DE3308196C2 - - Google Patents

Info

Publication number
DE3308196C2
DE3308196C2 DE3308196A DE3308196A DE3308196C2 DE 3308196 C2 DE3308196 C2 DE 3308196C2 DE 3308196 A DE3308196 A DE 3308196A DE 3308196 A DE3308196 A DE 3308196A DE 3308196 C2 DE3308196 C2 DE 3308196C2
Authority
DE
Germany
Prior art keywords
spectinomycin
alkyl
group
radical
alkenyl
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Expired - Fee Related
Application number
DE3308196A
Other languages
English (en)
Other versions
DE3308196A1 (de
Inventor
David Raymond Kalamazoo Mich. Us White
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Pharmacia and Upjohn Co
Original Assignee
Upjohn Co
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Upjohn Co filed Critical Upjohn Co
Publication of DE3308196A1 publication Critical patent/DE3308196A1/de
Application granted granted Critical
Publication of DE3308196C2 publication Critical patent/DE3308196C2/de
Granted legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D497/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having oxygen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D497/02—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having oxygen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D497/04—Ortho-condensed systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H15/00—Compounds containing hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to hetero atoms of saccharide radicals
    • C07H15/20—Carbocyclic rings
    • C07H15/22—Cyclohexane rings, substituted by nitrogen atoms
    • C07H15/222—Cyclohexane rings substituted by at least two nitrogen atoms
    • C07H15/224—Cyclohexane rings substituted by at least two nitrogen atoms with only one saccharide radical directly attached to the cyclohexyl radical, e.g. destomycin, fortimicin, neamine

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Oxygen Or Sulfur (AREA)
  • Saccharide Compounds (AREA)
  • Nitrogen And Oxygen Or Sulfur-Condensed Heterocyclic Ring Systems (AREA)

