DK152505B - Analogifremgangsmaade til fremstilling af et somatostatin-analogt cyclisk hexapeptid - Google Patents
Analogifremgangsmaade til fremstilling af et somatostatin-analogt cyclisk hexapeptid Download PDFInfo
- Publication number
- DK152505B DK152505B DK460580AA DK460580A DK152505B DK 152505 B DK152505 B DK 152505B DK 460580A A DK460580A A DK 460580AA DK 460580 A DK460580 A DK 460580A DK 152505 B DK152505 B DK 152505B
- Authority
- DK
- Denmark
- Prior art keywords
- phe
- carbon atoms
- trp
- thr
- alkyl
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 22
- NHXLMOGPVYXJNR-ATOGVRKGSA-N somatostatin Chemical class C([C@H]1C(=O)N[C@H](C(N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N[C@@H](CC=2C3=CC=CC=C3NC=2)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@H](C(=O)N1)[C@@H](C)O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](C)N)C(O)=O)=O)[C@H](O)C)C1=CC=CC=C1 NHXLMOGPVYXJNR-ATOGVRKGSA-N 0.000 title description 23
- 229940075620 somatostatin analogue Drugs 0.000 title 1
- 239000011347 resin Substances 0.000 claims description 41
- 229920005989 resin Polymers 0.000 claims description 41
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims description 35
- -1 hydroxy, amino Chemical group 0.000 claims description 33
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims description 31
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 claims description 29
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 claims description 22
- 125000001797 benzyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])* 0.000 claims description 18
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 claims description 14
- OAKJQQAXSVQMHS-UHFFFAOYSA-N Hydrazine Chemical compound NN OAKJQQAXSVQMHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- 230000008569 process Effects 0.000 claims description 11
- 125000003545 alkoxy group Chemical group 0.000 claims description 10
- 229910052736 halogen Inorganic materials 0.000 claims description 9
- 150000002367 halogens Chemical class 0.000 claims description 9
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical group N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 150000001540 azides Chemical class 0.000 claims description 8
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 claims description 8
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 claims description 8
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 7
- OWFXIOWLTKNBAP-UHFFFAOYSA-N isoamyl nitrite Chemical compound CC(C)CCON=O OWFXIOWLTKNBAP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- 125000000449 nitro group Chemical group [O-][N+](*)=O 0.000 claims description 7
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 7
- 238000007363 ring formation reaction Methods 0.000 claims description 7
- NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N Sulfur Chemical group [S] NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 claims description 6
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 claims description 6
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 claims description 6
- 229910052717 sulfur Chemical group 0.000 claims description 6
- 239000011593 sulfur Chemical group 0.000 claims description 6
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 5
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 claims description 5
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 claims description 4
- 125000002373 5 membered heterocyclic group Chemical group 0.000 claims description 3
- 125000004070 6 membered heterocyclic group Chemical group 0.000 claims description 3
- GRYLNZFGIOXLOG-UHFFFAOYSA-N Nitric acid Chemical compound O[N+]([O-])=O GRYLNZFGIOXLOG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 229910052783 alkali metal Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 125000004103 aminoalkyl group Chemical group 0.000 claims description 2
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical group [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 125000000484 butyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 claims description 2
- 125000004181 carboxyalkyl group Chemical group 0.000 claims description 2
- 125000005842 heteroatom Chemical group 0.000 claims description 2
- 125000002768 hydroxyalkyl group Chemical group 0.000 claims description 2
- 238000011065 in-situ storage Methods 0.000 claims description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 2
- 229910017604 nitric acid Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 claims description 2
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical group [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 claims 1
- 150000003512 tertiary amines Chemical class 0.000 claims 1
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N Vilsmeier-Haack reagent Natural products CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 37
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 34
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 33
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 33
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 26
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 22
- 125000004122 cyclic group Chemical group 0.000 description 21
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 20
- 102000005157 Somatostatin Human genes 0.000 description 19
- 108010056088 Somatostatin Proteins 0.000 description 19
- 229960000553 somatostatin Drugs 0.000 description 19
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N L-threonine Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N 0.000 description 18
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 18
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 18
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 17
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N Tetrahydrofuran Chemical compound C1CCOC1 WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 125000000325 methylidene group Chemical group [H]C([H])=* 0.000 description 11
- RDOXTESZEPMUJZ-UHFFFAOYSA-N anisole Chemical compound COC1=CC=CC=C1 RDOXTESZEPMUJZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 10
- QIVBCDIJIAJPQS-SECBINFHSA-N D-tryptophane Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-SECBINFHSA-N 0.000 description 9
- YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N Furan Chemical compound C=1C=COC=1 YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N Trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 8
- NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N insulin Chemical compound N1C(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(NC(=O)CN)C(C)CC)CSSCC(C(NC(CO)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CSSCC(NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(C)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2NC=NC=2)NC(=O)C(CO)NC(=O)CNC2=O)C(=O)NCC(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)N3C(CCC3)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C)C(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C1CSSCC2NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)CC1=CN=CN1 NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 7
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- KZBUYRJDOAKODT-UHFFFAOYSA-N Chlorine Chemical compound ClCl KZBUYRJDOAKODT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 102000001189 Cyclic Peptides Human genes 0.000 description 6
- 108010069514 Cyclic Peptides Proteins 0.000 description 6
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical compound C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 6
- 239000000122 growth hormone Substances 0.000 description 6
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 6
- 239000000047 product Substances 0.000 description 6
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 6
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 5
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 5
- 239000000460 chlorine Substances 0.000 description 5
- 239000006260 foam Substances 0.000 description 5
- UZKWTJUDCOPSNM-UHFFFAOYSA-N methoxybenzene Substances CCCCOC=C UZKWTJUDCOPSNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 5
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 5
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 5
- MYRTYDVEIRVNKP-UHFFFAOYSA-N 1,2-Divinylbenzene Chemical compound C=CC1=CC=CC=C1C=C MYRTYDVEIRVNKP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N Ammonium hydroxide Chemical compound [NH4+].[OH-] VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- GAWIXWVDTYZWAW-UHFFFAOYSA-N C[CH]O Chemical group C[CH]O GAWIXWVDTYZWAW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- KRHYYFGTRYWZRS-UHFFFAOYSA-N Fluorane Chemical compound F KRHYYFGTRYWZRS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 102000051325 Glucagon Human genes 0.000 description 4
- 108060003199 Glucagon Proteins 0.000 description 4
- 102000018997 Growth Hormone Human genes 0.000 description 4
- 108010051696 Growth Hormone Proteins 0.000 description 4
- 102000004877 Insulin Human genes 0.000 description 4
- 108090001061 Insulin Proteins 0.000 description 4
- DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N L-asparagine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N 0.000 description 4
- FXHOOIRPVKKKFG-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylacetamide Chemical compound CN(C)C(C)=O FXHOOIRPVKKKFG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- PTDAGKJHZBGDKD-OEAJRASXSA-N Phe-Thr-Lys Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CC=CC=C1)N)O PTDAGKJHZBGDKD-OEAJRASXSA-N 0.000 description 4
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N ammonia Natural products N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 4
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 4
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 4
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 4
- 229940113088 dimethylacetamide Drugs 0.000 description 4
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 4
- 230000029142 excretion Effects 0.000 description 4
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 4
- MASNOZXLGMXCHN-ZLPAWPGGSA-N glucagon Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O)C(C)C)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](N)CC=1NC=NC=1)[C@@H](C)O)[C@@H](C)O)C1=CC=CC=C1 MASNOZXLGMXCHN-ZLPAWPGGSA-N 0.000 description 4
- 229960004666 glucagon Drugs 0.000 description 4
- 229910000040 hydrogen fluoride Inorganic materials 0.000 description 4
- 125000006301 indolyl methyl group Chemical group 0.000 description 4
- 229940125396 insulin Drugs 0.000 description 4
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 4
- 239000002002 slurry Substances 0.000 description 4
- 125000005931 tert-butyloxycarbonyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(OC(*)=O)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 4
- FHSGULRVYLHXFO-FFNFELIASA-N (3s,6s,9s,12r,15s,18s)-9-(4-aminobutyl)-3,15-dibenzyl-6-[(1r)-1-hydroxyethyl]-12-(1h-indol-3-ylmethyl)-1,4,7,10,13,16-hexazabicyclo[16.3.0]henicosane-2,5,8,11,14,17-hexone Chemical compound C([C@H]1C(=O)N[C@H](CC=2C3=CC=CC=C3NC=2)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@H](C(N[C@@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N2CCC[C@H]2C(=O)N1)=O)[C@H](O)C)C1=CC=CC=C1 FHSGULRVYLHXFO-FFNFELIASA-N 0.000 description 3
- 125000006847 BOC protecting group Chemical group 0.000 description 3
- QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N Dicylcohexylcarbodiimide Chemical compound C1CCCCC1N=C=NC1CCCCC1 QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N L-Cysteine Chemical compound SC[C@H](N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N 0.000 description 3
- QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N L-tryptophane Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 230000027119 gastric acid secretion Effects 0.000 description 3
- IXCSERBJSXMMFS-UHFFFAOYSA-N hydrogen chloride Substances Cl.Cl IXCSERBJSXMMFS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229910000041 hydrogen chloride Inorganic materials 0.000 description 3
- RAXXELZNTBOGNW-UHFFFAOYSA-N imidazole Natural products C1=CNC=N1 RAXXELZNTBOGNW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 description 3
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 150000007530 organic bases Chemical class 0.000 description 3
- 125000001997 phenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(*)C([H])=C1[H] 0.000 description 3
- 229960005190 phenylalanine Drugs 0.000 description 3
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 3
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 3
- 229920003002 synthetic resin Polymers 0.000 description 3
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 3
- 206010000599 Acromegaly Diseases 0.000 description 2
- 102000004400 Aminopeptidases Human genes 0.000 description 2
- 108090000915 Aminopeptidases Proteins 0.000 description 2
- UMJHAEUVYNEBNP-RXYCCRQDSA-N C([C@H]1C(=O)N[C@H](CC=2C3=CC=CC=C3NC=2)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@H](C(N[C@@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N2CCC[C@H]2C(=O)N1)=O)[C@H](O)C)C1=CC=C(O)C=C1 Chemical compound C([C@H]1C(=O)N[C@H](CC=2C3=CC=CC=C3NC=2)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@H](C(N[C@@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N2CCC[C@H]2C(=O)N1)=O)[C@H](O)C)C1=CC=C(O)C=C1 UMJHAEUVYNEBNP-RXYCCRQDSA-N 0.000 description 2
- 241000282472 Canis lupus familiaris Species 0.000 description 2
- CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N Carbon dioxide Chemical compound O=C=O CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000005367 Carboxypeptidases Human genes 0.000 description 2
- 108010006303 Carboxypeptidases Proteins 0.000 description 2
- ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N Chlorine atom Chemical compound [Cl] ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010012689 Diabetic retinopathy Diseases 0.000 description 2
- 206010056340 Diabetic ulcer Diseases 0.000 description 2
- SIKJAQJRHWYJAI-UHFFFAOYSA-N Indole Chemical compound C1=CC=C2NC=CC2=C1 SIKJAQJRHWYJAI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N L-Proline Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 2
- KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N L-valine Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 2
- LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N N-Butanol Chemical compound CCCCO LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010079943 Pentagastrin Proteins 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- PPBRXRYQALVLMV-UHFFFAOYSA-N Styrene Chemical compound C=CC1=CC=CC=C1 PPBRXRYQALVLMV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000009471 action Effects 0.000 description 2
- 150000001450 anions Chemical class 0.000 description 2
- KCXMKQUNVWSEMD-UHFFFAOYSA-N benzyl chloride Chemical compound ClCC1=CC=CC=C1 KCXMKQUNVWSEMD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940073608 benzyl chloride Drugs 0.000 description 2
- 125000001584 benzyloxycarbonyl group Chemical group C(=O)(OCC1=CC=CC=C1)* 0.000 description 2
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 2
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 2
- 235000011089 carbon dioxide Nutrition 0.000 description 2
- 150000001732 carboxylic acid derivatives Chemical group 0.000 description 2
- 150000001733 carboxylic acid esters Chemical class 0.000 description 2
- 229910052801 chlorine Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 2
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 2
- 239000007822 coupling agent Substances 0.000 description 2
- 125000000118 dimethyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 2
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 2
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 2
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 2
- 125000001153 fluoro group Chemical group F* 0.000 description 2
- 125000005843 halogen group Chemical group 0.000 description 2
- 125000004029 hydroxymethyl group Chemical group [H]OC([H])([H])* 0.000 description 2
- 239000003456 ion exchange resin Substances 0.000 description 2
- 229920003303 ion-exchange polymer Polymers 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- 125000000956 methoxy group Chemical group [H]C([H])([H])O* 0.000 description 2
- 125000000250 methylamino group Chemical group [H]N(*)C([H])([H])[H] 0.000 description 2
- SMBBZHGTZJNSRQ-UHFFFAOYSA-N n'-(6,6-dichlorohexyl)methanediimine Chemical compound ClC(Cl)CCCCCN=C=N SMBBZHGTZJNSRQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000017066 negative regulation of growth Effects 0.000 description 2
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 2
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 2
- ANRIQLNBZQLTFV-DZUOILHNSA-N pentagastrin Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=1[C]2C=CC=CC2=NC=1)NC(=O)CCNC(=O)OC(C)(C)C)CCSC)C(N)=O)C1=CC=CC=C1 ANRIQLNBZQLTFV-DZUOILHNSA-N 0.000 description 2
- 229960000444 pentagastrin Drugs 0.000 description 2
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- UYWQUFXKFGHYNT-UHFFFAOYSA-N phenylmethyl ester of formic acid Natural products O=COCC1=CC=CC=C1 UYWQUFXKFGHYNT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000002952 polymeric resin Substances 0.000 description 2
- 229960002429 proline Drugs 0.000 description 2
- 125000000467 secondary amino group Chemical group [H]N([*:1])[*:2] 0.000 description 2
- LPXPTNMVRIOKMN-UHFFFAOYSA-M sodium nitrite Chemical compound [Na+].[O-]N=O LPXPTNMVRIOKMN-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- 238000010532 solid phase synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- 231100000397 ulcer Toxicity 0.000 description 2
- TXUICONDJPYNPY-UHFFFAOYSA-N (1,10,13-trimethyl-3-oxo-4,5,6,7,8,9,11,12,14,15,16,17-dodecahydrocyclopenta[a]phenanthren-17-yl) heptanoate Chemical compound C1CC2CC(=O)C=C(C)C2(C)C2C1C1CCC(OC(=O)CCCCCC)C1(C)CC2 TXUICONDJPYNPY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DHBXNPKRAUYBTH-UHFFFAOYSA-N 1,1-ethanedithiol Chemical compound CC(S)S DHBXNPKRAUYBTH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 1,2-bis(ethenyl)benzene;1-ethenyl-2-ethylbenzene;styrene Chemical compound C=CC1=CC=CC=C1.CCC1=CC=CC=C1C=C.C=CC1=CC=CC=C1C=C NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 1,4-Dioxane Chemical compound C1COCCO1 RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ASOKPJOREAFHNY-UHFFFAOYSA-N 1-Hydroxybenzotriazole Chemical compound C1=CC=C2N(O)N=NC2=C1 ASOKPJOREAFHNY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000004066 1-hydroxyethyl group Chemical group [H]OC([H])([*])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- HBAHZZVIEFRTEY-UHFFFAOYSA-N 2-heptylcyclohex-2-en-1-one Chemical compound CCCCCCCC1=CCCCC1=O HBAHZZVIEFRTEY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101150055869 25 gene Proteins 0.000 description 1
- DEXFNLNNUZKHNO-UHFFFAOYSA-N 6-[3-[4-[2-(2,3-dihydro-1H-inden-2-ylamino)pyrimidin-5-yl]piperidin-1-yl]-3-oxopropyl]-3H-1,3-benzoxazol-2-one Chemical compound C1C(CC2=CC=CC=C12)NC1=NC=C(C=N1)C1CCN(CC1)C(CCC1=CC2=C(NC(O2)=O)C=C1)=O DEXFNLNNUZKHNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XDOLZJYETYVRKV-UHFFFAOYSA-N 7-Aminoheptanoic acid Chemical compound NCCCCCCC(O)=O XDOLZJYETYVRKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000001433 C-terminal amino-acid group Chemical group 0.000 description 1
- 101710115643 Cathelicidin-1 Proteins 0.000 description 1
- XJUZRXYOEPSWMB-UHFFFAOYSA-N Chloromethyl methyl ether Chemical compound COCCl XJUZRXYOEPSWMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VYZAMTAEIAYCRO-UHFFFAOYSA-N Chromium Chemical compound [Cr] VYZAMTAEIAYCRO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930182827 D-tryptophan Natural products 0.000 description 1
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 1
- JOYRKODLDBILNP-UHFFFAOYSA-N Ethyl urethane Chemical compound CCOC(N)=O JOYRKODLDBILNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010016717 Fistula Diseases 0.000 description 1
- 238000005727 Friedel-Crafts reaction Methods 0.000 description 1
- 206010065713 Gastric Fistula Diseases 0.000 description 1
- 101150016456 Hexa gene Proteins 0.000 description 1
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000019766 L-Lysine Nutrition 0.000 description 1
- 239000004201 L-cysteine Substances 0.000 description 1
- 235000013878 L-cysteine Nutrition 0.000 description 1
- 125000002435 L-phenylalanyl group Chemical group O=C([*])[C@](N([H])[H])([H])C([H])([H])C1=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C1[H] 0.000 description 1
- 229930182821 L-proline Natural products 0.000 description 1
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 1
- 229920001367 Merrifield resin Polymers 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- GDFAOVXKHJXLEI-VKHMYHEASA-N N-methyl-L-alanine Chemical compound C[NH2+][C@@H](C)C([O-])=O GDFAOVXKHJXLEI-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- 239000004793 Polystyrene Substances 0.000 description 1
- YYARMJSFDLIDFS-FKBYEOEOSA-N Pro-Phe-Trp Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=C1C=CC=C2)C(O)=O YYARMJSFDLIDFS-FKBYEOEOSA-N 0.000 description 1
- ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N Proline Natural products OC(=O)C1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WTKZEGDFNFYCGP-UHFFFAOYSA-N Pyrazole Chemical compound C=1C=NNC=1 WTKZEGDFNFYCGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101000868151 Rattus norvegicus Somatotropin Proteins 0.000 description 1
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101710138331 Somatostatin-1 Proteins 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- FZWLAAWBMGSTSO-UHFFFAOYSA-N Thiazole Chemical compound C1=CSC=N1 FZWLAAWBMGSTSO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IQHUITKNHOKGFC-MIMYLULJSA-N Thr-Phe Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 IQHUITKNHOKGFC-MIMYLULJSA-N 0.000 description 1
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 description 1
- 229910021626 Tin(II) chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N Valine Chemical compound CC(C)C(N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AZFNGPAYDKGCRB-XCPIVNJJSA-M [(1s,2s)-2-amino-1,2-diphenylethyl]-(4-methylphenyl)sulfonylazanide;chlororuthenium(1+);1-methyl-4-propan-2-ylbenzene Chemical compound [Ru+]Cl.CC(C)C1=CC=C(C)C=C1.C1=CC(C)=CC=C1S(=O)(=O)[N-][C@@H](C=1C=CC=CC=1)[C@@H](N)C1=CC=CC=C1 AZFNGPAYDKGCRB-XCPIVNJJSA-M 0.000 description 1
- 230000003187 abdominal effect Effects 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 229940124277 aminobutyric acid Drugs 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 239000003125 aqueous solvent Substances 0.000 description 1
- 229960001230 asparagine Drugs 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 1
- 235000013405 beer Nutrition 0.000 description 1
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 1
- 150000001768 cations Chemical class 0.000 description 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 125000004218 chloromethyl group Chemical group [H]C([H])(Cl)* 0.000 description 1
- 229940061627 chloromethyl methyl ether Drugs 0.000 description 1
- 229910052804 chromium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011651 chromium Substances 0.000 description 1
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 1
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 1
- 229940125898 compound 5 Drugs 0.000 description 1
- 238000007334 copolymerization reaction Methods 0.000 description 1
