DE69007744T2 - Verwendung von Interleukin 2 zur Behandlung von Leukämien. - Google Patents
Verwendung von Interleukin 2 zur Behandlung von Leukämien.Info
- Publication number
- DE69007744T2 DE69007744T2 DE69007744T DE69007744T DE69007744T2 DE 69007744 T2 DE69007744 T2 DE 69007744T2 DE 69007744 T DE69007744 T DE 69007744T DE 69007744 T DE69007744 T DE 69007744T DE 69007744 T2 DE69007744 T2 DE 69007744T2
- Authority
- DE
- Germany
- Prior art keywords
- leukaemias
- human
- treatment
- leukemia
- activity
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Lifetime
Links
- 208000032839 leukemia Diseases 0.000 title claims abstract description 16
- 108010002350 Interleukin-2 Proteins 0.000 title claims description 58
- 102000000588 Interleukin-2 Human genes 0.000 title claims description 58
- 101001002657 Homo sapiens Interleukin-2 Proteins 0.000 claims abstract description 13
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims abstract description 10
- 102000055277 human IL2 Human genes 0.000 claims abstract description 10
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims abstract description 9
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 claims abstract description 6
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 claims abstract description 6
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims abstract description 6
- 238000002347 injection Methods 0.000 claims description 13
- 239000007924 injection Substances 0.000 claims description 13
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 claims description 8
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 claims description 5
- 208000031261 Acute myeloid leukaemia Diseases 0.000 claims description 4
- 208000033776 Myeloid Acute Leukemia Diseases 0.000 claims description 4
- 108700003606 glycosylated interleukin 2 Proteins 0.000 claims description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 3
- 230000003449 preventive effect Effects 0.000 claims description 3
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 claims description 2
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 abstract description 6
- 208000025113 myeloid leukemia Diseases 0.000 abstract description 4
- 208000032852 chronic lymphocytic leukemia Diseases 0.000 abstract description 3
- 108020004511 Recombinant DNA Proteins 0.000 abstract description 2
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 abstract description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 abstract description 2
- 208000010833 Chronic myeloid leukaemia Diseases 0.000 abstract 1
- 210000003969 blast cell Anatomy 0.000 abstract 1
- 208000003747 lymphoid leukemia Diseases 0.000 abstract 1
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 24
- 238000004007 reversed phase HPLC Methods 0.000 description 12
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 10
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 9
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 9
- 230000004044 response Effects 0.000 description 6
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 4
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 4
- 230000010412 perfusion Effects 0.000 description 4
- RWSOTUBLDIXVET-UHFFFAOYSA-N Dihydrogen sulfide Chemical group S RWSOTUBLDIXVET-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 3
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 3
- VHJLVAABSRFDPM-QWWZWVQMSA-N dithiothreitol Chemical compound SC[C@@H](O)[C@H](O)CS VHJLVAABSRFDPM-QWWZWVQMSA-N 0.000 description 3
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 3
- 238000002798 spectrophotometry method Methods 0.000 description 3
- PSYGHMBJXWRQFD-UHFFFAOYSA-N 2-(2-sulfanylacetyl)oxyethyl 2-sulfanylacetate Chemical compound SCC(=O)OCCOC(=O)CS PSYGHMBJXWRQFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CYWHLOXWVAWMFO-UHFFFAOYSA-N 3-sulfanyl-1h-pyridine-2-thione Chemical compound SC1=CC=CN=C1S CYWHLOXWVAWMFO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108700028369 Alleles Proteins 0.000 description 2
- 201000009030 Carcinoma Diseases 0.000 description 2
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 2
- ZRALSGWEFCBTJO-UHFFFAOYSA-N Guanidine Chemical compound NC(N)=N ZRALSGWEFCBTJO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 2
- 238000004737 colorimetric analysis Methods 0.000 description 2
- 125000000151 cysteine group Chemical class N[C@@H](CS)C(=O)* 0.000 description 2
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 2
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 2
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 2
- 208000014951 hematologic disease Diseases 0.000 description 2
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010000830 Acute leukaemia Diseases 0.000 description 1
- 208000024893 Acute lymphoblastic leukemia Diseases 0.000 description 1
- 208000014697 Acute lymphocytic leukaemia Diseases 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- 102000014150 Interferons Human genes 0.000 description 1
- 108010050904 Interferons Proteins 0.000 description 1
- 102000015696 Interleukins Human genes 0.000 description 1
- 108010063738 Interleukins Proteins 0.000 description 1
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 1
- 208000034578 Multiple myelomas Diseases 0.000 description 1
- CHJJGSNFBQVOTG-UHFFFAOYSA-N N-methyl-guanidine Natural products CNC(N)=N CHJJGSNFBQVOTG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 208000015914 Non-Hodgkin lymphomas Diseases 0.000 description 1
- 206010035226 Plasma cell myeloma Diseases 0.000 description 1
- 208000006664 Precursor Cell Lymphoblastic Leukemia-Lymphoma Diseases 0.000 description 1
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 1
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 1
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 1
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000003708 ampul Substances 0.000 description 1
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 1
