DK146220B - 2-chloradeninderivater eller syreadditionssalte deraf - Google Patents

Description

i 146220

Den foreliggende opfindelse angår hidtil ukendte 2-chloradeninde-rivater eller syreadditionssalte deraf, der kan anvendes som mellemprodukter til fremstilling af hidtil ukendte purin-derivater, der er værdifulde som non-adrenergiske bronchodilatorer.

Theophyllin, der normalt administreres som ethylendiåmin-sal-05 tet (aminophyllin) eller cholin-saltet, er en kraftig og værdifuld non-adrenergisk bronchodilator, der almindeligt foreskrives til behandling af bronchialastma. Da aminophyllin er let opløselig har det i mange år været accepteret som en effektiv bronchodilator til oral indgivelse. Aminophyllin vides 10 imidlertid at have visse ulemper, fx. gastrisk irritation samt kardiovaskulære og centralnerve-system bivirkninger, der retfærdiggør en søgning efter nye non-adrenergiske bronchodilatorer, som kan have mere fordelagtige egenskaber såsom forøget styrke og/eller reducerede bivirkninger.

15 I relation til de her omhandlede hidtil ukendte forbindelser har et meget stort antal purin-derivater været beskrevet i patentlitteraturen og den videnskabelige litteratur. De følgende referencer er illustrative herfor: 1. J, Am. Chem. Soc., 81, 197-201 (1959) omhandler synte- 20 sen af forbindelser med formlen NI^ L 1 > i

R

hvori R er cyclohexyl eller 2-cyclohexeneyl. Forbindelserne fremstilledes som potentielle anticancer-midler. 1 USA-patentskrift nr. 3.917.837 omhandler brugen af for- 25 bindeisen 2 146220 fz rry 0·.··“ som et anti-inflammatorisk middel.

3. USA-patentskrift nr. 3.930.005 omhandler forbindelser med formlen R1 I? 05 i i > δ 2 3 1 .

hvori R og R inter alia kan være hydrogen og R inter alia kan være (lavere)alkoxy. Forbindelserne anføres at besidde anti-inflammatorisk aktivitet.

4. Belgisk patentskrift nr. 853.086 (Farmdoc 70719Y) om- 10 handler forbindelser med formlen

X

jkX> Q i

Y

3 146220 hvori enten X er C^-Cgalkoxy eller -NHR, E er B eller (lavere)alkyl, Y er C^-Cgalkyl, C^-C^gcycloalkyl eller hydroxycycloalkyl, phenyl, halophenyl, trifluormethyl-phenyl, bicycloalkyl eller hydroxybicycloalkyl med ind-05 til 12 carbonatomer, eller -AR1, A er methylen eller ethylen, R er phenyl, halophenyl, trifluormethyl-phe-nyl, bicycloalkyl eller.hydroxybicycloalkyl med indtil 12 carbonatomer, Q er H, C^-Cgalkyl, Cj-C^cycloalkyl eller hydroxycycloalkyl, bicycloalkyl eller hydroxybi-10 cycloalkyl med indtil 12 carbonatomer, phenyl, halo phenyl, tri fluormethyl-phenyl eller AR^", eller X er halogen eller (lavere)dialkylamino, Y er methyl, ethyl, cyclopentyl, phenyl, halophenyl, trifluormethy1-phenyl eller benzyl og Q har den ovenfor anførte betydning.

15 Forbindelserne anføres at være værdifulde til behandling af psoriasis.

5. Vesttysk offentligt tilgængelig patentansøgning nr.

2.610.985 (Farmdoc 70863Y) omhandler forbindelser med formlen f2 3 4 20 i Ϊ > cox d k- k 2 2 hvori R og R er OH eller ONO„, eller tilsammen danner 1 4 3 C2-C^alkyliden, aralkyliden eller CR^R,., R er H eller C^-C7alkyl, R5 er ORg eller NR?Rg, R° er C1-C7alkyl, 4 R og R er eventuelt substitueret C^-C7alkyl eller 25 C^-C^cycloalkyl, eller tilsammen danner en C2-C5alkylen- 5 gruppe, hvori den ene CH2-gruppe eventuelt erstattes 4 146220 3 af et heteroatom, R er C^-C^alkyl eller alkoxy, eventuelt substitueret phenyl eller Η, X er ORg eller NR^q R,-, R9 er C,-C7alkyl, C,-C_cycloalkyl, eventuelt sub-xx x / J 7 10 11 stitueret phenyl eller aralkyl, R og R er H, eventu- 05 elt substitueret C^-C^alkyl, alkenyl eller alkynyl, even tuelt substitueret Cg-C^cycloalkyl, substitueret phenyl, benzylamino, 2-methylfuryl eller adamantyl, eller den ene kan være H og den anden en gruppe med formlen 11¾

-(0¾) -MH-OC

g R1 R2 10 hvori n er 2-16, eller R^® og R^ tilsammen danner en C2~C5alkylen-gruppe, hvori den ene CH2~gruppe kan erstattes af et heteroatom. Forbindelserne anføres at have kredsløbsmæssig, kardial og metabolisk aktivitet.

6. Chem. Pharm. Bull., 23,(4), 759-774 (1975) omhandler in-15 ter alia forbindelser med formlen i jC> Ηγχ

OH OH

5 146220 hvori R er (lavere)alkyl. Forbindelsen anføres at besidde koronar-vasodilaterende aktivitet.

7. Japansk offentligt tilgængelig patentansøgning nr. 52-71492 (Farmdoc 53190Y) omhandler forbindelser med formlen NHp Λα

05 R •’-S

R3 hvori R1 er C^-C10 li?ekæ<^et eller forgrenet alkyl, C5~ cycloalkyl, C^-C^aralkyl eller piperazinethyl med formlen -CHo -OK, -1/ \-£ w 2 10 hvori R er C aralkyl, mono-substitueret aralkyl, cinnamyl eller fluorenyl, R3 er C-^-C.^ ligekædet eller forgrenet alkyl, C^-C^qcycloalkyl, C^-C^^aralkyl eller piperazinethyl med den ovenfor anførte betydning, 1 3 med undtagelse af forbindelser hvori R og R er methyl, 13 1 15 R er methyl og R er ethyl og R er Cg-C^^cycloalkyl og R3 er C^-C^alkyl, Cg-C-j^cycloalkyl eller C^-C^aralkyl.