- 239000012043 crude product Substances 0.000 description 1
- 238000010511 deprotection reaction Methods 0.000 description 1
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 230000003890 fistula Effects 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 1
- BTCSSZJGUNDROE-UHFFFAOYSA-N gamma-aminobutyric acid Chemical compound NCCCC(O)=O BTCSSZJGUNDROE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 1
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 1
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 1
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000002260 hypophysiotrophic effect Effects 0.000 description 1
- 239000000960 hypophysis hormone Substances 0.000 description 1
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 description 1
- PZOUSPYUWWUPPK-UHFFFAOYSA-N indole Natural products CC1=CC=CC2=C1C=CN2 PZOUSPYUWWUPPK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RKJUIXBNRJVNHR-UHFFFAOYSA-N indolenine Natural products C1=CC=C2CC=NC2=C1 RKJUIXBNRJVNHR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 1
- 125000005647 linker group Chemical group 0.000 description 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 1
- 210000003097 mucus Anatomy 0.000 description 1
- WHQSYGRFZMUQGQ-UHFFFAOYSA-N n,n-dimethylformamide;hydrate Chemical compound O.CN(C)C=O WHQSYGRFZMUQGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WOOWBQQQJXZGIE-UHFFFAOYSA-N n-ethyl-n-propan-2-ylpropan-2-amine Chemical compound CCN(C(C)C)C(C)C.CCN(C(C)C)C(C)C WOOWBQQQJXZGIE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 1
- LQNUZADURLCDLV-UHFFFAOYSA-N nitrobenzene Chemical group [O-][N+](=O)C1=CC=CC=C1 LQNUZADURLCDLV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000003854 p-chlorophenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C(*)=C([H])C([H])=C1Cl 0.000 description 1
- 238000000819 phase cycle Methods 0.000 description 1
- NMHMNPHRMNGLLB-UHFFFAOYSA-N phloretic acid Chemical compound OC(=O)CCC1=CC=C(O)C=C1 NMHMNPHRMNGLLB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000902 placebo Substances 0.000 description 1
- 229940068196 placebo Drugs 0.000 description 1
- 229920002223 polystyrene Polymers 0.000 description 1
- 239000004304 potassium nitrite Substances 0.000 description 1
- 235000010289 potassium nitrite Nutrition 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 238000012746 preparative thin layer chromatography Methods 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 238000003127 radioimmunoassay Methods 0.000 description 1
- 239000000376 reactant Substances 0.000 description 1
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 1
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 239000003421 short acting drug Substances 0.000 description 1
- 235000010288 sodium nitrite Nutrition 0.000 description 1
- 238000003746 solid phase reaction Methods 0.000 description 1
- 239000001119 stannous chloride Substances 0.000 description 1
- 235000011150 stannous chloride Nutrition 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 238000010254 subcutaneous injection Methods 0.000 description 1
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 238000001308 synthesis method Methods 0.000 description 1
- 239000000057 synthetic resin Substances 0.000 description 1
- IOGXOCVLYRDXLW-UHFFFAOYSA-N tert-butyl nitrite Chemical compound CC(C)(C)ON=O IOGXOCVLYRDXLW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WHRNULOCNSKMGB-UHFFFAOYSA-N tetrahydrofuran thf Chemical compound C1CCOC1.C1CCOC1 WHRNULOCNSKMGB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WROMPOXWARCANT-UHFFFAOYSA-N tfa trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F.OC(=O)C(F)(F)F WROMPOXWARCANT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960002898 threonine Drugs 0.000 description 1
- 238000004448 titration Methods 0.000 description 1
- 229960004799 tryptophan Drugs 0.000 description 1
- 229960004441 tyrosine Drugs 0.000 description 1
- 229960004295 valine Drugs 0.000 description 1
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K1/00—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/575—Hormones
- C07K14/655—Somatostatins
- C07K14/6555—Somatostatins at least 1 amino acid in D-form
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K1/00—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length
- C07K1/107—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length by chemical modification of precursor peptides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
- Y02P20/00—Technologies relating to chemical industry
- Y02P20/50—Improvements relating to the production of bulk chemicals
- Y02P20/55—Design of synthesis routes, e.g. reducing the use of auxiliary or protecting groups
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Description
i
DK 152505B
Somatostatin er et tetradecapeptid indeholdende et cyc-lisk dodecapeptid med formlen: I-i
Ala-Gly-Cys-Lys-Asn-Phe-Phe-Trp-Lys-Thr-Phe-Thr-Ser-Cys-OH 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 5 og det kan inhibere frigørelsen af væksthormon, frigørelsen af insulin og glucagon samt nedsætte mavesyre-sekre-tionen. Somatostatin i sig selv har en kort virkningsvarighed, da det inaktiveres, bl.a. af aminopeptidaser og carboxypeptidaser, der er til stede i legemet. Dette pro-10 biem med kortvarig virkning er til dels løst i den kendte teknik ved at fremstille derivater af somatostatin, som har ringe opløselighed, hvorved de bevirker en langsom frigivelse ved subcutan injektion. Når disse derivater først er opløst, er de imidlertid ikke længere stabile 15 over for inaktivering med aminopeptidaser og carboxypep-tidaser end somatostatin i sig selv.
Den foreliggende opfindelse angår en analogifremgangsmåde til fremstilling af hidtil ukendte cycliske hexapeptider, der er derivater af somatostatin, i hvilke bl.a. syv af 20 ringaminosyrerne er erstattet med en sekundær aminosyre, og begge de exocycliske aminosyrer er fjernet. Desuden kan der være foretaget substituering og omsætning af de resterende aminosyrer som beskrevet i det følgende. De cycliske hexapeptider inhiberer selektivt frigørelsen af 25 væksthormon. Nogle af forbindelserne inhiberer desuden frigørelsen af mavesyresekret, insulin og glucagon.
Forbindelserne har således en mere selektiv biologisk aktivitet end somatostatin. Den cycliske hexapeptid-struktur for de omhandlede forbindelser betyder også en 30 længere varighed af aktiviteten end varigheden af aktiviteten for somatostatin. De cycliske hexapeptider som så-
DK 152505 B
2 danne er nyttige til behandling af akromegali/ diabetes, diabetisk retinopati og mavesår.
Det tilsigtes således med den foreliggende opfindelse at tilvejebringe cycliske hexapeptider, som er analoge 5 med somatostatin. Forbindelserne er som nævnt egnede til behandling af akromegali, diabetisk retinopati og mavesår .
Dansk patentansøgning nr. 4284/78 omhandler en fremgangsmåde til fremstilling af somatostatinanaloge cyclopeptider 10 med formlen LR-phe-Phe-Trp-Lys-Thr-Phe(w)-X—Y J 5 6 7 8 9 10 11 12 13 hvor R betyder Asn, Ala eller des-R, Trp betyder D-Trp eller L-Trp, som i benzenringen kan være substitueret med 15 et halogenatom eller en nitrogruppe, w betyder hydrogen eller i benzenringen i L-phenylalanylgruppen som substituent tilstedeværende eventuelt forethret hydroxyl eller halogen, X betyder entv-aminoalkan-(mono- eller di-)car-boxylsyrerest eller des-X, og Y betyder en(v-aminoalkan-20 (mono- eller di-)carboxylsyrerest eller des-Y. Disse forbindelser kræver mindst én sammenkædende gruppe (X eller Y), medens de ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen fremstillede forbindelser udgøres af cycliske 6-leddede amino-syrekæder, hvor ringen dannes ved direkte binding af ende-25 aminosyrerne i den tilsvarende ligekædede forbindelse.
De ved den kendte fremgangsmåde fremstillede forbindelser har imidlertid, som det fremgår af det følgende, en ringere virkning.
Fremgangsmåden ifølge opfindelsen er af den i krav l's
DK 152505B
3 indledning angivne art, og den er ejendommelig ved det i krav l's kendetegnende del anførte.
De ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen fremstillede forbindelser har den i krav 1 angivne almene formel I, 5 hvori 1 2 R og R uafhængigt af hinanden betegner alkyl med 2-5 carbonatomer bortset fra sec.butyl, benzyl, substitueret benzyl, hvori substituenten kan være en eller to af grupperne alkyl med 1-5 carbonatomer, halogen, hydroxy, amino, 10 nitro eller alkoxy med 1-5 carbonatomer, eller betegner alkyl med 1-5 carbonatomer substitueret med en 5- eller 6-leddet heterocyclisk ring med 1 eller 2 heteroatomer valgt blandt oxygen, nitrogen og svovl, 3 R er 3-indolylmethyl eller 3-indolylmethyl substitueret 15 én gang med alkyl med 1-5 carbonatomer, alkoxy med 2-5 carbonatomer eller halogen, R^ er alkyl med 1-5 carbonatomer, hydroxyalkyl med 1-5 carbonatomer, benzyl, carboxyalkyl med en alkylgruppe med 1-5 carbonatomer, aminoalkyl med 1-5 carbonatomer 20 eller én gang substitueret benzyl, hvori substituenten kan være alkyl med 1-5 carbonatomer, alkoxy med 1-5 carbonatomer, hydroxy, halogen, amino eller nitro, 5 , R er alkyl med 1-5 carbonatomer, benzyl eller en gang substitueret benzyl, hvor substituenten er alkyl med 1-5 25 carbonatomer, alkoxy med 1-5 carbonatomer, hydroxy, halogen, amino eller nitro, g R er methyl, eller 5 6 R og R sammen danner gruppen -CI^-X-CH.^-, hvor
DK 152505 B
4 X er r hvor n er 0, 1 eller 2, eller svovl, Y er (CH9) , hvor m er 0 eller 2, eller svovl, Δ* lu hvor de indgående aminosyrer kan have D- eller L-konfigu-ration.
5 Den 5- eller 6-leddede heterocycliske ring kan således f.eks. være imidazol, furan, thiazol, pyrazol eller pyri-din.
I de omhandlede forbindelser er der flere asymmetriske centre, som fører til forekomsten af optiske isomere for 10 sådanne forbindelser. Den foreliggende opfindelse omfatter såvel D- som L-konfigurationerne for hvert enkelt asymmetrisk centrum i de forskellige aminosyrer, som udgør de omhandlede cycliske hexapeptider.
1 2
Det vil forstås af fagmanden, at når R og R er benzyl, 3 4 15 R er indolylmethy1, Y er methylen, og R er 1-hydroxy- ethyl, er der tale om 7,8,9,10 og 11-aminosyrer af somatostatin (-Phe-Trp-Lys-Thr-Phe-), og den sekundære amino- 5 syre præsenteret ved N-methylalanin, når R er methyl, . og ved prolin, når X er methylen i en forbindelse med 20 formlen I, har erstattet resten af somatostatin- aminosyrerne. Under anvendelse af de i det foregående angivne definitioner for substituenterne dannes således følgende repræsentative cycliske hexapeptid, der er analogt med somatostatin og har formlen I: 25 N-Me-Ala-Phe-Trp i i
Phe-Thr-Lys
Foretrukne cycliske hexapeptider har formlen I, hvori Y er CH2, 5
DK 1S2505B
1 2 R og R har den i det foregående angivne betydning, 3 R er 3-indolylmethyl eller substitueret indolylmethyl, hvori substituenten er methoxy eller fluor, 4 5 R er methyl, ethyl, hydroxymethyl eller hydroxyethyl, og 5 R er methyl.
Andre foretrukne forbindelser er sådanne, hvori Y er methylen, 1 2 10 R og R har den i det foregående angivne betydning, 3 R er indolylmethyl, R4 er hydroxyethyl, og 5 R er methyl.
1 „2
De foretrukne betydninger for grupperne R og R er 15 alkyl, benzyl eller substitueret benzyl, hvor substituenten er alkyl, halogén, hydroxy, amino nitro eller alkoxy.
Under anvendelse af de i det foregående angivne definitioner for substituentgrupperne dannes følgende repræ-2o sentative cycliske hexapeptid, der er analogt med somatostatin og har formlen:
Pro-Phe-Trp
I I
Phe-Thr-Lys
De foretrukne cycliske hexapeptider med denne formel er sådanne, hvori X og Y er CH^
DK 152505B
6 1 2 R og R er som defineret i det foregående, r^ er 3-indolylmethyl eller substitueret indolylmethyl, hvori substituenten er methoxy eller fluor, og 4 5 R er methyl, ethyl, hydroxymethyl eller hydroxyethyl.