- 238000010533 azeotropic distillation Methods 0.000 description 1
- 230000008512 biological response Effects 0.000 description 1
- 238000010322 bone marrow transplantation Methods 0.000 description 1
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 1
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 208000024207 chronic leukemia Diseases 0.000 description 1
- 210000001072 colon Anatomy 0.000 description 1
- 201000003970 colon lymphoma Diseases 0.000 description 1
- 238000011254 conventional chemotherapy Methods 0.000 description 1
- 239000000287 crude extract Substances 0.000 description 1
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 1
- 230000002380 cytological effect Effects 0.000 description 1
- 238000011393 cytotoxic chemotherapy Methods 0.000 description 1
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- SWSQBOPZIKWTGO-UHFFFAOYSA-N dimethylaminoamidine Natural products CN(C)C(N)=N SWSQBOPZIKWTGO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 230000008482 dysregulation Effects 0.000 description 1
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 1
- 229960004198 guanidine Drugs 0.000 description 1
- 229960000789 guanidine hydrochloride Drugs 0.000 description 1
- PJJJBBJSCAKJQF-UHFFFAOYSA-N guanidinium chloride Chemical compound [Cl-].NC(N)=[NH2+] PJJJBBJSCAKJQF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002489 hematologic effect Effects 0.000 description 1
- 230000002519 immonomodulatory effect Effects 0.000 description 1
- 238000009169 immunotherapy Methods 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 1
- 229940079322 interferon Drugs 0.000 description 1
- 238000011835 investigation Methods 0.000 description 1
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 1
- 210000003810 lymphokine-activated killer cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 description 1
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- 201000001441 melanoma Diseases 0.000 description 1
- 208000011645 metastatic carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 206010061289 metastatic neoplasm Diseases 0.000 description 1
- MYWUZJCMWCOHBA-VIFPVBQESA-N methamphetamine Chemical compound CN[C@@H](C)CC1=CC=CC=C1 MYWUZJCMWCOHBA-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 1
- 125000001360 methionine group Chemical group N[C@@H](CCSC)C(=O)* 0.000 description 1
- 230000003387 muscular Effects 0.000 description 1
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 238000011127 radiochemotherapy Methods 0.000 description 1
- 239000000376 reactant Substances 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 239000008223 sterile water Substances 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 125000003831 tetrazolyl group Chemical group 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 150000003573 thiols Chemical class 0.000 description 1
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000003390 tumor necrosis factor Human genes 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/19—Cytokines; Lymphokines; Interferons
- A61K38/20—Interleukins [IL]
- A61K38/2013—IL-2
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
- A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Public Health (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Immunology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Zoology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Hematology (AREA)
- Oncology (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
Description
- Das Interleukin 2 (IL&sub2;), das ein durch die aktivierten Lymphozythen T produziertes Lymphokin ist. besitzt eine immunomodulierende Wirkung und eine Anti-Tumorwirkung, beispielsweise beschrieben durch Fletcher, M. et al. [Lymphokine Research 6 (1987) 47-57]. Diese Wirkungen umfassen insbesondere die Fähigkeit, die Proliferation der Lymphozythen T und die Induktion der Cytotoxizität der Zellen NK (natural killer) und der Zellen LAK (lymphokine activated killer) zu initiieren. Es wurde beobachtet, daß die Verabreichung von IL&sub2;, entweder allein in hoher Dosis oder assoziiert mit Zellen LAK, geeignet ist, die Regression von einigen Karzinomen zu induzieren, die bei der Maus und bei Patienten mit metastatischen Karzinomen etabliert sind, wie Melanom, Karzinome der Niere, des Dickdarms oder das Nicht-Hodgkin-Lymphom [Rosenberg, S.A. et al. N.Engl.J.Med. (1987) 316, 889-897].
- M. K. Brenner et al. (Proceeding of Asco, Vol. 8, März, 1989, S.198, Resümee No. 769) haben die Verabreichung von IL&sub2; an Patienten mit einer hämatologischen Residual-Erkrankung infolge einer cytotoxischen Chemotherapie oder einer Knochenmarktransplantation beschrieben und gezeigt, daß IL&sub2; ohne unerwünschte Wirkungen an diese Patienten verabreicht werden kann.
- D. J. Gottlieb et al. (Br.J.Cancer, Vol. 60, Oktober 1989, S. 610-615) hat die Verabreichung von IL&sub2; nach den hohen Dosierungen der Chemo-Radio-Therapie bei hämatologischen Erkrankungen beschrieben, wie der akuten myeloischen Leukämie oder dem multiplen Myelom, und das Potential der Anwendung von IL&sub2; bei der Beseitigung der Residual-Erkrankung gezeigt.
- Keines der klinischen Resultate hat die Wirksamkeit der Therapie mit IL&sub2;, sowohl allein als auch in Verbindung mit einer adoptiven Immunotherapie, bei den verschiedenen bekannten, akuten oder chronischen Leukämien gezeigt, insbesondere bei der akuten myeloischen Leukämie (LMA).
- Die Phänomene der Fehlsteuerung, die zur Proliferation der leukämischen Zellen führen, sind komplex. Man nimmt im allgemeinen an, daß ihre Kontrolle die Verwendung in Assoziation mit verschiedenen Faktoren der Differenzierung erfordert, insbesondere die Verwendung von IL&sub2; mit beispielsweise einem Interferon, dem Faktor der tumoralen Nekrose, einem anderen Interleukin oder anderen Differenzierungs-Faktoren, wie beispielsweise für die chronische lymphoische Leukämie in der Patentanmeldung WO 88/06991 beschrieben wurde.
