DE4134224C2 - Neue 1-Heterocyclylmethyl-3-nitro-1,2,4-triazole - Google Patents

Neue 1-Heterocyclylmethyl-3-nitro-1,2,4-triazole

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Description

Die vorliegende Erfindung betrifft neue 1-Heterocyclylmethyl-3-nitro-1,2,4-triazole, Verfah­ ren zur Herstellung derselben, einschließlich notwendiger Zwischenverbindungen, sowie deren Verwendung in Arzneimitteln, die eine verstärkte strahlensensibilisierende Wirkung aufweisen.
Es ist bekannt, daß die Strahlenresistenz einiger maligner Tumore mit großer Wahrscheinlich­ keit auf eine verringerte Sauerstoffversorgung zurückzuführen ist. Dabei entstehen zeitweise oder permanent hypoxische Zellbereiche, die sich einer wirksamen Strahlenschädigung entziehen. Zur Vernichtung dieser hypoxischen Zellbereiche ist im Vergleich zu gut sauer­ stoffversorgten Gewebe eine ca. dreifache Strahlendosis erforderlich, wodurch aber die Toleranzgrenze des gesunden Gewebes überschritten wird. Der "Sensitizer Sauerstoff" sollte somit ein Mittel der Wahl zur Effektivierung einer Strahlentherapie sein. Neben verschiede­ nen Möglichkeiten, den Sauerstoffpartialdruck im Tumorgewebe zu erhöhen, wurden in den letzten Jahren elektronenaffine Verbindungen auf ihren Einsatz als Radiosensitizer überprüft. Außer 2-Nitro-imidazolderivaten (vgl. US-PS 4 282 232 und 4 371 540) wurden in jüngster Vergangenheit verstärkt 3-Nitro-1,2,4-triazolderivate untersucht. Hierbei zeigte sich, daß diese als Radiosensitizer für hypoxische Zellen durch geringe Neurotoxizitäten den bisherigen Nitroimidazolen überlegen sind (vgl. Chem. Phar. Bull. (Japan) 37(7) (1989) 1951). Neben verschiedenen 3-Nitro-1,2,4-triazol-1-yl-essigsäurederivaten und 1-((3-alkoxy- bzw. 3- aminosubstituierten- oder 3-Carbonyloxy)-2-hydroxypropyl)-3-nitro-1,2,4-triazolen (vgl. EP-PS 212 558 und 319 329, JP-PS 63 068 575, Int. J. Radiat. Oncol. Biol. Phys. 12(7) (1986) 1063) bzw. analogen fluorsubstituierten Derivaten (vgl. EP-PS 294 847; Int. J. Radiat. Oncol. Biol. Phys. 16(4) (1989) 1054) wurden bisher 1-Glycosidyl-3-nitro-1,2,4- triazole (vgl. JP-PS 63 170 394, Eur. J. Med. Chem.-Chim. Ther. 19(1) (1984) 89) als auch 1- (2-Oxopropylsubstituierte)-3-nitro-1,2,4-triazole (vgl. JP-PS 61 194019) hergestellt und gegebenenfalls auf ihre strahlensensibilisierende Wirkung getestet. Die Wirkung dieser Verbindungen ist jedoch, insbesondere bei den für einen strahlensensibilisierenden Effekt notwendigen Konzentrationen, durch neurotoxische und andere Nebenwirkungen nicht immer zufriedenstellend.
Es besteht daher noch ein Bedürfnis nach weiteren Verbindungen mit strahlensensibilisieren­ der Wirkung, die geringe Nebenwirkungen und eine bessere Allgemeinverträglichkeit als die bisher bekannten Verbindungen aufweisen.
Überraschenderweise wurden neue 1-Heterocyclylmethyl-3-nitro-1,2,4-triazole gefunden, die eine verstärkte strahlensensibilisierende Wirkung aufweisen und in Arzneimitteln anwendbar sind.
Die Struktur der erfindungsgemäßen Verbindungen wird durch die allgemeine Formel (I) wiedergegeben:
in welcher Q für
  • - 5-Amino-1,3,4-oxadiazol-2-yl oder
  • - 5-Oxo-1,3,4-oxadiazolin-2-yl oder
  • - 5-Amino-1,2,4-Triazol-3-yl oder
  • - 4-Butyl-5-(2-methoxyethylcarbamoyl-methylsulfanyl)-1,2,4-triazol-3-yl oder
  • - 4-(3-Nitro-1,2,4-triazol-1-yl-methyl)-piperazin-1-yl
steht.
