DK160829B

DK160829B - Fremgangsmaade til fremstilling af pyrido-imidazorifamyciner

Info

Publication number: DK160829B
Application number: DK214585A
Authority: DK
Inventors: Vincenzo Cannata; Silvano Piani; Gian Franco Tamagnone; Manuela Campana; Giovanni Da Roit
Original assignee: Alfa Farmaceutici Spa
Priority date: 1984-05-15
Filing date: 1985-05-14
Publication date: 1991-04-22
Also published as: GR851146B; NO851920L; FI851908A0; ATA145085A; ES543116A0; DK214585A; DK214585D0; FI83874B; ES8603490A1; CA1215976A; DK160829C; NO164030C; AT386829B; NO164030B; PT80447A; FI83874C; PT80447B; AR242795A1; FI851908L

Description

i

DK 160829 B

Den foreliggende opfindelse angår en særlig fremgangsmåde til fremstilling af pyrido-imidazo-rifamyciner med den i krav l's indledning angivne formel (I).

Nogle af forbindelserne med formlen (I) 5

O ... CH„ CH„ CH

il I O I ό I o

0CH3 OH OH II

io CHs il 1 J OH OH CO CH3

I ch, i l /NH

15 0-^As^-n R.

20 mere præcist sådanne forbindelser, hvori Rj og Rg uafhængigt af hinanden er (C14)-alkyl, eller· Rj og R2 sammen med to konsekutive carbonatomer i pyridinkernen danner en benzenring, kendes fra litteraturen, se US patentskrift nr. 4341785.

25 Andre forbindelser med formlen (I), mere præcist sådanne hvori i det mindste én af Rj og R2 er halogen, er beskrevet i italiensk patentansøgning nr. 3626 A/82, der nu er offentligt tilgængelig.

I disse to dokumenter er en fremgangsmåde til fremstilling af forbindelserne med formlen (I) også beskrevet.

30 I korthed angår den kendte fremgangsmåde omsætningen af en molær mængde af 3-halogen-rifamycin S med formlen 35

DK 160829 B

2 o CH3 CH3 CH3

^yVVS

OCH,, OH 0H I

5 γ'Χ S * 3 halogen O-i-i 0 '0 CH3 15 hvori halogen fortrinsvis betegner brom eller i od, med ca. 2 til ca. 8 molækvival enter af en egnet 2-aminopyridin med formlen

H,N N

V

R1 R2 hvori Rj og Rg har de ovenfor anførte betydninger, eller et salt deraf, til dannelse af en forbindelse med formlen

25 ° CH- ch CH

ch3-c-o i- Ij 1“ och3 C' oh oh il Π

3 |l V

OH 0 CH3 30 οΛΛΑν 0--X0 CH >==/ 35 Ri hvori Rj og Rg har de ovenfor anførte betydninger, hvilken forbindelse fortrinsvis isoleres og karakteriseres og dernæst behandles med ascor-

DK 160829 B

3 binsyre til dannelse af si utforbindelserne med formlen (I).

Udbytterne af de nævnte trin beregnet ud fra udgangsforbindelsen (IV) er undertiden ganske gode (varierende fra ca. 45% til ca. 75%), men fremgangsmåden beskrevet i US patentskrift nr. 4.341.785 hæmmes stærkt 5 af den omstændighed, at udgangsforbindelsen (IV) ikke er kommercielt tilgængelig. Den må fremstilles ud fra rifamycin S ved hjælp af egnede, ofte besværlige halogenringsprocesser, som giver et udbytte på ca. 90-95% rå 3-halogen-rifamycin S og ca. 85% ren 3-halogen-rifamycin S, således at de endelige udbytter ligger mellem ca. 40% og ca. 64%. Af denne 10 grund giver fremgangsmåderne til fremstilling af forbindelserne med formlen (I), der er beskrevet enten i US patentskrift nr. 4341785 eller i italiensk patentansøgning nr. 3626 A/82, samlede udbytter, der er lavere end de udbytter, der opnås ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen, og tillader ikke opnåelse af de ønskede forbindelser med formlen (I) med 15 tilfredsstillende udbytte ud fra et industrielt synspunkt.

Den foreliggende opfindelse angår en særlig fremgangsmåde til fremstilling af rifamyciner med den almene formel

n CH, CH„ CH

O . 3 . 0 I

20 CH3-C-0

OCH, I OH OH

'γΧ. 1 i (P CH O« OH CO 3 CH3 i i NH 1

XxX

·4Τκ3τ''

ch3 W

Rl- 30 hvori Rj og R2 uafhængigt af hinanden er (Cj_^)-alkyl eller halogen, eller Rj og R2 sammen med to konsekutive carbonatomer i pyridinkernen danner en benzenring, hvilken fremgangsmåde er ejendommelig ved det i krav l's kendetegnende del anførte.

35 Udtrykket (Cj_4)-alkyl betyder ligekædede eller forgrenede al kyl-grupper, som f.eks. methyl, ethyl, propyl, isopropyl, butyl, sec.-butyl, isobutyl og tert.-butyl.