- Es wurde nahegelegt und anschließend bestätigt, daß IL&sub2; in vitro in signifikanter Weise die Proliferation von blastischen Zellen der befallenen Kranken bei LMA stimuliert [J. A. Carron und J. C. Cawley Br.J.Haematol. 71 (1) (1989). 168].
- Die Anmelderin hat jetzt in unerwarteter Weise Resultate erhalten, die zeigen, daß IL&sub2; allein eine therapeutische Aktivität bei LMA besitzt.
- Die Erfindung betrifft daher die Verwendung eines Polypeptides mit der Aktivität des humanen Interleukins 2 zur Herstellung einer pharmazeutischen Zusammensetzung, die für die Behandlung von Leukämie-Rezidiven oder für deren vorbeugende Behandlung vorgesehen ist. Man versteht unter Polypeptid mit der Aktivität des humanen Interleukins 2 das natürliche humane IL&sub2;, die humane IL&sub2;-Rekombinante, das heißt, erhalten durch die Technologie der rekombinierenden DNA, wie beispielsweise beschrieben durch Taniguchi, T. et al. [Nature (1983) 302, 305-310] oder in dem Patent EP 91530 B, sowie der Allele oder der Derivate dieser Produkte, wie beispielsweise beschrieben durch Ju, C. et al. [J. Biol.Chem. (1987) 262, 5723-5731]. Die Leukämien, die den Rahmen der Erfindung betreffen, umfassen die chronischen lymphoischen oder myeloischen Leukämien und die akuten lymphoischen oder nicht lymphoblastischen Leukämien, beispielsweise die myeloischen Leukämien, die im allgemeinen durch die Proliferation der blastischen Zellen gekennzeichnet sind.
- Die Erfindung hat insbesondere die Verwendung zum Gegenstand, dadurch gekennzeichnet, daß die Leukämie eine akute myeloische Leukämie (LMA) ist, diagnostiziert durch übliche histologische, cytologische und biologische Untersuchungen. Die erfindungsgemäße Verwendung ist bestimmt für die Behandlung von Rezidiven von LMA oder für deren vorbeugende Behandlung. Die Erfindung beschreibt die Verwendung von IL&sub2; bei einer Behandlung, deren Effizienz durch einen Ansprechgrad von etwa 20 % beim von LMA befallenen Kranken im Fall des Widerstandes gegen eine konventionelle Chemotherapie gezeigt wird, und zwar im Rezidiv nach der Chemotherapie oder im Rezidiv nach einer Knochenmarktransplantation.
- Die Erfindung hat besonders die Verwendung zum Gegenstand, dadurch gekennzeichnet, daß das humane IL&sub2; eine reine IL&sub2;-Rekombinante ist. Die gemäß der Erfindung hergestellten pharmazeutischen Zusammensetzungen umfassen eine humane IL&sub2;-Rekombinante sowie deren Allele oder Derivate, wie bereits oben beschrieben, bei denen man die dem Fachmann bekannten Techniken der Reinigung anwendet, die es ermöglichen, reine Produkte herzustellen.
- Die Erfindung hat ganz besonders die Verwendung zum Gegenstand, dadurch gekennzeichnet, daß das IL&sub2; eine nicht glycosylierte IL&sub2;-Rekombinante in reduzierter Form ist. Das verwendete nicht glycosylierte IL&sub2; ist insbesondere solches mit der Sequenz des natürlichen IL&sub2;, mit 133 Aminosäuren und gegebenenfalls einem zusätzlichen N-terminalen Methionin, dessen drei Cysteine in Stellung 58, 105 und 125 in der reduzierten Form vorliegen, und das eine mit der des oxydierten IL&sub2;, das die gleiche Sequenz mit einer Disulfid-Brücke in Stellung 58-105 besitzt, vergleichbare biologische Aktivität aufweist. Ein Beispiel zur Herstellung des reduzierten IL&sub2;, ausgehend von einem Stamm E. coli, ist weiter unten im experimentellen Teil angegeben. Unter reduzierter Form versteht man, daß die IL&sub2; enthaltenden Cysteinreste eine freie Schwefelwasserstoff-Gruppe umfassen, die beispielsweise durch Spektrophotometrie mit Dithiopyridin als Reaktant der Thiole bestimmt wurden. Die biologische Aktivität wurde durch Messung der Proliferation der leukämischen Zell-Linien von Mäusen, die zu IL&sub2;, CTLL-2 gehören, mit einem colorimetrischen Test am Tetrazolium-Salz bestimmt [Mossmann, T.J. Immunol.Meth. (1983) 65, 55-63].
- Die spezifische Aktivität der bei der Erfindung verwendeten IL&sub2;-Rekombinanten beträgt mindestens 0,5.106 U BRMP/mg, vorzugsweise 1 10&sup7; U BRMP/mg. Die Aktivitäts-Einheit IL&sub2; ist definiert als die Menge, die 50 % der maximalen Ansprech-Reaktion in dem Test hervorruft. Als Standard verwendet man eine Probe "Biological Response Modifier Programm (BRMP) reference agent human IL&sub2; (jurkat)", geliefert von National Cancer Institute (NCI).
