DK156730B - Testkomposition og -materiale til bestemmelse af tilstedevaerelsen af glucose i en flydende proeve samt fremgangsmaade til semikvantitativ bestemmelse af glucose i urin - Google Patents

Testkomposition og -materiale til bestemmelse af tilstedevaerelsen af glucose i en flydende proeve samt fremgangsmaade til semikvantitativ bestemmelse af glucose i urin Download PDF

Info

Publication number
DK156730B
DK156730B DK060882A DK60882A DK156730B DK 156730 B DK156730 B DK 156730B DK 060882 A DK060882 A DK 060882A DK 60882 A DK60882 A DK 60882A DK 156730 B DK156730 B DK 156730B
Authority
DK
Denmark
Prior art keywords
glucose
chromogen
test
composition according
urine
Prior art date
Application number
DK060882A
Other languages
English (en)
Other versions
DK60882A (da
DK156730C (da
Inventor
Robert Bauer
Original Assignee
Miles Inc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Miles Inc filed Critical Miles Inc
Publication of DK60882A publication Critical patent/DK60882A/da
Publication of DK156730B publication Critical patent/DK156730B/da
Application granted granted Critical
Publication of DK156730C publication Critical patent/DK156730C/da

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/54—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving glucose or galactose
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
    • Y10S435/805—Test papers
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
    • Y10S435/81—Packaged device or kit
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10T—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER US CLASSIFICATION
    • Y10T436/00—Chemistry: analytical and immunological testing
    • Y10T436/10—Composition for standardization, calibration, simulation, stabilization, preparation or preservation; processes of use in preparation for chemical testing
    • Y10T436/104998—Glucose, ketone, nitrate standard or control
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10T—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER US CLASSIFICATION
    • Y10T436/00—Chemistry: analytical and immunological testing
    • Y10T436/14—Heterocyclic carbon compound [i.e., O, S, N, Se, Te, as only ring hetero atom]
    • Y10T436/142222—Hetero-O [e.g., ascorbic acid, etc.]
    • Y10T436/143333—Saccharide [e.g., DNA, etc.]
    • Y10T436/144444—Glucose

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
  • Saccharide Compounds (AREA)

