DK148035B

DK148035B - Analogifremgangsmaade til fremstilling af 4''-substituerede aminoderivater af oleandomycin eller salte deraf med syrer

Info

Publication number: DK148035B
Application number: DK051678AA
Authority: DK
Inventors: Robert Fischer Myers
Original assignee: Pfizer
Priority date: 1977-02-04
Filing date: 1978-02-03
Publication date: 1985-02-11
Also published as: DE2804517C3; IE46394B1; NL171588B; NL171588C; DK148035C; GB1593644A; US4140848A; US4085119A; IT7820007A0; FR2379551B1; BE863620A; DE2804517A1; DK51678A; IE780234L; JPS5628918B2; DE2804517B2; IT1094210B; NL7801261A; JPS5398983A; LU79005A1

Description

148035

Opfindelsen angår en analogifremgangsmåde til fremstilling af hidtil ukendte 4"-substituerede aminoderivater af oleandomycin med den almene formel II: _O H. j^CH3^2 CHoCOO.....f y 0 CH3 i 11 H3C----✓^-CH3 H3c'-'\A^r°YCH3

0 Ssf^'HH-(CH,) -Z-R

icH3 2 148035 eller farmaceutisk acceptable salte heraf med syrer, hvor: n er 1 eller 2, Z er valgt blandt O, S, SO, SO2, ^.CO, CHOH og NH, forudsat, at når Z er O, S, SO, S02 eller NH, er n 2, og R er phenyl eller heterocyclyl valgt blandt pyridyl, chlorsubstitueret pyridyl, 2-pyrimidinyl og 2-(1-methyl)imidazolyl.

Disse forbindelser er antibakterielle midler.

Oleandomycin, et makrolidt antibiotikum fremstillet ved forgæring, blev først beskrevet i USA-patentbeskrivelse nr. 2.757.123.

Det har nedenstående formel I: ^—0 »(CH3>2

H3C..T |/h3 Jr, I

H-C"S, <^CH3 ' H-θ' I "0. JO CH-

Ovi2A

CH3

Den består af tre hoveddele; L-oleandrosedelen, desosamindelen og oleandoliddelen.

Ved derivatdannelsen af oleandomycin har man især interesseret sig for dannelsen af estere med én eller flere af tre hydrcxygrupper, der er anbragt ved 2', 4" og 11-stillingerne. Mono-, di- og triacyl-estere, hvori acylgruppen stammer fra en lavere alifatisk carbonhy-dr idmonocarboxylsyre, der har fra 2-6 carbonatomer, er beskrevet i USA-patentbeskrivelse nr. 3.022.219.

Aminohydrinderivater af oleandomycin er beskrevet af Kastrons et al., Khim. Geterosikl Soedin (2), 168-71 (1974); C.A. J30, 14986η (1974). Forbindelserne, hvis anvendelse ikke er beskrevet, er fremstillet ved at behandle oleandomycin med en dialkylamin eller en hete-rocyclisk amin i et forseglet rør i 20 timer ved 30°C. Epoxidgrup-pen ved 8-stillingen er reaktionsstedet.

Det har nu vist sig, at de omhandlede 4"-substituerede amino-derivater af oleandomycin med ovennævnte formel II og deres salte, som nedenfor nærmere demonstreret, er mindst lige så virksomme antibakterielle midler som de kendte oleandomycin-forbindelser over for visse grampositive mikroorganismer, f.eks. Staphylococcus aureus og 148035 3

Streptococcus pyogenes, in vitro, og mange er virksomme in vivo ved parenteral og peroral anvendelse. Forbindelserne og deres salte er endvidere mere virksomme over for visse gramnegative mikroorganismer, såsom coccer, f.eks. Pasteurella multocida og Nisseria sicca end de kendte oleandomycinforbindelser.

Som nævnte salte kan der eksempelvis være tale om hydrochlo-rider, hydrobromider, phosphater, sulfater, formiater, acetater, propionater, butyrater, citrater, glycolater, lactater, tartrater, malater, maleater, fumarater, gluconater, stearater, mandelater, pamoater, benzoater, succinater, lactater, p-toluensulfonater og aspartater.

Særligt foretrukne på grund af deres større in vivo-aktivitet i forhold til de andre forbindelser er forbindelserne med formlen II, hvor η, Z og R har de nedenfor anførte betydninger: η Z ___5-—

2 NH

€>> 1 CHOH _ <Q> 2 S pyridyl 2 O pyridyl 2 g 2-pyrimidyl

Foretrukne forbindelser på grund af deres større orale virkning i forhold til de andre forbindelser er sådanne forbindelser med formlen II, hvor η, Z og R har de nedenfor anførte betydninger: - 1 _._R_ 2 NK CgH5 1 CHOH r tr 6tt5 2 s 2-pyridyl 2 ® 4-pyridyl ' 2 s 2-pyriir.idinyl 2 0 2-pyridyl 148035 4

Fremgangsmåden ifølge opfindelsen til fremstilling af de omhandlede forbindelser er ejendommelig ved, at a) en forbindelse med formlen III: ,—o \ ΐ1αί3>2 VS n H3C/ \ 3.cA-o^Oh· in CHjCOO .../ \·'

HjC-l j-Cli3 OCHj omsættes med en amin med formlen:

