen Feststoffes erhalten werden. Das Filtrat wird eingedampft undnach Kristallisation des Rückstandes erhält man 150g der Titelverbindung als gelben Feststoff (zusammen 69%).

IR (KBr) 3445,1775,1605,1535,1505,1485,1355,1235,1095,1075,1040,1005,935,890,870,815,735,680cm"¹.

Teilweises ¹H NMR (d6-DMSO) δ 8,79 (s, 1 H), 8,39 (d, 1H, J = 7,5Hz), 8,34-8,30 (m, 2 H), 7,76 (dd, 1 H), 6,99 (s, 1 H), 6,65 (d, 1H, J = 1,3Hz),6,53(s,1H),6,26(d,1H,J «-1,3Hz),6,00(s,2H),5,25-5,22(m,2H),4,95(d,1 H),4,73(q,1 H),4,58(d,1 H),4,52(d,1 H),

4,29-4,26 (m, 2 H), 4,07 (dd, 1 H), 3,7? is, 3 H), 1,23 (d, 3 H, J = 5 Hz).

Beispiel 23

3'-Desmethoxy-3'-[(N,N-dimethylamino)-methylen]-amino-etoposid

(IX; A = R⁷ = R⁸ = Methyl; Y = R³ = H)

Zu einer Lösung von 3'-Amino-etoposid (Va) (0,26g, 0,454mMol) wird unter Stickstoff und Rühren bei 2O⁰C in CHCI₃ (4 ml)

Ν,Ν-Dimethyl-dimethylformamidacetal (80μΙ, 0,60 mMol) hinzugefügt. Nach 20min zeigt eine Dünnschichtchromatographiedas Produkt (TLC Rf = 0,18; 10% MeOH in CH₂CI₂) sowie kein Ausgangsmaterial (TLCRf = 0,25). Das Lösungsmittel wird im

Hochvakuum entfernt. Flashchromatographie auf Silikagel unter Verwendung von 80% EtOAc in Hexan und anschließend EtOAc

als Elutionsmittel ergibt 171 mg eines hellbraunen Feststoffes, der auf Silikagel unter Verwendung von 10%, 20% undanschließend 30% Aceton in EtOAc rechromatographiert wird, wobei 85 mg (30%) eines weißlichen Feststoffs erhalten werden;Fp. = 198-200⁰C.

IR (KBr) 3440 (b), 2925,1780,1645,1615cm~¹.

¹H NMR (CDCI₃) δ 7,60 (s, 1 H), 6,82 (s, 1 H), 6,57 (s, 1 H), 6,37 (&, 1 H), 6,17 (s, 1 H), 5,99 (d, J = 4,4Hz, 2H), 4,91 (d, J = 3,4Hz, 1 H),4,76(q,J = 9,0Hz,iH),4,66(d,J = 7,2 Hz, 1H), 4,58 (d, J = 4,6Hz, 1 H), 4,42 (t, J = 9,6Hz, 1H), 4,22 (t, J = 7,8 Hz, 2 H), 3,75 (s, 3 H),3,60 (t, J = 9Hz, 1 H), 3,49-3,21 (m, 5H), 3,03 (s, 6H), 2,95 (m, 1 H), 1,41 (d, J = 6,0Hz, 3H).

FAB MS m/e (relative Intensität) 629 (MH⁺). Beispiel 24

3'-Desmethoxy-3'-nitro-etoposid

(XII; A = Methyl; Y = R³ = H)

Eine Lösung von 3'-Amino-etoposid (Va) (100mg, 0,174mMol) In CH₂CIj (5 ml) wird 3 min lang mit m-CPBA (Aldrich 80-85%,

114 mg, 0,542 mMol) behandelt und β Tage lang bei Raumtemperatur gerührt. Das Gemisch wird mit gesättigter wäßriger

Natrlumblcarbonatlösung (75ml) und CH₂CI₂ (75ml) partitlonlert. Die wäßrige Phase wird anschließend mit Phosphatpuffer pH7

(70ml) und Brine (50ml) verdünnt und nochmals mit CK₂CI₂ (20ml) und EtOAc (100ml) extrahiert. Die organischen Phasenwerden mit Brine gewaschen, über Na₂SO₄ getrocknet und im Vakuum konzentriert. Der Rückstand wird auf Silikagel unter

Verwendung von 2-5% CH₃OH in CH₂CI₂ flashchromatographiert, wobei 83,7 mg (82%) der reinen Titelverbindung erhalten

werden.

IR (KBr) 3460,1775,1630,1550,1492,1455,1393,1340,1275,1240,1160,1100,1080,1040,935,890,760,705Cm"¹.

¹HNMR (CDCI₃) δ 7,42 (d, 1H, J = 1,6 Hz), 6,83 (s, 1 H), 6,76 (d, 1H, J = 1,6 Hz), 6,44 (s, 1 H), 5,99 (d, 2 H), 4,93 (d, 1H, J = 3,2 Hz), 4,72(q, 1H, J= 5 Hz), 4,62 (d, 1H, J = 7,6 Hz), 4,59 (d, 1H. J = 5,4 Hz), 4,42 (dd, 1 H), 4,23 (dd, 1 H), 4,15 (dd, 1 H), 3,94 (s, 3 H), 3,71 (dd,1 H), 3,55 (m, 1 H), 3,41 (dd, 1 H), 3,37-3,27 (m, 3H), 2,81-2,73 (m, 1 H), 1,37 (d, 3 H, J = 5Hz).

