DK146105B - Fremgangsmaade til udtagning og isolering af proevemateriale fra en overflade, navnlig til videnskabelige eller diagnostiske undersoegelser og proevetager til brug ved fremgangsmaaden - Google Patents

Description

146105 1 Opfindelsen angår en fremgangsmåde til udtagning og isolering af prøvemateriale fra en overflade, navnlig til videnskabelige eller diagnostiske undersøgelser, ved hvilken fremgangsmåde overfladen af en prøvetager, 5 der i det mindste på sin overflade består af et oplø-ligt kunststof, bringes til at hæfte til prøvematerialet på den overflade, der skal undersøges, hvorefter prøvetageren med vedhæftende prøvemateriale fjernes, og prøvematerialet isoleres, samt en prøvetager til 10 brug ved fremgangsmåden.

Prøverne kan fx være prøver af bakterier eller andre mikroorganismer, af cellematerialer og af andre meget små dele af organisk eller uorganisk materiale.

15

Hidtil har man fået materialprøver af den omhandlede art først og fremmest ved afskrabning eller afstryg-ning ved hjælp af spatler, vattotter eller skarpe instrumenter. Det er ligeledes kendt, fx til bekæmpelse 20 af kriminalitet, at optage meget små dele ved hjælp af en med klæbestof belagt kunststoffolie og derefter mekanisk at aftage smådelene fra folien til nærmere diagnose eller at lade delene forblive på folien og undersøge dem på denne.

25

Ved' alle disse kendte fremgangsmåder kan man ikke undgå beskadigelser eller ødelæggelser af prøven, tab af prøvemateriale, tilsmudsning med bæremateriale og uønskede selektionsprocesser.

30

Pra tysk offentliggørelsesskrift nr. 2.4θ6.4ΐ6 kendes en prøvetager til udtagning af celler fra vaginalområdet, hvilken prøvetager er udformet som en tampon, hvis overflade er dækket med polycarbonatfolie eller film. Denne tampon indføres i legemshulheden, udtages 146105 2 1 atter, polycarbonatfolien aftages, lægges på en objektbærer og fjernes eventuelt før undersøgelsen med et opløsningsmiddel, såsom kloroform, bromoform, ætyldietdorid, metyleneMorid eller 1,1,2-dichlorætan.

5 Celleudtagningen sker ved denne prøvetager ved adhæsion af cellerne til overfalden af polycarbonatfoli-. en, der ikke er vandopløselig. Denne kendte prøvetager kan kun anvendes til udtagning af celleprøver, der ikke beskadiges af de anvendte opløsningsmidler og 10 har således begrænset anvendelse.

Formålet med den foreliggende opfindelse er at angive en fremgangsmåde samt en prøvetager, der kan have et meget bredt anvendelsesområde, og hvor man får ubeska-15 digede, uforfalskede og repræsentative prøver uden i øvrigt at beskadige aftagefladen.

Dette opnås ved at gå frem, som angivet i krav l*s kendetegnende del og under anvendelse af en prø-20 vetager som angivet i krav 2. Yed at anvende et vandopløseligt kunststof, som angivet, får man et meget bredt anvendelsesområde, fordi man alt efter, hvor prøverne skal udtages, enten kan befugte prøvetageren eller gøre brug af den naturlige fugtighed .på prøve-25 udtagningsstedet. Man kan udtage prøver fra både store og små flader i tilstrækkelige mængder, uden hverken prøvematerialet eller den flade, hvorfra prøven tages, beskadiges, og man får desuden prøver med en fordeling ganske svarende til fordelingen på den overflade, der 30 skal undersøges. Sidst, men ikke mindst, undgår man brugen af opløsningsmidler, der kan ændre eller skade det udtagne prøvemateriale.

Prøvetageren er hensigtsmæssigt udformet, som angivet i krav 3, idet de materialer, der kan bruges til gen- 3 146105 1 nemførelse af fremgangsmåden ifølge opfindelsen, er kunststoffer, der er opløselige i vand, og som er overordentlige billige i fremstilling og formgivning.

Folier, der er fremstillet af et sådant materiale, kan 5 være tynde og smyge sig tæt til en genstand, så at det også uden mellemrum kan tilpasse sig til ujævne flader.

Fremgangsmåden ifølge opfindelsen og prøvetageren til gennemførelse af den forklares nærmere ved hjælp 10 af udførelseseksempler nedenfor.

Til udtagning af celler, mikroorganismer eller lignende smådele ved diagnostiske undersøgelser og til videnskabelige arbejder i biologi og i medicinen kan 15 man fx gå frem som følger:

En folie, der består af vandopløseligt kunststof, bliver fx før aftageisen af en prøve lidt opløst på overfladen ved fugtning med vand. Denne fugtning kan 20 undværes, når fx en organ- eller vævoverflade, der skal undersøges, allerede har en tilstrækkelig egenfugtig-hed. Den klæbrige overflade på prøvetageren bliver så lagt på den flade, der skal undersøges, og ved et lille tilpresningstryk bragt i kontakt med denne. Ef-25 ter aftrækning af den anvendte tynde, bløde og tiltrykkende folie bliver folien med sin kontaktflade og det vedhæftende prøvemateriale opført på en fortrinsvis af glas bestående objektbærer eller ved en let tiltrykning udbredt på denne bærer.

30

Derefter bliver objektbæreren bragt ned i en beholder, der er fyldt med rent vand eller med en alkohol-vand-blanding. Folien opløser sig. Alkoholen i vandet bevirker samtidig en fiksering af det udvundne prøve- 4 146105 1 materiale. Efter en opløsning af folien uden rest vil den udvundne materialeprøve under fuldstændig bibeholdelse af dens topografi vedblive at hæfte på glasfladen på objektbæreren. Den videre behandling og 5 undersøgelse sker på sædvanlig måde, som det også er gængs i histologi (farvefremgangsmåde).