- Die Erfindung hat speziell die Verwendung zum Gegenstand, dadurch gekennzeichnet, daß das IL&sub2; in einer Dosierung von 2 bis 20 10&sup6; U/M² durch Injektion verabreicht wird.
- Die Zusammensetzungen der vorliegenden Erfindung können beispielsweise auf intravenösem Wege in langsamem Bolus oder durch kontinuierliche Perfusion, auf muskulärem Wege oder auf subkutanem Wege verabreicht werden.
- Die Erfindung hat noch spezieller die Verwendung zum Gegenstand, dadurch gekennzeichnet, daß das IL&sub2; auf intravenösem Wege in langsamem Bolus durch Injektion in einer Dosierung von 8 10&sup6; U/M² verabreicht wird.
- Die Erfindung hat ganz speziell die Verwendung zum Gegenstand, dadurch gekennzeichnet, daß das IL&sub2; in wiederholter Weise, mindestens zweimal pro Tag, pro Cyclus von mehreren Tagen pro Woche verabreicht wird, und dadurch, daß das IL&sub2; in wiederholter Weise innerhalb von mindestens drei nicht aufeinanderfolgenden Wochen verabreicht wird. Die verabreichte Dosis, die Häufigkeit der Injektion und die Dauer der Behandlung schwanken in Abhängigkeit vom Zustand des Kranken. Die tägliche Dosis liegt im allgemeinen zwischen 2 10&sup6; U/M²/24h und 30 10&sup6; U/M²/24h, vorzugsweise in der Größenordnung von 20 10&sup6; U/M²/24h, pro Cyclus von mehreren Tagen beim Erwachsenen oder beim Kind. Das IL&sub2; ist in einer pharmazeutischen Zusammensetzung enthalten, vorzugsweise lyophilisiert in einer Ampullen-Dosierung, die 0,1 bis 2 mg Wirkstoff enthält und die man mit destilliertem Wasser zur Injektion zubereitet. Die erhaltene Lösung wird unmittelbar danach mit Hilfe einer pharmakologischen Lösung verdünnt, beispielsweise mit Natriumchlorid (0,9 %) oder Glucose (5 %) für die Verabreichung in langsamem Bolus. Unter langsamem Bolus versteht man eine Perfusion von kurzer Dauer, beispielsweise von 15 Minuten. Gemäß der bevorzugten Verwendung der Erfindung ist das IL&sub2; eine reduzierte IL&sub2;-Rekombinante, deren Herstellung weiter unten angegeben wird, ebenso wie ein Beispiel für die pharmazeutische Herstellung, wobei die Dosierung durch Injektion 8 10&sup6; U/M², die Häufigkeit der Injektion alle 8 Stunden (3 Dosen/Tag) oder alle 12 Stunden (2 Dosen/Tag) gemäß einem Cyclus von 5 aufeinanderfolgenden Tagen und die Dauer der Verabreichung 3 nicht aufeinanderfolgende Wochen betragen, was etwa 360 10&sup6; U/M² und insgesamt 36 mg ausmacht, verabreicht an den Kranken auf intravenösem Wege, in langsamem Bolus von 15 Minuten.
- Die anliegenden Figuren veranschaulichen die weiter unten beschriebene Herstellung:
- - die Figur 1a ist ein Chromatogramm der RP-HPLC-Analytik des rohen Extraktes der Präparation in 8M Guanidin.
- - die Figur 1b ist ein Chromatogramm der RP-HPLC-Analytik des reduzierten und oxydierten IL&sub2;-Standards.
- - die Figur 2 ist ein Chromatogramm der RP-HPLC-Analytik der "Wiederauflösung" der Präparation.
- - die Figur 3 ist ein Chromatogramm der RP-HPLC-Analytik der "Hauptfraktion" der Präparation.
- - die Figur 4 ist ein Chromatogramm der RP-HPLC-Analytik der Fraktion "59" der Präparation.
