DE69920259T2

DE69920259T2 - Ionenkanal modulatoren

Info

Publication number: DE69920259T2
Application number: DE69920259T
Authority: DE
Inventors: Skaaning Bo JENSEN; Palle Christophersen; Dorte Strobaek; Lene Teuber
Original assignee: Neurosearch AS
Current assignee: NTG Nordic Transport Group AS
Priority date: 1998-12-04
Filing date: 1999-12-03
Publication date: 2005-01-20
Anticipated expiration: 2019-12-04
Also published as: US20020058700A1; DE69920259D1; EP1133467B1; ATE276232T1; EP1133467A1; JP2002531539A; AU1549700A; US6458846B1; WO2000034228A1

Description

TECHNISCHES GEBIET
Die vorliegende Erfindung bezieht sich auf Ionenkanal modulierende Mittel. Die vorliegende Erfindung bezieht sich insbesondere auf eine besondere Klasse von chemischen Verbindungen, die sich als Modulatoren von SK_Ca-, IK_Ca- und BK_Ca-Kanälen verwendbar erwiesen haben. In weiteren Aspekten bezieht sich die vorliegende Erfindung auf die Verwendung dieser SK/IK/BK-Kanal modulierenden Mittel zur Herstellung von Medikamenten und pharmazeutischen Zusammensetzungen, welche die SK/IK/BK-Kanal modulierenden Mittel enthalten.
Die SK/IK/BK-Kanal modulierenden Mittel der Erfindung sind zur Behandlung oder Erleichterung von Krankheiten und Zuständen verwendbar, die mit den SK/IK/BK-Kanälen assoziiert sind.
STAND DER TECHNIK
Ionenkanäle sind Transmembranproteine, welche den Transport von anorganischen Ionen durch Zellmembranen hindurch katalysieren. Die Ionenkanäle nehmen an Vorgängen teil, die so verschieden sind wie die Erzeugung und die zeitliche Steuerung von Aktionspotenzialen, synaptische Übertragungen, Sekretion von Hormonen, Kontraktion von Muskeln usw.
Zahlreiche Wirkstoffe üben ihre Wirkungen über eine Modulation von Ionenkanälen aus. Beispiele sind antiepileptische Verbindungen, wie Phenytoin und Lamotrigin, welche spannungsabhängige Na⁺-Kanäle im Gehirn blockieren, Wirkstoffe gegen Bluthochdruck, wie Nifedipin und Diltiazem, welche spannungsabhängige Ca²⁺-Kanäle in glatten Muskelzellen blockieren, und Stimulatoren der Insulinfreisetzung, wie Glibenclamid und Tolbutamid, welche einen ATP-regulierten K⁺-Kanal im Pankreas blockieren.
Sämtliche Säugerzellen exprimieren Kaliumkanäle (K⁺-Kanäle) in ihren Zellmembranen, und die Kanäle spielen eine vorherrschende Rolle bei der Regulation des Membranpotenzials. In Nerven- und Muskelzellen regulieren sie die Frequenz und Form des Aktionspotenzials, die Freisetzung von Neurotransmittern und den Grad von Broncho- und Vasodilatation.
Von einem molekularen Standpunkt aus stellen die K⁺-Kanäle die größte und verschiedenste Gruppe von Ionenkanälen dar. Für einen Überblick können sie in fünf große Unterfamilien aufgeteilt werden: spannungsaktivierte K⁺-Kanäle (K_v), Kanäle, die mit einem langen QT verbunden sind (KvLQT), einwärts gerichtete Gleichrichter, Zweiporen-K⁺-Kanäle (K_TP) und calciumaktivierte K⁺-Kanäle (K_ca).
Die letztere Gruppe, die Ca²⁺-aktivierten K⁺-Kanäle, besteht aus drei gut definierten Subtypen: SK-Kanälen, IK-Kanälen und BK-Kanälen. SK, IK und BK beziehen sich auf das Einkanalleitvermögen (K-Kanal mit geringem (small), mittlerem (intermediate) und hohem (big) Leitvermögen). Die SK-, IK- und BK-Kanäle zeigen Unterschiede in z. B. Spannungsempfindlichkeit und Calciumempfindlichkeit, Pharmakologie, Verteilung und Funktion.
Ca²⁺-aktivierte SK-Kanäle sind in zahlreichen zentralen Neuronen und Ganglien vorhanden, wo es ihre primäre Funktion ist, Nervenzellen nach einer oder mehreren Aktionspotenzialen zu hyperpolarisieren, um das Auftreten von lang dauernder epileptogener Wirkung zu verhindern. Die SK-Kanäle sind auch in verschiedenen peripheren Zellen, einschließlich Skelettmuskel, Drüsenzellen, Leberzellen und T-Lymphozyten vorhanden.
Die Bedeutung von SK-Kanälen in normalem Skelettmuskel ist nicht klar, aber ihre Anzahl ist in denerviertem Muskel signifikant erhöht, und die große Anzahl von SK-Kanälen in dem Muskel von Patienten mit myotonischer Muskeldystrophie legt nahe, dass sie eine Rolle in der Pathogenese der Krankheit spielen.
Eine Anzahl von Blockern von SK-Kanälen existiert, z. B. Apamin, Atracurium, Pancuronium und Tubocurarin, und sie sind alle positiv geladene Moleküle, welche als Porenblocker wirken.
Der Ca²⁺-aktivierte IK-Kanal teilt eine Anzahl von Charakteristiken mit dem Ca²⁺-aktivierten SK-Kanal, da er hoch K-selektiv ist, durch submikromolare Konzentrationen von Ca²⁺ aktiviert wird und ein einwärts gerichtetes Leitvermögen hat. Es gibt jedoch auch auffällige Unterschiede. Das Einheitsleitvermögen des IK-Kanals ist vier- bis fünffach höher als das des SK-Kanals, und die Verteilung des IK-Kanals ist auf das Blut und das Gefäßsystem beschränkt. Somit wird der IK-Kanal nicht im Nervensystem und im Muskel exprimiert, sondern in Endothelzellen, Zellen von epithelischem Ursprung und in roten Blutzellen.
In den roten Blutzellen, wo der IK-Kanal als Gardos-Kanal bezeichnet worden ist, öffnet ein Anstieg der Konzentration von intrazellulärem Ca²⁺ den Kanal und verursacht Caliumverlust und Zelldehydratation, ein Zustand, der bei der Sichelzellenanämie verschlimmert ist. Vielversprechende therapeutische Herangehensweisen für Sichelzellenanämie beinhalten das spezifische Blockieren des IK-Kanals.
IK-Kanäle sind auch in dem Mikrogefäßsystem der Niere beteiligt, wo sie für die gefäßerweiternden Wirkungen von Bradykinin verantwortlich sein können. Die Abnahme des Blutdrucks während eines septischen Schocks wird durch eine erhöhte NO-Produktion durch die Endothelzellen hervorgerufen, und die IK-Kanäle in diesen Zellen sind für das Aufrechterhalten des Ca²⁺-Zuflusses verantwortlich, welcher die Ca²⁺-empfindliche NO-Synthase aktiviert.
In Kapillarendothelzellen des Gehirns leiten IK-Kanäle, aktiviert durch Endothelin, das von Neuronen und Glia erzeugt wird, überschüssiges K⁺ in das Blut. Neurotrophile Granulozyten, d. h. bewegliche phagozytische Zellen, die den Körper gegen mikrobielle Angreifer verteidigen, gehen eine große Depolarisation anschließend auf agonistische Stimulation ein, und IK-Kanäle sind bei der Depolarisierung des stimulierten Granulozyten beteiligt.
Die Ca²⁺-aktivierten BK-Kanäle sind in zahlreichen Zellen vorhanden, einschließlich den meisten zentralen und peripheren Nervenzellen, den gestreiften Muskelzellen, den Herzzellen, den glatten Muskelzellen der Luftwege, dem Gefäßsystem, dem Gastrointestinaltrakt und der Blase, in endo- und exokrinen Drüsen einschließlich pankreatischen b-Zellen und in Nierenkanälchen.
ZUSAMMENFASSUNG DER ERFINDUNG
Gemäß der vorliegenden Erfindung ist nun festgestellt worden, dass eine besondere Gruppe von Oximderivaten wertvolle Wirkung als Modulatoren von SK_Ca-, IK_Ca- und/oder BK_Ca-Kanälen besitzt.
In ihrem ersten Aspekt bezieht sich die Erfindung auf neue Oximderivate, wiedergegeben durch die allgemeine Formel
worin
R¹ Wasserstoff, eine Alkylgruppe, eine Cycloalkylgruppe, Hydroxy, eine Alkoxygruppe, eine Acylgruppe, eine Phenyl- oder eine Benzylgruppe, wobei die Phenyl- und Benzylgruppen ein- oder mehrfach mit Substituenten substituiert sein können, ausgewählt aus Halogen, -NO₂, -CN, -CF₃, Alkyl, Cycloalkyl, Hydroxy und Alkoxy, eine Gruppe der Formel -CH₂CN, eine Gruppe der Formel -CH₂CO₂R', worin R' Wasserstoff oder eine Alkylgruppe bedeutet, eine Gruppe der Formel -CH₂CONR^IVR^V, worin R^IV und R^V unabhängig voneinander Wasserstoff oder eine Alkylgruppe bedeuten, oder eine Gruppe der Formel -CH₂C(=NOH)NH₂ bedeutet,
R² Wasserstoff, eine Alkylgruppe, eine Cycloalkylgruppe, eine Phenyl- oder eine Benzylgruppe, worin Phenyl- und Benzylgruppen ein- oder mehrfach mit Substituenten substituiert sein können, ausgewählt aus Halogen, -NO₂, -CN, -CF₃, Alkyl, Cycloalkyl, Hydroxy und Alkoxy, bedeutet,
X Sauerstoff, Schwefel oder eine Aminogruppe, vorzugsweise eine Aminogruppe der Formel NHR³, bedeutet,
R³ Wasserstoff, eine Alkylgruppe, eine Cycloalkylgruppe, eine Phenyl- oder eine Benzylgruppe, wobei die Phenyl- und Benzylgruppen ein- oder mehrfach mit Substituenten substituiert sein können, ausgewählt aus Halogen, -NO₂, -CN, -CF₃, Alkyl, Cycloalkyl, Hydroxy und Alkoxy, bedeutet, und
R⁴ und R⁵ zusammen einen zusätzlichen 4- bis 7-gliedrigen kondensierten Ring bilden, wobei der kondensierte Ring aromatisch oder teilweise gesättigt sein kann, und wobei der kondensierte Ring optional ein- oder mehrfach mit Substituenten substituiert sein kann, ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus Halogen, -NO₂, -CN, -CF₃ und einer Gruppe der Formel -SO₂NR''R''', worin R'' und R''' unabhängig voneinander Wasserstoff oder eine Alkylgruppe bedeuten.