Es wurde gefunden, daß man die erfindungsgemäßen Verbindungen der allgemeinen Verbin­ dung (I), in denen Q für
  • - 5-Amino-1,3,4-oxadiazol-2-yl oder
  • - 5-Oxo-1,3,4-oxadiazolin-2-yl oder
  • - 5-Amino-1,2,4-triazol-3-yl
steht, erhält, indem man (3-Nitro-1,2,4-triazol-1-yl)-essigsäurehydrazid mit C1
-Bausteinen, wie Halogencyanen oder Phosgen, bzw. (3-Nitro-1,2,4-triazol-1-yl)-essigsäureester mit entsprechend substituieren Hydrazinderivaten zu einem disubstituierten Hydrazid umsetzt und dieses einer Cyclokondensation unter neutralen, sauren oder alkalischen Bedingungen ohne oder unter Zuhilfenahme von Verdünnungsmitteln bei Temperaturen von 0°C bis 300°C unterwirft.
Die Verbindung der allgemeinen Formel (I), in der Q für 4-Butyl-5-(2- methoxyethylcarbamoyl-methylsulfanyl)-1,2,4-triazol-3-yl steht, läßt sich herstellen, indem man in an sich bekannter Weise (3-Nitro-1,2,4-triazol-1-yl)-essigsäurehydrazid mit Butyl­ isothiocyanat umsetzt, das Reaktionsprodukt einer Cyclokondensation zu 1-((4-Butyl-5- thioxo-1,2,4-triazolin-3-yl)-methyl)-3-nitro-1,2,4-triazol unterwirft und letzteres mit Chlores­ sigsäure-(N-methoxyethyl)-amid alkyliert.
Nach einem weiteren Verfahren läßt sich die Verbindung der Formel (I), in der Q für 4-(3- Nitro-1,2,4-triazol-1-yl-methyl)-piperazin-1-yl steht, erhalten, in dem man 1-Hydroxymethyl- 3-nitro-1,2,4-triazol mit Piperazin oder 3-Nitro-1,2,4-triazol in einer MANNICH-Reaktion mit Formaldehyd und Piperazin umsetzt.
Schließlich wurde gefunden, daß die erfindungsgemäßen Verbindungen der Formel (I) in einer für Arzneimittel üblichen Formulierung überführt werden können und gute strahlensen­ sibili-sierende Wirkungen bei geringen neurotoxischen und anderen Nebenwirkungen zeigen.
Hierbei werden die Verbindungen der allgemeinen Formel (I) in an sich bekannter Weise formuliert, bevorzugt in Form von oral applizierbaren Mitteln bzw. Injektions-, Infusions- und Instillationslösungen. Beispielsweise seien die verschiedensten Formen von Tabletten, Dragees und Suppositorien oder i. v. bzw. anders applizierbare Lösungen oder Suspensionen die organische bzw. anorganische Verdünnungsmittel oder Formulierungshilfsstoffe wie Tenside, Emulgatoren, Füllstoffe oder andere für die entsprechende galenische Form notwendige Hilfsstoffe sowie ggf. Geschmacks- oder Farbkorrigenzien genannt.
Die genannten Arzneimittel enthalten im allgemeinen 0,1 bis 99%, bevorzugt 1 bis 50% an mindestens einer Verbindung der allgemeinen Formel (I).
Anhand nachfolgender Beispiele wird die Erfindung näher erläutert:
Beispiel 1 1,4-Bis((3-nitro-1,2,4-triazol-1-yl)methyl)-piperazin
0,1 mol (11,4 g) 3-Nitro-1,2,4-triazol werden in 100 ml i-Propanol und 10 ml H2O suspendiert, mit 0,12 mol (12,4 g) 29%iger Formalinlösung versetzt und 15 Minuten unter Rückfluß zum Sieden erhitzt. Anschließend tropft man innerhalb 30 Minuten eine Lösung von 0,1 mol (8,6 g) Piperazin in 10 ml H2O unter gutem Rühren zu.
Es erfolgt sofortiger Ausfall des Reaktionsproduktes. Man erhitzt noch 1,5 Stunden unter Rückfluß, kühlt auf Raumtemperatur ab und saugt 15,45 g an analysenreinem Produkt ab. Umkristallisiert wird gegebenfalls aus 15%igem Ethanol.