Forbindelserne anføres at udvise en inhibitor!sk virkning på blodplade-aggregering samt at have koronar-dilaterende aktivitet.

20 8. Chem. Pharm. Bull., 25(7), 1811-1821 (1977) omhandler fremstilling af 2-thioadenosin-derivater inklusive inter alia en forbindelse med formlen 6 146220 NR, [>ΛΛ|> 0

Ovennævnte forbindelse anføres at være en smule effektiv som plade-aggregeringsinhibitor. Forfatterne bemærker, at den tilsvarende forbindelse med en ribose-sukkerdel 05 i 9-stillingen var langt mere effektiv og konkluderer, at ribosyl-delen af 2-thioadenosin-derivater er essentiel til effektiv inhibering af plade-aggregering og at den ikke kan erstattes af andre substituenter.

Der er ikke fundet kendt teknik som omhandler 2,9-disubstitue-10 rede adenin-derivater med en alkoxysubstituent i 2-stillingen og en cycloalkyl- eller cycloalkenylgruppe i 9-stillingen.

De ved hjælp af msllCTprodukteme ifølge' den foreliggende opfindelse fremstillede hidtil ukendte purin-derivater inhiberer effektivt brandri al kan-striktion san. induceres af histamin eller andre bronchi al-kons trik-15 tive stoffer. Forbindelserne hører til den non-adrenergiske klasse af bronchodilatorer og de er værdifulde til administrering til pattedyr og mennesker for behandling af astma, herunder bronchialastma, allergisk astma, bronchitis, pulmonar emphysema og andre kroniske åndedrætsygdomme som involverer bron- 20 chospasmer. De foretrukne forbindelser, som fremstilles ved hjælp af mellemprodukterne ifølge opfindelsen, er ved standard-farma-kologiske testmetoder påvist at have højere bronchodilatorisk aktivitet end aminophyllin med reducerede kardiovaskulære og cen-tralnerve-system bivirkninger.

25 De værdifulde slutprodukter har den almene formel: 7 146220 Æ 7 3 I, R1 og farmaceutisk acceptable syreadditionssalte deraf, hvori R betegner C.-C,alkyl og R1 er . _ _

Ό eiier O

Udtrykket "farmaceutisk acceptable syreadditionssalte" som an-05 vendt her, omfatter de salte, som dannes med mineralsyrer såsom saltsyre, hydrogenbromidsyre, hydrogeniodidsyre, salpetersyre, svovlsyre, fosforsyre o.l. samt organiske syrer såsom eddikesyre, citronsyre, pivalinsyre, mælkesyre, vinsyre, oxalsyre, ravsyre, æblesyre o.l. Enhver non-toksisk syre som danner 10 et salt med de foreliggende forbindelser er egnet. Saltene fremstilles ved hjælp af i og for sig kendte konventionelle metoder.

De ovenfor nævnte C^-Cgalkylgrupper omfatter sådanne med enten ligekædede eller forgrenede carbonhydridkæder. Særligt foretrukne alkylgrupper er sådanne med fra 1-4 carbonatomer. Eksempler 15 på egnede C^-Cgalkylgrupper omfatter methyl, ethyl, n-propyl, isopropyl, n-butyl, isobutyl, t-butyl, n-pentyl, n-hexyl o.l.

De mest foretrukne forbindelser som er omfattet af formel I er sådanne hvori R er C2H^-, n-CgH^- e-^er n-C^Hg-. Sådanne forbindelser udviste ved standard in vitro og in vivo tests for 20 bronchodilatorisk aktivitet forbedret styrke i forhold til ami-nophyllin. De udviste også reducerede kardiovaskulære og centralnervesystem bivirkninger sammenlignet med aminophyllin som referencemiddel.

De hidtil ukendte me 1lemprodukter ifølge opfindélsen har form-25 len: 146220 8 ΝΕ, i I 7 ί g \ 03 ci\A/ „0 0 II' og kan let omdannes ved de nedenfor beskrevne fremgangsmåder til forbindelserne med formel I. Det følgende almene reaktions-05 skema belyser disse fremgangsmåder samt mellemprodukternes fremstilling.

146220

Cl 9 I I ^ M = Na, K, TI, Ag eller HgCl o- / o

/ \ X = Cl, Br, I

Cl Cl

/r\ katalytisk ' '{'^S'A

J^AV hydrogenering ^Λ/ 6 ’ o ' NH, BE, » V 3 HK, NHg

Vrs I I v/ katalytisk -> ArMJk/ hydrogenering ^ Cl Jl

Cl

0 “ O

RO-alfc RO-alk

1 V

% ^ v -M.

I Μ katalytisk_\ I || R(X^N^N/ hydrogenering 0 ’· 0 Ifa 146220 ίο

Forbindelserne med formel I hvori er 2-cyclohexenyl kan fremstilles ud fra 2,6-dichlorpurin, en kendt forbindelse, ved hjælp af følgende trin i rækkefølge: 1) man omsætter 2,6-dichlorpurin med ca. et ækvivalent HgCl_ + + + + * 05 eller en kilde for Na , K , TI eller Ag (d.v.s. et salt som dissocierer til dannelse af den ønskede ion) i et inert opløsningsmiddel til fremstilling af et metalderivat med formlen

Cl.

ir^S^N

k LI

III

10 hvori M betyder HgCl, Na, K, TI eller Ag, 2) kondenserer metalderivat III i et i det væsentlige vandfrit inert organisk opløsningsmiddel med en 3-halogen-cyclohexen med formlen

O

IV

15 hvori X betyder chlor, brom eller iod til fremstilling af et mellemprodukt med formlen

Cl οι'Λ%η·^·ν o 11 146220 3) underkaster mellemproduktet V aminering med NH3 i et inert opløsningsmiddel til fremstilling af et mellemprodukt med formlen NHg

n^'N-'A

i Γ)

Cl

II

/ og 05 4) opvarmer mellemproduktet II med et alkalimetal-alkoxid med formlen RO-alk, hvori alk betyder natrium eller kalium og R har den ovenfor anførte betydning i et inert opløsningsmiddel til fremstilling af den ønskede frie baseforbindelse med formel I og, om ønsket, omdanner 10 forbindelsen på i og for sig kendt måde til et farmaceu tisk acceptabelt syreadditionssalt deraf.