H2H-<cH2)n-Z-R

hvor η, Z og R har ovennævnte betydninger, i et reaktionsinert opløsningsmiddel under samtidig eller efterfølgende behandling med et reducerende middel, eller

b) en forbindelse med formlen IV

—o Hs N(CH3)2

H3(X |.'CH3 I I

CH3C00 S Y 3 IV

h3°""n. s™3 h3c"T Κ/γΗ3 V/xh3 °CH3 5 148036 i et reaktionsinert opløsningsmiddel omsættes med et aldehyd af formlen:

R-Z-(CH2)n_1-CHO

hvor η, Z og R har ovennævnte betydninger, under samtidig eller efterfølgende behandling med et reducerende middel, eller c) til fremstilling af forbindelser med formlen II, hvor Z betegner CO, og n betegner 1, en forbindelse med formlen IV omsættes med Br-CE^-CO-R eller CI-CI^-CO-R, hvor R har ovennævnte betydning, og, om ønsket, en herved vundet forbindelse med formlen II overføres i et syreadditionssalt ved behandling med en syre.

Ved fremgangsmåden a) er totalreaktionen en reduktiv aminering af ketonen med formlen III, Da aminreaktanten og det reducerende middel er lettere tilgængelige end ketonforbindelsen med formlen III, foretrækkes det at udføre reaktionen trinvis for først at danne en Schiff'sk base som mellemprodukt, som herefter reduceres. Mellemproduktet i form af den Schiff'ske base behøver ikke isoleres. Man kan anvende en inert atmosfære, men det er ikke krævet.

Det molære forhold mellem ketonforbindelsen og aminreaktanten kan variere vidtgående, f.eks. fra ca. 1:1 til ca, 1:10. Molære forhold på mindre end 1:1 undgås af økonomiske grund for at sikre maksimal omsætning af ketonforbindelsen, hvilken forbindelse normalt er den mindst tilgængelige af reaktanterne. Forhold større end 1:10 anvendes sjældent, da de ikke synes at forbedre udbyttet af slutproduktet.

Velegnede reaktionsinerte opløsningsmidler er alkoholer, der indeholder fra 1-4 carbonatomer, ethylenelycol, propylenglyeol, te-trahydrofuran, dioxan, diethylether, benzen, toluen, acetonitril og methylenchlorid. De foretrukne opløsningsmidler er polære opløsningsmidler, som f.eks. alkoholer og acetonitril, der giver en hurtigere reaktionshastighed i forhold til de ikke polære opløsningsmidler.

Reaktionen kan udføres ved en temperatur fra ca. -10°C til ca. 50°C. Temperaturområdet fra ca. 10°C til ca. 30°C foretrækkes, da det tillader en tilfredsstillende reaktionshastighed og tilfredsstillende udbytter af produktet.

Reaktionen mel]em keton- og aminreaktanten er syrekatalyseret.

148035 6

Por nemheds skyld anvendes aminreaktanten som den fri base, og den passende syre tilsættes for at danne syreadditionssaltet in situ. Alternativt kan aminreaktanten anvendes i form af et syreadditionssalt med en organisk eller uorganisk syre, f.eks. eddikesyre, smørsyre, myresyre, saltsyre, hydrogenbromidsyre, hydrogeniodidsyre, svovlsyre, salpetersyre eller phosphorsyre. Acetat- og hydrochloridsal tene er de foretrukne syreadditionssalte, først og fremmest fordi de er let tilgængelige. Tilstedeværelse af syre synes at accelerere dannelsen af den Schiff'ske base og at forøge udbyttet af det ønskede produkt. Det molære forhold mellem anvendt syre- og aminreaktant er fortrinsvis i området fra ca. 0,5:1,0 til 1,5:1. Forhold uden for disse områder reducerer udbyttet af slutproduktet. Bedste resultater opnås sædvanligvis med ækvimolære eller næsten ækvimolære mængder (f.eks. 0,8:1 til 1,2:1) af syre- og aminreaktant.

Til fremgangsmåden b) anvendes passende en temperatur på fra ca. -10°C til ca. 50°C. Den ved omsætning med aldehydet dannede reaktionsblanding antages at indeholde en Schiff'sk base, og efterfølgende behandling med reducerende middel tilvejebringer det ønskede produkt med formlen II. Denne fremgangsmåde udføres under i det væsentlige samme betingelser som anført ovenfor for fremgangsmåde al.

Det eneste parameter, hvori der eksisterer forskelle, og denne er kun en mindre forskel, er temperaturområdet. Fremgangsmåden b) synes at tillade et lavere område som det foretrukne område, nemlig fra ca. -10°C til 10°C.

Reaktionen ved denne fremgangsmåde b) er også syrekatalyseret. Aminreaktanten med formlen IV kan være i form af et syreadditionssalt med en vilkårlig af en række syrer, såsom en stærk mineralsyre, f.eks. saltsyre, hydrogenbromidsyre, hydrogeniodidsyre, svovlsyre, salpetersyre eller phosphorsyre, eller en alkansyre med fra 1-4 car-bonatomer, f.eks. myresyre, eddikesyre, propionsyre eller smørsyre. Alternativt kan aminreaktanten anvendes i form af den frie base, og en passende syre tilsættes for at danne syreadditionssaltet in situ. Acetater og hydrochlorider er de foretrukne syreadditionssalte især på grund af deres tilgængelighed. Tilstedeværelsen af syreadditions saltet af aminreaktanten har tendens til at accelerere dannelsen af den Schiff’ske base og forøge udbyttet af det ønskede produkt. Molære forhold mellem syre- og aminreaktant, der anvendes, er fortrinsvis i området fra ca, 0,5:1,0 til 1,5:1. Ved forhold uden for disse områder reduceres udbyttet af slutproduktet. Bedste resultater opnås 148035 7 sædvanligvis med ækvimolære eller næsten ækvimolære mængder (f.eks. 0#8:1 til 1,2:1) af syre- og aminreaktant.