Yderligere foretrukne forbindelser er sådanne, hvori X og Y er methylen, 1 2 R og R er som defineret i det foregående, 3 R er 3-indolylmethyl, og 4 10 R er hydroxyethyl.
1 2
De foretrukne betydninger for grupperne R og R er alkyl, benzyl eller substitueret benzyl, hvor substitu-enten er alkyl, halogen, hydroxy, amino, nitro eller -alkoxy.
15 Blandt disse foretrukne forbindelser kan nævnes:
Cyclo-(Pro-Tyr-D-Trp-Lys-Thr-Phe)
Cyclo-(Pro-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Phe)
Cyclo-(Pro-Phe-L-Trp-Lys-Thr-Phe)
Cyclo-(Pro-Phe-D-Trp-Lys-Thr-p-Cl-Phe) 20 Cyclo-(Pro-Phe-D-5-F-Trp-Lys-Thr-Phe)
Cyclo-(Pro-Phe-L-5-F-Trp-Lys-Thr-Phe)
Cyclo-(Pro-Phe-D-Trp-Lys-Ser-Phe) I den foreliggende opfindelse er der anvendt adskillige forkortede betegnelser for aminosyrekomponenterne, visse 25 foretrukne beskyttelsesgrupper, reagenser og opløsningsmidler. Betydningerne af sådanne forkortelser er angivet i den efterfølgende tabel.
DK 152505 B
7
TABEL I
Forkortelse Aminosyre
Lys L-lysin
Phe L-phenylalanin 5 Trp L-tryptophan D-Trp D-tryptophan
Thr L-threonin
Aha 7-aminoheptansyre
Tyr L-tyrosin 10 Val L-valin
Abu L-ct-aminosmørsyre
Ser L-serin
Asn L-asparagin
Pro L-prolin 15 Asu D- eller L-aminosuberinsyre
Cys L-cystein
Beskyttelsesgrupper INOC isonicotinyloxycarbonyl BOC tert.-butyloxycarbonyl 20 OMe methylester
Bu tert.-butyl CBZ benzyloxycarbonyl
Bzl benzyl 2-C1-CBZ 2-chlorbenzyloxycarbonyl 25 Acm acetamidomethyl
Me methyl
Aktiveringsgrupper ONp p-nitrophenylester HSE N-hydroxysuccinimidester 30 HBT 1-hydroxybenzotriazol
Kondensationsmiddel DCCI dichlorhexylcarbodiimid
Reagenser TFA trifluoreddikesyre 35 TEA triethylamin DIPEA diisopropylethylamin
Opløsningsmidler EPAW ethylacetat/pyridin/eddikesyre/vand BAW butanol/eddikesyre/vand 40 CMW chloroform/methanol/vand DMF dimethylformamid THF tetrahydrofuran
DK 152505 B
8
Udvalgte forbindelser blev undersøgt tyndtlagschromato-grafisk og udviste følgende R^-værdier i de anførte opløsningsmidler. Alle chromatogrammer blev opnået på What-man-silicagelplader til tyndtlagschromatografi.
5 Opløsnings-
Rj middel *) C-(Pro-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Phe) 0,65 2 C-(Pro-Tyr-D-Trp-Lys-Thr-Phe) 0,30 1 C-(Pro-Phe-L-Trp-Lys-Thr-Phe) 0,30 1 10 C-(Pro-Phe-D-Trp-Lys-Thr-p-Cl-Phe) 0,64 2 0,43 4 C-(Pro-Phe-D-5-F-Trp-Lys-Thr-Phe) 0,40 1 C-(Pro-Phe-L-5-F-Trp-Lys-Thr-Phe) 0,30 1 C-(Pro-Phe-D-Trp-Lys-Val-Phe) 0,50 1 15 C-(N-Me-Ala-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Phe) 0,44 2 C-(N-Me-Ala-Tyr-D-Trp-Lys-Val-Phe) 0,50 1 C-(N-Me-Abu-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Phe) 0,46 3 C-(N-Me-Phe-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Phe) 0,50 1 C-(N-Me-Ala-Tyr-L-Trp-Lys-Val-Phe) 0,50 1 20 C-(N-Me-Ala-21-Phe-D-Trp-Lys-
Val-L-Trp) 0,45 1 C-(pro-Phe-D-Trp-Thia-Lys-Thr-phe) 0,50 1 C-(Pro-L-meta-Tyr-D-Trp-Lys-
Thr-Phe) 0,25 1 *) 25 1): 70 dele chloroform, 30 dele methanol og 3 dele kon centreret vandig ammoniak.
2) : 70 dele chlorform, 30 dele methanol og 5 déle kon centreret vandig ammoniak.
3) : 80 dele chloroform, 25 dele methanol og 5 dele kon- 30 centreret vandig ammoniak.
4) : 10 dele ethylacetat, 5 dele pyridin, 1 del eddike syre og 3 dele vand.
Alle dele er volumendele.
DK 152505B
9
Aminosyreanalyse og undersøgelse for optisk rotation for udvalgte forbindelser gav følgende resultater.
1) Cycle(Pro-Ph«-D-Trp-Ly»-Tbr-Phe)
Pro(0,97), Ph*(2,04), Trp(0,97), Ly»(0,99), Thr(l,03) j^^24-23;6· (Cl, eethenol) 2) Cyclo(Pro-Tyr-D-Trp«*Ly*-Thr-Phc)
Pro(0,97). Tyr(0,96), Ly»(l,00), Tbr(l,03), Ph*(l/01) 3) Cyclo(Pro-Ph«-l-Trp-Ly*-Thr-Ph·)
Pro(l,00), Ph* (2,02), Ly» (0 j 98) , Thr(l,00) 4) Cyclo(Pro-Phe-D-Trp-Ly*-Thr-pCl-Ph·)
Pro(0,98), Ph«(l,00), Trp(l,00, Ly»(l,01), Thr(lr00) p-Cl-Ph«(1,00) 5) Cyclo(Pro-Ph*-D-5-F-Trp-Ly*-Thr-Pbe)
Pro(0,97), Ph«(2,02)-5-F-Trp(l,01), Ly»(0,98), Thrd^Ol) 6) Cyclo(?ro-Ph«-l-5-F-Trp-Ly*-Thr-Ph·)
Pro(0,97) , Ph*(2,04),-5-F-Trp(1,01), Ly»(0,99), Thr(l,00) 7) Cyclo(Pro-Ph*-D-Trp-Ly*-V»l-Ph*)
Pro(l,02). Ph*(l,98), Trp(0,74). Ly*(0,99), Vold,02) 8) Cyclo(N-M«-Al»-Ph«-D-Trp-Ly»-Thr-Ph·)
Phe(l,98), Trp(l,04), ly»(l,01), Thr(0,98) j j‘4-65,34 (CO.4, acthanol) 9) Cyclo(N-M*-Ala-Tyr-D-Trp-Ly» - Val-Ph·)
Tyr(0,99), Trp(0,75), Ly»(l,01), Val(l,00), Ph«(l,01) 10) Cyclo(N-M«-Abu-Ph*-D-Trp-Ly»-Thr-Ph·)
Ph«(l,98), Trp(0,98), Lyid.,01), Thr(l,03) 11) Cyclo(K-M«-Ph*-Ph*-D-Trp-Ly*-Thr-Ph·)
Trp(0,89), ly* (1,00). Thr(l,00), Ph«(l,99) 12) Cyclo(N-Me-Al»-Tyr-l-Trp-Ly«-V*l-Ph«)
Tyr(0,99). Ly»(l,02), V.l(l,01), Ph«(0,99) 13) Cyclo(K-M*-Alt-2I-Ph*-D-Trp-Ly»-V»l-L-Trp)
Ph*(0,87), Trp(l,68), Ly*(l,00), V»l(0,97) 14) Cyclo(Pro-Ph«-D-Trp-Thi»-iy§-Thr-Pb·)
Prod,02), Pht(l,97), Trp(l,01), Thi»-Ly*(0,99), Tbr(l,01) j j24-112,8 (CO.5, aethanol) 15) Cyclo(Pro-L-»rta-Tyr-D-Trp-Ly*-Thr-Ph·)
Pro(0/98), L-ac«:*-Tyrd,02), Trp(0,74), Iy*(0,99), Thr(0y99). Ph«(1^01).
DK 152505 B
10
De omhandlede cycliske hexapeptider, der er analoge med somatostatin, fremstilles som sagt ved at ringslutte de tilsvarende lineære peptider. De lineære peptider fremstilles ved anvendelse af fastfase-sekvenssyntesemetoden.
5 Følgelig omfatter fremgangsmåden til fremstilling af de cycliske hexapeptider (a) fremstilling af et tilsvarende blokeret lineært peptid knyttet til en fastfaseharpiks, (b) selektiv afblokering af N-terminalamingruppen, 10 (c) fjernelse af det lineære peptid fra harpiksen, (d) behandling af de lineære peptidmed et ringslutningsmiddel til opnåelse af det cycliske hexa-peptid ved dannelse af en amidbinding, (e) fjernelse af enhver sidekæde-blokeringsgruppe.
15 Når det lineære peptid fremstilles på harpiksen, er det sædvanligvis ikke kritisk, hvilken aminosyre der vælges som C-terminalstillingsgruppe, forudsat at rækkefølgen af aminosyrer i det lineære peptid svarer til den ønskede i det cycliske peptid. Når et lineært pep-20 tid erblevet ringsluttet, kan man ikke længere bestemme, hvilken aminosyre der var afsluttende i det lineære peptid.
Skønt valget af den første aminosyre til at starte kæden er almindeligvis ikke kritisk, da det lineære 25 peptid skal ringsluttes, kan der være andre faktorer, som kan gøre det foretrukkent at starte med en aminosyre frem for en anden. For eksempel kan D-Trp reagere med t-butylcarboniumioner, som dannes, når BOC-grupper fjernes. Hvis man således vælger en reaktions-30 sekvens, hvor D-Trp placeres ved den N-terminale ende
DK 152505B
11 af det lineære peptid, vil det bevirke, at D-Trp tilsættes sidst, og det vil således i mindst mulig grad blive udsat for påvirkningen af t-butylcarboniumioner. Denne type valg er ikke altid mulig, såsom hvor der er to indolholdige 5 grupper i peptidet. Man bør imidlertid ved planlægningen af reaktionssekvensen tage hensyn til de forskellige stoffers følsomhed.
Syntesen af de lineære peptider ved fastfaseteknikken udføres trinvis i chlormethyleret harpiks. Harpiksen 10 er sammensat af fine perler (20 - 70 mikron i diameter) af en syntetisk harpiks fremstillet ved copolymerisation af styren og 1 - 2 pct. divinylbenzen. Benzenringene i harpiksen chlormethyleres ved en Friedel-Craft-reaktion med chlormethy1-methylether og stannichlorid. Friedel-15 Craft-reaktionen fortsættes, indtil harpiksen indeholder 0,5-5 mmol chlor pr. gram harpiks.