Description

Die Erfindung bezieht sich auf 6′-Alkylspectinomycin und dessen Analoga, ein Verfahren zur Herstellung derselben sowie auf Zwischenprodukte, die bei dem Verfahren ver­ wendet werden. Die Erfindung betrifft ferner einige Alkylspectinomycin-Analoge, die eine besonders gute antibakterielle Aktivität aufweisen.
Spektinomycin A ist ein bekanntes Antibiotikum und wurde erst­ mals mit einem mikrobiologischen Verfahren hergestellt (US-PS 32 34 092).
Einige Spectinomycin-Analoge werden von Rosenbrook jr. et al. in J. Antibiotics, Band 28, Seiten 953 bis 960 (1975) und J. Antibiotics, Band 31, Seite 451 (1978) beschrie­ ben. Darüber hinaus beschreiben Carney et al. Chlordeoxy­ derivate von Spectinomycin in J. Antibiotics, Band 30, Seite 960 (1977). Weiterhin berichten Foley et al. über 9-epi-4(R)-Dihydrospectinomycin in J. Org. Chem. Band 43, 22, Seiten 4355-4359 (1978). Es wird jedoch nicht be­ richtet, daß die in einer der vorstehend angegebenen Literatur offenbarten Spectinomycin-Analogen und -Derivate biologische Aktivität besitzen.
Lemieux beschreibt in Can. J. Chem., Band 51, Seite 53 (1973) eine bevorzugte Reaktion der 5-Hydroxylgruppe von 2-Desoxystreptamin (1) mit Tri-O-acetyl-2-deoxy-2-nitriso- α-D-glycopyranosylchlorid (2) unter Bildung eines α-Pseudodisaccharids, bei dem CBz eine Carbobenzyloxy­ gruppe ist. Mallams et al. haben in J. Chem. Soc. Perkin I, Seite 1118 (1976) die Lemieux-Reaktion weiter entwickelt, um Di- und Tri-saccharide zu synthetisieren.
Die Entfernung der Oxim-Gruppen wird von Lemieux et al. in Can. J. Chem. 51, Seite 19 (1973) und von Mallams et al. in J. Chem. Soc. Perkin I, Seite 1097 (1967) be­ schrieben.
Hannessian et al. (1979) beschreiben die chemische Synthe­ se von Spectinomycin.
White et al. beschreiben in Tetrahedron Letters, Juli 1979, die chemische Synthese von Spectinomycin und dessen Analogen. Die gleiche Synthese wird in der am 26. Mai 1980 hinterlegten US-Patentanmeldung Nr. 1 50 530 sowie in der am 3. März 1979 hinterlegten US-Fortsetzungsan­ meldung 20 172 beschreiben, die inzwischen fallengelassen worden ist. Die US-Patentanmeldungen 2 85 164 und 2 85 165, die beide am 20. Juli 1981 hinterlegt worden sind, be­ schreiben Verfahren zur Herstellung von 6′-Methylspectino­ mycin-Analoga und -Zwischenprodukte, die bei diesen Ver­ fahren verwendet werden.
In der am 16. Oktober 1981 hinterlegten US-Patentanmel­ dung 3 12 035 wird ein Verfahren zur Desmethylierung von Spectinomycin oder dessen Analogen und die Realkylierung der Zwischenprodukte beschrieben und aus der am 23. Ok­ tober 1981 hinterlegten US-Patentanmeldung 3 14 261 gehen Spectinomycin-Analoge hervor, bei denen Änderungen in der 3′-Position durchgeführt worden sind.
Gegenstand der Erfindungg sind 6′-Alkyl-Spectinomycin und -spectino­ mycin-Analoge gemäß Anspruch 2, deren O-acylierte Derivate, ein Verfahren zur Herstellung derselben sowie die Enolacetat­ zwischenstufen mit der Definition der Substituenten gemäß Anspruch 7.
Erfindungsgemäß wird ein Dienon mittels einer Kupfer­ katalysierten Grignard-Addition in eine Vielzahl 6′-Alkylspectinomycin-Analoga umgewandelt. Bei der Reak­ tionsfolge kommen mehrere vielseitige, anpaßbare Zwischen­ produkte zum Einsatz. Die Erfindung umfaßt eine Modifi­ kation an der C-6′-Position unter Verwendung eines Enon­ acylats.
Das erfindungsgemäße Verfaahren zur Herstellung von Ver­ bindungen der Formel I umfaßt die Verwendung von Enon­ acylat VII als Ausgangsmaterial. Das Verfahren kann durch die Reaktionsfolge des Reaktionsschemas I wieder­ gegeben und verdeutlicht werden, worin R Wasserstoff oder eine Alkyl-Gruppe ist, R′ eine gerad- oder verzweigte Alkylgruppe mit 1 bis 4 Kohlenstoffatom(en) oder eine Cycloalkylgruppe, wobei die längste Kette des zyclischen Systems 1 bis 4 Kohlen­ stoffatom (c) aufweist, ist; R₁ bis R₉ aus einer Gruppe ausgewählt werden, die aus Wasserstoff, einem niedrigen Alkyl-, einem niedrigen Alkenyl- und einem niedrigen Alkinylrest beteht; R′₂, R′₃, R′₆ und R′₇ aus einer Gruppe ausgewählt werden, die aus einem niedrigen Alkyl-, einem niedrigen Alkenyl-, einem niedrigen Alkinyl-Rest sowie aus einer Schutzgruppe besteht, die aus einer Gruppe ausgewählt wird, die aus einer Aralkoxycarbonyl-, halo­ genierten Alkoxycarbonyl- und Alkoxycarbonyl-Gruppe be­ steht; wobei einer der beiden Reste R₂ und R₃ stets Wasserstoff und einer der beiden Reste R₆ und R₇ stets Wasserstoff ist, und wobei ferner einer der beiden Reste R′₂ und R′₃ immer eine Schutzgruppe und einer der beiden Reste R′₆ und R′₇ immer eine Schutzgruppe ist; sowie R₁₀ eine Acylgruppe ist. A wird aus einer Gruppe ausge­ wählt, die aus Sauerstoff und Schwefel besteht, und B und B₁ sind gleich oder unterschiedlich und werden aus einer Gruppe ausgewählt, die aus Wasserstoff, einer Hydroxy-, Alkoxy-, einer O-niedriger Alkenyl-, einer Thio-, einer Thio-niedriger-alkyl- und einer Thio­ niedriger-alkenyl-Gruppe besteht. Einige der Zwischenpro­ dukte und Verfahrensschritte zwischen VI und I sind in der am 13. März 1979 hinterlegten US-Patentanmeldung 20 073, sowie in der am 20. Juli 1981 hinterlegten US- Patentanmeldung 2 85 164 beschrieben.
Die Zählung der Kohlenstoffe, wie sie die Verbindung I wiedergibt, wird in diesen Unterlagen stets verwendet.
Die Verbindungen, die nach dem erfindungsgemäßen Ver­ fahren hergestellt werden, umfassen die Hydrat-Form der Verbindungen der Formel I. Diese Verbindungen sind in der 3′-Position hydratisiert und weisen die Formel I′ auf; worin A, B, B₁ und R₁ bis R₁₀ die gleichen Bedeutungen haben, wie vorstehend angegeben. Auch werden pharmazeu­ tische Salze der Verbindungen der Formel I und I′ umfaßt.
"Niedriger Alkylrest" bedeutet eine Methyl-, Ethyl-, Propyl-, Butyl-, Pentyl-, Hexyl-, Heptyl- oder Octyl­ gruppe sowie deren isomere Formen.
"Niedriger Alkenyl-Rest" bedeutet eine Ethenyl-, Propenyl-, Butenyl-, Pentenyl-, Hexenyl-, Heptenyl- oder Ocetenyl- Gruppe sowie deren isomere Formen.
"Niedriger Alkinyl-Rest" bedeutet eine Ethinyl-, Propinyl-, Butinyl-, Pentinyl-, Hexinyl-, Heptinyl-, Ocitinyl-Gruppe sowie deren isomere Formen.
"Acyl-Rest" bedeutet eine Formyl-, Acetyl-, Propionyl-, Butyryl- oder Pentanoyl-Gruppe.
"Halogenierte Alkoxycarbonylgruppe" bedeutet eine Mono-, Di-, Tri-haloethoxycarbonyl-; Mono-, Di-, Tri-haloethoxy­ carbonyl-; Mono-, Tri-halopropoxycarbonyl-; Mono-, Di-, Tri-halobutoxycarbonyl- oder Mono-, Di- oder Tri-halo­ pentoxycarbonylgruppe, sowie deren isomere Formen.
"Halo" bedeutet Fluor, Chlor, Brom oder Iod.
"Aralkoxycarbonyl-Gruppe" bedeutet eine Benzyloxycarbo­ nyl-, Phenylethoxycarbonyl-, Phenylpropoxycarbonyl- oder Diphenyloctoxycarbonyl-Gruppe, sowie deren isomere Formen oder eine Fluorenylmethoxycarbonyl-Gruppe.
"Alkoxycarbonyl-Gruppe" bedeutet eine Isopropyloxycar­ bonyl-, tertiäre-Butyloxycarbonyl- oder tertiäre-Pentyl­ oxycarbonylgruppe.
"Alkylgruppe" bedeutet eine geradkettige oder unverzweig­ te Alkylgruppe, die 1 bis 20 Kohlenstoffatome enthält.
Wenn in der Beschreibung und in den Ansprüchen angegeben ist, daß mehr als eine Hydroxy- oder Alkoxy-Gruppe an einem Zuckerrest vorhanden sind, dann können diese ent­ weder gleich oder unterschiedlich sein.
Die Erfindung umfaßt die neuen Zwischenprodukte II′, III und IV. Das Dienon IV ist ein sehr vielseitiger Michael- Akzeptor, und damit ein hervorragendes Zwischenprodukt für Modifikationen.
Die Bezeichnung "α-Anomer" bedeutet einen 1′-Substituen­ ten unterhalb der Ebene des Ringsystems, und die Be­ zeichnung "β-Anomer" bedeutet Anomere, die eine C-1′- Konfiguration aufweisen, die der des Spectinomycins ent­ spricht.
Die Verbindungen, die nach dem erfindungsgemäßen Ver­ fahren hergestellt werden und erwünschte biologische Aktivität besitzen, sind β-Anomere der Verbindung I. Diese glycosidische Konfiguration findet man bei dem in der Liste 1 gezeigten Spectinomycin.
In der Stufe 1 wird das Enonacylat VII mit Dimethylformamid­ dimethylacetalin einem Lösungsmittel umgesetzt, um das Enamin VI zu ergeben. Die Reaktion wird im allgemeinen in einem Bereich zwischen 25°C und Rückflußtemperatur, vorzugsweise bei 40 bis 80°C, durchgeführt. Die Reak­ tionsdauer kann zwischen 1 und 48 h liegen und beträgt vorzugsweise 2 bis 10 h. Dimethylformamid-dimethylacetal wird im Überschuß eingesetzt. Bevorzugt wird eine Reak­ tionsdauer von 7 h und Dimethylformamid als Lösungsmittel. Andere Acetale des Dimethylformamids, wie Di-t-butyl, können gleichfalls verwendet werden.
Das Enonacetat als Ausgangsmaterial und die Verfahren zur Herstellung desselben sind in der am 16. Mai 1980 hinterlegten US-Patentanmeldung Nr. 1 50 530 beschrieben.
Das Enamin kann mit Hilfe herkömmlicher Verfahren, wie Extraktion, Chromatographie und Kombinationen davon, aus dem Gemisch isoliert werden.
In der Stufe 2 wird eine Reduktion der Seitenkette des Enamins VI unter üblichen Cyanoborhydridbedingungen durchgeführt, um das Amin V zu ergeben. Das Amin kann aus dem Reaktionsgemisch mit Hilfe herkömmlicher Metho­ den, wie Extraktion, Chromatographie oder Kombinationen davon, isoliert werden.
Die Stufe 3 umfaßt die Reaktion des Amins V mit einem Alkylhalogenid in Gegenwart eines Lösungsmittels, um das Dienon IV zu ergeben. Die Reaktion kann bei einer Temperatur zwischen etwa 0° und etwa 100°C während eines Zeitraums von etwa 1 h bis etwa 30 h erfolgen, und zwar unter Verwendung eines Überschusses an Methyliodid. Die bevorzugten Reaktionstemperaturen und -zeiten sind 20°C bis 40°C bzw. 1 bis 20 h. Die Lösungsmittel, die ver­ wendet werden können, umfassen Methylenchlorid, CHCl₃, THF und Ether. Das bevorzugte Lösungsmittel ist Methylen­ chlorid.
Eine alternative und bevorzugte Methode zur Durchführung der Stufe 3 umfaßt die Reaktion des Amids V mit meta- Chlorperbenzoesäure in einem Lösungsmittel, um das Dienon IV zu ergeben. Die Reaktion kann bei einer Tem­ peratur von etwa -20 bis 50°C während eines Zeitraums von etwa 1 min bis etwa 60 min durchgeführt werden. Die bevorzugten Reaktionstemperaturen und -zeiten be­ tragen 20 bis 30°C bzw. 5 bis 20 min. Die Lösungsmittel, die verwendet werden können, umfassen Ethylacetat/ Skellysolve B, Tetrahydrofuran, Dioxan und CH₂Cl₂. Das bevorzugte Lösungsmittel ist Ethylacetat/Skellysolve B.