Medens der principielt kan anvendes en række reducerende midler ved hver af fremgangsmåderne a) og b) for at opnå en totalreaktion i form af reduktiv aminering, må de reducerende midler vælges med omtanke på grund af tilstedeværelsen af andre reducerbare grupper i ketonreaktanten (formel III) eller aminreaktanten (formel IV).

Det foretrukne reducerende middel er natriumcyanborhydrid, da det kun udfører den ønskede reduktion og kræver forholdsvis milde betingelser. Yderligere påvirkes det ikke af det som biprodukt i reaktionsblandingen tilstedeværende vand. Det kan anvendes i forhold på fra 1 til ca. 3 ækvivalenter pr, mol af ketonreaktanten med formlen III eller af aldehydet med formlen R-Z-(CI^) n_^-CHO.

Andre reducerende midler, der kan anvendes, er hydrogen i nærværelse af palladium-på-carbon og boran-dimethylaminkompleks.

De ovenfor beskrevne processer giver vand, der skal fjernes fra reaktionsblandingerne. Imidlertid kan vand-biproduktet, om ønsket, fjernes ved at udføre reaktionen ved reduceret tryk eller ved "effektivt" at fjerne det ved at anvende molekylårsigter som adsorptionsmidler for vandet. Velegnede adsorptionsmidler er naturlige og syntetiske krystallinske aluminiumsilicater. De sidste adsorptionsmidler foretrækkes på grund af deres store vandbindende evne i forhold til naturlige krystallinske aluminiumsilicater. Blandt sådanne adsorptionsmidler er chabazit, et naturligt forekommende materiale, det syntetiske "Linde Molecular Sieves" fremstillet og forhandlet af Linde Company, f.eks. typerne 4A, 5A og 13X, og "Micro-traps" fremstillet af Davison Chemical Company. Sådanne materialer absorberer og fjerner effektivt vandet fra reaktionsmediet. Det opbrugte eller delvis opbrugte aluminiumsilicat fraskilles reaktionsblandingen ved filtrering eller dekantering.

Dersom der anvendes en molekylarsigte for effektivt at fjerne vand-biproduktet, er det nødvendigt at anvende et reaktionsinert opløsningsmiddel, som f.eks. benzen, toluen, dimethylsulfoxid, ethanol eller propanol. Atmosfærisk tryk foretrækkes på grund ar udstyrets enkelhed og letheden ved udførelsen, men sub- eller superatmo-sfæriske tryk kan også anvendes, derom det Ønskes. Den mængde molekylarsigte, der skal anvendes, afhænger af reaktionsbetingelserne, som f.eks. temperatur, opløsningsmiddel og molekylårsigtens egen natur, og bestemmes bedst ved forsøg. Sædvanligvis skal imidlertid 148035 8 anvendes en mængde, der er tilstrækkelig til teoretisk at fjerne mængden af vand-biproduktet. Ved praktisk udførelse er det fordelagtigt at anvende et overskud af molekylårsigte, da det sikrer mere fuldstændig omsætning.

Når reaktionsblandingen er befriet for molekylarsigte, reduceres den, således som beskrevet ovenfor.

Fremgangsmåden c) udføres i nærværelse af en syreacceptor, f.eks. en organisk base, såsom en trialkylamin, der har fra 3-12 carbonatomer, og fortrinsvis den let tilgængelige triethylamin, i et reaktionsinert opløsningsmiddel, som f.eks. tetrahydrofuran, dloxan, ether, benzen, toluen og methylenchlorid. Reaktanterne, nemlig forbindelsen med formlen IV og brom- eller chlor-forbindelsen, omsættes i et molforhold på fra 1:1 til 1:2, fortrinsvis 1:1 til 1:1,5. Syreacceptoren og brom- eller chlor-reaktanten anvendes i ækvimolekylære mængder.

Reaktionen udføres ved en temperatur på fra ca. 20°C til 50°C. Højere temperaturer kan anvendes, men er ingen fordel. Lavere temperaturer anvendes sædvanligvis ikke, fordi reaktionen så kræver længere reaktionstid.

Når formel IJI-reaktanten anvendes til den foreliggende fremgangsmåde, dvs. fremgangsmåde al, frembringer reaktionen en blanding af epimere (betegnet ved en bølget linie i formel Il-forbindelserne), der kan adskilles, dersom det ønskes. Søjlechroraatografi af en chlo-roformopløsning af det rå produkt på silicagel og eluering med passende opløsningsmidler, f.eks. chloroform-3% methanol, frembyder en bekvem metode til adskillese af de epimere, I nærværende beskrivelse med krav skal det forstås, at selv om forbindelserne betegnes som 4"-substituerede aminoderivater, er både epimere og blandinger deraf omfattet.

Syreadditionssalte af de omhandlede forbindelser fremstilles let ved at behandle forbindelser med formlen II med en ækvimolær mængde af en passende syre i et reaktionsinert opløsningsmiddel for forbindelser med formlen II. Syreadditionssaltene udvindes ved filtrering, dersom de er uopløselige i det reaktionsinerte opløsningsmiddel, ved udfældning,ved tilsætning af et ikke-opløsningsmiddel for saltet, eller ved inddampning af opløsningsmidlet.