In einem zweiten Aspekt stellt die Erfindung eine pharmazeutische Zusammensetzung bereit, enthaltend eine therapeutisch wirksame Menge eines Oximderivats der Erfindung oder ein pharmazeutisch annehmbares Additionssalz davon, zusammen mit wenigstens einem pharmazeutisch annehmbaren Träger oder Verdünnungsmittel, zur Behandlung oder Erleichterung von Krankheiten, Störungen oder Zuständen, die auf die Modulation von SK_Ca-, IK_Ca- und/oder BK_Ca-Kanälen ansprechen.
In einem dritten Aspekt bezieht sich die Erfindung auf die Verwendung eines Oximderivats der Erfindung oder eines pharmazeutisch annehmbaren Salzes davon zur Herstellung einer pharmazeutischen Zusammensetzung zur Behandlung oder Erleichterung einer Krankheit oder einer Störung oder eines Zustandes eines Säugers, einschließlich des Menschen, wobei die Krankheit, die Störung oder der Zustand auf die Modulation von SK_Ca-, IK_Ca- und/oder BK_Ca-Kanälen anspricht.
AUSFÜHRLICHE BESCHREIBUNG DER ERFINDUNG
Gemäß der vorliegenden Erfindung ist nun festgestellt worden, dass eine besondere Gruppe von Oximderivaten wertvolle Wirkung als Modulatoren von SK_Ca-, IK_Ca- und/oder BK_Ca-Kanälen besitzt.
SK/IK/BK modulierende Mittel
Im Zusammenhang dieser Erfindung werden chemische Verbindungen, die zur Beeinflussung von SK_Ca-, IK_Ca- und/oder BK_Ca-Kanälen befähigt sind, als SK/IK/BK-Kanal modulierende Mittel bezeichnet. Die SK/IK/BK-Kanal modulierenden Mittel der Erfindung können die Ionenkanäle durch Öffnen (Aktivieren) der Kanäle oder durch Hemmen (Blockieren) der Kanäle beeinflussen.
Die SK/IK/BK-Kanal modulierenden Mittel der Erfindung gehören zu einer besonderen Klasse von Oximdrivaten, wiedergegeben durch die allgemeine Formel
worin
R¹ Wasserstoff, eine Alkylgruppe, eine Cycloalkylgruppe, Hydroxy, eine Alkoxygruppe, eine Acylgruppe, eine Phenyl- oder eine Benzylgruppe, wobei die Phenyl- und Benzylgruppen ein- oder mehrfach mit Substituenten substituiert sein können, ausgewählt aus Halogen, -NO₂, -CN, -CF₃, Alkyl, Cycloalkyl, Hydroxy und Alkoxy, eine Gruppe der Formel -CH₂CN, eine Gruppe der Formel -CH₂CO₂R', worin R' Wasserstoff oder eine Alkylgruppe bedeutet, eine Gruppe der Formel -CH₂CONR^IVR^V, worin R^IV und R^V unabhängig voneinander Wasserstoff oder eine Alkylgruppe bedeuten, oder eine Gruppe der Formel -CH₂C(=NOH)NH₂ bedeutet,
R² Wasserstoff, eine Alkylgruppe, eine Cycloalkylgruppe, eine Phenyl- oder eine Benzylgruppe, worin Phenyl- und Benzylgruppen ein- oder mehrfach mit Substituenten substituiert sein können, ausgewählt aus Halogen, -NO₂, -CN, -CF₃, Alkyl, Cycloalkyl, Hydroxy und Alkoxy, bedeutet,
X Sauerstoff, Schwefel oder eine Aminogruppe, vorzugsweise eine Aminogruppe der Formel NHR³, bedeutet,
R³ Wasserstoff, eine Alkylgruppe, eine Cycloalkylgruppe, eine Phenyl- oder eine Benzylgruppe, wobei die Phenyl- und Benzylgruppen ein- oder mehrfach mit Substituenten substituiert sein können, ausgewählt aus Halogen, -NO₂, -CN, -CF₃, Alkyl, Cycloalkyl, Hydroxy und Alkoxy, bedeutet, und
R⁴ und R⁵ zusammen einen zusätzlichen 4- bis 7-gliedrigen kondensierten Ring bilden, wobei der kondensierte Ring aromatisch oder teilweise gesättigt sein kann, und wobei der kondensierte Ring optional ein- oder mehrfach mit Substituenten substituiert sein kann, ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus Halogen, -NO₂, -CN, -CF₃ und einer Gruppe der Formel -SO₂NR''R''', worin R'' und R''' unabhängig voneinander Wasserstoff oder eine Alkylgruppe bedeuten.
In einer bevorzugten Ausführungsform bedeutet R¹ Wasserstoff oder eine Alkylgruppe.
In einer anderen bevorzugten Ausführungsform bedeutet R² Wasserstoff, eine Alkylgruppe oder eine Phenyl- oder Benzylgruppe, wobei die Phenyl- und Benzylgruppen ein- oder mehrfach mit Substituenten substituiert sein können, ausgewählt aus Halogen, -NO₂, -CN, -CF₃, Alkyl, Cycloalkyl, Hydroxy und Alkoxy.
In einer dritten bevorzugten Ausführungsform bedeutet X Sauerstoff oder eine Aminogruppe der Formel NHR³, worin R³ Wasserstoff, Alkyl, Benzyl oder Acetyl bedeutet.
In einer weiteren bevorzugten Ausführungsform bilden R⁴ und R⁵ zusammen einen zusätzlichen 6-gliedrigen kondensierten Ring, wobei der kondensierte Ring aromatisch oder teilweise gesättigt sein kann, und wobei der kondensierte Ring optional ein- oder mehrfach mit Substituenten substituiert sein kann, ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus Halogen, -NO₂, -CN, -CF₃ und einer Gruppe der Formel -SO₂NR''R''', worin R'' und R''' unabhängig voneinander Wasserstoff oder eine Alkylgruppe bedeuten.
In einer noch anderen bevorzugten Ausführungsform kann das Oximderivat der Erfindung durch die folgende allgemeine Formel wiedergegeben werden
worin
X, R¹, R² und R³ wie vorstehend definiert sind, und
Y Wasserstoff, Halogen, -NO₂, -CN, -CF₃ oder eine Gruppe der Formel -SO₂NR''R''' bedeutet, worin R'' und R''' unabhängig voneinander Wasserstoff oder eine Alkylgruppe bedeuten.
In einer noch anderen bevorzugten Ausführungsform kann das Oximderivat der Erfindung durch die allgemeine Formel wiedergegeben werden
worin
X, R¹, R² und R³ wie vorstehend definiert sind, und
Y Wasserstoff, Halogen, -NO₂, -CN, -CF₃ oder eine Gruppe der Formel -SO₂NR''R''' bedeutet, worin R'' und R''' unabhängig voneinander Wasserstoff oder eine Alkylgruppe bedeuten.
In ihrer bevorzugtesten Ausführungsform ist das Oximderivat der Erfindung
2-Aldoximo-1-naphthol,
2-Aldoximo-5,6,7,8-tetrahydro-1-naphthol,
1-Hydroxy-2-acetonaphthonoxim,
1-Methoxy-2-acetonaphthonoxim,
O-Ethyl-1-methoxy-2-acetonaphthonoxim,
1-Ethoxy-2-acetonaphthonoxim,
1-Benzyloxy-2-acetonaphthonoxim,
1-Hydroxy-5,6,7,8-tetrahydro-2-acetonaphthonoxim,
1-Methoxy-5,6,7,8-tetrahydro-2-acetonaphthonoxim oder
1-(2-Propyloxy)-2-acetonaphthonoxim.
Definition von Substituenten
Im Zusammenhang dieser Erfindung bedeutet Halogen ein Fluor-, ein Chor-, ein Brom- oder ein Iodatom.
Im Zusammenhang dieser Erfindung bezeichnet eine Alkylgruppe eine einwertige gesättigte, geradkettige oder verzweigte Kohlenwasserstoffkette. Die Kohlenwasserstoffkette enthält bevorzugt 1 bis 12 Kohlenstoffatome (C_1-12-Alkyl), bevorzugter 1 bis 6 Kohlenstoffatome (C_1-6-Alkyl, Niederalkyl), einschließlich Pentyl, Isopentyl, Neopentyl, tert-Pentyl, Hexyl und Isohexyl. In einer bevorzugten Ausführungsform bedeutet Alkyl eine C_1-4-Alkylgruppe einschließlich Butyl, Isobutyl, sec-Butyl und tert-Butyl. In einer bevorzugtesten Ausführungsform bedeutet Alkyl eine C_1-3-Alkylgruppe, die insbesondere Methyl, Ethyl, Propyl oder Isopropyl sein kann.