Forbindelserne med formlen (I) har med fremragende anti bakterielle

DK 160829 B

4 egenskaber såvel in vitro som in vivo. De har specielt vist sig at være meget værdifulde til bekæmpelse af gastro-intestinale mikrobielle infektioner i kraft af deres sparsomme absorption i væv og organer hos dyr ved administration ad oral vej.

5 Fremgangsmåden ifølge opfindelsen repræsenterer en bemærkelsesvær dig forbedring i forhold til fremgangsmåden ifølge den kendte teknik, idet rifamycin S med formlen CH CH CH CH^COO J. 6 0CH3 I OH OH (I ["CH3 >jj ' " r T ?, co c«3 15 ch 3 0 1

20 CH3 O

der anvendes som udgangsforbindelse, er et kommercielt produkt, som let kan opnås enten ved kemisk omdannelse af rifamycin B som beskrevet i fransk patentskrift FM 739 eller ved syrehydrolyse af rifamycin 0 som 25 beskrevet i belgisk patentskrift nr. 820517 eller ved oxidation af halo-genmycin A, B og D ved hjælp af salpetersyre som beskrevet i US patentskrift nr. 3880839 eller ved fermentering af Micromonospora Chalcea stammer som beskrevet i US patentskrift nr. 3884763.

Rifamycin S omsættes ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen med et 30 molært overskud af en 2-amino-pyridin med formlen H2N\' N.

I i i I

S >! hvori Rj og R2 har de ovenfor angivne betydninger, i nærværelse af i od eller et egnet iodid sammen med et iodidoxidationsmiddel, eventuelt i

DK 160829B

5 nærværelse af et organisk eller uorganisk surt middel, ved en temperatur mellem stuetemperatur og reaktionsblandingens kogepunkt, i et egnet opløsningsmiddel eller opløsningsmiddelsystem, hvorefter reaktionsblandingen behandles med et reduktionsmiddel valgt blandt ascorbinsyre, iso-5 ascorbinsyre og dihydroxyacetone, og de ønskede forbindelser med formlen (I), hvori Rj og R2 har de ovenfor angivne betydninger, udvindes ved hjælp af teknikker, der er kendt af fagmanden, i udbytter fra ca. 65% til ca. 80% beregnet ud fra det som udgangsmateriale anvendte rifamycin S.

10 Omsætningen af forbindelserne med formlen (II) med forbindelserne med formlen (III) finder derfor sted i bare ét trin og belyses ved det efterfølgende reaktionsskema.

15 20 25 30 35 6

DK 160829 B

skema i GH CH CH„ 5 0CH3 r X TH I Vy.

γ ch3 1 + T i f ch3 «* « ty 10 Rx R2

I I

o du)

CH o CD

15 -> Λ ,CH3 ™3 Ψ3 20 ®3“0γ^γΝΑ

0CH3 1 OH OH I

1 0,1 I

Λ, r 7 =r“3 25 Yfll -—I—ζ κ3"! 30 CH3 R1

Rj og Rg har de ovenfor angivne betydninger.

I praksis omsættes en molær mængde rifamycin S med formlen (II) med fra 1 til 8 molækvival enter af en 2-aminopyridin med formlen (III) og fortrinsvis med fra 3 til 6 molækvival enter af aminopyridinen med form- 35

DK 160829 B

7 len (III), eventuelt i nærværelse af et organisk eller uorganisk surt middel såsom iodbrintesyre eller eddikesyre, i nærværelse af iod eller et iodid sammen med et iodidoxidationsmiddel, hvor iodidet f.eks. kan være iodidet af et alkali- eller et jordal kalimetal eller iodhydratet af 5 udgangs-2-aminopyridinen med formlen (III) og oxidationsmidlet en forbindelse som f.eks. mangandioxid, kaliumiodat, natriumiodat eller kali umferri cyanid, der er i stand til under de anvendte reaktionsbetingelser at oxidere iodidionen til frigørelse af iod i reaktionsmediet.

Iodet eller iodidet sammen med iodidoxidationsmidlet kan henholds-10 vis være til stede i reaktionsmediet i mængder, der varierer fra 0,1 til 4 molækvival enter iod for hvert mol udgangs-rifamycin S, eller i mængder der er i stand til at frigøre fra 0,1 til 4 molækvival enter iod pr. mol udgangs-rifamycin S. Omsætningen udføres i et opløsningsmiddel eller opløsningsmiddelsystem udvalgt blandt de almindeligt anvendte inden for 15 rifamycinkemi en. F.eks. anvendes lavere halogenerede carbonhydrider, såsom methylenchlorid, chloroform, 1,2-dichlorethan og dermed analoge eller lavere al kanoler såsom f.eks. methanol, ethanol, propanol, isopropanol eller 4-butanol. Også lavere al kyl estre af lavere alifatiske syrer, acetonitril, dimethoxyethan, dioxan, tetrahydrofuran og aromatiske car-20 bonhydrider har vist sig at være gode reaktionsopløsningsmidler. Alle disse opløsningsmidler kan bruges alene eller i indbyrdes blanding eller i blanding med vand i forskellige forhold. De bedste resultater opnås med opløsningsmidler som lavere halogenerede carbonhydrider, lavere al-kanoler, alene eller i blanding med vand i forskellige forhold, acetoni-25 tril, dimethoxyethan, dioxan og tetrahydrofuran.