Hensigtsmæssigt fremstilles en forbindelse med formlen: . 1¾ I ) b<Ah^n 15 hvori R er C^-Cgalkyl, eller et farmaceutisk acceptabelt syreadditionssalt deraf ved at man opvarmer mellemproduktet II med et alkalimetal-alkoxid med formlen RO-alk, hvori alk betegner natrium eller kalium og R har den ovenfor anførte betydning i et inert opløsningsmiddel indtil den ønskede frie 146220 12 base er dannet og om ønsket omdanner denne forbindelse på i og for sig kendt måde til et farmaceutisk acceptabelt syreadditionssalt deraf.

Forbindelser med formel I, hvori R"1" er cyclohexyl kan fremstilles 05 ved katalytisk hydrogenering af de tilsvarende forbindelser hvor R1 = cyclohexenyl. Som eksempel på en egnet fremgangsmåde kan en forbindelse med formel I opløses i et egnet ikke-reducerende inert opløsningsmiddel (fx. methanol, ethanol, vand, vandig methanol, vandig.ethanol) og dernæst hydrogene-10 res under anvendelse af en konventionel hydrogenerings-katalysator. Eksempler på egnede katalysatorer omfatter palladium "black", Pd-BaSO^, Pd-C, PtC^, Ru-C, Rh-C, Raney nikkel,

CuCrO, RhCl[P(CgH^)3 og RuCl[P(CgH^)3· En foretrukken katalysator er palladium-på-kul. Selvom temperatur og tryk ikke 15 er kritiske for hydrogeneringstrinet er fordelagtige resultater opnået under betingelser med stuetemperatur og atmosfærisk tryk.

En alternativ fremgangsmåde til fremstilling af forbindelser med formel I, hvori betegner cyclohexyl omfatter følgende 20 trin i rækkefølge: 1) man omsætter 2,6-dichlorpurin med ca. et ækvivalent HgCl2 eller en kilde for Na+, K+, Tl+ eller AG+ i et inert opløsningsmiddel til fremstilling af metal-derivatet III, 25 2) kondenserer metal-derivatet III i et i det væsentlige vandfrit inert organisk opløsningsmiddel med en cyclo-hexylhalid med formlen

O

IV« 13 146220 hvori X betyder chlor, brom eller iod til fremstilling af et mellemprodukt med formlen rY>

: Q

3) underkaster mellemproduktet V aminering med NH^ i et 05 inert opløsningsmiddel til fremstilling af et mellempro dukt med formlen 11¾ fr>

Cl IX’ / og 4) opvarmer mellemprodukt II' med et alkalimetal-alkoxid med formlen RO-alk, hvori a]k betyder natrium eller ka- 10 lium og R har den ovenfor anførte betydning i et inert opløsningsmiddel til fremstilling af den ønskede frie baseforbindelse med formel I og, øm ønsket, omdanner forbindelsen på i og for sig kendt måde til et farmaceutisk acceptabelt syreadditionssalt deraf.

15 Hensigtsmæssigt fremstilles en forbindelse méd formlen: 14 146220 Γχ> ο ,.

hvori R er C^-C^alkyl eller et farmaceutisk acceptabelt syreadditionssalt deraf, ved at man opvarmer mellemproduktet IX' med et alkalimetal-alkoxid med formlen RO-alk, hvori alk be-05 tegner natrium eller kalium og R har den ovenfor anførte betydning, i et inert opløsningsmiddel indtil den ønskede frie base er dannet og om ønsket omdanner denne forbindelse på i og for sig kendt måde til et farmaceutisk acceptabelt syreadditionssalt deraf.

10

Som det fremgår af det ovenfor viste almene reaktionsskema kan fremgangsmåden til fremstilling af forbindelser 1^ ud fra 2,6-dichlorpurin omfatte alle mulige varianter, hvor begge mellemprodukter V eller II' fremstilles via katalytisk hydro-15 genering af det tilsvarende cyclohexenyl-mellemprodukt. Således kan fremgangsmåden fx. omfatte, at man fremstiller mellemprodukt III, fremstiller mellemprodukterne V og II, katalytisk hydrogenerer II til II' og dernæst fremstiller Ifa ud fra II'. En alternativ vej ville være III-*V-*V' (ved katalytisk 20 hydrogenering)—"*II De foran beskrevne reaktionsbetinge-1- ser for katalytisk hydrogenering af I&—>1^ kan også anvendes til omdannelserne V->V* eller II—>11'.

Fremstillingen af 2,6-dichlorpurin-metalderivaterne med formel III kan ske ved hjælp af tidligere i litteraturen beskrev-25 ne fremgangsmåder.

15 146220 Sølv-derivatet af 2,6-dichlorpurin kan fremstilles i henhold til den almene fremgangsmåde som omhandlet i J. Am. Chem.

Soc., 73, 1650 (1951), d.v.s. at 2,6-dichlorpurinen opløses i kogende vand, opløsningen gøres basisk (fx. med vandig 05 ammoniak) og en vandig opløsning af ca. et ækvivalent af et sølvsalt (fx. AgNO^) tilsættes til dannelse af det ønskede 2,6-dichlorpurin-sølvsalt.

Natriumsaltet af 2,6-dichlorpurin kan fremstilles i henhold til den almene metode som er beskrevet i Chem. Pharm. Bull., 10 25, 1811 (1977), d.v.s. at 2,6-dichlorpurinen suspenderes i et inert opløsningsmiddel såsom dimethylformamid og ca. et ækvivalent af en natrimsalt såsom NaOH eller NaOCH^ tilsættes til dannelse af det ønskede salt in situ.