Im Zusammenhang dieser Erfindung bezeichnet eine Cycloalkylgruppe eine cyclische Alkylgruppe, die bevorzugt 1 bis 7 Kohlenstoffatome (C_3-7-Cycloalkyl) enthält, einschließlich Cyclopropyl, Cyclobutyl, Cyclopentyl und Cyclohexyl.
Im Zusammenhang dieser Erfindung bezeichnet eine Alkoxygruppe eine "Alkyl-O-"-gruppe, worin Alkyl wie vorstehend definiert ist.
Im Zusammenhang dieser Erfindung kann eine Aminogruppe eine primäre (-NH₂), sekundäre (-NH-R³) oder tertiäre (-N(Alkyl)R³) Aminogruppe sein.
Im Zusammenhang dieser Erfindung bezeichnet eine Acylgruppe eine Carboxygruppe oder eine Alkylcarbonylgruppe, worin Alkyl wie vorstehend definiert ist. Beispiele von bevorzugten Acylgruppen der Erfindung sind Carboxy, Acetyl und Propionyl.
Pharmazeutisch annehmbare Salze
Die SK/IK/BK-Kanal modulierenden Mittel der Erfindung können in jeder Form, die für die beabsichtigte Verabreichung geeignet ist, bereitgestellt werden. Geeignete Formen umfassen pharmazeutisch (d. h. physiologisch) annehmbare Salze und Prä- oder Prodrug-Formen der chemischen Verbindung der Erfindung.
Beispiele von pharmazeutisch annehmbaren Additionssalzen umfassen ohne Beschränkung die nicht-toxischen anorganischen und organischen Säureadditionssalze, wie das von Essigsäure abgeleitete Acetat, das von Aconitsäure abgeleitete Aconat, das von Ascorbinsäure abgeleitete Ascorbat, das von Benzolsulfonsäure abgeleitete Benzolsulfonat, das von Benzoesäure abgeleitete Benzoat, das von Zimtsäure abgeleitete Cinnamat, das von Citronensäure abgeleitete Citrat, das von Embonsäure abgeleitete Embonat, das von Önanthsäure abgeleitete Önantathat, das von Ameisensäure abgeleitete Formiat, das von Fumarsäure abgeleitete Fumarat, das von Glutaminsäure abgeleitete Glutamat, das von Glycolsäure abgeleitete Glycolat, das von Chlorwasserstoffsäure abgeleitete Hydrochlorid, das von Bromwasserstoffsäure abgeleitete Hydrobromid, das von Milchsäure abgeleitete Lactat, das von Maleinsäure abgeleitete Maleat, das von Malonsäure abgeleitete Malonat, das von Mandelsäure abgeleitete Mandelat, das von Methansulfonsäure abgeleitete Methansulfonat, das von Naphthalin-2-sulfonsäure abgeleitete Naphthalin-2-sulfonat, das von Salpetersäure abgeleitete Nitrat, das von Perchlorsäure abgeleitete Perchlorat, das von Phosphorsäure abgeleitete Phosphat, das von Phthalsäure abgeleitete Phthalat, das von Salicylsäure abgeleitete Salicylat, das von Sorbinsäure abgeleitete Sorbat, das von Stearinsäure abgeleitete Stearat, das von Bernsteinsäure abgeleitete Succinat, das von Schwefelsäure abgeleitete Sulfat, das von Weinsäure abgeleitete Tartrat, das von Toluol-p-sulfonsäure abgeleitete Toluol-p-sulfonat und Ähnliche. Solche Salze können nach im Stand der Technik bekannten und beschriebenen Verfahren hergestellt werden.
Andere Säuren, wie Oxalsäure, die nicht als pharmazeutisch annehmbar angesehen werden können, können bei der Herstellung von Salzen, die als Zwischenprodukte zum Erhalt einer chemischen Verbindung der Erfindung und ihres pharmazeutisch annehmbaren Additionssalzes verwendbar sind, verwendbar sein.
Metallsalze einer chemischen Verbindung der Erfindung umfassen Alkalimetallsalze, wie das Natriumsalz einer chemischen Verbindung der Erfindung, die eine Carboxygruppe enthält.
Die chemische Verbindung der Erfindung kann in unsolvatisierten oder solvatisierten Formen zusammen mit einem pharmazeutisch annehmbaren Lösemittel, wie Wasser, Ethanol und Ähnliches, bereitgestellt werden. Solvatisierte Formen können auch hydratisierte Formen umfassen, wie das Monohydrat, das Dihydrat, das Hemihydrat, das Trihydrat, das Tetrahydrat und Ähnliche. Im Allgemeinen werden solvatisierte Formen als äquivalent zu unsolvatisierten Formen für die Zwecke dieser Erfindung angesehen.
Sterische Isomere
Die SK/IK/BK-Kanal modulierenden Mittel der vorliegenden Erfindung können sowohl in (+)- und (–)-Formen als auch in racemischen Formen vorliegen. Die Racemate dieser Isomere und die einzelnen Isomere selbst sind vom Bereich der vorliegenden Erfindung umfasst.
Racemische Formen können in die optischen Antipoden nach bekannten Verfahren und Techniken aufgetrennt werden. Ein Weg der Trennung der diastereomeren Salze ist durch Verwendung einer optisch aktiven Säure und Freisetzen der optisch aktiven Aminverbindung durch Behandeln mit einer Base. Ein anderes Verfahren zum Auftrennen von Racematen in die optischen Antipoden basiert auf der Chromatografie auf einer optisch aktiven Matrix. Racemische Verbindungen der vorliegenden Erfindung können daher in ihre optischen Antipoden, z. B. durch fraktionierte Kristallisation der d- oder l-Salze (Tartrate, Mandelate oder Camphersulfonate) aufgetrennt werden.
Die chemischen Verbindungen der vorliegenden Erfindung können auch durch die Bildung diastereomeren Amide durch Umsetzen der chemischen Verbindungen der vorlie genden Erfindung mit einer optisch aktiven, aktivierten Carbonsäure, wie diejenige, die von (+)- oder (–)-Phenylalanin, (+)- oder (–)-Phenylglycin, (+)- oder (–)-Camphansäure abgeleitet sind, oder durch die Bildung von diastereomeren Carbamaten durch Umsetzen der chemischen Verbindung der vorliegenden Erfindung mit einem optisch aktiven Chlorformiat oder Ähnlichem aufgetrennt werden.
Zusätzliche Verfahren zum Auftrennen der optischen Isomere sind im Stand der Technik bekannt. Solche Verfahren umfassen diejenigen, die von Jaques J, Collet A, & Wilen S in "Enantiomers, Racemates. and Resolutions", John Wiley and Sons, New York (1981) beschrieben sind.
Darüber hinaus können einige der chemischen Verbindungen der Erfindung, die Oxime sind, daher in zwei Formen, der syn- und der anti-Form (Z- und E-Form) vorliegen, abhängig von der Anordnung der Substituenten um die -C=N- -Doppelbindung. Eine chemische Verbindung der vorliegenden Erfindung kann daher die syn- oder die anti-Form (Z- und E-Form) sein, oder sie kann eine Mischung davon sein.
Biologische Aktivität
Gemäß der vorliegenden Erfindung ist nun festgestellt worden, dass die Oximderivate der Erfindung wertvolle Wirkung als Modulatoren von SK_Ca-, IK_Ca- und/oder BK_Ca-Kanälen besitzen.
Die SK/IK/BK-Kanal modulierende Wirkung kann unter Verwendung herkömmlicher elektrophysiologischer Verfahren, wie Patch-Clamp-Techniken, oder herkömmlicher spektroskopischer Verfahren, wie FLIPR-Untersuchung (Fluoreszenz-Bildplatten-Lesegerät, erhältlich von Molecular Devices) verfolgt werden. Bei diesen Verfahren werden allgemein SK_Ca, IK_Ca oder BK_Ca enthaltende Zellen der Wirkung der chemischen Verbindung der Erfindung ausgesetzt, gefolgt von der Überwachung des Membranpotenzials der SK_Ca, IK_Ca oder BK_Ca enthaltenden Zelle, um Änderungen in dem Membranpotenzial zu identifizieren, die durch die Wirkung der Verbindung der Erfindung hervorgerufen werden.
In Beispiel 7 wird die biologische Aktivität der Verbindungen der Erfindung unter Verwendung elektrophysiologischer Patch-Clamp-Techniken gezeigt.
Auf der Grundlage ihrer biologischen Aktivität werden die Verbindungen der Erfindung als verwendbar zur Behandlung oder Erleichterung von Krankheiten oder Zuständen angesehen, die auf die Modulation von SK_Ca-, IK_Ca- und/oder BK-Kanälen ansprechen, einschließlich Krankheiten oder Zustände wie Krankheiten des Respirationstraktes, wie Asthma, cystische Fibrose, chronisch-obstruktive Lungenerkrankung und Rhinorrhoe, Krämpfe, Gefäßspasmen, Koronararterienspasmen, Nierenstörungen, polycystische Nierenerkrankungen, Blasenkrämpfe, Urininkontinenz, Blasenausflusssperre, irritables Kolonsyndron, gastrointestinale Störung, sekretorische Diarrhoe, Ischämie, zerebrale Ischämie, ischämische Herzerkrankung, Angina pectoris, koronare Herzerkrankung, traumatische Hirnverletzung, Psychose, Angstzustände, Depression, Demenz, Gedächtnis- und Aufmerksamkeitsstörungen, Alzheimersche Krankheit, Dysmenorrhoe, Narkolepsie, Reynaudsche Krankheit, intermittierende Claudicatio, Sjorgrensches Syndrom, Migräne, Arrhythmie, Bluthochdruck, Absenzen, myotonische Muskeldystrophie, Trockenheit im Mund, Diabetes Typ II, Hyperinsulinämie, vorzeitige Wehen, Kahlheit, Krebs und Immununterdrückung.