Description

DK 156730 B
Opfindelsen angâr en testkomposition til bestemmelse af tilstedeværelsen af glucose i en flydende pr0ve, hvilken komposition omfatter glucoseoxidase, et peroxidativt aktivt stof og ét eller flere chromogener, der er reaktive med 5 hydrogenperoxid, et testmateriale til bestemmelse af til-stedevaerelsen af glucose i en flydende pr0ve samt en frem-gangsmàde til semikvantitativ bestemmelse af glucose i urin.
Bestemmelsen af glucose i legemsvæsker, f.eks. urin eller blod, er ikke blot af betydning i tilfælde af diabe-10 tiske patienter, hvis sukkerindtagelse skal kontrolleres, men er Ogsâ betydningsfuld i de situationer, hvor detekte-ringen af sygdom som en offentlig sundhedsforanstaltning kræver unders0gelse af urin eller blod fra et stort antal personer. Eftersom en tidlig diagnose og fortsat kontrol er 15 vigtig ved diabetes7 mâ en glucose-test, for at være af st0rst vaerdi for lægen ved diagnosen og kontrollen med syg-dommen, være bekvemt hurtig, enkel nok til at være til hjælp for klinikeren og til strækkelig sensitiv til at afsl0re væsentlige variationer i koncentrationen af urin- eller 20 blodglucose.
Det er kendt at anvende glucoseoxidase, et peroxidativt aktivt stof og et chromogen, som oxideres ved udsæt-telse for hydrogenperoxid i nærværelse af det peroxidativt aktive stof, til detektering af glucose i urin. Systemet 25 involverer dannelsen af hydrogenperoxid ved indvirkning af glucoseoxidase pâ glucose: [Glucoseoxidase]
Glucose -> H2O2 30 og den resulterende oxidation af chromogenet til dets oxide-rede tilstand, der kan detekteres visuelt ved en farveænd-ring: [Peroxidase] 35 H202 + Chromogen-> H20 + Chromogen (oxideret)
Den ovenfor beskrevne test kan anvendes til be-
DK 156730 B
2 stemmelsen af en række materialer, der reagerer med oxy-gen og en oxidase med resuiterende dannelse af hydrogen-peroxid. Systemet er sâledes anvendeligt til detektering af okkult blod i forskellige legemsvæv pâ grund af den kends-5 gerning, at hæmoglobin er et sâdant materiale. Flere forskellige chromogener er blevet angivet at være anvendelige ved den omhandlede bestemmelsesmetode. I USA-patentskrift nr. 3.012.976 er der beskrevet anvendelsen af o-tolidin, o-toluidin, p-toluidin, o-phenylendiamin, N,N'-dimethyl-p-10 -phenylen-diamin, N, N'-diethyl-p-phenylendiamin, benzidin, p-anisidin, o-catechol og pyrogallol ved en test for okkult blod af den her omhandlede art. USA-patentskrift nr.
3.335.069 vedrdrer en test for urinsyre og beskriver anvendelsen af o-anisidin og p-anisidin som chromogener.
15 Blandt de chromogener, der er beskrevet som anvende lige, har faktisk kun fâ været anvendt i praksis. Benzidin var et foretrukkent chromogen, men grundet opdagelsen af, at denne forbindelse er et potent carcinogen, forsvandt interessen for denne forbindelse. Opdagelsen af, at 3,3',-20 5,5'-tetraalkylbenzidiner ikke var carcinogener, og offent- liggorelsen af denne opdagelse forte til den nærliggende foranstaltning at anvende en af disse forbindelser som chro-mogenet i et System af den ovenfor beskrevne type, jfr. britisk patentskrift nr. 1.464.359. Pâ side 5 i dette patent-25 skrift er der angivet iagttagne resultater med o-tolidin, tetramethylbenzidin og tetraethylbenzidin som chromogen ved 0, 50, 100, 250, 500 og 1000 mg glucose pr. dl i den under-s0gte væske. Hvert af de nævnte materialer skifter farve fra gui til klar gr0n, nâr koncentrationen af glucose for-30 0ges fra 0 til 50 mg pr. dl. Nâr koncentrationen af glucose stiger, bliver farven af det oxiderede chromogen m0rkere sâledes, at de iagttagne farver var henholdsvis oliven-sort, sort og dybgron. Denne iagttagelse sætter focus pâ et problem ved den semikvantitative bestemmelse af glucose i vandige 35 væsker, eftersom de kendte chromogener ved h0jere koncentra-tioner fremtræder som sorte eller meget m0rkegr0nne, hvil-
DK 156730 B
3 ket begrænser deres anvendelighed som chromogener i semi-kvantitative testmaterialer. Semikvantitativ bestemmelse af glucose i urin, nâr glucosekoncentrationen er hoj, dvs. fra ca. 2000 til ca. 5000 mg pr. dl, er af særlig betydning, 5 fordi urin-glucosekoncentrationer hos diabetiske patienter kan være sâ ho je sont 5% eller mere. Den kvantitative bestemmelse af urin-glucose op til koncentrationer pâ 5% er af vigtighed af i det mindste to grunde: (â) ho je urin-glucosekoncentrationer vil sandsynligvis være associeret med diabe-10 tisk coma. I nodssituationer er det vigtigt at kunne afgore, hvorvidt en bevidstloshedstilstand er diabetisk coma. En statisk test af denne art, der viser en hoj urin-glucose-koncentration, vil derfor tyde pâ diabetisk coma, (b) Urin--glucose-niveauer bliver foroget, hvis der er blevet indgivet 15 en utilstrækkelig mængde insulin. En test, der kan afslore hojere urin-glucosekoncentrationer, har derfor storre anvendelighed ved den terapeutiske styring af insulinbehovet.
Anvendelsen af m-anisidin som et chromogen ved reak-tioner, der involverer peroxider og peroxidase, er ikke 20 beskrevet i litteraturen. I to litteratursteder omtales anvendelsen af m-anisidin i systemer indeholdende peroxid og spormængder af Cu++, nemlig iî
Dolmanova, I.F., et al., "Mechamism of the Catalytic Action of Copper in the Oxidation of a Sériés of Organic 25 Compounds by Hydrogen Peroxide", Vestn. Mosk. Univ., Khim 1970, 11(5), 573, og i:
Krause,F., 'Organic Inhibitors Which are Converted Into Active Redox Catalysts by Trace Amounts of Cu++", Oesterr.Chem.Ztg., 68(2), 54 (1967).
30 Fra Chemical Abstracts, Vol.75, 104852U (1971), er det endvidere kendt, at aromatiske aminer kan pâvises ved oxidation med H2O2 i nærværelse af disse metalioner, idet der efter syrning fâs farver, der afhænger af metallet og syren. Farver og pâvisningsgrænser (2»10-5-0,ll mg/ml) er 35 bl.a. angivet for m-anisidin.