- Die folgenden Beispiele veranschaulichen die Erfindung:
- Das IL&sub2; wird ausgehend von Körnchen hergestellt, die durch Zentrifugieren von Kulturen eines Stammes von E. coli erhalten wurden, transformiert mit Hilfe eines Plasmides, das die Sequenz umfaßt, die für natives IL&sub2; kodiert und fähig ist, in dieser Form im Inneren der Zellen das IL&sub2; zu akkumulieren, wie beispielsweise von Sato, T. et al. [J.Biochem. (1987) 101, 525-534] beschrieben. Die auf diese Weise aus einem Fermenter von 10 Litern erhaltenen Zellen werden in einem Homogenisator Manton Gaul in aufgebrochen. Ausgehend von den isolierten und gewaschenen Zelltrümmern (90-170 g Feucht- Gewicht) wird das IL&sub2; in 2,5 Volumenteilen eines Tris-Puffers, HCl 20 mM, pH 8, der 8M Guanidin-Hydrochlorid (Gu. HCl) und 100 mM Dithiothreitol (DTT) enthält, aufgelöst. Die aufgelöste Menge von IL&sub2; (1,5 bis 2,5 g) wird durch RP-HPLC-Analytik mittels einer Kolonne C4 VYDAC (0,46 x 15 cm) 300 Å, 5 um, bei einem Durchsatz von 2 cm³/Minute, mit einem linearen Gradienten von Acetonitril (30 bis 70 % über 10 Minuten), der 0,1 % TFA enthält und mit einem spektrophotometrischen Nachweis bei 280 nm oder 210 nm, bei dem man die Fläche des Peaks bei 280 nm nach dem Kalibrieren mit einem IL&sub2;-Standard (Figur 1a und Figur 1b) berechnet, eingeschätzt. Das IL&sub2; wird dann durch Absenken der Konzentration an Gu, HCl auf 2M und in Anwesenheit von DTT ausgefällt. Nach dem Waschen des Niederschlages mit Hilfe einer wäßrigen Lösung von TFA (0,1 %) bis zum Erreichen eines pH-Wertes von unterhalb 5,0 im aufschwimmenden Anteil wird das IL&sub2; in einer wäßrigen Lösung von 20 % Acetonitril und 0,1 % TFA aufgelöst. Die erhaltene "Wiederauflösung", die gemäß RP-HPLC-Analytik (Figur 2) einen Gehalt an reduziertem IL&sub2; von höher als 85 % aufweist, besitzt eine biologischen Aktivität von unterhalb 0,01 10&sup7; U/mg reduziertes IL&sub2; und einem Gehalt an Schwefelwasserstoff-Gruppen von 2,85 SH/Mol reduziertes IL&sub2;. Eine Fraktion von dieser erhaltenen Lösung, die etwa 200 mg IL&sub2; entspricht, ermittelt durch RP-HPLC-Analytik, wird in der Weise verdünnt, daß eine Konzentration an Acetonitril von unterhalb 10 % in TFA 0,1 % eingestellt wird, wonach man diese Fraktion über eine Kolonne C4 VYDAC (5,7 x 30 cm) leitet. Das IL&sub2; wird bei einem Durchsatz von 100 cm³/Minute eluiert, mit Hilfe eines linearen Gradienten von Acetonitril (30 bis 80 % über 40 Minuten), der 0,1 % TFA enthält, und bei einer Konzentration von etwa 60 % an Acetonitril in einem vorherrschenden Peak, nachgewiesen durch Spektrophotometrie bei 280 nm und analysiert durch RP-HPLC. Die gesammelte "Hauptfraktion", die reduziertes IL&sub2; umfaßt, wird unmittelbar danach mit 2 Volumenteilen einer wäßrigen Lösung von Citronensäure (0,5 %) verdünnt und über eine Kolonne C4 VYDAC (5,7 x 30 cm) geschickt, die man mit einem linearen Gradienten von Isopropanol (20 bis 70 % über 40 Minuten), der 0,5 % Citronensäure enthält, bei einem Durchsatz von 50 cm³/Minute entwickelt. Die ausfließende Lösung zeigt, verfolgt durch Spektrophotometrie bei 280 nm, die sukzessive Elution eines kleineren Peaks bei einer Konzentration von etwa 48 % Isopropanol (Fraktion "48") und eines vorherrschenden Peaks bei einer Konzentration von etwa 59 % Isopropanol (Fraktion "59"), Figur 3. Die Fraktion "59" wird gesammelt. Sie ist unter Luftausschluß beim Aufbewahren bei 0 ºC, während mindestens 24 Stunden stabil.
- Nach dem Entfernen des Isopropanols durch azeotrope Destillation unter Vakuum wird die Fraktion "59" mittels RP-HPLC-Analytik analysiert und ergibt einen homogenen Peak (Figur 4), eluiert bei etwa 60 % Acetonitril, während das oxydierte IL&sub2; der Referenz bei etwa 57 % Acetonitril eluiert wird (Figur 1b). Die Fraktion "59", die nach Entfernung des Isopropanols eine Konzentration an IL&sub2; von höher als 1 mg/cm³ und einen pH-Wert von 3 1 0.5 besitzt, kann unter Luftausschluß bei +4 ºC während mindestens einer Woche aufbewahrt oder unverzüglich lyophilisiert oder zur Herstellung einer pharmazeutischen Zusammensetzung formuliert werden, Die lyophilisierte Fraktion "59", deren biologische Aktivität gemäß dem Test in vitro der Proliferation der Zellen CTLL-2 bestimmt wird, besitzt eine spezifische Aktivität von 1,3 ± 0,5 10&sup7; U/mg, die mit der von nativem IL&sub2; vergleichbar ist.
- Der Gehalt der lyophilisierten Fraktion "59" an freien Schwefelwasserstoff-Gruppen, bestimmt durch die colorimetrische Methode mit Dithiopyridin, beträgt 2.94 SH/Mol, im Vergleich zu 0,76 SH/Mol für das oxydierte IL&sub2; der Referenz.
- Ausgehend von einem Fermenter von 10 Litern werden in der Fraktion "59" 150 bis 300 mg r-hIL&sub2; erhalten, die bestimmt wurden durch RP-HPLC-Analytik, drei Gruppen SH enthalten sowie biologisch aktiv und in RP-HPLC homogen sind.