På lignende måde kan mikroorganismer og andre smådele aftages fra flader, der skal undersøges, og ved den 10 beskrevne præparationsfremgangsmåde deponeres på glasplader under bibeholdelse af deres stedlige fordeling.

Til udtagning og isolering af celler eller mikroorganismer fra svært tilgængelige åbninger i legemet og 15 hulheder, såsom fra urinrøret eller fra tårekanalen, kan prøvetageren ifølge opfindelsen i dimensioner og udformning tilpasses til udtagestedet. Fx kan man anbringe kunststoffolien omkring en bærerstilk, skære den op efter prøveudtagelsen og derefter brede den ud 20 på objektbæreren.

I andre tilfælde er det hensigtsmæssigt at belægge et prøvetageinstrument, fx en overflade på en sondestav, der i diameter svarer til urinrøret, ved en ned-25 dykningsfremgangsmåde med det vandopløselige kunststof. Ved hjælp af et kendt applikationsinstrument bliver den belagte sonde, der er overfladisk fugtet, ført ind gennem urinrøret, og urinrørets overflade bringes i kontakt med sonden. Efter en kort opholds-30 tid bliver urinrøret udvidet og sonden fjernet. Derefter bliver kunststofbelægningen på sonden i sin længderetning og med en kontaktside anbragt på en objektbærer, og kunststoffet opløses, som tidligere forklaret .

5 146105 1 Til andre anvendelsesformål i biologi og i medicin, fx til forebyggende gynækologiske undersøgelser, anvendes der hensigtsmæssigt fx en af skumplast bestående, stempellignende prøvetager som bærer for belæg-5 ningen af vandopløseligt kunststof. Efter prøveudtagelsen bliver kunststoffolien løsnet fra denne bærer, og det udvundne aftrykningsmateriale bliver som tidligere beskrevet overført til en objektbærer. På denne måde kan man ved studie af det mikroskopiske 10 billede få et indtryk af undersøgelsespersonens tilstand.

Alle objektbærerprøver, der er udvundet og fremstillet ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen, kan bedøm-15 mes, foruden ved de i mikroskopisk diagnostik gængse præparations- og farveprocesser, særlig gunstigt i en hurtig fremgangsmåde i et mikroskop ved hjælp af fasekontrastoptik. Hertil bliver kunststoffolien med det vedhæftende prøvemateriale blot delvist opløst 20 på objektbæreren med vand og straks dækket af et dækglas.

Det således fremstillede præparat kan straks mikroskoperes uden nedsættelse af den optiske kvalitet og er 25 desuden permanent tildækkede.

Ved anvendelse af fremgangsmåden ifølge opfindelsen til undersøgelse af mikroorganismer har det vist sig, at de allerede nævnte vandopløselige kunststoffer af 50 gruppen polyvinylalkoholer og polyvinylpyrrolidoner ikke på nogen måde påvirker bakterievæksten i næringsmedium negativt. Uheldige bivirkninger af anden art er heller ikke blevet fundet.

6 146105 1 Prøvetagere, der anvendes til gennemførelse af fremgangsmåden ifølge opfindelsen, kan enten være udformet i form af folier eller fremstillet på en bærer ved en neddykningsfremgangsmåde eller belagt med vand-5 opløseligt kunststof. Ved valget af bæremateriale og af formgivning er man i vidt omgang frit stillet.

Belægningen af det vandopløselige kunststof bliver fx opskåret, afskrabet eller på anden måde løsgjort fra bæreren efter prøveudtagelsen.

10

Til fremstilling af en kunststofopløsning til belægning af prøvetageren ifølge opfindelsen eller til fremstilling af en folie, der tjener som prøvetager, af det vandopløselige kunststof, kan man fx gå frem 15 som følger: 500 vægtdele polyvinylalkohol (88 mol% hydroxylgrupper, viskositet 4cP, ifølge DIN 53015) opløses i 120 vægtdele glycerin pro analyse (p.A.), 400 vægtdele ætyl-20 alkohol p.A. og 440 vægtdele destilleret vand.

Til belægning af'bæreren bliver prøvetageren neddykket i denne opløsning, atter fjernet fra opløsningen, og. den påførte film tørres. Til fremstilling af kunststof-25 folier, der er egnet som prøvetagere, går man enten frem efter en kendt støbefremgangsmåde, eller folien kan fremstilles ved afstrygning eller påføring med en rakel af opløsningen i et tyndt lag på et kunststoflegeme, der ikke reagerer'med opløsningen, og fra 30 hvilket folien atter kan fjernes efter en tørring.

Til gennemførelse af fremgangsmåden ifølge opfindelsen har belægnings- eller folietykkelser på 0,1 mm vist sig særligt fordelagtige.

7 146105 1 Fremgangsmåden ifølge opfindelsen kan udover de beskrevne anvendelsesmuligheder også anvendes på anden måde. Fx kan man generelt på hygiejniske indretninger ved hjælp af folie-aftryksteknikken ifølge opfindelsen 5 udtage og bestemme mikroorganismer ikke blot samlet kvantitativt, men også under hensyntagen til fordelingen på en bestemt flade.

Anvendelsen af fremgangsmåden ifølge opfindelsen fører 10 også til et virkeligt teknisk fremskridt på følgende anvendelses område:

Kimpåvisning i levnedsmiddelvirksomheder.

Påvisning af svampe og mikroorganismer på planter 15 og plantedele.

Udtagelse af jordprøver.

Udvinding af organiske stoffer, tekstilfibre og andre små partikler ved kriminaltekniske undersøgelser af forskellig art.

20