DE2119082B2 - Oral verabreichbares arzneipraeparat mit serumscholesterinspiegelsenkender wirkung - Google Patents

Oral verabreichbares arzneipraeparat mit serumscholesterinspiegelsenkender wirkung

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DE2119082B2
DE2119082B2 DE19712119082 DE2119082A DE2119082B2 DE 2119082 B2 DE2119082 B2 DE 2119082B2 DE 19712119082 DE19712119082 DE 19712119082 DE 2119082 A DE2119082 A DE 2119082A DE 2119082 B2 DE2119082 B2 DE 2119082B2
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Tsutomu Higo Kyoichi Maeda Akitoshi Monnaga Fumihiko Naruke Takeshi Tokio Inkura
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Kyonn Seiyaku K K , Tokio
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    • A61K31/00Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33Heterocyclic compounds
    • A61K31/395Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/53Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with three nitrogens as the only ring hetero atoms, e.g. chlorazanil, melamine
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
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Description

Die Erfindung betrifft ein oral verabreich bares Arzneipräparat mit Serumcholesterinspiegel senkender Wirkung, enthaltend 2-Amino-4,6-diphenäthylamino-s-triazin als Wirkstoff.
2-Amino-4,6-diphenäthylamino-s-triazin ist bereits von S u t e r und Z u 11 e r in Helvetica Chimica Acta, Bd. 48 (1965), S. 1940 bis 1944, beschrieben worden. S u t e r und Zutter synthetisierten zwölf s-Triazinderivate, in der Hoffnung, oral wirksame Antidiabetika zu finden. Die Versuche gründeten auf der Tatsache, daß die s-Triazinderivate durch Ringschlußreaktion von Biguaniden entstehen, deren Blutzucker senkende Wirkung bekannt war. Wie aus der vorgenannten Literaturstelle hervorgeht, besitzt keines der zwölf s-Triazinderivate, einschließlich 2-Amino-4,6-diphenäthylamino-s-triazin, antidiabetische Wirkung. Darüber hinaus sind auch weder Einzelheiten der Darstellung von 2-Amino-4,6-diphenäthylamino-s-triazin noch irgendwelche pharmakologischen Eigenschaften dieser Verbindung beschrieben.
Aus der deutschen Offenlegungsschrift 1 907 589 sind 2-Phenäthylamino-4-amino-s-triazinderivate bekannt, die in der 6-Stellung z. B. durch einen Alkylamino- oder Dialkylaminorest mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen substituiert sein können.
Diese s-Triazinderivate hemmen die Lipoidabscheidung in den Arterienwänden ohne den Serumcholesterinspiegel zu senken. Im Verlauf der weiteren Untersuchung über den Mechanismus der antiarteriosklerotischen Wirkung und über den Zusammenhang zwischen der antiateriosklerotischen Aktivität und der Struktur der s-Triazinderivate wurde überraschenderweise gefunden, daß einige s-Triazinderivate Blutbzw. Serumcholesterinspiegel senkende Wirkung besitzen. Insbesondere das 2-Amino-4,6-diphenäthylamino-s-triazin unterdrückt die Biosynthese des Cho-Iesterins in der Leber, reduziert den Serumcholesterinspiegel und verhindert die künstlich hervorgerufene Arteriosklerose. In dieser Wirkung zeichnet sich das 2-Arnino-4,6-diphenyläthylamino-s-triazin vor den bekannten s-Triazinderivaten aus.
Das Arzneipräparat der Erfindung kann z. B. in Form einer Tablette ovl,.- Pille, als Kapsel, Sirup oder Elixier oral verabfolgt werden.
Bestandteil
2-Amino-4,6-diphenäthylamino-
s-triazin
Lactose
Kristalline Cellulose
Kartoffelstärke
Magnesiumstearat
Hydroxypropylcellulose
Menge, mg
50
7
25
15
0,5
2,5
Zur Herstellung eines oral verabreichbaren Pulvers können 50 mg des Arzneistoffes mit 450 mg Lactose vermischt werden.
Die Einheitsdosis eines Sirups kann aus 50 mg Arzneistoff, 300 mg Natriumcarboxymethylcellulose und 60 ml einfachem Sirup bestehen. Die nachstehenden Versuche erläutern die Wirkung des 2-Amino-4,6-diphenäthylamino-s-triazins.