Det er et formai med den foreliggende opfindelse at
DK 156730 B
4 tilvejebringe en forbedret fremgangsmâde til detektering af glucose i vandige væsker ved hjælp af systemet glucose-oxidase/peroxidativt aktivt stof, hvilken fremgangsmâde er anvendelig til semikvantitativ bestemmelse af glucose i 5 koncentrationer pâ fra 2000 til 5000 mg pr. dl.
Opfindelsen angâr sâledes en forbedret testkomposi-tion til bestemmelse af nærværelsen af glucose i en flydende prove. Testkompositionen, der omfatter glucoseoxidase, et peroxidativt aktivt stof og ét eller flere chromogener, der 10 er reaktive med hydrogenperoxid, hvilken reaktion katalyseres af det peroxidativt aktive stof, forbedres if0lge opfindelsen ved anvendelsen af m-anisidin som chromogen.
I den foreliggende sammenhæng refererer udtrykket "væsker11 til legemsvæsker, f.eks. blodserum, blodplasma, 15 urin, spinalvæsker samt desuden vandige oplcsninger inde-holdende urinstof. Omend den mest foretrukne anvendelse af testmaterialerne og fremgangsmâden if0lge opfindelsen stâr i forbindelse med legemsvæsker, sâsom blod og urin, vil det forstâs, at de her beskrevne testmidler og den her beskrevne 20 fremgangsmâde lige sâ vel kan anvendes i forbindelse med industrielle væsker eller fluida.
Testmaterialet ifolge opfindelsen er ejendommeligt ved, at det omfatter et bærermateriale, der bærer den rest, der efterlades ved behandling af bærermaterialet med en 25 flydende testkomposition if0lge opfindelsen, samt pâf0lgende inddampning af oplosningsmidlet til efterladelse af den t0rre reagenskomposition, og fremgangsmâden if0lge opfindelsen er ejendommelig ved, at urinen bringes i kontakt med et testmateriale if0lge opfindelsen, idet den tilstedeværende 30 mængde glucose bestemmes ud fra farveændringen i reagenset.
Det her omhandlede glucose-testmateriale kan være i form af et behandlet papir, et reagens pâ flaske, en sk0r kapsel indeholdende indikatoren pâ reagensform, en pille eller tablet, der kan anbringes i vand eller alkohol eller 35 i den væske, der testes for glucose, eller en fast alkohol--gel indeholdende reagenset. Nâr materialet er i pille-
DK 156730 B
5 eller tabletform, kan det indeholde et varmefrembringende stof, f.eks. lithiumchlorid, der udvikler varme ved anbrin-gelse i vand, hvorved reaktionshastigheden forages.
Det foretrukne glucose-testmateriale fremstilles ved 5 behandling af et egnet bærermateriale med glucose-testkom-position i form af flydende reagens. üdtrykket "bærermate-riale" refererer til enten sugende eller ikkesugende mate-rialer, soin er uoploselige i og bibeholder deres strukturelle integritet, nâr de udsættes for indvirkning af vand eller 10 andre fysiologiske væsker eller fluida. Egnede sugende mate-rialer, der kan anvendes, omfatter papir, cellulose, træ, syntetiske harpikser, vævede og uvævede stoffer og lignende materialer. Ikke-sugende materialer omfatter glasfiber- og organoplast-materialer, f.eks. polypropylen. Bærermaterialet 15 kan gennemfugtes med, neddyppes i, sprojtes eller pâtrykkes med den flydende reagenskomposition, og bærermaterialet kan derpâ terres pâ passende mâde, f.eks. ved omgivelsernes temperatur eller ved torring med forceret luft sâledes, at der efterlades den terre reagens-materiale-kombination.
20 Materialet kan med fordel fastgeres til en uopleselig under-stetning, f.eks. en organoplast-strimmel, sâsom polystyren, ved hjælp af egnede midler, sàsom et dobbeltsidet adhæsivt tape, hvilket giver en lettere anvendelse.
En typisk flydende reagenskomposition vil indeholde 25 fra 1000 til 1600 internationale enheder (I.U.) glucoseoxi-dase pr. ml, fra 600 til 1300 I.U. peberrodsperoxidase pr. ml og fra 10 til 15 mg m-anisidin pr. ml som chromogen. I en foretrukken udferelsesform anvendes der en ringe mængde, dvs. fra 0,5 til 1,0 mg pr. ml, af en anden indikator med 30 en hoj ekstinktionskoefficient. Dette er tilfældet, fordi testsystemer af den her omhandlede type, hvori der anvendes m-anisidin som chromogen, giver semikvantitative aflæsninger over omrâdet fra 250 til 5000 mg pr. deciliter med farveom-slag ved ca. 250, 500, 1000, 2000 og 5000 mg/dl. Tilsætningen 35 af en ringe mængde af et andet chromogerf med en hoj ekstinktionskoefficient tilvejebringer et System, der er i stand
DK 156730 B
6 til at detektere nærværelsen af glucose i mindre koncentra-tioner, f.eks. 100 mg/dl, medens det samtidig besidder evne til at differentiere mellem koncentrationer pâ 2000 og 5000 mg/dl, hvilke niveauer normalt er vanskelige for ikke at sige 5 umulige at skelne imellem.
Den molaere ekstinktionskoefficient (molær absorp-tivitet) for det andet chromogen er fortrinsvis over 10.000, navnlig mellem 15.000 og 65.000.
Egnede materialer til anvendelse som det andet chromo-10 gen omfatter o-tolidin, benzidin, syringaldazin, diaminofluo-ren og tetramethylbenzidin. Der tilsættes fortrinsvis tetra-methylbenzidin til tilvejebringelse af semikvantitativ fol-somhed ved lave glucosekoncentrationer. Eftersom glucose-bestemmelsen foregâr bedst ved en pH-værdi fra ca. 5,0 til 15 ca. 7,0, sættes der normalt en puf fer til kompositionen til opretholdelse af den 0nskede pH-værdi.
Stoffer med peroxidativ aktivitet, som kan anvendes i forbindelse med nærværende opfindelse, kan vælges fra for-skellige organiske og uorganiske kilder. Der kan anvendes 20 plante-peroxidaser, f.eks. peberrodsperoxidase eller kartof-felperoxidase. Uorganiske forbindelser med peroxidativ aktivitet omfatter iodider, f.eks. natrium- og ammoniumiodider, og molybdater, f.eks. kalium- og ammoniummolybdater. Des-uden kan der anvendes urohemin og et antal andre porphyrin-25 forbindelser, der har peroxidativ aktivitet. Andre stoffer, der ikke er enzymer, men har peroxidativ aktivitet, omfatter sâdanne forbindelser som jernsulfocyanat, jerntannat, ferro-ferricyanid og kaliumchromisulfat.