¹³C NMR(CDCI₃)S 174,6,149,3,149,1,147,6,145,6,133,2,131,0(2Cs), 128,5,121,3,116,3,110,2,109,2,102,0,101,7,99,7,79,6,74,4,73,5,73,0,60,0,67,9,66,4,56,7,43,0,40,7,37,3,20,1.

Beispiel 25

3'-Desmethoxy-3'-diazonium-etopos!d-hydroxid-inneresSalz

(Xa; A »Methyl; Y = H)

Eisessig (3,0ml, 26,2 mMol) gefolgt von NaNO₂ (0,15g, 2,17mMol) wird zu einer Lösung von 3'-Amino-etoposid (Va) (0,22g,

0,384 mMol) in trockenem THF (17 ml) unter Rühren bei O⁰C sowie unter Stickstoff hinzugegeben. Das Reaktionsgemisch wird3,4h bei O⁰C geruht und in 150ml CH₂CI₂ gegossen. Die dunkelrotu organische Phase wird mit 100ml wäßrigem NaHCO₃gewaschen. Die vereinigten organischen Extrakte werden mit 100ml gesättigtem NaHCO₃ gewaschen, über MgSO₄ getrocknetund im Vakuum konzentriert, wobei 0,177g (79%) eines rötlich-orangen Feststoffs erhalten werden; Schmelzpunkt: langsame

Zersetzung 15O⁰C.

IR (KBr) 3440 (b), 2930,2160,2120,1779cm"¹.

¹H NMR (CDCI₃) δ 6,78 (s, 1 H), 6,73 (s, 1 H), 6,52 (S, 1 H), 5,97 (d, J = 8,3Hz, 2H), 5,82 (s, 1 H), 4,86 (d, J = 2,2Hz, 1 H), 4.72 (m, 1 H),4,54 (d, J = 7,6Hz, 1 H), 4,43 (t, J = 9,0Hz, 1 H), 4,35 (d, J = 5,1 Hz, 1 H), 4,26 (t, J = 8,3Hz, 1 H), 4,14 (m, 1 H), 3,71 (s, 3H), 3,55 (t,

J = 9,7Hz, 1 H), 3,40 (t, J = 8,1 Hz, 1 H), 3,3 (bm, 4H), 3,02 (m, 1 H), 1,35 (d, J = 4,9Hz, 3H). Beispiel 26

3'-D ismethoxy-3'-azido-etoposid

(Xl; A = Methyl; Y = R³ = H)

Zu einer Lösung von 3'-Amino-etoposid (Va) (210mg, 0,366mMol) in trockenem THF (10ml), welche auf 0⁰C gekühlt ist und sich

unter Stickstoff befindet, wird Eisessig (2ml) gefolgt von festem Natriumnitrit (149mg, 2,16mMol) hinzugefügt. Das Gemischwird bei O⁰C 2h lang und bei Raumtemperatur 1 h lang gerührt. Eine Lösung von Natriumazid (110mg, 1,69mMol) in H₂O (1 ml)wird anschließend hinzugefügt und nach 15 min mit weiteren 200 mg festem Natriumazid versetzt. Das Gemisch wird bei

Raumtemperatur 30min lang gerührt und anschließend mit CH₂CI₂ (100ml), gesättigtem wäßrigem Natriumbicarbonat (30ml) Wasser (100 ml) partitioniert. Die wäßrige Phase wird nochmals mit CH₂CI₂ (2 χ 40ml) extrahiert und die vereinigten organischen Phasen werden mit H₂O (65ml) und Brine (75ml) gewaschen und über Na₂SO₄ getrocknet. Nach Eindampfen am Rotationsverdampfer, gefolgt von einer Chromatographie auf E. Merck 230-400 mesh Silikagel (0,45g) unter Verwendung von CH₂CI₂, mit anschließend 2% CH₃OH in CH₂CI₂ als Eluenten erhält man 210mg (96%) der reinen Titelverbindung als goldgelben

Feststoff.

IR (KBr) 3460,2120,1775,1612,1510,1490,1240,1165,1080,1045,1006,935,700cm"¹.

¹HNMR (CDCI₃) δ 6,80 (d, 1 H), 6,79 (s, 1 H), 6,48 (s, 1 H), 5,99 (ABq, 2 H), 5,79 (d, 1 H, J = 1,6Hz), 4,88 (d, 1H, J = 3,5 Hz), 4,73 (q, 1H,

J = 5Hz), 4,62 (d, 1H, J = 7,5Hz), 4,54 (d, 1H, J = 5,3 Hz), 4,38 (dd, 1HI, 4,23-4,15 (m, 2 H), 3,85 (s, 3H), 3,74 (m, 1 H), 3,56 (m, 1 H),

3,41 (dd, 1 H), 3,33-3,30 (m, 2 H), 3,24 (dd, 1 H), 2,89-2,83 (m, 1 H), 1,37 (d, 3H, J = 5Hz).

Beispiel 27 Etoposid-benzoxazol-Derivat

(VIII; A = Methyl; Y = R¹⁴ = H)

Eine Lösung von 3'-Amino-etoposid (Va) (240mg, 0,419mMol) in 9:1 CH₂CI₂/CH₃OH wird mit Trimethylorthoformiat (1 ml) und

1-2 Tropfen 60%iger Perchlorsäure behandelt. Das Gemisch wird 18h lang bei Raumtemperatur gerührt, anschließend wird das

Lösungsmittel im Vakuum entfernt und der Rückstand durch präparative Silikagelchromatographie (9:1 CH₂CI₂/CH₃OH)

gereinigt, wobei 80 mg (33%) der Titelverbindung als farbloser Feststoff erhalten werden.