Kaliumsaltet af 2,6-dichlorpurin kan fremstilles i henhold til 15 denalmene fremgangsmåde som er omhandlet i J. Org. Chem..

Soc., 81, 197 (1959) og J. Org. Chem., 81, 2310 (1963), d.v.s. at 2,6-dichlorpurin opløses i et inert opløsningsmiddel såsom dimethylsulfoxid eller dimethylformamid og en ækvimolær mængde af et kaliumslat såsom K2C03 tilsættes til dannelse af det 20 ønskede metalsalt in situ.

Thallium (I)-saltet af 2,6-dichlorpurin kan fremstilles i henhold til den almene fremgangsmåde som er omhandlet i J. Org.

Chem., 34, 1170 (1969), d.v.s. ved tilsætning af et thallium- (I)-salt såsom thallium (I)-ethoxid til en opløsning af 2,6-25 dichlorpurin i et inert opløsningsmiddel såsom ethanol.

Chlormerkurisaltet af 2,6-dichlorpurin kan fremstilles ved hjælp af metoder som tidligere har været anvendt for andre puriner, se fx. J. Org. Chem., 22, 954-959 (1957). 2,6-dichlorpurinen sættes til ca. et vægt-ækvivalent HgCl2 i et 30 inert vandigt eller vandigt oranisk opløsningsmiddel, fx. en vandig C^-Cgalkanol såsom 50% ethanol. En base såsom en vandig opløsning af et alkalimetalhydroxid (fx. NaOH, KOH) tilsættes dernæst under omrøring. Der anvendes en tilstrækkelig mængde base til at frembringe en permanent let gul farve 146220 16 (p.g.a. HgO-dannelse) der indicerer reaktionstrinets afslutning. Chlorxnercurisaltet er det foretrukne me talderivat til anvendelse ved fremgangsmåderne ifølge den foreliggende opfindelse.

05 Metalderivatet III kondenseres med en 3-halogencyclohexen, fortrinsvis 3-bromcyclohexen, eller et cyclohexylhalogenid til frembringelse af henholdsvis mellemprodukt V eller V. Reaktionsbetingelserne kan være i det væsentlige det samme som anvendt i den konventionelle nukleosid-syntese [se fx.

10 J. Am. Chem. Soc., 81, 197-201 (1959)]. I en foretrukken udførelsesform sættes 3-halogencyclohexenen eller cyclohexyl-halogenidet, fortrinsvis i overskud, til forbindelse III i et inert i det væsentlige vandfrit organisk opløsningsmiddel såsom et aromatisk carbonhydrid (fx. benzen, xylen, toluen) 15 og reaktionsblandingen opvarmes under tilbagesvaling til dannelse af mellemproduktet V eller V.

Aminering af det således dannede mellemprodukt til erstatning af 6-chlor-substituenten med en 6-aminogruppe kan udføres ved hjælp af konventionelle metoder [se fx. Chem. Phar. Bull.,~ 20 2_3, 759-774 (1975) ] . I en foretrukken udførelses form suspen deres mellemprodukt V eller V i et inert opløsningsmiddel (fx. vand, methanol, ethanol), suspensionen mættes med gas-formig ammoniak (fortrinsvis ved en reduceret temperatur såsom /v0°C) og den mættede reaktionsblanding opvarmes dernæst til 25 en temperatur fra lige over stuetemperatur til kogepunktet for reaktionsblandingen. En mest foretrukken amineringsmetode omfatter opvarmning af en opløsning af det passende mellempro- o dukt i methanoliskammoniak i et lukket rør ved ca. 100 C. Som anført ovenfor er forbindelserne II og II' mellemprodukter til 30 fremstilling af 2-alkoxyforbindelser med formel I.

Mellemprodukt II eller II' kan dernæst underkastes en nukleo-fil substitueringsreaktionsomdannelse af 2-chlor-substituenten til en 2-alkoxygruppe. Dette trin kan udføres ved hjælp af den 35 almene fremgangsmåde som omhandlet i Vesttysk offentliggort 17 146220 patentansøgning nr. 2.258.378. I en foretrukken udførelses-form opvarmes mellemproduktet II eller II' med en opløsning af et alkalimetal (lavere)alkoxid (RONa eller ROK hvor R er C^-Cgalkyl) i et inert opløsningsmiddel (fx. benzen, dime-05 thylformamid eller C^-Cgalkanol). Såfremt der som opløsningsmiddel anvendes en (lavere)alkano1 bør både alkanolen og al-koxidet som anvendes i dette trin, indeholde den samme "R"-substituent. Selvom temperaturen for reaktionen ikke er kritisk foretrækkes det at udføre substitueringen ved tilbage-10 svalingstemperatur for at maksimere udbyttet og minimere reaktionstiden. Ved reaktionens afslutning neutraliseres eventuelt overskydende base i reaktionsblandingen med syre og den ønskede frie base udvindes såsom ved fordampning til tørhed.

Frie baser med formel I, II eller II' kan omdannes til 15 syreadditionssalte ved hjælp af konventionelle metoder. Således kan den frie base fx. opløses i et inert opløsningsmiddel, omsættes med ca. en ækvivalentvægt af en egnet organisk eller uorganisk syre til dannelse af det ønskede salt og saltet udvindes såsom ved opløsningsfældning 20 eller lyofilisering.

Til reduktion af bronchial konstriktion hos et menneske eller pattedyr som lider af denne tilstand administreres til individet en effektiv bronchodilatorisk mængde af en forbindelse med den almene formel I eller et farmaceutisk acceptabelt syre-25 additionssalt deraf.

Forbindelserne kan anvendes i et farmaceutisk præparat på enhedsdosisform. Et sådant præparat omfatter som aktiv bestanddel en effektiv bronchodilaterende mængde af en forbindelse med formel I ovenfor eller et farmaceutisk acceptabelt syre-30 additionssalt deraf, i blanding med en farmaceutisk acceptabel bærer eller fortyndingsmiddel.