Opfindelsen belyses nærmere i de folgende eksempler 30 i hvilke den anvendte mængde peroxidase hver gang svarer til en mængde pâ fra 600 til 1300 internationale enheder peberrodsperoxidase pr. milliliter.
DK 156730 B
7
Eksempel 1
Der udfores et fors0g med henblik pâ at demonstrere den forbedring i kvantificering, der opnâs ved anvendelsen af indikatoren m-anisidin i det ovenfor beskrevne testmate-5 riale. Forsdget er begrænset til at vise forbedringen i forbindelse med glucosekoncentrationer pâ fra 2000 til 5000 mg/dl. Selv om de i dette eksempel anvendte enheder er mg/dl, b0r det bemærkes, at de er ækvivalente til de mg-%, der refereres til i den kendte teknik. Der freinstilles strimler 10 ud fra testopl0sninger ved imprægnering af Whatman® 31 ET -papir med den flydende reagenskomposition og t0rring af det behandlede papir ved 50°C i 15 minutter.
Der fremstilles en række testopl0snïnger under an-vendelse af f0lgende generelle sammensætninger: 15
Citratpuffer, 2,0 M, pH 5,5 1,0 ml
Peroxidase (peberrod), 50 milligram pr. milliliter (mg/ml) 2,0 ml (1000 I.U. pr. ml) 20 Glucoseoxidase (5.000 I.U./ml) 3,0 ml1
Polyvinylpyrrolidon (15% i éthanol) 1,9 ml
Emulphor® ON-870, 10% éthanol 0,5 ml
Indikator 0,001 mol
Tetrahydrofuran 1.6 ml 25 Totalrumfang: 10,0 ml
Mindre mængder af glucoseoxidase anvendes ved visse indikatorer. Vand tilsættes i disse til-fælde for at bringe totalrumfanget op pâ 10 ml.
30
Emulphor® ON-870 er et ikke-ionisk detergent. Dets formâl er at give en bedre strimmel-befugtelighed, hvilket igen f0rer til en mere ensartet farveudvikling.
Antallet af tilsatte glucoseoxidase-enheder varieres 35 til opfyldelse af behovet for hver indikator. Inkuberings-tiderne ved stuetemperatur for de resulterende strimler
DK 156730 B
8 varieres derfor kun mellem 60 og 90 sekunder. Mængderne af glucoseoxidase varieres for at tillade hvert System at ud-vikle praktisk taget de samme mængder af farve ved enhver given inkuberingstid. De systemer, hvori der anvendes indi-5 katorer med lavere molære ekstinktionskoefficienter, inde-holder derfor tilsvarende hejere glucoseoxidase-koncentra-tioner. Dette er normalt hvad der foretages for at optimere kvantificeringen af et teststrimmelmateriale. Hvis glucose-oxidase-koncentrationen holdes pâ samme værdi for aile indi-10 katorer, kunne strimler med indikatorer med h0jere ekstinktionskoefficienter udvikle sâ merke farver som respons pâ 2% glucose, at der ikke kunne skelnes mellem glucosekon-centrationer pâ 2% og 5%.
Reflektansmâlinger udferes ved den optimale belge-15 længde for hver indikator efter dypning af strimlerne i enten 2000 eller 5000 mg/dl glucose i urin. De procentlige reflektansværdier for de to glucosekoncentrationer omregnes til K/S-værdier. Reflektansmâlinger kan omregnes til K/S--værdier ved hjælp af formlen: 20 k/s = a-κι2
K/S 2R
25 hvor K er absorptionskoefficienten for preven, S er ma-terialets lysspredningskoefficient, og R er den brekdel af indfaldende lys, som reflekteres fra reagenspuden eller -materialet. Ligningen er en simplificeret version af Kubelka-Munk-ligningen. K/S-værdier er relaterede til reflek-30 tansmâlinger som absorbans er relateret til transmittans--mâlinger. De opnâede kurver (K/S versus % glucose) giver en mere rimelig sammenligning af indikatorer med forskellige molære ekstinktionskoefficienter. En kurve for K/S-værdier versus glucosekoncentrationer pâ 2000 og 5000 mg/dl giver 35 hældninger, der tilvejebringer et mâl for hver indikators kvantitative ydeevne. X den f0lgende tabel er der angivet de beregnede og normaliserede værdier for de opnâede hældninger.
DK 156730 B
9
Indikator Hældning Normaliseret værdi m-Anisidin 0,233 100 o-Anisidin 0,057 24 p-Anisidin 0,110 47 5 p-Aminosalicylat 0,123 53 p-Bromanilin 0,100 43 4-Aminoantipyren og indol 0,113 49 Hældningerne normaliseres sâledes, at hældningen for 10 m-anisidin tilskrives en værdi pâ 100%. Hældningerne opnâet for de andre indikatorer er dernæst anfort som procentværdier af hældningen opnâet for m-anisidin. Stejle hældninger repræ-senterer en bedre kvantificering. De resultater, der er sam-menfattet i tabellen, viser, at forskellen mellem farve-15 intensiteterne udviklet som respons pâ 2% og 5% glucose er væsentligt stprre for m-anisidin end for andre indikatorer. Resultaterne viser, at den hældning, der opnâs med m-anisidin, er mindst to gange sâ stor som den, der opnâs med ad-skillige strukturelt beslægtede og strukturelt forskellige 2 0 redox-indikatorer.
Eksempel 2
En optimeret prototype indeholdende en lav koncen-tration af tetramethylbenzidin og m-anisidin fremstilles 25 som i eksempel 1 under anvendelse af de f0lgende bestanddele til fremstilling af en testoplosning til anbringelse pâ teststrimler:
DK 156730 B
10
Citratpuffer, 2,0 M, pH 5,5 1,0 ml
Peroxidase, 50 mg/ml (1000 I.U. pr. ml) 2,0 ml
Glucoseoxidase, 5.000 I.U./ml 3,0 ml
Polyvinylpyrrolidon, 5 15% i éthanol 1,9 ml
Emulphor® 0N-870, 10% i éthanol 0,5 ml m-Anisidin 0,112 ml
Tetramethylbenz idin, 0,05 M i tetrahydrofuran 0,5 ml 10 Tetrahydrofuran 1,0 ml
Totalrumfang: 10,0 ml
Disse strimlers effektivitet bed0mmes ved anvendelse af 56 kliniske urinprover. De farver, der udvikles af test-15 strimlerne som respons pâ nærværelsen af glucose i disse prever, sammenholdes med et standard-farvekort med blokke ækvivalente med 0,0, 100, 250, 500, 1000, 2000 og 5000 mg glucose pr. dl. Teststrimlerne viste sig at kunne muligg0re det at skelne mellem aile disse niveauer. En korrelations-20 kurve til sammenligning af disse resultater med en hexoki-nase-referenceprocedure udviser en lineær régression pâ y = 1,07 x - 0,08 og en korrektionskoefficient pâ 0,93.