Versuch A
Einfluß von 2-Amino-4,6-diphenylamino-s-triazin auf den Serumcholesterinspiegel von mit cholesterinreicher Nahrung gefütterten Mäusen
Männliche, 8 Wochen alte Mäuse (dd-Abstammung) mit einem Gewicht von 20 bis 23 g werden in 3 Gruppen eingeteilt. Die erste Gruppe (A) wird mit einer Grundnahrung gefüttert. Die zweite Gruppe (B) erhält ein cholesterinreiches Futter, das 2% Cholesterin und 0,1% Cholsäure, bezogen auf die Grundnahrung, enthält. Die dritte Gruppe (C) erhält ein Futter, das 2% Cholesterin, 0,1% Cholsäure und 0,0714% 2-Amino-4,6-diphenäthylarπino-s-tΓiazin, jeweils bezogen auf die Grundnahrung, enthält. Die Mäuse werden 14 Tage gefüttert und am 14. Tag getötet. Hierbei wird nach dem Decapitieren das gesamte Blut aufgefangen. Im Serum wird nach der Methode von Z a k und H e η 1 y der Gesamtcholesteringehalt bestimmt. Die Ergebnisse sind in Tabelle I zusammengestellt. In der Spalte 1 der Tabelle I gibt die Zahl in Klammern die Anzahl der Versuchstiere an. Die in der letzten Spalte angegebene Senkungsrate berechnet sich wie folgt:
Sk (°/\ - (Serumcholesteringehalt der Gruppe B) — (Serumcholesteringehalt der Gruppe C) ..
(Serumcholesteringehalt der Gruppe B) — (Serumcholesteringehalt der Gruppe A)
Tabelle I
Gruppe Körper
gewich ts-
zunahme
(ε)
Nahrungs
aufnahme
(g/kg/Tag)
Cholesterin-
dosis
(g/kg/Tag)
Serumcholesterin-
gehalt*)
(mg %)
Senkungs-
raie
(%)
A. Grundnahrung (9) 0,6
2,7
1,1
160,6
189,7.
163,2
0
3,794
3,264
173,3 ± 22,5
270,1 ± 31,9
215,4 ± 30,3**)
B. Cholesterinreiche Nahrung (10) ..
C. Cholesterinreiche Nahrung
+ Triazin (8)
56,5
♦) Mittelwert ± statistische Abweichung.
·♦) Erhebliche Senkung (P < 0,005) gegenüber der Gruppe B.
Tabelle I zeigt, daß bei den mit der tnazinhaltigen Nahrung gefütterten Mäusen (Gruppe C) der Serumcholesteringehalt gegenüber den Mäusen der Gruppe B erheblich herabgesetzt ist.
Versuch B
Einfluß von 2-Aminu-4,6-diphenäthylamino-s-triazin auf den Serumcholesterinspiegel bei Ratten
Männliche. 10 Wochen alte Wistar-Ratten von 236 bis 300 g Gewicht werden in drei Gruppen eingeteilt, die mit einer Grundnahrung gefüttert werden, die 0,0% (Gruppe A), 0,1% (Gruppe B) und 0,3% (Gruppe C) 2-Amino-4,6-diphenäthylamino-s-triazin enchält. Die Ratten werden 14 Tage mit der angegebenen Nahrung gefüttert und dann gemäß Beispiel 1 getötet. Die Ergebnisse sind in Tabelle II zusammengestellt. In der ersten Spalte der Tabelle II gibt die Zahl in Klammern die Anzahl der Versuchstiere an.
Tabelle II
Gruppe Körpergewichls-
zunahme
(g)
Triazindosis
(mg/kg/Tag)
Gewicht der Leber
pro 100 g Körper
gewicht*)
(g)
Serumcholesterin-
gehalt»)
(mg %)
A. Ohne Triazin (6)
B. 0,1% Triazin (5)
C. 0,3% Triazin (6)
23,0
3,8
13,3
0
58,1
204,9
3,821 ± 0,121
4,310 ± 0,630
5,513 ± 0,312
91,8 ± 8,3
100,2 ± 26,6
79,8 ± 7,0**)
·) Mittelwert ± statistische Abweichung.