Udgangsforbindelsen med formlen III fremstilles ved oxidation af 11,2'-diacetyl-oleandomycin med f.eks. N-chlorsuccinimid-dimethyl-sulfid til den tilsvarende ll,2l-diacetyl-4"-deoxy-4"-oxo-oleandomy- 148035 9 cin. Solvolyse af diesteren ved behandling med methanol giver 11-monoesterforbindelsen.

Udgangsforbindelsen med formlen IV fremstilles ved reduktiv aminering af ll-acetyl-4"-deoxy-4"-oxo-oleandomycin under anvendelse af palladium-på-carbon, hydrogen og ammoniumacetat i et passende opløsningsmiddel (CH^OH, i-CgH^OH!. Alternativt kan natriumcyanbor-hydrid anvendes som reducerende middel i stedet for palladium-på-carbon og hydrogen.

De omhandlede oleandomycinderivater udviser som nævnt virkning in vitro over for forskellige grampositive mikroorganismer og over for visse gramnegative mikroorganismer, som f.eks. dem ided sfærisk eller ellipsoid form (coccer). Deres virkning demonstreres let ved in vitro forsøg over for forskellige mikroorganismer i et hjerne-hjerte-infusionssubstrat ved almindelig tofold rækkefortyndingsteknik.

Til påvisning af de omhandlede oleandomycinderivaters gode antibakterielle egenskaber er i nedenstående tabel for de i eksemplerne 1-15 omhandlede forbindelser samt for bleandomycinet angivet den minimale hæmningskoncentration (MIC), i jig pr .ml over for fire mikroorganismer.

Minimale hæmningskoncentråtioner (MIC) i ug/ml.

Forbindelse Organisms

Staph.aureus Strp.pyogenes Past, multocida Neiss.sicca 01A005 02C203 “ 59A001 66C000

Eks. 1 « 0,10 12,5 < 0.10 2 0,39 .< 0,10 3,12 3 25 s< 0,10 4 0,39 « 0,10 3,12 5 3,12 ^ 0,10 6 3,12 7 25 ^ 0,10 8 6,25 « 0,10 9 6,25 0,20 10 0,39 < 0,10 1,56 ^ 0,10 11 6,25 « 0,10 12 ^ 0,10 0,78 ^ 0,10 13 0,39 <C 0,10 3,12 14 6,25 15 12,5

Oleandcntycin 0,39 0,2 50 12,5 148035 ίο

Forbindelsernes in vitro aktivitet gør dem nyttige til topisk anvendelse i form af f.eks. salver eller cremer. Til topisk anvent delse er det ofte hensigtsmæssigt at kombinere den valgte forbindelse med et farmaceutisk acceptabelt bærestof, som f.eks. vegetabilsk eller mineralsk olie eller en blødgøringscreme. Ligeledes kan den opløses eller dispergeres i flydende bærestoffer eller opløsningsmidler, f.eks. vand, alkohol, glycoler eller blandinger heraf eller andre farmaceutisk acceptable inerte stoffer, dvs. stoffer, der ikke har nogen skadelig virkning på den aktive forbindelse. Til et sådant formål vil det sædvanligvis være gunstigt at anvende koncentrationer af aktive forbindelser på fra ca. 0,01 vægt% til ca. 10 vægt% baseret på hele præparatet.

Yderligere er mange af de omhandlede forbindelser aktive over for grampositive og visse gramnegative mikroorganisker in vivo ved peroral og/eller parenteral anvendelse til pattedyr, herunder mennesket. Deres in vivo-virkning er mere begrænset, hvad angår modtagelige organismer, og den bestemmes på sædvanlig måde, der omfatter, at man inficerer mus af i det væsentlige ensartet vægt méd forsøgsorganismen, og at man herefter behandler dem peroralt eller subkutant med forsøgsforbindelsen. I praksis gives mus, f.eks. 10 mus, en intraperitoneal podning af passende fortyndede kulturer indeholdende ca. 1 til 10 gange LD^qo (den laveste koncentration af organismer, der kræves for at give 100% dødsfald). Kontrolforsøg løber samtidig, hvor musene podes med lavere fortyndinger for at undersøge mulige variationer i forsøgsorganismens virulens. Forsøgsforbindelsen anvendes 0,5 time efter podningen og gentages 4, 24 og 48 timer senere. Overlevende mus holdes i 4 dage efter den sidste behandling, hvorefter man noterer antallet af overlevende.