146220 18

De omhandlede farmakologisk aktive forbindelser kan administreres enten som individuelle terapeutiske midler eller som blandinger med andre terapeutiske midler. De kan administeres alene, men indgives i almindelighed i form af farmaceutiske 05 præparater. Eksempler på sådanne præparater omfatter tabletter, hostepastiller, kapsler, pulvere, aerosol-sprays, vandige eller olieagtige suspensioner, siruper, eleksirer og vandige opløsninger. Forbindelserne administreres fortrinsvis oralt, men'kan også indgives ved inhalation eller injektion.

10 Arten af det farmaceutiske præparat og den farmaceutiske bærer eller fortyndingsmidlet vil naturligvis afhænge af den ønskede administreringsvej. Fx. kan orale præparater være i form af tabletter eller kapsler og kan indeholde konventionelle strækkemidler såsom bindemidler (fx. sirup, akacia, ge-15 latine, sorbitol, tragakant eller polyvinylpyrrolidon), fyldstoffer (fx. laktose, sukker, majsstivelse, kalciumfosfat, sorbitol eller glycin), smøremidler (fx. magnesiumstearat, talkum, polyethylenglycol eller silika), opløsningsmidler (fx. stivelse) eller befugtningsmidler (fx. natriumlauryl-20 sulfat). Orale flydende præparater kan være i form af vandige eller olieagtige suspensioner, opløsninger, emulsioner, siruper, elikserer osv. og kan før anvendelsen præsenteres som et tørprodukt til rekonstituering med vand eller en anden passende bærer. Sådanne flydende præparater kan indeholde kon-25 ventionelle tilsætningsstoffer såsom suspensionsmidler, smagsmidler, fortyndingsmidler eller emulsionsmidler. Til parenteral administrering eller inhalering kan anvendes opløsninger eller suspensioner af en forbindelse med formlen I med konventionelle farmaceutiske bærere, fx. som aerosol-spray til 30 inhalation, som en vandig opløsning til intravenøs injektion eller som en olieagtig suspension til intramuskulær injektion.

Forbindelserne med formlen I eller farmaceutiske præparater deraf kan administreres til pattedyr (inklusive især menneskelige patienter) i orale doser fra ca. 0,1 til 20 mg/kg/dag 35 aktiv bestanddel. Til intravenøs administrering til mennesker kan anvendes enkelt-doser fra ca. 0,02-5 mg/kg/dosis aktiv bestanddel. Passende humane doser til aerosol administrering 19 146220 ligger i området mellem ca. 0,1-20'mg/dosis aktiv bestanddel.

Disse værdier er imidlertid kun illustrative , og det er selvfølgelig lægen, der i sidste ende vil bestemme den passende dosis for en bestemt patient på grundlag af faktorer så-05 som alder, vægt, alvor af symptomerne og arten af midlet, som skal administreres.

Repræsentative forbindelser med den almene formel (I) underkastedes sammenlignende tests med aminophyllin til bestemmelse af den btonchodilatoriske aktivitet in vitro og 10 in vivo og den hypotensiske aktivitet in vivo (en måling af kardiovaskulære bivirkninger).

Bronchodilatorisk aktivitet in vitro

Trachea-kæder af marsvin praqaareredes efter metoden beskrevet af A. Akcasu i Arch. Int. Pharmacodyn. Ther., 122, 201 (1959).

15 Reaktionen på hver test-forbindelse optegnedes ved hjælp af Magnus-metoden og udtryktes som en procentdel af maximum-reaktionen opnået med 0,1 mcg./ml isoproterenol før hvert eksperiment. Den bronchodilatoriske aktivitet (in vitro) af aminophyllin og testforbindelserne udtrykkes i nedenstående 20 tabel I som en EC5q-værdi (koncentration in mcg./ml som frembringer en afspænding som er 50% af maximum-reaktionen til 0,1 mcg./ml isoproterenol).

Bronchodilatorisk og hypotenaisk aktivitet in vivo Den bronchodilatoriske aktivitet af aminophyllin og testfor-25 Mindelserne in vivo bedømtes på grund af en forøgelse af detintra-tracheale tryk (ITP) i marsvin gennem en modifikation af metoden beskrevet af James i J. Pharm. Pharmac., 21^,379 (1969).

Kanyler førtes til trachea hos anæstetiserede marsvin og ITP optegnedes på en polygraf ved kunstig ventilering. Det arte-30 rielle blodtryk (ABP, måling af hypotensisk aktivitet) måltes også ved eksperimentet. Data opnåedes både for intravenøs og intraduodenal administrering. Tabel I viser den bronchodilatoriske aktivitet (ITP) in vivo for hver forbindelse som EDgQ-værdi (dosisimg/kg resulterende i en 50%ig formindskel- 166220 20 se af intratracheal tryk) og den hypotensiskeaktivitet (ABP) som ED2Q-værdi (dosis i mg/kg, som reducerer det arterielle blodtryk med 20%).

Separation af bronchodilatoriske og kardiovaskulære virk-05 ninger

Til adskillelse mellem den ønskede bronchodilatoriske aktivitet og den uønskede kardiovaskulære (hypotensiske) virkning af test-forbindelserne beregnedes forholdet mellem hypoten-sisk ED2Q/bronchodilatorisk ED^q som vist i tabel I. Forbin-10 delserne med de højeste ABP/ITP forhold viste den største adskillelse af kardiovaskulære hivirkninger fra bronchodila-torisk aktivitet.

21 146220 tu tr* σ\ ο -PH · . Φ X in ιλ σ\ cvi

+J (1, Η Η VO

J Μ·Η Μ Η Ό (1 > «· ΙίτΙ ά> & «ί Q) -Ρ Si 0)

1¾¾ OH

+> 8β c χ ^ -+ . *0 S U ? -S ϋΓ «0 Η OT Sc]' <Λ α) ιϋ Λ! ο PQ ε W C -g cd Η -Η ^ Ο +3 •Η ·Η rH g -ΡΧ^

Hii'd «ώ •g -g ·γη 3 5

j! +J ί} - ^ CVI + >S CM

® ® η I ^ Η Η ΟΗ «η II ιι ιι > ββ& > Η Η S β Η tu εη οο σ\ οο Η ·

\ VO CM Ν- CM ΙΑ =? CM

Dh i—I VO III H a I

., m n- A

H <$ H

<u •p _ .