¹H NMR (CDCI₃) δ 7,97 (s, 1 H), 7,18 (br s, 1 H), 6,81 (s, 1 H), 6,52 (br s, 2H), 5,97 (m, 2H), 4,90 (d, 2 H, J = 3,4Hz), 4,75-4,71 (m, 2H),4,64 (d, 1H, J = 7,5Hz), 4,41 (dd, 1 H), 4,20-4,15 (m, 2H), 4,02 (s, 3H), 3,76-3,72 (m, 1 H), 3,58-3,54 (m, 1 H), 3,45-3,41 (m, 1 H),3,37-3,32 (m, 3H), 2,95-2,90 (m, 1 H), 1,37 (d, 3H, J = 5Hz).

Beispiel 28 S'-Desmethoxy-ö'-acetylamino-etoposid-S'^'-orthochinon

(XIV; A = Methyl; R¹¹ = Acetyl; Y = H)

Essigsäure (1,5ml, 26,2 mf *oi) wird gefolgt von Natriumnitrit (34mg, 0,49mMol7 zu einer Lösung von 3'-Acetamidoetoposid

(0,150g,0,244mMol) in 20ml trockenem THF unter Stickstoff und gleichzeitigem Rühren bei 2⁰C hinzugegeben. Die klare Lösung

verfärbt sich langsam rot und verdunkelt allmählich mit zunehmendem Verlauf der Reaktion. Das Reaktionsgemisch wird 3,5 h

bei 2⁰C gerührt, in 100ml 50% ETOAc in Et₂O gegossen und zweimal mit 50ml einer gesättigten wäßrigen

Natriumbicarbonatlösung sowie einmal mit 50ml einer gesättigten Brinelösung gewaschen. Die organische Phase wird über

IIP.;:

MgSO₄ getrocknet, im Vakuum konzentriert und über Sllikagel unter Verwendung von 5% MeOH in CH₂CI₂ als Eluenten

flaehchromatographiert, wobei 91 mg (62%) eines dunkelroten Feststoffes erhalten werden; Fp = 24'J-250°C, TLC R_F (6% MeOHInCH₂CI₂).

IR (KBr) 3450 (b), 2925,1779,1669cm'¹.

¹H NMR (CDCI₃) δ 7,78 (m, 2 H), 6,77 (s, 1 H), 6,56 (s, 1 H), 5,99 (m, 2 H), 5,70 (s, 11 ·), 4,89 (d, J = 3,24 Hz, 1 H), 4,74 (q, J = 5,1 Hz, 1 H),4,56 (d, J = 7,8 Hz, 1 H), 4,45 (t,J =3,2 Hz, 1 H), 4,34 (t, J = 7,5 Hz, 1 H), 4,26 (d, J = 6,3 Hz, 1 H), 4,1 β (dd, J » 5,4,2,1 Hz, 1 H), 3,70 (t,

J = 8,5Hz₁1 H), 3,57 (m, 1 H), 3.42 (t, J = 11,8Hz, 2H), 3,34-3,29 (m, 2H), 2,89 (m, 1 H), 2,75 (bs, 1 H), 2,50 (bs, 1 H), 1,37 (d,

J » 4,9Hz, 3H).

Beispiel 29

5'-Desmethoxy-5'-[((2-chlorethyl)-am!nol-carbonyl]-amino-etopooid-3',4'-ortho-chlnon(XIV; A = Methyl; R¹¹ = 2-I(Chlorethyl)-amino]-carbonyl)

Die allgemeine Versuchsvorschrift von Beispiel 28 wird wiederholt, wobei das Produkt aus Beispiel 10 anstelle von 3'- Acetylamlno-etoposid unter Bildung der Titelverbindung eingesetzt wird; Fp = 195-197⁰C (Zersetzung).

IR (KBr) 3400 (b), 2940,1780 cm"¹.

¹H NMR (CDCI₃) δ 8,62 (s, 1 H), 7,53 (s, 1 H), 7,43 (s, 1 H), 7,28 (bt, J = 7,2Hz, 1 H), 6,83 (s, 1 H), 6,61 (s, 1 H), 5,98 (bs, 2 H), 5,59 (s, 1 H),4,95 (d, J = 3,1 Hz, 1 H), 4,79 (m, 2 H), 4,58-4,30 (m, 3 H), 4,28-4,13 (m, 2 H), 3,80-3,60 (bm, 7 H), 3,60-3,25 (bm, 3 H), 2,98 (m, 1 H),1,41 (d,J = 5,1 Hz, 3H).

FAB MS m/e (relative Intensität) 665 (MH⁺). Beispiel 30

5'-Desmethoxy-5'-(((2,2,2-tr!chlorethyl)-oxy]-carbonylj-amino-etoposid-3',4'-ortho-chinon(XIV; A = Methyl; R¹¹ = 2,2,2-((Trichlorethyl)-oxy]-carbonyl)

Die allgemeine Versuchsvorschrift von Beispiel 28 wird wiederholt, wobei das Produkt aus Beispiel 9 anstelle von 3'- Acetylamino-etoposld unter Bildung der Titelverbindung eingesetzt wird.

CH

Man wiederholt die allgemeine Versuchsvorschrift von Beispiel 28, wobei man die nachfolgend angegebenen 3'-Acetylaminoetoposidedukte einsetzt. Man erhält die entsprechenden o-Chinondorivate.