·- Når de omhandlede forbindelser anvendes in vivo, kan de indgives peroralt eller parenteralt, f.eks. ved subkutan eller intramuskulær injektion, med en dosis fra ca. 1 mg/kg til ca. 200 mg/kg legemsvægt pr. dag. Det bedste dosisområde er fra ca. 5 mg/kg til ca. 100 mg/kg legemsvægt pr. dag, og det foretrukne område er fra ca. 5 mg/kg til ca. 50 mg/kg legemsvægt, pr. dag. Bærestoffer, der er velegnet til parenteral injektion, kan være enten vandige, som f.eks. vand, isotonisk saltvand, isotonisk dextrose. Ringer's opløsning eller ikke-vandige, som f.eks. fede olier af vegetabilsk oprindelse (bomuldsfrø, jordnød, . majs, sesam), dimethylsulfoxid og andre ikke-vandige bærestoffer, der ikke vil gribe ind i den terapeutiske virkning af præparatet, og som er ikke-toksiske i det vo- 148035 11 lumen eller det forhold, de anvendes (glycerol, propylenglycol, sorbitol) . Yderligere kan præparater, der er egnede til fremstilling af opløsninger på stedet inden anvendelsen,være fordelagtige at fremstille. Sådanne præparater kan omfatte flydende fortyndingsmidler, f.eks. propylenglycol, diethylcarbonat, glycerol eller sorbitol, puffermidler, hyaluronidase, lokalanesthetica og uorganiske salte for at tilvejebringe de ønskede farmakologiske egenskaber. De omhandlede forbindelser kan også kombineres med forskellige farmaceutisk acceptable inerte bærestoffer omfattende faste fortyndingsmidler, vandige bærestoffer, ikke-toksiske organiske opløsninger i form af kapsler, tabletter, sugetabletter, pastiller, tørre blandinger, suspensioner, opløsninger, eliksirer og parenterale opløsninger eller suspensioner. Sædvanligvis anvendes forbindelserne i forskellig dosisform på koncentrationsniveauer, der går fra ca. 0,5 vægt% til ca. 90 vægt% af hele præparatet.

Fremgangsmåden ifølge opfindelsen beskrives nærmere gennem følgende eksempler.

De nødvendige udgangsmaterialer med formlen H2N-(CH2)n-Z-R og R-Z-(CH2)n_i“CH0 er kendte materialer eller fremstilles ved fremgangsmåder, der er velkendte for fagmanden, f.eks. som angivet nedenfor under Fremstilling D og G.

Eksempel 1 ll-Acetyl-4"-deoxy-4"-(2-hydroxy-2-phenylethyl)-aminooleandomycin.

En opløsning af 2-hydroxy-2-phenylethylamin (2,12g, 15,5 mmol), eddikesyre (0,98 g, 15,4 mmol) og ll-acetyl-4"-deoxy-4"-oxo-oleandomycin (4,5 g, 6,19 mmol) i methanol (35 ml) afkøles under nitrogen i et isbad og omrøres i 15 minutter. Herefter behandles den dråbevis med natriumcyanborhydrid (0,33 g [på 85%], 4,52 mmol) i methanol. (15 ml) i løbet af 1/2 time. Isbadet fjernes, og reaktionsblandingen omrøres i 16 timer. Herefter hældes den i en blanding af diethylether (150 ml) og vand (150 ml). Den vandige opløsning ekstraileres med ether (150 ml) ved hver af følgende pH-værdier 4, 5, 6, 7, 8 og 9,3. De ekstrakter, der fås ved pH 8 og 9,3, slås sammen og koncentreres under reduceret tryk til opnåelse af 3,0 g af et hvidt skum.

148035 12

Skummet opløses i chloroform (20 ml) og chromatograferes på silicagel (200 g) under anvendelse af chloroform-5% methanol som elu-eringsmiddel. De fraktioner, der indeholder forbindelsen, slås sammen og koncentreres under reduceret tryk, hvorved man opnår titelforbindelsen (430 mg, 7,8%) som et rent hvidt skum. Det er en blanding af epimere forbindelser.

Massespek. m/e = 264.

NMR (60 MHz) (ppm) 7,4 (s, 5H), 3,40 (s, 3H), 2,66 (s, 2H),2,30 (s, 6H), 2,θΙ (s, 3H) .

Eksempel 2 ll-Acetyl-4"-deoxy-4"-[2-(4-pyridyl)thioethyl]aminooleandomycin.

En blanding af ll-acetyl-4"-deoxy-4"-aminooleandomycin (2,1 g, 2,9 mmol), eddikesyre (0,13 g, 2,9 mmol) og råt 2-(4-pyridyl)thio-acetaldehydhydrat, HC1 (1,97 g, 11,5 mmol) i methanol (10 ml) afkøles under en atmosfære af nitrogen til -10°C og omrøres i 15 minutter. Natriumcyanborhydrid (0,155 g [på 85%], 2,1 mmol) i methanol (10 ml) sættes til, og den resulterende blanding omrøres i 1 time under 15°C og herefter i 1,75 timer ved stuetemperatur. Herefter udhældes blandingen i en blanding af diethylether (150 ml) og vand (150 ml). Blandingen ekstraheres i ether (150 ml) ved hver af følgende pH-værdier 4, 5,5, 7, 8, 9 og 10. Ekstrakterne fra pH 7, 8 og 9 slås sammen og koncentreres under reduceret tryk til opnåelse af 1,98 g af et gult skiam, der renses ved søjlechromatografi på silicagel (200 g) under anvendelse af chloroform-5% methanol som elue-ringsmiddel, hvorved man efter koncentration af eluatet under reduceret tryk opnår 0,56 g (22%) af titelforbindelsen som en blanding af epimere. -

Massespek. m/e =281.

ΦΜΟ NMR (60 MHz) (ppm) : 8,3-8,5 (bred d, 2H) , 7,0-7,3 (bred d, 2H), 3,33 (s, 3H?, 2,66 (s, 2H), 2,33 (s, 6H), 2,06 (s, 3H).

Eksempel 3

Il-Acetyl-4"-deoxy~4"-(benzoylmethyl)aminooleandomycin.