Beispiel 2 1-((5-Amino-1,3,4-oxadiazol-2-yl)-methyl)-3-nitro-1,2,4-triazol Stufe A (3-Nitro-1,2,4-triazol-1-yl)-essigsäurehydrazid
0,1 mol (18,6 g) (3-Nitro-1,2,4-triazol-1-yl)-essigsäure-methylester werden in 80-90 ml Methanol suspendiert, mit 0,115 mol (5,9 g) 97,53%igem Hydrazinhydrat versetzt, 4 Stunden unter Rückfluß erhitzt, gegebenfalls die Lösung filtriert und im Eisbad gut abgekühlt. Die ausgefallenen Nadeln, 16,37 g (88% der Theorie), werden abgesaugt. Sie schmelzen bei 122- 123°C. Ein Umkristallisieren ist nicht erforderlich.
Stufe B 1-((5-Amino-1,3,4-oxadiazol-2-yl)-methyl)-3-nitro-1,2,4-triazol
0,05 mol (9,3 g) (3-Nitro-1,2,4-triazol-1-yl)-essigsäurehydrazid werden in 60 ml Wasser unter leichtem Erwärmen gelöst, auf ca. 25°C abgekühlt und unter Rühren mit 0,055 mol (5,85 g) Bromcyan portionsweise versetzt. Anschließend werden zu dieser Lösung 0,055 mol (5,5 g) KHCO3 portionsweise zugegeben. Nach ca. 10 Minuten fällt das Reaktionsprodukt aus. Man rührt noch etwa 3-4 Stunden bei Raumtemperatur nach, saugt 8,9 g Reaktionsprodukt ab und kristallisiert gegebenenfalls das bei 187,5-189°C schmelzende Produkt aus der gerade erforderlichen Menge Wasser um.
Beispiel 3 1-((5-Oxo-1,3,4-oxadiazolin-2-yl)-methyl)-3-nitro-1,2,4-triazol
0,05 mol (9,3 g) (3-Nitro-1,2,4-triazol-1-yl)-essigsäurehydrazid (Stufe A Beispiel 2) werden in 90 ml Acetonitril suspendiert, mit 0,0275 mol (4,5 g) Diphosgen versetzt, innerhalb 15 Minuten auf 50°C erwärmt, mit 0,1 mol (8,4 g) NaHCO3 versetzt und 5 Stunden unter NaHCO3 Rückfluß gerührt. Danach wird heiß von den anorganischen Salzen abfiltriert und die Lösung im Vakuum zur Trockne eingeengt. Der Rückstand wird mit 120 ml Methanol versetzt und ca. 10 Minuten unter Rückfluß zum Sieden erhitzt, wodurch eine klare Lösung entsteht. Diese wird auf Raumtemperatur abgekühlt, wodurch das Reaktionsprodukt ausfällt. Umkristallisiert wird aus der gerade erforderlichen Menge Butanol. Man erhält 5,5 g Reakti­ onsprodukt mit einem Schmelzpunkt von 182-184°C.
Beispiel 4 1-((5-Amino-1,2,4-triazol-3-yl)-methyl)-3-nitro-1,2,4-triazol
0,1 mol (2,3 g) Natrium werden in 200 ml Methanol gelöst, mit 0,105 mol (10,55 g) Amino­ guanidinhydrochlorid versetzt, 15 Minuten unter Rückfluß gerührt, von NaCl abfiltriert, mit 0,1 mol (18,6 g) (3-Nitro-1,2,4-triazol-1-yl)-essigsäuremethylester versetzt und 3 Stunden unter Rückfluß gerührt. Nach 5-10 Minuten erfolgt bereits der Ausfall des resultierenden 1- (Carboxyaminoguanidino-methyl)-3-nitro-1,2,4-triazols. Nach Abkühlen im Eisbad wird dieses abgesaugt, mit Wasser gewaschen und gegebenfalls aus 70%igem Methanol umkristal­ lisiert. Man erhält 19,8 g (87% der Theorie) einer Verbindung, die bei 164-166°C unter leichter Zersetzung schmilzt.