(β S'T

jj jn

Zj b bC

ω « > ^ -t oo^.^h

2 mja c w ΙΛ ΙΛ 1Λ -+ CM ΙΛ CM IA CM H

§K -¾ Λ A Λ λ Λ

-p S

tn s CL) ίΰ o --— H -P jj in · o

HQ) fjjS 5 t'- t·— O tA^-tn CO

Λ in U > ^ n o R S

rO-H &c O O O rA ^ IA O O O ΓΑ fA fA O

^ S’ K-S λΛλ ΛΛΛ

•3 OH

^ o n g e vom g c*- in β -Η N COCMCMH- 5 S 1 d S vrt P >·.· Η O O ΓΑ CO ·+ O O O -=f ΙΑ M3 ty β in O O O O O r-ι H O O O O O (A vo

” HH e Λ H

Oj ' ' ·" 0......

,HJ

\J' 3 S

S-( -H o OH

Λ <N I σ\ O O „CT\ O O >>

°ν ° « O C K H fA O O SI H iA -C

K fe I f— CJVp-HH t^-CTiJ-HH P.

o tu tu o tu tu o tu tu o κ ru o in ία 4· i in va in ,-a =r i invo c κ o o o o o ru o o o o α h

cm I i w i · CM I I W I I S

cjcchcc: o ββ-πββ cj

IZ

146220 22

De følgende eksempler belyser fremstillingen af mellemprodukterne ifølge opfindelsen og disses omdannelse til værdifulde slutprodukter.

Eksempel 1 9-(2-cyclohexenyl) -2-n-propoxy-9H-adenin NHg

’i'V

05

n-C^HyO

Å. HgCl-salt af 2/6-dichlorpurin

Cl mT\

En opløsning af 7,38 g (27,2 mmol) HgC^ i 100 ml 50% ethanol omrørtes og der tilsattes 5,15 g (27,2 mmol) 2,6-dichlor-10 purin. Efter 5 minutter sattes 10% NaOH (~10 ml) til opløsningen indtil farvereaktionen standsede (gul p.g.a. HgO).

Blandingen omrørtes i 30 minutter og bundfaldet frafiltre-redes, vaskedes i denne rækkefølge med vand, ethanol og di-ethylether og tørredes til opnåelse af 6,91 g (64% udbytte) 15 af titel-saltet.

B. 9-(2-cyclohexenyl)-9H-2,6-dichlorpurin 23 146220

Cl i Γ .0

En blanding af 6,91 g (16,3 mmol) af produktet af trin A og 6,91 g "Celite" (diatoméjord) i benzen inddampedes azeotropt til fjernelse af fugtighed. Til den resulterende blanding 05 sattes 100 ml tør xylen og 4 ml (339 mmol) 3-bromcyclohexen. Blandingen tilbagesvaledes i 2,5 timer under omrøring, afkøledes og filtreredes. Filtreringsmassen vaskedes med en lille smule CHCl^. Filtratet og vaskevæsken inddampedes til tørhed. Remanensen opløstes i 50 ml benzen og opløsningen 10 vaskedes med 20% Kl-opløsning (3 gange) og vandig NaCl (én gang) og tørredes med Na2S04· Filtratet inddampedes og remanensen rensedes ved hjælp af kromatografi på silikagel til opnåelse af 3,87 g (88%) af titel-mellemproduktet, ...

smp. 133-135°C. IR(KBr): 2930, 1590, 1565, 1405, 15 1355, 1315, 1210, 875, 835 cm"1. UV: x^e0h 276 nm (ε 9500).

IDclX

NMR (CDC13): 62,00 (6H, m), 5,60 (IH, m), 6,00 (2H, m) , 8,11 (IH, s).

Anal. ber. for chhioN4CL2: C' 49'09' H' 3,75, N, 20,82, Cl, 26,35.

20 Fundet : C, 48,54, H, 3,48, N, 20,34, Cl, 25,54.

C. 2-chlor-9-(2-cyclohexenyl)-9H-adenin 146220 24 11¾ ' ιΤ\ ο

Ammoniakgas bobledes til en blanding af 2,8 g (10,3 mmol) 9-(2-cyclohexenyl)-9H-2,6-dichlorpurin i 50 ml CH^OH ved 0°C indtil gas-absorptionen standsede. Blandingen opvarmedes ved 05 100°C i 4 timer i et forseglet rør, afkøledes dernæst og kon centreredes til afsætning af krystaller, som frafiltreredes til opnåelse af 2,39 g af titel-forbindelsen.

Et yderligere udbytte (112 mg) opnåedes fra filtratet ved kromatografisk adskillelse på silikagel. Total udbytte = 10 2,50 g (96%), smp. 195-197°C. IR(KBr): 3120, 1640, 1590, 1320,

1300, 1225, 1190, 920 cm-1. UV: 266 nm (ε14600), NMR

XuclX

(CDC13): 6 0,89 (IH, m) , 1,26 (IH, m), 2,00 (4H, m), 5,30 (IH, m), 6,00 (2H, m) , 8,11 (IH, s).

D. 9-(2-cyclohexenyl)-2-n-propoxy-9H-adenin 15 En opløsning af 2,4 g (9,2 mmol) 2-chlor-9-(2-cyclohexenyl)-9H-adenin i 60 ml IN natrium-n-propoxid i n-propanol opvarmedes under tilbagesvaling natten over under en nitrogen-atmosfære. Reaktionsblandingen hældtes i is-vand indeholdende en tilstrækkelig mængde eddikesyre til neutralisering af det 20 overskydende alkoxid. Blandingen inddampedes i vakuum.