In der Stufe 4 wird das Dienon IV umgesetzt mit einem Grignard-Reagens in Gegenwart eines Kupferkatalysators, um III zu bilden. Diese Reaktion wird durchgeführt mit einem Lösungsmittel und bei einer Temperatur von etwa -130 bis 0°C während eines Zeitraums von etwa 1 min bis 2 h. Die bevorzugte Temperatur und Reaktionszeit liegt zwischen -78° und -50°C bzw. 1 min bis 10 min. Lösungs­ mittel, die verwendet werden können, umfassen Diethyl­ ether, 1,2-Dimethylethan, Tetrahydrofuran und Diisopropyl­ ether. Das bevorzugte Lösungsmittel ist Tetrahydrofuran.
In der Stufe 5 wird das Enon III einer Reduktion unter­ worfen, um mit Schutzgruppen versehenes 6′-Alkylspectino­ mycin II zu ergeben. Dabei handelt es sich aus mehreren Gründen um eine sehr kritische Stufe bei dem Verfahren. Es ist schwierig, die 4′,5′-Doppelbindung zu reduzieren, ohne daß eine Reduktion der 3′-Carbonylgruppe erfolgt. Palladiumkatalysatoren, d. h. 10% Palladium auf Barium­ sulfat (ionisches Palladium, brauner Katalysator) können mit teilweisem Erfolg verwendet werden, wie vorstehend beschrieben, jedoch werden die Schutzgruppen, insbeson­ dere Carbobenzyloxy-Gruppen, entfernt, so daß die Trennungsprobleme schwieriger werden. Weiterhin sind Palladiumkatalysatoren bei den Analogen mit höher substi­ tuierten Zuckerseitenketten weniger wirksam. Es wird deshalb Platinoxid in Gegenwart eines Lösungsmittels und einer Base bevorzugt.
Ein zweiter wichtiger Vorteil besteht darin, daß die Schutzgruppen bestehen bleiben, so daß das Produkt mittels Chromatographie gereinigt werden kann, bevor eines von mehreren Verfahren zur Schutzgruppenentfernung angewendet wird. Die Reaktion wird durchgeführt, indem man das Enon III in dem Lösungsmittel löst, eine Base und Platinoxid zufügt und dann das Gemisch mit Wasser­ stoff in Berührung bringt. Die Reduktion wird bei einer Temperatur zwischen 20 und 40°C während eines Zeitraums von etwa 1 h bis 4 h durchgeführt. Eine Temperatur und Reaktionsdauer von 20 bis 40°C bzw. 2 bis 3 h wird be­ vorzugt.
Eine alternative und bevorzugte Methode für die Durch­ führung der Stufe 5 umfaßt die Reduktion des Didehydro­ spectinomycins III zu dem mit einer Schutzgruppe ver­ sehenen 6′-Spectinomycins II durch Reaktion desselben mit Li-Selectrid, einer Tri-sek.-butylborhydrid-Lösung. Die Reaktion wird durchgeführt, indem man das Didehydro­ spectinomycin III in einem Lösungsmittel löst und die Lithiumlösung sowie anschließend eine Base und Wasser zugibt. Die Reduktion wird bei einer Temperatur zwischen etwa 100 bis -10°C innerhalb von 5 bis 40 min durchge­ führt. Eine Temperatur und eine Reaktionsdauer zwischen -78 bis -10°C bzw. 5 bis 60 min wird bevorzugt. Die Lösungsmittel, die verwendet werden können, umfassen Tetrahydrofuran, Dioxan, 1,2-Dimethoxyethan und Diethyl­ ether. Das bevorzugte Lösungsmittel ist Tetrahydrofuran.
In der Stufe 6 wird die Verbindung der Formel II von Schutzgruppen befreit, um die Verbindung der Formel I zu ergeben. Die speziellen Bedingungen zur Schutzgruppen­ entfernung hängen von den jeweiligen Gruppen ab, d. h. den Gruppen R′₂ oder R′₃ und R′₆ oder R′₇, die das Amin an dem Actinaminring schützen bzw. blockieren. Falls diese Gruppe eine Benzyloxycarbonyl- oder Aralkoxycar­ bonyl-Gruppe ist, kann die Schutzgruppenentfernung bei einem Wasserstoffdruck von -0,7 Pascal bis =14 Pascal mit einem herkömmlichen Katalysator erfolgen, beispiels­ weise mit Palladium-Schwarz, Palladium auf Kohle, Palla­ dium auf Bariumsulfat oder Palladium auf Bariumcarbonat, wobei es in dem Lösungsmittel suspendiert ist, beispiels­ weise in Isopropanol, absolutem Ethanol, Methanol, Ethyl­ acetat, Toluol oder Tetrahydrofuran. Die in situ-Bildung von Wasserstoff aus Ameisensäure in Methanol wird manch­ mal bevorzugt.
Statt dessen kann die Schutzgruppenentfernung von Ver­ bindungen, in denen R′₂, R′₃ und R′₆ oder R′₇ Alkoxycar­ bonyl- oder Aryloxycarbonylgruppen sind, in Gegenwart einer Säure in einem Lösungsmittel, wie in Nitromethan oder Methylenchlorid, durchgeführt werden.
Wenn R′₂ oder R′₃ sowie R′₆ oder R′₇ eine Haloalkoxy­ carbonylgruppe sind, wird die Schutzgruppenentfernung vorzugsweise in Gegenwart von Zink durchgeführt.
Ein besonders wirksames Verfahren zur Herstellung der Verbindung der Formel VI ist in dem Reaktionsschema II wiedergegeben.
Die Stufe I umfaßt die Umsetzung von N,N′-Dibenzyloxy­ carbonyl-spectinomycin (JACS Band 85, Seite 2652, 1963) mit Ameisensäure in Gegenwart von Essigsäureanhydrid­ ethylacetat und Pyridin. Die Reaktion wird bei einer Temperatur zwischen etwa -70 und 10°C während eines Zeit­ raums von etwa ½ h bis etwa 30 h in Gegenwart eines Lösungsmittels durchgeführt. Der bevorzugte Temperatur­ bereich beträgt etwa -40 bis 0°C und die bevorzugte Reaktionszeit etwa 10 bis 18 h. Die Lösungsmittel, die verwendet werden können, umfassen Ethylacetat, Tetra­ hydrofuran, Methylenchlorid, Chloroform und 1,2- Dimethylethan. Das bevorzugte Lösungsmittel ist Ethyl­ acetat. Durch die Stufe 1 wird eine Verbindung der Formel IX erhalten.
In der Stufe 2 wird die Verbindung der Formel IX mit Essigsäureanhydrid und einer Base umgesetzt, um eine Verbindung der Formel VIII zu ergeben. Die Reaktion wird in Abwesenheit oder in Gegenwart eines Lösungs­ mittels bei einer Temperatur zwischen etwa 20 und 90°C, vorzugsweise zwischen 50 und 70°C, während eines Zeit­ raums von etwa 2 bis 30 h, vorzugsweise 10 bis 20 h, durchgeführt. Die Lösungsmittel, die verwendet werden können, umfassen Ethylacetat, Tetrahydrofuran, 1,2- Dimethyloxyethan und Chloroform. Das bevorzugte Lösungs­ mittel ist Ethylacetat.
In der Stufe 3 wird die Verbindung VIII einer Licht­ behandlung in Gegenwart von Dibromdimethylhydantoin unterworfen, um ein C₃-Carbonyl in Form der Verbindung der Formel VII zu bilden. Die Reaktion wird bei einer Temperatur von etwa 10 bis etwa 100°C, vorzugsweise 40 bis 80°C, bei einer Reaktionsdauer von 2 bis 60 min, vorzugsweise 10 bis 20 min, durchgeführt. Durch diese Stufe wird eine ungesättigte Bindung an der 4,5-Position hervorgerufen.
In der Stufe 4 wird die Verbindung der Formel VII mit Dimethylformamidacetyl in Gegenwart von Dimethylformamid umgesetzt, wobei das Produkt mit Methanol oder Wasser um­ gesetzt wird, um eine Verbindung der Formel VI zu er­ geben. Die Stufe 4 wird bei einer Temperatur von etwa 30 bis 90°C, vorzugsweise 40 bis 70°C und während eines Zeitraums von etwa 2 bis 6, vorzugsweise 3 bis 5 h, durch­ geführt. Jedes Produkt, das in einer der oben angegebenen Stufen hergestellt wird, kann aus demm Reaktionsgemisch nach herkömmlichen Verfahren entfernt werden.
Zur Isolierung eines Analogen oder eines asterischen Gemischs einer Verbindung mit der Formel I kann jede herkömmliche Methode verwendet werden, so daß die hier beschriebenen Methoden nicht einschränkend zu verstehen sind. Falls eine Isolierung unter wasserfreien Bedin­ gungen durchgeführt wird, werden Verbindungen erhalten, die eine Carbonylgruppe in der 3′-Position (Formel I) aufweisen. Wenn wäßrige Bedingungen angewendet werden, können Verbindungen erhalten werden, die in der 3′-Posi­ tion (Formel I′) hydratisiert sind, abgesehen von den Verbindungen VII und VI, die keine Hydrate bilden.
Die rohen Analogen können durch Adsorption an einer Säule eines schwach sauren Ionenaustauschers, wie Amberlite® IRC-50 oder CG-50, gefolgt von einer Elution mit einem Lösungsmittel, wie Wasser, Methanol, Ethanol, Ether, Tetrahydrofuran, 1,2-dimethoxyethan oder p-Dioxan, die Chlorwasserstoffsäure, Bromwasserstoffsäure, Iod­ wasserstoffsäure und Schwefelsäure enthalten, gereinigt werden.
Die sauren Salze können dadurch hergestellt werden, daß die Verbindungen der Formel I mit der betreffenden Säure auf einen pH-Wert von weniger als 7,0, vorzugsweise auf etwa pH 2 bis pH 3, neutralisiert werden. Geeignete Säuren für diesen Zweck sind Chlorwasserstoffsäure, Schwefel­ säure, Phosphorsäure, Sulfaminsäure und Bromwasserstoff­ säure. Die sauren und basischen Salze der Ver­ bindungen können für die gleichen biologischen Zwecke wie die Stammverbindungen verwendet werden.
Die Verbindungen der Formel I verhindern das Wachstum von Mikroorganismen in verschiedenen Umgebungen. Bei­ spielsweise sind Formel-I-Verbindungen, die die β-Konfi­ guration aufweisen, wirksam gegenüber Escherichia coli, so daß sie für die Verringerung, Unterbrechung und Be­ seitung der Schlammbildung bei Papiermühlen aufgrund ihrer antibakteriellen Wirkung gegenüber diesem Mikro­ organismus verwendet werden können. Die β-Anomeren können auch verwendet werden, um die Lebensdauer von Trichomonas foetus-, Trichomonas hominis- und Trichomona vaginalis-Kulturen zu verlängern, indem dieselben von einer Escherichia coli-Verunreinigung befreit werden. Weiterhin sind die β-Anomeren wirksam gegenüber Bacillus subtilis, so daß sie zur Herabsetzung oder Verhinderung des Geruchs von Fisch oder Fischkörben oder -kisten ver­ wendet werden können, der durch diesen Organismus her­ vorgerufen wird. Die β-Anomeren können auch dazu ver­ wendet werden, Labortische und -einrichtungen mycologi­ scher Laboratorien zu reinigen. Die β-Anomeren sind ferner gegenüber Klebsiella pneumoniae wirksam.
Die Verbindungen der Formel I sind auch bei der Behand­ lung bakterieller Infektionen wirksam, beispielsweise bei der Gonorrhöe von Säugetieren, einschließlich Menschen.
Verbindungen, die eine entsprechend gute antibakterielle Wirksamkeit besitzen, sind die Verbindungen der Formel I, bei denen R′ eine geradkettige, cyclische oder verzweigte Alkylgruppe ist, wobei die größte Länge der Kette oder des cyclischen Systems 1 bis einschließlich 4 Kohlen­ stoffatome aufweist. Beispiele für R′ sind Ethyl, Propyl, Isopropyl, Butyl, t-Butyl und Cyclohexyl. Die Verbin­ dungen 6′-n-Propylspectinomycin, 6′-n-Butylspectinomycin und 6′-Pentylspectinomycin sind besonders wirksame anti­ bakterielle Mittel.
Die erfindungsgemäßen Zusammensetzungen liegen zur Ver­ abreichung bei Menschen oder bei Tieren in Einheitsdosis­ formen vor, beispielsweise als sterile neutrale Lösungen oder Suspensionen, Augentropfen, sowie Wasser-in-Öl- Emulsionen, die geeignete Mengen der Verbindungen der Formel I enthalten.