**) Erhebliche Senkung gegenüber der Gruppe A (P < 0,025).
Versuch C
Unterdrückung der Biosynthese von Cholesterin in der Rattenleber durch 2 - Amino - 4,6 - diphenäthyl-
amino-s-triazin
Es werden männliche Wistar-Ratten, die 7 Tage mit einer Grundnahrung gefüttert werden, die 0,1 bzw. 0,3% des Triazine enthält, mit denjenigen Ratten verglichen, die mit triazinfreier Grundnahrung gefüttert werden. Am 8. Tag wird den Ratten in die Schwanzvene pro 200 g Körpergewicht ImI einer l-uC-Acetatlösung (20 μ^πβ/20 μΜοΙ pro 1 ml Lösung) injiziert. 60 Minuten danach werden die Ratten getötet. Die Lebern der Tiere werden 3 Stunden bei 80° C in 5 ml/ 1 g Leber einer lOprozentigen alkoholischen Kalilauge der Hydrolyse unterworfen.
Die erhaltene Lösung wird zur Trockne eingedampft, der Rückstand wird mit 3mal 30 ml Petroläther extrahiert. Die Petrolätherextrakte werden zur Trockne eingedampft, der Rückstand wird in 10 ml Petroläther gelöst, von denen 5 ml in ein Prüfröhrchen übergeführt und nach dem Eindampfen zur Trockne in 2 ml Aceton gelöst werden. Nach Versetzen dieser Lösung mit 4 ml einer 1 prozentigen Digitoniniösung in wäßrigem Äthanol (1:1) läßt man das Reaktionsgemisch 15 Stunden stehen. Das entstandene Cholesterindigitonid wird 2mal mit wäßrigem Äthanol (Wasser: Äthanol =1:3) gewaschen, in 3 ml Pyridin gelöst und mit Dioxan auf 10 ml verdünnt. Zur Aktivitätsbestimmung werden 10 ml eines Dioxanszintillators mit 2 ml dieser Lösung versetzt. Die Ergebnisse sind in Tabelle III zusammengestellt. In Tabelle III sind in jeder Gruppe A, B und C jeweils acht Versuchstiere verwendet worden.
Tabelle III
Gruppe
Anzahl der Zerfalle
(103/min)
A. Ohne Triazin
B. 0,1 % Triazin
C. 0,3% Triazin
18,65
7,76
9,26
Anzahl der Zerfalle
pro g Leber*)
(ICP/min/g)
2,72 ± 0,97
0,80 ±0,14
0,76 ±0,19
*) Mittelwert ± statistische Abweichung.
Tabelle III zeigt, daß bei den Versuchstieren, deren Nahrung 2 - Amino - 4,6 - diphenäthylamino - s - triazin enthält, die Biosynthese des Cholesterins aus Acetaten in der Leber deutlich gehemmt wird.
Versuch D
Einfluß von 2-Amino-4,6-diphenäthylamino-s-triazin auf die künstlich hervorgerufene Arteriosklerose bei Kaninchen
Von drei Gruppen aus jeweils fünf Kaninchen wird die Gruppe A mit einer Grundnahrung, die Gruppe B mit einer cholesterinreichen Nahrung, die 2% Cho-
lesterin, bezogen auf die Grundnahrung, und die Gruppe C mit einer Grundnahrung, die 2% Cholesterin und 0,2% des Triazins enthalten, 80 Tage gefüttert. Danach werden die Tiere getötet. Je nach dem Umfang der makroskopisch ermittelten plaquesartigen Einbzw. Ablagerung von Cholesterin (Atheromatose) erfolgt eine Bewertung von 0 bis 5. Die Ergebnisse sind
in Tabelle IV zusammengestellt. Durch die Wirkung des 2-Amino-4,6-diphenäthylamino-s-triazms wird der Cholesierinspiegel in der Aorta und in der Leber beträchtlich herabgesetzt. Aus der makroskopischen Bewertung geht hervor, daß 2-Amino-4,6-diphenäthylamino-s-triazin hemmend auf die Entstehung von Arteriosklerose wirkt.
Tabelle IV
Gruppe
Lebergewicht*)
(S)
Cholesteringehalt der Leber*)
(mg/g) Atheromatose
Aorta
Arch.
Thrac.
Abdom.