- Es wurde eine Präparation für die Injektion durch Perfusion auf intravenösem Wege mit der folgenden Formulierung realisiert:
- reduziertes IL&sub2; ........................0,5 mg
- Citronensäure ..........................5 mg
- Mannitol ................................50 mg
- steriles Wasser ........................1 cm³
- Glucose 5 %ig ..........................50 cm³
- Die Untersuchung schließt Kranke mit einer primitiven LMA histologischer Diagnostik (Typ M1 bis M5 gemäß der Klassifikation FAB) ein, die eine Induktions-Chemotherapie erhielten, entweder gefolgt von einer Erhaltungs-Chemotherapie oder von einer autologen Knochenmarktransplantation (notiert GDMA), und deren spätere Diagnostik den Rezidiv oder die Widerstandsfähigkeit gegen die Chemotherapie ergeben hat, bewertet anhand der Anwesenheit von mehr als 10 % Blasten in zwei Entnahmeproben von Knochenmark, realisiert mindestens im einwöchigen Intervall, beispielsweise im zweiwöchigen Intervall.
- Die gemäß der Erfindung hergestellten Zusammensetzungen von IL&sub2; ermöglichen die Injektion der Dosen von 8 10&sup6; U/M². das sind 0,8 mg/M² pro Injektion, im Verhältnis von einer Injektion alle 8 Stunden während 5 aufeinanderfolgenden Tagen der ersten Woche, anschließend die gleiche Dosis wie oben im Verhältnis von einer Injektion alle 12 Stunden während 5 aufeinanderfolgenden Tagen der dritten und der fünften Woche, auf intravenösem Wege in langsamem Bolus von 15 Minuten. Man verwendet die in Beispiel 1 beschriebenen Zusammensetzungen.
- Die Beurteilung der Kranken erfolgte vor und nach der Behandlung mit IL&sub2; an Entnahmeproben von Knochenmark durch Bestimmung des Prozentsatzes von Blasten und Bewertung des Differenzierungs-Zustandes der medullaren Vorläufer.
- Bei 11 beurteilten Kranken wurden die folgenden Ansprech-Reaktionen erhalten:
- (Ergebnisse siehe Tabelle Seite 8)
- Die Resultate zeigen zwei vollständige Reaktionen (RC), das entspricht einem Ansprechgrad von 20 %. Unter den Mißerfolgen weisen zwei Kranke (Patienten Nr. 3 und Nr. 7) eine signifikante Verringerung des Prozentsatzes von medullaren Blasten auf, was eine gewisse Wirksamkeit von IL&sub2; erkennen läßt. Patient Alter Geschl. Typ Hämatologischer Zustand bei Einbiehung % medullare Blasten nach IL&sub2; Ansprech-Reaktion Tag 1. Rezidiv unter Chemotherapie primäre Resistenz 2. Rezidiv, resistent gegen Chemotherapie 3. Rezidiv nach GDMA n.best. Mißerfolg
Claims (6)
1. Verwendung eines Polypeptides mit der Aktivität von humanem Interleukin 2
zur Herstellung einer pharmazeutischen Zusammensetzung, die für die
Behandlung von Leukämie-Rezidiven oder für deren vorbeugende Behandlung vorgesehen
ist.
2. Verwendung nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß die Leukämie eine
akute myeioische Leukämie ist, die der Chemotherapie widersteht, und
zwar im Rezidiv nach der Chemotherapie oder im Rezidiv nach einer
Knochenmarktranspl antati on.
3. Verwendung nach Anspruch 2, dadurch gekennzeichnet, daß das Polypeptid
eine reine IL&sub2;-Rekombinante ist.
4. Verwendung nach Anspruch 3, dadurch gekennzeichnet, daß das IL&sub2; eine nicht
glycosylierte IL&sub2;-Rekombinante in reduzierter Form ist.
5. Verwendung nach Anspruch 3 oder 4, dadurch gekennzeichnet, daß die
pharmazeutische Zusammensetzung von IL&sub2; an eine Verabreichung durch Injektion in
einer Dosierung von 2 bis 20 10&sup6; U/M² angepaßt ist.