Beispiel EtoposidEdukt

31 R = H(Beispiel6)

32 R = CF₃ (Beispiel 8)

33 R= -NHCH₂Ph (Beispiel 11)

Beispiel 34 S'-Desmethoxy-S'-demethyl-S'-acetylamino-etoposid

(XV; A = Methyl; Y = H; R" = Acetyl)

Das Verfahren von Beispiel 7 wird unter Verwendung von 65,4μΙ (0,»?9mMol) Essigsäureanhydrid und 0,38g (0,66mMol) 3'- Amino-etoposid (Va) in 10ml CH₂CI₂ wiederholt. Das dabei entstandene Produkt wird nach Trocknen über MgSO₄ und Vakuumkonzentration in 10ml wasserfreiem THF gelöst und mit 1,5ml (26,2mMol) Essigsäure, gefolgt von 0,182g (2,64mMol) Natrlumnitrit der Beschreibung von Beispiel 30 folgend, umgesetzt. Nach Flashchromatographie erhält man einen dunkelroten Feststoff, v/elcher in 100ml EtOAc gelöst wird. Gesättigtes wäßriges Natriummetabisulfit (60ml) wird hinzugegeben, und das Gemisch geschüttelt (weniger als 1 min), bis sich die dunkelrote Farbe zurückbildet und eine schwach pinkfarbene organische Phase zurückbleibt, welche über MgSO₄ getrocknet und im Vakuum konzentriert wird. Flachchromatographie über Silikagel

unter Verwendung von4%MeOH in CH₂CI₂ergibt 73 mg(18%) des hellbraunen festen Produktes; Fp = 210-22O⁰C (Zersetzung).

IR (KBr) 3440 (b), 2945,1775cm"¹.

¹HNMR(CDCl3)69,49(bs,2H),6,97(bs,1H),6,84(s,1H),6,61(d,J = 2,0Hz,1H),6,46(s,iH),e,20(d,J = 2,0Hz,1H),5,95,(s,2H),

4,94 (d, J = 3,6 Hz, 1 H), 4,75 (q, J = 5,2 Hz, 1 H), 4,55-4,39 (m, 3 H), 4,30-4,16 (m, 2 H), 3,61 (m, 2 H), 3,43-3,29 (m, 4 H), 2.98 (bm, 1 H),?.19(s,3H),1,38(d,J = 4,8Hz,3H).

FAB MS (m/e) 602 (MH⁺).

Beispiele 35 bis 37

OH

Eine Reduktion mit Natriummetabisulfit wie in Beispiel 34 beschrieben wird auf folgende ortho-Chinone zur Herstellung der entsprechenden Hydroohinone angewendet.

Beispiele R

35 NHCH₂CHjCI (Beispiel 29)

36 H (Beispiel 31) 37

Beispiel 38

3'-Desmethoxy-5'-demethyl-3'-([[(2,2,2-trichlor)-ethyll-oxy)-carbonyU-amino-etoposid

(XV; A = Methyl; Y=H; R¹¹ = ^^-[(Trichlort-ethyll-oxycarbonyl) ^!

Natriumnitrit (0,200g, 2,9OmMoI) wird zu einer Lösung von Etoposid-5'-trinhlorethylcarbamat (Produkt aus Beispiel 11,0,354g, 0,473 mMol) und Essigsäure (3 ml) in THF (10ml) unter Stickstoff u· .d Rühren bei 2⁰C hinzugegeben. Das Reaktionsgemisch wird 3 h lang gerührt und die gebildete rote Lösung in gesättigtes wäßriges NaHCO₃ (80ml) gegossen und anschließend mit 80ml EtOAc, gefolgt von 2 χ 25ml EtOAc extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen werden mit wäßriger NaCI (50ml) gewaschen, über Na₂SO₄ getrocknet und im Vakuum konzentriert, wobei ein roter Feststoff anfällt, weicher in 7 ml THF gelöst wird. Wasser (1 ml) und Eisessig (1 ml) werden hinzugefügt. Das Reaktionsgemisch wird in einem Eiswasserbad gekühlt, anschließend wird aktiviertes Zink (0,20g, 3,0SmMoI) hinzugegeben. Das Reaktionsgemisch wird aus dem Eisbad entfernt. Die rote Farbe verblaßt schnell und nach 15 min wird das Reaktionsgemisch in Wasser gegossen und dreimal mit EtOAc extrahiert. Die organischen Phasen werden über MgGO₄ getrocknet und durch Flashchromatographie auf Silikagel unter Verwendung von 5% MeOH in CH₂CI₂ als Eluenten gereinigt, wobei 0,2052g (58%) eines weißlichen Feststoffes erhalten werden; Fp IR (KBr) 3440,2930,1772 (b), 1623cm"¹.

¹HNMR (CDCI₃) δ 8,12 (bs, 1 H), 7,79 (bs, 1 H), 7,64 (bs, 1 H), 5,73 (s, 1 H), 6,64 (s, 1 H), 6,26 (s, 1 H), 6,24 (s, 1 H), 6,73 (m, 2 H), 4,75 (d, J = 3,4Hz, 1 H), 4,76-4,43 (m, 4H), 4,31 (d, J = 7,5Hz, 1 H), 4,24-4,15 (m, 2H), 4,02-3,95 (m, 2 H), 3,43-3,33 (m, 2H), 3,20-3,05 (m, 4H), 2,86-2,78 (m, 1 H), 1,16 (d, J = 5,0Hz, 3H)

MS (FAB) m/e 734 (M+ H)⁺.