Til en opløsning af triethylamin (0',2 ml) og ll-acetyl-4"-de-oxy-4"-aminooleandomycin (2,0 g, 2,7 mmol) i tetrahydrofuran (15 ml) sættes a-bromacetophenon (0,6 g, 3 mmol), og blandingen omrøres ved stuetemperatur i 3 timer. Reaktionsblandingen filtreres, og filtratet udhældes i en blanding af ether (150 ml) og vand (150 ml) og ekstraheres med diethylether ved følgende pH-værdier 4, 5,5, 7 og 148035 13 8,5. Ekstrakterne fra pH 5,5, 7 og 8,5 slås sammen og koncentreres til opnåelse af 1,65 g af et skum. Det renses ved chromatografi på silicagel (140 g) under anvendelse af chloroform-5% methanol som elu-eringsmiddel. Koncentration af eluatet under reduceret tryk giver titelforbindelsen i form af et hvidt skum (0,5 g, 21,8%), der er en blanding af de epimere former.

Massespek. m/e = 262.

NMR (60 MHz) (ppm): 7,0-8,0 (m, 5H) , 3,31 (s, 3H) , 2,65 (d, J=2, 2H), 2,30 (s, 6H?, 2,05 (s, 3H).

Eksempler 4-15 Følgende forbindelser fremstilledes ud fra de passende reaktanter ved fremgangsmåden fra eksempel 1 eller 2. I hvert tilfælde opnåedes en blanding af de epimere forbindelser.

Hn .jY],ch3 Γ x > V X 0 CH3 CH3C00..j^ γ H C''' \ «^CH3 “’Vj YCHs

3^SrX^NH-(CH2)n_Z“R

Jch3 148035 14 (I) +) +) o lo o m <ni i-H ο σ\ m mr-t'·

dp >4 Γ- ΓΟ ΗΓΟιΗγ-Ι'Φ m CSMM

Λ Ό

D

to tl»

G

01 CM CM CM CM CM H CM CM CM <M CM CM

a m - 1-0 -- K ^

Mc5j 'SB ς c M ό 1146 - OI KM Ο - _ - - - ro Λ οι ---. tn οι a --- a — —- οι —. -a - r» Μ ^ >-)— S a οι a 8 II a tn η οι 8 ιο νοπ » “Μ 2j cs - οι οι Η) οι II οι·. οι οι ro η, - tn * « - - η tn 6 - tn -- a --. il - — οι tn tn Ό tn ro — - g w ro cm ro a β w II in — -— — — - ro Ό —' ro -ro — m hj to to o to ro ro o —1 σι ro -- tn - oo in

H - - vo r- vo vo -co -- ^ W NO

tflOTJ oi - - - - -cm vo to oi MS ro·' b »

EQ — CM CM CM CM .--. - I H to -ro -OI

Eu co v a - cm m - - - ro ο Ό £Q y-. — ^ ^ · CO ^ — — .---' ΙΠ W — — - a „ _ - a — to a ii'-'-oiiH — oi m a a a a gm a «μ b>a> --. tea N «.ro ro co ro— - ro -- -·Μ· a - to S- tn -—. -.—. -^ ^ tn tn -.—. — cm +j - ro — T5 - — — —a tn a tn a in a tn a in a a n ~oi -a tn K a coco.—ro ·—co — co '— ro r-~ oo — ro H b H into co—' o rororo-oo-ro-r--ro-|oiH - - - o - ^ co vo -- ·μ Nta "itn rots ηιη m - win SO ---- to tn -- cq to cn'-' - — ---- -— ---- -oi -—' ------ r-a -- r-ro w — ro ro to mo rots row to rom H to oi no a in οι -ο ο ο ο o - o m to -- ro --g - -- - - -- - - « ^ -- - - ---in - - —— s -η a oi --.oi cm --.cm --.oi —a ---cm t- oi a— --.oi aa ro m a a a a aoia oih s hh — — v»ici-tn-in-m-H«'i - - - - oo cm - - - _____^ m --— «,—. .,—. .,—. —. —oi — -—. .—..—.-—. in — —.—. cm co aa a g a g a g a ga gii gw a a a » « sa π π into vo — vo ·—vo — to — to *—bo —to Htoro to — cm bobo --<D-i-l-o-tn-«i,-«i,-cM- --- - - i-ι - - - tn in Min -tn -tn -tn -tn -Ό -tn g in in — -01¾¾ -— -- ,2«-- co --- CO ·—- Γ— — — 00 --- GO — w-'a Γ-. 11 — — 0 m — >h iro 100 10 1 to i in 1 ro to 0 co 0 ro 1 b ho tnro *a* «31 0 co σι ro in 01 01 vo voro H «3* 0 r- - co - oi to * - - - - - - - - - - - - - - - - -- -tn -¾ - - r-οι r- 01 r-· oi r- cm to cm to cm 00 01 vo 01 co ro 01 co—- to — co to 0) · tn ^4 in ro in 01 0 intuo) r- to to to co 0

CtJ Cl's. CM CM CM CM CM ro

Stng h 1 >1 —

G iH

•Η >|H I

Η Η H id a >1 CM

>1 >1 >1 -H +1 Η I

Ό Ό Ό g (DO Μ H

•Η ·Η ·Η ·Η g N 0 >ι Μ Μ Μ Μ I (0 Η Ό

a in m m m m m>^ f»i fc-iH'da-H

a a a a a a a a a a*—-hum to to to to to to 1 I I I I g I >1 u O U O U a CM CM CM CM CM-Hina

CM

0 0 0 a a n ω 03 tnuoaaos cowo

β CM CM CM CM CM CM CM CM CM CM CM CM

H

0) a g 0 bH CM ro -31 in 5 **ιηιθΓ^οοίηΗΗ·-ι ηηη tn

H

148035 15

Fremstilling af udgangsforbindelser:

Fremstilling A.