0,02 mol (4,56 g) dieser Verbindung werden ca. 70 Minuten bei 175-180°C Badtemperatur und einem Vakuum von etwa 15 Torr gehalten, nach dem Abkühlen mit Ether verrieben und aus Wasser oder 50%igem Ethanol umkristallisiert. Die resultierenden 3,2 g der Zielverbin­ dung schmelzen unter Zersetzung bei 216-220°C.
Beispiel 5 1-((4-Butyl-5-(2-methoxyethylcarbamoyl-methylsulfanyl)-1,2,4-triazol-3-yl)-methyl)-3-nitro- 1,2,4-triazol Stufe A 1-((4-Butyl-5-thioxo-1,2,4-triazolin-3-yl)-methyl)-3-nitro-1,2,4-triazol
0,1 mol (18,6 g) entsprechendes Hydrazid (Stufe A Beispiel 2) werden in 150 ml Acetonitril unter Erwärmen am Rückfluß und Rühren gelöst, tropfenweise mit der äquivalenten Menge (11,5 g) Butylisothiocyanat versetzt, 5-6 Stunden unter Rückfluß gehalten und im Vakuum auf Rückstand eingeengt. Dieser wird mit Ether verrieben und aus Ethanol umkristallisiert. Man erhält 23,2 g (77% der Theorie) entsprechendes Thiosemicarbazid mit einem Schmelz­ punkt von 99-103°C. 0,05 mol (15,1 g) dieses Thiosemicarbazides werden in einer Lösung von 0,065 mol (3,65 g) KOH in 130 ml Wasser 2 Stunden unter Rückfluß zum Sieden erhitzt, im Eisbad abgekühlt und bis zu einem pH-Wert von 1-2 angesäuert.
Das nach 30 Minuten durchkristallisierte Produkt wird abgesaugt, mit Wasser gewaschen und gegebenfalls aus Methanol umkristallisiert. Man erhält 11 g Zielprodukt mit einem Schmelz­ punkt von 143-145,5°C.
Stufe B 1-((4-Butyl-5-(2-methoxyethylcarbamoyl-methylsulfanyl)-1,2,4-triazol-3-yl)- methyl)-3-nitro-1,2,4-triazol
0,05 mol (14,2 g) des nach Stufe A erhaltenen Triazolinthions werden zu einer Lösung von 0,05 mol (1,15 g) Natrium in 90 ml Methanol gegeben, im Vakuum zur absoluten Trockne eingeengt, in 150 ml Acetonitril gelöst, gegebenfalls mit einer Spatelspitze KJ versetzt, mit 0,05 mol (7,56 g) Chloressigsäure-(N-methoxyethyl)-amid versetzt und 6 Stunden unter Erwärmen zum Rückfluß gerührt. Vom NaCl wird heiß abgesaugt und die Lösung im Eisbad abgekühlt. Dabei fällt bereits ein erster Teil des Reaktionsproduktes aus. Durch Einengen der Mutterlauge wird weiteres Produkt erhalten. Beide Produkte werden aus ca. 60 ml 50%igem Ethanol umkristallisiert. Man erhält 12,9 g des Zielproduktes mit einem Schmelzpunkt von 127-129°C.
Die chemisch-physikalischen Daten sind in Tabelle 1 aufgeführt:
Tabelle 1
chemisch-physikalische Angaben zu den Beispielen 1-5
Pharmakologische Untersuchungen
Untersucht wurde die in vivo Toxizität und Strahlensensibilisierung der 1-Heterocyclymethyl- 3-nitro-1,2,4-triazolderivate.
Zur Ermittlung der Sensitizerwirkung in vivo wurden am Mammakarzinom der C3H-Maus die Wachstumsverzögerungszeiten des Tumors nach Bestrahlung mit und ohne Sensitizer bestimmt. Die Substanzen (1 mMol/kg) wurden in physiologischer Kochsalzlösung 30 min. vor der Bestrahlung i. p. injiziert. Die lokale Tumorbestrahlung der nichtnarkotisierten Tiere erfolgte mit einer 60Co-Anlage (Dosis: 30 Gy; DL: 2,8 Gy/min.). In der Folgezeit wurde der mittlere Tumordurchmesser 3× wöchentlich gemessen, in Tumorvolumina umgerechnet und zum Volumen am Behandlungstag in Relation gesetzt (Vt/V0). Das Relationsvolumen wurde im halblogarithmischen Maßstab gegen die Zeit aufgetragen und aus der resultierenden Geraden die Zeit bis zum Erreichen des ein- oder zweifachen Ausgangsvolumens bestimmt. Anhand einer Kalibrierungskurve aus den Werten der ohne Substanz bestrahlten Tumoren werden diese Zeiten in Dosiswerte umgerechnet und nach Division durch die tatsächlich applizierte Dosis ergibt sich der Sensibilisierungsfaktor. In Tabelle 2 sind die entsprechenden Ergebnisse aufgeführt und den Ergebnsissen der Vergleichsubstanz AK 2123 gegenüberge­ stellt. Ersichtlich ist die gegenüber der Vergleichssubstanz verbesserte sensibilisierende Wirkung.