Den aminosyre, der er valgt som den C-terminale aminosyre i det lineære peptid, overføres i sit aminobeskyt-tede derivat. Carboxylgruppen i den valgte C-terminale 20 aminosyre bindes covalent til den uopløselige polymere harpiksbærer, som f.eks. som carboxylsyreesteren af det harpiksbundne benzylchlorid, der er til stede i chlormethy1-substitueret polystyren/divinylbenzen-har-piks. Efter fjernelse af aminobeskyttelsesgruppen til-25 sættes det aminobeskyttende derivat af den næste aminosyre i rækkefølgen sammen med et koblingsmiddel, såsom dichlorhexylcarbodiimid. Aminosyre-reaktanten kan anvendes i form af en carboxyl-aktiveret aminosyre, såsom ONp-esteren, et aminosyreazid eller lignende. Afbeskyt-30 telse og tilsætning af successive aminosyrer foretages, indtil det ønskede lineære peptid er dannet. Valget af beskyttelsesgrupperne er dels dikteret af de særlige koblingsbetingelser, dels af aminosyren og de indgående peptidkomponenter i reaktionen.
35 Amino-beskyttelsesgrupper, der sædvanligvis anvendes,
DK 152505B
12 omfatter de i teknikken velkendte, f.eks. urethan-be-skyttende substituenter, såsom benzyloxycarbonyl (carbo-benzoxy), p-methoxycarbobenzoxy, p-nitrocarbobenzoxy og t-butyloxycarbonyl. Det foretrækkes at anvende t-5 butyloxycarbonyl (BOC) til beskyttelse af ct-aminogrup-pen i de aminosyrer, der undergår reaktion ved carb-oxylenden af aminosyren. BOC-beskyttelsesgrupperne fjernes let efter en sådan koblingsreaktion og før det følgende trin ved den forholdsvis lille påvirkning af * 10 syrerne (dvs. trifluoreddikesyre eller hydrogenchlo-rid i ethylacetat).
OH-gruppen i Thr og Ser kan beskyttes med Bzl-gruppen, og €-aminogruppen i Lys kan beskyttes med INOC-gruppen i 2-chlorbenzyloxycarbonylgruppen (2-C1-CBZ). I til-15 fældet med Lys foretrækkes det, at 6-aminogruppen med 2-Cl-CBZ-gruppen som denne gruppe fjernes samtidig med Bzl-grupperne ved behandling med HF efter ringslutning af det lineære peptid. INOC-grupperne fjernes ikke af HF, men kræver en yderligere behandling 20 med Zn. Ingen af grupperne påvirkes af TFA, der anvendes til fjernelse af BOC-beskyttelsesgrupper. Efter ringslutning af det lineære peptid fjernes beskyttelsesgrupperne, såsom 2-C1-CBZ og Bzl,ved behandling med HF.
25 Efter dannelsen af det lineære peptid på den faste harpiks kan det fjernes fra denne på en række forskellige måder, der er kendte i teknikken. Peptidet kan for eksempel spaltes fra harpiksen med hydrazin, hvorved der direkte dannes peptid-hydrazidet, som kan ring-30 sluttes derefter via azidet til det ønskede cycliske peptid. Hydrazidet overføres til det tilsvarende azid ved påvirkning med et reagens, som giver salpetersyrling in situ. Egnede reagenser til dette formål omfatter et lavere alkylnitrit (f.eks. t-butylnitrit, isoamylnitrit) 35 eller et alkalimetalnitritsalt (f.eks. natriumnitrit,
DK 152505 B
13 kaliumnitrit) i nærværelse af en stærk syre, såsom saltsyre eller phosphorsyre. Denne reaktion udføres i nærværelse af enten vand og/eller et ikke-vandigt opløsningsmiddel, såsom dimethylformamid, tetrahydrofuran, 5 dioxan, chloroform eller methylenchlorid, ved en temperatur på mellem cirka -40°C og 20°C. Alternativt kan peptidet fjernes fra harpiksen ved behandling med en lavere alkohol, såsom methanol, i nærværelse af en organisk base, såsom triethylamin, hvilket således resul-10 terer i dannelsen af den tilsvarende lavere alkoholester af det lineære peptid. Den resulterende ester kan overføres til hydrazidet, som derpå kan ringsluttes, via azidet, til det ønskede cycliske peptid. Den foretrukne metode til spaltning af peptidet fra harpiksen er an-15 vendeisen af hydrazin.
Som det vil fremgå af den efterfølgende tabel II, involverer en foretrukken totalproces til fremstilling af de ønskede cycliske peptider trinvis syntese af det lineære peptid på en harpiks på fast fase. Ved fremstillingen 20 af N-Me-Ala-Phe-D-Trp eller Pro-Phe-D-Trp Phe-Thr---L^s påe-Thr---Lys bindes carboxylenden af den N-blokerede aminosyre phenylalanin covalent til den uopløselige polymere 25 harpiksbærer som carboxylsyreesteren af det harpiks-bundne benzylchlorid. Aminogruppen i Phe er beskyttet med BOC-gruppen. Efter fuldendt tilknytning af Phe til harpiksen fjernes BOC-beskyttelsesgruppen med TFA i CH2C12. De efterfølgende aminosyrer tilknyttes, i 30 form af BOC-aminosyre, idet man anvender DCCI som kondensationsmiddel eller en aktiv ester, såsom ONp. Efter fremstillingen af det ønskede lineære peptid afblokeres N-terminal-aminogruppen selektivt, og peptidet fjernes fra harpiksen ved behandling med hydrazin.
35 Det resulterende lineære peptid-hydrazid, hvor den N-
DK 152505 B
14 terminale aminogruppe er afblokeret, og som har amino-syresekvensen: OBzl i D-Trp-Lys-Thr-Phe-N-Me-Ala-Phe-NHN^
5 2-C1CBZ
eller OBzl D-Trp-Lys-Thr-Phe-Pro-Phe-NHNH2
2-C1CBZ
10 behandles med isoamylnitrit ved surt pH til dannelse af det tilsvarende azid. Azidopløsningen fortyndes med opløsningsmiddel og neutraliseres med en organisk base.
Det lineære peptid ringslutter til dannelse af: OBzl 15 Cyclo-(D-Trp-Lys-Thr-Phe-N-Me-Ala-Phe)
2-C1CBZ
OBzl
Cyclo-(D-Trp-Lys-Thr-Phe-Pro-Phe)
2-C1CBZ
20 Under ringslutningen kontrolleres pH, og surhedsgraden holdes neutral ved tilsætning af organisk base. pH i organisk opløsningsmiddel bestemmes ved påføring af en del af opløsningen på fugtet pH-papir med et snævert måleområde.
25 Efter ringslutning af det lineære peptid fjernes beskyttelsesgrupperne 2-C1-CBZ og OBzl ved behandling med HF i nærværelse af anisol. Det rå cycliske peptid, der opnås, renses ved chromatografi, foretrukkent søjlechro-matografi på silicagel. Elueringsmidlet er almindelig- 30 vis et organisk opløsningsmiddel eller blandinger af sådanne, som vælges ved at analysere portioner af materi-
DK 152505 B
15 alet under anvendelse af tyndtlagschroxnatografi.
TABEL II
Reaktionsskemaet til fremstilling af to af de omhandlede cycliske hexapeptider er skitseret ved hjælp af 5 følgende reaktionsrække:
Reaktionsskema for fremstilling af:
N-Me-Ala-Phe-D-Trp I I
Phe-Thr---Lys
Cl-CH20-harpiks 10 BOC-Phe
V
BOC-Phe-0-CH20-harpiks
Fastfasernetode 1) BOC-N-Me-Ala 2) BOC-Phe 15 3) BOC-(OBZl)Thr 4) BOC-(6-2-C1-CBZ)Lys * 5) BOC-D-Trp BOC-D-Trp(6-2-C1-CBZ)Lys-(OBZl)Thr-Phe-N-Me-Ala-Phe-OCH20-harpiks
20 TFA
V
D-Trp- (É-2-C1-CBZ) Lys- (OBZl)Thr-Phe-N-Me-Ala-Phe-0-CH20-harpiks J, ™2NH2
D-Trp-(e-2-Cl-CBZ)Lys-(OBZl)Thr-Phe-N-Me-Ala-Phe-NHNH2 25 isoamylnitrit, H+, DMF
16
DK 152505 B
TABEL II (forts.) D-Trp-(e-2-Cl-CBZ)Lys-(OBZ1)Thr-Phe-N-Me-Ala-Phe-N3 DMF/triethylamin v
Cyclo(D-Trp-(&-2-C1-CBZ)Lys-(OBZ1)Thr-Phe-N-Me-Ala-Phe) 5 HF/anisol
Cyclo-(D-Trp-Lys-Thr-Phe-N-Me-Ala-Phe)
Reaktionsskema for forfremstilling af:
Pro-Phe-D-Trp I \
Phe-Thr---Lys 10 Cl-CH20-harpiks BOC-Phe i B0C-Phe-0-CH20-harpiks
Fastfasemetode 1) BOC-Pro 15 2) BOC-Phe 3) BOC-(OBZl)Thr 4) BOC-(G—2-C1-CBZ)Lys Ί 5) BOC-D-Trp BOC-D-Trp(6-2-C1-CBZ)Lys-(OBZ1)Thr-Phe-Pro-Phe-OCI^Ø-harpiks
20 TFA
V
D-Trp- (6 -2-C1-CBZ) Lys-) OBZ1) Thr-Phe-Pro-Phe-O-C^Ø-harpiks NH0NH0 i / £ Δ D-Trp-(6-2-C1-CBZ)Lys-(OBZ1)Thr-Phe-Pro-Phe-NHNEL· + z
isoamylnitrit, H , DMF
\i
DK 152505B
17 D-Trp-(6 - 2-C1-CBZ)Lys-(OBZ1)Thr-Phe-Pro-Phe-N3 DMF/triethylamin
V
Cyclo(D-Trp-(6-2-C1-CBZ)Lys-(0BZ1)Thr-Phe-Pro-Phe) HF/anisol Ψ 5 Cyclo-(D-Trp-Lys-Thr-Phe-Pro-Phe)
De efterfølgende eksempler forklarer opfindelsen nærmere.