Omsætningen udføres ved en temperatur i intervallet mellem stuetemperatur og reaktionsblandingens kogepunkt; i almindelighed er en temperatur mellem stuetemperatur og 60eC tilstrækkelig til opnåelse af de mest tilfredsstillende resultater.

30 Omsætningen fuldendes inden for et tidsrum, som i det væsentlige afhænger af arten af pyridinen med formlen (III), af reaktantforholdene og af omsætningstemperaturen. Generelt kræves der fra 1 til 120 timer for at opnå slutprodukterne med formlen (I) i de ønskede udbytter.

Reaktionsopløsningen skal derefter behandles med et egnet reduk-35 tionsmiddel som f.eks. ascorbinsyre, isoascorbinsyre eller dihydroxyace-tone. Alle ovennævnte operationer finder sted, uden at mellemprodukterne isoleres, således at karakteren af "éttrinsreaktion", der er typisk for den foreliggende opfindelse, bevares. De således opnåede forbindelser 8 DK 16Ό829Β med formlen (I) udvindes fra reaktionsmediet i henhold til kendte teknikker.

Således fjernes f.eks. den overskydende uomsatte aminopyridin med formlen (III) fra den organiske fase ved behandling med en vandig opløs-5 ning af en mineralsyre. Derefter fraskilles den organiske fase, tørres eventuelt over et egnet middel, f.eks. vandfrit natriumsulfat, og slutproduktet med formlen (I) opnås ved afdampning af opløsningsmidlet. Alternativt opnås de ønskede forbindelser med formlen (I) ved krystallisation af reaktionsmediet ved en temperatur fra ca. 0°C til ca. 10eC, når 10 der anvendes opløsningsmiddel systemer, som indeholder vand.

Om nødvendigt kan forbindelserne med formlen (I) renses ved krystallisation fra egnede opløsningsmidler eller opløsningsmiddel systemer.

Den foreliggende opfindelse belyses nærmere ved hjælp af de efterfølgende eksempler.

15 UV-spektrene udførtes i absolut methanol med et "Perkin-Elmer 552" spektrofotometer, IR-spektrene udførtes i KBr.med et "PerkinElmer 281-B" spektrofotometer, mens de kerne-magnetiske resonansspektre 1H-NMR og 13C-NMR udførtes i deuterochloroform under anvendelse af tetrame-thylsilan som referencestandard med et "Varian XI 100" spektrofotometer.

20

Eksempel 1

4-deoxy-47-methyl-pyridoTl7,2':1,2]imidazor5,4-clrifamycin SV

4,9 g (0,007 mol) rifamycin S, 2,27 g (0,021 mol) 2-amino-4-methyl-pyridin og 0,89 g (0,0035 mol) i od opløses i 30 ml methylenchlorid, og 25 den resulterende reaktionsblanding omrøres ved stuetemperatur i 30 timer. Derefter tilsættes reaktionsblandingen 5 ml af en 20% (vægt/vol) vandig opløsning af ascorbinsyre, og efter omrøring i 30 minutter fra-ski11 es den organiske fase og vaskes først med 0,5 N vandig saltsyre og dernæst med vand til neutralitet. Derefter afdampes opløsningsmidlet 30 under vakuum, og remanensen krystalliseres fra en 7/3 (vol/vol) blanding af ethanol/vand. Efter filtrering og tørring opnås 4,2 g af produktet i et udbytte på 76% af det teoretiske. Produktet har følgende fysisk-kemi-ske karakteristika: 35 1% 9

DK 160829 B

UV spektrum: λ max (m/j) Ejcm 232 489 260 339 5 292 295 320 216 370 119 450 159 10 IR spektrum: karakteristiske absorptionsbånd observeredes ved følgende frekvenser (i cm”1): 3440 (b), 2960 (s), 2920 (s), 2860 (w), 2820 (vw), 1705 (s), 1640 (s), 1580 (s), 1500 (s).

b = bred; s = stærk; w = svag; vw = meget svag.

15 H-NMR spektrum: karakteristiske resonanstoppe observeredes ved følgende S (udtrykt som ppm): -0,56 (d,3H); 0,14 (d,3H); 0,74 (d,3H); 0,94 (d,3H); 1,94 (s,3H); 1,98 (s,3H); 2,02 (s,3H); 2,26 (s,3H); 2,63 (s,3H); 3,00 (s,3H); 3,2-3,9 (m,3H); 4,15-5,20 (m,2H); 5,9-6,9 (m,4H); 7,06 20 (dd,lH); 7,38 (s,IH), 8,39 (s,IH); 8,43 (d,lH); 11,0 (s,IH); 13,12 (s,IH).

s= singlet; d - dublet; m = multiplet; dd = dobbelt dublet.

