DK142288B - Analogifremgangsmåde til fremstilling af 1- og d1-(racem-)formerne af derivater af 6-(m-aminophenyl)-2,3,5,6-tetrahydroimidazo(2,1-b)thiazol. - Google Patents

Description

\REL/ (11) FREMLÆGGELSESSKRIFT 142288 DANMARK (51) lnt-c'·3 ° 07 ° 513/04 §(21) Ansøgning nr. 4680/77 (22) Indleveret den 20. Okt. 1977 (24) Løbedag 20. okt · 1977

(44) Ansøgningen fremlagt og _ Q

fremlssggelsesskriftet offentliggjort den O· Okt. 1 9oU

DIREKTORATET FOR . . u .

PATENT-OG VAREMÆRKEVÆSENET (30) Pnontet begæret fra den ,

22. okt. 1976» 44061/76, GB

(71) PFIZER CORPORATION, Calle 15 l/2, Avenlda Santa Isabel, Colon, PA.

(72) Opfinder: Michael Raymond Graves Leemlng, 7 Beaconsfield Road, St.

Stephens, Canterbury, Kent, GB: John Kendrick _Stubbs, 111 Blenheim Road, Beal, Kent, GB.

(74) Fuldmægtig under sagens behandling:

Internationalt Patent-Bureau._ (54) Analogifremgangsmåde til fremstilling af 1 - og d1-(racem-)formerne af derivater af 6-(m-aminophenyl)-2,3,5,6-tetrahydroimidazo(2,1-b)thia= zol.

Den foreliggende opfindelse angår en analogifremgangsmåde til fremstilling af 1- og dl-(racern-)formerne af hidtil ukendte derivater af 6-(m-aminophenyl)-2,3,5,6-tetrahydroimidazo[2,l-b]thiazol (m-aminotetramisol) med den almene formel R , ^ 5 4 3)-(4 r^^N -N-* 3 hvori R er H eller CH^, eller ikke-toksiske syreadditionssalte heraf, hvilke forbindelser er nyttige til bekæmpelse af helminther hos varmblodede dyr.

2 1422 80

Af typiske ikke-toksiske syreadditionssalte kan der nævnes hydrochloridet, hydrobromidet, hydroiodidet, nitratet, sulfatet, acetatet, lactatet, tartratet og citratet.

R er fortrinsvis CH3. 1-Formerne er mere aktive end dl-for- merne.

Fra tysk offentliggørelsesskrift nr. 2.147.857 kendes anthel-minthisk virkende derivater (1- og dl-former) af 6-(m-aminophenyl)- 2.3.5.6- tetrahydroimidazo[2,l-b]thiazol, og herunder er der angivet sådanne derivater, hvori aminogruppen er substitueret med pyridyl-carbonyl, thiazolylcarbonyl og furfurylcarbonyl. De med de her omhandlede forbindelser nærmest beslægtede blandt disse heterocyclisk substituerede forbindelser er 6-{m-(thiazolyl-carboxamido)phenyl}- 2.3.5.6- tetrahydroimidazo[2,1-b]thiazoler, men de her omhandlede forbindelser er disse sidstnævnte forbindelser virkningsmæssigt overlegne, som det vil fremgå af nedenstående forsøgsdata.

Fremgangsmåden ifølge opfindelsen er ejendommelig ved det i kravets kendetegnende del angivne.

De omhandlede forbindelser kan således fremstilles ved, at man omsætter 1- eller dl-6-(m-aminophenyl)-2,3,5,6-tetrahydroimid-azol[2,1-b]thiazol (m-aminotetramisol) med formlen 5 _N_.3 med en syre med formlen V, \s ni 2 JULCOOH 1 hvori R har den under formel I anførte betydning, eller med et funktionelt ækvivalent heraf som acyleringsmiddel, f.eks. et syrehalogenid, en "aktiveret" ester eller et blandet anhydrid af forbindelsen med formlen III.

De foretrukne syrehalogenider er syrechloridet og -bromidet.

De kan fremstilles ved konventionelle fremgangsmåder, f.eks. ved omsætning af den frie syre med henholdsvis thionylchlorid eller -bromid.

3

14228C

Den foretrukne "aktiverede" ester er succinimidoesteren med formlen R O.

Y\_ >η

N V\-COON IV

Denne kan ligeledes fremstilles ved konventionelle fremgangsmåder, f.eks. ved omsætning af den frie syre med N-hydroxysuccinimid i nærværelse af et dehydratiserende middel, f.eks. dicyclohexylcarbodiimid. En anden foretrukken aktiveret ester er phthalimidoesteren.