EKSEMPEL 1 D-Trp-^_-22Cl-CBZ2Lys-_(OBZl)_Thr-Phe-Pro-Phe-OCH20-harpiks
Chlormethylharpiks (2% tørbundet Merrifield resin), 862,0 10 g (2,37 mol) med 2,75 milliækvivalenter chlor pr. gram og 607,0 g (2,37 mol, 1 ækvivalent) BOC-Phe blev sat til 4320 ml peroxidfri tetrahydrofuran. Blandingen blev omrørt i et oliebad ved 80°C i 45 minutter. Triethylamin, 310,0 ml, blev tilsat, og reaktionsblandingen blev om-15 rørt ved 80°C som badtemperatur i 70 timer, afkølet til 25°C og overført til en fastfase-reaktionssøjle med 2000 ml tetrahydrofuran. Efter fjernelse af opløsningsmidlet blev harpiksen vasket under anvendelse af den omrørte søjle med: 20 3 x 2000 ml tetrahydrofuran 3 x 5170 ml ethanol 1 x 5170 ml eddikesyre 3 x 5170 ml vand 3 x 5170 ml ethanol 25 3 x 5170 ml chloroform BOC-Phe-O-Ci^Ø-harpiksen blev tørret i vakuum ved 25°C i 16 timer, hvilket gav 1293 g BOC-Phe-O-CI^Ø-harpiks indeholdende 1,2 mmol phenylalanin g harpiks.
BOC-Phe-0-CH20-harpiks (2,13 g, 2,0 mmol) blev underka-
DK 152505 B
18 kastet procedurerne i tabel III og IV under anvendelse af to afblokeringer (2 minutter og 25 minutter) med 25% TFA i methylenchlorid og 2,5 ækvivalenter BOC-aminosyre i den påkrævede rækkefølge, indtil den ønskede BOC-hexa-5 peptid-O-CI^Ø-harpiks var opnået.
DCCI blev anvendt som det eneste koblingsmiddel i hver reaktion.
Koblingen af hver aminosyre gik let. De bedste udbytter blev opnået, når koblingen blev gentaget i hvert 10 trin. Når koblingen blev gentaget, blev de initiale to chloroform-vaskevæsker, afblokeringstrinnet og de efterfølgende tre gange vask med chloroform alle udeladt og erstattet meden enkelt vask med chloroform.
Koblingsreaktionerne blev udført i methylenchlorid, 15 frisk afgasset DMF eller en blanding af disse to opløsningsmidler. Den N-terminale aminogruppe blev blokeret med en BOC-gruppe i hvert tilfælde. Hydroxylgruppen i Thr blev blokeret med Bzl og £-aminogruppen i Lys med 2-C1-CBZ.
20 Når den ønskede BOC-hexapeptid-O-CI^Ø-harpiks var opnået, blev den N-terminale BOC-gruppe fjernet ved den terminale afblokeringsprocedure, der fremgår af tabel V.
DK 152505 B
19 i—I rH rH rH CNJ^
ΓΟ O CM
8d ^
SIS SS
o H ro U cm _ U H tp Q U g
SK q m H
in u Ηi Æ
* Q
o -Η M
G
(1) •Η · B1 9> cm H S tn <ί Η Η ·Π & i< o Dfl S m m
CM g Λ CM
8 S ii h ly m Sil co co
CM
COH
HU OOI
U cm •sp æ κ H u u
H
H
J
ω i cm-' m S co—I cn — 5 +> O ·· m o tn
< H oH ^ "sf O
h gm- o m ro H *—> y co o a <| cm in
[il H CM
HU - O _ CM CM N bi
# M ^ O
ιηϋ cm
CM -H
ro !—I >---- U cm o in tti '-r ^
U
jgu
g ® ^ S
y ^ § h · w a) i © g
1*% t I
HH - tn
R (D Η H jp H -H
cn h cd αί > -Q. Η .u t n · _ rt® S58 S 3
O ^ Η Ό > H
DK 152505 B
20
TABEL IV
Beskyttet aminosyre Opløsningsmiddel, ml BOC-N-Me-Ala (1,08 g) 20 ml CH2C12 5 Afkobling BOC-Phe (1,32 g) 20 ml CH2C12
Afkobling BOC (OBzL)Thr (1,55 g) 20 ml CH2Cl2
Afkobling 10 BOC-(e-2-Cl-CBZ)Lys (2,24 g) 20 ml CH2C12
Afkobling
BOC-D-Trp (1,52 g) 15 ml CH2C12, 5 ml DMF
Afkobling
II
15 BOC-Pro (1,80 g) 25 ml CH2C12
Afkobling BOC-Phe (1,32 g) 25 ml CH2C12
Afkobling BOC (OBZ)Thr (1,55 g) 25 ml CH2Cl2 20 Afkobling BOC-(0-2-C1-CBZ)Lys (2,24 g) 25 ml CH2C12
Afkobling
BOC-D-Trp (1,52 g) 20 ml CH2C12, 5 ml DMF
Afkobling
25 TABEL V
Cpløsningsmiddel CHCU (1) 25% TFA i CHCL, MeOH (2) eller reagens CH2C12 + 1% CH2C12 (1) (antal behand- Ethandithiol MeOH (2) linger, herun- (2) (3) CH2C12 (2) 30 der vask)
Vol. i ml 40 40 40 40
Tid i min. 5 2 og 25 2 2
DK 152505B
21
Efter udførelse af de i tabel III, IV og V angivne procedurer tørres den blokerede hexapeptid-OCH^Ø-harpiks natten over og vejer 3,7 g.
EKSEMPEL 2 5 )_L^s-_(OBZl)_Thr-Phe-N-Me-Ala-Phe-NHNH2
Den i eksempel 1 opnåede harpiks kombineres med 30 ml af en 2:1 blanding af dimethylacetamid og hydrazin og omrøres ved stuetemperatur i 1 time. Den uopløselige harpiks fjernes ved filtrering, og opløsningen inddampes til 10 fjernelse af dimethylacetamidet. Harpiksen anbringes under højvakuum natten over til fjernelse af alle flygtige materialer. Der dannes et skum ved opløsning af resten i alkohol, filtrering og inddampning til tørhed, hvilket giver 2,19 g.
15 EKSEMPEL 3
Dl^Eli^-Cl-CBZ.JiLysMOBZlXThr-Phe-N-Me-Ala^Phe-^
Skummet fra eksempel 2 kombineres med 15 ml afgasset di-methylformamid under et tæppe af nitrogen og afkøles til -10°C, hvorpå 5 ækvivalenter 4,52 M hydrogenchlorid i 20 tetrahydrofuran (2,2 ml) tilsættes. Opløsningen afkøles til -25°C, og 5 ml af en 1:19 blanding af isoamylnitrit og dimethylformamid tilsættes portionsvis, indtil der opnås en positiv prøve for stivelse med Kl. Fuldendelse af reaktionen følges ved tyndtlagschromatografi og opbrug 25 af hydrazid-udgangsmaterialet.
EKSEMPEL 4 9Y5l2liDlSiPli^l2lCl-CBZ2LyS“_(OBZl)_Thr-Phe-N-Me-Ala-Phe
Azidforbindelsen fra eksempel 3 sættes til 600 ml afgas-set dimethylformamid, forkølet til -25°C, pH indstilles 30 på 8 med triethylamin, og reaktionsblandingen anbringes i en fryser natten over. pH genindstilles til 8, om nødvendigt, efter cirka 14 timers forløb, og blandingen op-
DK 152505 B
22 bevares i 16 timer ved -20°C og 16 timer ved 5°C. Tyndt-lagschromatografi indikerer, at reaktionen er fuldstændig. Blandingen koncentreres til tørhed, opløses i 150 ml 3:1 dimethylformamid/vand-blanding og behandles med et blan-5 det leje af anion/kation-ionbytterharpiks i 1 time.
Blandingen filtreres og koncentreres til tørhed i vakuum til en olie, og resten tritureres ved methanol, hvilket giver 1,91 g hvidt fast stof.
EKSEMPEL 5 10 Cyclo-^D-Trp-Lys-Thr-Phe-N“Me-Ala-Phe)_ 1,91 g (1,8 mmol) af det beskyttede cycliske hexapeptid fra eksempel 4 kombineres i et teflonforet kammer med 2 ml anisol. Kammeret evakueres derpå og fyldes med flydende hydrogenfluorid ved temperaturen for et bad med 15 tøris og acetone. Temperaturen forøges til 0°C, og der omrøres fortsat i 1 time. Hydrogenfluoridet får lov at afdampe, og resten anbringes i vakuum, indtil der er dannet en opslæmning. Opslæmningen tritureres med ethylace-tat og filtreres, hvilket giver 1,29 g af et fint pulver.
20 Pulveret anbringes på 300 g silicagel og elueres med en 10:5:1:3 blanding af EPAW, idet der elueres med fraktioner på 9 ml. Fraktionerne 55-66 kombineres og koncentreres. Produktet udfældes fra en blanding af chloroform, ethylacetatoghexan, hvilket giver 679 mg.
25 EKSEMPEL 6 2lT£Ellt=2-Cl-CBZXLys-^OBZlXThr-Phe-Pro-Phe-NHNH2
Harpiksen fra eksempel 1 kombineres med 30 ml af en 2:1 blanding af dimethylacetamid og hydrazin, og der omrøres ved stuetemperatur i 1 time. Den uopløselige harpiks 30 fjernes ved filtrering, og opløsningen inddampes til fjernelse af dimethylacetamid. Resten anbringes under højvakuum natten over til fjernelse af alt flygtigt materiale. Ved opløsning af resten i methanol, filtrering og inddampning til tørhed opnås et skum, der vejer 1,84 g.
DK 152505B
23 EKSEMPEL 7
Pz?rEliéz2-Cl;CBZ)_LYS-_(OBZl)_Thr-Phe-Pro-Phe-N2
Skummet fra eksempel 2 kombineres med 15 ml afgasset dimethyl formamid under et tæppe af nitrogen og afkøles til 5 -10°C, og 5 ækvivalenter 5,8 M hydrogenchlorid i tetra- hydrofuran (1,7 ml) tilsættes. Opløsningen afkøles til -25°C, og 5 ml af en 1:19 blanding af isoamylnitrit og dimethylfomamid tilsættes. Fuldendelse af reaktionen følges ved tyndtlagschromatografi og opbruget af hydra-10 zid-udgangsmaterialet.
EKSEMPEL 8 CYclo_(D-Trp-_(^-2-Cl-CBZ^Lys-_(OBZl)_Thr-Phe-Pro-Phe)_
Azidforbindelsen fra eksempel 3 sættes til 600 ml afgasset dimethylfomamid, forkølet til -25°C, pH indstilles 15 til 8, og reaktionsblandingen anbringes i en fryser natten over. pH genindstilles til 8, om nødvendigt, efter cirka 14 timers forløb, og blandingen opbevares i 16 timer ved -20°C og 16 timer ved 5°C. Tyndtlagskromatogra-fi indikerer, at reaktionen er fuldstændig. Blan-20 dingen koncentreres til tørhed, opløses i 150 ml 3:1 dimethylf ormamid/vand-blanding og behandles med en anion/ka-tion-ionbytterharpiks i blandet leje i 2 timer. Blandingen filtreres og koncentreres til tørhed i vakuum, og resten opløses i methanol, filtreres og inddampes til 25 tørhed, hvilket giver et skum.