13 25 C-NMR spektrum: karakteristiske resonanstoppe observeredes ved følgende S (udtrykt som ppm): 6,98; 8,06; 8,21; 10,76; 17,56; 20,43; 20,78; 21,44; 22,35; 32,91; 36,93; 37,78; 38,59; 56,99; 72,65; 73,91; 76,75; 77,86; 97,83; 103,86; 104,09; 108,97; 109,99; 112,03; 114,96; 115,52; 117,61; 119,26; 122,99; 125,35; 128,44; 128,96; 136,21; 138,87; 30 141,75; 142,10; 147,74; 155.10; 170,63; 171,89; 182,19; 188,84.

Eksempel 2

4-deoxy-4'-methyl-pyridoTl/,2':1,21imidazor5,4-clrifamycin SV

6,95 g (0,01 mol) rifamycin S og 3,24 g (0,03 mol) 2-amino-4-me-35 thyl-pyridin opløses i 20 ml methylenchlorid, og reaktionsblandingen tilsættes en opløsning af 3,8 g (0,015 mol) iod i 100 ml methylchlorid på en time under kraftig omrøring. Reaktionsblandingen omrøres i yderligere 4 timer ved stuetemperatur og tilsættes derefter 20 ml af en 20%

DK 160829B

ίο (vægt/vol) vandig opløsning af ascorbinsyre. Omrøringen fortsættes i endnu 30 minutter, derefter adskilles faserne, og det organiske lag vaskes først med en 0,5 N vandig opløsning af saltsyre og dernæst med vand til neutralitet. Efter afdampning af methylenchloridet i vakuum, opnås 5 en remanens, som krystalliseres fra en 7:3 (vol/vol) blanding af etha-nol/vand, hvorved der opnås 6,1 g af produktet med de samme fysisk-kemi-ske karakteristika som beskrevet for forbindelsen i eksempel 1. Udbyttet er 78% af det teoretiske.

10 Eksempel 3 3’-chlor-4-deoxy-pyri do Γ1',2':1,2]i mi dazo[5,4-c]rifamyci n SV Ved i det væsentlige at gå frem som beskrevet i eksempel 1, startende med 3,47 g (0,005 mol) rifamycin S, 1,54 g (0,012 mol) 2-ami-no-5-chlor-pyridin og 0,63 g (0,0025 mol) iod i 20 ml methylenchlorid, 15 opnås 2,8 g af titel forbindel sen i et udbytte på 68% af det teoretiske. Forbindelsen udviser følgende fysisk-kemiske karakteristika: 1% UV spektrum: λ max (m/ι) Ejcm 20 238 508,5 296 343 378 106 455 137 25 IR spektrum: karakteristiske absorptionsbånd observeredes ved følgende frekvenser (i cm"1): 3430 (b), 3200 (w), 3090 (w), 2960 (m), 2920 (m), 2870 (w), 1712 (s), 1635 (s), 1595 (s), 1575 (s).

b = bred; s = stærk; w = svag; m * medium.

30 H-NMR spektrum: karakteristiske resonanstoppe observeredes ved føl gende 8 (udtrykt som ppm): -0,63 (d,3H); 0,12 (d,3H); 0,77 (d,3H); 0,93 (d,3H); 1,89 (s,3H); 1,94 (s,3H); 1,99 (s,3H); 2,24 (s,3H); 2,83 (d,lH); 2,94 (s,3H); 3,25 (d,lH); 3,57 (d,lH); 3,30-4,00 (m,2H); 4,82 (d,lH); 35 4,96 (q,IH); 5,97 (d,lH); 5,80-6,96 (m,3H); 7,74 (m,2H); 8,51 (s,IH), 8,62 (d,IH); 15,56 (bred,s,IH); 16,75 (s,IH).

s= singlet; d = dublet; q = kvartet; m = multiplet.

DK 160829 B

π 1 3 C-NMR spektrum: karakteristiske resonanstoppe observeredes ved følgende 8 (udtrykt som ppm): 6,81; 7,73; 7,95; 10,05; 16,98; 20,02; 20,07; 20,10; 32,57; 36,55; 37,60; 38,22; 56,78; 72,43; 73,36; 76,42; 5 77,33; 98,12; 103,52; 104,87; 108,99; 112,31; 115,24; 115,78; 120,98; 122,55; 123,31; 125,11; 127,00; 128,32; 144,62; 146,37; 147,18; 151,82; 151,98; 155.52; 170,78; 171,42; 171,74; 182,36; 187,79.

Eksempel 4

10 3/,5/-dibrom-4-deox,y-pyridorr,2/:l,21imidazof5,4-clrifam.ycin SV

Ved at gå frem på i det væsentlige samme måde som beskrevet i eksempel 1, startende med 1,39 g (0,002 mol) rifamycin S, 1,76 g (0,007 mol) 2-amino-3,5-dibrom-pyridin og 0,25 g (0,001 mol) iod i 15 ml methy-lenchlorid, opnås 1,35 g af titel produktet i et udbytte på 71% af det 15 teoretiske.