Claims (10)

1. Testkomposition til bestemmelse af tilstedevæ-relsen af glucose i en flydende prove, hvilken komposition omfatter glucoseoxidase, et peroxidativt aktivt stof og ét 5 eller flere chromogener, der er reaktive med hydrogenperoxid, kendetegnet ved, at der som chromogen anvendes m-anisidin.
2. Komposition ifolge krav 1, kendetegnet ved, at den er i form af en flydende reagensoplosning inde- 10 holdende 1000 til 1600 internationale enheder glucoseoxidase pr. milliliter, 600 til 1300 internationale enheder peberrods-peroxidase pr. milliliter og fra 10 til 15 milli-gram m-anisidin pr. milliliter.
3. Komposition ifolge krav 1 eller 2, k e n d e - 15 t- e g n e t ved, at den yderligere indeholder et andet chromogen.
4. Komposition if0lge krav 3, kendetegnet ved, at det andet chromogen har en molær ekstinktionskoef-ficient pâ over 10.000, fortrinsvis pâ mellem 15.000 og 20 65.000.
5. Komposition ifdlge krav 3 eller 4, kendetegnet ved, at det andet chromogen er til stede i en mængde fra 0,5 til 1,0 mg pr. ml.
6. Komposition ifolge krav 3-5, kendeteg- 25 net ved, at det andet chromogen er benzidin, syringal- dazin, diaminofluoren, o-tolidin eller tetramethylbenzidin.
7. Komposition ifolge krav 1-6, kendetegnet ved, at den indeholder en puffer i tilstrækkelig mængde til opretholdelse af pH-værdien af den flydende 30 prove pâ et niveau fra ca. 5,0 til ca. 7,0.
8. Testmateriale til bestemmelse af tilstedeværelsen af glucose i en flydende prove, kendetegnet ved, at det omfatter et bærermateriale, der bærer den rest, der efterlades ved behandling af bærermaterialet med en flydende 35 testkomposition ifolge ethvert af kravene 1-7, samt pâfol-gende inddampning af oplosningsmidlet til efterladelse af DK 156730 B den tdrre reagenskomposition.
9. Materiale ifdlge krav 8, kendetegnet ved, at det er i form af en teststrimmel.
10. Fremgangsmâde til semikvantitativ bestemmelse af 5 glucose i urin, kendetegnet ved, at urinen bringes i kontakt med et testmateriale if0lge krav 8 eller 9, idet den tilstedeværende mængde glucose bestenmes ud fra farve-ændringen i reagenset.
DK060882A 1981-02-12 1982-02-11 Testkomposition og -materiale til bestemmelse af tilstedevaerelsen af glucose i en flydende proeve samt fremgangsmaade til semikvantitativ bestemmelse af glucose i urin DK156730C (da)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US23392881 1981-02-12
US06/233,928 US4340669A (en) 1981-02-12 1981-02-12 System for the determination of glucose in fluids

Publications (3)

Publication Number Publication Date
DK60882A DK60882A (da) 1982-08-13
DK156730B true DK156730B (da) 1989-09-25
DK156730C DK156730C (da) 1990-02-05

Family

ID=22879224

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
DK060882A DK156730C (da) 1981-02-12 1982-02-11 Testkomposition og -materiale til bestemmelse af tilstedevaerelsen af glucose i en flydende proeve samt fremgangsmaade til semikvantitativ bestemmelse af glucose i urin

Country Status (15)

Country Link
US (1) US4340669A (da)
EP (1) EP0058334B1 (da)
JP (1) JPS6035118B2 (da)
AT (1) ATE9821T1 (da)
AU (1) AU524238B2 (da)
CA (1) CA1157749A (da)
DE (1) DE3260918D1 (da)
DK (1) DK156730C (da)
ES (1) ES509523A0 (da)
FI (1) FI71767C (da)
IE (1) IE52266B1 (da)
IL (1) IL63685A0 (da)
MX (1) MX157869A (da)
NO (1) NO159562C (da)
ZA (1) ZA816060B (da)