Bei der parenteralen Verabreichung werden flüssige Ein­ heitsdosisformen hergestellt, indem die Verbindung und ein steriler Träger, vorzugsweise Wasser, verwendet wer­ den. Die Verbindung kann, in Abhängigkeit von dem ver­ wendeten Träger und der verwendeten Konzentration, in dem Träger entweder suspendiert oder gelöst sein. Wenn Lösungen hergestellt werden, kann die Verbindungen zur Injektion in Wasser gelöst und durch Filtrieren steri­ lisiert werden, bevor sie in eine geeignete Phiole oder Ampulle abgefüllt und eingeschlossen wird. Vorteilhaf­ terweise werden Zusatzstoffe, wie Lokalanästhetika, Konservierungsmittel und Puffermittel in dem Träger ge­ löst. Um die Stabilität zu erhöhen, kann die Zusammen­ setzung nach dem Abfüllen in die Phiole gefroren und das Wasser im Vakuum entfernt werden. Das getrocknete lyophi­ lisierte Pulver wird dann in der Phiole eingeschlossen, wobei eine Wasserphiole zur Injektion mitgeliefert wird, um die Flüssigkeit vor der Anwendungg neu zu bilden.
Eine parenterale Suspension kann im wesentlichen auf die gleiche Weise hergestellt werden, außer daß die Verbin­ dung in dem Träger nicht gelöst sondern suspendiert wird, wobei die Sterilisierung nicht durch Filtrieren erfolgen. Die Verbindung kann sterilisiert werden, indem sie Ethy­ lenoxid ausgesetzt wird, bevor sie in dem sterilen Träger suspendiert wird. Vorteilhafterweise enthält die Zu­ sammensetzung ein oberflächenaktives oder Netzmittel, um eine gleichmäßige Verteilung der Verbindung zu er­ leichtern.
Die Bezeichnung "Einheitsdosisform" wird in diesem Zu­ sammenhang für körperlich getrennte Einheiten verwen­ det, die als Einheitsdosen für Menschen und Tiere geeig­ net sind, wobei jede Einheit eine vorgegebene Wirkstoff­ menge enthält, die berechnet worden ist, um die gewünsch­ te therapeutische Wirkung in Verbindung mit den erfor­ derlichen pharmazeutischen Verdünnungsmitteln, Träger oder Transportmitteln hervorzubringen. Die Spezifizierungen der erfindungsgemäßen Einheitsdosisformen werden bestimmt und sind direkt abhängig von (a) den jeweiligen Eigen­ schaften des Wirkstoffs und der speziellen Wirkung, die erreicht werden soll, und (b) den Beschränkungen, die der Mischtechnik innewohnen, um einen Wirkstoff zur Anwendung bei Menschen und Tieren einzuarbeiten, wie sie in dieser Beschreibung im einzelnen wiedergegeben wer­ den, wobei es sich um erfindungsgemäße Maßnahmen handelt. Beispiele für geeignete Einheitsdosisformen nach der Er­ findung sind Ampullen, Phiolen, Aerosole mit Dosierab­ gabeeinrichtungen, getrennte Mehrfache derselben und andere hier beschriebene Formen.
Zur Behandlung wird eine wirksame Menge der Verbindung angewandt. Die Behandlungsdosis hängt von den zahl­ reichen Faktoren ab, die dem Fachmann bekannt sind. Dazu gehört beispielsweise der Verabreichungsweg und die Wirk­ samkeit der betreffenden Verbindung. Ein Dosierplan beim Menschen, nachdem mit einer Einzeldosis etwa 2 bis etwa 4000 mg der Verbindung parenteral oder in Form der er­ findungsgemäßen Zusammensetzung verabreicht werden, er­ weist sich bei bakteriellen Infektionen als wirksam. Ins­ besondere weist die Einzeldosis 5 bis etwa 200 mg der Verbindung auf.
Nachstehend ist die Herstellung von Spectinomycin- Analogen sowie von Zwischenprodukten, die zu deren Her­ stellung geeignet sind, beispielsweise beschrieben.
Für den Fachmann liegen Abänderungen von dem Ver­ fahren sowohl im Hinblick auf die Analogen, wie auf die Ausgangsverbindungen der Analogen der erfindungsgemäßen Verbindungen sowie im Hinblick auf die Reaktionsbedin­ gungen und -methoden auf der Hand.
Beispielsweise sollen vom Schutzumfang der Erfindung bei jeder der nachstehend beschriebenen Präparationen und Beispiele die korrespondierenden Stereoisomeren jeder an­ gegebenen Verbindung jeweils mitumfaßt werden.
Ferner wird ein Vergleichsversuch angeführt, der die Überlegenheit der erfindungsgemäß beanspruchten Verbindungen bezüglich ihrer in­ vivo-Aktivität gegen "Streptococcus pyogenes" und "Haemophilus influenzae" zeigt.
Präparation 1 N,N′-Dibenzyloxycarbonyl-2,6-di-O-formyl-spectinomycin
In einen 5-l-Kolben, der mit einem Rührer und einem Thermometer versehen ist, wird Ethylacetat (1,33 l) und 97%ige Ameisensäure (255 ml) gegeben. Es wird Essigsäure­ anhydrid (618 ml) hinzugegeben, wobei mit Trockeneis/Ace­ ton gekühlt wird, so daß die Temperatur unterhalb -40°C bleibt. Es wird langsam Pryridin (1,09 l) hinzugegeben, so daß die Temperatur etwa -40°C beträgt.
Es wird N,N′-Dibenzyloxyspectinomycin (100 g) hinzuge­ geben, wobei sich das Kühlbad auf Raumtemperatur erwärmt und das Rühren über Nacht fortgesetzt wird. Die Lösung wird mit Ethylacetat (1,65 l) verdünnt, mit 0,5 N Chlor­ wasserstoffsäure (5×675 ml), Wasser (2×675 ml), 10%igem wäßrigem Natriumbicarbonat (2×675 ml) und Koch­ salzlösung (2×175 ml) gewaschen. Nach dem Trocknen und Einengen der organischen Schicht verbleiben 105 g N,N′- Dibenzyloxycarbonyl-2,6-di-O-formylspectionomycin.
CMR (d₆-Aceton): 201,6, 161,4, 161,0, 157,1, 13,6, 129,1, 128,4, 128,1, 97,1, 92,1, 73,7, 71,7, 68,3, 67,7, 67,6, 65,9, 56,1 ppm.
Wenn ein Verfahren ähnlich dem der Präparation 6 ange­ wendet wird, das N,N′-Dibenzyloxyspectinomycin, jedoch durch das geeignete substituierte N,N′-Dibenzyloxy­ spectinomycin ersetzt wird, werden die Di-O-formyl­ spectinomycine nach den Tabellen I und II erhalten.
Tabelle I
R₁
R₅
CH₃-
CH₃-
C₂H₅- C₂H₅-
C₃H₇- C₃H₇-
C₄H₉- C₄H₉-
C₅H₁₁- C₅H₁₁-
C₈H₁₁- C₈H₁₁-
CH₂=CH- CH₂=CH-
CH≡C- CH≡C-
Tabelle II
R₁
R₅
CH₃-
CH₃-
C₂H₅- C₂H₅-
C₃H₇- C₃H₇-
C₄H₉- C₄H₉-
C₅H₁₁- C₅H₁₁-
C₈H₁₁- C₈H₁₁-
CH₂=CH- CH₂=CH-
CH≡C- CH≡C-
Präparation 2 N,N′Dibenzyloxycarbonyl-2,6-di-O-formyl-2′-O- acetylspectinomycin-enol-acetat
N,N′-Dibenzyloxycarbonyl-2,6-di-O-formylspectinomycin (7,0 g), Essigsäureanhydrid (15,0 ml), Pyridin (30,0 ml), Dimethylaminopyridin (0,5 g) werden zu Ethylacetat (50 ml) in einen 250 ml Kolben gegeben und über Nacht auf 55° erwärmt. Das Reaktionsgemisch wird mit Ethylacetat (500 ml) und Hexan (500 ml) verdünnt und mit 0,6 Chlor­ wasserstoffsäure (3×1 l), (1×0,5 l) und dann mit gesättigtem Natriumbicarbonat (2×500 ml) und Koch­ salzlösung (2×500 ml) extrahiert. Die organischen Phasen werden über Natriumsulfat getrocknet und auf 7,0 g N,N′-Dibenzyloxycarbonyl-2,6-di-O-formyl-2′-O- acetylspectinomycin-enol-acetat eingeengt.
CMR (d₆-Aceton): 168,9, 167,7, 161,4, 161,0, 157,1, 139,9, 137,8, 129,1, 128,4, 128,2, 128,1, 122,8, 94,7, 92,2, 74,1, 71,3, 69,1, 67,6, 67,2, 56,3, 55,5, 31,4, 30,7, 21,1, 21,0, 20,7 ppm.
Wenn ein der Präparation 2 ähnliches Verfahren angewendet wird, das N,N′-carbobenzyloxycarbonyl-2,6-di-O-formyl­ spectinomycin jedoch durch das entsprechende substituier­ te 2,6-Di-O-formyl-2′-O-acetylspectinomycin ersetzt wird, werden die Enamine der Tabellen III und IV erhal­ ten.
Tabelle III
Tabelle IV
Präparation 3 N,N′-Dibenzyloxycarbonyl-2,6-di-O-formyl-2′-O- acetyl-4′,5′-didehydrospectinomycin
N,N′-Dibenzyloxycarbonyl-2,6-di-O-formyl-2′-O-acetyl­ spectinomycin-enol-acetat (5,26 g) wird in Tetrachlor­ kohlenstoff (75 ml) gelöst, und es wird Dibromdimethyl­ hydantoin (1,05 g) zugegeben. Die Lösung wird unter Rückfluß erwärmt, und zwar mit einem bei sichtbaren Licht wirksamen Initiator. Nach 20 min wird die Lösung gekühlt und mit Chloroform (200 ml) und Wasser (100 ml) verdünnt. Die Phasen werden getrennt, wobei die orga­ nischen Phasen mit wäßrigem Natriumchlorid (60 ml) ge­ waschen werden. Die organischen Phasen werden über Natriumsulfat getrocknet und eingeengt, um 5,65 g N,N′-Dibenzyloxycarbonyl-2,6-O-formyl-2′-O-acetyl-4′, 5′-didehydrospectinomycin zu ergeben.
CMR (d₆-Aceton): 182,4, 173,4, 170,0, 161,6, 161,0, 157,0, 137,6, 129,2, 128,6, 128,2, 103,4, 95,7, 93,1, 73,7, 72,1, 67,8, 66,9, 56,1, 55,7, 31,8, 30,6, 21,0 ppm.
Wenn ein der Präparation 3 ähnliches Verfahren angewen­ det wird, das N,N′-Dicarbobenzyloxycarbonyl-2,6-di-O- formyl-acetylspectinomycin jedoch durch das geeignete substituierte Enolacetat ersetzt wird, werden die 4′,5′-Didehydrospectinomycine der Tabellen V und VI er­ halten.
Tabelle V
Tabelle VI
Präparation 4 N,N′-Dicarbobenzyloxy-2′-O-acetyl-6-[(dimethylamino)- methylen]-4′,5′-didehydrospectinomycin
Eine Lösung von N,N′-Dicarbobenzyloxy-2′-O-acetyl-4′,5′- didehydrospectinomycin (22,0 g, 34,4 mMol) und Dimethyl­ formamid-dimethylacetal (100 ml) in Dimethylformamid (100 ml) wird 7 h bei 50-55°C unter Drieritschutz ge­ rührt. Die braune Lösung wird im Vakuum eingeengt und der Rückstand mit Silicagel (250 g) chromatographiert, das im feuchten Zustand in einen gesinterten 2-l-Glas­ trichter gefüllt worden ist. Das Gemisch wird mit 5%igem (2 l), 7%igem (3 l), 33%igen (3 l), 50%igem (6 l) Acetonitril in Chloroform innerhalb von 1,5 h eluiert. Es werden Fraktionen von jeweils ½ l genommen. Die Fraktionen werden mit Dünnschichtchromatographie (1/1 Acetonitril in Chloroform) bestimmt und vereinigt, um 19,78 g reines N,N-Dicarbobenzyloxy-2′-O-acetyl-6- [(dimethylamino)-methylen]-4′,5′-didehydrospectino­ mycin und 3,30 g N,N-Dicarbobenzyloxy-2′-O-acetyl-6- [(dimethylamino)-methylen]-4′,5′-didehydrospectino­ mycin, das etwas DMF (Dimethylformamid) enthält, zu er­ geben. Die letztere Fraktion wird erneut, wie oben an­ gegeben, chromatographiert (jedoch unter Verwendung von 60 g Silicagel), um 2,7 g reines N,N-Dicarbobenzyl­ oxy-2′-O-acetyl-6-[(dimethylamino)-methylen]-4′,5′- didehydrospectinomycin zu ergeben. Die Gesamtausbeute beträgt 22,53 g (94%ige Ausbeute).
CD(CH₃OH)[R]₃₁₁nm-10,400±1,200, [R]₂₈₅-2,500±1,200, [R]₂₄₆-1,200±1,200.
IR(mull): 3380, 1750, 1695, 1675sh, 1600, 1555, 1500, 1385, 1350, 1280, 1240, 1195, 1185, 1145, 1110, 1085, 1065, 1025, 1000, 960, 770, 740, 645 cm-1.
PMR (CDCl₃): 2,13 (3H, s), 2,82 (3H, s), 2,89 (6H, br.s), 2,91 (3H, s), 5,10 (4H, br.s), 5,16 (1H, s), 5,97 (1H, s), 7,30δ (10H, s).
CMR (CD₃COCD₃): 20,9, 31,2, 31,5, 30-44 br, 36,3, 59,6, 66,2, 67,3, 74,6, 75,4, 88,7, 94,9, 95,0, 95,1, 95,5, 128,3, 129,1, 137,9, 138,0, 150,3, 157,2, 157,7, 163,3, 169,8, 171,2, 180,3 PPM.
Massenspektrum, m/c (diTMS): 839 (M+), 824, 797, 779, 730, 688. Berechneter Peak: 839, 3480;
gefunden: 839, 3466.
Wenn der Präparation 4 ähnliche Verfahren angewendet werden, N,N′-Dicarbobenzyloxy-2′-O-acetyl-4′,5′-dide­ hydrospectinomycin jedoch durch das geeignete substi­ tuierte Enonacetat ersetzt wird, werden die Enamine der Tabelle VII und VIII erhalten.
Tabelle VII
Tabelle VIII
Präparation 5 N,N′-Dicarbobenzyloxy-2′-O-acetyl-6-[(dimethyl­ amino)-methylen]-4′,5′-didehydrospectinomycin