Cholesteringehalt
der Aorta*)
(mg/g)
A. Grundnahrung
B. Cholesterinreiche
Nahrung
C. Cholesterinreiche
Nahrung + Triazin.
88 ± 8
151 ± 14
140 ± 20
2,50 ± 0,16 23,49 ± 2,65 14,29 ± 3,82**)
*) Mittelwert ± statistische Abweichung.
**) Erhebliche Senkung (P < 0,01) gegenüber der Gruppe B. ***) Erhebliche Senkung (P < 0,02) gegenüber der Gruppe. B.
4,4 2,5
3,3 1,2
2,0 0,4
1,65 ± 0,28
19,87 ± 2,47
7,38 ± 2,10***)
Versuch E
Vergleich der Serumcholesterinspiegel senkenden Wirkung von 2-Amino-4,6-diphenäthylamino-s-triazin und 3 typischen Verbindungen, die aus der deutschen Offenlegungsschrift 1 907 589 bekannt sind.
Die Versuchsbedingungen und die Methodik sind die gleichen wie in Versuch A. Die zu untersuchenden Verbindungen wurden in einer Dosis von 0,0714% in Futter, das 2% Cholesterin und 0,l%Cholsäure, bezogen auf die Grundnahrung, enthält, Mäusen 14 Tage verabfolgt.
Die Ergebnisse sind in Tabelle V zusammengestellt.
Aus Tabelle V ist ersichtlich, daß 2-Amino-4,6-di-
phenäthylamino-s-triazin die Zunahme des Serumcholesterinspiegels bei den Versuchstieren am stärksten unterdrückt.
Zahl der
Versuchstiere
Tabelle V Cholesterin-
dosis
(g/kg/Tag)
Serumcholesterin-
gehalt*)
(mg %)
Serum-
cholesterin-
Index**)
Cholesterinreiche Grundnahrung 10
8
9
8
7
Körper-
gewichts-
zunahrnc
(g)
Triazin-
Tagesdosis
(mg/kg/Tag)
3,794
3,264
3,120
3,904
3,168
270,1 ± 39,1
215,4 ± 30,3
228,7 ± 36,4
228,4 ± 36,3
270,9 ± 58,1
100
79,7
84,7
84,6
100,3
A. Ohne Zusatz
B. 2-Amino-4,6-diphenäthyl-
amino-s-triazin
C. 2-Amino-4-phenäthyl-
amino-6-n-butyl-s-triazin ...
D. 2-n-Propyl-4,6-cyclohexyl-
amino-s-triazin
E. 2-Amino-4-cyclohexyl-
amino-6-äthylamino-s-tri-
azin
2,7
1,1
1,8
0,8
0,7
116,5
111,4
139,8
113,1
*) Mittelwert ± statistische Abweichung.
**) Der Serumcholesterin-Index S.I. wird nach folgender Gleichung berechnet:
s j _ Serumcholesterinspiegel der mit der Testverbindung behandelten Tiere ]0(. Serumcholesterinspiegel der unbehandelten Tiere

Claims (1)

  1. Patentanspruch:
    Oral verabreichbares Arzneipräparat mit Serumcholesterinspiegel senkender Wirkung, enthaltend 2-Amino-4,6-diphenäthylamino-s-triazin als Wirkstoff.
    IO Herstellung von 2-Amino-4,6-diphenylaminos-triazin
    Eine Suspension von 3,3 g 2-Amino-4,6-dichlors-triazin in 100 ml Wasser wird unter Kühlen und Rühren tropfenweise mit 9,7 g Phenäthylamin versetzt. Das Reaktionsgemisch wird 2 Stunden unter Rühren erhitzt, nach dem Abkühlen wird der Niederschlag abgetrennt und aus Isopropanol umkristallisiert. Hierbei erhält man 6,0 g des gewünschten Triazins in Form farbloser Nadeln vom F. 140 bis 1420C.
    Beispiel
    Die nachstehend genannten Bestandteile werden zur Herstellung einer Tablette in üblicher Weise vermischt, granuliert und verpreßt.
DE19712119082 1971-04-20 1971-04-20 Oral verabreichbares Arzneipräparat mit Serumcholesterinspiegelsenkender. Wirkung Expired DE2119082C3 (de)

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