Tabelle 2
Strahlensensibilisierung und in vivo Toxizität der 1-Heterocyclylmethyl-3-nitro-1,2,4-triazole
Vergleichssubstanz
AK 2123 (3-Nitro-1,2,4-triazol-1-yl-(N-(2-methoxy)-ethyl-essigsäureamid); vergleiche hierzu Int. J. Radiat. Oncol. Biol. Phys. 12 (1986) 1063

Claims (6)

1. Neue 1-Heterocyclylmethyl-3-nitro-1,2,4-triazole der allgemeinen Formel (I),
in welcher Q für
  • - 5-Amino-1,3,4-Oxadiazol-2-yl- oder
  • - 5-Oxo-1,3,4-Oxadiazolin-2-yl- oder
  • - 5-Amino-1,2,4-Triazol-3-yl- oder
  • - 4-Butyl-5-(2-methoxyethylcarbamoyl-methylsulfanyl)-1,2,4-Triazolin-3-yl- oder
  • - 4-(3-Nitro-1,2,4-triazol-1-yl-methyl)-piperazin-1-yl
steht.
2. Verfahren zur Herstellung von Verbindungen der allgemeinen Formel (I) nach Anspruch 1, in denen Q für
  • - 5-Amino-1,3,4-Oxadiazol-2-yl- oder
  • - 5-Oxo-1,3,4-Oxadiazolin-2-yl- oder
  • - 5-Amino-1,2,4-Triazol-3-yl
steht, dadurch gekennzeichnet, daß man in an sich bekannter Weise (3-Nitro- 1,2,4-triazol-1-yl)-essigsäurehydrazid mit Halogencyanen oder Phosgen bzw. (3-Nitro-1,2,4-triazol-1-yl)-essigsäureester mit entsprechend substituierten Hydrazinderivaten zu einem disubstituierten Hydrazid umsetzt und dieses einer Cyclokondensation unter neutralen, sauren oder alkalischen Bedingungen ohne oder unter Zuhilfenahme von Verdünnungsmitteln bei Temperaturen von 0°C bis 300°C unterwirft.
3. Verfahren zur Herstellung einer Verbindung der allgemeinen Formel (I) nach Anspruch 1, in der Q für 4-Butyl-5-(2-methoxyethylcarbamoyl-methylsulfanyl)- 1,2,4-triazol-3-yl steht, dadurch gekennzeichnet, daß man in an sich bekannter Weise (3-Nitro-1,2,4-triazol-1-yl)-essigsäurehydrazid mit Butylisothiocyanat umsetzt, das Reaktionsprodukt einer Cyclokondensation zu 1-((4-Butyl-5- thioxo-1,2,4-triazolin-3-yl)-methyl)-3-nitro-1,2,4-triazol unterwirft und letzteres mit Chloressigsäure-(N-methoxyethyl)-amid alkyliert.
4. Verfahren zur Herstellung einer Verbindung der allgemeinen Formel (I) nach Anspruch 1, in der Q für 4-(3-Nitro-1,2,4-triazol-1-yl-methyl)-piperazin-1-yl steht, dadurch gekennzeichnet, daß man in an sich bekannter Weise 1- Hydroxymethyl-3-nitro-1,2,4-triazol mit Piperazin oder 3-Nitro-1,2,4-triazol in einer MANNICH-Reaktion mit Formaldehyd und Piperazin umsetzt.
5. Verwendung von Verbindungen des Anspruchs 1 als strahlensensibilisierende Substanzen.
6. Verwendung von Verbindungen des Anspruchs 1 als Arzneimittel in der Tumortherapie.
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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0319329A2 (de) * 1987-12-04 1989-06-07 Btg International Limited Nitro substituierte aromatische und heteroaromatische Verbindungen für Krebsbehandlungen

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