Die Verbindungen der Erfindung sind besonders zur Verringerung oder Hemmung von unerwünschten immunoregulatorischen Wirkungen verwendbar. In einer bevorzugten Ausführungsform können die Verbindungen der Erfindung verwendet werden bei der Behandlung oder Erleichterung von Krankheiten, Störungen oder eines Zustandes, verbunden mit Immundysfunktion, oder um eine Immunsuppression in einem Individuum, das sie benötigt, zu erhalten.
In einer anderen und noch bevorzugteren Ausführungsform bezieht sich die Erfindung auf die Verwendung einer Verbindung der Erfindung in einer Kombinationstherapie mit bekannten Immunsuppressiva zur Behandlung oder Erleichterung von Krankheiten, Störungen oder eines Zustandes, verbunden mit Immundysfunktion, oder um eine Immunsuppression zu erhalten. Bevorzugte Immunsuppressiva, die mit den Verbindungen der Erfindung kombiniert werden, umfassen die Calcineurininhibitoren (d. h. Proteinphosphatase 2 B-Inhibitoren), insbesondere Cyclosporin und FK506.
Zustände, die von dieser Behandlung begünstigt werden, umfassen, sind aber nicht beschränkt auf Krankheiten, Störungen oder Zustände, wie Autoimmunkrankheiten, z. B. Addisonsche Krankheit, Alopecia areata, ankylosierende Spondylitis, hämolytische Anämie (Anemia haemolytica), perniziöse Anämie (Anemia perniciosa), Aphthen, aphthöse Stomatitis, Arthritis, arteriosklerotische Störungen, Osteoarthritis, rheumatoide Arthritis, Aspermiogenese, Asthma bronchiale, Autoimmunasthma, autoimmune Hämolyse, Bechetsche Krankheit, Boecksche Krankheit, entzündliche Darmerkrankung, Burkittsches Lymphom, Morbus Chron, Chorioiditis, Colitis ulcerosa, Erkrankung des Coecums, Kryoglobulinämie, Dermatitis herpetiformis, Dermatomyositis, Insulin abhängiger Diabetes Typ I, juveniler Diabetes, idiopathischer Diabetes insipidus, Insulin abhängiger Diabetes mellitus, autoimmune demyelisierende Erkrankungen, Dupuytrensche Kontraktur, Encephalomyelitis, Encephalomyelitis allergica, Endophthalmia phacoanaphylactica, Enteritits allergica, autoimmunes enteropathisches Syndrom, Erythema nodosum leprosum, idiopathische Gesichtslähmung, chronisches Ermüdungssyndrom, rheumatisches Fieber, Glomerulonephritis, Goodpasturesches Syndrom, Gravessche Krankheit, Hamman-Richsche Krankheit, Hashimotosche Krankheit, Hashimotosche Thyroiditis, plötzlicher Hörverlust, sensoneuraler Hörverlust, Hepatitis chronica, Hodgkinsche Krankheit, paroxysmale Haemoglobinurie, Hypogonadismus, Ileitis regionalis, Iritis, Leukopenie, Leukämie, Lupus erythematosus disseminatus, systemischer Lupus erythematosus, kutaner Lupus erythematosus, Lymphogranuloma malignum, infektiöse Mononukleose, Myasthenia gravis, traverse Myelitis, primäres idiopathisches Myxödem, Nephrose, Ophthalmia symphatica, Orchitis granulomatosa, Pankreatitis, Pemphigus, Pemphigus vulgaris, Polyarteritis nodosa, primäre chronische Polyarthritis, Polymyositis, Polyradiculitis acuta, Psoriasis, Purpura, Pyoderma gangränosum, Quervainsche Thyreoiditis, Reitersches Syndrom, Sarkoidose, ataxische Sklerose, progressive systemische Sklerose, Skleritits, Sklerodermie, multiple Sklerose, Sclerosis disseminata, erworbene Milzatrophie, durch Antispermatozoen-Antikörper bedingte Infertilität, Thrombocytopenie, idiopathische thrombocytopenische Purpura, Thymome, akute vordere Uveitis, Vitiligo, mit AIDS-, HIV-, SCID- und Epstein Barr-Virus assoziierte Krankheiten, wie Sjorgrensches Syndrom, Virus-(AIDS oder EBV)-assoziiertes B-Zelllymphom, parasitäre Krankheiten, wie Leischmaniose und durch Immununterdrückung hervorgerufene Krankheitszustände, wie virale Infektionen nach allogenen Transplantationen, Graft versus Host-Syndrom, Transplantatabstoßung oder AIDS, Krebserkrankungen, chronisch aktive Hepatitis, Diabetes, toxisches Schocksyndrom, Nahrungsmittelvergiftung und Transplantatabstoßung.
Pharmazeutische Zusammensetzungen
In einem anderen Aspekt stellt die Erfindung neue pharmazeutische Zusammensetzungen bereit, die eine therapeutisch wirksame Menge einer chemischen Verbindung mit SK_Ca-, IK_Ca- oder BK_Ca-modulierender Wirkung enthalten.
Obwohl eine chemische Verbindung der Erfindung zur Verwendung in der Therapie in Form der rohen chemischen Verbindung verabreicht werden kann, ist es bevorzugt, den aktiven Wirkstoff, optional in Form eines physiologisch annehmbaren Salzes, in einer pharmazeutischen Zusammensetzung zusammen mit einem oder mehreren Adjuvanzien, Corrigenzien, Trägern, Puffern, Verdünnungsmitteln und/oder anderen üblichen pharmazeutischen Hilfsstoffen zuzuführen.
In einer bevorzugten Ausführungsform stellt die Erfindung pharmazeutische Zusammensetzungen bereit, die SK/IK/BK-Kanal modulierende Mittel der Erfindung oder ein pharmazeutisch annehmbares Salz oder Derivat davon, zusammen mit einem oder mehreren pharmazeutisch annehmbaren Trägern hierfür und optional anderen therapeutischen und/oder prophylaktischen Bestandteilen enthalten, die im Stand der Technik bekannt sind und verwendet werden. Der bzw. die Träger müssen "annehmbar" in dem Sinn sein, dass sie mit den anderen Bestandteilen der Formulierung verträglich und für ihren Empfänger nicht schädlich sind.
Pharmazeutische Zusammensetzungen der Erfindung können solche sein, die für orale, rektale, bronchiale, nasale, topische (einschließlich buccale und sublinguale), transdermale, vaginale oder parenterale (einschließlich kutane, subkutane, intramuskuläre und intravenöse Injektion) Verabreichung geeignet sind, oder solche, die in einer geeigneten Form für die Verabreichung durch Inhalation oder Insufflation vorliegen.
Die chemische Verbindung der Erfindung, zusammen mit einem herkömmlichen Adjuvans, Träger oder Verdünnungsmittel, kann somit in Form von pharmazeutischen Zusammensetzungen und Einheitsdosierungen davon gebracht werden. Solche Formen umfassen Feststoffe, und insbesondere Tabletten, gefüllte Kapseln, Pulver und Pelletformen, und Flüssigkeiten, insbesondere wässrige oder nicht wässrige Lösungen, Suspensionen, Emulsionen, Elixiere und mit diesen gefüllte Kapseln, sämtliche für die orale Verwendung, Suppositorien für die rektale Verabreichung und sterile, injizierbare Lösungen für die parenterale Verwendung. Solche pharmazeutischen Zusammensetzungen und Einheitsdosierformen davon können herkömmliche Bestandteile in herkömmlichen Anteilen, mit oder ohne zusätzliche aktive Verbindungen oder Prinzipien, enthalten, und solche Einheitsdosierformen können jede geeignete wirksame Menge des aktiven Bestandteils enthalten, welche dem beabsichtigten anzuwendenden täglichen Dosierungsbereich entspricht.
Die chemische Verbindung der vorliegenden Erfindung kann in einer großen Vielzahl von oralen und parenteralen Dosierformen verabreicht werden. Es ist dem Fachmann klar, dass die folgenden Dosierformen als aktive Komponente entweder eine chemische Verbindung der Erfindung oder ein pharmazeutisch annehmbares Salz einer chemischen Verbindung der Erfindung enthalten können.
Zur Herstellung pharmazeutischer Zusammensetzungen aus einer chemischen Verbindung der vorliegenden Erfindung können pharmazeutisch annehmbare Träger entweder fest oder flüssig sein. Präparationen in fester Form umfassen Pulver, Tabletten, Pillen, Kapseln, Kachets, Suppositorien und dispergierbare Körnchen. Ein fester Träger kann eine oder mehrere Substanzen sein, die auch als Verdünnungsmittel, Aromatisierungsmittel, Löslichmacher, Gleitmittel, Suspendiermittel, Bindemittel, Konservierungsmittel, Tablettensprengmittel oder als ein Einkapselungsmaterial wirken können.
In Pulvern ist der Träger ein fein verteilter Feststoff, welcher in einer Mischung mit der fein verteilten aktiven Komponente vorliegt.
In Tabletten ist die aktive Komponente mit dem Träger vermischt, welcher die notwendige Bindungskapazität in geeigneten Anteilen hat, und in die gewünschte Form und Größe verpresst.