Families Citing this family (91)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3966160A (en) * 1975-05-12 1976-06-29 The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Air Force Inflight intravenous bottle holder
US4322049A (en) * 1977-03-17 1982-03-30 W. C. Bradley Co. Barbeque grill mounting bracket
DE3016618C2 (de) * 1980-04-30 1982-06-09 Gerhard 3560 Biedenkopf Scharf Testmittel unter Verwendung von polymer gebundenen, bezüglich des Systems Peroxydase-Wasserstoffperoxyd oxydierbaren Chromogenen
DE3211167A1 (de) * 1982-03-26 1983-09-29 Merck Patent Gmbh, 6100 Darmstadt Testsystem und verfahren zur bestimmung von substanzen in fluessigkeiten
US4621049A (en) * 1984-11-19 1986-11-04 Miles Laboratories, Inc. Enzymatic high range glucose test
US4649121A (en) * 1985-02-26 1987-03-10 Miles Laboratories, Inc. Viability test device
US4935346A (en) * 1986-08-13 1990-06-19 Lifescan, Inc. Minimum procedure system for the determination of analytes
US4849340A (en) * 1987-04-03 1989-07-18 Cardiovascular Diagnostics, Inc. Reaction system element and method for performing prothrombin time assay
US5176999A (en) * 1989-12-07 1993-01-05 Eastman Kodak Company Buffered wash composition, insolubilizing composition, test kits and method of use
GB9113212D0 (en) * 1991-06-19 1991-08-07 Hypoguard Uk Ltd Reagent mixture
IT1251150B (it) * 1991-08-05 1995-05-04 Enichem Polimeri Composizione termoplastica tenacizzata a base di polifenilenetere e poliammide
US5605152A (en) * 1994-07-18 1997-02-25 Minimed Inc. Optical glucose sensor
US5620838A (en) * 1994-12-21 1997-04-15 Eastman Kodak Company Photographic elements containing directly dispersible UV absorbing polymers and method of making such elements and polymers
US6030842A (en) * 1997-07-21 2000-02-29 Environmental Test Systems, Inc. Method, composition and device for the determination of free halogens in aqueous fluids
US6036924A (en) 1997-12-04 2000-03-14 Hewlett-Packard Company Cassette of lancet cartridges for sampling blood
US6391005B1 (en) 1998-03-30 2002-05-21 Agilent Technologies, Inc. Apparatus and method for penetration with shaft having a sensor for sensing penetration depth
US6361960B1 (en) * 1999-11-09 2002-03-26 Environmentally Sensitive Solutions, Inc. Method and test kit for measuring concentration of a cleaning agent in a wash liquor
US6458326B1 (en) 1999-11-24 2002-10-01 Home Diagnostics, Inc. Protective test strip platform
US8641644B2 (en) 2000-11-21 2014-02-04 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Blood testing apparatus having a rotatable cartridge with multiple lancing elements and testing means
RU2186370C1 (ru) * 2000-12-26 2002-07-27 Санкт-Петербургская общественная организация "Невская академия изобретателей" Способ определения инвертных сахаров
US6525330B2 (en) 2001-02-28 2003-02-25 Home Diagnostics, Inc. Method of strip insertion detection
US6541266B2 (en) 2001-02-28 2003-04-01 Home Diagnostics, Inc. Method for determining concentration of an analyte in a test strip
US6562625B2 (en) 2001-02-28 2003-05-13 Home Diagnostics, Inc. Distinguishing test types through spectral analysis
WO2002100460A2 (en) 2001-06-12 2002-12-19 Pelikan Technologies, Inc. Electric lancet actuator
US8337419B2 (en) 2002-04-19 2012-12-25 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Tissue penetration device
US7344507B2 (en) 2002-04-19 2008-03-18 Pelikan Technologies, Inc. Method and apparatus for lancet actuation
CA2448902C (en) 2001-06-12 2010-09-07 Pelikan Technologies, Inc. Self optimizing lancing device with adaptation means to temporal variations in cutaneous properties
US9226699B2 (en) 2002-04-19 2016-01-05 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Body fluid sampling module with a continuous compression tissue interface surface
AU2002348683A1 (en) 2001-06-12 2002-12-23 Pelikan Technologies, Inc. Method and apparatus for lancet launching device integrated onto a blood-sampling cartridge
US9795747B2 (en) 2010-06-02 2017-10-24 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Methods and apparatus for lancet actuation
WO2002100461A2 (en) 2001-06-12 2002-12-19 Pelikan Technologies, Inc. Method and apparatus for improving success rate of blood yield from a fingerstick
US7537571B2 (en) 2001-06-12 2009-05-26 Pelikan Technologies, Inc. Integrated blood sampling analysis system with multi-use sampling module
US7981056B2 (en) 2002-04-19 2011-07-19 Pelikan Technologies, Inc. Methods and apparatus for lancet actuation
US7041068B2 (en) 2001-06-12 2006-05-09 Pelikan Technologies, Inc. Sampling module device and method
US7682318B2 (en) 2001-06-12 2010-03-23 Pelikan Technologies, Inc. Blood sampling apparatus and method
US6444169B1 (en) 2001-06-18 2002-09-03 Ralston Purina Company Test-device for threshold glucose detection in urine
US7344894B2 (en) 2001-10-16 2008-03-18 Agilent Technologies, Inc. Thermal regulation of fluidic samples within a diagnostic cartridge
US7226461B2 (en) 2002-04-19 2007-06-05 Pelikan Technologies, Inc. Method and apparatus for a multi-use body fluid sampling device with sterility barrier release
AU2003231749A1 (en) 2002-04-19 2003-11-03 Pelikan Technologies, Inc. Device and method for variable speed lancet
US7892183B2 (en) 2002-04-19 2011-02-22 Pelikan Technologies, Inc. Method and apparatus for body fluid sampling and analyte sensing
US7291117B2 (en) 2002-04-19 2007-11-06 Pelikan Technologies, Inc. Method and apparatus for penetrating tissue
US7232451B2 (en) 2002-04-19 2007-06-19 Pelikan Technologies, Inc. Method and apparatus for penetrating tissue
US7331931B2 (en) 2002-04-19 2008-02-19 Pelikan Technologies, Inc. Method and apparatus for penetrating tissue
US7901362B2 (en) 2002-04-19 2011-03-08 Pelikan Technologies, Inc. Method and apparatus for penetrating tissue
US7892185B2 (en) 2002-04-19 2011-02-22 Pelikan Technologies, Inc. Method and apparatus for body fluid sampling and analyte sensing
US7547287B2 (en) 2002-04-19 2009-06-16 Pelikan Technologies, Inc. Method and apparatus for penetrating tissue
US7371247B2 (en) 2002-04-19 2008-05-13 Pelikan Technologies, Inc Method and apparatus for penetrating tissue
US9795334B2 (en) 2002-04-19 2017-10-24 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Method and apparatus for penetrating tissue
US8360992B2 (en) 2002-04-19 2013-01-29 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Method and apparatus for penetrating tissue
US8702624B2 (en) 2006-09-29 2014-04-22 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Analyte measurement device with a single shot actuator
US7674232B2 (en) 2002-04-19 2010-03-09 Pelikan Technologies, Inc. Method and apparatus for penetrating tissue
US7909778B2 (en) 2002-04-19 2011-03-22 Pelikan Technologies, Inc. Method and apparatus for penetrating tissue
US7976476B2 (en) 2002-04-19 2011-07-12 Pelikan Technologies, Inc. Device and method for variable speed lancet
US8221334B2 (en) 2002-04-19 2012-07-17 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Method and apparatus for penetrating tissue
US8579831B2 (en) 2002-04-19 2013-11-12 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Method and apparatus for penetrating tissue
US7229458B2 (en) 2002-04-19 2007-06-12 Pelikan Technologies, Inc. Method and apparatus for penetrating tissue
US9314194B2 (en) 2002-04-19 2016-04-19 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Tissue penetration device
US7491178B2 (en) 2002-04-19 2009-02-17 Pelikan Technologies, Inc. Method and apparatus for penetrating tissue
US7141058B2 (en) 2002-04-19 2006-11-28 Pelikan Technologies, Inc. Method and apparatus for a body fluid sampling device using illumination
US7524293B2 (en) 2002-04-19 2009-04-28 Pelikan Technologies, Inc. Method and apparatus for penetrating tissue
US7297122B2 (en) 2002-04-19 2007-11-20 Pelikan Technologies, Inc. Method and apparatus for penetrating tissue
US7374544B2 (en) 2002-04-19 2008-05-20 Pelikan Technologies, Inc. Method and apparatus for penetrating tissue
US8784335B2 (en) 2002-04-19 2014-07-22 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Body fluid sampling device with a capacitive sensor
US7717863B2 (en) 2002-04-19 2010-05-18 Pelikan Technologies, Inc. Method and apparatus for penetrating tissue
US7648468B2 (en) 2002-04-19 2010-01-19 Pelikon Technologies, Inc. Method and apparatus for penetrating tissue
US7582099B2 (en) 2002-04-19 2009-09-01 Pelikan Technologies, Inc Method and apparatus for penetrating tissue
US7563232B2 (en) 2002-04-19 2009-07-21 Pelikan Technologies, Inc. Method and apparatus for penetrating tissue
US8267870B2 (en) 2002-04-19 2012-09-18 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Method and apparatus for body fluid sampling with hybrid actuation
US7485128B2 (en) 2002-04-19 2009-02-03 Pelikan Technologies, Inc. Method and apparatus for penetrating tissue
US7410468B2 (en) 2002-04-19 2008-08-12 Pelikan Technologies, Inc. Method and apparatus for penetrating tissue
US7244265B2 (en) 2002-04-19 2007-07-17 Pelikan Technologies, Inc. Method and apparatus for penetrating tissue
US8574895B2 (en) 2002-12-30 2013-11-05 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Method and apparatus using optical techniques to measure analyte levels
EP2238892A3 (en) 2003-05-30 2011-02-09 Pelikan Technologies Inc. Apparatus for body fluid sampling
ES2490740T3 (es) 2003-06-06 2014-09-04 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Aparato para toma de muestras de fluido sanguíneo y detección de analitos
WO2006001797A1 (en) 2004-06-14 2006-01-05 Pelikan Technologies, Inc. Low pain penetrating
US7604592B2 (en) 2003-06-13 2009-10-20 Pelikan Technologies, Inc. Method and apparatus for a point of care device
EP1671096A4 (en) 2003-09-29 2009-09-16 Pelikan Technologies Inc METHOD AND APPARATUS FOR PROVIDING IMPROVED SAMPLE CAPTURING DEVICE
EP1680014A4 (en) 2003-10-14 2009-01-21 Pelikan Technologies Inc METHOD AND DEVICE FOR A VARIABLE USER INTERFACE
WO2005065414A2 (en) 2003-12-31 2005-07-21 Pelikan Technologies, Inc. Method and apparatus for improving fluidic flow and sample capture
US7822454B1 (en) 2005-01-03 2010-10-26 Pelikan Technologies, Inc. Fluid sampling device with improved analyte detecting member configuration
US8828203B2 (en) 2004-05-20 2014-09-09 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Printable hydrogels for biosensors
US9775553B2 (en) 2004-06-03 2017-10-03 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Method and apparatus for a fluid sampling device
EP1765194A4 (en) 2004-06-03 2010-09-29 Pelikan Technologies Inc METHOD AND DEVICE FOR A LIQUID DETECTION DEVICE
US8652831B2 (en) 2004-12-30 2014-02-18 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Method and apparatus for analyte measurement test time
EP2265324B1 (en) 2008-04-11 2015-01-28 Sanofi-Aventis Deutschland GmbH Integrated analyte measurement system
US9375169B2 (en) 2009-01-30 2016-06-28 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Cam drive for managing disposable penetrating member actions with a single motor and motor and control system
US8965476B2 (en) 2010-04-16 2015-02-24 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Tissue penetration device
ITMI20122153A1 (it) 2012-12-17 2014-06-18 Versalis Spa Composizione polimerica espandibile a migliorata flessibilita' e relativo procedimento di preparazione
ES2855982T3 (es) * 2014-02-27 2021-09-27 7905122 Canada Inc Material absorbente cromógeno para lecho de animales
US11976317B2 (en) 2017-04-18 2024-05-07 Sun Chemical Corporation Printed test strips to determine glucose concentration in aqueous liquids
EP4444899A1 (en) 2022-03-11 2024-10-16 Sun Chemical Corporation Method of determining glucose concentration