Beispiel 39

3'-Desmethoxy-5'-demethyl-3'-amino-etoposid

(XVI; A = Methyl; Y = H)

Aktivierter Zinkstaub (0,40g, 6,11 mMol) wird zu einer Lösung von Etoposid-dihydroxy-trichlorethylcarbamat (0,205g, 0,273mMol) in 5ml THF, 0,5ml H₂O und 0,5ml Eisessig unter Rühren bei Raumtemperatur hinzugegeben. Das Reaktionsgefäß wird 90 min lang in ein Ultraschallbad gehalten. TLC-Anaiyse (5% MeOH in CH₂CI₂ auf Silikagel) zeigt die Bildung eines Produktes mit einem geringeren R_f-Wert als das Ausgangsmaterial. Das Reaktionsgemisch wird in Wasser gegossen und viermal mit EtOAc extrahiert. Die vereinigten organischen Extrakte worden über Na₂SO₄ getrocknet, konzentriert und durch Flashchromatographie auf Silikagel unter Verwendung von b% MeOH in CH₂CI₂ ils Elutionsmittel gereinigt, wobei 29 mg (19%) eines dunkelgrauen metallisch-glänzenden Feststoffs erhalten werden. Schmelzpunkt.

IR (KBr) 3434,2923,1767,1734,1486cm"¹.

¹HNMR (CDCIj/DMSO) δ 7,75 (bs, 1 H), 6,61 (s, 1 H), 6,26 (s, 1 H), 57S (s, 1 H), 5,71 (m, 2 H), 5,67 (s, 1 H), 4,70 (d, J = 3,2 Hz, 1 H), 4,53 (m, 1 H), 4,45 (bs, 1 H), 4,28 (d, J = 7,7 Hz, 1 H), 4,22-4,13 (m, 2 M, 3,996 (m, 2 H), 3,50 (bm, 1 H), 3,34 (m, 2 H), 3,15-3,0 (m, 3 H)₁ 2,80-2,75 (m, 1 H), 1,15 (d, J = 4,9Hz, 3Hl.

MS (FAB) m/e 560 (M + H)⁺.

Beispiel 40

3'-De8methoxy-3'-methyltriazenyl-etoposld

(XIII; A = R⁹ - Methyl; Y « R³ - H)

Das Produkt aus Beispiel 9 wird in CH₂Ci₂ mit Pyridin, gefolgt von 2-Trimethyl8ilylethoxy-methylchlorld behandelt, wobei das Silylethoxymethylacetal-phenoigeschutzte Derivat entsteht. Aktivierter Zinkstaub wird zu der Lösung der phenolgeschützten Verbindung In THF/HjO/ACOH hinzugegeben. Das so erhaltene 3'-Amlnoprodukt wird mit HCI/NaNO₂ diazotieit. Eine Umsetzung der Dlazonlumverbindung mit Methylamin und anschließender Entfernung der SEM-Etherschutzgruppe unter Verwendung von Bu4 NF liefert die Titelverbindung.

Beispiel 41

3'-Desmethoxy-3'-amino-etoposid-ortho-chinon

(XIX; A «Methyl; Y = H)

Das Produkt au« Beispiel 39 wird diazotiert und anschließend mit Natriumazid entsprechend der allgemeinen Versuchsvorschrift von Beispiel 26 behandelt. Rückflußkochen der resultierenden Azidoverbindung in Chloroform liefert die Titelverbindung.

Claims (37)

1. Patentansprüche:

   1. Verfahren zur Herstellung stickstoffhaltiger Derivate von Epipodophyllotoxinglucosiden der allgemeinen Formo!:

   (IV)₁

   worin

   Y ein Wasserstoffatom bedeutet und A aus der Gruppe folgender Reste ausgewählt ist:

   einem C₁-I₀-AIkVl, C₂-2o-Alkenyl, Cs-e-Cycloalkyl-Rest; einem 2-Furyl- oder 2-Thienylrest; einem Aryl-, Araikyl- und Aralkenylrest, wobei jeder aromatische Ring unsubstituiert oder substituiert sein kann mit einer oder mehreren Gruppen, ausgewählt unter einem Halo-, C^-Alkyl-, C₁-S-

   Alkoxy-, Hydroxyd-, Nitro- oder einem Aminorest;

   A und Y jeweils einen Ci-e-Alkylrest bedeuten; oder

   A und Y und das Kohlenstoffatom, an welches sie gebunden sind, eine C^-Cycloalkylgruppe

   bilden; und B ausgewählt ist aus der Gruppe folgender Resto:

   OR , R₀O

   IVa

   IVb

   und

   NHR

   11

   IVC '

   worin

   R¹ eine C^o-Alky!-, C^-Cycloalkyl-, C₂-i₀-Alkenyl- oder Cj-^-Mlkinylgruppe bedeutet, wobei jede der oben angegebenen Gruppen unsubstituiert oder mit einem oder mehreren Z substituiert sein kann; oder eine Aryl-, Heteroaryl-, Araikyl- oder Heteroaralkylgruppe bedeutet, wobei der in den oben genannten Gruppen enthaltene Ring unsubstituiert oder mit einer oder mehreren Gruppen, ausgewählt unter einem C^-Alkylrest oder Z substituiert ist; wobei Z aus der Gruppe folgender Reste ausgewählt ist: Halo-, C₁^-AIkOXy-, Amino-, Nitro-, Cyano-, Hydroxy- und Mercaptorest;