Die Pulver und Tabletten enthalten vorzugsweise fünf oder zehn bis etwa siebzig Prozent der aktiven Verbindung. Geeignete Träger sind Magnesiumcarbonat, Magnesium stearat, Talkum, Zucker, Lactose, Pektin, Dextrin, Stärke, Gelatine, Tragant, Methylcellulose, Natriumcarboxymethylcellulose, ein niedrig schmelzendes Wachs, Kakaobutter und Ähnliches. Der Ausdruck "Präparation" soll die Formulierung der aktiven Verbindung mit Einkapselungsmaterial als Träger umfassen, die eine Kapsel bereit stellt, in welcher die aktive Komponente, mit oder ohne Träger, von einem Träger umgeben ist, der so in Verbindung mit ihr steht. In ähnlicher Weise sind Kachets und Pastillen umfasst. Tabletten, Pulver, Kapseln, Pillen, Kachets und Pastillen können als feste Formen verwendet werden, die für die orale Verabreichung geeignet sind.
Zur Herstellung von Suppositorien wird ein niedrig schmelzendes Wachs, wie eine Mischung von Fettsäureglycerid oder Kakaobutter, zuerst geschmolzen, und die aktive Komponente wird darin, z. B. durch Rühren, homogen dispergiert. Die geschmolzene, homogene Mischung wird dann in Formen von geeigneter Größe gegossen, abkühlen und dadurch fest werden gelassen.
Für die vaginale Verabreichung geeignete Formulierungen können als Pessare, Tampons, Cremes, Gele, Pasten, Schäume oder Sprays vorliegen, die zusätzlich zu dem aktiven Bestandteil solche Träger enthalten, wie sie im Stand der Technik als geeignet bekannt sind.
Präparationen in flüssiger Form umfassen Lösungen, Suspensionen und Emulsionen, z. B. Wasser oder Wasser-Propylenglycol-Lösungen. Flüssige Präparationen zur parenteralen Injektion können z. B. als Lösungen in wässriger Polyethylenglycol-Lösung formuliert werden.
Die chemische Verbindung gemäß der vorliegenden Erfindung kann somit für die parenterale Verabreichung (z. B. durch Injektion, z. B. Bolus-Injektion oder kontinuierliche Infusion) formuliert werden, und sie kann in Einheitsdosisform in Ampullen, vorgefüllten Spritzen, kleinvolumigen Infusionsbehältern oder Mehrfachdosenbehältern mit einem zugesetzten Konservierungsmittel vorliegen. Die Zusammensetzungen können solche Formen haben, wie Suspensionen, Lösungen oder Emulsionen in öligen oder wässrigen Vehikeln, und sie können Formulierungsmittel enthalten, wie Suspendier-, Stabilisier- und/oder Dispergiermittel. Alternativ kann der aktive Wirkstoff in Pulverform vorliegen, erhalten durch aseptische Isolierung eines sterilen Feststoffs oder durch Gefriertrock nung aus einer Lösung zur Wiederherstellung mit einem geeigneten Vehikel, z. B. sterilem, Pyrogen-freiem Wasser, vor der Verwendung.
Wässrige Lösungen, die für die orale Verwendung geeignet sind, können durch Auflösen der aktiven Komponente in Wasser und Zugabe von geeigneten Färbemitteln, Aromastoffen, Stabilisier- und Verdickungsmitteln, wie erwünscht, hergestellt werden.
Wässrige Suspensionen, die für die orale Verwendung geeignet sind, können durch Dispergieren der fein verteilten aktiven Komponente in Wasser mit viskosem Material, wie natürlichen oder synthetischen Gummen, Harzen, Methylcellulose, Natriumcarboxymethylcellulose oder anderen bekannten Suspendiermitteln, hergestellt werden.
Ebenfalls umfasst sind Präparationen in fester Form, die kurz vor der Verwendung in Präparationen in flüssiger Form für die orale Verabreichung umgewandelt werden sollen. Solche flüssigen Formen umfassen Lösungen, Suspensionen und Emulsionen. Diese Präparationen können zusätzlich zu der aktiven Komponente Färbemittel, Aromastoffe, Stabilisatoren, Puffer, künstliche und natürliche Süßstoffe, Dispergiermittel, Verdickungsmittel, Löslichmacher und Ähnliches enthalten.
Für die topische Verabreichung auf die Epidermis kann das Oximderivat der Erfindung als Salben, Cremes oder Lotionen oder als ein transdermales Kissen formuliert werden. Salben und Cremes können z. B. mit einer wässrigen oder öligen Grundlage unter Zugabe von geeigneten Verdickungs- und/oder Geliermitteln formuliert werden. Lotionen können mit einer wässrigen oder öligen Grundlage formuliert werden und enthalten im Allgemeinen eines oder mehrere Emulgiermittel, Stabilisatoren, Dispergiermittel, Suspendiermittel, Verdickungsmittel oder Färbemittel.
Für die topische Verabreichung im Mund geeignete Zusammensetzungen umfassen Pastillen, die ein aktives Mittel in einer aromatisierten Grundlage enthalten, gewöhnlich Sucrose und Akaziengummi oder Tragant; Pastillen, die den aktiven Bestandteil in einer inerten Grundlage enthalten, wie Gelatine und Glycerin oder Sucrose und Akaziengummi; und Mundspülungen, die den aktiven Bestandteil in einem geeigneten flüssigen Träger enthalten.
Lösungen oder Suspensionen werden direkt in der Nasenhöhle durch herkömmliche Maßnahmen angewendet, z. B. mit einer Tropfeinrichtung, einer Pipette oder einem Spray. Die Zusammensetzungen können in Form von Einzeldosen oder Mehrfachdosen vorliegen. Im letzteren Fall einer Tropfeinrichtung oder einer Pipette kann dies durch den Patienten durch Verabreichen eines geeigneten, vorbestimmten Volumens der Lösung oder Suspension erreicht werden. Im Falle eines Sprays kann dies z. B. mittels einer Vernebelungs-Sprühdosierpumpe erreicht werden.
Eine Verabreichung an den Atmungstrakt kann auch mittels einer Aerosol-Formulierung erreicht werden, in welcher der aktive Bestandteil in einer mit Druck beaufschlagten Packung mit einem geeigneten Treibmittel, wie Chlorfluorkohlenstoff (CFC), z. B. Dichlordifluormethan, Trichlorfluormethan oder Dichlortetrafluorethan, Kohlendioxid oder ein anderes geeignetes Gas, vorgesehen ist. Das Aerosol kann in geeigneter Weise auch ein oberflächenaktives Mittel, wie Lecithin, enthalten. Die Dosis des Wirkstoffs kann geregelt werden, indem ein Dosierventil vorgesehen ist.
Alternativ können die aktiven Bestandteile in der Form eines trockenen Pulvers, z. B. einer Pulvermischung der Verbindung in einer geeigneten Pulvergrundlage, wie Lactose, Stärke, Stärkederivate, wie Hydroxypropylmethylcellulose, und Polyvinylpyrrolidon (PVP), vorgesehen sein. Der Pulverträger bildet in geeigneter Weise ein Gel in der Nasenhöhle. Die Pulverzusammensetzung kann in einer Einheitsdosisform vorliegen, z. B. in Kapseln oder Hülsen von z. B. Gelatine, oder Blister-Packungen, aus welchen das Pulver mittels eines Inhalators verabreicht werden kann.
In Zusammensetzungen, deren Verabreichung an den Atmungstrakt beabsichtigt ist, einschließlich intranasaler Zusammensetzungen, wird die Verbindung allgemein eine kleine Teilchengröße, z. B. in der Größenordnung von 5 Mikron oder weniger, haben. Eine solche Teilchengröße kann durch im Stand der Technik bekannte Maßnahmen erhalten werden, z. B. durch Mikronisieren.
Wenn es erwünscht ist, können Zusammensetzungen verwendet werden, die so angepasst sind, dass sie eine verzögerte Freisetzung des aktiven Wirkstoffs ergeben.
Die pharmazeutischen Präparationen sind vorzugsweise Einheitsdosierformen. In einer solchen Form ist die Präparation in Einheitsdosen unterteilt, die geeignete Mengen der aktiven Komponente enthalten. Die Einheitsdosierform kann eine verpackte Präparation sein, wobei die Verpackung getrennte Mengen der Präparation enthält, wie verpackte Tabletten, Kapseln und Pulver in Vialen oder Ampullen. Die Einheitsdosierform kann auch selbst eine Kapsel, eine Tablette, ein Kachet oder eine Pastille sein, oder sie kann eine geeignete Anzahl von sämtlichen von diesen in verpackter Form sein.
Tabletten oder Kapseln für die orale Verabreichung und Flüssigkeiten für die intravenöse Verabreichung und die kontinuierliche Infusion sind bevorzugte Zusammensetzungen.
Weitere Einzelheiten betreffend Techniken für die Formulierung und Verabreichung können in der letzten Ausgabe von Remington's Pharmaceutical Sciences (Maack Publishing Co., Easton, PA) gefunden werden.
Eine therapeutisch wirksame Dosis bezieht sich auf diejenige Menge des aktiven Bestandteils, welcher die Symptome oder den Zustand verbessert. Die therapeutische Wirksamkeit und die Toxizität, d. h. ED₅₀ und LD₅₀, können nach pharmakologischen Standardverfahren in Zellkulturen oder Versuchstieren bestimmt werden. Das Dosisverhältnis zwischen der therapeutischen Wirkung und der toxischen Wirkung ist der therapeutische Index und kann durch das Verhältnis LD₅₀/ED₅₀ ausgedrückt werden. Pharmazeutische Zusammensetzungen, welche hohe therapeutische Indices aufweisen, sind bevorzugt.