Remanensen opløstes i CHCl^ under omrøring. CHCl^-ekstrakterne vaskedes med vand, tørredes med Na2S04 og inddampedes til opnåelse af 2,35 g (90%) af titel-produktet, smp. 157-159°C. IR(KBr): 3450, 3110, 1630, 1585, 25 1470, 1390, 1335 cm"1. UV: λ*^°Η 266 nm (ε13200) . NMR(CDCl^) : IQaX u δ 1,03 (3H, t, 7Hz), 1,80 (8H, m), 4,15 (2H, t, J=7Hz), 5,03 (2H, m), 5,88 (IH, m), 6,56 (2H, m), 7,4 (IH, s).

25 146220

Eksempel 2 9-cyclohexyl-2-n-propoxy-9H-adenin NHg

En opløsning af 2,21 g (7,8 mmol) 9-(2-cyclohexenyl)-2-n-05 propoxy-9H-adenin i 30 ml 90%ig ethanol hydrogeneredes natten over med 250 mg 10%ig Pd-C og filtreredes dernæst.

Filtratet inddampedes i vacuum til opnåelse af en remanens som udkrystalliseredes fra ethylacetat-n-hexan. Udbytte 1,85 g (76%), smp. 148-150°C. IR(KBr): 3510, 2930, 1670, 10 1640, 1595, 1405 cm-1. UV: 252 nm (ε8360), 269 nm fe

ItlaX

13200). NMR(CDC13): Si,03 (3H, t, J=7Hz), 1,80 (12H, m) , 4,20 (2H, t, J=7Hz), 4,35 (IH, m), 6,02 (2H, s), 7,55 (IH, s).

Anal·, ber. for C, 61,07, H, 7,69, N, 25,43.

Fundet : C, 61,07, H, 7,89, N, 25,48.

15 Eksempel 3 9-(2-cyclohexenyl)2-ethoxy-9H-adenin N&p S|T'\ c2h5o-^n/^n o 146220 26

En blanding af 2-chlor-9-(2-cyclohexenyl)-9H-adenin (310 mg, 1,24 mmol) og en opløsning af natriumethoxid i ethanol (0,25-1N,^10 ml) tilbagesvaledes natten over under en nitrogenatmosfære. Reaktionsblandingen ekstraheredes med ethylacetat 05 (20 ml). Ekstrakterne vaskedes med vand, tørredes over Na2SO^ og filtreredes. Filtratet inddampedes og remanensen underkastedes dernæst en silikagel-kromatografi (7 g silikagel, elueret med 1% CH3OH-CHCl3) til opnåelse af titel-produktet med 93%. udbytte, smp. 67-72°C. IR 10 (KBr): 3320, 2940, 1640, 1595, 1465, 1410, 1385, 1340 cm_1.

UV: XEt0H 243 nm (ε8400), 269 nm (ε12600). NMR(CDC1,): 1,44 max o (3H, t, J=7Hz), 2,00 (6H, m), 4,45 (2H, q, J=7Hz), 5,20 (IH, m), 5,95 (2H, m), 6,16 (2H, s), 7,62 (IH, s).

Eksempel 4 15 9-(2-cyclohexenyl)-2-n-butoxy-9H-adenin 19¾ i r>

n-CjlHgO

o

Fremgangsmåden i eksempel 3 gentoges med undtagelse af at natriumethoxidet i ethanol-opløsning erstattedes med en ækvivalent mængde af natrium-n-butoxid i n-butanol. Titel-produk-20 tet (som hygroskopisk pulver) fremstilledes med 40% udbytte.

IR(KBr): 3310, 3160, 2930, 1640, 1595, 1410, 1345 cm'1. UV: λ 254 nm (ε8300) , 270 nm (ε11500) . NMR(CDC1J : 1,80 max o (13H, m), 4,23 (2H, t, J= 7Hz), 5,02 (IH, m), 5,84 (2H, m) , 6,06 (2H, s) , 7,58 (lH, s) .

25 Eksempel 5 9-(2-cyclohexenyl)-2-n-pentyloxy-9H-adenin 27 146220 X2 n-c5Hii° "V^K/ ό

Fremgangsmåden i eksempel 3 gentoges med undtagelse af at natriumethoxidet i ethanolopløsning erstattedes af en ækvivalent mængde natrium-n-pentyloxid i n-pentanol. Titel-pro-05 duktet (som en hygroskopisk pulver) fremstilledes med 48% udbytte. IR (rent): 3500/ 3320, 2970, 1635, 1590, 1500, 1465, 1400, 1335 cm"1. UV: XEt0H 253 nm (ε8400), 269 nm (ε12500).

ITlclX

NMR(CDC13): 1,80 (15H, m), 4,25 (2H, t, J= 6,5 Hz), 5,07 (IH, m), 5,89 (2H, m) , 6,08 (2H, s), 7,56 (IH, s).

10 Eksempel 6 9-(2-cyclohexenyl)-2-n-hexyloxy-9H-adenin 11¾ rY;>

Fremgangsmåden i eksempel 3 gentoges med undtagelse af at natriumethoxidet i ethanolopløsning erstattedes med en ækvi-15 valent mængde natrium-n-hexyloxid i n-hexanol. Titel-produktet (som en hygroskopisk pulver) fremstilledes med 26% udbytte.

IR(rent): 3500, 3320, 1635, 1590, 1460, 1395, 1340 cm"1.

UV: XEt0H 252 nm (ε6900), 268 nm (ε10200). NMR(CDC1 ): 1,50 max 3 166220 28 (17H, m), 4,25 (2H, t, J=6Hz), 5,08 (IH, m), 5,86 (2H, m), 6,01 (2H, s), 7,60 (IH, s).