11,2'-Diacetyl-4"-deoxy-4"-oxooleandomycin.

Til 4,5. g N-chlorsuccinimid, 50 ml benzen og 150 ml toluen i en tør kolbe udstyret med en magnetisk omrører og nitrogentiHedning og afkølet til -5°C sættes 3,36 ml dimethyl sulfid. Efter omrøring ved 0°C i 20 minutter afkøles indholdet til -25°C og behandles med 5,0 g ll,2'-diacetyloleandomycin i 100 ml toluen. Afkøling og omrøring fortsættes i 2 timer, hvorefter der tilsættes 4,73 ml triethyl-amin. Reaktionsblandingen omrøres ved 0°C i 15 minutter, hvorefter den udhsldes i 500 ml vand. pH indstilles til 9,5 med 1 N vandig na-trixmhydroxid, og det organiske lag fraskilles, vaskes med vand og en saltopløsning og tørres over natriumsulfat. Fjernelse af opløsningsmidlet i vakuum giver 4,9 g af det ønskede produkt som et skum.

NMR (60 MHz) 6^^ (ppm): 3,48 (s, 3H) , 2,61 (m, 2H) , 2,23 (s, 2H) og 2,03 (s, 6H). 3

Fremstilling B.

11-Acety1-4"-deoxy-4"-oxooleandomycin.

En opløsning af 4,0 g 11,2'-diacetyl-4"-deoxy-4"-oxooleandomycin i 75 ml methanol omrøres ved stuetemperatur natten over. Reaktionsblandingen koncentreres under reduceret tryk, hvorved forbindelsen opnås som et skum. En diethyletheropløsning af resten, efter behandling med hexan, giver 2,6 g af forbindelsen, som et hvidt fast stof, smp. 112-117°C.

NMR (60 MHz) (ppm) : 3,42 (s, 3H) , 2,60 (m, 2H) , 2,23 (s, 6H) og 2,01 (s, 3H) . 3

Fremstilling C.

11-Ac ety1-4"-deoxy-4"- aminooleandomycin.

Til en opslemning af 10% palladium-på carbon (10 g) i methanol (100 ml) sættes ammoniumacetat (21,2 g), og den resulterende opslemning behandles med en opløsning af ll-acetyl-4"-deoxy-4"-oxooleandomycin (20 g) i 100 ml af det samme opløsningsmiddel. Opslemnin- gen rystes ved stuetemperatur i en hydrogenatmosfære indtil et be- 2 gyndelsestryk på ca. 3,5 kg/cm . Efter 1,5 timer frafiltreres kata-, lysatoren, og filtratet sættes under omrøring til en blanding af vand (1200 ml) og chloroform (500 ml). pH indstilles fra 6,4 til 4,5, og det organiske lag fraskilles. Det vandige lag behandles 148035 16 efter en yderligere ekstraktion med chloroform (500 ml) med ethyl-acetat (500 ml), og pH indstilles til 9,5 med 1 N natriumhydroxid. Ethylacetatlaget fraskilles, og det vandige lag ekstraheres atter med ethylacetat. Ethylacetatekstrakterne slås sammen, tørres over natriumsulfat og koncentreres til et gult skum (18,6 g), der efter omkrystallisation med diisopropylether giver 6,85 g af det rensende produkt, smp. 157,5 til 160°C.

NMR ($, CDC13)s 3,41 (3H)s, 2,70(2H)m, 2,36 (6H)s og 2,10 (3H)s.

Den anden epimere, der eksisterer i det rå skum i indtil 20 til 25% opnås ved gradvis koncentrering og filtrering af modervæskerne .

Fremstilling K.

Almindelig fremstilling af aldehydreaktanter.

Til en opslemning af natriumhydrid (23,5 g af 50%, 0,46 mol) i tetrahydrofuran sættes en opslemning af 4-mercaptopyridin (65,4 g, 0,5 mol) i tetrahydrofuran (400 ml) og Ν,Ν-dimethylformamid (100 ml), og blandingen omrøres ved stuetemperatur i 1/2 time. Bromacetalde-hyddiethylacetal (98,6 g, 0,5 mol) i tetrahydrofuran (100 ml) tilsættes herefter i løbet af 5 minutter, og den resulterende blanding omrøres i 1,25 timer, hvorefter den koges med tilbagesvaling i 1 time. Tetrahydrofuranen afdestilleres ved atmosfærisk tryk, og resten fortyndes med chloroform (200 ml). Den vaskes først med 1 N NaOH, vand og saltvand, og tørres derefter (Na2S04). Den tørrede opløsning destilleres til opnåelse af diethylacetalen af 2-(4-pyridyl)thioacet-aldehyd (68,2 g, 71%), kogepunkt 140-143°C, (I 0,35 mm.

Diethylacetalen (27,3 g) opløses i 5% saltsyre (300 ml) og omrøres ved stuetemperatur i 18 timer. Herefter frysetørres reaktionsblandingen til opnåelse af en blanding af et fast stof og en olie. Det faste stof fraskilles ved filtrering. NMR (D20) viser, at det er hydratet af 2-(4-pyridyl)thioacetaldehydhydrochlorid.