Die verabreichte Dosis muss natürlich sorgfältig sowohl auf das Alter, das Gewicht und den Zustand des zu behandelnden Individuums als auch auf den Verabreichungsweg, die Dosierungsform und die Therapie und auf das erwünschte Ergebnis eingestellt werden, und die exakte Dosierung sollte natürlich vom Arzt bestimmt werden.
Die exakte Dosierung hängt von der Natur und der Schwere der zu behandelnden Krankheit und von dem Verabreichungsweg ab und steht im Ermessen des Arztes und kann durch Bemessung der Dosierung auf die besonderen Umstände dieser Erfindung variiert werden, um die erwünschte therapeutische Wirkung hervorzurufen. Derzeit wird jedoch davon ausgegangen, dass pharmazeutische Zusammensetzungen, die etwa 0,1 bis etwa 500 mg des aktiven Bestandteils pro Einzeldosis, vorzugsweise etwa 1 bis etwa 100 mg, am bevorzugtesten etwa 1 bis etwa 10 mg, enthalten, für therapeutische Behandlungen geeignet sind.
Der aktive Bestandteil kann in einer Dosis oder mehreren Dosen pro Tag verabreicht werden. Ein zufriedenstellendes Ergebnis kann in bestimmten Fällen mit einer Dosierung so niedrig wie 0,1 μg/kg i. v. und 1 μg/kg p. o. erhalten werden. Als obere Grenze des Dosierungsbereichs werden derzeit etwa 10 mg/kg i. v. und 100 mg/kg p. o. angesehen. Bevorzugte Bereiche betragen etwa 0,1 μg/kg bis etwa 10 mg/kg/Tag i. v. und etwa 1 μg/kg bis etwa 100 mg/kg/Tag p. o.
Therapieverfahren
In einem anderen Aspekt stellt die Erfindung die Verwendung eines Oximderivats der Erfindung oder eines pharmazeutisch annehmbaren Salzes davon zur Herstellung einer pharmazeutischen Zusammensetzung zur Behandlung oder Erleichterung von Krankheiten oder Störungen oder Zuständen von lebenden tierischen Körpern, einschließlich des Menschen, bereit, wobei die Krankheiten, Störungen oder Zustände auf die Modulation von SK_Ca-, IK_Ca- und/oder BK_Ca-Kanälen anspricht, und wobei das Verfahren die Verabreichung eines wirksamen Menge eines Oximderivats der Erfindung an einen solchen lebenden tierischen Körper, einschließlich des Menschen, der dessen bedarf, umfasst.
In einer bevorzugteren Ausführungsform ist die Krankheit, die Störung oder der Zustand Asthma, cystische Fibrose, chronisch-obstruktive Lungenerkrankung und Rhinorrhoe, Krämpfe, Gefäßspasmen, Koronararterienspasmen, Nierenstörungen, polycystische Nierenerkrankung, Blasenkrämpfe, Urininkontinenz, Blasenausflusssperre, irritables Darmsyndron, gastrointestinale Störung, sekretorische Diarrhoe, Ischämie, zerebrale Ischämie, ischämische Herzerkrankung, Angina pectoris, koronare Herzerkrankung, traumatische Hirnverletzung, Psychose, Angstzustände, Depression, Demenz, Gedächtnis- und Aufmerksamkeitsstörungen, Alzheimersche Krankheit, Dysmenorrhoe, Narkolepsie, Reynaudsche Krankheit, intermittierende Claudicatio, Sjorgrensches Syndrom, Migräne, Arrhythmie, Bluthochdruck, Absenzen, myotonische Muskeldystrophie, Trockenheit im Mund, Diabetes Typ II, Hyperinsulinämie, vorzeitige Wehen, Kahlheit, Krebs und Immununterdrückung.
Es wird derzeit in Betracht gezogen, dass geeignete Dosierbereiche 0,1 bis 1000 Milligramm pro Tag, 10 bis 500 Milligramm pro Tag und insbesondere 30 bis 100 Milligramm pro Tag sind, abhängig wie gewöhnlich von der genauen Verabreichungsart, der Verabreichungsform, der Indikation, gegen welche die Verabreichung gerichtet ist, dem beteiligten Patienten und dem Körpergewicht des beteiligten Patienten und ferner der Vorliebe und Erfahrung des behandelnden Arztes oder Tierarztes.
BEISPIELE
Die Erfindung wird weiter mit Bezug auf die folgenden Beispiele erläutert, die in keiner Weise den Bereich der beanspruchten Erfindung beschränken sollen.
Tabelle 1 Oxime von substituierten Benzaldehyden und Acetophenonen
Beispiel 1
Die folgenden Aldoxime wurden durch Behandeln der entsprechenden Aldehyde mit den geeigneten Hydroxylaminen in Ethanol unter Rückfluss hergestellt.
2-Aldoximo-1-naphthol (1a). Aus 2-Formyl-1-naphthol und Hydroxylamin·HCl, Fp. 143–144°C.
2-Aldoximo-5,6-dimethylphenol (1c). Aus 2-Formyl-5,6-dimethylphenol und Hydroxylamin·HCl, Fp. 101–103°C.
2-Aldoximo-5,6-dichlorphenol (1d). Aus 2-Formyl-5,6-dichlorphenol und Hydroxylamin· HCl, Fp. 188–190°C.
O-Benzyl-2-formyl-5,6-dichlorphenoloxim (1e). Aus 2-Formyl-5,6-dichlorphenol und O-Benzylhydroxylamin·HCl, Fp. 64–69°C.
O-Methyl-2-formyl-5,6-dichlorphenoloxim (1f). Aus 2-Formyl-5,6-dichlorphenol und O-Methylhydroxylamin·HCl, Fp. 82–83°C.
2-Aldoximo-5,6,7,8-tetrahydro-1-naphthol (1r). Aus 2-Formyl-5,6,7,8-tetrahydro-1-naphthol und Hydroxylamin·HCl, Fp. 122–123°C.
Beispiel 2
Die folgenden 2-Formylphenole wurden in Analogie zu dem in Organic Syntheses, Coll. Vol. III, Seite 463 beschriebenen Verfahren aus den entsprechenden Phenolen hergestellt. Die Produkte wurden durch Säulenchromatografie gereinigt.
2-Formyl-1-naphthol aus 1-Naphthol.
2-Formyl-5,6-dimethylphenol aus 2,3-Dimethylphenol.
2-Formyl-5,6-dichlorphenol aus 2,3-Dichlorphenol.
2-Formyl-5,6,7,8-tetrahydro-1-naphthol aus 5,6,7,8-tetrahydro-1-naphthol.
Beispiel 3
Die folgenden Ketoxime wurden durch Behandlung der entsprechenden Ketone mit den geeigneten Hydroxylaminen in Ethanol unter Rückfluss hergestellt.
1-Hydroxy-2-acetonaphthonoxim (1b). Aus 1-Hydroxy-2-acetonaphthon und Hydroxylamin·HCl, Fp. 165–165,5°C.
1-Methoxy-2-acetonaphthonoxim (1g). Aus 1-Methoxy-2-acetonaphthon und Hydroxylamin·HCl, Fp. 118–119°C.
O-Ethyl-1-methoxy-2-acetonaphthonoxim (1h). Aus 1-Methoxy-2-acetonaphthon und O-Ethylhydroxylamin·HCl, Fp. Öl, m/z: 251 (53%), 184 (53%), 183 (100%), 158 (29%), 114 (26%).
1-Ethoxy-2-acetonaphthonoxim (1j). Aus 1-Ethoxy-2-acetonaphthon und Hydroxylamin· HCl, Fp. 115–116°C.
1-Benzyloxy-2-acetonaphthonoxim (1k). Aus 1-Benzyloxy-2-acetonaphthon und Hydroxylamin·HCl, Fp. 153–155°C.
2-Hydroxy-3,4-dimethylacetophenonoxim (1l). Aus 2-Hydroxy-3,4-dimethylacetophenon und Hydroxylamin·HCl, Fp. 152–154°C.
2-Methoxy-3,4-dimethylacetophenonoxim (1m). Aus 2-Methoxy-3,4-dimethylacetophenon und Hydroxylamin·HCl, Fp. 108–120°C.
2-Hydroxy-3,4-dimethoxyacetophenonoxim (1n). Aus 2-Hydroxy-3,4-dimethoxyacetophenon und Hydroxylamin·HCl, Fp. 131–132°C.
2,3,4-Trimethoxyacetophenonoxim (1o). Aus 2,3,4-Trimethoxyacetophenon und Hydroxylamin·HCl, Fp. 75–78°C.
1-Hydroxy-5,6,7,8-tetrahydro-2-acetonaphthonoxim (1p). Aus 1-Hydroxy-5,6,7,8-tetrahydro-2-acetonaphthon und Hydroxylamin·HCl, Fp. 147–149°C.
1-Methoxy-5,6,7,8-tetrahydro-2-acetonaphthonoxim (1q). Aus 1-Methoxy-5,6,7,8-tetrahydro-2-acetonaphthon und Hydroxylamin·HCl, Fp. 115–120°C.
1-(2-Propyloxy)-2-acetonaphthonoxim (1s). Aus 1-(2-Propyloxy)-2-acetonaphthon und Hydroxylamin·HCl, m/z: 243 (36%), 201 (76%), 183 (100%), 168 (38%), 140 (41%), Fp. 90–90,3°C.