6. Verwendung nach Anspruch 5, dadurch gekennzeichnet, daß die
pharmazeutische Zusammensetzung von IL&sub2; an eine Verabreichung auf intravenösem Weg in
langsamem Bolus durch Injektion in Dosierungen von 8 10&sup6; U/M² angepaßt ist.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| FR8913546A FR2653020B1 (fr) | 1989-10-17 | 1989-10-17 | Utilisation d'un polypeptide ayant l'activite de l'interleukine 2 humaine pour la preparation de compositions pharmaceutiques destinees au traitement des leucemies. |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| DE69007744D1 DE69007744D1 (de) | 1994-05-05 |
| DE69007744T2 true DE69007744T2 (de) | 1994-07-28 |
Family
ID=9386473
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| DE69007744T Expired - Lifetime DE69007744T2 (de) | 1989-10-17 | 1990-10-16 | Verwendung von Interleukin 2 zur Behandlung von Leukämien. |
Country Status (13)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US5582822A (de) |
| EP (1) | EP0426521B1 (de) |
| JP (1) | JP2961189B2 (de) |
| KR (1) | KR0168420B1 (de) |
| AT (1) | ATE103494T1 (de) |
| AU (1) | AU640173B2 (de) |
| CA (1) | CA2027725A1 (de) |
| DE (1) | DE69007744T2 (de) |
| DK (1) | DK0426521T3 (de) |
| FR (1) | FR2653020B1 (de) |
| HU (1) | HU206048B (de) |
| OA (1) | OA09317A (de) |
| ZA (1) | ZA907648B (de) |
Families Citing this family (20)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| FR2671728B1 (fr) * | 1991-01-17 | 1995-01-20 | Roussel Uclaf | Utilisation d'un polypeptide ayant l'activite de l'interleukine 2 humaine pour la preparation de compositions pharmaceutiques destinees au traitement des pneumathorax. |
| FR2686899B1 (fr) | 1992-01-31 | 1995-09-01 | Rhone Poulenc Rorer Sa | Nouveaux polypeptides biologiquement actifs, leur preparation et compositions pharmaceutiques les contenant. |
| US5419900A (en) * | 1993-05-19 | 1995-05-30 | The United States Of America As Represented By The Department Of Of Health And Human Services | Immunologic enhancement with intermittent interleukin-2 therapy |
| US5696079A (en) * | 1993-05-19 | 1997-12-09 | The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services | Immunologic enhancement with intermittent interleukin-2 therapy |
| JP2003530838A (ja) | 2000-04-12 | 2003-10-21 | ヒューマン ゲノム サイエンシズ インコーポレイテッド | アルブミン融合タンパク質 |
| US6852344B2 (en) * | 2000-12-04 | 2005-02-08 | Council Of Scientific And Industrial Research | Herbal composition for treating CD33+ acute and chronic myeloid leukemia and a method thereof |
| GB2372598A (en) * | 2001-02-26 | 2002-08-28 | Coppereye Ltd | Organising data in a database |
| ES2425738T3 (es) | 2001-12-21 | 2013-10-17 | Human Genome Sciences, Inc. | Proteínas de fusión de la albúmina |
| WO2003101446A1 (en) * | 2002-05-31 | 2003-12-11 | Council Of Scientific And Industrial Research | A herbal molecule as potential anti-leukemic drug |
| US6967034B2 (en) * | 2002-05-31 | 2005-11-22 | Council Of Scientific And Industrial Research | Herbal-based composition for treating acute and chronic myeloid leukemia |
| US20070161704A1 (en) * | 2002-07-08 | 2007-07-12 | Council Of Scientific And Industrial Research | Pharmaceutical composition useful for treating chronic myeloid leukemia |
| US20050282892A1 (en) * | 2002-07-08 | 2005-12-22 | Santu Bandyopadhyay | Pharmaceutical composition useful for treating chronic myeloid leukemia |
| US20040006138A1 (en) | 2002-07-08 | 2004-01-08 | Council Of Scientific | Pharmaceutical composition useful for treating chronic myeloid leukemia |
| AU2003266086A1 (en) * | 2002-09-16 | 2004-04-30 | Vasogen Ireland Limited | Chronic lymphocytic leukemia combination treatment (treated cll cells and cytokine) |
| EP1594530A4 (de) | 2003-01-22 | 2006-10-11 | Human Genome Sciences Inc | Albuminfusionsproteine |
| US7357652B1 (en) * | 2006-10-27 | 2008-04-15 | Leviton Manufacturing Company, Inc. | Modular wiring system with locking elements |
| US8206920B2 (en) * | 2007-03-26 | 2012-06-26 | Arnold Ganser | Diagnostic assay for the specific treatment of acute myeloid leukemia |
| US10622768B1 (en) | 2019-05-10 | 2020-04-14 | Walter Morgan Cowham | Methods and systems for a modular plug-in bus wiring system |
| US10971879B1 (en) | 2020-08-12 | 2021-04-06 | Cowham Innovations, LLC. | Electrical connection forming tool |
| CN111821423B (zh) * | 2020-08-17 | 2023-04-11 | 中南大学湘雅二医院 | 一种白介素2用于治疗慢性自发性荨麻疹的应用 |
Family Cites Families (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| SE8701004D0 (sv) * | 1987-03-11 | 1987-03-11 | Astra Ab | Method for therapy of leukemias and certain other malignancies |
| AU2635088A (en) * | 1987-12-04 | 1989-06-08 | Du Pont Merck Pharmaceutical Company, The | Immobilized interleukin 2 and interleukin 2 containing a carboxyl-terminal extension |