Forbindelsen udviser følgende fysisk-kemi ske karakteristika: 1% 20 UV spektrum: λ max (m/ί) Ejcm 241 470 300 311 382 76 455 94 25 IR spektrum: karakteristiske absorptionsbånd observeredes ved følgende frekvenser (i cm’1): 3480 (b), 3350 (b), 3200 (w), 2980 (m), 2940 (m), 2880 (w), 1715 (s), 1650 (s), 1625 (m), 1600 (s); 1580 (m).

30 b = bred; s = stærk; w = svag; m = medium.

XH-NMR spektrum: karakteristiske resonanstoppe observeredes ved føl gende 8 (udtrykt som ppm): -0,47 (d,3H); 0,30 (d,3H); 0,80 (d,3H); 0,98 (d,3H); 1,96 (s,6H); 1,99 (s,3H); 2,25 (s,3H); 2,88 (d,lH); 3,03 (s,3H); 35 3,20-4,00 (m,4H); 4,87 (d,lH); 5,11 (q,lH); 6,12 (d,lH); 6,00-7,00 (m,3H); 7,94 (d,lH); 8,52 (d,lH), 15,48 (bred,s,IH); 16,66 (bred,s,IH).

s * singlet; d = dublet; m = multiplet; q = kvartet.

12

DK 160829B

13 C-NMR spektrum: karakteristiske resonanstoppe observeredes ved følgende 6 (udtrykt som ppm): 7,46; 7,89; 8,38; 11,92; 18,22; 20,40; 21,07; 22,38; 33,19; 37,49; 38,94; 39,99; 40,71; 56,37; 72,38; 73,01; 5 76,13; 76,42; 99,04; 104,07; 104,73; 107,40; 109,36; 110,35; 112,31; 116,29; 118,40; 121,77; 124,90; 126,20; 126,92; 130,56; 137,68; 138,62; 140,44; 141,82; 142,73; 157,29; 170,01; 170,72; 183,49; 185,85.

Eksempel 5

10 4-deoxy-isoquinolinorr,2;:l,21imidazoF5,4-c1rifamycin SV

Ved i det væsentlige at gå frem som beskrevet i eksempel 2, startende med 6,95 g (0,01 mol) rifamycin S, 4,32 g (0,03 mol) 1-amino-isoquinolin og 3,80 g (0,015 mol) iod opnås 5,9 g af titelforbindel sen i et udbytte på 72% af det teoretiske.

15 Forbindelsen udviser følgende fysisk-kemiske karakteristika:

Snip.: 181°-186°C (dekomp.).

1% 20 UV spektrum: λ max (ηιμ) Ejcm 253 532 288 363 300 346 320 290 25 382 120 430 120 IR spektrum: karakteristiske absorptionsbånd observeredes ved følgende frekvenser (i cm”1): 3440 (b), 3140 (b), 2910 (s), 2850 (w), 1700 (s), 30 1630 (b), 1610 (b), 1580 (w), 1555 (vw), 1535 (vw).

b = bred; s = stærk; w = svag; vw = meget svag.

1H-NMR spektrum: karakteristiske resonanstoppe observeredes ved føl - 35 gende S (udtrykt som ppm): -0,65 (d,3H); 0,04 (d,3H); 0,7 (d,3H); 0,88 (d,3H); 1,55 (s,3H); 1,92 (s,3H); 2,02 (s,3H); 2,27 (s,3H); 2,77 (d,lH); 2,94 (s,3H); 3,00-3,90 (m,4H); 4,78 (d,lH); 4,93 (q,lH); 5,75-7,00 (m,4H); 7,34 (d,lH); 7,6-8,0 (m,6H); 16,6 (m,lH).

DK 160829 B

13 s = singlet; d = dublet; m = multiplet; q - kvartet.

Eksempel 6 5 3',5'-dichlor-4-deoxy-pyridofT,2':l,21imidazor5,4-clrifamycin SV Ved i det væsentlige at gå frem som beskrevet i eksempel 2, startende med 4,9 g (0,007 mol) rifamycin S, 3,42 g (0,021 mol) 2-amino- 3,5-dichlorpyridin og 2,66 g (0,0105 mol) iod opnås 4 g af titelforbindelsen i et udbytte på 67% af det teoretiske. Denne forbindelse udviser 10 følgende fysisk-kemi ske karakteristika: 1% UV spektrum: λ max (m/j) Ejcm 239 527 15 289 366 380 95 450 122 IR spektrum: karakteristiske absorptionsbånd observeredes ved følgende 20 frekvenser (i cm’1): 3450 (b), 3250 (w), 2970 (m), 2930 (m), 2880 (m), 1710 (s), 1640 (s), 1585 (s).

b = bred; s = stærk; w = svag; m = medium.