Beispiel 4
1-Methoxy-2-acetonaphthon. Zu einer Lösung von 1-Hydroxy-2-acetonaphthon (4,0 g, 21,5 mmol) in wasserfreiem DMF (20 ml) wurde Natriumhydrid (25,8 mmol, 1,03 g einer 60%igen Dispersion in Mineralöl) zugesetzt. Als die Wasserstoffentwicklung beendet war, wurde Iodmethan (2,4 ml, 25,8 mmol) zugesetzt, und die Mischung wurde bei Raumtemperatur über Nacht gerührt. Die Mischung wurde in vier Volumina Wasser gegossen und mit Ethylacetat extrahiert. Die organische Phase wurde nacheinander mit wässrigem Natriumhydroxid (1 M) und Wasser gewaschen, über Natriumsulfat getrocknet und unter vermindertem Druck konzentriert. Das Konzentrat wurde durch Säulenchromatografie auf Silicagel unter Verwendung einer Mischung von Ethylacetat und Ligroin (8 : 2) als Elutionsmittel gereinigt. Ausbeute: 3,6 g (84%).
Die folgenden Verbindungen wurden in analoger Weise hergestellt:
1-Ethoxy-2-acetonaphthon. Aus 1-Hydroxy-2-acetonaphthon und Bromethan.
1-Benzyloxy-2-acetonaphthon. Aus 1-Hydroxy-2-acetonaphthon und Benzylbromid.
1-(2-Propyloxy)-2-acetonaphthon. Aus 1-Hydroxy-2-acetonaphthon und 2-Brompropan.
2-Acetyl-5,6-dimethylanisol. Aus 2-Hydroxy-3,4-dimethylacetophenon und Iodmethan.
2,3,4-Trimethoxyacetophenon. Aus 2-Hydroxy-3,4-dimethoxyacetophenon und Iodmethan.
1-Methoxy-5,6,7,8-tetrahydro-2-acetonaphthon. Aus 1-Hydroxy-5,6,7,8-tetrahydro-2-acetonaphthon.
Beispiel 5
Die folgenden 2-Acetylphenole wurden gemäß dem vorstehenden Schema in Analogie mit dem in Organic Syntheses, Coll. Vol. III, Seite 543 beschriebenen Verfahren aus den geeigneten Phenolen hergestellt.
2-Hydroxy-3,4-dimethylacetophenon. Aus 2,3-Dimethylphenol.
1-Hydroxy-5,6,7,8-tetrahydro-2-acetonaphthon. Aus 5,6,7,8-Tetrahydro-1-naphthol.
2-Hydroxy-3,4-dimethoxyacetophenon. Aus 2,3-Dimethoxyphenol.
Beispiel 6
N-(2-Acetylphenyl)acetamidoxim (1i). Eine Mischung von 2-Acetylanilin (1 ml, 8,3 mmol) und Essigsäureanhydrid (10 ml) wurde über Nacht bei Raumtemperatur gerührt. Gesättigtes wässriges Natriumcarbonat wurde bis zur basischen Reaktion zugesetzt, und die erhaltene Mischung wurde mit Ethylacetat extrahiert. Die organische Phase wurde über Natriumsulfat getrocknet und unter vermindertem Druck eingedampft, wobei N-(2-Acetylphenyl)acetamid quantitativ zurückblieb. Dieses Produkt wurde in Ethanol (40 ml) aufgelöst, und Hydroxylamin-Hydrochlorid (0,94 g, 13,6 mmol) wurde zugesetzt. Die Mischung wurde 7 Stunden unter Rückfluss erhitzt und dann bei Raumtemperatur über Nacht stehen gelassen. Das Lösungsmittel wurde durch Verdampfung entfernt, und der Rest wurde zwischen Ethylacetat und wässrigem Natriumcarbonat verteilt. Die organische Phase wurde konzentriert und der Chromatografie auf Silicagel unter Verwendung einer Mischung von Ethylacetat und Methanol (9 : 1 v/v) als Elutionsmittel unterworfen. Ausbeute: 0,26 g (15%), Fp. 99–100°C.
Beispiel 7
Elektrophysiologische Versuche
In diesem Beispiel wird die biologische Aktivität der Verbindungen der Erfindung unter Verwendung von elektrophysiologischen Patch-Clamp-Techniken gezeigt.
Ca²⁺-aktivierte K⁺-Kanäle mit mittlerer Leitfähigkeit (IK-Kanäle) sind aus menschlicher Plazenta kloniert und stabil in HEK293-Zellen exprimiert worden. Der Ionenstrom durch die Kanäle wird im Ganzzellmodus der Patch-Clamp-Technik aufgezeichnet.
Stabile Expression von IK in HEK293-Zellen
Humanes IK (hIK) wurde aus pT3T7 (GenBank Acc. Nr. N56819) unter Verwendung von EcoRI und NotI ausgeschnitten und in dem Säugerexpressionsvektor pNS1Z (Neuro- Search), einem maßgeschneiderten Derivat von pcDNA3Zeo (InVitrogen), subkloniert, wodurch das Plasmidkonstrukt pNS1Z_hIK erhalten wurde.
HEK293-Gewebekulturzellen wurden in DMEM (Dulbecco's Modified Eagle Medium), ergänzt mit 10% FCS (fötales Kalbserum), bei 37°C in 5% CO₂ wachsen gelassen. Ein Tag vor der Transfektion wurden 10⁶ Zellen in einem T25 Zellkulturgefäß ausplattiert. Am folgenden Tag wurden die Zellen unter Verwendung von Lipofektion (20 μ Lipofectamin^®, Life Technologies, mit 2,5 μg des Plasmids pNS1Z_hIK in einem Gesamtvolumen von 540 μl) transfektiert.
Die Lipofektionsmischung wurde auf die Zellen überschichtet und bei 37°C 5 Stunden inkubiert. Die Zellen wurden dann mit normalem Medium gespült und 72 Stunden in DMEM, 10% FCS bei 37°C in 5% CO₂ wachsen gelassen.
72 Stunden nach der Transfektion wurden die mit pNS1Z_hIK transfektierten Zellen ausgewählt in Medien, die mit 0,25 mg/ml Zeocin ergänzt waren. Einzelne Klone wurden entnommen und in Auswahlmedien vermehrt, bis genügend viele Zellen zum Gefrieren erhältlich waren. Danach wurden die Zellen in normalem Medium ohne Auswahlmittel kultiviert.
Die Expression von funktionalen hIK-Kanälen wurde durch Patch-Clamp-Messungen nachgewiesen.
Aufzeichnungen an ganzen Zellen
Die Versuche wurden auf einer von mehreren Patch-Clamp-Anordnungen durchgeführt. Auf Deckgläsern plattierte Zellen wurden in eine 15 μl Perfusionskammer (Fließgeschwindigkeit ~1 ml/min) verbracht, die auf einem IMT-2-Mikroskop, ausgerüstet mit Nomarski- oder Hoffmann-Optik, montiert waren. Die Mikroskope wurden auf schwingungsfreie Tische in geerdeten Faraday-Käfigen gestellt. Sämtliche Versuche wurden bei Raumtemperatur (20 bis 22°C) durchgeführt. EPC-9 Patch-Clamp-Verstärker (HEKA-electronics, Lambrect, Deutschland) sind mit Macintosh-Computern über ITC16-Interfaces verbunden. Die Daten werden direkt auf der Festplatte gespeichert und durch die IGOR-Software (WaveMetrics, Lake Oswega, USA) analysiert.
Es wird die Gesamtzellkonfiguration der Patch-Clamp-Technik angewandt. Die Spitze einer Borsilicatpipette (Widerstand 2 bis 4 MΩ) wird vorsichtig (entferntes Kontrollsystem) auf die Zellmembran aufgebracht. Ein leichtes Ansaugen führt zu einem Giga-Verschluß (der Pipettenwiderstand steigt auf mehr als 1 GΩ an), und die Zellmembran wird dann durch kräftigeres Saugen aufgebrochen. Die Zellkapazitanz wird elektronisch kompensiert, und der Widerstand zwischen der Pipette und dem Zellinneren (der Vorwiderstand Rs) wird gemessen und kompensiert. Gewöhnlich liegt die Zellkapazitanz im Bereich von 5 bis 20 pF (abhängig von der Zellgröße), und der Vorwiderstand liegt im Bereich von 3 bis 6 MΩ. Sowohl die Kompensation für Rs als auch für die Kapazitanz werden während der Versuche (vor jedem Reiz) aktualisiert.
Sämtliche Versuche mit schwankenden Rs-Werten werden verworfen. Lecksubtraktionen werden nicht durchgeführt.
Lösungen
Die Verbindungen 1a bis 1h, 1j und 2l bis 2r (d. h. 16 Verbindungen) von Tabelle 1 wurden diesem Versuch unterworfen.
Die extrazelluläre (Bad)-Lösung enthält: 144 mM KCl, 2 mM CaCl₂, 1 mM MgCl₂, 10 mM HEPES (pH = 7,4). Prüfverbindungen werden in DMSO aus Basislösungen aufgelöst und dann auf eine Endkonzentration von etwa 10 μM in der extrazellulären Lösung verdünnt. Die Konzentration von CaCl₂ beträgt 7,6 mM, und diejenige von MgCl₂ beträgt 1,2 mM, wodurch sich berechnete freie Konzentrationen von 300 nM bzw. 1 mM ergeben.
Quantifizierung
Nach der Einrichtung der Ganzzellkonfiguration werden Spannungsanstiege (gewöhnlich –100 bis +100 mV) an die Zelle alle 5 Sekunden angelegt. Es wird ein stabiler Grundlinienstrom innerhalb einer Zeit von 100 bis 300 Sekunden erhalten, und die Verbindungen werden dann zugesetzt, indem auf eine extrazelluläre Lösung, welche die zu prüfende Verbindung enthält, gewechselt wird. Unter diesen Bedingungen wird in nati ven HEK293-Zellen ein sehr geringer endogener Strom (< 200 pA bei 100 mV im Vergleich zu dem IK-Strom von 2 bis 20 nA) aktiviert.