N,N′-Dibenzyloxycarbonyl-2,6-di-O-formyl-2′-O-acetyl- 4′,5′-di-dehydrospectinomycin (5,50 g) wird in Dimethyl­ formamid (39,0 ml) gelöst und es wird Dimethylformamid­ dimethylacetal (36,0 ml) hinzugegeben. Nach 4stündigem Erhitzen auf 55 bis 60°C wird Methanol (36 ml) hinzu­ gegeben, und das Erwärmen wird bei 55 bis 60°C 3 h fort­ gesetzt. Der Rückstand wird in Chloroform (15 ml) auf­ genommen und auf Silicagel (200 ml) in einem Filter auf­ gebracht. Das Produkt wird nach dem restlichen DMF durch Elution mit Chloroform (1,5 l), 5%igem Acetonitril in Chloroform (0,8 l), 30%igem Acetonitril in Chloroform (150 ml) und Acetonitril (1 l) ausgewaschen. Die Frak­ tionen werden vereinigt, um 2,71 g N,N′-Dicarbobenzyl­ oxy-2′-O-acetyl-6-[(dimethylamino)-methylen]-4′,5′- didehydrospectinomycin zu ergeben.
CMR (d₆-Aceton): 180,3, 171,2, 169,8, 157,0, 150,3, 137,9, 129,0, 128,2, 95,5, 95,2, 95,1, 94,8, 88,7, 75,3, 67,3, 66,2, 59,9, 56,7, 41,0, 31,4, 30,7, 21,2 ppm.
Wenn ein der Präparation 5 ähnliches Verfahren ange­ wendet wird, jedoch N,N′-Dibenzyloxycarbonyl-2,6-di-O- formyl-2′-O-acetyl-4′,5′-didehydrospectinomycin durch das geeignete substituierte 4′,5′-Didehydrospectinomycin ersetzt wird, werden die Enamine der Tabellen IX und X erhalten.
Tabelle IX
Tabelle X
Präparation 6 N,N′-Dicarbobenzyloxy-2-O′-acetyl-6′-(dimethyl­ aminomethyl)-4′,5′-didehydrospectinomycin
N,N′-Dicarbobenzyloxy-2′-O-acetyl-6′-[(dimethylamino)- methylen]-4′,5′-didehydrospectinomycin (20,0 g, 28,78 mMol) und Methyl-Orange (5 mg) werden in Methanol (200 ml) gelöst. Der pH wird auf 4 mit 2N-methanolischer Chlorwasserstoffsäure eingestellt und es wird Natriumcyanoborhydrid innerhalb von 20 min portionsweise und unter ständiger Neueinstellung des pH-Werts mit 2N- methanolischer Chlorwasserstoffsäure zugegeben. Nachdem insgesamt 2,00 g (31,83 mMol) Natriumcyanoborhydrid zugegeben worden sind, wird die Lösung noch 1 h bei Raumtemperatur gerührt. Die Dünnschichtchromatographie (1 : 9 Methanol/Chloroform) zeigt, daß das Ausgangsmaterial verbraucht worden ist. Die Lösung wird eingeengt und mit Ethylacetat (500 ml), 0,1 N Natriumhydroxid (250 ml), 1,0 N NaOH (25 ml) und gesättigter Kochsalzlösung (250 ml) verdünnt. Die organische Phase wird mit Kochsalzlösung (200 ml + 100 ml) gewaschen. Die drei wäßrigen Phasen werden nacheinander mit Ethylacetat (2 × 200 ml) gewaschen. Die organischen Extrakte werden über Natriumsulfat getrocknet und eingeengt, um N,N′- Dicarbobenzyloxy-2-O′-acetyl-6′-(dimethylaminomethyl)- 4′,5′-didehydrospectinomycin in Form eines Schaumes zu ergeben (17,93 g, Ausbeute: 89%).
CD (CH₃OH): [R]₃₂₁-12,000±1,100, [R]₂₇₀ ±1,100.
UV (C₂H₅OH): 273 nm (8,800), 377 nm (sh) (63).
PMR (CDCl₃): 2.13 (3H, s), 2.17 (6H, s), 2.46 (3H, s), 3,05 (3H, s), 3.06 (3H, s), 5.05 (4H, d), 5.34 (1H, s), 5,89 (1H, s), 7.26 (1OH, d).
CMR (CD₃COCD₃): 20.9, 31.3, 45., 56.1, 57.1, 61.3, 66.1, 67.3, 74.0, 75.4, 93.7, 96.0, 103.1, 128.3, 129.1, 137.9, 157.2, 170.0, 174.9, 183.1 ppm.
Präparation 6a N,N′-Dicarbobenzyloxy-2-O′-acetyl-6′-(dimethylaminomethyl)- 4′,5′-didehydrospectinomycin
N,N′-Dicarbobenzyloxy-2′-O-acetyl-6′-[(dimethylamino)- methylen]-4′,5′-didehydrospectinomycin (57,0 g, 78,7 mMol) Ethylacetat (450 ml) und Methanol (105 ml) werden vermischt. Der pH wird mit 2N Chlorwasserstoffsäure auf 4 eingestellt, und es wird Natriumcyanoborhydrid (7,3 g) in 5 Portionen innerhalb von 5 min unter häufiger Neueinstellung des pH von 4 unter Verwendung von 2N Chlorwasserstoffsäure zugegeben. Nachdem die Zugabe des Natriumcyanoborhydrids abgeschlossen ist, wird der pH von 4 weitere 15 min aufrechterhalten. Die Dünnschichtchromatographie (1 : 9 Methanol/Chloroform) zeigt, daß das Ausgangsmaterial verbraucht worden ist. Die Lösung wird dann mit Wasser (350 ml) und Natriumhydroxid (175) vermischt, und die Phasen werden getrennt. Die obere Phase wird mit Kochsalz (250 ml) ausgewaschen, und es wird Skellysolve B (150 ml) zugegeben, um die Emulsion zu brechen. Die beiden wäßrigen Phasen werden nacheinander mit Ethylacetat (300 ml) plus Skellysolve B (75 ml) nachgewaschen, und die gesamten organischen Phasen werden über Natriumsulfat getrocknet. Nach dem Abfiltrieren des Natriumsulfats wird ein Filtrat erhalten, das N,N′-Dicarbobenzyloxy-2-O′-acetyl-6′-(dimethylaminomethyl)- 4′,5′-didehydrospectinomycin enthält.
Wenn den Präparationen 6 und 6a ähnliche Verfahren angewendet werden, jedoch N,N′-Dicarbobenzyloxy-2′-O-acetyl- 6′-[(dimethylamino)-methylen]-4′,5′-didehydrospectinomycin durch geeignete substituierte Enaminvorstufen der Tabellen I und II ersetzt werden, werden die mit Schutzgruppen versehenen Spectinomycin-Analogen der Tabellen XI und XII erhalten.
Tabelle XI
Tabelle XII
Präparation 7 N,N′-Dicarbobenzyloxy-2-O′-acetyl-6′-methylen- 4′,5′-didehydrospektinomycin
N,N′-Dicarbobenzyloxy-2-O′-acetyl-6′-(dimethylaminomethyl)- methyl)-4′,5′-didehydrospectinomycin (17,43 g, 25,0 mMol) werden in Methylenchlorid (200 ml) und Methyliodid (18,0 ml, 41,04 g, 289 mMol) gelöst, und es wird bei Raumtemperatur 6 h gerührt. Nach dem Stehenlassen bei 10°C für weitere 16 h wird die Lösung eingeengt und dann in Acetonitril/Chloroform 1 : 9 gelöst. Das Gemisch wird mit Silicagel (300 g) chromatographiert, wobei das gleiche Lösungsmittel (4 l) verwendet wird, und dann mit Acetonitril/Chloroform 1 : 3 (4 l). Die erste eluierte reine Substanz wird erhalten, indem die Fraktionen vereinigt und eingeengt werden, wobei 10,03 g N,N′-Dicarbobenzyloxy-2-O′-acetyl-6′-methylen-4′,5′- didehydrospektinomycin erhalten werden (Ausbeute: 61%).
CD (CH₃OH): [R]₃₃₄-26,100±2,300, [R]₂₄₀-44,800±2,300, [R]₂₄₄nm-10,800±2.300.
UV (C₂H₅OH): 204sh (22.500), 241 (6,750) 250sh (5,900), 256sh (4,900), 293nm (14,650).
PMR (CDCl₃): 2.13 (3H, s), 3.03 (3H, s), 3.06 (3H, s), 5.05 (4H, d), 5.44 (1H, s), 5.61 (1H, q), 5.95 (1H, s), 6.11 (1H, s), 6.19 (1H, s), 7.29pp (1OH, s).
CMR (CD₃COCD₃): 20.9, 31,4, 57.2, 60.1, 66.2, 67.4, 74.1, 74.7, 75.6, 94.0, 96.1, 104.3, 125.3, 128.4, 129.2, 131.1, 138.0, 138.1, 157.6, 166.6, 170.2, 184.0 ppm.
Präparation 7a N,N′-Dicarbobenzyloxy-2-O′-acetyl-6′-methylen-4′,5′- didehydrospectinomycin
Zu N,N′-Dicarbobenzyloxy-2-O′-acetyl-6′-(dimethylaminomethyl)- 4′,5′-didehydrospectinomycin in Ethylacetat/ Skellysolve B, das nach der Präparation 6a hergestellt worden ist, wird m-Chlorperbenzoesäure (15 g) zugegeben. Nachdem die Lösung 10 min gerührt worden ist, wird eine gesättigte Natriumbicarbonatlösung (60 ml) zugegeben, und zwar unter Mischen und Trennen der Phasen. Die organische Schicht wird mit Kochsalzlösung (250 ml) gewaschen, worauf Methanol zugegeben wird, um die Emulsion zu brechen. Die beiden wäßrigen Fraktionen werden nacheinander mit Ethylacetat (250 ml) und Skellysolve B (75 ml) gewaschen. Die vereinigten organischen Phasen werden mit Natriumsulfat getrocknet und dann zu einem festen Stoff eingeengt. Der feste Stoff wird in Chloroform gelöst, und die Lösung mit Silica (1 l, feucht in einen gesinterten 1-l-Glastrichter gefüllt) chromatographiert, wobei Chloroform (4 l), 2%iges Acetonitril/ Chloroform (2 l), 5%iges Acetonitril/Chloroform (2 l), 5%iges Acetonitril/Chloroform (2 l), 10%iges Acetonitril (4 l) und 15%iges Acetonitril (4 l) verwendet werden. Die Fraktionen 10 bis 14 werden vereinigt und eingeengt, um 15,7 g eines Gemischs zu ergeben, das N,N′-Dicarbobenzyloxy-2-O′-acetyl-6′-methylen- 4′,5′-didehydrospectinomycin enthält.
Wenn der Präparation 7 und 7a ähnliche Verfahren durchgeführt werden, jedoch das N,N′-Dicarbobenzyloxy-2-O′- acetyl-6′-(dimethylaminomethyl)-4′,5′-didehydrospectinomycin ersetzt wird durch das geeignete substituierte Didehydrospectinomycin, werden die mit Schutzgruppen versehenen Spectinomycin-Analogen der Tabellen XIII und XIV erhalten.
Tabelle XIII
Tabelle XIV
Präparation 8 N,N′-Dibenzyloxycarbonyl-2′-O-acetyl-4′,5′- didehydro-6′-n-octylspectinomycin
Ein trockener 15 ml Dreihalskolben wird mit einem Magnetrührer und einer Serumkappe versehen. N,N′-Dicarbobenzyloxy- -2-O′-acetyl-6′-methylen-4,5′-didehydrospectinomycin (332 mg, 0,5 mMol) werden in Tetrahydrofuran (10 ml) gelöst, und es wird Kupfer(I)-bromid (25 mg) zugegeben. Nach dem Kühlen des Breis auf -78°C in einer Stickstoffatmosphäre wird Heptylmagnesiumbromid (1,2 ml, 2,1 M) durch Injektion durch die Serumkappe zugegeben. Eine dünnschichtchromatographische Probe (CH₃OH : CHCl₃ 1 : 4) zeigt, daß das Ausgangsmaterial zu einem etwas weniger polaren Hauptprodukt umgewandelt worden ist. Das Reaktionsgemisch wird in eine Lösung aus Ethylacetat (20 ml) und Essigsäure (0,3 ml) gegossen. Nach dem Verdünnen mit Wasser (10 ml) und Mischen wird die organische Phase abgetrennt und mit gesättigter Natriumbicarbonatlösung (15 ml) sowie gesättigter Kochsalzlösung (10 ml) gewaschen. Die wäßrigen Extrakte werden ihrerseits mit Ethylacetat (20 ml) gewaschen. Die organischen Extrakte werden über Natriumsulfat getrocknet und zu einem Schaum eingeengt. Die Chromatographie mit 6,0 g Silica und Acetonitril-Chloroform 1 : 9 ergibt (0,32 g) gereinigtes N,N′-Dibenzyloxycarbonyl-2′-O- acetyl-4′,5′-didehydro-6′-n-octylspectinomycin.
CMR (CD₃COCD₃): 183,1, 178,4, 170,0, 157,7, 138,0, 124,1, 128,3, 102,5, 96,0, 93,8, 75,6, 73,4, 67,3, 66,1, 59,7, 57,2, 35,0, 32,4, 31,4, 30,0, 29,8, 29,6, 26,7, 23,2, 20,4, 14,3 ppm.
Massenspektrum (silyliert): M/e 856 (M⁺), 841, 769, 671, 600, 484, 356, 313, 284, 243, 217, 199, 171, 145, 73.
Wenn ein ähnliches Verfahren, wie es bei der Präparation 8 durchgeführt wurde, verwendet wird, jedoch Heptylmagnesiumbromid ersetzt wird durch das geeignete substituierte Alkylmagnesiumbromid, werden erhalten.
N,N′-Dibenzyloxycarbonyl-2′O-acetyl-4′,5′-didehydro- 6′-ethylspectinomycin.
CMR 183.1, 176,2, 170,0, 151,3, 137,81, 129,0, 128,1, 102,6, 95,9, 93,6, 75,3, 74,2, 67,3, 66,1, 60,0, 57,1, 36,8, 31,3, 20,8, 20,0, 13,6 ppm.
N,N′-Dibenzyloxycarbonyl-2′-O-acetyl-4′,5′-didehydro-6′-n-butylspect-inomycin.
CMR 183.1, 176.4, 170.0, 157.9, 138.2, 129.1, 128.7, 102.5, 96.0, 93.8, 75.6, 74.6, 67.3, 66.1, 60,0, 57.2, 35.0, 31.7, 31.4, 26.3, 22.8, 20.9, 14.1 ppm.
N,N′-Dibenzyloxycarbonyl-2′-O-acetyl-4′,5′-didehydro-6′-n-pentylspec-tinomycin.
CMR 183.1, 176.5, 170.0, 157.8, 138.4, 129.1, 128.3, 102.6, 96.0, 93.7, 75.6, 74.8, 67.3, 66.0, 60.2, 57.1, 35.0, 32.0, 31.4, 29.2, 26.6, 23.0, 20,9, 14.2 ppm.
N,N′-dibenzyloxycarbonyl-2<-O-acetyl-4′,5′-didehydro-6′-n-propylspec-tinomycin.
CMR 183.3, 176.5, 170.1, 157.2, 138.2, 129.2, 128.4, 102.6, 96.1, 93.8, 75.6, 74.6, 67.4, 66.2, 60.1, 57.3, 34.8, 32.2, 28.8, 22.7, 20,9, 13.9 ppm.
sowie die N,N′-Dibenzyloxycarbonyl-2′-O-acetyl-4′,5′- didehydro-6′-n-octyl-spectinomycin-Analogen der Tabellen XV und XVI.