NMR (60 MHz) δ^ (ppm): 7,6-8,6 (4H) , 5,43 (t, J=5, IH) , 3,50 (d, J=5, 2H). 2

Det anvendes direkte ved den reduktive amineringsproces i eksempel 2 uden yderligere rensning.

148035 17

Fremstilling E.

Almindelig omdannelse: Z = S til Z = SO.

Thioaldehydet, f.eks. 2-phenylthioacetaldehyd (1,1 g, 7,2 mmol),opløses i chloroform (8 ml),og m-chlorperbenzoesyre (85%, 1,47 g, 7,2 mmol) i chloroform (12 ml) tilsættes langsomt under omrøring. Reaktionsblandingen omrøres i 2,5 timer ved stuetemperatur, efterfulgt af 1 time ved 50°C, og herefter henstår den natten over ved stuetemperatur. Reaktionsblandingen filtreres og koncentreres under reduceret tryk til opnåelse af forbindelsen som en hvid pasta (2,5 g). NMR (60 MHz) 6™®l (ppm) s 9,8 (t, J=2, IH), 3,98 (d, J=2,2H).

Fremstilling P-

Almindelig omdannelse af Z = S til .Z = SO2·

Thioaldehydet, f.eks. 2-phenylthioacetaldehyd (1,5 g, 9,8 mmol), opløses i chloroform (5 ml), og en opløsning af m-chlorper-benzoesyre (85%, 4,0 g, 19 mmol) i chloroform (25 ml) sættes langsomt til under omrøring. Reaktionsblandingen står natten over vedstuetemperatur, hvorefter den filtreres og koncentreres under reduceret tryk til opnåelse af 2,1 g af en hvid pasta, der anvendes som sådan.

NMR (60 MHz) (ppm): 9,8 (t, J=2, IH), 4,13 (d, J=2, 2H) . 3

Fremstilling G.

Almindelig fremgangsmåde for R-CHOH- (C^) n_i“CH0 eller R-00-(CH2)n_^“C3K).

Forbindelserne med den ovenfor angivne formel fremstilles ved fremgangsmådens-følg® Loozen, j. Org. Chem., 40, 520—1 (1975), der omfatter omsætning af det passende aldehyd R-CHO med det passende Grignard-reagens /°\

BrMgiQ^) I til opnåelse af en alkohol /0N[ R-CH-(CH2)n_1-CH , som herefter hydrolyseres til det tilsvarende

OH

hydroxyaldehyd eller oxideres til den tilsvarende keton, og herefter hydrolyseres til en ketoaldehyd ved behandling med 5% HCl.

Claims

146035

1. Analogifremgangsmåde til fremstilling af 4"-substituerede aminoderivater af oleandomycin med den almene formel II: r-0 H 1CH3>2 ‘'/S H3\l· I/CH3 L X ch3goo— γ' Nr-'' h3c*“*\^^ .1— H3C'1 r0"-y^0N/CH3 y cH3l i O ^Y^^VNH-(CH2)n-Z-R och3 eller farmaceutisk acceptable salte heraf med syrer, hvor? n er 1 eller 2, Z er valgt blandt O, S, SO, S02, xCO, CHOH og NH, forudsat at når Z er O, S, SO, S02 eller NH, er n 2, og R er phenyl eller heterocyclyl valgt blandt pyridyl, chlorsubstitueret pyridyl, 2-pyrimidinyl og 2-(1-methyl)imidazolyl, kendetegnet ved, at a) en forbindelse med formlen III: _n N(CH3)? v<s, vv H3C^J JC 3 < ^(rNj^CHj III ch3coq y H3C"\ >-CH3 h3c"1 KaPj 3 “· CX OCH3 omsættes med en amin med formlen: H2H-(cH2)n-Z-R 148035 hvor η, Z og R har ovennævnte betydninger, i et reaktionsinert opløsningsmiddel under samtidig eller efterfølgende behandling med et reducerende middel, eller b) en forbindelse med formlen IV x—° N(CH ) vs vs H3CN /CH3 I CH-COO—S >** 3

2. Fremgangsmåde ifølge krav 1 a) eller b), kendetegnet ved, at det reducerende middel er natriumcyanborhydrid.

3. Fremgangsmåde ifølge krav 1 a) eller b) eller krav 2, kendetegnet ved, at henholdsvis omsætningen mellem forbindelsen med formlen III og aminen eller omsætningen mellem forbindelsen med formlen IV og aldehydet udføres i nærværelse af en syre.

3. IV H3C'** Nv /'CH3 h3c'i Y^CH3 " Ν^Ηνη2 OCH^ i et reaktionsinert opløsningsmiddel omsættes med et aldehyd af formlen: R-Z- (CH2) n_>1“CHO hvor η, Z og R har ovennævnte betydninger, under samtidig eller efterfølgende behandling med et reducerende middel, eller c) til fremstilling af forbindelser med formlen II, hvor Z betegner CO, og n betegner 1, en forbindelse med formlen IV omsættes med Br-CH^-CO-R eller Cl-CI^-CO-R, hvor R har ovennævnte betydning, og, om ønsket, en herved vundet forbindelse med formlen II overføres i et syreadditionssalt ved behandling med en syre.

4. Fremgangsmåde ifølge krav 3, kendetegnet ved, at syren er eddikesyre.