25 ^-NMR spektrum: karakteristiske resonanstoppe observeredes ved føl gende S (udtrykt som ppm): -0,56 (d,3H); 0,23 (d,3H); 0,78 (d,3H); 0,94 (d,3H); 1,92 (s,3H); 1,97 (s,6H); 2,25 (s,3H); 2,70-3,00 (m,IH); 2,98 (s,3H); 3,10-3,80 (m,4H); 4,84 (d,lH); 5,05 (q,lH); 6,03 (d,IH); 6,00- 7,00 (m,3H); 7,18 (s,IH); 8,13 (s,IH), 8,35 (s,IH); 16,00 (bred,s,IH); 30 16,45 (stor,s,IH).

s = singlet; d = dublet; m = multiplet; q = kvartet.

1 3 C-NMR spektrum: karakteristiske resonanstoppe observeredes ved 35 følgende S (udtrykt som ppm): 7,03; 8,34; 8,58; 11,08; 17,53; 20,54; 20,88; 21,82; 33,41; 37,23; 38,25; 38,69; 57,16; 74,17; 77,16; 78,14; 78,76; 99,49; 105,59; 106,15; 110,52; 112,50; 116,80; 116,95; 119,97; 121,23; 124,96; 125,57; 125,62; 126,00; 128,45; 132,03; 137,53; 138,06;

DK 160829B

14 142,83; 142,07; 155,15 ; 170,74; 170,96; 172,21; 181,66; 184,91.

Eksempel 7 4-deoxy-47-methyl-pyrido[1',27:l,21imidazor5,4-clrifamycin SV 5 En opløsning af 6,95 g (0,01 mol) rifamycin S og 3,24 g (0,03 mol) 2-amino-4-methyl-pyridin i 20 ml acetonitril tilsættes portionsvis 3,80 g (0,015 mol) iod i løbet af 1 time, og omsætningen fortsættes i yderligere 6 timer under omrøring ved stuetemperatur. Derefter tilsættes reaktionsblandingen 20 ml af en 20% (vægt/vol) vandig opløsning af as-10 corbinsyre og omrøres i yderligere 30 minutter. Derefter tilsættes 5 ml eddikesyre og 25 ml 0,IN vandig opløsning af saltsyre, og reaktionsblandingen hensættes natten over ved 5°C. Det krystalliserede faste stof filtreres fra og tørres , hvorved der fås 5,1 g produkt i et udbytte på 65% af det teoretiske. Den opnåede forbindelse har de samme fysisk-kemi-15 ske karakteristika som forbindelsen ifølge eksempel 1.

Eksempel 8

4-deoxy-4/-methv1-p,yridori/,2/:l«21imidazor5,4-clrifamycin SV

En opløsning af 4,9 g (0,007 mol) rifamycin S, 3 g (0,028 mol) 2-20 amino-4-methyl-pyridin og 3 g (0,012 mol) iod i 30 ml methylenchlorid opvarmes til reaktionsblandingens kogepunkt i 1 time. Efter afkøling til stuetemperatur tilsættes opløsningen 20 ml af en 25% (vægt/vol) vandig opløsning af ascorbinsyre og omrøres i 30 minutter. De to lag adskilles, det organiske vaskes to gange med 30 ml IN vandig opløsning af saltsyre 25 og derefter med vand til neutralitet og tørres dernæst over natriumsulfat. Efter filtrering og afdampning af opløsningsmidlet opnås en remanens, som krystalliseres fra en 7/3 (vol/vol) blanding af ethanol/vand, hvorved der fås 4,4 g produkt i et udbytte på 80% af det teoretiske. Forbindelsen har de samme fysisk-kemi ske karakteristika som forbindelsen 30 ifølge eksempel 1.

Eksempel 9

4-deoxy-57-methyl-pyridori7,27:l,21imidazor5,4-clrifamycin SV

En opløsning af 4,9 g (0,007 mol) rifamycin S, 3 g (0,028 mol) 2-35 amino-3-methyl-pyridin, 3,3 g (0,014 mol) 2-amino-3-methyl-pyridin, hy-droiodid og 1,8 g (0,0071 mol) iod i 35 ml methylenchlorid opvarmes til reaktionsblandinges kogepunkt i et tidsrum på 4 timer. Efter afkøling tilsættes 10 ml af en 25% (vægt/vol) vandig opløsning af ascorbinsyre, 15

DK 160829 B

og der omrøres i 30 minutter. De to lag adskilles, og det organiske lag vaskes to gange med 30 ml IN vandig opløsning af saltsyre og derefter med vand til neutralitet og tørres efterfølgende over natriumsulfat. Efter filtrering og afdampning af opløsningsmidlet opnås en remanens, som 5 krystalliseres fra en 7/3 (vol/vol) blanding af ethanol /vand, hvorved der opnås 4,1 g produkt i et udbytte på 75% af det teoretiske.

Dette produkt udviser følgende fysisk-kemi ske karakteristika:

Smp.: 185°-190°C (dekomp.).