   R² ein Wasserstoffatom oder eine Methylgruppe bedeutet;

   R¹¹ ein Wasserstoffatom, einen -CH , -CR¹⁰ , -COR¹⁰ oder

   Il Il Il

   0 0 0 CNHR -Rest bedeutet; worin R eine C₁ ,„-Alkylgruppe, ι

   0 '

   welche unsubstituiert vorliegt oder substituiert ist mit einem oder mehreren Z, oder einen AiYl-C₁-s-alkylrest bedeutet;

   R³ ein Wasserstoffatom oder eine Phenolschutzgruppe bedeutet; R⁴ und R⁶Jt veils unabhängig voneinander R¹¹ oder R¹ bedeuten; oder R⁴ ein Wasserstoffatom bedeutet und R^B eine Sulfonylgruppe O

   -CH-

   :h-N ^v<""2'n

   oder

   Il

   -CH-N l)

   bedeutet,

   worin R¹² ein Wasserstoffatom oder eine C₁_₈-Ar'ylgruppe bedeutet; R¹³ ein Wasserstoffatom, R¹, oder-S-R¹ bedeutet; η für 2 odc« 3 steht; oder

   R³, R⁴ und R⁵ zusammen -CHR^K = bedeuten worin R¹⁴ ein Wasserstoffatom oder einen C₁^- Alkylrest bedeutet; oder

   NR⁴R⁵ eine Nitro- oder A-.idogruppe bedeutet; oder NjX" bedeutet, unter der Bedingung, daß R³ kein Wasserstoffatom bedeutet und worin X^- eine anionische Gruppe darstellt; oder

   NR⁴R⁶ einen -N=^CHR⁶, -N=CHNR⁷R⁸ oder-N=NNHR⁹-Rest bedeutet, worin R⁸ der Definition für R¹ entspricht, R⁷ und R^r jeweils unabhängig voneinander ein Wasserstoffatom oder eine C₁-S-Alkylgruppe bedeuten und R⁹ eine C^-Alkylgruppe darstellt; oder

   R³ und NR⁴R⁶ zusammen ein inneres Diazoniumhydroxidsaiz darstellen, dadurch gekennzeichnet, daß man

   A) eine Verbindung der allgemeinen Formel: V

   (IH)

   CH₃O'

   mit einem Oxim der allgemeinen Formel H₂NOR¹ oder mit einem Säureadditionssalz davon

   umsetzt, wobei eine Verbindung der allgemeinen Formel IVa:

   (IVa)

   gebildet wird,

   B) eine Verbindung der allgemeinen Formel IVa zu einer Verbindung der allgemeinen Formel V:

   (V)

   reduziert; oder

   eine Verbindung der allgemeinen Formel III mit Ammoniak oder einem Alkylamin zu einer

   Verbindung der allgemeinen Formel V umsetzt,

   welche anschließend umgesetzt wird mit einer Verbindung ausgewählt unter:

   Acylierungsmitteln; Sulfonylierungsmitteln; Chlorformiat; Kohlensäureestern; substituierten Isocyanaten; Alkylierungsmitteln; einem Aldehyd mit der allgemeinen Formel R⁶CHO; einem Trialkoxyester der allgemeinen Formel R¹⁴C(OaIk)₃); einem Amidacetal der allgemeinen Formel IaIkO)₂CHNR⁷R⁸; einem Diazotisierungsreagens und anschließend gegebenenfalls einem Alkalimetallazid oder einem Amin der allgemeinen rormel R⁹NH₂; einer Persäure; einem

   cyclischen Imid der allgemeinen Formel

   ,13

   oder

   in Gegenwart eines Aldehyds der allgemeinen Formel R¹²CHO;

   C) eins Verbindung der allgemeinen Formel IV,worin B definiert ist als:

   worin R² eine Methylgrupoe bedeutet,

   R³ und R⁴ ein Wasserstoffatom bedeuten und

   R⁵eine Acylgruppe bedeutet,

   zum korrespondierenden o-Chinon oxidiert, welches man gegebenenfalls zum korrespondierenden o-Hydrochinon reduziert, dieses anschließend deacyliert und gewünschtenfalls das deacylierte Produkt mit einer Verbindung ausgewählt unter einem: Alkylierungsmittel, Acylierungsmittel, Chlorformiat, Kohlensäureester und subst^!<:uierten Isocyanat umsetzt, oder das deacylierte Produkt diazotiert, mit einem Azid behandelt und thermolysiert.

   wobei die Substituenten n, A, Y, B, R¹ bis R¹⁴ den oben gegebenen Definitionen entsprechen. 2. Verfahren nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß man eine Verbindung der allgemeinen Formel IV erhält, worin B folgenden Rest bedeutet:

   NOR^J

   worin R¹ einen C^o-Alkyl-, Phenyf-C^o-alkyl- oder einen Phenyi-C^io-aikyirest bedeutet, dessen aromatischer Ring mit einer oder mehreren Gruppen, ausgewählt unter Z und einem C^-Alkylrest, substituiert ist.
2. 3. Verfahren nach Anspruch 2, dadurch gekennzeichnet, daß man eine Verbindung erhält, worin Y ein Wasserstoffatom und Λ einen Methyl- oder 2-Thienylrest bedeutet.
3. 4. Verfahren nach Anspruch 3, dadurch gekennzeichnet, daß man eine Verbindung erhält, worin A einen Methylrest bedeutet.
4. 5. Verfahren nach Anspruch 4, dadurch gekennzeichnet, daß man eine Verbindung erhält, worin R¹ einen C^-Alkyl- oder einen Phenylmethylrest bedeutet.
5. 6. Verfahren nach Anspruch 5, dadurch gekennzeichnet, daß man eine Verbindung erhält, worin R¹ einen Methylrest bedeutet.
6. 7. Verfahren nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß man eine Verbindung der allgemeinen Formel IV erhält, worin B folgenden Rest bedeutet:

   nrV

   worin R² ein Wasserstoffatom oder einen Methylrest bedeutet, R³ ein Wasserstoffatom oder eine Phenolschutzgruppe bedeutet; R⁴ ein Wasserstoffatom und R⁶ eine Sulfonylgruppe; R¹¹; einen C

   -CH-N I⁰¹^n ^oder -CH-N j

   bedeutet,

   worin R¹² ein Wasserstoffatom bedeutet; η für 2 oder 3 steht, R¹³ ein Wasserstoftatom, einen Ci_₁₀-Alkylrestoder-S-R¹ bedeutet; oder

   R⁴ und R⁶ jeweils einen CMo-Alkylrest bedeuten; oder

   R³, R⁴ und R⁶ zusammen -CHR¹⁴= bedeuten, worin R¹⁴ ein Wasserctoffatom oder einen Ci_e-Alkylrest bedeutet; oder

   NRR⁵ eine Nitro- oder Azidogruppe bedeutet; oder NjX" bedeutet, wobei R³ kein Wasserstoffatom ist; und X^- eine anionische Gruppe bedeutet; oder

   NR⁴R⁶ eine N=CHR⁶-, N=CHNR⁷R⁸- oder N=NNHR⁹-Gruppe bedeutet; ν ^ ^!n R^e eine Aryl- oder Heteroarylgruppe darstellt und der Ring einer jeden Gruppe unsubstituiert i-i: oder mit einer oder mehreren Gruppen, ausgewählt unter Z und einem C^-Alkylrest substituiert ist; R⁷ und R⁸ jeweils unabhängig voneinander ein Wasserstoffatom oder einen Ci^-Alkylrest bedeuten; R⁹ einen C₁^- Alkylrest bedeutet; oder

   R³ und NR⁴R⁶ ein inneres Diazoniumhydroxidsalz bedeuten.
7. 8. Verfahren nach Anspruch 7, dadurch gekennzeichnet, daß man eine Verbindung erhält, worin Y ein Wasserstoffatom und A eine Methyl- oder 2-Thienylgruppe bedeutet.
8. 9. Verfahren nach Anspruch 8, dadurch gekennzeichnet, daß man eine Verbindung erhält, worin A eine Methylgruppe bedeutet.
9. 10. Verfahren nach Anspruch 9, dadurch gekennzeichnet, daß man eine Verbindung erhiilt, worin R² eine Methylgruppe bedeutet; R³ und R⁴ jeweils ein Wasserstoffatom bedeuten.
10. 11. Verfahren nach Anspruch 10, dadurch gekennzeichnet, daß man eine Verbindung erhält, worin R⁵ für R¹¹ steht.
11. 12. Verfahren nach Anspruch 1 !,dadurch gekennzeichnet, daß man eine Verbindung erhält, worin R⁵ ein Wasserstoffatom, einen Formyl-, Acetyl-, Trifluorethyl-, 2,2,2-Trichlorethoxycarbonyl-, 2-Chlorethylnminocarbonyi- oder einen Phenylmethylaminocarbonylrest oedeutet.
12. 13. Verfahren nach Anspruch 10, dadurch gekennzeichnet, daß man eine Verbindung erhält, worin R⁵ einen N-Maleimidmethylrest bedeutet.
13. 14. Verfahren nach Anspruch 10, dadurch gekennzeichnet, daß man eine Verbindung erhält, worin R⁶ folgenden Rest bedeutet:

    worin R¹³ ein Wasserstoffatom oder-S-R¹ ist.
14. 15. Verfahren nach Anspruch 14, dadurch gekennzeichnet, daß man fine Verbindung erhält, worin R¹³ ein Wasserstoffatom, einen Octylthio- oder einen 2-Pyridylthiorest bedeutet.
15. 16. Verfahren nach Anspruch 10, dadurch gekennzeichnet, daß man eine Verbindung erhält, worin R⁶ einen Sulfonylrest bedeutet.
16. 17. Verfahren nach Anspruch 16, dadurch gekennzeichnet, daß man eine Verbindung erhält, worin R⁵ einen Methansulfonylrest bedeutet.
17. 18. Verfahren nach Anspruch 10, dadurch gekennzeichnet daß man eine Verbindung erhält, worin R⁵ einen C^-Alkylrest bedeutet.
18. 19. Verfahren nach Anspruch 18, dadurch gekennzeichnet, daß man eine Verbindung erhält, worin R⁵ einen Methyl- oder n-Butylrest bedeutet.
19. 20. Verfahren nach Anspruch 9, dadurch gekennzeichnet daß man eine Verbindung erhalt, worin R² einen Methylrest bedeutet; R³ ein Wasserstoffatom bedeutet; und NR⁴R⁶ eine N=CHR⁸-Gruppe bedeutet, worin R⁶ der Definition in Anspruch 7 entspricht.
20. 21. Verfanren nach Anspruch 20, dadurch gekennzeichnet, daß man eine Verbindung erhält, worin R⁶ einen 2-Furyl-, 2-Thienyl-, 3,4,5-Trimethoxyphenyl-, 4-Methoxyphenyi-, 3-Nitrophenyl- oder einen 4-Pyridylrest bedeutet.
21. 22. Verfahren nach Anspruch 9, dadurch gekennzeichnet, daß man eine Verbindung erhält, worin R² eine Methylgruppe bedeutet; R³ ein Wasserstoffatom bedeutet; und NR⁴R⁵ eine Nitrogruppe oder jine Azidogruppe bedeutet.
22. 23. Verfahren nach Anspruch 9, dadurch gekennzeichnet, daß man eine Verbindung erhält, worin R² eine Methylgruppe bedeutet; R³ eine Phenolschutzgruppe bedeutet; und NR⁴R⁶ eine NpC-Gruppe bedeutet, worin X" eina anionischa Gruppe darstellt.
23. 24. Verfahren nach Anspruch 9, dadurch gekennzeichnet, daß man eine Verbindung erhält, worin R² eine Methylgruppe bedeutet; R³ ein Wasserstoffstom bedeutet und NR⁴R⁶ eine NN-Diinethylformamidin· : J. · N=NNHR⁹-Gruppe bedeutet, worin R⁹ eine C^-Alkylgruppe darstellt.
24. 25. Verfahren nach Anspruch 9, dadurch gekennzeichnet, daß man eine Verbindung erhält, worin R² eine Methylgruppe bedeutet; R³ und NR⁴R⁵ ein inneres Diazoniumhydroxidsalz bedeuten.
25. 26. Verfahren nach Anspruch 9, dadurch gekennzeichnet, daß man eine Verbindung erhält, worin R² eine Methylgruppe bedeutet, R³, R⁴ und R⁵ zusammen -CH= bedeuten.
26. 27. Verfahren nach Anspruch 9, dadurch gekennzeichnet, daß man eine Verbindung erhält, worin R², A^a und R⁴ jeweils ein Wasserstoffatom bedeuten; und R⁵ für R¹¹ steht.
27. 28. Verfahren nach Anspruch 27, dadurch gekennzeichnet, daß man eine Verbindung erhält/worin R⁵ ein Wasserstoffatom oder -CR¹^ -COR^ oder -CNHR*^ darstellt, worin

    11 11 Il

    OO Ol

    R¹⁰ eine C^₁₀-Alkylgruppe bedeutet, die unsubstituiert oder mit einem oder mehreren Z substituiert ist, oder eine Ara-C^-alkylgruppe darstellt.
28. 29. Verfahren nach Anspruch 28, dadurch gekennzeichnet, daß man eine Verbindung erhält, worin R⁶ einen Acetyl- oder 2,2,2-Tr ichlorethoxycarbonylrest darstellt.
29. 30. Verfahren nach Anspruch 9, dadurch gekennzeichnet, daß man eine Verbindung erhält, worin R² und R³ jeweils ein Wasserstoffatom bedeuten; NR⁴R⁵ eine Azidogruppe bedeutet.
30. 31. Verfahren nach Anspruch 9, dadurch gekennzeichnet, daß man eine Verbindung erhält, worin R² ein Wasserstoffatom bedeutet; R³ und NR⁴R⁵ ein inneres Diazoniumhydroxidsalz darstellen.
31. 32. Verfahren nach Anspruch 9, dadurch gekennzeichnet, daß man eine Verbindung erhält, worin R² ein Wasserstoffatom bedeutet; R³ eine Phenolschutzgruppe bedeutet; und NR⁴R⁵ NjX" bedeutet, worin X~ eine anionische Gruppe darsteüi.
32. 33. Verfahren nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß man eine Verbindung der allgemeinen Formel IV erhält, worin B folgenden Rest darstellt:

    NHR¹¹
    worin R"¹ ein Wasserstoffatom oder -CH, CR , -COR

    Il Il Il

    0 0 0 oder -CNHR bedeutet; worin R eine C_{1 Λ} _-Alkylgruppe

    Ii 1 —IU

    bedeutet, welche unsubstituiert oder mit einem oder mehreren Z substituiert ist, oder einen Ara-Ci-6-alkylrest bedeutet.
33. 34. Verfahren nach Anspruch 33, dadurch gekennzeichnet, daß man eine Verbindung erhält, worin Y nin Wasserstoffatom und A einen Methyl- oder 2-Thienylrest bedeuten.
34. 35. Verfahren nach Anspruch 34, dadurch gekennzeichnet, daß man eine Verbindung erhält, worin A einen Methylrest bedeutet.
35. 36. Verfahren nnch Anspruch 35, dadurch gekennzeichnet, daß man eine Verbindung erhält, worin R¹¹ einen

    -CR¹⁰-, -COR¹⁰ oder -CNHR¹⁰-Rest bedeutet; worin H¹⁰

    0 0 0

    eine C_Wo-Alkylgruppe bedeutet, welche unsubstitulert oder mit einer oder mehreren Halogruppen substituiert ist, oder einen Ara-C^-alkylrest bedeutet.
36. 37. Verfahren nach Anspruch 36, dadurch gekennzeichnet daß man eine Verbindung erhält, worin R¹¹ einen Acetyl-, 2,2,2-Trich'orethoxycarbonyl· oder 2-Chlorethyi minocarbonylrest bedeutet.
37. 38. Verfahren nach Ansprucn 33, dadurch gekennzeichnet, daß nun eine Verbindung erhält, worin R¹¹ ein Wasserstoffatom bedeutet.