EKSEMPEL 9 iYEiEriDzilEZi'XSzihr-Phe^Pro^Phel 2,13 g (2 mmol) af det beskyttede cycliske hexapeptid fra eksempel 4 kombineres i et teflonforet kammer med 2 30 ml anisol. Kammeret, evakueres derpå og fyldes med flydende hydrogenfluorid ved den temperatur, der opnås med et bad af tøris og acetone. Temperaturen forøges til 0°C, og der omrøres endnu 1 time. Hydrogenfluoridet får lov at afdampe, og resten anbringes i vakuum, indtil 35 der er dannet en opslæmning. Opslæmningen behandles
DK 152505 B
24 med ethylacetat og filtreres, hvilket giver 1,19 g af et fint pulver. 300 mg af dette pulver anbringes på en 1000 μ silicagelplade til præparativ tyndlagschromatogra-fi og elueres med en 70:30:5 blanding af chloroform, 5 methanol og koncentreret vandig ammoniak, hvilket giver 200 mg produkt. Resten af det rå produkt anbringes på en silicagels.øjle og elueres med samme opløsningsmiddel. Tilstedeværelsen af produktet i eluenten bestemmes ved tyndtlagschromatografisk analyse, og efter fry-10 setørring opnås cirka 500 mg produkt.
De omhandlede cycliske hexapeptider, der er analoge med somatostatin, afprøves og sammenlignes i henseende til virkninger med somatostatin ved et forsøg in vitro for inhibering af vasks thormon. Forsøget beskrives i det 15 følgende:
Rotteslimafsondringer blev isoleret efter den procedure, der er beskrevet af Vale og Grant i "In vitro Pituitary Hormone Secretion Assay for Hypophysiotropic Substances" i Methods in Enzymology, bind XXXVIIt udgivere O'Malley, 20 B.W. og Hardman, J.G. (Academic Press, Inc., New York), side 5-93 (1975).
Efter 4 dages dyrkning blev cellerne vasket og inkuberet i 4 timer i Dulbecco-modificeret Eagle's medium i nærværelse af eller uden tilstedeværelse af graderede doser 25 af hver analog eller af somatostatin. Mediet blev derpå samlet til efterfølgende væksthormonbestemmelse ved et dobbelt antistof-radioimmunoforsøg for rottevæksthormon.
Forsøgsresultaterne for nogle af de omhandlede forbindelser fremgår af det følgende sammen med resultater for 30 somatostatin, der er angivet først og tildelt den arbitrære værdi 1. Resultaterne for de omhandlede forbindelser er givet som multipla eller brøkdele af virknin-
DK 152505B
25 gen af somatostatin. Tallene i parentes er referens-grænserne for det foranstående tal. Den første af de omhandlede forbindelser som anført er den forbindelse, der blev fremstillet i eksemplerne 1-5. Forbindelsen 5 er imidlertid skrevet på en lidt anden måde for lettere at kunne sammenligne med somatostatin i henseende til aminosyrerækkefølgen.
Aktivitet af cycliske hexapeptider, der er analoge med somatostatin 10 VaEksthormonfrigivelse
Forbindelse Inhihering in vitro
Somatostatin 1
Cyclo(N-Me-Ma-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Phe) 4,38 (2,15 - 11,90)
Cyclo(N-Me-D-Ala-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Phe) 2,13 (0,83 - 6,00) 15 Cyclo(Pro-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Phe) 1,71 (1,31 - 2,32)
Cyclo(Pro-Phe-L-Trp-Lys-Thr-Phe) 1,59 (1,33 - 1,92)
Cyclo(Pro-Phe-D-5F-Trp-Lys-Thr-Phe) 2,4 (2,1 - 2,8)
Cyclo(Pro-Phe-L-5F-Trp-Lys-Thr-Phe) 2,5 (1,9 - 3,2)
Cyclo(Pro-Phe-D-Trp-Lys-Ser-Phe) 1,4 (1,1 - 1,7 ) 20 Cyclo(Pro-Phe-D-Trp-Lys-a-ABU-Phe) 0,82 (0,57 - 1,18)
Cycio(Pro-Phe-D-Trp-Lys-Thr-p-Cl-Phe) 0,86 (0,75 - 1,0 )
Cyclo(Pro-p-Cl-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Phe) 1,14 (0,98 - 1,34)
Cyclo(Pro-Tyr-D-Trp-Lys-Thr-Phe) 14,3 (8,3 - 33,0 )
Virkningerne af de omhandlede cycliske hexapeptider be-25 stemmes ved følgende procedure.
Forbindelserne afprøves for deres evne til at inhibere pentagastrin—fremkaldt mavesyre-sekretion i den kronisk fistuløse hund. Hun-beagle-hunde med kronisk mavefistula blev indgivet pentagastrin (2,5 pg/kg/time, i.v.
30 fra -20 til 120 minutter), og maveudskillelsesprodukter blev samlet via fistula cannula. Prøver blev analyseret med mellemrum på 30 minutter for volumen (ml) og triter-bar syre (mækv./liter) (titrering til pH 7 med 0,01 N NaOH)? total syreudskillelse (mækv.) blev beregnet som produktet 35 af udskillelsesvolumenet og syrekoncentrationen. Prøveforbindelserne blev indgivet ved infusion med en konstant
DK 152505B
26 hastighed i O - 60 minutter. Data er udtrykt som procentvis ændring af totalsyreudskillelse i forhold til placebo-forsøg i samme dyr.
«. f
DK 152505 B
27
O
<N
. H’^’OOOOOOOCNt''
ij! β ri I H V£>r)H(N
ri o O O
Η -Η -η σι ri -ri +J „ tn φ fo o Η ri |u|OI ΗΓ'31'ί'ί^Ν ^ -Plvo^r in οι n in ød) ri o di to t n (D x>
gi ri O
g Q) -rH ΰ o 3 > MO'xit^H'^r^cNncn w φ ¢) Mi h^n'iiBin'i g Λ (Do ,π -H ri m H »ri X! >1
4J Q| C tn] O
•Η ΟΊ V£> LQ CN CO <N O O
_p - itHHHHinnro
tø ri o\o O
ri -H
øl -p —· r· n-i td ri o -p ri o <n tø -μ -H Hr^'^OWJ'^LD'^ β Og -P i ro oo co ^ m in -H -P <D o 4J (ti o ri σι
(ti g VD X
P O I (DO
tø ω o mriorHooLninHi·" 0 <D (Dl ω οι σι oo in co P Ό ri ri g o (ti (DO. >i ri vo g g -H tø Ή 0 tø <D 0 o Μ (Dri > >io hN^ooco^r· (ti i cn o oo σ> co σι co ri O ri go O H -H o 4-t (ti ri i o S. (3 rOLDt-tOCOOOOr·'· (1) ^ I (O dl Kl CO (O h li -P ri · o (ti (D ri
P -H
H rig ri (D \ ~ tø Ό H 2 d) g tøm^
μ v \ (D Pri (U (D
ri iji Λ i Λ X!
jj (D ri- (ii ri CU CU
(ϋ ’ϋ I -ri I I
> -h oo riE-i'-r-fri'-'
-H -p * X! I <U U Χί (U
(ri QjO EHW-rilE^Xl β (D I >i CM Ot I (¾
(ti O) tø tø iri I I W I
td -h triiriri>.ri
Li tø h-1 Q-ι r^3 Æ M Æ (D (DO I ri Β Β I Eh
rj p ft f( I I P< I
(tf ^ ri i m w ri cn
0) B Q >1 >i Eh N
(tf I I iri Μ I iri
rrt tø Q (ϋ I I P I
H i XJ ft ft I ft O H (D ft ri ri i) ri
ro O X! I En Β Λ B
c; >, PM (ti I i Cri I
3 O I H Q Q I Q
(ti (ti <1 I I 1—I I
i m h i φ 0) U ri
(ti ril-iQXrrrili^T
u_i (D τ| I I ft ft ft B
L, β tø -P <D (D 1 I I I
φ 0) H (tiggOOOO
+j (ri <D -P i i ri ri ri ri Ιμ β Ό tø g g ril 1¾ rit 1¾
ω β ·Η -P 0 O O O O O
Λ\ JJ rH rH i—I rH i—li—1 rS u u goooooo •H O O !>i !>i h > fø cnuuoouu
DK 152505B
28
Den biologiske aktivitet for et fra dansk patentansøgning nr. 4284/78 kendt cyclisk decapeptid blev sammenlignet med det dermed nærmest beslægtede decapeptid fremstillet ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen. Data er angivet i forhold til somatostatin, der er givet værdien 1.
Cyclo (Pro-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Phe)
Inhibering af insulin 5,2
Inhibering af glucagon 8,0
Inhibering af væksthormoner 1,71
Cyclo (Phe-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Phe)
Inhibering af insulin 0,32
Inhibering af glucagon inaktiv
Inhibering af væksthormoner 0,27
Den kendte forbindelse ses således at have meget ringere aktivitet end den ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen fremstillede forbindelse.
Claims (5)
1. Analogifremgangsmåde til fremstilling af et somato- statin-analogt cyclisk hexapeptid med formlen R5 o ^ H -.VAV N H O q-J n B Λ n~ O i 2J-H H é O hvor 1 2 R og R uafhængigt af hinanden betegner alkyl med 2-5 5 carbonatomer bortset fra sec.butyl, benzyl, sub stitueret benzyl, hvori substituenten kan være en eller to af grupperne alkyl med 1-5 carbonatomer, halogen, hydroxy, amino, nitro eller alkoxy med 1-5 carbonatomer, eller betegner alkyl med 1-5 carbonatom-10 er substitueret med en 5- eller 6-leddet heterocyclisk ring med 1 eller 2 heteroatomer valgt blandt oxygen, nitrogen og svovl, O R er 3-indolylmethyl eller 3-indolylmethyl substitueret én gang med alkyl med 1-5 carbonatomer, alkoxy med 15 2-5 carbonatomer eller halogen, R^ er alkyl med 1-5 carbonatomer, hydroxyalkyl med 1-5 carbonatomer, benzyl, carboxyalkyl med en alkyl-gruppe med 1-5 carbonatomer, aminoalkyl med 1-5 carbonatomer eller én gang substitueret benzyl, 20 hvori substituenten kan være alkyl med 1-5 carbon atomer, alkoxy med 1-5 carbonatomer, hydroxy, halogen, amino eller nitro, DK 152505B R5 er alkyl med 1-5 carbonatomer, benzyl eller én gang substitueret benzyl, hvor substituenten er alkyl med 1-5 carbonatomer, alkoxy med 1-5 carbonatomer, hydroxy, halogen, amino eller nitro, g 5. er methyl, eller C g R og R sammen danner gruppen -CH2-X-CH2-, hvor X er (CHn) , hvor n er 0, 1 eller 2, eller svovl, 2 n Y er (CH2)m, hvor m er 0 eller 2, eller svovl, hvor de indgående aminosyrer kan have D- eller L-konfigu-10 ration, kendetegnet ved, at man (a) fremstiller et til formel I svarende beskyttet lineært peptid knyttet til en harpiks på fast fase, (b) selektivt afblokerer den N-terminale aminogruppe, (c) fjerner det lineære peptid fra harpiksen, 15 (d) behandler det lineære peptid med et ringslutnings middel, og (e) fjerner eventuelle sidekædebeskyttelsesgrupper.