Egnede blandede anhydrider har formlen

R

\_. 0 0

\ I—0—I—R1 V

hvori R·*" betegner en C^-Cg-alkylgruppe eller C^-Cg-alkoxygruppe, mest foretrukket en t-butyl- eller iso-butoxygruppe. De kan fremstilles ved konventionelle fremgangsmåder, f.eks. ved omsætning af den frie syre med henholdsvis det tilsvarende alkanoylchlorid eller alky lchlorformiat, f.eks. pivaloylchlorid eller iso-butylchlorformiat, i nærværelse af en base, såsom triethylamin.

dl-(Racem-). eller 1-m-aminotetramisol skal anvendes som udgangsmateriale, alt efter om man ønsker henholdsvis dl- eller 1-formen af produktet I. dl-m-aminotetramisol kan opspaltes i dets d- og 1-isomere ved anvendelse af den i USA-patentskrifterne nr. 3.673.205 og 3.463.786 beskrevne fremgangsmåde. Endvidere kan 1-for-men af produktet I opnås ved opspaltning af dl-formen i dens dextro-og lævo-antipoder. Til dette formål kan der benyttes den i britisk patentskrift nr. 1.402.689 beskrevne fremgangsmåde.

Selv om de omhandlede forbindelser kan fremstilles ved omsætning af forbindelsen II med den frie syre III, foretrækkes det at anvende syren i form af dens syrechlorid.

Når den frie syreform III anvendes, må omsætningen almindeligvis udføres i nærværelse af et dehydratiserende middel, såsom dicyclohexylcarbodiimid.

Ved en typisk fremgangsmåde, hvor forbindelse II omsættes med et syrechlorid af forbindelse III, opløses forbindelse II i et vandigt opløsningsmiddel, f.eks. vandigt methanol, pH-værdien sænkes 4 142280 til f.eks. 5 med fortyndet saltsyre, blandingen afkøles, og syrechlo-ridet tilsættes forsigtigt. Efter omrøring af reaktionsblandingen ved stuetemperatur i flere timer kan den syrnes med fortyndet saltsyre og vaskes med et passende opløsningsmiddel, f.eks. methylenchlo-rid. Efter fraskillelse kan den vandige fase gøres basisk til f.eks. pH 8 med en passende base, f.eks. koncentreret ammoniakvand, og eks-traheres med et passende opløsningsmiddel, f.eks. methylenchlorid. Efter fraskillelse kan den organiske fase vaskes med vand ved pH 6 til fjernelse af eventuelt uomsat m-aminotetramiso1 og inddampes til tørhed under formindsket tryk til opnåelse af det ønskede produkt.

Om nødvendigt kan produktet renses ved omkrystallisation af et passende opløsningsmiddel, f.eks. acetone eller ethylacetat, eller ved chromatografi på silica i methylenchlorid indeholdende en lille mængde methanol. Hvis det rensede produkt ikke foreligger i en acceptabel krystallinsk form, kan det optages i ethanol, og overskud af hy-drogenchloridgas kan passeres gennem den ethanoliske opløsning til omdannelse af den frie base til dens hydrochloridsalt. Det krystallinske hydrochlorid kan udvindes ved koncentrering af den opnåede opløsning under formindsket tryk og kan om nødvendigt omkrystalliseres af et passende opløsningsmiddel, f.eks. ethanol eller isopropanol.

Alternativt kan hydrochloridsaltet af produktet fremstilles direkte på følgende måde. Forbindelse II opløses i et passende opløsningsmiddel, f.eks. vandigt acetone, pH-værdien sænkes til f.eks.

5 med fortyndet saltsyre, blandingen afkøles, og syrechloridet af forbindelse III tilsættes langsomt, f.eks. over et tidsrum på 30 minutter. Den opnåede blanding omrøres derefter ved lav temperatur, - f.eks. 10°C, i 1/2 til 1 time, og bundfaldet bestående af det ønskede hydrochloridsalt frafiltreres, vaskes med et passende opløsningsmiddel, f.eks. acetone, og tørres.