Ergebnisse
Sämtliche geprüfte 16 Verbindungen in diesem Versuch zeigten eine Aktivität bei einer Endkonzentration von etwa 10 μM, und diese Verbindungen sind daher SK/IK/BK-Kanal modulierende Mittel der Erfindung.

Claims

Oximderivat, wiedergegeben durch die allgemeine Formel
oder ein pharmazeutisch annehmbares Salz oder ein Oxid oder ein Hydrat davon, worin X Sauerstoff, Schwefel oder eine Aminogruppe, bevorzugt eine Aminogruppe der Formel NHR³, bedeutet, R¹ Wasserstoff, eine Alkylgruppe, eine Cycloalkylgruppe, Hydroxy, eine Alkoxygruppe, eine Acylgruppe, eine Phenyl- oder eine Benzylgruppe, wobei die Phenyl- und Benzylgruppen ein- oder mehrfach mit Substituenten substituiert sein können, ausgewählt aus Halogen, -NO₂, -CN, -CF₃, Alkyl, Cycloalkyl, Hydroxy und Alkoxy, eine Gruppe der Formel -CH₂CN, eine Gruppe der Formel -CH₂CO₂R', worin R' Wasserstoff oder eine Alkylgruppe bedeutet, eine Gruppe der Formel -CH₂CONR^IVR^V, worin R^IV und R^V unabhängig voneinander Wasserstoff oder eine Alkylgruppe bedeuten, oder eine Gruppe der Formel -CH₂C(=NOH)NH₂ bedeutet, R² Wasserstoff, eine Alkylgruppe, eine Cycloalkylgruppe, eine Phenyl- oder eine Benzylgruppe, worin Phenyl- und Benzylgruppen ein- oder mehrfach mit Substituenten substituiert sein können, ausgewählt aus Halogen, -NO₂, -CN, -CF₃, Alkyl, Cycloalkyl, Hydroxy und Alkoxy, bedeutet, R³ Wasserstoff, eine Alkylgruppe, eine Cycloalkylgruppe, eine Phenyl- oder eine Benzylgruppe, wobei die Phenyl- und Benzylgruppen ein- oder mehrfach mit Substituenten substituiert sein können, ausgewählt aus Halogen, -NO₂, -CN, -CF₃, Alkyl, Cycloalkyl, Hydroxy und Alkoxy, bedeutet, und R⁴ und R⁵ zusammen einen zusätzlichen 4- bis 7-gliedrigen kondensierten Ring bilden, wobei der kondensierte Ring aromatisch oder teilweise gesättigt sein kann, und wobei der kondensierte Ring optional ein- oder mehrfach mit Substituenten substituiert sein kann, ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus Halogen, -NO₂, -CN, -CF₃ und einer Gruppe der Formel -SO₂NR''R''', worin R'' und R''' unabhängig voneinander Wasserstoff oder eine Alkylgruppe bedeuten.
Oximderivat gemäß Anspruch 1, worin R¹ Wasserstoff oder eine Alkylgruppe bedeutet.
Oximderivat gemäß einem der Ansprüche 1 oder 2, worin R² Wasserstoff, eine Alkylgruppe oder eine Phenyl- oder Benzylgruppe bedeutet.
Oximderivat gemäß einem der Ansprüche 1 bis 3, worin X Sauerstoff oder eine Aminogruppe der Formel NHR³ bedeutet, worin R³ Wasserstoff, Alkyl, Benzyl oder Acetyl bedeutet.
Oximderivat gemäß einem der Ansprüche 1 bis 4, worin R⁴ und R⁵ zusammen einen zusätzlichen 6-gliedrigen kondensierten Ring bilden, wobei der kondensierte Ring aromatisch oder teilweise gesättigt sein kann, und wobei der kondensierte Ring optional ein- oder mehrfach mit Substituenten substituiert sein kann, ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus Halogen, -NO₂, -CN, -CF₃ und einer Gruppe der Formel -SO₂NR''R''', worin R'' und R''' unabhängig voneinander Wasserstoff oder eine Alkylgruppe bedeuten.
Oximderivat gemäß Anspruch 5, worin das Oximderivat durch die allgemeine Formel wiedergegeben wird
oder ein pharmazeutisch annehmbares Salz oder ein Oxid oder ein Hydrat davon, worin X, R¹, R² und R³ wie vorstehend definiert sind, und Y Wasserstoff, Halogen, -NO₂, -CN, -CF₃ oder eine Gruppe der Formel -SO₂NR''R''' bedeutet, worin R'' und R''' unabhängig voneinander Wasserstoff oder eine Alkylgruppe bedeuten.
Oximderivat gemäß Anspruch 5, worin das Oximderivat wiedergegeben wird durch die allgemeine Formel
oder ein pharmazeutisch annehmbares Salz oder ein Oxid oder ein Hydrat davon, worin X, R¹, R² und R³ wie vorstehend definiert sind, und Y Wasserstoff, Halogen, -NO₂, -CN, -CF₃ oder eine Gruppe der Formel -SO₂NR''R''' bedeutet, worin R'' und R''' unabhängig voneinander Wasserstoff oder eine Alkylgruppe bedeuten.
Oximderivat gemäß Anspruch 1, worin die chemische Verbindung 2-Aldoximo-1-naphthol, 2-Aldoximo-5,6,7,8-tetrahydro-1-naphthol, 1-Hydroxy-2-acetonaphthonoxim, 1-Methoxy-2-acetonaphthonoxim, O-Ethyl-1-methoxy-2-acetonaphthonoxim, 1-Ethoxy-2-acetonaphthonoxim, 1-Benzyloxy-2-acetonaphthonoxim, 1-Hydroxy-5,6,7,8-tetrahydro-2-acetonaphthonoxim, 1-Methoxy-5,6,7,8-tetrahydro-2-acetonaphthonoxim, 1-(2-Propyloxy)-2-acetonaphthonoxim oder ein pharmazeutisch annehmbares Salz oder ein Oxid oder ein Hydrat davon ist.
Pharmazeutische Zusammensetzung, enthaltend eine therapeutisch wirksame Menge eines Oximderivats gemäß einem der Ansprüche 1–8 oder ein pharmazeutisch annehmbares Additionssalz davon zusammen mit wenigstens einem pharmazeutisch annehmbaren Träger oder Verdünnungsmittel zur Behandlung oder Erleichterung einer Krankheit oder einer Störung oder eines Zustandes, die bzw. der auf die Modulation von SK_Ca-, IK_Ca- oder BK_Ca-Kanälen anspricht, wobei die Krankheit, die Störung oder der Zustand ausgewählt ist aus Asthma, cystischer Fibrose, chronisch-obstruktiver Lungenerkrankung und Rhinorrhoe, Krämpfen, Gefäßspasmen, Koronararterienspasmen, Nierenstörungen, polycystischer Nierenerkrankung, Blasenkrämpfen, Urininkontinenz, Blasenausflusssperre, irritablem Darmsyndrom, gastrointestinaler Störung, sekretorischer Diarrhoe, Ischämie, zerebraler Ischämie, ischämischer Herzerkrankung, Angina pectoris, koronarer Herzerkrankung, traumatischer Hirnverletzung, Psychose, Angstzuständen, Depression, Demenz, Gedächtnis- und Aufmerksamkeitsstörungen, Alzheimerscher Krankheit, Dysmenorrhoe, Narkolepsie, Reynaudscher Krankheit, intermittierender Claudicatio, Sjorgrenschem Syndrom, Migräne, Arrhythmie, Bluthochdruck, Ab senzen, myotonischer Muskeldystrophie, Trockenheit im Mund, Diabetes Typ II, Hyperinsulinämie, vorzeitige Wehen, Kahlheit, Krebs und Immununterdrückung.
Verwendung eines Oximderivats gemäß einem der Ansprüche 1–8 oder eines pharmazeutisch annehmbaren Additionssalzes davon zur Herstellung einer pharmazeutischen Zusammensetzung zur Behandlung oder Erleichterung einer Krankheit oder einer Störung oder eines Zustandes eines Säugers, einschließlich des Menschen, wobei die Krankheit, die Störung oder der Zustand anspricht auf die Modulation von SK_Ca-, IK_Ca- und/oder BK_Ca-Kanälen, wobei die Krankheit, die Störung oder der Zustand ausgewählt ist aus Asthma, cystischer Fibrose, chronisch-obstruktiver Lungenerkrankung und Rhinorrhoe, Krämpfen, Gefäßspasmen, Koronararterienspasmen, Nierenstörungen, polycystischer Nierenerkrankung, Blasenkrämpfen, Urininkontinenz, Blasenausflusssperre, irritablem Darmsyndrom, gastrointestinaler Störung, sekretorischer Diarrhoe, Ischämie, zerebraler Ischämie, ischämischer Herzerkrankung, Angina pectoris, koronarer Herzerkrankung, traumatischer Hirnverletzung, Psychose, Angstzuständen, Depression, Demenz, Gedächtnis- und Aufmerksamkeitsstörungen, Alzheimerscher Krankheit, Dysmenorrhoe, Narkolepsie, Reynaudscher Krankheit, intermittierender Claudicatio, Sjorgrenschem Syndrom, Migräne, Arrhythmie, Bluthochdruck, Absenzen, myotonischer Muskeldystrophie, Trockenheit im Mund, Diabetes Typ II, Hyperinsulinämie, vorzeitige Wehen, Kahlheit, Krebs und Immununterdrückung.