Tabelle XV
B
B₁
HO-
HO-
CH₃O- HO-
C₂H₅O- HO-
HS- HO-
CH₃S- HO-
C₂H₅S- HO-
H- HO-
HO- H-
HO- CH₃O-
HO- C₂H₅O-
HO- HS-
HO- CH₃S-
HO- C₂H₅S-
HO- HO-
HO- HO-
HO- HO-
HO- HO-
HO- HO-
HO- HO-
HO- HO-
HO- HO-
Tabelle XVI
B
B₁
HO-
HO-
CH₃O- HO-
C₂H₅O- HO-
HS- HO-
CH₃S- HO-
C₂H₅S- HO-
H- HO-
HO- H-
HO- CH₃O-
HO- C₂H₅-
HO- H₂-
HO- CH₃S-
HO- C₂H₅S-
HO- HO-
HO- HO-
HO- HO-
HO- HO-
HO- HO-
HO- HO-
HO- HO-
HO- HO-
Präparation 9 N,N′-Dibenzyloxycarbonyl-6′-octyl-spectinomycin
N,N′-Dicarbobenzyloxy-2′-O-acetyl-4′,5′-didehydro-6′-n- octyl-spectinomycin (0,32 g) wird in 2-Propanol (12,0 ml) gelöst, und es wird Triethylamin (0,12 ml) zugegeben. Die Lösung wird in vier gleiche Teile geteilt und in Reagenzgläser gegeben, die jeweils 30 mg Platinoxid enthalten. Die Reagenzgläser werden vorsichtig in eine Parr- Flasche gegeben und bei einem Wasserstoffdruck von 1,4 Pascal 2 h geschüttelt. Der Katalysator wird abfiltriert, und es wird Wasser (0,7 ml) zu den vereinigten Filtraten zugegeben. Nach 16stündigem Stehenlassen wird das Filtrat eine weitere Dreiviertelstunde auf 65°C erwärmt, eingeengt und mit Silica (6 g) chromatographiert. N,N′-Dibenzyloxycarbonyl-6′-n-octylspectinomycin wird mit 0,5% (200 ml), 1% (100 ml), 1,5% (150 ml), 2% (200 ml) und 3% (100 ml) Methanol in Chloroform eluiert. Die gewünschten Fraktionen werden durch dünnschichtchromatographische Analyse ermittelt. Das Produkt stellt einen purpurfarbenen Fleck dar, wenn es mit DNP und dann mit Schwefelsäure angesprüht und anschließend erwärmt wird. Das Gewicht des Produkts beträgt 0,09 g.
CMR (CD₃COCD₃): 201,5, 157, 138,1, 129,1, 128,3, 97,5, 92,3, 75,1, 74,7, 74,6, 71,8, 67,2, 66,4, 65,6, 61,1, 60,1, 57,5, 44,1, 36,1, 32,4, 31,7, 31,4, 30,7, 30,1, 29,8, 25,7, 23,1, 14,3 ppm.
Massenspektrum (silyliert); M/e=928 (M⁺), 913, 901, 837, 923, 793, 745, 624, 611, 539, 394, 449, 359, 91.
Präparation 9a N,N′-Dibenzyloxycarbonyl-6′-propylspectinomycin
Eine Lösung von 4′,5′-Didehydro-2-O-acetyl-N,N′-dibenzyloxycarbonyl- 6′-propylspectinomycin (0,70 g) wird in Tetrahydrofuran (10 ml) gelöst und auf -78°C gekühlt. Eine 1M-Lösung von Lithium-tri-sek.-butylborhydrid in Tetrahydrofuran (3,0 ml) wird zugegeben. Nachdem unter Stickstoff bei -78°C 25 min gerührt worden ist, wird die Lösung in Ethylacetat (10 ml) plus Essigsäure (0,2 ml) gegossen. Es wird weiteres Ethylacetat (10 ml), Wasser (1,0 ml) und Triethylamin (1,0 ml) zugegeben. Nach 2 h wird weiteres Triethylamin (1,0 ml) zugegeben, und die Lösung wird 16 h bei Raumtemperatur gerührt. Es wird Skellysolve B (20 ml) und Natriumbicarbonat (gesättigte wäßrige Lösung, 15 ml) zugegeben, und die Phasen werden getrennt. Die obere Phase wird mit wäßriger gesättigter NaCl (15 ml) gewaschen. Die organische Phase wird über Natriumsulfat getrocknet und zu einem Öl eingeengt. Dieses wird mit Silicagel (40 ml), das mit Methylenchlorid gepackt worden ist, chromatographiert. Das Produkt wird mit Methylenchlorid (50 ml), Methylenchlorid/Chloroform 1 : 1 (60 ml), Chloroform (50 ml), 0,5% Methanol in Chloroform (100 ml), 1% Methanol in Chloroform (100 ml), 2,5% Methanol in Chloroform (100 ml) und 5% Methanol in Chloroform (200 ml) eluiert. Nach dem Einengen der geeigneten Fraktionen werden 0,4 g (68,3%) N,N′-Dibenzyloxycarbonyl- 6′-propylspectinomycin erhalten.
Wenn Verfahren durchgeführt werden, die demjenigen der Präparation 9 oder 9a ähnlich sind, jedoch N,N′-Dicarbobenzyloxy- 6′-octyl-spectinomycin durch geeignete substituierte N,N′-Dicarbobenzyloxy-6′-alkylspectinomycin- Analoge ersetzt wird, werden erhalten
N,N′-Dibenzyloxycarbonyl-6′-ethylspectinomycin.
CMR 201.0, 158.2, 138.2, 129.1, 128.4, 97.6, 92.3, 75.2, 74.7, 74.6, 71.5, 67.2, 66.2, 65.6, 61.1, 60.2, 57.6, 57.3, 44.1, 38.2, 31,7, 31.4, 18.2, 14.1 ppm.
N,N′-Dibenzyloxycarbonyl-6′-n-propylspectinomycin.
CMR 201.8, 156.7, 138.1, 129.1, 128.3, 97.5, 92.3, 75.1, 74.7, 74.6, 71.8, 67.2, 66.4, 65.6, 60.9, 59.9, 57.5, 44.1, 35.7, 31.4, 30.8, 27.7, 23.0, 14.2 ppm.
N,N′-Dibenzyloxycarbonyl-6′-n-butylspectinomycin.
CMR 201.5, 156.2, 138.2, 129.4, 128.6, 97.7, 92.6, 75.3, 75.1, 74.8, 72.1, 67.6, 67.7, 66.0, 61.0, 60,0, 57.8, 44.3, 35.3, 31.6, 32.5, 32.1, 31.8, 31.2, 30.2, 29.2, 25.6, 23.3, 14.6 ppm.
N,N′-Dibenzyloxycarbonyl-6′-isobutylspectinomycin.
N,N′-Dibenzyloxycarbonyl-6′-n-pentylspectinomycin.
CMR 202.0, 158.1, 138.2, 129.1, 128.4, 97.6, 92.4, 75.2, 74.6, 74.0, 71.8, 67.2, 66.4, 65.7, 61.1, 60.1, 57.5, 57.3, 44.1, 36.1, 32.3, 31.7, 31.4, 29.77, 25.6, 23.2, 14.3 ppm.
N,N′-Dibenzyloxycarbonyl-6′-(3,3-dimethyl)-n-butylspectinomycin.
N,N′-Dibenzyloxycarbonyl-6′-cyclopentenylspectinomycin.
N,N′-Dibenzyloxycarbonyl-6′-cyclohexylmethylspectinomycin.
CMR 202.0, 157.5, 138.0, 129.1, 178.3, 97.5, 92.3, 75.1, 74.7, 72.1, 67.2, 66.4, 65.6, 60.9, 60.7, 57.5, 57.3, 44.1, 38.2, 33.8, 33.5, 31.7, 31.4, 27.2, 26.9 ppm
und die 6′-n-Butylspectinomycin-Analogen der Tabellen XVII und XVIII.
N,N′-Dibenzyloxycarbonyl-6′-undecylspectinomycin.
Tabelle XVII
B
B₁
HO-
HO-
CH₃O- HO-
C₂H₅O- HO-
HS- HO-
CH₃S- HO-
C₂H₅S- HO-
H- HO-
HO- H-
HO- CH₃O-
HO- C₂H₅O-
HO -HS-
HO- CH₃S-
HO- C₂H₅S-
HO- HO-
HO- HO-
HO- HO-
HO- HO-
HO- HO-
HO- HO-
HO- HO-
HO- HO-
Tabelle XVIII
Beispiel 1 6′-n-Octylspectinomycin
N,N′-Dibenzyloxycarbonyl-6′-n-octylspectinomycin (0,09 g) wird in Methanol (7,0 ml) gelöst, und es wird unter einer Stickstoffatmosphäre gerührt. Es wird Palladium-Schwarz (60 mg) zugegeben und danach 97%ige Ameisensäure (0,45 ml). Nachdem 40 min gut gerührt worden ist, wird der Katalysator abfiltriert, und das Filtrat wird im Hochvakuum eingeengt. Der Rückstand wird mit H₂O (8 ml) aufgenommen und mit 0,1 N Chlorwasserstoffsäure (0,35 ml) auf pH 1,5 angesäuert. Die Probe wird gefriergetrocknet, um eine CMR-Probe zu erhalten. Nach dem CMR wird die Probe mit H₂O verdünnt und gefriergetrocknet, um 0,05 g 6′-n-Octylspectinomycin als Dichlorhydrat zu erhalten.
CMR (D₂O, mit CH₃CN als innerer Bezugsgröße): 92,9, 92,6, 91,1, 70,9, 68,8, 65,1, 64,7, 60,6, 58,7, 57,5, 38,2, 33,4, 30,8, 30,1, 29,5, 28,5, 28,2, 24,2, 21,5, 12,8 ppm.
Wenn ein Verfahren durchgeführt wird, das dem ähnlich ist, das im Beispiel 1 angewendet wurde, jedoch N,N′- Dicarbobenzyloxy-6′-n-octylspectinomycin durch das entsprechende substituierte mit Schutzgruppen versehene 6′-Alkyl-spectinomycin ersetzt wird, werden in Form ihrer Dichlorhydrate erhalten
6′-Ethylspectinomycin
CMR 29.8, 29.4, 60.6, 58.6, 57.6, 64.6, 70.7, 65.0, 92.7, 92.7, 91.0, 58.5, 68.8, 35.0, 16.6, 12.4 ppm.
6′-n-Propylspectinomycin
CMR 29.8, 29.4, 60.6, 58.6, 57.6, 64.6, 70.9, 64.9, 92.6, 92.6, 91.0, 38.5, 68.7, 32.5, 25.4, 21.0, 12.3 ppm.
6′-n-Butylspectinomycin
CMR 29.9, 24.4, 60.4, 58.5, 57.4, 64.5, 70.7, 64.9, 92.5, 92.5, 90.9, 38.7, 68.7, 32.9, 30.1, 23.1, 20.4, 12.5 ppm.
6′-Iso-butylspectinomycin
6′-n-Pentylspectinomycin
CMR 29.8, 29.3, 60.6, 58.6, 57.7, 64.7, 71.0, 65.0, 92.7, 91.1, 38.6, 68.8, 32.9, 30.1, 23.2, 21.0, 20.8, 12.5 ppm.
6′-(3,3-Dimethyl)-n-butylspectinomycin
6′-Cyclopentylmethylspectinomycin
6′-Cyclohexylmethylspectinomycin
CMR 30.1, 29.5, 60.6, 58.6, 57.5, 64.7, 70.9, 65.1, 92.6, 92.6, 91.1, 38.2, 68.8, 33.4, 30,7, 28.5, 28.5, 28.2, 24.2, 21.5, 12.8 ppm.
6′-n-Undecylspectinomycin
CMR 60.5, 58.6, 57.5, 64.9, 70.9, 65.2, 97.7, 92.8, 91.2, 38.8, 68.8, 33.4, 30.9, 28.4, 28.8, 28.8, 28.8, 28.8, 28.8, 28.8, 24.4, 21.5, 12.8, 30.2, 24.6 ppm.
und die 6′-n-Octylspectinomycin-Analogen der Tabellen XIX und XX.
Tabelle XIX
B
B₁
HO-
HO-
CH₃O- HO-
C₂H₅O- HO-
HS- HO-
CH₃S- HO-
C₂H₅S- HO-
H- HO-
HO- H-
HO- CH₃O-
HO- C₂H₅O-
HO- H₂-
HO- CH₃S-
HO- C₂H₅S-
Tabelle XX
B
B₁
HO-
HO-
CH₃O- HO-
C₂H₅O- HO-
HS- HO-
CH₃S- HO-
C₂H₅S- HO-
H- HO-
HO- H-
HO- CH₃O-
HO- C₂H₅O-
HO- HS-
HO- CH₃S-
HO- C₂H₅S-
Beispiel 2 6′-n-Propylspectino-mycin-sulfat
N,N′-Dibenzyloxycarbonal-6′-n-octylspectinomycin (2,20 g) wird in Methanol (100 ml) gelöst und es wird unter einer Stickstoffatmosphäre gerührt. Es wird Palladium-Schwarz (1,39 g) zugegeben und danach 97%ige Ameisensäure (4,3 ml). Nachdem der Katalysator gut gerührt worden ist, wird filtriert, und das Filtrat wird im Hochvakuum eingeengt. Der Rückstand wird in H₂O (10 ml) aufgenommen, und es wird mit wäßrigem 1 M Hydrogensulfat (3,5 ml) angesäuert. Die Probe wird gefriergetrocknet und dann aus Aceton : Wasser umkristallisiert, um 0,87 g 6′-n- Propylspectinomycin-sulfat-pentahydrat zu ergeben.
CMR (D₂O, CH₃CH als interne Bezugsgröße):
118,07, 92,67, 91,24, 91,06, 70,73, 68,94, 65,01, 64,74, 60,78, 59,15, 57,69, 38,77, 32,83, 30,35, 29,77, 25,78, 21,18 und 12,45 ppm.
Vergleichsversuch
Die erfindungsgemäßen Verbindungen 6′-Ethyl-, 6′-Propyl- und 6′-Butylspectinomycin (=5′-Propyl-, 5′-Butyl- bzw. 5′-Pentylspectinomycinderivate) wurden hinsichtlich ihrer in-vivo- Aktivität gegen das klinisch bedeutsame Bakterium "Streptococcus pyogenes" mit dem Handelsprodukt Spectinomycin bzw. dem in der DE-OS-30 08 649 genannten 5′-Ethylspectinomycinderivat (= 6′-Methylspectinomycinderivat) verglichen.
Tabelle I
Die CD₅₀-Werte belegen, daß die erfindungsgemäßen Verbindungen 3 bis 6 dem Handelsprodukt Spectinomycin hinsichtlich ihrer Aktivität gegen Streptococcus pyogenes um mindestens etwa das 10fache überlegen sind. Das 5′-Ethylderivata (=6′-Methylspectinomycin entsprechend Entgegenhaltung 1) wurde nicht in vivo gegen Streptococcus pyogenes getestet, da die homologe Reihe zeigt, daß sich die Aktivität (gegen Streptococcus pyogenes) von der Verbindung 3 (noch erfindungsgemäß) in Richtung auf das niedrigere Ausgangshomologe "Spectinomycin" (Rest in 5′-Stellung=-CH₃) erheblich verschlechtert, in Richtung auf die höheren (erfindungsgemäßen) Homogen dagegen verbessert. In "Screening Tests" gegen Haemophilus influenzae hat es sich darüber hinaus auch noch gezeigt, daß die Verbindung 2 (gemäß DE-OS 30 08 649) gegen dieses klinisch wichtige Bakterium weit weniger wirksam ist als seine höheren Homologen. Zwischen den 5′-n-C₂H₅- bis n-C₆H₁₃-Homologen ist dagegen hinsichtlich der Wirksamkeit gegen Haemophilus influenzae kein statistischer Unterschied festzustellen.
Tabelle II
In-vivo-Wirksamkeit von 6′-Alkylspectinomycin- Derivaten gegen Haemophilus influenzae Typ b*)
Der Vergleich zeigt deutlich, daß mit den erfindungsgemäßen n-alkylsubstituierten Verbindungen gegenüber den aus der DE-OS 30 08 649 tatsächlich bekannten Verbindungen unerwartete Vorteile erzielbar sind.
Liste A
Reaktionsschema
Reaktionsschema II