2. Fremgangsmåde ifølge krav 1, kendetegnet ved, at trin (c) omfatter behandling af den lineære pep- 20 tidharpiks med hydrazin til dannelse af hydrazidet.
3. Fremgangsmåde ifølge krav 2, kendetegnet ved, at ringslutningstrinnet omfatter behandling af hydrazidet med et middel, der in situ danner salpetersyrling, til fremstilling af azidet, som ringsluttes i nær- DK 152505B værelse af en tertiær amin.
4. Fremgangsmåde ifølge krav 3, kendetegnet ved, at azidet dannes ved behandling af hydrazidet med et alkylnitrit med 1-5 carbonatomer eller et alkalimetal-5 nitrit i nærværelse af en stærk syre.
5. Fremgangsmåde ifølge krav 3, kendetegnet ved, at azidet dannes ved behandling af hydrazidet med isoamylnitrit i nærværelse af saltsyre.
Applications Claiming Priority (4)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US8982879A | 1979-10-31 | 1979-10-31 | |
| US8982779 | 1979-10-31 | ||
| US8982879 | 1979-10-31 | ||
| US06/089,827 US4235886A (en) | 1979-10-31 | 1979-10-31 | Cyclic hexapeptide somatostatin analogs |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| DK460580A DK460580A (da) | 1981-05-01 |
| DK152505B true DK152505B (da) | 1988-03-07 |
| DK152505C DK152505C (da) | 1988-07-25 |
Family
ID=26780979
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| DK460580A DK152505C (da) | 1979-10-31 | 1980-10-30 | Analogifremgangsmaade til fremstilling af et somatostatin-analogt cyclisk hexapeptid |
Country Status (17)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP0029310B1 (da) |
| KR (1) | KR860001961B1 (da) |
| AU (1) | AU540140B2 (da) |
| CA (1) | CA1216844A (da) |
| DD (1) | DD153684A5 (da) |
| DE (1) | DE3064499D1 (da) |
| DK (1) | DK152505C (da) |
| ES (1) | ES8202787A1 (da) |
| FI (1) | FI74711C (da) |
| GR (1) | GR70725B (da) |
| IE (1) | IE50364B1 (da) |
| NO (1) | NO150958C (da) |
| NZ (1) | NZ195303A (da) |
| PL (1) | PL128347B1 (da) |
| PT (1) | PT71966B (da) |
| RO (1) | RO81523A (da) |
| YU (1) | YU278780A (da) |
Families Citing this family (12)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4360516A (en) * | 1981-04-13 | 1982-11-23 | Merck & Co., Inc. | Modified D-retro cyclic hexapeptide somatostatin analogs |
| US4374060A (en) * | 1981-07-15 | 1983-02-15 | Merck & Co., Inc. | Process for the preparation of cyclic hexapeptide |
| US4427661A (en) * | 1982-07-30 | 1984-01-24 | Merck & Co., Inc. | Fluorinated cyclic hexapeptide somatostatin analogs |
| EP0113029B1 (en) * | 1982-12-06 | 1989-04-19 | Merck & Co. Inc. | Dicyclic hexapeptides, processes for their preparation and pharmaceutical compositions containing them |
| DE3303345A1 (de) * | 1983-02-02 | 1984-08-02 | Hoechst Ag, 6230 Frankfurt | Cyclische peptide mit somatostatin-wirkung |
| US4505897A (en) * | 1983-04-18 | 1985-03-19 | The Administrators Of The Tulane Educational Fund | Cyclic pentapeptides displaying somatostatin antagonism and method of treatment of mammals therewith |
| US5620675A (en) | 1992-06-23 | 1997-04-15 | Diatech, Inc. | Radioactive peptides |
| ATE337338T1 (de) * | 1993-06-23 | 2006-09-15 | Diatide Inc | Radioaktiv-markierte peptidderivate des somatostatins zur bildformenden und therapeutischen verwendung |
| US5932189A (en) * | 1994-07-29 | 1999-08-03 | Diatech, Inc. | Cyclic peptide somatostatin analogs |
| US6051206A (en) * | 1994-06-03 | 2000-04-18 | Diatide, Inc | Radiolabeled somatostatin-derived peptides for imaging and therapeutic uses |
| MY147327A (en) | 1995-06-29 | 2012-11-30 | Novartis Ag | Somatostatin peptides |
| GB0018891D0 (en) | 2000-08-01 | 2000-09-20 | Novartis Ag | Organic compounds |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DK252778A (da) * | 1977-06-08 | 1978-12-09 | Merck & Co Inc | Fremgangsmaade til fremstilling af somatostatinanaloge |
| DK151034B (da) * | 1977-09-28 | 1987-10-12 | Ciba Geigy Ag | Analogifremgangsmaade til fremstilling af somatostatinanaloge cyclopeptider eller fysiologisk taalelige syreadditionssalte eller komplekser deraf |
Family Cites Families (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| SE7708136L (sv) * | 1976-08-02 | 1978-02-03 | Merck & Co Inc | Cykliska hexapeptider |
-
1980
- 1980-10-20 NZ NZ195303A patent/NZ195303A/en unknown
- 1980-10-21 FI FI803306A patent/FI74711C/fi not_active IP Right Cessation
- 1980-10-22 AU AU63581/80A patent/AU540140B2/en not_active Ceased
- 1980-10-24 PT PT71966A patent/PT71966B/pt unknown
- 1980-10-25 GR GR63223A patent/GR70725B/el unknown
- 1980-10-27 RO RO80102446A patent/RO81523A/ro unknown
- 1980-10-28 DE DE8080303826T patent/DE3064499D1/de not_active Expired
- 1980-10-28 IE IE2224/80A patent/IE50364B1/en not_active IP Right Cessation
- 1980-10-28 DD DD80224779A patent/DD153684A5/de unknown
- 1980-10-28 CA CA000363416A patent/CA1216844A/en not_active Expired
- 1980-10-28 EP EP80303826A patent/EP0029310B1/en not_active Expired
- 1980-10-29 KR KR1019800004142A patent/KR860001961B1/ko not_active Expired
- 1980-10-30 NO NO803245A patent/NO150958C/no unknown
- 1980-10-30 ES ES496424A patent/ES8202787A1/es not_active Expired
- 1980-10-30 PL PL1980227577A patent/PL128347B1/pl unknown
- 1980-10-30 DK DK460580A patent/DK152505C/da not_active IP Right Cessation
- 1980-10-30 YU YU02787/80A patent/YU278780A/xx unknown
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DK252778A (da) * | 1977-06-08 | 1978-12-09 | Merck & Co Inc | Fremgangsmaade til fremstilling af somatostatinanaloge |
| DK151034B (da) * | 1977-09-28 | 1987-10-12 | Ciba Geigy Ag | Analogifremgangsmaade til fremstilling af somatostatinanaloge cyclopeptider eller fysiologisk taalelige syreadditionssalte eller komplekser deraf |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| AU6358180A (en) | 1981-05-07 |
| AU540140B2 (en) | 1984-11-01 |
| FI74711C (fi) | 1988-03-10 |
| RO81523A (ro) | 1983-08-03 |
| NO803245L (no) | 1981-05-04 |
| ES496424A0 (es) | 1982-02-16 |
| RO81523B (ro) | 1983-07-30 |
| FI803306L (fi) | 1981-05-01 |
| PT71966A (en) | 1980-11-01 |
| DD153684A5 (de) | 1982-01-27 |
| EP0029310B1 (en) | 1983-08-03 |
| ES8202787A1 (es) | 1982-02-16 |
| PT71966B (en) | 1982-03-31 |
| GR70725B (da) | 1983-01-18 |
| IE50364B1 (en) | 1986-04-02 |
| YU278780A (en) | 1983-01-21 |
| KR830004223A (ko) | 1983-07-09 |
| PL128347B1 (en) | 1984-01-31 |
| CA1216844A (en) | 1987-01-20 |
| NO150958C (no) | 1985-01-16 |
| PL227577A1 (da) | 1981-10-02 |
| EP0029310A1 (en) | 1981-05-27 |
| NZ195303A (en) | 1984-10-19 |
| KR860001961B1 (ko) | 1986-11-05 |
| DK152505C (da) | 1988-07-25 |
| IE802224L (en) | 1981-04-30 |
| DE3064499D1 (en) | 1983-09-08 |
| NO150958B (no) | 1984-10-08 |
| FI74711B (fi) | 1987-11-30 |
| DK460580A (da) | 1981-05-01 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US4310518A (en) | Cyclic hexapeptide somatostatin analogs | |
| US4235886A (en) | Cyclic hexapeptide somatostatin analogs | |
| US4522813A (en) | Cyclic hexapeptide somatostatin analogs | |
| Veber et al. | Conformationally restricted bicyclic analogs of somatostatin. | |
| US4360516A (en) | Modified D-retro cyclic hexapeptide somatostatin analogs | |
| US4146612A (en) | Somatostatin analogs | |
| US4372884A (en) | Pharmaceutically active peptides | |
| EP0342962A2 (en) | Peptides having T cell helper activity | |
| US4211693A (en) | Peptides with para-substituted phenylalanine | |
| DK152505B (da) | Analogifremgangsmaade til fremstilling af et somatostatin-analogt cyclisk hexapeptid | |
| US4486415A (en) | Cyclic hexapeptide somatostatin analogs | |
| US4190648A (en) | Peptides having somatostatin activity | |
| DK149092B (da) | Analogifremgangsmaade til fremstilling af tripeptider eller farmaceutisk acceptable syreadditionssalte deraf | |
| US4140767A (en) | Somatostatin analogs | |
| US4011182A (en) | Cyclic undecapeptide analogs of somatostatin and intermediates | |
| CA1268899A (en) | Cyclic hexapeptide somatostatin analogs | |
| US4611054A (en) | Cyclic hexapeptide somatostatin analogs | |
| EP0956296B1 (en) | Somatostatin antagonists | |
| EP0113029B1 (en) | Dicyclic hexapeptides, processes for their preparation and pharmaceutical compositions containing them | |
| US4139526A (en) | Somatostatin analogs | |
| DK149093B (da) | Analogifremgangsmaade til fremstilling af pentapeptidderivater eller farmaceutisk acceptable salte deraf | |
| US4663435A (en) | Bridged cyclic hexapeptide somatostatin analogs | |
| FujINo et al. | Synthesis of Porcine Motilin and Its D-Phe1-Analog by the Use of Methanesulfonic Acid | |
| GB2231051A (en) | Bombesin antagonists | |
| US4081433A (en) | D-Nle4 -somatostatin and analogues thereof |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PBP | Patent lapsed |