De omhandlede forbindelserkan administreres alene, men administreres almindeligvis med et ikke-toksisk fortyndingsmiddel eller bærerstof valgt under hensyn til den påtænkte administreringsvej. De kan f.eks. administreres oralt som vandige opløsninger eller i blanding med et dyrefoder eller dyrefodertilskud. Ved parenteral administrering, der fortrinsvis udføres subcutant eller intramuskulært, kan bæreren være vandig, såsom vand eller isotonisk saltopløsning, eller ikke-vandig, såsom polyethylenglycol.

Parenteral administrering af en vandig opløsning foretrækkes, og sådanne opløsninger indeholder typisk 1-20 vægt-% af den aktive forbindelse.

1422 SC

5

Egnede dosisniveauer er fra 0,5 til 20 mg af den aktive bestanddel pr. kg legemsvægt af dyret.

Forbindelserne er også aktive, når de administreres dermalt, idet den aktive forbindelse absorberes gennem dyrets hud.

De omhandlede forbindelser er navnlig aktive over for nemato-der, som optræder i lunger, maver og tarme hos får, kvæg og andre husdyr.

På basis af de omhandlede forbindelser kan der således tilvejebringes et anthelminthisk middel omfattende 1- eller dl-formen af en forbindelse med formlen I som defineret ovenfor, eller et ik-ke-toksisk syreadditionssalt heraf, og et ikke-toksisk fortyndingsmiddel eller bærerstof.

Ved hjælp af de omhandlede forbindelser kan man udrydde hel-minther hos inficerede dyr, herunder mennesker, idet man til det pågældende dyr eller menneske administrerer en anthelminthisk mængde af 1- eller dl-formen af en forbindelse med formlen I som defineret ovenfor, et ikke-toksisk syreadditionssalt heraf eller et anthelminthisk middel som defineret ovenfor.

Fremgangsmåden ifølge opfindelsen belyses nærmere ved hjælp af de efterfølgende eksempler.

Eksempel 1 A. Syrechlorid af 5-carboxy-3-methylisothiazol.

1 g 5-carboxy-3-methylisothiazol tilbagesvaledes med 20 ml thionylchlorid i 1 time. Reaktionsblandingen inddampedes derefter til tørhed under formindsket tryk til fjernelse af overskud af thionylchlorid. Derpå tilsattes der toluen, og blandingen inddampedes igen til tørhed under formindsket tryk til opnåelse af det rå syrechlorid, der udgjorde 1,1 g, og scm anvendtes direkte i det næste trin uden yderligere rensning.

B. dl-6-{m-(3-Methylisothiazol-5-carboxamido)phenyl}-2,3,5,6-tetra-hydroimidazo[2,1-b]thiazol.

En opløsning af 1,0 g dl-6-(m-aminophenyl)-2,3,5,6-tetrahydro-imidazo[2,1-b]thiazol i vandigt methanol (7 ml methanol/3 ml vand) syrnedes til pH 5 med 2 N saltsyre, afkøledes til 0°C og holdtes ved denne temperatur, medens det i trin A fremstillede syrechlorid (1,1 g) tilsattes portionsvis over et tidsrum på 10 minutter. Den opnåede blanding omrørtes ved 0°C i 1 time og derefter natten over ved stuetemperatur (25°C). Der tilsattes derefter 5 ml 2 N saltsyre, og op- 6 142288 løsningen vaskedes med methylenchlorid. Efter fraskillelse blev det vandigelag gjort basisk til pH 8 ved tilsætning af koncentreret ammoniakvand og ekstraheredes med methylenchlorid. Efter fraskillelse vaskedes den organiske fase med vand ved pH 6 til fjernelse af eventuelt uomsat imidazo[2,1-b]thiazol-udgangsmateriale, tørredes over MgS04 og inddampedes til tørhed under formindsket tryk til opnåelse af det ønskede produkt, 6-{m-(3-methylisothiazol-5-carboxamido)phenyl )-2,3,5,6-tetrahydroimidazo[2,1-b]thiazol. Produktet omkrystalliseredes af acetone/ethylacetat (1:1), udbytte 750 mg, smp. 168°C. Analyse: .

Fundet: C 55,21, H 4,55, N 16,20%.

Beregnet for ci6HigN4OS2: C 55,79, H 4,68, N 16,27%.

Eksempel 2 A. dl-6-{m-(Isothiazol-5-carboxamido)phenyl)-2,3,5,6-tetrahydroimid-azo[2,1-b]thiazol.