10 1% UV spektrum: λ max (m/ί) Ejcm 217 470 235 544 15 262 333 273 303 292 295 320 205 356 99 20 373 122 - 440 164 454 166 IR spektrum: karakteristiske absorptionsbånd observeredes ved følgende 25 frekvenser (i cm-1): 3440 (b), 3300 (b), 3200 (b), 2960 (s), 2920 (w), 2850 (vw), 1730 (s), 1710 (w), 1640 (s), 1595 (s), 1580 (b), 1555 (w).

b = bred; s = stærk; w = svag; vw = meget svag.

30 ^-NMR spektrum: karakteristiske resonanstoppe observeredes ved følgende 8 (udtrykt som ppm): -0,64 (d,3H); 0,02 (d,3H); 0,45 (d,3H); 0,90 (d,3H); 1,75 (s,3H); 1,94 (s,3H); 1,97 (s,3H); 2,23 (s,3H); 2,45 (s,3H); 2,95 (s,3H); 2,6-5,8 (m,5H); 4,5-5,25 (m,2H); 5,5-7,0 (m,4H); 7,25-7,75 (m,2H); 8,27 (s,IH); 8,47 (s,IH); 35 14,86 (s,IH); 16,77 (s,IH).

s= singlet; d = dublet; m = multiplet.

DK 160829 B

16

Eksempel 10

4-deoxy-47-methyl-pyridoTl7,27:l,21imidazo[5,4-clrifamycin SV

En opløsning af 6,95 g (0,01 mol) rifamycin S, 4,32 g (0,04 mol) 2-amino-4-methyl-pyridin, 2,4 g (0,04 mol) eddikesyre og 0,25 g (0,001 5 mol) iod i 40 ml methylenchlorid holdes ved stuetemperatur i 5 dage.

Derefter tilsættes reaktionsblandingen 0,37 g (0,002 mol) ascorbinsyre og omrøres i 30 minutter. Derefter vaskes den med en 0,5 N vandig opløsning af saltsyre og derefter med vand og til sidst inddampes den til tørhed under reduceret tryk. Remanensen krystalliseres fra en 7/3 (vol/-10 vol) blanding af ethanol/vand, hvorved der opnås 5,74 g produkt i et udbytte på 73% af det teoretiske.

Produktet har de samme fysisk-kemi ske karakteristika som produktet ifølge eksempel 1.

15 Eksempel 11

4-deoxy-4/-methy]-pyridorr,2/:l,21imidazo[5,4-clrifamycin SV

En opløsning af 4,9 g (0,007 mol) rifamycin S, 3 g (0,028 mol) 2-amino-4-methyl-pyridin, 0,45 g (0,0018 mol) iod og 1,65 ml (0,029 mol) eddikesyre i 15 ml acetonitril holdes ved stuetemperatur i 48 timer.

20 Derefter tilsættes reaktionsblandingen yderligere 0,2 g (0,0008 mol) iod og holdes ved stuetemperatur i endnu 16 timer. Derefter tilsættes den 3 ml af en 25% (vægt/vol) vandig opløsning af ascorbinsyre, og efter 30 minutter fortyndes den med 85 ml methylenchlorid. Den organiske opløsning vaskes to gange med 30 ml af en IN vandig opløsning af saltsyre, 25 derefter med vand til neutralitet og tørres over natriumsulfat. Efter filtrering og afdampning af opløsningsmidlet i vakuum opnås en remanens, som krystal!i ses fra en 7/3 (vol/vol) blanding af ethanol/vand, hvorved der opnås 4,2 g produkt i et udbytte på 77% af det teoretiske.

Produktet har de samme fysisk-kemi ske karakteristika som produktet 30 ifølge eksempel 1.

Eksempel 12

4-deoxy-47-methyl-p.yridorr,2':l,21imidazor5,4-clrifamycln SV

4,9 g (0,007 mol) rifamycin S, 3 g (0,028 mol) 2-amino-4-methylpy-35 ridin, 3,3 g (0,014 mol) 2-amino-4-methyl-pyridin, hydroiodid og 0,89 g (0,0035 mol) iod opløses i 20 ml dimethoxyethan, og reaktionsblandingen henstilles ved stuetemperatur i 20 timer. Derefter tilsættes reaktionsblandingen 5 ml af en 25% (vægt/vand) vandig opløsning af ascorbinsyre

DK 160829 B

17 og hensættes under omrøring i 30 minutter. Derefter fortyndes reaktions-blandingen med 100 ml methylenchlorid, vaskes to gange med 30 ml af en 1 N vandig opløsning af saltsyre, og derefter med vand til neutralitet.

Den organiske fase tørres over vandfrit natriumsulfat og filtreres, og 5 opløsningsmidlet afdampes.

Remanensen krystalliseres fra en 7/3 (vol/vol) blanding af ethanol og vand, hvorved der opnås 3,7 g produkt i et udbytte på 68% af det teoretiske. Produktet har de samme fysisk-kemi ske karakteristika som produktet ifølge eksempel 1.