| ZA898139B (en) * | 1988-11-17 | 1990-08-29 | Hoffmann La Roche | Recombinant interleukin-2 hybrid proteins |
-
1989
- 1989-10-17 FR FR8913546A patent/FR2653020B1/fr not_active Expired - Fee Related
-
1990
- 1990-09-25 ZA ZA907648A patent/ZA907648B/xx unknown
- 1990-10-16 EP EP90402900A patent/EP0426521B1/de not_active Expired - Lifetime
- 1990-10-16 AT AT90402900T patent/ATE103494T1/de not_active IP Right Cessation
- 1990-10-16 DE DE69007744T patent/DE69007744T2/de not_active Expired - Lifetime
- 1990-10-16 KR KR1019900016445A patent/KR0168420B1/ko not_active Expired - Lifetime
- 1990-10-16 DK DK90402900.6T patent/DK0426521T3/da active
- 1990-10-16 HU HU906463A patent/HU206048B/hu not_active IP Right Cessation
- 1990-10-16 CA CA002027725A patent/CA2027725A1/fr not_active Abandoned
- 1990-10-17 OA OA59870A patent/OA09317A/xx unknown
- 1990-10-17 JP JP2276591A patent/JP2961189B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 1990-10-17 AU AU64667/90A patent/AU640173B2/en not_active Ceased
-
1994
- 1994-09-30 US US08/315,890 patent/US5582822A/en not_active Expired - Lifetime
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| DK0426521T3 (da) | 1994-05-02 |
| DE69007744D1 (de) | 1994-05-05 |
| AU640173B2 (en) | 1993-08-19 |
| JP2961189B2 (ja) | 1999-10-12 |
| KR0168420B1 (ko) | 1999-01-15 |
| EP0426521B1 (de) | 1994-03-30 |
| ATE103494T1 (de) | 1994-04-15 |
| JPH03193736A (ja) | 1991-08-23 |
| KR910007541A (ko) | 1991-05-30 |
| CA2027725A1 (fr) | 1991-04-18 |
| FR2653020B1 (fr) | 1993-03-26 |
| HU906463D0 (en) | 1991-04-29 |
| US5582822A (en) | 1996-12-10 |
| ZA907648B (en) | 1991-11-27 |
| AU6466790A (en) | 1991-04-26 |
| OA09317A (fr) | 1992-09-15 |
| HU206048B (en) | 1992-08-28 |
| FR2653020A1 (fr) | 1991-04-19 |
| EP0426521A1 (de) | 1991-05-08 |
| HUT55241A (en) | 1991-05-28 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| DE69007744T2 (de) | Verwendung von Interleukin 2 zur Behandlung von Leukämien. | |
| DE3787020T2 (de) | Herstellung von m-csf. | |
| DE69033700T2 (de) | Il-11 aus säugetier | |
| DE69020573T2 (de) | Verfahren zur wachstumshemmung von stammzellen. | |
| DE3751677T3 (de) | Neue familie von primat-hämatopoietischen wachstumsfaktoren | |
| DE69029657T2 (de) | Menschliches cytokin, interleukin-9 | |
| DE3751406T2 (de) | Herstellung und Verwendung von nicht-glycosiliertem IL-6. | |
| DE69007975T2 (de) | Fusionsprotein bestehend aus gm-csf und il-3. | |
| DE68925966T2 (de) | Chemisch modifizierte granulocytenkolonie erregender faktor | |
| DE69227693T2 (de) | Hybride cytokine | |
| DE60223670T2 (de) | Fettsäuren als Faktoren für das Überleben und die Aktivierung von Neutrophilen. | |
| DE3686794T2 (de) | Reinigung des natuerlichen kolonie-stimulierenden faktors-1. | |
| DE3686582T2 (de) | Behandlung einer krankheit vom aids-typ. | |
| DE69528325T2 (de) | Interleukin-6 Inhibitor aus Mensch | |
| DE3856516T2 (de) | Verwendung von rekombinantem koloniestimulierendem Faktor-1 zur Herstellung eines Medikaments gegen Cytomegalovirusinfektionen | |
| DE69130679T2 (de) | Die herstellung von zusammensetzungen zur behandlung von krankheiten der zellproliferation | |
| DE69001686T2 (de) | Behandlung von leukozytstoerungen mit gm-csf. | |
| DE69116321T2 (de) | Immunostimulierendes Mittel das Interleukin-2 und 5'-Deoxy-5-fluorouridin enthält | |
| DE69004794T2 (de) | Verwendung eines Polypeptids mit Interleukin 2-Aktivität zur Herstellung einer zur Behandlung von einfachen Pleurageschwüren bestimmten pharmazeutischen Zusammensetzung. | |
| DE68917826T2 (de) | Rekombinantes, unglycosiliertes Human-IL2 in reduzierter Form, Herstellungsprozess und medizinische Anwendung. | |
| DE3875859T2 (de) | Zubereitungen zur verbesserung der adcc-therapien. | |
| EP1299541B1 (de) | Verfahren zur gewinnung und anwendung neuer humaner defensine als biologisch aktive eiweisstoffe zur behandlung von infektionen und anderen erkrankungen | |
| DE68911132T2 (de) | Hematopoietische kolonien stimulierende faktoren zur verbesserung des lipoprotein/cholesterin-profils. | |
| DE69527145T2 (de) | Verfahren zur behandlung von blutungsstorungen | |
| DE69122960T2 (de) | Verfahren und zubereitungen für die behandlung von verletzungen |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| 8364 | No opposition during term of opposition | ||
| 8327 | Change in the person/name/address of the patent owner |
Owner name: HOECHST MARION ROUSSEL, PUTEAUX, FR |
|
| 8327 | Change in the person/name/address of the patent owner |
Owner name: AVENTIS PHARMA S.A., ANTONY CEDEX, FR |
|
| 8328 | Change in the person/name/address of the agent |
Representative=s name: PFENNING MEINIG & PARTNER GBR, 80339 MUENCHEN |
|
| 8328 | Change in the person/name/address of the agent |
Representative=s name: MAIWALD PATENTANWALTSGESELLSCHAFT MBH, 80335 MUENC |