Claims (7)

1. Verfahren zur Herstellung eines 6′-Alkyl-spectinomycins oder -spectinomycin-Analogen mit folgender allgemeiner Formel dadurch gekennzeichnet, daß man
  • (a) ein Dienonacylat eines Spectinomycins oder Spectinomycin- Analogen mit folgender allgemeiner Formel mit einem Alkylmagnesiumhalogenid umsetzt,
  • (b) das durch die Stufe (a) gebildete Enonacylat eines 6′-Alkyl-spectinomycins oder -spectinomycin-Analogen mit folgender allgemeiner Formel mit einem Reduktionsmittel umsetzt und
  • (c) das durch die Stufe (b) gebildete 6′-Alkyl- spectinomycin oder -spectinomycin-Analoge mit folgender allgemeiner Formel von Schutzgruppen befreit und gegebenenfalls ein pharmazeutisch verträgliches Salz und Hydrat desselben hergestellt; wobei R Wasserstoff oder ein C₁- bis C₈-Alkylrest ist, R′ eine geradkettige oder verzweigte Alkylgruppe mit 1 bis 4 Kohlenstoffatom(en) oder eine Cycloalkylgruppe, wobei die längste Kette des cyclischen Systems 1 bis 4 Kohlenstoffatom(e) aufweist, ist;
    R₁ bis R₉ aus einer Gruppe ausgewählt werden, die aus Wasserstoff, einem C₁- bis C₈-Alkyl-, einem C₂- bis C₈- Alkenyl- und einem C₂- bis C₈-Alkinyl-Rest besteht, R′₂, R′₃, R′₆ und R′₇ aus einer Gruppe ausgewählt werden, die aus einem C₁- bis C₈-Alkyl-, einem C₂- bis C₈- Alkenyl- und einem C₂- bis C₈-Alkinyl-Rest sowie aus einer Schutzgruppe besteht, die aus einer Gruppe ausgewählt wird, die aus einem Aralkoxycarbonyl-, einem halogenierten Alkoxycarbonyl- und einem Alkoxycarbonylrest besteht; wobei einer der Reste R₂ und R₃ und einer der Reste R₆ und R₇ immer Wasserstoff ist, und wobei ferner einer der Reste R′₂ und R′₃ und einer der Reste R′⁶ und R′⁷ immer eine Schutzgruppe ist; R₁₀ ein Acylrest ist; A ausgewählt wird aus einer Gruppe, die aus Sauerstoff und Schwefel besteht; und B und B₁ gleich oder unterschiedlich sind und aus einer Gruppe ausgewählt werden, die aus Wasserstoff, einem Hydroxy-, einem Alkoxy-, einem O-(C₂- bis C₈-Alkenyl-, einem Thio-, einem Thio-(C₁- bis C₈)-alkyl- und einem Thio- (C₂- bis C₈)-alkenyl-Rest besteht.
2. 6′-Alkyl-spectinomycin oder -spectinomycin-Analoges mit folgender allgemeiner Formel worin R Wasserstoff oder ein C₁- bis C₈-Alkylrest ist;
R′ eine geradkettige oder verzweigte Alkylgruppe mit 1 bis 4 Kohlenstoffatom(en) oder eine Cycloalkylgruppe, wobei die längste Kette des cyclischen Systems 1 bis 4 Kohlenstoffatome aufweist, ist;
R₁ bis R₉ aus einer Gruppe ausgewählt werden, die aus Wasserstoff, einem Alkylrest bis 1 bis 8 Kohlenstoffatom(en), einem Alkenyl- oder einem Alkinylrest mit jeweils 2 bis 8 Kohlenstoffatomen besteht;
A Sauerstoff oder Schwefel bedeutet; und
B und B₁ gleich oder unterschiedlich sind und aus einer Gruppe ausgewählt werden, die aus Wasserstoff, einem Hydroxy-, einem Alkoxy-, einem O-(C₂- bis C₈)-Alkenyl-, einem Thio-, einem Thio-(C₁- bis C₈)-alkyl- und einem Thio-(C₂- bis C₈)-alkenyl-Rest besteht,
dessen hydratisierte Formen sowie pharmazeutisch verträgliche Salze des 6′-Alkyl-spectinomycins oder -spectinomycin-Analogen der allgemeinen Formel I und dessen hydratisierte Formen.
3. O-Acyliertes 6′-Alkyl-spectinomycin oder -spectinomycin- Analoges nach Anspruch 2 der folgenden allgemeinen Formel worin R′ die gleiche Bedeutung wie im Anspruch 2 hat; R₁ bis R₉ aus einer Gruppe ausgewählt werden, die aus Wasserstoff, einem Alkylrest mit 1 bis 8 Kohlenstoffatom(en), einem Alkenyl- oder einem Alkinylrest mit jeweils 2 bis 8 Kohlenstoffatomen besteht;
A Sauerstoff oder Schwefel bedeutet; und
B und B₁ gleich oder unterschiedlich sind und aus einer Gruppe ausgewählt werden, die aus Wasserstoff, einem Hydroxy-, einem Alkoxy-, einem O-(C₂- bis C₈)-Alkenyl-, einem Thio- einem Thio-(C₁- bis C₈)-alkyl- und einem Thio-(C₂- bis C₈)-alkenyl-Rest besteht, und
R₁₀ ein Acylrest ist,
dessen hydratisierte Formen, sowie pharmazeutisch verträgliche Salze des O-acylierten 6′-Alkyl-spectinomycins oder -spectinomycin-Analogen der allgemeinen Formel Ia und deren hydratisierte Formen.
4. O-Acyliertes 6′-Alkyl-spectinomycin oder -spectinomycin-Analoges nach Anspruch 3, nämlich
6′-Cyclopentylmethylspectinomycin;
6′-Cyclopentylmethylspectinomycin-dihydrochlorid;
6′-Cyclohexylmethylspectinomycin und
6′-Cyclohexylmethylspectinomycin-dihydrochlorid.
5. Verfahren zur Herstellung einer des 6′-Alkyl-spectinomycins oder -spectinomycin-Analogen mit folgender allgemeiner Formel dadurch gekennzeichnet, daß man
  • (a) ein Dienonacylat eines Spectinomycins oder Spectinomycin-Analogen mit folgender allgemeiner Formel mit einem Alkylmagnesiumhalogenid umsetzt und
  • (b) das durch die Stufe (a) gebildete Enonacylat eines 6′-Alkyl-spectinomycins oder -spectinomycin-Analogen mit folgender allgemeiner Formel mit einem Reduktionsmittel umsetzt, um ein 6′-Alkylspectinomycin oder -spectinomycin-Analoges mit folgender allgemeiner Formel zu bilden worin R, R′, R′₂, R′₃, R₄, R₅, R′₆, R′₇, R′₈, R₉, R₁₀, B und B₁ die gleichen Bedeutungen wie im Anspruch 1 besitzen.
6. Verfahren nach Anspruch 5, dadurch gekennzeichnet, daß die hergestellte Verbindung N,N′-Dicarbobenzyloxy-6′- cyclohexylspectinomycin ist.
7. Enonacylat eines 6′-Alkyl-spectinomycins oder -spectinomycin- Analogen mit folgender allgemeiner Formel worin R Wasserstoff oder ein C₁ bis C₈-Alkylrest ist;
R′ eine geradkettige, cyclische oder verzweigte Alkylgruppe ist, wobei die größte Länge der Kette oder des cyclischen Systems 1 bis einschließlich 4 Kohlenstoffatome umfaßt; R₁ bis R₉ aus einer Gruppe ausgewählt werden, die aus Wasserstoff, einem C₁- bis C₈-Alkyl-, einem C₂- bis C₈-Alkenyl- oder einem C₂- bis C₈- Alkinyl-Rest besteht;
R′₂, R′₃, R′₆ und R′₇ aus einer Gruppe ausgewählt werden, die aus einem C₁- bis C₈-Alkyl-, einem C₂- bis C₈- Alkenyl-, einem C₂- bis C₈-Alkinyl-Rest oder aus einer Schutzgruppe besteht, die aus einer Gruppe ausgewählt wird, die aus einem Aralkoxycarbonyl-, einem halogenierten Alkoxycarbonyl- und einem Alkoxycarbonylrest besteht; wobei einer der Reste R₂ und R₃ sowie einer der Reste R₆ und R₇ immer Wasserstoff sind; und wobei ferner einer der Reste R′₂ und R′₃ sowie einer der Reste R′₆ und R′₇ immer eine Schutzgruppe sind; R₁₀ ein Acylrest ist; A aus einer Gruppe ausgewählt wird, die aus Sauerstoff und Schwefel besteht, B und B₁ gleich oder unterschiedlich sind und aus einer Gruppe ausgewählt werden, die aus Wasserstoff, einem Hydroxy-, einem Alkoxy-, einem O-(C₂- bis C₈)-Alkenyl-, einem Thio-, einem Thio-(C₁- bis C₈)-alkyl und einem Thio- (C₂- bis C₈)-alkenyl-Rest besteht, ausgenommen folgende Verbindungen der allgemeinen Formel III′, worin R=H; R′=C₂H₅; R₁ bis R₉=H; B=B₁=OH; A=O oder S; R′₂=R′₇ = Carbobenzyloxy; R′₃=CH₃; R′₆=CH₃; R₁₀= sek.- oder tert.-Butyryl.
DE19833308196 1982-03-19 1983-03-08 Verfahren zur herstellung von 6'-alkyl-spectinomycin sowie alkyl-spectinomycin-analogen Granted DE3308196A1 (de)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US35972382A 1982-03-19 1982-03-19
US06/449,304 US4532336A (en) 1982-03-19 1982-12-13 6'-Alkylspectinomycins