På analog måde som i eksempel 1, afsnit B, fremstilledes dl- 6-{m- (isothiazol-5-carboxamido) phenyl )-2,3,5,6-tetrahydro imidazo [2,1-b]thiazol, smp. 170-172°C, ud fra syrechloridet af 5-carboxyisothia-zol og dl-6-(m-aminophenyl)-2,3,5,6-tetrahydroimidazo[2,1-b]thiazol. Analyse:

Fundet: C 53,71, H 4,15, N 16,95%.

Beregnet for C^H^N^OS^ C 54,52, H 4,27, N 16,95%.

Syrechloridet fremstilledes ud fra 5-carboxyisothiazol og thio-nylchlorid på analog måde som i eksempel 1, afsnit A.

B. Monohydrochloridsaltet af dl-6-{m-(isothiazol-5-carboxamido)phenyl )-2,3,5,6-tetrahydroimidazo [2,1-b] thiazol.

Overskud af hydrogenchloridgas ledtes gennem 5 g dl-6-{m-(iso-thiazol-5-carboxamido) phenyl )-2,3,5,6-tetrahydroimidazo 12,1-b] thiazol, fremstillet som i trin A ovenfor, i 120 ml ethanol, og opløsningen koncentreredes under formindsket tryk. Det ønskede monohydrochlorid-salt udkrystalliserede af opløsningen og frafiltreredes og omkrystalliseredes af vand, udbytte 4,5 g, smp. 243-245°C).

Analyse:

Fundet: C 49,26, H 4,06, N 15,87%

Beregnet for C15H14N40S2.HC1: C 49,10, H 4,12, N 15,27%.

7

U228C

Eksempel 3

Monohydrochloridsaltet af dl-6-{m-(3-methylisothiazol-5-carboxamido)-phenyl}-2f3,5,6-tetrahydroimidazo[2,1-b]thiazol.

Dette salt, smp. 275°C, fremstilledes på analog måde som i eksempel 2, afsnit B, ved omsætning af dl-6-{m-(3-methylisothiazol-5-carboxamido)phenyl}-2,3,5,6-tetrahydroimidazo[2,1-b]thiazol i ethanol med overskud af hydrogenchloridgas.

Saltet havde følgende analyse:

Fundet: C 50,59, H 4,70 , N 14,36%

Beregnet for: c16H16N4OS2.HC1: C 50,45, H 4,50, N 14,71%.

Virkningen af de omhandlede forbindelser ved en screeningprøve med tredobbelt infektion på mus mod en samtidig infektion af Nematospiroides dubius, Syphacia obvelata og Hymenolepsis nana kan bestemmes som følger. Albinomus af en vægt på 20 g inficeres og behandles på følgende måde. Idet den første infektion tages som dag 0, inficeres nus med 2000 H. nana ova på dag 0 og 100 N.dubius-larver på dag 5 og udsættes derefter for en Syphacia-inficeret koloni i 4 dage. Musene behandles derefter med prøveforbindelsen i grupper på 4 enten én gang på dag 14 eller på tre efter hinanden følgende dage 14-16 ved oral eller subcutan (s.c.) administrering. Musene obduceres på dag 19 og undersøges for tilstedeværelsen af orm. De opnåede resultater sammenlignes med resultaterne for ubehandlede inficerede kontroldyr (12 pr. gruppe). For N. dubius udføres der fuldstændige optællinger, og virkningen udtrykkes som procentisk formindskelse. Infektionerne med de andre parasitter udtrykkes efter en skala, Syphacia (0-3) og H. nana (0-3), og virkningen udtrykkes ved at sammenligne gennemsnitsværdierne for grupperne. Polyethylenglycol er det standardbær emiddel, der anvendes til at bringe prøveforbindelserne på doseringsformen, men der anvendes dog vandige opløsninger til vandopløselige stoffer, og stoffer, der er uopløselige i både polyethylenglycol og vand, kan formales i kuglemølle i vandigt 1% "Tween,|yiB0. De anvendte mg/kg-niveauer kan f.eks. være op til 12,5 mg/kg.

Virkningerne af de omhandlede forbindelser mod helminthen N. dubius under anvendelse af den ovennævnte metode, og til sammenligning de tilsvarende virkninger af de i tysk offentliggørelsesskrift nr. 2.147.857 anførte 6-{m-(thiazolyl-carboxamido)phenyl}- 2,3,5,6-tetrahydroimidazo[2,1-b]thiazoler, betegnet forbindelse A for thiazolyl-2-carboxamido-forbindelsens og forbindelse B for thia-zolyl-4-carboxamido-forbindelsens vedkommende, viste sig at være som