Family Cites Families (17)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3012976A (en) * 1959-11-02 1961-12-12 Miles Lab Specific test composition for occult blood
US3008879A (en) * 1960-03-18 1961-11-14 Miles Lab Diagnostic composition for the quantitative determination of glucose
US3411887A (en) * 1964-06-15 1968-11-19 Miles Lab Diagnostic composition
US3335069A (en) * 1964-12-14 1967-08-08 Miles Lab Composition and method for determining uric acid
CH522222A (de) * 1967-03-10 1972-06-15 Merck Patent Gmbh Verfahren zur Bestimmung von Wasserstoffperoxid und Mittel zur Durchführung des Verfahrens
DE1598828A1 (de) * 1967-03-10 1971-04-01 Merck Anlagen Gmbh Neues Mittel zur Glukosebestimmung
US3630847A (en) * 1967-07-20 1971-12-28 Boehringer Mannheim Gmbh Diagnostic agent for use in the determination of hydroperoxides and of peroxidate-active substances
US3814668A (en) * 1969-10-15 1974-06-04 Miles Lab Method and device for the semi-quantitative determination of glucose in aqueous fluids
DE2114638C3 (de) * 1971-03-26 1980-09-18 Merck Patent Gmbh, 6100 Darmstadt Verfahren zur Bestimmung von Peroxiden
US3964870A (en) * 1974-03-29 1976-06-22 Boehringer Mannheim G.M.B.H. Diagnostic composition for the determination of glucose
DE2460903C3 (de) 1974-12-21 1981-12-24 Boehringer Mannheim Gmbh, 6800 Mannheim Neue 3,3',5,5'-Tetraalkylbenzidine
CA1098808A (en) * 1977-03-14 1981-04-07 Charles T. W. Lam Test composition and device for determining peroxidatively active substances
US4148611A (en) * 1978-06-28 1979-04-10 Miles Laboratories, Inc. Test composition, device and method for the detection of peroxidatively active substances
JPS5520471A (en) * 1978-08-01 1980-02-13 Kyowa Hakko Kogyo Co Ltd Hydrogen peroxide quantifying method
US4211845A (en) * 1978-11-24 1980-07-08 Miles Laboratories, Inc. Glucose indicator and method
US4279993A (en) * 1979-11-13 1981-07-21 Magers Thomas A Indicator composition and test device containing amine oxide, and method of use
US4278439A (en) * 1979-12-17 1981-07-14 Miles Laboratories, Inc. Sensitizers for peroxidative activity tests