Publications (2)

Publication Number Publication Date
DE3308196A1 DE3308196A1 (de) 1983-09-29
DE3308196C2 true DE3308196C2 (de) 1993-06-09

Family

ID=27000602

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
DE19833308196 Granted DE3308196A1 (de) 1982-03-19 1983-03-08 Verfahren zur herstellung von 6'-alkyl-spectinomycin sowie alkyl-spectinomycin-analogen

Country Status (10)

Country Link
US (1) US4532336A (de)
JP (1) JPH0776222B2 (de)
BE (1) BE896215A (de)
DE (1) DE3308196A1 (de)
FR (1) FR2523583B1 (de)
GB (1) GB2117757B (de)
HK (1) HK61788A (de)
IT (1) IT1164157B (de)
MX (1) MX9203211A (de)
NL (1) NL8300893A (de)

Families Citing this family (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4532336A (en) * 1982-03-19 1985-07-30 The Upjohn Company 6'-Alkylspectinomycins
US4578485A (en) * 1984-02-08 1986-03-25 The Upjohn Company Synthesis of spectinomycin analogs by an improved Grignard process
JPH07554B2 (ja) * 1985-03-29 1995-01-11 ジ・アップジョン・カンパニ− スペクチノマイシン同族体を用いるクラミジア感染の治療
US4730059A (en) * 1986-03-10 1988-03-08 The Upjohn Company 6'-thiomethylsubstituted spectinomycins
WO1991004256A1 (en) * 1989-09-13 1991-04-04 The Upjohn Company Gamma alkylation of a protected derivative of the enone of spectinomycin
US5048126A (en) * 1989-10-02 1991-09-17 Mclaughlin James G Protective apparel
CN104725392B (zh) * 2013-12-24 2017-01-11 中国农业大学 半抗原spe-ede及其相应的人工抗原与应用

Family Cites Families (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3234092A (en) * 1959-10-20 1966-02-08 Upjohn Co Actinospectacin and process for producing same
DE2756914A1 (de) * 1977-12-21 1979-07-05 Thomae Gmbh Dr K 4-spectinomycylamin und seine physiologisch vertraegliche salze, verfahren zur herstellung und diese stoffe enthaltende arzneimittel
US4351771A (en) * 1979-03-13 1982-09-28 The Upjohn Company Spectinomycin analogs and methods for the preparation thereof
GB2050348B (en) * 1979-03-13 1983-08-03 Upjohn Co Spectinomycin analogues
US4282152A (en) * 1979-08-23 1981-08-04 The Upjohn Company Intermediates for preparing spectinomycin and analogs thereof
BE887456R (fr) * 1981-02-10 1981-08-10 Upjohn Co Procede de production de composes intermediaires pour l'obtention de la spectinomycine et de ses analogues et produits de ce procede
US4380651A (en) * 1981-07-20 1983-04-19 The Upjohn Company Process for preparing 6'-methylspectinomycin and analogs thereof
US4420623A (en) * 1981-07-20 1983-12-13 The Upjohn Company Process and intermediates for preparing 6'-methylspectinomycin and analogs thereof
US4405797A (en) * 1981-10-16 1983-09-20 The Upjohn Company Process for preparing spectinomycin analogs: N-demethylation of spectinomycin or its analogs and realkylation of the intermediates
US4465848A (en) * 1981-10-23 1984-08-14 The Upjohn Company Spectinomycin compounds
US4532336A (en) * 1982-03-19 1985-07-30 The Upjohn Company 6'-Alkylspectinomycins

Also Published As

Publication number Publication date
IT1164157B (it) 1987-04-08
DE3308196A1 (de) 1983-09-29
FR2523583A1 (fr) 1983-09-23
MX9203211A (es) 1992-09-01
FR2523583B1 (fr) 1987-06-12
JPH0776222B2 (ja) 1995-08-16
US4532336A (en) 1985-07-30
HK61788A (en) 1988-08-19
NL8300893A (nl) 1983-10-17
GB2117757A (en) 1983-10-19
IT8320066A0 (it) 1983-03-14
GB2117757B (en) 1985-08-29
BE896215A (fr) 1983-09-19
JPH0649072A (ja) 1994-02-22
GB8304026D0 (en) 1983-03-16

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CH655728A5 (de) Erythromycin a-verbindungen, verfahren zu ihrer herstellung sowie ihre verwendung.
DE2819479C2 (de)
EP0002680B1 (de) 4-Spectinomycylamin und seine physiologisch verträgliche Salze, Verfahren zur Herstellung und diese Stoffe enthaltende Arzneimittel
DE2804508C2 (de) Epimere 4&#34;-substituierte Aminoderivate des Oleandomycins und deren Verwendung als antibakterielle Wirkstoffe
DE2409654A1 (de) Therapeutisches mittel
DE1695935A1 (de) Verfahren zur Herstellung neuer Derivate des 7-Desoxylincomycins
CH648854A5 (de) Antibiotisch wirksame aminoglykoside.
DE2900118C2 (de)
DE2804517C3 (de) Epimere 4&#34;-substituierte Aminoderivate des Oleandomycins und deren Verwendung bei der Bekämpfung von Bakterien
DE2733867C3 (de) Oleandomycinderivate und diese Verbindungen enthaltende antibakterielle Mittel
CH621558A5 (en) Process for the preparation of kanamycin derivatives with antibacterial activity
DE3308196A1 (de) Verfahren zur herstellung von 6&#39;-alkyl-spectinomycin sowie alkyl-spectinomycin-analogen
EP0022504B1 (de) 1-N-Alkylsisomicin-Derivate, Verfahren zu ihrer Herstellung und ihre Verwendung als Arzneimittel
DE2618009B2 (de) l-N-(a-Hydroxy-eo-aminoacyl)- derivate des 3&#39;-Deoxykanamycin A und diese enthaltende Arzneimittel
CH640236A5 (en) 3-(2-Aminoethylthio)-6-ethyl-7-oxo-1-azabicyclo[3.2.0]hept-2-ene-2 -carboxylic acid and process for its preparation
DE3008649C2 (de)
DE2742950C2 (de) 4-N-Alkyl-Fortimicin B-Derivate, deren Salze und ihre Verwendung bei der Bekämpfung bakterieller Infektionen
DE2512587C3 (de) 1 -N-(L-4-Amino-2-hydroxybutyryl)-6&#39; -N-alkylkanamycine A, Verfahren zu ihrer Herstellung und diese Verbindungen enthaltende pharmazeutische Mittel
CH646714A5 (de) Aprosamin-derivate.
DE2408666A1 (de) Antibiotische derivate und verfahren zu deren herstellung
DE3008631A1 (de) Neue spectinomycin-analoge und verfahren zu ihrer herstellung
AT371481B (de) Verfahren zur herstellung von neuen 4&#39;&#39;-deoxy-4&#39;&#39;-acylamidoderivaten von erythromycin
DE2741431C3 (de) l-N-(L-4-Amino-2-hydroxybutyryl)-3&#39;-desoxykanamycin-C, l-N-(L-4-Amino-2hydroxybutyryl)-3&#39;,4&#39;-didesoxykanamycin-C und deren Säureadditionssalze, Verfahren zu ihrer Herstellung und diese Verbindungen enthaltende antibakterielle Zusammensetzungen
DE2900119A1 (de) 4&#39;&#39;-desoxy-4&#39;&#39;-carbamat- und -dithiocarbamat-derivate des oleandomycins und seine ester, verfahren zu deren herstellung und solche derivate enthaltende arzneimittel
CH647771A5 (de) Sulfoniumderivate.

Legal Events

Date Code Title Description
8181 Inventor (new situation)

Free format text: WHITE, DAVID RAYMOND, KALAMAZOO, MICH., US

8128 New person/name/address of the agent

Representative=s name: HENKEL, G., DR.PHIL. FEILER, L., DR.RER.NAT. HAENZ

8110 Request for examination paragraph 44
D2 Grant after examination
8364 No opposition during term of opposition
8339 Ceased/non-payment of the annual fee