Eksempel 7 9-(2-cyclohexenyl)-2-isobutoxy-9H-adenin NHg

iso-ChHoO

05 4 9 · 6

Fremgangsmåden i eksempel 3 gentoges med undtagelse af at natriumethoxidet i ethanolopløsning erstattedes med en ækvivalent mængde natrium-isobutoxid i isobutanol. Titel-produktet fremstilledes med 66% udbytte, smp. 132-135°C. IR(rent): 10 3025, 1630, 1590, 1460, 1395, 1375, 1350 cm-1. UV: λΕ^Η 253 ΙΏαΧ nm (ε8600), 269 nm (ε13000). NMR(CDC13): 0,98 (6Η, d, J=6,5 Hz),. 1,90 (7H, m) , 3,96 (2H, d, J=6,5 Hz), 5,02 (1H, m) , 5,83 (2H, m), 6,18 (2H, s), 7,50 (1H, s).

Eksempel 8 15 2-ethoxy-9-cyclohexyl-9H-adenin NHp

cpH5° I

ό 29 146220

En blanding af 9-(2-cyclohexenyl)-2-ethoxy-9H-adenin (0,5 mmol) og 10% palladium-på—trækul (35 mg) i ethanol (6 ml) hydrogeneredes ved stuetemperatur og under atmosfærisk tryk. Reaktionsblandingen filtreredes og filtratet inddampedes. Re-05 manensen lyofiliseredes til opnåelse af titel-produktet med 40% udbytte, smp. 134-136°C. IR(KBr): 3280, 2995, 1705, 1615, 1525, 1415, 1310, 1010 cm"1. UV: 253 nm (ε6800) , 269

IQaX

nm (ε, 10200). NMR(CDC13): 1,44 (3H, t, J=7Hz), 2,00 (10H, m), 4,45 (2H, q, J=7Hz), 4,50 (IH/ m) , 8,07 (IH, s), 8,60 10 (2H, s).

Eksempel 9 2-n-butoxy-9-cyclohexyl-9H-adenin fø 0

Fremgangsmåden i eksempel 8 gentoges med undtagelse af at 15 9-(2-cyclohexenyl)-2-ethoxy-9H-adeninen erstattedes med en ækvivalent mængde af 9-(2-cyclohexenyl)-2-n-butoxy-9H-adenin.

Titel-produktet fremstilledes med 47% udbytte, smp. 138-141 °C. IR(KBr): 3300, 2930, 1660, 1640, 1590, 1405, 1345 cm"1.

UV: 253 nm (ε7600) , 269 nm (ε11500) . NMR(CDC1,) : 1,50

IuciX J

20 (17H, m) , 4,30 (IH, m), 4,31 (2H, t, J=6Hz), 6,40 (2H, s), 7,67 (IH, s).

Eksempel 10 2-n-pentyloxy-9-cyclohexyl-9H-adenin 30

1Λ 6 2 2 O

Γ2 χχ> n"C5HH°

O

Fremgangsmåden i eksempel 8 .gentoges med undtagelse af at 9- (2-cyclohexenyl)-2-ethoxy-9H-adeninen erstattedes med en askvi valent mængde af 9-(2-cyclohexenyl) ^-n-pentyloxy-gH-OS adenin. Titel-produktet fremstilledes med 90% udbytte, smp.

64-68°C. IR(rent): 3500, 3320, 1635, 1590, 1460, 1395, 1340, 1325, 1265 cm-1. UV: XEt°H 253 nm (ε10900), 269 nm (ε16800).

ItlclX

NMR(CDC13)j 1,50 (19H, m), 4,20 (IH, m) , 4,26 (2H, t, J=6,5 HZ), 6,25 (2H, s), 7,56 (IH, s).

10 Eksempel 11 2-n-hexyloxy-9-cyclohexyl-9H-adenin NHg rV> n-c6Hi3°

Fremgangsmåden i eksempel 8 gentoges'med undtagelse af at 9-(2-cyclohexenyl)-2-ethoxy-9H-adeninen erstattedes med en 15 ækvivalent vægt af 9-(2-cyclohexenyl)-2-n-hexyloxy-9H-adenin. Titel-produktet fremstilledes med 90% udbytte, smp. 57-60°C.

IR(rent): 3500, 1635, 1595, 1500, 1465, 1420, 1400 cm"1. UV: λΕ!*°Η 253 11111 (ε7200) , 270 nm (ε10900). NMR(CDC1,) : 1,5 (21H,

JuaX O

31 146220 m), 4,25 (2H, t, J=6,5Hz), 4,40 (IH, m), 6,07 (2H, s), 7,54 (IH, s).

Eksempel 12 2-isobutoxy-9-cyclohexyl-9H-adenin NHg II!) Ί

Fremgangsmåden i eksempel 8 gentoges med undtagelse af at 9-(2-cyclohexenyl)-2-ethoxy-9H-adenin erstattedes med en ækvivalent vægt af 9-(2-cyclohexenyl)-2-isobutoxy-9H-adenin. Titel-produktet fremstilledes med 60% udbytte, smp. 123-134°C.

10 IR(rent): 3320, 3160, 2940, 1635, 1590, 1395, 1375 cm-1. UV: λ^°Η 253 nm (ε7000), 269 nm (εΙΙΟΟΟ) . NMR(CDC1,) : 1,05 (6H, d, J=6,5 Hz), 1,90 (11H, m), 4,05 (2H, d, J=6,5 Hz), 4,24 (IH, m), 6,14 (2H, s), 7,55 (IH, s).

Eksempel 13 2-n-hutoxv-9-cvclohexyl- 9H-adenin A 2-chlor-9-cyclohexyl-9H-adenin 5 En blanding af 2-chlor-9-(2-cyclohexenyl)-9H-adenin'1· (252 mg, 1,0 mmol) i ethanol hydrogeneredes med 10% palladium-på-træ-kul (93 mg) ved stuetemperatur og under atmosfærisk tryk. Reaktionsblandingen filtreredes og filtratet inddampedes. Remanensen rensedes ved silikagél-kromatografi til opnåelse af 0 139 mg (55%) af titel-forbindelsen, smp. 206-209°C. IR (KBr):

3360, 3150, 2905, 1645, 1595, 1570, 1540 cm"1. UV: \C2H5°U

max 267 nm (ε15.300). NMR(CDC13): δ 1,80 (10H, m), 4,47 (IH, m), 6,23 (2H, s), 7,82 (IH, s).