Also Published As

Publication number Publication date
NO820260L (no) 1982-08-13
JPS57146599A (en) 1982-09-10
EP0058334B1 (en) 1984-10-10
AU524238B2 (en) 1982-09-09
MX157869A (es) 1988-12-19
CA1157749A (en) 1983-11-29
ES8303700A1 (es) 1983-02-01
ES509523A0 (es) 1983-02-01
FI71767B (fi) 1986-10-31
IL63685A0 (en) 1981-11-30
FI820440L (fi) 1982-08-13
ZA816060B (en) 1982-11-24
NO159562C (no) 1989-01-11
ATE9821T1 (de) 1984-10-15
EP0058334A1 (en) 1982-08-25
DK60882A (da) 1982-08-13
NO159562B (no) 1988-10-03
IE52266B1 (en) 1987-08-19
IE820304L (en) 1982-08-12
US4340669A (en) 1982-07-20
FI71767C (fi) 1987-02-09
DE3260918D1 (en) 1984-11-15
JPS6035118B2 (ja) 1985-08-13
DK156730C (da) 1990-02-05

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US4391905A (en) System for the determination of glucose in fluids
US4391906A (en) System for the determination of glucose in fluids
US4340669A (en) System for the determination of glucose in fluids
CA1114268A (en) Glucose indicator and method
US4333734A (en) Diagnostic device for fecal occult blood and method of use
DK158645B (da) Fremgangsmaade til fremstilling af et analytisk materiale til bestemmelse af glucose i helblod samt fremgangsmaade og system til bestemmelse af glucoseindholdet i helblod.
NO130520B (da)
JP2958387B2 (ja) 酵素試薬組成物及びそれを用いる液体試料中分析対象物の酵素的測定方法
US3598704A (en) Diagnostic device for various sugars
US4673654A (en) Composition for determining peroxidase-like activity of hemoglobin
US5976823A (en) Low range total available chlorine test strip
KR19980024291A (ko) 육안 시험 스트립용 화학적 타이머
JPH047198B2 (da)
JPH0317479B2 (da)
NO800497L (no) Farvestabil glucosetest.
US3654180A (en) Indicator for detecting hydrogen peroxide and peroxidative compounds containing alpha naphthoflavone
US4291121A (en) Bilirubin-resistant determination of uric acid and cholesterol
AU754237B2 (en) Uric acid assay device with stabilized uricase reagent composition
DK167197B1 (da) Middel og fremgangsmaade til bilirubinresistent bestemmelse af urinsyre
US5776780A (en) Method for quantitatively measuring white blood cells esterase activity in urine
JPH05260994A (ja) ペルオキシド−ペルオキシダーゼ試験系を使用する唾液中の被検体の検出法
JP4544598B2 (ja) 液状試薬および保存方法
NO117789B (da)
MXPA97006716A (en) Chemical time regulator for pru reagent visual strip
JPH03103194A (ja) 試験剤および試験具

Legal Events

Date Code Title Description
PBP Patent lapsed