10

Eksempel 13

4-deoxy-4'-methyl-pyridofT,2':I,21imidazor5,4-clrifamycin SV

696 g (1 mol) rifamycin S, 324 g (3 mol) 2-amino-4-methyl-pyridin og 127 g (0,5 mol) iod opløses i 3 1 methylenchlorid, og reaktionsbiand-15 ingen holdes ved stuetemperatur i 24 timer. Derefter tilsættes reaktionsblandingen 0,5 liter af en 20% (vægt/vand) vandig opløsning af as-corbinsyre og omrøres i 1 time. Den vandige fase kastes bort, og den organiske fase vaskes først tre gange med 1 liter af en 1 N vandig opløsning af saltsyre for at fjerne det uomsatte overskud af 2-amino-4-me-20 thyl-pyridin, derefter med vand til neutralitet, og endelig inddampes den til tørhed under vakuum. Det faste stof krystalliseres fra en 7/3 (vol/vol) blanding af ethanol og vand, hvorved der opnås 613 g produkt i et udbytte på 78% af det teoretiske.

Det således opnåede produkt udviser de samme fysisk-kemi ske karak-25 teristika som produktet ifølge eksempel 1.

Eksempel 14

4-deox,y-4'-methyl-p.yridolT ,2' :1,21 imidazor5,4-clrifamycin SV

487 g (0,7 mol) rifamycin S, 303 g (2,8 mol) 2-amino-4-methylpyri-30 din og 254 g (1 mol) iod opløses i 3 liter methylenchlorid, og reaktionsblandingen holdes ved stuetemperatur i 4 timer. Derefter tilsættes den 1,5 liter af en 25% (vægt/vand) vandig opløsning af ascorbinsyre, og der omrøres i 30 minutter. Den vandige fase kastes bort, og den organiske fase vaskes først fire gange med 1 liter af en 1 N vandig opløsning 35 af saltsyre for at fjerne det uomsatte overskud af 2-amino-4-methyl-py-ridin, vaskes derefter med vand til neutralitet, og tørres endelig over natriumsulfat. Efter filtrering og afdampning af opløsningsmidlet opnås en remanens, som krystalliseres fra en 7/3 (vol/vol) blanding af ethanol

DK 160829 B

18 og vand, hvorved der opnås 440 g produkt i et udbytte på 80% af det teoretiske.

Det således opnåede produkt udviser de samme fysisk-kemi ske karakteristika som produktet ifølge eksempel 1.

Claims

1. Fremgangsmåde til fremstilling af pyrido-imidazo-rifamyciner med den almene formel 013-0° /1 OCH^j °jj Oh xr ch3 1

10. O« CO 3 CH3 NH « R2 CH R1 hvori Rj og R2 uafhængigt af friæamlen jer (C14)-alkyl eller halogen, eller Rj og R2 sammen med to konsekutive carbonatomer i pyridinkernen dan-20 ner en benzenring, KENDETEGNET ved, at man omsætter et molækvivalent ri-famycin S med formlen CH3 CH3 ™3 CH COO I ) 25 0xch3j1Tl i Y CH S CH3 i X As CH„ OH 0 CO CH. i I 30 < A JL Ah 3 X X 1 °—ί~Η 0 CH O 35 ^ med fra 1 til 8 molækvivalenter af en 2-amino-pyridin med formlen DK 160829B R1 R2 5 hvori Rj og R2 har de ovenfor angivne betydinger, i nærværelse af fra 0,1 til 4 molækvivalenter iod eller et iodid sammen med et iodidoxidationsmiddel, som er i stand til at frigøre den tilsvarende mængde iod, eventuelt i nærværelse af et surt middel og i nærværelse af et opløsningsmiddel eller et opløsningsmiddel system i et tidsrum mellem 10. time og 120 timer, ved en temperatur mellem stuetemperatur og reaktionsblandingens kogepunkt, behandler reaktionsblandingen med et passende reduktionsmiddel udvalgt blandt ascorbinsyre, isoascorbinsyre og di-hydroxyacetone, og udvinder forbindelserne med formel (I) fra reaktionsmediet ved hjælp af kendte teknikker. 15

2. Fremgangsmåde ifølge krav 1, KENDETEGNET ved, at der for hvert mol rifamycin S anvendes fra 3 til 6 molækvival enter af 2-aminopy-ridinen med formlen (III).

3. Fremgangsmåde ifølge krav 1, KENDETEGNET ved, at opløsnings midlet eller opløsningsmiddel systemet udvælges blandt lavere halogenerede carbonhydrider, lavere alkanoler, lavere alkylestre af lavere alifatiske syrer, acetonitril, dimethoxyethan, dioxan, tetrahydrofuran og aromatiske carbonhydrider. 25

4. Fremgangsmåde ifølge krav 3, KENDETEGNET ved, at opløsningsmidlet er methylenchlorid.

5. Fremgangsmåde ifølge krav 1, KENDETEGNET ved, at reaktionstem- 30 peraturen er mellem stuetemperatur og 60°C. 35